MX2007001647A

MX2007001647A - Derivados de pirazol para el tratamiento de condiciones mediadas por la activacion del receptor de adenosina a2b o a3.

Info

Publication number: MX2007001647A
Application number: MX2007001647A
Authority: MX
Inventors: Graham Charles Bloomfield; Clive Mccarthy; Neil John Press; Catherine Leblanc
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 2004-08-11
Filing date: 2005-08-10
Publication date: 2007-04-10
Also published as: KR20070032812A; WO2006015860A3; WO2006015860A2; CA2572752A1; KR100853044B1; JP2008509188A; US20070225335A1; RU2007108863A; AU2005270314B2; GB0417910D0; BRPI0514289A; CN101001626A; AU2005270314A1; EP1799206A2

Abstract

Los compuestos de la Formula (I): (ver formula) en forma libre o de sal, en donde R1, R2, R3, Y R4 tienen los significados indicados en la memoria descriptiva, son utiles para el tratamiento de una condicion mediada por la activacion del receptor de adenosina A2b o el receptor de adenosina A3, en particular una enfermedad inflamatoria u obstructiva de las vias respiratorias. Tambien se describen composiciones farmaceuticas que contienen a los compuestos, y procesos para la preparacion de los compuestos.

Description

DERIVADOS DE PIRAZOL PARA EL TRATAMIENTO DE CON DICION ES ME DIA DAS POR LA ACTIVAC IÓN DE L REC EPTOR DE ADE NOSINA A2B Ó A3 Esta i nvención se refiere a compuestos orgánicos, a su preparación , y a su uso como productos farmacéuticos. En un aspecto, la presente i nvención proporciona compuestos de la Fórmula I : en forma libre o de sal , en donde: R1 es fenílo opcionalmente sustituido por halógeno, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, alcoxi lo de 1 a 8 átomos de carbono, ciano, carboxilo, halo-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, ciano-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, carboxi-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, o a mino-carbonilo, ó R1 es un anillo heterocíclico de 5 ó 6 m iembros que contiene cuando menos un heteroátomo del anillo seleccionado a partir del g rupo que consiste en nitrógeno, oxígeno, y azufre , estando este anillo opcionalmente sustituido por alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, o uno o más grupos oxo; R2 es feni lo opcionalmente sustituido por halógeno, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, o morfolinilo, ó R2 es un anillo heterocíclico de 5 ó 6 miembros que contiene cuan do m enos un heteroátom o del a n il lo seleccionado a partir del g ru po q ue consiste en nitrógeno, oxígeno , y azufre, estando este ani llo opcionalmente sustituid o por alqu ilo de 1 a 8 átom os de carbono , a lcoxilo de 1 a 8 átom os de carbono , o u no o m ás g ru pos oxo; R3 y R4 son ambos hidrógeno, o uno de R3 y R4 es -CO-N R5R6, y el otro es hidrógeno; R5 y R6 son independientemente hidrógeno, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono opcionalmente sustituido por un anillo heterocíclico de 5 ó 6 miembros que contiene cuando menos un heteroátomo del anillo seleccionado a partir del grupo q ue consiste en nitrógeno, oxígeno, y azufre; alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono; cicloalquilo de 3 a 8 átomos de carbono; un anillo heterocíclico de 5 ó 6 miembros que contiene cuando menos un heteroátomo del anillo seleccionado a partir del grupo que consiste en nitrógeno , oxígeno, y azufre; o fenilo opcionalmente sustituido por halógeno, ciano, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono-carbonilo, o alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono-carbonilo; ó R5 y R6 forman juntos: - opcionalmente sustituido por halógeno, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, o ciano; y m es un entero de 0 a 5. Los términos empleados en la memoria descriptiva tienen los siguientes significados: "Halo" o "halógeno0 como se utiliza en la presente, puede ser flúor, cloro, bromo, o yodo. De preferencia, halo es flúor o cloro. "Alquilo de 1 a 8 átomos de carbono0 como se utiliza en la presente, denota alquilo de cadena recta o ramificada que tiene de 1 a 8 átomos de carbono. De preferencia, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono es alquilo de 1 a 4 átomos de carbono. "Alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono0 como se utiliza en la presente, denota alcoxilo de cadena recta o ramificada que tiene de 1 a 8 átomos de carbono. De preferencia, alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono es alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono. "Cicloalquilo de 3 a 8 átomos de carbono0 como se utiliza en la presente, denota cicloalquilo que tiene de 3 a 8 átomos de carbono del anillo, por ejemplo un grupo monocíclico, tal como un ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciciohexilo, cicioheptilo, o ciclo-octilo, cualquiera de los cuales puede estar sustituido por uno o más, usualmente 1 ó 2 grupos alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, o un grupo bicíclico, tal como biciclohexilo o biciclo-octilo. De preferencia, "cicloalquilo de 3 a 8 átomos de carbono" es ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciciohexilo, cicioheptilo, o ciclo-octilo. "Halo-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono" y "halo-alcoxílo de 1 a 8 átomos de carbono", como se utilizan en la presente, denotan alquilo de 1 a 8 átomos de carbono o alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, respectivamente, como se definen anteriormente en la presente, sustituido en una, dos, tres, o más posiciones por halógeno como se define anteriormente en la presente. De preferencia, halo-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono y halo-alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono son halo-alquilo de 1 a 4 átomos de carbono y halo-alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono, respectivamente. "Ciano-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono" y "carboxi-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono", como se utilizan en la presente, denotan alquilo de 1 a 8 átomos de carbono como se define anteriormente en la presente, sustituido en una, dos, tres, o más posiciones por ciano o carboxilo, respectivamente. De preferencia, ciano-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono y carboxi-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono son ciano-alquílo de 1 a 4 átomos de carbono y carboxi-alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, respectivamente. "Alquilo de 1 a 8 átomos de carbono-carbonilo" y "alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono-carbonilo", como se utilizan en la presente, denotan alquilo de 1 a 8 átomos de carbono o alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, respectivamente, como se define anteriormente en la presente, unido por un átomo de carbono a un grupo carbonilo. De preferencia, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono-carbonilo y alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono-carbonilo son alquilo de 1 a 4 átomos de carbono-carbonilo y alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono-carbonilo, respectivamente. "Amino-carbonilo", como se utiliza en la presente, denota un grupo amino unido a un grupo carbonilo. "Anillo heterocíclico de 5 ó 6 miembros que contiene cuando menos un heteroátomo del anillo seleccionado a partir del grupo que consiste en nitrógeno, oxígeno, y azufre", como se utiliza en la presente, puede ser, por ejemplo, pirrol, pirazol, imidazol, triazol, tetrazol, tiadiazol, oxazol, isoxazol, isotiazol, oxadiazol, piridina, pirazina, piridazina, pirimidina, piperazina, morfolíno, triazina, oxazina, furano, tiofeno, o tiazol. Los anillos heterocíclicos preferidos incluyen dioxo-tetrahidro-tiofenilo / sulfolanilo, piridilo, y furilo. "Opcionalmente sustituido", significa que el grupo referido puede estar sustituido en una o más posiciones por cualquiera o cualquier combinación de los radicales enlistados posteriormente. A través de toda esta memoria descriptiva y en las siguientes reivindicaciones, a menos que el contexto lo requiera de otra manera, la palabra "comprenden", o variaciones tales como "comprende" o "comprendiendo", se entenderán para implicar la inclusión de un entero o paso o grupo de enteros o pasos mencionados, pero no la exclusión de cualquier otro entero o paso o grupo de enteros o pasos. Los compuestos preferidos de la Fórmula I, en forma libre o de sal, son aquéllos en donde: R1 es fenilo sustituido por halógeno, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, o alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, ó R1 es un anillo heterocíclico de 5 miembros que contiene cuando menos un átomo de azufre, estando este anillo opcionalmente sustituido por uno o más grupos oxo; R2 es fenilo opcionalmente sustituido por halógeno o alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, ó R2 es un anillo heterocíclico de 6 miembros que contiene cuando menos un átomo de nitrógeno; R3 y R4 son ambos hidrógeno, o uno de R3 y R4 es -CO-N R5R6, y el otro es hidrógeno; y R5 y R6 son independientemente hidrógeno, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono opcionalmente sustituido por un anillo heterocíclico de 5 ó 6 miem bros que contiene cuando menos un átomo de nitrógeno y/u oxígeno; cicloalquilo de 3 a 8 átomos de carbono ; un anillo heterocíclico de 5 ó 6 miembros que contiene cuando menos un átomo de nitrógeno; o fenilo opcionalmente sustituido por hidrógeno, ciano, alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, o alq uilo de 1 a 8 átomos de carbono-carbonilo. Los compuestos especialmente preferidos de la Fórmula I , en forma libre o de sal , son aquéllos en donde: R1 es fenilo sustituido por halógeno, en particular halógeno meta para el átomo de carbono unido al anillo de pirazol indicado, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, o alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono; ó R es un anillo heterocíclico de 5 miembros que contiene cuando menos un átomo de azufre, estando este anillo opcionalmente sustituido por uno o más g rupos oxo; R2 es fenilo opcionalmente sustituido por halógeno o por alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono, ó R2 es un anillo heterocíclico de 6 miembros que contiene cuando menos un átomo de nitrógeno; R3 y R4 son ambos hidrógeno, o uno de R 3 y R4 es -CO-N R5R6, y el otro es hidrógeno; y R5 y R6 son independientemente hidrógeno, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono opcionalmente sustituido por un anillo heterocíclíco (de preferencia insaturado) de 5 ó 6 miembros que contiene cuando menos un átomo de nitrógeno y/u oxígeno; cícloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono; un anillo heterocíclico (de preferencia insaturado) de 5 ó 6 miembros q ue contiene cuando menos un átomo de nitrógeno; o fenilo opcionalmente sustituido por halógeno, ciano, alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono, o alquilo de 1 a 4 átomos de carbono-carbonilo. Los compuestos específicos especial mente preferidos de la Fórmula I son aquéllos descritos posteriormente en la presente, en los Ejemplos. Los compuestos representados por la Fórmula I son capaces de formar sales de adición de ácido, en particular sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables. Las sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables del compuesto de la Fórmula I incluyen aquéllas de los ácidos inorgánicos, por ejemplo de los ácidos haloh ídricos , tales como ácido fluorhídrico, ácido clorhídrico, ácido bromh ídrico, o ácido yodh ídrico; ácido n ítrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico; y de los ácidos orgánicos, por ejemplo de los ácidos mono-carboxílicos alifáticos, tales como ácido fórmico, ácido acético, ácido trífluoro-acétíco, ácido propiónico, y ácido butírico; de los hidroxi-ácidos alifáticos, tales como ácido láctico, ácido cítrico, ácido tartárico, o ácido málico; de los ácidos dicarboxílicos, tales como ácido maleico o ácido succínico; de los ácidos carboxílicos aromáticos, tales como ácido benzoico, ácido p-cloro-benzoico, ácido difenil-acétíco, o ácido trifenil-acétíco; de los hidroxi-ácidos aromáticos, tales como ácido o-hidroxi-benzoico, ácido p-hidroxi-benzoico, ácido 1-hidroxi-naftalen-2-carboxílíco, o ácido 3-hidroxi-naftalen-2-carboxílíco; y de los ácidos sulfónicos, tales como ácido metan-sulfónico o ácido bencen-sulfónico. Estas sales se pueden preparar a partir de los compuestos de la Fórmula I medíante procedimientos de formación de sales conocidas. Los compuestos de la Fórmula I que contengan grupos ácidos, por ejemplo carboxilo, también son capaces de formar sales con bases, en particular bases farmacéuticamente aceptables, tales como aquéllas bien conocidas en la materia; las sales adecuadas incluyen sales de metales, en particular sales de metales alcalinos o de metales alcalinotérreos, tales como sales de sodio, potasio, magnesio, o calcio, o sales con amoniaco o con aminas orgánicas farmacéuticamente aceptables, o bases heterocíclicas, tales como etanol-aminas, bencil-amínas, o píridina. Estas sales se pueden preparar a partir de los compuestos de la Fórmula I mediante procedimientos de formación de sales conocidos. En los compuestos en donde haya un átomo de carbono asimétrico, los compuestos existen en formas isoméricas ópticamente activas individuales, o como mezclas de los mismos, por ejemplo como mezclas racémicas o diaestereoméricas. La presente invención abarca tanto los isómeros R y S ópticamente activos individuales, como las mezclas, por ejemplo las mezclas racémicas o diaestereoméricas, de los mismos. La invención proporciona, en otro aspecto, un método para la preparación de un compuesto de la Fórmula I en forma libre o de sal, el cual comprende: (i) (A) para la preparación de los compuestos de la Fórmula I, en donde R3 y R4 son ambos hidrógeno, hacer reaccionar un compuesto de la Fórmula II: en donde R1 es como se define anteriormente en la presente, con un compuesto de la Fórmula lll: en donde R2 es como se define anteriormente en la presente; (B) para la preparación de los compuestos de la Fórmula I, en donde R3 es -CO-NR5R6, y R4 es hidrógeno, hacer reaccionar un compuesto de la Fórmula IV: en donde R1 y R2 son como se definen anteriormente en la presente, o un derivado de formación de amida del mismo, con un compuesto de la Fórmula V: en donde R5 y R6 son como se definen anteriormente en la presente; o (C) para la preparación de los compuestos de la Fórmula I , en donde R3 es hidrógeno y R4 es -CO-N R5R6, hacer reaccionar un compuesto de la Fórmula VI : en donde R1 y R2 son como se definen anteriormente en la presente, o un derivado de formación de amida del mismo, con un compuesto de la Fórmula V, en donde R5 y R6 son como se definen anteriormente en la presente; y (¡i) recuperar el compuesto resultante de la Fórmula I en forma libre o de sal . La variante del proceso (A) se puede llevar a cabo empleando procedimientos conocidos para la reacción de compuestos de enamina con derivados de hidrazina, o de una manera análoga , por ejemplo como se describe posteriormente en la presente, en los Ejemplos. La reacción convenientemente se lleva a cabo utilizando un solvente orgánico, por ejemplo dimetil-formamída. Las temperaturas de reacción adecuadas son temperaturas elevadas, por ejemplo de 70°C a 1 00°C, pero de preferencia de aproximadamente 90°C. La variante del proceso (B) se puede llevar a cabo empleando procedimientos conocidos para la reacción de los ácidos carboxílicos (o los derivados de formación de amida de los mismos, tales como los derivados de haluro de ácido) con aminas, o de una manera análoga, por ejemplo como se describe posteriormente en la presente, en los Ejemplos. La reacción convenientemente se lleva a cabo utilizando un solvente orgánico, por ejemplo dimetil-formamida, en la presencia de uno o más agentes de acoplamiento, por ejemplo hexaf luoro-fosf ato de O-(7-azabenzotriazol-1-íl)-1,1 ,3,3-tetrametil-uronio (HATU), y una base, por ejemplo dí-isopropil-etil-amína (DIPEA). Las temperaturas de reacción adecuadas son de 10°C a 40°C, por ejemplo la temperatura ambiente. La variante del proceso (C) se puede llevar a cabo empleando procedimientos conocidos para la reacción de los ácidos carboxílícos (o los derivados de formación de amida de los mismos, tales como los derivados de haluro de ácido) con aminas, o de una manera análoga, por ejemplo como se describe posteriormente en la presente, en los Ejemplos. La reacción convenientemente se lleva a cabo utilizando un solvente orgánico, por ejemplo dímetil-formamída, en la presencia de uno o más agentes de acoplamiento, por ejemplo hexafluoro-fosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-1 ,1 ,3,3-tetrametil-uronio (HATU), y una base, por ejemplo dí-isopropíl-etil-amina (DIPEA). Las temperaturas de reacción adecuadas son de 10°C a 40°C, por ejemplo la temperatura ambiente. Los compuestos de la Fórmula II se pueden preparar mediante la reacción del compuesto de acetilo correspondiente con dímetil- acetal de dimetíl-formamida. La reacción convenientemente se lleva a cabo utilizando un solvente orgánico, por ejemplo tolueno. Las temperaturas de reacción adecuadas son temperaturas elevadas, por ejemplo de 70°C a 100°C, pero de preferencia de aproximadamente 90°C. Los compuestos de la Fórmula lll están comercialmente disponibles, o bien se pueden obtener mediante procedimientos conocidos para la preparación de hidrazinas. Los compuestos de la Fórmula IV se pueden preparar mediante la hidrólisis del éster correspondiente de la Fórmula Vil: en donde R1 y R2 son como se definen anteriormente en la presente, y R7 es alquilo de 1 a 8 átomos de carbono. La hidrólisis se lleva a cabo convenientemente empleando procedimientos conocidos, por ejemplo utilizando un hidróxido de metal alcalino, tal como hidróxído de sodio. Las temperaturas de reacción adecuadas son de 10°C hasta el reflujo, pero de preferencia a reflujo. Los compuestos de la Fórmula V están comercialmente disponibles, o bien se pueden obtener mediante procedimientos conocidos para la preparación de aminas. Los compuestos de la Fórmula VI se pueden preparar mediante la hidrólisis del éster correspondiente de la Fórmula VIII: en donde R1 y R2 son como se definen anteriormente en la presente, y R8 es alquilo de 1 a 8 átomos de carbono. La hidrólisis se lleva a cabo convenientemente empleando proced imientos conocidos, por ejemplo utilizando un hídróxido de metal alcalino, tal como hidróxido de sodio. Las temperaturas de reacción adecuadas son de 1 0°C a 60°C, pero de preferencia de aproxi madamente 60°C .

Los compuestos de la Fórmula Vi l se pueden preparar mediante la reacción de u n compuesto de la Fórmula IX: en donde R2 y R7 son como se definen anteriormente en la presente, con un compuesto de la Fórmula X: H ? en donde R es como se define anteriormente en la presente.

La reacción convenientemente se lleva a cabo en una solución acida , por ejemplo ácido acético glacial. Las temperaturas de reacción adecuadas son temperaturas elevadas, por ejemplo de 70°C a 120°C, pero de preferencia la temperatura de reflujo. Los compuestos de la Fórmula VI I I se pueden preparar m ed iante la reacció n de un com puesto de la Fórm u la X I : en donde R2 y R8 son como se definen anteriormente en la presente, con un compuesto de la Fórmula X, en donde R1 es como se define anteriormente en la presente. La reacción convenientemente se lleva a cabo en una solución acida , por ejemplo ácido acético glacial . Las temperaturas de reacción adecuadas son temperaturas elevadas, por ejemplo de 70°C a 1 20°C, pero de preferencia a la temperatura de reflujo. Los compuestos de la Fórmula IX se pueden preparar mediante la reacción de un compuesto de la Fórmula XI I : en donde R2 y R7 son como se defi nen anteriormente en la presente , con dimetil-acetal de dimetil-formamida. La reacción convenientemente se lleva a cabo utilizando un solvente orgánico, por ejemplo tolueno. Las tem peraturas de reacción adecuadas son temperaturas elevadas, por ejemplo de 70°C a 1 20°C, pero de preferencia la temperatura de reflujo. Los compuestos de la Fórmula X están comercialmente disponibles, o bien se pueden obtener mediante los proced imientos conocidos para la preparación de hidrazinas. Los compuestos de la Fórmula XI se pueden preparar mediante la reacción de u n com puesto de la Fórm ula X I I I : R— f C-CH3 0 XIII en donde R2 es como se define anteriormente en la presente, con un oxalato apropiadamente alquilado en una solución básica, por ejemplo que contenga metóxido de sodio. La reacción convenientemente se lleva a cabo uti lizando un solvente orgánico, por ejemplo metanol . Las temperaturas de reacción adecuadas son de 1 0°C a 50°C, por ejemplo la temperatura ambiente. Los compuestos de la Fórmula XI I , por ejemplo el isonicotinoil-acetato de etilo, están comercialmente disponibles, o se pueden preparar empleand o métodos análogos a los utilizados para la preparación del ¡sonicotinoíl-acetato de etilo. Los compuestos de la Fórmula XI I I están comercialmente disponibles, o bien se pueden obtener mediante los procedimientos conocidos para la preparación de cetonas. Los compuestos de la Fórmula I en forma libre, se pueden convertir a la forma de sal , y viceversa, de una manera convencional . Los compuestos en forma libre o de sal , se pueden obtener en la forma de hidratos o solvatos que contengan un solvente utilizado para la cristalización . Los compuestos de la Fórmula I se pueden recuperar de las mezclas de reacción , y se pueden purificar de una manera convencional. Se pueden obtener isómeros , tales como enantiómeros, de una manera convencional , por ejemplo mediante cristalización fraccionaria o síntesis asimétrica a partir de los materiales de partida correspondientemente sustituidos asimétricamente, por ejemplo ópticamente activos. Los compuestos de la Fórmula I y sus sales farmacéuticamente aceptables son útiles como productos farmacéuticos. En particular, exhiben inhibición de la activación del receptor de adenosina A2b, es decir, actúan como antagonistas del receptor A2b. Más aún, en general inhiben selectivamente la activación del receptor A2b sobre los receptores de adenosina A1 y A2a. Sus propiedades inhibidoras se pueden demostrar en los siguientes procedimientos de prueba: Ensayo de Gen Reportero del Receptor de Adenosina A2b a) Cultivo de la línea celular A2b de ovario de hámster chino (CHO) Las células CHO transfectadas con un plásmido reportero que expresa lucíferasa (pCRE-LUCI), y con un plásmído que lleva el gen estructural del receptor de adenosina A2b humano (pA2bRCV), se cultivan rutinariamente en un Medio Eagle Modificado por Dulbecco (DMEM) - complementado con suero fetal de becerro al 10 por ciento por volumen/volumen (FCS), L-glutamina 2 mM, 0.4 miligramos/mililitro de L-prolina, selenita de sodio 1 mM, 0.5 miligramos/mililitro de higromicina B, y 1 miligramo/mililitro de genetícina - a 37°C, con CO2 al 5 por ciento y el 100 por ciento de humedad. Las células se dejan crecer hasta la confluencia durante 4 a 5 días. Las células obtenidas se pasan utilizando tripsina/EDTA, y se dividen a una proporción de 1 en 5. b) Preparación de las células para el ensayo Antes del ensayo, se aplican las células CHO-A2b sobre placas de cultivo de tejido View Píate blancas de 96 pozos (Packard) a una densidad de 50,000 células por pozo, en 50 microlitros de DMEM, y las placas se incuban a 37°C, con CO2 al 5 por ciento y el 100 por ciento de humedad. c) Preparación de los compuestos de referencia y de prueba Se preparan soluciones 10 mM del compuesto de referencia, Xanthine Amine Cogener (XAC), y el compuesto de prueba en sulfóxído de dimetilo (DMSO). Las soluciones se diluyen adicíonalmente con sulfóxido de dimetilo a 100 µM, luego se diluyen a 10 µM, y finalmente a 250 mM ó 2.5 µM con el Regulador de Ensayo (DMEM, medio de cultivo de tejido sin Rojo de Fenol complementado con Rolipram 10 µM y 10 unidades/mililitro de desaminasa de adenosina (ADA)). Las soluciones resultantes (40 microlitros) se agregan a las células en los pozos apropiados, siendo la concentración final por pozo de 100 nM ó 1 µM, y las placas se incuban a 37°C, con CO2 al 5 por ciento, y el 100 por ciento de humedad. d) Ensayo de gen reportero de luciferasa La 5'-N-etil-carboxamido-adenos¡na (ÑECA), un agonista de adenosína A2b, se prepara como una solución 10 nM en sulfóxido de dimetilo, y luego se diluye a 100 µM con el Regulador de Ensayo. Esta solución se diluye en serie en el Regulador de Ensayo para dar una serie de 10 concentraciones de ÑECA desde 100 hasta 0.01 µM.

Se agregan porciones de 10 microlitros de las soluciones de ÑECA resultantes a las mezclas de células CHO-A2b, y las soluciones de referencia o de prueba preparadas como se describe anteriormente (previamente incubadas durante 30 minutos), siendo las concentraciones finales de 10 a 0.0005 µM por pozo. Las células se incuban a 37°C, con CO2 al 5 por ciento y el 100 por ciento de humedad durante 3 horas para inducir la liberación de cAMP, que entonces se enlaza con la proteína de enlace de cAMP (CBP), y el complejo resultante interactúa con el plásmido reportero para expresar la Luciferasa. Se agregan 100 microlitros de Steady-Glo, un sustrato de ensayo de luciferasa de Promega, a todos los pozos, para Usar las células y generar lumínescencia en proporción con la cantidad de luciferasa producida. Las placas se dejan durante un mínimo de 5 minutos antes de leerse en el programa de luminiscencia de un contador de cintilacíón de microplacas Topcount NXT (ex Packard). Se grafican las curvas de concentración-respuesta a partir de los datos de luminiscencia utilizando el software Activitybase, y se calculan los valores KB para los antagonistas bajo prueba a partir de los cambios de la curva en una concentración particular (KB) [antagonista]/(proporción de concentración -1). Los compuestos de los Ejemplos que se encuentran más adelante en la presente, tienen valores KB debajo de 1.5 µMM en el ensayo del gen reportero. Por ejemplo, los compuestos de los Ejemplos 4, 14, 24, 33, y 38 tienen valores KB de 0.139, 0.224, 0.041 , 0.1 88 , y 0.240 µM, respectivamente. En general, los compuestos de la Fórmula I , en forma libre o de sal farmacéuticamente aceptable, también exhiben i nhibición de la activación del receptor de adenosina A3, lo cual se puede demostrar en el ensayo del receptor de adenosina A3 descrito en la Publicación I nternacional N úmero WO 99/6441 8. Considerando su inhibición de la activación del receptor de adenosina A2b, y en general su inhibición de la activación del receptor de adenosina A3, los compuestos de la Fórmula I , en forma libre o de sal farmacéuticamente aceptable, referidos de una manera alternativa posteriormente en la presente como los "agentes de la invención", son útiles en el tratamiento de las condiciones que sean mediadas por la activación del receptor de adenosína A2b ó el receptor de adenosi na A3, en particular condiciones inflamatorias o alérg icas. El tratamiento de acuerdo con la invención puede ser sintomático o profiláctico. De conformidad con lo anterior, los agentes de la invención son útiles en el tratamiento de enfermedades inflamatorias u obstructivas de las vías respiratorias, dando como resultado, por ejemplo, la reducción del daño del tejido, de la inflamación de las vías respiratorias, de la hiper-reactividad bronq uial , de la remodelación , o del progreso de la enfermedad . Las enfermedades inflamatorias u obstructivas de las vías respiratorias a las que es aplicable la presente invención incluyen asma de cualquier tipo o génesis, incluyendo tanto asma intrínseco (no alérg ico) como asma extrínseco (alérg ico) , asma leve, asma moderado, asma severo, asma bronquítico, asma inducido por ejercicio, asma ocupacional, y asma inducido en seguida de infección bacteriana. También se entiende que el tratamiento de asma abarca el tratamiento de sujetos, por ejemplo, menores de 4 ó 5 años de edad, que exhiban síntomas de jadeo y sean diagnosticados o diagnosticables como "bebés jadeantes", una categoría de paciente establecida de importante preocupación médica, y ahora identificada con frecuencia como asmáticos incipientes o en fase temprana. (Para mayor conveniencia, esta condición asmática particular es referida como "síndrome de bebé jadeante"). La eficacia profiláctica en el tratamiento de asma será evidenciada por una frecuencia o severidad reducida el ataque sintomático, por ejemplo del ataque asmático agudo o broncoconstrictor, mejora en la función pulmonar, o mejor hiper-reactividad de las vías respiratorias. Además se puede evidenciar por un requerimiento reducido de otra terapia sintomática, es decir, terapia para, o pretendida para restringir o abortar el ataque sintomático cuando se presente, por ejemplo anti-inflamatoria (por ejemplo, corticosteroide) o broncodilatadora. El beneficio profiláctico en asma puede ser aparente en particular en los sujetos susceptibles al "ahogamiento matutino". El "ahogamíento matutino" es un síndrome asmático reconocido, común a un porcentaje sustancial de asmáticos, y caracterizado por ataque de asma, por ejemplo entre las horas de aproximadamente las 4 y las 6 a.m., es decir, en un tiempo normalmente distante sustancialmente de cualquier terapia de asma sintomáticamente previamente administrada. Otras enfermedades y condiciones inflamatorias u obstructivas de las vías respiratorias a las que es aplicable la presente invención incluyen lesión pulmonar aguda (ALI), síndrome de insuficiencia respiratoria de adultos/aguda (ARDS), enfermedad pulmonar obstructiva crónica, de las vías respiratorias, o del pulmón (COPD, COAD, ó COLD), incluyendo bronquitis crónica o díspnea asociada con la misma, enfisema, así como exacerbación de la hiperreactividad de las vías respiratorias a consecuencia de otra terapia de fármacos, en particular otra terapia con fármacos inhalados. La invención también es aplicable al tratamiento de bronquitis de cualquier tipo o génesis, incluyendo, por ejemplo, bronquitis aguda, araquídíca, catarral, cruposa, crónica, o ftinoíde. Otras enfermedades inflamatorias u obstructivas de las vías respiratorias a las que es aplicable la presente invención incluyen neumoconiosís (una enfermedad inflamatoria, comúnmente ocupacional, de los pulmones, con frecuencia acompañada por obstrucción de las vías respiratorias, ya sea crónica o aguda, y ocasionada por una inhalación repetida de polvos) de cualquier tipo o génesis, incluyendo, por ejemplo, aluminosís, antracosis, asbestosis, calicosis, ptilosis, siderosis, silicosis, tabacosis, y bisinosis. Considerando su actividad anti-inflamatoria, en particular en relación con la inhibición de la activación de los eosinófilos, los agentes de la invención también son útiles en el tratamiento de trastornos relacionados con los eosinófilos, por ejemplo eosinofilia, en particular trastornos relacionados con los eosinófilos de las vías respiratorias (por ejemplo, que involucren infiltración eosínofílíca patológica de los tejidos pulmonares), incluyendo hiper-eosinofilia como afecta a las vías respiratorias y/o a los pulmones, así como, por ejemplo, trastornos relacionados con los eosinófilos de las vías respiratorias a consecuencia o concomitante a síndrome de Lóffler, neumonía eosinofílica, infectación parasitaria (en particular de metazoarios) (incluyendo eosinofilia tropical), aspergílosis bronco-pulmonar, poliarteritis nodosa (incluyendo síndrome de Churg-Strauss), granuloma eosinofílico, y trastornos relacionados con los eosinófilos que afecten a las vías respiratorias, ocasionados por reacción a fármacos. Los agentes de la invención también son útiles en el tratamiento de condiciones inflamatorias o alérgicas de la piel, por ejemplo psoriasis, dermatitis por contacto, dermatitis atópíca, alopecia areata, eritema multíforma, dermatitis herpetiformis, escleroderma, vitíligo, angiitis con hipersensibilidad, urticaria, penfigoide buloso, lupus eritematoso, penfigo, epidermólisis bulosa acquisita, y otras condiciones inflamatorias o alérgicas de la piel. Los agentes de la invención también se pueden utilizar para el tratamiento de otras enfermedades o condiciones, en particular enfermedades o condiciones que tengan un componente inflamatorio, por ejemplo el tratamiento de enfermedades y condiciones de los ojos, tales como conjuntivitis, queratoconjuntivitis sicca, y conjuntivitis vernal, enfermedades que afecten a la nariz, incluyendo rinitis alérgica, y enfermedad inflamatoria en donde estén implicadas las reacciones autoinmunes, o que tenga un componente o etiología autoinmune, incluyendo trastornos hematológicos autoinmunes (por ejemplo, anemia hemolítíca, anemia aplásica, anemia de glóbulos rojos puros, y trombocitopenia idiopátíca), lupus eritematoso sistémico, policondritis, esclerodomas, granulomatosis de Wegener, dermatomíositis, hepatitis activa crónica, miastenia gravis, síndrome de Steven-Johnson, prurito idiopático, enfermedad inflamatoria del intestino autoinmune (por ejemplo, colitis ulcerativa y enfermedad de Crohn), oftalmopatía endocrina, enfermedad de Graves, sarcoidosis, alveolitis, neumonitis con hipersensíbilidad crónica, esclerosis múltiple, cirrosis biliar primaria, uveítis (anterior y posterior), queratoconjuntivitis sicca y queratoconjuntivitis vernal, fíbrosis pulmonar intersticial, artritis psoríática y glomerulonefritis (con y sin síndrome nefrótico, por ejemplo incluyendo síndrome nefrótico idíopático o nefropatía de cambio mínimo). Otras enfermedades o condiciones que se pueden tratar con los agentes de la invención incluyen diabetes, por ejemplo diabetes mellitus tipo I (diabetes juvenil), y diabetes mellitus tipo II, enfermedades diarreicas, lesiones por isquemia/reperfusión, retinopatía, tal como retinopatía diabética o retinopatía inducida por oxígeno hiperbárico, y condiciones caracterizadas por una presión intraocular elevada o secreción de humor acuoso ocular, tales como glaucoma. La efectividad de un agente de la invención para inhibir las condiciones inflamatorias, por ejemplo en las enfermedades inflamatorias de las vías respiratorias, se puede demostrar en un modelo animal, por ejemplo un modelo de ratón o de rata, de inflamación de las vías respiratorias u otras condiciones inflamatorias, por ejemplo como es descrito por Szarka y colaboradores, J. Immunol. Methods (1997) 202:49-57; Renzi y colaboradores, Am. Rev. Respir. Dis. (1993) 148:932-939; Tsuyukí y colaboradores, J. Clin. Invest. (1995) 96:2924-2931; y Cernadas y colaboradores (1999) Am. J. Respir. Cell Mol. Biol.20:1-8. Los agentes de la invención también son útiles como agentes co-terapéuticos para utilizarse en combinación con otras sustancias de fármaco, tales como sustancias antí-inflamatorias, broncodilatadoras, anti-hístamínicas, o anti-tusivas, en particular en el tratamiento de enfermedades obstructivas o inflamatorias de las vías respiratorias, tales como las mencionadas anteriormente en la presente, por ejemplo como potenciadores de la actividad terapéutica de estos fármacos, o como un medio para reducir la dosificación requerida o los efectos secundarios potenciales de estos fármacos. Un agente de la invención se puede mezclar con la otra sustancia de fármaco en una composición farmacéutica fija, o se puede administrar por separado, antes, de una manera simultánea con, o después de, la otra sustancia de fármaco. Los fármacos antí-inflamatorios incluyen esferoides, en particular glucocorticosteroídes, tales como budesonida, dipropíonato de beclametasona, propionato de fluticasona, ciclesonida, o furoato de mometasona, o los esteroides descritos en las Publicaciones Internacionales Números WO 02/88167, WO 02/12266, WO 02/100879, WO 02/00679 (en especial aquéllos de los Ejemplos 3, 11, 14, 17, 19, 26, 34, 37, 39, 51, 60, 67, 72, 73, 90, 99, y 101), WO 03/35668, WO 03/48181, WO 03/62259, WO 03/64445, WO 03/72592, WO 04/39827, y WO 04/66920; agonistas de receptores glucocorticoídes no esteroidales, tales como los descritos en las Patentes Números DE 10261874, WO 00/00531, WO 02/10143, WO 03/82280, WO 03/82787, WO 03/86294, WO 03/104195, WO 03/101932, WO 04/05229, WO 04/18429, WO 04/19935, y WO 04/26248; antagonistas de LTB4, tales como BUL 284, CP-195543, DPC11870, etanolamida de LTB4, LY 293111, LY 255283, CGS025019C, CP-195543, ONO-4057, SB 209247, SC-53228, y los descritos en la Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número US 5451700; antagonistas de LTD4, tales como incluyendo montelukast, pranlukast, zafirlukast, accolato, SR2640, Wy-48,252, ICI 198615, MK-571, LY-171883, Ro 24-5913, y L-648051; agonistas del receptor de dopamina, tales como cabergolina, bromocriptína, ro pin ¡rol, y 4-hidroxi-7-[2-[[2-[[3-(2-fenil-etoxi)-propil]-sulfonil]-etil]-amino]-etil]-2(3H)-benzotiazolona, y las sales farmacéuticamente aceptables de la misma (siendo el clorhidrato el Viozan® -AstraZeneca), inhibidores de PDE4, tales como cilomilast (Ariflo® GlaxoSmithKIine), Roflumilast (Byk Gulden), V-11294A (Napp), BAY19-8004 (Bayer), SCH-351591 (Schering-Plough), Arofilina (Almirall Prodesfar a), PD189659/PD168787 (Parke-Davis), AWD- 12-281 (Asta Medica), CDC-801 (Celgene), SelCID(TM) CC-10004 (Celgene), VM554/UM565 (Vernalis), T-440 (Tanabe), KW-4490 (Kyowa Hakko Kogyo), y los que se dan a conocer en las Publicaciones Internacionales Números WO 92/19594, WO 93/19749, WO 93/19750, WO 93/19751, WO 98/18796, WO 99/16766, WO 01/13953, WO 03/104204, WO 03/104205, WO 03/39544, WO 04/000814, WO 04/000839, WO 04/005258, WO 04/018450, WO 04/018451, WO 04/018457, WO 04/018465, WO 04/018431, WO 04/018449, WO 04/018450, WO 04/018451, WO 04/018457, WO 04/018465, WO 04/019944, WO 04/019945, WO 04/045607, y WO 04/037805. Los fármacos broncodilatadores incluyen a los agentes antí-colínérgicos o anti-muscarínicos, en particular bromuro de ipratropio, bromuro de oxitropio, sales de tiotropio, y CHF 4226 (Chiesi), y glicopirrolato, pero también los descritos en las Patentes Números EP 424021, US 3714357, US 5171744, WO 01/04118, WO 02/00652, WO 02/51841, WO 02/53564, WO 03/00840, WO 03/33495, WO 03/53966, WO 03/87094, WO 04/018422, y WO 04/05285; y los agonistas del adrenoceptor beta (ß)-2, tales como los agonistas del adrenoceptor beta-2 tales como albuterol (salbutamol), metaproterenol, terbutalina, salmeterol, fenoterol, procaterol, y en especial formoterol, carmoterol, y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, y los compuestos (en forma libre o de sal o de solvato) de la Fórmula I de la Publicación Internacional Número VVO 0075114, cuyo documento se incorpora a la presente como referencia, de preferencia los compuestos de los ejemplos de la misma, en especial un compuesto de la Fórmula: y las sales farmacéuticamente aceptables del mismo, así como los compuestos (en forma libre o de sal o de solvato) de la Fórmula I de la Publicación Internacional Número WO 04/16601, y también los compuestos de las Patentes Números EP1440966, JP 05025045, WO 93/18007, WO 99/64035, US 2002/0055651, WO 01/42193, WO 01/83462, WO 02/66422, WO 02/70490, WO 02/76933, WO 03/24439, WO 03/42160, WO 03/42164, WO 03/72539, WO 03/91204, WO 03/99764, WO 04/16578, WO 04/22547, WO 04/32921, WO 04/33412, WO 04/37768, WO 04/37773, WO 04/37807, WO 04/39762, WO 04/39766, WO 04/45618, WO 04/46083, WO 04/80964, EP1460064, WO 04/087142, WO 04/089892, EP 01477167, US 2004/0242622, US 2004/0229904, WO 04/108675, WO 04/108676, WO 05/033121, WO 05/040103, y WO 05/044787. Las sustancias de fármacos anti-hístamínicos co-terapéuticos incluyen clorhidrato de cetirizina, acetaminofeno, fumarato de clemastina, prometazina, loratidina, desloratidina, difenhidramína, y clorhidrato de fexofenadina, activastina, astemizol, azelastina, ebastina, epínastina, mizolastina, y tefenadina, así como los que se dan a conocer en las Patentes Números WO 03/099807, WO 04/026841, JP 2004107299. Se pueden utilizar combinaciones de los agentes de la invención y uno o más esteroides, agonistas beta-2, inhibidores de PDE4, o antagonistas de LTD4, por ejemplo, en el tratamiento de enfermedad pulmonar obstructiva crónica, o en particular de asma. Se pueden utilizar combinaciones de los agentes de la invención y agentes anti-colinérgicos o anti-muscarínícos, inhibidores de PDE4, agonistas del receptor de dopamina, o antagonistas de LTB4, por ejemplo, en el tratamiento de asma, o en particular de la enfermedad pulmonar obstructiva crónica. Otras combinaciones útiles de los agentes de la invención con fármacos anti-inflamatorios, son aquéllas con otros antagonistas de receptores de quimiocina, por ejemplo CCR-1, CCR-2, CCR-5, CCR-6, CCR-7, CCR-8, CCR-9, y CCR-10, CXCR1, CXCR2, CXCR3, CXCR4, CXCR5, en particular los antagonistas CCR-5, tales como los antagonistas Schering-Plough SC-351125, SCH-55700 y SCH-D, antagonistas Takeda, tales como cloruro de N-[[4-[[[6,7-dihidro-2-(4-metil-fenil)-5H-benzo-ciclohepten-8-il]-carbonil]-amíno]-fenil]-metil]-tetrahidro-N,N-dimetil-2H-piran-4-aminio (TAK-770), los antagonistas CCR-5 descritos en la Patente de los Estados Unidos de Norteamérica Número US 6166037 (en particular en las reivindicaciones 18 y 19), en la Publicación Internacional Número WO 00/66558 (en particular en la reivindicación 8), y en la Publicación Internacional Número WO 00/66559 (en particular en la reivindicación 9), y en las Publicaciones Internacionales Números WO 04/018425 y WO 04/026873. De conformidad con lo anterior, la invención también proporciona un método para el tratamiento de una condición mediada por la activación del receptor de adenosina A2b, y/o el receptor de adenosina A3, por ejemplo una condición inflamatoria o alérgica, en particular una enfermedad inflamatoria u obstructiva de las vías respiratorias, el cual comprende administrar a un sujeto, en particular a un sujeto humano, que lo necesite, un compuesto de la Fórmula I en forma libre o en la forma de una sal farmacéuticamente aceptable. En otro aspecto, la invención proporciona un compuesto de la Fórmula I, en forma libre o en la forma de una sal farmacéuticamente aceptable, para utilizarse en el fabricación de un medicamento para el tratamiento de una condición mediada por la activación del receptor de adenosina A2b, y/o del receptor de adenosina A3, en particular una enfermedad inflamatoria u obstructiva de las vías respiratorias. Los agentes de la invención se pueden administrar por cualquier vía apropiada, por ejemplo oralmente, por ejemplo en la forma de una tableta o cápsula; parenteralmente, por ejemplo intravenosamente; mediante inhalación, por ejemplo en el tratamiento de una enfermedad inflamatoria u obstructiva de las vías respiratorias; intranasalmente, por ejemplo en el tratamiento de rinitis alérgica; tópicamente a la piel, por ejemplo en el tratamiento de dermatitis atópica; o rectalmente, por ejemplo en el tratamiento de enfermedad inflamatoria del intestino. En un aspecto adicional, la invención también proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la Fórmula I en forma libre p en la forma de una sal farmacéuticamente aceptable, opcionalmente junto con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable para el mismo. La composición puede contener un agente co-terapéutico, tal como un fármaco antiinflamatorio, broncodilatador, o anti-histamínico, como se describe anteriormente en la presente. Estas composiciones se pueden preparar utilizando diluyentes o excipientes convencionales y técnicas conocidas en el campo galénico. Por consiguiente, las formas de dosificación oral pueden incluir tabletas y cápsulas. Las formulaciones para administración tópica pueden tomar la forma de cremas, ungüentos, geles, o sistemas de suministro transdérmico, por ejemplo parches. Las composiciones para inhalación pueden comprender formulaciones en aerosol u otras formulaciones atomizables, o formulaciones de polvo seco. Cuando la composición comprenda una formulación en aerosol, de preferencia contiene, por ejemplo, un propelente de hidro-fluoro-alcano (HFA), tal como HFA134a ó HFA227, o una mezcla de los mismos, y puede contener uno o más co-solventes conocidos en la técnica, tales como etanol (hasta el 20 por ciento en peso), y/o uno o más tensoactívos, tales como ácido oleico o trioleato de sorbitán, y/o uno o más agentes de volumen, tales como lactosa. Cuando la composición comprenda una formulación en polvo seco, de preferencia contiene, por ejemplo, al compuesto de la Fórmula I con un diámetro de partículas de hasta 10 mieras, opcionalmente junto con un diluyente o vehículo, tal como lactosa, de la distribución de tamaños de partículas deseada, y un compuesto que ayude a proteger contra el deterioro del desempeño del producto debido a la humedad, tal como estearato de magnesio (por ejemplo, del 0.05 al 1.5 por ciento). Cuando la composición comprenda una formulación nebulizada, de preferencia contiene, por ejemplo, al compuesto de la Fórmula I disuelto o suspendido en un vehículo que contenga agua, un co-solvente tal como etanol o propílenglicol, y un estabilizante, el cual puede ser un tensoactívo. Las dosificaciones de los compuestos de la Fórmula I empleadas en la práctica de la presente invención, por supuesto, variarán dependiendo, por ejemplo, de la condición particular que se vaya a tratar, del efecto deseado, y del modo de administración. En general, las dosificaciones diarias adecuadas para la administración medíante inhalación son del orden de 0.005 a 10 miligramos, mientras que para la administración oral, las dosis diarias adecuadas son del orden de 0.05 a 100 miligramos. La invención se ¡lustra mediante los siguientes Ejemplos. Ejemplos 1 a 40 En la siguiente tabla se muestran los compuestos de la Fórmula I: "?r Los métodos para la preparación de estos compuestos se describen posteriormente en la presente. La tabla también muestra los datos de espectrometría de masas, MH+ [ESMS]. Los ejemplos están en forma libre.

Preparación de Ejemplos Específicos: Eiemplo 1 5-(3-cloro-fenil)-1-(1,1-dioxo-tetrahidro-tiofen-3-il)-1H-pirazol Una solución de 3-cloro-acetofenona (1.54 gramos, 10 milimoles) en tolueno (10 mililitros) se trata con dimetil-acetal de dimetil-formamida (5.4 mililitros, 40 milimoles). La mezcla se agita a 100°C durante la noche, seguido por la remoción del solvente al vacío, para dar la (E)-1-(3-cloro-fenil)-3-dimetíl-amino-propenona, MH+ (ESMS): 209.6. Una solución del intermediario de enamina (0.02 gramos, 0.1 milímoles) en etanol (0.5 mililitros) se trata con (1 ,1-díoxo-tetrahidro-tiofen-3-íl)-hidrazina (0.015 gramos, 0.1 milimoles) en dimetilformamida (DMF) (0.5 mililitros). La mezcla se agita a 90°C durante la noche. El solvente se remueve al vacío, y el residuo se purifica mediante LCMS de preparación (cromatografía de líquidos-espectroscopia de masas), para dar el compuesto del título. MH + (ESMS): 279.2. Los compuestos de los Ejemplos 2 y 3 se preparan empleando procedimientos análogos al utilizado en el Ejemplo 1. Eiemplo 4 (4-ciano-fenil)-amida del ácido 1 -(3-fluoro-fenil)-5-piridin-4-il-1H-pirazol-4-carboxílico 4a) Etil-éster del ácido 3-dimetil-amino-2-(piridin-4-carbonil)-acrílico Una solución de dimetil-acetal de dimetil-formamida (5.57 mililitros, 41.45 milimoles) en tolueno (25 mililitros) se agrega en una porción en una solución de isonicotinoil-acetato de etilo (5 gramos, 25.9 mílímoles) en tolueno (25 mililitros). La mezcla se pone a reflujo durante 1 hora, seguido por la remoción del solvente al vacío, para dar la enamina cruda. 4b) Etil-éster del ácido 1-(3-fluoro-fenil)-5-pir¡din-4-¡l-1 H-pirazol-4-carboxílico Al etil-éster del ácido 3-dimetíl-amino-2-(pirídin-4-carbonil)-acrílico (3.34 gramos, 13.5 mílimoles) en ácido acético glacial (30 mililitros) se le agrega 1-(3-fluoro-feníl)-hidraz¡na (13.5 milimoles), y la mezcla se pone a reflujo durante la noche. La mezcla de reacción se vierte en agua (50 mililitros), y se extrae con cloroformo (15 mililitros, tres veces). Las fases orgánicas combinadas se lavan con carbonato ácido de sodio al 5 por ciento (20 mililitros, dos veces), agua (20 mililitros, dos veces), y luego se secan con sulfato de magnesio. El solvente se evapora, y el residuo se purifica mediante cromatografía utilizando hexano/acetato de etilo (1:1) como eluyente, para dar el compuesto del título. 4 c) Ácido 1-(3-fluoro-fenil)-5-piridin-4-il-1 H-pirazol-4-carboxílico Al etíl-éster del ácido 1 -(3-fluoro-fenil)-5-piridin-4-il-1 H-pirazol- 4-carboxílico (3.14 gramos, 10.12 mílimoles) en dioxano acuoso al 30 por ciento (60 mililitros) se le agrega NaOH 2.5N (12.6 mililitros). La mezcla se agita a reflujo durante 1 hora, y luego a 50°C durante la noche. La mezcla se acidifica con HCl 1N (aproximadamente 36 mililitros), y el sólido resultante se filtra, se lava con agua, y se seca al vacío, para dar el compuesto del título como un sólido blanco. 4d) (4-ciano-fenil)-amida del ácido 1-(3-fluoro-fenil)-5-pirid¡n-4-il- 1 H-pirazol-4-carboxílico A una suspensión del ácido 1-(3-fluoro-fenil)-5-piridin-4-il-1 H-pirazol-4-carboxílíco (0.1 gramos, 0.35 milimoles) en dimetilformamida (2 mililitros), se le agrega una solución de di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (0.182 gramos, 1.4 milimoles) en dimetilformamida (0.5 mililitros), seguida por una solución de HATU (0.268 gramos, 0.7 milimoles) en dímetil-formamida (0.5 mililitros). Después de 40 minutos a temperatura ambiente, se agrega una solución de 4-amino-benzonitrilo (0.125 gramos, 1.05 milimoles) en dimetilformamida (0.5 mililitros). La mezcla se agita durante la noche a temperatura ambiente. El solvente se remueve al vacío, y el residuo se purifica mediante LCMS de preparación, para dar el compuesto del título. MH+ (ESMS): 384.2. Los compuestos de los Ejemplos 5 a 32 se preparan empleando procedimientos análogos al utilizado en el Ejemplo 4. Eiemplo 33 Piridin-3-ilamida del ácido 1 -(3-fluoro-fenil)-5-piridin-4-il-1 H-pirazol-3-carboxílico 33a) Metil-éster del ácido (Z)-2-hidroxi-4-oxo-4-piridin-4-il-but-2-enoico Una solución agitada de 4-acetíl-píridina (5 gramos, 41.3 milimoles) en metanol seco (100 mililitros) a temperatura ambiente, se trata con oxalato de dímetilo (7.8 gramos, 66.1 milímoles). Se agrega una solución de metóxido de sodio (al 25 por ciento en peso/volumen en metanol, 18 mililitros, 82.6 milímoles), y se continúa la agitación durante la noche. El sólido precipitado se filtra, se lava con metanol (200 mililitros), y se seca al vacío, para dar el compuesto del título. 33b) Metil-éster del ácido 1-(3-fluoro-fenil)-5-piridin-4-¡l-1 H-pirazol-3-carboxílíco Una suspensión agitada del metil-éster del ácido (Z)-2-hidrox¡-4-oxo-4-pirídin-4-il-but-2-enoico (1.0 gramos, 4.8 milimoles) en ácido acético glacial (10 mililitros) se trata con 1-(3-fluoro-fenil)-hidrazina (0.78 gramos, 4.8 milímoles), y la mezcla se pone a reflujo durante 7 horas. El solvente se remueve al vacío, y el residuo se purifica mediante cromatografía utilizando hexano/acetato de etilo (1:1) como eluyente, para dar el compuesto del título. 33c) Ácido 1-(3-fluoro-fenil)-5-piridin-4-il-1 H-pirazol-3-carboxílico Una solución del metil-éster del ácido 1-(3-fluoro-fenil)-5-piridín-4-il-1 H-pírazol-3-carboxílico (0.860 gramos, 2.89 mílímoles) en dioxano/agua (20 mililitros, 1/1), se trata con NaOH 2.5M (2 mililitros). La mezcla se agita durante la noche, y luego se acidifica con HCl 1N. El sólido resultante se filtra y se seca al vacío, para dar el compuesto del título. 33d) Piridin-3-ilamida del ácido 1-(3-fluoro-fenil)-5-piridin-4-il-1 H-pirazol-3-carboxílico A una suspensión del ácido 1-(3-fluoro-fenil)-5-piridin-4-il-1 H-pirazol-3-carboxílico (0.05 gramos, 0.18 milímoles) y DIPEA (0.09 mililitros, 0.54 milimoles) en dimetil-formamida (0.5 mililitros), se le agrega una solución de HATU (0.14 gramos, 0.36 milímoles) en dimetil-formamida (0.5 mililitros). Después de 20 minutos a temperatura ambiente, se agrega una solución de 3-amino-piridina (0.017 gramos, 0.18 milímoles) en dímetil-formamída (0.5 mililitros). La mezcla se agita a temperatura ambiente durante 4 horas. El solvente se remueve al vacío, y el residuo se purifica medíante LCMS de preparación, para dar el compuesto del título. MH + (ESMS): 360.1. Los compuestos de los Ejemplos 34 a 40 se preparan empleando procedimientos análogos al utilizado en el Ejemplo 33.

Claims

REIVI N DICACION ES

1 . U n compuesto de la Fórmula I : en forma libre o de sal , en donde: R1 es feni lo opcionalmente sustituido por halógeno, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, ciano, carboxílo, halo-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, halo-alcoxilo de 1 a 8 átomos de ca rbono, ciano-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, carboxi-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, o amíno-carbonilo, ó R1 es un anillo heterocíclico de 5 ó 6 miembros que contiene cuando menos un heteroátomo del anillo seleccionado a partir del grupo que consiste en nitrógeno, oxígeno, y azufre, esta ndo este anillo opcionalmente sustituido por alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, o uno o más grupos oxo; R2 es fenilo opcíonalmente sustituido por halógeno, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, o morfolinilo, ó R2 es un anillo heterocíclíco de 5 ó 6 miembros que contiene cuando menos un heteroátomo del anil lo seleccionado a partir del grupo que consiste en nitrógeno, oxígeno, y azufre, estando este anillo opcionalmente sustituido por alquilo de 1 a 8 átomos de carbono , alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, o uno o más grupos oxo;

R3 y R4 son ambos hidrógeno, o uno de R3 y R4 es -CO-N R5R6, y el otro es hidrógeno; R5 y R6 son independientemente hidrógeno, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono opcíonalmente sustituido por un anillo heterocíclíco de 5 ó 6 miembros que contiene cuando menos un heteroátomo del ani llo seleccionado a partir del gru po que consiste en nitrógeno, oxígeno, y azufre; alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono; cicloalqui lo de 3 a 8 átomos de carbono; un anillo heterocíclico de 5 ó 6 miembros que contiene cuando menos un heteroátomo del anillo seleccionado a partir del grupo que consiste en nitrógeno, oxígeno, y azufre; o fenílo opcíonalmente sustituido por halógeno, cíano, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono-carbonilo, o alcoxílo de 1 a 8 átomos de carbono-carbonilo; ó Rs y R6 forman juntos: v>> opcionalmente sustituido por halógeno, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, o ciano; y m es un entero de 0 a 5. 2. U n compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 , en donde: R1 es fenílo sustituido por halógeno, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, o alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, ó R es un anillo heterocíclíco de 5 miembros que contiene cuando menos un átomo de azufre, estando este anillo opcíonalmente sustituido por uno o m ás gru pos oxo; R2 es fenilo opcíonalmente sustituido por halógeno o alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono, ó R2 es un anillo heterocíclico de 6 miembros que contiene cuando menos un átomo de nitrógeno; R3 y R4 son ambos hidrógeno, o uno de R3 y R4 es -CO-N R5R6, y el otro es hidrógeno; y R5 y R6 son independientemente hidrógeno, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono opcíonalmente sustituido por un anillo heterocíclico de 5 ó 6 miembros que contiene cuando menos un átomo de nitrógeno y/u oxígeno; cicloalq uilo de 3 a 8 átomos de carbono; un anillo heterocíclico de 5 ó 6 miembros que contiene cuando menos un átomo de nitrógeno; o fenilo opcionalmente sustituido por hidrógeno, cíano, alcoxílo de 1 a 8 átomos de carbono, o alq uilo de 1 a 8 átomos de carbono-carbonilo. 3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 2, en donde: R es fenilo sustituido por halógeno, en particular halógeno meta para el átomo de carbono unido al anillo de pirazol indicado, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, o alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono; ó R1 es un anillo heterocíclico de 5 miembros que contiene cuando menos un átomo de azufre, estando este anillo opcionalmente sustituido por uno o más g rupos oxo; R2 es fenilo opcionalmente sustituido por halógeno o por alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono, ó R2 es un anillo heterocíclico de 6 miembros que contiene cuando menos un átomo de nitrógeno;

R3 y R4 son ambos hidrógeno, o uno de R3 y R4 es -CO-N R5R6, y el otro es hidrógeno; y R5 y R6 son independientemente hidrógeno, alq uilo de 1 a 4 átomos de carbono opcionalmente sustituido por un anillo heterocíclíco (de preferencia insaturado) de 5 ó 6 miembros que contiene cuando menos un átomo de nitrógeno y/u oxígeno; cicloalqui lo de 3 a 6 átomos de carbono; un anillo heterocíclico (de preferencia ¡nsaturado) de 5 ó 6 miembros q ue contiene cuando menos un átomo de nitrógeno; o fenílo opcionalmente sustituido por halógeno, ciano, alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono, o alquilo de 1 a 4 átomos de carbono-carbonilo.

4. U n compuesto de la Fórmula I , sustancialmente como se describe en la presente, en cualquiera de los Ejemplos.

5. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivi ndicaciones anteriores, para utilizarse como un producto farmacéutico.

6. U n compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en combinación con una sustancia de fármaco anti-inflamatorio, broncodílatador, anti-histam ínico, o antí-tusivo, estando el compuesto y la sustancia de fármaco en la misma o diferente composición farmacéutica.

7. Una composición farmacéutica, la cual comprende, como ingrediente activo, un compuesto de acuerdo con cualq uiera de las reivindicaciones 1 a 4, opcionalmente junto con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable.

8. El uso de un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una condición mediada por la activación del receptor de adenosína A2b.

9. El uso de un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una condición mediada por la activación del receptor de adenosina A3.

10. El uso de un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad inflamatoria u obstructiva de las vías respiratorias.

11. Un método para la preparación de un compuesto de la Fórmula I, como se define en la reivindicación 1, en forma libre o de sal, el cual comprende: (i) (A) para la preparación de los compuestos de la Fórmula I, en donde R3 y R4 son ambos hidrógeno, hacer reaccionar un compuesto de la Fórmula II: en donde R1 es como se define anteriormente en la presente, con un compuesto de la Fórmula lll: en donde R2 es como se define anteriormente en la presente; (B) pa ra la preparación de los com puestos de la Fórm ula I , en d onde R 3 es -CO-N R5R6, y R4 es hidrógeno, hacer reaccionar un compuesto de la Fórmula IV: en donde R1 y R2 son como se definen anteriormente en la presente, o un derivado de formación de amida del mismo, con un compuesto de la Fórmula V: NH en donde R5 y R6 son como se definen anteriormente en la presente; o (C) para la preparación de los compuestos de la Fórmula I , en donde R3 es hidrógeno y R4 es -CO-N R5R6, hacer reaccionar un compuesto de la Fórmula VI : en donde R1 y R2 son como se definen anteriormente en la presente, o un derivado de formación de amida del mismo, con un compuesto de la Fórmula V, en donde R5 y R6 son como se definen anteriormente en la presente; y (¡i) recuperar el compuesto resultante de la Fórmula I en forma libre o de sal . RESU MEN Los compuestos de la Fórmula (I): en forma libre o de sal , en donde R1 , R2, R3, y R4 tienen los significados indicados en la memoria descriptiva, son útiles para el tratamiento de una condición mediada por la activación del receptor de adenosina A2b ó el receptor de adenosina A3, en particular una enfermedad inflamatoria u obstructiva de las vías respiratorias. También se describen composiciones farmacéuticas que contienen a los compuestos, y procesos para la preparación de los compuestos. * * * * *