MX2013002566A

MX2013002566A - Tratamiento de enfermedades.

Info

Publication number: MX2013002566A
Application number: MX2013002566A
Authority: MX
Inventors: David Bar-Or
Original assignee: Dmi Acquisition Corp
Priority date: 2010-09-07
Filing date: 2011-09-07
Publication date: 2013-06-18
Also published as: CN103200952A; KR20140003399A; HK1182617A1; EA201390347A1; AU2011299353A1; BR112013005432A2; JP5941047B2; ZA201301601B; JP2016145261A; IL224931A; JP2013537194A; BR112013005432A8; US20210052578A1; CA2810834C; KR101822951B1; MX343160B; CN103200952B; NZ607600A; ES2611878T3; SG187986A1

Abstract

La invención proporciona un método para inhibir la hiperpermeabilidad vascular en un animal en necesidad del mismo. El método comprende administrar una cantidad efectiva de una dicetopiperazina, un profármaco de una dicetopiperazina o una sal farmacéuticamente aceptable de cualquiera de estos al animal, en donde la dicetopiperazina tiene la fórmula expuesta en la especificación. La invención también proporciona un método para modular el citoesqueleto de una célula endotelial en un animal. El método comprende administrar una cantidad efectiva de una dicetopiperazina, un profármaco de una dicetopiperazina o una sal farmacéuticamente aceptable de cualquiera de estos al animal, en donde la dicetopiperazina tiene la fórmula expuesta en la especificación. La invención además proporciona un equipo. El equipo comprende una dicetopiperazlna, un profármaco de una dicetopiperazina o una sal farmacéuticamente aceptable de cualquiera de estos para el animal, en donde la dicetopiperazina tiene la fórmula expuesta en la especificación.

Description

TRATAMIENTO DE ENFERMEDADES CAMPO DE LA INVENCIÓN La invención se relaciona a un método y equipo para inhibir la hiperpermeabilidad vascular y el edema y otros efectos adversos que resultan de esta. La invención también se relaciona a un método y equipo para modular el citoesqueleto de las células endoteliales . Ambos métodos comprenden la administración a un animal de una dicetopiperazina (DKP) de la fórmula I mostrada . enseguida, un profármaco de tal DKP o una sal farmacéuticamente aceptable de cualquiera de estos.

ANTECEDENTES El endotelio vascular reviste el interior de todos los vasos sanguíneos. Este actúa como la interfase entre la sangre y los tejidos y órganos. El endotelio forma una barrera semipermeable que mantiene la integridad del compartimiento de fluido sanguíneo, pero permite el pasaje de agua, iones, moléculas pequeñas, macromoléculas y células de una manera regulada. La desrregulación de este proceso produce una fuga vascular en los tejidos implícitos. La fuga de fluido en los tejidos que causa edema puede tener consecuencias serias y amenazantes de la vida en una variedad de enfermedades. Por consiguiente, sería altamente deseable tener un método para reducir el edema, de preferencia en su etapa más temprana, y restaurar la barrera endotelial a la condición fisiológica.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La invención proporciona tal método. En particular, la invención proporciona un método para inhibir la hiperpermeabilidad vascular y el edema y otros efectos adversos que resultan de esta. El método comprende administrar a un animal en necesidad del mismo una cantidad efectiva de un ingrediente activo, en donde el ingrediente activo comprende una dicetopiperazina, un profármaco de una dicetopiperazina o una sal farmacéuticamente aceptable de cualquiera de estos, en donde la dicetopiperazina tiene la fórmula : en donde R >1 y oR2 , que pueden ser los mismos o diferentes,, cada uno es : (a) una cadena lateral de un aminoácido, en donde el aminoácido es glicina, alanina, valina, norvalina, ácido a-aminoisobutirico, ácido 2,4- diaminobutírico, ácido 2, 3-diaminobutirico, leucina, isoleucina, norleucina, serina, homoserina,, treonina, ácido . aspár.tico, asparagina, ácido glütámico, glutamina, lisina, hidroxilisina, histidina, .· arginina, · homoarginina, citrulina, fenilalanina, p-aminofenilalanina, tirosina, . triptófano, tiroxina, ¦ cistéina, . homocisteina, metionina, penicilamina u ornitina; R1 es -CH2-CH2-CH2- o -CH2-CH (OH) -CH2- y junto con el nitrógeno del anillo adyacente forma prolina o hidroxiprolina y/o R2 es -CH2-CH2-CH2- o -CH2- CH(OH)-CH2- y junto con el nitrógeno del anillo adyacente forma prolina o hidroxiprolina; o un derivado de una cadena lateral de un aminoácido, en donde el aminoácido es uno de aquellos citados en (a), y la cadena lateral derivada tiene: (i) un grupo -?¾ reemplazado por un grupo -NHR3 o -N(R3)2, en donde cada R3 independientemente puede ser un alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo o heteroarilo sustituido o no sustituido; (ii) un grupo -OH reemplazado por un grupo -0-P03H2 o -0R3, en donde cada R3 independientemente puede ser un alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, alquilarilo; arilalquilo o heteroarilo sustituido o no sustituido; (iii) un grupo -COOH reemplazado por un grupo - COOR3, en donde cada R3 independientemente puede ser un alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo o heteroarilo sustituido o no sustituido; (iv) un grupo -COOH reemplazado por un grupo CON(R4)2, en donde cada R4 independientemente puede ser H o alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo o heteroarilo sustituido o no sustituido; (v) un grupo -SH reemplazado por -S-S-CH2-CH (NH2) - COOH o -S-S-CH2-CH2-CH (NH2) -COOH; (vi) un grupo -CH2- reemplazado por un grupo CH(NH2)- o -CH(OH)-; (vii) un grupo -CH3 reemplazado por un grupo -CH2- NH2 o -CH2-OH; y/o (viii) un H que se une a un átomo de carbono reemplazado por un halógeno.

La inhibición de la hiperpermeabilidad vascular de acuerdo con la invención incluye la inhibición de la hiperpermeabilidad de causa paracelular y la hiperpermeabilidad de causa de transcitosis . La evidencia reciente indica que la impermeabilidad de causa de transcitosis es la primera etapa de un proceso que finalmente conduce al daño de tejidos y órganos en muchas enfermedades y 1 condiciones. Por consiguiente, la presente invención proporciona un medio de intervención temprana en estas enfermedades y condiciones que puede reducir, retardar o aun _ pote'ncialmente prevenir el daño del te ido y órgano observados en estos.

La invención · también proporciona · un método para modular el citoesqueleto de las células endoteliales . en un animal. El método comprenda administrar una cantidad efectiva de un ingrediente activo, en donde el ingrediente activo comprende una dicetopiperazina, un profármaco de un dicetopiperazina o una sal farmacéuticamente aceptable de cualquiera de estos, al animal, en donde la dicetopiperazina tiene la fórmula: en donde R1 y R2, que pueden ser los mismos o diferentes, cada uno es : (a) una cadena lateral de un aminoácido, en donde el aminoácido es glicina, alanina, valina, norvalina, ácido a-aminoisobutírico, ácido 2, 4- diaminobutirico, ácido 2, 3-diaminobutirico, leucina, isoleucina, norleucina, serina, homoserina, treonina, ácido aspártico, asparagina, ácido glutámico, glutamina, lisina, hidroxilisina, istidina, ' arginina, homoarginina , citrulina, fenilalanina, p-aminofenilalanina , tirosina, triptófano, tiroxina, cisteina, homocisteina, metionina, penicilamina u ornltina; R1 es -CH2-CH2-CH2- o -CH2-CH (OH) -CH2- y junto con el nitrógeno del anillo adyacente forma prolina o hidroxiprolina y/o R2 es -CH2-CH2-CH2- o -CH2- CH(OH)-CH2- y junto con el nitrógeno del anillo adyacente forma prolina o hidroxiprolina; o un derivado de una cadena lateral de un aminoácido, en donde el aminoácido es uno de aquellos citados en (a), y la cadena lateral derivada tiene: (i) un grupo -NH2 reemplazado por un grupo -NHR3 o -N(R3)2, en donde cada R3 independientemente puede ser un alquilo, ciclo-alquilo, heterocicloalquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo o heteroarilo sustituido o no sustituido; (ii) un grupo -OH reemplazado por un grupo -O-PO3H2 o -0R3, en donde cada R3 independientemente puede ser un alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo o heteroarilo sustituido o. no -sustituido; (iii) un grupo -COOH reemplazado por un grupo - COOR3, en donde cada R3 independientemente puede ser un alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, alquilarilo,- arilalquilo- o - heteroarilo sustituido o no sustituido; - - . : (iv) un grupo -COOH reemplazado por un- grupo CON(R )2, en donde cada R4 independientemente puede ser H o alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo o héteroarilo sustituido o no sustituido; (v) un grupo -SH reemplazado por -S-S-CH2-CH (NH2) - COOH o -S-S-CH2-CH2-CH (NH2) -COOH; (vi) un grupo -CH2- reemplazado por-, un: grupo CH(NH2)- o -CH(OH)-; (vii) un grupo -CH3 reemplazado . por un grupo -CH2- NH2 o -CH2-OH; y/o (viii) un H que se une a un átomo de carbono reemplazado por un halógeno.

La invención además proporciona un equipo. El equipo comprende una dicetopiperazina,. un profármaco de un dicetopiperazina o una sal farmacéuticamente aceptable de cualquiera de estos para el animal, en donde la dicetopiperazina tiene la fórmula: en donde ...

R1 y R2, que pueden ser los mismos o diferentes, cada uno es : (a) una cadena lateral de un aminoácido, en donde el aminoácido es glicina, alanina, valina, norvalina, ácido a-aminoisobutirico, ácido 2, 4- diaminobutirico, ácido 2 , 3-diaminobutirico, leucina, isoleucina, norleucina, serina, homoserina, treonina, ácido aspártico, asparagina, ácido glutámico, glutamina, lisina, hidroxilisina, histidina, arginina, homoarginina, citrulina, fenilalanina, p-aminofenilalanina, tirosina, triptófano, tiroxina, cisteina, homocisteina, metionina, penicilamina u ornitina; (b) R1 es -CH2-CH2-CH2- o -CH2-CH (OH) -CH2- y junto con el nitrógeno del anillo adyacente forma prolina o hidroxiprolina y/o R2 es -CH2-CH2-CH2- o -CH2- CH(OH)-CH2- y junto con el nitrógeno del anillo adyacente forma prolina o hidroxiprolina; o un derivado de una cadena lateral de un aminoácido, en donde el aminoácido es uno de aquellos citados en (a), y la cadena lateral derivada tiene: (i) un grupo -NH2 reemplazado por un grupo -NHR3 o -N(R3)2, en donde cada R3 independientemente puede ser un alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo o heteroarilo sustituido o no sustituido; (ii) un grupo -OH reemplazado por un grupo -O-PO3H2 o -0R3, en donde cada R3 independientemente puede ser un alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo o heteroarilo sustituido o no sustituido; (iii) un grupo -COOH reemplazado por un grupo COOR3, en donde cada R3 independientemente puede ser un alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, ¦ alquilarilo, arilalquilo o heteroarilo sustituido o no sustituido; (iv) un grupo -COOH reemplazado por un grupo -CON(R4)2, en donde cada R4 independientemente puede ser H' o alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo o heteroarilo sustituido o no sustituido; (v) un grupo -SH reemplazado por -S-S-CH2-CH (NH2 ) - COOH o -S-S-CH2-CH2-CH (NH2) -COOH; (vi) un grupo -CH2- reemplazado por un grupo CH(NH2)- o -CH(OH)-; (vii) un grupo -CH3 reemplazado por un grupo -CH2- ' NH2 o -CH2-OH; y/o ·. ·¦· . (viii) un H que se.'une- "a. un átomo de' carbono reemplazado por un halógeno.

"Hiperpermeabilidad vascular" .- se utiliza en la presente para dar a entender la permeabilidad de un endotelio vascular que es incrementada como · es' comparado con los niveles básales. "Hiperpermeabilidad vascular" como se utiliza en la presente, incluye la hiperpermeabilidad de causa paracelular y la hiperpermeabilidad de causa de transcitosis .

La "hiperpermeabilidad de causa paracelular" se utiliza en la presente para dar a entender la hiperpermeabilidad vascular causada por el transporte paracelular que se incrementa como es comparado con los niveles básales. Otras características de la "hiperpermeabilidad de causa paracelular" se describen enseguida.

El "transporte paracelular" se utiliza en la presente para dar a entender el movimiento de iones, moléculas y fluidos a través de las uniones interendoteliales (IEJs) entre las células endoteliales de un endotelio.

"Hiperpermeabilidad de causa de transcitosis" se utiliza en la presente. para dar a entender la hiperpermeabilidad vascular causada por transcitosis que se incrementa como es comparado con los niveles básales.

"Transcitosis" se utiliza en la presente para dar a entender el transporte activo de macromoléculas y constituyentes y del plasma de fase fluida acompañantes a través de las células endoteliales del endotelio. Otras características de "transcitosis" se describen enseguida.

"Nivel basal" se utiliza en la presente para referirse al nivel encontrado en un tejido u órgano normal.

"Inhibición" "inhibir" y términos similares se utilizan en la presente para dar a entender la reducción, retardo o prevención.

Un animal esta "en necesidad" de tratamiento de acuerdo con la invención si el animal actualmente tiene una enfermedad o condición mediada por la hiperpermeabilidad vascular, exhibe signos tempranos de tal enfermedad o condición, o tiene una predisposición a desarrollar tal enfermedad o afección.

"Mediado" y términos similares se utilizan en la presente para dar a entender causado por, que causa por, que involucra o exacerbado por, hiperpermeabilidad vascular.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LAS MODALIDADES ACTUALMENTE PREFERIDAS DE LA INVENCIÓN El endotelio es un guardabarrera clave que controlar el intercambio de moléculas de la sangre al parénquima de tejido. Grandemente controla . la permeabilidad de un lecho vascular particular a las moléculas portadas por la sangre. La permeabilidad y selectividad de la- barrera de células endoteliales es . fuertemente " dependiente de la estructura y tipo de endotelio que reviste la microvasculatura en diferentes lechos vasculares. Las- células endoteliales que revisten los lechos microvasculares de diferentes órganos exhiben diferenciación estructural que se pueden agrupar en tres categorías morfológicas primarias: sinusoidal, fenestrado y continuo.

El endotelio sinusoidal (también referido como "endotelio discontinuo") tiene espacios intercelulares e intracelulares grandes y. nada de membrana de basamento, permitiendo el transporte mínimamente restringido de moléculas desde el lumen capilar al tejido y viceversa. El endotelio sinusoidal se encuentra en el hígado, bazo y médula ósea.

Los endotelios fenestrados se caracterizan por la presencia de un número grande de aberturas transcelulares y circulares llamadas fenestraciones con un diámetro de 60 a 80 nm. Los endotelios fenestrados se encuentran en tejidos y órganos que requieren el intercambio rápido de moléculas '3 pequeñas, incluyendo el riñon (glomérulos, capilares peritubulares y vasa recta ascendente) , páncreas, glándulas adrenales, glándulas endocrinas y el intestino. Las fenestraciones se cubren por diafragmas delgados, excepto por aquellos en glomérulos sanos, maduros. Ver Ichimura y colaboradores, J. Am. Soc. Nephrol, 19:1463-1471 (2008).

Los endotelios continuos no contienen fenestraciones o espacios, grandes. En cambio, los endotelios continuos se caracterizan por una monocapa de célula endotelial no interrumpida. La mayoría de los endotelios en el cuerpo son endotelio continuo, y el endotelio continuo se encuentra en, o alrededor de, el cerebro (barrera hematoencefálica) , diafragma,, musculatura duodenal, grasa, corazón, algunas áreas de los ríñones (micro vasculatura papilar, vasa recta descendente), vasos sanguíneos grandes, pulmones, mesenterio, nervios, retina (barrera retinal sanguínea), músculo esquelético, testículos y otros tejidos y órganos del cuerpo.

El transporte endotelial en el endotelio continuo se puede pensar en un sentido general como que ocurre mediante rutas paracelulares y transcelulares . La ruta paracelular es la ruta entre las. células endoteliales , a través de las uniones interendoteliales (IEJs). En el endotelio continuo no perturbado, el agua, iones y moléculas pequeñas se transportan paracelularmente mediante difusión y convección. Una cantidad significante de agua (hasta 40%) también cruza la barrera de célula endotelial transcelularmente a través de canales de membrana transportadores de agua llamados acuaporinas. Una variedad de estímulos pueden perturbar la organización de las IEJs, para de esta manera abrir espacios en la barrera endotelial. La formación de estos espacios intercelulares permite el pasaje de fluido, iones, macromoléculas (por ejemplo, proteínas) y otros constituyentes plásmáticos entre las células endoteliales de una manera no restringida. Esta hiperpermeabilidad de causa paracelular produce edema y otros efectos adversos que pueden eventualmente dar por resultados el daño a tejidos y órganos.

La ruta transcelular es responsable para el transporte activo de macromoléculas, tal como albúmina y otras proteínas de plasma, a través de las células endoteliales, un proceso referido como "transcitosis". El transporte de macromoléculas se presenta en vesículas llamadas caveolas. Casi todos los endotelios continuos tienen caveolas abundantes, excepto por los endotelios continuos localizados en el cerebro y testículos que tienen pocas caveolas. La transcitosis es un proceso de multietapas que involucra el brote de caveolas sucesivas y fisión del plasmalemma y translocación a través de la célula, seguido por la fijación y fusión con el plasmalemma opuesto, donde la caveólas liberan sus contenidos mediante exocitosis en el intersticio. La transcitosis es selectiva y altamente regulada bajo condiciones fisiológicas normales.

Hay una comprensión creciente de la importancia fundamental de la ruta transcelular . La transcitosis de proteínas de plasmas, especialmente albúmina, que representa 65% de la proteína de. plasma, es de interés particular debido a su habilidad para regular el gradiente de presión oncótico transvascular . Como se puede apreciar, entonces, la transcitosis incrementada de albúmina y otra proteínas de plasma arriba de de los niveles básales incrementará la concentración de proteína del tejido de estos que, a su vez, que causará que el agua se mueva a través de la barrera endotelial, para de esta manera producir edema.

Las lipoproteínas de baja densidad (LDL) también se transportan a través de las células endoteliales mediante transcitosis. En la hiperlipidemia, un incremento significante en la transcitosis de LDL se ha detectado como el evento inicial en la aterogénesis . La LDL se acumula en el espacio subendotelial, atrapado dentro de la lámina basal expandida y la matriz extracelular . La acumulación de lipoproteínas subendoteliales en la hiperlipidemia es seguido por una cascada de eventos que dan por resultado la formación de placa ateromatosa. Las lesiones ateroscleróticas avanzadas se reportan que son acompañadas ocasionalmente por la apertura de IEJs y el pasaje no controlado masivo de LDL y albúmina .

Las complicaciones vasculares son una marca de referencia de diabetes. En el nivel de vasos grandes, la enfermedad se presenta que es expresada como una aceleración de un proceso aterosclerótico . Con respecto a la microangiópatía, las alteraciones en la microvasculatura de la retina, glomérulo renal y nervios causan el número más grande de complicaciones clínicas, pero un número continuamente incrementado de investigaciones, muestran que la diabetes también afecta la microvasculatura de otros órganos, tales como el mesenterio, piel, músculo esquelético, corazón, cerebro y pulmón, causando complicaciones clínicas adicionales. En todos estos lechos vasculares, los cambios en la permeabilidad vascular aparecen para representar una marca de referencia de la disfunción endotelial diabética.

En el endotelio continuo, la hiperpermeabilidad capilar a macromoléculas del plasma en la etapa temprana de la diabetes se explica por una intensificación del transporte vesicular transendotelial (es decir, mediante la transcitosis incrementada) y no por la desestabilización de la IEJs. Además, las células endoteliales de diabéticos, incluyendo aquellas del cerebro, se ha reportado que contienen un número incrementado de caveolas como es comparado con las proteínas normales y glicadas, particularmente albúmina glicada, que son tomadas por las células endoteliales y transcitosadas en velocidades sustancialmente más grandes que sus formas nativas. Además, la transcitosis incrementada de macromoléculas es un proceso que continúa más allá de la fase temprana de la diabetes y aparece para ser una causa de edema en tejidos y órganos diabéticos por toda la enfermedad si se deja sin tratar. Este edema, a su vez, conduce al daño de tejido y órgano. Incrementos similares en el transporte transcelular de macromoléculas se han reportado en la hipertensión.

La hiperpermeabilidad de causa paracelular también es un factor en la diabetes y las complicaciones vasculares de la diabetes. Las IEJs de la ruta paracelular incluyen las uniones adherentes (AJs) y uniones herméticas (TJs) . La diabetes altera el contenido, fosforilación y la localización de ciertas proteínas en ambas de las AJs y TJs, para de esta manera contribuir a la permeabilidad de barrera endotelial incrementada .

En apoyo de la discusión anterior y para información adicional, ver Frank y colaboradores, Cell Tissue Res., 335:41-47 (2009), Simionescu y colaboradores, Cell Tissue Res., 335:27-40 (2009); Van den Berg y colaboradores, J. Cyst. Fibros, 7 (6) : 515-519 (2008); Viazzi y colaboradores, Hypertens. Res, 31:873-879 (2008); Antonetti y colaboradores, Chapter 14, pages 340-342, in Diabetic Retinopathy (edited by Elia J. Duh, Humana Press, 2008), Felinski y colaboradores, ' Curren t Eye Research, 30:949-957 (2005) Pascariu y colaboradores, Journal of histochemistry & Cytochemistry, 52(1): 65-76 (2004); Bouchard y colaboradores, Diabetologia, 45:1017-1025 (2002); Arshi y colaboradores, Laboratory Investigation, 80 (8) : 1171-1184 (2000); Vinores y colaboradores, · Documenta Ophthalmológica, 97:217-228 (1999); Oomen y - colaboradores, European Journal of Clinical Investigation, 29:1035-1040 (1999); Vinores y colaboradores, Pathol. Res. Pract, 194:497-505 (1998); Antonetti y colaboradores, Diabetes, 47:1953-1959 (1998), Popov y colaboradores, Acta Diabetol, 34:285-293 (1997); Yamaji y colaboradores, Circulation Research, 72:947-957 (1993); Vinores y colaboradores, Histochemicla Journal, 25:648-663 (1993); Beals y colaboradores, Microvascular Research, 45:11- 19(1993); Caldwell y colaboradores, Investigátive Ophthalmol. Visual Sci., 33(5) :16101619 (1992).

El transporte endotelial en el endotelio fenestrado también ocurre mediante la transcitosis y la ruta paracelular. Además, el transporte endotelial ocurre por medio de la fenestraciones . Los endotelios fenestrados muestran una permeabilidad notablemente alta al agua y a los solutos hidrofilicos pequeños debido a la presencia de la fenestraciones .

Las fenestraciones pueden o no ser cubiertas por un diafragma. Las ubicaciones de endotelio con fenestraciones diafragmadas incluyen el tejido endocrino (por ejemplo, isletas pancreáticas y corteza renal) mucosa gastrointestinal y capilares peritubulares renales. La permeabilidad a las proteínas . de plasma de endotelio fenestrado con fenestraciones' diafragmadas no excede aquellas del endotelio continuo ." '. - · · - Las ubicaciones de endotelio con fenestraciones no diafragmadas - incluyen los glomérulos de los' ríñones. El endotelio fenestrado glomerular es cubierto por un glicocáliz que se extiende en la fenestraciones (formando los llamados "tapones Seive") y por una capa de superficie de célula endotelial más sueltamente asociada de glicoproteínas . El análisis matemático de los estudios de permeselectividad funcionales han concluido que el glicocáliz de célula endotelial glomerular, incluyendo aquel presente en las fenestraciones, y su capa de superficie asociada tienen en cuenta la retención de hasta un 95¡% de las proteínas de plasma dentro de la circulación.

La pérdida de fenestraciones en el endotelio glomerular se ha encontrado que está asociado con la proteinuria en varias enfermedades, incluyendo la nefropatía diabética, glomerulopatía de trasplante, pre-eclampsia, diabetes, falla renal, nefropatía de ciclosporina, nefritis de malestar de suero y nefritis Thy-1. El rearreglo de actina y, en particular, la despolimerización de fibras ' de esfuerzo se han encontrado que son importantes para la formación y mantenimiento de fenestraciones .

En apoyo de la discusión anterior de endotelio.s fenestrados y para información adicional, ver Satchell y colaboradores, Am. J. Physiol. Renal Physiol, . 296 : F947-F956 (2009) ; Haraldsson y colaboradores, Curr.. Opin. Nephrol. Hypertens, 18:331-335 (2009); Ichimura y colaboradores, J. Am. Soc. Nephrol, 19:1463-1471 (2008 ) ; Ballermann, Nephron Physiol, 106:19-25 (2007); Toyoda y colaboradores, Diabetes, 56:2155-2160 (2007), Stan, "Endothelial Structures Involved Vascular Permeability", 679-688, Endothelial Biomedicine (ed. Aird, Cambridge University Press, Cambridge, 2007); Simionescu and Antohe, "Functional Ultrastructure of the Vascular Endothelium: Changes in Various Pathologies", pages .42-69, The Vascular Endothelium I (eds. Moneada y Higgs, Springer-Verlag, Berlín, 2006) .

El transporte endotelial en el endotelio sinusoidal ocurre mediante transcitosis y a través de los espacios intercelulares (ranuras interendoteliales ) y ¦ espacios intracelulares .( fenestraciones ) . El tratamiento del endotelio sinusoidal con fármacos que interrumpen el filamento de actina puede inducir un incremento sustancial y rápido en el número de espacios, indicando la regulación de la porosidad del revestimiento endotelial mediante el citoesqueleto de actina. Otros fármacos que alteran el citoesqueleto se ha reportado que cambian los diámetros, de las fenestraciones . Por lo tanto, el citoesqueleto asociado a las fenestraciones probablemente controla la función importante de la filtración endotelial en el endotelio sinusoidal. En el hígado, la defenestración (pérdida de fenestraciones ) , que causa una reducción en la permeabilidad del endotelio, se ha asociado con la patogénesis- .de varias enfermedades y condiciones, incluyendo el envejecimiento, aterogénesis, aterosclerosis, cirrosis, fibrosis, falla del hígado y cánceres de hígado primario y metastáticos . En apoyo de lo anterior y para información adicional, ver Yokomori, Med. Mol. Morphol, 41:1-4 (2008), Stan. "Endothelial Structures Involved In Vascular Permeability", pages 679-688, Endothelial Biomedicine (ed. Aird, Cambridge University Press, Cambridge, 2007) ; DeLeve, "The Hepatic Sinusoidal Endothelial Cell", pages 1226-1238, Endothelial Biomedicine (ed. Aird, Cambridge University Press, Cambridge, 2007); Pries and Kuebler, "Normal Endothelium", pages 1-40, The Vascular Endothelium I (eds. Moneada and Higgs, Springer- Verlag, Berlín, 2006) ; Simionescu and Antohe, "Functional Ultrastructure of the Vascular Endothelium: Changes in Various Pathologies", pages 42-69, The Vascular Endothelium I (eds. Moneada and Higgs, Springer-Verlag, Berlín, 2006) ; Braet and Wisse, Comparative Hepatology, 1:1-17 (2002); Kanai y colaboradores, Anat. Rec, 244:175-181 (1996); Kempka y colaboradores, Exp. Cell Res., 176:38-48 (1988); Kishimóto y colaboradores, Am. J. Anat., 178:241-249 (1987).

La invención proporciona un método para inhibir la hiperpermeabilidad vascular presente en cualquier tejido u órgano que contiene o es circundado por endotelio continuo. Cómo es: mencionado en lo anterior, el endotelio continuo está presente en, o . alrededor ¦ de, el cerebro (barrera hematoencefálica) , diafragma, musculatura duodenal, grasa, corazón, algunas áreas de los ríñones (microvasculatura papilares,- vasa recta descendente) , vasos sanguíneos grandes, pulmones, mesenterio, nervios, retina (barrera retinal sanguínea) , músculo esquelético, piel, testículos, vena umbilical y otros tejidos y órganos del cuerpo. De preferencia, el endotelio continuo es aquel encontrado en o alrededor del cerebro, corazón, pulmones, nervios o retina.

La invención también proporciona un método para inhibir la hiperpermeabilidad vascular presente en cualquier tejido u órgano que contiene o es circundado por el endotelio fenestrado. Como es mencionado en lo anterior, el endotelio fenestrado está presente en, o alrededor de, el riñon (glomérulos, capilares peritubulares y vasa recta ascendente) , páncreas, glándulas adrenales, glándulas endocrinas y el intestino. De preferencia, el endotelio fenestrado es aquel encontrado en los ríñones, especialmente aquel encontrado en los glomérulos de los ríñones .

Además, cualquier enfermedad o condición mediada por la hlperpermeabilidad vascular se puede tratar mediante el método de la invención para inhibir la hiperpermeabilidad vascular. Tales enfermedades y condiciones incluyen diabetes, hipertensión y aterosclerosis .· " En particular, las complicaciones vasculares de la diabetes,- incluyendo aquellas del cerebro, corazón, ríñones, pulmón, mesenterio, nervios, retina, músculo esquelético, piel y otros tejidos y órganos que contienen endotelio continuo fenestrado, se pueden tratar por la presente invención. Estas complicaciones vasculares incluyen edema, acumulación de LDL en el espacio subendotelial, aterosclerosis acelerada, y los siguientes: cerebro (envejecimiento acelerado de las paredes del vaso) , corazón (edema miocardiaco, fibrosis miocárdica, disfunción diastólica, cardiopatía diabética) , ríñones (nefropatía diabética) , pulmón (retardo del desarrollo del pulmón en los fetos de madres diabéticas, alteraciones de varios parámetros fisiológicos pulmonares y susceptibilidad incrementada a infecciones) , mesenterio (hiperplasia vascular) , ' nervios (neuropatía diabética) , retina (edema macular y retinopatía diabética) y piel (enrojecimiento, descoloración, sequedad y ulceraciones) . La hiperpermeabilidad vascular en la diabetes tanto Tipo 1 (autoinmune) y Tipo 2 (no dependiente de insulina) se puede inhibir por el método de la invención. El Tipo 2 es el Tipo mucho más común de diabetes, que afecta a 90-95% de diabéticos, y su tratamiento, especialmente el tratamiento de aquellos con signos tempranos de, o una predisposición a desarrollar diabetes de Tipo 2 (ver 'enseguida), debe ser particularmente benéfico.

La retinopatia diabética es una causa conducente de ceguera que afecta a aproximadamente 25% de los 21 millones de estadounidenses estimados con diabetes. Aunque su incidencia y progresión se puede reducir mediante el control glicémico y la presión sanguínea intensivo, casi todos los pacientes con diabetes mellitus tipo 1 y arriba de 60% de aquellos ' con diabetes mellitus tipo 2 eventualmente desarrollan retinopatia diabética. Hay dos etapas de retinopatia diabética. La primera, la retinopatia no proliferativa, es la etapa más temprana de la enfermedad y se caracteriza por permeabilidad vascular incrementada, microaneurismas , edema y eventualmente cierres del vaso. La neovascularización no es un componente de la fase no proliferativa . La mayor parte de la pérdida visual durante esta etapa es debido a la acumulación de fluido en la mácula, el área central de la retina. Esta acumulación de fluido es llamada edema macular y puede causar visión disminuida temporal o permanente. La segunda etapa de la retinopatia diabética en la llamada retinopatia proliferativa y se caracteriza por formación de nuevos vasos anormales. Desafortunadamente, esta neovascularización anormal puede ser muy dañante debido, a que puede causar sangrado en el ojo, tejido de cicatrización retinal, desuniones retínales diabéticas o glaucoma, cualquiera de los cuales puede causar visión disminuida o ceguera. El edema macular puede también Ocurrir en la fase proliferativa ..

La neuropatía diabética es una complicación seria común de la diabetes . Hay · cuatro tipos principales de neuropatía diabética: neuropatía periférica, neuropatía autonómica, neuropatía radiculoplexus y mononeuropatía . Los signos y síntomas de la neuropatía periférica, el tipo más común de neuropatía diabética, incluyen entumecimiento o habilidad reducida para sentir dolor o cambios en la temperatura (especialmente en los pies y los dedos del pie) , una sensación picante o quemante, dolor agudo, dolor cuando se camina, ' sensibilidad extrema al tacto más ligero, debilidad muscular, caminar dificultoso, y serios problemas del pie (tales como úlceras, infecciones, deformidades y dolor del hueso . y las articulaciones) . La neuropatía autonómica afecta el sistema nervioso autonómico, . que controla el corazón, vejiga, pulmones, estómago, intestinos, órganos sexuales y ojos, y problemas en cualquiera de estas áreas se pueden presentar. La neuropatía radiculoplexus (también llamada amiotrofia diabética, neuropatía femoral o neuropatía próxima) usualmente afecta los' nervios en las caderas, hombros o abdomen, usualmente en un lado del cuerpo. La mononeuropatía significa el daño a solamente un nervio, típicamente en un brazo, pierna o la cara. Las complicaciones comunes de neuropatía diabética incluyen la pérdida de miembros (por ejemplo, dedos del pie, pies o piernas), articulaciones de Charcot, ' infecciones del tracto urinario, incontinencia urinaria, inconsciencia de hipoglucemia (aún puede ser fatal) , baja presión sanguínea, problemas digestivos (por ejemplo, estreñimiento, diarrea, náuseas y vómitos), disfunción sexual (por ejemplo, disfunción .eréctil) y sudoración incrementado o disminuida. Como se puede observar, los síntomas pueden variar de leves a dolorosos, deshabilitantes y aún fatales.

La nefropatía diabética es la causa más común de la enfermedad renal de etapa final en los Estados Unidos. Es una complicación vascular de diabetes que afecta a los capilares glomerulares de los ríñones que reduce la habilidad de filtración del riñon. La nefropatía primero se indica por la aparición de hiperfiltración y luego microalbuminuria . La proteinuria pesada y una declinación progresiva en la función renal preceden a la enfermedad renal de etapa final. Típicamente, antes de que aparezca cualquiera de los signos de nefropatía, se ha diagnosticado usualmente en la retinopatía. El trasplante renal usualmente se recomienda a ' pacientes . con enfermedad renal de etapa final debido a la diabetes. La proporción de supervivencia en 5 años para los pacientes que reciben un trasplante es aproximadamente 60% comparado con solamente el 2% para aquellos en diálisis.

La hipertensión típicamente se desarrolla a través de muchos años, y este afecta casi a cualquiera eventualmente . La hiperténsión rió controlada incrementa el riesgo de problemas de salud serios, incluyendo el ataque cardiaco, falla de corazón congestivo, ataque apoplético, enfermedad de arteria periférica, falla del riñon, aneurismas, daño al ojo y problemas con. la memoria o entendimiento.

La aterosclerosis también se desarrolla gradualmente. La ateroesclerosis puede afectar las arterias coronarias, la arteria carótida, las arterias periféricas o microvasculatura, y las complicaciones' de aterosclerosis- incluyen enfermedad de la arteria coronaria (que puede causar angina o un ataque cordiaco) , enfermedad microvascular coronaria, enfermedad de la arteria carótida (que puede causar un ataque isquémico transitorio o ataque apopléjico), enfermedad dé arterial periférica (que puede causar pérdida de la sensibilidad al calor y al frío o aún daño al tejido) y aneurismas .

Las enfermedades y condiciones adicionales que se pueden tratar de acuerdo con la invención incluyen la lesión al pulmón aguda, degeneración macular relacionada con la edad, edema coroidea, coroiditis, enfermedad microvascular coronaria, enfermedad microvascular cerebral, enfermedad de Eals, enfermedad causada por lesión (por ejemplo, trauma o quemaduras), edema asociado con hipertensión, fuga vascular, glomerular, choque hemorrágico, síndrome de, Irvine Gass,. edema causado por isquemia, edema-- macular (por ejemplo, causada por isquemia, edema macular (por ejemplo, causada por oclusiones vasculares, cirugía postintraocular ) , cirugía de cataratas uveítis o retinitis pigmentosa, además de aquella causada por diabetes) , nefritis (por ejemplo, glomerulonefritis , nefritis de malestar por suero y nefritis de Thy-1), nefropatías, edema nefrótico, síndrome nefrótico, neuropatías, falla del órganos debido al- edema de tejido (por ejemplo, en sepsis o debido al trauma) , pre-eclampsia, edema pulmonar, hipertensión pulmonar, falla renal, edema retinal, hemorragia retinal, oclusiones de vena retinal (por ejemplo, oclusiones de la vena ramificado central) , retinitis, retinopatías (por ejemplo, retinopatía arterosclerótica, retinopatía hipertensiva, retinopatía por radiación, ;retinopatía por células enferma y retinopatía de prematuros, además de la retinopatía diabética) , infarto cerebral silencioso, síndromes de respuesta inflamatoria sistémica (SIRS), glomerulopatía del trasplante, uveítis, síndrome de fuga vascular, hemorragia vitrea y enfermedad de Von Hippie Lindau. Además, ciertos fármacos, incluyendo aquellos utilizados para tratar esclerosis múltiple, se conocen que causan la hiperpermeabilidad vascular, y una dicetopiperazina, un profármaco de una dicetopiperazina o una ' sal farmacéuticamente aceptable de cualquiera de estos, se puede utilizar para reducir este efecto secundario indeséado cuando se utilizan estos fármacos^- .. ' ·· "Tratar", "tratando" o "tratamiento" se utiliza en la presente para dar a entender la reducción (completa o parcialmente) de los síntomas, la duración o severidad de una enfermedad o condición, incluyendo la curación de la enfermedad, o para prevenir la enfermedad o condición.

La evidencia reciente indica que la hiperpermeabilidad de causa de transcitosis es la primera (etapa de un proceso que finalmente conduce al daño del tejido y órgano en muchas enfermedades y condiciones. Por consiguiente, la presente invención proporciona un medio de intervención temprana en estas enfermedades y condiciones que pueden reducir, retardar o aún potencialmente prevenir el daño al tejido y órgano observados en estos. Por ejemplo, un animal se puede tratar inmediatamente en la diagnosis de una de las enfermedades o condiciones tratables de acuerdo con la invención (aquellas enfermedades y condiciones descritas en lo anterior) .

Alternativamente, se prefiere el tratamiento de animales que tienen signos tempranos de, o una predisposición a desarrollar, tal enfermedad o condición antes de la existencia de los síntomas. Los signos tempranos de, y factores de riesgo para, diabetes, hipertensión y la aterosclerosis son bien conocidos, y el tratamiento de un animal que exhibe estos signos tempranos o factores de riesgo se puede iniciar antes de la presencia- de los síntomas de la enfermedad o condición (es decir, profilácticamente) .

Por ejemplo, el tratamiento de un paciente ' quien es diagnosticado con diabetes se puede iniciar inmediatamente en la diagnosis. En particular, los diabéticos de preferencia deben ser tratados con una dicetopiperazina, un profármaco de un dicetopiperazina o una sal de cualquiera de estos antes de que estén presentes cualquiera de los síntomas de una complicación vascular, aunque esto no es usualmente posible, puesto que la mayoría de los diabéticos muestran tales síntomas cuando son diagnosticados (ver enseguida) . Alternativamente, los diabéticos deben ser tratados mientras que la retinopatía diabética no proliferativa está leve (es decir, niveles leves de microaneurismas y hemorragias intraretinales ) . Ver Diabetic Retinopathy, página 9 (Ed. Elia Duh M.D, Human Press, 2008). Tal tratamiento temprano proporcionará la mejor oportunidad de prevenir el edema macular y la progresión de la retinopatía de la retinopatía diabética proliferativa . También, la presencia de la retinopatia diabética se considera un signo de que otras complicaciones microvasculares de diabetes existen o se desarrollar (ver Id, Páginas 474-477) y el tratamiento temprano también puede prevenir o. reducir estas complicaciones adicionales. Por supuesto, las enfermedades y condiciones más avanzadas que son las complicaciones vasculares de la diabetes también se pueden tratar con resultados benéficos.

Sin embargo, como es mencionado en lo anterior, las complicaciones vasculares frecuentemente ya están presentes en el tiempo que es diagnosticada la diabetes. Por consiguiente, es preferible tratar profilácticamente a un paciente quien tiene signos tempranos de, o una predisposición a desarrollar diabetes. Los signos tempranos y factores de riesgo de la diabetes Tipo 2 incluyen la glucosa en ayunas que es alta, pero no bastante alta para ser clasificada como diabetes ("prediabetes") , hiperinsulinemia, hipertensión, dislipidemia (alto colesterol, altos triglicéridos, alta lipoproteína de baja densidad y/o nivel bajo de lipoproteína de alta densidad) , obesidad (índice de masa corporal arriba de 25), inactividad, arriba de 45 años de edad, sueño inadecuado, historia familiar de diabetes, raza minoritaria, historia de diabetes gestacional, historia de síndrome de ovario poliquístico y diagnosis del síndrome metabólico. Por consiguiente, los pacientes con signos tempranos de, o una predisposición a desarrollar, diabetes Tipo 2 fácilmente se pueden tratar profilácticamente.

De manera similar, el tratamiento ' de un paciente quien es diagnosticado con hipertensión se puede iniciar inmediatamente en la diagnosis. La hipertensión típicamente no causa cualquiera de los síntomas, pero el tratamiento profiláctico se puede iniciar en paciente quienes tienen una predisposición a desarrollar hipertensión. Los factores de riesgo para la hipertensión incluyen la edad, raza (la hipertensión es más común en negros), historia familiar (la hipertensión se desarrolla en familia) , sobrepeso u obesidad, falta de actividad, fumar tabaco, demasiada sal en la dieta, muy poco potasio en la dieta, muy poca vitamina D en la dieta, beber demasiado alcohol, altos niveles de estrés, ciertas condiciones crónicas (por ejemplo, alto colesterol, diabetes, enfermedad del riñon y apnea del sueño) y uso de ciertos fármacos (por ejemplo, anticonceptivos orales, anfetaminas, pildoras de dieta y algunas medicaciones para la gripe y alergia) .

El tratamiento de un paciente' quien es diagnosticado con la aterosclerosis se puede iniciar inmediatamente en la diagnosis. Sin embargo, es preferible tratar profilácticamente a un paciente quien tiene signos tempranos de, o un predisposición a desarrollar, aterosclerosis. Los signos tempranos y factores de riesgo para aterosclerosis incluyen la edad, una historia familiar de aneurisma o enfermedad cardiaca temprana, hipertensión, alto colesterol, altos triglicéridos , resistencia a insulina, diabetes, obesidad, habito de fumar, falta de actividad física, dieta no saludable y alto nivel de proteina C-reactiva .

El método de la invención para inhibir la hiperpermeabilidad vascular comprende administrar una cantidad efectiva de un ingrediente activo, en donde el ingrediénte activo comprende una dicetopiperazina, un profármaco de dicetopiperazina o una sal farmacéuticamente aceptable de cualquiera de estos, a un animal en necesidad del mismo para inhibir la hiperpermeabilidad vascular. Las dicetopiperazinas de la invención tienen la siguiente fórmula : en donde R1 y R2, que pueden ser los mismos o diferentes, cada uno es : una cadena lateral de un aminoácido, en donde el aminoácido es glicina, alanina, valina, norvalina, ácido a-aminoisobutirico, ácido 2, 4- diaminobutirico, ácido 2 , 3-diaminobutirico, leucina, isoleucina, norleucina, serina, homoserina, treonina, ácido aspártico, asparagina, ácido glutámico, glutamina, lisina, hidroxilisina, histidina, . arginina, homoarginina, citrulina, fenilalanina, p-aminofenilalanina, tirosina, triptófano, tiroxina, cisteina, homocisteina, metionina, penicilamina u ornitina; R1 es -CH2-CH2-CH2- o -CH2-CH (OH) -CH2- y junto con el nitrógeno del anillo adyacente forma prolina o hidroxiprolina y/o R2 es -CH2-CH2-CH2- o -CH2- CH(OH)-CH2- y junto con el nitrógeno del anillo adyacente forma prolina o hidroxiprolina; o un derivado de una cadena lateral de un aminoácido, en donde el aminoácido es uno de aquellos citados en (a), y la cadena lateral derivada tiene: (i) un grupo -NH2 reemplazado por un grupo -NHR3 o -N(R3)2, en donde cada R3 independientemente puede ser un alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo o heteroarilo sustituido o no sustituido; (ii) un grupo -OH reemplazado por un grupo -O-PO3H2 o -OR3, en donde cada R3 independientemente puede ser un alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo o heteroarilo sustituido o no sustituido; (iii) un grupo -COOH reemplazado por un grupo - COOR3, en donde cada R3 independientemente puede ser un alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo- o heteroarilo sustituido o no sustituido; (iv) un grupo -COOH reemplazado por un grupo - CON(R4)2, en donde cada R4 independientemente puede ser H o alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo o heteroarilo sustituido o no sustituido; (v) un grupo -SH reemplazado por -S-S-CH2-CH (NH2) - COOH o -S-S-CH2-CH2-CH (NH2) -COOH; (vi) un grupo -CH2- reemplazado por un grupo - CH (NH2) - o -CH (OH) -; (vii) un grupo -CH3 reemplazado por un grupo -CH2- NH2 o -CH2-OH; y/o (viii) un H que se une a un átomo de carbono reemplazado por un halógeno.

Mucho más preferidas son las dicetopiperazinas en donde R1, R2 o ambos es la cadena lateral de ácido aspártico o ácido glutámico o un derivado de tal cadena en donde el grupo -COOH se reemplaza por un grupo-COOR3 o un grupo -CON(R4)2/ en donde R3 y R4 son como se definen en lo anterior. De este grupo de. compuestos, se prefieren las dicetopiperazinas que comprenden las cadenas laterales de ácido aspártico y alanina (Asp-Ala DKP o DA-DKP) , las cadenas laterales de ácido glutámico y alanina (Glu-Ala DKP o EA-DKP) , las cadenas laterales de tirosina y ácido aspártico (Tyr-Asp DKP o YDDKP) , las cadenas laterales de tirosina y ácido glutámico (Tyr-Glu DKP o YEDKP) y derivados de las cadenas laterales de ácido aspártico o ácido glutámico de estos cuatro dicetopiperazinas en donde el grupo -COOH se reemplaza por un grupo -COOR3 o un grupo -CON(R4)2, en donde R3 y R4 se definen en lo anterior. Mucho más preferido es DA-DKP.

También se prefieren dicetopiperazinas en donde R1, R2 o ambos son cadenas laterales hidrofóbicas o derivados de cadena lateral hidrofóbica. Por "derivado de cadena lateral hidrofóbica" se propone que la cadena lateral derivada es hidrofóbica. En particular, se prefieren dicetopiperzinas en donde R1 y/o R2, que pueden ser los mismos o diferentes, cada uno es la cadena lateral de glicina, alanina, valina, norvalina, ácido oc-aminobutirico, leucina, isoleucina, norleucina, metionina, fenilalanina, triptófano o tirosina, y/o R1 y/o R2 es -CH2-CH2-CH2- y junto con el átomo (s) de nitrógeno adyacente forma prolina. De este grupo, se prefieren las dicetopiperazinas en donde R1 y/o R2, que pueden ser los mismos o diferentes, cada uno es la cadena lateral de glicina, alanina, valina, norvalina, ' ácido a-aminóbutírico, leucina, isoleucina, norleucina, metionina o tirosina, más de preferencia alanina, valina, norvalina, ácido a-aminobutirico, leucina, isoleucina o norleucina.

Las dicetopiperazinas preferidas adicionales son aquellas en donde R1, R2 o ambas cadenas laterales son cadenas laterales neutras o derivados de cadenas laterales neutras. Por "derivado de cadena lateral neutra" se propone que la cadena lateral derivada es neutra. En particular, se prefieren dicetopiperzinas en donde R1 y/o R2, que pueden ser los mismos o diferentes, cada uno es la cadena lateral de asparagina, glutamina, serina, homoserina, treonina, tirosina, cisteina o metionina. De este grupo, se prefieren dicetopiperazinas en donde R1 y/o R2, que pueden ser los mismos o diferentes, cada uno es la cadena lateral de asparagina, glutamina, serina o treonina.

También se prefieren dicetopiperazinas en donde R1, R2 o ambos son cadenas laterales básicas o derivados de cadena lateral básica. Por "derivado de cadena lateral básica" se propone que la cadena lateral derivada es básica. En particular, se prefieren dicetopiperazinas en donde R1 y/o R2, que pueden ser los mismos o diferentes, cada uno es la cadena lateral de citrulina, ácido 2 , 4-diaminobutirico, ácido 2 , 3-diaminobutirico, lisina, hidroxilisina, histidina, arginina, homoarginina, p-aminofenilalanina u ornitina. De este grupo, se prefieren las dicetopiperazinas en donde R1 y/o R2, que pueden ser los mismos o diferentes, cada uno es la .cadena lateral de citrulina, ácido 2, -diaminobutirico, ácido 2 , 3-diaminobutirico, lisina, arginina, homoarginina o ,p-aminofenilalanina .

Las dicetopiperazinas preferidas adicionales son aquellas en, donde R1, R2 o ambos, es la cadena lateral de metionina, la cadena lateral de arginina o derivado de estas cadenas laterales. Mucho más preferido de este grupo es dicetopiperazina en donde R1 es la cadena lateral de metionina y R2 es la cadena lateral de la. arginina (Met-Arg DKP o MR-DKP) .

Por "reemplazado" se propone que, con referencia a la fórmula de una cadena lateral de aminoácidos, el grupo especificado se reemplaza por el otro grupo especificado. Por ejemplo, la fórmula de la cadena lateral de isoleucina es -CH (CH3) -CH2-CH3. Si el grupos -CH3 terminada se reemplaza con in grupo -CH2-OH, entonces la fórmula de la cadena lateral isoleucina derivada resultante sería -CH (CH3) CH2-CH2-OH . Como otro ejemplo, la fórmula de la cadena lateral de alanina es-CH3. Si uno de los átomos de hidrógeno se reemplaza por un átomo de cloro, entonces la cadena lateral de alanina derivada resultante sería -CH2-C1. Observar que la cadena lateral de glicina es-H, y si este H es reemplazado por cloros (u otro halógeno) , la cadena lateral resultante será -Cl, con. el átomo de cloro unido a carbono del anillo (por ejemplo, R1 = -Cl) .

Por "cadena lateral" de un aminoácido se propone que la porción del aminoácido unida a la cadena principal i NH2-CH-COOH común de todos los aminoácidos listados en lo anterior. Por ejemplo, la cadena lateral de glicina es -H, la cadena lateral de alanina es -CH3 y la cadena lateral de serina -CH2OH.

Por "hidrofóbico" se propone una cadena lateral o derivado de cadena lateral que está sin carga en pH fisiológico y es repelida por una solución acuosa.

Por "neutro" se propone una cadena lateral o un derivado de cadena lateral que está sin carga en pH fisiológico.

Por "básico" se - propone una cadena lateral o derivado de cadena lateral que se carga positivamente en pH fisiológico.

Por "acidico" se propone una cadena lateral o derivado de cadena lateral que se carga negativamente en pH fisiológico .

Por "alquilo" se propone un hidrocarburo de cadena recta o ramificada, saturado que contiene de 1-10 átomos de carbono, de preferencia 1-6 átomos de carbono. "Alquilo inferior" significa un hidrocarburo de cadena recta o ramificada saturado que contiene 1-6 átomos de carbono.

Por "cicloalquilo" se propone un hidrocarburo cíclico saturado que contiene por lo menos un anillo, cada anillo contiene por lo menos tres átomos de carbono. De 'preferencia, el cicloalquilo contiene un anillo de 4-8 átomos de carbono · ~ Por "heterocicloalquilo" se propone un cicloalquilo que tiene uno o más de los átomos de carbono en el anillo de por lo menos uno de los anillos reemplazados por .un O, S y/o N.

Por "arilo" se propone un grupo aromático que tiene por lo menos un anillo aromático (por ejemplo, fenilo) .

Por "alquilarilo" se propone un alquilo inferior que tiene un H reemplazado por un arilo (por ejemplo, -CH2-C6H5 o -CH3CH(C6H5)CH3) .

Por "arilalquilo" se propone un arilo que tiene un H reemplazado por un alquilo inferior (por ejemplo, -C6H4-CH3) .

Por "heteroarilo" se propone un arilo que tiene uno o más de los átomos de carbono en el anillo de por lo menos uno de los anillos reemplazados por un 0, S y/o N.

Por "sustituido" se propone que la porción 'es sustituida con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo siguiente: -OH, NH2, -SH, -COOH y/o un átomo de halógeno.

Por "halógeno" se propone cloro, flúor, bromo o yodo. Se prefiere cloro o bromo.

Métodos para hacer dicetopiperazinas son bien conocidos en la técnica, y estos métodos se pueden emplear para sintetizar los dicetopiperazinas de la invención. Ver, por ejemplo, las Patentes de los Estados Unidos Nos. 4, 694,081, 5,817, 751,: 5, 990, 112, 5, 932,579 y 6, 555,543, la Publicación de Solicitud de Patente de los Estados Unidos i Número 2004/0024180, Solicitudes de PCT WO 96/00391 y WQ 97/48685, y Smith y colaboradores, Bioorg. Med. Chem. Letters, 8,2369-2374(1998), las descripciones completas de las cuales se incorporan en la presente por referencia.

Por ejemplo, las dicetopiperazinas se pueden preparar al primero sintetizar dipéptidos. Los dipéptidos se :pueden sintetizar por métodos bien conocidos en la técnica utilizando L-aminoácidos , D-aminoácidos o una combinación de D- y L-amino ácidos. Se prefieren los métodos sintéticos de péptidos en fase sólida. Por supuesto, los dipéptidos también son disponibles comercialmente de numerosas fuentes, incluyendo Sigma-Aldrich, St Louis, O (síntesis principalmente ajustadas), Phoenix Pharmaceuticals, Inc., Belmont, CA (síntesis ajustada), Fisher Scientific (síntesis ajustada) y Advanced ChemTech, Louisville, KY.

Una vez que el dipéptido se sintetiza o se compra, este se ciclisa para formar una dicetopiperazina . Esto se puede realizar por una variedad de técnicas.

Por ejemplo, la Publicación de Solicitud de Patente de los Estados Unidos Número 2004/0024180 describe un método para ciclisar dipéptidos. Brevemente, el dipéptido se calienta en un solvente orgánico, mientras que se remueve agua por destilación. De preferencia, el solvente orgánico es un azeótropo de : bája ebullición con agua, tal como acetonitrilo, alcohol alilico, benceno,, alcohol bencílico, n-butanol, 2-butanol, t-butanol, éster butilico de ácido acético, tetracloruro de carbono, clorobenceno, cloroformo, ciclohexano, 1 , 2 -dicloroetano, dietilacetal , dimetilacetal , éster etílico del ácido acético, heptano, metilisobutilcetona, 3-pentanol, tolueno y xileno. La temperatura depende de la velocidad de reacción en la cual toma lugar la ciclisación y en el tipo de agente formador de azeótropo utilizado. La reacción de preferencia se lleva, a cabo a 50-200°C, más de preferencia 80-150°C. El intervalo de p'H en el cual toma lugar la ciclisación fácilmente se puede determinar por la persona experta . en la técnica. Será ventajoso 2-9, de preferencia 3-7.' Cuando uno o ambos de los aminoácidos del dipéptido tiene, o su derivado tiene, un grupo carboxilo en su cadena lateral (por ejemplo, ácido aspártico o ácido glutámico) , el dipéptido de preferencia se cicliza como se descrito en la Patente de los Estados Unidos No. 6,555,543. Brevemente, el dipéptido con el carboxilo de cadena lateral todavía protegido, se calienta bajo condiciones neutras. Típicamente, el dipéptido será calentado de aproximadamente 80°C a aproximadamente 180°C, de preferencia a aproximadamente 120°C. El solvente será un solvente neutro. Por ejemplo, el disolvente puede comprender un alcohol (tal- como butanol, metanol, etanol y alcoholes superiores,, pero no fenol) y un co-solvente azeotrópico (tal como tolueno, benceno o xileno) . De preferencia, el alcohol es butan-2-ol, y el co-solvente azeotrópico es tolueno. El calentamiento se continúa hasta que se completa la reacción, y tales tiempos se puede determinar empíricamente. Típicamente, el dipéptido será ciclizado al reflujarlo durante aproximadamente 8-24 horas, de preferencia aproximadamente 18 horas. Finalmente, el grupo-protector se remueve de la dicetopiperazina . Al hacerlo de esta manera, el uso de ácidos fuertes (ácidos minerales', tales como ácido sulfúrico o clorhídrico) , bases fuertes (bases alcalinas, tal como hidróxido de potasio o hidróxido de sodio) , y agentes reducción fuertes (por ejemplo, hidruro de aluminio de litio) se debe evitar, con el fin de mantener la quiralidad del compuesto final.

Los dipéptidos hechos sobre resinas de fase sólida se puede, ciclizar y liberar de la resina en una etapa. Ver, por ejemplo, la Patente de los Estados Unidos No. 5,817,751. Por ejemplo, la resina que tiene un dipéptido N-alquilado unido se suspende en tolueno o tolueno/etanol, en la presencia de ácido acético (por ejemplo, 1%) o trietilamina (por ejemplo, 4%). Típicamente, las condiciones de ciclización básicas son preferidas por sus tiempos de ciclización más rápidos.

Para preparar dicetopiperazinas en donde las cadenas laterales de aminoácidos son derivadas, los derivados de aminoácido se pueden utilizar en la síntesis de los dipéptidos, los dipéptidos pueden ser derivados y/o las dicetopiperazinas pueden ser. derivadas, como es conocido en la técnica. Ver, por ejemplo, aquellas referencias citadas en lo anterior.

Otros métodos para ciclizar dipéptidos y para hacer dicetopiperazinas son conocidos en la técnica y se pueden utilizar en la preparación de dicetopiperazinas útiles en la práctica de la invención. Ver, por ejemplo, aquellas referencias' listadas en lo anterior. Además, muchas dicetopiperazinas adecuadas para uso en la presente invención se pueden hacer de proteínas y péptidos como es descrito en la Patente de los Estados Unidos No. 7,732,403, la descripción completa de la cual se incorpora en la presente por referencia. Además, las dicetopiperazinas para uso en la práctica de la invención se pueden obtener comercialmente de, por ejemplo, Syngene, India o Hemmo Farmacéutica Ptv. Ltd. India (ambas síntesis ajustadas) .

Las dicetopiperazinas incluyen todos . los posibles estereoisómeros que se pueden obtener ' al variar la configuración de ' los centros quirales individuales, ejes o superficies. En otras palabras, los dicetopiperazinas incluyen todos los posibles diastereómeros, así como isómeros ópticos (enantiómeros) .

"Profármaco" " significa•¦'¦cualquier - compuesto que libera un fármaco de origen activo (una- dicetopiperaziná en este caso) in vivo cuando tal profármaco se administra a un animal. Los profármacos de dicetopiperazinas incluyen dicetopiperazinas derivadas con cualquier . grupo que puede ser segmentado in vivo para generar la dicetopiperaziná. Ejemplos de profármacos incluyen ésteres.

Las sales fisiológicamente aceptables de la dicetopiperazinas y profármacos de¦ la invención también se pueden utilizar' en la práctica de la invención. Las sales fisiológicamente aceptables incluyen sales no tóxicas convencionales, tales como sales derivadas de ácidos inorgánicos (tal como clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, fosfórico, nítrico, y los similares), ácidos orgánicos (tales como ácido acético, propiónico, succínico, 'glicólico, esteárico, láctico, málico, tartárico, cítrico, glutámico, aspártico, benzoico, salicílico, oxálico, ascórbico y los similares) o base (tal como el hidróxido, carbonato o bicarbonato de un catión o metal o cationes orgánicos farmacéuticamente derivados de N, N-dibenciletilendiamina , D-glucosamina o etilerídiamina) . Las sales se preparan de una manera convencional, por ejemplo, al neutralizar la forma de ;base libre del compuesto con un ácido.

Como se mencionó en lo anterior, una dicetopiperazina de la fórmula I, un profármaco de dicetopiperazina de la fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable de cualquiera de estos se puede utilizar para inhiben la hiperpermeabilidad vascular y 'para tratar una enfermedad o condición mediada por la hiperpermeabilidad vascular. Para hacerlo de esta manera, la dicetopiperazina, profármaco o sal farmacéuticamente aceptable se administra a un .animal en necesidad de tratamiento. De preferencia, el animal es un mamífero, tal como conejo, cabra, perro, gato, caballo o humano. Mucho más de preferencia, el animal es un humano .

Una dicetopiperazina de la fórmula I, un profármaco de una dicetopiperazina de la fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable de cualquiera de estos se utiliza en la presente invención como un ingrediente activo. "Ingrediente activo" se utiliza en la presente para dar a entender un compuesto que tiene actividad terapéutica, farmacéutica o farmacológica, y particularmente, la actividad terapéutica, farmacéutica o farmacológica -descrita en la presente. El profármaco de dicetopiperazina, profármaco o sal no se utiliza en la presente invención como un portador o como parte de un sistema portador de una composición farmacéutica como es descrito en, por ejemplo, las Patentes de los Estados Unidos Nos. 5,976,569, 6,099,856, 7,276,534 y las Solicitudes de PCT WO 96/10396, WO 2006/023943, WO 2007/098500, WO 2007/121411 y WO 2010/102148.

Las formas de- dosificación efectivas, modos de administración y cantidades de dosificación ¦ para los compuestos de la invención (es decir, una dicetopiperazina de fórmula I, un profármaco de una dicetopiperazina de la fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable de cualquiera de estos) se puede determinar empíricamente utilizando la guía proporcionada en la presente. Es entendido por aquellos expertos en la técnica que la cantidad de dosificación variará con la enfermedad o condición particular que es tratada, la severidad de la enfermedad o condición, la ruta(s) de administración, la duración del tratamiento, la identidad de cualquiera de estos fármacos que son administrados al animal, la edad, tamaño y especie del animal, y factores similares conocidos en las técnicas médicas y veterinarias. En general, una dosis diaria adecuada de un compuesto de la presente invención será aquella cantidad del compuesto que es la dosis más baja efectiva para producir un efecto terapéutico. Sin embargo, la dosificación diaria será determinada por un médico o veterinario asistente dentro del alcance del buen juicio médico. Si se desea, la dosis diaria efectiva se puede administrar como dos, tres, cuatro, cinco, seis o más sub-dosis, administradas por separado en intervalos apropiados por todo el día. La administración del compuesto debe ser continua hasta que se logra una respuesta aceptable.

En particular, una cantidad de dosificación efectiva de un compuesto de la . invención para inhibir la hiperpermeabilidad vascular será de 10 ng/kg/día a 225 mg/kg/día, de preferencia de .500 ng/kg/día a 150 mg/kg/día, mucho más de preferencia de 1 mg/kg/día a 30 mg/kg/día. Cuando se da oralmente a un humano adulto, - la dosis de preferencia será de 1 mg/día a aproximadamente 10 g/día, más preferencia la dosis será de 60 mg/día mucho más de preferencia será aproximadamente 6 g/día, mucho más de preferencia la dosis de aproximadamente' 100 mg/día a aproximadamente 1200 mg/día, de preferencia dada en varias dosis.

La invención también proporciona un método para modular el citoesqueleto de las células endoteliales en un animal. La modulación del citoesqueleto puede reducir la hiperpermeabilidad vascular e incrementar la hipopermeabilidad vascular (por ejemplo, permeabilidad abajo de los niveles básales), para de esta manera regresar el 'endotelio a la homeostasis. En consiguiente, estas enfermedades y condiciones mediadas por la hiperpermeabilidad vascular se pueden tratar (ver en lo anterior) y esas enfermedades y condiciones mediadas por la hipopermeabilidad vascular también se pueden tratar. El último tipo de enfermedades y condiciones incluyen hígado envejecido, , aterogénesis , aterosclerosis, cirrosis, fibrosis del hígado falla del hígado y cánceres de hígado primarios y metastáticos .

El método para modular el citoesqueleto de células endoteliales comprende administrar una cantidad efectiva de una dicetopiperazina de la fórmula I, un profármaco de una dicetopiperazina de la fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable de cualquiera de estos, el animal. Las dicetopiperazinas son las mismas como aquellas descritas en lo anterior para inhibir la hiperpermeabilidad vascular, y "animal" tiene el mismo significado como se expuso en lo anterior .

Las formas de dosificación efectivas, modos de administración y< cantidades de dosificación para los compuestos de la invención (es decir, una dicetopiperazina de fórmula I, un profármaco de una dicetopiperazina de la fórmula' I o una sal farmacéuticamente aceptable de cualquiera de estos) para modular el citoesqueleto se puede determinar empíricamente utilizando la guía proporcionada en la presente. Se entiende por aquellos expertos en la técnica que la cantidad de dosificación variará con la enfermedad o afección particular que es tratada, la severidad de la enfermedad o condición, las ruta(s) de administración, la duración del tratamiento, la identidad de cualquiera de otros fármacos que es administrado al animal, la edad, tamaño y especie del animal, y factores similares conocidos en las técnicas médica y veterinaria. En general, una dosis diaria adecuada de un compuesto de la presente invención será aquella cantidad del compuesto que es la dosis más baja efectiva para producir un efecto terapéutico. Sin embargo, la dosificación diaria será determinada por un médico o veterinario asistente dentro del alcance del buen juicio médico. Si es deseado, la dosis diaria efectiva se puede administrar como dos, tres, cuatro, cinco, seis o más sub-dosis, administradas por separado en intervalos apropiados por todo el dia. La administración del compuesto debe ser continua hasta que se logre una respuesta aceptable.

En particular, una cantidad de dosificación efectiva de un compuesto de la invención para modular el citoesqueleto de células endoteliales será de 10 ng/kg/dia a 225 mg/kg/dia, de preferencia 500 ng/kg/dia a 150 mg/kg/dia, más de preferencia de 1 mg/kg/dia a 30 mg/kg/dia. Cuando se da oralmente a un humano adulto, la dosis se preferencia será de aproximadamente 1 mg/dia a aproximadamente 10000 mg/dia, y más de preferencia, la dosis será de aproximadamente 60 mg/dia a aproximadamente 6000 mg/dia, mucho más de preferencia la dosis será de aproximadamente 100 mg/dia a aproximadamente 1200 mg/dia, de preferencia dada en varias dosis .

Los compuestos de la presente invención (es decir, dicetopiperazinas de fórmula I, profármacos de la misma y sales farmacéuticamente aceptables de cualquiera de estos) se pueden administrar a un paciente animal para terapia mediante cualquier ruta adecuada de administración, incluyendo oralmente, nasalmente, parenteralmente (por ejemplo, intravenosamente, intraperitonealmente, subcutáneamente o intramuscularmente) , transdérmicamente, intraocularmente y tópicamente (incluyendo bucalmente y sublingualmente) . Se prefiere en general la administración oral para cualquier enfermedad o condición tratable de acuerdo con la invención. Las rutas de administración preferidas para el tratamiento de enfermedades y condiciones del ojo son oralmente, intraocularmente y tópicamente. Mucho más preferido es oralmente. Las rutas preferidas de administración para el tratamiento de enfermedades y condiciones del cerebro son oralmente y parenteralmente. Mucho más preferido es oralmente.

Mientras que es posible para un compuesto de la presente invención que sea administrado solo, es preferible administrar el compuesto como una formulación (composición) farmacéutica. Las composiciones farmacéuticas de la invención comprenden un compuesto o compuestos de la invención como ingrediente activo en mezcla con uno o más portadores farmacéuticamente aceptables y, opcionalmente, con uno o más de otros compuestos, fármacos u otros materiales. Cada portador debe ser "aceptable" en el sentido de ser compatible con los otros ingredientes de la formulación y no perjudicial al animal. Los portadores farmacéuticamente aceptables son bien conocidos en la técnica. Sin considerar la ruta de administración seleccionada, los compuestos de la presente invención se formulan en formas de dosificación farmacéuticamente aceptables por métodos convencionales conocidos para aquellos de habilidad en la técnica. Ver, por ejemplo, Remington' s Pharmaceutical Sciences .

Las formulaciones de la invención adecuadas para administración oral pueden estar en forma de cápsulas, saquitos, pildoras, tabletas, polvos, gránulos o como una solución o una suspensión en un liquido acuoso o no acuoso, o emulsiones de aceite-en-agua o agua-en-aceite, o como un elixir o jarabe, o como pastillas (utilizando una base inerte, tal como gelatina y glicerina o sacarosa y acacia) , y los similares, cada una que contiene una cantidad predeterminada de un compuesto o compuestos de la presente invención como un ingrediente activo. Un compuesto o compuestos de la presente invención también se pueden administrar, bolo, electüario o pasta.

En formas de dosificación sólidas de la invención para administración oral (cápsulas, tabletas, pildoras, grageas, polvos, gránulos y los similares) , el ingrediente activo (es decir, una dicetopiperazina de la fórmula I, un profármaco de una dicetopiperazina de la fórmula I, un sal farmacéuticamente aceptable de cualquiera de estos, o combinaciones, de los anteriores) se" mezcla con uno o más portadores farmacéuticamente aceptables, tales como citrato de sodio o fosfato dicálcico, y/o cualquiera de los siguientes: (1) rellenadores o extendedores, tales como almidones, lactosa, sacarosa/ glucosa, manitol y/o ácido silícico; (2) aglutinantes, tales como, por ejemplo, carboximetilcelulosa, alginatos, gelatina, polivinilpirrolidona, sacarosa y/o acacia; (3) humectantes, tales como glicerol; (4) agentes desintegrantes, tales como, agar-agar carbonato de calcio, almidón de papa o tapioca, ácido algínico, ciertos silicatos^ y carbonato sódico; (5) agentes retardantes de solución, tal como parafina; (6) aceleradores de absorción, tales como compuestos de amonio cuaternario; (7) agentes humectantes, tales como, por ejemplo, alcohol cetílico y monoestearato de glicerol; (8) absorbentes, tales como caolín y arcilla bentonita; (9) lubricantes, tales como talco, estearato de calcio, estearato de magnesio, polietilenglicoles sólidos, lauril sulfato de sodio y mezclas de los mismos y (10) agentes colorantes. En el caso de cápsulas, tabletas y pildoras, las composiciones farmacéuticas también ' pueden comprender agentes amortiguantes. Las composiciones sólidas de un tipo particular se pueden emplear como rellenadores en cápsulas de gelatina de relleno blando y duro, utilizando tales excipientes como . lactosa o azúcares · de leche, asi como polietilenglicoles de alto peso molecular y los similares.

Una tableta se puede hacer mediante la compresión o moldeo opcionalmente con uno o más ingredientes adicionales. Las. tabletas comprimidas se pueden preparar utilizando aglutinante (por ejemplo, gelatina o hidroxipropilmetilcelulosa) , lubricante, diluyente inerte, conservados, desintegrante (por ejemplo, almidón glicolato de sodio o carboximetilcelulosa de sodio reticulada) , agente activo en la superficie o dispersante. Las tabletas moldeadas se pueden hacer al moldear en una máquina adecuada una mezcla del compuesto en polvo humedecido con un diluyente inerte liquido .

Las tabletas y otras formas de dosificación sólidas de las composiciones farmacéuticas de la presente invención, tales como grageas, " cápsulas, pildoras y gránulos, opcionalmente se puede marcar o preparar con recubrimientos y cubiertas, tales como recubrimientos entéricos y otros recubrimientos bien conocidos en la técnica de formulación farmacéutica. También se pueden formular para proporcionar liberación lenta o controlada del ingrediente activo en el mismo utilizando, por ejemplo, hidroxipropilmetilcelulosa en proporciones . variables para proporcionar el perfil de liberación deseado, otras matrices de polímero, liposomas y/o microesferas . Se pueden esterilizar mediante, por ejemplo, filtración a' través de' un filtro retenedor de bacterias. Las composiciones también pueden contener opcionalmente agentes opacificantes y pueden ser de una composición que liberen el ! ingrediente activo solamente, o preferentemente, en una cierta porción del tracto gastrointestinal, opcionalmente, de una manera retardada. Ejemplos de composiciones de incrustación que se pueden utilizar incluyen sustancias poliméricas y ceras. El ingrediente activo también puede estar en forma micróencapsulada .

Las formas de dosificación líquidas para administración oral de los compuestos dé la invención incluyen emulsiones, microemulsiones , soluciones, suspensiones, jarabes y elixires farmacéuticamente aceptables. Además del ingrediente activo, las formas' de dosificación líquidas pueden contener diluyentes inertes comúnmente usados en la técnica, tales como, por ejemplo, agua u otros solventes, agentes .. solubilizantes y emulsificadores , tales como alcohol etílico, alcohol isopropílico, carbonato de etilo, acetato de etilo, alcohol bencílico, benzoato de bencilo, propilenglicol, 1,3-butilenglicol, aceites (en particular, aceites de semilla de algodón, de nuez molida, maíz, germen, oliva, ricino y ajonjolí) , glicerol, alcohol tetrahidrofurílico, polietilenglicoles y ásteres de ácidos grasos de sorbitán, y mezclas de los mismos.

Además de diluyentes inertes, las composiciones orales también pueden incluir adyuvantes tales como agentes humectantes, agentes emulsionantes y de suspensión, agentes de adulzamiento, saborizantes , colorantes, perfumantes y conservadores .

Las suspensiones, además del ingredienté activo, pueden contener agentes de suspensión como, por ejemplo, alcoholes isoestearílicos etoxilados, ásteres de polioxietileno sorbitol y sorbitán de poliexitileno, celulosa microcristalina, metahidróxido de aluminio, bentonita, agar-agar y tragacanto y mezclas de los mismos.

La invención también proporciona productos farmacéuticos adecuados para el tratamiento del ojo. Tales productos farmacéuticos incluyen composiciones farmacéuticas, dispositivos e implantes (que pueden ser composiciones o dispositivos ) .

Las formulaciones farmacéuticas (composiciones) para la inyección infraocular de un compuesto o compuestos de la invención en la bola del ojo incluyen soluciones, emulsiones, suspensiones, partículas, cápsulas, microesferas , liposomas, matrices, etc. Ver, por ejemplo, la Patente de los Estados Unidos No. 6,060,463, la Publicación de Solicitud de Patente de los Estados Unidos No. 2005/0101582, y la Solicitud de PCT 2004/043480, descripciones completas de las cuales se incorporan en la presente por referencia. Por ejemplo, una formulación farmacéutica para inyección intraocular puede comprender uno o más compuestos de la invención en combinación con una o más soluciones, suspensiones o emulsiones acuosas o no acuosas isotónicas, estériles, farmacéuticamente aceptables, que pueden contener antioxidantes, amortiguadores, agentes de suspensión, agentes de espesamiento o ¦ agentes aumentadores de viscosidad (tal como un polímero de ácido hialurónico) . Ejemplos de portadores acuosos y no acuosos adecuados incluyen agua, solución salina (de preferencia 0.9%), dextrosa en agua (de preferencia 5%), amortiguadores, dimetilsulfóxido, alcoholes y polioles (tal como glicerol, propilenglicol, polietilenglicol y los similares) . Estos composiciones también pueden contener adyuvantes tales como agentes humectantes y agentes emulsificantes y agentes dispersantes. Además, la absorción prolongada de la forma farmacéutica inyectable se puede originar mediante la inclusión de agentes que retrasan la absorción tales como polímeros y gelatina. Las formas de depósito inyectables se pueden hacer al incorporar en fármaco en microcápsulas o microesferas hechas de polímeros biodegradables tal como polilactida-poliglicolida . Ejemplos de otros polímeros biodegradables incluyen poli (ortoésteres) , ácido pol°i (glicólico) , ácido poli (láctico) , policaprolactona y poli (anhídridos) . Las formulaciones inyectables de depósitos también se preparan al atrapar ei fármaco en liposomas (compuesto de los ingredientes usuales, tal como dipalmitoil fosfatidilcolina) o microemulsiones que son compatibles con el tejido del ojo. Dependiendo de la relación de fármaco a polímero o lipido, la naturaleza del polímero o componentes de lipídidos particulares, tipo de liposoma empleado, y si las microcápsulas o . microesferas están recubiertas o no recubiertas, se pueden controlar la velocidad de liberación del fármaco de las microcápsulas, microesferas y liposomas.

Los compuestos de la invención también se pueden administrar quirúrgicamente como un implante ocular. Por ejemplo, un recipiente de depósito que tiene una pared difusible de alcohol polivinílico o acetato de polivinilo y que contiene un compuesto o compuestos de la invención se puede implantar dentro o sobre la esclerótica. Como otro ejemplo, un compuesto o compuestos de la invención se pueden incorporar en una matriz polimérica hecha de un polímero, tal como una policaprolactona, ácido poli (glicólico) , ácido poli (láctico), poli (anhídrido), o un lipido, tal como ácido sebácico, y se pueden implantar en la esclerótica o en el ojo. Esto usualmente se realiza con el animal que recibe una anestésico tópico local y utilizando una incisión pequeña hecha detrás de la córnea. La matriz luego se inserta a través de la incisión y se sutura a la esclerótica.

Los compuestos de la invención también pueden administrar tópicamente "al ojo, y una modalidad preferida de la invención es una composición farmacéutica tópica adecuada para la aplicación al ojo. Las composiciones farmacéuticas tópicas adecuadas para aplicación al ojo incluyen soluciones, suspensiones, dispersiones, gotas, geles, hidrogeles y ungüentos. Ver, por ejemplo, la Patente de los Estados Unidos No. 5,407,926 y las Solicitudes de PCT 2004/058289, 01/30337 y 01/68053, las descripciones completas de todas las cuales se incorporan en la presente por referencia.

Las formulaciones tópicas adecuadas para aplicación al ojo comprenden uno o más compuestos de la invención en una base acuosa o no acuosa. Las formulaciones tópicas también pueden incluir aumentadores de absorción, aumentadores de permeación, agentes de espesamiento, aumentadores de viscosidad, agentes para ajustar y/o mantener el pH, agentes para ajustar la presión osmótica, conservadores, surfactantes, soluciones amortiguadoras, sales (de preferencia cloruro de sodio) , agentes de suspensión, agentes dispersantes, agentes solubilizantes, estabilizadores y/o agentes de tonicidad. Las formulaciones tópicas adecuadas para la aplicación en el ojo de preferencia comprenderán un aumentador de absorción o permeación para promover la absorción o permeación del compuesto o compuestos de la invención en el ojo ylo un agente de espesamiento o aumentador de viscosidad que es capaz de incrementar el tiempo de residencia - un · compuesto o compuestos de la invención en el ojo. Ver las Solicitudes de P.CT 2004/058289, 01/30337 y 01/68053. Los aumentadores de absorción/permeación ejemplares incluyen metilsulfonilmetano, solo o en combinación con dimetilsulfóxido, ácidos carboxilicos y surfactantes . Los agentes de espesamiento ejemplares y aumentadores de viscosidad incluyen dextranos, polietilenglicoles , polivinilpirrolidona , geles de polisacáridos , Gelrite®, polímeros celulósicos (tales como hidroxipropilmetilcelulosa) , polímeros que contienen carboxilo, (tales como polímeros o copolímeros de ácido acrílico) , alcohol polivinílico y ácido hialurónico o una sal del mismo.

Las formas de dosificación líquida (por ejemplo, soluciones, suspensiones, dispersiones y gotas) adecuadas para el tratamiento del ojo se pueden preparar, por ejemplo, disolver, dispersar, suspender, etc. un compuesto o compuestos de la invención en un vehículo, tal como, por ejemplo, agua, solución salina, dextrosá acuosa, glicerol, etanol y los similares, para formar una solución, dispersión o suspensión. Si es deseado, la formulación farmacéutica también puede contener cantidades menores de sustancias auxiliares no tóxicas, tales como agentes humectantes o emulsionantes, agentes 'amortiguadora del pH y los similares, por ejemplo el acetato de sodio, monolaurato de sorbitán, trietanolamina, acetato de sodio, oleato de trietanolamina, etc.

Las soluciones y suspensiones' acuosas adecuadas para el tratamiento del ojo pueden incluir, además de un compuesto o compuestos de la invención, conservadores, surfactantes, soluciones amortiguadoras, sales (de preferencia cloruro de sodio) agentes de tonicidad y agua. Si se utilizan suspensiones, los tamaños de las partículas deben ser menores que 10 µp\ para minimizar la irritación del ojo. : Si se utilizan soluciones o suspensiones, la cantidad suministrada al ojo no debe exceder de 50 µ? para evitar la inundación excesiva del ojo.

Las suspensiones coloidales adecuadas para tratamiento del ojo se forman generalmente de micropartículas (es decir, microesferas , nanoesferas, microcápsulas o nanocápsulas, donde las microesferas y nanoesferas son generalmente partículas monolíticas de una matriz de polímero en el cual la formulación se atrapa, se adsorbe o de otra manera se contiene, mientras que con las microcápsulas y nanocápsulas la formulación realmente se encapsula) . El limite superior para el tamaño de estas microparticulas es aproximadamente 5µ a aproximadamente 10µ.

Los ungüentos oftálmicos adecuados para el tratamiento . del ojo incluyen un compuesto o compuestos de la invención en una base apropiada, tal como aceite mineral, lanolina liquida, petrolato blanco, una cómb'inación de dos o todos los tres de los anteriores, o gel de aceite de polietileno-mineral . También se puede incluir opcionalmente un conservador. Los geles oftálmicos adecuados para el tratamiento del ojo incluyen un compuesto o compuestos de la invención suspendidas en una base hidrófila, tal como Carpobol-940 o una combinación de etanol, agua y propilenglicol ' (por ejemplo, en una relación de 40:40:20). Un agente gelificante, tal como hidroxietilcelulosa, hidroxipropilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa o glicirricinato amoniatado, es utilizado. Opcionalmente se puede incluir un conservador y/o un agente de tonicidad.

Los hidrogeles adecuados para el tratamiento del ojo se forman mediante la incorporación de un polímero formador de gel hinchable, tal como aquellos listados en lo anterior como agentes de espesamiento o aumentadores de viscosidad, excepto que una formulación referida en la técnica como un "hidrogel" típicamente tiene una viscosidad más alta que una formulación referida como una solución o suspensión "espesada". En contraste a tales hidrogeles preformados, una formulación también se puede preparar para formar un hidrogel in situ después de la aplicación al ojo. Tales geles son líquidos a temperatura ambiente, pero gelifican a temperaturas más altas (y de esta manera son llamados hidrogeles "termorreversibles" ) , tal como cuando se colocan en contacto con fluidos corporales. Los polímeros biocompatibles que imparten esta propiedad- incluyen polímeros de ácido acrílico y copolímeros, derivados de N-isopropilácrilamida y copolímeros de bloque ABA de óxido de etileno y óxido de propileno (convencionalmente referidos como "poloxámeros" y disponibles bajo el nombre comercial Pluronic® de BASF-Wayndotte ) .

Dispersiones preferidas son liposomales, caso en el cual la formulación se encierra dentro de liposomas (vesículas microscópicas compuestas de compartimentos acuosos alternantes y bicapas de lípido) .

Las gotas para ojos se pueden formular con una base acuosa o no acuosa que también comprende uno o más agentes dispersantes, agentes solubilizantes o agentes de suspensión. Las gotas se pueden suministrar por medio de una botella tapada con gotero para ojo simple o por medio de una botella de plástico adaptada para suministrar los contenidos líquidos gota a gota por medio de una tapa especialmente conformada.

Los compuestos de la invención también se pueden aplicar tópicamente por medio del portador sólido impregnado de fármaco que se inserta en el ojo. La liberación del fármaco generalmente se efectúa mediante · la disolución o bioerosión del polímero, osmosis o combinaciones de los mismos. Se puede utilizar varios sistemas de suministro de tipo matriz. Tales sistemas incluyen lentes de contacto blandos hidrofílicos impregnados o empapados con el compuesto deseado de la invención, así como dispositivos biodegradables o solubles que no necesitan ser removidos después de la colocación en el ojo. Estos insertos oculares solubles pueden ser compuestos de cualquier sustancia degradable que puede ser tolerada por el ojo y que es compatible con el compuesto de la invención que va a ser administrado. Tales sustancias incluyen, pero no están limitadas a, poli (alcohol polivinílico) , polímeros y copolímeros de poliacrilamida, etilacrilato y vinilpirrolidona , así como polipéptidos o polisacáridos reticulados, tal como quitina.

Las formas de dosificación para los otros tipos de administración tópica (es decir, no al ojo) o para administración transdérmica de compuestos de la invención incluyen polvos, rocíos, ungüentos, pastas, cremas, lociones, geles, soluciones, parches, gotas e inhalantes. El ingrediente activo se puede mezclar bajo condiciones estériles con un portador farmacéuticamente aceptable, y con cualquiera de las soluciones amortiguadoras, o propelentes que puedan ser requeridos. Los ungüentos, pastas, cremas y geles pueden contener, además del ingrediente activo, excipientes, tales como grasas de animales y vegetales, aceites, ceras, parafinas, almidón, tragacanto, derivados de celulosa, polietilenglicoles , siliconas,- bentonitas, ácido silícico, talco y óxido de zinc, o mezclas de los mismos. Los polvos y rocíos pueden contener, además del ingrediente activo, excipientes tales como lactosa, talco, ácido silícico, hidróxido de aluminio, silicatos de calcio y polvo de poliamida o mezclas de estas sustancias. Los rocíos adicionalmente pueden contener propelentes usuales tales como clorofluorohidrocarbonos e hidrocarburos no sustituidos volátiles, tales como butano ¦ y propano. Los parches transdérmicos tienen la ventaja adicionada de proporcionar suministro controlado de los compuestos de la invención al cuerpo. Tales formas de dosificación se pueden hacer al disolver, dispersar o de otra manera incorporar uno o más de los compuestos de la invención en un medio apropiado, tal como un material de matriz elastomérica . Los aumentadores de absorción también se pueden utilizar para incrementar el flujo del compuesto a través de la piel. La velocidad de tal flujo se puede controlar ya sea al proporcionar una membrana controladora de velocidad o al dispersar el compuesto en una matriz de polímero o gel. Un portador sólido impregnado con fármacos (por ejemplo, un aposito) también se puede utilizar para la administración tópica.

Las formulaciones farmacéuticas incluyen aquellas adecuadas para la administración mediante inhalación o insuflación o para administración nasal. Para administración al tracto respiratorio superior (nasal) o inferior por inhalación, los compuestos de la invención se suministran convenientemente desde un insuflador, nebulizador o paquete presurizado u otros medios convenientes para suministrar una rocío en aerosol. Los paquetes presurizados pueden comprender un propelente adecuado tal como diclorodifluorometano, triclorofluorometano, diclorotetrafluoroetano , dióxido de carbono u otro gas adecuado. En el caso de un aerosol presurizado, la unidad de dosificación se puede determinar al proporcionar una válvula para suministrar una cantidad dosificada.

Alternativamente, para administración por inhalación o insuflación, la composición puede tomar la forma de un polvo seco, por ejemplo, una mezcla de polvo de uno o más compuestos de la invención y una base en polvo adecuada, tal como lactosa o almidón. La composición de polvo se puede presentar en forma de dosificación- unitaria en, por ejemplo, cápsulas o cartuchos, o, por ejemplo, paquetes de gelatina o de ampollas desde los cuales el polvo se puede administrar con la ayuda de un inhalador, insuflador o un inhalador de dosis dosificada.

Para la administración intranasal, los compuestos de la invención se pueden administrar por medio de gotas para la nariz o un roció liquido, tal como por medio de un atomizador de botella de plástico o inhalador de dosis dosificada. Los rocíos líquidos se suministran convenientemente a partir de empaques presurizados . Típicos de atomizadores son Mistometer (Wintrop) y Medihaler (Riker) .

Las gotas para la nariz se pueden formular con una base acuosa o no acuosa que también comprende uno o más agentes dispersantes, agentes solubilizantes o agentes de suspensión. Las gotas se pueden suministrar por medio de una botella de tapa de gotero para ojos simple o por medio de una botella de plástico adaptada para suministrar contenido de líquido gota a gota por medio de una tapa especialmente conformada.

Las composiciones farmacéuticas de esta invención adecuadas para administración parenteral comprenden uno o más compuestos de la invención en combinación con una o más soluciones, dispersiones, suspensiones o emulsiones, acuosas o no acuosas, isotónicas, estériles, farmacéuticamente aceptables, o polvos estériles que se pueden reconstituir en soluciones o dispersiones inyectables estériles justo antes de uso, que pueden contener antioxidantes, soluciones amortiguadoras, solutos que vuelven la formulación isotónica con la sangre del recibidor propuesto o agentes de suspensión o espesamiento. También se pueden utilizar estén recubiertos con fármacos.

Ejemplos de portadores acuosos y no acuosos adecuados que se pueden empleados en las composiciones farmacéuticas de la invención incluyen agua, etanol, polioles (tales como glicerol, propilenglicol , polietilenglicol, y los similares) y mezclas adecuadas de los mismos, aceites vegetales, tales como aceite de oliva y ésteres orgánicos inyectables, tales como oleato de etilo. La fluidez apropiada puede mantenerse, por ejemplo, mediante el uso de materiales de recubrimiento, tal como lecitina, mediante el mantenimiento del tamaño de partícula requerido en el caso de dispersiones y mediante el uso de surfactantes.

Estas composiciones también pueden contener adyuvantes tales como agentes humectantes, agentes emulsificantes y agentes dispersantes. También puede ser deseable incluir agentes isotónicos, tales como azúcares, cloruro de sodio y los similares en las composiciones. Además, la absorción prolongada de la forma farmacéutica inyectable se puede originar mediante la inclusión de agentes que retardan la absorción tal como monoestearato de aluminio y gelatina.

En algunos casos, con el fin de prolongar el efecto de un fármaco, es deseable hacer lenta la absorción del fármaco a partir de inyección subcutánea o intramuscular.

Esto se puede realizar mediante el uso de una suspensión liquida de material cristalino o amorfo que tiene pobre solubilidad en el agua. La velocidad de absorción del fármaco luego depende de su velocidad de disolución que, a su vez, puede depender del tamaño de cristal y la forma cristalina. Alternativamente, la absorción retardada de un fármaco parenteralmente administrada se realiza al disolver o suspender el fármaco en un vehículo de aceite.

Las formas de depósito inyectables se hacen al formar matrices microencapsuladas del fármaco en polímeros biodegradables tal como polilactida-poliglicolida .

Dependiendo de la relación del fármaco al polímero, y la naturaleza del polímero particular empleado, se puede controlar la velocidad de liberación del fármaco. Ejemplos de otros polímeros biodegradables incluyen poli (ortoésteres) y poli (anhídridos) . Las formulaciones inyectables de depósito también se preparan al atrapar el fármaco en liposomas o microemulsiones que son compatibles con el tejido corporal. Los materiales inyectables se pueden esterilizar por ejemplo, mediante filtración a través de un filtro retenedor de bacterias.

Las formulaciones se pueden presentar en recipientes sellados de dosis unitarias o múltiples dosis, por ejemplo, ampolletas y frasquitos, y se pueden almacenar en una condición liofilizada que requiere solamente la adición del portador liquido estéril, por ejemplo agua para inyección, inmediatamente antes del uso. Las soluciones y suspensiones de inyecciones temporáneas se pueden preparar a partir de polvos estériles, gránulos y tabletas de tipo descrita en lo anterior.

Una dicetopiperazina de la fórmula I, un profármaco de un dicetopiperazina de la fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable de cualquiera de estos, se puede dar sola para tratar una enfermedad o condición que involucra hiperpermeabilidad vascular o disfunción del citoesqueleto . Alternativamente, la dicetopiperazina, profármaco, o sal se puede dar en combinación entre si en combinación con uno o más tratamientos o fármacos adecuados para tratar la enfermedad o condición. Por ejemplo, la dicetopiperazina, profármaco o la sal se puede administrar antes de, en conjunción con (que incluye simultáneamente con) o después del otro tratamiento o fármaco. En el caso de otro fármaco, el fármaco y la dicetopiperazina, profármaco o sal, se pueden administrar en composiciones farmacéuticas separadas o como parte de la misma composición farmacéutica.

La invención también proporciona equipos. Los equipos comprenden un recipiente que contiene una dicetopiperazina de la fórmula I, un profármaco de la misma o una sal farmacéuticamente aceptable de cualquiera de estos. Los equipos además pueden comprender uno o más recipientes adicionales cada uno que contiene uno o más de otros fármacos adecuados para el uso en los métodos de la invención. Los recipientes adecuados incluyen frasquitos, botellas (incluyendo con una botella con . un gotero o una botella comprimible), paquetes de ampollas, inhaladores, frascos, nebulizadores , paquetes (por ejemplo, hecho de lámina delgada, plástico, papel, celofán u otro material), jeringas y tubos. El equipo también contendrá instrucciones para la administración de la dicetopiperazina, profármaco o sal y, opcionalmente, el uno o más de otros fármacos adecuados para uso en los métodos de la invención. Las instrucciones pueden, por ejemplo, se pueden imprimir en el empaquetamiento que contiene el recipiente (s) , se puede imprimir en una etiqueta adjunta al equipo o el recipiente ( s) , o se puede imprimir en una hoja de papel separada que se incluye dentro o con el equipo. El empaquetamiento que contiene el recipiente ( s ) puede ser, por ejemplo, una caja, o el recipiente ( s ) puede envuelto en, por ejemplo, envoltura de contracción de plástico. El equipo también puede contener otros materiales que son conocidos en la técnica y que puede ser deseable desde un punto de vista comercial y del usuario. Por ejemplo, el equipo puede contener instrucciones para ayudar a un paciente a manejar su diabetes o hipertensión.

Como se utiliza en la presente, "un" o "uno" significa uno o más.

Como se utiliza en la presente, "comprende" y "que comprende" incluye dentro de su alcance cualquiera de los términos más reducidos, tales como1 "que consiste esencialmente de" y "que consiste de" como modalidades alternativas de la presente invención caracterizadas en la presente por "comprende" o "que comprende". Con respecto al uso de "que consiste esencialmente de"- esta frase limita el alcance de una reivindicación a las etapas y materiales especificados y aquellos que no afectan materialmente las características básicas y novedosas de la invención descrita en la presente. Las características básicas y novedosas de la invención puede ser la inhibición de la hiperpermeabilidad vascular, modulación de un citoesqueleto de una célula endotelial, o ambos, en un animal.

Objetivos, ventajas y características novedosas adicionales de la presente invención llegarán a ser evidentes para aquellos expertos en la técnica en consideración de los siguientes ejemplos no limitantes.

EJEMPLOS Ejemplo 1: Efecto de DA-DKP sobre ECIS Se realizaron ensayos para determinar el efecto de DA-DKP sobre la resistencia eléctrica transendotelial (TER) de células endoteliales microvasculares glomerulares renales humanas (ACBRI 128, Cell Systems Corporation (distribuidor exclusivo para Aplied Cell Biology Research Institute) , Kirkland, WA) . La resistencia eléctrica se midió utilizando el sistema de detección de impedancia eléctrica de células-sustrato (ECIS) (ECISZ6, obtenidos de Applied Biophysics) con placas de electrodo múltiples de 8 cavidades (8W10E) . Cada cavidad de las placas se recubrió con 5 pg/cm2 de fibronectina en HBSS al adicionar la fibronectina en un volumen de 100 µ?' por cavidad y al incubar las placas durante 30 minutos en una incubadora - a. 37 °C con CO2 al 5%. La solución de fibronectina se removió, y 400 ! µ? del medio de cultivo EGM-2 (Lonza) se, adicionó a cada cavidad. Las placas se conectaron al sistema ECISZ0 y se estabilizaron eléctricamente. El medio de EGM-2 se aspiró y se reemplazó ¡con 200 µ? del medio de cultivo EGM-2 que contiene 100,000 células por cavidad. Las placas se reconectaron al sistema ECISZ0 y se incubaron durante 24 horas en una incubadora a 37°C con C02 al 5%. El medio EGM-2 se , aspiró y se reemplazó .con 400 µ? del medio de cultivo EGM-2 fresco por cavidad. Las placas se recolectaron el sistema ECISZ0 y se incubaron ^durante 6 horas en una incubadora . a 37°C con C02 al 5%. Las soluciones dé los compuestos de prueba, en HBSS se prepararon y se colocaron en la incubadora para equilibrarse. Los compuestos de prueba luego se adicionaron a' las cavidades apropiadas en las siguientes concentraciones finales: DA-DKP (100 µ?) (Sigma) y TNFa (1 ng/ml) (Sigma) . La ECIS (resistencia) se monitoreó durante 90 horas.

En las células endoteliales glomerulares, DA-DKP 100 µ solo mostró un incremento de la ECIS como es comparado con las células no tratadas iniciando a aproximadamente 5.0 horas, alcanzando significado en 12 horas, y persistiendo durante 35 horas, después del tratamiento. Mientras que no significante, DA-DKP mostró una habilidad para prevenir algo de la caída inducida por TNFa en la ECIS.-Ejemplo 2 : Efecto de DA-DKP sobre ECIS Se realizaron ensayos para determinar el efecto de DA-DKP sobre la resistencia eléctrica transendotelial (TER') de células endoteliales retínales humanas (ACBRI 181, Cell Systems Corporation (distribuidor exclusivo para Applied Cell Biology Research Institute), Kirkland, WA) . La resistencia eléctrica se midió utilizando el sistema de detección de impedancia eléctrica de célula-sustrato (ECIS) (ÉCISZ9, obtenidos de Applied Biophysics) como es descrito en el Ejemplo 1, pero utilizando placas de electrodos múltiples de 96 cavidades .(8W10E). También, varios ¦ de los DA-DKP se utilizaron (0.5 µ?, 5.0 µ?, 50 µ? y 100 µ?) . DA-DKP dio un incremento dependiente de la dosis en ECIS (TER) , con 100 µ? que da el incremento más grande.

Ejemplo 3 : Efecto de DA-DKP Sobre la Formación de Fibra de Esfuerzo de Actina Células endoteliales retínales humanas del pasaje. 12 (ACBRI 181, Cell Systems Corporation . (distribuidor exclusivo para Applied Cell Biology Research Institute) , Kirkland, A) se sembraron en platinas de vidrio de 16 cámaras con 5 g/cm2 de fibronectina en 5000 células por cavidad en un volumen total de 200 µ? del medio EGM-2 (Lonza) . Las platinas se cultivaron en una incubadora a 37°C ,con C02 al 5% durante 48 horas con cambios, medios diarios. Luego, los compuestos de prueba (DA-DKP, SIP y TNFa) , diluidos en-- la. solución " de-- sál balanceada- de Hanks (HBSS; Lonza), se adicionaron para dar las concentraciones finales: DA-DKP (100 µ?) (Sigma), TNFa (1 ng/ml) (Sigma) y SIP (1 µ?) (Sigma) . Las platinas se incubaron con los compuestos de prueba durante 15 minutos ó 3 horas en una incubadora a 37 °C con C02 al 5%. Después de esta incubación, el medio se aspiró, las células se fijaron con utilizando formaldehido al 3.6% en solución salina regulada con fosfato (PBS) durante diez minutos a temperatura ambiente. Todas las cavidades luego se lavaron diez veces con 100 µ? de PBS. Las células se permeabili zaron utilizando Tritón X-100 a 0.1% en PBS durante 5 minutos. Todas las cavidades luego se lavaron dos veces con 100 µ? de PBS, y 50 µ? de una dilución 1:40 de rodamina-faloidina (Invitrogen) en PBS se adicionó a las células para manchar para F-actina y se dejaron en las células durante 20 minutos a temperatura . ambiente . Todas las cavidades luego se lavaron dos veces con 100 µ? de PBS. Luego 100 µ? de PBS se adicionó a cada cavidad y las células se observaron y fotografiaron utilizando un microscopio invertido utilizando un filtro de rodamina (ex530/em590) .

Las células endoteliales retínales tratadas con DA-DKP solo mostraron manchado de F actina de membrana difusa en 15 minutos y ¦ en 3 horas. Con TNFa solo, las fibras de esfuerzo se observaron en todo los tiempos, con el número de células que exhiben fibras de esfuerzo y el grosor de las fibras que se incrementan de 15 minutos a.3 horas. DA-DKP disminuyó la formación de fibras de esfuerzo y/o el grosor de las fibras causado por TNFa en ambos tiempos. Las células tratadas con S1P solo mostraron anillos corticales, de actina, en 15 minutos y 3 horas. El DA-DKP se consideró que aumenta los anillos corticales en 15 minutos y 3 horas.

SIP · (fosfato de esfingosina-1 ) desempeña una función muy importante en la formación y mantenimiento del endotelio vascular. SIP es una entrada de señalización constitutiva que facilita la organización y función de barrera del endotelio vascular a través de sus efectos sobre la citoesqueleto de actina. En particular, SIP está involucrado en la formación de fibras de actina corticales y la organización de las uniones adherentes. El agotamiento de SIP conduce a la fuga vascular y edema, y SIP puede invertir la disfunción endotelial y restaurar la función de barrera.

En este experimento, DA-DKP exhibió una habilidad para fortalecer los efectos protectores de SIP en células endoteliales retínales. DA-DKP también revirtió la formación de fibras de esfuerzo inducidas por TNFa. El manchado perinuclear difuso se observa en células tratadas con DA-DKP ¦solo .

Ejemplo 4: Efecto de DA-DKP sobre RhoA La remodelación del citoesqueleto de célula endotelial es central para muchas funciones del endotelio. La familia Rho de proteínas de enlace de GTP pequeñas, se han identificado como reguladores clave de la dinámica citoesqueletica de F-actina. La familia Rho consiste de tres formas, RhoA, RhoB y RhoC. La activación de' la actividad de' RhoA conduce a la formación de fibras de esfuerzo prominente en las células endoteliales. La estimulación de células endoteliales con trombina incrementa Rho GTP y la fosforilación de miosina, consistente con la contractibilidad de célula incrementada. La inhibición de RhoA bloquea esta respuesta y la pérdida de función de barrera, demostrando una función crítica para Rho de la permeabilidad vascular.

Este experimento se realizó utilizando un ensayo de activación de Rho comercialmente disponible (GLISA) comprado a Cytoskeleton, Denver, Colorado, siguiendo el protocolo del fabricante. Brevemente, células endoteliales retínales humanas del pasaje 8 ó 12 (ACBRI 181, Applied Cell Biology Research Institute, Kirkland, WA) se cultivaron en placas de cultivo de tejido de 6 cavidades recubiertas con fibronectina (1 µ?/?p?2) utilizando el medio de cultivo EG -2 (Lonza) durante 24 horas en. una incubadora a 37°C con C02 al 5% (30,000 células/cavidad en un volumen total de 3 mi). Luego, el medio se aspiró y se reemplazó con el medio Ultraculture suplementado con suero de bovino fetal al 0.1%, L-glutamina, piruvato de sodio, penicilina/estreptomicina y ITSS (insulina, transferrina sodio selenio) (todos de Lonza) para hacer deficiente al suero de las células y reducir el nivel ¦antecedente RhoA. Las células se cultivaron durante 24 horas en una incubadora a 37°C con. C02 al 5%. Los compuestos de prueba diluidos en HBSS se colocaron en la incubadora para equilibrar antes de la adición a las células. Luego, 150 µ? de cada compuesto de prueba se adicionó a las cavidades de cultivo apropiadas, y las placas se incubaron eri incubadora durante 15 minutos adicionales. Luego, la trombina se adicionó a las cavidades apropiadas. Después de 1 minuto, las células se lavaron una vez con 1.5 mi de solución salina amortiguada con fosfato y luego se Usaron con 100 µ? de solución amortiguadora de GLISA suplementado con inhibidores de proteasa. Los extractos se rasparon, se transfirieron a tubos de micrpcentrifuga y se transfirieron al hielo para preservar la forma activa de RhoA. Todos los extractos luego se clarificaron de desechos celulares mediante el . giro a 10,000 rpms durante 2 minutos a 4°C. Los sobrenadantes se transfirieron a nuevos tubos y se colocaron nuevamente sobre ¦hielo. Alícuotas de cada extracto se removieron para el ensayo GLISA y para la determinación de proteina. Todas las concentraciones de proteína estuvieron dentro de 10%, y los extractos se utilizaron a las concentraciones logradas (igual a 15 pg de proteina total por cavidad) . El ensayo GLISA se realizó utilizando los reactivos suministrados en el equipo.

Los resultados para las células endoteliales retínales el pasaje 12 se presentan en la Tabla 1 enseguida.

Como es esperado, los niveles de Rho A activo inducidos por la trombina fueron muy altos. Todos los compuestos de prueba inhibieron la activación inducida por trombina del Rho A.

Los resultados para las células endoteliales retínales de pasaje 8 se presentan en la Tabla 2 enseguida.

Como es esperado, los niveles de Rho A activos inducidos por trombina fueron muy altos. Todos los compuestos de prueba inhibieron la activación inducida por trombina del Rho A.

TABLA 1 Obtenido de Sigma TABLA 2 Ejemplo 5: Efecto de MR-DKP sobre ECIS Se realizaron ensayos para determinar el efecto de ;MR-DKP (una dicetopiperazina en donde R1 en la fórmula I es la cadena lateral de metionina y R2 la cadena lateral de arginina) sobre la resistencia eléctrica transendotelial (TER) de células endoteliales retínales humanas del pasaje 6 i (Applied Cell Systems Corporation (distribuidor exclusivo para Applied Cell Biology Research Institute) , Kirkland, WA) . La resistencia eléctrica se midió utilizando el sistema de detección de impedancia eléctrica de. célula-sustrato (ECIS) : (ECISZ6, obtenidos Applied Biophysics) con ' placas de electrodo múltiples de 8 cavidades (8W10E) . Cada cavidad de las placas se estabilizaron al adicionar 250 µ? de cisteína 10 mM (Sigma) en agua estéril a cada cavidad y el incubar .durante 30 minutos a temperatura ambiente. Las cavidades luego se lavaron dos veces con 150 µ? de agua estéril para remover la cisteína. Todas las cavidades luego se recubrieron con 10 µg cm2 de colágeno al diluir la solución madre (0.5 mg/ml de colagenina Tipo IV ácido acético 0.25% (Sigma) en agua estéril y el adicionar 150 µ? de la solución resultante a cada cavidad. La solución de colágeno se incubó sobre las placas a 37°C durante 120 minutos y luego se removió. Las cavidades se lavaron dos veces con 400 µ? de agua estéril para remover el colágeno. Enseguida, 400 µ? del medio de cultivo EGM-2 (Lonza) se adicionó a cada cavidad. Las placas se conectaron al sistema ECISZ0 y se estabilizaron eléctricamente. El medio EGM-2 se aspiró y se reemplazó con 400 µ? del medio de cultivo EGM-2 que contiene 100,000 células por cavidad. Las placas se conectaron al sistema ECISZG y se incubaron durante 24 horas en una incubadora a 37°C con C02 al 5%. El medio EGM-2 se aspiró y¦ se reemplazó con 400 µ? del medio de cultivo EGM-2. Las placas se conectaron al sistema de ECISZ6 y se incubaron durante 2 horas en una incubadora a 37°C con CO2 al 5%. Soluciones del compuesto de prueba en HBSS se prepararon y se colocaron en la incubadora para equilibrarse. El compuesto de prueba luego se adicionó a las cavidades apropiadas en las siguientes concentraciones finales: MR-DKP (50µ? y 100 µ?) . La ECIS (resistencia) se inspeccionó durante 50 horas.

En las células endoteliales retínales, MR-DKP tanto de 50 µ? como 100 µ? mostraron un incremento en la ECIS como es comparado con las células no tratadas iniciando en aproximadamente 15 horas, llegando a ser significantes de aproximadamente 18 horas. El incremento fue alrededor de 20% en su máximo. Para el grupo de 100 µ?, el incremento persistió durante el resto del experimento, alcanzando significado nuevamente en aproximadamente 33 horas. Para el grupo 50 µ?, en alrededor 28-29 horas, la resistencia regresó a los niveles del control, pero se incrementó nuevamente comenzando en aproximadamente 30 horas, alcanzando significado en aproximadamente 33 horas, y el incremento persistió durante el resto del experimento. Además, el grupo 50 µ? mostró una breve elevación en la resistencia de 2-5 horas.

Ejemplo 6: Efecto de YE-DKP sobre ECIS Se repitió el ejemplo 5, excepto que la dicetopiperazina utilizada fue YE-DKP (una dicetopiperazina en donde R1 en la fórmula I es la cadena · lateral de ácido glutámico y R2 es . la cadena lateral de tirosina) . En las células endoteliales retínales, YE-DKP 50 µ? no mostró un incremento significante en ECIS, pero YE-DKP 100 µ? mostró un incremento en ECIS como es comparado con las células no tratadas iniciando en aproximadamente 6 horas, llegando a ser significante en aproximadamente 12 horas. El incremento fue aproximadamente 20% en su máximo. En alrededor de 28 horas, la resistencia regresó a los niveles del control, pero se incrementó nuevamente comenzando en aproximadamente 29 horas, alcanzando significado en aproximadamente 33 horas, y el incremento persistió durante el resto del experimento.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un método para inhibir la hiperpermeabilidad vascular en un animal en necesidad del mismo, caracterizado porque comprende administrar al animal una cantidad efectiva de un ingrediente activo, en donde el ingrediente activo comprende una dicetopiperazina, un profármaco de una dicetopiperazina o una sal farmacéuticamente aceptable de cualquiera de estos, en donde la dicetopiperazina tiene la siguiente fórmula: en donde R1 y R2, que pueden ser los mismos o diferentes, cada uno es : (a) una cadena lateral de un aminoácido, en donde el aminoácido es glicina, alanina, valina, norvalina, ácido cc-aminoisobutírico, ácido 2, 4- diaminobutirico, ácido 2 , 3-diaminobutirico, leucina, isoleucina, norleucina, serina, - homoserina, treonina, ácido aspártico, asparagina, ácido glutámico, glutamina, lisina, hidroxilisina, histidina, arginina, homoarginina, . citrulina, fenilalanina, p-aminofenilalanina, tirosina, triptófano, tiroxina, cisteína, homocisteína, metionina, penicilamina u ornitina; R1 es -CH2-CH2-CH2- o -CH2-CH (OH) -CH2- y junto con el nitrógeno del anillo adyacente forma prolina o ... hidroxiprolina y/o R2 es -CH2-CH2-CH2- o -CH2- CH(OH)-CH2- y junto con el nitrógeno del anillo adyacente forma prolina o hidroxiprolina; o un derivado de una cadena lateral de un aminoácido, en donde el aminoácido es uno de aquellos citados en (a), y la cadena lateral derivada tiene: (i) un grupo -NH2 reemplazado por un grupo -NHR3 o -N(R3)2, en donde cada R3 independientemente puede ser un alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo o heteroarilo sustituido o no sustituido; (ii) un grupo -OH reemplazado por un grupo -O-PO3H2 o -0R3, en donde cada R3 independientemente puede ser un alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo o heteroarilo sustituido o no sustituido; (iii) un grupo -COOH reemplazado por un grupo -COOR3, en donde cada R3 independientemente puede ser un alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo o heteroarilo sustituido o no sustituido; (iv) un grupo -COOH reemplazado por un grupo CON(R )2, en donde cada R4 independientemente puede ser H o alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo o heteroarilo sustituido o no sustituido; (v) un grupo -SH reemplazado por -S-S-CH2-CH (NH2 ) - COOH o -S-S-CH2-CH2-CH (NH2) -COOH; (vi) un grupo -CH2- reemplazado por un grupo CH(NH2)- o -CH(OH)-; (vii) un grupo -CH3 reemplazado por un grupo -CH2- NH2 o -CH2-OH; y/o (viii) un H que se une a un átomo de carbono reemplazado por un halógeno.

2. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el animal está en necesidad de la dicetopiperazina, profármaco o sal debido a la presencia de una enfermedad o condición mediada por hiperpermeabilidad vascular.

3. El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la administración de la dicetopiperazina, profármaco o sal se comienza inmediatamente en la diagnosis de la enfermedad o condición.

4. El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la enfermedad o condición es una complicación vascular de diabetes.

5. El método de conformidad con. la reivindicación 4, caracterizado porque la complicación vascular es edema, acumulación de lipoproteinas de baja densidad en el espacio subendotelial , aterosclerosis acelerada, envejecimiento acelerado de las paredes del vaso en el cerebro, edema miocardiaco, fibrosis miocardiaca, disfunción diastólica, cardiopatia diabética, retardo del desarrollo de pulmón en los fetos de madres diabéticas, alteraciones de uno o más parámetros fisiológicos pulmonares, susceptibilidad incrementada a infecciones, hiperplasia vascular en el mesenterio, neuropatía diabética, edema macular diabético, nefropatía diabética, retinopatía diabética, o enrojecimiento, descoloración, sequedad y ulceraciones de la piel .

6. El método de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque la complicación vascular es edema.

7. El método de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque la complicación' vascular es cardiomiopatía diabética.

8. El método de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque la complicación vascular es neuropatía diabética.

9. El método de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque la complicación vascular es edema macular diabético.

10. El método de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque la complicación vascular es retinopatia diabética.

11. El método de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado porque la retinopatia diabética es retinopa'tia diabética no proliferativa .

12. El método de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque la complicación vascular es nefropatia diabética.

13. El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la enfermedad o condición es una lesión del pulmón aguda, síndrome de angustia- respiratoria aguda, degeneración macular relacionada con la edad, aterosclerosis , edema coroidal, coroiditis, enfermedad microvascular coronaria, enfermedad microvascular cerebral, diabetes, enfermedad de Eals, edema causado por lesión, edema asociado con- hipertensión, fuga vascular glomerular, choque hemorrágico, hipertensión, Síndrome de Irvine Gass, isquemia, edema macular, nefritis, nefropatías, edema nefrótico, síndrome nefrótico, neuropatía, falla de órgano debido a edema, pre-eclampsia, edema pulmonar, hipertensión pulmonar, falla renal, edema de retina, hemorragia retinal, oclusión de la vena retinal, retinitis, retinopatia, infarto cerebral silencioso, síndrome de respuesta inflamatoria sistémica, glomerulopatía de trasplante, uveítis, síndrome de fuga vascular, hemorragia vitrea o enfermedad de Von Hipple Lindau.

14. El método de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado porque la enfermedad o condición es un edema macular.

15. El método de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado porque la enfermedad o condición es una neuropatía.

16.· El método de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado porque la enfermedad o condición es una retinopatia.

17. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el animal está en necesidad de la dicetopiperazina, profármaco o sal debido a uno o más signos tempranos de, o una predisposición a desarrollar, una enfermedad o condición mediada por hiperpermeabilidad vascular.

18. El método de conformidad con la reivindicación 17, caracterizado porque la enfermedad o condición es diabetes, hipertensión o aterosclerosis .

19. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la hiperpermeabilidad vascular es hiperpermeabilidad vascular de un endotelio continuo encontrado en, o alrededor de, un cerebro, diafragma, musculatura duodenal, grasa, corazón, riñon, vaso sanguíneo grande, pulmón, mesenterio, nervio, retina, músculo esquelético, piel o testículos.

20. El método de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado porque el endotelio continuo se encuentra en, o alrededor de, un cerebro, corazón, pulmón, nervios o retina .

-21. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la hiperpermeabilidad vascular es hiperpermeabilidad vascular de un endotelio fenestrado encontrado en, o alrededor de, un riñon, un páncreas, una glándula adrenal, una glándula endocrina o un intestino.

22. El método de conformidad con la reivindicación 21, caracterizado porque el endotelio fenestrado se encuentra en un riñon.

23. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-22, caracterizado porque R1, R2 o ambos es la cadena lateral de ácido aspártico o ácido glutámico o un derivado de tal cadena lateral en donde el grupo -COOH es reemplazado por un grupo, -COOR3 o un grupo -CON(R4)2, en donde R3 y R4 se definen como en la reivindicación 1.

24. El método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque R1 es la cadena lateral de ácido aspártico o ácido glutámico, y R2 es la cadena lateral de alanina o tirosina.

25. El método de conformidad con la reivindicación 24, caracterizado porque R1 es la cadena lateral de ácido aspártico y R2 es la cadena lateral, de alanina.

26. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-22, caracterizado porque R1, R2 o ambos es la cadena lateral de metionina o arginina.

27. El método de conformidad con la reivindicación 26, caracterizado porque R1 es la cadena lateral de metionina y R2 es la cadena lateral de arginina.

28. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-27, caracterizado porque la dicetopiperazina, profármaco o sal se administran oralmente.

29. El método' de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-28, caracterizado porque el animal es un humano .

30. Un método para modular un citoesqueleto de una célula endotelial en un animal, caracterizado porque comprende administrar una cantidad efectiva de un ingrediente activo, en donde el ingrediente activo comprende una dicetopiperazina, un profármaco de un dicetopiperazina o una sal farmacéuticamente aceptable de cualquiera de estos al animal, en donde la dicetopiperazina tiene la fórmula: nde R1 y R2, que pueden ser los mismos o diferentes, cada uno (a) una cadena lateral de. un aminoácido, en donde el aminoácido es glicina, alanina, valina, norvalina, ácido a-aminoisobutirico, ácido 2,4- diaminobutirico, ácido 2 , 3-diaminobutirico, leucina, isoleucina, norleucina, serina, homoserina, treonina, ácido aspártico, asparagina, ácido glutámico, glutamina, lisina, hidroxilisina, histidina, arginina, homoarginina , citrulina, fenilalanina, p-aminofenilalanina, tirosina, triptófano, tiroxina, cisteina, homocisteina, metionina, penicilamina u ornitina; (b) R1 es -CH2-CH2-CH2- o -CH2-CH (OH) -CH2- y junto con el nitrógeno del anillo adyacente forma prolina o hidroxiprolina y/o R2 es -CH2-CH2-CH2- o -CH2- ¦ CH(OH)-CH2- y junto con el nitrógeno del anillo adyacente forma prolina o hidroxiprolina; o un derivado de una cadena lateral de un aminoácido, en donde el aminoácido es uno de aquellos citados en (a), y la cadena lateral derivada tiene: (i) un grupo -NH2 reemplazado por un grupo -NHR3 o -N(R3)2, en donde cada R3 independientemente puede ser un alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo o heteroarilo sustituido o no sustituido; (ii) un grupo -OH reemplazado por un grupo -O-PO3H2 o -0R3, en donde cada R3 independientemente puede ser un alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo o heteroarilo sustituido o no sustituido; (iii) un grupo -COOH reemplazado por un grupo -COOR3, en donde cada R3 independientemente puede ser un alquilo, cicloalquilo, héterocicloalquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo o heteroarilo sustituido o no sustituido; (iv) un grupo -COOH reemplazado por un grupo -CON(R4)2, en donde cada R4 independientemente puede ser H o alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo o heteroarilo sustituido o no sustituido; (v) un grupo -SH reemplazado por -S-S-CH2-CH (NH2) - COOH o -S-S-CH2-CH2-CH(NH2) -COOH; (vi) un grupo -CH2- reemplazado por un grupo - CH (NH2) - o -CH(OH) -; (vii) un grupo -CH3 reemplazado por un grupo -CH2- NH2 o -CH2-OH; y/o (viii) un H que se une a un átomo de carbono reemplazado por un halógeno.

31. El método de conformidad con la reivindicación 30, caracterizado porque la modulación del citoesqueleto incluye la inhibición de la formación de fibras de esfuerzo de actina .

32. El método de conformidad con la reivindicación 30, caracterizado porque la modulación del citoesqueleto incluye causar, incrementar o prolongar la formación de anillos de actina corticales. .

33. El método de conformidad con la reivindicación 30, caracterizado porque la modulación del citoesqueleto incluye la inhibición de RhoA.

34. El método de conformidad con cualquiera de las ' reivindicaciones 30-33, caracterizado porque R1, R2 o ambos es la cadena lateral de ácido aspártico o ácido glutámico o un derivado de tal cadena lateral en donde el grupo -COOH se reemplaza por un grupo -COOR3 o un grupo -CON(R4)2, en donde R3 y R4 se definen como en la reivindicación 30.

35. El método de conformidad con la reivindicación 34, caracterizado porque R1 es la cadena lateral de ácido aspártico o ácido glutámico, y R2 es la cadena lateral de alanina o tirosina.

36. El método de conformidad con la reivindicación 35, caracterizado porque R1 es la cadena lateral de ácido aspártico y R2 es la cadena lateral de alanina.

37. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 30-33, caracterizado porque R1, R2 o ambos es la cadena lateral de metionina o arginina.

38. El método de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado porque R1 es la cadena lateral de metionina y R2 es la cadena lateral de arginina.

39. Un equipo, caracterizado porque comprende: (a) un recipiente que contiene una' dicetopiperazina, un profármaco de un dicetopiperazina o una sal farmacéuticamente aceptable de cualquiera de estos; e (b) instrucciones para la administración de la dicetopiperazina, el profármaco o la sal farmacéuticamente aceptable para realizar un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-34, en donde la dicetopiperazina tiene la fórmula: I ' en donde R1 y R2, que pueden ser los mismos o diferentes, cada uno es : (a) una cadena lateral de un aminoácido, en donde el aminoácido es glicina, alanina, valina, norvalina, ácido oc-aminoisobutírico, ácido 2,4- diaminobutirico, ácido 2 , 3-diaminobutírico, leucina, isoleucina, norleucina, serina, homoserina, treonina, ácido aspártico, asparagina, ácido glutámico, glutamina, lisina, hidroxilisina, histidina, arginina, homoarginina, citrulina, fenilalanina, p-aminofenilalanina, tirosina, triptófano, tiroxina, cisteina, homocisteina, ' metionina, penicilamina u ornitina; (b) R1 es -CH2-CH2-CH2- o -CH2-CH (OH) -CH2- y junto con el nitrógeno del anillo adyacente forma prolina o hidroxiprolina y/o R2 es -CH2-CH2-CH2- o -CH2- CH(OH)-CH2- y junto con el nitrógeno del anillo adyacente forma prolina o hidroxiprolina; o un derivado de una cadena lateral de un aminoácido, en donde el aminoácido es uno de aquellos citados en (a)., y la cadena lateral derivada tiene: (i) un grupo- -NH2 reemplazado por un grupo -NHR3 o -N(R3)2, en donde cada R3 independientemente puede ser un alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo o heteroarilo sustituido o no sustituido; (ii) un grupo -OH reemplazado por un grupo -O-PO3H2 o -0R3, en donde cada R3 independientemente puede ser un alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo o heteroarilo sustituido o no sustituido; (iii) un grupo -COOH reemplazado por un grupo -COOR3, en donde cada R3 independientemente puede ser un alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo o heteroarilo sustituido o no sustituido; (iv) un grupo -COOH reemplazado por un grupo -CON(R4)2, en donde cada R4 independientemente puede ser H o alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, arilo, alquilarilo, arilalquilo o heteroarilo sustituido o no sustituido; (v) un grupo -SH reemplazado por -S-S-CH2-CH (NH2) -COOH o -S-S-CH2-CH2-CH (NH2) -COOH; (vi) un grupo -CH2- reemplazado por un grupo CH (NH2) - o -CH (OH) -; (vii) un grupo -CH3 reemplazado por un grupo -CH2- NH2 o -CH2-OH; y/o (viii) un H que se une a un átomo de carbono reemplazado por un halógeno.

40. El equipo de conformidad con la reivindicación 39, caracterizado porque R1, R2 o ambos es la cadena lateral de ácido aspártico o ácido glutámico o un derivado de tal cadena lateral en donde el grupo -COOH se reemplaza por un grupo -COOR3 o un grupo -CON(R4)2, en donde R3 y R4 se definen como en la reivindicación 39.

41. El equipo de conformidad con la reivindicación 40, caracterizado porque R1 es la cadena lateral de ácido aspártico o ácido glutámico, y R2 es la cadena lateral de alanina o tirosina.

42. El método de ' conformidad con la reivindicación 41, caracterizado porque R1 es la cadena lateral de ácido aspártico y R2 es la cadena lateral de alanina.

43. El equipo de conformidad con la reivindicación 39, caracterizado porque R1, R2 o ambos es la cadena lateral de metionina o arginina.

44. El equipo de conformidad con la reivindicación 43, caracterizado porque R1 es la cadena lateral de metionina y R2 es la cadena lateral de arginina.