MD3313850T2 - Noi derivaţi de aminoacizi, procedeu pentru prepararea acestora şi compoziţii farmaceutice care îi conţin - Google Patents

Abstract

Compuşii cu formula (I): în care R1, R2, R5, R6, R7, R12, X, Y, A, E şi n sunt definiţi în descriere. Medicamente.

Description

Prezenta invenţie se referă la noi derivaţi de aminoacizi, la procedeul pentru prepararea lor şi la compoziţiile farmaceutice care îi conţin.

Compuşii conform prezentei invenţii sunt noi şi au caracteristici farmacologice foarte valoroase în domeniul apoptozei şi cancerologiei.

Apoptoza, sau moartea programată a celulelor, este un procedeu fiziologic care este crucial pentru dezvoltarea embrionică şi întreţinerea homeostaziei tisulare. Moartea celulară de tip apoptotic implică schimbări morfologice precum condensarea nucleului, fragmentarea ADN-ului şi de asemenea fenomene biochimice precum activarea caspazelor care provoacă vătămarea componentelor cheie structurale ale celulei, astfel inducând dezmembrarea ei şi moartea. Reglarea procesului apoptozei estecomplexă şi implică activarea sau represiunea mai multor căi de semnalizare intracelulară (Cory S. et al., Nature Review Cancer 2002, 2, 647-656).

Dereglarea apoptozei este implicată în anumite patologii. Apoptoza crescută este asociată cu boli neurodegenerative ca boala Parkinson, boala Alzheimer şi ischemia. Din contră, deficitele în implementarea apoptozei joacă un rol semnificativ în dezvoltarea cancerelor şi chimiorezistenţa lor, in boli auto-imune, boli inflamatorii şi infecţii virale. În consecinţă, absenţa apoptozei este una din semnificaţiile fenotipice ale cancerului (Hanahan D. et al., Cell 2000, 100, 57-70).

Proteinele anti-apoptotice ale familiei Bcl-2 sunt asociate cu numeroase patologii. Implicarea proteinelor din familia Bcl-2 este descrisă în numeroase tipuri de cancer, precum cancer de colon, cancer de sân, cancer pulmonar cu celule mici, cancer pulmonar cu celule care nu sunt mici, cancer de vezică urinară, cancer ovarian, cancer de prostată, leucemie limfoidă cronică, limfom, mielom, leucemie mieloidă acută, cancer pancreatic, etc. Supraexpresia proteinelor anti-apoptotice ale familiei Bcl-2 este implicată în tumorigeneză, in rezistenţa la chimioterapie şi în prognoza clinică a pacienţilor afectaţi de cancer. Remarcabil, Mcl-1, un membru al familiei anti-apoptotice Bcl-2, este supraexprimat în variate tipuri de cancer (Beroukhim R. et al., Nature 2010, 899-905). WO 2013/110890dezvăluie inhibitori ai Bcl-2. Există, prin urmare o nevoie terapeutică pentru compuşi care inhibă activitatea anti-apoptotică a proteinelor din familia Bcl-2.

Inplus ca noutate, compuşii conform prezentei invenţii au proprietăţi pro-apoptotice care fac posibilă utilizarea lor în patologiile implicând un defect în apoptoză, ca, de exemplu, in tratamentul cancerului şi al bolilor imune şiauto-imune. Prezenta invenţie se referă în mod special la compuşii cu formula (I):

în care:

◆A reprezintă gruparea

incare 1 este legat de gruparea -NH- şi 2 este legat de ciclul aromatic,

◆ E reprezintă o grupare cicloalchil, o grupare heterocicloalchil, o grupare aril sau o grupare heteroaril,

◆ X reprezintă un atom de azot sau o grupare C-R4,

◆ Y reprezintă un atom de azot sau o grupare C-R3,

◆ R1 reprezintă un atom de halogen, o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, o grupare (C2-C6)alchenilliniară sau ramificată, o grupare (C2-C6)alchinilliniară sau ramificată, o grupare (C1-C6)polihaloalchilliniară sau ramificată, o gruparehidroxi, o gruparehidroxi(C1-C6)alchil, o grupare (C1-C6)alcoxiliniară sau ramificată, -S-(C1-C6)alchil, o grupare ciano, o grupare nitro, -alchil(C0-C6)-NR9R9', -O-alchil(C1-C6)-NR9R9', -O-alchil(C1-C6)-R10, -C(O)-OR9, -O-C(O)-R9, -C(O)-NR9R9', -NR9-C(O)-R9', -NR9-C(O)-OR9', -alchil(C1-C6)-NR9-C(O)-R9', -SO2-NR9R9', -SO2-alchil(C1-C6),

◆ R2, R3, R4şi R5 independent unul faţă de altul reprezintă un atom de hidrogen, un atom de halogen, o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, o grupare(C2-C6)alchenilliniară sau ramificată, o grupare (C2-C6)alchinilliniară sau ramificată, o grupare (C1-C6)polihaloalchilliniară sau ramificată, o gruparehidroxi, o grupare hidroxi(C1-C6)alchil, o grupare (C1-C6)alcoxiliniară sau ramificată, -S-(C1-C6)alchil, o grupare ciano, o grupare nitro, -alchil(C0-C6)-NR9R9', -O-alchil(C1-C6)-NR9R9', -O-alchil(C1-C6)-R10, -C(O)-OR9, -O-C(O)-R9, -C(O)-NR9R9', -NR9-C(O)-R9', -NR9-C(O)-OR9', -alchil(C1-C6)-NR9-C(O)-R9', -SO2-NR9R9', sau -SO2-alchil(C1-C6), sau substituenţii pereche (R1, R2) formează împreună cu atomul de carbon de care sunt legaţi un ciclu aromatic sau non-aromatic format din 5 la 7 atomi, care poate conţine de la 1 la 3 heteroatomi selectaţi dintre oxigen, sulf şi azot,fiind subînţeles că ciclul rezultat poate fi substituit cu de la 1 la 2 grupări selectate din halogen, (C1-C6)alchil liniar sau ramificat, -alchil(C0-C6)-NR9R9', -NR11R11', -alchil(C0-C6)-Cy1, sau oxo,

◆ R6 reprezintă un atom dehidrogen, un atom de halogen, o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, o grupare (C2-C6)alchenilliniară sau ramificată, o grupare(C2-C6)alchinilliniară sau ramificată, o grupare (C1-C6)polihaloalchilliniară sau ramificată, o gruparehidroxi, o grupare (C1-C6)alcoxiliniară sau ramificată, -S-(C1-C6)alchil, o grupare ciano, o grupare nitro, -alchil(C0-C6)-NR9R9', -O-Cy1, -alchil(C0-C6)-Cy1, -alchenil(C2-C6)-Cy1, -alchinil(C2-C6)-Cy1, -O-alchil(C1-C6)-R10, -C(O)-OR9, -O-C(O)-R9, -C(O)-NR9R9', -NR9-C(O)-R9', -NR9-C(O)-OR9', -alchil(C1-C6)-NR9-C(O)-R9', -SO2-NR9R9', sau -SO2-alchil(C1-C6),

◆ R7 reprezintă un atom de hidrogen, o grupare (C1-C8)alchilliniară sau ramificată, o grupare -CHRaRb, o grupare aril, o grupare heteroaril, o grupare arilalchil(C1-C6) sau o grupare heteroarilalchil(C1-C6),

◆ R8 reprezintă o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, o grupare (C2-C6) alchenilliniară sau ramificată, o grupare (C2-C6)alchinilliniară sau ramificată, -Cy2, un atom de halogen, o grupare ciano, -C(O)-R11sau -C(O)-NR11R11',

◆ R9şi R9' independentunul faţă de altul reprezintă un atom dehidrogen, o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată,

sau substituenţii perechii (R9, R9') formează împreună cu atomul de azot de care sunt legaţi un ciclu aromatic sau non-aromatic format din de la 5 la 7 atomi, care poate conţine în plus faţă de atomul de azot de la 1 la 3 heteroatomi selectaţi dintre oxigen, sulf şi azot, fiind subînţeles că azotul în cauză poate fi substituit cu o grupă reprezentând un atom de hidrogen sau o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată,

◆ R10 reprezintă -Cy3, -Cy3-alchil(C0-C6)-Cy4, -C(O)-NR9R9', -NR9R9', -OR9, -NR9-C(O)-R9', -O-alchil(C1-C6)-OR9, -SO2-R9, -C(O)-OR9, sau -NH-C(O)-NH-R9,

◆ R11şi R11' independent unul faţă de altul reprezintă un atom de hidrogen sau o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată opţional substituită,

◆ R12 reprezintă un atom de hidrogen, o gruparehidroxisau o gruparehidroxi (C1-C6)alchil,

◆ Ra reprezintă un atom de hidrogen sau o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată,

◆ Rb reprezintă o grupare -O-C(O)-O-Rc, o grupare -O-C(O)-NRcRc' sau o grupare -O-P(O)(ORc)2,

◆ Rcşi Rc' independent unul faţă de altul reprezintă un atom de hidrogen, o grupare (C1-C8)alchilliniară sau ramificată, o grupare cicloalchil, o grupare (C1-C6)alcoxi (C1-C6)alchil, o grupare (C1-C6)alcoxicarbonil(C1-C6)alchil,

sau substituenţii perechii (Rc, Rc') formează împreună cu atomul de azot de care sunt legaţi un ciclu non-aromatic format din de la 5 la 7 atomi, care poate conţine în plus faţă de atomul de azot de la 1 la 3 heteroatomi selectaţi dintre oxigen şi azot, fiind înţeles că azotul în cauză poate fi substituit cu o grupare reprezentând o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată,

◆ Cy1, Cy2, Cy3şi Cy4 independent unul faţă de celălalt, reprezintă o grupare cicloalchil, o grupare heterocicloalchil, o grupare aril sau o grupare heteroaril,

◆ n este un număr întreg egal cu 0, 1 sau 2,

fiind înţeles că:

• "aril" semnifică o gruparefenil, naftil, bifenil, • "heteroaril" semnifică o grupare mono- sau bi-ciclică formată din de la 5 la 10 atomi, având cel puţinun radical aromatic şi conţinând de la 1 la 3 heteroatomi selectaţi dintre oxigen, sulf şi azot, • "cicloalchil" semnifică orice grupare carbociclică mono- sau bi-ciclică non-aromatică conţinând de la 3 la 10 atomi în ciclu, • "heterocicloalchil" semnifică orice grupare carbociclică mono- sau bi-ciclică non-aromatică conţinând de la 3 la 10 atomi şi conţinând de la 1 la 3 heteroatomi selectaţi dintre oxigen, sulf şi azot, care poate include sisteme ciclice condensate, cu punte sau spiranice,

fiind posibil pentru grupările aril, heteroaril, cicloalchilşi heterocicloalchilastfel definite şi grupărilealchil, alchenil, alchinil, alcoxi, să fie substituite cu de la 1 la 4 grupări selectate dintre (C1-C6)alchil liniar sau ramificat opţional substituit, (C2-C6)alchenil liniar sau ramificat opţional substituit, (C2-C6)alchinil liniar sau ramificat opţional substituit, (C1-C6)alcoxi liniar sau ramificat opţional substituit,(C1-C6)alchil-S- opţional substituit, hidroxi, hidroxi(C1-C6)alchil, oxo (sau N-oxid unde este adecvat), nitro, ciano, -C(O)-OR', -O-C(O)-R', -C(O)-NR'R", -O-C(O)-NR'R", -NR'R", -(C=NR')-OR", -O-P(O)(OR')2, -O-P(O)(O-M+)2, (C1-C6)polihaloalchil liniar sau ramificat, trifluorometoxi, halogen sau o aldohexoză cu formula:

în care fiecare R' este independent;

fiind înţeles că R' şi R" independent unul faţă de celălalt reprezintă un atom de hidrogen sau o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată opţional substituită şi M+ reprezintă un cation monovalent acceptabil farmaceutic,

enantiomerii, diastereoizomerii şi atropizomerii lor şi sărurile acestora cu un acid sau o bază acceptabile farmaceutic.

Avantajos, prezenta invenţie se referă la compuşii cu formula (I) în care:

◆ R1şi R2 independent unul faţă de celălalt reprezintă un atom de halogen, o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, o gruparehidroxi, o grupare hidroxi (C1-C6)alchil, o grupare (C1-C6)alcoxiliniară sau ramificată,

sau substituenţii perechii (R1, R2) formează împreună cu atomii de carbon de care sunt legaţi un ciclu aromatic format din 5 la 7 atomi, care poate conţine de la 1 la 3 atomi de azot, fiind înţeles că ciclul rezultat poate fi substituit cu de la 1 la 2 grupări selectate din halogen, (C1-C6)alchil liniar sau ramificat sau -alchil(C0-C6)-NR9R9',

◆ R3 reprezintă un atom de hidrogen, un atom de halogen, o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, o gruparehidroxi, o grupare (C1-C6)alcoxiliniară sau ramificată sau -O-alchil(C1-C6)-NR9R9',

◆ R4şi R5 independent unul faţă de celălalt reprezintă un atom de hidrogen, un atom de halogen, o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, o gruparehidroxi, o grupare (C1-C6)alcoxiliniară sau ramificată,

◆ R6 reprezintă un atom de hidrogen, un atom de halogen, o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, o grupare (C1-C6)polihaloalchilliniară sau ramificată, o gruparehidroxi, o grupare (C1-C6)alcoxiliniară sau ramificată, o grupare ciano sau nitro, o grupare -alchil(C0-C6)-NR9R9',-alchil(C0-C6)-Cy1,-O-alchil(C1-C6)-R10sau -C(O)-NR9R9',

◆ R7 reprezintă un atom de hidrogen, o grupare (C1-C8)alchilliniară sau ramificată, o grupare -CHRaRbsau o grupare heteroarilalchil(C1-C6),

◆ R8 reprezintă o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, o grupare (C2-C6) alchenilliniară sau ramificată, o grupare (C2-C6)alchinilliniară sau ramificată, -Cy2, un atom de halogen sau -C(O)-R11,

◆ R9şi R9' independent unul de celălalt reprezintă un atom de hidrogen, o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată,

sau substituenţii perechii (R9, R9') formează împreună cu atomul de azot de care sunt legaţi un ciclu non-aromatic format din de la 5 la 7 atomi, care poate conţine în plus faţă de atomul de azot de la 1 la 3 heteroatomi selectaţi dintre oxigen şi azot, fiind înţeles că azotul în cauză poate fi substituit cu o grupare reprezentând o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată,

◆ R10 reprezintă -Cy3sau -Cy3-alchil(C0-C6)-Cy4,

◆ R11 reprezintă o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată,

fiind posibil pentru grupările aril, heteroaril, cicloalchilşi heterocicloalchilastfel definite şi grupărilealchil, alchenil, alchinil, alcoxi, să fie substituite cu de la 1 la 4 grupări selectate dintre (C1-C6)alchil liniar sau ramificat opţional substituit, (C1-C6) alcoxi liniar sau ramificat opţional substituit, hidroxi, hidroxi(C1-C6)alchil, oxo (sauN-oxid unde este posibil), -C(O)-OR', -C(O)-NR'R", -O-C(O)-NR'R", -NR'R", -O-P(O)(OR')2, -O-P(O)(O-M+)2, (C1-C6)polihaloalchil liniar sau ramificat, halogen sau o aldohexoză cu formula:

încare fiecare R' este independent;

fiind înţeles că R' şi R" independent unul faţă de altul reprezintă un atom de hidrogen sau o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată opţional substituită şi M+ reprezintă un cation monovalent acceptabil farmaceutic.

Printre acizii acceptabili farmaceutic pot fi menţionaţi, fără implicarea oricărei limitări, acid clorhidric, acid bromhidric, acid sulfuric, acid fosforic, acidacetic, acidtrifluoroacetic, acid lactic, acidpiruvic, acid malonic, acid succinic, acid glutaric, acid fumaric, acid tartric, acid maleic, acid citric, acid ascorbic, acidoxalic, acid metansulfonic, acid camforic etc.

Printre bazele acceptabile farmaceutic pot fi menţionate, fără limitare, hidroxidul de sodiu, hidroxidul de potasiu, trietilamina, tert-butilamina etc.

Mai specific, compuşii cu formula (I) cu preferinţa dată sunt compuşii în care n este un număr întreg egal cu1.

In altă variantă a invenţiei, o posibilitate avantajoasă constă din compuşii cu formula (I-a):

în care A, E, R1, R2, R5, R6, R7, R12, X, Y şi n sunt definiţi de formula (I).

Atropizomerii sunt stereoizomericare apar datorită rotaţiei împiedicate în jurul legăturii simple, unde diferenţele de energie datorate împiedicării sterice sau altor contributori creează o barieră de rotaţie care este destul de mare pentru a permite izolarea conformerilor individuali. Pentru compuşii conform invenţiei, atropizomerii sunt cum urmează:

Atropizomerul preferat este (5Sa) unde X reprezintă o grupare C-R4şi Y reprezintă o grupare C-R3 .

Avantajos, cel puţin una din grupările selectate din R2, R3, R4şi R5nu reprezintă un atom de hidrogen.

Preferabil, R12 reprezintă un atom de hidrogen, o gruparehidroximetilsau o gruparehidroxietil. Mai preferabil, R12 reprezintă un atom de hidrogen.

In compuşii preferaţi conform invenţiei, R1 reprezintă o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată sau un atom de halogen. Mai preferabil, R1 reprezintă o gruparemetil, o grupare etil, un atom de brom sau un atom de clor. În mod deosebit preferabil, R1 reprezintă o gruparemetil.

Avantajos, R2 reprezintă un atom de halogen, o gruparehidroxi, o grupare (C1-C6)alcoxiliniară sau ramificată. Mai preferabil, R2 reprezintă o grupare metoxi, o gruparehidroxi, un atom de fluor, un atom de bromsau un atom de clor. În mod deosebit preferabil, R2 reprezintă un atom de clor.

Intr-o variantă preferată conform invenţiei, când substituenţii perechii (R1, R2) formează împreună cu atomii de carbon de care sunt legaţi un ciclu aromatic,

reprezintă

în care R13 reprezintă un atom de hidrogen, o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată sau -alchil(C0-C6)-NR9R9' in care R9şi R9' sunt definiţi în formula (I) şi R14 reprezintă un atom de hidrogen, un atom de halogen sau o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată.

R13 reprezintă preferabil un atom de hidrogen, o gruparemetilsau -(CH2)m-NR9R9' în care m este un număr întreg egal cu 2 sau 3 şi, R9şi R9' reprezintă o grupare metil sau substituenţii perechii (R9, R9') formează împreună cu atomul de azot de care sunt legaţi o grupare pirolidinil, piperidinil, morfolinil sau 4-metil-piperazin-1-il.

R14 reprezintă avantajos un atom de hidrogen, un atom de brom, un atom de iod, un atom de clor sau o gruparemetil. R14este preferabil substituit în poziţia β faţă de atomul de azot.

Preferabil, X reprezintă o grupare C-R4. Intr-o variantă preferată a invenţiei, Y reprezintă o grupare C-R3. R3reprezintă avantajos un atom de hidrogen, o grupare (C1-C6)alcoxiliniară sau ramificată sau -O-alchil(C1-C6)-NR9R9'. R4 preferabil reprezintă un atom de hidrogen.

Intr-o variantă preferată conform invenţiei,

reprezintă

În care R1, R2, R9şi R9' sunt definiţi de formula (I).

Incompuşii preferaţi conform invenţiei,

reprezintă

în care R9 şi R9' sunt definiţi de formula (I).

R5 preferabil reprezintă un atom de hidrogen.

Într-o variantă avantajoasă, substituenţii perechii R5) sunt identici şi substituenţii perechii (R2, R4) sunt identici. In compuşii preferaţi conform invenţiei, substituenţii perechii (R1, R5) sunt identici şi reprezintă o grupare (C1-C6)alchil, preferabil o gruparemetil, în timp ce substituenţii perechii (R2, R4) sunt identici şi reprezintă un atom de halogen, preferabil un atom de clor sau un atom de hidrogen.

In altă variantă conform invenţiei, E reprezintă o gruparefenil, o grupare piridin-2-il, o grupare ciclohexil, o grupare pirazol-1-il, o grupare ciclopentil, o grupare indol-4-il, o grupare ciclopropil, o grupare piridin-3-il, o grupare indol-3-il, o grupare naft-1-il, o grupare imidazol-4-il sau o grupare piridin-4-il. Advantajos, E reprezintă o gruparefenil.

In compuşii preferaţi conform invenţiei, R6 reprezintă un atom de hidrogen; un atom de fluor; un atom de clor; un atom de brom; o gruparemetil; o grupare trifluorometil; o gruparehidroxi; o gruparemetoxi; o grupare (C1-C6)alcoxiliniară substituită cu atomi de halogen, o grupare -C(O)-NR'R" sau o grupare -NR'R"; o grupare ciano; o grupare nitro; o grupare aminometil, o grupare benzil; -O-alchil(C1-C6)-R10; -C(O)-NR9R9'. Preferabil, R6 reprezintă o gruparemetoxi, o grupare 2,2,2-trifluoroetoxisau -O-alchil(C1-C6)-R10,

In altă variantă conform invenţiei, o posibilitate avantajoasă constă din compuşii cu formula (I-b):

în care R1, R2, R5, R6, R7, R12, X, Y, A şi n sunt definiţi în formula (I).

In altă variantă conform invenţiei, o posibilitate avantajoasă constă din compuşii cu formula (I-c):

în care R6, R7, R9, R9', R12şi A sunt definiţi de formula (I).

Preferabil, R7 reprezintă un atom de hidrogen, o grupare -CHRaRb, o grupare (C1-C8)alchilliniară sau ramificată opţional substituită sau o grupare heteroarilalchil(C1-C6). Preferabil, R7 reprezintă o grupare -CHRaRbîn care Ra reprezintă un atom de hidrogen sau o gruparemetilşi Rb reprezintă o grupare-O-C(O)-O-(C1-C8)alchil; o grupare -O-C(O)-O-cicloalchil; o grupare -O-C(O)-NRcRc' , în care Rcşi Rc' independent unul de celălalt reprezintă un atom de hidrogen, o grupare(C1-C8)alchilliniară sau ramificată, o grupare (C1-C6)alcoxi(C1-C6)alchil, o grupare (C1-C6)alcoxicarbonil(C1-C6)alchilsau substituenţii perechii (Rc, Rc') formează împreună cu atomul de azot de care sunt legaţi un ciclu non-aromatic format din de la 5 la 7 atomi, care poate conţine suplimentar faţă de atomul de azot de la 1 la 3 heteroatomi selectaţi dintre oxigen şi azot; sau o grupare -O-P(O)(OH)2. Grupările R7preferate sunt următoarele: hidrogen; metil; etil; (5-metil-2-oxo-1,3-dioxol-4-il)metil; o grupare -CHRaRbîn care Ra reprezintă o gruparemetilşi Rb reprezintă o grupare -O-C(O)-O-CH2CH3sau o grupare -O-C(O)-N(CH3)2. În mod deosebit preferabil, R7 reprezintă hidrogen.

In compuşii preferaţi conform invenţiei, R8 reprezintă o grupare

(C2-C6)alchinilliniară sau ramificată, o grupare aril sau o grupare heteroaril. Mai preferabil, R8 reprezintă o grupare prop-1-in-1-il, o gruparefenilsau o grupare furan-2-il. Intr-o variantă în mod deosebit preferată, R8 reprezintă o grupare prop-1-in-1-il, o grupare 4-fluorofenilsau o grupare 5-fluorofuran-2-il. Chiar mai preferat, R8 reprezintă o grupare 4-fluorofenil.

In compuşii preferaţi conform invenţiei, R9şi R9' independent unul de celălalt reprezintă o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată sau substituenţii perechii (R9, R9') formează împreună cu atomul de azot de care sunt legaţi un ciclu non-aromatic format din de la 5 la 7 atomi,care pot conţine în plus faţă de atomul de azot de la 1 la 3 heteroatomi selectaţi dintre oxigen şi azot, fiind înţeles că azotul în cauză poate fi substituit cu o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată. Mai preferabil, R9şi R9' reprezintă o gruparemetilsau substituenţii perechii (R9, R9') formează împreunăo grupare 4-metil-piperazinil.

În mod avantajos, R10 reprezintă -Cy3sau -Cy3-alchil(C0-C6)-Cy4, Preferabil, R10 reprezintă -Cy3sau -Cy3-Cy4,

Cy3 preferabilreprezintă o grupare cicloalchil, în particular, o grupare ciclopentil. Intr-o variantă preferată, Cy3 reprezintă o grupare aril, în particular o gruparefenil. Avantajos, Cy3 reprezintă o grupare heteroaril, în particular, o grupare pirimidinil, o grupare pirazolil sau o grupare piridinil. Mai preferabil, Cy3 reprezintă o grupare pirimidin-4-il, o grupare pirazol-5-ilsau o grupare piridin-2-il. In compuşii preferaţi conform invenţiei, Cy3 reprezintă o grupare pirimidin-4-il. In altă variantă conform invenţiei, Cy3 reprezintă o grupare heteroaril care este substituită cu o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, opţional substituită, o grupare (C1-C6)alcoxiliniară sau ramificată, opţional substituită sau o grupare (C1-C6)polihaloalchilliniară sau ramificată. Preferabil, Cy3 reprezintă o grupare heteroaril care este substituită cu o grupare 2,2,2-trifluoroetoxi, o grupare 2-metoxietil, o grupare etoxi; o gruparetert-, o grupare etil , o grupare n-butil, o grupare 2,2,2-trifluoroetil sau o gruparemetil.

Cy4 preferabilreprezintă o gruparefenil, o grupare piridinil, o grupare piridazinil, o grupare pirazinil, o grupare pirimidinil sau o grupare morfolinil. Mai preferabil, Cy4 reprezintă o gruparefenil.

Alţi compuşi conform invenţiei care sunt preferaţi sunt aceia în care, R10 reprezintă

in care p este un număr întreg egal cu 0 sau 1 şi R15 reprezintă un atom de hidrogen, o gruparehidroxi, o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, opţional substituită sau o grupare (C1-C6)alcoxiliniară sau ramificată, o grupare -O-(CHR16-CHR17-O)q-R', o grupare -O-P(O)(OR')2, o grupare -O-P(O)(O-M+)2, o grupare -O-C(O)-NR18R19, o grupare di(C1-C6)alchilamino(C1-C6)alcoxi, un atom de halogen sau o aldohexoză cu formula:

încare fiecare R' este independent;

fiind înţeles că:

◆ R' reprezintă un atom de hidrogen sau o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată,

◆ R16reprezintă un atom de hidrogen sau o grupare (C1-C6)alcoxi(C1-C6)alchil,

◆ R17reprezintă un atom de hidrogen sau o gruparehidroxi(C1-C6)alchil,

◆ R18reprezintă un atom de hidrogen sau o grupare (C1-C6)alcoxi(C1-C6)alchil,

◆ R19 reprezintă o grupare (C1-C6)alcoxi(C1-C6)alchil, o grupare -(CH2)r-NR9R9' sau o grupare -(CH2)r-O-(CHR16-CHR17-O)q-R',

◆ q este un număr întreg egal cu 1, 2 sau 3 şi r este un număr întreg egal cu 0 sau 1,

◆ M+ reprezintă un cation monovalent acceptabil farmaceutic.

Aldohexoza conform invenţiei este preferabil D-manoza. Avantajos, R15 reprezintă o gruparemetoxi, o grupare 2-metoxietoxisau fluor. Preferabil, gruparea -(CH2)p-R15este localizată în poziţiaortoa grupării fenil.

Printre compuşii preferaţi conform invenţiei pot fi menţionaţi:

• N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(4-fluoro fenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[(1-metil-1H-pirazol-5-il)metoxi]-D-fenilalanina • N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(4-fluoro fenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[(2-etoxipirimidin-4-il)metoxi]-D-fenilalanina • N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(4-fluoro fenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxifenil)pirimidin-4-il] metoxi}-D-fenilalanina • N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(furan-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metoxi-D-fenilalanina • N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metoxi-D-fenilalanina • N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(5-fluoro furan-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(2,2,2-trifluoroetoxi)-D-fenilalanina • N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(5-fluoro furan-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(piridin-2-ilmetoxi)-D-fenilalanina • N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(5-fluoro furan-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[(1-metil-1H-pyrazol-5-il)metoxi]-D-fenilalanina • N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(5-fluoro furan-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[(1-etil-1H-pirazol-5-il)metoxi]-D-fenilalanina • N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(5-fluoro furan-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[(2-etoxipirimidin-4-il)metoxi]-D-fenilalanina • 2-[(1-butil-1H-pirazol-5-il)metoxi]-N[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metil piperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina • N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(5-fluoro furan-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)pirimidin-4-il]metoxi}-D-fenilalanina • N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(5-fluoro furan-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxifenil)pirimidin-4-il] metoxi}-D-fenilalanina • N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metoxi-D-fenilalanina • 2-[(1-tert-butil-1H-pirazol-5-il)metoxi]-N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metil piperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina • N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxietil)pirimidin-4-il] metoxi}-D-fenilalanina • N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[1-(2,2,2-trifluoroetil)-1H-pirazol-5-il] metoxi}-D-fenilalanina • N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(morfolin-4-il)pirimidin-4-il]metoxi}-D-fenilalanina • N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)pirimidin-4-il]metoxi}-D-fenilalanina • N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxifenil)pirimidin-4-il]metoxi}-D-fenilalanina • N-[5-{3-cloro-4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2-metilfenil}-6-(prop-1-in-1-il) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-1-(2,2,2-trifluoroetil)-1H-pirazol-5-il] metoxi}-D-fenilalanina • N-[5-{3-cloro-4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2-metilfenil}-6-(prop-1-in-1-il) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(morfolin-4-il)pirimidin-4-il]metoxi}-D-fenilalanina • N-[5-{3-cloro-4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2-metilfenil}-6-(prop-1-in-1-il) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)pirimidin-4-il] metoxi}-D-fenilalanina • N-[5-{3-cloro-4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2-metilfenil}-6-(prop-1-in-1-il) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxifenil)pirimidin-4-il]metoxi}-D-fenilalanina • N-[5-{3-cloro-4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2-metilfenil}-6-(4-fluorofenil) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-({2-[2-(2-metoxietoxi)fenil]pirimidin-4-il}metoxi)-D-fenilalanina • N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxifenil) pirimidin-4-il]metoxi}-D-fenilalaninat de etil • N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxifenil) pirimidin-4-il]metoxi}-D-fenilalaninat de etil • N-[(5Sa)-5-{3-cloro-4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2-metilfenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxifenil)pirimidin-4-il] metoxi}-D-fenilalaninat de etil • N-[5-{3,5-dicloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxifenil)pirimidin-4-il]metoxi}-D-fenilalanina Invenţia se referă de asemenea la un procedeu pentru prepararea compuşilor cu formula (I), care procedeu este caracterizat prin aceea că este utilizată ca materie primă compusul cu (II-a):

în care Z reprezintă brom sau iod şi A este aşa cum s-a definit pentru formula (I) în care1este legat de atomul de clor şi2este legat de grupareaZ, care compus cu formula (II-a) este supus cuplării cu un compus cu formula (III):

în care R6, R12, E şi n sunt aşa cum s-au definit pentru formula (I) şi Alk reprezintă o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată,

pentru a obţine compusul cu formula (IV):

în care R6, R12, A, E şi n sunt aşa cum s-au definit pentru formula (I) şi, Z şi Alk sunt aşa cum s-au definit înainte,

Compus cu formula (IV) care este apoi supus unei reacţii de cuplare cu compusul cu formula (V):

în care R1, R2, R5, X şi Y sunt aşa cum s-au definit pentru formula (I), şi RB1şi RB2 reprezintă un atom de hidrogen, o grupare (C1-C6) alchilliniară sau ramificată, sau RB1şi RB2 formează cu oxigenul de care sunt legaţi un ciclu opţional metilat, pentru a obţine compusul cu formula (VI):

în care R1, R2, R5, R6, R12, X, Y, A, E şi n sunt aşa cum s-au definit pentru formula (I) şi Alk este aşa cum s-a definit înainte,

Funcţia ester Alk-O-C(O)- a compusului cu formula (VI) este hidrolizată pentru a obţine acidul carboxilic, care poate reacţiona opţional cu un alcool cu formula R7'-OH sau un compus clorurat cu formula R7'-Cl în care R7' reprezintă o grupare (C1-C8)alchilliniară sau ramificată, o grupare -CHRaRb, o grupare aril, o grupare heteroaril, o grupare arilalchil(C1-C6) sau o grupare heteroarilalchil(C1-C6), Raşi Rbsunt aşa cum s-au definit pentru formula (I),

Pentru a se obţine compusul cu formula (I), care poate fi purificat conform unei tehnici de separare convenţională, care este transformat, dacă s-a dorit, în sărurile sale cu un acid sau bază acceptabile farmaceutic, care sunt opţional separate în izomerii lor conform unei tehnici de separare obişnuite.

fiind înţeles că în orice moment considerat potrivit în decursul procedeului descris mai sus, unele grupări (hidroxi, amino...) ale materiilor prime sau ale intermediarilor de sinteză pot fi protejate, ulterior deprotejate şi funcţionalizate, aşa cum este cerut de sinteză.

Inaltă variantă conform invenţiei, compuşii cu formula (I) pot fi obţinuţi utilizând un procedeu alternativ, care procedeu este caracterizat prin aceea că este utilizat ca materie primă compusul cu formula (II-b):

în care A este aşa cum s-a definit în formula (I) în care 1 este legat de atomul de clor şi 2 este legat de atomul de iod,

care compus cu formula (II-b) este supus cuplării cu un compus cu formula (V):

wherein R1, R2, R5, X şi Y sunt aşa cum s-au definit în formula (I) şi RB1şi RB2 reprezintă un atom de hidrogen, o grupare (C1-C6) alchilliniară sau ramificată sau RB1şi RB2 formează cu oxigenul de care sunt legaţi un ciclu metilat opţional, pentru a obţine compusul cu formula (VII):

în care R1, R2, R5, A, X şi Y sunt aşa cum s-au definit în formula (I), care compus cu formula (VII) este apoi supus cuplării cu un compus cu formula (III):

în care R6, R12, E şi n sunt definiţi în formula (I) şi Alk reprezintă o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, pentru a obţine compusul cu formula (VI):

în care R1, R2, R5, R6, R12, X, Y, A, E şi n sunt aşa cum s-au definit pentru formula (I) şi Alk este cum s-a definit înainte,

funcţiunea ester Alk-O-C(O)- din compusul cu formula (VI) este hidrolizată pentru a obţine acidul carboxilic, care poate reacţiona opţional cu un alcool cu formula R7'-OH sau cu compusul clorurat cu formula R7'-Cl în care R7' reprezintă o grupare(C1-C8)alchilliniară sau ramificată, o grupare -CHRaRb, o grupare aril, o grupare heteroaril, o grupare arilalchil(C1-C6) sau o grupare heteroarilalchil(C1-C6), Raşi Rbsunt aşa cum s-au definit pentru formula (I),

pentru a se obţine compusul cu formula (I), care poate fi purificat conform unei tehnici convenţionale de separare, care este transformat, dacă se doreşte, în sărurile sale cu un acid sau o bază acceptabile farmaceutic şi care este separat opţional în izomerii săi conform unei tehnici convenţionale de separare,

fiind înţeles că în orice moment considerat potrivit din decursul procedeului descris mai sus, unele grupări (hidroxi, amino...) ale materiilor prime sau ale intermediarilor sintezei pot fi protejate, ulterior deprotejate şi funcţionalizate, cum este necesar pentru sinteză.

Compuşii cu formulele (II-a), (II-b), (III), (V), R7'-OH şi R7'-Cl sunt fie disponibili comercial fie pot fi obţinuţi de specialistul în domeniu utilizând reacţii chimice obişnuite descrise în literatură.

Studiul farmacologic al compuşilor conform invenţiei a arătat că aceştia au proprietăţi pro-apoptotice. Capacitatea de a reactiva procesul apoptotic în celulele canceroase este de interes terapeutic major în tratamentul cancerelor şi bolilor imune şi auto-imune.

În mod mai special, compuşii conform invenţiei vor fi utili în tratamentul cancerelor chemo- sau radio-rezistente.

Printre tratamentele cancerului avute în vedere pot fi menţionate, fără implicarea vreunei limitări, tratamentul cancerelor de vezică, creier, sân şi uter, leucemiei limfoide cronice, cancerului de colon, de esofag şi de ficat, leucemiei limfoblastice, leucemiei mieloideacute, limfoamelor, melanoamelor, hemopatiei maligne, mieloamelor, cancerului ovarian, cancerului pulmonar cu celule care nu sunt mici, cancerului de prostată, cancerului pancreatic şi cancerului pulmonar cu celule mici.

Prezenta invenţie se referă la compoziţiile farmaceutice cuprinzând cel puţin un compus cu formula (I) în combinaţie cu unu sau mai mulţi excipienţi acceptabili farmaceutic.

Printre compoziţiile farmaceutice coform invenţiei pot fi menţionate în mod special acelea care sunt adecvate pentru administrare orală, parenterală, nazală, per- sau trans-cutanată, rectală, perlinguală, oculară sau respiratorie, în special tablete sau drajeuri, tablete sublinguale, săculeţe,pachete, capsule, glosete, pastile, supozitoare, creme, unguente, geluri dermice şi fiole buvabile sau injectabile.

Dozările variază în funcţie de sex, vârstă şi greutatea pacientului, calea de administrare, natura indicaţiei terapeutice sau orice tratamente asociate şi variază de la 0,01 mg la 1 g per 24 ore în una sau mai multe administrări.

Mai mult, prezenta invenţie se referă de asemenea la combinaţia unui compus cu formula (I) cu un agent anticancer selectat dintre agenţi genotoxici, otrăvuri mitotice, antimetaboliţi, inhibitori de proteazom, inhibitori ai kinazei şi anticorpi şi de asemenea la compoziţiile farmaceutice care cuprind astfel de tip de combinaţie şi utilizarea lui la fabricarea medicamentelor pentru utilizare în tratamentul cancerului.

Avantajos, prezenta invenţie se referă la combinaţia unui compus cu formula (I) cu un inhibitor al EGFR şi de asemenea la compoziţiile farmaceutice care cuprind acest tip de combinaţie.

In altă variantă, prezenta invenţie se referă la combinaţia unui compus cu formula (I) cu un inhibitor mTOR/PI3K şi de asemenea la compoziţiile farmaceutice care cuprind acest tip de combinaţie.

Intr-o variantă preferată, prezenta invenţie se referă la combinaţia unui compus cu formula (I) cu un inhibitor MEK şi de asemenea la compoziţiile farmaceutice care cuprind acest tip de combinaţie.

Preferabil, prezenta invenţie se referă la combinaţia unui compus cu formula (I) cu un inhibitor HER2 şi de asemenea la compoziţiile farmaceutice care cuprind acest tip de combinaţie.

Avantajos, prezenta invenţie se referă la combinaţia unui compus cu formula (I) cu un inhibitor RAF şi la compoziţiile farmaceutice care cuprind acest tip de combinaţie.

In altă variantă, prezenta invenţie se referă la combinaţia unui compus cu formula (I) cu un inhibitor EGFR/HER2 şi de asemenea la compoziţiile farmaceutice care cuprind acest tip de combinaţie.

Intr-o variantă preferată, prezenta invenţie se referă la combinaţia unui compus cu formula (I) cu un taxan şi de asemeneala compoziţiile farmaceutice care cuprind acest tip de combinaţie.

In altă variantă, prezenta invenţie se referă la combinaţia unui compus cu formula (I) cu un inhibitor de proteazom, un imunomodulator sau un agent de alchilare şi de asemenea la compoziţiile farmaceutice care cuprind acest tip de combinaţie.

Combinaţia unui compus cu formula (I) cu un agent anticancer poate fi administrată simultan sau succesiv. Calea de administrare estepreferabil calea orală şi compoziţiile farmaceutice corespunzătoare pot permite eliberarea instantanee sau întârziată a ingredientelor active. Compuşii din combinaţie pot fi administraţi în plus în forma a două compoziţii separate, fiecare conţinând unu din ingredientele active sau sub forma unei singure compoziţii farmaceutice, în care ingredientele active sunt în amestec.

Compuşii conform invenţiei pot fi utilizaţi de asemenea în combinaţie cu radioterapia în tratamentul cancerului.

În sfârşit, compuşii conforminvenţiei pot fi legaţi de anticorpi monoclonali sau fragmente ale acestora sau legaţi de proteinesuportcare pot fi legate sau nu de anticorpi monoclonali.

Fragmentele de anticorpi trebuie să fie înţelese ca fragmente de tip Fv, scFv, Fab, F(ab')2, F(ab'), scFv-Fc sau diacorpi, care au în general aceeaşi specificitate de legare ca anticorpul de la care ei provin. Conform prezentei invenţii, fragmentele de anticorp din invenţie pot fi obţinute plecând de la anticorpi prin metode precum digestia cu enzime, ca pepsina sau papaina şi/sau prin scindarea punţilor de disulfură prin reducere chimică. In alt mod, fragmentele de anticorp cuprinse în prezenta invenţie pot fi obţinute prin tehnici de recombinare geneticăde asemenea bine cunoscute de specialistul în domeniu sau în plusprin sinteza peptidelor prin intermediul, deexemplu, sintetizatoarelorautomate de peptide precum cele furnizate de compania Applied Biosystems, etc.

Proteinelesuport care pot fi legate sau nu de anticorpi monoclonali sunt înţelese ca însemnând o proteină care conţine sau nu o imunoglobulină pliatăşi care produce o capacitate de legare similară unui anticorp monoclonal. Specialistul în domeniu cunoaşte cum să selecteze proteina suport. Mai special, se cunoaşte că, pentru a fi selectat, un astfel de suportar trebui să prezinte mai multe caracteristici cum urmează (Skerra A., J. Mol. Recogn. 2000, 13, 167-187): o bună conservare filogenetică, arhitectură robustă cu organizare moleculară tri-dimensională bine cunoscută (precum, de exemplu, cristalografie sau RMN), dimensiune mică, fără sau cu grad scăzut de modificări post-translaţionale, uşor de produs, exprimat şi purificat. Astfel de proteină suport poate fi, dar fără limitare, o structură selectată din grupul constând din fibronectină şi preferenţial domeniul al treilea de fibronectină tip III (FNfn10), lipocalina, anticalina (Skerra A., J. Biotechnol. 2001, 74(4):257-75), derivatul proteinei Z din domeniul B al proteinei stafilococice A, tioredoxinei A sau oricărei proteine cu domeniu repetitiv precum o "repetiţie ankirină" (Kohl et al., PNAS 2003, 100(4), 1700-1705), "repetiţie armadillo", "repetiţie bogată în leucină" sau "repetiţie tetratricopeptidă". Ar putea fi de asemenea menţionaţi un derivat suport de la toxine (ca, de exemplu, toxinele scorpion, insecte, plantesau molusce) sau inhibitori de proteinepentru sintaza neuronală a oxidului de azot (PIN).

Următoarele Preparări şi Exemple ilustrează invenţia, dar nu o limitează în nici un fel.

Procedee generale

Toţi reactivii s-au obţinut din surse comercialeşi au fost utilizaţi fără purificare ulterioară. Solvenţii anhidri au fost obţinuţi din surse comerciale şi utilizaţi fără uscare suplimentară.

Cromatografia rapidă s-a efectuat pe ISCO CombiFlash Rf 200i cu cartuşuri preumplute cu silicagel (RediSep®Rf Gold High Performance).

Cromatografia pe strat subţire a fost realizată pe plăci de 5 x 10 cm acoperite cu silicagel Tip 60 F254 Merck.

Încălzirea cu microunde s-a realizat cu un aparat Anton Parr MonoWave sau CEM Discover® instrument.

Purificările HPLC preparative s-au realizat cu un sistem de cromatografie în lichid Armen Spot Liquid Chromatography cu o coloană Gemini-NX® 10 µM C18, 250 mm × 50 mm i.d. funcţionând la un debit de 118 mL min-1cu detecţie UV cu sistem de diode (210 - 400 nm) utilizând 25 mM soluţie apoasă de NH4HCO3şi MeCN ca eluanţi, dacă nu s-a specificat altfel.

LC-MS analitic: Compuşii conform prezentei invenţii au fost caracterizaţi prin cromatografie de lichid-spectroscopie de masă de înaltă performanţă (HPLC-MS) pe Agilent HP1200 cu Agilent 6140 cvadrupol LC/MS, operând în modul de ionizare electrospray cu ion pozitiv sau negativ. Intervalul de scanare a greutăţii moleculare este 100 la 1350,detecţia Parallel UV a fost făcută la 210 nm şi 254 nm. Probele au fost alimentate ca soluţie 1 mM în CAN sau în THF/H2O (1:1) cu 5 µL injectare în buclă.Analizele LCMS au fost efectuate cu două instrumente, din care unu a fost operat cu eluanţi bazici şi celălalt cu eluanţi acizi.

LCMS bazic: Gemini-NX, 3 µm, coloană C18, 50 mm × 3,00 mm i.d. la 23 °C, la un debit de 1 mL min-1 utilizând 5 mM bicarbonat de amoniu (Solvent A) şi acetonitril (Solvent B) cu un gradient pornind de la 100% Solvent A şi terminând la 100% Solvent B pe o variată/anumită durată de timp.

LCMS acidă: ZORBAX Eclipse XDB-C18, coloană1,8 µm, 50 mm × 4,6 mm i.d. la 40 °C, la un debit de 1 mL min-1 utilizând0,02% vol/volacid formic apos (Solvent A) şi0,02% vol/volacid formic în acetonitril (Solvent B) cu un gradient începând de la 100% Solvent A şi terminând la 100% Solvent B pe o variată/anumită durată de timp.

Măsurătorile1H-RMNau fost efectuate pe un spectrometru Bruker Avance III 500 MHz şi spectrometru Bruker Avance III 400 MHz, utilizând DMSO-d6sau CDCl3ca solvent. Datele 1H RMNsunt sub forma valorilor delta, date în părţi per million (ppm), utilizând picul rezidual al solventului(2,50 ppm pentru DMSO-d6şi7,26 ppm pentru CDCl3) ca standard intern. Multiplicităţile sunt desemnate ca: s (singlet), d (dublet), t (triplet), q (cvartet), quint (cvintet), m (multiplet), br s (singlet larg), dd (dublet de dubleţi), td (triplet de dubleţi), dt (dublat de tripleţi), ddd (dublet de dublet de dubleţi).

Combinaţia cromatografiei de gaz cu spectrometria de masă de joasă rezoluţie a fost efectuată pe un gaz cromatograf Agilent 6850 şi un spectrometru de masă Agilent 5975C utilizând coloana de 15 m × 0,25 mm cu 0,25 µm HP-5MS acoperire şi drept gaz purtător heliu. Sursa de ioni: EI+, 70 eV, 230°C, quadrupol: 150°C, interfaţa: 300°C.

HRMS s-au determinat pe un Shimadzu IT-TOF, temperatura sursei de ioni 200°C, ESI +/-, tensiune de ionizare: (+-)4,5 kV. Rezoluţia masei min. 10000.

Analizele elementare au fost efectuate pe un analizor Thermo Flash EA 1112 Elemental Analyzer.

Lista abrevierilor

Abrevierea Denumirea 2-Me-THF 2-metil-tetrahidrofuran Ac acetil Ad adamantil aq. apos AtaPhos bis(di-tert-butil(4-dimetilaminofenil)fosfin) dicloropaladiu(II) BuPAd2 butil-di(adamant-1-il)fosfan cc. concentrat DAST Dietilaminotrifluoro sulfura dba dibenzilidenacetona DCM clorură de metilen DIPA diizopropilamina DMA dimetilacetamida DME 1,2-dimetoxietan DMF dimetilformamida DMSO dimetilsulfoxid dppf 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen eq. echivalent Et etil HILIC Cromatografie în lichid cu interacţiune hidrofilă HMDS hexametildisilazan iPr izopropil LDA diizopropilamidura de litiu Me metil MeCN acetonitril MTBE metiltert-butil eter MW microunde NBS N-bromosucinimida nBu n-butil NCS N-clorosuccinimida Ph fenil PtBu3 x HBF4 tri-tert-butilfosfoniu tetrafluoroborat PCy3 x HBF4 triciclohexilfosfoniu tetrafluoroborat Q-Phos 1,2,3,4,5-pentafenil-1'-(di-tert-butilfosfino)ferocen r.t. temperatura camerei TBAF Fluorura de tetrabutil amoniu tBu tert-butil TEA trietilamina TFA Acid trifluoroacetic THF tetrahidrofuran TIPSCl Clorură de triizopropilsilil XantPhos 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxantena

Procedeul generalIa:

1 eq. din derivatul 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină corespunzător, 2 eq. din derivatul amino-acid corespunzător şi 2 eq. K2CO3au fost amestecaţi întBuOH:apă 4:1 (4 mL/mmol) şi agitaţi la temperatura de reflux (sau într-un reactor MW reactor la 100 °C dacă este necesar) până când nu s-a mai observat conversie. Amestecul s-a diluat apoi cu apă, s-a acidulat cu soluţie 1M de HCl (la pH = 1 sau la pH = 6 în prezenţa unei grupări amino bazice) şi s-a extras cu EtOAc sau precipitatul format după acidulare s-a izolat prin filtrare. In cazul purificării extractive fazele organice combinate s-au spălat cu saramură, s-au uscat pe MgSO4, s-au filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 25 mM de NH4HCO3şi acetonitril ca eluanţi, dacă nu s-a stabilit altfel.

Procedeul general Ib:

Derivat de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină 1 eq, corespunzător, 2 eq. derivat de amino acid corespunzător şi 3 eq. K2CO3s-au amestecat în DMSO (10 mL/mmol) şi s-au agitat la 50 °C până nu s-a mai observat conversie. Amestecul s-a diluat apoi cu apă, s-a acidulat cu soluţie 1M de HCl (la pH = 1 sau la pH = 6 în prezenţa unei grupări amino bazice) şi s-a extras cu EtOAc sau precipitatul format după acidulare s-a izolat prin filtrare. In cazul purificării extractive fazele organice combinate s-au spălat cu saramură, s-au uscat pe MgSO4,s-au filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 25 mM de NH4HCO3şi acetonitril ca as eluanţi dacă nu s-a stabilit altfel.

Procedeul general Ic:

Derivat de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină 1 eq. corespunzător, 1,5 eq. derivat de amino acid corespunzător şi 1,5 eq. Cs2CO3s-au amestecat în DMSO (6 mL/mmol) şi s-au agitat la 70 °C până nu s-a mai observat conversie. Amestecul s-a diluat apoi cu apă, s-a acidulat cu soluţie 1M de HCl (la pH = 1 sau la pH = 6 în prezenţa unei grupări amino bazice) şi s-a extras cu EtOAcsau precipitatul format după acidulare s-a izolat prin filtrare. In cazul purificării extractive fazele organice combinate s-au spălat cu saramură, s-au uscat pe MgSO4, s-au filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 25 mM de NH4HCO3şi ca eluanţi dacă nu s-a stabilit altfel.

Procedeul general IIa:

Derivat 5- (sau 6)-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină 1 eq. corespunzătorşi 3 eq. derivat de acid boronic corespunzător s-au dizolvat în DME (15 mL/mmol), apoi s-au adăugat 5 eq. K2CO3, 0,2 eq. Pd2dba3, 0,4 eq. nBuPAd2şi apă (5 mL/mmol) şi amestecul s-a agitat la 60 °C într-un reactor cu MW până când nu s-a mai observat conversie. Volatilele au fost îndepărtate in vacuoşi reziduul s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă, utilizând 25 mM soluţie apoasă de NH4HCO3 şi acetonitril ca eluanţi, dacă nu s-a stabilit altfel.

Procedeul general IIb:

Derivat de 5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină 1 eq. corespunzător şi 5 eq. derivat de acid boronic corespunzător au fost dizolvaţi în 2-Me-THF (8 mL/mmol), apoi s-au adăugat 5 eq. K2CO3, 0,1 eq. Q-Phos şi0,05 eq. Pd2dba3şi amestecul s-a agitat la 80 °C până nu s-a mai observat conversie. Amestecul s-a filtrat printr-un strat de celită, filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi, dacă nu s-a stabilit altfel.

Procedeul general IIc:

Derivat de 5-(sau 6)-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină corespunzător 1 eq. şi 1,1 eq. derivat corespunzător de acid boronic s-au dizolvat în 2-Me-THF (8 mL/mmol), apoi s-au adăugat1,1 eq. Ag2CO3şi0,1 eq. Pd(PPh3)4şi amestecul s-a agitat la 100 °C până când nu s-a mai observat conversie. Amestecul s-a filtrat printr-un strat de celită, filtratul s-a concentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi, dacă nu s-a stabilit altfel.

Procedeul general IId:

Derivat de 5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină corespunzător 1 eq. şi 3 eq. derivat corespunzător de acid boronic s-au dizolvat în amestec dioxan: apă 2:1 (10 mL/mmol), apoi s-au adăugat 2 eq. Cs2CO3, 5 mol% Pd(OAc)2şi0,2 eq. PtBu3×HBF4şi amestecul s-a agitat la 120 °C în reactor cu MW până când nu s-a mai observat conversie. Amestecul s-a neutralizat cu soluţie 1M de HCl şi s-a extras cu DCM. Fazele organice combinate s-au uscat pe Na2SO4, s-au filtrat şi filtratul s-a concentratin vacuo.Produsul brut s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi, dacă nu s-a stabilit altfel.

Procedeul general IIIa:

Derivat de 6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină corespunzător 1 eq. şi 4 eq. derivat de acid boronic corespunzător s-au dizolvat în amestec dioxan: apă 4:1 (10 mL/mmol), apoi s-au adăugat2,2 eq. Cs2CO3şi0,1 eq. Pd(dppf)Cl2şi amestecul s-a agitat la 40°C până când nu s-a mai observat conversie. Amestecul s-a diluat apoi cu apă şi s-a extras cu DCM. Fazele organice combinate s-au spălat cu apă, s-au uscat pe MgSO4, s-au filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat utilizând cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 25 mM de NH4HCO3şi acetonitril ca eluanţi, dacă nu s-a stabilit altfel.

Procedeul general IIIb:

Derivat de 6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină corespunzător 1 eq. şi 3 eq. derivat corespunzător de acid boronic s-au dizolvat în amestec THF: apă 1:1 (10 mL/mmol), apoi s-au adăugat 3 eq. Cs2CO3şi0,1 eq. AtaPhos şi amestecul s-a agitat la 100 °C în reactor cu MW până când nu s-a mai observat conversie. Volatilele s-au evaporat sub presiune redusă şi reziduul s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 25 mM de NH4HCO3şi acetonitril ca eluanţi, dacă nu s-a stabilit altfel.

Procedeul general IVa:

Compus de laPrepararea 4i1 eq. s-a dizolvat în THF anhidru (5 mL/mmol) şi s-a răcit la -78 °C. S-a adăugat soluţie LDA solution (1,2 eq. 2M în THF, heptan, EtPh) prin picurare sub argon şi amestecul s-a agitat pentru 1,5 ore. Apoi,1,2 eq. reactiv electrofil corespunzător în soluţie (dizolvat în 3mL/mmol THF anhidru) sau ca atare s-a adăugat la -78 °C şi amestecul s-a lăsat să se încălzească până la r.t. S-a agitat până nu s-a mai observat conversie. Amestecul de reacţie s-a stopat adăugând cu grijă cc. NH4Cl soluţie. Amestecul s-a extras cu MTBE, stratul organic s-a spălat cu saramură, s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi, dacă nu s-a stabilit altfel.

Procedeul general Va:

Acetalul corespunzător 1 eq. s-a agitat în soluţie 2M de HCl (3 mL/mmol) la 60 °C până nu s-a mai observat conversie. Amestecul de reacţie s-a răcit la 0 °C, apoi s-au adăugat5,7 eq. NaOH în porţiuni. S-a corectat pH-ul la 8 utilizând soluţie 10% K2CO3, apoi s-a adăugat 2 eq. borohidrură de sodiu în porţiuni menţinând temperatura sub 5 °C. După adăugare amestecul s-a agitat la 0 °C până nu s-a mai observat conversie. Amestecul s-a extras cu EtOAc, fazele organice combinate s-au uscat pe Na2SO4, s-au filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi, dacă nu s-a stabilit altfel.

Procedeul general Vb:

Etapa A

La o soluţie de 1 eq. N-alchil-pirazol corespunzător în THF anhidru (1,5 mL/mmol), 1,1 eq. nBuLi s-a adăugat prin picurare la -78 °C. Amestecul s-a agitat pentru 30 minute şi apoi s-a lăsat să se încălzească la 0 °C unde s-a agitat pentru 30 minute, apoi s-a răcit la -78 °C din nou. 1,1 eq. DMF s-a adăugat prin picurare apoi amestecul de reacţie s-a lăsat să atingă temperatura camerei şi s-a agitat peste noapte. Amestecul s-a stopat cu cc. NH4Cl soluţie. Fazele au fost separate şi stratul apos s-a extras cu EtOAc. Straturile organice combinate s-au uscat pe Na2SO4, s-au filtrat şi filtratul s-a concentrat sub presiune redusă. Reziduul s-a utilizat în etapa următoare fără purificare suplimentară.

Etapa B

La o soluţie de 1 eq. aldehidă brută corespunzătoare în EtOH (0,5 mL/mmol), s-au adăugat 1,3 eq. borohidrură de sodiu în porţiuni la -15 °C şi amestecul de reacţie s-a agitat la r.t. până când nu s-a mai observat conversie. Amestecul s-a turnat peste gheaţă pisată şi s-a agitat pentru 16 ore. Precipitatul s-a filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Faza uleioasă s-a separat şi stratul apos s-a extras cu EtOAc. Straturile organice combinate s-au uscat pe Na2SO4, s-au filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Produsul s-a purificat prin cromatografie rapidă dacă a fost necesar.

Procedeul general Vc:

La un amestec de1,2 eq. amidină sare corespunzătoare şi 1 eq. compus de la Prepararea 8aîn metanol anhidru (0,5 mL/mmol) s-au adăugat în porţiuni 1,2 eq. metoxid de sodiu şi amestecul s-a agitat la 75 °C până nu s-a mai observat conversie. Amestecul de reacţie s-a răcit şi s-a concentrat sub presiune redusă. La reziduu s-a adăugat apă şi s-a extras cu DCM. Straturile organice combinate s-au uscat pe MgSO4, s-au filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi, dacă nu s-a stabilit altfel.

Procedeul general Vd:

La un amestec de1,2 eq. hidrazină sau hidrazină clorhidrat corespunzătoare şi 1 eq. Prepararea 8aîn metanol anhidru (0,5 mL/mmol) s-au adăugat 1,2 eq. metoxid de sodiu în porţiuni şi amestecul s-a agitat la 75 °C până nu s-a mai observat conversie. Amestecul de reacţie s-a răcit şi s-aconcentrat sub presiune redusă. S-a adăugat apă la reziduu şi s-a extras cu DCM. Fazele organice combinate s-au uscat pe MgSO4, s-au filtrat şi filtratul s-a concentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi, dacă nu s-a stabilit altfel.

Procedeul general Ve:

Acetalul corespunzător 1 eq. s-a agitat cu soluţie 1M de HCl (3 mL/mmol) la 50 °C până nu s-a mai observat conversie. Amestecul de reacţie s-a răcit la 0 °C, apoi s-au adăugat în porţiuni2,85 eq. NaOH solid. S-a corectat pH-ulla 8 utilizând soluţie 10 % K2CO3, apoi s-au adăugat 2 eq. de borohidrură de sodiu în porţiuni menţinând temperatura sub 5 °C şi s-a agitat la 0 °C până nu s-a mai observat conversie. Amestecul s-a extras cu EtOAc, fazele organice combinate s-au uscat pe Na2SO4, s-au filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi, dacă nu s-a stabilit altfel.

Procedeul general VI:

Derivat de fenol corespunzător 1 eq., 2 eq. derivat de alcool corespunzător şi 3 eq. PPh3s-au dizolvat în toluen anhidru (7 mL/mmol) sub atmosferă de N2, apoi s-au adăugat 3 eq. di-tert-butil azodicarboxilat la r.t. Apoi amestecul s-a agitat la 50 °C până nu s-a mai observat conversie. Volatilele s-au îndepărtat in vacuoşi reziduul s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc (şi MeOH dacă este necesar) ca eluanţi. Dacă este necesar, produsul s-a mai purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 25 mM de NH4HCO3şi acetonitril ca eluanţi, dacă nu s-a stabilit altfel.

Procedeul general VII:

Derivat de ester corespunzător 1 eq. s-a dizolvat în THF (15 mL/mmol) apoi s-au adăugat 10 eq. LiOH×H2O şi apă (15 mL/mmol). Amestecul s-a agitat la r.t. (sau la 60 °C dacă este necesar) până nu s-a mai observat conversie. S-a corectat pH-ul la 6 cu soluţie 1M de HCl, apoi amestecul s-a diluat cu saramură, s-a extras cu DCM sau EtOAc. Stratul organic s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 25 mM de NH4HCO3 şi acetonitril ca eluanţi, dacă nu s-a stabilit altfel.

Procedeul general VIII:

Derivat de indol corespunzător 1 eq. şi 2 eq. derivat de alcool corespnzător s-audizolvat în toluen anhidru (8 mL/mmol) sub atmosferă de N2şi amestecul s-a răcit la 0 °C, apoi s-au adăugat 2 eq. 2-(tributil-fosfaniliden)acetonitril. Apoi amestecul s-a încălzit la 100 °C şi s-a agitat până nu s-a mai observat conversie. Volatilele s-au îndepărtat in vacuo,apoi s-au adăugat apă (4 mL/mmol) şi soluţie 2M de NaOH (1 mL/mmol) şi amestecul s-a agitat până nu s-a mai observat conversie. Amestecul s-a acidulat apoi cu soluţie 1M de HCl la pH = 6 şi s-a extras cu DCM. Fazele organice combinate s-au uscat pe Na2SO4, s-au filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH =4, corectată cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi, dacă nu s-a stabilit altfel.

Procedeul general IXa:

Etapa A

Compus de laPrepararea 9b1 eq. s-a dizolvat în toluen anhidru (8 mL/mmol), apoi s-au adăugat 1,18 eq. PPh3, 1,1 eq. derivat de alcool corespunzătorşi 1,18 eq. dietilazodicarboxilat (40 % soluţie în toluen) la r.t. Amestecul s-a agitat la r.t. până nu s-a mai observat conversie. Precipitatul rezultat s-a filtrat şi filtratul s-a spălat secvenţial cu soluţie 10 % de KHSO4, apă, soluţie saturată de NaHCO3şi din nou apă. Faza organică s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi filtratul s-a concentrat sub presiune redusă. Reziduul s-a agitat cu dietil-eter (5 mL/mmol), materialul solubil s-a filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă pentru a obţine produsul brut.

Etapa B

Produsul de laEtapa A s-a tratat cu 10 eq. soluţie HCl (4,9M în MeOH) şi s-a agitat la r.t. până nu s-a mai observat conversie. Amestecul s-a concentrat sub presiune redusă. Reziduul s-a repartizat între EtOAc rece şi apă răcită cu gheaţă, fazele s-au separat şi faza organică s-a extras cu soluţie răcită cu gheaţă 5 % de KHSO4. Faza organică combinată s-a alcalinizat cu Na2CO3solid şi produsul s-a extras cu EtOAc. Faza organică s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi filtratul s-a concentrat sub presiune redusă pentru a obţine esterul metilic al compusului din titlu.

Etapa C

Ester metilic obţinut în Etapa B 1 eq. s-a dizolvat în MeOH (9 mL/mmol), apoi s-au adăugat1,05 eq. NaOH şi apă (1 mL/mmol) şi amestecul s-a agitat la r.t. până nu s-a mai observat conversie. Metanolul s-a îndepărtat sub presiune redusă şi amestecul s-a neutralizat cu soluţie 1M de HCl, apoi s-a extras cu DCM. Faza organică s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă pentru a obţine derivatul O-alchilat al aminoacidului, care s-a utilizat fără purificare suplimentară.

Procedeul general IXb:

Etapa A

Compusul de laPrepararea 9b1 eq. s-a dizolvat în DMF anhidru (10 mL/mmol) şi s-au adăugat 4 eq. K2CO3 şi 2 eq. agent de alchilare corespunzător la r.t. Amestecul s-a agitat la 50 °C până nu s-a mai observat conversie. Amestecul s-a diluat cu apă, apoi s-a extras cu DCM. Faza organică s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Materialul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând DCM şi metanol ca eluanţi, dacă nu s-a stabilit altfel.

Etapa B şi Etapa C sunt la fel cum s-a descris în Procedeul general IXa.

Prepararea 1a: 5-Bromo-4-cloro-6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidina

Etapa A: 6-Iodo-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

Un balon de 2 L cu fund rotund echipat cu agitator mecanic, termometru şi condensator de reflux s-a încărcat cu soluţia de 433 mL acid acetic, 13 mL acid sulfuric şi 87 mL apă. S-au adăugat 69,3 g 3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-onă (0,46 mol), 51,9 g acid periodic (0,23 mol) şi 104 g iod (0,41 mol) la soluţia agitată, care s-a încălzit la 60 °C pentru 1 oră. Suspensia rezultată s-a răcit la r.t., s-a filtrat, s-a spălat cu un amestec de acid acetic şi apă (5:1) şi apoi cu dietileter. Solidul cristalin bej care rezultă s-a uscat la aer. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ: 12,57 (br s, 1H), 8,09 (s, 1H), 7,65 (s, 1H)

Etapa B: 4-Cloro-6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidina

Un balon cu fund rotund de 1 L echipat cu agitator mecanic, termometru, condensator de reflux şi tub cu CaCl2s-a încărcat cu 113 mL oxiclorură de fosfor şi 35 mL N,N-dimetilanilină (0,29 mol). 75,54 g 6-iodo-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-onă (0,27 mol) s-au adăugat la amestec în porţiuni în 5 minute. Amestecul de reacţie s-a agitat la 105 °C 1 oră. Suspensia rezultată s-a răcit la 10 °C, s-a filtrat şi spălat cu hexan. Produsul brut s-a adăugatîn apă rece şi s-a agitat 10 minute, s-a filtrat, s-a spălat cu apă rece, dietileter şi s-a uscat la aer. Solidul cristalin bej s-a obţinut. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8,89 (s, 1H), 7,98 (s, 1H)

Etapa C: Prepararea 1a

Un balon de 2 L cu fund rotund echipat cu agitator mecanic, termometru şi barbotor s-a încărcat cu 600 mL acetonitril. S-au adăugat 84,9 g 4-cloro-6-iodo-tieno[2,3-d] pirimidină (0,29 mol), 50,9 g NBS (0,29 mol) şi8,5 mL complex acid tetrafluoroboric dietil eter. Amestecul de reacţie s-a agitat la r.t. pentru 16 ore. Apoi, s-a adăugat 22,9 g (0,12 mol) NBS la amestec în trei porţiuni. După răcirea suspensiei la 0 °C şi agitare pentru încă 1 oră precipitatul s-a filtrat, s-a spălat cu acetonitril şi s-a uscat la aer. Produsul s-a obţinut ca solid cristalin bej. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8,88 (s, 1H)

Prepararea 1b: 4-Cloro-5,6-diiodo-tieno[2,3-d]pirimidina

Etapa A: 5,6-Diiodo-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

La o suspensie bine agitată de 61,3 g 3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-onă (396 mmol), s-au adăugat 92,4 g acid periodic (405 mmol), 1 L acid acetic, 200 mL apă, 6 mL cc. acid sulfuric şi 203 g iod (799 mmol). Amestecul de reacţie s-a încălzit la 110 °C şi s-a agitat 3 ore. Suspensia s-a răcit la r.t. apoi s-au adăugat 940 mL dietil eter şi amestecul s-a mai agitat la 10 °C pentru 30 minute. Precipitatul s-a filtrat, s-a spălat cu amestec 2:1 de dietileter şi etanol (100 mL), final cu dietileter (3 × 250 mL), apoi s-a uscat la aer pentru a da produsul ca pulbere cafenie-roşcată. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ: 12,60 (br s, 1H), 8,13 (s, 1H)

Etapa B: Prepararea 1b

La o suspensie bine agitată de 180 g 5,6-diiodo-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-onă (445 mmol) în 2,5 L oxiclorură de fosfor s-au adăugat 64 mL N,N-dimetilanilină. Amestecul de reacţie s-a încălzit la 105 °C şi s-a agitat pentru1,5 ore. Suspensia rezultată s-a răcit la r.t. şi s-a adăugat 1,5 L hexan şi s-a agitat pentru încă 20 minute. Precipitatul s-a filtrat, s-a spălat cu hexan (3 × 500 mL) şi apă (3 × 100 mL) apoi s-a uscat la aer pentru a da produsul ca solid cristalin cenuşiu. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8,88 (s, 1H)

Prepararea 1c: 4-Cloro-5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidina

Produs de laPrepararea1b52,8 g(125 mmol) s-a dizolvat în 400 mL THF anhidru şi s-a răcit la 0 °C. 100 mL tBuMgCl (200 mmol, 2M in dietileter) s-a adăugat în 15 minute. Apoi s-au adăugat 50 mL apă şi soluţia s-a decantat şi s-a concentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a sonicat într-un amestec de acetonitril şi apăde (3:1) şi apoi s-a colectat prin filtrare. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8,95 (s, 1H), 8,45 (s, 1H)

Prepararea 2a: 4-Cloro-6-etil-5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidina

Etapa A: 6-Etil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

Amestecul de 701 g ester etilic al acidului 2-amino-5-etil-tiofen-3-carboxilic (3,52 mol) şi 2200 mL formamidă s-a încălzit la 200 °C şi s-au distilat solvenţii cu punct de fierbere coborât. După 2 ore s-au adăugat încă 250 mL formamidă şi amestecul s-a agitat la aceeaşi temperatură pentru încă o oră, apoi la r.t. pentru 16 ore. Amestecul rezultat s-a turnat în 7,5 L apă şi precipitatul s-a filtrat, s-a spălat cu 1,5 L toluen şi 3 L apă, apoi s-a uscat la aer pentru a da produsul ca solid cristalin cafeniu. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ: 12,40 (br s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,11 (t, 1H), 2,85 (qd, 2H), 1,27 (t, 3H)

Etapa B: 6-Etil-5-iodo-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

Amestecul de 301 g 6-etil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-onă (1,67 mol), 847 g iod (3,34 mol), 1040 g sulfat de argint (3,34 mol) şi1,7 L etanol s-a agitat la r.t. pentru 3 zile.

Precipitatul rezultat s-a filtrat şi s-a spălat cu etanol (3 × 400 mL). Produsul s-a eluat de pe turta de la filtrarecu următorul procedeu: turta de pe filtru s-a agitat cu 800 mL DMF la 50 °C pentru 1 oră, apoi suspensia s-a filtrat. Această secvenţă s-a repetat de 6 ori. Stratul organic combinat s-a evaporat la sec pentru a da produsul ca solid cristalin cafeniu-roşcat.

Etapa C: Prepararea 2a

Amestecul agitat de 880 mL oxiclorură de fosfor şi 102 mL N,N-dimetilanilină s-a încălzit la 95 °C şi 220 g 6-etil-5-iodo-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-onă (0,719 mol) s-a adăugat repede la aceeaşi temperatură şi apoi s-a agitat pentru 15 minute. Amestecul de reacţie s-a răcit la 80 °C şi s-a turnat într-un amestec agitat de apă (1 L), gheaţă pisată (2 kg) şi DCM (700 mL). Amestecul rezultat s-a agitat pentru încă 30 minute în timp cetemperatura s-a menţinut sub 20 °C. Fazele s-au separat, stratul anorganic s-a extras cu DCM (100 mL) şi stratul organic s-a spălat cu apă (100 mL). Straturile organice combinate s-au uscat pe MgSO4, s-au filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă pentru a da produsul ca solid cristalin cafeniu roşcat. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8,79 (s, 1H), 3,02 (q, 2H), 1,39 (t, 3H)

Prepararea 2b: 5-Bromo-4-cloro-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidina

Compus de laPrepararea 1a75,08 g(200 mmol), 53,63 g 2-(4-fluorofenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan (240 mmol), 130 g carbonat de cesiu (400 mmol), 2,245 g Pd(OAc)2 (10 mmol) şi 8,50 g tBuX-Phos (20 mmol) s-au introdus într-un balon de 2 L. S-au adăugat 600 mL THF şi 200 mL apă şi apoi s-a agitat peste noapte la 70 °C sub atmosferă de argon. THF s-a evaporat şi apoi produsul s-a colectat prin filtrare. Produsul brut s-a sonicat în 250 mL acetonitril şi s-a filtrat din nou. Apoi compusul de laPrepararea 2ba cristalizat din EtOH/THF (2:1). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 9,02 (s, 1H), 7,80-7,77 (m, 2H), 7,47-7,43 (m, 2H).

Prepararea 2c: 4-Cloro-5-iodo-6-(prop-1-inil)-tieno[2,3-d]pirimidina

Compus de laPrepararea 1b42,24 g(100 mmol), 3,509 g Pd(PPh3)2Cl (5 mmol) şi 1,904 g CuI (10 mmol) s-au dizolvat în 400 mL DIPA, apoi s-a barbotat propină prin amestecul de reacţie, care s-a agitat la r.t. până nu s-a mai observat conversie. Volatilele s-au evaporat sub presiune redusă şi produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan/EtOAc ca eluanţi. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8,92 (s, 1H), 2,25 (s, 3H)

Prepararea 2d: 4-Cloro-5-iodo-6-izopropil-tieno[2,3-d]pirimidina

Etapa A: 6-Izopropil-5-iodo-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

Amestecul de 2,858 g (14,7 mmol) 6-izopropil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-onă, 7,468 g (29,4 mmol) iod, 9,175 g (29,4 mmol) sulfat de argint şi 55 mL etanol s-a agitat la r.t. 3 zile. Amestecul s-a diluat cu Et2O, precipitatul rezultat s-a filtrat şi s-a utilizat fără purificare. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 12,49 (br s, 1H), 8,11 (s, 1H), 3,35 (m, 1H, suprapus peste semnalul H2O), 1,28 (d, 6H)

MS (M-H): 319,0

Etapa B: Prepararea 2d

Amestecul de 15 mL (161 mmol) oxiclorură de fosfor şi 1,9 mL (14,7 mmol) N,N-dimetilanilină s-a încălzit la 95°C şi s-au adăugat repede 25,9 g (14,7 mmol) 6-izopropil-5-iodo-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-onă (0,719 mol) şi apoi s-a agitat pentru încă 15 minute la această temperatură. Amestecul de reacţie s-a răcit la 80 °C şi s-a turnat într-un amestec agitat de apă cu gheaţă (300 g) şi EtOAc (200 mL). Amestecul rezultat s-a agitat pentru încă 30 minute în timp ce temperatura s-a păstrat sub 20 °C. Fazele s-au separat, stratul anorganic s-a extras cu EtOAc (100 mL) şi stratul organic s-a spălat cu apă şi soluţie de NaHCO3. Stratul organic combinat s-a uscat pe MgSO4, s-a filtrat şi filtratul s-a concentratat sub presiune redusă şi s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAC ca eluanţi pentru a da produsul din titlu.

1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 8,78 (s, 1H), 3,63 (septet, 1H), 1,41 (d, 6H)

MS (M+H): 339,0

Prepararea 3a: acid (2R)-2-[(6-etil-5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]-3-fenil-propanoic

Utilizând Procedeul general Ia şiPrepararea 2aca derivat de 4-cloro-tieno[2,3-d] pirimidină corespunzător şi D-fenilalaninaca derivat de aminoacid corespunzător, s-a obţinut compusul de la Prepararea 3a.

1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8,44 (s, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,30-7,20 (m, 5H), 5,07 (m, 1H), 3,35 (dd, 1H), 3,16 (dd, 1H), 2,82 (q, 2H), 1,22 (t, 3H)

HRMS calculat pentru C17H16IN3O2S: 453,0008; găsit: 454,0064 (M+H)

Prepararea 4a: 4-cloro-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil]-6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidina

Etapa A: 4-cloro-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil]tieno [2,3-d]pirimidina

Utilizând Procedeul general IIa şi compusul de laPrepararea1cca derivat de 5-iodo-tieno[2,3-d] pirimidină corespunzător şi derivatul de acid boronic corespunzător de laPrepararea B4şi purificând produsul prin cromatografie rapidă utilizând DCM şi MeOH ca eluanţi s-a obţinut 4-cloro-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil]tieno[2,3-d] pirimidina. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8,98 (s, 1H), 7,97 (s, 1H), 7,22 (d, 1H), 7,09 (s, 1H), 4,25-4,16 (m, 2H), 2,76 (t, 2H), 2,54 (br s, 4H), 2,32 (br s, 4H), 2,14 (s, 3H), 2,06 (s, 3H)

Etapa B: Prepararea 4a

10,935 g 4-cloro-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil] tieno[2,3-d]pirimidină (25 mmol) s-au dizolvat în 250 mL THF anhidru şi s-a răcit la -78 °C. 25 mL LDA soluţie (50 mmol, 2M in THF, heptan, etil benzen) s-a adăugat prin picurare sub atmosferă de argon şi amestecul s-a agitat pentru 15 minute. Apoi s-au adăugat 12,69 g (50 mmol) iod la -78°C şi amestecul s-a lăsat să se încălzească până la r.t. Apoi amestecul s-a diluat cu EtOAc şi s-a spălat cu soluţie de NH4Cl, apoi cu soluţie de Na2S2O3, s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi s-a concentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând DCM şi MeOH ca eluanţi pentru a obţine compusul de laPrepararea4a. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8,93 (s, 1H), 7,15 (d, 1H), 7,13 (d, 1H), 4,22 (t, 2H), 2,77 (t, 2H), 2,56 (br s, 4H), 2,34 (br s, 4H), 2,16 (s, 3H), 2,00 (s, 3H)

Prepararea 4b: 4-cloro-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil]-6-(2-furil)tieno[2,3-d]pirimidina

Utilizând Procedeul general IIa şi compusul de la Prepararea4aca derivate corespunzător de 6-iodo-tieno[2,3-d] pirimidină şi 2-(2-furil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan ca derivat corespunzător de acid boronic, s-a obţinut compusul de laPrepararea4b. MS: (M+H) = 503,0

Prepararea 4c: 4-cloro-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil]-6-(5-fluoro-2-furil)tieno[2,3-d]pirimidina

Utilizând Procedeul general IIIa şi compusul de laPrepararea 4aca derivat de 6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină corespunzător şi 2-(5-fluoro-2-furil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan ca derivat de acid boronic corespunzător s-a obţinut compusul de laPrepararea 4c.

1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8,93 (s, 1H), 7,24 (d, 1H), 7,18 (d, 1H), 5,92 (dd, 1H), 5,68 (t, 1H), 4,23 (t, 2H), 2,79 (t, 2H), 2,58 (br s, 4H), 2,38 (br s, 4H), 2,19 (s, 3H), 2,05 (s, 3H).HRMS calculat pentru C24H23N4O2FSCl2: 520,0903; găsit: 521,0972 (M+H)

Prepararea 4d: 2-cloro-4-(4-cloro-6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidin-5-il)-3-metil-fenol

EtapaA: [2-cloro-4-(4-clorotieno[2,3-d]pirimidin-5-il)-3-metil-fenoxi]-triizopropil-silan

Utilizând Procedeul general IIa şi compusul de la Prepararea1cca derivat de 5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină corespunzător şi compusul de laPrepararea B3ca derivat de acid boronic corespunzător, s-a obţinut [2-cloro-4-(4-clorotieno[2,3-d] pirimidin-5-il)-3-metil-fenoxi]-triizopropil-silan. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8,95 (s, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,13 (d, 1H), 6,91 (d, 1H), 2,05 (s, 3H), 1,40-1,29 (m, 3H), 1,10 (dd, 18H)

Etapa B: [2-cloro-4-(4-cloro-6-iodotieno[2,3-d]pirimidin-5-il)-3-metil-fenoxi]-triizopropil-silan

33,7 g [2-cloro-4-(4-clorotieno[2,3-d]pirimidin-5-il)-3-metil-fenoxi]-triizopropil-silan (72 mmol) s-a dizolvat în 300 mL THF anhidru şi s-a răcit la -78 °C. S-a adăugat prin picurare 43,2 mL soluţie LDA (86,4 mmol, 2M în THF, heptan, etil benzen) prin picurare sun argon şi amestecul s-a agitat pentru 15 minute. Apoi s-au adăugat 23,8 g iod (93,7 mmol) la -78 °C şi amestecul s-a lăsat să se încălzească la r.t. Apoi amestecul s-a diluat cu EtOAc şi s-a spălat cu soluţie de NH4Cl apoi cu soluţie de Na2S2O3. Stratul organic s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi s-aconcentrat sub presiune redusă. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8,91 (s, 1H), 7,05 (d, 1H), 6,97 (d, 1H), 1,99 (s, 3H), 1,39-1,30 (m, 3H), 1,10 (dd, 18H).

Etapa C: Prepararea4d

10,0 g [2-cloro-4-(4-cloro-6-iodotieno[2,3-d]pirimidin-5-il)-3-metil-fenoxi]-triizopropil-silan (16,85 mmol) s-a dizolvat în 100 mL THF anhidru şi s-au adăugat 18,5 mL soluţie TBAF solution (18,5 mmol, 1M în THF) şi amestecul s-a agitat la r.t. pentru 10 minute. Apoi amestecul s-a diluat cu EtOAc şi s-a spălat cu soluţie 1M HCl şi saramură. Stratul organic s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi s-aconcentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a obţine compusul de laPrepararea 4d. HRMS calculat pentru C13H7Cl2IN2OS: 435,8701, găsit: 436,8780 (M+H)

Prepararea 4e: 2-[2-cloro-4-(4-cloro-6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidin-5-il)-3-metil-fenoxi]-N,N-dimetil-etanamina

Utilizând Procedeul general VI şi compusul de laPrepararea 4dcaderivat corespunzător de fenol şi N,N-dimetiletanolamina ca alcool corespunzător, s-a obţinut compusul de la Prepararea 4e. MS (M+H): 508,0

Prepararea 4f: 2-cloro-4-[4-cloro-6-(3-tienil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-3-metil-fenol

Utilizând Procedeul general IIIa şi compusul de laPrepararea 4dca derivat de 6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină corespunzător şiester pinacolic al acidului tiofen-3-boronic ca derivat de acid boronic corespunzător, s-a obţinut compusul de la Prepararea 4f. MS (M+H): 393,0

Prepararea 4g: 4-cloro-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil]-6-(3-tienil)tieno[2,3-d]pirimidina

Utilizând Procedeul general VI şi compusul de laPrepararea 4fca derivat corespunzător de 6-iodo-tieno [2,3-d]pirimidină şi 2-(4-metilpiperazin-1-il)etanol ca alcool corespunzător, s-a obţinut compusul de la Prepararea 4g.

1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8,94 (s, 1H), 7,60 (dd, 1H), 7,56 (dd, 1H), 7,19 (d, 1H), 7,12 (d, 1H), 6,79 (dd, 1H), 4,21 (t, 1H), 2,77 (t, 1H), 2,56 (br, 4H), 2,33 (br, 4H), 2,15 (s, 3H), 2,04 (s, 3H)

HRMS calculat pentru C24H24Cl2N4OS2: 518,0769; găsit: 519,0852 (M+H)

Prepararea 4h: 4-[2-[2-cloro-4-[4-cloro-6-(3-tienil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-3-metil-fenoxi]etil]morfolina

Utilizând Procedeul general VI şi compusul de laPrepararea 4fca derivat corespunzător de fenol şi 2-morfolinoetanol ca alcool corespunzător, s-a obţinut compusul de laPrepararea 4h.

Prepararea 4i: 4-cloro-5-(1-naftil)tieno[2,3-d]pirimidina

Etapa A: 2-amino-4-(1-naftil)tiofen-3-carboxilat de etil

50,00 g 1-(1-naftil)etanona (293,8 mmol), 43,66 g cianoacetat de etil (386,0 mmol), 18,84 g sulf (587,5 mmol), 8,4 mL AcOH şi 38,39 g morfolină s-au dozolvat în 300 mL EtOH şi s-au agitat la 60 °C până nu s-a observat conversie. Volatilele s-au îndepărtat in vacuo,şi reziduul s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a obţine 2-amino-4-(1-naftil)tiofen-3-carboxilat de etil. HRMS calculat pentru C17H15NO2S: 297,0823; găsit: 298,0891 (M+H)

Etapa B: 5-(1-naftil)-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

9,40 g 2-amino-4-(1-naftil)tiofen-3-carboxilat de etil (31,6 mmol) s-a dizolvat în 45 mL formamidă şi s-a agitat la 200 °C până nu s-a mai observat conversie. Volatilele s-au răcit la r.t. şi s-au turnat în apă. Solidul precipitat s-a filtrat, s-a spălat cu apă, apoi s-a uscat pentru a obţine 5-(1-naftil)-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona. HRMS calculat pentru C16H10N2OS: 278,0514; găsit: 279,0582 (M+H)

Etapa C: Prepararea 4i

8,50 g 5-(1-naftil)-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona (30,5 mmol), 4,07 g N,N-dimetilanilina (33,6 mmol) şi 22,8 mL oxiclorură de fosfor (244 mmol) s-au agitat la 100 °C pentru 1 oră. Amestecul s-a răcit la r.t. şi s-a turnat în apă cu gheaţă cu agitare. Solidul precipitat s-a filtrat şi recristalizat din acetonitril pentru a obţine compusul de la Prepararea 4i. HRMS calculat pentru C16H9N2SCl: 296,0175; găsit: 297,0255 (M+H)

Prepararea 4j: 4-cloro-5-(3-cloro-2-metil-fenil)-6-etil-tieno[2,3-d] pirimidina

Utilizând Procedeul general IIb şi compusul de laPrepararea 2aca derivat de 5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină corespunzător şi acid (3-cloro-2-metil-fenil)boronic ca derivat de acid boronic corespunzător, s-a obţinut compus de la Prepararea4j.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8,89 (s, 1H), 7,55 (dd, 1H), 7,33 (t, 1H), 7,23 (dd, 1H), 2,65 (m, 2H), 2,03 (s, 3H), 1,17 (t, 3H)

HRMS calculat pentru C15H12Cl2N2S: 322,0098; găsit: 323,0164 (M+H)

Prepararea 4k: 4-cloro-6-etil-5-(1-naftil)tieno[2,3-d]pirimidina

Utilizând Procedeul general IIb şi compusul de la Prepararea 2aca derivat de 5-iodo-tieno[2,3-d] pirimidină corespunzător şi esterul neopentil glicolic al acidului 1-naftalenboronic ca derivat corespunzător de acid boronic, s-a obţinut compusul de la Prepararea 4k.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8,91 (s, 1H), 8,07 (dd, 1H), 8,03 (dm, 1H), 7,63 (dd, 1H), 7,55 (tm, 1H), 7,51 (dd, 1H), 7,44 (tm, 1H), 7,33 (dm, 1H), 2,61 (q, 2H), 1,13 (t, 3H)

HRMS calculat pentru C18H13ClN2S: 324,0488; găsit: 325,0562 (M+H)

Prepararea 4l: 4-cloro-6-metil-5-(1-naftil)tieno[2,3-d]pirimidina

Utilizând Procedeul general IVa şi iodura de metil ca electrofil corespunzător, s-a obţinut compusul de la Prepararea 4l.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8,90 (s, 1H), 8,04 (dd, 2H), 7,63 (dd, 1H), 7,54 (td, 1H), 7,49 (dd, 1H), 7,43 (td, 1H), 7,32 (d, 1H), 2,28 (s, 3H)

MS (M+H): 311,0

Prepararea 4m: [4-cloro-5-(1-naftil)tieno[2,3-d]pirimidin-6-il]metanol

Etapa A: 4-cloro-5-(1-naftil)tieno[2,3-d]pirimidin-6-carbaldehida

Utilizând Procedeul general IVa şi DMF ca electrofil corespunzător, s-a obţinut 4-cloro-5-(1-naftil)tieno[2,3-d]pirimidin-6-carbaldehida. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 9,65 (s, 1H), 9,00 (s, 1H), 8,07 (d, 1H), 7,99 (d, 1H), 7,68-7,52 (m, 3H), 7,47 (t, 1H), 7,33 (d, 1H)

Etapa B: Prepararea 4m

4-Cloro-5-(1-naftil)tieno[2,3-d]pirimidin-6-carbaldehida s-a dizolvat în THF:MeOH 1:1 (4 mL/mmol) şi s-au adăugat 3 eq. NaBH4la 0 °C. Amestecul s-a agitat pentru 10 minute, apoi s-a stopat cu acid citric 1M. Amestecul s-a extras cu DCM, s-a spălat cu soluţie de NaHCO3şi saramură, s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi filtratul s-a concentratin vacuo.Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a obţine produsul de laPrepararea 4m.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8,92 (s, 1H), 8,06 (d, 1H), 8,03 (d, 1H), 7,62 (m, 1H), 7,58-7,49 (m, 2H), 7,44 (m, 1H), 7,35 (d, 1H), 5,99 (t, 1H), 4,54 (dd, 1H), 4,33 (dd, 1H)

MS (M+H): 327,0

Prepararea 4n1 şiPrepararea 4n2: 1-[4-cloro-5-(1-naftil)tieno[2,3-d] pirimidin-6-il]etanol

Utilizând Procedeul general IVa şi acetaldehida ca reactiv electrofil adecvat s-a obţinut produsul brut ca un amestec de diastereoizomeri, care au fost separaţi prin cromatografie rapidă secvenţială utilizând DCM-acetonă şi heptan-MTBE ca eluanţi. Ordinea eluţiei perechii diastereomerice a fost aceeaşi cu ambele sisteme de eluanţi.

Prepararea 4n1s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează la început (racemat).

1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 8,85 (s, 1H), 7,99 (d, 1H), 7,95 (d, 1H), 7,60-7,49 (m, 2H), 7,46-7,34 (m, 3H), 4,84 (m, 1H), 2,06 (d, 1H) 1,53 (d, 3H)

MS (M+H): 341,0

Prepararea 4n2s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează mai târziu (racemat).

1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 8,85 (s, 1H), 7,99 (d, 1H), 7,94 (d, 1H), 7,60-7,49 (m, 2H), 7,46 (dd, 1H) 7,43-7,37 (m, 1H), 7,27 (overlap, 1H), 4,98 (m, 1H), 2,14 (d, 1H) 1,35 (d, 3H)

MS (M+H): 341,0

Prepararea 4o: 1-[4-cloro-5-(1-naftil)tieno[2,3-d]pirimidin-6-il]etanona

Reactiv Dess-Martin 157 mg (0,37 mmol) s-a dizolvat în 2 mL DCM, apoi un amestec de produşi de la Prepararea4n1şi de la Prepararea 4n2 (120 mg, 0,35 mmol dizolvat în 10 mL DCM) s-a adăugat şi amestecul s-a agitat până când nu s-a mai observat conversie. Apoi amestecul s-a diluat cu DCM, s-a spălat cu soluţii de NaOH şi NaHCO3 şi saramură, s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şiconcentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a obţine compusul de la Prepararea 4o.

1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ: 9,09 (s, 1H), 8,16 (dd, 1H), 8,08 (d, 1H), 7,72-7,65 (m, 2H), 7,62-7,57 (m, 1H), 7,52-7,43 (m, 2H), 1,71 (s, 3H)

MS (M+H): 339,0

Prepararea 4p: 2-[4-cloro-5-(1-naftil)tieno[2,3-d]pirimidin-6-il]propan-2-ol

Utilizând Procedeul general IVa şiacetona ca electrofil corespunzător, s-a obţinut compusul de laPrepararea 4p.

1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 8,80 (s, 1H), 7,98 (d, 1H), 7,92 (d, 1H), 7,59-7,46 (m, 2H), 7,46-7,34 (m, 2H), 7,30 (d, 1H), 2,53 (br s, 1H), 1,54 (s, 3H), 1,21 (s, 3H)

MS (M+H): 355,0

Prepararea 4q: 4-cloro-6-izopropil-5-(1-naftil)tieno[2,3-d]pirimidina

Etapa A: 6-izopropil-5-(1-naftil)-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona

Compus de laPrepararea 4p250 mg (0,705 mmol) şi1,75 mL Et3SiH (10,9 mmol) s-au introdus într-un balon şi s-au tratat cu 10 mL TFA la -10 °C. Amestecul s-a agitat apoi la 50 °C până nu s-a mai observat conversie. Amestecul s-a diluat apoi cu DCM, s-a neutralizat cu K2CO3solid şi soluţie de NaHCO3. După separarea fazelor faza organică s-a spălat cu saramură, s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi s-a concentrat in vacuopentru a obţine 6-izopropil-5-(1-naftil)-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona ca intermediar brut. MS (M+H): 321,0

Etapa B: Prepararea 4q

Oxiclorură de fosfor 2 mL şi0,161 mL N,N-dimetilanilină (1,27 mmol) s-au introdus într-un balon sub argon şi 1,22 g 6-izopropil-5-(1-naftil)-3H-tieno[2,3-d] pirimidin-4-onă s-a adăugat la amestec în porţiuni în 5 minute. Amestecul de reacţie s-a agitat la 100 °C până nu s-a mai obsercat conversie. Amestecul s-a răcit la r.t. şi s-a turnat în apă cu gheaţă cu agitare. Mediul apos obţinut s-a neutralizat adăugând cu grijă NaHCO3solid. După ce degajarea gazului a încetat, produsul s-a extras de trei ori cu DCM. Straturile organice combinate s-au uscat pe Na2SO4, s-au filtrat şi concentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a obţine produs de laPrepararea 4q.

1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ: 8,80 (s, 1H), 7,97 (d, 1H), 7,94 (d, 1H), 7,57 (dd, 1H), 7,54-7,49 (m, 1H), 7,42-7,37 (m, 2H), 7,34 (d, 1H), 3,02 (septet, 1H), 1,31 (d, 3H), 1,20 (d, 3H)

MS (M+H): 339,0

Prepararea 4r: 4-cloro-6-(difluorometil)-5-(1-naftil)tieno[2,3-d]pirimidina

4-Cloro-5-(1-naftil)tieno[2,3-d]pirimidin-6-carbaldehida 0,250 g (Etapa A intermediar în sinteza compusului de laPrepararea 4m,0,77 mmol) s-a dizolvat în 7 mL DCM, apoi s-a adăugat 270 µl DAST (1,16 mmol). Amestecul s-a agitat la r.t. până nu s-a mai observat conversie. Amestecul s-a diluat apoi cu DCM şi s-a spălat cu apă, apoi cu soluţie de NaHCO3şi saramură. Faza organică s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi concentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a obţine compusul de laPrepararea 4r.

1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ: 8,97 (s, 1H), 8,04 (d, 1H), 7,97 (d, 1H), 7,62-7,54 (m, 2H), 7,49-7,43 (m, 2H), 7,28 (d, 1H), 6,47 (t, 1H)

MS (M+H): 347,0

Prepararea 4s: 4-cloro-6-iodo-5-(1-naftil)tieno[2,3-d]pirimidina

Utilizând Procedeul general IVa şi iod ca reactiv electrofil adecvat, s-a obţinut compusul de laPrepararea 4s.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8,94 (s, 1H), 8,10 (dm, 1H), 8,05 (dm, 1H), 7,66 (dm, 1H), 7,56 (tm, 1H), 7,48 (dd, 1H), 7,44 (tm, 1H), 7,31 (dm, 1H)

HRMS calculat pentru C16H8N2SClI: 421,9141; găsit: 422,9211 (M+H)

Prepararea 4t: 4-cloro-5-(3-cloro-2-metil-fenil)-6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidina

Etapa A: 4cloro-5-(3-cloro-2-metil-fenil)tieno[2,3-d]pirimidina

Utilizând Procedeul general IIb şi compusul de la Prepararea1cca derivat 5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină corespunzător şi acid (3-cloro-2-metil-fenil)boronic ca derivat de acid boronic corespunzător s-a obţinut 4-cloro-5-(3-cloro-2-metil-fenil)tieno[2,3-d]pirimidina. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 8,89 (s, 1H), 7,47 (dd, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,20 (t, 1H), 7,14 (dd, 1H), 2,14 (s, 3H)

Etapa B: Prepararea 4t

Utilizând Procedeul general IVa şi 4-cloro-5-(3-cloro-2-metil-fenil)tieno[2,3-d] pirimidina în locul compusului de laPrepararea 4i şi iod ca reactiv electrofil, s-a obţinut compusul de la Prepararea 4t. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 8,82 (s, 1H), 7,52 (dd, 1H), 7,25 (t, 1H), 7,05 (dd, 1H), 2,09 (s, 3H)

Prepararea 4u:4-cloro-5-(3-cloro-2-metil-fenil)-6-izopropil-tieno[2,3-d]pirimidina

Utilizând Procedeul general IIb şi compusul de laPrepararea 2dca derivat de 5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină corespunzător şi acidul (3-cloro-2-metil-fenil)boronic ca derivat de acid boronic corespunzător, s-a obţinut compusul de la Prepararea 4u.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8,90 (s, 1H), 7,56 (dd, 1H), 7,34 (t, 1H), 7,29-7,22 (m, 1H), 2,94 (septet, 1H), 2,04 (s, 3H), 1,26 (d, 3H), 1,22 (d, 3H)

HRMS calculat pentru C16H14N2SCl2: 336,0255; găsit: 337,0335 (M+H)

Prepararea 4v: 4-cloro-6-etil-5-(1H-indol-4-il)tieno[2,3-d]pirimidina

Amestecul de0,664 gcompus de la Prepararea 2a (2,0 mmol), 0,400 g acid 1H-indol-4-ilboronic(1,2 eq, 2,4 mmol), 44,9 mg Pd(OAc)2 (10 mol%, 0,2 mmol), 152 mg PCy3×HBF4 (20 mol%, 0,4 mmol), 1,96 g Cs2CO3 (3,0 eq, 6,0 mmol) în 7,3 mL dimetoxietan şi7,3 mL apă s-a încălzit în reactor cu microunde la 100 °C până nu s-a mai observat conversie. Amestecul de reacţie brut s-a filtrat prin strat de Celite, s-a spălat cu 2 × 10 mL MTBE şi 2 × 10 mL apă. Cele două straturi ale filtratului au fost separate şi stratul organic s-a spălat cu saramură, apoi s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi s-a concentrat in vacuo.Reziduul s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând apă (conţinând0,1 % TFA) şi acetonitril ca eluanţi pentru a obţine compusul de laPrepararea 4v.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 11,22 (br s, 1H), 8,87 (s, 1H), 7,49 (dm, 1H), 7,32 (m, 1H), 7,19 (dd, 1H), 6,95 (dm, 1H), 5,96 (m, 1H), 2,67 (m, 2H), 1,14 (t, 3H)

HRMS calculat pentru C16H12ClN3S: 313,0440; găsit 314,0508 (M+H)

Prepararea 4w: 4-cloro-5-(1-naftil)-6-vinil-tieno[2,3-d]pirimidina

Utilizând Procedeul general IIc şi compusul de la Prepararea 4sca derivat de 6-iodo-tieno[2,3-d] pirimidină corespunzător şi esterul pinacolic al acidului vinilboronic ca derivat corespunzător de acid boronic, s-a obţinut compusul de la Prepararea 4w.

1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8,95 (s, 1H), 8,09 (d, 1H), 8,05 (d, 1H), 7,65 (dd, 1H), 7,56 (t, 1H), 7,52 (dd, 1H), 7,45 (t, 1H), 7,35 (d, 1H), 6,34 (dd, 1H), 5,90 (d, 1H), 5,45 (d, 1H)

HRMS calculat pentru C18H11ClN2S: 322,0331; găsit 323,0415 (M+H)

Prepararea 4x: 4-cloro-5-(1-naftil)-6-[(E/Z)-prop-1-enil]tieno[2,3-d]pirimidina

Etapa A: 5,5-dimetil-2-[(Z/E)-prop-1-enil]-1,3,2-dioxaborinan

La o soluţie de 0,172 g acid (Z)-prop-1-en-1-il boronic(2,0 mmol, 9:1 Z/Eamestec de izomeri) şi0,208 g neopentilglicol (2,0 mmol) în 6 mL 2-Me-THF s-au adăugat 20 mg Amberlyst 15H+răşină schimbătoare de ioni la r.t. până nu s-a mai observat conversie. Conversia a fost urmărită prin măsurarea1H-RMNîn soluţie de CDCl3. Amestecul s-a filtrat printr-un strat de celite, s-a spălat cu 2 × 3 mL 2-Me-THF şi filtratul s-aconcentratin vacuo.Materialul brut rezultat a fost suficient de pur pentru etapa următoare ca amestec 87:13 de izomeri Z/E conform determinăriiRMN. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 6,57-6,43 (m, 1H), 5,39-5,27 (dd, 1H), 3,67 (s, 4H), 1,95-1,83 (dd, 3H), 0,97 (s, 6H)

Etapa B: Prepararea 4x

Utilizând Procedeul general IIc şi compusul de laPrepararea 4sca derivat de 6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină corespunzător şi 5,5-dimetil-2-[(Z/E)-prop-1-enil]-1,3,2-dioxaborinan (Z/E-amestec, Etapa A) ca derivat de acid boronic corespunzător, s-a obţinut compusul de la Prepararea 4xca amestec 63:37 de izomeriZ/E .

1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8,95-8,90 (s, 1H), 8,11-8,06 (m, 1H), 8,06-8,01 (m, 1H), 7,67-7,60 (m, 1H), 7,58-7,52 (m, 1H), 7,52-7,48 (m, 1H), 7,46-7,40 (m, 1H), 7,36-7,29 (m, 1H), 6,45-5,90 (m, 1H), 6,10-6,04 (m, 1H), 2,06-1,72 (dd, 3H)

HRMS calculat pentru C19H13ClN2S: 336,0488; găsit 337,0541 (M+H)

Prepararea 4y: 4-cloro-6-izopropenil-5-(1-naftil)tieno[2,3-d]pirimidina

Utilizând Procedeul general IIc şi compusul de laPrepararea 4sca derivat corespunzător de 6-iodo-tieno[2,3-d] pirimidină şi 2-izopropenil-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan ca derivat corespunzător de acid boronic, s-a obţinut produsul de laPrepararea 4y.

1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8,83 (s, 1H), 7,96 (d, 1H), 7,92 (d, 1H), 7,55-7,37 (m, 5H), 5,23 (m, 1H), 5,12 (m, 1H), 1,65 (dd, 3H)

HRMS calculat C19H13ClN2S: 336,0488; găsit 337,0551 (M+H)

Prepararea 4z: 4-cloro-5-(1-naftil)-6-[(E)-prop-1-enil]tieno[2,3-d]pirimidina

Etapa A: 5,5-dimetil-2-[(E)-prop-1-enil]-1,3,2-dioxaborinan

La o soluţie de 0,172 g acid (E)-prop-1-en-1-ilboronic (2,0 mmol) şi0,208 g neopentil glicol (2,0 mmol) în 6 mL 2-Me-THF s-au adăugat 20 mg Amberlyst 15H+răşină schimbătoare de ioni şi s-a agitat la r.t. până nu s-a mai observat conversie. Conversia a fost urmărită prin determinări1H-RMNîn soluţie CDCl3. Amestecul s-a filtrat printr-un strat de celite, s-a spălat cu 2 × 3 mL 2-Me-THF şi filtratul s-aconcentratin vacuo.Materialul brut rezultat a fost suficient de pur pentru etapa următoare. A conţinut numaiE-stereoizomerul.1H RMN (400MHz, CDCl3)δ:6,57 (m, 1H), 5,39 (dd,1H), 3,63 (s, 4H),1,83 (dd, 3H), 0,97(s, 6H)

Etapa B: Prepararea 4z

UtilizândProcedeul general IIcIIIb şi produsul de laPrepararea 4sca derivat corespunzător de 6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidinăşi 5,5-dimetil-2-[(E)-prop-1-enil]-1 ,3,2-dioxaborinan (Etapa A) ca derivat corespunzător de acid boronic, s-a obţinut compusul de la Prepararea 4z.

1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8,90 (s, 1H), 8,09 (d, 1H), 8,04 (d, 1H), 7,64 (dd, 1H), 7,58-7,53 (m, 1H), 7,50 (dd, 1H), 7,44 (m, 1H), 7,34 (d, 1H), 6,45 (m, 1H), 6,10-6,03 (m, 1H), 1,72 (dd, 3H)

HRMS calculat pentru C19H13ClN2S: 336,0488; găsit 337,0550 (M+H)

Prepararea 5a: acid (2R)-2-[[5-(3-cloro-2-metil-fenil)-6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-fenil-propanoic

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4tca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi D-fenilalaninaca derivat de aminoacid corespunzător, s-a sintetizat compusul de la Prepararea 5a. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie 0,1 % TFA şi acetonitril ca eluanţi şi s-a obţinut compusul de laPrepararea 5aca un amestec 1:1 de diastereoizomeri.

1HRMN(500 MHz, DMSO-d6) δ:13,15 (br s, 1H), 8,42-8,41 (s, 1H), 7,62-7,54 (d, 1H), 7,39-7,17 (t, 1H), 7,21-7,01 (m, d, 1H), 7,21 (m, 4H), 6,82-6,79 (d, 1H), 5,15-5,11 (d, 1H), 4,82-4,76 (q, 1H), 3,23-3,14 (dd, 1H), 2,73-2,67 (dd, 1H), 2,02-1,80 (s, 3H).

HRMS calculat pentru C22H17N2O2SClI: 548,9775; găsit 549,9842 şi 549,9864 (M+H)

Prepararea 5b: acid (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il) etoxi]fenil]-6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-[(2-metilpirazol-3-il) metoxi]fenil]propanoic

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4aca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d] pirimidină şi compusul de laPrepararea A1ca derivat corespunzător de amino acid, urmată de purificare prin HILIC, s-a obţinut compus Prepararea 5bca diastereoizomer eluând mai târziu. MS: (M+H) = 802,0

Prepararea 5c:acid (2R)-2-[[5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil]-6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-[(2-etilpirazol-3-il)metoxi] fenil]propanoic

Utilizând Procedeul general Ib şiPrepararea 4aca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi compusul de laPrepararea A7ca derivat corespunzător de amino acid, urmat de purificare prin HILIC, s-a obţinut compusul de la Prepararea 5cca diastereomerul care eluează ultimul. MS: (M+H) = 816,0

Prepararea 6a: acid (2R)-2-[[5-bromo-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il] amino]-3-(2-hidroxifenil)propanoic

Utilizând Procedeul general Ib şicompusul de la Prepararea 2bca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(2-hidroxifenil)propanoic ca aminoacid derivat corespunzător, s-a obţinut produsul de la Prepararea 6a, izolat prin filtrare.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 12,90 (br s, 1H), 9,65 (br s, 1H), 8,41 (s, 1H), 7,70 (m, 2H), 7,45-7,34 (m, 3H), 7,18 (dd, 1H), 7,04 (td, 1H), 6,80 (d, 1H), 6,72 (t, 1H), 4,96 (m, 1H), 3,31 (dd, 1H), 3,08 (dd, 1H)

Prepararea 6b: acid (2R)-3-(2-hidroxifenil)-2-[(5-iodo-6-prop-1-inil-tieno[2,3-d] pirimidin-4-il)amino]propanoic

Utilizând Procedeul general Ib şi produsul de laPrepararea 2cca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(2-hidroxifenil)propanoic ca derivat de amino acid corespunzător, s-a obţinut produsul de laPrepararea 6b. Produsul s-a izolat prin filtrare în loc de cromatografie. MS: (M+H) = 480,0

Prepararea 6c: (2R)-2-[(6-etil-5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]-3-fenil-propanoat de metil

3,246 g Produs de laPrepararea 2a (10 mmol), 3,70 g clorură de (1R)-1-benzil-2-metoxi-2-oxo-etil] amoniu (17 mmol) şi 13,03 g Cs2CO3 (40 mmol) s-au dizolvat în 15 mL DMSO şi s-a agitat la r.t. sub atmosferă de N2până nu s-a mai observat conversie. Amestecul s-a acidulat apoi cu soluţie 2M de HCl la pH=1 şi s-a extras cu 2 × 300 mL EtOAc. Fazele organice combinate s-au spălat cu soluţie de NaHCO3, s-au uscat pe Na2SO4, s-au filtrat şi concentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a obţine produsul de laPrepararea 6c.

1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8,39 (s, 1H), 7,33 (d, 1H), 7,30 (m, 2H), 7,25-7,22 (m, 3H), 5,11 (m, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,33 (dd, 1H), 3,18 (dd, 1H), 2,82 (q, 2H), 1,23 (t, 3H)

HRMS calculat pentru C18H18N3O2S: 467,0164; găsit 468,0242 (M+H)

Prepararea 7a: (2R)-2-[[5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il) etoxi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroxifenil)propanoat de etil

Etapa A:acid (2R)-2-[[5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroxifenil)propanoic

Utilizând Procedeul general IId şi produsul de laPrepararea 6aca derivat corespunzător de 5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină şi produsul de laPrepararea B4ca derivat de acid boronic corespunzător, s-a obţinut acid (2R)-2-[[5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroxifenil)propanoic. HRMS calculatpentru C35H35ClFN5O4S: 675,2082; găsit 676,2097 (M+H)

Etapa B: Prepararea 7a

2,3 g Acid (2R)-2-[[5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroxifenil)propanoic (3,4 mmol) s-au dizolvat în 20 mL 1,25 M HCl in EtOH şi s-a agitat la 40°C peste noapte. Amestecul s-a diluat apoi cu soluţie de NaHCO3şi s-a extras cu DCM. Fazele organice combinate s-au uscat pe Na2SO4, s-au filtrat şi concentrat in vacuo.Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând DCM şi MeOH ca eluanţi pentru a obţine produsul de laPrepararea 7a. HRMS calculat pentru C37H39ClFN5O4S: 703,2395; găsit 704,2417 (M+H)

Prepararea 7ad2: (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroxifenil)propanoat de etil

Etapa A:acid (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroxifenil)propanoic

Utilizând Procedeul general IId şi produsul de laPrepararea 6aca derivat corespunzător de 5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină şi produsul de laPrepararea B4ca derivat corespunzător de acid boronic, s-a obţinut acid (2R)-2-[[5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil]-6-(4-fluorofenil) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroxifenil)propanoic ca un amestec de diastereomeri. Amestecul s-a separat princromatografie rapidă utilizând eluanţi HILIC. Primul diastereoizomer care eluează s-a colectat ca produsul de laPrepararea 7a1, MS (M+H): 676,2 Ultimul diastereoizomer care eluează a fost colectat ca produs de laPrepararea 7a2, MS (M+H): 676,2

Etapa B: Prepararea 7ad2

Compus 44,51 g de laPrepararea 7a2 (6,67 mmol) s-a dizolvat în 85 mL 1,25 M HCl în EtOH şi s-a agitat la 40 °C peste noapte. Amestecul s-a diluat apoi cu grijă cu soluţie de NaHCO3şi s-a extras cu DCM. Fazele organice combinate s-au uscat pe Na2SO4, s-au filtrat şi concentrat in vacuo.Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând DCM şi MeOH ca eluanţi pentru a obţine compusul de laPrepararea 7ad2.

1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ: 9,49 (s, 1H), 8,40 (s, 1H), 7,34 (d, 1H), 7,27-7,21 (m, 3H), 7,20-7,14 (m, 2H), 7,00 (td, 1H), 6,71 (dd, 1H), 6,60 (td, 1H), 6,39 (dd, 1H), 5,03 (d, 1H), 4,92 (m, 1H), 4,26 (t, 2H), 4,03 (m, 2H), 3,03 (dd, 1H), 2,78 (t, 2H), 2,54 (br, 4H), 2,36 (dd, 1H), 2,30 (br, 4H), 2,12 (s, 3H), 1,83 (s, 3H), 1,10 (t, 3H)

HRMS calculat pentru C37H39ClFN5O4S: 703,2395; găsit 704,2450 (M+H)

Prepararea 7b: (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil]-6-prop-1-inil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroxifenil)propanoat de etil

Etapa A: acid (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil]-6-prop-1-inil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroxifenil)propanoic

Utilizând Procedeul general IIb şi compusul de la Prepararea 6bca derivat corespunzător de 5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină şi compusul de laPrepararea B4ca derivat corespunzător de acid boronic, Ataphos drept catalizator şi THF: apă 3:1 ca solvent s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Ei au fost separaţi prin cromatografie rapidă utilizând eluanţi HILIC. Diastereoizomerul care eluează ultimul s-a colectat caacid (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil]-6-prop-1-inil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroxifenil)propanoic. MS: (M+H): 620,2

Etapa B: Prepararea 7b

2,3 g Acid (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il) etoxi]fenil]-6-prop-1-inil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroxifenil)propanoic (3,71 mmol) s-a dizolvat în 20 mL 1,25M HCl în EtOH şi s-a agitat la 40 °C peste noapte. Amestecul s-a diluat apoi cu soluţie de NaHCO3şi s-a extras cu DCM. Fazele organice combinate s-au uscat pe Na2SO4, s-au filtrat şi s-au concentrat in vacuo.Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând EtOAc sau DCM şi MeOH ca eluanţi pentru a obţine compusul de laPrepararea 7b.

1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ: 9,47 (s, 1H), 8,41 (s, 1H), 7,21 (s, 1H), 7,21 (s, 1H), 7,00 (td, 1H), 6,70 (dd, 1H), 6,60 (td, 1H), 6,34 (d, 1H), 5,11 (d, 1H), 4,89 (m, 1H), 4,27 (t, 2H), 4,03 (m, 2H), 3,06 (dd, 1H), 2,79 (t, 2H), 2,55 (br, 4H), 2,40 (dd, 1H), 2,30 (br, 4H), 2,12 (s, 3H), 2,00 (s, 3H), 1,97 (s, 3H), 1,11 (t, 3H)

HRMS calculat pentru C34H38ClN5O4S: 647,2333; găsit 648,2385 (M+H)

Prepararea 7c: (2R)-2-[[5-[3-cloro-4-(2-dimetilaminoetiloxi)-2-metil-fenil]-6-prop-1-inil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroxifenil)propanoat de etil

Etapa A:acid (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-cloro-4-(2-dimetilaminoetiloxi)-2-metil-fenil]-6-prop-1-inil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroxifenil)propanoic

Utilizând Procedeul general IId şi compusul de laPrepararea 6bca derivat corespunzător de 5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină şi compusul de laPrepararea B5ca derivat corespunzător de acid boronic, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Ei au fost separaţi prin cromatografie rapidă utilizând eluanţi HILIC. Diastereoizomerul care eluează ultimul s-a colectat ca acid (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-cloro-4-(2-dimetilaminoetiloxi)-2-metil-fenil]-6-prop-1-inil-tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroxifenil)propanoic. MS (M+H): 565,2

Etapa B: Prepararea 7c

Acid (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-cloro-4-(2-dimetilaminoetiloxi)-2-metil-fenil]-6-prop-1-inil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroxifenil)propanoic 2,3 g (4,07 mmol) s-a dizolvat în 20 mL 1,25M HCl în EtOH şi s-a agitat la 40 °C peste noapte. Amestecul s-a diluat apoi cu soluţie NaHCO3şi s-a extras cu DCM. Fazele organice combinate s-au uscat pe Na2SO4, s-au filtrat şi concentrat in vacuo.Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând DCM şi MeOH ca eluanţi pentru a obţine produsul de laPrepararea 7c.

1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ: 9,45 (s, 1H), 8,41 (s, 1H), 7,21 (s, 1H), 7,21 (s, 1H), 7,00 (td, 1H), 6,70 (dd, 1H), 6,60 (td, 1H), 6,34 (d, 1H), 5,12 (d, 1H), 4,89 (m, 1H), 4,26 (m, 2H), 4,03 (m, 2H), 3,06 (dd, 1H), 2,74 (t, 2H), 2,39 (dd, 1H), 2,27 (s, 6H), 2,01 (s, 3H), 1,97 (s, 3H), 1,11 (t, 3H)

HRMS calculat pentru C31H33ClN4O4S: 592,1911; găsit 593,1954 (M+H)

Prepararea 7d: (2R)-2-[[5-bromo-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroxifenil)propanoat de etil

Compus2,5 g de laPrepararea 6a (5,1 mmol) s-a dizolvat în 20 mL 1,25M HCl în EtOH şi s-a agitat la 40 °C peste noapte. Amestecul rezultat s-a diluat cu soluţie apoasă de NaHCO3şi s-a extras cu DCM. Fazele organice combinate s-au uscat pe Na2SO4, s-au filtrat şi concentrat in vacuo.Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a obţine compus de laPrepararea7d.1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 9,67 (s, 1H), 8,42 (s, 1H), 7,70 (m, 2H), 7,43-7,37 (m, 3H), 7,14 (dd, 1H), 7,05 (td, 1H), 6,80 (dd, 1H), 6,72 (td, 1H), 5,01 (m, 1H), 4,12 (q, 2H), 3,26 (dd, 1H), 3,14 (dd, 1H), 1,17 (t, 3H)

Prepararea 7e: (2R)-2-[[6-etil-5-(4-hidroxi-2-metil-fenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-fenil-propanoat de metil

Compus 934 mg de la Prepararea 6c (2 mmol), 903 mg compus de la Prepararea B6 (2,4 mmol), 231 mg Pd(PPh3)4 (0,2 mmol), 662 mg Ag2CO3 (2,4 mmol) şi 81 µL metanol (2 mmol) s-au dizolvat în 20 mL 2-Me-THF şi s-a agitat în reactor cu MW la 110 °C până nu s-a mai observat conversie. Amestecul s-a filtrat prin Celite, s-a diluat cu 100 mL EtOAc apoi2,5 mL TBAF (soluţie 1M în THF) s-a adăugat şi amestecul s-a agitat la r.t. până nu s-a mai observat conversie. Amestecul s-a spălat apoi cu soluţie de NH4Cl şi saramură, s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şiconcentrat şi s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a se obţine compusul de laPrepararea 7eca un amestec de diastereoizomeri.

1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 8,43-8,43 (s, 1H), 7,26-6,80 (m, 7H), 6,76-6,64 (m, 2H), 5,18 (m, 1H), 5,03 (m, 1H), 3,66-3,65 (s, 3H), 3,16-3,13 (dd, 1H), 2,73 (dd, 1H), 2,57 (m, 2H), 2,07-1,80 (s, 3H), 1,18-1,17 (t, 3H)

MS (M+H): 448,2

Prepararea 7f: (2R)-2-[[5-(3,5-dicloro-4-hidroxi-2-metil-fenil)-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-fenil-propanoat de metil

402 mg Compus de la Prepararea 7e (0,898 mmol) şi 300 mg NCS (2,245 mmol) s-au dizolvat în 5 mL THF şi s-au agitat la 60 °C până nu s-a mai observat conversie. Volatilele s-au îndepărtat in vacuo,reziduul s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a obţine produsul din titlu ca amestec de diastereoizomeri.

1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ: 10,46-10,44 (s, 1H), 8,40-8,38 (s, 1H), 7,29-7,24 (s, 1H), 7,20 (m, 3H), 6,80-6,78 (d, 2H), 5,09-5,01 (d, 1H), 4,95 (m, 1H), 3,59-3,58 (s, 3H), 3,15-3,13 (dd, 1H), 2,78-2,61 (dd, 1H), 2,53 (q, 2H), 2,02-1,84 (s, 3H), 1,11 (t, 3H)

HRMS calculat pentru C25H23Cl2N3O3S: 515,0837; găsit 516,0908 (M+H)

Prepararea 7g: (2R)-2-[[5-(3-cloro-4-hidroxi-2-metil-fenil)-6-etil-tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]amino]-3-fenil-propanoat de metil

Utilizând Procedeul general IIc şi compus de laPrepararea 6cca derivat corespunzător de 5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină şi compus de laPrepararea B2ca derivat corespunzător de acid boronic, s-a obţinut compusul de la Prepararea 7gca amestec de diastereoizomeri. MS (M+H): 482,1

Prepararea 7gd1: (2R)-2-[[(5Sa)-5-(3-cloro-4-hidroxi-2-metil-fenil)-6-etil-tieno [2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-fenil-propanoat de metil

Diastereoizomerii de laPrepararea 7gs-auseparat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi. Diastereoizomerul care eluează la final s-a colectat ca produs de laPrepararea 7gd1.

1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ: 10,53 (s, 1H), 8,36 (s, 1H), 7,23 (m, 2H), 7,20 (m, 1H), 7,04 (d, 1H), 6,98 (d, 1H), 6,80 (m, 2H), 5,11 (d, 1H), 4,90 (m, 1H), 3,57 (s, 3H), 3,10 (dd, 1H), 2,63 (dd, 1H), 2,51-2,46 (m, 2H), 1,86 (s, 3H), 1,10 (t, 3H)

HRMS calculat pentru C25H24ClN3O3S: 481,1227; găsit 482,1313 (M+H)

Prepararea 7h: acid (2R)-2-[[6-etil-5-(1H-indol-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-fenil-propanoic

Utilizând Procedeul general Ib şi compus de laPrepararea 4vca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(2-hidroxifenil)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut compusul de la Prepararea 7hca amestec de diastereoizomeri.

1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ: 12,71-12,59 (br s, 1H), 11,48-11,37 (s, 1H), 8,35-8,30 (s, 1H), 7,64-7,53 (d, 1H), 7,45-7,39 (dd, 1H), 7,30-7,08 (t, 1H), 7,17-6,33 (m, 6H), 6,07-6,01 (s, 1H), 5,27 (d, 1H), 4,59/4,50 (m, 1H), 2,98-2,83 (dd, 1H), 2,56 (m, 2H), 2,35-2,15 (dd, 1H), 1,11-1,09 (t, 3H)

HRMS calculat pentru C25H22N4O2S: 442,1463; găsit 443,1529 şi 443,1538 (M+H)

Prepararea 7i: (2R)-2-[[5-(3-cloro-1H-indol-4-il)-6-ethyl-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-fenil-propanoat de metil

Etapa A: (2R)-2-[[6-etil-5-(1H-indol-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-fenil-propanoat de metil

8,87 g Compus de la Prepararea 7h (20 mmol) s-au dizolvat în 60 mL MeOH şi s-au adăugat5,88 mL cc. H2SO4 (60 mmol). Amestecul s-a agitat la r.t. în atmosferă de N2pentru 2 ore. Amestecul s-a turnat apoi în apă cu gheaţă, precipitatul s-a filtrat pentru a obţine (2R)-2-[[6-etil-5-(1H-indol-4-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]amino]-3-fenil-propanoat de metil ca amestec de diastereoizomeri.

1HRMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 11,52-11,43 (s, 1H), 8,39-8,34 (s, 1H), 7,65-7,57 (d, 1H), 7,47-7,42 (t, 1H), 7,30-7,11 (dd, 1H), 7,18-6,79 (m, 2H), 7,02 (m, 1H), 6,93 (m, 1H), 6,65 (m, 1H), 6,34 (m, 1H), 6,05 (dt, 1H), 5,28 (m, 1H), 4,71-4,62 (m, 1H), 3,55-3,41 (s, 3H), 2,91-2,77 (dd, 1H), 2,57 (m, 2H), 2,37-2,23 (dd, 1H), 1,11-1,10 (t, 3H)

MS (M+H): 457,2 şi 457,2

Etapa B: Prepararea 7i

(2R)-2-[[6-Etil-5-(1H-indol-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-fenil-propanoat de metil8,477 g (18,5 mmol), 2,47 g NCS (18,5 mmol) şi 30 mL THF abs. s-au agitat la r.t. până nu s-a mai observat conversie. Apoi amestecul s-a turnat în apă cu gheaţă şi s-a extras cu EtOAc. Fazele organice combinate s-au uscat pe Na2SO4, s-au filtrat şiconcentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a obţine compusul de laPrepararea 7i ca amestec de diastereoizomeri.

1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ: 11,73-11,65 (d, 1H), 8,35-8,31 (s, 1H), 7,63-7,56 (d, 1H), 7,62-7,54 (d, 1H), 7,44-7,15 (dd, 1H), 7,20-7,03 (m, 3H), 7,04-6,84 (d, 1H), 6,70-6,44 (dm, 2H), 5,09-4,98 (d, 1H), 4,80-4,72 (m, 1H), 3,51-3,38 (s, 3H), 2,93-2,81 (dd, 1H), 2,52 (m, 2H), 2,46-2,29 (dd, 1H), 1,10-1,09 (t, 3H)

HRMS calculat pentru C26H23ClN4O2S: 490,1230; găsit 491,1282 şi 491,1316 (M+H)

Prepararea 7j: 4-cloro-5-(3-cloro-1H-indol-4-il)-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidina

Amestecul de1,099 g compus de laPrepararea 4v (3,5 mmol) şi0,572 g NCS (4,2 mmol) în 20 mL CCl4s-a agitat la r.t. până nu s-a mai observat conversie. Amestecul s-a turnat apoi peste gheaţă pisată şi s-a extras cu DCM. Straturile organice combinate s-au uscat pe Na2SO4, s-au filtrat şi concentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a obţine 4-cloro-5-(3-cloro-1H-indol-4-il)-6-etil-tieno[2,3-d] pirimidinaPrepararea 7j.1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 8,79 (s, 1H), 8,33 (br s, 1H), 7,47 (dd, 1H), 7,31 (t, 1H), 7,18 (d, 1H), 7,03 (dd, 1H), 2,73 (m, 2H), 1,24 (t, 3H)

Prepararea 8a: (E)-4-(Dimetilamino)-1,1-dimetoxi-but-3-en-2-ona

1,1-Dimetoxipropan-2-onă 502,1 g (4,25 mol) şi 506,4 g 1,1-dimetoxi-N,N-dimetil-metanamină (4,25 mol) s-au amestecat într-un balon de 2 L şi s-au agitat la 105 °C pentru 3 ore. MeOH format s-a îndepărtat continuu prin distilare. Când formarea MeOH s-a stopat (la 65 °C temperatura capului de distilare) amestecul de reacţie s-a distilat cu vacuum (descrescând presiunea încet la 30 mbar) pentru a îndepărta produşii şi materiile prime nereacţionate. Produsul brut s-a distilat la 0,1 mbar. Fracţiile au fost colectate între 107-118 °C temperatura capului de distilare (temperatura băii 160-165 °C) pentru a da ulei galben. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ: 7,59 (d, 1H), 5,17 (d, 1H), 4,42 (s, 1H), 3,25 (s, 6H), 3,09 (s, 3H), 2,78 (s, 3H)

Prepararea 8b: 4-(Dimetoximetil)-2-metilsulfonil-pirimidina

Etapa A: 4-(Dimetoximetil)-2-metilsulfanil-pirimidina

Metoxid de sodiu198 g (3,67 mmol) s-a dizolvat în 3 L MeOH şi s-a răcit la 0 °C. S-au adăugat 322 g tiocarbamidă (4,23 mol) în porţiuni şi amestecul s-a agitat pentru 1 oră. Apoi s-au adăugat 488 g compus de laPrepararea 8a (2,82 mol) prin picurare la 0 °C, şi s-a încălzit la 70°C până nu s-a mai observat conversie. S-a răcit la r.t., s-au adăugat prin picurare 237 mL iodură de metil (3,81 mol), menţinând temperatura sub 28 °C şi amestecul rezultat s-a agitat peste noapte la r.t. S-a filtrat, filtratul s-a concentrat sub presiune redusă, s-a diluat cu EtOAc, s-a spălat cu apă şi saramură. Straturile apoase combinate s-au extras cu EtOAc. Straturile organice combinate s-au uscat pe Na2SO4, s-au filtrat şi s-au concentrat sub presiune redusă. Reziduul s-a dizolvat în 500 mL Et2O, s-a filtrat prin strat de silice, utilizând Et2O ca eluant. Filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă pentru a da un ulei cafeniu deschis. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8,69 (d, 1H), 7,23 (d, 1H), 5,22 (s, 1H), 3,33 (s, 6H), 2,52 (s, 3H)

Etapa B: Prepararea 8b

La o soluţie de 180 g 4-(dimetoximetil)-2-metilsulfanil-pirimidină (940 mmol) în 1,5 L metanol şi1,5 L apă s-a adăugat 752 g Oxone® (peroximonosulfat de potasiu, 1220 mmol) în porţiuni la -5 °C, apoi s-a agitat la 0 °C peste noapte. Amestecul de reacţie s-a concentrat sub presiune redusă la jumătate de volum utilizând baie de 30 °C şi apoi amestecul s-a filtrat şi precipitatul s-a spălat cu DCM. Filtratul s-a extras cu DCM. Straturile organice combinate s-au uscat pe MgSO4,s-au filtrat şi concentrat sub presiune redusăpentru a da ulei cafeniu deschis. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 8,98 (d, 1H), 7,97 (d, 1H), 5,36 (s, 1H), 3,47 (s, 6H), 3,39 (s, 3H)

Prepararea 9a: (2R)-2-amino-3-(2-hidroxifenil)propanoat de metil clorhidrat

Acid (2R)-2-amino-3-(2-hidroxifenil)propanoic 24,6 g (136 mmol) s-a agitat la r.t. în 900 mL soluţie 3M de HCl în metanol pentru 40 ore. Amestecul de reacţie s-a concentrat sub presiune redusămenţinând temperatura în baie sub 40 °C. Reziduul s-a triturat cu dietileter pentru a da produsul ca pulbere strălucitoare crem. HRMS calculat pentru C11H15NO3 (baza liberă): 209,1052; găsit 210,1128 (M+H)

Prepararea 9b: (2R)-2-(tert-butoxicarbonilamino)-3-(2-hidroxifenil)propanoat de metil

Compus de laPrepararea 9a16,7 g(73,0 mmol) s-a suspendat în 180 mL DCM. S-a adăugat 30,5 mL (219 mmol) TEA şi soluţia s-a răcit utilizând baie de apă cu gheaţă. O soluţie de 15,6 g bicarbonat de di-tert-butil (73,0 mmol) în 75 mL DCM s-a adăugat încet (2,5 ore). Amestecul s-a agitat peste noapte la r.t. Apoi s-au adăugat 100 mL apă şi faza organică s-a separat, s-a spălat cu apă, soluţie 1M de HCl şi în final cu apă. Faza organică s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă pentru a obţine produsul ca ulei.

Prepararea A1: acid (2R)-2-amino-3-[2-[(2-metilpirazol-3-il)metoxi]fenil]propanoic

Utilizând Procedeul general IXa şi (2-metilpirazol-3-il)metanol ca derivat de alcool corespunzător, s-a obţinut compusul de la PreparareaA1. MS (M+H): 276,2

Prepararea A2: acid (2R)-2-amino-3-[2-[(2-etoxipirimidin-4-il)metoxi]fenil] propanoic

Utilizând Procedeul general IXa şi compus de laPrepararea C1ca derivat de alcool corespunzător, s-a obţinut compusul de la Prepararea A2. MS (M+H): 318,1

Prepararea A3:acid (2R)-2-amino-3-[2-[(2-butilpirazol-3-il)metoxi]fenil]propanoic

Utilizând Procedeul general IXa şi compus de laPrepararea C2ca derivat de alcool corespunzător, s-a obţinut compusul de la Prepararea A3. MS (M+H): 318,2

Prepararea A4:acid (2R)-2-amino-3-[2-[[2-(2-metoxifenil)pirimidin-4-il]metoxi] fenil]propanoic

Utilizând Procedeul general IXa şi compus de laPrepararea C3ca derivat de alcool corespunzător, s-a obţinut compusul de la Prepararea A4. MS (M+H): 380,2

Prepararea A5: acid (2R)-2-amino-3-[2-(2-piridilmetoxi)fenil]propanoic

Utilizând Procedeul general IXa şi 2-piridilmetanol ca derivat de alcool corespunzător, s-a obţinut compusul de laPrepararea A5. MS (M+H): 273,1

Prepararea A6: acid (2R)-2-amino-3-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)fenil]propanoic

Utilizând Procedeul general IXb şi 2,2,2-trifluoroetiltrifluorometansulfonat ca agent de alchilare corespunzător, s-a obţinut compusul de la Prepararea A6. MS (M+H): 264,1

Prepararea A7:acid (2R)-2-amino-3-[2-[(2-etilpirazol-3-il)metoxi]fenil]propanoic

Utilizând Procedeul general IXa şi (2-etilpirazol-3-il)metanol ca derivat de alcool corespunzător, s-a obţinut compusul de la Prepararea A7. HRMS calculat pentru C15H19N3O3: 289,1426, găsit: 290,1512 (M+H)

Prepararea A8: acid (2R)-2-amino-3-[2-[[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)pirimidin-4-il] metoxi]fenil]propanoic

Utilizând Procedeul general IXa şi compusul de laPrepararea C8ca derivat de alcool corespunzător, s-a obţinut compusul de la Prepararea A8. MS (M+H): 372,1

Prepararea A9: acid (2R)-2-amino-3-[2-[2-(dimetilamino)-2-oxo-etoxi]fenil] propanoic

Utilizând Procedeul general IXb şi 2-cloro-N,N-dimetilacetamida ca agent de alchilare corespunzător, s-a obţinut compusul de la Prepararea A9. MS (M+H): 267,1

Prepararea A10: acid (2R)-2-amino-3-[2-(2-ciclopentiletoxi)fenil]propanoic

Utilizând Procedeul general IXa şi 2-ciclopentiletanol ca derivat de alcool corespunzător, s-a obţinut compusul de la Prepararea A10. MS (M+H): 278,2

Prepararea A11: acid (2R)-2-amino-3-(2-fenetiloxifenil)propanoic clorhidrat

Utilizând Procedeul general IXa şi 2-feniletanol ca derivat corespunzător de alcool, s-a obţinut compusul de la PreparareaA11. MS (M+H): 286,1

Prepararea A12: acid (2R)-2-amino-3-[2-(3-fenilpropoxi)fenil]propanoic

Utilizând Procedeul general IXa şi 3-fenilpropan-1-ol ca derivat de alcool corespunzător, s-a obţinut compusul de la Prepararea A12. MS (M+H): 300,2

Prepararea A13: acid (2R)-2-amino-3-[2-[(3-clorofenil)metoxi]fenil]propanoic

Utilizând Procedeul general IXa şi (3-clorofenil)metanol ca derivat de alcool corespunzător, s-a obţinut compusul de la Prepararea A13. MS (M+H): 306,1

Prepararea A14: acid (2R)-2-amino-3-[2-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil] propanoic

Utilizând Procedeul general IXa şi 2-(4-metilpiperazin-1-il)etanol ca derivat de alcool corespunzător, s-a obţinut compusul de la Prepararea A14. MS (M+H): 308,2

PreparareaA15: acid (2R)-2-amino-3-[2-(2-dimetilaminoetiloxi)fenil]propanoic

Utilizând Procedeul general IXa şi 2-(dimetilamino)etanol ca derivat de alcool corespunzător, s-a obţinut compusul de la Prepararea A15. MS (M+H): 253,2

PreparareaA16:acid (2R)-2-amino-3-[2-[3-(dimetilamino)propoxi]fenil]propanoic

Utilizând Procedeul general IXa şi 3-(dimetilamino)propan-1-ol ca derivat de alcool corespunzător, s-a obţinut compusul de laPrepararea A16. MS (M+H): 267,2

Prepararea B1: 3-metil-4-(3,3,4,4-tetrametilborolan-1-il)-1H-indol

1,87 g 4-bromo-3-metil-1H-indol (8,9 mmol), 5,028 g bis(pinacolato)diboron (19,6 mmol) şi2,65 g acetat de potasiu (26,7 mmol) s-au dizolvat în 35 mL DMF anhidru sub argon, apoi s-au adăugat 652 mg [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dicloropaladiu(II) (0,89 mmol). Amestecul de reacţie s-a încălzit la 85 °C şi s-a agitat până când nu s-a mai observat conversie. Apoi s-a concentrat sub presiune redusă şi s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a obţine compusul de laPrepararea B1.

1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 7,92 (br s, 1H), 7,56 (d, 1H), 7,42 (dd, 1H), 7,16 (t, 1H), 7,01 (d, 1H), 2,47 (d, 3H), 1,40 (s, 12H)

HRMS calculat pentru C15H20NO2B: 257,1587; găsit 258,1665 (M+H)

Prepararea B2: 2-Cloro-3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il) fenol

Etapa A: (4-Bromo-2-cloro-fenoxi)-trimetil-silan

20,8 g 4-bromo-2-cloro-fenol (100 mmol) s-a dizolvat în 150 mL THF anhidru, apoi s-au adăugat 24,2 g HMDS (150 mmol). Amestecul de reacţie s-a agitat la 85 °C sub atmosferă de argon pentru1,5 ore şi apoi s-aconcentrat sub presiune redusă. Produsul brut rezultat s-a utilizat fără purificare suplimentară.1H RMN (200 MHz, CDCl3) δ: 7,49 (d, 1H), 7,23 (dd, 1H), 6,75 (d, 1H), 0,26 (s, 9H)

Etapa B: 4-Bromo-2-cloro-3-metil-fenol

Soluţie 48 mL denBuLi (120 mmol, 2,5 M în hexani) s-a adăugat prin picurare la o soluţie de 12,1 g DIPA anhidru (120 mmol) în 250 mL THF anhidru la -78 °C sub atmosferă de argon. Amestecul s-a agitat pentru 30 minute la aceeaşi temperatură, apoi s-au adăugat prin picurare 28,0 g (4-bromo-2-cloro-fenoxi)-trimetil-silan (100 mmol). După2,5 ore 21,3 g MeI (150 mmol) s-a adăugat prin picurare apoi baia de răcire a fost îndepărtată şi amestecul s-a agitat peste noapte. Reacţia s-a stopat cu 100 mL soluţie NH4OH şi 200 mL soluţie NH4Cl apoi s-a extras cu EtOAc. Faza organică s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Masa închisă la culoare rezultată s-a refluxat cu hexan pur de câteva ori (porţii de 150-150 mL) şi s-a decantat lăsând la oparte răşina neagră. Fazele organice combinate au fost concentrate sub presiune redusă rezultând 19,0 g produs brut, care s-a utilizat fără purificare suplimentară. 1H RMN (200 MHz, CDCl3) δ: 7,32 (d, 1H), 6,76 (d, 1H), 5,62 (s, 1H), 2,49 (s, 3H)

Etapa C: (4-Bromo-2-cloro-3-metil-fenoxi)-trimetil-silan

20,8 g HMDS (129 mmol) s-a adăugat la soluţia de 19,0 g 4-bromo-2-cloro-3-metilfenol (86,0 mmol) in 150 mL THF anhidru. Amestecul s-a agitat la 85 °C sub balon de argon pentru1,5 ore şi apoi s-aconcentrat sub presiune redusă. Produsul obţinut s-a utilizat fără purificare ulterioară. 1H RMN (200 MHz, CDCl3) δ: 7,30 (d, 1H), 6,63 (d, 1H), 2,50 (s, 3H), 0,28 (s, 9H)

Etapa D: Prepararea B2

O soluţie de 25,2 g (4-bromo-2-cloro-3-metil-fenoxi)-trimetil-silan (86,0 mmol) în 250 mL THF anhidru s-a răcit la -78 °C sub argon şi apoi s-a adăugat prin picurare 38 mL soluţie denBuLi (94,6 mmol, 2,5M în hexani). După 5 minute s-au adăugat prin picurare19,2 g 2-izopropoxi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan (103 mmol). Baia de răcire s-a îndepărtat şi amestecul s-a lăsat să se încălzească încet până la r.t. Apoi amestecul s-a adăugat la 200 mL soluţie de NH4Cl şi s-a extras cu EtOAc. Straturile organice combinate s-au concentrat sub presiune redusă şi s-au trecut printr-un strat de silicagel utilizând hexan şi EtOAc ca eluanţi. Produsul brut s-a recristalizat din amestec de EtOAc şi hexan pentru a obţine compusul de laPrepararea B2,1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ: 10,40 (s, 1H), 7,42 (d, 1H), 6,80 (d, 1H), 2,49 (s, 3H), 1,27 (s, 12H)

Prepararea B3: [2-Cloro-3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il) fenoxi]-triizopropil-silan

Etapa A: (4-Bromo-2-cloro-fenoxi)-triizopropil-silan

200 g 4-Bromo-2-cloro-fenol (0,97 mol) şi 126 mL TIPSCl (1,18 mol) s-au dizolvat în 1,6 L DCM. S-au adăugat 167 g imidazol (2,45 mol) şi amestecul s-a agitat la r.t. pentru 2 ore. Apoi volatilele s-au evaporat sub presiune redusă şi reziduul s-a dizolvat în 1,5 L EtOAc. Amestecul s-a spălat cu saramură, s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Impuritatea triizopropilsilil hidroxid s-a îndepărtat prin distilare (120 °C la0,01 mmHg). Reziduul s-a filtrat printr-un strat mic de silice cu hexan şi s-aconcentrat sub presiune redusă. Produsul (ulei incolor) s-a utilizat în etapa următoare fără purificare.

1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 7,49 (d, 1H), 7,21 (dd, 1H), 6,78 (d, 1H), 1,31 (septet, 3H), 1,14 (d, 18H)

MS (EI, 70 eV) m/z (% intensitate relativă, [ion]): 63 (30), 79 (24), 93 (41), 170 (17), 235 (19), 251 (16), 265 (24), 293 (23), 319 (77), 321 (100), 323 (28), 362 (1, [M+]).

Etapa B: (4-Bromo-2-cloro-3-metil-fenoxi)-triizopropil-silan

DIPA anhidru 76,0 mL (0,54 mol) s-a dizolvat în 1,2 L THF anhidru sub atmosferă de argon şi s-au adăugat prin picurare 51,2 mL soluţie nBuLi (0,512 mol, 10M în hexani) la -78 °C. Amestecul s-a agitat pentru 45 minute la aceeaşi temperatură. Apoi s-au adăugat 178 g (4-bromo-2-cloro-fenoxi)-triizopropil-silan (0,488 mol) prin picurare la -78 °C şi suspensia albă s-a agitat până nu s-a mai observat conversie. Apoi s-au adăugat 36,5 mL MeI (0,586 mmol)la această temperatură şi amestecul de reacţie s-a agitat peste noapte fără răcire. Volatilele s-au evaporat sub presiune redusă. Reziduul s-a dizolvat în 1,5 L EtOAc, s-a spălat cu saramură. Faza organică s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a filtrat printr-un pat mic de silice utilizând hexan ca eluant şi s-aconcentrat sub presiune redusă pentru a obţine produsul ca ulei galben deschis. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 7,30 (d, 1H), 6,68 (d, 1H), 2,53 (s, 3H), 1,32 (septet, 3H), 1,14 (d, 18H)

Etapa C:Prepararea B3

178 g (4-Bromo-2-cloro-3-metil-fenoxi)-triizopropil-silan (0,472 mol) s-a dizolvat în1,4 L THF anhidru sub atmosferă de argon şi s-au adăugat prin picurare 52 mL soluţie de nBuLi (0,52 mol, 10M în hexani) la -78 °C. Amestecul s-a agitat pentru 5 minute la această temperatură. Apoi s-au adăugat 116 mL 2-izopropoxi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan (0,569 mol) şi amestecul s-a lăsat să se încălzească până la r.t. Volatilele s-au evaporat sub presiune redusă. Reziduul s-a dizolvat în 1,5 L EtOAc, s-a spălat cu saramură. Faza organică s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Impuritatea 2-izopropoxi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan s-a îndepărtat prin distilare (80 °C la0,01 mmHg). Produsul brut s-atriturat în MeOH rezultând produs de laPrepararea B3ca solid alb. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 7,53 (d, 1H), 6,74 (d, 1H), 2,60 (s, 3H), 1,34 (s, 12H), 1,32 (m, 3H), 1,12 (d, 18H)

Prepararea B4: 1-[2-[2-Cloro-3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenoxi]etil]-4-metil-piperazina

10,0 g Compus de laPrepararea B2 (37,2 mmol), 8,7 g 2-(4-metilpiperazin-1-il)etanol (60,3 mmol) şi 15,8 g PPh3 (60,3 mmol) s-au dizolvat în 100 mL toluen anhidru şi apoi s-au adăugat prin picurare 27 mL azodicarboxilat de dietil (60,3 mmol, 40 % soluţie în toluen). Amestecul s-a agitat la 50 °C sub argon până nu s-a mai observat conversie. Volatilele s-auevaporat sub presiune redusă şi s-au adăugat 100 mL Et2O. Cristalele albe precipitate s-au filtrat şi spălat cu Et2O. Filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă şi s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând CHCl3şi MeOH ca eluanţi. Uleiul cafeniu deschis rezultat s-a cristalizat din hexan pentru a da produsul de laPrepararea B4ca solid aproape alb. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ: 7,56 (d, 1H), 6,99 (d, 1H), 4,15 (t, 2H), 2,72 (t, 2H), 2,51 (s, 3H), 2,50 (br s, 4H), 2,29 (br s, 4H), 2,13 (s, 3H), 1,29 (s, 12H)

Prepararea B5: 1-[2-[2-Cloro-3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenoxi]etil]-4-metil-piperazina

10,0 g Compus de la Prepararea B2 (37,2 mmol), 5,366 g N,N-dimetiletanolamină (60,3 mmol) şi 15,8 g PPh3 (60,3 mmol) s-au dizolvat în 100 mL toluen anhidru şi apoi s-au adăugat prin picurare 27 mL azodicarboxilat de dietil(60,3 mmol, 40 % soluţie în toluen). Amestecul s-a agitat la 50 °C sub argon până nu s-a mai observat conversie. Volatilele s-au evaporat sub presiune redusă şi s-au adăugat 100 mL Et2O. Cristalele albe precipitate s-au filtrat şi s-au spălat cu Et2O. Filtratul s-a concentrat sub presiune redusă şi s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând CHCl3şi MeOH ca eluanţi. Uleiul cafeniu deschis rezultat s-a cristalizat din hexan pentru a da produsul de laPrepararea B5,1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7,56 (d, 1H), 6,99 (d, 1H), 4,13 (t, 2H), 2,66 (t, 2H), 2,51 (s, 3H), 2,23 (s, 6H), 1,29 (s, 12H)

Prepararea B6: [4-(5,5-dimetil-1,3,2-dioxaborinan-2-il)-3-metil-fenoxi]-triizopropil-silan

Etapa A: 4-(5,5-dimetil-1,3,2-dioxaborinan-2-il)-3-metil-fenol

4,675 g Acid (4-hidroxi-2-metil-fenil)boronic (30,76 mmol), 3,204 neopentil glicol (32,9 mmol), Amberlyst 15H+şi 150 mL 2-Me-THF s-au agitat la r.t. sub atmosferă de N2până nu s-a mai observat conversie. Amestecul s-a filtrat apoi prin Celite şi filtratul s-a concentrat sub presiune redusă pentru a obţine 4-(5,5-dimetil-1,3,2-dioxaborinan-2-il)-3-metil-fenol. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 7,64 (m, 1H), 6,60 (m, 2H), 5,23 (br s, 1H), 3,75 (s, 4H), 2,47 (s, 3H), 1,01 (s, 6H)

Etapa B: Prepararea B6

4-(5,5-Dimetil-1,3,2-dioxaborinan-2-il)-3-metil-fenol (30,76mmol),8,56 mL TIPSCl (40 mmol) şi4,19 g imidazol (61,52 mmol) s-au dizolvat în 100 mL DCM şis-a agitat la r.t. sub atmosferă de N2până nu s-a mai observat conversie. Clorhidratul de imidazoliu s-a îndepărtat prin filtrare, filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă şi s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a obţine compusul de laPrepararea B6,1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 7,62 (d, 1H), 6,68-6,66 (m, 2H), 3,76 (s, 4H), 2,47 (s, 3H), 1,32-1,21 (m, 3H), 1,11 (d, 18H), 1,03 (s, 6H)

Prepararea B7: 2-(3-bromo-2-metil-fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan

2,362 g 2,6-Dibromo-toluen (9,45 mmol) s-a dizolvat în 10 mL THF anhidru sub atmosferă de N2şi amestecul s-a răcit la -78 °C. Apoi s-au adăugat prin picurare5,2 mL nBuLi (2,0M în pentan, 10,4 mmol) şi amestecul s-a agitat pentru 15 minute. Apoi s-au adăugat prin picurare2,31 mL 2-izopropoxi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan (11,3 mmol) şi amestecul s-a lăsat să se încălzească până la r.t.. S-a agitat până nu s-a mai observat conversie. Apoi amestecul s-a stopat cu soluţie apoasă de NH4Cl, apoi s-a extras cu EtOAc. Straturile organice combinate s-au uscat pe Na2SO4, s-au filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a se obţine produsul de laPrepararea B7,1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 7,67 (d, 1H), 7,62 (d, 1H), 7,10 (t, 1H), 2,53 (s, 3H), 1,29 (s, 12H)

Prepararea C1: (2-etoxipirimidin-4-il)metanol

Etapa A: 4-(dimetoximetil)-2-etoxi-pirimidina

1500 mg Compus de la Prepararea 8b (6,46 mmol) s-au dizolvat în 60 mL etanol, apoi s-au adăugat 527 mg etoxid de sodiu (7,75 mmol) şi amestecul s-a agitat la r.t. pentru 1 oră. Volatilele au fost evaporate sub presiune redusă şi reziduul s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a da 4-(dimetoximetil)-2-etoxi-pirimidina. MS (M+H): 199,2

Etapa B: Prepararea C1

Utilizând Procedeul general Va şi 4-(dimetoximetil)-2-etoxi-pirimidina ca acetal, s-a obţinut compusul de laPrepararea C1. MS (M+H): 155,2

Prepararea C2: (1-Butil-1H-pirazol-5-il)metanol

Utilizând Procedeul general Vb şi 1-butilpirazol caalchil-pirazol corespunzător, s-a obţinut compusul de la Prepararea C2.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7,30 (d, 1H), 6,12 (d, 1H), 5,23 (t, 1H), 4,49 (d, 2H), 4,06 (t, 2H), 1,72 (m, 2H), 1,26 (m, 2H), 0,88 (t, 3H)

MS (M+H): 155,2

Prepararea C3: [2-(2-metoxifenil)pirimidin-4-il]metanol

Etapa A: 4-(dimetoximetil)-2-(2-metoxifenil)pirimidina

Utilizând Procedeul general Vc şi 2-metoxibenzamidina sare cu acid acetic ca sare de amidină corespunzătoare, s-a obţinut 4-(dimetoximetil)-2-(2-metoxi-fenil)pirimidina. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8,93 (d, 1H), 7,55-7,44 (m, 3H), 7,16 (d, 1H), 7,06 (m, 1H), 5,31 (s, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,37 (s, 6H)

Etapa B: Prepararea C3

261 mg 4-(Dimetoximetil)-2-(2-metoxifenil)pirimidina (1,0 mmol) s-a dizolvat în 2 mL HCl în dioxan (soluţie 4M), apoi s-au adăugat 2 mL apă şi amestecul s-a agitat la 50 °C pentru 16 ore. Amestecul de reacţie s-a răcit la 0 °C, apoi s-au adăugat în porţiuni 320 mg NaOH (8,0 mmol). S-a corectat pH-ul la 8 utilizând soluţie 10 % K2CO3, apoi s-au adăugat 76 mg borohidrură de sodiu (2,0 mmol) şi amestecul s-a agitat pentru 30 minute la 0 °C. Amestecul de reacţie s-a diluat cu 5 mL apă şi s-a extras cu EtOAc. Fazele organice combinate s-au uscat pe Na2SO4, s-au filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a da produsul de laPrepararea C3,1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8,84 (d, 1H), 7,50-7,42 (m, 3H), 7,14 (d, 1H), 7,03 (m, 1H), 5,66 (t, 1H), 4,58 (d, 2H), 3,75 (s, 3H)

Prepararea C4: (1-tert-Butil-1H-pirazol-5-il)metanol

Etapa A: 1-tert-butil-5-(dimetoximetil)-1H-pirazol

Utilizând Procedeul general Vd şi clorhidrat de tert-butilhidrazină drept clorhidrat de hidrazină corespunzător, s-a obţinut 1-tert-butil-5-(dimetoximetil)-1H-pirazol. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7,34 (d, 1H), 6,34 (d, 1H), 5,74 (s, 1H), 3,24 (s, 6H), 1,57 (s, 9H)

Notă: 1-tert-butil-3-(dimetoximetil)-1H-pirazolul s-a obţinut de asemenea. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7,75 (d, 1H), 6,18 (d, 1H), 5,34 (s, 1H), 3,24 (s, 6H), 1,50 (s, 9H)

Etapa B: Prepararea C4

Utilizând Procedeul general Ve şi 1-tert-butil-5-(dimetoximetil)-1H-pirazolul ca acetal adecvat, s-a obţinut compusul de laPrepararea C4. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7,27 (d, 1H), 6,19 (d, 1H), 5,31 (t, 1H), 4,61 (d, 2H), 1,56 (s, 9H)

Prepararea C5: [2-(2-metoxietil)pirimidin-4-il]metanol

Etapa A: 4-(dimetoximetil)-2-(2-metoxietil)pirimidina

Utilizând Procedeul general Vc şi 3-metoxipropanamidina clorhidrat precum clorhidrat de amidină corespunzător, s-a obţinut 4-(dimetoximetil)-2-(2-metoxietil) pirimidina. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8,78 (d, 1H), 7,38 (d, 1H), 5,25 (s, 1H), 3,80 (t, 2H), 3,33 (s, 6H), 3,22 (s, 3H), 3,11 (t, 2H)

Notă:De asemenea s-a obţinut 2-[4-(dimetoximetil)pirimidin-2-il]-N,N-dimetil-etanamina. MS (M+H): 226,2

Etapa B: Prepararea C5

Utilizând Procedeul general Va şi 4-(dimetoximetil)-2-(2-metoxietil)pirimidina acetal corespunzător, s-a obţinut compusul de la Prepararea C5. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8,70 (d, 1H), 7,39 (d, 1H), 5,60 (t, 1H), 4,52 (d, 2H), 3,78 (t, 2H), 3,22 (s, 3H), 3,06 (t, 2H)

Prepararea C6: [1-(2,2,2-Trifluoroetil)-1H-pirazol-5-il]metanol

Etapa A: 5-(dimetoximetil)-1-(2,2,2-trifluoroetil)-4,5-dihidro-1H-pirazol-5-ol

Utilizând Procedeul general Vd în absenţa metoxidului de sodiu şi utilizând etanol în loc de metanol şi 2,2,2-trifluoroetilhidrazina (70 greut./greut% în apă) ca hidrazina corespunzătoare, s-a obţinut 5-(dimetoximetil)-1-(2,2,2-trifluoroetil)-4,5-dihidro-1H-pirazol-5-ol. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 6,83 (t, 1H), 6,03 (s, 1H), 4,30 (s, 1H), 3,95 (m, 1H), 3,47 (m, 1H), 3,40 (d, 6H), 2,88 (m, 1H), 2,50 (m, 1H)

Etapa B: Prepararea C6

Utilizând Procedeul general Ve şi 5-(dimetoximetil)-1-(2,2,2-trifluoroetil)-4,5-dihidro-1H-pirazol-5-ol ca acetal corespunzător, s-a obţinut compusul de la Prepararea C6. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7,48 (d, 1H), 6,27 (d, 1H), 5,46 (t, 1H), 5,08 (q, 2H), 4,56 (d, 2H)

Prepararea C7: (2-(Morfolin-4-il)pirimidin-4-il)metanol

Etapa A: 4-[4-(dimetoximetil)pirimidin-2-il]morfolina

Compus de laPrepararea 8b25,0 g (107,6 mmol) s-a dizolvat în 161 mL morfolină şi amestecul s-a agitat la r.t. până nu s-a mai observat conversie. Apoi s-a concentrat sub presiune redusă şi produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a obţine 4-[4-(dimetoximetil)pirimidin-2-il]morfolina.

Etapa B: Prepararea C7

Utilizând Procedeul general Va şi 4-[4-(dimetoximetil)pirimidin-2-il]morfolina ca acetal corespunzător, s-a obţinut compusul de la Prepararea C7. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8,35 (d, 1H), 6,75 (dm, 1H), 5,431 (t, 1H), 4,36 (dm, 2H), 3,67 (m, 4H), 3,63 (m, 4H)

Prepararea C8: [2-(2,2,2-trifluoroetoxi)pirimidin-4-il]metanol

Etapa A: 4-(dimetoximetil)-2-(2,2,2-trifluoroetoxi)pirimidina

Compus de la Prepararea 8b5,00 g (21,5 mmol) s-a dizolvat în 54 mL acetonitril anhidru, apoi s-au adăugat5,95 g K2CO3 (43,1 mmol) şi3,24 g 2,2,2-trifluoroetanol (32,3 mmol) şi amestecul s-a agitat la 60 °C până nu s-a mai observat conversie. Amestecul de reacţie s-a răcit, s-a filtrat, solidul s-a spălat cu EtOAc, apoi filtratul s-a concentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a da 4-(dimetoximetil)-2-(2,2,2-trifluoroetoxi)pirimidina. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8,74 (d, 1H), 7,32 (d, 1H), 5,25 (s, 1H), 5,05 (q, 2H), 3,34 (s, 6H)

Etapa B: Prepararea C8

Utilizând Procedeul general Va şi 4-(dimetoximetil)-2-(2,2,2-trifluoroetoxi) pirimidina ca acetal corespunzător, s-a obţinut compusul de la Prepararea C8. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8,65 (d, 1H), 7,32 (d, 1H), 5,69 (t, 1H), 5,02 (q, 2H), 4,51 (d, 2H)

Prepararea C9: [2-(2-Fluorofenil)pirimidin-4-il]metanol

Etapa A: 2-Fluoro-N'-hidroxi-benzamidina

Amestecul de 11,48 g hidroxilamină clorhidrat (165 mmol), 13,87 g NaHCO3 (165 mmol) şi 120 mL MeOH s-a agitat la r.t. pentru 30 minute. Apoi s-au adăugat 10 g 2-fluorobenzonitril (82,6 mmol) şi amestecul s-a agitat la 75 °C până nu s-a mai observat conversie. Solventul s-aevaporat parţial sub presiune redusă, reziduul s-a filtrat, s-a spălat cu MeOH. Filtratul s-a concentrat sub presiune redusă, apoi s-a diluat cu apă şi s-a extras cu EtOAc. Fazele organice combinate s-au uscat pe Na2SO4, s-au filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă pentru a da 2-fluoro-N'-hidroxi-benzamidina.

Etapa B: 2-Fluorobenzamidina

2-Fluoro-N'-hidroxi-benzamidină 12,67 g (81,55 mmol) s-a dizolvat în 300 mL AcOH la 0 °C şi s-au adăugat9,24 mL Ac2O (97,86 mmol). Amestecul s-a agitat la r.t. până nu s-a mai observat conversie. Apoi s-au adăugat 630 mg 10 % Pd/C şi amestecul s-a agitat sub atmosferă de H2(4 bari) până nu s-a mai observat conversie. Amestecul s-afiltrat prin celite şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă pentru a obţine 2-fluorobenzamidina acetat. MS (M(baza liberă)+H): 139,4

Etapa C: 4-(Dimetoximetil)-2-(2-fluorofenil)pirimidina

Utilizând Procedeul general Vc şi 2-fluorobenzamidina ca amidină adecvată, s-a obţinut 4-(dimetoximetil)-2-(2-fluorofenil)pirimidina. MS (M+H): 249,2

Etapa D: Prepararea C9

Utilizând Procedeul general Va şi 4-(dimetoximetil)-2-(2-fluorofenil)pirimidina acetal corespunzător, s-a obţinut compusul de la Prepararea C9. MS (M+H): 205,2

Prepararea C10: [2-[2-(2-metoxietoxi)fenil]pirimidin-4-il]metanol

Etapa A: N'-Hidroxi-2-metoxietoxi-benzamidina

Hidroxilamină clorhidrat 2 eq. s-a dizolvat în MeOH (1mL/mmol), apoi s-au adăugat 2 eq. NaHCO3. Amestecul s-a agitat la r.t. pentru 20 minute, apoi s-a adăugat 1 eq. 2-metoxietoxi-benzonitril şi amestecul s-a agitat la reflux până nu s-a mai observat conversie. MeOH s-a evaporat parţial, reziduul s-a filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. N'-Hidroxi-2-(2-metoxietoxi)benzamidinaobţinută s-a utilizat fără purificare suplimentară.

1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 9,48 (s, 1H), 7,45 (m, 1H), 7,34 (m, 1H), 7,08 (d, 1H), 6,94 (td, 1H), 5,65 (br s, 2H), 4,17 (m, 2H), 3,67 (m, 2H), 3,31 (s, 3H)

MS (M+H): 211,2

Etapa B: 2-metoxietoxi-benzamidina

N'-Hidroxi-2-(2-metoxietoxi)benzamidina 8,22 g (39,1 mmol) s-a dizolvat în 80 mL AcOH la 0 °C, apoi s-au adăugat prin picurare4,43 mL Ac2O (46,92 mmol). Amestecul s-a agitat la r.t. până nu s-a mai observat conversie. S-au adăugat 575 mg 10 % Pd/C şi amestecul s-a agitat sub atmosferă de H2 (4 bari) până nu s-a mai observat conversie. Amestecul s-a filtrat prin celite şi filtratul s-a concentrat sub presiune redusă pentru a obţine 2-(2-metoxietoxi)benzamidina acetat. MS (M+H): 195,2

Etapa C: 4-(Dimetoximetil)-2-[2-metoxietoxi-fenil]pirimidina

Utilizând Procedeul general Vcşi 2-(2-metoxietoxi)benzamidinaacetat ca amidină sare corespunzătoare, s-a obţinut 4-(dimetoximetil)-2-[2-metoxietoxi-fenil]pirimidina.

1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 8,92 (d, 1H), 7,55 (m, 1H), 7,47 (m, 1H), 7,45 (m, 1H), 7,17 (d, 1H), 7,08 (m, 1H), 5,29 (s, 1H), 4,12 (m, 2H), 3,57 (m, 2H), 3,36 (s, 6H), 3,20 (s, 3H)

MS (M+H): 305,0

Etapa D: Prepararea C10

Utilizând Procedeul general Va şi 4-(dimetoximetil)-2-[2-metoxietoxi-fenil] pirimidina ca acetal corespunzător, s-a obţinut compusul de la Prepararea C10.

1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 8,84 (d, 1H), 7,53 (m, 1H), 7,47 (m, 1H), 7,43 (m, 1H), 7,14 (d, 1H), 7,05 (td, 1H), 5,64 (t, 1H), 4,58 (d, 2H), 4,11 (m, 2H), 3,57 (m, 2H), 3,21 (s, 3H)

MS (M+H): 261,0

Exemplul 1: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metoxi-D-fenilalaninaşi

Exemplul 2: N-[(5Ra)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metoxi-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VI şi compusul de laPrepararea 7aca derivat de fenol corespunzător şi metanol ca alcool corespunzător, apoi hidrolizând intermediarul format confom Procedeului general VII, s-a obţinut compusul din Exemplul 1ca diastereoizomerul care eluează la început. HRMS calculat pentru C36H37ClFN5O4S: 689,2240, găsit: 345,6182 (M+2H)

Exemplul 2s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C36H37ClFN5O4S: 689,2240, găsit: 345,6185 (M+2H)

Exemplul 3: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[(1-metil-1H-pirazol-5-il)metoxi]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VI şi compusul de laPrepararea 7ad2ca derivat corespunzător de fenol şi (2-metilpirazol-3-il)metanol ca alcool corespunzător, apoi hidrolizând intermediarul format conform Procedeului general VII, s-a obţinut compusul dinExemplul 3. HRMS calculat pentru C40H41ClFN7O4S: 769,2613, găsit: 385,6378 (M+2H)

Exemplul 4: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[(2-etoxipirimidin-4-il)metoxi]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 5: N-[(5Ra)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[(2-etoxipirimidin-4-il)metoxi]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VI şi compusul de laPrepararea 7aca derivat corespunzător de fenol şi compusul de la Prepararea C1ca alcool corespunzător , apoi hidrolizând intermediarul format conform Procedeului general VII, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Ei au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi, compusul din Exemplul 4s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C42H43ClFN7O5S: 811,2719, găsit: 406,6417 (M+2H)

Compusul dinExemplul 5s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C42H43ClFN7O5S: 811,2719, găsit: 406,6436 (M+2H)

Exemplul 6: 2-[(1-butil-1H-pirazol-5-il)metoxi]-N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VI şi compusul de laPrepararea 7ad2ca derivat corespunzător de fenol şi compusul de la Prepararea C2ca alcool corespunzător, apoi hidrolizând intermediarul format conform Procedeului general VII, s-a obţinut compusul din Exemplul 6. HRMS calculat pentru C43H47ClFN7O4S: 811,3082, găsit: 406,6616 (M+2H)

Exemplul 7: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxifenil)pirimidin-4-il] metoxi}-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VI şi compusul de la Prepararea 7ad2ca derivat corespunzător de fenol şi compusul de la Prepararea C3ca alcool corespunzător, apoi hidrolizând intermediarul format conform Procedeului general VII, s-a obţinut compusul din Exemplul 7. HRMS calculat pentru C47H45ClFN7O5S: 873,2875, găsit: 437,6498 (M+2H)

Exemplul 8: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(furan-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metoxi-D-fenilalaninaşi

Exemplul 9: N-[(5Ra)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil}-6-(furan-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metoxi-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ic şi compusul de laPrepararea4bca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(2-metoxifenil)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut compusul dinExemplul 8ca diastereomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C34H36ClN5O5S: 661,2126, găsit: 662,2203 (M+H). Compusul dinExemplul 9s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C34H36ClN5O5S: 661,2126, găsit: 662,2203 (M+H)

Exemplul 10: 2-cloro-N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil}-6-(furan-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina, diastereoizomer 1

Utilizând Procedeul general Ic şi compusul de laPrepararea 4bca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(2-clorofenil)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut compusul din Exemplul 10ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C33H33Cl2N5O4S: 665,1630, găsit: 666,1670 (M+H)

Exemplul 11: 2-carbamoil-N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il) etoxi]fenil}-6-(furan-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Etapa A: 5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil]-4-fluoro-6-(2-furil)tieno[2,3-d]pirimidina

Un amestec de 150 mg compus de la Prepararea 4b (0,3 mmol) şi 380 mg fluorură de argint (3,0 mmol) în 6 mL toluen s-a încălzit la temperatura de reflux pentru 3 ore. Apoi s-a răcit la r.t. şi componentele anorganice s-au filtrat. Filtratul s-a concentrat sub presiune redusă pentru a obţine produsul brut care a fost utilizat în etapa următoare fără purificare suplimentară.

Etapa B: Exemplul 11

Un amestec de 316 mg 5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il) etoxi]fenil]-4-fluoro-6-(2-furil)tieno[2,3-d]pirimidină (0,65 mmol), 271 mg acid (2R)-2-amino-3-(2-carbamoilfenil)propanoic (1,30 mmol) şi 424 mg Cs2CO3 (1,30 mmol) în 6 mL DMSO s-a agitat la 40 °C pentru 30 minute. Amestecul s-a diluat cu apă, pH-ul s-a corectat la 5 utilizând soluţie 1M de HCl şi s-a extras cu DCM. Faza organică s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Diastereoizomerul care eluează întâi s-a colectat caExemplul 11, HRMS calculat pentru C34H35ClN6O5S: 674,2078, găsit: 675,2146 (M+H)

Exemplul 12: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(furan-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(piridin-2-ilmetoxi)-D-fenilalaninaşi

Exemplul 13: N-[(5Ra)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(furan-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(piridin-2-ilmetoxi)-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ic şi compusul de laPrepararea 4bca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi compusul de laPrepararea A5ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut produsul de la Exemplul 12ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C39H39ClN6O5S: 738,2391, găsit: 370,1269 (M+2H)

Exemplul 13s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C39H39ClN6O5S: 738,2391, găsit: 370,1263 (M+2H)

Exemplul 14: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-hidroxi-D-fenilalanina

Etapa A: acid (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil]-6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroxifenil)propanoic

Utilizând Procedeul general Ic şi produsul de la Prepararea 4aca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(2-hidroxifenil)propanoic s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Ei au fost separaţi prin cromatografie HILIC. S-a obţinut acidul (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil]-6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroxifenil)propanoic ca diastereoizomerul care eluează ultimul. MS (M+H): 708,0

Etapa B: Exemplul 14

Utilizând Procedeul general IIIb şi acid (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metil-piperazin-1-il)etoxi]fenil]-6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroxifenil)propanoic ca derivat corespunzător de 6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidinăşi 2-(5-fluoro-2-furil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan ca derivat corespunzător de ester boronic, s-a obţinut compusul din Exemplul 14. HRMS calculat pentru C33H33ClFN5O5S: 665,1875, găsit: 333,6012 (M+2H)

Exemplul 15: N-[(5Ra)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metoxi-D-fenilalaninaşi

Exemplul 16: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metoxi-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4cca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidinăşi acid (2R)-2-amino-3-(2-metoxifenil)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a onţinut produsul din Exemplul 15ca diastereoizomer care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C34H35ClFN5O5S: 679,2031, găsit: 680,2100 (M+H)

Exemplul 16s-a obţinut ca diastereizomer care eluează întâi. HRMS calculat pentru C34H35ClFN5O5S: 679,2031, găsit: 680,2092 (M+H)

Exemplul 17: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(2,2,2-trifluoroetoxi)-D-fenilalanina

Etapa A: (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil]-6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroxifenil)propanoat de etil

Acid (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil]-6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroxifenil)propanoic 876 mg (1,24 mmol) s-a dizolvat în 5 mL etanol, apoi s-au adăugat0,05 mL acid sulfuric concentrat şi amestecul s-a agitat la 70 °C pentru 2 ore. Apoi amestecul s-a diluat cu apă, pH-ul s-a stabilit la 5 utilizând soluţie 1M de NaHCO3şi s-a extras cu DCM. Faza organică s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând DCM şi MeOH ca eluanţi pentru a obţine (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil]-6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroxifenil)propanoat de etil. MS (M+H): 736,1

Etapa B: (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil]-6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)fenil] propanoat de etil

(2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-Cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil]-6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroxifenil)propanoat de etil648 mg (0,88 mmol) s-a dizolvat în 10 mL DMF apoi s-au adăugat 415 mg K2CO3 (3,00 mmol) şi 348 mg 2,2,2-trifluoroetil trifluorometansulfonat (1,50 mmol) la r.t. Amestecul s-a agitat la 50 °C pentru 5 ore. Amestecul de reacţie s-a diluat cu saramură, s-a extras cu DCM. Faza organică s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi filtratul s-a concentrat sub presiune redusă. Materialul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând DCM şi metanol ca eluanţi pentru a obţine (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil]-6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-(2,2,2-tri-fluoroetoxi)fenil]propanoat de etil. MS (M+H): 818,1

Etapa C: Exemplul 17

(2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-Cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil]-6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)fenil]propanoat de etils-a hidrolizat conform Procedeului general VII pentru a da acid (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil]-6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)fenil]propanoic. Acest compus s-a utilizat ca derivat corespunzător de 6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină şi s-a transformat în produsul din Exemplul 17conform Procedeului general IIIb, utilizând 2-(5-fluoro-2-furil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan ca derivat corespunzător de acid boronic. HRMS calculat pentru C35H34ClF4N5O5S: 747,1905, găsit: 374,6006 (M+2H)

Exemplul 18: N-[(5Ra)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(piridin-2-ilmetoxi)-D-fenilalaninaşi

Exemplul 19: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(piridin-2-ilmetoxi)-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ic şi compusul de laPrepararea 4cca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d] pirimidină şi compusul de laPrepararea A5caderivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut Exemplul 18ca diastereoizomer care eluează întâi. HRMS calculat pentru C39H38ClFN6O5S: 756,2296, găsit: 379,1230 (M+2H)

Exemplul 19s-a obţinut ca diastereoizomer care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C39H38ClFN6O5S: 756,2296, găsit: 379,1230 (M+2H)

Exemplul 20: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[(1-metil-1H-pirazol-5-il)metoxi]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general IIIb şicompusul de laPrepararea 5bca derivat corespunzător de 6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină şi 2-(5-fluoro-2-furil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan ca derivat corespunzător de acid boronic, s-a obţinut compusul din Exemplul 20. HRMS calculat pentru C38H39ClFN7O5S: 759,2406, găsit: 380,6271 (M+2H)

Exemplul 21: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[(1-etil-1H-pirazol-5-il)metoxi]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general IIIb şi compusul de laPrepararea 5cca derivat corespunzător de 6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină şi 2-(5-fluoro-2-furil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan ca derivat corespunzător de acid boronic, s-a obţinut compusul din Exemplul 21. HRMS calculat pentru C39H41ClFN7O5S: 773,2562, găsit: 387,6358 (M+2H)

Exemplul 22: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[(2-etoxipirimidin-4-il)metoxi]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ic şi compusul de laPrepararea 4cca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidinăşi compusul de laPrepararea A2ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut compusul din Exemplul 22ca diastereoizomer care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C40H41ClFN7O6S: 801,2512, găsit: 401,6326 (M+2H)

Exemplul 23: 2-[(1-butil-1H-pirazol-5-il)metoxi]-N-[(5Ra)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 24: 2-[(1-butil-1H-pirazol-5-il)metoxi]-N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ic şi compusul de laPrepararea 4cca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi compusul de laPrepararea A3ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut Exemplul 23ca diastereoizomer care eluează întâi. HRMS calculat pentru C41H45ClFN7O5S: 801,2875, găsit: 401,6502 (M+2H)

Exemplul 24s-a obţinut ca diastereoizomer care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C41H45ClFN7O5S: 801,2875, găsit: 401,6505 (M+2H)

Exemplul 25: N-[(5Ra)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2,2,2-trifluoro-etoxi)pirimidin-4-il]metoxi}-D-fenilalaninaşi

Exemplul 26: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)pirimidin-4-il]metoxi}-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ic şi compusul de laPrepararea 4cca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d] pirimidină şi compusul de laPrepararea A8 ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut compusul din Exemplul 25ca diastereoizomer care eluează întâi. HRMS calculat pentru C40H38ClF4N7O6S: 855,2228, găsit: 428,6181 (M+2H)

Exemplul 26s-a obţinut ca diastereoizomer care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C40H38ClF4N7O6S: 855,2228, găsit: 428,6193 (M+2H)

Exemplul 27: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxifenil)pirimidin-4-il] metoxi}-D-fenilalanina

Etapa A: (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil]-6-(5-fluoro-2-furil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroxifenil)propanoat de etil

Compus dinExemplul 140,97 g, (1,46 mmol) s-a dizolvat în 15 mL soluţie de HCl (1,25M în EtOH) şi s-a agitat la 40 °C peste noapte. Amestecul s-a răcit la r.t., s-a neutralizat cu soluţie apoasă de NaHCO3şi amestecul s-a extras cu DCM. Faza organică s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi filtratul s-a concentrat sub presiune redusă. Reziduul s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând DCM şi MeOH ca eluanţi pentru a obţine (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il) etoxi]fenil]-6-(5-fluoro-2-furil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroxifenil)propanoat de etil.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 9,48 (br s, 1H), 8,39 (s, 1H), 7,30 (s, 2H), 7,01 (td, 1H), 6,72 (d, 1H), 6,64 (t, 1H), 6,41 (d, 1H), 5,83 (m, 1H), 5,56 (t, 1H), 5,08 (d, 1H), 4,94 (m, 1H), 4,30 (t, 2H), 4,03 (m, 2H), 3,07 (dd, 1H), 2,81 (t, 2H), 2,56 (br, 4H), 2,36 (dd, 1H), 2,32 (br, 4H), 2,14 (s, 3H), 1,91 (s, 3H)

MS (M+H): 694,2

Etapa B: Exemplul 27

Utilizând Procedeul general VI şi (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metil piperazin-1-il)etoxi]fenil]-6-(5-fluoro-2-furil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroxifenil)propanoat de etil ca derivat corespunzător de fenol şi compusul de la Prepararea C3ca derivat corespunzător de alcool, apoi hidrolizând intermediarul format conform Procedeului general VII, s-a obţinut compusul de la Exemplul 27. HRMS calculat pentru C45H43ClFN7O6S: 863,2668, găsit: 432,6414 (M+2H)

Exemplul 28: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2-metilfenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-hidroxi-D-fenilalanina

Etapa A: 2-[2-cloro-4-[4-cloro-6-(5-fluoro-2-furil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-3-metil-fenoxi]-N,N-dimetil-etanamina

Utilizând Procedeul general IIIb şi compusul de laPrepararea 4eca derivat corespunzător de 6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină şi 2-(5-fluoro-2-furil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan ca derivat corespunzător de acid boronic, s-a obţinut 2-[2-cloro-4-[4-cloro-6-(5-fluoro-2-furil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-3-metil-fenoxi]-N,N-dimetil-etanamina.

Etapa B: Exemplul 28

Utilizând Procedeul general Ib şi 2-[2-cloro-4-[4-cloro-6-(5-fluoro-2-furil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-3-metil-fenoxi]-N,N-dimetil-etanaminaca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi 2-hidroxi-D-fenilalaninaca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut compusul din Exemplul 28ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C30H28ClFN4O5S: 610,1453, găsit: 611,1503 (M+H)

Exemplul 29: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(tiofen-3-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-piridin-2-il-D-alaninaşi

Exemplul 30: N-[(5Ra)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(tiofen-3-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-piridin-2-il-D-alanina

Utilizând Procedeul general Ic şi compusul de laPrepararea 4gca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(2-piridil)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Ei au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi. S-a obţinut compusul din Exemplul 29ca diastereoizomer care eluează întâi. HRMS calculat pentru C32H33ClN6O3S2: 648,1744, găsit: 649,1811 (M+H) Exemplul 30s-a obţinut ca diastereoizomer care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C32H33ClN6O3S2: 648,1744, găsit: 649,1816 (M+H)

Exemplul 31: N-[(5Ra)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(tiofen-3-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-ciclohexil-D-alanina şi

Exemplul 32: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(tiofen-3-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-ciclohexil-D-alanina

Utilizând Procedeul general Ic şi compusul de laPrepararea 4gca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-ciclohexil-propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut compusul dinExemplul 31ca diastereoizomer care eluează întâi. HRMS calculat pentru C33H40ClN5O3S2: 653,2261, găsit: 327,6194 (M+2H)

Exemplul 32s-a obţinut ca diastereoizomer care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C33H40ClN5O3S2: 653,2261, găsit: 327,6195 (M+2H)

Exemplul 33: N-[(5Ra)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(tiofen-3-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-fluoro-D-fenilalaninaşi

Exemplul 34: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(tiofen-3-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-fluoro-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ic şi compusul de laPrepararea 4gca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(2-fluorofenil)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut compusul din Exemplul 33ca diastereoizomer care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C33H33ClFN5O3S2: 665,1697, găsit: 666,1776 (M+H)

Exemplul 34s-a obţinut ca diastereoizomer care eluează întâi. HRMS calculat pentru C33H33ClFN5O3S2: 665,1697, găsit: 666,1776 (M+H)

Exemplul 35: N-[(5Ra)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(morfolin-4-il)etoxi]fenil}-6-(tiofen-3-il)tieno [2,3-d]pirimidin-4-il]-3-piridin-2-il-D-alanina şi

Exemplul 36: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(morfolin-4-il)etoxi]fenil}-6-(tiofen-3-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-piridin-2-il-D-alanina

Utilizând Procedeul general Ic şi compusul de laPrepararea 4hca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(2-piridil)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut compusul din Exemplul 35ca diastereoizomer care eluează întâi. HRMS calculat pentru C31H30ClN5O4S2: 635,1428, găsit: 636,1499 (M+H)

Exemplul 36s-a obţinut ca diastereoizomer care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C31H30ClN5O4S2: 635,1428, găsit: 636,1508 (M+H)

Exemplul 37: 2-(aminometil)-N-[(5Ra)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(morfolin-4-il) etoxi]fenil}-6-(tiofen-3-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 38: 2-(aminometil)-N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(morfolin-4-il) etoxi]fenil}-6-(tiofen-3-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ic şi compusul de laPrepararea 4hca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-[2-(aminometil)fenil]propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut compusul dinExemplul 37ca diastereoizpmer care eluează întâi. HRMS calculat pentru C33H34ClN5O4S2: 663,1741, găsit: 664,1808 (M+H)

Exemplul 38s-a obţinut ca diastereoizomer care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C33H34ClN5O4S2: 663,1741, găsit: 664,1825 (M+H)

Exemplul 39: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metoxi-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VI şi compusul de laPrepararea 7bca derivat corespunzător de fenol şi metanol ca derivat corespunzător de alcool, apoi hidrolizând intermediarul format conform aparocedeului general VII, s-a obţinut compusul din Exemplul 39. HRMS calculat pentru C33H36ClN5O4S: 633,2176, găsit: 317,6163 (M+2H)

Exemplul 40: 2-[(1-tert-butil-1H-pirazol-5-il)metoxi]-N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VI şi compusul de laPrepararea 7bca derivat corespunzător de fenol şi compusul de laPrepararea C4ca derivat corespunzător de alcool, apoi hidrolizând intermediarul format conform Procedeului general VII, s-a obţinut compusul din Exemplul 40. HRMS calculat pentru C40H46ClN7O4S: 755,3021 găsit: 378,6573 (M+2H)

Exemplul 41: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxietil)pirimidin-4-il] metoxi}-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VI şi compusul de laPrepararea 7bca derivat corespunzător de fenol şi compusul de laPrepararea C5ca derivat corespunzător de alcool, apoi hidrolizând intermediarul format conform Procedeului general VII, s-a obţinut compusul din Exemplul 41. HRMS calculat pentru C40H44ClN7O5S: 769,2813, găsit: 385,6476 (M+2H).

Exemplul 42: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[1-(2,2,2-trifluoroetil)-1H-pirazol-5-il] metoxi}-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VI şi compusul de laPrepararea 7bca derivat corespunzător de fenol şi compusul de laPrepararea C6ca derivat corespunzător de alcool, apoi hidrolizând intermediarul format conform Procedeului general VII, s-a obţinut compusul din Exemplul 42. HRMS calculat pentru C38H39ClF3N7O4S: 781,2425, găsit: 391,6300 (M+2H)

Exemplul 43: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(morfolin-4-il)pirimidin-4-il] metoxi}-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VI şi compusul de laPrepararea 7bca derivat corespunzător de fenol şi compusul de laPrepararea C7ca derivat corespunzător de alcool, apoi hidrolizând intermediarul format conform Procedeului general VII, s-a obţinut compusul din Exemplul 43. HRMS calculat pentru C41H45ClN8O5S: 796,2922, găsit: 399,1546 (M+2H)

Exemplul 44: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)pirimidin-4-il] metoxi}-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VI şi compusul de laPrepararea 7bca derivat corespunzător de fenol şi compusul de laPrepararea C8ca derivat corespunzător de alcool, apoi hidrolizând intermediarul format conform Procedeului general VII, s-a obţinut compusul din Exemplul 44. HRMS calculat pentru C39H39ClF3N7O5S: 809,2374, găsit: 405,6262 (M+2H)

Exemplul 45: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxifenil)pirimidin-4-il] metoxi}-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VI şi compusul de la Prepararea 7bca derivat corespunzător de fenol şi compusul de laPrepararea C3ca derivat corespunzător de alcool, apoi hidrolizând intermediarul format conform Procedeului general VII, s-a obţinut compusul din Exemplul 45. HRMS calculat pentru C44H44ClN7O5S: 817,2813, găsit: 409,6494 (M+2H)

Exemplul 46: N-[(5Sa)-5-13-cloro-4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2-metilfenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[1-(2,2,2-trifluoroetil)-1H-pirazol-5-il] metoxi}-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VI şi compusul de laPrepararea 7cca derivat corespunzător de fenol şi compusul de laPrepararea C6ca derivat corespunzător de alcool, apoi hidrolizând intermediarul format conform Procedeului general VII, s-a obţinut compusul din Exemplul 46. HRMS calculat pentru C35H34ClF3N6O4S: 726,2003, găsit: 727,2092 (M+H)

Exemplul 47: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2-metilfenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(morfolin-4-il)pirimidin-4-il]metoxi}-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VI şi compusul de laPrepararea 7c ca derivat corespunzător de fenol şi compusul de laPrepararea C7ca derivat corespunzător de alcool, apoi hidrolizând intermediarul format conform Procedeului general VII, s-a obţinut compusul din Exemplul 47. HRMS calculat pentru C38H40ClN7O5S: 741,2500, găsit: 371,6331 (M+2H)

Exemplul 48: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-4-[2-(dimetilamino)etoxi] -2-metilfenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)pirimidin-4-il] metoxi}-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VI şi compusul de laPrepararea 7cca derivat corespunzător de fenol şi compusul de laPrepararea C8ca derivat corespunzător de alcool, apoi hidrolizând intermediarul format conform Procedeului general VII, s-a obţinut compusul din Exemplul 48. HRMS calculat pentru C36H34ClF3N6O5S: 754,1952, găsit: 755,1971 (M+H)

Exemplul 49: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2-metilfenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxifenil)pirimidin-4-il]metoxi}-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VI şi compusul de laPrepararea 7cca derivat corespunzător de fenol şi compusul de laPrepararea C3ca derivat corespunzător de alcool, apoi hidrolizând intermediarul format conform Procedeului general VII, s-a obţinut compusul din Exemplul 49. HRMS calculat pentru C41H39ClN6O5S: 762,2391, găsit: 371,6323 (M+2H)

Exemplul 50: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2-metilfenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-fluorofenil)pirimidin-4-il]metoxi}-D-fenilalanina

Etapa A: (2R)-2-[[5-bromo-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-[[2-(2-fluorofenil)pirimidin-4-il]metoxi]fenil]propanoat de etil

Utilizând Procedeul general VI şi compusul de laPrepararea 7dca derivat corespunzător de fenol şi compusul de laPrepararea C9ca derivat corespunzător de alcool, s-a obţinut (2R)-2-[[5-bromo-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-[[2-(2-fluorofenil)pirimidin-4-il] metoxi]fenil]propanoat de etil. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8,84 (d, 1H), 8,39 (s, 1H), 7,95 (td, 1H), 7,58-7,52 (m, 3H), 7,39-7,24 (m, 8H), 7,13 (d, 1H), 6,95 (t, 1H), 5,29-5,15 (m, 3H), 4,16 (q, 2H), 3,63 (dd, 1H), 3,25 (dd, 1H), 1,19 (t, 3H)

Etapa B: (2R)-2-[[5-[3-cloro-4-(2-dimetilaminoetiloxi)-2-metil-fenil]-6-(4-fluoro-fenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-[[2-(2-fluorofenil)pirimidin-4-il] metoxi]fenil]propanoat de etil

(2R)-2-[[5-Bromo-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-[[2-(2-fluorofenil)pirimidin-4-il]metoxi]fenil]propanoat de etil 1 eq. şi1,2 eq. compus de la Prepararea B5s-au dizolvat în dioxan (5 mL/mmol), apoi s-au adăugat 5 mol% AtaPhos, 3 eq. Cs2CO3şi apă(5 mL/mmol) şi amestecul s-a agitat la 70 °C sub atmosferă de argon până când nu s-a mai observat conversie. Apoi amestecul s-a diluat cu EtOAc şi s-a spălat cu saramură. Faza organică s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi filtratul s-a concentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând DCM şi MeOH ca eluanţi pentru a obţine (2R)-2-[[5-[3-cloro-4-(2-dimetilaminoetiloxi)-2-metil-fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-[[2-(2-fluorofenil)pirimidin-4-il]metoxi]fenil]propanoat de etil ca amestec de diastereoizomeri. MS (M+H): 834,6

Etapa C: Exemplul 50

Utilizând Procedeul general VII şi (2R)-2-[[5-[3-cloro-4-(2-dimetilaminoetil oxi)-2-metil-fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-[[2-(2-fluorofenil)pirimidin-4-il]metoxi]fenil]propanoat de etil ca derivat corespunzător de ester, s-a obţinut compusul din Exemplul 50ca diastereoizomer care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C43H37ClF2N6O4S: 806,2254, găsit: 807,2343 (M+H)

Exemplul 51: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2-metilfenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-({2-[2-(2-metoxietoxi)fenil]pirimidin-4-il} metoxi)-D-fenilalanina

Etapa A: (2R)-2-[[5-bromo-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-[[2-[2-(2-metoxietoxi)fenil]pirimidin-4-il]metoxi]fenil]propanoat de etil

Utilizând Procedeul general VI şi compusul de laPrepararea 7dca derivat corespunzător de fenol şi compusul de la Prepararea C10ca derivat corespunzător de alcool, s-a obţinut (2R)-2-[[5-bromo-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-[[2-[2-(2-metoxietoxi)fenil]pirimidin-4-il]metoxi]fenil]propanoat de etil. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8,80 (d, 1H), 8,41 (s, 1H), 7,57-7,53 (m, 3H), 7,46-7,23 (m, 7H), 7,16 (d, 1H), 7,07 (d, 1H), 7,03 (t, 1H), 6,94 (t, 1H), 5,28-5,23 (m, 1H), 5,19 (dd, 2H), 4,18-4,11 (m, 4H), 3,61-3,57 (m, 3H), 3,27 (dd, 1H), 3,21 (s, 3H), 1,19 (t, 3H)

Etapa B: (2R)-2-[[5-[3-cloro-4-(2-dimetilaminoetiloxi)-2-metil-fenil]-6-(4-fluoro-fenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-[[2-[2-(2-metoxietoxi)fenil] pirimidin-4-il]metoxi]fenil]propanoat de etil

(2R)-2-[[5-Bromo-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-[[2-[2-(2-metoxietoxi)fenil]pirimidin-4-il]metoxi]fenil]propanoat de etil 1 eq. şi1,2 eq. compus de la Prepararea B5s-au dizolvat în dioxan (5 mL/mmol), apoi s-au adăugat 5 mol% AtaPhos, 3 eq. Cs2CO3 şi apă (5 mL/mmol) şi amestecul s-a agitat la 70°C sub atmosferă de argon până când nu s-a mai observat conversie. Apoi amestecul s-a diluat cu EtOAc şi s-a spălat cu saramură. Faza organică s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând DCM şi MeOH ca eluanţi pentru a obţine (2R)-2-[[5-[3-cloro-4-(2-dimetilaminoetiloxi)-2-metil-fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]amino]-3-[2-[[2-[2-(2-metoxietoxi)fenil]pirimidin-4-il]metoxi]fenil]propanoat de etil ca amestec de diastereoizomeri. MS (M+H): 890,6

Etapa C: Exemplul 51

Utilizând Procedeul general VII şi (2R)-2-[[5-[3-cloro-4-(2-dimetilaminoetil oxi)-2-metil-fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-[[2-[2-(2-metoxi-etoxi)fenil]pirimidin-4-il]metoxi]fenil]propanoat de etil ca derivat corespunzător de ester, s-a obţinutExemplul 51ca diastereoizomer care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C46H44ClFN6O6S: 862,2716, găsit: 432,1442 (M+2H)

Exemplul 52: N-[(5Ra)-5-(3,5-dicloro-4-hidroxi-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 53: N-[(5Sa)-5-(3,5-dicloro-4-hidroxi-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VII şi compusul de laPrepararea 7fca derivat corespunzător de ester, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Ei s-au separat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. S-a obţinut compusul din Exemplul 52ca diastereomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C24H21Cl2N3O3S: 501,0681, găsit: 502,0755 (M+H)

Exemplul 53s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C24H21Cl2N3O3S: 501,0681, găsit: 502,0772 (M+H)

Exemplul 54: N-((5Sa)-5-{3,5-dicloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil}-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-D-fenilalaninaşi

Exemplul 55: N-((SRa)-5-{3,5-dicloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil}-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VI şi compusul de laPrepararea 7fca derivat corespunzător de fenol şi 2-(4-metilpiperazin-1-il)etanolul ca derivat corespunzător de alcool, apoi hidrolizând intermediarul format conform Procedeului general VII, s-a obţinut compusul din Exemplul 54ca diastereomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C31H35Cl2N5O3S: 627,1838, găsit: 628,1935 (M+H)

Exemplul 55s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C31H35Cl2N5O3S: 627,1838, găsit: 628,1932 (M+H)

Exemplul 56: N-{(5Sa)-5-[3-cloro-4-(2-hidroxietoxi)-2-metilfenil]-6-etiltieno[2,3-d] pirimidin-4-il}-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VI şi compusul de la Prepararea 7gd1ca derivat corespunzător de fenol şi 10 eq. de etilenglicol ca derivat corespunzător de alcool, apoi hidrolizând intermediarul format conform Procedeului general VII, s-a obţinut compusul din Exemplul 56. HRMS calculat pentru C26H26ClN3O4S: 511,1333, găsit: 512,1390 (M+H)

Exemplul 57: N-{(5Sa)-5-[4-(carboximetoxi)-3-cloro-2-metilfenil]-6-etltieno [2,3-d]pirimidin-4-il}-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VI şi compusul de laPrepararea 7gd1ca derivat corespunzător de fenol şi 2-hidroxi-N,N-dimetilacetamida ca derivat corespunzător de alcool, apoi hidrolizând intermediarul format conform Procedeului general VII, s-a obţinut compusul din Exemplul 57. HRMS calculat pentru C26H24ClN3O5S: 525,1125, găsit: 526,1217 (M+H)

Exemplul 58: N-((5Ra)-5-{3-cloro-4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2-metilfenil}-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-L-fenilalaninaşi

Exemplul 59: N-((5Sa)-5-13-cloro-4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2-metilfenil}-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-L-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VI şi compusul de laPrepararea 7gca derivat corespunzător de fenol şi 2-(dimetilamino)etanol ca derivatul corespunzător de alcool, apoi hidrolizând intermediarul format conform Procedeului general VII, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Ei au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 58s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C28H31ClN4O3S: 538,1805, găsit: 539,1869 (M+H)

Compusul din Exemplul 59s-a obţinut ca diastereoizomerul ca eluează ultimul. HRMS calculat pentru C28H31ClN4O3S: 538,1805, găsit: 539,1866 (M+H)

Exemplul 60: N-((5Sa)-5-{3-cloro-4-[3-(dimetilamino)propoxi]-2-metilfenil}-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VI şi compusul de laPrepararea 7gd1ca derivatul corespunzător de fenol şi 3-(dimetilamino)propanol ca derivat corespunzător de alcool, apoi hidrolizând intermediarul format conform Procedeului general VII, s-a obţinut compusul din Exemplul 60. HRMS calculat pentru C29H33ClN4O3S: 552,1962, găsit: 553,2036 (M+H)

Exemplul 61: N-((5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(morfolin-4-il)etoxi]fenil}-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VI şi compusul de laPrepararea 7gd1ca derivat corespunzător de fenol şi 2-morfolinoetanol ca derivatul corespunzător de alcool, apoi hidrolizând intermediarul format conform Procedeului general VII, s-a obţinut compusul din Exemplul 61. HRMS calculat pentru C30H33ClN4O4S: 580,1911, găsit: 581,1981 (M+H)

Exemplul 62: N-((5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-D-fenilalaninaşi

Exemplul 63 N-((5Ra)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil}-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VI şi compusul de laPrepararea 7gca derivatul corespunzător de fenol şi 2-(4-metilpiperazin-1-il)etanol ca derivat corespunzător de alcool, apoi hidrolizând intermediarul format conform Procedeului general VII, s-a obţinut compusul din Exemplul 62ca diastereomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C31H36ClN5O3S: 593,2227, găsit: 594,2313 (M+H)

Compusul din Exemplul 63s-a obţinut ca diastereomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C31H36ClN5O3S: 593,2227, găsit: 594,2304 (M+H)

Exemplul 64: N-((5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[3-(4-metilpiperazin-1-il)propoxi] fenil}-6-etiltieno [2,3-d]pirimidin-4-il)-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VI şi compusul de laPrepararea 7gd1ca derivat corespunzător de fenol şi 3-(4-metilpiperazin-1-il)propan-1-ol ca derivatul corespunzător de alcool, apoi hidrolizând intermediarul format conform Procedeului general VII, s-a obţinut compusul din Exemplul 64. HRMS calculat pentru C32H38ClN5O3S: 607,2384, găsit: 608,2444 (M+H)

Exemplul 65: N-((5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil}-6-[5-(metoxicarbonil)-4-metilfuran-2-il]tieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-2-metoxi-D-fenilalaninaşi

Exemplul 66: N-((5Ra)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-[5-(metoxicarbonil)-4-metilfuran-2-il]tieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-2-metoxi-D-fenilalanina

Etapa A: [4-cloro-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil] tieno[2,3-d]pirimidin-6-il]-trimetil-stanan

4-Cloro-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil]tieno [2,3-d] pirimidina 1,97 g (4,50 mmol, din Etapa A de laPrepararea 4a) s-a dizolvat în 40 mL THF anhidru sub atmosferă de N2şi amestecul s-a răcit la -78 °C. Apoi s-a adăugat4,5 mL LDA (9 mmol, 2M soluţie în heptan, THF şi etilbenzen) şi amestecul s-a agitat la -78 °C pentru 1 oră. Apoi s-au adăugat 13,5 mL Me3SnCl soluţie (13,5 mmol, 1M în hexan) şi amestecul s-a lăsat să se încălzească până la r.t. Amestecul s-a diluat apoi cu soluţie cc. NH4Cl şi s-a extras cu dietileter. Faza organică s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi filtratul s-a concentrat sub presiune redusă. Apoi s-a dizolvat în 60 mL EtOAc şi s-au adăugat 40 mL soluţie saturată de NaF şi s-a agitat la r.t. peste noapte. Apoi s-a filtrat, fazele filtratului s-au separat. Faza apoasă s-a extras cu EtOAc. Fazele organice combinate s-au uscat pe Na2SO4, s-au filtrat şi filtratul s-a concentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând DCM şi MeOH ca eluanţi pentru a obţine [4-cloro-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil]tieno[2,3-d]pirimidin-6-il]-trimetil-stanan. HRMS calculat pentru C23H30N4OSCl2Sn: 600,0539, găsit: 601,0584 (M+H)

Etapa B: 5-[4-cloro-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil] tieno[2,3-d]pirimidin-6-il]-3-metil-furan-2-carboxilat de metil

[4-Cloro-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil]tieno[2,3-d] pirimidin-6-il]-trimetil-stanan 900 mg (1,50 mmol), 657 mg 5-bromo-3-metil-furan-2-carboxilat de metil (3 mmol), 29 mg CuI (0,15 mmol), 29 mg Pd(PhCN)2Cl2 (0,075 mmol), 46 mg Ph3As (0,15 mmol) şi 2 mL NMP s-au agitat la 100 °C până nu s-a mai observat conversie. Apoi amestecul s-a diluat cu EtOAc şi s-aspălat cu soluţie saturată de NaF. Faza apoasă s-a extras cu EtOAc. Fazele organice combinate s-au uscat pe Na2SO4, s-au filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând DCM şi MeOH ca eluanţi pentru a obţine 5-[4-cloro-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil]tieno[2,3-d] pirimidin-6-il]-3-metil-furan-2-carboxilat de metil. HRMS calculat pentru C27H28Cl2N4O4S: 574,1208, găsit: 575,1263 (M+H)

Etapa C: Exemplul 65

Utilizând Procedeul general Ib şi 5-[4-cloro-5-[3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metil piperazin-1-il)etoxi]fenil]tieno[2,3-d]pirimidin-6-il]-3-metil-furan-2-carboxilat de metil ca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(2-metoxifenil)propanoic ca derivatul corespunzător de amino acid s-a obţinut compusul dinExemplul 65ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C37H40ClN5O7S: 733,23369, găsit: 367,6263 (M+2H).

Compusul din Exemplul 66s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C37H40ClN5O7S: 733,23369, găsit: 367,6223 (M+2H)

Exemplul 67: N-[6-etil-5-(3-hidroxi-2-metilfenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general IId şi compusul de laPrepararea 3aca derivatul corespunzător de 5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină şi 2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenol ca derivat corespunzător de acid boronic, s-a obţinut compusul dinExemplul 67ca un amestec de diastereoizomeri. HRMS calculat pentru C24H23N3O3S: 433,1460, găsit: 434,1545 şi 434,1535 (M+H)

Exemplul 68: N-[6-etil-5-(3-fluoro-2-metilfenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general IIa şi compusul de laPrepararea 3aca derivat corespunzător de 5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (3-fluoro-2-metil-fenil)boronic ca derivat corespunzător de acid boronic, s-a obţinut compusul din Exemplul 68ca un amestec de diasteromeri. HRMS calculat pentru C24H22FN3O2S: 435,1417, găsit: 436,1489 şi 436,1484 (M+H)

Exemplul 69: N-[6-etil-(5Sa)-5-(3-fluoro-2-metilfenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 70: N-[6-etil-(5Ra)-5-(3-fluoro-2-metilfenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Diastereoizomerii dinExemplul 68au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 25 mM de NH4HCO3şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 69s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C24H22FN3O2S: 435,1417, găsit: 436,1481 (M+H) Compusul din Exemplul 70s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C24H22FN3O2S: 435,1417, găsit: 436,1498 (M+H)

Exemplul 71: N-[6-etil-5-(1H-indol-7-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina, diastereoizomer 1 şi

Exemplul 72: N-[6-etil-5-(1H-indol-7-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina, diastereoizomer 2

Utilizând Procedeul general IIa şi compusul de laPrepararea 3aca derivat corespunzător de 5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină şi 7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-indolul ca derivat corespunzător de acid boronic, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Ei au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 71s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C25H22N4O2S: 442,1463, găsit: 443,1540 (M+H)

Compusul din Exemplul 72s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C25H22N4O2S: 442,1463, găsit: 443,1537 (M+H)

Exemplul 73: N-[6-etil-(5Sa)-5-(1H-indol-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 74: N-[6-etil-(5Ra)-5-(1H-indol-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Diastereoizomerii de laPrepararea 7hs-au separat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 73s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C25H22N4O2S: 442,1463, găsit: 443,1529 (M+H) Compusul din Exemplul 74s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C25H22N4O2S: 442,1463, găsit: 443,1538 (M+H)

Exemplul 75: N-[6-etil-(5Sa)-5-(3-metoxi-2-metilfenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 76: N-[6-etil-(5Ra)-5-(3-metoxi-2-metilfenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general IIb şi compusul de laPrepararea 3aca derivat corespunzător de 5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină şi 2-(3-metoxi-2-metil-fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan ca derivat corespunzător de acid boronic, utilizând DME:apă 5:1 în loc de 2-Me-THF şi separând diastereoizomerii prin cromatografie preparativă cu fază inversă cu soluţie apoasă 25 mM de NH4HCO3şi acetonitril ca eluanţi, s-a obţinut compusul din Exemplul 75ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C25H25N3O3S: 447,1617, găsit: 448,1701 (M+H)

Compusul din Exemplul 76s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C25H25N3O3S: 447,1617, găsit: 448,1672 (M+H)

Exemplul 77: N-[(5Ra)-5-(2-cloro-3-metilpiridin-4-il)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 78 N-[(5Sa)-5-(2-cloro-3-metilpiridin-4-il)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general IIb şi compusul de laPrepararea 3aca derivat corespunzător de 5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină şi 2-cloro-3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridina ca derivat corespunzător de acid boronic, utilizând DME: apă 5:1 în loc de 2-Me-THF şi separând diastereoizomerii prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi, s-a obţinut compusul din Exemplul 77ca diastereoizomer care eluează întâi. HRMS calculat pentru C23H21ClN4O2S: 452,1074, găsit: 453,1158 (M+H) Compusul din Exemplul 78s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C23H21ClN4O2S: 452,1074, găsit: 453,1165 (M+H)

Exemplul 79: N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general IIb şi compusul de la Prepararea 3aca derivat corespunzător de 5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină şi 4,4,5,5-tetrametil-2-(1-naftil)-1,3,2-dioxaborolan ca derivat corespunzător de acid boronic, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Acesta s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul dinExemplul 79s-a obţinut ca amestec de diastereoizomeri. HRMS calculat pentru C27H23N3O2S: 453,1511, găsit: 454,1580 şi 454,1580 (M+H)

Exemplul 80: N-[6-etil-5-(chinolin-5-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general IIa şi compusul de laPrepararea 3aca derivat corespunzător de 5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină şi 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxa-borolan-2-il)chinolona ca derivat corespunzător de acid boronic, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Acesta s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi. Exemplul 80s-a obţinut ca amestec de diastereoizomeri. HRMS calculat pentru C26H22N4O2S: 454,1463, găsit: 455,1554 şi 455,1518 (M+H)

Exemplul 81: N-[6-etil-(5Sa)-5-(izochinolin-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 82: N-[6-etil-(5Ra)-5-(izochinolin-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Etapa A: 4-cloro-6-etil-5-(4-izochinolil)tieno[2,3-d]pirimidina

Utilizând Procedeul general IIc şi compusul de laPrepararea 2aca 5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină corespunzătoare şi 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)izochinolină ca derivat corespunzător de acid boronic, s-a obţinut 4-cloro-6-etil-5-(4-izochinolil)tieno[2,3-d] pirimidina.

1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ: 9,46 (s, 1H), 8,93 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,26 (m, 1H), 7,74 (m, 2H), 7,42 (m, 1H), 2,65 (q, 2H), 1,14 (t, 3H)

HRMS calculat pentru C17H12ClN3S: 325,0440; găsit 326,0502 (M+H)

Etapa B: N-[6-etil-5-(izochinolin-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general la, produsul dinEtapa A ca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şiD-fenilalaninaca derivat corespunzător de amino acid s-a obţinutN-[6-etil-5-(izochinolin-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaca amestec de diastereoizomeri. Ei au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând apă şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 81s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C26H22N4O2S: 454,1463, găsit: 455,1526 (M+H).

Compusul din Exemplul 82s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C26H22N4O2S: 454,1463, găsit: 455,1538 (M+H).

Exemplul 83: N-[6-etil-(5Sa)-5-(1-metil-1H-indol-7-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 84: N-[6-etil-(5Ra)-5-(1-metil-1H-indol-7-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general IIb şi compusul de laPrepararea 3aca derivat corespunzător de 5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină şi 1-metil-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)indol ca derivat corespunzător de acid boronic, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Ei au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 83s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C26H24N4O2S: 456,1620, găsit: 457,1671 (M+H).

Compusul din Exemplul 84s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C26H22N4O2S: 456,1620, găsit: 457,1701 (M+H)

Exemplul 85: N-[6-etil-(5Sa)-5-(3-metil-1H-indol-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 86: N-[6-etil-(5Ra)-5-(3-metil-1H-indol-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general IIc şi compusul de laPrepararea 3aca derivat corespunzător de 5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină şi 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-indol ca derivatul corespunzător de acid boronic, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Ei au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi. HRMS calculat pentru C26H24N4O2S: 456,1620, găsit: 457,1691 (M+H).

Compusul din Exemplul 86s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C26H24N4O2S: 456,1620, găsit: 457,1688 (M+H)

Exemplul 87: N-[6-etil-5-(1-metil-1H-indazol-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general IIa şi compusul de laPrepararea 3aca derivat corespunzător de 5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină şi 1-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)indazol ca derivatul corespunzător de acid boronic, s-a obţinut compusul dinExemplul 87ca un amestec de diastereoizomeri. HRMS calculat pentru C25H23N5O2S: 457,1572, găsit: 458,1646 şi 458,1648 (M+H)

Exemplul 88: N-[6-etil-(5Sa)-5-(1-metil-1H-indazol-7-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 89: N-[6-etil-(5Ra)-5-(1-metil-1H-indazol-7-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general IIa şi compusul de laPrepararea 3aca derivat corespunzător de 5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (1-metilindazol-7-il)boronic ca derivat corespunzător de acid boronic, s-a obţinut compusul dinExemplul 88ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C25H23N2O2S: 457,1572, găsit: 458,1641 (M+H)

Compusul din Exemplul 89s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C25H23N2O2S: 457,1572, găsit: 458,1634 (M+H)

Exemplul 90: N-[(5Sa)-5-(3-cloro-4-hidroxi-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 91: N-[(5Ra)-5-(3-cloro-4-hidroxi-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Compus de la Prepararea 7e500 mg(1,12 mmol) şi 157 mg NCS (1,173 mmol) s-au dizolvat în 30 mL THF şi amestecul s-a agitat la 60 °C peste noapte. Solventul s-aevaporat sub presiune redusă şi reziduul s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a obţine 2-[[5-(3-cloro-4-hidroxi-2-metilfenil)-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-fenil-propanoat de metil ca amestec de diastereoizomeri (împreună cu alţi regioizomeri). Amestecul brut s-a hidrolizat conform Procedeului general VII. Diastereoizomerii s-au purificat şiseparat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 25 mM de NH4HCO3şi acetonitril ca eluanţi.Compusul din Exemplul 90s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C24H22ClN3O3S: 467,1070, găsit: 468,1153 (M+H)

Compusul din Exemplul 91s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C24H22ClN3O3S: 467,1070, găsit: 468,1143 (M+H)

Exemplul 92: N-[(5Ra)-5-(2,3-diclorofenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 93: N-[(5Sa)-5-(2,3-diclorofenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general IIa şi compusul de laPrepararea 3aca derivat corespunzător de 5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2,3-diclorofenil)boronic ca derivat corespunzător de acid boronic, utilizând Xantphos în loc denBuPAd2, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Ei s-au separat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul dinExemplul 92s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C23H19Cl2N3O2S: 471,0575, găsit: 472,0667 (M+H). Compusul din Exemplul 93s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C23H19Cl2N3O2S: 471,0575, găsit: 472,0654 (M+H)

Exemplul 94: N-[(5Ra)-5-(3,4-dicloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 95: N-[(5Sa)-5-(3,4-dicloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general IIb şi compusul de la Prepararea 3aca derivat corespuzător de 5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (3,4-dicloro-2-metil-fenil)boronic ca derivat corespunzător de acid boronic, utilizând Xantphos ca ligand în loc de Q-Phos şi DME: apă 4:1 în loc de 2-Me-THF, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Ei au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 94s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C24H21Cl2N3O2S: 485,0731, găsit: 486,0816 (M+H)

Compusul din Exemplul 95s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C24H21Cl2N3O2S: 485,0731, găsit: 486,0797 (M+H)

Exemplul 96: N-[(5Ra)-5-(3-bromo-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 97: N-[(5Sa)-5-(3-bromo-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general IIa şi compusul de laPrepararea 3aca derivat corespunzător de 5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină şi compusul de laPrepararea B7ca derivat corespunzător de acid boronic, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Ei au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 96s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C24H22BrN3O2S: 495,0616, găsit: 496,0673 (M+H). Compusul dinExemplul 97s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C24H22BrN3O2S: 495,0616, găsit: 496,0687 (M+H)

Exemplul 98: N-[6-etil-5-(1H-indazol-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general IIa şi compusul de laPrepararea 3aca derivat corespunzător de 5-iodo-tieno[2,3-d] pirimidină şi acid 1H-indazol-4-ilboronic ca derivat corespunzător de acid boronic, apoi purificând produsul brut prin cromatografie preparativă cu fază inversă, utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şiacetonitril ca eluanţi, s-a obţinut produsul dinExemplul 98ca amestec de diastereoizomeri. HRMS calculat pentru C24H21N5O2S: 443,1416, găsit: 444,1485 şi 444,1481 (M+H)

Exemplul 99: N-[6-etil-5-(chinolin-8-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general IId şi produsul de laPrepararea 3aca derivat corespunzător de 5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid 8-chinolilboronic ca derivat corespunzător de acid boronic, s-a obţinut compusul din Exemplul 99ca amestec de diastereoizomeri. HRMS calculat C26H28N4O2S: 454,1463, găsit: 455,1558 (M+H)

Exemplul 100: N-[6-etil-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 101: N-[6-etil-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Separând diastereoizomerii dinExemplul 79, utilizând cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi,s-a obţinut compusul din Exemplul 100ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C27H23N3O2S: 453,1511, găsit: 454,1596 (M+H) Compusul din Exemplul 101s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C27H23N3O2S: 453,1511, găsit: 454,1577 (M+H)

Exemplul 102: N-[6-etenil-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 103: N-[6-etenil-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ia şi compusul de laPrepararea 4wca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şiD-fenilalaninaca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut compusul dinExemplul 102ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C27H21N3O2S: 451,1354, găsit: 452,1411 (M+H). Compusul din Exemplul 103s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C27H21N3O2S: 451,1354, găsit: 452,1412 (M+H)

Exemplul 104: N-[(5Sa)-5-(naftalen-1-il)-6-((1Z)-prop-1-en-1-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 105: N-[(5Ra)-5-(naftalen-1-il)-6-((1Z)-prop-1-en-1-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ib şi produsul de laPrepararea 4xca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şiD-fenilalaninaca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Ei au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 104s-a obţinut ca diastereoizomer care eluează întâi. HRMS calculat pentru C28H23N3O2S: 465,1511, găsit: 466,1577 (M+H). Compusul din Exemplul 104conţine de asemenea 55 % de compus dinExemplul 108.

Compusul din Exemplul 105s-a obţinut cadiastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C28H23N3O2S: 465,1511, găsit: 466,1578 (M+H). Compusul din Exemplul 105conţine de asemenea 55 % compus din Exemplul 109.

Exemplul 106: N-[(5Sa)-5-(naftalen-1-il)-6-(prop-1-en-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 107: N-[(5Ra)-5-(naftalen-1-il)-6-(prop-1-en-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ia şi compusul de laPrepararea 4yca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi D-fenilalaninaca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Ei s-au separat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 106s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C28H23N3O2S: 465,1511, găsit: 466,1581 (M+H).

Compusul din Exemplul 107s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C28H23N3O2S: 465,1511, găsit: 466,1597 (M+H).

Exemplul 108: N-{(5Sa)-5-(naftalen-1-il)-6-[(1E)-prop-1-en-1-il]tieno[2,3-d] pirimidin-4-il}-D-fenilalaninaşi

Exemplul 109: N-{(5Ra)-5-(naftalen-1-il)-6-[(1E)-prop-1-en-1-il]tieno[2,3-d] pirimidin-4-il}-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ia şi compusul de laPrepararea 4zca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şiD-fenilalaninaca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Ei s-au separat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 108s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C28H23N3O2S: 465,1511, găsit: 466,1593 (M+H). Compusul din Exemplul 109s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C28H23N3O2S: 465,1511, găsit: 466,1581 (M+H).

Exemplul 110: N-[5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-(1H-pirazol-1-il)alanina

Utilizând Procedeul general Ic şi compusul de laPrepararea 4jca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi 2-amino-3-pirazol-1-il-propanoat de metil clorhidratca derivat corespunzător de amino acid, apoi hidrolizând intermediarul format conform Procedeului general VII, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Acesta s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi şi compusul din Exemplul 110s-a obţinut ca amestec de diastereoizomeri. HRMS calculat pentru C21H20ClN5O2S: 441,1026, găsit: 442,1120 and 442,1123 (M+H).

Exemplul 111: N-[(5Ra)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-ciclopentil-D-alaninaşi

Exemplul 112: N-[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-ciclopentil-D-alanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4jca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-ciclopentil-propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Ei au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul dinExemplul 111s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C23H26ClN3O2S: 443,1434, găsit: 444,1519 (M+H). Compusul din Exemplul 112s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C23H26ClN3O2S: 443,1434, găsit: 444,1518 (M+H).

Exemplul 113: N-[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 114: N-[(5Ra)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general IIa şi compusul de la Prepararea 3aca derivat corespunzător de 5-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (3-cloro-2-metil-fenil)boronic ca derivat corespunzător de acid boronic, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Ei au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 113s-aobţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C24H22ClN3O2S: 451,1121, găsit: 452,1192 (M+H). Compusul din Exemplul 114s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C24H22ClN3O2S: 451,1121, găsit: 452,1174 (M+H).

Exemplul 115: N-[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-L-fenilalaninaşi

Exemplul 116: N-[(5Ra)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-L-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPreparareav4jca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şiL-fenilalaninaca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Ei au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 115s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C24H22ClN3O2S: 451,1121, găsit: 452,1207 (M+H). Compusul din Exemplul 116s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C24H22ClN3O2S: 451,1121, găsit: 452,1183 (M+H)

Exemplul 117: N-[(SRa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-ciclohexil-D-alanina şi

Exemplul 118: N-[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-ciclohexil-D-alanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4jca derivatul corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acidul (2R)-2-amino-3-ciclohexil-propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Ei au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 117s-a obţinut cadiastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C24H28ClN3O2S: 457,1591, găsit: 458,1672 (M+H)

Compusul din Exemplul 118s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul . HRMS calculat pentru C24H28ClN3O2S: 457,1591, găsit: 458,1663 (M+H)

Exemplul 119: N-[5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-alfa-metil-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ib şi produsul de laPrepararea 4jca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-2-metil-3-fenil-propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Acesta s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 119s-a obţinut ca amestec de diastereoizomeri. HRMS calculat pentru C25H24ClN3O2S: 465,1278, găsit: 466,1372 şi 466,1356 (M+H)

Exemplul 120: N-[(5Ra)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-hidroxi-D-fenilalaninaşi

Exemplul 121: N-[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-hidroxi-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ib, compusul de la Prepararea 4jca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(2-hidroxifenil)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul dinExemplul 120s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C24H22ClN3O3S: 467,1070, găsit: 468,1135 (M+H). Compusul dinExemplul 121s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C24H22ClN3O3S: 467,1070, găsit: 468,1162 (M+H)

Exemplul 122: (βS)-N-[(5Ra)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-beta-hidroxi-D-fenilalaninaşi

Exemplul 123: (βS)-N-[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-beta-hidroxi-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4jca derivatul corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi (2R,3S)-3-fenilserina ca derivatul corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 122s-a obţinut ca diastereoizomerul care elueazăîntâi. HRMS calculat pentru C24H22ClN3O3S: 467,1070, găsit: 468,1151 (M+H). Compusul din Exemplul 123s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C24H22ClN3O3S: 467,1070, găsit: 468,1133 (M+H)

Exemplul 124: (βR)-N-[(5Ra)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-beta-hidroxi-L-fenilalaninaşi

Exemplul 125: (βR)-N-[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-beta-hidroxi-L-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4jca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2S,3R)-2-amino-3-hidroxi-3-fenilpropionic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 124s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C24H22ClN3O3S: 467,1070, găsit: 468,1144 (M+H). Compusul din Exemplul 125s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C24H22ClN3O3S: 467,1070, găsit: 468,1153 (M+H)

Exemplul 126: N-[(5Ra)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-ciano-D-fenilalaninaşi

Exemplul 127 N-[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il] -2-ciano-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4jca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(2-cianofenil)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 126s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C25H21ClN4O2S: 476,1074, găsit: 477,1129 (M+H). Compusul din Exemplul 127s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C25H21ClN4O2S: 476,1074, găsit: 477,1134 (M+H)

Exemplul 128: N-[(5Ra)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metoxi-D-fenilalaninaşi

Exemplul 129: N-[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metoxi-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ic şi compusul de laPrepararea 4jca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(2-metoxifenil)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 128s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C25H24ClN3O3S: 481,1227, găsit: 482,1320 (M+H). Compusul din Exemplul 129s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C25H24ClN3O3S: 481,1227, găsit: 482,1319 (M+H)

Exemplul 130: N-[(SRa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2,6-difluoro-D-fenilalaninaşi

Exemplul 131: N-[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2,6-difluoro-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul generalIb şi compusul de laPrepararea 4jca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(2,6-difluoro-fenil)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 130s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C24H20ClF2N3O2S: 487,0933, găsit: 488,1009 (M+H). Compusul din Exemplul 131s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C24H20ClF2N3O2S: 487,0933, găsit: 488,1020 (M+H).

Exemplul 132: acid (2R)-2-{[(5Ra)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d] pirimidin-4-il]amino}-3-(1H-indol-4-il)propanoic şi

Exemplul 133: acid (2R)-2-{[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d] pirimidin-4-il]amino}-3-(1H-indol-4-il)propanoic

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4jca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidina şi acid (2R)-2-amino-3-(1H-indol-4-il)propanoic clorhidrat ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 132s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C26H23ClN4O2S: 490,1230, găsit: 491,1289 (M+H). Compusul dinExemplul 133s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C26H23ClN4O2S: 490,1230, găsit: 491,1309 (M+H)

Exemplul 134: 2-carbamoil-N-[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4jca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(2-carbamoil fenil)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 134s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C25H23ClN4O3S: 494,1179, găsit: 495,1255 (M+H)

Exemplul 135: N-[(5Ra)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-nitro-D-fenilalaninaşi

Exemplul 136: N-[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il] -2-nitro-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4jca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(2-nitrofenil)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul dinExemplul 135s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C24H21ClN4O4S: 496,0972, găsit: 497,1026 (M+H). Compusul din Exemplul 136s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C24H21ClN4O4S: 496,0972, găsit: 497,1045 (M+H)

Exemplul 137: N-[(SRa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(trifluorometil)-D-fenilalaninaşi

Exemplul 138: N-[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(trifluorometil)-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4jca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-[2-(trifluorometil)fenil]propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 137s-a obţinut ca diastereoizomerul eluează întâi. HRMS calculat pentru C25H21ClF3N3O2S: 519,0995, găsit: 520,1068 (M+H). Compusul din Exemplul 138s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C25H21ClF3N3O2S: 519,0995, găsit: 520,1047 (M+H)

Exemplul 139: 2-bromo-N-[(5Ra)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 140: 2-bromo-N-[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de la Prepararea 4jca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-[2-bromofenil]propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 139s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C24H21ClBrN3O2S: 529,0226, găsit: 530,0312 (M+H). Compusul din Exemplul 140s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C24H21ClBrN3O2S: 529,0226, găsit: 530,0294 (M+H)

Exemplul 141: N-[(5Ra)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[2-(dimetilamino)-2-oxoetoxi]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 142: N-[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[2-(dimetilamino)-2-oxoetoxi]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4jca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d] pirimidină şi compusul de laPrepararea A9ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul141s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C28H29ClN4O4S: 552,1598, găsit: 553,1694 (M+H).

Compusul din Exemplul 142s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C28H29ClN4O4S: 552,1598, găsit: 553,1673 (M+H)

Exemplul 143: N-[(5Ra)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(2-ciclopentiletoxi)-D-fenilalaninaşi

Exemplul 144: N-[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(2-ciclopentiletoxi)-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul generalIb şi compusul de la Prepararea 4jca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi compusul de laPrepararea A10ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 143s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C31H34ClN3O3S: 563,2009, găsit: 564,2106 (M+H). Compusul din Exemplul 144s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C31H34ClN3O3S: 563,2009, găsit: 564,2101 (M+H)

Exemplul 145: N-[(SRa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(2-feniletoxi)-D-fenilalaninaşi

Exemplul 146: N-[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(2-feniletoxi)-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4jca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi compusul de laPrepararea A11ca derivat corespunzător de aminoacid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul dinExemplul145s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C32H30ClN3O3S: 571,1696, găsit: 572,1769 (M+H). Compusul din Exemplul 146s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C32H30ClN3O3S: 571,1696, găsit: 572,1763 (M+H).

Exemplul 147: N-[(5Ra)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(3-fenilpropoxi)-D-fenilalaninaşi

Exemplul 148: N-[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(3-fenilpropoxi)-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4jca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi compusul de laPrepararea A12ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul147s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C33H32ClN3O3S: 585,1853, găsit: 586,1917 (M+H). Compusul din Exemplul 148s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C33H32ClN3O3S: 585,1853, găsit: 586,1906 (M+H).

Exemplul 149: 2-[(3-clorobenzil)oxi]-N-[(5Ra)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno [2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 150: 2- [(3-clorobenzil)oxi]-N-[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno [2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4j ca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi compusul de laPrepararea A13ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul149s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C31H27Cl2N3O3S: 591,1150, găsit: 592,1211 (M+H). Compusul din Exemplul 150s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C31H27Cl2N3O3S: 591,1150, găsit: 592,1234 (M+H).

Exemplul 151: N-[(5Ra)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-piridin-2-il-D-alaninaşi

Exemplul 152: N-[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-piridin-2-il-D-alanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4jca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(2-piridil)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 151s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C23H21ClN4O2S: 452,1074, găsit: 453,1146 (M+H). Compusul din Exemplul 152s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C23H21ClN4O2S: 452,1074, găsit: 453,1135 (M+H).

Exemplul 153: N-[(5Ra)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 154: N-[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4jca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi compusul de laPrepararea A14ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul153s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C31H36ClN5O3S: 593,2227, găsit: 594,2297 (M+H).

Compusul dinExemplul 154s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C31H36ClN5O3S: 593,2227, găsit: 594,2289 (M+H).

Exemplul 155: N-[(5Ra)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 156: N-[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[2-(dimetilamino)etoxi]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4jca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi compusul de laPrepararea A15ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul155s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C28H31ClN4O3S: 538,1805, găsit: 539,1890 (M+H). Compusul din Exemplul 156s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C28H31ClN4O3S: 538,1805, găsit: 539,1887 (M+H)

Exemplul 157: N-[(5Ra)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[3-(dimetilamino)propoxi]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 158: N-[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[3-(dimetilamino)propoxi]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4jca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şicompusul de la Prepararea A16ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 157s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C29H33ClN4O3S: 552,1962, găsit: 553,2043 (M+H). Compusul din Exemplul 158s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C29H33ClN4O3S: 552,1962, găsit: 553,2053 (M+H).

Exemplul 159: 3-ciclopropil-N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-alanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4kca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-ciclopropil-propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi.Compusul din Exemplul 159s-a obţinut ca amestec de diastereoizomeri. HRMS calculat pentru C24H23N3O2S: 417,1511, găsit: 418,1570 (M+H)

Exemplul 160: acid (2R)-{[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino} (fenil)etanoic, diastereoizomer 1 şi

Exemplul 161: acid (2R)-{[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino} (fenil)etanoic, diastereoizomer 2

Utilizând Procedeul generalIb şi compusul de la Prepararea 4kca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-2-fenil-acetic ca derivat corespunzător de amino acid, utilizând DMA ca solvent în loc de DMSO, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 160s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C26H21N3O2S: 439,1354, găsit: 440,1428 (M+H). Compusul din Exemplul 161s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C26H21N3O2S: 439,1354, găsit: 440,1412 (M+H)

Exemplul 162: N-[6-etil-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-piridin-3-il-D-alaninaşi

Exemplul 163: N-[6-etil-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-piridin-3-il-D-alanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4kca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(3-piridil)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 162s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C26H22N4O2S: 454,1463, găsit: 455,1520 (M+H). Compusul din Exemplul 163s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C26H22N4O2S: 454,1463, găsit: 455,1536 (M+H)

Exemplul 164: 3-ciclohexil-N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-alanina

Utilizând Procedeul general Ia şi compusul de laPrepararea 4kca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-ciclohexil-propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Acesta s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,02 % de HCOOH şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 164s-a obţinut ca amestec de diastereoizomeri. HRMS calculat pentru C27H29N3O2S: 459,1980, găsit: 460,2042 (M+H)

Exemplul 165: 3-ciclohexil-N-[6-etil-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-alaninaşi

Exemplul 166: 3-ciclohexil-N-[6-etil-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-alanina

Diastereoizomerii dinExemplul 164au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 165s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C27H29N3O2S: 459,1980, găsit: 460,2043 (M+H). Compusul din Exemplul 166s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C27H29N3O2S: 459,1980, găsit: 460,2058 (M+H)

Exemplul 167: N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metil-D-fenilalanina, diastereoizomer 1 şi

Exemplul 168: N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metil-D-fenilalanina, diastereoizomer 2

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4kca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi D-2'-metilfenilalanina ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 167s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat C28H25N3O2S: 467,1667, găsit: 468,1747 (M+H). Compusul din Exemplul 168s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C28H25N3O2S: 467,1667, găsit: 468,1748 (M+H)

Exemplul 169: acid (2R)-2-{[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il] amino}-4-fenilbutanoic

Utilizând Procedeul general Ia şi compusul de la Prepararea 4kca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-4-fenil-butanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Acesta s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 0,02 % de HCOOH şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 169s-a obţinut ca amestec de diastereoizomeri. HRMS calculat pentru C28H25N3O2S: 467,1667, găsit: 468,1731 (M+H)

Exemplul 170: acid (2R)-2-{[6-etil-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il] amino}-4-fenilbutanoic şi

Exemplul 171: acid (2R)-2-{[6-etil-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il] amino}-4-fenilbutanoic

Diastereoizomerii din Exemplul 169au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 170s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C28H25N3O2S: 467,1667, găsit: 468,1733 (M+H). Compusul din Exemplul 171s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C28H25N3O2S: 467,1667, găsit: 468,1726 (M+H)

Exemplul 172: N-[6-etil-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-tirozinaşi

Exemplul 173: N-[6-etil-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-tirozina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de la Prepararea 4kca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(4-hidroxifenil)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, utilizând DMA ca solvent în loc de DMSO, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul dinExemplul 172s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C27H23N3O3S: 469,1460, găsit: 470,1539 (M+H) Compusul din Exemplul 173s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C27H23N3O3S: 469,1460, găsit: 470,1534 (M+H)

Exemplul 174: N-[6-etil-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-hidroxi-D-fenilalaninaşi

Exemplul 175: N-[6-etil-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-hidroxi-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4kca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(2-hidroxifenil)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 174s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C27H23N3O3S: 469,1460, găsit: 470,1546 (M+H). Compusul din Exemplul 175s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C27H23N3O3S: 469,1460, găsit: 470,1520 (M+H)

Exemplul 176: N-[6-etil-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-4-fluoro-D-fenilalaninaşi

Exemplul 177: N-[6-etil-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-4-fluoro-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4kca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(4-fluoro-fenil)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, utilizând DMA ca solvent în loc de DMSO, s-a obţinut amestec de diastereoizomeri, care s-a separat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 176s-a obţinut ca diastereoizomer care eluează întâi. HRMS calculat pentru C27H22FN3O2S: 471,1417, găsit: 472,1493 (M+H) Compusul din Exemplul 177s-a obţinut ca diastereoizomer care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C27H22FN3O2S: 471,1417, găsit: 472,1494 (M+H)

Exemplul 178: N-[6-etil-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-fluoro-D-fenilalaninaşi

Exemplul 179: N-[6-etil-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-fluoro-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4kca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(3-fluorofenil)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec dediastereoizomeri. Aceştia s-au separat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 178s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C27H22FN3O2S: 471,1417, găsit: 472,1486 (M+H). Compusul din Exemplul 179s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C27H22FN3O2S: 471,1417, găsit: 472,1482 (M+H).

Exemplul 180: N-[6-etil-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-fluoro-D-fenilalaninaşi

Exemplul 181: N-[6-etil-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-fluoro-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4kca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(2-fluorofenil)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, utilizând DMA ca solvent în loc de DMSO, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 180s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C27H22FN3O2S: 471,1417, găsit: 472,1501 (M+H). Compusul din Exemplul 181s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C27H22FN3O2S: 471,1417, găsit: 472,1492 (M+H)

Exemplul 182: N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metoxi-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4kca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(2-metoxifenil)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Acesta s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 182s-a obţinut ca un amestec de diastereoizomeri. HRMS calculat pentru C28H25N3O3S: 483,1617, găsit: 484,1682 şi 484,1695 (M+H)

Exemplul 183: 2-cloro-N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul generalIb şi compusul de la Prepararea 4kca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(2-clorofenil)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Acesta s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 183s-a obţinut ca amestec de diastereoizomeri. HRMS calculat pentru C27H22ClN3O2S: 487,1121, găsit: 488,1198 şi 488,1199 (M+H)

Exemplul 184: N-[6-etil-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-triptofan şi

Exemplul 185: N-[6-etil-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-triptofan

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4kca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(1H-indol-3-il)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, utilizând DMA ca solvent în loc de DMSO, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul dinExemplul 184s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C29H24N4O2S: 492,1620, găsit 493,1693 (M+H). Compusul din Exemplul 185s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C29H24N4O2S: 492,1620, găsit 493,1690 (M+H)

Exemplul 186: N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-naftalen-1-il-D-alanina, diastereoizomer 1 şi

Exemplul 187: N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-naftalen-1-il-D-alanina, diastereoizomer 2

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4kca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acidul (2R)-2-amino-3-(1-naftil)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, utilizând DMA ca solvent în loc de DMSO, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 186s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C31H25N3O2S: 503,1667, găsit: 504,1754 (M+H). Compusul din Exemplul 187s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C31H25N3O2S: 503,1667, găsit: 504,1758 (M+H).

Exemplul 188: acid (2R)-bifenil-2-il{[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino}etanoic, diastereoizomer 2

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4kca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acidul (R)-amino-bifenil-2-il-acetic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 188s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C32H25N3O2S: 515,1667, găsit: 516,1747 (M+H).

Exemplul 189: acid (2R)-bifenil-3-il{[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino}etanoic, diastereoizomer 1

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4k ca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidina şi acid (R)-amino-bifenil-3-il-acetic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri.Aceştia s-au separat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi. Compusul dinExemplul 189s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C32H25N3O2S: 515,1667, găsit: 516,1743 (M+H)

Exemplul 190: N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-histidina

Utilizând Procedeul general Ia şi compusul de la Prepararea 4kca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(1H-imidazol-4-il)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Acesta s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % deTFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 190s-a obţinut ca amestec de diastereoizomeri. HRMS calculat pentru C24H21N5O2S: 443,1416, găsit: 444,1462 şi 444,1471 pentru cei doi diastereoizomeri (M+H)

Exemplul 191: N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-piridin-2-il-D-alanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4kca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(2-piridil)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Acesta s-a purificat princromatografie preparativă cufază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul Exemplul 191s-a obţinut ca amestec de diastereoizomeri. HRMScalculat pentru C26H22N4O2S454,1463, găsit: 455,1537 şi 455,1558 pentru cei doi diastereoisomeri (M+H).

Exemplul 192: N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-piridin-3-il-D-alanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4kca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi 3-(3-piridil)-D-alanină ca derivat de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Acesta s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul dun Exemplul 192s-a obţinut ca amestec de diastereoizomeri. HRMS calculat pentru C26H22N4O2S: 454,1445, găsit: 455,1545 şi 455,1553 pentru cei doi diastereoizomeri (M+H).

Exemplul 193: N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-piridin-4-il-D-alanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de la Prepararea 4kca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(4-piridil)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec dediastereoizomeri. Acesta s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 193s-a obţinut ca amestec de diastereoizomeri. HRMS calculat pentru C26H22N4O2S: 454,1440, găsit: 455,1540 şi 455,1545 pentru cei doi diastereoizomeri (M+H)

Exemplul 194: N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-1-metil-D-histidina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4kca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(1-metil-imidazol-4-il)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut amestec de diastereoizomeri. Acesta s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 194s-a obţinut ca amestec de diastereoizomeri. HRMS calculat pentru C25H23N5O2S: 457,1572, găsit: 458,1641 şi 458,1654 pentru cei doi diastereoizomeri (M+H)

Exemplul 195: 1-benzil-N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-histidina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4kca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(1-benzil-imidazol-4-il)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut amestec de diastereoizomeri. Acesta s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 195s-a obţinut ca amestec de diastereoizomeri. HRMS calculat pentru C31H27N5O2S: 533,1885, găsit: 534,1934 şi 534,1934 pentru cei doi diastereoizomeri (M+H)

Exemplul 196:N-[6-metil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ia şi compusul de la Prepararea 41ca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi D-fenilalaninaca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Acesta s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţia apoasă 0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 196s-a obţinut ca amestec de diastereoizomeri. HRMS calculat pentru C26H21N3O2S: 439,1354, găsit: 440,1421 şi 440,1429 (M+H)

Exemplul 197: N-[6-(hidroximetil)-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 198: N-[6-(hidroximetil)-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ia şi compusul de laPrepararea 4mca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şiD-fenilalaninaca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 197s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C26H21N3O3S: 455,1304, găsit: 456,1356 (M+H). Compusul din Exemplul 198s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C26H21N3O3S: 455,1304, găsit: 456,1390 (M+H)

Exemplul 199: N-[6-acetil-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 200: N-[6-acetil-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ia şi compusul de la Prepararea 4oca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d] pirimidină şiD-fenilalaninaca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 199s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C27H21N3O3S: 467,1304, găsit: 468,1379 (M+H)

Compusul din Exemplul 200s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C27H21N3O3S: 467,1304, găsit: 468,1377 (M+H)

Exemplul 201: N-[5-(naftalen-1-il)-6-(propan-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina, diastereoizomer 1 şi

Exemplul 202: N-[5-(naftalen-1-il)-6-(propan-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina, diastereoizomer 2

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4qca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d] pirimidină şiD-fenilalaninaca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut amestec de diastereoizomeri. Aceştia s-au separat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 201s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C28H25N3O2S: 467,1667, găsit: 468,1731 (M+H). Compusul din Exemplul 202s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C28H25N3O2S: 467,1667, găsit: 468,1720 (M+H)

Exemplul 203: N-[6-(1-hidroxietil)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina, diastereoizomer 1 şi

Exemplul 204: N-[6-(1-hidroxietil)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina, diastereoizomer 2

Utilizând Procedeul general Ia şi compusul de laPrepararea 4n1ca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno [2,3-d]pirimidină şiD-fenilalaninaca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 203s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C27H23N3O3S: 469,1460, găsit: 470,1511 (M+H). Compusul din Exemplul 204s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C27H23N3O3S: 469,1460, găsit: 470,1536 (M+H)

Exemplul 205: N-[6-(1-hidroxietil)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina, diastereoizomer 3 şi

Exemplul 206: N-[6-(1-hidroxietil)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina, diastereoizomer 4

Utilizând Procedeul general Ia şi compusul de laPrepararea 4n2a derivat corespunzător de 4-cloro-tieno [2,3-d]pirimidină şi D-fenilalaninaca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 205s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C27H23N3O3S: 469,1460, găsit: 470,1539 (M+H). Compusul din Exemplul 206s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C27H33N3O3S: 469,1460, găsit: 470,1534 (M+H)

Exemplul 207: N-[6-(difluorometil)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina, diastereoizomer 1 şi

Exemplul 208: N-[6-(difluorometil)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina, diastereoizomer 2

Utilizând Procedeul general Ia şi compusul de laPrepararea 4rca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şiD-fenilalaninaca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 207s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C26H19F2N3O2S: 475,1166, găsit: 476,1242 (M+H). Compusul din Exemplul 208s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C26H19F2N3O2S: 475,1166, găsit: 476,1244 (M+H)

Exemplul 209: N-[6-(2-hidroxipropan-2-il)-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 210: N-[6-(2-hidroxipropan-2-il)-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ia şi compusul de laPrepararea 4pca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şiD-fenilalaninaca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 209s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C28H25N3O3S: 483,1617, găsit: 484,1689 (M+H). Compusul din Exemplul 210s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C28H25N3O3S: 483,1617, găsit: 484,1704 (M+H)

Exemplul 211: N-[6-iodo-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ia şi compusul de laPrepararea 4sca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şiD-fenilalaninaca derivat corespunzător de amino acid, utilizând DMA ca solvent în loc de DMSO, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Acesta s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 211s-a obţinut ca amestec de diastereoizomeri. HRMS calculat pentru C25H18IN3O2S: 551,0164, găsit: 552,0258 (M+H)

Exemplul 212: N-[(5Ra)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etenil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 213: N-[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-etenil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general IIc şi compusul de laPrepararea 5aca derivat corespunzător de 6-iodo-tieno [2,3-d]pirimidină şi ester pinacolic al acidului vinilboronic ca derivat corespunzător de acid boronic, s-a obţinut amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 212s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C24H20ClN3O2S: 449,0965, găsit: 450,1038 (M+H). Compusul din Exemplul 213s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C24H20ClN3O2S: 449,0965, găsit: 450,1050 (M+H)

Exemplul 214: N-[(5Ra)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-(prop-1-en-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 215: N-[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-(prop-1-en-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general IIc şi compusul de laPrepararea 5aca derivat corespunzător de 6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină şi 2-izopropenil-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan ca derivat corespunzător de acid boronic, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 214s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C25H22ClN3O2S: 463,1121, găsit: 464,1178 (M+H). Compusul din Exemplul 215s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C25H22ClN3O2S: 463,1121, găsit: 464,1179 (M+H)

Exemplul 216: N-[(5Ra)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-ciclopropil-tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 217: N-[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-ciclopropil-tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general IIa şi compusul de laPrepararea 5aca derivat corespunzător de 6-iodo-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid ciclopropilboronic ca derivat corespunzător de acid boronic şi Bu4NOH în loc de K2CO3, s-a obţinut amestec de diastereoizomeri. Ei s-au separat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând eluanţi soluţie apoasă0,1 % TFA şi acetonitril. Compusul Exemplul 216s-a obţinut ca diastereoizomer care eluează întâi. HRMS calculat pentru C25H22ClN3O2S: 463,1121, găsit: 464,1177 (M+H). Compusul Exemplul 217s-a obţinut ca diastereoizomer care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C25H22ClN3O2S: 463,1121, găsit: 464,1182 (M+H)

Exemplul 218: N-[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-(propan-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-L-fenilalaninaşi

Exemplul 219: N-[(5Ra)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-(propan-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-L-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4u ca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şiL-fenilalaninaca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut amestec de diastereoizomeri. Aceştia s-au separat prin cromatografie rapidă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 218s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C25H24ClN3O2S: 465,1278, găsit: 466,1371 (M+H). Compusul din Exemplul 219s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C25H24ClN3O2S: 465,1278, găsit: 466,1361 (M+H)

Exemplul 220: N-[(5Ra)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-(propan-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 221: N-[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-(propan-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4uca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şiD-fenilalaninaca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativăcu fază inversă utilizând soluţie apoasă 0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 220s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C25H24ClN3O2S: 465,1278, găsit: 466,1348 (M+H). Compusul din Exemplul 221s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C25H24ClN3O2S: 465,1278, găsit: 466,1350 (M+H)

Exemplul 222: N-[(5Ra)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-(propan-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-metoxi-D-fenilalaninaşi

Exemplul 223: N-[(5Sa)-5-(3-cloro-2-metilfenil)-6-(propan-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-metoxi-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general Ib şi compusul de laPrepararea 4uca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(2-metoxifenil)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şiacetonitrile ca eluanţi. Compusul din Exemplul 222s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C26H26ClN3O3S: 495,1383, găsit: 496,1460 (M+H). Compusul din Exemplul 223s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C26H26ClN3O3S: 495,1383, găsit: 496,1454 (M+H)

Exemplul 224: N-[(5Ra)-5-(3-cloro-1H-indol-4-il)-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 225: N-[(5Sa)-5-(3-cloro-1H-indol-4-il)-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Compus de laPrepararea 7h522 mg(1 mmol), 164 mg NCS (1,2 mmol), 15 mL CCl4şi 10 mL THF s-au agitat la r.t. sub atmosferă de N2pentru 2 ore. Apoi amestecul s-a turnat în apă cu gheaţă şi s-a extras cu DCM. Fazele organice combinate s-au uscat pe Na2SO4, s-au filtrat şi filtratul s-a concentrat sub presiune redusă. Diastereoizomerii formaţi s-au separat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 224s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul.HRMS calculat pentru C25H21ClN4O2S: 476,1074, găsit: 477,1133 (M+H). Compusul din Exemplul 225s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C25H21ClN4O2S: 476,1074, găsit: 477,1137 (M+H)

Exemplul 226: N-[(5Sa)-5-(3-bromo-1H-indol-4-il)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalaninaşi

Exemplul 227: N-[(5Ra)-5-(3-bromo-1H-indol-4-il)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Compus de laPrepararea7h522 mg(1 mmol), 216 mg NBS (1,2 mmol), 15 mL CCl4şi 5 mL THF s-au agitat la at r.t. sub atmosferă de N2pentru 2 ore. Apoi amestecul s-a turnat în apă cu gheaţă şi s-a extras cu DCM. Fazele organice combinate s-au uscat pe Na2SO4, s-au filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Diastereoizomerii formaţi s-au separat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 226s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C25H21BrN4O2S: 520,0569, găsit: 521,0653 (M+H). Compusul din Exemplul 227s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C25H21BrN4O2S: 520,0569, găsit: 521,0629 (M+H)

Exemplul 228: N-[6-etil-(5Sa)-5-(3-iodo-1H-indol-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina şi

Exemplul 229: N-[6-etil-(5Ra)-5-(3-iodo-1H-indol-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Compus de laPrepararea 7h522 mg(1 mmol), 196 mg KOH (3,5 mmol), 15 mL DMF şi 267 mg iod (1,05 mmol) s-au agitat la r.t. sub atmosferă de N2pentru 18 ore. Apoi amestecul s-a turnat în apă cu gheaţă şi s-a adăugat soluţie saturată de Na2S2O3. Amestecul s-a extras cu DCM, fazele organice combinate s-au uscat pe Na2SO4, s-au filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Diastereoizomerii formaţi au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 228s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C25H21IN4O2S: 568,043, găsit: 569,0498 (M+H). Compusul din Exemplul 229s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C25H21IN4O2S: 568,043, găsit: 569,0502 (M+H)

Exemplul 230: N-((5Sa)-5-{3-cloro-1-[2-(dimetilamino)etil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-D-fenilalaninaşi

Exemplul 231: N-((5Ra)-5-{3-cloro-1-[2-(dimetilamino)etil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VIII şi compusul de laPrepararea 7ica derivat corespunzător de indol şi 2-(N,N-dimetilamino)etanol ca derivat corespunzător de alcool, s-a obţinut compusul din Exemplul 230ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C29H30ClN5O2S: 547,1809, găsit: 548,1902 (M+H). Compusul din Exemplul 231s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C29H30ClN5O2S: 547,1809, găsit: 548,1889 (M+H)

Exemplul 232: N-((5Ra)-5-{3-cloro-1-[2-(pirolidin-1-il)etil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-D-fenilalaninaşi

Exemplul 233: N-((5Sa)-5-{3-cloro-1-[2-(pirolidin-1-il)etil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VIII şi compusul de laPrepararea 7ica derivat corespunzător de indol şi 2-pirolidin-1-iletanol ca derivat corespunzător de alcool, s-a obţinut compusul din Exemplul 232ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C31H32ClN5O2S: 573,1965, găsit: 574,2059 (M+H). Compusul din Exemplul 233s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C31H32ClN5O2S: 573,1965, găsit: 574,2060 (M+H)

Exemplul 234: N-((5Ra)-5-{3-cloro-1-[2-(piperidin-1-il)etil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-D-fenilalaninaşi

Exemplul 235: N-((5Sa)-5-{3-cloro-1-[2-(piperidin-1-il)etil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VIII şi compusul de laPrepararea 7ica derivat corespunzător de indol şi 2-(1-piperidil)etanol ca derivat corespunzător de alcool, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 234s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C32H34ClN5O2S: 587,2122, găsit: 588,2201 (M+H). Compusul din Exemplul 235s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C32H34ClN5O2S: 587,2122, găsit: 588,2199 (M+H)

Exemplul 236: N-((5Ra)-5-{3-cloro-1-[2-(morfolin-4-il)etil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-D-fenilalaninaşi

Exemplul 237: N-((5Sa)-5-{3-cloro-1-[2-(morfolin-4-il)etil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VIII şi compusul de laPrepararea 7ica derivat corespunzător de indol şi 2-morfolinoetanol ca derivat corespunzător de alcool, s-a obţinut compusul din Exemplul 236ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C31H32ClN5O3S: 589,1914, găsit: 590,1998 (M+H). Compusul din Exemplul 237s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C31H32ClN5O3S: 589,1914, găsit: 590,1994 (M+H).

Exemplul 238: N-((5Sa)-5-{3-cloro-1-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-D-fenilalaninaşi

Exemplul 239: N-((5Ra)-5-{3-cloro-1-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VIII şi compusul de laPrepararea 7ica derivat corespunzător de indol şi 2-(4-metilpiperazin-1-il)etanol ca derivat corespunzător de alcool, s-a obţinut compusul din Exemplul 238ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C32H35ClN6O2S: 602,2231, găsit: 603,2312 (M+H). Compusul din Exemplul 239s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C32H35ClN6O2S: 602,2231, găsit: 603,2311 (M+H)

Exemplul 240: N-((5Sa)-5-{3-cloro-1-[3-(4-metilpiperazin-1-il)propil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-D-fenilalaninaşi

Exemplul 241: N-((5Ra)-5-{3-cloro-1-[3-(4-metilpiperazin-1-il)propil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-D-fenilalanina

Utilizând Procedeul general VIII şi compusul de laPrepararea 7ica derivat corespunzător de indol şi 3-(4-metilpiperazin-1-il)propan-1-ol ca derivat corespunzător de alcool, s-a obţinut compusul din Exemplul 240ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C33H37ClN6O2S: 616,2387, găsit: 617,2466 (M+H). Compusul din Exemplul 241s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C33H37ClN6O2S: 616,2387, găsit: 617,2473 (M+H)

Exemplul 242: 3-ciclohexil-N-[6-etil-5-(1H-indol-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-alanina, diastereoizomer 1 şi

Exemplul 243: 3-ciclohexil-N-[6-etil-5-(1H-indol-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-alanina, diastereoizomer 2

Utilizând Procedeul general Ia şi compusul de laPrepararea 4vca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-ciclohexil-propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă0,1 % de TFA şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 242s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C25H28N4O2S: 448,1933, găsit: 449,1994 (M+H). Compusul din Exemplul 243s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C25H28N4O2S: 448,1933, găsit: 449,2006 (M+H)

Exemplul 244: N-[(5Sa)-5-(3-cloro-1H-indol-4-il)-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-piridin-2-il-D-alanina şi

Exemplul 245: N-[(5Ra)-5-(3-cloro-1H-indol-4-il)-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-piridin-2-il-D-alanina

Utilizând Procedeul general Ia şi compusul de laPrepararea 7jca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d]pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(2-piridil)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 244s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C24H20ClN5O2S: 477,1026, găsit: 478,1087 (M+H). Compusul din Exemplul 245s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C24H20ClN5O2S: 477,1026, găsit: 478,1089 (M+H)

Exemplul 246: N-((5Sa)-5-{3-cloro-1-[2-(morfolin-4-il)etil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-3-piridin-2-il-D-alanina

Etapa A: (2R)-2-[[(5Sa)-5-(3-cloro-1H-indol-4-il)-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-piridil)propanoat de metil

Compus dinExemplul 2440,13 g (0,27 mmol) s-a dizolvat în 13 mL MeOH, apoi s-au adăugat0,3 mL cc. H2SO4şi amestecul s-a agitat la r.t. până când nu s-a mai observat conversie. Apoi s-a concentrat sub presiune redusăşi s-a adăugat soluţie apoasă saturată de NaHCO3şi amestecul s-a agitat. Precipitatul format s-a colectat prin filtrare pentru a obţine (2R)-2-[[(5Sa)-5-(3-cloro-1H-indol-4-il)-6-etil-tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]amino]-3-(2-piridil)propanoat de metil.

Etapa B: Exemplul 246

Utilizând Procedeul general VIII şi (2R)-2-[[(5Sa)-5-(3-cloro-1H-indol-4-il)-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-piridil)propanoat de metil ca derivat corespunzător de indolşi 2-morfolinoetanol ca derivat corespunzător de alcool, s-a onţinut compusul din Exemplul 246. HRMS calculat pentru C30H31ClN6O3S: 590,1867, găsit: 591,1938 (M+H)

Exemplul 247: N-((5Ra)-5-{3-cloro-1-[2-(morfolin-4-il)etil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-3-piridin-2-il-D-alanina

Etapa A: (2R)-2-[[(5Ra)-5-(3-cloro-1H-indol-4-il)-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-piridil)propanoat de metil

Compus dinExemplul 2450,157 g (0,33 mmol) s-a dizolvat în 15 mL MeOH, apoi s-a adăugat0,3 mL cc. H2SO4şi amestecul s-a agitat la r.t. până nu s-a mai observat conversie. Apoi s-a concentrat sub presiune redusă şi s-a adăugat soluţie apoasă saturată de NaHCO3şi amestecul s-a agitat. Precipitatul format s-a colectat prin filtrare pentru a obţine (2R)-2-[[(5Ra)-5-(3-cloro-1H-indol-4-il)-6-etil-tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]amino]-3-(2-piridil)propanoat de metil.

Etapa B: Exemplul 247

Utilizând Procedeul general VIII şi (2R)-2-[[(5Ra)-5-(3-cloro-1H-indol-4-il)-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-piridil)propanoat de metil ca derivat corespunzător de amină şi 2-morfolinoetanol ca alcool corespunzător s-a obţinut compusul din Exemplul 247. HRMS calculat pentru C30H31ClN6O3S: 590,1867, găsit: 591,1918 (M+H)

Exemplul 248: N-((5Sa)-5-{3-cloro-1-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-3-piridin-2-il-D-alanina

Etapa A: (2R)-2-[[(5Sa)-5-(3-cloro-1H-indol-4-il)-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-piridil)propanoat de metil

Compus dinExemplul 2440,13 g(0,27 mmol) s-a dizolvat în 13 mL MeOH, apoi s-a adăugat 0,3 mL cc. H2SO4şi amestecul s-a agitat la r.t. până nu s-a mai observat conversie. Apoi s-a concentrat sub presiune redusă şi s-a adăugat soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi amestecul s-a agitat. Precipitatul format s-a colectat prin filtrare pentru a obţine (2R)-2-[[(5Sa)-5-(3-cloro-1H-indol-4-il)-6-etil-tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]amino]-3-(2-piridil)propanoat de metil.

Etapa B: Exemplul 248

Utilizând Procedeul general VIII şi (2R)-2-[[(5Sa)-5-(3-cloro-1H-indol-4-il)-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-piridil)propanoat de metil ca derivat corespunzător de indol şi 2-(4-metilpiperazin-1-il)etanol ca alcool corespunzător s-a obţinut compusul din Exemplul 248. HRMS calculat pentru C31H34ClN7O2S: 603,2183, găsit: 302,6172 (M+2H)

Exemplul 249: N-((5Ra)-5-{3-cloro-1-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-3-piridin-2-il-D-alanina

Etapa A: (2R)-2-[[(5Ra)-5-(3-cloro-1H-indol-4-il)-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-piridil)propanoat de metil

Compus din Exemplul 2450,157 g (0,33 mmol) s-a dizolvat în 15 mL MeOH, apoi s-a adăugat 0,3 mL cc. H2SO4şi amestecul s-a agitat la r.t. până nu s-a mai observat conversie. Apoi s-aconcentrat sub presiune redusă şi s-a adăugat soluţie apoasă saturată de NaHCO3şi amestecul s-a agitat. Precipitatul format s-a colectat prin filtrare pentru a obţine (2R)-2-[[(5Ra)-5-(3-cloro-1H-indol-4-il)-6-etil-tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]amino]-3-(2-piridil)propanoat de metil.

Etapa B: Exemplul 249

Utilizând Procedeul general VIII şi (2R)-2-[[(5Ra)-5-(3-cloro-1H-indol-4-il)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-piridil)propanoat de metil ca derivat corespunzător de indol şi 2-(4-metilpiperazin-1-il)etanol ca alcool corespunzător, s-a obţinut compusul dinExemplul 249. HRMS calculat pentru C31H34ClN7O2S: 603,2183, găsit: 302,6164 (M+2H)

Exemplul 250: N-[6-(difluorometil)-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-piridin-2-il-D-alanina şi

Exemplul 251: N-[6-(difluorometil)-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-piridin-2-il-D-alanina

Utilizând Procedeul generalIa şi compusul de laPrepararea 4rca derivat corespunzător de 4-cloro-tieno[2,3-d] pirimidină şi acid (2R)-2-amino-3-(2-piridil)propanoic ca derivat corespunzător de amino acid, s-a obţinut un amestec de diastereoizomeri. Aceştia au fost separaţi prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi. Compusul din Exemplul 250s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează întâi. HRMS calculat pentru C25H18F2N4O2S: 476,1119, găsit: 477,1195 (M+H). Compusul din Exemplul 251s-a obţinut ca diastereoizomerul care eluează ultimul. HRMS calculat pentru C25H18F2N4O2S: 476,1119, găsit: 477,1182 (M+H)

Exemplul 252: N-[(5Sa)-5-(naftalen-1-il)-6-propiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Compus din Exemplul 108266 mg (0,57 mmol) s-a dizolvat în 10 mL MeOH şi 2 mL AcOH, apoi s-au adăugat 61 mg 10 % Pd/C. Amestecul s-a agitat sub atmosferă de H2la 40°C pentru 2 ore. S-a filtrat prin Celite şi filtratul s-a concentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi pentru a obţine compusul din Exemplul 252, HRMS calculat pentru C28H25N3O2S: 467,1667, găsit: 468,1746 (M+H)

Exemplul 253: N-[(5Ra)-5-(naftalen-1-il)-6-propiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina

Compus dinExemplul 109266 mg(0,57 mmol) s-a dizolvat în 10 mL MeOH şi 2 mL AcOH, apoi s-au adăugat 61 mg 10 % Pd/C. Amestecul s-a agitat sub atmosferă de H2la 40 °C pentru 2 ore. S-a filtrat prin Celite şi filtratul s-a concentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 40 mM de NH4OAc (pH = 4, corectat cu AcOH) şi acetonitril ca eluanţi pentru a obţine compusul dinExemplul 253. HRMS calculat pentru C28H25N3O2S: 467,1667, găsit: 468,1736 (M+H)

Exemplul 254: N-[6-etil-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalaninat de metil

Compus din Exemplul 101102 mg (0,225 mmol) s-a dizolvat în 2 mL MeOH şi amestecul s-a răcit la 0°C sub atmosferă de N2. Apoi s-au adăugat 135 µL soluţie diazometil(trimetil)silan (2M în Et2O) şi amestecul s-a lăsat să se încălzească până la r.t. Apoi amestecul s-a concentrat in vacuo şi s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a obţine compusul dinExemplul 254. HRMS calculat pentru C28H25N3O2S: 467,1667, găsit: 468,1746 (M+H)

Exemplul 255: N-[6-etil-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalaninat de metil

Compus dinExemplul 100102 mg (0,225 mmol) s-a dizolvat în 2 mL MeOH şi amestecul s-a răcit la 0 °C sub atmosferă de N2. Apoi s-au adăugat 135 µL soluţie de diazometil(trimetil)silan (2M în Et2O) şi amestecul s-a lăsat să se încălzească la r.t. Amestecul s-a concentrat in vacuo şi s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a obţine compusul din Exemplul 255. HRMS calculat pentru C28H25N3O2S: 467,1667, găsit: 468,1737 (M+H)

Exemplul 256: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il) etoxi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxifenil)pirimidin-4-il] metoxi}-D-fenilalaninat de etil

Compusul dinExemplul 7s-a dizolvat în soluţie de HCl (20 mL/mmol, 1,25M în EtOH) şi amestecul s-a agitqat la r.t. peste noapte. Apoi amestecul s-a neutralizat cu soluţie de NaHCO3şis-a extras cu DCM. Faza organică s-a uscat pe Na2SO4,s-a filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 25 mM de NH4HCO3şi acetonitril ca eluanţi pentru a da compusul dinExemplul 256. HRMS calculat pentru C49H49ClFN7O5S: 901,3188, găsit: 902,3225 (M+H)

Exemplul 257: 2-[(1-tert-butil-1H-pirazol-5-il)metoxi]-N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalaninat de etil

Compusul din Exemplul 40s-a dizolvat în soluţie de HCl (20 mL/mmol, 1,25M în EtOH) şi amestecul s-a agitat la r.t. peste noapte. Apoi amestecul s-a neutralizat cu soluţie de NaHCO3şi s-a extras cu DCM. Faza organică s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi filtratul s-a concentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 25 mM de NH4HCO3şi acetonitril ca eluanţi pentru a da compusul din Exemplul 257. HRMS calculat pentru C42H50ClN7O4S: 783,3334, găsit: 392,6744 (M+2H)

Exemplul 258: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il) etoxi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxifenil)pirimidin-4-il] metoxi}-D-fenilalaninat de etil

Compusul dinExemplul 45s-a dizolvat în soluţie de HCl (20 mL/mmol, 1,25M în EtOH) şi amestecul s-a agitat la r.t. peste noapte. Apoi amestecul s-a neutralizat cu soluţie de NaHCO3şi s-a extras cu DCM. Faza organică s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi filtratul s-a concentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 25 mM de NH4HCO3şi acetonitril ca eluanţi pentru a da compusul dinExemplul 258. HRMS calculat pentru C46H48ClN7O5S: 845,3126, găsit: 423,6650 (M+H)

Exemplul 259: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2-metilfenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxifenil)pirimidin-4-il] metoxi}-D-fenilalaninat de etil

Compusul din Exemplul 49s-a dizolvat în soluţie de HCl (20 mL/mmol, 1,25M în EtOH) şi amestecul s-a agitat la r.t. peste noapte. Apoi amestecul s-a neutralizat cu soluţie de NaHCO3şi s-a extras cu DCM. Faza organică s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 25 mM de NH4HCO3şi acetonitril ca eluanţi pentru a da compusul dinExemplul 259. HRMS calculat pentru C43H43ClN6O5S: 790,2704, găsit: 396,1425 (M+2H)

Exemplul 260: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2-metilfenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-({2-[2-(2-metoxietoxi)fenil]pirimidin-4-il} metoxi)-D-fenilalaninat de etil

Compusul dinExemplul 51s-a dizolvat în soluţie de HCl (20 mL/mmol, 1,25M în EtOH) şi amestecul s-a agitat la 60 °C până nu s-a mai observat conversie. Apoi amestecul s-a neutralizat cu soluţie de NaHCO3şi s-a extras cu DCM. Faza organică s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi filtratul s-a concentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 25 mM de NH4HCO3şi acetonitril ca eluanţi pentru a obţine compusul dinExemplul 260. HRMS calculat pentru C48H48ClFN6O6S: 890,3029, găsit: 891,3105 (M+H)

Exemplul 261: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2-metilfenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-({2-[2-(2-metoxietoxi)fenil]pirimidin-4-il} metoxi)-D-fenilalaninat de(5-metil-2-oxo-1,3-dioxol-4-il)metil

Compus dinExemplul 511 eq. şi1,1 eq. 4-(clorometil)-5-metil-1,3-dioxol-2-onă s-au dizolvat în DMF (10 mL/mmol), apoi s-au adăugat 2 eq. NaI şi 2 eq. Cs2CO3şi amestecul s-a agitat până când nu s-a mai observat conversie. Apoi amestecul s-a injectat direct şi s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 25 mM de NH4HCO3şi acetonitril ca eluanţi pentru a obţine compusul din Exemplul 261. HRMS calculat pentru C51H48ClFN6O9S: 974,2876, găsit: 975,2949 (M+H)

Exemplul 262: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxifenil)pirimidin-4-il] metoxi}-D-fenilalaninat de1-[(etoxicarbonil)oxi]etil

Exemplul 263: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxifenil)pirimidin-4-il] metoxi}-D-fenilalaninat de1-[(dimetilcarbamoil)oxi]etil

Exemplul 264: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-({2-[3-(hidroximetil) fenil]pirimidin-4-il}metoxi)-D-fenilalanina

Exemplul 265: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-({2-[2-(hidroximetil) piridin-4-il] pirimidin-4-il}metoxi)-D-fenilalanina

Exemplul 266: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-({2-[6-(hidroximetil) piridazin-4-il] pirimidin-4-il}metoxi)-D-fenilalanina

Exemplul 267: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-({2-[6-(hidroximetil) pirazin-2-il] pirimidin-4-il}metoxi)-D-fenilalanina

Exemplul 268: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2'-(hidroximetil)-2,5'-bipirimidin-4-il]metoxi}-D-fenilalanina

Exemplul 269: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-({2-[4-(fosfonooxi) fenil]pirimidin-4-il}metoxi)-D-fenilalanina

Exemplul 270: N-[5-{3,5-dicloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il) etoxi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxifenil) pirimidin-4-il]metoxi}-D-fenilalanina

Etapa A: 4-bromo-2,6-dicloro-3,5-dimetil-fenol

S-au dizolvat 30,16 g 4-bromo-3,5-dimetil-fenol (150 mmol) într-un amestec de 75 mL 1,2-dicloroetan şi 75 mL acetonitril, apoi s-au adăugat în porţiuni 40,06 g NCS (300 mmol) şi amestecul s-a agitat la r.t. până nu s-a mai observat conversie. Amestecul de reacţie s-a concentrat sub presiune redusă, reziduul s-a dizolvat în DCM, s-a spălat cu apă şi saramură. Stratul organic s-a uscat pe Na2SO4şi s-a concentrat sub presiune redusă şi s-a utilizat în etapa următoare fără purificare suplimentară. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 10,10 (s, 1H), 2,46 (s, 6H)

Etapa B: 1-bromo-3,5-dicloro-4-metoxi-2,6-dimetil-benzen

La o soluţie de 26,0 g 4-bromo-2,6-dicloro-3,5-dimetil-fenol (96,3 mmol) şi 26,6 g K2CO3 (192,6 mmol) în 300 mL MeCN s-a adăugat 6,6 mL MeI (105,9 mmol) şi amestecul s-a agitat la r.t. până nu s-a mai observat conversie. Solidele s-au filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a dizolvat în DCM, s-a spălat cu apă şi saramură. Straturile organice s-au uscat pe Na2SO4şi s-au concentrat sub presiune redusă şi s-a utilizat în etapa următoare fără purificare suplimentară. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 3,78 (s, 3H), 2,49 (s, 6H)

Etapa C: 2-(3,5-dicloro-4-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan

S-au dizolvat 10,0 g 1-bromo-3,5-dicloro-4-metoxi-2,6-dimetil-benzen (35,2 mmol) în 360 mL THF anhidru sub azot şi s-a răcit la -78 °C cu zăpadă carbonică-acetonă. 23,2 mL nBuLi (1,6 M in hexani) (37,0 mmol) s-au adăugat şi amestecul s-a agitat pentru 15 minute, apoi s-au adăugat8,6 mL 2-izopropoxi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan (42,24 mmol) şi amestecul s-a lăsat să se încălzească până la r.t. s-a stopat cu saramură, s-a extras cu DCM, s-a uscat pe Na2SO4, s-a filtrat şi s-a concentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a obţine 2-(3,5-dicloro-4-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 3,81 (s, 3H), 2,33 (s, 6H), 1,34 (s, 12H)

Etapa D: 4-(3,5-dicloro-4-metoxi-2,6-dimetil-fenil)tiofen-3-carboxilat de etil

S-au dizolvat3,92 g 4-bromotiofen-3-carboxilat de etil (16,68 mmol) şi9,9 g 2-(3,5-dicloro-4-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan (30,0 mmol) în 140 mL dioxan, apoi s-au adăugat 10,87 g Cs2CO3 (33,36 mmol) dizolvat în 40 mL apă. Apoi 590 mg AtaPhos (0,83 mmol) s-a adăugat şi amestecul s-a agitat sub azot la temperatura de reflux până nu s-a mai observat conversie. Apoi s-a diluat cu DCM şi saramură. După separarea fazelor, faza apoasă s-a extras cu DCM. Straturile organice s-au combinat şi uscat pe Na2SO4, s-au filtrat şi filtratul s-a concentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a obţine 4-(3,5-dicloro-4-metoxi-2,6-dimetil-fenil)tiofen-3-carboxilat de etil.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8,53 (d, 1H), 7,47 (d, 1H), 4,02 (q, 2H), 3,83 (s, 3H), 1,95 (s, 6H), 1,00 (t, 3H)

HRMS (M+NH4)+ = 376,0538

Etapa E: 4-(3,5-dicloro-4-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-2,5-diiodo-tiofen-3-carboxilat de etil

S-au dizolvat 2,65 g 4-(3,5-dicloro-4-metoxi-2,6-dimetil-fenil)tiofen-3-carboxilat (7,38 mmol) în 75 mL acetonitril, apoi s-au adăugat2,2 mL complex acid fluoroboric dietileter (16,23 mmol) şi3,65 g N-iodosuccinimidă (16,23 mmol) la amestec şi s-a agitat la r.t. până nu s-a mai observat conversie. Amestecul de reacţie s-a concentrat sub presiune redusă şi produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a obţine 4-(3,5-dicloro-4-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-2,5-diiodo-tiofen-3-carboxilat de etil.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 3,98 (q, 2H), 3,84 (s, 3H), 1,92 (s, 6H), 0,84 (t, 3H)

Etapa F: 4-(3,5-dicloro-4-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-5-iodo-tiofen-3-carboxilat de etil

S-au dizolvat 5,29 g 4-(3,5-dicloro-4-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-2,5-diiodo-tiofen-3-carboxilat de etil (8,66 mmol) în 90 mL THF anhidru, apoi s-a răcit la -78 °C sub atmosferă de argon. S-au adăugat 6,7 mL clorură de izopropilmagneziu, complex clorură de litiu (1,3 M în THF) (8,66 mmol) şi amestecul s-a agitat la -78 °C pentru 30 minute. Apoi s-a adăugat soluţie apoasă saturată de NH4Cl şi amestecul s-a extras cu acetat de etil. Stratul organic s-a uscat pe Na2SO4şi s-a concentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a obţine 4-(3,5-dicloro-4-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-5-iodo-tiofen-3-carboxilat de etil. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8,71 (s, 1H), 4,01 (q, 2H), 3,86 (s, 3H), 1,89 (s, 6H), 0,99 (t, 3H)

Etapa G: 4-(3,5-dicloro-4-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil)tiofen-3-carboxilat de etil

S-au dizolvat4,20 g 4-(3,5-dicloro-4-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-5-iodo-tiofen-3-carboxilat de etil(8,66 mmol) şi acid1,82 g 4-fluorofenilboronic (13,0 mmol) în 80 mL dioxan, apoi s-a adăugat5,64 g Cs2CO3 (17,32 mmol) dizolvat în 20 mL apă. Apoi s-au adăugat 500 mg Pd(PPh3)4 (0,43 mmol) şi amestecul s-a agitat sub azot la 80 °C până nu s-a mai observat conversie. Atunci s-a diluat cu DCM şi saramură. După separarea fazelor, faza apoasă s-a extras cu DCM. Straturile organice s-au combinat şi s-au uscat pe Na2SO4, s-au filtrat şi s-au concentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a obţine 4-(3,5-dicloro-4-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil)tiofen-3-carboxilat de etil.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 8,58 (s, 1H), 7,22-7,10 (m, 4H), 4,03 (q, 2H), 3,82 (s, 3H), 1,92 (s, 6H), 1,00 (t, 3H)

HRMS (M+H)+ = 453,0498

Etapa H: 4-(3,5-dicloro-4-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil)-2-nitro-tiofen-3-carboxilat de etil

S-au dizolvat1,97 g 4-(3,5-dicloro-4-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil) tiofen-3-carboxilat de etil(4,34 mmol) în 40 mL acetonitril anhidru, apoi s-au adăugat 576 mg tetrafluoroborat de nitroniu (4,34 mmol) şi amestecul s-a agitat la r.t. până nu s-a mai observat conversie. Apoi acesta s-a diluat cu DCM şi saramură. După separarea fazelor, faza apoasă s-a extras cu DCM. Straturile organice s-au combinat şi s-au uscat pe Na2SO4, s-au filtrat şi s-au concentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a obţine 4-(3,5-dicloro-4-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil)-2-nitro-tiofen-3-carboxilat de etil. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 7,37-7,33 (m, 2H), 7,32-7,26 (m, 2H), 4,14 (q, 2H), 3,82 (s, 3H), 2,06 (s, 6H), 0,88 (t, 3H)

Etapa I: 2-amino-4-(3,5-dicloro-4-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil) tiofen-3-carboxilat de etil

S-au dizolvat 1,85 g 4-(3,5-dicloro-4-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil)-2-nitro-tiofen-3-carboxilat de etil (3,71 mmol) s-au dizolvat într-un amestec de 90 mL acid acetic şi 18 mL apă, apoi s-au adăugat în porţiuni2,43 g zinc praf (37,1 mmol) şi amestecul s-a agitat la r.t. până nu s-a mai observat conversie. Amestecul de reacţie s-a concentrat sub presiune redusă şi produsul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a obţine 2-amino-4-(3,5-dicloro-4-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil)tiofen-3-carboxilat de etil.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 7,73 (s, 2H), 7,12-7,06 (m, 2H), 7,02-6,97 (m, 2H), 3,86-3,80 (m, 2H), 3,80 (s, 3H), 2,01 (s, 6H), 0,72 (t, 3H)

HRMS (M+H)+ = 456,0598

Etapa J: 5-(3,5-dicloro-4-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-6-(4-fluorofenil)-3H-tieno[2,3-d] pirimidin-4-ona

S-au dizolvat1,1 g 2-amino-4-(3,5-dicloro-4-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil)tiofen-3-carboxilat de etil (2,35 mmol) în 20 mL formamidă şi s-a agitat la 150 °C până nu s-a mai observat conversie. Apoi s-a turnat în apă şi produsul precipitat s-a colectat prin filtrare pentru a da 5-(3,5-dicloro-4-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-6-(4-fluorofenil)-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 12,53 (br s, 1H), 8,18 (s, 1H), 7,23-7,16 (m, 4H), 3,84 (s, 3H), 1,96 (s, 6H)

HRMS (M+H)+ = 449,0289

Etapa K: 4-cloro-5-(3,5-dicloro-4-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-6-(4-fluorofenil) tieno[2,3-d]pirimidina

5-(3,5-Dicloro-4-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-6-(4-fluorofenil)-3H-tieno [2,3-d] pirimidin-4-ona700 mg (1,56 mmol) s-a dizolvat în 6 mL oxiclorură de fosfor şi s-a agitat la 90 °C până când nu s-a mai observat conversie. Amestecul de reacţie s-a concentrat sub presiune redusă, apoi la produsul brut s-a adăugat apă cu gheaţă şi s-a sonicat pentru 10 minute. Produsul precipitat s-a colectat prin filtrare pentru a da 4-cloro-5-(3,5-dicloro-4-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidina. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 9,02 (s, 1H), 7,38-7,26 (m, 4H), 3,86 (s, 3H), 1,99 (s, 6H) HRMS (M+H)+ = 466,9954

Etapa L: 2,6-dicloro-4-[4-cloro-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-3,5-dimetil-fenol şi 4-[4-bromo-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-2,6-dicloro-3,5-dimetil-fenol

La o soluţie agitată din 700 mg 4-cloro-5-(3,5-dicloro-4-metoxi-2,6-dimetil-fenil)-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidină (1,50 mmol) în 15 mL DCM s-au adăugat 3,0 mL tribromură de bor (1 M în DCM) (3,0 mmol) la 0 °C şi amestecul s-a lăsat să se încălzească până la r.t. şi s-a agitat până când nu s-a mai observat conversie. Amestecul s-a stopat cu soluţie apoasă saturată de NH4Cl şi s-a extras cu DCM. Fazele organice combinate s-au uscat pe Na2SO4şi s-au concentrat sub presiune redusă. Reziduul s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând heptan şi EtOAc ca eluanţi pentru a obţine 2,6-dicloro-4-[4-cloro-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-3,5-dimetil-fenol şi 4-[4-bromo-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-2,6-dicloro-3,5-dimetil-fenol ca un amestec 37:63 de produşi.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 10,14 (br s, 1H), 9,01 (s, 1H), 7,40-7,23 (m, 4H), 1,95 (s, 6H) and 10,14 (br s, 1H), 8,93 (s, 1H), 7,40-7,23 (m, 4H), 1,93 (s, 6H)

HRMS (M+H)+ = 452,9800 şi 496,9287

Etapa M: 4-cloro-5-[3,5-dicloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidina şi 4-bromo-5-[3,5-dicloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidina

Amestec 300 mg de 2,6-dicloro-4-[4-cloro-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidin-5-il]-3,5-dimetil-fenol şi 4-[4-bromo-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-2,6-dicloro-3,5-dimetil-fenol (0,62 mmol), 286 mg 2-(4-metilpiperazin-1-il)etanol (1,98 mmol) şi 520 mg trifenilfosfină (1,98 mmol) s-au dizolvat în 10 mL toluen anhidru, apoi s-au adăugat 460 mg azodicarboxilat de ditertbutil (1,98 mmol). Amestecul s-a agitat la 50 °C sub azot până nu s-a mai observat conversie. Volatilele s-au evaporat sub presiune redusă şi intermediarul brut s-a purificat prin cromatografie rapidă utilizând EtOAc şi metanol ca eluanţi pentru a obţine 4-cloro-5-[3,5-dicloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidina şi 4-bromo-5-[3,5-dicloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil]-6-(4-fluoro-fenil)tieno[2,3-d]pirimidinaca un amestec 35:65 de produşi.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 9,02 (S, 1H), 7,40-7,22 (m, 4H), 4,11 (t, 2H), 2,78 (t, 2H), 2,63-2,20 (m, 8H), 2,17 (br s, 3H), 1,98 (s, 6H) and 8,94 (S, 1H), 7,40-7,22 (m, 4H), 4,11 (t, 2H), 2,78 (t, 2H), 2,63-2,20 (m, 8H), 2,15 (br s, 3H), 1,98 (s, 6H)

HRMS (M+H)+ = 579,0968 şi 623,0455

EtapaN:Exemplul 270

Amestec 250 mg de 4-cloro-5-[3,5-dicloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidină şi 4-bromo-5-[3,5-dicloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidină (0,41 mmol), 327 mg acid (2R)-2-amino-3-[2-[[2-(2-metoxifenil)pirimidin-4-il] metoxi]fenil]propanoic (PreparareaA4, 0,86 mmol) şi 280 mg Cs2CO3 (0,86 mmol) s-a dizolvat în 5 mL tert-butanol şi amestecul s-a agitat la 70°C până nu s-a mai observat conversie. Solidele s-au filtrat şi filtratul s-aconcentrat sub presiune redusă. Produsul brut s-a purificat prin cromatografie preparativă cu fază inversă utilizând soluţie apoasă 25 mM de NH4HCO3şi MeCN, s-a obţinut compusul Exemplul 270. HRMS calculat pentru C48H46N7O5FSCl2: 921,2642, găsit: 461,6398 (M+2H)

Exemplul 271: N-[5-{2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxifenil)pirimidin-4-il]metoxi}-D-fenilalanina

Exemplul 272: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-β-(hidroximetil)-2-{[2-(2-metoxifenil) pirimidin-4-il]metoxi}fenilalanina

Exemplul 273: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-β-hidroxi-2-{[2-(2-metoxifenil)pirimidin-4-il]metoxi}fenilalanina

Exemplul 274: N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi] fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-β-(2-hidroxietil)-2-{[2-(2-metoxifenil) pirimidin-4-il]metoxi}fenilalanina

STUDIU FARMACOLOGIC

EXEMPLUL A: Inhibarea Mcl-1 prin tehnica polarizării fluorescenţei

Puterea relativă de legare a fiecărui compus s-a determinat prin Polarizare de fluorescenţă (FP). Metoda a utilizat un ligand marcat cu Fluoresceină (Fluorescein-βAla-Ahx-A-REIGAQLRRMADDLNAQY-OH; mw 2,765) care se leagă de proteina Mcl-1(astfel încât Mcl-1 corespunde la numărul de acces primar UniProtKB®: Q07820) conducând la o anizotropie crescută măsurată în unităţi de mili-polarizare (mP) utilizând un cititor. Adăugarea unui compus care se leagă competitiv la acelaşi situs ca ligandul va conduce la o proporţie mai mare de ligand nelegat în sistem indicat printr-o descreştere a unităţilor mP.

Metoda 1:O diluţie în serie cu 11 puncte ale fiecărui compus a fost preparată în DMSO şi 2 µl s-au transferat într-o placă cu 384-godeuricu fund plat, legare scăzută(concentraţia finală în DMSO 5 %). S-au adăugat apoi 38µl tampon (10 mM acid 4-(2-hidroxietil)-1-piperazinetansulfonic [HEPES], 150 mM NaCl, 0,05 % Tween 20, pH 7,4), conţinând ligandul marcat cu fluoresceină(concentraţie finală 1 nM) şi proteina Mcl-1 (concentraţie finală 5 nM).

Plăcile test au fost incubate ~2 hours la r.t. înainte de măsurarea FP pe un cititor Biomek Synergy2 (Ex. 528 nm, Em. 640 nm, referinţă 510 nm) şi s-au calculat unităţile mP. Legarea dozelor în creştere de compus test a fost exprimată ca o reducere a procentului în mP comparat cu o fereastră stabilită întremartori '5 % DMSO numai' şi '100 % inhibare'. Curbele răspuns la doză în 11-puncte au fost trasate cu un soft XL-Fit utilizând un model logistic cu 4-parametri (Sigmoidal Dose-Response Model) şi au fost determinate concentraţiile inhibitorii care au dat o reducere 50 % în mP (IC50). Rezultatele obţinute cu Metoda 1 sunt prezentate în Tabelul 1 de mai jos; Valorile IC50ale inhibării Mcl-1 obţinute utilizând Metoda 1 nu sunt subliniate.

Metoda 2:S-a preparat o diluţie în serie cu 11 puncte pentru fiecare compus în DMSO şi 2 µl s-au transferat într-o placă cu 384-godeuri cu fund plat, legare joasă (DMSO concentraţie finală 5 %). S-au adăugat 38 µl de tampon (20 mM Na2HPO4, 1mM EDTA, 50 mM NaCl, pH 7,4), conţinând ligand marcat cu fluoresceină (concentraţia finală 10 nM) şiproteină Mcl-1(concentraţie finală 10 nM).

Plăcile test au fost incubate ~2 ore la r.t. înainte ca FP să fie măsurată pe un cititor Biomek Synergy2 (Ex. 528 nm, Em. 640 nm, referinţă 510 nm) şi s-au calculat unităţile mP. Legarea la doze crescânde ale compusului test a fost exprimată ca o reducere a procentului în mP comparată cu o fereastră stabilită între '5% DMSO numai' şi '100% inhibare' martori (50 µM ligand nemarcat). Curbele răspuns la doză în 11puncte au fost trasate cu soft XL-Fit utilizând un model logistic cu 4-parametri (Sigmoidal Dose-Response Model) şi au fost determinate concentraţiile inhibitorii care au dat o reducere 50 % în mP (IC50). Rezultatele obţinute utilizând Metoda 2 sunt prezentate în Tabelul 1 de mai jos; Valorile IC50 ale inhibării Mcl-1 obţinute utilizând Metoda 2 sunt subliniate.

Rezultatele arată că compuşii conform invenţiei inhibă interacţiunea dintre proteina Mcl-1 şi peptida fluorescentă descrisă anterior.

EXEMPLUL B:Citotoxicitatea in vitro

Studiile de citotoxicitate s-au efectuat pe o linie tumorală de mielom multiplu H929.

Celulele sunt distribuite pe microplăci şi expuse faţă de compuşii test pentru 48 ore. Viabilitatea celulară este apoi cuantificată prin analiză colorimetrică, Microculture Tetrazolium Assay (test de microcultură cu tetrazoliu) (Cancer Res., 1987, 47, 939-942).

Rezultatele sunt exprimate în valori IC50 (concentraţia compusului care inhibă viabilitatea celulară la 50 %) şi sunt prezentate în Tabelul 1 de mai jos.

Rezultatele arată că compuşii conform invenţiei sunt citotoxici.

Tabel 1: Valorile IC50 ale inhibării Mcl-1 (test polarizare de fluorescenţă) şi ale citotoxicităţii pentru celule H929

Notă: valorile IC50ale inhibării Mcl-1obţinute utilizând Metoda 2 sunt subliniate. IC50 (µM) Mcl-1 FP IC50 (M) MTT H929 IC50 (µM) Mcl-1 FP IC50 (M) MTT H929 Exemplul 1 0,127 >6,0E-07 Exemplul 29 0,063 2,52E-06 Exemplul 2 56,9% @ 10 µM >6,0E-07 Exemplul 30 68,2% @ 10 µM >3,75E-06 Exemplul 3 0,114 3,18E-07 Exemplul 31 16,7% @ 10 µM >3,75E-06 Exemplul 4 0,005 2,15E-07 Exemplul 32 0,007 >3,75E-06 Exemplul 5 ND ND Exemplul 33 54,9% @ 10 µM ND Exemplul 6 0,013 >6,0E-07 Exemplul 34 0,726 4,27E-06 Exemplul 7 0,008 1,38E-08 Exemplul 35 24,78% @ 10 µM >3,0E-05 Exemplul 8 0,054 2,58E-07 Exemplul 36 0,086 >7,50E-06 Exemplul 9 2,697 >3,75E-06 Exemplul 37 18,7% @ 10 µM >3,75E-06 Exemplul 10 72,75% @ 3,3 µM >3,75E-06 Exemplul 38 1,871 >3,75E-06 Exemplul 11 35,55% @ 10 µM >3,75E-06 Exemplul 39 0,025 4,01E-07 Exemplul 12 0,014 6,47E-07 Exemplul 40 0,006 3,28E-08 Exemplul 13 58% @ 10 µM >3,75E-06 Exemplul 41 0,006 7,38E-09 Exemplul 14 0,038 7,21E-07 Exemplul 42 0,010 6,1E-08 Exemplul 15 40,05% @ 10 µM >3,75E-06 Exemplul 43 0,006 1,25E-08 Exemplul 16 0,006 9,93E-08 Exemplul 44 0,007 3,44E-09 Exemplul 17 0,057 2,94E-07 Exemplul 45 0,005 8,96E-10 Exemplul 18 1,821 ≥1,14E-07 Exemplul 46 0,024 1,66E-07 Exemplul 19 0,020 1,75E-07 Exemplul 47 0,008 8,39E-08 Exemplul 20 0,026 7,86E-08 Exemplul 48 0,007 1,61E-08 Exemplul 21 0,006 3,97E-08 Exemplul 49 0,003 4,12E-09 Exemplul 22 0,002 8,59E-09 Exemplul 50 0,007 >1,50E-07 Exemplul 23 41,27% @ 1 µM >6,0E-07 Exemplul 51 0,005 2,33E-08 Exemplul 24 0,008 4,73E-08 Exemplul 52 0,301 ND Exemplul 25 55,5% @ 10 µM >6,0E-07 Exemplul 53 0,020 ND Exemplul 26 0,012 6,36E-09 Exemplul 54 0,541 ND Exemplul 27 0,011 2,09E-09 Exemplul 55 8,839 ND Exemplul 28 0,116 >1,88E-06 Exemplul 56 0,019 ND IC50 (µM) Mcl-1 FP IC50 (M) MTT H929 IC50 (µM) Mcl-1 FP IC50 (M) MTT H929 Exemplul 57 0,106 ND Exemplul 88 1,225 ND Exemplul 58 52,8% @ 10 µM ND Exemplul 89 72,13% @ 200 µM ND Exemplul 59 0,127 ND Exemplul 90 0,023 ND Exemplul 60 0,092 ND Exemplul 91 6,372 ND Exemplul 61 0,036 ND Exemplul 92 12,887 ND Exemplul 62 0,060 ND Exemplul 93 0,080 ND Exemplul 63 12,18% @ 10 µM ND Exemplul 94 6,901 ND Exemplul 64 0,025 ND Exemplul 95 0,077 ND Exemplul 65 0,345 ≥2,78E-06 Exemplul 96 1,628 ND Exemplul 66 36,9% @ 10 µM >3,75E-06 Exemplul 97 0,073 ND Exemplul 67 2,079 ND Exemplul 98 2,873 ND Exemplul 68 0,142 ND Exemplul 99 28,3% @ 200 µM ND Exemplul 69 0,109 ND Exemplul 100 4,747 ND Exemplul 70 0,974 ND Exemplul 101 0,462 ND Exemplul 71 39,015 ND Exemplul 102 0,073 ND Exemplul 72 12,007 ND Exemplul 103 0,715 ND Exemplul 73 0,276 ND Exemplul 104 0,046 ND Exemplul 74 0,621 ND Exemplul 105 0,704 ND Exemplul 75 0,280 ND Exemplul 106 0,065 ND Exemplul 76 3,177 ND Exemplul 107 0,544 ND Exemplul 77 75,45% @ 200 µM ND Exemplul 108 0,079 ND Exemplul 78 0,135 ND Exemplul 109 1,858 ND Exemplul 79 0,429 ND Exemplul 110 0,839 ND Exemplul 80 0,487 ND Exemplul 111 4,452 ND Exemplul 81 20,241 ND Exemplul 112 0,104 ND Exemplul 82 1,109 ND Exemplul 113 0,045 ND Exemplul 83 0,258 ND Exemplul 114 0,981 ND Exemplul 84 4,022 ND Exemplul 115 1,753 ND Exemplul 85 0,228 ND Exemplul 116 1,059 ND Exemplul 86 9,976 ND Exemplul 117 2,603 ND Exemplul 87 62,6 % @ 7,4 µM ND Exemplul 118 0,056 ND Exemplul 119 1,456 ND Exemplul 150 0,528 ND Exemplul 120 9,445 ND Exemplul 151 71,3% @ 66,7 µM ND Exemplul 121 0,167 ND Exemplul 152 0,047 ND Exemplul 122 10,215 ND Exemplul 153 75,7% @ 50 µM ND Exemplul 123 0,152 ND Exemplul 154 2,316 2,03E-05 Exemplul 124 75,7 % @ 50 µM ND Exemplul 155 63,15 % @ 50 µM ND Exemplul 125 13,710 ND Exemplul 156 0,309 ND Exemplul 126 41,2 % @ 50 µM ND Exemplul 157 62,05 % @ 50 µM ND Exemplul 127 0,913 ND Exemplul 158 0,104 ND Exemplul 128 10,722 ND Exemplul 159 1,770 ND Exemplul 129 0,053 ND Exemplul 160 11,725 ND Exemplul 130 67,4 % @ 50 µM ND Exemplul 161 12,579 ND Exemplul 131 0,495 ND Exemplul 162 0,597 ND Exemplul 132 9,844 ND Exemplul 163 8,375 ND Exemplul 133 0,079 ND Exemplul 164 0,227 ND Exemplul 134 0,176 ND Exemplul 165 0,315 ND Exemplul 135 75,25% @ 50 µM ND Exemplul 166 0,064 ND Exemplul 136 0,146 ND Exemplul 167 1,146 ND Exemplul 137 71,05% @ 50 µM ND Exemplul 168 4,775 ND Exemplul 138 0,664 ND Exemplul 169 2,105 ND Exemplul 139 32,75% @ 10 µM ND Exemplul 170 0,955 ND Exemplul 140 0,208 ND Exemplul 171 2,775 ND Exemplul 141 26,78% @ 10µM ND Exemplul 172 28,849 ND Exemplul 142 0,335 ND Exemplul 173 6,794 ND Exemplul 143 68,85% @ 50 µM ND Exemplul 174 0,466 ND Exemplul 144 0,154 ND Exemplul 175 3,856 ND Exemplul 145 3,888 ND Exemplul 176 8,409 ND Exemplul 146 0,071 ND Exemplul 177 0,957 ND Exemplul 147 14,236 ND Exemplul 178 3,232 ND Exemplul 148 0,416 ND Exemplul 179 0,881 ND Exemplul 149 14,001 ND Exemplul 180 2,104 ND Exemplul 181 0,299 ND Exemplul 212 12,674 ND Exemplul 182 0,407 ND Exemplul 213 0,111 ND Exemplul 183 2,044 ND Exemplul 214 1,911 ND Exemplul 184 76,8% @ 200 µM ND Exemplul 215 0,015 ND Exemplul 185 2,533 ND Exemplul 216 58,95% @ 10 µM ND Exemplul 186 7,880 ND Exemplul 217 0,065 ND Exemplul 187 1,385 ND Exemplul 218 71,5% @ 50 µM ND Exemplul 188 21,302 ND Exemplul 219 10,940 ND Exemplul 189 8,327 ND Exemplul 220 31,7% @ 10 µM ND Exemplul 190 34,602 ND Exemplul 221 0,097 ND Exemplul 191 0,171 ND Exemplul 222 70% @ 50 µM ND Exemplul 192 2,082 ND Exemplul 223 0,086 ND Exemplul 193 36,522 ND Exemplul 224 8,607 ND Exemplul 194 1,752 ND Exemplul 225 0,053 ND Exemplul 195 14,228 ND Exemplul 226 0,069 ND Exemplul 196 2,908 ND Exemplul 227 3,312 ND Exemplul 197 54,1% @ 200 µM ND Exemplul 228 0,025 ND Exemplul 198 9,862 ND Exemplul 229 6,325 ND Exemplul 199 0,298 ND Exemplul 230 3,236 ND Exemplul 200 5,440 ND Exemplul 231 56,75% @ 50 µM ND Exemplul 201 0,136 ND Exemplul 232 62,2% @ 50 µM ND Exemplul 202 0,751 ND Exemplul 233 3,408 ND Exemplul 203 71,85% @ 100 µM ND Exemplul 234 68,7% @ 50 µM ND Exemplul 204 44,8% @ 100 µM ND Exemplul 235 1,393 ND Exemplul 205 26,2% @ 100 µM ND Exemplul 236 13,498 ND Exemplul 206 8,844 ND Exemplul 237 0,569 ND Exemplul 207 0,136 ND Exemplul 238 2,785 ND Exemplul 208 0,632 ND Exemplul 239 20,328 ND Exemplul 209 56,85% @ 200 µM ND Exemplul 240 0,958 ND Exemplul 210 8,363 ND Exemplul 241 14,334 ND Exemplul 211 0,668 ND Exemplul 242 0,091 ND Exemplul 243 0,073 ND Exemplul 259 1,347 >6,0E-07 Exemplul 244 0,120 ND Exemplul 260 1,982 ND Exemplul 245 11,367 ND Exemplul 261 ND ND Exemplul 246 0,293 >1,50E-05 Exemplul 262 ND ND Exemplul 247 11,826 ND Exemplul 263 ND ND Exemplul 248 2,176 ND Exemplul 264 ND ND Exemplul 249 36,761 ND Exemplul 265 ND ND Exemplul 250 0,617 ND Exemplul 266 ND ND Exemplul 251 12,053 ND Exemplul 267 ND ND Exemplul 252 0,223 ND Exemplul 268 ND ND Exemplul 253 1,363 ND Exemplul 269 ND ND Exemplul 254 22,08% @ 200 µM ND Exemplul 270 0,055 5,22E-07 Exemplul 255 41,08% @ 200 µM ND Exemplul 271 ND ND Exemplul 256 1,606 >6,0E-07 Exemplul 272 ND ND Exemplul 257 57,15% @ 10 uM ND Exemplul 273 ND ND Exemplul 258 1,070 4,28E-07 Exemplul 274 ND ND

ND: nedeterminat Pentru inhibitori parţiali, este indicată inhibarea procentuală a polarizării de fluorescenţă pentru o concentraţie dată a compusului test. În conformitate, 45,1% @10 µM semnifică faptul că 45,1 % inhibare a polarizării de fluorescenţă este observată pentru o concentraţie a compusului test egală cu 10 µM.

EXEMPLUL C: Cuantificarea formei scindate a PARPin vivo

Capacitatea compuşilor conform invenţiei de a induce apoptoza, prin măsurarea nivelurilor PARP scindate, este evaluată într-un model de heterotransplant de celule AMO-1 de mielom multiplu.

1,107Celule AMO-1sunt grefate sub-cutanat la şoareci imunosupresaţi (tulpina SCID). La 12 până la 14 zile după grefă, animalele sunt tratate pe cale intravenoasă sau orală cu compuşi variaţi. După tratament, masele tumorale sunt recuperate şi lizate şi forma scindată a PARP este cuantificată în lizate tumorale. Cuantificarea este efectuată utilizând testul "Meso Scale Discovery (MSD) ELISA platform", care testează în mod specific forma scindată a PARP. Aceasta este exprimată în forma unui factor de activare care corespunde raportului dintre cantitatea de PARP scindat la şoareci trataţi împărţită la cantitatea de PARP la şoareci martor.

Rezultatele (prezentate în Tabelul 2 de mai jos) arată că compuşii conform invenţiei sunt capabili de inducerea apoptozei în celule tumorale AMO-1 in vivo.

Tabel 2: Cuantificarea formei scindate a PARP in vivo

PARP factor PARP factor PARP factor Exemplul 7 81,4 Exemplul 43 114,6 Exemplul 51 52,2 Exemplul 22 222,2 Exemplul 44 85,8 Exemplul 256 99,5 Exemplul 24 164,5 Exemplul 45 103,7 Exemplul 258 132,3 Exemplul 40 114,3 Exemplul 49 138,8 Exemplul 259 134,4

EXEMPLUL D: Activitatea anti-tumoralăin vivo

Activitatea anti-tumorală a compuşilor conform invenţieieste evaluată pe un model de heterotransplant de celule AMO-1 de mielom multiplu. Celule AMO-1 1x107 sunt grefate subcutanat la şoareci imunosupresaţi (tulpina SCID). La 6 până la 8 zile după grefă, când masa tumorală a atins circa 150 mm3, şoarecii sunt trataţi cu compuşi variaţi după o schemă zilnică (tratament 5 zile). Masa tumorală este măsurată de două ori pe săptămână de la începutul tratamentului.

Compuşii conform invenţiei au activitate anti-tumorală (regresia tumorii) in modelul de mielom multiplu AMO-1 cu ΔT/C (parametru de definire a activităţii unui produs, care este măsurat prin scăderea volumului median al tumorii din ziua ultimului tratament din volumul median al tumorii din ziua primului tratament / volumul tumoral al grupului martor netratat din ziua ultimului tratament) variind de la-1,5 până la -24,5 %. Rezultatele obţinute arată că compuşii conform invenţiei induc regresie semnificativă a tumorii în timpul perioadei de tratament.

EXEMPLUL E: Compoziţia farmaceutică: Tablete

1000 tablete conţinând doza de 5 mg compus selectat din Exemplele 1 la 274 5 g Amidon de grâu 20 g Amidon de porumb 20 g Lactoză 30 g Stearat de magneziu 2 g Silice 1 g Hidroxipropilceluloză 2 g

Claims (41)

1. Compuşi cu formula (I):

în care: ◆ A reprezintă gruparea

în care1este legat de gruparea -NH- şi2este legat de ciclul aromatic, ◆ E reprezintă o grupare cicloalchil, o grupare heterocicloalchil, o grupare aril sau o grupare heteroaril, ◆ X reprezintă un atom de azot sau o grupare C-R4, ◆ Y reprezintă un atom de azot sau o grupare C-R3 , ◆ R1 reprezintă un atom de halogen, o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, o grupare (C2-C6)alchenilliniară sau ramificată, o grupare(C2-C6)alchinilliniară sau ramificată, o grupare (C1-C6)polihaloalchilliniară sau ramificată, o gruparehidroxi, o gruparehidroxi(C1-C6)alchil, o grupare(C1-C6)alcoxiliniară sau ramificată, -S-(C1-C6)alchil, o grupare ciano, o grupare nitro, -alchil(C0-C6)-NR9R9', -O-alchil (C1-C6)-NR9R9', -O-alchil(C1-C6)-R10, -C(O)-OR9, -O-C(O)-R9, -C(O)-NR9R9', -NR9-C(O)-R9', -NR9-C(O)-OR9', -alchil(C1-C6)-NR9-C(O)-R9', -SO2-NR9R9', -SO2-alchil(C1-C6), ◆ R2, R3, R4şi R5 independent unul faţă de altul reprezintă un atom de hidrogen, un atom de halogen, o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, o grupare (C2-C6) alchenilliniară sau ramificată, o grupare(C2-C6)alchinilliniară sau ramificată, o grupare (C1-C6)polihaloalchilliniară sau ramificată, o gruparehidroxi, o gruparehidroxi(C1-C6)alchil, o grupare (C1-C6)alcoxiliniară sau ramificată, -S-(C1-C6)alchil, o grupare ciano, o grupare nitro, -alchil(C0-C6)-NR9R9', -O-alchil(C1-C6)-NR9R9', -O-alchil(C1-C6)-R10, -C(O)-OR9, -O-C(O)-R9, -C(O)-NR9R9', -NR9-C(O)-R9', -NR9-C(O)-OR9', -alchil(C1-C6)-NR9-C(O)-R9', -SO2-NR9R9', sau -SO2-alchil(C1-C6), sau substituenţii perechii (R1, R2) formează împreună cu atomii de carbon de care sunt legaţi un ciclu aromatic sau non-aromatic compus din de la 5 până la 7 atomi, care poate conţine de la 1 la 3 heteroatomi selectaţi dintre oxigen, sulf şi azot, fiind înţeles că ciclul rezultant poate fi substituit cu de la 1 la 2 grupări selectate dintre halogen, (C1-C6)alchil liniar sau ramificat, -alchil(C0-C6)-NR9R9', -NR11R11', -alchil(C0-C6)-Cy1sau oxo, ◆ R6 reprezintă un atom de hidrogen, un atom de halogen, o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, o grupare (C2-C6)alchenilliniară sau ramificată, o grupare (C2-C6)alchinilliniară sau ramificată, o grupare (C1-C6)polihaloalchilliniară sau ramificată,o gruparehidroxi, o grupare (C1-C6)alcoxiliniară sau ramificată, -S-(C1-C6)alchil, o grupare ciano, o grupare nitro, -alchil(C0-C6)-NR9R9', -O-Cy1,-alchilC0-C6)-Cy1, -alchenil(C2-C6)-Cy1, -alchinil(C2-C6)-Cy1, -O-alchil(C1-C6)-R10,-C(O)-OR9, -O-C(O)-R9, -C(O)-NR9R9', -NR9-C(O)-R9', -NR9-C(O)-OR9', -alchil(C1-C6)-NR9-C(O)-R9', -SO2-NR9R9', sau -SO2-alchil(C1-C6), ◆ R7 reprezintă un atom de hidrogen, o grupare (C1-C8)alchilliniară sau ramificată, o grupare -CHRaRb, o grupare aril, o grupare heteroaril, o grupare arilalchil(C1-C6) sau o grupare heteroarilalchil(C1-C6), ◆ R8 reprezintă o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, o grupare (C2-C6) alchenilliniară sau ramificată, o grupare (C2-C6)alchinilliniară sau ramificată, -Cy2, un atom de halogen, o grupare ciano, -C(O)-R11, sau -C(O)-NR11R11', ◆ R9şi R9' independent unul faţă de celălalt reprezintă un atom de hidrogen, o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, sau substituenţii perechii (R9, R9') formează împreună cu atomul de azot de care se leagă un ciclu aromatic sau non-aromatic compus din de la 5 la 7 atomi în ciclu, care poate conţine în plus faţă de atomul de azot de la 1 până la 3 heteroatomi selectaţi dintre oxigen, sulf şi azot, fiind înţeles că azotul în cauză poate fi substituit cu o grupare care reprezintă un atom de hidrogen sau o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, ◆ R10 reprezintă -Cy3, -Cy3-alchil(C0-C6)-Cy4, -C(O)-NR9R9', -NR9R9', -OR9, -NR9-C(O)-R9', -O-alchil(C1-C6)-OR9, -SO2-R9, -C(O)-OR9, sau -NH-C(O)-NH-R9, ◆ R11şi R11' independent unul faţă de altul reprezintă un atom de hidrogen sau o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată opţional substituită, ◆ R12 reprezintă un atom dehidrogen, o gruparehidroxisau o gruparehidroxi(C1-C6) alchil, ◆ Ra reprezintă un atom de hidrogen sau o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, ◆ Rb reprezintă o grupare -O-C(O)-O-Rc, o grupare -O-C(O)-NRcRc' sau o grupare -O-P(O)(ORc)2 , ◆ Rcşi Rc' independent unul faţă de celălalt reprezintă un atom de hidrogen, o grupare (C1-C8)alchilliniară sau ramificată, o grupare cicloalchil, o grupare (C1-C6)alcoxi(C1-C6)alchil, o grupare (C1-C6)alcoxicarbonil(C1-C6)alchil, sau substituenţii perechii (Rc, Rc') formează împreună cu atomul de azot de care sunt legaţi un ciclu non-aromatic compus din de la 5 la 7 atomi în ciclu, care poate conţine în plus faţă de atomul de azot de la 1 la 3 heteroatomi selectaţi dintre oxigen şi azot, fiind înţeles că azotul în cauză poate fi substituit de o grupare care reprezintă o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, ◆ Cy1, Cy2, Cy3şi Cy4 independent unul faţă de celălalt, reprezintă o grupare cicloalchil, o grupare heterocicloalchil, o grupare aril sau o grupare heteroaril, ◆ n este un număr întreg egal cu 0, 1 sau 2, fiind înţeles că: - "aril" semnifică o gruparefenil, naftil, bifenil, - "heteroaril" semnifică orice grupare mono- sau bi-ciclică compusă din de la 5 la 10 atomi în ciclu, având cel puţin un radical aromatic şi conţinând de la 1 la 3 heteroatomi selectaţi dintre oxigen, sulf şi azot, - "cicloalchil" semnifică oricare grupare carbociclică mono- sau bi-ciclică non-aromatică conţinând de la 3 la 10 atomi în ciclu, - "heterocicloalchil" semnifică oricare grupare carbociclică mono- sau bi-ciclică non-aromatică conţinând de la 3 la 10 atomi în ciclu şi conţinând de la 1 la 3 heteroatomi selectaţi dintre oxigen, sulf şi azot, care poate include sisteme ciclice condensate, cu punte sau spiranice, fiind posibil ca grupările aril, heteroaril, cicloalchilşi heterocicloalchilastfel definite şi grupările alchil, alchenil, alchinil, alcoxi, să fie substituite cu de la 1 până la 4 grupări selectate dintre (C1-C6)alchil liniar sau ramaficat opţional substituit, (C2-C6)alchenil, liniar sau ramificat opţional substituit, (C2-C6)alchinil liniar sau ramificat opţional substituit, (C1-C6)alcoxi liniar sau ramificat opţional substituit, (C1-C6)alchil-S- opţional subatituit, hidroxi, hidroxi(C1-C6)alchil, oxo (sauN-oxid când este adecvat), nitro, ciano, -C(O)-OR', -O-C(O)-R', -C(O)-NR'R", -O-C(O)-NR'R", -NR'R", -(C=NR')-OR", -O-P(O)(OR')2, -O-P(O)(O-M+)2, (C1-C6)polihaloalchil liniar sau ramificat, trifluorometoxi, halogen sau o aldohexoză cu formula:

încare fiecare R' este independent; fiind înţeles că R' şi R" independent unul faţă de celălalt reprezintă un atom de hidrogen sau o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată opţional substituită şi M+ reprezintă un cation monovalent acceptabil farmaceutic, enantiomerii, diastereoizomerii şi atropizomerii săi şi sărurile de adiţie ale acestora cu un acid sau bază acceptabile farmaceutic.

2. Compus cu formula (I) conform revendicării 1, în care: ◆ R1şi R2 independent unul faţă de celălalt reprezintă un atom de halogen, o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, o gruparehidroxi, o grupare hidroxi (C1-C6)alchil, o grupare (C1-C6)alcoxiliniară sau ramificată, sau substituenţii perechii (R1, R2) formează împreună cu atomii de carbon de care sunt legaţi un ciclu aromatic compus din de la 5 până la 7 atomi în ciclu, care poate conţine de la 1 până la 3 atomi de azot, fiind înţeles că ciclul care rezultă poate fi substituit cu de la 1 până la 2 grupări selectate dintre halogen, (C1-C6)alchil liniar sau ramificat sau -alchil(C0-C6)-NR9R9', ◆ R3 reprezintă un atom de hidrogen, un atom de halogen, o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, o gruparehidroxi, o grupare (C1-C6)alcoxiliniară sau ramificată sau -O-alchil(C1-C6)-NR9R9', ◆ R4şi R5 independent unul faţă de celălalt reprezintă un atom de hidrogen, un atom de halogen, o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, o grupare hidroxi, o grupare (C1-C6)alcoxiliniară sau ramificată, ◆ R6 reprezintă un atom de hidrogen, un atom de halogen, o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, o grupare (C1-C6)polihaloalchilliniară sau ramificată, o grupare hidroxi, o grupare (C1-C6)alcoxiliniară sau ramificată, o grupare ciano, o grupare nitro, -alchil(C0-C6)-NR9R9', -alchil(C0-C6)-Cy1,-O-alchil(C1-C6)-R10, sau-C(O)-NR9R9', ◆ R7reprezintă un atom dehidrogen, o grupare (C1-C8)alchilliniară sau ramificată, o grupare -CHRaRbsau o grupare heteroarilalchil(C1-C6), ◆ R8reprezintă o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, o grupare (C2-C6)alchenilliniară sau ramificată, o grupare (C2-C6)alchinilliniară sau ramificată, -Cy2, un atom de halogen sau -C(O)-R11, ◆ R9şi R9' independent unul faţă de celălalt reprezintă un atom de hidrogen sau o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, sau substituenţii perechii (R9, R9') formează împreună cu atomul de azot de care sunt legaţi un ciclu non-aromatic compus din de la 5 la 7 atomi în ciclu, care poate conţine în plus faţă de atomul de azot de la 1 până la 3 heteroatomi selectaţi dintre oxigen şi azot, fiind înţeles că azotul în cauză poate fi substituit cu o grupare reprezentând o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, ◆ R10reprezintă -Cy3sau -Cy3-alchil(C0-C6)-Cy4, ◆ R11reprezintă o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, fiind posibil ca grupările aril, heteroaril, cicloalchil şi heterocicloalchilastfel definite şi grupărilealchil, alchenil, alchinil, alcoxi să fie substituite cu de la 1 la 4 grupări selectate dintre (C1-C6)alchil liniar sau ramificat opţional substituit, (C1-C6)alcoxi, liniar sau ramificat opţional substituit, hidroxi, oxo (sauN-oxid unde este adecvat), -C(O)-OR', -C(O)-NR'R", -O-C(O)-NR'R", -NR'R", -O-P(O)(OR')2, -O-P(O)(O-M+)2, (C1-C6)polihaloalchil liniar sau ramificat sau o aldohexoză cu formula:

în care fiecare R' este independent; fiind înţeles că R' şi R" independent unul faţă de celălalt reprezintă un atom de hidrogen sau o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată opţional substituită şi M+ reprezintă un cation monovalent acceptabil farmaceutic.

3. Compuşi conform revendicării 1, în care n este un număr întreg egal cu1.

4. Compuşi conform revendicării 1, în care cel puţin una din grupările selectate dintre R2, R3, R4şi R5nu reprezintă un atom de hidrogen.

5. Compuşi conform revendicării 1, în care R12 reprezintă un atom de hidrogen.

6. Compuşi conform revendicării 1, în care R1 reprezintă o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată sau un atom de halogen.

7. Compuşi conform revendicării 1, în care R2 reprezintă o grupare (C1-C6)alcoxiliniară sau ramificată, o gruparehidroxisau un atom de halogen.

8. Compuşi conform revendicării 1, în care X reprezintă o grupare C-R4.

9.Compuşi conform revendicării 1, în care Y reprezintă o grupare C-R3.

10. Compuşi conform revendicării 1, în care R4şi R5 reprezintă un atom de hidrogen.

11. Compus conform revendicării 1, în care substituenţii perechii (R1, R5) sunt identici şi substituenţii perechii (R2, R4) sunt identici.

12. Compuşi conform revendicării 1, în care :

reprezintă

în care R1, R2, R9 şi R9' sunt definiţi în revendicarea1.

13. Compuşi conform revendicării 1, în care :

reprezintă

în care R9şi R9' sunt definiţi în revendicarea1.

14. Compuşi conform revendicării 1, în care E reprezintă o grupare fenil, o grupare piridin-2-il, o grupare ciclohexil, o grupare pirazol-1-il, o grupare ciclopentil, o grupare indol-4-il, o grupare ciclopropil, o grupare piridin-3-il, o grupare indol-3-il, o grupare naft-1-il, o grupare imidazol-4-il sau o grupare piridin-4-il. 15. Compuşi conform revendicării 1, care sunt compuşi cu formula (I-b):

în care R1, R2, R5, R6, R7, R12, X, Y, A şi n sunt definiţi pentru formula (I).

16. Compuşi conform revendicării 1, în care R6 reprezintă un atom de hidrogen; un atom de fluor; un atom de clor; un atom de brom; o gruparemetil; o grupare trifluorometil; o gruparehidroxi; o gruparemetoxi; o grupare (C1-C6)alcoxiliniară substituită cu atomi de halogen, o grupare -C(O)-NR'R" sau o grupare -NR'R"; o grupare ciano; o grupare nitro; o grupare aminometil; o grupare benzil; -O-alchil(C1-C6)-R10; -C(O)-NR9R9'.

17. Compuşi conform revendicării 1, în care R7 reprezintă un atom de hidrogen, o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată opţional substituită, o grupare -CHRaRbsau o grupare heteroarilalchil(C1-C6).

18.Compuşi conform revendicării 1, în care R8 reprezintă o grupare (C2-C6)alchinilliniară sau ramificată, o grupare aril sau o grupare heteroaril.

19. Compuşi conform revendicării 1, în care R9şi R9' independent unul faţă de celălalt reprezintă o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, sau substituenţii perechii (R9, R9') formează împreună cu atomul de azot de care sunt legaţi un ciclu non-aromatic compus din de la 5 până la 7 atomi în ciclu, care poate conţine în plus faţă de atomul de azot de la 1 la 3 heteroatomi selectaţi dintre oxigen şi azot, fiind înţeles că azotul în cauză poate fi substituit cu o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată.

20. Compuşi conform revendicării 1, în care R10 reprezintă -Cy3sau -Cy3-alchil(C0-C6)-Cy4,

21. Compuşi conform revendicării 20, în care Cy3 reprezintă o grupare cicloalchil, o grupare aril sau o grupare heteroaril.

22. Compuşi conform revendicării 20, în care Cy4 reprezintă o grupare fenilsau o grupare morfolinil.

23. Compuşi conform revendicării 20, în care R10reprezintă

in care p este un număr întreg egal cu 0 sau 1 şi R15reprezintă un atom de hidrogen, o grupare hidroxi, o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată opţional substituită, o grupare (C1-C6)alcoxiliniară sau ramificată, o grupare -O-(CHR16-CHR17-O)q-R' , o grupare -O-P(O)(OR')2, o grupare -O-P(O)(O-M+)2, o grupare -O-C(O)-NR18R19. o grupare di(C1-C6)alchilamino(C1-C6)alcoxi, un atom de halogen sau o aldohexoză cu formula:

încare fiecare R' este independent; fiind înţeles că: ◆ R' reprezintă un atom de hidrogen sauo grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, ◆ R16 reprezintă un atom de hidrogen sauo grupare (C1-C6)alcoxi(C1-C6)alchil, ◆ R17 reprezintă un atom de hidrogen sauo gruparehidroxi(C1-C6)alchil, ◆ R18 reprezintă un atom de hidrogen sauo grupare (C1-C6)alcoxi(C1-C6)alchil, ◆ R19 reprezintă o grupare (C1-C6)alcoxi(C1-C6)alchil, o grupare -(CH2)r-NR9R9' sau o grupare -(CH2)r-O-(CHR16-CHR17-O)q-R' , ◆ q este un număr întreg egal cu 1, 2 sau 3 şi r este un număr întreg egal cu 0 sau 1, ◆ M+ reprezintă un cation monovalent acceptabil farmaceutic.

24. Compuşi conform revendicării 23, în care aldexoza este D-manoza.

25. Compuşi conform revendicării 1, care sunt: - N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[(1-metil-1H-pirazol-5-il) metoxi]-D-fenilalanina, -N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(4-fluorofenil) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[(2-etoxipirimidin-4-il)metoxi]-D-fenilalanina, -N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxifenil)pirimidin-4-il]metoxi}-D-fenilalanina, - N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(furan-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-metoxi-D-fenilalanina, - N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno [2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metoxi-D-fenilalanina, - N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno [2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(2,2,2-trifluoroetoxi)-D-fenilalanina, - N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno [2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(piridin-2-ilmetoxi)-D-fenilalanina, - N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno [2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[(1-metil-1H-pirazol-5-il) metoxi]-D-fenilalanina, - N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno [2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[(1-etil-1H-pirazol-5-il) metoxi]-D-fenilalanina, - N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno [2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[(2-etoxipirimidin-4-il) metoxi]-D-fenilalanina, - 2-[(1-butil-1H-pirazol-5-il)metoxi]-N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metil piperazin-1-il) etoxi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina, - N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)pirimidin-4-il]metoxi}-D-fenilalanina, - N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxifenil)pirimidin-4-il]metoxi}-D-fenilalanina, - N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno [2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metoxi-D-fenilalanina, - 2-[(1-tert-butil-1H-pirazol-5-il)metoxi]-N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanina, - N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno [2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxietil)pirimidin-4-il] metoxi}-D-fenilalanina, - N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno [2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[1-(2,2,2-trifluoroetil)-1H-pirazol-5-il] metoxi}-D-fenilalanina, - N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno [2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(morfolin-4-il)pirimidin-4-il] metoxi}-D-fenilalanina, - N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno [2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)pirimidin-4-il] metoxi}-D-fenilalanina, - N-[5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno [2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxifenil)pirimidin-4-il] metoxi}-D-fenilalanina, - N-[5-{3-cloro-4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2-metilfenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-{[1-(2,2,2-trifluoroetil)-1H-pirazo1-5-il] metoxi}-D-fenilalanina, - N-[5-{3-cloro-4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2-metilfenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-{[2-(morfolin-4-il)pirimidin-4-il]metoxi}-D-fenilalanina, - N-[5-{3-cloro-4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2-metilfenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-{[2-(2,2,2-trifluoroetoxi)pirimidin-4-il] metoxi}-D-fenilalanina, - N-[5-{3-cloro-4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2-metilfenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxifenil)pirimidin-4-il]metoxi}-D-fenilalanina, - N-[5-{3-cloro-4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2-metilfenil}-6-(4-fluoro fenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-({2-[2-(2-metoxietoxi)fenil]pirimidin-4-il}metoxi)-D-fenilalanina; - N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(4-fluorofenil) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxifenil)pirimidin-4-il]metoxi}-D-fenilalaninat de etil; - N-[(5Sa)-5-{3-cloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxifenil)pirimidin-4-il]metoxi}-D-fenilalaninat de etil; - N-[(5Sa)-5-{3-cloro-4-[2-(dimetilamino)etoxi]-2-metilfenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxifenil)pirimidin-4-il]metoxi}-D-fenilalaninat de etil; - N-[5-{3,5-dicloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoxi]fenil}-6-(4-fluorofenil) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoxifenil)pirimidin-4-il]metoxi}-D-fenilalanina.

26. Procedeu pentru prepararea unui compus cu formula (I) conform revendicării 1, caracterizat prin aceea căeste utilizat ca material iniţial compusul cu formula (II-a):

în care Z reprezintă brom sau iod şi A este aşa cum s-a definit pentru formula (I) în care1este legat de atomul de clor şi 2este legat de gruparea Z, care compus cu formula (II-a) este supus unei cuplări cu un compus cu formula (III):

în care R6, R12, E şi n sunt aşa cum s-au definit pentru formula (I) şi Alk reprezintă o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, pentru a obţine compusul cu formula (IV):

în care R6, R12, A, E şi n sunt aşa cum s-au definit pentru formula (I) şi Z şi Alk este definit anterior, compus cu formula (IV) care este supus ulterior cuplării cu compusul cu formula (V):

în care R1, R2, R5, X şi Y sunt aşa cum s-au definit pentru formula (I), şi RB1şi RB2reprezintă un atom dehidrogen, o grupare (C1-C6) alchilliniară sau ramificată sau RB1şi RB2 formează cu oxigenul de care sunt legaţi un ciclu metilat opţional, pentru a obţine compusul cu formula (VI):

în care R1, R2, R5, R6, R12, X, Y, A, E şi n sunt aşa cum s-au definit pentru formula (I) şi Alk este aşa cum s-a definit anterior, funcţiunea ester Alk-O-C(O)- din compusul cu formula (VI) este hidrolizată pentru a obţine acidul carboxilic, care poate reacţiona opţional cu un alcool cu formula R7'-OH sau cu un compus clorurat cu formula R7'-Cl în care R7' reprezintă o grupare (C1-C8)alchilliniară sau ramificată, o grupare -CHRaRb, o grupare aril, o grupare heteroaril, o grupare arilalchil(C1-C6) sau o grupare heteroarilalchil(C1-C6), Raşi Rbsunt aşa cum s-au definit pentru formula (I), pentru a obţine compusul cu formula (I), care poate fi purificat conform unei tehnici de separare convenţionale, care este transformat, dacă se doreşte, în sărurile sale de adiţie cu un acid sau o bază acceptabile farmaceutic şi care este opţional separat în izomerii săi conform unei tehnici convenţionale de separare, fiind înţeles că în orice moment considerat corespunzător în timpul desfăşurării procedeului descris mai sus, unele grupări (hidroxi, amino...) din reactivii iniţiali sau din intermediarii de sinteză pot fi protejate, ulterior deprotejate şi funcţionalizate, cum este cerut de sinteză.

27. Procedeu pentru prepararea unui compus cu formula (I) conform revendicării 1, caracterizat prin aceea căeste utilizat ca material iniţial compusul cu formula (II-b):

în care A este aşa cum s-a definit în formula (I) in care1este legat de atomul de clor şi 2este legat de atomul de iod, carecompus cu formula (II-b) este supus cuplării cu un compus cu formula (V):

în care R1, R2, R5, X şi Y sunt aşa cum s-au definit pentru formula (I)şi RB1şi RB2 reprezintă un atom de hidrogen, o grupare (C1-C6) alchilliniară sau ramificată sau RB1şi RB2 formează cu oxigenul de care sunt legaţi un ciclu metilat opţional, pentru a se obţine compusul cu formula (VII):

în care R1, R2, R5, A, X şi Y sunt aşa cum s-au definit în formula (I), care compus cu formula (VII) este ulterior supus cuplării cu un compus cu formula (III):

În care R6, R12, E şi n sunt aşa cum s-au definit pentru formula (I), şi Alk reprezintă o grupare (C1-C6)alchilliniară sau ramificată, pentru a se obţine compusul cu formula (VI):

în care R1, R2, R5, R6, R12, X, Y, A, E şi n sunt aşa cum s-au definit pentru formula (I) şi Alk este aşa cum s-a definit anterior, funcţia ester Alk-O-C(O)- din compusul cu formula (VI) este hidrolizată pentru a se obţine acidul carboxilic, care poate reacţiona opţional cu un alcool cu formula R7'-OH sau cu un compus clorurat cu formula R7'-Cl în care R7' reprezintă o grupare (C1-C8)alchilliniară sau ramificată, o grupare -CHRaRb, o grupare aril, o grupare heteroaril, o grupare arilalchil(C1-C6) sau o grupare heteroarilalchil(C1-C6), Raşi Rbsunt aşa cum s-au definit pentru formula (I), pentru a se obţine compusul cu formula (I), care poate fi purificat conform unei tehnici de separare convenţionale, care este transformat, dacă se doreşte, în sărurile sale de adiţie cu un acid sau cu o bază acceptabile farmaceutic şi care este opţional separat în izomerii săi conform unei tehnici de separare convenţionale, fiind înţeles că la orice moment considerat corespunzător în decursul procedeului descris mai sus, unele grupări (hidroxi, amino...) din reactivii iniţiali sau din intermediarii de sinteză pot fi protejaţi, ulterior deprotejaţi şi funcţionalizaţi, aşa cum este cerut de sinteză.

28. Compoziţie farmaceutică cuprinzând un compus cu formula (I) conform oricăreia din revendicările 1 la 25 sau o sare de adiţie a acestuia cu un acid sau o bază acceptabile farmaceutic în combinaţie cu unu sau mai mulţi excipienţi acceptabili farmaceutic.

29. Compoziţie farmaceutică conform revendicării 28 pentru utilizare ca agenţi pro-apoptotici.

30. Compoziţie farmaceutică conform revendicării 28 pentru utilizare în tratamentul cancerelor şi bolilor auto-imune şi ale sistemului imunitar.

31. Compoziţie farmaceutică pentru utilizare conform revendicării 30 pentru tratamentul cancerelor devezică, creier, sân şi uter, leucemiei limfoide cronice, cancerului de colon, de esofag şi ficat, leucemiei limfoblastice, leucemiei mieloide acute, limfoamelor, melanoamelor, hemopatiei maligne, mieloamelor, cancerului ovarian, cancerului pulmonar cu celule care nu sunt mici, cancerului de prostată, cancerului pancreatic şi cancerului pulmonar cu celule mici.

32. Utilizarea compoziţiei farmaceutice conform revendicării 28 la fabricarea medicamentelor pentru utilizare ca agenţi pro-apoptotici.

33. Utilizarea unei compoziţii farmaceutice conform revendicării 28 la fabricarea medicamentelor pentru utilizare în tratamentul cancerelor şi bolilor auto-imune şiale sistemului imunitar.

34. Utilizarea unei compoziţii farmaceutice conform revendicării 28 la fabricarea medicamentelor pentru utilizare în tratamentul cancerelor de vezică, creier, sân şi uter, leucemiei limfoide cronice, cancerului de colon, esofag şi ficat, leucemiei limfoblastice, leucemiei mieloide acute, limfoamelor, melanoamelor, hemopatiei maligne, mieloamelor, cancerului ovarian, cancerului pulmonar cu celule care nu sunt mici, cancerului de prostată, cancerului pancreatic şi cancerului pulmonar cu celule mici.

35. Compus cu formula (I) conform oricăreia din revendicările 1 la 25 sau o sare de adiţie a acestuia cu un acid sau o bază acceptabile farmaceutic, pentru utilizare în tratamentul cancerelor de vezică, creier, sân şi uter, leucemiei limfoide cornice, cancerului de colon, esofag şi ficat, leucemiei limfoblastice, leucemiei mieloide acute, limfoamelor, melanoamelor, hemopatiei maligne, mieloamelor, cancerului ovarian, cancerului pulmonar cu celule care nu sunt mici, cancerului de prostată, cancerului pancreatic şi cancerului pulmonar cu celule mici.

36. Utilizarea unui compus cu formula (I) conform oricăreia din revendicările 1 la 25 sau a unei sări de adiţie a acestuia cu un acid sau o bază acceptabile farmaceutic, la fabricarea medicamentelor pentru utilizare în tratamentul cancerelor de vezică, creier, sân şi uter, leucemiei limfoide cronice, cancerului de colon, esofag şi ficat, leucemiei limfoblastice, leucemiei mieloide acute, limfoamelor, melanoamelor, hemopatiei maligne, mieloamelor, cancerului ovarian, cancerului pulmonar cu celule care nu sunt mici, cancerului de prostată, cancerului pancreatic şi cancerului pulmonar cu celule mici.

37.Combinaţia unui compus cu formula (I) conform oricăreia din revendicările 1 la 25 cu un agent anti-cancer selectat dintre agenţi genotoxici, otrăvuri mitotice, anti-metaboliţi, inhibitori ai proteazomului, inhibitori ai kinazei şi anticorpi.

38. Compoziţie farmaceutică cuprinzând o combinaţie conform revendicării 37 în combinaţie cu unu sau mai mulţi excipienţi acceptabili farmaceutic.

39. Combinaţie conform revendicării 37 pentru utilizare în tratamentul cancerelor.

40. Utilizarea unei combinaţii conform revendicării 37 la fabricarea de medicamente pentru utilizare în tratamentul cancerelor.

41. Compus cu formula (I) conform oricăreia din revendicările 1 la 25 pentru utilizare în tratamentul cancerelor care necesită radioterapie.