WO2025233425A1 - Composition à base d'extrait de bambou, de sélénium et de polyphénols pour améliorer la santé du cheveu et des ongles - Google Patents
Composition à base d'extrait de bambou, de sélénium et de polyphénols pour améliorer la santé du cheveu et des onglesInfo
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Definitions
- the invention relates to a composition
- a composition comprising, as an active ingredient, a mixture of bamboo shoot extract, polyphenols, and selenium, and its uses, in particular, as a food supplement, pharmaceutical product, cosmetic product, or nutritional product.
- This specific combination of ingredients is of particular interest for improving the quality of hair and nails, especially for improving their growth and strengthening.
- the human body is composed of epidermal appendages, or skin appendages, such as nails and the pilosebaceous unit; the latter comprising the hair shaft and the hair follicle.
- skin appendages are primarily composed of keratin, which is a component of the skin and all skin appendages (hair, nails, etc.), thus giving hair and nails their structure and ensuring their strength, shine, and hydration by preventing water evaporation. Finally, it also protects them from external aggressions.
- Hair growth occurs at the hair follicle, located at the junction of the deep dermis and the hypodermis. Its nutrition is ensured by the blood supply via small vessels that reach the hair shaft, thus providing the amino acids, minerals, vitamins, and growth hormones that the hair needs to maintain its health. Furthermore, the hair is naturally lubricated by sebum, which is produced by the sebaceous glands surrounding the hair shaft.
- Certain alterations may appear with age or due to extrinsic factors (environmental, mechanical, chemical, nutritional, etc.) or intrinsic factors (hormonal, oxidative stress, health status, etc.). These alterations can cause a decrease in hair density, accelerating hair loss, or making hair drier and more brittle.
- the hair cycle is thus composed of three phases alternating between growth, rest, and shedding cycles, namely: respectively the anagen, catagen and telogen phases.
- the anagen phase represents the hair growth period. It constitutes the longest part of the hair cycle, lasting from 2 to 8 years. Consequently, the vast majority of hairs on our head are in the anagen phase. During this phase, metabolic activity at the hair bulb is intense, resulting in a high production of keratin and melanin. The mitotic activity of the matrix cells is also very significant, leading to the growth of the hair shaft. The longer the anagen phase, the more the hair can grow and the longer it becomes.
- a catagen phase is a transitional phase between the growth phase and the resting phase, during which the hair ceases to develop.
- the telogen phase represents the hair shedding phase, as it leads, after a few months, to the death and expulsion of the hair, making way for a new follicle in the anagen phase.
- the hair does not grow but remains attached to the follicle, while the dermal papilla at the base of the epidermis is in a resting phase.
- the bulb detaches and moves forward until it reaches the superficial part of the hair follicle, the infundibulum, causing the hair to fall out spontaneously. We thus lose 60 to 100 hairs per day. In parallel, a new hair bud appears, allowing the formation of a new hair shaft.
- Hair loss is therefore a normal process that occurs when the hair reaches the end of its life cycle. However, a loss of more than 100 hairs per day is considered abnormal and excessive. Episodes of hair dystrophy can then manifest as hair loss, but also as thinning hair and Thinning, slowed growth, or dry and brittle hair. Abnormal hair loss can be due to excessive production of dihydrotestosterone (which can cause androgenic alopecia) or a dysregulation of signaling pathways involved in the hair cycle (tq pCatenin/Wnt, TGF-, FGF, Shh, BMP, Notch%), responsible for slowing down or stimulating hair growth.
- dihydrotestosterone which can cause androgenic alopecia
- signaling pathways involved in the hair cycle tq pCatenin/Wnt, TGF-, FGF, Shh, BMP, Notch
- hair damage is often accompanied by scalp problems, such as a dysregulation of sebum production.
- Sebum which protects the cuticle and gives shine to the hair, may then be produced in insufficient quantities, causing cuticle damage, lifting of the scales, and leading to brittle, dry, and rough hair.
- excessive sebum secretion makes the hair greasy and can promote the growth of microorganisms and the appearance of dandruff and itching of the scalp, as well as hair loss.
- Nutritional intake therefore has a significant impact on the health and beauty of hair and nails. Sufficient intake of nutrients, vitamins, proteins, and trace elements helps maintain healthy hair and nails.
- Solutions including pharmaceutical ones, exist to combat hair loss or promote hair nourishment and growth.
- minoxidil and finasteride are pharmaceutical treatments used to slow hair loss and can also be effective, to a lesser extent, in improving regrowth.
- these treatments cause significant side effects (oily hair, dandruff, skin irritation, libido problems) and do not maintain their effectiveness after treatment is discontinued.
- the invention proposes a composition based on natural ingredients, namely a specific mixture of polyphenols, bamboo extract, and selenium as the active ingredient, forming the present composition.
- This specific mixture thus meets the requirements of the present invention and provides improved efficacy compared to existing solutions, particularly with regard to the efficacy of each ingredient taken individually.
- the invention relates to a composition
- a composition comprising, as an active ingredient, a mixture consisting essentially of: a mixture of polyphenols, a bamboo extract, and selenium.
- This specific mixture of polyphenols, bamboo extract, and selenium, as an active ingredient, forming the composition according to the present invention thus makes it possible to prevent and combat hair loss and promote regrowth, and to combat oxidation, through a synergistic action of said three ingredients, which makes it possible to improve the known effects of certain ingredients taken individually, in particular polyphenols.
- the inventors have advantageously selected a bamboo shoot extract as the bamboo extract, which further improves the effectiveness compared to a bamboo extract, in particular an extract obtained from the mature stem of bamboo.
- the inventors specifically selected an extract of young shoots of bamboo for its enhanced properties in combination with selenium and the polyphenol blend.
- the bamboo extract in particular from the species Bambusa vulgaris, is thus derived from young shoots and preferably represents at least 5% of the active ingredient, namely the mixture of the three ingredients, the percentage being given as a percentage of the total dry weight of the active ingredient. More preferably, the extract of young bamboo shoots of Bambusa vulgaris represents between 5 and 85% of the active ingredient, the percentage being given as a percentage of the total dry weight of the active ingredient. Even more preferably, the extract of young bamboo shoots of Bambusa vulgaris represents between 6 and 30% of the active ingredient, the percentage being given as a percentage of the total dry weight of the active ingredient.
- the mixture of polyphenols is preferably obtained from a natural ingredient, namely an extract selected from an extract of vine, grape, tea, apple, cocoa, red fruits, maritime pine, drupe fruits or nuts, and combinations thereof. These are of particular interest given the polyphenols they contain.
- the polyphenol mixture comprises at least flavanol monomers.
- the composition according to the invention thus comprises at least 15% flavanol monomers, measured by HPLC-DAD, the percentages being given on a dry weight basis relative to the total dry weight of the active ingredient.
- the composition according to the invention comprises between 15% and 95% flavanol monomers, more preferably between 20% and 90% flavanol monomers, and even more preferably between 25% and 85% flavanol monomers measured by HPLC-DAD, the percentages being given on a dry weight basis relative to the total dry weight of the active ingredient.
- the composition according to the invention comprising this specific mixture of three ingredients, as active ingredients, has a flavanol monomer/bamboo extract ratio of between 0.17 and 19.
- the ratio of flavanol monomers to bamboo extract is between 2 and 12.5.
- the mixture forming the composition according to the invention also comprises selenium.
- This may be in an organic form such as selenomethionine, selenocystin, selenocysteine, or in an inorganic form such as than selenate or selenite.
- selenium can also be derived from selenium-enriched yeast, selenium-rich microalgae such as spirulina, Brazil nuts, brown rice, cashew nuts, mushrooms, wheat germ, or sunflower seeds.
- selenium can be a mixture of different selenium sources, such as selenium in an inorganic and/or organic form and/or a source chosen from selenium-enriched yeast, selenium-rich microalgae such as spirulina, Brazil nuts, brown rice, cashew nuts, mushrooms, wheat germ, or sunflower seeds.
- selenium sources such as selenium in an inorganic and/or organic form and/or a source chosen from selenium-enriched yeast, selenium-rich microalgae such as spirulina, Brazil nuts, brown rice, cashew nuts, mushrooms, wheat germ, or sunflower seeds.
- said mixture forming the composition according to the invention comprises at least 80 ppm of selenium, by dry weight relative to the total dry weight of the active ingredient.
- composition according to the invention is in any form suitable for oral administration.
- Said composition may be a nutritional, pharmaceutical, or nutricosmetic composition.
- said composition according to the invention is a nutricosmetic composition comprising said mixture, as an active ingredient, as described according to one of the preceding embodiments, and comprising at least one acceptable excipient.
- Said composition according to the invention is advantageously in the form of a tablet, capsule, powder, encapsulated powder, gummies, softgel, beverage, etc.
- the composition according to the invention aims to improve and promote the health of hair and/or nails, in particular hair and/or nail growth, and/or stimulate hair follicle growth and/or combat hair loss in an individual not suffering from a hair loss-related disease, and/or improve antioxidant capacity.
- the present invention also relates to a non-therapeutic use of said composition according to any of the embodiments described above for:
- the composition according to the invention is also intended to improve, promote hair growth and/or stimulate hair follicle growth and/or combat hair loss in an individual suffering from at least one hair loss-related disease, in particular an individual suffering from alopecia.
- the present invention relates to a composition according to any of the embodiments described above, for its use in improving, promoting hair growth and/or stimulating hair follicle growth and/or combating hair loss in an individual suffering from at least one hair loss-related disease, preferably alopecia.
- FIG. 1 represents the results on the antioxidant capacity of the ingredients of the composition according to the invention, alone or in combination, namely the mixture of polyphenols from green tea, bamboo shoot extract and selenium yeast comprising 0.22% selenium.
- FIG. 2 represents the results on the antioxidant capacity of the ingredients of the composition according to the invention, alone or in combination, namely the mixture of polyphenols from grape, bamboo shoot extract and selenium yeast comprising 0.22% selenium.
- FIG. 3 represents the results on the antioxidant capacity of the ingredients of the composition according to the invention, alone or in combination, namely the mixture of polyphenols from green tea, bamboo shoot extract and pure selenium.
- FIG. 4 represents the comparative results on the antioxidant capacity of the composition according to the invention comprising an extract of bamboo shoot or an extract from the bamboo stem, compared to polyphenols from green tea alone.
- FIG. 5 represents the results on the proliferation of human hair follicle cutaneous papilla cells (HFDPC) in the presence or absence of the composition according to the invention.
- FIG. 6 represents the results on hair density in the anagen phase over the entire scalp.
- FIG. 7 represents the results on hair volume after treatment with the composition according to the invention, evaluated by a panel of experts. Detailed description of the invention
- active ingredient or “active principle” refers to a mixture comprising a flavanol monomer, a bamboo extract, and selenium, acting synergistically and conferring its effects on hair and/or scalp cells, particularly on dermal papilla cells, whether its effects are cosmetic or therapeutic.
- This mixture of three specifically selected ingredients acts as an active ingredient and makes it possible to obtain and enhance the aforementioned effects compared to each ingredient taken individually, including an antioxidant effect, an effect to combat hair loss, and an effect to promote hair regrowth.
- “bamboo extract” means at least one molecule, preferably a set of molecules, obtained from a species of bamboo selected from the group consisting of Bambusa vulgaris, Bambusa breviflora, Bambusa textilis, Phyllostachys nigra, Aralia nudicaulis and Lophatherum gracile.
- bamboo shoot extract refers to a specific part of the bamboo plant, namely the young shoots. These young shoots are the tips of new bamboo stems, also called “turions,” which are just emerging from the ground. They are characterized by not yet being fully lignified and fibrous, unlike the mature bamboo stem.
- the bamboo shoot extract comprises silicon in monomeric and/or oligomeric form.
- an "acceptable excipient” is any compound that facilitates the formulation of the composition and does not alter the nature of the biological activity of the mixture forming the composition according to the invention.
- An acceptable excipient may be a solvent, buffer, saline solution, plasticizer, lubricant, dispersion medium, absorption retardant or enhancer, flow agent, isotonic agent, antioxidant, or chelating agent.
- it may be a pharmaceutically acceptable excipient, chosen according to the desired pharmaceutical form and route of administration. The excipient will thus be chosen based on the route of administration, for example, suitable for oral administration.
- the excipient may also be a cosmetically acceptable excipient, that is, one that does not cause discomfort to the user, such as redness, tightness, or tingling.
- the excipient can be chosen from among a preservative, an antioxidant, a stabilizer, or a spray-drying agent.
- it can be an excipient acceptable in nutritional products, such as dextrins, maltodextrin, sugars, glycerin, fats, vegetable waxes, vegetable oils, proteins, peptides, alginates, phospholipids, polyols (for example, sorbitol or maltitol), starch, cellulose, calcium or magnesium carbonate, or gum arabic.
- the present invention therefore relates to a composition
- a composition comprising, as an active ingredient, a mixture consisting essentially of: a mixture of polyphenols, a bamboo extract, and selenium.
- This specific mixture comprising a blend of polyphenols, bamboo extract, and selenium as an active ingredient, forming the composition according to the invention, helps prevent and combat hair loss and promote hair regrowth. Furthermore, the synergistic effect of these three ingredients improves the antioxidant capacity and the effectiveness in preventing and combating hair loss compared to the effectiveness of each ingredient taken individually.
- the present composition according to the invention is particularly suitable for promoting overall hair health, especially for hair weakened by extrinsic or intrinsic factors. Furthermore, such a synergistic action of the mixture consisting of polyphenols, bamboo extract, and selenium is surprising and unexpected in light of prior art knowledge, as no synergistic effect has been reported by the combination of these three ingredients.
- the polyphenol mixture which is a carefully selected blend of natural polyphenolic compounds, in combination with bamboo extract and selenium, promotes hair health.
- Several polyphenol mixtures may be particularly suitable for inclusion in the present composition, including a mixture of polyphenols derived from a natural ingredient selected from an extract of vine, grape, tea, apple, cocoa, red berries, maritime pine, drupe, or nut, and combinations thereof.
- the polyphenol mixture is derived from the vine or green tea, very preferably green tea.
- Polyphenols derived from the vine in particular from Vitis vinifera, especially from grape seeds and skins, are particularly rich in proanthocyanidins, resveratrol and flavonoids, thus helping to protect hair follicles from oxidative stress and promoting hair growth.
- a grape seed extract rich in flavanol monomers can be obtained by the following process: a. Hydroalcoholic extraction of dried grape seeds in a liquid heated to 60°C b. Liquid/solid separation c. Filtration through a suitable membrane, then the permeate is passed through an adsorption chromatography column d. Purification on an adsorption resin e. Washing with water f. Hydroethanolic elution g. Concentration under vacuum and dealcoholization h. Pasteurization of the concentrated aqueous extract i. Spray drying
- Tea particularly green tea, is especially rich in catechins, including epiga lococatechin gallate (EGCG).
- EGCG epiga lococatechin gallate
- DHT dihydrotestosterone
- a green tea extract rich in flavanol monomers can be obtained by the following process: a. Aqueous extraction of green tea leaves in water heated to 85°C b. Liquid/solid separation of the liquid tea leaf extract by filtration c. Vacuum concentration and dealcoholization d. Purification of the aqueous extract by chromatography on adsorption resin e. Washing with water f. Vacuum evaporation and concentration of the ethanol and concentration of the aqueous extract g. Pasteurization of the concentrated aqueous extract h. Drying of the purified extract by spray drying and sieving [0053] Apple extracts also contain procyanidins, a type of condensed tannin. Procyanidins promote hair growth by prolonging the anagen phase of the hair growth cycle.
- Cocoa is rich in flavanols, which have been associated with increased blood circulation. Improved blood circulation to the scalp is beneficial for the health of hair follicles and thus promotes hair growth.
- Red fruits such as berries are also rich in anthocyanins and ellagic acid, which have antioxidant properties that are particularly beneficial for protecting hair and scalp from environmental damage.
- Maritime pine bark extract includes oligomeric proanthocyanidins (OPCs) strengthening hair follicles and improving hair growth.
- OPCs oligomeric proanthocyanidins
- Extracts from drupes such as plums, cherries, and apricots
- nuts such as almonds and walnuts
- various polyphenols including lactic acid and gallic acid, which again contribute to overall hair health.
- a combination of these polyphenolic extracts is particularly preferred to obtain a broad-spectrum polyphenol blend that harnesses and enhances the benefits of each source.
- the specific polyphenols included in the polyphenol blend can be tailored to target different aspects of hair health, such as promoting growth, strengthening, and protecting against oxidative damage.
- the polyphenol mixture is preferably obtained from a natural ingredient selected from an extract of vine, grape, tea, apple, cocoa, red berries, maritime pine, drupe, or nut, and combinations thereof.
- the polyphenol mixture comprises at least flavanol monomers.
- the composition according to the invention comprises at least 15% flavanol monomers measured by HPLC-DAD, the percentages being given as a percentage of the total dry weight of the active ingredient.
- the composition according to the invention comprises between 15% and 95% flavanol monomers, more preferably between 20% and 90% flavanol monomers, and even more preferably between 25% and 85% flavanol monomers as measured by HPLC-DAD, the percentages being given on a dry weight basis relative to the total dry weight of the active ingredient.
- This mixture of polyphenols, particularly when it comprises at least 15% of Flavanol monomers are advantageously selected for their ability to act in synergy with the other ingredients in the composition, particularly bamboo shoot extract and selenium, thus improving the overall effectiveness of the hair treatment, the antioxidant effect, and consequently promoting hair health, hair growth and limiting hair loss.
- the mixture forming the composition according to the invention also comprises a bamboo extract, preferably a bamboo shoot extract, but also selenium.
- the extract of young bamboo shoots in particular of the species Bambusa vulgaris, is particularly rich in bioactive compounds, thus contributing to improving the overall effectiveness of the active ingredient within the meaning of the present invention and participating in the synergistic effect observed by the inventors.
- the bamboo (Bambusa vulgaris) extract is derived from young shoots and represents at least 5% of the active ingredient, the percentage being given as a percentage of the total dry weight of the active ingredient. More preferably, the Bambusa vulgaris young shoot extract represents between 5% and 85% of the active ingredient, the percentage being given as a percentage of the total dry weight of the active ingredient. Even more preferably, the Bambusa vulgaris young shoot extract represents between 6% and 30% of the active ingredient, the percentage being given as a percentage of the total dry weight of the active ingredient.
- the composition according to the invention comprising this specific mixture of three ingredients, as an active ingredient, has a flavanol monomer/bamboo extract ratio of between 0.17 and 19, even more preferably said ratio is between 2 and 12.5.
- the third ingredient constituting the mixture is selenium.
- selenium can be obtained from several sources. In the context of the present invention, it can be in an organic form such as selenomethionine, selenocystin, or selenocysteine; or in an inorganic form such as selenate or selenite.
- the selenium can also be obtained from selenium-enriched yeast, selenium-enriched microalgae such as spirulina, Brazil nuts, brown rice, cashew nuts, mushrooms, wheat germ, or sunflower seeds.
- the selenium can also be a mixture of different sources of selenium, especially selenium in an inorganic and/or organic form and/or a source chosen from selenium-enriched yeast, selenium-enriched microalgae such as spirulina, Brazil nuts, brown rice, cashew nuts, mushrooms, wheat germ or sunflower seed.
- Selenium is an essential trace element that plays a crucial role in various physiological processes in the human body, including hair health.
- Selenium is a component of selenoproteins, including glutathione peroxidases, which have antioxidant properties and participate in protecting cells, including hair follicles, from oxidative damage. Thus, selenoproteins also contribute to hair structure and growth.
- selenium regardless of its source or form, represents at least 80 ppm of selenium, by dry weight relative to the total dry weight of the active ingredient. More preferably, between 80 ppm and 3800 ppm, by dry weight relative to the total dry weight of the active ingredient.
- the active ingredient can combine with the three ingredients described above a fourth ingredient, thus constituting a new active ingredient.
- This fourth ingredient in combination with the three ingredients described above, can be a source of silica, advantageously in organic or inorganic form, particularly from horsetail, bamboo, nettle, or oats; or from a synthetic source such as Mesoporosil.
- the composition according to the invention is presented in a form suitable for oral administration. More preferably, said composition is a nutricosmetic composition.
- So-called nutricosmetic compositions are nutritional supplements designed to promote the health and appearance of skin, hair, and nails through oral administration, as opposed to local administration, for example, topical or scalp application.
- This nutricosmetic composition intended for oral administration thus comprises an active ingredient, namely the aforementioned specific mixture, providing nutritional support, which in turn improves the appearance cosmetics, particularly hair health.
- the said active ingredient which consists of the specific mixture, namely a mixture of polyphenols, selenium and bamboo extract, acts synergistically to promote hair health, in particular to combat hair loss and/or promote regrowth.
- the said nutricosmetic composition is thus intended for oral administration and is specifically designed to improve the health of hair and/or nails.
- the nutricosmetic composition according to the invention advantageously comprises at least one acceptable excipient that facilitates the formulation and administration of said mixture of active ingredients.
- excipients may include, in particular, the following:
- Binders such as starch, gelatin or hydroxypropylcellulose, used to ensure the adhesion and formulation of ingredients in tablet or capsule form.
- Disintegrants such as croscarmellose sodium or sodium starch glycolate, used to help the tablet or capsule break down in the digestive system.
- Lubricating agents such as magnesium stearate or silicon dioxide, used to prevent ingredients from sticking to equipment during manufacturing.
- Antioxidant agents such as ascorbic acid or tocopherols, used to prevent the oxidation of active ingredients.
- Preservatives such as potassium sorbate or sodium benzoate, used to extend the shelf life of the composition.
- the quantity of each ingredient taken individually, for example bamboo extract, may be modified accordingly. Therefore, the quantities of each ingredient constituting the active ingredient are expressed as a percentage of the total dry weight of the active ingredient without any acceptable excipient or other carrier.
- the composition according to the invention can be formulated in different dosage forms suitable for oral administration, in particular in the form of capsules, tablets, powders, soft capsules, gummies, etc.
- said composition according to the invention is particularly suitable for treatment, especially for the health of hair and/or nails.
- the invention relates to a non-therapeutic use of said composition according to the invention to improve, promote hair growth, and/or stimulate hair follicle growth, and/or combat hair loss in an individual not suffering from a hair loss-related disease, and/or to improve antioxidant capacity.
- hair follicles are highly sensitive to oxidative stress due to their rapid cell renewal and exposure to various environmental factors. Oxidative stress can therefore impact hair fibers both before emergence (oxidative metabolism, smoking, UV radiation, and inflammation of microbial, polluting, or irritating origin) and after emergence (UV radiation, chemical attacks). These negative impacts on hair follicle cells can lead to premature aging, reduced hair growth, and hair loss, and can also disrupt the normal hair growth cycle. High levels of oxidative stress can induce premature entry into the catagen phase and thus shorten the duration of the anagen phase. Damage to proteins caused by oxidative stress, particularly keratin, can also lead to increased hair porosity and greater fragility, making hair brittle and dull. Thus, the composition according to the invention is particularly suitable for the aforementioned uses.
- the present composition is also suitable for an individual suffering from at least one hair loss-related disease, such as alopecia.
- the invention also relates to said composition according to the invention for its therapeutic use to improve and promote hair growth and/or stimulate hair follicle growth and/or combat hair loss in an individual suffering from at least one hair loss-related disease, preferably alopecia.
- the invention is now illustrated by non-limiting examples of compositions according to the invention and by results. Examples
- Example 1 Preparation of a grape seed extract rich in flavanol monomers.
- This grape seed extract thus obtained (El) comprises at least 95% total polyphenols (DO-280), of which 30% are flavanol monomers (measured by UHPLC-DAD), the quantities being given relative to the dry weight of the extract. It can be characterized in polyphenols as described in Table 1 below.
- Example 2 Preparation of a green tea extract rich in flavanol monomers.
- Such a green tea extract thus obtained comprises at least 98% total polyphenols (DO-280), of which 80% are flavanol monomers (measured by UHPLC-DAD), the quantities being given relative to the dry weight of the extract. It can be characterized in polyphenols as described in Table 1 below.
- Example 3 Preparation of red grape marc extract.
- Example 4 Preparation of a purified red grape marc extract.
- Example 5 Preparation of a white grape marc extract.
- the extract is obtained according to the following process: - 125kg of white grape pomace, hydro-alcoholic extraction at 30% V/V, solid-liquid ratio 1/10, agitation at 350 rpm at 80°C for 4 hours
- the grape extract thus obtained (E5) is also characterized in Table 1 below.
- Example 6 according to the invention Active ingredients according to the invention in powder form
- Table 2 presents several examples of an active ingredient according to the invention, comprising extracts obtained from the processes described previously in Examples 1 to 5 and characterized in Table 1 by simply mixing the different extracts in the quantities indicated. The percentages of each ingredient constituting the active ingredient are given as a dry weight of the total dry weight of the active ingredient. [0101] [Table 2]
- the various active ingredients thus obtained comprise at least 15% flavanol monomers, at least 5% bamboo extract, a flavanol monomer/bamboo extract ratio of between 0.17 and 19, and at least 80 ppm selenium, by dry weight of the total dry weight of the active ingredient.
- Said active ingredients are obtained by mixing the constituents under conventional conditions known to those skilled in the art. Alternatively, the active ingredient may be obtained from an extract or a mixture of extracts.
- Example 6 The active ingredients described in this Example 6, in powder form, can then serve as a basis for the compositions described below.
- Examples 7 according to the invention Capsule-type composition
- capsule-type composition including the active ingredient according to the invention are shown in Table 3 below.
- compositions according to the invention can thus be added to the composition according to the invention to complement the properties of the composition, however without additional effect, in particular synergistic effect on hair health, such as vitamins, minerals, amino acids and excipients such as magnesium stearate, calcium carbonate, sodium carbonate, acacia fiber, talc, maltodextrin, silicon dioxide, modified starches, cellulose, microcrystalline cellulose, cellulose gum, polysorbates.
- vitamins, minerals, amino acids and excipients such as magnesium stearate, calcium carbonate, sodium carbonate, acacia fiber, talc, maltodextrin, silicon dioxide, modified starches, cellulose, microcrystalline cellulose, cellulose gum, polysorbates.
- composition is obtained by mixing the constituents under conventional conditions known to those skilled in the art, and placed in a capsule under similarly conventional conditions.
- the recommended dosage for the examples in Table 3 is 1 capsule per day.
- Example 8 according to the invention Tablet-type composition
- Example 8 is a tablet-type composition comprising an active ingredient according to the invention, particularly as described in Table 3, and the following excipients: sodium carboxymethyl starch, microcrystalline cellulose, gelatin, talc, magnesium stearate; as well as the following colorants: titanium dioxide, yellow iron oxide, red iron oxide; and the following film coating: glycerol, sodium lauryl sulfate, macrogol 6000, hypromellose, magnesium stearate.
- the composition according to Example 8 is obtained by mixing the constituents, and then the 1000 mg tablet is prepared under conventional manufacturing conditions. known to those in the trade.
- Example 9 Chewing gum type composition
- Example 9 is a food supplement, in the form of chewing gum comprising an active ingredient according to the invention, in particular described in Table 3, as well as pectin, citric acid, sorbitol, water, and maltitol.
- composition according to Example 9 is obtained by mixing the constituents, and then the chewing gum is manufactured according to the conventional manufacturing conditions known to those skilled in the art.
- Example 10 according to the invention: Capsule-type mole composition
- Example 10 consists of the composition according to Example 6 in the form of a soft capsule, the latter containing 1g of fish oil rich in EPA/DHA and 12mg of lutein. The recommended dosage is 1 capsule per day.
- Example 11 according to the invention Composition in the form of a beverage
- Example 11 is a 50 ml beverage containing the equivalent of 300 mg of the composition according to the invention.
- the mixture may consist of 250 mg of green tea extract, 40 mg of bamboo shoot extract, and 10 mg of selenium-enriched yeast (0.2% selenium).
- the extracts may be microencapsulated. Concentrated fruit juices, flavorings, colorings, preservatives, and sweeteners may be added to the composition.
- the recommended dosage is 1 to 2 shots of 25 ml per day.
- Example 12 according to the invention Composition in the form of yogurt
- Example 12 is a composition in the form of yogurt, to be consumed 2 to 3 times a day.
- the composition is detailed in Table 5. [0124] [Table 5]
- Example 13 Dog kibble type composition
- Example 13 is a kibble composition for a 20 kg dog fed 300 g of kibble/day providing:
- Example 14 outside the invention Composition with a bamboo leaf extract
- This example is a composition comprising a green tea extract as characterized in Table 1 (E2), a bamboo leaf extract and selenium.
- Table 6 below presents several examples of composition comprising extracts from the processes described above in Examples 1 and 2 or characterized in Table 1.
- the mixtures do not include at least one of the following four characteristics, namely: at least 15% flavanol monomers, at least 5% bamboo extract, a flavanol monomer/bamboo extract ratio between 0.17 and 19 and at least 80 ppm of selenium.
- Reactive oxygen species are molecules that can cause significant damage to lipids, proteins, and DNA. They are generated by a multitude of endogenous and environmental factors, potentially leading to progressive damage to cellular structures, including hair. Oxidative stress can impact both pre-emergent hair fibers (oxidative metabolism, smoking, UV radiation, and inflammation of microbial, pollutant, or irritant origin) and post-emergent fibers (UV radiation, chemical aggressions). Although the body possesses endogenous antioxidant defense mechanisms, these diminish with age, potentially creating an imbalance between free radicals and antioxidant defenses. Thus, antioxidants present in food can play an important role in overall health, including hair health.
- the objective of this test is therefore to compare the antioxidant capacity of the composition according to the invention with the ingredients taken individually or in combination two by two.
- antioxidant activity was measured in vitro by a colorimetric reaction using the ORAC method, an analytical method for determining the antioxidant activity of natural substances found in food supplements, certain pharmaceutical agents, or food ingredients.
- the ORAC test well known to those skilled in the art, evaluates the ability of the antioxidants in a sample to limit the oxidation of fluorescein, a fluorescent probe sensitive to oxidation, by peroxide radicals generated by an oxidizing component, AAPH.
- the oxidation of fluorescein is accompanied by a decrease in fluorescence over time.
- Antioxidants inhibit the oxidation reaction and thus temporarily delay the decrease in fluorescence.
- the antioxidant potential is then determined by the difference in area under the curve between the measured sample and an antioxidant control, Trolox®. 1 ORAC unit is equivalent to 1 mol of Trolox® per gram of sample.
- the combination of the 3 ingredients thus increases the ORAC capacity of the green tea polyphenol + bamboo combination by 53% (Fig. 1; p ⁇ 0.001), and that of the green tea polyphenol + selenium combination by 40% (Fig. 1; p ⁇ 0.001).
- Efficacy Test 3 Evaluation of the effect of the composition according to the invention on the proliferative efficacy on human hair follicle dermal papilla cells (HFDPC)
- HFDPC human hair follicle dermal papilla cells
- Hair regeneration originates from hair follicle stem cells (HFSCs) and dermal papilla cells (DPCs). The latter form the cellular layer around the bulb and are an important cell reservoir for hair regeneration.
- the objective of this test was to compare the proliferation of dermal papilla cells from human follicles in the presence or absence of the composition according to the invention (Example B of Table 2).
- HFDPC human scalp dermis
- composition according to the invention namely the combination of polyphenols, bamboo shoot extract, and selenium, significantly increases the number of cells per unit area compared to the untreated condition (p ⁇ 0.001), thus improving cell density by 23%.
- Efficacy Test 4 Evaluation of the effect of the composition according to the invention on hair growth and health in women with acute telogen effluvium.
- This study aims to evaluate the efficacy of a composition according to the invention, namely consisting essentially of:
- Flavanol monomers 73.2%
- composition is administered once daily at breakfast for 12 weeks (1 capsule of 280mg).
- the primary inclusion criteria are as follows: healthy Caucasian women aged 18 to 65 years suffering from acute transient telogen effluvium (duration less than 6 months) not pathological not taking any treatment for hair loss for at least 3 months before the study not taking any treatment (oral or topical) that may interfere with hair growth or loss for the duration of the study not dyeing hair for 4 weeks before the start of the study and for the duration of the study.
- the main objective of this study is to confirm the improvement in hair growth using a phototrichogram (TrichoScan) after 84 days.
- the secondary objectives of this study are to confirm: the improvement in hair growth using a phototrichogram (TrichoScan) after 42 days, Increased hair density and thickness after 42 and 84 days of supplementation, reduced hair loss after 42 and 84 days, improved hair length after 84 days, and increased hair shine and elasticity after 84 days.
- TrichoScan phototrichogram
- the phototricogram aims to assess hair growth/loss. Digital photographs were taken immediately after shaving an area of the scalp (0 1.8 cm) and 2 days later. The two photographs were compared using software capable of determining whether the hair was in the anagen (growth) or telogen (resting) phase.
- the hair pulling test is designed to assess hair loss. Gentle traction was applied to 60 hairs at 3 different locations on the scalp. If >10 hairs per pull were extracted, the subject had telogen effluvium.
- the spectrocolorimetric test aims to evaluate the color and shine of hair by assessing the reflection of light at a specific angle.
- the measurement (taken at 5 points near the hair roots) of light reflection is performed at an 8-degree angle of incidence relative to the perpendicular to the surface. The higher this value, the shinier the hair.
- composition according to the invention allows for an increase in hair density in the anagen phase [Fig. 6], an improvement in hair shine and volume [Fig. 7] as well as a reduction in hair loss, which shows that the composition according to the invention induces better hair health with promoted hair regrowth/regeneration.
- Efficacy Test 5 Evaluation of the effect of a composition according to the invention on the hair growth and health in women wishing to improve the growth and strength of their hair.
- This real-life study aims to evaluate the effectiveness of a composition according to the invention on the growth, strength, density, hydration, shine and beauty of hair in 40 healthy women.
- composition according to the invention consists essentially of 26% monomers, 145ppm of selenium and 10.6% of bamboo shoot extract, and is administered once a day in the morning for 3 months (1 capsule of 170mg).
- the main objective of this study is to confirm the improvement in hair quality after 3 months of supplementation using satisfaction questionnaires.
- composition according to the invention improves hair growth, strength, shine, density, hydration, and beauty after only one month of supplementation. These various parameters are further improved after three months of supplementation. Overall, 90% of women found the formula effective in improving the overall beauty of their hair after three months of supplementation.
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Abstract
La présente invention concerne une composition comprenant, comme ingrédient actif, un mélange comprenant un extrait de pousse de bambou, des polyphénols et du sélénium, ainsi que ses utilisations notamment comme complément alimentaire, produit pharmaceutique, produit cosmétique ou produit de nutrition. Cette combinaison spécifique d'ingrédients est particulièrement d'intérêt pour améliorer la qualité des cheveux et des ongles, en particulier pour améliorer leur croissance et leur fortification.
Description
Composition à base d'extrait de bambou, de sélénium et de polyphénols pour améliorer la santé du cheveu et des ongles
Domaine technique
[0001] L'invention concerne une composition comprenant, à titre d'ingrédient actif, un mélange d'un extrait de pousse de bambou, de polyphénols et de sélénium, ainsi que ses utilisations notamment comme complément alimentaire, produit pharmaceutique, produit cosmétique ou produit de nutrition. Cette combinaison spécifique d'ingrédients est particulièrement d'intérêt pour améliorer la qualité des cheveux et des ongles, en particulier pour améliorer leur croissance et leur fortification.
Etat de l'art
[0002] Le corps humain est composé d'annexes épidermiques, ou appendices de la peau, tels que les ongles et l'unité pilo-sébacée ; celle-ci comprenant la tige du poil et le follicule pileux. Ces appendices sont principalement composés de kératine, qui entre dans la composition de la peau et de tous les phanères (poils, ongles, ...), conférant ainsi, aux cheveux et aux ongles leur structure, et assurant leur résistance, leur brillance, leur hydratation, en empêchant l'eau de s'évaporer. Enfin, elle les protège également des agressions extérieures.
[0003] La croissance du cheveu se situe au niveau du follicule capillaire à la jonction du derme profond et de l'hypoderme. Sa nutrition est assurée par l'apport sanguin via des petits vaisseaux qui atteignent la tige capillaire, apportant ainsi les acides aminés, les sels minéraux, les vitamines ou encore les hormones de croissance dont le cheveu a besoin pour se maintenir en bonne santé. D'autre part, le cheveu est naturellement lubrifié par le sébum, celui-ci est produit par les glandes sébacées qui entourent la tige capillaire.
[0004] Certaines altérations peuvent apparaître avec l'âge ou à cause de facteurs extrinsèques (environnementaux, mécaniques, chimiques, nutritionnels...) ou intrinsèques (hormonaux, stress oxydant, état de santé...). Ces altérations peuvent causer une diminution de la densité des cheveux, accélérant leur chute, ou les rendant plus secs et cassants.
Diverses voies de signalisation permettent de fortement réguler la croissance du cheveu, résultant de l'équilibre entre des facteurs inhibiteurs, qui freinent la pousse pileuse, et des facteurs stimulateurs, qui au contraire la promeut. Le cycle capillaire est ainsi composé de trois phases alternant des cycles de croissance, de repos et d'expulsion du cheveu, à savoir
respectivement la phase anagène, catagène et télogène.
[0005] La phase anagène représente la période de croissance du cheveu. Elle représente la partie la plus longue du cycle pilaire, pouvant aller de 2 à 8 ans. Aussi, la grande majorité des cheveux présents sur notre tête se trouve par conséquent en phase anagène. Pendant cette phase, l'activité métabolique au niveau du bulbe pileux est intense ce qui entraîne une forte production de kératine et de mélanine. L'activité mitotique des cellules matricielles est également très importante entraînant la croissance de la tige pilaire. Plus la phase anagène va être longue, plus le cheveu va pouvoir pousser et plus il devient long.
[0006] A l'inverse, si le début de la phase anagène est repoussé, cela conduit à une régénérescence perturbée. Ceci explique en grande partie la différence entre les individus, certains pouvant avoir des cheveux très longs et d'autres non. La phase anagène est suivie pendant 2 à 3 semaines d'une phase catagène qui est une phase de transition entre la phase de croissance et la phase de repos pendant laquelle le cheveu cesse d'évoluer.
[0007] Enfin, la phase télogène représente la phase de chute du cheveu puisqu'elle va aboutir, après quelques mois, à la mort et à l'expulsion de celui-ci, laissant place à un nouveau follicule en phase anagène. Pendant cette phase les cheveux ne poussent pas, mais restent collés au follicule, tandis que la papille dermique au fond de l'épiderme se trouve en phase de repos. Le bulbe va se détacher et avancer jusqu'à atteindre la partie superficielle du follicule pileux, l'infundibulum pilaire, provoquant la chute spontanée du poil. Nous perdons ainsi de 60 à 100 cheveux par jour. En parallèle, un nouveau bourgeon pilaire va apparaître permettant de former une nouvelle tige pilaire. L'ancien cheveu, en fin de phase télogène, peut ainsi coexister avec le nouveau cheveu en début de phase anagène qui se trouve en dessous, ce qui explique que lorsque le cheveu tombe, il est très rapidement remplacé au niveau de l'orifice folliculaire. En moyenne, chez une personne qui ne comporte pas de troubles au niveau capillaire, environ 85 % des follicules sont en phase anagène et 15% sont en phase télogène. Les poils corporels et les cils suivent les mêmes cycles de vie mais possèdent une phase de croissance assez brève et une phase de repos plus longue, empêchant une croissance trop importante et inappropriée.
[0008] La chute des cheveux est donc un processus normal qui arrive lorsque le cheveu arrive à la fin de son cycle de vie. Néanmoins, une perte de plus de 100 cheveux par jour est considérée comme anormale et excessive. Les épisodes de dystrophie capillaire peuvent alors se manifester par une perte de cheveux mais également par des cheveux clairsemés et
affinés, un ralentissement de la pousse ou des cheveux secs et cassants. Une perte anormale de cheveux peut être due à une production excessive de dihydrotestostérone (pouvant provoquer une alopécie androgénique) ou une dérégulation des voies de signalisations impliquées dans le cycle du cheveux (tq pCatenin/Wnt, TGF- , FGF, Shh, BMP, Notch...), responsable de ralentir ou de stimuler la croissance du cheveu.
[0009] Par ailleurs, l'altération du cheveu est souvent accompagnée d'altération de l'état du scalp, telle qu'une dérégulation de la production de sébum. Le sébum, qui sert à protéger la cuticule et à donner de la brillance au cheveu, peut alors être produit en quantité insuffisante, provoquant une altération de la cuticule, un soulèvement des écailles et conduisant à des cheveux cassants, secs et rêches. En revanche une sécrétion trop abondante de sébum graisse le cheveu et peut favoriser le développement de microorganismes et l'apparition de pellicules et de démangeaisons au niveau du cuir chevelu, ainsi qu'une chute de cheveux.
[0010] Enfin l'état de santé des cheveux dépend en grande partie d'un apport suffisant en nutriments au follicule pileux. Un apport insuffisant ralentit la croissance des cheveux, affaiblit leur structure et impacte négativement la formation de nouveaux cheveux sains. Les ongles sont également sensibles à un apport nutritionnel insuffisant, aboutissant à un ralentissement de leur croissance, à les rendre mous ou cassants.
[0011] Les apports nutritionnels ont donc une grande incidence sur la santé et la beauté des cheveux, ainsi que des ongles. Un apport suffisant en nutriments, vitamines, protéines et oligoéléments permet de maintenir les cheveux et les ongles en pleine santé.
[0012] Des solutions, notamment pharmaceutiques, existent pour lutter contre la chute des cheveux ou favoriser leur nutrition et leur croissance. A titre d'exemple, le minoxidil et le finastéride sont des traitements pharmaceutiques utilisés pour freiner la chute des cheveux, et peuvent également être efficace, à moindre mesure, pour améliorer leur repousse. Cependant, ces traitements engendrent des effets secondaires importants (cheveux gras, apparition de pellicules, irritations cutanées, problèmes de libido) et ne permettent pas de prolonger l'efficacité à l'arrêt du traitement.
[0013] Il est également connu de nombreuses solutions cosmétiques. En effet, dans notre société qui accorde une place prépondérante à l'apparence, la chevelure est un symbole de beauté et de force dont l'état a un impact important sur l'estime de soi et l'image que l'on renvoie. Or, l'accélération de la chute des cheveux est perçue comme un signe de
vieillissement anticipé et peut considérablement affecter la qualité de vie des personnes touchées. C'est pourquoi, les consommateurs sont particulièrement sensibles à l'efficacité de tels produits et sont toujours à la recherche de nouvelles solutions pour améliorer et stimuler la croissance, favoriser la protection, la nutrition ou l'hydratation, ou lutter voire prévenir la chute des cheveux. C'est l'objet de la présente invention.
Résumé de l'invention
[0014] Pour répondre à ce besoin, l'invention propose une composition à base d'ingrédients naturels, à savoir un mélange spécifique de polyphénols, d'un extrait de bambou et de sélénium, à titre d'ingrédient actif, formant la présente composition. Ce mélange spécifique permet ainsi de répondre aux besoins de la présente invention et de fournir une efficacité améliorée des solutions existantes, notamment par rapport à l'efficacité de chaque ingrédient pris individuellement.
[0015] Ainsi, l'invention concerne une composition comprenant, à titre d'ingrédient actif, un mélange constitué essentiellement par : un mélange de polyphénols, un extrait de bambou, et du sélénium.
[0016] Ce mélange spécifique de polyphénols, d'extrait de bambou, et de sélénium, comme ingrédient actif, formant la composition selon la présente invention permet ainsi de prévenir et lutter contre la chute des cheveux et favoriser leur repousse, lutter contre l'oxydation, par une action synergique desdits trois ingrédients, ce qui permet d'améliorer les effets connus de certains ingrédients pris individuellement, notamment des polyphénols.
[0017] En effet, les inventeurs ont démontré à travers des résultats d'efficacité que ce mélange de trois ingrédients spécifiquement sélectionnés présente un effet synergique, notamment pour son effet antioxydant, par rapport à l'efficacité seule de chacun de ces ingrédients.
[0018] En outre, dans le contexte de la présente invention, les inventeurs ont, avantageusement, sélectionné un extrait de pousse de bambou, comme extrait de bambou, celui-ci permettant encore d'améliorer l'efficacité comparé à un extrait de bambou, notamment un extrait obtenu à partir de la tige mature du bambou.
[0019] Ainsi, les inventeurs ont particulièrement sélectionné un extrait de jeunes pousses de
bambou pour ses propriétés améliorés en combinaison avec le sélénium et le mélange de polyphénol.
[0020] L'extrait de bambou, en particulier de l'espèce Bambusa vulgaris, est ainsi issu de jeunes pousses et représente préférentiellement au moins 5% de l'ingrédient actif, à savoir le mélange des trois ingrédients, le pourcentage étant donné en poids sec par rapport au poids sec total de l'ingrédient actif. Plus préférentiellement, l'extrait de jeunes pousses de bambou de Bambusa vulgaris représente entre 5 et 85 % de l'ingrédient actif, le pourcentage étant donné en poids sec par rapport au poids sec total de l'ingrédient actif. Encore plus préférentiellement, l'extrait de jeunes pousses de bambou de Bambusa vulgaris représente entre 6 et 30% de l'ingrédient actif, le pourcentage étant donné en poids sec par rapport au poids sec total de l'ingrédient actif.
[0021] Selon un autre objet de l'invention, le mélange de polyphénols est préférentiellement obtenu à partir d'un ingrédient naturel, à savoir un extrait choisi parmi un extrait de vigne, de raisin, de thé, de pomme, de cacao, de fruits rouges, de pin maritime, de fruits à drupe ou de fruits à coque, et leur combinaison. Ceux-ci étant particulièrement d'intérêt étant donné les polyphénols les constituants.
[0022] Avantageusement, le mélange de polyphénols comprend au moins des monomères de flavanols. Préférentiellement, la composition selon l'invention comprend ainsi au moins 15% de monomères de flavanols, mesurés par HPLC-DAD, les pourcentages étant donnés en poids sec par rapport au poids sec total de l'ingrédient actif. Très préférentiellement, la composition selon l'invention comprend entre 15% et 95% de monomères de flavanols, plus préférentiellement entre 20% et 90% de monomères de flavanols, encore plus préférentiellement entre 25% et 85% de monomères de flavanols mesurés par HPLC-DAD, les pourcentages étant donnés en poids sec par rapport au poids sec total de l'ingrédient actif. [0023] Selon un autre objet préféré de l'invention, la composition selon l'invention comprenant ce mélange spécifique de trois ingrédients, comme ingrédients actifs, présente un ratio monomères de flavanol / extrait de bambou compris entre 0,17 et 19.
Préférentiellement le ratio monomères de flavanol / extrait de bambou est compris entre 2 et 12,5.
[0024] Selon un autre objet préféré, le mélange formant la composition selon l'invention comprend également du sélénium. Celui-ci peut se présenter sous une forme organique tel que la sélénométhionine, sélénocystine, sélénocystéine ou sous une forme inorganique tel
que le sélénate ou la sélénite. Selon une variante, le sélénium peut également être issu de la levure séléniée, de microalgues enrichies en sélénium telles que la spiruline, de noix du Brésil, de riz brun, de noix de Cajou, de champignons, de germe de blé ou de graine de tournesol. Enfin, selon un autre objet, le sélénium peut être un mélange de différentes sources de sélénium, tel que du sélénium sous une forme inorganique et/ou organique et/ou une source choisies parmi la levure séléniée, de microalgues enrichies en sélénium telles que la spiruline, de noix du Brésil, de riz brun, de noix de Cajou, de champignons, de germe de blé ou de graine de tournesol
[0025] Préférentiellement, ledit mélange formant la composition selon l'invention comprend au moins 80 ppm de sélénium, en poids sec par rapport au poids sec total de l'ingrédient actif.
[0026] Selon un autre objet préféré, la composition selon l'invention se présente sous toute forme adaptée à une administration orale. Ladite composition peut être une composition nutritionnelle, pharmaceutique ou nutricosmétique.
[0027] Très préférentiellement, ladite composition selon l'invention est une composition nutricosmétique comprenant ledit mélange, à titre d'ingrédient actif, tel que décrit selon l'un des précédemment modes de réalisation, et comprenant au moins un excipient acceptable. [0028] Ladite composition selon l'invention se présente avantageusement sous forme de comprimé, gélule, poudre, poudre encapsulé, gummies, capsule molle, boisson, etc.
[0029] Selon un autre aspect de l'invention, la composition selon l'invention vise à améliorer, promouvoir la santé des cheveux et/ou des ongles, notamment la croissance des cheveux et/ou des ongles, et/ou stimuler la croissance du follicule pileux et/ou lutter contre la chute de cheveux chez un individu ne souffrant pas d'une maladie liée à la perte de cheveux, et/ou améliorer la capacité antioxydante. Aussi, la présente invention se rapporte également à une utilisation non thérapeutique de ladite composition selon l'un des quelconques modes de réalisation précédemment décrits pour :
- améliorer, promouvoir la croissance des cheveux, et/ou
- stimuler la croissance du follicule pileux, et/ou
- lutter contre la chute des cheveux, et/ou
- améliorer la capacité antioxydante, et/ou
- augmenter la brillance des cheveux chez un individu ne souffrant pas d'une maladie liée à la perte de cheveux.
[0030] Selon un autre aspect de l'invention, la composition selon l'invention vise également à améliorer, promouvoir la croissance des cheveux et/ou stimuler la croissance du follicule pileux et/ou lutter contre la perte des cheveux chez un individu souffrant d'au moins une maladie liée à la perte de cheveux, en particulier un individu souffrant d'alopécie. Dans ce contexte, la présente invention se rapporte à une composition selon l'un des quelconques modes de réalisation précédemment décrits, pour son utilisation pour améliorer, promouvoir la croissance des cheveux et/ou stimuler la croissance du follicule pileux et/ou lutter contre la perte des cheveux chez un individu souffrant d'au moins une maladie liée à la perte de cheveux, préférentiellement l'alopécie.
[0031] D'autres caractéristiques et avantages ressortiront de la description détaillée de l'invention, des exemples et des figures qui vont suivre.
Brève description des Figures
[0032] [Fig. 1] représente les résultats sur la capacité antioxydante des ingrédients de la composition selon l'invention, seuls ou en combinaison, à savoir le mélange de polyphénols issus du thé vert, de l'extrait de pousse de bambou et de la levure séléniée comprenant 0,22% de sélénium.
[0033] [Fig. 2] représente les résultats sur la capacité antioxydante des ingrédients de la composition selon l'invention, seuls ou en combinaison, à savoir le mélange de polyphénols issus du raisin, de l'extrait de pousse de bambou et de la levure séléniée comprenant 0,22% de sélénium.
[0034] [Fig. 3] représente les résultats sur la capacité antioxydante des ingrédients de la composition selon l'invention, seuls ou en combinaison, à savoir le mélange de polyphénols issus du thé vert, de l'extrait de pousse de bambou et du sélénium pur.
[0035] [Fig. 4] représente les résultats comparatifs sur la capacité antioxydante de la composition selon l'invention comprenant un extrait de pousse de bambou ou d'un extrait issu de la tige de bambou, comparé aux polyphénols issus du thé vert seuls.
[0036] [Fig. 5] représente les résultats sur la prolifération des cellules de papilles cutanées de follicules pileux humains (HFDPC) en présence ou non de la composition selon l'invention.
[0037] [Fig. 6] représente les résultats sur la densité des cheveux en phase anagène sur l'ensemble du cuir chevelu.
[0038] [Fig. 7] représente les résultats sur le volume des cheveux après traitement avec la composition selon l'invention, évalué par un panel d'expert.
Description détaillée de l'invention
[0039] Définition
[0040] Par « ingrédient actif » ou « principe actif » au sens de l'invention, on entend un mélange comprenant un mélange de monomère de flavanol, d'un extrait de bambou et de sélénium, agissant en synergie et conférant ses effets sur les cellules du cheveu et/ou du cuir chevelu, en particulier sur les cellules de la papille dermique, que ses effets soient cosmétiques ou thérapeutiques. Aussi, ce mélange de trois ingrédients spécifiquement sélectionnés, agit comme ingrédient actif et permet d'obtenir et d'améliorer les effets précités par rapport à chaque ingrédient pris individuellement, notamment un effet antioxydant, un effet pour lutter contre la chute des cheveux et favoriser leur repousse. [0041] Par « extrait de bambou » au sens de l'invention, on entend au moins une molécule, préférentiellement un ensemble de molécules, obtenue(s) à partir d'une espèce de bambou choisie parmi le groupe constitué de Bambusa vulgaris, Bambusa breviflora, Bambusa textilis, Phyllostachys nigra, Aralia nudicaulis et Lophatherum gracile.
[0042] Par « extrait de pousse de bambou » au sens de l'invention, on entend une partie spécifique de la plante de bambou, à savoir celle qui correspond à des jeunes pousses de la plante de bambou. Les jeunes pousses correspondent aux pointes des nouvelles tiges de bambou également nommé « turion », qui sortent à peine du sol. Elles ont la particularité de ne pas encore être complètement lignifiées et fibreuses à la différence de la tige de bambou ou tige mature de bambou. Avantageusement, l'extrait de pousse de bambou comprend du silicium sous forme monomérique et/ou oligomérique.
[0043] Par « excipient acceptable » au sens de l'invention on entend tout composé permettant de faciliter la mise en forme de la composition et ne modifiant pas la nature de l'activité biologique du mélange formant la composition selon l'invention. Un excipient acceptable peut être un solvant, tampon, solution saline, plastifiant, lubrifiant, milieu de dispersion, agents retardant ou augmentant l'absorption, agent d'écoulement, agent isotonique, agent antioxydant, agent chélatant. Par exemple, il peut s'agir d'excipients pharmaceutiquement acceptables qui sont choisis selon la forme pharmaceutique et le mode d'administration souhaité. L'excipient sera ainsi choisi en fonction de la voie d'administration, par exemple approprié pour une administration orale. Il peut également s'agir d'excipient cosmétiquement acceptable, c'est-à-dire qui ne provoque pas de sensations d'inconfort pour l'utilisateur telles que des rougeurs, tiraillements ou picotements, par
exemple l'excipient peut être choisi parmi un conservateur, un antioxydant, un stabilisant, un support d'atomisation. Enfin, il peut s'agir d'excipient acceptable dans les produits de nutrition, tels que les dextrines, la maltodextrine, les sucres, la glycérine, des matières grasses, des cires végétales, des huiles végétales, des protéines, des peptides, alginates, phospholipides, des polyols (par exemple sorbitol ou maltitol), l'amidon, la cellulose, le carbonate de calcium ou de magnésium, ou la gomme arabique.
[0044] Composition
[0045] La présente invention a donc pour objet une composition comprenant, à titre d'ingrédient actif, un mélange constitué essentiellement par : un mélange de polyphénols un extrait de bambou, et du sélénium.
[0046] Ce mélange spécifique comprenant un mélange de polyphénols, un extrait de bambou, et du sélénium, comme ingrédient actif, formant la composition selon l'invention, permet de prévenir et lutter contre la chute des cheveux et favoriser leur repousse. Or, l'effet synergique de ces trois ingrédients permet d'améliorer la capacité antioxydante ainsi que l'efficacité dans la prévention et la lutte contre la chute des cheveux par rapport à l'efficacité de chaque ingrédient pris individuellement.
[0047] Aussi, la présente composition selon l'invention est particulièrement adaptée pour promouvoir la santé globale des cheveux et notamment des cheveux affaiblis par des facteurs extrinsèques ou intrinsèques. En outre, une telle action synergique, du mélange constitué de polyphénols, d'un extrait de bambou et de sélénium, est surprenante et inattendue à la lecture de l'enseignement de l'art antérieur. Aucun effet synergique n'ayant été rapportée par la combinaison de ces trois ingrédients.
[0048] Ainsi, le mélange de polyphénols, qui est un mélange soigneusement sélectionné de composés polyphénoliques naturels permet en combinaison avec l'extrait de bambou et le sélénium de promouvoir la santé des cheveux. Plusieurs mélanges de polyphénols peuvent être particulièrement adaptés pour être intégrés dans la présente composition, notamment un mélange de polyphénols issus d'ingrédient naturel choisi parmi un extrait de vigne, de raisin, de thé, de pomme, de cacao, de fruits rouges, de pin maritime, de fruits à drupe ou de fruits à coque, et leur combinaison. Préférentiellement, le mélange de polyphénols est issu
de la vigne ou du thé vert, très préférentiellement du thé vert.
[0049] Les polyphénols dérivés de la vigne en particulier de Vitis vinifera, notamment issus des pépins et des peaux de raisin, sont particulièrement riches en proanthocyanidines, en resvératrol et en flavonoïdes permettant ainsi de contribuer à protéger les follicules pileux du stress oxydatif et ainsi de favoriser la croissance des cheveux.
[0050] A titre d'exemple, un extrait de pépin de raisin riche en monomères de flavanols particulièrement adapté pour être intégré dans la présente composition peut être obtenu selon le procédé suivant : a. Extraction hydroalcoolique de pépins de raisin secs dans un liquide chauffé à 60°C b. Séparation liquide/solide c. filtration au moyen d'une membrane adapté puis le perméat est passé sur une colonne chromatographique d'adsorption d. Purification sur résine d'adsorption e. Lavage à l'eau f. Elution hydro éthanolique g. Concentration sous vide et désalcoolisation h. Pasteurisation de l'extrait aqueux concentré i. Séchage par atomisation
[0051] Le thé, en particulier le thé vert, est particulièrement riche en catéchines, dont l'épiga I locatéchi ne gallate (EGCG). L'EGCG a notamment été étudié pour son rôle dans l'inhibition de la production de dihydrotestostérone (DHT), une hormone associée à la chute des cheveux, et pour la stimulation des follicules pileux.
[0052] Un extrait de thé vert riche en monomères de flavanols peut être obtenu selon le procédé suivant : a. Extraction aqueuse de feuilles de thé vert dans de l'eau chauffée à 85°C b. Séparation liquide/solide de l'extrait liquide des feuilles de thé par filtration c. Concentration sous vide et désalcoolisation d. Purification de l'extrait aqueux par chromatographie sur résine d'adsorption e. Lavage à l'eau f. Evapoconcentration de l'éthanol sous vide et concentration de l'extrait aqueux g. Pasteurisation de l'extrait aqueux concentré h. Séchage de l'extrait purifié par atomisation et tamisage
[0053] Les extraits de pomme comprennent également des procyanidines, un type de tanins condensés. Or, les procyanidines favorisent la croissance des cheveux en prolongeant ainsi la phase anagène du cycle de croissance des cheveux.
[0054] Le cacao est riche en flavanols, qui ont été associés à l'augmentation de la circulation sanguine. Or, l'amélioration de la circulation sanguine au niveau du cuir chevelu est bénéfique pour la santé des follicules pileux et favoriser ainsi la croissance des cheveux. [0055] Les fruits rouges comme les baies sont également riches en anthocyanines et en acide ellagique, ayant des propriétés antioxydantes particulièrement d'intérêt pour contribuer à protéger les cheveux et le cuir chevelu des dommages causés par l'environnement.
[0056] L'extrait d'écorce de pin maritime comprend des proanthocyanidines oligomériques (OPC) renforçant les follicules pileux et améliorer la croissance des cheveux.
[0057] Les extraits de drupes (comme les prunes, les cerises et les abricots) ou de noix (comme les amandes et les noix) sont riches en divers polyphénols, notamment en el lagita nins et en acide gallique, contribuant, là encore, à la santé générale des cheveux. [0058] Enfin, une combinaison de ces extraits polyphénoliques est particulièrement préférée pour obtenir un mélange de polyphénols à large spectre qui exploite et renforce les avantages de chaque source. Ainsi, les polyphénols spécifiques inclus dans le mélange de polyphénols peuvent être adaptés pour cibler différents aspects de la santé des cheveux, tels que la promotion de la croissance, le renforcement et la protection contre les dommages oxydatifs.
[0059] Ainsi, le mélange de polyphénols est préférentiellement obtenu à partir d'un ingrédient naturel choisi parmi un extrait de vigne, de raisin, de thé, de pomme, de cacao, de fruits rouges, de pin maritime, de fruits à drupe ou de fruits à coque, et leur combinaison. [0060] Avantageusement, le mélange de polyphénols comprend au moins des monomères de flavanols. Préférentiellement, la composition selon l'invention comprend au moins 15% de monomères de flavanols mesurés par HPLC-DAD, les pourcentages étant donnés en poids sec par rapport au poids sec total de l'ingrédient actif. Très préférentiellement, la composition selon l'invention comprend entre 15% et 95% de monomères de flavanols, plus préférentiellement entre 20% et 90% de monomères de flavanols, encore plus préférentiellement entre 25% et 85% de monomères de flavanols mesurés par HPLC-DAD, les pourcentages étant donnés en poids sec par rapport au poids sec total de l'ingrédient actif. [0061] Ce mélange de polyphénols, en particulier lorsqu'il comprend au moins 15% de
monomères de flavanols, est avantageusement sélectionné pour sa capacité à agir en synergie avec les autres ingrédients de la composition, en particulier l'extrait de pousse de bambou et le sélénium, permettant ainsi d'améliorer l'efficacité globale du traitement capillaire, l'effet anti-oxydant, et par conséquent promouvoir la santé du cheveu, la croissance du cheveu et limiter leur chute.
[0062] Selon un autre objet, le mélange formant la composition selon l'invention comprend également un extrait de bambou, préférentiellement un extrait de pousse de bambou, mais également du sélénium.
[0063] L'extrait de jeunes pousses de bambou, notamment de l'espèce Bambusa vulgaris, est particulièrement riche en composés bioactifs contribuant ainsi à améliorer l'efficacité globale de l'ingrédient actif au sens de la présente invention et participant à l'effet synergique observé par les inventeurs.
[0064] Selon un autre objet préféré de la présente invention, l'extrait de bambou (Bambusa vulgaris) est issu de jeunes pousses et représente au moins 5% de l'ingrédient actif, le pourcentage étant donné en poids sec par rapport au poids sec total de l'ingrédient actif. Plus préférentiellement, l'extrait de jeunes pousses de bambou de Bambusa vulgaris représente entre 5 et 85 % de l'ingrédient actif, le pourcentage étant donné en poids sec par rapport au poids sec total de l'ingrédient actif. Encore plus préférentiellement, l'extrait de jeunes pousses de bambou de Bambusa vulgaris représente entre 6 et 30% de l'ingrédient actif, le pourcentage étant donné en poids sec par rapport au poids sec total de l'ingrédient actif.
[0065] De façon particulièrement préférée, la composition selon l'invention comprenant ce mélange spécifique de trois ingrédients, à titre d'ingrédient actif, présente un ratio monomères de flavanol / extrait de bambou compris entre 0,17 et 19, encore plus préférentiellement ledit ratio est compris entre 2 et 12,5.
[0066] Enfin, le troisième ingrédient constituant le mélange est le sélénium. Celui-ci peut être issu de plusieurs sources. Dans le contexte de la présente invention, celui-ci peut se présenter sous une forme organique tel que la sélénométhionine, sélénocystine, sélénocystéine ; ou sous une forme inorganique tel que le sélénate ou la sélénite. Selon une variante, le sélénium peut également être issu de la levure séléniée, de microalgues enrichies en sélénium telles que la spiruline, de noix du Brésil, de riz brun, de noix de Cajou, de champignons, de germe de blé ou de graine de tournesol. Enfin, le sélénium peut également
être un mélange de différentes sources de sélénium, en particulier du sélénium sous une forme inorganique et/ou organique et/ou une source choisie parmi la levure séléniée, de microalgues enrichies en sélénium telles que la spiruline, de noix du Brésil, de riz brun, de noix de Cajou, de champignons, de germe de blé ou de graine de tournesol.
[0067] Le sélénium est un oligo-élément essentiel qui joue un rôle crucial dans divers processus physiologiques du corps humain, y compris la santé des cheveux. Le sélénium est un composant des sélénoprotéines, dont les glutathion peroxydases, qui ont des propriétés antioxydantes et participent à la protection des cellules, y compris des follicules pileux, contre les dommages oxydatifs. Ainsi, les sélénoprotéines contribuent également à la structure et à la croissance des cheveux.
[0068] Selon un autre objet préféré, le sélénium peu importe sa source ou sa forme, représente au moins 80 ppm de sélénium, en poids sec par rapport au poids sec total de l'ingrédient actif. Plus préférentiellement entre 80 ppm et 3800 ppm, en poids sec par rapport au poids sec total de l'ingrédient actif.
[0069] Ainsi, l'art antérieur ne nous enseigne aucun effet synergique associé à la combinaison de ces trois ingrédients, permettant ainsi de répondre aux inconvénients de l'art antérieur.
[0070] Selon une autre variante de la présente invention, l'ingrédient actif peut combiner avec les trois ingrédients précédemment décrits, un quatrième ingrédient, constituant ainsi un nouvel ingrédient actif. Ce quatrième ingrédient en combinaison avec les trois ingrédients précédemment décrits peut être une source de silice, avantageusement sous forme organique ou inorganique, notamment issue de la prêle, du bambou, de l'ortie, de l'avoine ; ou de source synthétique tel que le Mésoporosil.
[0071] Selon un autre objet préféré, la composition selon l'invention se présente sous une forme adaptée à une administration orale. Plus préférentiellement, ladite composition est une composition nutricosmétique.
[0072] Les compositions dites nutricosmétiques sont des suppléments nutritionnels conçus pour favoriser la santé et l'apparence de la peau, des cheveux et des ongles, par une administration orale à l'inverse d'une administration locale, par exemple topique ou au niveau du cuir chevelu. Ladite composition nutricosmétique destinée à être administrée par voie orale comprend ainsi un ingrédient actif, à savoir le mélange spécifique susmentionné, permettant un apport nutritionnel, lui-même permettant à son tour d'améliorer l'apparence
cosmétique, en particulier la santé des cheveux. Ainsi, ledit ingrédient actif qui est constitué du mélange spécifique, à savoir d'un mélange de polyphénols, de sélénium et d'extrait de bambou, agit en synergie pour promouvoir la santé des cheveux, notamment pour lutter contre la chute des cheveux et/ou promouvoir leur repousse.
[0073] Ladite composition nutricosmétique est ainsi destinée à être administrée par voie orale, et est spécialement conçue pour améliorer la santé des cheveux et/ou des ongles. [0074] En outre, la composition nutricosmétique selon l'invention comprend avantageusement au moins un excipient acceptable qui facilite la formulation et l'administration dudit mélange d'ingrédients actifs.
[0075] Ces excipients peuvent notamment être les suivants :
- Des agents de charge tels que la cellulose microcristalline, la maltodextrine, la gomme arabique, utilisées pour donner du volume et de la consistance à la composition.
- Des liants tels que l'amidon, la gélatine ou l'hydroxypropylcellulose, utilisés pour garantir l'adhésion et la formulation des ingrédients sous forme de comprimés ou de gélules.
- Des désintégrants tels que la croscarmellose sodique ou le glycolate d'amidon sodique, utilisés pour aider le comprimé ou la gélule à se décomposer dans le système digestif.
- Des agents lubrifiants tels que le stéarate de magnésium ou le dioxyde de silicium, utilisés pour empêcher les ingrédients de coller à l'équipement pendant la fabrication.
- Des agents antioxydants tels que l'acide ascorbique ou les tocophérols, utilisés pour prévenir l'oxydation des ingrédients actifs.
- Des conservateurs tels que le sorbate de potassium ou le benzoate de sodium, utilisés pour prolonger la durée de conservation de la composition.
[0076] Dans ce contexte, dans lequel l'ingrédient actif au sens de la présente invention est associé à au moins un excipient acceptable, la quantité de chaque ingrédient, pris individuellement, par exemple l'extrait de bambou peut éventuellement être modifiée en conséquence. Aussi, les quantités de chaque ingrédient constituant l'ingrédient actif sont exprimées en poids sec par rapport au poids sec total de l'ingrédient actif dépourvu d'excipient acceptable ou autre support.
[0077] Ainsi, la composition selon l'invention peut être formulée sous différentes formes posologiques adaptées à une administration orale, notamment sous forme de gélules, comprimés, poudres, capsules molles, gummies, etc.
[0078] Utilisation
[0079] Selon un autre aspect de l'invention, ladite composition selon l'invention est particulièrement adaptée dans le traitement, notamment la santé des cheveux et/ou des ongles. Ainsi, l'invention se rapporte à une utilisation non thérapeutique de ladite composition selon l'invention pour améliorer, promouvoir la croissance des cheveux, et/ou stimuler la croissance du follicule pileux, et/ou lutter contre la chute des cheveux chez un individu ne souffrant pas d'une maladie liée à la perte de cheveux et/ou pour améliorer la capacité antioxydante.
[0080] En effet, les follicules pileux sont très sensibles au stress oxydatif en raison de leur renouvellement cellulaire rapide et de leur exposition à divers facteurs environnementaux. Le stress oxydatif peut donc avoir un impact sur les fibres capillaires en pré-émergence (métabolisme oxydatif, tabagisme, rayons UV et inflammation d'origine microbienne, polluante ou irritante), et en post-émergence (rayons UV, attaques chimiques). Ces impacts négatifs sur les cellules du follicule pileux, peut alors entraîner un vieillissement prématuré, une croissance réduite des cheveux et une chute des cheveux, mais peut également perturber le cycle normal de croissance des cheveux. Des niveaux élevés de stress oxydatif pouvant induire une entrée prématurée dans la phase catagène et ainsi raccourcir la durée de la phase anagène. Les dommages causés aux protéines par le stress oxydatif, en particulier à la kératine, peuvent également entraîner une augmentation de la porosité des cheveux et une plus grande fragilité, les rendant cassants et ternes. Ainsi, la composition selon l'invention est particulièrement adaptée aux utilisations susmentionnées.
[0081] Selon un autre objet, la présente composition est également adaptée à un individu souffrant d'au moins une maladie liée à la perte de cheveux, tel que l'alopécie. Ainsi, l'invention vise également ladite composition selon l'invention pour son utilisation thérapeutique pour améliorer, promouvoir la croissance des cheveux et/ou stimuler la croissance du follicule pileux et/ou lutter contre la perte des cheveux chez un individu souffrant d'au moins une maladie liée à la perte de cheveux, préférentiellement l'alopécie. [0082] L'invention est à présent illustrée par des exemples non limitatifs de compositions selon l'invention et par des résultats.
Exemples
[0083] Exemple 1 : Préparation d'un extrait de pépin de raisin riche en monomères de flavanols.
[0084] L'extrait est obtenu selon le procédé suivant :
- Extraction hydroalcoolique (eau 70%, éthanol 30%) de 40 kg de pépins de raisin secs dans 400 kg de liquide chauffé à 60°C
- Séparation liquide/solide puis l'extrait aqueux est alors passé sur une membrane < 15kD
- Le perméat est alors passé sur une colonne chromatographique d'adsorption C18
- Purification sur résine d'adsorption 10 BV à 2 BV/h
- Lavage à l'eau 4 BV a 2BV/h
- Elution hydro éthanolique avec solution 80% V/V à 1BV/H avec 2BV
- Concentration sous vide et désalcoolisation sous 60 mbar à 40°C
- Pasteurisation de l'extrait aqueux concentré à une température de 85°C pendant 10 min
- Séchage par atomisation
[0085] Cet extrait de pépin de raisin ainsi obtenu (El) comprend au moins 95 % de polyphénols totaux (DO-280) dont 30 % de monomères de flavanols (mesurés par UHPLC- DAD), les quantités étant données par rapport au poids sec de l'extrait. Il peut être caractérisé en polyphénols comme décrit dans le tableau 1 ci-après.
[0086] Exemple 2 : Préparation d'un extrait de thé vert riche en monomères de flavanols.
[0087] L'extrait est obtenu selon le procédé suivant :
- Extraction aqueuse de 60 kg de feuilles de thé vert dans 600 L d'eau chauffée à 85°C pendant 2 heures
- Séparation liquide/solide de l'extrait liquide des feuilles de thé par filtration
- Concentration sous vide et désalcoolisation sous 60 mbar à 40°C
- Purification de l'extrait aqueux par chromatographie sur résine d'adsorption avec élution à l'éthanol à l'aide d'une solution à 80%v/v
- Lavage à l'eau 4 BV a 2BV/h
- Evapoconcentration de l'éthanol sous vide et concentration de l'extrait aqueux à une température préférentiellement de 60°C et à une pression inférieure à 90m bars
- Pasteurisation de l'extrait aqueux concentré à une température de 85°C pendant 10 min
- Séchage de l'extrait purifié par atomisation et tamisage
[0088] Un tel extrait de thé vert ainsi obtenu (E2) comprend au moins 98 % de polyphénols totaux (DO-280) dont 80 % de monomères de flavanols (mesurés par UHPLC-DAD), les quantités étant données par rapport au poids sec de l'extrait. Il peut être caractérisé en polyphénols comme décrit dans le tableau 1 ci-après.
[0089] Exemple 3 : Préparation d'extrait de marc de raisin rouge.
[0090] L'extrait est obtenu selon le procédé suivant :
- Extraction hydro alcoolique
- Extrait de marc de raisin rouge (E3)
- 10kg de marc sec extraction hydro alcoolique à 30% V/V ratio solide liquide 1/10 agitation à 350 rpm à 80°C pendant 4 heures
- Séparation solide liquide par filtration à 20pm
- Concentration sous vide à 40°C
- Séchage par atomisation
[0091] L'extrait de raisin ainsi obtenu (E3) est caractérisé dans le tableau 1 ci-après.
[0092] Exemple 4 : Préparation d'un extrait de marc de raisin rouge purifié.
[0093] L'extrait est obtenu selon le procédé suivant :
- Extraction 80°C pendant 4H à 50% v/v EtOh ratio 1/10
- 10kg de marc sec extraction hydro alcoolique à 30% V/V ratio solide liquide 1/10 agitation à 350 rpm à 80°C pendant 4 heures
- Séparation solide liquide par filtration à 20pm
- Concentration sous vide à 40°C
- Purification sur résine d'adsorption 20 BV à 2 BV/h
- Lavage à l'eau 4 BV a 2BV/h
- Elution hydro éthanolique avec solution 80% V/V à 1BV/H avec 2BV
- Concentration sous vide et désalcoolisation sous 200 mbar à 40°C
- Séchage par lyophilisation
[0094] L'extrait de raisin ainsi obtenu (E4) est caractérisé dans le tableau 1 ci-après.
[0095] Exemple 5 : Préparation d'un extrait de marc de raisin blanc.
[0096] L'extrait est obtenu selon le procédé suivant :
- 125kg de marc de raisin blanc extraction hydro alcoolique à 30% V/V ratio solide liquide 1/10 agitation à 350 rpm à 80°C pendant 4 heures
- Séparation solide liquide par filtration à 20pm
- Concentration/désalcoolisation sous vide sous 100 mbar à 40°C - Concentration sous vide et désalcoolisation sous 200 mbar à 40°C
- Séchage par atomisation.
[0097] L'extrait de raisin ainsi obtenu (E5) est également caractérisé dans le tableau 1 ci- après.
[0098] [Tableau 1]
[0099] Exemple 6 selon l'invention : Ingrédients actifs selon l'invention sous forme de poudre
[0100] Le tableau 2 décrit ci-après présente plusieurs exemples d'ingrédient actif selon l'invention comprenant des extraits issus des procédés décrits précédemment dans les exemples 1 à 5 et caractérisés dans le tableau 1 par simple mélange des différents extraits dans les quantités indiqués. Les pourcentages de chaque ingrédient constituant l'ingrédient actif, sont donnés en poids sec du poids total sec de l'ingrédient actif. [0101] [Tableau 2]
0102] Les différents ingrédients actifs ainsi obtenus comportent au moins 15% de monomères de flavanols, au moins 5% d'extrait de bambou, un ratio monomères de flavanols/extrait de bambou compris entre 0.17 et 19 et au moins 80 ppm de sélénium, en poids sec du poids total sec de l'ingrédient actif. [0103] Lesdits ingrédients actifs sont obtenus par mélange des constituants dans les conditions classiques connues de l'homme du métier. Alternativement, l'ingrédient actif peut être obtenue à partir d'extrait ou mélange d'extraits.
[0104] Les ingrédients actifs décrits dans cet exemple 6 sous forme de poudre, peut alors servir de base pour des compositions décrites ci-après. [0105] Exemples 7 selon l'invention : Composition de type gélule
[0106] Plusieurs exemples de composition de type gélule incluant l'ingrédient actif selon l'invention est présenté dans le tableau 3 ci-dessous.
[0107] [Tableau 3]
[0108] On peut ainsi ajouter à la composition selon l'invention d'autres ingrédients permettant de compléter les propriétés de la composition, toutefois sans effet additionnel, notamment synergique sur la santé cheveu, tel que des vitamines, des minéraux, des acides aminés et des excipients de type magnésium stéarate, calcium carbonate, sodium carbonate, fibre d'acacia, talc, maltodextrine, dioxyde de silicium, amidons modifiés, cellulose, cellulose microcristalline, gomme de cellulose, polysorbates.
[0109] La composition est obtenue par mélange des constituants dans les conditions classiques connues de l'homme du métier, et mis dans une gélule selon les conditions classiques également. La posologie préconisée pour les exemples du tableau 3 est de 1 gélule par jour.
[0110] Exemple 8 selon l'invention : Composition de type comprimé
[0111] L'exemple 8 est une composition de type comprimé comprenant un ingrédient actif selon l'invention, notamment décrit dans le tableau 3, et les excipients suivants : sodium carboxyméthylamidon, cellulose microcristalline, gélatine, talc, magnésium stéarate ; ainsi que les colorants suivants : titane dioxyde, fer jaune oxyde, fer rouge oxyde ; et le pelliculage suivant : glycérol, sodium laurylsulfate, macrogol 6000, hypromellose, magnésium stéarate. [0112] La composition selon l'exemple 8 est obtenue par mélange des constituants puis le comprimé de 1 OOOmg au total est préparé selon les conditions classiques de fabrication
connues par l'homme du métier.
[0113] Exemple 9 selon l'invention : Composition de type gomme à mâcher
[0114] L'exemple 9 est un complément alimentaire, sous forme de gomme à mâcher comprenant ingrédient actif selon l'invention, notamment décrit dans le tableau 3, ainsi que de la pectine, de l'acide citrique, du sorbitol, de l'eau, et du maltitol.
[0115] On peut éventuellement adjoindre à la composition selon l'invention d'autres ingrédients ayant leur propre efficacité (sans effet sur le cheveu au sens de l'invention), tels que des vitamines, des minéraux, des acides aminés, des arômes et colorants, comme présenté dans les exemples du tableau 4, ci-après. [0116] La composition selon l'exemple 9 est obtenue par mélange des constituants puis les gomme à mâcher sont fabriquées selon les conditions classiques de fabrication connues par l'homme du métier.
[0117] [Tableau 4]
[0118] Exemple 10 selon l'invention : Composition de type capsule mole
[0119] L'exemple 10 est constitué de la composition selon l'exemple 6 sous la forme d'une capsule molle, celle-ci contenant lg d'huile de poisson riche en EPA/DHA et 12mg de lutéine. La posologie préconisée est de 1 capsule par jour. [0120] Exemple 11 selon l'invention : Composition sous forme de boisson
[0121] L'exemple 11 est une boisson de 50 ml contenant l'équivalent de 300 mg de la composition selon l'invention. Le mélange pouvant être composé de 250 mg d'extrait de thé vert, de 40 mg d'extrait de pousse de bambou et de 10 mg de levure séléniée (0.2% sélénium). Les extraits pourront être microencapsulés. On pourra adjoindre à la composition des jus de fruits concentrés, des arômes, colorants, conservateurs, édulcorants. La posologie préconisée est de 1 à 2 shots de 25 mL par jour.
[0122] Exemple 12 selon l'invention : Composition sous forme de yaourt
[0123] L'exemple 12 est une composition sous forme de yaourt, à consommer 2 à 3 fois par jour. La composition est détaillée dans le tableau 5. [0124] [Tableau 5]
0125] Exemple 13 selon l'invention : Composition de type croquettes pour chien
[0126] L'exemple 13 est une composition sous forme de croquettes à destination d'un chien de 20 kg nourri avec 300 g de croquettes/jour apportant :
- 6,6 mg par kg de poids corporel d'une source de polyphénols telle que décrit dans
les exemples 1 à 3,
- 462 pg d'extrait de pousse de bambou par kg de poids corporel, et
- 1,46 pg de sélénium par kg de poids corporel.
[0127] Exemple 14 hors invention : Composition avec un extrait de feuille de bambou [0128] Cet exemple est une composition comprenant un extrait de thé vert tel que caractérisé dans le tableau 1 (E2), un extrait de feuille de bambou et du sélénium.
[0129] Exemples 15 hors invention : Composition hors invention
[0130] Le tableau 6 ci-après présente plusieurs exemples de composition comprenant des extraits issus des procédés décrits précédemment dans les exemples 1 et 2 ou caractérisés dans le tableau 1. Les mélanges ne comprenant pas au moins l'une des quatre caractéristiques suivantes, à savoir : au moins 15% de monomères de flavanols, au moins 5% d'extrait de bambou, un ratio monomères de flavanols/extrait de bambou compris entre 0.17 et 19 et au moins 80 ppm de sélénium.
[0131] [Tableau 6]
[0132] Essai d'efficacité
[0133] Essai d'efficacité 1 - Evaluation de l'effet de la composition selon l'invention sur la capacité absorbante d'oxygène radicalaire (ORAC)
[0134] Les espèces réactives de l'oxygène ou radicaux libres sont des molécules qui peuvent hautement endommager les lipides, les protéines et l'ADN. Ils sont générés par une multitude de facteurs endogènes et environnementaux, pouvant entraîner des dommages progressifs sur les structures cellulaires, y compris sur les cheveux. Le stress oxydant peut avoir un impact sur les fibres capillaires pré-émergentes (métabolisme oxydatif, tabagisme, rayons UV et inflammation d'origine microbienne, polluante ou irritante), et sur les fibres post-émergentes (rayons UV, agressions chimiques). Bien que l'organisme possède des mécanismes de défense antioxydantes endogènes, elles diminuent avec l'âge pouvant créer un déséquilibre entre radicaux libres et défenses antioxydantes. Ainsi, les antioxydants présents dans les aliments peuvent jouer un rôle important dans la santé générale, y compris
la santé du cheveu.
[0135] L'objectif de cet essai est donc de comparer la capacité antioxydante de la composition selon l'invention avec les ingrédients pris individuellement ou en association deux par deux.
[0136] Pour ce faire, l'activité antioxydante a été mesurée in vitro par une réaction colorimétrique suivant la méthode ORAC, une méthode analytique permettant de déterminer l'activité antioxydante de substances naturelles que l'on retrouve dans les compléments alimentaires, certains agents pharmaceutiques ou ingrédients alimentaires. Le test ORAC, bien connu de l'Homme du métier, évalue la capacité des antioxydants d'un échantillon à limiter l'oxydation de la fluorescéine, une sonde fluorescente sensible à l'oxydation, par des radicaux peroxydes générés par un composant oxydant, l'AAPH.
L'oxydation de la fluorescéine s'accompagne d'une diminution de la fluorescence au cours du temps. Les antioxydants inhibent la réaction d'oxydation et donc retarde pendant un temps la diminution de la fluorescence. Le potentiel antioxydant est alors déterminé par la différence d'aire sous la courbe entre l'échantillon mesuré et un témoin antioxydant, le Trolox®. 1 unité ORAC équivaut à lpmole de Trolox par g d'échantillon.
[0137] Dans une plaque noire 96 puits, les quantités suivantes ont été déposées dans chaque puits : 25pl d'échantillon à tester, de solutions diluées de Trolox pour la gamme étalon (entre 5 et 30 pM) ou de tampon phosphate APHA pour le blanc (pH 7.5, 85mM) et 150pl de fluorescéine (8nM). Après une période d'incubation de 15 min à 37°C, 25pL d'AAPH (153mM) a été ajouté à chaque puits pour initier la réaction. Par la suite, un suivi de la fluorescence a été réalisé pendant 20min (excitation 485 nm, émission : 520nm). La valeur d'ORAC ainsi obtenue est exprimée en pmol Trolox/g extrait.
[0138] Les effets synergiques ont été évalués par une analyse de variance (ANOVA) à trois voies, suivi d'un test de comparaison multiple (HSD de Tukey). Enfin, un test U de Mann- Whitney a été effectué pour évaluer la significativité entre deux groupes.
[0139] Les résultats sont présentés dans la Fig. 1 et la Fig. 2 sous forme de moyenne ± SEM. Les valeurs p < 0,05 dénotent une signification statistique.
[0140] Les résultats démontrent ainsi que le mélange de polyphénols issus du thé vert [Fig. 1] et du raisin [Fig. 2] possèdent une capacité antioxydante assez importante, à l'inverse de l'extrait de bambou et du sélénium lorsqu'ils sont testés seuls, ou ensemble (bambou + sélénium). Cependant, lorsqu'on ajoute aux polyphénols du thé vert ou du raisin, l'extrait de
bambou et le sélénium, l'efficacité est significativement augmentée. Les inventeurs constatant un effet synergique associé à la combinaison de ces trois ingrédients.
[0141] La combinaison des 3 ingrédients (Exemple B du Tableau 2) augmente ainsi de 53% la capacité ORAC de l'association polyphénols thé vert + bambou (Fig. 1 ; p<0.001), et de 40% celle de l'association polyphénols thé vert + sélénium (Fig. 1 ; p<0.001). Il en va de même pour la combinaison des 3 ingrédients (Exemple C du Tableau 2) lorsque les polyphénols sont issus du raisin, dont la capacité antioxydante améliore la capacité ORAC de l'association extrait de bambou + polyphénols de 23% (Fig. 2 ; p<0.001) et celle de l'association levure séléniée + polyphénols de 16.6% (Fig. 2 ; p<0.001).
[0142] Ces résultats démontrent donc un effet synergique des ingrédients de la composition selon l'invention sur la capacité antioxydante, comme résumé dans le tableau 7 ci-après décrivant des exemples de calculs de formules donnant des résultats synergiques sur la capacité antioxydante.
[0143] [Tableau 7]
0144] En outre, les inventeurs ont démontré que l'impact bénéfique de la levure séléniée sur la capacité antioxydante des polyphénols observé dans la Figure 1 est bien dû au sélénium qu'il contient, la même expérience a été réalisée avec du sélénium pur (<99.5%) en remplacement de la levure. Comme pour la levure séléniée, les résultats montrent que cette autre source de sélénium augmente significativement la capacité antioxydante des polyphénols du thé (Fig. 3 ; p<0.05) et que l'association sélénium, extrait de bambou et polyphénols augmente encore davantage la capacité ORAC de ces derniers (Fig. 3 ; p<0.001). Ces données montrent que le sélénium, peu importe sa source, est bien au moins en partie responsable de l'effet synergique et non pas un autre composé de la levure.
[0145] Essai d'efficacité 2 - Effet antioxydant de la composition selon l'invention comparé à une composition hors invention
[0146] Cet essai selon le protocole décrit dans l'essai 1, vise à démontrer que l'effet synergique de l'association des trois ingrédients dépend de la partie du bambou utilisée, et non pas de son contenu en silice comme on aurait pu l'attendre à partir de l'enseignement
de l'art antérieur. En effet, nous avons comparé la capacité ORAC des polyphénols du thé seuls à l'association des polyphénols du thé, du sélénium et d'un extrait de pousse de bambou ou de tige de bambou, ces derniers étant tous deux titrés à 75% de silice. De manière surprenante, les inventeurs ont ainsi constaté que l'association des ingrédients avec de l'extrait de pousse de bambou améliore significativement la capacité ORAC des polyphénols seuls (Fig. 4 ; p<0.001), alors que l'association avec de l'extrait de tige de bambou n'a pas d'impact significatif sur la valeur ORAC comparé aux polyphénols du thé. [0147] Ces résultats décrits dans la Figure 4 démontrent que la silice du bambou, présente en même quantité dans les deux extraits, n'est pas responsable de l'effet synergique de l'association des trois ingrédients, mais d'autres molécules spécifiques de la pousse de bambou.
[0148] Essai d'efficacité 3 - Evaluation de l'effet de la composition selon l'invention sur l'efficacité proliférative sur cellules de papilles cutanées de follicules pileux humains (HFDPC) [0149] La régénérescence du cheveu provient des cellules souches des follicules capillaires (HFSC) et des cellules de la papille dermique (DPC). Ces dernières forment la couche cellulaire autour du bulbe et sont un réservoir important de cellule pour la régénérescence capillaire.
[0150] L'objectif de cet essai était de comparer la prolifération des cellules de la papille dermique provenant de follicules humains en présence ou en l'absence de la composition selon l'invention (Exemple B du Tableau 2).
[0151] Pour ce faire, des cultures primaires isolées du derme du cuir chevelu humain (HFDPC) ont été incubées à 37°C avec 5% de CO2 avec du milieu de croissance pour FDPC. Les cellules (6 réplicas cellulaires par condition) ont été mises en contact avec ou sans la composition selon l'invention pendant 48h. A l'issue de cette période d'incubation, les noyaux cellulaires ont été immunomarqués avec le fluorochrome DAPI et détectés par microscopie à épifluorescence puis comptés à l'aide du logiciel ImageJ.
[0152] Les résultats sont exprimés comme la moyenne du nombre de cellules par surface (Fig. 5) et montrent le pourcentage d'augmentation du nombre de cellule par rapport au groupe contrôle (Tableau 8, ci-après).
[0153] [Tableau 8]
0154] La composition selon l'invention, à savoir l'association de polyphénols, d'extrait de pousse de bambou et de sélénium, augmente significativement le nombre de cellules par surface par rapport à la condition non traitée (p<0.001), améliorant ainsi de 23% la densité cellulaire. Ces résultats démontrent alors l'efficacité de l'invention sur la prolifération des cellules responsables de la pousse du cheveux in vitro.
[0155] Essai d'efficacité 4 - Evaluation de l'effet de la composition selon l'invention sur la croissance et la santé des cheveux chez les femmes atteintes d'effluvium télogène aigu. [0156] Cette étude vise à évaluer l'efficacité d'une composition selon l'invention, à savoir constitué essentiellement de :
Monomères de flavanols : 73.2%
Extrait de pousse de bambou: 6,4%,
Sélénium : 90,3 ppm, sur la croissance, la perte, la densité, l'élasticité et la brillance des cheveux chez des femmes en bonne santé souffrant d'effluvium télogène aigu (33 femmes), par rapport à un groupe placebo (31 femmes).
[0157] Cette composition est administrée une fois par jour au petit déjeuner pendant 12 semaines (1 capsule de 280mg).
[0158] Les critères principaux d'inclusion sont les suivants : femmes en bonne santé de type caucasien, âgées de 18 à 65 ans souffrant d'effluvium télogène aigu transitoire (durée inférieure à 6 mois) non pathologique ne pas prendre de traitement contre la chute des cheveux au moins 3 mois avant l'étude ne suivre aucun traitement (oral ou topique) susceptible d'interférer avec la croissance ou la chute des cheveux pendant toute la durée de l'étude ne pas teindre les cheveux pendant les 4 semaines précédant le début de l'étude et pendant toute la durée de l'étude.
[0159] L'objectif principal de cette étude est de confirmer l'amélioration de la croissance des cheveux à l'aide d'un phototrichogramme (TrichoScan) après 84 jours.
[0160] Les objectifs secondaires de cette étude sont de confirmer : l'amélioration de la croissance des cheveux à l'aide d'un phototrichogramme (TrichoScan) après 42 jours,
l'augmentation de la densité et l'épaisseur des cheveux après 42 et 84 jours de supplémentation, la réduction de la perte de cheveux après 42 et 84 jours, l'amélioration de la longueur des cheveux après 84 jours l'augmentation de la brillance et l'élasticité des cheveux après 84 jours.
[0161] Le phototricogramme vise à évaluer la croissance/perte des cheveux. Des photos numériques ont été prises immédiatement après le rasage d'une zone du cuir chevelu (0 1,8 cm) et 2 jours plus tard. Les deux photos ont été comparées à l'aide d'un logiciel capable de déterminer si les cheveux étaient en phase anagène (croissance) ou télogène (arrêt de la croissance).
[0162] Le test de tirage des cheveux vise à évaluer la perte de cheveux. Une traction douce a été exercée sur 60 cheveux à 3 endroits différents du cuir chevelu. Si >10 cheveux/traction sont extraits, le sujet est atteint d'effluvium télogène.
[0163] Le test de spectrocolorimétrie vise à évaluer la couleur et la brillance des cheveux en évaluant la réflexion de la lumière sous un angle spécifique. La mesure (réalisée sur 5 points près de la racine des cheveux) de la réflexion de la lumière est effectuée à 8 degrés d'incidence par rapport à la perpendiculaire de la surface. Plus cette valeur est élevée, plus les cheveux sont brillants.
[0164] Les résultats sont présentés dans le tableau 9 pour les femmes recevant la composition selon l'invention et le tableau 10 pour les femmes recevant le placebo, ainsi que les [Fig. 6] et [Fig. 7], (*p<0.05; **p<0.01; ***p<0.001 vs. T0; s p<0.05; ss p<0.01; sss pcO.001 vs. Placebo).
[0165] [Tableau 9]
0166] [Tableau 10]
[0167] Ces résultats montrent que la composition selon l'invention permet l'augmentation de la densité des cheveux en phase anagène [Fig. 6], une amélioration de la brillance des cheveux et de leur volume [Fig. 7] ainsi qu'une réduction de la chute des cheveux ce qui montre que la composition selon l'invention induit une meilleure santé capillaire avec une repousse/régénération des cheveux favorisée.
[0168] Essai d'efficacité 5 - Evaluation de l'effet d'une composition selon l'invention sur la
pousse et la santé des cheveux chez des femmes souhaitant améliorer la croissance et la force de leurs cheveux.
[0169] Cette étude en vie réelle vise à évaluer l'efficacité d'une composition selon l'invention sur la pousse, la force, la densité, l'hydratation, la brillance et la beauté des cheveux chez 40 femmes en bonne santé.
[0170] Cette composition selon l'invention est constituée essentiellement de 26 % de monomères, 145ppm de sélénium et 10,6% d'extrait de pousse de bambou, et est administrée une fois par jour le matin pendant 3 mois (1 capsule de 170mg).
[0171] Les critères d'inclusion sont les suivants :
Femmes françaises en bonne santé, âgées de 25 à 45 ans
Etant insatisfaites de la qualité de leurs cheveux (ayant une faible pousse, force, brillance)
Ne pas être enceinte, allaitante, en période de ménopause ou péri-ménopause ou ne pas avoir accouché depuis moins de 6 mois
Ne pas prendre de produit (traitement, complément alimentaire, huiles essentielles) pour les cheveux/ongles au moins 2 mois avant l'étude
Ne pas suivre de traitement médicamenteux au long court
Ne suivre aucun traitement (oral ou topique) susceptible d'interférer avec la croissance ou la chute des cheveux pendant toute la durée de l'étude
Ne pas souffrir de psoriasis ou d'eczéma du cuir chevelu
Ne pas avoir réalisé de changement de votre routine de soins capillaires dans les 2 mois précédents l'étude et pendant toute la durée de l'étude
[0172] L'objectif principal de cette étude est de confirmer l'amélioration de la qualité des cheveux après 3 mois de supplémentation à l'aide de questionnaires de satisfaction.
[0173] Pour cela, des questionnaires sont réalisés à T0 (avant le début de la cure), T30, T60 et T90 jours afin de confirmer :
L'amélioration de la pousse des cheveux
L'amélioration de la force des cheveux
L'amélioration de la densité des cheveux
L'amélioration de la brillance des cheveux
L'amélioration de l'hydratation des cheveux
L'amélioration de la beauté des cheveux
L'efficacité ressentie de la composition
[0174] Les résultats sont présentés dans le tableau 11, ci-après.
[0175] [Tableau 11]
0176] Ces résultats montrent que la composition selon l'invention améliore la pousse, la force, la brillance, la densité, l'hydratation et la beauté des cheveux après seulement 1 mois de supplémentation. Ces différents paramètres sont d'autant plus améliorés après 3 mois de supplémentation. Au total, 90% des femmes trouvent la formule efficace sur la beauté globale de leurs cheveux après 3 mois de supplémentation.
Claims
[Revendication 1] Composition comprenant, à titre d'ingrédient actif, une combinaison d'ingrédients constituée essentiellement par : un mélange de polyphénols un extrait de bambou, et du sélénium
[Revendication 2] Composition selon la revendication précédente, caractérisée en ce que l'extrait de bambou est un extrait de pousse de bambou.
[Revendication 3] Composition selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que le mélange de polyphénols est obtenu à partir d'un ingrédient naturel choisi parmi un extrait de vigne, de raisin, de thé, de pomme, de cacao, de fruits rouges, de pin maritime, de fruits à drupe et de fruits à coque.
[Revendication 4] Composition selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que le mélange de polyphénols comprend au moins des monomères de flavanols.
[Revendication 5] Composition selon la revendication précédente, caractérisée en ce que l'ingrédient actif est constitué essentiellement de : au moins 15% de monomères de flavanols, mesuré par HPLC-DAD, et/ou au moins 5% d'extrait de pousse de bambou, et/ou au moins 80 ppm de sélénium, les quantités étant données en poids sec par rapport au poids sec total de l'ingrédient actif.
[Revendication 6] Composition selon l'une des revendications 4 ou 5, caractérisée en ce que le ratio monomères de flavanols et extrait de bambou est compris entre 0,17 et 19.
[Revendication 7] Composition selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que la composition est sous une forme adaptée à une administration orale.
[Revendication 8] Composition nutricosmétique comprenant la composition selon l'une des revendications précédentes et au moins un excipient acceptable.
[Revendication 9] Utilisation non thérapeutique d'une composition selon l'une des revendications 1 à 8, pour améliorer, promouvoir la croissance des cheveux, et/ou stimuler la croissance du follicule pileux et/ou augmenter
la brillance des cheveux chez un individu ne souffrant pas d'une maladie liée à la perte de cheveux.
[Revendication 10] Composition selon l'une des revendications 1 à 7, pour son utilisation pour améliorer, promouvoir la croissance des cheveux et/ou stimuler la croissance du follicule pileux et/ou lutter contre la perte des cheveux, chez un individu souffrant d'au moins une maladie liée à la perte de cheveux.
[Revendication 11] Composition selon l'une des revendications 1 à 7, pour son utilisation pour ses effets antioxydants.
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Non-Patent Citations (2)
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| DATABASE GNPD [online] MINTEL; 12 May 2008 (2008-05-12), ANONYMOUS: "Topic + Oral Extreme Anti-Ageing Formula", XP093241266, retrieved from https://www.gnpd.com/sinatra/recordpage/912164/ Database accession no. 912164 * |
| DATABASE GNPD [online] MINTEL; 22 February 2010 (2010-02-22), ANONYMOUS: "Triple Action Facial Scrub", XP093241264, retrieved from https://www.gnpd.com/sinatra/recordpage/1276612/ Database accession no. 1276612 * |
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