MX2007015504A - Uso de fumagilina y sus derivados para aumentar la biodisponibilidad de lactonas macrociclicas. - Google Patents

Abstract

La invencion es concerniente con el uso de fumagilina y derivados analogos de la misma como inhibidores de transportadores celulares, tales como transportadores ABC y especialmente P-glicoproteina con el fin de incrementar la biodisponibilidad de ingredientes activos que pueden ser usados en el tratamiento de patologias tales como canceres o enfermedades parasitarias y especialmente con el fin de incrementar la biodisponibilidad de lactonas macrociclicas.

Description

USO DE FUMAGILINA Y SUS DERIVADOS PARA AUMENTAR LA BIODISPONIBILIDjAD DE LACTONAS MACROCICLICAS DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La invención es concerniente con el uso de fumagilina y sus derivados análogos, como inhibidores de transportadores celulares, tales como transportadores ABC y más particularmente de P-glicoproteina, con el fin de incrementar la biodisponibilidad de ingredientes activos que pueden ser usados en el tratamiento de patologías tales como cánceres o enfermedades parasitarias y en particular con el fin de incrementarla biodisponibilidad de lactonas macrocíclicas . Las lactonas macrociclicas o ML, tales como avermectina y milbemicinas, son moléculas antiparasitarias para uso veterinario que son muy poderosas, (activas contra endo- y exo-parásitos, larga permanencia, baja toxicidad) . Las avermectinas son compuestos de la siguiente fórmula general : La ivermectina B?a es el compuesto de la fórmula previa con X = -CH2CH2- y R?= CH(CH3)CH2CH3; La abamectina B?a es el compuesto de la fórmula previa con X = -CH=CH- y R?= CH (CH3) CH2CH3; La doramectina es el compuesto de la fórmula previa con X = -CH=CH- y R?= ciciohexilo; La eprinomectina es el compuesto de la fórmula previa con X = -CH=CH- y R?= CH (CH3) CH2CH3 y R2 = NHCOCH3. Otra avermectina, selamectina, es el compuesto de la siguiente fórmula: Las milbemicinas constituyen otra familia de ML. Entre la milbemicina, la nemadectina es el compuesto de la siguiente fórmula : y la moxidectina es el compuesto de la siguiente fórmula: Las ventajas de ML son en el origen de un uso significativo en numerosos mamíferos (bovinos, ovinos, caprinos, puercos, caballos, perros y gatos). La ivermectina es también usada en medicina humana para el tratamiento de la Oncocerciasis (de Silva et al., 1997). La situación de las lactonas macrocíclicas en el mercado de medicamentos veterinarios es económicamente importante. Sin embargo, debido al uso no apropiado (uso de dosis o rutas de administración no recomendadas y/o uso en especies para las cuales no existe autorización de mercado) , los fenómenos de resistencia parasitaria han aparecido en numerosas especies. Debido a que no se han desarrollado moléculas novedosas, es de principal importancia optimizar el uso de lactonas macrocíclicas (ML) al respecto de que sean usadas seguramente. La actividad antiparasitaria de estos compuestos está enlazada directamente con la concentración del ingrediente activo en el organismo animal. Por consiguiente, la optimización de su efectividad es vía el incremento la cantidad de medicamento en el animal huésped después de la administración. Métodos fisiológicos y farmacológicos han sido usados para incrementar la biodisponibilidad de ML tales como la reducción en ingestión de alimentos en ovejas (Ali y Hennessy, 1996) , ayuno en caballos (Alvinerie et al., 2000), la co-administración de medicamentos (Lifschitz et al., 2002) o de compuesto natural (Dupuy et al., 2003) . De entre los numerosos factores que pueden modular la biodisponibilidad de ML, la P-glicoproteína o Pgp es reconocido como uno de los factores principales tanto en células (Dupuy et al., 2001b), en todo el animal (Alvinerie et al., 1999; Dupuy et al., 2003; Lifschitz et al., 2002) y en parásitos (Xu et al., 1998). En efecto, el transportador de membrana de la familia ""transportadores de cásete de enlace de ATP" involucrado en los mecanismos de poliquimiorresistencia (resistencias a multifármacos o MDR), control del flujo activo de numerosos compuestos en los que se incluyen ivermectina y moxidectina. Esta Pgp está presente al nivel de la barrera sangre-cerebro en donde protege el sistema nervioso central de la neurotoxicidad de la ivermectina (Roulet et al., 2003, Schinkel et al., 1994). la implicación de Pgp en la eliminación de ML mediante rutas biliares e intestinales, que son rutas de eliminación principales, ha sido demostrada (Laffont et al., 2002) . Los hepatocitos en ratas en cultivos primarios fueron usados para evaluar la habilidad de diferentes compuestos para incrementar la cantidad intracelular de moxidectina 14C. En este mcdelo, verapamilp (inhibidor reconocido de Pgp) o quercetina (un flavonoide natural que interfiere con Pgp) incrementa significativamente la cantidad de moxidectina 14C en los hepatocitos de ratas (Dupuy et al., 2001b; Dupuy et al., 2003). Similarmente, el ketoconazol incrementa selectivamente la cantidad intracelular de moxidectina 14C, un efecto que está enlazado a su acción inhibidora concomitante sobre Pgp y los citocromos P450, dos sistemas que están presentes en los hepatocitos. Además, la modulación de Pgp es también útil para incrementar la biodisponibilidad de diferentes ingredientes activos de ML. la modulación de Pgp es por ejemplo, útil dentro de la estructura del tratamiento de cáncer, con el fin de incrementar la biodisponibilidad de ingredientes activos anticancerosos . Por consiguiente, varios agentes que modulan Pgp han sido usados recientemente para tratar leucemias mieloblásticas agudas (AML) y leucemias linfoblásticas agudas (ALL) en humanos (Roos 2004), como se resume en la Tabla 1 a continuación: Tabla 1 : Uso de compuestos que modulan la actividad de Pgp con el fin de tratar leucémicas mieloblásticas agudas (AML) y leucemias linfoblásticas agudas (ALL) en humanos (Roos 2004) Tipo de Tratamiento Compuestos que modulan la actividad Pgp LAM Daunorubicma Ciclospopna LAM Etoposide, mitoxantrona Ciclosponna LAM Etoposide, daunorubicina Valspodar (PSC 833) LAM, LAL Mitoxantrona Quinina Sorprendentemente, los inventores han descubierto gue la fumagilina y sus derivados hacen posible incrementar la biodisponibilidad de ML, que proporciona una nueva solución técnica al problema descrito anteriormente. La fumagilina es producida por el hongo Aspergillus fumiga tus, que es activo in vivo en las microsporidia de abejas e in vi tro dentro de las esporas de Enterocytozoon Bieneusi (Fumidil B - CEVA Santé Animale) . En humanos, la fumagilina ha sido usada por cuarenta años para tratar la amibiasis intestinal y es prescrita actualmente como aplicación local como queratoconjuntivitis provocada por microsporidia. Además, la fumagilina y sus análogos son inhibidores de angiogénesis vía la inhibición de proliferación celular endotelial (Pyun et al., 2004). Debido a sus propiedades antiangiogénicos, estos compuestos son usados en medicina humana para el tratamiento de cánceres. Un propósito principal de la invención es proporcionar composiciones que hacen posible incrementar la biodisponibilidad de ingredientes activos en el organismo humano y animal y sí mejorar tratamientos existentes, en particular en la estructura de enfermedades parasitarias o cancerosas . Un propósito más particular de la invención es proporcionar composiciones que hacen posible incrementar la biodisponibilidad de lactonas macrocíclicas y agentes antitumorales . Principalmente, la invención es concerniente con el uso de por lo menos un compuesto de fórmula general (I) que sigue: en la cual: - Ri es H o un Ci-ß alquilo lineal o ramificado; - R2 es H, un C?- alquilo, un arilo, un aril C?_ alquilo, un cicloalquilo, un cicloalquil C?- alquilo, o un grupo alquenilo con 1 a 10 átomos de carbono, tal como un grupo CH2Rd, en el cual Re es .un 2-metil-l-propenilo o un isobutilo opcionalmente sustituido por un grupo hidroxilo, amino, (C?_3 alquil) -amino o di (C?-3 alquil) -amino; - R es un átomo de H, un C?_4 alquilo o un C5-8 arilo que está opcionalmente sustituido por uno o más halógenos, tales como F, Cl, I, Br, un C?- alcoxilo o un C?_4 alquilo; - R4 es un átomo de H, un OH o un C?_4 alquilo; - R5 es la forma 0R7, en cuyo caso el enlace representa un solo enlace, o R5 es de la forma N en cuyo caso, el enlace ^t representa un enlace en posición a o ß; - R7 es escogido del grupo compuesto de: ' el átomo de H, " un grupo C1-10 alcanoilo o alquenoilo, saturado o insaturado, que puede estar sustituido en particular por 1 a 3 sustituyentes escogidos de amino, (C1-6 alquil) -amino, di(C?_e alquil ) -amino, nitro, halógeno, hidroxi, C?_6 alcoxi, ciano, carbamilo, carboxilo, (C1-6 alcoxi) -carbonilo, carboxi- (C?_6 alcoxi), fenilo opcionalmente sustituido (por 1 a 5 sustituyentes escogidos de los átomos de halógeno, los C?-6 alquilos, C?-6 alcoxi, alquilos halogenados y nitroalquilos) y los grupos heterocíclicos aromáticos, 1 un grupo arilo que puede estar sustituido por un átomo de halógeno o por un C2_6 alquilo, amino, hidroxi, C1-6 alcoxi, ciano, carbamilo o carboxilo, » un heterocil-carbonilo que puede estar sustituido por un átomo de halógeno o por un C2-5 alquilo, amino, hidroxi, C?_6 alcoxi, ciano, carbonilo o carboxilo, " un carbamilo que puede estar sustituido por uno o dos sustituyentes escogidos de los grupos C?_6 alquilo, por sí mismo siendo aptos de ser sustituidos por un mono- o di- (C?_6 alquil) -amino, C?-6 alcanoilo, cloroacetilo, dicloroacetilo, tricloroacetilo, (C?_6 alcoxi) -carbonil-metilo, carboxi-metilo, fenilo opcionalmente sustituido (por uno a cinco sustituyentes escogidos de los átomos de halógeno, los C?_6 alquilo, los C?-6 alcoxi, los alquilos halogenados y nitroalquilos), grupo naftilo o benzoilo; " un Ci-io alquilo con una cadena lineal o ramificada, que puede opcionalmente ser epoxidado y/o sustituido en particular por uno a tres sustituyentes escogidos de amino, (C?_6 alquil) -amino, di-(C?-6 alquil ) -amino, nitro, halógeno, hidroxi, C?-6 alcoxi, ciano, carbamilo, carboxilo, (C?_ 6 alcoxi) -carbonilo, carboxi- (C?_6 alcoxi), fenilo opcionalmente sustituido (por uno a cinco sustituyentes escogidos de los átomos de halógeno, los C?-6 alquilo, los C?_6 alcoxis, los alquilos halogenados y nitroalquilos) y grupos heterocíclicos aromáticos, " un C?-?o alquenilo con cadena lineal o ramificada, " un C?-?o alquinilo con cadena lineal o ramificada, " un residuo de hidrocarburo cicloalifático, " un (amina cíclica) carbonilo, • un bencen-sulfonilo, que puede estar opcionalmente sustituido por uno a tres sustituyentes escogidos de los C?-6 alquilos y átomos de halógeno, " un Ci-io alquil-sulfonilo, que puede estar opcionalmente sustituido por uno a tres sustituyentes escogidos de amino, (C?-6 alquil) -amina, di-(C?-6 alquil) -amino, nitro, halógeno, C?-6 alcoxi, ciano, carbamido, carboxilo, (C?-6 alcoxi) carbonilo, carboxi- (C?-6 al) -alcoxi, fenilo opcionalmente sustituido (por uno a cinco sustituyentes escogidos de átomos de halógeno, C?-6 alquilo, C?-6 alcoxi, alguilos halogenados y nitroalquilos) y grupos heterocíclicos aromáticos, • un sulfamilo, que puede estar opcionalmente sustituido por uno o dos sustituyentes escogidos de C?-6 alquilo y un fenilo opcionalmente sustituido (por uno a cinco sustituyentes escogidos de átomos de halógeno, C?-6 alquilo, C?_6 alcoxi, alquilos halogenados y nitroalquilos), • un alcoxi-carbonilo, que puede estar opcionalmente sustituido por uno a tres sustituyentes escogidos de amino, (C?-6 alquil) -amino, di-(C?-6 alquil) -amino, nitro, halógeno, C?_6 alcoxi, ciano, carbonilo, carboxilo, (C?_6 alcoxi) -carbonilo, carboxi- (C?-6 alcoxi), fenilo opcionalmente sustituido (por uno a cinco sustituyentes escogidos de átomos de halógeno, C?_6 alquilo, C?-6 alcoxi, aquilos halogenados y nitroalquilos) y grupos heterocíclicos aromáticos, " un fenoxicarbonilo, que puede estar opcionalmente sustituido por uno a tres sustituyentes escogidos de los átomos de halógeno y C?-6 alquilos, C(0)-NH-C(0)-CH2-C1 - cada uno de Rs y Rg representan un átomo de H, un grupo hidrocarburo opcionalmente sustituido o un grupo acilo opcionalmente sustituido o R8 y R9 pueden constituir un anillo junto con el átomo de nitrógeno adyacente; como adyuvante para la preparación de un medicamento planeado para incrementar la biodisponibilidad de ingredientes activos, en particular de ingredientes activos antiparasitarios o anticancerosos y por consiguiente, para potenciar sus efectos, estos ingredientes activos son capaces de ser reconocidos y enlazarse a transportadores celulares con el fin de ser transportados fuera de estas células sin ser aptos de alcanzar su objetivo terapéutico intracelular, los transportadores están presentes en la células del organismo humano o animal al cual los ingredientes activos son administrados y si es apropiado, a las células de parásitos contra las cuales estos ingredientes activos son administrados. Más en particular, la materia de la invención es el uso mencionado anteriormente de los compuestos de fórmula (I), escogidos de los siguientes compuestos de fórmula (la): en la cual Ri, R2, R3 y R4 son como se definen anteriormente. Más en particular, la invención es concerniente con el uso mencionado anteriormente de los compuestos de la fórmula (Ib) : en la cual: - Ri es H o un Ci-s alquilo lineal o ramificado: - R2 es H, un grupo C?_4 alquilo o un grupo alquenilo conl a 10 átomos de carbono tal como un grupo CH2R6 en el cual R6 es un 2-metil-l-propenilo . Más en particular, la invención es concerniente con el uso mencionado anteriormente del compuesto de fórmula (I) anterior correspondiente a fumagilina de la siguiente fórmula (II) : "Adyuvante" significa un compuesto gue es parte de una composición farmacéutica para un medicamento con el fin de "potenciar", en otras palabras, para intensificar y/o habilitar y/o acelerar la acción del compuesto base, el compuesto base también es llamado en este caso "ingrediente activo". "Biodisponibilidad" de un ingrediente activo significa la cantidad de ingrediente activo efectivamente presente en un organismo humano o animal y/o la cantidad de ingrediente activo efectivamente presente en una parte específica de un organismo humano o animal, en particular en uno o más órgano (s) específico (s) de un organismo humano o animal y en particular en un subconjunto de células de uno o más tipo(s) específicos (s) de un organismo humano o animal. la "biodisponibilidad" puede también indicar la proporción del ingrediente activo administrado a un organismo humano o animal que es efectivamente activo o capaz de actividad en el organismo. Más en particular, la materia de la invención es el uso mencionado anteriormente de los compuestos de la fórmula (I) anterior y en particular de los compuestos de la fórmula (la), (Ib) y la fumagilina de la formula (II) para la preparación de un medicamento propuesto para incrementar la biodisponibilidad de ingredientes activos, más en particular de ingredientes activos parasitarios, aptos de ser reconocidos y de enlace a transportadores celulares ATP dependientes, también llamados transportadores ABC (cásete de enlace ATP9 o transportadores de secuencia de enlace de ATP, estos transportadores son descritos en particular en Dean et al. (2001), Genome Research, 11: 1156-1166, and Dean et al. (2001), Journal of Lipid Research, 42:1007-1017. Más en particular, la invención es concerniente con el uso mencionado anteriormente de los compuestos de fórmula U(I) anterior y en particular de los compuestos de fórmula (IA), (Ib) y la fumagilina de fórmula (II), para la preparación de un medicamento diseñado para incrementar la biodisponibilidad de ingredientes activos, más en particular de ingredientes activos parasitarios capaces de ser reconocidos y de enlace a transportadores de ABC escogidos de P-glicoproteína (Pgp, también llamada ABCB1), los transportadores ABCC (ABCC1 a 8, también llamados MRP1 a 8), o los transportadores ABC G2. Más en particular, la materia de la invención es el uso mencionado anteriormente de los compuestos de la fórmula (I) anterior y en particular de los compuestos de fórmula (la), (Ib) y fumagilina de fórmula (II), como inhibidores de la función de transporte de transportadores celulares mediante interacción entre estos compuestos y estos transportadores, para la preparación de un medicamento diseñado para incrementar la biodisponibilidad de ingredientes activos, más en particular de ingredientes activos antiparasitarios, aptos de ser reccnocidos y de enlace a estos transportadores. Más en particular, la invención es concerniente con el uso mencionado anteriormente con los compuestos de fórmula (I) anterior y en particular de los compuestos de fórmula (la), (Ib) y fumagilina de fórmula (II), como inhibidores de la función de transporte de Pgp mediante interacción de estos compuestos y Pgp, para la preparación de un medicamento diseñado para incrementar la biodisponibilidad de ingredientes activos, más en particular, de ingredientes activos antiparasitarios, aptos de ser reconocidos y de enlace a Pgp. Ventajosamente, los compuestos mencionados anteriormente de fórmula (I) son usados como adyuvantes para la preparación de un medicamento diseñado para incrementar la biodisponibilidad de ingredientes activos antiparasitarios o anticancerosos escogidos de los sustratos de transportadores celulares y más en particular de sustratos de los transportadores ABC definidos anteriormente, en particular Pgp, dentro de la estructura del tratamiento de patologías parasitarias o cancerosas.

Ventajosamente, los compuestos mencionados anteriormente de fórmula (I) usados comp adyuvantes para la preparación de un medicamento diseñado para incrementar la biodisponibilidad de ingredientes activos antiparasitarios o anticancerosos dentro de la estructura del tratamiento de patologías parasitarias o cancerosas son escogidos de los compuestos de fórmula (la), (Ib) y fumagilina de fórmula (II). Preferiblemente, el compuesto mencionado anteriormente de fórmula (I), usado como adyuvante para la preparación de un medicamento diseñado para el tratamiento de patologías parasitarias o cancerosas es fumagilina de fórmula (II). Ventajosamente, el uso mencionado anteriormente de los compuestos de fórmula (I) anterior y más en particular de los compuestos de la fórmula (la), (Ib) y fumagilina de fórmula (II), está caracterizado porque los ingredientes activos antiparasitarios son escogidos de las lactonas macrocíclicas, tales como las avermectinas y milbemicinas . ventajosamente, el uso mencionado anteriormente de los compuestos de fórmula (I) anterior y más en particular de los compuestos de la fórmula (la), (Ib) y fumagilma de fórmula (II), está caracterizado porque los ingredientes activos antiparasitarios son escogidos de avermectina, tales como ivermectina, abamectma, doramectma, eppnomectina y selanectma, dentro de la estructura del tratamiento de enfermedades parasitarias, endoparasitarias y exoparasitapas .

Ventajosamente, el uso mencionado anteriormente de los compuestos de fórmula (I) anterior y más en particular de los compuestos de la fórmula (la), (Ib) y fumagilina de fórmula (II), están caracterizados porque los ingredientes activos antiparasitarios son escogidos de milbemicinas, tales como moxidectina o nemadectina dentro de la estructura de tratamiento de enfermedades parasitarias, endoparasitarias o exoparasitarias . Las enfermedades endoparasitarias son concernientes con infecciones parasitarias internas, en tanto que las enfermedades exoparasitarias son concernientes con infecciones parasitarias externas. Dentro de las enfermedades parasitarias tratadas ventajosamente por ML y que caen por consiguiente dentro de la estructura de la invención están en particular: - estrongilosis gastrointestinal (adulta y larva L3 o L4): Haemonchus, Ostertagia, Trichostrongylus, Cooperia, Oesophagostonum, Nematodirus, Bunostonum; - estrongilosis pulmonar: Dictyocaulus viviparus; - hipodermosis (todas las etapas larvales) : Hypioderma bovis y lineatum; - sarna animal sarcotóxica y sórtica; - ftiriasis; - filariosis; - oncocerciasis; Igualmente de manera ventajosa, el uso mencionado anteriormente de los compuestos de la fórmula (I) anterior y más en particular de los compuestos de la fórmula (la), (Ib) y fumagilina de fórmula (II), está caracterizado porque los ingredientes activos anticancerosos son escogidos de los sustratos de transportadores celulares y más en particular, sustratos de los transportadores ABC definidos anteriormente, en particular Pgp, dentro de la estructura de les tratamientos de cánceres y más en particular cánceres resistentes a quimioterapias . "Cánceres resistentes a quimioterapias" significa cánceres que en respuesta a tratamientos químicos sobreexpresan transportadores celulares, tales como transportadores ABC, en particular el Pgp. Mediante el flujo del ingrediente activo fuera de la célula, estos transportadores reducen o neutralizan el efecto terapéutico esperado. Los ingredientes activos anticancerosos que son los sustratos de los transportadores celulares mencionados anteriormente y más en particular Pgp, son en particular: - antibióticos antitumorales tipo antraciclina y en particular: * daunorubicina y doxorubicina (usados en el tratamiento de leucemias agudas, leucemias mieloides crónicas con transformación aguda, linfoma de Hodgkin y no de Hodgkin) ; * mitomicina C (usado en el tratamiento de cánceres de pecho, esófago, estómago, vejiga), * mitoxantrona (usada en el tratamiento de leucemia linfocítica mieloide o aguda, cáncer de pecho, próstata, ovario) , * adriamicina (usada en el tratamiento de leucemias agudas, leucemias mieloides crónicas con transformación aguda, linfoma de Hodgkin y no de Hodgkin) , * actinomicina-D (usada en el mismo caso como adriamicina) . - taxanos y en particular: * docetaxel (usado en el tratamiento de linfomas, de cáncer de pecho, esófago, estómago, vejiga, próstata, útero), * paclitaxel (usado en el tratamiento de cáncer de ovario, pulmón, sarcoma de Kaposi enlazado a SIDA) , - alcaloides y en particular: * vinblastina (usada en el tratamiento de cáncer de pecho, vejiga, testículos y linfomas), * vincristina (usado en el tratamiento de leucemia, linfomas, sarcomas, cáncer de pulmón, útero, cerebro) , - epidopodofilotoxinas y en particular: * etoposide (usado en el tratamiento de cáncer de testículo y ciertos tipos de cáncer de pulmón) , * irinotecana (usada en el tratamiento de cáncer colorrectal), * teniposide (usado en el tratamient de cáncer de pulmón, cerebro, pecho) , * topotecana .

Otro aspecto de la invención es concerniente con una ccmposición farmacéutica caracterizada porque comprende por lo menos un compuesto de fórmula (I) como se define anteriormente en combinación con uno o más ingredientes activos capaces de ser reconocidos y enlazarse a los transportadores celulares mencionados anteriormente y más en particular a los transportadores ABC definidos anteriormente, en particular Pgp, para ser transportados fuera de las células del organismo humano o animal. Más en particular, la materia de la invención es una composición farmacéutica como se describe anteriormente, que comprende por lo menos un compuesto de fórmula (I) escogido de los compuestos de fórmula (la), (Ib) o (II) definida anteriormente . De acuerdo con una modalidad preferida, la composición farmacéutica está caracterizada porque los ingredientes activos, en combinación con un compuesto de fórmula (I) como se define anteriormente y más en particular con un compuesto de fórmula (la), (Ib) o fumagilina de la fórmula (II) son ingredientes activos antiparasitarios o anticancerosos. De acuerdo con una modalidad más particular, la composición farmacéutica esta caracterizada porque comprende por lo menos un compuesto de formula (I) como se define anteriormente y más en particular con un compuesto de fórmula (la), (Ib) o fumagilina de la fórmula (II), en combinación con ingredientes activos antiparasitarios escogidos de lactona macrocistica, tales como avermectinas y milbemicinas . De acuerdo con una modalidad particularmente preferida, la composición farmacéutica esta caracterizada porque los ingredientes activos antiparasitarios escogidos de avermectmas, tales como ívermectma, abamectma, doramectma, eprinomectma o selamectma. De acuerdo con otra modalidad particularmente preferida, la composición farmacéutica está caracterizada porque los ingredientes activos antiparasitarios son escogidos de milbemicmas tales como moxidectma o nemadectma. Ventajosamente, la composición farmacéutica mencionada anteriormente está caracterizada porque contiene por lo menos un compuesto de fórmula (I) como se define anteriormente y mas en particular cen un compuesto de formula (la), (Ib) o fumagilina de la fórmula (II), a una dosificación apropiada para una administración diaria de aproximadamente 0.2 a aproximadamente 2 mg/Kg. Ventajosamente, la composición farmacéutica mencionada anteriormente está caracterizada porque el ingrediente activo antiparasitapo y el compuesto de fórmula (I) un como se define anteriormente y más en particular con un compuesto de fórmula (la), (Ib) o fumagilina de la fórmula (II), están presentes en una proporción en peso comprendida entre aproximadamente 1:1 y aproximadamente 1:100, en particular entre aproximadamente 1:1 y aproximadamente 1:20. En general, el compuesto de fórmula (I) como se define anteriormente y más en particular con un compuesto de fórmula (la), (Ib) o fumagilina de la fórmula (II), debe en efecto ser dosificado en exceso con respecto al ingrediente activo, debido a su afinidad por los transportadores celulares mencionados anteriormente, en particular Pgp, es más baja que aquella del ingrediente activo. Más en particular, la invención es concerniente con una composición farmacéutica como se define anteriormente que comprende la fumagilina mencionada anteriormente de fórmula (II) en combinación con uno o más ingredientes activos antiparasitarios como se definen anteriormente. De acuerdo con otra modalidad preferida, la composición farmacéutica mencionada anteriormente está caracterizada porque comprende por lo menos un compuesto de fórmula (I) como se define anteriormente en combinación con ingredientes activos anticancerosos escogidos de los sustratos de los transportadores celulares mencionados anteriormente y más en particular de sustratos de los transportadores ABC definidos anteriormente, en particular Pgp; preferiblemente, esta composición farmacéutica comprende por lo menos un compuesto de fórmula (I) escogido de los compuestos de fórmula (la), (Ib) o (II) definidos anteriormente; esta composición está caracterizada de manera particularmente ventajosa en que contiene por lo menos un compuesto de fórmula (I), (la), (Ib) o (II) definida anteriormente a una dosificación apropiada para una administración diaria de aproximadamente 0.2 a aproximadamente mg/Kg y en una manera todavía más ventajosa, esta composición farmacéutica está caracterizada porque el ingrediente activo anticanceroso y el compuesto de fórmula (I), (la), (Ib) o (II) definida anteriormente, están presentes en una proporción en peso comprendida entre aproximadamente 1:1 y aproximadamente 1:100 y en particular entre aproximadamente 1:1 y aproximadamente 1.20. Más en particular, la materia de la invención es una composición farmacéutica que comprende por lo menos un compuesto de la fórmula (I) como se define anteriormente y más en particular un compuesto de fórmula (I), (la), (Ib) o fumagilina de fórmula (II), en combinación con por lo menos un antibiótico antitumoral tipo antraciclina y/o un taxano y/o un alcaloide y/o una epipodofilotoxina como se menciona anteriormente . Más en particular, la invención es concerniente con una composición farmacéutica como se define anteriormente, que comprende la fumagilina de la fórmula (II), en combinación con uno o más ingredientes activos anticancerosos como se definen anteriormente . En sus varias modalidades, las composiciones farmacéuticas de acuerdo con la invención están caracterizadas más ventajosamente en que están en una forma que puede ser administrada en una ruta parenteral u oral. Otra materia de la invención es concerniente con productos de combinación para uso que es simultánea, separada o esparcida en el tiempo en terapia, en particular antiparasitaria o anticancerosa, utilizando un ingrediente activo capaz de ser reconocido y enlazarse a los transportadores celulares mencionados anteriormente y más en particular a los transportadores ABC definidos anteriormente, en particular a Pgp, para ser transportado fuera de las células del organismos humano o animal, caracterizados porque contienen un ingrediente activo como se define anteriormente y por lo menos un compuesto de fórmula (I) como se define anteriormente y más en particular fumagilina de fórmula (II): Ventajosamente, el compuesto de fórmula (I) en los productos de combinación es escogido de los compuestos de fórmula (la), (Ib) o (II) definida anteriormente. Preferiblemente, los productos de combinación de acuerdo con la invención están caracterizados porque contienen por lo menos un ingrediente activo capaz de ser reconocido y de enlace a los transportadores celulares mencionados anteriormente y más en particular a los transportadores ABC definidos anteriormente, en particular a Pgp y por lo menos un compuesto de fórmula (I) como se define anteriormente y más en particular un compuesto de fórmula (la), (Ib) o de fumagilina de fórmula (II), en una proporción en peso de aproximadamente 1:1 a aproximadamente 1:100 y en particular de aproximadamente 1:1 a aproximadamente 1:20. Más en particular, los productos de combinación de acuerdo con la invención, para un uso que es simultáneo, separado o esparcido en el tiempo, en terapia antiparasitaria, están caracterizados porque contienen por lo menos un ingrediente activo antiparasitario y por lo menos un compuesto de fórmula (I) como se define anteriormente y más en particular un compuesto de fórmula (la), (Ib) o fumagilina de fórmula (II). Ventajosamente, los productos de combinación de acuerdo con la invención están caracterizados porque los ingredientes activos antiparasitarios son escogidos de lactonas macrocíclicas, tales ccmo avermectinas y milbelicinas . En una modalidad más particular, los productos de combinación de acuerdo con la invención están caracterizados porque los ingredientes activos antiparasitarios son escogidos de avermectinas, tales como ivermectina, abamectina, doramectina, eprinomectina o selamectina, dentro de la estructura de tratamiento de enfermedades parasitarias, endoparasitarias y ectoparasitarias .

Más en particular, los productos de combinación están caracterizados porque los ingredientes activos antiparasitarios son escogidos de milbelicinas, tales como moxidectina o nemadectina, dentro de la estructura de las enfermedades ectoparasitarias. Más en particular, los productos de combinación están caracterizados porque los ingredientes activos antiparasitarios son escogidos de milbelicinas, tales como moxidectina o nemadectina, dentro de la estructura de tratamiento de enfermedades parasitarias, endoparasitarias o ectoparasitillas.

Ventajosamente, los productos de combinación están caracterizados porque contienen por lo menos un ingrediente activo antiparasitario y por lo menos un compuesto de fórmula (I) como se define anteriormente y más en particular fumagilina de fórmula (II) , en una proporción en peso de aproximadamente 1:1a aproximadamente 1:100 y en particular de aproximadamente 1:1 a aproximadamente 1:20. Más en particular, la materia de la invención son los productos de combinación para un uso que es simultáneo, separado o esparcido en el tiempo, en terapia antiparasitaria, caracterizado porque contiene por lo menos un ingrediente activo antiparasitario como se define anteriormente y fumagilina de fórmula (II) como se menciona anteriormente. De acuerdo con otra modalidad ventajosa, los productos de combinación de acuerdo con la invención, para un uso que es simultáneo, separado esparcido en el tiempo, en terapia de cáncer, están caracterizados porque contienen por lo menos un ingrediente activo anticanceroso y por lo menos un compuesto de fórmula (I) como se define anteriormente y más en particular un compuesto de fórmula (la), (Ib) o fumagilina de fórmula (II). Preferiblemente, los productos de combinación están caracterizados porque los ingredientes activos anticancerosos son escogidos de los sustratos de los transportadores celulares mencionados anteriormente y más en particular, sustratos de los transportadores ABC definidos anteriormente, en particular Pgp, dentro de la estructura de tratamiento de cánceres y más en particular, de cánceres resistentes a quimioterapias y son escogidos más particularmente de antibióticos antitumorales tipo antraciclina, taxanos, alcaloides y epipodofilotoxinas como se menciona anteriormente. En una manera particularmente preferida, los productos de combinación están caracterizados porque contienen por lo menos un ingrediente activo anticanceroso y por lo menos un compuesto de fórmula (I) como se define anteriormente y más en particular un compuesto de fórmula (la), (Ib) o fumagilina de fórmula (II), en una proporción en peso de aproximadamente 1:1 a 1:100 y en particular de aproximadamente 1:1 a aproximadamente 1:20.

Más en particular, la materia de la invención son los productos de combinación para un uso que es simultáneo, separado o esparcido en el tiempo, en terapia anticáncer, caracterizado porque contienen por lo menos un ingrediente activo anticanceroso como se define anteriormente y fumagilina de fórmula (II) como se menciona anteriormente.

Breve descripción de las Figuras La Figura 1 muestra el área bajo la curva (AUC) de moxidectina 14C después de dos tratamientos separados: en blanco el control (moxidectina); en negro: tratamiento con fumagilina. El eje y está en µg.mL.h"1. p<0.01 para el tratamientp con fumagilina (resultado significativamente diferente del control) . La Figura 2 muestra el efecto de diferentes compuestos sobre la acumulación de rodamina 123 en células LLCPK1 transfectadas con Pgp murina. En el eje x: la concentración del compuesto; en el eje y, el porcentaje de acumulación de Rho 123 en relación con el control (contenido de Rho 123/proteina) . Blanco, ivermectina; negro uniforme, valspodar; rayado, fumagilina . La Figura 3 muestra la acumulación de Rho 123 en Mdrla LLC-PKl después del tratamiento mediante fumagilina. En el eje x, la concentración de fumagilina en µM; en el eje y, el porcentaje de efecto relativo al efecto de valspodar (modelado de acuerdo con el modelo de Hill) .

Parte experimental En esta parte experimental, en primer lugar se muestra la capacidad de fumagilina para incrementar la concentración intracelular de moxidectina 14Cen hepatocitos de rata (Ejemplo 1) . Su capacidad para interferir con la función de Pgp en las células epiteliales de un riñon de puerco transfectado con Pgp murino (Mdr la-LLCPKl) es luego evaluada, como se resume en el Ejemplo 2. La función de transporte Pgp es evaluada mediante la acumulación intracelular de rodamina 123, un sustrato conocido de Pgp. Este modelo es particularmente apropiado para detectar compuestos que interactúan con Pgp (Hamada et al., 2003).

Compuestos químicos y medios La solución estándar de moxidectina 14C (radiopureza = 98%, pureza química > 99%, actividad específica = 14.8 µCi/mg) fue proporcionada por Strong-Dodge Santé Animale (Tours, Francia) . La fumagilina fue proporcionada por by CEVA Santé Animale (Libourne, Francia) . Valspodar (VSP) fue proporcionado amablemente por Novartis (Basilea, Suiza). Dimetil-sulfóxido (DMSO), dodecil sulfato de sodio (SDS), colágeno, rodamina 123 (Rho123) , tripsina-EDTA e ivermectina fueron comprados de Sigma Chimie (Saint-Quentin Fallavier, France) . Medio 199, solución salina de pH regulado de fosfato (PBS 10X) , suero de becerro fetal, solución salina de pH regulado de Hank (HBSS) sin rojo de fenol, penicilina, estreptomicina y geniticina (G418) se originan de InVitrogen (Cergy Pontoise, Francia) . las cajas de cultivo son de Nunclon (Roskilde, Dinamarca), los matraces de cultivo y cajas de cultivo de 24 cavidades de Sarstedt Francia (Orsay, Francia) . El equipp de ácido bicinoconínico se origina de Interchim (Montlu?on, Francia) . Acetonitrilo y metanol (calidad RS para la cromatografía líquida de alto desempeño9 fueron comprados de Cario Erba (Milano, Italia) . El agua usada durante este estudio fue de calidad ultra-pura (dispositivo MilliQ AlO, Millipore ITS, Saint-Quentin, Francia) .

Aislamiento de hepatocitos , cultivo y tratamiento El aislamiento y cultivo de hepatocitos de rata han sido descritos previamente (Dupuy et al., 2001b). Los hepatocitos son distribuidos en cajas de cultivo y mantenidos a 37°C durante 12 horas (horno al 5% de C02) . Las células son cultivadas en presencia de moxidectina 14C 5 µM (control) +/-fumagilina 100 µM. Después de 0, 6, 24, 48 y 72 horas, las incubaciones son detenidas (n = 3 para cada tratamiento) , los medios recolectados y los hepatocitos cosechados mediante diasociación mecánica en solución dalina de pH regulado de fosfato (PBS IX). los medios y los hepatocitos son almacenados a -20°C hasta el análisis mediante cromatografía líquida de alto desempeño (HPLC) .

Mdrla-LLCPKl y acumulación intracelular de rodamina 123 las células transfectadas con la Pgp murina Mdrla-LLCPKl fueron cultivadas en medio 199 complementado con penicilina (100 unidades/ml) y estreptomicina (100 µg/ml), suero de becerro fetal al 10% y sulfato de geniticina (G418, 400 µg/ml) como agente de selección de Pgp. Las células confluentes fueron subcultivadas mediante tripsinación cada semana y el medio renovado dos veces a la semana. Son mantenidos a 37°C en una atmósfera controlada a 5% de C02. Con el fin de monitorear la Pgp en las células Mdrla-LLCPKl , se mide la acumulación intracelular de Rhol23. las células Mdrla-LLCPKl son distribuidas sobre las cajas de cultivo de células 824 cavidades) a una proporción de 1.5X105 células/cavidad. Son cultivadas durante 48 horas a 37°C para alcanzar la confluencia en 1 ml de medio sin G418. El medio es eliminado y las células lavadas con 0.5 ml de PBS IX. Las células son cultivadas durante 2 horas a 37°C con 0.2 ml de medio HBSS gue contiene Rho123 10 µM (HBSS/DMSO, 50/50, v/v) +/- 5 µM VSP (in DMSO) +/-10 µM IVM (in DMSO) +/- 1, 5, 10, 50 y 100 µM de fumagilina (en DMSO) . Después de 2 horas, el medio de cultivo es eliminado, las células lavadas con 0.5 ml de OBS IX para eliminar el Rho123 en exceso. Las células son sometidas a lisis mediante la adición de 0.3 ml de PBS IX/O.5% dodecil sulfato de sodio al 0.5% (50/50 v/v) en cada cavidad. Después de 10 minutos a temperatura ambiente, se agregan 0.3 ml de PBS IX a cada cavidad cuando luego el lisado total (0.6 ml9 es transferido a un tubo de plástico de 2 ml y almacenado a -20°C hasta que es analizado mediante espectrofluorimetría .

Cuantificación de datos y análisis : moxidectina 14C en hepatocitos cultivados La moxidectina 14C es cuantificada en el medio y los hepatocitos mediante una técnica de HPLC acoplada con detección de radioactividad en línea (Dupuy et al., 2001b). esta técnica permite que la moxidectina 14C y su metabolito principal (monohidroximetil moxodectina C29) en hepatocitos de rata sea detectada y cuantificada. La radioactividad es medida mediante conteo de centelleo líquido (contador Kontron Beta V) . La radioactividad inicial total del medio inicial a moxidectina 1C a 5 µM +/- fumagilina 100 µM corresponde al valor de 100%. Debido a la concentración de moxidectina detectada en los hepatocitos (ng.ml"1) y el porcentaje de radiactividad introducido inicialmente, las áreas bajo la curva de tiempo-concentración son calculadas a partir del primero al último punto experimental utilizando el método trapezoidal (Gibaldi y Perrier, 1982) .

Cuantificación de datos y análisis : acumulación de Rho123 en Mdrla-LLCPKl La fluorescencia de Rho123 es medida utilizando un fluorímetro (Perkin Elmer LS50B, ?max excitación = 507 nm; ?max emisión = 529 nm) luego estandarizada con el contenido de proteína de cada cavidad reacción de detección colorimétrica, equipo BCA) . Los resultados son expresados en porcentaje de acumulación de Rho 123 en células tratadas (VSP o IVM o fumagilina) en relación con las células de control que contienen solamente Rho123. Con el fin de comparar las diferentes moléculas, VSP es definido como el compuesto por el cual Rho123 está al máximo y por consiguiente corresponde a una inhibición del 100% de Pgp. Los resultados obtenidos fueron modelados de acuerdo con el modelo de Hill (Programa Scientist, micromath research, San Luis, USA) .

Análisis estadístico El promedio y la desviación estándar fueron determinadas para todos los parámetros estudiados. Todos los datos fueron sometidos a la prueba de Fischer (prueba de Fischer PLSD)vía elementos de programa Statview (Abacus Concept, Berkeley, USA) . En todos los casos, un valor de p < 0.05 es considerado significativo.

Ejemplo 1: hepatocitos de rata La viabilidad de cultivos de hepatocito de ratas (exclusión de azul de tripán) es mayor del 80% y no se observó ningún cambio morfológico durante el cultivo por 72 horas, cualquiera que sea el tratamiento. El compuesto principal detectado es moxidectina y las cantidades intracelulares son dadas en la tabla 2 a continuación. El metabolito principal correspondiente a C2g monohidroximetilo ya descrito durante un estudio previo (Dupuy et al., 2001b) representa solo el 4% (valor máximo) de la sustancia original. La fumagilina incrementa significativamente la cantidad de moxidectina intracelular con un máximo a 6 horas en los controles y después de 24 horas en las células tratadas por fumagilina. La reducción en la concentración de moxidectina en los hepatocitos es más rápida en los controles (6 horas post-tratamiento) gue aquellos tratados por fumagilina (post-tratamiento de 24 horas). La concentración del metabolito principal se incrementa de 6 horas para alcanzar su valor máximo 24 horas después del tratamiento y su cinética de producción no es afectada, la exposición de las células a moxidectina es cuantificada por el área de tiempo de concentración bajo la curva calculada en el curso del experimento (Figura 1). La fumagilina incrementa significativamente por 655 la cantidad de moxidectina en los hepatocitos en un periodo de 72 horas.

Tabla 2 : cantidad de moxidectina 14C Duración del cultivo Moxidectipa Moxidectina + fumagilina (hora) 0 4.5 + 1.25 7.05 + 0.24 6 72.95 + 9.98 79.29 + 1.01 2 52.60 ± 5.94 82.94 ± 14.97** 48 22.19 ± 4.00 27.88 + 2.67 72 11.98 ± 1.30 16.22 ± 1.21 ° Los valores representan el promedio + desviación estándar de tres ca^as de cultivo diferentes. ** Significativamente diferentes a células tratadas por moxidectma . P < 0.01 Ejemplo 2 : Mdrla-LLCPKl la acumulación intracelular de Rho123 fue monitoreada con el fin de evaluar el efecto de fumagilina sobre la actividad de Pgp en células Mdrla-LLCPKl . este modelo fue validado utilizando dos compuestos conocidos como agentes que interfieren con Pgp: IVM y VSP. Los resultados de fluorescencia fueron estandarizados en relación con la cantidad de proteína.

El efecto inducido por VSP (10 µM) es considerado el valor máximo (100%) para la acumulación de Rho 123 en las células (Figura 2). IVM 5 µM tiene un poder inhibidor muy cercano a aquel de VSP puesto que genera un efecto que representa el 95% del efecto de VSP. la fumagilina 810 a 100 µM) permitió que la cantidad de Rho 123 intracelular sea incrementada. Los resultados fueron luego expresados en porcentaje de acumulación en relación con VSP y fueron modelados utilizando el modelo de Hill. una curva sigmoide fue así generada (Figura 3). El efecto máximo (Emax) , definido como la cantidad máxima de Rho123 en las células en presencia de fumagilina, es alcanzada a una concentración de 50 µM de fumagilina y representa 43.7% del efecto obtenido en presencia de VSP. Ec50, la concentración necesaria para alcanzar el 50% del efecto máximo, es obtenido en presencia de 10 µM para fumagilina y representó el 21.85 del efectc de VSP.

Discusión de los experimentos En medicina veterinaria, la ML siguen siendo los compuestos antiparasitarios más efectivos en particular a cuenta de su amplio espectro de acción y su mecanismo de acción único. Para asegurar la calidad duradera de estos compuestos, es vital optimizar su uso. Una estrategia consiste de incrementar la biodisponibilidad del compuesto, luego la efectividad de ML está enlazada directamente a la presencia del medicamento en la circulación sistémica por una duración de tiempo suficiente. Los métodos farmacológicos para la administración de compuestos químicos o naturales (Dupuy et al., 2003; Lifschitz et al., 2002) están basados principalmente en la implicación del transportadores activos tales como Pgp que modulan la biodisponibilidad de ML en animales y en parásitos. Gracias al uso de los inhibidores de Pgp, la biodisponibilidad de IVM en ratas (Alvinerie et al., 1999) y moxidectina en ovejas (Dupuy et al., 2003) fue apta de ser incrementada. Además, la efectividad antiparasitaria fue incrementada por la co-administración de ML y agentes que interfieren con Pgp en cepas de parásitos resistentes a ivermectina y moxidectina. Esto demuestra que Pgp podría jugar un papel en la resistencia a nemátodos a ML (Molento y Prichard, 1999) . Estudios previos han demostrado que los hepatocitos de rata de cultivo primario representan una herramienta particularmente útil para el estudio de la función de interacciones Pgp y Pgp/citocromo P450 3A (Dupuy et al., 2001b; Hirsch-Ernst et al., 2001). En efecto, Pgp es expresada en hepatocitos y su expresión es incrementada con el paso del tiempo (Hirsch-Ernst et al., 1998). En este caso, la capacidad de la fumagilina, un medicamento usado en medicina veterinaria y humana, para incrementar la cantidad de moxidectina intracelular en ratas fue evaluada. Sorprendentemente, la fumagilina indujo una acumulación intracelular de moxidectina. En comparación con los resultados obtenidos previamente con este modelo celular, la acumulación intracelular de moxidectina obtenida con fumagilina (100 µM) es comparable con aquella obtenida con quercetina con un efecto máximo 24 horas después del tratamiento (Dupuy et al., 2003). La reducción con el tiempo de la concentración de moxidectina en los hepatocitos (contrcles, tratados con fumagilina) y también observados con quercetina, puede ser atribuido a la actividad de citocromos P450 que es la base para la producción de metabolitos que son expulsados rápidamente de los hepatocitos. Estos resultados muestran que la fumagilina pueden modular la acumulación intracelular de moxidectina en el sistema celular usado en la presente. El efecto obtenido con verapamilo o quercetina trae definidamente a juego la implicación de Pgp en la acumulación de moxidectina en el modelo de hepatocitos puesto que se sabe que estos compuestos interfieren con Pgp. la influencia de fumagilina sobre la acumulación intracelular de Rho123 en células Mdrla-LLCPKl (Schinkel et al., 1995) también se ha estudiado. Estas células sobreexpresan la Pgp murina y poseen poco o ningunas otros transportadores de la misma familia (transportadores ABC) o citocromos P450. Un estudio reciente mostró que diferentes ML permitieron el eflujo de Rho123 y la acumulación de calceina en células tumorales (Korystov et al., 2004). En nuestro modelo, la fumagilina permitió que la cantidad de Rho123 sea incrementada de manera dependiente de la dosis, que implica una interacción con Pgp. El modelado del efecto de fumagilina permitió que el porcentaje de acumulación de Rho123 sea correlacionado en relación con el efecto inducido por un inhibidor conocido (VSP) de Pgp. Sin embargo a la fecha no hay datos disponibles en cuanto a la interacción entre fumagilina y Pgp u otros transportadores ABC. Estos resultados muestran que el incremento en moxidectina observado en hepatocitos de rata en presencia de fumagilina está asociado con un efecto inhibidor de este compuesto sobre la función de Pgp. Por esta razón, la fumagilina adquiere un nuevo interés en el campo de medicina veterinaria como agente regulador para Pgp. Debido al surgimiento de resistencia a lactonas macrocíclicas en numerosas especies y la ausencia del desarrollo de nuevas sustancias antiparasitarias poderosas a corto plazo, es vital desarrollar estrategias gue apunten a ser que la efectividad ML dure, la fumagilina permite así que la efectividad de ML frente a parásitos sea incrementada al incrementar la cantidad de medicamento dentro de parásitos resistentes . Uno de tales procedimientos para potencializar la acción de un compuesto emitido por Pgp mediante la co-administración de una sustancia para reducir el fenómeno de resistencia es usado en quimioterapia de cáncer humana. Se llevan a cabo actualmente estudios clínicos en pacientes que sufren de cáncer y desarrollan resistencia a fármacos anticáncer. El uso de moléculas que inhiben la función de Pgp en conjunción con fármacos anticáncer permite que la cantidad de medicamento en estos pacientes sea incrementada con el fin de tener una efectividad terapéutica incrementada (List et al., 2001). Recientemente, se demostró que las avermectinas eran aptas de incrementar la cantidad de medicamentos anti-tumorales en células de cáncer (Korystov et al., 2004). por consiguiente, se puede contemplar que las lactonas macrocíclicas serán usadas en quimioterapia de cáncer.

Referencias Ali, D. N., and Hennessy, D. R. (1996). The effect of level of feed intake on the pharmacokinetic disposition and efficacy of ivermectin in sheep. J Vet Pharmacol Ther 19, 89-94. Alvinerie, M., Dupuy, J., Eeckhoutte, C, and Sutra, J. F. (1999). Enhanced absorption of pour-on ivermectin formulation in rats by co-administration of the multidrug-resistant-reversing agent verapamil. Parasitol Res 85, 920-922. Alvinerie, M., Sutra, J. F., Cabezas, I., Rubilar, L., and Pérez, R. (2000) . Enhanced plasma availability of moxidectin in fasted horses. Journal of Equine Veterinary Science 20, 575-578. de Silva, N., Guyatt, H., and Bundy, D. (1997). Anthelmintics . A comparative review of their clinical pharmacology. Drugs 53, 769-788. Dupuy, J., Chartier, C, Sutra, J. F., and Alvinerie, M. (2001a). Eprinomectin in dairy goats: dose influence on plasma levéis and excretion in milk. Parasitol Res 87, 294-298.

Dupuy, J., Larrieu, G., Sutra, J. F., Eeckhoutte, C, and Alvinerie, M. (2001b) . Influence of verapamil on the efflux and metabolism of 14C moxidectin in cultured rat hepatocytes .

J Vet Pharmacol Ther 24, 171-177. Dupuy, J., Larrieu, G., Sutra, J. F., Lespine, A., and Alvinerie, M. (2003). Enhancement of moxidectin bioavailability in lamb by a natural flavonoid: quercetin. Vet Parasitol 112, 337-347. Gibaldi, M., and Perrier, D. (1982). Pharmacokinetics, 2nd (revised and expanded) edn (New York, Marcel Dekker Inc.) . Hamada, A., Miyano, H., Watanabe, H., and Saito, H. (2003).

Interaction of imatinib mesilate with human P-glycoprotein. J Pharmacol Exp Ther 307, 824-828. Hirsch-Ernst, K. I., Ziemann, C, Foth, H., Kozian, D., Schmitz-Salue, C, and Kahl, G. F. (1998). Induction of mdrlb mRNA and P-glycoprotein expression by tumor necrosis factor alpha in primary rat hepatocyte cultures. J Cell Physiol 176, 506-515. Hirsch-Ernst, K. I., Ziemann, C, Rustenbeck, I., and Kahl, G. F. (2001). Inhibitcrs of mdrl-dependent transport activity delay accumulation of the mdrl substrate rhodamine 123 in primary rat hepatocyte cultures. Toxicology 167, 47-57. Korystov, Y. N., Ermakova, N. V., Kublik, L. N., Levitman, M., Shaposhnikova, V. V., Mosin, V. A., Drinyaev, V. A., Kruglyak, E. B., Novik, T. S., and Sterlina, T. S. (2004). Avermectins inhibit multidrug resistance of tumor cells. Eur J Pharmacol 493, 57-64. Laffont, C. M., Toutain, P. L., Alvinerie, M., and Bousguet-Melou, A. (2002). Intestinal secretion is a major route for parent ivermectin elimination in the rat. Drug Metab Dispos 30, 626-630. Lifschitz, A., Virkel, G., Sallovitz, J., Imperiale, F., Pis, A., and Lanusse, C. (2002). Loperamide-induced enhancement of moxidectin availability in cattle. J Vet Pharmacol Ther 25, 111-120. List, A. F., Kopecky, K. J., Willman, C. L., Head, D. R., Persons, D. L., Slovak, M. L., Dorr, R., Karanes, C, Hynes, H. E., Doroshow, J. H., et al. (2001). Benefit of Cyclosporin modulation of drug resistance in patients with poor-risk acute myeloid leukaemia: a Southwest Oncology Group study. Blood 98, 3212-3220. Molento, M. B., and Prichard, R. K. (1999). Effects of the multidrug-resistance-reversing agents verapamil and CL 347.099 on the efficacy of ivermectin or moxidectin against unselected and drug-selected strains of Haemonchus contortus in jirds (Meriones unguiculatus) . Parasitol Res 85, 1007-1011. Roos D.D. (2004), Best Practice & Research Clinical Haematology, 17: 641-651. Roulet, A., Puel, O., Gesta, S., Lepage, J. F., Drag, M., Solí, M., Alvinerie, M., and Pineau, T. (2003). MDRl-deficient genotype Collie dogs hypersensitive to the P-glycoprotein substrate ivermectin. Eur J Pharmacol 460, 85-91. Schinkel, A. H., Smit, J. J., van Tellingen, O., Beijnen, J.

H., Wagenaar, E., van Deemter, L., Mol, C. A., van der Valk, M. A., Robanus-Maandag, E. C, te Riele, H. P., et al. (1994).

Disruption of the mouse mdrla P-glycoprotein gene leads to a deficiency in the blood-brain barrier and to increased sensitivity to drugs. Cell 77, 491-502. Schinkel, A. H., Wagenaar, E., van Deemter, L., Mol, C. A., and Borst, P. (1995) . Absence of the mdrla P-Glycoprotein in mice affects tissue distribution and pharmacokinetics of dexamethasone, digoxin, and cyclosporin A. J Clin Invest 96, 1698-1705. Xu, M., Molento, M., Blackhall, W., Ribeiro, P., Beech, R., and Prichard, R. (1998). Ivermectin resistance in nematodes may be caused by alteration of P-glycoprotein homolog. MolBiochemParasitol 91, 327-335.

Claims (2)

1. REIVINDICACIONES 1. El uso de por lo menos un compuesto de fórmula general 'I) caracterizada porque: en la cual: - Ri es H o un Ci-ß alquilo lineal o ramificado; - R2 es H, un C?-4 alquilo, un arilo, un aril C?- alquilo, un cicloalquilo, un cicloalquil C?_4 alquilo, o un grupo alquenilo con 1 a 10 átomos de carbono, tal como un grupo CH2R6, en el cual Rß es un 2-metil-l-propenilo o un isobutilo opcionalmente sustituido por un grupo hidroxilo, amino, (C?_3 alquil) -amino o di (C?-3 alquil) -amino; - R3 es un átomo de H, un C?-4 alquilo o un C5-8 arilo que está opcionalmente sustituido por uno o más halógenos, tales como F, Cl, I, Br, un C?_ alcoxilo o un C?_4 alquilo; - R es un átomo de H, un OH o un C?_ alquilo; - R5 es la forma OR7, en cuyo caso el enlace representa un solo enlac en cuyo caso, el enlace representa un enlace en posición a o ß; - R7 es escogido del grupo compuesto de: " el átomo de H, " un grupo Ci-io alcanoilo o alquenoilo, saturado o insaturado, que puede estar sustituido en particular por 1 a 3 sustituyentes escogidos de amino, (C?-6 alquil) -amino, di(C?_6 alquil ) -amino, nitro, halógeno, hidroxi, C?_6 alcoxi, ciano, carbamilo, carboxilo, (Ci-e alcoxi) -carbonilo, carboxi- (C?-S alcoxi), fenilo opcionalmente sustituido (por 1 a 5 sustituyentes escogidos de los átomos de halógeno, los C?-6 alguilos, C?-6 alcoxi, alquilos halogenados y nitroalguilos) y los grupos heterociclicos aromáticos, " un grupo arilo gue puede estar sustituido por un átomo de halógeno o por un C2-6 alquilo, amino, hidroxi, C?-S alcoxi, ciano, carbamilo o carboxilo, " un heterocil-carbonilo que puede estar sustituido por un átomo de halógeno o por un C2-6 alquilo, amino, hidroxi, C?_6 alcoxi, ciano, carbonilo o carboxilo, • un carbamilo que puede estar sustituido por uno o dos sustituyentes escogidos de los grupos C?_6 alquilo, por sí mismo siendo aptos de ser sustituidos por un mono- o di- (C?_6 alquil) -amino, C?-6 alcanoilo, cloroacetilo, dicloroacetilo, tricloroacetilo, (C?-6 alcoxi) -carbonil-metilo, carboxi-metilo, fenilo opcionalmente sustituido (por uno a cinco sustituyentes escogidos de los átomos de halógeno, los C?_6 alquilo, los C?-6 alcoxi, los alquilos halogenados y nitroalquilos), grupo naftilo o benzoilo; • un Ci-io alquilo con una cadena lineal o ramificada, que puede opcionalmente ser epoxidado y/o sustituido en particular por uno a tres sustituyentes escogidos de amino, (C?_6 alquil) -amino, di-(C?_6 alquil ) -amino, nitro, halógeno, hidroxi, C?-6 alcoxi, ciano, carbamilo, carboxilo, (Ci-6 alcoxi) -carbonilo, carboxi- (C?_6 alcoxi), fenilo opcionalmente sustituido (por uno a cinco sustituyentes escogidos de los átomos de halógeno, los C?-6 alquilo, los C?-6 alcoxis, los alquilos halogenados y nitroalquilos) y grupos heterociclicos aromáticos, " un C?-?o alquenilo con cadena lineal o ramificada, " un C?-?o alquinilo con cadena lineal o ramificada, " un residuo de hidrocarburo cicloalifático, " un (amina cíclica) carbonilo, " un bencen-sulfonilo, que puede estar opcionalmente sustituido por uno a tres sustituyentes escogidos de los C?-6 alquilos y átomos de halógeno, " un C?-?o alquil-sulfonilo, que puede estar opcionalmente sustituido por uno a tres sustituyentes escogidos de amino, (C?_6 alquil) -amina, di-(C?_6 alquil) -amino, nitro, halógeno, C?_6 alcoxi, ciano, carbamido, carboxilo, (C?_6 alcoxi) carbonilo, carboxi- (C?-6 al) -alcoxi, fenilo opcionalmente sustituido (por uno a cinco sustituyentes escogidos de átomos de halógeno, C?-6 alquilo, C?-6 alcoxi, alquilos halogenados y nitroalquilos) y grupos heterocíclicos aromáticos, " un sulfamilo, gue puede estar opcionalmente sustituido por uno o dos sustituyentes escogidos de C?-6 alquilo y un fenilo opcionalmente sustituido (por uno a cinco sustituyentes escogidos de átomos de halógeno, C?_6 alquilo, C?_6 alcoxi, alquilos halogenados y nitroalquilos), " un alcoxi-carbonilo, que puede estar opcionalmente sustituido por uno a tres sustituyentes escogidos de amino, (C?-6 alquil ) -amino, di-(C?-6 alquil) -amino, nitro, halógeno, C?-6 alcoxi, ciano, carbonilo, carboxilo, (C?-6 alcoxi) -carbonilo, carboxi- (C?_6 alcoxi), fenilo opcionalmente sustituido (por uno a cinco sustituyentes escogidos de átomos de halógeno, C?_6 alquilo, C?-6 alcoxi, aquilos halogenados y nitroalquilos) y grupos heterociclicos aromáticos, " un fenoxicarbonilo, gue puede estar opcionalmente sustituido por uno a tres sustituyentes escogidos de los átomos de halógeno y C?_6 alquilos, C(0)-NH-C(0)-CH2-C1 - cada uno de Rs y R9 representan un átomo de H, un grupo hidrocarburo opcionalmente sustituido o un grupo acilo opcionalmente sustituido o R8 y Rg pueden constituir un anillo junto con el átomo de nitrógeno adyacente; como adyuvante para la preparación de un medicamento diseñado para incrementar la biodisponibilidad de ingredientes activos y por consiguiente, de potenciar sus efectos, estos ingredientes activos son aptos de ser reconocidos y enlazarse a transportadores celulares presentes en las células del organismo humano o animal al cual los ingredientes activos son administrados y si es apropiado, a las células de parásitos contra los cuales estos ingredientes activos son administrados, con el fin de ser transportados fuera de estas células sin ser aptos de llegar a su objetivo terapéutico intracelular. 2. El uso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque los compuestos de fórmula (I) tienen la siguiente fórmula (la): en la cual Ri, R2, R3, y R4 son como se definen en la reivindicación 1. 3. El uso de conformidad con la reivindicación 1 o 2, caracterizado porque los compuestos de fórmula (I) tienen la siguiente fórmula (Ib): en la cual: - Ri es H o un C?_8 alquilo lineal o ramificado; - R2 es H, un C?- alquilo, o un grupo alquenilo con 1 a 10 átomos de carbono tal como un grupo CH?Rß en el cual R? es un
2. 2-metil-l-propenilo . 4. El uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, caracterizado porque el compuesto de fórmula (I) anterior corresponde a fumagilina de la siguiente fórmula (II) : 5. El uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, de un compuesto de fórmula (I) para la preparación de un medicamento diseñado para incrementar la biodisponibilidad de ingredientes activos capaces de ser reconocidos y enlazados a transportadores celulares ATP dependientes, también llamados transportadores ABC (caset de enlace de ATP) o transportadores de secuencia de enlace de ATP, tales como los transportadores ABC escogidos de P-glicoproteina (Pgp, también llamado ABCB1), los transportadores ABCC (ABCC1 a 8, también llamados MRP1 a 8) o los transportadores ABC G2. 6. El uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, de un compuesto de formula (I) como inhibidor de la función de transporte de transportadores celulares mediante interacción de estos compuestos y estos transportadores, para la preparación de un medicamento diseñado para incrementar la biodispombilidad de ingredientes activos capaces de ser reconocidos y enlazarse a estos transportadores. 7. El uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, de un compuesto de fórmula (I) como inhibidor de la función de transporte de Pgp mediante interacción entre estos compuestos y Pgp, para la preparación de un medicamento diseñado para incrementar la biodispombilidad de ingredientes activos capaces de ser reconocidos y enlazarse a Pgp. 8. El uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, de un compuesto de fórmula (I) escogidos de los compuestos de fórmulas (la), (Ib) o (II), como adyuvante para la preparación de un medicamento diseñado para incrementar la biodisponibilidad de ingredientes activos antiparasitarios o anticancerosos dentro de la estructura del tratamiento de patologías parasitarias o cancerosas. 9. El uso de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado porque los ingredientes activos antiparasitarios son escogidos de lactonas macrocíclicas, tales como avermectina, en particular ibermectina, avamectina, doramectina, eprinomectina o selamectina o tal como las miolbemicinas tal como moxidectina o nemadectina dentro de la estructura del tratamiento de enfermedades parasitarias, endoparasitarias o ectoparasitarias. 10. El uso de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque los ingredientes activos anticancerosos son escogidos de los sustratos de los transportadores celulares, particularmente Pgp, particularmente de antibióticos antitumorales tipo antraciclina, tales como daunorubicina, doxorubicina, mitomicina C mitoxantrona, adriamicina, actinomicina-D o de taxanos, tales como docetaxel o paclitaxel o de alcaloides, tales como vinblastina o vincristina o de epipodofilotoxinas tales como etoposido, inotecana, teniposide y topotecana, dentro de la estructura de tratamiento de cánceres y más en particular de cánceres resistentes a quimioterapias . 11. La composición farmacéutica caracterizada porque comprende por lo menos un compuesto de fórmula (I) definida en la reivindicación 1, en combinación con uno o más ingredientes activos capaces de ser reconocidos y enlazarse a transportadores celulares como se define en cualquiera de las reivindicaciones 5 a7. 12. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 11, caracterizada porque comprende por lo menos un compuesto de fórmula (I) escogido de los compuestos de fórmula (la), (Ib) o (II) definida en cualquiera de las reivindicaciones 2 a 4. 13. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 11 0 12, caracterizada porque los ingredientes activos en combinación con el compuesto de fórmula (I) escogido de los compuestos de fórmula (la), (Ib) o (II) son ingredientes activos antiparasitarios o anticancerosos como se define en las reivindicaciones 9 y 10. 14. La composición farmacéutica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 11 a 13, caracterizada porque tiene un compuesto de fórmula (I) (la), (Ib) o (II) definida en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, a una dosificación apropiada para una administración diaria de aproximadamente 0.2 a aproximadamente 2 mg/Kg. 15. La composición farmacéutica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 11 a 14, caracterizada porque el ingrediente activo y compuesto de fórmula (I) (la), (Ib) o (II) definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 están presentes en una proporción en peso comprendida entre aproximadamente 1:1 y aproximadamente 1:100 y en particular entre aproximadamente 1:1 y aproximadamente 1:20. 16. La composición farmacéutica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 11 a 15, caracterizada porque comprende fumagilina de fórmula (II) como se define en la reivindicación 4, en combinación con uno o más ingredientes activos antiparasitarios o anticancerosos como se define en las reivindicaciones 9 y 10. 17. La composición farmacéutica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 11 a 16, caracterizada porque está en una forma que puede ser administrada mediante una ruta parenteral u oral. 18. Productos de combinación para uso que es simultáneo, separado o esparcido en el tiempo, en terapias, utilizando un ingrediente activo capaz de ser reconocido por transportadores celulares como se define en cualquiera de las reivindicaciones 5 a 7, caracterizado porque contienen por lo menos un ingrediente activo como se define anteriormente y un compuesto de fórmula (I) como se define en la reivindicación 1. 19. Los productos de combinación de conformidad con la reivindicación 18, caracterizados porque el compuesto de fórmula (I) es escogido de los compuestos de fórmula (la), (Ib) o (II) definidos en cualquiera de las reivindicaciones 2 a . 20. Los productos de combinación de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 18 o 19, para un uso que es simultáneo, separado o esparcido en el tiempo, en terapia antiparasitaria, caracterizados porque contienen por lo menos un ingrediente activo como se define en la reivindicación 9 y un compuesto de fórmulas (I), (la), (Ib) o (II) definidas en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4. 21. Los productos de combinación de conformidad con la reivindicación 18 o 19, para un uso que es simultáneo, separado o esparcido en el tiempo, en terapia anticáncer, caracterizado porque contiene por lo menos un ingrediente activo como se define en la reivindicación 10 y un compuesto de fórmulas (I), (la), (Ib) o (II) definido en cualguiera de las reivindicaciones 1 a 4. 22. Los productos de combinación de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 18 a 21, caracterizados porque contienen por lo menos un ingrediente activo capaz de ser reconocido por transportadores celulares y un compuesto de fórmula (I), en una proporción en peso comprendida entre aproximadamente 1:1 y aproximadamente 1:100, en particular entre aproximadamente 1:1 y aproximadamente 1:20. 23. Los productos de combinación de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 18 a 22, caracterizados porque contienen por lo menos un ingrediente activo antiparasitario o anticanceroso como se define en la reivindicación 9 o 10 y fumagilina de fórmula (II) como se define en la reivindicación 4.