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WO2025219389A1 - Compositions contenant une combinaison synergique de mémantine et de vitamine d - Google Patents

Compositions contenant une combinaison synergique de mémantine et de vitamine d

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Publication number
WO2025219389A1
WO2025219389A1 PCT/EP2025/060377 EP2025060377W WO2025219389A1 WO 2025219389 A1 WO2025219389 A1 WO 2025219389A1 EP 2025060377 W EP2025060377 W EP 2025060377W WO 2025219389 A1 WO2025219389 A1 WO 2025219389A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
memantine
vitamin
glutamate
cholecalciferol
disease
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
PCT/EP2025/060377
Other languages
English (en)
Inventor
Sébastien Maurice LASNIER
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Synaptys Neuroscience
Original Assignee
Synaptys Neuroscience
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Synaptys Neuroscience filed Critical Synaptys Neuroscience
Publication of WO2025219389A1 publication Critical patent/WO2025219389A1/fr
Pending legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/59—Compounds containing 9, 10- seco- cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems
    • A61K31/593—9,10-Secocholestane derivatives, e.g. cholecalciferol, i.e. vitamin D3
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia

Definitions

  • the present invention relates to compositions comprising a synergistic combination of memantine and vitamin D, their method of preparation and their use in the prevention and treatment of neurodegenerative diseases, in particular Alzheimer's disease.
  • Glutamate excitotoxicity is implicated in acute neurological damage caused by ischemia and traumatic brain injury, as well as in chronic neurodegeneration in Alzheimer's disease and Huntington's disease.
  • Excitotoxic neuronal death through overactivation of the N-methyl-D-aspartic acid receptor (NMDA receptor or NMDAR) contributes to an excessive and continuous flow of calcium (Ca2 + ) into the cell. This triggers a range of reactions leading to cell death, including increased oxidative stress, inappropriate activation of proteases such as calpain, dysregulation of Ca2 + -related pathways, mitochondrial damage, and an apoptotic cascade.
  • Memantine is a low-affinity, voltage-dependent, non-competitive NMDA receptor antagonist. It is currently prescribed for the treatment of Alzheimer's disease in conjunction with acetylcholinesterase inhibitors such as galantamine, donepezil, and rivastigmine (Allgaier et al., Frontiers in Bioscience, 2014, vol. 19, pp. 1345-1354). As a low-affinity antagonist, it blocks NMDA receptors, but is rapidly displaced from them, avoiding the prolonged blockade of the NMDA receptor channel and the negative side effects on learning and memory that have been observed with high-affinity NMDAR antagonists (dissociative anesthetics, ketamine, and MK-801).
  • memantine Another advantage of memantine is that it only interacts with the NMDA receptor channel when it is pathologically activated under excessive glutamate concentration in the synaptic cleft, as is the case in Alzheimer's disease (Masters et al., Nature Reviews/Disease primers, 2015, 1, pp. 1-18).
  • cholecalciferol is a form of vitamin D, also known as vitamin D3. Cholecalciferol is an essential substance required for calcium and phosphorus homeostasis in the human body. Furthermore, cholecalciferol receptors (VDRs) and cholecalciferol-activating enzymes have been found in different brain structures, including the hippocampus, prefrontal cortex, and amygdala (Adam et al., Clin Endocrinol Metab, February 2010, 95(2), pp. 471-478).
  • Cholecalciferol may modulate different physiological processes in the brain, such as the regulation of brain-derived neurotrophic factor (BDNF) and other neurotrophic factors, neurogenesis, neuroplasticity, neuroprotection, and neuroimmunomodulation (DeLuca et al., Neuropathology and Applied Neurobiology, 2013, 39(5), pp. 458-484; Koshkina et al., Nutrients, 2019, 11, p. 1726). Used alone, cholecalciferol has no proven efficacy in the treatment of neurodegenerative diseases, particularly Alzheimer's disease.
  • BDNF brain-derived neurotrophic factor
  • patent FR. 2 965 178 B1 describes pharmaceutical compositions comprising a combination of 5 to 20 mg of memantine hydrochloride and 800 to 2000 IU of cholecalciferol which could be useful in the treatment of Alzheimer's disease.
  • This patent suggests, without however demonstrating it, that there could be a potentiating effect between the two active ingredients, in particular a potentiating effect of vitamin D on memantine.
  • Patent application EP 2 363 119 A1 describes pharmaceutical compositions comprising from 1 to 40 mg of memantine and from 200 to 10,000 IU of vitamin D, i.e. from 5 pg to 250 pg of vitamin D (40 IU of vitamin D corresponds to the biological equivalent of 1 pg of vitamin D). These compositions are described as being useful in the treatment of Alzheimer's disease, but no results proving this effect are given.
  • Anweiler C. et al. (Neurobiology of Aging, 2014, 35, pp. 331-335) describe a neuroprotective effect of a combination comprising 1 pM memantine and 100 nM vitamin D in an in vitro model of glutamate toxicity on cortical cells.
  • D. Charier et al. (Annales conses d'Anesthésie et de Réanimation 33S, 2014, A168- A173) describe a synergistic effect of memantine at a concentration of 1 mM and vitamin D at a concentration of 100 nM on the prevention of neuronal death in a model of mouse neurons cultured on microfluidic medium and subjected to blood aggression.
  • memantine when administered alone, is effective in the treatment of Alzheimer's disease at a dose greater than 5 mg.
  • memantine-based drugs prescribed for the treatment of moderate to severe forms of Alzheimer's disease contain, regardless of the manufacturer, doses of 10 mg or 20 mg of memantine.
  • memantine frequently causes adverse effects such as drowsiness, dizziness, balance disorders, shortness of breath, headaches, constipation, high blood pressure and increased transaminases...
  • the present invention aims to satisfy this need.
  • the subject of the invention is a pharmaceutical composition
  • a pharmaceutical composition comprising a synergistic combination of memantine and vitamin D and at least one pharmaceutically acceptable excipient, said composition being characterized in that the unit dose of memantine present within said composition is less than 0.5 mg and in that the unit dose of vitamin D present within said composition is less than 0.08 mg.
  • the invention relates to said pharmaceutical composition for its use in the prevention and/or treatment of neurodegenerative diseases, and in particular Alzheimer's disease.
  • the invention relates to a combined preparation comprising at least two individual components, said preparation being characterized in that a first component contains a unit dose of memantine in an amount of less than 0.5 mg and in that a second component contains a unit dose of vitamin D in an amount of less than 0.08 mg for simultaneous, separate or sequential use in the prevention and/or treatment of neurodegenerative diseases, and in particular Alzheimer's disease.
  • the invention relates to a method for preventing, inhibiting, delaying or treating neuronal degeneration, in particular that linked to Alzheimer's disease in a subject who needs it, said method being characterized in that it comprises the administration of a pharmaceutical composition as defined according to the first aspect of the invention or of a combined preparation as defined according to the third aspect of the invention to said subject.
  • the inventors have shown that the combination of memantine and vitamin D makes it possible to significantly reduce the effective unit dose of memantine usually used in the treatment of Alzheimer's disease.
  • the inventors have been able to demonstrate that when memantine is used in combination with vitamin D, it is possible to reduce the effective unit dose of memantine by a factor of at least 100.
  • the invention therefore has as its first subject a pharmaceutical composition comprising a synergistic combination of memantine and vitamin D, said composition being characterized in that the unit dose of memantine present within said composition is less than 0.5 mg and in that the unit dose of vitamin D present within said composition is less than 0.08 mg. At such unit doses, each of these two compounds shows no activity on neuronal survival and protection of the neuritic network.
  • memantine is in the form of a salt, in particular hydrochloride.
  • vitamin D may be chosen from the group comprising vitamin D2 or ergocalciferol, vitamin D3 or cholecalciferol, vitamin D4 or 22-dihydroergocalciferol, vitamin Ds or sitocalciferol, their derivatives such as, for example, vitamin D ethyl derivative of vitamin D4 or vitamin D7, 24R-methyl derivative of vitamin D3, as well as their salts.
  • the vitamin D is cholecalciferol.
  • the unit dose of memantine is from about 5 pg to 0.1 mg and the unit dose of vitamin D is from about 0.8 pg to 8 pg.
  • the memantine/vitamin D molar ratio within said synergistic association is from 1:2 to 1:100 and even more preferably from 1:3.5 to 1:100.
  • the term "pharmaceutically acceptable excipient” means any substance other than the active substance(s), intended to provide a consistency, taste or color to a drug, while avoiding any interaction with the active substance(s).
  • the pharmaceutically acceptable excipient according to the invention will be chosen according to the pharmaceutical form and the desired method of administration, from among the usual excipients which are known to those skilled in the art, with a view to being administered to humans or animals.
  • the pharmaceutical composition according to the present invention may be in any pharmaceutical form suitable for local, regional, systemic or continuous administration.
  • routes of administration include oral, sublingual, subcutaneous, parenteral, intramuscular, intravenous, intranasal, or rectal administration or any other route of administration.
  • Suitable administration forms include oral forms such as tablets, soft or hard capsules, powders, granules and oral solutions or suspensions, administration forms sublingual, buccal, intranasal, inhalation, subcutaneous, intramuscular or intravenous administration forms, rectal administration forms and implants.
  • the pharmaceutical composition is formulated for oral administration.
  • composition in accordance with the present invention can be prepared by any techniques known to those skilled in the art, in particular by mixing memantine and cholecalciferol with at least one pharmaceutically acceptable excipient.
  • the synergistic combination present in the pharmaceutical composition in accordance with the present invention exhibits a neuroprotective effect at a very low dose of memantine which is completely inactive when used alone. Also, the synergistic combination of memantine and vitamin D usable according to the invention exhibits a better therapeutic index than memantine alone.
  • the invention also relates to the pharmaceutical composition comprising a synergistic combination of memantine and vitamin D and at least one pharmaceutically acceptable excipient as defined according to the first subject of the invention, for its use in the prevention and/or treatment of degenerative diseases.
  • Neurodegenerative diseases include Alzheimer's disease, dementias such as Lewy body dementia, frontotemporal dementia (FTD) and mixed dementia, and other neurodegenerative diseases such as Lou Gehrig's disease (or amyotrophic lateral sclerosis or ALS) or progressive supranuclear palsy (PSP).
  • the invention is particularly aimed at the treatment of Alzheimer's disease.
  • Memantine and cholecalciferol can be formulated together or mixed just before administration. In this case, they can be presented in a form suitable for combined administration for use in the prevention and/or treatment of neurodegenerative diseases, particularly Alzheimer's disease.
  • the third subject of the invention is a combined preparation comprising at least two individual components, said preparation being characterized in that a first component contains a unit dose of memantine in an amount of less than 0.5 mg and in that a second component contains a unit dose of vitamin D in an amount of less than 0.08 mg, for simultaneous, separate or sequential use in the prevention and/or treatment of neurodegenerative diseases, and in particular Alzheimer's disease.
  • the fourth subject of the invention is a method for preventing, inhibiting, delaying or treating neuronal degeneration, in particular that linked to Alzheimer's disease in a subject in need thereof, in which the method comprises the administration of an effective amount of the pharmaceutical composition as defined according to the first subject of the invention or of a combined preparation according to the third subject of the invention.
  • the usual dosage for an adult of approximately 70 kg comprises the administration of a pharmaceutical composition as defined according to the first object of the invention or of a combined preparation as defined according to the third object of the invention, once or twice a day.
  • the unit dose of memantine and the unit dose of vitamin D are preferably administered simultaneously, even more preferably, simultaneously and orally.
  • Figure 2A represents the effect of a combination of memantine (at 500 pM in 180 pL of medium) and cholecalciferol (at doses varying from 5 nM to 80 nM in 180 pL of medium) on the survival of MAP-2 neurons in a primary culture of cortical neurons injured by glutamate according to the example.
  • Figure 2B represents the effect of a combination of memantine (at 500 pM in 180 pL of medium) and cholecalciferol (at doses ranging from 5 nM to 80 nM in 180 pL of medium) on the protection of the total neuronal network in a primary culture of cortical neurons injured by glutamate according to the example.
  • Figure 3A represents the effect of a combination of memantine (at 1 nM in 180 pL of medium) and cholecalciferol (at doses varying from 5 nM to 80 nM in 180 pL of medium) on the survival of MAP-2 neurons in a primary culture of cortical neurons injured by glutamate according to the example.
  • Figure 3B represents the effect of a combination of memantine (at 1 nM in 180 pL of medium) and cholecalciferol (at doses ranging from 5 nM to 80 nM in 180 pL of medium) on the protection of the total neuronal network in a primary culture of cortical neurons injured by glutamate according to the example.
  • Figure 4A represents the effect of a combination of memantine (at 10 nM in 180 pL of medium) and cholecalciferol (at doses varying from 5 nM to 80 nM in 180 pL of medium) on the survival of MAP-2 neurons in a primary culture of cortical neurons injured by glutamate according to the example.
  • Figure 4B represents the effect of a combination of memantine (at 10 nM in 180 pL of medium) and cholecalciferol (at doses varying from 5 nM to 80 nM in 180 pL of medium) on the protection of the total neuronal network in a primary culture of cortical neurons injured by glutamate according to the example.
  • Glutamate excitotoxicity is responsible for neuronal death in acute neurological disorders, including neurodegenerative diseases. Loss of calcium homeostasis is a key mediator of glutamate-induced cell death. The inventors tested memantine alone for its ability to prevent or reduce the toxic effects of glutamate on glutamate-injured primary cortical neurons.
  • Rat cortical neurons were cultured as described by Callizot et al. (J. Neurosc. Res. (2013), 91(5), 706-716).
  • Pregnant rats (Wistar) of 15 Days of gestation were killed using deep anesthesia with a CO2 chamber and cervical dislocation. Briefly, fetuses were collected and immediately placed in ice-cold Leibovitz L15 medium with 2% penicillin (10,000 U/mL) and streptomycin (10 mg/mL) solution (PS) and 1% bovine serum albumin (BSA) solution. Cortices were treated for 20 minutes at 37°C with a trypsin-EDTA solution at a final concentration of 0.05% trypsin and 0.02% EDTA.
  • DMEM Dulbecco's Modified Eagle's Medium
  • FCS fetal calf serum
  • Cells were mechanically disrupted by three forced passages through the tip of a 10 mL pipette. Cells were then centrifuged at 515 x g for 10 minutes at 4°C. The supernatant was discarded, and the pellet was resuspended in defined culture medium consisting of neurobasal medium with 2% B27 supplement, 2 mmol/L L-glutamine, 2% PS solution, and 10 ng/mL brain-derived neurotrophic factor (BDNF).
  • BDNF brain-derived neurotrophic factor
  • Viable cells were counted in a Neubauer cytometer, using the trypan blue exclusion assay. Cells were seeded at a density of 25,000 cells per well in poly-L-lysine-precoated 96-well plates and grown at 37°C in an air (95%) - CO2 (5%) incubator.
  • Pre-incubation on day 13 of culture, memantine (memantine hydrochloride SIGMA ALDRICH) and cholecalciferol (SIGMA ALDRICH) were diluted in 180 ⁇ L of culture medium as defined in point 1.1.1. to a final concentration of 1x and preincubated with primary cortical neurons for 1 h, before exposure to glutamate.
  • memantine memantine hydrochloride SIGMA ALDRICH
  • SIGMA ALDRICH cholecalciferol
  • Glutamate treatment On day 13 of culture, glutamate was added at a final concentration of 20 pM diluted in the 180 pL of culture medium still in the presence of the compounds (alone or in combination) for 20 minutes. After 20 minutes, the glutamate was removed by washing and a little medium was added. Fresh culture with the test compounds at the same 1x concentration was added for an additional 48 hours.
  • MAP-2 survival and neural network
  • MAP-2 is a neuronal marker present in the cell bodies and neurites of neurons, and which allows the study of neuron survival and the length of the neuritic network.
  • MAP-2 mouse monoclonal anti-microtubule-associated protein 2
  • This antibody was revealed by goat anti-microtubule IgG Alexa Fluor 488 (Molecular Probes) (1:400 dilution) in PBS containing 1% fetal bovine serum, 0.1% saponin, for 1 hour at room temperature.
  • Glutamatergic stress induces a loss of cortical neurons (Fig. 1A) and a shrinkage of the total neuritic network (Fig. 1B).
  • Memantine used alone shows neuroprotective effects, as it strongly improves neuronal survival at all tested concentrations between 50 nM and 10 pM (in 180 pL of medium, corresponding to doses between 0.009 nmol and 0.0018 pmol of memantine per well).
  • a significant protective effect on the neuritic network was observed for concentrations of 100 nM to 10 pM (in 180 pL of medium, corresponding to doses of 0.018 nmol to 0.0018 pmol per well). Only the two lowest concentrations (500 pM and 10 nM, in 180 pL of medium and corresponding to doses of 0.09 pmol and 0.0018 nmol per well) are inactive.
  • the first 3 inactive concentrations for memantine were selected, namely concentrations of 500 pM, 1 nM and 10 nM (in 180 pL of medium and corresponding respectively to doses of 0.09 pmol, 0.00018 nmol and 0.0018 nmol per well).
  • concentrations of memantine was tested in association with cholecalciferol at concentrations ranging from 5 nM to 80 nM (in 180 pL of medium), corresponding to equally very low doses of vitamin D ranging from 0.0009 nmol to 0.0144 nmol per well.
  • Glutamatergic stress induces a loss of cortical neurons (Fig. 2A, 3A and 4A) and a shrinkage of the total neuritic network (Fig. 2B, 3B and 4B).
  • cholecalciferol concentrations 20 nM (i.e. 0.0036 nmol/well) and 35 nM (i.e. 0.0063 nmol/well). It is interesting to note that when the cholecalciferol concentration is lower than 35 nM (i.e. 0.0063 nmol/well) or higher than 50 nM (i.e. 0.009 nmol/well), this effect is not observed.
  • cholecalciferol concentrations 20 nM (i.e. 0.0036 nmol/well), 35 nM (i.e. 0.0063 nmol/well) and 50 nM (i.e. 0.009 nmol/well). It is interesting to note that when the cholecalciferol concentration is lower than 20 nM (i.e. 0.0036 nmol/well) or higher than 50 nM (i.e. 0.009 nmol/well), this effect is not observed.

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Abstract

L'invention concerne des compositions comprenant une association synergique de mémantine et de vitamine D, leur méthode de préparation et leur utilisation dans la prévention et le traitement des maladies neurodégénératives, en particulier de la maladie de Alzheimer.

Description

DESCRIPTION
Compositions contenant une combinaison synergique de mémantine et de vitamine D
La présente invention concerne des compositions comprenant une association synergique de mémantine et de vitamine D, leur méthode de préparation et leur utilisation dans la prévention et le traitement des maladies neurodégénératives, en particulier de la maladie d'Alzheimer.
L'excitotoxicité du glutamate est impliquée dans les dommages neurologiques aigus causés par l'ischémie et les lésions cérébrales traumatiques, ainsi que dans la neurodégénérescence chronique de la maladie d'Alzheimer et de la maladie de Huntington. La mort neuronale excitotoxique par suractivation du récepteur N- méthyl-D-aspartique (récepteurs NMDA ou NMDAR) contribue à un flux excessif et continu de calcium (Ca2+) dans la cellule. Cela déclenche toute une série de réactions entraînant la mort cellulaire, notamment un stress oxydatif accru, une activation inappropriée des protéases telles que la calpaïne, une dysrégulation des voies liées au Ca2+, des dommages mitochondriaux et une cascade apoptotique.
La mémantine (MEM) est un antagoniste non compétitif des récepteurs NMDA, de faible affinité et voltage-dépendant. Elle est actuellement prescrite pour le traitement de la maladie d'Alzheimer conjointement avec des inhibiteurs de l'acétylcholinestérase tels que la galantamine, le donépézil et la rivastigmine (Allgaier et al., Frontiers in Bioscience, 2014, vol. 19, p. 1345-1354). Comme il s'agit d'un antagoniste de faible affinité, il bloque les récepteurs NMDA, mais il en est rapidement déplacé, ce qui évite le blocage prolongé du canal des récepteurs NMDA et les effets secondaires négatifs sur l'apprentissage et la mémoire qui ont été observés chez les antagonistes NMDAR. de haute affinité (anesthésiques dissociatifs, kétamine et MK-801). Un autre avantage de la mémantine est qu'elle n'interagit avec le canal des récepteurs NMDA que lorsqu'il est pathologiquement activé sous une concentration excessive de glutamate dans la fente synaptique, comme c'est le cas pour la maladie d'Alzheimer (Masters et al., Nature Reviews/ Disease primers, 2015, 1, p. 1-18).
Il est généralement admis que le cholécalciférol est une forme de vitamine D, également appelée vitamine D3. Le cholécalciférol est une substance essentielle nécessaire à l'homéostasie du calcium et du phosphore dans le corps humain. En outre, les récepteurs du cholécalciférol (VDR) et les enzymes activant le cholécalciférol ont été trouvés dans différentes structures du cerveau, notamment l'hippocampe, le cortex préfrontal et l'amygdale (Adam et al., Clin Endocrinol Metab, February 2010, 95(2), p. 471-478). Le cholécalciférol pourrait moduler différents processus physiologiques dans le cerveau, tels que la régulation du facteur neurotrophique dérivé du cerveau (BDNF) et d'autres facteurs neurotrophiques, la neurogénèse, la neuroplasticité, la neuroprotection et la neuroimmunomodulation (DeLuca et al., Neuropathology and Applied Neurobiology, 2013, 39(5), p. 458-484) ; Koshkina ét al., Nutrients, 2019, 11, p. 1726). Utilisé seul, le cholécalciférol n'a aucune efficacité démontrée dans le traitement des maladies neurodégénératives et en particulier de la maladie d'Alzheimer.
Dans cette optique, un traitement pharmacologique précoce avec des substances réduisant l'excitotoxicité du glutamate pourrait représenter une très bonne option pour améliorer la survie neuronale (et la fonction cognitive), et pourrait représenter une stratégie thérapeutique intéressante pour les patients diagnostiqués avec la maladie d'Alzheimer et plus généralement atteints d'une maladie neurodégénérative.
Ainsi le brevet FR. 2 965 178 B1 décrit des compositions pharmaceutiques comprenant une association de 5 à 20 mg de chlorhydrate de mémantine et de 800 à 2000 UI de cholécalciférol qui pourraient être utiles dans le traitement de la maladie d'Alzheimer. Ce brevet suggère, sans néanmoins le démontrer, qu'il pourrait y avoir un effet de potentialisation entre les deux principes actifs, notamment un effet potentialisateur de la vitamine D sur la mémantine.
La demande de brevet EP 2 363 119 Al décrit des compositions pharmaceutiques comprenant de 1 à 40 mg de mémantine et de 200 à 10 000 UI de vitamine D soit de 5 pg à 250 pg de vitamine D (40 UI de vitamine D correspondent à l'équivalent biologique de 1 pg de vitamine D). Ces compositions sont décrites comme pouvant être utiles dans le traitement de la maladie d'Alzheimer mais aucun résultat prouvant cet effet n'est donné.
Anweiler C. ét al. (Neurobiology of Aging, 2014, 35, p. 331-335) décrivent un effet neuroprotecteur d'une association comprenant 1 pM de mémantine et 100 nM de vitamine D dans un modèle in vitro de toxicité du glutamate sur des cellules corticales. D. Charier et al. (Annales Françaises d'Anesthésie et de Réanimation 33S, 2014, A168- A173) décrivent un effet synergique de la mémantine à une concentration de 1 mM et de la vitamine D à une concentration de 100 nM sur la prévention de la mort neuronale sur un modèle de neurones de souris cultivés sur milieu microfluidique et soumis à une agression par du sang.
Bien que la combinaison mémantine/vitamine D et sa potentielle application dans le traitement de la maladie d'Alzheimer aient déjà été décrites, ces principes actifs sont utilisés à des doses élevées qui pourraient présenter des effets secondaires néfastes. En effet, il ressort des différentes publications de l'art antérieur que la mémantine, lorsqu'elle est administrée seule, est efficace dans le traitement de la maladie d'Alzheimer à une dose supérieure à 5 mg. A titre d'exemple, les médicaments à base de mémantine prescrits pour le traitement des formes modérées à sévères de la maladie d'Alzheimer contiennent, quels que soient les fabricants, des doses de 10 mg ou de 20 mg de mémantine. A de telles doses, la mémantine entraine fréquemment des effets indésirables tels que somnolence, sensation vertigineuse, troubles de l'équilibre, essoufflement, maux de tête, constipation, hypertension artérielle et augmentation des transaminases...
Il a par ailleurs été reconnu que les récepteurs sur lesquels la mémantine est active, à savoir les récepteurs NMDA, peuvent s'internaliser, baissant l'efficacité de la mémantine et ainsi créer un échappement thérapeutique après une certaine durée de traitement (Katherine W. Roche et al., Nature Neuroscience, 2001, volume 4, pages 794-802).
Il existe donc un besoin pour des compositions pharmaceutiques permettant de remédier à ces inconvénients afin de prévenir et/ou de traiter les maladies neurodégénératives, en particulier la maladie d'Alzheimer, de façon efficace tout en limitant les effets secondaires néfastes habituellement observés ou susceptibles d'être observés lorsqu'une dose de 5 mg ou plus de mémantine est utilisée et en diminuant ou supprimant l'échappement thérapeutique.
La présente invention a pour but de satisfaire ce besoin.
Selon un premier aspect, l'invention a pour objet une composition pharmaceutique comprenant une association synergique de mémantine et de vitamine D et au moins un excipient pharmaceutiquement acceptable, ladite composition étant caractérisée en ce que la dose unitaire de mémantine présente au sein de ladite composition est inférieure à 0,5 mg et en ce que la dose unitaire de vitamine D présente au sein de ladite composition est inférieure à 0,08 mg.
Selon un deuxième aspect, l'invention a pour objet ladite composition pharmaceutique pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement des maladies neurodégénératives, et en particulier de la maladie d'Alzheimer.
Selon un troisième aspect, l'invention a pour objet une préparation combinée comprenant au moins deux composants individuels, ladite préparation étant caractérisée en ce qu'un premier composant renferme une dose unitaire de mémantine en une quantité inférieure à 0,5 mg et en ce qu'un deuxième composant renferme une dose unitaire de vitamine D en une quantité inférieure à 0,08 mg pour une utilisation simultanée, séparée ou séquentielle dans la prévention et/ou le traitement des maladies neurodégénératives, et en particulier de la maladie d'Alzheimer.
Enfin selon un quatrième aspect, l'invention a pour objet une méthode pour prévenir, inhiber, retarder ou traiter la dégénérescence neuronale, notamment celle liée à la maladie d'Alzheimer chez un sujet qui en a besoin, ladite méthode étant caractérisée en ce qu'elle comprend l'administration d'une composition pharmaceutique telle que définie selon le premier aspect de l'invention ou d'une préparation combinée telle que définie selon le troisième aspect de l'invention audit sujet.
En effet, et ainsi que cela est démontré dans les exemples qui suivent, les inventeurs ont mis en évidence que la combinaison de mémantine et de vitamine D permet de diminuer de façon très importante la dose unitaire efficace de mémantine habituellement utilisée dans le traitement de la maladie d'Alzheimer. En particulier, les inventeurs ont pu démontrer que lorsque la mémantine est utilisée en association avec de la vitamine D, il est possible de diminuer la dose unitaire efficace de mémantine par un facteur d'au moins 100.
L'invention a donc pour premier objet une composition pharmaceutique comprenant une association synergique de mémantine et de vitamine D, ladite composition étant caractérisée en ce que la dose unitaire de mémantine présente au sein de ladite composition est inférieure à 0,5 mg et en ce que la dose unitaire de vitamine D présente au sein de ladite composition est inférieure à 0,08 mg. A de telles doses unitaires, chacun de ces deux composés ne présente aucune activité sur la survie neuronale et protection du réseau neuritique.
Dans un mode de réalisation avantageux de l'invention, la mémantine se présente sous forme de sel, notamment de chlorhydrate.
Conformément à l'invention, la vitamine D peut être choisie dans le groupe comprenant la vitamine D2 ou ergocalciferol, la vitamine D3 ou cholécalciférol, la vitamine D4 ou 22-dihydroergocalciférol, la vitamine Ds ou sitocalciférol, leurs dérivés comme par exemple la vitamine De dérivé éthylé de la vitamine D4 ou la vitamine D7, dérivé 24R-méthyl de la vitamine D3, ainsi que leurs sels.
Dans un autre mode de réalisation particulièrement avantageux de l'invention, la vitamine D est du cholécalciférol.
Selon une forme de réalisation préférée de l'invention, la dose unitaire de mémantine est de 5 pg à 0,1 mg environ et la dose unitaire de vitamine D est de 0,8 pg à 8 pg environ.
Egalement selon une forme de réalisation préférée de l'invention, le rapport molaire mémantine / vitamine D au sein de ladite association synergique est de 1 :2 à 1 : 100 et encore plus préférentiellement de 1 :3,5 à 1 : 100.
Conformément à l'invention, on entend par « excipient pharmaceutiquement acceptable », toute substance autre que la ou les substances actives, destinée à apporter une consistance, un goût, une couleur à un médicament, tout en évitant toute interaction avec le ou les substances actives. L'excipient pharmaceutiquement acceptable selon l'invention sera choisi selon la forme pharmaceutique et le mode d'administration souhaité, parmi les excipients habituels qui sont connus de l'homme du métier, en vue d'être administré à l'Homme ou aux animaux.
La composition pharmaceutique conforme à la présente invention peut se présenter sous toute forme pharmaceutique adaptée à l'administration locale, régionale, systémique ou continue. On peut citer à titre d'exemple les voies d'administration suivantes : voie orale, sublinguale, sous-cutanée, parentérale, intramusculaire, intraveineuse, intranasale, ou rectale ou par toute autre voie d'administration. Les formes d'administration appropriées comprennent les formes par voie orale telles que les comprimés, les gélules molles ou dures, les poudres, les granules et les solutions ou suspensions orales, les formes d'administration sublinguale, buccale, intranasale, par inhalation, les formes d'administration sous- cutanée, intramusculaire ou intraveineuse, les formes d'administration rectale et les implants.
Selon une forme de réalisation préférée de l'invention, la composition pharmaceutique est formulée pour une administration par la voie orale.
La composition pharmaceutique conforme à la présente invention peut être préparée par toutes techniques connues de l'homme du métier, notamment par mélange de la mémantine et du cholécalciférol avec au moins un excipient pharmaceutiquement acceptable.
Comme indiqué précédemment, l'association synergique présente dans la composition pharmaceutique conforme à la présente invention présente un effet neuroprotecteur à une dose de mémantine très faible qui est totalement inactive lorsqu'elle est utilisée seule. Aussi l'association synergique de mémantine et de vitamine D utilisable selon l'invention présente un meilleur indice thérapeutique que la mémantine seule.
L'invention a également pour objet la composition pharmaceutique comprenant une association synergique de mémantine et de vitamine D et au moins un excipient pharmaceutiquement acceptable telle que définie selon le premier objet de l'invention, pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement des maladies dégénératives.
Parmi les maladies neurodégénératives, on peut notamment mentionner la maladie d'Alzheimer, les démences telles que la démence à corps de Lewy, la démence fronto-temporale (DFT) et la démence mixte, et d'autres maladies neurodégénératives comme la maladie de Charcot (ou sclérose latérale amyotrophique ou SLA) ou encore la paralysie supranucléaire progressive (PSP). Parmi ces maladies neurodégénératives, l'invention vise plus particulièrement le traitement de la maladie d'Alzheimer.
La mémantine et le cholécalciférol peuvent être formulés conjointement ou bien également être mélangés juste avant l'administration. Dans ce cas ils peuvent se présenter sous une forme apte à une administration combinée pour leur utilisation dans la prévention et/ou le traitement des maladies neurodégénératives et en particulier de la maladie d'Alzheimer. Ainsi l'invention a pour troisième objet une préparation combinée comprenant au moins deux composants individuels, ladite préparation étant caractérisée en ce qu'un premier composant renferme une dose unitaire de mémantine en une quantité inférieure à 0,5 mg et en ce qu'un deuxième composant renferme une dose unitaire de vitamine D en une quantité inférieure à 0,08 mg, pour une utilisation simultanée, séparée ou séquentielle dans la prévention et/ou le traitement des maladies neurodégénératives, et en particulier de la maladie d'Alzheimer.
Enfin, l'invention a pour quatrième objet une méthode pour prévenir, inhiber, retarder ou traiter la dégénérescence neuronale, notamment celle liée à la maladie de Alzheimer chez un sujet qui en a besoin, dans laquelle la méthode comprend l'administration d'une quantité efficace de la composition pharmaceutique telle que définie selon le premier objet de l'invention ou d'une préparation combinée selon le troisième objet de l'invention.
Selon ce quatrième objet, la posologie habituelle pour un adulte d'environ 70 kg comprend l'administration d'une composition pharmaceutique telle que définie selon le premier objet de l'invention ou d'une préparation combinée telle que définie selon le troisième objet de l'invention, à raison d'une fois ou deux par jour.
Selon une forme de réalisation particulière de l'invention et lorsque ladite méthode comprend l'administration d'une préparation combinée, alors la dose unitaire de mémantine et la dose unitaire de vitamine D sont de préférence administrées simultanément, en encore plus préférentiellement, simultanément et par voie orale.
Brève description des figures
Les figures 1 à 4 et l'exemple qui suivent illustrent l'invention :
[Fig.l] La figure IA représente l'effet de la mémantine seule sur la survie des neurones MAP-2 dans une culture primaire de neurones corticaux lésés par du glutamate conformément à l'exemple. Les résultats sont exprimés en pourcentage par rapport au témoin moyenne ± écart-type (n=4-6/groupe). Témoin = 100 % correspond à milieu sans glutamate One-way ANOVA suivie par un test LSD Fisher's test. *p< 0.05 vs glutamate 20 pM est considéré comme significatif. La figure IB représente l'effet de la mémantine seule sur la protection du réseau total de neurones dans une culture primaire de neurones corticaux lésés par du glutamate conformément à l'exemple. Les résultats sont exprimés en pourcentage par rapport au témoin moyenne ± écart-type (n=4-6/groupe). Témoin = 100 % correspond à milieu sans glutamate One-way ANOVA suivie par un test LSD Fisher's test. *p< 0.05 vs glutamate 20 pM est considéré comme significatif.
[Fig.2] La figure 2A représente l'effet d'une association de mémantine (à 500 pM dans 180 pL de milieu) et de cholécalciférol (à des doses variant de 5 nM à 80 nM dans 180 pL de milieu) sur la survie des neurones MAP-2 dans une culture primaire de neurones corticaux lésés par du glutamate conformément à l'exemple. Les résultats sont exprimés en pourcentage par rapport au témoin moyenne ± écart- type (n=4-6/groupe). Témoin = 100 % correspond à milieu sans glutamate. Oneway ANOVA suivie par un test LSD Fisher's test. *p< 0.05 vs glutamate 20 pM est considéré comme significatif. La figure 2B représente l'effet d'une association de mémantine (à 500 pM dans 180 pL de milieu) et de cholécalciférol (à des doses variant de 5 nM à 80 nM dans 180 pL de milieu) sur la protection du réseau total de neurones dans une culture primaire de neurones corticaux lésés par du glutamate conformément à l'exemple. Les résultats sont exprimés en pourcentage par rapport au témoin moyenne ± écart-type (n=4-6/groupe). Témoin = 100 % correspond à milieu sans glutamate. One-way ANOVA suivie par un test LSD Fisher's test. *p< 0.05 vs glutamate 20 pM est considéré comme significatif.
[Fig.3] La figure 3A représente l'effet d'une association de mémantine (à 1 nM dans 180 pL de milieu) et de cholécalciférol (à des doses variant de 5 nM à 80 nM dans 180 pL de milieu) sur la survie des neurones MAP-2 dans une culture primaire de neurones corticaux lésés par du glutamate conformément à l'exemple. Les résultats sont exprimés en pourcentage par rapport au témoin moyenne ± écart- type (n=4-6/groupe). Témoin = 100 % correspond à milieu sans glutamate. Oneway ANOVA suivie par un test LSD Fisher's test. *p< 0.05 vs glutamate 20 pM est considéré comme significatif. La figure 3B représente l'effet d'une association de mémantine (à 1 nM dans 180 pL de milieu) et de cholécalciférol (à des doses variant de 5 nM à 80 nM dans 180 pL de milieu) sur la protection du réseau total de neurones dans une culture primaire de neurones corticaux lésés par du glutamate conformément à l'exemple. Les résultats sont exprimés en pourcentage par rapport au témoin moyenne ± écart-type (n=4-6/groupe). Témoin = 100 % correspond à milieu sans glutamate. One-way ANOVA suivie par un test LSD Fisher's test. *p< 0.05 vs glutamate 20 pM est considéré comme significatif. [Fig.4] La figure 4A représente l'effet d'une association de mémantine (à 10 nM dans 180 pL de milieu) et de cholécalciférol (à des doses variant de 5 nM à 80 nM dans 180 pL de milieu) sur la survie des neurones MAP-2 dans une culture primaire de neurones corticaux lésés par du glutamate conformément à l'exemple. Les résultats sont exprimés en pourcentage par rapport au témoin moyenne ± écart- type (n=4-6/groupe). Témoin = 100 % correspond à milieu sans glutamate. Oneway ANOVA suivie par un test LSD Fisher's test. *p< 0.05 vs glutamate 20 pM est considéré comme significatif. La figure 4B représente l'effet d'une association de mémantine (à 10 nM dans 180 pL de milieu) et de cholécalciférol (à des doses variant de 5nM à 80 nM dans 180 pL de milieu) sur la protection du réseau total de neurones dans une culture primaire de neurones corticaux lésés par du glutamate conformément à l'exemple. Les résultats sont exprimés en pourcentage par rapport au témoin moyenne ± écart-type (n=4-6/groupe). Témoin = 100 % correspond à milieu sans glutamate. One-way ANOVA suivie par un test LSD Fisher's test. *p< 0.05 vs glutamate 20 pM est considéré comme significatif.
EXEMPLE : PREVENTION DE LA TOXICITE DU GLUTAMATE DES CELLULES NEURONALES PAR DIFFERENTES CONCENTRATIONS DE MEMANTINE, DE CHOLECALCIFEROL ET D'UNE COMPOSITION SYNERGIQUE SELON L'INVENTION
L'excitotoxicité du glutamate est responsable de la mort neuronale dans les troubles neurologiques aigus, y compris les maladies neurodégénératives. La perte de l'homéostasie du calcium est un médiateur clé de la mort cellulaire induite par le glutamate. Les inventeurs ont testé la mémantine seule pour sa capacité à prévenir ou à réduire les effets toxiques du glutamate sur les neurones corticaux primaires lésés par le glutamate.
1.1 Matériel et méthodes
1.1.1 Cultures primaires de neurones corticaux
Toutes les expériences ont été réalisées conformément au guide des Instituts Nationaux de la Santé pour le soin et l'utilisation des animaux de laboratoire et ont suivi les réglementations actuelles de l'Union européenne (directive 2010 / 63 / UE). Numéro de l'accord : B1301310.
Les neurones corticaux de rats ont été mis en culture comme décrit par Callizot et al. (J. Neurosc. Res. (2013), 91(5), 706-716). Des rattes gravides (Wistar) de 15 jours de gestation ont été tuées en utilisant une anesthésie profonde avec chambre à CO2 et une dislocation cervicale. En bref, les fœtus ont été recueillis et immédiatement placés dans un milieu Leibovitz L15 glacé avec une solution (PS) de pénicilline (10 000 U/mL) et de streptomycine (10 mg/mL) à 2 % et une solution de sérum albumine bovine (BSA) à 1 %. Les cortex ont été traités pendant 20 minutes à 37°C avec une solution de trypsine et d'EDTA à une concentration finale de 0,05 % de trypsine et 0,02 % d'EDTA. La dissociation a été arrêtée par l'ajout du milieu Eagle's modifié de Dulbecco (DMEM) avec 4,5 g/L de glucose, contenant de la DNAse I grade II (concentration finale 0,5 mg/mL) et 10 % de sérum de veau fœtal (FCS). Les cellules ont été dissociées mécaniquement par trois passages forcés à travers l'embout d'une pipette de 10 mL. Les cellules ont ensuite été centrifugées à 515 x g pendant 10 minutes à 4°C. Le surnageant a été jeté, et le culot a été remis en suspension dans un milieu de culture défini composé d'un milieu neurobasal avec une solution à 2 % de supplément B27, 2 mmol/L de L- glutamine, 2 % de solution PS, et 10 ng/mL de facteur neurotrophique dérivé du cerveau (BDNF). Les cellules viables ont été comptées dans un cytomètre Neubauer, en utilisant le test d'exclusion au bleu de trypan. Les cellules ont été ensemencées à une densité de 25 000 cellules par puits dans des plaques de 96 puits pré-enrobées de poly-L-lysine et ont été cultivées à 37°C dans un incubateur air (95 %) - CO2 (5 %).
Pour éviter tout effet de bord, les première et dernière colonnes ainsi que les première et dernière lignes des plaques de culture n'ont pas été utilisées dans l'étude. Les puits vides ont été remplis d'eau. Le milieu a été renouvelé tous les 2 jours.
1.1.2 Composés testés et exposition au glutamate
Pré-incubation : au I3ème jour de culture, la mémantine (chlorhydrate de mémantine SIGMA ALDRICH) et le cholécalciférol (SIGMA ALDRICH), ont été dilués dans 180 pL de milieu de culture tel que défini au point 1.1.1. jusqu'à une concentration finale de lx et préincubés avec des neurones corticaux primaires pendant lh, avant l'exposition au glutamate.
Traitement au glutamate : le I3ème jour de la culture, le glutamate a été ajouté à une concentration finale de 20 pM diluée dans les 180 pL de milieu de culture encore en présence des composés (seuls ou en association) pendant 20 minutes. Après 20 minutes, le glutamate a été éliminé par lavage et un peu de milieu de culture frais avec les composés à tester à la même concentration lx a été ajouté pendant 48 heures supplémentaires.
1.1.3 Immunomarquage : MAP-2 (survie et réseau de neurones)
MAP-2 est un marqueur neuronal présent dans les corps cellulaires et les neurites des neurones, et qui permet d'étudier la survie des neurones et la longueur du réseau neuritique.
48 heures après l'application du glutamate, le surnageant de culture cellulaire a été éliminé. Les cellules ont été fixées par une solution froide d'éthanol (95 %) et d'acide acétique (5 %) pendant 5 minutes à -20 °C. Les cellules ont été lavées deux fois dans du tampon phosphate salin (PBS). Les cellules ont été perméabilisées et les sites de fixation non spécifiques bloqués avec une solution de PBS contenant 0,1 % de saponine et 1 % de sérum de veau fœtal pendant 15 minutes à température ambiante.
Les cultures ont ensuite été incubées pendant 2 heures avec un anticorps monoclonal de souris anti-microtubule-associé à la protéine 2 (MAP-2), à une dilution de 1/400, dans du PBS contenant 1 % de sérum de veau fœtal et 0,1 % de saponine. Cet anticorps a été révélé par une IgG anti-microtubule de chèvre Alexa Fluor 488 (Molecular Probes) (dilution au 1/400) dans du PBS contenant 1 % de sérum de veau fœtal, 0,1 % de saponine, pendant 1 heure à température ambiante.
1.1.4 Analyse automatique par ordinateur
Pour chaque condition, 30 photos (représentatives de l'ensemble de la zone du puits) par puits ont été prises en utilisant ImageXpress® (Molecular Devices) avec un grossissement de 20 fois. Toutes les images ont été générées en utilisant les mêmes paramètres d'acquisition. À partir des images, des analyses ont été automatiquement effectuées par MetaXpress® (Molecular Devices).
Les données suivantes ont été examinées :
- la survie totale des neurones (nombre de neurones MAP-2 positif) ; les données sont exprimées en nombre moyen de neurones de 30 images par puits.
- le réseau total de neurones (MAP-2 en pm) ; les données sont exprimées en longueur moyenne du réseau de neurones de 30 images par puits. 1.1.5 Analyse statistique
Toutes les valeurs ont été exprimées en moyenne +/- SEM (écart-type de la moyenne). L'analyse statistique a été effectuée par ANOVA à sens unique, suivie d'un test de Dunnett ou de Fisher au LSD. p<0,05 a été considéré comme significatif.
1.1.6 Résultats
* Effets de la mémantine seule sur des neurones corticaux lésés par du glutamate
Ils sont donnés dans les figures IA et IB.
Le stress glutamatergique induit une perte de neurones corticaux (Fig. IA) et un rétrécissement du réseau neuritique total (Fig. IB).
La mémantine utilisée seule montre des effets neuroprotecteurs, car elle améliore fortement la survie neuronale à toutes les concentrations testées comprises entre 50 nM et 10 pM (dans 180 pL de milieu, correspondant à des doses comprises entre 0,009 nmole et 0,0018 pmole de mémantine par puits). En outre, un effet protecteur important sur le réseau neuritique a été observé pour des concentrations de 100 nM à 10 pM (dans 180 pL de milieu, correspondant à des doses de 0,018 nmole à 0,0018 pmole par puits). Seules les deux concentrations les plus faibles (500 pM et 10 nM, dans 180 pL de milieu et correspondant à des doses de 0,09 pmole et 0,0018 nmole par puits) sont inactives.
Lorsque la mémantine est utilisée seule, on observe un effet neuroprotecteur (survie et réseau neuritique) fonction de la dose.
* Effets d'une association synergique de mémantine et de cholécalciférol sur des neurones corticaux lésés par du glutamate
Ils sont donnés dans les figures 2A, 2B, 3A, 3B, 4A et 4C.
Les 3 premières concentrations inactives pour la mémantine ont été sélectionnées, à savoir les concentrations de 500 pM, 1 nM et 10 nM (dans 180 pL de milieu et correspondant respectivement à des doses de 0,09 pmole, 0,00018 nmole et 0,0018 nmole par puits). Chacune de ces doses de mémantine a été testée en association avec le cholécalciférol à des concentrations allant de 5 nM à 80 nM (dans 180 pL de milieu), correspondant à des doses également très basses de vitamine D allant 0,0009 nmole à 0,0144 nmole par puits. Le stress glutamatergique induit une perte de neurones corticaux (Fig. 2A, 3A et 4A) et un rétrécissement du réseau neuritique total (Fig. 2B, 3B et 4B).
Ces résultats montrent :
- pour une concentration en mémantine de 500 pM (soit 0,09 pmole/puits), on observe un effet neuroprotecteur significatif de l'association mémantine + cholécalciférol à la fois sur la survie des neurones et sur le réseau neuritique pour des concentrations en cholécalciférol de 35 nM (soit 0,0063 nmole/puits) et 50 nM (soit 0,009 nmole/puits). Il est intéressant de remarquer que lorsque la concentration en cholécalciférol est inférieure à 35 nM ou supérieure à 50 nM, cet effet n'est pas observé.
- pour une concentration en mémantine de 1 nM (soit 0,00018 nmole/puits), on observe un effet neuroprotecteur significatif de l'association mémantine + cholécalciférol sur la survie des neurones pour des concentrations en cholécalciférol de 20 nM (soit 0,0036 nmole/puits) et 35 nM (soit 0,0063 nmole/puits). Il est intéressant de remarquer que lorsque la concentration en cholécalciférol est inférieure à 35 nM (soit 0,0063 nmole/puits) ou supérieure à 50 nM (soit 0,009 nmole/puits), cet effet n'est pas observé.
- pour une concentration en mémantine de 1 nM (soit 0,00018 nmole/puits), on observe un effet neuroprotecteur significatif de l'association mémantine + cholécalciférol sur le réseau neuritique pour des concentrations en cholécalciférol de 20 nM (soit 0,0036 nmole/puits), 35 nM (soit 0,0063 nmole/puits) et 50nM (soit 0,009 nmole/puits). Il est intéressant de remarquer que lorsque la concentration en cholécalciférol est inférieure à 20 nM (soit 0,0036 nmole/puits) ou supérieure à 50 nM (soit 0,009 nmole/puits), cet effet n'est pas observé.
- pour une concentration en mémantine de 10 nM (soit 0,0018 nmole/puits), on observe un effet neuroprotecteur significatif de l'association mémantine + cholécalciférol à la fois sur la survie des neurones et sur le réseau neuritique pour des concentrations en cholécalciférol allant de 20 nM (soit 0,0036 nmole/puits) à 80 nM (soit 0,0144 nmole/puit). Il est intéressant de remarquer que lorsque la concentration en cholécalciférol est inférieure à 20 nM (soit 0,0036 nmole/puits) ou supérieure à 80 nM (soit 0,0144 nmole/puit), cet effet n'est pas observé.
Ainsi, quelle que soit la concentration en mémantine testée (500 pM, 1 nM, ou 10 nM qui sont toutes les trois des concentrations à laquelle la mémantine seule est inactive vis-à-vis de la protection neuronale (correspondant respectivement à des doses de mémantine de 0,09 pmole/puits, 0,00018 nmole/puits et 0,0018 nmole/puits), l'association avec du cholécalciférol à une concentration très faible également, de 35 nM (soit 0,0063 nmole/puits), permet d'obtenir une association synergique ayant un effet neuroprotecteur significatif.
L'ensemble de ces résultats démontre que l'association de la mémantine avec de la vitamine D permet de diminuer par un facteur d'au moins 100 les doses efficaces de mémantine habituellement utilisées seule dans le traitement de la maladie d'Alzheimer. Sans vouloir être liés par une quelconque théorie, les Inventeurs pensent que ces résultats sont dus à de nouveaux mécanismes d'action parmi lesquels on peut envisager, entre autres, la stimulation d'une autre sous-unité du récepteur NMDA que celle habituellement mise en œuvre avec des doses de mémantine supérieures, ou une modification morphologique de ce récepteur lui- même, et/ou une meilleure utilisation des ions calcium.

Claims

REVENDICATIONS
1. Composition pharmaceutique comprenant une association synergique de mémantine et de vitamine D et au moins un excipient pharmaceutiquement acceptable, ladite composition étant caractérisée en ce que la dose unitaire de mémantine présente au sein de ladite composition est inférieure à 0,5 mg et en ce que la dose unitaire de vitamine D présente au sein de ladite composition est inférieure ou égale à 0,08 mg.
2. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que la mémantine se présente sous forme de sel, notamment de chlorhydrate.
3. Composition selon la revendication 1 ou 2, caractérisée en ce que la dose unitaire de mémantine est de 5 pg à 0,1 mg et la dose unitaire de vitamine D est de 0,8 pg à 8 pg.
4. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que le rapport molaire mémantine / vitamine D au sein de ladite association synergique est de 1 :2 à 1 : 100.
5. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que la vitamine D est du cholécalciférol.
6. Composition pharmaceutique selon l'une quelconque des revendications 1 à 5 pour son utilisation dans la prévention ou le traitement des maladies neurodégénératives.
7. Composition pharmaceutique pour son utilisation selon la revendication 6, caractérisée en ce que la maladie neurodégénérative est la maladie d'Alzheimer.
8. Préparation combinée comprenant au moins deux composants individuels, ladite préparation étant caractérisée en ce qu'un premier composant renferme une dose unitaire de mémantine en une quantité inférieure à 0,5 mg et en ce qu'un deuxième composant renferme une dose unitaire de vitamine D en une quantité inférieure à 0,08 mg, pour une utilisation simultanée, séparée ou séquentielle dans la prévention et/ou le traitement des maladies neurodégénératives, en particulier de la maladie d'Alzheimer.
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Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4897388A (en) * 1988-12-20 1990-01-30 Geriatric Research Institute, Inc. Method of treating Alzheimer's disease
EP2363119A1 (fr) 2010-03-05 2011-09-07 Centre Hospitalier Universitaire d'Angers Nouvelle composition pharmaceutique utile pour le traitement des personnes affectées par des maladies neurodégénératives ou neurovasculaires
FR2965178A1 (fr) * 2010-09-29 2012-03-30 Sebastien Lasnier Composition pharmaceutique utilise dans le traitement de la maladie d'alzheimer

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4897388A (en) * 1988-12-20 1990-01-30 Geriatric Research Institute, Inc. Method of treating Alzheimer's disease
EP2363119A1 (fr) 2010-03-05 2011-09-07 Centre Hospitalier Universitaire d'Angers Nouvelle composition pharmaceutique utile pour le traitement des personnes affectées par des maladies neurodégénératives ou neurovasculaires
FR2965178A1 (fr) * 2010-09-29 2012-03-30 Sebastien Lasnier Composition pharmaceutique utilise dans le traitement de la maladie d'alzheimer
FR2965178B1 (fr) 2010-09-29 2012-10-05 Sebastien Lasnier Composition pharmaceutique utilise dans le traitement de la maladie d'alzheimer

Non-Patent Citations (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ADAM ET AL., CLIN ENDOCRINOL METAB, vol. 95, no. 2, February 2010 (2010-02-01), pages 471 - 478
ALLGAIER ET AL., FRONTIERS IN BIOSCIENCE, vol. 19, 2014, pages 1345 - 1354
ANNWEILER C�DRIC ET AL: "Combination of memantine and vitamin D prevents axon degeneration induced by amyloid-beta and glutamate", NEUROBIOLOGY OF AGING, vol. 35, no. 2, 2014, pages 331 - 335, XP028769711, ISSN: 0197-4580, DOI: 10.1016/J.NEUROBIOLAGING.2013.07.029 *
ANWEILER C. ET AL., NEUROBIOLOGY OF AGING, vol. 35, 2014, pages 331 - 335
CALLIZOT ET AL., J. NEUROSC. RES., vol. 91, no. 5, 2013, pages 706 - 716
CHARIER D. ET AL: "Int�r�t de l'association m�mantine + vitamine D sur la pr�vention de la mort de neurones soumis � une agression par le sang - EM consulte", vol. 33, 30 August 2014 (2014-08-30), FR, pages A172, XP093214611, ISSN: 0750-7658, Retrieved from the Internet <URL:https://www.em-consulte.com/article/920257/interet-de-l-association-memantine+vitamine-d-sur-> DOI: 10.1016/j.annfar.2014.07.288 *
D. CHARIER ET AL., ANNALES FRANÇAISES D'ANESTHÉSIE ET DE RÉANIMATION, vol. 33, 2014, pages 168 - 173
DELUCA ET AL., NEUROPATHOLOGY AND APPLIED NEUROBIOLOGY, vol. 39, no. 5, 2013, pages 458 - 484
KATHERINE W. ROCHE ET AL., NATURE NEUROSCIENCE, vol. 4, 2001, pages 794 - 802
KOSHKINA ET AL., NUTRIENTS, vol. 11, 2019, pages 1726
MASTERS ET AL., NATURE REVIEWS/DISEASE PRIMERS, vol. 1, 2015, pages 1 - 18

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