MXPA05011681A - Antibioticos de carbacefen (-lactama. - Google Patents

Abstract

La presente invencion se refiere a antibioticos de carbacefeno y sales farmaceuticamente aceptables del mismo utiles para el tratamiento de infecciones bacteriales en particular infecciones ocasionadas por bacterias Staphylococcus spp. resistentes a meticilina.

Description

ANTIBIÓTICOS PE CARBACEFEN ß-LACTAM A REFERENCIA CRUZADA A SOLICITUDES RELACIONADAS La presente solicitud reclama el beneficio de conformidad con U.S.C. § 119€ de la Solicitud Provisional de los Estados Unidos de Norteamérica No. 60/466,982 presentada el 30 de abril de 2003, los contenidos de la cual están incorporados mediante referencia a la presente descripción.

CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a la química orgánica, la química medicinal, la bioquímica, la biología y la medicina. En particular, se refiere a antibióticos de carbacefen ß-lactama, sales farmacéuticamente aceptables de la misma y el uso del compuesto o su sal para tratar infecciones bacteriales, de manera especial infecciones ocasionadas por especies bacteriales resistentes a las ß-lactamas convencionales.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Lo siguiente se proporciona como información antecedente solamente y no será considerada como técnica anterior para la presente invención.

Durante las últimas tres décadas se han vuelto disponibles una variedad de antibióticos para uso clínico. Una clase de antibiótico que ha tenido un crecimiento significativo es de las ß-lactamas, más de 70 de las cuales han ingresado al uso clínico desde 1965. Desafortunadamente, el uso diseminado de esos antibióticos ha dado como resultado un alarmante incremento en el número de cepas resistentes, especialmente entre bacterias clínicamente importantes tales como los géneros Salmonella, Enterobacteriaceae, Pseudomona y Staphylococcus. La resistencia bacterial a las cefalosporinas ocurre principalmente a través de tres mecanismos: (a) destrucción del antibiótico por medio de ß-lactamasas; (b) penetración disminuida debida a los cambios en la composición de la membrana externa bacterial; y (c) alteración de las proteínas de enlace-a-penicilina (PBPs) que resulta en una interferencia con el enlace de ß-lactama. Esta última trayectoria es de especial importancia, ya que el enlace de las ß-lactamas a las PBPs es esencial para la inhibición de la biosíntesis de peptidoglican (peptidoglican es un componte de pared celular bacterial requerido). Ciertas bacterias gram-positivas tales como Staphylococcus aureus resistente a la meticilina ("MRSA") y diversas bacterias del género Enterococcus son altamente resistentes a antibióticos de beta-lactama. La resistencia de MRSA se debe a la presencia de una PBP llamada PBP2a, la cual se enlaza muy escasamente a los antibióticos de ß-lactama. Las opciones para tratar la infección ocasionada por MRSA son limitadas y existe la necesidad de nuevos antibióticos con actividad contra esas cepas. En años recientes, se ha informado que una familia novedosa de antibióticos de ß-lactama, los carbacefenos (1), son promisorios contra MRSAs y otras especies resistentes. En el compuesto (1), y R2 se describen de forma variada como un amplio rango de entidades aromáticas o heteroaromáticas. R3 ha sido reportado de manera general como un grupo alquilo opcionalmente sustituido. Por ejemplo, (1) in Ternansky, et al., J. Meó. Chem., 1993, 1971, se describen compuestos de la estructura general (1), en la cual R¾ es 2-amino-4- tiazolil, R3 es 2-fluoroetil y R2 es de manera alterna 1 ,3,4-tiadiazol- 2-il (2), 6-nitrobenzotiazol-2-il (3) o piridino[3,4-d]tiazol-2-il (4).

El problema con los compuestos a nteriores y de manera presumible, los carbacefenos en general , es que los i nvestigadores que investigan la familia no han sido capaces de lograr un equilibrio aceptable entre la potencia MRSA y el enlace de proteína del suero.. Es decir, la actividad MRSA fue demostrada relativamente temprano para correlacionarse con la lipofilicidad; entre más lipofílico es el carbacefeno , mayor es su potencia. Desafortu nadamente, a mayor lipofilicidad del compuesto, mayor es su tendencia al enlace de alta proteína. Dicho enlace es indeseable debido a que reduce la biodisponibilidad del compuesto. En los compuestos (2) , (3) y (4), por ejemplo, el grupo fluoroetilo periférico fue igualmente utilizado en un intento por evitar el problema al lograr alguna lipofilicidad para el compuesto como un todo mientras que se mantiene un nivel más bajo de I ipof ílicidad en la molécula del núcleo. El esfuerzo parece no haber sido exitoso ya que el compuesto (2) exhibió una buena MIC (2 µ?/?G)..) aunque escaso enlace al suero (>99.2%), el compuesto (3) exhibió una adecuada MIC (4 µgfmL·) aunque también mostró un escaso enlace al suero (99.6%) y el compuesto (4) exhibió un enlace al suero bajo excelente, 36%, aunque una MIC extremadamente escasa (64 µ9/?t??). A pesar de lo anterior, los carbacefenos se mantienen en un enfoque interesante para tratar con MRSA y otras especies bacteriales resistentes. Sin embargo, lo que se necesita es una clase de carbacefenos que logre el equilibrio de requisito de potencia MRSA y enlace de proteína. La presente invención proporciona dicha clase de compuestos.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Por lo tanto, en un aspecto, la presente invención se refiere a un compuesto que tiene la fórmula química: o una sal del mismo, en donde n es O o 1 , en donde: cuyo n es 0: Ai se selecciona a partir del grupo que comprende oxígeno y azufre; R2 no existe; A2, A3 y A5 se selecciona a partir del grupo que consta en carbono y nitrógeno de manera que e! anillo de 5- miembros resultante es aromático; y, R3 se selecciona a partir del grupo que comprende hidrógeno, -NH2, y -CH2S(CH2)2NH2; cuyo n es 1 : A-i es carbono; uno o dos de A2, A3, A4 y A5 es/son nitrógeno, el resto son carbono; R2 es -CH2S(CH2)2NH2; y, si A2.es carbono, R3 es hidrógeno; si A2 es nitrógeno, R3 no existe; Ri es seleccionado a partir del grupo que consta de: hidrógeno; -CH3; -C H2C H3 ; -CH2F; y, -C H2C H2F . En un aspecto de esta invención, n es 0, A1 es azufre, dos de A2, A3 y A5 son nitrógeno, las "A" restantes son carbono, y R3 es hidrógeno. En un aspecto de esta invención, n es 0, es azufre, dos de A2, A3 y A5 son nitrógeno, las "A" restantes que son carbono, y R3 es -NH2. En un aspecto de esta invención, n es 0, A-? es azufre, A2 es carbono, A3 y A5 son nitrógeno y R3 es hidrógeno. En un aspecto de esta invención, n es 0, A-i es azufre, A2 es carbono, A3 y A5 son nitrógeno y R3 es -NH2. Un aspecto de esta invención es un compuesto que tiene la estructura "química: Un aspecto de esta invención es un compuesto que tiene estructura química: En un aspecto de esta invención, n es 1, y uno de A2, A3, A4 y A5 es nitrógeno, los demás son carbono.

En un aspecto de esta invención, n es 1, A2 es nitrógeno, y los otros grupos "A" son carbono. En un aspecto de esta invención, n es 1, A3 es nitrógeno, y los otros grupos "A" son carbono. Un aspecto de esta invención es un compuesto que tiene la estructura química: Un aspecto de esta invención es un compuesto químico que tiene la estructura química: Un aspecto de esta invención es un método de tratamiento o prevención de una infección bacterial que comprende administrar una cantidad farmacéuticamente efectiva de un compuesto de esta invención o una sal del mismo a un paciente que necesita del mismo.

En un aspecto de esta invención, la infección bacterial es ocasionada por una bacteria resistente a antibiótico de ß-Iactama. En un aspecto de esta invención, la bacteria resistente al antibiótico de ß-lactama es una bacteria Staphylococcus del género resistente a la meticilüna. Un aspecto de esta invención es una composición farmacéutica que comprende un compuesto u una sal del mismo y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Breve Descripción de los Cuadros El Cuadro 1 muestra los valores de enlace de MICs y suero humano de compuestos representativos de esta invención.

Definiciones El término "método" se refiere a maneras, medios, técnicas y procedimientos para ejecutar una tarea determinada incluyendo, pero sin limitarse a, aquellos maneras, medios, técnicas y procedimientos ya sean conocidos, o fácilmente desarrollados a partir de esas maneras, medios, técnicas y procedimientos conocidos por los practicantes de las técnicas químicas, farmacéuticas, biológicas, bioquímicas y médicas. Una "composición farmacéutica" se refiere a una mezcla de uno o más de los compuestos de esta invención, o sales fisiológicamente -aceptables de la misma, con excipientes farmacéuticamente aceptables. El propósito de una composición farmacéutica es facilitar la administración de un compuesto a un organismo. Una "sal farmacéuticamente aceptable," la cual, para los propósitos de esta descripción incluye una sal aceptable a nivel veterinario o agrícola, de un compuesto de esta invención se refiere a un compuesto en una forma cargada, ya sea un catión o un anión, junto con un contra-ión que no afecta de manera adversa la actividad de un compuesto o el bienestar del paciente. Cuando el compuesto de la presente invención está cargado en forma negativa, el contra-ión cargado en forma positiva puede ser sodio, potasio, litio, magnesio, calcio, zinc, aluminio, amonio o cualquier otro catión farmacéuticamente aceptable conocido en la técnica. Cuando el compuesto de esta invención es cargado de manera positiva, el contra-ión cargado de manera negativa puede ser cloro, bromuro, yoduro, nitrato, fosfato, sulfato, acetato, propionato, butirato, maleato, fumarato, ¦ metansulfonato, etansulfonato, 2-hidroxiethilsulfonato, n-propilsulfonato, isopropilsulfonato, lactato, malato, citrato o cualquier otro anión farmacéuticamente aceptable conocido en la técnica. Las sales son preparadas mediante la reacción de un compuesto de la presente con un ácido o base inorgánico u orgánico. Los ácidos útiles incluyen, sin limitación ácido trifluoroacético, clorhídrico, sulfúrico y metansulfónico. Las bases útiles incluyen, sin limitación, benzateno, cloroprocaina, colina, dietanolamina, etilendiamina, meglumina, procaina, y las sales de hidróxido, alcóxido, carbonato, bicarbonato, sulfato, bisulfato, amida, alquilamida, o dialquilamida de, por ejemplo, sin limitación, los siguientes cationes metálicos: litio, sodio, potasio, magnesio, calcio, aluminio, y zinc. Dichas sales pueden existir como uno o más equivalentes de ácido o base por equivalente de compuesto o como uno o más equivalentes de compuesto por equivalente de ácido o base. Los compuestos de la presente pueden existir como sales internas, llamadas zwitteriones, en los cuales un grupo básico en la molécula toma un protón a partir de un grupo ácido en la molécula para formar la sal. Por supuesto, los compuestos de la presente invención pueden ser preparados como sales no- farmacéuticamente aceptables y dichas sales están también dentro del alcance de esta invención. Como se utiliza en la presente un "excipiente farmacéuticamente aceptable", el cual para los fines de esta descripción incluye un excipiente aceptable a nivel veterinario o agrícola, se refiere a un portador, diluyente u otra sustancia inerte que no ocasiona irritación significativa para los pacientes y no anulará la actividad biológica y las propiedades del compuesto administrado aunque facilita la administración de un compuesto a un paciente. "In vitro" se refiere a procedimientos ejecutados en un ambiente artificial como, por ejemplo, sin limitación, en un tubo de ensayo o plato de Petri que contiene medio de cultivo.

"I n vivo" se refiere a procedimientos ejecutados de un organismo viviente tal como, si n limitación, un ratón, una rata, un conejo , un perro o un ser humano. Como. se utiliza en la presente, una "i nfección bacterial" se refiere al establecimiento de una población suficiente de una bacteria patogénica en un paciente para que tenga un efecto nocivo en la salud y bienestar del paciente y/o para dar origen a síntomas discernibles asociados con la bacteria particular. Como se usa en la presente, el térm ino "M I C," el cual sig nifica concentración inhibidora m ínima , se refiere a aquella concentración, en µ9/???_, de u n compuesto de esta invención que inhibe el creci miento y/o la proliferación de una cepa de bacteria en por lo menos el 80% en comparación con un control no tratado. Como se utilizan en la presente, los términos "tratar", "que trata" y "tratamiento" se refieren a un método para aliviar o anular una infección bacterial y/o sus síntomas acompañantes una vez que un paciente ha contraído una infección. Como se emplean en la presente, los términos "preven ir", "que previene" y "prevención" se refieren a u n método para impedir q ue un paciente adq uiera . una infección bacterial en primer lugar o que re-adquiera una infección después de haber sido tratado por ella.. Como se usa en la presente, "administrar", "que administra," o "administración" se refiere al suministro de u n compuesto de esta invención, una sal del mismo o de una composición farmacéutica que contiene el com puesto o su sal para el propósito de tratar o prevenir una i nfección bacterial . El término "paciente" se refiere a cualquier enti dad viviente suscepti ble a ser infectada por bacteria. Por lo tanto, u n "paciente" puede ser una planta , árbol, pez, marisco, ave, reptil o mamífero. Los pacientes actualmente preferidos incl uyen mamíferos tales como, si n limitación, perros, gatos, caballos, vacas, cerdos, conejos, cabras y ovejas. De man era más preferible, "paciente" se refiere a un ser humano. El término "cantidad terapéuticamente efectiva" como se utiliza en la presente se refiere a aquella cantidad del compuesto que es administrada q ue aliviará hasta cierto grado uno o más de los síntomas de una infección . Es decir, u na cantidad terapéuticamente efectiva se refiere a aquella cantidad de un compuesto de esta invención que tiene el efecto de (1 ) reducir, de manera preferible eliminar, una población de bacterias patogénicas en el cuerpo de un paciente, (2) inhibir (es decir, desacelerar, en forma preferible detener) la proliferación de bacteria en el cuerpo de un paciente, (3) inhibir (es decir, desacelerar, en forma preferible detener) la dispersión de una infección bacterial , y/o, (4) aliviar hasta cierto grado (de preferencia , elim inar) uno o más síntomas asociados con una infección bacterial. El término "cantidad profi lácticamente efectiva" se refiere a aquella cantidad de un compuesto de esta invención que, cuando es administrada subsecuente a una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la presente o algún otro antibiótico, tiene el efecto de (1) mantener un nivel reducido de una población de bacteria logrado por la cantidad terapéuticamente efectiva; (2) mantener el nivel de inhibición de proliferación de bacteria logrado por la cantidad terapéuticamente efectiva; (3) mantener el nivel de inhibición de dispersión de una infección logrado por la cantidad terapéuticamente efectiva; (4) mantener el nivel de alivio de uno o más síntomas o, si los síntomas fueron eliminados, mantener la inexistencia de síntomas lograda por la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de esta invención o algún otro antibiótico; o, (5) prevenir que bacterias patogénicas infecten a un paciente particularmente susceptible a la infección, tales como pacientes que padecen de enfermedades relacionadas con el sistema inmune (por ejemplo, SIDA) o aquellos que han sido tratados a propósito con inmuno-supresores tales como receptores dé transplante cuyos sistemas inmunes son suprimidos para desalentar el rechazo del transplante. El término "bacteria resistente a ß-lactama" se refiere a una bacteria contra la cual ün antibiótico de ß-lactama antibiótico tienen una concentración inhibidora mínima (MIC) mayor de 8 µg/mL.

Discusión La presente invención proporciona compuestos, métodos y composiciones efectivos para tratar infecciones bacteriales, en particular aquellas ocasionadas por bacterias que han desarrollado resistencia a los antibióticos de ß-lactama convencionales. Está bien establecido que la efectividad de los antibióticos de ß-lactama está correlacionada con la cantidad de tiempo que la concentración del fármaco libre (no enlazado) excede la MIC. Un valor de enlace de proteína del suero de >97% se considera muye elevado para que se establezca una concentración de fármaco libre suficiente en un paciente utilizando cualquier régimen de dosificación práctico. Además, un compuesto que exhibe enlace a suero humano de 70% tiene diez veces la cantidad de fármaco libre que un compuesto con 97% de enlace de suero (30% vs 3%). Los -compuestos de esta invención exhiben excelente (es decir, relativamente bajo) enlace al suero acoplado con MICs de 2 µ?/?t??- o menos contra cepas de Staphyloccus aureus resistente a meticilina.

Síntesis.

Las síntesis en la presente son solamente ilustrativas y no se pretende, ni serán consideradas, para ser limitantes del alcance de de esta invención en forma alguna. Por ejemplo, hay numerosos enfoques para la síntesis de los compuestos de la presente y todos esos enfoques están dentro del alcance de esta invención.

Ejemplo 1 Sal de (7R)-7-[(Z)-2-(2-amino-5-clorotiazol-4-il)-2- (trifenilmetoxíimino]-acetamido]-3-cloro-8-oxo-1 -aza-biciclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxilato trietil amina A una solución de bis-(2-benzotiazolil)-disulfuro (4.3 g, 0.013 mol) en diclorometano (100 mL) se agregó trifenilfosfina (3.4 g, 0.013 mol). La mezcla fue agitada durante 15 minutes después de los cuales se agregó ácido (Z)-2-(2-amino-5-clorotiazol-4-il)-2-(trifenilmetoxiimino)acético (4.9 g, 0.010 mol). La mezcla fue agitada durante 1 hora y fue enfriada hasta 0°C. En un matraz separado, se suspendió sal de ácido (7R)-7-amino-3-cloro-8-oxo-1-aza-biciclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxílico trifluoroacético (2.6 g, 0.008 mol) en diclorometano (50 mL) y se agregó trietilamina (4.0 g, 0.04 mol). La suspensión fue agitada durante 0.5 hora a temperatura ambiente y después fue transferida al matraz que contiene el éster activado de ácido 7-[(Z)-2-(2-amino-5-clorotiazolil-4)-2-tritiloxiimino] carboxílico. Se dejó calendar la solución transparente resultante hasta temperatura ambiente y fue agitada durante 48 horas. La mezcla de reacción fue lavada dos veces con porciones de 100 mL de agua, y la capa orgánica fue separada, secada sobre MgS04 anhidro, filtrada y concentrada hasta aproximadamente 50 mL. El residuo oleoso fue tratado con éter de dietilo (250 mL), y el sólido fue filtrado y secado dando 6.5 g de producto crudo. Ei análisis HPLC indicó que contenía aproximadamente 3.0 g. (0.004 mol) del compuesto deseado como sal de trietilamina. 1H NMR 400 MHz, (DMSO-d6) d 1.63-1.77 (m, 2H), 2.21-2.41 (m, 2H), 3.77-3.82 (m, 1H), 5.47 (dd, J = 9 Hz, J = 5 Hz, 1H), 7.11-7.41 (m, 15H), 9.44 (d, J = 9 Hz, 1H).

Ejemplo 2 Ester de (7R)-7-[(Z)-2-(2-amino-5-clorotiazol-4-il)-2- (trifenilmetoxiimino]-acetam¡do]-3-cloro-8-oxo-1 -aza-biciclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxilato difen i I metilo La sal de trietilamina de ácido (7R)-7-[(Z)-2-(2-amino-5-clorotiazol-4-il)-2-trifenilmetoxiimino]-acetamido]-3-cloro-8-oxo-1-aza-biciclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxílico crudo (6.5 g.) se disolvió en diclorometano (200 mL) y fue lavado dos veces con 50% H3P04/H20 y después con agua. La capa orgánica fue secada sobre MgS04 anhidro, filtrada y tratada con solución de difenildiazometano en diclorometano (40 ml_ de solución 0.5 mol/L, 0.02 mol), seguido por agitación a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla de reacción fue concentrada hasta sequedad y el residuo fue disuelto en acetato de etilo (20 mL). La solución de acetato de etilo fue sometida después a cromatografía sobre gel de sílice (200 g). Los subproductos no polares fueron eluidos con acetato de etilo:hexano (1:6), y el producto con etilo:acetato:hexano (1:1). Después de la evaporación, se obtuvo el éster de título (3.7 g.). La HPLC indicó que contenía aproximadamente - 3.5 g. (0.004 mol) del producto deseado. 1H NMR 400 MHz, (DMSO-d6) d 1.71-1.82 (m, 2H), 2.56-2.66 (m, 2H), 3.96-4.00 (m, 1H), 5.68 (dd, J = 9 Hz, J = 5 Hz, 1H), 6.94 (s, 1H), 7.28-7.36 (m, 21H),7.44 (d, J = 7 Hz, 2H), 7.54 (d, j = 7 Hz, 2H), 9.50 (d, J=9 Hz, 1H). ! Éster de (7R)-7-[(Z)-2-(2-amino-5-clorot¡azol-4-il)-2- (trifenilmetoxiimino]-acetamido]-3-[5-amino-1 ,3,4-tiadiazol-2-¡ltio]-8-oxo-1 -aza-biciclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxylato difenílmetilo A una solución de 5-amino-1 ,3,4-tiadiazol-2-tiol (0.6 g., 0.0045 mol) en dimetilformamida (25 mL) se agregó carbonato de potasio (1.0 g, 0.0076 mol). La mezcla fue agitada durante 1 hora a temperatura ambiente después de lo cual se agregó éster de (7R)-7-[(Z)-2-(2-amino-5-clorotiazol-4-il)-2-(trifenilmetoxiimino]acetamido]-3-cloro-8-oxo-1 -aza-bi cid o[4.2.0] oct-2-en-2-carboxi lato dífenilmetilo (3.2 g., 0.0039 mol). La agitación se continúo durante 18 horas. La mezcla fue particionada entre acetato de etilo (50 mL) y agua (50 mL). La capa orgánica fue separada, lavada con agua (30 mL), secada sobre MgS04 anhidro y el solvente fue retirado con un evaporador giratorio. El aceite espeso resultante fue tratado con éter de dietilo (50 mL) y el sólido que se formó fue filtrado y secado para dar 2.6 g de producto crudo. 1H NMR 400 MHz, (DMSO-d6) 6 1.53-1.71 (m, 2H), 2.18-2.21 (m, 2H), 3.88-3.93 (m, 1H), 5.65 (dd, J=9 Hz, J = 5 Hz, 1H), 6.90 (s, 1H), 7.20-7.40 (m, 21H), 7.52 (d, J = 7 Hz, 2H), 7.68 (d, J = 7 Hz, 2H), 7.72 (s, 2H), 9.48 (d, J = 9 Hz, 1H).

Ejemplo 4 Ácido (7R)-7-[(Z)2-(2-am¡no-5-cIorotiazol-4- (hidroxiimino]acetamido]-3-[5-amino-1 ,3,4-tiadíazoI-2-Utio]-8-oxo-1-aza-biciclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxílico Una solución de ácido trifluoroacético (10 mL), trietilsilano (5 mL) y diclorometano (10 mL) fue enfriada a 0°C y éster de (7R)-7-[(Z)-2-(2-amino-5-cIorotiazol-4-il)-2-(trifenilmetoxiimino]acetamido]-3-[5-amino- ,3,4-tiadiazol-2-iltio]-8-oxo-1-aza-biciclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxilato difenilmetilo de la etapa previa (2.3 g) se agregó en porciones. La mezcla de reacción fue agitada durante 3 horas a 0°C, se dejó calentar hasta temperatura ambiente y fue evaporada hasta sequedad. El residuo fue tratado con éter de dietilo (50 mL) y el sólido que formó fue filtrado y secado para dar 2.4 g de producto crudo. El producto crudo fue purificado en HP 20 inicialmente elusión de agua hasta que el pH fue neutro, después de lo cual el producto fue eluido con acetonitrilo:agua 80:20. el solvente fue evaporado para dar los 0.65 g del compuesto de título. 1H N R 400 MHz, (DMSO-d6) d 1.53-1.56 (m, 1H), 1.89-1.92 (m, 1H), 2.28-2.34 (m, 2H), 3.80-3.85 (m, 1H), 5.44 (dd, J=9 Hz, J=5 Hz, 1H), 7.28 (s, 2H), 7.63 (s, 2H), 9.12 (d, J = 9 Hz, 1H), 11.70 (s, 1H), 13.55 (brs, 1H).

Ejemplo 5 Ester de (7R)-7-[(Z)2-(2-amino-5-clorotiazol-4-il)-2- (trifenilmetoxiimino]-acetamido]-3-[1 ,3,4-tiadiazol-2-iltio]-8-oxo-1 -aza-biciclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxilato d ifen i I metilo A una suspensión de 1 ,3,4-tiadiazol-2-tioi (0.5 g, 0.004 mol) en acetonitrilo (40 mL) se agregó hidruro de sodio (0.2 g, 0.0043 mol) y la mezcla fue agitada durante 1 hora a temperatura ambiente. A la suspensión resultante se agregó éster de (7R)-7-[(Z)-2-(2-amino-5-clorotiazol-4-il)-2-(trifenilmetoxiimino]-acetamido]-3-cloro-8-oxo-1-aza-biciclo[4.2..0]oct-2-en-2-carboxilato difenilmeilo (2.6 g, 0.003 mol), y la mezcla fue agitada durante 48 horas. El solvente fue evaporado y el residuo fue particionado entre agua (50 mL) y acetato de etilo (50 mL). La capa orgánica fue secada sobre MgS04 anhidro, filtrada y evaporada. El sólido resultante fue tratado con éter de dietilo (50 mL), y el sólido que se formó fue filtrado y secado para dar 2.1 g de producto crudo. El producto crudo fue purificado mediante cromatografía sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente a partir de acetato de etilo:hexano 1:2 para acetato de etilo puro. Se obtuvo el producto de título (1.1 g.) H NMR 400 Hz, (DMSO-d6) d 1.66-1.72 (m, 2H), 2.18-2.40 (m, 2H), 3.96-4.02 (m, 1H), 5.71 (dd, J=9 Hz, J = 5 Hz, 1H), 6.94 (s, 1H), 7.20-7.40 (m, 21H), 7.45 (d, J = 7 Hz, 2H), 7.57 (d, J = 7 Hz, 2H), 9.50 (d, J = 9 Hz, 1H), 9.73 (s, 1H).

Ejemplo 6 Ácido (7R)-7-[(Z)2-(2-amino-5-clorotiazol-4-N)-2-(hidroxiimino]acetamido]-3-[1 ,3,4-tiadiazol-2-iltio]-8-oxo-1 -aza-biciclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxilico Una solución de ácido trifluoroacético (5 mL), trietilsilano (3 mL) y diclorometano (8 mL) fue enfriada hasta 0°C y se agregó éster de- (7R)-7-[(Z)-2-(2-amino-5-clorotiazol-4-il)-2-(trifenilmetoxiimino]acetamido]-3-[1 ,3,4-tiadiazol-2-i!tio]-8-oxo-1 -aza-biciclo-[4.2.0]oct-2-en-2-carboxilatoe difenilmetilo (1.5 g) en porciones. La mezcla de reacción fue agitada a 0°C durante 3 horas, se dejó calentar hasta temperatura ambiente y fue evaporada hasta sequedad. El residuo fue tratado con éter de dietilo (50 mL), y el sólido que se formó fue filtrado y secado para dar el producto crudo. El producto crudo fue purificado en HP 20 inicialmente con elusión de agua hasta que el pH fue neutro, y posteriormente con acetonitrilo:agua 80:20 para dar el compuesto de título (0.63 g.) 1H NMR 400 MHz, (DMSO-d6) d 1.63-1.73 (m, 1H), 1.88-1.91 (m, 1H), 2.33-2.48 (m, 2H), 3.89-3.94 (m, 1H), 5.50 (dd, J = 9 Hz, J=5 Hz, 1H), 7.28 (brs, 2H), 9.18 (d, J = 9 Hz, 1H), 9.70 (d, J = 9 Hz, 1H), 11.71 (s, 1H), 13.46 (brs, 1H). .

Ester de (7R)-7-[(Z)-2-(2-amino-5-clorotiazol-4-il)-2- (trifenilmetoxiimino]-acetamido]-3-rnercapto-8-oxo-1 -aza- biciclo[4.2.0] oct-2-en-2-carboxi lato difenilmetilo Una solución de éster (7R)-7-[(Z)-2-(2-amino-5-clorotiazol-4- yl)-2-(tr¡fenilmetoxiimino]-acetamido]-3-cloro-8-oxo-1-aza- biciclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxilato difenilmetilo (3.0 g, 0.0036 mol) en dimetiiformaamida (40 ml_) fue enfriado a -20°C y se agregó una solución de sulfuro de amonio in agua (20%, 5.7 ml_) mediante goteo. La mezcla fue agitada a -20°C durante 4 horas y después vertida en un regulador de pH de fosfato pH 3 (100 mL). El sólido resultante fue filtrado, lavado con agua y secado para lograr el compuesto de título crudo (5.4 g). 1H NMR 400 MHz, (DMSO-d6) d 1.64-1.82 (m, 2H), 2.24-2.32 (m, 2H), 3.87-3.92 (m, 1H), 5.73 (dd, J = 9 Hz, J=5 Hz, 1H), 6.90 (s, 1H), 7.28-7.32 (m, 21H), 7.50 (d, J=7 Hz, 2H), 7.65 (d, j=7 Hz, 2H), 7.95 (s, 1H), 9.48 (d, J=9 Hz, 1H).

Ejemplo 8 Ester de (7R)-7-[(Z)-2-(2-amino-5-clorot¡azol-4-il)-2- (trifenilmetoxiimido]-acetamido]-3-[3-(N-tert- butoxicarbonilaminoetiltiometil)pirid-4-iltio]-8-oxo-1-aza- biciclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxilato d ifen i I metilo A una solución de éster de (7R)-7-[(Z)-2-(2-amino-5-clorotiazol- 4-il)-2-(trifenilmetoxiimido]-acetamido]-3-mercapto-8-oxo-1-aza- biciclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxilato difeniimmetilo (3.0 g, 0.0036 mol) in dimetilformaamida (30 mL) se agregó 3-(N-ter- butoxicarbonilaminoetiltiometil)-4-cloropiridina (1.3 g, 0.0043 mol) a temperatura ambiente. Después de la agitación durante la noche, la mezcla de reacción fue tratada con agua (200 mL), y el sólido que se formó fue filtrado y secado para lograr el compuesto de título crudo (2.9 g). 1H NMR 400 MHz, (D SO-d6) [delta] 1.38 (s, 9H), 1.60-1.82 (m, 2H), 2.27-2.35 (m, 2H), 2.43 (t, J = 7 Hz, 2H), 3.11 (q, J=7 Hz, 2H), 3.75 (s, 2H), 3.98-4.00 (m, 1H), 5.77 (dd, J=9 Hz, J = 5 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 6.89 (d, J = 7 Hz, 1H), ,6.94 (q, J = 7 Hz, 1H), 7.18 (d, J=7 Hz, 1H), 7.20-7.60 (m, 26H), 8.36 (d, J = 5 Hz, 1H), 8.46 (s, 1H), 9.42" (d, J = 9 Hz, 1H).

EXAMPLE 9 Sal de ácido (7R)-7-[(Z)-2-(2-amino-5-clorotiazol-4-il)-2-(hidroxiimino]acetamido]-3-[3-(aminoetiltiometil)pirid-4-iltio]-8-o'xo-1 -aza-biciclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxilato, trif luoroacético Una solución de ácido trifluoroacético (10 mL), trietilsilano (5 mL) y diclorometano (10 mL) fue enfriado hasta 0°C y se agregó éster de (7R)-7-[(Z)-2-(2-amino-5-clorotiazol-4-il)-2- (trifenilmetoxiimido]acetamido]-3-[3-(N-ter-butoxicarbonilaminoetiltiometil)-pirid-4-iltio]-8-oxo-1-aza-biciclo[4.2.0]óct-2-en-2-carboxilato difenilmetilo (2.9 g, crudo de la etapa previa) en porciones. La mezcla de reacción fue agitada a 0°C durante 6 horas, se dejó calentar hasta temperatura ambiente y se evaporó hasta sequedad. El residuo fue tratado con éter de dietilo (50 mL), y el sólido que se formó fue filtrado y secado para dar 2.0 g de producto crudo. El producto crudo fue purificado en HP 20 inicialmente con elusión de agua hasta que el pH fue neutro, y posteriormente con acetonitrilo: agua 80:20, para dar el producto (0.12 g). 1H NMR 400 MHz, (DMSO-d6) d 1.75-1.90 (m, 2H), 2.23-2.34 (m, 2H), 2.65 (t, J=7 Hz, 2H), 3.04 (q, J=7 Hz, 2H), 3.87 (d, J = Hz, 2H), 3.95-4.00 (m, 1H), 5.53 (dd, J = 9 Hz, J = 5 Hz, 1H), 7.23 (d, J=6 Hz, 1H), 7.30 (brs, 2H), 7.80 (brs, 2H), 8.43 (d, J = 5 Hz, 1H), 8.49 (s, 1H), 9.14 (d, J = 9 Hz, 1H), 11.75 (s, 1H).

Ejemplo 10 Ester (7R)-7-[(Z)-2-(2-amino-5-clorotiazol-4-il)-2-(trifenilmetox¡imido]-acetamido]-3-[2-(N-ter-bu toxicar bo ni lamí noetiltiometil)pirid-3-iltio]-8-oxo-1 -aza-biciclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxilato difenilmetilo A una solución de éster de terbutilo de ácido (2-{3-[2-(2-ter-butoxicarbonilaminoetil-sulfanilmetil)-piridin-3-ildisulfanil]-piridin-2-ilmetilsulfanil}etil)carbámico (1.3 g, 0.0022 mol) en acetonitrilo (120 mL) se agregó borohidruro de sodio (0.12 g, 0.003 mol), y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 18 horas. Se agregó éster de (7R)-7-[(Z)-2-(2-amino-5-clorotiazol-4-il)-2- (trifenilmetoxiimido]-acetamido]-3-cloro-8-oxo-1 -aza-biciclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxilato difenilmetilo (3.6 g, 0.0043 mol) en porciones y la mezcla fue calentada a reflujo durante 6 horas. El solvente fue evaporado y el residuo fue particionado entre acetato de etilo (50 ml_) y agua (50 mL). La capa orgánica fue separada, secada sobre gS04 anhidro y concentrada. El residuo fue tratado con éter de dietilo (50 mL), y el sólido que se formó fue filtrado y secado para dar 3.6 g de producto crudo. El producto crudo fue purificado mediante cromatografía de columna sobre gel de sílice (100 g), fluyendo con hexano:acetato de etilo 1:1, para dar el compuesto de título (1.15 g). H NMR 400 MHz, (DMSO-d6) 8 1.36 (s, 9H), 1.55-1.60 (m, 2H), 2,40-2.51 (m, 2H), 3.08 (q, J = 7 Hz, 2H), 3.86-3.90 (m, 1H), 3.91 (s, 2H), 5.69 (dd, J=9 Hz, J=5 Hz, 1H), 6.90 (s, 2H), 7.20-7.60 (m, 28H), 7.85 (dd, J=8 Hz, J=2 Hz, 1H), 8.51 (dd, J=5 Hz, J=2 Hz, 1H), 9.44 (d, J=9 Hz, 1H).

EXAMPLE 11 Sal de ácido (7R)-7-[(Z)-2-(2-amino-5-clorotiazol-4-il)-2-(hidroxi¡mino]acetamido]-3-[2-(aminoetiltiometil)pír¡d-3-¡ltio]-8-oxo-1 -aza-biciclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxilato, trif luoroacético Una solución de ácido trifluoroacético (5 mL), trietilsilano (3 mL) y diclorometano (5 mL) fue enfriada a 0°C y se agregó éster de (7R)-7-[(Z)-2-(2-amino-5-clorotiazol-4-il)-2-(trifenilmetoxiimido]acetamido]-3-[2-(N-ter-butoxicarbonilaminoetiltiometil)-pirid-3-iltio]-8-oxo-1 -aza-biciclo[4.2.0]oct-2-en-2-carboxilato difenilmetilo (1.0 g, 0.9 mmol) en porciones. La mezcla de reacción fue agitada a 0°C durante 2 horas, se dejó calentar hasta temperatura ambiente y fue evaporada hasta sequedad. El residuo fue tratado con éter de dietilo (50 mL), y el sólido que se formó fue purificado y secado para dar 0.65 g del producto de título. 1H NMR 400 MHz, (DMSO-d6) d 1.56-1.66 (m, 1H), 1.78-1.86 (m, 1H), 2.08-2.18 (m, 2H), 2.73 (t, J = 7 Hz, 2H), 3.03 (q, J=7 Hz, 2H), 3.81-3.86 (m, 1H), 4.01 (dd, J = 17 Hz, J = 14 Hz, 2H), 5.45 (dd, J=9 Hz, J=5 Hz, 1H), 7.37 (dd, J = 8 Hz, J = 5 Hz, 2H), 7.84 (brs, 2H), 7.86 (dd, J=8 Hz, J=2 Hz, 2H) 8.47 (dd, J = 5 Hz, J=2 Hz, 1H), 9.12 (d, J = 9 Hz, 1H), 11.70 (s, 1H).

Rutas de Administración Las rutas de administración adecuadas de un compuesto de esta invención incluyen, sin limitación , oral , rectal , transm ucosa, intramuscular, subcutánea, intramedular, i ntratecal , intraventricular directa, i ntravenosa, intravítrea, intraperitoneal , intranasal, au ral o intraocular. Las rutas of administración preferidas son oral y parenteral. De manera alternativa, se puede administrar el compuesto de una manera local en vez de sistémica, por ejemplo, por medio de preparación como un ungüento que se aplica de manera directa al área infectada o por medio de inyección del compuesto directamente dentro del tejido infectado. En cualquier caso, se "puede utilizar una formulación de liberación sostenida. La ruta de administración determinará la composición/formulación del compuesto utilizado. A continuación hay una discusión breve y no limitante de composiciones farmacéuticas que, bajo circunstancias adecuadas pueden ser útiles con los compuestos de esta invención.

Com posiciones farmacéuticas Un compuesto de la presente invención o una sal fisiológicamente aceptable del mismo, puede ser administrado a un paciente o puede ser administrado en composiciones farmacéuticas que comprenden uno más excipientes adecuados. Las técnicas de formulación de fármacos para uso con varios métodos de administración se pueden encontrar en la más reciente edición de Remington's Pharmacologica! Sciences, Mack Publishing Co., Easton, Pa. Las formulaciones y técnicas descritas en Las formulaciones y técnicas descritas en Remington se refieren principalmente al uso con pacientes humanos; sin embargo, pueden ser modificadas para uso con pacientes no humanos a través de técnicas bien conocidas por aquellos con experiencia en la veterinaria y la agricultura. Las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden ser elaboradas a través de procesos bien conocidos en la técnica, por ejemplo utilizando una variedad de procesos bien conocidos de mezclado, disolución, granulación, elaboración de grageas, levigación, emulsificación, encapsulamiento, atrapamiento o liofilización. Las compasiones pueden ser formuladas en conjunción con uno o más portadores fisiológicamente aceptables que comprenden excipientes y auxiliares que facilitan el procesamiento de los compuestos activos en los que se pueden utilizar farmacéuticamente. La formulación adecuada depende la- ruta de administración seleccionada. Por ejemplo, para inyección, incluyendo, sin limitación, inyección intravenosa, intramuscular y subcutánea, los compuestos de la invención pueden ser formulados en soluciones acuosas, de manera preferible en reguladores de pH fisiológicamente compatibles tales como solución de Hanks, solución de Ringer, regulador de pH salino fisiológico o solventes polares incluyendo, sin limitación, N-metil-2-pirrolidona, 2-pirrolidona, otras pirrolidonas, N,N-dimetilacetamida, ?,?-dimetilformaamida, dimetilsulfóxido, acetona y gl'icerol formal. Para administración transmucosa, se pueden utilizar en la formulación, penetrantes apropiados para la barrera que va a ser permeada. Dichos penetrantes son conocidos de manera general en la técnica. Para administración oral, los compuestos pueden ser formulados a través de la combinación de los compuestos activos con portadores farmacéuticamente aceptables bien conocidos en la técnica. Dichos portadores permiten que los compuestos de la invención sean formulados como tabletas, pildoras, pastillas, grageas, cápsulas, líquidos, geles, jarabes, pastas, papillas, soluciones, suspensiones, soluciones concentradas y suspensiones para dilución en el agua para beber de un paciente, premezclas para dilución en la alimentación de un paciente, y similares, para ingestión oral de un paciente. Las preparaciones farmacéuticas para uso oral se pueden elaborar utilizando un excipiente sólido, de manera opcional moliendo la mezcla resultante, y procesando la mezcla de gránuios, después de la adición de otros auxiliares si se desea, para obtener tableta o núcleos de grageas. Los excipientes útiles son, en particular, rellenos tales como azúcares, incluyendo lactosa, sacarosa, manitol, o sorbitol, preparaciones de celulosa como por ejemplo, almidón de maíz, almidón de trigo, almidón de arroz y almidón de papa y otros materiales tales como gelatina, goma de tragacanto, metil celulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio y/o polivinilpirrolidona (PVP). Si se desea , se pueden agregar agentes de desintegración, tales como polivinil pirrolidona entrelazada, agar, o ácido algínico. También se puede emplear una sal como el alginato de sodio.

Los núcleos de gragea son provistos con recubrimientos adecuados. Para este fin propósito, se pueden utilizar soluciones de azúcar concentradas que pueden contener de manera opcional goma arábiga, talco, polivinil pirrolidona, gel de carbopol, polietilen glicol, y/o dióxido de titanio, soluciones de laca, y solventes orgánicos adecuados o mezclas de solvente. Se pueden agreg ar tintes o pigmentos las tabletas o recubrimientos de gragea para identificación o para caracterizar diferentes combinaciones de dosis de compuesto activo. Las composiciones farmacéuticas que se pueden utilizar oralmente incluyen cápsulas de aj uste suave hechas de gelatina, así como cápsulas selladas suaves hechas de gelatina y un plastificante, tal como glicerol o sorbitol. Las cápsulas de ajuste suave pueden contener los ingredientes activos en mezcla con un relleno tal como lactosa, un aglutinante como almidón y/o un lubricante como talco a o estearato de magnesio y, de manera opcional , estabilizadores. En las cápsulas suaves, los compuestos activos pueden ser disueltos o suspendidos en líquidos adecuados, tales como aceites grasos, parafina líquida o polietilen glicoles líquidos. Los estabilizadores pueden agregarse también a esas formulaciones. Para la administración mediante inhalación, los compuestos de la presente invención pueden ser suministrados de manera conveniente en u na forma de una aspersión en aerosol util izando un paquete presurizado o un nebulizador y un propulsor adecuado , por ejemplo, sin limitación, diclorodifl uorometano, triclorofluorometano, diclorotetrafluoroetano o dióxido de carbono. En el caso de un aerosol presurizado, la unidad de dosis puede ser controlada al proporcionar u na válvula para suministrar una dosis medida. Las cápsulas y cartuchos de, por ejemplo, gelatin a para uso en un inhalador o aislante pueden ser formuladas para contener una mezcla en polvo del compuesto y una base de polvo adecuada del tal como lactosa o almidón. Los compuestos también pueden ser formulados para administración parenteral , incluyendo, sin limitación, inyección de bolo, o infusión continua. Las formulaciones para inyección pueden ser presentadas en forma de dosis, por ejemplo, en ampolletas o recipientes de dosis m últiple. Las composiciones útiles incluyen, sin limitación, suspensiones soluciones o emulsiones en vehículos oleosos o acuosos, y pueden contener aditamentos tales como agentes de suspensión, estabilización y/o suministro . Las composiciones farmacéuticas para administración parenteral incluyen soluciones acuosas de una forma soluble en agua , tales como, sin limitación, una sal, del compuesto activo. Adicionalmente, las suspensiones de los compuestos activos pueden ser preparadas en un vehículo lipofílico. Los vehículos lipofílicos adecuados incl uyen aceites grasos tales como aceite de ajonjolí, ésteres de ácido graso sintético tales como oleato de eti lo y triglicéridos, o materiales tales como liposomas. Las suspensiones de inyección acuosas pueden contener sustancias que incrementan la viscosidad la suspensión, tales como carboximetil celulosa de sodio, sorbitol, o dextran. En forma opcional, la suspensión también puede contener estabilizadores y/o agentes adecuados que incrementan la solubilidad de los compuestos para permitir la preparación de soluciones altamente concentradas. De manera alternativa, el ingrediente activo puede estar en forma de polvo para constitución con un vehículo adecuado, por ejemplo, agua libre de pirógeno, estéril, antes del uso. Los compuestos también pueden ser formulados como supositorios o enemas de retención, utilizando por ejemplo, bases de supositorio convencionales tales como manteca de cacao u otros glicéridos. Además de las formulaciones descritas con anterioridad, los compuestos- también pueden ser formulados como preparaciones de depósito. Dichas formulaciones de acción prolongada pueden ser implementadas mediante implantación (por ejemplo, en forma subcutánea o intramuscular) o por medio de inyección intramuscular. Un compuesto de esta invención puede ser formulado para esta ruta de administración con materiales poliméricos o hidrofóbicos adecuados (por ejemplo, en una emulsión con un aceite farmacológicamente aceptable), con resinas de intercambio de ión, o como un derivado moderadamente soluble tal como, sin limitación, una sal moderadamente soluble.

Se pueden emplear otros sistemas de suministro para compuestos farmacéuticos relativamente hidrofóbicos. Las liposomas y emulsiones son ejemplos bien conocidos de vehículos o portadores de suministro para fármacos hidrofóbicos. Además, se pueden emplear solventes orgánicos tales como dimetilsulfóxido, aunque con frecuencia con el riesgo de mayor toxicidad. De manera adicional, los compuestos pueden ser suministrados empleando un sistema de liberación sostenida, tales como matrices semi-permeables de polímeros hidrofóbicos sólidos que contienen el agente terapéutico. Se han establecido varios materiales de liberación sostenida y son bien conocidos por aquellos con experiencia en la técnica. Las cápsulas de liberación sostenida pueden, dependiendo de su naturaleza química, liberar los compuestos durante unos cuantos días hasta más de 100 días. Dependiendo de la naturaleza química y la estabilidad biológica del compuesto particular, pueden emplearse estrategias de estabilización adicionales. Las composiciones farmacéuticas útiles en la presente pueden comprender portadores o excipientes sólidos o de fase de gel. Ejemplos de dichos portadores o excipientes incluyen, pero no se limitan a, carbonato de calcio, fosfato de calcio, varios azúcares, almidones, derivados de celulosa, gelatina, y polímeros tales como polietilen glicoles. Una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de esta invención se puede utilizar para tratar a un paciente que padece una infección bacterial resistente a antibiótico tal como aquella ocasionada por MRSA, u otra cepa resistente a meticilina, o una cepa resistente a vancomicina o resistente a ampicilina. En particular, las infecciones ocasionadas por S. aureus resistentes pueden ser tratadas con un compuesto de esta invención. Las cepas S. aureus ilustrativas que pueden ser tratadas, incluyen, sin limitación, S. aureus Col (MethR)(bla-), S. aureus 76 (MethR) (bla+), S. Aureus ATCC 29213, S. Aureus ATCC 25913, S. Aureus ATCC 32432 y S. /Aureus C0I8A. Además, las cepas Enterococcus tales como, sin limitación, £. faecium ATCC 35667 y E. faecalis ATCC 29212 pueden ser tratadas de manera efectiva. Las composiciones que contienen un compuesto o compuestos de esta invención pueden ser administrados para tratamiento profiláctico o terapéutico. En aplicaciones terapéuticas, el o los compuestos pueden ser administrados a un paciente que ya padece una infección, como se describió antes, en una cantidad suficiente para curar o por lo menos detener parcialmente los síntomas de la infección. La dosis requerida es referida como una cantidad terapéuticamente efectiva o dosis. La dosis dependerá de la severidad y el curso de la infección, la terapia previa, el estado de salud del paciente y la respuesta a los fármacos, y el criterio del médico tratante. Para aplicaciones profilácticas, los compuestos de la invención son administrados a un paciente que aún no está infectado aunque está particularmente en riesgo de infección tal como, por ejemplo, un paciente de transplante a quien se le dan inmuno-supresores para evitar el rechazo. La dosis utilizada es referida como una cantidad profilácticamente efectiva o dosis. En este uso, las cantidades precisas dependen de nuevo del estado de salud del paciente, peso y similares. Y, como se observó en forma previa, también se puede administrar una cantidad profiláctica para mantener el nivel de mejoría en la salud y bienestar de un paciente logrado por la(s) dosis terapéutica(s) previa(s). Una vez que ha mejorado la condición de un paciente que ha recibido una dosis terapéutica, se puede administrar, si es necesario, una dosis de mantenimiento, similar a la dosis profiláctica. La dosis o frecuencia de administración, o ambas, pueden ser reducidas como una función de los síntomas, hasta un nivel en el cual se mantiene la condición mejorada. Los pacientes pueden requerir de tratamiento intermitente en una base a largo plazo que asegura el control de la infección.

Dosis La dosis adecuada para lograr una cantidad terapéutica o profilácticamente efectiva dependerá de la severidad y curso de la infección, la terapia previa, el estado de salud general del paciente, su respuesta a los fármacos, etc., todo lo cual está dentro del conocimiento, experiencia y criterio del médico tratante.

En general, una dosis efectiva adecuada del compuesto de la invención estará en el rango de 0.1 hasta 10,000 miligramos (mg) por receptor por día, de manera preferible en el rango de 20 hasta 2000 mg por día. La dosis deseada es presentada de manera preferible en una, dos, tres, cuatro o más sub-dosis administradas en intervalos apropiados a lo largo del día. Esas sub-dosis pueden ser administradas como una unidad de dosis, por ejemplo, una dosis individual, por ejemplo, una dosis individual de 5 hasta 1000 mg, de preferencia 10 hasta 100 mg de ingrediente activo. De manera preferible, los compuestos de la invención serán administrados en cantidades de entre aproximadamente 2.0 mg/kg hasta 250 mg/kg del peso corporal del paciente, entre aproximadamente una hasta cuatro veces por día. Una vez que se observa mejoría de la condición del paciente, se puede administrar una dosis de mantenimiento o profiláctica, si así lo desea el médico tratante. La dosis, frecuencia o ambas, se pueden reducir como una función de la respuesta del paciente hasta un nivel en el cual persiste la mejoría. Cuando se han aliviado los síntomas hasta el nivel deseado, el tratamiento puede ser detenido aunque algunos pacientes pueden requerir de tratamiento intermitente en una base a largo plazo si vuelven a presentarse empeoramientos de los síntomas. Evaluación biológica Se apreciará que, en cualquier serie determinada de compuestos, se observará un espectro de actividad biológica. En su modalidad más preferida, un compuesto de esta invención demostrará actividad superior a la vancomicina o cefotaxima contra infecciones bacteriales resistentes a antibióticos de ß-lactama convencionales tales como meticilina y ampicilina. Los siguientes procedimientos pueden, sin limitación, ser utilizados para evaluar los compuestos de esta invención. La MIC in vitro para aislados bacteriales se puede obtener de la siguiente manera: un compuesto de prueba es incorporado en una serie de diluciones dobles en agar Mueller-hinton. A la solidificación, un número de diferentes cepas bacteriales son inoculadas por punto sobre la superficie del agar. El agar es incubado durante la noche y el punto de interrupción MIC determinado mediante observación de la concentración de fármaco que inhibe por completo el crecimiento. Los procedimientos utilizados en esos experimentos son generalmente aquellos sintetizados por el National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS), como se establece en la publicación de NCCLS titulada "Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests" (1991), la cual está incorporada mediante referencia como si estuviese completamente integrada a la presente. A continuación se ejemplifica dicho procedimiento aunque se comprende que las modificaciones del procedimiento pueden ser implementadas según se requieran. Alícuotas de los compuestos son preparadas en solución salina reguladora de pH de fosfato (PBS) a un pH de aproximadamente 7.2.

Se agrega Tween 20 o dimetilsulfóxido (DMSO) si es necesario para solubilizar el compuesto y se pueden emplear también formación de remolino, sonicación y calentamiento moderado. Comúnmente, la concentración de la solución de abastecimiento es de 10X aquella de la concentración de compuesto concentración más elevada que se va a utilizar. Se prepararon diluciones dobles seriales por debajo de la concentración más baja que se va a probar. Cada concentración de compuesto es probada por duplicado. Una placa de control que utiliza un fármaco de referencia tal como cefotaxima, vancomicina o imipenem es utilizada como control positivo. Se prepara también una placa de control negativo que no contiene fármaco ni compuesto. Se recuperaron unas cuantas colonias aisladas a partir de un cultivo puro preparado sobre placas de agar y transferidas a un tubo de caldo nutriente y se dejaron crecer a 35-36°C hasta que se alcanzo la fase-log de crecimiento, de manera usual aproximadamente 4-6 horas. El caldo se agregó después mediante goteo a PBS hasta que la turbidez de la suspensión iguala un estándar 0.5 McFarland el cual es igual a aproximadamente 108 cfu/ml. Las placas de prueba que contienen las diluciones de compuesto y las placas de control son inoculadas después con la suspensión PBS. Las placas son incubadas después durante 16-20 horas a 35-36°C. Las placas son observadas después para determinar que concentración del compuesto de prueba es la MIC. Los compuestos que muestran actividad superior en las pruebas in vitro pueden después ser evaluadas adicionalmente en modelos animales tales como ratas y ratones. A continuación hay un ejemplo de dicha prueba, que se comprende es un ejemplo que no se interpretará como limitante del alcance de esta invención en forma alguna. La cepa de Staphylococcus aureus Smith (ATCC 13709, susceptible a la penicilina) o la cepa 76 (resistente a la meticilina) se deja crecer durante la noche a 37°C en caldo de infusión cerebro-corazón (BHIB). A la mañana siguiente, es sub-cultivada en BHIB fresco e incubada durante 4-5 horas a 37°C. Las células son recolectadas mediante centrifugación y lavadas dos veces mediante con PBS, y ajustadas para el inoculo deseado inoculo. La suspensión celular es mezclada después con un volumen igual de 14% mucina gástrica de cerdo estéril (Comber K. R.; Osborne C. D.; Sutherly R., "Comparative effects of amoxicillin y ampicillin in the treatment of experimental mouse infeccións," Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 1995, 7(2):179-185). El inoculo es mantenido en un baño de hielo hasta que está listo para el uso (preferible menos de una hora). Ratones Swiss-Webster machos son sometidos a prueba de manera intraperitoneal con 0.5 mL de la suspensión bacterial anterior de la cepa S. aureus Smith (LD50). Los compuestos de prueba son administrados de manera subcutánea en volúmenes de 0.1 mL inmediatamente después de la inoculación y de nuevo 2 horas más tarde. Los animales son observados después durante 72 h. La dosis asociada con la sobrevivencia del 50% (ED50) es determinada entonces utilizando el método próbit (Pasiello, A. P., J. M. Essigmann, y G. N. Wogan, "Rapid y accurate determination of median lethal dose (LD50) y its error con a small computer," J. Toxicol. Environ. Health, 1977, 3:797-809). Como se observó previamente, para ser un compuesto anti- RSA efectivo, a carbacefen debe exhibir un equilibrio adecuado de potencia contra enlace de proteína del suero. Se puede utilizar el siguiente procedimiento para evaluar el enlace de suero: los compuestos son incubados en suero durante 10 minutos a 37°C en un baño de agua con agitación. Después se obtiene un ultrafiltrado de suero mediante centrifugación de unidades de ultra-filtración (Amicon Centrifree) durante, por ejemplo, 20 minutos a 25°C. El contenido de compuesto en el ultrafiltrado es cuantificado mediante HPLC utilizando estándares preparados en ultra-filtrado de modelo que experimenta procesamiento similar. Los compuestos representativos de esta invención fueron probados contra dos aislados de MRSA, MRSA COL y MRSA 76, contra los cuales no son efectivos los antibióticos de ß-lactama clínicos actuales, ya que exhiben MICs>=16 µg/mL. Además, los valores de enlace de suero humano de los compuestos fueron determinados y los resultados se muestran en el Cuadro 1. Como se puede ver, todos los compuestos exhiben ICs of 2 g/mL o menos y enlace de suero de 89.4% o menos, números que indican que esos compuestos serán altamente efectivos para tratar infecciones ocasionadas por esas cepas. Se espera que los compuestos sean igual, si no es que más, potentes contra otras cepas resistentes de bacterias así como bacterias que son susceptibles a los antibióticos clínicos actuales. El rango de utilidad de los compuestos de la presente pueden establecerse por parte de aquellos con experiencia en la técnica utilizando las descripciones de la presente y todas las bacterias dentro del rango útil están dentro del alcance de esta invención. CUADRO 1 CONCLUSION En tanto que la descripción anterior describe modalidades particulares y ejemplos que ilustran la invención, aquellos con experiencia en la técnica reconocerán que la invención puede ser practicada en una variedad de formas alternativas, por ejemplo, los compuestos de la presente pueden ser sintetizados a través de muchas rutas diferentes. Todas esas variaciones están dentro del alcance de esta invención. Otras modalidades de esta invención están contenidas en las siguientes reivindicaciones.

Claims (16)

1. REIVINDICACIONES compuesto que tiene la estructura química o una sal del mismo en donde: n es 0 o 1 , en donde: cuando n es 0: Ai se selecciona a partir del grupo que consta en oxígeno y azufre; R2 no existe; A2l A3 y A5 se seleccionan a partir del grupo que comprende carbono y nitrógeno de manera que el anillo de 5 miembros resultante es aromático; y, R3 se selecciona a partir del grupo que comprende hidrógeno, -NH2, y -CH2S(CH2)2NH2; cuando n es 1: Ai es carbono; uno o dos de A2, A3, A4 y A5 es/son nitrógeno, el resto son carbono;
2. R2 es -CH2S(CH2)2NH2; y, si A2 es carbono, R3 es hidrógeno; si A2 es nitrógeno, R3 no existe; R se selecciona a partir del grupo que comprende: hidrógeno; -CH3; -CH2CH3; -CH2F; y -CH2CH2F. 2. El compuesto o sal de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque: n es 0; A-i es azufre; dos de A2, A3 y A5 son nitrógeno, las "A" restantes son carbono; y R3 es hidrógeno.
3. 3. El compuesto o sal de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque: n es 0; ? es azufre; dos de A2, A3 y A5 son nitrógeno, las "A" restantes son carbono; y R3 is -NH2.
4. 4. El compuesto o sal de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque: n es 0; es azufre; A2 es carbono; A3 y AS son nitrógeno; y R3 es hidrógeno.
5. 5. El compuesto o sal de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque: n es 0; AT es azufre; A2 es carbono; A3 y A5 son nitrógeno; y, R3 es -NH2.
6. 6. El compuesto o sal de conformidad con la reivindicación 1, que tiene la estructura química:
7. 7. El compuesto o sal de conformidad con la reivindicación 1, que tiene la estructura química:
8. 8. El compuesto o sal de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque: n es 1 ; y uno de A2, A3t A4 y A5 es nitrógeno, los otros son carbono.
9. 9. El compuesto o sal de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado porque A2 es nitrógeno.
10. 10. El compuesto o sal de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado porque A3 es nitrógeno.
11. 11. El compuesto o sal de conformidad con la reivindicación 1, que tiene la estructura química:
12. 12. El compuesto o sal de conformidad con la reivindicación 1, que tiene la estructura química:
13. 13. Un método de tratamiento o prevención de una infección bacterial que comprende administrar una cantidad farmacéuticamente efectiva de un compuesto o sal de conformidad con la reivindicación 1 a un paciente que necesita del mismo.
14. 14. El método de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado porque la infección bacterial es ocasionada por una bacteria resistente al antibiótico de ß-lactama.
15. 15. El método de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado porque la bacteria resistente al antibiótico de ß-lactama es una bacteria de Staphylococcus del género resistente a la meticilina.
16. 16. Una composición farmacéutica, que comprende: un compuesto o sal de conformidad con la reivindicación 1; y, uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables.