MXPA03005655A - Liberacion pulmonar de agentes antifungicos de polieno. - Google Patents

Abstract

La presente invencion proporciona composiciones de polieno secadas por aspersion para inhalacion oral al pulmon. Las composiciones antifungicas de polieno demostraron propiedades de aerosol superiores, no exhibieron degradacion apreciable del polieno en el secado por aspersion, y son utiles en el tratamiento y profilaxis de ambas, infecciones fungicas generalizadas y pulmonares.

Description

LIBERACION PULMONAR~T5E"SS S ????FUNGICOS DE POLIENO CAMBO E LA INVENCION La presente invención concierne a composiciones de polieno secadas por aspersión, y a métodos para elaborar y administrar dichas composiciones- En particular, la invención está dirigida a composiciones de polieno en polvo que poseen numerosas características notables, que las hace ventajosas para inhalación oral al pulmón para el tratamiento y/o profilaxis de infecciones generalizadas y pulmonares. El polieno es sorprendentemente estable Tes decir, exhibe degradación química mínima) al secar por aspersión, y el polvo resultante posee propiedades ' de aerosol superiores al polvo resultante (bajo MMAD, excelente disponibilidad) , aun en la ausencia de portadores o excipientes estabilizantes.

ANTECEDENTES DE" XA 'INV^NCTON Las infecciones fúngicas pulmonares, que están asociadas con niveles significativos de morbilidad y mortalidad, representan un reto médico importante. Recientemente, la frecuencia y seriedad de las infecciones fúngicas ha aumentado, debido al número creciente de trasplantes de órganos, regímenes de terapia antineoplástica agresiva, y pacientes que sufren de enfermedades inmunes, tales como HIV. Las infecciones fúngicas del pulmón, por ejemplo, neumonía fúngica, aspergilosis broncopulmonar alérgica y otras infecciones causadas por Aspergillus, se tratan típicamente por instilación intracavitaria directa, administración oral, intraperitoneal, o intrapleural, o infusión intravenosa de uno o más agentes antifúngicos tales como Anfotericina B (St. Georgiev, V., Respiration, 59: 291-302 (1992). Desafortunadamente, existen serios inconvenientes con cada una de las rutas de administración empleadas comúnmente, como se describe más completamente posteriormente. La instilación intracavitaria directa, un procedimiento invasor, se logra usualmente por medio de inyecciones transtoráxicas repetidas en la cavidad. Los inconvenientes de la administración intracavitaria puede incluir poca tolerancia (el desarrollo de fiebre) , riesgo de pneumotórax, y reincidencia de infección en la cavidad (Glimp, RA, y colaboradores, Aren Interm Med., 143: 303-308 (1983) . En general, la administración endobronquial de antifúngicos ha encontrado con mínimo éxito (Henderson, AH, y colaboradores Thorax, 23: 519 - 523 (1968)). Las formulaciones orales tienden a ser absorbidas muy pobremente desde el tracto gastrointestinal, y como la terapia intravenosa, está limitada por la toxicidad del fármaco dependiente de la dosis asociada, la cual (i) limita la dosis intravenosa que puede ser administrada, y (ii) puede dar como resultado complicaciones desagradables o igualmente que atentan contra la vida tales como nefrotoxicidad y anemia normocrómica. Algunas de las desventajas de la terapia intravenosa que usa formulaciones antifúngicas convencionales se han dirigido hacia el desarrollo de composiciones liposómicas tales como ambisoma (una formulación liposómica de Anfotericina B) , la cual, cuando se administra por medio de inyección, no presenta toxicidad seria tales como daño renal tubular, y permite la administración de dosis que exceden las usadas en formulaciones convencionales (Hay, RJ in Recent Progress in Antifungal Chemotherap . New York, Marcel Dekker, 1992 (323-332) ) . Los antifúngicos generalizados administrados intravenosa u oralmente para el tratamiento de infecciones respiratorias adolecen de una desventaja adicional - la incierta penetración del fármaco en el tejido pulmonar y secreciones infectadas. Esto es importante ya que la terapia efectiva del fármaco para infecciones del tracto respiratorio más leves depende no solamente de la susceptibilidad de los microorganismos que lo infectan, sino del logro de concentraciones antifúngicas efectivas en el tejido y mucosa pulmonar. En un intento de vencer este problema, se ha investigado la terapia por inhalación que usa aerosoles generados por un nebulizador, usando antifúngicos tales como Anfotericina B (Beyer, J. y colaboradores, Infection, 22: 2, 143 (1994); Calvo, V., y colaboradores, Chest, 115: 5 (1999); Dubois J. , y colaboradores, Chest, 108: 3, 750- 753 (1995); Diot, P. y colaboradores, Eur. Respir J., 8: 1263- 1268 (1995)) . Productos farmacéuticos aerosolizados para inhalación pueden ser liberados en una variedad de diferentes formas que incluyen rocios nebulizados, formulaciones en polvo presurizadas, y formulaciones en polvo no presurizadas . Existen varios inconvenientes para ambas formulaciones liquida y presurizada. Las desventajas de las formulaciones liquidas incluyen la inestabilidad química de ciertos agentes activos en solución (polienos en particular) , el alto potencial de contaminación por microorganismos, y el uso de nebulizadores líquidos incómodos. Las formulaciones en polvo presurizadas que contienen un gas comprimido o gas propelente licuado tiene las desventajas de emplear agentes que desprenden ozono en el caso de CFCs, o gases de invernadero en el caso de HFCs . Adicionalmente, los gases propelentes líquidos típicamente no pueden acomodar las cantidades de agente antifúngico requeridas para lograr niveles de actividad fungistática/ fungicida localmente en el sitio de infección. La formulaciones en polvo presurizadas pueden también exhibir un alto nivel de variabilidad en la dosis que es liberada a los pulmones, debido a la incapacidad de los pacientes para coordinar consistentemente el disparo del inhalador para generar el aerosol con el ciclaje apropiado de la inhalación. El logro de solubilización o suspensión de agentes antifúngicos adecuados tales como el polieno, Anfotericina B, en el gas propelente licuado puede también ser problemático. Asi, en vista de los problemas observados anteriormente seria deseable el uso de terapias antifúngicas convencionales, para proporcionar un polvo seco antifúngico no presurizado inhalable para liberar de manera localizada al pulmón, para ambos, el tratamiento de infecciones fúngicas pulmonares y para terapia de enfermedades por hongos generalizada. Las formulaciones de polvo seco inhalable pueden proporcionar altas concentraciones de agente antifúngico en el pulmón con concentraciones despreciables en la sangre y tejidos corporales. Además, al utilizar una ruta de administración tópica, la mayor parte de las toxicidades que están asociadas con agentes antifúngicos genralizados (que incluyen nefrotoxicidad, convulsiones, fiebre, y resfriado, entre otras) pueden ser minimizadas o evitadas. La inhalación de antifúngicos usando un inhalador de polvo seco maximiza la conveniencia y la velocidad de administración, y supera las desventajas de las terapias de inhalación alternativas que se describieron anteriormente.

Desafortunadamente, el desarrollo de polvos secos estables químicamente de un agente antifúngico tal como Jnfotericina B que posee también las propiedades físicas necesarias para la aerosolización (por ejemplo, alta dispersabilidad que permanece estable durante el tiempo, tamaño aerodinámico apropiado) permanece un reto técnico.

SUMARIO DE IA INVENCION La presente invención está dirigida hacia las formulaciones de antibióticos de polieno en polvo seco por aspersión, inhalable . Mientras que los polienos tales como la anfotericina son compuestos antifúngicos muy efectivos, poseen también muy bajas solubilidades en agua y en solventes orgánicos convencionales tales como cloroformo. Así, la formulación de estos compuestos excluyendo las mezclas secas es extremadamente difícil . Aunque la solubilidad del polieno, anfotericina, puede ser aumentada bajo condiciones extremas de pH, dichas condiciones típicamente conducen a niveles significativos de degradación de fármacos y son usualmente considerados indeseables para las formulaciones de polvos para administración directa al pulmón. Así, la invención se enfrentó con el reto de tratar de encontrar condiciones para secar por aspersión el fármaco muy insoluble, anfotericina, que (i) no promete alto nivel .de degradación del fármaco, (ii) fue económicamente práctico, y (iii) da como resultado la formación de partículas aerosolizadas adecuadas para inhalación. Mientras el encuentro de una solución a alguno de estos problemas bastante directamente, llegando a un método de secado por aspersión en el cual todos estos factores fueron equilibrados para producir un polvo químicamente estable y muy dispersable, fue un reto técnico . En un esfuerzo por superar este problema, la presente invención proporciona métodos para secar por aspersión agentes antifúngicos de polieno que dan como resultado la formación de polvos muy dispersables aún estables químicamente. Esto quiere decir, los polvos antifúngicos de la invención tienen excelentes características de aerosol, de modo que sean preparadas reproduciblemente y puedan ser administradas eficientemente por inhalación al pulmón, mientras que exhiban buena estabilidad química y física. En un aspecto, la presente invención proporciona un método para preparar un polieno secado por aspersión, tal como la Anfotericina B o nistatina, para administración orai al pulmón¦. El método incluye las etapas de disolver un agente antifúngico de polieno en un solvente ácido y secar por aspersión la solución de polieno para formar un polvo inhalable que contenga no más de aproximadamente 10 % de productos de degradación de polieno y caracterizado porque una dosis emitida de más de 60 %. En una modalidad de este aspecto de la invención, el solvente ácido comprende un alcohol acidificado tal como etanol, metanol acuoso, o etanol acuoso. En aún otra modalidad, el pH del solvente acidificado varia desde aproximadamente 3.5 a aproximadamente 5. En una modalidad preferida de la invención, el polieno es disuelto en el solvente acidificado en una extensión mayor de aproximadamente 1 mg/ mi o preferiblemente en una extensión mayor de aproximadamente 2 - 3 mg/ mi . En aún otra modalidad del método, la solución que contiene polieno ácido es mantenida a una temperatura inferior a 25 °C antes de y/o durante el secado por aspersión. En una modalidad preferida, la solución que contiene polieno ácido es mantenida a una temperatura inferior a 8 °C e igualmente más preferiblemente inferior a 0 °C antes y/o durante el secado por aspersión. En aún otra modalidad del método, la solución que contiene polieno a ser secada por aspersión contiene al menos 50 % en peso de polieno con base' en el contenido de sólidos disueltos totales de la solución. En aún otra modalidad del método, la solución que contiene polieno está ausente de lipidos o agentes encapsuladores poliméricos.

En aún otro aspecto, se proporciona un método para preparar un polvo de polieno secado por aspersión para inhalación oral al pulmón en la cual un compuesto antifúngico de polieno es suspendido en un solvente acuoso para formar una suspensión, la cual es entonces molida vía húmeda, y secada por aspersión. El polvo inhalable que resulta contiene no más de aproximadamente 10 % de productos de degradación de polieno /y típicamente menos de eso) y está caracterizado por medio de una dosis emitida mayor de aproximadamente 60 % . En una modalidad particular de este aspecto de la invención, el compuesto antifúngico es homogeneizado para formar una suspensión homogeneizada antes de secar por aspersión . En aún otra modalidad de este aspecto de la invención, el polvo secado por aspersión es expuesto a humedad antes de empacarlo (es decir durante o post secado por aspersión) para disminuir o mantener el diámetro aerodinámico de las partículas, preferiblemente inferior a aproximadamente 5 micrones . En una modalidad particular, el polvo es secado por aspersión usando un gas de secado en húmedo, tal como aire húmedo, argón o nitrógeno. alternativamente, el polvo secado por aspersión es expuesto, post secado por aspersión, a una cantidad de humedad suficiente para formar un polvo que tenga un contenido de humedad que varia desde aproximadamente 3 % hasta aproximadamente 10 % en peso. En una modalidad preferida, el polvo secado por aspersión es expuesto o mantenido a humedad relativa superior a aproximadamente 5 % antes de empaque. En aún otra modalidad, el polvo secado por aspersión es aerosolizado en una corriente de aire. También se proporcionan polvos secos de polieno producidos por uno u otro de los métodos anteriores. En aún otro aspecto, la invención proporciona una composición en polvo secado por aspersión adecuada para inhalación oral al pulmón que comprende una cantidad efectiva terapéuticamente de un compuesto antifúngico de polieno, en donde la composición comprende no más de aproximadamente 10 % de productos de degradación de polieno y está caracterizado por una dosis emitida superior a aproximadamente 60 %. En una modalidad particular de la invención, el polvo secado por aspersión está compuesto de partículas que tienen un MMAD de menos de aproximadamente 5 micrones, y preferiblemente menos de aproximadamente 3.5 micrones. En aún otra modalidad, el polvo seco por aspersión no es proteináceo. En aún otra modalidad de este aspecto de la invención, el polieno no es encapsulado.

En una modalidad particular, el polvo de polieno secado por aspersión comprende substancialmente compuesto antifúngico de polieno puro (es decir, sin aditivos y/o excipientes adicionales) . En una modalidad alternativa, la composición en polvo secada por aspersión comprende adicionalmente un excipiente aceptable farmacéuticamente. Los excipientes preferidos son reguladores, leucina y trileucina . En aún otra modalidad, el polvo secado por aspersión está compuesto de al menos aproximadamente 30 % en peso de polieno . En aún otro aspecto, se proporciona en la presente un método para preparar un polvo secado por aspersión inhalable que incluye las etapas de secar por aspersión una solución o suspensión que contenga un agente activo para formar partículas que tengan un MMAD particular, es una mejora en donde el polvo es expuesto ya sea durante o después del secado por aspersión, a humedad en una cantidad efectiva para reducir el MMAD de las partículas sobre el MMM) de las partículas formadas en la ausencia de una etapa de exposición tal. Este método es aplicable particularmente a polvos que comprenden uno o más componentes moleculares que tengan un gran porcentaje de sitios de enlace de agua. La invención abarca adicionalmente composiciones en polvo aerosolizado como se describe anteriormente.

La invención abarca adicionalmente un método para tratar o prevenir infecciones fúngicas en un sujeto mamífero en necesidad del mismo para administrar al sujeto por inhalación oral un polvo antifúngico de polieno secado por aspersión como se describe en la presente. Estos y otros objetos y características de la invención se harán más completamente obvios cuando la siguiente descripción detallada sea leída conjuntamente con las figuras y ejemplos que se incluyen.

BREVE DESCRIPCION DE LAS FIGURAS Figura- 1. La figura es una gráfica de MM ) como una función del contenido de humedad de polvos de Anfotericina B pura, secada por aspersión, el detalle de la cual se proporciona en el Ejemplo 8. Los círculos sólidos representan polvos en los cuales el contenido de humedad varió por exposición a ambientes controlados de diferentes humedades relativas (6 - 40 %) y los triángulos vacíos representan polvos en los cuales el contenido de humedad varió al cambiar las condiciones de secado por aspersión.

DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION I. Definiciones Los siguientes términos que se usan en la presente tienen los significados que se indica: "Compuesto antifúngico", se refiere a cualquier compuesto o sus sales aceptables farmacéuticamente que tengan propiedades fungistáticas y/o fungicidas. "Polieno", se refiere a un compuesto orgánico que contenga una serie de dobles enlaces que sea típicamente, pero no necesariamente, conjugado. "Sal aceptable farmacéuticamente" incluye, pero no se limita a, sales preparadas con ácidos inorgánicos, tales como sales de cloruro, sulfato, fosfato, difosfato, bromhidrato y mitrato, o sales preparadas con un ácido orgánico, tal como sales de malato, maleato, fumarato, tartrato, succinato, etilsuccinato, citrato, acetato, lactato, metansulfonato, benzoato, ascorbato, para-toluensulfonato, palmoato, salicilato y estearato, asi como también estolato, gluceptato y lactobionato . Simil ármente las sales que contienen cationes aceptables farmacéutiamente incluyen, pero no se limitan a, litio, sodio, potasio, bario, calcio, aluminio, y amonio (incluyendo amonio substituido) . Las sales aceptables farmacéuticamente de compuestos antifúngicos tienen las mismas propiedades farmacológicas generales que el compuesto progenitor del cual se derivaron. Un "éster aceptable farmacéuticamente" de un compuesto antifúngico que contiene ácido carboxilico es un éster hidrolizable que tiene las mismas propiedades farmacológicas generales que el ácido del cual es derivado. Dichos ésteres incluyen ésteres de alquilo substituido o no substituido, arilo y fosforilo. Ejemplos no limitantes de ésteres aceptables farmacológicamente incluyen por ejemplo, isopropilo, butilo terciario, 2-cloroetilo, 2, 2, 2-tricloroetilo, 2, 2, 2-trifluoroetilo, p-toluensulfoniletilo, glicilo, sarcosilo, bencilo, fenilo, 1, 2-hexanoilglicerilo, para-nitrofenilo, 2, 2-dimetilo-l, 3-dioxolen-4-iuetilo, isopentenilo, o-carbometoxifenilo, piraloiloximetilsalicilo, dietilamidofosforilo, pivaloiloximetilo, aciloximetilo, propioniloximetilo, isobutiriloximetilo, dodecilo, octadecilo, e isopropiloximetilo . "Biodisponibilidad pulmonar relativa", es el porcentaje de una dosis antifúngica (para el tratamiento de enfermedad fúngica generalizada) que es depositada en los pulmones que es absorbida y entra a la sangre de un mamifero en relación al porcentaje que es absorbido en la sangre después desde un sitio de inyección intravenosa. Sistemas modelos representativos para determinar biodisponibilidades pulmonares relativas incluyen rata, conejo, mono. Las composiciones antifúngicas de la invención son, en un aspecto, caracterizadas por una biodisponibilidad pulmonar relativa de al menos aproximadamente 3 % en plasma o sangre, con biodisponibilidades pulmonares relativas generalmente que varían desde aproximadamente 5 % hasta aproximadamente 20 % o superiores. La biodisponibilidad pulmonar relativa puede estimarse al medir la absorción desde la administración intratraqueal directa o por inhalación de una composición antifúngica . "Aminoácido", se refiere a cualquier compuesto que contenga ambos grupos uno amino y un ácido carboxílico, y quiere decir que abarca sales de las mismas aceptables farmacéuticamente. Aunque el grupo amino más comúnmente tiene, lugar en la posición adyacente a la función carboxi, el grupo amino puede estar colocado en cualquier localización en la molécula. El aminoácido puede también contener grupos funcionales adicionales, tales como amino, tio, carboxilo, carboxamida, imidazol, etc. El aminoácido puede ser sintético o encontrarse de manera natural, y puede ser usado ya sea en su forma racémica o como formas activas ópticamente (D-, o L-) . por ejemplo, como un solo enantiómero activo ópticamente o como cualquier combinación o proporción de enantiómeros . "M orador", se refiere a un compuesto que mejora la absorción de un compuesto antifúngico a través de las membranas mucósicas, por ejemplo, del pulmón. "Polvo seco", se refiere a una composición pulverizada que contiene partículas sólidas finamente divididas que son capaces de (i) ser dispersadas fácilmente en un dispositivo de inhalación y (ii) inhalada por un sujeto de modo que una porción de las partículas alcancen los pulmones para permitir la penetración en los alveolos . Un polvo tal es considerado que es "respirable" o adecuado para liberación pulmonar. A menos que de establezca de otra manera , una "composición de polvo seco para liberar en el pulmón profundo" es uno que, cuando es aerosolizado, es administrado como partículas de polvo seco. Un polvo seco de conformidad con la invención es preferiblemente un polvo no liposómico. Adicionalmente, un polvo seco de la invención es uno que preferiblemente carece de agentes encapsulantes poliméricos o matrices poliméricas. "Oligopéptidos", son péptidos que comprenden dos a diez residuos aminoácidos (dímeros a decámeros) . "Péptido", como se usa en la presente abarca ambos polipéptidos, como se encuentran naturalmente y construidos artificialmente en los cuales las unidades aminoácido individuales son unidas juntas a través del enlace amida péptido estándar (el grupo carboxilo de uno y el grupo amino del otro) y que tienen un peso molecular entre aproximadamente 1,000 y aproximadamente 6,000. "Proteína", se refiere a una clase particular de polipéptidos que tienen pesos moleculares que varían desde aproximadamente 6,000 hasta más de 1,000,000.

Un "excipiente que contiene leucilo que comprende desde 1 a 5 residuos de aminoácido" incluye el aminoácido leucina, y oligómeros compuestos desde 2 hasta 5 residuos de aminoácido, uno o más de los cuales es leucina. Un polvo que comprende esencialmente "polieno antifúngico puro" es uno que carece substancialmente de algunos otros excipientes o aditivos junto al compuesto antifúngico, es decir, contiene menos de aproximadamente 3 % en peso de componentes no antifúngicos, preferiblemente menos de aproximadamente 2 % en peso de componente antifúngico, más preferiblemente menos de 1 % en peso de componente antifúngico, y en algunos casos comprende 100 % de compuesto antifúngico. "Dosis emitida", proporciona una indicación de la liberación de un polvo seco desde la pieza bucal de un dispositivo inhalador adecuado después de un evento de dispersión o de disparo. Más específicamente, la ED es una medida del porcentaje de polvo que es sacado de un envase de dosis unitaria y que sale de la pieza bucal de un dispositivo inhalador. La ED está definida como la proporción de la dosis liberada por un dispositivo inhalador a la dosis nominal (es decir masa de polvo por dosis unitaria colocada en un dispositivo inhalador adecuado antes de disparar) . La ED es un parámetro determinado experimentalmente, y es típicamente determinado in vitro usando un dispositivo de ajuste que mimetiza la dosificación del paciente. Para determinar un valor de ED, una dosis nominal de polvo seco, típicamente en una forma de dosis unitaria, es colocada en un inhalador de polvo seco adecuado (tal como el descrito en la Patente EUA No. 5,785,049, asignada a Inhale Iherapeutic Systems, Inc.) el cual es entonces activado, dispersando el polvo. La nube de aerosol resultante es entonces sacada al vacio desde el dispositivo, en donde es capturada en un filtro tarado fijado a la pieza bucal del dispositivo. La cantidad de polvo que alcanza el filtro constituye la dosis liberada. Por ejemplo, por una forma de dosificación que contenga polvo seco, 5 mg, colocada en un dispositivo de inhalación, si la dispersión del polvo da como resultado la recuperación de 4 mg de polvo sobre un filtro tarado como se describió anteriormente, entonces la ED para la composición de polvo seco es: 4 mg (dosis liberada)/ 5 mg (dosis nominal) x 100 = 80 %. Para polvos homogéneos, los valores de ED proporcionan una indicación de la liberación de porción terapéutica (es decir, compuesto antifúngico) desde un dispositivo inhalador después de dispararlo. Similarmente para MDI y formas de dosificación de nebulizador, la ED corresponde al porcentaje de fármaco que es sacado desde una forma de dosificación y que sale de la pieza bucal de un dispositivo inhalador.

La "fracción de partículas finas", o "FPF", proporciona una medida de la eficiencia de liberación de polvo seco aerosolxzado desde una forma de dosificación unitaria (por ejemplo, un empaque de vejigas) en el pulmón profundo, y es determinada experimentalmente usando un impactador de cascada Anderson de tiro corto operado al vacio de 28.3 litros por minuto. La FPF es definida como la masa total, en miligramos, de polvo aerosolxzado que tiene un tamaño de partícula de menos de 3.3 micrómetros, en relación a la masa de polvo contenida en un forma de dosificación unitaria, en miligramos, y expresada como un porcentaj e . FPF = Masa de polvo aerosolxzado total inferior a 3.3 um (mg) masa que llena la forma de dosificación unitaria El polvo "dispersable" es uno que tiene un valor de EL de al menos aproximadamente 30 ¾, preferiblemente al menos aproximadamente 35 %, más preferiblemente al menos 40 %, y más preferiblemente al menos aproximadamente 50 . Los polvos de la presente invención son muy dispersables, que tienen valores de ED de al menos 60 % o superior. La dispersabilidad, como se usa en la presente, se refiere a la dispersabilidad de un polvo seco en una corriente de gas (por ejemplo, corriente de aire) a menos que se indique de otra manera.

Una composición de polvo seco adecuada para "terapia inhalatoria", es una que, cuando se aerosoliza, puede ser (i) fácilmente dispersada en un dispositivo de liberación para inhalación, y (ii) inspirada ya sea a través de la boca por un sujeto mamífero de modo que al menos una porción de las partículas son absorbidas en el pulmón. Una composición adecuada para "administración pulmonar oral" comprende partículas al menos una porción de las cuales, cuando se libera vía inhalación por la boca, alcanza los tejidos del pulmón, incluyendo el pulmón profundo . El "diámetro medio de masa" o "MMD" es una medida del tamaño de partícula medio, ya que los polvos de la invención son generalmente polidispersos (es decir, consisten de un intervalo de tamaños de partículas) . Los valores de MMD como se reportan en la presente son determinados por difracción láser, aunque pueden usarse numerosas técnicas empleadas comúnmente para medir el tamaño de partícula medio (por ejemplo, sedimentación por centrifugación, microscopía electrónica, dispersión luminosa) . El "diámetro aerodinámico medio de masa" o " MAD", es una medida del tamaño aerodinámico de una partícula dispersa. El diámetro aerodinámico se usa para describir un polvo aerosolizado en términos de su comportamiento de sedimentación, y es el diámetro de una esfera de densidad unitaria que tiene la misma velocidad de sedimentación, generalmente en aire, que la partícula. El diámetro aerodinámico abarca forma de partícula, densidad y tamaño físico de partícula. Como se usa en la presente, MMAD se refiere al punto medio o mediana de la distribución de tamaño de partícula aerodinámica de un polvo aerosolizado determinado por medio del impacto en cascada. "Excipientes o portadores aceptables farmacéuticamente" se refiere a un excipiente que puede ser incluido en las partículas de la invención y captados en el pulmón en asociación con las partículas sin efecto colateral toxicológico adverso significativo (por ejemplo, toxicidad, irritación, y respuesta alérgica) al sujeto, y particularmente a los pulmones del sujeto. "Cantidad efectiva farmacológicamente" o "cantidad efectiva fisiológicamente" de un polvo antifúngico es la cantidad de un compuesto antifúngico presente en una composición en polvo seco en forma de partículas, como se describe en la presente que es necesaria para proporcionar un nivel profiláctico o terapéutico de agente antifúngico, ya sea en el torrente sanguíneo o al sitio de tejido infectado (dependiendo de los hongos a ser tratados) cuando dicha composición es administrada por inhalación por una duración particular de tiempo. La cantidad precisa dependerá de numerosos factores, por ejemplo, el antifúngico particular contenido en el polvo, la potencia del compuesto antifúngico empleado, la condición a ser tratada, el dispositivo de liberación empleado, las características físicas del polvo, uso del paciente previsto (por ejemplo, el número de dosis administradas por día) , y consideraciones de paciente, y puede fácilmente ser determinado por un experto en la materia, con base en la información proporcionada en la presente. Los intervalos de dosificación recomendados se describirán posteriormente con mayor detalle . "Densidad aparente", se refiere a la densidad de un polvo previo a la compactación (es decir, la densidad de un polvo sin comprimir) , y se mide típicamente por medio de los métodos ÜSP bien conocidos. La "extensión de degradación" de un polieno es el porcentaje de polieno, contenido en la composición de polvo seco determinada para ser modificada químicamente desde el material inicial intacto, que se determinó por medio de un ensayo químico adecuado (por ejemplo, NMR, HPLC, etc.); 100 % del polieno remanente químicamente intacto durante el proceso de secado por aspersión representa una extensión de degradación de 0 % . Composiciones Antifúngicas Inhalables La presente invención proporciona composiciones para la liberación pulmonar oral de compuestos antifúngicos de polieno. Estas composiciones superan muchos de los problemas e inconvenientes encontrados hasta ahora al administrar antifúngicos, y particularmente antifúngicos con polieno, por otras rutas (por ejemplo, pobre absorción desde el tracto gastrointestinal, efectos colaterales tóxicos severos, los requerimientos de hospitalización durante la terapia intravenosa, etc.) particularmente para tratar y/o prevenir enfermedades fúngicas pulmonares y/o generalizada. Las composiciones en polvo descritas en la presente (19 son fácilmente dispersas por medio de los dispositivos de liberación de polvo seco (es decir, propiedades de aerosol superiores demostradas) , (ii) exhibe buena estabilidad física durante la fabricación, procesamiento, y almacenamiento del polvo, (iii) son preparados reproduciblemente con mínima degradación de polieno. Las composiciones antifúngicas de polieno inhalables de conformidad con la invención son preferiblemente polvos secos (es decir, para uso en inhaladores de polvo seco (DPls) . Las composiciones de polvo seco de conformidad con la presente invención generalmente incluye uno o más compuestos antifúngicos, siendo uno el polieno, y opcionalmente un excipiente aceptable farmacéuticamente. Se han preparado polvos secos compuestos del agente antifúngico de polieno puro (es decir, polvos respirables compuestos de uno o más compuestos antifúngicos de polieno y que carecen esencialmente de cualquier aditivo o excipientes adicionales) y que demuestra buenas propiedades de aerosol (ver por ejemplo, los Ejemplos 1, 2, 5, 6 y 8) . El reto que enfrentaron los inventores fue equilibrar los factores que influyen la degradación química del compuesto antifúngico de polieno durante la preparación de la formulación líquida y secado por aspersión (el polieno es propenso a la degradación química, especialmente a temperaturas elevadas) con lo que se afecta el tamaño aerodinámico de partícula y la dispersabilidad de partícula. Sorprendentemente, los inventores han preparado polvos en los cuales todos estos factores son optimizados - la extensión de la degradación de polieno, alta dispersabilidad, y tamaños aerodinámico de partícula pequeño. (Ver los ejemplos) . Además, es inusual preparar polvos caracterizados por ambos, valores altos de dosis emitidas y tamaños de partícula aerodinámica bajos, ya que estos factores a menudo trabajan en direcciones opuestas. Esto quiere decir, las partículas que tienen buenas dispersabilidades son caracterizadas a menudo por grandes tamaños aerodinámicos, ya que partículas primarias más grandes, que exhiben menos fuerza cohesiva, tienden a aglomerar menos y así dispersar mejor.

Además, la preparación de polvos antifúngicos que tienen propiedades de aerosol superiores, que se caracterizan por valores de ED altos y tamaños aerodinámicos pequeños, en la ausencia de aditivos o agentes dispersantes para mejorar las propiedades de aerosol, es particularmente sorprendente (Yamashita, C, y colaboradores, Respiratory Drug Delivery VI, p. 483-485 (1998)), particularmente para polvos fúngicos de polieno en donde el polvo antifúngico no es proteináceo. Los componentes específicos de polvos secos antifúngicos adecuados para liberar en el pulmón se describirán a continuación. A. Compuestos Antifúngicos Los compuestos antifúngicos para uso en los polvos secos de la invención son aquellos que tienen propiedades fungistáticas o fungicidas cuando se administran por inhalación oral al pulmón. Los compuestos antifúngicos preferidos son aquellos caracterizados por la estructura química del polieno, tales como la Anfotericina B, nistatina, hamicina, natamicina, piramicina, y ambruticina, y derivados y sales de los mismos aceptables farmacéuticamente. Son preferidos para uso en la presente invención Anfotericina B y nistatina. Otros compuestos antifúngicos adecuados para uso en los polvos de la invención incluyen acrisocina, aminacrina, antralina, benanomicina A, ácido benzoico, butilparabeno, undecilenato de calcio, candicidina, ciclopiroxolamina, ciclofungin, clioquinol, clotrimazol, ecaonazol, fluconazol, flucitosina, violeta de genciana, griseofulvina, haloprogin, hamicin, ictamol, iodo, itaconazol, ketoconazol, miconazol, nicomicina Z, ioduro de potasio, permanganato de potasio, pradiraicina A, propilparabeno, resorcinol, benzoato de sodio, propionato de sodio, sulconazol, terconazol, tolnaftato, triacetin, ácido undecilenico, factor estimulador de las colonias macrófagas de monocitos (M-CSF) y undecilenato de zinc, de éstos, se prefiere candicidin, clotrimazol, econazol, fluconazol, griseofulvin, hamicin, itraconazol, ketoconazol, miconazol, sulconazol, terconazol, y tolnaftato. En' una modalidad particular de la invención, el polvo seco antifúngico comprende un antifúngico diferente de un ag'ente antifúngico que contiene -azol (por ejemplo, los polvos que no contienen -azoles tales como clotrimazol, econazol, fluconazol, itraconazol, ketoconazol, o miconazol) . En aún otra modalidad de la invención, los componentes (es decir el compuesto antifúngico y excipientes/ portadores opcionales) comprende un polvo homogéneo secado por aspersión en vez de una mezcla de polvo seco de componentes en forma de partículas. En aún otra modalidad, el compuesto antifúngico (por ejemplo, polieno) no está protegido por secuestramiento en liposomas o por un agente encapsulante polimérico, o por una capa de recubrimiento discreta, pero en vez de eso, es directamente expuesto a las condiciones ásperas del secado por aspersión durante la formación del polvo antifúngico secado por aspersión. Esto quiere decir, las composiciones de la presente invención típicamente son aquellas en las cuales el polieno no es encapsulado. Adicionalmente, en las composiciones de la invención típicamente están ausentes cantidades substanciales de aditivos poliméricos, tales como los empleados en formulaciones de liberación controlada o polímeros no biológicos. Por ejemplo, formulaciones representativas no contendrán típicamente más de aproximadamente 10 % en peso de polímero, más preferiblemente no más de 5 % en peso de polímero, e igualmente más preferiblemente no más de aproximadamente 3 % de aditivo polimérico . Composiciones de conformidad con la invención comprenden una cantidad efectiva terapéuticamente de un compuesto antifúngico, preferiblemente un polieno tal como Anfotericina B. La cantidad de antifúngico contenido en las partículas en polvo será la cantidad necesaria para liberación pulmonar de una cantidad efectiva profilácticamente o terapéuticamente (es decir, cantidad fungistática y/o fungicida) del compuesto antifúngico en el transcurso de un régimen de dosificación particular en el sitio de infección. En práctica, esta variará ampliamente dependiendo del compuesto antifúngico particular y su potencia correspondiente, la composición fúngica particular a ser tratada o prevenida y su severidad, la población de pacientes prevista, y consideraciones similares, y puede ser fácilmente determinada por el experto en la materia. Una ventaja notable de las composiciones respirables descritas en la presente, es su habilidad, en el caso de infecciones fúngicas pulmonares, para ser liberadas directamente en el sitio de infección - el pulmón. Esto tiene en cuenta la administración de dosis totales más pequeñas de antifúngico que son típicamente administradas oral o intravenosamente para lograr el mismo nivel de acción fungistática o fungicida, lo cual puede también reducir efectos colaterales adversos potenciales en el paciente. Además, debido ala naturaleza muy dxspersable de los polvos antifúngicos de la invención, las pérdidas en el dispositivo de inhalación son minimizadas, lo que significa que más de la dosis del polvo es liberada actualmente al paciente. Las formulaciones en polvo seco comprenderán generalmente desde aproximadamente 0.1 % a 100 % en peso de un polieno, preferiblemente desde aproximadamente 5 % hasta aproximadamente 100 % en peso de polieno, más preferiblemente desde aproximadamente 20 % hasta aproximadamente 100 % en peso de polieno, y más preferiblemente comprenderá más de aproximadamente 30 % en peso de polieno. Los polvos particulares de la invención son los que comprenden alguno de los siguientes porcentajes en peso de compuesto antifúngico de polieno: 1 %, 3 %, 5 %, 10 %, 15 %, 20 %, 25 %, 30 %, 35 %, 40 %, 45 %, 50 %, 55 %, 60 %, 65 %, 70 %, 75 , 80 %, 85 %, 90 %, 95 %, o 100 %. Se prefieren particularmente composiciones en polvo seco que contengan al menos aproximadamente 30 % a 50 % o más de polieno. Los polvos antifúngicos son particularmente útiles para antifúngicos que son administrados al pulmón en dosis desde 1 mg/dia a 200 mg/dia, preferiblemente 5 mg/dia a 100 mg/dia . B. Excipientes En las composiciones de la invención, un compuesto antifúngico, preferiblemente un polieno, es opcionalmente pero no necesariamente combinado con uno o más excipientes farmacéuticos que sean adecuados para administración respiratoria y pulmonar. Dichos excipientes pueden servir simplemente como agentes de densidad cuando se desee para reducir la concentración del agente activo en el polvo que está siendo liberado a un paciente. Se prefieren los excipientes que pueden servir en una o más de las siguientes capacidades: (i) mejorar la dispersabilidad y el comportamiento de aerosol de un polvo en un dispositivo para dispersión en polvo a fin de proporcionar liberación más eficiente u reproductible del compuesto, (ii) mejorar las características de manejo del polvo (por ejemplo, fluencia y consistencia) para facilitar la fabricación y el llenado en formas de dosis unitarias, y (iii) mejorar la estabilidad química y/o física. En particular, los materiales excipientes pueden a menudo funcionar para optimizar el contenido de humedad residual, impedir la captación de humedad excesiva, influir el tamaño de partícula, el grado de agregación, propiedades de la superficie de las partículas (es decir, rugosidad) , facilidad de inhalación, y el acierto de las partículas resultantes al tejido del pulmón incluyendo el pulmón profundo . Alternativamente, y en una modalidad preferida de la presente invención, el antifúngico, preferiblemente un polieno, puede ser formulado en una forma esencialmente pura, en donde la composición contiene partículas antifúngicas en el rango de tamaño requerido y substancialmente libre de otros componentes activos biológicamente, excipientes farmacéuticos y los similares . Alternativamente, el antifúngico puede ser formulado en una forma pura esencialmente pero complejada con una sal de desoxicolato, por adición de desoxicolato de sodio u otra sal de desoxicolato para formar una solución acuosa, en donde la composición contiene partículas antifúngicas en el rango de tamaño requerido y substancialmente libre de otros componentes activos biológicamente, excipientes farmacéu icos, y los similares. El desoxicolato de sodio mejora la solubilización del agente antifúngico, Anfotericina B, en particular, en agua a un pH que conduce especialmente a buena estabilidad química y aún, sorprendentemente, produce particularmente polvos dispersables (ver, por ejemplo, el Ejemplo 2). Los excipientes y aditivos farmacéuticos útiles en la presente composición incluyen pero no se limitan a proteínas, péptidos, aminoácidos (que son preferiblemente no acilados o no sulfonados) , lípidos (los cuales, si se emplean son típicamente agentes no encapsulantes) , es decir liposomas), y carbohidratos (por ejemplo, azúcares, que incluyen monosacáridos, disacáridos, trisacáridos, tetrasacáridos, y oligosacáridos ; azúcares derivados tales como alditoles, ácidos aldónicos, azúcares esterificados y los similares; y polisacáridos ) , los cuales pueden estar presentes solos o en combinación. También se prefieren excipientes que tienen temperaturas de transición vitrea (Tg) , superiores a aproximadamente 35 °C, preferiblemente superiores a 45 °C, más preferiblemente superiores a 55 °C. Excipientes ilustrativos adecuados para uso en las composiciones descritas en la presente incluyen aquellos descritos en la Solicitud de Patente Internacional No. WO 98/16207 de Inhale Therapeutic Systems. Los excipientes proteínicos ejemplares incluyen albúmina de suero tales como albúmina de suero humano (HSA) , albúmina humana recombinante (rHA) , gelatina, caseína, y los similares. Se proporcionan polipéptidos y proteínas adecuados para uso en la composición e polvo seco de la invención en la Publicación de la Patente Internacional No. WO 96/32096 de Inhale Therapeutic Systems. La HSA es un excipiente proteináceo preferido, y se ha mostrado que aumenta la dispersabilidad de los polvos secos para liberación aerosolizada a los pulmones (WO 96/32096, ibid) . No obstante, como se muestra por medio de los Ejemplos contenidos en la presente, los polvos de la invención presentan buenas dispersabilidades, igualmente en ausencia de agentes mejoradores de dispersabilidad tales como HSA y los similares . Componentes polipéptidos/ aminoácidos representativos, que pueden opcionalmente funcionar con una capacidad reguladora, incluyen alanina, glicina, arginina, betaina, histidina, ácido glutámico, ácido aspártico, cisteína, lisina, leucina, isoleucina, valina, metionina, fenilalanina, aspartame, treonina, tirosina, triptofano y los similares. Los péptidos y aminoácidos son los preferidos porque pueden también funcionar como agentes me oradores de dispersabilidad. Los aminoácidos que caen en esta categoría incluyen aminoácidos hidrofóbicos tales como leucina (leu) , valina (val) , isoleucina (isoleu) , norleucina, triptofano (try) , alanina (ala) , metionina (met) , fenilalanina (phe) , tirosina (tyr), histidina (his) , y prolina (pro) . Una aminoácido particularmente preferido es el aminoácido, leucina. La leucina, cuando se usa en las formulaciones descritas en la presente incluyen D-leucina, L-leucina, leucina racémica, y combinaciones de D- y L-leucina en alguna proporción. Los péptidos me oradores de dispersabilidad para u-so en la invención, incluyen dimeros, trímeros, tetrámeros, y pentámeros compuestos de componentes aminoácidos hidrofóbicos tales como los descritos anteriormente, por ejemplo, di-leucina y tri-leucina. Los ejemplos adicionales incluyen di-valina, di-isoleucina, di-triptofano, di-alanina, y los similares, tri-valina, tri-isoleucina, tri-triptofano, etc.; di- y tri-péptidos mezclados, tales como Leu-val, isoleu-leu, try-ala, leu-try, etc., y leu- al-leu, val-isoleu-try, ala-leu-val, y los similares, y homo-tetrámeros o pentámeros tales como tetra-alanina y penta-alanina. Son aminoácidos y oligómeros preferidos los que contienen desde 1 - 5 residuos de aminoácidos, y más preferiblemente que contienen 1 -3 residuos de aminoácidos y que contienen al menos uno (es decir uno o más) residuos leucilo. Dimeros y trímeros ilustrativos para uso en las composiciones antifúngicas de la invención son proporcionados en la Solicitud de Patente Internacional No. PCT/ÜS 00/09785, intitulada "Dry Po der Compositions Having Improved Dispersivity", cuya descripción se incorpora en su integridad a la presente como referencia. Son composiciones preferidas las que comprenden al menos 10 % en peso de excipiente que contiene leucilo, por ejemplo, leucina, dileucina o trileucina, y más preferiblemente al menos 25 % a 30 % en peso de un excipiente que contenga leucilo como se describió anteriormente. Composiciones en polvo representativas de conformidad con la invención comprenden alguno de los siguientes porcentajes en peso de excipiente, preferiblemente un excipiente que contenga leucilo tal como leucina, dileucina o trileucina: 5 %, 10 %, 15 %, 20 , 25 , 30 %, 35 %, 40 %, 45 %, 50 %, 55 %, 60 %, 65 %, 70 ¾, 75 %, u 80 % o más de excipiente. Se proporcionan formulaciones representativas en los Ejemplos. Los excipientes carbohidratos adecuados para uso en la invención incluyen, por ejemplo, monosacáridos tales como fructosa,, maltosa, galactosa, glucosa, D-manosa, sorbosa, y los similares; disacáridos, tales como lactosa, sacarosa, tre alosa, celobiosa, y los similares; trisacáridos tales como melesitosa y rafinosa; polisacáridos, maltodextrinas, dextranos, almidones, y los similares, y alditoles, tales como manitol, xilitol, maltitol, lactitol, xilitol, sorbitol (glucitol) , mioinositol y los similares. Excipientes carbohidratos preferidos para uso en la presente invención incluyen manitol, trealosa, y rafinosa.

Las composiciones en polvo seco pueden también incluir un regulador o agente ajustador de pH; típicamente, el regulador es una sal preparada desde un ácido o base orgánico. Reguladores representativos incluyen sales de ácido orgánico tales como sales de ácido cítrico, ácido ascórbico, ácido glucónico, ácido carbónico, ácido tartárico, ácido succínico, ácido acético; ácido itálico, Tris, y clorhidrato de trometamina. Reguladores/ ácidos inorgánicos comúnmente usados incluyen ácido clorhídrico, ácido sulfúrico, ácido bórico, ácido carbónico y ácido fosfórico. Reguladores preferidos para uso en las composiciones de la invención son reguladores de fosfato y citrato . Adicionalmente, las formulaciones de la invención pueden incluir pequeñas cantidades de excipientes/ aditivos poliméricos tales como polivinilpirrolidonas, celulosas derivadas, tales como, hidroximetilcelulosa, hidroxietilcelulosa, o hidroxipropilmetilcelulosa, Ficolls (un azúcar polimérica) , hidroxietilalmidón, dextratos (por ejemplo ciclodextrinas tales como 2-hidroxipropil-p-ciclodextrina y sulfobutiléter- -ciclodextrina) , polietilen glicoles, poliaminoácidos (por ejemplo, polileucina, ácido poliglutámico) , pectina, generalmente cuando dichos polímeros están presentes como aditivos en polvo ya sea como agentes recubridores o encapsuladores o como componentes de una matriz polimérica. La composición de la invención puede también opcionalmente contener agentes saborizantes, sales ("por ejemplo, cloruro de sodio) , edulcorantes, antioxidantes, agentes antiestáticos, ¦ surfactantes (por ejemplo, polisorbatos tales como "TWEEN 20" y TWEEN 80"), lecitina, ácido oleico, cloruro de benzalconio, ásteres de sorbitan, lípidos (por ejemplo. fosfolípidos, ácidos grasos), esteroides (por ejemplo, colesterol) , y agentes secuestrantes (por ejemplo EDTA) . Otros excipientes y/o aditivos farmacéuticos adecuados para uso en las composiciones de la invención se enlistan en "Remington: The Science & Practice of Pharmacy", 10th. ed., Williams & Williams, (1995), y en el Physician's Desk Reference", 52 th. ed., Medical Economics, Montvale, NJ (19989), y "Handbook of Pharmaceutical Excipients", (3a. Ed.), Vol. 3, Arthur H. ibbe (Ed.), Ainley Wade, Paul J. Weller (1999), cuya descripción se incorpora a la presente como referencia. Las composiciones sólidas secadas por aspersión de conformidad con la invención pueden ser formas amorfas cristalinas (es decir, vidriosas), o mezclas de ambas. Son preferidas las composiciones sólidas que, independientemente de su por ciento de cristalinidad, son estables con respecto a su porcentaje con el tiempo. III. Preparación de las Formulaciones Antifúngicas Las formulaciones antifúngicas en polvo seco de la invención se preparan preferiblemente por secado por aspersión. En general, el secado por aspersión es un proceso que combina un liquido muy dispersado y un volumen suficiente de un gas caliente para producir evaporación y secado de las goticulas de líquido para producir un polvo. La preparación o pasta puede ser una solución, suspensión, lechada, o dispersión coloidal que sea atomizable. El secado por aspersión de una formulación antifúngica, se lleva a cabo, por ejemplo, como se describe generalmente en "Spray Drying Handbook, 5th. ed., (1991), en la Solicitud de Patente Europea EP 520 748 Al, en las Publicaciones de Patentes Internacionales WO 97/41833 y WO 96/32149 de Inhale Therapeutics Systems, o como se describe en la Publicación de Patente Internacional WO 99/16419, cuyos contenidos se incorporan a la presente como referencia.

Al intentar preparar un polvo seco de polieno dispersable, estable químicamente para administración pulmonar, los inventores llegaron a dos procedimientos de procesamiento que (i) se minimizó la extensión de degradación del antibiótico de polieno, (ii) se mantuvo una concentración razonable de polieno en la composición líquida secada por aspersión previa (por ejemplo, más de aproximadamente 1 mg/ml) , y (iii)se obtuvo como resultado polvos dispersables . En un procedimiento, que proporciona típicamente una distribución uniforme de los componentes de la formulación de lo que resulta, partículas secadas por aspersión (significa que cada una de las partículas en la formulación final secada por aspersión posee substancialmente la misma composición química y distribución de componentes en la partícula) , la pasta comprende una solución que contiene polieno. Los solventes preferidos son agua, alcoholes tales como metanol o etanol, y combinaciones de los mismos. El desafío al utilizar este procedimiento fue encontrar un solvente o sistema de solventes en el cual el polieno fuera ambos, razonablemente soluble (en una extensión mayor de 1 mg/ml) y relativamente estable (es decir, que exhiba menos de aproximadamente 10 % de degradación en disolución y secado por aspersión) . En el caso de Anfotericina B, la cual es esencialmente insoluble en agua, excepto a pHs extremos (por ejemplo pHs inferiores de 3 y superiores a 10), su solubilidad en agua a pHs neutros puede ser significativamente mejorada por complej ación con una sal de desoxicolato tal como desoxicolato de sodio o por ajuste de pH. Al utilizar el primer procedimiento el antifúngico de polieno es primero disuelto en agua, que contiene opcionalmente un regulador y/o agente complejante aceptable fisiológicamente y/o ácido o base. ara ajustar el pH, como se describió anteriormente. El intervalo de pH de la solución resultante está preferiblemente entre aproximadamente 4 y 10. La formulación acuosa puede contener opcionalmente solventes miscibles en agua adicionales, tales como acetona, alcoholes y los similares como se describen anteriormente. En aún otra modalidad de la invención en donde el compuesto antifúngico es secado por aspersión como una solución en vez de una suspensión, el compuesto antifúngico (por ejemplo, Anfotericina B o nistatina) , es disuelto en alcohol acidificado. Son alcoholes representativos los alcoholes inferiores tales como metanol, etanol, propanol, isopropanol, y los similares. Un alcohol preferido es metanol. Como se muestra en el ejemplo 4, los extremos de pH, mientras mejoran la solubilidad del polieno representativo, Anfotericina B, fueron nocivos para la integridad química del fármaco, como se muestra en la Tabla 6. Así, el desafío fue optimizar ambos, la solubilidad y la estabilidad química del polieno. Después de experimentación extensiva, un intervalo óptimo de pHs desde aproximadamente 3 a 6, preferiblemente desde aproximadamente 3.5 a 6, igualmente más preferiblemente desde aproximadamente 3 a 5, e igualmente más preferiblemente desde aproximadamente 4 a 5, se determinó por secado por aspersión de las soluciones de polieno de la invención (Ejemplos 4-6) . Un intervalo de pH particularmente preferido es desde 4.4 a 4.8 con pHs desde aproximadamente 4.8 a 6, y más preferiblemente desde aproximadamente 4.6 a 5, siendo más preferido 4.8 a 5. En formas exploratorias adicionales para mejorar la estabilidad química de las soluciones de polieno, se descubrió inesperadamente que, para las soluciones de polieno examinadas, la temperatura tuvo muy poco efecto sobre la solubilidad mientras que tienen un profundo efecto sobre la velocidad de degradación de polieno. Así, se determinó que bajas temperaturas, por ejemplo, inferiores a la ambiental o 25 °C, preferiblemente inferiores a aproximadamente 8 °C, y aún más preferiblemente a 0 °C o inferiores, mejoraron significativamente la estabilidad química de las soluciones mientras que no impactaron adversamente o disminuyeron significativamente la solubilidad del polieno en el solvente empleado. A este respecto/ el mantenimiento de la solución de polieno a temperaturas bajas tales como las descritas anteriormente antes de secar por aspersión (es decir, durante y/o después de disolución) y/o cuando la solución es alimentada, es efectivo para mejorar la estabilidad química del polieno para formar así los polvos secados por aspersión. La utilización de dichas condiciones es típicamente efectivo para reducir la extensión de la degradación del polieno a menos de aproximadamente 10 %, y aún más preferiblemente menos de aproximadamente 5 %. Así, condiciones particularmente preferidas para secar por aspersión una solución de polieno que son efectivas para producir solubilidades de polieno mayor de aproximadamente 1 mg/ml, más preferiblemente más de aproximadamente 2 mg/ml, y aún más preferiblemente más de aproximadamente 3 mg/ml y mantener una extensión de degradación de polieno de menos de aproximadamente 10 %, son la utilización de solventes acidificados tales como metanol o etanol o combinaciones acuosas de las mismas a pHs que varían desde aproximadamente 3.5 a 5, mientras que utilizar opcxonalmente condiciones de baja temperatura como se describe en la presente para formar, y/o mantener, y/o secar por aspersión dichas soluciones (Ejemplo 7) . Adicionalmente, los polvos formados así se mostró que poseen buenas dispersabilidades y diámetros aerodinámicos (Ejemplo 7) . En un segundo procedimiento preferido para preparar los polvos secados por aspersión de la invención, una suspensión de polieno es secada por aspersión, en este procedimiento, el polieno (por ejemplo, Anfotericina B) , el cual, como se suministra por el vendedor, generalmente posee un tamaño de partícula mediano desde aproximadamente 8 a 13 micrones, es suspendido primero en un solvente acuoso tal como agua y se sometió a molienda vía húmeda. El proceso de molienda vía húmeda es efectivo para reducir el tamaño de partícula del polieno, típicamente a menos de aproximadamente 5 micrones, y preferiblemente a menos de aproximadamente 3 micrones. Más típicamente, las partículas de fármaco (y cualquier sólido de excipientes no disueltos opcionales) son reducidos a un tamaño de aproximadamente 1 micrón o menos durante el proceso. La reducción del tamaño de partícula, y en particular, molienda vía húmeda, se emplea en el presente proceso ya que, en la ausencia de dicha etapa, las partículas secadas por aspersión poseerán típicamente tamaños de partícula que sean suficientemente grandes para administración efectiva al pulmón como un polvo seco. El proceso de molienda vía húmeda que puede ser empelado incluye la homogeneización (por ejemplo, usando un tipo de aspersión présurizada u homogeneizador ultrasónica) o microfluidización .

Las suspensiones contendrán generalmente aproximadamente 1 mg/ml a aproximadamente 100 mg/ml de polieno, preferiblemente desde aproximadamente 5 hasta aproximadamente 100 mg/ml de polieno, y aún más preferiblemente desde aproximadamente 5 hasta 20 mg/ mi de polieno. La etapa de molienda vía húmeda es efectiva para disminuir ambos, la distribución y el tamaño de partícula; el número de pasadas estará típicamente en el intervalo desde aproximadamente 1 a 10, aunque una constante o desnivel de la reducción del tamaño de partícula se logra típicamente después de aproximadamente 3-5 pasadas. Sorpresivamente, se observó la degradación no detectable de polieno durante la molienda vía. húmeda de las suspensiones de anfotericina ejemplares de la invención. Un método ejemplar de molienda vía húmeda para uso en el método es la homogeneización (Ejemplo 8) . Opcionalmente, uno o más excipientes como se describió anteriormente pueden incluirse en las suspensiones de la invención. Dichos excipientes pueden añadirse ya sea en solución o en forma seca a la suspensión antes de molienda vía húmeda, alternativamente, uno o más excipientes ya sea en solución o en forma seca pueden ser añadidos a la suspensión después de molienda vía húmeda, o añadidos en forma de solución como una solución para complementar el secado por aspersión durante la etapa de secado por aspersión.- Opcionalmente, un regulador tal como fosfato o citrato o los similares es añadido a la suspensión molida vía húmeda para formar una suspensión que tenga pHs casi neutros desde aproximadamente 6 a 8, o más preferiblemente desde aproximadamente 7 a 8. Alternativamente, el polímero puede ser molido en seco antes de la formación de la suspensión. Las propiedades de aerosol de los polvos secados por aspersión, particularmente pero no necesariamente aquellas secadas por aspersión desde suspensiones, pueden ser adicionalmente mejoradas por exposición a humedad de los polvos secados por aspersión. Específicamente, se encontró que por exposición de los polvos secados por aspersión, ya sea durante (por ejemplo, usando aire para secar "vía húmeda") o post secado por aspersión, para ambientes de humedad relativa controlada, los diámetros aerodinámicos de dichos polvos pueden reducirse, preferiblemente a menos de aproximadamente 5 micrones MMAD (Ejemplo 8) . Preferiblemente, los polvos son expuestos a un grado de humedad suficiente para aumentar el contenido de humedad de los polvos a más de o igual a aproximadamente 3 % o 3.5 % en peso, con contenido de humedad preferido de los polvos que varíen desde aproximadamente 4 % a aproximadamente 10 % en peso. Las condiciones de humedad relativa controlada (RH) preferidas son RHs mayores de aproximadamente 5 %, con valores típicamente que varían desde aproximadamente '5 % a aproximadamente 60 %. Aunque la mayoría de los polvos secados por aspersión son manejados ventajosamente y empacados en formas de dosificación unitaria bajo condiciones secad para optimizar el comportamiento de aerosol, el comportamiento de aerosol (y diámetro aerodinámico de masa media en particular) de los polvos de la invención se mejoró (es decir, disminución de MMAD) aumentando en vez de disminuir sus contenidos de humedad. Mientras que no haya enlace en teoría, parece que la exposición de los polvos a la humedad es efectiva para enlazar agua en sitios de alta energía sobre la superficie de las partículas de polieno, disminuyendo así la tendencia de las partículas a agregarse. Alternativamente, pueden lograrse indirectamente ambientes con niveles más altos de humedad desde el proceso de secado por aspersión por sí mismo al emplear uno o más de los siguientes procedimientos: abatir la temperatura de entrada, por ejemplo, a menos de aproximadamente 80 °C, por ejemplo, a temperaturas que varían desde aproximadamente 50 °C a 80 °c, o desde aproximadamente 60 °C a 80 °C; aumentando la velocidad de alimentación de la suspensión a más de aproximadamente 5 ml/min, por ejemplo a velocidades mayores de aproximadamente 10 ml/min, o, como se describió anteriormente, por el uso de un gas de secado diferente del aire seco, es decir, aire u otro gas inerte a humedades relativas controladas más altas que el aire seco. Se observó que las condiciones exactas de operación variarán, dependiendo de la unidad de procesamiento empleada. Opcionalmente, la sonicación en linea puede también emplearse para reducir adicionalmente el tamaño de partícula de las composiciones de polieno secadas por aspersión de la invención. Por ejemplo, la suspensión de alimentación puede ser pasada a través de un sonicador antes de atomización. Procesos de secado por aspersión adicionales, que pueden ser adecuados para preparar las composiciones antifúngicas secadas por aspersión de la invención se describen en las Patentes USA Nos. 5,985,248; 5,976,574; 6,001,336, y 6,077,543, todas asignadas a Inhale Therapeutic Systems, Inc. cuyos contenidos se incorporan expresamente a la presente como referencia. Las soluciones/suspensiones que contienen polieno tales como las descritas anteriormente son secadas por aspersión en un secador por aspersión convencional, tal como aquellos disponibles de los abastecedores comerciales tales como Niro A/S (Dinamarca) , Buchi (Suiza) y los similares, que dan como resultado polvos secos antifúngicos estables químicamente, dispersables . Las condiciones óptimas para secar · por aspersión las soluciones/suspensiones antifúngicas de polieno variarán dependiendo de los componentes de la formulación, y se determinan generalmente de manera experimental . el gas usado para secar por aspersión el material es típicamente aire, aunque gases inertes tales como nitrógeno o argón sin también adecuados. Además, la temperatura de ambas, la entrada y la salida del gas usado para secar el material aspereado sea tal que no causa descomposición significativa del antifúngico de polieno en el material aspersado. Dichas temperaturas se determinan típicamente de manera experimental/ aunque generalmente, la temperatura de entrada estará en el intervalo de aproximadamente 50 °C a aproximadamente 200 °C, más preferiblemente desde aproximadamente 60 °C a aproximadamente 150 °C, mientras que la temperatura de salida variará desde aproximadamente 30 °C a aproximadamente 150 °C. Un polvo seco antifúngico de conformidad con la invención puede ser preparado aunque menos preferiblemente, por liofilización, secado al vacío, secado por congelación por aspersión, procesamiento de fluido super crítico, u otras formas de secado por evaporación. Dichos procedimientos de secado serán preferiblemente acompañados por etapas de proceso adicionales , por ejemplo, por mezclado, triturado, o molienda por chorro, para obtener un polvo seco antifúngico que tenga propiedades de aerosol adecuadas y físicas, químicas adecuadas para administración en el pulmón profundo . En algunos casos, será deseable preparar formulaciones en polvo seco que posean características de manejo/ procesamiento mejoradas, por ejemplo, estática reducida, mejor fluencia, bajo apelmazamiento, y los similares, al preparar composiciones compuestas de agregados de partículas finas, que se agregan o aglomeran de las partículas de polvo seco descritas anteriormente, en donde los agregados son fácilmente convertidos a componentes de polvo fino para liberación pulmonar, como se describe, por ejemplo, en Johnson, y colaboradores, Patente EUA No. 5,654,007, Agosto 5 de 1997, incorporada a la presente como referencia. Alternativamente, los "polvos pueden ser preparados al aglomerar los componentes del polvo, tamizando los materiales para obtener los aglomerados, que se esferonizan para proporcionar un aglomerado más esférico, y calibrar para obtener un producto de tamaño más uniforme, como se describe, por ejemplo, y en Ahlneck, C; y colaboradores, Publicación de PCT Internacional No. WO 95/09616, Abril 13 de 1995, incorporada a la presente como referencia. Los polvos secos de la invención pueden prepararse también por mezclado, triturado o molienda a chorro de los componentes de la formulación directamente en forma de polvo seco.

IV. Características de las Formulaciones Antifúngicas en Polvo. Las composiciones antifúngicas de la invención se caracterizan adicionalmente por varios aspectos más notablemente, la habilidad de la composición aerosolizada para alcanzar los tejidos del pulmón y del tracto respiratorio inferior. El paso de las partículas al interior del pulmón fisiológicamente es un aspecto importante de la presente invención, ya que la concentración de antifúngico en el sitio de infección es un aspecto importante en el tratamiento exitoso de infecciones fúngicas pulmonares. Realmente, ciertas características físicas de polvos secos antifúngicos, a ser descritas más completamente posteriormente, son importantes para maximizar la eficiencia de la liberación aerosolizada de dichos polvos al pulmón profundo. Los polvos secos antifúngicos de polieno están compuestos de partículas efectivas para penetrar en los alveolos de los pulmones, esto es, que tienen un diámetro medio de masa (MMD) desde aproximadamente 0.1 a 20 um. Típicamente, el MMD de las partículas es menor de aproximadamente 10 um (por ejemplo, que varía desde 0.1 a 10 um) , preferiblemente menos de 7.5 {m (por ejemplo, que varía desde aproximadamente 0.5 a 7 micrones), y más preferiblemente menos de 5 um, y usualmente que está en el rango de 0.1 µ? a 5 µ?a de diámetro, dependiendo de las características específicas del polvo, al buscar en los polvos representativos de conformidad con la invención (ver, por ejemplo, los ejemplos 1 y 3) , los polvos de la invención son más preferiblemente, aunque no necesariamente caracterizados por el tamaño de partícula extremadamente pequeño, de menos de aproximadamente 2 micrones de MMD. Dichas partículas son extremadamente efectivas para llegar al pulmón cuando se administran por inhalación. En algunos casos, una composición en polvo antifúngica contendrá también partículas portadoras no respirables tales como lactosa, en donde las partículas no respirables son típicamente mayores de aproximadamente 40 micrones de tamaño . Los polvos antifúngicos de la invención están caracterizados adicionalmente por la distribución del tamaño de partícula del aerosol inferior a aproximadamente 10 um de diámetro aerodinámico de masa media (MMAD) , y preferiblemente inferior a 5 um, y más preferiblemente inferior a aproximadamente 3.5 um. El procedimiento descrito anteriormente para exponer los polvos a ambientes muy húmedos es particularmente efectivo al producir polvos que tienen valores de MMM) inferiores a aproximadamente 3.5 micrones. Los diámetros aerodinámicos de masa media de los polvos característicamente variarán desde aproximadamente 0.5 a 5.0 µ?a, preferiblemente desde aproximadamente 1.0 a 4.0 um de MMAD, más preferiblemente desde aproximadamente 1.0 a 3.5 µ?a de MMM), y aún más preferiblemente desde aproximadamente 1.0 a 3.0 µ?a. Como se demuestra en los Ejemplos, polvos antifúngicos ilustrativos que tienen tamaños aerodinámicos extremadamente pequeños, típicamente inferiores a 3.5 micrones, y a menudo inferiores a 2.0 micrones, han sido preparados reproduciblemente . Este aspecto de los polvos de la presente es particularmente ventajoso, ya que partículas grandes que tienen diámetros superiores a 5 micrones son típicamente removidos por impacto en las vías respiratorias superiores (nariz, faringe, tráquea y bronquios mayores), mientras que aquellos que tienen tamaños aerodinámicos inferiores a 0.5 micrones son exhalados generalmente. Así, las partículas de la presente son benéficas para terapia por inhalación debido, en un aspecto, a su capacidad para llegar eficientemente al pulmón sin depósito extensivo en las vías respiratorias superiores . Las composiciones en polvo seco de la invención tendrán generalmente un contenido de humedad inferior a aproximadamente 15 % en peso, usualmente inferior a aproximadamente 10 % en peso, y preferiblemente que varía desde aproximadamente 3 % hasta aproximadamente 10 % en peso.

Los polvos de la invención se caracterizan adicionalmente como sólidos compactados en vez de afluencia relativamente libre. La dosis emitida o ED (algunas veces también mencionada como eficiencia de dosis liberada, DDE) de estos polvos es mayor que 30 % y usualmente mayor de 40 %. Más típicamente, la dosis emitida de los polvos antifúngicos de la invención es mayor de 50 % y es a menudo mayor de 60 % . Aún más preferiblemente, la ED de un polvo antifúngico es mayor de 65 %.Son polvos muy preferidos los que tienen valores de ED mayores de 50 ¾ a 60 ¾ y MMADs de menos de aproximadamente 3.5 micrones. Los polvos de la invención poseerán típicamente un valor de densidad aparente que varía desde aproximadamente 0.05 a 10 gramos/centímetro cúbico, preferiblemente desde aproximadamente 0.05 a 5 gramos/centímetro cúbico, más preferiblemente desde aproximadamente 0.10 a 4.0 gramos/centímetro cúbico, aún más preferiblemente desde aproximadamente 0.10 a 1 gramo/centímetro cúbico, aún más preferiblemente desde aproximadamente 0.10 - 0.75 gramos/ centímetro cúbico, y más preferiblemente desde aproximadamente 0.17 a 0.75 gramos/centímetro cúbico. Una medida adicional para caracterizar el comportamiento del aerosol total de un polvo seco es la fracción de partícula fina (FPF) , que describe el porcentaje de polvo que tiene un diámetro aerodinámico inferior a 3.3 micrones. Las composiciones de polvo antifúngico son bien adaptadas para liberación pulmonar, y poseerán valores de FPF que varían desde aproximadamente 45 % - 90 %. Dichos polvos contienen al menos aproximadamente 45 por ciento de partículas de aerosol de tamaño inferior a 3.3 um a aproximadamente 0.5 um y de ese modo son extremadamente efectivas cuando se liberan en forma aerosolizada, en (i) alcanzar los tejidos del pulmón y, en caso de tratamiento de infecciones fúngicas generalizadas, (ii) alcanzar la región alveolar del pulmón, seguido por (iii) difusión a los intersticios y (iv) paso subsecuente al torrente sanguíneo a través del endotelio. Las partículas de la invención también poseen polieno substancialmente intacto, esto quiere decir, la cantidad de productos de degradación de polieno es típicamente inferior a aproximadamente 10 % en relación a al control seco pre-aspersión, y más preferiblemente es menor que aproximadamente 5 %. En otras palabras, en relación al material inicial seco pre-aspersión, el polieno permanece al menos 90 % químicamente intacto o puro del secado por aspersión. Preferiblemente, el polvo seco por aspersión contiene al menos 95 % de polieno puro o químicamente intacto en relación al material seco pre-aspersión. Las composiciones descritas en la presente también poseen buena estabilidad con respecto al comportamiento del aerosol con el tiempo. V. Administración Pulmonar del Polvo Las formulaciones en polvo seco como que se describen en la presente pueden ser liberadas usando cualquier inhalador de polvo seco adecuado (DPI), es decir, un dispositivo inhalador que utiliza la respiración inhalada del paciente como un vehículo para transportar el fármaco en polvo seco a los pulmones. Se prefieren los dispositivos de inhalación de polvo seco de Inhale Therapeutic Systems que se describen en Patton, J. S. y colaboradores, Patente EUA No. 5,458,135, 17 de Octubre de 1995; Smith, A. E. y colaboradores Patente EUA No. 5,740,794, 21 de Abril de 1998; y en Smith, a. e. y colaboradores, Patente EUA No. 5,785,049, 28 de Julio de 1998, incorporadas a la presente como referencia. Cuando se administran usando un dispositivo de este tipo, los medicamentos pulverizados están contenidos en un receptáculo que tiene una punta perforable u otra superficie de acceso, preferiblemente un empaque de vejiga o cartucho, en el cual el receptáculo puede contener una sola unidad de dosificación o unidades de dosificación múltiples. Los métodos convenientes para llenar gran número de cavidades (es decir empaques de dosis unitaria) con dosis medidas de medicamentos en polvo seco, se describen, por ejemplo, en Parks, D. J. y colaboradores, Publicación de Patente Internacional WO 97/ 410131, 6 de Noviembre de 1997, incorporada a la presente como referencia. También son adecuados para liberar los polvos antifúngicos descritos en la presente son los inhaladores de polvo seco del tipo descrito, por ejemplo, en Cocozza, S. y colaboradores, Patente EUA No. 3,906,950, 23 de Septiembre de 1974, y en Cocozza, S. y colaboradores, Patente EUA No. 4,013., 075, 22 de Marzo de 1977, incorporada a la presente como referencia, en donde una dosis pre-medida de FSP de polvo seco para liberar a un sujeto está contenida en una cápsula de gelatina dura. Otros dispositivos para dispersiones de polvo seco para administración pulmonar de polvos secos incluyen los descritos, por ejemplo, en Newell, R. E., y colaboradores, Patente Europea No. EP 129985, 7 de Septiembre de 1988); en Hodson, P. D., y colaboradores, Patente Europea No. EP 472598, 3 de Julio de 1996; en Cocozza, S. y colaboradores, Patente Europea No. EP 467172, 6 de Abril de 1994, y en Lloyd, L. J. y colaboradores, Patente EUA No. 5,522,385, 4 de Junio de 1996, incorporados a la presente como referencia. También adecuados para liberar los polvos secos antifúngicos de la invención son los dispositivos para inhalación tales como el Astra-Draco "TURBUHALER" . este tipo de dispositivo se describe en detalle en Virtanen, R.

Patente EÜA No., 4,668,218, 26 de Mayo de 1987; en etterlin, K., y colaborador-es, Patente EÜA No- 4, 667, 668, 26 de Mayo de 1987; y en Wetterlin, K. , y colaboradores Patente EUA No. 4 , 805 , 811 , 21 de Febrero de 1989, todas las cuales se incorporan a la presente como referencia. Otros dispositivos adecuados incluyen inhaladores de polvo seco tal como los inhaladores Rotahaler® (Glaxo) , Discus® (Glaxo), Spiros™ (Dura Pharmaceuticals ) , y el Spinhalex® (Fisons) . También son adecuados los dispositivos que emplean el uso de un pistón para proporcionar aire ya sea para introducir en medicamento pulverizado, elevando el medicamento desde "un tamiz portador por paso del -aire ~a través del tamiz, o mezclando aire con el medicamento en polvo en una cámara de mezclado con la introducción subsecuente del polvo al paciente a través de la pieza bucal del dispositivo, tal como se describe en Muhlhauser, P., y colaboradores, Patente EÜA No. 5,388,572, Septiembre 30 de 1997, incorporada a la presente como referencia. Una composición antifúngica inhalable puede también ser liberada usando un inhalador de dosis medida presurizado (MDI) , por ejemplo, el inhalador de dosis medida Ventolín®, que contiene una solución o suspensión de fármaco en un propelente líquido inerte farmacéuticamente, por ej-emplo, HFC, clorofluorocarbono o fluorocarbono, que se describe en Laube, y colaboradores, Patente EUA No. 5,320,094, 14 de Junio de 1994, y en Rubsamen, R. M., y colaboradores, Patente EUA No. 5,672,581 (1994), ambos incorporados a la presente como referencia. Antes de uso, un polvo seco antifúngico empacado es generalmente almacenado bajo condiciones ambientales, y preferiblemente es almacenado a una temperatura de o inferior a aproximadamente 25 °C, y humedad relativa (RH) que varia desde aproximadamente 20 a 60 % o más como se describe anteriormente. VI . Aplicaciones Terapéuticas Los polvos antifúngicos de la invención, cuando se administran pulmonarmente, son particularmente efectivos en el tratamiento de infecciones fúngicas respiratorias. Los polvos, cuando se inhalan, penetran en las vias respiratorias de los pulmones y logran concentraciones efectivas en las secreciones y tejidos pulmonares infectado, incluyendo el fluido de revestimiento epitelial, macrófagos alveolares, y neutrófilos, que exceden típicamente el MCIgos ¦ de los patógenos fúngicos respiratorios. Además, las dosis de compuesto antifúngico que son administradas pulmonarmente son típicamente mucho menos que la administrada por otras rutas y la requerida para obtener efecto antifúngico similar, debido a la legada eficiente del polvo inhalado directamente al sitio de la infección fúngica.

Los polvos de la presente invención son útiles en la profilaxis de infecciones fúngicas pulmonares, particularmente para pacientes inmuno comprometidos, tales como pacientes que están sometidos a terapia de radiación o quimioterapia por cáncer, recipientes de trasplante de órganos, pacientes que sufren de condiciones que afectan adversamente al sistema inmune tales como HIV, o cualquier condición que predispone al sujeto a infecciones fúngicas pulmonares. Los polvos son también ventajosos para uso en el tratamiento de infecciones fúngicas pulmonares activas, tales como aspergilosis (más comúnmente debida a Aspergillus fumigatus, Aspergillus flavus, Asperglllus nigerr Aspergillus nidulansr y Aspergillus terreus) , coccidioidomicosis, histoplasmosis , blastoplasmosis, y otros hongos patógenos . Para profilaxis, la cantidad por dosis de agente antifúngico es la cantidad que es efectiva para prevenir la infección pulmonar por un hongo está generalmente entre aproximadamente 0.01 mg/kg a aproximadamente 5.0 mg/kg. Preferiblemente, la cantidad por dosis del antifúngico (por ejemplo, polieno) que es administrado por inhalación a un sujeto en necesidad del mismo es típicamente desde aproximadamente 0.4 mg/kg a aproximadamente 4.0 mg/kg, o aún más preferiblemente desde aproximadamente 0.7 mg/kg a aproximadamente 3.0 mg/kg. Un polvo de conformidad con la invención es administrada a un sujeto en cualquier régimen que sea efectivo para prevenir la infección fúngica pulmonar. Los regímenes profilácticos ilustrativos incluyen administrar un polvo seco antifungico como se describe en la presente 1 a 21 veces por semana durante un tiempo transcurrido desde a 1 26 semanas, seguido, si es necesario, después de esto por administración una vez o dos veces semanalmente . Un sujeto adecuado para recibir el tratamiento tratamiento que se describe en la presente es cualquier sujeto mamífero en necesidad del mismo, preferiblemente dicho mamífero es un humano. Para tratar a un sujeto que sufre de una infección fúngica pulmonar, la cantidad por dosis de agente antifungico administrado por inhalación oral es la cantidad que es efectiva para tratar la infección. La cantidad de agente antifúngico para el tratamiento de infecciones será generalmente más alta que la usada para la prevención, y estará típicamente en el intervalo desde aproximadamente 0.01 mg/kg a 7.0 mg/kg. Preferiblemente, la cantidad administrada será desde aproximadamente 0.2 mg/kg a aproximadamente 6.0 mg/kg, y más preferiblemente desde aproximadamente 0.8 mg/kg a aproximadamente 5.0 mg/kg. En un régimen de tratamiento ejemplar, un polvo antifúngico de conformidad con la invención es administrado 1 a 8 veces diariamente, preferiblemente desde 2-6 veces diarias, durante un transcurso de aproximadamente 7 a aproximadamente 183 dias . Al tratar estas condiciones fúngicas respiratorias, los polvos de la invención son típicamente administrados en dosis que son 3 - 10 veces la MIC90 de los patógenos fúngicos causales; estos niveles _son logrables con seguridad por inhalación. Generalmente, la dosis de compuesto antifúngico liberada a un sujeto será desde aproximadamente 2 mg a aproximadamente 400 mg/ diariamente, preferiblemente desde aproximadamente 10 a 200 .miligramos diariamente, dependiendo del compuesto antifúngico particular, la condición a sex tratada, la edad y peso del sujeto, y los similares. El polvo antifúngico, cuando es administrado vía un inhalador de polvo seco, es típicamente administrado en forma de dosis unitaria, con tamaños de dosis unitaria que varía desde aproximadamente 2 miligramos a 250 miligramos, y más preferiblemente desde aproximadamente 5 miligramos a 100 miligramos. Desde una hasta aproximadamente 10 dosis unitarias son administradas generalmente diariamente durante el curso de la terapia, aunque más preferiblemente un régimen de tratamiento consistirá desde una a aproximadamente 8 dosis unitarias diariamente por inhalación. Las composiciones de la invención ofrecen varias ventajas notables: (i) protección antifúngica incrementada al sitio, de entrada del fármaco, (ii) eliminación o minimización de efectos colaterales indeseables sin un aumento concomitante en la toxicidad renal, (iii) da como resultado niveles mínimos o indetectables de compuesto anti-fúngico en tejidos no objetivos, (iv) reduce el balance fúngico en el tracto respiratorio para disminuir así el estímulo antigénico crónico, reduce la respuesta inflamatorio, y mejora los síntomas, (v) posiblemente re4duce el riesgo a largo plazo de progreso o progreso lento, y (vi) son administrados convenientemente. La descripción de cada publicación, patente o solicitud de patente mencionadas en esta especificación se incorporan como referencia a la presente en la misma medida que si cada publicación, patente o solicitud de patente individual fueron específica e individualmente indicadas para ser incorporadas como referencia. Los siguientes ejemplos ilustran, pero de ninguna manera se pretende limitar el alcance de la presente invención . Experimental Materiales y Métodos Se emplearon los siguientes materiales . Los grados y los fabricantes son representativos de muchos que son adecuados . Materiales Anfotericina B (Spectrum, New Brunswick, NJ; Alapharma) Nistatina (Spectrum, New Brunswick, NJ) Metanol deshidratado, grado HPLC (EM Industries, Gibbstown, NJ) Hidróxido de Sodio, 50 % (J.T. Baker, Phillipsburg, NJ) L-Leucina (Aldrich) Acido Clorhídrico (J. T. Baker, Phillipsburg, NJ) Desoxicolato de Sodio (Spectrum, New Brunswick, NJ) Métodos HPLC- Fase Inversa Se efectuaron análisis por HPLC-RP sobre un sistema HPLC aters 2690 con un Detector 996 Waters (Skywalker, Inhale No. 101232) . El sistema estaba equipado ya sea con columna C-18 Vydac o una columna C-18 YMC ODC-AQ™. Las muestras fueron eluidas con fases móviles con un gradiente que consistió de regulador de acetato de sodio de 10 mM (fase móvil A) a pH 5 y CAN (fase móvil B) . El gasto se mantuvo a 1.0 ml/min, la longitud de onda del detector fue de 383 nía, y el volumen de inyección fue de 30 µ? . Muestras de Estabilidad Los empaques vesiculares de las formulaciones para estabilidad fueron colocados en estaciones a 25 °C y 40 °C (Estaciones de temperatura: 40 °C/ 75RH: Environmental Specialities, Inc.; 25 °C/60RH: Environmental Specialities, Inc . ) . Los empaques vesiculares fueron sellados en una bolsa de aluminio con desecante. Las muestras fueron removidas de la estación de temperatura en puntos de tiempo predeterminados . Ejemplo 1 FORMULACIONES EN POLVO SECO DE ANFOTERICINA B INHMJABLE A. SELECCION DE UN SOLVENTE ADECUADO PARA SECADO POR ASPERSION La solubilidad de la anfotericina y los excipientes/aditivos de interés, se determinaron en varios solventes en un intento por encontrar un sistema solvente adecuado para secar por aspersión (es decir, que tenga una presión de vapor suficientemente alta) y que sea capaz de disolver ambos, la anfotericina y cualquier excipiente añadido en mayor extensión que aproximadamente 10 mg/ml de solvente. Aunque los agentes activos pueden ser secados por aspersión como suspensiones, que tengan los componentes de la formulación disueltos en solución proporciona partículas resultantes que tengan una composición homogénea (es decir, en comparación con de una partícula con otra) - esto quiere decir, cada partícula en la composición tiene aproximadamente la misma composición y distribución de los componentes de la formulación. La Anfotericina B es difícil de secar por aspersión debido a su pobre solubilidad en agua a cualquier pH en los cuales probablemente tenga estabilidad razonable (la anfotericina es insoluble en agua a pH de 6 a 7. La anfotericina B es soluble en agua a pHs inferiores a 3 y superiores a 10, pero solamente en una extensión limitada (0.2 mg/ml) - para hacer el volumen del solvente requerido para secar por aspersión bajo estas condiciones demasiado amplias para ser manejadas razonablemente. Asi, se determinaron experimentalmente las siguientes solubilidades para encontrar un sistema de solventes único (no mezclado) para secar por aspersión formulaciones representativas de anfotericina B y nistatina.

Tabla 1. Solubilidad de Polienos y Excipientes Representativos Solubilidad (mg de compuesto/g de solvente) Ni el agua ni algún solvente puro aceptable farmacéuticamente pareció ser capaz de disolver juntamente la anfotericina B y un excipiente particularmente preferido, leucina, en los niveles deseados. No obstante, cuando se acidificó con un ácido tal como el ácido clorhídrico, el metanol fue efectivo al disolver ambas, la anfotericina B y la leucina en niveles aceptables, esto es, en concentraciones de sólidos combinados de al menos aproximadamente 10 mg/ml. B. PREPARACION DE POLVOS SECOS El antifúngico y el excipiente sólido (cuando se emplea) fueron mezclados con metanol a una concentración de sólidos al 1 % en peso para formar una solución. El pH del medio se ajustó (acidificado) con ácido clorhídrico mientras se agitaba continuamente y/o se sónico para facilitar la solubilización de los componentes. El pH se ajustó hasta que todos los componentes estuvieron en solución. El objetivo fue utilizar la condición menos ácida posible que dio como resultado la solubilización completa, para minimizar la desestabilización química de los componentes en solución. El hidróxido de sodio se añadió para ajusfar adicionalmente el pH si se necesita. La solución resultante fue entonces secada por aspersión. Todos los lotes fueron secados por aspersión usando un Buchi 190 Mini Spray Dryer modificado provisto con nitrógeno como fuente de gas y equipado con un detector de nivel de oxígeno. La velocidad de alimentación de solución fue 5 ml/min, la temperatura de alimentación se ajustó para obtener una temperatura de salida de aproximadamente 80 °C, el gasto del gas de secado fue de aproximadamente 18 SCEM, y el aire atomizado fue suministrado a 0.5 a 1.5 SCEM, típicamente a una presión de aproximadamente 100 PSI. Las características de cada una de las formulaciones preparadas y las características de los 'polvos resultantes se proporcionan en la Tabla 2 siguiente.

Tabla 2 Características del Aerosol de los Polvos eno Secados por Aspersión Ilustrativos *E1 contenido de solvente residual se determinó por análisis termogravimétrico **La precisión de este resultado es cuestionable; el valor real puede ser más bajo.

Tabla 2B. Características del Aerosol de Polvos Polieno Secados por Aspersión Ilustrativos La Anfotericina B pura secada por aspersión disuelta en metanol acidificado proporcionó un polvo que tuvo una buena dispersabilidad (una dosis emitida de 63 ) y una MMAD superior de 1.9 micrones . Las propiedades de aerosol de la formulación pura fueron sorprendentes, particularmente en vista de la (i) ausencia de excipientes mejoradores de la dispersabilidad o estabilizantes, y (ii) la naturaleza no proteínica del agente activo. Mientras que las proteínas y los polipéptidos demostraron tener características mej oradoras de la dispersabilidad cuando se emplearon en formulaciones de polvo seco (Patente EUA No. 6,136,346), no es usual secar por aspersión un agente activo no proteináceo para formar un polvo muy dispersable. La adición de 10 % en peso de leucina no cambió materialmente las características del polvo, no obstante, cuando la cantidad de leucina contenida en el polvo fue aumentada a 25 % en peso de la composición, se logró una mejora significativa en la dosis emitida (desde 63 % a 81 %) , sin comprometer el valor de MMAD. Esto fue también sorprendente, ya que típicamente estos dos factores, dosis emitida y diámetro aerodinámico, trabajan en estilos opuestos. Esto quiere decir, generalmente, un aumento o mejora en ED es a menudo acompañado por un incremento indeseable en el diámetro aerodinámico, ya que partículas más grandes tienden a aglomerar menos y así dispersar mejor. Es decir, se mostró generalmente que partículas más grandes tienden a exhibir fuerzas cohesivas más bajas debido a la relación inversa entre las fuerzas de Van der Waals y el tamaño de partícula, y también debido a un impacto disminuido de las fúerzas electrostáticas sobre las partículas más grandes. Así, no es usual preparar polvos secos que no contienen proteínas que poseen ambos, excelentes EDs (mayores que 50 %, preferiblemente mayores que 60 %, más preferiblemente mayores que 80 %) y diámetros aerodinámicos superiores (menos de aproximadamente 5 micrones, preferiblemente menos de aproximadamente 3.5 micrones, más preferiblemente menos de aproximadamente 3 micrones, y aún más pref riblemente menos de aproximadamente 2 micrones) .

Ejemplo 2 FORMULACIONES EE POLVO SECO DE ANFOTERICINA B INHALABLE QUE CONTIENEN DESOXICOLATO A. PREPARACION DE LOS POLVOS SECOS Se disolvió desoxicolato sódico en agua. Se añadió anfotericina a la solución de desoxicolato sódico, y se sónico. Se añadió lentamente a la mezcla, hidróxido de sodio 6 molar, mientras se agitaba y/o se sonicaba hasta que se disolvió la anfotericina. El pH de la solución resultante se ajustó (acidificó) a 7.0 - 7.5, mientras se agitaba, con ácido clorhídrico 1.2 normal. La solución se protegió de la luz. El objetivo fue utilizar la solución más neutra posible que dio como resultado la solubilización completa, para minimizar o eliminar esencialmente cualquier desestabilización química de los componentes en solución. La solución resultante fue entonces secada por aspersión como se detalla en el ejemplo 1. Las características de cada una de las formulaciones preparada y las características de los polvos resultantes se proporcionan en la Tabla 3 siguiente.

Tabla 3? Anfotericina B/ Desoxicolato sódico Preparación del Polvo : Formulación Parámetros Cantidad por Ingrediente Lote 2242-AA- Lote 2242-AA- 57 60 Anfotericina B 0.700 g 0.825 g Desoxicolato 0.314 g 0.1848 g sódico Agua Desionizada 100 mi 165 mi HCl 12 N y 1.2 N 0.925 mi 0.225 mi NaOH 6 M 0.162 mi 0.225 mi Tabla 3B. Anfotericina B Con Desoxicolato Características del Polvo Secar por aspersión una solución de pH casi neutra de anfotericina B con desoxicolato sódico proporcionó un polvo que tiene a buena dipersabilidad (una dosis emitida de más de 70 %) y una buena M7AD de menos de 3.0 micrones. Ejemplo 3 FORMULACIONES DE POLVO SECO INHALABLE DE NISTATINA Se exploró la solubilidad de nistatina y leucina en varios solventes para identificar un solvente para preparar un polvo secado por aspersión de la "invención; los resultados de solubilidad se proporcionan en el Ejemplo 1 anterior. Se prepararon polvos secos como se describe en el ejemplo 1 anterior usando metanol acidificado como el solvente. Las características de los polvos resultantes se resumen a continuación. Tabla 4A.Formulaciones Inhalables de Nistatina: Características de la Composición Formulación No. pH de la Solvente % ED MMAD Morfología del Fármaco de Solución Residual ± Lote (%) RSD Nistatina 1696- 3.0 1.6 74+4 1.6 Esferas HS-40 alveoladas Nistatina 1696- 3.9 1.8 79±3 1.5 Esferas al 75 % + HS-42 muy L-Leucina alveoladas al 25 S Tabla 4B. Formulaciones Inhalables de Nistatina: Características de la Composición La nistatina pura disuelta en metanol acidificado secada por aspersión produjo un polvo con una buena dosis emitida de más de 70 % y Un MMAD superior de 1.6 micrones. La adición de leucina al 25 % a la formulación dio como resultado una mejora nominal en la dosis emitida de 79 % sin comprometer el MMAD (1.5 micrones) . De nuevo, las propiedades superiores del aerosol de estos polvos, particularmente de los polvos puros, fueron sorprendentes en vista de la falta de agentes mej oradores de la dispersabilidad tales como proteínas o polipéptidos en la formulación. Se identificó una formulación optimizada que comprende 25 % de leucina. Ejemplo 4 OPTIMIZACION DE LAS CONDICIONES DE SECADO POR ASPERSION DE LA SOLUCION A PH BAJO PARA ANFOTERICINA Se prepararon soluciones ejemplares de anfotericina B y se evaluaron las estabilidades químicas y sus solubilidades. Las soluciones fueron secadas por aspersión, y se evaluaron también las estabilidades químicas de los polvos secados por aspersión. Tabla 5. Composición de las Formulaciones de AmB % de Sólidos Totales La solución fue secada por aspersión a una velocidad de alimentación de aproximadamente 5 ml/min y presiones de atomización que varían desde 80 - 150 psi . El tamaño de lote fue de 1.5 litros para ambas formulaciones, con rendimiento que varió desde 30 - 40 %. Las formulaciones R01011 y R01013 se colocaron en las estaciones de temperatura después de llenar las formas de dosificación unitaria (empaque vesicular) . La estabilidad química de AmB en ambas, R01013 y R01017 fueron muy pobres en el punto de tiempo inicial (Tabla 6) .

Tabla 6. Estabilidad Química de AmB % de AmB en la muestra Ejemplo 5 OPTIMIZACION DE LAS CONDICIONES DE SECADO POR ASPERSION DE LA SOLUCION A BAJO PH DE ANFOTERICINA Se condujeron experimentos de solubilidad, en un intento por reducir la extensión de la degradación química de anfotericina, mientras que también se encuentran condiciones de la solución bajo las cuales la anfotericina B fue razonablemente soluble (por ejemplo, en un extensión mayor de aproximadamente 1 mg/ml) . Los experimentos se efectuaron a temperatura ambiente por las primeras 2 horas mientras que se ajustó el pH de la solución. Después de que la anfotericina estuvo completamente disuelta, las muestras se transfirieron a un refrigerador a 4 °C para análisis de estabilidad quimica adicionales . La Tabla 7 resume los detalles de las formulaciones y las estabilidades aparentes a condiciones especificas de pH. La Tabla 8 muestra la estabilidad quimica de la anfotericina B a 2 horas y a 8 horas, como se determinó por RP-HPLC. Tabla 7. Solubilidad Aparente de Formulaciones de AmB en MeOH Sólidos Totales AmB (%) Tabla 8. Estabilidad Quimica de anfotericina en las Formulaciones Como se muestra en la formulación 2452-36-3, la solubilidad aparente de AmB fue de 2.9 mg/ml, . mientras que la estabilidad química fue de 92 % a 8 horas . Con base en estos resultados favorables (es decir buena solubilidad y estabilidad) , esta formulación fue adicionalmente secada por aspersión a varias condiciones como se muestra en la Tabla 9. Las soluciones fueron secadas por aspersión usando presiones de atomización que varían en el rango desde aproximadamente 25-60 psi. Se evaluó también la estabilidad química del polvo resultante. Tabla 9. Condiciones de Secado por Aspersión y Estabilidad Química Así, en las formulaciones fueron determinadas ambas, la solubilidad y la estabilidad química de la anfotericina, estuvieron en niveles aceptables. A pH de 4.4 en metanol, la anfotericina exhibió una solubilidad aparente de 2.9 mg/ml, y la estabilidad química de la solución fue de aproximadamente 92 % a 8 horas . Los polvos obtenidos por secado por aspersión contuvieron 92 % de anfotericina B intacta cuando la temperatura de salida se mantuvo inferior a 80 °C, a 50 °C. El experimento también indicó que la temperatura es otro factor clave para mejorar la estabilidad de la anfotericina B en la formulación y secado por aspersión. Ejemplo 6 OPTIMIZACION DE LAS CONDICIONES DE SECADO POR ASPERSION DE LA SOLUCION A PH BAJO PARA ANFOTERICINA Se investigaron adicionalmente la solubilidad de anfotericina B y la estabilidad de la formulación representativa, R0140. Se investigó la solubilidad de la anfotericina a pH 5 y a pH 4.7; adicionalmente, se examinó además la estabilidad química de la anfotericina B a pH 4.8. en estos experimentos, las muestras fueron colocadas en un baño de hielo durante la preparación de la formulación. Se enlistan los resultados en la Tabla 10.

Tabla 10. Solubilidad y Estabilidad de AmB en MeOH * Concentración de AmB en la formulación Aún a bajas temperaturas inferiores a la ambiental tales como alrededor de 0 °C (baño de hielo) (se sabe que la solubilidad disminuye cuando disminuye la temperatura) , la solubilidad de AmB es aproximadamente 3 mg/ml a pH 5 y 3.4 mg/ml a pH 4.7. Es decir, ambos de estos son niveles de solubilidad razonables del fármaco por secado por aspersión. Adicionalmente, la formulación a pH 4.8 demostró buena estabilidad química de AmB (97 %) durante la preparación de la formulación. Ejemplo 7 ESTABILIDAD QUIMICA DE ANFOTERICI A VERSUS TEMPERATURA Se prepararon soluciones como sigue. Se añadió Anfotericina B a MeOH (3 mg de AmB/ml) ya sea a temperatura ambiente o en baño de hielo. Luego se añadió HC1 1N a las soluciones lentamente con agitación para ajustar el pH de la solución a 4.8 hasta disolución completa de la anfotericina B. Se determinó la estabilidad química de AmB, por medio de un ensayo por HPLC como una función del tiempo durante 24 horas. Los resultados se resumen en la Tabla 11. Tabla 11. Estabilidad Química de AmB como una función del tiempo en MeOH a pH 4.8 Aunque la solubilidad de AmB aumenta a pHs bajos (pH < 4.8, la estabilidad química disminuye. Usando los mismos procedimientos de preparación de la solución de AmB descritos anteriormente, la estabilidad química de AmB a pH 3 y pH 4 en un baño de hielo se resumen a continuación.

Tabla 12. Estabilidad Química de AmB en MeOH a diferentes pHs en baño de hielo Una solución de AmB en MeOH a 3 mg/ml fue secada por aspersión; las propiedades de aerosol de los polvos de AmB resultantes se proporcionan a continuación Tabla 13. Propiedades de Aerosol Ejemplo 8 SUSPENSIONES DE ANFOTERICINA HOMOGENEIZADAS POR SECADO POR ASPERSION Y CONDICIONES DE HUMEDAD PARA MEJORAR EL COMPORTAMIENTO DEL AEROSOL Lo siguiente describe la utilización exitosa de un procedimiento basado en suspensiones para preparar polvos secos de Anfotericina B inhalables, dispersables , estables químicamente.

A. Método de Preparación General Empleado para la Reducción del Tamaño de Partícula por Hoiaogeneización Se pesó anfotericina B (tamaño de partícula medio, 8-13 micrones) y se dispersó en agua usando un mezclador de alto esfuerzo cortante (Ultraturax) para lograr una suspensión uniforme. La suspensión se pasó a través de un homogeneizador Avestin C-5, varias veces (1-5) a presiones altas (~ 25,000 psi)bajo condiciones ambientales para reducir el tamaño de partícula a menos de aproximadamente 1 micrón, determinado usando un Malvern Mastersizer. Pueden usarse presiones que varíen desde aproximadamente 5,000 a 30, 000 psi . La concentración de anfotericina en la suspensión varió desde aproximadamente 5 - 20 mg/ml, aunque pueden usarse suspensiones con concentraciones de polieno que varían desde aproximadamente 1 mg/ml a aproximadamente 100 mg/ml. Las suspensiones homogeneizadas fueron entonces secadas por aspersión usando temperaturas de salida que varían desde aproximadamente 60 °C a 80 °C, una velocidad de alimentación de 5 ml/min, y presiones de atomizador que varían desde 60- 100 psi. El contenido de sólidos en la alimentación varió desde 0.3 - 1.0 % (peso/volumen). La HPLC no mostró degradación de anfotericina B después de omogeneización y el secado por aspersión en comparación con el fármaco sin procesar (material crudo) usado como control . B. Formulaciones Se incluyeron excipientes opcionales en las formulaciones. Se añadieron los excipientes a la formulación usando varios procedimientos: (i) se añadió a/ se mezcló una solución acuosa de excipiente o excipiente sólido, con la suspensión acuosa homogeneizada de anfotericina B, seguido por el secado por aspersión; o (ii) se añadió excipiente a una suspensión de anfotericina B antes de homogeneiz ción. Los excipientes incluyeron leucinar trileucina, rafinosa, citrato de sodio y fosfato de sodio. Durante alguna de las corridas de secado por aspersión, se empleó la sonicación en linea para minimizar la agregación de las partículas. C. Propiedades de Aerosol de Polvos Secados por Aspersión Homogeneizado Tabla 14 Composición MMAD Dosis (Micrones) Emitida, % Anfotericina B al 100 % 6.0 72 (R01131-1) Anfotericina B al 100 % 5.0 67 (R01131-3 Anfotericina B en peso / 4.0 No dió rafinosa al 30 % (R01196) Anfotericina B en peso/ 3.9 No dió Leucina al 30 % (R01198) Anfotericina B en peso/ 4.7 No dió Fosfato de sodio (pH 7.4), (R01199) Anfotericina B al 100 % 5.55 61 (R01101) Anfotericina B al 100 % 4.72 71 (R01115) Anfotericina B con Leucina 4.76 72 al 30 % (R01102) Anfotericina B con 4.36 71 Trileucina al 30 % (R01103) D. estabilidad Química La degradación de la anfotericina fue esencialmente indetectable antes y después de homogeneización. Es decir, la anfotericina fue estable químicamente bajo estas condiciones de proceso. Tabla 15. Estabilidad Química de AmB FormulaDescripción AmB AmB en Pico ción (mg/ la Principal mi) formu(%) lación (%) Estándar Mezclado con 11.6 96.1 A Excipientes para preparar para R01101 a R01103 Estándar Preparar para 12.8 95.8 B R01104 R01101 AmB pura 96.2 96.3 R01102 AmB con Leu al 30 72.3 96.4 R01103 AmB con Trileu al 75.3 95.5 30 % R01104 AmB con DSPC al 5 89.3 96.1 %/Ca++ E. Efecto de la Humedad Formulaciones de Anfotericina B pura con diferentes niveles de contenido de humedad, fueron preparadas por uno de los dos métodos siguientes: (a) Los polvos secados por aspersión fueron expuestos a ambientes controlados de diferente humedad relativa (Intervalo de 6 % a 40 % de RH) . (b) Suspensiones acuosas de Anfotericina B fueron secadas por aspersión bajo diferentes condiciones de temperaturas de salida y velocidades de alimentación para generar polvos con diferentes contenidos de humedad residual . Las propiedades de aerosol de los polvos fueron probadas, La gráfica siguiente muestra la correlación entre MMAD y el contenido de humedad de polvos de anfotericina pura. Para polvos en los cuales se introdujo la humedad por exposición a humedad después de secado por aspersión, el MMAD disminuyó con el aumento en el contenido de humedad hasta aproximadamente 4.0 - 4.5 %. Más allá del contenido de humedad de 4.5 %, el MMAD es independiente de la humedad. Una dependencia similar de MMAD sobre el contenido de humedad se observó para polvos en los cuales el contenido de humedad fue incrementado por secado por aspersión bajo condiciones menos agresivas. Sin embargo, el umbral del contenido de humedad más allá del cual el MMAD se vuelve independiente del contenido de humedad parece ser aproximadamente 3.5 %. Así, un contenido de humedad mínimo es necesario para el mejoramiento de las propiedades de aerosol de polvos secados por aspersión que contienen Anfotericina B. Sin embargo, el umbral del contenido de humedad más allá del cual las propiedades de aerosol se vuelven independientes del contenido de humedad puede diferir, dependiendo del proceso usado. Los polvos de Anfotericina B que contienen excipientes también mostraron mejora en el comportamiento del aerosol por incremento en el contenido de humedad- Polvos de Anfotericina B que contienen excipientes se llenaron en empaques vesiculares bajo dos diferentes condiciones de humedades relativas controladas y se probaron para MMAD. El dato (en la tabla siguiente) muestra claramente que una reducción significativa en MMAD puede lograrse por incremento del contenido de humedad de los polvos de Anfotericina B (ambos, en ausencia y presencia de excipientes) .

Tabla 16. Efecto de la humedad de acondicionamiento sobre el MMAD de formulaciones de polvos secos de Anfotericina B que contienen excipiente y pura El encuentro fue inesperado, ya que la mayoría de los polvos secados por aspersión muestra ya sea mejores propiedades de aerosol en ausencia de humedad o bien son sensibles al contenido de humedad. este fenómeno es probablemente debido al enlace de agua en los sitios de alta energía localizados, ya sea sobre la superficie de las partículas de Anfotericina B o bien en la retícula del cristal. Una asociación tal de agua con partículas de Anfotericina B disminuye su propensión a agregar, mejorando así el comportamiento de aerosol de los polvos.

Claims (60)

NOVEDAD DE IA INVENCION Habiendo descrito la presente invención, se considera como novedad, y por lo tanto se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes REIVINDICACIONES :

1. Un método para preparar un polvo de polieno secado por aspersión adecuado para inhalación oral al pulmón, el método está caracterizado porque comprende: (i) disolver un compuesto antifúngico de polieno en un solvente acidificado para formar una solución que contiene polieno ácido, y (ii) secar por aspersión la solución que contiene polieno para formar un polvo seco inhalable que contenga no más de aproximadamente 10 % de productos de degradación de polieno y caracterizado por una dosis emitida superior a 60

%. 2. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el polvo seco producido en la etapa (ii) contiene no más de aproximadamente 5 % de productos de degradación de polieno.

3. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el solvente comprende alcohol acidificado.

4. El método de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque el solvente comprende metanol o etanol acidificado 5. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el pH de la solución acidificada en la etapa (i) varia desde aproximadamente 3.5 a

5.

6. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el polieno es disuelto en la solución acidificada en una cantidad no mayor de aproximadamente 1 mg/ml .

7. El método de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque el polieno es disuelto en la solución acidificada en una cantidad de no más de 2 mg/ml.

8. El método de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque el polieno es disuelto en la solución acidificada en una cantidad no mayor de aproximadamente 3 mg/ml .

9. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque antes de la etapa de secado por aspersión, la solución ácida que contiene el polieno es mantenida a una temperatura inferior a 25 °C.

10. El método de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque antes de la etapa de secado por aspersión, la solución ácida que contiene el polieno es mantenida a una temperatura inferior a aproximadamente 8 °C.

11. El método de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la solución acida que contiene polieno que comprende una solución de alimentación es mantenida a una temperatura inferior a 25 °C durante la etapa de secado por aspersión.

12. El método de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la solución ácida que contiene polieno que comprende una solución de alimentación es mantenida a una temperatura inferior a 8 °C durante la etapa de secado por aspersión.

13. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el polieno comprende anfotericina o nistatina.

14. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado adicionalmente porque comprende la etapa de disolver un excipiente aceptable farmacéuticamente en el solvente acidificado para formar una solución que comprende el excipiente y el polieno.

15. El método de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque el excipiente es leucina o trileucina.

16. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la solución que contiene polieno comprende sólidos disueltos y porque al menos aproximadamente 60 % en peso de los sólidos disueltos comprenden el polieno.

17. El método de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque al menos aproximadamente 70 % en peso de los sólidos disueltos comprenden el polieno.

18. El método de conformidad con la reivindicación 17, caracterizado porque en la solución que contiene polieno están substancialmente ausentes excipientes o estabilizantes adicionales.

19. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque en la solución que contiene polieno están ausentes agentes encapsulantes poliméricos o lipidíeos .

20. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el polvo seco inhalable comprende partículas caracterizadas por un M ¾D de menos de aproximadamente 5 micrones.

21. ün método para preparar un polvo de polieno secado por aspersión adecuado para inhalación oral al pulmón, el método está caracterizado porque comprende: (i) suspender un compuesto antifúngico de polieno en un solvente acuoso para formar una suspensión (ii) moler por vía húmeda la suspensión de (i) para formar una suspensión molida húmeda, y (iii) secar por aspersión la suspensión molida húmeda para producir un polvo seco inhalable que contiene no más de aproximadamente 10 % de productos de degradación de polieno y caracterizado por una dosis emitida superior a aproximadamente 60 %.

22. El método de conformidad con la reivindicación 21, caracterizado porque la etapa de molienda húmeda comprende homogeneizar para formar una suspensión homogeneizada.

23. El método de conformidad con la reivindicación 21, caracterizado porque el solvente acuoso en la etapa (i) comprende adicionalmente un excipiente.

24. El método de conformidad con la reivindicación 21, caracterizado porque comprende mezclar la suspensión molida vía húmeda en la etapa (ii) ya sea con un excipiente sólido o bien con una solución acuosa que comprenda un excipiente antes de secar por aspersión.

25. El método de conformidad con la reivindicación 23 o la reivindicación 24, caracterizado porque el excipiente es seleccionado del grupo que consiste de leucina, trileucina, y reguladores.

26. El método de conformidad con la reivindicación 25, caracterizado porque el excipiente es un regulador que es citrato de sodio o fosfato de sodio.

27. El método de conformidad con la reivindicación 21, caracterizado porque comprende la etapa de exponer el polvo a humedad ya sea durante o después del secado por aspersión.

28. El método de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado porque comprende la etapa de exponer el polvo formado en la etapa (iii) a humedad en una cantidad efectiva para proporcionar un polvo que tenga un contenido de humedad que varia desde aproximadamente 4 % a aproximadamente 10 % en peso.

29. El método de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado porque la etapa de secar por aspersión comprende adicionalmente secar por aspersión la suspensión usando un gas de secado que comprende una cantidad de agua suficiente para formar un polvo secado por aspersión que tiene un contenido de humedad que varia desde aproximadamente 4 % a aproximadamente 10 % en peso.

30. El método de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado porque la etapa de exposición comprende exponer o mantener el polvo a una 'humedad relativa superiora aproximadamente 10 %.

31. El método de conformidad con alguna de las reivindicaciones 27- 30, caracterizado porque la etapa de exposición es efectiva para reducir el ???? del polvo secado por aspersión desde el de un polvo secado por aspersión preparado en ausencia de la etapa de exposición.

32. El método de conformidad con la reivindicación 21, caracterizado porque la concentración del polieno en suspensión en la etapa (i) varia desde aproximadamente 1 mg/ml a aproximadamente 100 mg/ml.

33. El método de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque la concentración del polieno en la suspensión en la etapa (i) varía desde aproximadamente 5 mg/ml a aproximadamente 20 mg/ml .

34. El método de conformidad con la reivindicación 21, caracterizado porque comprende la etapa de aerosolizar el polvo seco formado en la etapa (iii) .

35. El método de conformidad con la reivindicación 27, caracterizada adicionalmente porque comprende, después de la etapa de exposición, aerosolizar el polvo seco formado en (iii) .

36. El método de conformidad con la reivindicación 21, caracterizado porque el polvo seco inhalable formado en la etapa (iii) se caracteriza adicionalmente por un MMAD de menos de aproximadamente 5 micrones.

37. El método de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado porque el polvo seco inhalable, después de exposición a humedad, se caracteriza adicionalmente por un MMAD de menos de aproximadamente 5 micrones.

38. El método de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado porque el polvo seco inhalable, después de exposición a humedad, se caracteriza adicionalmente por un MMAD de menos de aproximadamente 3.5 micrones.

39. El método de conformidad con la reivindicación 21, caracterizado porque el polieno es anfotericina o nistatina .

40. Un polvo seco producido por el método de conformidad con la reivindicación 1.

41. Un polvo seco producido de por el método de conformidad con la reivindicación 21.

42. Una composición en polvo secada por aspersión, adecuada para inhalación oral al pulmón que comprende una cantidad efectiva terapéuticamente de un compuesto antifúngico de polieno, en donde la composición comprende no más de aproximadamente 10 % de productos de degradación de polieno y está caracterizado por una dosis emitida superior a aproximadamente 60 %.

43. La composición en polvo de conformidad con la reivindicación 42, caracterizada porque contiene no más de aproximadamente 5 % de productos de degradación de polieno.

44. La composición en polvo de conformidad con la reivindicación 42, caracterizada porque el polvo comprende partículas que tienen un MMAD de menos de aproximadamente 5 micrones .

45. La composición en polvo de conformidad con la reivindicación 44, caracterizada porque el polvo comprende partículas que tienen un MMAD de menos de aproximadamente 3.5 micrones.

46. La composición en polvo de conformidad con la reivindicación 42, caracterizada porque no es proteinácea.

47. La composición en polvo de conformidad con la reivindicación 42, caracterizada porque el polieno es nistatina o anfotericina B.

48. La composición en polvo de conformidad con la reivindicación 42, caracterizado porque el polieno no es encapsulado .

49. La composición en polvo de conformidad con la reivindicación 48, caracterizada porque el polieno es encapsulado no polimérico no liposomático.

50. La composición en polvo de conformidad con la reivindicación 42, caracterizado substancialmente porque comprende polieno puro.

51. La composición en polvo de conformidad con la reivindicación 42, caracterizada adicionalmente porque comprende un excipiente aceptable farmacéuticamente.

52. La composición en polvo de conformidad con la reivindicación 51, caracterizada porque el excipiente es seleccionado desde el grupo que consiste de reguladores, leucina, y trileucina.

53. La composición en polvo de conformidad con la reivindicación 51, caracterizada porque comprende al menos aproximadamente 30 % en peso de polieno.

54. La composición en polvo de conformidad con la reivindicación 53, caracterizada porque comprende al menos aproximadamente 50 % en peso de polieno.

55. La composición en polvo de conformidad con la reivindicación 42, caracterizada porque tiene un contenido de agua superior a aproximadamente 4 % en peso.

56. La composición en polvo de conformidad con la reivindicación 55, caracterizada porque un contenido de agua que varia desde aproximadamente más de 4 % en peso a aproximadamente 10 % en peso.

57. Una composición en polvo secada por aspersión adecuada para inhalación oral al pulmón caracterizada porque comprende una cantidad efectiva terapéuticamente de un compuesto antifúngico de polieno y un excipiente que contiene leucilo que comprende desde 1 a 3 residuos de aminoácidos .

58. Una composición en polvo secada por aspersión, aerosolizada, adecuada para inhalación oral al pulmón que comprende una cantidad efectiva terapéuticamente de un compuesto antifúngico de polieno, en donde la composición comprende no más de aproximadamente 10 % de productos de degradación de polieno y está caracterizada por una dosis emitida superior a 60 %.

59. Un método para tratar o prevenir infección fúngica en un sujeto en necesidad del mismo, el método está caracterizado porque comprende administrar al sujeto por inhalación oral una cantidad efectiva terapéuticamente de una composición en polvo secada por aspersión de conformidad con la reivindicación 42, en forma aerosolizada.

60. En un método para preparar un polvo secado por aspersión inhalable caracterizado porque comprende las etapas de secar por aspersión una solución o suspensión que contiene un agente activo para formar partículas que tienen un MMAD particular, el mejoramiento comprende exponer el polvo ya sea durante o después de secar por aspersión a humedad en una cantidad efectiva para reducir el MMAD de las partículas desde el de las partículas formadas en ausencia de la etapa de exposición.