MXPA06010610A

MXPA06010610A - [hidrocloruro de [4-(5-aminometil -2-fluoro -fenil)-piperidin -1-il]-(4-bromo -3-metil -5-propoxi- tiofen-2-il)- metanina como un inhibidor de la triptasa de mastocitos.

Info

Publication number: MXPA06010610A
Application number: MXPA06010610A
Authority: MX
Inventors: Larry Davis; Adam W Sledeski; Mark Czekaj; Zhongli Gao; Julian Levell; El-Bdaoui Haddad
Original assignee: Aventis Pharma Inc
Priority date: 2004-03-26
Filing date: 2005-03-24
Publication date: 2006-12-15
Also published as: UY28821A1; PA8627601A1; DOP2005000039A; UA83738C2; IL178031A0; PE20060084A1; TNSN06278A1; AU2005230934A1; ZA200607752B; CR8603A; KR20060130682A; BRPI0509245A; TW200602035A; RU2006137717A; ECSP066878A; US20070142435A1; CN1956978A; WO2005097780A1; EP1737848A1; AR048336A1

Abstract

La presente invencion incluye el compuesto de formula I: (ver formula I) o un profarmaco, farmaceuticamente aceptable o solvato de dicho compuesto; ademas, la presente invencion se refiere a una composicion farmaceutica que comprende una cantidad farmaceuticamente eficaz del compuesto de formula I, y un vehiculo farmaceuticamente aceptable; ademas, la presente invencion se refiere al uso de un compuesto de formula I como inhibidor de triptasa, que comprende introducir el compuesto en una composicion que comprende triptasa; ademas, la presente invencion se refiere al uso de un compuesto de formula I parta tratar a un paciente que padece o propenso a padecer una afeccion fisiologica que necesita la mejora de un inhibidor de triptasa que comprende administrar al paciente una cantidad terapeuticamente eficaz del compuesto de la reivindicacion 1; la presente invencion tambien se refiere a la preparacion de un compuesto de formula I.

Description

cual produce una constricción de los bronquiolos. La triptasa se almacena en los gránulos secretores de los mastocitos y es la proteasa secretora principal de los mastocitos humanos. La triptasa se ha implicado en diversos procesos biológicos, incluyendo la degradación de neuropéptidos de vasodilatación y broncorelajación (Caughey, et al., J. Pharmacol. Exp. Ther., 1988, 244, páginas 133-137; Franconi, et al., J. Pharmacol. Exp. Ther., 1988, 248, páginas 947-951 ; y Tam, et al., Am. J. Respir. Cell Mol. Biol., 1990, 3, páginas 27-32) y la modulación de la respuesta bronquial a la histamina (Sekizawa, et al., J. Clin. Invest, 1989, 83, páginas 175-179). Como resultado, los inhibidores de triptasa pueden ser útiles como agentes antiinflamatorios (K Rice, P.A. Sprengler, Current Opinión in Drug Discovery and Deveiopment, 1999, 2(5), páginas 463-474) particularmente en el tratamiento del asma crónica (M.Q. Zhang, H. Timmerman, Mediators Inflamm., 1997, 112, páginas 311-317), y también pueden ser útiles en el tratamiento o prevención de la rinitis alérgica (S. J. Wilson et al, Clin. Exp. Allergy, 1998, 28, páginas 220-227), enfermedad inflamatoria del intestino (S.C. Bischoff et al, Histopathology, 1996, 28, páginas 1-13), psoriasis (A. Naukkarinen et al, Arch. Dermatol. Res., 1993, 285, páginas 341-346), conjuntivitis (A.A.Irani et al, J. Allergy Clin. Immunol., 1990, 86, páginas 34-40), dermatitis atópica (A. Jarvikallio et al, Br. J. Dermatol., 1997, 136, páginas 871-877), artritis reumatoide (L.C Tetlow et al,-Ann. Rheum. Dis., 1998, 54, paginas 549-555), osteoartritis (M.G. Buckley et al, J. Pathol., 1998, 186, páginas 67-74), artritis gotosa, espondilitis reumatoide, y enfermedades de la destrucción del cartílago de las articulaciones. Además, se ha demostrado que la triptasa es un potente mitógeno para fibroblastos, lo que sugiere su implicación en la fibrosis pulmonar en el asma y en enfermedades pulmonares intersticiales (Ruoss et al., J. Clin. Invest, 1991 , 88, páginas 493-499). Por lo tanto, los inhibidores de triptasa pueden ser útiles en el tratamiento o prevención de afecciones fibróticas (J.A.Cairns y A.F. Walls, J. Clin. Invest, 1997, 99, páginas 1313-1321) por ejemplo, fibrosis, esclerodermia, fibrosis pulmonar, cirrosis hepática, fibrosis de miocardio, neurofibromas y cicatrices hipertróficas. Además, los inhibidores de triptasa pueden ser útiles en el tratamiento o prevención del infarto de miocardio, apoplejía, angina y otras consecuencias de la ruptura de placas ateroscleróticas (M. Jeziorska et al, J. Pathol., 1997, 182, páginas 115-122). También se ha descubierto que la triptasa activa la prostomelisina que a su vez activa la colagenasa, iniciándose de esta manera la destrucción del cartílago y el tejido conectivo periodontal, respectivamente. Por lo tanto, los inhibidores de triptasa podrían ser útiles en el tratamiento o prevención de la artritis, enfermedad periodontal, retinopaíía diabética y crecimiento tumoral (W.J. Beil et al, Exp. Hematol., (1998) 26, páginas 158-169). Además, los inhibidores de triptasa pueden ser útiles en el tratamiento de la anafilaxis (L.B. Schwarz et al, J. Clin. Invest, 1995, 96, páginas 2702-2710), esclerosis múltiple (M. Steinhoff et al, Nat. ed. (N. Y.), 2000, 6(2), páginas 151-158), úlceras pépticas e infecciones por virus sincitiales. En la solicitud de Estados Unidos en trámite junto con la presente, con N° de serie 09/843.126 se presentan arilmetilaminas sustituidas, representadas como los compuestos de fórmula (A), su preparación, composiciones farmacéuticas que contienen estos compuestos y su uso farmacéutico en el tratamiento de estados de enfermedad que pueden modularse por la inhibición de triptasa. Dentro de la descripción genérica de los compuestos de fórmula (A) de la solicitud de patentes de Estados Unidos con el N° de serie 09/843.126, se incluye el compuesto de la presente invención, de fórmula I. Sin embargo, el compuesto de fórmula I no se describe específicamente en la solicitud de Estados Unidos con el N° de serie 09/843.126.

Por consiguiente, lo que se necesita es un compuesto nuevo y útil que tenga propiedades farmacéuticas particularmente valiosas, en su capacidad para inhibir la triptasa. Tal compuesto debe tener utilidad para tratar a un paciente que padece afecciones que pueden mejorar por medio de la administración de un inhibidor de triptasa, por ejemplo, afecciones inflamatorias mediadas por mastocitos, inflamación y enfermedades o trastornos relacionados con la degradación de neuropéptidos vasodilatadores y broncorelajantes.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN La presente invención incluye el compuesto de fórmula I: o un profármaco, farmacéuticamente aceptable o solvato de dicho compuesto. Además, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende una cantidad farmacéuticamente eficaz del compuesto de fórmula I, y un vehículo farmacéuticamente aceptable. Además, la presente invención se refiere al uso de un compuesto de fórmula I como inhibidor de triptasa, que comprende introducir el compuesto en una composición que comprende triptasa. Además, la presente invención se refiere al uso de un compuesto de fórmula I para tratar a un paciente que padece o propenso a padecer una afección fisiológica que necesita la mejora de un inhibidor de triptasa que comprende administrar al paciente una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto de la reivindicación 1. La presente invención también se refiere a la preparación de un compuesto de fórmula I.

Breve descripción de los dibujos Los aspectos, características y ventajas de la presente invención se entenderán mejor tras las siguientes descripciones detalladas consideradas junto con las figuras adjuntas, proporcionándose todas ellas sólo a modo de ilustración y sin limitar la presente invención, en las que: Figura I: Niveles de compuesto I en plasma, fluido de lavado broncoalveolar (BAL) y pulmón, medidos dos horas después de la dosificación del compuesto I a 1 mg/kg, p.o. Los valores son media ± SE de 6-8 animales. Figura II: Niveles de compuesto I en plasma y en pulmón medidos 24 horas después de la dosificación. Los valores son la media ± SE de 3-4 animales.

DESCRIPCIÓN DETALLADA Definiciones Como se ha usado anteriormente y a lo largo de la presente memoria descriptiva y la reivindicaciones adjuntas, se entenderá que las siguientes expresiones, a menos que se indique otra cosa, tienen los siguientes significados: Como se usa en este documento, se entiende que la expresión "compuesto de la presente invención", y expresiones equivalentes, incluyen el compuesto de fórmula I, como se ha descrito anteriormente en este documento, incluyendo la expresión el profármaco, la sal farmacéuticamente aceptable y el solvato, por ejemplo el hidrato. De forma similar, se entiende que la referencia a los intermedios, se reivindiquen o no se reivindiquen, incluye las sales y solvatos cuando lo permita el contexto. Por claridad, cuando el contexto lo permite, algunas veces ciertos casos particulares están indicados en el texto, pero estos casos son puramente ilustrativos y no pretenden excluir otros casos cuando el contexto lo permite. Como se usa en este documento, el término "tratamiento" o "tratar" incluye la terapia profiláctica así como el tratamiento de una afección establecida. "Paciente" significa un ser humano u otro mamífero. "Cantidad eficaz" pretende describir una cantidad de un compuesto eficaz para producir el efecto terapéutico deseado. "Profármaco" significa un compuesto que es adecuado para administrarse a un paciente sin toxicidad indebida, irritación, respuesta alérgica y similares, y se puede convertir in vivo por medios metabólicos (por ejemplo por hidrólisis) en el compuesto de la presente invención. En T. Higuchi y V. Stella, Pro-druqs as Novel Deliverv Systems, Vol. 14 de las A. C. S. Symposium Series, y en Edward B. Roche, ed., Bioreversible Carriers in Drug Desiqn, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987, se proporciona una discusión minuciosa de profármacos. Modalidades particulares o preferidas Además, la presente invención se refiere al uso del compuesto de fórmula I para tratar a un paciente que padece una afección fisiológica que puede mejorarse por medio de la administración al paciente de una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto de fórmula I. Las modalidades particulares de afecciones fisiológicas que pueden tratarse con el compuesto de la presente invención incluyen, pero por supuesto sin limitación, enfermedades inflamatorias, por ejemplo, inflamación de las articulaciones, artritis, artritis reumatoide, espondilitis reumatoide, artritis gotosa, artritis traumática, artritis por rubéola, artritis psoriática, y otras enfermedades inflamatorias crónicas de las articulaciones. Otras modalidades de afecciones fisiológicas qüe pueden tratarse por la presente invención incluyen afecciones fisiológicas tales como enfermedad pulmonar obstructiva crónica ( COPD), exacerbaciones de COPD, destrucción del cartílago de las articulaciones, conjuntivitis ocular, conjuntivitis vernal, enfermedad inflamatoria del intestino, asma, rinitis alérgica, enfermedades pulmonares intersticiales, fibrosis, esclerodermia, fibrosis pulmonar, cirrosis hepática, fibrosis de miocardio, neurofibromas, cicatrices hipertróficas, diversas afecciones dermatológicas, por ejemplo, dermatitis atópica y psoriasis, infarto de miocardio, apoplejía, angina y otras consecuencias de la ruptura de placas ateroscleróticas, así como enfermedad periodontal, retinopatía diabética, crecimiento tumoral, anafilaxis, esclerosis múltiple, úlceras pépticas e infecciones por virus sincitiales. En una modalidad particular, la presente invención se refiere al uso de un compuesto de fórmula I para tratar a un paciente que padece asma, que comprende administrar al paciente una cantidad fisiológicamente eficaz del compuesto. En otra modalidad particular, la presente invención se refiere al uso de un compuesto de fórmula I para tratar a un paciente que padece COPD, que comprende administrar al paciente una cantidad fisiológicamente eficaz del compuesto. En otra modalidad particular, la presente invención se refiere al uso de un compuesto de fórmula I para tratar a un paciente que padece exacerbaciones de COPD, que comprende administrar al paciente una cantidad fisiológicamente eficaz del compuesto. En otra modalidad particular, la presente invención se refiere al uso de un compuesto de fórmula I para tratar a un paciente que padece rinitis alérgica, que comprende administrar al paciente una cantidad fisiológicamente eficaz del compuesto. En otra modalidad particular, la presente invención se refiere al uso de un compuesto de fórmula I para tratar a un paciente que padece inflamación de las articulaciones, que comprende administrar al paciente una cantidad fisiológicamente eficaz del compuesto. En otra modalidad particular, la presente invención se refiere al uso de un compuesto de fórmula I para tratar a un paciente que padece enfermedad inflamatoria del intestino, que comprende administrar al paciente una cantidad fisiológicamente eficaz del compuesto. Además, la presente invención incluye una composición farmacéutica que comprende el compuesto de fórmula I, un segundo compuesto seleccionado entre el grupo que consiste en un agonista beta adrenérgico, un anticolinérgico, un corticosteroide anti-ínflamatorio, y un agente antiinflamatorio, y un vehículo farmacéuticamente aceptable de los mismos. En tal composición, el . compuesto de fórmula I y el segundo compuesto están presentes en cantidades que proporcionan una actividad terapéuticamente eficaz, es decir un efecto aditivo o sinérgico. Las enfermedades o trastornos inflamatorios particulares que pueden tratarse con tal composición farmacéutica incluyen, pero sin limitación, asma. Además la presente invención se refiere a un método para tratar a un paciente que padece un trastorno inflamatorio, que comprende administrar al paciente el compuesto de fórmula I y un segundo compuesto seleccionado entre el grupo que consiste en un agonista beta adrenérgico, un anticolinérgico, un corticosteroide antiinflamatorio y un agente antiinflamatorio. En tal método, el compuesto de fórmula I y el segundo compuesto están presentes en cantidades que proporcionan una actividad terapéuticamente eficaz, es decir un efecto aditivo o sinérgico. En tal método de la presente invención, el compuesto de la presente invención puede administrarse al paciente antes que un segundo compuesto, el segundo compuesto puede administrarse al paciente antes que el compuesto de la presente invención, o el compuesto de la presente invención y el segundo compuesto pueden administrarse conjuntamente. Más adelante se describen ejemplos particulares de agonistas adrenérgicos, anticolinérgicos, corticosteroides antiinflamatorios y agentes antiinflamatorios que tienen aplicación de acuerdo con el método. Composiciones farmacéuticas Como se ha explicado anteriormente, el compuesto de la presente invención presenta actividad farmacológica útil y, por consiguiente, puede incorporarse en una composición farmacéutica y usarse en el tratamiento de pacientes que padecen ciertos trastornos médicos. De esta manera, la presente invención proporciona, de acuerdo con un aspecto adicional, composiciones farmacéuticas que comprenden el compuesto de la invención y un vehículo farmacéuticamente aceptable del mismo. Como se usa en este documento, la expresión "farmacéuticamente aceptable" preferiblemente tiene significado aprobado por una agencia reguladora gubernamental, en particular el gobierno federal o un gobierno estatal, o indicado en la farmacopea de Estados Unidos u otra farmacopea reconocida generalmente para uso en animales, y más particularmente en seres humanos. En "Remington's Pharmaceutical Sciences" dé E.W. Martin se describen vehículos farmacéuticos adecuados. Las composiciones farmacéuticas de acuerdo con la presente invención pueden prepararse de acuerdo con los métodos habituales usando uno o más adyuvantes o excipientes farmacéuticamente aceptables. Los adyuvantes comprenden, entre otros diluyentes, cargas, aglutinantes, disgregantes, deslizantes, lubricantes, tensioactivos, medios. acuosos estériles y diversos disolventes orgánicos no tóxicos. Las composiciones pueden presentarse en forma de comprimidos, cápsulas, pildoras, formulaciones de liberación sostenida, gránulos, polvos, soluciones o suspensiones acuosas, soluciones inyectables, elixires o jarabes, y pueden contener uno o más agentes seleccionados entre el grupo que comprende edulcorantes, aromatizantes, colorantes o estabilizadores para obtener preparaciones farmacéuticamente aceptables. La elección del vehículo y el contenido de la sustancia activa en el vehículo generalmente se determinan de acuerdo con la solubilidad y propiedades químicas del compuesto activo, el modo particular de administración y las disposiciones a tener en cuenta en la práctica farmacéutica. Por ejemplo, para preparar comprimidos pueden usarse excipientes tales como lactosa, celulosa microcristalina, almidón pregelatinizado, almidón no modificado, celulosa microcristalina silicificada, manitol, sorbitol, xilitol, dextratos, fructosa, citrato sódico, carbonato cálcico, fosfato dicálcico dihidrato, fosfato dicálcico anhidro, sulfato cálcico, junto con aglutinantes tales como polivinilpirrolidona, hidroxipropilmetil celulosa, etil celulosa, hidroxietil celulosa, metil celulosa, carboximetíl celulosa sódica, almidón pregelatinizado, almidón, polietilenglicoles, poli(óxido de etileno), policarbofilos, gelatina y goma arábiga, y agentes disgregantes tales como croscarmelosa sódica, almidón glicolato sódico, crospovidona, almidón, celulosa microcristalina, ácidos algínicos y ciertos silicatos complejos junto con lubricantes tales como estearato de magnesio, estearato cálcico, ácido esteárico, aceite vegetal hidrogenado, aceite mineral, polietilenglicoles, ésteres de glicerilo de ácidos grasos, laurilsulfato sódico y deslizantes tales como dióxido de silicio, talco, almidón, junto con algunos agentes humectantes adecuados tales como laurilsulfato sódico, ésteres de sorbitán, ésteres de ácidos grasos o de ácido graso de polioxietiieno, poloxámero, éter de polioxietiieno, docusato sódico, aceite de ricino polietoxilado, y cloruro de benzalconio. Para preparar una cápsula, es ventajoso usar cargas tales como lactosa, celulosa microcristalina, almidón pregelatinizado, almidón no modificado, celulosa microcristalina silicificada sola o una mezcla de dos o más cargas, con y sin aglutinantes como se han descrito anteriormente junto con uno o más agentes humectantes adecuados, disgregantes, deslizantes, lubricantes, etc, como se ha indicado anteriormente. Cuando se usa suspensiones acuosas, pueden contener agentes emulsionantes o agentes que facilitan la suspensión. También pueden usarse diluentes tales como sacarosa, etanol, polietilenglicol, propilenglicol, glicerol y cloroformo o mezclas de los mismos. Tales vehículos farmacéuticamente aceptables también pueden ser agua estéril y aceites, incluyendo los de petróleo, de origen vegetal o sintético, tales como aceite de cacahuete, aceite de soja, aceite mineral, aceite de sésamo y similares. El agua es un vehículo preferido cuando la composición farmacéutica se administra por vía intravenosa. También pueden emplearse soluciones salinas y soluciones acuosas de dextrosa y glicerol como vehículos líquidos, particularmente para soluciones inyectables. Los- excipientes farmacéuticos adecuados incluyen manitol, albúmina de suero humano (HSA), almidón, glucosa, lactosa, sacarosa, gelatina, maita, arroz, harina, carbonato cálcico, gel de sílice, carbonato de magnesio, estearato de magnesio, estearato sódico, monoestearato de glicerol, talco, cloruro sódico, leche desnatada deshidratada, glicerol, propilenglicol, agua, etanol y similares. Estas composiciones pueden tomar la forma de soluciones, suspensiones, comprimidos, pildoras, cápsulas, polvos, formulaciones de liberación sostenida y similares. Naturalmente, una composición farmacéutica de la presente invención contendrá una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto activo junto con una cantidad adecuada de vehículo para proporcionar la forma para la administración apropiada al paciente. Cuando la inyección intravenosa es una muy eficaz de administración, pueden emplearse otros modos, tales como inyección, o administración oral, nasal o parenteral, que se describe más adelante. Métodos de Tratamiento El compuesto de fórmula I posee actividad de inhibición de la triptasa de acuerdo con ensayos descritos en la bibliografía y descritos más adelante en este documento, considerándose que los resultados de los ensayos se correlacionan con la actividad farmacológica en seres humanos y otros mamíferos. De esta manera, en una modalidad adicional, la presente invención se refiere al uso de la fórmula I o una composición que la comprende para tratar a un paciente que padece o propenso a padecer una afección que puede mejorar por medio de la administración de un inhibidor de triptasa. Por ejemplo, el compuesto de fórmula I es útil para tratar una enfermedad inflamatoria, por ejemplo, inflamación de las articulaciones, incluyendo artritis, artritis reumatoide y otros estados artríticos tales como espondilitis reumatoide, artritis gotosa, artritis traumática, artritis por rubéola, artritis psoriática, osteoartritis u otra enfermedad inflamatoria crónica de las articulaciones, o enfermedades de la destrucción del cartílago de las articulaciones, conjuntivitis ocular, conjuntivitis vernal, enfermedad inflamatoria del intestino, asma, rinitis alérgica, enfermedades pulmonares intersticiales, fibrosis, esclerodermia, fibrosis pulmonar, cirrosis hepática, fibrosis miocárdica, neurofibromas, cicatrices hipertróficas, diversas afecciones dermatológicas, por ejemplo, dermatitis atópicas y psoriasis, infarto de miocardio, apoplejía, angina, u otras consecuencias de la ruptura de. placas ateroscleróticas, así como enfermedad períodontal, retinopatía diabética, crecimiento tumoral, anafilaxis, esclerosis múltiple, úlceras pépticas o una infección producida por un virus sincitial. De acuerdo con otra característica de la invención, se proporciona un método para el tratamiento de un paciente humano o animal que padece o propenso a padecer afecciones que pueden mejorar por medio de la administración de un inhibidor de triptasa, por ejemplo, las afecciones descritas anteriormente en este documento, que comprende administrar al paciente una cantidad eficaz de compuesto de la invención o una composición que contiene un compuesto de la invención. Terapia de Combinación Como se ha explicado anteriormente, dependiendo de la enfermedad que se vaya a tratar en combinación con el compuesto de fórmula I pueden emplearse otros agentes farmacéuticamente activos. Por ejemplo, en el tratamiento del asma, pueden incluirse agonistas beta-adrenérgicos tales como albuterol, terbutalina, formoterol, fenoterol o prenalina, así como anticolinérgicos tales como bromuro de ipratropio, corticosteroides antiinflamatorios tales como dipropionato de beclometasona, triancinolona acetonida, flunisolida o dexametasona, y agentes anti-inflamatorios tales como cromoglicato sódico y nedocromil sódico. De esta manera, la presente invención incluye una composición farmacéutica que comprende el compuesto de fórmula I y un segundo compuesto seleccionado entre el grupo que consiste en un agonista beta adrenérgico, un anticolinérgico, un corticosteroide anti-inflamatorio y un agente anti-inflamatorio; y un vehículo farmacéuticamente aceptable para los mismos. En este documento se describen vehículo farmacéuticos particulares que tienen aplicaciones en esta composición farmacéutica. Además, ia presente invención incluye un método para tratar un paciente que padece asma, que comprende administrar al paciente el compuesto de la presente invención y un segundo compuesto seleccionado entre el grupo que consiste en un agonista beta adrenérgico, un anticolinérgico, un corticosteroide anti-inflamatorio y un agente anti- inflamatorio. En tal método de combinación, el compuesto de la presente invención puede administrarse antes de la administración del segundo compuesto, el compuesto de la presente invención puede administrarse después de la administración del segundo compuesto, o el compuesto de la presente invención y el segundo compuesto puede administrarse conjuntamente. Modos de Administración De acuerdo con la invención, el compuesto de fórmula I, o una composición farmacéutica que comprende el compuesto, puede introducirse por vía parenteral, transmucosa, por ejemplo, oral, nasal, pulmonar o rectal, o por vía transdérmica a un paciente. Administración Oral Para uso en este documento se contemplan formas de dosificación oral sólidas, que se describen en general en Remington's Pharmaceutical Sciences, 18a Ed.1990 (Mack Publishing Co. Easton PA 18042) en el capítulo 89, que se incorpora en este documento como referencia. Las formas de dosificación sólidas incluyen comprimidos, cápsulas, pildoras, trociscos o grageas, obleas o gránulos. Además, puede usarse la encapsulación liposomal o en proteinoides para formular las presentes composiciones (por ejemplo, como microesferas proteinoides presentadas en la Patente de Estados Unidos N° 4.925.673). Puede usarse encapsulación liposomal y los liposomas pueden modificarse con diversos polímeros {por ejemplo, .Patente de Estados Unidos N° 5.013.556). Marshall, K. en: Modern Pharmaceutics Editado por by G.S. Banker y C.T. Rhodes Capítulo 10, 1979, incorporado a este documento como referencia. En general, la formulación incluirá un compuesto de la presente invención e ingredientes inertes que permiten la protección frente al medio de estómago, y la liberación del material biológicamente activo, es decir, un compuesto de la presente invención, en el intestino. También se contemplan específicamente formas de dosificación oral del compuesto de la presente invención. Tal compuesto puede modificarse químicamente de forma que la administración oral sea más eficaz. Generalmente, la modificación química contemplada es la unión de al menos un resto a la propia molécula componente, donde dicho resto permite (a) la inhibición de la proteolisis; y (b) la absorción en la corriente sanguínea desde el estómago o el intestino. También se desea el aumento de la estabilidad global del compuesto de la presente invención y el aumento del tiempo de circulación en el cuerpo. Los ejemplos de tales restos incluyen: polietilenglicol, copolímeros de etilenglicol y propilenglicol, carboximetilceluiosa, dextrano, alcohol polivinílico, polivinilpirrolidona y poliprolina. Abuchowski y Davis, 1981 , "Soluble Polymer-Enzyme Adducts" en: Enzymes as Drugs, Hocenberg y Roberts, eds., Wiley-lnterscience, New York, NY, pág. 367-383; Newmark, et al., 1982, J. Appl. Biochem. 4:185-189. Otros polímeros que podría usarse son poli-1 ,3-dioxolano y poli-1 ,3,6-tioxocano. Para uso farmacéuticos, como se indicado anteriormente, se prefieren restos de polietilenglicol.

Para compuesto de la presente invención, la localización de liberación puede ser el estómago, el intestino delgado (el duodeno, el yeyuno o el íleo) o el intestino grueso. Un especialista en la técnica dispone de formulaciones que no se disolverán en el estómago, liberando el material en el duodeno o en cualquier parte del intestino. Preferiblemente, la liberación, evitará los efectos perjudiciales del medio del estómago, bien por medio de la protección del compuesto de la presente invención o por medio de la liberación del compuesto más allá del medio del estómago, tal como en el intestino. Para asegurar una resistencia gástrica completa, es esencial un recubrimiento impermeable a un valor de pH de al menos 5,0. Son ejemplos de los ingredientes inertes más comunes que se usan como recubrimientos entéricos acetato trimelitato de celulosa (CAT), ftalato de hidroxipropilmetil celulosa (HPMCP), HPMCP 50, HP CP 55, acetato ftalato de polivinilo (PVAP), Eudragit L30D, Aquateric, acetato ftalato de celulosa (CAP), Eudragit L, Eudragit S, y goma laca. Estos recubrimientos pueden usarse como películas mixtas. También puede usarse un recubrimiento o mezcla de recubrimiento en comprimidos, que no están destinados para la protección frente al estómago. Este puede incluir recubrimientos de azúcar, o recubrimientos que hacen que el comprimido sea más fácil de tragar. Las cápsulas pueden constar de una cubierta dura (tal como gelatina) para suministrar el agente terapéutico seco, es decir en forma de polvo; en el caso de la formas líquidas, puede usarse una cubierta de gelatina blanda. El material de la cubierta de obleas podría ser almidón espeso u otro papel comestible. En el caso de las pildoras, grageas, comprimidos moldeados o triturados de comprimidos, pueden usarse técnicas de amasado en húmedo. El agente terapéutico puede incluirse en la formulación como multiparticulados finos en forma de gránulos o bolitas con un tamaño de partículas de aproximadamente 1 mm. La formulación del material para la administración en cápsulas también podría ser como un polvo, tabletas ligeramente comprimidas o incluso como comprimidos. El agente terapéutico podría prepararse por compresión. Pueden incluirse agentes colorantes y aromatizantes. Por ejemplo, el compuesto de la presente invención puede formularse (tal como por medio de encapsulación en liposomas o microesferas) y después introducirse en un producto comestible, tal como una bebida refrigerada que contiene agentes colorantes y aromatizantes. Se puede diluir o aumentar el volumen del agente terapéutico con un material inerte. Estos diluyentes podrían incluir carbohidratos, especialmente manitol, a-lactosa, lactosa anhidra, celulosa, sacarosa, dextranos modificados y almidón. También pueden usarse ciertas sales inorgánicas como cargas, incluyendo trifosfato cálcico, carbonato de magnesio y cloruro sódico. Algunos diluyentes disponibles en el mercado son Fast-Flo, Emdex, STA-Rx 1500, Emcompress y Avicell. En la formulación de los agentes terapéuticos en una forma de dosificación sólida pueden incluirse disgregantes. Los materiales usados como disgregantes incluyen, pero sin limitación almidón, incluyendo el disgregante comercial basado en almidón, Explotab. Pueden usarse almidón glicolato sódico, Amberlite, carboximetil celulosa sódica, ultramilopectina, alginato sódico, gelatina, piel de naranja, carboximetil celulosa ácida, esponja natural y bentonita. Otra forma de los disgregantes son las resinas de intercambio catiónico insolubles. Como disgregantes y como aglutinantes puede usarse gomas en polvo y éstas pueden incluir gomas en polvo tales como agar, Karaya o tragacanto. También son útiles como disgregantes el ácido algínico y su sal de sodio. Puede usarse aglutinantes para mantener unido el agente terapéutico para formar un comprimido duro e incluyen materiales procedentes de productos naturales tales como goma arábiga, tragacanto, almidón y gelatina. Otros incluyen metil celulosa ( C), etil celulosa (EC) y carboximetil celulosa (CMC). En soluciones alcohólicas para granular el agente terapéutico puede usarse tanto polivinilpirrolidona (PVP) como hidroxipropilmetil celulosa (HPMC). En las formulaciones del agente terapéutico se puede incluir un agente contra la fricción para impedir la adherencia durante el proceso de formulación. Pueden usarse lubricantes como una capa entre el agente terapéutico y la pared de la matriz, y estos pueden incluir, pero sin limitación; ácido esteárico incluyendo sus sales de calcio y de magnesio, polietetrafluoroetileno (PTFE), parafina líquida, aceites vegetales y ceras.

También pueden usarse lubricantes solubles tales como laurilsuífato sódico, laurilsulfato de magnesio, polietilenglicol de diversos pesos moleculares, Carbowax 4000 y 6000. Podían añadirse deslizantes que mejoren las propiedades de fluidez del fármaco durante la formulación y que ayuden a la redisposición durante la compresión. Los deslizantes pueden incluir almidón, talco, sílice pirogénica y silicoaluminato hidratado. Para ayudar a la disolución del agente terapéutico en el medio acuoso, podría añadirse un tensioactivo como agente humectante. Los tensioactivos pueden incluir detergentes aniónicos tales como laurilsulfato sódico, dioctil sulfosuccinato sódico y dioctil sulfonato sódico. Podría usarse detergentes catiónicos e incluirían cloruro de benzalconio o cloruro de bencetonio. La lista de detergentes no iónicos potenciales que podrían incluirse en la formulación como tensioactivos es lauromacrogol 400, estearato de polioxilo 40, polioxietileno-aceite de ricino hidrogenado 10, 50 y 60, monoestearato de glicerol, polisorbato 40, 60, 65 y 80, éster de ácido graso de sacarosa, metilcelulosa y carboximetil celulosa. Estos tensioactivos podrían estar presentes en la formulación de un compuesto de la presente invención solos o como una mezcla en diferentes relaciones. Son aditivos que potencialmente aumentan la absorción del compuesto de la presente invención, por ejemplo, los ácidos grasos ácido oleico, ácido linoleico y ácido linolénico. Puede ser deseable una formulación oral de liberación controlada. El fármaco podría incorporarse en un matriz inerte que permita la liberación por mecanismos de difusión o infiltración, por ejemplo gomas. En la formulación también pueden incorporarse matrices de degeneración lenta. Algunos recubrimientos entéricos también tienen un efecto de liberación retardada. Otra forma de liberación controlada de este agente terapéutico es por medio de un método basado en el sistema terapéutico Oros (Alza Corp.), es decir, el fármaco se encierra en una membrana semipermeable que permite la entrada de agua y expulsa el fármaco a través de una sola abertura pequeña debido a efectos osmóticos. Para la formulación pueden usarse otros recubrimientos. Estos incluyen una diversidad de azúcares que podrían aplicarse en una bandeja de recubrimiento. El agente terapéutico también podría proporcionarse en un comprimido recubierto con película y los materiales usados en este caso se dividen en dos grupos. Los primeros son los materiales no entéricos e incluyen metilcelulosa, etilcelulosa, hidroxietil celulosa, metilhidroxietil celulosa, hidroxipropil celulosa, hidroxipropil-metil celulosa, carboxi-metil celulosa sódica, povidona y los polietilenglicoles. El segundo grupo consta de los materiales entéricos que son comúnmente ásteres de ácido ftálico. Podría usarse una mezcla de materiales para proporcionar el recubrimiento de película óptimo. El recubrimiento de película puede realizarse en un recubridor de bandeja o un lecho fluidizado o por medio de recubrimiento por comprensión.

Administración Pulmonar En el presente documento también se contempla la administración pulmonar del compuesto de la presente invención, sólo o en una composición farmacéutica. El compuesto se administra a los pulmones de un mamífero mientras se inhala y atraviesa el revestimiento del epitelio pulmonar hasta llegar a la corriente sanguínea. Otros informes de esto incluyen Adjei et al., 1990, Pharmaceutical Research, 7:565-569; Adjei et al., 1990, International Journal of Pharmaceutics, 63:135-144 (acetato de leuprolida); Braquet et al., 1989, Journal of Cardiovascular Pharmacology, 13(suppl. 5):14£-146 (endotelina-1 ); Hubbard et al., 1989, Annals of Interna! Medicine, Vol. III, pp. 206-212 (a1- antitripsina); Smith et al., 1989, J.CIin. Invest. 84:1145-1146 (a-1-proteinasa); Oswein et al., 1990, "Aerosolization of Proteins", Proceedings of Symposium on Respiratory Drug Delivery II, Keystone, Colorado, Marzo, (hormona de crecimiento humana recombinante); Debs et al., 1988, J. Innmunol. 140:3482-3488 (interferón- factor de necrosis tumoral alfa) y Platz et al., Patente de Estados Unidos N° 5,284,656 (factor estimulador de colonias de granulocitos). En la Patente de Estados Unidos N° 5.451.569, expedida del 19 de septiembre de 1995 a Wong et al se describe un método y composición para la administración pulmonar de fármacos para conseguir un efecto sistémico. Para uso en la práctica de esta invención se contempla una amplia serie de dispositivos mecánicos diseñados para la administración pulmonar de productos terapéuticos, incluyendo pero sin limitación nebulizadores, inhaladores de dosis medidas, e inhaladores de polvo, con los que estarán familiarizados los especialistas en la técnica. Algunos ejemplos específicos de dispositivos disponibles en el mercado adecuados para la práctica de esta invención son el nebulizador Ultravent fabricado por Mallinckrodt, Inc., St. Louis, Missouri; el nebulizador Acorn II, fabricado por Marquest Medical Products, Englewood, Colorado; el inhalador de dosis medidas Ventolín fabricado por Glaxo Inc., Research Triangle Park, North Carolina; y el inhalador de polvo Spinhaler, fabricado por Fisons Corp., Bedford, Massachusetts, por nombrar algunos. Todos estos dispositivos requieren el uso de formulaciones adecuadas para la distribución del compuesto de la presente invención. Típicamente, cada formulación es específica para el tipo de dispositivo empleado y puede implicar el uso de un material propelente apropiado, además de los diluyentes, adyuvantes y/o vehículos habituales útiles en terapia. Además, se contempla el uso de liposomas, microcápsulas o microsesferas, complejos de inclusión u otros tipos de vehículos. Un compuesto modificado químicamente de la presente invención también puede prepararse en diferentes formulaciones dependiendo del tipo de modificación química o del tipo de dispositivo empleado. Las formulaciones adecuadas para uso con un nebulizador, en chorro o ultrasónico, típicamente comprenderán el compuesto de la presente invención disuelto en agua a una concentración de aproximadamente 0,1 a 25 mg de compuesto por mi de solución. La formulación también puede incluir un tampón y un azúcar sencillo {por ejemplo para la estabilización y regulación de la presión osmótica). La formulación del nebulizador también puede contener un tensioactivo para reducir o prevenir la agregación inducida en la superficie del compuesto producida por la atomización de la solución para formar, el aerosol. Las formulaciones para uso con un dispositivo inhalador de dosis medida generalmente comprenderán un polvo finamente dividido que contiene el compuesto de la invención suspendido en un propelente con la ayuda de un tensioactivo. El propelente puede ser cualquier material convencional empleado para este fin, tal como un clorofluorocarburo, hidroclorofluorocarburo, hidrofluorocarburo o hidrocarburo, incluyendo triclorofluorometano, diclorodifluorometano, diclorotetrafluoroetanol y 1 ,1 ,1 ,2-tetrafluoroetano, o combinaciones de los mismos. Los tensioactivos adecuados incluyen trioleato de sorbitán y lecitina de soja. También puede ser útil como tensioactivo el ácido oleico. Las formulaciones para distribuir desde un dispositivo inhalador de polvo comprenderán un polvo seco finamente dividido que contiene el compuesto de la invención, y también pueden incluir un agente para proporcionar volumen, tal como lactosa, sorbitol, sacarosa o manitol en cantidades que facilitan la dispersión del polvo desde el dispositivo, por ejemplo, de 50 a 90% en peso de las formulación. Lo más ventajoso es que el compuesto de la presente invención se prepare en forma particulada con un tamaño medio de partículas menor de 10 mm (o micrómetros), siendo el íamaño más preferiblemente de 0,5 a 5 mm, para proporcionar una administración eficaz en un sitio distal del pulmón. Administración Nasal También se contempla la administración nasal de compuesto de la presente invención. La administración nasal permite el paso del compuesto a la corriente sanguínea directamente después de administrar el producto terapéutico en la nariz, sin la necesidad de la deposición del producto en el pulmón. Las formulaciones para administración nasal incluyen las que tienen dextrano o ciclodextrano. Administración Transdérmica En la técnica se conocen diversos y numerosos métodos para la administración transdérmica de un fármaco, por ejemplo, a través de un parche transdérmico, y tienen aplicaciones en la presente invención. Se describen parches transdérmicos, por ejemplo, en la Patente de Estados Unidos N° 5.407.713, expedida el 18 de abril de 1995 a Rolando et al.; Patente de Estados Unidos N° 5.352.456, expedida el 4 de octubre de 1994 a Fallón et al.; Patente de Estados Unidos N° 5.332.213 expedida el 9 de agosto de 1994 a D'Angelo et al.; Patente de Estados Unidos N° 5.336.168, expedida el 9 de agosto de 1994 a Sibalis; Patente de Estados Unidos N° 5.290.561 , expedida el 1 de marzo de 1994 a Farhadieh et al.; Patente de Estados Unidos N° 5.254.346, expedida el 19 de octubre de 993 a Tucker et al.; Patente de Estados Unidos N°. 5.164.189, expedida el 17 de noviembre de 1992 a Berger et al.; Patente de Estados Unidos N° 5.163.899, expedida el 17 de noviembre de 1992 a Sibalis; Patente de Estados Unidos N° 5.088.977 y 5.087.240, ambas expedidas el 18 de febrero de 1992 a Sibalis; Patente de Estados Unidos N° 5.008. 10, expedida el 16 de abril de 991 a Benecke et al.; y Patente de Estados Unidos N° 4.921.475, expedida el 1 de mayo de 1990 a Sibalis, incorporándose en este documento como referencia en su totalidad las descripciones de cada una de estas patentes. Se apreciará fácilmente que la ruta de administración transdérmica puede mejorarse por medio del uso de un potenciador de la penetración dérmica, por ejemplo, tales como los potenciadores descritos en la Patente de Estados Unidos N° 5.164.189 (supra), Patente de Estados Unidos N° 5.008.1 10 (supra), y Patente de Estados Unidos N° 4.879.1 19, expedida el 7 de noviembre de 1989 a Aruga et al., incorporándose en este documento como referencia en su totalidad las descripciones de cada una de estas patentes.. Administración Tópica Para la administración tópica, pueden usarse geles (basados en agua o en alcohol), cremas o pomadas que contienen compuestos de la invención. Los compuestos de la invención también pueden incorporarse en una base de gel o matriz para aplicación en un parche, que permite una liberación controlada del compuesto a través de la barrera transdérmica. Administración rectal Las composiciones sólidas para administración rectal incluyen supositorios formulados de acuerdo con métodos conocidos y que contienen el compuesto de la invención. Dosificaciones El porcentaje de ingrediente activo en la composición de la invención puede variarse, siendo necesario que constituya una proporción tal que se obtenga una dosificación adecuada. Evidentemente, puede administrarse varias formas de dosificación unitaria aproximadamente al mismo tiempo. La dosis empleada se determinará por el médico y depende del efecto terapéutico deseado, la vía de administración y la duración del tratamiento, y el estado del paciente. En el adulto, la dosis generalmente son de aproximadamente 0,001 a aproximadamente 50, preferiblemente de aproximadamente 0,001 a aproximadamente 5 mg/kg de peso corporal al día por inhalación, de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 100, preferiblemente de 0,1 a 70 y más especialmente de 0,5 a 10 mg/kg de peso corporal al día por administración oral, y de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 10, preferiblemente de 0,01 a 1 mg/kg de peso corporal al día por administración intravenosa. En cada caso particular, las dosis se determinará de acuerdo con los factores característicos del sujeto a tratar, tales como la edad, el peso, el estado general de salud y otras características que pueden influir sobre la eficacia del producto medicinal. Además, el compuesto de acuerdo con la invención puede administrarse tan frecuentemente como sea necesario para obtener el efecto terapéutico deseado. Algunos pacientes pueden responder rápidamente a una dosis mayor o menor y pueden considerarse adecuadas dosis de mantenimiento mucho más débiles. En el caso de otros pacientes, puede ser necesario proporcionar tratamientos a largo plazo en la proporción de 1 a 4 dosis al día, de acuerdo con los requisitos fisiológicos de cada paciente en particular. Generalmente, el producto activo puede administrarse por vía oral de 1 a 4 veces al día. Por supuesto, para algunos pacientes será necesario recetar no más de una o dos dosis al día. Naturalmente, un paciente en el que la administración del compuesto de la presente invención es un régimen terapéutico eficaz es preferiblemente un ser humano, pero puede ser cualquier animal. De esta manera, como puede apreciarse fácilmente por un especialista habitual en la técnica, los métodos y composiciones farmacéuticas de la presente invención son particularmente adecuados para la administración a cualquier animal, particularmente un mamífero, e incluyendo pero sin limitación animales domésticos, tales como gatos o perros, animales de granja tales como, pero sin limitación, vacas, caballos, cabras, ovejas y cerdos, animales silvestres (tanto en estado silvestre como en un zoológico, animales de investigación tales como ratones, ratas, conejos, cabras, ovejas, cerdos, perros, gatos, etc, especies aviares tales como pollos, pavos, pájaros cantores, etc, es decir, para uso veterinario. Detalles de Preparación El compuesto de fórmula I puede prepararse por la aplicación o adaptación de métodos conocidos, por lo que se entiende métodos usados en este documento o descritos en la bibliografía, por ejemplo los descritos por R.C.Larock en Comprehensive Organic Transformations, VCH publishers, 1989, o como se describe en este documento. En las reacciones descritas en lo sucesivo, puede ser necesario proteger grupos funcionales reactivos, por ejemplo, grupos amino, para evitar su participación indeseada en reacciones. Pueden usarse grupos protectores convencionales de acuerdo con la práctica convencional, véase, por ejemplo T.W. Greene y P.G. .Wuts en "Protective Groups in Organic Chemistry" John Wiley and Sons, 1991. En particular, el compuesto de fórmula I puede prepararse como se muestra a lo largo de los Esquemas l-lll. Por ejemplo, el compuesto de la presente invención es un compuesto no quiral cuya preparación comprende una síntesis convergente. El Esquema I presentado a continuación muestra los procedimientos que culminan en la preparación de la amina 10. El Esquema II presentado a continuación muestra los procedimientos que culminan en la preparación del ácido 10. El Esquema III presentado a continuación muestra los procedimientos que culminan en la preparación del compuesto de fórmula I, para producir el compuesto de fórmula I en una secuencia de dos etapas. La preparación de 10, 16 y el compuesto de fórmula I de la presente invención se describen, a su vez, a continuación. El compuesto 2 se convierte en el compuesto 3 mediante la protección del grupo amino con un agente protector de amino, tal como 1 ,2-bis(clorodimetilsilil)etano, en presencia de una amina terciaria, tal como trietiiamina, en un disolvente inerte adecuado, tal como diclorometano, para producir el compuesto 3 protegido. El compuesto 3 se convierte en el compuesto 5 por alquilación del compuesto 4 usando el compuesto 3 en condiciones de alquilación que comprenden una base fuerte tal como n-butillitio, en un disolvente aprótico, tal como tetrahidrofurano, para producir el compuesto 5 derivado de hidroxilo. El compuesto 5 se convierte en el compuesto 6 por desprotección del grupo amino del mismo con un agente de desprotección, tal como un ácido inorgánico fuerte, tal como ácido fosfórico, en presencia de un disolvente inerte, tal como heptano, para producir ei compuesto 6 desprotegido.. El compuesto 6 se convierte en el compuesto 7 por deshidratación, usando un ácido inorgánico fuerte, tal como ácido fosfórico, y la posterior neutralización del producto usando una base inorgánica fuerte, tal como hidróxido sódico acuoso para producir el compuesto 7 deshidratado. El compuesto 7 se convierte en el compuesto 8 por desprotección del grupo amino con un agente protector de amino tal como anhídrido de boc, en un sistema de disolventes mixto acuoso/orgánico, donde el disolvente orgánico es un disolvente orgánico polar tal como metanol, usando una base inorgánica fuerte, tal como hidróxido sódico acuoso para producir el compuesto 8 boc-protegido. El compuesto 8 se convierte en el compuesto 9 por hidrogenación usando un agente reductor, tal como hidróxido de paladio sobre carbono (20%), en un sistema de disolventes mixto, tal como ácido acético metanólico para producir la sal de piperidina desprotegida, compuesto 9. El compuesto 9 se convierte en su forma de base libre, compuesto 10, por neutralización usando una base inorgánica fuerte, tal como hidróxido sódico acuoso, para producir el compuesto final 10. El disulfuro de carbono se convierte en el compuesto 11 por acilación usando el agente de acilación cloroformiato de propilo en presencia de una base inorgánica fuerte, tal como hidróxido potásico, en n-propanol para producir el compuesto 11. El compuesto 1 se convierte en el compuesto 12 por alquilación de acetona con el compuesto 11 en presencia de una base fuerte tal como hidruro sódico para producir el compuesto alquilado 12. El compuesto 12 se convierte en el compuesto 13 por alquilación del compuesto 12 con acetato de a-bromo metilo en presencia de una amina terciaria tal como trietilamina para producir el compuesto alquilado 13. El compuesto 13 se convierte en el compuesto 14 por delación en condiciones de base fuerte, tal como metóxido sódico, en presencia de un disolvente orgánico prótico tal como metanol para producir el compuesto 14 ciclado. El compuesto 14 se convierte en el compuesto 15 por bromación en un disolvente orgánico inerte, tal como triclorometano o una mezcla de TBME/heptano, para producir el compuesto 15 bromado. El compuesto 15 se convierte en el compuesto 16 por hidrolización usando una base inorgánica fuerte, tal como hidróxido de litio. El compuesto 16 se convierte en el compuesto 17 por acoplamiento con el compuesto 10 usando un agente de acoplamiento tal como TPTU/HOBT o EDC, en presencia de un disolvente inerte, tal como diclorometano, y una amina terciaria tal como diisopropil etilamina en condiciones anhidras, para producir el compuesto 17 acoplado. El compuesto 17 se convierte en el compuesto I por desprotección en condiciones de ácido fuerte, tal como ácido clorhídrico, en presencia de un disolvente orgánico polar, tal como dioxano, para producir el compuesto I desprotegido.

Esquema I 5 6 7 10 Esquema 3 El compuesto de la presente invención es básico, y tal compuesto es útil en forma de base libre o en forma de una sal de adición de ácidos farmacéuticamente aceptable del mismo. Las sales de adición de ácidos pueden ser una forma más conveniente de uso; y en la práctica, el uso de la forma de sal intrínsecamente equivale al uso de la forma de base libre. Los ácidos que pueden usarse para preparar las sales de adición de ácidos incluyen preferiblemente los que producen, en combinación con la base libre, sales farmacéuticamente aceptables, es decir, sales cuyos aniones son no tóxicos para el paciente en dosis farmacéuticas de las sales, de forma que los efectos inhibidores beneficiosos intrínsecos en la base libre no esté enviciado por efectos secundarios atribuibles a los aniones. Aunque se prefieren las sales farmacéuticamente aceptables de dicho compuesto básico, las sales de adición de ácidos son útiles como fuentes de la forma de base libre aunque la sal particular, per se, se desee sólo como un producto intermedio, por ejemplo, cuando la sal se forma sólo con fines de purificación e identificación o cuando se usa como intermedio en la preparación de una sal farmacéuticamente aceptable por procedimientos de intercambio iónico. Las sales farmacéuticamente aceptables dentro del alcance de la invención incluyen las derivadas de ácidos minerales y ácidos orgánicos, e incluyen hidrohaluros, por ejemplo, hidrocloruro e hidrobromuro, sulfates, nitratos, sulfamatos, acetatos, citratos, lactatos, tartratos, malonatos, oxalatos, salicilatos, propionatos, succinatos, fumaratos, maleatos, metílen-bis-b-hidroxinaftoatos, benzoatos, tosilatos, gentisatos, isetionatos, di-p-toluoiltartratos, metanosulfonatos, etanosulfonatos, bencenosulfonatos, p-toluenosulfonatos, ciciohexilsulfamatos y quinatos. Una sal más particular del compuesto de fórmula I es la sal hidrocloruro. Además de ser útiles por sí mismas como compuesto activo, las sales del compuesto de la invención son útiles para la purificación del compuesto, por ejemplo, por medio de la explotación de las diferencias de solubilidad entre las sales y el compuesto parental, productos secundarios y/o materiales de partida por técnicas bien conocidas para los especialistas en la técnica.

De acuerdo con otra característica de la invención, la sal de adición de ácidos del compuesto de esta invención puede prepararse por reacción de la base libre con el ácido apropiado, por medio de la aplicación o adaptación de métodos conocidos. Por ejemplo, las sales de adición de ácidos del compuesto de esta invención pueden prepararse disolviendo la base libre en agua o en una solución acuosa del alcohol u otro disolvente adecuado que contenga el ácido apropiado y aislando la sal por evaporación de la solución o por reacción de la base libre y el ácido en un disolvente orgánico, en cuyo caso la sal se separa directamente o puede obtenerse por concentración de la solución. Las sales de adición de ácidos del compuesto de esta invención pueden regenerarse a partir de la sales por la aplicación o adaptación de métodos conocidos. Por ejemplo, el compuesto parental de la invención puede regenerarse a partir de sus sales de adición de ácidos por tratamiento con un álcali, por ejemplo, solución acuosa de bicarbonato sódico o solución acuosa de amoniaco. Los materiales de partida e intermedios pueden prepararse por la aplicación o adaptación de métodos conocidos, por ejemplo, los métodos descritos en los ejemplos de referencia o sus equivalente químicos evidentes. La presente invención también se refiere algunos intermedios en los esquemas anteriores y, como tales, los procesos descritos en este documento para su preparación constituyen características adicionales de la presente invención.

Ejemplos La presente invención pueden entenderse mejor haciendo referencia a los siguientes ejemplos no limitantes, que se proporcionan a modo ejemplar de la invención. Los siguientes ejemplos se presentan para ilustrar con más detalle modalidades particulares de la invención. Sin embargo, no deben considerarse de ninguna manera limitantes del amplio alcance de la invención. En los espectros de resonancia magnética nuclear (RMN), presentados más adelante, los desplazamientos químicos se expresan en ppm con respecto al tetrametilsilano. Las abreviaturas tienen los siguientes significados: a = ancho, dd = doblete de dobletes, s = singlete; m = multiplete.

EJEMPLO 1 Etapa 1 : Preparación de 1-(3-Bromo-4-fluoro-bencil)-2,2,5,5-tetrametil-H .2,51 azádisilolidina (Compuesto 3) Se suspenden 110 g (0,46 mol) de hidrocloruro de 3-bromo-4-fluoro-bencilamina (2) en 900 mi de cloruro de metileno en un matraz de fondo redondo de tres bocas y de 2 I equipado con atmósfera de N2, sensor de temperatura termopar recubierto de Teflón y agitador mecánico y se enfría a ~5°C en un baño de hielo. Se añaden un total de 144 g (1 ,42 mol, 3,1 equiv. d=0,7) lo que produce una suspensión espesa. Después se añade gota a gota durante 1 ,5 horas una solución de 1 ,2-bis(clorodimetilsilil) etano (100 g, 0,46 mol) en 250 mi de cloruro de metileno mientras se mantiene la temperatura de la mezcla de reacción entre 5 y 8°C. La mezcla se agita durante 30 minutos y después se calienta a temperatura ambiente. La suspensión de hidrocloruro de trietilamina se retira por filtración. El filtrado se concentra al vacío (40°C, <50 mbar), se añade 1 litro de pentanq y el precipitado de Et3N x HCI adicional que se forma se retira por filtración. El procedimiento se repite con 1 I más de pentano. El filtrado se concentra al vacío (40°C, <5 mbar) hasta dar un líquido incoloro que solidifica tras un periodo de refrigeración, para dar 159 g (-100%) del compuesto 3 en forma de un sólido cristalino blanco. La finalización de la reacción debería controlarse usando 1 H N R para asegurar que no queda esencialmente ningún resto de material de partida 2 y de hidrocloruro de trietilamina según se ha consumido el n-butil litio en la etapa posterior, por lo que da como resultado un menor rendimiento de la reacción.

Etapa 2: Preparación de 1-Bencil-4-í2-fluoro-5-(2,2,5,5-tetrametil-? .2.51-azadisilolidin-1-ilmetinfen¡np¡peridin-4-ol (Compuesto 5) Una solución del compuesto 3 (159 g, 0,4574 mol) en 1 ,5 I de THF se coloca en un matraz de fondo redondo, de tres bocas y de 5 I equipado con una atmósfera de N2, sensor de temperatura con termopar recubierto de Teflón y agitador mecánico y se enfría a -75°C. A esta solución agitada se le añade gota a gota una solución 2,5 M de n-butil litio (192 mi, 0,48 mol, 1 ,05 equis.) durante aproximadamente 1 hora mientras se mantiene la temperatura de la mezcla de reacción entre -72°C y -75°C. Después de 30 min, se añade gota a gota durante 1 hora una solución de 1-bencil-4- piperidona (Compuesto 4, 88,2 g, 0,47 mol, 1 ,02 equiv.) en THF anhidro (350 mi + 50 mi de aclarado) mientras se mantiene la temperatura de reacción por debajo de -70°C. Después de 20 min a una temperatura de -70°C a -75°C, a la mezcla de reacción se le añaden 200 mi de metanol (cambia de color de naranja a amarillo) y después la mezcla se deja calentar a temperatura ambiente. La solución de reacción se concentra al vacío (50°C) para dar 295 g de un aceite pardo, compuesto 5.

Etapa 3: Preparación de 4-(5-Aminometil-2-fluorofenil)-1-bencilpiperidin-4-ol (sal fosfato) (Compuesto 6) El compuesto 5 bruto (-295 g) se diluye con 1 I de cloruro de metileno y se transfiere a un matraz de fondo redondo de tres bocas y de 3 litros equipado con sensor de temperatura termopar recubierto con Teflón y agitador mecánico. A esta solución se le añaden lentamente 53 g de HsP04 al 85%(1 equiv.) mientras se agita (exotérmica) y la mezcla se concentra al vacío (40°C). Se añade 1 I de cloruro de metileno y la mezcla se concentra al vacío (40°C, 1 mbar) hasta dar una espuma amarilla que después se suspende en 1 l de heptano. Se forma un sólido y se aisla por filtración. El sólido castaño se seca para dar 190 g del compuesto 6. MS: encontrado m/z 3 5 (M+H).

Etapa 4: Preparación de 3-(1-benci¡-1 ,2,3,6-tetrahidro- piridin-4-il)-4-fluoro-bencilamina (Compuesto 7) Se transfiere un total de 190 g del compuesto 6 a un matraz de fondo redondo de tres bocas y de 2 I, equipado con sensor de temperatura termopar recubierto con Teflón y agitador mecánico. Se añade un total de 600 mi de H3P04 al 85%. La suspensión resultante se calienta gradualmente a 100°C mientras se agita. La reacción se controla por HPLC con respecto a su finalización (típicamente de 2 a 3 horas). Una vez que la reacción se ha completado, la solución de reacción se enfría a temperatura ambiente y se diluye con 800 mi de agua. La capa acuosa se lava con éter (2 x 200 mi). Después, la capa acuosa se neutraliza con NaOH acuoso al 50% a pH > 9 mientras se mantiene la temperatura por debajo de 30 °C. Esta solución acuosa es un sistema tampón muy concentrado en el que el pH permanece sin cambios a aproximadamente 7-8 hasta que se alcanza el punto de neutralización. La confirmación de que la neutralización se ha completado se efectúa añadiendo unas pocas gotas de base a una pequeña muestra del líquido sobrenadante para asegurar que no se observa más precipitación. Una gran cantidad de la sal se retira por precipitación. La mezcla se filtra y el sólido se aclara con DCM (dicloruro de metileno) (aproximadamente 3 I) y 2 i de agua. La capa orgánica (fondo) se separa y se lava con agua (2 x 1 l). La solución orgánica se concentra al vacío (40°C) para dar 107 g de un aceite pardo, compuesto 7. MS: encontrado m/z 297 (M+H).

Etapa 5: Preparación de éster terc-butílico del ácido G3-?- Bencil-1 ,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)-4-fluoro-benc¡ncarbámico (Compuesto 8) A un matraz de fondo redondo, de 2 litros y 3 bocas, equipado con sensor de temperatura termopar recubierto con teflón y agitador mecánico se le añaden 50 g del compuesto 7 y una solución de metanol (800 mi) y agua (400 mi). Se añaden 36,8 g de anhídrido BOC y 2 mi de NaOH al 50% y la mezcla se agita a temperatura ambiente. El producto se retira por precipitación de la solución después de 2 horas de agitación. Si el producto de Boc no precipita, decantar la capa acuosa superior y añadir n-heptano al aceite para solidificar el producto. La mezcla se agita durante una noche a temperatura ambiente. El sólido se aisla por filtración y se suspende en 1 ,05 I de MeOH/agua (2:1 en volumen) durante 4 horas, después se aisla por filtración y se seca durante 4 días para dar 40 g (el rendimiento total es de aproximadamente 35% a 48% a partir del compuesto 3) de compuesto 8 en forma de un sólido amarillo claro. Pureza: 96,3% por HPLC. MS: m/z 397 ( +H), 398 (M+2H).

Etapa 6: Preparación de éster terc-butílico del ácido 6 (4-Fluoro-3-piperidin-4-il-bencil)carbámico, sal acetato (Compuesto 9) Se cargan 64 g (0,16 mol) del compuesto 8, 6,4 g hidróxido de paladio/C 20%, 19,5 g (2 equiv.) de ácido acético glacial y 250 mi de metanól en un recipiente de hidrogenación de 1 litro. El recipiente de la mezcla de reacción se purga (N2/vacío, 3 veces), después se carga H2 a 275,71 kPá (40 psi) y se agita durante una noche a temperatura ambiente. El catalizador se retira por filtración y el filtrado se concentra al vacío (40°C) para producir un aceite. Se añaden 200 mi de éter isopropílico y se agita durante una noche. Un sólido blanco, que precipita, se filtra, se aclara con éter isopropílico y se seca para dar 53,5 g de un sólido blanco con una pureza de 95,4 % por HPLC. El sólido se suspende en 500 mi de MTBE durante 5 horas, después se aisla por filtración y se suspende de nuevo en 500 mi de MTBE durante una noche. El sólido se aisla por filtración y se seca para producir 51 ,3 g (86,3%) de la sal acetato del compuesto 9 en forma de un sólido blanco. Análisis elemental: Calculado para C17H25FN202: C, 61 ,94; H, 7,93; N, 7,6. Encontrado: C, 62,0; H, 8, 7; N, 7,49. KF: 0,34% de agua. HPLC: Tr 9,14 min, pureza 97 % por AUC. MS: m/z 309 (M+H), 310 (M+2H).

Etapa 7: Preparación de éster terc-butílico del ácido (4-Fluoro-3-piperidin-4-il-bencil)carbámico (Compuesto 10) Se disuelve la sal acetato del compuesto 9 (51 g) en 400 mi de agua y el pH se ajusta a 5 con HCI 2 N. La solución acuosa se lava con éter (2 x 200 mi). La capa acuosa se neutraliza a pH > 12 con NaOH ac. al 50%. y se extrae con éter (2 x 300 mi). La capa orgánica se lava con agua y se seca sobre Na2SO4, y después se concentra hasta un aceite. Al aceite se le añaden 200 mi de n-pentano y se agita durante 3 horas. El producto sólido se aísla por filtración, se lava con n-pentano y se seca a temperatura ambiente con vacío doméstico durante 24 horas para producir 42 g del compuesto 10 (98%) en forma de un sólido blanco. S: (ESI) m/z 309 ( + H). Análisis elemental: Calculado para C17H25FN2O2: C, 66,21 ; H, 8,17; N, 9,08. Encontrado sin corrección para agua: C, 64,30; H, 8,64; N, 8,77. KF: 2,57% de agua. HPLC: Tr 9,16 min, pureza 98,1 % por AUC.

Nota: Si la pureza de la sal acetato del compuesto 9 es menor del 95% por HPLC, puede usarse una solución de n-pentano y éter (hasta de 1 :1 en volumen) para solidificar el producto (base libre) a partir del aceite en lugar de sólo n-pentano. El producto es muy soluble en éter, de forma que si se usa más éter; se perderá más producto, obteniéndose de esta manera un menor rendimiento.

EJEMPLO 2 Etapa 1 : Preparación de sulfuro de bis(propoxitiocarbonilo) (compuesto 11 ) Se añaden 84,2 g de hidróxido potásico en . polvo (1 ,27 mol) a 530 mi de n-propanol colocado en un matraz de fondo redondo de tres bocas equipado con un agitador mecánico y un baño de refrigeración a temperatura ambiente. Después se añaden gota a gota durante 1 hora 80 mi de disulfuro de carbono (1 ,33 mol) a la solución mediante un embudo adicional de presión equilibrada. Se continua agitando durante 3 horas. Se añaden 200 mi de agua. Se añaden gota a gota 73,5 g (0,6 mol) de cloroformiato de propilo en forma pura mediante un embudo adicional de presión equilibrada . La mezcla se agita durante una noche a temperatura ambiente. La mezcla después se diluye con 400 mi de heptano. La capa acuosa se extrae dos veces con 100 mi de heptano. La capa orgánica combinada se lava con 100 mi de agua y 100 mi de salmuera y después se seca sobre carbonato potásico y se evapora. El propanol residual se retira adicionalmente por destilación a alto vacío para obtener un líquido amarillo transparente. Se disuelven 10 g del líquido amarillo transparente en 10 g de heptano y se purifica por cromatografía sobre gel de sílice, eluyendo con heptano para obtener 8,35 g del compuesto 1 (rendimiento de 41 %).

Etapa 2: Preparación de éster O-propílico del ácido 3-oxo-tiobutírico (Compuesto 12) Se suspenden 1 ,82 g (45 mmol) de hidruro sódico en 40 mi de tolueno. A esta suspensión se le añade una solución de 4,76 g (20 mmol) del compuesto 11 en 10 mi de tolueno a 40°C con agitación. La reacción se inicia introduciendo una pequeña cantidad de hidruro potásico. Cuando se hace esto se forman burbujas y el color de la reacción cambia de amarillo a naranja. La mezcla de reacción se agita a 40°C durante una hora y después se enfría a 0°C en un baño de agua enfriada con hielo. Después, la mezcla de reacción se vierte en un vaso de precipitados que contiene 11 mi de HCI 4 N, hielo y 150 mi de éter. La capa orgánica se separa y se concentra. El producto bruto se purifica por cromatografía sobre gel de sílice, eluyendo con acetato de etilo al 5% en heptano para obtener éster O-propílico del ácido 3-oxo-tiobutírico (compuesto 12).

Etapa 3: Preparación de éster metílico del ácido (3-oxo-1- propoxi-but-1-enilsulfanil)-acético (Compuesto 13) Después, el compuesto 12 se disuelve en 40 mi de DMF y se enfría a 0°C. A esta solución se le añaden 4,6 g de acetato de a-bromo metilo en 5 mi de DMF y 5,2 mi de trietilamina. Instantáneamente se forma un precipitado blanco. Esta suspensión se agita a 0°C durante 2 horas y después se vierte en éter/agua enfriada con hielo. La capa orgánica se separa y se concentra. El producto bruto se purifica por cromatografía sobre gel de sílice y después se eluye con metanol al 3% en DCM para obtener 2,61 g del compuesto 13 (rendimiento de 56% en dos etapas).

Etapa 4: Preparación de éster metílico del ácido 3-metil-5-propoxi-tiofeno-2-carboxílico (compuesto 14) Una mezcla de 2,61 g (11 ,24) del compuesto 13 y 2 mi de metóxido sódico 0,5 M/metanol en 40 mi de metanol se calienta a 70-73°C durante 40 minutos. Después, la mezcla se vierte en éter/agua enfriada con hielo. La capa orgánica .se separa y se concentra. El producto bruto se purifica por cromatografía sobre gel de sílice, éluyendo con DCM para obtener 1 ,85 g (rendimiento de 76,8) del compuesto 14.

Etapa 5: Preparación de éster metílico del ácido 4-bromo-3- metil-5-propoxi-tiofeno-2-carboxílicó (compuesto 15) A una solución de 1 ,22 g (5,7 mmol) del compuesto 14 en 20 mi de triclorometano se le añaden 11 mi de bromo 0,55 M/triclorometano a 0°C y se agita durante 10 minutos. La mezcla se inactiva con una solución acuosa de sulfuro sódico y se extrajo con DCM. La capa orgánica se separa y se concentra. El producto bruto se purifica con una capa de carbonato potásico-gel de sílice con DCM para obtener 1 ,67 g (rendimiento de 100%) del compuesto 15. " Etapa 6: Preparación de ácido 4-bromo-3-metil-5-propoxi-tiofeno-2-carboxílico (compuesto 16) A una solución de 1 ,67 g del compuesto 15 (5,70 mmol) en 27 mi de dioxano se le añadieron 10 mi de LiOH 2 M/agua y 9 mi de agua. La mezcla se agita a temperatura ambiente durante 4 horas. Después, la mezcla se diluye con 10 mi de agua y se extrae dos veces con 10 mi de éter. La solución acuosa se enfría en un baño de agua enfriada con hielo y se acidifica con HCI 4 M. El sólido blanco se recoge por filtración por succión para proporcionar 1 ,28 g (rendimiento de 80,5%) del compuesto 16.

EJEMPLO 3 Etapa 1 : Preparación de éster terc-butílico del ácido (3-G1-(4- bromo-3-metil-5-propoxi-thiofeno-2-carbonin-piperidin-4-il1-4-fiuoro-bencil}- carbámico (compuesto 17) A una solución de 170 mg del compuesto 16 (0,61 mmol) en 25 mi de DCM en una atmósfera de N2 se le añaden 170 mg de TPTU (0,61 mmol) y 80 mg de 1-hidroxi-1 H-benzotriazol (HOBt) (0,61 mmol). La mezcla se agita durante 3 minutos. Después, a la mezcla se le añade una solución de 200 mg (0,65 mmol) del compuesto 10 en 5 mi de DCM y 0,3 mi de diisopropil etilamina (1 ,2 mmol). La mezcla se agita a temperatura ambiente durante 24 horas. Después, la mezcla se lava con 20 mi de agua, se seca sobre sulfato sódico anhidro y se concentra. El aceite bruto se purifica por cromatografía sobre gel de sílice, eluyendo con metanol al 3% en DCM para obtener 0,3 g (rendimiento de 86,5%) del compuesto 17.

H RMN [CDCI3]: 7,14-7,04 (m, 2H), 6,95 (dd, H), 4,82 (s a, H), 4,38 (d a, 2H), 4,23 (d, 2H), 4,05 (t, 2H), 3,17-2,95 (m, 3H), 2,21 (s, 3H), 1 ,92-1 ,59 (m, 6H), ,44 (s, 9H), ,05 (t, 3H). MS(ESI+): 569 (M++ ).

Etapa 2: Preparación de hidrocloruro de r4-(5-aminometil-2-fluoro-fenil)-piperidin-1-in-(4-bromo-3-metil-5-propoxi-tiofen-2-il)-metanona (compuesto I) Una solución de 0,25 g del compuesto 17 (0,44 mmol) en 8 mi de HCI 4 M/dioxano en una atmósfera de nitrógeno se agita a temperatura ambiente durante 3 horas. La solución se diluye con 30 mi de éter y se agita durante 5 min. El líquido se decanta del sólido. El sólido se lava con 30 mi de éter y el líquido se decanta de nuevo. Después, el sólido se disuelve en metanol al 3% en DCM y se purifica por cromatografía sobre gel de sílice, eluyendo con metanol al 3%-10% en DCM. Se obtiene el compuesto I, 0,19 g (rendimiento de 86,4%)en forma de un sólido amorfo retirando el disolvente de las fracciones puras combinadas del producto por evaporación. El producto es un vidrio amorfo. 1 H RMN [CDCI3]: d (TMS) 8,62 (br s, 3H), 7,53-7,43 (m, H), 7,36-7,26 (m, H), 6,97 (dd, H), 4,22 (br d, 2H), 4,18-3,99 (m, 4H), 3,16-2,90 (m, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,00-1 ,60 (m, 6H), 1 ,02 (t, 3H). MS(ESI+): 469 (M++1 ). 100% de pureza por LC/MS (UV 220 nm y conteo iónico total).

ACTIVIDAD BIOLÓGICA Las propiedades del compuesto de la presente invención se demuestran por: 1) su potencia inhibidora de /?-Triptasa (valores de Cl50 y K¡) y 2) su actividad medida en el modelo de hiperreactividad de las vías respiratorias de cobaya (DE50 Oral).

PROCEDIMIENTO DE ENSAYO IN VITRO Como todas las acciones de la triptasa, como se ha descrito en la sección de antecedentes, dependen de su actividad catalítica, entonces los compuestos que inhiben su actividad catalítica inhibirán potenciaimente las acciones de la triptasa. La inhibición de esta actividad catalítica puede medirse por medio del ensayo enzimático in vitro y el ensayo celular. La actividad de inhibición de la triptasa se confirma usando triptasa aislada de pulmón humano o beta triptasa humana recombinante expresada en células de levadura. Se obtienen resultados esencialmente equivalentes usando la enzima nativa aislada o la enzima expresada. El procedimiento de ensayo emplea una microplaca de 96 pocilios (Costar 3590) usando L-piroglutamil-L-prolil-L-arginina-para-nitroanilida (S2366: Quadratech) como sustrato (esencialmente como describe McEuen eí. al. Biochem Pharm, 1996, 52, páginas 331-340). Los ensayos se realizan a temperatura ambiente usando sustrato 0,5 mM (2 x km) y la microplaca se lee en un lector de microplacas (lector de placas Beckman Biomek) a una longitud de onda de 405 nm.

Materiales y Métodos para la Selección Primaria de la Triptasa (Ensayo Cromoqénico) Tampón de Ensayo Tris (pH 8,2) 50 mM NaCI 100 mM, Tween 20 al 0,05%, 50 g/ml de heparina. Sustrato S2366 (Soluciones madre de una concentración 2,5 mM). Enzima Soluciones madre de beta triptasa recombinante purificada de 310 g/ml.

• Añadir 60 µ? de sustrato diluido (concentración final de 500 µ? en tampón de ensayo) a cada pocilio. • Añadir compuesto por duplicado, a una concentración final de 20 µ?, a un volumen de 20 µ? • Añadir enzima a una concentración final de 50 ng/ml en un volumen de 20 µ? • El volumen total de cada pocilio es de 100 µ? • Agitar brevemente para mezclar e incubar a temperatura ambiente en la oscuridad durante 30 minutos • Leer las absorbancias a 405 nM Cada placa tiene los siguientes controles: Totales: 60 µ? de sustrato, 20 µ? de tampón (con una concentración final del 0,2% de DIVISO), 20 µ? de enzima No específico: 60 µ? de sustrato, 40 µ? de tampón (con DMSO al 0,2% DMSO) Totales: 60 µ? de sustrato, 20 µ? de tampón (Sin DMSO), 20 µ? de enzima No específico: 60 µ? de sustrato, 40 µ? de tampón (Sin DMSO) Protocolo (Determinación de Clso y K¡) El protocolo es esencialmente igual que el anterior con la excepción de que el compuesto se añade por duplicado a las siguientes concentraciones finales: 0.01 , 0.03, 0.1 , 0.3, 1 , 3, 10 µ? (Todas la diluciones se realizan manualmente). Para cada ensayo, ya sea la determinación de un solo punto o del valor de CI5o se usa un compuesto patrón para obtener el Cl50 por comparación. A partir del valor de Cl50, la K¡ puede calcularse usando la siguiente fórmula: K¡ = Cl50/(1 + [Sustrato]/Km). La potencia inhibidora de la ?-Triptasa para el compuesto de fórmula I corresponde a valores de CI50 y K¡ de 76 nM y 15 nM respectivamente.

PROCEDIMIENTO DE ENSAYO IN VIVO Protocolo de ensayo: Sensibilización y tratamiento con fármaco: Se sensibilizan cobayas Hartley macho (225-250 g) con ovoalbúmina (0,5 mi de una solución al 1 %, i.p. y s.c.). En el día 4, los animales recibieron una inyección de refuerzo (i.p.)de 0,5 mi de ovoalbúmina al 1 %. En el día 21 , los animales reciben por vía oral (2ml/kg) vehículo (metilcelulosa al 0,5% /Tween 80 al 0,2% ) o compuesto de ensayo dos horas antes de la exposición al antígeno. Treinta minutos antes de la exposición al antígeno, a los animales también se les inyecta mepiramina (30 mg/kg, i.p.) para impedir el colapso anafiláctico. Después, los animales se exponen durante 5 minutos a un aerosol de solución salina (animales de control) u ovoalbúmina al 1 % usando un nebulizador deVilbiss Ultraneb. Medición de AHR: De dieciocho a veinticuatro horas después de la exposición, los animales se anestesian con una combinación de ketamina (133 mg/kg) y xilazina (24 mg/kg) administradas por vía intramuscular, se preparan quirúrgicamente y después se montan en un pletismografo de cuerpo entero para medir la función pulmonar. Los animales se conectan a ventiladores Ugo-Basile que suministran un volumen corriente de 1 ml/100 g a una velocidad de 50 respiraciones/minuto a través de una cánula traqueal. También se cánula la vena yugular para la exposición a histamina. Se pone una cánula esofágica rellena con agua de tal forma que se pueda registrar la presión transpulmonar. La presión transpulmonar se mide como la diferencia entre las cánulas traqueal y esofágica usando un transductor de presión diferencial. El volumen, el flujo de aire y las señales de presión transpulmonar se controlan usando un sistema de análisis pulmonar (software Buxco XA) y se usan para calcular la resistencia pulmonar (cm H20/ml/s) y la complianza dinámica (ml/cm H2O). La resistencia de las vías respiratorias y la complianza dinámica se calculan en una base de respiración por respiración. La histamina se administra por vía intravenosa y se evalúa la reactividad a concentraciones crecientes (0,3-20 Og/kg). Los valores de DE50 se estiman a partir de los valores de área bajo la curva (AUC) obtenidos a partir de las curvas de dosis-respuesta a histamina individuales. Niveles de fármaco en plasma y en pulmón Los niveles de compuesto en plasma y en pulmón se determinan en grupos satélite. Para la determinación de los niveles de fármaco se usan de tres a cuatro cobayas de cada uno de los grupos de tratamiento con fármaco experimental. En el punto de tiempo indicado (2 o 24 horas después de la dosificación), los animales se eutanizan y se obtienen muestras de un 1 mi de sangre por punción cardiaca y se recogen en jeringa recubiertas con heparina que contienen 20 µ? (por 1 mi de sangre) de una solución de hidralazina 5 mM. El plasma se separa del componente celular de la sangre por centrifugación y se almacena a -20°C hasta que se ensaya. Las muestras de pulmón se diseccionan del tejido conectivo, se secan con papel secante, se pesan y se almacenan en viales de 20 mi que contienen 5 mi de una solución de hidralazina 5 mM en solución salina. Las muestras de plasma congelada después se transfieren en hielo seco al grupo Pilot PK para determinar los niveles de compuesto. Resultados: La eficacia del compuesto II se perfila basándose en la Hiper- respuesta de las Vías Respiratorias (AHR) a la histamina en cobayas sensibilizadas por vía oral . El compuesto I no tiene ningún efecto sobre la resistencia basal de las vías respiratorias o la complianza pulmonar dinámica basal. La sensibilización y exposición individual con ovoalbúmina tiene como resultado un aumento de la reactividad bronquial a la histamina como se indica por un desplazamiento hacia la izquierda en la curva de dosis-respuesta del espasmogeno y también por un aumento significativo en el área bajo la curva (AUC) tanto para la resistencia de las vías respiratorias como para la complianza pulmonar. Los valores absolutos representan un aumento de la resistencia de las vías respiratorias y una reducción en la complianza pulmonar. Tras la dosificación oral, 2 horas de la exposición a ovoalbúmina, el compuesto I protege significativamente frente a la AHR estimulada por antígeno a la histamina con un valor de DE50 = 0,1 mg/kg medido por resistencia de las vías respiratorias y complianza pulmonar dinámica. En animales separados, se miden los niveles de compuesto I en el fluido de la lavado broncoalveolar (BAL), pulmón y plasma, dos horas después de la dosificación del compuesto (1 mg/kg, p.o.). Hay una cantidad apreciable de compuesto I en órganos diana tales como pulmón y BAL (sin tener en cuenta el factor de dilución para BAL). Los niveles del compuesto en plasma se detectan a un nivel mucho menor. En animales satélite, los niveles de compuesto I, tanto en pulmón como en plasma, también se miden 24 horas después de lá dosificación. Aunque no pudo detectarse en plasma, sin embargo, había una cantidad apreciable de compuesto I dependiente de la dosis detectada en el pulmón de cobaya 24 horas después de la dosificación. También se demuestra que el compuesto I posee una larga duración de la acción con un valor medio de DE50 de 0,4 mg/kg cuando se dosifica 24 horas antes de la exposición al antígeno. Esta larga duración de la acción está de acuerdo con su exposición prolongada. Los datos orales del compuesto de la presente invención en el modelo de cobaya de hiper-respuesta de las vías respiratorias demuestra claramente que el compuesto presenta actividad inhibidora de triptasa. Por consiguiente, el compuesto de la presente invención fácilmente tiene aplicación como agente farmacéutico para tratar una amplia diversidad de afecciones relacionadas con la triptasa, y naturalmente, en métodos para tratar tales afecciones en un paciente. La presente invención no se limita en alcance por las modalidades específicas descritas en este documento. De hecho, para los especialistas en la técnica serán evidentes diversas modificaciones de la invención además de las descritas en este documento por la descripción anterior y las figuras adjuntas. Tales modificaciones pretenden incluirse dentro del alcance de las reivindicaciones adjuntas. En el presente documento se citan diversas publicaciones, cuyas descripciones se incorporan como referencia en su totalidad.

Claims

RE1VIND1CACI0NES:

1.- Un compuesto de fórmula I: o un profármaco, sal farmacéuticamente aceptable o solvato del mismo.

2. - El compuesto de la reivindicación 1 , como una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

3. - El compuesto de la reivindicación 2, donde la sal farmacéuticamente aceptable es un hidrocloruro.

4. - Un método para tratar a un paciente que padece o que es propenso a padecer una afección fisiológica en necesidad de mejora de un inhibidor de triptasa que comprende administrar al paciente una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto de la reivindicación 1.

5. - El método de la reivindicación 4, donde la afección fisiológica se selecciona entre el grupo que consiste en enfermedad inflamatoria, una enfermedad de destrucción del cartílago de las articulaciones, conjuntivitis ocular, conjuntivitis vernal, enfermedad inflamatoria del intestino, asma, rinitis alérgica, enfermedad pulmonar intersticial, fibrosis, esclerodermia, fibrosis pulmonar, cirrosis hepática, fibrosis de miocardio, neurofibroma, cicatrización hipertrófica, afección dermatológica, afección relacionada con la ruptura de placas ateroscleróticas, enfermedad periodontal, retinopatía diabética, crecimiento tumoral, anafilaxis, esclerosis múltiple, úlcera péptica e infección por virus sincitial.

6. - El método de la reivindicación 5, donde la afección fisiológica es una enfermedad inflamatoria.

7. - El método de la reivindicación 6, donde la enfermedad inflamatoria es inflamación de las articulaciones, artritis, artritis reumatoide, espondilitis reumatoide, artritis gotosa, artritis traumática, artritis de rubéola, artritis psoriática u osteoartritis.

8. - El método de la reivindicación 5, donde la afección fisiológica es COPD.

9. - El método de la reivindicación 5, donde la afección fisiológica es exacerbaciones de COPD.

10. - El método de la reivindicación 5, donde la afección fisiológica es una afección dermatológica.

11. - El método de la reivindicación 10, donde la afección dermatológica es dermatitis atópica o psoriasis.

12. - El método de la reivindicación 5, donde la afección fisiológica está relacionada con la ruptura de placas ateroscleróticas.

13. - El método de la reivindicación 12, donde la ruptura de placas ateroscleróticas es posterior a un infarto de miocardio, apoplejía o angina.

14. - Un método para tratar a un paciente que padece asma, que comprende administrar ai paciente una combinación de una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la reivindicación 1 , y un segundo compuesto seleccionado entre el grupo que consiste en un agonista beta adrenérgico, un anticoíinérgico, corticosteroide anti-inflamatorio y un agente anti-inflamatorio.

15. - El método de la reivindicación 4, donde la administración es tal que el compuesto de la reivindicación 1 se distribuye preferentemente en ei tejido pulmonar en lugar de en el plasma.

16. - Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la reivindicación 1 y un vehículo farmacéuticamente aceptable del mismo.

17. - Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la reivindicación 1 y una cantidad terapéuticamente eficaz de un segundo compuesto seleccionado entre el grupo que consiste en un agonista beta adrenérgico, un anticolinérgico, corticosteroide anti-inflamatorio y agente anti-inflamatorio; y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

18. - La composición farmacéutica de la reivindicación 17, donde el segundo compuesto es un agonista beta adrenérgico.

19. - La composición farmacéutica de la reivindicación 18, donde el agonista beta adrenérgico se selecciona entre albuterol, terbutalina, formoterol, fenoterol o prenalina.

20. - La composición farmacéutica de la reivindicación 17, donde el segundo compuesto es un anticolinérgico.

21. - La composición farmacéutica de la reivindicación 20, donde el anticolinérgico es bromuro de ipratropio.

22. - La composición farmacéutica de la reivindicación 17, donde el segundo compuesto es un corticosteroide anti-inflamatorio.

23. - La composición farmacéutica de la reivindicación 22, donde el corticosteroide anti-inflamatorio se selecciona entre dipropionato de beclometasona, triamcinolona acetonida, flunisolida o dexametasona.

24. - La composición farmacéutica de la reivindicación 17, donde el segundo compuesto es un agente anti-inflamatorio.

25. - La composición farmacéutica de la reivindicación 24, donde el agente anti-inflamatorio es cromoglicatos sódico o nedocromil sódico.

26. - La composición farmacéutica de la reivindicación 17, donde el segundo compuesto es un vehículo farmacéuticamente aceptable . del mismo.