MX2011000941A - Composicion util para la rpevencion o reduccion del progreso de cancer de prostata. - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a una composición que comprende como ingredientes activos extracto de té verde y extracto de granada para la prevención o reducción del progreso de cáncer de próstata.

Description

COMPOSICION UTIL PARA LA PREVENCION O REDUCCION DEL PROGRESO DE CANCER DE PROSTATA Descripción de la Invención La invención describe una composición útil para la prevención o reducción del progreso de cáncer de próstata .

En particular, la presente invención describe una composición, que comprende como ingredientes activos té verde y extracto de granada, útiles para la prevención o reducción del progreso de cáncer de próstata.

Cáncer de próstata es el cáncer más común en mamíferos, especialmente entre hombres humanos en los países occidentales (Cáncer Statistics 1997, CA Cáncer J. Clin. 1997 ; 47 ; 5-27) .

Varios factores tales como una etiología desconocida, patología variable, una relación elaborada para factores endocrinos, y progreso anaplástico contribuyen a la complejidad de esta enfermedad.

Un equipo de investigadores de la Universidad de Wisconsin, Madison, is., y de Case Western Reserve University, Cleveland, Ohio, documenta la función de polifenoles de té verde (GTP) en modulación de la trayectoria molecular accionada por factor 1 de crecimiento tipo insulina (IGF-1) en células de tumor de Ref.: 217078 próstata en un modelo de ratón para cáncer de próstata humano. Estas observaciones tienen significado en vista de estudios que indican como niveles incrementados de IGF-1 se asocian con el riesgo incrementado de varios canceres, tal como próstata, mama, pulmón y colon. Los polifenoles de té verde contribuyen a minimizar el desarrollo de tumor al gobernar la cantidad de factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) en el suero de modelo de ratón con cáncer de próstata. La reducción de VEGF puede resultar de supresión inducida por GTP de niveles de IGF-1. Funciones de VEGF reclutan y desarrollan nuevos vasos sanguíneos que portan nutrientes para desarrollar tumores. Al reducir la cantidad de VEGF, GTP trabaja para minimizar nutrientes que fluyen y que soportan el crecimiento tumoral .

En Clinic Cáncer Research, 1 de julio, 2006; pp 4018-4026 y Clinical Cáncer Research Vol . 12, 4018-4026, 1 de julio, 2006, se reporta que el extracto de granada puede ser útil para la prevención o reducción del progreso de cáncer de próstata.

En Prostate Cáncer and Prostatic Diseases (2002) 5, 6-12 se reporta que licopeno puede ser útil para la prevención o reducción del progreso de cáncer de próstata.

En W00057892 se reporta que serenoa es útil para el tratamiento de cáncer de próstata.

En WO 03035635 se reporta que derivados de isoflavonoide son útiles para el tratamiento de cáncer de próstata ; En WO 040921602 se reporta que L-carinitina es útil en el tratamiento de enfermedades cardiovasculares.

Selenio en humanos es un nutriente de elemento indicador que funciona como cofactor para reducción de enzimas antioxidantes tal como peroxidasas de glutationa. Selenio dietético viene de nueces, cereales, carne, pescado y huevos. La "prevención nutricional de proyecto cancerígeno" (NPC) es un ensayo de prevención de cáncer aleatorio, controlado en el cual 1,312 pacientes reciben una dosis diaria de 200 ig de selenio o un placebo por hasta 10 años. En este estudio se obtiene una reducción significante estadísticamente en la incidencia de cáncer de próstata y progreso de cáncer de próstata: Aunque los efectos anti -cancerígenos del té verde y extracto de granada han sido ya conocidos, ninguno de los documentos de la técnica previa citados anteriormente mencionan ni sugieren el uso de estos dos ingredientes activos en combinación para la prevención o reducción del progreso de cáncer de próstata.

Además, mientras existen otros agentes disponibles para quimioterapia de tumores, y otras opciones de tratamiento invasivo existen para cáncer de próstata tal como remoción de la próstata cancerosa o colocación de una semilla radioactiva diseñada para reducir el tumor, puede ser más deseable proveer una composición útil como un adjunto o complemento a terapias tradicionales de baja toxicidad para un paciente que servirá como un agente anti -carcinogénico para cáncer de próstata .

Es por lo tanto un objetivo de la presente invención una composición sinergística que comprende como ingredientes activos extracto de té verde y extracto de granada.

La composición mencionada anteriormente puede además comprender licopeno, selenio, zinc, serenoa, derivados de isoflavonoide y L-carnitina.

En un objetivo adicional de la presente invención una composición que comprende: (a) extracto de té verde, como ingrediente activo, en una dosis de 25 a 800 mg, dosis preferidas son 125 y 250 mg; y (b) extracto de granada, como ingrediente activo, en una dosis de 25 a 800 mg, las dosis preferidas son 40, 125 y 250 mg; y (c) licopeno en una dosis de 0.03 a 30.0 mg, las dosis preferidas son 1.25 y 5 mg; (d) selenio en una dosis de 8.2 a 500 ig , las dosis preferidas son 55 y 82.5 µg; (d) zinc en una dosis de 1 a 200 mg, la dosis preferida es 20 mg; y (e) serenoa en una dosis de 10 a 400 mg, las dosis preferidas son 160 y 320 mg; (f) derivados de isoflavonoide (isoflavona de soya) en una dosis de 10 a 500 mg, la dosis preferida es 100 mg; y (g) L-carnitina en una dosis de 50 a 500 mg, la dosis preferida es 200 mg .

Es un objetivo adicional de la presente invención el uso de la composición mencionada anteriormente, para la prevención o reducción del progreso de cáncer de próstata.

Es un objetivo adicional de la presente invención el uso de la composición mencionada anteriormente, para preparar un medicamento para la prevención o reducción del progreso de cáncer de próstata .

Es un objetivo adicional de la presente invención el uso de la composición mencionada anteriormente, para, preparar un suplemento alimenticio para la prevención o reducción del progreso de cáncer de próstata.

La composición de la invención puede comprender adicionalmente co-enzimas, sustancias minerales, antioxidantes, vitaminas y agentes útiles para tratar cáncer de próstata.

Los siguientes ejemplos no limitantes además ilustran la invención.

EJEMPLO 1 Para los experimentos reportados en el siguiente, se usan líneas celulares de carcinoma de próstata humano establecidas LNCaP y PC3 (obtenidas de la Colección de Cultivo Tipo Americano Rockville, MD) .

Las células LNCaP se cultivan en medio RPMI 1640 (Life Technologies, Rockville, MD) , suplementado con 10% de Suero bovino fetal (FBS) y 1% de penicilina y estreptomicina. Las células se incuban a 37°C en una atmósfera humidificada de C02 al 5% en aire. Ambas series de cultivos celulares se hacen crecer al 80% de confluencia en matraces de cultivo de tejido de 10 cm y se dividen 1:8. Las células se colocan en 96 placas celulares y se dejan unir y alcanzar 60-70% de confluencia antes de ser usadas para experimentación.

Efecto en crecimiento celular in vitro La serie cultivada de células LNCaP y PC3 se tratan con extracto de té verde (40 µ?/ml en PBS) , extracto de granada (40 yg/ml en PBS) o en combinación (tanto extracto de té verde como extracto de granada) en 10 cavidades cada una conteniendo medio celular completo. Las células que se usan como control se incuban con la misma cantidad de PBS en medio celular completo. Los efectos de licopeno (5 mmol/L) , selenio (30 ng/ml), zinc (10 yg/ml), serenoa (10 g/ml), e isoflavona de soya (10 g/ml) también se analizan mediante la adición de estos al cultivo celular solo o en combinación con el extracto de té verde y extracto de granada. La proliferación celular de las células se determina usando en ensayo calorimétrico de 3 - ( 4 , 5 -dimet iltiazol -2 - i 1 ) - 2 , 5 -difeniltetrazolio (MTT) seguido por 24 horas de incubación a 37°C con o sin los agentes de prueba. El MTT (5 ng/ml) se añade a todas las cavidades y se incuba por 2 horas adicionales. La placa después se centrifuga a 500 x g durante 5 minutos a 4°C. La solución de MTT se remueve de las cavidades mediante aspiración cuidadosa y DMSO amortiguado (0.1 mi) se añade a cada una de las cavidades y las placas se agitan durante 15 minutos. La absorbancia se mide en un lector de microplaca en la longitud de onda de 540 nm. Se valora el efecto de cada compuesto solo y en combinación en crecimiento celular como el porcentaje de viabilidad celular en el cual las células de control no tratadas se toman como aquellas que son completamente viables y se dejan crecer libremente.

Los resultados obtenidos se reportan en las siguientes tablas 1-4.

Tabla 1 Efectos de compuestos de prueba en proliferación de célula LNCaP A= extracto de té verde; B= extracto de granada; C= licopeno; D= selenio; E= zinc.

\ Tabla 2 Efectos de compuestos de prueba en proliferación de célula PC3 Tabla 3 Efectos de compuestos de prueba en proliferación de célula LNCaP A= Extracto de té verde; B= extracto de granada; F= serenoa; G= isoflavona de soya; H= L-carnitina.

Tabla 4 Efectos de compuestos de prueba en proliferación de célula PC3 A= extracto de té verde; B= extracto de granada; F= serenoa; G= isoflavona de soya; H= L-carnitina.

Los resultados reportados en los cuadros 1, 2, 3 y 4 muestran que la composición de la invención es estadísticamente más activa respecto a los constituyentes únicos .

Además, la presencia de licopeno, selenio y zinc, o serenoa, isoflavona de soya y L-carnitina no incrementa la actividad inhibidora de la composición de la invención.

EJEMPLO 2 Experimento 2 Efecto de división celular in vitro Las células LNCaP y PC3 en matraces de cultivo de 25 mi se tratan con ya sea: extracto de té verde (40 µ/ml en PBS) , extracto de granada (40 ug/ml en PBS) , serenoa (10 µ/ml) , isoflavona de soya (10 µ/ml) o la combinación de extracto de té verde más extracto de granada.

Los controles reciben PBS solo. El tratamiento se inicia 48 horas después de la unión. Las células se dejan crecer en el cultivo durante hasta 72 horas antes de ser analizadas mediante citometría de flujo. Las células se etiquetan previamente con 10 mM de bromodeoxiuridina (BrdU) durante 2 horas con o sin tratamiento previo con extracto de té verde o extracto de granada o ambos para hacer crecer de manera asincránica células. Las células después se recolectan, se fijan con etanol al 70%, se tratan con de HC1 al 0.1% y se calientan durante 10 minutos a 90°C para exponer el ADN etiquetado. Las células se tiñen con FITC conjugado con anti-BrdU (Becton Dickinson) y se contra-tiñen con yoduro de propidio. Los análisis de ciclo celular se llevan a cabo en un FACScan Becton-Dickinson, usando software Lysis II.

Los resultados del análisis citométrico de flujo obtenidos usando la composición de la invención respecto a los componentes sencillos se reportan en las siguientes Tablas.

Tabla 5 Extracto de té verde, BrdU división celular LNCaP Tabla 6 Extracto de granada, BrdU división celular LNCaP Tabla 7 Extracto de serenoa, BrdU división celular LNCaP % de ciclo celular Tiempo hora 0 24 48 72 Gl 70 68 71 62 S 18 18 18 14 G2/M 12 14 11 24 % inhibición de 0 0 22.2 fase S vs 0 hora Tabla 8 Extracto de isoflavona de soya, BrdU división celular LNCaP Tabla 9 Extracto de té verde más granada, BrdU división celular LNCaP Tabla 10 Extracto de té verde, BrdU división celular PC3 % de ciclo celular Tiempo hora 0 24 48 72 61 64 69 65 72 S 30 26 23 22 62/M 6 5 12 6 % inhibición de 13.3 23.3 26.7 fase S vs 0 hora Tabla 11 Extracto de granada, BrdU división celular PC3 Tabla 12 Extracto de Serenoa, BrdU división celular PC3 Tabla 13 Extracto de isoflavona de soya, BrdU división celular PC3 % de ciclo celular Tiempo hora 0 24 48 72 Gl 63 68 66 68 S 25 26 23 25 G2/M 12 6 11 7 % inhibición de 4.0 8.0 0 fase S vs 0 hora Tabla 14 Extracto de té verde ms granada, BrdU división celular PC3 El uso de los compuestos únicos muestra una acción inhibidora en la proliferación de células tanto LNC&P como PC3 (ver los cuadros 5-8 y 10-13) . Los resultados reportados en los cuadros 9 y 14 muestran que la composición de combinación de la invención se dota con un efecto sinergístico inesperado para la inhibición de la proliferación de células tanto LNCaP como PC3. Las líneas celulares se detienen en la fase S que persiste durante 72 horas por un máximo de 60.9% y 54.8% en líneas LNCaP y PC3 , respectivamente .

No se observan efectos en la división celular o supresión del crecimiento en los controles que se tratan con el vehículo solo.

EJEMPLO 3 Actividad anti-tumoral in vivo Para evaluar la actividad anti-tumoral de la combinación de la invención/ se usa una cepa de tumor sólido LNCaP (ATCC) .

Las células se cultivan durante cinco o seis veces en ratones desnudos. Un fragmento de cáncer sólido de esta cepa (3 mm cuadrado) se trasplantan debajo de la piel de la región axilar de ratones de 8 semanas de edad desnudos nu-nu (NxGen Biosciences, San Diego, CA) . Los ratones en los cuales el tumor se toma de manera confiable (después de aproximadamente 20 días) se asignan al azar a 4 grupos de 10 animales cada uno. Los grupos de animales se tratan con vehículo, extracto de té verde, granada o combinación de té verde y granada. Los animales en el grupo control reciben solo agua para beber mientras el té verde y extracto de granada o su combinación se administran al 1% en el agua para beber (p/v, ad libitum) una vez al día en la mañana durante 28 días consecutivos. Se mide el diámetro del tumor dos veces a la semana, y se calcula el volumen del tumor usando la fórmula 0.5238L1L2H en donde Li es el diámetro largo, L2 es el diámetro corto y H es la altura del tumor. Todos los animales se sacrifican una vez que los tumores alcanzan alrededor de 1300 mm3 en los animales de control, lo cual es después de aproximadamente 28 días.

Los resultados (media y DE) muestran que los volúmenes del tumor en el día 28 son 1305±87 en el grupo control, mientras que en los grupos tratados con extracto de té verde y extracto de granada los valores son de 1026+98 (p<0.05) y 1011±91 (p<0.05), respectivamente. Mientras que en el tratamiento de combinación (extracto de té verde más extracto de granada) hay un efecto sinergístico definitivo en la reducción del tumor, 623+112 (p<0.001) . De este modo la inhibición es de 52.3% por la combinación en comparación con té verde (21.4%) o granada (22.5%) solamente.

Los resultados obtenidos, informados en la Tabla 15, muestran que la composición de la invención es más activa estadísticamente con respecto a los constituyentes sencillos.

Tabla 15 El complemento alimenticio o medicamento de conformidad con la presente invención se compone de ingredientes activos que son familiares a los operadores en el campo médico y ya en uso en la práctica clínica, y sus perfiles farmacotoxicológicos se conocen.

Su obtención por lo tanto es muy fácil, en cuanto a que estos productos han estado en el mercado durante mucho tiempo y son de un grado adecuado para la administración humana o animal.

En lo siguiente se reportan ejemplos no limitantes de composiciones de conformidad con la presente invención.

Composición 1 Extracto de té verde 250 mg; Extracto de granada 250 mg.

Composición 2 Extracto de té verde 250 mg; Extracto de granada 250 mg; Licopeno 1.25 mg; Selenio 82.5 ]ig; Zinc 20 mg.

Composición 3 Extracto de té verde 125 mg; Extracto de granada 125 mg; Licopeno 5 mg; Selenio 82.5 ig; ' Zinc 20 mg; Serenoa 160 mg; Isoflavona de soya 100 mg.

Composición 4 Extracto de té verde 125 mg; Extracto de granada 40 mg; Licopeno 5 mg; Selenio 55 µg,· Zinc 20 mg; Serenoa 320 mg; Isoflavona de soya 100 mg.

Composición 5 Extracto de té verde 125 mg; Extracto de granada 125 mg; Licopeno 5 mg; Selenio 82.5 µg; Zinc 20 mg; Serenoa 160 mg; Isoflavona de soya 100 mg; L-carnitina 200 mg.

Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (12)

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones :

1. Composición, caracterizada porque comprende como ingredientes activos extracto de té verde y extracto de granada .

2. Composición de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque comprende además licopeno, selenio, zinc, serenoa, isoflavona de soya y L-carnitina.

3. Composición de conformidad con las reivindicaciones 1 o 2, caracterizada porque el extracto de té verde está presente en una dosis de 25 a 800 mg; extracto de granada está presente en una dosis de 25 a 800 mg.

4. Composición de conformidad con las reivindicaciones 1 o 2, caracterizada porque licopeno está presente en una dosis de 0.03 a 30.0 mg; selenio está presente en una dosis de 8.2 a 500 ]ig; zinc está presente en una dosis de 1 a 200 mg; serenoa está presente en una dosis de 10 a 400 mg; isoflavona de soya está presente en una dosis de 10 a 500 mg; y Lcarnitina está presente en una dosis de 50 a 500 mg.

5. Composición de conformidad con la reivindicación 2, caracterizada porque el extracto de té verde está presente en una dosis de 250 mg; extracto de granada está presente en una dosis de 2.50 mg; licojDeno está presente en una dosis de 1.25 mg; selenio está presente en una dosis de 82.5 µg; zinc está presente en una dosis de 20 mg.

6. Composición de conformidad con la reivindicación 2, caracterizada porque el extracto de té verde está presente en una dosis de 125 mg; extracto de granada está presente en una dosis de 125 mg; licopeno está presente en una dosis de 5 mg; selenio está presente en una dosis de 82.5 µg; zinc está presente en una dosis de 20 mg; serenoa está presente en una dosis de 160 mg; isoflavona de soya está presente en una dosis de 100 mg.

7. Composición de conformidad con la reivindicación 2, caracterizada porque el extracto de té verde está presente en una dosis de 125 mg; extracto de granada está presente en una dosis de 40 mg; licopeno está presente en una dosis de 5 mg; selenio está presente en una dosis de 55 µg; zinc está presente en una dosis de 20 mg; serenoa está presente en una dosis de 320 mg; isoflavona de soya está presente en una dosis de 100 mg.

8. Composición de conformidad con la reivindicación 2, caracterizada porque el extracto de té verde está presente en una dosis de 125 mg; extracto de granada está presente en una dosis de 125 mg; licopeno está presente en una dosis de 5 mg; selenio está presente en una dosis de 82.5 ]ig; zinc está presente en una dosis de 20 mg; serenoa está presente en una dosis de 160 mg; isoflavona de soya está presente en una dosis de 100 mg; L-carnitina está presente en una dosis de 200 mg.

9. Composición de conformidad con las reivindicaciones 1 o 2, caracterizada porque es para la prevención o reducción del progreso de cáncer de próstata.

10. Uso de la composición de conformidad con la reivindicación 1 o 2, para la preparación de un medicamento para la prevención o reducción del progreso de cáncer de próstata.

11. Uso de la composición de conformidad con la reivindicación 1 o 2, para la preparación de un complemento alimenticio para la prevención o reducción del progreso de cáncer de próstata.

12. Uso de conformidad con la reivindicación 10 o 11, que comprende además co-enzimas, sustancias minerales, antioxidantes, vitaminas y agentes útiles para el tratamiento de cáncer de próstata.