[go: up one dir, main page]

WO2025242925A1 - Nouvel extrait riche en gaba et son utilisation en cosmetique et/ou en dermatologie - Google Patents

Nouvel extrait riche en gaba et son utilisation en cosmetique et/ou en dermatologie

Info

Publication number
WO2025242925A1
WO2025242925A1 PCT/EP2025/064415 EP2025064415W WO2025242925A1 WO 2025242925 A1 WO2025242925 A1 WO 2025242925A1 EP 2025064415 W EP2025064415 W EP 2025064415W WO 2025242925 A1 WO2025242925 A1 WO 2025242925A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
extract
gaba
yeast
advantageously
skin
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
PCT/EP2025/064415
Other languages
English (en)
Inventor
Rudy MENIN
Carole AUGÉ
Antoine Thomas
Céline Monnet-Mars
Hoang Bao Ngoc PHAM
Elodie VANDENHAUTE
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Lesaffre et Cie SA
Original Assignee
Lesaffre et Cie SA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Lesaffre et Cie SA filed Critical Lesaffre et Cie SA
Publication of WO2025242925A1 publication Critical patent/WO2025242925A1/fr
Pending legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/40—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing nitrogen
    • A61K8/44—Aminocarboxylic acids or derivatives thereof, e.g. aminocarboxylic acids containing sulfur; Salts; Esters or N-acylated derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/06—Fungi, e.g. yeasts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/06—Fungi, e.g. yeasts
    • A61K36/062—Ascomycota
    • A61K36/064—Saccharomycetales, e.g. baker's yeast
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9728—Fungi, e.g. yeasts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/99—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from microorganisms other than algae or fungi, e.g. protozoa or bacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/10—Anti-acne agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q17/00—Barrier preparations; Preparations brought into direct contact with the skin for affording protection against external influences, e.g. sunlight, X-rays or other harmful rays, corrosive materials, bacteria or insect stings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/02—Preparations for care of the skin for chemically bleaching or whitening the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q5/00—Preparations for care of the hair
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/20—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of the composition as a whole
    • A61K2800/30—Characterized by the absence of a particular group of ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
    • A61K2800/85—Products or compounds obtained by fermentation, e.g. yoghurt, beer, wine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis

Definitions

  • the present invention falls within the field of cosmetics and dermatology, seeking natural solutions to improve skin properties.
  • the solution proposed in this application is the provision of a natural extract rich in GABA, whose beneficial properties for the skin are well-known.
  • incorporating such an extract into a cosmetic composition results in a product with a range of positive effects for the skin.
  • the skin is the body's largest organ, representing 16% of total body weight. It serves as the first line of defense, maintaining essential chemicals and nutrients. It has been established that the skin undergoes age-related changes due to a combination of intrinsic factors, which occur naturally over time, and extrinsic factors, which result from external stressors such as UV radiation and pollution. These factors can lead to dryness or inflammation of the epidermis, decreased proliferation and function of fibroblasts in the dermis, loss of elasticity, and the formation of wrinkles. Keratinocytes, which make up the majority of epidermal cells, are distinguished by their synthesis of cytokeratin and the presence of desmosomes. They are also tightly bound to one another to form a robust physical and chemical barrier.
  • the dermis also contains abundant fibroblasts, which play a key role in many physiological skin reactions by producing connective tissue in the dermis and linking other cells.
  • Age-related aging is associated with epidermal atrophy and a reduction in the number of fibroblasts and in the quantity and quality of collagen in the dermis, which are the main histological changes in the skin.
  • Intrinsically aged skin is characterized by decreased epidermal turnover, a phenomenon associated with a narrowing of the stratum spinosum.
  • GABA Gamma-aminobutyric acid
  • GABA is naturally produced by the body. GABA is present in large quantities in vertebrates, plants, and microbes, and it is the main inhibitory neurotransmitter in the adult brain. GABA is present in synaptic vesicles in the nervous system and then released into the synaptic cleft, where it diffuses to target receptors on the postsynaptic surface. GABA has a relatively low molecular weight, which allows it to cross the skin and bind to GABA receptors on skin cells.
  • GABA could have beneficial effects on the skin due to its anti-inflammatory and antioxidant properties.
  • GABA could improve skin resilience to age-related stresses or environmental exposure (light, pollution, etc.) (Zhao et al., Biomol Ther (Seoul). 2023 Nov 1;31(6):640-647. doi: 10.4062/biomolther.2023.085. Epub 2023 Aug 1. PMID: 37524442).
  • GABA could also regulate melanin production and therefore skin pigmentation (Ceol, Craig J. (2023) Cancer Discov, vol. 13, no. 10, pp. 2128-2130. DOI: 10.1158/2159-8290.CD-23-0843).
  • Preliminary studies have also examined the role of GABA in regulating sebum production, which could be relevant for people with acne-prone skin.
  • GABA also has muscle-toning properties, which may suggest anti-wrinkle benefits.
  • Document CN114292763 describes a new yeast strain that produces high amounts of GABA and the use of an extract from this strain to combat wrinkles.
  • Document KR2018-0020534 describes the use of a GABA-producing yeast extract for hair regrowth.
  • the database document "Neuro GABA Body Balm” describes a rejuvenating balm containing GABA.
  • Document US2009/068150 describes a culture of lactic acid bacteria in a medium containing mung bean extract and glutamic acid.
  • the solution proposed by the present invention is to provide a natural extract containing gamma-aminobutyric acid (GABA) in a complex matrix (inactivated bacteria, peptides, amino acids, RNA, etc.).
  • GABA gamma-aminobutyric acid
  • a complex matrix inactivated bacteria, peptides, amino acids, RNA, etc.
  • the present invention relates to a natural extract rich in gamma-aminobutyric acid (GABA).
  • GABA gamma-aminobutyric acid
  • a "GABA-rich extract” is defined as an extract containing at least 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, or 10%, or even at least 11, 12, 13, 14, or even at least 15% by weight of GABA, the percentage by weight being expressed relative to the dry weight of the extract.
  • the extract contains at least 5% by weight of GABA. A content between 5 and 15% is particularly suitable for the purposes of this invention.
  • a natural extract is defined as one obtained from an element of nature, in particular from plant matter or from a microorganism such as a yeast or a bacterium.
  • the extract according to the invention is obtained from a yeast, hereinafter referred to as "yeast extract” ("YE" for Yeast Extract).
  • yeast extracts are products known to those skilled in the art.
  • yeast extract or “yeast hydrolysate” or “yeast peptone” refers to the soluble fraction obtained after thermal, mechanical (using known methods such as high-pressure homogenization, mechanical milling, mechanical lysis using glass beads, ultrasonic disintegration, repeated freeze-thaw cycles, or osmotic shock), or enzymatic lysis (using an enzyme exogenous or endogenous to the yeast).
  • the objective of such lysis is to release the internal macromolecules of said yeast in their native state, in particular the pool of free amino acids, including free glutamic acid.
  • the co-products obtained correspond to the insoluble fraction called "yeast hulls" and can be used in other processes.
  • yeast hulls and yeast extracts are well known in the art (see, for example, the reference work “Yeast Technology”, 2nd edition, 1991, G. Reed and T.W. Nogodawithana, published by Van Nostrand Reinhold, New York, ISBN 0-442-31892-8).
  • the insoluble and/or soluble fractions can then be dried.
  • a yeast extract can be presented in dry form, preferably as a fine, water-soluble powder, in liquid form or even as a concentrated liquid, or as a paste.
  • a yeast extract consists mainly of protein, preferably at least 55% protein.
  • the challenge overcome by the present invention is to obtain a natural extract rich in GABA, without the addition of exogenous GABA. Indeed, some plants, such as broccoli or sweet potatoes, contain GABA but in very small quantities, unusable for the desired properties.
  • the natural extract used in the context of the present invention is an extract naturally rich in glutamic acid (or glutamate).
  • glutamic acid or glutamate
  • glutamate refers to the amino acid in its free form, not incorporated into a peptide or protein.
  • an extract is said to be "rich in glutamic acid” if it contains at least 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, or 10%, or even 11, 12, 13, 14, 15, 20, or 25% by weight of free glutamic acid, the percentage by weight being expressed relative to the dry weight of the extract.
  • the extract comprises at least 10% by weight of free glutamic acid.
  • a content between 5 and 25%, for example between 10 and 20%, is particularly suitable for the purposes of the present invention.
  • Natural extracts meeting this definition include, for example, yeast extracts, bacterial extracts, or plant extracts, advantageously yeast extracts.
  • such an extract is obtained from an organism, especially a plant or microorganism such as yeast or bacteria, capable of synthesizing or even secreting glutamic acid, advantageously in large quantities.
  • the organism advantageously a yeast
  • glutamic acid present in the medium may be transported into and by the organism, advantageously a yeast.
  • the present invention relates to a yeast extract containing gamma-aminobutyric acid (GABA), said GABA being obtained from glutamic acid present as a free amino acid in said yeast.
  • GABA gamma-aminobutyric acid
  • An extract according to the invention differs from synthetic or purified GABA in that it also contains the components of the natural extract, in particular yeast extract, thus constituting an enriched form.
  • a yeast extract according to the invention can be obtained from any yeast, advantageously meeting the above definition.
  • the yeast strain used for preparing the extract according to the invention belongs to the genus Saccharomyces, Kluyveromyces or Candida (also known as Pichia or Lindnera).
  • the yeast strain used for the preparation of the extract belongs to the genus Saccharomyces and particularly to the species Saccharomyces cerevisiae.
  • GABA glutamate decarboxylase
  • the invention relates to a process for obtaining an extract, advantageously a yeast extract as described above, and the extract thus obtained.
  • a process for obtaining an extract advantageously a yeast extract as described above, and the extract thus obtained.
  • a process for obtaining an extract advantageously a yeast extract as described above, and the extract thus obtained.
  • such a process comprises the following steps:
  • GAD glutamate decarboxylase
  • the extract obtained is low in glutamic acid, or even free of glutamic acid.
  • low-glutamic acid extract means an extract that advantageously comprises less than 10%, or even less than 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1, 0.9, 0.8, 0.7, 0.6, 0.5, 0.4, 0.3, or even 0.2 or even 0.1% by weight of glutamic acid in free form, the percentage by weight being expressed relative to the dry weight of the extract.
  • Glutamic acid-free or glutamic acid-deprived extract means an extract that does not contain glutamic acid in free form, corresponding to the case where all the free glutamic acid present in the extract has been converted to GABA.
  • a natural extract advantageously a yeast extract
  • a yeast extract can be incubated in the presence of such an enzyme under conditions, particularly temperature and pH, that ensure this conversion.
  • conditions particularly temperature and pH, that ensure this conversion.
  • a natural extract advantageously a GABA-rich yeast extract according to the invention, is obtained via a bacterium exhibiting suitable glutamate decarboxylase activity.
  • the bacterium used in the invention exhibits glutamate decarboxylase (GAD) activity; in other words, it is capable of producing the glutamate decarboxylase (GAD) enzyme.
  • GAD glutamate decarboxylase
  • the proteins involved in this metabolic pathway notably the The GadA and/or GadB genes encoding the enzyme and the GadC gene encoding the substrate transporter are widely documented in the prior art, see for example the review by Yogeswara et al. (Microorganisms 2020,8(12), 1923; https://doi.org/10.3390/microorganisms8121923) in connection with lactic acid bacteria.
  • a bacterium of interest carries a GadA and/or GadB gene encoding the GAD enzyme.
  • the bacterium also carries a GadC gene encoding a glutamate and GABA transporter.
  • endogenous or exogenous genes can be endogenous or exogenous genes, single or multicopy, chromosomally integrated or carried by a plasmid, and placed under the control of regulatory elements allowing their expression, such as a promoter. In a particular embodiment, these are called endogenous genes.
  • lactic acid bacteria particularly those of the Lactobacillaceae family, are especially well-suited for implementation within the scope of the present invention.
  • the bacteria listed below can be used alone or in combination.
  • Bacteria carrying at least one GadA and/or GadB gene are chosen, for example, from the group including: Lactobacillus plantarum.
  • Bacteria carrying at least one GadA and/or GadB gene and at least one GadC gene are, for example, chosen from the group including the following genera: Levilactobacilus, Lentil actobacilus, Lactococcus, Lacticaseibacillus, Furfurilactobacillus, Leuconostoc, Lactiplantibacillus, Bifidobacterium, Pediococcus, Enterococcus and Limosilactobacillus.
  • the bacterium is cultured under conditions favorable to the growth of bacteria of the Lactobacillaceae family, for example, in an MRS (Man Rogosa, Sharpe) type culture medium.
  • the culture conditions particularly those relating to pH, temperature, and aerobic or anaerobic conditions (partial or total), depend on the strain chosen.
  • a strain of Levilactobacillus brevis is advantageously cultured under partially anaerobic conditions, at a temperature between 30 and 35°C and at a slightly acidic pH, for example, 6.2.
  • the bacterium is further cultured under conditions that promote the expression of genes in the pathway, including GadA, GadB and/or GadC.
  • the culture thus obtained can be used as is, or in dried or even freeze-dried form, provided that these treatments do not affect the enzymatic activity.
  • whole cells can be implemented to ensure the conversion of glutamic acid from the natural extract into GABA.
  • the bacteria are subjected to lysis, then possibly centrifuged, and it is the lysate containing the enzyme of interest, possibly purified, that is used.
  • the extract advantageously of yeast, is then incubated with the bacterial culture, possibly in the form of a bacterial lysate.
  • the free glutamic acid titration of the extract, particularly yeast extract is adjusted.
  • the extract is advantageously used in this incubation step at a concentration of at least 100, 150, 200, 250, or even 300 g/L, for example, between 150 g/L and 250 g/L.
  • the conversion is ensured by contacting or incubating the extract, advantageously of yeast, as detailed above with the bacterium, namely the bacterial must or bacterial lysate, as described above.
  • Incubation is advantageously carried out under conditions adapted to the bacterium used or to the enzyme in the case of a bacterial lysate.
  • incubation conditions are adjusted according to the bacterial strain and the enzyme present to ensure optimal conversion activity. In this sense, the medium and incubation conditions are conducive to enzymatic activity and are not intended to promote bacterial growth.
  • the incubation medium is not a medium for bacterial culture and consists solely of yeast extract and bacterial culture, possibly lysed.
  • an incubation time of approximately 15 to 70 hours, preferably 24 to 70 hours.
  • the conversion step is carried out until the desired amount of free glutamic acid is consumed.
  • the conversion to GABA must be optimal, advantageously exceeding 90%.
  • the final extract advantageously comprises less than 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, or 1%, or even 0.9, 0.8, 0.7, 0.6, 0.5, 0.4, 0.3, 0.2, or even 0.1% by weight of free glutamic acid, the weight percentage being expressed relative to the dry weight of the extract. Even more advantageously, all of the glutamic acid in the extract is consumed.
  • an extract according to the invention further has the following characteristics, expressed as a percentage by weight relative to the dry weight of the extract:
  • the resulting extract can be considered: According to a first embodiment, and at least in the case of incubation with live bacteria, it is subjected to thermal inactivation, for example at a temperature of 90°C. In this case, the product obtained contains inactivated bacteria.
  • the bacteria are removed from the extract by any technique known to those skilled in the art, for example by tangential membrane filtration (microfiltration or ultrafiltration), by centrifugation, or by a combination of these different techniques.
  • the extract may contain inactivated bacteria or be free (or essentially devoid) of bacteria.
  • the inactivated bacteria are preserved in the extract according to the invention, thus constituting a post-biotic of interest in the context of an application particularly in cosmetics.
  • an extract according to the invention is water-soluble.
  • the extract thus obtained is dried, advantageously by spray drying, for example using a spray drying tower.
  • spray drying for example using a spray drying tower.
  • the extract according to the invention is in the form of a dry extract. Alternatively, it may be in liquid or powder form. In another particular embodiment, the extract according to the invention may be diluted in a physiologically acceptable carrier or excipient.
  • a physiologically acceptable carrier or excipient is one that is aromatically neutral and suitable for administration in humans or animals. Examples of physiologically acceptable carriers or excipients include maltodextrins, triacetin, propylene glycol, vegetable glycerin, glycerol, soluble fibers, yeast derivatives such as yeast extracts, barks, and autolysates, and fats such as palm oil.
  • An extract according to the invention possesses properties beneficial to the beauty and health of the skin, of interest to any product intended for topical use.
  • One aspect of the invention therefore relates to the use of such an extract in this context.
  • the extract according to the invention can be used alone as an active ingredient or formulated in a cosmetic and/or dermatological composition.
  • Another object of the invention therefore relates to the use of the extract according to the invention contained in a cosmetic and/or dermatological composition, which also includes at least one cosmetically and/or dermatologically acceptable excipient.
  • the present invention relates to a topical cosmetic and/or dermatological composition comprising an extract as defined above.
  • excipient refers to a substance or compound that possesses no biological and/or therapeutic properties.
  • the excipient ensures the creation of a specific texture, fragrance, and/or color for a formulation, as well as its preservation, stability, safety, and longevity, in accordance with regulations.
  • the excipient is distinct from the active compound(s) present in the composition according to the invention.
  • an “acceptable excipient” is defined as any vehicle or solvent suitable for use in contact with the skin, including the scalp and/or human mucous membranes, which is non-toxic, non-irritating, does not induce an allergic response, and is chemically stable.
  • the excipient(s) may be chosen from: preservatives, emollients, emulsifiers, surfactants, moisturizers, thickeners, conditioners, mattifying agents, stabilizers, antioxidants, texturizing agents, gloss enhancers, film-forming agents, solubilizers, pigments, colorants and perfumes.
  • excipients are preferably chosen from the group consisting of amino acids and their derivatives, polyglycerols, esters, polymers and cellulose derivatives, lanolin derivatives, phospholipids, lactoferrins, lactoperoxidases, sucrose-based stabilizers, vitamin E and its derivatives, natural and synthetic waxes, vegetable oils, triglycerides, unsaponifiables, phytosterols, vegetable esters, silicones and their derivatives, protein hydrolysates, jojoba oil and its derivatives, fat/water-soluble esters, betaines, aminoxides, plant extracts, sucrose esters, titanium dioxides, glycines, and parabens.
  • the group of excipients may consist of butylene glycol, steareth-2, steareth-21, glycol-15 stearyl ether, cetearyl alcohol, phenoxyethanol, methylparaben, ethylparaben, propylparaben, butylparaben, butylene glycol, natural tocopherols, glycerin, dihydroxycetyl sodium phosphate, isopropyl hydroxycetyl ether, glycol stearate, trisononanoin, octyl cocoate, polyacrylamide, isoparaffin, aureth-7, a carbomer, propylene glycol, glycerol, bisabolol, a dimethicone, sodium hydroxide, PEG-30 dipolyhydroxysterate, capric/caprylic jojoba, triglycerides, magnesium cetearyl sulfate, octanoate, EDTA, dibutylene glycol alcohol,
  • the extract represents from 0.01 to 10% by weight of the composition.
  • a cosmetic composition according to the invention comprises the extract defined above advantageously at a level of 0.01% to 10% by total weight of the composition, even more advantageously from 0.1% to 5%, preferably between 1% and 3%.
  • the cosmetic composition may, in addition to the extract according to the invention, contain other active ingredients of interest.
  • active compound active compound
  • active ingredient active principle
  • active principle refers to a substance or compound that possesses biological and/or therapeutic properties underlying a physiological effect.
  • the active compound, active ingredient, or active principle is distinct from the excipient(s) as defined above.
  • Active ingredients of interest for the skin may have the same activity as the extract according to the invention, or a complementary activity.
  • the cosmetic composition is presented in a form suitable for cutaneous or topical application.
  • composition for cutaneous application or “for topical use” refers to a composition compatible with application to the skin, mucous membranes, hair and/or scalp, preferably human skin.
  • the composition according to the invention is in a galenic form suitable for acceptable cosmetic use, i.e. compatible with the skin, mucous membranes, hair and scalp.
  • the composition according to the invention may be in the form of an aqueous, hydroalcoholic, organic, or oily solution; a suspension or dispersion in solvents or fatty substances, such as a lotion or serum; a vesicular dispersion; or an emulsion, in particular water-in-oil (W/O), oil-in-water (O/W), or a combination emulsion such as a water-in-oil-in-water (W/O/W) emulsion.
  • the emulsion may be more or less thick and may be in the form of a cream or a lotion.
  • the composition of the invention may also be in the form of an ointment, gel, solid stick, anhydrous paste or solid product, foam, in particular an aerosol, a biphasic composition, or a sprayable composition.
  • the composition may be formulated as a solution, aqueous or oily, cream, serum, aqueous gel or oily gel, in particular in a jar or tube, in particular a shower gel, shampoo, milk, emulsion, microemulsion or nanoemulsion, in particular oil-in-water or water-in-oil or multiple or silicone, lotion, in particular in a glass bottle, plastic bottle or dosing bottle or aerosol, ampoule, liquid soap, dermatological bar, ointment, foam, anhydrous product, preferably liquid, paste or solid, for example in stick form, powders.
  • the composition of the invention is in the form of a cream, lotion, solution, emulsion, gel, oil, stick, mousse, powder, spray or mist.
  • compositions as well as its method of preparation, and consequently the excipients appropriate to the composition of the invention, can be chosen by a person skilled in the art on the basis of their general knowledge according to the type of composition sought.
  • the composition may include any fat commonly used in cosmetics.
  • fats such as oils and waxes of vegetable, mineral, animal, and/or synthetic origin. Oils may be volatile or non-volatile. Other examples include synthetic esters and ethers, fatty alcohols, and fatty acids.
  • the composition may also include an aqueous medium, a hydroalcoholic medium containing an alcohol such as ethanol or isopropanol, or an organic medium comprising common organic solvents such as Cl-6 alcohols, particularly ethanol and isopropanol. Glycols such as propylene glycol and ketones may be used.
  • the composition may include at least one conventional emulsifier, chosen from amphoteric, anionic, cationic, or nonionic emulsifiers, used alone or in mixtures. It may be particularly advantageous to formulate the composition of the invention so that it is sprayable. This can be achieved, for example, by formulating specific emulsions comprising particular combinations of excipients.
  • the invention relates to the application of an extract as defined above, advantageously of a composition containing it, to the skin, mucous membranes, hair and/or scalp.
  • the method consists of the topical application of the extract or the composition comprising it to all or part of the human body chosen from among the legs, feet, armpits, hands, thighs, belly, Vietnameselleté, neck, arms, torso, back, labial mucosa, face and/or scalp, advantageously the Vietnameselleté and/or face, further advantageously the face.
  • Another object of the invention relates to the use of the extract or composition according to the invention in various cosmetic and/or dermatological applications, or to prevent and/or treat various conditions described below.
  • the invention also relates to: the extract or composition according to the invention for these different applications; and/or the use of the extract or composition according to the invention to prepare a medicinal product intended to prevent and/or treat these different conditions; and/or
  • the present application covers both cosmetic care processes and therapeutic uses.
  • cosmetic use and/or cosmetic composition means a non-pharmaceutical use and/or composition, i.e., one that does not require therapeutic treatment, and is intended for any area of skin, including the scalp, and/or mucous membranes, considered healthy.
  • Healthy skin and/or mucous membranes means all or part of an area of skin, including the scalp and/or healthy mucous membranes, in particular
  • the subject in question is a human being, on whom the extract according to the invention is applied and who is deemed “non-pathological" by a dermatologist, meaning she does not present any infection, scar, disease, or skin condition such as candidiasis, impetigo, psoriasis, eczema, acne, or dermatitis, or any wounds or injuries and/or other dermatoses.
  • This therefore involves the use of the extract on areas of skin and/or mucous membranes of subjects, particularly human subjects, that are considered "normal” by a dermatologist.
  • an extract or composition according to the invention can be used as an antioxidant, healing agent, anti-inflammatory agent, anti-acne agent, or in the treatment of alterations of skin, lip, hair, and/or mucous membrane cells caused by stresses, particularly environmental ones (e.g., pollution).
  • a moisturizing agent in addition, and more specifically related to the field of cosmetics and aesthetics, it can be used as a moisturizing agent, anti-aging agent, soothing agent, barrier function regenerator, or bleaching agent.
  • a yeast extract of Saccharomyces cerevisiae was prepared and used at a concentration of between 30g/L and 300g/L.
  • the bacterium Levilactobacillus brevis was cultured under suitable conditions on an MRS (Man Rogosa, Sharpe) type medium.
  • the culture thus obtained is used as is or subjected to freeze-drying and then used in the step of converting glutamic acid to GABA. 3/ Conversion of glutamic acid to GABA
  • the conversion is carried out at a temperature between 30 and 40°C and a pH between 5 and 7. Inoculation of the extract with the bacterial culture initiates the conversion. The conversion time is approximately 24 to 70 hours. The reaction is stopped when the conversion to GABA is greater than 90%, ideally complete.
  • the resulting GABA-rich extract is then subjected to thermal inactivation and then centrifuged.
  • composition of the final extract obtained, in dry form is given in the table below:
  • the cell samples are used for mRNA recovery, cDNA synthesis, and transcriptomic analysis.
  • the modifications observed at the transcriptomic level allow for the allegation of cosmetic indications (anti-aging, regenerating, moisturizing, soothing, protective against oxidative stress”) for an extract according to the invention combining the naturalness, and the presence of GABA, of the various constituents of the yeast extract and of post-biotics, in this case inactivated lactic acid bacteria.
  • HEPK human epidermal keratinocytes
  • HDF primary human dermal fibroblasts
  • GABA-enriched yeast extract according to the invention and commercially purified GABA (Sigma-Aldrich).
  • RNAs were extracted from the cells to study by RT-qPCR 128 genes selected for their importance in epidermal physiology, skin aging, barrier function or oxidative stress, including 3 housekeeping genes used for normalization of results.
  • RNA quality was assessed by capillary electrophoresis (TapeStation 4200 system, Agilent Technologies). RNA quantity was determined using a spectrophotometer (Synergy HI, Biotek Instruments).
  • cDNA Complementary DNA
  • Quantitative PCR was performed using a LightCycler® system (Roche Molecular Systems Inc.) according to the manufacturer's instructions.
  • the PCR reaction was carried out with a reagent mixture (Ozyme) containing taq DNA polymerase, SYBR Green I, and MgC12 in the presence of specific primers and cDNA.
  • the incorporation of fluorescence into the amplified DNA was continuously measured during the PCR cycles. This resulted in a "fluorescence intensity" versus "PCR cycle” graph, allowing the evaluation of a relative expression (RE) value for each marker.
  • the value selected for the RE calculations is the "exit point" (Ct) of the fluorescence curve. For a given marker, the higher the number of cycles, the lower the amount of mRNA.
  • the RE value was calculated using the formula: (1/2 number of cycles) x 106.
  • the PCR array used in this study included three reference genes (RPS28, GAPDH, and ACTB). These housekeeping genes were used for data normalization because their expression is constitutive and theoretically stable. Therefore, the expression levels of the target markers were compared to the mean expression levels of these three markers across all test conditions.
  • DCt Ct (target gene) - Ct (reference gene)
  • IVL encoding the involucrine protein expressed in the upper spinous and granular layers of the epidermis and is recognized as an early marker of epidermal differentiation
  • SPRR1 A and SPRR1B whose associated proteins act after involucrin for the formation and strengthening of the corneocyte envelope
  • Filaggrin is synthesized as a precursor protein called profilaggrin and is present in keratohyalin granules in the granular layer of the epidermis;
  • Keratin 1 (encoded by KRT1) is expressed in the suprabasal layers of the epidermis and promotes terminal differentiation of keratinocytes;
  • PADI1 codes for peptidylarginine deiminase type 1, a calcium-dependent enzyme involved in the later stages of epidermal differentiation and responsible for the deamination of filaggrin and keratin 1.
  • SULT2B1 encodes the enzyme called sulfotransferase family 2B member 1, which sulfonates various sterols, such as cholesterol, converting them to cholesterol sulfate.
  • the SULT2B1 protein is involved in the differentiation of keratinocytes and affects the expression of proteins involved in the formation of the corneal envelope such as loricrin, involucrin and fdaggrin.
  • the GABA-enriched yeast extract according to the invention has benefits for the skin's barrier function (barrier strengthening), and thus helps protect the skin against external aggressors in general (pollution, environmental stress, etc.). In conjunction with the aforementioned benefits for the dermis, it also has a significant impact on skin repair by promoting epidermal differentiation.
  • NMF Natural Moisturizing Factor
  • the yeast extract enriched with GABA according to the invention modulates the expression of genes involved in the production of antimicrobial peptides (AMPs):
  • the proteins of the SPRR superfamily which play a role in the formation of the stratum corneum, enable the production of antimicrobial proteins (AMPs) to protect the skin barrier, by binding to and disrupting the bacterial membrane.
  • AMPs antimicrobial proteins
  • CAMP codes for the antimicrobial peptide cathelicidin or LL-37, which can inhibit bacterial biofilm formation by . aureus and S. epidermis and control the growth of C. acnes.
  • - PI3 codes for the peptidase 3 inhibitor or elafin which targets Gram-positive and Gram-negative bacteria as well as fungal pathogens.
  • Psoriasin also known as calcium-binding protein S100A7, is encoded by the S100A7 gene and is expressed exclusively by keratinocytes. Psoriasin targets A. coli, C. acnes, and dermatophytes in infected keratinocytes.
  • the GABA-enriched yeast extract according to the invention has advantages in strengthening the skin barrier by protecting it from potentially harmful microorganisms (by promoting the skin's natural defenses against external biological aggressions); in protecting the skin against acne; and in the early stages of skin repair since AMPs are involved in the early stages of healing, in conjunction with effects on the dermis.
  • the GABA-enriched extract according to the invention can therefore be used as an agent: moisturizing, barrier function restoration, anti-acne, healing, in the treatment of skin cell alterations caused by environmental stresses.
  • EXTL1 excreted glycosyltransferase 1 expression compared to the untreated control condition, or to commercial GABA or the corresponding unenriched extract.
  • the encoded protein possesses alpha 1,4-N-acetylglucosaminyltransferase activity and is involved in heparan sulfate chain elongation. Since heparan sulfate is present in perlecan (heparan sulfate proteoglycan 2) and the syndecan family of skin proteoglycans, it impacts the content of the dermal extracellular matrix, its aging, and its repair. This suggests that the GABA-enriched yeast extract according to the invention has a positive impact on skin aging (anti-aging properties) and wound healing (skin repair).
  • the GABA-enriched extract according to the invention can therefore be used as an agent: anti-aging and healing.
  • yeast extract enriched with GABA according to the invention can be used in the cosmetic or dermocosmetic field as an anti-aging agent, barrier function restoration agent, moisturizing agent.
  • the GABA-enriched yeast extract according to the invention can also be used therapeutically as a healing agent, an anti-acne agent, or in the treatment of skin cell damage caused by stress, particularly environmental stressors.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

La présente invention concerne un extrait naturel, préférentiellement extrait de levure, riche en acide gamma-aminobutyrique (GABA), un produit cosmétique et/ou dermatologique comprenant un tel extrait, et leur utilisation pour leurs effets bénéfiques sur la peau.

Description

NOUVEL EXTRAIT RICHE EN GABA ET SON UTILISATION EN COSMETIQUE ET/OU EN DERMATOLOGIE
Domaine technique
La présente invention s’inscrit dans le domaine de la cosmétique et de la dermatologie, à la recherche de solutions naturelles permettant d’améliorer les propriétés de la peau. La solution proposée dans la présente demande est la mise à disposition d’un extrait naturel riche en GABA dont les propriétés bénéfiques pour la peau sont connues. Ainsi, l’incorporation d’un tel extrait dans une composition cosmétique permet d’obtenir un produit présentant un panel d’effets positifs pour la peau.
Etat antérieur de la technique
La peau est le plus grand organe du corps, représentant 16 % du poids total du corps. Elle sert de première ligne de défense et permet le maintien des substances chimiques et des nutriments essentiels. Il a été établi que la peau subit des changements liés à l'âge en raison d'une combinaison de facteurs intrinsèques, qui se produisent naturellement au fil du temps, et de facteurs extrinsèques, qui résultent de facteurs de stress externes tels que le rayonnement UV et la pollution. Ces facteurs peuvent entraîner une sécheresse ou une inflammation de l'épiderme, une diminution de la prolifération et de la fonction des fibroblastes dans le derme, une perte d'élasticité et la formation de rides. Les kératinocytes, qui constituent la majorité des cellules de l'épiderme, se distinguent par leur synthèse de cytokératine et la présence de desmosomes. Ils sont également étroitement liés les uns aux autres pour former une solide barrière physique et chimique. Le derme contient également des fibroblastes en abondance, qui jouent un rôle clé dans de nombreuses réactions physiologiques de la peau en produisant du tissu conjonctif dans le derme et en reliant d'autres cellules. Le vieillissement lié à l’âge est associé à une atrophie épidermique et à une réduction du nombre de fibroblastes et de la quantité et la qualité du collagène dans le derme, qui sont les principaux changements histologiques de la peau. La peau intrinsèquement âgée se caractérise par une diminution du renouvellement de l'épiderme, phénomène associé à un rétrécissement de la couche épineuse.
L'acide gamma-aminobutyrique (GABA), un acide aminé non protéinogène, est naturellement produit par l'organisme. Le GABA est présent en grandes quantités chez les vertébrés, les plantes et les microbes, et c'est le principal neurotransmetteur inhibiteur dans le cerveau adulte. Le GABA est présent dans des vésicules synaptiques dans le système nerveux, puis libéré dans la fente synaptique, où il se diffuse vers les récepteurs cibles sur la surface postsynaptique. Le GABA a un poids moléculaire relativement faible, ce qui lui permet de traverser la peau et de se lier aux récepteurs GABA des cellules cutanées. Ainsi, il a été découvert qu'il jouait un rôle dans plusieurs fonctions de la peau : (1) la production d'acide hyaluronique ; (2) la capacité des kératinocytes humains normaux à maintenir l'homéostasie du volume cellulaire sous l'effet des rayons UV ; et (3) la capacité des fibroblastes dermiques à survivre lorsqu'ils sont exposés à un stress oxydatif.
Ainsi, ces travaux suggèrent que le GABA pourrait avoir des effets bénéfiques sur la peau en raison de ses propriétés anti-inflammatoires et antioxydantes. Le GABA pourrait améliorer la résilience cutanée aux stress liés à l’âge ou encore à l’exposition environnementale (lumière, pollution etc...) (Zhao et al., Biomol Ther (Seoul). 2023 Nov l;31(6):640-647. doi: 10.4062/biomolther. 2023.085. Epub 2023 Aug 1. PMID: 37524442). Le GABA pourrait aussi réguler la production de mélanine et donc la pigmentation de la peau (Ceol, Craig J. (2023) Cancer Discov, vol. 13, n° 10, p. 2128-2130. DOI: 10.1158/2159-8290.CD-23-0843.). Des études préliminaires ont également examiné le rôle du GABA dans la régulation de la production de sébum, ce qui pourrait être pertinent pour les personnes ayant une peau sujette à l'acné. Enfin, le GABA a aussi des propriétés de relaxation du tonus musculaire, ce qui peut suggérer des propriétés anti-rides.
Le document CN114292763 décrit une nouvelle souche de levure produisant de fortes quantités de GABA et l’utilisation d’un extrait de cette souche pour lutter contre les rides. Le document KR2018-0020534 décrit l’utilisation d’une levure produisant du GABA, sous forme d’extrait, pour la repousse des cheveux. Le document database « Neuro GABA Body Balm » décrit un baume rajeunissant contenant du GABA. Le document US2009/068150 décrit une culture de bactéries lactiques dans un milieu comprenant de l'extrait de haricot mungo et de l’acide glutamique.
Il existe toutefois un besoin évident de développer de nouveaux ingrédients cosmétiques naturels permettant d’améliorer l’état de la peau.
La solution proposée par la présente invention est de fournir un extrait naturel contenant de l’acide gamma-aminobutyrique (GABA) dans une matrice complexe (bactéries inactivées, peptides, acides aminées, ARN, ...). Ainsi, l’intégration d’un tel extrait dans un produit à appliquer sur la peau permet de fournir une quantité de GABA suffisante pour obtenir un effet bénéfique sur la peau humaine, dans un contexte naturel, également riche en d’autres composés potentiellement utiles (en termes d’hydratation, de potentiel anti-oxydant, .. .). Description détaillée de l’invention
Ainsi et selon un premier aspect, la présente invention concerne un extrait naturel riche en acide gamma-aminobutyrique (GABA).
Dans le cadre de l’invention on entend par « extrait riche en GABA », le fait que l’extrait comprend au moins 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10%, voire au moins 11, 12, 13, 14 ou même au moins 15% en poids de GABA, le pourcentage en poids étant exprimé par rapport au poids de matière sèche de l’extrait. Avantageusement, l’extrait comprend au moins 5% en poids de GABA. Une teneur comprise entre 5 et 15% est particulièrement adaptée dans le cadre de la présente invention.
Dans le contexte de l’invention, un extrait naturel est défini comme étant obtenu à partir d’un élément de la nature, notamment à partir de matière végétale ou d’un microorganisme tel qu’une levure ou une bactérie. Selon un mode de réalisation particulier, l’extrait selon l’invention est obtenu à partir d’une levure, appelé ci-après «extrait de levure» («YE» pour Yeast Extract).
De manière générale, les extraits de levure sont des produits connus de l’homme du métier. Par «extrait de levure» (ou «hydrolysat de levure» ou «peptone de levure»), on entend selon l’invention, la fraction soluble obtenue après une lyse thermique, mécanique (selon des méthodes connues telles que l’homogénéisation à haute pression, le broyage mécanique, la lyse mécanique utilisant des billes de verre, la désintégration aux ultrasons, les cycles répétés de congélation-décongélation ou un choc osmotique) ou enzymatique (à l’aide d’une enzyme exogène ou endogène à la levure)... L’objectif d’une telle lyse est de libérer les macromolécules internes de ladite levure dans leur état natif, en particulier le pool d’acides aminés libres dont notamment l’acide glutamique libre. Les coproduits obtenus correspondent à la fraction insoluble appelée « écorces de levure » et peuvent être utilisés dans d’autres procédés. Les procédés d’obtention d’écorces de levure et d’extraits de levure sont connus dans l’art (voir par exemple l’ouvrage de référence “Yeast Technology”, 2ème édition, 1991, G. Reed et T.W. Nogodawithana, publié par Van Nostrand Reinhold, New York, ISBN 0-442-31892-8). La fraction insoluble et/ou la fraction soluble peuvent ensuite être séchées.
Ainsi, un extrait de levure peut se présenter sous forme sèche, de préférence sous forme de poudre hydrosoluble fine, sous forme liquide voire de liquide concentré, ou sous forme de pâte. Un extrait de levure comprend majoritairement des matières protéiques, de préférence au moins 55 % de matières protéiques. La difficulté surmontée par la présente invention est d’obtenir un extrait naturel riche en GABA, sans ajout de GABA exogène. En effet, certains végétaux, tels que les brocolis ou les patates douces, contiennent du GABA mais dans des quantités très faibles, non exploitables pour les propriétés recherchées.
De manière avantageuse, l’extrait naturel mis en œuvre dans le cadre de la présente invention est un extrait naturellement riche en acide glutamique (ou glutamate). A noter que dans le cadre de l’invention, on entend par « acide glutamique » (ou « glutamate ») l’acide aminé sous forme libre, non intégré dans un peptide ou une protéine.
De manière particulière, un extrait est dit « riche en acide glutamique » s’il contient au moins 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10%, voire 11, 12, 13, 14 ou même 15, 20 ou 25% en poids d’acide glutamique libre, le pourcentage en poids étant exprimé par rapport au poids de matière sèche de l’extrait. Avantageusement, l’extrait comprend au moins 10% en poids d’acide glutamique libre. Une teneur comprise entre 5 et 25%, par exemple entre 10 et 20%, est particulièrement adaptée dans le cadre de la présente invention. Des extraits naturels répondant à cette définition sont par exemple des extraits de levure, des extraits bactériens ou des extraits végétaux, avantageusement des extraits de levure.
Selon un mode de réalisation particulier, un tel extrait est obtenu à partir d’un organisme, notamment végétal ou microorganisme tel que levure ou bactérie, capable de synthétiser voire de sécréter de l’acide glutamique, avantageusement en grande quantité. De manière connue de l’homme du métier, l’organisme, avantageusement une levure, peut être naturellement capable de synthétiser de l’acide glutamique en grande quantité, ou modifié génétiquement dans ce but. Alternativement, de l’acide glutamique présent dans le milieu peut être transporté dans et par l’organisme, avantageusement une levure.
Ainsi et selon un aspect particulier, la présente invention vise un extrait de levure contenant de l’acide gamma-aminobutyrique (GABA), ledit GABA étant obtenu à partir d’acide glutamique présent sous forme d’acide aminé libre chez ladite levure.
Un extrait selon l’invention se distingue du GABA synthétique ou purifié en ce qu’il contient en outre les composants de l’extrait naturel, en particulier de l’extrait de levure, constituant ainsi une forme enrichie.
Un extrait de levure selon l’invention peut être obtenu à partir de n’importe quelle levure, avantageusement répondant à la définition ci-dessus. De préférence, la souche de levure utilisée pour la préparation de l’extrait selon l’invention appartient au genre Saccharomyces, Kluyveromyces ou Candida (également connue sous les noms Pichia ou Lindnera). De préférence, la souche de levure utilisée pour la préparation de l’extrait appartient au genre Saccharomyces et tout particulièrement à l'espèce Saccharomyces cerevisiae.
L’obtention de GABA à partir d’acide glutamique implique la mise en œuvre d’une activité glutamate décarboxylase (GAD) capable d’assurer la conversion suivante :
L-Glutamate+ H+ GABA + CO2
Selon un autre aspect, l’invention concerne un procédé permettant l’obtention d’un extrait, avantageusement un extrait de levure tel que décrit ci-dessus, et l’extrait ainsi obtenu. Avantageusement, un tel procédé comprend les étapes suivantes :
- préparation de l’extrait de levure à partir d’une levure contenant de l’acide glutamique sous forme d’acide aminé libre ;
- incubation de l’extrait en présence d’une enzyme glutamate décarboxylase (GAD).
A l’issue de ce procédé, l’extrait obtenu est pauvre en acide glutamique, voire exempt d’acide glutamique. Dans le cadre de l’invention, on entend par « extrait pauvre en acide glutamique », un extrait qui comprend avantageusement moins de 10%, voire moins de 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1, 0.9, 0.8, 0.7, 0.6, 0.5, 0.4, 0.3 voire 0.2 voire même 0.1% en poids d’acide glutamique sous forme libre, le pourcentage en poids étant exprimé par rapport au poids de matière sèche de l’extrait On entend par « extrait exempt ou dépourvu d’acide glutamique », un extrait qui ne comprend pas d’acide glutamique sous forme libre, correspondant au cas où tout l’acide glutamique libre présent dans l’extrait a été converti en GABA.
De manière connue de l’homme du métier, l’extrait naturel, avantageusement l’extrait de levure, peut être incubé en présence d’une telle enzyme dans des conditions, notamment de température et de pH, permettant d’assurer cette conversion. Ces conditions varient en fonction de l’origine de l’enzyme GAD. A titre d’exemple et en lien avec l’enzyme produite par Levilactobacilus brevis, ces conditions sont :
- un pH acide, par exemple de 5 ; et
- une température comprise entre 30 et 35°C, par exemple égale à 33°C.
Alternativement, un extrait naturel, avantageusement un extrait de levure riche en GABA selon l’invention est obtenu par l’intermédiaire d’une bactérie présentant une activité glutamate décarboxylase adaptée.
Ainsi, la bactérie mise en œuvre dans le cadre de l’invention présente une activité glutamate décarboxylase (GAD), en d’autres termes est capable de produire une enzyme glutamate décarboxylase (GAD). Les protéines impliquées dans cette voie métabolique, notamment les gènes GadA et/ou GadB codant l’enzyme et le gène GadC codant le transporteur du substrat, sont largement documentés dans l’art antérieur, voir par exemple la revue de Yogeswara et al. (Microorganisms 2020,8(12), 1923; https://doi.org/10.3390/ microorganisms 8121923) en lien avec les bactéries lactiques.
Selon un mode de réalisation particulier, une bactérie d’intérêt porte un gène GadA et/ou GadB codant l’enzyme GAD.
Selon un autre mode de réalisation, la bactérie porte en outre un gène GadC codant un transporteur du glutamate et du GABA.
Il peut s’agir de gènes endogènes ou exogènes, mono ou multicopies, intégrés chromosomiquement ou portés par un plasmide, et placés sous le contrôle d’éléments de régulation permettant leur expression, tel qu’un promoteur. Selon un mode de réalisation particulier, il s’agit de gènes endogènes.
Il a été mis en évidence que des bactéries lactiques, en particulier de la famille des lactobacillaceae , étaient particulièrement adaptées pour une mise en œuvre dans le cadre de la présente invention. Les bactéries listées ci-dessous peuvent être utilisées seules ou en combinaison.
Des bactéries porteuses d’au moins un gène GadA et/ou GadB sont par exemple choisies dans le groupe comprenant : Lactobacillus plantarum.
Des bactéries porteuses d’au moins un gène GadA et/ou GadB et d’au moins un gène GadC sont par exemple choisies dans le groupe comprenant les genres suivants : Levilactobacilus, Lentil actobacilus, Lactococcus, Lacticaseibacillus, Furfurilactobacillus, Leuconostoc, Lactiplantibacillus, Bifidobacterium, Pediococcus, Enterococcus et Limosilactobacillus.
Il peut par exemple s’agir de : Levilactobacilus brevis, Lentilactobacilus buchneri, Lactococcus lactis, Lacticaseibacillus paracasei, Furfurilactobacillus rossiae, Enterococcus faecium, Leuconostoc suionicum, Lactobacillus amylovorus, Lactiplantibacillus plantarum, Bifidobacterium dentium, Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium angulatum, Pediococcus pentosaceus, Enterococcus casseliflavus, Limosilactobacillus reuteri, Enterococcus gallinarum, Limosilactobacillus oris, Pediococcus acidilactici, Limosilactobacillus fermentum et Enterococcus hermanniensis . De manière connue de l’homme du métier, la bactérie est cultivée dans des conditions favorables à la croissance des bactéries de la famille des lactobacillaceae, par exemple dans un milieu de culture de type MRS (Man Rogosa, Sharpe). Les conditions de culture, notamment relatives au pH, à la température et aux conditions aérobies ou anaérobies (partielle ou totale) dépendent de la souche choisie. De manière connue et comme décrit dans les exemples, une souche de Levilactobacilus brevis est avantageusement cultivée en conditions d’anaérobiose partielle, à une température comprise entre 30 et 35°C et à pH légèrement acide, par exemple de 6.2.
De manière avantageuse, la bactérie est cultivée en outre dans des conditions favorisant l’expression des gènes de la voie, notamment GadA, GadB et/ou GadC.
Ala fin de la croissance et pour l’étape de conversion, la culture ainsi obtenue peut être utilisée telle quelle, ou sous forme séchée voire lyophilisée, dans la mesure où ces traitements n’affectent pas l’activité enzymatique.
En utilisant une bactérie pourvue du transporteur codé par GadC, les cellules entières peuvent être mises en œuvre pour assurer la conversion de l’acide glutamique issu de l’extrait naturel en GABA.
Alternativement et notamment lorsque les bactéries ne possèdent pas un tel transporteur, les bactéries sont soumises à lyse, puis éventuellement centrifugées, et c’est le lysat contenant l’enzyme d’intérêt, éventuellement purifié, qui est mis en œuvre.
L’extrait, avantageusement de levure, est alors incubé avec la culture bactérienne, éventuellement sous forme de lysat bactérien.
Selon un mode de réalisation, la titration en acide glutamique libre de l’extrait, notamment de levure, est ajustée. En pratique, l’extrait est avantageusement utilisé dans cette étape d’incubation à une concentration d’au moins 100, 150, 200, 250 voire 300 g/L, par exemple comprise entre 150g/L et 250g/L.
Selon un mode de réalisation, la conversion est assurée par mise en contact ou incubation de l’extrait, avantageusement de levure, tel que détaillé ci-dessus avec la bactérie, à savoir le moût bactérien ou le lysat bactérien, tel que décrits ci-dessus.
L’incubation est avantageusement réalisée dans des conditions adaptées à la bactérie mise en œuvre ou à l’enzyme dans le cas d’un lysat bactérien. Ainsi, de manière connue de l’homme du métier, les conditions d’incubation sont ajustées en fonction de la souche bactérienne et de l’enzyme en présence, pour assurer une activité de conversion optimale. En ce sens, le milieu et les conditions d’incubation sont favorables à l’activité enzymatique et ne sont pas destinées à assurer la croissance de la bactérie.
A noter également que dans cette étape, il ne peut y avoir de croissance de la levure puisque celle-ci est sous forme d’extrait et donc sous forme inactivée.
Selon un mode de réalisation, le milieu d’incubation n’est pas un milieu pour la culture bactérienne et est constitué uniquement de l’extrait de levure et de la culture bactérienne, éventuellement lysées.
D’autres conditions adaptées à cette étape de conversion sont :
- une température comprise entre 30 et 40°C,
- un pH compris entre 5 et 7 ;
- un temps d’incubation de l’ordre de 15h à 70h, de préférence 24h à 70h.
L’étape de conversion est menée jusqu’à la consommation de la quantité souhaitée d’acide glutamique libre. Dans le cadre de la présente demande visant l’utilisation de l’extrait final pour la santé, et en l’absence de toxicité du GABA, la conversion en GABA doit être optimale, avantageusement supérieure à 90%. Comme déjà dit, l’extrait final comprend avantageusement moins de 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1 %, voire 0.9, 0.8, 0.7, 0.6, 0.5, 0.4, 0.3, 0.2 voire même 0.1% en poids d’acide glutamique libre, le pourcentage en poids étant exprimé par rapport au poids de matière sèche de l'extrait. De manière encore plus avantageuse, la totalité de l’acide glutamique de l’extrait est consommée.
Selon un mode de réalisation particulier, un extrait selon l’invention présente en outre les caractéristiques suivantes, exprimées en pourcentage en poids par rapport au poids de matière sèche de l'extrait :
- un taux d’azote de 0 à 20%, par exemple de 7 à 20% ; et/ou
- un taux d’acides aminés libres de 0 à 30%, par exemple de 10 à 20% ; et/ou
- un taux d’acides aminés totaux de 20 à 50%, par exemple de 30 à 40%.
Après l’arrêt de la conversion, plusieurs schémas de traitement de l’extrait ainsi obtenu peuvent être envisagés : Selon un premier mode de réalisation et au moins dans le cas d’une incubation avec des bactéries vivantes, il est soumis à une inactivation thermique, par exemple à une température de 90°C. Dans ce cas de figure, le produit obtenu contient des bactéries inactivées.
Selon un autre mode de réalisation, après cette étape d’inactivation thermique, les bactéries sont éliminées de l’extrait par toute technique connue de l’homme du métier, par exemple par filtration membranaire tangentielle (microfiltration ou ultrafiltration), par centrifugation, ou par combinaison de ces différentes techniques.
Ces étapes peuvent s’avérer inutiles dans le cas de la mise en œuvre d’un lysat bactérien.
Ainsi et à cette étape, l’extrait peut contenir des bactéries inactivées ou être exempt (ou essentiellement dépourvu) de bactéries.
Selon un mode de réalisation particulier, les bactéries inactivées sont conservées dans l’extrait selon l’invention, constituant ainsi un post-biotique d’intérêt dans le cadre d’une application notamment en cosmétique.
Selon une autre caractéristique, un extrait selon l’invention est hydrosoluble.
Selon un mode de réalisation particulier, l’extrait ainsi obtenu est séché, avantageusement par atomisation, par exemple à l’aide d’une tour d’atomisation. Dans le cadre de la présente demande, il a été montré que le GAB A présent dans l’extrait résiste à ces traitements thermiques et reste stable.
Selon un mode de réalisation particulier, l’extrait selon l’invention est sous la forme d’un extrait sec. Alternativement, il peut se présenter sous forme liquide ou sous forme de poudre. Selon un autre mode de réalisation particulier, l’extrait selon l’invention peut être dilué dans un support ou un excipient physiologiquement acceptable. Un support ou excipient physiologiquement acceptable est un support ou excipient aromatiquement neutre et approprié à l’administration chez l’homme ou l’animal. Des exemples de supports ou d'excipients physiologiquement acceptables sont notamment les maltodextrines, le triacétine, le propylène glycol, la glycérine végétale, le glycérol, les fibres solubles, des dérivés de levure tels que les extraits de levures, les écorces et les autolysats, ou encore des matières grasses telles que l’huile de palme.
Un extrait selon l’invention présente des propriétés bénéfiques pour la beauté et la santé de la peau, d’intérêt pour tout produit destiné à un usage topique. Un aspect de l’invention concerne donc l’utilisation d’un tel extrait dans ce contexte. L'extrait selon l'invention peut être utilisé seul sous forme d'ingrédient actif ou formulé dans une composition cosmétique et/ou dermatologique. Un autre objet de l'invention concerne donc l'utilisation de l'extrait selon l’invention contenu dans une composition cosmétique et/ou dermatologique, laquelle comprend par ailleurs au moins un excipient cosmétiquement et/ou dermatologiquement acceptable. En d’autres termes et selon un aspect particulier, la présente invention concerne une composition cosmétique et/ou dermatologique à usage topique comprenant un extrait tel que défini ci-dessus.
Dans le cadre de la demande, par le terme « excipient » on désigne une substance ou un composé qui ne possède aucune propriété biologique et/ou thérapeutique. L’excipient garantit la création de texture, parfum et/ou couleur particulières pour une formulation, mais aussi sa conservation, stabilité, sécurité et longévité, en conformité avec la réglementation. L’excipient est à différencier du ou des composés actifs présents dans la composition selon l’invention.
On entend par « excipient acceptable » tout véhicule ou solvant adapté à l'utilisation en contact avec la peau, y compris le cuir chevelu et/ou les muqueuses humaines, non toxique, non irritant, n’induisant pas de réponse allergique et stable sur le plan chimique.
De manière connue pour la personne du métier, le ou les excipients peuvent être choisis parmi : les conservateurs, les émollients, les émulsifiants, les tensioactifs, les hydratants, les épaississants, les conditionneurs, les agents matifiants, les stabilisants, les antioxydants, les agents de texture, les agents de brillance, les agents filmogènes, les solubilisants, les pigments, les colorants et les parfums.
Ces excipients sont de préférence choisis parmi le groupe consistant en les acides aminés et leurs dérivés, les polyglycérols, les esters, les polymères et dérivés de cellulose, les dérivés de lanoline, les phospholipides, les lactoferrines, les lactopéroxidases, les stabilisants à base de sucrose, la vitamine E et ses dérivés, les cires naturelles et synthétiques, les huiles végétales, les triglycérides, les insaponifiables, les phytostérols, les esters végétaux, les silicones et leurs dérivés, les hydrolysats de protéines, l'huile de Jojoba et ses dérivés, les esters lipo/hydrosolubles, les bétaïnes, les aminoxides, les extraits de plantes, les esters de saccharose, les dioxydes de titane, les glycines, et les parabènes.
En particulier dans le domaine cosmétique, le groupe d’excipients peut consister en le butylène glycol, le stéareth-2, le stéareth-21, le glycol- 15 stéaryl éther, le cétéaryl alcool, le phénoxyéthanol, le méthylparabène, l'éthylparabène, le propylparabène, le butylparabène, le butylène glycol, les tocophérols naturels, la glycérine, le dihydroxycétyl sodium phosphate, l'isopropyl hydroxycétyl éther, le glycol stéarate, le trisononanoin, l'octyl cocoate, le polyacrylamide, l'isoparaffine, le aureth-7, un carbomère, le propylène glycol, le glycérol, le bisabolol, une diméthicone, l’hydroxyde de sodium, le PEG 30-dipolyhydroxystérate, les caprique/caprylique jojoba, triglycérides, le sulfate le cétéaryl de magnésium, octanoate, l'EDTA, le dibutyl une adipate, cyclométhicone, l'huile de pépin, la gomme de raisin, de xanthane, l'huile de l’acide citrique, le lauryl sulfate de sodium, les cires et les huiles minérales, l'isostéaryl isostéarate, le dipélargonate de propylène glycol, l'isostéarate de propylène glycol, le PEG 8, Beeswax, les glycérides d'huile de cœur de palme hydrogénée, les glycérides d'huile de palme hydrogénée, l'huile de lanoline, l'huile de sésame, le cétyl lactate, le lanoline alcool, l'huile de ricin, le dioxyde de titane, le lactose, le saccharose, le polyéthylène basse densité, une solution isotonique salée.
Selon un mode de réalisation particulier, l’extrait représente de 0,01 à 10% en poids de la composition. En d’autres termes, une composition cosmétique selon l’invention comprend l’extrait défini ci-dessus avantageusement à hauteur de 0,01% à 10% en poids total de la composition, encore plus avantageusement de 0,1% à 5%, de préférence entre 1% et 3%.
La composition cosmétique peut, outre l’extrait selon l’invention, contenir d’autres actifs d’intérêt.
Dans le cadre de l’invention, les expressions « composé actif », « ingrédient actif » et « principe actif » s’utilisent de manière interchangeable et désignent une substance ou un composé qui possède des propriétés biologiques et/ou thérapeutiques qui sous-tendent un effet physiologique. Le composé actif, ingrédient actif ou principe actif est à différencier du ou des excipients tels que définis ci-dessus.
Des actifs d’intérêt pour la peau peuvent avoir la même activité que l’extrait selon l’invention, ou une activité complémentaire.
Des actifs d’intérêt aussi bien dans le domaine cosmétique que dermatologique sont bien connus de la personne du métier.
Selon un mode de réalisation particulier, la composition cosmétique se présente sous une forme adaptée pour une application cutanée ou topique.
Dans le cadre de l’invention, par l’expression « composition pour application cutanée » ou « à usage topique », on désigne une composition compatible avec une application sur la peau, les muqueuses, les cheveux et/ou le cuir chevelu, de préférence la peau humaine. Ainsi et selon un mode de réalisation particulier, la composition selon l’invention est sous une forme galénique adaptée pour un usage cosmétique acceptable, c’est-à-dire compatible avec la peau, les muqueuses, les cheveux et le cuir chevelu.
Ainsi, la composition selon l’invention peut se présenter sous la forme d’une solution aqueuse, hydroalcoolique, organique ou huileuse ; de suspension ou de dispersion dans des solvants ou des corps gras, de type lotion ou sérum ; sous forme de dispersion vésiculaire ; sous forme d’émulsion, notamment eau dans huile (E/H), huile dans eau (H/E) ou multiple telle qu’une émulsion eau dans huile dans eau (E/H/E). L’émulsion peut être plus au moins épaisse et se présenter sous forme de crème ou de lait ; la composition de l’invention peut se présenter également sous forme de pommade, de gel, de bâtonnet solide, de stick, de produits anhydres pâteux ou solides, de mousse, notamment aérosol, de composition biphasique ou encore de composition pulvérisable.
La composition peut être formulée sous forme de solution, aqueuse ou huileuse, de crème, sérum, de gel aqueux ou de gel huileux, notamment en pot ou en tube, notamment un gel douche, de shampoing, de lait, d'une émulsion, d'une microémulsion ou d'une nanoémulsion, notamment huile-dans-eau ou eau-dans-huile ou multiple ou siliconée, d'une lotion, notamment en flacon de verre, de plastique ou en flacon doseur ou en aérosol, d'une ampoule, d'un savon liquide, d'un pain dermatologique, d'une pommade, d'une mousse, d'un produit anhydre, de préférence liquide, pâteux ou solide, par exemple sous forme de bâtonnet, des poudres.
Selon un mode de réalisation particulier, la composition de l’invention se présente sous la forme d’une crème, d’une lotion, d’une solution, d’une émulsion, d’un gel, d’une huile, d’un stick, d’une mousse, d’une poudre, d’un spray ou d’une brume.
La forme galénique de la composition ainsi que son mode de préparation, et par conséquent les excipients appropriés à la composition de l’invention, peuvent être choisis par l’homme du métier sur la base de ses connaissances générales en fonction du type de composition recherché.
Notamment, la composition peut comprendre tout corps gras usuellement utilisé dans le domaine cosmétique. On peut notamment citer les corps gras tels que les huiles et les cires d’origine végétale, minérale, animale et/ou synthétique. Les huiles peuvent être volatiles ou non volatiles. On peut encore citer les esters et les éthers de synthèse, les alcools gras et les acides gras. La composition peut également comprendre un milieu aqueux, un milieu hydroalcoolique contenant un alcool tel que l’éthanol ou l’isopropanol, ou un milieu organique comprenant des solvants organiques usuels tels que des alcools en Cl-6, notamment l’éthanol et l’isopropanol, des glycols tels que le propylène glycol, des cétones. Bien entendu, l’homme du métier veillera à choisir ce ou ces éventuels adjuvants ou excipients complémentaires, et/ou leur quantité, de manière telle que les propriétés avantageuses de la composition selon l’invention ne soient pas, ou substantiellement pas, altérées par l’adjonction envisagée. La composition peut comprendre au moins un émulsifiant classique, choisi parmi les émulsifiants amphotères, anioniques, cationiques ou non ioniques, utilisés seuls ou en mélange. Il peut être particulièrement avantageux de formuler la composition de l’invention de façon qu’elle soit pulvérisable. Ceci peut être réalisé par exemple par la formulation d’émulsions spécifiques comprenant des combinaisons particulières d’excipients.
Selon un autre aspect, l’invention concerne l’application d’un extrait tel que défini ci-dessus, avantageusement d’une composition le contenant, sur la peau, les muqueuses, les cheveux et/ou le cuir chevelu.
Dans un mode de réalisation de l'invention, le procédé consiste en l'application par voie topique de l'extrait ou de la composition le comprenant sur tout ou partie du corps humain choisi parmi les jambes, les pieds, les aisselles, les mains, les cuisses, le ventre, le décolleté, le cou, les bras, le torse, le dos, la muqueuse labiale, le visage et/ou le cuir chevelu, avantageusement le décolleté et/ou le visage, encore avantageusement le visage.
Un autre objet de l’invention concerne l’utilisation de l’extrait ou de la composition selon l’invention dans différentes applications cosmétiques et/ou dermatologiques, ou pour prévenir et/ou traiter différentes conditions décrites ci-dessous.
En d’autres termes, l’invention vise également : l’extrait ou la composition selon l’invention pour ces différentes applications ; et/ou l’utilisation de l’extrait ou de la composition selon l’invention, pour préparer un médicament destiné à prévenir et/ou traiter ces différentes conditions ; et/ou
- une méthode pour prévenir et/ou traiter ces différentes conditions comprenant l’administration topique, de l’extrait ou de la composition selon l’invention.
Ainsi et en fonction des activités mises en évidence pour l’extrait selon l’invention, la présente demande vise aussi bien des procédés de soin cosmétique que des utilisations thérapeutiques.
On entend au sens de la présente invention par « utilisation cosmétique et/ou composition cosmétique » une utilisation et/ou une composition non pharmaceutique, c'est-à-dire qui ne nécessite pas de traitement thérapeutique, c'est-à-dire destinée à toute zone de peau, incluant le cuir chevelu, et/ou muqueuses, dite saines. On entend par « peau et/ou muqueuse saine » tout ou partie d'une zone de peau incluant le cuir chevelu et/ou muqueuse saine, notamment humaine, sur laquelle est appliquée l'extrait selon l'invention et dite « non pathologique » par un dermatologue, c'est à dire ne présentant pas d'infection, de cicatrice, de maladie ou d'affection cutanée telle que candidose, impétigo, psoriasis, eczéma, acné ou dermatite, ou de plaies ou de blessures et/ou autres dermatoses. Il s'agit donc d'une utilisation de l'extrait sur zone de peau et/ou de muqueuse de sujets notamment humains qualifiés de « normaux » par un dermatologue.
En particulier, un extrait ou une composition selon l’invention peut être utilisé comme agent antioxydant, agent cicatrisant, agent anti-inflammatoire, agent anti-acnéique, ou dans le traitement des altérations des cellules de la peau, des lèvres, des cheveux, et/ou des muqueuses causées par les stress notamment environnementaux (par exemple la pollution).
En outre et plus en lien avec le domaine de la cosmétique et de l’esthétique, il peut être utilisé comme agent hydratant, agent anti-âge, agent apaisant, agent régénérateur de la fonction barrière ou agent de blanchiment.
FIGURES
Figure 1 : Protocoles de test pour démontrer de nouveaux effets cosmétiques d’un extrait selon l’invention
Fi ure 2 : Résultats de l’étude transcriptomique sur les kératinocytes humains
Figure 3 : Résultats de l’étude transcriptomique sur les fibroblastes humains
EXEMPLES DE REALISATION
L’invention et les avantages qui en découlent ressortiront mieux des exemples de réalisation suivants, à l’appui de la figure annexée. Ceux-ci n’ont toutefois aucune portée limitative.
1/ Préparation de l’actif selon l’invention
1/ Préparation de l’extrait de levure
Un extrait de levure de Saccharomyces cerevisiae a été préparé et utilisé à une concentration comprise entre 30g/L à 300g/L.
2/ Préparation de la bactérie porteuse de l’activité glutamate décarboxylase
La bactérie Levilactobacillus brevis a été cultivée dans des conditions adaptées sur un milieu de type MRS (Man Rogosa, Sharpe).
La culture ainsi obtenue est utilisée en l’état ou soumise à lyophilisation pour ensuite être utilisée dans l’étape de conversion de l’acide glutamique en GABA. 3/ Conversion de l’acide glutamique en GABA
La conversion est réalisée à une température comprise entre 30 et 40°C et à un pH compris entre 5 et 7. L’inoculation de l’extrait par le moût bactérien initie la conversion. La durée de conversion est de l’ordre de 24h à 70h. La réaction est arrêtée lorsque la conversion en GABA est supérieure à 90%, si possible totale.
L’extrait riche en GABA ainsi obtenu est alors soumis à une inactivation thermique puis est centrifugé.
La composition de l’extrait final obtenu, sous forme sèche, est donnée dans le tableau ci- dessous :
Tableau 1
II/Mise en évidence de l’impact de l’extrait selon l’invention sur la peau
L’effet d’un extrait de levure tel qu’obtenu en (I), et donc riche en GABA, a été évalué sur différentes cellules cutanées. Ces expériences ont été réalisées en parallèle sur : le même extrait mais non incubé en présence de bactéries lactiques ; du GABA synthétique pur commercial (Ref. A2129, Sigma-Aldrich) ;
Le schéma expérimental est illustré à la figure 1.
1/ Conditions testées:
■ Cultures in vitro de cellules cutanées : kératinocytes primaires humains adultes (cellules principales de l’épiderme) et fibroblastes primaires humains (cellules principales du derme)
■ Temps d’incubation : 24 heures
■ 4 conditions testées :
■ Cellules cutanées non traitées
Cellules cutanées incubées en présence de l’extrait de levure enrichi en GABA selon l’invention
Cellules cutanées incubées en présence de l’extrait de levure non enrichi en GABA Cellules cutanées incubées en présence de GABA purifié commercial (à la même concentration dans le milieu de culture qu’en présence de l’extrait enrichi en GABA)
2/ Tests réalisés:
Après incubation, les échantillons cellulaires sont utilisés pour la récupération des ARNm, la synthèse d’ADNc et l’analyse transcriptomique.
La corrélation entre les gènes dont l’expression est modulée et de possibles applications cosmétiques est montrée dans le tableau ci-dessous :
Tableau 2
Ainsi, les modifications observées au niveau transcriptomique permettent d’alléguer des indications cosmétiques (anti-âge, régénérant, hydratant, apaisant, protecteur vis-à-vis du stress oxydant...) pour un extrait selon l’invention combinant la naturalité, et la présence de GABA, des divers constituants de l’extrait de levure et des post-biotiques, en l’occurrence des bactéries lactiques inactivées.
III/ un extrait selon l’invention A titre d’exemples, 3 formulations intégrant un extrait de levure obtenu tel que décrit en (I) (noté « produits de l’invention » dans les tableaux ci-dessous) ont été préparées. Il s’agit de compositions cosmétiques pour application topique, préparés par mélange de différentes parties A, B, C, D, E ou F selon les connaissances classiques de l’homme du métier.
Tableau 3
Tableau 4
Tableau 5
IV/ Mise en évidence de l’impact de l’extrait selon l’invention sur les fibroblastes et les kératinocytes primaires de la peau humaine
Dans cette étude in vitro, des kératinocytes épidermiques humains normaux (HEPK) et des fibroblastes dermiques humains primaires (HDF) ont été traités avec 3 produits :
Extrait de levure non enrichi,
Extrait de levure enrichi en GABA selon l’invention, et GABA purifié commercial (Sigma-Aldrich).
Après incubation, les ARN ont été extraits des cellules pour étudier par RT-qPCR 128 gènes sélectionnés pour leur importance dans la physiologie de l'épiderme, le vieillissement cutané, la fonction barrière ou le stress oxydatif, dont 3 gènes de ménage utilisés pour la normalisation des résultats.
1/ Matériel et méthode
Modèles cellulaires et incubation avec des produits
Après amplification, les fibroblastes de peau adulte (HDFas, passage 2) et les kératinocytes de peau adulte (HPEKas, passage 3, fournisseur : CELLnTEC) ont été ensemencés à 60 000 cellules/puits dans une plaque de 24 puits (Costar, référence 3526) pendant 48h dans un milieu prêt à l'emploi CnT Prime Epithelial proliferation Medium (réf CnT-PR, CELLnTEC) à 37°C, 5% CO2. Pour cette étude d'expression génique, les cellules sont au passage 3.
Ensuite, les cellules ont été incubées avec les composés 1 et 3 à 0,1% pendant 24h (Composé 1= YE non enrichi; composé 3= YE enrichi en GABA selon l’invention). Le composé 2 (GABA) a été utilisé à concentration équimolaire avec le YE enrichi en GABA pour atteindre la même concentration de GABA finale. Après 24h d'incubation avec les produits, les surnageants ont été retirés et les échantillons cellulaires ont été congelés à -80°C.
Extraction d'ARN
Les ARN totaux ont été extraits de chaque échantillon en utilisant le réactif d'isolement TriPure® selon les instructions du fournisseur.
La qualité des ARN a été évaluée par électrophorèse capillaire (système TapeStation 4200, technologies Agilent). La quantité d'ARN a été déterminée à l'aide d'un spectrophotomètre (Synergy HI, Biotek Instruments).
RT-qPCR
L'ADN complémentaire (cDNA) a été synthétisé par transcription inverse des ARN totaux en présence d'oligo(dT) et de Transcriptor Reverse Transcriptase (Roche). Les quantités de cDNA ont été ajustées avant l'étape de PCR quantitative.
Les PCR quantitatives ont été réalisées en utilisant un système « LightCycler® » (Roche Molecular System Inc.) selon les instructions du fournisseur. La réaction de PCR a été réalisée avec un mélange de réactifs (Ozyme) contenant de la taq DNA polymérase, du SYBR Green I et du MgC12 en présence d'amorces spécifiques et de cDNA.
L'analyse des transcrits a été réalisée en n=2 en utilisant un array PCR ciblant 128 gènes (125 gènes sélectionnés + 3 gènes de ménage).
Analyse de l'expression génique
L'incorporation de la fluorescence dans l'ADN amplifié a été mesurée en continu pendant les cycles de PCR. Cela a donné lieu à un graphique « intensité de fluorescence » versus « cycle de PCR » permettant l'évaluation d'une valeur d'expression relative (RE) pour chaque marqueur. La valeur sélectionnée pour les calculs de RE est le « point de sortie » (Ct) de la courbe de fluorescence. Pour un marqueur considéré, plus le nombre de cycles est élevé, plus la quantité d'ARNm est faible. La valeur de RE a été calculée avec la formule : (l/2nombre de cycles) x 106.
L'array PCR utilisé dans la présente étude comprenait 3 gènes de référence (RPS28, GAPDH et ACTB). Ces gènes de ménage ont été utilisés pour la normalisation des données car leur expression est constitutive et théoriquement stable. Par conséquent, le niveau d'expression des marqueurs cibles a été comparé au niveau moyen d'expression de ces 3 marqueurs pour toutes les conditions de test.
Les effets ont été classés en fonction de l'expression relative pour les conditions « traitées » versus la condition « contrôle » selon le tableau suivant :
L'analyse a été réalisée en utilisant la méthode du 2 -AACt telle qu’expliquée dans Livak et Schmittgen 2001.
DCt = Ct (target gene) - Ct (reference gene)
DDCt = DCt (target sample) - DCt (reference sample)
Fold change = 2'DDCt
2/ Résultats sur les kératinocytes
Les résultats de l’étude transcriptomique sur les kératinocytes humains sont présentés dans la figure 2 dans laquelle la ligne en pointillée à 100% correspond au contrôle non traité.
2-1 Effet hydratant, restauration de la fonction barrière, cicatrisant ou traitement des altérations des cellules de la peau causées par les stress environnementaux
Gènes impliqués dans différenciation des kératinocytes
L'incubation avec l’extrait de levure enrichi en GABA selon l’invention a régulé à la hausse par rapport à l’extrait non enrichi différents gènes impliqués dans la différenciation des kératinocytes :
IVL codant pour la protéine involucrine exprimée dans les couches épineuses et granulaires supérieures de l'épiderme et est reconnue comme un marqueur précoce de la différenciation de l'épiderme ;
SPRR1 A et SPRR1B, dont les protéines associées interviennent après l'involucrine pour la formation et le renforcement de l'enveloppe des cornéocytes ;
- FLG codant pour la protéine filaggrine joue également un rôle dans la fonction de barrière. La filaggrine est synthétisée sous forme de protéine précurseur appelée profilaggrine et présente dans les granules de kératohyaline dans la couche granulaire de l'épiderme ;
- Kératine 1 (codée par KRT1) est exprimée dans les couches suprabasales de l'épiderme et favorise la différenciation terminale des kératinocytes ;
- Le gène le plus surexprimé est PADI1 qui code la protéine peptidylarginine déiminase de type 1, une enzyme dépendante du calcium impliquée dans les dernières étapes de la différenciation de l'épiderme et responsable de la déamination de la filaggrine et de la kératine 1.
SULT2B1 codant pour l'enzyme nommée sulfotransférase famille 2B membre 1 qui permet la sulfonation de divers stérols comme le cholestérol pour le convertir en sulfate de cholestérol. La protéine SULT2B1 est impliquée dans la différenciation des kératinocytes et affecte l'expression des protéines impliquées dans la formation de l'enveloppe cornée comme la loricrine, l'involucrine et la fdaggrine.
En favorisant l'expression de ces gènes, l’extrait de levure enrichi en GABA selon l’invention a des avantages sur la fonction de barrière de la peau (renforcement de la barrière), et aide ainsi à protéger la peau contre les agressions extérieures en général (pollution, stress environnemental...). En conjonction avec les avantages mentionnés précédemment pour le derme, il a également un grand impact sur la réparation de la peau en favorisant la différenciation de l'épiderme.
Gènes impliqués dans 1 ’hydratation de la peau
De plus, certains de ces gènes ont également un rôle dans l'hydratation de la peau :
- Les monomères de fdaggrine (codés par le gène FLG, qui a été régulé à la hausse ici) sont des cibles directes de la caspase 14 (CASP14) et sont clivés en acides aminés libres et dérivés, qui agissent comme des contributeurs majeurs du Facteur Naturel d'Hydratation (NMF) qui protège la peau contre la perte d'eau,
- PADI1 qui code la protéine peptidylarginine déiminase de type 1, une enzyme dépendante du calcium, est également impliquée dans la formation du NMF.
2-2 Effet restauration de la fonction barrière, anti-acnéique, cicatrisant
Gènes impliqués dans l'immunité innée et la production de peptides antimicrobiens
L’extrait de levure enrichi en GABA selon l’invention module l'expression des gènes impliqués dans la production de peptides antimicrobiens (AMPs) :
- Les protéines de la superfamille SPRR, qui jouent un rôle dans la formation de l'enveloppe cornée, permettent de produire des protéines antimicrobiennes (AMPs) pour protéger la barrière cutanée, en se liant et en perturbant la membrane bactérienne.
CAMP code pour le peptide antimicrobien cathelicidine ou LL-37, qui peut inhiber la formation de biofilm bactérien par . aureus et S. epidermis et contrôler la croissance de C. acnés.
- PI3 code pour l'inhibiteur de peptidase 3 ou élafine qui cible les bactéries Gram- positives et Gram-négatives ainsi que les pathogènes fongiques.
- La psoriasine, également appelée protéine de liaison au calcium S 100 A7, est codée par le gène S100A7 et est exprimée exclusivement par les kératinocytes. La psoriasine cible les bactéries A. coli, C. acnés et les dermatophytes dans les kératinocytes infectés.
En favorisant l'expression de ces gènes, l’extrait de levure enrichi en GABA selon l’invention a des avantages sur le renforcement la barrière cutanée en la protégeant des micro-organismes potentiellement nocifs (en favorisant les défenses naturelles de la peau contre les agressions biologiques externes) ; sur la protection de la peau contre l'acné ; et sur les phases précoces de la réparation cutanée puisque les AMPs sont impliqués dans les premières étapes de la cicatrisation, en conjonction avec les effets sur le derme.
2-4 conclusion
L’extrait enrichi en GABA selon l’invention peut donc être utilisé comme agent : hydratant, de restauration de la fonction barrière, anti-acnéique, cicatrisant, dans le traitement des altérations des cellules de la peau causées par les stress environnementaux.
3/ Résultats sur les fibroblastes
Les résultats de l’étude transcriptomique sur les fibroblastes humains sont présentés dans la figure 3 dans laquelle la ligne en pointillée à 100% correspond au contrôle non traité.
3-1 Effet anti-âge et cicatrisant
Gènes impliqués dans les composants de la matrice extracellulaire et des protéines/enzymes associées
L'incubation avec l’extrait de levure enrichi en GABA selon l’invention a régulé à la hausse l'expression de ELN (Elastine) de seulement 37% par rapport à la condition de contrôle non traitée, mais elle a augmenté de 78% par rapport à l’extrait non enrichi correspondant. Cela suggère que l’extrait de levure enrichi en GABA selon l’invention a un impact positif sur le vieillissement de la peau (propriétés anti-âge).
De la même manière, l'incubation avec l’extrait de levure enrichi en GABA selon l’invention a régulé à la hausse l'expression EXTL1 (exostosine-like glycosyltransferase 1) par rapport à la condition de contrôle non traitée, ou au GABA commercial ou à l’extrait non enrichi correspondant. La protéine codée possède une activité alpha 1,4-N- acétylglucosaminyltransférase et est impliquée dans l'élongation de la chaîne de sulfate d'héparane. Etant donné que le sulfate d'héparane est présent dans le perlecan (protéoglycane de sulfate d'héparane 2) et la famille syndecan des protéoglycanes de la peau, il impacte alors le contenu de la matrice extracellulaire du derme, son vieillissement et sa réparation. Cela suggère que l’extrait de levure enrichi en GABA selon l’invention a un impact positif sur le vieillissement de la peau (propriétés anti-âge) et la cicatrisation (réparation de la peau).
3-2 conclusion
L’extrait enrichi en GABA selon l’invention peut donc être utilisé comme agent: anti-âge, et cicatrisant.
4\Conclusion En conséquence, l'extrait de levure enrichi en GABA selon l’invention peut être utilisé dans le domaine cosmétique ou dermocosmétique comme agent anti-âge, agent de restauration de la fonction barrière, agent hydratant.
Par ailleurs, l'extrait de levure enrichi en GABA selon l’invention peut aussi être utilisé dans le domaine thérapeutique comme agent cicatrisant, agent anti-acnéique, ou dans le traitement des altérations des cellules de la peau causées par les stress notamment environnementaux.

Claims

REVENDICATIONS
1. Extrait de levure contenant de l’acide gamma-aminobutyrique (GABA), ledit GABA étant obtenu à partir d’acide glutamique présent sous forme d’acide aminé libre chez ladite levure.
2.Extrait selon la revendication 1, caractérisé en ce qu’il contient au moins 5% en poids de GABA, le pourcentage en poids étant exprimé par rapport au poids de matière sèche de l’extrait.
3. Extrait selon l’une des revendications 1 à 2, caractérisé en ce qu’il contient moins de 10% en poids d’acide glutamique, avantageusement moins de 5%, encore plus avantageusement moins de 1%, le pourcentage en poids étant exprimé par rapport au poids de matière sèche de l’extrait.
4. Extrait selon l’une des revendications 1 à 3, caractérisé en ce qu’il s’agit d’un extrait hydrosoluble, avantageusement sous forme sèche.
5. Extrait selon l’une des revendications 1 à 4, caractérisé en ce qu’il est obtenu à partir d’une levure capable de synthétiser de l’acide glutamique.
6. Extrait selon la revendication 5, caractérisé en ce qu’il est obtenu à partir d’une levure de l’espèce Saccharomyces cerevisiae.
7. Extrait selon l’une des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que le GABA est obtenu à l’aide du procédé suivant :
- préparation de l’extrait de levure à partir d’une levure contenant de l’acide glutamique sous forme d’acide aminé libre ;
- incubation de l’extrait en présence d’une enzyme glutamate décarboxylase (GAD).
8. Extrait selon la revendication 7, caractérisé en ce que l’enzyme glutamate décarboxylase (GAD) est issue d’une bactérie ou d’un lysat d’une telle bactérie produisant ladite enzyme, avantageusement porteuse des gènes GadA et/ou GadB voire GadC.
9. Extrait selon la revendication 8, caractérisé en ce que la bactérie appartient à la famille des lactobacillaceae , avantageusement choisie dans le groupe constitué de : Levilactobacilus brevis, Lentilactobacilus buchneri et Lactococcus lactis, plus avantageusement en ce que la bactérie est Levilactobacilus brevis.
10. Extrait selon l’une des revendications 8 à 9, caractérisé en ce que l’incubation entre la bactérie et l’extrait de levure est réalisée dans des conditions favorisant la conversion de l’acide glutamique en GABA.
11. Extrait selon l’une des revendications précédentes, caractérisé en ce qu’il comprend des bactéries inactivées ou est exempt de bactéries.
12. Composition à usage topique comprenant un extrait selon l’une des revendications 1 à 11, l’extrait représentant avantageusement de 0,01 à 10% en poids de la composition.
13. Composition selon la revendication 12, caractérisée en ce qu’ elle est sous une forme adaptée à une application topique, avantageusement en ce qu’elle se présente sous la forme d’une crème, d’une lotion, d’une solution, d’une émulsion, d’un gel, d’une huile, d’un stick, d’une mousse, d’une poudre, d’un spray ou d’une brume.
14. Composition selon la revendication 12 ou 13 pour son utilisation comme agent antioxydant, agent cicatrisant, agent anti-inflammatoire, agent anti-acnéique, ou dans le traitement des altérations des cellules de la peau, des lèvres, des cheveux, et/ou des muqueuses causées par les stress environnementaux.
15. Utilisation cosmétique d’une composition selon la revendication 12 ou 13 pour la préparation d’une composition cosmétique, notamment comme agent hydratant, agent anti-âge, agent apaisant, agent de restauration de la fonction barrière, ou agent de blanchiment.
PCT/EP2025/064415 2024-05-24 2025-05-23 Nouvel extrait riche en gaba et son utilisation en cosmetique et/ou en dermatologie Pending WO2025242925A1 (fr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FRFR2405362 2024-05-24
FR2405362A FR3162355A1 (fr) 2024-05-24 2024-05-24 Nouvel extrait riche en gaba et son utilisation en cosmetique et/ou en dermatologie

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2025242925A1 true WO2025242925A1 (fr) 2025-11-27

Family

ID=93010852

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/EP2025/064415 Pending WO2025242925A1 (fr) 2024-05-24 2025-05-23 Nouvel extrait riche en gaba et son utilisation en cosmetique et/ou en dermatologie

Country Status (2)

Country Link
FR (1) FR3162355A1 (fr)
WO (1) WO2025242925A1 (fr)

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2001352940A (ja) * 2000-06-13 2001-12-25 Fujicco Co Ltd γ−アミノ酪酸を高含有した食品素材の製造方法およびそれにより得られる食品素材
WO2006064791A1 (fr) * 2004-12-14 2006-06-22 Japan Applied Microbiology Research Institute Ltd. Procedes de production d'acide $g(g)-aminobutyrique et extrait contenant de l'acide $g(y)-aminobutyrique
US20090068150A1 (en) 2005-07-07 2009-03-12 Doosan Corporation Lactic acid bacteria culture of mung bean and the preparation method of the same, and the cosmetic composition comprising the same
JP4838628B2 (ja) * 2006-04-26 2011-12-14 ユニチカ株式会社 γ−アミノ酪酸高含有組成物の製造方法
KR20160085161A (ko) * 2015-01-07 2016-07-15 롯데푸드 주식회사 고농도 감마아미노부티르산 생산능을 가지는 락토바실러스 브레비스 llb5238 균주를 이용하여 맥주 효모 부산물로부터 감마아미노부티르산을 생산하는 방법
KR20180020534A (ko) 2016-08-18 2018-02-28 한상우 가바를 함유하는 효모추출물을 유효성분으로 포함하는 발모촉진 또는 탈모예방용 조성물
CN114292763A (zh) 2021-12-20 2022-04-08 时垠(上海)生物科技有限公司 一株高产γ-氨基丁酸和可溶性β-葡聚糖的酿酒酵母及其应用
JP2024019906A (ja) * 2022-08-01 2024-02-14 大塚食品株式会社 γ－アミノ酪酸の製造方法

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2001352940A (ja) * 2000-06-13 2001-12-25 Fujicco Co Ltd γ−アミノ酪酸を高含有した食品素材の製造方法およびそれにより得られる食品素材
WO2006064791A1 (fr) * 2004-12-14 2006-06-22 Japan Applied Microbiology Research Institute Ltd. Procedes de production d'acide $g(g)-aminobutyrique et extrait contenant de l'acide $g(y)-aminobutyrique
US20090068150A1 (en) 2005-07-07 2009-03-12 Doosan Corporation Lactic acid bacteria culture of mung bean and the preparation method of the same, and the cosmetic composition comprising the same
JP4838628B2 (ja) * 2006-04-26 2011-12-14 ユニチカ株式会社 γ−アミノ酪酸高含有組成物の製造方法
KR20160085161A (ko) * 2015-01-07 2016-07-15 롯데푸드 주식회사 고농도 감마아미노부티르산 생산능을 가지는 락토바실러스 브레비스 llb5238 균주를 이용하여 맥주 효모 부산물로부터 감마아미노부티르산을 생산하는 방법
KR20180020534A (ko) 2016-08-18 2018-02-28 한상우 가바를 함유하는 효모추출물을 유효성분으로 포함하는 발모촉진 또는 탈모예방용 조성물
CN114292763A (zh) 2021-12-20 2022-04-08 时垠(上海)生物科技有限公司 一株高产γ-氨基丁酸和可溶性β-葡聚糖的酿酒酵母及其应用
JP2024019906A (ja) * 2022-08-01 2024-02-14 大塚食品株式会社 γ－アミノ酪酸の製造方法

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CEOL, CRAIG J., CANCER DISCOV, vol. 13, no. 10, 2023, pages 2128 - 2130
DATABASE GNPD [online] MINTEL; 29 July 2021 (2021-07-29), ANONYMOUS: "Neuro GABA Body Balm", XP093253095, retrieved from https://www.gnpd.com/sinatra/recordpage/8903437/ Database accession no. 8903437 *
G. REEDT.W. NOGODAWITHANA: "Yeast Technology", 1991, VAN NOSTRAND REINHOLD
WANG YAQI ET AL: "Metabolism Characteristics of Lactic Acid Bacteria and the Expanding Applications in Food Industry", vol. 9, no. 612285 (article number), 12 May 2021 (2021-05-12), pages 1 - 19, XP055835978, Retrieved from the Internet <URL:http://dx.doi.org/10.3389/fbioe.2021.612285> [retrieved on 20250225], DOI: 10.3389/fbioe.2021.612285 *
YOGESWARA, MICROORGANISMS, vol. 8, no. 12, 2020, pages 1923, Retrieved from the Internet <URL:https://doi.org/10.3390/microorganisms8121923>
ZHAO ET AL., BIOMOL THER, vol. 31, no. 6, 1 August 2023 (2023-08-01), pages 640 - 647

Also Published As

Publication number Publication date
FR3162355A1 (fr) 2025-11-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FR2929511A1 (fr) Nouveau principe actif stimulant la proliferation et/ou l&#39;activite des fibroblastes.
EP3174603B1 (fr) Extrait de camellia japonica et compositions cosmétiques le comprenant
EP3512606A1 (fr) Nouvelle utilisation cosmétique et/ou nutraceutique ou dermatologique d&#39;un extrait de levure
FR2916977A1 (fr) STIMULATION DE LA SYNTHESE DES RECPTEURS MCR1, MCR2 ET µ OPIOIDE.
EP1354593B1 (fr) Utilisation d&#39;un extrait de bacterie filamenteuse non photosynthetique non fructifiante en tant qu&#39;agent augmentant la synthese endogene de superoxyde dismutase
EP4262999B1 (fr) Utilisation cosmétique, nutraceutique ou dermatologique d&#39;une souche de lactobacillus crispatus et/ou d&#39;une composition la comprenant
KR101645476B1 (ko) 흑효모 발효를 통해 비타민 c 함량이 증가된 산자나무 발효 추출물을 함유하는 화장료 조성물
FR3058641B1 (fr) Utilisation cosmetique, nutraceutique ou pharmaceutique preferentiellement dermatologique d&#39;un extrait de feuilles de la plante lansium domesticum pour diminuer la pigmentation de la peau et/ou des annexes cutanees
EP3744401B1 (fr) Procédé d&#39; extraction de végetaux comprenant une étape de fermentation avec saccharomyces cerevisiae
FR2928549A1 (fr) Utilisation d&#39;un extrait de l&#39;orchidee brassocattleya marcella koss en tant qu&#39;actif pour prevenir ou retarder l&#39;apparition des signes du vieillissement cutane
FR2954702A1 (fr) Agent stimulant l&#39;expression de loxl
FR3104416A1 (fr) Extraits de bourgeons de roses
EP1174120B1 (fr) Utilisation d&#39;un extrait d&#39;une Iridacée dans une composition destinée à stimuler les défenses immunitaires
WO2019077268A1 (fr) Composition cosmétique de prévention active des signes de l&#39;âge
WO2025242925A1 (fr) Nouvel extrait riche en gaba et son utilisation en cosmetique et/ou en dermatologie
EP3085418B1 (fr) Compositions cosmetiques comprenant des oligomeres d&#39;acide hyaluronique et des cellules vegetales dedifferenciees et elicitees de bougainvillier encapsulant un extrait de safran
EP3237072B1 (fr) Utilisation d&#39;un extrait de lythrum salicaria
WO2023152080A1 (fr) Procede d&#39;obtention d&#39;extraits vegetaux comprenant une etape d&#39;autofermentation, compositions comprenant de tels extraits et leurs utilisations cosmetiques
FR2977158A1 (fr) Utilisation d&#39;huile essentielle de bursera graveolens
WO2021152250A1 (fr) Utilisation cosmétique, nutraceutique ou dermatologique d&#39;un extrait de tamarindus indica l. et / ou d&#39;une composition le comprenant
EP4009940B1 (fr) Nouvelle utilisation cosmétique d&#39;un extrait d&#39;epilobium angustifolium
FR3076461A1 (fr) Composition cosmétique de prévention active des signes de l’âge.
FR2859102A1 (fr) Utilisation d&#39;un extrait de rhodiola crenulata par voie topique
FR3154005A1 (fr) Composition cosmetique comprenant des protozoaires
FR3152983A1 (fr) EXTRAIT DE CITRUS et SON UTILISATION EN TANT QU’AGENT COSMETIQUE