MX2013013369A

MX2013013369A - Formulaciones de gel bioadhesivo de testosterona intranasal y uso del mismo para tratar hipogonadismo masculino.

Info

Publication number: MX2013013369A
Application number: MX2013013369A
Authority: MX
Inventors: Wayne Kreppner; Siobhan Fogarty; Werner Oberegger; Paul Jose Pierre Marie Maes
Original assignee: Trimel Biopharma Srl
Priority date: 2011-05-15
Filing date: 2012-05-15
Publication date: 2014-10-17
Also published as: BR112013029336A2; JP6152092B2; AR089553A1; CN109481394A; EP2709588A1; MX2013013388A; WO2012156820A9; CA2836405C; JP2017160204A; JP2020073469A; AU2020210227A1; CN109481394B; CA2836405A1; IL229401A0; CA2836398C; CA2836398A1; MX2020008599A; JP2022105175A; AR086409A1; BR112013029332A2

Abstract

La presente invención se refiere a formulaciones de gel pernasales bioadhesivas de testosterona para la administración intranasal, y a métodos de tratamiento de reemplazo de testosterona para utilizar las formulaciones de gel pernasales bioadhesivas de gel a efectos de proveer una entrega intranasal prolongada de testosterona a varones con deficiencia en testosterona, por ejemplo, sujetos varones a los que se ha diagnosticado hipogonadismo.

Description

FORMULACIONES DE 6EL BIOADHESIVO DE TESTOSTERONA INTRANASAL Y USO DEL MISMO PARA TRATAR HIPOGONADISMO MASCULINO CAMPO DE LA INVENCION La presente invención se refiere a geles bioadhesivos de testosterona intranasal 4.0% y 4.5% para proporcionar la liberación intranasal sostenida de testosterona a un varón y métodos de tratamiento intranasal para proporcionar en forma segura la liberación sostenida de testosterona para tratar varones con hipogonadismo . En particular, la presente invención se refiere a una terapia de reemplazo de testosterona mejorada (TRT) y formulaciones de gel de testosterona intranasal de liberación sostenida para tratar el hipogonadismo masculino. La presente invención también se refiere un sistema para dispensar en forma intranasal una cantidad de dosis exacta de tales geles en volúmenes pequeños en una localización anatómica óptima dentro de cada fosa nasal del varón, de modo que se deposita una cantidad efectiva de testosterona dentro de cada fosa nasal en la localización anatómica óptima para la TRT, que incluye tratar efectivamente la deficiencia de testosterona en los sujetos masculinos, tal como hipogonadismo.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Los andrógenos son un grupo esferoides C19 que causan la masculinizacion del aparato genital y el desarrollo y mantenimiento de las características sexuales secundarias masculinas. Los andrógenos también contribuyen a la masa muscular, masa ósea, libido, y desempeño sexual de los varones. La testosterona es el principal andrógeno secretado por las células de Leydig de los testículos, y su producción aumenta durante la pubertad. Ver por ejemplo, Tietz: Textbook of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics, 4th edition, Editors: Burtis CA, Ashwood ER, y Bruns DE (2006. La deficiencia de andrógenos actualmente se reconoce como una afección relativamente común en el envejecimiento masculino. Ver, por ejemplo, 2. Wang C, Swerdloff R.S.: Androgen replacement therapy. Ann Med, 29: 365-370 (1997); Matsumoto A.M. : Andropause: clinical implications of the decline in serum Testosterone levéis with aging in men. J Gerontol A Med Sci, 57: M76-M99 (2002); y Harén Mtet al.: Andropause: a quality-of-life issue in older males. Med Clin North Am, 90: 1005-1023 (2006) . La terapia hormonal con testosterona está indicada para la terapia de reemplazo y los varones que tienen afecciones asociadas con una deficiencia o ausencia de testosterona endógena, tal como para tratar hipogonadismo masculino. Esto puede causar disfunción sexual, pérdida muscular, aumento de grasa, infertilidad, disminución de barba y vello corporal y otras afecciones.

El hipogonadismo se define como deficiencia de testosterona . El hipogonadismo masculino puede ser congénito o se puede desarrollar más tarde en la vida debido a, por ejemplo, lesión, trauma, cirugía, infección, enfermedades, fármacos y/o envejecimiento. En general, el hipogonadismo masculino de inicio infantil tiene consecuencias mínimas y generalmente queda sin diagnosticar hasta que se retrasa la pubertad. Los síntomas o signos asociados con el hipogonadismo masculino de inicio infantil, si se deja sin tratar, incluye desarrollo pobre muscular y del vello corporal, que incluye crecimiento pobre de vello facial, púbico, torácico y axilar, una voz de tono agudo, crecimiento excesivo de brazos y piernas en relación con el tronco del cuerpo, un escroto pequeño, crecimiento fálico y testicular anormal y otros problemas de crecimiento, por ejemplo, crecimiento y maduración de la próstata y vesículas seminales. En el hipogonadismo masculino de inicio adulto, los síntomas pueden incluir una deficiencia la producción de espermatozoides, osteoporosis, pérdida de masa muscular o alteraciones de la musculatura corporal, distribución de grasa, fatiga y pérdida de energía, debilidad, anemia, cambios de humor, por ejemplo, depresión y enojo, una disminución de las aptitudes cognitivas, que incluye pérdida de memoria e incapacidad para concentrarse, alteraciones del sueño, ginecomastia, una reducción de la barba y vello corporal, impotencia, disfunción eréctil; una disminución del volumen de eyaculación, infertilidad, una disminución del deseo sexual (pérdida de libido) , y una regresión de otras características sexuales secundarias.

El hipogonadismo masculino se denomina como hipogonadismo primario, que se debe a un trastorno de los testículos, o hipogonadismo central o secundario que resulta de un trastorno del eje hipotalámo-hipófisis . En el hipogonadismo primario, existe una falta de producción de testosterona en los testículos porque los testículos no responden a la Hormona Foliculoestimulante (FSH) y Hormona Leutinizante (LH) . Como resultado, las elevaciones en ambas hormonas, FSH y LH, se observan en el hipogonadismo primario masculino. La causa más común del hipogonadismo primario masculino es el síndrome de Klinefelter. Otras causas congénitas de gonadismo primario pueden incluir, por ejemplo, anorquia congénita bilateral, hipoplasia de las células de Leydig (aplasia de células de Leydig) , testículos sin descender (críptorquidismo) , síndrome de Noonan, distrofia miotónica (MD) y defectos en la síntesis enzimática de testosterona. Las causas de hipogonadismo primario de inicio adulto pueden incluir envejecimiento, trastornos autoinmunes, cirugía, quimioterapia, radiación, infección, enfermedad, cirugía, alcoholismo, terapia farmacológica y uso de drogas recreativas .

En el hipogonadismo secundario o central, se producen cantidades insuficientes de FSH y LH en el hipotálamo. Las causas genitales del hipogonadismo secundario o central incluyen, por ejemplo, síndrome de Kallmann, síndrome de Prader-Willi (P S), malformación de Dandy-Walker , deficiencia de hormona luteinizante aislada (LH) e hipogonadismo hipogonadrópico idiopático (IHH) . Las causas de hipogonadismo secundario o central de inicio adulto puede incluir envejecimiento, enfermedad, infecciones, tumores, sangrado, deficiencias nutricionales, alcoholismo, cirrosis del hígado, obesidad, pérdida de peso, síndrome de Cushing, hipopituitarismo, hiperprolactinemia, hemocromatosis , cirugía, trauma, terapia farmacológica, y uso de drogas recreativas .

En el hipogonadismo masculino primario, los niveles observados para testosterona están por debajo del nivel normal pero en general están por encima de lo normal para FSH y LH. En el hipogonadismo secundario o central masculino, los niveles observados para testosterona, FSH y LH están por debajo de lo normal. En consecuencia, el diagnóstico de hipogonadismo masculino primario o secundario normalmente se confirma por los niveles de hormona y, en las pruebas, los niveles sanguíneos de testosterona en hipogonadismo primario o secundario se caracterizan como bajas y se deben reemplazar. El tratamiento generalmente varía con la etiología, pero normalmente incluye terapia de reemplazo de testosterona. En los Estados Unidos, la testosterona se puede administrar como inyección intramuscular, un parche transdérmico o un gel transdérmico . En otros países, pueden estar disponibles las preparaciones orales de testosterona.

En vista del hecho de que millones de hombres en los Estados Unidos, así como en todo el mundo, sufren de hipogonadismo, existe una necesidad real e inmediata para una terapia médica efectiva y conveniente que puede tratar este trastorno, de modo que se puede mejorar la calidad de vida de estos individuos. Un objetivo terapéutico de tal terapia para resolver esta necesidad inmediata podría ser restaurar los niveles de testosterona en los hombres a los niveles de la edad adulta joven en espera de aliviar los síntomas generalmente asociados con hipogonadismo debido posiblemente a deficiencia de testosterona.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención supera las limitaciones y desventajas asociadas con la terapia de reemplazo de testosterona actual (TRT) y, en particular, terapia de testosterona actual para tratar el hipogonadismo en los sujetos varones mediante el descubrimiento de nuevos geles de testosterona pernasal y métodos de uso para la TRT y para tratar hipogonadismo . En particular, la presente invención supera las limitaciones y desventajas de opciones actualmente disponibles para la administración de testosterona a través del descubrimiento de nuevas y mejores formulaciones de gel de testosterona con concentración de dosis específicamente diseñadas para administración intranasal para liberar cantidades terapéuticamente efectivas de testosterona para tratar varones que sufren de y/o han sido diagnosticados con deficiencia de testosterona, incluyendo hipogonadismo.

La expresión "una cantidad terapéuticamente efectiva" significa una cantidad de testosterona suficiente para inducir un efecto terapéutico o profiláctico para usar en la terapia de reemplazo o suplementaria de testosterona para tratar deficiencia de testosterona masculina, es decir, hipogonadismo en varones.

En consecuencia, en términos generales, la presente invención proporciona nuevas y mejores formulaciones de gel de testosterona de nueva concentración de dosis sustancialmente menos irritantes, formuladas con testosterona en cantidades entre aproximadamente 4% y 8.0% en peso, y con preferencia entre aproximadamente 4.0% y aproximadamente 4.5% en peso, y con más preferencia aproximadamente 4.0%, aproximadamente 4.5% y 8.0% en peso, para la administración nasal para liberar una cantidad terapéuticamente efectiva de testosterona para tratar efectivamente varones que se han diagnosticado con deficiencia de testosterona, incluyendo hipogonadismo .

De acuerdo con la presente invención, las tasas de difusión de la testosterona en los geles intranasales de la presente invención a través de la membrana de las celdas de Franz, que se contempla en la presente invención, están entre aproximadamente 28 y 100 pendiente/mgT% , y con preferencia aproximadamente 30 y 95 pendiente/mgT% . Para estos geles intranasales formulados con entre aproximadamente 4.0% y 4.5% de testosterona, las tasas de difusión preferidas de testosterona están entre aproximadamente 28 y 35 pendiente/mgT% .

La presente invención también se dirige a nuevos métodos de administración pernasal de los geles de testosterona nasales. En términos generales, los nuevos métodos involucran depositar los geles de testosterona intranasales en forma tópica en la cavidad nasal de cada fosa nasal para liberar una cantidad terapéuticamente efectiva de testosterona en volúmenes más pequeños respecto de la vida de la dosis para proporcionar niveles cerebrales y/o sanguíneos constantes y efectivos de testosterona para usar en TRT, en especial para tratar efectivamente varones que necesitan testosterona para tratar el hipogonadismo .

Más específicamente, la presente invención se dirige a formulaciones de gel intranasal de testosterona biodisponible adecuadas para la administración pernasal para usar en TRT y para tratar sujetos hipogonadales . De acuerdo con la presente invención, y a modo de ejemplo, la presente invención contempla: • Tratamiento con dispositivos de dosis unitaria precargados con 125 L de gel de testosterona 4.0% para liberar aproximadamente 5.0 mg de testosterona por fosa nasal (intranasal) dada, por ejemplo, tres veces por día (dosis total 30 mg/día) ; • Tratamiento con dispositivos de dosis unitaria precargada con aproximadamente 150 µ?. de gel 4.5% para liberar aproximadamente 6.75 mg de testosterona por fosa nasal (intranasal) dada, por ejemplo, dos veces por día (dosis total 27.0 mg/día); y/o • Tratamiento con dispositivos de dosis unitaria precargados con aproximadamente 125 µ?? de gel 4.5% para liberar aproximadamente 5.625 mg de testosterona POR fosa nasal (intranasal) dada, por ejemplo, tres veces al día (dosis total 33.75 mg/día).

En términos generales, la formulaciones de gel de testosterona iñtranasal de la presente invención se formulan con aproximadamente 4% y 4.5% de testosterona en peso, y la testosterona se absorbe bien cuando tales formulaciones de gel se administran en forma pernasal a pacientes hipogonadales ; más específicamente, la testosterona se absorbe rápidamente después de la administración pernasal con una concentración pico alcanzada dentro de 36 minutos a 1 hora 6 minutos (Tmax media) después de la administración intranasal y la concentración sérica máxima se alcanza después de aproximadamente 1-2 horas administración postnasal. La concentración de testosterona máxima durante un intervalo de 24 horas se observa durante la primera administración (0-10 horas) en aproximadamente 57% a 71% de los hombres hipogonadales mientras aproximadamente 29% a 43% de los sujetos presentaron su concentración de testosterona máxima de 24 horas durante posteriores administraciones.

Las formulaciones que contienen 4% y 4.5% de testosterona en peso proporcionan propiedades sorprendentes. Es importante destacar que, la solubilidad de la testosterona en aceite de ricino puro es 3.6% como máximo, y disminuye a 3.36% aproximadamente con 4% de Labrafil. La adición de sílice pirógena (Aerosil, CabOsil) puede aumentar la solubilidad de la testosterona en aceite de ricino hasta 4.5% incluso con 4.0% de Labrafil. Esto es en contraintuitivo para los expertos en la técnica. Sin embargo, sin desear que esté ligado por ninguna teoría particular, se considera que este aumento de la solubilidad en presencia de sílice se debe, al menos en parte, al hecho de que Si02 adsorbe aproximadamente 10% de la testosterona .

De acuerdo con los nuevos métodos de la presente invención, los geles de testosterona intranasales se depositan en forma tópica en las paredes externas exteriores (opuestas al tabique nasal) dentro de la cavidad nasal de cada fosa nasal, con preferencia a aproximadamente la mitad a aproximadamente la sección superior de la pared externa exterior (opuesta al tabique nasal) justo debajo de la sección de cartílago de la pared externa exterior dentro de la cavidad nasal de cada fosa nasal. Una vez que se completa el depósito de gel dentro de cada fosa nasal de la nariz, la nariz externa luego es apretada y/o frotada suave y cuidadosamente por el sujeto, de modo que el gel depositado permanezca en contacto con las membranas mucosas dentro de la cavidad nasal para la liberación sostenida de la testosterona durante la vida de la dosis. Las cantidades típicas de dosis del gel de testosterona depositado por aplicación pernasal están entre aproximadamente 50 a aproximadamente 150 microlitros por fosa nasal, y con preferencia aproximadamente 125 a aproximadamente 150 microlitros por fosa nasal.

Para llevar a cabo los métodos de la presente invención, aproximadamente entre aproximadamente 50 microlitros y aproximadamente 150 microlitros de un gel de testosterona intranasal de la presente invención, se aplica en cada fosa nasal de un sujeto una vez o dos veces por día o tres veces por día, por ejemplo, durante un, dos, tres, cuatro o más semanas consecutivas, o durante dos, tres, cuatro, cinco o seis días consecutivos o más, o en forma intermitente tal como una cada dos días o una vez, dos veces o tres veces por semana, o a demanda una vez o dos veces durante el mismo día, como TRT o para tratar deficiencia de testosterona masculina, incluyendo hipogonadismo masculino.

Además, la presente invención contempla formulaciones de gel de testosterona para la administración nasal que son farmacéuticamente equivalente, terapéuticamente equivalente, bioequivalente y/o intercambiable, independientemente del método seleccionado para demostrar equivalentes o bioequivalencia, tal como metodologías farmacocinéticas , microdiálisis, métodos in vitro e in vivo y/o criterios de valoración clínicos descritos en la presente. En consecuencia, la presente invención contempla formulaciones de gel de testosterona para la administración nasal que son bioequivalentes, farmacéuticamente equivalente y/o terapéuticamente equivalente, en especial formulaciones de gel de testosterona para la administración nasal que son 0.15% de testosterona en peso del gel formulación, 0.45% de testosterona en peso del gel de formulación y 0.6% de testosterona en peso del gel formulación, cuando se usa de acuerdo con la terapia de la presente invención para tratar anorgasmia y/o HSDD por administración intranasal. En consecuencia, la presente invención contempla: (a) formulaciones de gel de testosterona farmacéuticamente equivalentes para la administración nasal que contienen la misma cantidad de testosterona en la misma forma de dosis; (b) formulaciones de gel de testosterona bioequivalentes para la administración nasal que son químicamente equivalentes y que, cuando se administran a los mismos individuos en los mismos regímenes de dosis, producen biodisponibilidades comparables; (c) formulaciones de gel de testosterona terapéuticamente equivalentes para la administración nasal que, cuando se administran a los mismos individuos en los mismos regímenes de dosis, proporcionan esencialmente la misma eficacia y/o toxicidad; y (d) formulaciones de gel de testosterona intercambiables para la administración nasal de la presente invención que son farmacéuticamente equivalente, bioequivalente y terapéuticamente equivalente.

Si bien los geles de testosterona intranasales de la presente invención son preparaciones farmacéuticas preferidas cuando se practican los nuevos métodos de la presente invención, se debe considerar que las nuevas formulaciones de gel intranasales tópicas y los métodos de la presente invención también contemplan la administración pernasal de cualquier ingrediente activo adecuado, sea solo o en combinación con testosterona u otros ingredientes activos, tales como neurosteroides u hormonas sexuales (por ejemplo, andrógenos y progestinas como testosterona, estradiol, estrógeno, estrona, progesterona, etc.), neurotransmisores , (por ejemplo, acetilcolina, epinefrina, norepinepinefriña, dopamina, serotonina, melatonina, histamina, glutamato, ácido gamma-aminobutirico, aspartato, glicina, adenosina, ATP, GTP, oxitocina, vasopresina, endorfina, óxido nítrico, pregnenolona, etc.), prostaglandina, benzodiacepinas tipo diazepam, midazolam, lorazepam, etc., y los inhibidores de PDEF como sildenafilo, tadalafilo, vardenafilo, etc., en cualquier preparación farmacéutica adecuada, tal como líquido, crema, ungüento, pomada o gel. Los ejemplos de formulaciones tópicas adicionales para la práctica de acuerdo con los nuevos métodos de la presente invención incluyen las formulaciones pernasales tópicas descriptas, por ejemplo, en las patentes U.S. Nos. 5,578,588, 5,756,071 y 5,756,071 y publicación de patente U.S. Nos. 2005/0100564, 2007/0149454 y 2009/0227550, los cuales se incorporan en la presente por referencia en su totalidad.

La presente invención también se dirige a productos farmacéuticos envasados que comprenden las formulaciones de gel de testosterona nuevas y mejoradas para administración nasal de la invención. Por ejemplo, la presente invención contempla sistemas aplicadores precargados, de dosis única o múltiple para la administración pernasal para depositar en forma estratégica y única los geles de testosterona nasales en las localizaciones preferidas dentro de la cavidad nasal para practicar los nuevos métodos y enseñanzas de la presente invención. En términos generales, los sistemas aplicadores de la presente invención son por ejemplo, sistemas dispensadores de fluido sin aire, fluido con tubo de inmersión, bombas, jeringas precargadas, dosis unitaria o cualquier otro sistema adecuado para practicar los métodos de la presente invención. Los sistemas aplicadores o bombas incluyen, por ejemplo, una cámara precargada con una dosis única o múltiples dosis de un gel de testosterona intranasal de la presente invención, que está cerrado por una boquilla o tapa de accionamiento. La boquilla de accionamiento puede comprender una canal y punta de salida, donde el accionador de la boquilla se configura para conformar en la superficie interior de una fosa nasal del usuario para (a) la administración constante de cantidades de dosis uniforme de un gel de testosterona intranasal de la presente invención durante la aplicación pernasal dentro de la cavidad nasal y (b) depósito en la localización indicada dentro de cada fosa nasal de un paciente tal y como está contemplado por los nuevos métodos y enseñanzas de la presente invención. Los ejemplos de sistemas aplicadores de multidosis, precargados incluyen, por ejemplo, (a) el sistema COMOD disponible en Ursatec, Verpackung-GmbH, Schillerstr. 4, 66606 St. Wendel, Alemania, (b) los sistemas aplicadores sin aire Albion o Digital disponibles en Airlessystems, RD 149 27380 Charleval, Francia o 250 North Route 303 Congers, NY 10950, (c) los aplicadores nasales de Neopac, The Tube, Hoffmann Neopac AG, Burgdorfstrasse 22, Postfach, 3672 Oberdiessbach, Suiza, o (d) las jeringas descritas en los siguientes Ejemplos de la presente.

Un dispositivo dispensador multidosis nasal de acuerdo con las formas de realización de la presente invención, tal como sistemas aplicadores sin aire Albion o Digital de Airlessystems, está compuesto de un recipiente de fluido y una bomba distribuidora para la liberación de múltiples dosis de un gel u otra formulación tópica. En una forma de realización de la presente invención, el dispositivo dispensador multidosis nasal está adaptado para un sistema dispensador de fluido sin aire. En otra forma de realización de la presente invención, el dispositivo dispensador multidosis nasal está adaptado para un sistema de dispensado de fluido con tubo de inmersión.

Un ejemplo de un sistema sin aire que está contemplado por la presente invención es uno que liberará un liquido, incluyendo gel, sin necesidad de que un gas presurizado o bomba de aire esté en contacto con el liquido (o gel) . En general, un sistema sin aire de la presente invención comprende una bolsa flexible que contiene el liquido, un recipiente cilindrico sólido, un pistón móvil, una bomba aspiradora, una válvula dosificadora y una boquilla de administración, que se ilustra, por ejemplo, en las Figuras 1-4. Ver también Figura 7?, 7B, 8A, 8B, 9?, 9B, 10A, 10B y 11.

De acuerdo con la presente invención, el dispensador multidosis 100 de la Figura 1 está provisto de un recipiente de fluido 120, una bomba distribuidora 140 y una tapa 102.

El recipiente de fluido 120 comprende un cuerpo del recipiente 122, una base 124 y un cuello 126. La bomba distribuidora 140 se sujeta al cuello por un manguito 128. El extremo superior del cuerpo del recipiente 122 está cerrado por la bomba distribuidora 140. El manguito 128 aprieta herméticamente una junta del cuello 150 contra el extremo superior del cuerpo del recipiente 122. El cuerpo del recipiente 122 forma un vacio y aloja el fluido para dispensar .

La bomba distribuidora 140 se cierra con su accionador de la boquilla 130, que retiene el vástaqo 144 en el cabezal del vástago. El accionador de la boquilla 130 comprende un canal de salida 132 y la punta 134.

El accionador de la boquilla 130 se moldea para conformarse la superficie interior de una fosa nasal del usuario. El accionador de la boquilla 130 se puede mover entre una posición abierta descendente y posición cerrada ascendente. El usuario retira la tapa 102 e inserta el accionador de la boquilla 130 en la fosa nasal del usuario. Cuando el usuario empuja el accionador de la boquilla 130 hacia abajo a la posición abierta, el fluido en la cámara de dosificación 180 se extrae con la bomba distribuidora 140 y sale en la punta 134 por medio del canal de salida 132 del accionador de la boquilla 130.

La Figura 2 muestra una vista transversal de la bomba distribuidora 140.

La bomba distribuidora tiene un cuerpo 142 provisto con una toma inferior que tiene una válvula de entrada 160 con una bola 162 como su elemento de válvula. La bola 162 se mantiene en el lugar con una jaula 164 y por un resorte de retorno 170.

En su extremo inferior, el vástago 144 porta una tapa del resorte 172. Un pistón 174 se localiza por encima de la tapa del resorte 172. El vástago 144 pasa a través de un orificio axial de la base del pistón 176.

Las paredes laterales del pistón 174 sellan contra el cuerpo de la bomba distribuidora 142 por medio de rebordes. El manguito 128 aprieta estrechamente una junta del vástago 152 contra el collar del vástago 146, cuerpo de la bomba distribuidora 142 y la parte superior del pistón 174.

Un resorte de precompresión 178 colocado entre la base del pistón 176 y el collar del vástago 146. El resorte de precompresión 178 inclina el accionador de la boquilla 130 por medio del vástago 144 a la posición cerrada.

El resorte de retorno 170, que retorna el pistón 174 un nuevo hacia arriba, se comprime entre dos asientos opuestos sobre la jaula 164 y la tapa del resorte 172.

La bomba distribuidora 140 tiene una cámara de dosificación 180 formada entre la jaula 164 y el pistón 174. Cuando el usuario empuja el accionador de la boquilla hacia abajo a la posición abierta, el fluido en la cámara de dosificación se extrae con la bomba distribuidora 140 y se dispensa desde la punta del accionador de la boquilla 130.

Cuando el usuario libera el accionador de la boquilla 130 hacia arriba a la posición cerrada, un fluido en el cuerpo del recipiente 122 se extrae en la cámara de dosificación 180 con la bomba distribuidora 140. En consecuencia, una dosis de fluido está preparada para el próximo accionamiento del accionador de la boquilla por parte del usuario.

En otra forma de realización de la presente invención, el dispensador 200 de la Figura 3 se proporcionar con un recipiente de fluido 220, una bomba distribuidora 240 y una tapa 202.

El recipiente de fluido 220 comprende un cuerpo del recipiente 222, una base 224 y un cuello 226. La bomba distribuidora 240 se sujeta al cuello por un manguito 228. El extremo superior del cuerpo del recipiente 222 se cierra con la bomba distribuidora 240. El manguito 228 aprieta estrechamente una junta del cuello 250 contra la parte superior del cuerpo del recipiente 222. El cuerpo del recipiente 222 aloja el fluido para dispensar.

La bomba distribuidora 240 se cierra con su accionador de la boquilla 230, que retiene el vástago 244 en el cabezal del vástago. El accionador de la boquilla 230 comprende un canal de salida 232 y punta 234. El accionador de la boquilla 230 se moldea para conformar la superficie interior de la fosa nasal del usuario. El accionador de la boquilla 230 se puede mover a una posición abierta descendente y posición cerrada ascendente. El usuario retira la tapa 202 e inserta el accionador de la boquilla 230 en la fosa nasal del usuario. Cuando el usuario empuja el accionador de la boquilla 230 hacia abajo a la posición abierta, el fluid de la cámara de dosificación 280 es extraído por la bomba distribuidora 240 y sale en la punta 234 por medio del canal de salida 232 del accionador de la boquilla 230.

La Figura 4 muestra una vista transversal de la bomba distribuidora 240.

La bomba distribuidora tiene un cuerpo 242 provisto con una toma de inferior que tiene una válvula de entrada 260 con una bola 262 como su elemento de válvula. La bola 262 se mantiene en el lugar por la jaula 264 y por un resorte de retorno 270. Opcionalmente, un tubo de inmersión 290 puede extenderse hacia abajo desde la válvula de entrada 260 y se sumerge en el líquido contenido en el cuerpo del recipiente.

En su extremo inferior, el vástago 244 porta una tapa del resorte 272. Un pistón 74 se localiza por encima de la tapa del resorte 272. El vástago 244 pasa a través de un orificio axial de la base del pistón 276.

Las paredes laterales del pistón 274 se sellan contra el cuerpo de la bomba distribuidora 242 por medio de rebordes. El manguito 228 aprieta estrechamente una junta del vástago 252 contra el collar del vástago 246, cuerpo de la bomba distribuidora 242 y parte superior del pistón 274.

Un resorte de precompresion 278 se coloca entre la base del pistón 276 y el collar del vástago 246. El resorte de precompresion 278 inclina el accionador de la boquilla 230 por medio del vástago 244 a la posición cerrada.

El resorte de retorno 270, que retorna el pistón 274 un nuevo hacia arriba, se comprime entre dos asientos opuestos sobre la jaula 264 y la tapa del resorte 272.

La bomba distribuidora 240 tiene una cámara de dosificación 280 formada entre la jaula 264 y el pistón 274. Cuando el usuario empuja el accionador de la boquilla hacia abajo a la posición abierta, el aire entra en la cámara de dosificación para ser extraída con la bomba distribuidora 240 y se dispensa desde la punta del accionador de la boquilla 230.

Cuando el usuario libera el accionador de la boquilla 230 hacia arriba a la posición cerrada, el aire contenido en la cámara de dosificación 280 fuerza el fluido en el cuerpo del recipiente 222 para ser extraída en la cámara de dosificación 280. En consecuencia, una dosis de fluido está preparada para el próximo accionamiento del accionador de la boquilla por parte del usuario.

La cantidad de fluido extraída por la bomba distribuidora en la cámara de dosificación puede ser un volumen fijo. Las bombas distribuidoras pueden ser de una variedad de tamaño para alojar una variedad de volúmenes de administración. Por ejemplo, una bomba distribuidora puede tener un volumen de administración de 140 µ?.

Los dispensadores de la presente invención pueden dispensar formulaciones de gel intranasal tópicos u otras formulaciones intranasales tópicas, con preferencia por vía pernasal, que contienen ingredientes alternativos o adicionales, tales como neuroesteroides u hormonas sexuales (por ejemplo, andrógenos y progestinas como testosterona, estradiol, estrógeno, estrona, progesterona , etc.), neurotransmisores, (por ejemplo, acetilcolina, epinefrina, norepinepinefriña, dopamina, serotonina, melatonina, histamina, glutamato, ácido gamma aminobutírico, aspartato, glicina, adenosina, ATP, GTP, oxitocina, vasopresina, endorfina, óxido nítrico, pregnenolona, etc.), prostaglandina, benzodiacepinas tipo diazepam, midazolam, lorazepam, etc., y los inhibidores de PDEF como sildenafilo, tadalafilo, vardenafilo, etc., en la forma de un líquido, crema, ungüento, pomada o gel. Los dispensadores pueden ser adecuados para las aplicaciones cosméticas, dermatológicas o farmacéuticas. Los ejemplos de formulaciones intranasales tópicas para aplicación pernasal tópica, que se puede dispensar de acuerdo con la presente invención incluyen los geles de testosterona pernasales de la presente invención u otros geles tópicos intranasales donde la testosterona se reemplaza o combina con otro ingrediente activo en cantidades efectivas, tales como los ingredientes activos descritos anteriormente en la presente invención. Además, otras formulaciones de testosterona adecuadas y contempladas para dispensarse de los dispensadores y/o de acuerdo con los métodos de la presente invención incluyen las formulaciones descritas en, por ejemplo, las patentes U. S. Nos. 5.578.588, 5.756.071 y 5.756.071 y publicación de la patente U. S. Nos. 2005/0100564, 2007/0149454 y 2009/0227550, todos los cuales se incorporan en la presente por referencia en su totalidad.

Los expertos en la técnica deben entender que la cantidad de testosterona en un gel de testosterona intranasal de concentración de dosis menor, de la presente invención que será terapéuticamente efectiva en una situación específica, dependerá de aspectos tales como el régimen de dosis, el sitio de aplicación, la formulación del gel particular, longevidad de la dosis y la afección por tratar. Como tal, en general no es práctico identificar cantidades de administración específicas en la presente; sin embargo, se considera que los expertos en la técnica podrán determinar cantidades terapéuticamente efectivas apropiadas sobre la orientación provista en la presente, información disponible en la técnica perteneciente a una terapia de reemplazo de testosterona, y ensayo de rutina.

También se debe considerar que el anterior resumen de la presente invención no describe cada forma de realización descrita o cada implementación de la presente invención. La descripción además ejemplifica las formas de realización ilustrativas. En varias partes a lo largo de la descripción, se proporciona orientación a través de los ejemplos, estos ejemplos se pueden usar en varias combinaciones. En cada caso, los ejemplos sirven solo como grupos representativos y no se deben interpretar como ejemplos exclusivos.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS Los precedentes y otros objetivos, ventajas y características de la presente invención, y la manera en que se obtienen los mismos, serán más fácilmente evidentes sobre la consideración de la siguiente descripción detallada de la invención tomada en conjunto con las figuras y ejemplos acompañantes, que ilustran las formas de realización, donde: La Figura 1 es una vista lateral de una primera forma de realización de la invención; La Figura 2 es una vista lateral transversal de la bomba distribuidora de la primera forma de realización de la invención; La Figura 3 es una vista lateral de una segunda forma de realización de la invención; La Figura 4 es una vista lateral transversal de la bomba distribuidora de la segunda forma de realización de la invención; La Figura 5 es una vista lateral de una segunda forma de realización de la invención que se refiere a un ensamblaje del frasco sin aire de la invención; La Figura 6 es una vista lateral de una segunda forma de realización de la invención que se refiere a un accionador digital y tapa redondeada; La Figura 7A ilustra la fosa nasal derecha del sujeto #1 después de una administración de la jeringa de dosis única; La Figura 7B ilustra la fosa nasal izquierda del sujeto #1 después de una administración del dispensador de dosis múltiple; La Figura 8A ilustra la fosa nasal derecha del sujeto #2 después de una administración de la jeringa de dosis única; La Figura 8B ilustra la fosa nasal izquierda del sujeto #2 después de una administración del dispensador de dosis múltiple; La Figura 9A ilustra la fosa nasal derecha del sujeto #3 después de una administración de la jeringa de dosis única; La Figura 9B ilustra la fosa nasal izquierda del sujeto #3 después de una administración del dispensador de dosis múltiple; Las Figura 10A y 10B ilustran el uso de un dispensador de dosis múltiple de acuerdo con la presente invención; La Figura 11 ilustra un dispensador de dosis múltiple de acuerdo con la presente invención; La Figura 12 ilustra una presentación de la posición del aparato de la celda de Franz para comparar las pruebas de acuerdo con el Ejemplo 5; La Figura 13 es un gráfico que muestra el cambio en los niveles de testosterona en suero con el tiempo para un gel bioadhesivo de 4.5% de testosterona administrado en cada fosa nasal de un varón hipogonadal dos veces por día de acuerdo con la presente invención en comparación con la farmacocinética de la testosterona normal en varones adultos sanos jóvenes, informado en Diver MJ. et al: Diurnal rhythms of total, free and bioavailable testosterona and of SHBG in middle-aged men compared con those in young men. Clinical Endocrinology, 58: 710-717 (2003); La Figura 14 ilustra una comparación entre TBS 1 A 8% (Parte I) ; La Figura 15 ilustra una comparación entre TBS 1 A 8% (Parte II) ; La Figura 16 ilustra una comparación entre la corrida de 6 horas y 24 horas (RD11101 y RD11102) La Figura 17 ilustra una comparación entre TBS 1 A 4% (Parte I) ; La Figura 18 ilustra una comparación entre TBS 1 A 4% (Parte II) ; La Figura 19 ilustra una comparación entre TBS 1 A 4% (Parte III) ; La Figura 20 ilustra una comparación de difusión más lenta; La Figura 21 ilustra una comparación entre la corrida de 6 horas y 24 horas (RD11063 y RD11085) ; y La Figura 22 ilustra una comparación entre 400 mg y 1 gramo de gel (RD11063) .

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Por medio de la ilustración y provisión de una apreciación más completa de la presente invención y muchas de las ventajas acompañantes de éstas, se proporcionan la descripción y ejemplos siguientes detallados con referencia a los nuevos geles de testosterona intranasales de concentración de dosis menor, dispositivos de aplicación y métodos de la presente invención.

Como se usa en la descripción de la invención y las reivindicaciones anexas, las formas singulares "un", "una" y "el/la" se usan en forma indistinta y se considera que también incluyen las formas plurales y están comprendidos en cada significado, a menos que el contexto indique claramente lo contrario. Asimismo, como se usa en la presente, "y/o" se refiere y abarca alguna y todas las combinaciones posibles de uno o más de los artículos listados, así como la falta de combinaciones cuando se interpretan en la alternativa ("o").

Como se usa en la presente, "al menos uno" se considera que significa "uno o más" de los elementos listados .

Se considera que las formas de palabras en singular incluyen las formas de palabras en plural y se usan igualmente en la presente en forma intercambiable cuando sean apropiados y se incluyen dentro de cada significado, a menos que se indique expresamente lo contrario.

Excepto cuando se indique lo contrario, las formas en mayúsculas y no mayúsculas de todos los términos quedan incluidas en cada significado.

A menos que se indique lo contrario, se considera que está contemplado que todos los números que expresan cantidades, relaciones, y propiedades numéricas de ingredientes, condiciones de reacción, y demás usadas en la descripción y reivindicaciones se puedan modificar en todos los casos con el término "aproximadamente".

Todas las partes, porcentajes, relaciones, etc. en la presente son en peso a menos que se indique lo contrario.

Como se usa en la presente, "bioequivalencia" o "bioequivalente" , se refieren a formulaciones de gel de testosterona o productos farmacológicos administrados en forma nasal que son farmacéuticamente equivalentes y sus biodisponibilidades (velocidad y grado de absorción) después de la administración en la misma dosis o cantidad molar son similares en tal grado que sus efectos terapéuticos, en cuanto a seguridad y eficacia, son esencialmente iguales. En otras palabras, bioequivalencia o bioequivalente significa la ausencia de una diferencia significativa en la tasa y grado en que la testosterona está disponible a partir de estas formulaciones en el sitio de acción de la testosterona cuando se administra en la misma dosis molar en condiciones similares, por ejemplo, la tasa a la que la testosterona puede dejar tal formulación y la tasa a la que la testosterona se puede absorber y/o estar disponible en el sitio de acción para afectar la TRT, incluyendo el hipogonadismo . En otras palabras, existe un alto grado de semejanza en la biodisponibilidad de dos productos farmacéuticos de formulación de gel de testosterona para la administración nasal (de la misma forma galénica) a partir de la misma dosis molar, que es improbable que produzcan diferencias clínicamente relevantes en los efectos terapéuticos, o reacciones adversas, o ambas. Los términos "bioequivalencia", así como "equivalencia farmacéutica" y "equivalencia terapéutica" son también usados en la presente como es definido y/o usado por (a) la FDA, (b) el Code of Federal Regulations ("C.F.R."), Título 21, (c) Health Canadá, (d) European Medicines Agency (EMEA) , y/o (e) el Japanese Ministry of Health and Welfare. En consecuencia, se debe considerar que la presente invención contempla las formulaciones de gel de testosterona o productos farmacológicos para la administración nasal que pueden ser bioequivalentes para otras formulaciones de gel de testosterona para administración nasal o productos farmacológicos de la presente invención. A modo de ejemplo, una primera formulación de gel de testosterona para administración nasal o producto farmacológico es bioequivalente a una segunda formulación de gel de testosterona para administración nasal o producto farmacológico, de acuerdo con la presente invención, cuando la medición de al menos un parámetro farmacocinético, tal como Concentración máxima (Cmax) , Tiempo al cual se alcanza la Cmax (Tmax) , Área bajo la curva (AUC) , etc., de la primera formulación de gel de testosterona para administración nasal o producto farmacológico varia en no más de aproximadamente ±25%, cuando se comparan con la medición del mismo parámetro farmacocinético para la segunda formulación de gel de testosterona para administración nasal o producto farmacológico de la presente invención.

Como se usa en la presente, "biodisponibilidad" o "biodisponible", significa en general la tasa y grado de absorción de testosterona en la circulación sistémica y, más específicamente, la tasa o mediciones destinadas a reflejar la tasa y grado en que la testosterona se vuelve disponible en el sitio de acción o se absorbe de un producto farmacológico y esté disponible en el sitio de acción. En otras palabras, y a modo de ejemplo, el grado y la velocidad de absorción de testosterona de una formulación de gel de concentración de dosis inferior para la administración nasal de la presente invención reflejado por una curva de tiempo-concentración de testosterona en circulación sistémica.

Como se usa en la presente, el términos "equivalencia farmacéutica" o "farmacéuticamente equivalente", se refieren a las formulaciones de gel de testosterona para la administración nasal o productos farmacológicos de la presente invención que contienen la misma cantidad de testosterona, en las mismas formas de dosis, pero que no contiene necesariamente los mismos ingredientes inactivos, para la misma vía de administración y que cumple los mismos o comparables estándares de compendio u otros estándares aplicables de identidad, concentración y pureza, que incluyen potencia y, cuando se aplicable, uniformidad y/o uniformidad de contenido. En consecuencia, se debe considerar que la presente invención contempla formulaciones de gel de testosterona para administración nasal o productos farmacológicos que pueden ser farmacéuticamente equivalentes para otras formulaciones de gel de testosterona para administración nasal o productos farmacológicos usados de acuerdo con la presente invención.

Como se usa en la presente, "equivalencia terapéutica" o "terapéuticamente equivalente", significa las formulaciones de gel de testosterona para administración nasal o productos farmacológicos que (a) producirán el mismo efecto clínico y perfil de seguridad cuando se utiliza producto farmacológico de testosterona para la TRT y para tratar la deficiencia de testosterona, que incluye hipogonadismo, en sujetos masculinos de acuerdo con la presente invención y (b) son equivalentes farmacéuticos, por ejemplo, éstos contienen testosterona en la misma forma de dosis, tienen la misma via de administración; y tienen la misma concentración de testosterona . En otras palabras, la equivalencia terapéutica significa un equivalente químico de una formulación de testosterona de concentración de dosis inferior de la presente invención (es decir, que contiene la misma cantidad de testosterona en la misma forma de dosis cuando se administra a los mismos individuos en el mismo régimen de dosis) proporcionará esencialmente la misma eficacia y toxicidad.

Como se usa en la presente una "formulación de gel de testosterona para administración nasal" significa una formulación que comprende testosterona en combinación con un solvente, un agente humectante y un agente de aumento de viscosidad.

Como se usa en la presente, "nivel de testosterona plasmática" significa el nivel de testosterona en el plasma de un sujeto. El nivel de testosterona plasmático se determina por métodos conocidos en la técnica.

"Diagnóstico" o "pronóstico", como se usa en la presente, se refiere al uso de información (por ejemplo, información biológica o química de muestras biológicas, signos y síntomas, hallazgos del examen físico, hallazgos del examen psicológico, etc.) para prever los resultados más probables, marcos temporales, y/o respuestas a un tratamiento particular para una enfermedad, trastorno o afección, basado en las comparaciones con una pluralidad de individuos que comparte síntomas, signos, antecedentes familiares u otros datos relevantes para la consideración de un estado de salud del paciente o la confirmación de una afección de un sujeto, por ejemplo, deficiencia de testosterona, que incluye hipogonadismo .

Un "sujeto" de acuerdo con algunas formas de realización es un individuo cuyos signos y síntomas, hallazgos del examen físico y/o hallazgos del examen psicológico se determinan y registran en conjunto con la afección del individuo (es decir, estado de enfermedad o trastorno) y/o respuesta a un fármaco o tratamiento candidato .

"Sujeto" como se usa en la presente, es con preferencia, pero no necesariamente limitado, un sujeto humano. El sujeto pueden ser varón o mujer, y con preferencia mujer, y puede ser de cualquier raza o etnicidad, que incluye, pero sin limitación, caucásica, afroamericana, africana, asiática, hispánica, hindú, etc. Sujeto como se usa en la presente también puede incluir un animal, en particular un mamífero tal como canino, felino, bovino, caprino, equino, ovino, porcino, roedor (por ejemplo, una rata y ratón) , un lagomorfo, un primate (que incluye primate no humano), etc., que se puede tratar de acuerdo con los métodos de la presente invención o seleccionar para fines de medicina veterinaria o desarrollo de agentes farmacéuticos. Un sujeto de acuerdo con algunas formas de realización de la presente invención incluyen un paciente, humano o de otro modo, que necesita tratamiento terapéutico de la deficiencia de testosterona, que incluye hipogonadismo .

"Tratamiento" como se usa en la presente, incluye cualquier fármaco, producto farmacológico, método, procedimiento, cambio de estilo de vida, u otro ajuste introducido en un intento por efectuar un cambio en un aspecto particular de la salud del sujeto (es decir, dirigido a una enfermedad, trastorno o afección particular) .

"Fármaco" o "sustancia farmacológica" como se usa en la presente, se refiere a un ingrediente activo, tal como una entidad química o entidad biológica o combinaciones de entidades químicas y/o entidades biológicas, adecuadas para administrar a un sujeto masculino para tratar la deficiencia de testosterona, que incluye hipogonadismo. De acuerdo con la presente invención, el fármaco o sustancia farmacológica es testosterona o una de sus sales o esteres farmacéuticamente aceptables .

La expresión "producto farmacológico" como se usa en la presente, es sinónimo de los términos "medicina", "medicamento", "intervención farmacéutica" o "producto farmacéutico". Con máxima preferencia, un producto farmacológico es aprobado por una agencia gubernamental para usar de acuerdo con los métodos de la presente invención. Un producto farmacológico, de acuerdo con la presente invención, es un gel intranasal formulado con una sustancia farmacológica, es decir, testosterona .

"Enfermedad", "trastorno" y "afección" son comúnmente reconocidos en la técnica y designan la presencia de signos y/o síntomas en un individuo o paciente que son generalmente reconocidos como anormales y/o no deseables. Las enfermedades o afecciones se pueden diagnosticar y categorizar basados en los cambios patológicos. La enfermedad o afección se puede seleccionar de los tipos de enfermedades listadas en los textos estándares, tales como Harrison's Principies of Infernal Medicine, 1997, o Robbins Pathologic Basis of Disease, 1998.

Como se usa en la presente, "diagnosticar" o "identificar" un paciente o sujeto que tiene deficiencia de testosterona, tal como hipogonadismo, se refiere a un proceso de determinar si un individuo está afectado con deficiencia de testosterona, tal como hipogonadismo.

Como se usa en la presente, "sujeto control" significa un sujeto que no se ha diagnosticado con deficiencia de testosterona o hipogonadismo y/o no exhibe ningún síntoma detectable asociado con estas enfermedades. Un "sujeto control" también significa un sujeto que no están en riesgo de desarrollar deficiencia de testosterona o hipogonadismo, como se define en la presente.

Las formulaciones de gel de testosterona de la invención son formulaciones basadas en aceite, viscosas y tixotrópicas que contienen una solución de testosterona destinada para la aplicación intranasal. La formulación no irritante se diseña para adherirse a la nariz interna. Además, actúa como una matriz de control, de este modo permite la liberación de fármaco sostenida a través de la mucosa nasal.

Otros ingredientes farmacológicamente inactivos en el gel de testosterona intranasal son aceite de ricino USP, oleoil macrogolglicéridos EP y dióxido de silicio coloidal NF. Ninguno de estos excipientes son de origen humano o animal. Todos los excipientes son bien conocidos y listados en la lista de "Ingrediente inactivo" para los productos farmacológicos aprobados publicados por la FDA.

La hormona esferoide testosterona es el ingrediente activo en las formulaciones de gel de testosterona de la invención. La fabricación de la sustancia farmacológica no presenta potencial riesgo para los seres humanos; la vía de síntesis á bien caracterizada.

Tabla 1 : Nomenclatura de testosterona Fórmula estructural Fórmula molecular C19H28O2 Masa molecular relativa 288.4 Las propiedades fisicoquímicas de la testosterona se listan en la Tabla 2.

Tabla 2 : Propiedades generales de testosterona La testosterona, para formulaciones de gel de testosterona de la invención, aparece como cristales o polvo cristalino blanco o blanco ligeramente cremoso. Es libremente soluble en metanol y etanol, soluble en acetona e isopropanol e insoluble en n-heptano. También se puede considerar como insoluble en agua (S2o °c=2.41 x 10~2 g/L ± 0.04 x 10"2 g/L); su coeficiente de partición n-octanol/agua (log P0w determinado por HPLC) es 2.84. La solubilidad de la testosterona en aceites se determinó que es 0.8% en isopropilmiristato, 0.5% en aceite de maní, 0.6% en aceite de soja, 0.5% en aceite de maíz, 0.7% en aceite de semilla de algodón y hasta 4% en aceite de ricino.

Debido a que la testosterona se disuelve completamente dentro de las formulaciones de la presente invención, las características físicas de la sustancia farmacológica no influyen en el rendimiento del producto farmacológico, formulaciones de gel de testosterona de la invención. La capacidad de fabricación de las formulaciones de gel de testosterona de la invención, sin embargo está influido por el tamaño de partícula de la testosterona. Cuando se usa un tamaño de partícula de 50% < 25 micrones, 90% = 50 micrones la solubilidad de la sustancia farmacológica en la matriz es especialmente favorable.

De acuerdo con la presente invención, el fármaco de testosterona puede estar en, por ejemplo, forma cristalina, amorfa, micronizada, no micronizada, polvo, partículas pequeñas o partículas grandes cuando se formulan en geles de testosterona intranasales de la presente invención. Un ejemplo de rango de tamaño de partícula de testosterona incluye de aproximadamente 0.5 micrones a aproximadamente 200 micrones. Con preferencia, el tamaño de partícula de testosterona está en el rango de aproximadamente 5 micrones a aproximadamente 100 micrones, y la testosterona está en forma cristalina o amorfa y no micronizada o micronizada. Con preferencia, la testosterona están en forma micronizada cristalina o amorfa.

La estructura molecular de la testosterona no contiene grupos funcionales que se pueden protonar o desprotonar en este rango de pH fisiológico. En consecuencia se considera que la testosterona como una molécula neutra sin valor pKa en el rango de 1-14. Debido a que es neutra, la testosterona es compatible con los excipientes.

Las formulaciones de gel de testosterona de la invención son formulaciones basadas en aceite viscosas y tixotrópicas , que contienen una solución de testosterona deseada para aplicación intranasal. La formulación no irritante se diseña para adherir a la nariz interna. Además, actúa como una matriz de control, de este modo permite la liberación de fármaco sostenida a través de la mucosa nasal.

De acuerdo con el "Handbook of Pharmaceutical Additives" se usan oleoil polioxiglicéridos como aceite hidrofilicos para aplicaciones tópicas, inyectables y nasales. En los productos medicinales aprobados por la FDA se usa como coemulsionante en las emulsiones/lociones/cremas tópicas y en emulsiones/cremas vaginales. En Francia este excipiente está aprobado para las preparaciones nasales tales como "Rhino-Sulforgan" (Laboratoire Jolly-Jatel, Francia; que contiene 10% de oleoil polioxilglicéridos ) y "Huile Gomenolee 2% ("Laboratoire Goménol, Francia; que contiene 10% de oleoil polioxilglicéridos) . En consecuencia, de modo similar que en el aceite de ricino se puede deducir que los oleoil polioxilglicéridos son adecuados para una vía de aplicación donde la seguridad y tolerabilidad son de superior importancia (por ejemplo, preparaciones inyectables y nasales o vaginales) .

Los oleoil macrogolglicéridos también se denominan como Labrafil M 1944 CS, esteres de aceite de pepita de damasco PEG-6, Peglicol-5-oleato, mezcla de glicéridos y esteres de polietileno. El aceite de ricino, que se usa como solvente para las formulaciones de gel de testosterona de la invención, es un aceite fijo. Tales aceites tienen la ventaja de ser no volátiles o esparcirse (en contraste con los aceites esenciales o parafina liquida) , pero tienen la desventaja de ser hidrofóbicos . La mucosa nasal contiene 95-97% de agua. Sin los oleoil macrogol-glicéridos, el aceite de ricino que contiene el ingrediente activo forma una capa no interactiva sobre la membrana mucosa. A fin de obtener un contacto adecuado entre la capa de aceite de ricino y la membrana mucosa, los oleoil macrogol-glicéridos hidrofilicos se añaden a la formulación para formar una emulsión entre el aceite de ricino y el fluido de la mucosa.

Los oleoil macrogolglicéridos se usan en semisólidos a una concentración que varia de aproximadamente 3 a 20%, de acuerdo con la aplicación. La cantidad de oleoil macrogol-glicéridos en las formulaciones de gel de testosterona de la invención es suficientemente alto para permitir un mejor contacto del aceite portador sobre la membrana mucosa y suficientemente baja para tener impacto mínimo sobre la cantidad de testosterona que se puede incorporar en el aceite portador. Se halla que una favorable concentración de oleoil microgol-glicéridos en formulaciones de gel de testosterona de la invención es 4% de la formulación .

De acuerdo con el "Handbook of Pharmaceutical Additives" el dióxido de silicio coloidal se usa como un adsorbente de aceite, estabilizante térmico y gelificante. En productos medicinales aprobados por la FDA, este se usa en geles dentales, comprimidos sublinguales, gel endocervical , supositorios, emulsiones / cremas / comprimidos / tampones vaginales y cápsulas para inhalación. Además, se usa como excipiente en "Testoderm with adhesives" (Alza Corporation, aprobada en 1996) un parche transdérmico de testosterona . En consecuencia, se puede deducir que el dióxido de silicio coloidal es adecuado para una vía de aplicación donde la seguridad y tolerabilidad son de mayor importancia (por ejemplo inhalaciones, preparaciones endocervicales , vaginales o rectales ) .

Para los suministros del ensayo clínico, el gel de testosterona intranasal se suministra en jeringas de dosis unitaria que consisten en un cuerpo de jeringa hecho de polipropileno, un émbolo moldeado de polietileno y una tapa de jeringa hecha de polietileno de alta densidad. Las jeringas se envuelven en papel de aluminio como envasado secundario. Las jeringas de dosis unitaria precargadas usadas de acuerdo con el estudio en los Ejemplos se llena de la siguiente manera: (a) 4% de gel bioadhesivo de testosterona intranasal - 148 microlitros y 5.92 mg de testosterona; (b) 4.5% de gel bioadhesivo de testosterona intranasal - 148 microlitros y 6.66 mg de testosterona; y (c) 4.5% de gel bioadhesivo de testosterona intranasal - 148 microlitros y 7.785 mg de testosterona.

El aceite en las formulaciones de gel de testosterona de la invención se espesa con dióxido de silicio coloidal, que actúa como un agente formador de gel. Este compuesto se usa comúnmente para endurecer oleogeles.

La forma de dosis deseada para las formulaciones de gel de testosterona de la invención es un semisólido, no un liquido. La formulación se espesa con dióxido de silicio coloidal. Se considera que el dióxido de silicio coloidal contribuye a las propiedades tixotrópicas del gel, lo que simplifica la administración del fármaco en la fosa nasal.

El dióxido de silicio coloidal generalmente es un material inerte que es bien tolerado como excipiente en las aplicaciones mucosas tales como supositorios. El dióxido de silicio coloidal normalmente se usa en estas preparaciones en concentraciones que varían de aproximadamente 0.5 a 10%. La concentración de dióxido de silicio coloidal en las formulaciones de gel de testosterona de la invención es suficientemente alta para obtener la formación de gel pero a un nivel que tiene impacto mínimo sobre la incorporación de testosterona en el aceite portador.

Con preferencia, los geles de testosterona intranasales de la presente invención tienen en general, una viscosidad en el rango de entre aproximadamente 3000 cps y aproximadamente 27,000 cps. No obstante los expertos en la técnica deben entender que, si bien se considera que el rango de viscosidad anteriormente mencionado es un rango de viscosidad preferido, se contempla cualquier viscosidad o rango de viscosidad que no anule los objetivos de la presente invención .

Una descripción detallada de los lotes de una formulación de gel de testosterona de la invención se muestra en la Tabla 3.

Tabla 3 : Composición de una formulación de gel de testosterona de la invención Las formulaciones de gel de testosterona de la invención se conservan a temperatura ambiente (20-25°C o 68 a 77°F) . Las excursiones de temperatura de 15 a 30°C o 59 a 86°F son permisibles para las formulaciones de gel de testosterona de las invenciones. Los datos de estabilidad avalan una vida media de 12 meses. Las jeringas de dosis unitaria se eligen para el envasado primario de los materiales clínicos para el ensayo clínico que se describe a continuación para permitir la facilidad de administración, capacidad de generar múltiples dosis por la variación del volumen de carga y consistencia de la dosis administrada. La jeringa consiste en un cuerpo de jeringa, un émbolo y una tapa de jeringa. El cuerpo de jeringa se moldea de polipropileno, el émbolo se moldea de polietileno y la tapa es de HDPE. Estas jeringas se diseñan y fabrican para liberar soluciones estériles y no estériles, líquidos y geles en volúmenes bajos. Para la protección adicional del ambiente (es decir, exposición a suciedad, luz, humedad y oxígeno) , las jeringas se envasan en una bolsa envuelta en laminado de aluminio .

Las jeringas y tapas se diseñan para usar en un establecimiento clínico y cumplen con los requerimientos de EU Medical Devices Directive 93/42/EEC del 14 de junio de 1993 y enmiendas. Como este cierre de recipiente solo está destinado al uso en esta porción del programa clínico, no se realizarán estudios adicionales sobre la jeringa y componentes de la jeringa.

Como elemento de protección adicional, dos jeringas están en el envase secundario que consiste en una bolsa de papel de aluminio. Dos jeringas se envasan en la bolsa de papel de aluminio y cada bolsa se sella.

La bolsa consiste en un laminado de aluminio de tres capas flexible a) poliéster 12 micrones, b) aluminio 12 micrones y c) un polietileno 75 micrones. Está fabricado por Floeter Flexibles GmbH, y suministrado con el nombre "CLIMAPAC II 12-12-75".

La presente invención proporciona las formulaciones de gel bioadhesivo de testosterona intranasal para administrar por via intranasal, donde la dosis de la formulación es de aproximadamente 4.0% o 4.5% de testosterona en peso de dicho gel.

Los métodos y tratamientos de la presente invención son adecuados para la TRT en varones y son especialmente adecuados para tratar sujetos masculinos deficientes en testosterona, tal como los que se diagnostican con hipogonadismo .

A menos que se especifique de otro modo, todos los términos técnicos y científicos usados en la presente tienen el mismo significado comúnmente entendido por los expertos en la técnica a la que pertenece esta invención. Si bien los métodos y materiales similares o equivalentes a los descritos en la presente se pueden usar en la práctica o ensayo de la presente invención, los métodos y materiales adecuados se describen a continuación. Todas las publicaciones, solicitudes de patente, patentes, y otras referencias mencionadas en la presente se incorporan por referencia en su totalidad. En caso de conflicto, regirá la presente descripción, que incluye las definiciones. Además, los materiales, métodos y ejemplos son solo ilustrativos y no se consideran limitantes.

EJEMPLOS Habiendo descrito en general la invención, la misma se entenderá más fácilmente a través de la referencia a los-siguientes Ejemplos que se proporcionan a modo de ilustración, y no se consideran limitantes de la presente invención, a menos que sea especificado.

Los siguientes ejemplos se exponen con solo fines ilustrativos y no tienen por objeto limitar el alcance que lo que los inventores consideran como su invención.

EJEMPLO 1 Descripción y composición de testosterona Formulaciones del gel de la invención Las composiciones de tres concentraciones diferentes del producto farmacológico para administrar en este ensayo clínico se proporcionan en las siguientes tablas.

Descripción de la forma de dosis Las formulaciones de gel de testosterona de la invención son formulaciones basadas en aceite, viscosas y tixotrópicas que contienen testosterona solubilizada destinada a la aplicación intranasal. El producto farmacológico se formula de acuerdo con los ingredientes activos del compendio: aceite de ricino, oleoil polioxilglicéridos y dióxido de silicio coloidal.

Dos dosis diferentes de las formulaciones de gel de testosterona de la invención se administran por vía intranasal: 0.4% p/p y 0.45% p/p. Se añade un excedente a cada jeringa para tomar en cuenta el gel que se retiene en la jeringa después de la dosificación. Este excedente permanece constante a 23 yL, independientemente del volumen de gel en la jeringa.

Composiciones de testosterona intranasal 4.0% y 4.5% Tabla 4: Componentes, cantidad, estándares de calidad y función - formulación de gel de testosterona 0.4% de la invención Tabla 5 Componentes, cantidad, estándares de calidad y función - formulación de gel de testosterona 0.6% de la invención Tabla 6: Componentes, cantidad, estándares de calidad y función, TBS-1: 5.6 mg/125 yiL/ jeringa (4.5% gel) Tabla 7: Componentes, cantidad, estándares de calidad y función, TBS-1 : 6.75 mg/150 µ??/ jeringa (4.5% gel) Recipiente Las formulaciones de gel de testosterona de la invención se suministran en jeringas de polipropileno de dosis unitaria. Dos jeringas de cada dosis se envasan en una bolsa de papel de aluminio protectora.

EJEMPLO 2 Formulaciones de gel de testosterona intranasal Las formulaciones de gel de testosterona de la invención son formulaciones de testosterona en un gel intranasal propuesto para evaluar la farmacocinética de dos dosis diferentes de las formulaciones de gel de testosterona de la invención para las formulaciones de gel de testosterona de la invención en varones hipogonadales .

El ingrediente activo, testosterona, proviene de Bayer Schering.

Los desafíos para la administración nasal incluyen: • requerimientos de partículas más grandes que la administración pulmonar (es decir, solo las partículas > 10 µ?? son suficientemente pesadas para evitar entrar en el aparato respiratorio) ; • las concentraciones deben ser más altas debido a los volúmenes pequeños se pueden administrar; • rápida eliminación del agente terapéutico desde el sitio de depósito produce un tiempo más corto disponible para la absorción; • potencial para la irritación del tejido local; y • posibilidades de manipulación de la formulación limitadas para alterar los perfiles de administración del fármaco.

La testosterona está indicada para la TRT en varones que son deficientes en testosterona por numerosas razones, que incluyen hipogonadismo . Las opciones disponibles actuales ' para la administración de testosterona son vía oral, bucal, inyectable, implantable y transdérmica (parches y geles) .

Un gel de testosterona intranasal (3.2%) se desarrolla para el tratamiento de hipogonadismo en los varones y se ha administrado a varones hipogonadales en varios ensayos clínicos, ver por ejemplo, Mattern, C. et al., 2008 The Aging Male 11 ( 4 ): 171-178 (Dec 2008, que se incorpora en la presente por referencia en su totalidad. En un estudio de fase II NCT00975650, que se realiza en Estados Unidos de América en varones deficientes en testosterona y que fue complementario con el estudio rumano informado en Mattern et al., Supra, el gel intranasal 3.2% que se informa en Mattern et al, Supra, no logró alcanzar los niveles de testosterona plasmática requeridos por la FDA para respaldar la eficacia de la TRT en varones deficientes en testosterona. Las formulaciones de los geles de testosterona intranasales de la presente invención se desarrollan en concentraciones de aproximadamente 4.0% y 4.5% de testosterona.

EJEMPLO 3 Excedentes [Formulaciones de gel de testosterona de la invención] No se añade excedente a la formulación. Se añade un excedente a cada jeringa para tomar en cuenta el gel que se retiene en la jeringa después de la dosificación. Este excedente permanece constante en 23 yL, independientemente del volumen de gel en la jeringa. Las cantidades teóricas de cargado y dispensado para las formulaciones de gel de testosterona de la invención se proporcionan a continuación.

Tabla 8 EJEMPLO 4 Propiedades fisicoquímicas y biológicas [Formulaciones de gel de testosterona de la invención] Las formulaciones de gel bioadhesivo de testosterona de la invención tiene una viscosidad en el rango de 3000 a 10000 mPa x seg. La viscosidad es importante porque facilita el mantenimiento del gel en la cavidad nasal en contacto con la mucosa nasal. Cuando la viscosidad es menor de aproximadamente 3000 mPa x seg (es decir, 3000 centipoise) , el gel tiende a ser atraído por la gravedad fuera de la cavidad nasal.

EJEMPLO 5 Fórmula del lote [Formulaciones de gel de testosterona de la invención] Se fabrican tres concentraciones diferentes de formulaciones de gel de testosterona de la invención, 0.15%, 0.45% y 0.6%, para el ensayo clínico propuesto. Las fórmulas del lote para estos lotes se presentan en la siguiente Tabla 9.

Tabla 9: Fórmulas del lote de 200 KG para formulaciones de gel bioadhesivo de testosterona 4.0% y 4.5% de la invención en el tamaño de lote de 8 kg EJEMPLO 6 Proceso de fabricación y controles del proceso [Formulaciones de gel de testosterona de la invención] El material se fabrica de acuerdo con el siguiente proceso.

Compuesto Actividad Control Aceite de ricino (porción 1 y 2} Testosteiona (micronizada) Prueba de liberación OC Dióxido de silicio coloidal Aceite de ricino (porción 1) Mezcla de testosterona en aceite de ricino Testosterona (mieronizada) (porción 1) Mezda I Mezcla de premezcla con aceite Aceite de ricino (porción 2) de ricino (porción 1) Mezcla II Oleoil polioxilglicéridos Mezcla de Oleoil polioxilqlicéridos con la mezcla I Tamizado Verificación de agregados no disueltos Examen visual -Aspe do Dióxido de silicio coloidal Mezcla de dióxido de silicio coloidal con la mezcla tamizada II Descarga Prueba de liberación OC (incluye en linea) Diagrama de fluj o del proceso de fabricación Mezclado de los Ingredientes - gel a granel La premezcla se prepara por el mezclado, con un mezclador de hélice, de la cantidad total de testosterona con la porción 1 del aceite de ricino durante 10 minutos.

La mezcla I se prepara por la adición de la premezcla al aceite de ricino restante y se mezcla durante 60 minutos . La temperatura del producto se mantiene debaj o de 50°C durante el proceso de mezclado entero.

Los oleoil polixoilglicéridos se precalientan a 40-50°C y se mezclan durante 10 minutos antes de añadirse a la mezcla I (esto se identifica como la mezcla II). Se mezcla durante 45 minutos mientras se mantiene la temperatura del producto debajo de 50°C. La mezcla II luego se tamiza a través de un tamiz para eliminar cualquier agregado de testosterona no disuelto.

La mezcla III se prepara por la adición de dióxido de silicio coloidal a la mezcla II y se mezcla durante 15 minutos mientras se mantiene la temperatura del producto debajo de 50°C. Se realiza un examen visual después de esta etapa, para asegurar que el gel está transparente.

A la finalización del mezclado el gel se agita y enfria a una temperatura del producto debajo de 30°C. El producto luego se descarga en tambores de acero inoxidable y se toma una muestra del gel a granel para la prueba analítica .

Cargado y envasado - Suministros clínicos Después de la liberación de la mezcla de gel final por parte del laboratorio de control de calidad, se realiza el proceso de cargado y envasado por el cargado de un volumen predeterminado en la jeringa seguido por la aplicación de la tapa de la jeringa. Dos jeringas se envasan en una bolsa de aluminio .

Las jeringas se cargan usando una pipeta sobre el gel tomado de un tanque de almacenamiento. La punta de la pipeta se descarta después de cargar la jeringa y se aplica la tapa de la jeringa. Cada jeringa se rotula individualmente .

Después de la aplicación de la etiqueta, dos jeringas se envasan en una bolsa de aluminio preformada y la bolsa se sella. Cada bolsa se rotula.

EJEMPLO 7 El producto farmacológico, TBS-1, es una formulación basada en aceite, viscosa y tixotrópica que contiene testosterona destinada a la aplicación intranasal para el tratamiento del hipogonadismo en los varones.

El producto farmacológico se formula con los siguientes ingredientes activos del compendio: aceite de ricino, oleoil macrogolglicéridos, y dióxido de silicio coloidal .

Para permitir la administración de diferentes dosis en el programa de Fase II, se usa una jeringa como recipiente de dosis unitaria para los suministros clínicos.

Las jeringas destinadas para usar en el programa clínico son sin aguja y se aplica una tapa de rosca en el extremo de la jeringa. La jeringa consiste en el cilindro de la jeringa y el émbolo. El cilindro de la jeringa se forma de polipropileno. El émbolo se forma de polietileno. La tapa de jeringa se forma de polietileno de alta densidad (HDPE) .

Se fabrica una nueva formulación de dosis de TBS-1 para el estudio clínico TBS-1-2010-01 (presentado a la Agencia en 28/07/2010 Número de serie 0019) . La cantidad de testosterona en estas formulaciones es 4.0% y 4.5% junto con un ajuste de la cantidad de aceite de ricino. La exacta formulación se lista en las Tablas 10, 11 y 12. La TBS-1 está concentrada de modo que se administra la misma dosis por vía intranasal en un volumen más pequeño.

Se administrarán tres concentraciones diferentes de gel de TBS-1 gel en este ensayo clínico 5.0 mg/125 iL/ jeringa (4.0% de gel), 5.6 mg/125 pL/ jeringa (4.5% de gel) y 6.75 mg/150 \iL/ jeringa (4.5% de gel) . Se añade un exceso a cada jeringa para representar el gel que se retiene en la jeringa después de la dosificación. Este excedente permanece constante independientemente del volumen del gel en la j eringa .

Composición Las composiciones de las tres concentraciones diferentes del producto farmacológico por administrar en este ensayo clínico se proporcionan en las Tablas 10, 11 y 12.

Tabla 10: Componentes, cantidad, estándares de calidad y función, TBS-1 : 5.0 mg/125 L jeringa (4.0% de gel) Tabla 11: Componentes, cantidad, estándares de calidad y función, TBS-1: 5.6 mg/125 µ??/ jeringa (4.5% de gel) Tabla 12: Componentes, cantidad, estándares de calidad y función, TBS-1: 6.75 mg/150 µ?·/ jeringa (4.5% de gel) Recipiente El gel TBS-1 se suministra en jeringas de polipropileno de dosis unitarias. Dos jeringas de cada dosis se envasan en una bolsa de papel de aluminio protectora.

Control de Productos farmacológicos [TBS-1, Gel] Especificación [TBS-1, Gel] El gel a granel de TBS-1 se analiza en cuanto a las siguientes especificaciones para la liberación del lote.

El gel TBS-1 del producto terminado envasado en jeringas de dosis unitaria se analiza en cuanto a las siguientes especificaciones para la liberación del lote.

Tabla 13 : Especificación para gel de TBS-1 a granel TAMC - recuento microbiano aeróbico total TYMC - recuento de levaduras/hongos combinados totales Análisis de lote [TBS-1, Gel] Se han producido un lote preliminar (Lote No. 100304), cuatro lotes de escala piloto (Lote No.ED 187, ED 188, ED 189 y ED 014), dos lotes piloto no GMP (NA 090811-1 y NA090723-1) y tres lotes de escala comercial (Lote 9256, 0823 y 0743) de TBS-1. Los datos de los nuevos lotes, 0823 y 0743 se describen en las Tablas 16 y 17.

Tabla 15 : Descripción de lotes TBS-1 El Lote 0743, de gel de testosterona 4.5% a granel, se carga en dos concentraciones de dosis diferentes, 5.6 mg (Lote 0943) y 6.75 mg (Lote 0744), por la variación del peso del gel en la jeringa terminada. El Lote 0823, de gel de testosterona 4.0% a granel, se carga como una concentración de dosis, 5.0 mg (Lote 0942).

Tabla 16: Análisis de lote - Lotes TBS-1 0743 y 0823 TYMC - recuento levaduras/hongos combinados totales Tabla 17: Análisis de lote - Lotes de TBS-1 00744, 0942 y 0943 Estabilidad [TBS-1, Gel] Síntesis y conclusiones de estabilidad [TBS-1, gel] Esta sección se ha enmendado para incluir datos adicionales sobre los estudios de estabilidad en curso para los lotes de estabilidad inicial y para proporcionar datos de estabilidad sobre el producto farmacológico en las jeringas utilizadas para el estudio clínico de Fase II. Solo se han incluido las secciones actualizadas e información nueva para la revisión.

Todos los estudios de estabilidad del gel TBS-1 han sido realizados por ACC GmbH Analytical Clinical Concepts, Schóntalweg 9-11, 63849 Leidersbach/Aschaffenburg, Alemania. Los estudios de estabilidad que cumplen los requerimientos de ICH están en curso.

Tabla 18 : Estudios de estabilidad realizados para soporte del TBS-1 En conjunto, los datos de estabilidad provistos en esta sección concluyeron avalar un periodo de "uso por" 24 meses para TBS-1 almacenado en condiciones de temperatura ambiente controlada [es decir, 25°C (77°F) ; excursiones 15-30°C (59-86°F) ] . Los datos también muestran que no se requieren condiciones especiales de almacenamiento para el producto farmacológico. La configuración de envasado es adecuada para proteger el producto farmacológico de la luz y el producto farmacológico no se degrada o cambia físicamente después de la exposición a estrés del ciclado de temperatura.

Los suministros clínicos se aplican en un período de reensayo de 1 año, cuando se almacenan en condiciones de temperatura controlada [es decir, 25°C (77°F); excursiones 15-30°C (59-86°F)], para reflejar la duración del ensayo y los datos disponibles. Como los datos adicionales están disponibles el período de reensayo se extenderá según sea apropiado .

Datos de estabilidad [TBS-1, Gel] En esta sección, se proporcionan las tablas de datos de estabilidad actualizados para un lote a granel de tamaño comercial 9256, 0743 y 0823 y lotes de producto terminado 9445, 9446, 9447, 0943.

Un programa de estabilidad de tiempo real de 6 meses está en curso en producto a granel en escala comercial (Lote 9256) . Un programa de estabilidad de tiempo real de 36 meses y acelerada de 6 meses está en curso en tres dosis diferentes del Lote 9256 envasado en jeringas de 1 mL: Lote 9445 4.0 mg (3.2% gel), Lote 9446 5.5 mg (3.2% gel), Lote 9447 7.0 mg (3.2% gel) .

Un programa de estabilidad de tiempo real de 6 meses se está llevando a cabo en el lote a granel en escala comercial 0743 '(4.5% de gel) y 0823 (4.0% de gel). Un programa de estabilidad de tiempo real de 36 meses y acelerada de 6 meses se está llevando a cabo en el lote 0943 (Lote a granel 0743 cargado en las jeringas de 1 mL) .

Tabla 1 : Esquema de estabilidad para gel TBS-1 a granel en escala comercial y producto finalizado cargado en jeringas de 1 mL Tabla 20: Datos de estabilidad del Lote de TBS-1 9256 (3.2% de gel a granel) fabricado en julio de 2009 almacenado a temperatura ambiente Tabla 21: Datos de estabilidad de 4.0 mg de TBS-1 Lote 9445 (3.2% de gel) jeringa de 1 mL (25 ± 2 °C, 60 ± 5% RH, horizontal) Tabla 22 : Datos de estabilidad de 4.0 mg de TBS-1 Lote 9445 (3.2% de gel) jeringa de 1 mL, (40 ± 2 °C, 75 ± 5% RH, horizontal) Tabla 23: Datos de estabilidad de 5.5 mg de TBS Lote 9446 (3.2% de gel) jeringa de 1 mL (25 ± 2°C, 60 ± RH, horizontal) Tabla 24: Datos de estabilidad de 5.5 mg de TBS-1 Lote 9446 (3.2% de gel) jeringa de 1 mL (40 ± 2°C, 75 ± 5% RH, horizontal) Tabla 25 : Datos de estabilidad de 7.0 mg de TBS-1 de Lote 9447 (3.2% de gel) jeringa de 1 mL (25 ± 2°C, 60 ± 5% RH, horizontal) Tabla 26: Datos de estabilidad de 7.0 mg de TBS Lote 9447 (3.2% de gel) jeringa de 1 niL (40 + 2 °C, 75 + RH. , horizontal) Tabla 27 : Datos de estabilidad de 5.6 mg de TBS-1 Lote 0943 (4.5% de gel) jeringa de 1 mL (25 + 2°C, 60 ± 5% RH, horizontal) Tabla 28 : Datos de estabilidad de 5.6 mg de TBS-1 Lote 0943 (4.5% de gel) jeringa de 1 mL (40 ± 2 °C, 75 ± 5% horizontal) Tabla 29: Datos de estabilidad de TBS-1 Lote 0743 (4.5% de gel) a granel almacenado a temperatura ambiente Tabla 30: Datos de estabilidad de TBS-1 Lote 0823 (4.5% de gel) a granel almacenado a temperatura ambiente EJEMPLO 8 Este es un estudio de Fase II diseñado para investigar la absorción intranasal de 4% del fármaco tres veces por día y 4.5% del fármaco administrado dos veces por dia y tres veces por día, y comparar la absorción del estudio anterior en los mismos sujetos que respondieron con un gel de testosterona al 3.2%. En el estudio anterior, se utilizó Nasobol-01-2009, un gel de testosterona al 3.2%, para liberar 4.0 mg, 5.5 mg y 7.0 mg, de testosterona intranasalmente mediante volúmenes de gel de 125 µ?<, 172 µ?, y 219 .Lr respectivamente. En este estudio, se administraron 5.0 mg, 5.65 mg y 6.75 mg de testosterona en volúmenes de gel de 125 µ??, 125 i , y 150 i , respectivamente. Este estudio permitió investigar la liberación de cantidades similares de testosterona en volúmenes mucho más pequeños.

En este estudio de etiqueta abierta, los sujetos se distribuyen de manera igual aleatoriamente en tres brazos de tratamiento. Los tratamientos se administran durante una semana, en un diseño paralelo. Al final de una semana se comparan los tratamientos llevando a cabo una investigación farmacocinét ica de la absorción sistémica del producto de testosterona y de sus dos metabolitos fisiológicos dihidrotestosterona y estradiol. 8. OBJETIVOS DEL ESTUDIO 8.1 Objetivo primario El objetivo primario de este estudio es el de determinar la biodisponibilidad por intermedio del análisis PK de un gel TBS al 4% (aplicado tres veces por día) y de un gel TBS-1 al 4.5% (aplicado dos veces por día y tres veces por dia) en hombres hipogonadales . 8.2 Objetivo secundario El objetivo secundario del estudio es el de establecer el perfil de seguridad para el TBS-1. 9. PLAN DE INVESTIGACIÓN 9.1 Diseño general del estudio y descripción del plan Este es un estudio farmacocinético de diseño paralelo, etiqueta abierta, aleatorizado, equilibrado, triple (4.0% t.i.d. 4.5% . b.i.d. y 4.5% t.i.d.), de TBS-1, administrado intranasalmente . Las concentraciones en el suero de los totales de testosterona, dihidrotestosterona y estradiol fueron medidas mediante métodos de LC/MS validados.

A unos sujetos hipogonadales se les solicitó visitar la Clínica en tres (3) ocasiones, de las cuales una (1) visita (la Visita 3) requirió pasar la noche en la Clínica para establecer el perfil farmacocinético de 24 horas descrito anteriormente.

Para todos los sujetos se determinaron los siguientes parámetros farmacocinéticos : • AUCo-x Cpr0mediof Ciuin / Cmax í tmax, PT F y PTS / los valores medios y el error estándar del valor medio se calculan para el intervalo de 24 horas.

• Se calcula el porcentaje de sujetos con un Cpromedio para testosterona, dihidrotestosterona y estradiol, en lo que sigue, dentro y arriba del intervalo de referencia para el respectivo analito.

Se supervisan eritrocitosis , anemia e infecciones midiendo recuentos completos de sangre en la selección sistemática en la visita de cierre.

Se planea reclutar aproximadamente 30 sujetos. Veintidós (22) sujetos completaron el estudio. La participación en el estudio es de 2 a 3 semanas. 9.2 Análisis del diseño del estudio La terapia con testosterona para hombres hipogonadales debería corregir las anormalidades clínicas de la deficiencia de testosterona, las que incluyen los trastornos de la función sexual. La testosterona reduce la grasa corporal e incrementa la masa muscular no grasa y la densidad ósea, con mínimos efectos adversos.

Se dispone de varios productos para el reemplazo de la testosterona, que pueden administrarse por vía intramuscular, oral, como comprimido bucal en las encías, o tópicamente como parche o gel. Las terapias de reemplazo actuales tienen diversos inconvenientes. Las inyecciones de testosterona demuestran grandes variaciones en los niveles de testosterona en el suero, frecuentemente superiores al intervalo de referencia (5) . Los parches de testosterona presentan un elevado coeficiente de irritación de la piel (6,7). Los geles de testosterona, si bien se utilizan ampliamente en Norteamérica, no son siempre convenientes y presentan un riesgo de contacto de piel a piel para los miembros de la familia (8,9). El undecanoato de testosterona, oral, debe ser administrado con una comida de elevado contenido de grasa, y los niveles obtenidos son frecuentemente bajos (10-12).

La administración intranasal de una nueva formulación de testosterona (TBS-1) ha demostrado ser absorbida de manera eficiente, y muestra un excelente potencial como producto terapéutico de hipogonadismo masculino (13). La mucosa nasal ofrece una vía alternativa para la administración que no está expuesta al efecto del primer paso, tiene una elevada permeabilidad y facilidad de administración con una rápida absorción en la circulación sistémica, produciéndose elevados niveles de plasma similares a los observados después de una administración intravenosa.

Las ventajas del gel de testosterona, en comparación con otras formulaciones, son las siguientes: una aplicación conveniente que permite un uso no conspicuo, la mucho más pequeña cantidad de ingrediente activo necesario para el sujeto, y el hecho de saber que este tipo de administración es mucho menos propensa a contaminar los otros miembros de la familia (esposa e hijos) .

Varios estudios han indicado la utilidad de la administración de testosterona mediante el gel nasal. El estudio anteriormente efectuado en 2009 permitió demostrar la eficacia de TBS-1 en el tratamiento de hombres hipogonadales que requieren una terapia de reemplazo de testosterona. La eficacia se determina estableciendo un perfil farmacocinético para los niveles de testosterona en el suero después de un perfil de dosificación de múltiples dosis b.i.d. para el TBS-1, para lo cual se utilizan tres cantidades diferentes de testosterona (8.0 mg, 11.0 mg y 14.0 mg) y se los compara con el perfil del control activo, Androderm®. El objetivo secundario de este estudio es el de establecer un perfil de seguridad para el TBS-1. Esto se logra supervisando los acontecimientos adversos y adversos graves durante el transcurso de la totalidad del estudio, y comparándose los diversos parámetros de seguridad obtenidos en el seguimiento con aquellos obtenidos en la linea de base. Estos parámetros de seguridad consistieron en los signos vitales, recuentos completos de la sangre, un perfil químico, un perfil endocrino, y un análisis de orina. Además, los cambios en la mucosa nasal y en la próstata durante el seguimiento se comparan con la línea de base.

Una ventaja importante de la potencia del diseño del hallazgo de las dosis es que minimiza la distorsión en la selección de los sujetos y de los diferentes grupos huésped frecuentemente observados en los diseños de estudios secuenciales .

Los tres sitios clínicos son supervisados por Schiff & Company para asegurar la seguridad de los sujetos y el desempeño del estudio clínico de acuerdo con las directivas ICH E6 y FDA.

Se utiliza un laboratorio central para el análisis de los parámetros de hepatología y bioquímicas a efectos de obtener resultados de laboratorio consistentes y no distorsionados. Para los análisis de PK se utiliza un segundo laboratorio central.

Los siguientes son las actividades específicas en el estudio durante las visitas de los sujetos: Tabla 31 * Examen médico en la selección sistemática y el día 8 solamente ¦"¦El consentimiento informado será firmado antes de la visita de selección sistemática 1 en el Periodo In/ex: inclusión y exclusión Si el sujeto tuvo un examen de próstata normal anterior en Nasobol-01-2009, no es necesario. 3Perfil químico: Na/K, glucosa, urea, creatinina, bilirrubina total, albúmina, calcio, fosfato, ácido úrico, AST, ALT, ALP, GGT y CK. 4 Recuento completo de sangre y diferencial 5 Varilla de inmersión en orina (no microscópico) 6 Cocaína, canabinoides , opiáceos, benzodiacepinas . 7 Nivel de alcohol en la orina mediante varilla de inmersión 8 Testosterona en suero, dihidrotestosterona & estradiol serán medidos por un laboratorio de referencia en base a un método LC-MS/MS validado, para T y DHT y un LC-MS/ S validado o método de inmunoensayo, para estradiol.

Visita de selección sistemática 1 • Los sujetos, después de haber firmado voluntariamente el formulario de consentimiento informado, son entrevistados por el investigador clínico o un médico/enfermera practicante apoderado quien tuvo a su cargo la historia médica y física, datos demográficos registrados, y llevó a cabo el examen físico rutinario. Se mide el peso corporal y la altura, y se calcula el BMI . Se miden los signos vitales (sentado durante cinco minutos) (presión sanguínea, frecuencia cardiaca, frecuencia respiratoria, y temperatura corporal) .

• Si el sujeto tuvo un examen rectal digital normal de la próstata en la prueba Nasobol-01-2009, no se repite .

• El investigador clínico evaluó la elegibilidad del sujeto para el estudio sobre la base de los criterios de inclusión/exclusión, y los sujetos elegibles que se hallaban actualmente en terapia de reemplazo de testosterona tuvieron que experimentar un período de lavado; cuatro (4) semanas para productos de deposición administrados intramuscularmente (por ejemplo enantato de testosterona 200 mg/mL) , y dos (2) semanas para productos administrados oralmente o tópicamente (parche, gel, o bucal) . Al final del período de lavado, es necesario que los sujetos regresen para medir la testosterona en su suero.

• Para los sujetos que no habían sido expuestos al tratamiento no fue necesario un período de lavado • La sangre para la testosterona en el suero se extrae bajo condiciones de ayuno, a las 0900 h ± 30 minutos. El nivel de la testosterona en el suero debe ser > 150 ng/dL, y < 300 ng/dL.

• Se extrae sangre para las investigaciones de laboratorio clínico después de un ayuno durante la noche (un ayuno de ocho a 10 horas) que incluía la siguiente: o Recuento sanguíneo completo (hemoglobina, hematocritos, MCV, MCHC, RBC, WBC & Diferencial) o Perfil de clínica química (Na/K, glucosa, urea, creatinina, bilirrubina completa, albúmina, calcio, fosfato, ácido úrico, AST, ALT, ALP, GGT y CK) . o PSA en el suero o Pruebas para HBV, HCV y HIV (antígeno de superficie de hepatitis C, anticuerpos de HIV) o Muestra de sangre entera para hemoglobina Ale o Análisis urinario mediante varilla de inmersión o orina para selección sistemática de drogas (Cocaína, cannabis, Opiáceos y benzodiacepinas ) . Los sujetos con resultado positivo no fueron inscritos, a menos que el resultado positivo se deba a la interferencia de un fármaco prescripto por un médico o Orina para nivel de alcohol.

• El examen endoscópico nasal otorrinolaringológico (examen ENT) fue hecho por un especialista de ENT.

• La totalidad de los sujetos que cumplieron con los criterios de inclusión y de exclusión son inscritos en el estudio y distribuidos aleatoriamente en uno de tres grupos de tratamiento (A, B ó C) .

Visita 2 (día 1) • Los sujetos llegaron a la Clínica bajo condiciones de ayuno (ayuno de seis a ocho horas) a las 20:00 horas o antes.

• Se dan instrucciones a los sujetos acerca de la técnica correcta para la dosificación intranasal de TBS-1.

• Se extrae sangre a las 20:45 hrs para establecer los niveles de linea de base de testosterona, dihidrotestosterona y estradiol en el suero.

• Se miden los signos vitales (sentado durante cinco minutos) (presión sanguínea, pulso cardiaco, frecuencia respiratoria y temperatura corporal) a efectos de establecer una línea de base.

• A los sujetos se les dio un suministro de bolsitas para una semana de 18 bolsitas para el tratamiento A, 18 bolsitas para el tratamiento B, y 18 bolsitas para el tratamiento C. Las bolsitas requeridas para la dosificación durante el perfil farmacocinético quedaron en poder del investigador clínico. Cada bolsita contenía dos jeringas prellenadas con gel TBS-1 para el tratamiento A, B o C.

• Los sujetos administraron su primera dosis de TBS-1 a las 21:00 horas de acuerdo con su grupo de tratamiento .

• Se miden los signos vitales a las 22:00 horas y los sujetos son enviados a sus casas con su suministro de bolsitas para su grupo de tratamiento.

Control telefónico (dia 4) En el dia 4 se llama por teléfono a todos los sujetos para verificar su cumplimiento con la administración del fármaco de estudio, abstenerse de alcohol durante 48 horas, y documentar cualesquier acontecimientos adversos que pudiera presentarse. A los sujetos se le recuerda devolver a traer todas las jeringas para su control en la visita 3.

Visita 3 (dia 7) • Los sujetos llegaron a la clínica bajo condiciones de ayuno (seis a ocho horas de ayuno) a las 20:00 horas o antes.

• Se extrae sangre a las 20:45 horas para establecer los niveles de línea de base de testosterona, dihidrotestosterona y estradiol, en el suero. Los signos vitales se registran cada hora durante dos horas después de la dosificación.

• Se registran los parámetros de seguridad.

• Los sujetos siguieron en ayuno durante dos horas de la dosis después de lo cual se les sirvió una cena.

Después de la cena los sujetos ayunaron nuevamente durante la noche y siguieron ayunando hasta las 09:00 horas del día 8. El almuerzo y cena en el día 8 tuvieron lugar en momentos normales y no están sujetos a condiciones de ayuno.

Extracciones de sangre para farmacocinética • La administración del fármaco debería haber tenido lugar a ± 5 min con respecto al tiempo indicado (21:00 h y 07:00 h para dosificación b.i.d. y 21:00 h, 06:00 h y 13:00 h para dosificación t.i.d.) • Las extracciones de sangre deberían haber tenido lugar dentro de ± 5 min con respecto a los tiempos dedicados cuando los intervalos de extracción de sangre = 30 min y dentro de ± 15 minutos cuando las extracciones de sangre son de > 30 min.

• Tratamiento A: extracciones de sangre para las mediciones de testosterona, dihidrotestosterona, y estradiol en el suero. Las extracciones de sangre para dosificación t.i.d. se efectúan en los siguientes tiempos después de la administración del fármaco a las 21:00 hrs : 0.33, 0.66, 1.0, 1.5, 2.0, 3.0, 6.0, 9.0, 9.75, 10.33, 10.66, 11.0, 11.5, 12.0, 13.0, 14.0, 15.75, 16.33, 16.66, 17.0, 17.5, 18.0, 20.0, 22.0 y 24.0 horas, (extracciones dotada de sangre: 25 + línea de base) .

• Tratamiento B: Extracciones de sangre para las mediciones de testosterona, dihidrotestosterona, y estradiol en el suero. Las extracciones de sangre para la dosificación de b.i.d. se efectúan en los tiempos siguientes después de la administración del fármaco a las 21:00 hrs: 0.33, 0.66, 1.0, 1.5, 2.0, 3.0, 6.0, 9.0, 9.75, 10.33, 10.66, 11.0, 11.5, 12.0, 13.0, 16.0, 19.0, 22.0, y 24.0 horas, (total de extracciones de sangre; 19 + linea de base) .

• Tratamiento C: Extracciones de sangre para las mediciones de testosterona, dihidrotestosterona, y estradiol en el suero. Las extracciones de sangre para la dosificación de t.i.d. se efectúan en los siguientes momentos después de la administración del fármaco a las 21:00 hrs: 0.33, 0.66, 1.0, 1.5, 2.0, 3.0, 6.0, 9.0, 9.75, 10.33, 10.66, 11.0, 11.5, 12.0, 13.0, 14.0, 15.75, 16.33, 16.66, 17.0, 17.5, 18.0, 20.0, 22.0 y 24.0 horas, (total de extracciones de sangre; 25 + linea de base) .

• La última extracción de sangre en el perfil farmacocinético incluyó suficiente sangre para medir los parámetros de seguridad del laboratorio clinico requeridos en el Cierre.

Visita 3 (día 8) , visita de cierre Los sujetos fueron sometidos a las siguientes evaluaciones : • Un examen médico rutinario que incluía los signos vitales (presión sanguínea, frecuencia cardiaca, frecuencia respiratoria, y temperatura corporal) .

• Examen médico otorrinolaringológico.

• Se toman muestras de sangre para el recuento completo de sangre (hemoglobina, hematocritos , RBC, WBC y diferencial ) .

• Muestra de sangre para perfil químico (Na/K, glucosa, urea, creatinina, calcio, fosfato, ácido úrico, bilirrubina completa, albúmina, AST, ALT, ALP, GGT y CK) .

• Muestra de sangre para PSA.

• Muestra de orina para análisis urinario mediante varilla de inmersión. 9.3 Selección de la población de estudio Los sujetos se incluyen en el estudio de acuerdo con los siguientes criterios de inclusión/exclusión: 9.3.1 Criterios de inclusión 1. Hombres que respondieron a la testosterona intranasal de elevada dosis en la prueba de Nasobol 01-2009. 2. Consentimiento informado escrito. 3. Hombres entre 18 y 80 años de edad. 4. Hombres con hipogonadismo primario o secundario y con niveles de testosterona en el suero matutinos (09:00 h ± 30 min) > 150 ng/dL y < 300 ng/dL en sangre extraída bajo condiciones de ayuno. 5. BIM de entre 18.5 - 35 kg/m2. 6. Todas las evaluaciones del laboratorio clínico en la visita de selección sistemática son de sangre extraída o de orina recolectada después de un ayuno durante la noche (10 horas) y se hallan dentro del ± 15% del intervalo de referencia del laboratorio clínico, salvo la testosterona en el suero. 7. Examen endoscópico nasal otorrinolaringológico normal. Ver el apéndice 16.1.1.1. para criterios de exclusión relacionados con el examen endoscópico. 8. Examen de próstata anterior normal (no hay masa prostética palpable) , tomado de la prueba Nasobol-01-2009. 9. PSA en el suero = 4.0 ng/mL. 9.3.2 Criterios de exclusión 1. Enfermedad interactual significativa de cualquier tipo, en particular de hígado, riñon, cardíaca, cualquier forma de diabetes mellitus o enfermedad psiquiátrica. 2. Limitaciones en cuanto a movilidad, definida como dificultad para caminar dos cuadras sobre una superficie plana o de subir 10 escalones 3. Hematocrito > 54 % en la selección sistemática 4. Historia de cáncer, con exclusión de cáncer de piel 5. Historia de cirugía nasal, específicamente turbinoplastia, septoplasia, rinoplastia, "trabajo de nariz", o cirugía de seno. 6. Sujeto con fracturas nasales anteriores. 7. Sujeto con alergias activas, tales como rinitis, rinorrea, y congestión nasal. 8. Sujeto con trastornos inflamatorios de la mucosa, especialmente pénfigo, y síndrome de Sjogren. 9. Sujeto con enfermedad sinusal, especialmente sinusitis aguda, sinusitis crónica, o sinusitis fangal alérgica . 10. Historia con trastornos nasales (por ejemplo, poliposis, epistaxis recurrente (> 1 hemorragia nasal por mes), abuso de descongestivos nasales) o apnea de sueño. 11. Sujeto que utilice cualquier forma de entrega de medicación intranasal, específicamente corticosteroides nasales y oximetazolina que contiene sprays nasales (por ejemplo, Dristan, Spray Nasal de 12 horas). 12. Historia de reacción adversa severa a los fármacos o leucopenia. 13. Historia de tendencia de hemorragias anormales o tromboflebitis no relacionada con venipuntura o canulación intravenosa . 14. Prueba positiva para Hepatitis B, Hepatitis C, o HIV. 15. Historial de asma o de tratamiento en curso para asma. 16. Historial de problemas para dormir. 17. Fumadores (> 10 cigarrillos por día). 18. Bebedores habituales de más de cuatro (4) unidades de alcohol por día (1 unidad = 300 mL de cerveza, 1 vaso de vino, 1 medida de bebida espirituosa) , o aquellos que pueden tener dificultad en abstenerse de alcohol durante las 48 horas antes de la visita de muestreo de las 24 horas. 19. Historial de, o evidencia vigente de abuso de alcohol o de cualquier sustancia ó droga, legal o no, u orina positiva a droga y selección sistemática de alcohol o abuso de drogas o alcohol. 20. Tratamiento actual con andrógenos (por ejemplo, dehidroepiandrostendiona, androstenediona) o esteroides anabólicos (por ejemplo, testosterona, dihidrotestosterona ) '. 21. Tratamiento con estrógenos antagonistas de GnRH, o de hormona de crecimiento, dentro de los 12 meses anteriores . 22. Tratamiento con fármacos que interfieren con el metabolismo de testosterona, tal como Anastrozol, Clomifeno, Dutasterida, Finasterida, Flutamida, Ketoconazol, Espironolactona y Testolactona . 23. Tratamiento con andrógeno dentro de las cuatro semanas anteriores (intramuscular, tópica, bucal, etc.). 24. Sujeto con pobre historial en cuanto a cumplimiento o del cual es improbable que siga concurriendo. 25. Participación en cualquier otro estudio de investigación durante la realización de este estudio o 30 días antes de la iniciación de este estudio, con la excepción de Nasobol-01-2009. 26. Donación de sangre (usualmente 550 mL) en cualquier momento durante este estudio, y dentro del periodo de 12 semanas antes del inicio de este estudio. 9.3.3 Retiro de los sujetos de la terapia o evaluación A los sujetos se les informa que tienen libertad de retirarse del estudio en cualquier momento sin necesidad de dar razones por su retiro, y sin que ello tenga consecuencias en cuanto a su tratamiento médico futuro. Se les pide informar de inmediato al investigador acerca de su decisión. La participación del sujeto puede ser interrumpida por cualquiera de las siguientes razones: • El deseo propio del sujeto.

• Falta significativa de cumplimiento del protocolo y procedimientos del estudio.

• Enfermedad intercurrente que interfiere con el progreso del estudio.

• Acontecimiento adverso intolerable, que incluye descubrimientos anormales clínicamente significativos del laboratorio clínico, donde, en opinión del investigador clínico, podrían interferir con la seguridad del sujeto.

• La decisión del investigador clínico de que el retiro del estudio es el mejor interés del sujeto.

El investigador clínico tiene el derecho de terminar el estudio prematuramente por razones de seguridad, después haber informado al patrocinador y de haber consultado con el mismo. El patrocinador tiene el derecho de terminar el estudio antes si las observaciones clínicas reunidas durante el estudio sugieren que podría ser injustificable continuar o por otras razones descritas en el contrato entre el patrocinador y los sitios clínicos (por ejemplo, administrativos, reguladoras, etc.). Sin embargo, esto no es necesario. No hay terminaciones prematuras ni abandonos del estudio. 9.4 Tratamientos 9.4.1 Tratamientos Administrados Los sujetos se distribuyen aleatoriamente de manera central en los siguientes grupos de tratamiento a efectos de equilibrar las cantidades igualmente dentro de los grupos de los tres centros: • Tratamiento A (n=10): JERINGAS DE TBS-1 PRELLENADAS CON 125 µL de gel al 4 % para liberar 5.0 mg de testosterona por fosa nasal (intranasal) dado t.i.d. a 21:00, 07:00, y 13:00 horas, (dosis total 30 mg/dia) • Tratamiento B (n=10) : JERINGAS DE TBS-1 PRELLENADAS CON 150 µ?, de gel al 4.5% para liberar 6.75 mg de testosterona por fosa nasal (intranasal) dado b.i.d. a 21:00 y 07:00 horas, (dosis total 27.0 mg/dia) • Tratamiento C (n=10) : JERINGAS DE TBS-1 PRELLENADAS CON 125 µ?? de gel al 4.5% para liberar 5.625 mg de testosterona por fosa nasal (intranasal) dado t.i.d. a 21:00, 07:00, y 13:00 horas, (dosis total 33.75 mg/dia) 9.4.2 Identidad de los productos utilizados en la investigación Nombre del fármaco: TBS-1 (las jeringas están prellenadas de manera de contener 5.0 mg, 5.625 mg, y 6.75 mg de testosterona/j eringa) .

Forma farmacéutica: gel para administración nasal Contenido : ingrediente activo: testosterona.

Excipientes : dióxido de silicio, aceite de ricino, Labrafil®.

Modo de administración: Nasalmente, en forma de dosis individual para cada fosa nasal.

Fabricante : Haupt Farma Amareg.

Lotes Número: 0744, 0942, y 0943 Condiciones de almacenamiento: entre 20 - 25°C.

Envasado El fármaco de estudio TBS-1 se entrega en el sitio de ensayo clínico en forma de una jeringa lista para ser utilizada en una bolsita de lámina (dos jeringas por bolsita) . En el Apéndice 4 del protocolo se describen ejemplos de jeringa y de etiquetas de bolsita. 9.4.3 Método para asignar los sujetos al tratamiento Los sujetos que cumplieron con el criterio de admisión fueron asignados aleatoriamente sobre una base 1:1:1 a uno de los tres grupos de tratamiento. En la selección sistemática, a cada sujeto se le asigna un número de sujeto en sitio en orden secuencial. Los números de los sujetos consistían en cinco dígitos. Los primeros dos dígitos reflejaban el número de sitio asignado al investigador, seguido por un número de tres dígitos para el sujeto. Por ejemplo, 01-001 indica el sitio (01) y el primer sujeto (001) .

Se utilizó el número de sujeto para identificar al sujeto a lo largo del estudio, y el mismo fue ingresado en todos los documentos. A un sujeto no se le asignó más de un número de sujeto. 9.4.4 Selección de dosis en el estudio En un estudio anterior, se utilizó Nasobol-01-2009, un gel de testosterona al 3.2% para entregar 4.0 mg, 5.5 mg y 7.0 mg de testosterona intranasalmente mediante volúmenes de gel de 125 i~L, 172 µL y 219 µL, respectivamente. En este estudio, se administran 5.0 mg, 5.65 mg y 6.75 mg de testosterona en volúmenes de gel de 125 µ?,, 125 µ?, y 150 µ?,, respectivamente. Este estudio permite la investigación de la entrega de cantidades similares de testosterona en volúmenes mucho más pequeños. 9.4.5 Selección y programación de dosis para cada sujeto Esto se basó en los resultados del estudio anterior . 9.4.6 Procedimiento a ciegas No se procedió a ciegas, por cuanto éste es un estudio de etiqueta abierta. La explicación por no haberse utilizado un procedimiento a ciegas, es que se midieron puntos finales analíticos que son de una naturaleza más cuantitativa que cualitativa, por lo que no estaban expuestos a ninguna distorsión introducida ni por los sujetos ni por los investigadores. 9.4.7 Terapia anterior y concomitante Los siguientes medicamentos están prohibidos durante el transcurso del estudio: Sujetos que utilicen cualquier forma de entrega de medicación intranasal, específicamente corticoides nasales y sprays nasales que contengan oximetazolina (por ejemplo, spray nasal 12 horas Dristan) ; Tratamientos actuales con androgenos (por ejemplo, dehidroepiandrosteniona, androstenediona) o esteroides anabólicos (por ejemplo, testosterona, dihidrotestosterona) .

Tratamiento con estrógenos, antagonistas de GnRH u hormona del crecimiento, dentro de los 12 meses anteriores. Tratamientos actuales con androgenos; Tratamiento con fármacos que interfieren con el metabolismo de la testosterona, tales como Anastrozol, Clomifeno, Dutasterida, Finasterida, Flutamida, Ketoconazol, Espironolactona y Testolactona .

Tratamiento con andrógeno dentro de las cuatro semanas pasadas (intramuscular, tópica, bucal, etc.). 9.4.8 Cumplimiento del "bratcuniento Todos los fármacos fueron administrados de acuerdo con el protocolo. Es la responsabilidad principal del investigador asegurarse de que se mantenga un registro exacto de suministros y devoluciones de fármacos. Al final del estudio, los envases originales utilizados son devueltos al patrocinador para su destrucción. La contabilidad de los fármacos es verificada por los supervisores durante el transcurso del estudio y antes de la destrucción de los fármacos de estudios restantes.

Durante la visita 2, a los sujetos se les entrega un suministro de una semana de bolsitas; 18 bolsitas para el tratamiento A, 12 bolsitas para el tratamiento B, y 18 bolsitas para el tratamiento C. Cada bolsita contenia dos jeringas prellenadas con gel TBS-uno para el tratamiento A, B, o C. A los sujetos se les instruye cómo administrar el gel y se les da también un diario para indicar los tiempos de administración en sus casas. 9.5 Variables de eficacia y seguridad 9.5.1 Evaluación de la medición de eficacia y seguridad El parámetro eficacia primaria es el AUC obtenido en las 24 horas después de la administración de TBS-1. A partir de del AUC se calcula la Cpromedio a lo largo de 24 horas . • Área bajo la curva de concentración (AUC, área under the concentration curve) tanto para la dosificación b.i.d. como t.i.d.: se determina para el intervalo de tiempo de 0 a 24 horas mediante la regla trapezoidal.

• La concentración promedio en el intervalo de dosificación (Cpr0medio) se calcula a partir del AUC mediante la siguiente fórmula: Cpr0medio = AUC0-T/i, donde t = tiempo de intervalo de la dosificación.

• PTF (Peak Through Fluctuation, fluctuación entre cresta y seno de onda) y PTS (Peak Trough Swing, oscilación entre cresta y seno de onda) se calcula como sigue : o PTF — ( Cmax — Cmín) /C romecji0 O PTS — (Cmax — Cmín ) / Cmin • Cmin, Cmax, y tmax se toman de los valores reales medidos. Los valores se determinan con respecto al tiempo para la administración de la testosterona en los sujetos tratados .

• Se calcula el porcentaje de sujetos con valores de Cpr0medio de 24 h para la concentración en el suero de testosterona, DHT y estradiol anteriormente mencionadas, dentro y por debajo del respectivo intervalo de referencia.

• Es posible efectuar análisis exploratorios adicionales de los parámetros Farmacocinéticos (PK), en la medida de lo necesario.

Análisis de los datos de seguridad La eritrocitosis, anemia, y las infecciones se supervisan midiendo recuentos de sangre completos en la selección sistemática, y en la visita de cierre. Un médico otorrinolaringólogo examinó los sujetos e identifica cualquier cambio clinicamente significativo en la mucosa nasal en el seguimiento, en comparación con la linea de base.

Se evalúan la química clínica y el análisis urinario en la visita de selección sistemática 1, y en el cierre se evalúan hipo o hiperglucemia, función renal, función hepática (enfermedad hepato-celular o de hígado obstructiva) , daños en músculos esquelético y cardiaco, y cambios en la homeostasis de calcio.

Se mide el PSA (Antígeno Prostético Específico) en el suero como medida precautoria para medir posibles cambios en la próstata, si bien no se esperan cambios en la próstata ni en el PSA en el suero a corto plazo del tratamiento.

La medición de la testosterona, dihidrotestosterona y estradiol, en el suero, en la visita de selección sistemática y en la visita 3, permitió observar cualesquier excursión más allá del límite superior del intervalo de referencia para los dos productos fisiológicos de la testosterona; DHT y estradiol.

Se lleva a cabo el análisis de seguridad sobre todos los sujetos que recibieron TBS-1. La presentación de acontecimientos adversos se presenta por grupo de tratamiento, por gravedad, y por relación con los fármacos del estudio. Todos los acontecimientos adversos han sido descritos y evaluados en cuanto a causalidad y gravedad. Los acontecimientos adversos se clasifican mediante MedDRA. Sin embargo, son pocos, y salvo dos de ellos, no están relacionados con el fármaco.

Seguridad del sujeto • Supervisión de los sujetos y procedimientos de emergencia: la medicación de emergencia, el equipamiento para el sujeto están disponibles en el centro de estudios. Durante la fase de "en casa" los sujetos disponen de un número de teléfono para emergencias y pueden ponerse en contacto con el investigador clínico.

• Por definición, los acontecimientos adversos (AA) son cualquier ocurrencia médica adversa en un sujeto o sujeto de ensayo clínico al que se haya administrado un producto médico y que puede tener o no una relación causal con este tratamiento. Por ello un evento adverso puede ser cualquier signo desfavorable y no previsto, descubrimiento de laboratorio, síntoma o enfermedad temporalmente asociado con el uso de un producto médico de investigación, tanto si se lo considera relacionado con el mismo o no. Toda condición preexistente durante el ensayo clínico que se empeore durante el estudio clínico debe ser considerado como un evento adverso.

• Por definición, una reacción adversa es cualquier respuesta desfavorable y no prevista a un producto de investigación relacionado con cualquier cosa administrada. Todas las reacciones adversas consideradas por el investigador clínico o por patrocinador que tienen una relación causal razonable con un producto médico, es considerado como una reacción adversa. Esto tiende a significar en términos generales que existe una evidencia o argumento que sugiera una relación causal.

• Por definición, una reacción adversa no prevista es una reacción adversa cuya naturaleza o gravedad no es consistente con la información aplicable al producto.

• Por definición, un evento adverso serio o una reacción adversa seria es cualquier presentación o efecto médico desfavorable que en cualquier dosis tenga como resultado la muerte, sea un peligro para la vida, que requiera hospitalización o prolongación de una hospitalización preexistente del sujeto, tenga como resultado una discapacidad persistente significativa, o sea un anomalía congénita o un defecto de nacimiento.

• El período de observación se extiende desde el tiempo en que el sujeto empezó la medicación del estudio hasta el final de la visita 3 para los sujetos hipogonádicos . Los AAs que continúen al final del período de estudio se continúan hasta que el investigador crea que los AAs hayan llegado a punto final clínico estable o se hayan resuelto.

• El porcentaje de los sujetos con un DHT y estradiol en el suero mayor que el límite superior del intervalo de referencia, para los respectivos analitos.

• Los hallazgos de cierre del día 8 se comparan con los resultados de selección sistemática, y los cambios clínicamente significativos se identifica mediante los siguientes : o Signos vitales y acontecimientos adversos: presión sanguínea, temperatura corporal, frecuencia respiratoria, pulsación cardiaca o Examen otorrinolaringológico . o Recuento completo de sangre para evaluar cambios en el conteo de células blancas, hemoglobina y hematocritos . o Perfil químico clínico: Na/K, glucosa, urea, creatinina, calcio, fosfato, ácido úrico, bilirrubina total, albúmina, AST, ALT, ALP, GGT, CK, y PSA.

• Clasificaciones: o SAE (serious adverse event : evento adverso serio) o reacción adversa sería: por definición, cualquier presentación o efecto médico desfavorable a cualquier dosis; que tenga como resultado la muerte, sea una amenaza para la vida, requiera la hospitalización del sujeto o la prolongación existente en la hospitalización del sujeto, tenqa como resultado una discapacidad o incapacidad persistente o significativa, sea una anomalía congénita o defecto de nacimiento, una condición médicamente importante, es decir, el AE perjudicó al sujeto, y requiere una intervención para prevenir uno de los resultados anteriormente enumerados. o AE no serio: todo AE que no cumpla los criterios de SAE. o Intensidad: un acontecimiento/reacción se clasifica como suave, moderada, o grave. o Causalidad: el evento adverso puede ser considerado una reacción adversa frente a un producto médico sometido a investigación cuando exista una "relación causal razonable" entre el acontecimiento y el producto sometido a investigación. Puede considerarse el siguiente grado de relación causal: ¦ Definido: existe una relación temporal plausible entre la administración del fármaco y su retiro, y reaparece después de reiniciarse el fármaco.

¦ Probable: existe una relación temporal plausible con la administración del fármaco.

¦ Posible: existe una relación temporal plausible con la administración del fármaco, pero se la puede también asociar razonablemente a otros factores.

¦ Improbable: no se observa una relación temporal plausible con la administración del fármaco.

¦ Desconocido: no se dispone de suficientes elementos para establecer una correlación con la incorporación del fármaco en el organismo.

¦ Sin relación: no es posible correlacionar con la administración del fármaco.

• Procedimiento a ser seguido en el caso de acontecimientos adversos: todos los acontecimientos adversos detectados por el investigador clínico se registran en el capítulo especial del formulario de informe de casos. Cualquier acontecimiento que se clasifique como serio, independientemente de una relación causal, debe ser informado al CRO (Contract Research Organization) y al patrocinador dentro de las 24 horas. No hay acontecimientos adversos no serios. 9.5.2 Mediciones adecuadas Todas las mediciones utilizadas en este estudio son índices estándar de eficacia, PK y seguridad, y en términos generales se los reconoce como fiables, exactos y pertinentes . 9.5.3. Variable (s) de Eficacia Primaria Los perfiles farmacocinéticos de testosterona en suero para sujetos dosificados en los tratamientos A, B y C que tienen: 1. Un valor de Cpr0medio para 24 h de > 300 ng/dL y < 1,050 ng/dL. 2. El porcentaje de sujetos en cada grupo de tratamiento con un Cpromedio de 24 h inferior a, dentro y superior al intervalo referencia de testosterona en el suero de 300 ng/dL - 1050 ng/dL. 9.6 Control de calidad de los datos Se verifican las entradas de CRF mediante los monitores contra documentos fuente. Todas las entradas incluían los datos de CRF y de la tarjeta de datos del sujeto, y los valores de laboratorio. Todos los datos son objeto de auditoría después de haber sido ingresados en la base de datos para este informe. 9.7 Métodos estadísticos planificados en el protocolo y determinación de la magnitud de las muestras. 9.7.1 Planes estadísticos y analíticos El plan de análisis de PK es como arriba descrito.

El plan de análisis para los signos vitales y los resultados de laboratorio se comparan con los resultados finales después del análisis de PK. Los otros datos, incluyendo datos demográficos, son descriptivos. No se lleva a cabo un análisis estadístico debido a que los tamaños de los grupos no se seleccionan sobre la base de la significancia estadística . 9.7.2 Determinación de la magnitud de las muestras En base a los resultados obtenidos llevando a cabo diversos estudios farmacocinéticos en grupos de 10 sujetos por cohorte, los mismos son suficientes para una descripción aceptable de los parámetros farmacocinéticos en esta población. Como este es un estudio de fase II relativamente modesto con la intención de investigar dos concentraciones más elevadas de gel de TBS-1, no se lleva a cabo un cálculo de magnitudes reales de las muestras. 9.8 Cambios en la conducción del estudio o del análisis planeado El protocolo ha sido enmendado el 27 de julio de 2010. El cambio requerido es en la programación de las extracciones de sangre. La cantidad de extracciones de sangre siguió siendo la misma. Se requiere este cambio para permitir la captura completa del pico de la absorción de la testosterona después de la tercera dosificación de TID que tuvo lugar a las 13:00 horas el día 8 o a las 16:00 horas después de la administración inicial del fármaco a las 21:00 horas del día anterior (DIA 7). 10. LOS SUJETOS DEL ESTUDIO 10.1 Disposición de los sujetos El estudio se lleva a cabo en tres centros situados en Miami, Florida; Shreveport, Los Angeles y Tucson, Arizona.

Los tres grupos de tratamiento están divididos igualmente entre los tres sitios. Ocho sujetos recibieron el tratamiento A, siete sujetos recibieron los tratamientos B y C, respectivamente. En el estudio hay un total de 22 sujetos. Además, cinco sujetos que participaron en el estudio clínico anterior no aprobaron la selección sistemática, por lo que no fueron distribuidos aleatoriamente en el estudio.

Tabla 32. Disposición de los Sujetos por Sitio Tratamiento 10.2 Desviaciones con respecto al protocolo No hay desviaciones farmacocinéticas significati as . 11. FARMACOCINÉTICA Y ESTADÍSTICAS 11.1 Conjuntos de datos analizados Por definición, la población PK consiste en lo sujetos que reciben el tratamiento A, B o C, y que completan el estudio sin una importante violación del protocolo o a partir de los cuales es posible caracterizar adecuadamente el perfil de PK. La población PK se utiliza para el análisis de los datos de PK.

En base a los criterios anteriormente mencionados, en la población PK se incluyen veintidós (22) sujetos. Seguidamente se muestra la cantidad de sujetos por sitio y por tratamiento.

Tabla 33 : Disposición de los su etos en la población de PK: Sitio Cantidad de sujetos 1 9 2 7 3 6 Tratamiento Cantidad de sujetos A: TBS- 1 125 ]iL de Gel al 4 .0% (t. i .d.) 8 B: TBS- 1 150 ]iL de Gel al 4 • Do (b. i .d.) 7 C: TBS- 1 125 de Gel al 4 .5% (t. i .d.) 7 1.2 Demografía y otras características de la línea de base Los datos demográficos y las características se presentan por grupo de dosis para la totalidad de los sujetos tratados en la Tabla 34. No se observan diferencias significativas entre los tres grupos, para ninguna de las características .

Tabla 34: Síntesis de las características demográficas - todos los sujetos Las poblaciones tratadas para el grupo A tienen una edad media de 52.38, para el grupo B 53.86, y para el grupo C 51.57. Las desviaciones estándar son de 12.55, 11.04, y 9.90, respectivamente. Las distribuciones étnica y racial son esencialmente las mismas en cada grupo. 11.3 Medición del cumplimiento con el •tratamiento El cumplimiento de la utilización de los fármacos durante la parte doméstica del estudio se determina mediante una revisión de los datos y la devolución de las bolsitas y jeringas utilizadas. Aunque el método no es absoluto, es suficiente para establecer un cumplimiento razonable. Uno de los sujetos no pudo hallar su diario. 11.4 Resultados farmacocinéticos y estadísticos 11.4.1 Métodos Las concentraciones en la sangre se reciben de ABL y se transfieren electrónicamente desde Trimel Biofarma SRL a la unidad de estadística de Farmanet. Las concentraciones de testosterona y de dihidrotestosterona en el suero se proporcionan en ng/mL. Sin embargo, las concentraciones en el suero se convierten en ng/dl para el cálculo de PK para que coincida con las unidades de los intervalos de referencia de la bibliografía especializada.

Durante la prueba, el sitio clínico 1 realiza un muestreo de PK un día después de lo especificado en el protocolo, por el hecho de que comenzó en el Día 8 en lugar de en el Día 7. Este cambio no está previsto. En consecuencia, los tiempos reales se calculan en relación con la administración del fármaco a las 21:00 del Día 8 para los sujetos del sitio clínico 1 y la administración del fármaco a las 21:00 del Día 7 para los sujetos de los sitios clínicos 2 y 3.

Para el sujeto N° 02-003, el tiempo de dosificación no se registra en el Día 7. En consecuencia, se utilizan los tiempos de muestreo de la programación en lugar de los tiempos de muestreo reales para los cálculos de PK. Las muestras de 16.33 h y 16.67 h para el sujeto 01-001 se extraen al mismo tiempo, debido a razones técnicas. El tiempo de muestreo de la programación es se utiliza para la muestra 16.33 h, mientras que el tiempo de muestreo real se utiliza para la muestra 16.67 h.

Con la exclusión de las excepciones anteriormente mencionadas, las desviaciones de tiempo durante el muestreo se tratan como sigue: para todos los tiempos de muestreo, la diferencia entre el tiempo de muestreo programado y el tiempo de muestreo real se considera aceptable si es menos de 1 minuto. Cuando la diferencia supera este límite de tiempo, los tiempos de muestreo reales (redondeado en 3 dígitos decimales) se utilizan para calcular los parámetros farmacocinéticos , a excepción de las muestras de dosis previas, que siempre se informan como cero (0.000), independientemente de las desviaciones de tiempo. Los tiempos de muestreo programados se presentan en las tablas de concentración y en los gráficos en el informe estadístico.

Los cálculos de PK se realizan utilizando WinNonlin™ versión 5.2 (o superior), validado de acuerdo con las expectativas industriales y de los requisitos reglamentarios. Los cálculos estadísticos descriptivos también se llevan a cabo mediante Microsoft ® Office Excel 2003. Microsoft ® Office Excel 2003 y Microsoft ® Office Word 2003 se utilizan la tabulación de los datos del informe.

Se proveen estadísticas descriptivas (N, valor medio, desviación estándar (SD, standard deviation) , coeficiente de variación (CV) , valor de la mediana, valor mínimo (Min) , y valor máximo (Max) de las concentraciones en el suero en función del tiempo, así como también todos los parámetros farmacocinéticos para cada tratamiento en cada nivel de dosis utilizando la población evaluable. Todas las cifras se presentan con las escalas: lineal (a) y semi-log (b) .

Para el cálculo de los parámetros PK de las últimas administraciones de fármacos (Tratamientos A y C: 0 hora a 10 horas, 10 horas y 16 horas y 16 horas y 24 horas; Tratamiento B: 0 horas a 10 horas y 10 horas y 24 horas), los valores de concentración para testosterona, dihidrotestosterona, y estradiol en el suero, en los instantes de tiempo de 10 horas (predosis para la segunda administración del fármaco) y 16 horas (predosis para la tercera administración del fármaco bajo los tratamientos A y C) se obtienen imputando el valor de la concentración en el suero en los instantes de tiempo 9.75 horas y 16.75 horas, respectivamente.

Los siguientes parámetros farmacocinéticos se determinan para todos los sujetos para testosterona, dihidrotestosterona y estradiol: Para los tratamientos A y C (t.i.d.): AUCO-t, AUC0-10, AUC10-16, AUC16-24, Cmax, Cmax 0-10, Cmax 10-16, Cmax 16-24, Cmin, Cmin 0-10, Cmin 10-16, Cmin 16-24, Cpromedio, Cpromedio 0-10, Cpromedio 10-16, Cpromedio 16-24, tmax, tmax 0-10, tmax 10-16, tmax 16-24, tmax 10-24, PTF, PTS .

Para el tratamiento B (b.i.d.): AUCO-T, AUCO-10, AUC10-24, Cmax, Cmax 0-10, Cmax 10-24, Cmin, Cmin 0-10, Cmin 10-24, Cpromedio, Cpromedio 0-10, Cpromedio 10-24, tmax, tmax 0-10, tmax 10-24, PTF, PTS.

Además, el porcentaje de sujetos con valores de Cpromedio para testosterona, dihidrotestosterona y estradiol anteriormente mencionados, en el suero, por encima de, dentro de, y por debajo de, su respectivo intervalo de referencia se calcula para cada tratamiento. Además, el tiempo porcentual medio de testosterona, dihidrotestosterona y estradiol en el suero (% de tiempo arriba) , dentro de (% de tiempo dentro) y debajo (% de tiempo debajo) el correspondiente intervalo de referencia correspondiente se proporciona para cada tratamiento. El cálculo de todos estos parámetros farmacocinéticos se explica a continuación. 11.4.1.1 Concentraciones máximas y mínimas observadas, y tiempo de concentraciones cresta observadas Cmáx, la concentración máxima observada, y Tmax, el tiempo para alcanzar dichas concentraciones cresta, asi como tamaño Cmin, la concentración mínima observada, se determinan para cada sujeto y para cada tratamiento, como sigue: Cmax: Concentración máxima observada a lo largo del intervalo de dosificación. Se calcula este parámetro para los tratamientos A, B y C.

Cmax o-io ' Concentración máxima observada desde el instante cero hasta 10 horas. Se calcula este parámetro para los tratamientos A, B y C.

Cmaxio-i6: Concentración máxima observada desde el instante cero hasta 10 horas. Se calcula este parámetro para los tratamientos A, B y C. max 16-24: Concentración máxima observada desde el instante 10 horas a 16horas. Se calcula este parámetro para los tratamientos A y C.

Concentración máxima observada desde el instante 16 horas a 24 horas. Se calcula este parámetro para los tratamientos A y C.

Cmax 10-24: Concentración máxima observada desde el instante 10 horas a 24 horas. Se calcula este parámetro para el tratamiento B solamente.

Cmin: Concentración minima observada a lo largo del intervalo de dosificación. Se calcula este parámetro para los tratamientos A, B y C.

Cmin 0-10: Concentración minima observada desde el instante cero hasta 10 horas. Se calcula este parámetro para los tratamientos A, B y C.

Cmin 10-16: Concentración minima observada desde el instante 10 horas a 16 horas. Se calcula este parámetro para los tratamientos A y C.

Cmin 16-24 : Concentración minima observada desde el instante 16 horas a 24 horas. Se calcula este parámetro para los tratamientos A y C.

Cmin 10-24: Concentración minima observada desde el instante 10 horas a 24 horas. Se calcula este parámetro para el tratamiento B solamente. tmax: Tiempo de Cmax observado a lo largo del intervalo de dosificación. Se calcula este parámetro para los tratamientos A, B y C. tmax o-io i Tiempo de Cmax observado desde el instante cero hasta 10 horas. Se calcula este parámetro para los tratamientos A, B y C. tmax 10-16= Tiempo de Cmax observado desde el instante 1 0 horas a 1 6 horas. Se calcula este parámetro para los tratamientos A y C. tmax 16-2 : Tiempo de Cmax observado desde el instante 1 6 horas a 2 4 horas. Se calcula este parámetro para los tratamientos A y C. tmax 10-24: Tiempo de Cmax observado desde el instante 1 0 horas a 2 4 horas. Se calcula este parámetro para el tratamiento B solamente. 11.4.1.2 Áreas bajo las curvas concentración-tiempo El cálculo de los AUCs se realiza utilizando el método trapezoidal lineal.

Se calcula AUCo-t desde el tiempo de dosis ( 0 ) hasta el tiempo de dosis t (t = 2 4 h) . Sin embargo, en el caso en que la muestra de las 2 4 h sea recolectada con una desviación de tiempo, el AUCo-T se estima sobre la base de la concentración estimada a las 2 4 horas mediante la linea de regresión calculada a partir de la fase de eliminación, y no a partir del momento de la observación real.

En el caso en que el ultimo valor de la concentración (Y) esté faltando o no corresponde a un tiempo de muestreo programado (es decir, a las 10 horas y a las 16 horas), se extrapola AUCX-Y mediante a fase de eliminación del sujeto correspondiente, si puede calcularse.

Se calculan los siguientes AUCs: AUCo-t : Área bajo la curva de concentración-tiempo para un intervalo de dosificación. Se calcula este parámetro para los tratamientos A, B y C.

AUCo-io: Área bajo la curva de concentración-tiempo desde el instante cero hasta 10 horas. Se calcula este parámetro para los tratamientos A, B y C.

UCio-16: Área bajo la curva de concentración-tiempo desde el instante 10 horas a 16 horas. Se calcula este parámetro para los tratamientos A y C.

AUCi6-24: Área bajo la curva de concentración-tiempo desde el instante 16 horas a 24 horas. Se calcula este parámetro para los tratamientos A y C.

AUC 10-24: Área bajo la curva de concentración-tiempo desde el instante 10 horas a 24 horas. Se calcula este parámetro para el tratamiento B solamente. Los Cpromedio se calculan como sigue: Cpromedio í Concentración promedio durante el intervalo de dosificación, calculado como AUCO-t/t (t=24 horas) . Se calcula este parámetro para los tratamientos A, B y C.

Cpromedio o-io Concentración promedio desde el instante cero hasta 10 horas, calculado como AUCO-10/10. Se calcula este parámetro para los tratamientos A, B y C.

Cpromedio ??-?ß? Concentración promedio desde el instante 10 horas a 16 horas, calculado como AUC10-16/6. Se calcula este parámetro para los tratamientos A y C.

Cpromedio 16-24 ? Concentración promedio desde el instante 16 horas a 24 horas, calculado como AUC16-24/8. Se calcula este parámetro para los tratamientos A y C.

Cpromedio io-24 : Concentración promedio desde el instante 10 horas a 24 horas, calculado como AUC10-24/14. Se calcula este parámetro para el tratamiento B solamente . 11.4.1.3 Concentraciones promedio del fármaco Los Cpromedio se calculan como sigue: Cpromedio: Concentración promedio durante el intervalo de dosificación, calculado como AUCO-t/t (t=24 horas).

Se calcula este parámetro para los tratamientos A, B y C.

Cpromedio o-io : Concentración promedio desde el instante cero hasta 10 horas, calculado como AUCO-10/10. Se calcula este parámetro para los tratamientos A, B y C. Cpromedio 10-16: Concentración promedio desde el instante 10 horas a 16 horas, calculado como AUC10-16/6. Se calcula este parámetro para los tratamientos A y C.

Cpromedio 16-24 : Concentración promedio desde el instante 16 horas a 24 horas, calculado como AUC16-24/8. Se calcula este parámetro para los tratamientos A y C.

Cpromedio io-24 '· Concentración promedio desde el instante 10 horas a 24 horas, calculado como AUC10-24/14. Se calcula este parámetro para el tratamiento B solamente . 11.4.1.4 Fluctuación entre pico y seno y oscilación entre pico y seno El PTF (peak through fluctuation, fluctuación entre pico y seno) y el PTD (Peak through swing, oscilación entre picos y seno) se calculan como sigue: PTF: Fluctuación pico seno, calculado como (Cmax-Cmin) /Cpromedio.

Se calcula este parámetro para los tratamientos A, B y C.

PTS: Oscilación pico seno, calculado como (Cmax-Cmin) /Cmin. Se calcula este parámetro para los tratamientos A, B y C. 11.4.1.5 Porcentaje de tiempo arriba, dentro y debajo del intervalo de referencia y porcentaje de sujetos con Cpromedio arriba, dentro y debajo del intervalo de referencia .

Los porcentajes de tiempo durante los cuales las observaciones se encuentran por arriba (Tiempoarriba% ) , dentro (Tiempodentro% ) , y debajo (% Tiempodebaj o) los intervalos de referencia se calculan para cada sujeto y tratamiento para testosterona, dihidrotestosterona y estradiol en el suero, El porcentaje de sujetos con valores de Cpromedio para testosterona, dihidrotestosterona y estradiol en el suero por encima de, dentro de, y por debajo de intervalo de referencia respectivo, se calculan para cada tratamiento. Los intervalos de referencia son de 300 ng/dL a 1.050 ng/dl para testosterona, 25.5 ng/dl a 97.8 ng/dl para dihidrotestosterona y 3 pg/mL a 81 pg/mL para estradiol.

PTS: Oscilación cresta seno, calculado como (Cmax- Cmin) /Cmin- Se calcula este parámetro para los tratamientos A, B y C. 11.4.1.6 Análisis estadístico Solamente se calculan las estadísticas descriptivas (N, media, SD, CV, mediana, Min. y Méx.) sobre las concentraciones en el suero, y los parámetros PK para cada tratamiento. No se lleva a cabo ningún análisis estadístico de inferencia. 11.4.2 Análisis de la farmacocinética y de temas estadísticos 11.4.2.2 Tratamiento de los datos faltantes Las muestras que no son analizadas debido a un volumen insuficiente (véase el informe bioanalitico) se registran como INV (volumen insuficiente para el análisis) en las tablas de concentración.

Estas muestras se consignan como faltantes para análisis farmacocinéticos y estadísticos. Dado que los parámetros PK podrían ser estimados utilizando los puntos de datos restantes, los sujetos con datos faltantes son mantenidos en el análisis farmacocinético . 11.4.2.3 Análisis farmacocinético Los parámetros farmacocinéticos siguientes se determinan para todos los sujetos en cuanto a testosterona, dihidrotestosterona y estradiol: Para los tratamientos A y C (t.i.d.): AUCo-t , AUC0- 10, AUCio-16/ AUCi6-24 Cmax, Cmax 0-10/ Cmax 10-16/ Cmax 16-24/ Cmin , Cmin o-10/ Cmin 10-16/ Cmj.n 16-24/ Cpr0medio / Cpromecji0 0-10/ Cpr0medio 10-16/ Cpromecji0 16-24/ tmax, tmax 0-10/ tmax 10-16/ tmax 16-24/ tmax 10-24/ PTF, PTS .

Para el tratamiento B (b.i.d.): AUC0-T, AUC0-io, AUCi0- 24/ Cmax , Cmax 0-10/ Cmax 10-24/ Cmin , Cmín 0-10/ Cmín 10-24/ Cpr0medio / Cpromedio 0-10/ Cpromedi0 10-24/ tmax, tmax 0-10/ tmax 10-24/ PTF, PTS.

Adicionalmente, para cada tratamiento se calcula el porcentaje de sujetos con valores Cpromedio para testosterona, dihidrotestosterona y estradiol en el suero por encima de, dentro de, y por debajo de su respectivo intervalo de referencia para cada tratamiento. Además, el tiempo porcentual medio de los valores de testosterona, dihidrotestosterona y estradiol en el suero arriba (%TiempoArriba) , dentro de (% TiempoDentro) , y por debajo (TiempoDebajo%) del correspondiente intervalo de referencia, se proporcionan para cada tratamiento. El cálculo de todos estos parámetros farmacocinéticos se explica a continuación.

Con la excepción de las tablas de texto y de las Figuras de texto, todas las Tablas y Figuras a las que se hace referencia en este capitulo, se presentan respectivamente. Por razones de brevedad, los tratamientos con TBS-1 se identifican en el texto del informe estadístico por su código de tratamiento: A (125 pL de gel al 4% dado t.i.d. para una dosis total de dosis de 30 mg/día) , B (150 L de gel al 4.5% se da t.i.d. para una dosis total de 27.0 mg/dia) y C (125 i de gel al 4.5% dado t.i.d. para un total dosis de 33.75 mg/día) .

Las muestras de sangre para el análisis farmacocinético se reúnen antes y después de la administración del fármaco a las 21:00 en el día 7 a las 0.333, 0.667, 1.00, 1.50, 2.00, 3.00, 6.00, 9.00, 9.75, 10.33, 10.66, 11.0, 11.5, 12.0, 13.0, 14.0 , 15.75, 16.33, 16.66, 17.0, 17.5, 18.0, 20.0, 22.0, 24.0 horas para los tratamientos A y C. Las muestras de sangre para el análisis farmacocinético se recolectan antes y después de la administración del fármaco a las 21:00 horas en el día 7 a las 0.333, 0.667, 1.00, 1.50, 2.00.3.00, 6.00, 9.00, 9.75, 10.33, 10.66, 11.0, 11.5, 12.0, 13.0, 16.0, 19.0, 22.0, y 24.0 horas partícula el tratamiento B. Los tiempos de muestreo reales utilizados para el cálculo de PK se muestran en las Tablas de la presente invención y para los Tratamientos A, B y C, respectivamente.

TESTOSTERONA Las concentraciones de testosterona en el suero medidas para cada sujeto en cada tiempo de muestreo se muestran de acuerdo con el tratamiento. Los gráficos de los distintos niveles en el suero durante el período de muestreo se presentan con ambas escalas, la lineal (a) y la semi-log (b) en las Figuras. Las líneas para los límites mínimo (300 ng/dL) y máximo (1.050 ng/dl) del intervalo de referencia para las concentraciones séricas de la testosterona también se presentan con fines informativos. Además, también se presenta una línea para la concentración promedio del fármaco ( Cpr0meciio) durante el intervalo de dosificación (t = 24 horas) en los perfiles individuales.

Los gráficos de los niveles medios en el suero a lo largo del período de muestreo también se presentan utilizando escalas tanto lineales (a) como semi-log (b) en las Figuras para los tratamientos A, B y C, respectivamente. Las barras de error en estos perfiles medios corresponden a una desviación estándar. Las lineas para el limite máximo y limite mínimo de los intervalos de referencia también se presentan en las cifras medias.

El gráfico medio en la escala lineal para cada tratamiento también se presenta seguidamente en la Figura de texto 11.4.2.3-1.

Figura 11.4.2.3-1: Concentración media de testosterona en el suero (ng/dL) - Perfil de tiempo para cada tratamiento Perfil de concentración sérica de testosterona media (ng dL)-tiempo Los parámetros farmacocinéticos calculados para cada sujeto de acuerdo con el tratamiento se muestran en las Tablas para los Tratamientos ?, B y C, respectivamente. Han sido resumidos En la siguiente Tabla 11.4.2.3-1.

Tabla 11.4.2.3-1: Resumen de los parámetros farmacocinéticos para cada tratamiento Tabla 11.4.2.3-1 (cont.): Resumen de los parámetros farmacocineticos para cada tratamiento Los tiempos porcentuales durante los cuales las observaciones se encuentran por arriba (Tiempoarriba% ) , dentro (% Tiempodentro) , y por debajo (% Tiempoabajo) del intervalo de referencia se calculan para cada sujeto y se presentan en las Tablas para los tratamientos A, B y C, respectivamente. Estos resultados también se resumen en la Tabla 11.4.2.3-1.

El porcentaje de sujetos con valores Cpromedio para testosterona en el suero arriba de, dentro de y por debajo del intervalo de referencia se calcula para cada tratamiento, estos resultados también se resumen en la Tabla 11.4.2.3-1.

DIHIDROTESTOSTERONA Las concentraciones de dihidrotestosterona en el suero se miden para cada sujeto en cada tiempo de muestreo y aparecen en las Tablas de acuerdo con al tratamiento. Los gráficos de los niveles individuales en el suero a lo largo del periodo de muestreo se presentan en dos escalas: la lineal (a) y la semi-log (b) en las Figuras. Las lineas para los limites mínimo (25.5 ng/dl) y máximo (97.8 ng/dl) del intervalo de referencia para las concentraciones séricas de dihidrotestosterona también se presentan con fines informativos. Además, también se presenta una línea para la concentración promedio del fármaco (Cpromedio) durante el intervalo de dosificación (t = 24 horas) en los perfiles individuales .

También se presentan los gráficos de los valores medios de la concentración en el suero mediante escala tanto lineal (a) como semi log (b) en las Figuras para los tratamientos A, B y C, respectivamente. Las barras de error sobre estos perfiles de valores medios corresponden a una desviación estándar. Las lineas para los limites máximo y mínimo de los intervalos de referencia también se presentan en las Figuras de los valores medios.

El gráfico de los valores medios en escala lineal para cada tratamiento también se presenta en la Tabla 11.4.2.3-2.

Figura 11.4.2.3-2: Perfil de concentración sérica media de dihidrotestosterona en el suero (ng/dL) - Perfil de tiempo para cada tratamiento Perfil de ccmcentracion sérica de dihidrotestosterona media (ng/dL)-tiempo De acuerdo con SAP, el AUCX-Y se calcula en base a la concentración estimada (Y) usando la linea de regresión calculada a partir de los datos de la fase de eliminación cuando la última concentración (Y) no corresponde a un tiempo de muestreo programado. Para los sujetos N ° 01-002 y 02-007, la fase de eliminación no está bien caracterizado debido a la fluctuación en la concentración sérica de la dihidrotestosterona para los intervalos de 10 a 16 horas y de 0 a 10 horas, respectivamente. Por ello los valores de AUC 10-16 y Cpromedio 10-16 (derivado a partir de AUCio-?ß) no pudieron ser calculados para el sujeto N 0 01-002 para el tratamiento A (N = 7 para estos parámetros) . Además, el AUC0-10 y el Cpromedi00-10 (derivado de AUCo-io) no pudieron ser calculados para el sujeto N ° 02-007 para el tratamiento A (N = 7 para estos parámetros) .

Los parámetros farmacocinéticos calculados para cada sujeto de acuerdo con un tratamiento se muestran en las Tablas para los tratamientos A, B y C, respectivamente. Han sido resumidos en la Tabla 11.4.2.3-2. o Tabla 11.4.2.3-2 ¡ Sintaala de paraaetrea farmacocloeticot para cada tratamiento IV) o Oí Tabla 11.4.2.3-2 (Cont) : Síntesis de parámetros farmacocinéticos de dihidrotestosterona para cada tratamiento Los tiempos porcentuales durante los cuales las observaciones arriba (Tiempoarriba% ) , dentro (Tiempodentro% ) , y debajo (Tiempoabaj o% ) , del intervalo de referencia, se calculan para cada sujeto y se presentan en las Tablas para los tratamientos A, B y C, respectivamente. Estos resultados también se resumen en la Tabla 11.4.2.3-2.

El porcentaje de sujetos con valores Cpromedio para dihidrotestosterona en el suero arriba, dentro y debajo del intervalo de referencia, se calcula para cada tratamiento, estos resultados también se resumen en la Tabla de 11.4.2.3-2.

ESTRADIOL Las concentraciones de estradiol en suero se miden para cada sujeto en cada tiempo de muestreo y aparecen en las Tablas de acuerdo con el tratamiento. Los gráficos de los niveles individuales en el suero se presentan en una escala lineal (a) y en una semi-log (b) en las Figuras. Para fines de información también se presentan las lineas para los limites mínimo (3 pg/mL) y máximo (81 pg/mL) del intervalo de referencia para la concentración de estradiol en el suero. También se presenta una línea para la concentración promedio del fármaco (Cpromedi0) durante el intervalo de dosificación (t = 24 horas) en los perfiles individuales.

Los gráficos de los niveles medios en el sujeto a lo largo del periodo de muestreo también se presentan utilizando tanto las escalas lineal (a) como semi-log (b) en las Figuras para los tratamientos A, B y C, respectivamente, Las barras de error en estos perfiles de valores medios corresponden a una desviación estándar. Las lineas para los limites mínimo y máximo del intervalo de referencia también se presentan en las Figuras de los valores medios.

El gráfico de los valores medios en la escala lineal para cada tratamiento también se presenta abajo en la Figura de texto 11.4.2.3-3.

Figura 11.4.2.3-3: Concentración media del estradiol en el suero (pg/mL) . Perfil de tiempo para cada tratamiento .

Perfil de concentración sérica de estradiol medía (ng/dL}-t¡empo SJ Tiempo (h) De acuerdo con SAP, el AUCX-Y se calcula basándose en la concentración estimada (Y) y usando la línea de regresión calculada a partir de los datos de la fase de eliminación cuando la última concentración (Y) no corresponde a un tiempo de muestreo programado. Sin embargo, para algunos sujetos la fase de eliminación no está bien caracterizada debido a la fluctuación en la concentración de estradiol en el suero, como sigue: • Sujeto No.: 02-007 para los intervalos de tiempo 0 a 10 horas y para las 0 a 24 horas para el tratamiento A . Para este sujeto no pudieron calcularse los siguientes parámetros PK: AUC0-io , Cp r0medio o-io, AUCo-t , Cp r0medio y PTF para el Tratamiento A (N = 7 para estos parámetros) .

• Sujetos Nos: 01-002 y 01-007 para el intervalo de tiempo de 10 a 16 horas para el Tratamiento A . El AUC 10-16 y el Cpromedio 10-16 no pudieron calcularse para estos sujetos para el Tratamiento A (N = 6 para estos parámetros) .

· Sujetos Nos. 02-004 y 02-007 para el intervalo de tiempo de 16 a 24 horas para el Tratamiento A . El AUC16-24 y el Cpromedio 16-24 no pudo calcularse para este sujeto para el Tratamiento A (N = 6 para estos parámetros) .

• Sujetos Nos. 02-003 y 02-005 para el intervalo de tiempo de 0 a 10 horas para el Tratamiento C . El AUCo-io y el Cpromedio o-io no pudieron calcularse para estos sujetos para el Tratamiento C (N = 5 para estos parámetros) .

Los parámetros farmacocinéticos calculados para cada sujeto de acuerdo con el tratamiento se muestran en las Tablas para los tratamientos A, B y C, respectivamente. Se los ha resumido en la siguiente Tabla 11.4.2.3-3.

Los tiempos porcentuales durante los cuales las observaciones recaen arriba (Tiempoarriba% ) , dentro (Tiempodentro%) , y debajo (Tiempoabaj o% ) , del intervalo de referencia, se calculan para cada sujeto y se presentan en las Tablas para los tratamientos A, B y C, respectivamente. Estos resultados se resumen también en la Tabla 11.4.2.3-3.

El porcentaje de sujetos con valores Cpromedio de estradiol en el suero arriba, dentro, y debajo del intervalo de referencia, se calcula para cada tratamiento. Estos resultados se resumen también en la tabla de texto 11.4.2.3-3. o Tabla 11.4.2.3-3Sintesis de parámetros farmacocinéticos de Estradiol para cada tratamiento o en Tabla 11.4.2.3-3 (cont.): Síntesis de parámetros farmacocinéticos de Estradiol para cada tratamiento * Intervalo de referencia = 3-31 pg/mL. 1 = TBS-1, 125 de gel si 4.0% dado t.i.d. (dosis total 30 mgr/dia) 2 = TBS-1, 150 uL de gel al 4.5% dado b.i.d. (dosis total 27,0 lEg dia) 3 = TBS-1, 125 uL de gel el 4.51 dado t.i.d, (dosis total 33.75 mg/día) fc = Fara estos parámetros, N = 7 para el tratamiento A, c = Fara estos parámetros, H = € para el tratamiento A. d = Fara e3tcs parámetros, N = 5 para el tratamiento C. 11.4.2.4 Análisis farmacodinamico Durante este estudio no se planificó ni realizó ningún análisis farmacodinámico . 11.4.7 Conclusiones farmacocinéticas y estadísticas En este estudio de fase II, varios sujetos son distribuidos aleatoriamente en tres brazos de tratamiento (TBS-1 al 4.0 % administrado b.i.d. y t.i.d.). Los tratamientos son administrados durante una semana por via intranasal, en un diseño paralelo. Al final de una semana, se comparan los tres tratamientos mediante la realización de una investigación farmacocinética de 24 de la absorción sistémica del producto fármaco testosterona, y de sus dos metabolitos fisiológicos, dihidrotestosterona y estradiol.

TESTOSTERONA Se examina el perfil farmacocinético de TBS-1 tras la dosificación simple y de repetición en dos estudios anteriores (TST-PKP-01-MAT/04 y TST-DF-02-MAT/05) . Se demuestra en estos estudios que la testosterona se absorbe bien después de la administración intranasal. La concentración sérica máxima se alcanza después de 1-2 horas después de la administración. En el estudio actual, las formulaciones de testosterona (el TBS-1 al 4.0% se administra b.i.d. y el TBS-1 al 4.5% se administra b.i.d y t.i.d.) se absorben rápidamente, alcanzándose una concentración pico dentro de los 36 minutos a 1 hora y 6 minutos (Tmax media) después de la administración intranasal. La máxima concentración de testosterona en el intervalo de 24 horas se observa durante la primera administración (0-10 horas) en aproximadamente el 57% a 71% de los hombres hipogonadales, mientras que aproximadamente el 29% a 43% de los sujetos tuvo su máxima concentración de testosterona a las 24 durante las administraciones posteriores.

Cuando se comparan las administraciones de TBS-1 por separado para los tratamientos t.i.d., si bien el valor medio de AUC es similar entre las formulaciones, se observa un AUC mayor después de la primera administración en comparación con las dos administraciones posteriores (AUC 0-io : 4178.68 y 4355.19 h * ng/dl> AUC10-i6: 2635.05 y 2301.51 h * ng/dL <AUCi6-24: 3016.52 y 2766.97 h * ng/dL para los tratamientos A y C, respectivamente) . Se observa un AUC mayor para la segunda administración en comparación con la primera administración para el tratamiento B (AUC0-io: 4451.64 h * ng/dl ~ AUC10-24: 5264.19 h * ng/dL). La diferencia en el AUC entre las administraciones, tanto para las formulaciones de t.i.d. y b.i.d. puede deberse a los diferentes periodos de tiempo transcurridos entre cada administración. El valor medio de AUCo-T calculado sobre el intervalo de dosificación de 24 horas, es comparable entre todos los tratamientos (AUC0- t: 9920.07, 9781.39 y 9505.03 h * ng/dL para los tratamientos A, B y C , respectivamente) .

Si bien el valor medio de Cmax valor es similar entre los tratamientos A y C, se observa una tendencia hacia una disminución en la CmáX con las administraciones posteriores ( Cmax 0-10: 786 y 857 ng/dl> Cmax ??-?ß: 698 y 675 ng/dL > Cmax 16-24: 556 y 595 ng/dL para los tratamientos A y C , respectivamente) . Se observan valores medios comparables Cmax de testosterona para ambas administraciones de tratamiento B ( Craax 0-10: 894 ng/dl ~ Cmax 10-24: 846 ng/dL) . La diferencia en la CmáX entre las administraciones para las formulaciones de t.i.d. podría deberse a los diferentes períodos de tiempo que han transcurrido entre cada administración. El valor medio de CI[iax calculado a lo largo del intervalo de dosificación de 24 horas, es ligeramente mayor para el tratamiento B (150 L de gel al 4.5% (b.i.d.)) ( Cmax : 1.050 ng/dl) en comparación con los tratamientos A y C ( Cmax : 830 y 883 ng/dL, respectivamente) . El límite superior del intervalo de referencia fisiológico (1.050 ng/dl) es superado por 1 de 8 sujetos para el tratamiento A y por 3 de 7 sujetos para los tratamientos B y C .

Se observa una tendencia hacia una ligera disminución en Cpromedio cuando se comparan las administraciones por separado para los tratamientos de t.i.d. y b.i.d. ( Cpromeciio o-io : 418 y 436 ng/dl> Cproitledio ío-ie: 439 y 384 ng/dl> Cpromedio ie-24: 377 y 346 ng/dL para los tratamientos A y C, respectivamente y Cpromedio 0-10: 445 ng/dl> Cpromedio 10-24: 376 ng/dL para el tratamiento B) . La diferencia en Cpromedio entre las administraciones podría deberse a los diferentes períodos de tiempo transcurridos entre cada administración. El valor medio de Cpromedio calculado en el intervalo de dosificación de 24 horas, es comparable para todos los tratamientos (Cpromedio: 413, 408, 396 ng/dL para los tratamientos A, B y C, respectivamente) .

Estos resultados sugieren una disminución de la exposición (AUC, Cpromedio y Cmax) entre cada dosis para las administraciones t.i.d. (tratamientos A y C) , pero no para la administración b.i.d. (Tratamiento B) . Esta disminución en la exposición para las administraciones t.i.d. se podría explicar en parte por la retroalimentación negativa en la producción endógena de testosterona a partir del HPG. En otras palabras, debido a los intervalos de tiempo más pequeños entre cada administración para los grupos t.i.d., la recuperación del sistema de retroalimentación HPG desde la retroalimentación negativa sería inferior que para el grupo b.i.d.

Independientemente de la formulación, aproximadamente el 86% -88% de los sujetos tenían una concentración promedio del fármaco (Cpromedio) dentro del intervalo de referencia fisiológica (300 a 1050 ng/dl) , el 13% -14% de los sujetos tenia un Cpromedio debajo del intervalo de referencia, y ningún sujeto tenia un Cpromedio arriba del intervalo de referencia.

El periodo de tiempo durante un día (24 horas) para las concentraciones de la testosterona en el suero se hallan por debajo, dentro y por arriba del intervalo de referencia fisiológico, está cubierto respectivamente de 30 a 35%, 59% a 68% y 0% del periodo de 24 horas para todas las formulaciones. Es decir, los niveles de testosterona se hallan dentro de los intervalos normales durante aproximadamente 14 a 16 horas por día.

DIHIDROTESTOSTERONA La concentración máxima de dihidrotestosterona se alcanza dentro de 1 hora 24 minutos y 2 horas 23 minutos (valor medio de Tmax) después de las administraciones de TBS-1. Cuando se comparan las administraciones de TBS-1 por separado para los tratamientos t.i.d., si bien el valor medio de AUC es similar entre las formulaciones, se observa una tendencia hacia una disminución de las AUC con las administraciones posteriores (AUC0-io: 345.77 y 411.10 h*ng/dl> AUC10-i6: 186.33 y 222.62 h * ng/dl> AUCi6-24 : 269.16 y 275.21 h*ng/dL para los tratamientos A y C, respectivamente).

Se observa un AUC comparable para ambas administraciones del tratamiento B (AUC0-i0 : 402.77 h*ng/dl ~ AUCio-24: 543.29 h*ng/dL). La diferencia en el AUC entre las administraciones para las formulaciones t.i.d. puede deberse a los diferentes periodos de tiempo transcurridos entre cada administración. El valor medio de AUCo-u calculado sobre el intervalo de dosificación de 24 horas, es comparable entre todos los tratamientos ( AUC0-T : 818.95, 946.89 y 909.68 h*ng/dL para los tratamientos A, B y C , respectivamente) .

Si bien el valor medio de Cmax valor es similar entre las formulaciones t.i.d., se observa una tendencia hacia una disminución en la Cmax con las administraciones posteriores ( Cmax o-io : 51.4 y 59.0 ng/dl> Cmax ío-ie : 44.2 y 48.9 ng/dl> Cma¡! ie-2i- 41.3 y 42.6 ng/dl para los tratamientos A y C , respectivamente) . Se observó un valor medio comparable para Cmax de testosterona para ambas administraciones de Tratamiento B ( Cmax0-io : 56.8 ng/dl ~ Cmaxi0-24 : 54.6 ng/dl). La diferencia en' la Cmax entre las administraciones para las formulaciones t.i.d. podrá deberse a los diferentes periodos de tiempo transcurridos entre cada administración. El valor medio de Cmax valor se calcula para el intervalo de dosificación de 24 horas, y es comparable para todos los tratamientos ( Cmax : 52.2, 61.0 y 60.3 ng/dl para los tratamientos A, B y C , respectivamente) . El limite superior del intervalo de referencia fisiológico (97.8 ng/dl) no es superado en ningún sujeto para ningún tratamiento.

Los Cpromedio calculados para las administraciones son comparables entre los tratamientos y administraciones (Cpromedi0 o-io : 34.6 y 41.1 ng/dl> Cpromedio ??- ?ß· 31.1 y 37.1 ng/dl>Cpromedioi6-24 : 33.6 y 34.4 ng/dl para los tratamientos A y C, respectivamente, y Cpr0medioo-io : 40.3 ng/dl> Cpromedioio-24 : 38.8 ng/dl para el tratamiento B) . El valor medio de Cpromedi0 calculado para el intervalo de dosificación de 24 horas, es comparable para todos los tratamientos (Cpromedio: 34.1, 39.5, 37.9 ng/dl para los tratamientos A, B y C, respectivamente).

Aproximadamente el 63% de los sujetos tenían su promedio incluido en el intervalo de referencia fisiológico para DHT (25.5 a 97.8 ng/dl) después de la administración del tratamiento A, mientras que esta cifra se eleva a cerca del 86% cuando se administran los tratamientos y C. Ningún sujeto tuvo su Cpromedio arriba del intervalo normal, mientras que el 38% y 14% de los sujetos tienen su Cpromedio debajo del intervalo normal para los tratamientos B y C, respectivamente.

El período de tiempo durante un día (24 horas) para el que las concentraciones séricas de DHT están debajo, dentro y arriba del intervalo de referencia fisiológico, está cubierto en respectivamente el 32.64%, 67.36% y 0% para el tratamiento A, 26.22%, 73.78% y 0 % para el tratamiento B, y 13.87%, 86.13% y 0% para el tratamiento , es decir que los niveles de DHT se hallan dentro del intervalo normal durante aproximadamente 6, 18 y 21 horas por día para los tratamientos A, B y C, respectivamente.

ESTRADIOL La concentración pico de estradiol se alcanza dentro de 1 hora 12 minutos y 2 horas 41 minutos (valor medio de Tmax) después de las administraciones de TBS-1.

Cuando las administraciones de TBS-1 se comparan por separado para los tratamientos t.i.d., si bien el valor medio de AUC es similar entre las formulaciones, se observa una tendencia hacia una disminución de las AUC con las administraciones posteriores (AUC0 io: 234.96 y 267.78 h*pg/mL> AUCi0-i6: 144.76 y 144.30 h*pg/mL <AUCi6-24 : 153.02 y 177.97 h*pg/mL para los tratamientos A y C, respectivamente) . Se observan AUCs comparables para ambas administraciones de tratamiento B (AUC 0-io : 242.02 h*pg/mL ~ AUC10-24: 295.12 h*pg/mL) . La diferencia en el AUC entre las administraciones para las formulaciones t.i.d. puede deberse a los diferentes periodos de tiempo transcurridos entre cada administración. El valor medio de AUC0-T calculado a lo largo del intervalo de dosificación de 24 horas, es comparable entre todos los tratamientos (AUC 0-t : 530.27, 537.16 y 601.91 h*pg/mL para los tratamientos A, B y C, respectivamente) .

Aunque el valor medio de Cmax es similar entre las formulaciones t.i.d., se observa una tendencia hacia una disminución en la Cmax con las administraciones posteriores (Cmax 0-10: 36.8 y 35.5 pg/mL> Cmax 10-16: 28.9 y 31.5 pg/mL> Cmax 16-24: 27.2 y 26.9 pg/mL para los tratamientos A y C, respectivamente) . Se observaron valores medios comparables de Cmax para ambas administraciones de tratamiento B (Cmax 0-10: 35.8 pg/mL ~Cmax 10- 24: 30.6 pg/mL) . La diferencia en la Cmax entre las administraciones para las formulaciones t.i.d. puede ser debida a los diferentes periodos de tiempo transcurridos entre cada administración. El valor medio para Cmax, calculado para el intervalo de dosificación de 24 horas, es comparable para todos los tratamientos (CmdX: 37.9, 36.2 y 36.4 pg/mL para los tratamientos A, B y C, respectivamente) . El limite superior del intervalo de referencia fisiológico (81 pg/mL) no es superado por ningún sujeto en ningún tratamiento.

Los Cpromedio calculados por administración son comparables entre los tratamientos y administraciones (Cpromedio o-io : 23.5 y 26.8 pg/mL> Cpromedio 10 -ie: 24.1 y 24.0 pg/mL> Cpromedio 16-2 19.1 y 22.2 pg/mL para los tratamientos A y C, respectivamente y el Cpromedio o-io: 24.2 pg/mL> Cpromedio 10-24 '· 21.1 pg/mL para el tratamiento B) . El valor medio de Cpr0medio se calcula para el intervalo de dosificación de 24 horas, y es comparable para todos los tratamientos (Cprome(jio: 22.1, 22.4, 25.1 pg/mL para los tratamientos A, B y C, respectivamente).

Todos los sujetos tienen su Cpr0medio incluido en el intervalo de referencia fisiológico para E2 (3 a 81 pg/mL) después de la administración de todos los tratamientos. Todos los sujetos tienen concentraciones dentro del intervalo normal a lo largo del periodo de 24 horas. Ningún sujeto tenia niveles de E2 debajo o arriba del intervalo normal en ningún momento del día. 12. EVALUACIÓN DE LA SEGURIDAD 12.1 Amplitud de la exposición Los sujetos utilizan el fármaco durante 7 días en dos sitios y durante 8 días en otro. 12.2 Acontecimientos adversos 12.2.1 Breve síntesis de acontecimientos adversos .

Hay ocho acontecimientos que se presentaron en seis sujetos. Seis de los acontecimientos tiene lugar durante el tratamiento A y dos tienen lugar durante el tratamiento B. Ambos sujetos 01-001 y 01-0077 001 experimentan mareos y en ambos casos se indica que esto está posiblemente relacionado con el fármaco de estudio. El sujeto 01-002 tenía una gravedad moderada que se resolvió después de 5 días. Seis de los 8 acontecimientos adversos son suaves. Seis de los ocho acontecimientos no están relacionados con el fármaco de estudio. El investigador decidió que el sujeto 02-004 tiene anemia. La hemoglobina se halla en su nivel normal mínimo y se considera que esto no está relacionado con el fármaco. En la Tabla 12.2.2 se resumen los acontecimientos. 12.2.2 Presentación de los acontecimientos adversos Tabla 12.2.2: Acontecimientos adversos 12.2. Listado de acontecimientos adversos por los sujetos En la Tabla 12.2.2 se enumeran los acontecimientos adversos por sujeto. 12.3 Muertes , otros acontecimientos adversos serios, y otros acontecimientos adversos significati os Durante el transcurso de este estudio no hubo muertes, acontecimientos adversos serios ni otros acontecimientos adversos significativos. 12.4.2 Evaluación de cada parámetro de laboratorio No hay cambios clínicamente significativos en los valores de laboratorio desde el principio hasta el final del estudio de acuerdo con lo determinado por los investigadores principales. Todos los sujetos tenían algunos valores anormales en la visita inicial y/o en la tercera visita. No hay cambios constantes entra una visita y la subsiguiente.

El sujeto 01-007 tenía un nivel de ácido úrico de 539 U/1 con 289 como límite superior de normalidad en la tercera visita. Hay valores elevados de glucosa en aproximadamente la mitad de los sujetos en comparación con un valor normal de la primera visita. Hay una dispersión a través de las tres dosificaciones, y el valor es ligeramente elevado. No hay ninguna significación clínica. 12.5 Signos vitales, hallazgos físicos, y otras observaciones relacionadas con la seguridad No hay cambios significativos en los signos vitales después de la administración del fármaco de ensayo. 12.6 Conclusiones de seguridad El gel de TBS-1 demuestra en este estudio y en otros que su uso es seguro. No hay acontecimientos adversos serios ni acontecimientos de secuelas durante este estudio de PK ni durante los siete días de autoadministración. En las tablas se muestran todos los valores de laboratorio para la visita 1 y la visita 3. 13. COMENTARIOS Y CONCLUSIONES GLOBALES El objetivo principal de este estudio es el de determinar la biodisponibilidad de un gel de TBS-1 al 4.0% (aplicada t.i.d.) y de un gel de TBS-1 al 4.5% (aplicado b.i.d. y t.i.d.) en los hombres hipogonadales .

En un estudio anterior se utilizó Nasobol-01-2009, un gel de testosterona al 3.2%, para entregar 4.0 mg, 5.5 mg y 7.0 mg de testosterona intranasalmente mediante volúmenes de gel de 125 µ?, 172 µ? y 219 µ?, respectivamente. En este estudio, 5.0 mg, 5.65 mg y 6.75 mg de testosterona se administran en volúmenes de gel de 125 µ?, 125 µ?, y 150 µ?, respectivamente. Este estudio permitió investigar la entrega de cantidades similares de testosterona en volúmenes mucho más pequeños.

El objetivo secundario de este estudio es el de establecer un perfil de seguridad para el TBS-1. En este estudio de FASE II, varios sujetos son distribuidos aleatoriamente en tres brazos de tratamiento (TBS-1 al 4.0% administrado t.i.d. y TBS-1 administrado b.i.d. y t.i.d.). Los tratamientos son administrados durante una semana por via intranasal, en un diseño paralelo. Al final de una semana, se comparan los tres tratamientos llevando a cabo una investigación farmacocinética de 24 horas de la absorción sistémica del fármaco producto testosterona, y de sus dos metabolitos fisiológicos: dihidrotestosterona y estradiol.

Hay ocho acontecimientos adversos presentados por seis sujetos. Seis de los acontecimientos tuvieron lugar durante el tratamiento A, y dos se produjeron durante el tratamiento B. Ambos sujetos 01-002 y 01-007, experimentaron mareos, y para ambos se indica que esto está posiblemente relacionado con el fármaco objeto de estudio. El resto no está relacionado con el fármaco objeto del estudio.

No hay cambios en los signos vitales ni de laboratorio que sean significativos o importantes. No se observó eritrocitosis , anemia ni infecciones, después de la medición de los recuentos de sangre completos y en ocasión del cierre. La química clínica y el análisis de orina no mostraron cambios de cierre en cuanto a hipo o hiperglucemia, función renal, función hepática, daño en músculos esqueléticos/cardiaco ni cambios en la homeostasis de calcio. No hay cambios clínicamente significativos en la mucosa nasal .

La población de PK se define como los sujetos que recibieron el tratamiento A, B o C, y que completaron el estudio sin mayores infracciones del protocolo o para los que es posible caracterizar adecuadamente el perfil PK. Se utiliza la población de PK para el análisis de los datos de PK. En base a estos criterios, hay veintidós (22) sujetos incluidos en la- población PK.

TESTOSTERONA El perfil farmacocinético de TBS-1 después de la administración simple y de repetición se examina en 2 estudios anteriores (TST-PKP-01-MAT/04 y TST-DF-02-MAT/05 ) . Se demuestra en estos estudios que la testosterona se absorbe bien después de administración intranasal. Se alcanza la concentración máxima en el suero después de 1-2 horas después de la administración. En el estudio actual, las formulaciones de testosterona (TBS-1 al 4.0% administrado t.i.d. y TBS-1 al 4.5% administrado b.i.d. y t.i.d.) son rápidamente absorbidas, llegándose a una concentración pico dentro de 36 minutos a 1 hora 6 minutos (valor media de Tmax) después de administración intranasal. La concentración máxima concentración de testosterona en el intervalo de 24 horas se observa durante la primera administración (0-10 horas) en aproximadamente el 57% a 71% de los hombres hipogonadales , mientras que aproximadamente el 29% a 43% de los sujetos tuvo su concentración máxima de testosterona a las 24 horas durante las administraciones subsiguientes.

Cuando se comparan las administraciones de TBS-1 por separado para los tratamientos de t.i.d., y si bien el valor medio de AUC es similar entre las formulaciones, se observa un AUC después de la primera administración que es mayor en comparación con las dos administraciones posteriores (AUCo-io: 4178.68 y 4355.19 h*ng/dl> AUCi0-i6: 2635.05 y 2301.51 h*ng/dL <AUCi6-24: 3016.52 y 2766.97 h*ng/dL para los tratamientos A y C, respectivamente) . Se observa un AUC mayor para la segunda administración en comparación con la primera administración para el tratamiento B (AUC0-io: 4451.64 h*ng/dl ~ AUC10-24: 5264.19 h*ng/dL) . La diferencia en el AUC entre las administraciones, tanto para las formulaciones de t.i.d. como de b.i.d. podría deberse a los diferentes períodos de tiempo transcurridos entre cada administración. El valor medio de AUCo-t calculado a lo largo del intervalo de dosificación de 24 horas, es comparable entre todos los tratamientos (AUC o-t' 9920.07, 9781.39 y 9505.03 h*ng/dL para los tratamientos A, B y C, respectivamente) .

Cuando se comparan las administraciones de TBS-1 por separado para los tratamientos t.i.d., y si bien el valor medio de Cmax es similar entre las formulaciones, se observa una tendencia hacia una disminución en la CmáX con las administraciones posteriores (Cmax o-io: 786 y 857 ng/dl> Cmax i0-i6: 698 y 675 ng/dl> Cmáx 16 -2 '· 556 y 595 ng/dL para los tratamientos A y C, respectivamente) . Se observa un valor medio de Cmax para la testosterona para ambas administraciones de tratamiento B (Cmax 0-io: 894 ng/dl ~ Cmax 10-24: 846 ng/dL). La diferencia en la CmáX entre las administraciones para las formulaciones t.i.d. podría deberse a los diferentes periodos de tiempo transcurridos entre cada administración. El valor medio Cmax calculado en el intervalo de dosificación de 24 horas, es ligeramente mayor para el tratamiento B (150 µ? de gel al 4.5% (b.i.d.)) (Cmax: 1050 ng/dL) en comparación con los tratamientos A y C (Cmax: 830 y 883 ng/dL, respectivamente) . El limite superior del intervalo de referencia fisiológico (1.50 ng/dl) es excedido por 1 de 8 sujetos para el tratamiento A y por 3 de 7 sujetos para los tratamientos B y C.

Se observa una tendencia a una ligera disminución en Cpromedio cuando se comparan las administraciones por separado para t.i.d. y b.i.d. (Cpromedi0 0-io: 418 y 436 ng/dl> Cpromedio 10-16= 439 y 384 ng/dl> Cpromedio ie-24 : 377 y 346 ng/dL para los tratamientos A y C, respectivamente y Cpromedio ?-?? = 445 ng/dl> Cpr0medio io-24: 376 ng/dL para el tratamiento B) . La diferencia en Cpromedio entre las administraciones puede ser debido a los diferentes periodos de tiempo transcurridos entre cada administración. El valor medio calculado de Cpromedio en el intervalo de dosificación de 24 horas, es comparable para todos los tratamientos (Cpromedio: 413, 408, 396 ng/dL para los tratamientos A, B y C, respectivamente) .

Estos resultados sugieren una disminución en la exposición (AUC, Cmax y Cpromedio) entre cada dosis para las administraciones t.i.d. (tratamientos A y C) , pero no por la administración b.i.d. (tratamiento B) . Esta disminución en la exposición de la t.i.d. para las administraciones t.i.d. se podría explicar en parte por la retroalimentacion negativa en la producción endógena de testosterona desde el eje HPG. En otras palabras, debido a los intervalos de tiempo más pequeños entre cada administración para los grupos t.i.d., la recuperación del sistema de HPG a partir de la retroalimentacion negativa sería inferior que para el grupo b.i.d.

Independientemente de la formulación, aproximadamente el 86%-88% de los sujetos tenían una concentración promedio del fármaco (Cpromedio) dentro del intervalo de referencia fisiológico (300 a 1050 ng/dl) , el 13% -14% de los sujetos tenía un Cpromedi0 por debajo del intervalo de referencia, y ningún sujeto tenía un Cpromedio arriba del intervalo de referencia.

El periodo de tiempo durante el día (24 horas) para el que las concentraciones de la testosterona en el suero se hallan por debajo, dentro y arriba del intervalo de referencia fisiológico, abarcaba respectivamente 30 a 35%, 59% a 68% y 0% del periodo de 24 horas para todas las formulaciones. Es decir que los niveles de testosterona se hallan por debajo del intervalo normal durante aproximadamente 14 a 16 horas por dia.

DIHIDROTESTOSTERONA La concentración pico de dihidrotestosterona se alcanza dentro de 1 hora 24 minutos y 2 horas 23 minutos (valor medio de Tmax) después de las administraciones de TBS-1. Cuando se comparan las administraciones de TBS-1 por separado para los tratamientos de t.i.d., y si bien el valor medio de AUC es similar entre las formulaciones, se observa una tendencia hacia una disminución de las AUC con las administraciones posteriores (AUC 0-io: 345.77 y 411.10 h * ng/dl> AUCio-i6: 186.33 y 222.62 h*ng/dl> AUC16-24: 269.16 y 275.21 h*ng/dL para los tratamientos A y C, respectivamente). Se observan AUC comparables para ambas administraciones de tratamiento B (AUC 0-io: 402.77 h*ng/dl ~ AUC10-2 : 543.29 h*ng/dL) . La diferencia en el AUC entre las administraciones para las administraciones t.i.d. puede deberse a los diferentes periodos de tiempo transcurridos entre cada administración. El valor medio calculado para AUCo-t en el intervalo de dosificación de 24 horas, es comparable entre todos los tratamientos (AUC0-t: 818.95, 946.89 y 909.68 h*ng/dL para los tratamientos A, B y C, respectivamente) .

Si bien el valor medio de Cmax es similar entre las formulaciones t.i.d., se observa una tendencia hacia una disminución en Cmax con las administraciones posteriores (Cmax o-io : 51.4 y 59.0 ng/dl> Cmax ío-ie: 44.2 y 48.9 ng/dl> Cmax i6_24 : 41.3 y 42.6 ng/dl para los tratamientos A y C, respectivamente) . Se observó un valor medio de Cmax comparable para la testosterona para ambas administraciones de tratamiento B (Cmax o-io: 56.8 ng/dl ~ Cmax 10-24: 54.6 ng/dl). La diferencia en la Cmax entre las administraciones para las formulaciones t.i.d. puede ser debida a los diferentes periodos de tiempo transcurridos entre cada administración. El valor medio calculado para Cmdx en el intervalo de dosificación de 24 horas, es comparable para todos los tratamientos (Cmax: 52.2, 61.0 y 60.3 ng/dl para los tratamientos A, B y C, respectivamente) . El limite superior del intervalo de referencia fisiológico (97.8 ng/dl) no es superado por ningún sujeto en ningún tratamiento.

Los Cpromedio calculados por administración son comparables entre los tratamientos y administraciones (Cpr0medio 0-10: 34.6 y 41.1 ng/dl> Cpr0medio ío-ie: 31.1 y 37.1 ng/dl> Cpr0medio 16-24 : 33.6 y 34.4 ng/dl para los tratamientos A y C, respectivamente y Cpromedi0 0-io: 40.3 ng/dl> Cpromedio 10-2 : 38.8 ng/dl para el tratamiento B) . El valor medio Cpromedio calculado en el intervalo de dosificación de 24 horas, es comparable para todos los tratamientos Cpr0medio 34.1, 39.5, 37.9 ng/dl para los tratamientos A, B y C, respectivamente) .

Aproximadamente el 63% de los sujetos tenían su Cpromedio incluido en el intervalo de referencia fisiológico para DHT (25.5 a 97.8 ng/dl) después de la administración de tratamiento A, mientras que esta cifra se eleva a cerca del 86% cuando se administran los tratamientos B y C. Ningún sujeto tenía un Cpromedio arriba del intervalo normal, mientras que el 38% y 14% de los sujetos tenían su Cpromedio debajo del intervalo normal para el tratamiento A y para ambos tratamientos B y C, respectivamente.

El período de tiempo durante un día (24 horas) para el que las concentraciones de DHT en el suero se hallan por debajo, dentro y arriba del intervalo de referencia fisiológica cubría respectivamente el 32.64%, 67.36% y 0% para el tratamiento A, 26.22%, 73.78% y 0% para el tratamiento B y 13.87%, 86.13% y 0% para el tratamiento C, es decir, que los niveles de DHT se hallan dentro del intervalo normal durante aproximadamente 16, 18 y 21 horas por día para los tratamientos A, B y C, respectivamente.

ESTRADIOL La concentración pico de estradiol se presenta dentro de 1 hora 12 min a 2 horas 41 min (valor medio de Tmax) después de las administraciones de TBS-1.

Cuando se comparan las administraciones de TBS-1 por separado para los tratamientos t.i.d., y si bien el valor medio de AUS es similar entre las formulaciones, se observa una tendencia hacia una disminución de las AUC con las administraciones posteriores (AUCo-io: 234.96 y 267.78 h*pg/mL> AUCi0-i6: 144.76 y 144.30 h*pg/mL <AUCi6-2 : 153.02 y 177.97 h*pg/mL para los tratamientos A y C, respectivamente). Se observaron AUC comparables para ambas administraciones del tratamiento B (AUC0-i0: 242.02 h*pg/mL ~ AUC10-24: 295.12 h*pg/mL) . La diferencia en el AUC entre las administraciones para las formulaciones t.i.d. puede deberse a diferentes periodos de tiempo transcurridos entre cada administración. El valor medio calculado de AUC0-t en el intervalo de dosificación de 24 horas, es comparable entre todos los tratamientos (AUC0-t: 530.27, 537.16 y 601.91 h*pg/mL para los tratamientos A, B y C, respectivamente) .

Aunque el valor medio de Cmax es similar entre las formulaciones t.i.d., se observa una tendencia hacia una disminución en la CmáX con las administraciones posteriores (Cmax 0-10: 36.8 y 35.5 pg/mL> Cmax ío-ie: 28.9 y 31.5 pg/mL> Cmax íe- 24 : 27.2 y 26.9 pg/mL para los tratamientos A y C, respectivamente) . Se observan valores medios comparables de Cmax para testosterona para ambas administraciones de tratamiento B (Cmax o-io 35.8 pg/mL ~ Cmáx i0 -24: 30.6 pg/mL) . La diferencia en la CmdX entre las administraciones para las formulaciones t.i.d. puede ser debida a los diferentes periodos de tiempo transcurridos entre cada administración. El valor medio calculado para Cmax en el intervalo de dosificación de 24 horas, es comparable para todos los tratamientos (Cmax: 37.9, 36.2 y 36.4 pg/mL para los tratamientos A, B y C, respectivamente) . El limite superior del intervalo de referencia fisiológico (81 pg/mL) no es superado por ningún sujeto en ningún tratamiento.

Los Cpromedio calculados por administración son comparables entre los tratamientos y administraciones (Cpromedio o-i0: 23.5 y 26.8 pg/mL> Cpromedio 10-i6: 24.1 y 24.0 pg/mL> Cpr0medio 16-2 : 19.1 y 22.2 pg/mL para los tratamientos A y C, respectivamente y Cpromedio 0-10: 24.2 pg/mL> Cpromedio 10-24: 21.1 pg/mL para el tratamiento B) . El valor medio calculado parra Cmax en el intervalo de dosificación de 24 horas, es comparable para todos los tratamientos (Cpr0medio: 22.1, 22.4, 25.1 pg/mL para los tratamientos A, B y C, respectivamente).

Todos los sujetos tenían su Cpromedio incluido en el intervalo de referencia fisiológico para E2 (3 a 81 pg/mL) después de la administración de todos los tratamientos. Todos los sujetos tenían concentraciones de E2 dentro del intervalo normal a lo largo del periodo de las 24 horas. Ningún sujeto tenia niveles de E2 debajo o arriba del intervalo normal en ningún momento del dia.

CONCLUSIONES Las formulaciones TBS-1 (gel de TBS-1 al 4.0% (aplicado t.i.d.) y TBS-1 gel (al 4.5% aplicado b.i.d. y t.i.d.) son absorbidos rápidamente, observándose un pico de testosterona con un valor medio dentro de una hora.

En general, la exposición a la testosterona (AUCo-t y Cmax) en el estado estacionario es comparable entre todos los tratamientos.

Independientemente de la formulación, aproximadamente el 86% -88% de los sujetos tenían una concentración promedio de fármaco testosterona (Cpr0medio) en el intervalo de referencia fisiológico (300 a 1050 ng/dl) .

Los niveles de testosterona se hallan dentro del intervalo normal durante aproximadamente 14 a 16 horas por día.

El TBS-1 es seguro para la administración intranasal en dosis y frecuencias indicadas. No hay acontecimientos adversos significativos, cambios en los signos vitales ni cambios en los resultados de laboratorio en comparación con la linea de base.

En base a estos resultados, no hay evidencia clara que indique un mejor rendimiento de una de las formulaciones.

Ejemplo 9 Informe de TBS1A para Gel en masa al 4% y 8% Objetivo: Hacer el seguimiento de la producción de lotes de IMP-Clinico. Los puntos principales afectan al flujo del proceso y el aspecto masivo sobre la estabilidad.

• Mejora del flujo del proceso • Viscosidad del gel masivo • Estabilidad (recristalización) • Evaluación de fuentes y calidades de materiales alternativos • Resultados in vivo, cambios de formulación para incidir sobre la presentación de la liberación • Realización de pruebas mediante selección de pruebas en celdas de Franz Tabla 35. Lista de materiales en bruto identificados para su uso en pruebas : Equipo utilizado Además de la mezcladora Silverson de alto corte, utilizada solamente durante la producción de los lotes de TBS1A IMP clínicos, se incluyó también una unidad mezcladora de tipo hélice para los ensayos en diversas operaciones mezcla preliminar. La única aplicación de la acción de alto corte es para la dispersión de la sustancia activa en los codisolventes .

Para el control y mezclado más uniforme de la temperatura, se recomienda un recipiente encamisado con hojas de barrido para remover el material desde las paredes interiores del cuenco (lo que especialmente crítico para lograr una temperatura masiva uniforme durante el calentamiento, así como también ciclos de enfriamiento) .

Información fundamental durante la producción de lotes de IMP La observación durante la fabricación por lotes de IMP clínico incluyó alta viscosidad durante la preparación de la mezcla preliminar de DMI / co-solvente Transcutol consistente en PVP K17/S640, Klucel HF y testosterona micronizada. El mezclado resultó en una masa pegajosa cuando se añade al aceite de ricino mediante el conjunto de mezcladora de alto corte. Con el mismo conjunto mezclador de alto corte para la adición del Cab-O-Sil (que en lo que sigue lleva la designación Si02), no se pudo obtener un vórtice para incorporar el material y fue necesario un mezclado manual adicional durante la etapa de adición, de ahí la recomendación de utilizar una unidad mezcladora de tipo hélice) . A pesar de que el material era viscoso durante esa etapa de adición, durante el mezclado adicional la viscosidad del gel a granel final se redujo a aproximadamente 1500 -2000 cps . Fue necesario controlar el tiempo de mezclado y la velocidad para no excederse de la temperatura de gel teórica deseada (no hay sistema de refrigeración) .

.Reseña general de las pruebas: Los ensayos iniciales (placebo) se concentraron en cambiar el orden de adición para identificar el impacto sobre la viscosidad. El proceso anterior incluía la adición del Si02 en la etapa final (véanse las observaciones arriba) , cambió a la dispersión del Si02 en el aceite de ricino antes de la adición de la mezcla activa alternativa. La viscosidad resultante de la mezcla de aceite de ricino/Si02, en la que se utilizaron diversos porcentajes, aumentó con la adición de un pequeño porcentaje de Arlasolve (DMI) .

El siguiente paso consistió en duplicar estos resultados mediante la mezcla activa (Co-solventes/PVP/HPC/activo) y añadir dicha mezcla a la mezcla previa de aceite de ricino y Si02. Sin embargo, esto resultó en una solución de baja viscosidad, lo que indica un impacto de la mezcla activa sobre la formación de un gel viscoso.

Dado que la mezcla codisolvente, sin materiales adicionales resultó en un incremento de la viscosidad, las cantidades de disolvente se dividieron en 2 partes, añadiéndose una parte de la mezcla disolvente solamente a la mezcla de aceite y la mezcla del aceite restante se utilizó para dispersar el PVP, HPC y sustancia activa. La mezcla activa con el co-solvente reducido terminó más viscosa, más una baja viscosidad, similar, cuando se añadió a la mezcla preliminar de aceite de ricino. Los ensayos adicionales incluyeron la preparación de las sustancias activas en solamente DMI (no PVP) y se obtuvo una buena viscosidad. El HPC se preparó por separado en el P Transcutol, presentándose problemas de inserción cuando se añadió a la mezcla (similar a las observaciones IMP) . La adición de Si02 en un nivel de 0.1 a 0.3% resolvió el problema.

El proceso arriba descrito para disolver sustancia activa en los co-solventes es suficiente y no requiere PVP para aumentar la solubilidad de la formulación al 4%; sin embargo no hay suficientes co-solventes en la formulación para lograr la solubilidad para una intensidad del 8%. Los ensayos sobre el 8% incluyeron un enfoque alternativo exitoso para preparar la dispersión activa que contiene PVP mediante la inclusión de Si02 en dicha mezcla. Como se ha demostrado en ensayos de evaluación que evalúan el impacto de Si02 añadido al DMI, asi como con el Transcutol P, dio lugar a una buena viscosidad formado con DMI, sin embargo no con Transcutol. Por ello la dispersión de la sustancia activo preparada disolviendo el PVP en DMI solamente, seguido por la adición de la sustancia activa a 55°C (50-60°C) y la porción de Si02 disponible.

Hay que tener presente que este proceso se ha desarrollado solamente durante el trabajo de ensayo en el 8%, por lo que se puede reducir en escala a una concentración del 4% si se PVP indica una funcionalidad adicional (prueba en Celdas de Franz) .

Los comentarios relacionados con la adición de agua purificada indican un aumento de la viscosidad con ensayos con HPC, sin aumento de la viscosidad en los ensayos en los que se utilizó solamente PVP. Estos ensayos se incluyeron solamente para información para estudiar la absorción de agua y el impacto sobre la viscosidad después de la aplicación en la cavidad nasal.

El paso critico durante el establecimiento de HPC arriba es el de proporcionar al menos 24 horas de solvatación para obtener una solución límpida.

Como se indica en los objetivos del estudio, se implementaron los coeficientes de formulación también mediante tipos y fuentes alternativos de materiales, y se los identifica en la tabla de formulaciones. Para identificar el impacto de los cambios en el proceso (tales como una reacción de aumento de la viscosidad por la adición de co-solventes ) , se llevaron a cabo ensayos para estudiar el impacto si se relaciona con DMI o Transcutol P. se llevaron cabo ensayos para dispersar Si02 (en la misma proporción que la utilizada para la mezcla de aceite de ricino) en DMI solamente asi como en Transcutol P solamente. La mezcla con la DMI resultó en una mezcla viscosa mientras que la mezcla de Transcutol fue muy fluida.

Se llevaron a cabo ensayos similares para utilizar los co-solventes individualmente para estudiar la solubilidad de los polímeros así como de la sustancia activa para la reducción potencial en Transcutol P. No hay una diferencia apreciable en la solubilidad si se utiliza la mezcla o los solventes individuales con una concentración del 4%. Sin embarqo, si se preparan PVP y HPC solamente en DMI, se observó una separación de los dos materiales cuando se almacenó durante la noche (no aparente cuando se mezcla en la mezcla de codisolvente) . Para eliminar la pegajosidad de la dispersión cuando se añade la mezcla de sustancia activa / polímero, se retiró el HPC de la formulación y se utilizó el PVP solamente (tipos individuales K17-K29/32-K90 , sin mezclas) . Esto dio lugar a varios grados de viscosidad relacionados con el tipo utilizado.

El método también incluyó el uso de Labrafil M 1944 CS, y se reseña en la descripción de los lotes y se seleccionó para su ensayo en celdas de Franz.

Comentarios : Las diversas pruebas se reseñan en lo que sigue para las concentraciones de 4% y de 8%. Se han seleccionado lotes de ensayos con ambas concentraciones para su ensayo en celdas de Franz e identifican lotes seleccionados.

Todos los ensayos serán supervisados en busca de evidencia física de recristalización y cambio en aspecto (separación), y se los ensaya para establecer los cambios en la viscosidad. Los valores de viscosidad de los ensayos serán documentados y actualizados.

En espera de la evaluación de los resultados de celdas de Franz, es posible implementar la optimización del proceso de formulación. Esto es crítico para identificar ya que el esquema general del ensayo no incluyó el impacto sobre la viscosidad en relación con la totalidad de los parámetros de proceso (necesario para incluir los datos de ensayos analíticos y de estabilidad) .

Las observaciones durante el ensayo de viscosidad mediante el viscosimetro Brookfield Modelo DV-II+, con husillo #6, a 50 rpm durante 30 segundos, mostraron en realidad un incremento en los valores de la viscosidad durante el tiempo de prueba en las muestras preparadas con un HPC de mayor grado de viscosidad. Esto se puede atribuir a la pegajosidad del gel que causa una aglomeración del gel en el vástago del husillo y disco y la creación de un arrastre (no se informa una verdadero valor de la viscosidad en los resultados) . El gel masivo de varios ensayos no es tixotrópico. Se ensayaron varias pruebas con el nuevo método Haupt con husillo 4 a 6 rpm.

Las diversas tablas adjuntas muestran los números de los ensayos para obtener geles activos, mezclas preliminares y placebos.

Comentarios y consideraciones para ensayos de seguimiento con ambas concentraciones A pesar de que la "mejora DE la viscosidad" no era el objetivo principal para llevar a cabo los ensayos, fue sin duda un esfuerzo diseñado para estudiar la causa de la baja viscosidad, teniéndose en cuenta el alto porcentaje de Si02 presente en la formulación. Una comparación cruzada de. fuentes de Si02 no indicó diferencias importantes; tampoco lo hicieron diversas relaciones de co-solventes, ajuste limitado, ya que se requirió un determinado porcentaje requerido para disolver la testosterona . Los cambios en los tipos de PVP indicaron un impacto sobre la viscosidad cuando se utiliza en la dispersión activa, pero no cuando se añade al resto de la mezcla. Los cambios en los tipos de HPC (utilizándose materiales de fuentes alternativas) mostraron un impacto en el gel final, sin embargo, cuanto mayor es el peso molecular del HPC, tanto mayor es el impacto de la pegajosidad e inserción en el gel final. La viscosidad del ensayo después de varias semanas de hecho mostró una separación en el gel con un asentamiento viscoso en el fondo del recipiente.

Con la indicación de Si02 que retiene la testosterona, añadiendo más para aumentar la viscosidad no era una opción, el objetivo era reducir el porcentaje usado, especialmente para la concentración TBS1A al 4%, lo que indica un porcentaje mucho mayor de T retenido en comparación con el TBS1A al 8%. El objetivo era obtener al menos la misma proporción de Si02 con respecto al T para la concentración del 8% para la concentración de 4% (por ello diseñado para reducir al 3%). Cuando se completaron los ensayos y los mismos mostraron el impacto sobre la viscosidad relacionada con el proceso y los cambios de formulación, una reducción en Si02 para la concentración del 4%, definitivamente posible, que incluiría también el uso de PVP en la formulación, aprovechándose el cambio de proceso para la concentración del 8%. Lo que precede se basa en la viscosidad solamente; sin embargo, el impacto sobre los cambios en la formulación para frenar la velocidad de absorción inicial en vivo solamente puede evaluarse a partir de los datos obtenidos en las pruebas utilizadas para la prueba analítica mediante celdas de Franz. Estos resultados serán revisados y evaluados con posibles recomendaciones para ensayos adicionales a efectos de duplicar los ensayos anteriores o basados en DOE.

Las tablas de viscosidad adjuntas muestran los datos de fabricación y los resultados de los ensayos más recientes (para ayudar en la selección de ensayos sobre la celda de Franz) . En la columna de los comentarios originales se hará referencia a los datos originales.

Se recomienda una evaluación adicional de los materiales de fuentes alternativas una vez que para la comparación directa se haya establecido una formulación primaria y un procedimiento para cada concentración.

Formulación/composición de TBS1A - 4% Tabla 1A (Ver las formulaciones en los ejemplos precedentes, e incluyéndose el Ejemplo 10) Lote # D11037 El proceso de duplicación del lote de IMP lote (4%) sin HPC. Se disolvió 1K17 y S630 disolvió en una mezcla de DMI /Transcutol seguido por la adición de la sustancia activa. Solución límpida. Se precalento aceite de ricino y se añadió a la mezcla de sustancia activa mencionada arriba. Se observa una solución límpida. A continuación: adición de Cabosil con bajo corte. Viscosidad en el momento de fabricación 500 cps, seguido por prueba después de 48 horas, resultó en 620 cps. Viscosidad menor, debido principalmente a la falta de HPC (tener presente que el IMP al 4% tenía aproximadamente 1500 cps) .

Lote # RD11038 Cambio en el orden de adición, utilizándose la misma formulación con una reducción de DMI /Transcutol y ajustado con aceite de ricino. Se mezcló Cabosil en el aceite de ricino con lo que se obtuvo una solución viscosa límpida. Se preparó la mezcla activa de acuerdo con RD11037.

La viscosidad de la mezcla de aceite de ricino/Cabosil cambió a 1180 cps (se preveía una mayor viscosidad en base a la adición de co-solventes durante las pruebas con placebo) . Impacto potencial de PVP y de sustancia activa sobre la mezcla de solvente.

Lote # RD11039 Performance duplicada en base a la mezcla de placebo que también contenia Labrafil en aceite de ricino más Cabosil más (para IP) . La misma reacción de viscosidad reducida cuando se añade la mezcla activa.

Lote # RD11040 Proceso duplicado de placebo añadiendo la mezcla de aceite de ricino/ Cabosil a una porción de la mezcla de DMI / Transcutol P co-solvente. La viscosidad de la mezcla de aceite aumentó. Se preparó la mezcla activa con los co-solventes restantes sin el PVP y se añadió a la mezcla de aceite. La viscosidad final del gel en masa era de 10400 cps . Potencial de F/C.

Lote # RD11041 Se repitió el proceso de acuerdo con RD11040 incluyéndose PVP K17 y S630 con la mezcla activa, y se redujo la viscosidad a 500 cps (aumentó a 1500 cps después de 3 semanas) . Indicación clara del impacto de PVP sobre la reducción de la viscosidad mediante K17 y S630.

Lote # RD11042 Se repite el ensayo con adición de aceite de ricino/Labrafil de acuerdo con RD11037, y Cabosil reducido, con mezcla de sustancia activa co-solvente pero sin PVP. Viscosidad de 1750 cps.

Los siguientes ensayos fueron diseñados para identificar el impacto de cambiar a tipos superiores de PVP, asi como también a fuentes alternativas de HPC (2 tipos) . La mezcla previa se realizó como se indica en tabla 35 que se concentra en las mezclas sin Labrafil, con aceite de ricino nativo y Aerosil 200.

Lote # RD11050 Se preparó una dispersión (mezcla preliminar I) de aceite de ricino y Aerosil 200, y se incrementó la viscosidad mediante la adición de parte del DMI (4%). La preparación de la mezcla activa utiliza la mezcla preliminar de RD11047A (PVP K17-3%) en DMI solamente, se añadió 0.3% de HPC Nisso H seguido por la adición de sustancia activa. La mezcla activa se añadió a la mezcla preliminar I.

Lote # RD11050A La misma formulación básica que RD 11050, con cambio de adición a una porción adicional de 1 % de Aerosil 200.

Lote # RD11051 Se preparó una dispersión (mezcla preliminar I) de aceite de ricino y de Aerosil 200, y se incrementó la viscosidad mediante la adición de parte del DMI (4%) . La preparación de la mezcla activa utiliza la mezcla preliminar de RD11047B (PVP K30-3%) en DMI solamente, se añadió 0.3% de HPC Nisso M seguido por la adición de sustancia activa. Se añadió la mezcla activa a la mezcla preliminar I.

Lote # RD11051A La misma formulación básica que RD 11051, con cambio de adición a una porción adicional de 1% de Aerosil 200 Lote # D11053 Se preparó una dispersión (mezcla preliminar I) de aceite de ricino y de Aerosil 200, y se incrementó la viscosidad mediante la adición de parte del DMI y Transcutol P. La preparación de la mezcla activa utiliza la mezcla preliminar de RD11048A (PVP K17-3%) de HPC Nisso H seguido por la adición de sustancia activa. Se añadió la mezcla activa a la mezcla preliminar I.

Lote # RD11054 Se preparó una dispersión (mezcla preliminar I) de aceite de ricino y de Aerosil 200, y se incrementó la viscosidad mediante la adición de parte del DMI y Transcutol P. La preparación de la mezcla activa utiliza la mezcla preliminar de RD11048B (PVP K30-3%), se añadió 0.3 % de HPC Nisso H seguido por la adición de sustancia activa. Se añadió la mezcla activa a la mezcla preliminar I.

Lote # RD11055 Se preparó una dispersión (mezcla preliminar I) de aceite de ricino y de Aerosil 200, y se incrementó la viscosidad mediante la adición de parte del DMI y Transcutol P. La preparación de la mezcla activa utiliza la mezcla preliminar de RD11048C (PVP K90-3%) . No se añadió HPC. Se añadió la mezcla activa a la mezcla preliminar I.

Lote # RD11056 Se preparó una dispersión (mezcla preliminar I) de aceite de ricino y de Aerosil 200, y se incrementó la viscosidad mediante la adición de parte del DMI. La preparación de la mezcla activa utiliza la mezcla preliminar de RD11047C (PVP K90-3%). No se añadió HPC. Se añadió la mezcla activa a la mezcla preliminar I.

Lote # RD11059 Se preparó una mezcla de aceite de ricino y Cabosil (2.5%). Se disolvió la sustancia activa en DMI y Transcutol P. Resultó una apariencia lechosa. Se añade esta mezcla a la mezcla preliminar de aceite de ricino; la mezcla no se aclaró. Se preparó la solución de PVP (K30) con DMI, se añadió a la mezcla; sin cambio en el aspecto, pero una viscosidad reducida.

Obsérvese que no hay cambio en la evaluación si se añade una mezcla de 0.1% HPC hasta un ligero aumento en la viscosidad. Este ensayo no fue registrado con un número de lote .

Lote # RD11060 Se preparó el aceite de ricino añadiendo Cabosil al 3.5%, seguido por la adición de una mezcla de DMI / Transcutol P para espesar. Se preparó la dispersión activa en un PVP (K30) con DMI como co-solvente. (sin HPC) .

Lote # RD11061 Se preparó el aceite de ricino añadiendo Cabosil al 3%, seguido por la adición de Labrafil (2%) para el espesamiento. Se preparó la dispersión activa en una mezcla de DMI que contiene PVP K17 (2%) . La mezcla resultó tener una baja viscosidad, sin embargo podría ser considerada para una prueba de F/C.

Lote # RD11062 Se mezcló aceite de ricino con Aerosil 200 (3%) y se añadió una mezcla de DMI/Transcutol P (6 +2) para el espesamiento. Se disolvió una mezcla de PVP de K17 y K30 se disolvió en CMS/Transcutol P, seguido por HPC H y solvato durante 4 días. Se recalentó la mezcla antes de la adición de la sustancia activa. La mezcla preliminar de aceite de ricino fue calentada antes de la adición de la dispersión activa. Recomendado para F/C Lote # RD11063 Se mezcló aceite de ricino con Aerosil 200 (4%) y se añadió el DMI (6%), resultando una mezcla muy viscosa. Se disolvió una mezcla de PVP K17 y L29/32 en DMI, más HPC Nisso H (0.2) . En el montaje para durante la noche, se observó una separación, que requirió un remezclado. Se añade sustancia activa a la mezcla preliminar de aceite de ricino de alta viscosidad. A ser seguido con modificación a composición potencial para F/C o para utilizar RD11065 Lote # RD11064 Adición de 0.3% a la porción de lote RD11062 Lote # RD11065 Adición de 0.3% a la porción de lote RD 11063 Lote # RD11066 Adición de 0.3% a la porción de lote RD 11041 Lote # RD11070 Adición de 0.3% a la porción de lote RD 11037 Lote # RD11071 Adición de 0.3% a la porción de lote RD 11042 Lote # RD11072 Adición de 0.3% a la porción de lote RD 11040 Lote # RD11073 Se preparó una mezcla preliminar de aceite de ricino/Aerosil 200. Se disolvió en DMI (6%) sin PVP, y se añade a la mezcla preliminar de testosterona /aceite de ricino. Se obtuvo una viscosidad de 6300 cps . En una mezcla de Transcutol P y DMI, se dispersa el HPC M (sólo se utiliza el 0.25% de preparación) y se añade a la mezcla principal. Propuesto para F / C Lote # RD11074 Adición de 0.3% a la porción de lote RD 11072 Lote# RD11075 Se preparó una mezcla de trabajo para completar 3x500 ensayos consistentes en aceite de ricino (68%)/ Aerosil 200 (3 %) D I (6%) . A esta mezcla se añadió PVP K29-32 (1%) en DMI (10) y sustancia activa. Se divide en masa en 3 partes a ser completadas para tres pruebas que contienen mezclas y tipos diferentes de HPC Nisso en Transcutol (lotes de referencia RD11067/68/69) Lote # RD11076 Se utilizó material en masa de RD11075 y se añadió mezcla de HPC RD11067 (Transcutol P con Nisso H. (0.15%) Lote # D11077 Se utilizó material en masa de RD11075 y se añadió mezcla de HPC RD11068 (Transcutol P con Nisso H. (0.2%) Lote # D11078 Se utilizó material en masa de RD11075 y se añadió mezcla de HPC RD11069 (Transcutol P con Nisso H (0.1) y M (0.1) Lote # RD11079 Adición de 0.3% a la porción de lote RD 11076 Lote #RD11080 Adición de 0.3% a la porción de lote RD 11077 Lote #RD11081 Adición de 0.3% a la porción de lote RD 11078 Lote #RD11082 Falló una tentativa de preparar un lote sin el uso de Si02.

Lote #RD11085 Se preparó una mezcla preliminar de aceite de ricino añadiendo Aerosil 200 al 2.5% con una mezcla de DMI (10) y testosterona . Se obtuvo una viscosidad de 3100 cps. Seguido por la adición de HPC Nisso L (0.2%) y de Nisso M (0.3%) mezclado en DMI y Transcutol más 0.3% Aerosil 200 para reducir la pegajosidad. El material se añade sin ningún tipo de hilado en la mezcla y se obtiene una viscosidad de 4800 cps en el día de la fabricación y 4900 cps a las 3 semanas más tarde. Propuesta para F / C Lote #RD11086 Adición de 0.3% a la porción de lote RD 11085 Tabla 36. TBS1A al 4% Valores de viscosidad con husillo 6, 20 rpm, ensayo de repetición referencia a Celdas de Franz: F/C Tabla 37. TBS1A al 8 % Formulación/composición Reseña general para ensayos activos : Lote # RD11087 La prueba se inició sin PVP para identificar el impacto sobre la solubilidad de la T. La dispersión activa en% de DMI utilizada no proporcionó una solución límpida y no se aclaró cuando se añadió a la mezcla de aceite de ricino/Si02. Aún los co-solventes presentes en la mezcla de HPC no permitieron obtener un gel de masa límpida. A la mezcla de HPV se le añadió una mezcla de Si02 al 0.1% a efectos de reducir el hilado y la pegajosidad.

Viscosidad a 4400 Sin embargo, se seleccionará este parámetro para el ensayo en celdas de Franz para identificar la velocidad de difusión mediante la eliminación de PVP.

Lote # RD11088 Se añadió 0.3 % de agua a una porción del lote RD11087 para identificar el impacto sobre la viscosidad. Como se ha observado en los ensayos al 4%, el aumento de la viscosidad no es evidente en la masa mezclada con Si02 en el HPC. Este ensayo no se considera para F/C.

Lote # RD11089 En este ensayo se utilizó la misma formulación cuantitativa que el IMP Clínica al 8%, sin embargo con una fuente alternativa de HPC (fuente original fuente: HPC Klucel HF) . También se hicieron cambios menores en el proceso, se disolvió PVP en DMI solamente y se añadió sustancia activa. Se preparó HPC en Transcutol y se añadió a masa principal por separado.

Se obtuvo una solución límpida cuando se añadió la mezcla co-solvente activa en el aceite de ricino, y ningún ahilado significativo con la adición de HPC después de la adición de Si02.

La viscosidad del gel en el día de la fabricación era de 1800 cps, cuando se ensayó de nuevo después de 24 horas, 3700 y después de 48 horas se llegó a 4300. En el nuevo ensayo el día 3 de octubre (véase la tabla) se registró 4500 cps.

Se seleccionó esta prueba para el ensayo F/C.

Lote #RD11089A Se añadió 0.3% de agua a una porción del lote RD11089 para identificar la incidencia sobre la viscosidad.

El cambio de viscosidad a lo largo del tiempo similar al ensayo arriba descrito, día de fabricación, 2700 cps, cuando se volvió a ensayar después de 24 horas, 3920, y después de 48 horas, hasta 4600. El nuevo ensayo en oct. 3 (véase la tabla) registró 5040 cps.

Seleccionado para el estudio del impacto de agua.

Lote # RD11090 Se utilizó un porcentaje más elevado de DMI y Transcutol a ser dividido para diversas mezclas preliminares, similares a Si02, a ser añadidos a HPC. Se preparó una mezcla preliminar de aceite de ricino y Si02; sin embargo, debido a la relación más baja entre los 2 excipientes, la mezcla se volvió bastante espesa y se espesó aún más cuando se añadió una parte de la DMI .

Se terminó la prueba, se la terminó con baja viscosidad, dia de la fabricación: 900 cps, prueba el día Oct . 03: 1260 cps. Se consideró el bajo nivel de Si02 para estudio de la incidencia, sin embargo, debido al problema de procesamiento (ver RD11100), no es adecuado para la prueba de F/C.

Lote # RD11100 Utilizándose una parte del ensayo anteriormente mencionado RD 11090, se agregó un 2% adicional de Si02 (para un total de 5.5%) para estudiar el impacto sobre la viscosidad. El aumento a 1900 cps en el dia de la fabricación y un nuevo ensayo el 03 de octubre (ver tabla) resultó en un valor de 3060.

Lote # RD11101 Para reducir potencialmente el impacto de PVP, requerido para disolver la sustancia activa, durante la adición a la mezcla de aceite de ricino/Si02, se añadió 2% de Si02 a la mezcla de DMI-PVP-testosterona, obteniéndose una mezcla viscosa. Después de la adición de esta mezcla a una dispersión de aceite de ricino que contiene 1% de Si02, se mantuvo una mezcla viscosa a la temperatura de 50% (se espesaría más aún al enfriarse) . Además, aumenta la viscosidad con la adición de la mezcla de HPC y cantidad final de Si02.

La viscosidad después de enfriar el gel a 21°C era de 3800 cps (Obsérvese que será necesario un nuevo ensayo a lo largo del tiempo, lote fabricado 03 de octubre) .

Este ensayo fue seleccionado para F/C Lote #RD11102 Con el objetivo de lograr una viscosidad 5000 cps para el proyecto TBS1A, el RD11101 era hasta aquí el mejor candidato para evaluar el impacto de la adición de más Si02, por tanto, a una porción de dicho lote se le añadió una cantidad adicional de 1% Si02. Lo lógico para el 6% era el de obtener la misma relación entre sustancia activa y Si02 como el objetivo teórico deseado de 3% de Si02 para la concentración al 4%.

La viscosidad aumenta a 8000 cps, este lote fue seleccionado para el estudio F/C para identificar el impacto de la viscosidad en la velocidad de difusión en comparación con la composición RD11101 de la misma, con excepción de la adición de 1% de Si02, que puede ser necesario considerar en el ensayo obtenido.

Lote #RD11103 La adición de agua para el impacto sobre la viscosidad, no se considera para el Ensayo de seguimiento (ver tabla de resultado para las viscosidades, incremento para RDlllOl de 3800 a 4500 cps) Lote #RD11104 Se incluyó este estudio para evaluar la adición de Labrafil. Se añadió Labrafil al aceite de ricino mezclado con Si02 al 1%. Como se observó anteriormente, la adición de Labrafil al aceite de ricino que contiene Si02 aumenta la viscosidad. Todas las otras mezclas se prepararon y añadieron de acuerdo con el ensayo RDlllOl, con la adición de 2% de Si02 para completar la mezcla. Esta mezcla contiene un porcentaje mayor de burbujas de aire, común en las formulaciones que contienen Labrafil.

Viscosidad obtenida: 3300 cps, será objeto de seguimiento y ensayasen diversos instantes de tiempo.

Seleccionado para ensayos F/C.

Lote #RD11105 Al RD11104 se le adicionó un adicional de 0.5% de Si02 (% ajustado para evitar un elevado incremento observado en RD11102) Incremento de 3300 a 4100 cps No seleccionado para ensayo F/C Nota: se establecen ensayos de placebo para identificar el impacto sobre la viscosidad para lo cual se establecen las dos fuentes diferentes de aceite de ricino y Si02. Estos ensayos también contestaran preguntas potenciales relacionadas con TBS1 y TBS2.

TABLA 38. TBS1A con una concentración de 8 % Valores de viscosidad con husillo #6, 20 rpm, celda de Franz = F/C Tabla 39. Ensayos de mezclas preliminares de RD (utilizados para adición en ensayo activos) Tabla 40. Ensayo de Placebo TBSIA EJEMPLO 10 Estudios de Celda de Franz - Coeficientes de difusión de testosterona Hablando en términos generales, embeber la membrana durante 30 min en la solución de difusión. Seguidamente, colocar la membrana sobre la Celda de Franz. Colocar el anillo y la cámara donante sobre la membrana y fijarlos mediante abrazadera. Añadir aproximadamente 1 g de gel (TBS con una concentración de 4% u 8%) . Verificar el nivel de la difusión en las Celdas de Franz. Se supone que estén a ras de las marcas. Colocar "parafilm" sobre el puerto de muestreo, a efectos de evitar la evaporación. Extraer 0.3 mL de muestra a los 60, 120, 180, 240 y 360 min mediante jeringa. Añadir soluciones de difusión para reponer a nivel en las Celdas de Franz. Cada muestra debería ser recolectada en inserto.

En la Figura 12 se ilustra una celda de Franz típica utilizada de acuerdo con este Ejemplo 9 y con la invención. Los materiales incluyen: Solución de difusión: etanol/Agua 50:50 Membrana: Millipore 0.45 µp?.

Temperatura: 37° ± 0.5°C.

Velocidad de agitación: 600 rpm.

Volumen del medio: 20 mL. Área de superficie: 1.7671 cm2 Cantidad de Celdas de Franz: 6.

Tiempo de muestreo (minutos) : 60, 120, 180, 240, 300 y 360.

Volumen de alícuotas: 0.3 mL.

Inserto: 0.4 mL.

Las formulaciones de TBS1A son como sigue y como se reporta en la presente como también en los ejemplos anteriormente mencionados. La velocidad de difusión resulta de la testosterona que pasa a través de la membrana de las Celdas de Franz, normalizada para cada una de las concentraciones de gel que se analizan, medidas en forma de pendiente/mgT% , se reportan en la siguiente tabla de Celdas de Franz .

Formulaciones de ensayo de TBS1A al 4% utilizadas en las Celdas de Franz Tabla 41. Lote de ensayo # RD11063. Magnitud de lote: 500 g Tabla 42. Lote de ensayo # RD11085. Magnitud del lote: 500 g Tabla 43. Lote de ensayo # RD11038. Magnitud Tabla 44. Lote de ensayo # RD11039. Magnitud del lote: 500 g Tabla 45. Lote de ensayo # RD11040. Magnitud del lote: 500 g Tabla 46. Lote de ensayo # RD11042. Magnitud del lote: 500 g Tabla 47. Lote de ensayo # RD11051. Magnitud del lote: 500 g Tabla 48. Lote de ensayo # RD11055. Magnitud del lote: 500 g Tabla 49. Lote de ensayo # RD11078. Magnitud del lote: 500 g Tabla 50. Lote de ensayo # RD11054. Magnitud del lote: 500 g Tabla 51. Lote de ensayo # RD11061 Magnitud del lote: 500 g o Tabla 52. Celda de Franz - Pendiente/mgT% ANEXO A Validación del método de tasa de liberación in vitro para Nasobol Gel al 4.0% Actualización de validación de la tasa de liberación in vitro de Nasobol Gel Síntesis del estudio de la tasa de liberación Parte 3: Nasobol Gel al 4.0% Finalidad : Este resumen sintetiza todos los datos experimentales de la tasa de liberación para Nasobol Geles.

Hay cuatro Nasobol Geles (al 0.15%, 0.6%, 4.0% y 4.5%) para la validación del método.

La finalidad del ensayo de día 1 y día 2 consiste en determinar la especificidad y la precisión intradía/interdía de la pendiente (tasa de liberación) , el día 3 y el día 4 consisten en evaluar la sensibilidad de la pendiente a la variación de la potencia de la muestra.

Tasa de liberación de Nasobol Gel al 4.0% Tabla 53. Cantidad real de activo liberado (yg/cm2) versus tiempo °'5 Tasa de liberación del día 1 al 4% Gel de testosterona al 4% Tabla 54. Cálculo de cantidad liberada j xg/ L) por curva de regresión lineal Col A#l Cíl M2 Cíl ?? Ctí A#4 Cei « Cel w m 1-6 60.00 100.61S 100.156 101 259 104.065 98.829 102.631 100909 24 Tabla 55. Cantidad real de activo liberado (µg cm2) A»l AHI 3 ??4 (V»'5 M6 1-6 %RSD 1-6 7.75 683155 680.13Í 687.628 706.683 65754S 696 266 685.253 2.4 10.95 1055.820 1045.287 1060.715 1081 392 1047075 1090.010 1063.383 1 7 13.42 1385.252 1363 087 1386.248 [413.214 1352.630 1419.826 1386709 1.9 13,49 1635 154 1630.364 1639.722 1681 399 1608.117 1686.130 1646.814 1 9 17.32 1874378 1839.269 1 56.682 1876.434 1820.56» 191 í.189 1866.587 1.6 1897 2050217 3055.800 20Í6.W7 2092 561 1994.157 2120.851 . 2066.756 2.1 12344 123.83 124.46 123.99 120.01 127.49 123.87 1.9 RJ 0.9994 ' 0.9995 0.9995 0.9993 0.9995 0.9998 0.9995 0.0 Idoneidad del sistema para gel al 4% día 1 1. Medio (diluyente) Resultado: No hay picos de interferencia en el RT de la testosterona de la inyección de diluyente.

Criterios: No debería haber picos de interferencia significativos en el RT de la testosterona del diluyente.

Comentario: pasa 2. Reproducibilidad de la inyección RT, factor de asimetría y cantidad de placas teóricas de seis inyecciones replicadas de STD-4 Tabla 56 4. Verificación STD Rec. (%) (Tabla 58) Tasa de liberación del dia 2 al 4% Gel de testosterona al 4% Concentración de activo ( g/mL) versus tiempo Tabla 59. Cálculo de cantidad liberada ( ig/mL) por curva de regresión lineal Cel A*2 cci AJM Cel A#6 el m Cel m Ctt M5 1-6 %RSD 1-6 6000 98.128 102.754 103.493 100.481 97.477 10 f. 09 100.740 23 ¡20.00 147.56$ 153.454 156.309 150502 143917 151.716 150578 29 180.00 181.258 130.081 184.198 185.232 181.807 185.787 181.724 1.7 240.00 216.954 213.139 220.725 218545 212.788 109.829 213.663 3.5 300.00 238.102 241.620 251.876 240.200 235770 218.192 237.627 4.6 360.00 257241 251.849 264.068 253.383 262.637 246.400 255.761 2.7 Cantidad real de activo liberado ( g/cm2) versus tiempo 0 5 Cantidad liberada (pg/cm2) Cel A#2 Cel A#4 Cel AS6 Cel Btfl Cd B#3 Cel R*5 1-6 %HSD 1-6 7.75 671.120 697781 702.799 682.345 661.946 688.647 684.106 2.3 1095 I03O.06Í 1071.14» 1090.744 I0J0.45Í 1004.891 1058965 1051 <M5 29 1342 1100.602 1363.158 1324.360 1328.887 1302.915 1333262 1325,531 1.7 15.49 1594.293 1573.653 1624.526 1607.519 1561.743 1481.186 1574.320 3.2 1732 1799291 1827.369 1898.520 1816.411 1781.017 1662.427 1797.506 4.3 2500000 ¡ ???s?? ¡ IWO.CCO fow.ee» « S O.009 0000 000 200 400 600 T00 10.00 (2.00 KCO «00 1300 3000 Tiempo '* DCe AK ACe AJM OC« A» ?<¾ ß»? - Ca B« «Ce S«5 Idoneidad del sistema para gel al 4% dia 2 1. Medio (diluyente) Resultado: No hay picos de interferencia en el RT de la testosterona de la inyección de diluyente.

Comentario: pasa 2. Reproducibilidad de la inyección RT, factor de asimetría y cantidad de placas teóricas de seis inyecciones replicadas de STD-4.

Tabla 60 3. Curva de calibración. (Tabla 61) 4. Verificación STD Rec. (%) (Tabla 62) Tasa de liberación del dia 3 al 4% Gel de testosterona al 2% Tabla 63. Cálculo de cantidad liberada ( g/mL) por Cel A«2 Cel Affó Cel B83 Ce! B«4 l>4 %RSD 1-4 60.00 48.687 51.463 48,815 48.993 49.490 2.7 120.00 73.695 78.583 73.975 75.427 75.420 3.0 180.00 90.952 9/.059 91.673 93:652 9X337 X9 240.00 104.753 111.751 104.737 107.587 107.207 3.1 300.00 114.343 121.973 116.610 118.783 117.680 2.9 360.00 122.360 131.256 123.836 127.772 126.311 3.2 Tabla 64. Cantidad real de activo liberado g/cm2) versus tiempo 0 5 Cantidad liberada (yg/ Cel A#2 Cel ??6 Cel BS3 Cel BM4 1* VoRSD 1-4 7.75 330.623 349.474 331 492 332.701 336.073 2.7 10.95 514.223 548.202 516.161 526.071 526.164 3.0 13.42 652.332 695.903 657.275 671.175 669.171 2.9 15.49 771.721 823.136 7 1.929 792.304 789.773 3.1 17.32 866.484 924.172 875.400 898.843 891.225 2.9 18.97 953.415 1021.723 963.973 993.430 983.135 3.1 55.61 59.82 56.40 58.83 57.66 3.4 Ra 0.9996 0.9997 0.9999 0.9999 0.9998 0.0 ?Cel A#2 ACei m O Cel B#3 ? Ce! B*4 Tasa de liberación del día 3 al 4% Gel de testosterona al 4% Tabla 65. Cálculo de cantidad liberada ( g/mL) por curva de regresión lineal Cel A#l Cel A#5 Cel B#2 Cel B#6 1-4 %RSD 1-4 60.00 100.960 101.116 102.665 95.377 100.030 3.2 120.00 154.364 154.139 154.940 147.997 152.860 2.1 180.00 186.594 ??4 ?20" Í90.4Ó1 T8T36Z 185:609 1.? 240.00 208.156 214.665 216.224 209.841 212.197 1.8 300.00 233.787 235.816 238.251 229.168 234.256 1.6 360.00 254.064 253.085 253.819 240.556 250.381 2.6 Tabla 66. Cantidad real de activo liberado {yq/cm2) versus tiempo 05 Cantidad liberada (pg/cm2) Cel ASI Cel AS5 Cel QU2 Cel B#6 1-4 % SD 1-4 7.75 685.598 686.657 697.176 647.685 679.279 3.2 10.95 1076.820 1075.336 1081.214 1032.003 1066.343 2.2 1142 1339.364 1322.544 1366,269 1299.774 1331.988 2.1 15.49 1538.584 1581.386 1595.1 1 ! ¡545.136 1565.054 1.8 17.32 1771.536 1786.408 1805.872 1735.756 1774.893 1.7 18.97 1975.383 1970.402 1979.004 1877.932 1950.680 2.5 1 12.89 114.01 ?4.24 1 10.57 112.93 1.5 0.9985 0.9994 0.9996 0.9981 0.9989 0.1 Tasa de liberación del dia 3 al 4% Gel de testosterona al 8.0% Tabla 67. Cálculo de cantidad liberada tog/mL) por curva de regresión lineal Ce! A#3 Cel A#4 Cel B#l Cel BS5 1- %KSD 1-4 60,00 194.025 206.537 196.S09 200.268 199.335 2.7 120.00 291.732 312.939 296.662 301.987 300.830 3.0 180.00 366.623 382.831 355.576 367.135 368.<M1 S.ü 240.00 420.979 432.753 416.896 429.097 424.931 1.7 300.00 462.747 469.037 459.11 469.069 464.991 1.1 360.00 600.130 607.265 493.510 507.861 502.192 1.3 Tabla 68. Cantidad real de activo liberado (pg/cm2) versus tiampc 0. 5 Cantidad liberada (µ?/a?2 Cel A#3 Cel ??4 Cel B*t Cel BUS 1-4 % SD 1-4 7.75 1317.582 1402.549 1334.451 JJ59.977 1353,(540 2.7 10.9S 2035.989 2183.542 2070.1 1 2107.395 2099.274 3.0 13.42 2627.103 2746.709 2554.183 2635.248 2640.81 1 3.0 15.49 3099.959 3194.041 3071.205 3159.900 3131.276 1.8 17.32 3502.713 3562.885 3475.838 3552.754 3523.547 1,2 18.97 3887.507 3955.197 3839.340 3948.905 3907.737 1.4 229.29 225.09 223.05 230.19 226.91 l.S 0.9999 0.9991 0.9994 0.9997 0.9995 0.0 Idoneidad del sistema para gel al 4% dia 3 1. Medio (diluyente) Resultado: No hay picos de interferencia en el RT de la testosterona de la inyección de diluyente.

Criterios: No deberla haber picos de interferencia significativos en el RT de la testosterona del diluyente.

Comentario: pasa 2. Reproducibilidad de la inyección RT, factor de asimetría y cantidad de placas teóricas de seis inyecciones replicadas de STD-4. (Tabla 69) 3. Curva de calibración. (Tabla 70) " 4. Verificación STD Rec. (%) (Tabla 71) Tasa de liberación del día 4 al 2% del gel testosterona Tabla 72. Concentración de activo { iq/mL) versus tiempo Cel AHI Cel A#5 Cel Qi¡2 Cel BS6 1- %KSD 1-4 60.00 46.114 45.990 46.957 48.744 46.951 2.7 120.00 71.036 70.056 70.143 74.792 71.507 3.1 180.00 86.556 87.932 89,263 87.432 87.796 1.3 240.00 mi 7tn 102.943 101.472 102.594 102.201 0.7 300.00 1 14.336 U5.560 116.237 116.744 115.719 0.9 360.00 124.001 124.783 128.162 124.530 125.369 1.5 Tabla 73. Cantidad real de activo liberado g/cm2) versus tiempo 0,5 Cantidad liberada (yg/cm2) Cel A#l Cel A#5 Cel B#2 Cel B#6 1-4 %RSD 1-4 7.75 313.150 312.308 318.875 331,010 318.836 2.7 10.95 495.438 488.748 489.613 521.689 498.872 3.1 13.42 620.931 629.963 639.299 628.687 629.720 1.2 15.49 748.893 756.779 747.465 756.387 752.381 0.6 17.32 862.872 871.586 876.442 881.506 873.102 0.9 18.97 960.856 966.916 990.312 967.412 971.374 1.3 57.62 58.68 59.48 56.59 58.09 2.2 0.9990 0.9994 0.9971 0.9971 0.9982 0.1 ? Ce AHI dCel AÍ5 OCel Qff2 4Cel BS6 Tasa de liberación del día 4 al 4% de gel testosterona Tabla 74. Concentración de activo (pg/mL) versus tiempo Cel A#3 Cel A#4 Cel \ Cel B#5 |-4 %RSD 1-4 60.00 97.536 101.702 92.098 101.777 98.278 4.7 120.00 139.740 145.279 136.327 149.357 142.676 4.1 180.00 174.342 184.915 173.585 185.982 179.706 3.7 240.00 202.707 208.453 197.116 207.509 203.946 2.6 3O0D0 Toarm 238.72J 227.099 23832 236:275 2? 360.00 2S2.426 248.202 226.276 250.303 244.302 5.0 Tabla 7 f5*-*.· C v.ai-nint.ixduaadu r j-ecaa-l. dv*ets acti_i-v vou l j.ij.bme.ir.aemdoo (ungj//c <_am .,2 f: , versus tiempo 0 5 Cantidad liberada ( g/cm2) ? Cel A#3 ¿Cel A* OCel B#1 ?Cel B*S Tasa de liberación del día 4 al 8% Gel de testosterona al 8.0% Tabla 76 . Cálculo de cantidad liberada (ug/mL) por curva de regresión lineal Cci M2 Cel A#6 Cel B#3 Cel Bfi4 1 %RSP 1-4 60.00 225.146 222.0S9 224.68S 222.320 223.553 0.7 120.00 317.633 309.500 316.071 313.279 314.121 i .l ?5??0 370.322 367.146 3703* 369.41 1 369:457 0:5 240.00 418.459 415.671 421.783 18.698 418.653 0.6 300.00 480.398 469.438 476.809 478.279 476.231 1.0 360.00 494.787 483.727 487.877 490.443 489.209 0.9 Tabla 77. Cantidad real de activo liberado g/cm2) Cantidad liberada (pg/cm2) Cel A#2 Cel AH6 Cel B#3 Cel B04 %RSD 1-4 7.75 1528.919 1507.955 1525.788 1509.728 1518.097 0.7 10.95 2220.683 2164.580 2209.945 2190.316 2196.381 1.1 13.42 2668.357 2643.615 2672.029 2660.139 2661.035 0.5 15.49 3100.027 3077.021 3122.204 3099.361 3099.654 0.6 17.32 3639.045 3559.756 3615.218 3Í22.433 3609.1 13 1.0 18.97 3872.686 3789.616 3825.291 3Í40.365 3831.990 0.9 211.76 207.16 209.08 211.75 209.94 1.1 0.9959 0.9976 0.9968 0.9964 0.9967 0.1 ?Cel A#2 ¿Cel A)Í6 O Ce! B*3 «Cel B* Idoneidad del sistema 1. Medio (diluyente) Resultado: No hay picos de interferencia en el RT de la testosterona de la inyección de diluyente.

Criterios: No debería haber picos de interferencia significativos en el RT de la testosterona del diluyente. 2. Reproducibilidad de la inyección RT, factor de asimetría y cantidad de placas teóricas de seis inyecciones replicadas de STD- .

Tabla 78 3. Curva de calibración. (Tabla 79) 4. Verificación STD Rec. (%) (Tabla 80) ANEXO B Validación del método de tasa de liberación in vitro para Nasobol Gel al 4.5% Actualización de validación de la tasa de liberación in vitro de Nasobol Gel Síntesis del estudio de la tasa de liberación Parte 4: Nasobol Gel al 4.5% Finalidad: Este resumen sintetiza todos los datos experimentales de la tasa de liberación para Nasobol Geles.

La finalidad del ensayo de día 1 y día 2 consiste en determinar la especificidad y la precisión intradía / interdía de la pendiente (tasa de liberación) , el día 3 y el día 4 consisten en evaluar la sensibilidad de la pendiente a la variación de la potencia de la muestra.

Tasa de liberación de Nasobol Gel al 4.0% Tabla 81. Cantidad real de activo liberado ( g/cm2) versus tiempo 0 5 Tasa de liberación del día 1 al 4.5% Gel de testosterona al 4.5% Tabla 82. Concentración de activo (ug/mL) versus tiempo Cálculo de cantidad liberada (yg/mL) por curva de regresión lineal A 2 2BT551 2w m Tabla 83. Cantidad real de activo liberado (yiq/cm2) versus tiempo 0 5 Idoneidad del s stema para gel al 4% dia 1 1. Medio (diluyente) Resultado: No hay picos de interferencia en el RT de la testosterona de la inyección de diluyente.

Tabla 84 Curva de calibración (Tabla 85) 4. Verificación STD Rec. (%) (Tabla 86) Tasa de liberación del día 2 al 4.5% Gel de testosterona al 4.5% Tabla 87. Concentración de activo (yg/mL) versus tiempo Cálculo de cantidad liberada ( iq/mL) por curva de regresión lineal Cel M2 Cel Ai/4 Cel AH6 Cel 801 Ce! BM Cel B*5 1-4 %RSÜ 1-6 108443 114.787 116 970 0.229 103.462 1 2806 111.115 4.4 120.00 165 786 171.091 175.T55 165.082 160.313 168.966 167.866 3.2 203.096 212.317 21 .530 208.824 199.76$ 21 .561 209 649 3 1 240.00 238.056 241.644 254.045 236.272 228.447 245.676 240.340 3 7 300.00 262.862 267.630 280.600 266.863 235.981 273.553 267.932 3 2 360.00 284.142 294602 303.353 289.822 277.465 298.212 291 283 3.3 Tabla 88. CCantidad real de activo liberac (pg/cm2) versus tiempo 0 . 5 Cantidad liberada ( g/cm: 2) Cel A#2 Cel A#t C«l A*6 Cel B*l Cel RM Cel BM 1-6 ¾nsü i-< 7.75 736.413 779.494 794 318 748 542 702.588 766.042 754.566 4.4 1095 1156.501 1194.321 1227.970 1152.226 1117.926 1179.331 1171.379 32 13.42 1470.356 1522689 1560.083 1494.620 1431.197 1536.765 1502.818 31 1 S.49 1738631 1781.238 1869.598 1741.402 1682.493 1808.771 1770.356 3.7 17.32 1988 136 2026.727 2121.131 2016.671 1934.110 2067.591 2026.72B 32 18.97 2206.308 2266.614 2355.666 2248.118 2152.433 2312.447 2260.111 3.3 130.70 132.72 138.44 133.37 126.58 137.72 133.75 3.1 0.9999 0.8992 0.9998 0.9992 0.9998 0.9996 0.9996 0.0 Idoneidad del sistema para gel al 4.5% dia 2 1. Medio (diluyente) Resultado: No hay picos de interferencia en el RT de la testosterona de la inyección de diluyente.

Tabla 89 Curva de calibración. (Tabla 90) 4. Verificación STD Rec. ( % ) (Tabla 91) Tasa de liberación del dia 3 al 4.5%.

Gel de testosterona al 2.25% Tabla 92. Concentración de activo (pg/mL) versus tiempo Cálculo de cantidad liberada (µ?/?t?? ) por curva ' 'egresión lineal .

Cel. A#2 Ccl A06 Cel B#3 Ce! B#4 (-4 %RSD 1-4 60.00 64.994 57.714 54.019 54.717 55.361 2.9 120.00 82.496 86.872 80.964 82.932 83.316 3.0 -ttSftOO 102.U5 TOOnJOÜ 101.611 103.4(39 2 E 240.00 118.492 123.255 116.098 117.953 1 8.450 2.8 300.00 127.040 135.982 128.371 129.901 130.324 3.0 360.00 137.604 148.125 139.169 142.064 141.741 3.3 Tabla 93. Cantidad real de activo liberado (pg/cm2) Cantidad liberada ( g/cm2) Cel A#2 Cel A#6 Cet B#3 Cel BH t-4 %RSD 1-4 " b.i 7.75 373.453 391.923 366.832 371.572 375.945 2.9 10.95 575.773 606.259 565.094 578.656 681.446 3.0 13.42 732.548 778.692 729.570 741 ,584 745.098 2.9 15.49 858.877 908.567 855.398 869.218 873.015 2.8 17.32 963.468 1029.868 971.591 983.729 987.184 3.0 18.97 1071.151 1150.804 1081.240 1103.081 1101.569 3.2 61.87 67.19 63.58 64.65 64.32 3.5 0.9998 0.9998 0.9999 0.9997 0.9998 0.0 Tasa de liberación del día 3 al 4.5% Gel de testosterona al 4.5% Tabla 94. Concentración de activo (pg/mL) versus tiempo Cálculo de cantidad liberada ( ig / L ) por curva de regresión lineal Cel A#l Cel A#5 Ce! B«2 Cel B#6 [-4 % SD 1-4 60.00 114.924 110.831 111.525 108.299 111.395 2.5 120.00 170.368 168.304 167.373 164.053 167.525 1.6 1 ??.?? 206.437 2B83PTB 1.3 240.00 239.862 235028 233.826 232.401 235.279 1.4 300.00 261.230 258.500 258.483 255.056 258.317 1.0 360.00 287.163 282.227 279.233 280.592 282.301 1.2 Tabla 95. Cantidad real de activo liberado ( g/cm2) versas tiempo 0 5 Cantidad liberada ( g/cm2) Cel A»l Cel A#5 Cel B#2 Cel B«6 1 -4 V.RSD 1-4 7.75 780.424 752.630 757.343 735.435 756.458 2.5 10.95 1189.451 1174.276 1168.150 1144.692 1169.142 1.6 13.42 1495.489 1480.851 1492 763 1453.493 1480.649 1.3 15.49 1768.524 1733.417 1725.687 1712.599 1735.067 i. 17.32 1981.498 1959.312 1959.288 1932.202 1958.075 1.0 18.97 2231.450 2193.579 2173.335 2177.779 2194.036 1.2 127.93 I26.9I 125.41 I 27.04 126.S2 0.8 R' 0.9994 0.9997 0.9996 0.9995 0.9996 0.0 Tasa de liberación del día 3 al 4.5% Gel de testosterona al 9.0% Tabla 96. Concentración de activo tog/mL) versus tiempo Cálculo de cantidad liberada (pg/mL) por curva de regresión lineal Cel A#3 Cet AH4 Cel Btf l Cel B»5 1-4 %RSD 1-4 60.00 216.929 227.909 217.968 223.670 221.619 2.3 120.00 328.565 344.343 328.394 334.315 333.904 2.2 4054724 4?.232 4Ü7TT7 4T5¾80 4107088 í.f 240.00 461.177 470.177 455.528 469.412 464.074 1.5 300.00 508.616 517.603 508.752 523.012 514.496 1.4 360.00 556.120 561.780 553,943 564.663 559.127 0.9 Tabla 97. Cantidad real de activo liberado ( iq/cm2) versus tiempo 0·5 Cantidad liberada (µ?/a?2) Cel A*3 Cel A#4 Cel B#l Cel B#5 1-4 %RSD 1-4 7.75 1473.119 1547.682 1480.174 1518.895 1504.967 2.3 10.9S 2292.595 2402.847 2291.728 2333.549 2330.180 2.2 13.42 2909.533 2954.507 2919.917 2981.893 2941.464 1.1 15.49 3400.901 3471.148 3363.208 3463.223 3424.621 1.5 17.32 3853.539 392S.244 3853.533 3960.032 3898.337 1.4 18.97 4320.042 4372.697 4304.366 4390.861 4346.991 1.0 250.91 248.45 248.81 254.97 250.79 1.2 0.9996 0.9994 0.9993 0.9998 0.9995 0.0 Idoneidad del sistema para gel al 4.5% día 3 1. Medio (diluyente) Resultado: No hay picos de interferencia en el RT de la testosterona de la inyección de diluyente.

Tabla 98 3. Curva de calibración. (Tabla 99) 4. Verificación STD Rec. (%) (Tabla 100) Tasa de liberación del día 4 al 4.5% Gel de testosterona al 2.25% Tabla 101. Concentración de activo ^g/mL) versus Cálculo de cantidad liberada (µ?/???,) por curva de regresión lineal Cei A#l Ccl A#5 Ccl B#2 Cel B#6 1- %RSD 1-4 60.00 55.058 54.174 55.844 54.942 55.005 1.2 120.00 82.450 81.172 83.609 82.010 82.310 1.2 T803JO msw T03WT3 240.00 119.731 117894 120.468 118.790 119.221 0.9 300.00 132.888 130.313 134.287 131 .764 132.313 1.3 360.00 143.479 138.721 143.770 141.399 141.842 1.6 Tabla 102. Cantidad real de activo liberado (pg/cm2) versus tiempo 0-5 Cantidad liberada (pg/cm2) Cel A#L Cel A#5 Cel B#2 Cel B#6 1-4 %RSD 1-4 —"¦«:« 1 7.75 373.887 367.884 379.225 373.099 373.524 1.2 10.95 575.479 586.550 583 572 572.458 574.515 1.2 13.42 738.569 733.041 744.749 737.210 738.392 0.7 15.49 881.128 867.837 886.918 874.531 877.603 0.9 17.32 1004.352 985.530 1014.846 996.246 1000.243 1.2 18.97 1113.874 1079.499 1117.240 1098.958 1102.392 1.6 ¿6.23 64.08 66.22 65.12 65.41 I.6 0.9998 0.9996 0.9997 0.9998 0.9997 0.0 DCe AÍ1 ACe ?#5 O Ce B#2 ?Ce B#6 Tasa de liberación del día 4 al 4.5% de gel de testosterona Gel de testosterona al 4.5% Tabla 103. Concentración de activo ( ig/xa ) versus tiempo Cálculo de la cantidad liberada ( iq /m. ) por curva de regresión lineal Cel A#3 Cel A«4 Cel BS1 Cel. B#5 1-4 %RSD i -4 60.00 112.124 114.480 12.222 115.808 113.658 1.6 120.00 170.342 175.929 170.587 175.841 173.175 1.8 2tt869 245G483 212:348 249.092 214.723 fiS 240.00 246.587 260.181 244.691 262.851 248.328 1.8 300.00 268,986 276.034 270.206 282.540 274.442 2.3 360.00 290.134 298.167 293.638 305.212 296.788 2.2 Tabla 104. Cantidad real de activo liberado ( ig/cm2) versus tiempo 0 5 Cantidad liberada ( g/cm2) Cel A#3 Cel A#4 Cel B#l Cel B*5 1-4 % SD I-4 7.75 761.410 777.409 762.076 786.414 771.827 1.6 10.95 1188.482 1227.088 1190.173 1226.866 1208.152 1.8 13.42 1519.360 1545.470 1522.031 1570.329 1639.297 1.5 15.49 1807.629 1842.068 180 .749 1861.571 1828.254 1.6 17.32 2036.016 2088.419 2044.251 2134.726 2075.853 2.2 18.97 2255.737 2316.823 2279.827 2368.632 2305.255 2.1 133.35 136.8Í 134.82 141.11 136.52 2.5 0.9999 0.9999 0.9999 0.9998 0.9999 0.0 ?Ce A*3 ¿Ce A#4 O Ce 8#1 ? Ce B#5 Tasa de liberación del día 4 al 4.5% Gel de testosterona al 9.0% Tabla 105. Concentración de activo (pg/mL) versus tiempo Cálculo de cantidad liberada ^g/mL) por curva de regresión lineal Cel A#2 Ce! A#6 Ce! B#3 Ccl B*4 l i - %RSD V4 60.00 215.853 222.792 211.379 219.348 217.343 2.2 120.00 329.810 344.136 321.102 337.453 333.125 3.0 "180:00 41 1.198 42B.858 404.979 42t 971 416:752 2¾ 240.00 474.841 493.977 462.253 487.875 479.737 2.9 300.00 522.127 550.136 512.332 540.898 531.373 3.2 360.00 565.951 593.682 555.027 584.821 574 870 3.1 Tabla 106. Cantidad real de activo liberado ( g/cm2) versus tiempo 0 5 Cantidad liberada (yg/cm2) Ccl A#2 Ccl AÜ6 Cel B#3 Cel B#4 i -4 %RSD 1-4 T ti 7.75 1465.812 1512.933 1435.430 1489.546 1475.930 2.2 10.95 2300.745 2399.993 2240.345 2353.636 2323.680 3.0 13.42 2946.753 3072695 2900.791 3023.062 2985.825 2.6 15.49 3495.287 3835.250 3404.316 3569.998 3531.463 2 9 Idoneidad del sistema 1. Medio (diluyente) Resultado: No hay picos de interferencia en el RT de la testosterona de la inyección de diluyente.

Tabla 107 3. Curva de calibración. (Tabla 108) 4. Verificación STD Rec. (%) (Tabla 109) Lista de referencias : 1. Tietz Textbook of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics, 4th edition, 2006. Editors; Burtis CA, Ashwood ER, y Bruns DE. 2. Wang C, Swerdloff RS. Androgen replacement therapy. Ann Med 1997; 29: 365-370. 3. Matsumoto AM. Andropause: clinical implications of the decline in serum testosterone levéis with aging in men. J Gerontol A Med Sci 2002; 57: M76-M99. 4. Harén MT, Kim MJ, Tariq SH, Wittert GA, Morley JE. Andropause: a quality-of-life issue in older males. Med Clin North Am 2006; 90: 1005-1023. 5. Nieschlag E. testosterone treatment comes of age: new options for hipogonadal men. Clin Endocrinol (Oxf) 2006: 65: 275-281. 6. Tenover JL. The androgen-deficient aging male: current treatment options. Rev Urol 2003; 5 (Suppl) : S22-S28. 7. Jockenhovel F. testosterone therapy - what, when y to whom? Aging Male 2004; 7: 319-324. 8. Kunz GH, Klein KO, Clemons RD, Gottschalk ME, Jones KL. Virilization of young children after topical androgen use by their parents. Pediatrics 2004; 114: 282-284. 9. Brachet C, Vermeulen J, Heinrichs C. Children' s virilisation and the use of a testosterona gel by their fathers. Eur J Pediatr 2005; 164: 646-647. 10. Bagchus WM, Hust R, Maris F, Schnabel PG, Houwing NS. Important effect of food on the bioavailability of oral testosterone undecanoate. Pharmacotherapy 2003; 23: 319-325. 11. Harén M, Chapman IM, Harén MT, MacKintosh S, Coates P, Morley JE. Oral testosterone supplementation increases muscle y decreases fat mass in ñealthy elderly males with low normal gonadal status. J Gerontol A Biol Sci Med Sci 2003; 58: 618-625. 12. Harén M, Chapman I, Coates P, Morley JE, ittert G. Effect of 12 month oral testosterone on testosterone deficiency symptoms in symptomatic elderly males with low-normal gonadal status. Age Ageing 2005; 34: 123-130. 13. Mattern C, Hoffmann C, Morley JE, Badiu C. The Aging Male 2008; 11: 171-178.

Claims

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN Habiendo descrito la presente invención como antecede, se considera como novedad y por lo tanto se reclama como propiedad lo descrito en las siguientes: REIVINDICACIONES

1. Una formulación de gel con testosterona para administración nasal, caracterizada porque comprende: a. aproximadamente 4.0% de testosterona en peso referido a dicha formulación de gel; y b. un vehículo farmacéuticamente aceptable.

2. Una formulación de gel con testosterona para administración nasal, caracterizada porque comprende: a. aproximadamente 4.5% de testosterona en peso referido a dicha formulación de gel; y b. un vehículo farmacéuticamente aceptable.

3. Una formulación de gel con testosterona para administración nasal, caracterizada porque comprende: a. aproximadamente 8.0% de testosterona en peso referido a dicha formulación de gel; y b. un vehículo farmacéuticamente aceptable.

4. La formulación de gel con testosterona de conformidad con las reivindicaciones 1 a 3, caracterizada porque comprende un solvente, un agente de humectación, y un agente que incrementa la viscosidad.

5. La formulación de gel con testosterona de conformidad con la reivindicación 4, caracterizada porque el solvente es aceite de ricino.

6. La formulación de gel con testosterona de conformidad con la reivindicación 4, caracterizada porque el agente de humectación es un oleoil polioxiglicérido .

7. La formulación de gel con testosterona de conformidad con la reivindicación 4, caracterizada porque el agente que incrementa la viscosidad es dióxido de silicio coloidal .

8. La formulación de gel con testosterona de conformidad con las reivindicaciones 1 a 3, caracterizada porque la formulación de gel comprende aceite de ricino, oleoil polioxilglicéridos y dióxido de silicio coloidal.

9. La formulación de gel con testosterona de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-8, caracterizada porque la formulación de gel es una formulación bioequivalente .

10. La formulación de gel con testosterona de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-8, caracterizada porque la formulación de gel es una formulación farmacéuticamente equivalente.

11. La formulación de gel con testosterona de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-8, caracterizada porque la formulación de gel es una formulación terapéuticamente equivalente.

12. Un producto farmacéutico envasado, caracterizado porque comprende: (a) una formulación de gel con testosterona para administración nasal o una de sus sales o profármacos farmacéuticamente aceptables, en donde la formulación de gel comprende aproximadamente 4.0% de testosterona en peso; y (b) instrucciones asociadas para utilizar la formulación de gel con testosterona para la terapia de reemplazo de testosterona, o para tratar el hipogonadismo o la deficiencia en testosterona.

13. Un producto farmacéutico envasado, caracterizado porque comprende: (a) una formulación de gel con testosterona para administración nasal o una de sus sales o profármacos farmacéuticamente aceptables, en donde la formulación de gel comprende aproximadamente 4.5% de testosterona en peso; y (b) instrucciones asociadas para utilizar la formulación de gel con testosterona para la terapia de reemplazo de testosterona, o para tratar el hipogonadismo o la deficiencia en testosterona.

14. Un producto farmacéutico envasado, caracterizado porque comprende: (a) una formulación de gel con testosterona para administración nasal o una de sus sales o profármacos farmacéuticamente aceptables, en donde la formulación de gel comprende aproximadamente 8,0 de testosterona en peso; y (b) instrucciones asociadas para utilizar la formulación de gel con testosterona para la terapia de reemplazo de testosterona, o para tratar el hipogonadismo o la deficiencia en testosterona.

15. El producto farmacéutico envasado de conformidad con las reivindicaciones 12 a 14, caracterizado porque la testosterona se encuentra presente como una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de testosterona o una de sus sales o profármacos farmacéuticamente y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

16. El producto farmacéutico envasado de conformidad con las reivindicaciones 12 a 14, caracterizado porque además comprende un paso de identificar un sujeto que necesite dicho producto farmacéutico.

17. Un método para tratar el hipogonadismo en un sujeto varón, caracterizado porque comprende administrar intranasalmente a un sujeto varón la formulación de gel de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 16 para entregar una cantidad terapéuticamente efectiva de testosterona para tratar el hipogonadismo de manera efectiva.

18. Un método para tratar la deficiencia en testosterona en un sujeto varón, caracterizado porque comprende administrar intranasalmente a un sujeto varón la formulación de gel de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 16 para entregar una cantidad terapéuticamente efectiva de testosterona para tratar de manera efectiva la deficiencia en testosterona.

19. Un método para proveer una terapia de reemplazo de testosterona en un sujeto varón, caracterizado porque comprende administrar intranasalmente a un sujeto varón la formulación de gel de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 16 para entregar una cantidad terapéuticamente efectiva de testosterona para proveer de manera efectiva dicha terapia de reemplazo de testosterona.

20. Un método para preparar una formulación de gel con testosterona para administración nasal, caracterizado porque la formulación de gel con testosterona comprende aproximadamente 4.0% de testosterona en peso referido a dicha formulación de gel; y un vehículo farmacéuticamente aceptable, en donde el método comprende: a. combinar testosterona micronizada en contacto con un solvente de manera de formar una primera mezcla; b. combinar oleoil polioxilglicéridos con la primera mezcla de manera de formar una segunda mezcla; y c. combinar dióxido de silicio coloidal con la segunda mezcla de manera de proveer una formulación de gel con testosterona para administración nasal.

21. Un método para preparar una formulación de gel con testosterona para administración nasal, caracterizado porque la formulación de gel con testosterona comprende aproximadamente 4.5% de testosterona en peso referido a la formulación de gel; y un vehículo farmacéuticamente aceptable, en donde el método comprende: a. combinar testosterona micronizada en contacto con un solvente de manera de formar una primera mezcla; b. combinar oleoil polioxilglicéridos con la primera mezcla de manera de formar una segunda mezcla; y c. combinar dióxido de silicio coloidal con la segunda mezcla de manera de proveer una formulación de gel con testosterona para administración nasal.

22. Un método para preparar una formulación de gel con testosterona para administración nasal, caracterizado porque la formulación de gel con testosterona comprende aproximadamente 8.0% de testosterona en peso referido a la formulación de gel; y un vehículo farmacéuticamente aceptable, en donde el método comprende: