NL1031218C2

NL1031218C2 - Oxyindoolderivaten.

Info

Publication number: NL1031218C2
Application number: NL1031218A
Authority: NL
Inventors: Kiyoshi Kawamura; Hiroki Sone; Chikara Uchida
Original assignee: Pfizer
Priority date: 2005-02-22
Filing date: 2006-02-22
Publication date: 2007-01-23
Also published as: AU2006217534A8; UY29389A1; NL1031218A1; JP4130220B1; DK1856110T3; GT200600083A; TW200640915A; ES2366375T3; CN101522668B; EA012615B1; HN2006007884A; US20060194842A1; WO2006090279A1; US7589109B2; DOP2006000046A; KR20070098936A; CA2598536C; TNSN07319A1; AP2007004067A0; UA86301C2

Description

τ·* -<·· η

ΟΧΥINDOOLDERIVATEN

Achtergrond van de uitvinding

Deze uitvinding heeft betrekking op oxyindoolderivaten. Deze verbindingenhebben een selectieve agonistische activiteit op de 5-HT4-receptor. De onderhavige uitvinding heeft ook betrekking op een farmaceutisch preparaat, een 5 werkwijze voor behandeling en gebruik omvattende de bovenstaande derivaten voor de behandeling van ziektetoestanden gemedieerd door 5-HT4-receptoractiviteit, in het bijzonder agonistische activiteit op de 5-HT4-receptor.

In het algemeen blijken 5-HT4-receptoragonisten bruik-10 baar bij de behandeling van diverse ziekten, zoals gastro- oesofageale refluxziekte, gastro-intestinale ziekte, gastrische motiliteitsstoornis, dyspepsie die niet door ulcera wordt veroorzaakt, functionele dyspepsie, prikkel-bare-darm-syndroom (irritable bowel syndrome; IBS), con-15 stipatie, dyspepsie, oesophagitis, gastro-oesofageale ziekte, misselijkheid, ziekte van het centrale zenuwstelsel, ziekte van Alzheimer, cognitieve stoornis, emesis, migraine, neurologische ziekte, pijn, cardiovasculaire stoornissen, hartinsufficiëntie, hartaritmie, diabetes en 20 apneusyndroom (zie TiPs, 1992, 13, 141; Ford, A.P. D. W.

et al., Med. Res. Rev., 1993, 13, 633; Gullikson, G.W. et al., Drug Dev. Res., 1992, 26, 405; Richard M. Eglen et al, TiPs, 1995, 16, 391; Bockaert, J. Et. Al., CNS Drugs-, 1, 6; Romanelli, Μ. N. et al., Arzheim Forsch./Drug Res., 25 1993, 43, 913; Kaumann A. et al., Naunyn-Schmiedeberg's, (103 1 218 ;j 2 1991, 344, 150, en Romanelli, M.N. et al., Arzheim

Forsch./Drug Res., 1993, 43, 913).

In US 5.399.562A worden indolonverbindingen beschreven als agonisten of antagonisten van 5-HT4 en/of antago-5 nisten van 5-HT3. In het bijzonder verbindingen die worden weergegeven met de volgende formule worden beschreven als voorbeeld 5: o^re —.

10 Er bestaat behoefte aan nieuwe 5-HT4-agonisten die goede kandidaten voor een geneesmiddel zijn. Met name dienen voorkeursverbindingen zich krachtig aan de 5-HT4-re-ceptor te binden, terwijl zij weinig affiniteit tonen voor andere receptoren en bovendien functionele activiteit als 15 agonisten vertonen. Zij dienen goed te worden geabsorbeerd uit het maag/darmkanaal, metabolisch stabiel te zijn en gunstige farmacokinetische eigenschappen te bezitten. Wan- j neer deze worden ingezet tegen receptoren in het centrale zenuwstelsel dienen zij de bloed-hersenbarrière vrijelijk 20 te kunnen passeren, en wanneer zij selectief worden ingezet tegen receptoren in het perifere zenuwstelsel, dienen deze de bloed-hersenbarrière niet te passeren. Bovendien mogen ze niet-toxisch zijn en maar weinig bijwerkingen vertonen. Bovendien zal de ideale kandidaat voor een ge-25 neesmiddel in een fysische vorm bestaan die stabiel, niet-hygroscopisch en gemakkelijk te formuleren is.

Samenvatting van de uitvinding

Met deze uitvinding is nu ontdekt dat het vervangen 30 van de chinuclidinering door een piperidinering de agonis-tische activiteit op 5-HT4 aanzienlijk verbetert.

! r >·.

3

Nu is dus tot onze verrassing gevonden dat de verbindingen van de onderhavige uitvinding een sterkere selectieve agonistische activiteit op 5-HT4 hebben wanneer men deze vergelijkt met de stand der techniek. Deze zijn dus 5 bruikbaar voor de behandeling van ziektetoestanden gemedi-eerd door 5-HT4-activiteit, zoals gastro-oesofageale re-fluxziekte, gastro-intestinale ziekte, gastrische motili-teitsstoornis, dyspepsie die niet door ulcera wordt veroorzaakt, functionele dyspepsie, prikkelbare-darm-syndroom 10 (IBS), constipatie, dyspepsie, oesophagitis, gastro-oesofageale ziekte, misselijkheid, ziekte van het centrale zenuwstelsel, ziekte van Alzheimer, cognitieve stoornis, emesis, migraine, neurologische ziekte, pijn, cardiovasculaire stoornissen, hartinsuffiëntie, hartaritmie, diatbe-15 tes en apnoesyndroom (hierna worden deze ziekten aangeduid als "5-HT4-ziekten").

De onderhavige uitvinding voorziet in een verbinding met de volgende formule (I):

Ox R4 . ir^vNv_H k/NM-R5 o

20 R

of een farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan, waarin: A staat voor een Ci~C4 alkyleengroep, waarbij de alkyleen-groep ongesubstitueerd of gesubstitueerd is met 1 tot 4 25 substituenten onafhankelijk gekozen uit de groep bestaande uit een Ci~C4 alkylgroep, een hydroxy-Ci-C4 alkylgroep en een C!-C2 alkoxy-Ci-C4 alkylgroep, waarbij twee van de substituenten eventueel een brug kunnen vormen, zodat een 3-tot 6-ledige ring wordt verkregen die ongesubstitueerd of 30 gesubstitueerd is met een hydroxygroep of een carboxy- groep, 4 R1 staat voor een waterstofatoom, een halogeenatoom of een C1-C4 al-kylgroep, R2 en R3 onafhankelijk staan voor een methyl- of ethyl-groep, of R2 en R3 tezamen een C2-C4 alkyleenbrug kunnen 5 vormen, zodat een 3- tot 5-ledige ring wordt verkregen, R4 staat voor een waterstofatoom, een halogeenatoom of een hydroxygroep en R5 staat voor een hydroxygroep, een carboxygroep, een tetrazolylgroep, een 5-oxo-l,2,4-oxadiazool-3-ylgroep of 10 een 5-oxo-l,2,4-thiadiazool-3-ylgroep.

De onderhavige uitvinding voorziet ook in het gebruik van een verbinding met de formule (I), of een farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan, elk zoals hierin beschreven, voor de vervaardiging van een geneesmiddel voor de 15 behandeling van een aandoening gemedieerd door modulerende 5-HT4-activiteit en met name agonistische 5-HT4-activiteit.

De onderhavige uitvinding voorziet bij voorkeur ook in het gebruik van een verbinding met de formule (I), of een farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan, elk zoals 20 hierin beschreven, voor de vervaardiging van een geneesmiddel voor de behandeling van ziekten gekozen uit 5-HT4-ziekten.

De onderhavige uitvinding voorziet ook in een farmaceutisch preparaat omvattende een verbinding met de formu-25 le (I), of een farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan, elk zoals hierin beschreven, tezamen met een farmaceutisch aanvaardbare drager voor de verbinding.

De onderhavige uitvinding voorziet ook in een farmaceutisch preparaat omvattende een verbinding met de formu-30 le (I), of een farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan, elk zoals hierin beschreven, tezamen met een farmaceutisch aanvaardbare drager voor de verbinding en een ander farmacologisch actief middel.

De onderhavige uitvinding voorziet bovendien in een 35 werkwijze voor de behandeling van een aandoening gemedieerd door modulerende 5-HT4~activiteit bij een patiënt die een zoogdier is, welke werkwijze omvat het toedienen aan

J

5 een zoogdier dat een dergelijke behandeling nodig heeft van een therapeutisch effectieve hoeveelheid van een verbinding met de formule (I), of een farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan, elk zoals hierin beschreven.

5 Voorbeelden van aandoeningen gemedieerd door module rende 5-HT4-activiteit op omvatten, maar zijn niet beperkt tot, 5-HT4-ziekten.

De verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen een geringe toxiciteit, een goede absorptie, een goede 10 verdeling, een goede oplosbaarheid, een geringere eiwit-bindingsaffiniteit anders dan bij een zuurpomp, een geringere geneesmiddel-geneesmiddelinteractie en een goede metabolische stabiliteit vertonen.

15 Uitvoerige beschrijving van de uitvinding

In de verbindingen van de onderhavige uitvinding kan wanneer A de Ci-C4 alkyleengroep is, deze Ci~C4 alkyleengroep een groep met rechte keten van 1 tot 4 kool-stofatomen zijn, en omvatten voorbeelden, maar zijn deze 20 niet beperkt tot, een methyleen, ethyleen, trimethyleen en tetramethyleen. Van deze heeft "methyleen of ethyleen de voorkeur; ethyleen heeft meer de voorkeur.

Wanneer R2 en R3 de C2-C4 alkyleenbrug vormen, zodat de 3- tot 5-ledige ring wordt verkregen, kan deze 3- tot 5-25 ledige ring een cycloalkylgroep met 3 tot 5 koolstofatomen zijn, en omvatten voorbeelden, maar zijn deze niet beperkt tot, cyclopropyl, cyclobutyl en cyclopentyl. Van deze heeft cyclopentyl de voorkeur.

; Wanneer R1 en R4 het halogeenatoom zijn, kan dit een ! 30 fluor-, chloor-, broom- of joodatoom zijn. Van deze hebben een fluoratoom en een chlooratoom de voorkeur; een fluor-atoom heeft meer de voorkeur.

Wanneer R1 en de substituent van A de Ci~C4 alkylgroep zijn, kan deze Ci-C4 alkylgroep een groep met rechte of 35 vertakte keten van 1 tot 4 koolstofatomen zijn, en omvatten voorbeelden, maar zijn deze niet beperkt tot, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, sec-butyl en 6 tert-butyl. Van deze heeft methyl of ethyl de voorkeur; methyl heeft voor R1 meer de voorkeur.

Wanneer de substituent van A de hydroxy - C1-C4 alkyl-groep is, staat deze voor de C1-C4 alkylgroep die gesubsti-5 tueerd is met hydroxy, en omvatten voorbeelden, maar zijn deze niet beperkt tot, hydroxymethyl, 2-hydroxyethyl, 1- j hydroxyethyl, 3-hydroxypropyl, 2-hydroxypropyl, 2-hydroxy- 1- methylethyl, 4-hydroxybutyl, 3-hydroxybutyl, 2-hydroxy-butyl, 3-hydroxy-2-methylpropyl en 3-hydroxy-l-methylpro- 10 pyl. Van deze hebben hydroxyalkylgroepen met 1 tot 3 kool-stofatomen de voorkeur; hydroxymethyl, 2-hydroxyethyl en 2- hydroxypropyl hebben meer de voorkeur.

Wanneer de substituent van A de C1-C2 alkoxy-Ci-C4 alkylgroep is, staat deze voor de C1-C4 alkylgroep die gesub-15 stitueerd is met methoxy of ethoxy, en omvatten voorbeelden, maar zijn deze niet beperkt tot, methoxymethyl, ethoxymethyl, 2-methoxyethyl, 2-ethoxyethyl, 1-methoxy-ethyl, 3-methoxypropyl, 3-ethoxypropyl, 2-methoxypropyl, 2- methoxy-l-methylethyl, 4-methoxybutyl, 4-ethoxybutyl, 3-20 methoxybutyl, 2-methoxybutyl, 3-methoxy-2-methylpropyl en 3- methoxy-l-methylpropyl. Van deze hebben alkoxyalkylgroe-pen met 2 tot 4 koolstofatomen de voorkeur; methoxymethyl, 2-methoxyethyl en 3-methoxypropyl hebben meer de voorkeur.

Wanneer 2 substituenten van A de brug vormen, zodat 25 de 3- tot 6-ledige ring wordt verkregen, kan deze een cy-cloalkyl- of heterocyclylgroep zijn, en omvatten voorbeelden cyclopropyl, cyclopentyl, cyclobutyl, cyclohexyl, me-thylcyclopropyl, ethylcyclopropyl, methylcyclobutyl, me-thylcyclopentyl, methylcyclohexyl, ethylcyclohexyl, hy-30 droxycyclopropyl, hydroxycyclobutyl, hydroxycyclopentyl, hydroxycyclohexyl, methoxycyclopropyl, methoxycyclobutyl, methoxycyclopentyl, methoxycyclohexyl, tetrahydrofuryl en tetrahydropyranyl, bij voorkeur cyclopropyl, cyclobutyl, ! cyclopentyl, cyclohexyl, methoxycyclohexyl en tetrahydro-35 pyranyl, en liefst cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl en i tetrahydropyranyl.

7

De uitdrukkingen "behandelen" en "behandeling" zoals hierin gebruikt, hebben betrekking op curatieve, pallia-tieve en profylactische behandeling, met inbegrip van het terugdringen, verlichten en remmen van de progressie van 5 of het voorkomen van de stoornis of aandoening waarop een dergelijke uitdrukking van toepassing is, of één of meer symptomen van een dergelijke stoornis of aandoening.

Voorkeursverbindingen van de onderhavige uitvinding zijn die verbindingen met de formule (I), of een farmaceu-10 tisch aanvaardbaar zout daarvan, elk zoals hierin beschreven, waarin: (A) A een C1-C2 alkyleengroep is, waarbij de alkyleengroep ongesubstitueerd of gesubstitueerd is met 1 tot 4 substituenten onafhankelijk gekozen uit de groep be- 15 staande uit een C1-C4 alkylgroep, een hydroxy-Ci-C^ alkylgroep en een Ci-C2 alkoxy-Ci-C4 alkylgroep, waarbij twee van de substituenten eventueel een brug kunnen vormen, zodat een 3- tot 6-ledige ring wordt verkregen; R1 een waterstofatoom, een halogeenatoom of 20 een C1-C4 alkylgroep is; R2 en R3 een methylgroep zijn of R2 en R3 tezamen een tetramethyleenbrug kunnen vormen/ zodat een 5-ledige ring wordt verkregen, R4 een waterstofatoom, een halogeenatoom of een hydroxygroep is en R5 een hydroxygroep, een carboxygroep, een 25 tetrazolylgroep, een 5-oxo-l,2,4-oxadiazool-3-ylgroep of een 5-oxo-l,2,4-thiadiazool-3-ylgroep is, (B) A een Ci~C2 alkyleengroep is, waarbij de alkyleengroep ongesubstitueerd of gesubstitueerd is met 1 of 2 substituenten onafhankelijk gekozen uit de groep be- 30 staande uit een C1-C4 alkylgroep, een hydroxy-Ci-C4 alkylgroep en een C1-C2 alkoxy-Ci-C4 alkylgroep, waarbij twee van de substituenten eventueel een brug kunnen vormen, zodat een 3- tot 6-ledige ring wordt verkregen; R1 een waterstofatoom of een halogeenatoom is; 35 R2 en R3 een methylgroep zijn of R2 en R3 tezamen een tetramethyleenbrug kunnen vormen, zodat een 5-ledige ring wordt verkregen, R4 een waterstofatoom is en R5 8 ' t 1 , een carboxygroep, een tetrazolylgroep, een 5-oxo- 1,2,4-oxadiazool-3-ylgroep of een 5-oxo-l, 2,4-thia-diazool-3-ylgroep is, (C) A een Ci-C2 alkyleengroep is, waarbij de alkyleengroep 5 ongesubstitueerd of gesubstitueerd is met 2 substitu- enten die onafhankelijk worden gekozen uit een groep bestaande uit een C1-C4 alkylgroep en een hydroxy-Ci-C* alkylgroep, waarbij twee van de substituenten eventueel een brug kunnen vormen, zodat een 3- tot 6-ledige 10 ring wordt verkregen; R1 een waterstofatoom of een fluoratoom is, R2 en R3 een methylgroep zijn of R2 en R3 tezamen een tetramethyleenbrug kunnen vormen, zodat een 5-ledige ring wordt verkregen, R4 een waterstofatoom is en R5 een carboxygroep of een tetrazolylgroep 15 is,

(D) A

is, R1 een waterstofatoom of een fluoratoom is; R2 en 20 R3 een methylgroep zijn; R4 een waterstofatoom is en R5 een carboxygroep of een tetrazolylgroep is, (E) A een Ci-C2 alkyleengroep is, waarbij de alkyleengroep ongesubstitueerd of gesubstitueerd is met 2 substituenten onafhankelijk gekozen uit de groep bestaande 25 uit een Ci-C2 alkylgroep en een hydroxy-Ci-C2 alkyl groep, waarbij twee van de substituenten eventueel een brug kunnen vormen, zodat een 4- tot 6-ledige ring wordt verkregen; R1 een waterstofatoom of een fluoratoom is; R2 en R3 een methylgroep zijn of R2 en 30 R3 tezamen een tetramethyleenbrug kunnen vormen, zodat een 5-ledige ring wordt verkregen; R4 een waterstofatoom is en R5 een carboxygroep of een tetrazolylgroep is,

(F) A

9

^ XSX

is, R1 een waterstofatoom of een fluoratoom is; R2 en R3 een methylgroep zijn; R4 een waterstofatoom is en 5 R5 een carboxygroep of een tetrazolylgroep is, (G) A een Ci-C4 alkyleengroep is, waarbij de alkyleengroep ongesubstitueerd of gesubstitueerd is met 1 tot 4 substituenten onafhankelijk gekozen uit de groep bestaande uit een C1-C4 alkylgroep, een hydroxy-Ci-C4 10 alkylgroep en een C1-C2 alkoxy-Ci-C4 alkylgroep, waar bij twee van de substituenten eventueel een brug kunnen vormen, zodat een 3- tot 6-ledige ring wordt verkregen die ongesubstitueerd of gesubstitueeerd is met een hydroxygroep of een carboxygroep; R1 een water-15 stofatoom, een halogeenatoom of een C1-C4 alkylgroep is; R2 en R3 tezamen een tetramethyleenbrug kunnen vormen, zodat een 5-ledige ring wordt verkregen; R4 een waterstofatoom, een halogeenatoom of een hydroxygroep is en R5 een hydroxygroep, een carboxygroep, een 20 tetrazolylgroep, een 5-oxo-l,2,4-oxadiazool-3-ylgroep of een 5-oxo-l,2,4-thiadiazool-3-ylgroep is, (Η) A een C1-C2 alkyleengroep is, waarbij de alkyleengroep ongesubstitueerd of gesubstitueerd is met 1 tot 4 substituenten onafhankelijk gekozen uit de groep be-25 staande uit een C1-C4 alkylgroep, een hydroxy-Ci-C4 alkylgroep en een Ci-C2 alkoxy-Ci-C4 alkylgroep, waarbij twee van de substituenten eventueel een brug kunnen vormen, zodat een 3- tot 6-ledige ring wordt verkregen; R1 een waterstofatoom of een halogeenatoom is; 30 R2 en R3 een methylgroep zijn of R2 en R3 tezamen een ' * * * 10 tetramethyleenbrug kunnen vormen, zodat een 5-ledige ring wordt verkregen; R4 een waterstofatoom, een halo-geenatoom of een hydroxygroep is en R5 een hydroxy-groep, een carboxygroep, een tetrazolylgroep, een 5-5 oxo-1,2,4-oxadiazool-3-ylgroep of een 5-oxo-l,2,4- thiadiazool-3-ylgroep is, (I) A een C1-C2 alkyleengroep is, waarbij de alkyleengroep ongesubstitueerd of gesubstitueerd is met 1 tot 4 substituenten onafhankelijk gekozen uit de groep be- 10 staande uit een Ci-C4 alkylgroep, een hydroxy-Ci-C4 alkylgroep en een C1-C2 alkoxy-Ci-C4 alkylgroep, waarbij twee van de substituenten eventueel een brug kunnen vormen, zodat een 3- tot 6-ledige ring wordt verkregen; R1 een waterstofatoom of een halogeenatoom is; 15 R2 en R3 een methylgroep zijn of R2 en R3 tezamen een tetramethyleenbrug kunnen vormen, zodat een 5-ledige ring wordt verkregen; R4 een waterstofatoom, een fluoratoom of een hydroxygroep is en R5 een hydroxygroep, een carboxygroep, een tetrazolylgroep, een 5- 20 oxo-1,2,4-oxadiazool-3-ylgroep of een 5-oxo-l,2,4- thidiazool-3-ylgroep is, (J) A een C1-C2 alkyleengroep is, waarbij de alkyleengroep ongesubstitueerd of gesubstitueerd is met 1 of 2 substituenten onafhankelijk gekozen uit de groep be- 25 staande uit een Ci-C4 alkylgroep, een hydroxy-Ci-C4 alkylgroep en een C1-C2 alkoxy-Ci~C4 alkylgroep, waarbij twee van de substituenten eventueel een brug kunnen vormen, zodat een 3- tot 6-ledige ring wordt verkregen; R1 een waterstofatoom of een halogeenatoom is; 30 R2 en R3 een methylgroep zijn; R4 een waterstofatoom is en R5 een carboxygroep, een tetrazolylgroep, een 5-oxo-1,2,4-oxodiazool-3-ylgroep of een 5-oxo-l,2,4-thiadiazool-3-ylgroep is, (K) A een Ci-C2 alkyleengroep is, waarbij de alkyleengroep 35 ongesubstitueerd of gesubstitueerd is met 2 substi tuenten onafhankelijk gekozen uit de groep bestaande uit een Ci-C4 alkylgroep en een hydroxy-Ci~C4 alkyl- ί i I * 11 groep, waarbij twee van de substituenten eventueel een brug kunnen vormen, zodat een 3- tot 6-ledige ring wordt verkregen; R1 een waterstofatoom of een fluoratoom is; R2 en R3 een methylgroep zijn; R4 een 5 waterstofatoom is en R5 een carboxygroep of een tetra- zolylgroep is.

Voorkeursklassen van verbindingen van de onderhavige uitvinding zijn die verbindingen met de formule (I), of een farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan, elk zoals 10 hierin beschreven, waarin:

(a) A een C1-C2 alkyleengroep is, waarbij de alkyleengroep ongesubstitueerd of gesubstitueerd is met 1 tot 4 substituenten onafhankelijk gekozen uit de groep bestaande uit een C1-C4 alkylgroep, een hydroxy-Ci-CU

15 alkylgroep en een C1-C2 alkoxy-Ci-C4 alkylgroep, waar bij twee van de substituenten eventueel een brug kunnen vormen, zodat een 3- tot 6-ledige ring wordt verkregen; R1 een waterstofatoom, een halogeenatoom of een C1-C4 alkylgroep is, 20 (b) A een C1-C2 alkyleengroep is, waarbij de alkyleengroep ongesubstitueerd of gesubstitueerd is met 1 of 2 substituenten onafhankelijk gekozen uit de groep bestaande uit een C1-C4 alkylgroep, een hydroxy-Ci-C4 alkylgroep en een C1-C2 alkoxy-Ci~C4 alkylgroep, waar-25 bij twee van de substituenten eventueel een brug kun nen vormen, zodat een 3- tot 6-ledige ring wordt verkregen, (c) A een C1-C2 alkyleengroep is, waarbij de alkyleengroep ongesubstitueerd of gesubstitueerd is met 2 substi-30 tuenten onafhankelijk gekozen uit de groep bestaande uit een C1-C4 alkylgroep en een hydroxy-Ci-C4 alkylgroep, waarbij twee van de substituenten eventueel een brug kunnen vormen, zodat een 3- tot 6-ledige ring wordt verkregen, 35 (d) A een C1-C2 alkyleengroep is, waarbij de alkyleengroep ongesubstitueerd of gesubstitueerd is met 2 substituenten onafhankelijk gekozen uit de groep bestaande * φ * t 12 uit een C1-C2 alkylgroep en een hydroxy-Ci~C2 alkyl-groep, waarbij twee van de substituenten eventueel een brug kunnen vormen, zodat een 4- tot 6-ledige ring wordt verkregen; R1 een waterstofatoom of een 5 fluoratoom is,

(e) A

t is,

10 (f) A

is, (g) R1 een waterstofatoom of een halogeenatoom is, 15 (h) R1 een waterstofatoom of een fluoratoom is, (i) R2 en R3 een methylgroep zijn of R2 en R3 tezamen een tetramethyleenbrug kunnen vormen, zodat een 5-ledige ring wordt verkregen, (j) R2 en R3 een methylgroep zijn, 20 (k) R4 een waterstofatoom is, (l) R5 een carboxygroep, een tetrazolylgroep, een 5-oxo- 1,2,4-oxadiazool-3-ylgroep of een 5-oxo-l,2,4-thia-diazool-3-ylgroep is, (m) R5 een carboxygroep of een tetrazolylgroep is.

25 Van deze klassen van verbindingen heeft een combinatie van (a) tot (m) ook de voorkeur. j 13 Eén uitvoeringsvorm van de onderhavige uitvinding voorziet in een verbinding gekozen uit de groep bestaande uit: l-{ [4- ({ [ (3, 3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-lii-indool-l-yl) -5 carbonyl]amino}methyl)piperidine-l-yl]methyl}cyclobutaan-carbonzuur, l-{[4-({[(6-fluor-3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-lH-in-dool-1-yl) carbonyl]amino}methyl)piperidine-l-yl]methyl}cy-clobutaancarbonzuur, 10 3-[4-({[(6-fluor-3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-lH-indool- 1-yl)carbonyl]amino}methyl)piperidine-l-yl]-2,2-dimethyl-propaanzuur, en een farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan.

Farmaceutisch aanvaardbare zouten van een verbinding 15 met de formule (I) omvatten de zuuradditiezouten en base-zouten (waaronder dizouten) daarvan.

Geschikte zuuradditiezouten worden gevormd uit zuren die niet-toxische zouten vormen. Voorbeelden omvatten de acetaat-, adipaat-, aspartaat-, benzoaat-, besylaat-, bi-20 carbonaat-/carbonaat-, bisulfaat-/sulfaat-, boraat-, cam-sylaat-, citraat-, cyclamaat-, edisylaat-, esylaat-, for-miaat-, fumaraat-, gluceptaat-, gluconaat-, glucuronaat-, hexafluorfosfaat-, hibenzaat-, hydrochloride-/chloride-, hydrobromide-/bromide-, hydrojodide-/jodide-, isethio-25 naat-, lactaat-, malaat-, maleaat-, molonaat-, mesylaat-, methylsulfaat-, naftylaat-, 2-napsylaat-, nicotinaat-, nitraat-, orotaat-, oxolaat-, palmitaat-, pamoaat-, fos-faat/waterstoffosfaat/diwaterstoffosfaat-, pyroglutamaat-, saccharaat-, stearaat-, succinaat-, tannaat-, tartraat-, 30 tosylaat-, trifluoracetaat- en xinofoaatzouten.

Geschikte basezouten worden gevormd uit basen die niet-toxische zouten vormen. Voorbeelden omvatten de aluminium-, arginine-, benzathine-, calcium-, choline-, diethylamine-, diolamine-, glycine-, lysine-, magnesium-, 35 meglumine-, olamine-, kalium-, natrium-, tromethanime- en zinkzouten.

14

Zie voor een overzicht van geschikte zouten "Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use" door Stahl en Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Duitsland, 2002). Een farmaceutisch aanvaardbaar zout van een verbin-5 ding met de formule (I) kan gemakkelijk worden bereid door tezamen mengen van oplossingen van de verbinding met de formule (1) en het gewenste zuur of de gewenste base, naar gelang van hetgeen van toepassing is. Het zout kan uit oplossing neerslaan en worden verzameld door affiltreren of 10 worden verkregen door afdamping van het oplosmiddel. De ionisatiegraad in het zout kan variëren van volledig geïoniseerd tot nagenoeg niet geïoniseerd.

De verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen in zowel ongesolvateerde als gesolvateerde vormen bestaan.

15 De uitdrukking "solvaat" wordt hierin gebruikt om een moleculair complex omvattende een verbinding van de onderhavige uitvinding en één of meer farmaceutisch aanvaardbare oplosmiddelmoleculen, bijvoorbeeld ethanol, te beschrijven. De uitdrukking "hydraat" wordt gebruikt wanneer het 20 oplosmiddel water is.

Farmaceutisch aanvaardbare solvaten volgens de onderhavige uitvinding omvatten hydraten en solvaten waarbij het oplosmiddel waaruit wordt gekristalliseerd met een isotoop gesubstitueerd kan zijn, bijv. D2O, de-aceton, d6~ ‘ 25 DMSO.

Vervat in de beschermingsomvang van de onderhavige uitvinding zijn complexen zoals clathraten, geneesmiddel-gastheer-inclusiecomplexen waarin, in tegenstelling tot de voornoemde solvaten, het geneesmiddel en de gastheer aan-30 wezig zijn in stoichiometrische of niet-stoichiometrische hoeveelheden. Ook vervat zijn complexen van het geneesmiddel die twee of meer organische en/of anorganische bestanddelen bevatten die in stoichiometrische of niet-stoichiometrische hoeveelheden kunnen zijn. De ontstane 35 complexen kunnen geïoniseerd, gedeeltelijke geïoniseerd of niet geïoniseerd zijn. Zie voor een overzicht van derge- 15 lijke complexen J. Pharm. Sci., 64 (8), 1269-1288, door

Haleblian (augustus 1975).

Hierna omvatten alle verwijzingen naar een verbinding met de formule (I) verwijzingen naar zouten en complexen 5 daarvan en naar solvaten en complexen van zouten daarvan.

De term "verbinding van de onderhavige uitvinding" of "verbindingen van de onderhavige uitvinding" heeft, tenzij anderszins wordt aangegeven, betrekking op een verbinding met de formule (I) zoals hiervoor gedefinieerd, polymor-10 fen, prodrugs en isomeren daarvan (met inbegrip van optische, geometrische en tautomere isomeren) zoals hierna gedefinieerd en van een isotooplabel voorziene verbindingen met de formule (I).

Ook binnen de beschermingsomvang van de onderhavige 15 uitvinding vallen zogenaamde "prodrugs" van de verbindingen met de formule (I) . Bepaalde derivaten van de verbindingen met de formule (I) die zelf weinig of geen farmacologische activiteit hebben, kunnen, wanneer deze in of aan het lichaam worden toegediend, dus worden omgezet in ver-20 bindingen met de formule (I) met de gewenste activiteit, bijvoorbeeld door hydrolytische splitsing. Dergelijke derivaten worden aangeduid als "prodrugs". Verdere informatie over het gebruik van prodrugs kan worden aangetroffen in "Pro-drugs as Novel Delivery Systems, Vol. 14, ACS Sym-25 posium Series (T. Higuchi en W. Stella) en "Bioreversible Carriers in Drug Design", Pergamon Press, 1987 (ed. E.B. Roche, American Pharmaceutical Association) .

Prodrugs volgens de onderhavige uitvinding kunnen bijvoorbeeld worden geproduceerd door vervangen van ge-30 schikte functies die in de verbindingen met de formule (I) aanwezig zijn door bepaalde resten die voor de deskundigen bekend zijn als "pro-resten" die, bijvoorbeeld, worden beschreven in "Design of Prodrugs" door H. Bundgaard (Elsevier, 1985). Enkele voorbeelden van prodrugs volgens de 35 onderhavige uitvinding omvatten: (i) wanneer de verbinding met de formule (I) een carbonzuurfunctie (-COOH) bevat, een ester daar- 16 van, bijvoorbeeld door vervanging van de waterstof door (Ci-Ce) alkyl, (ii) wanneer de verbinding met de formule (I) een al-coholfunctie (-0H) bevat, een ether daarvan, 5 bijvoorbeeld door vervanging van de waterstof door (Ci-Cë) alkanoyloxymethyl.

Verdere voorbeelden van vervangingsgroepen volgens de voorgaande voorbeelden en voorbeelden van andere prodrug-typen kunnen worden aangetroffen in de voornoemde litera-10 tuurplaatsen.

Ten slotte kunnen bepaalde verbindingen met de formule (I) zelf werken als prodrugs van andere verbindingen met de formule (Ij .

Verbindingen met de formule (I) die één of meer asym-15 metrische koolstofatomen bevatten, kunnen als twee of meer stereo-isomeren bestaan. Wanneer de verbinding bijvoorbeeld een keto- of oximgroep of een aromatische rest bevat, kan tautomere iosmerie ("tautomerie") optreden. Hieruit volgt dat een enkele verbinding meer dan één type iso-20 merie kan vertonen.

Vervat in de beschermingsomvang van de onderhavige uitvinding zijn alle stereo-isomeren, geometrische isome-ren en tautomere vormen van de verbindingen met de formule (I), met inbegrip van verbindingen die meer dan één type 25 isomerie vertonen, en mengsels van één of meer daarvan.

Ook vervat zijn zuuradditiezouten of basezouten waarin het tegenion optisch actief is, bijvoorbeeld D-lactaat of L-lysine, of racemisch is, bijvoorbeeld DL-tartraat of DL-arginine.

30 De onderhavige uitvinding omvat alle farmaceutisch aanvaardbare, van een isotooplabel voorziene verbindingen met de formule (I) waarin één of meer atomen worden vervangen door atomen met hetzelfde atoomgetal, maar met een atoommassa of massagetal die resp. dat verschilt van de 35 atoommassa of het massagetal die resp. dat doorgaans in de natuur wordt aangetroffen.

17

Voorbeelden van isotopen die geschikt zijn voor opneming in de verbindingen van de onderhavige uitvinding omvatten isotopen van waterstof, zoals 2H en 3H, koolstof, zoals UC, 13C en 14C, chloor, zoals 36C1, fluor, zoals 18F, 5 jood, zoals 123I en 125I, stikstof, zoals 13N en 15N, zuurstof, zoals 150, 170 en 180, fosfor, zoals 32P, en zwavel, zoals 35S.

Bepaalde van een isotooplabel voorziene verbindingen met de formule (I) , bijvoorbeeld die waarin een radioac-10 tieve isotoop is opgenomen, zijn bruikbaar in studies naar de verdeling van geneesmiddel en/of substraat in de weefsels. De radioactieve isotopen tritium, dus 3H, en kool-stof-14, dus 14C, zijn voor dit doel met name bruikbaar met het oog op het gemak waarmee deze kunnen worden opgenomen 15 en de gemakkelijke detectiewijzen.

Substitutie met zwaardere isotopen zoals deuterium, dus 2H, kan bepaalde therapeutische voordelen opleveren die voortvloeien uit een grotere metabolische stabiliteit, bijvoorbeeld een langere in vivo halfwaardetijd of lagere 20 doseereisen, en dus in bepaalde omstandigheden de voorkeur hebben.

Substitutie met isotopen die positronen emitteren, zoals nC, 18F, 150 en 13N, kan bruikbaar zijn in Postron

Emission Topography (PET)-studies voor het onderzoek naar 25 de bezetting van de substraatreceptor.

Van een isotooplabel voorziene verbindingen met de formule (I) kunnen in het algemeen worden bereid door ge- ; bruikelijke technieken die voor de deskundigen bekend zijn of door middel van werkwijzen die analoog zijn aan die 30 welke in de begeleidende voorbeelden en bereidingen worden beschreven, waarbij in plaats van de eerder gebruikte, niet van een label voorziene reagentia nu van een geschikt isotooplabel voorziene reagentia worden gebruikt.

Alle verbindingen met de formule (I) kunnen worden 35 bereid door middel van de procedures die in de hierna gegeven algemene werkwijzen worden beschreven, of door middel van de specifieke werkwijzen die in het gedeelte voor- ‘ # * · 18 beelden en het gedeelte bereidingen worden beschreven, of door middel van routinematige modificaties daarvan. De onderhavige uitvinding omsluit, behalve de daarin gebruikte nieuwe tussenproducten, tevens één of meer van deze werk-5 wijzen voor het bereiden van de verbinding met de formule (I) -

Algemene synthese

De verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen 10 worden bereid met diverse werkwijzen die bekend zijn voor de bereiding van verbindingen van dit type, bijvoorbeeld zoals wordt getoond in de volgende werkwijzen A tot en met I.

De volgende werkwijzen A en B illustreren de berei-15 ding van verbindingen met de formule (I) . De werkwijzen C tot en met I lichten de bereiding toe van diverse tussenproducten.

Tenzij anderszins wordt aangegeven hebben R1, R2, R3, R4, R5 en A in de volgende werkwijzen de hierboven gegeven | 20 betekenis. De term "beschermende groep" zoals hierna ge bruikt betekent een beschermende groep voor hydroxy, car-boxy of amino gekozen uit typische beschermende groepen voor hydroxy, carboxy of amino beschreven in Protective Groups in Organic Synthesis, onder redactie van T.W.

25 Greene et al. (John Wiley & Sons, 1999). Alle uitgangsmaterialen in de volgende algemene synthesen zijn commercieel verkrijgbaar of kunnen worden verkregen met gebruikelijke werkwijzen die voor de deskundigen bekend zijn, zoals Howard, Harry R. et al., J. Med. Chem., 1996, 39, 143/ 30 Joensson, N. et al., Acta Chem. Scand. Ser. B, 1974, 28, 225; Robertson, David W. et al., J. Med. Chem., 1986, 29, 1832; Quallich, George J. et al., Synthesis, 1993, 351, waarvan de beschrijvingen hierin zijn opgenomen door verwijzing.

35 * » · f 19

Werkwijze A

Deze ilustreert de bereiding van de verbindingen met de formule (I).

5 Reactieschema A

ste»A’ Vn-^I

(lil)

In reactieschema A is RSa R5 met de hierboven gegeven betekenis of een groep met de formule -COOR6, waarin R6 een beschermende groep voor een carboxygroep is.

10 De uitdrukking "beschermende groep voor een carboxy- groep" als hierin wordt gebruikt, duidt een beschermende groep aan die met chemische middelen kan worden afgesplitst, zoals door hydrogenolyse, hydrolyse, elektrolyse of fotolyse, en dergelijke beschermende groepen voor car-15 boxy worden beschreven in Protective Groups in Organic Synthesis, onder redactie van T.W. Greene et al. (John Wiley & Sons, 1999). Typische beschermende groepen voor car-boxy omvatten, maar zijn niet beperkt tot: methyl, ethyl, t-butyl, methoxymethyl, 2,2,2,-trichloorethyl, benzyl, di-20 fenylmethyl, trimethylsilyl, t-butyldimethylsilyl en al-lyl. Van deze groepen heeft t-butyl, ethyl of methyl de voorkeur.

Stap Al 25 In deze stap wordt de gewenste verbinding met de for mule (I) van de onderhavige uitvinding bereid door carbo-nylering van de verbinding met de formule (II) met de verbinding met de formule (III). De verbinding met de formule (II) is commercieel verkrijgbaar of kan worden bereid vol-30 gens de werkwijzen C en D die hierna worden gegeven. De verbinding met de formule (III) kan worden bereid volgens de werkwijzen E tot en met G die hierna worden gegeven.

20

De reactie wordt doorgaans en bij voorkeur uitgevoerd in aanwezigheid van een oplosmiddel. Er is geen bijzondere beperking aan de aard van het oplosmiddel dat zal worden gebruikt, mits het geen schadelijk effect heeft op de re-5 actie of de betrokken reagentia en het de reagentia, ten minste in enige mate, kan oplossen. Voorbeelden van geschikte oplosmiddelen omvatten, maar zijn niet beperkt tot: gehalogeneerde koolwaterstoffen, zoals dichloorme- thaan, chloroform, koolstoftetrachloride en 1,2-dichloor-10 ethaan; aromatische koolwaterstoffen, zoals benzeen, tolueen en nitrobenzeen; ethers, zoals diethylether, diiso-propylether, tetrahydrofuran en dioxaan, en amiden, zoals N,N-dimethylformamide en N,N-dimethylaceetamide. Van deze oplosmiddelen heeft dichloormethaan de voorkeur.

15 Er geldt evenmin een bijzondere beperking aan de aard van de gebruikte carbonyleringsmiddelen en een carbonyle-ringsmiddel dat doorgaans in reacties van dit type wordt gebruikt, kan evenzeer hier worden gebruikt. Voorbeelden van dergelijke carbonyleringsmiddelen omvatten, maar zijn 20 niet beperkt tot: een imidazoolderivaat zoals Ν,Ν'-carbo-nyldiimidazool (CDI); eèn chloorformiaat zoals trichloor-methylchloorformiaat en 4-nitrofenylchloorformiaat; ureum en trifosgeen. Van deze heeft 4-nitrofenylchloorformiaat de voorkeur.

25 De reactie kan plaatsvinden over een breed tempera- tuurtraject, en de precieze reactietemperatuur is niet van kritisch belang voor de onderhavige uitvinding. De reactietemperatuur die de voorkeur heeft, zal afhankelijk zijn van dergelijke factoren als de aard van het oplosmiddel en 30 de uitgangsmaterialen. In het algemeen is het echter gemakkelijk om de reactie uit te voeren bij een temperatuur van ongeveer 0°C tot ongeveer 100°C. De vereiste tijdsduur voor de reactie kan ook over een breed traject variëren, | hetgeen afhankelijk is van vele factoren, in het bijzonder 35 de reactietemperatuur en de aard van de uitgangsmaterialen en het oplosmiddel die worden gebruikt. Mits de reactie wordt uitgevoerd onder de voorkeursomstandigheden die hierboven worden genoemd, zal een periode van ongeveer 5 minuten tot ongeveer 24 uur doorgaans echter toereikend zijn.

21 ' I .,

In het geval waarin R5a een groep met de formule 5 -COOR6 is, zal de ontschermingsreactie volgen, zodat een carboxygroep wordt verkregen. Deze reactie wordt in bijzonderheden beschreven door T. W. Greene et al. in Protective Groups in Organic Synthesis, 369-453 (1999), waarvan de beschrijving hierin is opgenomen door verwijzing. Het 10 volgende is een voorbeeld van een typische reactie waarbij de beschermende t-butylgroep betrokken is.

De ontschermingsreactie wordt doorgaans en bij voorkeur uitgevoerd in aanwezigheid van een oplosmiddel. Er is geen bijzondere beperking aan de aard van het oplosmiddel 15 dat zal worden gebruikt, mits het geen schadelijk effect heeft op de reactie of de betrokken reagentia en het de reagentia, ten minste in enige mate, kan oplossen. Voorbeelden van geschikte oplosmiddelen omvatten, maar zijn niet beperkt tot: gehalogeneerde koolwaterstoffen, zoals 20 dichloormethaan, chloroform, koolstoftetrachloride en 1,2-dichloorethaan, en aromatische koolwaterstoffen, zoals benzeen, tolueen en nitrobenzeen. Van deze oplosmiddelen hebben gehalogeneerde koolwaterstoffen de voorkeur.

De ontschermingsreactie wordt uitgevoerd in aanwezig-25 heid van een zuur. Er geldt evenmin een bijzondere beperking aan de aard van de zuren die worden gebruikt, en een zuur dat doorgaans in reacties van dit type wordt gebruikt, kan evenzeer hier worden gebruikt. Voorbeelden van dergelijke zuren omvatten, maar zijn niet beperkt tot: zu-30 ren zoals waterstofchloride, azijnzuur, p-tolueensulfon- zuur en trifluorazijnzuur. Van deze heeft trifluorazijn- | zuur de voorkeur. !

De ontschermingsreactie kan worden uitgevoerd in aan- 1 wezigheid van een radicaalvanger. En is evenmin een bij-35 zondere beperking aan de aard van de radicaalvanger die wordt gebruikt, en een radicaalvanger die doorgaans in reacties van dit type wordt gebruikt kan evenzeer hier wor- ' * k 22 den gebruikt. Voorbeelden van dergelijke radicaalvangers omvatten, maar zijn niet beperkt tot: HBr, dimethylsul- foxide of (CH3CH2) 3S1H. Van deze heeft (CH3CH2)3SiH de voorkeur .

5 De ontschermingsreactie kan plaatsvinden over een breed temperatuurtraject, en de precieze reactietempera-tuur is voor de onderhavige uitvinding niet van kritisch belang. De reactietemperatuur die de voorkeur heeft zal afhankelijk zijn van dergelijke factoren als de aard van 10 het oplosmiddel en de uitgangsmaterialen. In het algemeen is het echter gemakkelijk om de reactie uit te voeren bij een temperatuur van ongeveer 0°C tot ongeveer 100°C. De vereiste tijdsduur voor de reactie kan ook over een breed traject variëren, hetgeen afhankelijk is van vele facto-15 ren, in het bijzonder de reactietemperatuur en de aard van de uitgangsmaterialen en het oplosmiddel die worden gebruikt. Mits de reactie wordt uitgevoerd onder de voorkeursomstandigheden die hierboven worden genoemd zal een periode van ongeveer 5 minuten tot ongeveer 24 uur door-20 gaans echter toereikend zijn.

Werkwijze B

Deze illustreert de bereiding van de verbindingen met de formule (I).

25

React ie schema B

0 R4 O R4

Stap 01 (IV) 0 R4

StapB2 H ^ '€%?, '

(VI) (VII) R

• * * 23

In reactieschema B heeft R5a de hierboven gegeven betekenis, is R7 een beschermende groep voor amino, is Aa A met de hierboven gegeven betekenis of een C1-C3 alkyleen-groep, waarbij de alkyleengroep ongesubstitueerd of gesub-5 stitueerd is met 1 tot 4 substituenten onafhankelijk gekozen uit de groep bestaande uit een halogeenatoom, een C1-C4 alkylgroep, een hydroxy-Ci~C4 alkylgroep en een C1-C2 al-koxy-Ci-C4 alkylgroep, waarbij twee van de substituenten eventueel kunnen worden samengenomen met de één of meer 10 koolstofatomen om een 3- tot 6-ledige ring te vormen, en is X een halogeenatoom zoals een joodatoom, een chloor-atoom of een broomatoom.

De term "beschermende groep voor amino" zoals hierin wordt gebruikt, duidt een beschermende groep aan die met 15 chemische middelen kan worden afgesplitst, zoals door hy-drogenolyse, hydrolyse, elektrolyse of fotolyse. Dergelijke beschermende groepen voor amino worden beschreven in Protective Groups in Organic Synthesis, onder redactie van T.W. Greene et al. (John Wiley & Sons, 1999). Typische be-20 schermende groepen voor amino omvatten, maar zijn niet beperkt tot: benzyl, C2H50(C=0)-, CH3(C=0)-, t-butyldime- thylsilyl, t-butyldifenylsilyl, benzyloxycarbonyl en t-bu-toxycarbonyl. Van deze groepen heeft t-butoxycarbonyl de voorkeur.

25

Stap BI

In deze stap wordt de verbinding met de formule (V) bereid door de ontscherming van de verbinding met de formule (IV), die bijvoorbeeld kan worden bereid met een 30 werkwijze die vergelijkbaar is met die beschreven in werkwijze A voor de bereiding van de verbinding met de formule (I) uit een verbinding met de formule (II) . Deze ontscher-mingswerkwijze wordt in detail beschreven door T.W. Greene et al. [Protective Groups in Organic Synthesis, 494-653, 35 (1999)], waarvan de beschrijving hierin is opgenomen door verwijzing. Het volgende vormt een voorbeeld van een typi- 24 sche werkwijze waarbij de beschermende groep t-butoxycarbonyl is betrokken.

De reactie wordt doorgaans en bij voorkeur uitgevoerd in aanwezigheid van een oplosmiddel. Er is geen bijzondere 5 beperking aan de aard van het oplosmiddel dat zal worden gebruikt, mits het geen schadelijk effect heeft op de reactie of de betrokken reagentia en het de reagentia, ten minste in enige mate, kan oplossen. Voorbeelden van geschikte oplosmiddelen omvatten, maar zijn niet beperkt 10 tot: gehalogeneerde koolwaterstoffen, zoals dichloorme- thaan, chloroform, koolstoftetrachloride en 1,2-dichloor-ethaan, en alcoholen, zoals methanol, ethanol, propanol, 2-propanol en butanol. Van deze oplosmiddelen hebben alcoholen de voorkeur.

15 De reactie wordt uitgevoerd in aanwezigheid van een overmatige hoeveelheid van een zuur. Er geldt evenmin een bijzondere beperking aan de aard van de zuren die worden gebruikt, en een zuur dat doorgaans in reacties van dit type wordt gebruikt kan evenzeer hier worden gebruikt. 20 Voorbeelden van dergelijke zuren omvatten, maar zijn niet beperkt tot: zuren zoals waterstofchloride of trifluor- azijnzuur. Van deze heeft waterstofchloride de voorkeur.

De reactie kan plaatsvinden over een breed tempera-tuurtraject en de precieze reactietemperatuur is niet van 25 kritisch belang voor de onderhavige uitvinding. De reactietemperatuur die de voorkeur heeft, zal afhankelijk zijn van dergelijke factoren als de aard van het oplosmiddel en de uitgangsmaterialen. In het algemeen is het echter gemakkelijk om de reactie uit te voeren bij een temperatuur 30 van ongeveer 0°C tot ongeveer 100°C. De vereiste tijdsduur voor de reactie kan ook over een breed traject variëren, hetgeen afhankelijk is van vele factoren, in het bijzonder de reactietemperatuur en de aard van de uitgangsmaterialen en het oplosmiddel die worden gebruikt. Mits de reactie 35 wordt uitgevoerd onder de voorkeursomstandigheden die hierboven worden genoemd zal een periode van ongeveer 5 * Ί » , 25 minuten tot ongeveer 24 uur doorgaans echter toereikend zijn.

Stap B2 5 In deze stap wordt de gewenste verbinding met de for mule (I) bereid door de koppeling (B2-a) van de verbinding met de formule (V), die wordt bereid als beschreven in i stap BI, met de verbinding met de formule (VI) of door de j reductieve aminering (B2-b) van de verbinding met de for- 10 mule (V) met de verbinding met de formule (VII).

(B2-a) koppeling met de verbinding met de formule (VI):

De reactie wordt doorgaans en bij voorkeur uitgevoerd in aanwezigheid van een oplosmiddel. Er is geen bijzondere 15 beperking aan de aard van het oplosmiddel dat zal worden gebruikt, mits het geen schadelijk effect heeft op de reactie of de betrokken reagentia en het de reagentia, ten minste in enige mate, kan oplossen. Voorbeelden van geschikte oplosmiddelen omvatten, maar zijn niet beperkt 20 tot: gehalogeneerde koolwaterstoffen, zoals dichloorme- thaan, chloroform, koolstoftetrachloride en 1,2-dichloor-ethaan; ethers, zoals diethylether, diisopropylether, te-trahydrofuran en dioxaan; aminen, zoals N-methylmorfoline, triethylamine, tripropylamine, tributylamine, diisopropy-25 lethylamine, dicyclohexylamine, N-methylpiperidine, N-me- thylpyrrolidine, pyridine, 4-pyrrolidinopyridine, N,N-di-methylaniline en JM^N-diethylaniline, en amiden, zoals N,N-dimethylformamide en 2\7,W-dimethylaceetamide. Van deze hebben Ν,Ν-dimethylformamide of N-methylpyrrolidine de voor-30 keur.

De reactie wordt uitgevoerd in aanwezigheid van een base. Er geldt evenmin een bijzondere beperking aan de aard van de base die wordt gebruikt, en een base die doorgaans in reacties van dit type wordt gebruikt kan evenzeer 35 hier worden gebruikt. Voorbeelden van dergelijke basen omvatten, maar zijn niet beperkt tot: aminen, zoals N-me- thylmorfoline, triethylamine, tripropylamine, tributylami- 26 • 9 i ne, diisopropylethylamine, dicyclohexylamine, N-methylpi-peridine, pyridine, 4-pyrrolidinopyridine, picoline, 4-(W,N-dimethylamino) pyridine, 2, 6-di (t-butyl) -4-methylpyri-dine, chinoline, W,N-dimethylaniline, W,N-diethylaniline, 5 1, 5-diazabicyclo[4.3.0]non-5-een (DBN), 1,4-diazabicyclo- [2.2.2]octaan (DABCO) en 1,8-diazabicyclo[5.4.0]undec-7-een (DBU); alkalimetaalhydriden, zoals lithiumhydride, na-triumhydride en kaliumhydride, en alkalimetaalalkoxiden, zoals natriummethoxide, natriumethoxide, kalium-t-butoxi-10 de. Van deze heeft diisopropylethylamine de voorkeur.

De reactie kan plaatsvinden over een breed tempera-tuurtraject en de precieze reactietemperatuur is niet van kritisch belang voor de onderhavige uitvinding. De reactietemperatuur die de voorkeur heeft zal afhankelijk zijn 15 van dergelijke factoren als de aard van het oplosmiddel en de uitgangsmaterialen. In het algemeen is het echter gemakkelijk om de reactie uit te voeren bij een temperatuur van ongeveer 0°C tot ongeveer 120°C. De vereiste tijdsduur voor de reactie kan ook over een breed traject variëren, 20 hetgeen afhankelijk is van vele factoren, in het bijzonder de reactietemperatuur en de aard van de uitgangsmaterialen en het oplosmiddel die worden gebruikt. Mits de reactie wordt uitgevoerd onder de voorkeursomstandigheden die hierboven wordt genoemd zal een periode van ongeveer 5 mi-25 nuten tot ongeveer 48 uur doorgaans echter toereikend zijn.

(B2-b) reductieve aminering:

De reactie wordt doorgaans en bij voorkeur uitgevoerd 30 in aanwezigheid van een oplosmiddel. Er is geen bijzondere beperking aan de aard van het oplosmiddel dat zal worden gebruikt, mits het geen schadelijk effect heeft op de reactie of de betrokken reagentia en het de reagentia, ten j minste in enige mate, kan oplossen. Voorbeelden van ge- ! 35 schikte oplosmiddelen omvatten, maar zijn niet beperkt tot: gehalogeneerde koolwaterstoffen, zoals dichloorme- thaan, chloroform, koolstoftetrachloride en 1,2-dichloor- • * » 27 ethaan; ethers, zoals diethylether, diisopropylether, di-methoxyethaan, tetrahydrofuran en dioxaan; alcohol, zoals methanol, ethanol, propanol, 2-propanol en butanol; azijnzuur, en water. Van deze oplosmiddelen hebben gehaloge-5 neerde koolwaterstoffen de voorkeur.

De reactie wordt uitgevoerd in aanwezigheid van een reductiemiddel. Er geldt evenmin een bijzondere beperking aan de aard van de reductiemiddelen die worden gebruikt en een reductiemiddel dat doorgaans in reacties van dit type 10 wordt gebruikt kan evenzeer hier worden gebruikt. Voorbeelden van een dergelijk reductiemiddel omvatten, maar zijn niet beperkt tot: natriumboorhydride, natriumcyano- boorhydride en natriumtriacetoxyboorhydride. Van deze heeft natrium triacetoxyboorhydride de voorkeur. De hoe-15 veelheid van het reductiemiddel die voor de reactie vereist is kan ook over een breed traject variëren, hetgeen afhankelijk is van vele factoren, in het bijzonder de re-actietemperatuur en de aard van de uitgangsmaterialen en het oplosmiddel die worden gebruikt. Als de reactie wordt 20 uitgevoerd onder voorkeursomstandigheden zal een chemisch equivalent in de verhouding van 1 tot 3 van het reductiemiddel tot het uitgangsmateriaal doorgaans echter toereikend zijn.

De reactie kan plaatsvinden over een breed tempera-25 tuurtrajeet en de precieze reactietemperatuur is niet van kritisch belang voor de onderhavige uitvinding. De reac-tietemperatuur die de voorkeur heeft, zal afhankelijk zijn van dergelijke factoren als de aard van het oplosmiddel en de uitgangsmaterialen. In het algemeen is het echter ge-30 makkelijk om de reactie uit te voeren bij een temperatuur van ongeveer -20°C tot ongeveer 60°C. De vereiste tijdsduur voor de reactie kan ook over een breed traject variëren, hetgeen afhankelijk is van vele factoren, in het bijzonder de reactietemperatuur en de aard van de uitgangsma-35 terialen en het oplosmiddel die worden gebruikt. Mits de reactie wordt uitgevoerd onder de voorkeursomstandigheden die hierboven worden genoemd zal een periode van ongeveer • * 28 5 minuten tot ongeveer 24 uur doorgaans echter toereikend zijn.

In het geval waarin R5a een groep met de formule -COOR6 is, zal de ontschermingsreactie volgen, zodat een 5 carboxygroep wordt verkregen. De reactie kan onder dezelfde omstandigheden worden uitgevoerd als beschreven in stap Al van werkwijze A.

Werkwijze C

10 Deze illustreert de bereiding van de verbindingen met de formule (II).

Reactieschema C

aNOj Stap C1 f''^r-N02 Stap C2 X COjR8 Oj R8 2 'L^xCOjR8 < * (IX) R,^ RJ R3 (VIII) COjR8 (X) R’-X (XI)

Stap C3 H

- "Oj? (II) 15 In reactieschema C is R8 een C1-C4 alkylgroep, bij voorkeur methyl of ethyl, en heeft X de hierboven gegeven betekenis.

Stap Cl 20 In deze stap wordt de verbinding met de formule (X) bereid door de koppeling (Cl-a) van een verbinding met de formule (VIII) en de verbinding met de formule (IX), het- ! geen wordt gevolgd door decarboxylering (Cl-b) van de ontstane verbinding. De verbinding met de formule (VIII) en 25 de verbinding met de formule (IX) zijn commercieel verkrijgbaar.

V.

' r “ » 29 (Cl-a) koppeling met de verbinding met de formule (VIII):

De reactie wordt doorgaans en bij voorkeur uitgevoerd in aanwezigheid van een oplosmiddel. Er is geen bijzondere beperking aan de aard van het oplosmiddel dat zal worden 5 gebruikt, mits het geen schadelijk effect heeft op de reactie of de betrokken reagentia en het de reagentia, ten minste in enige mate, kan oplossen. Voorbeelden van geschikte oplosmiddelen omvatten: ethers, zoals diethyl- ether, diisopropylether, tetrahydrofuran en dioxaan; ami-10 den, zoals formamide, N,N-dimethylformamide, N,N-dimethyl-aceetamide en hexamethylfosfortriamide, en sulfoxiden, zoals dimethylsulfoxide en sulfolaan. Van deze oplosmiddelen heeft N,A/-dimethylsulfoxide de voorkeur.

De reactie wordt uitgevoerd in aanwezigheid van een 15 base. Er geldt evenmin een bijzondere beperking aan de aard van de basen die worden gebruikt en een base die doorgaans in reacties van dit type wordt gebruikt kan hier evenzeer hier worden gebruikt. Voorbeelden van dergelijke basen omvatten: alkalimetaalhydriden, zoals lithiumhydri- 20 de, natriumhydride en kaliumhydride; alkalimetaalalkoxi-den, zoals natriummethoxide, natriumethoxide en kalium-t-butoxide; alkalimetaalcarbonaten, zoals lithiumcarbonaat, natriumcarbonaat en kaliumcarbonaat, en alkalimetaalami-den, zoals lithiumamide, natriumamide, kaliumamide, li-25 thiumdiisopropylamide, kaliumdiisopropylamide, natriumdi-isopropylamide, lithiumbis(trimethylsilyl)amide en kalium-bis(trimethylsilyl)amide. Van deze heeft natriumhydride de voorkeur.

De reactie kan plaatsvinden over een breed tempera-30 tuurtraject en de precieze reactietemperatuur is niet van kritisch belang voor de onderhavige uitvinding. De reactietemperatuur die de voorkeur heeft, zal afhankelijk zijn van dergelijke factoren als de aard van het oplosmiddel en de uitgangsmaterialen. In het algemeen is het echter ge-35 makkelijk om de reactie uit te voeren bij een temperatuur van ongeveer 20°C tot ongeveer 200°C. De vereiste tijds-. duur voor de reactie kan ook over een breed traject varië-

' « · I

30 ren, hetgeen afhankelijk is van vele factoren, in het bijzonder de reactietemperatuur en de aard van de uitgangsmaterialen en het oplosmiddel die worden gebruikt. Mits de reactie wordt uitgevoerd onder de voorkeursomstandigheden 5 die hierboven worden genoemd zal een periode van ongeveer 10 minuten tot ongeveer 24 uur doorgaans echter toereikend zijn.

(Cl-b)decarboxylering 10 De reactie wordt doorgaans en bij voorkeur uitgevoerd in aanwezigheid van een oplosmiddel. Er is geen bijzondere beperking aan de aard van het oplosmiddel dat zal worden gebruikt, mits het geen schadelijk effect heeft op de reactie of de betrokken reagentia en het de reagentia, ten 15 minste in enige mate, kan oplossen. Voorbeelden van geschikte oplosmiddelen omvatten: ethers, zoals diethyl- ether, diisopropylether, tetrahydrofuran en dioxaan, ami-den; zoals formamide, ΛΓ,Ν-dimethylformamide, W,W-dimethyl-aceetamide en hexamethylfosfortriamide, en sulfoxiden, zo-20 als dimethylsulfoxide en sulfolaan. Van deze oplosmiddelen heeft Ν,Ν-dimethylsulfoxide de voorkeur.

De reactie wordt uitgevoerd in aanwezigheid van een metaalhalogenide en water. Er is geen bijzondere beperking aan de aard van het metaalhalogenide dat zal worden ge- 25 bruikt, mits het geen al te schadelijk effect op de reac tie heeft. Voorbeelden van het metaalhalogenide omvatten: lithiumchloride, kaliumchloride, natriumchloride en na-triumjodide. Van deze heeft lithiumchloride de voorkeur.

De reactie kan plaatsvinden over een breed tempera-30 tuurtraject en de precieze reactietemperatuur is niet van kritisch belang voor de onderhavige uitvinding. De reactietemperatuur die de voorkeur heeft, zal afhankelijk zijn van dergelijke factoren als de aard van het oplosmiddel en de uitgangsmaterialen. In het algemeen is het echter ge-35 makkelijk om de reactie uit te voeren bij een temperatuur van ongeveer 50°C tot ongeveer 200°C. De vereiste tijdsduur voor de reactie kan ook over een breed traject varië-

‘ t ► I

31 ren, hetgeen afhankelijk is van vele factoren, in het bijzonder de reactietemperatuur en de aard van de uitgangsmaterialen en het oplosmiddel die worden gebruikt. Mits de reactie wordt uitgevoerd onder de voorkeursomstandigheden 5 die hierboven worden genoemd zal een periode van ongeveer 10 minuten tot ongeveer 24 uur doorgaans echter toereikend zi jn.

Stap C2 10 In deze stap wordt de verbinding met de formule (XI) bereid door alkylering van de verbinding met de formule (X) met de verbindingen met de formule R2-X en R3-X.

De reactie wordt doorgaans en bij voorkeur uitgevoerd in aanwezigheid van een oplosmiddel. Er is geen bijzondere 15 beperking aan de aard van het oplosmiddel dat zal worden gebruikt, mits het geen schadelijk effect heeft op de reactie of de betrokken reagentia en het de reagentia, ten minste in enige mate, kan oplossen. Voorbeelden van geschikte oplosmiddelen omvatten: ethers, zoals diethyl- 20 ether, diisopropylether, tetrahydrofuran en dioxaan; ami- den, zoals formamide, Ν,Ν-dimethylformamide, N,W-dimethyl-aceetamide en hexamethylfosfortriamide, en sulfoxiden, zoals dimethylsulfoxide en sulfolaan. Van deze oplosmiddelen heeft Ν,Ν-dimethylformamide de voorkeur.

25 De reactie wordt uitgevoerd in aanwezigheid van een base. Er geldt evenmin een bijzondere beperking aan de aard van de base die wordt gebruikt en een base die doorgaans in reacties van dit type worden gebruikt kan evenzeer hier worden gebruikt. Voorbeelden van dergelijke ba-30 sen omvatten: alkalimetaalhydriden, zoals lithiumhydride, natriumhydride en kaliumhydride; alkalimetaalalkoxiden, zoals natriummethoxide, natriumethoxide en kalium-t-bu- toxide; alkalimetaalcarbonaten, zoals lithiumcarbonaat, natriumcarbonaat en kaliumcarbonaat; alkalimetaalamiden, 35 zoals lithiumamide, natriumamide, kaliumamide, lithiumdi- isopropylamide, kaliumdiisopropylamide, natriumdiisopro-pylamide, lithiumbis(trimethylsilyl)amide en kalium-bis- * * · i 32 (trimethylsilyl)amide, en organische lithiumverbindingen, zoals n-butyllithium, sec-butyllithium, t-butyllithium en fenyllithium. Van deze heeft natriumhydride of n-butyllithium de voorkeur.

5 De reactie kan worden uitgevoerd in aanwezigheid of afwezigheid van additieven zoals 16-kroon-6, N,N, N’ ,N'-te-tramethylethyleendiamine (TMEDA) en hexamethylfosfortria-mide (HMPA). Van deze additieven heeft 16-kroon-6 of TMEDA de voorkeur.

10 De reactie kan plaatsvinden over een breed tempera- tuurtraject en de precieze reactietemperatuur is niet van kritisch belang voor de onderhavige uitvinding. De reac- j tietemperatuur die de voorkeur heeft, zal afhankelijk zijn van dergelijke factoren als de aard van het oplosmiddel en 15 de uitgangsmaterialen. In het algemeen is het echter gemakkelijk om de reactie uit te voeren bij een temperatuur van ongeveer 50°C tot ongeveer 200°C. De vereiste tijdsduur voor de reactie kan ook over een breed traject variëren, hetgeen afhankelijk is van vele factoren, in het bij-20 zonder de reactietemperatuur en de aard van de uitgangsmaterialen en het oplosmiddel die worden gebruikt. Mits de reactie wordt uitgevoerd onder de voorkeursomstandigheden die hierboven worden genoemd zal een periode van ongeveer 10 minuten tot ongeveer 24 uur doorgaans echter toereikend 25 zijn.

Stap C3

In deze stap wordt de verbinding met de formule (II) bereid door ringsluiten van de verbinding met de formule 30 (XI) onder reductieve omstandigheden.

De reactie wordt doorgaans en bij voorkeur uitgevoerd in aanwezigheid van een oplosmiddel. Er is geen bijzondere beperking aan de aard van het oplosmiddel dat zal worden gebruikt, mits het geen schadelijk effect heeft op de re-35 actie of de betrokken reagentia en het de reagentia, ten minste in enige mate, kan oplossen. Voorbeelden van geschikte oplosmiddelen omvatten: alcoholen, zoals methanol, * ♦ » .

33 ethanol, propanol, 2-propanol en butanol, en esters, zoals ethylacetaat en propylacetaat. Van deze oplosmiddelen heeft methanol de voorkeur.

De reactie wordt uitgevoerd in aanwezigheid van een 5 reductiemiddel. Er geldt evenmin een bijzondere beperking aan de aard van de reductiemiddelen die worden gebruikt en een reductiemiddel dat doorgaans in reacties van dit type wordt gebruikt kan evenzeer hier worden gebruikt. Voorbeelden van dergelijke reductiemiddelen omvatten: combina-10 ties van een waterstofbron, zoals waterstofgas en ammo-niumformiaat, en een katalysator, zoals palladium-koolstof, platina en Raney-nikkel, en een combinatie van metalen, zoals zink en ijzer, en zuren, zoals waterstof-chloride, azijnzuur en azijnzuur-ammoniumchloridecomplex. 15 Van deze heeft de combinatie van ijzer en azijnzuur de voorkeur.

De reactie kan plaatsvinden over een breed tempera-tuurtraject en de precieze reactietemperatuur is niet van kritisch belang voor de onderhavige uitvinding. De reac-20 tietemperatuur die de voorkeur heeft, zal afhankelijk zijn van dergelijke factoren als de aard van het oplosmiddel en de uitgangsmaterialen. In het algemeen is het echter gemakkelijk om de reactie uit te voeren bij een temperatuur van ongeveer 10°C tot ongeveer 50°C in het geval waarbij 25 de combinatie van de waterstofbron en de katalysator als het reductiemiddel wordt gebruikt, of bij ongeveer 50°C tot ongeveer 200°C in het geval waarbij de combinatie van de metalen en de zuren als het reductiemiddel wordt ge- j bruikt. De vereiste tijdsduur voor de reactie kan ook over 30 een breed traject variëren, hetgeen afhankelijk is van vele factoren, in het bijzonder de reactietemperatuur en de aard van de uitgangsmaterialen en het oplosmiddel die worden gebruikt. Mits de reactie wordt uitgevoerd onder de voorkeursomstandigheden die hierboven worden genoemd zal 35 een periode van ongeveer 10 minuten tot ongeveer 24 uur doorgaans echter toereikend zijn.

* < * , 34

Werkwijze D

Deze illustreert de bereiding van de verbindingen met de formule (II).

5 Reactieschema D

"'CCcw' — >o5“ -==- 'Oj? (X) (XII) (II)

In reactieschema D hebben R8 en X elk de hierboven gegeven betekenis.

10 Stap Dl

In deze stap wordt de verbinding met de formule (XII) bereid door ringsluiten van de verbinding met de formule (X) die commercieel verkrijgbaar is of wordt bereid volgens stap Cl van werkwijze C. De reactie kan onder dezelf-15 de omstandigheden worden uitgevoerd als beschreven in stap C3 van werkwijze C.

Stap D2

In deze stap wordt de verbinding met de formule (II) 20 bereid door alkylering van de verbinding met de formule (XII) met de verbindingen met de formule R2-X en R3-X. De reactie kan onder dezelfde omstandigheden worden uitgevoerd als beschreven in stap C2 van werkwijze C.

25 Werkwijze E

Deze illustreert de bereiding van de verbinding met de formule (III).

Reactieschema E

• 1 · < 35 R9 ^ ^ Stap E1 o0 ^ R* Stap E2 H L.NH OHC^R58 H l,N_R5a -- {XIII) ™ ^ (XIV) R4 H2N^k^ R5a (lil)

In reactieschema E hebben X, Aa en R3a elk de hierboven gegeven betekenis en is R9 een beschermende groep voor 5 een aminogroep.

Stap El

In deze stap wordt de verbinding met de formule (XIV) bereid door koppelen van de verbinding met de formule 10 (XIII) met een verbinding met de formule (VI) of door de reductieve aminering van de verbinding met de formule (XIII) met de verbinding met de formule (VII). De verbinding met de formule (XIII) kan worden bereid volgens de werkwijzen H en I die hierna worden gegeven, of deze is 15 commercieel verkrijgbaar.

Stap E2

In deze stap wordt de verbinding met de formule (III) bereid door de ontscherming van de verbinding met de for- 20 mule (XIV) die wordt bereid als beschreven in stap El. De reactie kan onder dezelfde omstandigheden worden uitgevoerd als beschreven in stap BI van werkwijze B.

Werkwijze F

25 Deze illustreert de bereiding van de verbinding met de formule (III), waarin A Ab is.

Reactieschema F

36

StapF' 8,5,162 Η,Ν-^^Ι H H-Y H k^O R« kA^ R,0°N^p,« (llla) <*"') m Jrö r (XVI)

In reactieschema F hebben R5a, R6 en R9 elk de hierboven gegeven betekenis, is R10 een silylgroep zoals t-bu-5 tyldimethylsilyl, t-butyldifenylsilyl, triethylsilyl of trimethylsilyl, en bij voorkeur trimethylsilyl, staan R11 en R12 onafhankelijk voor een halogeenatoom, een Ci~C4 j alkylgroep, een hydroxy-Ci-C4 alkylgroep en een C1-C2 al- koxy-Ci-C4-alkylgroep, waarbij R11 en R12 eventueel kunnen 10 worden samengenomen met het koolstofatoom waaraan deze gebonden zijn, zodat een 3- tot 6-ledige ring wordt gevormd, is Ab A met de hierboven gegeven betekenis, met dien verstande dat een methyleengroep en een gesubstitueerde me-thyleengroep worden uitgesloten, en is Y een alkoxygroep 15 met 1 tot 4 koolstofatomen, een imidazolylgroep of een ftaalimidylgroep.

Stap F1

In deze stap wordt de verbinding met de formule (XV) 20 bereid door condensatie van de verbinding met de formule (XIII) met de verbinding met de formule H-Y in aanwezigheid van paraformaldehyd. Een verbinding met de formule (XIII) kan worden bereid volgens werkwijze H en I, of deze is commercieel verkrijgbaar.

25 In het geval waarin Y geen alkoxygroep is, wordt de reactie doorgaans en bij voorkeur uitgevoerd in aanwezigheid van een oplosmiddel. Er is geen bijzondere beperking aan de aard van het oplosmiddel dat zal worden gebruikt, mits het geen schadelijk effect heeft op de reactie of de 30 betrokken reagentia en het de reagentia, ten minste in enige mate, kan oplossen. Voorbeelden van geschikte oplosmiddelen omvatten, maar zijn niet beperkt tot: gehaloge- • < ' « 37 neerde koolwaterstoffen, zoals dichloormethaan, chloroform, koolstoftetrachloride en 1,2-dichloorethaan, en alcoholen, zoals methanol, ethanol, propanol, 2-propanol en butanol. Van deze heeft dichloormethaan of ethanol de 5 voorkeur.

De reactie kan plaatsvinden over een breed tempera-tuurtraject en de precieze reactietemperatuur is niet van kritisch belang voor de onderhavige uitvinding. De reactietemperatuur die de voorkeur heeft, zal afhankelijk zijn 10 van dergelijke factoren als de aard van het oplosmiddel en de uitgangsmaterialen. In het algemeen is het echter gemakkelijk om de reactie uit te voeren bij een temperatuur van ongeveer 0°C tot ongeveer 120°C. De vereiste tijdsduur voor de reactie kan ook over een breed traject variëren, 15 hetgeen afhankelijk is van vele factoren, in het bijzonder de reactietemperatuur en de aard van de uitgangsmaterialen en het oplosmiddel die worden gebruikt. Mits de reactie wordt uitgevoerd onder de voorkeursomstandigheden die hierboven worden genoemd zal een periode van ongeveer 5 20 minuten tot ongeveer 48 uur doorgaans echter toereikend zijn.

Stap F2

In deze stap wordt de verbinding met de formule (II-25 Ia) bereid door een Mannich-reactie van de verbinding met de formule (XV) en de verbinding met de formule (XVI).

De reactie wordt doorgaans en bij voorkeur uitgevoerd in aanwezigheid van een oplosmiddel. Er is geen bijzondere j beperking aan de aard van het oplosmiddel dat zal worden I 30 gebruikt, mits het geen schadelijk effect heeft op de re actie of de betrokken reagentia en het de reagentia, ten minste in enige mate, kan oplossen. Voorbeelden van geschikte oplosmiddelen omvatten, maar zijn niet beperkt tot: gehalogeneerde koolwaterstoffen, zoals dichloorme- 35 thaan, chloroform, koolstoftetrachloride en 1,2-dichloorethaan; ethers, zoals diethylether, diisopropylether, te-trahydrofuran en dioxaan; nitrillen, zoals acetonitril en * 4 . 4 38 benzonitril, en amiden, zoals formamide, N,N-dimethylfor-mamide, N,N-dimethylaceetamide en hexamethylfosfortriami-de. Van deze oplosmiddelen heeft dichloormethaan de voorkeur.

5 De reactie wordt uitgevoerd in aanwezigheid van een

Lewiszuur. Er geldt evenmin een bijzondere beperking aan de aard van de Lewiszuren die worden gebruikt, en een Lewiszuur dat doorgaans in reacties van dit type wordt gebruikt kan evenzeer hier worden gebruikt. Voorbeelden van 10 dergelijke Lewiszuren omvatten, maar zijn niet beperkt tot: BF3, A1C13, FeCl3, MgCl2, AgCl, Fe(N03)3, CF3S03Si (CH3) 3, Yb(CF3S03)3 en SnCl4. Van deze heeft

Yb(CF3S03)3, CF3S03Si (CH3) 3 of MgCl2 de voorkeur.

De reactie kan plaatsvinden over een breed tempera-15 tuurtraject en de precieze reactietemperatuur is niet van kritisch belang voor de onderhavige uitvinding. De reactietemperatuur die de voorkeur heeft, zal afhankelijk zijn van dergelijke factoren als de aard van het oplosmiddel en de uitgangsmaterialen. In het algemeen is het echter ge-20 makkelijk om de reactie uit te voeren bij een temperatuur van ongeveer 0°C tot ongeveer 100°C. De vereiste tijdsduur voor de reactie kan ook over een breed traject variëren, hetgeen afhankelijk is van vele factoren, in het bijzonder de reactietemperatuur en de aard van de uitgangsmaterialen 25 en het oplosmiddel die worden gebruikt. Mits. de reactie wordt uitgevoerd onder de voorkeursomstandigheden die hierboven worden genoemd zal een periode van ongeveer 5 minuten tot ongeveer 24 uur doorgaans echter toereikend zijn.

30

Werkwijze G

Deze illustreert de bereiding van de verbinding met de formule (III), waarin R4 een waterstofatoom is en A Ab is.

35

Reactieschema G

» 4 . f 39 - Stap 01 . Sta p G2 0VN1 NC'A 'Ria - H2N^A.Rfia -— |^N b.R5· W (XVI) Γ (XVIII) (XVII)

StapG3 Stap G4 Η2Ν'^|^Λνν) - k^N^b-R53 - Ov*53 (XIX) (II lb)

In reactieschema G hebben Aa, Ab en R5a elk de hierboven gegeven betekenis, is elk van R en R' een C1-C4 alkyl-5 groep, en bij voorkeur een methylgroep, of een aralkyl-groep zoals een benzyl- of fenethylgroep, en bij voorkeur een benzylgroep.

Stap G1 10 In deze stap wordt de verbinding met de formule (XVI) bereid door reductie van de cyaangroep van de verbinding met de formule (XV), die commercieel verkrijgbaar is.

De reactie wordt doorgaans en bij voorkeur uitgevoerd in aanwezigheid van een oplosmiddel. Er is geen bijzondere 15 beperking aan de aard van het oplosmiddel dat zal worden gebruikt, mits het geen schadelijk effect heeft op de reactie of de betrokken reagentia en het de reagentia, ten minste in enige mate, kan oplossen. Voorbeelden van geschikte oplosmiddelen omvatten, maar zijn niet beperkt 20 tot: ethers, zoals diethylether, diisopropylether, te- trahydrofuran en dioxaan; aromatische koolwaterstoffen, zoals benzeen, tolueen en nitrobenzeen, en alcoholen, zoals methanol, ethanol, propanol, 2-propanol en butanol. Van deze heeft methanol de voorkeur.

25 De reactie wordt uitgevoerd in aanwezigheid van een reductiemiddel. Er geldt evenmin een bijzondere beperking aan de aard van de reductiemiddelen die worden gebruikt en een reductiemiddel dat doorgaans in reacties van dit type ‘ < · 1 40 wordt gebruikt kan evenzeer hier worden gebruikt. Voorbeelden van dergelijke reductiemiddelen omvatten, maar zijn niet beperkt tot: metaalboorhydriden zoals natrium-boorhydride en natriumcyanoboorhydride; combinaties van 5 waterstofgas en een katalysator zoals palladium-koolstof, platina en Raney-nikkel, en hydrideverbindingen zoals li-thiumaluminiumhydride en diisobutylaluminiumhydride. Van deze heeft Raney-nikkel de voorkeur.

De reactie kan plaatsvinden over een breed tempera-10 tuurtraject en de precieze reactietemperatuur is niet van kritisch belang voor de onderhavige uitvinding. De reactietemperatuur die de voorkeur heeft, zal afhankelijk zijn van dergelijke factoren als de aard van het oplosmiddel en de uitgangsmaterialen. In het algemeen is het echter ge-15 makkelijk om de reactie uit te voeren bij een temperatuur van ongeveer 0°C tot ongeveer 100°C. De vereiste tijdsduur voor de reactie kan ook over een breed traject variëren, hetgeen afhankelijk is van vele factoren, in het bijzonder de reactietemperatuur en de aard van de uitgangsmaterialen 20 en het oplosmiddel die worden gebruikt. Mits de reactie wordt uitgevoerd onder de voorkeursomstandigheden die hierboven worden genoemd zal een periode van ongeveer 5 minuten tot ongeveer 24 uur doorgaans echter toereikend zijn.

25

Stap G2

In deze stap wordt de verbinding met de formule (XVIII) bereid door in reactie brengen van een verbinding met de formule (XVII) , die commercieel verkrijgbaar is, 30 met een verbinding met de formule (XVI).

De reactie wordt doorgaans en bij voorkeur uitgevoerd in aanwezigheid van een oplosmiddel. Er is geen bijzondere beperking aan de aard van het oplosmiddel dat zal worden gebruikt, mits het geen schadelijk effect heeft op de re-35 actie of de betrokken reagentia en het de reagentia, ten minste in enige mate, kan oplossen. Voorbeelden van geschikte oplosmiddelen omvatten, maar zijn niet beperkt 41 I tot: water, en alcoholen zoals methanol, ethanol, propa- nol, 2-propanol en butanol. Van deze heeft een mengsel van water en ethanol de voorkeur.

! ! De reactie wordt uitgevoerd in aanwezigheid van een 5 base. Er geldt evenmin een bijzondere beperking aan de aard van de base die wordt gebruikt en een base die doorgans in reacties van dit type wordt gebruikt kan evenzeer hier worden gebruikt. Voorbeelden van dergelijke basen omvatten, maar zijn niet beperkt tot: alkalimetaalhydroxi- 10 den, zoals lithiumhydroxide, natriumhydroxide en kaliumhy-droxide; alkalimetaalalkoxiden, zoals natriummethoxide, natriumethoxide, kalium-t-butoxide en alkalimetaalcarbona-ten, zoals lithiumcarbonaat, natriumcarbonaat en kalium-carbonaat. Van deze heeft kaliumcarbonaat de voorkeur.

15 De reactie kan plaatsvinden over een breed tempera tuurt ra j eet en de precieze reactietemperatuur is niet van kritisch belang voor de onderhavige uitvinding. De reactietemperatuur die de voorkeur heeft, zal afhankelijk zijn van dergelijke factoren als de aard van het oplosmiddel en 20 de uitgangsmaterialen. In het algemeen is het echter gemakkelijk om de reactie uit te voeren bij een temperatuur van ongeveer 0°C tot ongeveer 120°C. De vereiste tijdsduur voor de reactie kan ook over een breed traject variëren, hetgeen afhankelijk is van vele factoren, in het bijzonder 25 de reactietemperatuur en de aard van de uitgangsmaterialen en het oplosmiddel die worden gebruikt. Mits de reactie echter wordt uitgevoerd onder de voorkeursomstandigheden die hierboven worden genoemd zal een periode van ongeveer 5 minuten tot ongeveer 24 uur doorgaans echter toereikend 30 zijn.

Stap G3

In deze stap wordt de verbinding met de formule (XIX) bereid door omzetten van de oxogroep van de verbinding met 35 de formule (XVIII)in een cyaangroep in aanwezigheid van p-tolueensulfonylmethylisocyanide.

1 4 · , 42

De reactie wordt doorgaans en bij voorkeur uitgevoerd in aanwezigheid van een oplosmiddel. Er is geen bijzondere beperking aan de aard van het oplosmiddel dat zal worden gebruikt, mits het geen schadelijk effect heeft op de re-5 actie of de betrokken reagentia en het de reagentia, ten minste in enige mate, kan oplossen. Voorbeelden van geschikte oplosmiddelen omvatten, maar zijn niet beperkt tot: ethers, zoals diethylether, diisopropylether, ethy- leenglycoldimethylether, tetrahydrofuran en dioxaan, en 10 alcoholen, zoals methanol, ethanol, propanol, 2-propanol en butanol. Van deze heeft een mengsel van ethyleenglycol-dimethylether en ethanol de voorkeur.

De reactie wordt uitgevoerd in aanwezigheid van een base. Er geldt evenmin een bijzondere beperking aan de 15 aard van de base die wordt gebruikt en een base die gewoonlijk in reacties van dit type wordt gebruikt kan evenzeer hier worden gebruikt. Voorbeelden van dergelijke basen omvatten, maar zijn niet beperkt tot: alkalimetaalal-koxiden, zoals natriummethoxide, natriumethoxide en ka-20 lium-t-butoxide. Van deze heeft kalium-t-butoxide de voorkeur.

De reactie kan plaatsvinden over een breed tempera-tuurtraject en de precieze reactietemperatuur is niet van kritisch belang voor de onderhavige uitvinding. De reac-25 tietemperatuur die de voorkeur heeft zal afhankelijk zijn van dergelijke factoren als de aard van het oplosmiddel en de uitgangsmaterialen. In het algemeen is het echter ge- I

makkelijk om de reactie uit te voeren bij een temperatuur van ongeveer 0°C tot ongeveer 100°C. De vereiste tijdsduur ; 30 voor de reactie kan ook over een breed traject variëren, j hetgeen afhankelijk is van vele factoren, in het bijzonder de reactietemperatuur en de aard van de uitgangsmaterialen en het oplosmiddel die worden gebruikt. Mits de reactie wordt uitgevoerd onder de voorkeursomstandigheden die 35 hierboven worden genoemd zal een periode van ongeveer 5 minuten tot ongeveer 24 uur doorgaans, echter toereikend zijn.

43

Stap G4

In deze stap wordt de verbinding met de formule (Illb) bereid door reductie van de cyaangroep van de ver-5 binding met de formule (XIX). De reactie kan onder dezelfde omstandigheden worden uitgevoerd als beschreven in stap G1 van werkwijze G.

Werkwijze H

10 Deze illustreert de bereiding van verbindingen met de formule (XIII), waarin R4 een halogeenatoom is.

Reactieschema H

Stap H1 <2^ StapH2 H0^ \>IR13 L.NR13 *" L>IR13 ^ (CH3)3S(0)l ^ ^ (XX) (XXI) (XXII)

Stap H3 _ Stap H4 dB _ R4a

k^NR13 H

(XXIID

(XII la) 15 In reactieschema H is R4a een halogeenatoom, heeft R9 de hierboven gegeven betekenis en is R13 een beschermende groep voor een aminogroep, en bij voorkeur een benzoyl-groep.

20 Stap Hl

In deze stap wordt de verbinding met de formule (XXI) bereid door omzetten van de carbonylgroep van de verbinding met de formule (XX) in de epoxidegroep.

De reactie wordt doorgaans en bij voorkeur uitgevoerd 25 in aanwezigheid van een oplosmiddel. Er is geen bijzondere beperking aan de aard van het oplosmiddel dat zal worden gebruikt, mits het geen schadelijk effect heeft op de reactie of de betrokken reagentia en het de reagentia, ten 44 minste in enige mate, kan oplossen. Voorbeelden van geschikte oplosmiddelen omvatten, maar zijn niet beperkt tot: amiden, zoals formamide, Ν,Ν-dimethylformamide, N,N-dimethylaceetamide en hexamethylfosfortriamidè; sulfoxi-5 den, zoals dimethylsulfoxide of sulfolaan. Van deze oplosmiddelen heeft dimethylsulfoxide de voorkeur.

De reactie wordt uitgevoerd in aanwezigheid van een base. Er geldt evenmin een bijzondere beperking aan de aard van de base die wordt gebruikt en een base die door-10 gaans in reacties van dit type wordt gebruikt kan evenzeer hier worden gebruikt. Voorbeelden van dergelijke basen omvatten, maar zijn niet beperkt tot: alkalimetaalalkoxiden, zoals natriummethoxide, natriumethoxide en kalium-t-bu-toxide, en alkalimetaalcarbonaten, zoals lithiumcarbonaat, 15 natriumcarbonaat en kaliumcarbonaat. Van deze heeft kalium- t-butoxide de voorkeur.

De rèactie kan plaatsvinden over een breed tempera-tuurtraject en de precieze reactietemperatuur is niet van kritisch belang voor de onderhavige uitvinding. De reac-20 tietemperatüur die de voorkeur heeft, zal afhankelijk zijn van dergelijke factoren als de aard van het oplosmiddel en de uitgangsmaterialen. In het algemeen is het echter gemakkelijk om de reactie uit te voeren bij een temperatuur van ongeveer 0°C tot ongeveer 100°C. De vereiste tijdsduur 25 voor de reactie kan ook over een breed traject variëren, hetgeen afhankelijk is van vele factoren, in het bijzonder de reactietemperatuur en de aard van de uitgangsmaterialen en het oplosmiddel die worden gebruikt. Mits de reactie wordt uitgevoerd onder de voorkeursomstandigheden die 30 hierboven worden genoemd zal een periode van ongeveer 5 minuten tot ongeveer 24 uur doorgaans echter toereikend zijn.

Stap H2 35 In deze stap wordt de verbinding met de formule (XX) bereid door in reactie brengen van een waterstofhalogenide met de verbinding met de formule (XXI).

45

De reactie wordt doorgaans en bij voorkeur uitgevoerd in aanwezigheid van een oplosmiddel. Er is geen bijzondere beperking aan de aard van het oplosmiddel dat zal worden gebruikt, mits het geen schadelijk effect heeft op de re-5 actie of de betrokken reagentia en het de reagentia, ten minste in enige mate, kan oplossen. Voorbeelden van geschikte oplosmiddelen omvatten, maar zijn niet beperkt tot: ethers, zoals diethylether, diisopropylether, te- trahydrofuran en dioxaan; amiden, zoals formamide, N,N-10 dimethylformamide, N,N-dimethylaceetamide en hexamethyl-fosfortriamide. Van deze oplosmiddelen heeft tetrahydrofu-ran de voorkeur.

De reactie kan plaatsvinden over een breed tempera-tuurtraject en de precieze reactietemperatuur is niet van 15 kritisch belang voor de onderhavige uitvinding. De reactietemperatuur die de voorkeur heeft, zal afhankelijk zijn van dergelijke factoren als de aard van het oplosmiddel en de uitgangsmaterialen. In het algemeen is het echter gemakkelijk om de reactie uit te voeren bij een temperatuur 20 van ongeveer 0°C tot ongeveer 100°C. De vereiste tijdsduur voor de reactie kan ook over een breed traject variëren, hetgeen afhankelijk is van. vele factoren, in het bijzonder de reactietemperatuur en de aard van de reactiematerialen en het oplosmiddel die worden gebruikt. Mits de reactie 25 wordt uitgevoerd onder de voorkeursomstandigheden die hierboven worden genoemd zal èen periode van ongeveer 5 minuten tot ongeveer 24 uur doorgaans echter toereikend zijn.

30 Stap H3

In deze stap wordt de verbinding met de formule (XXIII) bereid door reactie van de verbinding met de formule (XXII) met natriumazide (H3-a), hetgeen wordt gevolgd door reductie van de azidegroep (H3-b).

35 * * \ 46 (H3-a) reactie met natriumazide;

De reactie wordt doorgaans en bij voorkeur uitgevoerd in aanwezigheid van een oplosmiddel. Er is geen bijzondere beperking aan de aard van het oplosmiddel dat zal worden 5 gebruikt, mits het geen schadelijk effect heeft op de reactie of de betrokken reagentia en het de reagentia, ten minste in enige mate, kan oplossen. Voorbeelden van ge- j i schikte oplosmiddelen omvatten, maar zijn niet beperkt tot: gehalogeneerde koolwaterstoffen, zoals dichloorme- 10 thaan, chloroform, koolstoftetrachloride en 1,2-dichloor-ethaan; ethers, zoals diethylether, diisopropylether, te-trahydrofuran en dioxaan; amiden, zoals formamide, N,N-di-methylformamide, Ν,Ν-dimethylaceetamide en hexamethylfos- fortriamide, en sulfoxiden zoals dimethylsulfoxide en sul-15 folaan. Van deze oplosmiddelen heeft N,N-dimethylformamide de voorkeur.

Voor het toevoegen van natriumazide wordt de hydroxy- i groep omgezet in een vertrekkende groep, zoals een methyl- | sulfonylgroep, een trifluormethylsulfonylgroep en een 4- j 20 methylfenylsulfonylgroep, door toevoegen van reagentia zo- i als trifluormethaansulfonylchloride, mesylchloride en j tosylchloride. Van deze reagentia heeft mesylchloride de | voorkeur. |

De reactie kan plaatsvinden over een breed tempera- J

25 tuurtraject en de precieze reactietemperatuur is niet van ' kritisch belang voor de onderhavige uitvinding. De reactietemperatuur die de voorkeur heeft, zal afhankelijk zijn van dergelijke factoren als de aard van het oplosmiddel en de uitgangsmaterialen. In het algemeen is het echter ge-30 makkelijk om de reactie uit te voeren bij een temperatuur van ongeveer 0°C tot ongeveer 120°C. De vereiste tijdsduur voor de reactie kan ook over een breed traject variëren, hetgeen afhankelijk is van vele factoren, in het bijzonder de reactietemperatuur en de aard van de uitgangsmaterialen 35 en het oplosmiddel die worden gebruikt. Mits de reactie wordt uitgevoerd onder de voorkeursomstandigheden die hierboven worden genoemd zal een periode van ongeveer 5 • *' r 47 minuten tot ongeveer 24 uur doorgaans echter toereikend zijn.

(H3-b) reductie 5 De reactie kan worden uitgevoerd onder dezelfde om standigheden als beschreven in stap G1 van werkwijze G.

Stap H4

In deze stap wordt de verbinding met de formule (XII-10 Ia) bereid door inbrengen van de beschermende groep voor amino R9 in de primaire aminogroep (H4-a) en selectief ontschermen van de beschermende groep voor amino R13 uit de secundaire aminogroep (H4-b).

15 (H4-a) Inbrengen van de beschermende groep voor amino:

Deze reactie wordt in detail beschreven door T.W. Greene et al. [Protective Groups in Organic Synthesis, 494-653, (1999)], waarvan de beschrijving hierin is opge nomen door verwijzing. Het volgende vormt een voorbeeld 20 van een typische reactie waarbij de beschermende groep t-butoxycarbonyl is betrokken.

De reactie wordt doorgaans en bij voorkeur uitgevoerd in aanwezigheid van een oplosmiddel. Er is geen bijzondere beperking aan de aard van het oplosmiddel dat zal worden 25 gebruikt, mits het geen schadelijk effect heeft op de reactie of de betrokken reagentia en het de reagentia, ten minste in enige mate, kan oplossen. Voorbeelden van geschikte oplosmiddelen omvatten, maar zijn niet beperkt tot: water; ethers, zoals diethylether, diisopropylether, 30 tetrahydrofuran en dioxaan, en sulfoxiden, zoals dimethyl-sulfoxide en sulfolaan. Van deze oplosmiddelen heeft tetrahydrofuran de voorkeur.

De reactie wordt uitgevoerd in aanwezigheid van een reagens. Er geldt evenmin een bijzondere beperking aan de 35 aard van de reagentia die worden gebruikt en een reagens dat gewoonlijk in de reacties van dit type wordt gebruikt kan evenzeer hier worden gebruikt. Voorbeelden van derge- • * * 48 lijke reagentia omvatten, maar zijn niet beperkt tot: di-t-butylcarbonaat en 1-(t-butoxycarbonyl)benztriazool. Van deze heeft di-t-butylcarbonaat de voorkeur.

De reactie kan plaatsvinden over een breed tempera-5 tuurtraject en de precieze reactietemperatuur is niet van kritisch belang voor de onderhavige uitvinding. De reactietemperatuur die de voorkeur heeft, zal afhankelijk zijn van dergelijke factoren als de aard van het oplosmiddel en de uitgangsmaterialen. In het algemeen is het echter ge-10 makkelijk om de reactie uit te voeren bij een temperatuur van ongeveer 0°C tot ongeveer 120°C. De vereiste tijdsduur voor de reactie kan ook over een breed traject variëren, hetgeen afhankelijk is van vele factoren, in het bijzonder de reactietemperatuur en de aard van de uitgangsmaterialen 15 en het oplosmiddel die worden gebruikt. Mits de reactie wordt uitgevoerd onder de voorkeursomstandigheden die hierboven worden genoemd zal een periode van ongeveer 5 minuten tot ongeveer 24 uur doorgaans echter toereikend zijn. ! 20 : (H4-b) ontscherminq:

Deze werkwijze wordt in detail beschreven door T.W.

Greene et al., Protective Groups in Organic Synthesis; 494-653, (1999), waarvan de beschrijving hierin is opgeno- 25 men door verwijzing. Het volgende vormt een voorbeeld van een typische werkwijze waarbij de beschermende benzoyl-groep is betrokken, in aanwezigheid van combinaties van waterstofgas en een katalysator zoals palladium-koolstof of platina.

30 De reactie wordt doorgaans en bij voorkeur uitgevoerd in aanwezigheid van een oplosmiddel. Er is geen bijzondere beperking aan de aard van het oplosmiddel dat zal worden gebruikt mits het geen schadelijk effect heeft op de reactie of de betrokken reagentia en het de reagentia, ten 35 minste in enige mate, kan oplossen. Voorbeelden van geschikte oplosmiddelen omvatten, maar zijn niet beperkt tot: gehalogeneerde koolwaterstoffen, zoals dichloorme- ' r f « 49 thaan, chloroform, koolstoftetrachloride en 1,2-dichloor-ethaan; alcoholen, zoals methanol, ethanol, propanol, 2-propanol en butanol, en ethers, zoals diethylether, diiso-propylether, tetrahydrofuran en dioxaan. Van deze oplos-5 middelen heeft methanol de voorkeur.

De reactie kan plaatsvinden over een breed tempera-tuurtraject en de precieze reactietemperatuur is niet van kritisch belang voor de onderhavige uitvinding. De reactietemperatuur die de voorkeur heeft, zal afhankelijk zijn 10 van dergelijke factoren als de aard van het oplosmiddel en de uitgangsmaterialen. In het algemeen is het echter gemakkelijk om de reactie uit te voeren bij een temperatuur van 0°C tot ongeveer 120°C. De vereiste tijdsduur voor de reactie kan ook over een breed traject variëren, hetgeen 15 afhankelijk is van vele factoren, in het bijzonder de reactietemperatuur en de aard van de uitgangsmaterialen en het oplosmiddel die worden gebruikt. Mits de reactie wordt uitgevoerd onder de voorkeursomstandigheden die hierboven worden genoemd zal een periode van ongeveer 5 minuten tot 20 ongeveer 24 uur doorgaans echter toereikend zijn.

Werkwijze I

Deze illustreert de bereiding van verbindingen met de formule (XIII), waarin R4 een hydroxygroep is.

25

Reactieschema I

OH

°V^1 Stap II Stap 12 k^NR13 —-- k^NR13-- (XX) (XXIV)

OH Stap 13 _e OH

Η,Ν'Ν^ --

k^NR13 H

(XXV) (XI Ha)

In reactieschema I hebben R9 en R13 elk de hierboven gegeven betekenis.

30 r « , 50

Stap II

In deze stap wordt de verbinding met de formule (XXIV) bereid door in reactie brengen van de carbonylgroep van de verbinding met de formule (XX) , die commercieel 5 verkrijgbaar is, met trimethylsilylcyanide.

De reactie wordt doorgaans en bij voorkeur uitgevoerd in aanwezigheid van een oplosmiddel. Er is geen bijzondere beperking aan de aard van het oplosmiddel dat zal worden gebruikt, mits het geen schadelijk effect heeft op de re-10 actie of de betrokken reagentia en het de reagentia, ten minste in enige mate, kan oplossen. Voorbeelden van geschikte oplosmiddelen omvatten, maar zijn niet beperkt tot: aromatische koolwaterstoffen, zoals benzeen, tolueen en nitrobenzeen; gehalogeneerde koolwaterstoffen, zoals 15 dichloormethaan, chloroform, koolstoftetrachloride en 1,2-dichloorethaan; ethers, zoals diethylether, diisopropyl-ether, ethyleenglycoldimethylether, tetrahydrofuran en di-oxaan; nitrillen, zoals acetonitril en benzonitril, en alcoholen, zoals methanol, ethanol, propanol, 2-propanol en 20 butanol. Van deze heeft tolueen de voorkeur.

De reactie wordt uitgevoerd in aanwezigheid van een reagens. Er geldt evenmin een bijzondere beperking aan de aard van de reagentia die worden gebruikt en een reagens dat gewoonlijk in reacties van dit type wordt gebruikt kan 25 evenzeer hier worden gebruikt. Voorbeelden van een dergelijk reagens omvatten, maar zijn niet beperkt tot: Lewis-zuren, zoals BF3, AICI3, FeCl3, AgCl, Znl2, Fe(NC>3)3, CF3S03Si (CH3) 3, Yb(CF3SC>3)3 en SnCl4,· basen, zoals CaO; ethers zoals 18-kroon-6; zuren, zpals Amberlite XAD-4-30 kunsthars. Van deze heeft Znl2 de voorkeur.

De reactie kan plaatsvinden over een breed tempera-tuurtraject en de precieze reactietemperatuur is. niet van kritisch belang voor de onderhavige uitvinding. De reactietemperatuur die de voorkeur heeft, zal afhankelijk zijn 35 van dergelijke factoren als de aard van het oplosmiddel en de uitgangsmaterialen. In het algemeen is het echter gemakkelijk om de reactie uit te voeren bij een temperatuur V f , 51 van ongeveer 0°C tot ongeveer 100°C. De vereiste tijdsduur voor de reactie kan ook over een breed traject variëren, hetgeen afhankelijk is van vele factoren, in het bijzonder de reactietemperatuur en de aard van de uitgangsmaterialen 5 en het oplosmiddel die worden gebruikt. Mits de reactie wordt uitgevoerd onder de voorkeursomstandigheden die ! hierboven worden genoemd zal een periode van ongeveer 5 j minuten tot ongeveer 24 uur doorgaans echter toereikend ! zijn.

10

Stap 12

In deze stap wordt de verbinding met de formule (XXV) bereid door omzetten van de cyaangroep van de verbinding met de formule (XXII) in een aminogroep. De reactie kan 15 onder dezelfde omstandigheden worden uitgevoerd als be schreven in stap G1 van werkwijze.

Stap 13

In deze stap wordt de verbinding met de formule 20 (XlIIa) bereid door beschermen en ontschermen van de ami- nogroepen van de verbinding met de formule (XXV). De reactie kan onder dezelfde omstandigheden worden uitgevoerd als beschreven in stap H4 van werkwijze H.

De verbindingen met de formule (I) en de tussenpro-25 ducten van de bovengenoemde bereidingswerkwijzen kunnen worden geïsoleerd en gezuiverd door middel van gebruikelijke procedures, zoals destillatie, herkristallisatie of chromatografische scheiding.

De verbindingen van de onderhavige uitvinding die be-30 stemd zijn voor farmaceutisch gebruik kunnen als kristal- lijne of amorfe producten worden toegediend. Deze kunnen bijvoorbeeld worden verkregen als vaste massa's, poeders of films door middel van werkwijzen als neerslaan, kristallisatie, vriesdrogen, sproeidrogen of drogen door in-35 damping. Drogen met een magnetronoven of golven met radiofrequentie kan voor dit doel worden gebruikt.

9 ♦ , 52

Gebruikelijke technieken voor de bereiding/isolering van afzonderlijke enantiomeren omvatten chirale synthese uit een geschikte optische zuivere precursor of scheiding van het racemaat (of het racemaat van een zout of deri-5 vaat) met, bijvoorbeeld, chirale hogedrukvloeistofchroma-tografie (HPLC).

Als alternatief kan een werkwijze voor de optische scheiding van een racemaat (of een racemische voorloper) op geschikte wijze worden gekozen uit gebruikelijke proce-10 dures, bijvoorbeeld preferente kristallisatie of scheiding van diastereomere zouten tussen een basische rest van een verbinding met de formule (I) en een geschikt optisch actief zuur zoals wijnsteenzuur.

Deze kunnen alleen of in combinatie worden toegediend 15 met één of meer andere verbindingen van de onderhavige uitvinding of in combinatie met één of meer andere geneesmiddelen (of als een combinatie daarvan) . In het algemeen zullen deze worden toegediend als een farmaceutisch preparaat in associatie met één of meer farmaceutisch aanvaard-20 bare dragers of excipiënten. De uitdrukking "drager” of "excipiënt" wordt hierin gebruikt ter omschrijving van een ander bestanddeel van de één of meer verbindingen van de onderhavige uitvinding. De keuze van de drager of excipient zal in grote mate afhankelijk zijn van factoren zoals 25 de desbetreffende wijze van toediening, het effect van de excipiënt op oplosbaarheid en stabiliteit en de aard van de doseervorm.

Farmaceutische preparaten die geschikt zijn voor afgifte van de verbindingen van de onderhavige uitvinding en 30 werkwijzen voor hun bereiding zullen voor de deskundigen voor de hand liggen. Dergelijke preparaten en werkwijzen voor hun bereiding kunnen bijvoorbeeld worden aangetroffen in "Remington's Parmaceutical Sciences", 19e editie (Mack Publishing Company, 1995).

35 Ϋ * , 53

ORALE TOEDIENING

De verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen oraal worden toegediend. Orale toediening kan inslikken behelzen, zodat de verbinding het maagdarmkanaal binnen-5 gaat, of er kan buccale of sublinguale toediening worden gebruikt, waardoor de verbinding de bloedstroom rechtstreeks vanuit de mond binnengaat.

Preparaten die geschikt zijn voor orale toediening omvatten vaste preparaten zoals, bijvoorbeeld, tabletten, 10 capsules die deeltjes bevatten, vloeistoffen of poeders, pastilles (waaronder met vloeistof gevulde), kauwgommen, multi- en nano-deeltjes, gelen, oplossing van vaste stof, liposomen, films (waaronder muco-adhesieve) , ovules, sprays en vloeibare preparaten.

15 Vloeibare preparaten omvatten bijvoorbeeld suspen sies, oplossingen, siropen en elixirs. Dergelijke preparaten kunnen worden gebruikt als vulmiddelen in zachte of harde capsules en omvatten in een typisch geval een drager, bijvoorbeeld water, ethanol, polyethyleenglycol, pro-20 pyleenglycol, methylcellulose of een geschikte olie, en één of meer emulgatoren en/of suspendeermiddelen. Vloeibare preparaten kunnen ook worden bereid door samenstelling uit een vaste stof, bijvoorbeeld uit een sachet.

De verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen 25 ook worden gebruikt als snel in oplossing gaande, snel desintegrerende doseervormen zoals die welke worden beschreven in Expert Opinion in Therapeutic Patents, 11 (6), 981-986, door Liang en Chen (2001).

Voor doseervormen als tabletten kan het geneesmiddel, 30 afhankelijk van de dosis, ongeveer 1 gew.% tot ongeveer 80 gew.% van de doseervorm, en in een meer typisch geval ongeveer 5 gew.% tot ongeveer 60 gew.% van de doseervorm uitmaken. Behalve het geneesmiddel bevatten tabletten in het algemeen een desintegreermiddel. Voorbeelden van des-35 integreermiddelen omvatten natriumzetmeelglycolaat, na-triumcarboxymethylcellulose, calciumcarboxymethylcellulose, croscarmellosenatrium, crospovidon, polyvinylpyrroli- 54 don, methylcellulose, microkristallijne cellulose, met lagere alkyl gesubstitueerde hydroxypropylcellulose, zetmeel, voorgegelatineerde zetmeel en natriumalginaat. In het algemeen zal het desintegreermiddel ongeveer 1 gew.% 5 tot ongeveer 25 gew.% en bij voorkeur ongeveer 5 gew.% tot ongeveer 20 gew.% van de doseervorm omvatten.

Bindmiddelen worden in het algemeen gebruikt om cohe- ! sieve eigenschappen aan een tabletpreparaat te verlenen. j

Geschikte bindmiddelen omvatten microkristallijne cellulo- j 10 se, gelatine, suikers, polyethyleenglycol, natuurlijke en | synthetische gommen, polyvinylpyrrolidon, voorgegelati- j neerde zetmeel, hydroxypropylcellulose en hydroxypropylme- j thylcellulose. Tabletten kunnen ook verdunningsmiddelen j bevatten, zoals lactose (monohydraat, gesproeidroogd mono- j 15 hydraat, watervrije en dergelijke), mannitol, xylitol, i dextrose, sacharose, sorbitol, microkristallijne cellulose, zetmeel en dibasisch calciumfosfaat-dihydraat.

Tabletten kunnen eventueel oppervlakactieve middelen bevatten, zoals natriumlaurylsulfaat en polysorbaat 80, en 20 glijmiddelen zoals siliciumdioxide en talk. Wanneer deze aanwezig zijn kunnen oppervlakactieve middelen ongeveer 0,2 gew.% tot ongeveer 5 gew.% van het tablet en glijmiddelen ongeveer 0,2 gew.% tot ongeveer 1 gew.% van het tablet omvatten.

25 Tabletten bevatten in het algemeen ook smeermiddelen zoals magnesiumstearaat, calciumstearaat, zinkstearaat, natriumstearylfumaraat en mengsels van magnesiumstearaat met natriumlaurylsulfaat. Smeermiddelen omvatten in het algemeen ongeveer 0,25 gew.% tot ongeveer 10 gew.% en bij 30 voorkeur ongeveer 0,5 gew.% tot ongeveer 3 gew.% van het tablet.

Andere mogelijke bestanddelen omvatten antioxidanten, kleurstoffen, geur- en smaakstoffen, conserveermiddelen en smaakmaskerende middelen.

35 Voorbeelden van tabletten bevatten tot ongeveer 80% geneesmiddel, ongeveer 10 gew.% tot ongeveer 90 gew.% bindmiddel, ongeveer 0 gew.% tot ongeveer 85 gew.% verdun- i > , ' 55 ningsmiddel, ongeveer 2 gew.% tot ongeveer 10 gew.% desin-tegreermiddel en ongeveer 0,25 gew.% tot ongeveer 10 gew.% smeermiddel.

Tabletmengsels kunnen voor het vormen van tabletten 5 rechtstreeks of met een roller worden samengeperst. Tabletmengsels of gedeelten van mengsels kunnen als alternatief nat, droog of door smelten worden gegranuleerd, men kan deze laten smelten en weer doen stollen of deze kunnen worden geëxtrudeerd voor het tabletteren. Het eindprepa-10 raat kan één of meer lagen omvatten en al of niet bekleed zijn; het kan zelfs ingekapseld zijn.

De formulering van tabletten wordt besproken in "Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Vol. 1", door Η.

Lieberman en L. Lachman, Marcel Dekker, N.Y., N.Y., VS, 15 1980 (ISBN 0-8247-6918-X).

Vaste preparaten voor orale toediening kunnen worden geformuleerd voor onmiddellijke en/of gemodificeerde afgifte. Preparaten voor gemodificeerde afgifte omvatten die voor vertraagde, ononderbroken, gepulseerde, gecontroleer-20 de, doelgerichte en geprogrammeerde afgifte.

Geschikte preparaten voor gemodificeerde afgifte voor de doeleinden van de onderhavige uitvinding worden beschreven in Amerikaans octrooischrift no. 6.106.864. Bijzonderheden van andere geschikte afgiftetechnologieën, zo-25 als hoogenergetische dispersies en osmotische en beklede deeltjes kunnen worden aangetroffen in Pharmaceutical Technology On-line, 25(2), van Verma et al., 25 (2) 1-14 (2001) . Het gebruik van kauwgom voor het verkrijgen van gecontroleerde afgifte wordt beschreven in WO 00/35298.

30

PARENTERALE TOEDIENING

De verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen ook rechtstreeks worden toegediend in de bloedstroom, in spieren of in een inwendig orgaan. Geschikte wijzen van 35 parenterale toediening omvatten intraveneus, intra-arte-rieel, intraperitoneaal, intrathecaal, intraventriculair, intra-uretraal, intrasternaal, intracranieel, intramuscu- I » , 56 lair en subcutaan. Geschikte middelen voor parenterale toediening omvatten naald (waaronder micronaald) injecto-ren, naaldvrije injectoren en infuustechnieken.

Parenterale preparaten zijn in een typisch geval wa-5 terige oplossingen die excipiënten kunnen bevatten zoals zouten, koolhydraten en buffermiddelen (bij voorkeur tot een pH van ongeveer 3 tot ongeveer 9), maar voor sommige ' toepassingen kunnen deze beter worden geformuleerd als een steriele niet-waterige oplossing of als een gedroogde vorm 10 die zal worden gebruikt met een geschikt vehiculum zoals steriel, pyrogeenvrij water.

De bereiding van parenterale preparaten onder steriele omstandigheden, bijvoorbeeld door vriesdrogen, kan gemakkelijk worden uitgevoerd met gebruik van farmaceutische 15 standaardtechnieken die voor de deskundigen bekend zijn.

De oplosbaarheid van de verbindingen met de formule (I) die bij de bereiding van parenterale oplossingen worden gebruikt kan worden verhoogd door het gebruik van geschikte formuleringstechnieken, zoals het opnemen van mid-20 delen die de oplosbaarheid verhogen.

Preparaten voor parenterale toediening kunnen worden geformuleerd voor onmiddellijke en/of gemodificeerde afgifte. Preparaten voor gemodificeerde afgifte omvatten die voor vertraagde, langdurige, gepulseerde, gecontroleerde, 25 doelgerichte en geprogrammeerde afgifte. Verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen dus worden geformuleerd als een vaste, halfvaste of thixotrope vloeistof voor toediening als een geïmplanteerd depot dat zorgt voor de gemodificeerde afgifte van de actieve verbinding. Voorbeel-30 den van dergelijke preparaten omvatten met geneesmiddel beklede stents en PGLA-microbollen.

TOPISCHE TOEDIENING

De verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen 35 ook topisch worden toegediend op huid of slijmvliezen, dat wil zeggen dermaal of transdermaal. Typische preparaten voor dit doel omvatten gelen, hydrogelen, lotions, oplos- t » 57 singen, crèmes, zalven, stuifpoeders, smeersels, schuimen, films, huidpleisters, wafels, implantaten, sponzen, vezels, verbanden en micro-emulsies. Ook liposomen kunnen worden gebruikt. Typische dragers omvatten alcohol, water, 5 minerale olie, vloeibare petrolatum, witte petrolatum, glycerine, polyethyleenglycol en propyleenglycol. Penetra-tieverbeteraars kunnen worden opgenomen - zie, bijvoorbeeld, J. Pharm Sci., 8£ (10), 955-958, door Finnin en

Morgan (oktober 1990).

10 Andere wijzen van topische toediening omvatten afgif te door middel van elektroporatie, iontoforese, fonofore-se, sonoforese en injectie met een micronaald of naald-vrije injectie (bijv. Powderject™, Bioject™, enz.).

Preparaten voor topische toediening kunnen worden ge-15 formuleerd voor onmiddellijke en/of gemodificeerde afgifte. Preparaten voor gemodificeerde afgifte omvatten die voor vertraagde, ononderbroken, gepulseerde, gecontroleerde, doelgerichte en geprogrammeerde afgifte.

20 GE INHALEERDE/INTRANASALE TOEDIENING

De verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen ook intranasaal of door inhalatie worden toegediend, in een typisch geval in de vorm van een droog poeder (hetzij alleen, als een mengsel, bijvoorbeeld in een droog mengsel 25 met lactose, hetzij als een bestanddeel met gemengde deeltjes, bijvoorbeeld gemengd met fosfolipiden, zoals fosfa-tidylcholine) uit een droogpoederinhalator of als een aë-rosolspray uit een onder druk staande houder, pomp, spray, vernevelaar (bij voorkeur een vernevelaar die elektrohy-30 drodynamica gebruikt om een fijne mist te produceren), met of zonder het gebruik van een geschikt drijfgas, zoals 1,1,1,2-tetrafluorethaan of 1,1,1,2,3,3,3-heptafluorpro-paan. Voor intranasaal gebruik kan het poeder een bioadhe-sief middel bevatten, bijvoorbeeld chitosan of cyclodex-35 trine.

De onder druk staande houder, pomp, spray of vernevelaar bevat een oplossing of suspensie van de één of meer ! » * 58 verbindingen van de onderhavige uitvinding die, bijvoor- , beeld, ethanol, waterige ethanol of een geschikt alterna- i tief middel bevat voor het dispergeren, solubiliseren of uitbreiden van de afgifte van het actieve middel, één of 5 meer drijfgassen als oplosmiddel en een eventueel opper-vlakactief middel, zoals sorbitantrioleaat, oliezuur of een oligomelkzuur.

Voorafgaand aan het gebruik in een droogpoeder- of een suspensiepreparaat wordt het geneesmiddelproduct ver-10 kleind tot een afmeting die geschikt is voor afgifte door inhalatie (in een typisch geval minder dan 5 micron). Dit kan worden trajectt door een geschikte verkleiningswerk-wijze, zoals spiraalstraalmalen, straalmalen in een geflu-idiseerd bed, bewerken met superkritische vloeistof, om 15 nanodeeltjes te vormen, homogenisatie onder hoge druk of sproeidrogen.

Capsules (die bijvoorbeeld uit gelatine of HPMC zijn gemaakt), doordrukverpakkingen en patronen voor gebruik in een inhalator of insufflator kunnen zodanig worden gefor-20 muleerd dat deze een poedermengsel van de verbinding van de onderhavige uitvinding, een geschikte poedergrondstof zoals lactose of zetmeel en een prestatieverbeteraar zoals 1-leucine, mannitol of magnesiumstearaat bevatten. De lactose kan watervrij of in de vorm van het monohydraat zijn, 25 maar bij voorkeur in de laatstgenoemde. Andere geschikte excipiënten omvatten dextran, glucose, maltose, sorbitol, xylitol, fructose, saccharose en trehalose.

Een geschikt oplossingspreparaat voor gebruik in een vernevelaar die elektrohydrodynamica gebruikt om een fijne 30 mist te produceren kan ongeveer 1 pg tot ongeveer 20 mg van de verbinding van de onderhavige uitvinding per activering bevatten en het activeringsvolume kan variëren van ongeveer 1 μΐ tot ongeveer 100 μΐ. Een typisch preparaat kan een verbinding met de formule (I), propyleenglycol, 35 steriel water, ethanol en natriumchloride omvatten. Alternatieve oplosmiddelen die in plaats van propyleenglycol 59 kunnen worden gebruikt, omvatten glycerol en polyethyleen-glycol.

Geschikte geur- en smaakstoffen, zoals menthol en le-vomenthol, of zoetstoffen, zoals sacharine of sacharinena-5 trium, kunnen worden toegevoegd aan die preparaten van de onderhavige uitvinding die bedoeld zijn voor gelnhaleer-de/intranasale toediening. Preparaten voor gelnhaleer-de/intranasale toediening kunnen worden geformuleerd voor onmiddellijke en/of gemodificeerde afgifte met, bijvoor-10 beeld, poly(DL-melk-coglycolzuur (PGLA). Preparaten voor gemodificeerde afgifte omvatten die voor vertraagde, langdurige, gepulseerde, gecontroleerde, doelgerichte en geprogrammeerde afgifte.

In het geval van droge poeder-inhalatoren en aeroso-15 len zal de doseereenheid worden vastgesteld door middel van een ventiel dat een afgemeten hoeveelheid afgeeft. Eenheden volgens de onderhavige uitvinding worden in een typisch geval zo ingesteld dat een afgemeten dosis of "puf" wordt toegediend die ongeveer 1 tot ongeveer 100 pg 20 van de verbinding met de formule (I) bevat. De totale dagelijkse dosis zal in een typisch geval in het traject van ongeveer 50 pg tot ongeveer 20 mg zijn, die kan worden toegediend als een enkele dosis of, gebruikelijker, als verdeelde doses gedurende de dag.

25

RECTALE/INTRAVAGINALE TOEDIENING

De verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen rectaal of vaginaal worden toegediend, bijvoorbeeld in de vorm van een suppositorium, pessarium of klysma. Cacaobo-30 ter is een traditionele grondstof voor een suppositorium, maar naar behoefte kunnen diverse alternatieven worden gebruikt.

Preparaten voor rectale/vaginale toediening kunnen worden geformuleerd voor onmiddellijke en/of gemodificeer-35 de afgifte. Preparaten voor gemodificeerde afgifte omvatten die voor vertraagde, langdurige, gepulseerde, gecontroleerde, doelgerichte en geprogrammeerde afgifte.

< » , 60

OCUIAIRE/AURAIiE TOEDIENING

De verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen ook rechtstreeks aan oog of oor worden toegediend, in een 5 typisch geval in de vorm van druppels van een fijngemaakte .suspensie of een oplossing in isotone, steriele zoutoplossing waarvan de pH is geregeld. Andere preparaten die geschikt zijn voor oculaire en aurale toediening omvatten zalven, biologisch afbreekbare (bijv. absorbeerbare gel-10 sponzen, collageen) en niet biologisch afbreekbare (bijv. siliconen) implantaten, wafels, lenzen en systemen die uit deeltjes of blaasjes bestaan, zoals niosomen of liposomen. Een polymeer zoals verknoopt polyacrylzuur, polyvinylalco-hol, hyaluronzuur, een cellulosepolymeer, bijvoorbeeld hy-15 droxypropylmethylcellulose, hydroxyethylcellulose of me-thylcellulose of een heteropolysacharidepolymeer, bijvoorbeeld gelangom, kan worden opgenomen, tezamen met een conserveermiddel, zoals benzalkoniumchloride. Dergelijke preparaten kunnen ook worden afgegeven door iontoforese.

20 Preparaten voor oculaire/aurale toediening kunnen worden geformuleerd voor onmiddellijke en/of gemodificeerde afgifte. Preparaten voor gemodificeerde afgifte omvatten die voor vertraagde, langdurige, gepulseerde, gecontroleerde, doelgerichte of geprogrammeerde afgifte.

25

ANDERE TECHNOLOGIEËN

De verbindingen van de onderhavige uitvinding kunnen worden gecombineerd met oplosbare macromoleculaire entiteiten, zoals cyclodextrine en geschikte derivaten daar-30 van, of polymeren die polyethyleenglycol bevatten, voor het verbeteren van hun oplosbaarheid, oplossingssnelheid, smaakmaskering, biologische beschikbaarheid en/of stabiliteit, voor het gebruik bij één van de voornoemde wijzen van toediening.

35 Complexen van geneesmiddel-cyclodextrine blijken in het algemeen bijvoorbeeld bruikbaar voor de meeste doseer-vormen en toedieningsroutes. Zowel inclusie- als niet- * ’ t 61 inclusiecomplexen kunnen worden gebruikt. Als alternatief voor rechtstreekse complexering met het geneesmiddel kan het cyclodextrine als een hulpadditief worden gebruikt, dat wil zeggen als een drager, verdunningsmiddel of solu-5 biliseermiddel. Voor deze doeleinden worden alfa-, bèta-en gamma-cyclodextrinen het vaakst gebruikt, waarvan voorbeelden kunnen worden aangetroffen in WO 91/11172, WO 94/02518 en WO 98/55148.

10 KIT-VAN-ONDERDELEN

Voor zoverre het gewenst kan zijn om een combinatie van actieve verbindingen toe te dienen, bijvoorbeeld met als doel het behandelen van een bepaalde ziekte of aandoening, valt het onder de beschermingsomvang van de onderha-15 vige uitvinding dat twee of meer farmaceutische preparaten, waarvan ten minste één een verbinding volgens de onderhavige uitvinding bevat, gemakkelijk worden gecombineerd in de vorm van een kit die geschikt is voor gezamenlijke toediening van de preparaten.

20 De kit van de onderhavige uitvinding omvat dus twee of meer afzonderlijke farmaceutische preparaten, waarvan ten minste één een verbinding met de formule (I) volgens de onderhavige uitvinding bevat, en middelen voor het apart houden van de preparaten, zoals een houder, een on-25 derverdeelde fles of onderverdeelde folie-verpakking. Een voorbeeld van een dergelijke kit is de bekende doordruk-verpakking die wordt gebruikt voor het verpakken van tabletten, capsules en dergelijke.

De kit van de onderhavige uitvinding is met name ge-30 schikt voor het toedienen van verschillende doseervormen, bijvoorbeeld orale en parenterale, voor het toedienen van de aparte preparaten met verschillende tussenpozen van do-sering of voor het titreren van de aparte preparaten tegen elkaar. Opdat men zich beter aan de voorschriften houdt 35 bevat de kit typisch aanwijzingen voor de toediening ervan en kan deze zijn voorzien van een zogenaamde geheugensteun.

i i ! ' ’ ’ I j

62 I

DOSERING

Voor toediening aan menselijke patiënten ligt de totale dagelijkse dosis van de verbindingen van de onderha-5 vige uitvinding typisch in het traject van ongeveer 0,05 mg tot 100 mg, hetgeen, uiteraard, afhankelijk is van de wijze van toediening, bij voorkeur in het traject van ongeveer 0,1 mg tot ongeveer 50 mg en liever in het traject van ongeveer 0,5 mg tot ongeveer 20 mg. Orale toediening 10 kan bijvoorbeeld een totale dagelijkse dosis vereisen van ongeveer 1 mg tot ongeveer 20 mg, terwijl een intraveneuze dosis slechts ongeveer 0,5 mg tot ongeveer 10 mg kan vereisen. De totale dagelijkse dosis kan worden toegediend in een enkele of verdeelde doses.

15 Deze doseringen zijn gebaseerd op een gemiddelde men selijke patiënt met een gewicht van ongeveer 65 kg tot ongeveer 70 kg. De arts zal gemakkelijk in staat zijn tot het bepalen van doses voor patiënten waarvan het gewicht buiten dit traject valt, zoals kinderen en ouderen.

20 Zoals hierboven wordt besproken vertoont een verbin ding van de onderhavige uitvinding agonistische 5-HT4-activiteit op. Een 5-HT4-agonist van de onderhavige uitvinding kan bruikbaar worden gecombineerd met ten minste één ander farmacologisch actief middel of ten minste één 25 andere farmacologisch actieve verbinding, met name bij de behandeling van gastro-oesofageale refluxziekte. Een 5-HT4-agonist, in het bijzonder een verbinding met de formule (I), of een farmaceutisch aanvaardbaar zout of solvaat daarvan, als hierboven gedefinieerd, kan bijvoorbeeld ge-30 lijktijdig, opeenvolgend of afzonderlijk worden toegediend in combinatie met één of meer farmacologisch actieve middelen die worden gekozén uit: (i) histamine H2-receptorantagonisten, bijv. raniti- 35 dine, lafutidine, nizatidine, cimetidine, famotidine en roxatidine, ! 63 i i (ii) protonpompremmers, bijv. omeprazool, esomepra-zool, pantoprazool, rabeprazool, tenatoprazool, ilaprazool en lansoprazool, (iii) zuurpompantagonisten, bijv. soraprazan, revapra- 5 zan(YH-1885), AZD-0865, CS-526, AU-2064 en YJA-20379- 8, (iv) orale antacidummengsels, bijv. Maalox®, Aludrox® en Gaviscon®, (v) beschermende middelen voor slijmvliezen, bijv.

10 polaprezink, ecabetnatrium, rebamipide, teprenon, ce- traxaat, sucralfaat, chloorpylline-koper en plauno-tol, (vi) GABAB-agonisten, bijv. baclofen en AZD-3355, (vii) . a2-agonisten, bijv. clonidine, medetomidine, 15 lofexidine, moxonidine, tizanidine> guanfacine, gu- anabenz, talipexool en dexmedetomidine, (viii) xanthinederivaten, bijv. theofylline, aminofyl-line en doxofylline, (ix) calciumkanaalblokkers, bijv. aranidipine, laci- 20 dipine, falodipine, azelnidipine, clinidipine, lome- rizine, diltiazem, gallopamil, efondidipine, nisoldi-pine, amlodipine, lercanidipine, bevantolol, nicardipine, isradipine, benidipine, verapamil, nitrendipine, barnidipine, propafenon, manidipine, bepridil, 25 nifedipine, nilvadipine, nimodipine en fasudil; (x) benzodiazepine-agonisten, bijv. diazepam, zale- plon, zolpidem, haloxazolam, clonazepam, prazepam, quazepam, flutazolam, triazolam, lormetazepam, mida zolam, tofisopam, clobazam, flunitrazepam en flu- 30 toprazepam, (xi) prostaglandine-analoga, bijv. prostaglandine, misoprostol, treprostinil, esoprostenol, latanoprost, iloprost, beraprost, enprostil, ibudilast en ozagrel, (xii) histamine H3~agonisten, bijv. R-alfa-methylhis- 35 tamine en BP-294, (xiii) antigastrische middelen, bijv. anti-gastrine-vaccin, itriglumide en Z-360, * » ' ί 64 (xiv) 5-HT3-antagonisten, bijv. dolasetron, palonoset- ron, alosetron, azasetron, ramosetron, mitrazapine, granisetron, tropisetron, E-3620, ondansetron en in-disetron, 5 (xv) tricyclische antidepressiva, bijv. imipramine, amitriptyline, clomipramine, amoxapine en lofepramine, (xvi) GABA-agonisten, bijv. gabapentine, topiramaat, cinolazepam, clonazepam, progabide, brotizolam, zopi-clone, pregabaline en eszopiclon, 10 (xvii) opioïd-analgetica, bijv. morfine, heroïne, hy- ; dromorfon, oxymorfon, levorfanol, levallorfan, methadon, meperidine, fentanyl, cocaïne, codeïne, dihydro-codeïne, oxycodon, hydrocodon, propoxyfeen, nalme-feen, nalorfine, naloxon, naltrexon, buprenorfine, 15 butorfanol, nalbufine en pentazocine, (xviii) somatostatine-analoga, bijv. octreotide, AN-238 en PTR-317 3, (xix) Cl-kanaalactivator, bijv. lubiproston, (xx) selectieve serotonineheropnameremmers, bijv.

20 sertraline, escitalopram, fluoxetine, nefazodon, flu- voxamine, citalopram, milnacipran, paroxetine, venla-faxine, tramadol, sibutramine, duloxetine, desvenla-faxine en dapoxetine, (xxi) anticholinergica, bijv. dicyclomine en hyoscya- 25 mine, (xxii) laxeermiddelen, bijv. Trifyba®, Fybogel®, Kon-syl®, Isogel®, Regulan®, Celevac® en Normacol®, (xxiii) vezelproducten, bijv. Metamucil®, (xxiv) antispasmodica, bijv. mebeverine, 30 (xxv) dopamineantagonisten, bijv. metaclopramide, dom- peridon en levosulpiride, (xxvi) cholinergica bijv. neostigmine, (xxvii) AchE-remmers, bijv. galantamine, metrifonaat, rivastigmine, itopride en donepezil, 35 (xxviii) Tachykinine(NK)antagonisten, in het bijzonder NK-3-, NK-2- en NK-l-antagonisten, bijv. nepadutant, saredutant, talnetant, (ccR, 9R) -7-[3, 5-bis (trifluorme- * * * , 65 thyl)benzyl]-8,9,10,ll-tetrahydro-9-methyl-5-(4-me-thylfenyl)-7H-[1,4]d-iazocino[2,l-g][1, 7]naftridine-, 6,13-dion (TAK-637), 5[[(2R,3S)-2-[(1R)-1-[3,5-bis- (trifluormethyl)fenyl]ethoxy-3-(4-fluorfenyl)-4-mor-5 folinyl]methyl]-1,2-dihydro-3H-l,2,4-triazool-3-on (MK-869), lanepitant, dapitant en 3-[[2-methoxy-5-(trifluormethoxy)fenyl]methylamino-2-fenylpiperidine (2S,3S) .

10 Werkwijze voor het beoordelen van biologische activiteiten :

De bindingsaffiniteiten voor de 5-HT4-receptor van de verbindingen van de onderhavige uitvinding worden bepaald door middel van de volgende procedures.

15

Binding aan humaan 5-HTa (1)

Met humaan 5-HT4(d) getransfecteerde HEK293-cellen werden in het eigen laboratorium bereid en gekweekt. De verzamelde cellen werden gesuspendeerd in 50 mM HEPES (pH= 20 7,4 bij 4°C) die was aangevuld met proteaseremmer-cocktail (Boehringer, verdunning 1:1000) en gehomogeniseerd met gebruik van een in de hand gehouden Polytron PT 1200 disrup-tor op vol vermogen gedurende 30 seconden op ijs. De homo-genaten werden 30 minuten gecentrifugeerd bij 4°C en 25 40.000x g. De pellets werden vervolgens opnieuw gesuspen deerd in 50 mM HEPES (pH =7,4 bij 4°C) en nogmaals op dezelfde wijze gecentrifugeerd. De uiteindelijke pellets werden opnieuw gesuspendeerd in een geschikt volume van 50 mM HEPES (pH =7,4 bij 25°C), gehomogeniseerd, in aliquots 30 verdeeld en tot gebruik bewaard bij -80°C. Een aliquot van de membraanfracties werd gebruikt voor bepaling van de ei-witconcentratie; hiervoor werden een BCA eiwitassaykit (PIERCE) en een ARVOsx platenflezer (Wallac) gebruikt.

Voor de bindingsexperimenten werd 25 μΐ van de proef-35 verbindingen geïncubeerd met 25 μΐ [3H]-GR113808 (Amer-sham, eindconcentratie 0,2 nM) en 150 μΐ membraanhomogo-naat en suspensies van WGA-SPA-parels (Amersham) (10 μg ' i · , 66 eiwit en 1 mg SPA-parels/putje), gedurende 60 minuten bij kamertemperatuur. De niet-specifieke binding werd bepaald door middel van 1 pm GR113808 (Tocris) bij de eindconcen-tratie. De incubatie werd beëindigd door centrifugatie bij 5 1000 rpm.

De aan de receptor gebonden radioactiviteit werd gekwantificeerd door tellen met een MicroBeta-platenteller (Wallac).

Alle verbindingen van de voorbeelden vertoonden affi-10 niteit voor de 5HT,j-receptor.

Binding aan humaan 5-HTa(2)

Met humaan 5HT4<d) getransfecteerde HEK293-cellen werden in het eigen laboratorium bereid en gekweekt. De ver-15 zamelde cellen werden gesuspendeerd in 50 mM Tris-buffer (pH = 7,4 bij 4°C) die was aangevuld met proteaseremmer-cocktail (Boehringer, verdunning 1:1000) en gehomogeniseerd met gebruik van een in de hand gehouden Polytron PT 1200 disruptor op vol vermogen gedurende 30 seconden op 20 ijs. De homogenaten werden 10 minuten gecentrifugeerd bij 40.000x g en 4°C. De pellets werden vervolgens opnieuw gesuspendeerd in 50 mM Tris- buffer (pH = 7,4 bij 4°C) en nogmaals op dezelfde wijze gecentrifugeerd. De uiteindelijke pellets werden gesuspendeerd in een geschikt volume 25 van 50 mM Tris-buffer (pH = 7,4 bij 25°C) die 10 mM MgCl2 bevatte, gehomogeniseerd, in aliquots verdeeld en tot gebruik bewaard bij -80°C. Een aliquot van de membraanfrac-ties werd gebruikt voor bepaling van de eiwitconcentratie; hiervoor werden een BCA eiwitassaykit (PIERCE) en een AR-30 VOsx platenaflezer (Wallac) gebruikt. j

Voor de bindingsexperimenten werd 50 μΐ van de proef- i verbindingen geïncubeerd met 50 μΐ [3H]-5-HT (Amersham, eindconcentratie 8,0 nM) en 400 μΐ membraanhomogenaat (300 pg eiwit/buis), gedurende 60 minuten bij kamertemperatuur.

35 De niet-specifieke binding werd bepaald met 50 μΜ GR113808 (Tocris) bij de eindconcentratie. Alle incubaties werden beëindigd door snelle filtratie onder vacuüm door in 0,2% ’' ' t 67 PEI geweekte glasvezelfliters, waarvoor een BRANDEL-cel-oogster werd gebruikt. Hierna volgde drie wasbeurten met 50 mM Tris-buffer (pH=7,4 bij 25°C). De aan de receptor gebonden radioactiviteit werd gemeten door middel van 5 vloeistofscintillatietelling, waarvoor een LS-teller van Packard werd gebruikt.

Alle verbindingen van de voorbeelden vertoonden affiniteit voor de 5HT4-receptor. .

10 Met agonist geïnduceerde stijging van cAMP in met humaan 5-HT4td> getransfecteerde HEK293-cellen

Met humaan 5-HT4(d) getransfecteerde HEK293-cellen werden in het eigen laboratorium bereid. De cellen werden gekweekt bij 37 °C en 5% CO2 in met DMEM die was aangevuld 15 met 10% FCS, 20 mM HEPES (pH=7,4), 200 pg/ml hygromycine B (Gibco), 100 eenheden/ml penicilline en 100 pg/ml strep- tomycine.

De cellen werden gekweekt tot een confluentie van 60-80%. Op de dag voorafgaand aan de behandeling met de ver-20 bindingen werd in plaats van de normale nu gedialyseerde FCS (Gibco) toegevoegd en werden de cellen gedurende de nacht geïncubeerd.

De verbindingen werden bereid in platen met 96 putjes (12,5 μΐ/putje). De cellen werden geoogst met PBS/1 mM 25 EDTA, gecentrifugeerd en gewassen met PBS. Aan het begin van de assay werd de pellet van de cellen opnieuw gesuspendeerd in DMEM die was aangevuld met 20 mM HEPES, 10 μΜ pargyline (Sigma) en 1 mM 3-isobutyl-l-methylxanthine (Sigma) tot een concentratie van 1,6 x 105 cellen/ml, en 30 vervolgens liet men gedurende 15 minuten staan bij kamertemperatuur. De reactie werd geïnitieerd door toevoeging van de cellen aan de platen (12,5 μΐ/putje). Na gedurende 15 minuten incubatie bij kamertemperatuur werd 1% Triton X-100 toegevoegd om de reactie te beëindigen (25 μΐ/putje) 35 en liet men de platen gedurende 30 minuten staan bij kamertemperatuur. Homogene tijdsonafhankelijke detectie van cAMP op basis van de fluorescentie (Schering) werd gedaan I * , 68 volgens de aanwijzingen van de fabrikant. Een ARVOsx multilabel teller (Wallac) werd gebruikt om HTRF te meten (excitatie bij 320 nm, emissie bij 665 nm/620 nm, vertra-gingsduur 50 ps, tijdsduur 400 ps). De gegevens werden ge-5 analyseerd met behulp van de verhouding van de intensiteit van de fluorescentie van elk putje bij 620 nm en 665 nm, waarna de concentratie van cAMP werd vastgesteld met behulp van een standaardkromme voor cAMP. De stijging van de cAMP-productie die door elke verbinding werd veroorzaakt, 10 werd genormaliseerd tot de hoeveelheid cAMP die werd geproduceerd door middel van 1000 mM serotonine (Sigma).

Alle verbindingen van de voorbeelden vertoonden ago-nistische activiteit op de 5 HT4~receptor.

15 Functionele TMM-assay

De aanwezigheid van 5-HT4 receptoren in de slokdarm van ratten en het vermogen om partieel agonisme te vertonen in het TMM-preparaat worden in de literatuur genoemd (zie G.S. Baxter et al. Naunyn-Schmiedeberg's Arch. Phar-20 macol., (1991) 343: 439-446; M. Yukiko et al., JPET (1997) 283: 1000-1008; en J.J. Reeves et al., Br. J. Pharmacol., (.1991), 103:1067-1072). In meer specifieke zin kan de partiële agonistische activiteit worden gemeten volgens de volgende procedures.

25 Mannelijke SD-ratten (Charles River) met een gewicht van 250-300 g worden verdoofd en vervolgens gedood door middel van cervicale dislocatie. De slokdarm werd uitgenomen vanaf het gedeelte dat onmiddellijk proximaal ten opzichte van de maag lag (met inbegrip van een stuk maag om 30 het distale uiteinde aan te geven) tot het punt van de luchtpijp, en vervolgens in verse Krebsoplossing gebracht.

De buitenste laag van skeletspieren werd in één keer verwijderd door deze af te pellen van de onderliggende laag van gladde spieren; hiervoor werd een tang gebruikt 35 (in de richting van de maag naar de luchtpijp) . De resterende binnenbuis van gladde spieren was bekend als de TMM.

69

Deze werd ingekort tot 2 cm vanaf het oorspronkelijke uiteinde van de maag, en de rest werd verwijderd, j De TMM's werden in lengteoriëntatie opgesteld als ge hele "open" buizen in orgaanbaden van 5 ml die waren ge-5 vuld met warme (32°C) en beluchte Krebsoplossing. De weefsels werden vervolgens onder een beginspanning van 750 mg gebracht en men liet ze gedurende 60 minuten equilibreren.

Tijdens de equilibreringsperiode werden de weefsels met intervallen van 15 minuten tweemaal opnieuw onder spanning 10 gebracht. Het pompdebiet werd gedurende deze periode ingesteld op 2 ml/min.

Na equilibratie werd de pomp uitgeschakeld. De weefsels werden blootgesteld aan 1 μΜ carbachol, en trokken samen en bereikte binnen 15 minuten een stabiel contrac-15 tiel niveau. De weefsels werden vervolgens onderworpen aan 1 μΜ 5 HT (dit was bedoeld om de weefsels te conditioneren (prime)). De weefsels ontspanden zich in reactie op 5-HT redelijk snel - binnen 1 minuut. Zodra de maximale relaxatie was opgetreden en een meting was gedaan, werden de 20 weefsels met de maximale snelheid (66 ml/min) gedurende ten minste .1 minuut gewassen tot de oorspronkelijke basislijn (voor-carbachol en 5-HT) was teruggekeerd (doorgaans viel de basislijn terug tot beneden de oorspronkelijke na het aanvankelijke equilibreren). Het pompdebiet werd ver-25 minderd tot 2 ml/min en men liet de weefsels gedurende 60 minuten rusten.

Een cumulatieve concentratie-effect-kromme (concen-tration-effect-curve; CEC) voor 5-HT werd met stijgingen van een halve logaritmewaarde uitgezet over het traject 30 van 0,1 nm tot en met 1 μΜ (5-HT-kromme 1 voor analyse van gegevens). De contactduur tussen de doses was 3 minuten, of tot zich een stabiel niveau had ingesteld. De weefsels reageerden sneller als de concentratie van 5-HT in het bad steeg. Aan het eind van de krommen werden de weefsels zo 35 snel mogelijk (met de maximale snelheid) gewassen om de-sensibilisatie van de receptoren te vermijden. Het pompde- ___ _____ __________ 1 ' t 70 biet werd verminderd tot 2 ml/min en men liet de weefsels gedurende 60 minuten rusten.

Er werd een tweede CEC uitgevoerd - voor 5-HT (voor een tijdscontrole van de weefsels) , een andere 5-HT4-ago-5 nist (standaard) of een proefverbinding (kromme 2 voor analyse van gegevens). De contactduur varieerde voor de andere 5-HT4-agonisten en proefverbindingen, en werd aangepast volgens de afzonderlijke responsen van de weefsels op het desbetreffende middel. In weefsels blootgesteld aan 10 een proefverbinding werd een hoge concentratie (1 μΜ) van een 5-HT4-antagonist (SB 203.186: lH-indool-3-carbonzuur- 2-(1-piperidinyl)ethylester, Tocris) aan het bad toegevoegd na de laatste concentratie van de proefverbinding. Dit werd gedaan om na te gaan of een door een agonist ge-15 induceerde relaxatie (als deze optrad) kon worden teruggedraaid. SB 203.186 draaide de door 5-HT geïnduceerde relaxatie terug en herstelde de oorspronkelijke spannings-graad van het weefsel die door carbachol was geïnduceerd.

De agonistactiviteit van de proefverbindingen werd 20 bevestigd door voorincuberen van weefsels met 100 nM standaard 5-HT4-antagonist, zoals SB 203.186. SB 203.186 werd aan het bad toegevoegd 5 minuten voor de toevoeging van carbachol voorafgaand aan kromme 2. De weefsels dienen te worden "gepaard" voor analyse van de gegevens, dat wil 25 zeggen dat de proefverbinding in afwezigheid van SB 203.186 in één weefsel werd vergeleken met de proefverbinding in aanwezigheid van SB 203.186 in een afzonderlijk weefsel. Het was niet mogelijk om een kromme 3 uit te voeren, dat wil zeggen kromme 1 van 5-HT, en vervolgens krom-30 me 2 van de proefverbinding (-SB 203.186), gevolgd door kromme 3 van de proefverbinding (+SB 203.186).

Alle verbindingen van de voorbeelden vertoonden ago-nistische activiteit op de 5-HT4-receptor.

35 Binding van humaan dofetilide

Met humaan HERG getransfecteerde HEK293S-cellen werden in het eigen laboratorium bereid en gekweekt. De ver- * ’ t 71 zamelde cellen werden gesuspendeerd in 50 mM Tris-HCL (pH = 7,4 bij 4°C) en gehomogeniseerd met gebruik van een in de hand gehouden Polytron PT 1200 disruptor op vol vermogen gedurende 30 seconden op ijs. De homogenaten werden 5 gedurende 20 minuten gecentrifugeerd bij 48000x g en 4°C. De pellets werden vervolgens opnieuw gesuspendeerd, gehomogeniseerd en nogmaals op dezelfde wijze gecentrifugeerd. De uiteindelijke pellets werden opnieuw gesuspendeerd in een geschikt volume van 50 mM Tris-HCl, 10 mM KC1, 1 mM 10 MgCl2 (pH = 7,4 bij 4°C), gehomogeniseerd, in aliquots verdeeld en tot gebruik bewaard bij -80°C. Een aliquot van de membraanfracties werd gebruikt voor bepaling van de ei-witconcentratie; hiervoor worden een BCA eiwitassaykit (PIERCE) en een ARVOsx-platenaflezer (Wallac) gebruikt.

15 De bindingsassays werden in een totaal volume van 200 μΐ uitgevoerd in platen van 96 putjes. 20 μΐ van de proef-verbindingen werd geïncubeerd met 20 μΐ [3H]-dofetilide (Amersham, eindconentratie 5 nM) en 160 μΐ membraanhomoge-naat (25 pg eiwit), gedurende 60 minuten bij kamertempera-20 tuur. De niet-specifieke binding werd bepaald door middel van 10 μΜ dofetilide bij de eindconcentratie. De incubatie werd beëindigd door snelle filtratie onder vacuüm door een met 0,5% voorgeweekte GF/B Betaplate, waarvoor een Ska-tron-celoogster en 50 mM Tris-HCl, 10 mM KC1, 1 mM MgCl2 25 bij pH = 7,4 en 4°C werden gebruikt. De filters werden gedroogd, in monsterzakjes gebracht en Betaplate Seint werd toegevoegd. De aan het filter gebonden radioactiviteit werd geteld met gebruik van een Betaplate-teller van Wallac .

30

Permeabiliteit van Caco-2

De permeabiliteit van Caco-2 werd gemeten volgens de werkwijze die werd beschreven door Shiyin Yee, Pharmaceutical Research, 763 (1997).

35 Caco-2-cellen werden gedurende 14 dagen gekweekt op filterdragers (Falcon HTS; inzetsysteem voor vele putjes). Het kweekmedium werd uit zowel de apicale als basolaterale 72 gedeelten verwijderd en de monolagen werden voorgeïncu-beerd met 0,3 ml voorverwarmde apicale buffer en 1,0 ml basolaterale buffer. Dit geschiedde gedurende 0,5 uur bij 37°C in een waterbad dat werd geschud met 50 cycli/minuut.

5 De apicale buffer bestond uit Hanks Balanced Salt Solution, 25 mM D-glucosemonohydraat, 20 mM MES Biological Buffer, 1,25 mM CaCl2 en 0,5 mM MgCl2 (pH = 6,5). De baso- j laterale buffer bestond uit Hanks Balanced Salt Solution, i 25 mM D-glucosemonohydraat, 20 mM HEPES Biological Buffer, 10 1,25 mM CaCl2 en 0,5 mM MgCl2 (pH = 7,4). Aan het eind van de voor-incubatie werd het medium verwijderd en werd de oplossing van de proef verbinding (10 μΜ) in buffer aan het apicale gedeelte toegevoegd. De inzetstukken werden gedurende 1 uur in de putjes geplaatst die verse basolaterale 15 buffer bevatten. De concentratie van het geneesmiddel in de buffer werd gemeten met LC/MS-analyse.

De stroomsnelheid (F, massa/tijd) werd berekend uit de helling van de cumulatieve verschijning van substraat j

aan de ontvangende zijde en de schijnbare permeabiliteits- I

20 coëfficiënt (Papp) werd berekend uit de volgende vergelij- j king:

Papp (cm/sec) = (F*VD) / (SA*MD) 25 waarin SA het oppervlak voor het transport (0,3 cm2) is, VD het volume van de donor (0,3 ml) is, en MD de totale hoeveelheid van het geneesmiddel aan de zijde van de donor op tijdstip t=0 is. Alle gegevens vertegenwoordigen het gemiddelde van twee inzetstukken. De integriteit van de 30 monolaag werd bepaald door middel van het transport van

Lucifer Yellow.

Halfwaardetijd in microsomen uit de menselijke lever (HEM)

Proefverbindingen (1 μΜ) werden bij 37 °C in platen 35 met 96 diepe putjes geïncubeerd met 3,3 mM MgCl2 en 0,78 mg/ml HLM (HL101) in 100 mm kaliumf osf aatbuf fer (pH = 7,4). Het reactiemengsel werd onderverdeeld in twee groe- 73 pen, een non-P450- en een P450-groep. NADPH werd slechts toegevoegd aan het reactiemengsel van de P450-groep. Een volume van monsters van de P450-groep werd verzameld op de tijdstippen 0, 10, 30 en 60 minuten, waarbij het tijdspunt 5 van 0 minuten het moment aangaf waarop NADPH werd toegevoegd aan het reactiemengsel van de P450-groep. Een klein volume van monsters van de non-P450-groep werd verzameld op de tijdstippen -10 en 65 min. De verzamelde volumina werden geëxtraheerd met een oplossing in acetonitril die 10 een inwendige standaard bevatte. Het neergeslagen eiwit werd gecentrifugeerd (2000 rpm, 15 min). De concentratie van de verbinding in de supernatant werd gemeten door middel van een LC/MS/-systeem.

De halfwaardetijd werd verkregen door uitzetten van 15 de natuurlijke logaritme van de verhouding tussen het pie-koppervlak van de verbindingen/de inwendige standaard tegen de tijd. De helling van de lijn die het beste aansloot bij deze punten leverde de snelheid van het metabolisme (k) op. Deze werd met behulp van de volgende vergelijking 20 omgezet in een halfwaardetijd:

Halfwaardetijd = ln 2/k Voorbeelden 25 De onderhavige uitvinding wordt toegelicht door de volgende niet-beperkende voorbeelden, tenzij anderszins wordt aangegeven: alle bewerkingen werden uitgevoerd bij kamer- of omgevingstemperatuur, dat wil zeggen in het traject van 18-25°C; de afdamping van oplosmiddel werd uitge-30 voerd met gebruik van een rotatieverdamper onder verminderde druk met een badtemperatuur tot 60°C; de reacties werden gevolgd door middel van dunnelaagchromatografie (TLC) en de reactieduren worden slechts ter toelichting gegeven; de opgegeven smeltpunten (sm.p.) zijn ongecorri-35 geerd (polymorfie kan verschillende smeltpunten tot gevolg hebben); de structuur en zuiverheid van alle geïsoleerde verbindingen werden bepaald door ten minste één van de 74 volgende technieken: TLC (Silicagel 60 F254 voorbeklede TLC-platen van Merck, of met NH2-gel (een silicagel die is bekleed met amine) F254S voorbeklede TLC-platen van Merck), massaspectrometrie, kernspinresonantiespectra (NMR), in-5 frarood-absorptiespectra (IR) of microanalyse. De opbrengsten worden louter voor illustratieve doeleinden gegeven.

De opwerking met een uitwisselingskolom voor kationen werd uitgevoerd met een SCX-patroon (Varian BondElute) die werd | voorgeconditioneerd met methanol. Flash-kolomchromatogra-10 fie werd uitgevoerd met silicagel 60 van Merck (63-200 pm), silicagel 300 HG van Wako (40-60 pm), NH-gel van Fuji Silysia (een met amine beklede silicagel) (30-50 pm), KP-SIL van Biotage (32-63 pm) of AMINOSILICA van Biotage (een met amine beklede silicagel) (40-75 pm) . Preparatieve TLC 15 werd uitgevoerd met silicagel 60 F254 voorbeklede TLC-platen van Merck (0,5 of 1,0 mm dikte). Lage-resolutie-massaspectra (EI) werden verkregen op een Integrity massa-spectrometer (Waters). Lage-resolutiemassaspectra (ESI) werden verkregen met ZMD™- of ZQ™ spectrometers (Waters).

20 De NMR-gegevens werden bepaald met spectrometers (270 MHz, JEOL JNM-LA 27 0; 300 MHz, JEOL JNM-LA 300; of 600 MHz;

Bruker AVANCE 600), waarvoor, tenzij anderszins werd aangegeven, gedeutereerde chloroform (99,8% D) of dimethyl-sulfoxide (99,9% D) als oplosmiddel werd gebruikt. Tetra-25 methylsilaan (TMS) werd als inwendige standaard gebruikt; de verschuivingen zijn in delen per miljoen (ppm) vanaf TMS. De gebruikte afkortingen zijn: s = singlet, d = doublet, t = triplet, k = kwartet, kwint = kwintet, m = mul-tiplet, br. = breed, enz. De IR-spectra werden gemeten met 30 een infraroodspectrofotometer voor Fouriertransformatie (Shimazu FTIR-8300). Het poeder-röntgendiffractie-(PXRD)-patroon werd bepaald met gebruik van een poeder-röntgen-diffractometer (RINT-TTR van Rigaku) die was uitgerust met een automatische monsterhouder, een 2-thèta-thèta-gonio-35 meter, spleetbreedten voor divergentie van de bundel, een secundaire monochromator en een scintillatieteller. Het monster werd voor analyse geprepareerd door het poeder in

J

! j j 75 een aluminium monsterhouder te brengen. Het monster werd met 60.000 rpm geroteerd en door middel van Cu-ka-bestra-ling bij kamertemperatuur afgelezen met 4°/min. De chemische symbolen hebben hun gebruikelijke betekenissen: k.p.

5 (kookpunt), sm.p. (smeltpunt), 1 (liter), ml (milliliter), g (gram), mg (milligram), mol (mol), mmol (millimol), eq. (equivalent), kwant, (kwantitatieve opbrengst).

VOORBEELD 1: 10 4-{ [4- ({ [ (2 1 -OXOSPIRO [CYCLOPENTAAN-1,3 1 -INDOOL] -1' (2 ’ H) -

YL) CARBONYL] AMINO}METHYL) PIPERIDINE-l-YL] METHYL }TETRAHY-DRO-2H-PYRAN-4-CARBONZUUR

I o H rV

i ‘rN-^T n"Vco2h 0£> 0 15

Stap 1. tert-Butyl-4-cyaantetrahydro-2tf-pyran-4-carboxy-laat

Aan een geroerde suspensie van NaH (17,7 g, 0,443 mol) in N,N-dimethylformamide (200 ml) werd bij 0°C onder 20 N2 druppelsgewijs een oplossing van tert-butylcyaanacetaat (25,0 g, 0,177 mol) in N,N-dimethylformamide (100 ml) toegevoegd. Men liet het mengsel opwarmen tot omgevingstemperatuur en het werd gedurende 1 uur geroerd. Vervolgens werd bis(2-broomethyl)ether (49,3 g, 0,177 mol) aan het 25 mengsel toegevoegd en het ontstane mengsel gedurende 24 uur geroerd bij 90°C. Na koelen tot 0°C werd het mengsel gewassen met water (100 ml) . De vluchtige bestanddelen werden verwijderd door afdamping en het residu neergeslagen met een mengsel van ethylacetaat-tolueen (1:2, 500 ml) 30 en water (500 ml). De organische fase werd driemaal gewassen met water (500 ml), gedroogd op Na2SÜ4, gefiltreerd en ingedampt. De vaste stof werd gewassen met hexaan, verza- * I 4 , 76 meld door affiltreren en in vacuüm gedroogd, hetgeen 19,0 i g (57%) titelverbinding als witte kristallen gaf.

1H-NMR (CDCI3) δ: 3,96 (2H, dt, J=3,9 Hz, 12,3 Hz), 3,73 J

(2H,dt, J=2,6 Hz, 12,3 Hz), 2,20-1,94 (4H,m) , 1,52 (9H,s).

5

Stap 2. tert-Butyl-4-(aminomethyl) tetrahydro-2H-pyran-4-carboxylaat

Een mengsel van tert-butyl-4-cyaantetrahydro-2H-py-ran-4-carboxylaat (18,95 g, 0,0897 mol, stap 1 van voor-10 beeld 1) en Raney-Ni (1,00 g) in methanol (200 ml) werd gedurende 12 uur bij kamertemperatuur gehydrogeneerd (3 atm) . Vervolgens werd het mengsel gefiltreerd door een laag Celite en het filtraat in vacuüm geconcentreerd, hetgeen 16,01 g (83%) titelverbinding als een gele stroop 15 gaf.

1H-NMR (CDCI3) δ: 3,86 (2H, dt, J=4,l Hz, 11,4 Hz), 3,48 (2H, dt, J=2,5Hz, 11,5 Hz), 2,75 (2H,s), 2,03 (2H, br d, J=10,7 Hz), 1,55-1,35 (13H , m, met inbegrip van 9H, s, 1,49 ppm).

20

Stap 3tert-Butyl-4-[(4-oxopiperidine-l-yl)methyl3tetrahy-dro-2ff-pyran-4-carboxylaat

Aan een refluxend mengsel van tert-butyl-4-(aminomethyl) tetrahydro-2H-pyran-4-carboxylaat (8,00 g, 0,0372 25 mol, stap 2 van voorbeeld 1) en K2CO3 (0,51 g, 0,0373 mol) in ethanól-H20 (2:1, 240 ml) werd druppelsgewijs 1-ethyl- l-methyl-4-oxopiperidiniumjodide (12,0 g, 0,0445 mol, J.

Org. Chem., 1995, 60, 4324) in ethanol-H20 (2:1, 150 ml) druppelsgewijs toegevoegd. Het ontstane mengsel werd gedu-30 rende 1 uur bij dezelfde temperatuur geroerd. Na afkoelen tot kamertemperatuur werd het oplosmiddel in vacuüm verwijderd. Het residu werd uitgegoten in verz. NaHC03 aq.

(200 ml) en het mengsel geëxtraheerd met CH2CI2 (200 ml x 3) . De extracten werden gedroogd op Na2S04, gefiltreerd en 35 geconcentreerd. Het residu werd gechromatografeerd over een kolom met silicagel, waarbij werd geëlueerd met 77 hexaan/ethylacetaat (3:1 tot 2:1), hetgeen 10,77 g (98%) titelverbinding als een kleurloze stroop gaf.

MS (ESI), m/z:298 (M+H)+.

1H-NMR (CDCls) δ: 3,84 (2H, br d, J=ll,4 Hz), 3,50 (2H, dt, 5 J=2,0Hz, 11,7 Hz), 2,85 (4H, t, J=5, 9 Hz), 2,61 (2H,s), 2,39 (4H, t, J=6,1 Hz), 2,05 (2H,d, J=ll,5 Hz), 1,75-1,45 (11H, m met inbegrip van 9H, s, 1,49 ppm).

Stap 4. tert-Butyl-4-[(4-cyaanpiperidine-l-yl)methyl]te-10 trahydro-2H-pyran-4-carboxylaat

Aan een geroerde oplossing van tert-butyl-4-[(4-oxo-piperidine-l-yl)methyl]tetrahydro-2#-pyran-4-carboxylaat (8,77 g, 0, 0295 mol, stap 3 van voorbeeld 3) in 1,2-di-methoxyethaan (250 ml) werden p-tolueensulfonylmethyliso-15 cyanide (11,51 g, 0,0590 mol), ethanol (3,96 ml, 0,0678 mol) en kalium- t-butoxide (11,58 g, 0, 1032 mol) bij 0°C toegevoegd. Het ontstane mengsel werd gedurende 16 uur geroerd bij 50°C. Na koelen werd het reactiemengsel uitgegoten in verz. NaHC03 aq. (200 ml) en het mengsel geëxtra-20 heerd met CH2CI2 (200 ml) x 3. De extracten werden gedroogd op N32S04, gefiltreerd en geconcentreerd. Het residu werd gechroma.tografeerd over een kolom met silicagel, waarbij werd geëlueerd met hexaan/ethylacetaat (2:1), hetgeen 5,76 . g (63%) titelverbinding als een gele stroop gaf.

25 MS (ESI), m/z: 309 (M+H)+.

1H-NMR (CDCI3) δ: 3,81 (2H,dt, J=3,l Hz, 11,0 Hz), 3,48 (2H, dt, J=2,1 Hz, 11,7 Hz), 2,76-2,64 (2H,m), 2,64-2,52 (1H, m), 2,50-2,35 (4H, m met inbegrip van 2H, s, 2,46 ppm), 1,98 (2H, br, d, J=ll,9 Hz), 1,92-1,70 (4H, m) , 30 1,65-1,40 (llH,m met inbegrip van H, s, 1,47 ppm).

Stap 5. tert-Butyl-4-{[4-amiomethyl)piperidine-l-yl]me- thyl}tetrahydro-2ff-pyran-4-carboxylaat

Een mengsel van tert-butyl-4-[(4-cyaanpiperidine-l-35 yl)methyl]tetrahydro-2H-pyran-4-carboxylaat (5,76 g, 0,0187 mol, stap 4 van voorbeeld 1) en Raney-Ni (3,00 g) in methanol (100 ml) werd gedurende 12 uur bij kamertempe- 78 4 ί ratuur gehydrogeneerd (3 atm). Vervolgens werd het mengsel gefiltreerd door een laag Celite en het filtraat in vacuüm geconcentreerd, hetgeen 5,72 g (98%) titelverbinding als een gele stroop gaf.

5 MS (ESI), m/z: 313 (M+H)+.

1H-NMR (CDC13) δ: 3,80 (2H, dt, J=3,l Hz, 11,5 Hz), 3,49 (2H, dt, J= 2,1 Hz, 12,2 Hz), 2,80 (2H, br.d, J=ll,5 Hz), 2,58-2,40 (4H, m, met inbegrip van 2H, s, 2,43 ppm), 2,15 (2H, br, t, J-7,3 Hz), 1,98(2H, br d, J=13,7 Hz), 1,70-10 1,40 (16H, m, met inbegrip van 9H, s, 1,47 ppm), 1,30-1,10 (2H, m).

Stap 6. tert-Butyl-4-{[4-({[(21-oxospiro[cyclopentaan-1,3'-indool]-1'(2'H) -yl)carbonyl]amino}methyl)piperidine-15 1-yl]methyl}tetrahydro-2ff-pyran-4-carboxylaat

Aan een geroerde oplossing van spiro[cyclopentaan- 1,3-indool]-2' (1'H)-on (600 mg, 3,2 mmol, Howard, Harry R. et al., J. Med. Chem., 1996, 39, 143) en triethylamine (972 mg, 9,6 mmol) in CH2CI2 (20 ml) werd 4-nitrochloor-20 formiaat (677 mg, 3,4 mmol) toegevoegd bij kamertemperatuur en vervolgens werd gedurende 3 uur geroerd bij omgevingstemperatuur. Vervolgens werd een oplossing van tert-butyl-4-{ [4-aminomethyl) piperidine-1-yl]methyl}tetrahydro-2H-pyran-4-carboxylaat (1,0 g, 3,2 mmol, stap 5 van voor-25 beeld 1) in CH2CI2 (5 ml) toegevoegd bij kamertemperatuur, waarna gedurende 18 uur werd geroerd. Vervolgens werd verz. NaHCCb aq. (20 ml) toegevoegd, geëxtraheerd met CH2C12 (30 ml x 3), gedroogd op MgSC^, gefiltreerd en geconcentreerd, hetgeen een geelbruine olie gaf. Het residu 30 werd gechromatografeerd over een kolom met aminopropyl-silicagel, waarbij werd geëlueerd met hexaan/ethylacetaat (11:1), hetgeen 1,3 g (75%) titelverbinding als een heldergele olie gaf.

MS (ESI), m/z: 526 (M+H)\ 35 1H-NMR (CDCI3) δ: 8,70 (1H, br s) , 8,23 (1H, d, J=8,l Hz), 7,41-7,10 (3H, m), 3,83-3,75 (2H, m) , 3,52-3,47 (2H,m), 79 I 1 , 3.29- 3,20 (2H, m) , 2,83-2,75 (2H,m), 2,44 (2H,s), 2,25- 1,20 (28H, m).

Stap 7. 4-{[4-({[(21-Oxospiro[cyclopentaan-1,31-indool]- 5 11{2 Ή)-yl)carbonyl]amino}methyl)piperidine-l-yl]methyl}- tetrahydro-2ff-pyran-4-carbonzuur

Aan een oplossing van tert-butyl-4-{[4-({[(2'-oxospiro [cyclopentaan-1,3'-indool]-1'(2 Ή) -yl)carbonyl]amino}me-i thyl)piperidine-l-yl]methyl}tetrahydro-2H-pyran-4-carboxy- 10 laat (2,3 g, 4,38 mmol, stap 6 van voorbeeld 1) in CH2CI2 (14 ml) werd trifluorazijnzuur (18 ml) toegevoegd bij kamertemperatuur, en het mengsel gedurende de nacht geroerd bij kamertemperatuur. Het mengsel werd geconcentreerd, hetgeen een gele olie gaf. CH2C12 (200 ml) werd toegevoegd 15 en er werd gewassen met verz. NaHCC>3 aq. (80 ml), gedroogd op MgS04, gefiltreerd en geconcentreerd, hetgeen een stroop gaf. Deze werd gechromatografeerd over een kolom met silicagel, waarbij werd geëlueerd met CH2Cl2/methanol (15:1), hetgeen 2,1 g (kwant) titelverbinding als een wit-20 te, vaste stof gaf. Herkristallisatie uit ethylacetaat/n-heptaan gaf een wit poeder.

. MS (ESI), m/z: 470 (M+H)+.

Sm.p. = 146,3°C.

IR (KBr) v: 2943, 2864, 1733, 1558, 1465, 1352, 1151, 25 1109, 759 cm'1.

1H-NMR (CDCI3) 6: 8,85 (lH,br s), 8,21 (1H, d, J=8,l Hz), 7.30- 7,15 (3H,m), 3,95-3,72 (4H,m), 3,40-3,25 (2H,m), I 3,20-3, 06 (2H,m), 2,65-2,45 (4H,m), 2,25-1, 85 (13H, m) , 1,60-1, 40 (4H,m) .

30 Een signaal van CO2H werd niet waargenomen.

Anal., ber. voor C26H35N3O5· 0,25H20: C, 65,87; H, 7,55; N, 8,86.

Gevonden: C, 65,58; H, 7,39; N, 8,86.

* · * β 80 VOORBEELD 2;

2,2-DIMETHYL-3-[4- ( { [ (2 ' -OXOSPIRO [CYCLOPENTAAN-l, 31 -INDOOL] -1' (2 1 H) -YL) CARBONYL] AMINO)METHYL) PIPERIDINE-1-YL] -PROPAANZUUR

5 ° M j—\ χ

Stap 1. tert-Butyl-4-({[(21-oxospiro[cyclopentaan-1,3'-indool] -1' (2 Ή) -yl)carbonyl]amino}methyl)piperidine-l-car-10 boxylaat

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 6 van voorbeeld 1 uit tert-butyl-4-(aminomethyl)piperidine-l-carboxylaat.

Rf =.0,2 (hexaan/ethylacetaat (8/1)).

15 1H-NMR (CDC13) δ: 8,78· (lH,br, s) , 8,23 (lH,d, J=9 Hz), 7,31-7,10 (3H,m), 4,20-4,05 (2H,m), 3,35-3,25 (2H,m), ! 2,80-2,60 (2H,m), 2,25-1,80 (9H, m), 1, 80-1,65 (2H, m) , 1,46 (9H, s), 1,30-1,10 (2H,m) .

! 20 Stap 2. 21-Oxo-N- (piperidine-4-ylmethyl)spiro[cyclopen- j taan-1,3'-indool]-11(2Ή)-carboxamide | tert-Butyl-4-({[(2'-oxospiro[cyclopentaan-1,3'-in-dool]-l' {2 Ή) -yl)carbonyl]aminoJmethyl)piperidine-l-carboxylaat (750 mg, 1,8 mmol, stap 1 van voorbeeld 2) werd i 25 opgelost in 10% HC1 in methanol (20 ml) en het mengsel gedurende 7 uur geroerd bij kamertemperatuur. Concentratie gaf een kleurloze olie die werd gechromatografeerd over een kolom met silicagel, waarbij werd geëlueerd met | CH2Cl2/methanol/NH4OH (12/1/0,1), hetgeen 570 mg (kwant.) 30 titelverbinding als een kleurloze olie gaf.

MS (ESI) m/z: 328 (M+H)+.

1H-NMR (CDC13) δ: 8,76 (1H, br s), 8,24 (1H, d, J=9,0 Hz), 7,31-7,10 (3H,m), 3,32-3,25 (2H,m), 3,15-3,09 (2H,ra), 2,67-2,60 (2H,m), 2,30-1,60 (12H, m), 1,32-1,10 (2H,m) .

81 I 5 Stap 3. Methyl-2,2-dimethyl-3-[4-({[(2'-oxospiro[cyclopen- ! taan-1,31-indool]-11(2Ή) -yl)carbonyl]amino}methyl)pipe- ! ridine-l-yl]propanoaat

Aan een geroerde oplossing van 2'-oxo-N-piperidine-4-ylmethyl)spiro[cyclopentaan-1,3'-indool]-1'(2'H)-carboxa-10 mide (480 mg, 1,5 mmol, stap 2 van voorbeeld 2) en methyl-2, 2-dimethyl-3-oxopropanoaat (248 mg, 1,7 mmol, Kim, Hwa-Ok et al., Synth. Commun., 1997, 27, 2505) in CH2CI2 (40 ml) werd natriumtriacetoxyboorhydride (623 mg, 2,9 mmol) in één portie bij kamertemperatuur toegevoegd. Het mengsel 15 werd gedurende 20 uur geroerd bij omgevingstemperatuur. Aan het mengsel werd verz. NaHCC>3 aq. (10 ml) toegevoegd en er werd geëxtraheerd met CH2CI2 (30 ml x 2), gedroogd op MgS04, gefiltreerd en geconcentreerd, hetgeen een gele olie gaf. Het residu werd gechromatografeerd over een ko-20 lom met aminopropyl-silicagel, waarbij werd geëlueerd met hexaan/ethylacetaat (9:1), hetgeen 150 mg (23% titelver-binding als een heldere, kleurloze olie gaf.

MS (ESI), m/z: 470 (M+H)+.

XH-NMR (CDCI3) δ: 8,72 (1H, br s), 8,24 (1H, d, J=8,l Hz), 25 7,31-7,10 (3H, m), 3,65 (3H, s), 3,27-3,20 (2H, m), 2,85- 2,75 (2H,m), 2,46 (2H,s), 2,23-1,90 (11H, m), 1,70-1,60 (2H,m) , 1,35-1,28 (2H, m), 1,15 (6H,s).

Stap 4, 2,2-Dimethyl-3-[4-({[(21-oxospiro[cyclopentaan- 30 1,3' -indool] -1' (2 Ή) -yl) carbonyl] amino}methyl)piperidine- 1-yl]propaanzuur

Aan een geroerde oplossing van methyl-2,2-dimethyl-3-[4-({[(2'-oxospiro[cyclopentaan-1,3'-indool]-1'(2'H)-yl)-carbonyl]aminojmethyl)piperidine-l-yl]propanoaat (170 mg, 35 0,38 mmol, stap 3 van voorbeeld 2) in azijnzuur (2 ml) werd H2SO4 (113 mg) in water (2 ml) toegevoegd, en het mengsel werd gedurende 36 uur gerefluxt. Men liet het 82 I * , mengsel afkoelen tot kamertemperatuur en vaste NaHCCb (500 mg) werd langzaam toegevoegd. Het ontstane mengsel werd geconcentreerd, hetgeen een witte, vaste stof gaf. Aan de vaste stof werd CH2CI2 (40 ml) toegevoegd en er werd gedu-5 rende 10 minuten geroerd en gedroogd op MgSO*. De oplossing werd gefiltreerd en geconcentreerd en vervolgens resteerde een gele olie. De olie werd gechromatografeerd over een kolom met silicagel, waarbij werd geëlueerd met CH2Cl2/methanol (14:1), hetgeen 130 mg (80%) titelverbin-10 ding als een witte, vaste stof gaf. Herkristallisatie uit ethylacetaat/diethylether gaf een wit poeder.

MS (ES), m/z: 328 (M+H)+.

Sm.p. 189,1°C

IR (KBr) v: 2950, 1732, 1600, 1537, 1475, 1348, 1321, 15 1280, 1153, 964, 873, 758 cm-1.

1H-NMR (CDCI3) δ: 8,80 (lH,br s), 8,21 (1H, d, J=8,l Hz), 7,35-7,10 (3H,m), 3,36-3,20 (2 H, m), 3,20-3,10 (2 H, m), 2,56 (2H, s), 2,54-2,40 (2H,m), 2,30-1,60 (11H, m), 1,58- 1,35 (2H,m), 1,24 (6H, s) .

20 Een signaal van C02H werd niet waargenomen.

Anal., ber. voor C24H33N3O4 · 0,3H20: C, 66,58; H, 7,82; N, 9,71.

Gevonden: C, 66,33; H, 7,72; N, 9,51.

25 VOORBEELD 3:

1-[4-({[(2'-OXOSPIRO[CYCLOPENTAAN-1,31-INDOOL]-11(2'H)-YL) CARBONYL] AMINO)METHYL) PIPERIDINE-l-YL] CYCLOPROPAAN-CARBONZUUR

O H ^

VN-0>C°2H

0£> * 30 ^

Stap 1. tert-Butyl-1-(joodmethyl)cyclopropaancarboxylaat

Aan een geroerde oplossing van diisopropylamine (7,7 ml, 0,055 mol) in tetrahydrofuran (80 ml) werd n-butyl- » * ( 83 lithium (1,59 M in cyclohexaan, 34 ml, 0,055 mol) langzaam toegevoegd bij -70°C en het mengsel gedurende 20 minuten geroerd bij 0°C. Het mengsel werd gekoeld tot -78°C en 1 tert-butylcyclopropaancarboxylaat (6,5 g, 0,046 mol, Kohl- | 5 rausch et al., Z. Elektrochem. Angew. Phys. Chem. , 1937, j 70, 392) in tetrahydrofuran (10 ml) in tetrahydrofuran (10 ml) werd druppelsgewijs toegevoegd en het mengsel gedurende 3 uur geroerd. Vervolgens werd dijoodmethaan (4,0 ml, 0, 050 mol) in tetrahydrofuran (10 ml) druppelsgewijs toe-10 gevoegd, en men liet het mengsel gedurende de nacht opwarmen tot kamertemperatuur. Verzadigde NH4C1 in water (80 ml) werd aan de oplossing toegevoegd en deze werd geëxtraheerd met diethylether (50 ml), gewassen met geconcentreerde zoutoplossing (20 ml) , gedroogd op MgS04, gefil-15 treerd en geconcentreerd, hetgeen een bruine olie gaf. De olie werd gechromatografeerd over een kolom met silicagel, waarbij werd geëlueerd met hexaan/diethylether (40:1), hetgeen 1,9 g titelverbinding als een onzuiver product gaf. Het onzuivere product werd zonder verdere zuivering 20 gebruikt.

Rf: 0,3 (hexaan/diethylether (40:1)).

Stap 2. tert-Butyl-1-[(4-{[(tert-butoxycarbonyl)amino] methyl }piperidine-l-yl) methyl] cyclopropaancarboxylaat 25 Een mengsel van tert-butyl-1-(joodmethyl)cyclopro paancarboxylaat (1,9 g, 6,7 mmol, stap 1 van voorbeeld 3), tert-butyl (piperidine-4-ylmethyl) carbamaat (3,0 g, 14 mmol), N,N-diisopropylethylamine (5,8 ml, 34 mmol) in N,N-dimethylformamide (25 ml) werd gedurende 20 uur verhit tot 30 120°C. Na afkoelen tot kamertemperatuur werd water (50 ml) toegevoegd en geëxtraheerd met ethylacetaat/tolueen (1:2, 60 ml x 2), gewassen met water (50 ml x 2), geconcentreerde zoutoplossing (50 ml), gedroogd op MgS04, gefiltreerd en geconcentreerd, hetgeen een bruine olie gaf. De olie 35 werd gechromatografeerd over een kolom met silicagel, waarbij werd geëlueerd met CH2CI2/methanol (10:1, hetgeen « » 84 560 mg (11%) titelverbinding als een helderbruine olie gaf.

MS (ESI), m/z: 369 (M+H)\ 1H-NMR (CDCI3) δ: 4,60 (1H, br) , 3,08-2,82 (4H, m) , 2,59 5 (2H, s), 2,10-1,90 (2H, m), 1,75-1,55 (4H,m), 1,50-1,05 (23H,m).

Stap 3. l-{[4-(Aminomethyl)piperidine-l-yl]methyl}cyclo- propaancarbonzuur 10 Tert-Butyl-1-[(4-{[(tert-butoxycarbonyl) amino] me thyl }piperidine-l-yl) methyl] cyclopropaancarboxylaat (211 mg, 0,57 mmol, stap 2 van voorbeeld 3) werd opgelost in 10% HC1 in dioxaan (5 ml) en het mengsel gedurende 4 uur geroerd bij kamertemperatuur. De ontstane bruine suspensie 15 werd geconcentreerd, hetgeen 150 mg (kwant), titelverbin-ding als een bleekbruine, vaste stof gaf. Deze werd zonder verdere zuivering gebruikt.

MS (ESI), m/z: 211 (M-H)‘.

20 Stap 4. 1-[4-({[(21-Oxospiro[cyclopentaan-1,3'-indool]- 11[2 Ή)-yl)carbonyl]amino}methyl)piperidine-l-yl]methyl}-cyclopropaancarbonzuur

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 6 van voorbeeld 1 uit l-{ [4-25 (aminomethyl)piperidine-l-ylmethyl}cyclopropaancarbonzuur (stap 3 van voorbeeld 3) . De zuivering werd uitgevoerd over een kolom met silicagel, waarbij werd geëlueerd met CH2Cl2/methanol (18:1 ~10:1), hetgeen 130 mg (53%) titel-verbinding als een witte, vaste stof gaf. De vaste stof 30 werd fijngewreven met hexaan/diethylether en verzameld door affiltreren, hetgeen de titelverbinding als een witte, vaste stof gaf.

MS (ESI), m/z: 426 (M+H)+.

Sm.p. 186,5°C

35 IR (KBr) v: 3300. 2960, 2908, 1743, 1697, 1542, 1463, 1348, 1267, 1161, 1143, 1105, 779 cm"1.

' « · .

85 1H-NMR (CDC13) δ: 8,81 (lH,br s) , 8,21 (1H, d, J=8, 1 Hz), 7,32-7,14 (3H,m), 3,43-3,15 (4 H, m), 2,59 (2 H, s), 2,30- 1,60 (17H,m) , 0,65-0,56 (2H,m) .

Een signaal van CO2H werd niet waargenomen.

5 Anal., ber. voor C24H31N3O4: C, 67,74; H, 7,34; N, 9,88.

Gevonden: C, 67,45; H, 7,36; N, 9,80.

VOORBEELD 4: 10 1-4-( { [ (2 '-OXOSPIRO[CYCLOPENTAAN-1,3'-INDOOL]-1' (2 ' H)-YL)-

CARBONYL] AMINO}METHYL) PIPERIDINE- 1-YL]METHYL)CYCLOPENTAAN-CARBONZUUR

Vn^T"n-\ C0 H

0 15

Stap 1. Methyl-1-joodmethyl)cyclopentaancarboxylaat

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 1 van voorbeeld 3 uit methylcyclopen-taancarboxylaat.

20 1H-NMR (CDCI3) δ: 3,73 (3H,s), 3,42 (2H,s), 2,30-2,15 (2H,m), 1,80-1,55 (6H,m).

Stap 2. Methyl-1-[ (4-{ [ (tert-butoxycarbonyl) amino]methyl}-piperidine-l-yl)methyl]cyclopropaancarboxylaat 25 De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 2 van voorbeeld 3 uit methyl-1-(j oodmethyl)cyclopentaancarboxylaat.

MS (ESI) m/z: 355 (M+H)+.

1H-NMR (CDCI3) δ: 4,58 (1H, br s) , 3,66 (3H,s), 2,97 (2H, 30 t, J=6,3 Hz), 2,77 (2H, br d, J=ll,5 Hz), 2,55 (2H,s), 1,70-1,50 (9H,m), 1,44 (9H, s), 1,25-1,08 (2H,m).

86

Stap 3. Methyl-l-{[4-(aminomethyl)piperidine-l-yl] methyl}-cyclopropaancarboxylaat

Een oplossing van methyl-1-[(4 —{[(tert-butoxycarbo-nyl) amino]methyl}piperidine-l-yl)methyl]cyclopropaancar-5 boxylaat (1,16 g, 3,27 mmol, stap 2 van voorbeeld 4) in CH2CI2 (25 ml) en trifluorazijnzuur (5 ml) werd gedurende 1.5 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd vervolgens geconcentreerd, basisch gemaakt met verz. NaHCC>3 aq. (100 ml) en vijfmaal geëxtraheerd met CHCI3 (100 10 ml) . De gecombineerde extracten werden gedroogd op MgSÜ4, gefiltreerd en geconcentreerd, hetgeen 0,831 g (100%) ti-telverbinding als een gele stroop gaf.

MS (ESI) , m/z: 255 (M+H)\ 1H-NMR (CDCI3) 6:3,66 (3H,s), 2,78 (2H,d, J=ll,5 Hz), 2,62-15 2, 50 (4H,m), 2,15-1,98 (4H,m), 1,80-1,40 (9H, m) , 1,30- 1.05 (2H,m) .

Stap 4. Methyl-1-{[4-({[(2'-oxospiro[cyclopentaan-1,31-indool] -1 ' (2Ή) -yl) carbonyl] amino}methyl) piperidine-l-yl] cy-20 clopentaancarboxylaat

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 6 van voorbeeld 1 uit methyl-1-{ [4- (aminomethyl)piperidine-l-yl]methylJcyclopentaancarboxy-laat (stap 3 van voorbeeld 4).

25 MS(ESI), m/z: 468 (M+H)+.

XH-NMR (CDCI3) 6: 8,71 (1H, br s) , 8,23 (1H, d, J=8,l Hz), 7,34-7,10 (3H,m), 366 (3H, s), 3,28-320 (2H,m), 2,82-2,75 (2H,m), 2,56 (2H,s), 2,25-1,40 (21H,m), 1,38-1,12 (2H,m) .

30 Stap 5. l-{[4-({[(21-Oxospiro[cyclopentaan-1,3'-indool]- 11 (2 Ή) -yl)carbonyl]amino}methyl)piperidine-l-yl]methyl}-cyclopentaancarbonzuur

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 4 van voorbeeld 2 uit methyl-1-{ [4- 35 ({[(2’-oxospiro(cyclopentaan-1, 3'-indool]-1’ (2Ή)-yl)car bonyl] amino(methyl)piperidine-l-yl]cyclopentaancarboxylaat (stap 4 van voorbeeld 4).

87 I * · MS(ESI), m/z: 454 (M+H)+.

Sm.p. 188,1°C

IR (KBr) v: 3301, 2935, 2869, 1730, 1602, 1531, 1469, 1278, 1147, 758 cm-1.

5 1H-NMR (CDC13) δ: 8,80 (lH,br s) , 8,21 (1H, d, J=8,l Hz), 7,32-7,14 (3H,m), 3,31 (2H,t, J=5,4 Hz), 3,23-3,12 (2H,m), 2,67 (2H,s), 2,50-2,32 (2H,m), 2,31-1,56 (17H,m), 1,55- 1,32 (4H,m) .

Een signaal van CO2H werd niet waargenomen.

10 Anal., ber. voor C26H35N3O4 · 0, 5H20: C, 67,51; H, 7,84; N, 9,08.

Gevonden: C, 67,17; H, 7,83; N, 8,85.

VOORBEELD 5: 15 1-{[4-({[(2'-OXOSPIRO [CYCLOPENTAAN-1,3'-INDOOL]-11 (2 fH)-

YL) CARBONYL] AMINO}METHYL) PIPERID INE-l-YL 3 METHYL }CYCLOBU-TAANCARBONZUUR

(f ΊΓ)=0 w 20

Stap 1. Methyl-1-[(4-{[(tert-butoxycarbonyl)amino]methyl}-piperidine-l-yl) methyl]cyclobutaancarboxylaat

Aan een geroerd mengsel van tert-butyl(piperidine-4-ylmethyl)carbamaat (12,8 g, 60 mmol) en methyl-l-formylcy-25 clobutaancarboxylaat (2,13 g, 15 mmol, Davis, Charles R.; Swenson, Dale C.; Burton, Donald J., J. Org. Chem., 1993, 58, 6843) in tetrahydrofuran (50 ml) werd bij omgevings temperatuur azijnzuur (8,6 ml, 150 mmol) toegevoegd. Na 30 minuten werd natriumtriacetoxyboorhydride (12,7 g, 60 30 mmol) aan het mengsel toegevoegd. Vervolgens werd het mengsel gedurende 2 uur verhit tot 60°C. Na koelen werd het reactiemengsel uitgegoten in verz. NaHCC>3 aq. De wa-terlaag werd driemaal geëxtraheerd met CH2CI2. De gecombineerde organische fasen werden gewassen met geconcentreer- • ' v 88 de zoutoplossing, gedroogd op MgSOi, gefiltreerd en geconcentreerd. Het residu werd gechromatografeerd over een kolom met silicagel, waarbij werd geëlueerd met hex-aan/ethylacetaat (1:1), hetgeen 4,25 g (83%) titelverbin-5 ding als een witte, vaste stof gaf.

MS(ESI), m/z: 341 (M+H)+.

1H-NMR (CDC13) δ: 3,69 (3H,s), 2,96 (2H,t, J=6,2 Hz), 2,75 (2H,d, J= 11,4 Hz), 2,67 (2H, s) , 2,37-2,46 (2H,m) , 1,78- 2,05 (6H,m), 1,45-1,65 (2H,m) , 1,43 (9H, s) , 1,09-1,21 10 (2H,m) .

Stap 2. Methyl-l-{[4-(aminomethyl)piperidine-l-yl]methyl}-cyclobutaancarboxylaat

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure 15 beschreven in stap 3 van voorbeeld 4 uit methyl-1-[(4- {[(tert-butoxycarbonyl)amino]methyl)piperidine-l-yl)methyl] cyclobutaancarboxylaat (stap 1 van voorbeeld 5).

MS(ESI), m/z: 241 (M+H)+.

1H-NMR (CDCI3) δ: 3,67 (3H,s), 2,72-2,78 (2H,m) , 2,66 20 (2H,s), 2,54 (2H, d, J=6,2.Hz), 2,34-2,47 (2H, m) , 1,79- 2,04 (8H, m), 1,54-1, 64 (2H, m) , 1,05-1,35 (3H,m).

Stap 3. Methyl-l-{[4-({[(2'-oxospiro[cyclopentaan-1,3'-indool] -11(2 Ή) -yl)carbonyl]amino}methyl)piperidine-l-yl]me-25 thyl}cyclobutaancarboxylaat

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 6 van voorbeeld 1 uit methyl-l-{ [4- (aminomethyl)piperidine-l-yl]methyl}cyclobutaancarboxylaat (stap 2 van voorbeeld 5).

30 MS(ESI), m/z: 454 (M+H)+.

1H-NMR (CDCI3) δ: 8,71 (1H, br s) , 8,23 (1H, d, J=8,l Hz), 7,35-7,10 (3H, m), 3,70 (3H,s), 3,27-3,21 (2 H, m), 2,88- 2,70 (2H,m), 2,68 (2H,s), 2,49-2,35 (2H,m), 2,28-2,15 (2H,m), 2,14-1,75 (13H, m) , 1,70-1, 62 (2H, m), 1,34-1,15 35 (2H, m) .

89 4 »

Stap 4. l-{[4-({[(21-Oxospiro[cyclopentaan-1,31-indool]- 1'(2Ή)-yl)carbonyl]amino}methyl)piperidine-l-yl]methyl}-cyclobutaancarbonzuur

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure 5 beschreven in stap 4 van voorbeeld 2 uit methyl-l-{[4-({[(2'-oxospiro[cyclopentaan-1,3'-indool]-1' (2 Ή) -yl)carbonyl] amino}methyl)piperidine-l-yl]methyl}cyclobutaancar-boxylaat (stap 3 van voorbeeld 5).

MS(ESI), m/z: 440 (M+H)+.

10 Sm.p. 171,0°C

IR (KBr) v: 3303, 2937, 2868, 1728, 1537, 1461, 1280, 1226, 1145, 765, 750 cm"1.

1H-NMR (CDC13) δ: 8,80 (lH,br s), 8,20 (1H, d, J=8,0 Hz), 7,32-7,12 (3H,m), 3,30 (2H,t, J=6,1 Hz), 3,14-3,00 (2H, 15 m), 2,77 (2H, s), 2, 60-2,46 (2H, m) , 2,45-1,70 (17H, m) , 1,54-1,35 (2H, m).

Een signaal van CO2H werd niet waargenomen.

Anal., ber. voor C25H33N3O4 * 0,5H2O: C, 66, 94; H, 7,64; N, 9,37.

20 Gevonden: C, 66,95; H, 7,75; N, 9,32.

VOORBEELD 6:

2-ETHYL-2- { [4- ({ [ (2 1 -OXOSPIRO [CYCLOPENTAAN-1,3 1 -INDOOL] -1' (2Ή) -YL) CARBONYL]AMINO)METHYL) PIPERIDINE-l-YL]METHYL)-25 BUTAANZUUR

O H

VNjf'NXcOjH

O

Stap 1. Methyl-2-[(4-{[(tert-butoxycarbonyl)amino]methyl}-30 piperidine-l-yl)methyl]-2-ethylbutanoaat

De titelverbinding werd bereid met de werkwijze die vergelijkbaar was met die welke werd getoond in stap 1 van voorbeeld 5, met gebruik van methyl-2-ethyl-2-formylbuta- 90 noaat (Okano, K.; Morimoto, T.; Sekiya, M., Journal of the Chemical Society, Chemical Communications, 1985, 3, 119) MS(ESI), m/z: 357 (M+H)+.

1H-NMR (CDC13) δ: 4,62-4,48 (1H, br) , 3,65 (3H, s), 3,01- 5 2,93 (2H,m), 2,73-2,65 (2H,m), 2,46 (2H,s), 2,13-2,02 (2H,m), 1, 73-1, 50 (6H,m), 1,44 (9H,s), 1,28-1,10 (3H, m) , 0,76 (6H, t, J=7,5 Hz).

Stap 2. Methyl-2-{[4-(aminomethyl)piperidine-l-yl]methyl}-10 2-ethylbutanoaat

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 3 van voorbeeld 4 uit methyl-2-[(4-{[(tert-butoxycarbonyl)amino]methyl}piperidine-l-yl)me-thyl]-2-ethylbutanoaat (stap 1 van voorbeeld 6).

15 MS(ESI), m/z: 459 (M+H)+.

1H-NMR (CDCI3) δ: 8,92-8,86 (lH,m), 8,28-8,23 (lH,m), 7,20- 7,12 (3H,m), 4,77-4,61 (1H, m) , 3,65 (3H, s), 3,27 (2H,t, J=6,4 Hz), 2,75-2, 66 (2H,m) , 2,47 (2H,s), 2,16-2,05 (2H, m) , 1,72-1,49 (10 H, m), 1,38-1,21 (5H, m), 0,76 (6H, d, 2 0 J=7,5 Hz) .

Stap 3. Methyl-2-ethyl-2-{[4-({[(21-oxospiro[cyclopentaan-1,3'-indool]-11(2’H)-yl)carbonyl]amino}methy1)piperidine-l-yl ]methyl}butanoaat 25 De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 6 van voorbeeld 1 uit methyl-2-{ [4-(aminomethyl)piperidine-l-yl]methyl}-2-ethylbutanoaat (stap 2 van voorbeeld 6).

MS(ESI), m/z: 470 (M+H)+.

30 1H-NMR (CDCI3) δ: 8,72 (1H, br s) , 8,23 (1H, d, J=8,l Hz), 7,30-7,13 (3H, m) , 3,65 (3H, s) , 3,24 (2H, t, J=5,4 Hz), 2,75-2, 69 (2H, m) , 2,47 (2H, m), 2,30-1,50 (20H,m), 1,35- 1,20 (2H, m), 0,76 (3H, t, J=6,0 Hz).

* · · 91

Stap 4. 2-Ethyl-2-{[4-({[(21-oxospiro[cyclopentaan-1,31 - j indool]-11(2'H)-yl)carbonyl]amino}methyl)piperidine-l-yl]- methyl}butaanzuur

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure 5 beschreven in stap 4 van voorbeeld 2 uit methyl-2-ethyl-2-{ [4- ({[(2'-oxospiro[cyclopentaan-1, 3'-indool]-1'(2Ή)-yl) -carbonyl]amino}methyl)piperidine-l-yl]methyl}butanoaat (stap 3 van voorbeeld 6).

MS (ESI), m/z: 456 (M+H)\ 10 IR (KBr) v: 3323, 2937, 1732, 1596, 1463, 1348, 1147, 746 cm"1.

1H-NMR (CDC13) δ: 8,80 (lH,br s) , 8,22 (1H, d, J=8,l Hz), 7,35-7,15 (3H,m), 3,31 (2H,t, J=6,0 Hz), 3,18-3,05 (2H, m), 2,61 (2H, s), 2,57-2,40 (2H, m), 2,30-1,25 (17 H, m) , 15 0,88 (6H, t, J=9,0 Hz). .

Een signaal van CO2H werd niet waargenomen.

Anal., ber. voor C26H37N3O4 · 0,4H2O: C, 67,48; H, 8,23; N, 9,08.

Gevonden: C, 67,87; H, 8,13; N, 8,95.

20 VOORBEELD 7:

l-{ [4- ({ [ (6 1 -FLUOR-2 1 -OXOSPIRO[CYCLOPENTAAN-1,3 ' -INDOOL] -1' (2 'H) -YL)CARBONYL]AMINO}METHYL) PIPERIDINE-1-YL]METHYL}-CYCLOBUTAANCARBONZUUR

Stap 1. Ethyl-1-[(4-{[(tert-butoxycarbonyl)amino]methyl}-piperidine-l-yl)methyl]cyclobutaancarboxylaat 30 De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 3 van voorbeeld 8 uit [cyclobutyli-deen(ethoxy)methoxy](trimethyl)silaan (Kuo. Y.-N. et al., J. Chem. Soc. D., 1971, 136).

MS(ESI), m/z: 355 (M+H)+.

92 * .

1H-NMR (CDC13) δ: 4,55 (1H, br) , 4,17 (2H,k, J=7,l Hz), 2,96 (2H, t, J=6,3 Hz), 2,76 (2H, d, J=ll,4 Hz), 2,48-2,33 (2H,m), 2,05-1,80 (6H,m), 1,43 (9H,s), 1,25 (3H, k, J=7,l

Hz) , 1,40-1, 05 (7H,m) .

5

Stap 2. 1-[(4-{[(tert-Butoxycarbonyl)amino3 methyl}piperi- dine-l-yl) methyl]cyclobutaancarbonzuur

Een mengsel van ethyl-1-[(4-{[(tert-butoxycarbonyl)-amino]methyl}piperidine-l-yl) methyl]cyclobutaancarboxylaat .10 (4,2 g, 11,9 mmol, stap 1 van voorbeeld 7), 2N NaOH (18 ml) en ethanol (12 ml) werd gedurende 4 uur verhit tot 50°C. De ontstane oplossing werd gekoeld in een ijsbad en 2N HC1 (ca. 19 ml) werd toegevoegd tot de pH van het mengsel ca. 5-6 was. Het geheel werd geëxtraheerd met CH2CI2/1-15 propanol (3:1, 30 ml x 3). De gecombineerde organische lagen werden gedroogd (Na2S04) en gefiltreerd. Het filtraat werd geconcentreerd, hetgeen 3,8 g (98%) titelverbinding als een gele, vaste stof gaf.

1H-NMR (CDCI3) δ: 4,08 (lH,m), 3,20-3,10 (2H,m), 3,08-2,99 20 (2H,m), 2,91 (2H,s), 2,60-2,38 (4H, m), 2,35-2,16 (2H,m), 2,05-1,76 (6H, m), 1,65 (lH,m), 1,44 (9H,s)

Stap 3. 1~{[4-(Aminomethyl)piperidine-l-yl]methyl}cyclobu-taancarbonzuur-4-methylbenzeensulfonaat 25 In een 3-halsrondbodemkolf van 500 ml werd onder N2 een mengsel van 1-[(4-{[(tert-butoxycarbonyl)amino]me-thyl}piperidine-l-yl)methyl]cyclobutaancarbonzuur (30 g, 92 mmol, stap 2 van voorbeeld 7) in tetrahydrofuran (150 ml) gedurende 10 minuten geroerd bij kamertemperatuur. Aan 30 deze suspensie werd een oplossing van p-tolueensulfonzuur-monohydraat (52,4 g, 276 mmol) in tetrahydrofuran (150 ml) toegevoegd bij kamertemperatuur. Na gedurende 10 minuten roeren bij die temperatuur werd de ontstane oplossing gedurende 3 uur verhit onder reflux. Na afkoelen tot kamer-35 temperatuur werd triethylamine (28,1 ml, 202 mmol) gedurende een periode van 1 uur zeer langzaam toegevoegd, en ondertussen werd geënt. Het witte neerslag vormde zich 1 j • “λ 93 ; tijdens de toevoeging van triethylamine. De ontstane witte suspensie werd gedurende 6 uur geroerd bij kamertemperatuur, deze werd gefiltreerd en de verkregen vaste stof werd gewassen met tetrahydrofuran (100 ml x 2), gedurende 5 5 uur gedroogd bij 50°C, hetgeen 35 g (96%) titelverbin- ding als een wit poeder gaf.

Sm.p.: 210°C.

^•H-NMR (D20) δ: 7,40 (2H, d, J= 7,2 Hz), 7,07 (2H, d, J = 7,2 Hz), 3,28-3, 00 (4H, m), 2,80-2,57 (4H,m), 2,09 (3H, 10 s), 2,18-1,97 (2H,m), 1,85-1,58 (8H,m) , 1,36-1,12 (2H,m).

Stap 4. l-{[4-({[(6*-Fluor-21-oxospiro[cyclopentaan-1,31- indool]-11 (2Ή) -yl)carbonyl]amino}methyl)piperidine-l-yl]-methyl}cyclobutaancarbonzuur 15 De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 6 van voorbeeld 1 uit 6'-fluorspiro[cyclopentaan-1, 3'-indool]-2'(1'H)-on (Joensson, N. et al., Acta Chem. Scand. Ser. B, 1974, 28, 225) en l-{[4-(ami- nomethyl)piperidine-l-yl]methyl}cyclobutaancarbonzuur-4-20 methylbenzeensulfonaat (stap 3 van voorbeeld 7).

MS (ESI), m/z: 458 (M+H)+

Sm.p.: 150,3°C.

IR (KBr) v: 3305, 2935, 1735, 1602, 1492, 1440, 1357, 1296, 1228, 1157, 1095, 869 cm"1.

25 1H-NMR (CDC13) δ: 8,73 (lH,br s) , 8,01 (1H, dd, J=5,4, 8,1 Hz), 6, 92-6, 83 (lH,m), 3,30 (2H, t, J=5,4 Hz), 3,15-3,03 (2H, m), 2,78 (3H,s), 2,64-2,50 (2H,m), 2,45-1,70 (16H,m), 1,55-1,36 (2H,m).

Een signaal van. C02H werd niet waargenomen.

30 Anal., ber. voor C25H32FN3O4 · 0,4H2O: C, 64,61; H, 7,11; N, 9,01.

Gevonden: C, 64,31; H, 7,11; N, 9,05.

94 VOORBEELD 8:

4-{[4-({[(6' -FLUOR-2 ' -OXOSPIRO [ CYCLOPENTAAN-1,3 ' - INDOOL ] -11 (21H) -YL) CARBONYL] AMINO}METHYL) PIPERIDINE-l-YL]METHYL} -TETRAHYDRO-2H-PYRAN-4-CARBONZUUR

5 O. II o

Stap 1. tert-Butyl{ [1- (ethoxymethyl) piperidine-4,~yl]methyl }carbamaat 10 Aan een geroerde oplossing van tert-butyl(piperidine- 4-yl]methyl}carbamaat (7,0 g, 33 mmol) in ethanol (19 ml) werden paraformaldehyd (1,2 g, 39 mmol) en K2CO3 (5,4 g, 39 mmol) toegevoegd bij omgevingstemperatuur. Het mengsel werd gedurende 4 uur geroerd bij omgevingstemperatuur. Het 15 mengsel werd gefiltreerd en de filterkoek gewassen met ethanol (50 ml) . De vluchtige bestanddelen werden door af-damping verwijderd, hetgeen 8,9 g (kwant), titelverbinding als een wit poeder gaf.

1H-NMR (CDCI3) δ: 4,60 (1H, br s) , 4,07 (2H,s), 3,49 (2H, 20 k, J=7,l Hz), 3,08-2,83 (4H,m), 2,50-2,36 (2H, m) , 1,75- 1,60 (2H,m) , 1,44 (9H,s), 1,52-1,35 (lH,m) , 1.,19 (3H, t, J=7,1 Hz), 1,31-1,12 (2H,m).

Stap 2. [Methoxy(tetrahydro-4H-pyran-4-ylideen)methoxy]-25 (trimethyl)silaan

Aan een geroerde oplossing van diisopropylamine (1,6 g, 0,016 mol) in tetrahydrofuran (4 ml) werd bij 0°C onder stikstof druppelsgewijs n-butyllithium (1,59 M in hexaan, 9,2 ml, 0,014 mol) toegevoegd, en er werd gedurende 20 mi-30 nuten geroerd. Vervolgens werd het reactiemengsel gekoeld tot -40°C, werden methyltetrahydro-2H-pyran-4-carboxylaat (1,9 g, 0,013 mol) en trimethylsilylchloride (2,0 ml, 0,015 mol) in tetrahydrofuran (1 ml) toegevoegd en liet men het ontstane mengsel in 3 uur geleidelijk opwarmen tot « 95 kamertemperatuur. De vluchtige bestanddelen werden door afdamping verwijderd en het residu werd gefiltreerd door een laag Celite, waarbij werd gewassen met hexaan. Het filtraat werd in vacuüm gedroogd, hetgeen 2,9 g (kwant), 5 titelverbinding als een heldergele olie gaf.

1H-NMR (CDCI3) 5:3, 64-3, 59 (4H, m) , 3,52 (3H,s), 2,24 (2H,t,J = 5,2 Hz), 2,15 (2H, t, J = 5,3 Hz), 0,22 (9H, s).

Stap 3. Methyl-4-[(4-{[(terfc-butoxycarbonyl)amino]methyl}-10 piperidine-l-yl)methyl]tetrahydro-2ff-pyran-4-carboxylaat

Aan een geroerde oplossing van tert-butyl{[1-(ethoxy-methyl)piperidine-4-yl]methyl}carbamaat (4 g, 14 mmol, stap 1 van voorbeeld 8) en [methoxy(tetrahydro-4H-pyran-4-ylideen)methoxy](trimethyl)silaan (2,9 g, 13 mmol, step 2 15 van voorbeeld 8) in CH2CI2 (30 ml) werd bij 0°C druppelsgewijs trimethylsilyltrifluormethaansulfonaat(0,24 ml, 1,3 mmol) toegevoegd en het ontstane mengsel gedurende 12 uur geroerd bij kamertemperatuur. De reactie werd afgebroken met verzadigde natriumbicarbonaat in water (150 ml) en het 20 reactiemengsel geëxtraheerd met CH2CI2 (30 ml x 2) . De gecombineerde organische laag werd gedroogd op natriumsul-faat en gefiltreerd. Verwijdering van het oplosmiddel gaf een residu dat werd gechromatografeerd over een kolom met silicagel, waarbij werd geëlueerd met ethylacetaat/hexaan 25 (1:1), hetgeen 6,3 g (64%) titelverbinding als een helde re, kleurloze olie gaf.

MS (ESI), m/z: 371 (M+H)\ 1H-NMR (CDCI3) 5: 4,57 (1H, br.s), 3,84-3,78 (2H,m) , 3,70 (3H,s), 3,49-3,41 (2H,m), 2,99-2,95 (2H, m) , 2,73-2,68 30 (2H,m), 2,47 (2H,s), 2,19-2,11 (2H,m), 2,06-2,01 (2H,m), 1,61-1,51 (5H,m), 1,44 (9H, s), 1,24-1,11 (2H,m),

Stap 4. 4-[(4-{[(tert-Butoxycarbonyl) amino]methyl}piperi- dine-l-yl)methyl]tetrahydro-2#-pyran-4-carbonzuur 35 Aan een oplossing van methyl-4-[(4 — {[(tert-butoxycar- bonyl)amino]methyl)piperidine-l-yl)methyl]tetrahydro-2H-pyran-4-carboxylaat (6,47 g, 17,5 mmol, stap 3 van voor- i 96 beeld 8) in methanol (32 ml) werd 5 N NaOH aq. (10 ml) toegevoegd bij kamertemperatuur (exotherme reactie). De ontstane oplossing werd gedurende 7 uur geroerd bij 60°C en vervolgens gekoeld tot 5 ~10°C in een ijskoud bad. Aan 5 deze oplossing werd 5 N HC1 aq. (10 ml) toegevoegd en de ontstane oplossing (pH-waarde was ca. 6) geconcentreerd.

Aan het residu werd 2-propanol (80 ml) toegevoegd. Deze oplossing werd geconcentreerd. Aan het residu werd 2-propanol (80 ml) toegevoegd en het werd opnieuw geconcen-10 treerd. Het residu werd verdund met ethanol (80 ml) en het mengsel gedurende 2 uur geroerd bij kamertemperatuur. Het werd gefiltreerd door een laag Celite (5,0 g) om de NaCl te verwijderen. De Celitelaag werd gewassen met ethanol (20 ml) en het gecombineerde filtraat werd geconcentreerd.

15 Aan het residu werd CH3CN (40 ml) toegevoegd en het werd geconcentreerd. Tijdens deze procedure werd de vorming van een wit neerslag waargenomen. Aan het residu werd CH2CN (40 ml) toegevoegd en de ontstane suspensie gedurende 2 uur geroerd bij kamertemperatuur. Dit mengsel werd gefil-20 treerd en de verkregen vaste stof werd gewassen met CH3CN (10 ml) en vervolgens gedroogd onder verminderde druk, hetgeen 4,1 g (65%) titelverbinding als een wit poeder gaf.

Sm.p. 129°C.

25 1H-NMR (CDCI3) δ: 4,66 (lH,m), 3,93-3,82 (3H,m) , 3,15-2,99 (4H,m), 2,58 (2H,s), 2,58-2,45 (2H,m), 1,98-1,76 (4H,m), 1,55-1,35 (6H,m), 1,44 (9H, s).

Stap 5. 4-{[4-(Aminomethyl)piperidine-l-yl]methyl)tetrahy- 30 dro-2ff-pyran-4-carbonzuur-4-methylbenzeensulfonaat

In een driehalsrondbodemkolf van 300 ml werd onder N2 4-[(4 — {[(tert-butoxycarbonyl)aminojmethyl}piperidine-l-yl)methyl]tetrahydro-2H-pyran-4-carbonzuur (10 g, 28 mmol, stap 4 van voorbeeld 8) gebracht en een oplossing van p-35 tolueensulfonzuurmonohydraat (16 g, 84 mmol) in i-propanol (150 ml) bij gegoten bij kamertemperatuur. Het ontstane mengsel werd gedurende 7 uur onder N2 geroerd bij 60°C en '' 97 triethylamine (8,6 ml, 62 mmol) langzaam druppelsgewijs toegevoegd gedurende de periode van 2 uur, en ondertussen werd geënt. Tijdens de toevoeging van triethylamine vormde zich een wit neerslag. De ontstane witte suspensie werd 5 gedurende 3 uur geroerd bij 60°C, gedurende 5 uur bij 50°C en gedurende 10 uur bij kamertemperatuur. De suspensie werd gefiltreerd en de verkregen vaste stof gewassen met i-propanol (100 ml), gedurende 5 uur gedroogd bij 50°C, hetgeen 10,5 g (87%) titelverbinding als een wit poeder 10 gaf.

Sm.p.: 247°C.

1H-NMR (D20) δ: 7,54 (2H,d, J=7,4 Hz), 7,22 (2H, J=7,4 Hz), 3,80-3, 65 (2H,m), 3,55-3,40 (4H,m), 3,20-2,75 (6H,m) , 2,24 (3H,s), 1,90-1,80 (6H, m), 1,55-1,35 (4H,m) 15

Stap 6. 4-({[(61-Fluor-21-oxospiro[cyclopentaan-1,3 *-in dool] -1'(2 Ή) -yl)carbonyl]amino}methyl)piperidine-l-yl]methyl }tetrahydro-2H-pyran-4-carbonzuur

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure 20 beschreven in stap 6 van voorbeeld 1 uit 6'-fluorspiro[cy-clopentaan-1,3 *-indool]-2'(1' H)-on (Joensson, N. et al., Acta Chem. Scand. Ser. B, 1974, 28 225) en 4-{[4-(amino-methyl)piperidine-l-yl]methyl}tetrahydro-2H-pyran-4-car-bonzuur-4-methylbenzeensulfonaat (stap 5 van voorbeeld 8). 25 .MS (ESI), m/z: 488 (M+H) +

Sm.p.: 161,3°C.

IR (KBr) v: 3315, 2943, 2869, 1733, 1604, 1541, 1473, 1359, 1298, 1228, 1157, 1099, 867 cm"1.

1H-NMR (CDC13) δ: 7,16-7,11 (1H, m), 6,90-6,84 (lH,m), 30 3, 90-3,75 (4H,m) , 3,31 (2H,t, J=6,0 Hz), 3,18-3,06 (2H,m), 2,65-2, 45 (4H,m), 2,25-1,75 (T3H,m) , 1,58-1,40 (4H,m) .

Het signaal van CO2H werd niet waargenomen.

Anal., ber. voor C26H34FN3O5 · 0,4H2O: C, 63,12; H, 7,09; N, 8,49.

35 Gevonden: C, 62,83; H, 7,09; N, 8,45.

* Μ · , 98 VOORBEELD 9:

1- { [4- ( { [ (3,3-DIMETHYL-2-ΟΧΟ-2,2-DIHYDRO- 1Η-INDOOL- 1-YL) -CARBONYL] AMINO > METHYL) PIPERIDINE-1-YL] METHYL } CYCLOBUTAAN-CARBONZUÜR

Cc^=o ^OH

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 6 van voorbeeld 1 uit 3,3-dimethyl-l,3-10 dihydro-2.ff-indool-2-on (Robertson, David W et Med.

Chem., 1986, 29, 1832) en l-{[4-(aminomethyl)piperidine-l-yl]methyl}cyclobutaancarbonzuur-4-methylbenzeensulfonaat (stap 3 van voorbeeld 7).

MS (ESI), m/z: 414 (M+H)+ 15 Sm.p.: 170,9°C.

IR (KBr) v: 3440, 3296, 2933, 1735, 1705, 1608, 1541, 1382, 1346, 1271,. 1159, 966, 773 cm'1.

^H-NMR (CDC13) δ: 8,78 (1H, br, s) , 8,23 (1H, d, J=8,l Hz), 7,35-7,18 (2H,m), 3,31 (2H, t, J=5,4 Hz), 3,12-3,01 20 (2H,m), 2,78 (2H,s), 2,61-2,48 (2H,m), 2,45-2,25 (3H,m), 2, 00-1,75 (6H, m), 1,44 (3H,s), 1,55-1,40 (6H,m).

Een signaal van CO2H werd niet waargenomen.

Anal., ber. voor C23H31N3O4 0,4H2O: C, 65, 66; H, 7,62; N, 9,99.

25 Gevonden: C, 65,82; H, 7,64; N, 9,89.

VOORBEELD 10:

3-{[4-({[(3,3-DIMETHYL-2-OXO-2,3-DIHYDRO-1H-INDOOL-1-YL)-CARBONYL] AMINO}METHYL) PIPERIDINE-l-YL] PROPAANZUUR

O H O

30 99

Stap 1. Ethyl-3- (4-{ [ (tert-butoxycarbonyl) amino]methyl)pi-peridine-l-yl)propanoaat

Een mengsel van tert-butyl(piperidine-4-ylmethyl)car-5 bamaat (3,0 g, 14 mmol) en etylacrylaat (1,7 g, 17 mmol) in ethanol (30 ml) werd gedurende 1 uur gerefluxt. Na afkoelen tot kamertemperatuur werd de oplossing geconcentreerd, hetgeen een heldere kleurloze olie gaf. Het residu werd gechromatografeerd over een kolom met silicagel, 10 waarbij werd geëlueerd met CH2Cl2/methanol (14:1), hetgeen 4,0 g (91%) titelverbinding als heldere, kleurloze olie gaf.

MS (ESI), m/z: 31.5 (M+H) + 1H-NMR (CDC13) δ:4,61 (1H, br s), 4,13 (2H, k, J=8,l Hz), 15 3,01 (2H,t, J=5,4 Hz), 2,98-2,80 (2H,m), 2,05-1,90 (2H,m), 1,70-1,60 (2H,m), 1,44(9H, s) , 1,25 (3H, t, J=8,l H), 1,55-1,20 (4H,m).

Stap 2. Ethyl-3-[4-({[(3,3-dimethyl-2-oxy-2,3-dihydro-lff-20 indool-l-yl)carbonyl)amino)methyl) piperidine-l-yl]propanoaat

Aan een geroerde oplossing van ethyl-3-(4-{[(tert-butoxycarbonyl) amino] methyl } piperidine-l-yl) propanoaat (500 mg, 1,6 mmol, stap 1 van voorbeeld 10) in CH2CI2 (5 ml) 25 werd trifluorazijnzuur (1,2 ml, 16 mmol.) toegevoegd en er werd gedurende de nacht geroerd bij kamertemperatuur. Het mengsel werd geconcentreerd en de resterende olie opgelost in CH2CI2 (60 ml), vaste K2CO3 (5 g) werd toegevoegd en er werd gedurende 10 minuten geroerd. Het mengsel werd gefil-30 treerd en het filtraat werd geconcentreerd, hetgeen ethyls' [4-(aminomethyl)piperidine-l-yl]propanoaat als een bleekgele olie gaf. Vervolgens werd de koppelingsreactie uitgevoerd volgens de procedure beschreven in stap 6 van voorbeeld 1 uit 3,3-dimethyl-l, 3-dihydro-2tf-indool-2-on 35 (Robertson, David W. et al. , J. Med. Chem., 1986,29 1832) en ethyl-3-[4-(aminomethyl)piperidine-l-yl]propanoaat.

MS (ESI), m/z: 428 (M+H)+ I , 100 1H-NMR (CDC13) δ: 8,73 (1H, br s) , 8,25 (1H, d, J=8,l Hz), 7,34-7,10 (2H,m), 4,13 (2H,k, J=8,1 Hz), 3,29 (2H, t, J=5,4 Hz), 2,98-2,85 (2H,m), 2,69 (2H,t, J=8,l Hz), 2,49 (2H, t, J=8,1 Hz), 2,05-1, 95 (2H, m) , 1,81-1,70 (2H,m), 1,50-1,20 5 (13H,m) .

Stap 3. 3-[4-({[(3,3-Dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-lH-indool- 1-yl)carbonyl)amino}methyl)piperidine-l-yl]propaanzuur

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure 10 beschreven in stap 4 van voorbeeld 2 uit ethyl-3-[4~ ({[(3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-lH-indool-l-yl)carbonyl) aminoJmethyl)piperidine-l-yl]propanoaat (stap 2 van voorbeeld 10).

MS (ESI), m/z: 374 (M+H)+ 15 IR (KBr) v:3315, 1733, 1606, 1541, 1460, 1379, 1344, 1269, 1163, 958, 769 cm"1.

1H-NMR (CDCI3) 5:8,79 (1H, br,s), 8,23 (1H, d, J=8,l Hz), 7,40-7,15 (3H,m), 3,40-3, 24 (2H,m), 3,20-3,18 (2H,m) , 2,85-2,73 (2H,m), 2,39-2,21 (2H,m), 2,00-1,75 (3H,m), 20 1,55-1,30 (10H,m),

Een signaal van CO2H werd niet waargenomen.

Anal., ber. voor C20H27N3O4 · 1, OH2O· 0,5MeOH· 0,2CH2CI2: : C, 58,57; H, 7,46; N, 9,90.

Gevonden: C, 58,94; H, 7,16; N, 9,81.

25 VOORBEELD 11:

3-{[4-({[(3,3-DIMETHYL-2-OXO-2,3-DIHYDRO-1H-INDOOL-1-YL)-CARBONYL] AMINO }METHYL) PIPERIDINE-l-YL] -2,2-ΡΙΜΕΤΗΥΙιΡΚΟ-PAANZUPR

30

N—' S\ OH

' 1 * ^

Stap 1. tert-Butyl-4-({[(3,3-dimethyl-2-oxo-2/3-dihydro- lH-indool-l-yl)carbonyl)amino}methyl)piperidine-l-carboxy- laat 101

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure j 5 beschreven in stap 6 van voorbeeld 1 uit 3,3-dimethyl-l,3- ! dihydro-2H-indool-2-on (Robertson, David W. et al., J.

Med.Chem., 1986, 29, 1832) en tert-butyl-4-(aminomethyl)- piperidine-l-carboxylaat.

MS (ESI), m/z: 402 (M+H)+ 10 1H-NMR (CDC13) 8: 8,76 (1H, br s), 8,24 (1H, d, J=8,l Hz), 7.34- 7,15 (3H,m), 4,25-4,03 (2H,m), 3,36-3,23 (2H,m), 2,79-2,60 (2H,m), 1,85-1,69 (2H,m), 1,55-1,36 (16H,m), 1,30-1,10 (2H,m).

15 Stap 2, 3,3-Dimethyl-2-oxo-i\ir-(piperidine-4-ylmethyl) indo- line-l-carboxaxnide

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 2 van voorbeeld 2 uit tert-butyl-4-({[(3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-lH-indool-l-yl)carbo-20 nyl)amino}methyl)piperidine-l-carboxylaat (stap 1 van voorbeeld 11).

MS (ESI), m/z: 302 (M+H)+ · 1H-NMR (CDCI3) δ: 8,74 (1H, br s) , 8,25 (2H,d, J=8,l Hz), 7.34- 7,15 (3H, m), 3,29 (2H, t, J=5,4 Hz), 3,15-3,05 25 (2H,m), 2,67-2,55 (2H,m), 1,80-1,74 (2H,m), 1,43 (6H,s), 1,28-1,18 (2H,m).

Een signaal van NH (piperidine) werd niet waargenomen.

Stap 3. Methyl-3-[4-({[(3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-lff-30 indool-l-yl)carbonyl)amino}methyl)piperidine-l-ylj-2,2-di-methylpropanoaat

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 3 van voorbeeld 2 uit 3,3-dimethyl-2-oxo-N- (piperidine-4-ylmethyl)indoline-l-carboxamide (stap 35 2 van voorbeeld 11).

MS. (ESI), m/z: 416 (M+H)+ ' 4 102 ! ! 1H-NMR (CDCI3) δ: 8,70 (1H, br s) , 8,25 (1H, d, J=6,0 Hz), 7.33- 7,15 (3H, m) , 3,65 (3H, s) , 3,25 (2H, t, J = 6,0 Hz), 2,84-2,72 (2H,m), 2,46 (2H,s), 2,23-2,10 (3H, m) , 1,73- 1,54 (2H,m), 1,43 (6H,m), 1, 38-1,24 (2H,m) , 1,15 (6H, s) .

5

Stap 4. 3- [4-({ [ (3,3-Dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-lH-indool- 1-yl) carbonyl]amino}methyl) piperidine-1-yl]-2,2-dimethyl-propaanzuur

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure 10 beschreven in stap 4 van voorbeeld 2 uit methyl-3-[4-({[(3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-lH-indool-l-yl)carbonyl) amino)methyl)piperidine-l-yl]-2,2-dimethylpropanoaat (stap 3 van voorbeeld 11).

MS (ESI), m/z: 402 (M+H)+

15 Sm.p.: 164,5°C

IR (KBr) v: 3402, 3317, 2943, 2858, 1616, 1596, 1541, 1498, 1307, 1263, 1105, 985 cm'1.

1H-NMR (CDCI3) δ: 8,78 (1H, br s), 8,24 (1H, d, J=8,l Hz), 7.34- 7,18 (3H,m), 3,32 (2H, t, J=6,0Hz), 3,24-3,06 (2H,m) , 20 2, 60-2,38 (4H,m), 1, 97-1, 65 (3H,m) , 1, 60-1,28 (8H,m) , 1,24 (6H,s).

Een signaal van CO2H werd niet waargenomen.

Anal., ber. voor C22H31N3O4 : C, 65,81; H, 7,78; N, 10,47.

25 Gevonden: C, 65,56; H, 7,83; N, 10,36.

VOORBEELD 12

3-{[4-({[(3,3-DIMETHYL-2-OXO-2,3-DIHYDRO-1H-INDOOL-1-YL)-CARBONYL] AMINO}METHYL) -4-HYDROXYPIPERIDINE-l-YL] -2,2-DIME-30 THYLPROPAANZÜUR

VLOOr0*" 103

Stap 1. A7-[ (l-Benzyl-4-hvdroxypiperidine-4-ylmethyl]-3, 3- dimethyl-2-oxoindoline-l-carboxamide

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 6 van voorbeeld 1 van 3,3-dimethyl-l,3-5 dihydro-2H-indool-2-on (Robertson, David W. et al., J. Med. Chem., 1986, 29, 1832) en 4-(aminomethyl)-1-benzyl- piperidine-4-ol (Somanathan, R. et al., Synth. Conmun., 1994, 24, 1483) MS (ESI), m/z: 408(M+H)+ 10 1H-NMR (CDC13) 6: 8,93 (1H, br s) , 8,23 (1H, d, J=8,lHz), 7,35-7,16 (8H,m), 5,30 (2H,s), 3,54 (2H,s), 3,45 (2H, d, J=5,4 Hz), 2,70-2,56 (2H,m), 2,46-2,33 (2H,m), 2,27 (1H,s), 1,80-1,67 (2H, m), 1,43 (6H, m).

15 Stap 2. AT-[ (4-Hydroxypiperidine-4-yl)methyl]-3,3-dimethyl- 2-oxoindoline-l-carboxamide

Een mengsel van N-[(l-benzyl-4-hydroxypiperidine-4-yl)methyl]-3,3-dimethyl-2-oxoindoline-l-carboxamide (280 mg, 0,68 mmol, stap 1 van voorbeeld 12) en palladiumhy-20 droxide (80 mg, 20 gew.% Pd-op-koolstof) in 10% HC1 in methanol werd gedurende 20 uur geroerd onder een H2-atmo-sfeer. Het mengsel werd gefiltreerd door een laag Celite, gewassen met methanol en het filtraat geconcentreerd, hetgeen een bleekgele olie gaf. Het residu werd gechromato-25 grafeerd over een kolom met silicagel, waarbij werd geëlu-eerd met CH2Cl2/methanol/NH40H (10:1:0,2), hetgeen 73 mg (34%) titelverbinding als een heldergele olie gaf.

MS (ESI), m/z: 318 (M+H)+ 1H-NMR (CDCI3) δ: 8,95 (1H, br s) , 8,25-8,16 (lH,m), 7,35-30 7,12 (3H, m), 3,51-3,40 (4H,m), 3,05-2,80 (4 H, m), 1,75- 1,55 (2H,m), 1,44 (6H,s).

Stap 3. Methyl-3-[4-({[(3,3-dimethyl-2-oxo-2, 3-dihydro-lH-indool-l-yl)carbonyl)amino}methyl)-4-hydroxypiperidine-l-35 yl]-2,2-dimethylpropanoaat

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 3 van voorbeeld 2 uit N-[(4-hydroxy- 104 piperidine-4-yl)methyl]-3,3-dimethyl-2-oxoindoline-l-car-boxamide (stap 2 van voorbeeld 12).

Rf: 0,25 (aminopropyl-silicagel; hexaan/ethylacetaat (2/1)).

5 MS (ESI), m/z: 432 (M+H)+

Stap 4. 3-[4-({[(3,3-Dimethyl-2-oxo-2,S-dihydro-lH-indool- 1-yl)carbonyl)amino)methyl)-4-hydroxypiperidine-l-yl]-2,2-dimethylpropaanzuur 10 De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 4 van voorbeeld 2 uit methyl-3-[4-({[(3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-ltf-indool-l-yl)carbonyl) aminojmethyl)piperidine-l-yl]-2,2-dimethylpropanoaat (stap 3 van voorbeeld 12).

15 MS (ESI), m/z: 418 (M+H)+ 1H-NMR (CDC13) δ: 9,01 (1H, br s) , 8,20 (1H, d, J=8,l Hz), 7,33-7,15 (3H,m), 3,50-3,45 (2H,m), 3,00-2,85 (4H,m), 2,65-2,55 (2H,m), 1,81-1,45 (4H,m) , 1,45 (6H, s) , 1,25 (6H,s).

20 Signalen van OH en C02H werden niet waargenomen.

HRMS(FAB) (M+H)+, Ber. voor C22H32 05N3: 418,2342,

Gevonden: 418,2356.

VOORBEELD 13: 25 1-{[4-(([(2'-OXOSPIRO[CYCLOPENTAAN-1,3'-INDOOL]-11 (2 ' H) -

YL) CARBONYL] AMINO} METHYL) PIPERIDINE-l-YL] METHYL }CYCLO-HEXAANCARBONZUUR

0^° o 30

Stap 1. Methyl-1-[(4 — {[(tert-butoxycarbonyl)amino] methyl}-piperidine-l-yl)methyl]cyclohexaancarboxylaat

De titelverbinding werd bereid met een werkwijze die vergelijkbaar was met die getoond in stap 3 van voorbeeld 105 8 met gebruik van [cyclohexylideen(methoxy)methoxy]-(trimethyl)silaan (Hannaby, Malcolm et al., J. Chem. Soc. Perkin Trans.1, 1989, 303).

MS (ESI), m/z: 369 (M+H)+ ! 5 1H-NMR (CDC13) δ: 4,56 (1H, br s) , 3,66 (3H, s) , 2,97 (2H, ! t, J=6,1 Hz), 2,71 (2H, br, d, J=ll,7 Hz), 2,43(2H, s) , 2,11 (2H, br, t, J=ll,5 Hz), 2,03 (2H, br d, J=ll,4 Hz), 1,65-1,10 (22 H, m).

10 Stap 2. Methyl-1-{[4-({[(21-oxospiro[cyclopentaan-1,3'-indool]-11(21H)-yl)carbonyl]amino}methyl)piperidine-l-yl]-methyl}cyclohexaancarboxylaat

De titelverbinding werd bereid met de werkwijze die vergelijkbaar was met die getoond in stap 2 van voorbeeld 15 10 uit methyl-1-[ (4 — { [ (tert-butoxycarbonyl) amino] methyl)- piperidine-l-yl)methyl]cyclohexaancarboxylaat (stap 1 van voorbeeld 13).

MS (ESI), m/z: 482 (M+H)+ 1H-NMR (CDCI3) δ: 8,71 (1H, br s), 8,23 (1H, d, J=9,0 Hz), 20 .7,34-7,15 (3H,m), 3,66 (3H, s) , 3,24 (2H, t, J=6,0 Hz), 2,80-2,68 (2H,m), 2,44 (2H,s), 2,25-1,15 (25 H,m).

Stap 3. 1-([4-({[(2'-Oxospiro[cyclopentaan-1,3'-indool]- 1'(2 Ή) -yl)carbonyl]amino}methyl)piperidine-l-yl]methyl}-25 cyclohexaancarbonzuur

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 4 van voorbeeld 2 uit methyl-l-{ [4- ({ [ (2 '-oxospiro[cyclopentaan-1,3'-indool]-1'(2Ή)-yl)carbonyl] amino [methyl) piperidine-l-yl] methyl }cyclohexaancar-30 boxylaat (stap 2 van voorbeeld 13).

MS (ESI), m/z: 468 (M+H)+ sm.p.: 160,4°C

IR (KBr) v: 3300, 2923, 2862, 1728, 1600, 1552, 1469, 1346, 1265, 1222, 1143, 752 cm"1.

35 1H-NMR (CDCI3) δ: 8,80 (1H, br s) , 8,21 (1H, d, J=9,0 Hz), 7,32-7,13 (3H,m), 3,30 (2H, t, J=6,0 Hz), 3,16-3,03 106 (2H,m), 2,60 (2H,s), 2,55-2,40 (2H,m), 2,27-1,26 (23 H, m) .

Een signaal van CO2H werd niet waargenomen.

Anal., ber. voor C27H37N3O4· 0,8 H20 : 5 C, 67,28; H, 8,07; N, 8,72.

Gevonden: C, 67,46; H, 8,05; N, 8,66. 1 i VOORBEELD 14: 2 1 -OXO-N- [ (l-{ [1- (1H-TETRAZOOL-5-YL)CYCLOPENTYL]METHYL}-10 PIPERIDINE-4-YL) METHYL] SPIRO [CYCLOPENTAAN-1,3-INDOOL] -

11 (2 ' H) -CARBOXAMIDE

0%· ^ 15 Stap 1. a-Cyclopentyltetrazool-5-azijnzuur-ethylester

Aan een geroerde oplossing van 1-cyaan-l-cylcopen-taancarbonzuur-ethylester (6,19 g, 37,0 mmol, Bioorg. Med.

Chem. Lett., 1999, 9, 369-374) in 1,4- dioxaan (100 ml) werd (CH3CH2CH2CH2) 3SnN3 (12,3 g, 37,0 mmol) toegevoegd bij 20 omgevingstemperatuur. Het ontstane mengsel werd gedurende 15 uur gerefluxt en geconcentreerd onder verminderde druk.

Aan het ontstane residu werd 4 M HC1 in 1,4-dioxaan (50 ml) toegevoegd en het werd geconcentreerd onder verminderde druk. De ontstane olie werd tweemaal gewassen met hex-25 aan, hetgeen het onzuivere product van de titelverbinding als een gele olie gaf, die zonder verdere zuivering voor de volgende stap werd gebruikt.

Stap 2. 2-Benzyl-g-cyclopentyl-2H-tetrazool-5-azijnzuur-30 ethylester

Aan een geroerd mengsel van a-cyclopentyltetrazool-5-azijnzuur-ethylester (stap 1 van voorbeeld 14) en K2CO3 (12,3 g, 89,0 mmol) in aceton (200 ml) werd benzylbromide (4,84 ml, 40,7 mmol) toegevoegd bij omgevingstemperatuur.

107

Het ontstane mengsel werd gedurende 14 uur geroerd bij 50°C en geconcentreerd onder verminderde druk. Het ontstane residu werd gechromatografeerd over een kolom met sili-| cagel, waarbij wérd geëlueerd met hexaan/ethylacetaat 5 (10:1), hetgeen 2,95 g (27% in twee stappen) titelverbin- ding gaf.

MS (ESI), m/z: 301(M+H)+ 1H-NMR (CDCI3) 6: 7,45-7,23 (5H,m) , 5,73 (2H, s) , 4,11 (2H, k, J=7,1 Hz), 2,55-2,35 (4H,m), 1,88-1, 56 (4H, m) , 1,12 10 (3H, t, J= 7,1 Hz).

Stap 3. 2-Benzyl-g-cyclopentyl-2H-tetrazool-5-aceetaldehyd Aan een geroerd mengsel van 2-benzyl-a-cyclopentyl-2H-tetrazool-5-azijnzuur-ethylester (2,92 g, 9,72 mmol, 15 stap 2 van voorbeeld 14) in CH2C12 (50 ml) werd bij -78°C diisobutylaluminiumhydride (1,0 M in tolueen, 22,5 ml, 22,5 mmol) toegevoegd. Het ontstane mengsel werd gedurende 5 uur geroerd bij -78°C. Aan het mengsel werden 2 M HC1 in water (50 ml) en verzadigde NH4CI in water (10 ml) toege-20 voegd. De organische laag werd afgescheiden, gedroogd op magnesiumsulfaat en geconcentreerd onder verminderde druk. Het ontstane residu werd gechromatografeerd over een kolom met silicagel, waarbij werd geëlueerd met hexaan/ethylacetaat (10:1), hetgeen 862 mg (35%) titelverbinding gaf.

25 MS(ESI), m/z: 257(M+H)+ 1H-NMR (CDCI3) δ: 9,71 (lH,s), 7,50-7,30 (5H,m), 5,74 (2H, s), 2,45-2,18 (4H,m), 1,85-1,66 (4H, m) .

Stap 4. tert-Butyl[{1-(2-(2-benzyltetrazool)-2-cyclopen-30 tylmethyl)piperidine-4-yl}methyl]carbamaat

Aan een geroerde oplossing van 2-benzyl-a-cyclopen-tyl-2H-tetrazool-5-aceetaldehyd (850 mg, 3,32 mmol, stap 3 van voorbeeld 14) en tert-butyl(piperidine-4-ylmethyl)-carbamaat (7,11 g, 33,2 mmol) in tetrahydrofuran (500 ml) 35 werden NaBH(O(CO)CH3) 3 (3,52 g, 16,6 mmol) en azijnzuur (1,03 g, 16,9 mmol) toegevoegd. Het ontstane mengsel werd gedurende 13 uur geroerd bij 60°C en geconcentreerd onder 108 verminderde druk. Aan het geroerde residu werden verzadigde NaHCC>3 in water en CH2CI2 toegevoegd. De organische laag werd afgescheiden, gedroogd op magnesiumsulfaat en geconcentreerd onder verminderde druk. Het ontstane residu werd 5 gechromatografeerd over een kolom met silicagel, waarbij werd geëlueerd met hexaan/ethylacetaat (1:1), hetgeen 1,19 g (79%) titelverbinding gaf.

MS(ESI), m/z: 455(M+H)+ 1H-NMR (CDCI3) δ: 7,43-7,23 (5H,m) , 5,72 (2H,s), 4,67 (1H, 10 br t), 2,88 (2H,m) , 2,66(2H, br s), 2,48 (2H, m), 2,24 (2H,m), 1,93 (2H, m), 1,83 (2H,m), 1,78-1,48 (4H,m), 1,43 (9H,s), 1,37 (2H,m), 1,23 (1H, m), 0,94 (2H,m).

Stap 5. ({1-[1-(2-Benzyl-21ir-tetrazool-5-yl) cyclopentyl]pi- 15 peridine-4-yl}methyl)amine

Een mengsel van tert-butyl[{1-(2-(2-benzyltetrazool)- 2-cyclopentylethyl) piperidine-4-yl}methyl]carbamaat (150 mg, 0,34 mmol, stap 4 van voorbeeld 14) en 10% HC1 in methanol (10 ml) werd gedurende 3 uur geroerd bij 60°C en 20 het mengsel werd geconcentreerd, hetgeen een gele olie gaf. Het residu werd gechromatografeerd over een kolom met silicagel, waarbij werd geëlueerd met CH2C1/methanol/NH4OH (12:1:0,1), hetgeen 115 mg (kwant.) titelverbinding als een heldergele, vaste stof gaf.

25 1H-NMR (CDCI3) δ 7, 50-7,25 (5H, m) , 5,73 (2H, s) , 2,67 (2H, s), 2, 60-2,40 (4H, m) , 2,35-2,16 (2H, m) , 2, 05-1,78 (4H, m), 1,75-1,34 (6H, m) , 1,20-0,85 (3H, m).

Stap 6. N-[(1-{[1-(2-Benzyl-2#-tetrazool-5-yl)cyclopen-30 tyl]methyl}piperidine-4-yl)methyl]-21-oxospiro[cyclopen-taan-1,31-indool]-11 (21H) -carboxamide

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 6 van voorbeeld 1 uit ({1-[1-(2-benzyl-2H-tetrazool-5-yl)cyclopentyl]piperidine-4-ylJmethyl)amine 35 (stap 5 van voorbeeld 14).

MS (ESI), m/z: 568 (M+H)+.

I ( ' 109 1H-NMR (CDC13) δ 8,66 (1H, br s), 8,23 (1H, d, J=9, 0 Hz), 7,40-7,15 (3H, m), 5,73 (2H, s), 3,15 (2H, t, J=6,0 Hz), 2,67 (2H, s), 2,54-2,44 (2H, m), 2,26-2,11 (4H, m), 2,ΙΟΙ,76 (10H, m), 1,70-0,90 (14H, m).

5

Stap 7. 2'-Oxo-N-[ (1-{ [1-(2ff-tetrazool-5-yl) cyclopentyl] - methyl)piperidine-4-yl)methyl]spiro[cyclopentaan-1,31-in-dool-11(2 Ή)-carboxamide

Een mengsel van N-[(1—{[1-(2-benzyl-2H-tetrazool-5-10 yl)cyclopentyl]methyl}piperidine-4-yl)methyl]-2'-oxospiro-[cyclopentaan-1,3'-indool]-1'(2'H)-carboxamide (120 mg, 0,21 mmol, stap 6 van voorbeeld 14) en palladiumhydroxide (20 mg, 20 gew.% palladium-op-koolstof) in methanol (10 ml) werd gedurende 8 uur geroerd onder een H2-atmosfeer.

15 Het mengsel werd gefiltreerd door een laag Celite, gewassen met methanol en het filtraat geconcentreerd, hetgeen een heldere, kleurloze olie gaf. Het residu werd gechroma-tografeerd over een kolom met silicagel, waarbij werd geëlueerd met CH2Cl2/methanol (16:1), hetgeen 80 mg (80%) 20 titelverbinding als een witte, vaste stof gaf. De vaste stof werd fijngewreven met ethylacetaat/hexaan en verzameld door affiltreren, hetgeen 72 mg (72%) titelverbinding als een witte, vaste stof gaf.

MS (ESI), m/z: 478 (M+H)+.

25 IR (KBr) v: 3417, 2958, 1732, 1703, 1548, 1465, 1282, 1161, 769 cm-1.

XH-NMR (CDCI3) δ 8,81 (1H, br s), 8,22 (1H, d, J=9,0 Hz), 7,34-7,12 (3H, m) , 3, 40-3,27 (2H, m) , 3,16-3,05 (2H, m), 2,45-2,31 (2H, m), 3,00-1,65 (21H, m) , 1,58-1,41 (2H, m) . 30 Een signaal van tetrazool-H werd niet waargenomen.

Anal., ber. voor C26H35N7O2 · 1, 0 H20: C, 63,01; H, 7,52; N, 19,78.

Gevonden: C, 62,90; H, 7,35; N, 19,40.

110 VOORBEELD 15:

1~{[4-({[(6-FLÜOR-3,3-DIMETHYL-2-OXO-2,3-DIHYDRO-1H-IN-DOOL-l-YL) CARBONYL] AHINO}METHYL) PIPERIDINE-l-YL]METHYL}-CYCLOBUTAANCARBONZUUR

Stap 1. Methyl-2-(4-fluor-2-nitrofenyl)-2-methylpropanoaat Een geroerd mengsel van methyl(4-fluor-2-nitrofenyl) -10 acetaat (3,0 g, 0,014 mol, Quallich, George J. et al. Synthesis, 1993, 351), methyljodide (2 ml, 0,032 mol) en 18-kroon-6 (925 mg, 3,5 mmol) in N,N-dimethylformamide (75 ml) werd bij 0°C portiegewijs behandeld met NaH (1,28 g, 0,032 mol, 60% dispersie in minerale olie). Vervolgens 15 werd het reactiemengsel gedurende 2 uur geroerd bij kamertemperatuur. De reactie werd afgebroken door de toevoeging van water. De waterlaag werd geëxtraheerd met diethylether (25 ml x 3). De organische laag werd gewassen met water en geconcentreerde zoutoplossing, gedroogd op natriumsulfaat 20 en in vacuüm geconcentreerd. Het residu werd gechromato-grafeerd over een kolom met silicagel, waarbij werd geëlu-eerd met ethylacetaat/hexaan (1:20 tot 1:4), hetgeen 2,52 g (75%) titelverbinding als een olie gaf.

1H-NMR (CDC13) δ: 7,67 (1H, dd, J=8,3, 2,9 Hz), 7,59 (1H, 25 dd, J=8,9, 5,4 Hz), 7,39-7,29 (1H, m) , 3,66 (3H, s), 1,66 (6H, s) .

Stap 2. 6-Fluor-3,3-dimethyl-l,3-dihydro-2H-indool-2-on

Een mengsel van methyl-2-(4-fluor-2-nitrofenyl)-2-me-30 thylpropanoaat (2,53 g, 0,010 mol, stap 1 van voorbeeld 15) en ijzerpoeder (2,34 g, 0,042 mol) in azijnzuur (30 ml) werd gedurende 5,5 uur geroerd bij 100°C. Het reactiemengsel werd gespoeld met methanol en het werd gefiltreerd door een laag Celite. Het filtraat werd geconcentreerd.

* * ' t 111

Water werd toegevoegd en de waterlaag werd geëxtraheerd met ethylacetaat (20 ml x 3) . De organische laag werd gewassen met geconcentreerde zoutoplossing, gedroogd op na-triumsulfaat en geconcentreerd. Het residu werd gechroma-5 tografeerd over een kolom met silicagel, waarbij werd geëlueerd met ethylacetaat/hexaan (1:6 tot 1:4), hetgeen 1,67 g (89%) titelverbinding als een witte, vaste stof gaf.

MS (ESI), m/z: 180 (M+H)+, 178 (M-H)'.

10 1H-NMR (CDC13) δ: 7,84 (1H, br s), 7,12 (1H, dd, J=8,l, 5,3 Hz), 6,73 (1H, ddd, J=9,2, 8,1, 2,4 Hz), 6,65 (1H, dd, J=8,8, 2,4 Hz), 1,39 (6H, s).

Stap 3. l-{ [4-({[(6-Fluor-3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro- 15 ltf-indool-l-yl)carbonyl]amino}methyl)piperidine-l-yl] methyl }cyclobutaancarbonzuur

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 6 van voorbeeld 1 uit 6-fluor-3,3-dimethyl-1,3-dihydro-2H-indool-2-on (stap 2 van voorbeeld 20 15) en l-{[4-(aminomethyl)piperidine-l-yl]methyl}cyclobu- taancarbonzuur-4-methylbenzeensulfonaat (stap 3 van voorbeeld 7) .

MS (ESI), m/z: 432 (M+H)+.

Sm.p.: 193°C

25 IR (KBr) v 3300, 2934, 1740, 1605, 1547, 1477, 1385, 1352, 1304, 1236, 1151 crrf1.

1H-NMR (CDCI3) δ: 8,71 (1H, t, J=5,9 Hz), 8,03 (1H, dd, J=10,2, 2,5 Hz), 7,15 (1H, dd, J-8,2, 5,4 Hz), 6,94-6,84 (1H, m), 3,31 (2H, t, J=5,9 Hz), 3,13-3,00 (2H, m) , 2,78 30 (2H, s), 2,61-2,44 (2H, m) , 2,44-2,24 (3H, m) , 2,01-1,80 (5H, m), 1,82-1,65 (1H, m) , 1,54-1, 42 (2H, m) , 1,42 (6H, s) .

Een signaal van C02H werd niet waargenomen.

Anal., ber. voor C23H30N3O4F· 0,7 H20: 35 C, 62,20; H, 7,13; N, 9,46.

Gevonden: C, 61,85; H, 7,14; N, 9,34.

• · 112 VOORBEELD 16: 3- [4- ( { [ (6-FLUOR-3,3-DIMETHYL-2-OXO-2,3-DIHYDR0-1H-IND00L-

1-YL) CARBONYL3 AMINO}METHYL) PIPERIDINE-l-YL] PROPAANZÜUR

%

Stap 1. Ethyl-3-[4-({[(6-fluor-3,3-diraethyl-2-oxo-2,3-di-hydro-lff-indool-l-yl)carbonyl]amino}raethyl)piperidine-1-yl1propanoaat 10 De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 6 van voorbeeld 1 uit 6-fluor-3,3-di-methyl-1,3-dihydro-2H-indool-2-on (stap 2 in voorbeeld 15) en ethyl-3-[4-(aminomethyl)piperidine-l-yl]propanoaat (stap 2 in voorbeeld 10).

15 MS (ESI), m/z: 420 (M+H)+.

Hi-NMR (CDC13) δ: 8,67 (1H, br s) , 8,05 (1H, dd, J=10,2, 2,6 Hz), 7,14 (1H, dd, J=7,7, 5,4 Hz), 6, 93-6,84 (1H, m) , 4,14 (2H, dd, J=14,3, 7,2 Hz), 3,29 (2H, t, J=6,2 Hz), 2,96-2,86 (2H, m) , 2,70 (2H, t, J=7,5 Hz), 2,50 (2H, t, 20 J=7,5 Hz), 2,06-1, 93 (2H, ra), 1,82-1,65 (2H, m) , 1,43-1,28 (2H, m) , 1,42 (6H, s), 1,27 (3H, t, J=14,3 Hz).

Een signaal van CH werd niet waargenomen.

Stap 2. 3-[4-({[(6-Fluor-3,3-diraethyl-2-oxo-2,3-dihydro- 25 lH-indool-l-yl)carbonyl]amino)methyl)piperidine-l-yl)pro-paanzuur

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 4 van voorbeeld 2 uit ethyl-3-[4-({((6-fluor-3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-lH-indool-l-yl)carbo-30 nyl]aminojmethyl)piperidine-l-yl]propanoaat (stap 1 van voorbeeld 16).

MS (ESI), m/z: 392 (M+H)+.

IR (KBr) v: 3317, 2972, 2937, 1728, 1603, 1545, 1493, 1385, 1354, 1304, 1273, 1155, 1111, 1072 cm-1. 1 j 113 1H-NMR (CDC13) δ: 8,72 (1H, br s), 8,03 (1H, dd, J-10,5, 2,5 Hz), 7,15 (1H, dd, J=8,5, 5,4 Hz), 8,89 (1H, dt, J=8,5, 2,5 Hz), 3,23 (2H, t, J=6,3 Hz), 3,25-3,12 (2H, m), 2,79 (2H, t, J=6,3 Hz), 2,53 (2H, t, J=6,3 Hz), 2,38-2,24 j 5 (2H, m), 1, 99-1,86 (2H, m), 1,90-1,70 (1H, m), 1,56-1,35 (2H, m), 1,43 (6Ή, s).

Een signaal van CO2H werd niet waargenomen.

HRMS (ESI), m/z: ber. voor C20H27FN3O4 ([M+H]+): 392,1986; gevonden: 392,1993.

10 VOORBEELD 17: 3- [4- ({ [ (6-FLUOR-3,3-DIMETHYL-2-OXO-2,3-DIH YDRO-1H-INDOOL-

1-YL) CARBONYL] AMINO}METHYL) PIPERIDINE-l-YL] -2,2-DIMETHYL-PROPAANZÜUR

XX£>

Stap 1. tert-Butyl-4-({[(6-fluor-3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-lH-indool-l-yl)carbonyl] amino}methyl)piperidine-1-20 carboxylaat

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 6 van voorbeeld 1 uit 6-fluor-3,3-di-methyl-1,3-dihydro-2tf-indool-2-on (stap 2 van voorbeeld 15) en tert-butyl-4-(aminomethyl)piperidine-l-carboxylaat. 25 ^-NMR (CDCI3) δ: 8,69 (1H, t, J=5,5 Hz), 8,04 (1H, dd, J=10,2, 2,4 Hz), 7,15 (1H, dd, J=8,3, 5,5 Hz), 6,92-6,84 (1H, m) , 4,24-4,03 (2H, m) , 3,34-3,24 (2H, m) , 2,78-2,60 (2H, m) , 1,80-1, 64 (3H, m) , 1,46 (9H, s) , 1,42 (6H, s) , 1,29-1,10 (2H, m).

30

Stap 2. 6-Fluor-3,3-dimethyl-2-oxo-N-(piperidine-4-ylme-thyl)indoline-l-carboxamide

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 2 van voorbeeld 2 uit tert-butyl-4- 1 1 ’ , 114 ({[(6-f luor-3,3-dimethyl-2-oxo-2, 3-dihydro-lii-indool-l-yl)carbonyl]amino}methyl)piperidine-l-carboxylaat (stap 1 van voorbeeld 17).

MS (ESI), m/z: 320 (M+H) \ 5 1H-NMR (CDC13) δ: 8,68 (1H, br s), 8,05 (1H, dd, J=10,3, 2,4 Hz), 7,15 (1H, dd, J=8,3, 5,5 Hz), 6, 93-6,83 (1H, m) , 3,29 (2H, t, J=6,0 Hz), 3,25-3,08 (2H, m) , 2,65 (2H, dt, J=12,2, 2,3 Hz), 1, 89-1, 65 (3H, m) , 1,42 (6H, s), 1,40- 1,15 (2H, m) .

10

Stap 3. Methyl-3-[4-({[(6-fluor-3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-di-hydro-lff-indool-l-yl) carbonyl] amino}methyl)piperidine-l-yl]-2,2-dimethylpropanoaat

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure 15 beschreven in stap 3 van voorbeeld 2 uit 6-fluor-3,3-di-methyl-2-oxo-N- (piperidine-4-ylmethyl)indoline-l-carboxa-mide (stap 2 van voorbeeld 17).

MS (ESI), m/z: 434 (M+H)+.

1H-NMR (CDCI3) 5:8,63 (1H, br s) , 8,05 (1H, dd, J=10,4, 2,5 20 Hz), 7,14 (1H, dd, J=8,3, 5,5 Hz), 6,92-6, 83 (1H, m) , 3,66 (3H, s), 3,25 (2H, t, J=6,3 Hz), 2,83-2,73 (2H, m) , 2,47 (2H, s), 2,16 (2H, dt, J=ll,6, 2,0 Hz), 1,71-1,56 (2H, m) , 1, 56-1,44 (1H, m), 1,42 (6H, s) , 1,36-1,22 (2H, m) , 1,15 (6H, s) .

25

Stap 4. 3-E4-({[(6-Fluor-3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro- lfl-indool-l-yl)carbonyl]amino}methyl)piperidine-l-yl]-2,2-dimethylopropaanzuur

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure 30 beschreven in stap 4 van voorbeeld 2 uit methyl-3-[4-({[(6-fluor-3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-lH-indool-l-yl) carbonyl]amino }methyl)piperidine-l-yl]-2,2-methylpropa-noaat (stap 3 van voorbeeld 17).

Sm.p.: 134°C.

35 MS (ESI), m/z: 420 (M+H)\ IR (KBr) v: 3319, 2974, 2930, 1736, 1605, 1545, 1497, 1439, 1350, 1302, 1275, 1231, 1153 cm'1.

115 1H-NMR (DMSO) δ: 8,55 (1H, t, J=6,1 Hz), 7,83 (1H, dd, J-10,6, 2,6 Hz), 7,48 (1H, dd, J=8,3, 5,8 Hz), 7,03 (1H, ddd, J=9,4, 8,3, 2,6 Hz), 3,18 (2H, t, J=6,l Hz), 2,91- 2,80 (2H, m),2,45 (2H, s) , 2,24-2,12 (2H, m),1,67-1,56 i 5 (2H, m) , 1, 60-1, 45 (1H, m) , 1,36 (6H, s) , 1,28-1,10 (2H, ! S), 1,06 (6H, s).

i ' Een signaal van CO2H werd niet waargenomen.

I Anal., ber. voor C22H30FN3O4: I C, 62,99; H, 7,21; N, 10,02.

10 Gevonden: C, 62,66; H, 7,27; N, 9,90.

VOORBEELD 18

[4- ( { [ (6-FLUOR-3,3-DIMETHYL-2-OXO-2,3-DIHYDRO-1H-INDOOL-1-YL)CARBONYL]AMINO}METHYL)PIPERIDINE-l-YL]AZIJNZUUR

TXf° 0

Stap 1. tert-Butyl[4-({[(6-fluor-3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-lH-indool-l-yl)carbonyl]amino)methyl)piperidine-1-20 yl]acetaat

Een oplossing van 6-fluor-3,3-dimethyl-2-oxo-i\7·- (pipe-ridine-4-ylmethyl)indoline-l-carboxamide (200 mg, 0,63 mmol, stap 2 in voorbeeld 17) en triethylamine (114 μΐ, 0,82 mmol) in tetrahydrofuran (3 ml) werd geroerd bij 0°C 25 en tert-butylbroomacetaat (111 μΐ, 0,75 mmol) werd langzaam toegevoegd. Het reactiemengsel werd gedurende 5 uur bij kamertemperatuur en gedurende 4 uur bij 35°C geroerd. Bovendien werden triethylamine (17 μΐ, 0,12 mmol) en tert-butylbroomacetaat (18 μΐ, 0,12 mmol) toegevoegd. De oplos-30 sing werd gedurende de nacht geroerd bij kamertemperatuur. Aan de ontstane oplossing werd verz. natriumbicarbonaat toegevoegd. Deze werd geëxtraheerd met ethylacetaat (10 ml x 3). De organische fase werd gewassen met geconcentreerde zoutoplossing, gedroogd op natriumsulfaat en geconcen- t · 116 treerd. Het residu werd gechromatografeerd over een kolom met aminopropyl-silicagel, waarbij werd geëlueerd met ethylacetaat/hexaan (1:10 tot 1:6), hetgeen 203 mg (74%) titelverbinding gaf.

5 MS (ESI), m/z: 434 (M+H)+.

1H-NMR (CDC13) δ: 8,67 (1H, t, J=6,l Hz), 8,05 (1H, dd, J=10,4, 2,5 Hz), 7,14 (1H, dd, J=8,3, 5,6 Hz), 6,87 (1H, dt, J=8,7, 2,5 Hz), 3,30 (2H, t, J=6,l Hz), 3,11 (2H, s) , 3,02-2, 92 (2H, m), 2,16 (2H, dt, J=ll,6, 2,3 Hz), 1,80-10 1,69 (2H, m) , 1,54-1,33 (3H, m) , 1,46 (9H, s) , 1,42 (6H, s) .

Stap 2. [4-({[(6-Fluor-3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-lff- indool-l-yl)carbonyl]amino)methyl)piperidine-l-yl]azijn-15 zuur

Een mengsel van tert-butyl[4-({[(6-fluor-3,3-dime-thyl-2-oxo-2,3-dihydro-lH-indool-l-yl)carbonyl]amino}me- | thyl)piperidine-l-yl]acetaat (200 mg, 0,46 mmol, stap 1 j van voorbeeld 18) en trifluorazijnzuur (106 μΐ, 1,38 mmol) j 20 in CH2CI2 (1 ml) werd gedurende de nacht geroerd bij kamertemperatuur. De ontstane oplossing werd geneutraliseerd door de toevoeging van natriumbicarbonaat (116 mg) en deze werd geconcentreerd. Het gewenste product werd opgelost met CH2Cl2/methanol=8/l en gefiltreerd. Het filtraat werd 25 geconcentreerd. Het residu werd gechromatografeerd door preparatieve TLC, waarbij werd geëlueerd met metha- nol/dichloormethaan (1:7), hetgeen 115 mg (66%) als een witte gom gaf.

MS (ESI), m/z: 378 (M+H)+.

30 IR (KBr) v: 3315, 2937, 2872, 1732, 1686, 1638, 1543, 1497, 1408, 1304, 1275, 1304, 1205, 1130 cm"1.

1H-NMR (CDCI3) δ: 8,69 (1H, t, J=5,9 Hz), 7,96 (1H, dd, J=10,3, 2,4 Hz), 7,11 (1H, dd, J-8,5, 5,6 Hz), 6,83 (1H, dt, J=8,5, 2,4 Hz), 3,75-3,54 (3H, br) , 3,37-3,23 (2H, 35 br), 2,90-2,64 (2H, br), 2,55-1,53 (6H, br) , 1,38 (6H, s).

Een signaal van CO2H werd niet waargenomen.

s « , 117 HRMS (ESI), m/z: ber. voor C19H25FN3O4 ([M+H) + : 378,1829; gevonden: 378,1816.

VOORBEELD 19: 5 2-[4-({[(6-FLUOR-3,3-DIMETHYL-2-OXO-2,3-DIHYDRO-lH-INDOOL-

1-YL) CARBONYL] AMINO}METHYL) PIPERIDINE-l-YL] -2-METHYLPRO-PAANZUUR

10

Stap 1. tert-Butyl-2-methyl-2-(4-oxopiperidine-l-yl)propa-noaat

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 3 van voorbeeld 1 uit tert-butyl-2-15 methylalaninaat.

1H-NMR (CDCI3) δ: 2, 95-2,85 (4H, m), 2,48-2,40 (4H, m), 1,47 (9H, s), 1,35 (6H, s).

Stap 2. tert-Butyl-2-(4-cyaanpiperidine-l-yl)-2-methylpro-20 panoaat

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 4 van voorbeeld 1 uit tert-butyl-2-me-thyl-2-(4-oxopiperidine-l-yl)propanoaat (stap 1 van voorbeeld 19) .

25 1H-NMR (CDCI3) δ: 2, 93-2,76 (2H, m) , 2,68-2,45 (3H, m) , 2,00-1,75 (4H, m), 1,47 (9H, s), 1,27 (6H, s).

Stap 3. tert-Butyl-2-[4-(aminomethyl)piperidine-l-yl]-2-methylpropanoaat 30 De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 5 van voorbeeld 1 uit tert-butyl-2- (4-cyaanpiperidine-l-yl)-2-methylpropanoaat (stap 2 van voorbeeld 19) .

MS (ESI), m/z: 257 (M+H)\ ·» 118 1H-NMR (CDC13) δ: 3,07-2, 96 (2H ,m), 2,56 (2H, d, J=5,9

Hz), 2,25-2,13 (2H, m), 1,80-1,65 (3H, m), 1,46 (9H, s), 1,27 (6H, s), 1,30-1,10 (2H, m) .

Een signaal van NH2 werd niet waargenomen.

5

Stap 4. tert-Butyl-2-[4-({[(6-fluor-3,3-dimethyl-2-oxo- 2,3-dihydro-lfl-indool-l-yl)carbonyl]amino}methyl)piperidi-ne-l-yl]-2-methylpropanoaat

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure 10 beschreven in stap 6 van voorbeeld 1 uit 6-fluor-3,3-di-methyl-1,3-dihydro-2H-indool-2-on (stap 2 van voorbeeld 15) en tert-butyl-2- [4-(aminomethyl) piperidine-l-yl] -2-methylpropanoaat (stap 3 van voorbeeld 19) .

MS (ESI), m/z: 462 (M+H)+.

15 1H-NMR (CDCI3) δ: 8,65 (1H, br s) , 8,05 (1H, dd, J=10,5, 2,5 Hz), 7,14 (1H, dd, J=8,3, 5,5 Hz), 6,88 (1H, dt, J=8,6, 2,5 Hz),3,28 (2H, t, J=6,2 Hz), 3,10-2,98 (2H, m) , 2,28-2,13 (2H, m) , 1,83-1, 64 (3H, m) , 1,46 (9H, s) , 1,42 (6H, s), 1,45-1,25 (2H, m), 1,27 (6H, s).

20

Stap 5. 2-[4-({[(6-Fluor-3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro- lH-indool-l-yl)carbonyl]amino)methyl)piperidine-l-yl]-2-methylpropaanzuur

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure 25 beschreven in stap 4 van voorbeeld 2 uit tert-butyl-2-[4-({[(6-fluor-3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-lH-indool-l-yl)carbonyl]aminojmethyl)piperidine-l-yl]-2-methylpropanoaat (stap 4 van voorbeeld 19).

Sm.p. : 213°C.

30 IR (KBr) v: 3271, 2934, 1736, 1632, 1560, 1495, 1441, 1346, 1302, 1231, 1151 cm"1.

MS (ESI), m/z: 406 (M+H)+.

1H-NMR (DMSO) δ: 8,59 (1H, t, J=6,0 Hz), 7,83 (1H, dd, J=10,7, 2,5 Hz), 7,47 (1H, dd, J=8,3, 5,8 Hz), 7,04 (1H, 35 ddd, J=9,4, 8,3, 2,5 Hz), 3,23-3,53 (4H, m) , 2,70-2,56 (2H, m) , 1, 85-1,65 (3H, m) , 1, 63-1,40 (2H, m) , 1,55-1,42 (1H, m), 1,37 (6H, s), 1,23 (6H, s).

j ·* 119

Een signaal van CO2H werd niet waargenomen.

Anal. ber. voor C2iH28H^304 · 0,2 H2O: C, 61,66; H, 7,00; N, 10,27.

Gevonden: C, 61,26; H, 6,90; N, 10,14.

5 VOORBEELD 20

3- [4-FLUOR-3- ( { [ (6-FLUOR-3,3-DIMETHYL-2-OXO-2,3-DIHYDRO-1H-INDOOL-1-YL) CARBONYL] AMINO}METHYL) PIPERIDINE-l-YL] -2,2-DIMETHYLPROPAANZUUR

10 vJHüooA.

Stap 1. A/-Benzoyl-4-tert-butoxycarbonylaminomethyl-4-fluorpiperidine 15 Een mengsel van N-benzoyl-4-aminomethyl-4-fluorpipe- ridine (J. Med. Chem., 1999, 42, 1648-1660) (3,54 g, 15,0 mmol) en di-tert-butyldicarbonaat (4,91 g, 22,5 itunol) in methanol (80 ml) werd gedurende 15 uur geroerd bij kamertemperatuur en in vacuüm geconcentreerd. Het ontstane re-20 sidu werd gechromatografeerd over een kolom met silicagel, waarbij werd geëlueerd met hexaan/ethylacetaat (1:1), hetgeen 4,52 g (89%) titelverbinding als een kleurloze olie gaf.

MS (ESI), m/z: 337 (M+H)+.

25 1H-NMR (CDCI3) δ: 7,55-7,25 (5H, m) , 5,16 (1H, br t, J=6,3 Hz), 4,51 (1H, m) , 3,62 (1H, m), 3, 55-3,00 (4H, m) , 2,ΙΟΙ,25 (4H, m), 1,43 (9H, s).

Stap 2. 4-tert-Butoxycarbonylaminomethyl-4-fluorpiperidine 30 Een mengsel van AT-benzoyl-4-tert-butoxycarbonylamino- methyl-4-fluorpiperidine (stap 3 van voorbeeld 15) (4,42 g, 13,1 mmol), NaOH (2,62 g, 65,5 mmol), H2O (9,00 ml) en ethanol (90,0 ml) werd gedurende 15 uur gerefluxt en in vacuüm geconcentreerd. Aan het ontstane residu werden wa- 120 '· ·, ter en chloroform toegevoegd. De organische laag werd afgescheiden, gedroogd op magnesiumsulfaat en geconcentreerd onder verminderde druk. Herkristallisatie van de ontstane vaste stof met hexaan-CH2Cl2 leverde een kleurloze, vaste 5 stof (1,77 g, 58%) als de titelverbinding op.

MS(ESI), m/z: 233(M+H)+ 1H-NMR (CDC13) δ: 4,93 (lH,m), 3,30 (2H, dd, J=21,5, 6,3

Hz), 2,91 (4H,m), 1,88-1,34 (4H,m), 1,45 (9 H, s).

Een signaal van NH werd niet waargenomen.

10

Stap 3. Methyl-3-(4-{[(tert-butoxycarbonyl) amino] methyl}-4-fluorpiperidine-l-yl)-2,2-dimethylpropanoaat

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 3 van voorbeeld 2 uit 4-tert-butoxy-15 carbonylaminomethyl}-4-fluorpiperidine (stap 2 van voorbeeld 20) .

1H-NMR (CDCI3) δ: 4,78 (1H, br s) , 3,66 (3H, s) , 3,27 (2H,dd, J=22,1, 6,3 Hz), 2,50 (2H,s), 2,64-2,35 (4 H,m), 1,77-1,50 (4H,m), 1,44 (9H,s), 1,15 (6H, s).

20 Een signaal van NH werd niet waargenomen.

Stap 4. Methyl-3-[4-(aminomethyl)-4-fluorpiperidine-l-yl]-2,2-dimethylpropanoaat

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure 25 beschreven in stap 2 van voorbeeld 2 uit methyl-3-(4-{[(tert-butoxycarbonyl)amino]methyl}-4-fluorpiperidine-l-yl) -2,2-dimethylpropanoaat (stap 3 van voorbeeld 20).

MS(ESI), m/z: 247(M+H)+ 30 1H-NMR (CDCI3) δ: 3,66 (3H,s), 2,74 (2H, d, J= 20,4 Hz), 2,65-2,41 (4H,m), 2,51 (2H,s), 1,87-1,20 (4H,m), 1,16 (6H, s) .

Een signaal van NH2 werd niet waargenomen.

· » 121

Stap 5. Methyl-3-[4-fluor-4-({[(6-fluor-3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-lff-indool-l-yl)carbonyl]amino}methyl)pipe-ridine-l-yl]-2,2-dimethylpropanoaat

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure 5 beschreven in stap 6 van voorbeeld 1 uit 6-fluor-3,3-dime-thyl-1,3-dihydro-lH-indool-2-on (stap 2 van voorbeeld 15) en methyl-3-[4-(aminomethyl)-4-fluorpiperidine-l-yl]-2,2-dimethylpropanoaat (stap 4 van voorbeeld 20).

MS(ESI), m/z: 452(M+H)+ 10 1H-NMR (CDC13) δ: 8,81 (1H, t, J=5,3 Hz), 8,03 (1H, dd, J= 10,6, 2,5 Hz), 7,15 (1H, dd, J=8,4, 5,6 Hz), 6,88 (1H, dt, J=8,4, 2,5 Hz), 3,66 (3H,s), 3,56 (2H, dd, J=21,l, 5,9 Hz), 2,68-2,45 (4H,m), 2,51 (2H,s), 1,89-1,58 (4H, m), 1,43 (6H, s), 1,15 (6H, s).

15

Stap 6. 2-[4-Fluor-4-({[(6-fluor-3,3-dimethyl-2-oxo-2,3- 1 dihydro-lH-indool-l-yl)carbonyl]amino}methyl)piperidine-1- yl]-2,2-dimethylpropaanzuur

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure 20 beschreven in stap 4 van voorbeeld 2 uit methyl-3-[4-fluor-4-({ [ (6-fluor-3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-lif-in-dool-l-yl)carbonyl]amino}methyl)piperidine-l-yl]-2, 2-dime-thylpropanoaat (stap 5 van voorbeeld 20).

Sm.p.: 176 °C.

25 IR (KBr) v: 3319, 2974, 2937, 1734, 1607, 1'543, 1497, 1352, 1304, 1273, 1232, 1153, 1092 cm'1.· ! MS(ESI), m/z: 438(M+H)+ 1H-NMR (CDCI3) 5: 8,87 (lH,t, J=6,3 Hz), 8,02 (1H, dd, i J=10,2, 2,5 Hz), 7,16 (1H, dd, J=8,4, 5,6 Hz), 6,90 (1H, 30 dt, J=8,4, 2,5 Hz), 3,63 (2H, dd, J=20,7, 6,3 Hz), 3,04- 2,94 (2H,m), 2,86-2,72 (2H,m), 2,59 (2H,s), 2,05-1,74 (4H, m), 1,44 (6H,s), 1,24 (6H,s).

Eén signaal van CO2H werd niet waargenomen.

Anal., ber. voor C22H29F2N3O4 · 0, IH2O: 35 C, 60,15; H, 6,70; N, 9,57.

Gevonden: C, 59,95; H, 6,67; N, 9,37.

j *k · \ ' 122 VOORBEELD 21

3-{ [4- ({ [ (3,3-DIMETHYL-2-OXO-2,3-DIHYDRO-lH-INDOOL-l-YL) -CARBONYL] AMINO}METHYL) -4-FLUORPIPERIDINE-l-YL] -2,2-DIME-THYLPROPAANZUUR

Stap 1. Methyl-3-[4-({[(3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-lff-indool-l-yl)carbonyl]amino}methyl)-4-fluorpiperidine-l-10 yl]-2, 2-dimethylpropanoaat

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 6 van voorbeeld 1 uit 3,3-dimethyl-l,3-dihydro-2H-indool-2-on (Robertson, David W. et al., J.

Med. Chem., 1986, 29, 1832) en methyl-3-[4-(aminomethyl)-15 4-fluorpiperidine-l-yl]-2,2-dimethylpropanoaat (stap 4 van voorbeeld 20).

MS(ESI), m/z: 434(M+H)+ 1H-NMR (CDCI3) δ: 8,88 (1H, t, J=5,9 Hz), 8,24 (1H, d, J= 7,9 Hz), 7,34-7,14 (3H,m), 3,66 (3H, s) , 3,57 (2H, 20 dd,J=21,1, 5,9 Hz), 2,67-2,45 (4H,m), 2,51 (2H,s), 1,90- 1,53 (4H,m), 1,44 (6H, s), 1,15 (6H,s).

Stap 2. 3-[4-({ [ (3,3-Dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-lij-indool- 1-yl)carbonyl]amino}methyl)-4-fluorpiperidine-l-yl3-2,2-25 dimethylpropaanzuur

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 4 van voorbeeld 2 uit methyl-3-[4-({ [ (3,3-dimethyl-2-oxo-2, 3-dihydro-lJi-indool-l-yl) carbonyl] amino) methyl) -4-fluorpiperidine-l-yl]-2,2-dimethylpro-30 panoaat (stap 1 van voorbeeld 21).

Sm.p.: 156°C.

IR (KBr) v: 3306, 2972, 1736, 1543, 1460, 1344, 1271, 1229, 1159, 770 cm"1.

MS(ESI), m/z: 420(M+H)+ * % · .

123 ^-NMR (CDC13) δ: 8,94 (1H, t, J=4,9 Hz), 8,23 (1H, d, J=8,6 Hz), 7,36-7,15 (3H,m) , 3,64 (2H, dd, J=21,l, 5,9 Hz

Hz), 3,04-2,92 (2H,m) , 2,86-2,69 (2H,5), 2,59 (2H,s), 2,15-1,65 (4H,m), 1,45 (6H,s), 1,24 (6H,s).

5 Een signaal van C02H werd niet waargenomen.

Anal., ber. voor C22H30FN3O4 · 0,1H20: C, 62,72; H, 7,23; N, 9,97.

Gevonden: C, 62.32; H, 7,22; N, 9,74.

10 VOORBEELD 22:

1- { [4- ( { [ (6-FLUOR-3,3-DIMETHYL-2-OXO-2,3-DIHYDRO-1H-IN-DOOL-l-YL) CARBONYL] AMINO)METHYL) -4-HYDROXYPIPERIDINE-l-YL] METHYL } CYCLOBÜTAANCARBONZUÜR

Stap 1. tert-Butyl-4-cyaan-4-hydroxypiperidine-l-carboxy-laat

Aan een suspensie van tert-butyl-4-oxopiperidine-l-20 carboxylaat (2,0 g, 10 mmol) in diethylether (40 ml) werd een oplossing van NaCN (0,54 g, 11 mmol) en NaHC03 (1,7 g, 20 mmol) in water bij kamertemperatuur onder krachtig roeren langzaam toegevoegd. Het mengsel werd gedurende de nacht geroerd en geëxtraheerd met Et20 (30 ml x 2) . De or-25 ganische fase werd gewassen met water (50 ml), geconcentreerde zoutoplossing (50 ml) en gedroogd op MgS04, gefiltreerd en ingedampt, hetgeen 2,1 g titelverbinding als een heldere, kleurloze olie gaf.

1H-NMR (CDCI3) δ: 3,81-3,72 (2H,m) , 3,42-3,32 (2H,m), 2,18-30 2,00 (2H,m),.1,88-1,77 (2H,m), 1,46 (9H,s).

13C-NMR (CDCI3) δ: 154,67, 121,13, 80,57, 67,15, 36,57, 28,23.

124

Stap 2. fcert-Butyl-4-(aminomethyl)-4-hydroxypiperidine-l-carboxylaat

Aan een suspensie van lithiumaluminiumhydride (84 mg, 2,2 mmol) in THF (5 ml) werd een oplossing van tert-butyl-5 4-cyaan-4-hydroxypiperidine-l-carboxylaat (200 mg, 0,88 mmol, stap 1 van voorbeeld 22) in THF (1 ml) druppelsgewijs toegevoegd bij 0°C. Het mengsel werd gedurende 1 uur geroerd bij die temperatuur en Na2SO4*10H2O (400 mg) langzaam toegevoegd. Het mengsel werd gedurende 5 uur geroerd 10 bij kamertemperatuur. Het mengsel werd gefiltreerd door een laag Celite, gewassen met CH2CI2 (20 ml x 2) en het filtraat geconcentreerd, hetgeen een heldere, kleurloze olie gaf. Het residu werd gechromatografeerd over een kolom met silicagel, waarbij werd geëlueerd met 15 CH2Cl2/MeOH/NH4OH (14:1:0,1), hetgeen 120 mg (59%) titel- verbinding als een witte, vaste stof gaf.

1H-NMR (CDCI3) δ: 3,98-3,75 (2H,m) , 3,17 (2H, t, J=10,8

Hz), 2,56 (2H,s), 1,46 (9H, s) , 1,60-1,25 (4H, m) .

Signalen van OH en NH2 werden niet waargenomen.

20

Stap 3. tert-Butyl-4-({[(6-fluor-3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-lH-indool-l-yl)carbonyl]amino}methyl)piperidine-1-carboxylaat

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure 25 beschreven in stap 6 van voorbeeld 1 uit 6-fluor-3,3-dime- thyl-1,3-dihydro-2iï-indool-2-on (stap 2 van voorbeeld 15) j en tert-butyl-4-(aminomethyl)-4-hydroxypiperidine-l-car- ! boxylaat (stap 2 van voorbeeld 22).

MS(ESI), m/z: 336(M+H)+ -BOC

30 1H-NMR (CDCI3) δ: 8,91 (1H, t, J=6,1 Hz), 8,01 (lH,dd, J=10,2, 2,5 Hz), 7,16 (1H, dd, J=8,4, 5,6 Hz), 6,90 (1H, dt, J=8,4, 2,5 Hz), 3,95-3,74 (2H, m), 3,44 (2H, d, J=6,l Hz), 3,28-3,12 (2H,m), 1,71-1,45 (4H, m) , 1,46 (9H, s) , 1,43 (6H,s).

35 Een signaal van OH werd niet waargenomen * 1 « 125

Stap 4. 6-Fluor-N- [(4-hydroxypiperidine-4-yl)methyl]-3,3-dimethyl-2-oxoindoline-l-carboxaniide

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 2 van voorbeeld 2 uit tert-butyl-4-5 ({[(6-fluor-3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-lH-indool-l- yl)carbonyl]amino}methyl)-4-hydroxypiperidine-l-carboxy-laat (stap 3 van voorbeeld 22).

MS (ESI), m/z: 336(M+H) + .

XH-NMR (CDC13) δ: 8,88 (1H, t, J=5,8 Hz), 8,02 (1H, dd, 10 J=10,5, 2,3 Hz), 7,15 (1H, dd, J=8,4, 5,6 Hz), 6,89 (1H, dt, J=8,4, 2,3 Hz), 3,45 (2H, d, J=5,8 Hz), 3,04-2,82 (4H,m), 1,69-1,57 (4H, m), 1,43 (6H,s).

Een signaal van OH werd niet waargenomen.

15 Stap 5. Methyl-l-{[4-({[(6-flüor-3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-lH-indool-l-yl)carbonyl]amino}methyl)-4-hydroxypi-peridine-l-yl]methyl}cyclobutaancarboxylaat

De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 3 van voorbeeld 2 uit 6-fluor-N-[(4-20 hydroxypiperidine-4-yl)methyl]-3,3-dimethyl-2-oxoindoline-1-carboxamide en methyl-1-formylcyclobutaancarboxylaat (stap 4 van voorbeeld 22) en (Davis Charles R. et al., J. Org. Chem., 1993, 58, 6843).

MS(ESI), m/z: 462 (M+H)+.

25 XH-NMR (CDCI3) δ: 8,85 (1H, t, J=5,8 Hz), 8,02 (1H, dd, J=10,4, 2,6 Hz), 7,14 (1H, dd, J=8,6, 5,3 Hz), 6,88 (1H, dt, J=8,6, 2,6 Hz), 3,70 (2H,s), 3,40 (2H, d, J=5,8 Hz), 2,73 (2H,s), 2,61-2,30 (6H,m), 2,10-1,78 (6H,m), 1,65-1,56 (2H,m), 1,42 (6H,s).

30 Een signaal van OH werd niet waargenomen.

Stap 6. 1-{ (4-(( [ (6-Fluor-3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro- lH-indool-l-yl)carbonyl]amino}methyl)-4-hydroxypiperidine-1-yl]methyl}cyclobutaancarbonzuur 35 De titelverbinding werd bereid volgens de procedure beschreven in stap 4 van voorbeeld 2 uit methyl-l-{ [4-({[(6-fluor-3,3-dimethyl-2-oxo-2, 3-dihydro-lH-indool-l- 126 yl)carbonyl]amino}methyl)-4-hydroxypiperidine-l-yl]methyl } cyclobutaancarboxylaat (stap 5 van voorbeeld 22).

Sm.p.: 159°C.

IR (KBr) v: 3300, 2939, 1738, 1535, 1495, 1481, 1350, 5 1302, 1231, 1155 cm*1.

MS(ESI), m/z: 448 (M+H)+ 1H-NMR (CDC13) δ: 8,94 (1H, t, J=5,9 Hz), 7,99 (1H, dd, j J-10,2, 2,3 Hz), 7,16 (1H, dd, J-8,5, 5,6 Hz), 6,90 (1H, dt, J= 8,5, 2,3 Hz), 3,46 (2H, d, J=5,9 Hz), 2,95-2,74 10 (4H, br) , 2,84 (2H,s), 2,61-2,48 (2H,m) , 2,41-2,24 (lH,m), 2,04-1,86 (3H,m), 1,83-1,66 (4H,m), 1,43 (6H,s).

Signalen van OH en CO2H werden niet waargenomen.

Anal., ber. voor C23H30FN3O5· 1H20: C, 59,34; H, 6,93; N, 9,03.

15 Gevonden: C, 59,02; H, 6,57; N, 8,95.

VOORBEELD 23:

1- { [4- ({ [ (3,3-DIMETHYL-2-OXO-2,3-DIHYDRO-lff-INDOOL-l-YL) -CARBONYL] AMINO}METHYL) PIPERIDINE-l-YL] METHYL} CYCLOBUTAAN-20 CARBONZUUR-WATERSTOFCHLORIDEZOUT

l-{ (4-(([(3,3-Dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-lH-indool-l-yl)carbonyl]aminoJmethyl)piperidine-l-yl]methylJcyclobu-taancarbonzuur (41,0 g, 99,2 mmol, voorbeeld 9) werd opgelost in tetrahydrofuran (820 ml). Het mengsel werd gefil-25 treerd en gewassen met tetrahydrofuran (410 ml) en de ontstane oplossing verwarmd tot 45°C. Geconcentreerd zoutzuur (12 N, 8,27 ml, 99,2 mmol) werd gedurende 20 minuten bij 25°C aan de oplossing toegevoegd, en er werd gedurende 1 uur bij deze temperatuur geroerd. De suspensie werd gedu-30 rende 1 minuut gekoeld tot 20°C en vervolgens 2 uur geroerd. Na affiltreren werd de ontstane vaste stof gewassen met tetrahydrofuran (205 ml) en in vacuüm gedroogd bij 40°C. De titelverbinding werd verkregen als een witte, vaste stof (38,6 g, 86,6%).

35 PXRD (20(+/-0,1): 9,2, 11,0, 16,5, 22,0) « k 127 VOORBEELD 24:

l-{[4-({[(3,3-DIMETHYL-2-OXO-2,3-DIHYDRO-1H-INDOOL-1-YL)-CARBONYL] AMINO}METHYL) -PIPERIDINE-l-YL]METHYL)CYCLOBUTAAN-CARBONZUÜR-HEMIFOMARAATZOÜT

5 l-{(4-({[ (3,3-Dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-liï-indool-l- yl)carbonyl]amino}methyl)piperidine-l-yl]methyl}cyclobu-taancarbonzuur (2,09 g, 5,04 mmol, voorbeeld 9) werd bij 60°C opgelost in THF (25 ml) . Aan de oplossing werd fu-maarzuur (293 mg, 2,52 mmol) toegevoegd. Het mengsel werd 10 geconcentreerd tot een volume van 12,5 ml. Men liet het afkoelen tot kamertemperatuur en het werd gedurende 1 uur geroerd. Na affiltreren werd de ontstane vaste stof gewassen met THF (3 ml) en in vacuüm gedroogd. De gewenste verbinding werd verkregen als een witte, vaste stof (2,02 g, 15 85%).

1H-NMR (DMSO,δ) 8,59 (t, 1H, J= 5,9 Hz), 8,04 (d, 1H,J=8,1 Hz), 7,44 (dd, 1H, J=l,5, 7,3 Hz), 7,30 (ddd, 1H, J = 1,5, 8,1, 8,1 Hz), 7,19 (dd, 1H = 8,1, 7,3 Hz), 6,62 (s, 1H) , 3,19 (t, 2H, J=5,9 Hz), 2,89 (br-d, 2H, J = 11,8 Hz),. 2,75 20 (s, 2H) , 2,35-2,20 (m, 2H) , 2,20 (br-t, 2H, J= 11,8 Hz), 2,00-1,75 (m, 4H) , 1,75-1,50 (m, 3H) , 1,37 (s, 6H), 1,30- 1,10 (m, 2H).

Sm.p.:181°C

PXRD(20(+/-0,1) : 5,7, 10,8, 11,4, 12,4, 16,6).

25 BEREIDING:

3,3-DIMETHYL-l, 3-DIHYDRO-2H-INDOOL-2-ON

Stap 1. 1-Broom-l-methylpropaananilide 30 Onder een stikstofatmosfeer werd een oplossing van 2- broomisobutyrylbromide (150 g, 652 mmol) in ethylacetaat (200 ml) toegevoegd aan een goed geroerde oplossing van aniline (66,8 g, 717 mmol) en Et3N (72,6 g, '717 mmol) in ethylacetaat (400 ml) in een ijsbad, waarbij de reactie-35 temperatuur onder 30°C werd gehouden. Het mengsel werd gedurende 2 uur geroerd bij kamertemperatuur. Koud water (600 ml) werd toegevoegd en er werd gedurende 20 minuten % ·\ 128 geroerd bij kamertemperatuur. Het mengsel werd gescheiden in zijn lagen en de waterlaag geëxtraheerd met ethylacetaat (600 ml). De gecombineerde organische laag werd gewassen met 2 N HC1 (180 ml), water (180 ml) en gedroogd op 5 natriumsulfaat. Na affiltreren werd het filtraat geconcentreerd. De gewenste verbinding werd verkregen als een bleekgele, vaste stof (153 g, 97%).

Rf: 0,77 (heptaan/ethylacetaat= 60/40) 1H-NMR (CDC13, δ) 8,4 6 (br-s, 1H), 7,55 (d, 2H, J=8,l Hz), 10 7,36 (dd, 2H, J=7,3, 8,1 Hz), 7,16 (t, 1H, J= 7,3 Hz), 2,06 (s, 6H)

Stap 2. 3,3-Dimethyl-l,3-dihydro-2H-indool-2-on

Een mengsel van AICI3 (16,5 g, 75,0 mmol) en 1-broom-15 1-methylpropaananilide (10,0 g, 41,3 mmol, stap 1) werd langzaam verhit tot ongeveer 90°C. Het mengsel werd gedurende 30 miuten op 90-120°C gehouden. Vervolgens werd het mengsel gekoeld tot 30-40°C. Vervolgens werd aan het goed geroerde mengsel tolueen (100 ml) toegevoegd. De ontstane 20 slurrie werd toegevoegd aan goed geroerd ijswater (100 g) . Het mengsel werd gescheiden in zijn lagen en de waterlaag geëxtraheerd met ethylacetaat (50 ml). De gecombineerde organische laag werd gewassen met 1 N HC1 (30 ml), 10 gew.% natriumcarbonaat in water (30 ml), gedroogd op 25 natriumsulfaat en gefiltreerd. Het filtraat werd ingedampt, hetgeen een gele, vaste stof (6,94 g) opleverde. De verkregen vaste stof werd opgelost in ethylacetaat (14 ml) en er werd gerefluxt. Men de liet de oplossing langzaam afkoelen tot kamertemperatuur en deze werd vervolgens ge-30 durende 1 uur geroerd bij kamertemperatuur. Aan de ontstane slurrie werd langzaam heptaan (56 ml) toegevoegd. De slurrie werd gedurende 1 uur geroerd bij 20-30°C en gekoeld tot 0-5°C. Na gedurende 1 uur roeren werd deze gefiltreerd en de ontstane vaste stof gewassen met een klei-35 ne hoeveelheid ethylacetaat/heptaan (1/4). De gewenste verbinding werd verkregen als een witte, vaste stof (5,4 g, 81%) .

129

Product: Rf = 0,37 (heptaan/ethylacetaat = 60/40) 1H-NMR (CDC13,6) 7,60 (br-s, 1H) , 7,23-7,18 (m, 2H) , 7,05 (t, 1H, J=7,3 Hz), 6,90 (dd, 1H, J = 1,5, 7,3 Hz), 1,40 (s, 6H).

5

Alle publicaties, met inbegrip van, maar niet beperkt tot, gepubliceerde octrooischriften, octrooiaanvragen en tijdschriftartikelen die in deze aanvrage worden aangehaald, zijn hierin elk door verwijzing in hun geheel opge-10 nomen.

Hoewel de onderhavige uitvinding hierboven is beschreven aan de hand van de beschreven uitvoeringsvormen, zal het voor de deskundigen duidelijk zijn dat de specifieke experimenten die in bijzonderheden worden beschreven 15 louter illustratief voor de onderhavige uitvinding zijn. Het zal ook duidelijk zijn dat diverse modificaties kunnen worden gemaakt zonder af te wijken van de geest van de onderhavige uitvinding. De onderhavige uitvinding wordt dus slechts beperkt door de volgende conclusies.

1031218

Claims

5 CONCLUSIES
1. Verbinding met de formule (I): ri£^P3vr5 o> f?"*3 10 waarin: A een Ci~C4 alkyleengroep is, waarbij de alkyleengroep ongesubstitueerd of gesubstitueerd is met 1 tot 4 substitu-enten onafhankelijk gekozen uit de groep bestaande uit een 15 C1-C4 alkylgroep, een hydroxy-Ci~C4 alkylgroep en een C1-C2 alkoxy-Ci-C4 alkylgroep, waarbij twee van de substituenten eventueel een brug kunnen vormen, zodat een 3- tot 6-ledige ring wordt verkregen die ongesubstitueerd of gesubstitueerd is met een hydroxygroep of een carboxygroep,
20 R1 is een waterstofatoom, een halogeenatoom of een Ci-C4-alkylgroep, R2 en R3 onafhankelijk een methyl- of ethylgroep zijn, of R2 en R3 tezamen een C2-C4 alkyleenbrug kunnen vormen, zodat een 3- tot 5-ledige ring wordt verkregen,
25 R4 een waterstofatoom, een halogeenatoom of een hydroxygroep is en R5 een hydroxygroep, een carboxygroep, een tetrazolyl-groep, een 5-oxo-l,2,4-oxadiazool-3-ylgroep of een 5-oxo- 1,2,4-thiadiazool-3-ylgroep is, 30 of een farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan. 1031218
2. Verbinding of farmaceutisch aanvaardbaar zout vol- I gens conclusie 1, waarin A een Ci~C* alkyleengroep is, waarbij de alkyleengroep ongesubstitw^erd of gesubstitueerd is met 1 tot 4 substituenten otisüföriankelij k gekozen 5 uit de groep bestaande uit een C1-C4 au.k.ylgroep, een hy-droxy-Ci-C4 alkylgroep en een Ci-Cj ialkoxy-Ci-C4 al-kylgroep, waarbij twee van de substituenten eventueel een brug kunnen vormen, zodat een 3- tot Smedige ring wordt verkregen, die ongesubstitueerd of gesubstitueerd is met 10 een hydroxygroep of een carboxygroep, R1 een waterstofatoom, een halogeenatodwr, of een C1-C4 alkylgroep is, R2 en R1 een methylgroep zijn, of R2 en UK1 tezamen een te-tramethyleenbrug kunnen vormen, zodat aesn 5-ledige ring 15 wordt verkregen, R2 een waterstofatoom, een halogeenatcce of een hydroxygroep is en R3 4 5 6 7 8 9 een hydroxygroep, een carboxygroep,,. een tetrazolyl-groep, een 5-oxo-l, 2,4-oxadiazool-3-ylg'n'ü-ep of een 5-oxo-20 1,2,4-thiadiazool-3-ylgroep is. Verbinding of het farmaceutisch aanvaardbare zout 2 volgens conclusie 2, waarin A een C1-C2 alkyleengroep is, waarbij de alkyleengroep ongesubstitus^erd of gesubsti- 3 25 tueerd is met 1 of 2 substituenten onssillihankelij k gekozen 4 uit de groep bestaande uit een C1-C4 al.kylgroep, een hy- 5 droxy-Ci-C4 alkylgroep en een Cl-Cj ialkoxy-Ci-C4 al 6 kylgroep, waarbij twee van de substituenten eventueel een 7 brug kunnen vormen, zodat een 3- tot 6r~Ledige ring wordt 30 verkregen, 8 R1 een waterstofatoom of een halogeenatocv is, 9 R10 en R1 een methylgroep zijn, of R2 en 5|K11 tezamen een te- 10 tramethyleenbrug kunnen vormen, zodat »en 5-ledige ring wordt verkregen, 11
35 R2 een waterstofatoom is en R5 een carboxygroep, een tetrazolylgroep, een 5-oxo-l,2,4-oxadiazool-3-ylgroep of een 5-oxo-l,2,4-thiadiazool-3-yl-groep is.
4. Verbinding of het farmaceutisch aanvaardbare zout volgens conclusie 3, waarin Ά een C1-C2 alkyleengroep is, waarbij de alkyleengroep ongesubstitueerd of gesubstitueerd is met 2 substituenten onafhankelijk gekozen uit de groep bestaande uit een C^-C^ alkylgroep en een hydroxy-Cj.-10 C4 alkylgroep, waarbij twee van de substituenten eventueel een brug kunnen vormen, zodat een 3- tot 6-ledige ring wordt verkregen, R1 een waterstofatoom of een fluoratoom is, R2 en R3 een methylgroep zijn, of R2 en R3 tezamen een te-15 tramethyleenbrug kunnen vormen, zodat een 5-ledige ring wordt verkregen, R4 een waterstofatoom is en R5 een carboxygroep of een tetrazolylgroep is.
5. Verbinding of het farmaceutisch aanvaardbare zout volgens conclusie 4, waarin A ^/0-:070 - Ό is, R1 een waterstofatoom of een fluoratoom is,
25 R2 en R3 een methylgroep zijn, R4 een waterstofatoom is en R5 een carboxygroep of een tetrazolylgroep is.
6. Verbinding volgens conclusie 1, die wordt gekozen 30 uit: 1—{(4—({[(3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-lH-indool-l-yl)-carbonyl]amino]methyl)piperidine-l-yl]methyl}cyclobutaan-carbonzuur, l-{[4-({[(6-fluor-3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-lH-in-dool-l-yl)carbonyl]amino}methyl) piperidine-l-yl]methyl}cy-clobutaancarbonzuur, 5 3- [4- ({ [ (6-fluor-3, 3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-lf/-indool-1-yl)carbonyl]aminojmethyl)piperidine-l-yl]-2,2-dimethyl-propaanzuur, 10 en het farmaceutisch aanvaardbare zout daarvan.
7. Farmaceutisch preparaat dat de verbinding of het farmaceutisch aanvaardbare zout volgens één van de conclusies 1-6, tezamen met een farmaceutisch aanvaardbare exci- 15 piënt omvat.
8. Verbinding of het farmaceutisch aanvaardbare zout volgens één van de conclusies 1-6 voor het gebruik als een geneesmiddel. 20
9. Gebruik van de verbinding of het farmaceutisch aanvaardbare zout volgens één van de conclusies 1-6 voor de vervaardiging van een geneesmiddel voor het behandelen van een ziekte waarvoor een 5-HT4-agonist geïndiceerd is. 25
10. Gebruik van de verbinding of het farmaceutisch aanvaardbare zout volgens één van de conclusies 1-6 voor de vervaardiging van een geneesmiddel voor de behandeling van gastro-oesofageale refluxziekte, gastro-intestinale 30 ziekte, gastrische motiliteitsstoornis, dyspepsie die niet door ulcera wordt veroorzaakt, functionele dyspepsie, prikkelbare-darm-syndroom (irritable bowel syndrome; IBS), constipatie, dyspepsie, oesophagitis, gastro-oesofageale ziekte, misselijkheid, ziekte van het centrale zenuwstel- 35 sel, ziekte van Alzheimer, cognitieve stoornis, emesis, migraine, neurologische ziekte, pijn, cardiovasculaire --- ---- stoornissen, hartinsufficiëntie, hartaritmie, diabetes of apnoesyndroom.
11. Combinatie van de verbinding of het farmaceutisch aanvaardbare zout volgens één van de conclusies 1-6, en een ander farmacologisch actief middel.
12. Farmaceutisch preparaat dat de verbinding of het 10 farmaceutisch aanvaardbare zout volgens één van de conclusies 1-6, en een ander farmacologisch actief middel omvat. 1031218