[go: up one dir, main page]

MD4551C1 - Derivaţi pe bază de tetrahidroizochinoline şi N-(fenilfosfat)amide, procedeu de obţinere a lor şi compoziţii farmaceutice care îi conţin - Google Patents

Derivaţi pe bază de tetrahidroizochinoline şi N-(fenilfosfat)amide, procedeu de obţinere a lor şi compoziţii farmaceutice care îi conţin Download PDF

Info

Publication number
MD4551C1
MD4551C1 MDA20140073A MD20140073A MD4551C1 MD 4551 C1 MD4551 C1 MD 4551C1 MD A20140073 A MDA20140073 A MD A20140073A MD 20140073 A MD20140073 A MD 20140073A MD 4551 C1 MD4551 C1 MD 4551C1
Authority
MD
Moldova
Prior art keywords
group
compound
branched
linear
phenyl
Prior art date
Application number
MDA20140073A
Other languages
English (en)
Russian (ru)
Other versions
MD4551B1 (ro
MD20140073A2 (en
Inventor
Тиран Арно Ле
Дигуарье Тьерри Ле
Жером-Бенуа Старк
Жан-Мишель ХЕНЛИН
Анна-Франсуаза ГИЙЮЗИС
Нантей Гийом Де
Оливье Женест
Джеймс Эдвард Пол Дэвидсон
Джеймс Брук МЮРРЕЙ
Ай-Джен ЧЕНЬ
Original Assignee
Les Laboratoires Servier
Vernalis (R&D) Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=50288170&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=MD4551(C1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Les Laboratoires Servier, Vernalis (R&D) Ltd filed Critical Les Laboratoires Servier
Publication of MD20140073A2 publication Critical patent/MD20140073A2/ro
Publication of MD4551B1 publication Critical patent/MD4551B1/ro
Publication of MD4551C1 publication Critical patent/MD4551C1/ro

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61N—ELECTROTHERAPY; MAGNETOTHERAPY; RADIATION THERAPY; ULTRASOUND THERAPY
    • A61N5/00—Radiation therapy
    • A61N5/10—X-ray therapy; Gamma-ray therapy; Particle-irradiation therapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
    • C07F9/08—Esters of oxyacids of phosphorus
    • C07F9/09—Esters of phosphoric acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6558—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing at least two different or differently substituted hetero rings neither condensed among themselves nor condensed with a common carbocyclic ring or ring system
    • C07F9/65583—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing at least two different or differently substituted hetero rings neither condensed among themselves nor condensed with a common carbocyclic ring or ring system each of the hetero rings containing nitrogen as ring hetero atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6561—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing systems of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring or ring system, with or without other non-condensed hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A61K31/675—Phosphorus compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pyridoxal phosphate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61N—ELECTROTHERAPY; MAGNETOTHERAPY; RADIATION THERAPY; ULTRASOUND THERAPY
    • A61N5/00—Radiation therapy
    • A61N5/10—X-ray therapy; Gamma-ray therapy; Particle-irradiation therapy
    • A61N2005/1092—Details
    • A61N2005/1098—Enhancing the effect of the particle by an injected agent or implanted device

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Radiology & Medical Imaging (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Low-Molecular Organic Synthesis Reactions Using Catalysts (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Abstract

Invenţia se referă la compuşii cu formula (I):unde X, Y, A1, A2, Ra, Rb, Rc, Rd, R3, R4, T şi R5 sunt definiţi în descrierea invenţiei, totodată R4 reprezintă un fenil sau piridin-5-il, substituit în poziţia para cu o grupare fosfat, preferabil cu gruparea -OPO(O-Na+)(O-Na+).Invenţia se referă, de asemenea, la un procedeu de obţinere a compuşilor cu formula (I), la compoziţii farmaceutice, care conţin un compus cu formula (I) sau o sare de adiţie a acestuia cu un acid sau o bază acceptabilă farmaceutic, şi la utilizarea compoziţiilor farmaceutice în fabricarea medicamentelor pentru tratarea cancerului, maladiilor autoimune şi ale sistemului imunitar.

Description

Prezenta invenţie se referă la noi compuşi fosfaţi, la un procedeu de obţinere a lor şi la compoziţii farmaceutice care îi conţin.
Compuşii din prezenta invenţie sunt noi şi posedă caracteristici farmacologice şi farmacocinetice foarte valoroase pentru utilizarea în domeniul apoptozei şi oncologiei.
Apoptoza, sau moartea programată a celulelor, este un procedeu fiziologic, care este crucial pentru dezvoltarea embrionară şi menţinerea homeostazei tisulare.
Moartea de tip apoptotic a celulelor implică modificări morfologice, cum ar fi condensarea nucleului, fragmentarea ADN-ului şi, de asemenea, fenomene biochimice, cum ar fi activarea caspazelor care deteriorează componentele structurale cheie ale celulei, cauzând astfel dezasamblarea şi moartea ei. Reglarea procesului de apoptoză este complexă şi implică activarea sau reprimarea mai multor căi de semnalizare intracelulară (Suzanne Cory şi Jerry M. Adams. The Bcl2 family: regulators of the cellular life-or-death switch. Nature Review Cancer, 2002, vol. 2, nr. 9, p. 647-656).
Dereglarea apoptozei este implicată în anumite patologii. Apoptoza sporită este asociată cu bolile neurodegenerative, cum ar fi boala Parkinson, boala Alzheimer şi ischemia. Dimpotrivă, deficitele în implementarea apoptozei joacă un rol semnificativ în dezvoltarea formelor de cancer şi chimiorezistenţa acestora, în bolile autoimune, bolile inflamatorii şi infecţiile virale. În consecinţă, absenţa apoptozei este una dintre carasteristicile fenotipice ale cancerului (Douglas Hanahan şi Robert A Weinberg. The Hallmarks of Cancer. Cell, 2000, vol. 100, nr. 1, p. 57-70).
Proteinele anti-apoptotice din familia Bcl-2 sunt asociate cu numeroase patologii. Implicarea proteinelor din familia Bcl-2 este descrisă în numeroase tipuri de cancer, cum ar fi cancerul colorectal, cancerul la sân, cancerul pulmonar cu celule mici, cancerul pulmonar cu celule non-mici, cancerul vezicii urinare, cancerul ovarian, cancerul de prostată, leucemia cronică limfoidă, limfomul folicular, mielomul, etc. Supra-expresia proteinelor anti-apoptotice din familia Bcl-2 este implicată în tumorigeneză, în rezistenţa la chimioterapie şi în prognosticul clinic al pacienţilor afectaţi de cancer. Prin urmare, există o necesitate terapeutică de compuşi care inhibă activitatea anti-apoptotică a proteinelor din familia Bcl-2.
Pe lângă faptul că sunt noi, compuşii din prezenta invenţie au proprietăţi farmacologice şi farmacocinetice, fapt ce permite utilizarea lor în patologii care implică un defect în apoptoză, cum ar fi, de exemplu, în tratamentul cancerului, bolilor autoimune şi bolilor sistemului imunitar.
Prezenta invenţie se referă, mai îndeosebi, la un compus fosfat cu formula (I):
pib posrelh3posrelv3fLayoutInCell1fAllowOverlap1fBehindDocument0fPseudoInline1fLayoutInCell1fLockPosition1fLockRotation1
unde:
X şi Y reprezintă un atom de carbon sau un atom de azot, înţelegându-se că ei pot să nu reprezinte simultan doi atomi de carbon sau doi atomi de azot;
A1 şi A2 împreună cu atomii care îi poartă, formează un heterociclu Het, substituit opţional, aromatic sau nearomatic, compus din 5, 6 sau 7 membri inelari, care pot conţine, pe lângă azot reprezentat de X sau Y, între 1 - 3 heteroatomi selectaţi independent dintre oxigen, sulf şi azot, înţelegându-se că azotul în cauză poate fi substituit cu o grupare ce reprezintă un atom de hidrogen, o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată sau o grupare -C(O)-O-Alk, unde Alk este o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată;
A1 şi A2, independent unul de celălalt, reprezintă un atom de hidrogen, un polihaloalchil (C1-C6) liniar sau ramificat, o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată sau un cicloalchil;
T reprezintă un atom de hidrogen, o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată, substituită opţional cu unul - trei atomi de halogen, o grupare alchil(C1-C4)-NR1R2, sau o grupare alchil(C1-C4)-OR6;
R1 şi R2, independent unul de celălalt, reprezintă un atom de hidrogen sau o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată;
sau R1 şi R2 formează cu atomul de azot care îi poartă un heterocicloalchil;
R3 reprezintă o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată, o grupare alchenil (C2-C6) liniară sau ramificată, o grupare alchinil (C2-C6) liniară sau ramificată, o grupare cicloalchil, o grupare cicloalchil (C3-C10)alchil(C1-C6), în care fracţiunea alchil este liniară sau ramificată, o grupare heterocicloalchil, o grupare aril sau o grupare heteroaril, înţelegându-se că unul sau mai mulţi atomi de carbon din grupările precedente, sau ai substituenţilor posibili ai acestora, pot fi deuteraţi;
R4 reprezintă o grupare aril, o grupare heteroaril, o grupare cicloalchil sau o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată, totodată se va înţelege că unul sau mai mulţi atomi de carbon din grupele precedente, sau ai substituenţilor posibili ai acestora, pot fi deuteraţi;
R5 reprezintă un atom de hidrogen sau halogen, o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată, sau o grupare alcoxi (C1-C6) liniară sau ramificată;
R6 reprezintă un atom de hidrogen sau o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată;
Ra, Rb, Rc şi Rd, independent unul de celălalt, reprezintă R7, un atom de halogen, o grupare alcoxi (C1-C6) liniară sau ramificată, o grupare hidroxi, o grupare polihaloalchil (C1-C6) liniară sau ramificată, o grupare trifluorometoxi, -NR7R7', nitro, R7-CO-alchil(C1-C6)-, R7-CO-NH-alchil(C1-C6)-, NR7R7'-CO-alchil(C1-C6)-, NR7R7'-CO-alchil(C0-C6)-O-, R7-SO2-NH-alchil(C1-C6)-, R7-NH-CO-NH-alchil(C1-C6)-, R7-O-CO-NH-alchil(C1-C6)-, o grupare heterocicloalchil, sau substituenţii uneia dintre perechile (Ra,Rb), (Rb,Rc) sau (Rc,Rd) formează împreună cu atomii de carbon care îi poartă un inel compus din 5 - 7 membri inelari, care pot conţine 1- 2 heteroatomi selectaţi dintre oxigen şi sulf, de asemenea, înţelegându-se că unul sau mai mulţi atomi de carbon ai inelului defini mai sus poate fi deuterat sau substituit cu 1- 3 grupări selectate dintre halogen sau alchil (C1-C6) liniar sau ramificat;
R7 şi R7', independent unul de celălalt, reprezintă un hidrogen, un alchil (C1-C6) liniar sau ramificat, un alchenil (C2-C6) liniar sau ramificat, un alchinil (C2-C6) liniar sau ramificat, un aril sau un heteroaril, sau R7 şi R7' , împreună cu atomul de azot care îi poartă, formează un heterociclu compus din 5 - 7 membri inelari;
compusul cu formula (I) fiind astfel că, cel puţin, unul dintre atomii de carbon pe care îi conţinea este substituit cu una dintre următoarele grupări fosfat: -OPO(OM)(OM'), -OPO(OM)(O-M1 +), -OPO(O-M1 +)(O-M2 +), -OPO(O-)(O-)M3 2+, -OPO(OM)(O[CH2CH2O]nCH3), sau -OPO(O-M1 +)(O[CH2CH2O]nCH3), unde M şi M', independent unul de celălalt, reprezintă un atom de hidrogen, o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată, o grupare alchenil (C2-C6) liniară sau ramificată, o grupare alchinil (C2-C6) liniară sau ramificată, un cicloalchil sau un heterocicloalchil ambii compuşi din 5 sau 6 membri inelari, în timp ce M1 + şi M2 +, independent unul de celălalt, reprezintă un cation monovalent acceptabil farmaceutic, şi M3 2+ reprezintă un cation bivalent acceptabil farmaceutic şi n este un număr integru de la 1 până la 5;
înţelegându-se că:
- "aril" înseamnă o grupare fenil, naftil, bifenil sau indenil;
- "heteroaril" înseamnă orice grupare mono- sau bi-ciclică compusă din 5-10 membri inelari, având cel puţin o fracţiune aromatică şi conţinând 1-4 heteroatomi selectaţi dintre oxigen, sulf şi azot (inclusiv atomi de azot cuaternar);
- "cicloalchil" înseamnă orice grupare mono-sau bi-ciclică, nearomatică, carbociclică care conţine 3-10 membri inelari,
- "heterocicloalchil" înseamnă orice grupare mono-sau bi-ciclică, nearomatică, condensată sau spiro compusă din 3 - 10 membri inelari şi care conţine 1-3 heteroatomi selectaţi dintre oxigen, sulf, SO, SO2 şi azot;
fiind posibil ca grupările aril, heteroaril, cicloalchil şi heterocicloalchil astfel definite şi grupările alchil, alchenil, alchinil şi alcoxi să fie substituite cu 1 - 3 grupări selectate dintre alchil (C1-C6) liniară sau ramificată, substituită opţional, spiro (C3-C6), alcoxi (C1-C6) liniară sau ramificată, substituită opţional, (C1-C6)alchil-S, hidroxi, oxo (sau N-oxid, după caz), nitro, ciano, -COOR', -OCOR', NR'R", polihaloalchil (C1-C6) liniar sau ramificat, trifluormetoxi, (C1-C6)alchilsulfonil, halogen, aril opţional substituită, heteroaril, ariloxi, ariltio, cicloalchil, heterocicloalchil, substituit opţional cu unul sau mai mulţi atomi de halogen sau grupări alchil, înţelegându-se că R' şi R", independent unul de celălalt, reprezintă un atom de hidrogen sau o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată, substituită opţional;
fiind posibil ca gruparea Het definită în formula (I) să fie substituită cu una - trei grupări selectate dintre alchil (C1-C6) liniar sau ramificat, hidroxi, alcoxi (C1-C6) liniar sau ramificat, NR1'R1" şi halogen, înţelegându-se că R1' şi R1 sunt astfel precum sunt definiţi pentru grupările R' şi R'' menţionate mai sus;
la enantiomerii şi diastereoizomerii acestuia, şi la sărurile de adiţie ale acestora cu un acid sau o bază acceptabilă farmaceutic.
Printre acizii acceptabili farmaceutic pot fi menţionaţi, fără a se limita la acidul clorhidric, bromhidric, sulfuric, fosforic, acetic, trifluoracetic, lactic, piruvic, malonic, succinic, glutaric, fumaric, tartric, maleic, citric, ascorbic, oxalic, metansulfonic, camforic, etc.
Printre bazele acceptabile farmaceutic pot fi menţionate, fără a se limita la hidroxidul de sodiu, hidroxidul de potasiu, hidroxidul de potasiu, trietilamină, terţ-butilamină etc.
Compuşi preferaţi ai invenţiei includ compuşi cu formula (I) unde R4 reprezintă fenil substituit în poziţia para cu o grupare cu formula -OPO(OM)(OM'), -OPO(OM)(O-M1 +), -OPO(O-M1 +)(O-M2 +), -OPO(O-)(O-)M3 2+, -OPO(OM)(O[CH2CH2O]nCH3), or -OPO(O-M1 +)(O[CH2CH2O]nCH3), unde M şi M', independent unul de celălalt, reprezintă un atom de hidrogen, o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată, o grupare alchenil (C2-C6)) liniară sau ramificată, o grupare alchinil (C2-C6) liniară sau ramificată, un cicloalchil sau un heterocicloalchil, ambii compuşi din 5 sau 6 membri inelari, în timp ce M1 + şi M2 +, independent unul de celălalt, reprezintă un cation monovalent acceptabil farmaceutic, şi M3 2+ reprezintă un cation bivalent acceptabil farmaceutic şi n este un număr integru de la 1 până la 5, înţelegându-se că gruparea fenil poate fi substituită opţional cu unul sau mai mulţi atomi de halogen.
Se preferă compuşi cu formula (I), unde R4 reprezintă o grupare fenil sau o grupare pirimidin-5-il, ambele substituite în poziţia para cu o grupare cu formula OPO(O-M1 +)(O-M2 +), şi chiar mai îndeosebi cu o grupare cu formula -OPO(O-Na+)(O-Na+).
În mod avantajos, X reprezintă un atom de carbon şi Y reprezintă un atom de azot. Chiar mai avantajos, gruparea:
reprezintă o 5,6,7,8-tetrahidroindolizină, o indolizină sau un pirol dimetilat.
De preferinţă, T reprezintă o grupare metil, (morfolin-4-il)metil sau 3-(morfolin-4-il)propil.
În compuşii preferaţi ai invenţiei, Ra şi Rd reprezintă fiecare un atom de hidrogen şi (Rb,Rc), împreună cu atomii de carbon care îi poartă, formează o grupare 1,3-dioxolan sau o grupare 1,4-dioxan; sau Ra, Rc şi Rd reprezintă fiecare un atom de hidrogen şi Rb reprezintă un hidrogen sau un halogen.
Într-o altă variantă de executare a invenţiei, Ra şi Rd reprezintă fiecare un atom de hidrogen, Rb reprezintă un atom de halogen şi Rc o grupare metoxi.
Alternativ, Ra, Rb şi Rd reprezintă fiecare în mod avantajos un atom de hidrogen şi Rc reprezintă o grupare NR7R7'-CO-(C0-C6)alchil-O-, şi chiar mai preferabil Rc reprezintă o grupare 2-oxo-2-(piperidin-1-il)etoxi.
În plus, R3 reprezintă în mod avantajos o grupare selectată dintre fenil, 1H-indol, 1H-pirolo[2,3-b]piridină, piridină, 1H-pirazol, 1H-pirol şi 2,3-dihidro-1H-pirolo[2,3-b]piridină, aceste grupări având opţional unul sau mai mulţi substituenţi selectaţi dintre alchil (mai preferabil metil) (C1-C6) liniar sau ramificat, ciano şi trideuteriometil.
Printre compuşii preferaţi ai invenţiei pot fi menţionaţi:
- 4-[{[3-(6-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)-5,6,7,8-tetrahidroindolizin-1-il]carbonil}(fenil)amino]fenil fosfat disodic,
- 4-[{[5-(5-cloro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1Hil]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}(piridin-4-il)amino]fenil fosfat disodic,
- 4-({[5-(5-cloro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}[1-(trideuteriometil)-1H-pirazol-4-il]amino)fenil fosfat disodic,
- 4-({[5-(5-cloro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}(5-ciano-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il)amino]fenil fosfat disodic,
- 4-({[5-(5-cloro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}(5-ciano-1-metil-1H-pirol-3-il)amino]fenil fosfat disodic,
- 4-({[5-(5-cloro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}(1-metil-1H-pirazol-4-il)amino]fenil fosfat disodic,
- 4-[(5-ciano-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il){[5-(5-fluoro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}amino]fenil fosfat disodic,
- 4-({[5-(5-fluoro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}(1-metil-1H-pirazol-4-il)amino]fenil fosfat disodic,
enantiomerii şi diastereoizomerii lor, şi sărurile de adiţie ale acestora cu un acid sau o bază acceptabilă farmaceutic.
Studiul farmacocinetic al compuşilor fosfaţi cu formula (I) a arătat că aceştia au fost transformaţi in vivo în compuşi cu formula (I'), caracterizaţi prin aceea că funcţia fosfat a fost metabolizată într-o funcţie hidroxi. Compuşii cu formula (I) se comportă corespunzător ca promedicamente ale compuşilor cu formula (I') având următoarea formulă:
pib posrelh3posrelv3fLayoutInCell1fAllowOverlap1fBehindDocument0fPseudoInline1fLayoutInCell1fLockPosition1fLockRotation1
unde:
X şi Y reprezintă un atom de carbon sau un atom de azot, înţelegându-se că ei pot să nu reprezinte simultan doi atomi de carbon sau doi atomi de azot;
A1 şi A2 împreună cu atomii care îi poartă, formează un heterociclu Het substituit opţional, aromatic sau nearomatic, compus din 5, 6 sau 7 membri inelari, care pot conţine, pe lângă azot reprezentat de X sau Y, între 1 - 3 heteroatomi selectaţi independent dintre oxigen, sulf şi azot, înţelegându-se că azotul în cauză poate fi substituit cu o grupare ce reprezintă un atom de hidrogen, o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată sau o grupare -C(O)-O-Alk, unde Alk este o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată;
sau A1 şi A2, independent unul de celălalt, reprezintă un atom de hidrogen, un polihaloalchil (C1-C6) liniar sau ramificat, o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată sau un cicloalchil;
T reprezintă un atom de hidrogen, o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată, substituită opţional cu unu - trei atomi de halogen, o grupare alchil (C1-C4)-NR1R2, sau o grupare alchil (C1-C4)-OR6;
R1 şi R2, independent unul de celălalt, reprezintă un atom de hidrogen sau o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată;
sau R1 şi R2 formează cu atomul de azot care îi poartă un heterocicloalchil,
R3 reprezintă o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată, o grupare alchenil (C2-C6) liniară sau ramificată, o grupare alchinil (C2--C6) liniară sau ramificată, o grupare cicloalchil, o grupare cicloalchil (C3-C10)-alchil(C1-C6), în care fracţiunea alchil este liniară sau ramificată, o grupare heterocicloalchil, o grupare aril sau o grupare heteroaril, înţelegându-se că unul sau mai mulţi atomi de carbon din grupările precedente, sau ai substituenţilor posibili ai acestora, pot fi deuteraţi;
R4 reprezintă o grupare aril, o grupare heteroaril, o grupare cicloalchil sau o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată, înţelegându-se că unul sau mai mulţi atomi de carbon din grupările precedente, sau ai substituenţilor posibili ai acestora, pot fi deuteraţi;
R5 reprezintă un atom de hidrogen sau halogen, o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată, sau o grupare alcoxi (C1-C6) liniară sau ramificată;
R6 reprezintă un atom de hidrogen sau o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată;
Ra, Rb, Rc şi Rd, independent unul de alţii, reprezintă R7, un atom de halogen, o grupare alcoxi (C1-C6) liniară sau ramificată, o grupare hidroxi, o grupare polihaloalchil (C1-C6) liniară sau ramificată, o grupare trifluorometoxi, -NR7R7', nitro, R7-CO-alchil(C0-C6)-, R7-CO-NH-alchil(C1-C6)-, NR7R7'-CO-alchil(C01-C6)-, NR7R7'-CO-alchil(C1-C6)-O-, R7-SO2-NH-alchil(C1-C6)-, R7-NH-CO-NH-alchil(C1-C6), R7-O-CO-NH-alchil(C1-C6 )-, o grupare heterocicloalchil, sau substituenţii uneia dintre perechile (Ra,Rb), (Rb,Rc) sau (Rc,Rd formează împreună cu atomii de carbon care îi poartă un inel compus din 5-7 membri inelari, care pot conţine 1-2 heteroatomi selectaţi dintre oxigen şi sulf, de asemenea, înţelegându-se că unul sau mai mulţi atomi de carbon ai inelului definiţi mai sus poate fi deuterat sau substituit cu 1-3 grupări selectate dintre halogen sau alchil (C1-C6) liniar sau ramificat;
R7 and R7', independent unul de celălalt, reprezintă un hidrogen, un alchil (C1-C6) liniar sau ramificat, un alchenil (C2-C6) liniar sau ramificat, un alchinil (C2C6) liniar sau ramificat, un aril sau un heteroaril, sau R7 şi R7', împreună cu atomul de azot care îi poartă, formează un heterociclu compus din 5-7 membri inelari;
înţelegându-se că:
- "aril" înseamnă o grupare fenil, naftil, bifenil sau indenil;
- "heteroaril" înseamnă orice grupare mono- sau bi-ciclică compusă din 5-10 membri inelari, având cel puţin o fracţiune aromatică şi conţinând 1-4 heteroatomi selectaţi dintre oxigen, sulf şi azot (inclusiv atomi de azot cuaternar);
- "cicloalchil" înseamnă orice grupare mono-sau bi-ciclică, nearomatică, carbociclică care conţine 3 -10 membri inelari;
- "heterocicloalchil" înseamnă orice grupare mono-sau bi-ciclică, nearomatică, condensată sau spiro compusă din 3-10 membri inelari şi care conţine 1-3 heteroatomi selectaţi dintre oxigen, sulf, SO, SO2 şi azot;
fiind posibil ca grupările aril, heteroaril, cicloalchil şi heterocicloalchil astfel definite şi grupările alchil, alchenil, alchinil şi alcoxi să fie substituite cu 1 - 3 grupări selectate dintre alchil (C1-C6) liniar sau ramificat, substituit opţional, spiro (C3-C6), alcoxi (C1-C6) liniar sau ramificat, substituit opţional, (C1-C6)alchil-S, hidroxi, oxo (sau N-oxid, după caz), nitro, ciano, -COOR', -OCOR', NR'R", polihaloalchil (C1C6) liniar sau ramificat, trifluormetoxi, alchilsulfonil (C1-C6), halogen, aril opţional substituit, heteroaril, ariloxi, ariltio, cicloalchil, heterocicloalchil substituit opţional cu unul sau mai mulţi atomi de halogen sau grupări alchil, înţelegându-se că R' şi R", independent unul de celălalt, reprezintă un atom de hidrogen sau o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată, substituită opţional;
fiind posibil ca gruparea Het definită în formula (I) să fie substituită cu una - trei grupări selectate dintre alchil (C1-C6) liniar sau ramificat, hidroxi, alcoxi (C1-C6) liniar sau ramificat, NR1'R1" şi halogen, înţelegându-se că R1' şi R1 sunt astfel cum sunt definiţi pentru grupările R' şi R'' menţionate mai sus;
enantiomerii şi diastereoizomerii lor, şi sărurile de adiţie ale acestora cu un acid sau o bază acceptabilă farmaceutic.
Compuşii cu formula (I') posedă proprietăţi pro-apoptotice şi ca rezultat prezintă un interes terapeutic major în tratamentul formelor de cancer, bolilor autoimune şi bolilor sistemului imunitar. În prezenta invenţie s-a arătat că prin administrarea compuşilor fosfaţi cu formula (I), a fost optimizată expunerea in vivo la compuşii cu formula (I'). Solubilitatea compuşilor cu formula (I) este, de fapt, mult mai mare, decât cea a compuşiilor cu formula (I'). În consecinţă, utilizarea compuşilor cu formula (I) în fabricarea compoziţiilor farmaceutice este, în special, avantajoasă din punct de vedere galenic.
Invenţia se referă, de asemenea, la un procedeu de obţinere a compuşilor cu formula (I), procedeul dat fiind caracterizat prin aceea că în calitate de material iniţial este utilizat compusul cu formula (II):
unde Ra, Rb, Rc şi Rd sunt definiţi ca în formula (I');
compusul cu formula (II) fiind supus unei reacţii Heck, într-un mediu apos sau organic, în prezenţa unui catalizator de paladiu, unei baze, unei fosfine şi compusului cu formula (III):
unde grupările A1 şi A2, X şi Y sunt astfel cum au fost definite pentru formula (I') şi Alk reprezintă un alchil (C1-C6) liniar sau ramificat;
pentru a obţine compusul cu formula (IV):
unde A1, A2, X, Y, Ra, Rb, Rc şi Rd sunt astfel cum au fost definiţi pentru formula (I') şi Alk este astfel cum a fost definit mai sus;
compus cu formula (IV), a cărui funcţie aldehidă este oxidată în acid carboxilic pentru a forma compusul cu formula (V):
unde A1, A2, X, Y, Ra, Rb, Rc şi Rd sunt astfel cum au fost definiţi pentru formula (I') şi Alk este astfel cum a fost definit mai sus;
compusul cu formula (V) fiind apoi supus cuplării peptidice cu un compus cu formula (VI):
unde T şi R5 sunt astfel cum au fost definiţi pentru formula (I');
pentru a obţine compusul cu formula (VII):
unde A1, A2, X, Y, Ra, Rb, Rc, Rd, T şi R5 sunt astfel cum au fost definiţi pentru formula (I') şi Alk este astfel cum a fost definit mai sus;
compusul cu formula (VII), a cărui funcţie ester este hidrolizată pentru a se obţine acidul carboxilic sau carboxilatul corespunzător, care poate fi transformat într-un derivat de acid, cum ar fi clorura de acil sau anhidrida corespunzătoare înainte de a fi cuplat cu o amină NHR3R4 în care R3 şi R4 au aceleaşi semnificaţii ca pentru formula (I'), înainte de a fi supus acţiunii unui pirofosfat, fosfonat sau unui compus fosforil în condiţii bazice, fiind posibil ca compusul obţinut astfel să fie opţional hidrolizat sau hidrogenolizat pentru a se obţine compusul cu formula (I),
compusul cu formula (I) care poate fi purificat conform unei tehnici de separare convenţionale, care este transformat, la dorinţă, în sărurile sale de adiţie cu un acid sau o bază acceptabilă farmaceutic şi care este opţional separat în izomerii săi conform unei tehnici de separare convenţionale;
înţelegându-se că în orice moment considerat oportun în cursul procedeului descris mai sus, anumite grupări (ex.: hidroxi, amino) de reactivi sau intermediari de sinteză pot fi protejate şi apoi deprotejate în conformitate cu cerinţele de sinteză.
Compuşii cu formulele (II), (III), (VI) şi amina NHR3R4 sunt disponibili comercial sau pot fi obţinuţi de către specialistul în domeniu prin reacţii chimice obişnuite descrise în literatură.
Mai exact, compuşii fosfaţi cu formula (I) conform invenţiei vor fi utili în tratamentul formelor de cancer rezistente la chimio- sau radioterapie şi, de asemenea, în hemopatii maligne şi cancerul pulmonar cu celule mici.
Printre tratamentele formelor de cancer prevăzute pot fi menţionate, fără a se limita la cancerul vezicii urinare, la creier, de sân şi uter, leucemiile limfoide cronice, cancerul colorectal, formele de cancer la esofag şi ficat, leucemiile limfoblastice, limfoamele non-Hodgkin, melanoamele, hemopatiile maligne, mieloamele, cancerul ovarian, cancerul pulmonar cu celule non-mici, cancerul de prostată şi cancerul pulmonar cu celule mici. Printre limfoamele non-Hodgkin, pot fi menţionate mai preferabil limfoamele foliculare, limfoamele cu celule de manta, limfoame difuze cu celule mari B, limfoamele limfocitare mici şi limfoamele zonei marginale cu celule B.
Prezenta invenţie se referă, de asemenea, la compoziţii farmaceutice care cuprind, cel puţin, un compus cu formula (I), în combinaţie cu unul sau mai mulţi excipienţi acceptabili farmaceutic.
Printre compoziţiile farmaceutice conform invenţiei pot fi menţionate, în mod special, cele care sunt adecvate pentru administrarea orală, parenterală, nazală, per- sau transcutanată, rectală, perlinguală, oculară sau respiratorie, în special comprimatele sau drajeurile, comprimatele sublinguale, pliculeţele, capsulele, comprimatele sublinguale cu dizolvare lentă (glossettes), tabletele, supozitoarele, cremele, unguentele, gelurile dermice, şi fiolele buvabile sau injectabile.
Doza variază în funcţie de sexul, vârsta şi greutatea pacientului, calea de administrare, natura indicaţiei terapeutice, sau orice tratamente asociate, şi variază între 0,01 mg şi 1 g pentru 24 ore în una sau mai multe administrări.
Pe lângă aceasta, prezenta invenţie se referă, de asemenea, la asocierea unui compus cu formula (I) cu un agent anticanceros selectat dintre agenţii genotoxici, toxinele mitotice, anti-metaboliţi, inhibitorii de proteazom, inhibitorii de kinază şi anticorpii, şi, de asemenea, la compoziţii farmaceutice care cuprind acest tip de asociere şi utilizarea acestora în fabricarea medicamentelor pentru utilizarea în tratamentul cancerului.
Compuşii din invenţie pot fi, de asemenea, utilizaţi în asociere cu radioterapia în tratamentul cancerului.
Următoarele Preparări şi Exemple ilustrează invenţia fără a o limita în vreun oarecare mod.
Prepararea 1: Acidul 6-[1-(metoxicarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro-3-indolizinil]-1,3-benzodioxol-5-carboxilic
Etapa A: Acidul 1-formil-2-piperidină-carboxilic
La o soluţie de 40 g de amestec racemic de acid 2-piperidină-carboxilic (0,310 mmol) în 300 ml de acid formic plasat la 0°C se adaugă, prin picurare, 200 ml (2,15 mmol) de anhidridă acetică. Amestecul se agită apoi la temperatura ambiantă timp de o noapte. Apoi, amestecul de reacţie se răceşte până la 0°C, se hidrolizează prin adăugarea a 250 ml de apă, şi se agită timp de o jumătate de oră la 0°C înainte de a fi concentrat la sec. Uleiul astfel obţinut este prelevat în 200 ml de metanol şi apoi concentrat la sec. Produsul din titlu este obţinut sub formă de ulei cu un randament de 98%. Acesta este utilizat direct, fără a fi purificat în alt mod, în etapa următoare.
RMN 1H: δ (400 MHz; dmso-d6; 300°K): 13,0 (m, 1H OH); 8,0-8,05 (2s, 1H aldehidă); 4,9-4,5 (2d, 1H α al N şi COOH) ; 4,1-2,6 (m, 2H αal N); 2,2-1,2 (m, 6H piperidină).
IR: ν: -OH: 2000-3000 cm-1 acid; ν: >C=O 1703 cm-1 banda largă.
Etapa B: 5,6,7,8-tetrahidro-1-indolizină-carboxilatul de metil
La o soluţie de 10 g de acid carboxilic obţinut în Etapa A (63,6 mmol) în 65 ml de dicloretan se adaugă succesiv 13,4 g de clorură de tosil (70,4 mmol), 11,5 ml de 2-cloracrilat de metil (113,5 mmol) şi apoi, prin picurare, 17,8 ml de N,N,N-trietilamină (127,2 mmol). Amestecul de reacţie este apoi adus la reflux timp de 1 oră 30 minute. Acesta este plasat la temperatura ambiantă, şi apoi se adaugă 5 ml de 2-cloracrilat de metil (48,9 mmol) şi, prin picurare, 9 ml de N,N,N-trietilamină (64 mmol). Amestecul este încălzit la reflux timp de o noapte.
Amestecul de reacţie este apoi diluat cu clorură de metilen, spălat succesiv cu soluţie de HCl 1M, soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi apoi cu saramură până la obţinerea unui pH neutru. Faza organică este ulterior uscată pe MgSO4, filtrată, concentrată la sec şi purificată prin cromatografia pe gel de silice (gradient heptan/AcOEt). Produsul din titlu este obţinut sub formă de ulei.
RMN 1H: δ (400 MHz; CDCl3; 300°K): 6,55-6,40 (d, 2H, tetrahidroindolizină); 3,91 (t, 3H ester metilic); 3,78 (s, 3H tetrahidroindolizină); 3,08 (t, 2H, tetrahidroindolizină); 1,95-1,85 (m, 4H, tetrahidroindolizină).
IR: ν:>C=O 1692 cm-1 ester.
Etapa C: 3-(6-formil-1,3-benzodioxol-5-il)-5,6,7,8-tetrahidro-1-indolizină-carboxilat metilic
La o soluţie de 6,4 g de ester obţinut în Etapa B (35,7 mmol) în 12 ml de N,N-dimetilacetamidă se adaugă succesiv 12,3 g de 6-bromo-1,3-benzodioxol-5-carbaldehidă (53,6 mmol) şi 7 g de acetat de potasiu (71,4 mmol), şi apoi amestecul se agită sub argon timp de 20 de minute. Apoi se adaugă 1,3 g de catalizator de paladiu diclorobis(trifenilfosfină)paladiu(II) (PdCl2(PPh3)2) (1,8 mmol). Amestecul de reacţie este apoi încălzit la 130°C timp de o oră înainte de adăugarea a 139 µl de H2O la acesta. Încălzirea este menţinută la aceeaşi temperatură timp de noapte. Amestecul este lăsat să revină la temperatura ambiantă şi apoi este diluat cu AcOEt. Se adaugă cărbune de origine animală (25 g per g de produs) şi amestecul se agită la temperatura ambiantă timp de 1 oră şi apoi se filtrează. Faza organică se spală apoi cu apă, se usucă pe sulfat de magneziu şi se concentrează la sec. Produsul brut astfel obţinut este purificat prin cromatografie pe gel de silice (gradient heptanl/AcOEt). Produsul din titlu este obţinut sub formă de ulei.
RMN 1H: δ:(400 MHz; dmso-d6; 353°K): 9,65 (s, 1H, H aldehidă); 7,3-7,15 (2s, 2H, H aromatici); 6,45 (s, 1H tetrahidroindolizină); 6,20 (s, 2H metilenedioxi); 3,70 (s, 3H ester metilic); 3,5-4,0 (m, 2H tetrahidroindolizină); 3,05 (m, 2H tetrahidroindolizină); 1,85 (m, 4H tetrahidroindolizină).
IR: ν: >C=O 1695 cm-1 ester; ν: >C=O 1674 cm-1.
Etapa D: Acidul 6-[1-(metoxicarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro-3-indolizinil]-1,3-benzodioxol-5-carboxilic
Se prepară o soluţie ce conţine 3,37 g de compus obţinut în Etapa C (10,3 mmol) în 9,3 ml de acetonă şi 8,8 ml (80,24 mmol) de 2-metil-2-butenă şi se plasează la 0°C. La aceasta se adaugă, prin picurare, 9,3 ml de soluţie apoasă care conţine un amestec de 3,3 g de clorură de sodiu (NaClO2) (36,05 mmol) şi 3,6 g de monohidrat hidrogenfosfat de sodiu (NaH2PO4) (25,75 mmol). Apoi amestecul se agită la temperatura ambiantă timp de 7 ore. Amestecul de reacţie este apoi concentrat pentru a înlătura acetona. Solidul obţinut se filtrează, se spală cu apă şi apoi se usucă la 40°C sub vid timp de o noapte. Produsul din titlu este obţinut sub formă de solid, care se utilizează ulterior fără a fi purificat în alt mod.
RMN 1H: δ (400 MHz; dmso-d6; 300°K): 12,10 (m, 1H, H acid carboxilic); 7,40-6,88 (2s, 2H, H aromatici); 6,20 (s, 1H tetrahidroindolizină); 6,18 (s, 2H metilenedioxi); 3,70 (s, 3H ester metilic); 3,55 (t, 2H tetrahidroindolizină); 3,00 (m, 2H tetrahidroindolizină); 1,80 (m, 4H, H tetrahidroindolizină).
IR: ν: -OH: 3000-2000 cm-1 acid; ν: >C=O 1686-1676 cm-1 ester+acid; ν: >C=C< 1608 cm-1.
Prepararea 2: Acidul 2-[1-(metoxicarbonil)-5,6,7,8-tetrahidro-3-indolizinil]benzoic
Procedura este în conformitate cu protocolul descris în Prepararea 1, înlocuind 6-brom-1,3-benzodioxol-5-carbaldehida utilizată în Etapa C cu 2-brom-benzaldehidă.
Prepararea 3: Acidul 6-[1-(metoxicarbonil)-3-indolizinil]-1,3-benzodioxol-5-carboxilic
Etapa A: Bromură de 1-(carboximetil)-1,2-dihidropiridinium
La o soluţie de 16,2 ml de piridină (200 mmol) în 120 ml de acetat de etil se adaugă, în porţii, 27,8 g (200 mmoli) de acid bromacetic. Apoi amestecul se agită la temperatura ambiantă timp de o noapte. Precipitatul astfel obţinut se filtrează şi apoi se spală cu acetat de etil rece. După uscare, produsul din titlu este obţinut sub formă de pudră, care este utilizată direct în următoarea etapă.
RMN 1H: δ (400 MHz; dmso-d6; 300°K): 9,15 (d, 2H, H aromatici piridină); 8,7 (t, 1H, H aromatic); 8,25 (t, 2H, H aromatic); 5,65 (s, 2H, H CH2COOH).
IR: ν: C=O: 1732 cm-1; -OH acid: 2800 cm-1.
Etapa B: Metil 1-indolizincarboxilat
La o suspensie de 6,55 g de sare de piridiniu obţinută în Etapa A (30 mmol) în 240 ml de toluen se adaugă succesiv 16,7 ml de acrilat de metil (150 mmol), 4,2 ml de trietilamină (30 mmol) şi apoi, în porţii, 20,9 g de MnO2 (240 mmol). Amestecul este apoi încălzit la 90°C timp de 3 de ore. După răcire, amestecul de reacţie se filtrează pe o turtă de celită şi se concentrează la sec. Produsul din titlu se izolează apoi prin purificare pe gel de silice (gradient heptan/AcOEt: 0-10%) sub formă de ulei care se cristalizează în stare rece.
RMN 1H: δ (300 MHz; dmso-d6; 300°K): 8,5 (d, 1H, H indolizină); 8,05 (d, 1H, H indolizină); 7,6 (s, 1H, H indolizină); 7,15 (m, 2H, H indolizină); 6,85 (m, 1H, H indolizină); 4,25 (q, 2H, -C(O)CH2CH3); 1,35 (t, 3H, -C(O)CH2CH3).
IR: ν: C=O ester: 1675 cm-1; fracţiuni aromatice C=C: 1634 cm-1.
Etapa C: Acidul 6-[1-(metoxicarbonil)-3-indolizinil]-1,3-benzodioxol-5-carboxilic
Procedura este în conformitate cu protocolul descris în Etapele C şi D a Preparării 1.
Prepararea 4: Acidul 4-cloro-2-[4-(etoxicarbonil)-1,5-dimetil-1H-pirol-2-il]benzoic
Etapa A: 1,2-dimetil-1H-pirol-3-carboxilat de etil
La o soluţie de 10 g de 2-metil-1H-pirol-3-carboxilat de etil (65,3 mmol) şi 8,95 ml (130,6 mmol) de iodură de metil în 70 ml de dimetilformamidă plasată la 0°C se adaugă, în trei porţii , 2,61 g (65,3 mmol) de hidrură de sodiu de 60%. Amestecul se agită apoi la 0°C timp de o oră. Ulterior, amestecul de reacţie este hidrolizat prin adăugarea a 420 ml de apă rece ca gheaţa. Amestecul de reacţie este apoi diluat cu acetat de etil, spălat succesiv cu soluţie de HCl 0,1 M , soluţie apoasă saturată de LiCl şi apoi cu saramură. Faza organică este apoi uscată pe MgSO4, filtrată, concentrată la sec şi purificată prin cromatografia pe gel de silice (gradient eter de petrol/AcOEt).
RMN 1H: δ (400 MHz; dmso-d6; 300K): 6,65 (d, 1H pirol); 6,3 (1d, 1H pirol); 4,1 (1q, 2H, OCH2CH3); 3,5 (s, 3H N-pirol); 2,4 (s, 3H pirol); 1,5 (1t, 3H OCH2CH3).
IR: ν: >C=O: 1688 cm-1; ν: C-O-C: 1172 cm-1.
Etapa B: 5-(5-cloro-2-formilfenill)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-carboxilat de etil
La o soluţie de 10,5 g de compus obţinut în Etapa A (62,8 mmol) în 65 ml de N,N-dimetilacetamidă se adaugă succesiv 15,2 g de 2-bromo-4-clorobenzaldehidă (69 mmol), 12,3 g de acetat de potasiu (125,6 mmol) şi apoi amestecul se agită sub argon timp de 20 de minute. Apoi se adaugă 2,2 g de catalizator de paladiu PdCl2(PPh3)2 (3,14 mmol). Amestecul de reacţie este apoi încălzit la 130°C timp de o noapte. Amestecul este lăsat să revină la temperatura ambiantă şi apoi este diluat cu diclormetan. Se adaugă cărbune de origine animală (30 g) şi amestecul se agită la temperatura ambiantă timp de 1 oră şi apoi se filtrează. Faza organică se spală apoi cu apă, se usucă pe sulfat de magneziu şi se concentrează la sec. Produsul brut obţinut astfel este purificat prin cromatografie pe gel de silice (gradient eter de petrol/AcOEt). Produsul din titlul este obţinut sub formă de solid.
RMN 1H: δ (400 MHz; dmso-d6; 300K): 9,8 (s, 1H, formil); 7,91-7,69-7,61 (d, 3H, H aromatici); 6,5 (s, 1H pirol); 4,2 (q, 2H, OCH2CH3 ); 3,4 (s, 3H, CH3-N-pirol); 2,55 (s, 3H pirol); 1,28 (t, 3H, OCH2CH3).
Etapa C: Acidul 4-cloro-2-[4-(etoxicarbonil)-1,5-dimetil-1H-pirol-2-il]benzoic
Se prepară o soluţie care conţine 12,85 g de compus obţinut în Etapa B (42 mmol) şi 35,7 ml (336 mmol) de 2-metil-2-butenă într-un amestec care conţine 20 ml de acetonă şi 20 ml de tetrahidrofuran. Se adaugă, prin picurare, 200 ml de o soluţie apoasă care conţine un amestec de 13,3 g de clorură de sodiu (NaClO2) (147 mmol) şi 14,5 g de monohidrat hidrogenfosfat de sodiu (NaH2PO4 .H2O) (105 mmol). Amestecul se agită apoi viguros la temperatura ambiantă timp de 7 ore. Amestecul de reacţie este apoi concentrat pentru a înlătura acetona. Se adaugă acetat de etil, iar faza organică se spală cu apă şi apoi se concentrează la sec. Reziduul este apoi prelevat într-o cantitate minimă de eter etilic. Solidul obţinut se filtrează, se spală cu eter şi apoi se usucă sub vid la 40°C timp de o noapte. Produsul din titlu este obţinut sub formă de solid, care este ulterior folosit fără a fi purificat în alt mod.
RMN 1H: δ (400 MHz; dmso-d6; 300K): 13 (s, 1H, COOH); 7,85-7,6-7,41 (d,dd, wd, 3H, H aromatici); 6,3 (s, 1H, H pirol); 4,15 (q, 2H, OCH2CH3); 3,25 (s, 3H, CH3-N-pirol); 2,5 (s, 3H, CH3-pirol); 1,25 (t, 3H, OCH2CH3).
IR: ν: -OH: 3100-2500 cm-1 acid; ν: >C=O: 1681 cm-1 ester + acid.
Prepararea 5: Acidul 6-[4-(etoxicarbonil)-1,5-dimetil-1H-pirol-2-il]-1,3-benzodioxol-5-carboxilic
Procedura este în conformitate cu procedeul din Prepararea 4, înlocuind 2-bromo-4-clorobenzaldehidă utilizată în Etapa B cu 6-bromo-1,3-benzodioxol-5-carbaldehidă.
Prepararea 6: Acidul 4-fluoro-3-metoxi-2-[4-(etoxicarbonil)-1,5-dimetil-1H-pirol-2-il]benzoic
Procedura este în conformitate cu procedeul din Prepararea 4, înlocuind 2-bromo-4-clorobenzaldehida utilizată în Etapa B cu 2-bromo-4-fluoro-3-metoxibenzaldehidă.
Prepararea 7: Acidul 4-fluoro-2-[4-(etoxicarbonil)-1,5-dimetil-1H-pirol-2-il]benzoic
Procedura este în conformitate cu procedeul din Prepararea 4, înlocuind 2-bromo-4-clorobenzaldehida utilizată în Etapa B cu 2-bromo-4-fluorobenzaldehidă.
Prepararea 8: Acidul 7-[4-(metoxicarbonil)-1,5-dimetil-1H-pirol-2-il]-2,3-dihidro-1,4-benzodioxin-6-carboxilic
Procedura este în conformitate cu procedeul din Prepararea 4, înlocuind 2-metil-1H-pirol-3-carboxilatul de etil în Etapa A cu 2-metil-1H-pirol-3-carboxilatul de metil şi 2-bromo-4-clorobenzaldehida utilizată în Etapa B cu 7-bromo-2,3-dihidro-1,4-benzodioxin-6-carbaldehidă.
Prepararea 9: Acidul 5-benziloxi-2-(1-metoxicarbonil-5,6,7,8-tetrahidroindolizin-3-il)benzoic
Etapa A: 3-(4-benziloxi-2-formil-fenil)-5,6,7,8-tetrahidroindolizină-1-carboxilat metilic
Se introduce 5-benziloxi-2-bromo-benzaldehidă (12,3 g, 42,2 mmol) într-un balon în prezenţa acetatului de potasiu (8,3 g; 84,2 mmol) şi 120 ml de dimetilacetamidă. După degazare sub argon, se adaugă diclorbis(trifenilfosfină)paladiu (II) (1,04 g, 1,5 mmol) şi amestecul este apoi degazat sub argon înainte de a fi încălzit la 100°C timp de 16 ore. După revenirea la temperatura ambiantă, amestecul de reacţie se toarnă în 200 ml de acetat de etil, se filtrează pe celită şi se spală cu apă şi apoi cu saramură. Fazele apoase combinate sunt extrase cu acetat de etil. Fazele organice se usucă pe sulfat de sodiu, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul obţinut se purifică prin cromatografie pe gel de silice pentru a obţine produsul din titlu.
Etapa B: Acidul 5-benziloxi-2-(1-metoxicarbonil-5,6,7,8-tetrahidroindolizin-3-il)benzoic
La o soluţie de compus obţinut în Etapa B (4,63 g, 11,89 mmol) în 300 ml de acetonă se adaugă 2-metil-2-butenă (6,31 ml, 59 mmol). Apoi se toarnă, prin picurare, o soluţie de monohidrat hidrogenfosfat de sodiu (6,56 g, 47,6 mmol) şi clorură de sodiu (2,69 g, 23,8 mmol) în 40 ml de apă, în timp ce temperatura se menţine sub 20°C. După agitare timp de 30 minute la temperatura ambiantă, amestecul este acidulat cu soluţie de HCl 2M şi apoi fazele sunt separate. Faza apoasă este extrasă cu acetat de etil. Fazele organice combinate se usucă pe sulfat de sodiu, se filtrează şi se evaporă la sec pentru a se obţine compusul preconizat.
Prepararea 1': (3S)-3-[4-(morfolinilmetil)-1,2,3,4-tetrahidroizochinolină
Etapa A: (3S)-3-(4-morfolinilcarbonil)-3,4-dihidro-2(1H)-izochinolincarboxilat de benzil
La o soluţie de 5 g de acid de (3S)-2-[(benziloxi)carbonil] -1,2,3,4-tetrahidro-3-izochinolincarboxilic (16 mmol) în 160 ml de diclormetan se adaugă 1,5 ml de morfolină (17,6 mmol), apoi 9 ml de N,N,N-trietilamină (64 mmol), 3,3 g de 1-etil-3-(3'-dimetilaminopropil)-carbodiimidă (EDC) (19,2 mmol) şi 2,6 g de hidroxibenzotriazol (HOBt) (19,2 mmol). Amestecul de reacţie se agită la temperatura ambiantă timp de o noapte; apoi acesta se toarnă în soluţie apoasă de clorură de amoniu şi se extrage cu acetat de etil. Faza organică se usucă apoi pe sulfat de magneziu, şi apoi se filtrează şi se evaporă la sec. Produsul brut astfel obţinut este apoi purificat prin cromatografie pe gel de silice (gradient diclormetan/metanol). Produsul este obţinut sub formă de spumă.
RMN 1H: δ (400 MHz; dmso-d6; 353K): 7,30 (m, 5H benzil); 7,15 (m, 4H, H aromatici); 5,2-5,0 (m, 3H, 2H benzil, 1H dihidroizochinolin); 4,75-4,5 (2d, 2H dihidroizochinolin); 3,55-3,3 (m, 8H morfolină); 3,15-2,9 (2dd, 2H dihidroizochinolin).
IR: ν: >C=O: 1694; 1650 cm-1.
Etapa B: (3S)-3-(4-morfolinilcarbonil)-3,4-dihidro-2(1H)-izochinolincarboxilat de benzil
La o soluţie de 5,3 g de produs obţinut în Etapa A (13,9 mmol) în 278 ml de tetrahidrofuran se adaugă 14 ml de complex boran-dimetilsulfură (BH3Me2S) (27,8 mmol) la temperatura ambiantă. Amestecul este încălzit timp de 4 ore la 80°C. Se lasă să revină la temperatura ambiantă şi apois se adaugă 7 ml (14 mmol) de BH3Me2S. Amestecul de reacţie este încălzit din nou la 80°C timp de 2 ore. Tetrahidrofuranul este apoi evaporat şi se adaugă lent metanol şi apoi 5,6 ml de acid clorhidric 5M (27,8 mmol). Amestecul se agită la temperatura ambiantă timp de o noapte şi apoi la 80°C timp de 1 oră. Apoi se adaugă soluţie apoasă saturată de NaHCO3 la amestecul de reacţie plasat la 0°C până la obţinerea unui pH de 8, şi ulterior se extrage cu acetat de etil. Faza organică se usucă pe sulfat de magneziu, şi apoi se filtrează şi se evaporă la sec. Produsul din titlu este obţinut sub formă de ulei.
RMN 1H: δ (400 MHz; dmso-d6; 353K): 7,43-7,30 (vârf fără rezoluţie, 5H benzil); 7,19 (m, 4H, H aromatici); 5,16 (m, 2H, 2H benzil); 4,79-4,29 (d, 2H dihidroizochinolin); 4,58 (m, 1H dihidroizochinolin); 3,50 (m, 4H morfolină); 3,02-2,80 (dd, 2H dihidroizochinolin); 2,42-2,28 (vârf fără rezoluţie, 5H, 4H morfolină, 1H morfolină); 2,15 (dd, 1H morfolină).
IR: ν: >CH: 2810 cm-1; ν: >C=O: 1694 cm-1; ν: >C-O-C<: 1114 cm-1; ν:>CH-Ar: 751; 697 cm-1.
Etapa C: (3S)-3-[4-(morfolinilmetil)-1,2,3,4-tetrahidroizochinolină
La o soluţie de 4,9 g de compus din Etapa B (13,4 mmol) în 67 ml de etanol se adaugă 0,980 g de dihidoxid de paladiu (20% în greutate) la temperatura ambiantă. Amestecul de reacţie se plasează sub 1,2 bari de hidrogen la temperatura ambiantă timp de 4 ore. Acesta este apoi trecut printr-un filtru Whatman şi paladiul este ulterior clătit de mai multe ori cu etanol. Filtratul este evaporat la sec. Produsul din titlu este obţinut sub formă de ulei.
RMN 1H: δ (400 MHz; dmso-d6; 300K): 7,12-7,0 (vârf fără rezoluţie, 4H, H aromatici); 3,92 (s, 2H tetrahidroizochinolină); 3,60 (t, 4H morfolină); 2,98 (m, 1H tetrahidroizochinolină); 2,68 (dd, 1H tetrahidroizochinolină); 2,5-2,3 (vârf fără rezoluţie, 8H, 1H tetrahidroizochinolină, 6H morfolină, 1H NH).
IR: ν: >NH: 3322 cm-1; ν: >C-O-C<: 1115 cm-1; ν: >CH-Ar: 742 cm-1.
Prepararea 2': Clorhidrat de (3R)-3-metil-1,2,3,4-tetrahidroizochinolină
Etapa A: {(3S)-2-[(4-metilfenil)sulfonil]-1,2,3,4-tetrahidroizochinolină-3-il}metil 4-metilbenzensulfonat
La o soluţie de 30,2 g de [(3S)-1,2,3,4-tetrahidroizochinolină-3-il]metanol (185 mmol) în 750 ml de diclorometan se adaugă succesiv 91,71 g de clorură de tosil (481 mmol) şi apoi, prin picurare, 122,3 ml de N,N,N-trietilamină (740 mmol). Amestecul de reacţie se agită apoi la temperatura ambiantă timp de 20 ore. Apoi acesta este diluat cu diclormetan, spălat succesiv cu soluţie de HCl 1M, soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi apoi cu saramură până la neutralitate. Faza organică se usucă apoi pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează la sec. Solidul obţinut este apoi dizolvat într-un volum minim de diclormetan şi apoi se adaugă ciclohexan până la formarea unui precipitat. Acest precipitat este apoi filtrat şi spălat cu ciclohexan. După uscare, produsul din titlu este obţinut sub formă de cristale.
RMN 1H: δ (400 MHz; dmso-d6; 300°K): 7,75 (d, 2H, H aromatici, orto O-tosil); 7,6 (d, 2H , H aromatici, orto N-tosil); 7,5 (d, 2H, aromatic Hs, meta O-tosil); 7,3 (d, 2H, H aromatici, meta N-tosil); 7,15-6,9 (m, 4H, H aromatici, tetrahidroizochinolină); 4,4-4,15 (dd, 2H, H alifatici, tetrahidroizochinolină); 4,25 (m, 1H, H alifatic, tetrahidroizochinolină); 4,0-3,8 (2dd, 2H, H alifatici, CH2-O-tosil); 2,7 (2dd, 2H, H alifatici, tetrahidroizochinolină); 2,45 (s, 3H, O-SO2-Ph- CH3); 2,35 (s, 3H, N-SO2-Ph- CH3).
IR: ν: -SO2: 1339-1165 cm-1.
Etapa B: (3R)-3-metil-2-[(4-metilfenil)sulfonil]-1,2,3,4-tetrahidroizochinolină
La o suspensie de 8,15 g (214,8 mmol) de LiAlH4 în 800 ml de metil terţ-butil eter (MTBE) se adaugă 101,2 g de compus ditosil obţinut în Etapa A (214,8 mmol) dizolvat în 200 ml de MTBE. Amestecul este apoi încălzit la 50°C timp de 2 de ore. Acesta este lăsat să se răcească şi este plasat la 0°C, şi apoi se adaugă, prin picurare, 12 ml de soluţie de NaOH 5M. Amestecul se agită la temperatura ambiantă timp de 45 de minute. Solidul astfel obţinut se filtrează şi se spală cu MTBE şi apoi cu diclorometan. După aceasta filtratul se concentrează la sec. Produsul din titlu este apoi obţinut sub formă de solid.
RMN 1H: δ (400 MHz; dmso-d6; 300°K): 7,70 (d, 2H, H aromatici, orto N-tosil); 7,38 (d, 2H, aromatic Hs, meta N-tosil); 7,2-7,0 (m, 4H, H aromatici, tetrahidroizochinolină); 4,4 (m, 2H, H alifatici, tetrahidroizochinolină); 4,3 (m, 1H, H alifatic, tetrahidroizochinolină); 2,85-2,51 (2dd, 2H, H alifatici, tetrahidroizochinolină); 2,35 (s, 3H, N-SO2-Ph- CH3); 0,90 (d, 3H, tetrahidroizochinolină-CH3).
IR : ν: -SO2: 1332-1154 cm-1.
Etapa C: (3R)-3-metil-1,2,3,4-tetrahidroizochinolină
La o soluţie de 31,15 g (103,15 mmol) de compus monotosil, obţinut în Etapa B, în 500 ml de metanol anhidru se adaugă, în porţii, 3,92 g (161 mmol) de aşchii de magneziu. Amestecul se agită în prezenţa ultrasunetelor timp de 96 de ore. Apoi amestecul de reacţie se filtrează şi solidul se spală de mai multe ori cu metanol. După aceasta filtratul se concentrează la sec. După purificare prin cromatografie pe gel de silice (gradient diclormetan/EtOH /NH4OH), produsul din titlu este obţinut sub formă de ulei.
RMN 1H: δ (400 MHz; dmso-d6; 300°K): 7,05 (m, 4H, H aromatici, tetrahidroizochinolină); 3,90 (m, 2H, H alifatici, tetrahidroizochinolin); 2,85 (m, 1H, H alifatic, tetrahidroizochinolină); 2,68-2,4 (2dd, 2H, H alifatici, tetrahidroizochinolină); 1,12 (d, 3H, tetrahidroizochinolină-CH3); 2,9-2,3 (m, larg, 1H, HN (tetrahidroizochinolină)).
IR: ν: -NH: 3248 cm-1.
Etapa D: Clorhidrat de (3R)-3-metil-1,2,3,4-tetrahidroizochinolină
La o soluţie de 14,3 g (97,20 mmol) de compus, obţinut în Etapa C, în 20 ml de etanol anhidru se adaugă, prin picurare, 100 ml de soluţie de HCl 1M în eter. Amestecul se agită la temperatura ambiantă timp de o oră şi apoi se filtrează. Cristalele astfel obţinute se spală cu eter etilic. După uscare, produsul din titlu este obţinut sub formă de cristale.
RMN 1H: δ (400 MHz; dmso-d6; 300°K): 9,57 (m, larg, 2H, NH2 + (tetrahidroizochinolină); 7,22 (m, 4H, H aromatici, tetrahidroizochinolină); 4,27 (s, 2H, H alifatici, tetrahidroizochinolină); 3,52 (m, 1H, H alifatic, tetrahidroizochinolină); 3,03--2,85 (2dd, 2H, H alifatici, tetrahidroizochinolină); 1,39 (d, 3H, tetrahidroizochinolină-CH3).
IR: ν: -NH2 +: 3000-2300 cm-1 ; ν: aromatic -CH: 766 cm-1.
Prepararea 3': (3R)-3-[3-(morfolin-4-il)propil]-1,2,3,4-tetrahidroizochinolină
Etapa A: {(3S)-2-[(4-metilfenil)sulfonil]-1,2,3,4-tetrahidroizochinolină-3-il}metil 4-metilbenzensulfonat
Procedura este identică cu cea din Etapa A a Preparării 2'.
Etapa B: 2-({(3R)-2-[(4-metilfenil)sulfonil]-1,2,3,4-tetrahidroizochinolină-3-il}metil)-3-(morfolin-4-il)-3-oxopropanoat de terţ-butil
La o suspensie de 1 g de NaH (60%) (25,08 mmol) în 30 ml de MTBE se adaugă, prin picurare, o soluţie de 5 g de 3-morfolino-3-oxopropanoat de terţ-butil (21,81 mmol) în 20 ml de MTBE anhidru. Această suspensie se agită la temperatura ambiantă timp de o oră şi apoi compusul obţinut în Etapa A se adaugă sub formă de pudră. Amestecul se agită la 60°C timp de 30 de ore. Se adaugă 100 ml de soluţie apoasă saturată de clorură de amoniu. Soluţia rezultată se extrage cu diclormetan. Faza organică se usucă apoi pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează la sec. După purificare prin cromatografie pe gel de silice (gradient diclormetan/MeOH), produsul preconizat este obţinut sub formă de ulei.
RMN 1H (500 MHz, dmso-d6) δ ppm: 7,63/7,59 (2d, 2 H), 7,3/7,26 (2d, 2 H), 7,13 (m, 2 H), 7,09/6,97 (2t, 2 H), 4,64/4,55/4,36/4,28 (2AB, 2 H), 4,25/4,11 (2m, 1 H), 3,81 (m, 1 H), 3,73-3,48 (m, 4 H), 3,57-3,32 (m, 4 H), 2,51 (m, 2 H), 2,32/2,31 (2s, 3 H), 1,88/1,79 (2m, 2 H), 1,39/1,38 (2s, 9 H).
IR (ATR) cm-1: ν: >C=O: 1731 (ester); ν: >C=O: 1644 (amidă); ν: -SO2 : 1334-1156; ν: >C-O-C<: 1115; γ : >CH-Ar: 815-746-709.
Etapa C: Acidul 2-({(3R)-2-[(4-metilfenil)sulfonil]-1,2,3,4-tetrahidroizochinolină-3-il}metil)-3-(morfolin-4-il)-3-oxopropanoic
La o soluţie de 9,5 g (17,97 mmol) de compus obţinut în Etapa B în 40 ml de dioxan se adaugă, prin picurare, 20 ml de soluţie de HCl 4M în dioxan. Amestecul se agită la temperatura ambiantă timp de 48 ore şi apoi soluţia se concentrează la sec. După uscare, produsul preconizat este obţinut sub formă de ulei.
RMN 1H (400 MHz, dmso-d6) δ ppm: 12,75 (m, 1 H), 7,6 (2*d, 2 H), 7,3 (2*d, 2 H), 7,1/6,95 (2*m, 4 H), 4,7-4,2 (d, 2 H), 4,25/4,12 (2*m, 1 H), 3,9-3,3 (m, 9 H), 2,55 (d, 2 H), 2,3 (2*s, 3 H), 1,8 (t, 2 H).
IR (ATR) cm-1: ν: -OH: 3500 până la 2000; ν: >C=O: 1727 (acid); ν: >C=O: 1634 (amidă); ν: -SO2: 1330-1155.
Etapa D: 3-{(3R)-2-[(4-metilfenil)sulfonil]-1,2,3,4-tetrahidroizochinolină-3-il}-1-(morfolin-4-il)propan-1-onă
La o soluţie de 7,80 g (16,51 mmol) de compus obţinut în Etapa C în 100 ml de DMSO se adaugă 1,16 g (19,83 mmol) de clorură de sodiu solidă (NaCl) şi apoi, prin picurare, 5 ml de apă. Amestecul se agită la 130°C timp de o oră şi apoi soluţia se concentrează până la 3⁄4. Amestecul de reacţie se diluează apoi cu diclormetan şi se spală succesiv cu soluţie apoasă saturată de clorură de litiu şi apoi cu saramură. Faza organică se usucă apoi pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează la sec. După purificare prin cromatografie pe gel de silice (gradient ciclohexan/acetat de etil), produsul preconizat este obţinut sub formă de ulei.
RMN 1H (400 MHz, dmso-d6) δ ppm: 7,65 (d, 2 H), 7,3 (d, 2 H), 7,15/7 (2 m, 4 H), 4,6 (d, 1 H), 4,25 (d, 1 H), 4,2 (m, 1 H), 3,5 (m, 4 H), 3,4 (2 m, 4 H), 2,6 (2 dd, 2 H), 2,35 (s, 3 H), 2,3 (m, 2 H), 1,5 (quad., 2 H).
IR (ATR) cm-1: ν: >C=O: 1639; ν: -SO2: 1331-1156; γ : >CH-Ar: 815-675.
Etapa E: (3R)-2-[(4-metilfenil)sulfonil]-3-[3-(morfolin-4-il)propil]-1,2,3,4-tetrahidroizochinolină
La o soluţie de 6,0 g (14,0 mmol) de compus obţinut în Etapa D în 60 ml de MTBE şi 14 ml de diclormetan se adaugă 1,06 g (28 mmol) de LAH în porţii timp de 5 minute. Amestecul se agită la temperatura ambiantă timp de 15 de ore. Se adaugă, prin picurare, 1,5 ml de apă şi se agită timp de 15 minute. Apoi se adaugă, prin picurare, 1,5 ml de soluţie de hidroxid de sodiu 5M şi se agită timp de 15 minute. Amestecul de reacţie este apoi diluat cu MTBE şi diclormetan. Suspensia se filtrează apoi şi precipitatul se spală cu MTBE şi diclormetan. Faza organică se usucă apoi pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează la sec. După purificare prin cromatografie pe gel de silice (gradient diclormetan/EtOH/NH4OH), produsul preconizat este obţinut sub formă de ulei.
RMN 1H (400 MHz, dmso-d6) δ ppm: 7,68 (d, 2 H), 7,32 (d, 2 H), 7,1 (vârf fără rezoluţie, 4 H), 4,65/4,23 (AB, 2 H), 4,2 (m, 1 H), 3,55 (t, 4 H), 2,7/2,6 (ABX, 2 H), 2,35 (s, 3 H), 2,25 (t, 4 H), 2,2 (t, 2 H), 1,4/1,3 (2m, 4 H).
IR (ATR) cm-1: ν: -SO2: 1333-1158.
Etapa F: (3R)-3-[3-(morfolin-4-il)propil]-1,2,3,4-tetrahidroizochinolină
La o soluţie de 1,50 g (3,62 mmol) de compus obţinut în Etapa E în 20 ml de metanol anhidru se adaugă, în porţii, 2,0 g (82,3 mmol) de aşchii de magneziu. Amestecul se agită în prezenţa ultrasunetelor timp de 96 de ore. Apoi amestecul de reacţie se filtrează, solidul se spală de mai multe ori cu metanol, iar filtratul se concentrează la sec. După purificare prin cromatografie pe gel de silice (gradient diclormetan/EtOH/NH4OH), produsul preconizat este obţinut sub formă de ulei.
RMN 1H (400 MHz, dmso-d6) δ ppm: 7,3 (d, 2 H), 7,1 (t, 2 H), 7,1 (d+t, 3 H), 7 (d, 2 H), 3,9 (s, 2 H), 3,55 (t, 4 H), 2,75 (m, 1 H), 2,72/2,45 (dd, 2 H), 2,35 (t, 4 H), 2,25 (t, 2 H), 1,6 (m, 2 H), 1,45 (m, 2 H).
IR (ATR) cm-1: ν: >NH2+/NH+: 3500-2300; ν: >C-O-C<: 1115.
Spectrometria de masă de înaltă rezoluţie (ESI+-/FIA/HR):
Formula empirică: C16 H24 N2 O,
[M+H]+ calculat 261,1961,
[M+H]+ măsurat: 261,1959.
Prepararea 4': (3R)-3-[4-(morfolinilmetil)-1,2,3,4-tetrahidroizochinolină
Procedura este n conformitate cu procedeul din Prepararea 1', înlocuind acidul (3S)-2-[(benziloxi)carbonil]-1,2,3,4-tetrahidro-3-izochinolincarboxilic folosit în Etapa A cu acidul (3R)-2-[(benziloxi)carbonil]-1,2,3,4-tetrahidro-3-izochinolincarboxilic.
Prepararea 1'': 4-{[terţ-butil(dimetil)silil]oxi}-N-fenilanilină
La o soluţie de 12 g de 4-anilinofenol (64,7 mmol) în 200 ml de acetonitril se adaugă, la temperatura ambiantă, 6,7 g de imidazol (97,05 mmol) şi 11,7 g de terţ-butil(cloro)dimetilsilan (77,64 mmol). Amestecul se agită la 70°C timp de 4 de ore. Apoi amestecul de reacţie se toarnă în apă şi se extrage cu eter. Faza organică se usucă apoi pe sulfat de magneziu, ulterior se filtrează şi se evaporă la sec. Produsul brut astfel obţinut este purificat prin cromatografie pe gel de silice (gradient eter de petrol/diclormethan). Produsul din titlu este obţinut sub formă de pudră.
RMN 1H: δ (400 MHz; dmso-d6; 300K): 7,84 (s, 1H NH); 7,17 (t, 2H anilină); 6,98 (d, 2H fenoxi); 6,94 (d, 2H anilină); 6,76 (d, 2H fenoxi); 6,72 (t, 1H anilină); 0,95 (s, 9H terţ-butil); 0,15 (s, 6H dimetil).
IR: ν: >NH: 3403 cm-1; ν:>Ar: 1597 cm-1.
Prepararea 2'': N-(4-{[terţ-butil(dimetil)silil]oxi}fenil)-1-metil-1H-indol-5-amină
Procedura este în conformitate cu procedeul din Prepararea 5'', înlocuind 4-bromo-1-metil-1H-pirazol utilizat în Etapa B cu 5-bromo-1-metil-1H-indol.
Prepararea 3'': N-(4-{[terţ-butil(dimetil)silil]oxi}fenil)-1-metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-5-amină
Procedura este în conformitate cu procedeul din Prepararea 5'', înlocuind 4-bromo-1-metil-1H-pirazol utilizat în Etapa B cu 5-bromo-1-metil-1H-pirolo[2,3-b]piridină (obţinută în conformitate cu un protocol din literatură: Heterocycles, 60(4), 865, 2003).
IR: ν: -NH-: 3278 cm-1; ν: fracţiuni aromatice -C=C-: 1605 cm-1.
Prepararea 4'': N-(4-{[terţ-butil(dimetil)silil]oxi}fenil)piridin-4-amină
Procedura este în conformitate cu procedeul din Prepararea 5'', înlocuind 4-bromo-1-metil-1H-pirazol utilizat în Etapa B cu 4-bromopiridină.
IR: ν -NH-: 3200 şi 2500 cm-1; ν -Si-O-: 902 cm-1; ν -Si-C-: 820 cm-1.
Prepararea 5'': N-(4-{[terţ-butil(dimetil)silil]oxi}fenil)-1-metil-1H-pirazol-5-amină
Etapa A: 4-{[terţ-butil(dimetil)silil]oxi}anilină
Compusul din titlu este obţinut pornind de la 4-aminofenol în THF în prezenţa imidazolului şi terţ-butil(cloro)dimetilsilanului în conformitate cu protocolul descris în literatură (Sarah Knaggs et al. New prodrugs derived from 6-aminodopamine and 4-aminophenol as candidates for melanocyte-directed enzyme prodrug therapy (MDEPT). Organic & Biomolecular Chemistry, 2005, vol. 3, nr. 21, p. 4002-4010).
RMN 1H: δ (400 MHz; dmso-d6; 300K): 6,45-6,55 (dd, 4H, H aromatici); 4,60 (m, 2H, NH2-Ph); 0,90 (s, 9H, Si (CH2)2CH(CH3)2); 0,10 (s, 6H, Si (CH2)2CH(CH3)2).
IR: ν: -NH2 +: 3300-3400 cm-1.
Etapa B: N-[4-[terţ-butil(dimetil)silil]oxifenil]-1-metil-pirazol-4-amină
La o soluţie de 30,8 g (0,137 mol) de compus din Etapa A în 525 ml de toluen anhidru se adaugă succesiv 29,8 g de terţ-butilat de sodiu (0,310 mol), 4,55 g de Pd2(dba)3 (denumit, de asemenea, tris(dibenzilidenacetonă)dipaladiu (0)) (4,96 mmol), 4,81 g de 2-di-terţ-butilfosfino-2',4',6'-tri-izopropil-1,1'-bifenil (9,91 mmol) şi 12,8 ml de 4-bromo-1-metil-1H-pirazol (0,124 mol). Amestecul este degazat sub argon timp de 30 minute şi apoi se încălzeşte la reflux timp de 3 ore. Se lasă să se răcească. Amestecul de reacţie se concentrează la sec şi apoi este prelevat în diclormetan, se filtrează pe celită şi apoi se concentrează din nou la sec. Reziduul este apoi purificat prin cromatografie pe gel de silice (gradient CH2Cl2/AcOEt) pentru a se obţine produsul preconizat sub formă de solid.
RMN 1H: δ (400 MHz; dmso-d6; 300K): 7,55 (s, 1H, pirazol); 7,23 (s, 1H, pirazol); 7,18 (s larg, 1H, NH2-Ph); 6,64 (m, 4H, H aromatici); 3,77 (s, 3H, CH3-pirazol); 0,90 (s, 9H, Si (CH2)2CH(CH3)2); 0,12 (s, 6H, Si (CH2)2CH(CH3)2).
IR: ν -NH+: 3275 cm-1; ν Ar şi C=N: 1577 şi 1502 cm-1; ν -Si-C-: 1236 cm-1; ν -Si-O-: 898 cm-1; ν -Si-C-: 828, 774 cm-1.
Prepararea 6'': N-{4-[(terţ-butildimetilsilil)oxi]fenil}-1-trideuteriometil-1H-pirazol-4-amină
Etapa A: 4-bromo-1-trideuteriometil-1H-pirazol
Se adaugă 4-bromo-1H-pirazol (9,05 g, 61,6 mmol), în porţii, la o suspensie de hidrură de sodiu (60% în ulei) (2,83 g, 70,8 mmol) în tetrahidrofuran (90 ml) răcită într-o baie de gheaţă. După ce baia de gheaţă a fost înlăturată, soluţia se agită la temperatura ambiantă timp de 0,5 ore. Aceasta este din nou răcită într-o baie de gheaţă şi se adaugă iodmetan-d3 (5,0 ml, 80,3 mmol). Soluţia se agită la temperatura ambiantă timp de 19 de ore. Ulterior suspensia este concentrată. Reziduul de evaporare este triturat cu terţ-butil metil eter (90 ml) şi se filtrează. Filtratul este concentrat sub vid pentru a se obţine compusul preconizat sub formă de ulei.
RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 7,37 (s, 1 H), 7,43 (s, 1 H).
Etapa B: N-{4-[(terţ-butildimetilsilil)oxi]fenil}-1-trideuteriometil-1H-pirazol-4-amină
Se adaugă 4-bromo-1-trideuteriometil-1H-pirazol (9,6 g, 58,5 mmol), 4-[(terţ-butildimetilsilil)oxi]anilină (14,4 g, 64,6 mmol) şi toluen (150 ml) într-un balon cu trei gâturi de 500 ml. Soluţia este degazată cu azot timp de 15 minute, şi apoi se adaugă succesiv terţ-butilat de sodiu (11,4 g, 0,12 mol), 2-di-terţ-butilfosfino-2',4',6'-triizopropilbifenil (0,77 g, 1,81 mmol) şi tris(dibenzilidenacetonă)dipaladiu(0) (1,64 g, 1,79 mmol). Suspensia este încălzită la 85°C timp de 1,5 ore. Amestecul de reacţie se răceşte apoi până la temperatura ambiantă şi se adaugă apă (270 ml). Amestecul se agită timp de 30 minute. Apoi se adaugă celită (30 g) şi suspensia se filtrează pe un strat de celită. Fazele filtratului sunt separate şi faza apoasă este extrasă cu acetat de etil (3 x 200 ml). Fazele organice combinate sunt uscate pe sulfat de sodiu şi sunt filtrate. Produsul este purificat prin cromatografie pe gel de silice (gradient acetat de etil/ heptan). Produsul obţinut este recristalizat din heptan (80 ml) pentru a obţine compusul preconizat.
RMN 1H(400 MHz, CDCl3) δ ppm: 0,16 (s, 6 H), 0,97 (s, 9 H), 4,92 (s, 1 H), 6,61 - 6,73 (m, 4 H), 7,25 (s, 1 H), 7,36 (s, 1 H).
RMN 13C (100 MHz, CDCl3) δ ppm: -4,37, 18,28, 25,86, 38,67 (sept., 1JC-D = 21,0 Hz), 115,12, 120,73, 123,76, 126,52, 134,74, 141,07, 148,43.
MS (ESI): [M+H]+ 307,08.
Prepararea 7'': 4-({4-[(terţ-butildimetilsilil)oxi]fenil}amino)-1,5-dimetil-1H-pirol-2-carbonitril
Etapa A: 4-bromo-1,5-dimetil-1H-pirol-2-carbonitril
Se adaugă, prin picurare, o soluţie de brom (6,58 ml, 0,13 mol) în acid acetic (60 ml) cu ajutorul unei pâlnii picurătoare, la o soluţie de 1,5-dimetil-1H-pirol-2-carbonitril (15,0 g, 0,12 mol) în acid acetic (300 ml). Amestecul se agită la temperatura ambiantă timp de 24 de ore. Apoi amestecul de reacţie se toarnă într-un pahar de laborator care conţine 300 ml de apă. Solidul format este filtrat şi clătit cu apă. Apoi acesta se dizolvă în diclormetan (300 ml) şi faza organică se spală cu saramură, se usucă pe sulfat de sodiu, se filtrează şi se concentrează sub vid pentru a se obţine produsul preconizat sub formă de solid.
RMN 1H (CDCl3) δ ppm: 2,25 (s, 3 H), 3,67 (s, 3 H), 6,74 (s, 1 H).
Etapa B: 4-({4-[(terţ-butildimetilsilil)oxi]fenil}amino)-1,5-dimetil-1H-pirol-2-carbonitril
O soluţie de compus din etapa precedentă (1,5 g, 7,53 mmol), 4-[(terţ-butildimetilsilil) oxi]anilină (2,02 g, 9,04 mmol), terţ-butilat de sodiu (1,45 g, 15,06 mmol) şi 2 di-terţ-butilfosfino-2',4',6'-triizopropilbifenil (0,13 g, 0,30 mmol) în toluen (20 ml) este purjată cu azot. Se adaugă tris(dibenzilidenacetonă)dipaladiu(0) (0,28 g, 0,30 mmol), şi apoi amestecul de reacţie este încălzit la 90°C până la sfârşitul reacţiei (monitorizată prin TLC). Încălzirea se opreşte şi se lasă ca amestecul să revină la temperatura ambiantă. Se adaugă apă (75 ml) şi amestecul este extras cu acetat de etil (3 x 75 ml). Fazele organice combinate sunt spălate cu saramură şi apoi sunt concentrate. Produsul brut este purificat prin cromatografie pe gel de silice (gradient acetat de etil/ heptan). Produsul astfel obţinut este dizolvat în heptan în stare caldă şi se lasă să se precipite, prin agitare, la temperatura ambiantă, şi apoi la 0°C. Solidul este filtrat şi procesul se repetă pe filtrat pentru a se obţine compusul preconizat sub formă de solid.
RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 0,15 (s, 6 H), 0,97 (s, 9 H), 2,13 (s, 3 H), 3,66 (s, 3 H), 4,68 (br, s, 1 H), 6,49 (d, J = 8,5 Hz, 2 H), 6,64 (s, 1 H), 6,66 (d, J = 8,7 Hz, 2 H).
RMN 13C (100 MHz, CDCl3) δ ppm: 4,34, 9,72, 18,30, 25,88, 32,94, 101,27, 114,37, 114,70, 116,41, 120,73, 124,52, 131,23, 141,54, 148,27.
MS (ESI+): [M+H]+ măsurat: 342,3.
Prepararea 8'': 4-[(4-{[terţ-butil(dimetil)silil]oxi}fenil)amino]-1-metil-1H-pirol-2-carbonitril
Etapa A: 1-metil-1H-pirol-2-carbonitril
Se adaugă N,N-dimetilformamidă (3 ml) şi 1,4-diazabiciclo[2,2,2]octan (0,49 g, 4,3 mmol) la o soluţie de pirol-2-carbonitril (4 g, 43,4 mmol) în dimetil carbonat (56 ml). Soluţia se agită la 90°C timp de 15 ore, şi apoi se încălzeşte la 110°C timp de 8 ore. Amestecul se răceşte până la temperatura ambiantă, apoi se adaugă acetat de etil (80 ml). Fazele sunt separate şi faza organică este spălată cu apă (2 x 80 ml) şi soluţie apoasă de acid clorhidric 1M (1 x 80 ml). Fazele apoase combinate sunt extrase din nou cu acetat de etil (1 x 80 ml). Fazele organice combinate se spală cu saramură (1 x 80 ml), se usucă pe sulfat de magneziu, se filtrează şi se concentrează sub vid pentru a se obţine produsul preconizat sub formă de lichid.
RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 3,78 (m, 2 H), 6,12 - 6,18 (m, 1 H), 6,74 - 6,82 (m, 1 H).
Etapa B: 4-bromo-1-metil-1H-pirol-2-carbonitril
Se adaugă N-bromosuccinimidă (6,2 g, 34,9 mmol) la o soluţie de 1-metil-1H-pirol-2-carbonitril (3,7 g, 34,9 mmol) în N,N-dimetilformamidă (150 ml). Soluţia se agită timp de 15 ore la temperatura ambiantă. Se adaugă o altă cantitate de N-bromosuccinimidă (2,0 g, 11 mmol) şi amestecul se agită timp de 3 ore. Produsul este purificat prin cromatografie pe gel de silice (gradient acetatul de etil/ heptanul) pentru a se obţine compusul preconizat sub formă de solid.
RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 3,77 (s, 3 H), 6,75 (d, J = 1,7 Hz, 1 H), 6,80 (d, J = 1,7 Hz, 1 H).
Etapa C: 4-[(terţ-butildimetilsilil)oxi]fenil}amino)-1-metil-1H-pirol-2-carbonitril
Azotul se barbotează într-o soluţie de 4-bromo-1-metil-1H-pirol-2-carbonitril (2,82 g, 15,2 mmol) şi 4-[(terţ-butildimetilsilil)oxi]anilină (4,08 g, 18,3 mmol) în toluen (55 ml) timp de 5 minute. Apoi la amestecul de reacţie se adaugă terţ-butilat de sodiu (2,92 g, 30,4 mmol), tris(dibenzilidenacetonă)dipaladiu(0) (556 mg, 0,6 mmol) şi 2-di-terţ-butilfosfino-2',4',6'-triizopropilbifenil (255 mg, 0,6 mmol). Amestecul se agită timp de 1 oră la 80°C sub azot. Apoi suspensia se răceşte până temperatura ambiantă şi se filtrează pe celită. Ulterior turta de celită se clăteşte cu acetat de etil. Filtratul se spală cu apă şi apoi cu saramură. Faza organică se usucă pe sulfat de magneziu, se filtrează şi se concentrează sub vid. Produsul este purificat de două ori prin cromatografie pe gel de silice (gradient (AcOEt/heptan), şi apoi prin triturare în heptan pentru a se obţine produsul preconizat sub formă de solid.
RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 0,16 (s, 6 H), 0,97 (s, 9 H), 3,73 (s, 3 H), 6,57 (d, J = 1,9 Hz, 1 H), 6,64 - 6,66 (m, 1 H), 6,70 (s, 4 H).
RMN 13C (100 MHz, CDCl3) δ ppm: -4,48, 18,17, 25,72, 35,46, 103,01, 113,56, 113,69, 115,92, 119,55, 120,67, 129,04, 139,94, 148,85.
MS (ESI+): [M+H]+ 328,25.
Aminele NHR3R4 în care R3 şi R4, independent unul de celălalt, reprezintă o grupare aril sau heteroaril, sunt obţinute în conformitate cu procedeele descrise în literatură (David S. Surry şi Stephen L. Buchwald. Dialkylbiaryl phosphines in Pd-catalyzed amination: a user's guide. Chemical Science, 2011, vol. 2, nr. 1, p. 27-50; Mark D. Charles et al. Efficient Pd-Catalyzed Amination of Heteroaryl Halides. Organic Letters, 2005, vol. 7, nr. 18, p. 3965-3968). Reacţia de protecţie a funcţiei hidroxi a 4-anilinofenol descrisă în Prepararea 1' poate fi aplicată diverselor amine secundare NHR3R4 (precum sunt definite mai sus), având una sau mai multe funcţii hidroxi, atunci când acestea sunt disponibile pe piaţă. Alternativ, aminele secundare având, cel puţin, un substituent hidroxi pot fi sintetizate direct sub o formă protejată, şi anume pornind de la reactivii a căror funcţie hidroxi a fost protejată în prealabil. Printre grupările protectoare, terţ-butil(dimetil)sililoxi şi benziloxi sunt preferate în mod special.
Printre aminele NHR3R4 având un substituent hidroxi, care sunt utilizate pentru sintetizarea compuşilor invenţiei, pot fi menţionate: 4-(4-toluidino)fenol, 4-(4-cloroanilino)fenol, 4-(3-fluoro-4-metilanilino)fenol, 4-[4-(trifluorometoxi)anilino]fenol, 4-[4-hidroxianilino]fenol, {4-[(1-metil-1H-indol-6-il)amino]fenil}metanol, 4-(2,3-dihidro-1H-indol-6-ilamino)fenol, 4-[(1-metil-2,3-dihidro-1H-indol-6-il)amino]fenol, 4-[(1-metil-1H-indol-6-il)amino]fenol, 4-[(1-metil-1H-indol-6-il)amino]ciclohexanol, 4-[(1-metil-1,2,3,4-tetrahidro-6-chinolinil)amino]fenol, 4-[(4-metil-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoxazin-7-il)amino]fenol, 4-[4-(dietilamino)anilino]fenol, 4-(2,3-dihidro-1H-inden-5-ilamino)fenol, 4-[(1-metil-1H-indazol-5-il)amino]fenol, 4-[(1'-metil-1',2'-dihidrospiro[ciclopropan-1,3'-indol]-5'-il)amino]fenol, 4-[(1,3,3-trimetil-2,3-dihidro-1H-indol-5-il)amino]fenol, 4-[4-metoxi-3-(trifluorometil)anilino]fenol, 4-[4-(metilsulfanil)-3-(trifluorometil)anilino]fenol, 2-fluoro-4-[(1-metil-1H-indol-5-il)amino]fenol, 4-[(1-etil-1H-indol-5-il)amino]fenol, 4-[(1-etil-2,3-dihidro-1H-indol-5-il)amino]fenol, 4-[(1-isopropil-2,3-dihidro-1H-indol-5-il)amino]fenol, 4-(butilamino)fenol, 3-[(1-metil-1H-indol-5-il)amino]-1-propanol, 4-[(1-metil-1H-indol-5-il)amino]-1-butanol, 4-[(3-fluoro-4-metilfenil)amino]fenol, 4-[(3-cloro-4-metilfenil)amino]fenol, 4-[(4-fluorofenil)amino]fenol, 4-[(1-metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-5-il)amino]fenol, 4-[(4-fluorofenil)amino]fenol, 4-[(2-fluorofenil)amino]fenol, 4-[(3-fluorofenil)amino]fenol, 4-[(2,4-difluorofenil)amino]fenol, 4-[(3,4-difluorofenil)amino]fenol, 3-[(4-hidroxifenil)amino]benzonitril, 4-[(3-metoxifenil)amino]fenol, 4-[(3,5-difluorofenil)amino]fenol, 4-[(3-metilfenil)amino]fenol, 4-[(4-hidroxifenil)amino]benzonitril, 4-[(3-clorofenil)amino]fenol, 4-(pirimidin-2-ilamino)fenol, 4-[(ciclobutilmetil)amino]fenol, 2-[(4-hidroxifenil)amino]benzonitril, 4-{[(1-metil-1H-pirazol-4-il)metil]amino}fenol, 4-[(ciclopropilmetil)amino]fenol, 4-{[(1-metil-1H-pirazol-3-il)metil]amino}fenol, 4-(but-2-in-1-ilamino)fenol, 4-(pirazin-2-ilamino)fenol, 4-(piridin-2-ilamino)fenol, 4-(piridazin-3-ilamino)fenol, 4-(pirimidin-5-ilamino)fenol, 4-(piridin-3-ilamino)fenol, 4-[(3,5-difluoro-4-metoxifenil)amino]fenol, 4-(piridin-4-ilamino)fenol, 4-[(3-fluoro-4-metoxifenil)amino]fenol, 2-(fenilamino)pirimidin-5-ol, 5-[(4-hidroxifenil)amino]-2-metoxibenzonitril şi 4-{[3-(trifluorometil)fenil]amino}fenol.
Funcţia(ile) hidroxi ale aminelor secundare enumerate mai sus este (sunt) protejată(e) în prealabil de o grupare protectoare adecvată înainte de orice cuplare la un derivat de acid al compusului cu formula (VII) astfel cum este definit în procedeul general precedent.
Exemplul 1. 4-[{[3-(6-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)-5,6,7,8-tetrahidroindolizin-1-il]carbonil}(fenil)amino]fenil fosfat disodic
Etapa A: 3-{6-[((3S)-3-(4-morfolinilmetil)-3,4-dihidro-2(1H)-isochinolinil)carbonil]-1,3-benzodioxol-5-il}-5,6,7,8-tetrahidro-1-indolizină-carboxilat de metil
La o soluţie de 2 g de compus din Prepararea 1 (5,83 mmol) în 20 ml de diclormetan se adaugă, la temperatura ambiantă, 5,5 ml de N,N,N-trietilamină (6,96 mmol), 2,12 g de compus din Prepararea 1' (6,96 mmol) şi apoi 0,94 g de hidroxibenzotriazol (HOBT) şi 1,34 g de 1-etil-3-(3'-dimetilaminopropil)-carbodiimidă (EDC) (6,96 mmol). Amestecul de reacţie se agită apoi la temperatura ambiantă timp de o noapte şi apoi acesta se toarnă în soluţie apoasă saturată de clorură de amoniu şi se extrage cu acetat de etil. Faza organică se usucă apoi pe sulfat de magneziu, şi apoi se filtrează şi se evaporă la sec. Produsul brut astfel obţinut este purificat prin cromatografie pe gel de silice (gradient heptanl/AcOEt). Produsul din titlu este obţinut sub formă de ulei.
RMN 1H: δ (500 MHz; dmso-d6; 300°K): 7,2-6,9 (m, 4H, H aromatici); 7,04-7,03-7,00 (m, 1H, H aromatic); 6,85 (m, 1H, H aromatic); 6,35-6,26-6,06 (m, 1H, H tetrahidroindolizină); 6,15-6,12 (m, 2H, H metilenedioxi); 5,06-4,84 (m, 1H, H dihidroizochinolină); 4,86-4,17 (m, 2H, H dihidroizochinolină); 3,65-3,6-3,55 (m, 3H, H ester metilic); 3,43-4,26 (m, 2H, H tetrahidroindolizină); 3,58-3,5 (m, 4H, H morfolină); 2,37-3,05 (m, 4H, 2H dihidroizochinolină, 2H tetrahidroindolizină); 1,68-2,56 (m, 4H, H morfolină); 1,4-2,0 (m, 4H, H tetrahidroindolizină).
IR: ν: >C=O 1695 cm-1 ester; ν: >C=O 1625 cm-1 amidă; ν: >C-O-C< 1214-1176-1115 cm-1; >CH-Ar 772-744 cm-1.
Etapa B: 3-[6-[(3S)-3-(morfolinometil)-3,4-dihidro-1H-izochinolin-2-carbonil]-1,3-benzodioxol-5-il]-5,6,7,8-tetrahidro-1-indolizină-carboxilat de litiu
La o soluţie de 4,6 g de compus din Etapa A (8,26 mmol) în 24 ml de dioxan se adaugă o soluţie de hidroxid de litiu (675 mg, 16,1 mmol). Amestecul se plasează într-un cuptor cu microunde la 140W, 100°C pentru o perioadă de 2 ore 30 de minute. Amestecul de reacţie se filtrează apoi şi se evaporă. Solidul astfel obţinut se usucă la 40°C într-un cuptor în prezenţa P2O5.
RMN 1H: δ (400 MHz; dmso-d6; 353°K): 6,7-7,15 (vârf fără rezoluţie, 6H, H aromatici); 6,21 (s, 1H, H aromatic); 6,03 (s, 2H, H metilendioxi); 4,0-5,0 (vârf fără rezoluţie, 3H dihidroizochinolină); 3,4-3,6 (vârf fără rezoluţie, 3H tetrahidroindolizină, 3H morfolină); 2,5-3,1 (vârf fără rezoluţie, 4H, 2H tetrahidroindolizină, 2H morfolină); 1,5-2,4 (vârf fără rezoluţie, 10H morfolină).
IR: ν :>C=O larg 1567 cm-1 acetat ; ν : 1236 cm-1.
Etapa C: N-(4-{[terţ-butil(dimetil)silil]oxi}fenil)-3-{6-[((3S)-3-(4-mofolinilmetil)-3,4-dihidro-2(1H)-izochinolinil)carbonil]-1,3-benzodioxol-5-il}-N-fenil-5,6,7,8-tetrahidro-1-indolizină carboxamidă
La o soluţie de 2,6 g compus din Etapa B (4,73 mmol) în 47 ml de diclormetan se adaugă, prin picurare, 1,2 ml de clorură de oxalil (14,2 mmol) la 0°C. Amestecul de reacţie se agită la temperatura ambiantă timp de 11 ore şi apoi este co-evaporat de mai multe ori cu diclormetan. Produsul astfel obţinut se pune în suspensie în 37 ml de diclormetan şi apoi se adaugă la o soluţie de 2,1 g de compus obţinut în Prepararea 1'' (7,1 mmol) în 10 ml de diclormetan în prezenţa a 0,6 ml de piridină (7,1 mmol). Amestecul se agită la temperatura ambiantă timp de o noapte.
Amestecul de reacţie este concentrat şi purificat prin cromatografie pe gel de silice (gradient diclormetan/metanol). Produsul din titlul este obţinut sub formă de spumă.
RMN 1H: δ (500MHz; dmso-d6; 300°K): 6,9-7,3 (9H, H aromatici); 6,88 (2H, H aromatici); 6,72-6,87 (2H, H aromatici); 6,64 (2H, H aromatici); 6,13 (2H metilendioxi); 5,05-4,74 (1H dihidroizochinolină); 4,25-4,13 (2H dihidroizochinolină); 3,44-3,7 (4H morfolină); 3,62-3,52 (2H tetrahidroindolizină); 3,0-2,6 (4H, 2H tetrahidroindolizină, 2H dihidroizochinolină); 2,54-1,94 (6H morfolină); 1,91-1,53 (4H tetrahidroindolizină); 0,92 (9H terţ-butil); 0,17 (6H dimetil).
IR: ν:>C=O: 1632 cm-1; ν: >C-O-C< : 1237 cm-1; ν: -Si-O-C-: 1035 cm-1; -Si-C-: 910 cm-1; >CH-Ar: 806 cm-1.
Etapa D: Clorhidrat de N-(4-hidroxifenil)-3-{6-[((3S)-3-(4-morfolinilmetil)-3,4-dihidro-2(1H)-izochinolinil)carbonil]-1,3-benzodioxol-5-il}-N-fenil-5,6,7,8-tetrahidro-1-indolizină carboxamidă
La o soluţie de 1,9 g de compus obţinut în Etapa C (2,3 mmol) în 4 ml de metanol se adaugă 0,646 g (11,5 mmol) de hidroxid de potasiu dizolvat în 8 ml de metanol. Amestecul se agită la temperatura ambiantă timp de 30 de minute. Amestecul de reacţie este apoi diluat cu diclormetan şi spălat succesiv cu soluţie de HCl 1M, soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi apoi cu saramură, până la obţinerea unui pH neutru. Faza organică se usucă apoi pe sulfat de magneziu, se filtrează şi se evaporă. Produsul brut astfel obţinut este purificat prin cromatografie pe gel de silice (gradient diclormetan/metanol). Solidul este apoi dizolvat în diclormetan, şi se adaugă 2 ml de HCl eteric 1M. Amestecul se agită la timp de 1 oră şi apoi se evaporă la sec. Clorhidratul astfel obţinut este dizolvat într-un amestec de apă/acetonitril până la dizolvarea completă, şi apoi este liofilizat.
Microanaliza elementară: (%, teoretică: măsurată)
%C=69,11:68,95; %H=5,8:5,46; %N=7,5:7,51; %Cl=4,74:4,48.
Rotaţia optică: (α) D 20 = + 50.8° (c = 9 mg/mL, MeOH).
Etapa E: 4-[{[3-(6-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)-5,6,7,8-tetrahidroindolizin-1-il]carbonil}(fenil)amino]fenil fosfat de dibenzil
La o suspensie de 82 mg de hidrură de sodiu (2,06 mmol) în 10 ml de THF anhidru se adaugă, în porţii, şi la 0°C, 700 mg de compus din Etapa D. După agitare timp de 30 minute la 0°C şi timp de 30 minute la temperatura ambiantă, se adaugă pirofosfat de tetrabenzil la 0°C şi amestecul de reacţie se agită timp de o noapte la temperatura ambiantă. După evaporarea solventului, produsul de reacţie brut este diluat cu diclormetan (30 ml), spălat cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi apoi cu saramură. Faza organică este apoi uscată pe MgSO4, filtrată, concentrată la sec şi purificată prin cromatografia pe gel de silice (gradient CH2Cl2/MeOH). Produsul din titlu este apoi obţinut sub formă de solid.
RMN 1H: δ (500 MHz; dmso-d6; 300K): 7,34 (m, 10H, fenil); 7,30-6,71 (m, 15H, aril); 6,06 (s, 1H, metilendioxi); 5,30-4,97 (m, 1H, pirol); 5,11 (m, 4H, benzil): 5,03-3,64 (m, 1H, C terţiar THIQ); 4,91-4,09 (m, 2H, C secundar THIQ); 3,99-3,48 (m, 2H, C secundar THIQ); 3,54-3,44 (m, 4H, morfolină); 2,89-2,65 (m, 3H, C secundar THIQ); 2,51-1,87 (m, 4H, C secundar THID); 2,36-1,85 (m, 2H, C secundar THIQ); 1,91-1,45 (m, 4H, C secundar THID).
Etapa F: 4-[{[3-(6-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)-5,6,7,8-tetrahidroindolizin-1-il]carbonil}(fenil)amino]fenil fosfat disodic
Se adaugă 50 mg de Pd(OH)2 la o soluţie de produs obţinut în Etapa E (505 mg; 0,52 mmol) în metanol (10 ml), şi apoi amestecul de reacţie este plasat sub atmosferă de hidrogen (1 bar) timp de 5 ore. După filtrarea catalizatorului şi concentrarea la sec, produsul de reacţie brut este dizolvat în metanol (5 ml) şi tratat cu 0,95 ml de soluţie de hidroxid de sodiu 1M. Solvenţii sunt apoi evaporaţi şi produsul de reacţie brut este purificat prin cromatografie pe o fază OASIS® (gradient acetonitril /H2O) pentru a se obţine un solid de culoare albă.
Microanaliza elementară:
%C %H %N %Na Calculat 61,87 4,95 6,71 5,51 Constatat 61,45 4,46 6,61 5,38
IR: ν: -C=O: 1628 cm-1; ν: C-O-C: 1234 cm-1; ν: P=O: 115 cm-1; ν: P-O: 985 cm-1; ν: CH-Ar: 876 cm-1.
Spectrometria de masă de înaltă rezoluţie (ESI+):
Formula empirică: C43 H41 N4 Na2 O9 P
[M+H]+ calculat: 835,2479
[M+H]+ măsurat: 835,2467.
Exemplul 2. 4-[{[3-(6-{[(3R)-3-metil-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)-5,6,7,8-tetrahidroindolizin-1-il]carbonil}(fenil)amino]fenil fosfat disodic
Etapa A: N-(4-hidroxifenil)-3-(6-{[(3R)-3-metil-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)-N-fenil-5,6,7,8-tetrahidroindolizină-1-carboxamidă
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele A-D din Exemplul 1 înlocuind produsul din Prepararea 1' în Etapa A cu cel din Prepararea 2', înţelegându-se că produsul astfel obţinut nu este supus unei etape de transformare în sare în prezenţa acidului clorhidric în eter.
Microanaliza elementară: (%, teoretică: măsurată)
%C=74,86:74,88; %H=5,64:5,31; %N=6,72:6,78
Etapa B: 4-[{[3-(6-{[(3R)-3-metil-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)-5,6,7,8-tetrahidroindolizin-1-il]carbonil}(fenil)amino]fenil fosfat disodic
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele E şi F din Exemplul 1.
Spectrometria de masă de înaltă rezoluţie (ESI+):
Formula empirică: C39H36N3O8P
[M+H]+ calculat: 706,2313
[M+H]+ măsurat: 706,2324
Exemplul 3. 4-[(1-metil-1H-indol-5-il){[3-(2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-5,6,7,8-tetrahidroindolizin-1-il]carbonil}amino]fenil fosfat disodic
Etapa A: Clorhidrat de 3-{5-cloro-2-[((3S)-3-(4-morfolinilmetil)-3,4-dihidro-2(1H)-izochinolinil)carbonil]fenil}-N-(4-hidroxifenil)-N-(1-metil-1H-indol-5-il)-5,6,7,8-tetrahidro-1-indolizină carboxamidă
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele A-D din Exemplul 1 înlocuind, pe de o parte, compusul din Prepararea 1 utilizat în Etapa A cu compusul din Prepararea 2 şi, pe de altă parte, compusul din Prepararea 1'' utilizat în Etapa C cu cel din Prepararea 2''.
Microanaliza elementară:
%C %H %N %Cl- Calculat 68,04 5,72 8,82 4,91 Constatat 67,84 5,46 8,64 5,21
Rotaţia optică: (α) D 20 = + 55.9° (c = 7 mg/mL, MeOH).
Etapa B: 4-[(1-metil-1H-indol-5-il){[3-(2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-5,6,7,8-tetrahidroindolizin-1-il]carbonil}amino]fenil fosfat disodic
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele E şi F din Exemplul 1.
Spectrometria de masă de înaltă rezoluţie (ESI+):
Formula empirică: C45H44N5Na2O7P
[M-2Na+3H]+ calculat: 800,3208
[M-2Na+3H]+ măsurat: 800,3211
Exemplul 4. 4-[{[3-(6-{[(3R)-3-metil-3,4-dihidroizochinolin-2(1H-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)indolizin-1-il]carbonil}(1-metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-5-il)amino]fenil fosfat disodic
Etapa A: Clorhidrat de N-(4-hidroxifenil)-3-(6-{[(3R)-3-metil-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)-N-(1-metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-5-il)indolizină-1-carboxamidă
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele A-D din Exemplul 1 înlocuind, pe de o parte, compuşii din Preparările 1 şi 1' utilizaţi în Etapa A cu compuşii din Preparările 3 şi 2' şi, pe de altă parte, compusul din Prepararea 1'' utilizat în Etapa C cu cel din Prepararea 3''.
Microanaliza elementară: (%, teoretică: măsurată)
%C=69,14:70,09; %H=4,81:4,55; %N=9,83:10,09; %Cl=4,98:3,26.
Etapa B: 4-[{[3-(6-{[(3R)-3-metil-3,4-dihidroizochinolin-2(1H-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)indolizin-1-il]carbonil}(1-metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-5-il)amino]fenil fosfat dietilic
La o suspensie de compus obţinut în etapa A (1,5 mmol) în 10 ml de CH2Cl2 anhidru se adaugă trietilamină (0,42 ml, 3 mmol), şi apoi cianofosfonat dietilic (0,24 ml; 1,65 mmol), prin picurare, la temperatura ambiantă. După agitarea timp de o noapte la temperatura ambiantă, amestecul de reacţie este diluat cu CH2Cl2, spălat cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi apoi cu saramură. Faza organică este apoi uscată pe MgSO4, filtrată, concentrată la sec şi purificată prin cromatografia pe gel de silice (gradient CH2Cl2/MeOH). Produsul din titlu este apoi obţinut sub formă de solid.
Etapa C: 4-[{[3-(6-{[(3R)-3-metil-3,4-dihidroizochinolin-2(1H-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)indolizin-1-il]carbonil}(1-metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-5-il)amino]fenil fosfat disodic
Se adaugă, prin picurare, la temperatura ambiantă 0,4 ml de bromură de trimetilsilil (3 mmol) la o soluţie de produs obţinut în Etapa B (0,78 mmol) în CH2Cl2 (12 ml). Amestecul de reacţie se agită timp de 5 ore, şi apoi se adaugă lent, la 0°C, o soluţie de Na2CO3 (580 mg) în apă (4 ml). După agitare timp de 30 minute, amestecul de reacţie se concentrează la sec, se diluează cu metanol anhidru (25 ml) şi este microfiltrat. Filtratul este uscat şi purificat prin cromatografie pe o fază OASIS® (gradient acetonitril /H2O).
Spectrometria de masă de înaltă rezoluţie (ESI+):
Formula empirică: C45H44N5Na2O7P
[M-2Na+3H]+ calculat: 800,3211
[M-2Na+3H]+ măsurat: 800,3201
Exemplul 5. 4-[{[3-(6-{[(3R)-3-metil-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)indolizin-1-il]carbonil}(piridin-4-il)amino]fenil fosfat disodic
Etapa A: Clorhidrat de N-(4-hidroxifenil)-3-(6-{[(3R)-3-metil-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)-N-(piridin-4-il)indolizină-1-carboxamidă
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele A-D din Exemplul 1 înlocuind, pe de o parte, compuşii din Preparările 1 şi 1' utilizaţi în Etapa A cu compuşii din Preparările 3 şi 2' şi, pe de altă parte, compusul din Prepararea 1'' utilizat în Etapa C cu cel din Prepararea 4''.
Microanaliza elementară: (%, teoretică: măsurată)
%C=69,24:69,12; %H=4,74:4,23; %N=8,5:8,45; %Cl=5,38:5,2.
Etapa B: 4-[{[3-(6-{[(3R)-3-metil-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)indolizin-1-il]carbonil}(piridin-4-il)amino]fenil fosfat dietilic
La o suspensie de 950 g de compus obţinut în etapa A (1,5 mmol) în 10 ml de CH2Cl2 anhidru se adaugă trietilamină (0,42 ml, 3 mmol), şi apoi cianofosfonat dietilic (0,24 ml; 1,65 mmol), prin picurare, la temperatura ambiantă. După agitarea timp de o noapte la temperatura ambiantă, amestecul de reacţie este diluat cu CH2Cl2, spălat cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi apoi cu saramură. Faza organică este apoi uscată pe MgSO4, filtrată, concentrată la sec şi purificată prin cromatografia pe gel de silice (gradient CH2Cl2/MeOH). Produsul din titlu este apoi obţinut sub formă de solid.
RMN 1H: δ (500 MHz; dmso-d6; 300K): 8,5-8, 0 (m, 5H); 7,2-7,1 (m, 1H); 6,85-6,65 (m, 1H); 7,3-6,8 (m, 10H); 6,25-6,10 (bs, 1H); 6,2 (bs, 2H); 5,1-3,7 (6d, 2H); 4,7-3,8 (m,1H); 4,15 (m, 4H); 3,0-1,7 (m,2H); 1,25 (m, 6H); 0,85-0,24 (m,3H).
Etapa C: 4-[{[3-(6-{[(3R)-3-metil-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)indolizin-1-il]carbonil}(piridin-4-il)amino]fenil fosfat disodic
0,4 ml de bromură de trimetilsilil (3 mmol) se adaugă, prin picurare, la temperatura ambiantă, la o soluţie de produs obţinut în Etapa B (591 mg; 0,78 mmol) în CH2Cl2 (12 ml). Amestecul de reacţie se agită timp de 5 ore, şi apoi se adaugă lent, la 0°C, o soluţie de Na2CO3 (580 mg) în apă (4 ml). După agitare timp de 30 minute, amestecul de reacţie se concentrează la sec, se diluează cu metanol anhidru (25 ml) şi este microfiltrat. Filtratul este uscat şi purificat prin cromatografie pe o fază OASIS® (gradient acetonitril /H2O).
RMN 1H: δ (500 MHz; D2O; 300K): 8,23-7,98 (m, 2H, piridil); 7,01-6,97 (m, 2H, piridil); 7,88-7,80 (m, 1H, indolizină); 7,18-6,57 (m, 13H, H aromatici THIQ+aril+indolizină+fenol); 6,17-6,15 (m, 1H, indolizină): 5,96 (m, 2H, metilenedioxi); 4,61-3,76 (m, 1H, C ternar THIQ); 4,16 (m, 2H, C secundar THIQ); 2,86-2,31 (m, 2H, C secundar THIQ); 0,94-0,76 (m, 3H, C primar THIQ)
IR: ν: -C=O: 1620 cm-1; ν: C-O-C: 1218 cm-1; ν: P=O: 1107 cm-1 ν: P-O: 981 cm-1 ν: CH-Ar: 881-741 cm-1.
Spectrometria de masă de înaltă rezoluţie (ESI+):
Formula empirică: C38H29N4Na2O8P
[M-2Na+3H]+ calculat: 703,1952
[M-2Na+3H]+ măsurat: 703,1951
Exemplul 6. 4-[{[3-(6-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)-5,6,7,8-tetrahidroindolizin-1-il]carbonil}(fenil)amino]fenil fosfat disodic
Procedura este în conformitate cu protocolul descris în Etapele A-E din Exemplul 1.
RMN 1H: δ (500 MHz; DMSO-d6; 300K): 7,34 (m, 10H, fenil); 7,30-6,71 (m, 15H, aril); 6,06 (s, 1H, metilendioxi); 5,30-4,97 (m, 1H, pirol); 5,11 (m, 4H, benzil): 5,03-3,64 (m, 1H, C terţiar THIQ); 4,91-4,09 (m, 2H, C secundar THIQ); 3,99-3,48 (m, 2H, C secundar THIQ); 3,54-3,44 (m, 4H, morfolină); 2,89-2,65 (m, 3H, C secundar THIQ); 2,51-1,87 (m, 4H, C secundar THID); 2,36-1,85 (m, 2H, C secundar THIQ); 1,91-1,45 (m, 4H, C secundar THID).
Exemplul 7. 4-[{[3-(6-{[(3R)-3-metil-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)indolizin-1-il]carbonil}(piridin-4-il)amino]fenil dietil fosfat
Procedura este în conformitate cu protocolul descris în Etapele A şi B din Exemplul 5.
RMN 1H: δ (500 MHz; DMSO-d6; 300K): 8,5-8, 0 (m, 5H); 7,2-7,1 (m, 1H); 6,85-6,65 (m, 1H); 7,3-6,8 (m, 10H); 6,25-6,10 (bs, 1H); 6,2 (bs, 2H); 5,1-3,7 (6d, 2H); 4,7-3,8 (m,1H); 4,15 (m, 4H); 3,0-1,7 (m,2H); 1,25 (m, 6H); 0,85-0,24 (m,3H).
Exemplul 8. Clorhidrat de 4-[{[3-(6-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)-5,6,7,8-tetrahidroindolizin-1-il]carbonil}(fenil)amino]fenil dihidrogenofosfat
Se adaugă 100 mg de Pd(OH)2 la o soluţie de produs obţinut în Etapa E din Exemplul 1 (500 mg; 0,51 mmol) în metanol (10 ml), şi apoi amestecul de reacţie este plasat sub atmosferă de hidrogen (1 bar) timp de 5 ore. După filtrarea catalizatorului şi concentrarea la sec, produsul de reacţie brut este purificat imediat prin cromatografie pe o fază C18 (gradient acetonitril /H2O +HCl 0,2%) pentru a se obţine un solid.
Spectrometria de masă de înaltă rezoluţie (ESI+):
Formula empirică: C43H43N4O9P
[M+H]+ calculat: 791,2846
[M+H]+ măsurat: 791,2852
Exemplul 9. 4-[{[5-(5-cloro-2-{[(3R)-3-metil-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}(piridin-4-il)amino]fenil fosfat disodic
Etapa A: Clorhidrat de 5-(5-cloro-2-{[(3R)-3-metil-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-N-(4-hidroxifenil)-1,2-dimetil-N-(piridin-4-il)-1H-pirol-3-carboxamidă
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele A-D din Exemplul 1 înlocuind, pe de o parte, compuşii din Preparările 1 şi 1' utilizaţi în Etapa A cu compuşii din Preparările 4 şi 2' şi, pe de altă parte, compusul din Prepararea 1'' utilizat în Etapa C cu cel din Prepararea 4''.
Microanaliza elementară: (%, teoretică: măsurată)
%C=66,99:66,88; %H=5,14:5,28; %N=8,93:8,87; %Cl=5,65:4,98.
Spectrometria de masă de înaltă rezoluţie (ESI+):
Formula empirică: C35H32ClN4O3
[M+H]+ calculat: 591,2157
[M+H]+ măsurat: 591,2178
Etapa B: 4-[{[5-(5-cloro-2-{[(3R)-3-metil-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}(piridin-4-il)amino]fenil fosfat disodic
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele B şi C din Exemplul 4.
Exemplul 10. 4-[{[1,2-dimetil-5-(6-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)-1H-pirol-3-il]carbonil}(1-metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-5-il)amino]fenil fosfat disodic
Etapa A: Clorhidrat de N-(4-hidroxifenil)-1,2-dimetil-N-(1-metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-5-il)-5-(6-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)-1H-pirol-3-carboxamidă
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele A-D din Exemplul 1 înlocuind, pe de o parte, compusul din Prepararea 1 utilizat în Etapa A cu compusul din Prepararea 5 şi, pe de altă parte, compusul din Prepararea 1'' utilizat în Etapa C cu cel din Prepararea 3''.
Microanaliza elementară: (%, măsurată(teoretică))
%C=66,41(66,62);%H=5,08(5,59);%N=10,85(10,84);%Cl-=4,68(4,57).
Etapa B: 4-[{[1,2-dimetil-5-(6-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)-1H-pirol-3-il]carbonil}(1-metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-5-il)amino]fenil fosfat disodic
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele B şi C din Exemplul 4.
Exemplul 11. 4-[{[1,2-dimetil-5-(6-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)-1H-pirol-3-il]carbonil}(1-metil-1H-pirazol-4-il)amino]fenil fosfat disodic
Etapa A: Clorhidrat de N-(4-hidroxifenil)-1,2-dimetil-N-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5-(6-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)-1H-pirol-3-carboxamidă
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele A-D din Exemplul 1 înlocuind, pe de o parte, compusul din Prepararea 1 utilizat în Etapa A cu compusul din Prepararea 5 şi, pe de altă parte, compusul din Prepararea 1'' utilizat în Etapa C cu cel din Prepararea 5''.
Microanaliza elementară: (%, măsurată(teoretică))
%C=64,25(64,59);%H=5,4(5,7);%N=11,41(11,59);%Cl-=4,93(4,89).
Etapa B: 4-[{[1,2-dimetil-5-(6-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)-1H-pirol-3-il]carbonil}(1-metil-1H-pirazol-4-il)amino]fenil fosfat disodic
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele E şi F din Exemplul 1.
IR (cm-1): ν: C=O: 1628; ν: (fosfat; eter): 1238, 1143,1113, 985; γ: >CH Ar: 740.
Microanaliza elementară:
%C %H %N Calculat 57,64 4,84 10,34 Constatat 56,62 4,54 10,14
Spectrometria de masă de înaltă rezoluţie (ESI+-/FIA/HR):
Formula empirică: C39H39ClN6Na2O9P
[M-Na+H]+ calculat: 791,2565
[M-Na+H]+ măsurat: 791,2564
Exemplul 12. 4-[{[1,2-dimetil-5-(6-{[(3R)-3-(morfolin-4-il)propil]-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)-1H-pirol-3-il]carbonil}(1-metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-5-il)amino]fenil fosfat disodic
Etapa A: Clorhidrat de N-(4-hidroxifenil)-1,2-dimetil-N-(1-metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-5-il)-5-(6-{[(3R)-3-[3(morfolin-4-il)propil]-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)-1H-pirol-3-carboxamidă
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele A-D din Exemplul 1 înlocuind, pe de o parte, compuşii din Preparările 1 şi 1' utilizaţi în Etapa A cu compuşii din Preparările 5 şi 3' şi, pe de altă parte, compusul din Prepararea 1'' utilizat în Etapa C cu cel din Prepararea 3''.
Microanaliza elementară: (%, măsurată(teoretică))
%C=67,63(68,06);%H=5,27(5,95);%N=10,08(10,13);%Cl-=4,53(4,27).
Spectrometria de masă de înaltă rezoluţie (ESI+):
Formula empirică: C35H32ClN4O3
[M+H]+ calculat: 793,3708
[M+H]+ măsurat: 793,3704
Etapa B: 4-[{[1,2-dimetil-5-(6-{[(3R)-3-(morfolin-4-il)propil]-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)-1H-pirol-3-il]carbonil}(1-metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-5-il)amino]fenil fosfat disodic
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele E şi F din Exemplul 1.
Cu excepţia cazului în care se menţionează altfel, compuşii din următoarele Exemple sunt sintetizaţi în conformitate cu procedeul din Exemplul 1 folosind: (i) acidul corespunzător obţinut conform uneia dintre Preparările 1-9 şi (ii) compusul de tetrahidroizochinolină corespunzător obţinut conform uneia dintre Preparările 1'-4' şi, în Etapa C: (iii) amina adecvată NHR3R4 (o listă neexhaustivă este propusă în Preparările 1"-8").
Exemplul 13. 4-[{[5-(5-cloro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1Hil]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}(piridin-4-il)amino]fenil fosfat disodic
Etapa A: Clorhidrat de 5-(5-cloro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-N-(4-hidroxifenil)-1,2-dimetil-N-(piridin-4-il)-1H-pirol-3-carboxamidă
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele A-D din Exemplul 1 înlocuind, pe de o parte, compusul din Prepararea 1 utilizat în Etapa A cu compusul din Prepararea 4 şi, pe de altă parte, compusul din Prepararea 1'' utilizat în Etapa C cu cel din Prepararea 4''. Produsul obţinut este supus, la sfârşit, unei etape de transformare în sare în prezenţa acidului clorhidric 1M în eter. După filtrare şi liofilizare într-un amestec de acetonitril/apă, se obţine compusul preconizat.
Spectrometria de masă de înaltă rezoluţie (ESI+):
Formula empirică: C39H38ClN5O4
[M+H]+ calculat: 676,2685
[M+H]+ măsurat: 676,2684
Etapa B: 4-[{[5-(5-cloro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1Hil]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}(piridin-4-il)amino]fenil fosfat disodic
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele B şi C din Exemplul 16.
RMN 31P (500 MHz, D2O) δ ppm: -0,05.
IR (cm-1): ν: C=O: 1631; ν: (fosfat; eter): 1243, 1136, 1112, 982; γ: >CH Ar: 883, 745.
Microanaliza elementară:
%C %H %N Calculat 58,54 4,66 8,75 Constatat 58,23 4,51 8,76
Spectrometria de masă de înaltă rezoluţie (ESI+):
Formula empirică: C39H37ClN5Na2O7P
[M-Na+2H]+ calculat: 778,2168
[M-Na+2H]+ măsurat: 778,2169
Exemplul 14. 4-({[5-(5-fluoro-4-metoxi-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}(1-metil-1H-pirazol-4-il)amino]fenil fosfat disodic
Exemplul 15. 4-({[5-(5-fluoro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}(1-metil-1H-pirazol-4-il)amino]fenil fosfat disodic
Etapa A: Clorhidrat de 5-(5-fluoro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-N-(4-hidroxifenil)-1,2-dimetil-N-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-1H-pirol-3-carboxamidă
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele A-D din Exemplul 1 înlocuind, pe de o parte, compusul din Prepararea 1 utilizat în Etapa A cu compusul din Prepararea 7 şi, pe de altă parte, compusul din Prepararea 1'' utilizat în Etapa C cu cel din Prepararea 5''. Produsul obţinut este supus, la sfârşit, unei etape de transformare în sare în prezenţa acidului clorhidric în eter. După filtrare şi liofilizare într-un amestec de acetonitril/apă, se obţine compusul preconizat.
Microanaliza elementară: (%, măsurată(teoretică))
%C=65,69(65,28);%H=5,38(5,77);%N=11,18(12,02);%Cl-=5,61(5,07).
Etapa B: 4-({[5-(5-fluoro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}(1-metil-1H-pirazol-4-il)amino]fenil fosfat disodic
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele B şi C din Exemplul 16.
RMN 31P (400/500 MHz, CD3OD) δ ppm: -0,5
IR (cm-1): ν: C=O: 1628; ν: (fosfat; eter): 1238, 1114, 983
Microanaliza elementară:
%C %H %N Calculat 58,02 4,87 10,68 Constatat 59,03 4,98 10,14
Spectrometria de masă de înaltă rezoluţie (ESI+):
Formula empirică: C38H38FN6Na2O7P
[M-2Na+3H]+ calculat: 743,2752
[M-2Na+3H]+ măsurat: 743,2760
Exemplul 16. 4-[{[1,2-dimetil-5-(7-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H-il]carbonil}-2,3-dihidro-1,4-benzodioxin-6-il)-1H-pirol-3-il]carbonil}(1-metil-1H-pirazol-4-il)amino]fenil fosfat disodic
Etapa A: Clorhidrat de N-(4-hidroxifenil)-1,2-dimetil-N-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-5-(7-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-2,3-dihidro-1,4-benzodioxin-6-il)-1H-pirol-3-carboxamidă
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele A-D din Exemplul 1 înlocuind, pe de o parte, compusul din Prepararea 1 utilizat în Etapa A cu compusul din Prepararea 8 şi, pe de altă parte, compusul din Prepararea 1'' utilizat în Etapa C cu cel din Prepararea 5''. Produsul obţinut este supus, la sfârşit, unei etape de transformare în sare în prezenţa acidului clorhidric 1M în eter. După filtrare şi liofilizare într-un amestec de acetonitril/apă, se obţine compusul preconizat.
Microanaliza elementară: (%, teoretică: măsurată)
%C=64,99:64,67; %H=5,86:5,67; %N=11,37:11,27; %Cl=4,8:4,71
Spectrometria de masă de înaltă rezoluţie (ESI+) :
Formula empirică: C40H43N6O6
[M+H]+ calculat: 703,3236
[M+H]+ măsurat: 703,3239
Etapa B: 4-[{[1,2-dimetil-5-(7-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-2,3-dihidro-1,4-benzodioxin-6-il)-1H-pirrol-3-il]carbonil}(1-metil-1H-pirazol-4-il)amino]fenil N,N,N',N'-tetrametilfosforodiamidat
La o soluţie de 125 mg de compus din Etapa A (0,18 mmol) în diclormetan (6 ml) se adaugă 55 µl de diazabiciclo [5,4,0]undec-7-enă (DBU; 0,36 mmol), şi apoi 33 µl de clorură de bisdimetilaminofosforil (0,19 mmol) şi 2 mg de dimetilamino-4-piridină (0,02 mmol). Amestecul de reacţie se agită timp de 15 ore, se diluează cu diclormetan şi apoi cu soluţie apoasă saturată de carbonat de sodiu. Faza apoasă se extrage cu diclormetan; fazele organice sunt apoi combinate, spălate cu apă şi cu saramură şi uscate pe sulfat de magneziu. După evaporarea solvenţilor, produsul de reacţie brut este utilizat direct în etapa următoare.
Etapa C: 4-[{[1,2-dimetil-5-(7-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H-il]carbonil}-2,3-dihidro-1,4-benzodioxin-6-il)-1H-pirol-3-il]carbonil}(1-metil-1H-pirazol-4-il)amino]fenil fosfat disodic
4 ml de acid trifluoracetic se adaugă, prin picurare, la o soluţie de 125 mg de compus din Etapa B (0,15 mmol) într-un amestec 1:1 de acetonitril şi apă (5 ml). După agitare timp de 20 ore la temperatura ambiantă, amestecul de reacţie se evaporă la sec, menţinând temperatura băii de apă sub 40°C, şi apoi reziduul este tratat cu o soluţie de carbonat de sodiu (95 mg; 0,9 mmol) în apă (4 ml). După agitare timp de 2 ore la temperatura ambiantă, amestecul de reacţie se evaporă la sec şi apoi se adaugă 6 ml de etanol anhidru. Solidul se filtrează, iar filtratul se concentrează la sec, şi apoi se purifică pe o fază OASIS® (gradient acetonitril/apă).
RMN 31P (500 MHz, D2O) δ ppm: 0,9.
IR (cm-1): ν: C=O: 1623; ν: (fosfat; eter): 1235, 1162,1115, 1065, 985; γ: >CH Ar:745.
Spectrometria de masă de înaltă rezoluţie (ESI+):
Formula empirică: C40H41N6Na2O9P
[M-2Na+3H]+ calculat: 783,2902
[M-2Na+3H]+ măsurat: 783,2907
Exemplul 17. 5-[{[5-(5-fluoro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}(piridin-4-il)amino]pirimidin-2-il fosfat disodic
Exemplul 18. 5-[{[5-(5-cloro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}(piridin-4-il)amino]pirimidin-2-il fosfat disodic
Exemplul 19. 4-({[5-(5-cloro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}[1-(trideuteriometil)-1H-pirazol-4-il]amino)fenil fosfat disodic
Etapa A: Clorhidrat de 5-(5-cloro-2-{[(3S)-3-(4-morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-N-(4-hidroxifenil)-1,2-dimetil-N-[1-(trideuteriometil)-1H-pirazol-4-il]-1H-pirol-3-carboxamidă
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele A-D din Exemplul 1 înlocuind, pe de o parte, compusul din Prepararea 1 utilizat în Etapa A cu compusul din Prepararea 4 şi, pe de altă parte, compusul din Prepararea 1'' utilizat în Etapa C cu cel din Prepararea 6''. Produsul obţinut este supus, la sfârşit, unei etape de transformare în sare în prezenţa acidului clorhidric 1M în eter. După filtrare şi liofilizare într-un amestec de acetonitril/apă, se obţine compusul preconizat.
Microanaliza elementară: (%, teoretică: măsurată)
%C=63,51:63,41; %H=5,63:5,42; %N=11,69:11,61; %Cl-=4,93:4,85.
Spectrometria de masă de înaltă rezoluţie (ESI+-/FIA/HR, ESI-/FIA):
Formula empirică: C38 H36 Cl D3 N6 O4
[M+H]+ calculat: 682,2982
[M+H]+ măsurat: 682,2986
Etapa B: 4-({[5-(5-cloro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}[1-(trideuteriometil)-1H-pirazol-4-il]amino)fenil fosfat disodic
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele B şi C din Exemplul 16.
RMN 31P (500 MHz, D2O) δ ppm: 4,8.
IR (cm-1): ν: C=O: 1626; ν: (fosfat; eter): 1243, 1141,1115, 982; γ: >CH Ar :880, 831.
Spectrometria de masă de înaltă rezoluţie (ESI/FIA/HR şi MS/MS):
Formula empirică: C38 H35 Cl D3 N6 Na2 O7 P
[M+H]+ calculat 806,2285
[M+H]+ măsurat: 806,2280
Exemplul 20. 4-[{[5-(5-cloro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}(5-ciano-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il)amino]fenil fosfat disodic
Etapa A: Clorhidrat de 5-(5-cloro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-N-(5-ciano-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il)-N-(4-hidroxifenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-carboxamidă
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele A-D din Exemplul 1 înlocuind, pe de o parte, compusul din Prepararea 1 utilizat în Etapa A cu compusul din Prepararea 4 şi, pe de altă parte, compusul din Prepararea 1'' utilizat în Etapa C cu cel din Prepararea 7''. Produsul obţinut este supus, la sfârşit, unei etape de transformare în sare în prezenţa acidului clorhidric 1M în eter. După filtrare şi liofilizare într-un amestec de acetonitril/apă, se obţine compusul preconizat.
RMN 1H (500 MHz, dmso-d6) δ ppm: 11,2 (bs, 1H), 9,39 (bs,1H), 7,83 (d, 1 H), 7,54 (d, 1 H), 7,33 (s, 1 H), 7,14 (m, 2 H), 7 (m, 2 H), 6,8 (d, 2 H), 6,62 (d, 2 H), 6,57 (bs, 1 H), 5,26 (s, 1 H), 5,26 (m, 1 H), 4,64/4,03 (AB, 2 H), 4,01/3,92 (2m, 4 H), 3,75/3,43/3,15/3,02 (4m, 4 H), 3,59 (s, 3 H), 3,3/3,15 (2m, 2 H), 2,97 (s, 3 H), 2,69/2,52 (dd+d, 2 H), 2,06 (s, 3 H), 1,91 (s, 3 H).
Microanaliza elementară: (%, teoretică: măsurată)
%C=65,34:65,50; %H=5,62:5,15; %N=11,15:10,84 %Cl-=4,70:4,44.
Spectrometria de masă de înaltă rezoluţie (ESI+):
Formula empirică: C41H41N6O4
[M+H]+ calculat: 717,2952
[M+H]+ măsurat: 717,2951
Etapa B: 4-[{[5-(5-cloro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}(5-ciano-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il)amino]fenil fosfat disodic
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele B şi C din Exemplul 16.
RMN 31P (500 MHz, dmso-d6) δ ppm: 3,7.
IR (cm-1): ν: -CN: 2210 cm-1; ν: C=O: 1623; ν: (fosfat; eter): 1227, 1133, 1110, 982; γ: >CH Ar:884-741.
Microanaliza elementară:
%C %H %N Calculat 58,54 4,79 9,99 Constatat 58,75 4,71 10,18
Spectrometria de masă de înaltă rezoluţie (ESI+-/FIA/HR):
Formula empirică: C41 H40 Cl N6 Na2 O7 P
[M-2Na+H]+ calculat: 797,2614
[M-2Na+H]+ măsurat: 797,2618
Exemplul 21. 4-[{[5-(5-cloro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}(5-ciano-1-metil-1H-pirol-3-il)amino]fenil fosfat disodic
Etapa A: Clorhidrat de 5-(5-cloro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-N-(5-ciano-1-metil-1H-pirol-3-il)-N-(4-hidroxifenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-carboxamidă
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele A-D din Exemplul 1 înlocuind, pe de o parte, compusul din Prepararea 1 utilizat în Etapa A cu compusul din Prepararea 4 şi, pe de altă parte, compusul din Prepararea 1'' utilizat în Etapa C cu cel din Prepararea 8''. Produsul obţinut este supus, la sfârşit, unei etape de transformare în sare în prezenţa acidului clorhidric 1M în eter. După filtrare şi liofilizare într-un amestec de acetonitril/apă, se obţine compusul preconizat.
Microanaliza elementară: (%, teoretică: măsurată)
%C=64,95:65,09; %H=5,45:5,20; %N=11,36:11,26; %Cl=4,79:4,62.
Spectrometria de masă de înaltă rezoluţie (ESI/+):
Formula empirică: C40 H39 Cl N6 O4
[M+H]+ calculat: 703,2794
[M+H]+ măsurat: 703,2789
Etapa B: 4-[{[5-(5-cloro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}(5-ciano-1-metil-1H-pirol-3-il)amino]fenil fosfat disodic
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele B şi C din Exemplul 16.
RMN 31P (500 MHz, dmso-d6) δ ppm: 4,5.
IR (cm-1): ν: -CN: 2215 cm-1; ν: C=O 1626; ν: (Fosfat; eter): 1227, 1141, 1112, 982; γ >CH Ar: 826-742.
Spectrometria de masă de înaltă rezoluţie (ESI+-/FIA/HR):
Formula empirică: C40 H38 Cl N6 Na2 O7 P
[M-2Na+3H]+ calculat: 783,2457
[M-2Na+3H]+ măsurat: 783,2462
Exemplul 22. 4-[{[3-(6-{[(3R)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)-5,6,7,8-tetrahidroindolizin-1-il]carbonil}(fenil)amino]fenil fosfat disodic
Etapa A: Clorhidrat de N-(4-hidroxifenil)-3-{6-[((3R)-3-(4-morfolinilmetil)-3,4-dihidro-2(1H)-izochinolinil)carbonil]-1,3-benzodioxol-5-il}-N-fenil-5,6,7,8-tetrahidro-1-indolizină carboxamidă
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele A-D din Exemplul 1 înlocuind compusul din Prepararea 1' utilizat în Etapa A cu compusul din Prepararea 4'. Solidul este apoi dizolvat în diclormetan, şi se adaugă 2 ml de HCl 1M în eter. Amestecul se agită timp de 1 oră şi apoi se evaporă la sec. Clorhidratul astfel obţinut este dizolvat într-un amestec de apă/acetonitril până la dizolvarea completă, şi apoi este liofilizat.
Microanaliza elementară:
%C %H %N %Cl- Calculat 69,11 5,80 7,50 4,74 Constatat 68,89 5,23 7,41 4,62
Rotaţia optică: (α) D 20 = - 45,1° (c = 9 mg/mL, MeOH).
Etapa B: 4-[{[3-(6-{[(3R)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)-5,6,7,8-tetrahidroindolizin-1-il]carbonil}(fenil)amino]fenil fosfat disodic
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele B şi C din Exemplul 16.
RMN 31P (400/500 MHz, dmso-d6) δ ppm: 2,6.
Microanaliza elementară:
%C %H %N Calculat 61,87 4,95 6,71 Constatat 61,33 4,93 7,14
Spectrometria de masă de înaltă rezoluţie (ESI+-/FIA/HR):
Formula empirică: C43H41N4Na2O9P
[M-2Na+H]+ calculat: 791,2840
[M-2Na+H]+ măsurat: 791,2845
Exemplul 23. 4-[(1-metil-2,3-dihidro-1H-pirolo[2,3-b]piridin-5-il){[3-(2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H-il]carbonil}-4-[2-oxo-2-(piperidin-1-il)etoxi]fenil)-5,6,7,8-tetrahidroindolizin-1-il]carbonil}amino]fenil fosfat disodic
Etapa A: 3-[4-benziloxi-2-[(3S)-3-(morfolinometil)-3,4-dihidro-1H-izochinolină-2-carbonil]fenil]-5,6,7,8-tetrahidroindolizină-1-carboxilat de metil
La o soluţie de 14,19 g (35,0 mmol) de compus obţinut în Prepararea 9 în 200 ml de dimetilformamidă se adaugă succesiv 4-[[(3S)-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-3-il]metil]morfolină (Prepararea 1'; 8,13 g; 35,0 mmol), hidroxibenzotriazol (6,15 g; 45,5 mmol), clorhidrat de 1-etil-3-(3'-dimetilaminopropil)-carbodiimidă (6,70 g; 45,5 mmol) şi trietilamină (21,95 ml; 0,16 mol). Apoi amestecul se agită timp de o noapte la temperatura ambiantă. Amestecul de reacţie se toarnă apoi în 400 ml de acetat de etil şi apoi se spală succesiv cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3, apă şi saramură. Fazele apoase combinate sunt extrase cu acetat de etil. Fazele organice rezultate se usucă pe sulfat de sodiu, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Produsul obţinut se purifică prin cromatografie pe gel de silice pentru a se obţine compusul din titlu.
RMN 1H (500 MHz, dmso-d6, 300K) δ ppm: 7,5-7,3 (m, 5 H), 7,38 (d, 1 H), 7,2-6,9 (m, 4 H), 7,15 (dd, 1 H), 6,9 (d, 1 H), 6,35/6,25/6,08 (3*s, 1 H), 5,21/5,12 (3*s, 2 H), 5,09/4,85/3,7 (3*m, 1 H), 4,9-3,8 (8*d, 2 H), 4,2-3,4 (m, 2 H), 3,65/3,6/3,55 (3*s, 3 H), 3,6-3,4 (m, 4 H), 3-2,4 (m, 2 H), 2,9-1,8 (6*dd, 2 H), 2,5-1,95 (4*m, 4 H), 2,35-1,7 (6*m, 2 H), 2-1,45 (6*m, 4 H).
Etapa B: Acidul 3-[4-benziloxi-2-[(3S)-3-(morfolinometil)-3,4-dihidro-1H-izochinolină-2-carbonil]fenil]-5,6,7,8-tetrahidroindolizină-1-carboxilic
Se adaugă 40,1 ml de soluţie apoasă de LiOH 1M la o soluţie de 12,7 g (20 mmol) de compus obţinut în etapa precedentă în 40 ml de dioxan. Amestecul este încălzit la 100°C timp de o noapte. Amestecul de reacţie se toarnă în apă şi apoi se extrage cu eter etilic. Faza eterică se extrage încă o dată cu apă. Fazele apoase combinate se acidulează la pH 4 prin adăugarea acidului citric sub formă de pudră, şi apoi se extrag cu diclormetan. Faza în diclormetan se spală cu saramură, se usucă pe sulfat de sodiu, se filtrează şi se concentrează la sec. Produsul din titlul este obţinut sub formă de bezea.
RMN 1H (500 MHz, dmso-d6, 300K) δ ppm: 11,35 (bs, 1 H), 7,5-7,3 (m, 5 H), 7,38 (m, 1 H), 7,2-6,9 (m, 4 H), 7,15 (m, 1 H), 6,9 (m, 1 H), 6,31/6,25/6,1 (3*s, 1 H), 5,22/5,2/5,15 (3*s, 2 H), 5,1/4,82/3,7 (3*m, 1 H), 4,85-3,8 (8*d, 2 H), 4,2-3,4 (m, 2 H), 3,6-3,45 (m, 4 H), 3-2,3 (m, 2 H), 2,9-1,8 (m, 2 H), 2,5-1,9 (6*m, 4 H), 2,35-1,8 (6*m, 2 H), 1,9-1,3 (m, 4 H).
Etapa C: 3-[4-benziloxi-2-[(3S)-3-(morfolinometil)-3,4-dihidro-1H-izochinolină-2-carbonil]fenil]-N-[4-[terţ-butil(dimetil)silil]oxifenil]-N-(1-metilpirolo[2,3-b]piridin-5-il)-5,6,7,8-tetrahidroindolizină-1-carboxamidă
Acidul obţinut în Etapa B (9 g; 11,8 mmol) este dizolvat în 90 ml de 1,2-dicloroetan. La acesta se adaugă 1,9 ml de 1-cloro-N,N,2-trimetilpropenilamină (14 mmol). După agitare timp de 3 ore la temperatura ambiantă, se adaugă 90 ml de toluen şi 4,62 g de N-[4-[terţ-butil(dimetil)silil]oxifenil]-1-metil-1H-pirolo[2,3-b]piridin-5-amină (Prepararea 3'', 13 mmol). Amestecul de reacţie este încălzit la 110°C timp de 20 de ore. După revenirea la temperatura ambiantă, amestecul de reacţie se spală cu saramură, se usucă pe Na2SO4, se filtrează şi se concentrează la sec. Reziduul obţinut se purifică prin cromatografie pe gel de silice (gradient diclormetan/etanol) pentru a se obţine produsul preconizat.
RMN 1H (500 MHz, dmso-d6, 300K) δ ppm: 7,95/7,8/7,75 (3*d, 1 H), 7,68/7,65/7,4 (3*d, 1 H), 7,4/7,3 (2*d, 1 H), 7,25-6,8 (m, 9 H), 7,05/6,9 (2*m, 1 H), 7-6,6 (3*bd, 2 H), 6,9 (m, 1 H), 6,75-6,45 (3*bd, 2 H), 6,7 (m, 1 H), 6,3 (2*d, 1 H), 5,15-4,95 (m, 2 H), 5,15/5,1/4,8 (3*s, 1 H), 4,95/4,6/3,5 (3*m, 1 H), 4,9-3,7 (8*d, 2 H), 3,8-3,3 (3*m, 2 H), 3,75/3,7/3,5 (3*s, 3 H), 3,45/3,3 (2*m, 4 H), 3-2,5 (3*m, 2 H), 3-2,3 (m, 2 H), 2,4-1,75 (5*m, 4 H), 2,25-1,7 (6*m, 2 H), 1,75-1,3 (m, 4 H), 0,7 (bs, 9 H), 0,1 (m, 6 H).
Etapa D: N-[4-[terţ-butil(dimetil)silil]oxifenil]-3-[4-hidroxi-2-[(3S)-3-(morfolinometil)-3,4-dihidro-1H-izochinolină-2-carbonil]fenil]-N-(1-metilpirolo[2,3-b]piridin-5-il)-5,6,7,8-tetrahidroindolizină-1-carboxamidă
Se adaugă 0,9 g de Pd/C 10% la o soluţie, în 100 ml de etanol, de 8,88 g (8,4 mmol) de compus obţinut în Etapa C, în timp ce se barbotează în argon. Amestecul de reacţie se plasează sub 1,2 bari de hidrogen la temperatura ambiantă timp de 15 ore. Catalizatorul este filtrat şi solventul este evaporat sub presiune redusă pentru a se obţine compusul din titlu.
RMN 1H (500 MHz, dmso-d6, 300K) δ ppm: 8,06/7,92/7,87 (3*d, 1 H), 7,75/7,5/7,39 (3*d, 1 H), 7,5 (m, 1 H), 7,28-6,9 (m, 5 H), 6,87/6,7 (2*m, 2 H), 6,76 (m, 1 H), 6,75/6,67/6,62 (3*m, 2 H), 6,67/6,46 (m, 1 H), 6,4/6,36 (2*m, 1 H), 5,19/5,13/4,9 (3*bs, 1 H), 5,06/4,7/3,6 (3*m, 1 H), 4,97/4,2/4,15/4,07 (4*m, 2 H), 4,87/4,81 (bs, 1H), 3,86/3,56/3,39 (3*m, 2 H), 3,78/3,57 (2*m, 3 H), 3,59/3,44 (2*m, 4 H), 2,96-2,61 (2*m, 2 H), 2,88/2,6 (2*m, 2 H), 2,59-1,81 (m, 6 H), 1,87-1,42 (m, 4 H), 0,89 (s, 9 H), 0,12 (m, 6 H).
Etapa E: N-[4-[terţ-butil(dimetil)silil]oxifenil]-N-(1-metilpirolo[2,3-b]piridin-5-il)-3-[2-[(3S)-3-(morfolinometil)-3,4-dihidro-1H-izochinolină-2-carbonil]-4-[2-oxo-2-(1-piperidil)etoxi]fenil]-5,6,7,8-tetrahidroindolizină-1-carboxamidă
Compusul din Etapa D (3,0 g; 2,9 mmol) este dizolvat în 100 ml de toluen. La acesta se adaugă 1,53 g (5,8 mmol) de trifenilfosfină şi 0,62 g (4,3 mmol) de 2-hidroxi-1-(1-piperidil)etanonă. Amestecul se încălzeşte la 50°C, apoi se adaugă 1,01 g (4,3 mmol) de di-terţ-butil azodicarboxilat. Amestecul de reacţie se agită la 50°C timp de 1 oră şi apoi este lăsat să revină la temperatura ambiantă înainte de adăugarea a 1 ml de acid trifluoracetic. După agitarea timp de o noapte la temperatura ambiantă, amestecul este spălat succesiv cu apă, soluţie saturată de NaHCO3 şi saramură. Fazele apoase combinate sunt extrase cu acetat de etil. Fazele organice rezultate se usucă pe sulfat de sodiu, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Produsul brut obţinut se purifică prin cromatografie pe gel de silice (diclormetan/etanol 98/2) pentru a se obţine compusul preconizat.
RMN 1H (500 MHz, dmso-d6, 300K) δ ppm: 8,06/7,92/7,87 (3*d, 1 H), 7,75/7,51/7,4 (3*d, 1 H), 7,49 (2*d, 1 H), 7,29-6,89 (m, 5 H), 6,93 (m, 1 H), 6,88/6,7 (m, 2 H), 6,75/6,67 (m, 1 H), 6,75/6,68/6,59 (3*m, 2 H), 6,4/6,36 (2*m, 1 H), 5,2/5,16/4,92 (3*m, 1 H), 5,06/4,69/3,58 (3*m, 1 H), 4,97/4,25/4,16/4,03 (4*d, 2 H), 4,89/4,81 (2*m, 2 H), 3,79/3,59 (2*m, 3 H), 3,59/3,43/3,4 (3*m, 6 H), 3,58/3,43 (2*m, 4 H), 3,03-2,61 (m, 2 H), 2,97-2,65 (m, 2 H), 2,57-1,74 (m, 6 H), 1,89-1,3 (m, 10 H), 0,89 (2bs, 9 H), 0,11 (m, 6 H).
Etapa F: N-(4-hidroxifenil)-N-(1-metilpirolo[2,3-b]piridin-5-il)-3-[2-[(3S)-3-(morfolinometil)-3,4-dihidro-1H-izochinolină-2-carbonil]-4-[2-oxo-2-(1-piperidil)etoxi]fenil]-5,6,7,8-tetrahidroindolizină-1-carboxamidă
Se adaugă o soluţie 1M de fluorură de tetrabutilamoniu (3,14 ml, 3 mmol) în tetrahidrofuran, la temperatura ambiantă, la o soluţie, în 30 ml de tetrahidrofuran, de compus obţinut în Etapa E (2,92 g, 2,9 mmol). După agitare timp de 5 minute, amestecul de reacţie se toarnă într-un amestec 50/50 de acetat de etil şi soluţie apoasă saturată de NaHCO3. Faza organică separată se spală cu apă şi apoi cu saramură. Fazele apoase combinate sunt extrase cu acetat de etil. Fazele organice rezultate se usucă pe sulfat de sodiu, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Produsul brut obţinut se purifică prin cromatografie pe gel de silice (gradient diclormetan/etanol/amoniac) pentru a se obţine compusul din titlu.
NMR 1H (500 MHz, dmso-d6, 300K) δ ppm: 9,4 (m, OH), 8,1-7,8 (3*d, 1 H), 7,7-7,3 (2*m, 1 H), 7,5/7,4 (2*m, 1 H), 7,3-6,9 (m, 4 H), 7,2 (m, 1 H), 6,9 (m, 1 H), 6,8-6,5 (m, 2 H), 6,7-6,5 (m, 2 H), 6,7 (m, 1 H), 6,4 (m, 1 H), 5,3-5 (m, 1 H), 5,1/4,7/3,6 (3*m, 1 H), 5-3,6 (m, 2 H), 5-3,6 (m, 2 H), 4,8 (m, 2 H), 3,8-3,6 (m, 3 H), 3,6/3,4 (m, 2 H), 3,4 (m, 6 H), 3,1-2,5 (m, 2 H), 2,9-1,9 (m, 2 H), 2,5-1,7 (m, 4 H), 1,8-1,4 (m, 6 H), 1,6-1,3 (m, 4 H).
Etapa A: N-(4-hidroxifenil)-N-(1-metil-2,3-dihidropirolo[2,3-b]piridin-5-il)-3-[2-[(3S)-3-(morfolinometil)-3,4-dihidro-1H-izochinolină-2-carbonil]-4-[2-oxo-2-(1-piperidil)etoxi]fenil]-5,6,7,8-tetrahidroindolizină-1-carboxamidă
0,71 g (11 mmol) de cianoborohidrură de sodiu se adaugă la o soluţie, în 20 ml de acid acetic, de compus obţinut în Etapa F (2,0 g, 2,2 mmol). După agitare timp de 14 ore la temperatura ambiantă, se adaugă din nou 0,36 g (5,5 mmol) de cianoborohidrură de sodiu, şi apoi amestecul de reacţie este încălzit la 50°C timp de 3 ore înainte de a doua adăugare a 0,1 echiv. de cianoborohidrură de sodiu pentru a sfârşi reacţia în 30 de minute la 50°C. Acidul acetic este evaporat sub presiune redusă, şi apoi reziduul este prelevat în diclormetan şi spălat cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3, apă şi saramură. Fazele apoase combinate sunt extrase cu diclormetan. Fazele organice rezultate se usucă pe sulfat de sodiu, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Produsul brut obţinut se purifică prin cromatografie pe gel de silice (gradient diclormetan/etanol/amoniac) pentru a se obţine compusul din titlu sub formă de bezea.
NMR 1H (500 MHz, dmso-d6, 300K) δ ppm: 9,3 (bs, 1 H), 7,5/7,4/7,3 (3*m, 1 H), 7,2/6,7 (2*m, 1 H), 7,2 (m, 1 H), 7,1-6,8 (m, 4 H), 6,9/6,7 (m, 1 H), 6,9 (m, 1 H), 6,8-6,5 (m, 2 H), 6,7-6,5 (m, 2 H), 5,3-5,1 (2*d, 1 H), 5,1/4,7/3,6 (3*m, 1 H), 4,9/4,2-3,5 (2*m, 1 H), 4,9/4,2-3,5 (2*, 1 H), 4,9-4,8 (m, 2 H), 3,6/3,4 (2*m, 4 H), 3,4/3,3 (m, 2 H), 3,4 (m, 6 H), 3,1-2,5 (m, 4 H), 3-2,4 (m, 2 H), 2,8/2,6 (m, 3 H), 2,6-1,7 (m, 6 H), 1,9-1,3 (m, 10 H).
Etapa H: Clorhidrat de N-(4-hidroxifenil)-N-(1-metil-2,3-dihidropirolo[2,3-b]piridin-5-il)-3-[2-[(3S)-3-(morfolinometil)-3,4-dihidro-1H-izochinolină-2-carbonil]-4-[2-oxo-2-(1-piperidil)etoxi]fenil]-5,6,7,8-tetrahidroindolizină-1-carboxamidă
Baza obţinută în Etapa G (0,60 g; 0,69 mmol) este dizolvată în acetonitril şi apoi transformată în sare folosind 0,7 mL (0,7 mmol) de soluţie de HCl 1N. Soluţia este filtrată, congelată şi apoi liofilizată pentru a se obţine compusul din titlu sub formă de pudră.
Microanaliza elementară: (%, teoretică: măsurată)
%C=68,02:68,06; %H=6,49:6,21; %N=10,89:10,87; %Cl=4,14:3,94
Spectrometria de masă de înaltă rezoluţie (ESI+):
Formula empirică: C51 H57 N7 O6
[M+H]+ calculat: 864,4445
[M+H]+ măsurat: 864,4443
Etapa I: 4-[(1-metil-2,3-dihidro-1H-pirolo[2,3-b]piridin-5-il){[3-(2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-4-[2-oxo-2-(piperidin-1-il)etoxi]fenil)-5,6,7,8-tetrahidroindolizin-1-il]carbonil}amino]fenil fosfat disodic
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele B şi C din Exemplul 16.
IR (cm-1): ν: C=O: 1625; ν: (fosfat; eter): 1229, 1138, 1115, 982; γ: >CH Ar: 880-748-745.
Microanaliza elementară:
%C %H %N Calculat 62,00 5,71 9,92 Constatat 61,45 5,53 9,96
Spectrometria de masă de înaltă rezoluţie (ESI+):
Formula empirică: C51H56N7Na2O9P
[M-2Na+3H]+ calculat: 944,4106
[M-2Na+3H]+ măsurat: 944,4116
Exemplul 24. 4-[{[5-(5-cloro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}(1-metil-1H-pirazol-4-il)amino]fenil fosfat disodic
Etapa A: Clorhidrat de 5-(5-cloro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-N-(4-hidroxifenil)-1,2-dimetil-N-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-1H-pirol-3-carboxamidă
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele A-D din Exemplul 1 înlocuind, pe de o parte, compusul din Prepararea 1 utilizat în Etapa A cu compusul din Prepararea 4 şi, pe de altă parte, compusul din Prepararea 1'' utilizat în Etapa C cu cel din Prepararea 5''. Produsul obţinut este supus, la sfârşit, unei etape de transformare în sare în prezenţa acidului clorhidric în eter. După filtrare şi liofilizare într-un amestec de acetonitril/apă, se obţine compusul preconizat.
Microanaliza elementară: (%, teoretică: măsurată)
%C=63,77:62,83; %H=5,63:5,83; %N=11,74:11,29; %Cl=4,95:5,42.
Etapa B: 4-[{[5-(5-cloro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}(1-metil-1H-pirazol-4-il)amino]fenil fosfat disodic
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele B şi C din Exemplul 16.
IR (cm-1): ν: C=O: 1625; ν: (fosfat; eter): 1241, 1146, 1112, 983.
Microanaliza elementară:
%C %H %N Calculat 56,83 4,77 10,46 Constatat 56,82 4,58 10,43
Spectrometria de masă de înaltă rezoluţie (ESI+):
Formula empirică: C38 H38 Cl N6 Na2 O7 P
[M-2Na+3H]+ calculat: 759,2457
[M-2Na+3H]+ măsurat: 759,2465
Exemplul 25. 4-[(5-ciano-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il){[5-(5-fluoro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}amino]fenil fosfat disodic
Etapa A: Clorhidrat de N-(5-ciano-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il)-5-(5-fluoro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-N-(4-hidroxifenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-carboxamidă
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele A-D din Exemplul 1 înlocuind, pe de o parte, compusul din Prepararea 1 utilizat în Etapa A cu compusul din Prepararea 7 şi, pe de altă parte, compusul din Prepararea 1'' utilizat în Etapa C cu cel din Prepararea 7''. Produsul obţinut este supus, la sfârşit, unei etape de transformare în sare în prezenţa acidului clorhidric în eter. După filtrare şi liofilizare într-un amestec de acetonitril/apă, se obţine compusul preconizat.
Spectrometria de masă de înaltă rezoluţie (ESI/FIA/HR şi MS/MS):
Formula empirică: C41 H41 F N6 O4
[M+H]+ calculat: 701,3246
[M+H]+ măsurat: 701,3282
Etapa B: 4-[(5-ciano-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il){[5-(5-fluoro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}amino]fenil fosfat disodic
Procedura este în conformitate cu un protocol similar celui descris în Etapele B şi C din Exemplul 16.
RMN 31P (400/500 MHz, CD3OD) δ ppm: -0,5.
IR (cm-1): ν: -CN: 2211 cm-1; ν: C=O: 1629; ν: (fosfat; eter): 1236, 1114, 984.
Microanaliza elementară:
%C %H %N Calculat 59,71 4,89 10,19 Constatat 60,09 4,95 9,88
Spectrometria de masă de înaltă rezoluţie (ESI+):
Formula empirică: C41 H40 F N6 Na2 O7 P
[M-2Na+3H]+ calculat: 781,2909
[M-2Na+3H]+ măsurat: 781,2898.
STUDII FARMACOLOGICE ŞI FARMACOCINETICE
În scopuri de clarificare, şi în cele ce urmează, compuşii cu formula (I') vor fi denumiţi "medicament din Exemplul x" din care aceştia au fost obţinuţi. De exemplu, N-(4-hidroxifenil)-3-{6-[((3S)-3-(4-morfolinilmetil)-3,4-dihidro-2(1H)-izochinolinil)carbonil]-1,3-benzodioxol-5-il}-N-fenil-5,6,7,8-tetrahidro-1-indolizină carboxamidă va fi denumit "medicament din Exemplul 1".
EXEMPLUL A1: Inducerea activităţii caspaze in vivo a compuşiilor cu formula (I')
Capacitatea compuşilor cu formula (I') de a activa caspaza 3 este evaluată într-un model de xenogrefă a celulelor leucemice RS4;11.
1x107 celule RS4;11 sunt grefate subcutanat în şoareci cu imunodepresie (tulpina SCID). 25 - 30 de zile după grefă, animalele sunt tratate oral cu diverşi compuşi. Şaisprezece ore după tratament, masele tumorale sunt recuperate şi lizate, iar activitatea caspazei 3 este măsurată în lizatele tumorale.
Această măsurare enzimatică este realizată prin analiza aspectului exterior al unui produs de clivaj fluorigenic (activitatea DEVDase, Promega). Ea este exprimată sub forma unui factor de activare ce corespunde raportului dintre cele două activităţi caspaze: activitatea pentru şoarecii trataţi divizată de activitatea pentru şoarecii de control.
A fost testată N-(4-hidroxifenil)-3-{6-[((3S)-3-(4-morfolinilmetil)-3,4-dihidro-2(1H)-izochinolinil)carbonil]-1,3-benzodioxol-5-il}-N-fenil-5,6,7,8-tetrahidro-1-indolizină carboxamida (denumită, de asemenea, medicament din Exemplul 1). La o doză de 100 mg / kg p.o., factorul de activare a caspazelor in vivo este de 29,3.
Rezultatele obţinute arată că compuşii cu formula (I') sunt capabili să inducă apoptoza în celulele tumorale RS4;11 in vivo.
EXEMPLUL A2: Cuantificarea formei clivate a caspazei 3 in vivo determinată de compuşii cu formula (I').
Capacitatea compuşilor cu formula (I') de a activa caspaza 3 este evaluată într-un model de xenogrefă a celulelor leucemice RS4;11.
1x107 celule RS4;11 sunt grefate subcutanat în şoareci cu imunodepresie (tulpina SCID). 25 - 30 de zile după grefă, animalele sunt tratate oral cu diverşi compuşi. După tratament, masele tumorale sunt recuperate şi lizate, iar forma clivată (activată) a caspazei 3 este cuantificată în lizatele tumorale.
Cuantificarea se efectuează cu ajutorul testului "Meso Scale Discovery (MSD) ELISA platform", care testează în mod specific forma clivată a caspazei 3. Aceasta este exprimată sub forma unui factor de activare ce corespunde raportului dintre cantitatea caspazei clivate 3 în şoarecii trataţi împărţită la cantitatea caspazei clivate 3 în şoarecii de control.
Rezultatele arată că compuşii cu formula (I') sunt capabili să inducă apoptoza în celulele tumorale RS4;11 in vivo.
Tabelul 1: Factori de activare a caspazelor (testul MSD a caspazei clivate 3 în tumorile şoarecilor trataţi comparativ cu şoarecii de control) in vivo, după tratament pe cale orală
Compusul testat Doza (mg/kg) Timpul de prelevare a probelor Factorul de activare +/- S.E.M. Medicamentul din Exemplul 13 12,5 2 ore 24,5 +/- 7,5 Medicamentul din Exemplul 19 12,5 2 ore 13,5 +/- 1,2 Medicamentul din Exemplul 20 12,5 2 ore 52,0 +/- 8,6 Medicamentul din Exemplul 21 12,5 2 ore 22,6 +/- 2,4 Medicamentul din Exemplul 24 25 2 ore 45,7 +/- 2,0 Medicamentul din Exemplul 25 12,5 2 ore 38,7 +/- 10,7 Medicamentul din Exemplul 15 25 2 ore 29,8 +/- 4,0
EXEMPLUL A3: Cuantificarea formei clivate a caspazei 3 in vivo determinată de compuşii cu formula (I).
Capacitatea compuşilor cu formula (I) de a activa caspaza 3 este evaluată într-un model de xenogrefă a celulelor leucemice RS4;11 în conformitate cu protocolul prezentat în Exemplul A2.
Tabelul 2: Factori de activare a caspazelor (testul MSD a caspazei clivate 3 în tumorile şoarecilor trataţi comparativ cu şoarecii de control) in vivo, după tratament pe cale orală
Compusul testat Doza (mg/kg) Timpul de prelevare a probelor Factorul de activare +/- S.E.M. Exemplul 13 12,5 2 ore 58,6 +/- 4,6 Exemplul 1 50 2 ore 21,2 +/- 1,3 Exemplul 19 12,5 2 ore 27,5 +/- 3,5 Exemplul 20 12,5 2 ore 62,1 +/- 3,4 Exemplul 21 25 2 ore 55,2 +/- 6,2 Exemplul 24 25 2 ore 60,5 +/- 4,5 Exemplul 25 12,5 2 ore 61,8 +/- 8,9 Exemplul 15 25 2 ore 12,1 +/-1,1
EXEMPLUL B: Solubilitatea compuşilor cu formula (I)
Solubilitatea compuşilor cu formula (I) în apă a fost măsurată şi comparată cu cea a compuşiilor cu formula (I').
Mai exact, 4-[{[3-(6-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)-5,6,7,8-tetrahidroindolizin-1-il]carbonil}(fenil)amino]fenil fosfatul disodic (denumit, de asemenea, compusul din Exemplul 1) a fost testat şi comparat cu N-(4-hidroxifenil)-3-{6-[((3S)-3-(4-morfolinilmetil)-3,4-dihidro-2(1H)-izochinolinil)carbonil]-1,3-benzodioxol-5-il}-N-fenil-5,6,7,8-tetrahidro-1-indolizină carboxamidă (denumită, de asemenea, medicamentul din Exemplul 1).
Solubilitatea compusului din Exemplul 1 în apă este mai mare sau egală cu 10 mg/ml (12,6mM), în timp ce solubilitatea medicamentului asociat este de doar 40 µg/ml (56,2µM). Solubilităţile compuşilor au fost măsurate, de asemenea, într-un mediu tamponat la pH-ul fiziologic (a se vedea Tabelul 3).
Tabelul 3: Solubilităţile în mediu apos (soluţie tampon: fosfat 0,33M, pH = 7,4) ale compuşilor cu formula (I) şi ale compuşilor asociaţi cu formula (I'), măsurate la patru concentraţii: 10µM, 20µM, 50µM şi 100µM
Compusul testat Solubilitatea la 10µM Solubilitatea la 20µM Solubilitatea la 50µM Solubilitatea la 100µM Exemplul 19 Solubil Solubil Solubil Solubil Medicamentul din Exemplul 19 Solubil Solubil Solubil Insolubil Exemplul 20 Solubil Solubil Solubil Solubil Medicamentul din Exemplul 20 Solubil Insolubil Insolubil Insolubil Exemplul 25 Solubil Solubil Solubil Solubil Medicamentul din Exemplul 25 Solubil Solubil Insolubil Insolubil Exemplul 1 Solubil Solubil Solubil Solubil Medicamentul din Exemplul 1 Insolubil Insolubil Insolubil Insolubil
Rezultatele arată că compuşii cu formula (I) sunt mult mai solubili decât compuşii cu formula (I'). Doar compuşii cu formula (I) prezintă solubilităţi mai mari sau egale cu 100µM.
EXEMPLUL C: Transformarea in vivo a compuşilor cu formula (I)
Profilul farmacocinetic al compuşilor fosfaţi cu formula (I) este evaluat într-o formulă lipidică şi în soluţie apoasă în şoarecii SCID femele. Acesta este comparat cu profilul farmacocinetic al compuşilor cu formula (I') într-o formulă lipidică. Mai exact, 4-[{[3-(6-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)-5,6,7,8-tetrahidroindolizin-1-il]carbonil}(fenil)amino]fenil fosfatul disodic (denumit, de asemenea, compusul din Exemplul 1) a fost testat şi comparat cu N-(4-hidroxifenil)-3-{6-[((3S)-3-(4-morfolinilmetil)-3,4-dihidro-2(1H)-izochinolinil)carbonil]-1,3-benzodioxol-5-il}-N-fenil-5,6,7,8-tetrahidro-1-indolizină carboxamidă (denumită, de asemenea, medicamentul din Exemplul 1).
Formula lipidică a compusului din Exemplul 1
Compusul din Exemplul 1 se prepară într-un amestec de etanol anhidru/polietilen glicol 300/apă (10/40/50, v/v/v) destinat administrării pe cale orală p.o. Studiul se realizează în 2 grupuri de şoareci SCID cărora le este administrat compusul din Exemplul 1 în următoarele condiţii:
- Grupul 1: 3 mg/kg p.o. (gavaj, 10 ml/kg),
- Grupul 2: 25 mg/kg p.o. (gavaj, 10 ml/kg).
Probele de sânge sunt prelevate la următoarele intervale de timp (3 probe per animal şi 3 animale pentru fiecare interval de timp): 0,25 ore, 0,5 ore, 1 oră, 2 ore, 6 ore şi 24 ore după administrarea orală.
Formula apoasă a compusului din Exemplul 1
Compusul din Exemplul 1 este, de asemenea, administrat pe cale orală într-un mediu apos şoarecilor SCID, în următoarele condiţii:
- Grupul 1: 30 mg/kg p.o. dizolvat în soluţie de carbonat de sodiu 1mM (gavaj, 10 ml/kg),
- Grupul 2: 100 mg/kg p.o. în apă (gavaj, 10 ml/kg).
Probele de sânge sunt prelevate la următoarele intervale de timp (3 animale pentru fiecare interval de timp şi 1 probă per animal): 0,25 ore, 0,5 ore, 1 oră, 2 ore, 4 ore, 6 ore şi 24 ore după administrarea orală.
Pentru toate formulele compusului din Exemplul 1, sângele colectat astfel este centrifugat şi plasma este transferată în eprubete care conţin acid clorhidric 1M. Concentraţiile plasmatice ale compusului fosfat (promedicament) şi omologului său hidroxilat (medicament) sunt determinate simultan folosind o metodă de cromatografie lichidă cuplată cu detecţia prin spectrometrie de masă (TFC-LC-MS/MS). Limita detecţiei pentru ambele entităţi este de 0,5 ng/ml.
Formula lipidică a medicamentului din compusul din Exemplul 1
Medicamentul din Exemplul 1 se prepară într-un amestec de etanol anhidru/polietilen glicol 300/apă (10/40/50, v/v/v) destinat administrării pe cale orală p.o. Studiul se realizează în câteva grupuri de şoareci SCID cărora li se administrează medicamentul din Exemplul 1 în următoarele condiţii:
- Grupul 1: 3 mg/kg p.o. (gavaj, 10 ml/kg),
- Grupul 2: 30 mg/kg p.o. (gavaj, 10 ml/kg),
- Grupul 3: 25 mg/kg p.o. (gavaj, 10 ml/kg),
- Grupul 4: 100 mg/kg p.o. (gavaj, 10 ml/kg).
Probele de sânge sunt prelevate la următoarele intervale de timp (3 animale pentru fiecare interval de timp şi 3 probe per animal pentru Grupurile 1-2 şi 1 probă per animal pentru Grupurile 3 şi 4):
- p.o.: înainte de administrare şi apoi 0,25 ore, 0,5 ore, 0,75 ore, 1 oră, 2 ore, 4 ore, 6 ore, 8 ore, 16 ore şi 24 ore după administrarea orală la 3 şi 30 mg/kg,
- p.o.: 0,5 ore, 2 ore, 6 ore, 16 ore şi 24 ore după administrarea orală la 25 mg/kg şi 0,5 ore, 1 oră, 2 ore, 6 ore, 16 ore, 30 ore şi 48 ore după administrarea orală la 100 mg/kg.
Plasma din probele de sânge colectate după administrarea formulelor lipidice ale medicamentului din compusul din Exemplul 1 sunt analizate prin cromatografie lichidă cuplată cu detecţia prin spectrometrie de masă. Limita de cuantificare a medicamentului din compusul din Exemplul 1 este mai mică sau egală cu 0,5 ng/ml.
Analiza farmacocinetică necompartimentală se realizează pe valorile medii ale concentraţiilor plasmatice ale compuşilor testaţi. Rezultatele sunt prezentate în Tabelele 4 şi 5 de mai jos.
Rezultatele arată că, indiferent de doză (de la 3 până la 100 mg/kg) şi purtător (formula lipidică sau apoasă), cea mai mare parte a promedicamentului cu formula (I) este transformată rapid in vivo în medicamentul corespunzător cu formula (I') (a se vedea Tabelul 4). Expunerea plasmatică a promedicamentului (Cmax, AUC) este joasă în comparaţie cu cea a medicamentului corespunzător. De asemenea, rezultatele arată că concentraţia plasmatică a medicamentului astfel măsurată (după administrarea promedicamentului) este echivalentă sau chiar mai mare decât cea măsurată după administrarea directă a medicamentului pe cale orală (a se vedea Tabelul 5).
Tabelul 4
Compusul administrat Compusul măsurat Exemplul 1 Medicamentul din Exemplul 1 Exemplul 1, 3 mg/kg p.o. Formula lipidică Cmax (ng/mL) = 16 Tmax (h)= 0,25 AUCt (ng.h/mL) = 5 Cmax (ng/mL) = 342 Tmax (h)= 0,25 AUCt (ng.h/mL) = 314 Exemplul 1, 25 mg/kg p.o. Formula lipidică Cmax (ng/mL) = 244 Tmax (h)= 0,25 AUCt (ng.h/mL) = 92 Cmax (ng/mL) = 6204 Tmax (h)= 0,5 AUCt (ng.h/mL) = 20952 Exemplul 1, 30 mg/kg p.o. Formula apoasă Cmax (ng/mL) = 391 Tmax (h)= 1,0 AUCt (ng.h/mL) = 879 Cmax (ng/mL) = 11967 Tmax (h)= 0,5 AUCt (ng.h/mL) = 49416 Exemplul 1, 100 mg/kg p.o. Formula apoasă Cmax (ng/mL) = 359 Tmax (h)= 2,0 AUCt (ng.h/mL) = 797 Cmax (ng/mL) = 28066 Tmax (h)= 2,0 AUCt (ng.h/mL) = 168478
Tabelul 5
Compusul administrat Compusul măsurat Medicamentul din Exemplul 1 Medicamentul din Exemplul 1, 3 mg/kg p.o. Formula lipidică Cmax (ng/mL) = 295 Tmax (h)= 0,25 AUCt (ng.h/mL) = 225 Medicamentul din Exemplul 1, 25 mg/kg p.o. Formula lipidică Cmax (ng/mL) = 5070 Tmax (h)= 2,0 AUCt (ng.h/mL) = 20400 Medicamentul din Exemplul 1, 30 mg/kg p.o. Formula lipidică Cmax (ng/mL) = 8580 Tmax (h)= 1,0 AUCt (ng.h/mL) = 24200 Medicamentul din Exemplul 1, 100 mg/kg p.o. Formula lipidică Cmax (ng/mL) = 25878 Tmax (h)= 0,5 AUCt (ng.h/mL) = 148046
Mai exact, administrarea pe cale orală a promedicamentului într-un purtător apos face posibilă obţinerea concentraţiilor plasmatice ale medicamentului care sunt echivalente sau chiar mai mari decât cele obţinute după administrarea directă pe cale orală a medicamentului într-un purtător lipidic. Prin urmare, promedicamentul oferă avantajul facilitării tehnologiei de preparare comparativ cu medicamentul corespunzător, în special într-un mediu apos, ceea ce este foarte avantajos în vederea dezvoltării clinice. Într-adevăr, după cum arată Exemplul D, medicamentul din Exemplul 1 este dificil de preparat într-un mediu apos.
Formula apoasă a compuşilor din Exemplele 20 şi 25
Compuşii din Exemplele 20 şi 25 sunt administraţi pe cale orală într-un mediu apos şoarecilor SCID, în următoarele condiţii:
- Grupul 1: 3 mg/kg p.o. în soluţie de carbonat de sodiu 1M (gavaj, 10 ml/kg),
- Grupul 2: 25 mg/kg p.o. în soluţie de carbonat de sodiu 1M (gavaj, 10 ml/kg).
Probele de sânge sunt prelevate la următoarele intervale de timp (3 animale pentru fiecare interval de timp): 0,25 ore, 0,5 ore, 1 oră, 2 ore, 6 ore şi 24 de ore după administrarea orală.
Sângele colectat astfel este centrifugat şi plasma este transferată în eprubete care conţin acid clorhidric 1M. Concentraţiile plasmatice ale compusului fosfat (promedicament) şi omologului său hidroxilat (medicament) sunt determinate simultan folosind o metodă de cromatografie lichidă cuplată cu detecţia prin spectrometrie de masă (TFC-LC-MS/MS). Limita detecţiei pentru ambele entităţi este de 0,5 ng/ml.
Formula lipidică a medicamentului din compuşii din Exemplele 20 şi 25
Medicamentele din Exemplele 20 şi 25 se prepară într-un amestec de polietilen glicol 300/etanol/Phosal 50PG (30/10/60, v/v/v) destinat administrării pe cale orală şoarecilor SCID, în următoarele condiţii:
- Grupul 1: 3 mg/kg p.o. (gavaj, 10 ml/kg),
- Grupul 2: 25 mg/kg p.o. (gavaj, 10 ml/kg).
Probele de sânge sunt prelevate la următoarele intervale de timp (3 animale pentru fiecare interval de timp): 0,25 ore, 0,5 ore, 1 oră, 2 ore, 6 ore şi 24 de ore după administrarea orală.
Sângele astfel colectat este centrifugat şi plasma este transferată în eprubete care conţin acid clorhidric 1M. Concentraţiile plasmatice ale medicamentului sunt determinate cu ajutorul unei metode de cromatografie lichidă cuplată cu detecţie prin spectrometrie de masă (TFC-LC-MS/MS). Limita cuantificării este de 0,5 ng/ml.
Se efectuează analiza farmacocinetică necompartimentală. Rezultatele medii sunt prezentate în Tabelele 6, 7, 8 şi 9 de mai jos.
Tabelul 6, Exemplul 20
Compusul administrat Compuşii măsuraţi Exemplul 20 Medicamentul din Exemplul 20 Exemplul 20, 3 mg/kg p.o. Formula apoasă Cmax (ng/mL) = SLC Tmax (h)= ND AUCt (ng.h/mL) = ND Cmax (ng/mL) = 56 Tmax (h)= 1,0 AUCt (ng.h/mL) = 51 Exemplul 20, 25 mg/kg p.o. Formula apoasă Cmax (ng/mL) = 127 Tmax (h)= 0,25 AUCt (ng.h/mL) = 106 Cmax (ng/mL) = 3701 Tmax (h)= 1,0 AUCt (ng.h/mL) = 8724
ND: nedeterminat
SLC: sub limita de cuantificare
Tabelul 7, Exemplul 20
Compusul administrat Compusul măsurat Medicamentul din Exemplul 20 Medicamentul din Exemplul 20, 3 mg/kg p.o. Formula lipidică Cmax (ng/mL) = 39 Tmax (h)= 1,0 AUCt (ng.h/mL) = 55 Medicamentul din Exemplul 20, 25 mg/kg p.o. Formula lipidică Cmax (ng/mL) = 5524 Tmax (h)= 2,0 AUCt (ng.h/mL) = 10172
Tabelul 8, Exemplul 25
Compusul administrat Compuşii măsuraţi Exemplul 25 Medicamentul din Exemplul 25 Exemplul 25, 3 mg/kg p.o. Formula apoasă Cmax (ng/mL) = 17 Tmax (h)= 1,0 AUCt (ng.h/mL) = 14 Cmax (ng/mL) = 29 Tmax (h)= 1,0 AUCt (ng.h/mL) = 31 Exemplul 25, 25 mg/kg p.o. Formula apoasă Cmax (ng/mL) = 106 Tmax (h)= 1,0 AUCt (ng.h/mL) = 114 Cmax (ng/mL) = 2232 Tmax (h)= 1,0 AUCt (ng.h/mL) = 3965
Tabelul 9, Exemplul 25
Compusul administrat Compusul măsurat Medicamentul din Exemplul 25 Medicamentul din Exemplul 25, 3 mg/kg p.o. Formula lipidică Cmax (ng/mL) = 33 Tmax (h)= 1,0 AUCt (ng.h/mL) = 37 Medicamentul din Exemplul 25, 25 mg/kg p.o. Formula lipidică Cmax (ng/mL) = 3004 Tmax (h)= 1,0 AUCt (ng.h/mL) = 5704
Rezultatele arată că, indiferent de doză (3 sau 25 mg/kg), cea mai mare parte a promedicamentelor cu formula (I) este transformată rapid in vivo în medicamentele corespunzătoare cu formula (I') (a se vedea Tabelele 6, 7, 8 şi 9). Expunerile plasmatice ale promedicamentelor (Cmax, AUC) sunt joase în comparaţie cu expunerile medicamentelor corespunzătoare. De asemenea, rezultatele arată că concentraţiile plasmatice ale medicamentelor astfel măsurate (după administrarea promedicamentelor) sunt echivalente cu cele măsurate după administrarea directă a medicamentelor pe cale orală (a se vedea Tabelele 7 şi 9).
EXEMPLUL D: Profilul farmacocinetic in vivo al compuşilor cu formula (I')
Profilul farmacocinetic al N-(4-hidroxifenil)-3-{6-[((3S)-3-(4-morfolinilmetil)-3,4-dihidro-2(1H)-izochinolinil)carbonil]-1,3-benzodioxol-5-il}-N-fenil-5,6,7,8-tetrahidro-1-indolizină carboxamidă (denumită, de asemenea, medicament din Exemplul 1) este, de asemenea, evaluat într-o formulă lipidică şi apoasă în şobolanul de rasă Wistar.
Medicamentul din Exemplul 1 se prepară într-o suspensie apoasă în hidroxietilceluloză 1% (greutate/volum) în apă şi este comparat cu o formulă lipidică compusă dintr-un amestec de etanol anhidru/polietilen glicol 400/Phosal 50PG (10/30/60, v/v/v). Cele două preparate sunt administrate pe cale orală şobolanilor masculi de rasă Wistar (3 şobolani per formulă) în doză de 100 mg/kg p.o. (gavaj, 10 ml/kg).
Probele de sânge sunt prelevate la următoarele intervale de timp de la fiecare animal (3 animale/interval de timp): 0,25 ore, 0,5 ore, 0,75 ore, 1 oră, 2 ore, 4 ore, 8 ore şi 24 de ore după administrarea orală.
Concentraţiile plasmatice ale compusului testat sunt determinate după extragere, urmată de cromatografia lichidă cuplată cu detecţia prin spectrometrie de masă. Limita cuantificării este de 0,1 ng. Rezultatele sunt prezentate în Tabelul de mai jos:
Tabelul 10
Compusul administrat Compusul măsurat Medicamentul din Exemplul 1 Medicamentul din Exemplul 1, 100 mg/kg p.o. Formula apoasă Cmax (ng/mL) = 816 AUCt (ng.h/mL) = 3480 Medicamentul din Exemplul 1, 100 mg/kg p.o. Formula lipidică Cmax (ng/mL) = 5070 AUCt (ng.h/mL) = 42900
Rezultatele arată că formula lipidică face posibilă o mai bună expunere plasmatică a medicamentului din Exemplul 1 decât formula apoasă.
EXEMPLUL E: Test in vitro pe celulele umane Caco-2.
Transportul celular de la A la B (Apical spre Bazolateral) a compuşilor fosfaţi cu formula (I) şi compuşilor cu formula (I') (medicamentele corespunzătoare) este studiat în celulele umane Caco-2. Fiecare compus se depozitează apical la 1 sau 3 µm (în duplicat) şi apoi sunt incubaţi timp de 120 min.
Mai multe probe sunt prelevate în timpul experimentului;
- apical: imediat după depozitare (t=0) şi la 120 minute
- bazolateral: la sfârşitul experimentului (120 minute)
Concentraţiile compusului fosfat (promedicamentului) şi/sau ale omologului hidroxilat al acestuia (medicamentului) sunt determinate prin cromatografie lichidă cuplată cu detecţia prin spectrometrie de masă (LC-MS/MS). Limita cuantificării pentru ambele entităţi este de 2 ng/ml.
Permeabilitatea evidentă (Papp) şi fracţia absorbită (Fabs) prezisă la om sunt calculate pentru promedicament, pentru medicament după incubarea promedicamentului şi pentru medicament după incubarea medicamentului (Hubatsch et al, Nat Protoc. 2007; 2(9), 2111-2119).
De asemenea, se calculează randamentul experimentului, care corespunde raportului (în procente) cantităţii totale a compusului constatat la sfârşitul experimentului comparativ cu cea incubată.
Rezultatele au fost adunate în Tabelul 11. Acestea arată că promedicamentele compuşilor cu formula (I) sunt descompuse considerabil în cursul experimentului (randamentele experimentului <1,5%), determinând astfel formarea medicamentelor asociate în cantităţi substanţiale.
La final, fracţiunea absorbită prezisă la om pentru medicamentele formate după incubarea promedicamentelor este similară cu cea obţinută după incubarea medicamentelor.
Tabelul 11
Compusul administrat Compuşii măsuraţi Exemplul 1 Medicamentul din Exemplul 1 Exemplul 1 Papp (10-6 cm/s) = 0,01 Fabs (%) = ND Randament (%) =0 Papp (10-6 cm/s) = 0,83 Fabs (%) = 71 Randament (%) =42 Medicamentul din Exemplul 1 Papp (10-6 cm/s) = 0,65 Fabs (%) = 67 Randament (%) =37 Exemplul 4 Medicamentul din Exemplul 4 Exemplul 4 Papp (10-6 cm/s) = 0,33 Fabs (%) = ND Randament (%) =1,3 Papp (10-6 cm/s) = 0,43 Fabs (%) =69 Randament (%) =38 Medicamentul din Exemplul 4 Papp (10-6 cm/s) = 0,21 Fabs (%) =46 Randament (%) =20 Exemplul 5 Medicamentul din Exemplul 5 Exemplul 5 Papp (10-6 cm/s) = 0,26 Fabs (%) = ND Randament (%) =1,2 Papp (10-6 cm/s) = 2,3 Fabs (%) = 86 Randament (%) =78 Medicamentul din Exemplul 5 Papp (10-6 cm/s) = 0,7 Fabs (%) = 68 Randament (%) =34 Exemplul 20 Medicamentul din Exemplul 20 Exemplul 20 Papp (10-6 cm/s) = 0 Fabs (%) = ND Randament (%) =0,94 Papp (10-6 cm/s) = 0,16 Fabs (%) = 16 Randament (%) =100 Medicamentul din Exemplul 20 Papp (10-6 cm/s) = 0,29 Fabs (%) = 25 Randament (%) =91 Exemplul 21 Medicamentul din Exemplul 21 Exemplul 21 Papp (10-6 cm/s) = 0 Fabs (%) = ND Randament (%) =0,83 Papp (10-6 cm/s) = 0,21 Fabs (%) = 19 Randament (%) =100 Medicamentul din Exemplul 21 Papp (10-6 cm/s) = 0,27 Fabs (%) = 24 Randament (%) =82 Exemplul 25 Medicamentul din Exemplul 25 Exemplul 25 Papp (10-6 cm/s) = 0 Fabs (%) = ND Randament (%) =33 Papp (10-6 cm/s) = 0,22 Fabs (%) = 20 Randament (%) =48 Medicamentul din Exemplul 25 Papp (10-6 cm/s) = 0,49 Fabs (%) = 40 Randament (%) =100
ND: nedeterminat
EXEMPLUL F: Activitatea anti-tumorală in vivo.
Activitatea anti-tumorală a compuşilor invenţiei este evaluată într-un model de xenogrefă a celulelor leucemice RS4;11.
1x107 celule RS4;11 sunt grefate subcutanat în şoareci cu imunodepresie (tulpina SCID). 25 - 30 de zile după grefă, atunci când masa tumorală a ajuns la circa 150 mm3, şoarecii sunt trataţi oral cu diferiţi compuşi în două regimuri diferite (tratament zilnic timp de cinci zile pe săptămână în decursul a două săptămâni, sau două tratamente pe săptămână în decursul a două săptămâni). Masa tumorală este măsurată de două ori pe săptămână de la începutul tratamentului.
Compuşii din invenţie posedă activitate antitumorală, pe cale orală, în modelul de leucemie RS4;11 (leucemie limfoblastică acută). Rezultatele obţinute arată că compuşii din invenţie sunt capabili să inducă regresia semnificativă a tumorii.
EXEMPLUL G: Compoziţie farmaceutică: Comprimate
1000 de comprimate conţinând o doză de 5 mg de un compus selectat din Exemplele 1-25 5 g Amidon de grâu 20 g Amidon de porumb 20 g Lactoză 30 g Stearat de magneziu 2 g Silice 1 g Hidroxipropilceluloză 2 g
1. John Porter et al. Atropisomeric small molecule Bcl-2 ligands: Determination of bioactive conformation. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 2009, vol. 19, nr. 6, p. 1767-1772 (regăsit în internet la data de 2017.12.12 URL: <<https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0960894X09000912>>)

Claims (26)

1. Compus cu formula (I): pib posrelh3posrelv3fAllowOverlap1fBehindDocument0fPseudoInline1fLayoutInCell1fLockPosition1fLockRotation1
unde X şi Y reprezintă un atom de carbon sau un atom de azot, înţelegându-se că aceştia pot să nu reprezinte simultan doi atomi de carbon sau doi atomi de azot; A1 şi A2 împreună cu atomii care îi poartă, formează un heterociclu (Het), substituit opţional, aromatic sau nearomatic, compus din 5, 6 sau 7 membri inelari, care pot conţine, pe lângă azot reprezentat de X sau Y, între 1…3 heteroatomi selectaţi independent dintre oxigen, sulf şi azot, înţelegându-se că azotul în cauză poate fi substituit cu o grupare ce reprezintă un atom de hidrogen, o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată sau o grupare -C(O)-O-Alk, unde Alk este o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată, sau A1 şi A2, independent unul de celălalt, reprezintă un atom de hidrogen, un polihaloalchil (C1-C6) liniar sau ramificat, o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată sau un cicloalchil; T reprezintă un atom de hidrogen, o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată, substituită opţional cu 1…3 atomi de halogen, o grupare alchil (C1-C4)-NR1R2, sau o grupare alchil (C1-C4)-OR6; R1 şi R2, independent unul de celălalt, reprezintă un atom de hidrogen sau o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată; sau R1 şi R2 formează cu atomul de azot care îi poartă un heterocicloalchil; R3 reprezintă o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată, o grupare alchenil (C2-C6) liniară sau ramificată, o grupare alchinil (C2-C6) liniară sau ramificată, o grupare cicloalchil, o grupare cicloalchil(C3-C10)alchil (C1-C6), în care fracţiunea alchil este liniară sau ramificată, o grupare heterocicloalchil, o grupare aril sau o grupare heteroaril, înţelegându-se că unu sau mai mulţi atomi de carbon din grupările precedente, sau ai substituenţilor posibili ai acestora, pot fi deuteraţi; R4 reprezintă fenil substituit în poziţia para cu una dintre următoarele grupări fosfatice: -OPO(OM)(OM'), -OPO(OM)(O-M1 +), -OPO(O-M1 +)(O-M2 +), -OPO(O-)(O-)M3 2+, -OPO(OM)(O[CH2CH2O]nCH3), sau -OPO(O-M1 +)(O[CH2CH2O]nCH3), sau R4 reprezintă o grupare pirimidin-5-il substituită în poziţia para cu o grupare cu formula -OPO(O-M1 +)(O-M2 +), unde M şi M', independent unul de celălalt, reprezintă un atom de hidrogen, o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată, o grupare alchenil (C2-C6) liniară sau ramificată, o grupare alchinil (C2-C6) liniară sau ramificată, un cicloalchil sau un heterocicloalchil, ambii fiind compuşi din 5 sau 6 membri inelari, în timp ce M1 + şi M2 + , independent unul de celălalt, reprezintă un cation monovalent acceptabil farmaceutic, iar M3 2+ reprezintă un cation bivalent acceptabil farmaceutic şi n este un număr întreg de la 1 până la 5, înţelegându-se că gruparea fenil poate fi substituită opţional cu unul sau mai mulţi atomi de halogen; R5 reprezintă un atom de hidrogen sau halogen, o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată, sau o grupare alcoxi (C1-C6) liniară sau ramificată; R6 reprezintă un atom de hidrogen sau o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată; Ra, Rb, Rc şi Rd, independent unul de alţii, reprezintă R7, un atom de halogen, o grupare alcoxi (C1-C6) liniară sau ramificată, o grupare hidroxi, o grupare polihaloalchil (C1-C6) liniară sau ramificată, o grupare trifluorometoxi, -NR7R7', nitro, R7-CO-alchil(C0-C6)-, R7-CO-NH-alchil(C0-C6)-, NR7R7'-CO-alchil(C0-C6)-, NR7R7'-CO-alchil(C0-C6)-O-, R7-SO2-NH-alchil(C0-C6)-, R7-NH-CO-NH-alchil(C0-C6)-, R7-O-CO-NH-alchil(C0-C6)-, o grupare heterocicloalchil, sau substituenţii uneia dintre perechile (Ra,Rb), (Rb,Rc) sau (Rc,Rd) formează împreună cu atomii de carbon care îi poartă un inel compus din 5…7 membri inelari, care pot conţine 1…2 heteroatomi selectaţi dintre oxigen şi sulf, înţelegându-se, de asemenea, că unul sau mai mulţi atomi de carbon ai inelului definit mai sus poate fi deuterat sau substituit cu 1…3 grupări selectate dintre halogen sau alchil (C1-C6) liniar sau ramificat; R7 şi R7', independent unul de celălalt, reprezintă un hidrogen, un alchil (C1-C6) liniar sau ramificat, un alchenil (C2-C6) liniar sau ramificat, un alchinil (C2-C6) liniar sau ramificat, un aril sau un heteroaril, sau R7 şi R7', împreună cu atomul de azot care îi poartă, formează un heterociclu compus din 5…7 membri inelari; înţelegându-se că: - "aril" înseamnă o grupare fenil, naftil, bifenil sau indenil, - "heteroaril" înseamnă orice grupare mono sau biciclică compusă din 5…10 membri inelari, având, cel puţin, o fracţiune aromatică şi conţinând 1…4 heteroatomi selectaţi dintre oxigen, sulf şi azot inclusiv atomi de azot cuaternari, - "cicloalchil" înseamnă orice grupare mono-sau biciclică, nearomatică, carbociclică care conţine 3 - 10 membri inelari, - "heterocicloalchil" înseamnă orice grupare mono-sau biciclică, nearomatică, condensată sau spiro compusă din 3…10 membri inelari şi care conţine 1…3 heteroatomi selectaţi dintre oxigen, sulf, SO, SO2 şi azot; fiind posibil ca grupările aril, heteroaril, cicloalchil şi heterocicloalchil astfel definite şi grupările alchil, alchenil, alchinil şi alcoxi să fie substituite cu 1…3 grupări selectate dintre alchil (C1-C6) liniar sau ramificat, substituit opţional, spiro (C3-C6), alcoxi (C1-C6) liniar sau ramificat, substituit opţional, (C1-C6)alchil-S-, hidroxi, oxo sau N-oxid, nitro, ciano, -COOR', -OCOR', NR'R", polihaloalchil (C1-C6) liniar sau ramificat, trifluormetoxi, (C1-C6)alchilsulfonil, halogen, aril opţional substituit, heteroaril, ariloxi, ariltio, cicloalchil, heterocicloalchil, substituit opţional cu unul sau mai mulţi atomi de halogen sau grupări alchil, înţelegându-se că R' şi R", independent unul de celălalt, reprezintă un atom de hidrogen sau o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată, substituită opţional; fiind posibil ca gruparea Het definită în formula (I) să fie substituită cu 1…3 grupări selectate dintre alchil (C1-C6) liniar sau ramificat, hidroxi, alcoxi (C1-C6) liniar sau ramificat, NR1'R1" şi halogen, înţelegându-se că R1' şi R1 sunt astfel cum au fost definiţi pentru grupările R' şi R'' menţionate mai sus; enantiomerii şi diastereoizomerii lor, şi sărurile de adiţie ale acestora cu un acid sau o bază acceptabilă farmaceutic.
2. Compus, conform revendicării 1, unde R4 reprezintă fenil substituit în poziţia para cu o grupare cu formula -OPO(OM)(OM'), -OPO(OM)(O-M1 +), -OPO(O-M1 +)(O-M2 +), -OPO(O-)(O-)M3 2+, -OPO(OM)(O[CH2CH2O]nCH3) sau -OPO(O-M1 +)(O[CH2CH2O]nCH3), unde M şi M', independent unul de celălalt, reprezintă un atom de hidrogen, o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată, o grupare alchenil (C2-C6) liniară sau ramificată, o grupare alchinil (C2-C6) liniară sau ramificată, un cicloalchil sau un heterocicloalchil, ambii fiind compuşi din 5 sau 6 membri inelari, în timp ce M1 + şi M2 +, independent unul de celălalt, reprezintă un cation monovalent acceptabil farmaceutic, iar M3 2+ reprezintă un cation bivalent acceptabil farmaceutic şi n este un număr întreg de la 1 până la 5, înţelegându-se că gruparea fenil poate fi substituită opţional cu unul sau mai mulţi atomi de halogen.
3. Compus, conform revendicării 1, unde R4 reprezintă un fenil substituit în poziţia para cu o grupare cu formula -OPO(O-Na+)(O-Na+).
4. Compus, conform uneia dintre revendicările 1 - 3, unde X reprezintă un atom de carbon şi Y reprezintă un atom de azot.
5. Compus, conform uneia dintre revendicările 1 - 3, unde grupa:
reprezintă o 5,6,7,8-tetrahidroindolizină, o indolizină sau un pirol dimetilat.
6. Compus, conform uneia dintre revendicările 1 - 5, unde T reprezintă o grupare metil, (morfolin-4-il)metil sau 3-(morfolin-4-il)propil.
7. Compus, conform uneia dintre revendicările 1 - 6, unde Ra şi Rd reprezintă fiecare un atom de hidrogen şi (Rb,Rc), împreună cu atomii de carbon care îi poartă formează o grupă 1,3-dioxolan sau o grupă 1,4-dioxan; sau Ra, Rc şi Rd reprezintă fiecare un atom de hidrogen şi Rb reprezintă un hidrogen sau un halogen.
8. Compus, conform uneia dintre revendicările 1 - 6, unde Ra şi Rd reprezintă fiecare un atom de hidrogen, Rb reprezintă un atom de halogen şi Rc o grupare metoxi.
9. Compus, conform uneia dintre revendicările 1 - 6, unde Ra, Rb şi Rd reprezintă fiecare, în mod avantajos, un atom de hidrogen şi Rc reprezintă o grupare NR7R7'-CO-(C0-C6)alchil-O-.
10. Compus, conform uneia dintre revendicările 1 - 9, unde R3 reprezintă, în mod avantajos, o grupare selectată dintre fenil, 1H-indol, 1H-pirolo[2,3-b]piridină, piridină, 1H-pirazol, 1H-pirol şi 2,3-dihidro-1H-pirolo[2,3-b]piridină, aceste grupări având opţional unul sau mai mulţi substituenţi selectaţi dintre alchil, ciano şi trideuteriometil (C1-C6) liniar sau ramificat.
11. Compus, conform revendicării 1, selectat din următoarea listă: 4-[{[3-(6-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}-1,3-benzodioxol-5-il)-5,6,7,8-tetrahidroindolizin-1-il]carbonil}(fenil)amino]fenil fosfat disodic, 4-[{[5-(5-cloro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1Hil]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}(piridin-4-il)amino]fenil fosfat disodic, 4-({[5-(5-cloro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}[1-(trideuteriometil)-1H-pirazol-4-il]amino)fenil fosfat disodic, 4-({[5-(5-cloro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}(5-ciano-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il)amino]fenil fosfat disodic, 4-({[5-(5-cloro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}(5-ciano-1-metil-1H-pirol-3-il)amino]fenil fosfat disodic, 4-({[5-(5-cloro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}(1-metil-1H-pirazol-4-il)amino]fenil fosfat disodic, 4-[(5-ciano-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il){[5-(5-fluoro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}amino]fenil fosfat disodic, 4-({[5-(5-fluoro-2-{[(3S)-3-(morfolin-4-ilmetil)-3,4-dihidroizochinolin-2(1H)-il]carbonil}fenil)-1,2-dimetil-1H-pirol-3-il]carbonil}(1-metil-1H-pirazol-4-il)amino]fenil fosfat disodic; enantiomerii şi diastereoizomerii lor, şi sărurile de adiţie ale acestora cu un acid sau o bază acceptabilă farmaceutic.
12. Procedeu de obţinere a compuşilor cu formula (I) conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că în calitate de material iniţial este utilizat compusul cu formula (II):
unde Ra, Rb, Rc şi Rd sunt astfel cum au fost definiţi în revendicarea 1, compusul cu formula (II) fiind supus unei reacţii Heck, într-un mediu apos sau organic, în prezenţa unui catalizator de paladiu, unei baze, unei fosfine şi a compusului cu formula (III):
unde A1 şi A2, X şi Y sunt astfel cum au fost definiţi în revendicarea 1 şi Alk reprezintă o grupare alchil (C1-C6) liniară sau ramificată, pentru a obţine compusul cu formula (IV):
unde A1, A2, X, Y, Ra, Rb, Rc şi Rd sunt astfel cum au fost definiţi în revendicarea 1 şi Alk este astfel precum a fost definit mai sus, funcţia aldehidă a compusului cu formula (IV) fiind oxidată în acid carboxilic pentru a forma compusul cu formula (V):
unde A1, A2, X, Y, Ra, Rb, Rc şi Rd sunt astfel cum au fost definiţi în revendicarea 1 şi Alk este astfel precum a fost definit mai sus, compusul cu formula (V) fiind supus apoi cuplării peptidice cu un compus cu formula (VI):
unde T şi R5 sunt astfel cum au fost definiţi în revendicarea 1, pentru a obţine compusul cu formula (VII):
unde A1, A2, X, Y, Ra, Rb, Rc, Rd, T şi R5 sunt astfel cum au fost definiţi în revendicarea 1 şi Alk este astfel precum a fost definit mai sus, funcţia esterică a compusului cu formula (VII) fiind hidrolizată pentru a se obţine acidul carboxilic sau carboxilatul corespunzător, care poate fi transformat într-un derivat de acid, cum ar fi clorura de acil sau anhidrida corespunzătoare înainte de a fi cuplat cu o amină NHR3R4 unde R3 şi R4 au aceleaşi semnificaţii ca în revendicarea 1, înainte de a fi supus acţiunii unui compus pirofosfat, fosfonat sau fosforil în condiţii bazice, fiind posibil ca compusul astfel obţinut să fie opţional hidrolizat sau hidrogenolizat pentru a se obţine compusul cu formula (I), compusul cu formula (I) care poate fi purificat conform unei tehnici de separare obişnuite, care este transformat, la dorinţă, în sărurile sale de adiţie cu un acid sau o bază acceptabilă farmaceutic şi care este opţional separat în izomerii săi conform unei tehnici de separare obişnuite, înţelegându-se că în orice moment considerat oportun în cursul procedeului descris mai sus, anumite grupări (hidroxi, amino...) de reactivi sau intermediari de sinteză pot fi protejate şi apoi deprotejate conform cerinţelor de sinteză.
13. Compoziţie farmaceutică care conţine un compus cu formula (I) conform uneia dintre revendicările 1 - 11 sau o sare de adiţie a acestuia cu un acid sau o bază acceptabilă farmaceutic în combinaţie cu unul sau mai mulţi excipienţi acceptabili farmaceutic.
14. Compoziţie farmaceutică, conform revendicării 13 pentru utilizarea în calitate de promedicament a unui agent proapoptotic.
15. Compoziţie farmaceutică, conform revendicării 13 pentru utilizarea în tratamentul formelor de cancer, bolilor autoimune şi bolilor sistemului imunitar.
16. Compoziţie farmaceutică, conform revendicării 15 pentru utilizarea în tratamentul formelor de cancer la vezica urinară, cerebral, de sân şi uter, leucemiilor limfoide cronice, cancerului colorectal, formelor de cancer la esofag şi ficat, leucemiilor limfoblastice, limfoamelor non-Hodgkin, melanoamelor, hemopatiilor maligne, mieloamelor, cancerului ovarian, cancerului pulmonar cu celule non-mici, cancerului de prostată şi cancerului pulmonar cu celule mici.
17. Utilizarea unei compoziţii farmaceutice conform revendicării 13 în fabricarea unui medicament pentru utilizarea în calitate de agent proapoptotic.
18. Utilizarea unei compoziţii farmaceutice conform revendicării 13 în fabricarea unui medicament destinat tratamentului formelor de cancer, bolilor autoimune şi bolilor sistemului imunitar.
19. Utilizarea, conform revendicării 18, a unei compoziţii farmaceutice în fabricarea unui medicament destinat tratamentului formelor de cancer la vezica urinară, cerebral, de sân şi uter, leucemiilor limfoide cronice, cancerului colorectal, formelor de cancer la esofag şi ficat, leucemiilor limfoblastice, limfoamelor non-Hodgkin, melanoamelor, hemopatiilor maligne, mieloamelor, cancerului ovarian, cancerului pulmonar cu celule non-mici, cancerului de prostată şi cancerului pulmonar cu celule mici.
20. Compus, conform uneia dintre revendicările 1 - 11, sau o sare de adiţie a acestuia cu un acid sau o bază acceptabilă farmaceutic, pentru utilizarea în tratamentul formelor de cancer la vezica urinară, cerebral, de sân şi uter, leucemiilor limfoide cronice, cancerului colorectal, formelor de cancer la esofag şi ficat, leucemiilor limfoblastice, limfoamelor non-Hodgkin, melanoamelor, hemopatiilor maligne, mieloamelor, cancerului ovarian, cancerului pulmonar cu celule non-mici, cancerului de prostată şi cancerului pulmonar cu celule mici.
21. Utilizarea unui compus cu formula (I) conform uneia dintre revendicările 1 - 11, sau a unei sări de adiţie a acestuia cu un acid sau o bază acceptabilă farmaceutic, în fabricarea unui medicament destinat tratamentului formelor de cancer la vezica urinară, cerebral, de sân şi uter, leucemiilor limfoide cronice, cancerului colorectal, formelor de cancer la esofag şi ficat, leucemiilor limfoblastice, limfoamelor non-Hodgkin, melanoamelor, hemopatiilor maligne, mieloamelor, cancerului ovarian, cancerului pulmonar cu celule non-mici, cancerului de prostată şi cancerului pulmonar cu celule mici.
22. Asocierea unui compus cu formula (I) conform oricăreia dintre revendicările 1 - 11 cu un agent anticanceros selectat dintre agenţii genotoxici, toxinele mitotice, anti-metaboliţi, inhibitorii de proteazom, inhibitorii de kinază şi anticorpi.
23. Compoziţie farmaceutică care conţine o asociere conform revendicării 22 în combinaţie cu unul sau mai mulţi excipienţi acceptabili farmaceutic.
24. Asociere, conform revendicării 22 pentru utilizarea în tratamentul formelor de cancer.
25. Utilizarea unei asocieri conform revendicării 22 în fabricarea unui medicament pentru utilizarea în tratamentul formelor de cancer.
26. Compus, conform oricăreia dintre revendicările 1 - 11 pentru utilizarea în asociere cu radioterapia în tratamentul formelor de cancer.
MDA20140073A 2013-07-23 2014-07-15 Derivaţi pe bază de tetrahidroizochinoline şi N-(fenilfosfat)amide, procedeu de obţinere a lor şi compoziţii farmaceutice care îi conţin MD4551C1 (ro)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR1357259A FR3008979B1 (fr) 2013-07-23 2013-07-23 Nouveaux derives phosphates, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent

Publications (3)

Publication Number Publication Date
MD20140073A2 MD20140073A2 (en) 2015-01-31
MD4551B1 MD4551B1 (ro) 2018-02-28
MD4551C1 true MD4551C1 (ro) 2018-09-30

Family

ID=50288170

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
MDA20140073A MD4551C1 (ro) 2013-07-23 2014-07-15 Derivaţi pe bază de tetrahidroizochinoline şi N-(fenilfosfat)amide, procedeu de obţinere a lor şi compoziţii farmaceutice care îi conţin

Country Status (48)

Country Link
US (3) US9115159B2 (ro)
EP (1) EP2829545B1 (ro)
JP (1) JP5894638B2 (ro)
KR (2) KR101713103B1 (ro)
CN (1) CN104341451B (ro)
AP (1) AP2014007773A0 (ro)
AR (1) AR097008A1 (ro)
AU (1) AU2014203808B2 (ro)
BR (1) BR102014017997B1 (ro)
CA (1) CA2856886C (ro)
CL (1) CL2014001865A1 (ro)
CR (1) CR20140336A (ro)
CU (1) CU24316B1 (ro)
CY (1) CY1117834T1 (ro)
DK (1) DK2829545T3 (ro)
DO (1) DOP2014000163A (ro)
EA (1) EA027444B1 (ro)
EC (1) ECSP14008757A (ro)
ES (1) ES2593417T3 (ro)
FR (1) FR3008979B1 (ro)
GE (1) GEP201706704B (ro)
HK (1) HK1204623A1 (ro)
HR (1) HRP20161202T8 (ro)
HU (1) HUE029616T2 (ro)
IL (1) IL233580B (ro)
JO (1) JO3160B1 (ro)
MA (1) MA37213B1 (ro)
MD (1) MD4551C1 (ro)
ME (1) ME02641B (ro)
MX (1) MX351467B (ro)
MY (1) MY173258A (ro)
NI (1) NI201400080A (ro)
PE (1) PE20150218A1 (ro)
PH (1) PH12014000194A1 (ro)
PL (1) PL2829545T3 (ro)
PT (1) PT2829545T (ro)
RS (1) RS55098B1 (ro)
RU (1) RU2617682C2 (ro)
SA (1) SA114350669B1 (ro)
SG (1) SG10201403939WA (ro)
SI (1) SI2829545T1 (ro)
SV (1) SV2014004771A (ro)
TN (1) TN2014000301A1 (ro)
TW (1) TWI527824B (ro)
UA (1) UA119738C2 (ro)
UY (1) UY35661A (ro)
WO (1) WO2015011399A1 (ro)
ZA (1) ZA201405418B (ro)

Families Citing this family (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8461179B1 (en) 2012-06-07 2013-06-11 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Dihydronaphthyridines and related compounds useful as kinase inhibitors for the treatment of proliferative diseases
FR3008976A1 (fr) * 2013-07-23 2015-01-30 Servier Lab "nouveaux derives d'indolizine, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent"
FR3008977A1 (fr) 2013-07-23 2015-01-30 Servier Lab Nouveaux derives d'isoindoline ou d'isoquinoline, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
UY37316A (es) * 2016-07-07 2018-01-31 Servier Lab Dispersión sólida farmacéutica de un inhibidor de bcl-2, composiciones farmacéuticas de ésta, y usos para el tratamiento de cáncer
UA125138C2 (uk) * 2016-07-22 2022-01-19 Ле Лаборатуар Сервьє Комбінація інгібітора bcl-2 та інгібітора mcl-1, їхнє застосування і фармацевтичні композиції
AU2017300738A1 (en) 2016-07-22 2019-02-07 Les Laboratoires Servier Combination of a BCL-2 inhibitor and a MCL-1 inhibitor, uses and pharmaceutical compositions thereof
WO2018158225A1 (en) 2017-02-28 2018-09-07 Les Laboratoires Servier Combination of a bcl-2 inhibitor and a mdm2 inhibitor, uses and pharmaceutical compositions thereof
EA039621B1 (ru) * 2017-06-09 2022-02-17 Ле Лаборатуар Сервье Комбинация bcl-2 ингибитора и mcl-1 ингибитора, их применения и фармацевтические композиции
TWI672302B (zh) * 2017-07-06 2019-09-21 法商施維雅藥廠 Bcl-2抑制劑之新結晶型、其製備方法及含其之醫藥組合物
FR3072679B1 (fr) * 2017-10-25 2020-10-30 Servier Lab Nouveaux derives macrocycliques, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
JP7523351B2 (ja) 2018-01-31 2024-07-26 デシフェラ・ファーマシューティカルズ，エルエルシー 肥満細胞症の治療のための併用療法
JP2021512105A (ja) 2018-01-31 2021-05-13 デシフェラ・ファーマシューティカルズ，エルエルシー 消化管間質腫瘍の治療のための併用療法
NZ784949A (en) 2019-08-12 2025-09-26 Deciphera Pharmaceuticals Llc Ripretinib for treating gastrointestinal stromal tumors
TWI878335B (zh) 2019-08-12 2025-04-01 美商迪賽孚爾製藥有限公司 治療胃腸道基質瘤方法
CN110606860B (zh) * 2019-09-29 2021-12-10 上海勋和医药科技有限公司 一种吡啶磺酰胺磷酸酯类化合物、其制备方法及其用途
AU2020419197B2 (en) 2019-12-30 2023-08-31 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Amorphous kinase inhibitor formulations and methods of use thereof
NZ789199A (en) 2019-12-30 2025-07-25 Deciphera Pharmaceuticals Llc Compositions of 1-(4-bromo-5-(1-ethyl-7-(methylamino)-2-oxo-1,2-dihydro-1,6-naphthyridin-3-yl)-2-fluorophenyl)-3-phenylurea
EP4304588A4 (en) * 2021-03-12 2025-01-29 Eil Therapeutics, Inc. COMPOUNDS CONTAINING TETRAHYDROINDOLIZIN-1-CARBOXAMIDE AS BCL-2 INHIBITORS
US20250002491A1 (en) 2021-10-04 2025-01-02 Forx Therapeutics Ag N,n-dimethyl-4-(7-(n-(1-methylcyclopropyl)sulfamoyl)-imidazo[1,5-a]pyridin-5-yl)piperazine-1-carboxamide derivatives and the corresponding pyrazolo[1,5-a]pyridine derivatives as parg inhibitors for the treatment of cancer
WO2023225359A1 (en) 2022-05-20 2023-11-23 Novartis Ag Antibody-drug conjugates of antineoplastic compounds and methods of use thereof
US11779572B1 (en) 2022-09-02 2023-10-10 Deciphera Pharmaceuticals, Llc Methods of treating gastrointestinal stromal tumors
WO2025111431A1 (en) 2023-11-22 2025-05-30 Les Laboratoires Servier Anti-cd7 antibody-drug conjugates and methods of use thereof
WO2025111450A1 (en) 2023-11-22 2025-05-30 Les Laboratoires Servier Anti-cd74 antibody-drug conjugates and methods of use thereof

Family Cites Families (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4901102B2 (ja) * 2002-05-03 2012-03-21 エクセリクシス， インク． プロテインキナーゼモジュレーターおよびその使用方法
AU2003249713A1 (en) * 2002-07-03 2004-01-23 Axys Pharmaceuticals, Inc. 3,4-dihydroisoquinolin-1-one derivatives as inducers of apoptosis
GB0224557D0 (en) * 2002-10-22 2002-11-27 Glaxo Group Ltd Novel compounds
AU2006331765A1 (en) * 2005-12-22 2007-07-05 Wyeth Substituted isoquinoline-1,3(2H,4H)-diones, 1-thioxo-1,4-dihydro-2H-isoquinoline-3-ones and 1,4-dihydro-3(2H)-isoquinolones and use thereof as kinase inhibitor
US7902218B2 (en) 2006-12-12 2011-03-08 Bristol-Myers Squibb Company Substituted tetrahydroisoquinolines as β-secretase inhibitors
JP5496877B2 (ja) * 2007-04-16 2014-05-21 アッヴィ・インコーポレイテッド ７−置換インドールＭｃｌ−１阻害薬
EP2149560B1 (en) 2007-05-22 2015-05-13 Astellas Pharma Inc. 1-substituted tetrahydroisoquinoline compound
US20090221612A1 (en) * 2008-02-13 2009-09-03 Mitchell Scott A Certain substituted amides, method of making, and method of use thereof
WO2010080503A1 (en) * 2008-12-19 2010-07-15 Genentech, Inc. Heterocyclic compounds and methods of use
TWI520960B (zh) * 2010-05-26 2016-02-11 艾伯維有限公司 用於治療癌症及免疫及自體免疫疾病之細胞凋亡誘導劑
US20120301080A1 (en) 2011-05-23 2012-11-29 Senko Advanced Components, Inc. True one piece housing fiber optic adapter
AU2012355619A1 (en) 2011-12-23 2014-07-17 Novartis Ag Compounds for inhibiting the interaction of BCL2 with binding partners
AU2012355624A1 (en) 2011-12-23 2014-07-17 Novartis Ag Compounds for inhibiting the interaction of BCL2 with binding partners
EA201491264A1 (ru) 2011-12-23 2014-11-28 Новартис Аг Соединения для ингибирования взаимодействия bcl-2 с партнерами по связыванию
CA2859873A1 (en) 2011-12-23 2013-06-27 Novartis Ag Compounds for inhibiting the interaction of bcl2 with binding partners
AU2012355613A1 (en) 2011-12-23 2014-07-17 Novartis Ag Compounds for inhibiting the interaction of BCL2 with binding partners
CN103177906A (zh) 2011-12-26 2013-06-26 西门子公司 用于中压开关设备的断路器
ITPR20110103A1 (it) 2011-12-27 2013-06-28 G E A F S R L Metodo e apparato per la sterilizzazione di una soluzione liquida mediante radio frequenza
US9114953B2 (en) 2011-12-29 2015-08-25 Inventio Ag Emergency operation of elevators based on an indicated emergency condition
FR2986002B1 (fr) * 2012-01-24 2014-02-21 Servier Lab Nouveaux derives d'indolizine, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
DE212013000059U1 (de) 2012-01-24 2014-09-11 Danfoss Power Electronics A/S Entfeuchter

Also Published As

Publication number Publication date
HUE029616T2 (en) 2017-03-28
EA201400754A2 (ru) 2014-12-30
ME02641B (me) 2017-06-20
PH12014000194B1 (en) 2015-06-29
US9597341B2 (en) 2017-03-21
GEP201706704B (en) 2017-07-25
WO2015011399A1 (fr) 2015-01-29
RS55098B1 (sr) 2016-12-30
FR3008979A1 (fr) 2015-01-30
EP2829545B1 (fr) 2016-06-22
MA37213A1 (fr) 2016-06-30
CN104341451A (zh) 2015-02-11
HRP20161202T8 (hr) 2016-12-30
AU2014203808B2 (en) 2018-09-20
CA2856886A1 (fr) 2015-01-23
TN2014000301A1 (fr) 2015-12-21
RU2617682C2 (ru) 2017-04-26
CR20140336A (es) 2015-10-07
MY173258A (en) 2020-01-09
US20150313923A1 (en) 2015-11-05
US20170143746A1 (en) 2017-05-25
IL233580B (en) 2020-03-31
BR102014017997B1 (pt) 2020-05-19
JP2015028017A (ja) 2015-02-12
HK1201536A1 (zh) 2015-09-04
HRP20161202T1 (hr) 2016-11-04
JP5894638B2 (ja) 2016-03-30
TWI527824B (zh) 2016-04-01
SI2829545T1 (sl) 2016-10-28
MA37213B1 (fr) 2017-03-31
BR102014017997A2 (pt) 2015-11-17
UA119738C2 (uk) 2019-08-12
FR3008979B1 (fr) 2015-07-24
AP2014007773A0 (en) 2014-07-31
KR20170001694A (ko) 2017-01-04
SV2014004771A (es) 2015-01-28
CL2014001865A1 (es) 2015-06-26
MD4551B1 (ro) 2018-02-28
MX2014008866A (es) 2015-07-21
MX351467B (es) 2017-10-17
NZ627178A (en) 2016-01-29
ZA201405418B (en) 2020-02-26
EP2829545A1 (fr) 2015-01-28
IL233580A0 (en) 2014-11-02
TW201504254A (zh) 2015-02-01
UY35661A (es) 2015-02-27
DOP2014000163A (es) 2015-01-15
CY1117834T1 (el) 2017-05-17
DK2829545T3 (en) 2016-09-19
KR20150011785A (ko) 2015-02-02
NI201400080A (es) 2014-10-24
AU2014203808A1 (en) 2015-02-12
CU24316B1 (es) 2018-02-08
RU2014130129A (ru) 2016-02-10
HK1204623A1 (en) 2015-11-27
EA201400754A3 (ru) 2015-03-31
SG10201403939WA (en) 2015-02-27
PH12014000194A1 (en) 2015-06-29
KR101713103B1 (ko) 2017-03-07
PE20150218A1 (es) 2015-02-14
PT2829545T (pt) 2016-07-13
CA2856886C (fr) 2016-08-02
CN104341451B (zh) 2018-04-03
ES2593417T3 (es) 2016-12-09
ECSP14008757A (es) 2016-01-29
AR097008A1 (es) 2016-02-10
US20150031648A1 (en) 2015-01-29
CU20140095A7 (es) 2016-02-29
SA114350669B1 (ar) 2016-04-11
US9115159B2 (en) 2015-08-25
PL2829545T3 (pl) 2016-12-30
EA027444B1 (ru) 2017-07-31
JO3160B1 (ar) 2017-09-20
MD20140073A2 (en) 2015-01-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
MD4551C1 (ro) Derivaţi pe bază de tetrahidroizochinoline şi N-(fenilfosfat)amide, procedeu de obţinere a lor şi compoziţii farmaceutice care îi conţin
US10258626B2 (en) Indolizine compounds, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
RU2693629C2 (ru) Новые индолизиновые соединения, способ их получения и фармацевтические композиции, содержащие их
MD4575C1 (ro) Noi compuşi ai pirolului, procedeu de obţinere a lor şi compoziţii farmaceutice care îi conţin
NZ627178B (en) New phosphate prodrugs of indolizine and pyrrole derivatives, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
NZ626623B (en) New pyrrole compounds, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
HK1201536B (en) New phosphate derivatives, method of preparing same and pharmaceutical compositions containing them

Legal Events

Date Code Title Description
FG4A Patent for invention issued
TH4A Change/correction in patent specification

Free format text: CHANGE OF APPLICANT ADDRESS

KA4A Patent for invention lapsed due to non-payment of fees (with right of restoration)
MM4A Patent for invention definitely lapsed due to non-payment of fees