MX2007009137A - Pirrolidonas substituidas por fenilo. - Google Patents

Abstract

La presente invencion se refiere a pirrolidonas sustituidas con fenilo y compuestos relacionados con pirrolidonas sustituidas con fenilo. Un uso de estos compuestos es para la inhibicion de viruses, por ejemplo, VIH. La presente invencion se refiere ademas con metodos para maltar estos compuestos, metodos para identificar la eficacia de estos compuestos y metodos para utilizar estos compuestos para inhibir o prevenir la infeccion VIH y estados de enfermedad relacionados, tales como, SIDA.

Description

PIRROLIDONAS SUBSTITUIDAS POR FENILO Referencias Cruzadas Con Solicitudes Relacionadas La presente solicitud reclama la prioridad de la Solicitud de Patente Provisional Norteamericana No 60/648,027, presentada el 28 de enero de 2005, la cual está incorporada en su totalidad para todos los propósitos, a la presente invención como referencia Campo de la Invención La presente invención se refiere a pirrohdonas substituidas con fenilo y a compuestos relacionados con pirro donas substituidas con fenilo Un uso de estos compuestos es para la inhibición de viruses, por ejemplo, VIH La presente invención se refiere además a métodos para elaborar estos compuestos, métodos para identificar la eficacia de estos compuestos y métodos para utilizar estos compuestos para inhibir o prevenir infección de VIH y estados de enfermedad relacionados, tales como SIDA Antecedentes de la Invención El Virus de Inmunodeficiencia Humana (VIH) infecta globalmente a millones de personas Se reportan casos casi de cada país contando hasta 40 millones de adultos y niños que viven con VIH/SIDA a nivel mundial En el 2001, 5 millones de personas fueron infectadas recientemente con VIH, y hubieron 3 millones de muertes de adultos y niños debido a VIH/SIDA Una tercera parte de estas personas que vive con SIDA, tienen edades entre 15 y 24 años. (World Health Organization, 2001). Sin embargo, existen tratamientos para VIH/SIDA, en donde los fármacos normalmente utilizados en las modalidades de tratamiento exhiben numerosos efectos secundarios, requieren tratamiento prolongado que con frecuencia induce a resistencia a los fármacos y no dan como resultado una erradicación total del virus del cuerpo. La enfermedad del SIDA, es el resultado final de un virus VIH-1 ó VIH-2 después de su propio ciclo de vida complejo. El ciclo de vida del virión comienza con la adhesión del virión por sí mismo a la célula inmune de linfocito T-4 humana del receptor a través del enlace de una glucoproteína en la superficie de recubrimiento protector del virión con la glucoproteína CD4 en la célula de linfocito. Una vez adherido, el virión se despoja de su recubrimiento de glucoproteína, penetra en la membrana de la célula huésped y descubre su ARN. La enzima de virión, transcriptasa inversa, dirige el proceso de transcribir el ARN en un ADN de hebra simple. El ARN viral se degrada y se crea una segunda hebra de ADN. El ADN ahora con hebra doble se integra en los genes de las células humanas y dichos genes se utilizan para la reproducción del virus. En este punto, la polimerasa de ARN transcribe el ADN integrado en ARN viral. El ARN viral se traduce en la glucoproteína de fusión gag-pol precursora. Posteriormente la poliproteína se disocia mediante la enzima de proteasa VIH para producir las proteínas virales maduras. Por lo tanto, la proteasa de VIH es la responsable de regular una cascada de eventos de disociación que conducen a la maduración de la partícula del virus en un virus que tiene la capacidad de infección total. La respuesta del sistema inmune humano típico, extermina el virión invasor, queda intervenida debido a que el virus infecta y extermina las células T del sistema inmune. Además, la transcriptasa inversa viral, la enzima utilizada en la elaboración de una nueva partícula de virión, no es muy específica, y origina errores en transcripción que dan como resultado en glucoproteínas con cambio continuo en la superficie de recubrimiento protector viral. Esta carencia de especificidad disminuye la efectividad del sistema inmune debido a que los anticuerpos producidos en forma específica contra una glucoproteína pueden ser inútiles contra otros, reduciendo de esta forma el número de anticuerpos disponibles para combatir el virus. El virus continúa reproduciéndose en tanto que el sistema de respuesta inmune continúa debilitándose. Eventualmente, el VIH mantiene en gran medida un reino libre con respecto al sistema inmune del cuerpo, permitiendo que infecciones oportunistas se establezcan y sin la administración de agentes antivirales, inmunomoduladores o ambos, se obtiene como resultado la muerte. Existen al menos tres puntos importantes en el ciclo de vida del virus, los cuales han sido identificados como objetivos posibles para fármacos antivirales: (1) la adhesión inicial del virión al sitio de linfocito o macrófago T-4; (2) la transcripción del ARN viral ó ADN viral (transcriptasa inversa, RT), y (3) el procesamiento de proteína gag-pol medíante proteasa VIH. La inhibición del virus en el segundo punto crítico, el proceso de transcripción de ARN viral a ADN viral, ha proporcionado un número de las terapias actuales utilizadas en tratamientos de SIDA. Esta transcripción debe ocurrir para que el virión se reproduzca debido a que los genes del virión están codificados en el ARN y la célula huésped únicamente lee el ADN. Al introducir fármacos que bloquean la transcriptasa inversa de el término de la formación del ADN viral, se puede detener la réplica de VIH-1. Un número de compuestos que interfieren con la réplica viral se han desarrollado para tratar SIDA. Por ejemplo, análogos de nucleósido, tales como 3-azido-3'-desoxitimidina (AZT), 2',3'-dídesoxicitidina (ddC), 2',3'-didesoxitimidina (d4T), 2',3'-didesoxi-inosina (ddl), y 2', 3'-didesoxi-3'-tia-citidina (3TC), han mostrado ser relativamente efectivos para obstaculizar la réplica del VIH en la etapa de transcriptasa inversa (RT). El uso de pirrolidonas para tratar padecimientos respiratorios es conocido en la técnica. Ver por ejemplo, la publicación de Keller y Asociados, Chem. Pharm. Bull. 49(8): 1009-1017 (2001); y Bacher y Asociados, Bioorg. Med. Chem. Lett. 8:3229-3234 (1998). El uso de pirrolidonas descritas para tratar VIH y padecimientos relacionados, no es sugerido en ninguna de estas referencias. Incluso con el éxito actual de los inhibidores de transcriptasa inversa, se ha descubierto que los pacientes con VIH se vuelven resistentes a un solo inhibidor. Por lo tanto, es deseable desarrollar inhibidores adicionales para combatir en forma adicional la infección de VIH. Breve Descripción de la Invención En la actualidad se ha descubierto que las pirrolidonas que tienen estructuras novedosas son agentes efectivos contra VIH. Las pirrolídonas seleccionadas de la presente invención son potentes inhibidores de transcriptasa inversa. Por consiguiente, la presente invención proporciona formulaciones farmacéuticas, y tratamientos profilácticos y terapéuticos, métodos y equipos de diagnóstico y pronóstico y métodos de clasificación farmacéutica que tienen la ventaja de la actividad anti-VIH de las pirrolidonas. Debido a que las pirrolidonas de la presente invención inhiben la réplica de VIH, la administración de las pirrolidonas a personas ya sea en forma profiláctica o terapéutica es un tratamiento para infección de VIH. Los tratamientos profilácticos son especialmente útiles para personas en alto riesgo de infección de VIH. La presente invención proporciona métodos para inhibir la réplica de VIH en una persona, administrando a la persona una cantidad farmacéuticamente efectiva de una pirrolidona. La presente invención también proporciona formulaciones farmacéuticas que comprenden una o más pirrolidonas en un vehículo farmacéuticamente aceptable. Los métodos para inhibir la réplica de VIH descritos anteriormente, pueden aplicarse a células que son cultivadas también in vitro. En otro aspecto, la presente invención proporciona una composición que comprende al menos una pirrolidona y un segundo agente o agentes terapéuticos. En una modalidad, el segundo agente terapéutico se utiliza para prevenir o tratar infección de VIH. En otra modalidad, el segundo agente terapéutico se utiliza para tratar una infección oportunista asociada con la infección de VIH. En otra modalidad, el segundo agente terapéutico es un inhibidor de proteasa, un inhibidor de transcriptasa inversa sin nucleósido, un inhibidor de transcriptasa inversa de nucleósido, un nucleósido antiretroviral, un inhibidor de entrada, o cualquier otro agente antiviral efectivo para inhibir o tratar infección de VIH. En otro aspecto, la presente invención proporciona métodos para tratar o prevenir infección de VIH en un humano, en donde los métodos comprenden administrar una pirrolidona de la presente invención al humano, en combinación con un segundo agente(s) terapéutico. En una modalidad, el segundo agente terapéutico se utiliza para prevenir o tratar infección de VIH. En otra modalidad, el segundo agente terapéutico se utiliza para tratar una infección oportunista asociada con infección de VIH. En otra modalidad, el segundo agente terapéutico es un inhibidor de proteasa, un inhibidor de transcriptasa inversa sin nucleósido, un inhibidor de transcriptasa inversa de nucleósido, un nucleósido anti-retroviral, un inhibidor de entrada, o cualquier otro agente antiviral efectivo para inhibir o tratar infección de VIH. En otra modalidad, el segundo agente terapéutico se selecciona del grupo que consiste en zidovurina, didanosina, estavudina, ¡nterferón, lamivudina, adefovir, nevirapina, delaviridina, lovirida, saquinavír, indinavir, y AZT. En otra modalidad, el segundo agente terapéutico es un antibiótico o aciclovir. En otro aspecto, la presente invención proporciona métodos para inhibir infección de VIH en un cultivo CD4 + , en donde los métodos comprenden el paso de contactar a la célula con una pirrolidona de la presente invención, ya sea sola o en combinación con el segundo agente terapéutico o una combinación de otros agentes terapéuticos. En una modalidad, el agente o agentes terapéuticos se utilizan para tratar o prevenir infección de VIH. En una segunda modalidad, el agente terapéutico es seleccionado del grupo que consiste en un inhibidor de proteasa, un inhibidor de transcpptasa inversa sin nucleósido, un inhibidor de transcpptasa inversa de nucleósido, un nucleósido anti-retroviral, un inhibidor de entrada, y cualquier otro agente anti-viral efectivo para inhibir o tratar infección de VIH En una tercera modalidad, un agente terapéutico es seleccionado del grupo que consiste en zidovupna, didanosina, estavudina, interferón, lamivudina, adefovir, nevirapina, delavipdina, lovipda, saqumavir, indinavir, y AZT Breve Descripción de las Figuras Las figuras 1A a 1N, ilustran una tabla que muestra compuestos usados como ejemplo de la presente invención. Descripción Detallada de la Invención y Modalidades Preferidas I Introducción La presente invención proporciona métodos nuevos para prevenir infección viral (por ejemplo, VIH), exterminar células infectadas en forma viral (por ejemplo, células infectadas por VIH) e inhibir en forma general la réplica viral (por ejemplo, VIH) La presente invención está basada, en parte, en el sorprendente descubrimiento de que pirrolidonas de la presente invención son efectivas para inhibir infección de VIH, exterminar células infectadas con VIH y/o prevenir la infección de VIH en el individuo La presente invención proporciona compuestos y formulaciones farmacéuticas que incluyen dichos compuestos. Además, la presente invención también proporciona métodos para inhibir VIH en una célula, inhibir transcriptasa inversa en una célula, tratar infección de VIH en un sujeto humano, proporcionar profilaxis contra infección de VIH, administrando al menos un compuesto de la presente invención a un paciente que necesita de dicho tratamiento. II. Definiciones El término "grupo funcional reactivo", tal como se utiliza en la presente invención, se refiere a grupos que incluyen, pero no se limitan a, olefinas, acetilenos, alcoholes, fenoles, éteres, óxidos, haluros, aldehidos, cetonas, ácidos carboxílicos, esteres, amidas, cianatos, isocíanatos, tiocianatos, isotiocíanatos, aminas, hidracinas, hidrazonas, hidrazidas, diazo, diazonio, nitro, nitrilos, mercaptanos, sulfuros, disulfuros, sulfóxídos, sulfonas, ácidos sulfónicos, y ácidos sulfínicos, acétales, cetales, anhídridos, sulfatos, isonitrilos de ácidos sulfénicos, amídinas, imidas, imidatos, nitronas, hidroxilaminas, oximas, ácidos hidroxámicos, ácidos tiohidroxámicos, alenos, ortoésteres, sulfitos, enaminas, inaminas, ureas, pseudoureas, semicarbazidas, carbodiimidas, carbamatos, iminas, azidas, compuestos azo, compuestos azoxi, y compuestos nitroso. Los grupos funcionales reactivos también incluyen aquéllos utilizados para preparar bioconjugados, por ejemplo, esteres de N-hidroxisuccinimida, maleimidas, y similares. Los métodos para preparar cada uno de estos grupos funcionales son bien conocidos en la técnica y su aplicación a, o modificación para un propósito particular, está dentro de la capacidad de un experto en la técnica (ver por ejemplo, la publicación de Sandler y Karo, eds. ORGANIC FUNCTIONAL GROUP PREPARATIONS, Academic Press, San Diego, 1989). Los "grupos de enlace de proteína no covalente" son porciones que interactúan con un polipéptído intacto o desnaturalizado en una forma asociativa. La interacción puede ser ya sea reversible o irreversible en un medio biológico. La incorporación de un "grupo de enlace de proteína no covalente" en un agente de quelación o complejo de la presente invención, proporciona al agente de complejo la capacidad de interactuar con un polipéptido en una forma no covalente. Las interacciones no covalentes de ejemplo incluyen interacciones hidrofóbicas-hidrofóbicas y electrostáticas. Los "grupos de enlace de proteína no covalente" de ejemplo incluyen grupos aniónicos, por ejemplo, fosfato, tiofosfato, fosfonato, carboxilato, boronato, sulfato, sulfona, tiosulfato, y tiosulfonato. Tal como se utiliza en la presente invención, un "elemento de enlace" se refiere a un enlace químico covalente que incluye al menos un heteroátomo. Los elementos de enlace de ejemplo incluyen -C(O)NH-, C(O)O-, -NH-, -S-, -O-, y similares. El término "grupo de dirección" pretende significar una porción que es: (1) capaz de dirigir en forma activa la entidad a la cual se adhiere (por ejemplo, agente de contraste) a una región objetivo, por ejemplo un tumor; o (2) se absorbe preferencíalmente en forma pasiva por, o ingresa dentro, de un tejido objetivo, por ejemplo un tumor. El grupo de dirección puede ser una molécula pequeña, la cual está proyectada para incluir tanto péptidos como no péptidos. El grupo de dirección también puede ser una macromolécula, la cual incluye, pero no se limita a, sacáridos, lectínas, receptores, ligando para receptores, proteínas tales como BSA, anticuerpos, poli(éteres), dendrímeros, poli(aminoácidos), etc. El término "grupo disociable" pretende significar una porción que permite la liberación del quelado del resto del conjugado, disociando un enlace que enlaza al quelado (o construcción de enlace enlazador de quelado) al resto del conjugado. Dicha disociación es ya sea química por naturaleza, o transmitida en forma enzimática. Los grupos disociables en forma enzimátíca de ejemplo incluyen aminoácidos naturales o secuencias de péptido que terminan con un aminoácido natural.

Además de los sitios enzimáticamente disociables, está dentro del alcance de la presente invención incluir uno o más sitios que sean disociados por la acción de un agente además de una enzima. Los agentes de disociación no enzimática de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, ácidos, bases, luz (por ejemplo, derivados de nitrobencilo, grupos fenacilo, y esteres de benzoína), y calor. Muchos grupos disociables son conocidos en la técnica. Ver por ejemplo, las publicaciones de Jung y Asociados, Biochem. Biophys. Acta, 761:152-162 (1983); Joshi y Asociados, J. Biol. Chem. 265:14518-14525 (1990); Zarling y Asociados, J. Immunol. 124:913-920 (1980); Bouizar y Asociados, Eur. J. Biochem. 155:141-147 (1986); Park y Asociados, J. Biol. Chem. 261:205-210 (1986); Browning y Asociados, J. Immunol., 143:1859-1867 (1989). Además, están comercialmente disponibles un amplío rango de brazos espaciadores disociables, bifuncionales (tanto homo- como hetero-bifuncíonal) en proveedores tales como Pierce. El símbolo ^^ utilizado ya sea como un enlace o desplegado en forma perpendicular a un enlace, indica el punto en el cual la porción desplegada es adherida al resto de la molécula, soporte sólido, etc. Ciertos compuestos de la presente invención, pueden existir en formas no solvatadas, así como formas solvatadas, incluyendo formas hidratadas. En general, las formadas solvatadas son equivalentes a la forma no solvatada y están comprendidas dentro del alcance de la presente invención. Ciertos compuestos de la presente invención pueden existir en múltiples formas cristalinas o amorfas. En general, todas las formas físicas son equivalentes para usos contemplados en la presente invención y se proyectan para estar dentro del alcance de la misma. Ciertos compuestos de la presente invención poseen átomos de carbono asimétricos (centros ópticos) o enlaces dobles; los racematos, diastereómeros, isómeros geométricos e isómeros individuales están comprendidos dentro del alcance de la presente invención. Los compuestos de la presente invención se pueden preparar como un isómero simple (por ejemplo, enantiómero, cis-trans, posicional, diastereómero) o una mezcla de isómeros. En una modalidad preferida, los compuestos se preparan substancialmente como un solo isómero. Los métodos para preparar compuestos isomérica y substancialmente puros son conocidos en la técnica. Por ejemplo, las mezclas enantioméricamente enriquecidas y los compuestos enantioméricos puros se pueden preparar utilizando intermediarios sintéticos que son enantioméricamente puros en combinación con reacciones que ya sea dejan la estereoquímica en un centro quirálico sin cambio o dan como resultado su completa inversión. Como alternativa, el producto final o intermediario es a lo largo de la ruta sintética pueden resolverse en un solo estereoisómero. Las técnicas para invertir o dejar sin cambio un estereocentro en particular, y para resolver las mezclas de estereoisómeros, son bien conocidas en la técnica y también están dentro de la capacidad de un experto en el arte para elegir un método adecuado para una situación en particular. Ver la publicación de Furniss y Asociados (eds.) VOGEL'S ENCYCLOPEDIA OF PRACTICAL ORGANIC CHEMISTRY, 5a Edición, Longman Scientifíc and Technical Ltd., Essex, 1991, páginas 809-816; y Heller, Acc. Chem. Res. 23:128 (1990). Los compuestos de la presente invención también pueden contener proporciones no naturales de isótopos atómicos en uno o más de los átomos que constituyen dichos compuestos. Por ejemplo, los compuestos pueden ser radioetiquetados con isótopos radioactivos, tales como por ejemplo tritio (3H), yodo-125 ( 25l) o carbono-14 (1 C). Todas las variaciones isotópicas de los compuestos de la presente invención, ya sean radioactivas o no, pretenden estar comprendidas en el alcance de la presente invención. Cuando los grupos substituyentes son especificados por sus fórmulas químicas convencionales, escritos de izquierda a derecha, comprenden de igual manera los sustituyentes químicamente idénticos, los cuales pueden resultar de escribir la estructura de derecha a izquierda, por ejemplo, -CH20-, también pretende indicar -OCH2-. El término "alquilo" por sí mismo o como parte de otro substituyente, significa, al menos que se manifieste lo contrario, un radical de hidrocarburo cíclico o de cadena recta o ramificada o combinación del mismo, el cual puede ser completamente saturado, mono ó poli-ínsaturado y puede incluir radicales di y multivalentes que tienen el número de átomos de carbono designados (por ejemplo, CrC?0 significa de 1 a 10 carbonos). Los ejemplos de radicales de hidrocarburo saturados incluyen, pero no se limitan a grupos tales como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, t-butilo, isobutilo, seg-butilo, ciciohexilo (ciclohexil)metilo, ciclopropilmetilo, homólogos e isómeros, por ejemplo, de n-pentilo, n-hexilo, n-heptilo, n-octílo, y similares. Un grupo alquilo insaturado es uno que tiene uno o más enlaces dobles o enlaces triples. Los ejemplos de grupos alquilo insaturados ¡ncluyen, pero no se limitan a, vinilo, 2-propenilo, crotilo, 2-isopentenilo, 2-(butadienilo), 2,4-pentadienilo, 3-(1 ,4-pentadienilo), etinilo, y 3-propinilo, 3-butinilo, y los homólogos e isómeros superiores. El término "alquilo", a menos que se indique lo contrario, también significa que incluye los derivados de alquilo definidos con más detalle más adelante, tales como "heteroalquilo". Los grupos alquilo que están limitados a grupos hidrocarburo, se denominan " h o m o a I q u i I o " . El término "alquileno" por sí mismo o como parte de otro substituyente, significa un radical divalente derivado de un alcano, tal como se ejemplifica pero no se limita por -CH2CH2CH2CH2-, e incluye además los grupos que se describen más adelante como "heteroalquileno". Normalmente, un grupo alquilo (o alquileno) tendrá de 1 a 24 átomos de carbono, en donde los grupos que tienen 10 ó menos átomos de carbono son los preferidos en la presente invención. Un "alquilo inferior" o "alquileno ¡nferior" es un grupo alquilo o alquileno de cadena más corta, que tiene generalmente 8 ó menos átomos de carbono. Los términos "alcoxi" y "alquilamino" y "alquiltio" (o tioalcoxi) se utilizan en su sentido convencional, y se refieren a aquéllos grupos alquilo adheridos al resto de la molécula a través de un átomo de oxígeno, un grupo amino o un átomo de azufre, respectivamente. El término "heteroalquilo" por sí mismo o en combinación con otro término, significa, al menos que se manifieste lo contrario, una cadena recta o ramificada estable, o radical de hidrocarburo cíclico o combinaciones de los mismos que consistan en un número manifestado de átomos de carbono y al menos un heteroátomo seleccionado del grupo que consiste en O, N, Si, y S, y en donde los átomos de nitrógeno y azufre pueden ser oxidados opcionalmente y el heteroátomo de nitrógeno puede ser cuaternizado opcionalmente. El heteroátomo(s) O, N, y S y Si, pueden ser reemplazados en cualquier posición interior del grupo heteroalquilo o en la posición en la cual el grupo alquilo se adhiere al resto de la molécula. Los ejemplos incluyen, pero no se limitan a, -CH2-CH2-O-CH3, -CH2-CH2-NH-CH3, -CH2-CH2-N (CH3)-CH3, -CH2-S-CH2-CH3, -CH2-CH2-S(O)-CH3, -CH2-CH2-S(O)2-CH3, -CH = CH-O-CH3, -Si(CH3)3, -CH2-CH = N-OCH3, y -CH = CH-N(CH3)-CH3. Hasta dos heteroátomos pueden ser consecutivos, tales como, por ejemplo, -CH2-NH-OCH3 y -CH2-O-Si(CH3)2. Similarmente, el término "heteroalquileno" por sí mismo, o como parte de otro substituyente significa un radical divalente derivado de heteroalquilo, tal como se ejemplifica, pero no se limita a, -CH2-CH2-S-CH2-CH2- y -CH2-S-CH2-CH2-NH-CH2-. Para grupos heteroalquileno, los heteroátomos también pueden ocupar cualquiera de o ambos de los términos de la cadena (por ejemplo, alquileno-oxi, alquilenodioxi, alquilenoamino, alquilenodiamino, y similares). Aún además, para grupos de enlace de alquileno y heteroalquileno, no se implica orientación alguna del grupo de enlace a través de la dirección en la cual se escribe la fórmula del grupo de enlace. Por ejemplo, la fórmula -C(O)2R'-, representa tanto -C(O)2R'- como -R'C(O)2-. Los términos "cicloalquilo" y "heterocicloalquilo", por sí mismos o en combinación con otros términos, representan, a menos que se manifieste lo contrario, versiones cíclicas de "alquilo" y "heteroalquílo", respectivamente. Además, para heterocicloalquilo, un heteroátomo puede ocupar la posición en la cual el heterociclo se adhiere al resto de la molécula. Los ejemplos de cícloalquilo ¡ncluyen, pero no se limitan a, ciclopentilo, ciciohexilo, 1-ciclohexenilo, 3-ciclohexenilo, cicioheptilo, y similares. Los ejemplos de heterocicloalquilo incluyen, pero no se limitan a, 1 -(1 ,2,5,6-tetrahidropiridilo), 1 -piperidinilo, 2-piperidinilo, 3-píperidinilo, 4-morfolinilo, 3-morfolinilo, tetrahidrofuran-2-ilo, tetrahídrofuran-3-ilo, tetrahidrotíen-2-ilo, tetrahidrotien-3-ílo, 1-piperazinilo, 2- piperazinilo, y similares. Los términos "halo" o "halógeno", por sí mismos o como parte de otro substituyente, significan al menos que se manifieste lo contrario, un átomo de flúor, cloro, bromo o yodo. Además, los términos tales como "haloalquilo", significa que incluyen monohaloalquilo y polihaloalquílo. Por ejemplo, el término "halo(C?-C )alquilo" significa que incluye, pero no se limita a, trifluorometilo, 2,2,2-trifluoroetilo, 4-clorobutilo, 3-bromopropilo, y similares. El término "arilo" significa, a menos que se manifieste lo contrario, un substituyente poliinsaturado, aromático que puede ser un anillo simple o anillos múltiples (preferentemente de 1 a 3 anillos) los cuales se fusionan juntos o enlazan en forma covalente. El término "heteroarilo" se refiere a grupos arilo (o anillos) que contienen de 1 a 4 heteroátomos seleccionados de N, O, y S, en donde los átomos de nitrógeno y azufre son opcionalmente oxidados, y el átomo(s) de nitrógeno es opcionalmente cuaternizado. Un grupo heteroarilo puede ser adherido al resto de la molécula a través de un heteroátomo. Los ejemplos sin limitación de grupos arilo y heteroarilo incluyen fenilo, 1 -naftilo, 2-naftilo, 4-bifenilo, 1 -pirrolilo, 2-pirrolilo, 3-pirrolilo, 3-pirazolilo, 2-imidazolilo, 4-imidazolilo, pirazinilo, 2-oxazolilo, 4-oxazolilo, 2-fenil-4-oxazolilo, 5-oxazolilo, 3-isoxazolilo, 4-isoxazolilo, 5-isoxazolilo, 2-tiazolilo, 4-tiazolílo, 5-tiazolilo, 2-f u rilo , 3-f uri lo , 2-tienilo, 3-tienilo, 2- piri ilo, 3-piridilo, 4-piridílo, 2-pirimidilo, 4-pirimidilo, 5-benzotiazolilo, purinilo, 2-bencimidazolilo, 5-indolilo, 1-isoquinolilo, 5-isoquinolilo, 2-quínoxalinilo, 5-quinoxalinilo, 3-quinolílo, y 6-quinolilo. Los substituyentes para cada uno de los sistemas de anillo de arilo y heteroarilo antes mencionados son seleccionados del grupo de los substituyentes aceptables que se describen más adelante. Por brevedad, el término "arilo" cuando se utiliza en combinación con otros términos (por ejemplo, ariloxi, ariltioxi, arilalquilo) incluye tanto anillos arilo como heteroarilo tal como se definió anteriormente. Por lo tanto, el término "arilalquilo" significa que incluye los radicales en los cuales se adhiere un grupo arilo a un grupo alquilo (por ejemplo, bencilo, fenetilo, piridilmetilo, y similares) incluyendo los grupos alquilo en los cuales ha sido reemplazado un átomo de carbono (por ejemplo, un grupo metileno) por, por ejemplo, un átomo de oxígeno (por ejemplo, fenoximetilo, 2-piridiloximetilo, 3-(1 -naftiloxi)propilo, y similares). Cada uno de los términos anteriores (por ejemplo, "alquilo", "heteroalquilo", "arilo", y "heteroarilo") significa que incluyen formas tanto substituidos como no substituidas del radical indicado. Los substituyentes preferidos para cada tipo de radical se proporcionan más adelante. Los substituyentes para los radicales alquilo y heteroalquilo (incluyendo los grupos referidos con frecuencia como alquileno, alquenilo, heteroalquileno, heteroalquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, cicloalquenilo, y heterocicloalquenilo) son referidos en forma genérica como "substituyentes de grupo alquilo" y pueden ser uno o más de una variedad de grupos seleccionados de, pero sin limitarse a: -OR', =O, =NR', =N-OR', -NR'R", -SR', -halógeno, -SiR'R"R"\ -OC(O)R', -C(O)R', -CO2R', -CONR'R", OC(O)NR'R", -NR"C(0)R', -NR', -C(O)NR"R"', -NR"C(O)2R', -NR-C(N R'R"R"') = N R"", -NR-C(NR'R") = NR"', -S(O)R', -S(O)2R', -S(O)2NR'R", -NRSO2R', -CN, y -NO2 en un número que fluctúa de cero a (2m' + 1), en donde m' es el número total de átomos de carbono en dicho radical. R', R", R"', y R"" se refieren preferentemente cada uno de manera independiente a hidrógeno, heteroalquilo substituido o no substituido, arilo substituido o no substituido, por ejemplo, arilo substituido con 1 a 3 halógenos, alquilo substituido o no substituido, grupos alcoxi o tioalcoxí, o grupos arilalquilo. Cuando un compuesto de la presente invención incluye más de un grupo R, por ejemplo, cada uno de los grupos R es seleccionado independientemente cada uno como grupos R', R", R"', R"", cuando más de uno de dichos grupos está presente. Cuando R' y R" se adhieren al mismo átomo de nitrógeno, puede ser combinados con el átomo de nitrógeno para formar un anillo de 5, 6, ó 7 miembros. Por ejemplo, -NR'R" significa que incluye, pero no se limita a, 1 -pirrolidinilo y 4-morfolinilo. A partir de la descripción de substítuyentes anterior, un experto en la técnica comprenderá que el término "alquilo" significa que incluye grupos que incluyen átomos de carbono enlazados a grupos además de grupos hidrógeno, tales como haloalquilo (por ejemplo, -CF3 y -CH2CF3), y acilo (por ejemplo, -C(O)CH3, -C(O)CF3, -C(O)CH2OCH3, y similares). En forma similar a los substituyentes descritos para el radical alquilo, los substituyentes para los grupos arilo y heteroarilo son referidos en forma genérica como "substituyentes de grupo arilo". Los substituyentes son seleccionados, por ejemplo, de: halógeno, -OR', =O, =NR', =N-OR', -NR'R", -SR', -halógeno, -SiR'R"R"', -OC(O)R\ -C(O)R\ -CO2R', -CONR'R", -OC(O)NR'R", -NR"C(0)R', -NR'-C(O)N R"R"' , -NR"C(O)2R', -NR-C(NR'R"R"') = NR"", -N R-C(N R'R") = NR"', -S(O)2R', -S(O)2NR'R", -NRSO2R', -CN, y -NO2, -R', -N3, -CH(Ph)2, fluoro(C1-C4)alcox¡, y fluoro(C?-C )alquilo, en un número que fluctúa de 0 al número total de valencias abiertas en el sistema de anillo aromático; y en donde R', R", R"', y R"" son seleccionados preferentemente de manera independiente de hidrógeno, alquilo substituido o no substituido, heteroalquilo substituido o no substituido, arilo substituido o no substituido y heteroarilo substituido o no substituido. Cuando un compuesto de la presente invención ¡ncluye más de un grupo R, por ejemplo, cada uno de los grupos R es seleccionado independientemente como siendo cada uno grupos R', R", R"', R"", cuando más de uno de estos grupos está presente.

Dos de los substituyentes en los átomos adyacentes del anillo arilo o heteroarilo pueden ser reemplazados opcionalmente con un substituyente de la fórmula -T-C(O)-(CRR')q-U-, en donde T y U son independientemente -NR-, -O-, -CRR'-, o un enlace simple, y q es un entero de 0 a 3. Como alternativa, dos de los substituyentes en átomos adyacentes del anillo arilo o heteroarilo pueden ser reemplazados opcionalmente con un substituyente de la fórmula -A-(CH2)r-B-, en donde A y B son independientemente -CRR'-, -O-, -NR-, -S-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2NR', o un enlace simple, y r es un entero de 1 a 4. Uno de los enlaces simples del anillo nuevo formado de esta manera, puede ser reemplazado opcionalmente con un enlace doble. Como alternativa, dos de los substituyentes en los átomos adyacentes del anillo arilo o heteroarilo pueden ser reemplazados opcionalmente con un substituyente de la fórmula -(CRR')s-X-(CR"R'") -, en donde s y d son independientemente enteros de 0 a 3, y X es -O-, -NR'-, -S-, -S(O)-, -S(O)2NR'-. Los substituyentes R, R', R", y R'" son seleccionados preferentemente/independiente de hidrógeno o (C1-C6)alquilo substituido o no substituido. Tal como se utiliza en la presente invención, el término "heteroátomo" significa que incluye oxígeno (O), nitrógeno (N), azufre (S), y silicón (Si). El término "grupo de protección", tal como se utiliza en la presente invención, se refiere a una parte de un substrato que es substancialmente estable bajo una condición de reacción en particular, pero la cual está disociada del substrato bajo una condición de reacción diferente. Un grupo de protección también puede ser seleccionado, de modo que participe en la oxidación directa del componente de anillo aromático de los compuestos de la presente invención. Para ejemplos de grupos de protección útiles se puede ver por ejemplo, la publicación de Greene y Asociados, PROTECTIVE GROUPS IN ORGANIC SYNTHESIS, John Wiley & Sons, Nueva York, 1991. Por el término "padecimiento asociado con infección de VIH" o "enfermedad asociada con infección de VIH" en la presente invención, significa un estado de enfermedad el cual está marcado por infección de VIH. Dichos padecimientos asociados con infección de VIH incluyen, pero no se limitan a, SIDA; sarcoma de Kaposi, infecciones oportunistas tales como las originadas por Pneumocystis carinii y Mycobacterium tuberculosis; lesiones orales, incluyendo aftas, leucoplaquia velluda y úlceras aftosas; línfadenopatía generalizada; herpes; trombocitopenia; meningitis aséptica; enfermedad neurológica tal como toxoplasmosis, criptococcosis, infección CMV, linfoma CNS primario, y demencia asociada con VIH; neuropatías periféricas, convulsiones; y míopatía. Tal como se utiliza en la presente ¡nvención, el término "inhibidor de transcriptasa inversa VIH" se refiere a inhibidores tanto de nucleósido como sin nucleósido de transcriptasa inversa (RT) de VIH. Los ejemplos de inhibidores RT de nucleósido ¡ncluyen, pero no se limitan a, AZT, ddC, ddl, d4T, y 3TC. Los ejemplos de inhibidores RT sin nucleósido incluyen, pero no se limitan a, delavirdína (Pharmacia and Upjohn U90152S), efavirenz (DuPont), nevirapina (Boehringer Ingelheim), Ro 18,893 (Roche), trovirdina (Lilly), MKC-442 (Triangle), HBY 097 (Hoechst), ACT (Korean Research Institute), UC-781 (Rega Institute), UC-782 (Rega Institute), RD4-2025 (Tosoh Co. Ltd.), y MEN 10979 (Menarini Farmaceutici). Tal como se utiliza en la presente invención, el término "inhibidor de proteasa de VIH" se refiere a compuestos que inhiben la proteasa VIH. Los ejemplos incluyen, pero no se limitan a, saquinavir (Roche, Ro31,8959), ritonavir (Abbott, ABT-538), indinavir (Merck, MK-639), amprenavir (Vertex/Glaxo Wellcome), nelfinavir (Agouron, AG-1343), palinavir (Boehringer Ingelheim), BMS-232623 (Bristol-Myers Squibb), GS3333 (Gilead Sciences), KNI-413 (Japan Energy), KNI-272 (Japan Energy), LG-71350 (LG Chemical), CGP-61755 (Ciba-Geigy), PD 173606 (Parke Davis), PD 177298 (Parke Davis), PD 178390 (Parke Davis), PD 178392 (Parke Davis), U-140690 (Pharmacia and Upjohn), y ABT-378. Los ejemplos adicionales incluyen los inhibidores de proteasa cíclica descritos en las Publicaciones Nos. WO93/07128, WO94/19329, WO 94/22840, y Solicitud TCP No. US96/03426.

Por el término "dosis terapéuticamente efectiva" significa una dosis que produce efectos para los cuales se administra. La dosis exacta dependerá del propósito del tratamiento, y podrá ser confirmada por un experto en la técnica utilizando técnicas conocidas (ver por ejemplo, la publicación de Lieberman, Pharmaceutical Dosage Forms (volúmenes 1-3, 1992); Lloyd, The Art, Science and Technology of Pharmaceutical Compounding (1999); y Pickar, Dosage Calculations (1999)). lll. Compuestos En un primer aspecto, la presente ¡nvención proporciona pirrolidonas y compuestos relacionados. Un compuesto de ejemplo de la presente invención tiene la fórmula: en donde A representa un sistema de anillo que es seleccionado de arilo substituido o no substituido y heteroarilo substituido o no substituido. El símbolo R6 representa arilo substituido o no substituido y heteroarilo substituido o no substituido. X es un carbono substituido o no substituido o un nitrógeno substituido o no substituido. Otros compuestos de ejemplo de la presente invención tienen las fórmulas: En las fórmulas anteriores, los símbolos m y n representan enteros que son seleccionados independientemente de 0, 1, y 2. X es substancialmente como se describió anteriormente. Los símbolos Ra, Rb, Rc, Rd, Re, y Rf representan elementos seleccionados de manera independiente de H, alquilo substituido o no substituido, cicloalquilo substituido o no substituido, heteroalquilo substituido o no substituido, arilo substituido o no substituido, heteroarilo substituido o no substituido, u otro "substituyente alquilo" tal como se definió anteriormente. El símbolo R6 representa arilo substituido o no substituido y heteroarilo substituido o no substituido. En un segundo aspecto, la presente invención proporciona un compuesto de acuerdo con la fórmula I: en donde los símbolos R7 y Y representan independientemente H, alquilo substituido o no substituido, cicloalquilo substituido o no substituido, heteroalquilo substituido o no substituido, arilo substituido o no substituido, heterocicloalquilo substituido o no substituido, o heteroarilo substituido o no substituido. El símbolo R6 representa arilo substituido o no substituido y heteroarilo substituido o no substituido. En un tercer aspecto, la presente invención proporciona compuestos de acuerdo con la fórmula II: en donde R R: pueden ser seleccionados independientemente de H, CN, halógeno, C-?-C4 alquilo substituido o no substituido, C2-C4 alquenilo substituido o no substituido, y OR8. R8 puede ser un C1-C4 alquilo y C?-C4 haloalquilo substituido o no substituido. R2 y R4 pueden ser seleccionados independientemente de H, halógeno, CN, y C?-C4 alquilo substituido o no substituido. R3 puede ser H, CN, y alquilo. R6 puede ser un sistema de anillo heterocíclico de fenilo fusionado y: en donde R9 y R11 pueden ser seleccionados independientemente de H, C?-C4 alquilo substituido o no substituido, CN, C(O)NR12R12, y NR12R12, y OR12. R12 puede ser H, C?-C4 alquilo substituido o no substituido. R10 puede ser H, CN, NR 3R14, SO2NHR13, NHSO2R13, SO2N H(CH2)nOR13, SO2NH(CH2)nNR13R14, O(CH2)nSO2NH R13, O(CH2)nN R13R14, O(CH2)nSO2R15, SO2R15, SO2(CH2)nNR13R14, y C(O)NR13R14. R13 y R14 pueden ser H y C?-C4 alquilo substituido o no substituido. Además, R13 y R14, junto con el nitrógeno al cual están adheridos, pueden ser unidos opcionalmente para formar un anillo heterocíclico. R15 puede ser C?-C4 alquilo substituido o no substituido. El símbolo n puede ser un entero de 1 a 8. En esta modalidad, al menos un elemento seleccionado de R9, R10, y R11 puede ser diferente a H. R7 puede ser halógeno, C?-C alquilo, C2-C4 alquenilo, y C2-C4 alquinilo. En otra modalidad seleccionada, R6 es un sistema de anillo heterocíclico definido fusionado. Este sistema de anillo heterocíclico de fenilo fusionado puede ser: R16 puede ser H, C(O)NR18R19, C(O)NR18(CH2)nNR18R19, C(O)NR18(CH2)nOR18, C(O)N R18CH (CH2OR18)2, C(O)NR18(CH2)nC(O)NR18R19, (CH2)nSO2NR18R19, S(O)2)R20. R 8 y R19 pueden ser seleccionados independientemente de H y Ci-C6 alquilo substituido o no substituido. Además R18 y R19, junto con el átomo de nitrógeno al cual están adheridos, pueden formar un anillo heterocíclico substituido o no substituido. El símbolo n puede ser un entero de 1 a 8. R20 puede ser C?-C6 alquilo substituido o no substituido y fenilo substituido o no substituido. R17 puede ser H, NH2, (CH2)mOH, C(O)NR21R22, SO2R23, NHSO2R23, NHCOR23. R21 y R22 pueden ser seleccionados independientemente de H, C?-C6 alquilo substituido o no substituido y fenilo substituido o no substituido. Además, R21 y R22, junto con el nitrógeno al cual están adheridos, pueden ser unidos opcionalmente para formar un anillo. R23 puede ser C?-C6 alquilo substituido o no substituido. El símbolo m es un entero de 1 a 5.

Aún en otra modalidad seleccionada, R1 y R5 pueden ser seleccionados independientemente de hidrógeno, halógeno, CN, metilo, metoxi, vinilo, y trifluorometoxi. Aún en otra modalidad, R6 puede ser: En otra modalidad seleccionada, R16 puede ser un miembro seleccionado de C(O)NR18R19 y S(O)2R20. En otra modalidad seleccionada, R18 y R19 puede ser H. En otra modalidad seleccionada, R20 puede ser CH3. En otra modalidad seleccionada, R17 es NH2. En otra modalidad seleccionada, R6 puede ser: en donde R9 puede ser un elemento seleccionado de NH2 y C(O)NH2. R10 puede ser un elemento seleccionado de C(O)NH2, NHS02CH3, y S02NH2. En otra modalidad de ejemplo, el compuesto de la presente invención puede tener una fórmula seleccionada de una de las siguientes: En otra modalidad de ejemplo, al menos uno de los substituyentes es una porción que incrementa la solubilidad en agua del compuesto de origen. Las porciones de ejemplo para utilizarse para incrementar la solubilidad en agua de un compuesto, incluyen éteres y poliéteres, por ejemplo, un elemento seleccionado de etilenglicol y oligómeros de etilenglicol, que tienen un peso molecular de aproximadamente 60 daltons a aproximadamente 10,000 daltons, y más preferentemente de aproximadamente 100 daltons a aproximadamente 1,000 daltons. Los substituyentes a base de poliéter representativos incluyen, pero no se limitan a, las siguientes estructuras: en donde b es preferentemente un número de 1 a 100, inclusive Otros poliéteres funciona zados son conocidos para los expertos en la técnica, y pueden estar disponibles comercialmente, por ejemplo, en Shearwater Polymers, Inc (Alabama) En otra modalidad de ejemplo, al menos uno de R1-R7 es una porción enlazadora que incluye un grupo funcional reactivo para conjugar el compuesto con otra molécula o con una superficie Los enlazadores de uso en los compuestos de la presente invención, también pueden incluir un grupo disociable En una modalidad de ejemplo, el grupo disociable está interpuesto entre el centro de pirrolidona y un agente objetivo o estructura macromolecular Los grupos reactivos útiles representativos se describen con mayor detalle en las secciones posteriores La información adicional con respecto a grupos reactivos útiles es conocida para los expertos en la técnica Ver, por ejemplo, la publicación de Hermanson, BIOCONJUGATE TECHNIQUES, Academic Press, San Diego, 1996 lll. a) Porciones específicas en los compuestos En esta sección, ciertas porciones en los compuestos de la presente invención son indicadas, tal como grupos funcionales reactivos, agentes de dirección, complejos macromoleculares, polisacáridos, agentes a base de dendrímero y agentes a base de poli(etilenglicol). En esta sección, se describen métodos para unir estas porciones a los compuestos de la presente ¡nvención. En estos métodos, un compuesto de la presente ¡nvención se hace reaccionar con una porción para formar un "conjugado de la presente ¡nvención". Favor de observar que estos "conjugados" también están comprendidos en los términos "compuesto" y "compuestos de la presente ¡nvención" tal como se utiliza en la presente especificación y reivindicaciones. El término "conjugado" se utiliza en la presente invención únicamente para diferenciar el "compuesto" reactivo, el cual puede ser un "compuesto de la presente invención", a partir del producto, el cual también puede ser un "compuesto de la presente invención", lll. a1) Grupos funcionales reactivos Tal como se describió anteriormente, el núcleo de pirrolidona de los compuestos de la presente invención son atados opcionalmente a otras especies por medio de enlaces formados entre un grupo funcional reactivo en la pirrolidona o un enlazador adherido a la pirrolidona, y un grupo funcional reactivo de reactividad complementaria en las otras especies.

Por claridad de ilustración, la discusión que se encuentra más adelante se enfoca en la conjugación de pirrolidonas representativas de la presente invención a polímeros, incluyendo poli(éteres) y dendrímeros, y a los agentes de dirección útiles para transubicar el conjugado del agente de dirección de pirrolidona a través de una membrana. El enfoque ejemplifica modalidades seleccionadas de la presente invención, de las cuales otras son fácilmente inferidas por un experto en la técnica. No se implica limitación alguna de la presente invención, al enfocar la descripción en las modalidades representativas. Las pirrolidonas de ejemplo de la presente ¡nvención, contienen un grupo funcional reactivo, el cual generalmente se localiza en el anillo de pirrolidona o en una cadena de alquilo o heteroalquilo substituido o no substituido debido al anillo, permitiendo la fácil adhesión a otras especies. Una ubicación conveniente para el grupo reactivo, es la posición terminal de un substituyente de alquilo o heteroalquilo del centro de pirrolidona. Los grupos reactivos y clases de reacciones útiles en la práctica de la presente invención son aquéllos que generalmente son alternativos en la técnica de la química de bioconjugado. Las clases de reacciones normalmente favorecidas disponibles con análogos reactivos, son aquéllas que preceden bajo condiciones relativamente suaves. Estas incluyen, pero no se limitan a, substituciones nucleofílicas (por ejemplo, reacciones de aminas y alcoholes con haluros de acilo, esteres activos), substituciones electrofílicas (por ejemplo, reacciones de enamina), y adiciones a enlaces múltiples de carbono-carbono y carbono-heteroátomo (por ejemplo, reacción de Michael, adición de Diels-Alder). Estas y otras reacciones útiles se describen, por ejemplo, en la publicación de March, ADVANCED ORGANIC CHEMISTRY, 3a Edición, John Wiley & Sons, Nueva York, 1985; Hermanson, BIOCONJUGATE TECHNIQUES, Academic Press, San Diego, 1996; y Feeney y Asociados, MODIFICATION OF PROTEINS; Advances in Chemistry Series, Vol. 198, American Chemical Society, Washington, D. C, 1982. Los grupos reactivos de ejemplo incluyen la reacción de grupos carboxilo y varios derivados de los mismos, incluyendo pero sin limitarse a, esteres de N-hidroxisuccinimida, esteres de N-hidroxibenzotriazole, haluros de ácido, imidazoles de acilo, tioésteres, esteres de p-nitrofenilo, alquilo, alquenilo, alquinilo, y esteres aromáticos. Los grupos hidroxilo pueden ser convertidos a esteres, éteres, aldehidos, etc. Los grupos haloalquilo son convertidos a especies nuevas a través de la reacción con, por ejemplo, una amina, un anión de carboxilato, un anión de tiol, un carbanión, o un ion de alcóxido. Los grupos de dienofilo (por ejemplo, maleimida) participan en Diels-Alder. Los grupos de aldehido o cetona pueden ser convertidos a iminas, hidrazonas, semicarbazonas, u oximas, o a través de mecanismos tales como adición de Grignard o adición de alquil-litio. Los haluros de sulfonilo reaccionan fácilmente con aminas, por ejemplo, para formar sulfonamidas. Los grupos de amina o sulfhidrilo son, por ejemplo, acilados, alquilados, u oxidados. Los alquenos, se pueden convertir en una formación de especies nuevas utilizando cicloadiciones, acilación, adición de Michael, etc. Los epóxidos reaccionan fácilmente con aminas y compuestos hídroxilo. Las combinaciones de ejemplo de los grupos funcionales reactivos encontrados en un compuesto de la presente ¡nvención y en una porción de dirección (o polímero o enlazador), se establecen en la tabla 1. Si el grupo funcional reactivo tiene una funcionalidad química 1, entonces la porción de dirección tiene una funcionalidad química 2, y viceversa.

TABLA 1 Un experto en la técnica podrá apreciar fácilmente que muchos de estos enlaces pueden ser producidos en una variedad de formas y utilizan una variedad de condiciones. Para la separación de esteres, ver por ejemplo, la publicación de March supra en 1157; para tíoésteres ver la publicación de March, supra en 362-363, 491, 720-722, 829, 941, y 1172; para carbonatos, ver la publicación de March, supra en 346-347; para carbamatos, ver la publicación de March, supra en 1156-57; para amidas, ver la publicación de March, supra en 1152; para ureas y tioureas, ver la publicación de March, supra en 1174; para acétales y cetales, ver la publicación de Greene y Asociados, supra 178-210, y March supra en 1146; para derivados de aciloxialquilo, ver la publicación de PRODRUGS: TOPICAL AND OCULAR DRUG DELIVERY, K. B. Sloan, ed., Marcel Dekker, Inc., Nueva York, 1992; para enol-ésteres, ver la publicación de March supra en 1160; para N-sulfonilimidatos, ver la publicación de Bundgaard y Asociados, J. Med. Chem. 31:2066 (1988); para anhídridos, ver la publicación de March supra en 355-56, 636-37, 990-91, y 1154; para N-acilamidas, ver la publicación de March supra en 379; para bases de N-Mannich, ver la publicación de March, supra en 800-02, y 828; para esteres de cetona de hidroximetilo, ver la publicación de Petracek y Asociados, Annals NY Acad. Sci. 507:353-54 (1987); para disulfuros, ver la publicación de March, supra en 1160; y para esteres de fosfonato y fosfonamidatos.

Los grupos funcionales reactivos pueden ser elegidos de modo que no participen, o interfieran con las reacciones necesarias para ensamblar el análogo de ligando reactivo. Como alternativa, el grupo funcional reactivo puede ser protegido de la participación en la reacción a través de la presencia de un grupo de protección. Los expertos en la técnica podrán comprender, proteger un grupo funcional en particular de que interfiera con un conjunto de condiciones de reacción elegido. Para ejemplos de grupos de protección útiles, ver por ejemplo la publicación de Greene y Asociados, PROTECTIVE GROUPS IN ORGANIC SYNTHESIS, John Wiley & Sons, Nueva York, 1991. Generalmente, antes de formar el enlace entre el ligando y el agente objetivo (u otro), y opcionalmente, el grupo enlazador, al menos una de las funcionalidades químicas será activada. Un experto en la técnica apreciará que una variedad de funcionalidades químicas, incluyendo grupos hídroxi, amino, y carboxi, pueden ser activadas utilizando una variedad de métodos y condiciones estándar. Por ejemplo, el grupo hidroxilo del ligando (o agente de dirección) puede ser activado a través del tratamiento con fosgeno para formar el cloroformato correspondiente o p-nitrofenilcloroformato para formar el carbonato correspondiente. En una modalidad de ejemplo, la presente invención hace uso de un agente de dirección que incluye una funcionalidad de carboxilo. Los grupos carboxilo pueden ser activados, por ejemplo, mediante la conversión al haluro de acilo o éster activo correspondiente. Esta reacción se puede llevar a cabo bajo una variedad de condiciones tal como se ilustra en la publicación de March, supra páginas 388-89. En una modalidad de ejemplo, el haluro de acilo se prepara a través de la reacción del grupo que consiste carboxilo con cloruro de oxalilo. El agente activado se combina con un ligando o combinación de brazo de enlazador de ligando para formar un conjugado de la presente invención. Los expertos en la técnica podrán apreciar que el uso de agentes de dirección que contienen carboxilo es meramente ilustrativo, y que los agentes que tienen muchos u otros grupos funcionales pueden ser conjugados a los lígandos de la presente invención. lll. a2) Agentes de dirección Los compuestos de la presente invención también pueden ser conjugados a un agente que dirige el compuesto a un tejido o región de enfermedad específico. Los agentes de dirección incluyen especies que son tomadas por células utilizando mecanismos ya sea activos o pasivos. Por ejemplo, los "polipéptidos de transubicación de membrana" tienen subsecuencias de aminoácido anfifílicas o hidrofóbicas que tienen la capacidad de actuar como transportadores de transubicación de membrana. En una modalidad, las proteínas de homodominio tienen la capacidad de transubicarse a través de membranas celulares. El péptido internalizable más corto de una proteína de homodominio, Antennapedia, se encontró como la tercera hélice de la proteína, de una posición de aminoácido 43 a la 58 (ver por ejemplo, la publicación de Prochiantz, Current Opinión in Neurobiology 6:629-634 (1996)). Otra subsecuencia, el dominio H (hidrofóbíco) de los péptidos de señal, se encontró como que tiene características de transubicación de membrana celular similares (por ejemplo ver la publicación de Lin y Asociados, J. Biol. Chem. 270:14255-14258 (1995)). Los ejemplos de secuencia de péptidos incluyen, pero no se limitan a: un péptido de 11 aminoácidos de la proteína tat de VIH; una secuencia de péptido de 20 residuos que corresponde a los aminoácidos 84 a 103 de la proteína p16 (ver la publicación de Fahraeus y Asociados, Current Biology 6:84 (1996)); la tercera hélice del homodominio largo de 60 aminoácidos de Antennapedia (Derossi y Asociados, J. Biol. Chem. 269:10444 (1994)); la región h de un péptido de señal tal como la región h del factor de crecimiento de fibroblasto de Kaposi (K-FGF) (Lin y Asociados, supra); o el dominio de transubicación VP22 procedente de VHS (Elliot & O'Hare, Cell 88:223-233 (1997)). Otras porciones químicas adecuadas que proporcionan captación celular mejorada también pueden ser enlazadas en forma química a los compuestos de la presente invención.

Dichas subsecuencias se pueden utilizar para transubicar compuestos de la presente invención a través de una membrana celular. Los compuestos de la presente invención pueden ser fusionados de manera conveniente a, o derivados con dichas secuencias. Normalmente, la secuencia de transubicación se proporciona como parte de una proteína de fusión. Opcionalmente, un enlazador tal como se describe en la presente invención se puede utilizar para enlazar al compuesto de la presente invención y la secuencia de transubicación. Se puede utilizar cualquier enlazador adecuado, por ejemplo, un enlazador de péptido u otros enlazadores químicos. Las moléculas de toxina también tienen la capacidad de transportar compuestos a través de las membranas celulares. Con frecuencia, dichas moléculas están compuestas de al menos dos partes (denominadas "toxinas binarias"): un dominio de transubicación o enlace o polipéptido y un dominio de toxina separada o polipéptido. Normalmente, el dominio de transubicación o polipéptido enlaza a un receptor celular, y posteriormente la toxina es transportada en la célula. Varias toxinas bacterianas, incluyendo toxina Clostridium perfringens ¡ota, toxina de difteria (DT), exotoxina A de Pseudomonas (PE), toxina pertusis (PT), toxina Bacillus anthracis, y ciclasa de adenilato pertusis (CYA), han sido utilizadas en los intentos para suministrar péptidos al citosol celular como fusiones internas y con terminal amino (Arora y Asociados, J. Biol.

Chem. 268:3334-3341 (1993); Perelle y Asociados, Infect. Immun. 61:5147-5156 (1993); Stenmark y Asociados, J. Cell Biol. 113:1025-1032 (1991); Donnelly y Asociados, PNAS 90:3530-3534 (1993); Carbonetti y Asociados, Abstr. Annu. Meet. Am. Soc. Microbiol. 95:295 (1995); Sebo y Asociados, Infect. Immun. 63:3851-3857 (1995); Klimpel y Asociados, PNAS EUA 89:10277-10281 (1992); y Novak y Asociados, J. Biol. Chem. 267:17186-17193 (1992)). Los grupos de enlace de proteína no covalentes también se usan para dirigir los compuestos de la presente invención a regiones específicas del cuerpo y para incrementar la vida media del agente a través del enlace de proteína, lll. a3) Complejos macromoleculares En una modalidad de ejemplo, la presente ¡nvención proporciona un conjugado macromolecular, por ejemplo MW >1000 D, entre el centro de pirrolidona y una especie macromolecular. En una modalidad, un conjugado macromolecular de la presente ¡nvención se forma mediante la conjugación covalente de una pirrolidona a una macromolécula a través de un grupo funcional reactivo. En otra modalidad, el complejo macromolecular se forma a través de una interacción no covalente entre un derivado de pirrolidona y una macromolécula, por ejemplo, una proteína de suero. En la descripción que se encuentra a continuación, la presente invención se describe como referencia a macromoléculas específicas para utilizarse para formar conjugados con los centros de pirrolidona novedosos de la presente invención. Los expertos en la técnica apreciarán que el enfoque de la descripción es por claridad de ilustración y no limita el alcance de la presente invención. La presente invención proporciona conjugados macromoleculares que incluyen componentes derivados de biomoléculas y moléculas sintéticas. Las biomoléculas de ejemplo incluyen polipéptidos (por ejemplo, anticuerpos, enzimas, receptores, antígenos); polísacáridos (por ejemplo, almidones, inulina, dextrano); lecitinas, antígenos sin péptido y similares. Los polímeros sintéticos de ejemplo incluyen poli(ácido acrílico), poli(lisina), poli(ácido glutámico), poli(etilen-imina), etc. lll. a3) Conjugación covalente de complejos macromoleculares La selección de un grupo funcional reactivo adecuado en un centro de pirrolidona de la presente invención para formar una especie macromolecular deseada, también está dentro de las capacidades de un experto en la técnica. Los grupos funcionales reactivos de ejemplo para utilizarse en la formación de conjugados covalentes de la presente invención se describieron anteriormente. Dentro de las capacidades de un experto en la técnica, son seleccionar y preparar un centro de pirrolidona de la presente invención que tenga el grupo funcional reactivo adecuado de reactividad complementaria a un grupo reactivo en su parte de conjugación. En una modalidad, el enlace formado entre los grupos funcionales reactivos de la macromolécula y los de la pirrolidona adhiere la pirrolidona a la macromolécula esencialmente en forma irreversible a través de un "enlace estable" entre los componentes. Un "enlace estable", tal como se utiliza en la presente invención, es un enlace, el cual mantiene su integridad química a través de un amplio rango de condiciones (por ejemplo, amida, carbamato, carbono-carbono, éter, etc.). En otra modalidad, la macromolécula y pirrolidona se enlazan a través de un "enlace disociable". Un "enlace disociable", tal como se utiliza en la presente invención, es un enlace que pasa por división bajo condiciones seleccionadas. Los enlaces disociables incluyen, pero no se limitan a, enlaces de disulfuro, imina, carbonato y éster. Tal como se describe en las secciones anteriores, el grupo funcional reactivo puede evitarse en una o más posiciones de la pirrolidona. lll. a4) Polisacáridos En una modalidad de ejemplo, la presente invención proporciona conjugados entre un centro de pirrolidona y sacáridos, por ejemplo, polisacáridos. En una modalidad de ejemplo, la presente ¡nvención proporciona un conjugado entre un quelado donante de oxígeno e inulina. La inulina es un polisacárido que ocurre naturalmente el cual ha sido previamente investigado como un transportador para porciones de diagnóstico (Rongved, P. K., J. Carbohydr. Res. 1991, 214, 315; Corsi, D. M. V. E. y Asociados, Chem. Eur. J. 2001, 7, 64). La estructura de la inulina puede describirse con una mezcla de cadenas a-D-glucopiranosilo enlazadas con ß-(2-?1) lineales con una unidad de a-D-glucopiranosilo en el extremo terminal. La inulina está comercialmente disponible en una variedad de pesos moleculares, y el grado de polimerización varía de 10 a 30, dando como resultado una distribución de peso molecular de 1500 a 5000 Da. La hidrofilicidad, estabilidad de pH, baja viscosidad de la solución, y biocompatibilidad de la inulina de alto nivel, asegura que sus conjugados tengan propiedades farmacológicas favorables, lll. a5) Agentes a base de dendrímero En otro aspecto, la presente invención proporciona una pirrolidona tal como se estableció anteriormente, la cual se adhiere a un dendrímero a través de un grupo funcional reactivo. En forma similar al grupo polimérico descrito anteriormente, el dendrímero tiene al menos dos grupos funcionales reactivos. En una modalidad, una o más pirrolidonas formadas se adhieren al dendrímero. Como alternativa, la pirrolidona se forma directamente en un dendrímero. En una modalidad de ejemplo, la clase de poliéster soluble en agua y bioadaptado (polipropionato) de agentes de contraste de dendrímero ha sido diseñada para proporcionar propiedades farmacocinéticas favorables. Ver la publicación de Ihre, H. y Asociados, Macromolecules 1998, 31, 4061; Ihre, H. y Asociados, J. Am. Chem. Soc. 1996, 118, 6388; Anders, H., Ihre, H., Patente No. WO/9900440 (Suecia)). En una modalidad de ejemplo, el término de los dendrímeros se conjuga a un centro de pirrolidona de la presente invención, lll. a6) Agentes a base de poli(etilenglicol) En otra modalidad de ejemplo, la presente invención proporciona un conjugado entre un centro de pirrolidona de la presente invención y un poli(etilenglicol). El poli(etilenglicol) (PEG) se utiliza en aplicaciones de biotecnología y biomédica. El uso de este agente ha sido revisado en las publicaciones de (POLY(ETHYLENE GLYCOL) CHEMISTRY: BIOTECHNICAL AND BIOMEDICAL APPLICATIONS, J. M. Harris, Ed., Plenum Press, Nueva York, 1992). La modificación de enzimas (Chiu y Asociados, J. Bioconjugate Chem., 4:290-295 (1993)), péptidos RGD (Breatz y Asociados, Bioconjugate Chem., 4:262-267 (1993)), liposomas (Zalipsky, S. Bioconjugate Chem., 4:296-299 (1993)), y glicoproteína CD4-lgG (Chamow y Asociados, Bioconjugate Chem., 4:133-140 (1993)) son algunos de los avances recientes en el grupo de polietilenglicol. Las superficies tratadas con PEG han mostrado resistir la deposición de proteína y tienen resistencia mejorada a la trombogenicidad cuando se cubren en biomateriales de contacto de sangre (Merrill, "Poly(ethylene glycol) and Blood Contact: A.

Chronicle of One Laboratory", en POLY(ETHYLENE GLYCOL) CHEMISTRY: BIOTECHNICAL AND BIOMEDICAL APPLICATIONS, Harris, Ed., Plenum Press, Nueva York, (1992), páginas 199-220). Muchas rutas están disponibles para adherir un centro de pirrolidona de la presente invención en un especie polimérica u oligomérica. Ver por ejemplo, la publicación de Dunn, R. L. y Asociados, Eds. POLYMERIC DRUGS AND DRUG DELIVERY SYSTEMS, ACS Symposium Series Vol. 469, American Chemical Society, Washington, D. C. 1991; Herrén y Asociados, J. Colloid and Interfacial Science 115:46-55 (1987); Nashabeh y Asociados, J. Chromatography 559:367-383 (1991); Balachandar y Asociados, Langmuir 6:1621-1627 (1990); y Burns y Asociados, Biomaterials 19:423-440 (1998). Muchos derivados activados de poli(etilenglicol) están comercialmente disponibles y en la literatura. También está dentro de las capacidades de un experto en la técnica, elegir, y sintetizar si es necesario, un derivado PEG activado adecuado con el cual se prepare un conjugado útil en la presente invención. Ver la publicación de Cáncer Biochem. Biophys., 7:175-186 (1984); Abuchowski y Asociados, J. Biol. Chem., 252:3582-3586 (1977); Jackson y Asociados, Anal. Biochem. 165:114-127 (1987); Koide y Asociados, Biochem. Biophys. Res. Commun. 111:659-667 (1983)), tresilato (Nilsson y Asociados, Methods Enzymol., 104:56-69 (1984); Delgado y Asociados, Biotechnol. Appl. Biochem. 12:119-128 (1990)); esteres activos derivados de N-hidroxisuccinimida (Buckmann y Asociados, Makromol. Chem., 182:1379-1384 (1981); Joppich y Asociados, Makromol. Chem., 180:1381-1384 (1979); Abuchowski y Asociados, Cáncer Biochem. Biophys. 7:175-186 (1984); Katre y Asociados, Proc. Nati. Acad. Sci. EUA, 84:1487-1491 (1987); Kitamura y Asociados, Cáncer Res., 51:4310-4315 (1991); Boccu y Asociados, Z. Naturforsch., 38C:94-99 (1983), carbonatos (Zalipsky y Asociados, POLY(ETHYLENE GLYCOL) CHEMISTRY: BIOTECHNICAL AND BIOMEDICAL APPLICATIONS, Harris, Ed., Plenum Press, Nueva York, 1992, páginas 347-370; Zalipsky y Asociados, Biotechnol. Appl. Biochem., 15:100-114 (1992); Veronese y Asociados, Appl. Biochem. Biotech., 11:141-152 (1985)); formatos de imidazolilo (Beauchamp y Asociados, Anal. Biochem., 131:25-33 (1983); Berger y Asociados, Blood, 71:1641-1647 (1988)), 4-ditiopiridinas (Woghiren y Asociados, Bioconjugate Chem., 4:314-318 (1993)), isocianatos (Byun y Asociados, ASAIO Journal, M649-M653 (1992)), y epóxidos (Patente Norteamericana No. 4,806,595, emitida por Noishiki y Asociados, (1989). Otros grupos de enlace incluyen el enlace de uretano entre grupos amino y PEG activado. Ver la publicación de Veronese y Asociados, Appl. Biochem. Biotechnol., 11:141-152 (1985). IV. Síntesis y purificación de pirrolidonas Los compuestos de la presente invención son sintetizados por una combinación adecuada de métodos sintéticos generalmente bien conocidos. Las técnicas útiles para sintetizar los compuestos de la presente invención, son tanto fácilmente apreciadas como accesibles para los expertos en la técnica. La descripción que se encuentra a continuación se ofrece para ¡lustrar ciertos de los diversos métodos disponibles para utilizarse en ensamblar los compuestos de la presente invenció, no pretende definir el alcance de las reacciones o secuencias de reacción que son útiles para preparar los compuestos de la presente invención. Esquema 1 Reactivos y condiciones: a) bromuro de bencilo, K2CO3 en DMF; b) CH3NO2, NH4OAc, AcOH, reflujo, 3 horas; c) 3-acetil-4-bencil-oxazolidin-2-ona, LDA, THF, -78°C, Py; d) Raney Ni/H2, bajo oxígeno y nitrógeno, 50°C. Un método para sintetizar los compuestos de la presente ¡nvención se muestra en el esquema 1. En este esquema, el hidrobenzaldehído se hace reaccionar con un grupo bencilo con el objeto de proporcionar 2 (reacción a). 2 posteriormente se hace reaccionar con un nitrato con el objeto de proporcionar 3. 3 posteriormente se hace reaccionar con una oxazolidinona con el objeto de proporcionar 4. La reducción de 4 con níquel Raney induce un ciclado intramolecular que produce 5, una lactam que comprende un grupo fenilo substituido-3,4. Esquema 2 Reactivos y condiciones: e) CH3CN, 0.4N HCL, ta, 1 hora; f) Rh(cat), (R)-BINAP, K2CO3, Dioxano/H2O, 80°C, 6 horas; g) CAN, CH3CN/H20 OC 4 horas. Otra ruta de ejemplo para compuestos de la presente invención, se estable en el esquema 2, el cual ilustra la síntesis de lactam 5, comprende un grupo fenilo substituido-3,4. Se hace reaccionar un dihidrofurano 6, con una p-anisidina 7 con el objeto de proporcionar 8 (reacción e). 8 se hace reaccionar posteriormente con borato 9 con el objeto de proporcionar 10 (reacción f). Finalmente el grupo N-fenilo en 10 se elimina con el objeto de producir 5 (reacción g). Esquema 3 Reactivos y condiciones: h) CH3CN, 0.4N HCl, rt, 1 h; i) Rh(cat), (R)-BINAP, K2CO3l Dioxano/H2O, 80C, 6 h; 5 se funcionaliza en forma adicional de acuerdo con el Esquema 3. El grupo de protección bencilo en 5 se elimina primero con el objeto de proporcionar 11 (reacción b). posteriormente 11 se acopla a un grupo fenilo substituido con el objeto de proporcionar 12 (reacción i). Esquema 4 Reactivos y condiciones: j) Cul, K3PO , 1,2 ciclohexanodiamina k) hidrazina; I) calor, m) isocianuro de clorosulfonilo En síntesis de ejemplo adicionales, el nitrógeno del producto final de lactam en los Esquemas del 1 al 3 se puede derivar tal como se muestra en los esquemas del 4 al 9. En el esquema 4, la síntesis comienza con 12. Este compuesto se hace reaccionar con un grupo arilo substituido con yodo con el objeto de producir 22 (reacción j). Posteriormente 22 se hace reaccionar con hidrazina con el objeto de producir el compuesto de N-pirrolidona de anillo fusionado 23. Posteriormente se agrega un grupo de protección, tal como anhídrido ftálico al grupo de amina libre en 23, con el objeto de producir 25. La eliminación del grupo de protección posteriormente produce 26 (reacción m). Esquema 5 Reactivos y condiciones: n) piridina, cloruro de metanosulfonilo, NH4C. Se pueden formar otros grupos, además de ureas, con el nitrógeno endocíclico en 25. Un ejemplo de este tipo de reacción se muestra en el Esquema 5. Aquí, 25 se hace reaccionar con un cloruro de sulfonilo con el objeto de producir 30. Un experto en la técnica reconocerá que se puede obtener una amplia variedad de derivados de lactam substituidos-N utilizando haluros de arilo substituidos en forma diversa, por ejemplo, alquilos, heteroarilos y heterocicloalquilos. Esquema 6 29 Reactivos y condiciones: o) Cul/K3PO4, 1 ,2-ciclohexanodiamina; p) SnCI2. Las substituciones-N de ejemplo adicionales del producto de lactam del Esquema 3 (consideradas aplicables a los productos del Esquema 1 y Esquema 2), se muestran en el Esquema 6. 12 se hace reaccionar con un grupo fenilo halosubstituido 27 con el objeto de producir 28 (reacción o). 28 se puede someter a varias reacciones con el objeto de funcionalizar el anillo fenilo recientemente agregado. Un ejemplo de esta funcionalización se muestra a través de la conversión de 28 a 29 (reacción p).

Esquema 7 Reactivos y condiciones: q) NaH; r) NaOH; s) (PMB)2NH. Con el objeto de sintetizar algunos compuestos de la presente invención, algunos componentes deben ser sintetizados por separado y posteriormente hacerse reaccionar con la pirrolidona. Los ejemplos de esta estrategia se proporcionan en los Esquemas 7 a 10. En el Esquema 7, el compuesto 13 y compuesto 14 se hacen reaccionar bajo condiciones q con el objeto de producir el compuesto 15. La reducción de hídruro subsecuente produce el compuesto 16 (reacción r). El grupo de carboxilato 16 posteriormente se protege bajo las condiciones de reacción s con el objeto de producir el compuesto 17. Esquema 8 Reactivos y condiciones: t) K3PO , Cul, trans-ciclohexanodiamina; u) TFA El Esquema 8 ilustra otro método para funcionalizar el nitrógeno del producto de lactam del Esquema 3 (Esto también es aplicable a los productos del Esquema 1). Aquí, el compuesto 17 substituido con bromo o yodo protegido se agrega a 12 con el objeto de producir el compuesto 32 (reacción t). Los grupos de protección en el compuesto 32 son eliminados subsecuentemente para proporcionar el compuesto 33 (reacción u). Esquema 9 D &• so2c? i 21 20 Reactivos y condiciones: NaBH4, EtOH; w) cloruro de 2-fluoro-4-bromobencenosulfonilo; x) 4-metoxibencilamina, DMF, K2CO3. Una variación en los métodos del Esquema 7 se muestra en el Esquema 9. Aquí, el compuesto 17 y el compuesto 18 se hacen reaccionar bajo una condición v con el objeto de producir el grupo de protección 19. 19 posteriormente se hace reaccionar con un compuesto de fenilo substituido con sulfato o sulfona con el objeto de proteger el grupo que comprende azufre 16 (reacción w). El compuesto 20 se hace reaccionar posteriormente con un grupo amina con el objeto de producir 21 (reacción x). Esquema 10 Reactivos y condiciones: y) K2CO3, DMSO; z) K3PO , Cul, trans-ciclohexanodiamina; aa) TFA. El Esquema 10 ilustra otro método para funcionalizar el nitrógeno del producto de lactam del Esquema 3 (Esto también es aplicable a los productos del Esquema 1). Primero, el oxígeno en la porción de fenol del compuesto 11 es funcionalizado por 34 con el objeto de proporcionar 35 (reacción y). Posteriormente el compuesto 21 substituido se agrega a 35 con bromo o yodo con el objeto de producir el compuesto 36 (reacción z). Los grupos de protección en el compuesto 36 son eliminados subsecuentemente para eliminar el compuesto 37 (reacción aa). Los compuestos de la presente invención pueden ser aislados y purificados de la mezcla de reacción mediante estrategias de purificación conocidas para los expertos en la técnica. Por ejemplo, los compuestos pueden ser purificados utilizando procedimientos cromatográficos conocidos tales como HPLC de fase inversa, permeabilidad de gel, intercambio de iones, exclusión por tamaño, afinidad, división o distribución de contracorriente. V. Formulaciones Farmacéuticas Los compuestos de la presente invención pueden prepararse y administrarse en una amplia variedad de formas de dosificación oral, parenteral y tópica. Por lo tanto, los compuestos de la presente invención se pueden administrar mediante inyección, esto es, en forma intravenosa, intramuscular, ¡ntracutánea, subcutánea, intraduodenal o intraperitoneal. Así mismo, los compuestos aquí descritos se pueden administrar mediante inhalación, por ejemplo, en forma intranasal. Además, los compuestos de la presente invención se pueden administrar en forma transdérmica. Por consiguiente, la presente invención también proporciona formulaciones farmacéuticas que comprenden un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable y uno o más compuestos de la presente invención. Para preparar formulaciones farmacéuticas a partir de los compuestos de la presente invención, los vehículos farmacéuticamente aceptables pueden ser ya sea sólidos o líquidos. Las preparaciones en forma sólida incluyen polvos, tabletas, pildoras, cápsulas, sobres, supositorios y granulos dispersivos. Un vehículo sólido puede ser una o más substancias, las cuales también pueden actuar como diluyentes, agentes de saborización, enlazadores, conservadores, agentes de desintegración tal como diluyentes, agentes de saborización, enlazadores, conservadores, agentes de desintegración de tabletas o un material de encapsulación. En polvos, el vehículo es un sólido dividido en forma fina, el cual está en una mezcla con el componente activo dividido en forma fina. En tabletas, el componente activo se mezcla con el vehículo que tiene las propiedades de enlace necesarias en proporciones adecuadas y compactada en la forma y tamaño. Los polvos y tabletas contienen preferentemente de 5% ó 10% a 70% del compuesto activo. Los vehículos adecuados son carbonato de magnesio, estearato de magnesio, talco, azúcar, lactosa, pectina, dextrina, almidón, gelatina, tragacanto, metilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio, una cera de bajo nivel de fundición, manteca de cocoa y similares. El término "preparación" pretende incluir la formulación del compuesto activo con el material de encapsulación como un vehículo que proporciona una cápsula en la cual el componente activo con o sin otros vehículos, está rodeado por un vehículo, el cual a su vez está en asociación con el mismo. En forma similar, se incluyen sobres y pastillas. Las tabletas, polvos, cápsulas, pildoras, sobres y pastillas se pueden utilizar como formas de dosificación sólida adecuadas para administración oral. Para preparar supositorios, una cera de bajo nivel de fundición, tal como una mezcla de glicéridos de ácido graso y manteca de cocoa, se fusiona primero y el componente activo se dispersa en forma homogénea en el mismo, mediante agitación. Posteriormente la mezcla homogénea fundida se vierte en moldes con tamaño conveniente, se deja enfriar, y de esta forma se solidifica. Las preparaciones en forma líquida incluyen soluciones, suspensiones y emulsiones, por ejemplo, soluciones de agua o agua/propilénglicol. Para inyección parenteral, las preparaciones líquidas pueden ser formuladas en solución en una solución en polietilénglicol acuosa. Las soluciones acuosas adecuadas para uso oral pueden ser preparadas disolviendo el componente activo en agua y agregando colorantes, saborizantes, estabilizadores y agentes de engrosamiento adecuados, según se desee. Las suspensiones acuosas adecuadas para uso oral pueden elaborarse dispersando el componente activo dividido en forma fina en agua con material viscoso, tal como gomas naturales o sintéticas, resinas, metilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio y otros agentes de suspensión bien conocidos. También se incluyen preparaciones en forma sólida, las cuales pretenden ser convertidas, brevemente antes de su uso, a preparaciones en forma líquida para administración oral. Dichas formas líquidas incluyen soluciones, suspensiones y emulsiones. Estas preparaciones pueden contener, además del componente activo, colorantes, saborizantes y estabilizadores, reguladores, edulcorantes artificiales y naturales, dispersantes, engrosadores, agentes de solubilización y similares. La dosis administrada a un paciente, dentro del contexto de la presente invención debe ser suficiente para llevar a cabo una respuesta terapéutica benéfica en el paciente con el tiempo. La dosis se determinará por la eficacia del compuesto en particular empleado y la condición del paciente, así como el peso corporal y área de superficie del paciente que será tratado. El tamaño de la dosis también será determinado por la existencia, naturaleza y grado de cualesquiera efectos secundarios adversos que acompañan la administración de un compuesto en particular, en un paciente en particular. El compuesto también puede ser introducido en una célula animal, preferentemente una célula de mamífero, a través de micropartículas y liposomas y derivados de liposomas tales como inmunoliposomas. El término "liposoma" se refiere a vesículas comprendidas de una o más bicapas de lípidos ordenadas en forma concéntrica, las cuales se encapsulan en una fase acuosa. La fase acuosa normalmente contiene el compuesto que será administrado a la célula. Los liposomas se fusionan con la membrana de plasma, librando de esta forma el fármaco en el citosol. Como alternativa, el liposoma es fagocitosado o captado por la célula en una vesícula de transporte. Una vez en el endosoma o fagosoma, el liposoma ya sea se degrada o fusiona con la membrana de la vesícula de transporte y libera sus contenidos. En métodos normales de suministro de fármacos vía liposomas, el liposoma finalmente se vuelve permeable y libera el compuesto encapsulado en el tejido o célula objetivo. Para el suministro sistémico o específico de tejido, esto se puede lograr, por ejemplo, en una forma pasiva en donde la bicapa del liposoma se degrada con el tiempo a través de la acción de varios agentes en el cuerpo. Como alternativa, la liberación del fármaco activo comprende utilizar un agente para inducir un cambio de permeabilidad en la vesícula del liposoma. Las membranas de liposoma pueden ser conducidas de modo que queden desestabilizadas cuando el ambiente se vuelve ácido cerca de la membrana de liposoma (ver por ejemplo, la publicación de PNAS 84: 7851 (1987); Biochemistry 28: 908 (1989)). Cuando los liposomas son endocitados por la célula objetivo, por ejemplo, se vuelven desestabilizadas y liberan sus contenidos. Esta desestabilización se denomina fusogénesis. El dioleoilfosfatidil-etanolamina (DOPE) es la base de muchos sistemas "fusogénicos". Dichos liposomas normalmente comprenden un compuesto de elección y un componente de lípidos, por ejemplo, un lípido neutral y/o catiónico, que incluye opcionalmente una molécula de reconocimiento-receptora tal como un anticuerpo que enlaza a un receptor o ligando de superficie celular determinado previamente (por ejemplo, un antígeno). Una variedad de métodos están disponibles para preparar liposomas tal como se describe en, por ejemplo, en las publicaciones de Szoka y asociados, Ann. Rev. Biophys. Bioeng. 9:467 (1980), Patentes Norteamericanas Nos. 4,186,183, 4,217,344, 4,235,871, 4,261,975, 4,485,054, 4,501,728, 4,774,085, 4,837,028, 4,235,871, 4,261,975, 4,485,054, 4,501,728, 4,774,085, 4,837,028, 4,946,787, Publicación PCT No. WO94M7424, Deamer & Bangham, Biochim. Biophys. Acta 443:629-634 (1976); Fraley, y asociados, PNAS 76: 3348-3352 (1979); Hope y asociados, Biochim. Biophys. Acta 812:55-65 (1985); Mayer y asociados, Biochim. Biophys. Acta 858:161-168 (1986); Williams y asociados, PNAS 85:242-246 (1988); Liposomes (Ostro (ed), 1983, Capítulo 1); Hope y asociados, Chem. Phys. Lip. 40:89 (1986); Gregoriadis, Liposome Technology (1984) y Lasic, Liposomes: from Physics to Applications (1993)). Los métodos adecuados incluyen, por ejemplo, sonicación, extrusión, alta presión/homogenización, microfluidización, diálisis detergente, fusión inducida por calcio de vesículas de liposoma pequeñas y métodos de fusión de éter, todos de los cuales son conocidos en la técnica. En ciertas modalidades de la presente invención, es deseable dirigir los liposomas de la presente invención utilizando porciones de dirección que son específicas para un tipo de célula, tejido en particular y similares. La dirección de liposomas utilizando una variedad de porciones de dirección (por ejemplo, ligandos, receptores y anticuerpos monoclonales) ha sido descrita previamente (ver por ejemplo, las Patentes Norteamericanas Nos. 4,957,773 y 4,603,044). Se pueden utilizar métodos estándar para el acoplamiento de agentes de dirección a liposomas. Estos métodos generalmente comprenden la incorporación en componentes de lípidos de liposomas, por ejemplo, fosfatidiletanolamina, que puede ser activada para adhesión de agentes de dirección, o compuestos lipofílicos derivados tales como bleomícina derivada de lípidos. Los liposomas dirigidos por anticuerpos pueden construirse utilizando, por ejemplo, liposomas que incorporan la proteína A (ver la publicación de Renneisen y asociados, J. Biol. Chem., 265:16337-16342 (1990) y Leonetti y asociados, PNAS 87:2448-2451 (1990). Para determinar la cantidad efectiva del compuesto que será administrada en el tratamiento o profilaxis de condiciones que pertenecen a infección VIH, el especialista evalúa los niveles del compuesto en el plasma en circulación, toxicidades del compuesto, progreso de enfermedad y la producción de resistencia viral al compuesto. La preparación farmacéutica es preferentemente en forma de dosis por unidad. En dicha forma la preparación se subdivide en dosis de unidad que contienen cantidades adecuadas del componente activo. La forma de dosis de unidad puede ser una preparación empacada, en donde el empaque contiene cantidades de preparación independientes, tales como tabletas, cápsulas y polvos empacados en frascos o ampolletas. Así mismo, la forma de dosis por unidad puede ser una cápsula, tableta, sobre o pastilla, o puede ser el número adecuado de cualesquiera de estas en la forma empacada. La cantidad de componente activo en una preparación de dosis de unidad puede variar o ajustarse de 0.1 mg a 10 g, más normalmente de 1.0 mg a 1 g, más típicamente 10 mg a 500 mg, de acuerdo con la aplicación particular y la potencia del componente activo. Si se desea, la composición también puede contener otros agentes terapéuticos o de diagnóstico compatibles. La administración puede lograrse a través de dosis simples o divididas. VI. Los Métodos La presente invención también proporciona métodos para tratar o disminuir la enfermedad y enfermedades relacionadas con VIH. El método incluye administrar una dosis terapéuticamente efectiva de al menos un compuesto de la presente invención a un sujeto que padece de enfermedad de VIH o enfermedades relacionadas con VIH. La presente invención también proporciona un método de terapia de combinación en donde al menos un compuesto de la misma se administra en combinación con al menos otro compuesto que tiene actividad contra enfermedad de VIH o enfermedad relacionada con VIH VI. a) Terapias de Combinación En numerosas modalidades, los compuestos de la presente invención se administrarán en combinación con uno o más compuestos o terapias adicionales Por ejemplo, se pueden administrar en conjunto múltiples inhibidores de transcpptasa inversa o uno o más compuestos de la presente invención se pueden administrar junto con otro compuesto terapéutico En una modalidad, el otro agente terapéutico es uno que se utiliza para prevenir o tratar infección de VIH En otra modalidad, el otro agente terapéutico es un agente utilizado para tratar una infección oportunista asociada con infección de VIH y/o tratar o prevenir infección de VIH Los agentes terapéuticos adecuados para utilizarse en combinación con los compuestos de la presente invención, incluyen pero no se limitan a, inhibidores de proteasa, inhibidores de transcpptasa inversas sin nucleósido, inhibidores de transcpptasa inversa de nucleósido, nucleósidos antiretrovirales, inhibidores de entrada, así como otros agentes anti-virales efectivos para inhibir o tratar infección de VIH Los ejemplos adicionales de agentes terapéuticos adecuados incluyen, pero no se limitan a, zidovudina, didanosina, estavudina, interferon, lamivudina, adefovir, nevirapina, delaviridina, lovirida, saquinavir, ¡ndinavir y AZT. Otros agentes terapéuticos adecuados ¡ncluyen, pero no se limitan a, antibióticos u otros agentes antivirales, por ejemplo, aciclovir. Otras terapias de combinación conocidas para los expertos en la técnica, se pueden utilizar junto con las composiciones y métodos de la presente invención. Tal como se explicó anteriormente, se ha descubierto que las pirrolidonas de la presente invención tienen actividad antiviral. Por lo tanto, los compuestos de la presente invención se pueden utilizar para inhibir una amplia variedad de víruses y, por lo tanto, tratar una amplia variedad de infecciones virales en un humano. Los víruses que pueden ser inhibidos utilizando los compuestos de la presente invención, incluyen pero no se limitan a, víruses de ADN, víruses de ARN, así como retrovíruses. Los ejemplos de víruses que pueden ser inhibidos utilizando los compuestos incluyen pero no se limitan a, víruses de Herpes, víruses de Hepatitis (A, B y C), víruses de influenza, víruses POX, víruses Rhino y HTLV (Leucemia de célula-T Humana) (por ejemplo, HTVL 1 y 2). Con base en su actividad antiviral, los expertos en la técnica tendrán en cuenta otros víruses que pueden ser tratados utilizando los compuestos de la presente invención. VI. b) Ensayos para Moduladores de Transcriptasa Inversa La modulación de transcriptasa inversa y la modulación correspondiente de VIH e infección viral, preferentemente inhibición, se puede evaluar utilizando una variedad de ensayos in vitro e in vivo, incluyendo modelos a base de células. Dichos ensayos se pueden utilizar para probar inhibidores y activadores de transcriptasa inversa, y en consecuencia, inhibidores y activadores de infección de VIH y enfermedades asociadas con VIH. Dichos moduladores de transcriptasa inversa son útiles para tratar padecimientos relacionados con la infección de VIH, tal como se describe en la presente invención. Los moduladores de transcriptasa inversa se prueban utilizando ya sea transcriptasa inversa recombinante, sintetizada en forma química o que ocurre naturalmente. Los moduladores preferidos de la presente invención son aquellos que actúan para disminuir la actividad o transcriptasa inversa en el nivel de proteína. Los moduladores preferidos también incluyen los que disminuyen la expresión de transcriptasa inversa en el nivel de ácido nucleico, por ejemplo, inhibidores de promotor de transcriptasa inversa, compuestos que incrementan la capacidad de acceso de cromosoma de gen de transcriptasa inversa, compuestos que disminuyen la estabilidad y procesamiento del ARN de transcriptasa inversa y compuestos que disminuyen niveles de ARN de transcriptasa inversa en el citoplasma o núcleo. La medida de la modulación de infección de VIH con el inhibidor de transcriptasa inversa, se puede llevar a cabo utilizando una variedad de ensayos, in vitro, in vivo y ex vivo, tal como se describe en la presente invención. Un cambio físico, químico o fenotípico adecuado que afecta la actividad, por ejemplo, actividad enzimática, proliferación celular (por ejemplo, proliferación de linfocitos CD4 + ), réplica de VIH, expresión de proteínas VIH o enlace de ligandos o substratos se puede utilizar para evaluar la influencia de un compuesto de prueba en el polipéptído de la presente invención. Cuando los efectos funcionales se determinan utilizando células o animales intactos, también se puede medir una variedad de efectos, tales como, niveles de ARN viral o tituladores virales en suero, enlace de ligando, cambios de transcripción tanto a marcadores genéticos conocidos como no caracterizados (por ejemplo, manchados northern), cambios en el metabolismo de la célula, cambios relacionados con la proliferación celular, expresión de marcador viral, síntesis de ADN, ensayos de dilución de marcador y tinta (por ejemplo, GFP y ensayos de rastreo celular), etc. VI. c) Ensayos in vitro Los ensayos para identificar los compuestos con actividad de modulación de transcriptasa inversa pueden llevarse a cabo in vitro. Tal como se describe más adelante, el ensayo puede ser ya sea en estado sólido o soluble. La proteína puede enlazarse a un soporté sólido, ya sea en forma covalente o no covalente. Con frecuencia, los ensayos in vitro de la presente invención son enlace de substrato o ligando o ensayos de afinidad, ya sea competitivo o no competitivo. Otros ensayos in vitro incluyen medir cambios en propiedades espectroscópicas (por ejemplo, fluorescencia, absorbancia, índice de refracción), hidrodinámica (por ejemplo, forma), cromatográficas o de solubilidad de la proteína. En una modalidad, se lleva a cabo un ensayo de enlace de alto rendimiento en el cual la transcriptasa inversa o un fragmento de la misma se pone en contacto con un modulador potencial y se incuba durante una cantidad de tiempo adecuada. En una modalidad, el modulador potencial se enlaza a un soporte sólido, y se agrega a la transcriptasa inversa. En otra modalidad, la transcriptasa inversa se enlaza a un soporte sólido. Se puede utilizar una amplia variedad de ensayos para identificar el enlace de modulador de la transcriptasa inversa, incluyen ensayos de enlace de proteína-proteína etiquetados, cambios de movilidad electroforética, inmunoensayos, ensayos enzimáticos tales como ensayos de cinasa y similares. En algunos casos, el enlace del modulador candidato se determina a través del uso de ensayos de enlace competitivo, en donde la interferencia con el enlace de un ligando o substrato conocido se mide en la presencia de un modulador potencial. Ya sea el modulador o el ligando o substrato conocido se enlaza primero, y posteriormente se agrega el competidor. Una vez que se lava la transcriptasa inversa, se determina la interferencia con el enlace, ya sea del modulador potencial o el ligando o substrato conocido. Con frecuencia, ya sea el modulador potencial o el ligando o substrato conocido es etiquetado. VI. d) Ensayos in vivo a base de células En otra modalidad, se expresa la transcriptasa inversa en una célula, y se ensayan los cambios funcionales, por ejemplo físicos y químicos o fenotípicos, para identificar moduladores de transcriptasa inversa y moduladores de réplica de VIH y células infectadas con VIH. Las células que expresan transcriptasa inversa también se pueden utilizar en ensayos de enlace y ensayos enzimáticos. Se puede medir cualquier efecto funcional adecuado, tal como se describe en la presente invención. Por ejemplo, la morfología celular (por ejemplo, volumen celular, volumen nuclear, perímetro celular y perímetro nuclear), enlace de ligando, proliferación de linfocito, apoptosis, expresión de marcador viral, positividad GFP y ensayos de dilución de tinta (por ejemplo, ensayos de rastreo de células con tinta que enlazan las membranas celulares), ensayos de síntesis de ADN (por ejemplo, 3H-trimidina y tintas de enlace de ADN fluorescentes tal como tinta BrdU o Hoechst con análisis FACS), todos son ensayos adecuados para identificar moduladores potenciales utilizando un sistema a base de células. Las células adecuadas para dichos ensayos a base de células incluyen tanto células primarías, tales como PBMCs, linfocitos (por ejemplo, CD4 + ), neutrofilos, leucocitos polimorfonucleares, como otras células fagocíticas y líneas celulares, por ejemplo, células Jurkat, células BJAB, etc. La transcriptasa inversa puede ocurrir naturalmente o ser recombinante. El ARN de transcriptasa inversa celular y los niveles de polipéptido pueden determinarse midiendo el nivel de proteína o mARN. El nivel de transcriptasa inversa o proteínas relacionadas con transcriptasa inversa se mide utilizando inmunoensayos tales como manchado western, ELISA y similares con anticuerpos que enlazan en forma selectiva al polipéptido de transcriptasa inversa o un fragmento del mismo. Para medir el mARN, se prefiere la amplificación, por ejemplo, utilizando PCR, LCR o ensayos de hibridación, por ejemplo, hibridación northern, protección de ARNse, manchado de puntos. El nivel de proteína o mARN se detecta utilizando agentes de detección directa o indirectamente etiquetados, por ejemplo, ácidos nucleicos etiquetados en forma fluorescente o radioactiva, anticuerpos etiquetados en forma radioactiva o enzimática y similares, tal como se describe en la presente invención. Como alternativa, la expresión de transcriptasa inversa se puede medir utilizando un sistema de gen reportero, por ejemplo, utilizando una proteína de fusión o un gen enlazado a un promotor de transcriptasa inversa. Dicho sistema puede ser considerado utilizando un promotor de proteína de transcriptasa inversa enlazado en forma operable a un gen reportero tal como aciltransferasa de cloranfenicol, luciferaza de mosca, luciferaza bacteriana, ß-galactosidasa y fosfatasa alcalina. Además, la proteína de interés se puede utilizar como un reportero indirecto a través de la adhesión a un segundo reportero tal como proteína fluorescente roja o verde (ver por ejemplo, la publicación de Mistili & Spector, Nature Biotechnology 15961-964 (1997)). La construcción reportera normalmente es transfectada en una célula. Después del tratamiento con un modulador potencial, la cantidad de transcripción, traducción o actividad del gen reportero se mide de acuerdo con técnicas estándar conocidas en el arte. VI. e) Modelos animales Los modelos animales de infección VIH también pueden encontrar uso en clasificar moduladores de transcriptasa inversa. En forma similar, la tecnología de animales transgénicos incluyendo tecnología de eliminación genética, por ejemplo, como resultado la recombinación homologa con un vector de dirección de gen adecuado, o sobre-expresión de gen, dará como resultado la ausencia de expresión o expresión incrementada de la transcriptasa inversa. También se puede aplicar la misma tecnología para elaborar células de eliminación. Cuando se desea, la expresión específica de tejido o eliminación de la proteína de transcriptasa inversa puede ser necesaria. Se pueden elaborar células de eliminación y ratones transgénicos mediante la inserción de un gen marcador u otro gen heterólogo en un sitio de gen de transcriptasa inversa endógeno en el genoma de ratón a través de recombinación homologa. Dichos ratones también pueden ser elaborados substituyendo una transcriptasa inversa endógena con una versión mutada del gen de transcriptasa inversa mutando una transcriptasa inversa endógena, por ejemplo, mediante exposición a carcinógenos. Una construcción de ADN se introduce en el núcleo de las células madre embriónicas. Las células que contienen la lesión genética recientemente construidas se inyectan en un embrión de ratón huésped, el cual se implanta nuevamente en un receptor hembra. Algunos de estos embriones se desarrollan en ratones quiméricos que poseen células germen derivadas parcialmente de la línea de célula mutante. Por consiguiente, al reproducir ratones quiméricos es posible obtener una nueva línea de ratones que contengan la lesión genética introducida (ver por ejemplo, la publicación de Capecchi y asociados, Science 244:1288 (1989)). Los ratones dirigidos en forma quimérica pueden ser derivados de acuerdo con la publicación de Hogan y asociados, Manipulating the Mouse Embryo: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory (1988) y Teratocarcinomas and Embryonic Stem Cells: A Practical Approach, Robertson, ed. IRL Press, Washington, D.C., (1987).

VI. f) Ensayos de alto rendimiento solubles v en estado sólido En una modalidad preferida, los métodos de clasificación de alto rendimiento comprenden proporcionar una molécula orgánica pequeña de combinación o biblioteca de péptidos que contiene un gran número de compuestos terapéuticos potenciales (compuestos moduladores o de ligando potenciales). Dichas "bibliotecas químicas de combinación" o "bibliotecas de ligando" se clasifican posteriormente en uno o más ensayos, tal como se describe en la presente invención, para identificar los elementos de la biblioteca (especies o subclases químicas particulares) que despliegan una actividad característica deseada. Los compuestos identificados de esta forma pueden servir como "compuestos líderes" convencionales o pueden ser utilizados por sí mismos como terapéuticos potenciales o reales. Una biblioteca química de combinación es una recolección de diversos compuestos químicos generados ya sea mediante síntesis química o síntesis biológica, combinando un número de "bloques de construcción" química, tales como reactivos. Por ejemplo, una biblioteca química de combinación lineal, tal como una biblioteca de polipéptido se forma combinando un grupo de bloques de construcción química (aminoácidos) en cada forma posible para una longitud determinada del compuesto (por ejemplo, el número de aminoácidos en un compuesto de polipéptido). Se pueden sintetizar millones de compuestos químicos a través de dicho mezclado de combinación de bloques de construcción química. La preparación y clasificación de bibliotecas químicas de combinación es bien conocida para los expertos en la técnica. Dichas bibliotecas químicas de combinación incluyen, pero no se limitan a, bibliotecas de péptidos (ver por ejemplo, la Patente Norteamericana No. 5,010,175, Furka, Int, J. Pept. Prot, Res. 37:487-493 (1991) y Houghton y asociados, Nature 354:84-88 (1991)). También se puede utilizar otras químicas para generar bibliotecas de diversidad química. Dichas químicas incluyen, pero no se limitan a: péptoides (por ejemplo, Publicación PCT No. WO 91M9735), péptidos codificados (por ejemplo, Publicación PCT No. WO 93\20242), bio-oligomeros aleatorios (por ejemplo, Publicación PCT No. WO92/00091), benzodiazepinas (por ejemplo, Patente Norteamericana No. 5,288,514), diversómeros tales como hidantoinas, benzodiazepinas y dipéptidos (Hobbs y asociados, Proc. Nat. Acad. Sci. EUA 90:6909-6913 (1993)), polipéptidos vinilogos (Hagihara y asociados, J. Amer. Chem. Soc. 114:6568 (1992)), peptidomimétícos sin péptido con andamiaje de glucosa (Hirschmann y asociados, J. Amer. Chem. Soc. 114:9217-9218 (1992)), síntesis orgánica análoga de biblioteca de compuestos pequeños (Chen y asociados, J. Amer. Chem. Soc. 116:2661 (1994)), oligocarbamatos (Cho y asociados, Science 261:1303 (1993)), y/o fosfonatos de peptidilo (Campbell y asocidados, J. Org. Chem. 59:658 (1994)), bibliotecas de ácido nucleico (ver la publicación de Ausubel, Berger y Sambrook, todos supra), bibliotecas de ácido nucleico de péptidos (ver por ejemplo, la Patente Norteamericana No, 5,539,083), bibliotecas de anticuerpos (ver por ejemplo, publicación de Vaughn y asociados, Nature Biotechnology, 14(3):309-314 (1996) y PCT/US96/10287), bibliotecas de carbohidrato (ver por ejemplo, publicación de Liang y asociados, Science, 274:1520-1522 (1996) y Patente Norteamericana No. 5,593,853), bibliotecas de moléculas orgánicas pequeñas (ver por ejemplo, benzodiazepinas, Baum C&EN, Enero 18, página 33 (1993); isoprenoides, Patente Norteamericana No. 5,569,588; tiazolidinonas y metatiazanonas, Patente Norteamericana No. 5,549,974; pirrolidinas, Patentes Norteamericanas Nos. 5,525,735 y 5,519,134; compuestos morfolino, Patente Norteamericana No. 5,506,337; benzodiazepinas, 5,288,514 y similares). Los aparatos para la preparación de bibliotecas de combinación están comercialmente disponibles (ver por ejemplo, la publicación de 357 MPS, 390 MPS, Advanced Chem Tech, Louisville KY, Symphony, Rainin, Woburn, MA, 433A Applied Biosystems, Foster City, CA, 9050 Plus, Millipore, Bedford, MA). Además, numerosas bibliotecas de combinación están comercialmente disponibles (ver por ejemplo, ComGenex, Ppnceton, N J Asinex, Moscú, Ru, Tpopos, Inc , St Louis, MO, ChemStar, Ltd, Moscú, RU, 3D Pharmaceuticals, Exton, PA, Martek Biosciences, Columbia, MD, etc) En una modalidad, la presente invención proporciona ensayos solubles utilizando una proteína de transcpptasa inversa, o una célula o tejido que expresa una transcpptasa inversa, ya sea que ocurre naturalmente o recombinante En otra modalidad, la presente invención proporciona ensayos m vitro con base en fase sólida en un formato de alto rendimiento, en donde la transcpptasa inversa se adhiere a una fase sólida Cualesquiera de los ensayos aquí descritos pueden ser adaptados para clasificación de alto rendimiento En los ensayos de alto rendimiento de la presente invención, ya sea solubles o en estado sólido, es posible clasificar hasta varios miles de moduladores o ligandos diferentes en un solo día Esta metodología puede ser utilizada para transcpptasa inversa m vitro, o para ensayos a base de membranas o a base de células que comprenden una proteína de transcpptasa inversa En particular, cada depósito de una placa de microtitulacion puede ser utilizada para correr un ensayo contra un modulador potencial seleccionado o, se observan efectos de tiempo de concentración o incubación, cada 5 a 10 depósitos pueden probar un modulador simple Por lo tanto, una sola placa de microtitulación estándar puede ensayar aproximadamente 100 (por ejemplo, 96) moduladores Si se utilizan placas de 1536 depósitos, entonces una sola placa puede ensayar fácilmente de aproximadamente 100 a aproximadamente 1500 compuestos diferentes. Es posible ensayar muchas placas por día; la clasificación de ensayos para hasta aproximadamente 6,000, 20,000, 50,000, o más de 100,000 compuestos diferentes, es posible utilizando los sistemas integrados de la presente invención. Para una reacción de estado sólido, la proteína de interés a un fragmento de la misma, por ejemplo, un dominio extracelular, o una célula o membrana que comprende la proteína de interés o un fragmento del mismo como parte de una proteína de fusión, pueden enlazarse al componente de estado sólido, directa o indirectamente a través de enlace covalente o no covalente. Una etiqueta para enlace covalente o no covalente puede ser cualquiera de una variedad de componentes. En general, una molécula que enlaza la etiqueta (un enlazador de etiqueta) se fija a un soporte sólido, y la molécula marcada de interés se adhiere al soporte sólido a través de la interacción de la etiqueta y el enlazador de la etiqueta. Se puede utilizar un número de etiquetas y enlazadores de etiqueta, con base en las interacciones moleculares conocidas bien descritas en la literatura. Por ejemplo, cuando una etiqueta tiene un enlazador natural, por ejemplo, biotina, proteína A, o proteína G, se puede utilizar junto con enlazadores de etiqueta adecuados (avidina, estreptavidina, neutravidina, la región Fc o una inmunoglobulina, etc.). Los anticuerpos para moléculas con enlazadores naturales, tales como bíotina también están ampliamente disponibles y son enlazadores de etiqueta adecuados; ver la publicación de SIGMA Immunochemicals 1998, catálogo SIGMA, St Louis MO). En forma similar, cualquier compuesto hapténico o antigénico se puede utilizar en combinación con un anticuerpo adecuado para formar un par enlazador de etiqueta/etiqueta. Miles de anticuerpos específicos están comercialmente disponibles y muchos anticuerpos adicionales se describen en la literatura. Por ejemplo, en una configuración común, la etiqueta es un primer anticuerpo y el enlazador de etiqueta es un segundo anticuerpo que reconoce el primer anticuerpo. Además de las interacciones de anticuerpo-antígeno, las interacciones de receptor-ligando también son adecuados como etiqueta y pares de etiqueta-enlazador. Por ejemplo, los agonistas y antagonistas de receptores de membrana celular (por ejemplo, interacciones de receptor celular-ligando tales como transferina, equipo-c, ligandos de receptor viral, receptores de citocina, receptores de quimocina, receptores de interleucina, receptores de inmunoglobulina y anticuerpos, la familia de cadherina, la familia de integrina, la familia de selectina y similares; ver por ejemplo, la publicación de Pigott & Power, The Adhesión Molecule Facts Book I (1993). En forma similar, las toxinas y venomas, epítopes virales, hormonas (por ejemplo, opiatos, esteroides, etc), receptores intracelulares (por ejemplo, que transmiten los efectos de varios ligandos pequeños, incluyendo esteroides, hormona tiroides, retinoides y vitamina D; péptidos), fármacos, lecitinas, azúcares, ácidos nucleicos (configuraciones de polímero tanto lineales como cíclicas), oligosacáridos, proteínas, fosfolípidos y anticuerpos pueden interactuar todas con varios receptores celulares. Los polímeros sintéticos, tales como poliuretanos, poliésteres, policarbonatos, poliureas, poliamidas, polietileneiminas, sulfuros de poliarileno, polisiloxanos, poliimidas y poliacetatos también pueden formar una etiqueta o enlazador de etiqueta adecuado. Muchos otros pares de enlazadores etiqueta/etiqueta también son útiles en sistemas de ensayos aquí descritos, tal como lo podrán apreciar los expertos en la técnica al revisar la presente descripción. Los enlazadores comunes tales como péptidos, poliéteres y similares también pueden servir como etiquetas, e incluyen secuencias de polipéptido, tales como secuencias de poliglicina de entre aproximadamente 5 y 200 aminoácidos. Dichos enlazadores flexibles son conocidos para las personas expertas en la técnica. Por ejemplo, los enlazadores de poli(etileno glicol) están disponibles en Shearwater Polymers, Inc. Huntsville, Alabama. Estos enlazadores tienen opcionalmente ligaduras de amida, ligaduras de sulfidrilo o ligaduras heterofuncionales. Los enlazadores de etiqueta se fijan a substratos sólidos utilizando cualquier variedad de métodos normalmente conocidos y disponibles. Los substratos sólidos se derivan comúnmente o se funcionalizan exponiendo toda o una parte del substrato a un reactivo químico que fija un grupo químico a la superficie la cual es reactiva con una parte del enlazador de etiqueta. Por ejemplo, los grupos que son adecuados para adhesión a una parte de cadena más larga pueden incluir aminas, hidroxilo, tiol o grupos carboxilo. Los aminoalquilsilanos e hidroxialquilsilanos se pueden utilizar para funcionalízar una variedad de superficies, tales como superficies de vidrio. La construcción de dichas formaciones de biopolímero de fase sólida se describe en la literatura. Ver por ejemplo, la publicación de Merrifield, J. Am. Chem. Soc. 85:2149-2154 (1963) (que describe síntesis de fase sólida, por ejemplo, de péptidos); Geysen y asociados, J. Immun. Meth. 102:259-274 (1987) (que describe síntesis de componentes de fase sólida en pernos); Frank & Doring, Tetrahedron 44:6031-6040 (1988) (que describe síntesis de varias secuencias de péptido en discos de celulosa); Fodor y asociados, Science, 251:767-777 (1991); Sheldon y asociados, Clinical Chemistry 39(4):718-719 (1993); y Kozal y asociados, Nature Medicine 2(7):753-759 (1996) (que describen todas las formaciones de biopolímeros fijos a los substratos sólidos). Los métodos no químicos para fijar los enlazadores de etiqueta a substratos incluyen otros métodos comunes, tales como calor, reticulación mediante radiación UV y similares. EJEMPLOS Los ejemplos que se encuentran a continuación se ofrecen a manera de ilustración y no a manera de limitación. Los químicos se compraron en Aldrich Chemical Co. (Milwaukee, Wl), y se utilizaron tal como se recibieron. Las placas de gel de sílice se obtuvieron en Analtech (Newark, DE). Los espectros RMN se registraron en un instrumento 300 MHz Brucker. Los cambios químicos están en campo descendente de ppm de TMS y se registraron en los solventes descritos. Se diseñaron patrones de división tal como se indica a continuación: s, singleto; d, dobleto; t, tripelto; m, multipleto; br, amplio. EJEMPLO 1 Preparación de 5 1.1 Síntesis de 2 Se preparó 4-cloro-3-hidroxi-benzaldehído, 1, de acuerdo con O. Langer, y asociados, Bioorg. Med. Chem., 9:677-694 (2001) y S. A. Adediran, y asociados, Bioorg. Med. Chem. 9:1175-1183 (2001). Se agregaron 26 mL de 64 mmol K2CO3 en DMF, y bromuro de bencilo (15.3 mmol) al fenol, 1, (12.9 mmol) y la reacción se filtró a temperatura ambiente durante la noche. La siguiente mañana la mezcla de reacción se filtró y el filtrado se extractó en EtOAc, se lavó con NH CI saturado, H2O y salmuera, se secó y se concentró. La purificación con gel de sílice produjo el compuesto de 3-benciloxi-4-cloro-benzaldehído, 2, deseado. 1.2 Resultados Los datos analíticos de la estructura 2 se proporcionan a continuación. 1.2 a 3-Benciloxi-4-cloro-benzaldehído 1H RMN (CDCI3): 9-92 (s, 1H), 7.57 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 7.49 (d, 3H, J = 7.2 Hz), 7.43-7.40 (m, 3H), 7.39-7.35 (m, 1H), 5.23 (s, 2H). 1.2 Síntesis de 3 Una mezcla del compuesto 3-benciloxi-4-cloro-benzaldehído, 2, (20 mmol), acetato de amonio (22 mL de 60 mmol en nitrometano) y 6 mL de ácido acético se calentó durante 3 horas. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se dejó durante la noche. Se formó un material cristalino, el cual se filtró y lavó con una pequeña cantidad de EtOAc y hexano para producir un producto color amarillo. El líquido madre fue concentrado, disuelto en cloroformo y lavado con agua y salmuera y fue secado. El material formado del líquido madre se concentró y se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (EtOAc:Hexano = 1:3) para producir más del producto amarillo en la forma de un sólido color amarillo claro, 2-benciloxi-1-cloro-4-(2-nitro-viníl)-benzano, 3. 1.3 Resultados Los datos analíticos en la estructura 3 se proporcionan a continuación. 1.3a 2-Benciloxi-1-cloro-4-(2-nitro-vinil)-benceno ? RMN (CDCI3): 8.06 (d, 1H, J = 13.6 Hz), 7.66-7.48 (m, 7H), 7.26 (dd, 1H, J = 2.0, 8.0 Hz), 7.21 (d, 1H, J = 2.0 Hz), 5.35 (s, 2H). LCMS m/z 290.20 [M + H]J 1.4 Síntesis de 4 Se agregó en forma de gotas 50 mL de una solución de 3-acetil-4-bencil-oxazolidin-2-ona (1 mmol) en THF anhidro a una temperatura de -78°C a la diisopropilamída de litio en THF (1.0 eq) a través de una jeringa y se agitó durante 1hora. Se agregaron lentamente 25 mL de una solución de nitro olefina (1 mmol en THF anhidro) a la mezcla de reacción. La reacción se agitó durante 1 hora, se extinguió con NH CI acuoso saturado y se templó a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se extractó con EtOAc, se secó, se filtró y concentró. La cromatografía del residuo sobre gel de sílice (EtOAc: Hexano) produjo el producto deseado en la forma de un sólido color blanco, 4-bencil-3-[3-(3-benciloxi-4-cloro-fenil)-4-nitro-butiril]-oxazolidin-2-ona, 4. 1.5 Resultados Los datos analíticos en la estructura 4 se proporcionan a continuación. 1.5a 4-Bencil-3-f3-(3-benc¡loxí-4-cloro-fenil)-4-nitro-butirin-oxazolidin-2-ona ? RMN (CDCI3): 7.48 (d, 2H, J = 7.2 Hz), 7.40 (t, 2H, J = 7.2 Hz), 7.36-7.28 (m, 5H), 7.17 (dd, 2H, J = 1.6, 8.0), 6.90 (d, 1H, J = 2.0 Hz), 6.83 (dd, 1H, J = 2.0, 8.4 Hz), 5.16 (s, 2H), 4.69 (dd, 1H, J = 6.8, 12.4 Hz), 4.62-4.54 (m, 2H), 4.18-4.07 (m, 3H), 3.51 (dd, 1H, J = 7.6, 17.2 Hz), 3.30-3.21 (m, 2H), 2.74 (dd, 1H, J = 9.6, 13.6 Hz), LCMS m/z 509.20 [M + H] + . 1.6 Síntesis de 5 4 se disolvió en EtOH (o se disolvió parcialmente). A esta solución se le agregó níquel Raney. La mezcla se colocó bajo hidrógeno y se agitó durante de 10 a 24 horas. La mezcla se filtró posteriormente a través de celita y se concentró. El residuo se purificó sobre gel de sílice para proporcionar un producto puro en la forma de un sólido color blanco, 4-(3-benciloxi-4-cloro-fenil)-pirrolidin-2-ona 5. 1.7 Resultados Los datos analíticos en la estructura 5 se proporcionan a continuación. 1.7a 4-(3-Benciloxi-4-cloro-fenil)-pirrolidin-2-ona ? RMN (CDCI3): 7.41 (d, 2H, J = 7.6 Hz), 7.35 (t, 2H, J = 6.8 Hz), 7.29 (d, 2H, J = 8.0 Hz), 6.78 (d, 1H, J = 2.0 Hz), 6.75 (dd, 1H, J = 2.0, 8.0 Hz), 5.58 (brs, 1H), 5.11 (s, 2H), 3.70 (t, 1H, J = 8.4 Hz), 3.62-3.56 (m, 1H), 2.27 (dd, 1H, J = 6.8, 9.2 Hz), 2.66 (dd, 1H, J = 8.8, 16.8 Hz), 2.36 (dd, 1H, J = 9.2, 17.2 Hz); LCMS m/z 302.20 [M + H]J EJEMPLO 2 2.1 Síntesis de 8 A 750 mL de solución de p-anisidina, 7, (18.48 g, 0.15 mol, 1 eq) y 2,5-dimetoxi-2,5-dihidrofuran , 6, (39.04 g, 0.3 mol, 2 eq) en acetonitrilo, se le agregó 600 mL de una solución HCl acuosa 0.4 N. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora, se extinguió con NaHCO3 (40.32 g, 0.48 mol, 2 eq para HCl), se concentró bajo presión reducida a una temperatura de 27°C y se dividió entre EtOAc y H2O. La fase acuosa se extractó con EtOAc y los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y concentraron. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía sobre columna de sílice con un solvente mezclado de hexanos:EtOAc (1:1) para producir 1-(4-metoxi-fenil)- 1 ,5-dihidro-pirrol-2-ona, 8 (10.85 g, 38%). 2.2 Resultados Los datos analíticos en la estructura 8 se proporcionan a continuación . 2.2a 1-(4-Metoxi-fenil)-1,5-dihidro-pirrol-2-ona ? RMN (CDCI3): d 7.57 (2H, d, J = 9.2 Hz), 7.14 (1H, dt, J = 0.8, 6.0 Hz), 6.92 (2H, d, J = 9.2 Hz), 6.26 (1H, dt, J = 0.8, 6.0 Hz), 4.40 (2H, t, J = 1.6), 3.80 (3H, s). 2.3 Síntesis de 9 Una mezcla de 2-benciloxi-4-bromo-1 -cloro-benceno (120 g, 0.4 mol), diborato (107.5 g, 0.42 mol), KOAc (117.8 g, 3 eq), Pd(dppf)2CI2 (1% mol) y 500 mL de DMF se le extrajeron los gases con agitación y se recargó con nitrógeno. La mezcla se calentó a una temperatura de 80°C durante 3 horas. Se eliminó el DMF bajo vacío. El residuo se mezcló con acetato de etilo. Después de la filtración, el sólido se lavó con acetato d etilo (3x20 mL) y se re-cristalizó en acetato de etilo para proporcionar 97 g de producto puro. La solución madre también fue concentrada. El residuo se purificó lavando con columna de sílice corta (10% de acetato de etilo:hexano) para producir el producto crudo, el cual se re-cristalizó en acetato de etilo para proporcionar 2-(4-cloro-3-benciloxi- fe nil)-4, 4,5,5, -tetrametil[1 ,3,2]dioxaborolano, 9. 2.4 Resultados Los datos analíticos en la estructura 9 se proporcionan a continuación. 2.4 a 2-(4-Clo ro-3-benciloxi -fenil )-4.4.5.5.-tetrametil[1.3.21dioxaborolano ? RMN (CDCI3): d 7.35 (2H, d, J = 7.6 Hz), 7.28 (1H, br s), 7.17-7.26 (5H, m), 7.11 (1H, s), 5.02 (2H, s), 1.20 (12H, s). 2.5 Síntesis de 10 Una solución de 1 -(4-metoxi-fenil)-1 ,5-dihidro-pirrol-2-ona, 8, (9 g, 47.57 mmol, 1 eq), 2-(3-benciloxi-4-cloro-fenil)-4, 4,5,5-tetrametil-[1 ,3,2]dioxaborolano, 9, (32.8 g, 95.14 mmol, 2 eq), dímero de cloro(1 ,5-ciclooctadieno)rodio (I) (352 mg, 0.7136 mmol, 0.015 eq), (R)-BINAP (1.04 g, 1.665 mmol), 0.035 eq) y K2CO3 (3.3 g, 23.8 mmol, 0.5 eq) se preparó en un solvente mezclado de dioxano (200 mL) y agua (20 mL). La solución se purgó con nitrógeno y se calentó a una temperatura de 80°C en un baño de aceite durante 26 horas. La mezcla de reacción se dividió entre EtOAc y salmuera. La fase acuosa se extractó con EtOAc y los extractos EtOAc se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y se evaporaron. La cromatografía a través de una columna corta con eluyente de 5:4 hexanos:EtOAc proporcionó un producto sólido el cual se re-cristalizó en EtOAc y hexanos para proporcionar (R)-4-(3-Benciloxi-4-cloro-fenil)-1-(4-metoxí-fenil)-pírrolidin-2-ona, 10. 2.6 Resultados Los datos analíticos en la estructura 10 se proporcionan a continuación. 2.6a (R)-4-(3-Benciloxi-4-cloro-fenil)-1-(4-metoxi-fenin-pirrolidin-2-ona ? RMN (CDCI3): d 7.48 (2H, d, J = 9.2 Hz), 7.44 (2H, m), 7.32-7.39 (4H, m), 6.92 (2H, d, J = 9.2 Hz), 6.86 (1H, d, J = 1.6 Hz), 6.83 (1H, dd, J = 0.8, 8.0 Hz), 5.16 (2H, s), 4.12 (1H, dd, J = 8.0, 9.6 Hz), 3.81 (3H, s), 3.75 (1H, dd, J = 6.8, 9.6 Hz), 3.63 (1H, dddd, J = 8 Hz), 2.98 (1H, dd, J = 8.8, 16.8 Hz), 2.68 (1H, dd, J = 16.8, 8.4 Hz) ppm. 2.7 Síntesis de 5 A una solución de 1400 mL de 4-(3-Benciloxi-4-cloro-fen i I )- 1 -(4-metoxi-fenil)-pirrolidin-2-ona, 10, (16.5 g, 40 mmol, 1 eq) en CH3CN, se le agregó en forma de gotas a una temperatura de 0°C una solución de nitrato de cerio de amonio (CAN) (65.8 g, 0.12 mol, 3 eq) en CH3CN acuoso al 50%. La mezcla de reacción se agitó a una temperatura de 0°C durante 1 hora y se agregó Na2SO3 (45.4 g, 0.36 mol, 9 eq). La mezcla de reacción se agitó a una temperatura de 0°C durante 1 hora y posteriormente se filtró a través de celita para eliminar el precipitado. Se concentró el licor madre bajo presión reducida y el residuo se dividió entre 5% MeOH en EtOAc y H2O. La fase acuosa se extractó con MeOH en EtOAc y los extractos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, y se evaporaron. La cromatografía a través de una columna corta con solución de agotamiento de 40:1 CH2CI2MeOH produjo (R)-4-(3-benciloxi-4-cloro-fenil)-pirrolidin-2-ona, 5. EJEMPLO 3 Preparación de 12 3.1. Síntesis de 11 A una mezcla de 5 (10.5 g, 34.8 mmol) y 3.2 g de Pd/C (10%), se le agregaron 500 ml de THF, y 500 µl de 4M HCl en dioxano. A la mezcla de reacción se le extrajeron los gases y se purgó 10 veces con hidrógeno, se agitó bajo hidrógeno atmosférico durante 19 horas y se filtró a través de celita. La evaporación del filtrado produjo el producto crudo que fue re-cristalizado en EtOAc y hexanos para proporcionar (R)-4-(4-cloro-3-hidroxi-fenil)-pirrolidin-2-ona, 11. 3.2 Síntesis de 12 A una solución de 11 (3.57 g, 16.9 mmol, 1 eq) y 3-cloro-2-fluorobenzonitrilo (5.25 g, 33.74 mol, 2 eq) en DMSO seco (125 ml) se le agregó K2CO3 (7 g, 50.6 mmol, 3.1 eq). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas y se dividió entre EtOAc y salmuera. La fase acuosa se extractó con EtOAc y los extractos EtOAc combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, y se evaporaron. La cromatografía sobre columna de sílice con solución de agotamiento de 20:1 CH2CI2:MeOH, produjo (R)-3-cloro-2-[2-cloro-5-(5-oxo-pirrolidin-3-il)-fenoxi]-benzonitrilo, 12. 2.4 Resultados Los datos analíticos de la estructura 9 se proporcionan a continuación: 2.4a (R)-3-cloro-2-[2-cloro-5-(5-oxo-pirrolidin-3-il)-fenoxi]-benzonitrilo MS m/z 347.0 (M + 1). EJEMPLO 4 Preparación de 26 4.1 Síntesis de 22 A un frasco de fondo redondo seco se le colocaron 0.5 mmol de 12, 0.9 mmol de fosfato de potasio, 2-fluoro-5-yodobenzonitrilo (0.75 mmol), 1 ,2-trans-ciclohexandiamina (60 µl) y Cul (80 mg) bajo nitrógeno. La reacción se cargó con nitrógeno, DMF (5 ml) y dioxano (5 ml). La mezcla se agitó y calentó a una temperatura de 110°C durante 20 horas y posteriormente se enfrio a temperatura ambiente La solución a temperatura ambiente se diluyó con EtOAc y se filtró El filtrado se lavó con cloruro de amonio saturado, agua y salmuera y se secó La concentración y cromatografía del residuo sobre gel de sílice produce 3-cloro-2-{2-cloro-5-[1-(3-c?ano-4-fluoro-fen?l)-5-oxo-p?rrol?d?n-3-?l]-fenox?}-benzon?tr?lo puro, 22 4 2 Resultados Los datos analíticos de la estructura 22 se proporcionan a continuación 4 2a 3-cloro-2-{2-cloro-5-[1 -(3-c?ano-4-fluoro-fen?ll)-5-oxo-p?rrol?d?n-3-?l]-fenox?}-benzon?tplo MS m/z 466 (M + 1) 4 3 Síntesis de 23 A una solución de 22 (20 mg, 0 043 mmol) en propanol (0 5 ml) se le agregó hidrazina (17 mg, 0 344 mmol) La mezcla se agito a una temperatura de 100°C durante 14 horas y posteriormente se enfrió a temperatura ambiente El solvente se elimino bajo vacío y el residuo se purificó mediante LC/MS de fase inversa para proporcionar 2-{5-[1-(3 -am?no-1 H-?ndazol-5-?l)-5-oxo-p?rrol?d?n-3-?l]-2-cloro-fenox?}-3-cloro-benzon?tr?lo, 23 44 Resultados Los datos analíticos de la estructura 23 se proporcionan a continuación 4 4a 2-{5-[1 -(3-am?no-1 H-?ndazol-5-?l)-5-oxo-p?rrol?d?n-3- ?l]-2-cloro-fenox?}-3-cloro-benzon?tr?lo ? RMN 400 MHz (MeOD) d 7 99 (1H, d), 7 94 (1H, dd), 7 85 (1H, dd), 7.78 (1H, dd), 7 56 (1H, d), 7 47 (1H, d), 7 43 (1H, t), 7 21 (1H, d), 6 64 (1H, d), 4 28 (1H, dd), 3 89 (1H, dd), 3 74 (1H, m), 3 01 (1H, dd), 2 67 (1H, dd), MS m/z 478 (M + 1) 4 5 Síntesis de 25 Se agregó 2-{ 5-[1 -(3-Am?no-1 H-?ndazol-5-?lo)-5-oxo-p?rrol?d?n-3-?lo-2-cloro-fenox? !>-3-cloro-benzonitrilo, 23(80 Mg , 0 167mmol) y anhídrido itálico (30 Mg., 0 2 mmol) en1 ml de dioxanoy se calentó a una temperatura de 120 °C Después de 3 horas, la mezcla se enfrió a temperatura ambiente y el solvente se eliminó bajo vacío El residuo se purificó mediante cromatologia instantánea ( gel de sílice, 0-8% MeOH en CH2CL2) para proporcionar 3-cloro-2-(2-cloro-5--| 1 -[3-(1 ,3-d?oxo1 ,3-d?h?dro-?so?ndol-2-?l)-1H-?ndazol-5-?lo]-5-oxo-pirrol?d?n-3-?lo-fenox?)-benzon?tr?lo, 25, en la forma de un sólido color amarillo claro 4 6 Síntesis de 26 Se trató 25 (62 Mg , 0 102 mmol) en CH2CL2 anh?dro(2ml) con isocianuro de clorosulfonilo (20µL) Después de agitar a temperatura ambiente durante una hora, se eliminó el solvente El residuo se trató con agua (1mL) y se agitó a temperatura ambiente durante una hora Posteriormente se eliminó agua bajo vacío, dejando un residuo El residuo se disolvió en EtOH (2mL) y se trató con hidracina (60µ) durante 3 horas Posteriormente se eliminó el solvente bajo vacío y el residuo se purificó mediante cromatografía instantánea (gel de sílice, 0-5% Moho en CH2CL2) para proporcionar amida de ácido 3-amino-5-<¡4-[cloro-3-(2-cloro-6-ciano-fenoxi)-fenil]-2oxo-pirrolídin-1-il?(--indazole-1 -carboxílico, 26, en la forma de un sólido color blanco. 4.7 Resultados Los datos analíticos de la estructura 26 se proporcionan a continuación: 4.7a amida de ácido 3-Amino-5-<¡ 4-[4-cloro-3-(2-cloro-6-ciano-fenoxi)-fenil]-2-oxo-firrolidin-1-il!>-indazole-1 -carboxílico.

? RMN 400 MHz (MeOD):d 8.10 (1H,d), 7.83 (1H,d) , 7.80(1H,d), 7.80(1H,d), 7.73(1H,dd), 7.67(11-1, dd), 7.53(11-1, d), 7.37(1H,t), 7.17(1H,d), 6.58(1H,d), 4.26(1H,dd), 3.86(1H,dd), 3.71(1H,m), 3.00(1H,dd), 2.61(1H,dd); MS m/z 521(M + 1). EJEMPLO 5 Preparación de 29 5.1 Síntesis de 28 Se acopló 12 (200. Omg, 0.58mmol) con 4-bromo-2-nitrobenzonitrilo ,27, (156.9mg, 0.69mmol) para proporcionar (R)-3-cloro-2-(2-cloro-5-(1-ciano-3-nitrofenil)-5-oxopirrolidin-3-ilo)fenoxi)benzonítrilo, 28, en la forma de un sólido color amarillo claro. 5.2 Resultados Los datos analíticos de la estructura 28 se proporcionaran a continuación: 5.2 a (R)-3-cloro-2-(2-cloro-5-(1-(4-ciano-3-nitrofenil)-5-oxopirrolidin-3-ilo)fenoxi)benzonitrilo. ? RMN 400 MHz (MeOD): d 88 (1H,d), 7.99 (2H,m), 7.85 (1H,dd), 7.78 (1H,dd), 7.54 (1H,d), 7.44(1H,t), 7.19(1H,dd), 6.64(1H,d), 4.30(1H,dd),3.88(1H,dd), 3.72(1H,m), 3.00(1H,dd), 2.73(1H,dd);MS m/z 493.0(M + 1). 5.3 Síntesis de 29 Una mezcla de 28 (277.7 mg, 0.56 mmol) y SnCI22H20 (393.8mg, 1.75mmol) en 5.6 mL de EtOH, se calentó a una temperatura de 50° bajo una atmósfera de N2 durante 2 horas.

La mezcla de reacción se diluyó posteriormente con 6 ml de agua y se hizo alcalina con una solución acuosa NaOH 1N hasta que el Ph se mantuvo entre 9 y 10. Posteriormente se agregó 6 mL de EtOAc. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante una hora antes de filtrar a través de celita. Las 2 capas del permeado se separaron, y la capa acuosa se extracto con EtOAc. La capa EtOAc combinada se lavó con salmuera, se seco sobre MgSO4, se concentró y purificó mediante cromatografía de gel de sílice (hexanos:EtOAc) para producir (R)-2-amino-4-(4-(4-cloro-3-(2-cloro-6-ciano fenoxi) fe nilo )-2-oxopirrolidin-1 -ilo)-benzamida ,29, en la forma de un sólido color amarillo. 5.4 Resultados Los datos analíticos de la estructura 29 se proporcionan a continuación: 5.4a (R)-2-amino-4-(4-(4-cloro-3-(2-cloro-6-cianofenoxi)fenilo)-2-oxopirrolidin-1-ilo)-benzamida. ? RMN 400 MHz (MeOD): d 7.81 (1H,dd), 7.74(1H,dd), 4.52 (2H,m), 7.39 (1H,t), 7.13 (1H,dd), 6.94 (1H,d), 6.83 (1H,dd), 6.51 (1H,d), 4.18 (1H,dd), 3.76 (1H,dd), 3.64 (1H,m), 2.97 (1H,dd), 2.55 (1H,dd); MS m/z 481.0 (M + 1). EJEMPLO 6 Preparación de 30 6.1 Síntesis de 30 Se disolvió 25 (10 Mg., 0.016 mmol) en 0.5 ml de piridina y se agregaron 10µL de cloruro de metasulfonilo. La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 16 horas. El solvente se eliminó bajo vacío y el residuo se trató con cloruro de amonio saturado (2 ml) seguido de extracción (3ml*3). Los extractos se combinaron, se concentraron y disolvieron nuevamente en 0.5 mL EtOH. Se agrego 5 µL de hidracina y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. El solvente se eliminó bajo vacío y el residuo se purificó mediante LC/MS de fase inversa para proporcionar 2-{5-[1-(3-amino-1-metanesulfonilo-1H-indazol-5-ilo)-5-oxo-pirrolidin-3-ilo]-2-cloro-fenoxi}-3-cloro-benzonitrilo, 30. 6.2 Resultados Los datos analíticos de la estructura 30 se proporcionan a continuación. 6.2a 2-{5-[1-(3-Amino-1-metanesulfonil-1H-indazol-5-ilo)-5-oxo-pirrolidin-3-ilo]2-cloro-fenoxi}-3-cloro-benzonitrilo. ? RMN 400MHZ (MeOD): d 7.94 (1H,d), 7.81-7.95 (3H,m), 7.75 (1Hdd), 7.54 (1H,d), 7.39 (1H,t), 7.18 (1H,d), 6.60 (1H,d), 4.28 (1H,dd), 3.88 (1H,dd), 3.72 (72 (1H,m), 2.93 (3H,s), 3.00 (1H,dd), 2.64 (1H,dd);MS m/z 556 (M + 1). EJEMPLO 7 Preparación de 31 7.1 Síntesis de 31 Siguiendo el mismo proceso para la preparación del compuesto 30, en el ejemplo 6 y 7, se elaboró el compuesto del titulo, 7.2 Resultados Los datos analíticos de la estructura 31 se proporcionarán a continuación: 7.2a 2-{5-[1-(3-amino-1-metanesulfonilo-1H-indazol-5-ilo)-5-oxo-pirrolidin-3-ilo]-2-cloro-fenoxi}-3-flouro-benzonitrilo.

? RMN 400 MHz (DMSO-d6): d 7.85 (1H,d,J = 2.0), 7.81 (1H,dd,J = 2.4,5.2 Hz,) 7.65-7.69 (2H,m), 7.58 (1H,d,J = 9.2 Hz), 7.46 (1H,d,J = 8.0 Hz), 7.34 (1H,dt,J = 4.8,8.0 Hz), 7.14 (1H,dd,J = 2.0,8.4 Hz), 6.94 (1H,s), 6.40 (2H,s), 3.99 (1H,t,J = 8.4 Hz), 3.66 (1H,t,J = 8.0 Hz), 3.59 (1H,ddd,J = 8.4Hz), 3.15 (3H,s), 2.70 (1H,dd,J = 8.4,16.4 Hz), 2.55 (1H,dd,J = 8.4,16.4 Hz).

EJEMPLO 8 Preparación de 17 8.1 Síntesis de 15 Una solución agitada de N-(4-metoxi-bencil)-metanosulfonamida, 14, (613 mg, 2.85 mmol) en DMF anhidro, se enfrío a una temperatura de 0°C con un baño de hielo y un agua y se trató con dispersión al 60% de hidruro de sodio (114 mg, 4.75 mmol). Una solución de 5 ml de 2-fluoro-5-yodobenzonitrilo, 13, en DMF anhidro se agregó a la mezcla de reacción. La solución resultante se dejó templar a temperatura ambiente y se calentó a una temperatura de 80°C durante 1 hora. La reacción se enfrío a temperatura ambiente y se extinguió con NH CI5 acuoso saturado, se extracto con EtOAc, se secó con Na2SO4, se filtró y concentró. La cromatografía (SiO2, 3:1 Hex:EtOAc), proporciona N-(2-ciano-4-yodo-fenil)-N-(4-metoxi-bencil)-metano-sulfonamida, 15, en la forma de un sólido color blanco. 8.2 Síntesis de 16 6 ml de una solución 15 (600 mg, 1.4 mmol) en 3:2:1 THF:MeOH:H2O se trató con hidróxido de sodio, (1.0 g, 27.0 mmol). La mezcla de reacción se calentó bajo reflujo durante 12 horas. La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y se lavó con etanol. La capa acuosa se acidificó a un pH de 1 y se extractó con EtOAc. La capa orgánica se secó con Na2SO4, se filtró y concentró para producir ácido 5-yodo-2- [metansulfonil-(4-metoxi-bencíl)-amino] -benzoico, 16, en la forma de un sólido color blanco. 8.3 Resultados Los datos analíticos de la estructura 16 se proporcionan a continuación. 8.3a Acido 5-yodo-2-[metansulfonil-(4-metoxibencil)-aminoj-benzoico ? RMN (CDCI3): d 8.34 (1H, d, J = 2.0 Hz), 7.76 (1H, dd, J = 2.0, 8.0 Hz), 7.15 (2H, d, J = 8.8 Hz), 6.79 (3H, m), 4.51 (1H, br s), 3.78 (3H, s), 2.98 (3H, s). 8.4 Síntesis de 17 Una solución de 16 (366 mg, 0.79 mmol) en CH2CI2 (10 ml) se agitó a una temperatura de 0°C y se trató con cloruro de metanosulfonilo (183 mg, 1.6 mmol) y Et3N (162 mg, 1.6 mmol). La reacción se agitó durante 1 hora y se trató con bis-(4-metoxi-bencil)-amina (257 mg, 0.87 mmol). La reacción se dejó templar a temperatura ambiente y se lavó con NaHCO3 acuoso saturado, se secó con Na2SO , y se concentró. La cromatografía (SiO2, 1:1 Hex:EtOAc) produjo 5-yodo-2-[metansulfonil-(4-metoxi-bencil)-amino]-N,N-bis-(4-metoxi-bencil)-benzamida, 17, en la forma de un sólido color blanco. 8.5 Resultados Los datos analíticos de la estructura 17 se proporcionan a continuación 8.5a 5-yodo-2-[metansulfonil-(4-metoxí-bencil)-amino]-N,N- bis-(4-metoxi-bencil)-benzamida ? RMN (CDCI3): d 7.63 (1H, d, J = 2.0 Hz), 7.56 (1H, dd, J = 2.0, 8.4 Hz), 7.30 (2H, d, J = 8.4 Hz), 7.18-7.21 (2H, m), 7.08 (2H, d, J = 8.4 Hz), 6.91 (2H, d, J = 8.4 Hz), 6.88 (2H, J = 8.4 Hz), 6.38-6.55 (2H, m), 6.67-6.70 (1H, m), 5.36 (1H, m), 4.71 (2H, m), 4.42 (1H, m), 4.12 (1H, m), 3.96 (1H, m), 3.83 (3H, s), 3.81 (3H, s), 3.79 (3H, s). EJEMPLO 9 Preparación de 33 9.1 Síntesis de 32 A un frasco de fondo redondo seco se le colocaron 0.5 mmol de 12, 0.9 mmol de fosfato de potasio, 17 (0.75 mmol), 1 ,2-trans-ciclohexandiamina (60 µl) y Cul (80 mg) bajo nitrógeno. La reacción se cargó con nitrógeno, DMF (5 ml) y dioxano (5 ml). La mezcla se agitó y calentó a una temperatura de 110°C durante 20 horas y posteriormente se enfrió a temperatura ambiente. La solución a temperatura ambiente se diluyó con EtOAc y se filtró. El filtrado se lavó con cloruro de amonio saturado, agua y salmuera y se secó. La concentración y cromatografía del residuo sobre gel de sílice produce 32 puro. 9.2 Síntesis de 33 Se disolvió 32 (200 mg) en 3 ml de TFA y la solución resultante se calentó a una temperatura de 80°C durante 4 horas, y posteriormente se enfrió a rt. Se eliminó TFA bajo presión reducida y el residuo se purificó mediante cromatografía de columna de gel de sílice (EtOAcMeOH = 20:1) para producir 5-{4-[4-cloro-3-(2-cloro-6-ciano-fenoxí)-fenil]-2-oxo-pirrolidin-1- ¡l}-2-metanosulfonilamino-benzamida puro, 33. 9.3 Resultados Los datos analíticos de la estructura 33 se proporcionan a continuación. 9.3a 5-{4-[4-cloro-3-(2-cloro-6-ciano-fenoxi)-fenil]-2-oxo-pirrolidin-1-il}-2-metanosulfonilamino-benzamida RMN 400 MHz (CDCI3): d 10.9 (1H, br s), 7.88 (1H, dd), 7.86 (1H, br s), 7.81-7.74 (3H, m), 7.53 (1H, d), 7.46 (1H, d), 7.41 (1H, apparent t), 7.15 (1H, d), 7.06 (1H, br s), 6.75 (1H, s), 4.09 (1H, d), 3.74 (1H, dd), 3.61 (1H, m), 2.92 (3H, s), 2.73 (1H, dd), 2.48 (1H, dd); MS m/z 559.0 (M + 1). EJEMPLO 10 Preparación de 21 10.1 Síntesis de 19 A una solución de p-anisaldehído (146 mmol) en etanol (500 ml), se le agregó 4-metoxibencilamína (146 mmol).

Posteriormente la mezcla se enfrió en un baño de agua con hielo. Se agregó NaBH (294 mmol) en porciones y la mezcla de reacción se dejó templar a temperatura ambiente gradualmente.

Se agregó un barro de agua con hielo (100 ml) y la mezcla se concentró a la mitad de su volumen original. Posteriormente la mezcla se extractó con éter y los orgánicos se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron y concentraron.

Se agregó hexano (-50 ml) y el precipitado se filtró para producir 35 g de bis-(4-metoxi-bencil)-amina, 19, en la forma de un sólido color blanco. 10.2 Síntesis de 20 A una solución de 19 (9.41 g), se le agregaron 10.2 ml de trietilamina y 100 ml de diclorometano. Posteriormente se agregó en porciones 10 g de cloruro de 2-fluoro-4-bromobecenosulfonilo a una temperatura de 0°C con agitación. La mezcla de reacción se templó lentamente a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. Se agregó diclorometano (100 ml) y la mezcla se lavó con una solución 1N HCl, NaHCO3 saturado, salmuera y se secó. Después de la eliminación del solvente, el sólido de mezcló con hexano y se filtró para proporcionar 4-bromo-2-fluoro-N,N-bis-(4-metoxi-bencil)-bencenosulfonamida, 20 puro. La solución madre se concentró y se purificó para proporcionar más producto. 10.3 Resultados Los datos analíticos de la estructura 20 se proporcionan a continuación. 10.3a 4-Bromo-2-fluoro-N,N-bis-(4-metoxi-bencil)-bencenosulfonamida ? RMN (CDCI3): d 7.74 (1H, t, J = 7.6 Hz), 7.36 (2H, dt, J = 8.4, 1.6 Hz), 6.98 (4H, d, J = 8.4 Hz), 6.76 (4H, d, J = 8.4 Hz), 4.33 (4H, s), 3.78 (6H, s). 10.4 Síntesis de 21 A un tubo de microondas de 20 ml se le agregaron 760 mg K2CO3, 20 (2 g), 660 uL 4-metoxibencilamina , y 18 ml DMF. El tubo se calentó en un reactor de microondas a una temperatura de 180°C durante 2500 segundos y se enfrió. La reacción se llevó a cabo 10 veces de modo que se utilizó un total de 20 g de 2-fluoro-sulfonamida. El orgánico de las 10 reacciones fue combinado, extractado con acetato de etilo, lavado con una solución saturada de cloruro de amonio y agua. Se secó, se concentró y el residuo se re-cristalizó a partir de acetato de etilo/hexano para proporcionar la 4-bromo-N,N-bis-(4-metoxibencil)-2-(4-metoxi-bencilamino)-bencenosul fonamida, 21 , deseada. 10.4 Resultados Los datos analíticos de la estructura 21 se proporcionan a continuación. 10.4a 4-Bromo-N,N-bis-(4-metoxi-bencil)-2-(4-metoxi-bencilamino)-bencenosulfonamida RMN (CDCI3): d 7.60 (1H, d, J = 8.4 Hz), 7.15 (2H, d, J = 8.4 Hz), 6.94 (4H, d, J = 8.4 Hz), 6.88 (1H, d, J = 1.6 Hz), 6.80-6.85 (3H, m), 6.77 (4H, d, J = 8.4 Hz), 6.35 (1H, t, J = 4.8 Hz), 4.24 (2H, d, J = 4.8 Hz), 4.18 (4H, s), 3.78 (9H, s). EJEMPLO 11 Preparación de 37 11.1 Síntesis de 35 A una solución de 11 (3.57 g, 16.9 mmol, 1 eq) y 3-fluoro- 2-fluorobenzonitrilo (5.25 g, 33.74 mol, 2 eq) en DMSO seco (125 ml) se le agregó K2CO3 (7 g, 50.6 mmol, 3.1 eq). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas y se dividió entre EtOAc y salmuera. La fase acuosa se extracto con EtOAc y los extractos EtOAc combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO , y se evaporaron. La cromatografía sobre una columna de sílice con eluente de 20:1 CH2CI2:MeOH, produjo (R)-3-cloro-2-[2-cloro-5-(5-oxo-pirrolidin-3-il)-fenoxi-benzonitrilo, 35. 11.2 Resultados Los datos analíticos de la estructura 35 se proporcionan a continuación . 11.2a 5-{4-[4-cloro-3-(2-cloro-6-ciano- fenoxi)- fe nil]-2-oxo-pirrolidin-1-il}-2-metanosulfonilamino-benzamida RMN (CDCI3): d 7.51 (1H, dt, J = 1.2, 7.6 Hz), 7.43 (1H, d, J = 8.0 Hz), 7.42 (1H, dt, J = 1.6, 10.4 Hz), 7.31 (1H, dd, J = 4.8, 8.0 Hz), 7.00 (1H, dd, J = 2.0, 8.0 Hz), 6.65 (1H, brs), 5.61 (1H, br s), 3.73 (1H, t, J = 9.2 Hz), 3.60 (1H, dddd, J = 8.4 Hz), 3.31 (1H, dd, J = 6.8, 9.2 Hz), 2.68 (1H, dd, J = 9.2, 17.2 Hz), 2.37 (1H, dd, J = 8.4, 16.8 Hz). 11.3 Síntesis de 36 A un frasco de fondo redondo seco se le colocó 35, (0.5 mmole), fosfato de potasio (0.9 mmol), 21 (0.75 mmol), 1,2-trans-ciclohexanodiamina (60 µl) y Cul (80 mg) bajo nitrógeno. La reacción se cargó con nitrógeno, DMF (5 ml) y díoxano (5 ml). La mezcla se agitó y calentó a una temperatura de 110°C durante 20 horas y posteriormente se enfrió a temperatura ambiente. Se diluyó con EtOAc y se filtró. El filtrado se lavó con cloruro de amonio saturado, agua y salmuera y posteriormente se secó. La concentración y cromatografía del residuo sobre gel de sílice produjo 4-{4-[4-cloro-3-(2-ciano-6-fluoro-fenoxi)-fenil]-2-oxo-pirrolidin-1-il}-N,N-bis-(4-metoxi-bencil)-2-(4-metoxi-bencilamino)-bencenosul fonamida, 36. 11.4 Síntesis de 37 Se disolvió 36 (120 mg) en 2 ml de 50:50 TFA:diclorometano. La solución se agitó a temperatura ambiente durante la noche y se enfrió. El residuo se disolvió en cloroformo y se trató con una solución saturada de bicarbonato de sodio. La mezcla resultante se agitó durante 10 minutos; posteriormente la capa orgánica se separó, se lavó con salmuera y se secó sobre sulfato de sodio. Después de la eliminación del solvente, el residuo se purificó sobre gel de sílice (EtOAc:MeOH = 50:1) para producir 2-amino-4-{4-[4-cloro-3-(2-ciano-6-fluoro-fenoxi)-fenil]-2-oxo-pirrolidin-1-il}-bencenosulfonamida, 37, puro. 11.5 Resultados Los resultados analíticos de la estructura 37 se proporcionan a continuación. 11.5a 2-amino-4-{4-[4-cloro-3-(2-ciano-6-fluoro-fenoxi)-fe nil]-2-oxo-pirrolidin-1-il}-bencenosul fonamida RMN (CDCI3): d 7.55-7.60 (2H, m), 7.48 (1H, d, J = 6.4 Hz), 7.46 (1H, d, J = 6.4 Hz), 7.40 (1H, dt, J = 4.8, 8.0 Hz), 7.17 (2H, m), 6.95 (1H, s), 6.83 (1H, dd, J = 2.4, 9.2 Hz), 6.34 (2H, br s), 5.52 (2H, br s), 4.08 (1H, m), 3.59-3.70 (2H, m), 2.76 (1H, dd, J = 8.4, 16.4 Hz), 2.51 (1H, dd, J = 8.4, 16.4). Al repetir los procedimientos descritos en los ejemplos anteriores, utilizando los materiales de partida adecuados, se obtuvieron los compuestos de la presente invención que se encuentran a continuación, tal como se identifican en la tabla 1. EJEMPLO 12 Ensayo de pruebas biológicas La capacidad de los compuestos de la presente ¡nvención para inhibir VIH, se probó a través del siguiente ensayo. Se utilizó en este ensayo virus reportero de luciferasa de VIH-1 ("HIV-1 pseudovirions") pseudotipificado por virus de estomatitis vesicular-glucoproteína ("VSV-g"). El virus se recolectó de células productoras 293T de riñon embriónico humano (HEK) ("HEK293T") después de una transfección temporal triple (CaP, Clontech) de el sistema de vector lentiviral VIH-1 de tres plásmidos comprendido del plásmido de expresión de envoltura VSV-g, construcción de empaque (delta psi) y plásmido HIV-1 LTR: Luc. El plásmido de expresión de envoltura VSV-g, genera el receptor de pseudovirus que permite un amplio tropismo y transmite la entrada en las células objetivo HEK293T. La construcción de empaque delta suministra todos los productos de gen estructurales y reguladores necesarios para generar el pseudovirus. El ARN de vector viral sintetizado del plásmido HIV-1 LTR:Luc, posee la señal de empaque cis ARN (secuencia psi) además del gen reportero de luciferasa y el VIH-1 LTR. Los sobrenadantes de las células productoras transfectadas que contienen pseudoviriones de VIH-1, llevan únicamente el gen de luciferasa en el genoma viral. Al momento de la transducción de las células 293T objetivo, el ARN genómico viral pasará por transcripción inversa, trans-locación nuclear, integración y transcripción del gen de luciferasa integrado conducido por el PGK (promotor de cinasa de fosfoglicerato). La actividad de luciferasa utilizando el substrato del reactivo Bright-Glo (Promega) se midió 48 horas después de la infección utilizando un lector de placa CLIPR (Molecular Devices) para determinar los valores EC50. Protocolo de ensayo de elaboración de pruebas biológicas Actividad contra replica de virus reportero de VIH defectuoso (ensayo de infección de ciclo simple) células objetivo 293T. Las células HEK 293T se cultivaron en forma rutinaria en un Medio de Eagle Modificado por Dulbecco (DMEM) suplementado con 10% FBS, 1X Pen/Strep/Glutamina. El protocolo es el siguiente: 1. Se sembraron células 293T en el formato de 1536 depósitos en 700 células/depósito (volumen 5 uL) utilizando un abastecedor de líquido Aquamax (Molecular Devices). 2. Las células se cultivaron a una temperatura de 37°C bajo 5% CO2 durante 24 horas. 3. Se transfirieron 50 ni de cada compuesto (diluidos en serie de DMSO) utilizando el PinTool (GNF). 4. después de 1 hora, incubación al 37°C, el virus reportado VIH se transfirió a las células utilizando el Aquamax en un volumen de 2 µl que corresponde a una multiplicidad de infección (MOI) de aproximadamente 1.0. 5. Las células tratadas e infectadas se cultivaron durante 48 horas adicionales a una temperatura de 48 horas. 6. La actividad de luciferasa se monitoreo mediante la visión de Bright-Glo (Promega, Cat.# E263B y E264B) reactivo de luciferasa (5 ul/depósito, Aquamax) seguido de lectura de placa en el aparato CLIPR (Molecular Devices) utilizando una velocidad de transborde de 20 segundos. Ensayo de citotoxicidad (en paralelo con todos los ensayos de inhibición de infección) 1. Se sembraron células 293 T en el formato de 1536 depósitos en 700 células/depósito (volumen µl) utilizando un abastecedor en líquido Aquamax (Molecular Devices). 2. Se cultivaron las células a una temperatura 37°C bajo 5% CO2 durante 24 horas. 3. Se transfirieron 50 ni de cada compuesto (diluidos en serie DMSO) utilizando el PinTool (GNF). 4. Las células tratadas y no infectadas se cultivaron durante 48 horas adicionales a una temperatura de 37°C. 5. Se evaluó la viabilidad celular a través de la adición de 1 ul Alamar Blue (Promega, Cat# 00-100) diluido en 1:1 en DMEM. 6. Las células se incubaron en forma adicional durante 4 horas a temperatura ambiente y se leyó la intensidad de fluorescencia subsecuente utilizando un Acquest (sistemas TREK) con un divisor de rayo 50/50. Deberá quedar entendido que los ejemplos y modalidades aquí descritas fueron únicamente con propósitos de ilustración y que varias modificaciones o cambios a la luz de las mismas, podrán ser apreciadas por los expertos en la técnica y estarán incluidas dentro del espíritu y alcance de la presente solicitud y de las reivindicaciones adjuntas. Todas las publicaciones, patentes y solicitudes de patentes aquí mencionadas, están incorporadas en su totalidad a la presente invención, como referencia y para todos los propósitos.

Claims (10)

1. R E I V I N D I C A C I O N E S 1. Un compuesto que tiene la fórmula: en donde R1 y R5 son elementos seleccionados independientemente de H, CN, halógeno, alquilo de C-?-C sustituido o no sustituido, alquenilo de C2-C4 sustituido o no sustituido y OR8 en donde R8 es un elemento seleccionado de alquilo de C1-C4 sustituido o no sustituido y halogenoalquilo de C1-C4; R2 y R4 son elementos seleccionados de H, halógeno, CN, y alquilo de C!-C4 sustituido o no sustituido; R3 es un elemento seleccionado de H, CN, y alquilo; R6 es un elemento seleccionado de un sistema de anillo heterocíclico de fenilo fusionado y: en donde
2. R9 y R 1 son elementos seleccionados independientemente de H, alquilo de C?-C4 sustituido o no sustituido, halógeno, CN, C(O)NR12R12 y NR12R12 y OR12 en donde 12 es un elemento seleccionado de H, alquilo de C?-C4 sustituido o no sustituido; R10 es un elemento seleccionado de H, CN, NR13R14, S02NHR13, NHSO2R13, SO2NH(CH2)nOR13, SO2NH(CH2)nNR13R14 , O(CH2)nSO2NHR13, O(CH2)nNR 3R14, O(CH2)NSO2R15, SO2R15, SO2(CH2)nNR13R14 y C(O)NR 3R14. en donde R13 y R14 son elementos seleccionados de H y alquilo de C1-C4 sustituido o no sustituido y, junto con el nitrógeno al cual están adheridos son unidos opcionalmente para formar un anillo heterocíclico; R15 es alquilo de C-?-C4 sustituido o no sustituido; n es un entero de 1 a 8; en donde al menos un elemento seleccionado de R9, R10 y R 1 es uno además de H; y R7 es un elemento seleccionado de halógeno, alquilo de C?-C , alquenilo de C2-C y alquinilo de C2-C4. 2. El compuesto tal como se describe en la reivindicación 1, caracterizado porque R es un sistema de anillo heterocíclico de fenilo fusionado, y el sistema de anillo heterocíclico de fenilo fusionado es un elemento seleccionado de: en donde R16 es un elemento seleccionado de H, C(O)NR18R19,
3. C(O)NR18(CH2)nNR18R19, C(O)NR18(CH2)nOR18, C(O)NR18CH(CH2OR18)2, C(O)NR18(CH2)nC(O)NR18R19, (CH2)nSO2NR18R19, S(O)2R20 en donde R18 y R19 son elementos seleccionados independientemente de H y alquilo de C?-C6 sustituido o no sustituido; o R18 and R 9, junto con el átomo de nitrógeno al cual están adheridos, forman un anillo heterocíclico sustituido o no sustituido; R20 es alquilo de C?-C6 sustituido o no sustituido y fenilo sustituido o no sustituido; y i 17 es un elemento seleccionado de H, NH2, (CH2)mOH,
4. C(0)NR .2¿11 cR-," 22, SO2 ,2"3, NHSO2R23, NHCOR23 en donde R21 y R22 son elementos seleccionados independientemente de H, alquilo de C?-C6 sustituido o no sustituido CrC6 y fenilo sustituido o no sustituido, y junto con el nitrógeno al cual están adheridos, son unidos opcionalmente para formar un anillo; R23 es alquilo de C?-C6 sustituido o no sustituido; y m es un entero de 1 a 5. 3. El compuesto tal como se describe en la reivindicación 1, caracterizado porque R1 y R5 son seleccionados independientemente de hidrógeno, halógeno, CN, metilo, metoxi, vinilo y trifluorometoxi. 4. El compuesto tal como se describe en la reivindicación 1, caracterizado porque R6 es
5. 5. El compuesto tal como se describe en la reivindicación 4, caracterizado porque R16 es un elemento seleccionado de C(O)NR18R19 y S(O)2R20.
6. 6. El compuesto tal como se describe en la reivindicación 5, caracterizado porque R18 y R19 son H.
7. 7. El compuesto tal como se describe en la reivindicación 5, caracterizado porque R20 es CH3.
8. 8. El compuesto tal como se describe en la reivindicación 4, caracterizado porque R17 es NH2.
9. 9. El compuesto tal como se describe en reivindicación 1, caracterizado porque R6 es en donde R9 es un elemento seleccionado de NH2 y C(O)NH2; y R10 es un elemento seleccionado de C(O)NH2, NHSO2CH3 y SO2NH2.
10. 10. El compuesto tal como se describe en la reivindicación 1, caracterizado porque tiene una fórmula seleccionada de: 11 Una formulación farmacéutica que comprende un compuesto tal como se describe en la reivindicación 1, y un vehículo farmacéuticamente aceptable 12 Un método para inhibir VIH en una célula, en donde el método comprende contactar la célula con una cantidad de un compuesto tal como se describe en la reivindicación 1, suficiente para inhibir el HIV 13 El método tal como se describe en la reivindicación 12, caracterizado porque el VIH es una cepa de HIV resistente a fármacos 14 El método tal como se describe en la reivindicación 12, caracterizado porque la célula está en un humano 15 Un método para inhibir transcpptasa inversa en una célula, en donde el método comprende contactar la célula con una cantidad de un compuesto tal como se describe en la reivindicación 1, suficiente para inhibir la transcpptasa inversa 16 El método tal como se describe en la reivindicación 15, caracterizado porque la transcpptasa inversa es transcpptasa inversa de VIH 17 El método tal como se describe en la reivindicación 16 caracterizado porque el VIH es una cepa de HIV resistente a fármacos 18 El método tal como se describe en la reivindicación 15, caracterizado porque la célula está en un humano 19 Un método para tratar infección VIH en un sujeto humano, en donde el método comprende administrar al sujeto humano una cantidad de un compuesto tal como se describe en la reivindicación 1, suficiente para tratar la infección de VIH. 20. El método tal como se describe en la reivindicación 19, caracterizado porque la infección de VIH es originada por una cepa de VIH resistente a fármacos. 21. Un método para proporcionar profilaxis contra infección de VIH, en donde el método comprende administrar una cantidad profiláctica de un compuesto tal como se describe en la reivindicación 1, a una persona que está en riesgo de infección de VIH. 22. El método tal como se describe en la reivindicación 21, caracterizado porque el VIH es una cepa de VIH resistente a los fármacos. R E S U M E N La presente invención se refiere a pirrolidonas sustituidas con fenilo y compuestos relacionados con pirrolidonas sustituidas con fenilo. Un uso de estos compuestos es para la inhibición de viruses, por ejemplo, VIH. La presente invención se refiere además con métodos para maltar estos compuestos, métodos para identificar la eficacia de estos compuestos y métodos para utilizar estos compuestos para inhibir o prevenir la infección VIH y estados de enfermedad relacionados, tales como, SIDA.