NL1006266C2 - Werkwijze voor de bereiding van ampicilline. - Google Patents
Werkwijze voor de bereiding van ampicilline. Download PDFInfo
- Publication number
- NL1006266C2 NL1006266C2 NL1006266A NL1006266A NL1006266C2 NL 1006266 C2 NL1006266 C2 NL 1006266C2 NL 1006266 A NL1006266 A NL 1006266A NL 1006266 A NL1006266 A NL 1006266A NL 1006266 C2 NL1006266 C2 NL 1006266C2
- Authority
- NL
- Netherlands
- Prior art keywords
- apa
- ampicillin
- concentration
- reaction mixture
- phenylglycine
- Prior art date
Links
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 title claims abstract description 33
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 title claims abstract description 28
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 23
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 10
- NGHVIOIJCVXTGV-UHFFFAOYSA-N 6beta-amino-penicillanic acid Natural products OC(=O)C1C(C)(C)SC2C(N)C(=O)N21 NGHVIOIJCVXTGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 53
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 22
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims abstract description 21
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 claims abstract description 14
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims abstract description 14
- 150000005331 phenylglycines Chemical class 0.000 claims abstract description 13
- NGHVIOIJCVXTGV-ALEPSDHESA-N 6-aminopenicillanic acid Chemical compound [O-]C(=O)[C@H]1C(C)(C)S[C@@H]2[C@H]([NH3+])C(=O)N21 NGHVIOIJCVXTGV-ALEPSDHESA-N 0.000 claims abstract description 7
- KIYRSYYOVDHSPG-SSDOTTSWSA-N (2r)-2-amino-2-phenylacetamide Chemical compound NC(=O)[C@H](N)C1=CC=CC=C1 KIYRSYYOVDHSPG-SSDOTTSWSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 13
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 2
- 238000001139 pH measurement Methods 0.000 claims 1
- 238000010923 batch production Methods 0.000 abstract description 3
- 230000010933 acylation Effects 0.000 abstract description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 22
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 22
- 150000003952 β-lactams Chemical class 0.000 description 10
- 108010073038 Penicillin Amidase Proteins 0.000 description 7
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 5
- 108010093096 Immobilized Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- ZGUNAGUHMKGQNY-SSDOTTSWSA-N D-alpha-phenylglycine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)C1=CC=CC=C1 ZGUNAGUHMKGQNY-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 3
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 3
- UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 5,8-dihydroxy-2-methoxy-6-methyl-7-(2-oxopropyl)naphthalene-1,4-dione Chemical compound CC1=C(CC(C)=O)C(O)=C2C(=O)C(OC)=CC(=O)C2=C1O UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000589220 Acetobacter Species 0.000 description 2
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000223218 Fusarium Species 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- ZGUNAGUHMKGQNY-ZETCQYMHSA-N L-alpha-phenylglycine zwitterion Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)C1=CC=CC=C1 ZGUNAGUHMKGQNY-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 2
- 241000588769 Proteus <enterobacteria> Species 0.000 description 2
- 241000589634 Xanthomonas Species 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- -1 for example Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 239000003349 gelling agent Substances 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000010626 work up procedure Methods 0.000 description 2
- PYHRZPFZZDCOPH-QXGOIDDHSA-N (S)-amphetamine sulfate Chemical compound [H+].[H+].[O-]S([O-])(=O)=O.C[C@H](N)CC1=CC=CC=C1.C[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 PYHRZPFZZDCOPH-QXGOIDDHSA-N 0.000 description 1
- GXBRYTMUEZNYJT-UHFFFAOYSA-N 2-anilinoacetamide Chemical compound NC(=O)CNC1=CC=CC=C1 GXBRYTMUEZNYJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000607534 Aeromonas Species 0.000 description 1
- 241000726092 Aphanocladium Species 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 241000194110 Bacillus sp. (in: Bacteria) Species 0.000 description 1
- 241001619326 Cephalosporium Species 0.000 description 1
- 239000004971 Cross linker Substances 0.000 description 1
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 description 1
- 241000589565 Flavobacterium Species 0.000 description 1
- 241000427940 Fusarium solani Species 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 description 1
- 241000586779 Protaminobacter Species 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- XSTXAVWGXDQKEL-UHFFFAOYSA-N Trichloroethylene Chemical compound ClC=C(Cl)Cl XSTXAVWGXDQKEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- LSQZJLSUYDQPKJ-NJBDSQKTSA-N amoxicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=C(O)C=C1 LSQZJLSUYDQPKJ-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 229960003022 amoxicillin Drugs 0.000 description 1
- 229960003311 ampicillin trihydrate Drugs 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- ZAIPMKNFIOOWCQ-UEKVPHQBSA-N cephalexin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@@H]3N(C2=O)C(=C(CS3)C)C(O)=O)=CC=CC=C1 ZAIPMKNFIOOWCQ-UEKVPHQBSA-N 0.000 description 1
- 229940106164 cephalexin Drugs 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000010924 continuous production Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002009 diols Chemical class 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- LSQZJLSUYDQPKJ-UHFFFAOYSA-N p-Hydroxyampicillin Natural products O=C1N2C(C(O)=O)C(C)(C)SC2C1NC(=O)C(N)C1=CC=C(O)C=C1 LSQZJLSUYDQPKJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000036632 reaction speed Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P37/00—Preparation of compounds having a 4-thia-1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring system, e.g. penicillin
- C12P37/04—Preparation of compounds having a 4-thia-1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring system, e.g. penicillin by acylation of the substituent in the 6 position
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Cephalosporin Compounds (AREA)
Description
- 1 -
WERKWIJZE VOOR DE BEREIDING VAN AMPICILLINE
5 De uitvinding betreft een werkwijze voor de bereiding van ampicilline waarbij 6-aminopenicilline-zuur (6-APA) wordt onderworpen aan een enzymatische acyleringsreactie met behulp van een fenylglycinederivaat waarbij de totale concentratie van 10 in het reactiemengsel aanwezige 6-APA plus ampicilline groter is dan 250 mM, de concentratie 6-APA in oplossing lager dan 300 mM wordt gehouden en de toegepaste molaire verhouding acyleringsmiddel tot 6-APA kleiner is dan 2,5.
15 In WO-A-92/01061 wordt de bereiding van β- lactamderivaten, waaronder ampicilline beschreven via enzymatische acylering van een β-lactamkern, bijvoorbeeld 6-APA, bij hoge concentraties van acyleringsmiddel plus β-lactamderivaat. De concentratie 20 van de β-lactamkern wordt relatief laag gehouden. Uit de voorbeelden valt af te leiden dat bij hoge molaire verhouding acyleringsmiddel tot β-lactamkern, hoge conversies worden gerealiseerd, terwijl bij lagere molaire verhouding acyleringsmiddel tot β-lactamkern de . 25 conversie beduidend lager is. Een nadeel van het toepassen van een hoge molaire verhouding acyleringsmiddel tot β-lactamkern is dat ten gevolge van optredende hydrolyse van het acyleringsmiddel, grote hoeveelheden acyleringsmiddel verloren gaan.
30 Bovendien is gebleken dat de opwerking van ampicilline bemoeilijkt wordt, doordat een relatief grote hoeveelheid D-fenylglycine ten opzichte van ampicilline aanwezig is in het na de enzymatische acyleringsreactie verkregen reactiemengsel, waardoor een kleinere 35 hoeveelheid ampicilline kan worden geïsoleerd.
1 0 0 6"2 6 e - 2 -
Gebleken is dat het, voor het behalen van een hoge conversie in het proces, van groot belang is de reactie bij hoge concentraties, dus ook bij hoge concentratie β-lactamkern, te kunnen uitvoeren.
5 In WO-A-96/02663 wordt een proces beschreven waarin de enzymatische acyleringsreactie van β-lactamkernen bij een constante concentratie van de reactanten wordt uitgevoerd. In het hier beschreven continu proces wordt een zo hoog mogelijk 10 concentratieniveau van beide reactanten nagestreefd.
Gebleken is dat wanneer de bereiding van ampicilline wordt uitgevoerd bij hoge concentratie 6-APA, er toch slechts een relatief lage conversie werd bereikt, vergeleken met conversies die konden worden 15 bereikt in de bereiding van andere β-lactamderivaten, zoals cefalexine.
Aanvraagster heeft nu verrassenderwijze gevonden dat door ervoor te zorgen dat de concentratie 6-APA in opgeloste vorm aanwezig in het reactiemengsel, 20 relatief laag wordt gehouden, een hogere conversie kon worden bereikt, dan wanneer de concentratie opgelost 6-APA zo hoog mogelijk werd gekozen. Bovendien is gebleken dat de roerbaarheid van het reactiemengsel aanzienlijk beter was wanneer de concentratie opgelost 25 6-APA laag werd gehouden.
Onder conversie wordt in het kader van deze uitvinding verstaan de molaire verhouding gevormd ampicilline tot ingezette hoeveelheid 6-APA.
De concentratie opgelost 6-APA wordt uitgedrukt als de 30 hoeveelheid 6-APA in molen per kg reactiemengsel; de totale concentratie, opgelost en niet opgelost, 6-APA en ampicilline wordt uitgedrukt als de hoeveelheid 6-APA plus ampicilline in molen per kg totaal reactiemengsel; het totale reactiemengsel kan naast de 35 oplossing een aantal vaste stoffen bevatten, bijvoorbeeld 6-APA, ampicilline, fenylglycine en 1006266 -3- geïmmobiliseerd enzym.
De molaire verhouding acyleringsmiddel tot 6-APA, d.w.z. de totale hoeveelheid toegevoegd fenylglycinederivaat gedeeld door de totale hoeveelheid 5 toegevoegd 6-APA uitgedrukt in molen, is kleiner dan 2,5. Bij voorkeur ligt de molaire verhouding tussen 1,0 en 2,0, in het bijzonder tussen 1,2 en 1,8.
De enzymatische acyleringsreactie wordt bij voorkeur als batch proces uitgevoerd. Desgewenst is het 10 ook mogelijk om de reactie continu uit te voeren, waarbij in line de concentratie opgelost 6-APA wordt geregeld.
De totale concentratie 6-APA plus ampicilline (in opgeloste en in onopgeloste vorm) in het 15 reactiemengsel wordt in de werkwijze volgens de uitvinding hoger dan 250 mM, bij voorkeur hoger dan 300 mM, in het bijzonder hoger dan 350 mM gekozen.
De concentratie van opgelost 6-APA wordt gedurende de bereiding van ampicilline in essentie 20 lager dan 300 mM, bij voorkeur lager dan 250 mM gehouden. Bij hogere concentratie van het acyleringsmiddel kan eventueel een hogere concentratie opgelost 6-APA, worden gekozen dan bij lagere concentratie. Bij een hogere concentratie van het 25 acyleringsmiddel is de reactiesnelheid namelijk hoger, waardoor 6-APA slechts relatief kort in hoge concentratie in opgeloste vorm aanwezig is.
De concentratie 6-APA in opgeloste vorm in het reactiemengsel aanwezig, kan op diverse manieren 30 laag worden gehouden. Een mogelijkheid om de concentratie opgelost 6-APA laag te houden is, slechts een deel van de totale hoeveelheid 6-APA voorleggen en de rest doseren tijdens de reactie. Een nadeel hiervan is echter dat 6-APA dan als vaste stof moet worden 35 gedoseerd hetgeen praktische bezwaren oplevert. Bij voorkeur wordt dan ook de totale hoeveelheid 6-APA in 1006266 - 4 - een batch proces voorgelegd aan het begin van de reactie, waarna gedurende de enzymatische acyleringsreactie de concentratie 6-APA in het reactiemengsel zal afnemen en de concentratie 5 ampicilline zal toenemen. Een geschikte methode om toch een lage concentratie opgelost 6-APA te bereiken is bijvoorbeeld door de pH op een lagere waarde te houden vergeleken met de pH-waarde waarbij een maximale oplosbaarheid van de reactanten wordt bereikt. Een 10 bijzonder geschikte methode om de 6-APA concentratie in opgeloste vorm laag te houden is bijvoorbeeld door ervoor te zorgen dat de concentratie van het fenylglycinederivaat laag wordt gehouden, bijvoorbeeld door het fenylglycinederivaat gedeeltelijk in de loop 15 van de reactie te doseren.
Gebleken is namelijk dat wanneer de fenylglycinederivaat-concentratie laag wordt gehouden, er weinig 6-APA in oplossing gaat, zodat door dosering van het fenylglcyinederivaat, de concentratie 6-APA in 20 oplossing kan worden geregeld.
In de (enzymatische) acyleringsreaktie kan als acyleringsmiddel fenylglycine in geaktiveerde vorm bijvoorbeeld een amide of een ester, in het bijzonder een methylester worden toegepast. Bij voorkeur wordt D-25 fenylglycineamide (FGA) toegepast.
Een bijzonder geschikte uitvoeringsvorm wordt verkregen wanneer FGA wordt toegevoegd in de vorm van een zout ervan, bij voorkeur het zout van FGA en een mineraal zuur, bijvoorbeeld FGA.HC1, FGA.1/2H2S04 en 30 FGA.HNO3. Op deze wijze is het namelijk eenvoudig mogelijk om via het constant houden van de pH een optimale dosering van het FGA te bewerkstelligen. Bij voorkeur wordt FGA.1/2H2S04 toegepast omdat dit zout een zeer hoge oplosbaarheid heeft.
35 De temperatuur waarbij de enzymatische acyleringsreaktie wordt uitgevoerd ligt meestal lager 1006266 - 5 - dan 40°C, bij voorkeur tussen -5 en 35°C. De pH waarbij de enzymatische acyleringsreactie wordt uitgevoerd ligt meestal tussen 5,5 en 8,0, bij voorkeur tussen 6,0 en 6,8.
5 Als enzym kan in principe elk enzym worden toegepast dat geschikt is als katalysator in de koppelingsreaktie. Dergelijke enzymen zijn bijvoorbeeld de enzymen die bekend zijn onder de algemene aanduiding penicilline amidase of penicilline acylase. Dergelijke 10 enzymen zijn bijvoorbeeld beschreven in J.G. Shewale et. al. Process Biochemistry, Augustus 1989 p. 146-154 en in J.G. Shewale et. al. Process Biochemistry International, Juni 1990, p. 97-103. Voorbeelden van geschikte enzymen zijn enzymen afgeleid van 15 Acetobacter. in het bijzonder Acetobacter pasteurianum, Aeromonas. Alcaliaenes. in het bijzonder Alcaliaenes faecal is. Aphanocladium, Bacillus sp.. in het bijzonder Bacillus meoaterium, Cephalosporium. Escherichia. in het bijzonder Escherichia coli, Flavobacterium.
20 Fusarium. in het bijzonder Fusarium oxvsporum en
Fusarium Solani. Kluvvera. Mvcoplana. Protaminobacter. Proteus. in het bijzonder Proteus rettaari. Pseudomonas en Xanthomonas. in het bijzonder Xanthomonas citrii.
Bij voorkeur wordt een geïmmobiliseerd enzym 25 toegepast, aangezien het enzym dan eenvoudig afgescheiden en hergebruikt kan worden. Een geschikte immobilisatietechnologie is bijvoorbeeld beschreven in EP-A-222462. Een andere geschikte technologie wordt gevormd door het Penicilline G acylase te immobiliseren 30 op een drager die een gelerend agens, bijvoorbeeld gelatine, en een polymeer met vrije aminogroepen, bijvoorbeeld alginaat amine, chitosan of polyethyleenimine bevat. Daarnaast kunnen enzymen ook als kristallijne stof worden ingezet (Clecs).
35 Van de geïmmobiliseerde enzymen zdie commerciëel verkrijgbaar zijn, zijn bijvoorbeeld 1006266 - 6 - bijzonder geschikt gebleken het Escherichia coli enzym van Boehringer Mannheim GmbH dat onder de naam Enzygel® commerciëel verkrijgbaar is, het geïmmobiliseerde Penicilline-G acylase van Recordati en het 5 geïmmobiliseerde Penicilline-G acylase van Pharma Biotechnology Hannover.
De (enzymatische) acyleringsreactie en de verdere opwerking van het reactiemengsel wordt in de praktijk meestal uitgevoerd in water. Desgewenst kan 10 het reactiemengsel ook een organisch oplosmiddel of een mengsel van organische oplosmiddelen bevatten, bij voorkeur minder dan 30 vol.%. Voorbeelden van organische oplosmiddelen die kunnen worden toegepast zijn alcoholen met 1-7 C-atomen, bijvoorbeeld een 15 monoalcohol, in het bijzonder methanol of ethanol; een diol, in het bijzonder ethyleenglycol of een triol, in het bijzonder glycerol.
Bij voorkeur wordt de reactie vrijwel volledig gestopt wanneer nagenoeg de maximale conversie 20 is bereikt. Een geschikte uitvoeringsvorm om dit te bereiken is het verlagen van de pH, bij voorkeur tot een waarde tussen 4,0 en 6,3, in het bijzonder tussen 5,0 en 5,7. Een andere geschikte uitvoeringsvorm is het verlagen van de temperatuur van het reactiemengsel 25 zodra de maximale conversie is bereikt. Ook een combinatie van beide uitvoeringsvormen is mogelijk.
Nadat de reactie vrijwel gestopt is bij het bereiken van maximale conversie, is het reactiemengsel meestal aanwezig in de vorm van een suspensie die 30 meerdere vaste stoffen, bijvoorbeeld ampicilline, D-fenylglycine en geïmmobiliseerd enzym bevat. Het geïmmobiliseerde enzym wordt, vanwege de proceseconomie, bij voorkeur teruggewonnen. Dit kan bijvoorbeeld geschikt worden uitgevoerd door het 35 reactiemengsel roerend te filteren over een zeef, waarbij bij voorkeur de draairichting van de roerder 1066266 - 7 - zodanig wordt gekozen dat de suspensie in het centrum van de roerder omhooggepompt wordt. Vervolgens kunnen waardevolle componenten, bijvoorbeeld AMPI en FG, worden gewonnen; bijvoorbeeld met behulp van pH-shift.
5 De resterende moederloog bevat slechts weinig nevenproducten, en kan desgewenst vervolgens worden gerecirculeerd.
In het kader van deze uitvinding kunnen de verschillende componenten in de vrije vorm of als 10 zouten in het reaktiemengsel aanwezig zijn. Met de genoemde pH-waarde wordt steeds de pH-waarde gemeten met een pH-elektrode geijkt bij kamertemperatuur bedoeld.
De uitvinding zal verder worden toegelicht 15 aan de hand van de voorbeelden, zonder evenwel daartoe te worden beperkt.
Afkortingen: 20 AMPI.3H20 = ampicilline trihydraat 6-APA = 6-aminopenicillinezuur FGA = D-fenylglyc ineamide FG = D—fenylglycine
Assemblase™ is een geïmmobiliseerde Escherichia coli 25 penicilline acylase uit E. coli ATCC 1105, zoals beschreven in WO-A-97/04086. De immobilisatie is uitgevoerd als beschreven in EP-A-222462, waarbij gelatine en chitosan als gellerend agens en glutaaraldehyde als crosslinker zijn gebruikt.
30 De uiteindelijke activiteit van de Escherichia coli penicilline acylase wordt bepaald door de hoeveelheid enzym die aan de geactiveerde bolletjes is toegevoegd en bedroeg 3 ASU/g drooggewicht waarbij 1 ASU (Amoxicilline Synhese Unit) is gedefinieerd als de 35 hoeveelheid enzym die per uur 1 g Amoxiccilline.3H20 genereert uit 6-APA en HPGM (bij 20°C; 6,5% 6-APA en 1006260 - 8 - 6,5% HPGM).
Voorbeeld I
Bereiding van FGA.1/2H2S04 oplossing.
5 301,6 g FGA (2,00 mol) werd gesuspendeerd in 650 g water bij T = 5°C. Onder roeren werd in 1 uur 102,1 g 96% H2S04 (1,00 mol) toegedruppeld, waarbij de temperatuur d.m.v. koelen op T < 25°C werd gehouden.
10 Voorbeeld II
Synthese van Ampicilline
Een enzymreactor (1,5 1, diameter 11 cm), voorzien van een zeef bodem met 175 μτα gaas, werd gevuld met 300 g netto-nat Assemblase™.
15 Een aanmaakreactor (1,2 1) werd gevuld met 131,6 g 6-APA (0,600 mol), 30,2 g FGA (0,200 mol) en 400 ml water (T = 10°C). Dit mengsel werd 15 minuten geroerd bij T = 10°C en vervolgens op t = 0 m.b.v. 100 ml water (T = 10°C) in de enzymreactor overgebracht.
20 Op t - 0 werd de roerder in de enzymreactor aangezet. Gedurende 283 minuten werd 423,7 g (0,800 mol) FGA.1/2H2S04 oplossing met constante snelheid toegevoegd, waarbij de temperatuur op 10°C werd gehouden. De pH was ca. 6,3. Vanaf t = 328 minuten werd 25 de pH op 6,3 gehouden d.m.v. titratie met 6N H2S04.
Op t = 540 minuten was de hoeveelheid Ampicilline maximaal en werd de pH verlaagd naar 5,6 d.m.v. toevoegen van 6N H2S04.
De enzymreactor bevatte nu: 30 575 mmol AMPI (=96% t.o.v. de ingezette hoeveelheid 6-APA)
15 mmol 6-APA 50 mmol FGA 365 mmol FG
35 De concentraties tijdens de reactie zijn weergegeven in grafiek 1.
1006266 - 9 -
Vergelijkend Experiment A Synthese van Ampicilline
Een enzymreactor (1,5 1, diameter 11 cm), voorzien van een zeef bodem met 175 μπι gaas, werd gevuld 5 met 300 g netto-nat Assemblase™.
Een aanmaakreactor (1,2 1) werd gevuld met 143,2 g (0,950 mol) FGA in 500 ml water bij 10°C. Bij 10°C werd onder koelen in 15 minuten 131,6 g 6-APA (0,600 mol) in kleine porties toegevoegd, terwijl de pH op 7,0 werd 10 gehouden d.m.v. titratie met 6N H2S04. In totaal was er 54,5 ml 6N H2S04 nodig. Het mengsel werd 15 minuten geroerd bij T = 10°C en vervolgens op t = 0 m.b.v. 100 ml water (T = 10°C) in de enzymreactor overgebracht.
Op t = 0 werd de roerder in de enzymreactor aangezet.
15 De pH werd op 7,0 gehouden d.m.v. titratie met 6N H2S04. De temperatuur werd op 10°C gehouden. Op t = 160 minuten was de hoeveelheid Ampicilline maximaal en werd de pH verlaagd naar 5,6 d.m.v. 6N H2S04. In totaal was 147,6 ml 6N H2S04 toegevoegd aan de enzymreactor. Het 20 mengsel was relatief visceus en moeilijk roerbaar.
De enzymreactor bevatte nu: 551 mmol AMPI (= 92% t.o.v. de ingezette hoeveelheid 6-APA)
24 mmol 6-APA
25 50 mmol FGA
330 mmol FG
De concentraties tijdens de reactie zijn weergegeven in grafiek 2.
UG 6 2 6 6
Claims (12)
1. Werkwijze voor de bereiding van ampicilline waarbij 6-aminopenicillinezuur (6-APA) wordt 5 onderworpen aan een enzymatische acyleringsreactie met behulp van een fenylglycinederivaat waarbij de totale concentratie van in het reactiemengsel aanwezige 6-APA plus ampicilline groter is dan 250 mM, de concentratie 6-APA in oplossing lager dan 10 300 mM wordt gehouden en de toegepaste molaire verhouding acyleringsmiddel tot 6-APA kleiner is dan 2,5.
2. Werkwijze volgens conclusie 1, waarin de concentratie van in het reactiemengsel aanwezige 15 6-APA plus ampicilline groter is dan 300 mM.
3. Werkwijze volgens conclusie 1 of 2, waarin de concentratie van 6-APA in oplossing lager wordt gehouden dan 250 mM.
4. Werkwijze volgens een der conclusies 1-3, waarin 20 de molaire verhouding totaal toegepast acyleringsmiddel tot 6-APA kleiner is dan 2,0.
5. Werkwijze volgens een der conclusies 1-4, met het kenmerk, dat het 6-APA gedeeltelijk wordt gedoseerd in de loop van de enzymatische 25 acyleringsreactie.
6. Werkwijze volgens een der conclusies 1-5, met het kenmerk, dat het fenylglycinederivaat gedeeltelijk in de loop van de enzymatische acyleringsreactie wordt gedoseerd.
7. Werkwijze volgens conclusie 6, met het kenmerk, dat het fenylglycinederivaat wordt gedoseerd als een zout van D-fenylglycineamide en een zuur.
8. Werkwijze volgens conclusie 7, met het kenmerk, dat het fenylglycinederivaat wordt gedoseerd in de 35 vorm van een oplossing van D-fenylglycineami de. 1/2H2S04 in water. 1006266 - 11 -
9. Werkwijze volgens een der conclusies 6-8, met het kenmerk, dat de dosering wordt geregeld middels pH-meting.
10. Werkwijze volgens een der conclusies 1-9, met het 5 kenmerk, dat de pH van het reactiemengsel wordt verlaagd zodra nagenoeg de maximale conversie is bereikt.
11. Werkwijze volgens een der conclusies 1-10, met het kenmerk, dat de temperatuur van het reactiemengsel 10 wordt verlaagd zodra nagenoeg de maximale conversie is bereikt.
12. Werkwijze voor de bereiding van ampicilline zoals beschreven en toegelicht aan de hand van de voorbeelden. 1006266
Priority Applications (12)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| NL1006266A NL1006266C2 (nl) | 1997-06-10 | 1997-06-10 | Werkwijze voor de bereiding van ampicilline. |
| AU76777/98A AU7677798A (en) | 1997-06-10 | 1998-05-25 | Process for the preparation of ampicillin |
| PCT/NL1998/000295 WO1998056946A1 (en) | 1997-06-10 | 1998-05-25 | Process for the preparation of ampicillin |
| CN98807876A CN1115417C (zh) | 1997-06-10 | 1998-05-25 | 用于制备氨苄青霉素的方法 |
| AT98924672T ATE319849T1 (de) | 1997-06-10 | 1998-05-25 | Verfahren zur herstellung vom ampicillin |
| BR9810020-3A BR9810020A (pt) | 1997-06-10 | 1998-05-25 | Processo para a preparação de ampicilina |
| EP98924672A EP0988393B1 (en) | 1997-06-10 | 1998-05-25 | Process for the preparation of ampicillin |
| KR10-1999-7011645A KR100508290B1 (ko) | 1997-06-10 | 1998-05-25 | 암피실린의 제조방법 |
| TR2000/00201T TR200000201T2 (tr) | 1997-06-10 | 1998-05-25 | Ampisilinin hazırlanması için proses |
| ES98924672T ES2258298T3 (es) | 1997-06-10 | 1998-05-25 | Proceso para la preparacion de ampicilina. |
| IN1224MA1998 IN186863B (nl) | 1997-06-10 | 1998-06-05 | |
| US09/457,765 US7029885B2 (en) | 1997-06-10 | 1999-12-10 | Process for the preparation of ampicillin |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| NL1006266 | 1997-06-10 | ||
| NL1006266A NL1006266C2 (nl) | 1997-06-10 | 1997-06-10 | Werkwijze voor de bereiding van ampicilline. |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NL1006266C2 true NL1006266C2 (nl) | 1998-12-14 |
Family
ID=19765126
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NL1006266A NL1006266C2 (nl) | 1997-06-10 | 1997-06-10 | Werkwijze voor de bereiding van ampicilline. |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US7029885B2 (nl) |
| EP (1) | EP0988393B1 (nl) |
| KR (1) | KR100508290B1 (nl) |
| CN (1) | CN1115417C (nl) |
| AT (1) | ATE319849T1 (nl) |
| AU (1) | AU7677798A (nl) |
| BR (1) | BR9810020A (nl) |
| ES (1) | ES2258298T3 (nl) |
| IN (1) | IN186863B (nl) |
| NL (1) | NL1006266C2 (nl) |
| TR (1) | TR200000201T2 (nl) |
| WO (1) | WO1998056946A1 (nl) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6538045B1 (en) * | 1999-12-23 | 2003-03-25 | Dsm N.V. | Optical fiber coating compositions containing secondary or tertiary amino silicone-containing additive |
| PL2723882T3 (pl) | 2011-06-23 | 2020-01-31 | Centrient Pharmaceuticals Netherlands B.V. | Sposób wytwarzania 3’-tiopodstawionych cefalosporyn z zastosowaniem acylazy penicyliny |
| CN103635586A (zh) | 2011-06-23 | 2014-03-12 | 中化帝斯曼制药有限公司荷兰公司 | 结晶头孢氧哌唑中间体、其制备方法及其制药用途 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2188608A5 (en) * | 1972-06-14 | 1974-01-18 | Aries Robert | Penicillins prepn by acylating 6-apa - in presence of catalytic enzymes using free acids |
| WO1992001061A1 (en) * | 1990-07-04 | 1992-01-23 | Novo Nordisk A/S | PROCESS FOR PREPARATION OF β-LACTAMS |
| EP0473008A2 (en) * | 1990-08-28 | 1992-03-04 | RECORDATI S.A. CHEMICAL and PHARMACEUTICAL COMPANY | Improved process for preparing penicillins and cephalosporins |
| WO1995003420A1 (en) * | 1993-07-19 | 1995-02-02 | Dsm N.V. | Process for the enzymatic preparation of a beta-lactam derivative |
| WO1996002663A1 (en) * | 1994-07-18 | 1996-02-01 | Gist-Brocades B.V. | PROCESS FOR PREPARATION OF β-LACTAMS AT CONSTANTLY HIGH CONCENTRATION OF REACTANTS |
| WO1996030376A1 (en) * | 1995-03-31 | 1996-10-03 | Chemferm V.O.F. | Process for the recovery of ampicillin |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NL1007076C2 (nl) | 1997-09-19 | 1999-03-22 | Dsm Nv | Werkwijze voor de winning van een ß-lactam antibioticum. |
| NL1007077C2 (nl) | 1997-09-19 | 1999-03-22 | Dsm Nv | Werkwijze voor de winning van een ß-lactam antibioticum. |
| NL1007302C2 (nl) | 1997-10-17 | 1999-04-20 | Dsm Nv | Werkwijze voor de bereiding van een ß-lactam antibioticum. |
-
1997
- 1997-06-10 NL NL1006266A patent/NL1006266C2/nl not_active IP Right Cessation
-
1998
- 1998-05-25 BR BR9810020-3A patent/BR9810020A/pt not_active Application Discontinuation
- 1998-05-25 ES ES98924672T patent/ES2258298T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1998-05-25 EP EP98924672A patent/EP0988393B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1998-05-25 WO PCT/NL1998/000295 patent/WO1998056946A1/en not_active Ceased
- 1998-05-25 AU AU76777/98A patent/AU7677798A/en not_active Abandoned
- 1998-05-25 KR KR10-1999-7011645A patent/KR100508290B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 1998-05-25 AT AT98924672T patent/ATE319849T1/de active
- 1998-05-25 CN CN98807876A patent/CN1115417C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1998-05-25 TR TR2000/00201T patent/TR200000201T2/xx unknown
- 1998-06-05 IN IN1224MA1998 patent/IN186863B/en unknown
-
1999
- 1999-12-10 US US09/457,765 patent/US7029885B2/en not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2188608A5 (en) * | 1972-06-14 | 1974-01-18 | Aries Robert | Penicillins prepn by acylating 6-apa - in presence of catalytic enzymes using free acids |
| WO1992001061A1 (en) * | 1990-07-04 | 1992-01-23 | Novo Nordisk A/S | PROCESS FOR PREPARATION OF β-LACTAMS |
| EP0473008A2 (en) * | 1990-08-28 | 1992-03-04 | RECORDATI S.A. CHEMICAL and PHARMACEUTICAL COMPANY | Improved process for preparing penicillins and cephalosporins |
| WO1995003420A1 (en) * | 1993-07-19 | 1995-02-02 | Dsm N.V. | Process for the enzymatic preparation of a beta-lactam derivative |
| WO1996002663A1 (en) * | 1994-07-18 | 1996-02-01 | Gist-Brocades B.V. | PROCESS FOR PREPARATION OF β-LACTAMS AT CONSTANTLY HIGH CONCENTRATION OF REACTANTS |
| WO1996030376A1 (en) * | 1995-03-31 | 1996-10-03 | Chemferm V.O.F. | Process for the recovery of ampicillin |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO1998056946A1 (en) | 1998-12-17 |
| KR100508290B1 (ko) | 2005-08-17 |
| EP0988393B1 (en) | 2006-03-08 |
| TR200000201T2 (tr) | 2000-06-21 |
| ES2258298T3 (es) | 2006-08-16 |
| IN186863B (nl) | 2001-11-24 |
| CN1265706A (zh) | 2000-09-06 |
| US7029885B2 (en) | 2006-04-18 |
| AU7677798A (en) | 1998-12-30 |
| KR20010013635A (ko) | 2001-02-26 |
| BR9810020A (pt) | 2000-09-19 |
| EP0988393A1 (en) | 2000-03-29 |
| US20020009769A1 (en) | 2002-01-24 |
| CN1115417C (zh) | 2003-07-23 |
| ATE319849T1 (de) | 2006-03-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA2086250C (en) | Process for preparation of beta-lactams | |
| EP0771357B1 (en) | PROCESS FOR PREPARATION OF $g(b)-LACTAMS AT CONSTANTLY HIGH CONCENTRATION OF REACTANTS | |
| EP2173892B1 (en) | Process for the preparation of penicillin or cephalosporin antibiotics | |
| NL1007302C2 (nl) | Werkwijze voor de bereiding van een ß-lactam antibioticum. | |
| NL1006266C2 (nl) | Werkwijze voor de bereiding van ampicilline. | |
| WO1999015531A1 (nl) | Process for recovery of a ss-lactam antibiotic | |
| KR20010043038A (ko) | β-락탐 항생제의 결정화 방법 | |
| KR100449193B1 (ko) | 효소억제제의존재하에서의β-락탐항생제의효소적합성방법 | |
| NL1007828C2 (nl) | Complexen van beta-lactam antibiotica en 1-naftol. | |
| NL1010506C2 (nl) | Werkwijze voor de bereiding van bêta-lactam antibiotica. | |
| WO1999015532A1 (nl) | PROCESS FOR RECOVERY OF A β-LACTAM ANTIBIOTIC | |
| NL1006267C2 (nl) | Werkwijze voor het afscheiden van een vaste stof. | |
| NL1007827C2 (nl) | Complexen van beta-lactam antibiotica. | |
| MXPA00003769A (en) | PROCESS FOR THE PREPARATION OF A&bgr;-LACTAM ANTIBIOTIC | |
| WO1998056945A1 (en) | PROCESS FOR ENZYMATICALLY PREPARING A β-LACTAM ANTIBIOTIC AND THIS ANTIBIOTIC | |
| CN101659977B (zh) | 一种酶催化一锅法合成青霉素类抗生素的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD2B | A search report has been drawn up | ||
| VD1 | Lapsed due to non-payment of the annual fee |
Effective date: 20020101 |