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WO2025036451A1 - 靶向irak蛋白抑制或降解的化合物及其应用 - Google Patents

靶向irak蛋白抑制或降解的化合物及其应用 Download PDF

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WO2025036451A1
WO2025036451A1 PCT/CN2024/112342 CN2024112342W WO2025036451A1 WO 2025036451 A1 WO2025036451 A1 WO 2025036451A1 CN 2024112342 W CN2024112342 W CN 2024112342W WO 2025036451 A1 WO2025036451 A1 WO 2025036451A1
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WO
WIPO (PCT)
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optionally substituted
mmol
alkyl
compound
deuterium
Prior art date
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Pending
Application number
PCT/CN2024/112342
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
刘劲松
朱家滨
赵默晗
甘庆庆
林佳璐
陈瑞
齐怀远
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangzhou Imd Pharmaceutical Co Ltd
Pamplona Therapeutics Shenzhen Co Ltd
Original Assignee
Guangzhou Imd Pharmaceutical Co Ltd
Pamplona Therapeutics Shenzhen Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
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Publication date
Application filed by Guangzhou Imd Pharmaceutical Co Ltd, Pamplona Therapeutics Shenzhen Co Ltd filed Critical Guangzhou Imd Pharmaceutical Co Ltd
Publication of WO2025036451A1 publication Critical patent/WO2025036451A1/zh
Pending legal-status Critical Current
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    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
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    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
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    • C07D495/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D495/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00

Definitions

  • the present invention belongs to the field of medicine, and specifically relates to a compound that targets IRAK protein for inhibition or degradation, a preparation method thereof, and an application thereof in treating or preventing related diseases mediated by IRAK protein.
  • the interleukin-1 receptor-associated kinase (IRAK) family is a class of specific serine/threonine protein kinases that play an important role in innate immune regulation and adaptive immune responses mediated by the toll-like receptor family (TLRs) and the interleukin-1 receptor family (IL-1R).
  • TLRs toll-like receptor family
  • IL-1R interleukin-1 receptor family
  • the IRAK protein family consists of four isozymes: IRAK1, IRAK2, IRAK3 (IRAK-M) and IRAK4.
  • DD conserved N-terminal death domain
  • ProST proline/serine/threonine-rich domain
  • KD kinase or pseudokinase domain
  • CCD long C-terminal domain
  • IRAK4 is activated by trans-autophosphorylation, then phosphorylates and activates IRAK1 and promotes its dissociation from the complex.
  • Activated IRAK1 forms a complex with the E3 ubiquitin ligase TNF receptor-associated factor 6 (TRAF6) and activates TGF ⁇ -activated kinase 1-binding protein 1 (TAK1), which ultimately activates the downstream NF- ⁇ B and MAPK/JNK/p38 signaling pathways through a series of intracellular cascade reactions, leading to the secretion of proinflammatory cytokines and the proliferation and differentiation of immune cells.
  • IRAK3 negatively regulates IRAK signaling by inhibiting the activation of IRAK4 and IRAK1.
  • IRAK4 is a central kinase at the intersection of the two major signaling pathways of the TLR family and the IL-1R family. Its kinase activity is key to activating the TLR/IL-1R downstream pathway, and is therefore a candidate target for a variety of inflammatory diseases.
  • IRAK4 with kinase domain mutations has shown protective effects on mice in a variety of preclinical inflammatory disease models, including septic shock, systemic lupus erythematosus, acute liver injury, cardiovascular disease, and Alzheimer's disease.
  • IRAK4 drugs under development worldwide, most of which are in early clinical trials. No drugs targeting IRAK4 have been marketed yet. Among them, there are 6 in Phase II clinical trials, 2 in Phase I/II clinical trials, 10 in Phase I clinical trials, and 25 in preclinical trials.
  • the most developed indications are autoimmune diseases, including rheumatoid arthritis, suppurative hidradenitis, atopic dermatitis, and rheumatoid arthritis. dermatitis, lupus erythematosus, etc.; followed by cancer, including acute myeloid leukemia, myelodysplastic syndrome and B-cell lymphoma.
  • PF-06650833 a potent IRAK4 inhibitor developed by Pfizer, which has completed Phase II clinical studies on rheumatoid arthritis indications and suppurative hidradenitis.
  • the results show that PF-06650833 has no significant therapeutic effect on the above indications; the inhibitor CA-4948 developed by Curis is undergoing Phase II clinical studies on multiple tumor indications.
  • KT-474 an IRAK4 degrader developed by Kymera using targeted protein degradation (TPD) technology, has completed Phase I clinical studies on suppurative hidradenitis and atopic dermatitis and has shown strong anti-inflammatory activity and good safety and tolerability.
  • TPD targeted protein degradation
  • TPD is an emerging therapeutic strategy that can directly target some proteins that are difficult to target with conventional small molecule drugs by using proteolysis-targeting chimeras (PROTACs).
  • PROTAC is a heterogeneous bifunctional molecule composed of two ligands. One end of the ligand recruits and binds to the target protein (Protein Of Interest, POI), and the other end of the ligand recruits and binds to the E3 ubiquitin ligase.
  • PROTAC induces the binding of the target protein and E3, and connects the ubiquitination tag to the lysine of the target protein through E3 catalysis. The ubiquitinated target protein is then recognized and degraded by the 26S subunit of the proteasome in the cell.
  • KT-474 as the first effective, highly selective, and orally bioavailable IRAK4 degrader, has an incomparable unique advantage in inhibiting the TLR/IL-1R signaling pathway.
  • IRAK4 mainly mediates IL-1R/TLR downstream signaling pathways and participates in immune surveillance through two pathways: on the one hand, IRAK4 has kinase activity and can phosphorylate downstream substrate proteins IRAK1, IRF5/7, etc.; on the other hand, IRAK4 plays a scaffolding structural role and participates in the assembly of the multimeric protein complex myddosome. Vollmer et al. found that pharmacological inhibition of IRAK4 autophosphorylation could not inhibit the activation of IRAK1 and NF-kB/P38/JNK signaling pathways in IL-1R cells under IL-1 stimulation.
  • IRAK4-deficient cells inducing the expression of inactive IRAK4 protein with kinase domain mutations, IRAK4-deficient cells significantly restored the stress response to IL-1, including the increase in IRAK1 phosphorylation levels under IL-1 stimulation and the activation of its downstream inflammatory signaling pathways.
  • Traditional small molecule inhibitors only show moderate efficacy against kinase activity and are unable to disrupt the formation of the complex to completely block the generation of inflammatory response signals.
  • KT-474 can simultaneously block kinase activity and scaffold structure, showing more potent pathway inhibition and anti-inflammatory activity in the study.
  • the object of the present invention is to provide a compound that targets IRAK protein for inhibition or degradation, a preparation method thereof, and an application of the compound in treating or preventing related diseases mediated by IRAK protein.
  • the present invention provides a compound of formula (I), or a pharmaceutically acceptable salt, ester, solvate or stereoisomer thereof:
  • Q1, Q2, Q3, Q4 and Q5 are independently selected from C, CH, CH 2 , N, NH, S or O;
  • Ring P is aryl or heteroaryl
  • R1 is selected from hydrogen, deuterium, halogen, hydroxyl, thiol, amino, nitro, cyano, -OR1a , -SR1a , -NR1aR1b, -COR1a, -SOR1a , -SO2R1a, -COOR1a , -CONR1aR1b, -NR1aCOR1b , -OCOR1a , -S(O ) (NR1a ) R1b , -SONR1aR1b, -SO2NR1aR1b , -NR1aSOR1b, -NR1aSO2R1b, optionally substituted alkyl , optionally substituted alkoxy , optionally substituted cycloalkyl and optionally substituted heterocyclyl , wherein R1a and R1a are selected from hydrogen, deuterium, halogen , hydroxyl, thiol, amino, nitro cyan
  • R2 is selected from optionally substituted cycloalkyl, optionally substituted heterocyclyl, optionally substituted aryl, optionally substituted heteroaryl;
  • R3 is selected from hydrogen, deuterium, halogen, hydroxyl, thiol, amino, nitro, cyano, -OR3a, -SR3a , -NR3aR3b , -COR3a, -SOR3a , -SO2R3a, -COOR3a , -CONR3aR3b , -NR3aCOR3b , -OCOR3a, -S ( O)(NR3a) R3b , -SONR3aR3b , -SO2NR3aR3b , -NR3aSOR3b , -NR3aSO2R3b, optionally substituted alkyl, optionally substituted alkoxy , optionally substituted cycloalkyl , optionally substituted heterocyclyl, optionally substituted aryl and optionally substituted heteroaryl, wherein R3a and R3a are selected from hydrogen, deuterium, halogen ,
  • n 0, 1, 2, 3, 4 or 5.
  • the present invention provides a compound of formula (II), or a pharmaceutically acceptable salt, ester, solvate or stereoisomer thereof.
  • Isomeric isomers :
  • Part A has the following structure:
  • Q1, Q2, Q3, Q4 and Q5 are independently selected from C, CH, CH 2 , N, NH, S or O;
  • Ring P is aryl or heteroaryl
  • R1 is selected from hydrogen, deuterium, halogen, hydroxyl, thiol, amino, nitro, cyano, -OR1a , -SR1a , -NR1aR1b, -COR1a, -SOR1a , -SO2R1a, -COOR1a , -CONR1aR1b, -NR1aCOR1b , -OCOR1a , -S(O ) (NR1a ) R1b , -SONR1aR1b, -SO2NR1aR1b , -NR1aSOR1b, -NR1aSO2R1b, optionally substituted alkyl , optionally substituted alkoxy , optionally substituted cycloalkyl and optionally substituted heterocyclyl , wherein R1a and R1a are selected from hydrogen, deuterium, halogen , hydroxyl, thiol, amino, nitro cyan
  • R3 is selected from hydrogen, deuterium, halogen, hydroxyl, thiol, amino, nitro, cyano, -OR3a, -SR3a , -NR3aR3b , -COR3a, -SOR3a , -SO2R3a, -COOR3a , -CONR3aR3b , -NR3aCOR3b , -OCOR3a, -S ( O)(NR3a) R3b , -SONR3aR3b , -SO2NR3aR3b , -NR3aSOR3b , -NR3aSO2R3b, optionally substituted alkyl, optionally substituted alkoxy , optionally substituted cycloalkyl , optionally substituted heterocyclyl, optionally substituted aryl and optionally substituted heteroaryl, wherein R3a and R3a are selected from hydrogen, deuterium, halogen ,
  • n 0, 1, 2, 3, 4 or 5;
  • R2' is selected from optionally substituted cycloalkylene, optionally substituted heterocyclylene, optionally substituted arylene, optionally substituted heteroarylene;
  • the A part is connected to the L part through the ring atom of R2';
  • the L section has the following structure:
  • L1, L3 and L5 are independently absent or selected from -Rm-, -Rm-Rn-, -Rm-O-Rn-, -Rm-C(O)-Rn-, -Rm-C(O)O-Rn-, -Rm-OC(O)-Rn-, -Rm-NRx-Rn-, -Rm-C(O)NRx-Rn-, -Rm-NRxC(O)-Rn-, -Rm-S(O)-Rn-, -Rm-S(O)NRx-Rn-, -Rm-NRxS(O)-Rn-, -Rm-S(O) 2 -Rn-, -Rm-S(O) 2NRx -Rn-, -Rm-NRxS(O) 2 -Rn-, -Rm-NRxC(O)NRy-Rn-, -Rm-OC(O)NRx-
  • L2 and L4 are independently absent or selected from optionally substituted cycloalkylene, optionally substituted heterocyclylene, optionally substituted arylene or optionally substituted heteroarylene;
  • Section E has the following structure:
  • RE 1 is selected from hydrogen, deuterium, halogen, hydroxy, thiol, amino, nitro, cyano, optionally substituted alkyl, optionally substituted alkoxy, optionally substituted cycloalkyl or optionally substituted heterocyclyl
  • RE 2 is selected from hydrogen, deuterium or halogen
  • RE L1 is selected from a bond, -CH 2 -, -NH-, -NCH 3 -, -O-, -CONH- or -CONCH 3 -
  • RE L2 is selected from a bond or -CH 2 -, and p is 1, 2, 3, 4 or 5;
  • RE 1a is selected from -COCH(CH 3 )OH, -COCH 3 , -CON(CH 3 ) 2 , -CO(CH 2 ) 2 CH(NH 2 )COOH or -COCH(NH 2 )(CH 2 ) 2 COOH, and RE 2a is selected from -CH 2 OCOOC(CH 3 ) 3 or -CH 2 OCOC(CH 3 ) 3 .
  • the present invention provides a method for treating or preventing a disease mediated by an IRAK protein, the method comprising administering a compound of formula (I) or formula (II) to a patient in need thereof.
  • the present invention provides the use of a compound of formula (I) or formula (II) in the preparation of a medicament for treating or preventing a disease mediated by an IRAK protein.
  • substituted refers to all allowed substituents of the compounds or functional groups described herein.
  • allowed substituents include acyclic and cyclic, branched and unbranched, carbocyclic and heterocyclic, aromatic and non-aromatic substituents of organic compounds.
  • exemplary substituents include, but are not limited to, halogen, hydroxyl, or any other organic group containing any number of carbon atoms (e.g., 1-20 carbon atoms), and optionally include one or more heteroatoms in the form of linear, branched or cyclic structures, such as oxygen, sulfur or nitrogen groups.
  • substituents include deuterium, alkyl, substituted alkyl, alkenyl, substituted alkenyl, alkynyl, substituted alkynyl, phenyl, substituted phenyl, aryl, substituted aryl, heteroaryl, substituted heteroaryl, halogen, nitro, hydroxy, alkoxy, substituted alkoxy, phenoxy, substituted phenoxy, aryloxy, substituted aryloxy, thiol, substituted thiol, alkylthio, substituted alkylthio, phenylthio, substituted phenylthio, arylthio, substituted arylthio, cyano, substituted cyano, isocyano, substituted isocyano, carbonyl, substituted carbonyl, carboxyl, substituted carboxyl, amino, substituted amino, amido, substituted amido, sulfonyl, substituted sulfonyl, sulfonic acid
  • heteroatoms such as nitrogen may have hydrogen substituents and/or any permissible substituents of organic compounds described herein which satisfy the valences of the heteroatoms.
  • substitution or “substituted” includes the implicit proviso that such substitution complies with the permitted valences of the substituted atom and substituent and that the substitution results in a stable compound, i.e., a compound that does not spontaneously undergo transformation, such as by rearrangement, cyclization, elimination, or the like.
  • substituted refers to a structure, such as a moiety on a compound or larger compound, regardless of how the structure is formed.
  • the structure is not limited to structures made by any particular method.
  • aryl refers to a C5 - C26 membered aromatic, fused aromatic or polyaromatic ring system.
  • the broad definition of “aryl” includes 5-, 6-, 7-, 8-, 9-, 10-, 14-, 18- and 24-membered monocyclic or polycyclic aromatic groups, such as benzene, naphthalene, anthracene, phenanthrene, (chrysene), pyrene, corannulene, coronene, etc.
  • Aryl also includes polycyclic ring systems having two or more rings in which two or more carbons are common to two adjacent rings (i.e., "fused rings"), wherein at least one ring is aromatic, e.g., the other cyclic ring or rings can be cycloalkyl, cycloalkenyl, cycloalkynyl, aryl, heteroaryl and/or heterocycle.
  • substituted aryl refers to an aryl group in which one or more hydrogen atoms on one or more aromatic rings are replaced by one or more substituents, including but not limited to deuterium, halogen, azide, alkyl, aralkyl, alkenyl, alkyne, [0063]
  • the substituents may be substituted with any of a plurality of radicals, such as cycloalkyl, cyclopentyl, cycloalkyl, hydroxyl, alkoxy, carbonyl (e.g., ketone, aldehyde, carboxyl, alkoxycarbonyl, formyl or acyl), silyl, ether, ester, thiocarbonyl (e.g., thioester, thioacetate or thioformate), alkoxy, phosphoryl, phosphate, phosphonate, phosphinate, amino (or quaternized amino), amido, amidine, imine,
  • Heterocycle and “heterocyclyl” are used interchangeably and refer to a non-aromatic cyclic group consisting of a monocyclic or polycyclic (e.g., bicyclic, such as spirocyclic, fused ring, etc.) ring containing 3-20 ring atoms (e.g., 3-16, 3-14, 3-12 or 3-10 ring atoms, such as 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 or 12 ring atoms), composed of carbon and one to six (such as one, two, three or four) heteroatoms, each of which may be selected from oxygen, sulfur and nitrogen, and optionally containing 1-3 double bonds and optionally substituted with one or more substituents.
  • a monocyclic or polycyclic e.g., bicyclic, such as spirocyclic, fused ring, etc.
  • 3-20 ring atoms e.g., 3-16, 3-14, 3-12 or 3-10 ring atoms, such as 3, 4, 5,
  • heterocyclyl is different from heteroaryl.
  • heterocycles include, but are not limited to, piperazinyl, piperidinyl, piperidonyl, 4-piperidonyl, tetrahydrofuranyl, dihydrofuran [2,3-b] tetrahydrofuran, morpholinyl, thiomorpholinyl, piperazinyl, piperidinyl, piperidonyl, 4-piperidonyl, piperonyl, indolinyl, pyranyl, tetrahydropyranyl, pyrrolidinyl, pyrrolinyl, 2H-pyrrolyl, imidazolidinyl, imidazolinyl, pyrazolidinyl, 4H-quinolyl, quinuclidinyl, tetrahydrofuranyl, 6H-1,2,5-thiadiazinyl, tetrahydrothienyl, isoxazolidinyl, iso
  • heteroaryl refers to a C5 - C26 membered monocyclic or polycyclic aromatic ring system or combinations thereof (e.g., 5-24, 5-20, 5-16, 5-12 or 5-10 ring atoms, such as 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 or 12 ring atoms), wherein one or more carbon atoms on one or more aromatic ring structures have been replaced by heteroatoms (e.g., one to six, such as one, two, three or four heteroatoms). Suitable heteroatoms include, but are not limited to, oxygen, sulfur and nitrogen.
  • heteroaryl includes 5-, 6-, 7-, 8-, 9-, 10-, 14-, 18- and 24-membered monocyclic aromatic radicals which may include from one to four heteroatoms, such as pyrrole, furan, thiophene, imidazole, oxazole, thiazole, triazole, tetrazole, pyrazole, pyridine, pyrazine, pyridazine, pyrimidine, oxadiazolyl, thiadiazolyl, triazinyl, isoxazolyl, isothiazolyl, azathiazolyl, Base, diazepine Heteroaryl groups may also be referred to as "aryl heterocycles" or "heteroaromatic compounds".
  • Heteroaryl also includes polycyclic systems with two or more rings, wherein two or more carbons are common to two adjacent rings (e.g., "fused rings"), wherein at least one ring is heteroaromatic, and the other ring or rings may be cycloalkyl, cycloalkenyl, cycloalkynyl, aryl, heterocycle, heteroaromatic ring, or a combination thereof.
  • heteroaromatic rings include, but are not limited to, benzimidazolyl, benzofuranyl, benzothiofuranyl, benzothiophenyl, benzoxazolyl, benzoxazolinyl, benzothiazolyl, benzotriazolyl, benzotetrazolyl, benzisoxazolyl, benzisothiazolyl, benzimidazolinyl, benzoxadiazolyl, benzothiadiazolyl, benzoquinolyl, benzoisoquinolyl, carbazolyl, 4aH-carbazolyl, carbolyl, chromanyl, benzopyranyl, cinnolinyl, decahydroquinolinyl, 2H,6H-1,5,2-dithiazinyl, furanyl, furazanyl, imidazolidinyl, imidazolinyl, imidazolyl, 1H-indazolyl, indolen
  • substituted heteroaryl refers to a heteroaryl group in which one or more hydrogen atoms on one or more heteroaryl rings are replaced with one or more substituents, including but not limited to deuterium, halogen, azide, alkyl, aralkyl, alkenyl, alkynyl, cycloalkyl, hydroxy, alkoxy, carbonyl (e.g., ketone, aldehyde, carboxyl, alkoxycarbonyl, formyl or acyl), silyl, ether, ester, thiocarbonyl (e.g., thioester, thioacetate or thioformate), alkoxy, phosphoryl, phosphate, phosphonate, phosphinate, amino (or quaternized amino), amido, amidine, imine, cyano, nitro, azido, sulfhydryl, imino, alkylthio, sulfate, s
  • substituents including
  • alkyl refers to a straight or branched saturated aliphatic group. It can include 1-30, 1-26, 1-20, 1-16, 1-12, 1-8 or 1-6 carbon atoms. Alkyl can be, for example, methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, sec-butyl, isobutyl, tert-butyl, n-pentyl, 2-methylbutyl, 3-methylbutyl, n-hexyl, 4-methylpentyl, neopentyl, n-hexyl, 1,2-dimethylpropyl, 2,2-dimethylpropyl, 1,2,2-trimethylpropyl, etc.
  • alkyl (or "low alkyl) used throughout the specification, embodiments and claims is intended to include “unsubstituted alkyl” and “substituted alkyl”, the latter referring to one or more substituents replacing the hydrogen on one or more carbons of the hydrocarbon chain.
  • substituents include, but are not limited to, deuterium, halogen, hydroxy, carbonyl (e.g., carboxyl, alkoxycarbonyl, formyl or acyl), thiocarbonyl (e.g., thioester, thioacetate or thioformate), alkoxy, phosphoryl, phosphate, phosphonate, phosphinate, amino, amido, amidine, imine, cyano, nitro, azido, sulfhydryl, alkylthio, sulfate, sulfonate, sulfamoyl, sulfoxide, sulfonylamino, sulfonyl, cycloalkyl, heterocyclyl, aralkyl or aromatic or heteroaromatic moiety, said substituents may be further substituted.
  • carbonyl e.g., carboxyl, alkoxycarbonyl, formyl or acyl
  • lower alkyl refers to an alkyl group as defined above, but having 1 to 10 carbon atoms, more preferably 1 to 6 carbon atoms in its backbone structure.
  • cycloalkyl refers to a saturated non-aromatic monocyclic or polycyclic hydrocarbon group. It may have 3-30, 3-26, 3-20, 3-16, 3-12, 3-8 or 3-6 carbon atoms, such as cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl or cyclohexyl.
  • Alkyl may include one or more substitutions at one or more carbon atoms of the hydrocarbon group. Suitable substituents include, but are not limited to, halogens such as fluorine, chlorine, bromine or iodine; hydroxyl; -NRR', wherein R and R' are independently hydrogen, alkyl, cycloalkyl, aryl or heteroaryl, and wherein the nitrogen atom is optionally quaternized; -SR, wherein R is hydrogen, alkyl, cycloalkyl, aryl or heteroaryl; -CN; -NO 2 ; -COOH; carboxylates; -COR, -COOR or CON(R) 2 , wherein R is hydrogen, alkyl or aryl; azide, aralkyl, alkoxy, imino, phosphonate, phosphinate, silyl, ether, sulfonyl, sulfonamido, heterocyclyl, aromatic or hetero
  • the substituted portion of the hydrocarbon chain itself may be substituted.
  • the substituents of the substituted alkyl may include deuterium, halogen, hydroxyl, sulfhydryl, nitro, thiol, amino, azido, imino, amido, phosphoryl (including phosphonates and phosphinates), sulfonyl (including sulfates, sulfonamido, sulfamoyl, sulfoxides and sulfonates), and silyl, as well as ethers, alkylthio, carbonyl (including ketones, aldehydes, carboxylates and esters), haloalkyl, -CN, etc. Cycloalkyl, heterocyclic, aryl, heteroaryl, etc. may be substituted in the same manner.
  • halogen refers to fluorine, chlorine, bromine or iodine.
  • hydroxy refers to an -OH group.
  • amino refers to a -NH2 group.
  • cyano refers to a -CN group.
  • nitro refers to a -NO2 group.
  • carbonyl refers to a -COR group (R is hydrogen or alkyl), particularly a -CHO group.
  • alkylene and the like refer to a divalent group in which two hydrogen atoms in a corresponding group and the like (eg, alkyl) are replaced.
  • stereoisomer refers to a compound made up of the same atoms bonded by the same bonds but having different three-dimensional structures that are not interchangeable.
  • “Stereoisomers” include enantiomers, diastereomers, and other stereoisomeric forms defined by absolute stereochemistry. The present invention is intended to include all such Isomers are possible, as well as their racemic and optically pure forms.
  • salts refers to derivatives of the disclosed compounds wherein the parent compound is modified by converting an existing acid or base moiety to its salt form.
  • examples of pharmaceutically acceptable salts include, but are not limited to, salts with inorganic acids such as hydrochloric acid, hydrobromic acid, phosphoric acid and sulfuric acid, and salts with organic carboxylic acids and sulfonic acids such as acetic acid, trifluoroacetic acid, propionic acid, maleic acid, fumaric acid, malic acid, citric acid, tartaric acid, lactic acid, benzoic acid, methanesulfonic acid, ethanesulfonic acid, benzenesulfonic acid, toluenesulfonic acid, naphthalenesulfonic acid and naphthalenedisulfonic acid; or salts with conventional bases such as alkali metal salts (e.g., sodium and potassium salts), alkaline earth metal salts (
  • solvate refers to a complex formed by coordination with a solvent molecule.
  • solvent molecule is water
  • the solvate is a hydrate.
  • Compounds as described herein may be isotopically labeled, i.e., one or more atoms therein are replaced by atoms having different atomic masses or mass numbers. Such isotopically labeled compounds are considered to be within the scope of the present invention.
  • isotopes that may be incorporated into compounds include isotopes of hydrogen, carbon, nitrogen, oxygen, phosphorus, sulfur, fluorine, chlorine, and iodine, such as, but not limited to, 2 H, 3 H, 11 C, 13 C, 14 C, 13 N, 15 N, 15 O, 17 O, 18 O, 31 P, 32 P, 35 S, 18 F, 36 Cl, 123 I, and 125 I, respectively .
  • the present invention provides a compound of formula (I), or a pharmaceutically acceptable salt, ester, solvate or stereoisomer thereof:
  • Q1, Q2, Q3, Q4 and Q5 are independently selected from C, CH, CH 2 , N, NH, S or O;
  • Ring P is aryl or heteroaryl
  • R1 is selected from hydrogen, deuterium, halogen, hydroxyl, thiol, amino, nitro, cyano, -OR 1a , -SR 1a , -NR 1a R 1b , -COR 1a , -SOR 1a , -SO 2 R 1a , -COOR 1a , -CONR 1a R 1b , -NR 1a COR 1b , -OCOR 1a , -S(O)(NR 1a )R 1b , -SONR 1a R 1b , -SO 2 NR 1a R 1b , -NR 1a SOR 1b , -NR 1a SO 2 R 1b , optionally substituted alkyl, optionally substituted alkoxy, optionally substituted cycloalkyl, and optionally substituted heterocyclyl, wherein R 1a and R 1b are independently selected from hydrogen, deuterium, optionally substituted alkyl, optionally substituted cycl
  • R2 is selected from optionally substituted cycloalkyl, optionally substituted heterocyclyl, optionally substituted aryl, optionally substituted heteroaryl;
  • R3 is selected from hydrogen, deuterium, halogen, hydroxyl, thiol, amino, nitro, cyano, -OR3a, -SR3a , -NR3aR3b , -COR3a, -SOR3a , -SO2R3a, -COOR3a , -CONR3aR3b , -NR3aCOR3b , -OCOR3a, -S ( O)(NR3a) R3b , -SONR3aR3b , -SO2NR3aR3b , -NR3aSOR3b , -NR3aSO2R3b, optionally substituted alkyl, optionally substituted alkoxy , optionally substituted cycloalkyl , optionally substituted heterocyclyl, optionally substituted aryl and optionally substituted heteroaryl, wherein R3a and R3a are selected from hydrogen, deuterium, halogen ,
  • n 0, 1, 2, 3, 4 or 5.
  • the ring structure in which Q1-Q5 is located is selected from the following structures:
  • ring P is a 6-10 membered aryl or heteroaryl. In some embodiments, ring P is a 6-membered aryl or heteroaryl. In some embodiments, ring P is a 9-10 membered bicyclic heteroaryl.
  • ring P is selected from phenyl, pyridyl, pyrazinyl, pyridazinyl, pyrimidinyl, triazinyl, pyrazolopyrimidinyl (e.g., derived from The structure of pyrazolo[2,3-a]pyrimidinyl) or pyrrolopyridazinyl (e.g. derived from The structure of pyrrolo[1,2-B]pyridazinyl).
  • R1 is selected from hydrogen, deuterium, halogen, hydroxyl, thiol, amino, nitro, cyano, -OR1a , -SR 1a , -NR 1a R 1b , -COR 1a , -SOR 1a , -SO 2 R 1a , -COOR 1a , -CONR 1a R 1b , -NR 1a COR 1b , -OCOR 1a , -S(O)(NR 1a )R 1b , -SONR 1a R 1b , -SO 2 NR 1a R 1b , -NR 1a SOR 1b , -NR 1a SO 2 R 1b , optionally substituted C 1-12 alkyl (e.g.
  • R 1a and R 1b is independently selected from hydrogen, deuterium, optionally substituted C 1-12 alkyl (eg C 1-6 alkyl), optionally substituted C 3-12 cycloalkyl (eg C 3-6 cycloalkyl) and optionally substituted 3-12 membered heterocyclyl (e.g. 3-6 membered heterocyclyl), wherein R 1a and R 1b is independently selected from hydrogen, deuterium, optionally substituted C 1-12 alkyl (eg C 1-6 alkyl), optionally substituted C 3-12 cycloalkyl (eg C 3-6 cycloalkyl) and optionally substituted 3-12 membered heterocyclyl (eg 3-6 membered heterocyclyl).
  • R 1a and R 1b are independently selected from: hydrogen; deuterium; unsubstituted alkyl, cycloalkyl, or heterocyclyl; and alkyl, cycloalkyl, or heterocyclyl substituted with one or more substituents independently selected from: deuterium; halogen; hydroxyl; thiol; amino; cyano; nitro; aldehyde; carboxyl; -OCO-alkyl; -OCOO-alkyl; and alkyl, alkoxy, cycloalkyl, or heterocyclyl optionally substituted with one or more substituents selected from deuterium, halogen, hydroxyl, thiol, amino, cyano, nitro, aldehyde, carboxyl, alkyl, haloalkyl, alkoxy, haloalkoxy, cycloalkyl, halocycloalkyl, heterocyclyl, and/or haloheterocyclyl
  • R1 is selected from unsubstituted alkyl, alkoxy, cycloalkyl, or heterocyclyl; and alkyl, alkoxy, cycloalkyl, or heterocyclyl substituted with one or more substituents independently selected from the group consisting of deuterium, halogen, hydroxyl, thiol, amino, cyano, nitro, -OR 1c , -SR 1c , -NR 1c R 1d , -COR 1c , -SOR 1c , -SO 2 R 1c , -COOR 1c , -CONR 1c R 1d , -NR 1c COR 1d , -OCOR 1c , -S(O ) (NR 1c )R 1d , -SONR 1c R 1d , -SO 2 NR 1c R 1d , -NR 1c SOR 1d , -NR 1c SO 2 R 1d , optionally
  • R1 is selected from alkyl, alkoxy, cycloalkyl, or heterocyclyl substituted with one or more substituents independently selected from:
  • R 1c and R 1d is independently selected from: hydrogen; deuterium; unsubstituted alkyl, cycloalkyl or heterocyclyl; and alkyl, cycloalkyl or heterocyclyl substituted with one or more substituents independently selected from: deuterium; halogen; hydroxyl; mercapto; amino; cyano; nitro; aldehyde; carboxy
  • Alkyl, alkoxy, cycloalkyl or heteroaryl optionally substituted with one or more substituents independently selected from Cyclic groups: deuterium; halogen; hydroxyl; mercapto; amino; cyano; nitro; aldehyde; carboxyl; alkyl; alkoxy; cycloalkyl; heterocyclic; and alkyl, alkoxy, cycloalkyl or heterocyclic groups substituted with one or more substituents selected from deuterium, halogen, hydroxyl, mercapto, amino, cyano, nitro, aldehyde and/or carboxyl.
  • R1 is selected from hydrogen; deuterium; halogen; hydroxyl; thiol; amino; nitro; cyano; alkyl; alkyl substituted with one or more substituents selected from deuterium, halogen, hydroxyl, thiol, amino, cyano, nitro, aldehyde and/or carboxyl; alkoxy; alkoxy substituted with one or more substituents selected from deuterium, halogen, hydroxyl, thiol, amino, cyano, nitro, aldehyde and/or carboxyl; cycloalkyl; cycloalkyl substituted with one or more substituents selected from deuterium, halogen, hydroxyl, thiol, amino, cyano, nitro, aldehyde, carboxyl, -OR 1c and/or -NR 1c R 1d ; heterocyclyl; heterocyclyl substituted with one or more substituents selected from deuterium, halogen
  • 1d is independently selected from hydrogen, deuterium, alkyl, cycloalkyl, heterocyclyl, and alkyl, cycloalkyl or heterocyclyl substituted with one or more substituents selected from deuterium, halogen, hydroxyl, mercapto, amino, cyano, nitro, aldehyde and/or carboxyl.
  • R1 is selected from hydrogen, hydroxy, cyano, alkyl, haloalkyl, hydroxyalkyl, alkoxy, haloalkoxy, cycloalkyl, cycloalkyl substituted with cyano, -OR 1c and/or -NR 1c R 1d , heterocyclyl, -NR 1a R 1b , -COR 1a , -CONR 1a R 1b , -S(O)(NR 1a )R 1b and -SO 2 NR 1a R 1b , wherein R 1a and R 1b are independently selected from hydrogen, alkyl, cycloalkyl and alkyl or cycloalkyl substituted with one or more substituents selected from deuterium, halogen, cyano, -OCO-alkyl and/or -OCOO-alkyl, and R 1c and R 1d are independently selected from hydrogen and alkyl.
  • R1 is selected from hydroxy, cyano, methyl, ethyl, propyl (e.g., n-propyl and sec-propyl), tert-butyl, difluoromethyl ( -CHF2 ), hydroxymethyl, hydroxyethyl, hydroxypropyl (e.g., hydroxyisopropyl), methoxy, ethoxy, isopropoxy, tert-butoxy, trifluoromethoxy, trifluoroethoxy, cyclopropyl, azetidinyl, cyclobutyl, cyclobutyl substituted with cyano , hydroxyl or -NHCH3, -S(O ) (NH) CH3 , -SO2NR1aR1b , -NR1aR1b , -COR1a , -CONR1aR1b , wherein R1a and R1b are independently selected from hydrogen , methyl, ethy
  • R2 is selected from optionally substituted C 3-12 cycloalkyl, optionally substituted 3-12 membered heterocyclyl, optionally substituted 6-10 membered aryl, optionally substituted 5-10 membered heteroaryl.
  • R2 is selected from optionally substituted cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl or cyclohexyl, bicyclo[1.1.1] Amyl (e.g. ), bicyclo[2.2.2]octyl (e.g. ) and cubic alkyl groups (e.g. ).
  • R2 is selected from optionally substituted 3-12 membered heterocyclyl containing one to six (eg, one, two, three, or four) heteroatoms independently selected from N, O, and S.
  • R2 is selected from optionally substituted tetrahydropyrrolyl, piperidinyl, piperazinyl, azetidinyl, (1-oxa-8-azaspiro[4.5]decyl) and (7-azaspiro[3.5]nonyl).
  • R2 is selected from optionally substituted phenyl.
  • R2 is selected from optionally substituted 5-6 membered heteroaryl. In some embodiments, R2 is selected from optionally substituted pyridinyl, pyrazinyl, pyridazinyl, pyrimidinyl or triazinyl.
  • R2 is selected from unsubstituted cycloalkyl, heterocyclyl, aryl or heteroaryl; and cycloalkyl, heterocyclyl, aryl or heteroaryl substituted with one or more substituents independently selected from the following: deuterium, halogen, hydroxyl, thiol, amino , cyano , nitro, -OR2a, -SR2a , -NR2aR2b , -COR2a , -SOR2a , -SO2R2a , -COOR2a , -CONR2aR2b , -NR2aCOR2b , -OCOR2a , -S(O ) ( NR2a ) R2b , -SONR2aR2b , -SO2NR2aR2b , -NR2aSOR2b , -NR2aSO2R2b , optionally substituted al
  • R and R are independently selected from: hydrogen; deuterium ; unsubstituted alkyl, cycloalkyl, heterocyclyl, aryl, and heteroaryl; and alkyl, cycloalkyl, heterocyclyl, aryl, and heteroaryl substituted with one or more substituents independently selected from: deuterium; halogen; hydroxyl; thiol; amino; cyano; nitro; aldehyde; carboxyl; and alkyl, alkoxy, cycloalkyl, heterocyclyl, aryl, and heteroaryl optionally substituted with one or more substituents selected from deuterium, halogen, hydroxyl, thiol, amino, cyano, nitro, aldehyde, carboxyl, alkyl, haloalkyl, alkoxy, haloalkoxy, cycloalkyl, halocycloalkyl, heterocyclyl, and/or halohetero
  • R2 is selected from cycloalkyl, heterocyclyl, aryl, or heteroaryl substituted with one or more substituents independently selected from:
  • R2a and R2b are independently selected from hydrogen , deuterium , optionally substituted alkyl , optionally substituted cycloalkyl, optionally substituted heterocyclyl, optionally substituted aryl, and optionally substituted heteroaryl ;
  • R2 is selected from:
  • Cycloalkyl Heterocyclyl; Aryl; Heteroaryl;
  • the carboxyl group, the alkyl group and/or the haloalkyl group may be substituted with one or more substituents, and the alkyl group, the cycloalkyl group or the heterocyclyl group may be substituted with one or more substituents.
  • R2 is selected from: cycloalkyl; heterocyclyl; aryl; heteroaryl; and cycloalkyl, heterocyclyl, aryl, heteroaryl substituted with one or more substituents independently selected from the following: halogen, -OR2a , -NR2aR2b , -COR2a , -COOR2a , -CONR2aR2b , -NR2aCOR2b , alkyl , cycloalkyl, heterocyclyl, and alkyl , cycloalkyl or heterocyclyl substituted with one or more substituents selected from halogen, -OR2c , -NR2cR2d , -COR2c , -COOR2c , -CONR2cR2d , -NR2cCOR2d and/ or alkyl, wherein R2a and R2a are substituted with one or more substituents independently selected from the following:
  • R2 is selected from phenyl; pyridinyl; pyrazinyl; pyridazinyl; pyrimidinyl; piperidinyl; cyclobutyl, cyclohexyl; azetidinyl; 1-oxa-8-azaspiro[4.5]decyl; 7-azaspiro[3.5]nonyl; phenyl, pyridinyl, pyrazinyl, pyridazinyl , pyrimidinyl , piperidinyl, cyclobutyl , cyclohexyl substituted with one or more substituents selected from fluoro, bromo, -OR2a , -NR2aR2b, -COR2a , -COOR2a , -CONR2aR2b , -NR2aCOR2b and/or piperazinyl, wherein R2a and R2b are
  • R3 is selected from hydrogen, deuterium, halogen, hydroxyl, thiol, amino , nitro, cyano , -OR3a, -SR3a , -NR3aR3b, -COR3a , -SOR3a , -SO2R3a , -COOR3a , -CONR3aR3b , -NR3aCOR3b , -OCOR3a , -S(O ) ( NR3a ) R3b , -SONR3aR3b , -SO2NR3aR3b , -NR3aSOR3b , -NR3aSO2R3b , optionally substituted C1-12 alkyl ( e.g., C1-6 alkyl ), optionally substituted C1-12 alkoxy (e.g.
  • C1-6 alkoxy optionally substituted C3-12 cycloalkyl
  • C R 3a and R 3b are independently selected from hydrogen, deuterium, optionally substituted C 1-12 alkyl (e.g. C 1-6 alkyl), optionally substituted C 3-12 cycloalkyl (e.g. C 3-6 cycloalkyl), optionally substituted 3-12 membered heterocyclyl (e.g. 3-10 membered heterocyclyl), optionally substituted 6-10 membered aryl (e.g. phenyl ) and optionally substituted 5-10 membered heteroaryl (e.g. 5-6 membered heteroaryl).
  • C 1-12 alkyl e.g. C 1-6 alkyl
  • C 3-12 cycloalkyl e.g. C 3-6 cycloalkyl
  • optionally substituted 3-12 membered heterocyclyl e.g. 3-10 membered heterocyclyl
  • optionally substituted 6-10 membered aryl
  • R 3a and R 3b are independently selected from: hydrogen; deuterium; unsubstituted alkyl, cycloalkyl, heterocyclyl, aryl or heteroaryl; and alkyl, cycloalkyl, heterocyclyl, aryl or heteroaryl substituted with one or more substituents independently selected from: deuterium; halogen; hydroxyl; thiol; amino; cyano; nitro; aldehyde; carboxyl; and any The invention further comprises an alkyl, alkoxy, cycloalkyl or heterocyclyl group which is optionally substituted with one or more substituents selected from deuterium, halogen, hydroxyl, mercapto, amino, cyano, nitro, aldehyde, carboxyl, alkyl, haloalkyl, alkoxy, haloalkoxy, cycloalkyl, halocycloalkyl, heterocyclyl and/or halohetero
  • R3 is selected from alkyl, alkoxy, cycloalkyl, heterocyclyl, aryl, or heteroaryl substituted with one or more substituents independently selected from:
  • R 3c and R 3d is independently selected from hydrogen; deuterium; unsubstituted alkyl, cycloalkyl, heterocyclyl, aryl or heteroaryl; and alkyl, cycloalkyl, heterocyclyl, aryl or heteroaryl substituted with one or more substituents independently selected from the group consisting of deuterium; halogen; hydroxyl; thio
  • R 3e and R 3f is independently selected from hydrogen, deuterium, alkyl, haloalkyl, cycloalkyl, halocycloalkyl, heterocyclyl and haloheter
  • R3 is selected from:
  • heteroaryl substituted by one or more substituents selected from deuterium, halogen, hydroxyl, thiol, amino, cyano, nitro, -OR 3e , -SR 3e , -NR 3e R 3f , -COR 3e , -SOR 3e , -SO 2 R 3e , -COOR 3e , -CONR 3e R 3f , -NR 3e COR 3f , -OCOR 3e , -S(O) (NR 3e ) R 3f , -SONR 3e R 3f , -SO 2 NR 3e R 3f , -NR 3e SOR 3f and/or - alkyl substituted with one or more substituents of NR 3e SO 2 R 3f ;
  • R 3a , R 3b , R 3c , R 3d , R 3e and R 3f are independently selected from hydrogen and alkyl.
  • R 3a , R 3b , R 3c , R 3d , R 3e and R 3f are independently selected from hydrogen and alkyl.
  • R3 is selected from: nitro; -CONH 2 ; trifluoromethyl; difluoroethyl;
  • Tetrahydropyrimidinyl triazacyclopentyl; morpholinyl; imidazolidinyl; octahydropyrrolo[3,4-B][1,4]oxazinyl; 2-oxa-5-azabicyclo[2.2.1]heptyl;
  • alkyl e.g. methyl
  • substituted alkyl e.g. difluoromethyl, hydroxymethyl, aminomethyl or dimethylaminomethyl
  • tetrahydropyrimidinyl morpholinyl
  • imidazolidinyl triazacyclopentyl
  • octahydropyrrolo[3,4-B][1,4]oxazinyl 2-oxa-5-azabicyclo[2.2.1]heptyl, as well as
  • R3 is selected from the following structures:
  • the R3 substituent when an R3 substituent is present, can be substituted at the ortho, meta, or para (eg, meta) position to the position of attachment of Ring P to the rest of the molecule.
  • the compound of formula (I) of the present invention has formula (III):
  • the ring structure where Q3 and Q4 are located is selected from the following structures:
  • the present invention relates to a compound of formula (III), or a pharmaceutically acceptable salt, ester, solvate or stereoisomer thereof:
  • the ring structure where Q3 and Q4 are located is selected from the following structures:
  • Ring P is pyridyl, pyrazolopyrimidinyl or pyrrolopyridazinyl;
  • R1 is selected from -OR1a , -COR1a , -CONR1aR1b , -S(O)( NR1a ) R1b , -SO2NR1aR1b , optionally substituted alkyl , wherein R1a and R1b are independently selected from hydrogen, deuterium , optionally substituted alkyl and optionally substituted cycloalkyl;
  • R2 is selected from optionally substituted cycloalkyl, optionally substituted heterocyclyl, and optionally substituted phenyl, pyridyl, and pyrimidinyl;
  • R3 is selected from cyano, optionally substituted alkyl and optionally substituted heteroaryl.
  • R1 is selected from alkyl (eg, methyl, ethyl, propyl (eg, isopropyl)) substituted with one or more substituents independently selected from halogen and hydroxy:
  • R 1a and R 1b are independently selected from: hydrogen; deuterium; alkyl (e.g., methyl, ethyl, propyl (e.g., isopropyl)); cycloalkyl (e.g., cyclopropyl); and alkyl (e.g., methyl, ethyl, propyl (e.g., isopropyl)) and cycloalkyl (e.g., cyclopropyl) substituted with one or more substituents independently selected from the following: deuterium, halogen (e.g., fluorine), hydroxyl, thiol, amino, cyano, and nitro.
  • alkyl e.g., methyl, ethyl, propyl (e.g., isopropyl)
  • cycloalkyl e.g., cyclopropyl
  • alkyl e.g., methyl, ethyl, propy
  • R1 is selected from -CONH2 , hydroxyisopropyl, hydroxymethyl, hydroxyethyl, methoxy, difluoromethyl, -CONH-(cyclopropyl), -SO2NH2 , -S(O)( NH ) CH3 , -OCH2CF3 , -COCH2CF3 , -COCH3 , -COCD2H, -COCF3 , -COCHF2 , -CONHCH3, -CONHCH( CH3 ) 2 , -SO2NHCH3 , -SO2NHCH ( CH3 ) 2 , -CONH- ( difluorocyclopropyl).
  • R2 is selected from optionally substituted cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, bicyclo[1.1.1]pentyl or bicyclo[2.2.2]octyl; optionally substituted piperidinyl, azetidinyl, azocyclopentyl or 1-oxa-8-azaspiro[4.5]decyl or 7-azaspiro[3.5]nonyl; optionally substituted phenyl, pyridinyl or pyrimidinyl.
  • R2 is selected from unsubstituted cycloalkyl, heterocyclyl, phenyl, pyridyl; and cycloalkyl, heterocyclyl, phenyl, pyridyl substituted with one or more substituents independently selected from the following: deuterium, halogen (e.g., fluorine or bromine), hydroxy, thiol, amino, cyano, nitro, -OR2a , -NR2aR2b , -COR2a , -COOR2a , -CONR2aR2b , -NR2aCOR2b , -OCOR2a , optionally substituted alkyl and optionally substituted heterocyclyl , wherein R2a and R2b are independently selected from hydrogen, deuterium, optionally substituted alkyl and optionally substituted heterocyclyl.
  • R2a and R2b are independently selected from hydrogen, deuterium, optionally substituted alkyl
  • R 2a and R 2b are independently selected from hydrogen, deuterium, alkyl (eg, methyl), alkyl substituted by halogen, heterocyclyl (eg, piperazinyl), heterocyclyl substituted by alkyl.
  • R2 is selected from cycloalkyl, heterocyclyl, phenyl, pyridinyl substituted with one or more substituents independently selected from:
  • Alkyl e.g. methyl
  • heterocyclyl e.g. piperazinyl
  • R 2c and R 2d are independently selected from hydrogen, deuterium, alkyl (e.g. methyl), phenyl;
  • Heterocyclyl eg piperazinyl substituted by one or more substituents selected from alkyl (eg methyl).
  • R2 is selected from phenyl; and phenyl substituted by one or more substituents independently selected from the following: deuterium; halogen (e.g., fluorine or bromine); -OR 2a , -NR 2a R 2b , -COR 2a , -COOR 2a , -CONR 2a R 2b , -NR 2a COR 2b , -OCOR 2a , wherein R 2a and R 2b are independently selected from hydrogen, deuterium, alkyl (e.g., methyl) and heterocyclyl (e.g., piperazinyl); alkyl (e.g., methyl), heterocyclyl (e.g., piperazinyl) and alkyl (e.g., methyl) or heterocyclyl (e.g., piperazinyl) substituted by one or more substituents independently selected from the following: -OR 2c , -NR 2c R 2d
  • R2 is selected from phenyl; and phenyl substituted with one or more substituents independently selected from the group consisting of fluoro, bromo, hydroxy, methoxy, amino, -NHCH3 , -N( CH3 ) 2 , -NHCOCH3, -COOH, -CONHCH3 , -CON ( CH3 ) 2 , -CO- (N-piperazinyl), -CH2OH, -CH2OCH3 , -CH2NH2 , -CH2NHCH3 , -CH2N ( CH3 ) 2 , -CH2NHCOCH3 , -CH2NCH3COCH3 , piperazinyl , 4 - methylpiperazinyl, 4-acetylpiperazinyl, 4-benzoylpiperazinyl.
  • R3 is selected from alkyl (eg, methyl) substituted with halogen (eg, fluorine), such as trifluoromethyl.
  • halogen eg, fluorine
  • R3 is selected from a 5-membered heteroaryl group containing one or more nitrogen ring atoms.
  • R3 is selected from:
  • Ring P is pyridinyl, and R3 is selected from -CF 3 .
  • ring P is pyridinyl or pyrazolopyrimidinyl
  • R3 is selected from
  • Ring P is pyrrolopyridazinyl and R3 is cyano.
  • Ring P is pyridinyl
  • R1 is -CONH 2
  • R2 is optionally substituted phenyl
  • R3 is selected from -CF 3 .
  • Ring P is pyridinyl
  • R2 is optionally substituted phenyl
  • R3 is selected from:
  • Ring P is pyridinyl
  • R1 is selected from -CONH2 , hydroxyisopropyl, hydroxymethyl , hydroxyethyl, methoxy, difluoromethyl, -CONH-(cyclopropyl), -SO2NH2 , -S(O)(NH) CH3 , -OCH2CF3 , -COCH2CF3 , -COCH3 , -COCD2H , -COCF3 , -COCHF2 , -CONHCH3, -CONHCH( CH3 ) 2 , -SO2NHCH3 , -SO2NHCH ( CH3 ) 2 , -CONH- (difluorocyclopropyl ) , R2 is phenyl, and R3 is selected from :
  • the present invention also provides a compound of formula (II), or a pharmaceutically acceptable salt, ester, solvate or stereoisomer thereof:
  • Part A has the following structure:
  • Q1, Q2, Q3, Q4 and Q5 are independently selected from C, CH, CH 2 , N, NH, S or O;
  • Ring P is aryl or heteroaryl
  • R1 is selected from hydrogen, deuterium, halogen, hydroxyl, thiol, amino, nitro, cyano, -OR1a , -SR1a , -NR1aR1b, -COR1a, -SOR1a , -SO2R1a, -COOR1a , -CONR1aR1b, -NR1aCOR1b , -OCOR1a , -S(O ) (NR1a ) R1b , -SONR1aR1b, -SO2NR1aR1b , -NR1aSOR1b, -NR1aSO2R1b, optionally substituted alkyl , optionally substituted alkoxy , optionally substituted cycloalkyl and optionally substituted heterocyclyl , wherein R1a and R1a are selected from hydrogen, deuterium, halogen , hydroxyl, thiol, amino, nitro cyan
  • R3 is selected from hydrogen, deuterium, halogen, hydroxyl, thiol, amino, nitro, cyano, -OR3a, -SR3a , -NR3aR3b , -COR3a, -SOR3a , -SO2R3a, -COOR3a , -CONR3aR3b , -NR3aCOR3b , -OCOR3a, -S ( O)(NR3a) R3b , -SONR3aR3b , -SO2NR3aR3b , -NR3aSOR3b , -NR3aSO2R3b, optionally substituted alkyl, optionally substituted alkoxy , optionally substituted cycloalkyl , optionally substituted heterocyclyl, optionally substituted aryl and optionally substituted heteroaryl, wherein R3a and R3a are selected from hydrogen, deuterium, halogen ,
  • n 0, 1, 2, 3, 4 or 5;
  • R2' is selected from optionally substituted cycloalkylene, optionally substituted heterocyclylene, optionally substituted arylene, optionally substituted heteroarylene;
  • the A part is connected to the L part through the ring atom of R2';
  • the L section has the following structure:
  • L1, L3 and L5 are independently absent or selected from -Rm-, -Rm-Rn-, -Rm-O-Rn-, -Rm-C(O)-Rn-, -Rm-C(O)O-Rn-, -Rm-OC(O)-Rn-, -Rm-NRx-Rn-, -Rm-C(O)NRx-Rn-, -Rm-NRxC(O)-Rn-, -Rm-S(O)-Rn-, -Rm-S(O)NRx-Rn-, -Rm-NRxS(O)-Rn-, -Rm-S(O) 2 -Rn-, -Rm-S(O) 2NRx -Rn-, -Rm-NRxS(O) 2 -Rn-, -Rm-NRxC(O)NRy-Rn-, -Rm-OC(O)NRx-
  • L2 and L4 are independently absent or selected from optionally substituted cycloalkylene, optionally substituted heterocyclylene, optionally substituted arylene or optionally substituted heteroarylene;
  • Section E has the following structure:
  • RE 1 is selected from hydrogen, deuterium, halogen, hydroxy, thiol, amino, nitro, cyano, optionally substituted alkyl, optionally substituted alkoxy, optionally substituted cycloalkyl or optionally substituted heterocyclyl
  • RE 2 is selected from hydrogen, deuterium or halogen
  • RE L1 is selected from a bond, -CH 2 -, -NH-, -NCH 3 -, -O-, -CONH- or -CONCH 3 -
  • RE L2 is selected from a bond or -CH 2 -
  • p is 1, 2, 3, 4 or 5.
  • RE 1a is selected from -COCH(CH 3 )OH, -COCH 3 , -CON(CH 3 ) 2 , -CO(CH 2 ) 2 CH(NH 2 )COOH or -COCH(NH 2 )(CH 2 ) 2 COOH, and RE 2a is selected from -CH 2 OCOOC(CH 3 ) 3 or -CH 2 OCOC(CH 3 ) 3 .
  • Q1-Q5 and the rings in which they are located, ring P, R1 and R3 in formula (II) are the same as defined in formula (I) (and formula (III)).
  • portion A has the following structure:
  • R2' is selected from optionally substituted C 3-12 cycloalkylene, optionally substituted 3-12 membered heterocyclylene, optionally substituted 6-10 membered arylene, optionally substituted 5-10 membered heteroarylene.
  • R2' is selected from optionally substituted cyclopropylene, cyclobutylene, cyclopentylene or cyclohexylene, bicyclo[1.1.1]pentylene (eg ), bicyclo[2.2.2]octylene (e.g. ) and cubic alkylene (e.g. ).
  • R2' is selected from an optionally substituted 3-12 membered heterocyclylene containing one to six (e.g., one, two, three, or four) heteroatoms independently selected from N, O, and S.
  • R2' is selected from optionally substituted tetrahydropyrrolylene, piperidinylene, piperazinylene, azetidinylene, 1-oxa-8-azaspiro[4.5]decylene, and 7-azaspiro[3.5]nonylene.
  • R2' is selected from optionally substituted phenylene.
  • R2' is selected from an optionally substituted 5-6 membered heteroarylene. In some embodiments, R2' is selected from an optionally substituted pyridinylene, pyrazinylene, pyridazinylene, pyrimidinylene or triazinylene.
  • R2' is selected from cycloalkylene, heterocyclylene, arylene or heteroarylene optionally substituted with one or more substituents selected from the following: deuterium, halogen, hydroxyl, thiol, amino, cyano, nitro, aldehyde, carboxyl, alkyl, alkoxy and alkyl or alkoxy substituted with one or more substituents selected from deuterium, halogen, hydroxyl, thiol, amino, cyano, nitro, aldehyde and/or carboxyl.
  • R2' is selected from phenylene, pyridylene, piperidylene, cyclohexylene, bicyclo[1.1.1]pentylene, bicyclo[2.2.2]octylene, or cubanylene.
  • Rm and Rn are independently selected from a bond, an optionally substituted C 1-20 alkylene group (e.g., C 1-12 alkylene group or C 1-6 alkylene group), an optionally substituted C 1-20 alkyleneoxy group (e.g., C 1-12 alkyleneoxy group or C 1-6 alkyleneoxy group), any optionally substituted C 3-6 cycloalkylene or optionally substituted 3-6 membered heterocyclylene.
  • Rx and Ry are independently selected from hydrogen, deuterium, optionally substituted C 1-20 alkyl (eg, C 1-12 alkyl or C 1-6 alkyl), optionally substituted C 3-6 cycloalkyl, or optionally substituted 3-6 membered heterocyclyl.
  • g is an integer from 1-20, or an integer from 1-16, or an integer from 1-12, or an integer from 1-8, or an integer from 1-6, or 1, 2, 3, 4, or 5.
  • Rm and Rn are independently selected from a bond, alkylene, alkyleneoxy, cycloalkylene, heterocyclylene, and alkylene, alkyleneoxy, cycloalkylene, or heterocyclylene substituted with one or more substituents selected from deuterium, halogen, hydroxyl, thiol, amino, nitro, cyano, alkyl, alkoxy, and alkyl or alkoxy substituted with one or more substituents selected from deuterium, halogen, hydroxyl, thiol, amino, cyano, nitro, aldehyde, and/or carboxyl.
  • Rx and Ry are independently selected from hydrogen, deuterium, alkyl, cycloalkyl, heterocyclyl, and alkyl, cycloalkyl, or heterocyclyl substituted with one or more substituents selected from the following: deuterium, halogen, hydroxyl, thiol, amino, nitro, cyano, alkyl, alkoxy, and alkyl or alkoxy substituted with one or more substituents selected from deuterium, halogen, hydroxyl, thiol, amino, cyano, nitro, aldehyde and/or carboxyl.
  • Rm and Rn are independently selected from a bond, methylene, ethylene, propylene, butylene, cyclopropylene, and fluorinated C 1-4 alkylene.
  • Rx and Ry are independently selected from hydrogen, methyl, or cyclopropyl.
  • L1, L3 and L5 are independently selected from: Where h is 1, 2, 3, 4 or 5.
  • L2 and L4 are independently absent or selected from optionally substituted C 3-12 cycloalkylene, optionally substituted 3-12 membered heterocyclylene, optionally substituted 6-10 membered arylene, or optionally substituted 5-10 membered heteroarylene.
  • L2 and L4 are independently selected from cycloalkylene or halogenated cycloalkylene (eg, fluorinated cycloalkylene).
  • L2 and L4 are independently selected from:
  • halogen e.g., fluorine
  • alkyl e.g., methyl
  • L2 and L4 are independently selected from: (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example )
  • L2 and L4 are independently selected from phenylene, which is optionally substituted with one or more substituents selected from halogen (eg, fluorine) and/or alkyl (eg, methyl).
  • halogen eg, fluorine
  • alkyl eg, methyl
  • L2 and L4 are independently selected from
  • L2 and L4 are independently selected from 5-6 membered heteroarylene containing one, two, three or four heteroatoms independently selected from N, O and S, which are optionally selected from halogen (e.g., fluorine) and/or alkyl (e.g., methyl).
  • halogen e.g., fluorine
  • alkyl e.g., methyl
  • L2 and L4 are independently selected from pyridinyl, pyrazinyl, pyridazinyl, pyrimidinyl, triazinyl, pyrrolyl, imidazolyl, pyrazolyl, triazolyl, tetrazolyl, oxazolyl, thiazolyl, oxadiazolyl or thiadiazolyl, which are optionally substituted with one or more substituents selected from halogen (e.g., fluorine) and/or alkyl (e.g., methyl).
  • halogen e.g., fluorine
  • alkyl e.g., methyl
  • L2 and L4 are independently selected from:
  • the combination of L2, L3 and L4 in the L portion (with or without L1 and/or L5) or the L portion is selected from:
  • the L moiety is selected from:
  • connection point on the left is connected to the remaining molecular parts from part A or in the direction toward part A; the connection point on the right is connected to the remaining molecular parts from part E or in the direction toward part E.
  • the E moiety has the following structure:
  • RE 1 is selected from hydrogen, deuterium, halogen, hydroxyl, thiol, amino, nitro, cyano, optionally substituted C 1-20 alkyl (e.g. C 1-12 alkyl or C 1-6 alkyl), optionally substituted C 1-20 alkoxy (e.g.
  • RE 2 is selected from hydrogen, deuterium or halogen
  • RE L1 is selected from a bond, -CH 2 -, -NH-, -NCH 3 -, -O-, -CONH- or -CONCH 3 -
  • RE L2 is selected from a bond or -CH 2 -
  • p is 1, 2, 3, 4 or 5.
  • RE 1 is selected from hydrogen, deuterium, halogen, hydroxyl, thiol, amino, nitro, cyano, alkyl, alkoxy, cycloalkyl, heterocyclyl, and alkyl, alkoxy, cycloalkyl, or heterocyclyl substituted with one or more substituents selected from deuterium, halogen, hydroxyl, thiol, amino, nitro, cyano, alkyl, haloalkyl, alkoxy, and/or haloalkoxy.
  • RE 1 is selected from hydrogen, deuterium, fluorine, chlorine, hydroxy, methyl, methoxy, ethoxy, hydroxymethyl, hydroxypropyl (eg, hydroxyisopropyl), trifluoromethyl, or trifluoromethoxy.
  • RE 2 is selected from hydrogen, deuterium, or fluorine.
  • RE 1a is selected from -COCH(CH 3 )OH, -COCH 3 , -CON(CH 3 ) 2 , -CO(CH 2 ) 2 CH(NH 2 )COOH, or -COCH(NH 2 )(CH 2 ) 2 COOH.
  • RE 2a is selected from -CH 2 OCOOC(CH 3 ) 3 or -CH 2 OCOC(CH 3 ) 3 .
  • the E moiety is selected from the following structures: (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example ) (For example
  • the A portion of the compound of formula (II) has the following structure:
  • the ring structure where Q3 and Q4 are located is selected from the following structures:
  • the present invention relates to a compound of formula (II), or a pharmaceutically acceptable salt, ester, solvate or stereoisomer thereof:
  • Part A has the following structure:
  • the ring structure where Q3 and Q4 are located is selected from the following structures:
  • Ring P is pyridyl, pyrazolopyrimidinyl or pyrrolopyridazinyl;
  • R1 is selected from -OR1a , -COR1a , -CONR1aR1b , -S(O)( NR1a ) R1b , -SO2NR1aR1b , optionally substituted alkyl , wherein R1a and R1b are independently selected from hydrogen, deuterium , optionally substituted alkyl and optionally substituted cycloalkyl;
  • R2' is selected from optionally substituted cycloalkylene, optionally substituted heterocyclylene, optionally substituted phenylene and pyridylene;
  • R3 is selected from cyano, optionally substituted alkyl and optionally substituted heteroaryl
  • Ring P, R1 and R3 in Formula (A') are the same as those described above (e.g., Formula (III)).
  • R2' is selected from cycloalkylene, heterocyclylene, phenylene and pyridylene, optionally substituted with one or more substituents selected from the following: deuterium, halogen, hydroxyl, thiol, amino, cyano, nitro, aldehyde, carboxyl, alkyl.
  • R2' is selected from optionally substituted cyclobutylene, cyclopentylene, cyclohexylene, bicyclo[1.1.1]pentylene or bicyclo[2.2.2]octylene; optionally substituted piperidinylene, aziridinylene, aziridineylene, 1-oxa-8-azaspiro[4.5]decylene or 7-azaspiro[3.5]nonylene; optionally substituted phenylene or pyridinylene.
  • L1, L3 and L5 are independently absent or selected from -Rm-, -Rm-O-Rn-, -Rm-C(O)-Rn-, -Rm-C(O)O-Rn-, -Rm-OC(O)-Rn-, -Rm-NRx-Rn-, -Rm-C(O)NRx-Rn-, -Rm-NRxC(O)-Rn- or wherein Rm and Rn are independently selected from a bond or an optionally substituted alkylene group, and Rx is independently selected from hydrogen, deuterium or an optionally substituted alkyl group.
  • Rm and Rn are independently selected from a bond or alkylene (eg, C 1-4 alkylene such as methylene or ethylene) optionally substituted with halogen (eg, fluorine).
  • alkylene eg, C 1-4 alkylene such as methylene or ethylene
  • halogen eg, fluorine
  • Rx is independently selected from hydrogen, deuterium, or alkyl (eg, C 1-4 alkylene, such as methylene and ethylene).
  • L2 is selected from optionally substituted heterocyclylene.
  • L2 and L4 are independently selected from 3-12 membered heterocyclylene containing one or two nitrogen heteroatoms, which are optionally substituted with one or more substituents selected from halogen (eg, fluorine) and/or alkyl (eg, methyl).
  • halogen eg, fluorine
  • alkyl eg, methyl
  • L2 and L4 are independently selected from:
  • L1 is absent or selected from -Rm-, -Rm-O-Rn-, -Rm-C(O)-Rn-, -Rm-C(O)O-Rn-, -Rm-OC(O)-Rn-, -Rm-NRx-Rn-, -Rm-C(O)NRx-Rn- or -Rm-NRxC(O)-Rn-, wherein Rm and Rn are independently selected from a bond or an alkylene (e.g., methylene or ethylene), and Rx is independently selected from hydrogen, deuterium or an alkyl (e.g., methyl).
  • Rm and Rn are independently selected from a bond or an alkylene (e.g., methylene or ethylene)
  • Rx is independently selected from hydrogen, deuterium or an alkyl (e.g., methyl).
  • L1 is absent or selected from -CH2- , -CH2CH2- , -CH2O- , -C(O)-, -CH2C (O)-, -CH2NH- , -NHCH2- , -CH2N ( CH3 ) -, -C(O)NH-.
  • L2 and L4 are independently selected from:
  • L3 is absent or selected from -Rm-, -Rm-O-Rn-, -Rm-C(O)-Rn-, -Rm-C(O)O-Rn-, -Rm-OC(O)-Rn-, -Rm-NRx-Rn-, -Rm-C(O)NRx-Rn- or -Rm-NRxC(O)-Rn-, wherein Rm and Rn are independently selected from a bond or an alkylene (e.g., methylene or ethylene), and Rx is independently selected from hydrogen, deuterium or an alkyl (e.g., methyl).
  • Rm and Rn are independently selected from a bond or an alkylene (e.g., methylene or ethylene)
  • Rx is independently selected from hydrogen, deuterium or an alkyl (e.g., methyl).
  • L3 is absent or selected from -CH2- , -CH2CH2- , -OCH2- , -C(O)-, -C(O) CH2- , -C(O)O-, -NH-, -NHCH2- , -N( CH3 )-.
  • L5 is absent or selected from -Rm-, -Rm-C(O)-Rn-, -Rm-NRx-Rn- or wherein Rm and Rn are independently selected from a bond or an alkylene group (eg, methylene or ethylene), and Rx is independently selected from hydrogen, deuterium, or an alkyl group (eg, methyl).
  • L5 is absent or selected from -CH2- , -C(O)-, -NH- or
  • L1 is absent or is selected from -CH2- , -CH2CH2- , -C(O)-, -NHCH2- , -CH2N ( CH3 )-, -CH2O- , -C(O)NH-, -CH2C (O)-, -CH2NH- ;
  • L2 is absent and L4 is selected from the following groups, or L2 is selected from the following groups and L4 is absent:
  • L3 is absent or selected from -CH 2 -, -CH 2 CH 2 - or -C(O)-;
  • L5 is absent or selected from -CH2- , -NH-, -C(O)-.
  • L1 is selected from -CH 2 -, -C(O)-;
  • L2 is selected from
  • L3 is absent or selected from -OCH 2 -, -CH 2 CH 2 -, -NHCH 2 -;
  • L5 is selected from
  • L1 is absent or selected from -CH 2 -, -C(O)-, -CH 2 O-;
  • L2 is selected from
  • L3 is absent or selected from -CH2- , -CH2CH2- , -NHCH2- , -C(O)O-, -OCH2- , -NH- , -N( CH3 )-, -C(O)-, -C(O) CH2- ;
  • L4 is selected from
  • L5 is absent or selected from -C(O)-, -CH 2 -.
  • L1 is selected from the group consisting of
  • L2 is selected from
  • L3 is absent or selected from -CH 2 -, -CH 2 CH 2 -, -C(O)-;
  • L4 is selected from
  • L5 is absent or selected from -C(O)-.
  • L1 is selected from -CH2- , -CH2CH2- , -C(O)-, -C(O)NH-, -CH2NH- , -CH2C (O)-, -CH2O- , -CH2N ( CH3 )-;
  • L2 is selected from
  • L3 is absent or selected from -CH 2 -, -C(O)-;
  • L is selected from:
  • the E moiety has the following structure:
  • RE 1 is selected from hydrogen, deuterium, halogen, hydroxyl, thiol, amino, nitro, cyano, alkyl, alkoxy
  • RE 2 is selected from hydrogen, deuterium or halogen
  • RE L1 is selected from a bond, -CH 2 -, -NH-, -NCH 3 -, -O-, -CONH- or -CONCH 3 -
  • RE L2 is selected from a bond, -CH 2 - or cyclopropylene
  • p is 1 or 2.
  • RE 1 is selected from hydrogen, deuterium, halogen (eg, fluorine), and methoxy.
  • RE 2 is selected from hydrogen or deuterium.
  • the E moiety has the following structure:
  • RE 1 is selected from hydrogen, deuterium, halogen (eg fluorine), methoxy
  • RE 2 is selected from hydrogen, deuterium or halogen
  • RE L1 is selected from a bond, -CH 2 -, -NH-, -NCH 3 -, -O-, -CONH- or -CONCH 3 -
  • RE L2 is selected from a bond, -CH 2 -, and p is 1 or 2.
  • the E moiety has the following structure:
  • E is selected from:
  • the compound of formula (II) has the following structure: A-L-E (II), wherein
  • Part A has the structure of formula (A'), wherein
  • the ring structure where Q3 and Q4 are located is selected from:
  • Ring P is pyridyl
  • R1 is selected from -CONH 2 , hydroxyisopropyl, difluoromethyl, -CONH-(cyclopropyl);
  • R2' is selected from phenylene, cyclohexylene, bicyclo[1.1.1]pentylene;
  • R3 is selected from -CF 3 .
  • the L part has the following structure: -L1-L2-L3-L4-L5- Formula (L)
  • L1 is absent or selected from -CH 2 -, -C(O)-, -CH 2 O-;
  • L2 is selected from
  • L3 is absent or selected from -CH2- , -CH2CH2- , -NHCH2- , -C(O)O-, -OCH2- , -NH- , -N( CH3 )-, -C(O)-, -C(O) CH2- ;
  • L4 is selected from
  • L5 is absent or selected from -C(O)-, -CH2- ; or
  • L1 is selected from not present;
  • L2 is selected from L3 is absent or selected from -CH 2 -, -CH 2 CH 2 -, -C(O)-;
  • L4 is selected from L5 is absent or selected from -C(O)-.
  • Section E has the following structure:
  • RE 1 is selected from hydrogen, deuterium, halogen (eg fluorine), methoxy
  • RE 2 is selected from hydrogen, deuterium or halogen
  • RE L1 is selected from a bond, -CH 2 -, -NH-, -NCH 3 -, -O-, -CONH- or -CONCH 3 -
  • RE L2 is selected from a bond, -CH 2 -, and p is 1 or 2; or
  • E is selected from:
  • the compound of formula (II) has the following structure: A-L-E (II), wherein
  • Part A has the following structure:
  • the L part has the following structure: -L1-L2-L3-L4-L5- Formula (L)
  • L1 is absent or selected from -CH2- , -CH2CH2- , -C(O)-, -NHCH2- , -CH2N ( CH3 )-, -CH2O- , -C(O)NH-, -CH2C (O)-, -CH2NH- ;
  • L2 is absent and L4 is selected from the following groups, or L2 is selected from the following groups and L4 is absent:
  • L3 is absent or selected from -CH 2 -, -CH 2 CH 2 - or -C(O)-;
  • L5 is absent or selected from -CH2- , -NH-, -C(O)-.
  • E is selected from the following structures:
  • the compound of formula (II) has the following structure: ALE (II), wherein the A moiety has the following structure:
  • the L portion has the following structure: -L1-L2-L3-L4-L5- Formula (L)
  • L1 is selected from -CH 2 -, -C(O)-;
  • L2 is selected from
  • L3 is absent or selected from -OCH 2 -, -CH 2 CH 2 -, -NHCH 2 -;
  • L5 is selected from
  • the compound of formula (II) has the following structure: A-L-E (II), wherein
  • Part A has the following structure:
  • the L portion has the following structure: -L1-L2-L3-L4-L5- Formula (L)
  • L1 is absent or selected from -CH 2 -, -C(O)-, -CH 2 O-;
  • L2 is selected from
  • L3 is absent or selected from -CH2- , -CH2CH2- , -NHCH2- , -C(O)O-, -OCH2- , -NH- , -N( CH3 )-, -C(O)-, -C(O) CH2- ;
  • L4 is selected from
  • L5 is absent or selected from -C(O)-, -CH 2 -
  • the compound of formula (II) has the following structure: A-L-E (II), wherein
  • Part A has the following structure:
  • the L part has the following structure: -L1-L2-L3-L4-L5- Formula (L)
  • L1 is selected from -CH2- , -CH2CH2- , -C(O)-, -C(O)NH-, -CH2NH- , -CH2C (O)-, -CH2O-, -CH2N ( CH3 )-
  • L2 is selected from
  • L3 is absent or selected from -CH 2 -, -C(O)-
  • the compound of Formula I is selected from:
  • the compound of formula (II) is selected from:
  • the present invention also provides a pharmaceutical composition
  • a pharmaceutical composition comprising the compound of the present invention or a pharmaceutically acceptable salt, ester, solvate or stereoisomer thereof, and a pharmaceutically acceptable excipient.
  • the present invention provides a method for treating or preventing a disease mediated by IRAK protein, comprising administering a compound of formula (I) or formula (II) or a composition of the present invention to a patient in need thereof.
  • the present invention provides use of a compound of formula (I) or formula (II) or a composition of the present invention in preparing a medicament for treating or preventing a disease mediated by an IRAK protein.
  • the disease mediated by the IRAK protein is selected from the group consisting of brain cancer, kidney cancer, liver cancer, adrenal cancer, bladder cancer, breast cancer, stomach cancer, ovarian cancer, colon cancer, rectal cancer, prostate cancer, pancreatic cancer, lung cancer, vaginal cancer, cervical cancer, testicular cancer, genitourinary tract cancer, esophageal cancer, laryngeal cancer, skin cancer, bone cancer, thyroid cancer, sarcoma, mesothelioma, glioblastoma, neuroblastoma, head and neck cancer, adenoma, adenocarcinoma, melanoma, lymphoma, Hodgkin lymphoma, non-Hodgkin lymphoma, follicular lymphoma, plasmacytoma or intravascular large B-cell lymphoma, diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL), Burkitt lymphoma (Burkitt lymphoma) lymphoma), acute
  • 2,5-dibromopyrazine (890 mg, 3.741 mmol, 1.12 equivalents) was placed in a sealed tube, 10 ml of DMF was added to dissolve, and then cesium carbonate (2.7 g, 8.287 mmol, 2.5 equivalents) was added.
  • Compound A2-3 (1 g, 3.342 mmol, 1 equivalent) was dissolved in 5 ml of DMF and added dropwise to the reaction system. The mixture was reacted in an oil bath at 80°C for 5 h.
  • 6-(Trifluoromethyl)pyridine-2-carboxylic acid (986 mg, 5.16 mmol, 1.00 equivalent), HATU (2.94 g, 7.74 mmol, 1.50 equivalent) and DCM (10.0 mL) were added to a 100 mL three-necked flask, and DIEA (2.00 g, 15.4 mmol, 2.70 mL, 3.00 equivalent) was added, and the mixture was reacted at 0-10° C. for 0.5 hour, and compound A4-2 (970 mg, 5.16 mmol, 1.00 equivalent) was added, and the mixture was reacted at 20-25° C. for 15.5 hours.
  • 6-(Trifluoromethyl)pyridine-2-carboxylic acid (179 mg, 937 ⁇ mol, 1.20 equiv), HATU (445 mg, 1.17 mmol, 1.50 equiv) and THF (2.00 mL) were added to a 10 mL single-necked bottle, and DIEA (302 mg, 2.34 mmol, 408 ⁇ L, 3.00 equivalents), reacted at 0-10°C for 0.5 hours, added compound A4-4 (250 mg, 781 ⁇ mol, 1.00 equivalents), reacted at 25°C for 15.5 hours.
  • compound Int1 400 mg, 1.34 mmol, 1.00 equiv
  • 4-iodoanisole 313 mg, 1.34 mmol, 1.00 equiv
  • DMEDA 118 mg, 1.34 mmol, 144 ⁇ L, 1.00 equiv
  • K 3 PO 4 851 mg, 4.01 mmol, 3.00 equiv
  • DMF 1.00 mL
  • CuI 127 mg, 668 ⁇ mol, 0.50 equiv
  • N-methyl-p-bromoaniline (4-bromo-N-methylaniline) 500 mg, 2.69 mmol, 1.00 equiv
  • DMAP 32.8 mg, 269 ⁇ mol, 0.10 equiv
  • Boc 2 O 880 mg, 4.03 mmol, 926 ⁇ L, 1.50 equiv
  • DCM 5.00 mL
  • reaction mixture was poured into water (100 mL), the aqueous phase was extracted with ethyl acetate (100 mL*2), the combined organic phase was washed with brine (100 mL*2), dried over anhydrous Na 2 SO 4 , filtered, and concentrated in vacuo to obtain a crude product.
  • LCMS showed that 2.01% of compound Int1 remained, and the desired mass spectrum was detected.
  • the crude product was stirred with ACN (5.00 mL) at 20-25°C for 10 minutes and filtered.
  • the filter cake was dissolved in 5 ml of water, then adjusted to pH 5-6 with HCl (2.00 M), and the filter cake was collected by filtration.
  • the filter cake was dissolved in ACN (2.00 mL), water (10.0 mL) was added, and then lyophilized to obtain compound A13 (266 mg, 634 ⁇ mol, yield 44.9%, purity 100%) as a blue solid.
  • LCMS: m/z 242.0 (M + Na) + .
  • Boc 2 O (836.01 mg, 3.83 mmol, 880 ⁇ L, 2.00 equiv), DMAP (46.8 mg, 383 ⁇ mol, 0.200 equiv) and 4-iodo-N-methylbenzamide (500 mg, 1.92 mmol, 1.00 equiv) were added to DCM (5.00 mL) and stirred at 40-45° C. for 3 hours.
  • the reaction mixture was added to water (50.0 mL), extracted with METB (50.0 mL*3), and washed with brine (50.0 mL) to obtain compound A14-1 (700 mg, crude product) as a yellow solid.
  • reaction solution was poured into 50.0 ml of water and filtered. The filter cake was concentrated in vacuo and then DMF was added. The mixture was slurried at 100°C for 30 minutes to obtain a crude product. The crude product was added to CAN and slurried at 80°C for 30 minutes to obtain compound A19 (45.9 mg, 106 ⁇ mol, yield 15.1%, purity 97.2%).
  • LCMS: m/z 420.1 (M+H) + .
  • reaction solution was filtered and washed with H 2 O (4.00 mL*3), and the filter cake was dissolved in H 2 O (20.0 mL) and ACN (3.00 mL).
  • the mixture was directly freeze-dried to obtain a crude product.
  • the crude product was stirred with ACN (10.0 mL) at 20-25°C for 10 minutes, and the filter cake was dissolved in H2O (20.0 mL) and ACN (3.00 mL).
  • the mixture was directly freeze-dried to obtain compound A28 (74.1 mg, 131 ⁇ mol, yield 43.1%, purity 100%) as a white solid.
  • LCMS: m/z 564.3(M+H) + .
  • tert-butyl (3-hydroxycyclobutyl)carbamate (1.00 g, 5.34 mmol, 1.00 equivalent)
  • TEA (1.62 g, 16.0 mmol, 2.23 mL, 3.00 equivalent)
  • DCM (10.0 mL)
  • MS 2 O (1.30 g, 7.48 mmol, 1.40 equivalent) and DCM (10 mL) were slowly added, replaced with nitrogen 3 times, and reacted at 0-25°C for 2 hours.
  • compound A32-1 (532 mg, 2.01 mmol, 1.20 equivalent), compound Int1 (500 mg, 1.67 mmol, 1.00 equivalent), Cs 2 CO 3 (2.18 g, 6.68 mmol, 4.00 equivalent) and DMF (15.0 mL) were added to a 100 mL three-necked round-bottom flask, and the temperature was raised to 110°C for 12 hours.
  • compound A33-1 (480 mg, 1.01 mmol, 1.00 equivalent), DCM (10.0 mL) and TFA (1.72 g, 15.12 mmol, 1.12 mL, 15.0 equivalent) were added to 40 mL parallel reaction bottles and reacted at 20-25 ° C for 2 hours.
  • N-BOC-3-hydroxypiperidine (1.00 g, 4.97 mmol, 1.00 equivalent), TEA (1.51 g, 14.9 mmol, 2.07 mL, 3.00 equivalent) and DCM (5.00 mL) were added to a 100 mL three-necked round-bottom flask, and Ms 2 O (1.13 g, 6.46 mmol, 1.30 equivalent) dissolved in DCM (5.00 mL) was slowly added, and the mixture was reacted at 0-5°C for 2.5 hours.
  • N-tert-butyloxycarbonyl-1-oxa-8-azaspiro[4.5]decan-3-ol 500 mg, 1.94 mmol, 1.00 equiv
  • TEA 589 mg, 5.83 mmol, 811 ⁇ L, 3.00 equiv
  • DCM 2.50 mL
  • trans-N-4-BOC-aminocyclohexanol 750 mg, 3.48 mmol, 1.00 equiv
  • TEA 7.5 mmol, 10.4 mmol, 1.45 mL, 3.00 equiv
  • DCM 5.00 mL
  • Ms 2 O 910 mg, 5.23 mmol, 1.50 equiv
  • DCM 5.00 mL
  • methyl 4-hydroxycyclohexanecarboxylate (1.00 g, 6.32 mmol, 1.00 equivalent), TEA (959 mg, 9.48 mmol, 1.32 mL, 1.50 equivalent) and DCM (10.0 mL) were added to a 100 mL three-necked round-bottom flask, and Ms 2 O (1.43 g, 8.22 mmol, 1.30 equivalent) dissolved in DCM (10.0 mL) was slowly added, and the mixture was reacted at 0°C for 3 hours.
  • reaction temperature was lowered to 25°C, diatomaceous earth was added to the reaction solution, stirred for 10 minutes, filtered, the filtrate was poured into water, extracted with ethyl acetate, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated to obtain compound A40-2 (510 mg, 1.92 mmol, yield 84.0%, purity 71.1%) as a black solid.
  • compound A41-2 (1.00 g, 2.50 mmol, 1.00 equivalent) and THF (15.0 mL) were added to a 100 mL three-necked round-bottom flask, cooled to 0-5°C, replaced nitrogen three times, and then NaBH 4 (1.23 g, 32.5 mmol, 13.0 equivalent) was added and reacted at 65°C for 12 hours.
  • LCMS showed the remaining compound A41-2, and the target mass spectrum was detected.
  • the reaction solution was poured into an aqueous ammonium chloride solution, extracted with ethyl acetate, washed with brine, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated.
  • the crude product was purified by column chromatography to obtain compound A41-3 (400 mg, 1.10 mmol, yield 43.8%, purity 99.4%) as a white solid.
  • reaction solution was poured into an aqueous sodium thiosulfate solution, extracted with dichloromethane, washed with sodium bicarbonate and brine, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated to obtain compound A41-3 (400 mg, 1.10 mmol, yield 43.8%, purity 99.4%) as a white solid.
  • reaction solution was poured into water, extracted with ethyl acetate, washed with sodium bicarbonate and brine, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated.
  • the crude product was purified by preparative HPLC to give compound A42-1 (1.30 g, 2.26 mmol, yield 14.4%, purity 100%) as a white solid.
  • Step A N-methyl-3-(4-nitro-1-phenyl-1H-pyrazol-3-yl)cyclobutane-1-amine
  • reaction solution was quenched with water, extracted with ethyl acetate three times, and the mixed organic phase was washed with water and saturated brine in turn, dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure to obtain a crude title compound (yellow solid, 218 mg, crude product), which was directly used in the next step without purification.
  • Step B tert-Butyl methyl(3-(4-nitro-1-phenyl-1H-pyrazol-3-yl)cyclobutyl)carbamate
  • Step C tert-Butyl (3-(4-amino-1-phenyl-1H-pyrazol-3-yl)cyclobutyl)(methyl)carbamate
  • tert-butyl methyl(3-(4-nitro-1-phenyl-1H-pyrazol-3-yl)cyclobutyl)carbamate 230 mg, 10% palladium on carbon (32.9 mg, 0.3 mmol) was added to a solution of 1% 2-(2-hydroxy-1-nitropropene)-2-nitropropene (0.6 mmol, 1.0 equivalent) in methanol (25 mL).
  • the reaction solution was replaced three times under the protection of a hydrogen balloon and stirred at room temperature for 2 hours under hydrogen.
  • the filtrate was filtered and concentrated under reduced pressure to obtain the crude title compound (yellow oil, 170 mg, crude product), which was used directly in the next step without purification.
  • Step D tert-Butyl methyl(3-(1-phenyl-4-(6-(trifluoromethyl)picolinamido)-1H-pyrazol-3-yl)cyclobutyl)carbamate
  • reaction solution was stirred at room temperature under nitrogen protection for 1 hour. After the reaction was complete, the reaction solution was diluted with ethyl acetate, washed with water and saturated brine in turn, dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography to give the crude title compound (light yellow solid, 256 mg, crude product).
  • Step E N-(3-(3-(Methylamino)cyclobutyl)-1-phenyl-1H-pyrazol-4-yl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide
  • Step A 4-nitro-1-(pyrimidin-5-yl)-1H-pyrazole-3-carboxylic acid methyl ester
  • Step B 4-amino-1-(pyrimidin-5-yl)-1H-pyrazole-3-carboxylic acid methyl ester
  • Iron powder (313 mg, 5.62 mmol, 5.0 equivalent) and ammonium chloride (60.1 mg, 1.12 mmol, 1.0 equivalent) were added to a solution of 4-nitro-1-(pyrimidin-5-yl)-1H-pyrazole-3-carboxylic acid methyl ester (280 mg, 1.12 mmol, 1.0 equivalent) in ethanol (9 mL) and water (3 mL) at room temperature.
  • the reaction mixture was stirred at 80 ° C for 1 hour. After the reaction was completed, the filtrate was filtered and concentrated under reduced pressure to obtain the crude title compound (yellow solid, 190 mg, yield 77%), which was used directly in the next step without purification.
  • Step C 1-(pyrimidin-5-yl)-4-(6-(trifluoromethyl)picolinamido)-1H-pyrazole-3-carboxylic acid methyl ester
  • 6-(trifluoromethyl)picolinic acid (165.7 mg, 0.88 mmol, 1.0 equivalent), DIEA (336 mg, 2.6 mmol, 3.0 equivalent) and HATU (329 mg, 0.88 mmol, 1.0 equivalent) were added to a solution of 4-amino-1-(pyrimidin-5-yl)-1H-pyrazole-3-carboxylic acid methyl ester (190 mg, 0.88 mmol, 1.0 equivalent) in N,N-dimethylformamide (7 mL). The reaction solution was stirred at room temperature under nitrogen protection for 18 hours.
  • reaction solution was diluted with ethyl acetate, washed with water and saturated brine in turn, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography to give the title compound (yellow solid, 70 mg, yield 20%).
  • Step D 1-(Pyrimidin-5-yl)-4-(6-(trifluoromethyl)picolinamido)-1H-pyrazole-3-carboxylic acid
  • lithium hydroxide monohydrate 15 mg, 0.36 mmol, 2.0 equiv was added to a mixed solution of 1-(pyrimidin-5-yl)-4-(6-(trifluoromethyl)picolinamido)-1H-pyrazole-3-carboxylic acid methyl ester (70 mg, 0.18 mmol, 1.0 equiv) in methanol (9 mL), tetrahydrofuran (9 mL) and water (3 mL). The reaction solution was stirred at room temperature under nitrogen protection for 18 hours. After the reaction was complete, the reaction solution was adjusted to pH ⁇ 5 with a diluted 1N HCl solution. Filter and dry to obtain the crude title compound (yellow solid, 50 mg, yield 74%), which was used directly in the next step without purification.
  • Step E N-(3-amino-1-(pyrimidin-5-yl)-1H-pyrazol-4-yl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide
  • Step A N-(3-(2-hydroxypropan-2-yl)-1-phenyl-1H-pyrazol-4-yl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide
  • Step B 2-(tert-butyl)4-ethyl 3-amino-1-phenyl-1H-pyrrole-2,4-dicarboxylate
  • reaction solution was cooled to room temperature, quenched with water, extracted with ethyl acetate three times, and the mixed organic phase was washed with water and saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography to obtain the title compound (white solid, 1.0 g, yield 13%).
  • Step C 4-amino-1-phenyl-1H-pyrrole-3-carboxylic acid ethyl ester
  • Step D 1-phenyl-4-(6-(trifluoromethyl)picolinamido)-1H-pyrrole-3-carboxylic acid ethyl ester
  • 6-(trifluoromethyl)picolinic acid 750 mg, 3.9 mmol, 3.0 equivalents.
  • the reaction solution was stirred at 80°C for 2 hours under nitrogen protection. After the reaction was complete, 6-(trifluoromethyl)picolinic acid chloride (3.0 equivalents) was obtained by concentration under reduced pressure, and dissolved in dichloromethane (2.0 mL).
  • Step E 1-phenyl-4-(6-(trifluoromethyl)picolinamido)-1H-pyrrole-3-carboxylic acid
  • reaction solution was cooled to room temperature, the reaction solution was adjusted to pH 6-7 with 1N HCl dilute solution, extracted with ethyl acetate three times, and the mixed organic phase was washed with water and saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography to obtain the title compound (white solid, 200.0 mg, yield 72%).
  • Step F N-(4-amino-1-phenyl-1H-pyrrol-3-yl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide
  • reaction solution was diluted with ethyl acetate, washed with water and saturated brine in turn, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by HPLC to give the title compound (white solid, 52.6 mg, yield 26%).
  • Step A Ethyl 5-phenyl-3-(6-(trifluoromethyl)picolinamido)-1H-pyrrole-2-carboxylate
  • 6-(trifluoromethyl)picolinic acid 83.0 mg, 0.434 mmol, 1.0 equiv.
  • DIEA 168 mg, 1.30 mmol, 3.0 equiv.
  • HATU 165 mg, 0.434 mmol, 1.0 equiv.
  • reaction solution was diluted with ethyl acetate, washed with water and saturated brine in turn, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography to give the title compound (yellow solid, 130 mg, yield 74%).
  • Step B 5-phenyl-3-(6-(trifluoromethyl)picolinamido)-1H-pyrrole-2-carboxylic acid
  • lithium hydroxide monohydrate (15.4 mg, 0.645 mmol, 2.0 equiv) was added to a mixed solution of 5-phenyl-3-(6-(trifluoromethyl)picolinamido)-1H-pyrrole-2-carboxylic acid ethyl ester (130 mg, 0.322 mmol, 1.0 equiv) in tetrahydrofuran (10 mL) and water (10 mL).
  • the reaction solution was stirred at 40°C for 24 hours. After the reaction was complete, the reaction solution was adjusted to pH 5-6 with a diluted 1N HCl solution.
  • the mixed solution was extracted three times with ethyl acetate, and the mixed organic phase was washed with water and saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure to obtain the crude title compound (white solid, 100 mg, yield 83%), which was directly used in the next step without purification.
  • ammonium chloride (42.8 mg, 0.799 mmol, 3.0 equivalents), DIEA (103 mg, 0.799 mmol, 3.0 equivalents) and HATU (152 mg, 0.400 mmol, 1.5 equivalents) were added to a solution of 5-phenyl-3-(6-(trifluoromethyl)picolinamido)-1H-pyrrole-2-carboxylic acid (100 mg, 0.266 mmol, 1.0 equivalents) in N,N-dimethylformamide (10 mL). The reaction solution was stirred at room temperature under nitrogen protection for 12 hours.
  • Step A tert-Butyl 2-(3-carbamoyl-4-nitro-1H-pyrazol-1-yl)-7-azaspiro[3.5]nonane-7-carboxylate
  • Step B tert-Butyl 2-(4-amino-3-carbamoyl-1H-pyrazol-1-yl)-7-azaspiro[3.5]nonane-7-carboxylate
  • tert-butyl 2-(3-carbamoyl-4-nitro-1H-pyrazol-1-yl)-7-azaspiro[3.5]nonane-7-carboxylate 300 mg, 0.79 mmol, 1 eq.
  • ethanol 10 mL
  • water 2 mL
  • iron powder 442 mg, 7.91 mmol, 10 eq.
  • ammonium chloride 423 mg, 7.91 mmol, 10 eq.
  • Step C tert-Butyl 2-(3-carbamoyl-4-(3-isocyanopyrrolo[1,2-b]pyridazine-7-carboxamido)-1H-pyrazol-1-yl)-7-azaspiro[3.5]nonane-7-carboxylate
  • HATU 3-isocyanopyrrolo[1,2-b]pyridazine-7-carboxylic acid (107 mg, 0.57 mmol, 1 eq.), 2-(4-amino-3-carbamoyl-1H-pyrazol-1-yl)-7-azaspiro[3.5]nonane-7-carboxylic acid tert-butyl ester (200 mg, 0.57 mmol, 1 eq.) and DIEA (222 mg, 1.72 mmol, 3 eq.), and the reaction was stirred under nitrogen for 1 hour.
  • Step D N-(3-Carbamoyl-1-(7-azaspiro[3.5]nonan-2-yl)-1H-pyrazol-4-yl)-3-isocyanopyrrolo[1,2-b]pyridazine-7-carboxamide
  • tert-butyl 2-(3-carbamoyl-4-(3-isocyanopyrrolo[1,2-b]pyridazine-7-carboxamido)-1H-pyrazol-1-yl)-7-azaspiro[3.5]nonane-7-carboxylate 150 mg, 0.412 mmol, 1 equivalent was added to HCl/EA (4N, 5 mL) solution under ice-bath stirring, and the reaction mixture was stirred under nitrogen for 1 hour. The reactants were concentrated in vacuo.
  • Step A Methyl 5-phenyl-3-(6-(trifluoromethyl)picolinamido)thiophene-2-carboxylate
  • 6-(trifluoromethyl)picolinic acid 615.0 mg, 3.2 mmol 1.5 equivalents
  • HOBT 652.0 mg, 4.3 mmol, 2.0 equivalents
  • EDCI 823.0 mg, 4.3 mmol, 2.0 equivalents
  • triethylamine 1.1 g, 10.7 mmol, 5.0 equivalents
  • 3-amino-5-phenylthiophene-2-carboxylic acid methyl ester 500.0 mg, 2.1 mmol, 1.0 equivalents
  • N,N-dimethylformamide 5 mL
  • reaction solution was diluted with ethyl acetate, washed with water and saturated brine in turn, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography to give the title compound (white solid, 600 mg, yield 70%).
  • Step B 5-phenyl-3-(6-(trifluoromethyl)picolinamido)thiophene-2-carboxylic acid
  • lithium hydroxide 17.6.4 mg, 7.4 mmol, 5.0 equiv
  • tetrahydrofuran 4 mL
  • water 4 mL
  • the reaction solution was stirred at 50°C for 18 hours. After the reaction was complete, the reaction solution was adjusted to pH 4 with a diluted 1N HCl solution.
  • the mixed solution was extracted three times with ethyl acetate, and the mixed organic phase was washed with water and saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure to obtain the crude title compound (white solid, 300 mg, yield 69%), which was directly used in the next step without purification.
  • Step B Ethyl 5-phenyl-2-(6-(trifluoromethyl)picolinamido)thiophene-3-carboxylate
  • Step C 5-phenyl-2-(6-(trifluoromethyl)picolinamido)thiophene-3-carboxylic acid
  • lithium hydroxide (75.6 mg, 0.6 mmol, 3.0 equiv) was added to a mixed solution of 5-phenyl-2-(6-(trifluoromethyl)picolinamido)thiophene-3-carboxylic acid ethyl ester (100.0 mg, 0.2 mmol, 1.0 equiv) in tetrahydrofuran (5 mL) and water (1 mL).
  • the reaction solution was stirred at 80°C for 16 hours. After the reaction was complete, the reaction solution was adjusted to pH 4 with a diluted 1N HCl solution.
  • the mixed solution was extracted three times with ethyl acetate, and the mixed organic phase was washed with water and saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure to obtain the crude title compound (colorless oil, 100 mg, crude product), which was directly used in the next step without purification.
  • Step D N-(3-amino-5-phenylthiophen-2-yl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide
  • reaction solution was diluted with ethyl acetate, washed with water and saturated brine in turn, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by HPLC to obtain the title compound (white solid, 11.4 mg, yield 11%).
  • Step B Ethyl 5-phenyl-3-(6-(trifluoromethyl)picolinamido)furan-2-carboxylate
  • 6-(trifluoromethyl)picolinyl chloride (100.0 mg, crude product) was added dropwise to a solution of ethyl 3-amino-5-phenylfuran-2-carboxylate (162.4 mg, 0.7 mmol, 1.0 equivalent) and DIEA (48.7 mg, 2.0 mmol, 3.0 equivalent) in dichloromethane (8.0 mL).
  • the reaction solution was stirred at room temperature for 1 hour under nitrogen protection.
  • the product was diluted with dichloromethane, washed with water and saturated brine in turn, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography to give the title compound (colorless oil, 80 mg, yield 29%).
  • the mixed solution was extracted three times with ethyl acetate, and the mixed organic phase was washed with water and saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure to obtain the crude title compound (colorless oil, 80.0 mg, crude product), which was directly used in the next step without purification.
  • Step D N-(2-amino-5-phenylfuran-3-yl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide
  • Step B N-(3-cyano-5-phenylfuran-2-yl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide
  • Step A Benzyl Benzamidothiocarboxylate
  • Step B 4-amino-2-phenyl-1H-imidazole-5-carbonitrile
  • Step D N-(4-amino-2-phenyl-1H-imidazol-5-yl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide
  • Step B Ethyl 2-phenyl-4-(((trifluoromethyl)sulfonyl)oxy)thiazole-5-carboxylate
  • Step C Ethyl 4-((tert-Butyloxycarbonyl)amino)-2-phenylthiazole-5-carboxylate
  • Step D 4-((tert-Butyloxycarbonyl)amino)-2-phenylthiazole-5-carboxylic acid
  • lithium hydroxide (0.19 g, 4.59 mmol, 2.0 equivalents) was added to a mixed solution of ethyl 4-((tert-butoxycarbonyl)amino)-2-phenylthiazole-5-carboxylate (0.8 g, 2.30 mmol, 1.0 equivalents) in tetrahydrofuran (5 mL) and water (5 mL).
  • the reaction solution was stirred at room temperature for 2 hours under nitrogen protection. After the reaction was complete, the reaction solution was adjusted to pH 4 with a diluted 4N HCl solution.
  • the mixed solution was extracted three times with ethyl acetate, and the mixed organic phase was washed with water and saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure to obtain the crude title compound (white solid, 600 mg, crude product), which was directly used in the next step without purification.
  • Step E tert-Butyl (5-carbamoyl-2-phenylthiazol-4-yl)carbamate
  • Step F tert-Butyl (5-cyano-2-phenylthiazol-4-yl)carbamate
  • Step H 2-phenyl-4-(6-(trifluoromethyl)picolinamido)thiazole-5-carboxamide and 4-amino-2-phenyl-N-(6-(trifluoromethyl)picolinamido)thiazole-5-carboxamide
  • Step B 2-phenyl-5-(6-(trifluoromethyl)picolinamido)thiazole-4-carboxamide
  • HATU 433.5 mg, 1.14 mmol, 1.0 equivalent
  • DIEA 294.7 mg, 2.3 mmol, 2.0 equivalent
  • HATU 433.5 mg, 1.14 mmol, 1.0 equivalent
  • DIEA 294.7 mg, 2.3 mmol, 2.0 equivalent
  • 5-amino-2-phenylthiazole-4-carboxamide 250.0 mg, 1.14 mmol, 1.0 equivalent
  • tert-butyl nitrite (9.90 g, 96.015 mmol, 2.0 equivalents) was added to a mixed solution of styrene (5.549 mL, 48.008 mmol, 1.0 equivalent) in dimethyl sulfoxide (100 mL) and water (50 mL).
  • the reaction solution was stirred at room temperature for 12 hours under nitrogen protection. After the reaction was complete, the reaction solution was diluted with dichloromethane, washed with water and saturated brine in turn, dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography to obtain the title compound (yellow oil, 7.0 g, yield 81%).
  • Step B Methyl 2-(((2-nitro-1-phenylethylidene)amino)oxy)-2-oxoacetate
  • Step C 4-nitro-3-phenylisoxazole-5-carboxylic acid methyl ester
  • Step E 4-amino-2-phenyloxazole-5-carboxylic acid methyl ester
  • Step F Methyl 2-phenyl-4-(6-(trifluoromethyl)picolinamido)oxazole-5-carboxylate
  • 6-(trifluoromethyl)picolinic acid (1.49 g, 7.79 mmol, 10 equivalents) and N-methylimidazole (1.28 g, 15.6 mmol, 20 equivalents) were added to a solution of 4-amino-2-phenyloxazole-5-carboxylic acid methyl ester (170 mg, 0.779 mmol, 1.0 equivalents) in acetonitrile (15 mL).
  • the reaction mixture was stirred at 80 ° C for 5 minutes.
  • N, N, N', N'-tetramethylchloroformamidine hexafluorophosphate (2.19 g, 7.79 mmol, 10 equivalents) was added to the above reaction solution.
  • reaction solution was stirred at 80 ° C for 5 hours. After the reaction was complete, it was cooled to room temperature, poured into ice water, and extracted with ethyl acetate three times. The mixed organic phase was washed with water and saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography to give the title compound (white solid, 200 mg, yield 46%).
  • Step G 2-phenyl-4-(6-(trifluoromethyl)picolinamido)oxazole-5-carboxamide
  • Step B N-(4-cyano-2-phenyloxazol-5-yl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide
  • Step C 2-phenyl-5-(6-(trifluoromethyl)picolinamido)oxazole-4-carboxamide
  • Step B 4-(Benzylthio)-3-nitro-1-phenyl-1H-pyrazole
  • N-chlorosuccinimide 375.3 mg, 2.8 mmol, 2.5 equiv
  • 4-(benzylthio)-3-nitro-1-phenyl-1H-pyrazole 350 mg, 1.125 mmol, 1.0 equiv
  • dichloromethane 5 mL
  • the reaction solution was stirred at room temperature under nitrogen protection for 2 hours. After the reaction was complete, it was concentrated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography to give the title compound (yellow solid, 210 mg, yield 65%).
  • Step E tert-Butyl (3-nitro-1-phenyl-1H-pyrazol-4-yl)sulfonyl)carbamate
  • Step F tert-Butyl (3-amino-1-phenyl-1H-pyrazol-4-yl)sulfonyl)carbamate
  • Zinc powder 159.74 mg, 2.5 mmol, 10 equivalents
  • ammonium chloride 26.14 mg, 0.5 mmol, 2.0 equivalents
  • tert-butyl (3-nitro-1-phenyl-1H-pyrazol-4-yl)sulfonyl)carbamate 90.0 mg, 0.25 mmol, 1.0 equivalent
  • ethanol 5 mL
  • the reaction mixture was stirred at 80°C for 3 hours. After the reaction was completed, the mixture was filtered and the filtrate was concentrated under reduced pressure to obtain the crude title compound (colorless liquid, 70 mg, yield 84%), which was used directly in the next step without purification.
  • Step G tert-Butyl (1-phenyl-3-(6-(trifluoromethyl)picolinamido)-1H-pyrazol-4-yl)sulfonyl)carbamate
  • 6-(Trifluoromethyl)pyridine-2-carboxylic acid (47.44 mg, 0.25 mmol, 1.2 equiv) in dichloromethane (5 HATU (118.0 mg, 0.31 mmol, 1.5 equiv.) and DIEA (80.2 mg, 0.6 mmol, 2.4 equiv.) were added to the 1% 4-thiazolyl-4-yl) sulfonyl) carbamic acid tert-butyl ester (70 mg, 0.21 mmol, 1.0 equiv.) in 2% 4-thiazolyl-4-yl) sulfonyl) carbamate solution. The reaction mixture was stirred at room temperature for 0.5 hours.
  • Step H N-(1-phenyl-4-sulfamoyl-1H-pyrazol-3-yl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide
  • Step A 4-(Methylthio)-3-nitro-1-phenyl-1H-pyrazole
  • Step B Methyl(3-nitro-1-phenylpyrazol-4-yl)(oxo)- ⁇ 6 sulfonamide
  • Step C tert-Butyl (3-nitro-1-phenyl-1H-pyrazol-4-yl)(oxo)- ⁇ 6 -sulfinyl)carbamate
  • Step D tert-Butyl (3-amino-1-phenyl-1H-pyrazol-4-yl)(methyl)(oxo)- ⁇ 6 -sulfinyl)carbamate
  • Zinc powder (169.3 mg, 2.6 mmol, 10.0 equiv) and ammonium chloride (13.8 mg, 0.26 mmol, 1.0 equiv) were added to a solution of tert-butyl (3-nitro-1-phenyl-1H-pyrazol-4-yl)(oxo)- ⁇ 6 -sulfinyl)carbamate (95.0 mg, 0.26 mmol, 1.0 equiv) in tetrahydrofuran (5 mL) and water (5 mL) at room temperature. The reaction mixture was stirred at 80° C. for 3 hours. After the reaction was completed, the mixture was filtered and the filtrate was concentrated under reduced pressure to obtain the crude title compound (yellow solid, 70 mg, crude product), which was used directly in the next step without purification.
  • Step D tert-Butyl (methyl(oxo)(1-phenyl-3-(6-(trifluoromethyl)picolinamido)-1H-pyrazol-4-yl)- ⁇ 6 -sulfinyl)carbamate
  • reaction mixture was stirred at 30°C under nitrogen protection for 2 hours. After the reaction was complete, it was cooled to room temperature, quenched with saturated ammonium chloride solution, and extracted with ethyl acetate three times. The mixed organic phase was then washed with water and saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography to give the title compound (yellow solid, 105 mg, yield 99%).
  • Step F N-(4-(S-methylsulfonylimino)-1-phenyl-1H-pyrazol-3-yl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide
  • Step A Ethyl 3-amino-1-phenyl-1H-pyrazole-4-carboxylate
  • Step B 1-phenyl-3-(6-(trifluoromethyl)picolinamido)-1H-pyrazole-4-carboxylic acid ethyl ester
  • Step C N-(4-(2-hydroxypropan-2-yl)-1-phenyl-1H-pyrazol-3-yl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide
  • reaction solution was diluted with saturated aqueous ammonium chloride solution and extracted three times with ethyl acetate.
  • the mixed organic phase was washed with water and saturated brine in turn, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure.
  • the residue was purified by column chromatography to give the title compound (yellow solid, 240 mg, yield 62%).
  • Step D 1-phenyl-4-(6-(trifluoromethyl)picolinamido)-1H-pyrazole-3-sulfonyl chloride
  • N-(3-(benzylthio)-1-phenyl-1H-pyrazol-4-yl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide (240 mg, 0.528 mmol, 1.0 equivalent) in acetonitrile (3 mL), water (1 mL) and acetic acid (3 mL) was added with N-chlorosuccinimide (564 mg, 4.22 mmol, 8.0 equivalent).
  • the reaction solution was stirred at room temperature under nitrogen protection for 12 hours. After the reaction was complete, it was diluted with ethyl acetate, washed with water and saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography to give the title compound (yellow solid, 220 mg, yield 96%).
  • Step E N-(1-phenyl-3-sulfamoyl-1H-pyrazol-4-yl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide
  • Step B Imino(methyl)(4-nitro-1-phenyl-1H-pyrazol-3-yl)- ⁇ 6 -aminosulfonone
  • Step C (4-amino-1-phenyl-1H-pyrazol-3-yl)(imino)(methyl)- ⁇ 6 -aminosulfonone
  • Step D N-(3-(S-methylsulfonylimino)-1-phenyl-1H-pyrazol-4-yl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide
  • Step B N-(3-bromo-1-phenyl-1H-pyrazol-4-yl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide
  • HATU (220 mg, 0.578 mmol, 1.1 equivalents) and DIEA (204 mg, 1.58 mmol, 3.0 equivalents) were added to a solution of 6-(trifluoromethyl)pyridine-2-carboxylic acid (125 mg, 0.525 mmol, 1.0 equivalents) in N,N-dimethylformamide (5 mL).
  • the reaction mixture was stirred at room temperature for 0.5 hours.
  • 3-Bromo-1-phenyl-1H-pyrazole-4-amine 125 mg, 0.525 mmol, 1.0 equivalents was added to the above reaction solution, and the reaction mixture was stirred at room temperature for 1 hour.
  • reaction solution was diluted with saturated aqueous ammonium chloride solution and extracted with ethyl acetate three times.
  • the mixed organic phase was washed with water and saturated brine in turn, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure.
  • the residue was purified by column chromatography to give the title compound (yellow solid, 180 mg, yield 83%).
  • Zinc powder (85.9 mg, 1.31 mmol, 5.0 equiv.), zinc cyanide (257 mg, 2.19 mmol, 10.0 equiv.) and RuPhos-Pd-G 3 (55 mg, 0.066 mmol, 0.3 equiv.) were added to a solution of N-(3-bromo-1-phenyl-1H-pyrazol-4-yl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide (90 mg, 0.219 mmol, 1.0 equiv.) in N, N -dimethylacetamide (10 mL) at room temperature. The reaction mixture was stirred at 120°C for 12 hours under nitrogen protection.
  • Step A 4-Nitro-1-phenyl-3-vinyl-1H-pyrazole
  • reaction solution was cooled to room temperature, the reaction solution was quenched with water, extracted with ethyl acetate three times, and the mixed organic phase was washed with saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography to obtain the title compound (yellow solid, 1.5 g, yield 93%).
  • Step B 3-(4-nitro-1-phenyl-1H-pyrazol-3-yl)cyclobutan-1-one
  • Trifluoromethanesulfonic anhydride (9.83 g, 34.85 mmol, 3.1 equivalents) was added dropwise to a Schlenk tube containing N,N-dimethylacetamide (1.2 mL, 13.4 mmol, 1.2 equivalents) and 1,2-dichloroethane (30 mL) at room temperature, and the mixture was stirred at room temperature for 10 minutes.
  • reaction solution was cooled to room temperature, extracted with dichloromethane three times, the mixed organic phase was washed with saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography to obtain the title compound (yellow solid, 403 mg, yield 14%).
  • Step D 3-(4-amino-1-phenyl-1H-pyrazol-3-yl)cyclobutan-1-ol
  • Step E N-(3-(3-Hydroxycyclobutyl)-1-phenyl-1H-pyrazol-4-yl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide
  • reaction solution was stirred at room temperature under nitrogen protection for 1 hour. After the reaction was complete, the reaction solution was diluted with ethyl acetate, washed with water and saturated brine in turn, dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by HPLC to give the title compound (white solid, 30 mg, yield 17%).
  • Step E N-(1-phenyl-3-propyl-1H-pyrazol-4-yl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide
  • Step A (E)-4-Nitro-1-phenyl-3-(prop-1-en-1-yl)-1H-pyrazole
  • Step A 4-Nitro-1-phenyl-3-(prop-1-en-2-yl)-1H-pyrazole
  • Step C N-(3-isopropyl-1-phenyl-1H-pyrazol-4-yl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide
  • Step B 3-(tert-Butyl)-1-phenyl-1H-pyrazol-4-amine
  • Step C N-(3-(tert-butyl)-1-phenyl-1H-pyrazol-4-yl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide
  • Step B 3-Cyclopropyl-1-phenyl-1H-pyrazol-4-amine
  • Step C N-(3-cyclopropyl-1-phenyl-1H-pyrazol-4-yl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide
  • Step B 3-cyclobutyl-4-nitro-1-phenyl-1H-pyrazole
  • Step D N-(3-cyclobutyl-1-phenyl-1H-pyrazol-4-yl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide
  • Step B 4-amino-1-phenyl-1H-pyrazol-3-ol
  • 6-(trifluoromethyl)picolinoyl chloride (89 mg, 1.38 mmol, 1.1 equivalent) was added to a solution of 4-amino-1-phenyl-1H-pyrazole-3-ol (220 mg, 1.26 mmol, 1.0 equivalent) and triethylamine (0.698 mL, 5.02 mmol, 4.0 equivalent) in dichloromethane (10 mL).
  • the reaction mixture was stirred at 0°C for 1 hour. After the reaction was complete, the reaction solution was quenched with a saturated sodium carbonate solution and extracted with dichloromethane three times.
  • Step A 4-nitro-1-phenyl-1H-pyrazole-3-carboxylic acid methyl ester
  • Step B 4-amino-1-phenyl-1H-pyrazole-3-carboxylic acid methyl ester
  • Step C 1-phenyl-4-(6-(trifluoromethyl)picolinamido)-1H-pyrazole-3-carboxylic acid methyl ester
  • Step D N-(3-(Hydroxymethyl)-1-phenyl-1H-pyrazol-4-yl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide
  • lithium diisopropylamide (1.0 mL, 1.0 mmol, 2.0 equiv) was slowly added to a solution of 1-phenyl-4-(6-(trifluoromethyl)picolinamido)-1H-pyrazole-3-carboxylic acid methyl ester (200.0 mg, 0.5 mmol, 1.0 equiv) in tetrahydrofuran (3 mL).
  • the reaction solution was stirred at 0°C for 1 hour under nitrogen protection. After the reaction was complete, it was quenched with water (0.2 mL) and 30% aqueous sodium hydroxide solution (0.2 mL), diluted with water, and extracted with ethyl acetate three times.
  • Step A N-(3-Formyl-1-phenyl-1H-pyrazol-4-yl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide
  • the mixed solution was extracted three times with dichloromethane, and the mixed organic phase was washed with water and saturated sodium thiosulfate, dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, and concentrated under reduced pressure to give the crude title compound (white solid, 120.0 mg, yield 75%), which was used directly in the next step without purification.
  • Step B N-(3-(1-hydroxyethyl)-1-phenyl-1H-pyrazol-4-yl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide
  • Step E N-(3-ethoxy-1-phenyl-1H-pyrazol-4-yl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide
  • reaction solution was diluted with ethyl acetate, washed with water and saturated brine in turn, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by HPLC to obtain the title compound (off-white solid, 63 mg, yield 18%).
  • Step B 4-Nitro-1-phenyl-3-(2,2,2-trifluoroethoxy)-1H-pyrazole
  • Step D N-(1-phenyl-3-(2,2,2-trifluoroethoxy)-1H-pyrazol-4-yl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide
  • reaction solution was diluted with ethyl acetate, washed with water and saturated brine in turn, dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by preparative column chromatography to obtain the title compound (white solid, 200 mg, yield 80%).
  • Step D N-(3-isopropoxy-1-phenyl-1H-pyrazol-4-yl)-6-(trifluoromethyl)picolinamide

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Abstract

本发明涉及靶向IRAK蛋白抑制或降解的化合物及其制备方法和在治疗或预防由IRAK蛋白介导的相关疾病中的应用。

Description

靶向IRAK蛋白抑制或降解的化合物及其应用 技术领域
本发明属于药物领域，具体地涉及靶向IRAK蛋白抑制或降解的化合物及其制备方法和在治疗或预防由IRAK蛋白介导的相关疾病中的应用。
背景技术
白介素-1受体相关激酶(IRAK)家族是一类特异性丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，在toll样受体家族(TLRs)和白细胞介素-1受体家族(IL-1R)介导的先天性免疫调节和适应性免疫应答中均具有重要作用。IRAK蛋白家族由IRAK1、IRAK2、IRAK3(IRAK-M)和IRAK4四种同工酶组成，这四种酶均具有相似的结构域，包括一个保守的N端死亡结构域(Death Domain，DD)、一个富含脯氨酸/丝氨酸/苏氨酸的(ProST)结构域、一个激酶或假激酶结构域(Kinase/Pseudokinase Domain，KD)以及除IRAK4外均具有一个长的C末端结构域(C-terminal Domain，CTD)。在机体炎症反应、免疫应答信号转导过程中，活化的TLR/IL-1R通过其受体胞内TIR结构域招募适配蛋白MyD88导致Myddosome组装，这是一种由MyD88、IRAK4和IRAK2组成的多蛋白复合物。在Myddosome复合物中，IRAK4通过反式自磷酸化激活，然后磷酸化激活IRAK1并且促进其从复合物上解离。活化的IRAK1与E3泛素连接酶TNF受体相关因子6(TRAF6)形成复合物并且激活TGFβ激活激酶1-结合蛋白1(TAK1)，后者通过一系列细胞内级联反应最终激活下游NF-κB和MAPK/JNK/p38信号通路，导致促炎性细胞因子的分泌和免疫细胞的增殖分化。在单核细胞和巨噬细胞中，IRAK3通过抑制IRAK4和IRAK1的激活负向调节IRAK信号传导。
目前在感染患者中发现，MYD88、IRAK4和IRAK1的突变揭示了这些蛋白质在宿主防御中的重要作用。研究表明缺失IRAK4或MyD88的常染色体隐性遗传病患者容易受到化脓性细菌感染，但是仍能够抵抗其他类型病原体，包括大多数细菌、病毒、真菌和寄生虫的感染。IRAK4作为TLR家族和IL-1R家族两大信号通路交汇的中枢激酶，其激酶活性是激活TLR/IL-1R下游通路的关键，因此也是多种炎症性疾病的候选靶点。激酶结构域突变的IRAK4在多种临床前炎症疾病模型中表现出保护小鼠的作用，包括脓毒症休克、系统性红斑狼疮、急性肝损伤、心血管疾病和阿尔茨海默病等。
据不完全统计，目前全球在研的IRAK4药物有约40种，多数处于临床早期，尚无靶向IRAK4的药物上市，其中II期临床6个、I/II期临床2个、I期临床10个、临床前25个。在适应症上开发最多的是自身免疫性疾病，包括类风湿关节炎、化脓性汗腺炎、特应 性皮炎、红斑狼疮等；其次是癌症，包括急性髓系白血病、骨髓增生异常综合征和B细胞淋巴瘤等。本领域内进展最快的药物包括：Pfizer开发的IRAK4强效抑制剂PF-06650833，目前已经在风湿性关节炎适应症和化脓性汗腺炎上完成II期临床研究，结果表明PF-06650833对上述适应症均未产生显著的疗效；Curis开发的抑制剂CA-4948，正在多个肿瘤适应症上进行II期临床研究。值得注意的是，Kymera利用靶向蛋白质降解(targeted protein degradation，TPD)技术开发的IRAK4降解剂KT-474已经完成针对化脓性汗腺炎和特应性皮炎的I期临床研究并且显示出强大的抗炎活性和良好的安全性和耐受性。TPD是一种新兴的治疗策略，其通过利用蛋白降解靶向嵌合体(proteolysis-targeting chimera，PROTAC)可以直接靶向一些常规小分子药物难以靶向的蛋白质。PROTAC是由两个配体连接组成的异质双功能分子，一端配体招募并结合靶蛋白(Protein Of Interest，POI)，另一端配体招募并结合E3泛素连接酶。PROTAC通过诱导靶蛋白和E3的结合，通过E3催化将泛素化标签连接至靶蛋白的赖氨酸，泛素化的靶蛋白随后被细胞内的蛋白酶体26S亚基识别并降解。目前由于缺乏可用的结合口袋和合适的化学物质，约80-85％的人类蛋白质组无法成药。与此同时，已成药靶点(诸如EGFR-TKI等)易产生耐药突变，导致药物效果下降。因此，通过蛋白靶向降解使不可成药靶点成为可成药靶点、避免点突变导致的耐药性、进而实现药物开发已成为新药研发的一大热门。相比于传统抑制剂，KT-474作为首款有效的、高选择性的、口服生物可利用的IRAK4降解剂，在抑制TLR/IL-1R信号通路方面具有无可比拟的独特优势。IRAK4主要通过两条途径介导IL-1R/TLR下游信号通路、参与免疫监测：一方面IRAK4具有激酶活性，能够磷酸化下游底物蛋白IRAK1、IRF5/7等；另一方面，IRAK4发挥支架结构作用，参与多聚蛋白复合体myddosome的组装。Vollmer等人发现，针对IRAK4自磷酸化的药理学抑制不能抑制IL-1刺激下的IL-1R细胞内IRAK1和NF-kB/P38/JNK信号通路的激活。Qin和Song的研究发现，在IRAK4缺失的细胞中诱导表达激酶结构域突变的失活型IRAK4蛋白，IRAK4缺失细胞对IL-1作用下的应激反应均获得显著恢复，包括IL-1刺激下的IRAK1磷酸化水平提高及其下游炎症信号通路的激活。传统的小分子抑制剂仅针对激酶活性显示出中等的效力，无法破坏复合物的形成来彻底阻断炎症反应信号的产生，而KT-474能同时阻断激酶活性和支架结构，在研究中显示出更强效的通路抑制和抗炎活性。
仍亟待开发更多靶向IRAK4的抑制剂和降解剂。
发明内容
本发明的目的在于提供靶向IRAK蛋白抑制或降解的化合物及其制备方法和在治疗或预防由IRAK蛋白介导的相关疾病中的应用。
在一个方面，本发明提供了一种式(I)的化合物，或其药用盐、酯、溶剂化物或立体异构体：
其中，
Q1、Q2、Q3、Q4和Q5独立地选自C、CH、CH2、N、NH、S或O；
---表示存在或不存在双键；
环P为芳基或杂芳基；
R1选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、氨基、硝基、氰基、-OR1a、-SR1a、-NR1aR1b、-COR1a、-SOR1a、-SO2R1a、-COOR1a、-CONR1aR1b、-NR1aCOR1b、-OCOR1a、-S(O)(NR1a)R1b、-SONR1aR1b、-SO2NR1aR1b、-NR1aSOR1b、-NR1aSO2R1b、任选取代的烷基、任选取代的烷氧基、任选取代的环烷基和任选取代的杂环基，其中R1a和R1b独立地选自氢、氘、任选取代的烷基、任选取代的环烷基和任选取代的杂环基；
R2选自任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基；
R3选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、氨基、硝基、氰基、-OR3a、-SR3a、-NR3aR3b、-COR3a、-SOR3a、-SO2R3a、-COOR3a、-CONR3aR3b、-NR3aCOR3b、-OCOR3a、-S(O)(NR3a)R3b、-SONR3aR3b、-SO2NR3aR3b、-NR3aSOR3b、-NR3aSO2R3b、任选取代的烷基、任选取代的烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基，其中R3a和R3b独立地选自氢、氘、任选取代的烷基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；并且
n为0、1、2、3、4或5。
在另一个方面，本发明提供了一种式(II)的化合物，或其药用盐、酯、溶剂化物或立 体异构体：
A-L-E(II)
A部分具有以下结构：
其中，
Q1、Q2、Q3、Q4和Q5独立地选自C、CH、CH2、N、NH、S或O；
---表示存在或不存在双键；
环P为芳基或杂芳基；
R1选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、氨基、硝基、氰基、-OR1a、-SR1a、-NR1aR1b、-COR1a、-SOR1a、-SO2R1a、-COOR1a、-CONR1aR1b、-NR1aCOR1b、-OCOR1a、-S(O)(NR1a)R1b、-SONR1aR1b、-SO2NR1aR1b、-NR1aSOR1b、-NR1aSO2R1b、任选取代的烷基、任选取代的烷氧基、任选取代的环烷基和任选取代的杂环基，其中R1a和R1b独立地选自氢、氘、任选取代的烷基、任选取代的环烷基和任选取代的杂环基；
R3选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、氨基、硝基、氰基、-OR3a、-SR3a、-NR3aR3b、-COR3a、-SOR3a、-SO2R3a、-COOR3a、-CONR3aR3b、-NR3aCOR3b、-OCOR3a、-S(O)(NR3a)R3b、-SONR3aR3b、-SO2NR3aR3b、-NR3aSOR3b、-NR3aSO2R3b、任选取代的烷基、任选取代的烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基，其中R3a和R3b独立地选自氢、氘、任选取代的烷基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；并且
n为0、1、2、3、4或5；
R2’选自任选取代的亚环烷基、任选取代的亚杂环基、任选取代的亚芳基、任选取代的亚杂芳基；并且
A部分通过R2’的环原子与L部分相连；
L部分具有以下结构：
-L1-L2-L3-L4-L5-  式(L)
其中：
L1、L3和L5独立地不存在或选自-Rm-、-Rm-Rn-、-Rm-O-Rn-、-Rm-C(O)-Rn-、-Rm-C(O)O-Rn-、-Rm-OC(O)-Rn-、-Rm-NRx-Rn-、-Rm-C(O)NRx-Rn-、-Rm-NRxC(O)-Rn-、-Rm-S(O)-Rn-、-Rm-S(O)NRx-Rn-、-Rm-NRxS(O)-Rn-、-Rm-S(O)2-Rn-、-Rm-S(O)2NRx-Rn-、-Rm-NRxS(O)2-Rn-、-Rm-NRxC(O)NRy-Rn-、-Rm-OC(O)NRx-Rn-、-Rm-NRxC(O)O-Rn-、、-(CH2CH2O)g-或-(OCH2CH2)g-，其中Rm和Rn独立地选自键、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烷氧基、任选取代的亚环烷基或任选取代的亚杂环基，Rx和Ry独立地选自氢、氘、任选取代的烷基、任选取代的环烷基或任选取代的杂环基，并且g为1-20的整数；
L2和L4独立地不存在或选自任选取代的亚环烷基、任选取代的亚杂环基、任选取代的亚芳基或任选取代的亚杂芳基；并且
E部分具有以下结构：

其中RE1选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、氨基、硝基、氰基、任选取代的烷基、任选取代的烷氧基、任选取代的环烷基或任选取代的杂环基，RE2选自氢、氘或卤素，REL1选自键、-CH2-、-NH-、-NCH3-、-O-、-CONH-或-CONCH3-，REL2选自键或-CH2-，并且p为1、2、3、4或5；
RE1a选自-COCH(CH3)OH、-COCH3、-CON(CH3)2、-CO(CH2)2CH(NH2)COOH或-COCH(NH2)(CH2)2COOH，RE2a选自-CH2OCOOC(CH3)3或-CH2OCOC(CH3)3。
在另一个方面，本发明提供了一种治疗或预防由IRAK蛋白介导的疾病的方法，所述方法包括向有需要的患者施用式(I)或式(II)的化合物。
在另一个方面，本发明提供了式(I)或式(II)的化合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗或预防由IRAK蛋白介导的疾病。
具体实施方式
定义
如本文所用，“取代的”是指本文所述的化合物或官能团的所有允许的取代基。在最广泛的意义上，允许的取代基包括有机化合物的无环和环状、支链和非支链、碳环和杂环、芳族和非芳族取代基。示例性的取代基包括但不限于卤素、羟基或含有任何数量碳原子(例如1-20个碳原子)的任何其他有机基团，并且任选地包括线性、支链或环状结构形式的一个或多个杂原子，例如氧、硫或氮基团。代表性的取代基包括氘、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、苯基、取代的苯基、芳基、取代的芳基、杂芳基、 取代的杂芳基、卤素、硝基、羟基、烷氧基、取代的烷氧基、苯氧基、取代的苯氧基、芳氧基、取代的芳氧基、巯基、取代的巯基、烷硫基、取代的烷硫基、苯硫基、取代的苯硫基、芳硫基、取代的芳硫基、氰基、取代的氰基、异氰基、取代的异氰基、羰基、取代的羰基、羧基、取代的羧基、氨基、取代的氨基、酰氨基、取代的酰氨基、磺酰基、取代的磺酰基、磺酸、磷酰基、取代的磷酰基、膦酰基、取代的膦酰基、聚芳基、取代的聚芳基、C3-C20环状基团、取代的C3-C20环状基团、杂环、取代的杂环、氨基酸、聚(乳酸-共-乙醇酸)、肽和多肽基团。这样的烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、苯基、取代的苯基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、卤素、硝基、羟基、烷氧基、取代的烷氧基、苯氧基、取代的苯氧基、芳氧基、取代的芳氧基、巯基、取代的巯基、烷硫基、取代的烷硫基、苯硫基、取代的苯硫基、芳硫基、取代的芳硫基、氰基、取代的氰基、异氰基、取代的异氰基、羰基、取代的羰基、羧基、取代的羧基、氨基、取代的氨基、酰氨基、取代的酰氨基、磺酰基、取代的磺酰基、磺酸、磷酰基、取代的磷酰基、膦酰基、取代的膦酰基、聚芳基、取代的聚芳基、C3-C20环状基团、取代的C3-C20环状基团、杂环、取代的杂环、氨基酸、聚(乳酸-共-乙醇酸)、肽和多肽基团可以进一步被取代。
杂原子例如氮可具有氢取代基和/或满足杂原子化合价的本文所述的有机化合物的任何允许的取代基。
应理解，“取代”或“取代的”包括这样的隐含条件，即此类取代符合被取代原子和取代基的允许价数，并且该取代产生稳定的化合物，即不会自发经历转化如通过重排、环化、消除等转化的化合物。
除非另有专门和明确规定，术语“取代的”是指结构，例如化合物或更大的化合物上的部分，而不管该结构是如何形成的。该结构不限于通过任何特定方法制成的结构。
如本文所用，“芳基”是指C5-C26元芳族、稠合芳族或多芳族环系统。如本文所用，广义定义的“芳基”包括5-、6-、7-、8-、9-、10-、14-、18-和24-元单环或多环芳族基团，例如苯(benzene)、萘(naphthalene)、蒽(anthracene)、菲(phenanthrene)、(chrysene)、芘(pyrene)、心环烯(corannulene)、晕苯(coronene)等。
“芳基”还包括具有两个或更多个环的多环系统，其中两个或更多个碳是两个相邻环(即“稠合环”)共有的，其中至少一个环是芳族的，例如其他环状环或多个环可以是环烷基、环烯基、环炔基、芳基、杂芳基和/或杂环。
术语“取代的芳基”是指芳基，其中一个或多个芳环上的一个或多个氢原子被一个或多个取代基取代，这些取代基包括但不限于氘、卤素、叠氮化物、烷基、芳烷基、烯基、炔 基、环烷基、羟基、烷氧基、羰基(例如酮、醛、羧基、烷氧基羰基、甲酰基或酰基)、甲硅烷基、醚、酯、硫代羰基(例如硫酯、硫代乙酸酯或硫代甲酸酯)、烷氧基、磷酰基、磷酸酯、膦酸酯、次膦酸酯、氨基(或季铵化氨基)、酰氨基、脒、亚胺、氰基、硝基、叠氮基、巯基、亚氨基、烷硫基、硫酸酯、磺酸酯、氨磺酰基、亚砜、磺酰氨基、磺酰基、杂环基、烷芳基、卤代烷基(例如CF3、-CH2-CF3、-CCl3)、-CN、芳基、杂芳基及其组合，所述取代基可以进一步被取代。
“杂环”和“杂环基”可互换使用，并且是指通过含有3-20个环原子(例如3-16、3-14、3-12或3-10个环原子，诸如3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个环原子)的单环或多环(例如双环如螺环、稠环等)的非芳族环状基团，由碳和一至六个(诸如一个、二个、三个或四个)杂原子组成，每个杂原子可以选自氧、硫和氮，并且任选地含有1-3个双键并且任选地被一个或多个取代基取代。根据定义，杂环基不同于杂芳基。杂环的实例包括但不限于哌嗪基、哌啶基、哌啶酮基、4-哌啶酮基、四氢呋喃基、二氢呋喃[2,3-b]四氢呋喃、吗啉基、硫代吗啉基、哌嗪基、哌啶基、哌啶酮基、4-哌啶酮基、胡椒基、二氢吲哚基、吡喃基、四氢吡喃基、吡咯烷基、吡咯啉基、2H-吡咯基、咪唑烷基、咪唑啉基、吡唑烷基、4H-喹啉基、奎宁环基、四氢呋喃基、6H-1,2,5-噻二嗪基、四氢噻吩基、异噁唑烷基、异噻唑烷基、噁唑烷基、噻唑烷基、氮杂环庚基、苯并氮杂环庚三烯。杂环基团可以任选地被如本文所定义的(例如对烷基和芳基等定义)的一个或多个取代基取代。
术语“杂芳基”是指C5-C26元单环或多环芳族环系统或其组合(例如5-24、5-20、5-16、5-12或5-10个环原子，诸如5、6、7、8、9、10、11或12个环原子)，其中一个或多个芳环结构上的一个或多个碳原子已被杂原子取代(例如一至六个，诸如一个、二个、三个或四个杂原子)。合适的杂原子包括但不限于氧、硫和氮。如本文所用，广义定义的“杂芳基”包括5-、6-、7-、8-、9-、10-、14-、18-和24-元单环芳族基团，其可以包括一至四个杂原子，例如吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、噁唑、噻唑、三唑、四唑、吡唑、吡啶、吡嗪、哒嗪、嘧啶、噁二唑基、噻二唑基、三嗪基、异噁唑基、异噻唑基、氮杂基、二氮杂基等。杂芳基团也可称为“芳基杂环”或“杂芳族化合物”。“杂芳基”还包括具有两个或更多个环的多环系统，其中两个或更多个碳是两个相邻环共有的(例如“稠合环”)，其中至少一个环是杂芳族的，其他环或多个环可以是环烷基、环烯基、环炔基、芳基、杂环、杂芳环或其组合。杂芳环的实例包括但不限于苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并硫代呋喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并噁唑啉基、苯并噻唑基、苯并三唑基、苯并四唑基、苯并异噁唑基、苯并异噻唑基、苯并咪唑啉基、苯并噁二唑基、苯并噻二唑基、苯并喹啉基、苯并异喹啉基、 咔唑基、4aH-咔唑基、咔啉基、苯并二氢吡喃基、苯并吡喃基、肉啉基(cinnolinyl)、十氢喹啉基、2H,6H-1,5,2-二噻嗪基、呋喃基、呋咱基(furazanyl)、咪唑烷基、咪唑啉基、咪唑基、1H-吲唑基、吲哚烯基(indolenyl)、二氢吲哚基、吲哚啉嗪基(indolizinyl)、吲哚基(indolyl)、3H-吲哚基、isatinoyl、异苯并呋喃基、isochromanyl、异吲唑基、异二氢吲哚基、异吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异噁唑基、亚甲二氧基苯基、萘啶基、八氢异喹啉基、1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基、1,3,4-噁二唑基、噁唑烷基、噁唑基、羟吲哚基、嘧啶基、菲啶基、菲咯啉基、吩嗪基、吩噻嗪基、酚黄素基(phenoxathinyl)、吩噁嗪基、酞嗪基、蝶啶基、嘌呤基、吡嗪基、吡唑烷基、吡唑啉基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并噁唑、吡啶并咪唑、吡啶并噻唑、吡唑并嘧啶、吡啶基(pyridinyl)、吡啶基(pyridyl)、嘧啶基、吡咯烷基、吡咯啉基、吡咯基、吡咯并哒嗪、喹唑啉基、喹啉基、喹喔啉基、四氢异喹啉基、四氢喹啉基、四唑基、1,2,3-噻二唑基、1,2,4-噻二唑基、1,2,5-噻二唑基、1,3,4-噻二唑基、噻蒽基、噻唑基、噻吩基、噻吩并噻唑基、噻吩并噁唑基、噻吩并咪唑基、苯硫基和呫吨基。杂芳基的一个或多个环可以被取代，如本文所定义的。
术语“取代的杂芳基”是指其中一个或多个杂芳基环上的一个或多个氢原子被一个或多个取代基取代的杂芳基，所述取代基包括但不限于氘、卤素、叠氮化物、烷基、芳烷基、烯基、炔基、环烷基、羟基、烷氧基、羰基(例如酮、醛、羧基、烷氧羰基、甲酰基或酰基)、甲硅烷基、醚、酯、硫代羰基(例如硫酯、硫代乙酸酯或硫代甲酸酯)、烷氧基、磷酰基、磷酸酯、膦酸酯、次膦酸酯、氨基(或季铵化氨基)、酰氨基、脒、亚胺、氰基、硝基、叠氮基、巯基、亚氨基、烷硫基、硫酸酯、磺酸酯、氨磺酰基、亚砜、磺酰氨基、磺酰基、杂环基、烷芳基、卤代烷基(例如CF3、-CH2-CF3、-CCl3)、-CN、芳基、杂芳基及其组合，所述取代基可以进一步被取代。
如本文所用，“烷基”是指直链或支链的饱和脂肪族基团。其可以包括1-30、1-26、1-20、1-16、1-12、1-8或1-6个碳原子。烷基例如可以是甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、4-甲基戊基、新戊基、正己基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1,2,2-三甲基丙基等。在整个说明书、实施例和权利要求中使用的术语“烷基”(或“低级烷基”)旨在包括“未取代的烷基”和“取代的烷基”，后者是指一个或多个取代基替换烃链的一个或多个碳上的氢。此类取代基包括但不限于氘、卤素、羟基、羰基(例如羧基、烷氧基羰基、甲酰基或酰基)、硫代羰基(例如硫酯、硫代乙酸酯或硫代甲酸酯)、烷氧基、磷酰基、磷酸酯、膦酸酯、次膦酸酯、氨基、酰氨基、脒、亚胺、氰基、硝基、叠氮基、巯基、烷硫基、硫酸酯、磺酸酯、氨磺酰基、 亚砜、磺酰氨基、磺酰基、环烷基、杂环基、芳烷基或芳族或杂芳族部分，所述取代基可以进一步被取代。
除非另外指定碳原子数，否则本文所用的“低级烷基”是指如上定义的烷基，但在其主链结构中具有1至10个碳原子，更优选1至6个碳原子。
如本文所用的，术语“环烷基”是指饱和非芳族单环或多环环烃基团。其可以具有3-30、3-26、3-20、3-16、3-12、3-8或3-6个碳原子，诸如环丙基、环丁基、环戊基或环己基。
“烷基”可以包括在烃基的一个或多个碳原子处的一个或多个取代。合适的取代基包括但不限于卤素，例如氟、氯、溴或碘；羟基；-NRR’，其中R和R’独立地为氢、烷基、环烷基、芳基或杂芳基，并且其中氮原子任选地被季铵化；-SR，其中R是氢、烷基、环烷基、芳基或杂芳基；-CN；-NO2；-COOH；羧酸盐；-COR、-COOR或CON(R)2，其中R是氢、烷基或芳基；叠氮化物、芳烷基、烷氧基、亚氨基、膦酸酯、次膦酸酯、甲硅烷基、醚、磺酰基、磺酰氨基、杂环基、芳族或杂芳族部分、卤代烷基(例如-CF3、-CH2-CF3、-CCl3)；CN；-NCOCOCH2CH2；NCOCOCH；-NCS；及其组合。
本领域技术人员将理解，如果合适，烃链上被取代的部分本身可以被取代。例如，取代烷基的取代基可包括氘、卤素、羟基、巯基、硝基、硫醇、氨基、叠氮基、亚氨基、酰氨基、磷酰基(包括膦酸酯和次膦酸酯)、磺酰基(包括硫酸酯、磺酰氨基、氨磺酰基、亚砜和磺酸酯)，和甲硅烷基，以及醚、烷硫基、羰基(包括酮、醛、羧酸盐和酯)、卤代烷基、-CN等。环烷基、杂环基、芳基、杂芳基等可以以相同方式被取代。
如本文所用，术语“卤素”是指氟、氯、溴或碘。
如本文所用，术语“羟基”是指-OH基团。
如本文所用，术语“氨基”是指-NH2基团。
如本文所用，术语“氰基”是指-CN基团。
如本文所用，术语“硝基”是指-NO2基团。
如本文所用，术语“羰基”是指-COR基团(R为氢或烷基)，特别是-CHO基团。
如本文所用，术语“亚烷基”等是指相应基团等(例如烷基)中的两个氢被取代的二价基团。
如本文所用，术语“立体异构体”是指由通过相同键键接的相同原子构成但具有不同的三维结构的化合物，所述三维结构是不可互换的。“立体异构体”包括对映异构体、非对映异构体以及根据绝对立体化学定义的其他立体异构形式。本发明意在包括所有这样的 可能异构体，以及它们的外消旋和光学纯形式。
如本文所用，术语“药用盐”是指所公开的化合物的衍生物，其中母体化合物通过将现有酸或碱部分转化为其盐形式而进行改性。药用盐的实例包括，但不限于，与无机酸诸如盐酸、氢溴酸、磷酸和硫酸的盐，以及与有机羧酸和磺酸诸如乙酸、三氟乙酸、丙酸、马来酸、富马酸、苹果酸、柠檬酸、酒石酸、乳酸、苯甲酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸、萘磺酸和萘二磺酸的盐；或者与常规碱的盐，诸如碱金属盐(例如钠盐和钾盐)、碱土金属盐(例如钙盐和镁盐)、来源于氨和有机胺(例如二乙胺、三乙胺、乙基二异丙基胺、普鲁卡因、二苄基胺、N-甲基吗啉、二氢松香胺(dihydroabiethylamine)、甲基哌啶、L-精氨酸、肌酸、胆碱、L-赖氨酸、乙二胺、N,N-二苄基乙二胺(benzathine)、乙醇胺、葡甲胺和氨丁三醇)的铵盐。
如本文所用，术语“溶剂化物”是指与溶剂分子配位形成的配合物。当溶剂分子为水时，溶剂化物是水合物。
如本文所述的化合物可以被同位素标记，即，在其中的一个或多个原子被具有不同原子质量或质量数的原子替代。这样的同位素标记的化合物被认为在本发明的范围内。可以掺入化合物的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯和碘的同位素，诸如但不限于分别为2H、3H、11C、13C、14C、13N、15N、15O、17O、18O、31P、32P、35S、18F、36Cl、123I和125I。
本发明提供了一种式(I)的化合物，或其药用盐、酯、溶剂化物或立体异构体：
其中，
Q1、Q2、Q3、Q4和Q5独立地选自C、CH、CH2、N、NH、S或O；
---表示存在或不存在双键；
环P为芳基或杂芳基；
R1选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、氨基、硝基、氰基、-OR1a、-SR1a、-NR1aR1b、 -COR1a、-SOR1a、-SO2R1a、-COOR1a、-CONR1aR1b、-NR1aCOR1b、-OCOR1a、-S(O)(NR1a)R1b、-SONR1aR1b、-SO2NR1aR1b、-NR1aSOR1b、-NR1aSO2R1b、任选取代的烷基、任选取代的烷氧基、任选取代的环烷基和任选取代的杂环基，其中R1a和R1b独立地选自氢、氘、任选取代的烷基、任选取代的环烷基和任选取代的杂环基；
R2选自任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基；
R3选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、氨基、硝基、氰基、-OR3a、-SR3a、-NR3aR3b、-COR3a、-SOR3a、-SO2R3a、-COOR3a、-CONR3aR3b、-NR3aCOR3b、-OCOR3a、-S(O)(NR3a)R3b、-SONR3aR3b、-SO2NR3aR3b、-NR3aSOR3b、-NR3aSO2R3b、任选取代的烷基、任选取代的烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基，其中R3a和R3b独立地选自氢、氘、任选取代的烷基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；并且
n为0、1、2、3、4或5。
在一些实施方案中，Q1-Q5所在的环结构选自以下结构：
在一些实施方案中，环P为6-10元芳基或杂芳基。在一些实施方案中，环P为6元芳基或杂芳基。在一些实施方案中，环P为9-10元双环杂芳基。
在一些实施方案中，环P选自苯基、吡啶基、吡嗪基、哒嗪基、嘧啶基、三嗪基、吡唑并嘧啶基(例如衍生自结构的吡唑并[2,3-A]嘧啶基)或吡咯并哒嗪基(例如衍生自结构的吡咯并[1,2-B]哒嗪基)。
在一些实施方案中，R1选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、氨基、硝基、氰基、-OR1a、 -SR1a、-NR1aR1b、-COR1a、-SOR1a、-SO2R1a、-COOR1a、-CONR1aR1b、-NR1aCOR1b、-OCOR1a、-S(O)(NR1a)R1b、-SONR1aR1b、-SO2NR1aR1b、-NR1aSOR1b、-NR1aSO2R1b、任选取代的C1-12烷基(例如C1-6烷基)、任选取代的C1-12烷氧基(例如C1-6烷氧基)、任选取代的C3-12环烷基(例如C3-6环烷基)和任选取代的3-12元杂环基(例如3-6元杂环基)，其中R1a和R1b独立地选自氢、氘、任选取代的C1-12烷基(例如C1-6烷基)、任选取代的C3-12环烷基(例如C3-6环烷基)和任选取代的3-12元杂环基(例如3-6元杂环基)。
在一些实施方案中，R1a和R1b独立地选自：氢；氘；未被取代的烷基、环烷基或杂环基；以及被独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的烷基、环烷基或杂环基：氘；卤素；羟基；巯基；氨基；氰基；硝基；醛基；羧基；-OCO-烷基；-OCOO-烷基；和任选地被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、醛基、羧基、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷基、卤代环烷基、杂环基和/或卤代杂环基的一个或多个取代基取代的烷基、烷氧基、环烷基或杂环基。
在一些实施方案中，R1选自未被取代的烷基、烷氧基、环烷基或杂环基；以及被独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的烷基、烷氧基、环烷基或杂环基：氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、-OR1c、-SR1c、-NR1cR1d、-COR1c、-SOR1c、-SO2R1c、-COOR1c、-CONR1cR1d、-NR1cCOR1d、-OCOR1c、-S(O)(NR1c)R1d、-SONR1cR1d、-SO2NR1cR1d、-NR1cSOR1d、-NR1cSO2R1d、任选取代的烷基、任选取代的烷氧基、任选取代的环烷基和任选取代的杂环基，其中R1c和R1d独立地选自氢、氘、任选取代的烷基、任选取代的环烷基和任选取代的杂环基。
在一些实施方案中，R1选自被独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的烷基、烷氧基、环烷基或杂环基：
氘；卤素；羟基；巯基；氨基；氰基；硝基；
-OR1c、-SR1c、-NR1cR1d、-COR1c、-SOR1c、-SO2R1c、-COOR1c、-CONR1cR1d、-NR1cCOR1d、-OCOR1c、-S(O)(NR1c)R1d、-SONR1cR1d、-SO2NR1cR1d、-NR1cSOR1d、-NR1cSO2R1d，其中R1c和R1d独立地选自：氢；氘；未被取代的烷基、环烷基或杂环基；以及被独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的烷基、环烷基或杂环基：氘；卤素；羟基；巯基；氨基；氰基；硝基；醛基；羧基；和任选地被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、醛基、羧基、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷基、卤代环烷基、杂环基和/或卤代杂环基的一个或多个取代基取代的烷基、烷氧基、环烷基或杂环基；以及
任选地被独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的烷基、烷氧基、环烷基或杂 环基：氘；卤素；羟基；巯基；氨基；氰基；硝基；醛基；羧基；烷基；烷氧基；环烷基；杂环基；和被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、醛基和/或羧基的一个或多个取代基取代的烷基、烷氧基、环烷基或杂环基。
在一些实施方案中，R1选自氢；氘；卤素；羟基；巯基；氨基；硝基；氰基；烷基；被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、醛基和/或羧基的一个或多个取代基取代的烷基；烷氧基；被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、醛基和/或羧基的一个或多个取代基取代的烷氧基；环烷基；被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、醛基、羧基、-OR1c和/或-NR1cR1d的一个或多个取代基取代的环烷基；杂环基；被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、醛基、羧基、-OR1c和/或-NR1cR1d的一个或多个取代基取代的杂环基；以及-OR1a、-SR1a、-NR1aR1b、-COR1a、-SOR1a、-SO2R1a、-COOR1a、-CONR1aR1b、-NR1aCOR1b、-OCOR1a、-S(O)(NR1a)R1b、-SONR1aR1b、-SO2NR1aR1b、-NR1aSOR1b和-NR1aSO2R1b，其中R1a和R1b独立地选自氢、氘、烷基、环烷基、杂环基以及被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、醛基和/或羧基的一个或多个取代基取代的烷基、环烷基或杂环基，并且R1c和R1d独立地选自氢、氘、烷基、环烷基、杂环基以及被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、醛基和/或羧基的一个或多个取代基取代的烷基、环烷基或杂环基。
在一些实施方案中，R1选自氢、羟基、氰基、烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷基、被氰基、-OR1c和/或-NR1cR1d取代的环烷基、杂环基、-NR1aR1b、-COR1a、-CONR1aR1b、-S(O)(NR1a)R1b和-SO2NR1aR1b，其中R1a和R1b独立地选自氢、烷基、环烷基和被选自氘、卤素、氰基、-OCO-烷基和/或-OCOO-烷基的一个或多个取代基取代的烷基或环烷基，并且R1c和R1d独立地选自氢和烷基。
在一些实施方案中，R1选自羟基、氰基、甲基、乙基、丙基(例如正丙基和仲丙基)、叔丁基、二氟甲基(-CHF2)、羟甲基、羟乙基、羟丙基(例如羟异丙基)、甲氧基、乙氧基、异丙氧基、叔丁氧基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、环丙基、氮杂环丁基、环丁基、被氰基、羟基或-NHCH3取代的环丁基、-S(O)(NH)CH3、-SO2NR1aR1b、-NR1aR1b、-COR1a、-CONR1aR1b，其中R1a和R1b独立地选自氢、甲基、异丙基、-CH2CN、-CD3、-CH2CF3、二氟甲基(-CHF2)、-CF3、环丙基、二氟环丙基、-CH2OCOOC(CH3)3、-CH2OCOC(CH3)3。
在一些实施方案中，R2选自任选取代的C3-12环烷基、任选取代的3-12元杂环基、任选取代的6-10元芳基、任选取代的5-10元杂芳基。
在一些实施方案中，R2选自任选取代的环丙基、环丁基、环戊基或环己基、双环[1.1.1] 戊基(例如)、双环[2.2.2]辛基(例如)和立方烷基(例如)。
在一些实施方案中，R2选自任选取代的含有一至六个(例如一个、两个、三个或四个)独立地选自N、O和S的杂原子的3-12元杂环基。
在一些实施方案中，R2选自任选取代的四氢吡咯基、哌啶基、哌嗪基、氮杂环丁基、(1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸基)和(7-氮杂螺[3.5]壬基)。
在一些实施方案中，R2选自任选取代的苯基。
在一些实施方案中，R2选自任选取代的5-6元杂芳基。在一些实施方案中，R2选自任选取代的吡啶基、吡嗪基、哒嗪基、嘧啶基或三嗪基。
在一些实施方案中，R2选自未被取代的环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；以及被独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的环烷基、杂环基、芳基或杂芳基：氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、-OR2a、-SR2a、-NR2aR2b、-COR2a、-SOR2a、-SO2R2a、-COOR2a、-CONR2aR2b、-NR2aCOR2b、-OCOR2a、-S(O)(NR2a)R2b、-SONR2aR2b、-SO2NR2aR2b、-NR2aSOR2b、-NR2aSO2R2b、任选取代的烷基、任选取代的烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基，其中R2a和R2b独立地选自氢、氘、任选取代的烷基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基。
在一些实施方案中，R2a和R2b独立地选自：氢；氘；未被取代的烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基；以及被独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基：氘；卤素；羟基；巯基；氨基；氰基；硝基；醛基；羧基；和任选地被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、醛基、羧基、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷基、卤代环烷基、杂环基和/或卤代杂环基的一个或多个取代基取代的烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基。
在一些实施方案中，R2选自被独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的环烷基、杂环基、芳基或杂芳基：
氘；卤素；羟基；巯基；氨基；氰基；硝基；
-OR2a、-SR2a、-NR2aR2b、-COR2a、-SOR2a、-SO2R2a、-COOR2a、-CONR2aR2b、-NR2aCOR2b、 -OCOR2a、-S(O)(NR2a)R2b、-SONR2aR2b、-SO2NR2aR2b、-NR2aSOR2b、-NR2aSO2R2b，其中R2a和R2b独立地选自氢、氘、任选取代的烷基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；以及
任选地被独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基：氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、-OR2c、-SR2c、-NR2cR2d、-COR2c、-SOR2c、-SO2R2c、-COOR2c、-CONR2cR2d、-NR2cCOR2d、-OCOR2c、-S(O)(NR2c)R2d、-SONR2cR2d、-SO2NR2cR2d、-NR2cSOR2d、-NR2cSO2R2d、烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基以及被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、醛基和/或羧基的一个或多个取代基取代的烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，其中R2c和R2d独立地选自氢；氘；未被取代的烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；以及被独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基：氘；卤素；羟基；巯基；氨基；氰基；硝基；醛基；羧基；和任选地被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、醛基、羧基、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷基、卤代环烷基、杂环基和/或卤代杂环基的一个或多个取代基取代的烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基。
在一些实施方案中，R2选自：
环烷基；杂环基；芳基；杂芳基；
被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、硝基、氰基、-OR2a、-NR2aR2b、-COR2a、-COOR2a、-CONR2aR2b和/或-NR2aCOR2b的一个或多个取代基取代的环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，其中R2a和R2b独立地选自氢、烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基以及被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、醛基、羧基、烷基和/或卤代烷基的一个或多个取代基取代的烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；
被选自以下各项的一个或多个取代基取代的环烷基、杂环基、芳基或杂芳基：被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、-OR2c、-NR2cR2d、-COR2c、-COOR2c、-CONR2cR2d和/或-NR2cCOR2d的一个或多个取代基取代的烷基、环烷基或杂环基，其中R2c和R2d独立地选自氢、烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基以及被氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、醛基、羧基、烷基和/或卤代烷基的一个或多个取代基取代的烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；
被选自以下各项的一个或多个取代基取代的环烷基、杂环基、芳基或杂芳基：烷基；环烷基；杂环基；以及被任选地被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、醛基、 羧基、烷基和/或卤代烷基的一个或多个取代基取代的烷基、环烷基和/或杂环基取代的烷基、环烷基或杂环基。
在一些实施方案中，R2选自：环烷基；杂环基；芳基；杂芳基；以及被独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的环烷基、杂环基、芳基、杂芳基：卤素、-OR2a、-NR2aR2b、-COR2a、-COOR2a、-CONR2aR2b、-NR2aCOR2b、烷基、环烷基、杂环基以及被选自卤素、-OR2c、-NR2cR2d、-COR2c、-COOR2c、-CONR2cR2d、-NR2cCOR2d和/或烷基的一个或多个取代基取代的烷基、环烷基或杂环基，其中R2a和R2b独立地选自氢、烷基、环烷基、杂环基、芳基以及被以下取代基取代的烷基：被烷基取代的环烷基或杂环基，并且R2c和R2d独立地选自氢、烷基、环烷基、杂环基、芳基以及被以下取代基取代的烷基：被烷基取代的环烷基或杂环基。
在一些实施方案中，R2选自苯基；吡啶基；吡嗪基；哒嗪基；嘧啶基；哌啶基；环丁基、环己基；氮杂环丁基；1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸基；7-氮杂螺[3.5]壬基；被选自氟、溴、-OR2a、-NR2aR2b、-COR2a、-COOR2a、-CONR2aR2b、-NR2aCOR2b和/或哌嗪基的一个或多个取代基取代的苯基、吡啶基、吡嗪基、哒嗪基、嘧啶基、哌啶基、环丁基、环己基，其中R2a和R2b选自氢、甲基、叔丁基、哌啶基和被甲基哌啶基取代的甲基；被选自以下各项的一个或多个取代基取代的苯基：被选自甲基、-OR2c、-NR2cR2d、-COR2c、-COOR2c、-CONR2cR2d和/或-NR2cCOR2d的一个或多个取代基取代的甲基或哌嗪基，其中R2c和R2d独立地选自氢、甲基、苯基或被甲基哌啶基取代的甲基。
在一些实施方案中，R3选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、氨基、硝基、氰基、-OR3a、-SR3a、-NR3aR3b、-COR3a、-SOR3a、-SO2R3a、-COOR3a、-CONR3aR3b、-NR3aCOR3b、-OCOR3a、-S(O)(NR3a)R3b、-SONR3aR3b、-SO2NR3aR3b、-NR3aSOR3b、-NR3aSO2R3b、任选取代的C1-12烷基(例如C1-6烷基)、任选取代的C1-12烷氧基(例如C1-6烷氧基)、任选取代的C3-12环烷基(例如C3-6环烷基)、任选取代的3-12元杂环基(例如3-10元杂环基)、任选取代的6-10元芳基(例如苯基)和任选取代的5-10元杂芳基(例如5-6元杂芳基)，其中R3a和R3b独立地选自氢、氘、任选取代的C1-12烷基(例如C1-6烷基)、任选取代的C3-12环烷基(例如C3-6环烷基)、任选取代的3-12元杂环基(例如3-10元杂环基)、任选取代的6-10元芳基(例如苯基)和任选取代的5-10元杂芳基(例如5-6元杂芳基)。
在一些实施方案中，R3a和R3b独立地选自：氢；氘；未被取代的烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；以及被独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基：氘；卤素；羟基；巯基；氨基；氰基；硝基；醛基；羧基；和任 选地被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、醛基、羧基、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷基、卤代环烷基、杂环基和/或卤代杂环基的一个或多个取代基取代的烷基、烷氧基、环烷基或杂环基。
在一些实施方案中，R3选自未被取代的烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；以及被独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基：氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、＝O、＝S、-OR3c、-SR3c、-NR3cR3d、-COR3c、-SOR3c、-SO2R3c、-COOR3c、-CONR3cR3d、-NR3cCOR3d、-OCOR3c、-S(O)(NR3c)R3d、-SONR3cR3d、-SO2NR3cR3d、-NR3cSOR3d、-NR3cSO2R3d、任选取代的烷基、任选取代的烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的芳基或任选取代的杂芳基，其中R3c和R3d独立地选自氢、氘、任选取代的烷基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基。
在一些实施方案中，R3选自被独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基：
氘；卤素；羟基；巯基；氨基；氰基；硝基；＝O；＝S；
-OR3c、-SR3c、-NR3cR3d、-COR3c、-SOR3c、-SO2R3c、-COOR3c、-CONR3cR3d、-NR3cCOR3d、-OCOR3c、-S(O)(NR3c)R3d、-SONR3cR3d、-SO2NR3cR3d、-NR3cSOR3d、-NR3cSO2R3d，其中R3c和R3d独立地选自氢；氘；未被取代的烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；以及被独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基：氘；卤素；羟基；巯基；氨基；氰基；硝基；醛基；羧基；和任选地被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、醛基、羧基、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷基、卤代环烷基、杂环基或卤代杂环基的一个或多个取代基取代的烷基、烷氧基、环烷基或杂环基；以及
任选地被独立地选自氘；卤素；羟基；巯基；氨基；氰基；硝基；醛基；羧基；＝O；＝S；-OR3e、-SR3e、-NR3eR3f、-COR3e、-SOR3e、-SO2R3e、-COOR3e、-CONR3eR3f、-NR3eCOR3f、-OCOR3e、-S(O)(NR3e)R3f、-SONR3eR3f、-SO2NR3eR3f、-NR3eSOR3f、-NR3eSO2R3f，其中R3e和R3f独立地选自氢、氘、烷基、卤代烷基、环烷基、卤代环烷基、杂环基和卤代杂环基；烷基；烷氧基；环烷基；杂环基；和被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、醛基和/或羧基的一个或多个取代基取代的烷基、烷氧基、环烷基或杂环基的一个或多个取代基取代的烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基。
在一些实施方案中，R3选自:
氢；氘；卤素；羟基；巯基；氨基；硝基；氰基；
-OR3a、-SR3a、-NR3aR3b、-COR3a、-SOR3a、-SO2R3a、-COOR3a、-CONR3aR3b、-NR3aCOR3b、-OCOR3a、-S(O)(NR3a)R3b、-SONR3aR3b、-SO2NR3aR3b、-NR3aSOR3b、-NR3aSO2R3b，其中R3a和R3b独立地选自氢和烷基；
被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、-OR3c、-SR3c、-NR3cR3d、-COR3c、-SOR3c、-SO2R3c、-COOR3c、-CONR3cR3d、-NR3cCOR3d、-OCOR3c、-S(O)(NR3c)R3d、-SONR3cR3d、-SO2NR3cR3d、-NR3cSOR3d和/或-NR3cSO2R3d的一个或多个取代基取代的烷基，其中R3c和R3d独立地选自氢和烷基；
被选自以下各项的一个或多个取代基取代的烷基：被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、＝O、＝S、-OR3e、-SR3e、-NR3eR3f、-COR3e、-SOR3e、-SO2R3e、-COOR3e、-CONR3eR3f、-NR3eCOR3f、-OCOR3e、-S(O)(NR3e)R3f、-SONR3eR3f、-SO2NR3eR3f、-NR3eSOR3f、-NR3eSO2R3f和/或烷基的一个或多个取代基取代的杂环基，其中R3e和R3f独立地选自氢和烷基；
杂环基；
被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、＝O、＝S、-OR3c、-SR3c、-NR3cR3d、-COR3c、-SOR3c、-SO2R3c、-COOR3c、-CONR3cR3d、-NR3cCOR3d、-OCOR3c、-S(O)(NR3c)R3d、-SONR3cR3d、-SO2NR3cR3d、-NR3cSOR3d、-NR3cSO2R3d和/或烷基的一个或多个取代基取代的杂环基；
被选自以下各项的一个或多个取代基取代的杂环基：被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、-OR3e、-SR3e、-NR3eR3f、-COR3e、-SOR3e、-SO2R3e、-COOR3e、-CONR3eR3f、-NR3eCOR3f、-OCOR3e、-S(O)(NR3e)R3f、-SONR3eR3f、-SO2NR3eR3f、-NR3eSOR3f和/或-NR3eSO2R3f的一个或多个取代基取代的烷基；
杂芳基；
被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、-OR3c、-SR3c、-NR3cR3d、-COR3c、-SOR3c、-SO2R3c、-COOR3c、-CONR3cR3d、-NR3cCOR3d、-OCOR3c、-S(O)(NR3c)R3d、-SONR3cR3d、-SO2NR3cR3d、-NR3cSOR3d、-NR3cSO2R3d和/或烷基的一个或多个取代基取代的杂芳基；以及
被选自以下各项的一个或多个取代基取代的杂芳基：被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、-OR3e、-SR3e、-NR3eR3f、-COR3e、-SOR3e、-SO2R3e、-COOR3e、-CONR3eR3f、-NR3eCOR3f、-OCOR3e、-S(O)(NR3e)R3f、-SONR3eR3f、-SO2NR3eR3f、-NR3eSOR3f和/或 -NR3eSO2R3f的一个或多个取代基取代的烷基；
其中R3a、R3b、R3c、R3d、R3e和R3f独立地选自氢和烷基。
在一些实施方案中，R3选自氢；氘；卤素；羟基；巯基；氨基；硝基；氰基；-OR3a、-NR3aR3a、-CONR3aR3b；被选自卤素、-OR3c、-NR3cR3d和/或-CONR3cR3d的一个或多个取代基取代的烷基；被选自以下各项的一个或多个取代基取代的烷基：被选自卤素、＝O、＝S、-OR3e、-NR3eR3f、-CONR3eR3f和/或烷基的一个或多个取代基取代的杂环基；杂环基；被选自卤素、＝O、＝S、-OR3c、-NR3cR3d、-CONR3cR3d和/或烷基的一个或多个取代基取代的杂环基；被选自以下各项的一个或多个取代基取代的杂环基：被选自卤素、-OR3e、-NR3eR3f和/或-CONR3eR3f的一个或多个取代基取代的烷基；杂芳基；被选自卤素、-OR3c、-NR3cR3d、-CONR3cR3d和/或烷基的一个或多个取代基取代的杂芳基；被选自以下各项的一个或多个取代基取代的杂芳基：被选自卤素、-OR3e、-NR3eR3f和/或-CONR3eR3f的一个或多个取代基取代的烷基；
其中R3a、R3b、R3c、R3d、R3e和R3f独立地选自氢和烷基。
在一些实施方案中，R3选自：硝基；-CONH2；三氟甲基；二氟乙基；
被以下取代基取代的甲基：任选地被选自＝O、＝S、烷基(例如甲基)和/或取代烷基(例如二氟甲基、羟甲基、氨基甲基或二甲氨基甲基)的一个或多个取代基取代的四氢嘧啶基、三氮杂环戊基、吗啡啉基、咪唑烷基、八氢吡咯并[3,4-B][1,4]噁嗪基、2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚基、
四氢嘧啶基；三氮杂环戊基；吗啡啉基；咪唑烷基；八氢吡咯并[3,4-B][1,4]噁嗪基；2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚基；
被选自＝O、＝S、烷基(例如甲基)和/或取代烷基(例如二氟甲基、羟甲基、氨基甲基或二甲氨基甲基)的一个或多个取代基取代的以下基团：四氢嘧啶基、吗啡啉基、咪唑烷基、三氮杂环戊基、八氢吡咯并[3,4-B][1,4]噁嗪基、2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚基、 以及
吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、噻二唑基和被氨基取代的噻二唑。
在一些实施方案中，R3选自以下结构：
在一些实施方案中，当存在R3取代基时，R3取代基可以在环P与分子其余部分的连接位置的邻位、间位或对位(例如间位)处取代。
在一些实施方案中，本发明的式(I)的化合物具有式(III)：
其中Q3和Q4所在的环结构选自以下结构：
其中式(III)中环P、R1、R2和R3与式(I)中的定义相同。
在一些实施方案中，本发明涉及一种式(III)的化合物，或其药用盐、酯、溶剂化物或立体异构体：
其中，
Q3和Q4所在的环结构选自以下结构：
环P为吡啶基、吡唑并嘧啶基或吡咯并哒嗪基；
R1选自-OR1a、-COR1a、-CONR1aR1b、-S(O)(NR1a)R1b、-SO2NR1aR1b、任选取代的烷基，其中R1a和R1b独立地选自氢、氘、任选取代的烷基和任选取代的环烷基；
R2选自任选取代的环烷基、任选取代的杂环基以及任选取代的苯基、吡啶基和嘧啶基；
R3选自氰基、任选取代的烷基和任选取代的杂芳基。
在一些实施方案中，R1选自被独立地选自卤素和羟基的一个或多个取代基取代的烷基(例如甲基、乙基、丙基(例如异丙基))：
在一些实施方案中，R1a和R1b独立地选自：氢；氘；烷基(例如甲基、乙基、丙基(例如异丙基))；环烷基(例如环丙基)；以及被独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的烷基(例如甲基、乙基、丙基(例如异丙基))和环烷基(例如环丙基)：氘、卤素(例如氟)、羟基、巯基、氨基、氰基和硝基。
在一些实施方案中，R1选自-CONH2、羟异丙基、羟甲基、羟乙基、甲氧基、二氟甲基、-CONH-(环丙基)、-SO2NH2、-S(O)(NH)CH3、-OCH2CF3、-COCH2CF3、-COCH3、-COCD2H、-COCF3、-COCHF2、-CONHCH3、-CONHCH(CH3)2、-SO2NHCH3、-SO2NHCH(CH3)2、-CONH-(二氟环丙基)。
在一些实施方案中，R2选自任选取代的环丁基、环戊基、环己基、双环[1.1.1]戊基或双环[2.2.2]辛基；任选取代的哌啶基、氮杂环丁基、氮杂环戊基或1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸基或7-氮杂螺[3.5]壬基；任选取代的苯基、吡啶基或嘧啶基。
在一些实施方案中，R2选自未被取代的环烷基、杂环基、苯基、吡啶基；以及被独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的环烷基、杂环基、苯基、吡啶基：氘、卤素 (例如氟或溴)、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、-OR2a、-NR2aR2b、-COR2a、-COOR2a、-CONR2aR2b、-NR2aCOR2b、-OCOR2a、任选取代的烷基和任选取代的杂环基，其中R2a和R2b独立地选自氢、氘、任选取代的烷基和任选取代的杂环基。
在一些实施方案中，R2a和R2b独立地选自氢、氘、烷基(例如甲基)、被卤素取代的烷基、杂环基(例如哌嗪基)、被烷基取代的杂环基。
在一些实施方案中，R2选自被独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的环烷基、杂环基、苯基、吡啶基：
烷基；
杂环基；
被选自-OR2c、-NR2cR2d、-COR2c、-COOR2c、-CONR2cR2d和/或-NR2cCOR2d的一个或多个取代基取代的烷基(例如甲基)或杂环基(例如哌嗪基)，其中R2c和R2d独立地选自氢、氘、烷基(例如甲基)、苯基；
被选自烷基(例如甲基)的一个或多个取代基取代的杂环基(例如哌嗪基)。
在一些实施方案中，R2选自苯基；以及被独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的苯基：氘；卤素(例如氟或溴)；-OR2a、-NR2aR2b、-COR2a、-COOR2a、-CONR2aR2b、-NR2aCOR2b、-OCOR2a，其中R2a和R2b独立地选自氢、氘、烷基(例如甲基)和杂环基(例如哌嗪基)；烷基(例如甲基)、杂环基(例如哌嗪基)和被独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的烷基(例如甲基)或杂环基(例如哌嗪基)：-OR2c、-NR2cR2d、-COR2c、-COOR2c、-CONR2cR2d和/或-NR2cCOR2d，其中R2c和R2d独立地选自氢、氘、烷基(例如甲基)、苯基。
在一些实施方案中，R2选自苯基；以及被独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的苯基：氟、溴、羟基、甲氧基、氨基、-NHCH3、-N(CH3)2、-NHCOCH3、-COOH、-CONHCH3、-CON(CH3)2、-CO-(N-哌嗪基)、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2NH2、-CH2NHCH3、-CH2N(CH3)2、-CH2NHCOCH3、-CH2NCH3COCH3、哌嗪基、4-甲基哌嗪基、4-乙酰基哌嗪基、4-苯甲酰基哌嗪基。
在一些实施方案中，R3选自被卤素(例如氟)取代的烷基(例如甲基)，诸如三氟甲基。
在一些实施方案中，R3选自含有一个或多个氮环原子的5元杂芳基。
在一些实施方案中，R3选自：
在一些实施方案中，环P为吡啶基，并且R3选自-CF3。
在一些实施方案中，环P为吡啶基或吡唑并嘧啶基，并且R3选自
在一些实施方案中，环P为吡咯并哒嗪基，并且R3为氰基。
在一些实施方案中，环P为吡啶基，R1为-CONH2，R2为任选取代的苯基，并且R3选自-CF3。
在一些实施方案中，环P为吡啶基，R2为任选取代的苯基，并且R3选自：
在一些实施方案中，环P为吡啶基，R1选自-CONH2、羟异丙基、羟甲基、羟乙基、甲氧基、二氟甲基、-CONH-(环丙基)、-SO2NH2、-S(O)(NH)CH3、-OCH2CF3、-COCH2CF3、-COCH3、-COCD2H、-COCF3、-COCHF2、-CONHCH3、-CONHCH(CH3)2、-SO2NHCH3、-SO2NHCH(CH3)2、-CONH-(二氟环丙基)，R2为苯基，并且R3选自：
本发明还提供了一种式(II)的化合物，或其药用盐、酯、溶剂化物或立体异构体：
A-L-E(II)
A部分具有以下结构：
其中，
Q1、Q2、Q3、Q4和Q5独立地选自C、CH、CH2、N、NH、S或O；
---表示存在或不存在双键；
环P为芳基或杂芳基；
R1选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、氨基、硝基、氰基、-OR1a、-SR1a、-NR1aR1b、-COR1a、-SOR1a、-SO2R1a、-COOR1a、-CONR1aR1b、-NR1aCOR1b、-OCOR1a、-S(O)(NR1a)R1b、-SONR1aR1b、-SO2NR1aR1b、-NR1aSOR1b、-NR1aSO2R1b、任选取代的烷基、任选取代的烷氧基、任选取代的环烷基和任选取代的杂环基，其中R1a和R1b独立地选自氢、氘、任选取代的烷基、任选取代的环烷基和任选取代的杂环基；
R3选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、氨基、硝基、氰基、-OR3a、-SR3a、-NR3aR3b、-COR3a、-SOR3a、-SO2R3a、-COOR3a、-CONR3aR3b、-NR3aCOR3b、-OCOR3a、-S(O)(NR3a)R3b、-SONR3aR3b、-SO2NR3aR3b、-NR3aSOR3b、-NR3aSO2R3b、任选取代的烷基、任选取代的烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基，其中R3a和R3b独立地选自氢、氘、任选取代的烷基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；
n为0、1、2、3、4或5；
R2’选自任选取代的亚环烷基、任选取代的亚杂环基、任选取代的亚芳基、任选取代的亚杂芳基；并且
A部分通过R2’的环原子与L部分相连；
L部分具有以下结构：
-L1-L2-L3-L4-L5-  式(L)
其中：
L1、L3和L5独立地不存在或选自-Rm-、-Rm-Rn-、-Rm-O-Rn-、-Rm-C(O)-Rn-、-Rm-C(O)O-Rn-、-Rm-OC(O)-Rn-、-Rm-NRx-Rn-、-Rm-C(O)NRx-Rn-、-Rm-NRxC(O)-Rn-、-Rm-S(O)-Rn-、-Rm-S(O)NRx-Rn-、-Rm-NRxS(O)-Rn-、-Rm-S(O)2-Rn-、-Rm-S(O)2NRx-Rn-、-Rm-NRxS(O)2-Rn-、-Rm-NRxC(O)NRy-Rn-、-Rm-OC(O)NRx-Rn-、-Rm-NRxC(O)O-Rn-、、-(CH2CH2O)g-或-(OCH2CH2)g-，其中Rm和Rn独立地选自键、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烷氧基、任选取代的亚环烷基或任选取代的亚杂环基，Rx和Ry独立地选自氢、氘、任选取代的烷基、任选取代的环烷基或任选取代的杂环基，并且g为1-20的整数；
L2和L4独立地不存在或选自任选取代的亚环烷基、任选取代的亚杂环基、任选取代的亚芳基或任选取代的亚杂芳基；并且
E部分具有以下结构：

其中RE1选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、氨基、硝基、氰基、任选取代的烷基、任选取代的烷氧基、任选取代的环烷基或任选取代的杂环基，RE2选自氢、氘或卤素，REL1选自键、-CH2-、-NH-、-NCH3-、-O-、-CONH-或-CONCH3-，REL2选自键或-CH2-，并且p为1、2、3、4或5。
RE1a选自-COCH(CH3)OH、-COCH3、-CON(CH3)2、-CO(CH2)2CH(NH2)COOH或-COCH(NH2)(CH2)2COOH，RE2a选自-CH2OCOOC(CH3)3或-CH2OCOC(CH3)3。
A部分
在一些实施方案中，式(II)中的Q1-Q5及其所在的环、环P、R1和R3与式(I)(和式(III))中的定义相同。
在一些实施方案中，A部分具有以下结构：

在一些实施方案中，R2’选自任选取代的C3-12亚环烷基、任选取代的3-12元亚杂环基、任选取代的6-10元亚芳基、任选取代的5-10元亚杂芳基。
在一些实施方案中，R2’选自任选取代的亚环丙基、亚环丁基、亚环戊基或亚环己基、双环[1.1.1]亚戊基(例如)、双环[2.2.2]亚辛基(例如)和亚立方烷基(例如)。
在一些实施方案中，R2’选自任选取代的含有一至六个(例如一个、两个、三个或四个)独立地选自N、O和S的杂原子的3-12元亚杂环基。
在一些实施方案中，R2’选自任选取代的亚四氢吡咯基、亚哌啶基、亚哌嗪基、亚氮杂环丁基、1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]亚癸基和7-氮杂螺[3.5]亚壬基。
在一些实施方案中，R2’选自任选取代的亚苯基。
在一些实施方案中，R2’选自任选取代的5-6元亚杂芳基。在一些实施方案中，R2’选自任选取代的亚吡啶基、亚吡嗪基、亚哒嗪基、亚嘧啶基或亚三嗪基。
在一些实施方案中，R2’选自任选地被选自以下各项的一个或多个取代基取代的亚环烷基、亚杂环基、亚芳基或亚杂芳基：氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、醛基、羧基、烷基、烷氧基以及被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、醛基和/或羧基的一个或多个取代基取代的烷基或烷氧基。
在一些实施方案中，R2’选自亚苯基、亚吡啶基、亚哌啶基、亚环己基、双环[1.1.1]亚戊基、双环[2.2.2]亚辛基或亚立方烷基。
L部分
在一些实施方案中，Rm和Rn独立地选自键、任选取代的C1-20亚烷基(例如C1-12亚烷基或C1-6亚烷基)、任选取代的C1-20亚烷氧基(例如C1-12亚烷氧基或C1-6亚烷氧基)、任 选取代的C3-6亚环烷基或任选取代的3-6元亚杂环基。
在一些实施方案中，Rx和Ry独立地选自氢、氘、任选取代的C1-20烷基(例如C1-12烷基或C1-6烷基)、任选取代的C3-6环烷基或任选取代的3-6元杂环基。
在一些实施方案中，g为1-20的整数，或1-16的整数，或1-12的整数，或1-8的整数，或1-6的整数，或1、2、3、4、5。
在一些实施方案中，Rm和Rn独立地选自键、亚烷基、亚烷氧基、亚环烷基、亚杂环基和被选自以下各项的一个或多个取代基取代的亚烷基、亚烷氧基、亚环烷基或亚杂环基：氘、卤素、羟基、巯基、氨基、硝基、氰基、烷基、烷氧基和被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、醛基和/或羧基的一个或多个取代基取代的烷基或烷氧基。
在一些实施方案中，Rx和Ry独立地选自氢、氘、烷基、环烷基、杂环基和被选自以下各项的一个或多个取代基取代的烷基、环烷基或杂环基：氘、卤素、羟基、巯基、氨基、硝基、氰基、烷基、烷氧基和被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、醛基和/或羧基的一个或多个取代基取代的烷基或烷氧基。
在一些实施方案中，Rm和Rn独立地选自键、亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚丁基、亚环丙基和氟代C1-4亚烷基。
在一些实施方案中，Rx和Ry独立地选自氢、甲基或环丙基。
在一些实施方案中，L1、L3和L5独立地选自：

其中h为1、2、3、4或5。
在一些实施方案中，L2和L4独立地不存在或选自任选取代的C3-12亚环烷基、任选取代的3-12元亚杂环基、任选取代的6-10元亚芳基或任选取代的5-10元亚杂芳基。
在一些实施方案中，L2和L4独立地选自亚环烷基、亚杂环基、亚芳基、亚杂芳基以及被选自以下各项的一个或多个取代基取代的亚环烷基、亚杂环基、亚芳基或亚杂芳基： 氘、卤素、羟基、巯基、氨基、硝基、氰基、＝O、＝S、烷基、烷氧基和被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、醛基和/或羧基的一个或多个取代基取代的烷基或烷氧基。
在一些实施方案中，L2和L4独立地选自亚环烷基或卤代亚环烷基(例如氟代亚环烷基)。
在一些实施方案中，L2和L4独立地选自：
(例如)
在一些实施方案中，L2和L4独立地选自含有一至六个(优选地一个、两个、三个或四个)独立地选自N、O和S的杂原子的3-12元亚杂环基，其任选地被选自卤素(例如氟)、＝O和/或烷基(例如甲基)的一个或多个取代基取代。
在一些实施方案中，L2和L4独立地选自：
(例如)(例如) (例如)(例如)
在一些实施方案中，L2和L4独立地选自亚苯基，其任选地被选自卤素(例如氟)和/或烷基(例如甲基)的一个或多个取代基取代。
在一些实施方案中，L2和L4独立地选自
在一些实施方案中，L2和L4独立地选自含有一个、两个、三个或四个独立地选自N、O和S的杂原子的5-6元亚杂芳基，其任选地被选自卤素(例如氟)和/或烷基(例如甲基)的 一个或多个取代基取代。在一些实施方案中，L2和L4独立地选自亚吡啶基、亚吡嗪基、亚哒嗪基、亚嘧啶基、亚三嗪基、亚吡咯基、亚咪唑基、亚吡唑基、亚三唑基、亚四唑基、亚噁唑基、亚噻唑基、亚噁二唑基或亚噻二唑基，其任选地被选自卤素(例如氟)和/或烷基(例如甲基)的一个或多个取代基取代。
在一些实施方案中，L2和L4独立地选自：
在一些实施方案中，L部分中L2、L3和L4的组合(存在或不存在L1和/或L5)或者L部分选自：















在一些实施方案中，L部分选自：




一般而言，对于L部分以及L部分中的各个基团，左侧的连接点与来自A部分的其余分子部分或以朝向A部分的方向连接；右侧的连接点与来自E部分的其余分子部分或以朝向E部分的方向连接。
E部分
在一些实施方案中，E部分具有以下结构：
在一些实施方案中，RE1选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、氨基、硝基、氰基、任选 取代的C1-20烷基(例如C1-12烷基或C1-6烷基)、任选取代的C1-20烷氧基(例如C1-12烷氧基或C1-6烷氧基)、任选取代的C3-6环烷基或任选取代的3-6元杂环基，RE2选自氢、氘或卤素，REL1选自键、-CH2-、-NH-、-NCH3-、-O-、-CONH-或-CONCH3-，REL2选自键或-CH2-，并且p为1、2、3、4或5。
在一些实施方案中，RE1选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、氨基、硝基、氰基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环基以及被选自氘、卤素、羟基、巯基、氨基、硝基、氰基、烷基、卤代烷基、烷氧基和/或卤代烷氧基的一个或多个取代基取代的烷基、烷氧基、环烷基或杂环基。
在一些实施方案中，RE1选自氢、氘、氟、氯、羟基、甲基、甲氧基、乙氧基、羟甲基、羟丙基(例如羟异丙基)、三氟甲基或三氟甲氧基。
在一些实施方案中，RE2选自氢、氘或氟。
在一些实施方案中，RE1a选自-COCH(CH3)OH、-COCH3、-CON(CH3)2、-CO(CH2)2CH(NH2)COOH或-COCH(NH2)(CH2)2COOH。
在一些实施方案中，RE2a选自-CH2OCOOC(CH3)3或-CH2OCOC(CH3)3。
在一些实施方案中，E部分选自以下结构：
(例如 ) (例如) (例如)(例如)(例如)(例如)(例如) (例如)(例如)(例如)(例如)(例如)(例如)(例如)(例如)(例如) (例如)(例如)(例如)(例如)(例如)(例如)(例如)
在一些实施方案中，式(II)的化合物的A部分具有以下结构：
其中Q3和Q4所在的环结构选自以下结构：
其中式(II)中环P、R1、R2’和R3的定义与上文所述定义相同。
在一些实施方案中，本发明涉及一种式(II)的化合物，或其药用盐、酯、溶剂化物或立体异构体：
A-L-E  (II)
A部分具有以下结构：
其中Q3和Q4所在的环结构选自以下结构：
环P为吡啶基、吡唑并嘧啶基或吡咯并哒嗪基；
R1选自-OR1a、-COR1a、-CONR1aR1b、-S(O)(NR1a)R1b、-SO2NR1aR1b、任选取代的烷基，其中R1a和R1b独立地选自氢、氘、任选取代的烷基和任选取代的环烷基；
R2’选自任选取代的亚环烷基、任选取代的亚杂环基、任选取代的亚苯基和亚吡啶基；
R3选自氰基、任选取代的烷基和任选取代的杂芳基；
并且L和E的定义与上文所述(例如式(II))相同。
在一些实施方案中，式(A’)中环P、R1和R3的定义与上文所述定义(例如式(III))相同。
在一些实施方案中，R2’选自任选地被选自以下各项的一个或多个取代基取代的亚环烷基、亚杂环基、亚苯基和亚吡啶基：氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、醛基、羧基、烷基。
在一些实施方案中，R2’选自任选取代的亚环丁基、亚环戊基、亚环己基、亚双环[1.1.1]戊基或亚双环[2.2.2]辛基；任选取代的亚哌啶基、亚氮杂环丁基、亚氮杂环戊基、1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]亚癸基或7-氮杂螺[3.5]亚壬基；任选取代的亚苯基或亚吡啶基。
在一些实施方案中，L1、L3和L5独立地不存在或选自-Rm-、-Rm-O-Rn-、-Rm-C(O)-Rn-、-Rm-C(O)O-Rn-、-Rm-OC(O)-Rn-、-Rm-NRx-Rn-、-Rm-C(O)NRx-Rn-、-Rm-NRxC(O)-Rn-或其中Rm和Rn独立地选自键或任选取代的亚烷基，Rx独立地选自氢、氘或任选取代的烷基。
在一些实施方案中，Rm和Rn独立地选自键或任选地被卤素(例如氟)取代的亚烷基(例如C1-4亚烷基，诸如亚甲基或亚乙基)。
在一些实施方案中，Rx独立地选自氢、氘或烷基(例如C1-4亚烷基，诸如亚甲基和亚乙基)。
在一些实施方案中，L2选自任选取代的亚杂环基。
在一些实施方案中，L2和L4独立地选自含有一个或两个氮杂原子的3-12元亚杂环基，其任选地被选自卤素(例如氟)和/或烷基(例如甲基)的一个或多个取代基取代。
在一些实施方案中，L2和L4独立地选自：
在一些实施方案中，L1不存在或选自-Rm-、-Rm-O-Rn-、-Rm-C(O)-Rn-、-Rm-C(O)O-Rn-、-Rm-OC(O)-Rn-、-Rm-NRx-Rn-、-Rm-C(O)NRx-Rn-或-Rm-NRxC(O)-Rn-，其中Rm和Rn独立地选自键或亚烷基(例如亚甲基或亚乙基)，Rx独立地选自氢、氘或烷基(例如甲基)。
在一些实施方案中，L1不存在或选自-CH2-、-CH2CH2-、-CH2O-、-C(O)-、-CH2C(O)-、-CH2NH-、-NHCH2-、-CH2N(CH3)-、-C(O)NH-。
在一些实施方案中，L2和L4独立地选自：
在一些实施方案中，L3不存在或选自-Rm-、-Rm-O-Rn-、-Rm-C(O)-Rn-、-Rm-C(O)O-Rn-、-Rm-OC(O)-Rn-、-Rm-NRx-Rn-、-Rm-C(O)NRx-Rn-或-Rm-NRxC(O)-Rn-，其中Rm和Rn独立地选自键或亚烷基(例如亚甲基或亚乙基)，Rx独立地选自氢、氘或烷基(例如甲基)。
在一些实施方案中，L3不存在或选自-CH2-、-CH2CH2-、-OCH2-、-C(O)-、-C(O)CH2-、-C(O)O-、-NH-、-NHCH2-、-N(CH3)-。
在一些实施方案中，L5不存在或选自-Rm-、-Rm-C(O)-Rn-、-Rm-NRx-Rn-或其中Rm和Rn独立地选自键或亚烷基(例如亚甲基或亚乙基)，Rx独立地选自氢、氘或烷基(例如甲基)。
在一些实施方案中，L5不存在或选自-CH2-、-C(O)-、-NH-或
在一些实施方案中，L1不存在或选自-CH2-、-CH2CH2-、-C(O)-、-NHCH2-、-CH2N(CH3)-、-CH2O-、-C(O)NH-、-CH2C(O)-、-CH2NH-；
L2不存在并且L4选自以下基团，或者L2选自以下基团并且L4不存在：
L3不存在或选自-CH2-、-CH2CH2-或-C(O)-；
L5不存在或选自-CH2-、-NH-、-C(O)-。
在一些实施方案中，L1选自-CH2-、-C(O)-；
L2选自
L3不存在或选自-OCH2-、-CH2CH2-、-NHCH2-；
L4不存在；
L5选自
在一些实施方案中，L1不存在或选自-CH2-、-C(O)-、-CH2O-；
L2选自
L3不存在或选自-CH2-、-CH2CH2-、-NHCH2-、-C(O)O-、-OCH2-、-NH-、-N(CH3)-、-C(O)-、-C(O)CH2-；
L4选自
L5不存在或选自-C(O)-、-CH2-。
在一些实施方案中，L1选自不存在
L2选自
L3不存在或选自-CH2-、-CH2CH2-、-C(O)-；
L4选自
L5不存在或选自-C(O)-。
在一些实施方案中，L1选自-CH2-、-CH2CH2-、-C(O)-、-C(O)NH-、-CH2NH-、-CH2C(O)-、-CH2O-、-CH2N(CH3)-；
L2选自
L3不存在或选自-CH2-、-C(O)-；
L4不存在或选自
L5不存在。
在L的具体实施方案中，L选自：



在一些实施方案中，E部分具有以下结构：
在一些实施方案中，RE1选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、氨基、硝基、氰基、烷基、烷氧基，RE2选自氢、氘或卤素，REL1选自键、-CH2-、-NH-、-NCH3-、-O-、-CONH-或-CONCH3-，REL2选自键、-CH2-或亚环丙基，并且p为1或2。
在一些实施方案中，RE1选自氢、氘、卤素(例如氟)和甲氧基。
在一些实施方案中，RE2选自氢或氘。
在一些实施方案中，E部分具有以下结构：

其中RE1选自氢、氘、卤素(例如氟)、甲氧基，RE2选自氢、氘或卤素，REL1选自键、-CH2-、-NH-、-NCH3-、-O-、-CONH-或-CONCH3-，REL2选自键、-CH2-，并且p为1或2。
在一些实施方案中，E部分具有以下结构：
在E的具体实施方案中，E选自：
在一些实施方案中，式(II)的化合物具有以下结构：A-L-E(II)，其中
A部分具有式(A’)的结构，其中
Q3和Q4所在的环结构选自：
环P为吡啶基；
R1选自-CONH2、羟异丙基、二氟甲基、-CONH-(环丙基)；
R2’选自亚苯基、亚环己基、双环[1.1.1]亚戊基；
R3选自-CF3。
L部分具有以下结构：-L1-L2-L3-L4-L5-  式(L)
其中L1不存在或选自-CH2-、-C(O)-、-CH2O-；
L2选自
L3不存在或选自-CH2-、-CH2CH2-、-NHCH2-、-C(O)O-、-OCH2-、-NH-、-N(CH3)-、-C(O)-、-C(O)CH2-；
L4选自
L5不存在或选自-C(O)-、-CH2-；或者
具体地，其中L1选自不存在；L2选自L3不存在或选自-CH2-、-CH2CH2-、-C(O)-；L4选自 L5不存在或选自-C(O)-。
E部分具有以下结构：
其中RE1选自氢、氘、卤素(例如氟)、甲氧基，RE2选自氢、氘或卤素，REL1选自键、-CH2-、-NH-、-NCH3-、-O-、-CONH-或-CONCH3-，REL2选自键、-CH2-，并且p为1或2；或者
具体地，E选自：
在一些实施方案中，式(II)的化合物具有以下结构：A-L-E(II)，其中
A部分具有以下结构：
L部分具有以下结构：-L1-L2-L3-L4-L5-  式(L)
其中L1不存在或选自-CH2-、-CH2CH2-、-C(O)-、-NHCH2-、-CH2N(CH3)-、-CH2O-、-C(O)NH-、-CH2C(O)-、-CH2NH-；
L2不存在并且L4选自以下基团，或者L2选自以下基团并且L4不存在：
L3不存在或选自-CH2-、-CH2CH2-或-C(O)-；
L5不存在或选自-CH2-、-NH-、-C(O)-。
E选自以下结构：在一些实施方案中，式(II)的化合物具有以下结构：A-L-E(II)，其中A部分具有以下结构：L部分具有以下结构：-L1-L2-L3-L4-L5-  式(L)
其中L1选自-CH2-、-C(O)-；
L2选自
L3不存在或选自-OCH2-、-CH2CH2-、-NHCH2-；
L4不存在；
L5选自
E选自以下结构：
在一些实施方案中，式(II)的化合物具有以下结构：A-L-E(II)，其中
A部分具有以下结构：
L部分具有以下结构：-L1-L2-L3-L4-L5-  式(L)
其中L1不存在或选自-CH2-、-C(O)-、-CH2O-；
L2选自
L3不存在或选自-CH2-、-CH2CH2-、-NHCH2-、-C(O)O-、-OCH2-、-NH-、-N(CH3)-、-C(O)-、-C(O)CH2-；
L4选自
L5不存在或选自-C(O)-、-CH2-
E选自以下结构：
在一些实施方案中，式(II)的化合物具有以下结构：A-L-E(II)，其中
A部分具有以下结构：
L部分具有以下结构：-L1-L2-L3-L4-L5-  式(L)
其中L1选自-CH2-、-CH2CH2-、-C(O)-、-C(O)NH-、-CH2NH-、-CH2C(O)-、-CH2O-、-CH2N(CH3)-
L2选自
L3不存在或选自-CH2-、-C(O)-
L4不存在或选自
L5不存在。
E选自以下结构：
在一些实施方案中，式I的化合物选自：
A1、A2、A3、A4、A5、A6、A7、A8、A9、A10、A11、A12、A13、A14、A15、A16、A17、A18、A19、A20、A21、A22、A23、A24、A25、A26、A27、A28、A29、A30、A31、A32、A33、A34、A35、A36、A37、A38、A39、A40、A41、A42、A43、A44、A45、A46、A47、A48、A49、A50、A51、A52、A53、A54、A55、A56、A57、A58、A59、A60、A61、A62、A63、A64、A65、A66、A67、A68、A69、A70、A71、A72、A73、A74、A75、A76、A77、A78、A79、A80、A81、A82、A83、A84、A85、A86、A87、A88、A89、A90、A91、A92、A93、A94、A95、A96、A97、A98、A99、A100、A101、A102、A103、A104、A105、A106、A107、A108、A229、A230、A231、A232、A233、A234、A235、A236、A237、A238、A239、A240、A241、A242、A243、A244、A245、A246、A247、A248、A249、A250、A251、A252、A253、A254、A255、A256、A257、A258、A259、A260、A261、A262、A263、A264、A265、A266、A267、A268、A269、A270、A271、A272、A273、A274、A275、A276、A277、A278、A279、A280、A281、A282、A283、A284、A285、A286、A287、A288、A289、A290、A291、A292、A293、A294、A295、A296、A297、A455、A456、A457、A458、A459、A460、A461、A462、A463、A464、A465、A466、A467、A468、A469、A470、A471、A472、A473。
在一些实施方案中，式(II)的化合物选自：
A109、A110、A111、A112、A113、A114、A115、A116、A117、A118、A119、A120、A121、A122、A123、A124、A125、A126、A127、A128、A129、A130、A131、A132、A133、A134、A135、A136、A137、A138、A139、A140、A141、A142、A143、A144、A145、A146、A147、A148、A149、A150、A151、A152、A153、A154、A155、A156、A157、A158、A159、A160、A161、A162、A163、A164、A165、A166、A167、A168、A169、A170、A171、A172、A173、A174、A175、A176、A177、A178、A179、A180、A181、A182、A183、A184、A185、A186、A187、A188、A189、A190、A191、A192、A193、A194、A195、A196、A197、A198、A199、A200、A201、A202、A203、A204、 A205、A206、A207、A208、A209、A210、A211、A212、A213、A214、A215、A216、A217、A218、A219、A220、A221、A222、A223、A224、A225、A226、A227、A228、A298、A299、A300、A301、A302、A303、A304、A305、A307、A308、A309、A310、A311、A312、A313、A314、A315、A316、A317、A318、A319、A320、A321、A322、A324、A325、A326、A327、A328、A329、A330、A331、A332、A333、A334、A335、A336、A337、A338、A339、A340、A341、A343、A348、A349、A350、A351、A352、A353、A354、A355、A356、A357、A358、A359、A360、A361、A362、A363、A364、A365、A366、A367、A368、A369、A370、A371、A372、A373、A374、A377、A378、A379、A380、A383、A384、A385、A386、A387、A388、A389、A390、A391、A392、A393、A394、A395、A396、A397、A398、A399、A400、A401、A402、A403、A404、A405、A406、A407、A408、A409、A410、A411、A412、A413、A414、A415、A416、A417、A418、A419、A420、A421、A422、A423、A424、A425、A426、A427、A428、A429、A430、A431、A432、A433、A434、A435、A436、A437、A438、A439、A440、A441、A442、A443、A444、A445、A446、A447、A448、A449、A450、A451、A452、A453、A454。
本发明还提供一种药物组合物，其包含本发明的化合物或其药用盐、酯、溶剂化物或立体异构体，以及药学上可接受的辅料。
本发明提供了一种治疗或预防由IRAK蛋白介导的疾病的方法，所述方法包括向有需要的患者施用式(I)或式(II)的化合物或本发明的组合物。
本发明提供了式(I)或式(II)的化合物或本发明的组合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗或预防由IRAK蛋白介导的疾病。
在一些实施方案中，由IRAK蛋白介导的疾病选自：脑癌、肾癌、肝癌、肾上腺癌、膀胱癌、乳癌、胃癌、卵巢癌、结肠癌、直肠癌、前列腺癌、胰腺癌、肺癌、阴道癌、宫颈癌、睾丸癌、泌尿生殖道癌、食管癌、喉癌、皮肤癌、骨癌、甲状腺癌、肉瘤、间皮瘤、神经胶质母细胞瘤、神经母细胞瘤、头颈癌、腺瘤、腺癌、黑色素瘤、淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、浆细胞瘤或血管内大B细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、伯基特淋巴瘤(Burkitt lymphoma)、急性髓系白血病(AML)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、骨髓增生异常综合征(MDS)、多发性骨髓瘤、阿尔茨海默症、帕金森氏病、肌肉萎缩性侧索硬化、亨廷顿病、大脑缺血或损伤、低氧血症、癫痫病、代谢综合症、分解代谢综合症、高血压、1型糖尿病、2型糖尿病、肥胖、痛风、高胆固醇血症、 高甘油三酯血症、脂代谢异常、心脏病、慢性心脏衰竭、心肥大、心肌炎、眼病、眼过敏、结膜炎、干眼症、结膜炎、白内障、青光眼、视网膜疾病、内分泌性眼病、鼻部疾病、鼻窦炎、过敏性鼻炎、病毒性心肌炎、自身免疫性血液病、溶血性贫血、再生障碍性贫血、纯红细胞贫血、特发性血小板减少、重症肌无力、史蒂芬-约翰逊综合症、胃肠病、胃炎、肠炎、结肠炎、直肠炎、肠易激综合症、克罗恩病、坏死性小肠结肠炎、炎症性肠病、小肠结肠炎、与胃肠道感染相关的炎症(包括艰难梭菌感染)、溃疡性结肠病、肺部疾病、肺炎、急性肺损伤、急性呼吸窘迫综合症、肺透明膜病、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、囊肿性纤维化、酸诱发的肺损伤、肺动脉高压、哮喘、过敏、细支气管炎、支气管炎、间质性肺纤维化、间质性肺病、肾脏疾病、肾小球疾病、慢性肾脏疾病、糖尿病肾脏疾病、肾炎、肾小球肾炎、钩端螺旋体肾病、免疫球蛋白A肾病、肾纤维化、肾盂肾炎、肝脏疾病、肝炎、慢性肝炎、酒精性肝病、酒精性脂肪肝、酒精性肝炎、非酒精性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、关节炎、全身性幼年型特发性关节炎、慢性痛风性关节炎、牛皮藓性关节炎、类风湿性关节炎、幼年型类风湿性关节炎、多发性软骨炎、其他炎性疾病、皮肤型红斑狼疮(CLE)、系统性红斑狼疮(SLE)、狼疮性肾炎、特应性皮炎、化脓性汗腺炎、银屑病、多发性硬化症、硬皮病、牛皮藓、白癜风、干燥综合征(Sjogren's syndrome)、葡萄膜炎、器官移植或移植物抗宿主疾病、血管炎、膀胱炎、慢性肉芽肿性疾病、肌肉萎缩、胰腺炎、遗传性周期性发热综合症、过敏反应、全身性过敏反应、多发性神经病、包涵体肌炎、甲状腺炎、阿狄森氏病(Addison's disease)、阑尾炎、滑囊炎、子宫颈炎、胆管炎、胆囊炎、慢性移植排斥反应、泪腺炎、皮炎、皮肌炎、多肌炎、脑炎、心内膜炎、子宫内膜炎、附睾炎、筋膜炎、纤维组织炎、喉炎、乳腺炎、脑膜炎、脊髓炎、肌炎、肝纤维化、心脏纤维化、卵巢炎、睾丸炎、骨炎、耳炎、腮腺炎、心包炎、腹膜炎、咽炎、胸膜炎、静脉炎、前列腺炎、输卵管炎、口腔炎、关节膜炎、扁桃腺炎、阴道炎、外阴炎、斑秃、多形性红斑、庖疹样皮炎、硬化病、白斑病、荨麻疹、天庖疮、隐热蛋白相关周期综合症、莱姆病(Lyme Disease)、盆腔炎、急性和慢性组织损伤。
具体实施方式
实施例
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或者按照制造厂商所建议的条件。
制备例1.化合物A1的合成
取化合物A1-0(10g，54.013mmol，1当量)溶于150ml甲醇溶液中，冰浴下滴加二氯亚砜(8ml，110.145mmol，2当量)，然后室温搅拌过夜。检测反应完成，旋蒸除去溶剂，得到化合物A1-1(9g，52.598mmol，收率98％)。
取化合物A1-1(9g，52.598mmol，1当量)稀释于28％氨水(100ml，799mmol，15当量)，油浴100℃回流24h。检测反应完成，此时溶液呈黄色浑浊状态，旋蒸除去溶剂，得到化合物A1-2(7.4g，47.406mmol，收率90％)，为黄色固体。
取化合物A1-2(4g，25.625mmol，1当量)和化合物A1-3(7.16g，25.631mmol，1当量)溶于50ml DMF中，加入碳酸铯(16.7g，51.255mmol，2当量)，油浴130℃反应16h。检测反应完成，乙酸乙酯稀释，硅藻土过滤除去固体，依次用水和饱和氯化钠水溶液萃取，无水硫酸钠干燥，湿法上样，硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝1:2)纯化，得到化合物A1-4(2.4g，7.072mmol，收率28％)。
取化合物A1-4(2.4g，7.072mmol，1当量)溶于25ml甲醇中，加入质量分数5％的钯碳(800mg，1:0.33)，于氢气球下搅拌8h。检测反应完成，通过硅藻土加小层硅胶抽滤，并且旋干，得到化合物A1-5(830mg，2.683mmol，收率38％)，为白色固体。
取化合物A1-6(518mg，2.710mmol，1.01当量)溶于10ml干燥DMF中，加入DIPEA(2.3ml，13.204mmol，5当量)，搅拌后加入HATU(1.224g，3.219mmol，1.2当量)，常温搅拌1小时后，加入化合物A1-5(830mg，2.683mmol，1当量，于5ml DMF中)，常温反应3h。检测反应完成，用大量乙酸乙酯稀释，然后用饱和NaCl水溶液萃取，无水硫酸钠干燥，湿法上样，硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝250:1)纯化，得到化合物A1(750mg，1.555mmol，收率58％)。1H NMR:(500MHz,DMSO)δ11.70(s,1H),8.47(s,1H),8.41(d,1H,J＝7.6Hz),8.37(t,1H,J＝7.7Hz),8.18(d,1H,J＝7.6Hz),7.68(s,1H),7.55(s,1H),4.44-4.53(m,1H),4.00-4.14(m,2H),2.81-3.03(m,2H),2.00-2.08(m,2H),1.81-1.92(m,2H),1.42(s,9H).
制备例2.化合物A2的合成
取化合物A2-0(6.1g，39.078mmol，1当量)溶于30ml甲醇中，加入质量分数5％的钯碳(900mg，1:0.3)，于氢气球下搅拌8h。检测反应完成，硅藻土抽滤，旋干，然后用大量甲醇/二氯甲烷溶解，快速柱层析(二氯甲烷:甲醇＝4:1)纯化，得到化合物A2-1(4.4g，34.887mmol，收率89％)。
取化合物A2-2(6.7g，35.058mmol，1.005当量)溶于30ml干燥DMF中，加入DIPEA(30ml，172.224mmol，5当量)，搅拌后加入HATU(16g，42.079mmol，1.2当量)，常温搅拌1小时后，加入化合物A2-1(4.4g，34.887mmol，1当量，于10ml DMF中)，常温反应3h。检测反应完成，用大量乙酸乙酯稀释，然后用饱和NaCl水溶液萃取，无水硫酸钠干燥，旋干，加入二氯甲烷后析出固体产物，并且抽滤，得到化合物A2-3(6.6g，22.058mmol，收率63％)。
取2,5-二溴吡嗪(890mg，3.741mmol，1.12当量)于封管中，加入10ml DMF溶解，然后加入碳酸铯(2.7g，8.287mmol，2.5当量)，另取化合物A2-3(1g，3.342mmol，1当量)溶于5ml DMF，逐滴滴入反应体系，油浴80℃反应5h。检测反应完成，用乙酸乙酯稀释，硅藻土抽滤，然后用饱和NaCl水溶液萃取，无水硫酸钠干燥，进行硅胶柱层析(二氯甲烷:三乙胺＝500:10，然后二氯甲烷:甲醇:三乙胺＝500:5:10)，得到化合物A2(350mg，0.767mmol，收率22％)。1H NMR:(500MHz,DMSO)δ11.74(s,1H),9.16(s,1H),9.08(s,1H),8.82(s,1H),8.43(d,1H,J＝7.6Hz),8.38(t,1H,J＝7.6Hz),8.23(s,1H),8.20(d,1H,J＝7.6Hz),7.94(s,1H).
制备例3.化合物A3的合成
取化合物A1(120mg，0.249mmol，1当量)溶于20ml二氯甲烷中，加入TFA(沸点72.4℃)(0.25ml，3.366mmol，12当量)，室温反应3小时。检测反应结束后，用乙酸乙酯稀释，用氢氧化钠溶液和饱和NaCl溶液依次萃取，无水硫酸钠干燥，并且旋蒸，得到化合物A3(93mg，0.243mmol，收率97.7％)，为白色固体。1H NMR:(500MHz,DMSO)δ11.72(s,1H),8.41-8.46(m,2H),8.38(t,1H,J＝7.6Hz),8.19(d,1H,J＝7.6Hz),7.66(s,1H), 7.57(s,1H),4.29-4.38(m,1H),3.03-3.13(m,2H),2.59-2.64(m,2H),1.97-2.04(m,2H),1.81-1.91(m,2H).
制备例4.化合物A4的合成
将化合物A4-0(3.30g，30.5mmol，1.00当量)和DMF(33.0mL)加入100mL三口瓶中，在氮气下于20-25℃再加入化合物A4-1(6.23g，30.5mmol，3.40mL，1.00当量)、DMEDA(2.69g，30.5mmol，3.29mL，1.00当量)、CuI(2.91g，15.2mmol，0.50当量)和K3PO4(19.4g，91.5mmol，3.00当量)，于100℃反应3小时。LCMS显示化合物A4-0反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝1.748mins)。过滤，收集滤液，浓缩，粗品用制备型HPLC(TFA条件；柱：Phenomenex Luna C18 200*40mm*10μm；流动相：[水(TFA)-ACN]；梯度：20％-50％B，10分钟)纯化，流动相用乙酸乙酯20mL萃取2次，硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩，得到化合物A4-2(970mg，5.16mmol，收率16.9％，纯度98.0％)，为黄色固体。
将6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(986mg，5.16mmol，1.00当量)、HATU(2.94g，7.74mmol，1.50当量)和DCM(10.0mL)加入100mL三口瓶中，再加入DIEA(2.00g，15.4mmol，2.70mL，3.00当量)，于0-10℃反应0.5小时，再加入化合物A4-2(970mg，5.16mmol，1.00当量)，于20-25℃反应15.5小时。LCMS显示剩余17.7％的化合物A4-2(RT＝0.319min)，并且检测到目标质谱(RT＝0.478min)。将反应液浓缩，得到粗品，柱层析分离(SiO2，DCM:MeOH＝50:1至10:1，产物：Rf＝0.75)得到化合物A4-3(1.01g，2.82mmol，收率54.6％，纯度99.7％)，为白色固体。
于20-25℃，将化合物A4-3(1.00g，2.79mmol，1.00当量)和二噁烷(2.00mL)加入100mL三口瓶中，加入HCl(12.0M，20.0mL，86.0当量)，升温至75℃反应3小时。LCMS显示剩余11.2％的化合物A4-3(RT＝0.452min)，并且检测到目标质谱(RT＝0.253min)。加入NaHCO3至pH＝7-8，用乙酸乙酯(50.0mL)萃取3次，用饱和食盐水(50.0mL)洗涤合并的有机相，硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩，得到化合物A4-4(300mg，937μmol，收率33.6％，纯度63.2％)，为黄色固体。
将6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(179mg，937μmol，1.20当量)、HATU(445mg，1.17mmol，1.50当量)和THF(2.00mL)加入10mL单口瓶中，再加入DIEA(302mg，2.34mmol，408 μL，3.00当量)，于0-10℃反应0.5小时，加入化合物A4-4(250mg，781μmol，1.00当量)，于25℃反应15.5小时。TLC(二氯甲烷:甲醇＝8:1)显示化合物A4-4(Rf＝0.70)反应完全，产生一个新点(Rf＝0.45)。过滤，收集滤饼，真空干燥，固体用THF(5.00mL)打浆，过滤，滤饼溶于水(20.0mL)和乙腈(5.00mL)中，并且冻干，得到化合物A4(114mg，262μmol，收率33.5％，纯度98.5％)，为白色固体。LCMS:m/z＝376.1(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ12.22(s,1H)9.00(s,1H)8.36-8.49(m,2H)8.21(d,J＝7.4Hz,1H)7.74-7.84(m,3H)7.54-7.62(m,3H)7.38(t,J＝7.4Hz,1H).
制备例5.化合物A5的合成
将化合物Int1-1(7.73g，40.4mmol，1.02当量)和DCM(75.0mL)加入250mL三口瓶中，在0-5℃下加入DIEA(10.2g，79.2mmol，13.8mL，2.00当量)和HATU(16.5g，43.6mmol，1.10当量)，在0-5℃下搅拌1小时，再加入化合物Int1-0(5.00g，39.6mmol，1.00当量)，在0-5℃下继续搅拌1小时。LCMS显示Int1-0反应完全，检测到产物主峰。减压浓缩，加入乙酸乙酯(500mL)，有机相用饱和食盐水(500mL*3)洗涤。硫酸钠干燥，浓缩。粗品用EtOAc/PE＝1/5(200mL)打浆，过滤，石油醚(200mL)洗涤滤饼，减压干燥，得到化合物Int 1(12.5g，38.4mmol，收率80.7％，纯度92％)，为黄色固体。LCMS:m/z＝322.1(M+Na)+.1H NMR:(400MHz,DMSO)δ13.31(s,1H),11.72(s,1H),8.42-8.39(m,3H),8.43-8.34(m,1H),8.18(d,J＝6.4Hz,2H),7.78(d,J＝100Hz,1H).
在20-25℃下，将ACN(4.00mL)、化合物Int1(200mg，668μmol，1.00当量)和苯硼酸(81.5mg，668μmol，1.00当量)加入到三口圆底烧瓶中。在氧气氛围下，加入氯(羟基)铜；N,N,N',N'-四甲基乙二胺(93.1mg，200μmol，0.300当量)和K2CO3(184mg，1.34mmol，2.00当量)。在氧气氛围下，升温至75-80℃，反应16小时。LCMS显示化合物Int1反应完全，并且检测到目标质谱。过滤反应液，并用ACN(0.5mL)洗涤滤饼2次。滤液用制备型HPLC(TFA条件)纯化后，在45℃下，真空浓缩部分馏分。加入NaHCO3(2.00g)至浓 缩液中，并用乙酸乙酯(20.0mL)萃取3次，合并的有机相用饱和食盐水(10.0mL)洗涤，硫酸钠干燥，过滤，浓缩。粗品再经过制备型TLC(乙酸乙酯:石油醚＝1:1，Rf＝0.44)纯化，刮板的硅胶粉末用ACN(30.0mL)搅拌30分钟，并且浓缩，得到化合物A5(66.0mg，171μmol，收率12.8％，纯度97.6％)，为白色固体。LCMS:m/z＝376.1(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),9.03(s,1H),8.42-8.36(m,1H),8.49-8.36(m,1H),8.25-8.18(m,1H),8.03(br s,1H),7.99(br d,J＝8.0Hz,2H),7.77(br s,1H),7.56(t,J＝8.0Hz,2H),7.46-7.36(m,1H).
制备例6.化合物A6的合成
在20-25℃下，将化合物Int1(400mg，1.34mmol，1.00当量)、4-碘苯酚(294mg，1.34mmol，1.00当量)、DMEDA(118mg，1.34mmol，144μL，1.00当量)、K3PO4(851mg，4.01mmol，3.00当量)、DMF(1.00mL)和CuI(127mg，668μmol，0.50当量)加入到10mL的单口圆底烧瓶中。在氮气氛围下，升温至100℃，反应1.5小时。LCMS显示剩余1.76％的化合物Int1，并且检测到目标质谱。过滤反应液，并用DMF(0.5mL)洗涤滤饼3次。在50-55℃下真空浓缩，得到的粗品用制备型HPLC(TFA条件)纯化后，在45℃下真空浓缩，并且冻干，得到化合物A6(207mg，523μmol，收率39.1％，纯度98.8％)，为粉色固体。LCMS:m/z＝392.0(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H)9.79(s,1H)8.85(s,1H)8.48-8.38(m,2H)8.21(dd,J＝7.6,1.0Hz,1H)7.93(s,1H)7.78-7.68(m,3H)6.95-6.89(m,2H).
制备例7.化合物A7的合成
在20-25℃下，将化合物Int1(400mg，1.34mmol，1.00当量)、4-碘苯甲醚(313mg，1.34mmol，1.00当量)、DMEDA(118mg，1.34mmol，144μL，1.00当量)，K3PO4(851mg，4.01mmol，3.00当量)、DMF(1.00mL)和CuI(127mg，668μmol，0.50当量)加入到10mL的单口圆底烧瓶中。在氮气氛围下，升温至100℃，反应1.5小时。LCMS显示剩余1.41％的化合物Int1，并且检测到目标质谱。过滤反应液，并用DMF(0.5mL)洗涤滤饼3次。在 50-55℃下真空浓缩，得到的粗品用制备型HPLC(TFA条件)纯化后，在45℃下真空浓缩，并且冻干，得到化合物A7(128mg，310μmol，收率23.2％，纯度97.8％)，为类白色固体。LCMS:m/z＝406.1(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H).8.93(s,1H)8.48-8.37(m,2H)8.22(dd,J＝7.6,0.8Hz,1H)7.98(s,1H)7.94-7.86(m,2H)7.73(s,1H)7.15-7.01(m,2H)3.83(s,3H).
制备例8.化合物A8的合成
在20-25℃下，将化合物Int1(923mg，2.49mmol，1.00当量)、吡啶(394mg，4.98mmol，402μL，2.00当量)和4-溴苯硼酸(500mg，2.49mmol，1.00当量)加入到40mL反应瓶中。在氧气氛围下，加入[Cu(OH)-(TMEDA)]2Cl2(347mg，747μmol，0.30当量)和ACN(12.0mL)。在氧气氛围下，升温至80℃，反应16小时。LCMS显示剩余32.8％的化合物Int1，并且检测到目标质谱。在45℃下真空浓缩。粗品用柱层析(SiO2，二氯甲烷:甲醇＝10:1，Rf＝0.5)纯化后，再用快速硅胶柱层析(Welch Ultimate XB-SiOH 250*70*10μm；流动相：[己烷-EtOH]；B％：6％-30％，25分钟)纯化并且冻干，得到化合物A8(55.5mg，119μmol，收率4.80％，纯度97.7％)，为白色固体。LCMS:m/z＝455.7(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.78(s,1H)9.07(s,1H)8.47-8.37(m,2H)8.13-8.26(m,1H)8.08(s,1H)7.99(d,J＝9.0Hz,2H)7.67-7.85(m,3H)3.60(br t,J＝6.6Hz,1H).
制备例9.化合物A9的合成
在20-25℃下，将化合物Int1(2.85g，7.69mmol，1.00当量)、K2CO3(2.12g，15.4mmol，2.00当量)和[Cu(OH)-(TMEDA)]2Cl2(428mg，922μmol，0.30当量)加入到100mL三口反应瓶中。在氧气氛围下，加入4-溴苯硼酸(1.05g，7.69mmol，1.00当量)和ACN(35.0mL)。在氧气氛围下，升温至50℃，反应16小时。LCMS显示剩余42.7％的化合物Int1，并且检测到49.1％目标质谱。过滤后，在45℃下真空浓缩。粗品用制备型HPLC(柱：Daisogel C18250*70mm*10μm；流动相：[水(NH4HCO3)-ACN]；B％：26％-66％，15分钟)纯化，并且冻干，得到化合物A9(83.5mg，205μmol，收率2.68％，纯度96.2％)，为灰色固体。LCMS: m/z＝390.9(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ12.11-11.48(m,1H)8.76(s,1H)8.47-8.33(m,2H)8.19(d,J＝7.4Hz,1H)7.88(br s,1H)7.67(br s,1H)7.56(d,J＝8.8Hz,2H)6.68(d,J＝8.2Hz,2H)5.38(br s,2H).
制备例10.化合物A10的合成
在20-25℃下，将N-甲基对溴苯胺(4-溴-N-甲基苯胺)(500mg，2.69mmol，1.00当量)、DMAP(32.8mg，269μmol，0.10当量)、Boc2O(880mg，4.03mmol，926μL，1.50当量)和DCM(5.00mL)加入40mL平行反应瓶中。于20-25℃反应14小时。LCMS显示剩余15.5％的N-甲基对溴苯胺(4-溴-N-甲基苯胺)，并且检测到目标质谱(RT＝0.520min)。将反应物倒入水(10.0mL)中，用二氯甲烷(15.0mL)萃取4次，合并的有机相用饱和食盐水(50.0mL)洗涤，硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩，得到化合物A10-1(800mg，2.10mmol，收率78.0％，纯度75.0％)，为黑棕色液体。
在20-25℃下，将化合物Int1(500mg，1.67mmol，1.00当量)、化合物A10-1(638mg，1.67mmol，1.00当量)、DMEDA(147mg，1.67mmol，180μL，1.00当量)、K3PO4(1.06g，5.01mmol，3.00当量)、DMF(10.0mL)和CuI(159mg，836μmol，0.50当量)加入100mL三口圆底烧瓶中。氮气置换三次，升温至100℃，反应11小时。LCMS显示剩余5.02％的化合物Int1，并且检测到目标质谱。过滤，用乙酸乙酯(5.00mL)萃取3次，粗品用制备型HPLC(TFA条件)纯化，在40-45℃下浓缩，并且冻干，得到化合物A10-2(50.0mg，97.0μmol，收率5.81％，纯度97.9％)，为棕色固体。
在20-25℃下，将化合物A10-2(40.0mg，79.3μmol，1.00当量)和TFA(271mg，2.38mmol，177μL，30.0当量)加入10mL平行反应瓶中，于20-25℃反应0.5小时。LCMS显示化合物A10-2被完全消耗，并且检测到目标质谱。浓缩后加入MeOH(100mL)和4.00g碱性树脂，于20-25℃反应1小时，过滤，并且浓缩，得到化合物A10(29.6mg，68.5μmol，收率86.4％，纯度93.5％)，为黄色固体。LCMS:m/z＝405.1(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H)8.76(s,1H)8.46-8.29(m,2H)8.19(br d,J＝3.6Hz,1H)7.87(s,1H)7.58(m,3H)6.59(d,J＝9.0Hz,2H)5.97-5.84(m,1H)2.66(d,J＝5.0Hz,3H).
制备例11.化合物A11的合成
在20℃下，将化合物Int1(500mg，1.41mmol，1.00当量)、4-碘-N,N-二甲基苯胺(384mg，1.56mmol，1.10当量)、DMEDA(124mg，1.41mmol，152μL，1.00当量)、K3PO4(900mg，4.24mmol，3.00当量)、CuI(134mg，706μmol，0.50当量)和DMF(20.0mL)加入到10mL反应瓶中。在氧气氛围下，升温至60℃，反应16小时。LCMS显示剩余12.6％的化合物Int1，并且检测到目标质谱。真空浓缩反应液。粗品用制备型HPLC(柱：Welch Ultimate C18 150*25mm*5μm；流动相：[水(FA)-ACN]；梯度：42％-72％B，12分钟)纯化，并且冻干，得到化合物A11(31.7mg，75.2μmol，收率5.33％，纯度99.3％)，为灰色固体。LCMS:m/z＝419.1(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),8.84(s,1H),8.54-8.32(m,2H),8.24-8.18(m,1H),7.90(s,1H),7.74(d,J＝9.0Hz,2H),7.68(s,1H),6.68(d,J＝9.2Hz,2H),2.96(s,6H).
制备例12.化合物A12的合成
在ACN(15.0mL)中加入4-乙酰胺基苯硼酸(300mg，848μmol，1.00当量)、化合物Int1(152mg，848μmol，1.00当量)和吡啶(134mg，1.70mmol，137μL，2.00当量)和[Cu(OH)-(TMEDA)]2Cl2(12mol％)(78.8mg，170μmol，0.20当量)，在25℃下加热至100℃，在100℃和O2下搅拌12h。LCMS显示剩余23.0％的4-乙酰胺基苯硼酸，并且检测到所需质谱。将反应混合物倒入水中(100mL)，水相用乙酸乙酯(100mL*2)萃取，合并的有机相用盐水(100mL*2)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩得到粗产物。粗产物用反相高效液相色谱法纯化(柱：Welch Xtimate C18 150*25mm*5μm；流动相：[水(TFA)-ACN]；梯度：30％-60％B，10分钟以上)，真空浓缩洗脱液去除ACN，将水相冻干，得到化合物A12(54.6mg，124μmol，收率14.6％，纯度97.9％)，为黄色固体。LCMS:m/z＝433.1(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.8(s,1H),10.1(s,1H),8.95(s,1H),8.46-8.38(m,2H),8.21(d,J＝7.4Hz,1H),7.97(s,1H),7.90(d,J＝8.6Hz,2H),7.74(d,J＝7.8Hz,3H),2.08(s,3H).
制备例13.化合物A13的合成
将化合物Int1(500mg，1.41mmol，1.00当量)和DMF(10.0mL)加入100mL瓶中，在20-25℃和氮气氛围下，再将4-溴苯甲酸(283mg，1.41mmol，1.00当量)、CuI(134mg，706μmol，0.50当量)和DMEDA(124mg，1.41mmol，151μL，1.00当量)注入瓶中。在20-25℃和氮气氛围下，再将K3PO4(899mg，4.24mmol，3.00当量)充入瓶中，在100℃和氮气氛围下搅拌16小时。LCMS显示剩余2.01％的化合物Int1，并且检测到所需质谱。在20-25℃下，粗产物用ACN(5.00mL)搅拌10分钟，并且过滤。将滤饼溶解于5ml水中，然后用HCl(2.00M)调至pH 5-6，过滤收集滤饼。将滤饼溶解在ACN(2.00mL)中，加入水(10.0mL)，然后冻干，得到化合物A13(266mg，634μmol，收率44.9％，纯度100％)，为蓝色固体。LCMS:m/z＝242.0(M+Na)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H)9.08(s,1H)8.47-8.38(m,2H)8.28-8.01(m,6H)7.74(br s,1H).
制备例14.化合物A14的合成
在DCM(5.00mL)中加入Boc2O(836.01mg，3.83mmol，880μL，2.00当量)、DMAP(46.8mg，383μmol，0.200当量)和4-碘-N-甲基苯甲酰胺(500mg，1.92mmol，1.00当量)，在40-45℃下搅拌3小时。薄层色谱(乙酸乙酯:石油醚＝1:1)显示4-碘-N-甲基苯甲酰胺(Rf＝0.300)被完全消耗，形成一个新的斑点(Rf＝0.750)。将反应混合物加入水(50.0mL)中，用METB(50.0mL*3)提取，用盐水(50.0mL)洗涤，得到化合物A14-1(700mg，粗品)，为黄色固体。
将化合物A14-1(408mg，1.13mmol，1.00当量)在DMF(8.00mL)中的溶液中加入化合物Int1(400mg，1.13mmol，1.00当量)、DMEDA(99.5mg，1.13mmol，121μL，1.00当量)、K3PO4(719mg，3.39mmol，3.00当量)和CuI(107mg，564μmol，0.500当量)，在20-25℃和氮气条件下加热。将反应混合物在70℃和氮气条件下搅拌3小时。薄层色谱(石油醚:乙酸乙酯＝8:1)显示化合物A14-1完全消耗，形成1个新点(Rf＝0.600)。用水(10ml)和NaHCO3(10ml)洗涤混合物。沉淀物被收集起来。将固体溶解在10ml ACN和20ml水中。将溶液在中性条件下冻干，得到粗产物A14-2(400mg，751μmol，收率66.5％)，为 黄色固体。将其不经提纯直接用于下一步。
在DCM(2.00mL)中加入TFA(2.57g，22.5mmol，1.67mL，60.0当量)和化合物A14-2(200mg，375μmol，1.00当量)。将反应混合物在25℃下搅拌1小时。薄层色谱(石油醚:乙酸乙酯＝8:1)显示化合物A14-2完全消耗(Rf＝0.600)，形成1个新点(Rf＝0.500)。薄层色谱(TLC)显示反应完全。加入NaHCO3(10mL)，用DCM(50.0mL*3)萃取，用盐水(50.0mL)洗涤组合有机相。在无水Na2SO4上干燥并过滤。在40℃和减压下浓缩滤液，得到化合物A14(54.7mg，125μmol，收率33.4％，纯度99.2％)，为灰白色固体。LCMS:m/z＝432.9(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),9.13(s,1H),8.59-8.51(m,1H),8.43(br d,J＝18.6Hz,2H),8.22(br d,J＝7.6Hz,1H),8.15-8.07(m,3H),8.01(br d,J＝8.6Hz,2H),7.81(br s,1H),2.81(d,J＝4.4Hz,3H).
制备例15.化合物A15的合成
在ACN(14.0mL)中加入化合物Int1(700mg，1.98mmol，1.00当量)、4-(N,N-二甲氨基甲酰基)苯硼酸(419mg，2.17mmol，1.10当量)、吡啶(312mg，3.95mmol，319.1μL，2当量)和[Cu(OH)-(TMEDA)]2Cl2(275mg，593μmol，0.300当量)。反应混合物在80℃下搅拌16小时。LCMS显示剩余约24.4％的化合物Int1(RT＝0.317min)。在LCMS上出现了几个新峰，检出到约22.2％的目标化合物(RT＝0.400min)。在40℃和真空下过滤浓缩，得到残渣。采用柱层析纯化(SiO2，石油醚:乙酸乙酯＝0:1，Rf＝0.600)。粗产物用THF(2.00mL)在25℃下发酵20分钟，得到化合物A15(91.3mg，201μmol，收率10.1％，纯度98.3％)，为白色固体。LCMS:m/z＝447.1(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),9.09(s,1H),8.43(br d,J＝19.0Hz,2H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),8.07(d,J＝8.4Hz,3H),7.81(s,1H),7.59(d,J＝8.6Hz,2H),3.05-2.89(m,6H).
制备例16.化合物A16的合成
在25℃和氧气条件下，在ACN(14.0mL)中加入4-(4-(叔-丁氧基羰基)哌嗪-1-羰基)苯基硼酸(726mg，2.17mmol，1.10当量)、吡啶(312mg，3.95mmol，319μL，2.00当量)、[Cu(OH)-(TMEDA)]2Cl2(275mg，593μmol，0.300当量)和化合物Int1(700mg，1.98mmol，1.00当量)，将反应混合物在40℃下搅拌16小时。LCMS显示剩余约19.6％的化合物Int1(RT＝0.319min)。在LCMS上出现了几个新峰，检测到约23.9％的目标化合物(RT＝0.464min)。在40℃和真空下过滤浓缩得到残渣。采用柱层析纯化(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝1/1～1/5)，然后用薄层色谱(石油醚:乙酸乙酯＝0:1，Rf＝0.500)二次纯化。粗产物用THF(5.00mL)在25℃下发酵10分钟，得到化合物A16-1(180mg，296μmol，收率15.0％，纯度96.8％)，为白色固体。
在DCM(6.50mL)中加入TFA(601mg，5.27mmol，391μL，20.0当量)和化合物A16-1(160mg，263μmol，1.00当量)，在25℃下搅拌3小时。薄层色谱(石油醚:乙酸乙酯＝0:1)显示化合物A16-1完全消耗(Rf＝0.500)，并且形成一个新斑点(Rf＝0.150)。薄层色谱(TLC)显示反应完全。在40℃和减压下浓缩滤液，得到粗产物A16-2(160mg，260μmol，收率98.9％，纯度98.0％)，为白色固体，将其不经提纯直接用于下一步。
将化合物A16-2(130mg，216μmol，1.00当量，TFA)溶于MeOH(10.0mL)和DCM(10.0mL)中，在25℃下加入Amberlyst A26(4.00g，216μmol，1.00当量)，在25℃下搅拌0.5小时。薄层色谱(二氯甲烷:甲醇＝1:2)显示化合物A16-2(Rf＝0.00)被完全消耗，并形成一个新的斑点(Rf＝0.110)。薄层色谱(TLC)显示反应完全。用MeOH(10ml)在25℃下过滤。在40℃和真空下过滤浓缩得到残渣。在中性条件下冻干，得到化合物A16(79.7mg，154μmol，收率71.4％，纯度94.3％)，为灰白色固体。LCMS:m/z＝488.1(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),9.08(s,1H),8.43(dd,J＝7.2,18.6Hz,2H),8.22(d,J＝7.0Hz,1H),8.07-8.06(m,3H),7.81(s,1H),7.56(d,J＝7.8Hz,2H),3.74-3.46(m,4H),2.80-2.60(m,4H).
制备例17.化合物A17的合成
在20-25℃下，将化合物Int1(591mg，1.67mmol，1.00当量)、2-氟-4-碘苯甲酸(444mg，1.67mmol，1.00当量)和NMP(6.00mL)加入到100mL三颈圆底烧瓶中。在20-25℃和氮气条件下，加入CuI(159mg，835μmol，0.50当量)、DMEDA(147mg，1.67mmol，179μL， 1.00当量)和K3PO4(1.06g，5.01mmol，3.00当量)。将混合物换气，用氮气吹扫3次。在100℃下搅拌12小时。LCMS显示剩余7.87％的化合物Int1(RT＝0.429min)，并且检测到75.7％(RT＝0.549min)的目标质谱。
加入ACN(20.0mL)过滤。滤饼加水20.0mL，用盐酸(2N)调至pH 5-6，过滤后浓缩滤饼。残渣采用高效液相色谱纯化(柱：Waters xbridge 150*25mm 10μm；流动相：[水(NH4HCO3)-ACN]；B％：11％-41％，10分钟)，然后将洗液冻干，得到化合物A17(103mg，227μmol，收率13.6％，纯度96.6％)。LCMS:m/z＝438.0(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.8(s,1H),9.10(s,1H),8.48-8.45(m,1H),8.43-8.37(m,1H),8.22(d,J＝8.0Hz,1H),8.12(s,1H),7.92-7.74(m,4H).
制备例18.化合物A18的合成
在20-25℃下，将4-碘苄醇(500mg，2.14mmol，1.00当量)和THF(5.00mL)加入到100mL三颈圆底烧瓶中。在20-25℃下加入PMB-Cl(669mg，4.27mmol，579μL，2.00当量)和t-BuOK(479mg，4.27mmol，2.00当量)。将混合物换气，用N2吹扫3次，在25℃下搅拌12小时。薄层色谱(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)显示4-碘苄醇(Rf＝0.2)被完全消耗，并且形成一个新的点(Rf＝0.5)。将反应液倒入10.0ml水中，水相用EtOAc(10.0mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(10.0mL)洗涤，用Na2SO4干燥，并且浓缩，得到化合物A18-1(700mg，粗品)，为白色固体。
在20-25℃，将化合物Int1(591mg，1.67mmol，1.00当量)、化合物A18-1(591mg，1.67mmol，1.00当量)和NMP(10.0mL)加入100mL三口瓶中，再加入CuI(159mg，835μmol，0.50当量)、DMEDA(147mg，1.67mmol，179μL，1.00当量)和K3PO4(1.06g，5.01mmol，3.00当量)，置换3次氮气，升温至80℃反应12小时。LCMS显示剩余15.9％的化合物A18-1(RT＝0.426min)，并且检测到25.9％的目标质谱。倒入水中，过滤，滤液浓缩，然后将粗品用制备型HPLC(柱：Welch Xtimate C18 150*25mm*5μm；流动相：[水(TFA)-ACN]；梯度：45％-75％ B，10分钟以上)纯化，洗脱液冻干，得到化合物A18-2(100mg，162μmol，收率9.71％，纯度85.3％)，为黄色固体。
在20-25℃，将化合物A18-2(100mg，190μmol，1.00当量)和DCM(4.00mL)加入100mL三口瓶中，再加入TFA(433mg，3.81mmol，282μL，20.0当量)，置换氮气3次，在 25℃下反应2小时。LCMS显示化合物A18-2反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.395min)。浓缩后粗品用薄层层析纯化(SiO2，石油醚:乙酸乙酯＝1/1，Rf＝0.2)。洗脱液浓缩，得到化合物A18(30.0mg，73.6μmol，收率38.7％，纯度99.5％)，为灰白色固体。LCMS:m/z＝406.1(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.8(s,1H),9.01(s,1H),8.51-8.35(m,2H),8.22(dd,J＝1.2,7.6Hz,1H),8.02(s,1H),7.95(d,J＝8.4Hz,2H),7.76(s,1H),7.49(d,J＝8.4Hz,2H),5.30(t,J＝5.6Hz,1H),4.56(d,J＝5.6Hz,2H).
制备例19.化合物A19的合成
在25℃下，将化合物Int1(500mg，1.41mmol，2.00当量)、4-(甲氧基甲氧基)苯硼酸(142mg，707μmol，1.00当量)、DMF(10.0mL)、DMEDA(62.3mg，707μmol，76.1μL，1.00当量)、K3PO4(450mg，2.12mmol，3.00当量)和CuI(67.3mg，353μmol，0.50当量)加入反应瓶中。升温至100℃，在N2氛围下搅拌4小时。LCMS显示剩余49.5％的化合物Int1，并且检测到目标产物质谱。将反应液倒入50.0ml水中，过滤，滤饼在真空中浓缩后加入DMF，在100℃下打浆30分钟，得到粗产品。将粗产品加入CAN中，在80℃打浆30分钟，得到化合物A19(45.9mg，106μmol，收率15.1％，纯度97.2％)。LCMS:m/z＝420.1(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.8(s,1H),9.06(s,1H),8.46-8.40(m,2H),8.21(d,J＝7.0Hz,1H),8.03-7.97(m,3H),7.79(s,1H),7.49(d,J＝7.6Hz,2H),4.47(s,2H),3.34-3.34(m,3H).
制备例20.化合物A20的合成
在20-25℃下，将THF(20.0mL)加入三口反应瓶中，再加入(4-碘苯基)甲胺。将NaHCO3(2.88g，34.3mmol，1.34mL，4.00当量)溶于H2O(20.0mL)后加入反应瓶中。再加入Boc2O(2.43g，11.2mmol，2.56mL，1.30当量)。反应液在20-25℃下搅拌1小时。LCMS显示(4-碘苯基)甲胺反应完全，并且检测到目标质谱。将20.0ml水加入反应液中，用乙酸乙酯(40ml)萃取3次，用15％的柠檬酸水溶液(100ml)洗涤有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，并 且浓缩，得到化合物A20-1(4.74g，粗品)。
在20-25℃下，将DMF(35.0mL)、化合物Int1(650mg，2.00mmol，1.00当量)、化合物A20-1(705mg，2.00mmol，1.00当量)、DMEDA(528mg，6.00mmol，645μL，3.00当量)、CuI(761mg，4.00mmol，2.00当量)和K3PO4(1.27g，6.00mmol，3.00当量)依次加入100ml的三口反应瓶中，在95-100℃和氮气氛围下搅拌5小时。LCMS显示剩余31.0％的化合物A20-1，并且检测到目标产物质谱。将100ml水加入反应液中，过滤，得到滤饼。粗品用制备型HPLC纯化，得到化合物A20-2(246mg，454μmol，收率22.7％，纯度93.2％)。
在20-25℃下，将HCl/EtOAc(10.0mL)和化合物A20-2(246mg，454μmol，1.00当量)加入100ml三口反应瓶中，并且搅拌1小时。HPLC显示化合物A20-2已经消耗完全，并且检测到一个主峰。过滤得到滤饼。将滤饼用10ml水溶解，加入饱和碳酸氢钠水溶液将pH调节至7-8。过滤得到滤饼，即化合物A20。LCMS:m/z＝405.0(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(br s,1H),9.00(s,1H),8.49-8.36(m,2H),8.21(br d,J＝7.4Hz,1H),8.02-7.87(m,3H),7.75(br s,1H),7.50(br d,J＝8.2Hz,2H),3.78(s,2H).
制备例21.化合物A21的合成
在20-25℃下，将THF(20.0mL)和N-甲基-4-溴苄胺(2.00g，10.0mmol，2.00mL，1.00当量)加入100ml三口反应瓶中。将NaHCO3(3.36g，39.9mmol，1.56mL，4.00当量)溶解在水(20.0mL)中，然后加入反应瓶中。再将Boc2O(2.84g，13.0mmol，2.99mL，1.30当量)加入反应瓶中。在20-25℃下，搅拌1小时。LCMS显示N-甲基-4-溴苄胺已经反应完全，并且检测到目标质谱。将H2O(20.0mL)加入反应液中，用乙酸乙酯(50.0mL)萃取3次，再用15％的柠檬酸水溶液(100mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩。加入正庚烷(10.0mL)后，在20-25℃下搅拌2小时，并且过滤，得到化合物A21-1(3.2g，粗品)。
在20-25℃下，将DMF(35.0mL)、化合物Int1(750mg，2.31mmol，1.00当量)、化合物A21-1(699mg，2.31mmol，1.00当量)、DMEDA(406mg，4.61mmol，496μL，2.00当量)、CuI(878mg，4.61mmol，2.00当量)和K3PO4(1.47g，6.92mmol，3.00当量)加入100ml三口反应瓶中。在95-100℃和氮气氛围下搅拌16小时。LCMS显示剩余27.3％的化合物A21-1，并且检测到目标质谱。将H2O(100ml)加入到反应中，过滤，得到滤饼。粗品用制备型HPLC纯化，得到化合物A21-2。
在20-25℃下，将HCl/EtOAc(10.0mL)和化合物A21-2(494mg，921μmol，1.00当量)加入到100ml三口反应瓶中，搅拌16小时。LCMS显示化合物A21-2反应完全，并且检测到目标质谱。过滤得到滤饼，加入H2O(10.0ml)溶解，再加入饱和碳酸氢钠水溶液将pH调至7-8。过滤得到滤饼，即为化合物A21。LCMS:m/z＝419.0(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.78(s,1H),9.00(s,1H),8.48-8.36(m,2H),8.21(d,J＝7.4Hz,1H),8.03-7.87(m,3H),7.75(br s,1H),7.48(br d,J＝8.4Hz,2H),3.69(s,2H),2.28(s,3H).
制备例22.化合物A22的合成
在20-25℃和氧气氛围下，将化合物Int1(500mg，1.41mmol，1.00当量)、DMF(8.00mL)、{4-[(N,N'-二甲基)亚甲基]}苯硼酸(278mg，1.55mmol，1.10当量)和K2CO3(390mg，2.82mmol，2.00当量)加入反应器中，将氯(羟基)铜；N,N,N',N'-四甲基乙二胺(196mg，423μmol，0.30当量)加入反应中，在80℃下搅拌16小时。LCMS表示剩余17.4％的化合物Int1，并且检测到目标质谱。在50-55℃下浓缩。粗产品经柱层析纯化后再经制备型HPLC(TFA条件)纯化，得到化合物A22。LCMS:m/z＝433.0(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H)9.00(s,1H)8.36-8.49(m,2H)8.21(d,J＝7.6Hz,1H)8.01(br s,1H)7.93(d,J＝8.4Hz,2H)7.76(br s,1H)7.45(d,J＝8.2Hz,2H)3.44(s,2H)2.17(s,6H).
制备例23.化合物A23的合成
在20-25℃下，将DMF(5.00mL)、化合物A20(100mg，233μmol，1.00当量)、吡啶(55.4mg，701μmol，56.5μL，3.00当量)和Ac2O(35.7mg，350μmol，32.9μL，1.50当量)加入40.0ml的反应瓶中，搅拌1小时。LCMS显示化合物A20反应完全，并且检测到目标质谱。加入饱和碳酸氢钠水溶液调pH至7-8，过滤，得到化合物A23(56.5mg，121μmol，收率51.9％，纯度95.9％)。LCMS:m/z＝447.2(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),9.01(s,1H),8.54-8.36(m,3H),8.21(br d,J＝7.6Hz,1H),8.03-7.90(m,3H),7.76(br s,1H),7.42(br d,J＝8.0Hz,2H),4.31(br d,J＝5.2Hz,2H),1.90(s,3H).
制备例24.化合物A24的合成
在20-25℃下，将DMF(5.00mL)、化合物A21(100mg，236μmol，1.00当量)、吡啶(56.0mg，708μmol，57.1μL，3.00当量)和Ac2O(36.1mg，354μmol，33.2μL，1.50当量)加入40.0ml的反应瓶中。搅拌3小时后，LCMS显示化合物A21反应完全，并且检测到目标质谱。加入饱和碳酸氢钠水溶液调pH至7-8，过滤，得到化合物A24(96.0mg，206μmol，收率87.3％，纯度98.9％)。LCMS:m/z＝461.1(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),9.04-8.98(m,1H),8.48-8.37(m,2H),8.21(d,J＝7.2Hz,1H),8.04-7.91(m,3H),7.77(br s,1H),7.43-7.35(m,2H),4.64-4.53(m,2H),2.97-2.80(m,3H),2.11-2.06(m,3H).
制备例25.化合物A25的合成
在20-25℃和氮气氛围下，将化合物Int1(1.00g，2.82mmol，1.00当量)、DMF(10mL)、4-(4-碘苯基)四氢-1(2H)-吡嗪甲酸叔丁酯(1.10g，2.82mmol，1.00当量)、DMEDA(248mg，2.82mmol，303μL，1.00当量)、K3PO4(1.80g，8.47mmol，3.00当量)和CuI(268mg，1.41mmol，0.50当量)加入反应瓶中，在100℃下搅拌16小时。LCMS显示剩余14.7％的化合物Int1，并且检测到目标质谱。过滤并且浓缩，粗品用制备型HPLC纯化，得到化合物A25-1(400mg，706μmol，收率25.0％，纯度98.8％)。
在20-25℃下，将化合物A25-1(400mg，706μmol，1.00当量)、DCM(0.50mL)和HCl/EtOAc(4.00M，4.94mL，28.0当量)加入10ml的反应瓶中，并且搅拌16小时。LCMS显示剩余63.8％的化合物A25-1，并且检测到目标质谱。浓缩得到粗产品，用H2O(10.0mL)溶解，加入饱和碳酸氢钠水溶液调pH至7-8，过滤，滤饼用H2O(4.00mL)洗三次。滤饼用H2O(20.0mL)和ACN(3.00mL)溶解，并且冻干，得到化合物A25(285mg，620μmol，收率87.8％，纯度100％)。LCMS:m/z＝460.2(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H)8.87(s,1H)8.34-8.52(m,2H)8.14-8.26(m,1H)7.94(br s,1H)7.77(d,J＝9.0Hz,2H)7.70(s,1H)7.05(d,J＝9.2Hz,2H)3.06-3.15(m,4H)2.80-2.89(m,4H).
制备例26.化合物A26的合成
在20-25℃和氮气氛围下，将化合物Int1(500mg，1.41mmol，1.00当量)、1-(4-溴苯基)-4-甲基哌嗪(360mg，1.41mmol，1.00当量)、DMEDA(124mg，1.41mmol，151μL，1.00当量)和DMF(10.0mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，再在氮气氛围下加入CuI(134mg，706μmol，0.5当量)和K3PO4(899mg，4.24mmol，3.00当量)，升温至100℃，并且在氮气下反应16小时。LCMS显示剩余25.0％的化合物Int1，并且检测到目标质谱(RT＝0.343min)。过滤反应液，收集滤液并真空下浓缩。粗产物采用反相高效液相色谱方法纯化，并且冻干，得到化合物A26(155mg，304μmol，收率21.5％，纯度93.1％，TFA)，为白色固体。LCMS:m/z＝474.2(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H)9.72-9.98(m,1H)8.93(s,1H)8.32-8.50(m,2H)8.21(d,J＝7.6Hz,1H)7.95(br s,1H)7.87(br d,J＝8.8Hz,2H)7.73(br s,1H)7.17(br d,J＝9.0Hz,2H)3.95(br d,J＝11.2Hz,2H)3.56-3.60(m,2H)3.18(br s,2H)2.94-3.10(m,2H)2.88(s,3H).
制备例27.化合物A27的合成
在20-25℃下，将化合物A25(80.0mg，174μmol，1.00当量)、吡啶(27.5mg，348μmol，28.1μL，2.00当量)和DMF(4.00mL)加入10mL平行反应瓶中。再在0-5℃下加入Ac2O(26.6mg，261μmol，24.5μL，1.50当量)。在20-25℃下反应2小时。LCMS显示化合物A25反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.441min)。将粗产物溶于H2O(10.0mL)中，然后用饱和NaHCO3调节pH至7-8。将反应液过滤后用H2O(4mL*3)洗涤，滤饼溶解于H2O(20.0mL)和ACN(3.00mL)中。将混合物直接冻干，得到化合物A27(73.9mg，147μmol，收率84.6％，纯度100％)，为白色固体。LCMS:m/z＝502.1(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H)8.90(s,1H)8.36-8.51(m,2H)8.21(d,J＝7.6Hz,1H)7.95(br s,1H)7.82(d,J＝9.0Hz,2H)7.71(br s,1H)7.11(d,J＝9.2Hz,2H)3.60(br s,4H)3.23-3.29(m,2H)3.15-3.22(m,2H)2.06(s,3H).
制备例28.化合物A28的合成
在20-25℃下，将化合物A25(140mg，304μmol，1.00当量)、吡啶(48.2mg，609μmol，49.1μL，2.00当量)和DMF(4.00mL)加入10mL平行反应瓶中。再在0-5℃下加入苯甲酰基苯甲酸酯(103mg，457μmol，86.2μL，1.50当量)，在20-25℃下反应2小时。LCMS显示化合物A25反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.496min)。将粗产物溶于H2O(10.0mL)中，然后用饱和NaHCO3调节pH至7-8。将反应液过滤后用H2O(4.00mL*3)洗涤，滤饼溶解于H2O(20.0mL)和ACN(3.00mL)中。将混合物直接冻干，得到粗产品。在20-25℃下将粗产物用ACN(10.0mL)搅拌10分钟，滤饼溶解于H2O(20.0mL)和ACN(3.00mL)中。将混合物直接冻干，得到化合物A28(74.1mg，131μmol，收率43.1％，纯度100％)，为白色固体。LCMS:m/z＝564.3(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.78(s,1H)8.89(s,1H)8.36-8.49(m,2H)8.20(d,J＝7.6Hz,1H)7.94(s,1H)7.82(d,J＝9.0Hz,2H)7.70(s,1H)7.38-7.53(m,5H)7.11(d,J＝9.0Hz,2H)3.44-3.86(m,4H)3.31-3.27(m,4H).
制备例29.化合物A29的合成
在20-25℃和氧气氛围下，将化合物Int1(500mg，1.41mmol，1.00当量)、吡啶-3-硼酸(190mg，1.55mmol，1.10当量)、[Cu(OH)-(TMEDA)]2Cl2(196mg，423μmol，0.30当量)、K2CO3(585mg，4.24mmol，3.00当量)和DMF(15.0mL)加入10mL平行反应瓶中，升温至100℃，在氧气氛围下反应12小时。LCMS显示剩余42.8％的化合物Int1(RT＝1.468mins)，并且检测到目标质谱(RT＝1.386mins)。将反应液在真空下浓缩。粗产物采用反相高效液相色谱方法纯化，并且冻干，得到化合物A29(104mg，272μmol，收率19.2％，纯度97.7％)，为黄色固体。LCMS:m/z＝376.9(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ14.02-13.60(m,1H),11.38(s,1H),11.16(s,1H),9.32(br s,1H),8.72(br d,J＝8.6Hz,1H),8.64-8.52(m,2H),8.50-8.36(m,2H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),7.92(dd,J＝5.4,8.4Hz,1H).
制备例30.化合物A30的合成
在20-25℃和氧气氛围下，将化合物Int1(300mg，848μmol，1.00当量)、2-溴吡啶-5-硼酸(188mg，933μmol，1.10当量)、K2CO3(351mg，2.54mmol，3.00当量)、[Cu(OH)-(TMEDA)]2Cl2(118mg，254μmol，0.30当量)和DMF(20.0mL)加入40mL平行反应瓶中，升温至80℃，在氧气氛围下反应12小时。LCMS显示剩余23.7％的化合物Int1(RT＝0.424min)，并且检测到目标质谱(RT＝0.585min)。将反应液在真空下浓缩。粗产物采用反相高效液相色谱纯化，并且冻干，得到化合物A30(86.0mg，179μmol，收率21.1％，纯度94.9％)，为黄色固体。LCMS:m/z＝456.9(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ13.68(s,1H),11.44(s,1H),10.74(s,1H),8.90(d,J＝2.4Hz,1H),8.54(s,1H),8.46-8.36(m,2H),8.22(br d,J＝7.8Hz,2H),7.68(d,J＝8.8Hz,1H).
制备例31.化合物A31的合成
在20-25℃和氮气氛围下，将化合物Int1(500mg，1.54mmol，1.00当量)、5-碘吡啶-2-甲酸(382mg，1.54mmol，1.00当量)、DMEDA(135mg，1.54mmol，165μL，1.00当量)、K3PO4(979mg，4.61mmol，3.00当量)、CuI(146mg，768μmol，0.50当量)和DMF(10.0mL)加入40mL平行反应瓶中，升温至100℃，在氮气氛围下反应16小时。LCMS显示剩余61％的化合物Int1(RT＝0.438min)，并且检测到目标质谱(RT＝0.391min)。将反应液降温至25℃，添加ACN(50.0mL)，过滤，并收集滤饼。将滤饼加入H2O(50.0mL)中，加入2.00M HCl调pH＝5-6，过滤，收集滤饼。将滤饼用DMF(50.0mL)溶解，用硅藻土过滤。过滤浓缩后进行冻干，得到化合物A31(187mg，439μmol，收率28.5％，纯度98.7％)，为灰白色固体。LCMS:m/z＝421.1(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.82(s,1H),9.43-9.18(m,2H),8.60(s,1H),8.47-8.39(m,2H),8.23-8.17(m,3H),7.88(s,1H).
制备例32.化合物A32的合成
在0-25℃下，将(3-羟基环丁基)氨基甲酸叔丁酯(1.00g，5.34mmol，1.00当量)、TEA(1.62g，16.0mmol，2.23mL，3.00当量)和DCM(10.0mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，再缓慢加入MS2O(1.30g，7.48mmol，1.40当量)和DCM(10mL)，用氮气置换3次，在0-25℃下反应2小时。LCMS显示化合物(3-羟基环丁基)氨基甲酸叔丁酯反应完全，并且检测到53.0％的目标质谱。在45℃下浓缩，得到化合物A32-1(1.42g，粗品)，为淡黄色固体。
在20-25℃下，将化合物A32-1(532mg，2.01mmol，1.20当量)、化合物Int1(500mg，1.67mmol，1.00当量)、Cs2CO3(2.18g，6.68mmol，4.00当量)和DMF(15.0mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，升温至110℃反应12小时。LCMS显示剩余4.25％的化合物A32-1，并且检测到51.5％的目标质谱(RT＝0.609min)。倒入水(30.0mL)中，用乙酸乙酯(60.0mL)萃取3次，合并的有机相用饱和食盐水(30.0mL)洗涤，硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩，得到化合物A32-2(1.30g，粗品)，为黄色油状物。
在20-25℃下，将化合物A32-2(170mg，363μmol，1.00当量)、DCM(3.40mL)和MeOH(3.40mL)加入40mL平行反应瓶中。降温至0-5℃后加入HCl/二噁烷(4.00M，3.40mL，37.5当量)，升温至20-25℃反应2小时。TLC(二氯甲烷:甲醇＝10:1)显示生成新点(Rf＝0.30)。过滤，并且浓缩，得到化合物A32-3(130mg，348μmol，收率91.4％，纯度98.7％)，为白色固体。
在20-25℃下，将化合物A32-3(130mg，353μmol，1.00当量)、DCM(10.0mL)和MeOH(10.0mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，再加入Amberlyst A26(4.00g，1.00当量)，于20-25℃反应0.5小时。TLC(二氯甲烷:甲醇＝1:1)显示生成新点(Rf＝0.00)。过滤，浓缩，用水(30.0mL)稀释，并且冻干，得到化合物A32(84.9mg，226μmol，收率64.1％，纯度98.0％)，为白色固体。LCMS:m/z＝368.9(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.70(s,1H)8.44(s,1H)8.42-8.36(m,2H)8.18(d,J＝7.4Hz,1H)7.73-7.52(m,2H)5.15-4.95(m,1H)3.73-3.64(m,1H)2.71-2.60(m,2H)2.25-2.15(m,2H).
制备例33.化合物A33的合成
在20-25℃下，将化合物Int1(500mg，1.67mmol，1.00当量)、N-BOC-3-溴环丁烷(473mg，2.01mmol，1.20当量)、Cs2CO3(1.09g，3.34mmol，2.00当量)和DMF(10.0mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，升温至60℃反应12小时。LCMS显示化合物Int1被完全消耗，并且检测到目标质谱(RT＝0.456min)。倒入水(50.0mL)中，用乙酸乙酯(50.0mL)萃取2次，合并的有机相用饱和食盐水(50.0mL)洗涤2次，硫酸钠干燥，过滤，粗产物采用柱层析纯化，并且浓缩，得到化合物A33-1(480mg，1.01mmol，收率60.3％，纯度95.4％)，为白色固体。
在20-25℃下，将化合物A33-1(480mg，1.01mmol，1.00当量)、DCM(10.0mL)和TFA(1.72g，15.12mmol，1.12mL，15.0当量)加入40mL平行反应瓶中，在20-25℃反应2小时。LCMS显示化合物A33-1被完全消耗，并且检测到目标质谱(RT＝0.289min)。过滤并且浓缩，得到化合物A33-2(490mg，990μmol，收率98.2％，纯度94.6％，TFA)，为白色固体。
在20-25℃下，将化合物A33-2(494mg，998μmol，1.00当量，TFA)、THF(5.00mL)和MeOH(5.00mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，再加入AMBERLYST A26(5.00g，30.9mmol)，于20-25℃反应0.5小时。TLC(二氯甲烷:甲醇＝1:1)显示生成新点(Rf＝0.10)。过滤并且浓缩，得到化合物A33(201mg，544μmol，收率54.5％，纯度95.7％)，为亮黄色固体。LCMS:m/z＝354.9(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.7(s,1H),8.58(s,1H),8.43-8.35(m,2H),8.19(d,J＝7.4Hz,1H),7.76(s,1H),7.60(s,1H),5.32-5.25(m,1H),3.93(t,J＝7.6Hz,2H),3.81-3.77(m,2H),1.35(s,1H).
制备例34.化合物A34的合成
在20-25℃下，将N-BOC-3-羟基哌啶(1.00g，4.97mmol，1.00当量)、TEA(1.51g，14.9mmol，2.07mL，3.00当量)和DCM(5.00mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，再缓慢加入溶于DCM(5.00mL)中的Ms2O(1.13g，6.46mmol，1.30当量)，在0-5℃下反应2.5小时。LCMS显示剩余16.3％的化合物N-BOC-3-羟基哌啶，并且检测到目标质谱(RT＝ 0.388min)。倒入水(100.0mL)中，用二氯甲烷(30.0mL)萃取3次，合并的有机相用饱和食盐水(90.0mL)洗涤，硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩，得到化合物A34-1(1.37g，2.40mmol，收率48.4％，纯度49.0％)，为黄色油状物。
在20-25℃下，将化合物Int1(856mg，2.40mmol，1.00当量)、化合物A34-1(1.37g，2.40mmol，1.00当量)、Cs2CO3(1.57g，4.81mmol，2.00当量)和DMF(27.4mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，升温至100℃反应10小时。LCMS显示剩余29.7％的化合物Int1(RT＝0.340min)，并且检测到目标质谱((RT＝0.466min)。倒入水(50.0mL)中，用乙酸乙酯(30.0mL)萃取4次，合并的有机相用饱和食盐水(100.0mL)洗涤，硫酸钠干燥，过滤，粗产物采用柱层析纯化，并且浓缩，得到化合物A34-2(532mg，1.10mmol，45.6％，纯度99.4％)，为白色固体。
在20-25℃下，将化合物A34-2(150mg，309μmol，1.00当量)和TFA(1.06g，9.27mmol，689μL，30.0当量)加入10mL平行反应瓶中，于20-25℃反应2小时。LCMS显示化合物A34-2被完全消耗，并且检测到目标质谱(RT＝0.305min)。加入5.00g碱性树脂，于20-25℃反应1小时，过滤，并且浓缩，得到化合物A34(125mg，311μmol，收率77.3％，纯度94.9％)，为白色固体。LCMS:m/z＝383.1(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.75-11.69(m,1H)8.49(s,1H)8.43-8.36(m,2H)8.19(d,J＝7.4Hz,1H)7.74-7.50(m,2H)4.31-4.19(m,1H)3.23-3.15(m,1H)2.91-2.81(m,2H)2.44-2.32(m,1H)2.20-2.09(m,1H)2.00-1.90(m,1H)1.76-1.69(m,1H)1.59(m,1H).
制备例35.化合物A35的合成
在20-25℃下，将N-叔丁氧羰基-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-3-醇(500mg，1.94mmol，1.00当量)、TEA(589mg，5.83mmol，811μL，3.00当量)和DCM(2.50mL)加入100mL三口圆底烧瓶中。再将溶于DCM(2.50mL)中的Ms2O(473mg，2.72mmol，1.40当量)缓慢加入，在0-25℃反应1小时。LCMS显示原料反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.372min)。浓缩后得到化合物A35-1(500mg，粗品)，为黄色固体。
在20-25℃下，将化合物Int1(483mg，1.61mmol，1.00当量)、化合物A35-1(500mg，1.49mmol，1.00当量)、K2CO3(669mg，4.84mmol，3.00当量)和DMF(210.0mL)加入100mL三口圆底烧瓶中。升温至80℃反应1小时。LC-MS显示化合物Int1反应完全，并 且检测到目标质谱(RT＝0.463min)。倒入水(25.0mL)中，乙酸乙酯(25.0mL)萃取3次，合并的有机相用NaHCO3(25.0mL)洗涤，硫酸钠干燥，过滤，粗产物用制备型HPLC纯化，并且浓缩，得到化合物A35-2(400mg，736μmol，收率45.5％，纯度99.1％)，为黄色固体。
在20-25℃下，将化合物A35-2(200mg，368.05μmol，1.00当量)、TFA(839mg，7.36mmol，546μL，20.0当量)和DCM(2.00mL)加入10mL平行反应瓶中。氮气置换3次，在20-25℃反应2小时。LCMS显示化合物A35-2反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.302min)。用NaHCO3调节pH至9-10，二氯甲烷(10.0mL)萃取3次，硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩，得到化合物A35(85.3mg，186μmol，收率50.5％，纯度95.6％)，为黄色固体。LCMS:m/z＝439.2(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(s,1H),8.49(s,1H),8.44-8.34(m,2H),8.19(dd,J＝1.2,7.6Hz,1H),7.73-7.55(m,2H),5.24-5.09(m,1H),4.23-4.00(m,2H),2.85(dd,J＝3.2,9.2Hz,2H),2.72-2.59(m,2H),2.38(dd,J＝8.8,13.2Hz,1H),2.20(dd,J＝5.6,13.2Hz,1H),1.66(t,J＝5.2Hz,2H),1.57(t,J＝5.2Hz,2H).
制备例36.化合物A36的合成
在0-5℃下，将反式-N-4-BOC-氨基环己醇(750mg，3.48mmol，1.00当量)、TEA(1.06g，10.4mmol，1.45mL，3.00当量)和DCM(5.00mL)加入100mL三口圆底烧瓶中。再将Ms2O(910mg，5.23mmol，1.50当量)加入到DCM(5.00mL)中，在0-5℃反应1小时。LCMS显示51.2％的反式-N-4-BOC-氨基环己醇(RT＝0.434min)未反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.515min)。倒入水(30.0mL)中，乙酸乙酯(40.0mL)萃取2次，合并的有机相用饱和食盐水(40.0mL)洗涤，硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩，得到化合物A36-1(1.06g，3.38mmol，收率96.9％，纯度93.5％)，为黄色固体。
在20-25℃下，将化合物A36-1(1.12g，3.72mmol，1.10当量)、化合物Int1(1.06g，3.38mmol，1.00当量)、Cs2CO3(3.30g，10.1mmol，3.00当量)和DCM(5.00mL)加入100mL三口圆底烧瓶中。升温至80-85℃反应12小时。LCMS显示50.1％的化合物A36-1(RT＝0.316min)未反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.456min)。将反应液浓缩，粗产物用制备型HPLC纯化，并且冻干，得到化合物A36-2(0.303g，604μmol，收率17.8％，纯度99.0％)，为白色固体。
在20-25℃下，将化合物A36-2(288mg，574μmol，1.00当量)、TFA(1.83g，16.0mmol， 1.19mL，28.0当量)和DCM(5.00mL)加入100mL三口圆底烧瓶中。在20-25℃反应2小时。LCMS显示化合物A36-2反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.289min)。加入10ml饱和碳酸氢钠水溶液，在20℃下搅拌10分钟。加入乙酸乙酯(20.0mL)萃取2次，合并的有机相用饱和食盐水(15.0mL)洗涤，硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩。粗产物用制备型HPLC纯化，并且冻干，得到化合物A36(39.2mg，97.7μmol，收率17.0％，纯度98.8％)，为白色固体。LCMS:m/z＝397.1(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(s,1H),8.56(s,1H),8.49-8.35(m,2H),8.19(d,J＝7.4Hz,1H),7.65-7.54(m,2H),4.27-4.21(m,1H),3.05-3.03(m,1H),2.25-2.23(m,2H),1.85-1.76(m,3H),1.64-1.61(m,3H).
制备例37.化合物A37的合成
在25℃和氮气氛围下，将化合物3-羟基环己基氨基甲酸叔丁酯(650mg，3.02mmol，1.00当量)、TEA(916mg，9.06mmol，1.26mL，3.00当量)和DCM(15.0mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，降温至0-5℃，在氮气氛围下加入Ms2O(788mg，4.53mmol，1.50当量)。LC-MS显示3-羟基环己基氨基甲酸叔丁酯反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.488min)。真空浓缩，加入100ml水溶液，用乙酸乙酯(200mL*3)萃取3次，合并的有机相用饱和食盐水洗涤，硫酸钠干燥，并且过滤。将反应液浓缩，得到化合物A37-1(890mg，2.96mmol，收率97.9％，纯度97.5％)，为黄色固体。
在25℃下，将化合物Int1(1.20g，3.41mmol，1.00当量)、化合物A37-1(1.00g，3.41mmol，1.00当量)、吡啶(312mg，3.95mmol，319μL，2.00当量)、Cs2CO3(3.33g，10.2mmol，3.00当量)和DMF(10.0mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，升温至80℃反应12小时。LC-MS显示剩余57.8％的化合物A37-1(RT＝0.317min)，并且检测到24.57％的目标质谱(RT＝0.454min)。真空浓缩，加入水(50mL*3)溶液，加入乙酸乙酯(100mL×3)萃取3次，合并的有机相用饱和食盐水(100mL*2)洗涤，硫酸钠干燥，过滤。将反应液浓缩，得到化合物A37-2(1.50g，粗品)，为黄色油状物。
在25℃下，将化合物A37-2(100mg，199μmol，1.00当量)、HCl/二噁烷(4.00M，1.10mL，22.1当量)和MeOH(2.00mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，于25℃反应3小时。TLC(石油醚:乙酸乙酯＝0:1)显示化合物A37-2(Rf＝0.600)反应完全，并且检测到新点(Rf＝ 0.200)。将反应液浓缩，得到化合物A37-3(87.0mg，197μmol，收率99.0％，纯度98.0％，HCl)，为白色固体。
在25℃下，将化合物A37-3(87.0mg，197μmol，1.00当量，HCl)加入MeOH(10.0mL)和DCM(10.0mL)中，再将Amberlyst A26(4.00g，197μmol，1.00当量)加入100mL三口圆底烧瓶中，于25℃反应0.5小时。TLC(二氯甲烷:甲醇＝1:2)显示化合物A37-3(Rf＝0.100)反应完全，并且检测到新点(Rf＝0.12)。向反应液中加入MeOH(10.0ml)，在25℃下过滤。在40℃和真空下过滤浓缩，得到粗产物。在中性条件下冻干，得到化合物A37(61.2mg，154μmol，收率78.4％，纯度100％)，为灰白色固体。LCMS:m/z＝397.0(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(s,1H),8.41(s,3H),8.18(d,J＝6.4Hz,1H),7.64-7.53(m,2H),4.79-4.19(m,1H),2.71-2.66(m,1H),2.18-1.95(m,2H),1.93-1.75(m,2H),1.56-1.49(m,4H).
制备例38.化合物A38的合成
在20-25℃下，将4-羟基环己甲酸甲酯(1.00g，6.32mmol，1.00当量)、TEA(959mg，9.48mmol，1.32mL，1.50当量)和DCM(10.0mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，再缓慢加入溶于DCM(10.0mL)中的Ms2O(1.43g，8.22mmol，1.30当量)，于0℃反应3小时。TLC(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)显示4-羟基环己甲酸甲酯被消耗完全(Rf＝0.40)，并且生成新点(Rf＝0.50)。浓缩得到化合物A38-1(1.30g，粗品)，为黄色油状物。
在20-25℃下，将化合物Int1(1.00g，2.83mmol，1.00当量)、Cs2CO3(1.84g，5.65mmol，2.00当量)、A38-1(802mg，3.39mmol，1.20当量)和DMF(15.0mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，升温至80℃反应12小时。LCMS显示剩余21.8％的化合物A38-1，并且检测到目标质谱(RT＝0.427min)。倒入水(50.0mL)中，用乙酸乙酯(50.0mL)萃取2次，溶液用盐水(50.0mL)洗涤3次，硫酸钠干燥，过滤，粗产物用硅胶柱层析纯化，并且浓缩，得到化合物A38-2(680mg，1.42mmol，收率50.3％，纯度91.8％)，为白色固体。
在20-25℃下，将化合物A38-2(160mg，364.14μmol，1.00当量)、THF(2.40mL)和H2O(0.80mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，降温至0℃，加入LiOH.H2O(15.3mg，364μmol，1.00当量)和THF(0.30mL)，于0℃反应2小时。LC-MS显示化合物A38-2被消耗完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.376min)。倒入水(20.0mL)中，调节pH至4-5，用乙酸乙酯(20.0mL)萃取2次，溶液用盐水(20.0mL)洗涤2次，硫酸钠干燥，过滤，粗品用制 备型HPLC纯化，并且浓缩，得到化合物A38(46.3mg，104μmol，收率28.5％，纯度95.3％)，为白色固体。LCMS:m/z＝426.1(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.7(s,1H),8.42-8.35(m,3H),8.18(d,J＝7.2Hz,1H),7.64(s,1H),7.52(s,1H),4.35-4.31(m,1H),2.60(d,J＝4.4Hz,1H),2.08-1.95(m,7H),1.70-1.63(m,2H).
制备例39.化合物A39的合成
在20-25℃下，将3-甲氧基-4-硝基-1H-吡唑(1g，6.99mmol，1.00当量)、4-(4-BOC-1-哌嗪基)苯硼酸(2.35g，7.69mmol，1.10当量)、吡啶(1.66g，20.9mmol，1.69mL，3.00当量)和Cu(OAc)2(152mg，838μmol，0.12当量)加入10mL单口瓶中，再加入DMF(10.0mL)，置换三次氧气，在20-25℃反应12小时。LC-MS显示剩余57.3％的3-甲氧基-4-硝基-1H-吡唑，并且检测到目标质谱。将反应液直接浓缩，用乙酸乙酯打浆，得到化合物A39-1(1.05g，2.59mmol，收率37.0％，纯度99.5％)，为黄色固体。
在20-25℃下，将化合物A39-1(500mg，1.23mmol，1.00当量)、NH4Cl(329mg，6.17mmol，5.00当量)、EtOH(20.0mL)和H2O(2.00mL)加入100mL单口瓶中，升温到50℃，反应0.5小时。再加入Fe(206mg，3.70mmol，3.00当量)，在85℃反应12小时。LCMS显示化合物A39-1反应完全，并且检测到目标质谱。将反应液冷却到25℃，加入硅藻土，搅拌10分钟，并且过滤。滤液加水，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，并且浓缩，得到化合物A39-2(510mg，1.07mmol，收率87.0％，纯度78.6％)，为黑色固体。
在20-25℃下，将6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(193mg，1.01mmol，1.20当量)、HATU(384mg，1.01mmol，1.20当量)、DIPEA(217mg，1.68mmol，293μL，2.00当量)和DCM(10.0mL)加入100mL单口瓶中，在0-5℃反应0.5小时。再加入化合物A39-2(400mg，841μmol，1.00当量)，在0-5℃反应1小时。LCMS显示剩余7.76％的化合物A39-2，并且检测到目标质谱。将反应液浓缩，粗品用制备型HPLC纯化，得到化合物A39-3(288mg，310μmol，收率36.8％，纯度58.9％)，为黑色固体。
在20-25℃下，将化合物A39-3(288mg，310μmol，1.00当量)、TFA(990mg，8.69mmol， 645μL，28.0当量)和DCM(2.00mL)加入100mL单口瓶中，在20℃反应12小时。LCMS显示化合物A39-3反应完全，并且检测到目标质谱。将反应液浓缩，得到化合物A39-4(180mg，粗品)，为黄色固体。
在20-25℃下，将化合物A39-4(180mg，403μmol，1.00当量)、MeOH(3.00mL)和DCM(3.0mL)加入50mL单口瓶中，再加入Amberlyst A26(1.00g，403μmol，1.00当量)，在20-25℃反应0.5小时。点板显示剩余化合物A39-4，并且检测到生成新点。将反应液过滤，浓缩，并且冻干，得到化合物A39(120mg，267μmol，收率66.2％，纯度98.7％)，为黄色固体。LCMS:m/z＝447(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ9.72(s,1H),8.56-8.46(m,1H),8.42-8.30(m,2H),8.18(dd,J＝2.2,6.6Hz,1H),7.68-7.46(m,2H),7.12-6.94(m,2H),3.98(s,3H),3.16(br d,J＝4.6Hz,1H),3.06-3.02(m,3H),2.86-2.80(m,3H),2.62(br d,J＝3.2Hz,1H).
制备例40.化合物A40的合成
在20-25℃下，将3-甲氧基-4-硝基-1H-吡唑(1.00g，6.99mmol，1.00当量)、苯硼酸(937mg，7.69mmol，1.10当量)、吡啶(1.66g，20.9mmol，1.69mL，3.00当量)和DMF(17.0mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，再加入Cu(OAc)2(152mg，838μmol，0.12当量)，置换3次氮气，升温至25℃反应12小时。LCMS显示剩余11.4％的3-甲氧基-4-硝基-1H-吡唑，并且检测到目标质谱。将反应物直接浓缩，粗品用制备型HPLC纯化，并且冻干，得到化合物A40-1(800mg，3.65mmol，收率52.2％，纯度100％)，为黄色固体。
在20-25℃下，将化合物A40-1(500mg，2.28mmol，1.00当量)、EtOH(20.0mL)和H2O(2.00mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，再加入NH4Cl(610mg，11.4mmol，5.00当量)，升温至50℃反应0.5小时，再加入Fe(382mg，6.84mmol，3.00当量)，升温至85℃反应12小时。LCMS显示化合物A40-1反应完全，并且检测到目标质谱。将反应降温至25℃，将硅藻土加入反应液，搅拌10分钟，过滤，滤液倒入水中，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，并且浓缩，得到化合物A40-2(510mg，1.92mmol，收率84.0％，纯度71.1％)，为黑色固体。
在0-5℃下，将化合物6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(344mg，1.80mmol，1.20当量)、HATU(628mg，1.65mmol，1.10当量)、DIPEA(388.mg，3.01mmol，523μL，2.00当量)和DCM (10.0mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，再加入化合物A40-2(400mg，1.50mmol，1.00当量)，在0-5℃下反应2小时。LCMS检测到目标质谱。将反应液直接浓缩，粗品用制备型HPLC纯化，并且冻干，得到化合物A40(182mg，495μmol，收率33.0％，纯度98.6％)，为黄色固体。LCMS:m/z＝363(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ9.76(s,1H),8.68(s,1H),8.42-8.32(m,2H),8.18(dd,J＝1.8,6.8Hz,1H),7.76(d,J＝7.8Hz,2H),7.46(dd,J＝7.6,8.4Hz,2H),7.26-7.18(m,1H),4.02(s,3H).
制备例41.化合物A41的合成
在20-25℃下，将4-氨基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(8.50g，60.2mmol，1.00当量)和DCM(130mL)加入250mL三口圆底烧瓶中，降温至0-5℃，再加入6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(11.7g，61.4mmol，1.02当量)和ECD·HCl(13.8g，72.2mmol，1.20当量)，在0℃反应1小时。LCMS显示4-氨基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯反应完全，并且检测到目标质谱。将反应液浓缩，加水，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，并且浓缩，得到化合物A41-1(18.3g，57.3mmol，收率95.1％，纯度98.4％)，为黑色固体。
在20-25℃下，将化合物A41-1(5.00g，15.6mmol，1.00当量)、苯硼酸(1.91g，15.6mmol，1当量)和DMF(50.0mL)加入250mL三口圆底烧瓶中，再加入Cu(OAc)2(341mg，1.88mmol，0.12当量)和K2CO3(4.33g，31.3mmol，2.00当量)，置换三次氧气，升温至85℃反应12小时。LCMS显示剩余2.33％的化合物A41-1，并且检测到目标质谱。将反应液冷却至20-25℃，通过硅藻土过滤。用乙酸乙酯洗涤滤饼，向滤液中加水，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，并且浓缩。粗品用制备型HPLC纯化，得到化合物A41-2(2.00g，5.01mmol，收率31.9％，纯度97.7％)，为黄色固体。
在20-25℃下，将化合物A41-2(1.00g，2.50mmol，1.00当量)和THF(15.0mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，降温至0-5℃，置换氮气三次，再加入NaBH4(1.23g，32.5mmol，13.0当量)，在65℃反应12小时。LCMS显示剩余化合物A41-2，并且检测到目标质谱。将反应液倒入氯化铵水溶液中，用乙酸乙酯萃取，用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩。粗产物采用柱层析纯化，得到化合物A41-3(400mg，1.10mmol，收率43.8％，纯度99.4％)，为白色固体。
在20-25℃下，将化合物A41-3(338mg，927μmol，1.00当量)和DCM(5.00mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，再加入DMP(786mg，1.85mmol，574μL，2.00当量)，在25℃反应12小时。LCMS显示化合物A41-3反应完全，并且检测到目标质谱。将反应液倒入硫代硫酸钠水溶液中，用二氯甲烷萃取，用碳酸氢钠和盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，并且浓缩，得到化合物A41-3(400mg，1.10mmol，收率43.8％，纯度99.4％)，为白色固体。
在20-25℃下，将化合物A41-3(325mg，733μmol，1.00当量)和DCM(10mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，再加入DAST(2.36g，14.6mmol，1.94mL，20.0当量)，在25℃反应12小时。LCMS显示化合物A41-3反应完全，并且检测到目标质谱。将反应液倒入碳酸氢钠水溶液中，用二氯甲烷萃取，用碳酸氢钠和盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩。用甲基叔丁基醚打浆，得到化合物A41(96.9mg，247μmol，收率33.7％，纯度97.6％)，为白色固体。LCMS:m/z＝383.1(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ10.30(s,1H),8.94(s,1H),8.52-8.36(m,2H),8.23(d,J＝7.6Hz,1H),7.89(d,J＝8.0Hz,2H),7.56(t,J＝8.0Hz,2H),7.47-7.17(m,2H).
制备例42.化合物A42的合成
在20-25℃下，将化合物A41-1(5.00g，15.6mmol，1.00当量)、4-(4-BOC-1-哌嗪基)苯硼酸(4.79g，15.6mmol，1.00当量)和DMF(50.0mL)加入500mL三口圆底烧瓶中，再加入Cu(OAc)2(341.27mg，1.88mmol，0.12当量)和K2CO3(4.33g，31.3mmol，2.00当量)，在85℃反应12小时。LCMS显示剩余9.90％的化合物A41-1，并且检测到目标质谱。将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取，用碳酸氢钠和盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，并且浓缩。粗品用制备型HPLC纯化，得到化合物A42-1(1.30g，2.26mmol，收率14.4％，纯度100％)，为白色固体。
在20-25℃下，将化合物A42-1(1.00g，1.74mmol，1.00当量)和THF(15.0mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，降温至0-5℃，氮气置换三次，再加入NaBH4(856mg，22.6mmol，13.0当量)，在65℃反应12小时。LCMS显示化合物A42-1反应完全，并且检测到目标质 谱。将反应液倒入氯化铵水溶液中，用乙酸乙酯萃取，用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，并且浓缩。粗品进行柱层析分离，得到化合物A42-2(400mg，726μmol，收率41.7％，纯度99.3％)，为白色固体。
在25℃下，将化合物A42-2(334mg，606μmol，1.00当量)和DCM(1.00mL)加入到100mL三口瓶中，置换氮气3次，再加入DMP(514mg，1.21mmol，376μL，2.00当量)，在25℃反应12小时。LCMS显示化合物A42-2反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.553min)。倒入饱和氯化铵(20.0mL)和饱和碳酸氢钠(20.0mL)，用乙酸乙酯(20.0mL*3)萃取3次。用饱和食盐水(20.0mL)洗涤有机相，硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩，得到化合物A42-3(400mg，539μmol，收率88.9％，纯度73.5％)，为黄色固体。
在20-25℃下，将化合物A42-3(430mg，580μmol，1.00当量)和DCM(10mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，再加入DAST(1.87g，11.6mmol，1.53mL，20.0当量)，在25℃反应12小时。LC-MS显示化合物A42-3反应完全，并且检测到目标质谱。将反应液倒入碳酸氢钠水溶液中，用二氯甲烷萃取，用碳酸氢钠和盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，并且浓缩。用甲基叔丁基醚打浆，得到化合物A42-4(65.0mg，114μmol，收率21.2％，纯度100％)，为白色固体。
在20-25℃下，将化合物A42-4(65.0mg，114μmol，1.00当量)和DCM(2mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，再加入TFA(261mg，2.29mmol，170μL，20.0当量)，在25℃反应12小时。LCMS显示化合物A42-4反应完全，并且检测到目标质谱。将反应液倒入碳酸氢钠水溶液中，搅拌10分钟，过滤，并且浓缩，得到化合物A42(65.0mg，114μmol，收率21.2％，纯度100％)，为白色固体。LCMS:m/z＝467.1(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ10.26(s,1H),8.78(s,1H),8.46-8.37(m,2H),8.23(dd,J＝1.2,7.6Hz,1H),7.68(d,J＝9.2Hz,2H),7.29(t,J＝54.0Hz,1H),7.05(d,J＝9.2Hz,2H),3.14-3.07(m,4H),2.87-2.81(m,4H).
制备例43.化合物A43的合成
在20-25℃下，将DCM(40.0mL)、6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(2.40g，12.5mmol，1.00当量)、TEA(7.63g，75.3mmol，10.4mL，6.00当量)和HATU(4.78g，12.5mmol，1.00当量)加入100mL三口圆底烧瓶中，在0-5℃反应0.5小时，加入3-苯基-1H-吡唑-5-胺(2.00 g，12.5mmol，1.00当量)，在20-25℃反应12小时。LCMS显示3-苯基-1H-吡唑-5-胺反应完全，并且检测到目标质谱。过滤并且用二氯甲烷打浆，得到化合物A43-1(3.10g，9.09mmol，收率72.3％，纯度97.4％)，为白色固体。
在20-25℃下，将化合物A43-1(200mg，586μmol，1.00当量)和DMF(1.50mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，再加入二氟氯乙酸钠(268mg，1.76mmol，3.00当量)和K2CO3(243mg，1.76mmol，3.00当量)，在80-85℃反应16小时。LCMS显示剩余约6.2％的化合物A43-1，并且检测到目标质谱。将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，并且浓缩。粗产物用制备型HPLC纯化，得到化合物A43(146mg，392μmol，收率66.9％，纯度100％)，为白色固体。LCMS:m/z＝383.1(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ10.94(s,1H)8.42-8.39(m,2H)7.90(d,J＝6.8Hz,1H)7.78(t,J＝42.4Hz,1H)7.48-7.42(m,3H)7.03(s,1H).
制备例44.化合物A44的合成
步骤A：N-甲基-3-(4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)环丁烷-1-胺
室温下，在3-(4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)环丁烷-1-酮(200mg，0.8mmol，1.0当量)的甲胺/甲醇(20mL)溶液中搅拌15小时。然后加入硼氢化钠(58.8mg，1.6mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下25℃搅拌反应1小时。反应完全后，反应液加水淬灭，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，218mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤B：甲基(3-(4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向N-甲基-3-(4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)环丁烷-1-胺(218mg，0.8mmol，1.0当量)的四氢呋喃/水(2:1，30mL)溶液中加入碳酸氢钠(160mg，1.9mmol，2.4当量)，然后加入二碳酸二叔丁酯(218.6mg，1.0mmol，1.25当量)。反应在室温下搅拌3小时。反应完全后，反应液加水淬灭，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤两次，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，230mg，产率65％)。
步骤C：(3-(4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)环丁基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向甲基(3-(4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯(230mg， 0.6mmol，1.0当量)的甲醇(25mL)溶液中加入10％钯碳(32.9mg，0.3mmol)。反应液在氢气球保护下置换三次并且在氢气下室温搅拌2小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状物，170mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤D：甲基(3-(1-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向(3-(4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)环丁基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(170mg，0.5mmol，1.0当量)和6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(95mg，0.5mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(15mL)溶液中加入EDCI(142.9mg，0.7mmol，1.5当量)、HOBt(100.8mg，0.7mmol，1.5当量)和三乙胺(0.2mL，1.5mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到粗品标题化合物(淡黄色固体，256mg，粗品)。
步骤E：N-(3-(3-(甲氨基)环丁基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
室温下，甲基(3-(1-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)环丁基)氨基甲酸叔丁酯(256mg，0.6mmol，1.0当量)在盐酸/1,4-二氧六环(4N，10mL)溶液中搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(淡黄色固体，9.6mg，产率4％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.68(s,1H),8.43-8.34(m,2H),8.31(s,1H),8.24-8.13(m,1H),7.82(d,J＝7.8Hz,2H),7.56-7.45(m,2H),7.36-7.25(m,1H),2.69-2.59(m,2H),2.29(s,3H),2.22-2.11(m,2H),2.09-1.92(m,2H).LC-MS(ESI):m/z＝416.3[M+H]+.
制备例45.化合物A45的合成
步骤A：4-硝基-1-(嘧啶-5-基)-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(1.00g，5.84mmol，1.0当量)的二氯甲烷(20mL)溶液中加入嘧啶-5-基硼酸(1.09g，8.77mmol，1.5当量)、醋酸铜(1.17g，5.84mmol，1.0当量)和吡啶(1.89mL，23.4mmol，4.0当量)。反应液在氧气保护下室温搅拌反应18 小时。反应完全后，反应液过滤，滤液用水稀释，二氯甲烷萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，580mg，产率40％)。
步骤B：4-氨基-1-(嘧啶-5-基)-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向4-硝基-1-(嘧啶-5-基)-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(280mg，1.12mmol，1.0当量)的乙醇(9mL)和水(3mL)的溶液中加入铁粉(313mg，5.62mmol，5.0当量)和氯化铵(60.1mg，1.12mmol，1.0当量)。反应混合物在80℃搅拌反应1小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，190mg，产率77％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：1-(嘧啶-5-基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向4-氨基-1-(嘧啶-5-基)-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(190mg，0.88mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(7mL)溶液中加入6-(三氟甲基)吡啶甲酸(165.7mg，0.88mmol，1.0当量)、DIEA(336mg，2.6mmol，3.0当量)和HATU(329mg，0.88mmol，1.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应18小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，70mg，产率20％)。
步骤D:1-(嘧啶-5-基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸
在0℃下，向1-(嘧啶-5-基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(70mg，0.18mmol，1.0当量)的甲醇(9mL)、四氢呋喃(9mL)和水(3mL)的混合溶液中加入一水合氢氧化锂(15mg，0.36mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应18小时。反应完全后，反应液用稀释的1N HCl溶液调节PH<5。过滤，干燥得到粗品标题化合物(黄色固体，50mg，产率74％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：N-(3-氨基-1-(嘧啶-5-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-(嘧啶-5-基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸(50mg，0.13mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中加入氯化铵(21.2mg，0.40mmol，3.0当量)、DIEA(51.3mg，0.40mmol，3.0当量)和HATU(75.4mg，0.20mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应0.5小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，15mg，产率30％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.81(s,1H),9.50(s,2H),9.28(s,1H),9.20(s,1H),8.47(d,J＝7.7Hz,1H),8.41(t,J＝7.8Hz,1H),8.23(d,J＝7.6Hz,1H),8.17(s,1H),7.89(s,1H).LC-MS(ESI):m/z 378[M+H]+.
制备例46.化合物A46的合成
步骤A：N-(3-(2-羟基丙-2-基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃氮气保护下，向1-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(100mg，0.256mmol，1.0当量)的四氢呋喃(5mL)溶液中缓慢加入3M甲基溴化镁乙醚溶液(0.85mL，2.56mmol，10当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应18小时。反应完全后，用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，16.1mg，产率16％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.22(s,1H),8.89(s,1H),8.45(d,J＝7.6Hz,1H),8.39(t,J＝7.8Hz,1H),8.19(d,J＝7.7Hz,1H),7.80(d,J＝7.8Hz,2H),7.49(t,J＝7.9Hz,2H),7.29(t,J＝7.4Hz,1H),5.98(s,1H),1.59(s,6H).LC/MS(ESI)m/z:391[M+H]+ .
制备例47.化合物A47的合成
步骤A：苯基甘氨酸叔丁酯
在室温下，向苯胺(4.8g，51.3mmol，1.0当量)和2-溴乙酸叔丁酯(10.0g，51.3mmol，1.0当量)的乙腈(50.0mL)溶液中加入碳酸钾(10.6g，76.9mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应16小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(绿色油状物，10.2g，产率96％)。
步骤B：3-氨基-1-苯基-1H-吡咯-2,4-二甲酸2-(叔丁酯)4-乙酯
在室温下，向苯基甘氨酸叔丁酯(5.0g，24.1mmol，1.0当量)和(Z)-2-氰基-3-乙氧基丙烯酸甲酯(7.5g，48.3mmol，2.0当量)的甲苯(50.0mL)溶液中加入DBU(21.2g，84.4mmol，3.5当量)。反应液在氮气保护下120℃搅拌反应16小时。反应完全后，反应液冷却至室温，用水淬灭，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1.0g，产率13％)。
步骤C：4-氨基-1-苯基-1H-吡咯-3-甲酸乙酯
在0℃下，向3-氨基-1-苯基-1H-吡咯-2,4-二甲酸2-(叔丁酯)4-乙酯(500.0mg，1.5mmol，1.0当量)中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(10mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，300mg，产率86％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤D：1-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡咯-3-甲酸乙酯
在0℃下，向6-(三氟甲基)吡啶甲酸(750mg，3.9mmol，3.0当量)中加入氯化亚砜(5mL)。反应液在氮气保护下80℃搅拌反应2小时。反应完全后，减压浓缩得到6-(三氟甲基)吡啶酰氯(3.0当量)，并将其溶于二氯甲烷(2.0mL)溶液中。在0℃下，向4-氨基-1-苯基-1H-吡咯-3-甲酸乙酯(300.0mg，1.3mmol，1.0当量)和三乙胺(660.0mg，6.5mmol，5.0当量)的二氯甲烷(3.0mL)溶液中滴加6-(三氟甲基)吡啶酰氯(3.0当量)的二氯甲烷溶液。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，300mg，产率57％)。
步骤E：1-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡咯-3-甲酸
在室温下，向1-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡咯-3-甲酸乙酯(300.0mg，743.8μmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入乙硫醇钠(625.6mg，7.4mmol，10.0当量)。反应液在氮气保护下100℃搅拌反应2小时。反应完全后，反应液冷却至室温，反应液用1N HCl稀溶液调节PH 6-7，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，200.0mg，产率72％)。
步骤F：N-(4-氨基-1-苯基-1H-吡咯-3-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡咯-3-甲酸(200.0mg，532.9μmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入氯化铵(43.0mg，800.0μmol，1.5当量)、DIEA(344.4mg，2.7nmol，5.0当量)和HATU(304.0mg，800.0μmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，52.6mg，产率26％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.25(s,1H),8.45-8.35(m,2H),8.17(d,J＝7.4Hz,1H),8.11(d,J＝2.4Hz,1H),8.02(d,J＝2.4Hz,1H),7.75(d,J＝26.4Hz,1H),7.62-7.54(m,4H),7.36(dd,J＝13.8,6.7Hz,2H).LC-MS(ESI):m/z 375 [M+H]+.
制备例48.化合物A48的合成
步骤A：5-苯基-3-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡咯-2-甲酸乙酯
在室温下，向3-氨基-5-苯基-1H-吡咯-2-甲酸乙酯(100mg，0.434mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入6-(三氟甲基)吡啶甲酸(83.0mg，0.434mmol，1.0当量)、DIEA(168mg，1.30mmol，3.0当量)和HATU(165mg，0.434mmol，1.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，130mg，产率74％)。
步骤B：5-苯基-3-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡咯-2-甲酸
在0℃下，向5-苯基-3-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡咯-2-甲酸乙酯(130mg，0.322mmol，1.0当量)的四氢呋喃(10mL)和水(10mL)的混合溶液中加入一水合氢氧化锂(15.4mg，0.645mmol，2.0当量)。反应液在40℃下搅拌反应24小时。反应完全后，反应液用稀释的1N HCl溶液调节PH 5-6。混合液乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，100mg，产率83％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：N-(2-氨基-5-苯基-1H-吡咯-3-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向5-苯基-3-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡咯-2-甲酸(100mg，0.266mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入氯化铵(42.8mg，0.799mmol，3.0当量)、DIEA(103mg，0.799mmol，3.0当量)和HATU(152mg，0.400mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应12小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，30.0mg，产率30％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.45(d,J＝7.8Hz,1H),8.28(t,J＝7.8Hz,1H),8.02(d,J＝7.2Hz,1H),7.73-7.68(m,2H),7.48(s,1H),7.44(t,J＝7.7Hz,2H),7.32(t,J＝7.4Hz,1H).LC-MS(ESI)m/z:375[M+H]+ .
制备例49.化合物A49的合成
步骤A：2-(3-氨基甲酰基-4-硝基-1H-吡唑-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯
将2-(3-(甲氧羰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(2g，3.04mmol，1.0当量)室温下加入到氨气的甲醇溶液中(7N，50mL，12.0当量)。然后将反应混合物在80℃、N2下在密封管中搅拌18小时。将反应物冷却，真空浓缩。使用硅胶柱色谱法纯化残留物，得到白色固体的2-(3-氨基甲酰基-4-硝基-1H-吡唑-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(0.8g，69.30％)。
步骤B：2-(4-氨基-3-氨基甲酰基-1H-吡唑-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯
在室温下，把2-(3-氨基甲酰基-4-硝基-1H-吡唑-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(300mg，0.79mmol，1当量)、乙醇(10mL)、水(2mL)、铁粉(442mg，7.91mmol，10当量)和氯化铵(423mg，7.91mmol，10当量)混合一起搅拌至80摄氏度，持续2小时。反应冷却后，在真空下浓缩。将残留物用硅胶柱色谱法纯化，得到2-(4-氨基-3-氨基甲酰基-1H-吡唑-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(200毫克，72.39％)，为白色固体。
步骤C：2-(3-氨基甲酰基-4-(3-异氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯
在0℃下，在氮气保护下，向3-异氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酸(107mg，0.57mmol，1当量)、2-(4-氨基-3-氨基甲酰基-1H-吡唑-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(200mg，0.57mmol，1当量)和DIEA(222mg，1.72mmol，3当量)的DMF(5mL)溶液中加入HATU(326.44mg，0.859mmol，1.5当量)，反应在氮气下搅拌1小时。反应液加水，萃取，干燥并真空浓缩。残余物通过快速柱纯化，得到无色油状的2-(3-氨基甲酰基-4-(3-异氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(200mg，产率67.38％)。
步骤D：N-(3-氨基甲酰基-1-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-1H-吡唑-4-基)-3-异氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺
在氮气保护下，在冰浴搅拌下把2-(3-氨基甲酰基-4-(3-异氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(150mg，0.412mmol，1当量)加入到HCl/EA(4N，5mL)溶液，反应混合物在氮气下搅拌反应1小时。将反应物真空浓缩。 残余物通过制备高效液相色谱法纯化，得到黄色固体状的N-(3-氨基甲酰基-1-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-1H-吡唑-4-基)-3-异氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺(98.7mg，产率61.16％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.12(s,1H),8.97(s,1H),8.71(d,J＝2.1Hz,1H),8.48(s,1H),8.39(s,1H),7.74(d,J＝4.8Hz,1H),7.60(s,1H),7.49(s,1H),7.10(d,J＝4.8Hz,1H),4.98(p,J＝8.3Hz,1H),2.87(dd,J＝30.5,4.0Hz,4H),2.42(dd,J＝15.3,5.0Hz,2H),2.34-2.28(m,2H),1.74(s,4H).
制备例50.化合物A50的合成
步骤A：5-苯基-3-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)噻吩-2-甲酸甲酯
在室温下，向3-氨基-5-苯基噻吩-2-甲酸甲酯(500.0mg，2.1mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入6-(三氟甲基)吡啶甲酸(615.0mg，3.2mmol 1.5当量)、HOBT(652.0mg，4.3mmol，2.0当量)、EDCI(823.0mg，4.3mmol，2.0当量)和三乙胺(1.1g，10.7mmol，5.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应18小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，600mg，产率70％)。
步骤B：5-苯基-3-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)噻吩-2-甲酸
在0℃下，向5-苯基-3-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)噻吩-2-甲酸甲酯(600.0mg，1.47mmol，1.0当量)的四氢呋喃(4mL)和水(4mL)的混合溶液中加入氢氧化锂(176.4mg，7.4mmol，5.0当量)。反应液在50℃下搅拌反应18小时。反应完全后，反应液用稀释的1N HCl溶液调节PH＝4。混合液乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，300mg，产率69％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：N-(2-氨基-5-苯基噻吩-3-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向5-苯基-3-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)噻吩-2-甲酸(100.0mg，340.1μmol，1.0当量)和HATU(193.9mg，510.2μmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中加入氯化铵(36.4mg，680.2μmol，2.0当量)和三乙胺(172.1mg，1.7mmol，5.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水 和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，8.7mg，产率7％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.18(s,1H),8.55(s,1H),8.47(d,J＝7.7Hz,1H),8.40(t,J＝7.8Hz,1H),8.22(d,J＝7.1Hz,1H),7.81(s,2H),7.76-7.69(m,2H),7.52(t,J＝7.5Hz,2H),7.45(t,J＝7.3Hz,1H).LC-MS(ESI):m/z 392[M+H]+.
制备例51.化合物A51的合成
步骤A：6-(三氟甲基)吡啶酰氯
在0℃下，向6-(三氟甲基)吡啶甲酸(2.0g 2.1mmol，1.0当量)中加入氯化亚砜(20mL)。反应液在氮气保护下80℃搅拌反应2小时。反应完全后，减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，2.0g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤B：5-苯基-2-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)噻吩-3-甲酸乙酯
在0℃下，向2-氨基-5-苯基噻吩-3-甲酸乙酯(172.95mg，0.7mmol，1.0当量)和三乙胺(48.7mg，2.0mmol，3.0当量)的二氯甲烷(8.0mL)溶液中滴加6-(三氟甲基)吡啶酰氯(500.0mg，粗品)的二氯甲烷溶液。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(无色油状物，100mg，产率29％)。
步骤C：5-苯基-2-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)噻吩-3-甲酸
在0℃下，向5-苯基-2-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)噻吩-3-甲酸乙酯(100.0mg，0.2mmol，1.0当量)的四氢呋喃(5mL)和水(1mL)的混合溶液中加入氢氧化锂(75.6mg，0.6mmol，3.0当量)。反应液在80℃下搅拌反应16小时。反应完全后，反应液用稀释的1N HCl溶液调节PH＝4。混合液乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品标题化合物(无色油状物，100mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤D：N-(3-氨基-5-苯基噻吩-2-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向5-苯基-2-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)噻吩-3-甲酸(100.0mg，0.02mmol，1.0当量)和HATU(1mL)的N,N-二甲基甲酰胺(2mL)溶液中加入氯化铵(200.0mg，0.02 mmol，1.0当量)和三乙胺(1mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，11.4mg，产率11％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.93(s,1H),8.51-8.38(m,2H),8.23(d,J＝7.5Hz,1H),8.00(s,1H),7.96(s,1H),7.76(s,1H),7.63(d,J＝7.5Hz,2H),7.47(t,J＝7.7Hz,2H),7.33(t,J＝7.3Hz,1H).LC-MS(ESI):m/z 392[M+H]+.
制备例52.化合物A52的合成
步骤A：3-氨基-5-苯基呋喃-2-甲酸乙酯
在室温下，向3-苯基丙腈(500.0mg，2.1mmol，1.0当量)和2-羟基乙酸乙酯(218.63mg，2.1mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶液中加入碳酸钾(438.0mg，3.1mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下100℃搅拌反应2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(无色油状物，450.0mg，产率48％)。
步骤B：5-苯基-3-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)呋喃-2-甲酸乙酯
在0℃下，向3-氨基-5-苯基呋喃-2-甲酸乙酯(162.4mg，0.7mmol，1.0当量)和DIEA(48.7mg，2.0mmol，3.0当量)的二氯甲烷(8.0mL)溶液中滴加6-(三氟甲基)吡啶酰氯(100.0mg，粗品)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(无色油状物，80mg，产率29％)。
步骤C：5-苯基-3-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)呋喃-2-甲酸
在0℃下，向5-苯基-3-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)呋喃-2-甲酸乙酯(80.0mg，0.2mmol，1.0当量)的四氢呋喃(5mL)和水(1mL)的混合溶液中加入氢氧化钠(75.6mg，0.6mmol，3.0当量)。反应液在80℃下搅拌反应16小时。反应完全后，反应液用稀释的1N HCl溶液调节PH＝4。混合液乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品标题化合物(无色油状物，80.0mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤D：N-(2-氨基-5-苯基呋喃-3-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向5-苯基-3-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)呋喃-2-甲酸(80.0mg，20.0μmol，1.0当量)和HATU(11.4mg，30.0μmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)溶液中加入氯化铵(90.0mg，0.1mmol，1.5当量)和DIEA(2.0mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，26.6mg，产率33％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.81(s,1H),8.47(d,J＝7.7Hz,1H),8.41(t,J＝7.8Hz,1H),8.23(d,J＝7.6Hz,1H),8.11(s,1H),8.03(d,J＝7.4Hz,2H),7.87(s,1H),7.71(s,1H),7.51(t,J＝7.5Hz,2H),7.42(t,J＝7.3Hz,1H).LC-MS(ESI):m/z 376[M+H]+.
制备例53.化合物A53的合成
步骤A：2-氨基-5-苯基呋喃-3-甲腈
在室温下，向2-溴-1-苯乙醇-1-酮(2.0g，10.0mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(30.0mL)溶液中加入二氰甲烷(0.66g，10.0mmol，1.0当量)和二乙胺(2.2g，30.1mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，加水(100mL)并继续搅拌20分钟。过滤，滤饼用水洗涤两次，干燥完全得到粗品标题化合物(黄色固体，1.0g，产率54％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤B：N-(3-氰基-5-苯基呋喃-2-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃下，向2-氨基-5-苯基呋喃-3-甲腈(1.0g，5.4mmol，1.0当量)和DIEA(2.1g，16.3mmol，3.0当量)的二氯甲烷(10.0mL)溶液中滴加6-(三氟甲基)吡啶-2-羰基氯(1.7g，8.1mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应0.5小时。反应完全后，二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，500.0mg，产率26％)。
步骤C：N-(3-氨基-5-苯基呋喃-2-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
向N-(3-氰基-5-苯基呋喃-2-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(500.0mg，1.4mmol，1.0当量)中加入磷酸(20.0mL)。反应液在100℃搅拌反应1小时。反应完全后，冷却至室温，用水稀释，二氯甲烷萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，31.5mg，产率6％)。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ12.45(s,1H),8.50-8.38(m,2H),8.24(d,J＝7.5Hz,1H),7.85(s,1H),7.65(d,J＝7.5Hz,2H),7.56(s,1H),7.49(t,J＝7.8Hz,2H),7.40(s,1H),7.34(t,J＝7.4Hz,1H).LC-MS(ESI):m/z 376[M+H]+.
制备例54.化合物A54的合成
步骤A：苯甲酰氨基硫代甲酸苄酯
在室温下，向搅拌的苯甲酰硫代酸(500mg，3.6mmol，1.0当量)的氯仿(2mL)溶液中缓慢加入溴甲基苯(0.44mL，3.6mmol，1.0当量)的氯仿(3mL)溶液。反应混合物在回流下搅拌12小时。反应完全后，减压浓缩，残余物用乙醚稀释直至固体析出。过滤，滤饼用低温乙醚洗涤，完全干燥后得到标题化合物(白色固体，600mg，产率53％)。
步骤B：4-氨基-2-苯基-1H-咪唑-5-甲腈
在0℃下，向苯甲酰氨基硫代甲酸苄酯(500mg，2.2mmol，1.0当量)的氯仿(5mL)溶液中加入2-氨基丙二腈(535mg，6.6mmol，3.0当量)和吡啶(0.54mL，6.6mmol，3.0当量)。反应混合物在室温下搅拌16小时。反应完全后，用饱和氯化铵溶液淬灭，二氯甲烷萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱分离得到标题化合物(黄色固体，320mg，产率78％)。
步骤C：N-(4-氰基-2-苯基-1H-咪唑-5-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向4-氨基-2-苯基-1H-咪唑-5-甲腈(320mg，1.7mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(4 98.0mg，2.6mmol，1.5当量)、HATU(990.9mg，2.6mmol，1.5当量)和DIEA(673.52mg，5.211mmol，3.0当量)。反应混合物40℃下搅拌16小时。反应完全后，将反应液用饱和氯化铵水溶液稀释，二氯甲烷萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，200mg，产率32％)。
步骤D：N-(4-氨基-2-苯基-1H-咪唑-5-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向N-(4-氰基-2-苯基-1H-咪唑-5-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(200mg，0.56mmol，1.0当量)的乙酸(10mL)溶液中加入浓硫酸(2mL)。反应混合物在40℃下搅拌16小时。反应完全后，冷却至室温，用水稀释，二氯甲烷萃取三次。混合有机相用水和饱和食 盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱分离得到标题化合物(黄色固体，77mg，产率36％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.85(brs,1H),12.06(brs,1H),8.48(d,J＝7.7Hz,1H),8.42(t,J＝7.7Hz,1H),8.24(d,J＝7.6Hz,1H),8.08(d,J＝6.4Hz,2H),7.63-7.27(m,5H).LC-MS(ESI):m/z 376[M+H]+.
制备例55.化合物A55的合成
步骤A：4-羟基-2-苯基噻唑-5-甲酸乙酯
在室温下，向苯甲硫酰胺(1g，7.29mmol，1.0当量)的乙醇(20mL)溶液中加入2-溴-3-乙氧基-3-氧代丙酸乙酯(1.92g，8.02mmol，1.1当量)。反应混合物在80℃下搅拌2小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经柱色谱分离得到标题化合物(黄色固体，1.6g，产率88％)。
步骤B：2-苯基-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)噻唑-5-甲酸乙酯
在0℃下，向4-羟基-2-苯基噻唑-5-甲酸乙酯(1.6g，6.42mmol，1.0当量)和三乙胺(1.80mL，12.84mmol，2.0当量)的二氯甲烷(20mL)溶液中缓慢加入三氟甲磺酸酐(2.17g，7.70mmol，1.2当量)。反应混合物在室温下搅拌2小时。反应完全后，用饱和氯化铵溶液淬灭，二氯甲烷萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱分离得到标题化合物(白色固体，1.3g，产率53％)。
步骤C：4-((叔丁氧羰基)氨基)-2-苯基噻唑-5-甲酸乙酯
在室温下，向2-苯基-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)噻唑-5-甲酸乙酯(1.3g，3.409mmol，1.0当量)和氨基甲酸叔丁酯(0.80g，6.82mmol，2.0当量)的1,4-二氧六环(20mL)溶液中加入Pd2(dba)3(0.31g，0.34mmol，0.1当量)、XantPhos(0.30g，0.51mmol，0.15当量)和碳酸铯(4.44g，13.64mmol，4.0当量)。反应混合物在氮气保护下80℃搅拌反应2小时。反应完全后，冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1g，产率84％)。
步骤D：4-((叔丁氧羰基)氨基)-2-苯基噻唑-5-甲酸
在0℃下，向4-((叔丁氧羰基)氨基)-2-苯基噻唑-5-甲酸乙酯(0.8g，2.30mmol，1.0当量)的四氢呋喃(5mL)和水(5mL)的混合溶液中加入氢氧化锂(0.19g，4.59mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，反应液用稀释的4N HCl溶液调节PH＝4。混合液乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，600mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：(5-氨基甲酰基-2-苯基噻唑-4-基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向4-((叔丁氧羰基)氨基)-2-苯基噻唑-5-甲酸(400mg，1.25mmol，1.0当量)和氯化铵(334mg，6.24mmol，5.0当量)的二氯甲烷(8mL)溶液中加入HATU(569.7mg，1.50mmol，1.2当量)和DIEA(484.1mg，3.75mmol，3.0当量)。反应混合物室温下搅拌3小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，230mg，产率58％)。
步骤F：(5-氰基-2-苯基噻唑-4-基)氨基甲酸叔丁酯
在0℃下，向(5-氨基甲酰基-2-苯基噻唑-4-基)氨基甲酸叔丁酯(160mg，0.50mmol，1.0当量)和三乙胺(0.20mL，1.50mmol，3.0当量)的二氯甲烷(5mL)溶液中缓慢加入三氟乙酸酐(157.8mg，0.75mmol，1.5当量)。反应混合物在室温下搅拌2小时。反应完全后，用水稀释，二氯甲烷萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱分离得到标题化合物(白色固体，100mg，产率66％)。
步骤G：4-氨基-2-苯基噻唑-5-甲腈
在0℃下，向(5-氰基-2-苯基噻唑-4-基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.33mmol，1.0当量)中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(1mL，4mmol，12当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，60mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤H：2-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)噻唑-5-甲酰胺和4-氨基-2-苯基-N-(6-(三氟甲基)吡啶酰基)噻唑-5-甲酰胺
在0℃氮气保护下，向4-氨基-2-苯基噻唑-5-甲腈(60mg，0.30mmol，1.0当量)的四氢呋喃(3mL)溶液中分批加入60重量％氢化钠(21.46mg，0.89mmol，3.0当量)。反应混合物室温下搅拌0.5小时。向上述反应液中继续加入6-(三氟甲基)吡啶酰氯(75mg，0.36mmol，1.2当量)。反应混合物在室温氮气保护下搅拌反应2小时。反应完全后，用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到2-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)噻唑-5- 甲酰胺(黄色固体，15.3mg，产率13％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.69(s,1H),8.42-8.36(m,2H),8.24(dd,J＝6.4,2.4Hz,1H),7.97-7.94(m,2H),7.64(s,2H),7.60-7.53(m,3H).LC-MS(ESI):m/z 393[M+H]+.；4-氨基-2-苯基-N-(6-(三氟甲基)吡啶酰基)噻唑-5-甲酰胺(白色固体，2.7mg，产率2％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.74(s,1H),8.46(d,J＝7.6Hz,1H),8.40(t,J＝7.7Hz,1H),8.22(d,J＝7.7Hz,1H),8.03-7.99(m,2H),7.92(brs,2H),7.60-7.57(m,3H).LC-MS(ESI):m/z 393[M+H]+.
制备例56.化合物A56的合成
步骤A：5-氨基-2-苯基噻唑-4-甲酰胺
在室温下，向2-氨基-2-氰基乙酰胺(1.0g，10.1mmol，1.0当量)的甲苯(20mL)和N-甲基吡咯烷酮(20mL)的混合溶液中加入苯甲醛(1.0mL，10.1mmol，1.0当量)、环辛硫烷(520.0mg，2.0mmol，0.2当量)和1-甲基咪唑(830.0mg，10.1mmol，1.0当量)。反应混合物在80℃搅拌反应16小时。反应完全后，反应液冷却至室温，倒入水中，乙酸乙酯萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，450mg，产率20％)。
步骤B：2-苯基-5-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)噻唑-4-甲酰胺
在室温下，向6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(217.9mg，1.14mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入HATU(433.5mg，1.14mmol，1.0当量)和DIEA(294.7mg，2.3mmol，2.0当量)。反应混合物室温下搅拌0.5小时。向上述反应液中继续加入5-氨基-2-苯基噻唑-4-甲酰胺(250.0mg，1.14mmol，1.0当量),反应混合物在40℃搅拌反应12小时。反应完全后，将反应液用二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，70mg，产率16％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.42(s,1H),8.50-8.41(m,2H),8.26(d,J＝7.6Hz,1H),8.05(dd,J＝7.8,1.3Hz,3H),7.96(s,1H),7.56-7.50(m,3H).LC-MS(ESI):m/z 393[M+H]+.
制备例57.化合物A57的合成
步骤A：2-硝基-1-苯乙醇-1-酮肟
在室温下，向苯乙烯(5.549mL，48.008mmol，1.0当量)的二甲基亚砜(100mL)和水(50mL)的混合溶液中加入亚硝酸叔丁酯(9.90g，96.015mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应12小时。反应完全后，将反应液用二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状物，7.0g，产率81％)。
步骤B：2-(((2-硝基-1-苯亚乙基)氨基)氧基)-2-氧代乙酸甲酯
在室温下，向2-硝基-1-苯乙醇-1-酮肟(3.0g，16.6mmol，1.0当量)的乙醚(100mL)溶液中加入2-氯-2-氧代乙酸甲酯(2.04g，16.6mmol，1.0当量)。反应液在室温下搅拌反应24小时。反应完全后，将反应液用二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状物，4.0g，产率90％)。
步骤C：4-硝基-3-苯基异噁唑-5-甲酸甲酯
在室温下，向2-(((2-硝基-1-苯亚乙基)氨基)氧基)-2-氧代乙酸甲酯(4.0g，15.0mmol，1.0当量)的二氯甲烷(60mL)溶液中加入三乙胺(2.1mL，15.0mmol，1.0当量)。反应液在40℃下搅拌反应48小时。反应完全后，冷却至室温，将反应液用二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.0g，产率27％)。
步骤D：4-硝基-2-苯基噁唑-5-甲酸甲酯
在室温下，向4-硝基-3-苯基异噁唑-5-甲酸甲酯(50mg，0.201mmol，1.0当量)的二甲苯(5mL)溶液中加入无水FeCl3-SiO2试剂(2mg，0.201mmol，1.0当量)。反应液在封管中155℃下搅拌反应完全。反应完全后，冷却至室温，将反应液用二氯甲烷稀释，过滤，滤液减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，30mg，产率60％)。
步骤E：4-氨基-2-苯基噁唑-5-甲酸甲酯
在室温下，向4-硝基-2-苯基噁唑-5-甲酸甲酯(300mg，1.21mmol，1.0当量)的甲醇(10mL)和水(2mL)溶液中加入铁粉(337mg，6.04mmol，5.0当量)和氯化铵(323mg，6.04mmol， 5.0当量)。反应液在80℃搅拌反应2小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，180mg，产率68％)。
步骤F：2-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)噁唑-5-甲酸甲酯
在室温下，向4-氨基-2-苯基噁唑-5-甲酸甲酯(170mg，0.779mmol，1.0当量)的乙腈(15mL)溶液中加入6-(三氟甲基)吡啶甲酸(1.49g，7.79mmol，10当量)和N-甲基咪唑(1.28g，15.6mmol，20当量)。反应混合物在80℃搅拌反应5分钟。向上述反应液中继续加入N,N,N',N'-四甲基氯甲脒六氟磷酸盐(2.19g，7.79mmol，10当量)。反应液在80℃搅拌反应5小时。反应完全后，冷却至室温，倒入冰水中，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，200mg，产率46％)。
步骤G：2-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)噁唑-5-甲酰胺
在室温下，向2-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)噁唑-5-甲酸甲酯(150mg，0.383mmol，1.0当量)中加入2N胺甲醇溶液(15mL)。反应液在室温搅拌反应8小时。反应完全后，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，15.7mg，产率11％)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ11.46(s,1H),8.53(d,J＝7.8Hz,1H),8.20(d,J＝6.7Hz,2H),8.14(t,J＝7.8Hz,1H),7.91(d,J＝7.8Hz,1H),7.58-7.47(m,3H),5.97(s,2H).LC-MS(ESI):m/z 377[M+H]+.
制备例58.化合物A58的合成
步骤A：5-氨基-2-苯基噁唑-4-甲腈
在0℃下，向氨基丙二腈对甲苯磺酸盐(2g，7.896mmol，1.0当量)的N-甲基吡咯烷酮(20mL)的溶液中加苯甲酰氯(1.22g，8.686mmol，1.1当量)。反应混合物在室温下搅拌反应18小时。反应完全后，用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1g，产率68％)。
步骤B：N-(4-氰基-2-苯基噁唑-5-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃氮气保护下，向5-氨基-2-苯基噁唑-4-甲腈(300mg，1.620mmol，1.0当量)的四氢呋喃(5mL)溶液中分批加入60重量％氢化钠(129.60mg，3.240mmol，2.0当量)。反应混合物室温下搅拌0.5小时。向上述反应液中继续加入6-(三氟甲基)吡啶酰氯(373.41mg， 1.782mmol，1.1当量)。反应混合物在室温氮气保护下搅拌反应2小时。反应完全后，用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，100mg，产率17％)。
步骤C：2-苯基-5-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)噁唑-4-甲酰胺
在0℃下，向N-(4-氰基-2-苯基噁唑-5-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(100mg，0.279mmol，1.0当量)中依次加入醋酸(4mL)和浓硫酸(2mL)。反应混合物在室温下搅拌反应18小时。反应完全后，反应液用冰水稀释，乙酸乙酯萃取三次。接着混合有机相用饱和碳酸氢钠水溶液和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，47.9mg，产率45％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.90(s,1H),8.45(dt,J＝15.4,7.7Hz,2H),8.27(d,J＝7.4Hz,1H),8.06-7.97(m,2H),7.76(d,J＝38.6Hz,2H),7.63-7.55(m,3H).LC-MS(ESI):m/z 377[M+H]+.
制备例59.化合物A59的合成
步骤A：4-溴-3-硝基-1-苯基-1H-吡唑
在室温下，向4-溴-3-硝基-1H-吡唑(1.5g，7.8mmol，1.0当量)的四氢呋喃(50mL)溶液中加入苯基硼酸(1.05g，8.6mmol，1.1当量)、醋酸铜(2.34g，11.7mmol，1.5当量)和吡啶(3.2mL，39.1mmol，5.0当量)。反应液在氧气保护下40℃搅拌反应18小时。反应完全后，反应液过滤，滤液用水稀释，乙酸乙酯萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，800mg，产率38％)。
步骤B：4-(苄硫基)-3-硝基-1-苯基-1H-吡唑
向4-溴-3-硝基-1-苯基-1H-吡唑(500mg，1.9mmol，1.0当量)和苄硫醇(278.0mg，2.2mmol，1.2当量)的1,4-二氧六环(10mL)溶液中依次加入二异丙基乙胺(482.2mg，3.8mmol，2.0当量)、4,5-双苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(215.8mg，0.4mmol，0.2当量)、三(二亚苄基 丙酮)二钯(170.8mg，0.20mmol，0.1当量)。反应液氮气置换3次，在氮气保护下100℃搅拌反应3小时。反应完毕，冷却至室温，乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，350mg，产率60％)。
步骤C：3-硝基-1-苯基吡唑-4-磺酰氯
在0℃下，向4-(苄硫基)-3-硝基-1-苯基-1H-吡唑(350mg，1.125mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入N-氯代丁二酰亚胺(375.3mg，2.8mmol，2.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，210mg，产率65％)。
步骤D：3-硝基-1-苯基吡唑-4-磺酰胺
在0℃下，向3-硝基-1-苯基吡唑-4-磺酰氯(210mg，0.73mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入7M氨甲醇(0.3mL)溶液。反应液在30℃下搅拌反应2小时。反应完全后，减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，195mg，产率99％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：(3-硝基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯
在0℃氮气保护下，向3-硝基-1-苯基吡唑-4-磺酰胺(100mg，0.37mmol，1.0当量)的四氢呋喃(3mL)溶液中分批加入60重量％氢化钠(29.9mg，0.75mmol，2.0当量)。反应混合物室温下搅拌0.5小时。向上述反应液中继续加入二碳酸二叔丁酯(122.0mg，0.56mmol，1.5当量)。反应混合物在50℃氮气保护下搅拌反应2小时。反应完全后，冷却至室温，用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色液体，90mg，产率65％)。
步骤F：(3-氨基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向(3-硝基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(90.0mg，0.25mmol，1.0当量)的乙醇(5mL)溶液中加入锌粉(159.74mg，2.5mmol，10当量)和氯化铵(26.14mg，0.5mmol，2.0当量)。反应混合物在80℃搅拌反应3小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(无色液体，70mg，产率84％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤G：(1-苯基-3-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-4-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(47.44mg，0.25mmol，1.2当量)的二氯甲烷(5 mL)溶液中加入HATU(118.0mg，0.31mmol，1.5当量)和DIEA(80.2mg，0.6mmol,2.4当量)。反应混合物室温下搅拌0.5小时。向上述反应液中继续加入(3-氨基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(70mg，0.21mmol，1.0当量)，反应混合物在40℃搅拌反应12小时。反应完全后，将反应液用二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，60mg，产率57％)。
步骤H：N-(1-苯基-4-氨磺酰基-1H-吡唑-3-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃下，向(1-苯基-3-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-4-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(60mg，0.117mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(1mL)溶液中加入4M HCl 1,4二氧六环溶液(1mL)。反应混合物在30℃搅拌反应1小时。反应完毕，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，35mg，产率72％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.88(s,1H),8.98(s,1H),8.52-8.32(m,2H),8.24(d,J＝6.6Hz,1H),7.92(d,J＝7.8Hz,2H),7.56(t,J＝7.9Hz,2H),7.48-7.30(m,3H).LC-MS(ESI):m/z 412[M+H]+.
制备例60.化合物A60的合成
步骤A：4-(甲硫基)-3-硝基-1-苯基-1H-吡唑
在室温下，向4-溴-3-硝基-1-苯基吡唑(850.0mg，3.2mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入氨基甲酰亚胺硫代甲酯(857.5mg，9.6mmol，3.0当量)。反应混合物在100℃下搅拌16小时。反应完全后，反应液冷却至室温，用水稀释，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱分离得到标题化合物(黄色固体，420mg，产率56％)。
步骤B：甲基(3-硝基-1-苯基吡唑-4-基)(氧代)-λ6磺胺
在室温下，向4-(甲硫基)-3-硝基-1-苯基-1H-吡唑(200.0mg，0.85mmol，1.0当量)的甲醇(5mL)溶液中加入碘苯二乙酸(551.1mg，1.7mmol，2.0当量)和乙酸胺(131.1mg，1.7mmol，2.0当量)。反应混合物在室温下搅拌2小时。反应完全后，反应液冷却至室温，倒入冰水中，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱分离得到标题化合物(黄色固体，96.0mg，产率42％)。
步骤C：(3-硝基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)(氧代)-λ6-亚磺酰基)氨基甲酸叔丁酯
在0℃氮气保护下，向甲基(3-硝基-1-苯基吡唑-4-基)(氧代)-λ6磺胺(90.0mg，0.34mmol，1.0当量)的四氢呋喃(5mL)溶液中分批加入60重量％氢化钠(40.6mg，1.0mmol，3.0当量)。反应混合物室温下搅拌0.5小时。向上述反应液中继续加入二碳酸二叔丁酯(147.5mg，0.68mmol，2.0当量)。反应混合物在氮气保护下50℃搅拌反应2小时。反应完全后，用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，95mg，产率76％)。
步骤D：(3-氨基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)(甲基)(氧代)-λ6-亚磺酰基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向(3-硝基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)(氧代)-λ6-亚磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(95.0mg，0.26mmol，1.0当量)的四氢呋喃(5mL)和水(5mL)溶液中加入锌粉(169.3mg，2.6mmol，10.0当量)和氯化铵(13.8mg，0.26mmol，1.0当量)。反应混合物在80℃搅拌反应3小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，70mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤D：(甲基(氧代)(1-苯基-3-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-4-基)-λ6-亚磺酰基)氨基甲酸叔丁酯
在0℃氮气保护下，向(3-氨基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)(甲基)(氧代)-λ6-亚磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(70.0mg，0.21mmol，1.0当量)的四氢呋喃(3mL)溶液中分批加入60重量％氢化钠(15.0mg，0.63mmol，3.0当量)。反应混合物室温下搅拌0.5小时。向上述反应液中继续加入6-(三氟甲基)吡啶-2-羰基氯(52.3mg，0.25mmol，1.2当量)。反应混合物在30℃氮气保护下搅拌反应2小时。反应完全后，冷却至室温，用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，105mg，产率99％)。
步骤F：N-(4-(S-甲基磺酰亚胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃下，向(甲基(氧代)(1-苯基-3-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-4-基)-λ6-亚磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(105.0mg，0.098mmol)的1,4-二氧六环(2mL)溶液中加入4M HCl 1,4二氧六环溶液(1mL)。反应混合物在室温搅拌反应1小时。反应完毕，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(米白色固体，46.0mg，产率55％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.69(s,1H),9.13(s,1H),8.47-8.36(m,2H),8.22(dd,J＝7.5,1.2Hz,1H),7.93(dd,J＝8.6,0.9Hz,2H),7.57(m,2H),7.40(t,J＝7.4Hz,1H),4.76(s,1H),3.29(s,3H). LC-MS(ESI):m/z 410[M+H]+.
制备例61.化合物A61的合成
步骤A：3-氨基-1-苯基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯
在0℃下，向(2Z)-2-氰基-3-乙氧基丙-2-烯酸乙酯(6.26g，36.98mmol，1.0当量)和苯肼(4g，36.98mmol，1.0当量)的乙醇(20mL)溶液中加入乙醇钠(5.04g，73.97mmol，2.0当量)。反应混合物室温搅拌反应3小时。反应完全后，用4N HCl溶液淬灭，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，700mg，产率8％)。
步骤B：1-苯基-3-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯
在室温下，向3-氨基-1-苯基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(100mg，0.43mmol，1.0当量)和6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(123.9mg，0.65mmol，1.5当量)的四氢呋喃(5mL)溶液中加入50重量％T3P乙酸乙酯溶液(550.4mg，0.87mmol，2.0当量)。反应混合物50℃搅拌反应18小时。反应完全后，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，30mg，产率17％)。
步骤C：N-(4-(2-羟基丙-2-基)-1-苯基-1H-吡唑-3-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃氮气保护下，向1-苯基-3-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(30mg，0.07mmol，1.0当量)的四氢呋喃(5mL)溶液中缓慢加入3M甲基溴化镁乙醚溶液(0.1mL，0.30mmol，4.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应3小时。反应完全后，用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，20.5mg，产率71％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.49(d,J＝7.6Hz,1H),8.31(t,J＝7.6Hz,1H),8.13(s,1H),8.06(d,J＝7.6Hz,1H),7.82(d,J＝8.0Hz,2H),7.47(t,J＝8.0Hz,2H),7.29(t,J＝7.2Hz,1H),1.63(s,6H).LC/MS(ESI)m/z:391[M+H]+ .
制备例62.化合物A62的合成
步骤A：3-(苄硫基)-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑
在0℃氮气保护下，向3-溴-4-硝基-1-苯基吡唑(400mg，1.49mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中分批加入60重量％氢化钠(89.5mg，2.24mmol，1.5当量)。反应混合物室温下搅拌0.5小时。向上述反应液中继续加入苄硫醇(204mg，1.64mmol，1.1当量)。反应混合物在70℃氮气保护下搅拌反应1小时。反应完全后，冷却至室温，用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色液体，390mg，产率84％)。
步骤B：3-(苄硫基)-1-苯基-1H-吡唑-4-胺
在室温下，向3-(苄硫基)-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑(390mg，1.253mmol，1.0当量)的甲醇(10mL)溶液中加入锌粉(655mg，10.0mmol，8.0当量)和氯化铵(670mg，12.5mmol，10当量)的水溶液(5mL)。反应混合物在室温搅拌反应1小时。反应完毕，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，240mg，产率68％)。
步骤C：N-(3-(苄硫基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(179mg，0.938mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入HATU(422mg，1.11mmol，1.2当量)和DIEA(331mg，2.56mmol，2.7当量)。反应混合物室温下搅拌0.5小时。向上述反应液中继续加入3-(苄硫基)-1-苯基-1H-吡唑-4-胺(240mg，0.853mmol，0.9当量),反应混合物在室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用饱和氯化铵水溶液稀释，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，240mg，产率62％)。
步骤D：1-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-磺酰氯
在0℃下，向N-(3-(苄硫基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(240mg，0.528mmol，1.0当量)的乙腈(3mL)、水(1mL)和乙酸(3mL)的混合溶液在中加入N-氯代丁二酰亚胺(564mg，4.22mmol，8.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应12小时。反应完全后，乙酸乙酯稀释，用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，220mg，产率96％)。
步骤E：N-(1-苯基-3-氨磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃下，向1-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-磺酰氯(170mg，0.395mmol，1.0当量)的乙腈(3mL)溶液中加入18％(w/w)氨水(1mL)溶液。反应液在室温下搅 拌反应2小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次。无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，48mg，产率30％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.85(s,1H),9.11(s,1H),8.48(d,J＝7.7Hz,1H),8.42(t,J＝7.8Hz,1H),8.24(d,J＝7.7Hz,1H),8.02(s,2H),7.92(d,J＝8.2Hz,2H),7.59(t,J＝7.9Hz,2H),7.45(t,J＝7.4Hz,1H).LC-MS(ESI):m/z 412[M+H]+.
制备例63.化合物A63的合成
步骤A：3-(甲硫基)-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑
在0℃下，向3-溴-4-硝基-1-苯基吡唑(500mg，1.87mmol，1.0当量)的四氢呋喃(20mL)溶液中分批加入甲硫醇钠(261mg，3.73mmol，2.0当量)。反应混合物室温下搅拌1小时。反应完全后，用水淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，240mg，产率54％)。
步骤B：亚氨基(甲基)(4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)-λ6-氨基磺酮
在室温下，向3-(甲硫基)-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑(240mg，1.02mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(3mL)和甲醇(3mL)的溶液中加入碘苯二乙酸(661mg，2.04mmol，2.0当量)和乙酸铵(314mg，4.08mmol，4.0当量)。反应混合物室温下搅拌12小时。反应完全后，用水淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，160mg，产率59％)。
步骤C：(4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)(亚氨基)(甲基)-λ6-氨基磺酮
在室温下，向亚氨基(甲基)(4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)-λ6-氨基磺酮(160mg，0.601mmol，1.0当量)的甲醇(5mL)溶液中加入锌粉(314mg，4.81mmol，8.0当量)和氯化铵(321mg，6.01mmol，10.0当量)的水溶液(2mL)。反应混合物在室温搅拌反应1小时。反应完毕，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，120mg，产率68％)。
步骤D：N-(3-(S-甲基磺酰亚胺基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(89.0mg，0.466mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入HATU(209mg，0.550mmol，1.2当量)和DIEA(164mg，1.27mmol，2.7当量)。反应混合物室温下搅拌0.5小时。向上述反应液中继续加入(4-氨基-1- 苯基-1H-吡唑-3-基)(亚氨基)(甲基)-λ6-氨基磺酮(100mg，0.423mmol，0.9当量)，反应混合物在室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用饱和氯化铵水溶液稀释，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，23mg，产率13％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.83(s,1H),9.12(s,1H),8.46(d,J＝7.6Hz,1H),8.40(t,J＝7.8Hz,1H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),7.95(d,J＝8.0Hz,2H),7.58(t,J＝7.9Hz,2H),7.45(t,J＝7.4Hz,1H),5.22(s,1H),3.36(s,3H).LC-MS(ESI):m/z 410[M+H]+.
制备例64.化合物A64的合成
步骤A：3-溴-1-苯基-1H-吡唑-4-胺
在室温下，向3-溴-4-硝基-1-苯基吡唑(200mg，0.746mmol，1.0当量)的甲醇(8mL)溶液中加入锌粉(390mg，5.97mmol，8.0当量)和氯化铵(399mg，7.46mmol，10.0当量)的水溶液(4mL)。反应混合物在70℃搅拌反应1小时。反应完毕，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，125mg，产率70％)。
步骤B：N-(3-溴-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(125mg，0.525mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入HATU(220mg，0.578mmol，1.1当量)和DIEA(204mg，1.58mmol，3.0当量)。反应混合物室温下搅拌0.5小时。向上述反应液中继续加入3-溴-1-苯基-1H-吡唑-4-胺(125mg，0.525mmol，1.0当量),反应混合物在室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用饱和氯化铵水溶液稀释，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，180mg，产率83％)。
步骤C：N-(3-氰基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向N-(3-溴-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(90mg，0.219mmol，1.0当量)的N,N-二甲基乙酰胺(10mL)溶液中加入锌粉(85.9mg，1.31mmol，5.0当量)、氰化锌(257mg，2.19mmol，10.0当量)和RuPhos-Pd-G3(55mg，0.066mmol，0.3当量)。反应混合物在氮气保护下120℃搅拌反应12小时。反应完全后，冷却至室温，加 入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，19.4mg，产率25％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.82(s,1H),8.93(s,1H),8.41(dt,J＝15.5,7.8Hz,2H),8.23(d,J＝7.5Hz,1H),7.92(d,J＝8.1Hz,2H),7.59(t,J＝7.8Hz,2H),7.47(t,J＝7.4Hz,1H).LC-MS(ESI):m/z 358[M+H]+.
制备例65.化合物A65的合成
步骤A：4-硝基-1-苯基-3-乙烯基-1H-吡唑
在室温下，向3-溴-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑(2g，7.46mmol，1当量)和碳酸钾(3.1g，22.4mmol，3当量)的1,4-二氧六环(10mL)和水(3mL)的溶液中加入Pd(dppf)Cl2(545mg，0.746mmol，0.1当量)和三氟(乙烯基)硼酸钾(2g，14.9mmol，2当量)。反应液在氮气保护下90℃搅拌反应3小时。反应完全后，反应液降至室温，反应液加水淬灭，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.5g，产率93％)。
步骤B：3-(4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)环丁烷-1-酮
在水浴室温下，向N,N-二甲基乙酰胺(1.2mL，13.4mmol，1.2当量)和1,2-二氯乙烷(30mL)的Schlenk管中滴加三氟甲磺酸酸酐(9.83g，34.85mmol，3.1当量)，混合液在室温下搅拌10分钟。然后将4-硝基-1-苯基-3-乙烯基-1H-吡唑(2.4g，11.2mmol，1.0当量)和2,6-二甲基吡啶(4.05mL，34.85mmol，3.1当量)的1,2-二氯乙烷(2mL)溶液加入到反应液中。反应液在氮气保护下90℃搅拌反应8小时。反应液降至室温，加水(40mL)后，反应液在90℃搅拌反应16小时。反应完全后，反应液降至室温，二氯甲烷萃取三次，混合有机相依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，403mg，产率14％)。
步骤C：3-(4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)环丁烷-1-醇
在室温下，向3-(4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)环丁烷-1-酮(150mg，0.6mmol，1.0当量)的甲醇(2mL)溶液中加入硼氢化钠(44.1mg，1.2mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下25℃搅拌反应1小时。反应完全后，反应液加水淬灭，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化 得到标题化合物(黄色固体，120mg，产率79％)。
步骤D：3-(4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)环丁烷-1-醇
在氮气保护下，室温向3-(4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)环丁烷-1-醇(120mg，0.5mmol，1.0当量)的甲醇(2mL)溶液中加入10％钯碳(49.3mg，0.5mmol，1.0当量)。反应液用氢气置换三次后，在氢气保护下25℃搅拌反应1小时。反应完全后，反应液过滤，减压浓缩得到粗品标题化合物(无色油状物，100mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：N-(3-(3-羟基环丁基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向3-(4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)环丁烷-1-醇(100mg，0.4mmol，1.0当量)和6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(83.4mg，0.4mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2mL)溶液中加入EDCI(125.4mg，0.6mmol，1.5当量)、HOBt(88.4mg，0.6mmol，1.5当量)和三乙胺(0.2mL，1.3mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，30mg，产率17％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.95(s,1H),8.66(s,1H),8.42-8.33(m,2H),8.20(dd,J＝6.8,1.9Hz,1H),7.85-7.78(m,2H),7.51(t,J＝8.0Hz,2H),7.30(t,J＝7.4Hz,1H),5.22(d,J＝6.8Hz,1H),4.16-4.06(m,1H),3.10-3.02(m,1H),2.69-2.60(m,2H),2.20-2.09(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 403[M+H]+.
制备例66.化合物A66的合成
步骤A：3-甲基-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑
在室温下，向3-溴-4-硝基-1-苯基吡唑(500mg，1.865mmol，1.0当量)和甲基硼酸(167.47mg，2.798mmol，1.5当量)的1,4-二氧六环(5mL)和水(1mL)溶液中加入碳酸钾(773.31mg，5.596mmol，3.0当量)和Pd(dppf)Cl2(136.48mg，0.187mmol，0.1当量)。反应混合物在氮气保护下100℃搅拌反应4小时。反应完全后，冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，150mg，产率39％)。
步骤B：3-甲基-1-苯基-1H-吡唑-4-胺
在室温下，向3-甲基-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑(150mg，0.738mmol，1.0当量)的甲醇(3mL)溶液中加入10％钯碳(20mg)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌2小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，80mg，产率62％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：N-(3-甲基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向3-甲基-1-苯基-1H-吡唑-4-胺(80mg，0.462mmol，1.0当量)和6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(132.39mg，0.693mmol，1.5当量)的四氢呋喃(3mL)溶液中加入50重量％T3P乙酸乙酯溶液(440.85mg，1.386mmol，3.0当量)和DIEA(179.08mg，1.386mmol，3.0当量)。反应混合物50℃搅拌反应12小时。反应完全后，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(粉红色固体，79.5mg，产率49％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.55(s,1H),8.45(d,J＝8.0Hz,1H),8.30(t,J＝8.0Hz,1H),8.06(d,J＝8.0Hz,1H),7.74-7.65(m,2H),7.48(t,J＝8.0Hz,2H),7.31(d,J＝7.2Hz,1H),2.39(s,3H).LC-MS(ESI):m/z 347[M+H]+.
制备例67.化合物A67的合成
步骤A：3-溴-4-硝基-1H-吡唑
在0℃下，向3-溴-1H-吡唑(5g，34.2mmol，1.0当量)中先加入浓硫酸(10mL)，接着缓慢滴加浓硝酸(2mL)。反应液在0℃搅拌反应1小时。反应完毕，将反应液倒入冰水中，过滤，滤饼干燥完全得到粗品标题化合物(黄色固体，3g，产率46％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤B：3-溴-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑
在室温下，向3-溴-4-硝基-1H-吡唑(500mg，2.61mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入苯基硼酸(413mg，3.39mmol，1.30当量)、醋酸铜(260mg，1.302mmol，0.50当量)和吡啶(0.105mL，1.30mmol，0.50当量)。反应液在氧气保护下室温搅拌反应16小时。反应完全后，反应液过滤，滤液减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，400mg，产率57％)。
步骤C：4-硝基-1-苯基-3-乙烯基-1H-吡唑
在室温下，向3-溴-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑(200mg，0.746mmol，1.0当量)和乙烯基三氟硼酸钾(85mg，0.97mmol，1.3当量)的1,4-二氧六环(4mL)和水(1mL)的溶液中加入碳酸钾(309mg，2.24mmol，3.0当量)和Pd(dppf)Cl2(55mg，0.075mmol，0.1当量)。反应混合物在氮气保护下100℃搅拌反应2小时。反应完全后，冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，110mg，产率39％)。
步骤D：3-乙基-1-苯基-1H-吡唑-4-胺
在室温下，向4-硝基-1-苯基-3-乙烯基-1H-吡唑(110mg，0.511mmol，1.0当量)的乙酸乙酯(10mL)溶液中加入10％钯碳(10mg)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌2小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，90mg，产率94％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：N-(1-苯基-3-丙基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向3-乙基-1-苯基-1H-吡唑-4-胺(90mg，0.481mmol，1.0当量)和6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(110mg，0.577mmol，1.5当量)的四氢呋喃(10mL)溶液中加入50重量％T3P乙酸乙酯溶液(379mg，1.19mmol，3.0当量)。反应混合物50℃搅拌反应3小时。反应完全后，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，54mg，产率30％)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ9.68(s,1H),8.68(s,1H),8.48(d,J＝7.8Hz,1H),8.14(s,1H),7.89(d,J＝7.8Hz,1H),7.72(d,J＝8.0Hz,2H),7.44(t,J＝7.9Hz,2H),7.26(d,J＝4.4Hz,1H),2.85(q,J＝7.6Hz,2H),1.43(t,J＝7.6Hz,3H).LC-MS(ESI):m/z 361[M+H]+.
制备例68.化合物A68的合成
步骤A：(E)-4-硝基-1-苯基-3-(丙-1-烯-1-基)-1H-吡唑
在室温下，向3-溴-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑(100mg，0.373mmol，1.0当量)和(E)-丙-1-烯-1-基硼酸(48mg，0.559mmol，1.5当量)的1,4-二氧六环(4mL)和水(1mL)的溶液中加入碳酸钾(103mg，0.746mmol，2.0当量)和Pd(dppf)Cl2(27mg，0.037mmol，0.1当量)。反应混合物在氮气保护下100℃搅拌反应10小时。反应完全后，冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，70mg，产率82％)。
步骤B：1-苯基-3-丙基-1H-吡唑-4-胺
在室温下，向(E)-4-硝基-1-苯基-3-(丙-1-烯-1-基)-1H-吡唑(70mg，0.305mmol，1.0当量)的甲醇(5mL)溶液中加入10％钯碳(10mg)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌5小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(棕色油状物，50mg，产率81％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：N-(1-苯基-3-丙基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-苯基-3-丙基-1H-吡唑-4-胺(50mg，0.248mmol，1.0当量)和6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(57mg，0.298mmol，1.20当量)的四氢呋喃(10mL)溶液中加入50重量％T3P乙酸乙酯溶液(379mg，0.745mmol，3.0当量)。反应混合物50℃搅拌反应3小时。反应完全后，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，26.4mg，产率28％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.73(s,1H),8.70(s,1H),8.47(d,J＝7.8Hz,1H),8.15(t,J＝7.8Hz,1H),7.89(d,J＝7.8Hz,1H),7.72(d,J＝7.7Hz,2H),7.45(t,J＝7.9Hz,2H),7.32-7.21(t,J＝7.7Hz,1H),2.82(t,J＝7.5Hz,2H),1.85(dd,J＝14.9,7.4Hz,2H),1.09(t,J＝7.4Hz,3H).LC-MS(ESI):m/z 375[M+H]+.
制备例69.化合物A69的合成
步骤A：4-硝基-1-苯基-3-(丙-1-烯-2-基)-1H-吡唑
在室温下，向3-溴-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑(200mg，0.746mmol，1.0当量)和4,4,5,5-四甲基-2-(丙-1-烯-2-基)-1,3,2-二氧杂硼烷(163mg，0.97mmol，1.3当量)的1,4-二氧六环(4mL)和水(1mL)的溶液中加入碳酸钾(309mg，2.238mmol，3.0当量)和Pd(dppf)Cl2(55mg，0.075mmol，0.1当量)。反应混合物在氮气保护下100℃搅拌反应2小时。反应完全后，冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，100mg，产率58％)。
步骤B：3-异丙基-1-苯基-1H-吡唑-4-胺
在室温下，向4-硝基-1-苯基-3-(丙-1-烯-2-基)-1H-吡唑(100mg，0.436mmol，1.0当量)的甲醇(10mL)溶液中加入10％钯碳(10mg)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌2小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(棕色油状物，80mg，产率91％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：N-(3-异丙基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向3-异丙基-1-苯基-1H-吡唑-4-胺(80mg，0.397mmol，1.0当量)和6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(91mg，0.477mmol，1.20当量)的四氢呋喃(10mL)溶液中加入50重量％T3P乙酸乙酯溶液(379mg，1.192mmol，3.0当量)。反应混合物50℃搅拌反应3小时。反应完全后，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，26.4mg，产率28％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.59(s,1H),8.46(d,J＝8.0Hz,1H),8.31(t,J＝8.0Hz,1H),8.07(d,J＝8.0Hz,1H),7.74(d,J＝8.4Hz,2H),7.48(t,J＝8.0Hz,2H),7.30(t,J＝7.6Hz,1H),3.23-3.16(m,1H),1.42(d,J＝6.8Hz,6H).LC-MS(ESI):m/z 375[M+H]+.
制备例70.化合物A70的合成
步骤A：3-(叔丁基)-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑
在室温下，向3-(叔丁基)-4-硝基-1H-吡唑(160mg，0.946mmol，1.00当量)和苯硼酸(173mg，1.419mmol，1.50当量)的二氯甲烷(4mL)溶液中加入醋酸铜(94.41mg，0.473mmol，0.50当量)和吡啶(74.81mg，0.946mmol，1.00当量)。反应液在氧气保护下30℃搅拌反应12小时。反应完全后，反应液过滤，滤液用水稀释，二氯甲烷萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，200mg，产率86％)。
步骤B：3-(叔丁基)-1-苯基-1H-吡唑-4-胺
在室温下，向3-(叔丁基)-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑(120mg，0.489mmol，1.00当量)的甲醇(5mL)溶液中加入10％钯碳(20mg)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌1小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，100mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：N-(3-(叔丁基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向3-(叔丁基)-1-苯基-1H-吡唑-4-胺(100mg，0.464mmol，1.00当量)和6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(133.15mg，0.697mmol，1.50当量)的四氢呋喃(2mL)溶液中加入50重量％T3P乙酸乙酯溶液(886.71mg，1.393mmol，3.00当量)。反应混合物50℃搅拌反应12小时。反应完全后，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，106.4mg，产率59％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.96(s,1H),8.78(s,1H),8.47-8.34(m,2H), 8.23(dd,J＝6.8,2.4Hz,1H),7.82(dd,J＝8.4,1.2Hz,2H),7.54-7.45(m,2H),7.29(t,J＝7.6Hz,1H),1.43(s,9H).LC-MS(ESI):m/z 389[M+H]+.
制备例71.化合物A71的合成
步骤A：3-环丙基-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑
在室温下，向3-溴-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑(200mg，0.746mmol，1.0当量)和环丙基硼酸(128mg，1.492mmol，2.0当量)的1,4-二氧六环(4mL)和水(1mL)的溶液中加入碳酸钾(309mg，2.238mmol，3.0当量)和Pd(dppf)Cl2(55mg，0.075mmol，0.1当量)。反应混合物在氮气保护下100℃搅拌反应2小时。反应完全后，冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，100mg，产率58％)。
步骤B：3-环丙基-1-苯基-1H-吡唑-4-胺
在室温下，向3-环丙基-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑(100mg，0.436mmol，1.0当量)的四氢呋喃(3mL)和水(1mL)的溶液中加入锌粉(56mg，0.872mmol，2.0当量)和氯化铵(47mg，0.872mmol，2.0当量)。反应混合物在50℃搅拌反应2小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(红色油状物，80mg，产率92％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：N-(3-环丙基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向3-环丙基-1-苯基-1H-吡唑-4-胺(80mg，0.401mmol，1.0当量)和6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(92mg，0.481mmol，1.20当量)的四氢呋喃(10mL)溶液中加入50重量％T3P乙酸乙酯溶液(383mg，1.203mmol，3.0当量)。反应混合物50℃搅拌反应12小时。反应完全后，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，40.1mg，产率27％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.14(s,1H),8.67(s,1H),8.39(q,J＝8.0Hz,2H),8.20(d,J＝7.1Hz,1H),7.78(d,J＝8.1Hz,2H),7.47(t,J＝7.8Hz,2H),7.27(t,J＝7.3Hz,1H),2.01(td,J＝8.4,4.2Hz,1H),0.94(dd,J＝8.2,2.9Hz,2H),0.88(dd,J＝9.0,6.2Hz,2H).LC-MS(ESI):m/z 373[M+H]+.
制备例72.化合物A72的合成
步骤A：3-环丁基-4-硝基-1H-吡唑
在0℃下，向3-环丁基-1H-吡唑(120mg，0.984mmol，1.0当量)中先加入浓硫酸(2mL)，接着缓慢滴加浓硝酸(1.5mL)。反应液在0℃搅拌反应2小时。反应完毕，将反应液倒入冰水中，乙酸乙酯萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经反相柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状物，120mg，产率73％)。
步骤B：3-环丁基-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑
在室温下，向3-环丁基-4-硝基-1H-吡唑(120mg，0.732mmol，1.0当量)和苯硼酸(178.6mg，1.464mmol，2.0当量)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入醋酸铜(73.1mg，0.366mmol，0.5当量)和吡啶(28mg，0.366mmol，0.5当量)。反应液在氧气保护下室温搅拌反应12小时。反应完全后，反应液过滤，滤液用水稀释，二氯甲烷萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，130mg，产率74％)。
步骤C：3-环丁基-1-苯基-1H-吡唑-4-胺
在室温下，向3-环丁基-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑(130mg，0.534mmol，1.0当量)的四氢呋喃(3mL)和水(1mL)的溶液中加入锌粉(342mg，5.34mmol，10.0当量)和氯化铵(572mg，10.7mmol，20.0当量)。反应混合物在50℃搅拌反应3小时。反应完全后，反应液过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(红色油状物，130mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤D：N-(3-环丁基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向3-环丁基-1-苯基-1H-吡唑-4-胺(130mg，0.610mmol，1.0当量)和6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(140mg，0.732mmol，1.2当量)的四氢呋喃(10mL)溶液中加入50重量％T3P乙酸乙酯溶液(582mg，0.915mmol，1.5当量)。反应混合物50℃搅拌反应4小时。反应完全后，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，56.2mg，产率24％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.93(s,1H),8.69(s,1H),8.42-8.34(m,2H),8.20(dd,J＝6.8,2.0Hz,1H),7.83(d,J＝7.7Hz,2H),7.49(t,J＝8.0Hz,2H),7.28(t,J＝7.4Hz,1H),3.77-3.67(m,1H),2.36(td,J＝8.8,6.4Hz,4H),2.12-2.01(m,1H),1.97-1.86(m,1H).LC-MS (ESI):m/z 387[M+H]+.
制备例73.化合物A73的合成
步骤A：4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-醇
在室温氮气保护下，向1-苯基吡唑-3-醇(500mg，3.12mmol，1.0当量)和硅胶粉(1.00g)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入68％浓硝酸(0.5mL，3.12mmol，1.0当量)。反应混合物在40℃搅拌反应18小时。反应完毕，过滤，滤液用水淬灭，二氯甲烷萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，400mg，产率62％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤B：4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-醇
在室温下，向4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-醇(400mg，1.95mmol，1.0当量)的甲醇(6mL)和乙酸乙酯(6mL)的溶液中加入10％钯碳(180mg)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌6小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(棕色固体，220mg，产率64％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：N-(3-羟基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃和氮气保护下，向4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-醇(220mg，1.26mmol，1.0当量)和三乙胺(0.698mL，5.02mmol，4.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入6-(三氟甲基)吡啶酰氯(289mg，1.38mmol，1.1当量)。反应混合物在0℃下搅拌1小时。反应完全后，反应液用饱和碳酸钠溶液淬灭，二氯甲烷萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，残余物经柱色谱分离得到标题化合物(黄色固体，69.4mg，产率16％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.94(s,1H),9.91(s,1H),8.65(s,1H),8.43-8.36(m,2H),8.20(d,J＝7.3Hz,1H),7.71(d,J＝8.4Hz,2H),7.45(t,J＝7.9Hz,2H),7.20(t,J＝7.3Hz,1H).LC-MS(ESI):m/z 349[M+H]+.
制备例74.化合物A74的合成
步骤A：4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(10.0g，58.44mmol，1.0当量)、苯硼酸(14.3g，116.88mmol，2.0当量)和醋酸铜(15.9g，87.66mmol，1.5当量)的二氯甲烷(200mL)溶液中加入吡啶(18.8mL，233.77mmol，4.0当量)。反应液在氧气保护下40℃搅拌反应18小时。反应完全后，反应液过滤，滤液用水稀释，二氯甲烷萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，8.2g，产率57％)。
步骤B：4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(6.0g，24.27mmol，1.0当量)的甲醇(120mL)溶液中加入10％钯碳(2.6g，2.43mmol，0.1当量)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌18小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状物，5.3g，产率100％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：1-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(5.3g，24.40mmol，1.0当量)、6-(三氟甲基)吡啶甲酸(4.7g，24.40mmol，1.0当量)和HOBT(4.0g，29.28mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(120mL)溶液中加入EDCI(5.6g，29.28mmol，1.2当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应18小时。反应完全后，将反应液用水稀释同时伴有粗产品析出。过滤，滤饼用水洗涤，乙酸乙酯打浆，再过滤，完全干燥后得到粗品标题化合物(灰色固体，6.3g，产率66％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤D：N-(3-(羟甲基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃氮气保护下，向1-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(200.0mg，0.5mmol，1.0当量)的四氢呋喃(3mL)溶液中缓慢加入二异丙基氨基锂(1.0mL，1.0mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下0℃搅拌反应1小时。反应完全后，用水(0.2mL)和30％氢氧化钠水溶液(0.2mL)淬灭，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，40.2mg，产率22％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.76(s,1H),8.88(s,1H), 8.46-8.36(m,2H),8.20(d,J＝6.8Hz,1H),7.81(d,J＝7.8Hz,2H),7.49(t,J＝8.0Hz,2H),7.29(t,J＝7.4Hz,1H),5.87(t,J＝4.9Hz,1H),4.82(d,J＝4.9Hz,2H).LC-MS(ESI):m/z 363[M+H]+.
制备例75.化合物A75的合成
步骤A：N-(3-甲酰基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃下，向N-(3-(羟甲基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(160.0mg，0.4mmol，1.0当量)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入DMP(373.1mg，0.8mmol，2.0当量)。反应混合物在氮气保护下室温搅拌1小时。反应完全后，用饱和碳酸氢钠溶液淬灭，搅拌0.5小时。混合液用二氯甲烷萃取三次，混合有机相用水和饱和硫代硫酸钠洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，120.0mg，产率75％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤B：N-(3-(1-羟乙基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在-78℃氮气保护下，向N-(3-甲酰基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(120.0mg，0.3mmol，1.0当量)的四氢呋喃(5mL)溶液中缓慢加入2M甲基溴化镁乙醚溶液(1.0mL，2.0mmol，6.0当量)。反应液在氮气保护下-78℃搅拌反应2小时。反应完全后，用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，50.6mg，产率40％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.02(s,1H),8.89(s,1H),8.46-8.34(m,2H),8.19(d,J＝7.6Hz,1H),7.81(d,J＝7.9Hz,2H),7.49(t,J＝7.9Hz,2H),7.29(t,J＝7.4Hz,1H),6.09(d,J＝4.3Hz,1H),5.18-5.06(m,1H),1.54(d,J＝6.5Hz,3H).LC-MS(ESI):m/z 377[M+H]+.
制备例76.化合物A76的合成
步骤A：1-苯基-1H-吡唑-3-醇
在室温下，向1-苯基吡唑啉-3-酮(10g，61.6mmol，1.0当量)的二甲基亚砜(100mL)溶液中加入碘(0.8g，3.1mmol，0.05当量)。反应液在100℃下搅拌反应16小时。反应完全后，反应液冷却至室温，用饱和硫代硫酸钠溶液淬灭，乙酸乙酯萃取两次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，8.5g，产率86％)。
步骤B：3-乙氧基-1-苯基-1H-吡唑
在室温下，向1-苯基-1H-吡唑-3-醇(0.7g，4.4mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入碘乙烷(1.0g，6.5mmol，1.5当量)和碳酸钾(1.2g，8.7mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(米白色固体，660mg，产率80％)。
步骤C：3-乙氧基-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑
在-20℃下，向3-乙氧基-1-苯基-1H-吡唑(160mg，0.8mmol，1.0当量)的乙酸酐(5mL)溶液中滴加60％硝酸(0.1mL，1.7mmol，2.0当量)溶液。反应液在-20℃下搅拌反应0.5小时。反应完全后，将反应液倒入冰水中，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(无色油状物，90mg，产率45％)。
步骤D：3-乙氧基-1-苯基-1H-吡唑-4-胺
在室温下，向3-乙氧基-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑(600mg，2.6mmol，1.0当量)的甲醇(6mL)溶液中加入锌粉(841mg，12.9mmol，5.0当量)和氯化铵(1.4g，25.7mmol，10当量)的水溶液(3mL)。反应混合物在70℃搅拌反应1小时。反应完毕，过滤，乙酸乙酯萃取，有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，600mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：N-(3-乙氧基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向6-(三氟甲基)吡啶甲酸(180mg，0.9mmol，1.0当量)和3-乙氧基-1-苯基-1H-吡唑-4-胺(229.7mg，1.1mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入DIEA(365.2mg，2.8mmol，3.0当量)和HATU(429.8mg，1.1mmol，1.2当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(米白色固体，63mg，产率18％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.72(s,1H),8.67(s,1H),8.44-8.30 (m,2H),8.20(dd,J＝6.9,1.9Hz,1H),7.75(d,J＝7.8Hz,2H),7.46(t,J＝8.0Hz,2H),7.22(t,J＝7.4Hz,1H),4.39(q,J＝7.0Hz,2H),1.41(t,J＝7.0Hz,3H).LC-MS(ESI):m/z 377[M+H]+.
制备例77.化合物A77的合成
步骤A：4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-醇
在室温下，向1-苯基-1H-吡唑-3-醇(300mg，1.87mmol，1.0当量)的乙酸(10mL)溶液中加入60％硝酸(983mg，4.68mmol，2.5当量)。反应混合物在室温下搅拌1小时。反应完全后，用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱分离得到标题化合物(黄色液体，260mg，产率68％)。
步骤B：4-硝基-1-苯基-3-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑
在室温下，向4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-醇(800mg，3.899mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入碳酸钾(1077mg，7.80mmol，2.0当量)和2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯(1.36g，5.85mmol，1.5当量)。反应混合物在室温下搅拌2小时。反应完全后，冷却至室温，用水淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品标题化合物(白色液体，1.0g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：1-苯基-3-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-4-胺
在室温下，向4-硝基-1-苯基-3-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑(500mg，1.74mmol，1.0当量)的甲醇(5mL)溶液中加入5％钯碳(185mg，0.174mmol，0.1当量)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌18小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，370mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤D：N-(1-苯基-3-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-苯基-3-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-4-胺(150mg，0.583mmol，1.0当量)和6-(三氟甲基)吡啶甲酸(111mg，0.583mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入DIEA(226mg，1.75mmol，3.0当量)和HATU(244mg，0.641mmol，1.1当量)。 反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残留物经制备柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，200mg，产率80％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.89(s,1H),8.72(s,1H),8.44-8.33(m,2H),8.20(dd,J＝6.8,1.8Hz,1H),7.79(d,J＝7.9Hz,2H),7.49(t,J＝7.9Hz,2H),7.27(t,J＝7.4Hz,1H),5.05(q,J＝8.9Hz,2H).LC-MS(ESI):m/z 431[M+H]+.
制备例78.化合物A78的合成
步骤A：3-异丙氧基-1-苯基-1H-吡唑
在室温下，向1-苯基-1H-吡唑-3-醇(1.0g，6.24mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(30mL)溶液中加入碳酸铯(4.07g，12.5mmol，2.0当量)和2-碘丙烷(3.12mL，31.2mmol，5.0当量)。反应混合物在50℃下搅拌18小时。反应完全后，冷却至室温，用水淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱分离得到标题化合物(黄色液体，1.1g，产率87％)。
步骤B：3-异丙氧基-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑
在0℃下，向3-异丙氧基-1-苯基-1H-吡唑(1.1g，5.44mmol，1.0当量)的乙酸酐(10mL)溶液中加入浓硝酸(1.58g，16.3mmol，3.0当量)。反应混合物在室温下搅拌1小时。反应完全后，反应液倒入冰水中，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱分离得到标题化合物(黄色固体，700mg，产率52％)。
步骤C：3-异丙氧基-1-苯基-1H-吡唑-4-胺
在室温下，向3-异丙氧基-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑(200mg，0.81mmol，1.0当量)的乙酸乙酯(15mL)溶液中加入5％钯碳(120mg，1.13mmol，1.4当量)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌2小时。反应完毕，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱分离得到标题化合物(黄色固体，100mg，产率57％)。
步骤D：N-(3-异丙氧基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向3-异丙氧基-1-苯基-1H-吡唑-4-胺(100mg，0.46mmol，1.0当量)和6-(三氟甲基)吡啶甲酸(88mg，0.46mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入DIEA (178mg，1.38mmol，3.0当量)和HATU(175mg，0.46mmol，1.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应0.5小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残留物经制备HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，68mg，产率38％)。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，70mg，产率20％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.66(s,1H),8.67(s,1H),8.44-8.34(m,2H),8.20(dd,J＝6.9,1.9Hz,1H),7.75(d,J＝7.9Hz,2H),7.47(t,J＝7.9Hz,2H),7.23(t,J＝7.4Hz,1H),5.03-4.94(m,1H),1.41(d,J＝6.1Hz,6H).LC-MS(ESI):m/z 391[M+H]+.
制备例79.化合物A79的合成
步骤A：1-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸
在0℃下，向1-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(1.2g，3.07mmol，1.0当量)的甲醇(50mL)和水(20mL)的混合溶液中加入氢氧化锂(220mg，9.22mmol，3.0当量)。反应液在室温搅拌反应4小时。反应完全后，减压浓缩去除甲醇，加水稀释，用稀释的1N HCl溶液调节PH＝4至产品全部析出。过滤，滤饼干燥完全得到粗品标题化合物(白色固体，1.1g，产率95％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤B：1-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向1-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸(900mg，2.39mmol，1.0当量)和三乙胺(1.66mL，12.0mmol，5.0当量)的叔丁醇(50mL)溶液中加入叠氮磷酸二苯酯(1316mg，4.78mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下90℃搅拌反应18小时。反应完全后，减压浓缩去除叔丁醇，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化，及石油醚/乙酸乙酯(10mL，1/20)打浆处理后得到标题化合物(白色固体，230mg，产率21％)。
步骤C：N-(3-氨基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃下，向1-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)氨基甲酸叔丁酯(230mg，0.51mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(1mL)溶液中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(5mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，反应液减压浓缩，加饱和碳酸氢钠溶液稀释，二氯甲烷萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠 干燥，过滤，减压浓缩。残余物经制备HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，80mg，产率45％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.14(s,1H),8.57(s,1H),8.42-8.29(m,2H),8.17(dd,J＝7.2,1.6Hz,1H),7.67-7.65(m,2H),7.46-7.36(m,2H),7.16-7.13(m,1H),5.34(s,2H).LC-MS(ESI):m/z 348[M+H]+.
制备例80.化合物A80的合成
步骤A：N-甲基-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-胺
在0℃下，向3-溴-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑(500mg，1.87mmol，1.0当量)的N-甲基吡咯烷酮(10mL)溶液中加入DIEA(1205mg，9.4mmol，5.0当量)和2M甲基胺(5mL，10.0mmol，5.4当量)的四氢呋喃溶液。反应混合物在100℃下封管搅拌18小时。反应完全后，冷却至室温，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱分离得到标题化合物(黄色固体，160mg，产率39％)。
步骤B：N3-甲基-1-苯基-1H-吡唑-3,4-二胺
在室温下，向N-甲基-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-胺(160mg，0.73mmol，1.0当量)的乙酸乙酯(25mL)溶液中加入10％钯碳(80mg，0.75mmol，1.0当量)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌18小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状物，150mg，产率98％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：N-(3-(甲氨基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向N3-甲基-1-苯基-1H-吡唑-3,4-二胺(150mg，0.72mmol，1.0当量)和6-(三氟甲基)吡啶甲酸(137.1mg，0.72mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入DIEA(278.1mg，2.2mmol，3.0当量)和HATU(272.7mg，0.72mmol，1.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应0.5小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残留物经制备HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，150mg，产率58％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.11(s,1H),8.58(s,1H),8.40-8.33(m,2H),8.22-8.09(m,1H),7.70(d,J＝8.1Hz,2H),7.42(t,J＝7.9Hz,2H),7.14(t,J＝7.3Hz,1H),5.77-5.74(m,1H),2.86(d,J＝5.0Hz,3H).LC-MS(ESI):m/z 362[M+H]+.
制备例81.化合物A81的合成
步骤A：N,N-二甲基-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-胺
在0℃下，向3-溴-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑(200mg，0.746mmol，1.0当量)的N-甲基吡咯烷酮(5mL)溶液中加入二甲胺(343mg，7.46mmol，10当量)。反应混合物在80℃下封管搅拌1小时。反应完全后，冷却至室温，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱分离得到标题化合物(黄色固体，60mg，产率35％)。
步骤B：N3,N3-二甲基-1-苯基-1H-吡唑-3,4-二胺
在室温下，向N,N-二甲基-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-胺(70mg，0.30mmol，1.0当量)的甲醇(10mL)溶液中加入10％钯碳(40mg，0.38mmol，1.3当量)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌18小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状物，60mg，产率98％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：N-(3-(二甲基氨基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向N3,N3-二甲基-1-苯基-1H-吡唑-3,4-二胺(60mg，0.30mmol，1.0当量)和6-(三氟甲基)吡啶甲酸(56.7mg，0.30mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(4mL)溶液中加入DIEA(115mg，0.89mmol，3.0当量)和HATU(112.8mg，0.30mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应0.5小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残留物经制备HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，68mg，产率28％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.90(s,1H),8.59(s,1H),8.42-8.34(m,2H),8.22-8.17(m,1H),7.75(d,J＝8.2Hz,2H),7.45(t,J＝7.9Hz,2H),7.20(t,J＝7.4Hz,1H),2.86(s,6H).LC-MS(ESI):m/z 376[M+H]+.
制备例82.化合物A82的合成
步骤A：1-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸
在0℃下，向1-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(200mg，0.51mmol，1.0当量)的甲醇(5mL)和水(5mL)的混合溶液中加入氢氧化锂(24.5mg，1.02mmol， 2.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，反应液用稀释的1N HCl溶液调节PH 5-6。混合液乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，150mg，产率78％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤B：N-(3-(甲氧基(甲基)氨基甲酰基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸(150mg，0.40mmol，1.0当量)和N,O-二甲基羟胺盐酸盐(43mg，0.44mmol，1.1当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入DIEA(155mg，1.20mmol，3.0当量)和HATU(152mg，0.40mmol，1.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，130mg，产率78％)。
步骤C：N-(3-乙酰基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃氮气保护下，向N-(3-(甲氧基(甲基)氨基甲酰基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(130mg，0.31mmol，1.0当量)的四氢呋喃(5mL)溶液中缓慢加入3M甲基溴化镁乙醚溶液(0.41mL，1.24mmol，4.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应3小时。反应完全后，用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，56.2mg，产率48％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.48(s,1H),9.06(s,1H),8.47-8.36(m,2H),8.23(d,J＝7.4Hz,1H),7.98(d,J＝8.0Hz,2H),7.57(t,J＝7.8Hz,2H),7.44(t,J＝7.3Hz,1H),2.66(s,3H).LC-MS(ESI)m/z:375[M+H]+.
制备例83.化合物A83的合成
步骤A：N-(3-(乙酰基-d3)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃氮气保护下，向N-(3-(甲氧基(甲基)氨基甲酰基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(170mg，0.40mmol，1.0当量)的四氢呋喃(10mL)溶液中缓慢加入1M(甲基-d3)碘化镁(1.6mL，1.60mmol，4.0当量)的乙醚溶液。反应液在氮气保护下室温搅拌反应3小时。反应完全后，用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和 饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，79.8mg，产率52％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.48(s,1H),9.06(s,1H),8.50-8.37(m,2H),8.24(d,J＝7.5Hz,1H),7.98(d,J＝7.8Hz,2H),7.58(t,J＝7.7Hz,2H),7.44(t,J＝7.3Hz,1H).LC-MS(ESI):m/z 378[M+H]+.
制备例84.化合物A84的合成
步骤A：4-硝基-1-苯基-3-乙烯基-1H-吡唑
在室温下，向3-溴-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑(2g，7.46mmol，1.0当量)和乙烯基三氟硼酸钾(2.0g，14.92mmol，2.0当量)的1,4-二氧六环(20mL)和水(5mL)的溶液中加入碳酸钾(2.0g，14.92mmol，2.0当量)和Pd(dppf)Cl2(545.3mg，0.746mmol，0.1当量)。反应混合物在氮气保护下90℃搅拌反应2小时。反应完全后，冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.5g，产率93％)。
步骤B：3,3,3-三氟-1-(4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)丙-1-醇
将氟化银(1.32g，10.4mmol，1.5当量)加入到干燥的Schlenk管中，用隔膜密封，并与氧气交换气(5次)。将4-硝基-1-苯基-3-乙烯基-1H-吡唑(1.5g，6.94mmol，1.0当量)、(三氟甲基)三甲基硅烷(1.97g，13.88mmol，2.0当量)溶于无水N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶液中，并迅速加到处理好的Schlenk管中。反应混合物在室温下搅拌反应12小时。反应完全后，乙酸乙酯稀释，过滤，滤液用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，500mg，产率24％)。
步骤C：3,3,3-三氟-1-(4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)丙-1-酮
在0℃下，向3,3,3-三氟-1-(4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)丙-1-醇(500mg，1.65mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中分批加入戴斯-马丁试剂(840mg，1.98mmol，1.2当量)。反应混合物室温下搅拌2小时。反应完全后，过滤，滤液减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，400mg，产率81％)。
步骤D：1-(4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)-3,3-三氟丙-1-酮
在室温下，向3,3,3-三氟-1-(4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)丙-1-酮(400mg，1.34mmol， 1.0当量)的乙酸乙酯(20mL)溶液中加入10％钯碳(285mg，0.267mmol，0.2当量)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌12小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，300mg，产率83％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：N-(1-苯基-3-(3,3,3-三氟丙酰基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-(4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)-3,3-三氟丙-1-酮(100mg，0.371mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入6-(三氟甲基)吡啶甲酸(71.0mg，0.371mmol，1.0当量)、DIEA(144mg，1.11mmol，3.0当量)和HATU(212mg，0.557mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，53.4mg，产率33％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.23(s,1H),9.11(s,1H),8.43(dt,J＝15.4,7.6Hz,2H),8.24(d,J＝7.4Hz,1H),8.02(d,J＝7.9Hz,2H),7.58(t,J＝7.8Hz,2H),7.46(t,J＝7.4Hz,1H),4.39(q,J＝11.0Hz,2H).LC-MS(ESI):m/z 443[M+H]+.
制备例85.化合物A85的合成
步骤A：4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(3.0g，17.5mmol，1.0当量)的二氯甲烷(20mL)溶液中加入苯基硼酸(4.28g，35.1mmol，2.0当量)、醋酸铜(5.25g，26.3mmol，1.5当量)和吡啶(5.7mL，70.1mmol，4.0当量)。反应液在氧气(1atm)保护下室温搅拌反应16小时。反应完全后，反应液过滤，滤液用水稀释，二氯甲烷萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，3.5g，产率81％)。
步骤B：4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(1g，4.05mmol，1.0当量)的甲醇(30mL)溶液中加入10％钯碳(861mg，0.81mmol，0.2当量)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气(1atm)下室温搅拌12小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，700mg，产率80％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：1-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(500mg，2.30mmol，1.0当量)和6-(三氟甲基)吡啶甲酸(440mg，2.30mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶液中加入DIEA(892mg，6.91mmol，3.0当量)和HATU(875mg，2.30mmol，1.0当量)。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，680mg，产率76％)。
步骤D：N-(3-(2-氰基乙酰基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在-78℃氮气保护下，向乙腈(42mg，1.02mmol，4.0当量)中20分钟缓慢滴加2M二异丙基氨基锂(0.51mL，1.02mmol，4.0当量)的四氢呋喃溶液。滴加完毕，混合液在-78℃氮气保护下搅拌0.5小时。向上述反应液中继续加入溶于四氢呋喃(5.0mL)溶液中的1-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(100mg，0.26mmol，1.0当量)。反应液在氮气保护下搅拌反应2小时。反应完毕后，用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，45.3mg，产率44％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.21(s,1H),9.12(s,1H),8.49-8.39(m,2H),8.26(d,J＝7.5Hz,1H),8.00(d,J＝8.0Hz,2H),7.59(t,J＝7.8Hz,2H),7.46(t,J＝7.3Hz,1H),4.73(s,2H).LC-MS(ESI):m/z 400[M+H]+.
制备例86.化合物A86的合成
步骤A：1-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸
在0℃下，向1-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(300.0mg，0.8mmol，1.0当量)的四氢呋喃(3mL)和水(0.6mL)的混合溶液中加入一水合氢氧化锂(65.0mg，1.6mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，反应液用稀释的1N HCl溶液调节PH 5-6。混合液乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状物，260mg，产率89％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤B：N-(3-(环丙基氨基甲酰基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸(120.0mg，0.3 mmol，1.0当量)和环丙基胺(21.9mg，0.4mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(1mL)溶液中加DIEA(116.1mg，0.9mmol，3.0当量)和HATU(182.5mg，0.5mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应16小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，50.5mg，产率38％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.61(s,1H),9.05(s,1H),8.60(d,J＝4.5Hz,1H),8.49-8.38(m,2H),8.23(d,J＝7.6Hz,1H),8.00(d,J＝7.9Hz,2H),7.55(t,J＝7.9Hz,2H),7.40(t,J＝7.4Hz,1H),3.01-2.92(m,1H),0.78-0.68(m,4H).LC-MS(ESI):m/z 416[M+H]+.
制备例87.化合物A87的合成
步骤A：N-(3-(甲氧基(甲基)氨基甲酰基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-苯基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸(160.0mg，0.4mmol，1.0当量)和N,O-二甲基羟胺盐酸盐(41.9mg，0.4mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2mL)溶液中加入HATU(245.3mg，0.6mmol，1.5当量)和DIEA(154.8mg，1.2mmol，3.0当量)。反应混合物在氮气下室温搅拌16小时。反应完全后，将反应液用饱和氯化铵水溶液稀释，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，150.0mg，产率83％)。
步骤B：N-(3-(环丙烷羰基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃氮气保护下，向N-(3-(甲氧基(甲基)氨基甲酰基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(150.0mg，0.4mmol，1.0当量)的四氢呋喃(1.5mL)溶液中缓慢加入1M环丙基溴化镁四氢呋喃溶液(1.8mL，1.8mmol，5.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，48.9mg，产率34％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.45(s,1H),9.12(s,1H),8.49-8.38(m,2H),8.24(d,J＝6.9Hz,1H),8.03(d,J＝7.8Hz,2H),7.59(t,J＝7.9Hz,2H),7.45(t,J＝7.4Hz,1H),3.21-3.12(m,1H),1.22-1.12(m,4H).LC-MS(ESI):m/z 401[M+H]+.
制备例88.化合物A88的合成
步骤A：6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酸乙酯
在室温下，向6-溴吡啶甲酸乙酯(3.0g，13.1mmol，1.0当量)和1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡唑(4.37g，15.7mmol，1.2当量)的1,4-二氧六环(50mL)和水(10mL)的溶液中依次加入碳酸钾(4.52g，32.8mmol，2.5当量)和Pd(dppf)Cl2 .CH2Cl2(1.06g，1.31mmol，0.1当量)。反应液氮气置换3次，在氮气保护下100℃搅拌反应2小时。反应完毕，冷却至室温，乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，3.5g，产率88％)。
步骤B：6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酸
在0℃下，向6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酸乙酯(3.5g，11.6mmol，1.0当量)的四氢呋喃(40mL)和水(8mL)的混合溶液中加入氢氧化锂(1.46g，34.8mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应12小时。反应完全后，反应液用稀释的1N HCl溶液调节PH 5-6。混合液乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，3.5g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：6-(1H-吡唑-3-基)吡啶甲酸
在0℃下，向6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酸(3.5g，粗品)中加入4MHCl 1,4-二氧六环溶液(35mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，3g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤D：4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(1g，5.84mmol，1.0当量)的二氯甲烷(20mL)溶液中加入苯基硼酸(0.71g，5.84mmol，1.0当量)、一水合醋酸铜(1.75g，8.76mmol，1.5当量)和吡啶(2.3g，29.2mmol，5.0当量)。反应液在氧气保护下40℃搅拌反应14小时。 反应完全后，反应液过滤，滤液用水稀释，二氯甲烷萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(无色液体，400mg，产率28％)。
步骤E：4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(100mg，0.41mmol，1.0当量)的氨水(5mL)溶液在室温搅拌反应6小时。反应完全后，过滤，滤饼用水洗涤，干燥完全后得到到粗品标题化合物(白色固体，80mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤F：4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(80mg，0.34mmol，1.0当量)的甲醇(10mL)溶液中加入10％钯碳(40mg)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌14小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(淡棕色固体，60mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤G：N-(3-氨基-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向6-(1H-吡唑-3-基)吡啶甲酸(97mg，0.51mmol，1.3当量)和HATU(194mg，0.51mmol，1.3当量)的N,N-二甲基甲酰胺(4mL)溶液中加入DIEA(258mg，2.00mmol，5.0当量)和4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(80mg，0.40mmol，1.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2.5小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经制备HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，49mg，产率35％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.21(s,1H),12.19(s,1H),9.02(s,1H),8.23(d,J＝7.8Hz,1H),8.10(d,J＝7.7Hz,1H),8.06(d,J＝6.6Hz,2H),8.01(d,J＝7.8Hz,2H),7.92(d,J＝11.5Hz,2H),7.57(t,J＝7.9Hz,2H),7.40(t,J＝7.4Hz,1H),7.33(s,1H).LC-MS(ESI):m/z 374.1[M+H]+.
制备例89.化合物A89的合成
步骤A：6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶甲酸
在室温下，向6-溴吡啶酸(2.5g，12.4mmol，1.0当量)和1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡唑(4.14g，14.9mmol，1.2当量)的1,4-二氧六环(30mL)和水(6mL)溶液中依次加入碳酸钾(4.28g，31.0mmol，2.5当量)和 Pd(dppf)Cl2 .CH2Cl2(2.51g，3.10mmol，0.1当量)。反应液氮气置换3次，在氮气保护下100℃搅拌反应2小时。反应完毕，冷却至室温，乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，2.6g，产率77％)。
步骤B：6-(1H-吡唑-4-基)吡啶甲酸
在0℃下，向6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶甲酸(1g，3.66mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入三氟乙酸(3mL)。反应混合物在室温下搅拌反应2小时。反应完全后，减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，380mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：N-(3-氨基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-4-酰基)吡啶甲酰胺
在室温下，向6-(1H-吡唑-4-基)吡啶甲酸(140mg，0.74mmol，1.0当量)和HATU(366mg，0.96mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入DIEA(477mg，3.70mmol，5.0当量)和4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(150mg，0.74mmol，1.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2.5小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经制备HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，19mg，产率7％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.22(s,1H),12.20(s,1H),9.00(s,1H),8.61-8.35(m,2H),8.13-8.06(m,1H),8.06-7.96(m,4H),7.95-7.88(m,2H),7.57(t,J＝7.8Hz,2H),7.40(t,J＝7.3Hz,1H).LC-MS(ESI):m/z 374.1[M+H]+.
制备例90.化合物A90的合成
步骤A：6-(1-(三异丙基甲硅烷基)-1H-吡咯-3-基)吡啶甲酸乙酯
在室温下，向6-溴吡啶甲酸乙酯(520mg，2.27mmol，1.0当量)和4-(三丁基锡基)-1-三基-1H-咪唑(1.50g，2.50mmol，1.1当量)的甲苯(10mL)溶液中加入四(三苯基膦)钯(131mg，0.11mmol，0.05当量)。反应液氮气置换3次，在氮气保护下100℃搅拌反应16小时。反应完毕，冷却至室温，乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，700mg，产率67％)。
步骤B：6-(1-三基-1H-咪唑-4-基)吡啶甲酸
在0℃下，向6-(1-(三异丙基甲硅烷基)-1H-吡咯-3-基)吡啶甲酸乙酯(700mg，1.53 mmol，1.0当量)的四氢呋喃(10mL)和水(2mL)的混合溶液中加入一水合氢氧化锂(193mg，4.59mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应12小时。反应完全后，反应液用稀释的1N HCl溶液调节PH 5-6。混合液乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，500mg，产率76％)。
步骤C：6-(1H-咪唑-4-基)吡啶甲酸
在0℃下，向6-(1-三基-1H-咪唑-4-基)吡啶甲酸(110mg，0.26mmol，1.0当量)中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(5mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，50mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤D：N-(3-氨基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-咪唑-4-基)吡啶甲酰胺
在室温下，向6-(1H-咪唑-4-基)吡啶甲酸(50mg，0.26mmol，1.0当量)和HATU(128mg，0.34mmol，1.3当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中加入DIEA(168mg，1.30mmol，5当量)和4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(53mg，0.26mmol，1.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应0.5小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经制备HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，23.4mg，产率24％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.58(s,1H),12.15(s,1H),9.01(s,1H),8.19-7.92(m,7H),7.88-7.78(m,2H),7.57(t,J＝7.9Hz,2H),7.41(t,J＝7.4Hz,1H).LC-MS(ESI):m/z 374.1[M+H]+.
制备例91.化合物A91的合成
步骤A：6-(1-(三异丙基甲硅烷基)-1H-吡咯-3-基)吡啶甲酸乙酯
在室温下，向6-溴吡啶甲酸乙酯(2.5g，10.9mmol，1.0当量)和3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1-(三异丙基甲硅烷基)-1H-吡咯(4.56g，13.0mmol，1.2当量)的1,4-二氧六环(50mL)和水(10mL)的溶液中加入碳酸钾(3.75g，27.2mmol，2.5当量)和Pd(dppf)Cl2 .CH2Cl2(0.89g，1.09mmol，0.1当量)。反应液氮气置换3次，在氮气保护下100℃搅拌反应2小时。反应完毕，冷却至室温，乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，2.9g，产率72％)。
步骤B：6-(1H-吡咯-3-基)吡啶甲酸乙酯
在室温下，向6-(1-(三异丙基甲硅烷基)-1H-吡咯-3-基)吡啶甲酸乙酯(2.9g，7.78mmol，1.0当量)的四氢呋喃(60mL)溶液中加入1M四丁基氟化铵四氢呋喃溶液(15.6mL，15.6mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完毕，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1.3g，产率77％)。
步骤C：6-(1H-吡咯-3-基)吡啶甲酸
在0℃下，向6-(1H-吡咯-3-基)吡啶甲酸乙酯(800mg，3.70mmol，1.0当量)的四氢呋喃(20mL)和水(4mL)的混合溶液中加入一水合氢氧化锂(466mg，11.1mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应12小时。反应完全后，反应液用稀释的1N HCl溶液调节PH＝3。混合液乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经反相柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，600mg，产率86％)。
步骤D：N-(3-氨基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡咯-3-基)吡啶甲酰胺
在室温下，向6-(1H-吡咯-3-基)吡啶甲酸(100mg，0.53mmol，1.0当量)和HATU(262mg，0.69mmol，1.3当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中加入DIEA(343mg，2.66mmol，5当量)和4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(107mg，0.53mmol，1.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应0.5小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经制备HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，15mg，产率8％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.09(s,1H),11.23(s,1H),9.01(s,1H),8.06-7.98(m,3H),7.97-7.91(m,1H),7.90-7.81(m,3H),7.75-7.71(m,1H),7.56(t,J＝8.0Hz,2H),7.40(t,J＝7.4Hz,1H),6.99-6.96(m,1H),6.91-6.87(m,1H).LC-MS(ESI):m/z 373.1[M+H]+.
制备例92.化合物A92、A93、A94、A95、A102、A103的合成
步骤A：3-溴-4-硝基-1-苯基吡唑
在室温下，向3-溴-4-硝基-1H-吡唑(8.50g，44.3mmol，1.0当量)和苯硼酸(7.02g，57.6 mmol，1.3当量)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入醋酸铜(13.3g，66.4mmol，1.5当量)和吡啶(14mL，177mmol，4.0当量)。反应液在氧气保护下室温搅拌反应18小时。反应完全后，反应液过滤，滤液用水稀释，二氯甲烷萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，11g，产率93％)。
步骤B：3-(苄基硫烷基)-4-硝基-1-苯基吡唑
在室温下，向3-溴-4-硝基-1-苯基吡唑(10.7g，39.9mmol，1.05当量)和苄硫醇(4.71g，37.9mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(150mL)溶液中依次加入二异丙基乙基胺(5.67g，43.9mmol，1.2当量)、4,5-双苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(4.62g，7.98mmol，0.2当量)和三(二亚苄基丙酮)二钯(3.66g，3.99mmol，0.1当量)。反应液氮气置换3次，在氮气保护下100℃搅拌反应18小时。反应完毕，冷却至室温，乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，9g，产率72％)。
步骤C：4-硝基-1-苯基吡唑-3-磺酰氯
在0℃下，向3-(苄基硫烷基)-4-硝基-1-苯基吡唑(9g，28.9mmol，1.0当量)的乙酸(150mL)和水(25mL)的溶液中加入N-氯代丁二酰亚胺(11.6g，86.7mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，反应液用乙酸乙酯萃取，混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，8g，产率96％)。
步骤D：4-硝基-1-苯基吡唑-3-磺酰胺
在0℃下，向4-硝基-1-苯基吡唑-3-磺酰氯(8g，27.8mmol，1.0当量)的乙腈(100mL)溶液中加入25重量％氨水溶液(25mL)。反应液在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，减压浓缩，残余物经用水(50mL)打浆纯化得到粗品标题化合物(白色固体，6g，产率80％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-磺酰胺
在室温下，向4-硝基-1-苯基吡唑-3-磺酰胺(1g，3.73mmol，1.0当量)的乙醇(20mL)和水(10mL)溶液中加入铁粉(1.04g，18.6mmol，5.0当量)和氯化铵(997mg，18.6mmol，5.0当量)。反应混合物在80℃搅拌反应1小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，600mg，产率68％)。
步骤F：N-(1-苯基-3-氨磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-3-基)吡啶甲酰胺(A92)
在室温下，向4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-磺酰胺(100mg，0.42mmol，1.0当量)和6-(1H-吡唑-3-基)吡啶-2-甲酸(79mg，0.42mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2mL)溶液中加入DIEA(54mg，0.42mmol，1.0当量)和50重量％T3P乙酸乙酯溶液(134mg，0.42mmol，1.0当量)。反应混合物在室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。经制备HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，54mg，产率31％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.20(s,1H),11.33(s,1H),9.10(s,1H),8.25(d,J＝7.6Hz,1H),8.09(ddd,J＝18.5,13.6,9.3Hz,4H),7.98-7.87(m,3H),7.59(t,J＝8.0Hz,2H),7.45(t,J＝7.4Hz,1H),7.23(s,1H).LC-MS(ESI):m/z 410.1[M+H]+.
N-(1-苯基-3-氨磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-4-酰基)吡啶甲酰胺(A93)
在室温下，向4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-磺酰胺(100mg，0.42mmol，1.0当量)和6-(1H-吡唑-4-基)吡啶-2-甲酸(238mg，1.26mmol，3.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中加入DIEA(434mg，3.36mmol，8.0当量)和50重量％T3P乙酸乙酯溶液(1.07g，1.68mmol，4.0当量)。反应混合物在室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。经制备HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，20.3mg，产率12％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.23(s,1H),11.35(s,1H),9.09(s,1H),8.53(s,1H),8.33(s,1H),8.13-7.97(m,4H),7.94(dd,J＝9.5,4.3Hz,3H),7.59(t,J＝8.0Hz,2H),7.44(t,J＝7.4Hz,1H).LC-MS(ESI):m/z 410.1[M+H]+.
6-(1H-咪唑-4-基)-N-(1-苯基-3-氨磺酰基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲酰胺(A94)
在室温下，向4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-磺酰胺(100mg，0.42mmol，1.0当量)和6-(3H-咪唑-5-基)吡啶-2-甲酸(238mg，1.26mmol，3.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入吡啶(0.5mL，6.18mmol，14.7当量)、HOBt(170mg，1.26mmol，3.0当量)和EDCI(242mg，1.26mmol，3.0当量)。反应混合物在室温搅拌反应3小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。经制备HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，19.1mg，产率11％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.52 (s,1H),11.37(s,1H),9.09(s,1H),8.15-8.00(m,4H),8.00-7.89(m,4H),7.85(s,1H),7.59(t,J＝7.9Hz,2H),7.44(t,J＝7.4Hz,1H).LC-MS(ESI):m/z 410.1[M+H]+.
N-(1-苯基-3-氨磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡咯-3-基)吡啶甲酰胺(A95)
在室温下，向4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-磺酰胺(100mg，0.42mmol，1.0当量)和6-(1H-吡咯-3-基)吡啶-2-甲酸(237mg，1.26mmol，3.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中加入DIEA(434mg，3.36mmol，8.0当量)和50重量％T3P乙酸乙酯溶液(1.07g，1.68mmol，4.0当量)。反应混合物在室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。经制备HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，23.4mg，产率14％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.33(s,1H),11.26(s,1H),9.09(s,1H),8.03(s,2H),7.98-7.90(m,3H),7.90-7.82(m,2H),7.73(dd,J＝2.8,1.5Hz,1H),7.59(t,J＝8.0Hz,2H),7.44(t,J＝7.4Hz,1H),6.89(dt,J＝3.5,2.1Hz,2H).LC-MS(ESI):m/z 409.1[M+H]+.
N-(1-苯基-3-氨磺酰基-1H-吡唑-4-基)间苯二甲酰胺(A102)
在室温下，向4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-磺酰胺(100mg，0.42mmol，1.0当量)和3-氨基苯甲酸(208mg，1.26mmol，3.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中加入DIEA(434mg，3.36mmol，8.0当量)和50重量％T3P乙酸乙酯溶液(1.07g，1.68mmol，4.0当量)。反应混合物在室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。经制备HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，52.9mg，产率33％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.71(s,1H),9.01(s,1H),8.42(t,J＝1.5Hz,1H),8.18(s,1H),8.12(d,J＝7.8Hz,1H),8.03(d,J＝8.2Hz,1H),7.91(dd,J＝14.2,6.5Hz,4H),7.69(t,J＝7.7Hz,1H),7.59(dd,J＝10.7,5.2Hz,3H),7.44(t,J＝7.4Hz,1H).LC-MS(ESI):m/z 386.1[M+H]+.
3-硝基-N-(1-苯基-3-氨磺酰基-1H-吡唑-4-基)苯甲酰胺(A103)
在室温下，向4-氨基-1-苯基吡唑-3-磺酰胺(250mg，1.05mmol，1.0当量)和3-硝基苯甲酸(526mg，3.15mmol，3.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(4mL)溶液中加入DIEA(1085mg，8.39mmol，8.0当量)和50重量％T3P乙酸乙酯溶液(2.67g，4.20mmol，4.0当量)。反应混合物在室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。经制备HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，18.3mg，产率4％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.96(brs,1H),9.00(s,1H),8.70(s,1H),8.50(dd,J＝7.9,1.7Hz,1H),8.34(d,J＝7.8Hz,1H),8.14-7.67(m,5H),7.58(t,J＝7.9Hz, 2H),7.44(t,J＝7.4Hz,1H).LC-MS(ESI):m/z 388.0[M+H]+.
制备例93.化合物A96的合成
步骤A：((4-(3-(1H-吡唑-3-基)苯甲酰胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-酰基)(甲基)(氧代)-λ6-亚磺酰基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向(4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)(甲基)(氧代)-λ6-亚磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.30mmol，1.0当量)和3-(1H-吡唑-3-基)苯甲酸(84mg，0.45mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(4mL)溶液中加入DIEA(115mg，0.89mmol，3.0当量)和HATU(169mg，0.45mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，100mg，产率66％)。
步骤B：N-(3-(S-甲基磺酰亚胺基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-3-基)吡啶甲酰胺
在0℃下，向((4-(3-(1H-吡唑-3-基)苯甲酰胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-酰基)(甲基)(氧代)-λ6-亚磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.20mmol，1.0当量)中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(4mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，滤液减压浓缩。残余物经制备HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，42.8mg，产率53％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.19(s,1H),11.92(s,1H),9.13(s,1H),8.24(d,J＝7.5Hz,1H),8.16-8.04(m,2H),7.94(t,J＝10.3Hz,3H),7.59(t,J＝7.9Hz,2H),7.45(t,J＝7.4Hz,1H),7.25(d,J＝1.9Hz,1H),5.33(s,1H),3.38(s,3H).LC-MS(ESI):m/z 408.1[M+H]+.
制备例94.化合物A97的合成
步骤A：(4-(3-(1H-吡唑-4-基)苯甲酰胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-基)(甲基)(氧代)-λ6-亚磺酰基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向(4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)(甲基)(氧代)-λ6-亚磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.30mmol，1.0当量)和3-(1H-吡唑-4-基)苯甲酸(84mg，0.45mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(4mL)溶液中加入DIEA(115mg，0.89mmol，3.0当量)和HATU(169 mg，0.45mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，100mg，产率66％)。
步骤B：N-(3-(S-甲基磺酰亚胺基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-4-基)吡啶甲酰胺
在0℃下，向(4-(3-(1H-吡唑-4-基)苯甲酰胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-基)(甲基)(氧代)-λ6-亚磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.20mmol，1.0当量)中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(4mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，滤液减压浓缩。残余物经制备HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，30.7mg，产率38％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.20(s,1H),11.92(s,1H),9.12(s,1H),8.52(s,1H),8.35(s,1H),8.05(t,J＝7.6Hz,1H),8.01-7.89(m,4H),7.59(t,J＝7.8Hz,2H),7.45(t,J＝7.3Hz,1H),5.39(s,1H),3.38(s,3H).LC-MS(ESI):m/z 408.2[M+H]+.
制备例95.化合物A98的合成
步骤A：(4-(3-(1H-咪唑-4-基)苯甲酰胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-基)(甲基)(氧代)-λ6-亚磺酰基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向(4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)(甲基)(氧代)-λ6-亚磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.30mmol，1.0当量)和3-(1H-咪唑-4-基)苯甲酸(84mg，0.45mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(4mL)溶液中加入DIEA(115mg，0.89mmol，3.0当量)和HATU(169mg，0.45mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，100mg，产率66％)。
步骤B：6-(1H-咪唑-4-基)-N-(3-(S-甲基磺酰亚胺基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲酰胺
在0℃下，向(4-(3-(1H-咪唑-4-基)苯甲酰胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-基)(甲基)(氧代)-λ6-亚磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.20mmol，1.0当量)中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(4mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，滤液减压浓缩。残余物经制备HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，31.0mg，产率39％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.47(s,1H),11.91(s,1H),9.12(s,1H),8.12(dd,J＝7.9,1.1Hz,1H),8.07(t,J＝7.7Hz,1H),8.03(s,1H),7.98-7.93(m,3H),7.84(s,1H),7.59(t,J＝7.9Hz,2H),7.45(t,J＝ 7.4Hz,1H),5.39(s,1H),3.37(s,3H).LC-MS(ESI):m/z 408.2[M+H]+.
制备例96.化合物A99的合成
步骤A：4-(3-(1H-吡咯-3-基)苯甲酰胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-基)(甲基)(氧代)-λ6-亚磺酰基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向(4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)(甲基)(氧代)-λ6-亚磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.30mmol，1.0当量)和3-(1H-吡咯-3-基)苯甲酸(84mg，0.45mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(4mL)溶液中加入DIEA(115mg，0.89mmol，3.0当量)和HATU(169mg，0.45mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，100mg，产率66％)。
步骤B：N-(3-(S-甲基磺酰亚胺基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡咯-3-基)吡啶甲酰胺
在0℃下，向4-(3-(1H-吡咯-3-基)苯甲酰胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-基)(甲基)(氧代)-λ6-亚磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.20mmol，1.0当量)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入三氟乙酸(1mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，滤液减压浓缩。残余物经制备HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，33.2mg，产率41％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.84(s,1H),11.20(s,1H),9.12(s,1H),7.94(dd,J＝7.5,5.1Hz,3H),7.85(t,J＝8.3Hz,2H),7.73(s,1H),7.59(t,J＝7.9Hz,2H),7.44(t,J＝7.4Hz,1H),6.88(d,J＝2.1Hz,2H),5.27(s,1H),3.36(s,3H).LC-MS(ESI):m/z 407.2[M+H]+.
制备例97.化合物A100的合成
步骤A：N-(3-氨基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)间苯二甲酰胺
在室温下，向3-氨基苯甲酸(200mg，1.21mmol，1.0当量)和EDCI(348mg，1.82mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入HOBt(245mg，1.82mmol，1.5当量)、4-二甲氨基吡啶(15mg，0.12mmol，0.1当量)和DIEA(783mg，6.06mmol，5.0当量)。反 应混合液在室温下搅拌0.5小时。向上述反应液中继续加入4-氨基-1-苯基吡唑-3-甲酰胺(245mg，1.21mmol，1.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应12小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经制备HPLC纯化得到标题化合物(粉色固体，36mg，产率9％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.84(s,1H),8.97(s,1H),8.42(s,1H),8.20(s,1H),8.15-8.09(m,2H),8.04(d,J＝8.0Hz,1H),7.99(d,J＝8.0Hz,2H),7.83(s,1H),7.69(t,J＝8.0Hz,1H),7.56(t,J＝8.0Hz,3H),7.40(t,J＝8.0Hz,1H).LC-MS(ESI):m/z 350.2[M+H]+.
制备例98.化合物A101的合成
步骤A：4-(3-硝基苯甲酰胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向3-硝基苯甲酸(66mg，0.40mmol，1.0当量)和HATU酯(180mg，0.48mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(4mL)溶液中加入N,N-二异丙基乙胺(102mg，0.79mmol，2.0当量)和4-氨基-1-苯基吡唑-3-甲酰胺(80mg，0.40mmol，1.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2.5小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经制备HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，70g，产率50。1H MR(400MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),8.97(s,1H),8.67(t,J＝1.8Hz,1H),8.49(dd,J＝8.2,1.5Hz,1H),8.32(d,J＝7.9Hz,1H),8.13(s,1H),8.00(d,J＝7.7Hz,2H),7.90(dd,J＝18.7,10.7Hz,2H),7.56(t,J＝8.0Hz,2H),7.41(d,J＝7.4Hz,1H).LC-MS(ESI):m/z 352.1[M+H]+.
制备例99.化合物A104的合成
步骤A：(4-(3-氨基甲酰基苯甲酰胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-基)(甲基)(氧代)-λ6-亚磺酰基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向(4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)(甲基)(氧代)-λ6-亚磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.30mmol，1.0当量)和3-氨基苯甲酸(74mg，0.45mmol，1.5当量)的N,N-二甲 基甲酰胺(4mL)溶液中加入HATU(169mg，0.45mmol，1.5当量)和DIEA(115mg，0.89mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，100mg，产率70％)。
步骤B：N-(3-(S-甲基磺酰亚胺基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)间苯二甲酰胺
在0℃下，向(4-(3-氨基甲酰基苯甲酰胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-基)(甲基)(氧代)-λ6-亚磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.21mmol，1.0当量)中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(4mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，滤液减压浓缩。残余物经制备HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，56.7mg，产率71％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.01(s,1H),9.05(s,1H),8.42(s,1H),8.17(s,1H),8.12(d,J＝7.7Hz,1H),8.01(d,J＝7.9Hz,1H),7.94(d,J＝8.1Hz,2H),7.69(t,J＝7.7Hz,1H),7.62-7.51(m,3H),7.45(t,J＝7.4Hz,1H),5.35(s,1H),3.39(s,3H).LC-MS(ESI):m/z 384.2[M+H]+.
制备例100.化合物A105的合成
步骤A：3-溴-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑
在室温下，向3-溴-4-硝基-1H-吡唑(300mg，1.56mmol，1.0当量)和苯硼酸(381mg，3.1mmol，2.0当量)的二氯甲烷(20mL)溶液中加入醋酸铜(468mg，2.3mmol，1.5当量)和吡啶(494mg，6.2mmol，4.0当量)。反应液在氧气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，反应液过滤，滤液用水稀释，二氯甲烷萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，370mg，产率88％)。
步骤B：3-(甲硫基)-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑
在室温下，向3-溴-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑(370mg，1.38mmol，1.0当量)和亚氮杂环基(甲基硫烷基)甲胺(187mg，2.1mmol，1.5当量)的二甲基亚砜(15mL)溶液中加入碳酸铯(1.79g，5.5mmol，4.0当量)。反应混合物在氮气保护下80℃搅拌1小时。反应完全后， 用水淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，290mg，产率89％)。
步骤C：亚氨基(甲基)(4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)-λ6-氨基磺酮
在室温下，向3-(甲硫基)-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑(290mg，1.23mmol，1.0当量)和乙酸铵(950mg，12.3mmol，10.0当量)的甲醇(5mL)溶液中加入碘苯二乙酸(1.19g，3.7mmol，3.0当量)。反应混合物在氮气保护下室温搅拌2小时。反应完全后，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，280mg，产率85％)。
步骤D：(4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)(氧代)-λ6-亚磺酰基)氨基甲酸叔丁酯
在0℃氮气保护下，向亚氨基(甲基)(4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)-λ6-氨基磺酮(260mg，0.98mmol，1.0当量)的四氢呋喃(10mL)溶液中分批加入60重量％氢化钠(78mg，1.95mmol，2.0当量)。反应混合物室温下搅拌1小时。向上述反应液中继续加入二碳酸二叔丁酯(426mg，1.95mmol，2.0当量)。反应混合物在50℃氮气保护下搅拌反应3小时。反应完全后，冷却至室温，用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，310mg，产率86％)。
步骤E：(4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)(甲基)(氧代)-λ6-亚磺酰基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向(4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)(氧代)-λ6-亚磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(280mg，0.76mmol，1.0当量)的乙醇(5mL)和水(5mL)的溶液中加入铁粉(213mg，3.8mmol，5.0当量)和氯化铵(408mg，7.6mmol，10.0当量)。反应混合物在60℃搅拌反应0.5小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩去除乙醇。混合液加水稀释，乙酸乙酯萃取两次，混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，180mg，产率70％)。
步骤F：(4-(3-硝基苯甲酰胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-基)(氧代)-λ6-亚磺酰基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向3-硝基苯甲酸(67mg，0.40mmol，1.5当量)和HATU(152mg，0.40mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(4mL)溶液中加入DIEA(103mg，0.80mmol，3.0当量)和(4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)(甲基)(氧代)-λ6-亚磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(90mg，0.27mmol，1.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，100mg，产率77％)。
步骤G：N-(3-(S-甲基磺酰亚胺基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-3-硝基苯甲酰
在0℃下，向(4-(3-硝基苯甲酰胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-基)(氧代)-λ6-亚磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(90mg，0.18mmol，1.0当量)中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(4mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，滤液减压浓缩。残余物经制备HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，30.4mg，产率42％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.17(s,1H),9.06(s,1H),8.67(s,1H),8.50(dd,J＝8.1,1.9Hz,1H),8.31(d,J＝7.8Hz,1H),7.93(dd,J＝14.8,7.7Hz,3H),7.59(t,J＝7.9Hz,2H),7.46(t,J＝7.4Hz,1H),5.35(s,1H),3.40(s,3H).LC-MS(ESI):m/z 386[M+H]+.
制备例101.化合物A106的合成
步骤A：2-(4-(3-氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺基)-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯
在氮气下，于0℃向3-异氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酸(77mg，0.41mmol，1.0当量)、2-(4-氨基-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(150mg，0.41mmol，1.0当量)和N,N-二异丙基乙胺(160mg，1.24mmol，3.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入HATU(235mg，0.62mmol，1.5当量)，反应在氮气下搅拌1小时。反应液加水，萃取，干燥并真空浓缩。残余物通过快速柱纯化，得到白色固体状的2-(4-(3-氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺基)-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(150mg，收率68.30％)。
步骤B：3-氰基-N-(3-(2-羟基丙-2-基)-1-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺
在0℃下，在氮气下搅拌2-(4-(3-氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺基)-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(150mg，0.28mmol，1.0当量)的HCl/EA(4N，5mL)溶液，并在氮气下搅拌反应1小时。将反应物真空浓缩。残余物通过制备高效液相色谱法纯化，得到白色固体状的3-氰基-N-(3-(2-羟基丙-2-基)-1-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺(38.7mg，31.76％)。LC-MS(ESI)m/z:434[M+H]+.1HNMR(400MHz,DMSO)δ11.75(s,1H),8.95(d,J＝2.2Hz,1H),8.73(d,J＝2.2Hz,1H),8.45-8.28(m,2H),7.70(d,J＝4.8Hz,1H),7.09(d,J＝4.8Hz,1H),4.86-4.78(m, 1H),2.90-2.80(m,4H),2.40-2.35(m,2H),2.20-2.15(m,2H),1.74-1.66(m,4H),1.55(s,6H).
制备例102.化合物A107的合成
步骤A：1-异丙基-4-苯基-1H-咪唑-2-胺
在室温下，向2-溴-1-苯乙醇-1-酮(2g，10.0mmol，1.0当量)的乙醇(40mL)溶液中加入丙-2-胺(0.820mL，9.55mmol，1.0当量)。混合液搅拌0.5小时。向上述反应液中加入氰胺(1.27g，30.1mmol，3.0当量)并用1N HCl烯溶液调节PH＝4。反应液在氮气保护下95℃搅拌反应18小时。反应完全后，减压浓缩，残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，500mg，产率25％)。
步骤B：N-(1-异丙基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向6-(三氟甲基)吡啶甲酸(228mg，1.19mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(8mL)溶液中加入DIEA(256mg，1.99mmol，2.0当量)和HATU(567mg，1.49mmol，1.5当量)并混合液在50℃搅拌反应0.5小时。向上述反应液中加入1-异丙基-4-苯基-1H-咪唑-2-胺(200mg，0.994mmol，1.0当量)。反应液在50℃搅拌反应18小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，50.5mg，产率14％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.70(s,1H),8.42-8.34(m,2H),8.21(d,J＝7.3Hz,1H),7.87(s,1H),7.77(d,J＝7.6Hz,2H),7.36(t,J＝7.6Hz,2H),7.20(t,J＝7.3Hz,1H),4.41-4.17(m,1H),1.40(d,J＝6.7Hz,6H).LC-MS(ESI):m/z 375[M+H]+.
制备例103.化合物A108的合成
步骤A：2-苯甲酰肼-1-甲酰亚胺
在0℃下，向苯甲酰氯(2g，14.228mmol，1.0当量)的吡啶(20mL)溶液中分批加入肼甲酰胺(1.05g，14.228mmol，1.0当量)。反应混合液在0℃下搅拌0.5小时后，升至室温 并室温搅拌反应12小时。反应完全后，减压浓缩，残余物溶于水(20mL)中并用2N氢氧化钠溶液调节PH＝12至产物析出。过滤，滤饼干燥完全得到标题化合物(红色固体，1.3g，产率51％)。
步骤B：3-苯基-1H-1,2,4-三唑-5-胺
2-苯甲酰肼-1-甲酰亚胺(280mg，1.12mmol，1.0当量)的水(5mL)溶液在封管中80℃搅拌反应2小时。反应完全后，冷却至室温，析出的产物过滤，滤饼用冰水洗涤，干燥完全得到标题化合物(白色固体，(215mg，产率60％)。
步骤C：1-异丙基-3-苯基-1H-1,2,4-三唑-5-胺
在0℃氮气保护下，向60重量％氢化钠(75.22mg，3.134mmol，2.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中加入3-苯基-1H-1,2,4-三唑-5-胺(251mg，1.567mmol，1.0当量)。反应混合物室温下搅拌0.5小时。向上述反应液中继续加入2-溴丙烷(0.148mL，1.567mmol，1.0当量)。反应混合物在室温氮气保护下搅拌反应3小时。反应完全后，用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(绿色固体，106mg，产率33％)。
步骤D：N-(1-异丙基-3-苯基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃氮气保护下，向60重量％氢化钠(14.24mg，0.593mmol，1.5当量)的二氯乙烷(3mL)溶液中加入1-异丙基-3-苯基-1H-1,2,4-三唑-5-胺(80mg，0.396mmol，1.0当量)。反应混合物室温下搅拌0.5小时。向上述反应液中继续加入6-(三氟甲基)吡啶酰氯(165.77mg，0.791mmol，2.0当量)。反应混合物在室温氮气保护下搅拌反应3小时。反应完全后，用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，56mg,产率38％)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.46(d,J＝7.8Hz,1H),8.31(t,J＝7.9Hz,1H),8.11(d,J＝7.7Hz,1H),8.03(dd,J＝7.9,1.5Hz,2H),7.52-7.36(m,3H),4.67-4.56(m,1H),1.55(d,J＝6.6Hz,6H).LC-MS(ESI):m/z 376[M+H]+.
制备例104.化合物A229的合成
步骤A：2-(4-(3-氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺基)-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯
在室温下，向2-(4-氨基-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯 (322.8mg，0.9mmol，1.0当量)和3-氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酸(186.4mg，1.0mmol，1.1当量)的DMF(5mL)溶液中加入HATU(513.0mg，1.4mmol，1.5当量)和TEA(181.8mg，1.8mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液倒入50mL水中，用乙酸乙酯萃取三次，每次50mL，有机相合并，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，410.0mg，产率86％)。
步骤B：3-氰基-N-(3-(二氟甲基)-1-(7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺
在室温下，将2-(4-(3-氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺基)-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(140.0mg，0.3mmol，1.0当量)溶于甲酸(2mL)中并在室温下搅拌反应2小时。反应完全后，将溶剂减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，甲酸盐，109.7mg，产率87％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.92(s,1H),8.99(d,J＝2.2Hz,1H),8.85(d,J＝2.2Hz,1H),8.45(s,1H),8.40(s,1H),7.74(d,J＝4.8Hz,1H),7.36-7.08(m,2H),5.00(p,J＝8.3Hz,1H),2.94(dt,J＝34.1,5.5Hz,4H),2.48-2.37(m,2H),2.33-2.21(m,2H),1.78(dt,J＝20.6,4.9Hz,4H).LC-MS(ESI):m/z 426[M+H]+.
制备例105.化合物A230的合成
步骤A：2-(4-(3-氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺)-3-甲氧基-1H-吡唑-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-甲酸叔丁酯
在无水DMF(2mL)中加入2-(4-氨基-3-甲氧基-1H-吡唑-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-甲酸叔丁酯(78.0mg，0.23mmol，1.0当量)和DIEA(93.1mg，0.72mmol，3.0当量)，在无水DMF(2mL)中加入HATU(137.0mg，0.36mmol，1.5当量)和3-氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酸(58.4mg，0.31mmol，1.3当量)。两种混合物分别在氮气保护下搅拌30分钟，然后将两种混合物混合。反应液在氮气保护下室温搅拌16小时。反应液用水稀释(20mL)，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。合并有机相，用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产物。粗品经柱色谱纯化(41％乙酸乙酯/石油醚)得到2-(4-(3-氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺)-3-甲氧基-1H-吡唑-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-甲酸叔丁酯(105.0mg，收率 87.5％)，为黄色固体。
步骤B：3-氰基-N-(3-甲氧基-1-(7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺
将2-(4-(3-氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺)-3-甲氧基-1H-吡唑-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-甲酸叔丁酯(105.0mg，0.21mmol，1.0当量)溶解在甲醇(5.0mL)中，加入2M的盐酸乙酸乙酯溶液(10mL)。将反应混合物在室温下搅拌2小时。LCMS检测反应完成。将反应液减压浓缩得到粗产物，通过HPLC纯化得到3-氰基-N-(3-甲氧基-1-(7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺(35.1mg，产率41.3％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.25(s,1H),8.97(d,J＝2.1Hz,1H),8.89(d,J＝2.1Hz,1H),8.40(s,1H),8.09(s,1H),7.70(d,J＝4.8Hz,1H),7.10(d,J＝4.8Hz,1H),4.80-4.68(m,1H),3.93(s,3H),2.94-2.87(m,2H),2.87-2.80(m,2H),2.37-2.29(m,2H),2.23-2.13(m,2H),1.75-1.67(m,4H).LC-MS(ESI):m/z 406[M+H]+.
制备例106.化合物A231的合成
步骤A：4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(2.5g，14.61mmol，1.0当量)的二氯甲烷(100mL)溶液中加入醋酸铜(3.9g，21.91mmol，1.5当量)、吡啶(4.72mL，58.44mmol，4.0当量)和苯硼酸(3.5g，29.22mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(白色固体，2.3g，产率63.68％)。
步骤B：4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(2.5g，10.11mmol，1.0当量)的甲醇 (100mL)溶液中加入钯碳(0.32g，10％)。反应液在氢气条件下置换三次后室温条件反应16小时。反应完全后，反应液过滤后，滤液旋干得到粗品标题化合物(白色固体，2.0g，粗品)。
步骤C：4-(((苄氧基)羰基)氨基)-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(750mg，3.45mmol，1.0当量)和DIEA(1.7g，10.35mmol，3.0当量)的四氢呋喃(30mL)溶液中加入氯甲酸苄酯(647mg，3.79mmol，1.1当量)和DMAP(85mg，0.69mmol，0.2当量)。反应液在室温条件下反应2小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(白色固体，1.2g，产率98.92％)。
步骤D：4-((苄氧羰基)氨基)-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸
在室温下，向4-(((苄氧基)羰基)氨基)-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(330mg，0.94mmol，1.0当量)的甲醇(5.0mL)和水(2.0mL)的混合溶液中加入氢氧化锂(75mg，1.88mmol，2.0当量)。反应液在40℃条件下反应8小时。反应完全后，反应液用1N稀盐酸调节pH至4-5后减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，300mg，粗品)。
步骤E：(3-氨基甲酰基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸苄酯
在室温下，向4-((苄氧羰基)氨基)-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸(300mg，0.88mmol，1.0当量)和氯化铵(238mg，4.44mmol，5.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入DIEA(574mg，4.44mmol，5.0当量)和HATU(507mg，1.33mmol，1.5当量)。反应液在室温条件下反应4小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(白色固体，200mg，产率66.86％)。
步骤F：4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向(3-氨基甲酰基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸苄酯(200mg，0.59mmol，1.0当量)的甲醇(5mL)溶液中加入钯碳(63mg，10％)。反应液在氢气条件下置换三次后室温条件反应16小时。反应完全后，反应液过滤后，滤液旋干得到粗品标题化合物(白色固体，100mg，粗品)。
步骤G：3,3-二乙氧基-2-甲酰基丙腈钾盐
在10℃下，向3,3-二乙氧基丙腈(24.5g，171.1mmol，1.0当量)和甲酸乙酯(15.2g，205.3mmol，1.2当量)的四氢呋喃(500mL)溶液中分批加入叔丁醇钾(21.1g，188.2mmol， 1.1当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。液相监控原料反应完，反应液加入正己烷(800mL)搅拌20分钟，过滤，滤饼再用正己烷淋洗一次，干燥得到标题化合物(浅黄色固体，30g，产率83％)。
步骤H：吡咯并[1,2-b]哒嗪-3-腈
在0℃下，向3,3-二乙氧基-2-甲酰基丙腈钾盐(29g，138.1mmol，1.0当量)的甲醇(270mL)溶液中加入浓盐酸(35mL，414.3mmol，3.0当量)，反应液在室温搅拌反应30分钟。再加入1H-吡咯-1-胺(11.3g，138.1mmol，1.0当量)，反应液在90℃下搅拌反应2小时。反应液冷却至室温，浓缩出一半的溶剂，缓慢加入饱和碳酸氢钠溶液PH至7。混合液乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，柱层析(PE:EA＝3:1)得到标题化合物(黄色固体，15.7g，产率79％)。
步骤I：7-溴吡咯并[1,2-b]哒嗪-3-腈
在0℃下，向吡咯并[1,2-b]哒嗪-3-腈(15.7g，109.7mmol，1.0当量)的无水乙腈(300mL)溶液中加N-溴代琥珀酰亚胺(19.5g，109.7mol,1.0当量)，反应液在氮气保护下0℃搅拌反应30分钟。反应完全后，将反应液倒入饱和碳酸氢钠溶液中，混合液乙酸乙酯萃取两次，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，柱层析(PE:DCM＝7:3)得到标题化合物(黄色固体，17.7g，产率72％)。
步骤J：3-氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酸
2000mL反应瓶中加入7-溴吡咯并[1,2-b]哒嗪-3-腈(10g，45.0mmol，1.0当量)，再加入THF/H2O(600mL/200mL)，氮气置换三次加入三乙胺(37.5mL g，270.2mmol，6.0当量)、Xant-Phos(2.6g，4.5mmol，0.1当量)、醋酸钯(505mg，2.25mmol，0.05当量)和Pd(dppf)Cl2(1.6g，2.25mmol，0.05当量)，反应液通入一氧化碳，100℃剧烈回流搅拌反应18小时。反应完全后，反应液冷却至室温将反应液减压浓缩，得到粗品水洗一次，乙酸乙酯洗一次，干燥得到标题化合物(黄绿色固体，5.7g，产率67％)。
步骤K：N-(3-氨基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-3-氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺
在室温条件下，向4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(60mg，0.30mmol，1.0当量)、DIEA(95mg，0.74mmol，2.5当量)和3-氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酸(61mg，0.33mmol，1.1当量)的DMF(3.0mL)溶液中加入HATU(124mg，0.33mmol，1.1当量)，再将所得混合物搅拌1小时。然后将混合物加水并用EA萃取两次。合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩至干。残留物通过制备HPLC纯化，得到黄色固体的N-(3-氨基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-3-氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺(17.4mg，产率15.79％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.12(s,1H),8.96(d,J＝2.1Hz,1H),8.70(d,J＝2.1Hz,1H),8.45(s,1H),7.73(d,J＝4.8Hz,1H),7.56(s,1H),7.43(s,1H),7.09(d,J＝4.8Hz,1H),4.24(m,1H),2.06(m,2H),1.88-1.64(m,5H),1.51-1.35(m,2H),1.30-1.17(m,1H).
制备例107.化合物A232的合成
步骤A：3-氰基-N-(3-(2-羟基丙-2-基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺
在室温条件下，向2-(4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)丙-2-醇(60mg，0.28mmol，1.0当量)、DIEA(89mg，0.69mmol，2.5当量)和3-氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酸(57mg，0.30mmol，1.1当量)的DMF(3.0mL)溶液中加入HATU(115mg，0.30mmol，1.1当量)，再将所得混合物搅拌1小时。然后将混合物加水并用EA萃取两次。合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩至干。残留物通过制备HPLC纯化，得到黄色固体的3-氰基-N-(3-(2-羟基丙-2-基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺(15.2mg，产率14.24％)。LC-MS(ESI):m/z 369[M+H-18]+/387[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.89(s,1H),8.96(d,J＝2.0Hz,1H),8.88(s,1H),8.75(d,J＝2.0Hz,1H),7.77(dd,J＝12.2,6.5Hz,3H),7.49(t,J＝7.9Hz,2H),7.27(t,J＝7.3Hz,1H),7.11(d,J＝4.8Hz,1H),5.80(s,1H),1.63(s,6H).
制备例108.化合物A233的合成
步骤A：3-氰基-N-(3-(二氟甲基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺
向3-(二氟甲基)-1-苯基-1H-吡唑-4-胺(50.0mg，0.24mmol，1.0当量)、3-氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酸(44.7mg，0.24mmol，1.0当量)和HOBt(38.8mg，0.29mmol，1.2当量)的DMF(2mL)溶液中加入EDCI(55.0mg，0.29mmol，1.2当量)。反应液在氮气保护中室温搅拌反应18小时。反应完全后，将反应液用水淬灭，用二氯甲烷萃取。有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，43.8mg，收率48.4％)。LC-MS(ESI):m/z 379.3[M+H]+.1H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.25(s,1H),8.91(s,1H),8.47(d,J＝2.1Hz,1H),8.32(d,J＝2.1Hz,1H),7.92(d,J＝4.9Hz, 1H),7.78-7.70(m,2H),7.49(t,J＝8.0Hz,2H),7.35(t,J＝7.4Hz,1H),7.12-6.77(m,2H).
制备例109.化合物A234的合成
步骤A：3-异氰基-N-(3-甲氧基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺
将3-甲氧基-1-苯基-1H-吡唑-4-胺(49.0mg，0.26mmol，1.0当量)溶解在无水DMF(2mL)中，加入DIEA(100.6mg，0.78mmol，3.0当量)。另外将3-氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酸(63.6mg，0.34mmol，1.3当量)和HATU(148.2mg，0.39mmol，1.5当量)溶解在无水DMF(2mL)中。将这份溶液分别在氮气保护下搅拌30分钟，然后将两种混合物混合，并在室温下在氮气保护下搅拌16小时。用水(20mL)稀释反应液，并用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过HPLC纯化得到3-异氰基-N-(3-甲氧基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺(31.5mg，产率33.8％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.42(s,1H),8.99(d,J＝2.0Hz,1H),8.92(d,J＝2.0Hz,1H),8.71(s,1H),7.78-7.73(m,3H),7.46(t,J＝7.9Hz,2H),7.22(t,J＝7.4Hz,1H),7.12(d,J＝4.8Hz,1H),4.06(s,3H).LC-MS(ESI):m/z 359[M+H]+.
制备例110.化合物A235的合成
步骤A：1-环己基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(1.72g，10.05mmol，1.0当量)和K2CO3(6.95g，50.26mmol，5.0当量)的DMF(30mL)溶液中加入碘代环己烷(3.17g，15.08mmol，1.5当量)。再将此混合物加热至80℃并搅拌18小时。然后将反应液加水并用EA(50mL)萃取两次。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。残余物经柱层析纯化，得到浅黄色油状的1-环己基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(0.7g，产率27.45％)。
步骤B：4-氨基-1-环己基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
向1-环己基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(700mg，2.76mmol，1.0当量)的EA(10mL)溶液中加入10％含量的Pd/C(70mg，负载在活性炭上)，并在装有H2气球下室温搅拌18小时。过滤混合物并浓缩滤液，得到4-氨基-1-环己基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(550mg，产率89.12％)。
步骤C：4-(((苄氧基)羰基)氨基)-1-环己基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在0℃条件下，向4-氨基-1-环己基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(550mg，2.46mmol，1.0当量)和TEA(1.03mL，7.39mmol，3.0当量)的DCM(10mL)混合物中加入CbzCl(0.44mL，3.08mmol，1.25当量)。再将混合物升温至r./t并搅拌6小时。然后将混合物倒入水中，用EA萃取两次，用盐水洗涤合并的有机相，再用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩至干。残余物经柱层析纯化，得到4-(((苄氧基)羰基)氨基)-1-环己基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(420mg，产率47.71％)。
步骤D：4-(((苄氧基)羰基)氨基)-1-环己基-1H-吡唑-3-甲酸
向4-(((苄氧基)羰基)氨基)-1-环己基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(150mg，0.42mmol，1.0当量)的THF(2.0mL)溶液中加入2M NaOH(0.53mL，1.05mmol，2.5当量)，再将所得混合物在50℃下搅拌3小时。然后将其冷却，用EA稀释并使用2M HCl调节至pH 2-3。水层用EA提取两次。合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩至干，得到白色固体的4-(((苄氧基)羰基)氨基)-1-环己基-1H-吡唑-3-甲酸(130mg，产率90.21％)。
步骤E：苄基(3-氨基甲酰基-1-环己基-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸酯
在r./t条件下，向4-(((苄氧基)羰基)氨基)-1-环己基-1H-吡唑-3-甲酸(130mg，0.38mmol，1.0当量)、DIEA(122mg，0.95mmol，2.5当量)和氯化铵(24mg，0.45mmol，1.2当量)的DMF(5mL)溶液中加入HATU(173mg，0.45mol，1.5当量)，再将所得混合物搅拌1小时。然后将反应混合液加水并用EA萃取两次。合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩至干。残余物经柱层析纯化，得到白色固体的苄基(3-氨基甲酰基-1-环己基-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸酯(90mg，产率69.43％)。
步骤F：4-氨基-1-环己基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温条件下，向苄基(3-氨基甲酰基-1-环己基-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸酯(90mg，0.26mmol，1.0当量)的MeOH(3mL)溶液中加入10％含量的Pd/C(45mg，负载在活性炭上)，并在装有H2气球下室温搅拌18h。过滤混合物并浓缩滤液，得到4-氨基-1-环己基-1H-吡唑-3-甲酰胺(45mg，产率82.20％)。
步骤G：N-(3-氨基-1-环己基-1H-吡唑-4-基)-3-氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺
在室温条件下，向4-氨基-1-环己基-1H-吡唑-3-甲酰胺(45mg，0.22mmol，1.0当量)、DIEA(69mg，0.54mmol，2.5当量)和3-氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酸(44mg，0.24mmol，1.1当量)的DMF(3mL)溶液中加入HATU(90mg，0.24mmol，1.1当量)，再将所得混合物搅拌1h。然后将此反应液加水并用EA萃取两次。合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩至干。残留物通过制备HPLC纯化，得到黄色固体的N-(3-氨基-1-环己基-1H-吡唑-4-基)-3-氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺(20.1mg，产率22.18％)。1HNMR(400MHz,DMSO)δ12.12(s,1H),8.96(d,J＝2.1Hz,1H),8.70(d,J＝2.1Hz,1H),8.45(s,1H),7.73(d,J＝4.8Hz,1H),7.56(s,1H),7.43(s,1H),7.09(d,J＝4.8Hz,1H),4.24(m,1H),2.06(m,2H),1.88-1.64(m,5H),1.51-1.35(m,2H),1.30-1.17(m,1H).
制备例111.化合物A236的合成
步骤A：3-溴-4-硝基-1H-吡唑
在室温下，将3-溴-1H-吡唑(5.0g，34.0mmol，1.0当量)溶于浓硫酸(10mL),向该溶液中缓慢滴加浓硝酸(5mL，34.0mmol，1.0当量)。反应液在50℃下反应3小时，反应结束，将反应液倒入饱和碳酸氢钠溶液(50mL)，乙酸乙酯萃取(50mL×3)，合并有机相，有机相用饱和食盐水(50mL)洗涤，再用无水硫酸钠干燥，过滤，将有机相旋干得到3-溴-4-硝基-1H-吡唑(黄色固体，5.0g，产率77％)。
步骤B：3-溴-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑
向3-溴-4-硝基-1H-吡唑(2.0g，10.4mmol，1.0当量)的二氯甲烷(20mL)溶液中中加入苯基硼酸(2.54g，20.8mmol，2.0当量)、醋酸铜(4.16g，20.8mmol，1.0当量)吡啶(1.7mL，20.8mmol，2.0当量)。该反应再氧气条件下室温搅拌过夜。反应完成后，用水(20mL)稀释反应液，然后用二氯甲烷(50mL×3)萃取，合并有机相，有机相用饱和食盐水(20mL)洗涤，再用无水硫酸钠干燥，过滤，旋干。粗品用柱层析分离，得到3-溴-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑(黄色固体，1.5g，产率54％)。
步骤C：4-硝基-1-苯基-3-乙烯基-1H-吡唑
向3-溴-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑(1.0g，3.73mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(10mL)和 水(2mL)中的溶液中加入4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二噁硼烷(0.86g，5.60mmol，1.5当量)、碳酸钾(1.03g，7.46mmol，2.0当量)和Pd(dppf)Cl2(3.05g，3.73mmol，1.0当量)。该反应液在氮气氛围中，80℃反应2小时，反应结束后，用水(20mL)稀释反应液，然后用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，有机相用饱和食盐水(20mL)洗涤，再用无水硫酸钠干燥，过滤，旋干。粗品用柱层析分离得到4-硝基-1-苯基-3-乙烯基-1H-吡唑(黄色固体，700g，产率87％)。
步骤D：3,3,3-三氟-1-(4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)丙-1-醇
向氟化银(1.18g，9.30mmol，2.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入4-硝基-1-苯基-3-乙烯基-1H-吡唑(1.0g，4.65mmol，1.0当量)和(三氟甲基)三甲基硅烷(1.32g，9.30mmol，2.0当量)。该反应液在氧气氛围中，35℃反应12小时。反应结束，向反应体系中加入乙酸乙酯(30mL)，过滤除去固体杂质，再向母液中加入水(30mL)，混合液用乙酸乙酯(30mL×3)萃取，合并有机相，有机相用饱和食盐水(20mL)洗涤，再用无水硫酸钠干燥，过滤，旋干。粗品用柱层析分离得到3,3,3-三氟-1-(4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)丙-1-醇(黄色固体，280mg，产率20％)。
步骤E：3,3,3-三氟-1-(4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)丙-1-酮
向3,3,3-三氟-1-(4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)丙-1-醇(250mg，0.83mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中加戴斯-马丁氧化剂(458mg，1.08mmol，1.3当量)。该反应液在室温下反应1小时。反应结束，将反应液旋干，柱层析分离得到3,3,3-三氟-1-(4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)丙-1-酮(黄色固体，200mg，产率81％)。
步骤F：1-(4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)-3,3-三氟丙-1-酮
向3,3,3-三氟-1-(4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)丙-1-酮(200mg，0.67mmol，1.0当量)的乙酸乙酯(10mL)溶液中加入湿Pd/C(71mg)。该反应液在氢气氛围室温下反应14小时。反应结束，过滤除去Pd/C，反应液旋干得到1-(4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)-3,3-三氟丙-1-酮(黄色固体，150mg，产率83％)。
步骤G：N-(1-苯基-3-(3,3,3-三氟丙酰基)-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
向6-(1H-吡唑-5-基)吡啶甲酸(500mg，0.26mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中加入HATU(101mg，0.26mmol，1.0当量)、N,N-二异丙基乙胺(68mg，0.53mmol，2.0当量)和1-(4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)-3,3-三氟丙-1-酮(71mg，0.26mmol，1.0当量)。该反应液在室温下反应2小时。反应结束，粗产品经反相柱纯化得到N-(1-苯基-3-(3,3,3-三氟丙酰基)-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺(黄色固体，15.1mg，产率13％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.26(s,1H),11.75(s,1H),9.14(s,1H),8.27(d,J＝7.6Hz,1H),8.18-7.98(m,5H),7.61(t,J＝7.9Hz,2H),7.48(t,J＝7.4Hz,1H),7.32(s,1H),4.44(q,J＝11.1Hz,2H).LCMS(ESI):m/z 441.2[M+H]+.
制备例112.化合物A237的合成
步骤A：4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(10g，58.4mmol，1.0当量)和苯基硼酸(14.3g，117mmol，2.0当量)的二氯甲烷(150.0mL)溶液中加入醋酸铜(17.5g，87.7mmol，1.5当量)和吡啶(14.2mL，175mmol，3.0当量)。反应液在氧气保护下室温条件反应12小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化后得到标题化合物(白色固体，8g，产率55％)。
步骤B：4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在氮气保护下，向4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(2.5g，10.1mmol，1.0当量)的甲醇(50.0mL)溶液中加入钯碳(0.22g，10％纯度)。反应液氢气置换三次后，在氢气保护下室温条件反应12小时。反应完全后，反应液过滤，滤饼用甲醇清洗三次，滤液减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，2.1g，产率95％)。
步骤C：1-苯基-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向6-[2-(3,4,5,6-四氢-2H-吡喃-2-基)吡唑-3-基]吡啶-2-甲酸(1g，3.66mmol，1.0当量)和HATU(1.67g，4.39mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)溶液中加入4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(0.87g，4.03mmol，1.1当量)和三乙胺(1.5mL，11.0mmol，3.0当量)。反应液在室温条件下反应12小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(白色固体，1g，产率58％)。
步骤D：N-(3-(2-氰基乙酰基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡 嗪-5-基)吡啶酰胺
在-78℃下，向乙腈(260mg，6.35mmol，10.0当量)的四氢呋喃(3.0mL)溶液中加入二异丙基氨基锂(2.54mL，6.35mmol，10.0当量，1M的四氢呋喃溶液)。反应液在-78℃条件下反应1小时。然后1-苯基-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(300mg，0.64mmol，1.0当量)加入到反应液中，反应液在-78℃条件下反应0.5小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经反相柱纯化得到标题化合物(黄色固体，71mg，产率23％)。
步骤E：N-(3-(2-氰基乙酰基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在室温下，向N-(3-(2-氰基乙酰基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡嗪-5-基)吡啶酰胺(50mg，0.10mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(1.0mL)溶液中加入盐酸/二氧六环(1.0mL，4M)。反应液在室温条件下反应0.5小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，15.0mg，产率36％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.27(s,1H),11.67(s,1H),9.13(s,1H),8.27(d,J＝7.2Hz,1H),8.18-7.99(m,5H),7.60(t,J＝7.7Hz,2H),7.47(t,J＝7.2Hz,1H),7.33(s,1H),4.77(s,2H).LCMS(ESI):m/z 398[M+H]+.
制备例113.化合物A238的合成
步骤A：1-苯基-1H-吡唑-3-醇
在室温下，向1-苯基吡唑啉-3-酮(10g，61.7mmol，1.0当量)的N-甲基吡咯烷酮(50.0mL)溶液中加入三氯化铁(0.2g，1.23mmol，0.02当量)。反应液在氧气保护下100℃条件反应16小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化后得到标题化合物(白色固体，9g，产率91％)。
步骤B：4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-醇
在室温下，向1-苯基-1H-吡唑-3-醇(9g，56.2mmol，1.0当量)的醋酸(100.0mL)溶液中缓慢加入硝酸(20mL)。反应液在室温条件反应16小时。反应完全后，反应液倒入水中， 过滤，滤饼减压干燥得到标题化合物(白色固体，9.5g，产率82％)。
步骤C：4-硝基-1-苯基-3-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑
在室温下，向4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-醇(500mg，2.44mmol，1.0当量)和2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸盐(679mg，2.92mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)溶液中加入碳酸铯(1.59g，4.87mmol，2.0当量)。反应液在20℃条件反应2小时。反应完全后，反应液经反相柱纯化后得到标题化合物(白色固体，0.5g，产率71％)。
步骤D：1-苯基-3-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-4-胺
在氮气保护下，向4-硝基-1-苯基-3-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑(50mg，0.17mmol，1.0当量)的甲醇(5.0mL)溶液中加入钯碳(5mg，10％纯度)。反应液氢气置换三次后，在氢气保护下室温条件反应0.5小时。反应完全后，反应液过滤，滤饼用甲醇清洗三次，滤液减压浓缩得到标题化合物(无色油状，35mg，产率78％)。
步骤E：N-(1-苯基-3-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在室温下，向6-(2H-吡唑-3-基)吡啶-2-甲酸(26mg，0.14mmol，1.0当量)和HATU(62mg，0.16mmol，1.1当量)的N,N-二甲基甲酰胺(1.0mL)溶液中加入1-苯基-3-(2,2,2-三氟乙氧基)-1H-吡唑-4-胺(35mg，0.14mmol，1.0当量)和DIEA(53mg，0.41mmol，2.9当量)。反应液在室温条件下反应半小时。反应完全后，反应液经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，20.0mg，产率34％)。1H NMR(400MHz,MeOD-d4)δ8.65-8.49(m,1H),8.19-8.02(m,3H),7.84-7.65(m,3H),7.47(t,J＝8.0Hz,2H),7.26(t,J＝7.4Hz,1H),7.03(s,1H),4.94(q,J＝8.6Hz,2H).LCMS(ESI):m/z 429.2[M+H]+.
制备例114.化合物A239的合成
步骤A：3-(二氟甲基)-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑
在室温下，向3-(二氟甲基)-4-硝基-1H-吡唑(500mg，3.07mmol，1.0当量)和苯基硼酸(748mg，6.13mmol，2.0当量)的二氯甲烷(30.0mL)溶液中加入醋酸铜(918mg，4.60mmol，1.5当量)和吡啶(0.25mL，3.07mmol，1.0当量)。反应液在氧气保护下室温条件反应0.5小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化后得到标题化合物(白色固体，0.7g，产率95％)。
步骤B：3-(二氟甲基)-1-苯基-1H-吡唑-4-胺
在室温下，向3-(二氟甲基)-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑(300mg，1.25mmol，1.0当量)的甲醇(15.0mL)溶液中加入钯碳(60mg，10％纯度)。反应液在氢气保护下室温条件反应12小时。反应完全后，反应液过滤，滤饼用甲醇清洗三次，滤液减压浓缩得到标题化合物(无色油状250mg，粗品)。
步骤C：N-(3-(二氟甲基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在室温下，向6-(1H-吡唑-5-基)吡啶甲酸(45mg，0.24mmol，1.0当量)和HATU(100mg，0.26mmol，1.1当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)溶液中加入3-(二氟甲基)-1-苯基-1H-吡唑-4-胺(50mg，0.24mmol，1.0当量)和三乙胺(0.2mL，1.19mmol，5.0当量)。反应液在室温条件下反应0.5小时。反应完全后，反应液经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，46mg，产率51％)。1H NMR(400MHz,MeOD-d4)δ8.88(s,1H),8.22-8.04(m,3H),7.85-7.79(m,3H),7.54(m,2H),7.39(t,J＝7.4Hz,1H),7.15(t,J＝54.4Hz,1H),7.09-7.03(m,1H).LCMS(ESI):m/z 381[M+H]+.
制备例115.化合物A240的合成
步骤A：4-(6-(1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向1-苯基-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(100mg，0.21mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(5.0mL)溶液中加入盐酸/二氧六环(3.0mL，4M)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，90mg，粗品)。
步骤B：N-(3-(2-羟基丙-2-基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在氮气保护下，向4-(6-(1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(90mg，0.23mmol，1.0当量)的四氢呋喃(5.0mL)溶液中滴加甲基溴化镁(1.2mL，1.16mmol，5.0当量，1M)。反应液在室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液倒入氯化铵溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，46.9mg，产率52％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.51(s,1H),8.89(s,1H),8.23-8.17(m,1H),8.10(t,J＝7.7Hz,1H),8.07-8.02(m,1H),7.91(s,1H),7.81(d,J＝7.7Hz,2H),7.49(t,J＝8.0Hz,2H),7.28(t,J＝7.4Hz,1H),7.15(d,J＝2.2Hz,1H),1.64(s,6H).LCMS(ESI):m/z 371.2[M-17]+.
制备例116.化合物A241的合成
步骤A：1-苯基-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸
在室温下，向1-苯基-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H吡唑-3-甲酸甲酯(1.13g，2.39mmol，1.0当量)的甲醇(30.0mL)、四氢呋喃(10mL)和水(10mL)的混合溶液中加入氢氧化锂一水合物(0.40g，9.57mmol，4.0当量)。反应液60℃条件反应2小时。反应完全后，反应液减压浓缩，残余物倒入水中，用稀盐酸调节pH至中性后成悬浊液，该悬浊液过滤，滤饼用水清洗三次，滤饼减压干燥后得到粗品标题化合物(黄色固体，897mg，粗品)。
步骤B：N-(3-(甲氧基(甲基)氨基甲酰基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡嗪-5-基)吡啶酰胺
在室温下，向1-苯基-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸(0.86g，1.88mmol，1.0当量)和HATU(1.07g，2.81mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)溶液中加入N、O-二甲基羟胺盐酸盐(0.22g，2.25mmol，1.2当量)和DIEA(0.97g，7.50mmol，4.0当量)。反应液在室温条件下反应18小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，1.02g，粗品)。
步骤C：N-(3-乙酰基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡嗪-5-基)吡啶酰胺
在0℃下，向N-(3-(甲氧基(甲基)氨基甲酰基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡嗪-5-基)吡啶酰胺(0.2g，0.40mmol，1.0当量)的四氢呋喃(10.0mL)溶液中加入甲基锂(1.6mL，1.60mmol，4.0当量)。反应液在室温条件下反应3小时。反应完全后，反应液倒入饱和氯化铵溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，132mg，产率72.5％)。
步骤D：N-(3-乙酰基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在室温下，向N-(3-乙酰基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡嗪-5- 基)吡啶酰胺(50mg，0.10mmol，1.0当量)的四氢呋喃(5.0mL)和甲醇(2.5mL)溶液中加入盐酸/二氧六环(1.0mL，4M)。反应液在室温条件下反应0.5小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物倒入水中，用碳酸氢钠调节pH＝8，后用二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(淡黄色固体，46.4mg，产率44％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.24(s,1H),11.94(s,1H),9.07(s,1H),8.25(d,J＝8.0Hz,1H),8.13(t,J＝7.6Hz,1H),8.07(dd,J＝7.6,1.2Hz,1H),8.01(d,J＝7.6Hz,3H),7.59(t,J＝7.6Hz,2H),7.45(t,J＝7.6Hz,1H),7.38(s,1H),2.71(s,3H).LCMS(ESI):m/z 373.2[M+H]+.
制备例117.化合物A242的合成
步骤A：N-(3-(乙酰基-2,2-d2)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在0℃下，向N-(3-(甲氧基(甲基)氨基甲酰基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡嗪-5-基)吡啶酰胺(300mg，0.60mmol，1.0当量)的四氢呋喃(30.0mL)溶液中加入CD3MgI(2.4mL，2.40mmol，4.0当量，1M的四氢呋喃溶液)。反应液在室温条件下反应3小时。反应完全后，反应液倒入饱和碳酸氢钠中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经两遍HPLC纯化得到标题化合物(淡黄色固体，37.4mg，产率17％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.25(s,1H),11.94(s,1H),9.08(s,1H),8.25(d,J＝7.6Hz,1H),8.14(t,J＝7.6Hz,1H),8.08(dd,J＝7.6,1.2Hz,1H),8.01(d,J＝7.6Hz,3H),7.60(t,J＝7.6Hz,2H),7.46(t,J＝7.6Hz,1H),7.38(s,1H),2.74-2.67(m,1H).LCMS(ESI):m/z 375.2[M+H]+.
制备例118.化合物A243的合成
步骤A：苄基(1-苯基-3-(2,2,2-三氟-1-羟乙基)-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸酯
在0℃下，向(3-甲酰基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸苄酯(300mg，0.9mmol，1.0当量)的无水THF(20mL)溶液中加入三甲基硅基三氟甲烷(256mg，1.8mmol，2.0当量)和四丁基氟化铵(1N，在THF中，0.09mL，0.09mmol，0.1当量)。反应液在N2保护下 室温搅拌过夜。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，130mg，产率37％)。
步骤B：苄基(1-苯基-3-(2,2,2-三氟乙酰基)-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸酯
向苄基(1-苯基-3-(2,2,2-三氟-1-羟乙基)-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸酯(130mg，0.3mmol，1.0当量)的无水DCM(10mL)溶液中在0℃下缓慢加入DMP(255mg，0.6mmol，2.0当量)，反应液在N2保护室温搅拌2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用饱和亚硫酸氢钠和饱和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，105mg，收率90％)。
步骤C：1-(4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)-2,2,2-三氟乙-1-酮
在室温下，Pd/C(15mg，10％碳，约55％水润湿)加入到苄基(1-苯基-3-(2,2,2-三氟乙酰基)-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸酯(105mg，0.3mmol，1.0当量)的四氢呋喃(20mL)溶液中。反应液在氢气保护下在室温下搅拌过夜。反应完全后，反应液过滤，滤饼用甲醇(20mL)洗涤。将合并的滤液浓缩，得到标题化合物(52mg，定量)，直接用于下一步，无需进一步纯化。
步骤D：N-(1-苯基-3-(2,2,2-三氟乙酰基)-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺
向6-(1H-吡唑-5-基)吡啶甲酸(57mg，0.3mmol，1.5当量)和HATU(114mg，0.3mmol，1.5当量)的无水N,N-二甲基甲酰胺(100mL)的混合物中加入DIEA(77mg，0.6mmol，3.0当量)和1-(4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)-2,2,2-三氟乙-1-酮(52mg，0.2mmol，1.0当量)。反应液在氮气保护下搅拌过夜。反应完全后，将反应液用水(10mL)稀释，并用乙酸乙酯(15mL×3)萃取。合并后的有机层用饱和食盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，减压浓缩，残渣经分析制备纯化得到标题化合物(白色固体，10.1mg，收率12％)。LCMS(ESI):m/z 427[M+H]+.1H NMR(400MHz,MeOD-d4)δ9.00(s,1H),8.22(d,J＝7.3Hz,1H),8.13(d,J＝7.5Hz,1H),8.05(t,J＝7.6Hz,1H),7.84(d,J＝7.7Hz,2H),7.79(s,1H),7.53(t,J＝8.0Hz,2H),7.37(t,J＝7.4Hz,1H),7.20(s,1H).
制备例119.化合物A244的合成
步骤A：4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
向4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(2.0g，8.1mmol，1.0当量)的MeOH(50mL)溶液加入Pd/C(200mg，10％碳，用约55％的水润湿)。反应液在氢气保护下室温搅拌过夜。反应完成后，将反应液过滤，滤饼用MeOH(20mL)洗涤。将合并的滤液浓缩至得到粗制的4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(1.6g，定量)，直接用于下一步，无需进一步纯化。
步骤B：4-(((苄氧基)羰基)氨基)-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在0℃下，向4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(1.6g，7.3mmol，1.0当量)和TEA(2.2g，21.9mmol，3.0当量)的DCM(30mL)溶液中加入CbzCl(2.5g，14.6mmol，2.0当量)。然后将溶液在N2气氛下在室温下搅拌过夜。将所得溶液用H2O(20ml)稀释，并用EtOAc(20mL×3)萃取。合并后的有机层用盐水(20mL×3)洗涤，用无水Na2SO4干燥并减压浓缩，残留物在硅胶上快速柱层析纯化，得到标题化合物(白色固体，1.5g，收率58％)。
步骤C：(3-(羟甲基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸苄酯
在0℃下，将4-(((苄氧基)羰基)氨基)-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(1.5g，4.3mmol，1.0当量)的无水THF(30mL)溶液滴加四氢铝锂(1N在THF(6.5mL，6.5mmol，6.5mmol，1.5当量)中。反应液在氮气保护下在0℃下搅拌30分钟。然后用H2O(0.2mL)淬灭混合物，然后加入15％NaOH(0.2mL)和H2O(0.6mL)。用EtOAc(30mL)稀释悬浮液并过滤。滤液用无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩至干。残留物在硅胶上快速柱层析纯化，得到标题化合物(淡黄色固体，950mg，收率68％)。
步骤D：苄基(3-甲酰基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸酯
在0℃下，向(3-(羟甲基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸苄酯(950mg，2.9mmol，1.0当量)在无水DCM(30mL)中的溶液中缓慢加入戴斯-马丁氧化剂(2.5g，5.8mmol，2.0当量)。反应液在N2保护下室温搅拌2小时。用NaHSO3水溶液(10mL，饱和)淬灭反应混合物，并用EtOAc(20mL×3)萃取。合并后的有机层用NaHCO3(15mL×2)洗涤，用无水Na2SO4干燥并减压浓缩，残留物在硅胶上快速柱层析纯化，得到标题化合物(黄色固体，610mg，收率66％)。
步骤E：(3-(2,2-二氟-1-羟乙基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸苄酯
在0℃下，向苄基(3-甲酰基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸酯(310mg，0.9mmol，1.0当量)的无水THF(20mL)溶液中加入三甲基硅基二氟甲烷(223mg，1.8mmol，2.0当量)和四丁基氟化铵(1N在THF，0.09mL，0.09mmol，0.1当量)。反应液在N2保护室温下搅拌过夜。将反应混合物用水(15mL)稀释，并用EtOAc(15mL×3)萃取。合并后的有机层用盐 水(15mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，减压浓缩，残留物在硅胶上快速柱层析纯化，得到标题化合物(黄色固体，180mg，收率53％)。
步骤F：(3-(2,2-二氟乙酰基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸苄酯
在0℃下，向(3-(2,2-二氟-1-羟乙基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸苄酯(180mg，0.5mmol，1.0当量)无水DCM(20mL)溶液中缓慢加入戴斯-马丁氧化剂(424mg，1.0mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌2小时。用饱和NaHSO3水溶液淬灭反应液，并用EtOAc(20mL×3)萃取。合并后的有机层用NaHCO3(15mL×2)洗涤，用无水Na2SO4干燥并减压浓缩，残留物在硅胶上快速柱层析纯化，得到标题化合物(黄色固体，140mg，收率75％)。
步骤G：1-(4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)-2,2-二氟乙-1-酮
向(3-(2,2-二氟乙酰基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸苄酯(140mg，0.4mmol，1.0当量)在THF(20mL)中的溶液中加入Pd/C(20mg，10％碳，用约55％水润湿)。反应液在氢气保护下室温下搅拌过夜。反应完成后，反应液用抽滤漏斗过滤，滤饼用MeOH(20mL)洗涤。将合并的滤液浓缩至干，得到标题化合物(65mg，定量)作为白色固体，直接用于下一步，无需进一步纯化。
步骤H：N-(3-(2,2-二氟乙酰基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺
向6-(1H-吡唑-5-基)吡啶甲酸(76mg，0.4mmol，1.2当量)和HATU(152mg，0.4mmol，1.2当量)的无水DMF(100mL)的溶液中加入DIEA(116mg，0.9mmol，3.0当量)和1-(4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)-2,2-二氟乙-1-酮(65mg，0.3mmol，1.0当量)。将反应液在氮气保护下在室温搅拌过夜。用H2O(15mL)稀释反应混合物，并用EtOAc(15mL×3)萃取。合并后的有机层用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，并在减压下浓缩。残留物通过分析制备纯化，得到标题化合物(白色固体，18.1mg，产率15％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.27(s,1H),11.69(s,1H),9.18(s,1H),8.28(d,J＝7.5Hz,1H),8.19-8.09(m,2H),8.08-7.99(m,3H),7.62(t,J＝7.9Hz,2H),7.50(t,J＝7.4Hz,1H),7.32(d,J＝9.4Hz,1H),7.10(t,J＝53.0Hz,1H).LCMS(ESI):m/z 409[M+H]+.
制备例120.化合物A245的合成
步骤A：2-(3-乙氧基-3-氧代丙酰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
将1-{[(2-甲基丙-2-基)氧基]羰基}氮杂环丁烷-2-甲酸(2g，9.939mmol，1.0当量)、二(咪唑-1-基)甲酮(1.93g，11.927mmol，1.2当量)和THF(20mL)加入预干燥的单口烧瓶中，然后用氮气吹扫3次，并在25℃搅拌2h。加入氯化镁(1.18g，12.424mmol，1.25当量)和丙二酸单乙酯钾盐(2.03g，11.927mmol，1.2当量)，并将混合物在25℃下再搅拌4小时。完成后，用水(30mL)稀释反应混合物，并用乙酸乙酯萃取(50mL×3)。有机相合并后用饱和食盐水(15mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤，滤液经减压浓缩，残留物用硅胶快速层析柱纯化，得到标题化合物(无色油状物，1.1g，产率39％)。
步骤B：(Z)-2-(3-(二甲基氨基)-2-(乙氧羰基)丙烯酰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
向2-(3-乙氧基-3-氧代丙酰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.06g，3.712mmol，1.0当量)的二氧六环(10mL)溶液中加入(二甲氨基)二甲氧基甲烷(0.614mL，4.825mmol，1.3当量)，将反应混合物在25℃下搅拌3小时。将所得混合物减压浓缩，将残留物用硅胶快速柱层析纯化，得到标题化合物(淡黄色油状物，1.2克，产率97％)。
步骤C：3-(1-(叔丁氧羰基)氮杂环丁烷-2-基)-1-苯基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯
向(Z)-2-(3-(二甲基氨基)-2-(乙氧羰基)丙烯酰基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.1g，3.303mmol，1.0当量)和TEA(1.377mL，9.908mmol，3.0当量)的二氧六环(20mL)溶液中加入苯肼(0.357mL，3.303mmol，3.0当量)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。完成后，将所得混合物减压浓缩，残余物通过反相制备纯化，得到标题化合物(淡黄色固体，1.2g，产率88％)。
步骤D：3-(1-(叔丁氧羰基)氮杂环丁烷-2-基)-1-苯基-1H-吡唑-4-甲酸
向3-(1-(叔丁氧羰基)氮杂环丁烷-2-基)-1-苯基-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(1.2g，3.166mmol，1.0当量)的MeOH(15mL)溶液中加入H2O(5mL)和LiOH(0.20g，4.749mmol，1.5当量)。 将反应混合物在室温下搅拌过夜。完成后，将反应混合物减压浓缩，残余物溶于水(20mL)中，用DCM(40mL)萃取，用浓盐酸调节水层pH至6，然后用乙酸乙酯(50mL)萃取，有机相混合后用水(3×30mL)洗涤。将有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液经减压浓缩，得到标题化合物(黄色油状，1.05克，产率92％)。
步骤E：2-(4-(叠氮羰基)-1-苯基-1H-吡唑-3-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
向3-(1-(叔丁氧羰基)氮杂环丁烷-2-基)-1-苯基-1H-吡唑-4-甲酸(1.1g，3.043mmol，1.0当量)的THF(15mL)溶液中加入TEA(1.1mL，7.608mmol，2.5当量)和DPPA(1.09g，3.956mmol，1.3当量)。将反应混合物在室温下搅拌1小时，然后升温至70℃并搅拌过夜。完成后，用水(30mL)稀释反应混合物，并用乙酸乙酯(50mL×3)萃取。合并后的有机相用饱和食盐水(15mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤，滤液经减压浓缩，残渣用硅胶快速柱层析纯化，得到标题化合物(黄色油状状物，1.1g，产率93％)。
步骤F：2-(4-(((苄氧基)羰基)氨基)-1-苯基-1H-吡唑-3-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
向2-(4-(叠氮羰基)-1-苯基-1H-吡唑-3-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1g，2.714mmol，1.0当量)的THF(20毫升)溶液中加入苯甲醇(0.842mL，8.143mmol，3.0当量)。将反应混合物在70℃下搅拌3小时。完成后，将反应混合物用水(20mL)稀释，并用乙酸乙酯(40mL×3)萃取。合并后的有机层用饱和食盐水(15mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤，滤液经减压浓缩，残留物用硅胶快速柱层析纯化，得到标题化合物(无色油状物，1.1g，产率86％)。
步骤G：2-(4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
向2-(4-(((苄氧基)羰基)氨基)-1-苯基-1H-吡唑-3-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(400mg，0.847mmol，1.0当量)的THF(5mL)溶液中加入NaHCO3(142mg，1.694mmol，2.0当量)和Pd(OH)2/C(12mg)。将反应混合物在28℃和氢气气氛(1atm.)条件下搅拌12小时。将反应混合物通过硅藻土过滤并减压浓缩，得到标题化合物(黄色固体，250mg，产率94％)，粗品产物无需进一步纯化而直接在下一步使用。
步骤H：2-(4-(6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
向溶有2-(4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(340mg，1.081mmol，1.0当量)、6-(1H-吡唑-5-基)吡啶甲酸(225mg，1.1891mmol，1.1当量)和DIEA(280mg，2.163mmol，2.0当量)的DMF(6mL)溶液中加入HATU(617mg，1.622mmol，1.5当量)。将反应混合物在室温下搅拌2小时。将反应混合物用水(10mL)稀释，用乙酸乙酯(3×40mL)萃取，合并后的有机层用饱和食盐水(20mL)洗涤并用Na2SO4干燥，过滤，滤 液经减压浓缩，残留物用pre-TLC(EA/EtOH＝20：1)纯化得到标题化合物(白色固体，60mg，产率11％)。
步骤I：N-(3-(氮杂环丁烷-2-基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺和N-(3-(2-氧代-1,3-噁嗪烷-4-基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在2-(4-(6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(60mg，0.124mmol，1.0当量)和2,6-二甲基吡啶(0.029mL，0.248mmol，2.0当量)的DCM(1mL)溶液中加入三氟甲磺酸三甲基硅酯(83mg，0.372mmol，3.0当量)。将反应混合物在室温下搅拌1h。反应完成后，将混合物减压浓缩，残留物通过反向制备纯化，得到N-(3-(氮杂环丁烷-2-基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺(白色固体，4.2mg，产率9％)，和副产物N-(3-(2-氧代-1,3-噁嗪烷-4-基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺(白色固体，8.6mg，产率16％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.18(s,1H),12.70(s,1H),8.40(s,1H),8.33(s,1H),8.18(d,J＝7.3Hz,1H),8.13-8.04(m,2H),7.85(s,1H),7.56(t,J＝7.6Hz,2H),7.47(t,J＝7.4Hz,1H),7.39(d,J＝7.3Hz,2H),6.96(d,J＝2.2Hz,1H),5.10(t,J＝8.1Hz,1H),3.83-3.61(m,2H),2.60(dd,J＝12.2,5.4Hz,2H).LCMS(ESI):m/z＝386.3[M+H]+.
制备例121.化合物A246的合成
步骤A：N-甲基-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
混合液4-硝基-1-苯基吡唑-3-甲酸甲酯(100mg，0.41mmol，1.0当量)和甲胺四氢呋喃溶液(1.0M,5.0mL，12.4当量)在密封管条件70℃反应16小时。反应完全后，反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，95mg，粗品)。
步骤B：4-氨基-N-甲基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向N-甲基-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(95mg，粗品)的甲醇溶液(10mL)中加入钯碳(10mg，10％)。反应液氢气置换三次，在25℃反应1.5小时。反应完全后，反应液经过硅藻土过滤，滤饼用甲醇清洗三次，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，80mg，粗品)。
步骤C：N-(3-(甲基氨基甲酰基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在0℃下，向6-(1H-吡唑-5-基)吡啶甲酸(58mg，0.31mmol，1.1当量)和4-氨基-N-甲 基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(60mg，粗品)的N,N-二甲基甲酰胺(1.5mL)溶液中加入DIEA(108mg，0.83mmol，3.0当量)和HATU(127mg，0.33mmol，1.2当量)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，61.7mg，产率57％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.20(s,1H),12.09(s,1H),9.03(s,1H),8.60(d,J＝4.8Hz,1H),8.23-8.22(m,1H),8.13-8.06(m,2H),8.01-7.97(m,3H),7.57(t,J＝7.6Hz,2H),7.42-7.34(m,2H),2.92(d,J＝4.4Hz,3H).LCMS(ESI):m/z 388[M+H]+.
制备例122.化合物A247的合成
步骤A：N-异丙基-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(100mg，0.40mmol，1.0当量)的四氢呋喃(2.0mL)中加入异丙胺(238mg，4.04mmol，10.0当量)。反应液在密封管的条件下70℃反应16小时。反应完全后，反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，95mg，粗品)。
步骤B：4-氨基-N-异丙基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向N-异丙基-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(90mg，粗品)的甲醇溶液(5mL)中加入钯碳(10mg，10％)。反应液氢气置换三次，在25℃反应1.5小时。反应完全后，反应液经过硅藻土过滤，滤饼用甲醇清洗三次，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，35mg，粗品)。
步骤C：N-(3-(异丙基氨基甲酰基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在0℃下，向6-(1H-吡唑-5-基)吡啶甲酸(30mg，0.16mmol，1.1当量)和4-氨基-N-异丙基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(35mg，粗品)的N,N-二甲基甲酰胺(1.5mL)溶液中加入DIEA(54mg，0.42mmol，3.0当量)和HATU(65mg，0.17mmol，1.2当量)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，15.0mg，产率26％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.20(s,1H),12.10(s,1H),9.03(s,1H),8.37(d,J＝8.4Hz,1H),8.24(d,J＝7.6Hz,1H),8.14-8.01(m,4H),7.97(s,1H),7.57(t,J＝8.0Hz,2H),7.41(t,J＝7.2Hz,1H),7.32(s,1H),4.31(dd,J＝14.4,6.8Hz,1H),1.27(d,J＝6.8Hz,6H).LCMS(ESI):m/z 416[M+H]+.
制备例123.化合物A248的合成
步骤A：N-甲基-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-磺酰胺
在0℃下，向4-硝基-1-苯基吡唑-3-磺酰氯(200mg，0.70mmol，1.0当量)的四氢呋喃溶液(1mL)中加入甲胺(2mL，2.10mmol，3.0当量)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经水(5mL)打浆后得到标题化合物(白色固体，150mg，产率76％)。
步骤B：4-氨基-N-甲基-1-苯基-1H-吡唑-3-磺酰胺
在室温下，向N-甲基-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-磺酰胺(150mg，0.53mmol，1.0当量)的四氢呋喃溶液(3mL)中加入钯碳(57mg，10％)。反应液氢气置换三次，在25℃反应2小时。反应完全后，反应液经过硅藻土过滤，滤饼用甲醇清洗三次，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状，110mg，产率82％)。
步骤C：N-(3-(N-甲基氨基磺酰基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在0℃下，向6-(2H-吡唑-3-基)吡啶-2-甲酸(75mg，0.40mmol，1当量)和4-氨基-N-甲基-1-苯基-1H-吡唑-3-磺酰胺(100mg，0.40mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)溶液中加入DIEA(153.69mg，1.19mmol，3.0当量)和T3P(378mg，0.60mmol，1.5当量，50％乙酸乙酯)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，30mg，产率18％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.21(s,1H),11.29(s,1H),9.15(s,1H),8.26(d,J＝8.0Hz,1H),8.17-8.01(m,3H),7.95(d,J＝8.0Hz,3H),7.59(t,J＝7.6Hz,2H),7.46(t,J＝7.6Hz,1H),7.22(s,1H),2.69(d,J＝4.8Hz,3H).LCMS(ESI):m/z 424.2[M+H]+.
制备例124.化合物A249的合成
步骤A：N-异丙基-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-磺酰胺
在0℃下，向4-硝基-1-苯基吡唑-3-磺酰氯(200mg，0.70mmol，1.0当量)的四氢呋喃溶液(5mL)中加入异丙胺(0.18mL，2.10mmol，3.0当量)。反应液在室温条件下反应1小 时。反应完全后，反应液减压浓缩，残余物经水(5mL)打浆得到标题化合物(白色固体，180mg，产率83％)。
步骤B：4-氨基-N-异丙基-1-苯基-1H-吡唑-3-磺酰胺
在室温下，向N-异丙基-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-磺酰胺(150mg，0.48mmol，1.0当量)的四氢呋喃溶液(3mL)中加入钯碳(51mg，10％)。反应液氢气置换三次，在25℃反应2小时。反应完全后，反应液经过硅藻土过滤，滤饼用甲醇清洗三次，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状，105mg，产率77％)。
步骤C：N-(3-(N-异丙基氨基磺酰基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在0℃下，向6-(2H-吡唑-3-基)吡啶-2-甲酸(68mg，0.36mmol，1当量)和4-氨基-N-异丙基-1-苯基-1H-吡唑-3-磺酰胺(100mg，0.40mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)溶液中加入DIEA(138mg，1.07mmol，3当量)和T3P(340mg，0.54mmol，1.5当量，50％乙酸乙酯)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，30mg，产率18％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.21(s,1H),11.32(s,1H),9.13(s,1H),8.35-8.22(m,2H),8.13-8.07(m,2H),7.99-7.86(m,3H),7.59(t,J＝8.0Hz,2H),7.45(t,J＝7.2Hz,1H),7.22(s,1H),3.70-3.60(m,1H),1.09(d,J＝6.8Hz,6H).LCMS(ESI):m/z 452.2[M+H]+.
制备例125.化合物A250的合成
步骤A：N-环丙基-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向4-硝基-1-苯基吡唑-3-甲酸甲酯(300mg，1.21mmol，1.0当量)的四氢呋喃溶液(3mL)中加入环丙胺(1385.9mg，24.27mmol，20.0当量)。反应液在密封管条件下70℃反应16小时。反应完全后，反应液减压浓缩得到标题化合物(白色固体，210mg，产率84％)。
步骤B：4-氨基-N-环丙基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向N-环丙基-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(280mg，1.03mmol，1.0当量)的甲醇溶液(10mL)中加入钯碳(22mg，10％)。反应液氢气置换三次，在25℃反应2小时。反应完全后，反应液经过硅藻土过滤，滤饼用甲醇清洗三次，滤液减压浓缩得到粗品 标题化合物(黄色油状，210mg，产率84％)。
步骤C：N-(3-(环丙基氨基甲酰基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在0℃下，向6-(1H-吡唑-5-基)吡啶甲酸(47mg，0.25mmol，1.0当量)和4-氨基-N-环丙基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(60mg，0.25mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)溶液中加入DIEA(96.0mg，0.74mmol，3.0当量)和HATU(113mg，0.30mmol，1.2当量)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液经反相柱纯化得到标题化合物(黄色固体，33mg，产率32％)。1H NMR(400MHz,DMSO DMSO-d6)δ13.21(s,1H),12.04(s,1H),9.03(s,1H),8.61(d,J＝4.8Hz,1H),8.24(d,J＝7.6Hz,1H),8.09(dd,J＝15.6,7.6Hz,2H),8.03-7.95(m,3H),7.56(t,J＝8.0Hz,2H),7.42-7.33(m,2H),3.04(d,J＝4.4Hz,1H),0.79-0.74(m,4H).LCMS(ESI):m/z 414[M+H]+.
制备例126.化合物A251的合成
步骤A：4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸
在室温下，向4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(500mg，2.02mmol，1.0当量)的四氢呋喃(3.0mL)和水(3.0mL)的混合溶液中加入氢氧化锂一水合物(254mg，6.07mmol，3.0当量)。反应液在室温条件反应2小时。反应完全后，反应液用1M稀盐酸调节pH至2-3，悬浊液过滤，滤饼用水清洗三次，滤饼减压浓缩干燥后得到标题化合物(白色固体，350mg，产率74％)。
步骤B：4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-羰基氯
在室温下，在4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸(350mg，1.50mmol，1.0当量)的二氯亚砜(5.0mL)溶液中80℃条件反应2小时。反应完全后，反应液减压浓缩后得到粗品标题化合物(白色固体，350mg，粗品)。
步骤C：N-(2,2-二氟环丙基)-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向2,2-二氟环丙烷-1-胺盐酸盐(180mg，1.39mmol，1.0当量)和三乙胺(0.6mL，4.17mmol，3.0当量)的二氯甲烷(5.0mL)溶液中加入4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-羰基氯(17.5g，87.7mmol，1.5当量)。反应液在室温条件反应1小时。反应完全后，反应液倒 入水中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化后得到标题化合物(白色固体，180mg，产率42％)。
步骤D：4-氨基-N-(2,2-二氟环丙基)-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向N-(2,2-二氟环丙基)-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(180mg，0.58mmol，1.0当量)的甲醇(5.0mL)溶液中加入钯碳(63mg，10％纯度)。反应液在氢气保护下室温条件反应2小时。反应完全后，反应液过滤，滤饼用甲醇清洗三次，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，140mg，粗品)。
步骤E：N-(3-((2,2-二氟环丙基)氨基甲酰基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡嗪-5-基)吡啶酰胺
在室温下，向4-氨基-N-(2,2-二氟环丙基)-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(140mg，0.50mmol，1.0当量)和6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酸(138mg，0.50mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)溶液中加入1H-苯并三唑-1-基氧三吡咯烷基六氟磷酸盐(393mg，0.76mmol，1.5当量)和DIEA(195mg，1.51mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下室温条件反应2小时。反应完全后，反应液倒入水中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，170mg，产率63％)。
步骤F：N-(3-((2,2-二氟环丙基)氨基甲酰基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在室温下，向N-(3-((2,2-二氟环丙基)氨基甲酰基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡嗪-5-基)吡啶酰胺(170mg，0.32mmol，1.0当量)的二氯甲烷(3.0mL)溶液加入三氟乙酸(1.0mL)，反应液在氮气保护下室温条件反应16小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化后得到标题化合物(白色固体，17.5mg，产率12％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.22(s,1H),11.97(s,1H),9.06(s,1H),9.05-9.02(m,1H),8.28-8.20(m,1H),8.12(t,J＝7.6Hz,1H),8.09-8.06(m,1H),8.03(d,J＝7.8Hz,2H),7.94(s,1H),7.58(t,J＝7.9Hz,2H),7.42(t,J＝7.4Hz,1H),7.32(s,1H),3.68-3.56(m,1H),2.08-1.88(m,2H).LCMS(ESI):m/z 450.3[M+H]+.
制备例127.化合物A252的合成
步骤A：1-环丁基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(2g，11.7mmol，1.0当量)和溴代环丁烷(1.9g，14.0mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(30.0mL)溶液中加入碳酸铯(11.4g，35.1mmol，3.0当量)和碘化钾(1.9g，11.6mmol，1.0当量)。反应液在100℃条件反应5小时。反应完全后，反应液降至室温后倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化后得到标题化合物(白色固体，750mg，产率29％)。
步骤B：1-环丁基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸
在室温下，向1-环丁基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(700mg，3.1mmol，1.0当量)的四氢呋喃(10.0mL)和水(5.0mL)混合溶液中加入氢氧化锂一水合物(1.3g，31.0mmol，1.0当量)。反应液在室温条件反应3小时。反应完全后，反应液用2M稀盐酸调节pH至4-5，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，670mg，粗品)。
步骤C：1-环丁基-N-环丙基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向1-环丁基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸(640mg，3.03mmol，1.0当量)和HATU(1.73g，4.5mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)溶液中加入环丙胺(207mg，3.6mmol，1.2当量)和DIEA(1.56g，12.1mmol，4.0当量)。反应液在室温条件下反应15小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(白色固体，380mg，产率50％)。
步骤D：4-氨基-1-环丁基-N-环丙基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向1-环丁基-N-环丙基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酰胺(360mg，1.4mmol，1.0当量)的甲醇(10.0mL)溶液中加入钯碳(50mg，10％纯度)。反应液在氢气保护下室温条件反应2小时。反应完全后，反应液过滤，滤饼用甲醇清洗三次，滤液减压浓缩得到标题化 合物(白色固体，240mg，产率76％)。
步骤E：N-(1-环丁基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)-6-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在室温下，向6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酸(300mg，1.1mmol，1.0当量)和HATU(570mg，1.5mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入4-氨基-1-环丁基-N-环丙基-1H-吡唑-3-甲酰胺(220mg，1.0mmol，1.0当量)和DIEA(387mg，3.0mmol，3.0当量)。反应液在室温条件下反应4小时。反应完全后，反应液倒入水中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(白色固体，210mg，产率44％)。
步骤F：N-(1-环丁基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在室温下，向N-(1-环丁基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)-6-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺(210mg，0.4mmol，1.0当量)的二氯甲烷(6.0mL)溶液中加入三氟乙酸(2.0mL)。反应液在室温条件反应5小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，22.7mg，产率13％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.19(s,1H),11.96(s,1H),8.48(s,1H),8.33(d,J＝4.8Hz,1H),8.21(d,J＝7.6Hz,1H),8.09(t,J＝7.6Hz,1H),8.02(d,J＝7.6Hz,1H),7.95(s,1H),7.31(s,1H),4.95(t,J＝8.4Hz,1H),2.99(d,J＝5.2Hz,1H),2.66-2.53(m,2H),2.41(d,J＝7.6Hz,2H),1.91-1.71(m,2H),0.72(d,J＝6.0Hz,4H).LCMS(ESI):m/z 392[M+H]+.
制备例128.化合物A253的合成
步骤A：4-硝基-1H-吡唑-3-羰基氯
室温下，在4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸(2g，12.732mmol，1.0当量)的二氯亚砜(20.0mL)溶液中80℃条件反应2小时。反应完全后，反应液减压浓缩后得到粗品标题化合物(白色固体，1.5g，粗品)。
步骤B：N-环丙基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向环丙胺(0.49g，8.55mmol，1.0当量)和三乙胺(3.6mL，25.6mmol，3.0当量)的1,4-二氧六环(20.0mL)溶液中加入4-硝基-1H-吡唑-3-羰基氯(1.5g，8.546mmol，1.0当量)。反应液在室温条件反应1小时。反应完全后，反应液倒入水中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化后得到标题化合物(白色固体，1.2g，产率72％)。
步骤C：3-(3-(环丙基氨基甲酰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向N-环丙基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酰胺(1g，5.10mmol，1.0当量)和3-溴氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.20g，5.10mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)溶液中加入碳酸铯(3.32g，10.2mmol，3.0当量)。反应液在100℃条件反应2小时。反应完全后，反应液降至室温后倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化后得到标题化合物(白色固体，400mg，产率22％)。
步骤D：3-(4-氨基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向3-(3-(环丙基氨基甲酰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(400mg，1.14mmol，1.0当量)的甲醇(5.0mL)溶液中加入钯碳(121mg，10％纯度)。反应液在氢气保护下室温条件反应2小时。反应完全后，反应液过滤，滤饼用甲醇清洗三次，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，380mg，粗品)。
步骤E：3-(3-(环丙基氨基甲酰基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酸(170mg，0.62mmol，1.0当量)和HATU(281mg，0.74mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)溶液中加入3-(4-氨基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.62mmol，1.0当量)和DIEA(241mg，1.88mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应15小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，250mg，产率70％)。
步骤F：N-(1-(氮杂环丁烷-3-基)-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在室温下，向3-(3-(环丙基氨基甲酰基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡 啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(240mg，0.42mmol，1.0当量)的二氯甲烷(3.0mL)溶液中加入三氟乙酸(1.0mL)。反应液在室温条件反应16小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，27.0mg，产率17％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.23(s,1H),11.97(s,1H),8.59(s,1H),8.39(d,J＝4.2Hz,1H),8.21(d,J＝7.8Hz,1H),8.10(t,J＝7.6Hz,1H),8.03(d,J＝7.5Hz,1H),7.93(s,1H),7.30(s,1H),5.35-5.20(m,1H),3.94(t,J＝7.3Hz,2H),3.79(t,J＝7.7Hz,2H),3.05-2.95(m,1H),0.76-0.68(m,4H).LCMS(ESI):m/z 393.2[M+H]+.
制备例129.化合物A254的合成
步骤A：3-(3-(环丙基氨基甲酰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向N-环丙基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酰胺(1g，5.10mmol，1.0当量)和3-溴吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.28g，5.1mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)溶液中加入碳酸铯(5.0g，15.3mmol，3.0当量)。反应液在100℃条件反应2小时。反应完全后，反应液降至室温后倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化后得到标题化合物(白色固体，420mg，产率23％)。
步骤B：3-(4-氨基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-1-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向3-(3-(环丙基氨基甲酰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(420mg，1.1mmol，1.0当量)的甲醇(10.0mL)溶液中加入钯碳(50mg，10％纯度)。反应液在氢气保护下室温条件反应2小时。反应完全后，反应液过滤，滤饼用甲醇清洗三次，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，240mg，粗品)。
步骤C：3-(3-(环丙基氨基甲酰基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H吡唑-1-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酸(197mg，0.77mmol，1.1当量)和HATU(399mg，1.05mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)溶液中加入3-(4-氨基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-1-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(220mg，0.7mmol，1.0当量)和DIEA(271mg，2.1mmol，3.0当量)。反应液在室温条件下反应4小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(白色固体，190mg，产率49％)。
步骤D：N-(3-(环丙基氨基甲酰基)-1-(吡咯烷-3-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在室温下，向3-(3-(环丙基氨基甲酰基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H吡唑-1-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(190mg，0.3mmol，1.0当量)的二氯甲烷(6.0mL)溶液中加入三氟乙酸(2.0mL)。反应液在室温条件反应16小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，22.6mg，产率17％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.21(s,1H),11.95(s,1H),8.48(s,1H),8.32(s,1H),8.21(d,J＝7.6Hz,1H),8.10(t,J＝7.6Hz,1H),8.03(d,J＝7.6Hz,1H),7.94(s,1H),7.30(s,1H),4.95(s,1H),3.11(s,3H),2.97(d,J＝3.6Hz,1H),2.87(s,1H),2.25(dd,J＝13.6,5.6Hz,1H),2.01(s,1H),0.88-0.60(m,4H).LCMS(ESI):m/z 407[M+H]+.
制备例130.化合物A255的合成
步骤A：1-环己基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸乙酯
向4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸乙酯(900mg，4.9mmol，1.0当量)和溴环己烷(951mg，5.8mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(50mL)溶液中加入碳酸钾(1343mg，9.7mmol，2.0当量)。将溶液100℃下搅拌过夜。反应完成后，用水(15mL)稀释反应混合物，并用乙酸乙酯(15mL×2)萃取。有机层用饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩，残留物通过正相柱纯化得到标题化合物(无色油状物，320mg，产率为24％)。
步骤B：1-环己基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸
向1-环己基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸乙酯(320mg，1.2mmol，1.0当量)的乙醇(5mL)和水(1mL)中的溶液中加入氢氧化锂一水合物(151mg，3.6mmol，3.0当量)，并将所得混合物在室温下搅拌2小时。反应完成后，用2N盐酸调节至pH＝4-5。所得混合物用水(10mL)稀释，并用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。将有机层用饱和食盐水(15mL×2)洗涤，用无水硫酸钠干燥，然后在减压下浓缩得到标题化合物(白色固体，230mg，定量)。
步骤C：1-环己基-N-环丙基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酰胺
向1-环己基-4-硝基吡唑-3-甲酸(230mg，1.0mmol，1.0当量)和HATU(439mg，1.2 mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入TEA(0.5mL，3.85mmol，4.0当量)和环丙胺(82mg，1.5mmol，1.5当量)。将反应混合物在25℃下搅拌30分钟。反应完成后，用水(15mL)稀释反应混合物，并用乙酸乙酯(15mL×3)萃取。有机层用饱和食盐水(15mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩，残留物通过正相柱纯化得到标题化合物(白色固体，220mg，产率为82％)。
步骤D：4-氨基-1-环己基-N-环丙基-1H-吡唑-3-甲酰胺
向1-环己基-N-环丙基-4-硝基吡唑-3-甲酰胺(220mg，0.8mmol，1.0当量)的甲醇(10mL)溶液中加入10％的钯碳(25mg)。将混合物置于氢气球下换气3次，并在室温下搅拌1小时。反应完成后，通过硅藻土过滤，用甲醇(20mL)洗涤滤饼。将合并的滤液浓缩至干，得到的标题化合物(棕色固体，190mg，定量)，其在下一步骤中直接使用，而无需进一步纯化。
步骤E：N-(1-环己基-3-(环丙基氨基戊基)-1H-吡唑-4-基)-6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
向4-氨基-1-环己基-N-环丙基-1H-吡唑-3-甲酰胺(190mg，0.8mmol，1.0当量)、CMPI(587mg，2.3mmol，3.0当量)、TEA(0.35mL，3.1mmol，4.0当量)和6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡嗪-5-基)吡啶甲酸(250mg，0.92mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入DMAP(9mg，0.076mmol，0.1当量)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟。完成后，用水(15mL)稀释反应混合物，并用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。将有机层用饱和食盐水(15mL×2)洗涤，用无水硫酸钠干燥，然后在减压下浓缩。残留物在正相柱纯化得到标题化合物(白色固体，160mg，产率为42％)。
步骤F：N-(1-环己基-3-(环丙基氨基甲酰)-1H-吡唑醇-4-基)-6-(1H-吡唑醇-5-基)吡啶酰胺
向N-(1-环己基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)-6-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺(130mg，0.22mmol，1.0当量)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入盐酸-1,4-二氧六环(1mL，4M)。将反应混合物在25℃下搅拌10分钟。完成后，在减压下浓缩反应混合物。残留物通过HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，37.2mg，产率为34％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.20(s,1H),11.96(s,1H),8.43(s,1H),8.26(d,J＝4.8Hz,1H),8.21(d,J＝7.8Hz,1H),8.09(t,J＝7.7Hz,1H),8.03(d,J＝7.6Hz,1H),7.95(s,1H),7.31(s,1H),4.42-4.09(m,1H),3.03-2.93(m,1H),2.11-2.01(m,2H),1.81(dt,J＝12.2,8.7Hz,4H),1.68(d,J＝12.1Hz,1H),1.41(q,J＝13.0Hz,2H),1.25(dd,J＝25.1,12.7Hz,1H),0.79-0.65(m,4H). LCMS(ESI):m/z 420[M+H]+.
制备例131.化合物A256的合成
步骤A：4-(3-(乙氧羰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁脂
向4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸乙酯(900mg，4.9mmol，1.0当量)、4-溴哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.54g，5.8mmol，1.2当量)的DMF(50mL)溶液中加入碳酸钾(1343mg，9.7mmol，2.0当量)。将溶液在100℃下搅拌过夜。反应完成后，用水(15mL)稀释反应混合物，并用乙酸乙酯(25mL×2)萃取。有机层用饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩，残留物通过正相柱纯化得到标题化合物(无色油状，390mg，产率为21％)。
步骤B：1-(1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-基)-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸
向4-(3-(乙氧羰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(390mg，1.06mmol，1.0当量)的乙醇(5mL)和水(1mL)溶液中加入氢氧化锂一水合物(133mg，3.2mmol，3.0当量)，并将所得混合物在室温下搅拌2小时。反应完成后，用2N稀盐酸调节至pH＝4-5。所得混合物用水(10mL)稀释，并用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。将有机层用饱和食盐水(15mL×2)洗涤，用无水硫酸钠干燥，然后在减压下浓缩得到标题化合物(白色固体，320mg，定量)。
步骤C：4-(3-(环丙基氨基甲酰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
向1-(1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-基)-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸(320mg，0.94mmol，1.0当量)和HATU(429mg，1.1mmol，1.2当量)在DMF(5mL)中的溶液中加入TEA(0.5mL，3.85mmol，4.0当量)和环丙胺(107mg，1.9mmol，2.0当量)。将反应混合物在25℃下搅拌30分钟。反应完成后，用水(15mL)稀释反应混合物，并用乙酸乙酯(15mL×3)萃取。有机层用饱和食盐水(15mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩，残留物通过正相柱纯化得到标题化合物(无色油状，290mg，产率82％)。
步骤D：4-(4-氨基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
向4-(3-(环丙基氨基甲酰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(290mg，0.53mmol，1.0当量)的甲醇(10mL)溶液中加入10％(25mg)钯碳。将混合物置于氢气球下换气3次，并在室温下搅拌1小时。反应完成后，通过硅藻土过滤，用甲醇(20mL)洗涤滤饼。将合并的滤液浓缩至干，得到的标题化合物(棕色固体，260mg，定量)，其在下一步 骤中直接使用，而无需进一步纯化。
步骤E：4-(3-(环丙基氨基甲酰基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(4-氨基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(260mg，0.75mmol，1.0当量)、CMPI(571mg，2.2mmol，3.0当量)、TEA(0.35mL，3.0mmol，4.0当量)和6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酸(244mg，0.90mmol，1.2当量)在DMF(5mL)中的溶液中加入DMAP(9mg，0.076mmol，0.1当量)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟。完成后，用水(15mL)稀释反应混合物，并用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。将有机层用饱和食盐水(15mL×2)洗涤，用无水硫酸钠干燥，然后在减压下浓缩。残留物在正相柱纯化得到标题化合物(白色固体，220mg，产率位49％)。
步骤F：N-(3-(环丙基氨基甲酰基)-1-(哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在室温下，向4-(3-(环丙基氨基甲酰基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(130mg，0.22mmol，1.0当量)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入盐酸-1,4-二氧六环(1mL，4M)。将反应混合物在25℃下搅拌10分钟。完成后，在减压下浓缩反应混合物。残留物通过预HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，35.3mg，产率位38％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.26(s,1H),11.96(s,1H),8.44(s,1H),8.32-8.24(m,2H),8.21(d,J＝7.7Hz,1H),8.10(t,J＝7.7Hz,1H),8.03(d,J＝7.6Hz,1H),7.93(s,1H),7.30(d,J＝2.1Hz,1H),4.41(dd,J＝15.5,11.9Hz,1H),3.19(d,J＝12.6Hz,2H),3.02-2.94(m,1H),2.75(t,J＝12.0Hz,2H),2.14-2.03(m,2H),1.96(dd,J＝21.5,11.9Hz,2H),0.78-0.64(m,4H).LCMS(ESI):m/z 421[M+H]+.
制备例132.化合物A257的合成
步骤A：4-硝基-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-3-甲酸乙酯
在4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸乙酯(500mg，2.7mmol，1.0当量)和吡啶-3-基硼酸(399mg， 3.24mmol，1.2当量)的N,N二甲基甲酰胺(20mL)混合溶液中加入Cu(OAc)2(488mg，2.7mmol，1当量)和吡啶(43mg，0.54mmol，0.2当量)。得到的混合物在100℃下搅拌4小时，完成后用水(15ml)稀释反应混合物，用乙酸乙酯(15ml×3)提取。将有机层混合，在无水硫酸钠上干燥，减压浓缩。用硅胶柱层析纯化得到4-硝基-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-3-甲酸乙酯(180mg，产率25％)为白色固体。
步骤B：4-硝基-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-3-甲酸
将4-硝基-1-(吡啶-3-酰基)-1H-吡唑-3-甲酸乙酯(180mg，0.68mmol，1.0当量)溶解在乙醚(5mL)和水(1mL)中，并加入氢氧化锂一水化合物(137mg，3.44mmol，5.0当量)在25℃下搅拌4小时。完成后，用1N稀盐酸调节pH至酸性，直至pH调整为pH＝4-5。所得混合物用水(10mL)稀释，用乙酸乙酯(20mL×3)提取。将有机层用盐水(15mL×2)洗涤，在无水硫酸钠上干燥，然后减压浓缩得到4-硝基-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-3-甲酸(150mg，定量)作为白色固体，直接用于下一步，无需进一步纯化。
步骤C：N-环丙基-4-硝基-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-3-甲酰胺
将4-硝基-1-(吡啶-3-酰基)-1H-吡唑-3-甲酸(160mg，0.68mmol，1.0当量)和HATU(310mg，0.82mmol，1.2当量)溶解在N,N二甲基甲酰胺(5mL)中，加入TEA(141mg，1.4mmol，2.0当量)和环丙胺(47mg，0.82mmol，1.2当量)。反应完成后，用水稀释(15ml)，用乙酸乙酯(15ml×3)提取。有机层用盐水洗涤(15ml)，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残渣用硅胶色谱纯化，得到N-环丙基-4-硝基-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-3-甲酰胺(70mg，产率38％)，为白色固体。
步骤D：4-氨基-N-环丙基-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-3-甲酰胺
在N-环丙基-4-硝基-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-3-甲酰胺(70mg，0.26mmol，1.0当量)的MeOH(10mL)溶液中加入Pd/C 10％(25mg)。用H2吹扫脱气3次，在室温下搅拌1h。完成后，用垫过滤悬浮液，用MeOH(20mL)洗涤滤饼。将滤液浓缩干燥得到4-氨基-N-环丙基-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-3-甲酰胺(55mg，定量)为无色油，无需进一步纯化，直接用于下一步。
步骤E：N-(3-(环丙基氨基甲酸基)-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在4-氨基-N-环丙基-1-(吡啶-3-酰基)-1H-吡唑-3-甲酰胺(55mg，0.23mmol，1.0当量)、CMPI(70mg，0.28mmol，1.2当量)、TEA(46mg，0.46mmol，2.0当量)和6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-酰基)-1H-吡唑-5-酰基)吡啶酸(75mg，0.28mmol，1.2当量)的DMF(5mL)溶液中， 加入DMAP(3mg，0.02mmol，0.1当量)，在室温下反应。反应完成后，用水(15ml)稀释反应混合物，用乙酸乙酯(20ml×3)萃取，用盐水(15ml×2)洗涤有机层，用无水硫酸钠干燥，然后减压浓缩。用硅胶柱层析纯化得到N-(3-(环丙基氨基甲酰)-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺(70mg，产率38％)白色固体。
步骤F：N-(3-(环丙基氨基甲酰)-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
将盐酸/二氧六环(1mL，4M)加入到N-(3-(环丙基氨基甲酸基)-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺(70mg，0.14mmol，1.0当量)的甲醇(5mL)溶液中，温度为25℃。将反应混合物在25℃下搅拌10min，完成后减压浓缩反应混合物。反相柱纯化得到N-(3-(环丙基氨基甲酰)-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺(30.2mg，产率52％)白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.22(s,1H),12.04(s,1H),9.29(d,J＝2.6Hz,1H),9.14(s,1H),8.68(d,J＝4.8Hz,1H),8.59(dd,J＝4.7,1.4Hz,1H),8.45-8.40(m,1H),8.24(d,J＝7.8Hz,1H),8.15-8.05(m,2H),7.96(s,1H),7.60(dd,J＝8.4,4.7Hz,1H),7.33(s,1H),3.03(d,J＝1.2Hz,1H),0.79-0.72(m,4H).LCMS(ESI):m/z 415[M+H]+.
制备例133.化合物A258的合成
步骤A：1-(二环[1.1.1]戊-1-基)-1H-吡唑-3-甲酸乙酯
在室温下，向双环[1.1.1]戊-1-肼盐酸盐(250mg，1.46mmol，1.0当量)的乙醇(5.0mL)溶液中加入4-(二甲基氨基)-2-氧代丁-3-烯酸乙酯(325mg，1.9mmol，1.3当量)。反应液在氮气保护下60℃条件下回流反应16小时。反应完全后，反应液降至室温后减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色油状，85mg，产率28.3％)。
步骤B：1-(双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4-溴-1H-吡唑-3-甲酸乙酯
在室温下，向1-(二环[1.1.1]戊-1-基)-1H-吡唑-3-甲酸乙酯(80mg，0.38mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)溶液中加入N-溴代丁二酰亚胺(203mg，1.14mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下常温反应4小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色油状，50mg，产率45.5％)。
步骤C：1-(双环[1.1.1]戊-1-基)-4-((二苯基亚甲基)氨基)-1H-吡唑-3-甲酸乙酯
在室温下，向1-(双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4-溴-1H-吡唑-3-甲酸乙酯(50mg，0.18mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(2.0mL)溶液中加入二苯甲酮亚胺(36mg，0.2mmol，1.1当量)、Pd2(dba)3(9mg，0.01mmol，0.1当量)、Xant-phos(6mg，0.01mmol，0.2当量)和碳酸铯(174mg，0.5mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下100℃条件下反应3小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色油状，35mg，产率52.4％)。
步骤D：4-氨基-1-(双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-吡唑-3-甲酸乙酯
在室温下，向1-(双环[1.1.1]戊-1-基)-4-((二苯基亚甲基)氨基)-1H-吡唑-3-甲酸乙酯(35mg，0.09mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(1.0mL)溶液中加入浓盐酸(0.25mL)。反应液在氮气保护下常温反应1小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(白色固体，18mg，产率90.6％)。
步骤E：6-(三氟甲基)吡啶甲酰氯
在室温下，向6-(三氟甲基)吡啶甲酸(50mg，0.26mmol，1.0当量)中加入氯化亚砜(1.0mL)。反应液在氮气保护下60℃条件下回流反应2小时。反应完全后，反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状，50mg，粗品)。
步骤F：1-(双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸乙酯
在0℃下，向4-氨基-1-(双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-吡唑-3-甲酸乙酯(18mg，0.08mmol，1.0当量)和6-(三氟甲基)吡啶甲酰氯(50mg，0.24mmol，1.5当量)的二氯甲烷(3.0mL)溶液中加入三乙胺(25mg，0.24mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下常温反应1小时。反应完全后，反应液倒入水中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(白色固体，15mg，产率46.8％)。
步骤G：1-(双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸
在常温下，向1-(双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸 乙酯(15mg，0.04mmol，1.0当量)的甲醇(2.0mL)和水(0.5mL)的混合溶液中加入氢氧化锂(8mg，0.2mmol，5.0当量)。反应液在氮气保护下40℃条件下反应1小时。反应完全后，反应液倒入水中，用1M的稀盐酸溶液将pH调至3-4，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，15mg，粗品)。
步骤H：N-(1-(双环[1.1.1]戊-1-基)-3-甲酰氨基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向1-(双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸(15mg，粗品)的N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)溶液中加入氯化铵(3mg，0.08mmol，1.1当量)、DIEA(10.5mg，0.12mmol，3.0当量)和HATU(46.5mg，0.12mmol，2当量)。反应液在氮气保护下常温反应1小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，3.3mg，产率22.6％)。1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.48-8.38(m,2H),8.30(t,J＝7.8Hz,1H),8.05(d,J＝7.8Hz,1H),2.69(s,1H),2.39(s,6H).
制备例134.化合物A259的合成
步骤A：3-氰基-N-(1-环己基-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺
在室温条件下，向2-(4-氨基-1-环己基-1H-吡唑-3-基)丙-2-醇(30mg，0.13mmol，1.0当量)、DIEA(43mg，0.34mmol，2.5当量)和3-氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酸(27mg，0.15mmol，1.1当量)的DMF(2.0mL)溶液中加入HATU(56mg，0.15mol，1.1当量)，再将所得混合物室温搅拌1h。将混合物加水并用EA萃取两次。合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩至干。残留物通过制备HPLC纯化，得到黄色固体的3-氰基-N-(1-环己基-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺(16.3mg，产率30.92％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.73(s,1H),8.94(d,J＝2.2Hz,1H),8.71(d,J＝2.2Hz,1H),8.25(s,1H),7.70(d,J＝4.8Hz,1H),7.08(d,J＝4.8Hz,1H),5.52(s,1H),4.14-3.99(m,1H),2.05-1.95(m,2H),1.87-1.75(m,2H),1.72-1.60(m,3H),1.53(s,6H),1.46-1.32(m,2H),1.30-1.17(m,1H).
制备例135.化合物A260的合成
步骤A：3-溴-1-环己基-4-硝基-1H-吡唑
在室温下，向3-溴-4-硝基-1H-吡唑(900mg，4.7mmol，1.0当量)和碘代环己烷(1.97g，9.4mmol，2.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)溶液中加入碳酸铯(4.6g，14.1mmol，3.0当量)。反应液在80℃条件下反应16小时。反应完全后，反应液降至室温后倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，400mg，产率31％)。
步骤B：3-(苄硫基)-1-环己基-4-硝基-1H-吡唑甲酸酯
在室温下，向3-溴-1-环己基-4-硝基-1H-吡唑(400mg，1.5mmol，1.0当量)和苄硫醇(272mg，2.19mmol，1.5当量)的1,4-二氧六环(8.00mL)中加入Pd2(dba)3(134mg，0.15mmol，0.1当量)、Xantphos(169mg，0.3mmol，0.2当量)和DIEA(566mg，4.4mmol，3.0当量)。反应液在80℃条件下反应16小时。反应完全后，反应液降至室温后倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，330mg，产率72％)。
步骤C：3-(苄硫基)-1-环己基-1H-吡唑-4-胺
在室温下，向3-(苄硫基)-1-环己基-4-硝基-1H-吡唑甲酸酯(330mg，1.1mmol，1.0当量)的乙醇(5.0mL)和水(1.0ml)混合溶液中加入铁粉(349mg，6.3mmol，6.0当量)和氯化铵(557mg，11.1mmol，10.0当量)。反应液在80℃条件下反应2小时。反应完全后，反应液降至室温后过滤，滤液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到标题化合物(棕色固体，160mg，产率54％)。
步骤D：N-(3-(苄硫基)-1-环己基-1H-吡唑-4-基)-6-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡嗪-5-基)吡啶酰胺
在室温下，向3-(苄硫基)-1-环己基-1H-吡唑-4-胺(160mg，0.56mmol，1.0当量)和6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酸(305mg，1.1mmol，2.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0ml)溶液中加入HATU(424mg，1.1mmol，2.0当量)和DIEA(216mg，1.67mmol，3.0当量)。反应液在室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残 余物经柱纯化得到标题化合物(棕色固体，130mg，产率43％)。
步骤E：4-(6-(1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1-环己基-1H-吡唑-3-磺酰氯
在室温下，向N-(3-(苄硫基)-1-环己基-1H-吡唑-4-基)-6-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡嗪-5-基)吡啶酰胺(130mg，0.24mmol，1.0当量)的乙酸(1.0ml)和水(0.3ml)的混合液中加入N-氯代丁二酰亚胺(96mg，0.72mmol，3.0当量)。反应液在室温条件下反应5小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品标题化合物(棕色固体，80mg，粗品)。
步骤F：N-(1-环己基-3-氨磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在室温下，向4-(6-(1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1-环己基-1H-吡唑-3-磺酰氯(80mg，粗品)的四氢呋喃(1.0ml)溶液中加入氨水(0.5mL)。反应液在室温条件下反应十分钟。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(棕色固体，19.0mg，产率25％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.19(s,1H),11.24(s,1H),8.52(s,1H),8.21(d,J＝7.8Hz,1H),8.10(t,J＝7.7Hz,1H),8.03(d,J＝7.7Hz,1H),7.92(s,1H),7.78(s,2H),7.19(d,J＝2.0Hz,1H),4.37-4.25(m,1H),2.05(d,J＝12.3Hz,2H),1.86-1.64(m,5H),1.42(q,J＝12.8Hz,2H),1.24(dd,J＝8.8,3.6Hz,1H).LCMS(ESI):m/z 416[M+H]+.
制备例136.化合物A261的合成
步骤A：6-(1H-咪唑-1-基)吡啶甲酸乙酯
在室温下，向6-溴吡啶-2-甲酸乙酯(2.50g，10.86mol，1.0当量)和咪唑(1.11g，16.30mmol，1.5当量)的二甲基亚砜(25.0mL)溶液中加入碘化亚铜(0.62g，3.26mmol，0.3当量)、 L-脯氨酸(0.50g，4.34mmol，0.4当量)和碳酸钾(3.00g，21.73mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下100℃条件反应16小时。反应完全后，反应液降至室温后倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色油状，1.4g，产率59.3％)。
步骤B：6-(1H-咪唑-1-基)吡啶甲酸
在室温下，向6-(1H-咪唑-1-基)吡啶甲酸乙酯(1.40g，6.44mmol，1.0当量)的四氢呋喃(20.0mL)和甲醇(10.0mL)的混合溶液中加入氢氧化锂(0.23g，9.66mmol，1.5当量)。反应液在室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液用2N稀盐酸调节pH至6，反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状，1.0g，粗品)。
步骤C：3-溴-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑
在室温下，向3-溴-4-硝基-1H-吡唑(2.50g，13.02mol，1.0当量)和苯基硼酸(3.18g，26.04mmol，2.0当量)的二氯甲烷(50.0mL)溶液中加入醋酸铜(3.53g，19.53mmol，1.5当量)和吡啶(2.10mL，26.04mmol，2.0当量)。反应液在氧气保护下室温条件反应48小时。反应完全后，反应液过滤后减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(白色固体，2.8g，产率80.2％)。
步骤D：3-(苄硫基)-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑
在室温下，向3-溴-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑(1.0g，3.73mol，1.0当量)和苄硫醇(0.69g，5.59mmol，1.5当量)的1,4-二氧六环(30.0mL)溶液中加入Xantphos(0.22g，0.37mmol，0.1当量)、Pd2(dba)3(0.17g，0.18mmol，0.05当量)和DIEA(0.96g，7.46mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下100℃条件反应16小时。反应完全后，反应液降至室温后减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(橙色固体，1.1g，产率94.7％)。
步骤E：3-(苄硫基)-1-苯基-1H-吡唑-4-胺
在室温下，向3-(苄硫基)-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑(500mg，1.60mol，1.0当量)的乙醇(30.0mL)和水(2.0mL)的混合溶液中加入铁粉(448.36mg，8.03mmol，5.0当量)和氯化铵(858.97mg，16.06mmol，10.0当量)。反应液在80℃条件下反应3小时。反应完全后，反应液降至室温后过滤，滤液减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(棕色固体，300mg，产率66.4％)。
步骤F：N-(3-(苄硫基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-咪唑-1-基)吡啶酰胺
在室温下，向3-(苄硫基)-1-苯基-1H-吡唑-4-胺(300mg，1.06mmol，1.0当量)和6-(1H-咪唑-1-基)吡啶甲酸(125mg，粗品)的N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)溶液中加入DIEA(551.21 mg，4.26mmol，2.0当量)和HATU(486.48mg，1.28mmol，1.2当量)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(灰色固体，470mg，产率97.4％)。
步骤G：4-(6-(1H-咪唑-1-基)吡啶甲酰胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-磺酰氯
在0℃下，向N-(3-(苄硫基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-咪唑-1-基)吡啶酰胺(120mg，0.27mmol，1.0当量)中加入醋酸(1.0mL)。后在冰浴条件下加入水(0.1mL)和N-氯代丁二酰亚胺(141.63mg，1.06mmol，4.0当量)。反应液在0℃条件下反应1小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品标题化合物(灰色固体，110mg，粗品)。
步骤H：6-(1H-咪唑-1-基)-N-(1-苯基-3-氨磺酰基-1H-吡唑-4-基)吡啶酰胺
在0℃下，向4-(6-(1H-咪唑-1-基)吡啶甲酰胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-磺酰氯(110mg，粗品)的四氢呋喃(1.0mL)中加入氨的甲醇溶液(0.29mL，7M的甲醇溶液，8.0当量)。反应液在0℃条件下反应2小时。反应完全后，反应液减压浓缩.残余物经HPLC得到标题化合物(灰白色固体，38.0mg，产率35.7％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.08(s,1H),9.08(s,1H),8.78(s,1H),8.31(t,J＝7.8Hz,1H),8.18(d,J＝9.0Hz,2H),8.14-8.04(m,3H),7.93(d,J＝7.9Hz,2H),7.59(t,J＝7.8Hz,2H),7.44(t,J＝7.3Hz,1H),7.25(s,1H).LCMS(ESI):m/z410(M+H)+.
制备例137.化合物A262的合成
步骤A：N-((3-甲氧基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)甲基)-6-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡嗪-4-基)吡啶酰胺
在0℃下，向(3-甲氧基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)甲胺(50mg，0.2mmol，1.5当量)和6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶甲酸(100mg，0.4mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)溶液中加入DIEA(95mg，0.7mmol，3.0当量)和HATU(140mg，0.4mmol，1.2当量)。反应液在室温条件下反应2小时。反应完全后，反应液倒入水中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，50mg，产率44.3％)。
步骤B：N-(3-甲氧基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-4-酰基)吡啶酰胺
在室温下，向N-((3-甲氧基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)甲基)-6-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡嗪-4-基)吡啶酰胺(200mg，0.4mmol，1.0当量)的甲醇(3.0mL)溶液中加入对甲苯磺酸(50mg，0.3mmol，1.2当量)。反应液氮气保护下室温条件反应1小时。反应完全后，反应液过滤，滤液减压浓缩。残余物经HPLC得到标题化合物(黄色固体，50.0mg，产率47.8％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.62(d,J＝343.7Hz,1H),10.23(d,J＝212.0Hz,1H),8.69(s,1H),8.05(t,J＝13.9Hz,3H),7.74(t,J＝28.8Hz,3H),7.48(t,J＝8.0Hz,2H),7.24(t,J＝7.4Hz,2H),4.03(s,3H).LC/MS(ESI)m/z:361[M+H]+.
制备例138.化合物A263的合成
步骤A：1-环己基-3-甲氧基-4-硝基-1H-吡唑
在室温下，向3-甲氧基-4-硝基-1H-吡唑(150mg，1.0mmol，1.0当量)和碘代环己烷(440mg，2.1mmol，2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(25.0mL)溶液中加入碳酸钾(434mg，3.1mmol，3当量)。反应液80℃条件下反应12小时。反应完全后，反应液降至室温后倒入冰水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(棕色固体，150mg，产率63.5％)。
步骤B：1-环己基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-胺
在室温下，向1-环己基-3-甲氧基-4-硝基-1H-吡唑(150mg，0.6mmol，1.0当量)的甲醇(10.0mL)溶液中加入钯碳(21mg，10％，0.2当量)。反应液在氢气条件下置换三次后室温条件反应16小时。反应完全后，反应液过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物(黄色油状，100mg，产率76.9％)。
步骤C：N-(1-环己基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-基)-6-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡嗪-5-基)吡啶酰胺
在室温下，向1-环己基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-胺(60mg，0.3mmol，1.0当量)和6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酸(84mg，0.3mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)溶液中加入DIEA(119mg，0.9mmol，3.0当量)和HATU(175mg，0.45mmol，1.5当量)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃 取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(白色固体，100mg，产率72.2％)。
步骤D：N-(1-环己基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在室温下，向N-(1-环己基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-基)-6-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡嗪-5-基)吡啶酰胺(60mg，0.1mmol，1.0当量)的甲醇(10.0mL)溶液中加入对甲苯磺酸(60mg，0.3mmol，3当量)。反应液室温条件下反应16小时。反应完全后减压浓缩。残余物经HPLC得到标题化合物(黄色固体，15.0mg，产率30.7％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.58(d,J＝329.4Hz,1H),10.01(d,J＝209.9Hz,1H),8.20-8.01(m,2H),7.98(d,J＝7.4Hz,1H),7.96-7.59(m,2H),7.08(d,J＝39.5Hz,1H),4.03-3.91(m,1H),3.87(d,J＝8.4Hz,3H),2.00(d,J＝12.0Hz,2H),1.81(d,J＝13.0Hz,2H),1.74-1.59(m,3H),1.39(q,J＝12.9Hz,2H),1.30-1.16(m,1H).LC/MS(ESI)m/z:367[M+H]+.
制备例139.化合物A264的合成
步骤A：4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸(200mg，0.9mmol，1.0当量)和氯化铵(55mg，1.1mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(4.0mL)溶液中加入DIEA(332mg，2.5mmol，3.0当量)和HATU(489mg，1.3mmol，1.2当量)。反应液在室温条件下反应2小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，150mg，产率75.3％)。
步骤B：4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(150mg，0.7mmol，1.0当量)的甲醇(8.0mL)溶液中加入钯碳(80mg，0.8mmol，10％纯度，1.1当量)。反应液在氢气条件下置换三次后，室温条件反应1小时。反应完全后，反应液过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，100mg，产率76.5％)。
步骤C：N-(3-氨基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1,1-二氟乙基)吡啶酰胺
在室温下，向4-氨基-N-环丙基-1-苯基吡唑-3-甲酰胺(97mg，0.4mmol，1.5当量)和6-(1,1-二氟乙基)吡啶-2-甲酸(50mg，0.3mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)溶液中加入DIEA(104mg，0.8mmol，3.0当量)和HATU(122mg，0.3mmol，1.2当量)。反应液在室温条件下反应2小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合 有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经prep-HPLC得到标题化合物(白色固体，50mg，产率45.5％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.98(s,1H),9.01(s,1H),8.30(dd,J＝8.0,5.5Hz,2H),8.12-7.95(m,4H),7.85(s,1H),7.56(t,J＝8.0Hz,2H),7.40(t,J＝7.4Hz,1H),2.23(t,J＝19.3Hz,3H).
制备例140.化合物A265的合成
步骤A：N-环丙基-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在0℃下，向4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酸(150mg，0.7mmol，1.0当量)和环丙胺(55mg，1.0mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入DIEA(249mg，1.9mmol3.0当量)和HATU(367mg，1.0mmol，1.5当量)。反应液在室温条件下反应2小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(棕色固体，100mg，产率57.1％)。
步骤B：4-氨基-N-环丙基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在0℃下，向N-环丙基-4-硝基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(100mg，0.4mmol，1.0当量)的甲醇(4.0mL)溶液中加入钯碳(60mg，0.6mmol，10％,1.2当量)。反应液在氢气条件下置换三次后室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物(白色固体，50mg，产率56.2％)。
步骤C：2-溴-6-(1,1-二氟乙基)吡啶
在0℃下，向1-(6-溴吡啶-2-基)乙烷-1-酮(2.0g，10.0mmol，1.0当量)的二氯甲烷(25.0mL)溶液中加入双(2-甲氧基乙基)氨基三氟化硫(18.4mL，100.0mmol，10.0.当量)。反应液在氮气条件下置换三次后室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠水溶液中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(无色油状，1.5g，产率67％)。
步骤D：6-(1,1-二氟乙基)吡啶甲酸甲酯
在0℃下，向2-溴-6-(1,1-二氟乙基)吡啶(1.5g，6.8mmol，1.0当量)的甲醇(25.0mL)溶液中加入Pd(dppf)Cl2(490mg，0.7mmol，0.1当量)和三乙胺(1.9mL，13.5mmol，2.0 当量)。反应液在一氧化碳保护下80℃条件反应16小时。反应完全后，反应液降至室温后减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(无色油状，150mg，产率11％)。
步骤E：6-(1,1-二氟乙基)吡啶甲酸
在室温下，向6-(1,1-二氟乙基)吡啶甲酸甲酯(150mg，0.7mmol，1.0当量)的四氢呋喃(4.0mL)和水(1.0mL)的混合溶液中加入氢氧化锂(36mg，1.5mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应2小时。反应完全后，反应液用1N稀盐酸调节pH至4-5，混合液减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，140mg，粗品)。
步骤F：N-(3-(环丙基氨基甲酰基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1,1-二氟乙基)吡啶酰胺
在0℃下，向4-氨基-N-环丙基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(97mg，0.4mmol 1.5当量)和6-(1,1-二氟乙基)吡啶甲酸(50mg，粗品)的N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)溶液中加入DIEA(104mg，0.8mmol 3.0当量)和HATU(122mg，0.3mmol，1.5当量)。反应液在室温条件下反应2小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC得到标题化合物(白色固体，50.0mg，产率45.5％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.82(s,1H),9.03(s,1H),8.60(d,J＝4.8Hz,1H),8.34-8.27(m,2H),8.07-7.98(m,3H),7.56(t,J＝8.0Hz,2H),7.40(t,J＝7.4Hz,1H),3.05-2.93(m,1H),2.25(t,J＝19.3Hz,3H),0.79-0.65(m,4H).LCMS(ESI):m/z 412[M+H]+.
制备例141.化合物A266的合成
步骤A：3-氰基-N-(1-环己基-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺
在室温下，向1-环己基-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-胺(80.0mg，0.4mmol，1.0当量)和3-氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酸(76.5mg，0.4mmol，1.1当量)的DMF(2mL)溶液中加入HATU(211.9mg，0.6mmol，1.5当量)和TEA(75.1mg，0.7mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液倒入20mL水中，用乙酸乙酯萃取三次，每次20mL，有机相合并，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化,再经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，82.1mg，产率57％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.90(s,1H),8.99(d,J＝2.1Hz,1H),8.85(d,J＝2.2Hz,1H),8.41(s,1H),7.75(d,J＝4.8Hz,1H),7.38-7.02(m,2H),4.31-4.17(m,1H),2.08-1.96(m,2H),1.90-1.57(m,5H),1.48-1.33(m,2H),1.24(tt,J＝12.7,3.5Hz,1H).LC-MS(ESI): m/z 385[M+H]+.
制备例142.化合物A267的合成
步骤A：N-(1-环己基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-基)-3-异氰基吡咯[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺
将1-环己基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-胺(55.0mg，0.28mmol，1.0当量)溶解在无水DMF(2mL)中，加入DIEA(108.4mg，0.84mmol，3.0当量)。将HATU(159.6mg，0.42mmol，1.5当量)和3-氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酸(67.5mg，0.36mmol，1.2当量)溶解在无水DMF(2mL)中。分别将这两种混合物在氮气保护下搅拌30分钟，然后将两份混合物混合，并将反应液在室温下在氮气保护下搅拌16小时。用水(20mL)稀释反应液，并用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过HPLC纯化，得到N-(1-环己基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-基)-3-异氰基吡咯并[1,2-b]哒嗪-7-甲酰胺(55.7mg，产率54.7％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.23(s,1H),8.96(d,J＝2.1Hz,1H),8.88(d,J＝2.1Hz,1H),8.02(s,1H),7.70(d,J＝4.8Hz,1H),7.09(d,J＝4.8Hz,1H),4.00-3.93(m,1H),3.91(s,3H),1.99(d,J＝10.3Hz,2H),1.80(d,J＝13.3Hz,2H),1.72-1.61(m,3H),1.45-1.33(m,2H),1.27-1.18(m,1H).LC-MS(ESI):m/z 365[M+H]+.
制备例143.化合物A268的合成
步骤A：3-溴-N-(1-环丁基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在室温下，向4-氨基-1-环丁基-N-环丙基-1H-吡唑-3-甲酰胺(160mg，0.7mmol，1.0当量)和3-溴吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酸(175mg，0.7mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(20.0ml)溶液中加入HATU(552mg，1.4mmol，2.0当量)和DIEA(468mg，3.6mmol，5.0当量)。反应液在室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠水溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，240mg，产率74％)。
步骤B：N-(1-环丁基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)-3-(1-(四氢-2H-吡唑-2- 基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在室温下，向3-溴-N-(1-环丁基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺(240mg，0.5mmol，1.0当量)和1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡唑(300mg，1.1mmol，2.0当量)的1,4-二氧六环(20.0ml)和水(4mL)溶液中加入Pd(dppf)Cl2(39mg，0.1mmol，0.1当量)和碳酸铯(528mg，1.6mmol，3.0当量)。反应液在90℃条件下反应48小时。反应完全后，反应液降至室温后减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色油状，66mg，产率24％)。
步骤C：N-(1-环丁基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)-3-(1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在室温下，向N-(1-环丁基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)-3-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺(66mg，0.1mmol，1.0当量)的甲醇(10.0ml)溶液中加入4-甲基苯磺酸(66mg，0.4mmol，4.0当量)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠溶液中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色油状，54.5mg，产率98％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.36-12.74(m,1H),12.07(s,1H),9.36(d,J＝7.2Hz,1H),8.77(s,1H),8.48(d,J＝4.7Hz,2H),7.78(s,1H),7.68-7.57(m,2H),5.03-4.91(m,1H),3.06-2.97(m,1H),2.64-2.53(m,2H),2.47-2.39(m,2H),1.88-1.78(m,2H),0.80-0.72(m,4H).LCMS(ESI):m/z 432[M+H]+.
制备例144.化合物A269的合成
步骤A：1-环己基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(7g，40.9mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)溶液中加入碘代环己烷(17.2g，81.8mmol，2.0当量)和碳酸铯(26.7g，81.8mmol，2.0当量)。反应液在90℃条件下反应16小时。反应完全后，反应液降至室温后倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色油状，2.04g，产率19％)。
步骤B：1-环己基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸
在室温下，向1-环己基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(670mg，2.6mmol，1.0当量)的四氢呋喃(15.0mL)和水(3.0mL)的混合溶液中加入氢氧化锂(222mg，5.2mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液用1N稀盐酸调节pH至4-5后减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，620mg，粗品)。
步骤C：1-环己基-N-环丙基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向1-环己基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸(620mg，粗品)和环丙胺(222mg，3.9mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(15.0mL)溶液中加入DIEA(1.4mL，7.8mmol，3.0当量)和HATU(1.9g，5.2mmol，1.0当量)。反应液在室温条件下反应4小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(无色油状，700mg，产率97％)。
步骤D：4-氨基-1-环己基-N-环丙基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向1-环己基-N-环丙基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酰胺(700mg，2.5mmol，1.0当量)的甲醇(50.0mL)溶液中加入钯碳(70mg，10％)。反应液在氢气条件下置换三次后室温条件反应16小时。反应完全后，反应液过滤后，滤液旋干得到粗品标题化合物(棕色油状，560mg，粗品)。
步骤E：N-(1-环己基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)-3-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在室温下，向4-氨基-1-环己基-N-环丙基-1H-吡唑-3-甲酰胺(60mg，粗品)和3-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酸(91mg，0.3mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)溶液中加入DIEA(94mg，0.7mmol，3.0当量)和HATU(184mg，0.5mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应3小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色油状，70mg，产率53％)。
步骤F：N-(1-环己基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)-3-(1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在室温下，向N-(1-环己基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)-3-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺(70mg，0.1mmol，1.0当量)的二氯甲烷(4.0mL)溶液中加入盐酸/二氧六环(2mL，4M)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，21mg，产率35％)。 1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.07(d,J＝143.2Hz,1H),12.08(d,J＝27.4Hz,1H),9.36(dd,J＝17.4,7.0Hz,1H),8.78(d,J＝41.3Hz,1H),8.45-8.35(m,2H),7.84(s,0.6H),7.71-7.58(m,2H),7.53(s,0.3H),4.30-4.21(m,1H),3.04-2.96(m,1H),2.10-2.02(m,2H),1.88-1.75(m,4H),1.72-1.64(m,1H),1.47-1.35(m,2H),1.30-1.19(m,1H),0.79-0.69(m,4H).LCMS(ESI):m/z 460[M+H]+.
制备例145.化合物A270的合成
步骤A：4-(3-(甲氧羰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(1g，5.8mmol，1.0当量)和4-碘哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.7g，8.8mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(25.0mL)溶液中加入碳酸铯(3.8g，11.7mmol，2.0当量)。反应液90℃条件下反应3小时。反应完全后，反应液降至室温后倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(无色油状，350mg，产率17％)。
步骤B：1-(1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-基)-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸
在室温下，向4-(3-(甲氧羰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(350mg，1.0mmol，1.0当量)的四氢呋喃(15.0mL)和水(3.0mL)的混合溶液中加入氢氧化锂(47mg，2.0mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应3小时。反应完全后，反应液用1N稀盐酸调节pH至6-7后减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，340mg，粗品)。
步骤C：4-(3-(环丙基氨基甲酰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向1-(1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-基)-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸(340mg，粗品)和环丙胺(114mg，2.0mmol，2.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(15.0mL)溶液中加入DIEA(0.9mL，5.0mmol，5.0当量)和HATU(760mg，2.0mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色油状，370mg，产率98％)。
步骤D：4-(4-氨基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(3-(环丙基氨基甲酰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(370mg，0.9mmol，1.0当量)的甲醇(50.0mL)溶液中加入钯碳(40mg，10％)。反应液在氢气条件下置换三次后室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物(棕色油状，320mg，粗品)。
步骤E：4-(4-(3-溴吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺基)-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(4-氨基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(120mg，粗品)和3-溴吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酸(99mg，0.4mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)溶液中加入DIEA(0.2mL，1.0mmol，3.0当量)和HATU(260mg，0.6mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，50mg，产率25％)。
步骤F：4-(3-(环丙基氨基甲酰基)-4-(3-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺基)-1H吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(4-(3-溴吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺基)-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(50mg，0.1mmol，1.0当量)和1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡唑(48mg，0.2mmol，2.0当量)的1,4-二氧六环(10.0mL)和水(3.0mL)溶液中加入Pd(dppf)Cl2(6mg，0.01mmol，0.1当量)和碳酸铯(85mg，0.3mmol，3.0当量)。反应液在90℃条件下反应48小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，40mg，产率71％)。
步骤G：N-(3-(环丙基氨基甲酰基)-1-(哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)-3-(1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在室温下，向4-(3-(环丙基氨基甲酰基)-4-(3-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺基)-1H吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(50mg，0.1mmol，1.0当量)的二氯甲烷(4.0mL)溶液中加入盐酸/二氧六环(2mL，4M)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，20.8mg，产率58％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.07(d,J＝142.5Hz,1H),12.06(s,1H),9.36(d,J＝7.2Hz,1H),8.75(s,1H),8.42(s,2H),7.74(d,J＝75.4Hz,3H),4.40-4.26(m,1H),3.11-3.04(m,2H),3.03-2.97(m,1H),2.67-2.54(m,2H),2.03-1.96(m,2H),1.92-1.81(m, 2H),0.81-0.70(m,4H).LCMS(ESI):m/z 461[M+H]+.
制备例146.化合物A271的合成
步骤A：N-(1-环丁基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)-3-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡啶-4-基吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在室温下，向3-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酸(100mg，0.32mmol，1.0当量)和4-氨基-1-环丁基-N-环丙基-1H-吡唑-3-甲酰胺(71mg，0.32mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入TEA(0.13mL，0.96mmol，3.0当量)和HATU(242mg，0.64mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液倒入氯化钠溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，125mg，产率76％)。
步骤B：N-(1-环丁基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)-3-(1H-吡唑-4-基吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在室温下，向N-(1-环丁基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)-3-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡啶-4-基吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺(125mg，0.24mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5.0mL)溶液中加入盐酸/二氧六环(5mL，4M)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，25mg，产率23.9％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.05(s,1H),12.12(s,1H),9.28(d,J＝7.2Hz,1H),8.76(s,2H),8.46(d,J＝4.9Hz,2H),8.29(s,1H),7.59(d,J＝7.2Hz,1H),4.96(t,J＝8.3Hz,1H),3.22(td,J＝7.1,3.0Hz,1H),2.67-2.53(m,2H),2.46-2.38(m,2H),1.82(qd,J＝10.3,7.0Hz,2H),0.81-0.70(m,4H).LCMS(ESI)m/z:432[M+H]+.
制备例147.化合物A272的合成
步骤A：吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酸乙酯
在室温下，向7-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酸乙酯(600mg，2.7mmol，1.0当量)的甲醇(6.0mL)溶液中加入钯碳(300mg，2.8mmol，10％纯度，0.2当量)。反应液在氢气条件下置换三次后，室温条件反应2小时。反应完全后，反应液过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物(黄色油状，460mg，产率90％)。
步骤B：3-溴吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酸乙酯
在室温下，向吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酸乙酯(500mg，2.6mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5.0mL)溶液中加入NBS(1.4g，7.8mmol，3.0当量)。反应液在室温条件下反应2小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，600mg，产率85％)。
步骤C：3-溴吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酸
在室温下，向3-溴吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酸乙酯(500mg，1.8mmol，1.0当量)的甲醇(3.0mL)、四氢呋喃(3.0mL)和水(3.0mL)混合溶液中加入氢氧化锂(133mg，5.6mmol，3.0当量)。反应液在室温条件下反应2小时。反应完全后，反应液用1N稀盐酸调节pH到4-5，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到标题化合物(白色固体，300mg，产率67％)。
步骤D：3-溴-N-(1-环丁基-4-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡咯-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在室温下，向3-溴吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酸(300mg，1.2mmol，1.0当量)和4-氨基-1-环丁基-N-环丙基-1H-吡咯-3-甲酰胺(326mg，1.5mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入DIEA(480mg，3.7mmol，3.0当量)和HATU(707mg，1.8mmol，1.2当量)。反应液在室温条件下反应2小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，400mg，产率73％)。
步骤E：N-(1-环丁基-4-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡咯-3-基)-3-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在室温下，向3-溴-N-(1-环丁基-4-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡咯-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺((200mg，0.4mmol，1.0当量)和1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡唑(188mg，0.7mmol，1.5当量)的四氢呋喃(5.0mL)和水(1.0mL)混合溶液中加入Pd(dppf)Cl2(33mg，0.04mmol，0.1当量)和碳酸钾(187mg，1.3mmol， 3.0当量)。反应液在80℃条件下反应16小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经柱纯化后得到标题化合物(黄色固体，180.0mg，产率78％)。
步骤F：N-(1-环丁基-4-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡咯-3-基)-3-(1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在室温下，向N-(1-环丁基-4-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡咯-3-基)-3-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺(100mg，0.2mmol，1.0当量)的甲醇(4.0mL)溶液中加入对甲苯磺酸(50mg，0.3mmol，1.2当量)。反应液氮气保护下室温条件反应1小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠水溶液中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC得到标题化合物(白色固体，50mg，产率60％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.98(s,1H),9.32(d,J＝7.2Hz,1H),8.41(d,J＝2.4Hz,1H),8.04(d,J＝3.7Hz,1H),7.61(dd,J＝25.8,10.9Hz,4H),7.02(d,J＝1.7Hz,1H),4.74-4.54(m,1H),2.82(td,J＝7.2,3.7Hz,1H),2.47-2.35(m,3H),2.29(ddd,J＝11.8,9.5,2.7Hz,3H),1.87-1.71(m,3H),0.78-0.66(m,2H),0.59-0.48(m,2H).
制备例148.化合物A273的合成
步骤A:N-(1-环丁基-4-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡咯-3-基)-3-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在室温下，向3-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酸(200mg，0.6mmol，1.0当量)和4-氨基-1-环丁基-N-环丙基-1H-吡咯-3-甲酰胺(155mg，0.7mmol，1.1当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入DIEA(247mg，1.9mmol，3当量)和HATU(485mg，1.3mmol，2当量)。反应液在氮气保护下室温反应16小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色油状，275mg，产率83.5％)。
步骤B：N-(1-环丁基-4-(环丙基甲酰氨基)-1H-吡咯-3-基)-3-(1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在室温下，向N-(1-环丁基-4-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡咯-3-基)-3-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺(275mg，0.54mmol，1.0当量)的四氢呋喃(5.0mL)溶液中加入氯化氢-二氧六环(1.0mL)溶液。反应液在氮气保护下常温反应4小时。反 应完全后，反应液降至室温后减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，13mg，产率5.65％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.59(s,1H),9.26(d,J＝7.2Hz,1H),8.74(s,1H),8.60(s,2H),8.08(d,J＝4.7Hz,1H),7.58(d,J＝7.2Hz,2H),7.54(d,J＝2.1Hz,1H),4.67-4.61(m,1H),2.47-2.42(m,2H),2.29(dd,J＝15.4,6.1Hz,2H),1.79(dd,J＝11.4,3.8Hz,2H),1.46(s,1H),0.86(t,J＝6.8Hz,1H),0.81-0.77(m,2H),0.55(dd,J＝7.2,3.5Hz,2H).
制备例149.化合物A274的合成
步骤A：3-(1-(叔丁氧基羰基)-1H-吡咯-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酸乙酯
在室温下，向3-溴吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酸乙酯(400mg，1.5mmol，1.0当量)和2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(521mg，1.8mmol，1.5当量)的四氢呋喃(5.0mL)和水(1.0mL)混合溶液中加入Pd(dppf)Cl2(108mg，0.1mmol，0.1当量)和磷酸钾(943mg，4.4mmol，3.0当量)。反应液在80℃条件下反应16小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，400.0mg，产率76％)。
步骤B：3-(1-(叔丁氧基羰基)-1H-吡咯-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酸
在室温下，向3-(1-(叔丁氧基羰基)-1H-吡咯-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酸乙酯(400mg，1.1mmol，1.0当量)的甲醇(5.0mL)、四氢呋喃(5.0mL)和水(5.0mL)混合溶液中加入氢氧化锂(80mg，3.4mmol，3.0当量)。反应液在室温条件下反应2小时。反应完全后，反应液减压浓缩后倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用稀盐酸洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到标题化合物(红色固体，300mg，产率82％)。
步骤C：N-(1-环丁基-4-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡咯-3-基)-3-(1H-吡咯-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在室温下，向3-(1-(叔丁氧基羰基)-1H-吡咯-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酸(100mg，0.3mmol，1.0当量)和4-氨基-1-环丁基-N-环丙基-1H-吡咯-3-甲酰胺(67mg，0.3mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入DIEA(39mg，0.3mmol，3.0当量)和HATU(115mg，0.3mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应2小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减 压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(红色固体，60mg，产率46％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.72(s,1H),11.00(s,1H),9.27(d,J＝7.2Hz,1H),8.71(s,1H),8.24(d,J＝3.7Hz,1H),7.72-7.40(m,3H),7.02(s,1H),6.94(s,1H),6.20(dd,J＝5.7,2.5Hz,1H),4.66(p,J＝8.2Hz,1H),2.94(dt,J＝10.9,3.7Hz,1H),2.43(dd,J＝9.6,6.8Hz,2H),2.37-2.24(m,2H),1.80(ddd,J＝14.4,10.9,8.0Hz,2H),0.87-0.75(m,2H),0.64-0.54(m,2H).
制备例150.化合物A275的合成
步骤A：环丁基甘氨酸叔丁酯
在室温下，向2-溴乙酸叔丁酯(10.0g，0.05mol，1.0当量)的乙腈(50.0mL)溶液中加入环丁胺(3.7g，0.05mol，1.0当量)和三乙胺(15.7g，0.15mol，3.0当量)。反应液在室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液减压浓缩后倒入水中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到标题化合物(棕色油状，7.0g，产率72.9％)。
步骤B：(E)-3-((2-(叔丁氧基)-2-氧乙基)(环丁基)氨基)-2-氰基丙烯酸乙酯
在室温下，向环丁基甘氨酸叔丁酯(7.0g，0.04mol，1.0当量)的甲苯(30.0mL)溶液中加入(E)-2-氰基-3-乙氧基丙烯酸乙酯(7.7g，0.04mol，1.0当量)和三乙胺(11.5g，0.15mol，2.75当量)。反应液在110℃条件下反应16小时。反应完全后，反应液减压浓缩后倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(棕色油状，10.2g，产率87.6％)。
步骤C.2-(叔丁基)4-乙基3-氨基-1-环丁基-1H-吡咯-2,4-二甲酸酯
在0℃下，向(E)-3-((2-(叔丁氧基)-2-氧乙基)(环丁基)氨基)-2-氰基丙烯酸乙酯(10.2g，0.03mol，1.0当量)的四氢呋喃(20.0mL)溶液中加入氢化钠(5.2g，0.13mol，60％纯度，4.3当量)。反应液在室温条件下反应半小时。反应完全后，反应液倒入氯化铵溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(棕色油状，7.2g，产率70.5％)。
步骤D.4-氨基-1-环丁基-1H-吡咯-3-甲酸乙酯
在室温下，向2-(叔丁基)4-乙基3-氨基-1-环丁基-1H-吡咯-2,4-二甲酸酯(7.2g，0.02mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5.0mL)溶液中加入三氟乙酸(5.0mL)。反应液在室温条件下反应2小时。反应完全后，反应液减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，4.6g，产率95.8％)。
步骤E.4-((叔丁氧羰基)氨基)-1-环丁基-1H-吡咯-3-甲酸乙酯
在室温下，向4-氨基-1-环丁基-1H-吡咯-3-甲酸乙酯(4.6g，0.22mmol，1.0当量)的二氯甲烷(20.0mL)溶液中加入二碳酸二叔丁酯(4.8g，0.22mmol，1.0当量)。反应液在室温条件下反应12小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(白色固体，6.5g，产率95.6％)。
步骤F.4-((叔丁氧羰基)氨基)-1-环丁基-1H-吡咯-3-甲酸
在室温下，向4-((叔丁氧羰基)氨基)-1-环丁基-1H-吡咯-3-甲酸乙酯(6.5g，0.02mmol，1.0当量)的甲醇(20.0mL)和水(20.0mL)混合溶液中加入氢氧化锂(5.0g，0.21mmol，10.0当量)。反应液在40℃条件下反应8小时。反应完全后，反应液减压浓缩后倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用稀盐酸洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到标题化合物(白色固体，5.4g，产率91.5％)。
步骤G.(1-环丁基-4-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡咯-3-基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向4-((叔丁氧羰基)氨基)-1-环丁基-1H-吡咯-3-甲酸(5.4g，0.02mmol，1.0当量)和环丙胺(2.2g，0.04mol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(20.0mL)溶液中加入DIEA(7.5g，0.06mmol，3.0当量)和HATU(14.7g，0.04mmol，2.0当量)。反应液在30℃条件下反应1小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到标题化合物(黄色油状，5.5g，产率89.4％)。
步骤H.4-氨基-1-环丁基-N-环丙基-1H-吡咯-3-甲酰胺
在室温下，向(1-环丁基-4-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡咯-3-基)氨基甲酸叔丁酯(5.5g，0.02mmol，1.0当量)的二氯甲烷(20.0mL)溶液中加入盐酸/二氧六环(5.0mL)。反应液在30℃条件下反应1小时。反应完全后，反应液减压浓缩后得到粗品标题化合物(白色油状，5.0g，粗品)。
步骤I：3-(1H-吡咯-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酸乙酯
在室温下，向3-溴吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酸乙酯(100mg，0.4mmol，1.0当量)和3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡咯(107mg，0.6mmol，1.5当量)的1,4-二氧六环(20.0mL)和水(4.0mL)混合溶液中加入Pd(dppf)Cl2(27mg，0.03mmol，0.1当量)和碳 酸钠((117mg，1.1mmol，3.0当量)。反应液在80℃条件下反应2小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经柱纯化后得到标题化合物(红色固体，75.0mg，产率79％)。
步骤J：3-(1H-吡咯-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酸
在室温下，向3-(1H-吡咯-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酸乙酯(75mg，0.3mmol，1.0当量)的甲醇(20.0mL)和水(10.0mL)混合溶液中加入氢氧化钠(23mg，0.6mmol，10.0当量)。反应液在室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液用1N稀盐酸调节pH到4-5，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，66mg，产率98％)。
步骤K：N-(1-环丁基-4-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡咯-3-基)-3-(1H-吡咯-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在室温下，向3-(1H-吡咯-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酸(70mg，0.3mmol，1.0当量)和4-氨基-1-环丁基-N-环丙基-1H-吡咯-3-甲酰胺(67mg，0.3mol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入DIEA(198mg，1.5mmol，5.0当量)和HATU(233mg，0.6mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(红色固体，24.5mg，产率19％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.44(s,1H),10.83(s,1H),9.19(d,J＝7.2Hz,1H),8.61(s,1H),8.04(d,J＝4.4Hz,1H),7.98-7.92(m,1H),7.59-7.50(m,3H),6.94-6.87(m,1H),6.85-6.81(m,1H),4.70-4.59(m,1H),3.12-3.04(m,1H),2.48-2.40(m,2H),2.35-2.25(m,2H),1.85-1.74(m,2H),0.82-0.74(m,2H),0.60-0.52(m,2H).LCMS(ESI):m/z 430[M+H]+.
制备例151.化合物A276的合成
步骤A：1-环丁基-3-甲氧基-4-硝基-1H-吡唑
在室温下，向3-甲氧基-4-硝基-1H-吡唑(500mg，3.4mmol，1.0当量)和溴环丁烷(465mg，3.4mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入碳酸钾(1.4g，10.2mmol，3.0当量)。反应液80℃条件下反应3小时。反应完全后，反应液降至室温后倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残 余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，0.5g，产率72.0％)。
步骤B：1-环丁基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-胺
在室温下，向1-环丁基-3-甲氧基-4-硝基-1H-吡唑(500mg，2.5mol，1.0当量)的乙醇(5.0mL)和水(1.0mL)的混合溶液中加入铁粉(1.4g，25.0mmol，10.0当量)和氯化铵(1.3g，25.0mmol，10.0当量)。反应液在80℃条件下反应3小时。反应完全后，反应液降至室温后过滤，滤液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，350mg，产率82.0％)。
步骤C：N-(1-环丁基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-基)-3-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡嗪-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在室温下，向1-环丁基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-胺(50mg，0.3mmol，1.0当量)和3-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酸(103mg，0.3mmol，1.1当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入DIEA(116mg，0.9mmol，3.0当量)和HATU(170mg，0.45mmol，1.5当量)。反应液在室温条件下反应3小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，70mg，产率50.0％)。
步骤D：N-(1-环丁基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-基)-3-(1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在室温下，向N-(1-环丁基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-基)-3-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡嗪-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺(70mg，0.15mmol，1.0当量)的乙腈(5.0mL)溶液中加入盐酸/二氧六环(2mL，4M二氧六环溶液)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，15.0mg，产率26％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.16(d,J＝194.0Hz,1H),10.19(d,J＝333.3Hz,1H),9.32(d,J＝7.1Hz,1H),8.76(d,J＝45.6Hz,1H),8.00(s,1H),7.75(d,J＝97.7Hz,2H),7.02(d,J＝133.0Hz,1H),4.70(p,J＝8.3Hz,1H),3.91(s,3H),2.49-2.39(m,2H),2.39-2.31(m,2H),1.83-1.70(m,2H).LCMS(ESI):m/z 379[M+H]+.
制备例152.化合物A277的合成
步骤A：1-环丁基-3-甲氧基-4-硝基-1H-吡唑
在室温下，向3-甲氧基-4-硝基-1H-吡唑(500mg，3.4mmol，1.0当量)和溴环丁烷(465mg，3.4mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入碳酸钾(1.4g，10.2mmol，3.0当量)。反应液80℃条件下反应3小时。反应完全后，反应液降至室温后倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，0.5g，产率72.0％)。
步骤B：1-环丁基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-胺
在室温下，向1-环丁基-3-甲氧基-4-硝基-1H-吡唑(500mg，2.5mol，1.0当量)的乙醇(5.0mL)和水(1.0mL)的混合溶液中加入铁粉(1.4g，25.0mmol，10.0当量)和氯化铵(1.3g，25.0mmol，10.0当量)。反应液在80℃条件下反应3小时。反应完全后，反应液降至室温后过滤，滤液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，350mg，产率82.0％)。
步骤C：N-(1-环丁基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-基)-3-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡嗪-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在室温下，向1-环丁基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-胺(50mg，0.3mmol，1.0当量)和3-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酸(103mg，0.3mmol，1.1当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入DIEA(116mg，0.9mmol，3.0当量)和HATU(170mg，0.45mmol，1.5当量)。反应液在室温条件下反应3小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，70mg，产率50.0％)。
步骤D：N-(1-环丁基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-基)-3-(1H-吡唑-4-基吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在室温下，向N-(1-环丁基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-基)-3-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡嗪-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺(70mg，0.15mmol，1.0当量)的乙腈(5.0mL)溶液中加入盐酸/二氧六环(2mL，4M)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，15.0mg，产率26％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.90(s,1H),9.24(d,J＝7.2Hz,1H),8.69(s,1H),8.39(s,2H),7.96(s,1H),7.54(d,J＝7.2Hz,1H),4.75-4.66(m,1H),3.90(s,3H),2.48-2.42(m,2H),2.35(dd,J＝9.2,6.5Hz,2H),1.80-1.73(m,2H).LCMS(ESI):m/z 379[M+H]+.
制备例153.化合物A278的合成
步骤A：N-(3-(苄巯基)-1-环丁基-1H-吡唑-4-基)-3-溴吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在室温下，向溶有3-溴吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酸(100mg，0.41mmol，1.0当量)和3-(苄巯基)-1-环丁基-1H-吡唑-4-胺(107mg，0.41mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入DIEA(160mg，1.23mmol，3.0当量)。室温搅拌10分钟后，再向反应液中加入HATU(235mg，0.62mmol，1.5当量)，继续室温反应。1小时后，将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取三次，合并所得的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱层析纯化得到标题化合物(白色固体，170mg，产率85.15％)。
步骤B：4-(3-溴吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺)-1-环丁基-1H-吡唑-3-磺酰氯
在冰浴条件下，向溶有N-(3-(苄巯基)-1-环丁基-1H-吡唑-4-基)-3-溴吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺(100mg，0.21mmol，1.0当量)的醋酸(2.0mL)溶液中先后加入H2O(0.2mL)和NCS(110.49mg，0.83mmol，4.0当量)。18小时后，将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取两次，合并所得的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物(130mg粗品)。
步骤C：3-溴-N-(1-环丁基-3-磺酰胺-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在室温下，向溶有4-(3-溴吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺)-1-环丁基-1H-吡唑-3-磺酰氯(90mg，0.20mmol，1.0当量)的THF(2.0mL)溶液中加入氨水(1mL)。室温搅拌1小时后，将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取两次，合并所得的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱层析纯化得到标题化合物(黄色固体，80mg，产率92.81％)。
步骤D：N-(1-环丁基-3-磺酰胺-1H-吡唑-4-基)-3-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在氮气保护下，将溶有3-溴-N-(1-环丁基-3-磺酰胺-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺(80mg，0.18mmol，1.0当量)和1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡唑(53.07mg，0.19mmol，1.05当量)、Na2CO3(38.52mg，0.36mmol，2.0当量)和Pd(dppf)Cl2(13.30mg，0.02mmol，0.1当量)的二氧六环(2.7mL)和水(0.3mL) 混合溶液中加热至95℃反应。18小时后，反应液降至室温后倒入水中，乙酸乙酯萃取两次，合并所得的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱层析纯化得到标题化合物(40mg，产率43.03％)。
步骤E：N-(1-环丁基-3-磺酰胺-1H-吡唑-4-基)-3-(1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在室温下，向N-(1-环丁基-3-磺酰胺-1H-吡唑-4-基)-3-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺(40mg，0.08mmol，1.0当量)的甲醇(2.0mL)溶液中加入对甲苯磺酸(16.16mg，0.09mmol，1.20当量)。反应液氮气保护下继续室温反应。3小时后，反应液减压浓缩，往残余物加入水，再用乙酸乙酯萃取两次，合并所得的有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经制备HPLC得到标题化合物(白色固体，10.5mg，产率31.42％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.08(d,J＝136.5Hz,1H),10.88(s,1H),9.37(t,J＝7.7Hz,1H),8.79(d,J＝37.8Hz,1H),8.59(d,J＝6.5Hz,1H),8.00-7.57(m,4H),7.26(d,J＝31.3Hz,1H),5.02(p,J＝8.3Hz,1H),2.59-2.39(m,4H),1.93-1.76(m,2H).
制备例154.化合物A279的合成
步骤A：1-环丁基-3-(二氟甲基)-4-硝基-1H-吡唑
在室温下，向3-(二氟甲基)-4-硝基-1H-吡唑(330mg，2.0mmol，1.0当量)和溴环丁烷(1.36g，10.1mmol，5.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入碳酸钾(1.98g，6.0mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下90℃条件反应16小时。反应完全后，反应液降至室温后倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色油状，340mg，产率77.0％)。
步骤B：1-环丁基-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-胺
在室温下，向1-环丁基-3-(二氟甲基)-4-硝基-1H-吡唑(150mg，0.6mmol，1.0当量)的甲醇(10.0mL)溶液中加入钯碳(83.30mg，10％,0.5当量)。反应液氢气置换三次后，在 氢气保护下室温条件反应2小时。反应完全后，反应液过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物(黄色油状，250mg，产率85.0％)。
步骤C：3-溴-N-(1-环丁基-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在室温下，向1-环丁基-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-胺(170mg，0.9mmol，1.0当量)和3-溴吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酸(220mg，0.9mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(15.0mL)溶液中加入DIEA(0.5mL，2.7mmol，3.0当量)和HATU(690mg，1.8mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠水溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，280mg，产率75.0％)。
步骤D：N-(1-环丁基-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-3-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在室温下，向3-溴-N-(1-环丁基-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺(280mg，0.7mmol，1.0当量)和1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡唑(378mg，1.4mmol，2.0当量)的二氧六环(20.0mL)和水(4.0mL)混合溶液中加入Pd(dppf)Cl2(50mg，0.07mmol，0.1当量)和碳酸铯(666mg，2.1mmol，3.0当量)。反应液在90℃条件下反应16小时。反应完全后，反应液降至室温后减压浓缩。残余物经柱纯化后得到标题化合物(黄色油状，80mg，产率24％)。
步骤E：N-(1-环丁基-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-3-(1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在室温下，向N-(1-环丁基-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-3-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺(80mg，0.2mmol，1.0当量)的甲醇(10.0mL)溶液中加入对甲苯磺酸(86mg，0.5mmol，3.0当量)。反应液氮气保护下室温条件反应1小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠水溶液中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC得到标题化合物(黄色固体，43.9mg，产率66.0％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.10(s,1H),10.44(s,1H),9.35(d,J＝7.2Hz,1H),8.78(s,1H),8.37(s,1H),7.83-7.61(m,2H),7.38-6.96(m,2H),5.00-4.91(m,1H),2.58-2.52(m,1H),2.50-2.38(m,3H),1.87-1.78(m,2H).LCMS(ESI):m/z 399[M+H]+.
制备例155.化合物A280的合成
步骤A：N-(3-氨基-1-环丁基-1H-吡唑-4-基)-5-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡嗪-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在室温下，向4-氨基-1-环丁基吡唑-3-甲酰胺(150mg，0.8mmol，1.5当量)和3-[2-(3,4,5,6-四氢-2H-吡喃-2-基)吡唑-3-基]吡唑[1,5-a]嘧啶-5-甲酸(100mg，0.3mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入DIEA(215mg，1.6mmol，3.0当量)和HATU(316mg，0.8mmol，1.5当量)。反应液在室温条件下反应2小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(白色固体，150mg，产率56.8％)。
步骤B：N-(3-氨基甲酰基-1-环丁基-1H-吡唑-4-基)-3-(1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在室温下，向N-(3-氨基-1-环丁基-1H-吡唑-4-基)-5-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡嗪-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(100mg，0.2mmol，1.0当量)的甲醇(5.0mL)溶液中加入对甲苯磺酸(43mg，0.3mmol，1.2当量)。反应液氮气保护下室温条件反应1小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠水溶液中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC得到标题化合物(黄色固体，50mg，产率60.7％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ13.11(d,J＝154.0Hz,1H),11.74(t,J＝59.7Hz,1H),9.52-9.21(m,1H),8.79(d,J＝38.8Hz,1H),8.54-8.40(m,1H),7.85-7.55(m,4H),7.39(d,J＝26.4Hz,1H),4.98(p,J＝8.5Hz,1H),2.59(dt,J＝11.9,9.5Hz,2H),2.42(dt,J＝36.8,17.7Hz,2H),1.89-1.76(m,2H).
制备例156.化合物A281的合成
步骤A：1-环丁基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯((5g，29mmol，1.0当量)和碘代环丁烷(7.9 g，44mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(100.0mL)溶液中加入碳酸钾(20g，146mmol，5.0当量)。反应液80℃条件下反应24小时。反应完全后，反应液降至室温后倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(无色油状，4g，产率60.7％)。
步骤B：4-氨基-1-环丁基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向1-环丁基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(800mg，3.6mmol，1.0当量)的甲醇(10.0mL)溶液中加入钯碳(400mg，10％纯度，0.2当量)。反应液在氢气条件下置换三次后，室温条件反应2小时。反应完全后，反应液过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物(白色固体，600mg，产率86.5％)。
步骤C：4-(苄氧基)羰基)氨基)-1-环丁基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向4-氨基-1-环丁基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(600mg，3mmol，1.0当量)和三乙胺(1.3mL，9mmol，3.0当量)的二氯甲烷(5.0mL)溶液中加入氯甲酸苄酯(1.2g，4.6mmol，1.5当量)。反应液在室温条件下反应2小时。反应完全后，反应液降至室温后倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，800mg，产率79.0％)。
步骤D：苄基(1-环丁基-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸酯
在-10℃下，向4-(苄氧基)羰基)氨基)-1-环丁基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(500mg，1.5mmol，1.0当量)的四氢呋喃(5.0mL)溶液中加入甲基溴化镁(5.0mL，2.1mmol，1M，3.0当量)。反应液在-10℃下反应2小时。反应完全后，反应液倒入饱和氯化铵水溶液中，用乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化后得到标题化合物(黄色油状，400mg，产率79.9％)。
步骤E：2-(4-氨基-1-环丁基-1H-吡唑-3-基)丙-2-醇
在室温下，向苄基(1-环丁基-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基)氨基甲酸酯(500mg，1.5mmol，1.0当量)的甲醇(6.0mL)溶液中加入钯碳(0.3g，10％纯度，0.2当量)。反应液在氢气条件下置换三次后，室温条件反应16小时。反应完全后，反应液过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物(白色固体，250mg，产率84.3％)。
步骤F：3-溴-N-(1-环丁基-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在室温下，向2-(4-氨基-1-环丁基-1H-吡唑-3-基)丙-2-醇(300mg，1.5mmol，1.5当量)和3-溴吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酸(557mg，2.3mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL) 溶液中加入DIEA(992mg，7.6mmol，3.0当量)和HATU(876mg，2.3mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应2小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，400mg，产率62.1％)。
步骤G：N-(1-环丁基-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基)-3-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在室温下，向3-溴-N-(1-环丁基-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺(300mg，0.7mmol，1.0当量)和1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡唑(298mg，1.0mmol，1.5当量)的四氢呋喃(5.0mL)和水(1.0mL)混合溶液中加入Pd(dppf)Cl2(52mg，0.07mmol，0.1当量)和碳酸钾(296mg，2.1mmol，3.0当量)。反应液在80℃条件下反应16小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，300.0mg，产率85.4％)。
步骤H：N-(1-环丁基-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基)-3-(1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺
在室温下，向N-(1-环丁基-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基)-3-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酰胺(200mg，0.4mmol，1.0当量)的甲醇(5.0mL)溶液中加入对甲苯磺酸(105mg，0.6mmol，1.2当量)。反应液氮气保护下室温条件反应2小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠水溶液中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC得到标题化合物(黄色色固体，100.0mg，产率60.3％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.07(d,J＝31.3Hz,1H),9.33(d,J＝6.8Hz,1H),8.76(d,J＝37.6Hz,1H),8.35(d,J＝6.8Hz,1H),7.95-7.55(m,2H),7.34-6.85(m,1H),5.89(d,J＝13.1Hz,1H),4.82(p,J＝8.3Hz,1H),2.39(ddd,J＝16.7,15.0,9.2Hz,4H),1.76(dt,J＝10.3,8.1Hz,2H),1.55(d,J＝20.4Hz,6H).
制备例157.化合物A282的合成
步骤A：1-环己基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(7g，40.9mmol，1.0当量)和碘代环己烷(17.2g，81.8mmol，2.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(25.0mL)溶液中加入碳酸铯(26.7g，81.8mmol，2.0当量)。反应液90℃条件下反应16小时。反应完全后，反应液降至室温后倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(淡黄色油状，2.04g，产率19％)。
步骤B：1-环己基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸
在室温下，向1-环己基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(670mg，2.6mmol，1.0当量)的四氢呋喃(15.0mL)和水(3.0mL)的混合溶液中加入氢氧化锂(222mg，5.2mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液用1N稀盐酸调节pH至4-5后，减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，620mg，粗品)。
步骤C：1-环己基-N-环丙基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向1-环己基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸(620mg，粗品)和环丙胺(1.4mL，7.8mmol，3.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(15.0mL)溶液中加入DIEA(1.4mL，7.8mmol，3.0当量)和HATU(1.9g，5.2mmol，1.0当量)。反应液在室温条件下反应4小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(无色油状，700mg，产率97％)。
步骤D：4-氨基-1-环己基-N-环丙基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向1-环己基-N-环丙基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酰胺(700mg，2.5mmol，1.0当量)的甲醇(50.0mL)溶液中加入钯碳(70mg，10％)。反应液在氢气条件下置换三次后室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物(棕色油状，560mg，粗品)。
步骤E：N-(1-环己基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)-5-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡啶-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在室温下，向4-氨基-1-环己基-N-环丙基-1H-吡唑-3-甲酰胺(120mg，粗品)和5-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(182mg，0.6mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(12.0mL)溶液中加入DIEA(0.26mL，1.5mmol),3.0当量)和HATU(368mg，1.0mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥， 过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色油状，70mg，产率26％)。
步骤F：N-(1-环己基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)-5-(1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在室温下，向N-(1-环己基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)-5-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡啶-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(70mg，0.1mmol，1.0当量)的二氯甲烷(4.0mL)溶液中加入盐酸/二氧六环(2mL，4M)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，21.0mg，产率37％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.42(s,1H),11.19(s,1H),9.52(s,1H),9.22(d,J＝7.3Hz,1H),8.79(s,1H),8.55(s,1H),8.44(s,1H),8.35(d,J＝4.0Hz,1H),7.65(d,J＝7.4Hz,1H),4.29-4.16(m,1H),3.04-2.86(m,1H),2.10-2.02(m,2H),1.88-1.74(m,4H),1.71-1.64(m,1H),1.46-1.36(m,2H),1.30-1.25(m,1H),0.85-0.81(m,2H),0.73-0.66(m,2H).LCMS(ESI):m/z 460[M+H]+.
制备例158.化合物A283的合成
步骤A：1-环己基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(7g，40.9mmol，1.0当量)和碘代环己烷(17.2g，81.8mmol，2.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(100.0mL)溶液中加入碳酸铯(26.7g，81.8mmol，2.0当量)。反应液90℃条件下反应16小时。反应完全后，反应液降至室温后倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(淡黄色油状，2.04g，产率19％)。
步骤B：1-环己基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸
在室温下，向1-环己基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(670mg，2.6mmol，1.0当量)的四氢呋喃(15.0mL)和水(3.0mL)的混合溶液中加入氢氧化锂(222mg，5.2mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液用1N稀盐酸调节pH至4-5后，减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，620mg，粗品)。
步骤C：1-环己基-N-环丙基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向1-环己基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸(620mg，粗品)和环丙胺(222mg，3.9mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(15.0mL)溶液中加入DIEA(1.4mL，7.8mmol，3.0当量)和HATU(1.9g，5.2mmol，1.0当量)。反应液在室温条件下反应4小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(无色油状，700mg，产率97％)。
步骤D：4-氨基-1-环己基-N-环丙基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向1-环己基-N-环丙基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酰胺(700mg，2.5mmol，1.0当量)的甲醇(50.0mL)溶液中加入钯碳(70mg，10％)。反应液在氢气条件下置换三次后室温条件反应16小时。反应完全后，反应液过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物(棕色油状，560mg，粗品)。
步骤E：N-(1-环己基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)-5-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡啶-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在室温下，向4-氨基-1-环己基-N-环丙基-1H-吡唑-3-甲酰胺(60mg，粗品)和5-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(91mg，0.3mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)溶液中加入DIEA(156mg，1.2mmol，3.0当量)和HATU(183mg，0.5mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色油状，70mg，产率53％)。
步骤F：N-(1-环己基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)-5-(1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在室温下，向N-(1-环己基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)-5-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡啶-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(70mg，0.1mmol，1.0当量)的二氯甲烷(4.0mL)溶液中加入盐酸/二氧六环(2mL，4M)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，11.0mg，产率19％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.01(d,J＝464.1Hz,1H),11.42(d,J＝180.0Hz,1H),9.31(dd,J＝68.0,7.3Hz,1H),8.88(d,J＝4.2Hz,0.5H),8.64(d,J＝20.1Hz,1H),8.44(d,J＝5.4Hz,1.5H),8.31(d,J＝3.9Hz,0.4H),7.96(s,0.4H),7.82(dd,J＝13.4,7.3Hz,1H),7.75(s,0.6H),7.45(s,0.6H),4.30-4.18(m,1H),3.18-2.86(m,1H),2.08-2.01(m,2H),1.87-1.74(m,4H),1.71-1.65(m,1H),1.47-1.37(m,2H),1.31-1.26(m,1H),0.89-0.71(m,4H).LCMS(ESI): m/z 460[M+H]+.
制备例159.化合物A284的合成
步骤A：1-环己基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(7g，40.9mmol，1.0当量)和碘代环己烷(17.2g，81.8mmol，2.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(100.0mL)溶液中加入碳酸铯(26.7g，81.8mmol，2.0当量)。反应液90℃条件下反应16小时。反应完全后，反应液降至室温后倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(淡黄色油状，2.04g，产率19％)。
步骤B：1-环己基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸
在室温下，向1-环己基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(670mg，2.6mmol，1.0当量)的四氢呋喃(15.0mL)和水(3.0mL)的混合溶液中加入氢氧化锂(222mg，5.2mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液用1N稀盐酸调节pH至4-5后，减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，620mg，粗品)。
步骤C：1-环己基-N-环丙基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向1-环己基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸(620mg，粗品)和环丙胺(222mg，3.9mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(15.0mL)溶液中加入DIEA(1.4mL，7.8mmol，3.0当量)和HATU(1.9g，5.2mmol，1.0当量)。反应液在室温条件下反应4小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(无色油状，700mg，产率97％)。
步骤D：4-氨基-1-环己基-N-环丙基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向1-环己基-N-环丙基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酰胺(700mg，2.5mmol，1.0当量)的甲醇(50.0mL)溶液中加入钯碳(70mg，10％)。反应液在氢气条件下置换三次后室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物(棕色油状，560mg，粗品)。
步骤E：5-(1H-吡咯-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯
在室温下，向5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸甲酯(500mg，2.2mmol，1.0当量)和3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡咯(644mg，3.3mmol，1.5当量)的1,4-二氧六环(15.0mL)和水(3.0mL)混合溶液中加入Pd(dppf)Cl2(162mg，0.2mmol，0.1当量)和碳酸铯(2.2g，6.7mmol，3.0当量)。反应液在90℃条件下反应16小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经柱纯化后得到标题化合物(黄色固体，470.0mg，产率79％)。
步骤F：5-(1H-吡咯-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸
在室温下，向5-(1H-吡咯-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯(470mg，1.8mmol，1.0当量)的甲醇(20.0mL)和水(10.0mL)混合溶液中加入氢氧化锂(88mg，3.7mmol，2.0当量)。反应液在50℃条件下反应16小时。反应完全后，反应液用1N稀盐酸调节pH到4-5后有固体析出。固体过滤后收集干燥得到标题化合物(棕色固体，370mg，产率88％)。
步骤G：N-(1-环己基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)-5-(1H-吡咯-3-基)吡唑[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在室温下，向4-氨基-1-环己基-N-环丙基-1H-吡唑-3-甲酰胺(80mg，粗品)和5-(1H-吡咯-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(88mg，0.4mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)溶液中加入DIEA(0.27mL，1.5mmol，5.0当量)和HATU(245mg，0.6mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，41.1mg，产率28％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.48(s,1H),11.09(s,1H),9.05(d,J＝7.4Hz,1H),8.58(s,1H),8.46(d,J＝17.7Hz,2H),8.25(d,J＝4.2Hz,1H),7.52(d,J＝7.4Hz,1H),7.37(s,1H),6.91(d,J＝2.2Hz,1H),4.27-4.15(m,1H),3.02-2.90(m,1H),2.07-2.01(m,2H),1.88-1.74(m,4H),1.71-1.63(m,1H),1.46-1.34(m,2H),1.30-1.21(m,1H),0.82-0.75(m,2H),0.73-0.67(m,2H).LCMS(ESI):m/z 459[M+H]+.
制备例160.化合物A285的合成
步骤A：1-环己基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(7g，40.9mmol，1.0当量)和碘代环己烷(17.2g，81.8mmol，2.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(100.0mL)溶液中加入碳酸铯(26.7g，81.8mmol，2.0当量)。反应液90℃条件下反应16小时。反应完全后，反应液降至室温后倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(淡黄色油状，2.04g，产率19％)。
步骤B：1-环己基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸
在室温下，向1-环己基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(670mg，2.6mmol，1.0当量)的四氢呋喃(15.0mL)和水(3.0mL)的混合溶液中加入氢氧化锂(222mg，5.2mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液用1N稀盐酸调节pH至4-5后减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，620mg，粗品)。
步骤C：1-环己基-N-环丙基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向1-环己基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸(620mg，粗品)和环丙胺(222mg，3.9mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(15.0mL)溶液中加入DIEA(1.4mL，7.8mmol，3.0当量)和HATU(1.9g，5.2mmol，1.0当量)。反应液在室温条件下反应4小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(无色油状，700mg，产率97％)。
步骤D：4-氨基-1-环己基-N-环丙基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向1-环己基-N-环丙基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酰胺(700mg，2.5mmol，1.0当量)的甲醇(50.0mL)溶液中加入钯碳(70mg，10％)。反应液在氢气条件下置换三次后室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(棕色油状，560mg，粗品)。
步骤E：5-(1-(叔丁氧基羰基)-1H-吡咯-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯
在室温下，向5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯(1.0g，4.4mmol，1.0当量)和(1-(叔丁氧基羰基)-1H-吡咯-2-基)硼酸(1.4g，6.6mmol，1.5当量)的二氧六环(20.0mL)和水(4.0mL)混合溶液中加入Pd(dppf)Cl2(320mg，0.4mmol，0.1当量)和碳酸铯(4.3g，13.3mmol，3.0当量)。反应液在90℃条件下反应16小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经柱纯化后得到标题化合物(黄色固体，1.3g，产率82％)。
步骤F：5-(1H-吡咯-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸
在室温下，向5-(1-(叔丁氧基羰基)-1H-吡咯-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸乙酯(1.3g，3.6mmol，1.0当量)的甲醇(20.0mL)和水(10.0mL)混合溶液中加入氢氧化钠(290mg，7.3mmol，2.0当量)。反应液在50℃条件下反应16小时。反应完全后，反应液用1N稀盐酸调节pH到4-5后有固体析出。固体过滤后收集干燥得到标题化合物(棕色固体，850mg，产率71％)。
步骤G：N-(1-环己基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)-5-(1H-吡咯-2-基)吡唑[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在室温下，向4-氨基-1-环己基-N-环丙基-1H-吡唑-3-甲酰胺(90mg，0.4mmol，1.0当量)和5-(1H-吡咯-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(119mg，0.4mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(15.0mL)溶液中加入DIEA(234mg，2.0mmol，5.0当量)和HATU(275mg，0.8mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，41.1mg，产率28％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.78(s,1H),11.41(s,1H),9.11(d,J＝7.4Hz,1H),8.72(d,J＝4.0Hz,1H),8.51(s,1H),8.45(s,1H),7.62(d,J＝7.5Hz,1H),7.32(d,J＝15.3Hz,2H),6.38-6.32(m,1H),4.30-4.18(m,1H),3.11-2.94(m,1H),2.10-2.02(m,2H),1.89-1.65(m,5H),1.48-1.35(m,2H),1.28-1.22(m,1H),0.89-0.72(m,4H).LCMS(ESI):m/z 459[M+H]+.
制备例161.化合物A286的合成
步骤A：1-环丁基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(5.0g，29.22mmol，1.0当量)和碘代环丁烷(5.85g，32.14mmol，1.1当量)的N,N-二甲基甲酰胺(50.0mL)溶液中加入碳酸钾(14.28g，43.83mmol，1.5当量)。反应液90℃条件下反应3小时。反应完全后，反应液降至室温后倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(白色固体，2.5g，产率38.0％)。
步骤B：1-环丁基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸
在室温下，向1-环丁基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(1.0g，4.44mmol，1.0当量)的甲醇(15.0mL)和水(5.0mL)的混合溶液中加入氢氧化锂(0.32g，13.29mmol，3.0当量)。反应液在室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液倒入水中，用1N稀盐酸调节pH至6，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化后标题化合物(白色固体，900mg，产率96.0％)。
步骤C：1-环丁基-N-环丙基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向1-环丁基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸(1.0g，4.73mmol，1.0当量)和环丙胺(0.40g，7.09mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(20.0mL)溶液中加入三乙胺(1.48g，14.22mmol，3.0当量)和HATU(3.60g，9.46mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(白色固体，1.0g，产率84.4％)。
步骤D：4-氨基-1-环丁基-N-环丙基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向1-环丁基-N-环丙基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酰胺(1.0g，4.00mmol，1.0当量)的乙醇(15.0mL)溶液中加入钯碳(0.25g，2.35mmol，10％纯度，0.2当量)。反应液在氢气条件下置换三次后，室温条件反应16小时。反应完全后，反应液过滤，滤液减压浓缩 得到标题化合物(无色油状，850mg，产率96.60％)。
步骤E：N-(1-环丁基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)-5-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在室温下，向4-氨基-1-环丁基-N-环丙基-1H-吡唑-3-甲酰胺(100mg，0.45mmol，1.0当量)和1-环丁基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(170.68mg，0.55mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)溶液中加入三乙胺(176.03mg，1.36mmol，3.0当量)和HATU(345.23mg，0.91mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(白色固体，110mg，产率47.0％)。
步骤F：N-(1-环丁基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)-5-(1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在室温下，向N-(1-环丁基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)-5-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(100mg，0.19mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10.0mL)溶液中加入盐酸/二氧六环(2.0mL，4M二氧六环溶液)。反应液在室温条件下反应20分钟。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经HPLC得到标题化合物(白色固体，15.0mg，产率17.9％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.01(d,J＝459.8Hz,1H),11.41(d,J＝177.7Hz,1H),9.52-9.09(m,1H),9.05-8.41(m,3H),8.18(d,J＝171.6Hz,1H),7.81(s,1H),7.60(d,J＝119.7Hz,1H),4.95(d,J＝7.6Hz,1H),3.03(d,J＝106.6Hz,1H),2.63-2.52(m,2H),2.42(d,J＝7.3Hz,2H),1.83(dt,J＝9.9,6.9Hz,2H),0.93-0.71(m,4H).LC-MS(ESI):m/z 432[M+H]+.
制备例162.化合物A287的合成
步骤A：N-(1-环丁基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)-5-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡啶-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在室温下，向4-氨基-1-环丁基-N-环丙基-1H-吡唑-3-甲酰胺(150mg，0.7mmol，1.0当量)和5-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(213mg，0.7mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(20.0mL)溶液中加入DIEA(0.6mL，3.4mmol，5.0当量)和HATU(518mg，1.4mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应16小时。反应完 全后，反应液倒入碳酸氢钠溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色油状，150mg，产率43.0％)。
步骤B：N-(1-环丁基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)-5-(1H-吡唑-4-基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在室温下，向N-(1-环丁基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-4-基)-5-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡啶-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(80mg，0.2mmol，1.0当量)的甲醇(10.0mL)溶液中加入对甲苯磺酸(80mg，0.5mmol，3.0当量)。反应液在室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠水溶液中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，25.0mg，产率30.0％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.43(s,1H),11.20(s,1H),9.53(s,1H),9.22(d,J＝7.4Hz,1H),8.80(s,1H),8.56(s,1H),8.50(s,1H),8.44(d,J＝4.1Hz,1H),7.66(d,J＝7.4Hz,1H),5.01-4.88(m,1H),2.99-2.92(m,1H),2.60-2.52(m,2H),2.46-2.38(m,2H),1.87-1.77(m,2H),0.87-0.81(m,2H),0.76-0.65(m,2H).LCMS(ESI):m/z 432[M+H]+.
制备例163.化合物A288的合成
步骤A：1-环丁基-3-甲氧基-4-硝基-1H-吡唑
在室温下，向3-甲氧基-4-硝基-1H-吡唑(500mg，3.4mmol，1.0当量)和溴环丁烷(465mg，3.4mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(100.0mL)溶液中加入碳酸钾(1.4g，10.2mmol，3.0当量)。反应液80℃条件下反应3小时。反应完全后，反应液降至室温后倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，500mg，产率72.0％)。
步骤B：1-环丁基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-胺
在室温下，向1-环丁基-3-甲氧基-4-硝基-1H-吡唑(500mg，2.5mol，1.0当量)的乙醇(5.0mL)和水(1.0mL)的混合溶液中加入铁粉(1.4g，25.0mmol，10.0当量)和氯化铵(1.3g，25.0mmol，10.0当量)。反应液在80℃条件下反应3小时。反应完全后，反应液降至室温后过滤，滤液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠 干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，350mg，产率82.0％)。
步骤C：N-(1-环丁基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-基)-5-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡嗪-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在室温下，向1-环丁基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-胺(50mg，0.3mmol，1.0当量)和5-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(103mg，0.3mmol，1.1当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入DIEA(116mg，0.9mmol，3.0当量)和HATU(170mg，0.45mmol，1.5当量)。反应液在室温条件下反应3小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，70mg，产率50.0％)。
步骤D：N-(1-环丁基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-基)-5-(1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在室温下，向N-(1-环丁基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-基)-5-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡嗪-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(70mg，0.15mmol，1.0当量)的乙腈(5.0mL)溶液中加入盐酸/二氧六环(2mL，4M)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，15.0mg，产率26％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.99(s,1H),9.27(d,J＝7.3Hz,1H),8.59(s,1H),8.06(d,J＝2.1Hz,2H),7.79(d,J＝7.3Hz,1H),7.25(d,J＝2.3Hz,1H),4.69(d,J＝8.3Hz,1H),4.04(s,3H),2.45(dd,J＝15.7,6.0Hz,2H),2.37-2.30(m,2H),1.81-1.69(m,2H).LCMS(ESI):m/z 379[M+H]+.
制备例164.化合物A289的合成
步骤A：N-(1-环丁基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-基)-5-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡嗪-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在室温下，向1-环丁基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-胺(50mg，0.3mmol，1.0当量)和5-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(103mg，0.3mmol，1.1当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入DIEA(116mg，0.9mmol，3.0当量)和HATU(170mg，0.45mmol，1.5当量)。反应液在室温条件下反应3小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压 浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，70mg，产率50.0％)。
步骤B：N-(1-环丁基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-基)-5-(1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在室温下，向N-(1-环丁基-3-甲氧基-1H-吡唑-4-基)-5-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡嗪-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(70mg，0.15mmol，1.0当量)的乙腈(5.0mL)溶液中加入盐酸/二氧六环(2mL，4M)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，15.0mg，产率26％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.57(s,1H),10.07(s,1H),9.27(d,J＝7.3Hz,1H),8.89-8.30(m,3H),8.04(s,1H),7.64(d,J＝7.3Hz,1H),4.70(p,J＝8.3Hz,1H),4.05(s,3H),2.49-2.38(m,2H),2.33(dt,J＝11.3,6.9Hz,2H),1.83-1.68(m,2H).LCMS(ESI):m/z 379[M+H]+.
制备例165.化合物A290的合成
步骤A：N-(1-环丁基-3-(2-羟基丙烷-2-基)-1H-吡唑-4-基)-5-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在室温下，向5-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(200mg，0.64mmol，1.0当量)和2-(4-氨基-1-环丁基-1H-吡唑-3-基)丙-2-醇(150mg，0.76mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入DIEA(248mg，1.91mmol，3.0当量)和HATU(365mg，0.95mmol，1.5当量)。反应液在室温条件下反应2小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，200mg，产率64％)。
步骤B：N-(1-环丁基-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基)-5-(1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在室温下，向N-(1-环丁基-3-(2-羟基丙烷-2-基)-1H-吡唑-4-基)-5-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(200mg，0.4mmol，1.0当量)的甲醇(5.0mL)溶液中加入对甲苯磺酸(105mg，0.6mmol，1.2当量)。反应液氮气保护下室温条件反应1小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠水溶液中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC得到标题化合物(黄色固体，100mg，产率60％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ13.84(d,J＝239.3Hz,1H),10.53 (d,J＝108.4Hz,1H),9.30(dd,J＝56.6,7.3Hz,1H),8.62(d,J＝19.7Hz,1H),8.35(d,J＝4.7Hz,1H),7.98(s,1H),7.88-7.70(m,2H),7.40(s,1H),7.13(s,1H),5.91(s,1H),4.87-4.68(m,1H),2.40(dt,J＝16.2,8.3Hz,4H),1.77(dd,J＝17.1,8.9Hz,2H),1.62(d,J＝21.6Hz,6H).
制备例166.化合物A291的合成
步骤A：N-(1-环丁基-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-5-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在室温下，向1-环丁基-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-胺(80mg，0.42mmol，1.0当量)和5-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(160.6mg，0.51mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入DIEA(0.21mL，1.2mmol，3.0当量)和HATU(325.0mg，0.85mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色油状，80mg，产率38.8％)。
步骤B：N-(1-环丁基-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-5-(1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在室温下，向N-(1-环丁基-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-5-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(80mg，0.16mmol，1.0当量)的甲醇(5.0mL)溶液中加入对甲苯磺酸(34.2mg，0.20mmol，1.2当量)。反应液氮气保护下室温条件反应1小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠水溶液中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC得到标题化合物(白色固体，27.3mg，产率41.3％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.61(s,1H),9.78(s,1H),9.29(d,J＝7.3Hz,1H),8.65(s,1H),8.48(s,1H),8.03(d,J＝1.6Hz,1H),7.84(d,J＝7.3Hz,1H),7.53-7.08(m,2H),4.95(p,J＝8.3Hz,1H),2.57-2.37(m,4H),1.90-1.69(m,2H).LCMS(ESI):m/z 399[M+H]+.
制备例167.化合物A292的合成
步骤A：1-环丁基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸
在零度下，向1-环丁基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(500mg，2.2mmol，1.0当量)的甲醇(2.0mL)、四氢呋喃(2.0mL)和水(2.0mL)的混合溶液中加入氢氧化锂(159mg，6.6mmol，3.0当量)。反应液在室温条件下反应2小时。反应完全后，反应液用1N稀盐酸调节pH至3后减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，400mg，粗品)。
步骤B：1-环丁基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在零度下，向1-环丁基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸(200mg，粗品)和氯化铵(60mg，1.1mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(4.0mL)溶液中加入DIEA(612mg，4.7mmol，3.0当量)和HATU(720mg，1.9mmol，1.5当量)。反应液在室温条件下反应2小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(白色固体，150mg，产率75％)。
步骤C：4-氨基-1-环丁基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向1-环丁基-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酰胺(100mg，0.5mmol，1.0当量)的甲醇(5.0mL)溶液中加入钯碳(100mg，10％)。反应液在氢气条件下置换三次后室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物(白色固体，60mg，产率70％)。
步骤D：N-(3-氨基甲酰基-1-环丁基-1H-吡唑-4-基)-5-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在零度下，向4-氨基-1-环丁基-1H-吡唑-3-甲酰胺(86mg，0.5mmol，1.5当量)和3-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-甲酸(100mg，0.3mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入DIEA(123mg，0.9mmol，3.0当量)和HATU((182mg，0.5mmol，1.5当量)。反应液在室温条件下反应2小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(白色固体，100mg，产率66％)。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-环丁基-1H-吡唑-4-基)-5-(1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在室温下，向N-(3-氨基甲酰基-1-环丁基-1H-吡唑-4-基)-5-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H- 吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(100mg，0.2mmol，1.0当量)的甲醇(5.0mL)溶液中加入对甲苯磺酸(43mg，0.3mmol，1.2当量)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，25mg，产率30％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ13.76(d,J＝240.0Hz,1H),11.18(d,J＝171.2Hz,1H),9.32(dd,J＝69.6,7.3Hz,1H),8.64(d,J＝18.9Hz,1H),8.51(d,J＝6.1Hz,1H),8.18-8.03(m,1H),7.92(d,J＝9.2Hz,1H),7.82(dd,J＝13.6,7.3Hz,1H),7.71(d,J＝52.9Hz,1H),7.50(d,J＝20.3Hz,1H),5.02-4.89(m,1H),2.71-2.53(m,2H),2.41(dd,J＝22.6,19.6Hz,2H),1.81(dd,J＝16.5,8.7Hz,2H).
制备例168.化合物A293的合成
步骤A：3-溴-1-环丁基-4-硝基-1H-吡唑
在室温下，向3-溴-4-硝基-1H-吡唑(1.50g，7.81mmol，1.0当量)和溴环丁烷(1.58g，11.72mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(20.0mL)溶液中加入碳酸铯(6.36g，19.53mmol，2.5当量)。反应液80℃条件下反应18小时。反应完全后，反应液降至室温后倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(棕色油状，1.0g，产率52.0％)。
步骤B：3-(苄硫基)-1-环丁基-4-硝基-1H-吡唑
在室温下，向3-溴-1-环丁基-4-硝基-1H-吡唑(500mg，2.03mmol，1.0当量)和苄硫醇(377.96mg，3.05mmol，2.0当量)的二氧六环(20.0mL)溶液中加入Xantphos(117.58mg，0.20mmol，0.1当量)、Pd2(dba)3(93.04mg，0.10mmol，0.05当量)和DIEA(525.28mg，4.06mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下100℃条件反应16小时。反应完全后，反应液降至室温后倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(棕色油状，580mg，产率98.6％)。
步骤C：3-(苄硫基)-1-环丁基-1H-吡唑-4-胺
在室温下，向3-(苄硫基)-1-环丁基-4-硝基-1H-吡唑(500mg，1.73mol，1.0当量)的乙醇(10.0mL)和水(2.0mL)的混合溶液中加入铁粉(482.46mg，8.64mmol，5.0当量)和氯化铵(924.31mg，17.28mmol，10.0当量)。反应液在80℃条件下反应3小时。反应完全后，反应液降至室温后过滤，滤液减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黑色固体，350mg，产率78.1％)。
步骤D：N-(3-(苄硫基)-1-环丁基-1H-吡唑-4-基)-5-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡嗪-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在室温下，向3-(苄硫基)-1-环丁基-1H-吡唑-4-胺(110mg，0.42mmol，1.0当量)和5-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(146.17mg，0.46mmol，1.1当量)的N,N-二甲基甲酰胺(4.0mL)溶液中加入DIEA(219.26mg，1.70mmol，4.0当量)和HATU(177.39mg，0.46mmol，1.1当量)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(绿色固体，100mg，产率42.5％)。
步骤E：1-环丁基-4-(5-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-磺酰氯
在0℃下，向N-(3-(苄硫基)-1-环丁基-1H-吡唑-4-基)-5-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡嗪-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(100mg，0.18mmol，1.0当量)中加入醋酸(2.0mL)。后在冰浴条件下加入水(0.2mL)和N-氯代丁二酰亚胺(96.30mg，0.72mmol，4.0当量)。反应液在室温条件下反应3小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品标题化合物(灰色固体，130mg，粗品)。
步骤F：N-(1-环丁基-3-氨磺酰基-1H-吡唑-4-基)-5-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡嗪-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在室温下，向1-环丁基-4-(5-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺基)-1H-吡唑-3-磺酰氯(130mg，粗品)的四氢呋喃(1.0mL)中加入氨的水溶液(1.0mL)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品标题化合物(灰色固体，60.0mg，粗品)。
步骤G：N-(1-环丁基-3-氨磺酰基-1H-吡唑-4-基)-5-(1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在室温下，向N-(1-环丁基-3-氨磺酰基-1H-吡唑-4-基)-5-(1-(四氢-2H-吡唑-2-基)-1H-吡 嗪-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(60mg，粗品)的甲醇(3.0mL)溶液中加入对甲苯磺酸(24.25mg，0.14mmol，1.2当量)。反应液在室温条件下反应3小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，12.0g，产率23.4％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.37(d,J＝87.2Hz,1H),10.17(d,J＝62.5Hz,1H),9.33(dd,J＝74.2,7.6Hz,1H),8.67(d,J＝22.2Hz,1H),8.56(s,1H),8.00(s,1H),7.84(d,J＝7.3Hz,1H),7.65(d,J＝111.0Hz,3H),4.99(p,J＝8.4Hz,1H),2.59-2.35(m,4H),1.98-1.71(m,2H).LCMS(ESI):m/z 428(M+H)+.
制备例169.化合物A294的合成
步骤A：环己基甘氨酸叔丁酯
在室温下，向环己胺(8.0g，80.0mmol，4.0当量)和碳酸氢钠(1.6g，20.0mmol，1.0当量)的乙醇(100.0mL)溶液中加入溴乙酸叔丁酯(4.0g，20.0mmol，1.0当量)的乙醇(5mL)溶液。反应液在室温条件下反应12小时。反应完全后，反应液减压浓缩后倒入水中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色油状，2.5g，产率58.1％)。
步骤B：(E)-3-((2-(叔丁氧基)-2-氧乙基)(环己基)氨基)-2-氰基丙烯酸乙酯
在室温下，向环己基甘氨酸叔丁酯(2.5g，11.7mmol，1.0当量)的甲苯(20.0mL)溶液中加入(E)-2-氰基-3-乙氧基丙烯酸乙酯(1.9g，11.7mmol，1.0当量)和三乙胺(4.9mL，35.1mmol，3.0当量)。反应液在110℃条件下反应16小时。反应完全后，反应液减压浓缩后倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，2.5g，产率63.4％)。
步骤C：2-(叔丁基)4-乙基3-氨基-1-环己基-1H-吡咯-2,4-二甲酸酯
在0℃下，向(E)-3-((2-(叔丁氧基)-2-氧乙基)(环己基)氨基)-2-氰基丙烯酸乙酯(2.30g，6.84mmol，1.0当量)的四氢呋喃(30.0mL)溶液中加入氢化钠(820mg，20.51mmol，60％纯度，3.0当量)。反应液在室温条件下反应3小时。反应完全后，反应液倒入氯化铵溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。 残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色油状，1.65g，产率72％)。
步骤D：4-氨基-1-环己基-1H-吡咯-3-甲酸乙酯
在室温下，向2-(叔丁基)4-乙基3-氨基-1-环己基-1H-吡咯-2,4-二甲酸酯(1.65g，4.90mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5.0mL)溶液中加入三氟乙酸(15.0mL)。反应液在室温条件下反应2小时。反应完全后，反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状，2.67g，粗品)。
步骤E：4-((叔丁氧羰基)氨基)-1-环己基-1H-吡咯-3-甲酸乙酯
在室温下，向4-氨基-1-环己基-1H-吡咯-3-甲酸乙酯(2.7g，粗品)的二氯甲烷(20.0mL)溶液中加入三乙胺(3.48g，34.46mmol，3.5当量)和二碳酸二叔丁酯(2.14g，9.82mmol，1.0当量)。反应液在40℃条件下反应12小时。反应完全后，反应液倒入水中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色油状，1.60g，产率96.9％)。
步骤F：4-((叔丁氧羰基)氨基)-1-环己基-1H-吡咯-3-甲酸
在室温下，向4-((叔丁氧羰基)氨基)-1-环己基-1H-吡咯-3-甲酸乙酯((1.60g，4.76mmol，1.0当量)的甲醇(8.0mL)和水(8.0mL)混合溶液中加入氢氧化锂(342mg，14.27mmol，3.0当量)。反应液在60℃条件下反应12小时。反应完全后，反应液减压浓缩后倒入水中，用1N稀盐酸调节pH至6-7，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，1.20g，产率81.8％)。
步骤G：(1-环己基-4-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡咯-3-基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向4-((叔丁氧羰基)氨基)-1-环己基-1H-吡咯-3-甲酸(1.0g，3.2mmol，1.0当量)和环丙胺(0.3g，4.8mol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(15.0mL)溶液中加入DIEA(1.2g，9.7mmol，3.0当量)和HATU(1.8g，4.8mmol，1.5当量)。反应液在室温条件下反应3小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(白色固体，1.0g，产率88.7％)。
步骤H：4-氨基-1-环己基-N-环丙基-1H-吡咯-3-甲酰胺
在室温下，向(1-环己基-4-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡咯-3-基)氨基甲酸叔丁酯(1.0g，2.8mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10.0mL)溶液中加入盐酸/二氧六环(5.0mL，4N)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液减压浓缩后得到盐酸盐标题化合物(白色固体，700mg，盐酸盐，产率98.3％)。
步骤I：N-(1-环己基-4-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡咯-3-基)-5-(1-(四氢-2H-吡喃-2- 基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在室温下，向4-氨基-1-环己基-N-环丙基-1H-吡咯-3-甲酰胺(100mg，0.4mmol，盐酸盐，1.0当量)和5-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(190mg，0.6mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入DIEA(156mg，1.2mmol，3.0当量)和HATU(230mg，0.6mmol，1.5当量)。反应液在室温条件下反应3小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化后得到标题化合物(白色固体，50.0mg，产率27.3％)。
步骤J：N-(1-环己基-4-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡咯-3-基)-5-(1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在室温下，向N-(1-环己基-4-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡咯-3-基)-5-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(50mg，0.1mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5.0mL)溶液中加入盐酸/二氧六环(5.0mL，4N)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化后得到标题化合物(黄色固体，15.0mg，产率35.5％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.37(s,1H),11.45(s,1H),9.59(s,1H),9.18(d,J＝7.4Hz,1H),8.81(s,1H),8.51(s,1H),8.04(d,J＝3.4Hz,1H),7.75-7.54(m,2H),7.48(d,J＝2.4Hz,1H),3.99-3.79(m,1H),2.98-2.75(m,1H),2.06-1.98(m,2H),1.90-1.77(m,2H),1.72-1.51(m,3H),1.42(q,J＝12.8Hz,2H),1.29-1.20(m,1H),0.91-0.79(m,2H),0.64-0.48(m,2H).LCMS(ESI):m/z 459[M+H]+.
制备例170.化合物A295的合成
步骤A：N-(1-环己基-4-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡咯-3-基)-5-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在0℃下，向4-氨基-1-环己基-N-环丙基-1H-吡咯-3-甲酰胺(100mg，0.4mmol，1.0当量)和5-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(190mg，0.6mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入DIEA(156mg，1.2mmol，3.0当量)和HATU(230mg，0.6mmol，1.5当量)。反应液在室温条件下反应3小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过 滤，减压浓缩。残余物经柱纯化后得到标题化合物(白色固体，50.0mg，产率27.3％)。
步骤B：N-(1-环己基-4-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡咯-3-基)-5-(1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在室温下，向N-(1-环己基-4-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡咯-3-基)-5-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(50mg，0.1mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5.0mL)溶液中加入盐酸/二氧六环(5.0mL，4N)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化后得到标题化合物(黄色固体，15mg，产率35.5％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ14.71(s,1H),11.88(s,1H),8.80-8.65(m,2H),7.79-7.65(m,2H),7.28-7.26(m,1H),6.97-6.86(m,2H),6.07(s,1H),3.92-3.61(m,1H),3.12(s,1H),2.12(d,J＝11.3Hz,2H),1.90(d,J＝13.5Hz,2H),1.78-1.65(m,3H),1.47-1.34(m,2H),1.28-1.21(m,1H),1.08(d,J＝6.4Hz,2H),0.65(s,2H).LCMS(ESI):m/z 459[M+H]+.
制备例171.化合物A296的合成
步骤A：N-(1-环己基-4-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡咯-3-基)-5-(1-(四氢-2H-吡咯-2-基)-1H-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在0℃下，向4-氨基-1-环己基-N-环丙基-1H-吡咯-3-甲酰胺(50mg，0.2mmol，1.0当量)和5-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡咯-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(94.4mg，0.3mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入DIEA(78.4mg，0.6mmol，3.0当量)和HATU(115mg，0.3mmol，1.5当量)。反应液在室温条件下反应3小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化后得到标题化合物(黄色固体，50.0mg，产率45.6％)。
步骤B：N-(1-环己基-4-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡咯-3-基)-5-(1H-吡咯3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在0℃下，向N-(1-环己基-4-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡咯-3-基)-5-(1-(四氢-2H-吡咯-2-基)-1H-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(50mg，0.1mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5.0mL)溶液中加入盐酸/二氧六环(5.0mL，4N)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化后得到标题化合物(黄色固体，15mg，产率35.5％)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ12.78(s,1H),11.24(s,1H),8.60(s,1H),8.51(d,J＝7.4Hz,1H), 7.23(d,J＝2.9Hz,1H),7.18(d,J＝7.4Hz,1H),7.13(s,1H),6.97(s,1H),6.82(d,J＝3.0Hz,1H),6.38-6.32(m,1H),5.88(s,1H),4.13-3.97(m,1H),3.04-2.86(m,1H),2.07-1.99(m,2H),1.97-1.88(m,2H),1.81-1.72(m,1H),1.69-1.61(m,3H),1.42-1.27(m,2H),0.95(q,J＝6.6Hz,2H),0.73-0.66(m,2H).LCMS(ESI):m/z 458[M+H]+.
制备例172.化合物A297的合成
步骤A：N-(1-环己基-4-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡咯-3-基)-5-(1-(四氢-2H-吡咯-2-基)-1H-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在0℃下，向4-氨基-1-环己基-N-环丙基-1H-吡咯-3-甲酰胺(50mg，0.2mmol，1.0当量)和5-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡咯-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(94.4mg，0.3mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入DIEA(78.4mg，0.6mmol，3.0当量)和HATU(115mg，0.3mmol，1.5当量)。反应液在室温条件下反应3小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化后得到标题化合物(黄色固体，50.0mg，产率45.6％)。
步骤B：N-(1-环己基-4-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡咯-3-基)-5-(1H-吡咯-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
在室温下，向N-(1-环己基-4-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡咯-3-基)-5-(1-(四氢-2H-吡咯-2-基)-1H-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(50mg，0.1mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5.0mL)溶液中加入盐酸/二氧六环(5.0mL，4N)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化后得到标题化合物(黄色固体，15mg，产率35.5％)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ9.76(s,1H),8.78(d,J＝22.0Hz,1H),8.66-8.57(m,2H),7.70-7.59(m,2H),7.17(d,J＝7.4Hz,1H),6.91-6.75(m,3H),6.25(d,J＝2.9Hz,1H),4.91-4.63(m,1H),2.87-2.71(m,1H),2.26-2.09(m,2H),1.93-1.82(m,2H),1.78-1.69(m,1H),1.52-1.39(m,3H),1.30-1.16(m,2H),0.68-0.60(m,2H),0.43-0.34(m,2H).LCMS(ESI):m/z 458[M+H]+.
制备例173.化合物A455的合成
步骤A：6-(1-(叔丁氧基羰基)-1H-吡咯-2-基)吡啶甲酸甲酯
在室温下，向6-溴吡啶-2-甲酸甲酯(1g，4.63mmol，1.0当量)和2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(1.63g，5.56mmol，1.2当量)的1,4-二氧六环(20.0mL)和水(4.0mL)混合溶液中加入Pd(dppf)Cl2(0.17g，0.23mmol，0.05当量)和碳酸钾(1.60g，11.6mmol，2.5当量)。反应液在氮气保护下100℃条件反应2小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经反相柱纯化后得到标题化合物(白色固体，1.0g，产率71％)。
步骤B：6-(1-(叔丁氧基羰基)-1H-吡咯-2-基)吡啶甲酸
在室温下，向6-(1-(叔丁氧基羰基)-1H-吡咯-2-基)吡啶甲酸甲酯(1.0g，3.31mmol，1.0当量)的四氢呋喃(10.0mL)和水(3.0mL)混合溶液中加入氢氧化锂一水合物(0.42g，9.92mmol，3.0当量)。反应液在25℃条件下反应2小时。反应完全后，反应液倒入水中，用1N稀盐酸调节pH至中性，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，0.9g，粗品)。
步骤C：6-(1H-吡咯-2-基)吡啶甲酸
在室温下，向6-(1-(叔丁氧基羰基)-1H-吡咯-2-基)吡啶甲酸(900mg，粗品)的二氯甲烷(10.0mL)溶液中加入三氟乙酸(3.0mL)。反应液在室温条件下反应0.5小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经反相柱纯化后得到标题化合物(白色固体，0.4g，产率68％)。
步骤D：N-(3-氨基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡咯-2-基)吡啶酰胺
在室温下，向6-(1H-吡咯-2-基)吡啶甲酸(150mg，0.80mmol，1.0当量)和4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(81mg，0.40mmol，0.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)溶液中加入DIEA(515mg，3.99mmol，5.0当量)和HATU(394mg，1.04mmol，1.3当量)。反应液在室温条件下反应0.5小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，27.0mg，产率9％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.16(s,1H),11.40(s,1H),8.99(s,1H),8.12-7.84(m,7H),7.57(t,J＝7.8Hz,2H),7.40(t,J＝7.4Hz,1H),7.22(s,1H),7.05(s,1H),6.27(s,1H).LCMS(ESI):m/z 372[M+H]+.
制备例174.化合物A456的合成
步骤A：6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-咪唑-5-基)吡啶甲酸甲酯
在室温下，向6-溴吡啶甲酸甲酯(600mg，2.78mmol，1.0当量)和1-(四氢-2H-吡喃-2- 基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-咪唑(927mg，3.33mmol，1.2当量)的1,4-二氧六环(15.0mL)和水(3.0mL)混合溶液中加入Pd(dppf)Cl2(102mg，0.14mmol，0.05当量)和碳酸钾(960mg，6.94mmol，2.5当量)。反应液在氮气保护下100℃条件反应2小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经反相柱纯化后得到标题化合物(白色固体，0.6g，产率75％)。
步骤B：6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-咪唑-5-基)吡啶甲酸
在室温下，向6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-咪唑-5-基)吡啶甲酸甲酯(600mg，2.09mmol，1.0当量)的四氢呋喃(10.0mL)和水(3.0mL)混合溶液中加入氢氧化锂一水合物(263mg，6.27mmol，3.0当量)。反应液在25℃条件下反应2小时。反应完全后，反应液倒入水中，用1N稀盐酸调节pH至中性，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经反相柱纯化得到标题化合物(白色固体，0.5g，产率88％)。
步骤C：6-(1H-咪唑-5-基)吡啶甲酸
在室温下，向6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-咪唑-5-基)吡啶甲酸(500mg，1.83mmol，1.0当量)的二氯甲烷(3.0mL)溶液中加入三氟乙酸(1.0mL)。反应液在室温条件下反应0.5小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经反相柱纯化后得到标题化合物(白色固体，250mg，产率72％)。
步骤D：N-(3-氨基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-咪唑-5-基)吡啶酰胺
在室温下，向6-(1H-咪唑-5-基)吡啶甲酸(150mg，0.80mmol，1.0当量)和4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(81mg，0.40mmol，0.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)溶液中加入DIEA(512mg，3.97mmol，5.0当量)和HATU(392mg，1.03mmol，1.3当量)。反应液在室温条件下反应0.5小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，41.2mg，产率14％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.55(s,1H),12.14(s,1H),9.01(s,1H),8.16-7.93(m,7H),7.90-7.79(m,2H),7.57(t,J＝7.9Hz,2H),7.40(t,J＝7.4Hz,1H).LCMS(ESI):m/z 374[M+H]+.
制备例175.化合物A457的合成
步骤A：1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-1,2,4-三唑
在25℃氮气气氛下，向1,2,4-三氮唑(2.0g，28.8mmol，1.0当量)的THF(30mL)搅拌溶液中分批加入NaH(1151mg，28.8mmol，1.0当量，纯度60％)，反应混合物在25℃下搅拌0.5小时。然后在混合物中加入SEMCl(5.1mL，28.8mmol，1.0当量)，在25℃下搅拌16小时。反应完成后，将反应混合物用水(20mL)淬灭，用乙酸乙酯(20mL)萃取三次。将有机相合并，用盐水(20mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩。最后用硅胶柱层析纯化得到标题化合物(无色油状，2.0g，收率35％)。
步骤B：6-((1-(2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶甲酸乙酯
在室温下，向6-溴吡啶-2-甲酸乙酯(2.0g，8.7mmol，1.0当量)、K2CO3(2.4g，17.4mmol，2.0当量)和1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-1,2,4-三唑(4.32g，21.7mmol，2.5当量)的甲苯(30mL)溶液中，加入PPh3(115mg，0.44mmol，0.05当量)、Cu(OAc)2(32mg，0.17mmol，0.02当量)和Pd(OAc)2(10mg，0.043mmol，0.005当量)。将反应混合物在真空下脱气，用氮气置换多次，然后在120℃的氮气气氛下加热20小时。反应完成后，用水(60mL)稀释反应混合物，用乙酸乙酯(40mL)萃取三次。合并有机相，用盐水(20mL)洗涤，然后用无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩。最后用硅胶柱层析纯化得到标题化合物(黑色固体，3.0g，收率99％)。
步骤C：6-(1-((2-(三甲基硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-1,2,4-三氮唑-3-基)吡啶甲酸
在室温下，向6-(1-(2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基-1H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶甲酸乙酯(3.0g，8.61mmol，1.0当量)的THF(20mL)和H2O(4mL)混合溶液中加入一水合氢氧化锂(1.08g，25.8mmol，3.0当量)，在25℃下搅拌16h。反应完成后，用2N HCl酸化，直至pH调整为pH＝4-5。所得混合物用H2O(10mL)稀释，用乙酸乙酯(20mL)萃取三次。合并有机相，用盐水(15mL)洗涤两次，用无水Na2SO4干燥，过滤，然后减压浓缩得到标题化合物(1.9g，白色固体，收率69％)。
步骤D：N-(3-氨甲酰基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1-((2-(三甲基硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶酰胺
在25℃下，向6-(1-(2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基-1H-1,2,4-三氮唑-3-基)吡啶甲酸(120mg，0.38mmol，1.0当量)和HATU(185mg，0.49mmol，1.3当量)的DMF(2mL)溶液中加入DIEA(194mg，1.50mmol，4.0当量)和4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(76mg，0.38mmol，1.0当量)。反应混合物在25℃下搅拌1小时。反应完成后，水稀释(10mL)，乙酸乙酯(15mL)萃取三次，合并有机相，用盐水(10mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩。最后用硅胶柱层析纯化得到标题化合物(白色固体，100mg收率53％)。
步骤E：N-(3-氨甲酰基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶酰胺
在25℃下，向N-(3-氨甲酰基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(1-((2-(三甲基硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶酰胺(100mg，0.20mmol，1.0当量)的MeOH(2mL)溶液中加入4M盐酸二氧六环(0.5mL)。反应混合物在室温下搅拌1小时，反应完成后,减压浓缩。最后用制备高效液相色谱法纯化得到标题化合物(白色固体，30mg，收率40％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.46(s,1H),11.73(s,1H),9.06(s,1H),8.71(d,J＝36.3Hz,1H),8.36-8.27(m,1H),8.25-8.12(m,2H),8.04-7.94(m,3H),7.72(s,1H),7.62-7.50(m,2H),7.46-7.38(m,1H).LCMS(ESI):m/z 375[M+H]+.
制备例176.化合物A458的合成
步骤A：6-(2H-四唑-5-基)吡啶甲酸甲酯
在室温下，向6-氰基吡啶-2-甲酸甲酯(500mg，3.08mmol，1.0当量)和三乙胺盐酸盐(1901mg，13.9mmol，4.5当量)的甲苯(5.0mL)溶液中加入叠氮钠(624mg，13.9mmol，4.5当量)。反应液在氮气保护下120℃条件反应12小时。反应完全后，加入NaHCO3溶液调节PH至弱碱性，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经反相柱纯化后得到标题化合物(白色固体，550mg，产率87％)
步骤B：6-(2H-四唑-5-基)吡啶甲酸
在室温下，向6-(2H-四唑-5-基)吡啶甲酸甲酯(450mg，2.19mmol，1.0当量)的甲醇(5mL)溶液中加入氢氧化钾(369mg，6.58mmol，3.0当量)。反应液在25℃条件下反应1小时。反应完全后，反应液倒入水中，用2N稀盐酸调节pH至弱酸性，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经反相柱纯化得到标题化合物(白色固体，300mg，产率72％)。
步骤C：N-(3-氨基甲酰-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-6-(2H-四唑-5-基)吡啶酰胺
在室温下，向6-(2H-四唑-5-基)吡啶甲酸(300mg，1.57mmol，1.0当量)和4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(318mg，1.57mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(8.0mL)溶液中加入DIEA(810mg，6.28mmol，4.0当量)和HATU(717mg，1.88mmol，1.2当量)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，19mg，产率10％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.64(s,1H),9.06(s,1H),8.37-8.31(m,1H),8.29-8.25(m,2H),8.04-7.96(m,3H),7.76(s,1H),7.61-7.53(m,2H),7.45-7.37(m,1H).LCMS(ESI):m/z 376[M+H]+.
制备例177.化合物A459的合成
步骤A：(E)-3-((2-氨基酰肼亚基)甲基)苯甲酸甲酯
在室温下，向3-甲酰基苯甲酸甲酯(2.0g，12.2mmol，1.0当量)和肼甲酰胺(0.91g，12.2mmol，1.0当量)的乙醇(20.0mL)溶液中加入4-二甲氨基吡啶(0.30g，2.44mmol，0.2当量)。反应液在室温条件反应1小时。反应完全后，反应液有固体析出，过滤，滤饼用乙醇重结晶得到标题化合物(白色固体，2.1g，产率78％)。
步骤B：3-(5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯甲酸甲酯
在室温下，向(E)-3-((2-氨基酰肼亚基)甲基)苯甲酸甲酯(1.0g，4.52mmol，1.0当量)的醋酸(15.0mL)溶液中滴加液溴(1.81g，11.3mmol，2.5当量)。反应液在80℃条件下反应3小时。反应完成后，反应液降至室温，甲基叔丁基醚加入到反应液中并搅拌10分钟，反应液过滤，滤饼干燥后得到标题化合物(白色固体，300mg，产率30％)。
步骤C：3-(5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯甲酸
在室温下，向3-(5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯甲酸甲酯(300mg，1.37mmol，1.0当量)的四氢呋喃(4.0mL)和水(1.0mL)混合溶液中加入氢氧化锂一水合物(82mg，3.42mmol，2.5当量)。反应液在25℃条件下反应16小时。反应完全后，反应液倒入水中，用1N稀盐酸调节pH至中性，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经反相柱纯化得到标题化合物(白色固体，235mg，产率84％)。
步骤D：4-(3-(5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯甲酰氨基)-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向3-(5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯甲酸(80mg，0.39mmol，1.0当量)和4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(79mg，0.39mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(1.5mL)溶液中加入三乙胺(99mg，0.98mmol，2.5当量)和HATU(156mg，0.41mmol，1.05当量)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完成后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，30.0mg，产率20％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.90(s,1H),8.97(s,1H),8.32(s,1H),8.13(s,1H),8.05(d,J＝7.9Hz,1H),8.03-7.96(m,3H),7.84(s,1H),7.78(t,J＝7.8Hz,1H),7.56(t,J＝7.9Hz,2H),7.46-7.33(m,3H).LCMS(ESI):m/z 390[M+H]+.
制备例178.化合物A460的合成
步骤A：3-(甲基氨基甲酰基)苯甲酸甲酯
在室温下，向3-(甲氧羰基)苯甲酸(1.5g，8.33mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(20.0mL)溶液中加入HATU(3.48g，9.16mmol，1.1当量)，反应液在室温条件下搅拌15分钟。然后甲胺盐酸盐(850mg，12.5mmol，1.5当量)和DIEA(2.69g，20.8mmol，2.5当量)加入到反应液中，反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经反相柱纯化得到标题化合物(白色固体，1.1g，产率74％)。
步骤B：(Z)-3-(氯(甲基亚氨基)甲基)苯甲酸甲酯
在室温下，向3-(甲基氨基甲酰基)苯甲酸甲酯(1.1g，6.14mmol，1.0当量)的甲苯(15.0mL)溶液中加入五氯化磷(1.30g，6.26mmol，1.02当量)，反应液在氮气保护下110℃条件反应3小时。反应完全后，反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(灰白色固体，1.5g，粗品)。
步骤C：3-(4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯甲酸甲酯
在室温下，向水合肼(0.83g，25.8mmol，5.0当量)的四氢呋喃(15.0mL)溶液中滴加(Z)-3-(氯(甲基亚氨基)甲基)苯甲酸甲酯(3.48g，9.16mmol，1.1当量)的四氢呋喃(15.0mL) 溶液，反应液在氮气保护下室温条件搅拌4小时。然后N,N'-羰基二咪唑(4.18g，25.8mmol，5.0当量)在0℃加入到反应液中，反应液在80℃条件下反应4小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经反相柱纯化得到标题化合物(白色固体，295mg，产率25％)。
步骤D：3-(4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯甲酸
在室温下，向3-(4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯甲酸甲酯(295mg，1.27mmol，1.0当量)的四氢呋喃(4.0mL)和水(1.0mL)混合溶液中加入氢氧化锂一水合物(78mg，3.16mmol，2.5当量)。反应液在25℃条件下反应16小时。反应完全后，反应液倒入水中，用1N稀盐酸调节pH至中性，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，235mg，粗品)。
步骤E：4-(3-(4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯甲酰胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向3-(4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯甲酸(80mg，0.37mmol，1.0当量)和HATU(146mg，0.38mmol，1.02当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)溶液中加入4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(74mg，0.37mmol，1.0当量)和三乙胺(111mg，1.10mmol，3.0当量)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，30.0mg，产率20％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.05(s,1H),10.92(s,1H),8.97(s,1H),8.21(s,1H),8.13(s,1H),8.05(d,J＝7.8Hz,1H),7.99(d,J＝8.0Hz,3H),7.86(s,1H),7.77(t,J＝7.8Hz,1H),7.56(t,J＝7.9Hz,2H),7.40(t,J＝7.4Hz,1H),3.34(s,3H).LCMS(ESI):m/z 404[M+H]+.
制备例179.化合物A461的合成
步骤A：3-(5-羰基-1,5-二氢-4H-1,2,4-三唑-4-基)苯甲酸叔丁酯
在室温下，将3-氨基苯甲酸叔丁酯(2g，10.3mmol，1.0当量)、肼基甲酸甲酯(4.63g，51.5mmol，5.0当量)和原甲酸三甲酯(5.673ml，51.5mmol，5.0当量)加入到乙醇(50ml)中。反应液在80℃、氮气保护下搅拌16小时。然后将反应混合液冷却至25℃，往上述溶液中加入甲醇钠(2.80g，51.5mmol，5.0当量)。反应液在80℃、氮气保护下搅拌4小时。将反应混合物减压浓缩，残留物经反相柱纯化后得到标题化合物(白色固体，600mg，产率22％)。
步骤B：3-(5-羰基-1,5-二氢-4H-1,2,4-三唑-4-基)苯甲酸
在室温下，把3-(5-羰基-1,5-二氢-4H-1,2,4-三唑-4-基)苯甲酸叔丁酯(600mg，2.29mmol，1.0当量)加入到二氯甲烷(10ml)溶液中，再加入三氟乙酸(3ml)。反应混合物在25℃、氮气环境下搅拌3小时。反应结束后，反应混合物经减压浓缩，得到标题化合物(白色固体，600mg，TFA盐)，直接用于下一步反应，无需进一步纯化。
步骤C：4-(3-(5-羰基-1,5-二氢-4H-1,2,4-三唑-4-基)苯甲酰胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，把3-(5-羰基-1,5-二氢-4H-1,2,4-三唑-4-基)苯甲酸(51mg，0.25mmol，1.0当量)和HATU(103mg，0.27mmol，1.1当量)加入到DMF(3mL)中，再加入4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(50mg，0.25mmol，1.0当量)和DIEA(160mg，1.24mmol，5当量)。反应液在室温条件下反应0.5小时。反应结束后，向反应混合物中加入氢氧化钠水溶液(2N，10mL)和乙酸乙酯(30mL)。摇晃静置后，有白色固体析出。将悬浮液过滤，滤饼用水洗涤，再用甲基叔丁基醚打浆并过滤，得到粗产品。粗产物经反相柱纯化得到标题化合物(白色固体，25mg，产率26％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.07(s,1H),10.83(s,1H),8.97(s,1H),8.51(s,1H),8.31(t,J＝1.7Hz,1H),8.11(s,1H),7.99(d,J＝7.7Hz,2H),7.95(dd,J＝8.0,1.3Hz,1H),7.89-7.78(m,2H),7.74(t,J＝7.9Hz,1H),7.56(t,J＝8.0Hz,2H),7.40(t,J＝7.4Hz,1H).
制备例180.化合物A462的合成
步骤A：5-(1,3,4-噻二唑-2-基)烟酸乙酯
在室温下，向5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)烟酸乙酯(500mg，1.8mmol，1.0当量)和2-溴-1,3,4-噻二唑(506mg，3.1mmol，1.7当量)的1,4-二氧六环(9.0mL)和水(1.5mL)混合溶液中加入Pd(PPh3)4(313mg，0.3mmol，0.15当量)和碳酸钾(499mg，3.6mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下100℃条件反应4小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经正相柱纯化后得到标题化合物(黄色固体，256mg，产率42％)。
步骤B：5-(1,3,4-噻二唑-2-基)烟酸
在室温下，向5-(1,3,4-噻二唑-2-基)烟酸乙酯(256mg，0.8mmol，1.0当量)的四氢呋喃(6.0mL)和水(2.0mL)混合溶液中加入氢氧化钠(61mg，1.5mmol，2.0当量)。反应液在25℃条件下反应3小时。反应完全后，反应液倒入水中，用2N稀盐酸调节pH＝4-5，乙 酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。得到粗品标题化合物用于下一步纯化(白色固体，200mg)。
步骤C：N-(3-氨基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)-5-(1,3,4-噻二唑-2-基)烟酰胺
在室温下，向5-(1,3,4-噻二唑-2-基)烟酸(115mg，0.6mmol，1.0当量)和4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(112mg，0.60mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入TEA(112mg，1.1mmol，2.0当量)和HATU(317mg，0.8mmol，1.5当量)。反应液在室温条件下反应2小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，16.0mg，产率7％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.97(s,1H),9.79(s,1H),9.40(s,1H),9.22(s,1H),8.99(s,1H),8.82(s,1H),8.12(s,1H),8.00(d,J＝7.9Hz,2H),7.85(s,1H),7.56(t,J＝7.8Hz,2H),7.41(t,J＝7.4Hz,1H).LCMS(ESI):m/z 392[M+H]+.
制备例181.化合物A463的合成
步骤A：3-异硫氰基苯甲酸甲酯
在0℃下，向3-氨基苯甲酸甲酯(300mg，1.99mmol，1.0当量)的四氢呋喃(10.0mL)溶液中加入二(1H-咪唑-1-基)甲硫酮(354mg，1.99mmol，3.0当量)。反应液在0℃条件下反应1小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，345mg，粗品)。
步骤B：2-((3-(甲氧羰基)苯基)氨基甲硫基)肼-1-甲酸乙酯
在室温下，向3-异硫氰基苯甲酸甲酯(345mg，1.8mmol，1.0当量)和肼甲酸乙酯(186mg，1.8mmol，1.0当量)的乙腈(10.0mL)溶液中加入三乙胺(542mg，5.4mmol，3.0当量)。反应液在80℃条件下反应3小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(白色固体，316mg，产率60％)。
步骤C：3-(3-氧代-5-硫代-1,2,4-三唑烷基-4-基)苯甲酸
在室温下，向2-((3-(甲氧羰基)苯基)氨基甲硫基)肼-1-甲酸乙酯(200mg，0.7mmol，1.0当量)的乙腈(2.0mL)和水(1.0mL)的混合溶液中加入氢氧化钾(38mg，0.7mmol，3.0当量)。反应液在100℃条件下反应2小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经柱纯化得到 标题化合物(白色固体，140mg，产率88％)。
步骤D：4-(3-(3-氧代-5-硫氧代-1,2,4-三唑烷基-4-基)苯甲酰氨基)-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向3-(3-氧代-5-硫代-1,2,4-三唑烷基-4-基)苯甲酸(140mg，0.6mmol，1.0当量)和HATU(337mg，0.9mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)溶液中加入4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(119mg，0.6mmol，1.0当量)和三乙胺(119mg，1.2mmol，2.0当量)。反应液在40℃条件下反应18小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，28.0mg，产率11％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.79(s,1H),8.97(s,1H),8.07(s,1H),8.02-7.95(m,3H),7.85-7.76(m,2H),7.69(d,J＝8.0Hz,1H),7.61(t,J＝7.8Hz,1H),7.55(t,J＝8.0Hz,2H),7.39(t,J＝7.4Hz,1H),7.08(s,2H).LCMS(ESI):m/z 422[M+H]+.
制备例182.化合物A464的合成
步骤A：2-((3-(甲氧羰基)苄基)氨基甲硫基)肼-1-甲酸乙酯
在室温下，向3-(氨基甲基)苯甲酸甲酯(500mg，2.5mmol，1.0当量)和三乙胺(750mg，7.4mmol，3.0当量)的乙腈(30.0mL)混合溶液中加入N,N'-硫羰基二咪唑(485mg，2.7mmol，1.1当量)。反应液在氮气保护下室温条件反应1小时。然后肼甲酸乙酯(257mg，2.5mmol，1.0当量)加入到反应液中，反应液在氮气保护下70℃条件反应16小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化后得到标题化合物(黄色固体，230mg，产率28％)。
步骤B：3-((3-氧代-5-硫代-1,2,4-三唑烷-4-基)甲基)苯甲酸
在室温下，向2-((3-(甲氧羰基)苄基)氨基甲硫基)肼-1-甲酸乙酯(230mg，0.9mmol，1.0当量)的乙腈(2.0mL)和水(1.0mL)的混合溶液中缓慢加入氢氧化钾(151mg，2.7mmol，3.0当量)。反应液在100℃条件下反应2小时。反应完全后，反应液倒入水中，用1N稀盐酸调节pH至中性，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，90mg，产率40％)。
步骤C：4-(3-((3-氧代-5-氧基-1,2,4-三唑烷基-4-基)甲基)苯甲酰氨基)-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向3-((3-氧代-5-硫代-1,2,4-三唑烷-4-基)甲基)苯甲酸(140mg，0.6mmol，1.0当量)和HATU(190mg，0.5mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)溶液中加入4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(101mg，0.5mmol，1.2当量)和三乙胺(121mg，1.2mmol，3.0当量)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，20.7mg，产率12％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.22(s,1H),12.19(s,1H),10.77(s,1H),8.96(s,1H),8.09(s,1H),7.98(d,J＝7.7Hz,2H),7.92(s,1H),7.82(s,1H),7.78(d,J＝7.3Hz,1H),7.62(d,J＝7.7Hz,1H),7.60-7.55(m,2H),7.54(s,1H),7.40(t,J＝7.4Hz,1H),4.97(s,2H).LCMS(ESI):m/z 436[M+H]+.
制备例183.化合物A465的合成
步骤A：3-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯
在室温下，向3-(氨基甲基)苯甲酸甲酯(200mg，1.2mmol，1.0当量)和三乙胺(785mg，3.6mmol，3.0当量)的二氯甲烷(30.0mL)溶液中加入二碳酸二叔丁酯(327mg，1.5mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温条件反应16小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化后得到标题化合物(黄色固体，285mg，产率89％)。
步骤B：3-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)苯甲酸
在0℃下，向3-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(285mg，1.1mmol，1.0当量)的甲醇(10.0mL)和水(2.0mL)混合溶液中加入氢氧化钠(88mg，2.2mmol，2.0当量)。反应液在25℃条件下反应2小时。反应完全后，反应液倒入冰水中，用1N稀盐酸调节pH至中性，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，240mg，产率86％)。
步骤C：(3-((3-氨基甲酰基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)氨基甲酰基)苄基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向3-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)苯甲酸(240mg，0.9mmol，1.0当量)和4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(223mg，1.1mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(20.0mL)溶液中加入HATU(418mg，1.1mmol，1.2当量)和三乙胺(273mg，2.7mmol，3.0当量)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(白色固体，210mg，产率54％)。
步骤D：4-(3-(氨基甲基)苯甲酰胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向(3-((3-氨基甲酰基-1-苯基-1H-吡唑-4-基)氨基甲酰基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(210mg，0.5mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(2.0mL)溶液中加入盐酸/1,4-二氧六环(10mL，4M)。反应液在室温条件下反应2小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物倒入饱和碳酸氢钠溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，150mg，产率89％)。
步骤E：4-(3-((5-氧代-2-硫代咪唑烷-1-基)甲基)苯甲酰胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向4-(3-(氨基甲基)苯甲酰胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(150mg，0.5mmol，1.0当量)和三乙胺(152mg，1.5mmol，3.0当量)的乙腈(20.0mL)溶液中加入N,N'-硫羰基二咪唑(107mg，0.6mmol，1.1当量)。反应液在氮气保护下室温条件反应1小时。然后甘氨酸甲酯盐酸盐(63mg，0.5mmol，1.0当量)加入到反应液中，反应液在氮气保护下70℃条件反应16小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化后得到标题化合物(黄色固体，25.6mg，产率12％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.79(s,1H),10.36(s,1H),8.95(s,1H),8.10(s,1H),7.98(d,J＝7.7Hz,2H),7.85(d,J＝9.5Hz,2H),7.78(d,J＝7.3Hz,1H),7.61(d,J＝7.7Hz,1H),7.58(d,J＝3.3Hz,1H),7.55(dd,J＝7.9,3.9Hz,2H),7.40(t,J＝7.4Hz,1H),4.99(s,2H),4.27(s,2H).LCMS(ESI):m/z 435[M+H]+.
制备例184.化合物A466的合成
步骤A：3-((4,4-二甲基-5-氧代-2-硫代咪唑烷-1-基)甲基)苯甲酸甲酯
在室温下，向3-(氨基甲基)苯甲酸甲酯(1.0g，5.0mmol，1.0当量)和三乙胺(2.5g，25.0 mmol，3.0当量)的乙腈(30.0mL)混合溶液中加入N,N'-硫羰基二咪唑(979mg，5.5mmol，1.1当量)。反应液在氮气保护下室温条件反应1小时。然后2-氨基-2-甲基丙酸甲酯盐酸盐(835mg，5.0mmol，1.0当量)加入到反应液中，反应液在氮气保护下70℃条件反应16小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化后得到标题化合物(黄色固体，850mg，产率58％)。
步骤B：3-((4,4-二甲基-5-氧代-2-硫代咪唑烷-1-基)甲基)苯甲酸
在室温下，向3-((4,4-二甲基-5-氧代-2-硫代咪唑烷-1-基)甲基)苯甲酸甲酯(850mg，2.9mmol，1.0当量)的醋酸(10.0mL)溶液中缓慢加入浓盐酸(5.0mL)。反应液氮气保护下在100℃条件反应2小时。反应完全后，反应液倒入冰水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色固体，420mg，产率52％)。
步骤C：4-(3-((4,4-二甲基-5-氧代-2-硫代咪唑烷-1-基)甲基)苯甲酰氨基)-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向3-((4,4-二甲基-5-氧代-2-硫代咪唑烷-1-基)甲基)苯甲酸(100mg，0.4mmol，1.0当量)和HATU(190mg，0.5mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)溶液中加入4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(101mg，0.5mmol，1.2当量)和三乙胺(121mg，1.2mmol，3.0当量)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，17.0mg，产率9％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.78(s,1H),10.62(s,1H),8.96(s,1H),8.09(s,1H),8.04-7.94(m,2H),7.86-7.73(m,3H),7.62-7.49(m,4H),7.43-7.37(m,1H),4.99(s,2H),1.36(s,6H).LCMS(ESI):m/z 463[M+H]+.
制备例185.化合物A467的合成
步骤A：3-异硫氰基苯甲酸甲酯
在0℃下，向3-(氨基甲基)苯甲酸甲酯(500mg，2.5mmol，1.0当量)的四氢呋喃(15.0mL)溶液中加入二(1H-咪唑-1-基)甲硫酮(354mg，1.99mmol，1.0当量)。反应液在氮气保护下0℃条件反应1小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到标题化合物(白色固体，348mg，粗品)。
步骤B：3-(4,4-二甲基-5-氧代-2-硫代咪唑烷-1-基)苯甲酸甲酯
在室温下，向3-异硫氰基苯甲酸甲酯(348mg，粗品)和2-氨基-2-甲基丙酸乙酯(236mg，1.8mmol，1.0当量)的乙腈(2.0mL)溶液中加入三乙胺(547mg，5.4mmol，3.0当量)。反应液在80℃条件下反应3小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(白色固体，417mg，产率83％)。
步骤C：3-(4,4-二甲基-5-氧代-2-硫代咪唑烷-1-基)苯甲酸
在室温下，3-(4,4-二甲基-5-氧代-2-硫代咪唑烷-1-基)苯甲酸甲酯(300mg，1.1mmol，3.0当量)的乙腈(2.0mL)和盐酸(1.0mL)混合溶液在100℃条件下反应2小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(白色固体，262mg，产率92％)。
步骤D：4-(3-(4,4-二甲基-5-氧代-2-硫代咪唑烷-1-基)苯甲酰氨基)-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向3-(4,4-二甲基-5-氧代-2-硫代咪唑烷-1-基)苯甲酸(100mg，0.4mmol，1.0当量)和HATU(216mg，0.6mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(77mg，0.4mmol，1.0当量)和三乙胺(77mg，0.8mmol，2.0当量)。反应液在40℃条件下反应18小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，43.0mg，产率25％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.81(s,1H),10.75(s,1H),8.95(s,1H),8.10(s,1H),7.99(d,J＝7.8Hz,2H),7.94(d,J＝7.8Hz,1H),7.90(s,1H),7.83(s,1H),7.73(t,J＝7.8Hz,1H),7.64(d,J＝8.6Hz,1H),7.56(t,J＝7.9Hz,2H),7.40(t,J＝7.4Hz,1H),1.47(s,6H).LC-MS(ESI):m/z 449[M+H]+.
制备例186.化合物A468的合成
步骤A：3-(3-(2-乙氧基-2-氧乙基)脲基)苯甲酸叔丁酯
在0℃下向溶有3-氨基苯甲酸叔丁酯(500mg，2.59mmol，1.0当量)的二氯甲烷(6mL)溶液中加入2-异氰基乙酸乙酯(501mg，3.88mmol，1.5当量)。反应液在25℃条件下反应3小时。反应完全后，反应液减压浓缩得到标题化合物(黄色油状物，0.8g，产率96％)。
步骤B：3-(2,5-二氧代咪唑烷-1-基)苯甲酸
在室温下向溶有3-(3-(2-乙氧基-2-氧乙基)脲基)苯甲酸叔丁酯(200mg，0.71mmol，1.0当量)的乙醇(3mL)溶液中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(8mL，4M)。反应液在90℃条件下反应3小时。反应完全后，反应液减压浓缩得到标题化合物(白色固体，122mg，产率88％)。
步骤C：4-(3-(2,5-二氧代咪唑烷-1-基)苯甲酰胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下向溶有3-(2,5-二氧代咪唑烷-1-基)苯甲酸(100mg，0.45mmol，1.0当量)的DMF(1mL)溶液中加入4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(92mg，0.45mmol，1.0当量)、PyBOP(355mg，0.68mmol，1.5当量)和DIEA(176mg，1.36mmol，3.0当量)。反应液在40℃条件下反应3小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，20mg，产率11％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.84(s,1H),8.97(s,1H),8.41(s,1H),8.11(s,1H),8.00(d,J＝7.8Hz,2H),7.94(t,J＝1.6Hz,1H),7.89(d,J＝7.7Hz,1H),7.83(s,1H),7.73(t,J＝7.8Hz,1H),7.69-7.64(m,1H),7.57(t,J＝7.9Hz,2H),7.41(t,J＝7.4Hz,1H),4.12(s,2H).LCMS(ESI):m/z 405[M+H]+.
制备例187.化合物A469的合成
步骤A：4-(3-吗啉基苯并氨基)-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在0℃下，向3-吗啉苯甲酸(67mg，0.32mmol，1.3当量)和4-氨基-1-苯基吡唑-3-甲酰胺(50mg，0.25mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)溶液中加入三乙胺(0.1mL，0.74mmol，3.0当量)和HATU(141mg，0.37mmol，1.5当量)。反应液在室温条件下反应5小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，15mg，产率12％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.76(s,1H),8.92(s,1H),8.09(s,1H),7.97(d,J＝7.8Hz,2H),7.83(s,1H),7.56(t,J＝7.9Hz,2H),7.48-7.36(m,3H),7.30(d,J＝7.7Hz,1H),7.24(dd,J＝8.3,2.3Hz,1H),3.84-3.73(m,4H),3.24-3.15(m,4H).LCMS(ESI): m/z 392[M+H]+.
制备例188.化合物A470的合成
步骤A：3-(2,2-二甲基吗啉基)苯甲酸甲酯
在室温下，向甲基(3-(甲氧羰基)苯基)硼酸(100mg，0.24mmol，1.0当量)的二氯甲烷(4.0mL)溶液中加入2,2-二甲基-1,4-噁嗪烷(154mg，1.33mmol，0.8当量)、三乙胺(0.9mL，6.67mmol，4.0当量)和醋酸铜(151mg，0.83mmol，0.5当量)。反应液在氧气保护下室温条件反应18小时。反应完全后，反应液加入氯化铵溶液，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经色谱柱纯化得到标题化合物(白色固体，170mg，产率41％)。
步骤B：3-(2,2-二甲基吗啉基)苯甲酸
在室温下，向3-(2,2-二甲基吗啉基)苯甲酸甲酯(150mg，0.60mmol，1.0当量)的四氢呋喃/乙醇/水(6mL，v/v/v＝1:1:1)混合溶液中加入氢氧化钠(241mg，6.02mmol，10.0当量)。反应液在室温条件反应5小时。反应完全后，反应液在冰浴中用稀盐酸溶液调节pH到5-6，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，110mg，粗品)。
步骤C：4-(3-(2,2-二甲基吗啉基)苯甲酰胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在0℃下，向3-(2,2-二甲基吗啉基)苯甲酸(75mg，0.13mmol，1.0当量)和4-氨基-1-苯基吡唑-3-甲酰胺(50mg，0.25mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)溶液中加入三乙胺(0.1mL，0.74mmol，3.0当量)和HATU(141mg，0.37mmol，1.5当量)。反应液在室温条件下反应5小时。反应完全后，反应液经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，20mg，产率19％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.74(s,1H),8.92(s,1H),8.09(s,1H),7.97(d,J＝7.8Hz,2H),7.84(s,1H),7.56(t,J＝7.9Hz,2H),7.45-7.38(m,3H),7.28-7.20(m,2H),3.81-3.77(m,2H),3.17-3.13(m,2H),3.04(s,2H),1.26(s,6H).LCMS(ESI):m/z 420[M+H]+.
制备例189.化合物A471的合成
步骤A：3-(2-(羟甲基)吗啉基)苯甲酸甲酯
在0℃下，向(3-(甲氧羰基)苯基)硼酸(350mg，1.95mmol，1.0当量)和吗啉-2-基甲醇(228mg，1.95mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5.0mL)溶液中加入三乙胺(1.1mL，7.78mmol，4.0当量)和醋酸铜(177mg，0.97mmol，0.5当量)。反应液在氧气保护下室温条件反应18小时。反应完全后，反应液倒入水中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(白色固体，110mg，产率23％)。
步骤B：3-(2-(羟甲基)吗啉基)苯甲酸
在0℃下，向3-(2-(羟甲基)吗啉基)苯甲酸甲酯(110mg，0.44mmol，1.0当量)的四氢呋喃(4.0mL)和水(1mL)溶液中加入一水合氢氧化锂(92mg，2.19mmol，5.0当量)。反应液在室温条件反应18小时。反应完全后，反应液在冰浴中用稀盐酸调节pH至5-6，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(白色固体，30mg，产率29％)。
步骤C：4-(3-(2-(羟甲基)吗啉基)苯甲酰胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在0℃下，向3-(2-(羟甲基)吗啉基)苯甲酸(37mg，0.17mmol，1.5当量)和4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(25mg，0.12mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)溶液中加入三乙胺(37mg，0.37mmol，3.0当量)和HATU(71mg，0.19mmol，1.6当量)。反应液在60℃条件下反应2小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，18mg，产率35％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.74(s,1H),8.92(s,1H),8.09(s,1H),7.97(d,J＝7.7Hz,2H),7.83(s,1H),7.56(t,J＝8.0Hz,2H),7.45(dd,J＝10.0,5.7Hz,2H),7.40(t,J＝7.4Hz,1H),7.28(d,J＝7.8Hz,1H),7.23(dd,J＝8.3,2.1Hz,1H),4.82(t,J＝5.8Hz,1H),3.98(dd,J＝11.3,2.0Hz,1H),3.73-3.62(m,2H),3.59(d,J＝10.4Hz,2H),3.53(dt,J＝10.8,5.4Hz,1H),3.46(dt,J＝11.3,5.8Hz,1H),2.77(td,J＝11.7,3.3Hz,1H),2.51(s,1H).LCMS(ESI):m/z 422[M+H]+.
制备例190.化合物A472的合成
步骤A：3-(2-((二甲基氨基)甲基)吗啉基)苯甲酸甲酯
在0℃下，向(3-(甲氧羰基)苯基)硼酸(470mg，2.61mmol，1.0当量)和N,N-二甲基-1-(吗啉-2-基)甲胺(490mg，3.40mmol，1.3当量)的二氯甲烷(5.0mL)溶液中加入三乙胺(1.5mL，10.4mmol，4.0当量)和醋酸铜(237mg，1.31mmol，0.5当量)。反应液在氧气保护下室温条件反应18小时。反应完全后，反应液倒入水中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经反相柱纯化得到标题化合物(黑色油状，200mg，产率28％)。
步骤B：3-(2-((二甲基氨基)甲基)吗啉基)苯甲酸
在0℃下，向3-(2-((二甲基氨基)甲基)吗啉基)苯甲酸甲酯(120mg，0.43mmol，1.0当量)的四氢呋喃(3.0mL)和水(1mL)溶液中加入氢氧化钠(86mg，2.16mmol，5.0当量)。反应液在室温条件反应18小时。反应完全后，反应液在冰浴中用稀盐酸调节pH至5-6，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到标题化合物(白色固体，100mg，产率88％)。
步骤C：4-(3-(2-((二甲基氨基)甲基)吗啉基)苯甲酰胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在0℃下，向3-(2-((二甲基氨基)甲基)吗啉基)苯甲酸(37mg，0.17mmol，1.5当量)和4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(70mg，0.35mmol，2.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)溶液中加入N-甲基咪唑(86mg，1.04mmol，6.0当量)和TCFH(18mg，64μmol，0.4当量)。反应液在70℃条件下反应1小时。反应完全后，反应液倒入水中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，18.9mg，产率12％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.75(s,1H),8.93(s,1H),8.09(s,1H),7.97(d,J＝8.1Hz,2H),7.82(s,1H),7.56(t,J＝7.9Hz,2H),7.42(dt,J＝14.8,7.6Hz,3H),7.25(dd,J＝19.6,8.0Hz,2H),3.97(d,J＝12.0Hz,1H),3.74-3.54(m,4H),2.77(dd,J＝11.5,8.1Hz,1H),2.47-2.31(m,3H),2.21(s,6H).LCMS(ESI):m/z 449[M+H]+.
制备例191.化合物A473的合成
步骤A：3-(2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚烷-5-基)苯甲酸甲酯
在0℃下，向(3-(甲氧羰基)苯基)硼酸(597mg，3.32mmol，1.5当量)和2-氮杂-5-氧杂双环[2.2.1]庚烷盐酸盐(300mg，2.21mmol，1.0当量)的二氯甲烷(4.0mL)溶液中加入三乙胺(1.2mL，8.85mmol，4.0当量)和醋酸铜(201mg，1.11mmol，0.5当量)。反应液在氧气保护下室温条件反应18小时。反应完全后，反应液倒入水中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱纯化得到标题化合物(黄色油状，80mg，产率16％)。
步骤B：3-(2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚烷-5-基)苯甲酸
在0℃下，向3-(2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚烷-5-基)苯甲酸甲酯(70mg，0.30mmol，1.0当量)的四氢呋喃(0.5mL)和水(0.2mL)溶液中加入氢氧化钠(48mg，1.20mmol，4.0当量)。反应液在50℃条件反应18小时。反应完全后，反应液在冰浴中用稀盐酸调节pH至5-6，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状，45mg，粗品)。
步骤C：4-(3-(2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚烷-5-基)苯甲酰胺基)-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在0℃下，向3-(2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚烷-5-基)苯甲酸(37mg，粗品)和4-氨基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(30mg，0.15mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)溶液中加入三乙胺(45mg，0.45mmol，3.0当量)和HATU(85mg，0.22mmol，1.5当量)。反应液在室温条件下反应5小时。反应完全后，反应液倒入水中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，17mg，产率28％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.74(s,1H),8.92(s,1H),8.09(s,1H),7.97(d,J＝8.1Hz,2H),7.83(s,1H),7.56(t,J＝7.8Hz,2H),7.38(dd,J＝17.2,7.6Hz,2H),7.16-7.03(m,2H),6.90(d,J＝8.1Hz,1H),4.65(d,J＝10.5Hz,2H),3.79(d,J＝7.3Hz,1H),3.69(d,J＝7.4Hz,1H),3.57(d,J＝9.1Hz,1H),3.03(d,J＝9.4Hz,1H),1.97(d,J＝9.6Hz,1H),1.89(d,J＝9.5Hz,1H).LC-MS(ESI):m/z 404[M+H]+.
制备例192.中间体Int3的合成
将化合物Int3-1(64.0g，291mmol，1.00当量)加入到2.00L的三口圆底烧瓶中，于25℃下加入THF(640mL)，并且于25℃下加入DIEA(169g，1.31mol，228mL，4.50当量)和二甲胺盐酸盐(88.4g，1.31mol，4.50当量)，加热至60℃并且搅拌12小时。LCMS显示化合物Int3-1反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.418min)。将反应液倒入1000mL水中，用乙酸乙酯(1000mL)萃取2次。合并的有机相用饱和盐水(1000mL)洗涤2次，硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩，得到化合物Int3-2(67.0g，290mmol，收率99.6％，纯度100％)，为红色液体。
将化合物Int3-2(64.0g，291mmol，1.00当量)加入到3L的三口圆底烧瓶中，于25℃下将乙酸乙酯(983mL)和水(32.8mL)加入三口瓶中，于25℃下加入冰乙酸(328mL)，加热至50℃后将铁粉(63.3g，1.13mol，4.00当量)分批加入反应液中，加热至80℃反应12小时。TLC(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)显示化合物Int3-2(Rf＝0.60)反应完全，生成一个新点(Rf＝0.50)。降温至25℃，过滤，并且浓缩滤液。加入饱和碳酸钠溶液(1000mL)，用乙酸乙酯(1000mL)萃取2次，用饱和盐水(1000mL)洗涤有机相2次，硫酸钠干燥，干燥，并且浓缩，得到化合物Int3-3(60.0g，274mmol，收率96.8％，纯度92％)，为黄色液体。
将化合物Int3-3(59.1g，270mmol，1.00当量)加入到2L的三口圆底烧瓶中。在25℃下加入乙腈(887mL)。在25℃和氮气氛围下加入CDI(87.7g，541mmol，2.00当量)。加热升温至85℃反应12小时。LCMS显示化合物Int3-3反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.410min)。过滤并且浓缩，粗品用水(500mL)洗涤，过滤，并且干燥，得到粗品。粗品用石油醚:乙酸乙酯＝1:1(500mL)打浆，得到化合物Int3-4(52.2g，220mmol，收率81.4％，纯度95.8％)，为类白色固体。
将化合物Int3-4a(50.0g，201mmol，1.00当量)加入到2.00L的三口圆底烧瓶中，加入二氯甲烷(500mL)。在20-25℃和氮气氛围下加入吡啶(31.7g，401mmol，32.4mL，2.00当量)，在0-5℃搅拌1小时，在0℃下加入三氟甲磺酸酐(113g，401mmol，66.5mL，2.00当量)。升温至25℃搅拌3小时。TLC(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)显示化合物Int3-4a反应完全， 生成一个新的主点(Rf＝0.60)。将反应液过滤，将滤液浓缩，得到粗品。粗品用硅胶色谱柱分离，得到化合物Int3-4b(55.1g，133mmol，收率66.4％，纯度92.2％)，为黄色油状物。
将化合物Int3-4(12.1g，50.9mmol，1.00当量)加入到1L的三口圆底烧瓶中，在25℃下加入四氢呋喃(302mL)，在25℃下加入叔丁醇钾(6.85g，61.1mmol，1.20当量)，降温至0℃，反应0.5小时。在0℃下，将溶解于四氢呋喃(97.0mL)中的化合物Int3-4b(19.4g，50.9mmol，1.00当量)加入反应瓶中，升温到25℃反应2.5小时。LCMS显示化合物Int3-4反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.508min)。将反应混合物倒入氯化铵水溶液(500mL)中，水相用乙酸乙酯(500mL*2)萃取，合并的有机相用盐水(500mL*2)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩，得到粗产物。粗产物用制备型HPLC纯化，洗脱液真空浓缩去除ACN，水相用乙酸乙酯(100mL*2)萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤后真空浓缩，得到化合物Int3-5(18.0g，37.6mmol，收率73.9％，纯度95.8％)，为紫色固体。
将化合物Int3-5(16.1g，33.7mmol，1.00当量)加入到500mL的三口圆底烧瓶中。在20℃下，加入甲苯(97mL)和甲烷磺酸(48.5mL)。加热至120℃反应3小时。LCMS显示化合物Int3-5反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.359min)。过滤并且浓缩，将粗品倒入水(50mL)中，再次过滤，收集滤饼，并且真空干燥。粗品用石油醚(50mL)打浆，得到化合物Int3(7.40g，18.8mmol，收率55.7％，纯度85.9％)，为类白色固体。LCMS:m/z＝339.9(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.1(s,1H),7.25-7.22(m,1H),7.17(d,J＝8.0Hz,1H),7.00-6.96(m,1H),5.41(dd,J＝12.6Hz,1H),3.63(s,3H),2.93-2.84(m,1H),2.76-2.61(m,2H),2.05-1.98(m,1H).
制备例193.化合物A109的合成

在20-25℃下，将4-溴哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.98g，11.3mmol，2.00当量)和DMF(20.0mL)加入100mL三口圆底烧瓶瓶中。再在20-25℃下，添加化合物Int1(2.00g，5.65mmol，1.00当量)和Cs2CO3(3.68g，11.3mmol，2.00当量)至反应液中。将混合物于120℃反应16小时。LCMS显示35.8％的化合物Int1未反应完全，并且检测到46.4％的目标质谱(RT＝0.713min)。过滤，浓缩，粗品采用柱层析纯化(SiO2，石油醚:乙酸乙酯＝1:1)。浓缩后得到化合物A109-2-1(1.50g，2.96mmol，收率52.3％,纯度95.1％)，为黄色固体。
将二氯甲烷(3.00mL)加入40.0mL单口瓶中。在20-25℃，加入化合物A109-2-1(1.50g，2.96mmol，1.00当量)和三氟乙酸(10.1g，88.7mmol，6.59mL，30.0当量)，在20-25℃反应2小时。TLC(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)显示生成一个新的主点。浓缩后得到化合物A109-2-2(1.53g，粗品)，为白色固体。
将化合物A109-2-2(1.53g，4.00mmol，1.00当量)加入100mL三口瓶中，再加入甲醇(30.0mL)和碱性树脂(10.0g，4.00mmol，1.00当量)，搅拌0.5小时。TLC(二氯甲烷:甲醇＝1:2)显示生成一个新的主点(Rf＝0)。过滤，浓缩滤液，得到化合物A109-2(0.80g，2.08mmol，收率52.0％，纯度99.5％)，为白色固体。
将二氯甲烷(50.0mL)加入250mL三口瓶中，在-10℃和氮气环境下，加入化合物A109-0(5.00g，21.7mmol，1.00当量)、DMSO(13.6g，174mmol，13.5mL，8.00当量)和DIEA(11.2g，86.8mmol，15.0mL，4.00当量)；分批加入吡啶三氧化硫络合物(12.1g，75.9mmol，3.50当量)。在-10-0℃反应4小时。TLC(二氯甲烷:甲醇＝20:1)显示原料(Rf＝0.20)反应完全，并且生成一个主点(Rf＝0.30)。将原料倒入水(80.0mL)、二氯甲烷(250mL)中，分液并用二氯甲烷(60.0mL)萃取一次。合并的有机相用饱和盐水(80.0mL)洗涤。硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩，得到化合物A109-1(4.96g，粗品)，为黄色油状物，将其直接用于下一步。
将化合物A109-1(1.90g，8.33mmol，4.00当量)和化合物A109-2(800mg，2.08mmol，1.00当量)加入40mL单口瓶中，加入DMF(8.00mL)、AcOH(500mg，8.33mmol，477μL， 4.00当量)和NaBH(OAc)3(882.49mg，4.16mmol，2.00当量)，在20-25℃反应12小时。LCMS显示化合物A109-1反应完全，并且检测到88.1％的目标质谱(RT＝0.594min)。加入饱和碳酸氢钠水溶液(5.00mL)、H2O(80.0mL)和乙酸乙酯(150mL)，分液，用乙酸乙酯(30.0mL)萃取一次。饱和盐水(60.0mL)洗涤合并的有机相，硫酸钠干燥，过滤，浓缩，粗产物用制备型HPLC纯化，将洗脱液冻干，得到化合物A109-3(1.00g，1.65mmol，收率67.0％，纯度97.9％)，为黄色固体。
将化合物A109-3(1.00g，1.65mmol，1.00当量)加入40mL单口瓶中，加入三氟乙酸(2.82g，24.7mmol，1.83mL，15.0当量)和二氯甲烷(10.0mL)。在20-25℃反应2小时。TLC(二氯甲烷:甲醇＝10:1)显示生成一个新点(Rf＝0.30)。过滤，滤液浓缩，得到化合物A109-4(814mg，粗品)，为黄色固体。
将化合物A109-4(814mg，1.65mmol，1.00当量)加入100mL三口瓶中，加入甲醇(16.0mL)和碱性树脂A26(4.00g，1.65mmol，1.00当量)，搅拌0.5小时。TLC(二氯甲烷:甲醇＝10:1)显示生成一个主点(Rf＝0.1)。过滤，滤液浓缩，得到化合物A109-5(814mg，粗品)，为黄色固体。
将化合物Int 7(910mg，2.67mmol，2.00当量)和DMSO(16.0mL)加入100mL三口瓶中，再加入化合物A109-5(814mg，1.33mmol，1.00当量)和K3PO4(1.75g，6.67mmol，5.00当量)。升温至100℃反应12小时。LCMS显示A109-5反应完全，并且检测到32.1％的目标质谱(RT＝0.553min)。倒入水(50.0mL)和二氯甲烷(100mL)，分液，再用二氯甲烷(50.0mL)萃取一次。饱和盐水(60.0mL)洗涤合并的有机相。硫酸钠干燥，过滤，浓缩，粗产物用制备型HPLC纯化，得到化合物A109(70.0mg，88.8μmol，收率6.40％，纯度95.2％)，为黄色固体。LCMS:m/z＝751.4(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(s,1H)11.08(br s,1H)8.34-8.47(m,3H)8.18(d,J＝7.2Hz,1H)7.64-7.71(m,1H)7.56(br s,1H)7.34(s,1H)7.26(br d,J＝8.2Hz,1H)5.07(dd,J＝12.0,5.4Hz,1H)4.23-4.31(m,1H)3.44(br s,5H)3.02(br d,J＝10.0Hz,2H)2.80-2.94(m,1H)2.53-2.62(m,9H)2.09-2.17(m,2H)2.03(br d,J＝5.6Hz,5H).
制备例194.化合物A110的合成
将化合物Int7(6.74g，24.4mmol，1.00当量)、1-Boc-3-氨甲基氮杂环丁烷(5.00g，26.8mmol，1.10当量)和NMP(30.0mL)加入100mL三口瓶中，再加入DIEA(6.31g，48.8mmol，8.50mL，2.00当量)。升温至120℃反应12小时。LCMS显示化合物Int7反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.425min)。将反应液倒入水(100mL)中，用二氯甲烷(100mL)萃取3次，合并的有机相用饱和盐水(200mL)洗涤，硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩。粗品用柱层析纯化(SiO2，石油醚/EtOAc＝10/1至8/1，Rf＝0.7)，得到化合物A110-1(3.40g，6.72mmol，收率27.5％，纯度87.5％)，为深蓝色油状物。
将化合物A110-1(500mg，989μmol，1.00当量)和二氯甲烷(2.40mL)加入100mL三口瓶中，再加入三氟乙酸，于20-25℃反应3小时。LCMS显示化合物A110-1反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.203min)。浓缩，得到化合物A110-2(600mg，粗品)，为绿色固体。
将化合物A13(100mg，238μmol，1.00当量)、TEA(144mg，1.43mmol，199μL，6.00当量)、DMF(5.00mL)和HATU(90.6mg，238μmol，1.00当量)加入40mL单口瓶中，于0-5℃反应0.5小时，加入化合物A110-2(300mg，876μmol，3.67当量)，于20-25℃反应1小时。LCMS显示化合物A13反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.446min)。过滤，滤饼用DMF(0.5mL)洗涤。粗产物用制备型HPLC纯化，将流动相冻干，得到化合物A110(44.6mg，57.9μmol，收率24.3％，纯度96.6％)，为黄色固体。LCMS:m/z＝744.1(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.87-11.78(m,1H)11.16-11.00(m,1H)9.25-9.06(m,1H)8.53-8.38(m,2H)8.23(d,J＝7.6Hz,1H)8.15-8.06(m,3H)7.88-7.78(m,3H)7.58(d,J＝8.2Hz,1H)7.34-7.27(m,1H)7.06-7.00(m,1H)6.95-6.88(m,1H)5.10-4.99(m,1H)4.52-4.42(m,1H)4.07(s,2H)3.87-3.79(m,1H)3.50(d,J＝5.6Hz,2H)3.01-2.92(m,2H)2.89-2.83(m,1H)2.60(d,J＝3.2Hz,1H)2.04-1.97(m,1H).
制备例195.化合物A111的合成
在20-25℃下，将化合物Int2(375mg，1.11mmol，1.00当量)、化合物A111-1(400mg，1.67mmol，1.50当量)和DMF(7.50mL)加入至100mL三口圆底烧瓶中。在氮气氛围下，再加入CuI(42.4mg，222μmol，0.20当量)、Pd(PPh3)2Cl2(156mg，222μmol，0.20当量)和Cs2CO3(1.45g，4.46mmol，4.00当量)。置换氮气3次。升温至80℃反应2小时。LCMS显示化合物Int2反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.503)。冷却至20-25℃。倒入水(35.0mL)中，水相用乙酸乙酯(35.0mL*3)萃取。有机层用盐水(40.0mL)洗涤，硫酸钠干燥，并且浓缩。粗产物用制备型HPLC纯化，将洗脱液冻干，得到化合物A111-2(130mg，251μmol，收率22.5％，纯度95.7％)，为黄色固体。
在20-25℃下，将化合物A111-2(130mg，251mmol，1.00当量)和DCM(7.50mL)加入至8mL单口瓶中。在20-25℃下加入TFA(2.00g，17.5mmol，1.30mL，69.7当量)，在25℃下反应1小时。LCMS显示化合物A111-2反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.272min)。浓缩，得到化合物A111-3(130mg，243μmol，收率97.1％，纯度95.6％，TFA)，为黄色固体，将其直接用于下一步。
在20-25℃下，将化合物A13(131mg，314mmol，1.00当量)、TEA(95.4mg，942μmol，131μL，3.00当量)和DCM(7.50mL)加入至100mL三口圆底烧瓶中(R1)。在20-25℃下加入HATU(119mg，314μmol，1.00当量)。用氮气置换3次。在0-5℃反应1小时。在25℃下，将化合物A111-3(130mg，314μmol，1.00当量，TFA)、TEA(95.4mg，942μmol，131μL，3.00当量)和DMF(4.00mL)加入到另一个10mL的单口瓶中(R2)，并在0-5℃下加入到三口瓶中，在20-25℃下反应3小时。LCMS显示化合物A111-3反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝1.620mins)。浓缩反应液。粗产物用制备型HPLC纯化，将洗脱液冻干，得到化合物A111(63.3mg，78.9μmol，收率52.4％，纯度99.3％)，为类白色固体。LCMS:m/z＝797.1(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),11.14(s,1H),9.09(s,1H),8.51-8.44(m,1H),8.44-8.35(m,1H),8.22(d,J＝8.0Hz,1H),8.08(br d,J＝8.4Hz,3H),8.01-7.87(m,3H),7.82(br s,1H),7.59(d,J＝8.4Hz,2H),5.17(dd,J＝5.6,12.8Hz, 1H),4.54(s,2H),4.10-3.94(m,1H),3.91-3.83(m,1H),2.93-2.83(m,1H),2.69-2.53(m,4H),2.47-2.24(m,1H),2.14-2.03(m,1H),2.02-1.79(m,2H),1.70-1.46(m,2H).
制备例196.化合物A112的合成
在15-25℃下，将化合物A112-1(150mg，361μmol，1.00当量)、THF(10.0mL)加入40mL单口反应瓶中。在0℃下，添加t-BuOK(777mg，6.93mmol，1.20当量)和3-溴丙炔(901mg，6.06mmol，653μL，1.05当量)至反应液中。将混合物于15-25℃反应16小时。TLC(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)显示化合物A112-1反应完全(Rf＝0.1)，并且检测到新点(Rf＝0.4)。倒入水(20mL)中，二氯甲烷(20mL)萃取3次，合并的有机相用饱和食盐水(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩，得到化合物A112-2(1.07g，5.06mmol，收率87.6％，纯度100％)，为白色固体。
在20-25℃下，将化合物A112-2(799mg，3.78mmol，1.50当量)、化合物Int2(850mg，2.52mmol，1.00当量)和DMF(17.0mL)加入100mL三口圆底烧瓶中。再加入DIEA(1.30g，10.1mmol，1.76mL，4.00当量)、Pd(dppf)Cl2(368mg，504μmol，0.20当量)和CuI(96.0mg，504μmol，0.20当量)，置换3次氮气，升温至80℃反应4小时。LCMS显示化合物Int2反应完全，并且检测到40.1％的目标质谱。倒入水(60.0mL)中，用乙酸乙酯(50.0mL)萃取3次，合并的有机相用饱和盐水(60.0mL)洗涤，硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩。粗产物用制备型HPLC纯化，并且冻干，得到化合物A112-3(0.45g，786μmol，收率29.7％，纯度81.7％)，为黄色固体。
将化合物A112-3(350mg，611μmol，1.00当量)加入10mL单口瓶中。在0-5℃下，加入二氯甲烷(3.50mL)和TFA(1.05g，9.18mmol，681μL，15.0当量)，升温至25℃反应2小时。LCMS显示化合物A112-3反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.256min)。将反应液浓缩，得到化合物A112-4(0.80g，粗品，TFA)，为黑色油状物。
在25℃和氮气氛围下，将化合物A13(144mg，332μmol，1.00当量)、三乙胺(101mg，998μmol，139μL，3.00当量)和二氯甲烷(7.00mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，降温至 0-5℃，加入HATU(126mg，332μmol，1.00当量)，搅拌1小时，再加入化合物A112-4(350mg，332μmol，1.00当量，TFA)、三乙胺(101mg，998μmol，139μL，3.00当量)和DMF(10.5mL)，反应3小时。LC-MS显示剩余4.89％的化合物A13，并且检测到58.0％的目标质谱。过滤，母液用制备型HPLC纯化，将洗脱液冻干，得到化合物A112(131mg，163μmol，收率49.1％，纯度95.7％)，为黄色固体。LCMS:m/z＝769.1(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H)11.14(s,1H)9.11(s,1H)8.48-8.37(m,2H)8.22(dd,J＝7.6,0.88Hz,1H)8.10(br d,J＝8.8Hz,3H)8.00-7.92(m,3H)7.87-7.80(m,3H)5.17(dd,J＝12.0,5.4Hz,1H)4.68-4.50(m,4H)4.42-4.32(m,2H)4.05-3.95(m,1H)2.95-2.81(m,1H)2.65-2.53(m,2H)2.11-2.01(m,1H).
制备例197.化合物A113的合成
在15-25℃下，将化合物A113-1(1.00g，5.37mmol，1.00当量)加入40mL单口瓶中，再加入乙腈(5.00mL)和碳酸钾(1.11g，8.05mmol，1.50当量)，降温至0℃，加入4-溴正丁炔(785mg，5.91mmol，1.10当量)，升温至60℃反应16小时。TLC(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)显示化合物A113-1(Rf＝0.1)已经反应完全，生成一个新的主点(Rf＝0.5)。倒入20mL水中，用乙酸乙酯(20mL)萃取3次，合并的有机相用饱和盐水(50mL)洗涤，硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩。粗品通过柱层析(SiO2，石油醚:乙酸乙酯＝20:1至10:1)分离，得到化合物A113-2(0.98g，4.13mmol，收率76.9％)，为白色油状物。
在20-25℃下，将化合物Int2(620mg，1.84mmol，1.00当量)、化合物A113-2(657mg，2.76mmol，1.50当量)和DMF(12.4mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，再加入Pd(dppf)Cl2(269mg，367μmol，0.20当量)、DIEA(950mg，7.36mmol，1.28mL，4.00当量)和碘化亚铜(70.0mg，367μmol，0.20当量)，置换3次氮气，升温至80℃反应4小时。LCMS显示化合物Int2反应完全，并且检测到43.7％的目标质谱。将反应液倒入40mL水中，用乙酸乙酯(30mL)萃取3次，合并的有机相用饱和氯化钠(60mL)洗涤，硫酸钠干燥，过滤，浓缩，粗产物用制备型HPLC纯化，将洗脱液冻干，得到化合物A113-3(160mg，162μmol， 收率8.81％，纯度50.1％)，为白色固体。
将化合物A113-3(370mg，730μmol，1.00当量)加入10mL单口瓶中，降温至0-5℃，加入二氯甲烷(3.70mL)和三氟乙酸(1.25g，10.9mmol，813μL，15.0当量)，升温至20-25℃反应2小时。LC-MS显示化合物A113-3反应完全，并且检测到95.8％的目标质谱(RT＝0.236min)。将反应液浓缩，得到化合物A114-4(1.00g，粗品，TFA)，为黄色油状物。
在25℃和氮气氛围下，将化合物A13(200mg，463μmol，1.00当量)、三乙胺(140mg，1.39mmol，193μL，3.00当量)和二氯甲烷(10.0mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，降温至0-5℃，加入HATU(176mg，463μmol，1.00当量)，搅拌1小时，再加入化合物A113-4(500mg，463μmol，1.00当量，TFA)、三乙胺(140mg，1.39mmol，193μL，3.00当量)和DMF(15.0mL)，升温至20-25℃反应3小时。LCMS显示剩余4.2％的化合物A13(RT＝0.440min)，并且检测到68.9％的目标质谱。倒入30mL水中，用乙酸乙酯(25.0mL)萃取3次，合并的有机相用饱和盐水(50.0mL)洗涤，硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩。粗产物用制备型HPLC纯化，将洗脱液冻干，得到化合物A113(233mg，286μmol，收率61.7％，纯度97.7％)，为白色固体。
LCMS:m/z＝796.2(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.81(s,1H)11.14(s,1H)9.13(s,1H)8.48-8.38(m,2H)8.23(dd,J＝7.6,1.2Hz,1H)8.18-8.04(m,3H)7.98-7.89(m,3H)7.85(s,1H)7.66(d,J＝8.6Hz,2H)5.17(dd,J＝12.0,5.4Hz,1H)3.58-3.13(m,9H)3.05(br d,J＝6.2Hz,2H)2.95-2.83(m,1H)2.68-2.53(m,3H)2.11-2.02(m,1H).
制备例198.化合物A114的合成
将化合物A13(261mg，602μmol，1.00当量)和二氯甲烷(6.50mL)加入100mL三口圆底烧瓶，在20-25℃下加入三乙胺(183mg，1.80mmol，251μL，3.00当量)和HATU(229mg，602μmol，1.00当量)，在0℃搅拌1小时，再加入化合物A114-1(250mg，602μmol，1.00当量)、三乙胺(183mg，1.80mmol，251μL，3.00当量)和DMF(7.50mL)，升温至25℃反应2小时。LCMS显示化合物A114-1反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.419min)。将反应液过滤，将母液浓缩，粗产物用制备型HPLC纯化，得到化合物A114(129mg，154μmol，收率25.6％，纯度95.1％)，为类白色固体。LCMS:m/z＝798.2(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),11.12(s,1H),9.09(s,1H),8.47-8.38(m,2H),8.22(d,J＝7.4 Hz,1H),8.07(d,J＝8.6Hz,3H),7.82(s,1H),7.58(d,J＝8.6Hz,2H),7.18-7.01(m,3H),5.41-5.37(m,1H),4.53(s,2H),4.01-3.97(m,1H),3.87-3.82(m,1H),3.65(s,3H),3.34-3.32(m,3H),2.91-2.84(m,1H),2.72-2.60(m,2H),2.03-1.91(m,3H),1.59-1.51(m,2H).
制备例199.化合物A115的合成
将化合物A115-1(500mg，1.27mmol，1.00当量)和化合物Int3(757mg，3.18mmol，2.50当量)加入100mL三口圆底烧瓶，然后加入DMF(10.0mL)。在氮气氛围下再加入CuI(48.4mg，254μmol，0.20当量)、Pd(dppf)Cl2(186mg，254μmol，0.20当量)和DIEA(657mg，5.08mmol，885μL，4.00当量)，升温至80℃反应4小时。LCMS显示剩余22.1％的化合物A115-1(RT＝0.359min)，并且检测到目标质谱(RT＝0.313min)。将反应液过滤，浓缩，粗产物用制备型HPLC纯化，将洗脱液浓缩，得到化合物A115-2(425mg，723μmol，收率56.9％，纯度84.3％)，为黄色固体。
将化合物A115-2(375mg，638μmol，1.00当量)加入100mL三口圆底烧瓶中，在25℃下加入二氯甲烷(4.00mL)和三氟乙酸(6.14g，53.8mmol，4.00mL，84.4当量)，加热至40℃，反应1小时。LCMS显示化合物A115-2反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.224min)。将反应液过滤，母液浓缩，得到化合物A115-3(400mg，粗品，TFA)，为棕色油状物。
将化合物A13(340mg，785μmol，1.00当量)加入100mL三口圆底烧瓶中，在25℃和氮气氛围下加入DMF(9.00mL)和三乙胺(238mg，2.36mmol，328μL，3.00当量)，降温至0-5℃，加入HATU(298mg，785μmol，1.00当量)，反应1小时，再加入化合物A115-3(400mg，785μmol，1.00当量，TFA)、三乙胺(238mg，2.36mmol，328μL，3.00当量)和二氯甲烷(6.00mL)，升温至25℃，反应2小时。LCMS显示化合物A115-3反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.385min)。将反应液过滤，母液浓缩，粗产物用制备型HPLC纯化，将洗脱液冻干，得到化合物A115(75.1mg，92.0μmol，收率11.7％，纯度97.6％)，为类白色固体。LCMS:m/z＝797.3(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.8(s,1H),11.1(s,1H),9.13(s,1H),8.50-8.38(m,2H),8.25-8.21(m,1H),8.17-8.05(m,3H),7.86(s,1H), 7.66(d,J＝8.6Hz,2H),7.23-6.97(m,3H),5.42-5.37(m,J＝12.8Hz,1H),3.65(s,3H),3.47-3.41(m,2H),3.29-3.21(m,3H),3.02(d,J＝8.8Hz,3H),2.94-2.85(m,2H),2.73-2.60(m,5H),2.07-1.99(m,1H).
制备例200.化合物A116的合成
在20-25℃下，将化合物A116-1(2.00g，10.04mmol，1.00当量)、炔丙胺(608mg，11.0mmol，707μL，1.10当量)和二氯甲烷(30.0mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，再加入冰乙酸(1.21g，20.1mmol，1.15mL，2.00当量)，搅拌1小时，降温至0℃，加入NaBH(OAc)3(3.19g，15.0mmol，1.50当量)，升温至20-25℃反应16小时。TLC(石油醚:乙酸乙酯＝0:1)显示化合物A116-1(Rf＝0.5)反应完全，并且生成一个新的主点(Rf＝0.2)。加入碳酸钠调pH＝9，加入水(30.0mL)，用二氯甲烷(25.0mL)萃取3次，合并的有机相用饱和实验水(50.0mL)洗涤，硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩。粗品通过柱层析分离(SiO2,石油醚/乙酸乙酯＝30/1至10/1)，得到化合物A116-2(1.70g，7.13mmol，收率71.0％)，为黄色油状物。
在20-25℃下，将化合物A116-2(787mg，3.30mmol，3.00当量)、化合物Int 3(400mg，1.10mmol，1.00当量)和DMF(8.00mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，再加入碘化亚铜CuI(41.9mg，220μmol，0.20当量)、DIEA(569mg，4.41mmol，767μL，4.00当量)和Pd(dppf)Cl2(161mg，220μmol，0.20当量)，置换3次氮气，升温至80℃反应4小时。LC-MS显示剩余25.1％的化合物Int 3(RT＝0.344min)，并且检测到32.4％的目标质谱(RT＝0.309min)。将反应液过滤，滤液用制备型HPLC纯化，讲洗脱液冻干，得到化合物A116-3(150mg，303μmol，收率24.9％，纯度100％)，为白色固体。
将化合物A116-3(130mg，262μmol，1.00当量)加入10mL单口瓶中，再加入二氯甲烷(3.00mL)和三氟乙酸(897mg，7.87mmol，585μL，30.0当量)，在20-25℃下反应2小时。LCMS显示化合物A116-3反应完全，并且检测到93.3％的目标质谱(RT＝0.197min)。将反应液浓缩，得到化合物A116-4(600mg，301μmol，粗品，TFA)，为黄色油状物，将其直接用于下一步。
在25℃和氮气氛围下，将化合物A13(86.9mg，200μmol，1.00当量)、三乙胺(60.9mg，602μmol，83.8μL，3.00当量)和二氯甲烷(8.00mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，在0-5℃下，加入HATU(76.4mg，200μmol，1.00当量)，搅拌1小时，再加入化合物A116-4(400mg，200μmol，1.00当量，TFA)、三乙胺(122mg，1.20mmol，167μL，6.00当量)和DMF(12.0mL)，升温至20-25℃反应3小时。LC-MS显示化合物A13反应完全，并且检测到63.5％的目标质谱(RT＝0.379min)。将反应液浓缩，过滤，粗产物用制备型HPLC纯化，将洗脱液冻干，得到化合物A116(55.6mg，68.9μmol，收率34.3％，纯度98.7％)，为类白色固体。LCMS:m/z＝797.4(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.81(s,1H)11.14(s,1H)9.42(s,1H)9.11(s,1H)8.49-8.34(m,2H)8.23(d,J＝7.6Hz,1H)8.13-8.03(m,3H)7.85(br s,1H)7.57(d,J＝8.6Hz,2H)7.28-7.15(m,2H)7.12-7.02(m,1H)5.42(dd,J＝12.0,5.2Hz,1H)4.63-4.44(m,1H)4.35(s,2H)3.66-3.47(m,6H)3.31-3.09(m,1H)3.05-2.82(m,2H)2.80-2.58(m,2H)2.26-2.06(m,2H)2.06-1.98(m,1H)1.67-1.42(m,2H).
制备例201.化合物A117的合成
在25℃和氮气氛围下，将化合物A117-1(2.00g，10.7mmol，1.00当量)加入40.0mL单口瓶中，再加入四氢呋喃(20.0mL)，降温至0℃，加入叔丁醇钾(1.45g，12.9mmol，1.20当量)和3-溴丙炔(1.68g，11.3mmol，1.21mL，1.05当量)，升温至15-25℃反应16小时。TLC(石油醚:乙酸乙酯＝0:1)显示化合物A117-1(Rf＝0.1)反应完全，生成一个主点(Rf＝0.4)。倒入水(30.0mL)中，用乙酸乙酯(25.0mL)萃取3次，合并的有机相用饱和实验水(50.0mL)洗涤，硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩。粗品通过柱层析分离(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝30/1至10/1)，得到化合物A117-2(0.64g，2.85mmol，收率26.5％)，为黄色油状物。
在20-25℃下，将化合物A117-2(296mg，1.32mmol，1.00当量)、化合物Int3(520mg，1.32mmol，1.00当量)和DMF(10.0mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，再加入碘化亚铜(50.3mg，264μmol，0.20当量)、碳酸铯(1.72g，5.28mmol，4.00当量)和Pd(dppf)Cl2(193mg， 264μmol，0.20当量)，置换3次氮气，升温至80℃反应4小时。LC-MS显示剩余9.54％的化合物Int 3(RT＝0.375min)，并且检测到36.6％的目标质谱(RT＝0.325min)。将反应液过滤，浓缩，得到粗品，使用制备型薄层色谱(SiO2，二氯甲烷:甲醇＝7:1，Rf＝0.5)纯化，得到化合物A117-3(200mg，318μmol，收率24.1％，纯度76.6％)，为黄色固体。
在20-25℃下，将化合物A117-3(150mg，238μmol，1.00当量)加入10.0mL单口瓶中，再加入二氯甲烷(1.50mL)和三氟乙酸(408mg，3.58mmol，265μL，15.0当量)，搅拌1小时。LCMS显示化合物A117-3反应完全，并且检测到74.3％的目标质谱。将反应液浓缩，得到化合物A117-4(300mg，粗品，TFA)，为黄色油状物。
在25℃，将化合物A13(101mg，234μmol，1.00当量)、三乙胺(71.2mg，704μmol，97.9μL，3.00当量)和二氯甲烷(5.00mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，降温至0-5℃，加入HATU(89.2mg，234.6μmol，1.00当量)，反应1小时，再加入化合物A117-4(250mg，234μmol，1.00当量，6TFA)、三乙胺(142mg，1.41mmol，196μL，6.00当量)和DMF(7.50mL)，升温至20-25℃，反应3小时。LCMS显示化合物A13反应完全，并且检测到53.8％的目标质谱(RT＝0.372min)。将反应液浓缩，过滤，将母液浓缩，粗产物用制备型HPLC纯化，将洗脱液冻干，得到化合物A117(21.1mg，26.5μmol，收率11.2％，纯度98.1％)，为类白色固体。LCMS:m/z＝783.4(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(d,J＝2.8Hz,1H)11.17-11.07(m,1H)9.11-9.00(m,1H)8.50-8.36(m,2H)8.22(d,J＝7.6Hz,1H)8.13-7.95(m,3H)7.82(s,1H)7.74-7.61(m,2H)7.18-7.00(m,2H)6.96-6.85(m,1H)5.44-5.31(m,1H)3.75-3.66(m,3H)3.64-3.55(m,5H)3.51-3.47(m,2H)3.00-2.81(m,1H)2.76-2.57(m,3H)2.12-1.93(m,2H)1.85(d,J＝4.8Hz,1H).
制备例202.化合物A118的合成
在20-25℃下，将化合物Int 1(10.0g，28.2mmol，1.00当量)、Int4-0(3.51g，28.2mmol，2.98mL，1.00当量)和二甲基甲酰胺(DMF)(100mL)加入250mL三口瓶中。再加入碳酸铯(18.4g，56.4mmol，2.00当量)，在50℃反应12小时。LC-MS显示化合物Int 1反应完全，质谱检测到目标产物Int 4。反应液倒入水中，过滤，滤饼直接浓缩，得到化合物Int 4(10.0g，23.9mmol，收率84.9％，纯度96.7％)，为黄色固体。LCMS:m/z＝403.9(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO)δ11.80(s,1H),10.05(s,1H),9.19(s,1H),8.50-8.44(m,1H),8.43-8.34(m, 1H),8.27(d,J＝8.8Hz,2H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),8.16(s,1H),8.08(d,J＝8.8Hz,2H),7.87(s,1H).
在20-25℃下,将化合物A118-1(1.06g，4.44mmol，1.50当量)、化合物Int 3(1.00g，2.96mmol，1.00当量)和DMF(20.0mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，再加入碘化亚铜CuI(112mg，591μmol，0.20当量)、Pd(PPh3)2Cl2(415mg，591μmol，0.20当量)和Cs2CO3(3.85g，11.8mmol，4.00当量)，置换3次氮气，升温至80℃反应2小时。LC-MS显示25.1％的化合物Int 3反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.473min)。将反应液倒入水(35.0mL)中，用乙酸乙酯(35.0mL)萃取3次，合并的有机相用饱和盐水(40.0mL)洗涤，硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩，粗产物用制备型HPLC纯化，将洗脱液浓缩，得到化合物A118-2(790mg，1.53mmol，收率51.8％，纯度96.4％)，为黄色固体。
在20-25℃下，将化合物A118-2(780mg，1.51mmol，1.00当量)和二氯甲烷(1.40mL)加入40.0mL单口瓶中，再加入三氟乙酸(11.5g，101mmol，7.80mL)，搅拌1小时。LCMS显示化合物A118-2反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.275min)。将反应液浓缩，得到化合物A118-3(799mg，1.46mmol，收率96.4％，纯度93.3％，TFA)，为黄色油状物。
在20-25℃下，将化合物A118-3(270mg，635μmol，1.00当量，TFA)、化合物Int 4(265mg，635μmol，1.00当量)、乙酸钾(124mg，1.27mmol，2.00当量)、DMF(11.0mL)和THF(54.0mL)加入250mL三口圆底烧瓶中，反应1小时，降温至0-5℃，加入NaBH(OAc)3(269mg，1.27mmol，2.00当量)，置换3次氮气，升温至25℃反应12小时。LCMS显示化合物A118-3反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.399min)。倒入水(100mL)中，用乙酸乙酯(100mL)萃取3次，合并的有机相用饱和盐水(100mL)洗涤，硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩，粗产物用制备型HPLC纯化，将洗脱液冻干，得到化合物A118(115mg，142μmol，收率22.3％，纯度96.3％，TFA)，为类白色固体。LCMS:m/z＝784.2(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),11.13(s,1H),9.11(s,1H),8.50-8.37(m,2H),8.23(d,J＝7.6Hz,1H),8.18-8.10(m,2H),8.05(s,1H),7.85(s,1H),7.68(t,J＝9.2Hz,2H),7.19(d,J＝7.2 Hz,1H),7.16-7.09(m,1H),7.08-7.01(m,1H),5.40(dd,J＝5.6,12.0Hz,1H),4.53(d,J＝6.4Hz,2H),4.46-4.31(m,2H),3.64(d,J＝4.8Hz,3H),3.50-3.48(m,1H),3.30-3.23(m,2H),3.17-3.04(m,2H),2.96-2.83(m,1H),2.77-2.62(m,2H),2.29-2.20(m,1H),2.13-2.00(m,2H),1.96-1.83(m,1H),1.69-1.56(m,1H).
制备例203.化合物A119的合成
将化合物A112-4(380mg，361μmol，1.00当量，6.00TFA)、化合物Int 4(151mg，361μmol，1.00当量)、乙酸钾(70.9mg，722μmol，2.00当量)、DMF(15.2mL)和THF(76.0mL)加入250mL三口圆底烧瓶中，反应0.5小时，降温至0℃，加入NaBH(OAc)3(153mg，723μmol，2.00当量)，升温至20-25℃，反应16小时。LCMS显示剩余18.3％的化合物Int4(RT＝0.480min)，并且检测到45.8％的目标质谱(RT＝0.394min)。将反应液过滤，粗产物用制备型HPLC纯化，将洗脱液冻干，得到化合物A119(81.2mg，103μmol，收率27.0％，纯度95.4％)，为白色固体。LCMS:m/z＝755.2(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ111.80(s,1H)11.14(s,1H)9.13(s,1H)8.48-8.38(m,2H)8.23(dd,J＝7.6,1.2Hz,1H)8.18-8.04(m,2H)7.98-7.89(m,4H)7.85(s,1H)7.66(d,J＝8.6Hz,2H)5.17(dd,J＝12.0,5.4Hz,1H)4.58-4.37(m,7H)4.22-4.12(m,2H)2.95-2.83(m,1H)2.68-2.53(m,2H)2.11-2.02(m,1H).
制备例204.化合物A120的合成
在20-25℃下，将化合物A120-1(270mg，530μmol，1.00当量，TFA)、化合物Int 4(221mg，530μmol，1.00当量)、THF(54.0mL)和二氯甲烷(2.00mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，再加入乙酸钾(104mg，1.06mmol，2.00当量)，反应1小时，降温至0-5℃，加入NaBH(OAc)3(224mg，1.06mmol，2.00当量)，升温至25℃反应12小时。LCMS显示化合物A120-1反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.408min)。将反应液浓缩，粗产物用制备型HPLC纯化，得到化合物A120(83.4mg，103μmol,收率81.6％，纯度97.1％， TFA)，为类白色固体。LCMS:m/z＝783.2(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),11.14(s,1H),9.11(s,1H),8.50-8.37(m,2H),8.23(d,J＝7.6Hz,1H),8.18-8.09(m,2H),8.03(s,1H),8.00-7.89(m,3H),7.85(s,1H),7.74-7.63(m,2H),5.23-5.11(m,1H),4.54(d,J＝7.6Hz,2H),4.40(dd,J＝3.2,19.6Hz,2H),4.05-3.95(m,1H),3.83-3.75(m,1H),3.45-3.42(m,1H),3.30-3.23(m,1H),3.19-3.02(m,2H),2.95-2.83(m,1H),2.73-2.63(m,1H),2.32-2.22(m,1H),2.15-2.01(m,2H),1.97-1.82(m,1H),1.72-1.56(m,1H).
制备例205.化合物A121的合成
在氮气氛围和20℃下，将化合物A25(800mg，1.68mmol，1.00当量)、4-(2-氧代乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(459mg，2.02mmol，1.20当量)和冰乙酸(202mg，3.37mmol，0.19mL，2.00当量)加入到DMF(16.0mL)的100mL三口反应瓶中。在20℃下搅拌1小时。降温至0℃，再加入NaBH(OAc)3(714mg，3.37mmol，2.00当量)。升温至20℃，继续反应1小时。LCMS显示化合物A25反应完全，并且检测到97.3％的目标质谱。将反应液倒入饱和Na2CO3(320mL)中，过滤，用水(8.00mL)洗涤滤饼，并收集滤饼，得到化合物A121-1(1.27g，粗品)，为棕色固体，将其用于下一步反应。
在15-20℃和氮气氛围下，将化合物A121-1(1.27g，1.85mmol，1.00当量)和二氯甲烷(13.0mL)加入到100mL三口反应瓶中。在氮气氛围和15-20℃下，将三氟乙酸(19.0g，167mmol，12.4mL，90.3当量)缓慢滴加到反应瓶中。在15-20℃下搅拌反应液1.5小时。LCMS显示化合物A121-1反应完全，并且检测到95.2％的目标质谱。真空浓缩后得到化合物A121-2(2.40g，粗品，6TFA)，为黑棕色固体，将其用于下一步反应。
在25℃和氮气氛围下，将化合物A121-2(400mg，0.70mmol，1.00当量)、化合物Int7(232mg，0.84mmol)和DMSO(8.00mL)加入到100mL三口反应瓶中，之后在氮气氛围和25℃下，将DIEA(272mg，2.10mmol，0.37mL，3.00当量)缓慢滴加到反应瓶中。在110℃下搅拌反应液16小时。LCMS显示化合物A121-2反应完全，并且检测到22.9％的 目标质谱。真空浓缩后得到化合物A121(105mg，0.13mmol，收率18.1％，纯度99.2％)，为黄色固体。LCMS:m/z＝827.4(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.08(s,1H),8.87(s,1H),8.47-8.36(m,2H),8.21(d,J＝7.6Hz,1H)),7.95(s,1H),7.78(d,2H),7.71(s,1H),7.64(d,J＝8.8Hz,1H),7.31(s,1H),7.24(dd,J＝8.4Hz,J＝2.0Hz,1H),7.07(d,J＝9.2Hz,2H),5.08(dd,J＝12.0,5.2Hz,1H),4.04(d,J＝12.0Hz,2H),3.24-3.15(s,4H),2.96(t,J＝12.0Hz,2H),2.90-2.82(m,1H),2.74-2.51(m,6H),2.38(t,J＝7.2Hz,2H),2.06-1.96(m,1H),1.78(d,J＝7.6Hz,2H),1.69-1.55(m,1H),1.49-1.36(m,2H),1.28-1.14(m,2H).
制备例206.化合物A122的合成
在20℃和氮气氛围下，将化合物A25(410mg，0.86mmol，1.00当量)、1-叔丁氧羰基哌啶-4-甲醛(221mg，1.04mmol，1.20当量)和AcOH(104mg，1.73mmol，0.09mL，2.00当量)加入到装有DMF(9.00mL)的100mL三口反应瓶中。在20℃搅拌反应液1小时。在氮气氛围下，降温至0℃，将NaBH(OAc)3(366mg，1.73mmol，2.00当量)缓慢加到反应瓶中。升温至20℃，继续反应1小时。LCMS显示化合物A25反应完全，并且检测到73.2％的目标质谱。将反应液倒入Na2CO3(180mL)中，过滤，用H2O(45.0mL)洗涤滤饼并收集滤饼，粗品用制备型HPLC纯化，并且冻干，得到化合物A122-1(199mg，0.28mmol，收率32.6％，纯度92.7％)，为黑棕色固体。
在15-20℃和氮气氛围下，将化合物A122-1(199mg，0.28mmol，1.00当量)和二氯甲烷(2.00mL)加入到100mL三口反应瓶中。在氮气氛围和15-20℃下，将三氟乙酸(289mg，25.3mmol，1.99mL，90.3当量)缓慢滴加到反应瓶中。在20℃下反应1.5小时。LCMS显示化合物A122-1反应完全，并且检测到96.5％的目标质谱。真空浓缩后得到化合物A122-2(146mg，粗品，TFA)，为棕色固体，将其用于下一步反应。
在25℃和氮气氛围下，将化合物A122-2(146mg，0.26mmol，1.00当量)、化合物Int7(87.0mg，0.32mmol，1.20当量)和DMSO(3.00mL)加入到100mL三口反应瓶中，之后在氮气氛围和25℃下，将DIEA(102mg，0.79mmol，0.14mL，3.00当量)缓慢滴加到反 应瓶中。在110℃下搅拌反应液12小时。LCMS显示化合物A122-2反应完全，并且检测到50.8％的目标质谱。真空浓缩后得到粗产物，用制备型HPLC纯化，并且冻干，得到化合物A122(64.7mg，0.08mmol，收率29.4％，纯度97.0％)，为黄色固体。LCMS:m/z＝813.2(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.07(s,1H),8.88(s,1H),8.48-8.37(m,2H),8.21(d,J＝7.6Hz,1H),7.96(s,1H),7.79(d,J＝8.8Hz,2H),7.71(s,1H),7.65(d,J＝8.6Hz,1H),7.32(s,1H),7.24(d,J＝8.6Hz,1H),7.08(d,J＝9.2Hz,2H),5.07(dd,J＝12.0,5.4Hz,1H),4.06(d,J＝12.0Hz,2H),3.22(s,4H),2.99(t,J＝12.0Hz,2H),2.90-2.83(m,1H),2.69-2.52(m,6H),2.26-2.17(m,2H),2.06-1.96(m,1H),1.88-1.75(m,3H),1.25-1.12(m,2H).
制备例207.化合物A123的合成
在25℃和氮气氛围下，将化合物A123-1(800mg，3.99mmol，1.00当量)、化合物Int7(1.10g，3.99mmol，1.00当量)和DMF(8.00mL)加入到100mL三口反应瓶中，之后在氮气氛围和25℃下，将DIEA(1.55g，11.9mmol，2.09mL，3.00当量)缓慢滴加到反应瓶中。在110℃下搅拌反应液12小时。TLC(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)显示化合物Int 7(Rf＝0.500)反应完全，生成一个新点(Rf＝0.300)，TLC板显示反应完全。将反应液冷却至25℃，倒入H2O(50mL)中，用乙酸乙酯(100mL)萃取3次，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩，得到化合物A123-2(64.7mg，0.08mmol，收率29.4％，纯度97.0％)，为绿色固体。
在20-25℃下，将化合物A123-2(250mg，537μmol，1.00当量)和二氯甲烷(5.00mL)加入到40mL单口反应瓶中。在20-25℃下，将三氟乙酸(1.84g，16.1mmol，1.20mL，30.0当量)缓慢滴加到反应瓶中。在20-25℃下反应2小时。LCMS显示化合物A123-2反应完全，并且检测到目标质谱。在35-45℃下，真空浓缩后得到化合物A123-3(253mg，粗品，TFA)，为绿色油状物，将其用于下一步反应。
在25℃和氮气氛围下，将化合物A13(229mg，531μmol，1.00当量)、三乙胺(161mg，1.59mmol，221μL，3.00当量)和DCM(5.00mL)加入到40mL单口反应瓶中。在氮气氛围和0-5℃下，将HATU(202mg，531μmol，1.00当量)加到反应瓶中，并在0-5℃反应1小时。在25℃下，将A123-3(250mg，531μmol，1.00当量，TFA)、三乙胺(161mg，1.59 mmol，221μL，3.00当量)和DMF(5.00mL)加入到10mL单口瓶中。将混合物在氮气氛围下冷却至0-5℃，并加入到40mL反应瓶中。在20-25℃下搅拌反应液3小时。LCMS显示化合物A123-3反应完全，并且检测到目标质谱。过滤反应液，并在40-45℃下，真空浓缩得到粗产物，用制备型HPLC纯化，并且冻干，得到化合物A123(81.8mg，105μmol，收率19.8％，纯度97.5％)，为黄色固体。LCMS:m/z＝758.3(M+H)+1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),11.13(s,1H),9.11(s,1H),8.43(m,2H),8.22(d,J＝7.8Hz,1H),8.08(d,J＝8.6Hz,3H),7.87-7.78(m,3H),7.57(d,J＝8.4Hz,1H),7.13(t,J＝5.4Hz,1H),6.97(s,1H),6.87(d,J＝7.8Hz,1H),5.03(dd,J＝5.8,12.6Hz,1H),4.50-4.40(m,1H),4.17(t,J＝8.8Hz,1H),4.12-4.04(m,1H),4.13-4.03(m,1H),3.77(dd,J＝4.8,8.6Hz,1H),3.24-3.12(m,2H),2.94-2.69(m,2H),2.62-2.54(m,2H),1.93(m,3H).
制备例208.化合物A124的合成
将乙酸(5.00mL)、化合物Int5-1(471mg，2.86mmol，1.10当量)和化合物Int5-0(500mg，2.60mmol，1.00当量)加入10mL单口瓶中，再加入乙酸钠(320mg，3.90mmol，1.50当量)，升温至90℃反应3小时。LCMS显示原料反应完全，检测到产物主峰。缓慢倒入水(200mL)中，搅拌10分钟，过滤反应液，母液浓缩，得到粗品化合物Int 5(560mg，1.85mmol，收率71.2％，纯度100％)，为灰白色固体。LCMS:m/z＝302.8(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO)δ13.92-13.62(m,1H),11.15(s,1H),8.40(dd,J＝1.4,7.6Hz,1H),8.28(s,1H),8.05(d,J＝7.8Hz,1H),5.20(dd,J＝5.4,12.8Hz,1H),2.96-2.84(m,1H),2.69-2.53(m,2H),2.13-2.02(m,1H).
在20-25℃下，将化合物Int1(1.00g，3.21mmol，1.00当量)和DMF(20.0mL)加入到 100mL三口反应瓶中。在20-25℃下，将A124-1和碳酸钾(443mg，3.21mmol，1.00当量)加到反应瓶中。在100℃下反应2小时。LCMS显示化合物Int1反应完全，并且检测到目标质谱。在45-50℃下，真空浓缩得到粗产品，倒入30mL水中，过滤并收集滤饼，得到化合物A124-2(850mg，1.96mmol，收率61.0％，纯度97.9％)，为黄色固体，将其用于下一步。
在氩气氛围下，将Pd/C(208mg，196μmol，10.0％，0.100当量)加入到75mL氢化瓶中。将DMF(20.0mL)和A124-2(850mg，1.96mmol，1.00当量)加入氢化瓶中。置换氢气3次，将气压调至15Psi，在25℃反应20小时。LCMS显示化合物A124-2反应完全，并且检测到目标质谱。反应后，在20-25℃下置换氩气3次。通过硅藻土过滤，用DMF(50.0mL)洗涤滤饼。滤液在40-45℃下真空浓缩，得到化合物A124-3(650mg，1.38mmol，收率70.4％，纯度83.2％)，为黄色固体，将其直接用于下一步反应。
在20-25℃下，将化合物A124-3(0.65g，1.39mmol，1.00当量)、化合物A124-4(256mg，1.39mmol，1.00当量)和DMF(6.50mL)加入到100mL三口反应瓶中。在20-25℃下，将HOAc(83.2mg，1.39mmol，79.3μL，1.00当量)加到反应瓶中，并在20-25℃反应0.5小时。冷却至0-5℃后，加入NaBH(OAc)3(880mg，4.16mmol，3.00当量)。在20-25℃下反应15.5小时。LCMS显示剩余35.4％的化合物A124-3，并且检测到目标质谱。将反应液倒入H2O(500mL)中，用乙酸乙酯(500mL)萃取3次，合并的有机相用饱和盐水(500mL)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩，得到粗产品。用制备型HPLC(TFA条件)纯化，得到化合物A124-5(400mg，粗品)，为黄色固体。
在20-25℃下，将化合物A124-5(400mg，714μmol，1.00当量)和DCM(1.00mL)加入到10mL单口反应瓶中。在20-25℃下，将TFA(6.14g，53.8mmol，4.00mL，75.3当量)缓慢滴加到反应瓶中，并在20-25℃反应1小时。LCMS显示剩余35.4％的化合物A124-5，并且检测到目标质谱。在40-45℃下，真空浓缩得到化合物A124-6(325mg，粗品，TFA)，为黄色固体，将其直接用于下一步反应。
在25℃下，将化合物Int 5(153mg，507μmol，1.00当量)和DMF(5.00mL)加入到10mL单口反应瓶中。冷却至0-5℃，将HATU(231mg，608μmol，1.20当量)和DIEA(393mg，3.04mmol，530μL，6.00当量)加到反应瓶中，并在0-5℃反应0.5小时。将A124-6(300mg，507μmol，1.00当量，TFA)加入到反应瓶中。在20-25℃下，反应15.5小时。LCMS显示剩余化合物A124-6，并且检测到目标质谱。过滤并收集滤液，并在40-45℃下，真空浓缩得到粗产物，用制备型HPLC纯化，并且冻干，得到化合物A124(118mg，136μmol，收 率26.8％，纯度99.1％，TFA)，为黄色固体。LCMS:m/z＝744.3(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.78(s,1H),11.15(s,1H),8.79(s,1H),8.47-8.36(m,2H),8.21(dd,J＝7.2,0.8Hz,1H),8.11(dd,J＝7.6,1.2Hz,1H),8.07(s,1H),8.01(d,J＝7.6Hz,1H,)7.89(br s,1H),7.70-7.62(m,3H),6.72(d,J＝8.8Hz,2H),5.19(dd,J＝12.8,5.4Hz,1H),4.41(br t,J＝8.4Hz,1H),4.20(br t,J＝9.2Hz,1H),4.10(br dd,J＝8.0,5.6Hz,1H),3.84(br s,2H),3.36(br d,J＝8.0Hz,2H),2.99-2.85(m,2H),2.69-2.54(m,2H),2.13-2.02(m,1H).
制备例209.化合物A125的合成
将1,4-二氧六环(40.0mL)和水(10.0mL)加入100mL单口瓶中，加入化合物Int 2(5.00g，14.8mmol，1.00当量)和化合物Int 6-1(4.57g，29.6mmol，5.03mL，2.00当量)，加入PdCl2(dppf)·CH2Cl2(2.42g，2.97mmol，0.20当量)和碳酸铯(9.66g，29.6mmol，2.00当量)，升温到80℃反应2小时。LC-MS显示化合物Int 2反应完全，检测到一个主峰。加入二氯甲烷(50.0mL)，用水(100mL)洗涤3次，减压浓缩，粗品使用柱层析(SiO2，二氯甲烷:甲醇＝10:1，Rf＝0.600)纯化，得到橘色化合物Int 6-2(1.80g，5.78mmol，收率38.9％，纯度91.3％)。
将化合物Int 6-2(1.08g，3.46mmol，1.00当量)、四氢呋喃(20.0mL)和水(4.00mL)加入到100mL三口瓶中。再加入高碘酸钠(2.96g，13.8mmol，767μL，4.00当量)、一水合锇酸钾(127mg，346μmol，0.05当量)和2,6-二甲基吡啶(742mg，6.92mmol，806μL，2.00当量)，在20-25℃反应1小时。LCMS显示原料反应完全，检测到产物主峰。将反应液倒入水(100mL)中，用MeOH/DCM(1/6，200mL)萃取5次。用亚硫酸钠水溶液(200mL)洗涤一次，用饱和食盐水(200mL)洗涤，硫酸钠干燥，减压浓缩。粗品用薄层色谱纯化，得到化合物Int 6(630mg，2.20mmol，收率63.5％，纯度100％)，为白色固体。
将化合物A125-1(1.00g，4.71mmol，1.00当量)和甲苯(30.0mL)加入到100mL反应瓶中。将t-BuONa(588mg，6.12mmol，1.30当量)、Xantphos(545mg，942μmol，0.200当量)和化合物A125-2(15.5g，47.0mmol，10.0当量)加到反应瓶中。置换氮气3次后，将Pd2(dba)3(431mg，471μmol，0.100当量)加入到反应瓶中。在80℃下，反应16小时。LCMS显示化合物A125-1反应完全，并且检测到目标质谱。将反应液倒入H2O(500mL)中，用乙酸乙酯(500mL)萃取3次，合并的有机相用饱和盐水(500mL)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩，得到粗产品。使用柱层析(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝20/1至3/1，产物：Rf＝0.45)纯化，得到化合物A125-3(1.00g，2.37mmol，收率50.2％，纯度98.5％)，为红色固体。
在氮气氛围下，将化合物A125-3(500mg，1.18mmol，1.00当量)和DMF(5.00mL)加入到100mL单口反应瓶中。在氮气氛围下，将化合物Int1(441mg，1.42mmol，1.20当量)、CuI(225mg，1.18mmol，1.00当量)、DMEDA(208mg，2.37mmol，254μL，2.00当量)和K3PO4(753mg，3.55mmol，3.00当量)加到反应瓶中。在80℃下，反应16小时。LCMS显示化合物A125-3反应完全，并且检测到目标质谱。过滤并收集滤液，滤液用制备型HPLC(TFA条件；柱：Welch Xtimate C18 150*25mm*5μm；流动相：[水(TFA)-ACN]；梯度：33％-63％B，3分钟)纯化，将馏分用乙酸乙酯(20mL)萃取3次，合并的有机相用饱和盐水(20mL)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩，得到化合物A125-4(300mg，491μmol，收率41.5％，纯度96.0％)，为灰色固体。
将化合物A125-4(300mg，493μmol，1.00当量)和DCM(3.00mL)加入到10mL反应瓶中。将TFA(4.61g，40.3mmol，3.00mL，81.8当量)加到反应瓶中。在20-25℃下，反应2小时。LCMS显示剩余化合物A125-4，并且检测到目标质谱。在40-45℃下，真空浓缩得到化合物A125-5(336mg，粗品，TFA)，为黄色固体。
在20-25℃下，将化合物A125-5(310mg，449μmol，1.00当量，TFA)、化合物Int 6(128mg，449μmol，1.00当量)、KOAc(88.2mg，898μmol，2.00当量)、DMF(13.0mL)和THF(66.0mL)加入到100mL反应瓶中。并在20-25℃反应1小时。冷却至0-5℃后，加入NaBH(OAc)3(285mg，1.35mmol，3.00当量)。在20-25℃下反应11小时。LCMS显示化合物A125-5反应完全，并且检测到目标质谱。过滤并收集滤液，在40-45℃下，真空浓缩滤液，粗产物用制备型HPLC纯化，并且冻干，得到化合物A125(153mg，202μmol，收率27.3％，纯度100％)，为黄色固体。LCMS:m/z＝756.2(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.16(s,1H),10.29-10.02(d,J＝13.2Hz,1H),8.94-8.81(d,J＝6.8 Hz,1H),8.48-8.35(m,2H),8.21(d,J＝7.6Hz,1H),8.17-8.10(m,1H),8.09-8.04(m,1H),8.03-7.97(m,1H),7.84-7.77(m,2H)7.93(m,1H),7.72(s,1H),6.90-6.74(m,2H),5.19(dd,J＝12.8,5.2Hz,1H),4.72-4.52(m,2H),3.66-3.32(m,6H),3.19-3.01(m,4H),2.97-2.82(m,1H),2.68-2.55(m,2H),2.18-2.00(m,1H).
制备例210.化合物A126的合成
将化合物Int 3-2(23.0g，98.7mmol，1.00当量)和THF(176mL)加入500mL三口瓶中，0℃条件下加入Boc2O(129g，592mmol，136mL，4.00当量)，DMAP(18.1g，148mmol，1.50当量)和DIPEA(38.3g，296mmol，51.6mL,3.00当量)，升温至50℃反应16小时，LCMS检测到产物主峰。加入水(600mL)，乙酸乙酯(1000mL)萃取3次，合并有机相并用饱和食盐水(400mL)洗涤，硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品用柱层析纯化得到黄色油状物A128-1-0(15.0g，45.3mmol，收率45.8％，纯度100％)。
将化合物A128-1-0(15.0g，45.3mmol，1.00当量)和乙醇(37.5mL)加入500mL三口瓶中，再加入THF(37.5mL)and NH4Cl(24.2g，453mmol，10.0当量)。20-25℃下加入Zn(29.2g，447mmol，9.87当量)反应4小时。LCMS显示化合物A128-1-0反应完全，检测到产物主峰。过滤，滤饼用1升乙醇洗涤，滤液浓缩，得到白色固体化合物A128-1-1(15.0g，粗品)。将化合物A128-1-1(15.0g，49.6mmol，1.00当量)和叔丁醇(240mL)加入1L三口瓶中，再依次加入Cs2CO3(48.5g，148mmol，3.00当量)，RuPhos(2.32g，4.97mmol，0.10当量)和Pd2(dba)3(2.27g，2.48mmol，0.05当量)，再加入化合物A128-1-2(28.6g，59.6mmol，1.20当量)，氮气作用下100℃反应16小时，LCMS显示A128-1-1反应完全，检测到产物主峰。加入乙酸乙酯(500mL)，过滤，100mL乙酸乙酯洗涤滤饼。继续加入水(200mL)，乙酸乙酯(300mL)萃取3次，合并有机相用饱和食盐水洗涤，硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品使用柱层析纯化，得到黄色固体化合物A128-1(9.40g，18.1mmol，收率36.5％，纯度99.6％)。
在20-30℃下，将化合物A125-2(49.9g，151mmol，10.0当量)、化合物A126-1(3.00g，5.13mmol，1.00当量)、甲苯(120mL)、t-BuONa(14.5g，151mmol，10.0当量)和Pd(dppf) Cl2(2.21g，3.03mmol，0.20当量)依次加入到250mL反应瓶中。置换氮气3次，并在90℃反应12小时。LCMS显示化合物A126-1反应完全，并且检测到目标质谱。反应液用900mL乙酸乙酯稀释，并用300mL盐水洗涤2次，真空浓缩有机相，得到粗产品，用柱层析(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝5/1，Rf＝0.5)纯化，得到化合物A126-3(1.90g，3.96mmol，收率26.2％，纯度83.4％)，为黄色固体。
在20-25℃下，将化合物A126-3(700mg，1.75mmol，1.00当量)、DMF(7.00mL)、化合物Int1(627mg，2.10mmol，1.20当量)、DMEDA(308mg，3.50mmol，376μL，0.60当量)、K2CO3(1.11g，5.25mmol，2.00当量)和CuI(333mg，1.75mmol，0.30当量)依次加入到50mL反应瓶中。置换氮气3次，并在60℃反应1小时。LCMS显示化合物A126-3反应完全，并且检测到目标质谱。讲反应液过滤，并用50mL乙酸乙酯萃取，洗涤滤饼3次，随后用20mL水稀释，用100mL乙酸乙酯萃取3次，合并有机相并用20mL盐水洗涤1次，无水硫酸钠干燥，在35-40℃真空浓缩有机相，得到化合物A126-4(1.90g，粗品)，为白色固体，将其直接用于下一步。
在20-25℃下，将化合物A126-4(0.55g，962μmol，1.00当量)、DCM(2.00V)和TFA(0.60V)依次加入到50mL反应瓶中，并在25℃反应3小时。LCMS显示化合物A126-4反应完全，并且检测到目标质谱。反应液在25℃下真空浓缩，将浓缩液冻干，得到化合物A126-5(700mg，757μmol，收率78.6％，纯度88.0％，3TFA)，为白色固体。
在20-25℃下，将化合物A126-5(120mg，246μmol，1.00当量)、DMF(6.00mL)、THF(24.0mL)、化合物lnt 6(77.7mg，271μmol，1.20当量)、乙酸钾(48.5mg，494μmol，2.00当量)和NaBH(OAc)3(156mg，740μmol，3.00当量)依次加入到50mL反应瓶中，并在25℃反应2小时。LCMS显示化合物A126-5反应完全，并且检测到目标质谱。用10mL水稀释，用30mL乙酸乙酯萃取3次，合并有机相并用20mL盐水洗涤1次，无水硫酸钠干燥，真空浓缩有机相，粗产物用制备型HPLC纯化，得到化合物A126(50.2mg，105μmol，收率42.4％，纯度97.0％)，为类白色固体。LCMS:m/z＝742.4(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.8(s,1H),11.1(s,1H),8.82(s,1H),8.48-8.36(m,2H),8.22-8.19(m,1H),7.97-7.85(m,2H),7.84-7.76(m,2H),7.76-7.65(m,3H),6.54(d,J＝8.8Hz,2H),5.28-5.03(q,1H),3.96(s,4H),3.76(s,3H),3.39(s,3H),2.95-2.84(m,1H),2.64-2.54(m,2H),2.16-1.97(m,1H).
制备例211.化合物A127的合成
在15-25℃下，将化合物A127-1(2.00g，8.84mmol，1.00当量)、化合物A125-2(29.2g，88.4mmol，10.0当量)、甲苯(80.0mL)、t-BuONa(8.49g，88.4mmol，10.0当量)和Pd(dppf)Cl2(1.29g，1.77mmol，0.20当量)依次加入到反应瓶中。置换氮气3次，并在80℃反应6小时。LCMS显示化合物A127-1反应完全，并且检测到目标质谱。用200mL乙酸乙酯稀释，过滤有机相，有机相用200mL盐水洗涤1次，真空浓缩有机相，得到粗产品，硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝10:1-0:1)纯化，得到产物(石油醚:乙酸乙酯＝5:1,Rf＝0.30)，在真空下浓缩有机层，得到化合物A127-2(2.00g，4.06mmol，收率45.9％，纯度86.9％)，为黄色固体。
在15-25℃下，将化合物A127-2(2.30g，5.37mmol，1.00当量)、化合物Int1(1.93g，6.44mmol，1.20当量)、DMF(23.0mL)、K3PO4(3.42g，16.1mmol，3.00当量)、DMEDA(947mg，10.7mmol，1.16mL，2.00当量)和CuI(1.02g，5.37mmol，1.00当量)依次加入到反应瓶中。在100℃下反应2小时。LCMS显示化合物A127-2反应完全，并且检测到目标质谱。用50mL乙酸乙酯稀释，过滤得到滤液，真空浓缩滤液，粗产物用制备型HPLC纯化，得到化合物A127-3(380mg，618μmol，收率11.5％，纯度97.6％)，为黄色固体。
在15-25℃下，将化合物A127-3(330mg，550μmol，1.00当量)、TFA(1.80mL)和DCM(5.50mL)依次加入到反应瓶中，并在25℃反应2小时。LCMS显示化合物A127-3反应完全，并且检测到目标质谱。反应液在真空下浓缩，得到化合物A127-4(370mg，粗品，TFA)，为棕色固体。
在15-25℃下，将化合物A127-4(200mg，400μmol，1.00当量)、化合物Int 6(115mg，400μmol，1.00当量)、DMF(10.0mL)、THF(40.0mL)和KOAc(78.6mg，801μmol，2.00当量)依次加入到反应瓶中。在25℃下反应1小时。向反应瓶中加入NaBH(OAc)3(255mg，1.20mmol，3.00当量),在25℃下反应2小时。LCMS显示化合物A127-4反应完全，并且检测到目标质谱。用100mL乙酸乙酯稀释反应液，再加入100mL水，用100mL乙酸乙酯萃取3次，合并有机相并用200mL饱和盐水洗涤1次，无水硫酸钠干燥，过滤并且真空浓缩，粗产物用制备型HPLC纯化，并且冻干，得到化合物A127(50.07mg，61.4μmol， 收率10.2％，纯度94.4％)，为黄色固体。LCMS:m/z＝770.2(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.78(s,1H),11.12(s,1H),8.80(s,1H),8.32-8.52(m,2H),8.12-8.26(m,1H),7.82-7.96(m,4H),7.64-7.76(m,3H),6.62(d,J＝8.8Hz,2H),5.14(dd,J＝5.2,13.0Hz,1H),3.80(s,2H),3.24(d,J＝9.2Hz,5H),2.82-2.96(m,1H),2.54-2.74(m,5H),1.94-2.12(m,3H),1.78-1.90(m,2H).
制备例212.化合物A128的合成
将化合物Int 3-2(23.0g，98.7mmol，1.00当量)和THF(176mL)加入500mL三口瓶中，在0℃下加入Boc2O(129g，592mmol，136mL，4.00当量)、DMAP(18.1g，148mmol，1.50当量)和DIPEA(38.3g，296mmol，51.6mL，3.00当量)，升温至50℃反应16小时。LCMS检测到产物主峰。加入水(600mL)，乙酸乙酯(1000mL)萃取3次，合并有机相并用饱和食盐水(400mL)洗涤，硫酸钠干燥，过滤，浓缩，粗品用柱层析纯化，得到化合物A128-1-0(15.0g，45.3mmol，收率45.8％，纯度100％)，为黄色油状物。
将化合物A128-1-0(15.0g，45.3mmol，1.00当量)和乙醇(37.5mL)加入500mL三口瓶中，再加入THF(37.5mL)和NH4Cl(24.2g，453mmol，10.0当量)。在20-25℃下加入Zn(29.2g，447mmol，9.87当量)，反应4小时。LCMS显示化合物A128-1-0反应完全，检测到产物主峰。过滤，滤饼用1升乙醇洗涤，滤液浓缩，得到化合物A128-1-1(15.0g，粗品)，为白色固体。将化合物A128-1-1(15.0g，49.6mmol，1.00当量)和叔丁醇(240mL)加入1L三口瓶中，再依次加入Cs2CO3(48.5g，148mmol，3.00当量)、RuPhos(2.32g，4.97mmol，0.10当量)和Pd2(dba)3(2.27g，2.48mmol，0.05当量)，再加入化合物A128-1-2(28.6g，59.6mmol，1.20当量)，在氮气条件下在100℃反应16小时。LCMS显示A128-1-1反应完全，检测到产物主峰。加入乙酸乙酯(500mL)，过滤，100mL乙酸乙酯洗涤滤饼。 继续加入水(200mL)，乙酸乙酯(300mL)萃取3次，合并有机相用饱和食盐水洗涤，硫酸钠干燥，过滤，浓缩，粗品使用柱层析纯化，得到化合物A128-1(9.40g，18.1mmol，收率36.5％，纯度99.6％)，为黄色固体。
在20-25℃下，将化合物A128-1(600mg，1.16mmol，1.00当量)、化合物A128-2(531mg，2.31mmol，2.00当量)和DMF(30.0mL)加入50mL圆底烧瓶中。再加入叔丁醇钠(334mg，3.47mmol，3.00当量)、分子筛(300mg)、BrettPhos Pd G3(210mg，231μmol，0.20当量)和BRETTPHOS(124mg，231μmol，0.20当量)，置换3次氮气，升温至90℃反应2小时。LC-MS显示化合物A128-1反应完全，并且检测到目标质谱。倒入水(100mL)中，用乙酸乙酯(50mL)萃取2次，合并的有机相用饱和盐水(100mL)洗涤，硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩。粗产物用制备型HPLC纯化，并且冻干，得到化合物A128-3(270mg，368μmol，收率31.8％，纯度90.7％)，为黄色固体。
在20-25℃下，将Pd/C(135mg，127μmol，10.0％)、Pd(OH)2/C(135mg，192μmol，20％)、DMF(2.70mL)和THF(13.5mL)加入75mL氢化瓶中。再加入化合物A128-3(270mg，368μmol，1.00当量)，置换3次氢气，室温反应2小时。LCMS显示化合物A128-3反应完全，并且检测到目标质谱。反应液过滤并用THF洗涤滤饼，滤液浓缩，得到化合物A128-4(230mg，粗品)，为黄色油状物。
在25℃下，将化合物A128-4(230mg，473μmol，1.00当量)和DCM(2.30mL)加入10mL圆底烧瓶中。再加入TFA(2.30mL)，室温反应1小时。LC-MS显示化合物A128-4反应完全，并且检测到目标质谱。反应液在50℃浓缩，得到化合物A128-5(379mg，粗品，TFA)，为黄色油状物。
在25℃下，将化合物A13(391mg，903μmol，1.00当量)和DCM(8.00mL)加入50mL圆底烧瓶中。再将化合物A128-5(349mg，903μmol，1.00当量)溶于DMF(7.00mL)中，滴加至反应液，在0℃下加入三乙胺(274mg，2.71mmol，377μL，3.00当量)，置换3次氮气，加入HATU(378mg，993μmol，1.10当量)，升温至室温反应12小时。LC-MS显示化合物A128-5反应完全，并且检测到目标质谱。浓缩后得到粗产物，用制备型HPLC纯化，并且冻干，得到化合物A128(42.9mg，53.7μmol，收率5.94％，纯度98.5％)，为紫色固体。LCMS:m/z＝788.1(M+H)+1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.8(s,1H),11.1(s,1H),9.13(s,1H),8.47-8.39(m,2H),8.24-8.22(m,1H),8.14-8.07(m,3H),7.85(s,1H),7.66(d,J＝8.4Hz,2H),6.92(t,J＝8.0Hz,1H),6.60-6.51(m,2H),5.33-5.29(m,1H),3.64(s,3H),3.52-3.51(m,3H),3.45-3.37(m,9H),2.92-2.84(m,1H),2.70-2.59(m,3H),1.99-1.94(m,1H).
制备例213.化合物A129的合成
在25℃下，将化合物Int 3(200mg，544μmol，1.00当量)、化合物A129-1(248mg，1.09mmol，2.00当量)和DMF(4.0.0mL)加入50mL圆底烧瓶中。再加入Pd2(dba)3(49.8mg，54.4μmol，0.10当量)、叔丁醇钾(104mg，1.09mmol，2.00当量)和RuPhos(25.4mg，54.4μmol，0.10当量)，置换3次氮气，升温至90℃反应2小时。LC-MS显示剩余30.4％的化合物Int 3，并且检测到目标质谱。倒入水(50.0mL)中，用TFA调pH＝3-4，并且浓缩。粗产物用制备型HPLC纯化，在真空中浓缩，得到化合物A129-2(51.0mg，101μmol，收率9.33％，纯度96.6％)，为棕色油状物。
在25℃下，将化合物A129-2(51.0mg，101μmol，1.00当量)和DCM(1.00mL)加入10mL圆底烧瓶中。再加入TFA(768mg，6.73mmol，0.50mL，66.3当量)，室温反应1小时。LC-MS显示化合物A129-2反应完全，并且检测到目标质谱。反应液在50℃浓缩，得到化合物A129-3(50.0mg，粗品，TFA)，为黄色油状物。
在25℃下，将化合物A13(56.2mg，129μmol，1.00当量)和DCM(1.12mL)加入50mL圆底烧瓶中。置换3次氮气，加入TEA(39.4mg，389μmol，54.2μL，3.00当量)，在0℃下加入HATU(49.3mg，129μmol，1.00当量)，反应0.5小时，再加入化合物A129-3(50mg，129μmol，1.00当量)、TEA(39.4mg，389μmol，54.2μL，3.00当量)和DMF(1.00mL)，升温至室温反应1.5小时。LC-MS显示化合物A129-3反应完全，并且检测到目标质谱。浓缩后得到粗产物，用制备型HPLC纯化，并且冻干，得到化合物A129(44.1mg，54.8μmol，收率97.6％，纯度97.6％)，为灰白色固体。
LCMS:m/z＝787.3(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),11.1(s,1H),9.09(s,1H),8.45-8.40(m,2H),8.22-8.08(m,4H),7.81(s,1H),7.56(d,J＝5.2Hz,2H),6.87(s,1H),6.52-6.44(m,2H),5.29(s,1H),4.53-4.43(m,1H),3.61(s,3H),3.12(s,2H),2.87-2.81(m,2H),2.63(s,2H),2.07-1.61(m,6H),1.19(d,J＝10.0Hz,2H),1.05(s,3H).
制备例214.化合物A130的合成
在25℃下，将化合物Int 3(200mg，544μmol，1.00当量)、化合物A130-1(218mg，1.09mmol，2.00当量)和DMF(4.00mL)加入10mL平底烧瓶中。再加入Pd2(dba)3(99.5mg，109μmol，0.20当量)、RuPhos(50.7mg，109μmol，0.20当量)、分子筛(100mg，544μmol，1.00当量)和叔丁醇钾(104mg，1.09mmol，2.00当量)，置换3次氮气，升温至90℃反应2小时。LCMS显示化合物Int 3反应完全，并且检测到目标质谱。将反应液浓缩，粗产物用制备型HPLC纯化，在真空中浓缩，得到化合物A130-2(83.0mg，179μmol，收率32.8％，纯度98.4％)，为棕色油状物。
在25℃下，将化合物A130-2(83.0mg，179μmol，1.00当量)和DCM(0.50mL)加入10mL圆底烧瓶中。再加入TFA(768mg，6.73mmol，0.50mL，37.7当量)，室温反应1小时。LCMS显示化合物A130-2反应完全，并且检测到目标质谱。反应液在50℃浓缩，得到化合物A130-3(85.0mg，粗品)，为黄色油状物。
在25℃下，将化合物A13(56.2mg，129μmol，1.00当量)、TEA(104mg，1.02mmol，143μL，3.00当量)和DCM(2.94mL)加入10mL圆底烧瓶中。置换3次氮气，在0℃下加入HATU(130mg，341.35μmol，1.00当量)，反应0.5小时，再加入化合物A130-3(122mg，341μmol，1.00当量)、TEA(104mg，1.02mmol，143μL，3.00当量)和DMF(2.44mL)，升温至室温反应1.5小时。LC-MS显示化合物A130-3反应完全，并且检测到目标质谱。浓缩后进行硅胶柱层析纯化，真空浓缩，得到化合物A130(33.8mg，42.3μmol，收率12.4％，纯度95.1％)，为亮黄色固体。LCMS:m/z＝759.4(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.8(s,1H),11.1(s,1H),9.14(s,1H),8.74(t,J＝9.6Hz,1H),8.47-8.39(m,2H),8.23(d,J＝8.0Hz,1H),8.13(d,J＝8.8Hz,3H),8.04(d,J＝8.8Hz,1H),7.83(s,1H),6.98(d,J＝4.8Hz,2H),6.88-6.85(m,1H),5.37-5.33(m,1H),3.62(s,3H),3.18-3.12(m,2H),2.98-2.92(m,2H),2.90-2.50(m,6H),2.12-2.07(m,1H),2.02-1.98(m,1H),1.75-1.66(m,1H).
制备例215.化合物A131的合成
在25℃下，将化合物Int 3(200mg，544μmol，1.00当量)、化合物A131-1(248mg，1.09mmol，2.00当量)和DMF(2.00mL)加入10mL平底烧瓶中。再加入Pd2(dba)3(49.8mg，54.4μmol，0.10当量)、RuPhos(25.4mg，54.4μmol，0.10当量)和tBuONa(104mg，1.09mmol，2.00当量)，置换3次氮气，升温至90℃反应2小时。LCMS显示剩余18.7％的化合物Int 3，并且检测到目标质谱。将反应液浓缩，粗产物用制备型HPLC纯化，在真空中浓缩，得到化合物A131-2(270mg，530μmol，收率24.4％，纯度95.3％)，为黄色固体。
在25℃下，将化合物A131-2(270mg，530μmol，1.00当量)和DCM(2.70mL)加入10mL圆底烧瓶中。再加入TFA(4.14g，36.3mmol，2.70mL，68.6当量)，室温反应1小时。LC-MS显示化合物A131-2反应完全，并且检测到目标质谱。将反应液浓缩，得到化合物A131-3(420mg，粗品，TFA)，为黄色油状物。
在25℃下，将化合物A13(472mg，1.09mmol，1.00当量)、DCM(10.0mL)和TEA(331mg，3.27mmol，455μL，3.00当量)加入50mL圆底烧瓶中。置换3次氮气，在0℃下加入HATU(414mg，1.09mmol，1.00当量)，反应1小时，再加入化合物A131-3(420mg，1.09mmol，1.00当量)和DMF(10.0mL)，升温至室温反应2小时。LC-MS显示化合物A131-3反应完全，并且检测到目标质谱。加水过滤，滤饼浓缩后得到粗产物，用制备型HPLC纯化，真空浓缩，得到化合物A131(127mg，157μmol，收率14.4％，纯度97.5％)，为灰白色固体。LCMS:m/z＝787.4(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),11.06(s,1H),9.10(s,1H),8.47-8.39(m,2H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),8.08(d,J＝8.4Hz,3H),7.82(s,1H),7.56(d,J＝8.6Hz,2H),6.87(t,J＝8.0Hz,1H),6.59-6.52(m,2H),5.32-5.27(m,1H),4.82(s,1H),4.01-3.97(m,1H),3.65(s,3H),3.38-3.33(m,2H),3.04-3.01(m,2H),2.92-2.84(m,1H),2.71-2.59(m,3H),2.00-1.96(m,1H),1.67-1.32(m,4H),1.09(s,3H).
制备例216.化合物A132的合成
在20-25℃和氮气氛围下，将化合物Int 3(400mg，1.04mmol，1.00当量)、化合物 A132-0(706mg，3.12mmol，3.00当量)、DMF(10.0mL)、Pd2(dba)3(190mg，208μmol，0.200当量)、t-BuONa(300mg，3.12mmol，3.00当量)、RuPhos(97.1mg，208μmol，0.200当量)和4A MS(100mg)加入100mL单口烧瓶中，将反应液升至90℃，反应2小时。LC-MS显示化合物Int 3反应完全，并且检测到48.2％的目标质谱(RT＝0.448min)。将反应液过滤，浓缩，粗产物用制备型HPLC纯化，旋干，并且冻干，得到化合物A132-1(172mg，274μmol，收率26.3％，纯度95.4％，TFA)，为黄色固体。
在20-25℃下，将化合物A132-1(95.0mg，187μmol，1.00当量)和DCM(0.5mL)加入10.0mL圆底烧瓶中，然后缓慢加入TFA(139mg，1.22mmol，90.6μL，6.51当量)，在20-25℃下反应1小时。LC-MS显示化合物A132-1反应完全，并且检测到91.2％的目标MS。将反应液浓缩，得到化合物A132-2(95.0mg，粗品，TFA)，为红色油状物。
在20-25℃下，将化合物A13(90.9mg，210μmol，1.10当量)和DMF(2.00mL)加入10mL单口圆底烧瓶中，将混合物降温至0℃。在0℃下加入DIEA(148mg，1.15mmol，199μL，6.00当量)、HATU(87.1mg，229μmol，1.20当量)和化合物A132-2(95.0mg，190μmol，1.00当量，TFA)，反应16小时。LCMS显示化合物A132-2反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.712min)。将反应液在真空下浓缩，得到化合物A132(49.3mg，53.7μmol，收率28.1％，纯度98.5％，TFA)，为白色固体。LCMS:m/z＝785.4(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.81(s,1H),11.06(s,1H),9.11(s,1H),8.45-8.40(m,2H),8.23(d,J＝7.6Hz,1H),8.15-8.06(m,3H),7.86-7.77(m,3H),6.86(t,J＝8.4Hz,1H),6.51(d,J＝8.0Hz,1H),6.42(d,J＝8.8Hz,1H),5.29(dd,J＝12.0,4.8Hz,1H),4.46-4.26(m,2H),4.16-3.98(m,4H),3.61(s,3H),3.13-3.02(m,2H),2.95-2.80(m,1H),2.70-2.61(m,2H),2.38-2.28(m,2H).2.06-1.91(m,3H).
制备例217.化合物A133的合成
在20-25℃，将DMF(200mL)加入500mL三口瓶中，依次加入化合物Int 8-1(8.00g，41.4mmol，1.00当量)、化合物Int 8-2(15.9g，82.8mmol，2.00当量)和叔丁醇钾(9.29g，82.8mmol，1.50当量)，氮气置换3次，在20-25℃反应2小时。LCMS检测到68.9％的未反应的化合物Int 8-1和21.4％的目标产物。将反应液倒入水(600mL)中，过滤，滤饼用水(50.0mL)洗涤，滤饼加入THF(400mL)和DMF(100mL)中，硫酸钠干燥，浓缩，得到化合物Int 8-3(8.00g，粗品)，为黄色油状物，将其直接用于下一步反应。
氩气下，将10％的Pd/C(5.25g，4.93mmol，10％纯度，0.10当量)加入75mL氢化瓶中，加入THF(200mL)，再加入化合物Int 8-3(15.0g，49.3mmol，1.00当量)，置换氢气3次，在30℃和氢气(15Psi)下反应16小时。LCMS显示原料反应完全，检测到45.6％目标产物。氩气置换3次，过滤，滤液使用薄层色谱纯化，得到化合物Int 8(714mg，2.60mmol，收率5.28％，纯度100％)，为白色固体。
将化合物Int 8(300mg，1.06mmol，1.00当量)、化合物A133-0(448mg，2.12mmol，2.00当量)、冰乙酸(191mg，3.18mmol，182μL，3.00当量)和二噁烷(7.50mL)加入40mL单口瓶中，升温至80℃反应5小时，降温至20-25℃，加入NaBH3CN(200mg，3.18mmol，3.00当量)，在20-25℃下继续反应3小时。LCMS显示剩余42.6％的化合物Int 8(RT＝0.184min)，并且检测到48.3％的目标质谱(RT＝0.427min)。将反应液浓缩，过滤，滤饼用DMF洗涤，粗产物用制备型HPLC纯化，将流动相冻干，得到化合物A133-1(90.0mg，186μmol，收率16.5％，纯度96.9％)，为粉红色固体。
在20-25℃下，将化合物A133-1(90.0mg，186μmol，1.00当量)、TFA(691mg，6.06mmol，450μL，32.6当量)和DCM(1.00mL)加入10mL单口圆底烧瓶中，在20-25℃下反应1小时。LC-MS显示化合物A133-1反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.287min)。将反应液在真空下浓缩，得到化合物A133-2(0.14g，粗品，TFA)，为黄色油状物。
在20-25℃和氮气氛围下，将化合物A13(125mg，289μmol，1.00当量)、TEA(87.9mg，869μmol，121μL，3.00当量)和DCM(2.80mL)加入40mL单口圆底烧瓶中，将混合物降温至0℃，添加化合物HATU(110mg，289μmol，1.00当量)，在0-5℃下反应1小时。在0℃下，将化合物A133-2(140mg，289μmol，1.00当量，TFA)、TEA(87.9mg，869μmol，121μL，3.00当量)和DMF(4.20mL)加入10mL圆底烧瓶中，将10mL圆底烧瓶中的溶液在0℃下加入40mL三口圆底烧瓶中，在20-25℃下反应3小时。LCMS显示剩余21.3％的化合物A133-2，并且检测到目标质谱(RT＝0.461min)。将反应液在真空下浓缩，并用DMF洗涤，粗产物用制备型HPLC纯化，并且冻干，得到化合物A133(52.1mg，66.8μmol，收率23.0％，纯度98.8％)，为白色固体。LCMS:m/z＝771.1(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H)11.05(s,1H)9.20(s,1H)8.53-8.37(m,2H)8.24-7.99(m,4H)7.82 (d,J＝7.6Hz,3H)6.89-6.85(m,1H)6.59-6.50(m,1H)6.38(d,J＝1.2Hz,1H)5.37-5.16(m,2H)4.55-4.30(m,2H)4.25-4.01(m,2H)3.85-3.67(m,1H)3.61(d,J＝5.6Hz,3H)2.97-2.80(m,1H)2.74-2.57(m,4H)2.28-2.10(m,2H)1.88(s,1H).
制备例218.化合物A134的合成
将化合物Int 8(300mg，1.06mmol，1.00当量)、化合物A134-0(508mg，2.12mmol，2.00当量)、HOAc(191mg，3.18mmol，182μL，3.00当量)和二噁烷(7.50mL)加入到40mL单口瓶中，在80℃下反应5小时，降温至20-25℃，再加入NaBH3CN(200mg，3.18mmol，3.00当量)，在20-25℃下继续反应3小时。LC-MS显示剩余15.2％的化合物Int 8(RT＝0.129min)，并且检测到78.3％的目标质谱(RT＝0.469min)。将反应液浓缩，过滤，滤饼用DMF洗涤，粗产物用制备型HPLC纯化，将流动相冻干，得到化合物A134-1(120mg，226μmol，收率20.1％，纯度93.9％)，为类白色固体。
在20-25℃，将化合物A134-1(120mg，226μmol，1.00当量)加入到DCM(1.20mL)中，加入TFA(921mg，8.08mmol，600μL，35.6当量)，反应1小时。LCMS显示化合物A134-1反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.326min)。将反应液浓缩，得到化合物A134-2(0.25g，粗品，TFA)，为黄色油状物。
将化合物A13(211mg，489μmol，1.00当量)、TEA(148mg，1.47mmol，204μL，3.00当量)和DCM(5.00mL)加入40mL单口瓶中，降温至0-5℃，加入HATU(186mg，489μmol，1.00当量)，反应1小时，再加入化合物A134-2(250mg，489μmol，1.00当量，TFA)、TEA(148mg，1.47mmol，204μL，3.00当量)和DMF(7.50mL)，升温至20-25℃反应3小时。LC-MS显示化合物A134-2反应完全，并且检测到73.7％的目标质谱(RT＝0.476min)。将反应液浓缩，过滤，滤饼用DMF洗涤，粗产物用制备型HPLC纯化，将流动相冻干，得到化合物A134(128mg，158μmol，收率32.4％，纯度98.7％)，为类白色固体。LCMS:m/z＝799.1(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H)11.1(s,1H)9.09(s,1H)8.48-8.44(m,1H)8.43-8.37(m,1H)8.26-8.17(m,1H)8.07(d,J＝8.4Hz,3H)7.87-7.75(m,1H)7.66-7.47(m,2H)6.85(t,J＝8.0Hz,1H)6.53(d,J＝8.0Hz,1H)6.36-6.21(m,1H)5.35-5.20(m,1H)3.91-3.76(m,2H)3.61(s,3H)3.58-3.49(m,1H)3.43-3.19(m,2H) 2.96-2.79(m,1H)2.74-2.57(m,2H)2.44-2.29(m,2H)2.03-1.90(m,1H)1.87-1.49(m,5H).
制备例219.化合物A135的合成
在20-25℃下，将化合物A13(73.7mg，175μmol，1.00当量)、TEA(53.4mg，527μmol，73.4μL，3.00当量)和DCM(1.20mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，将混合物降温至0℃。在0℃下加入HATU(66.9mg，175μmol，1.00当量)，反应半小时。将化合物A140-2(90.0mg，175μmol，1.00当量，TFA)、TEA(53.4mg，527μmol，73.4μL，3.00当量)和DCM(1.20mL)于20-25℃下加入50mL三口圆底烧瓶中。将50mL三口圆底烧瓶中的溶液在0℃下加入100mL三口圆底烧瓶中。在20-25℃下反应1.5小时。LC-MS显示化合物A140-2反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.496min)。将产物混合，并且真空下浓缩。粗产物采用反相高效液相色谱纯化，在真空下浓缩除去ACN，并且冻干，得到化合物A135(59.0mg，72.3μmol，收率31.6％，纯度98.0％)，为白色固体。LCMS:m/z＝799.2(M+H)+.1HNMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.8(s,1H),11.1(d,J＝8.0Hz,1H),9.11(s,1H),8.47-8.39(m,2H),8.22(d,J＝8.0Hz,1H),8.10-8.06(m,3H),7.82(s,1H),7.76-7.12(m,2H),7.00-6.84(m,3H),5.38-5.30(m,1H),3.67(s,3H),3.57(s,4H),3.14-2.85(m,5H),2.73-2.56(m,3H),1.99-1.90(m,2H),1.88-1.71(m,4H).
制备例220.化合物A136的合成
在20-25℃下，将化合物A13(122mg，293μmol，1.00当量)、TEA(89.0mg，879μmol，122μL，3.00当量)和DMF(3.00mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，将混合物降温至0℃。在0℃下加入HATU(111mg，293μmol，1.00当量)反应半小时。将化合物A141-2(150mg，293μmol，1.00当量，TFA)、TEA(89.0mg，879μmol，122μL，3.00当量)和DMF(3.00mL)于20-25℃下加入50mL三口圆底烧瓶中。将50mL三口圆底烧瓶中的溶液在0℃下加入100mL三口圆底烧瓶中。在20-25℃下反应1.5小时。LC-MS显示化合物A141-2反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.475min)。将产物混合，并将混合物过滤后在真空下浓缩。 粗产物采用反相高效液相色谱纯化，在真空下浓缩除去ACN，并且冻干，得到化合物A136(63.5mg，68.2μmol，收率18.0％，纯度98.9％，TFA)，为黄色固体。LCMS:m/z＝799.3(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.8(s,1H),11.1(s,1H),9.10(s,1H),8.47-8.38(m,2H),8.22(d,J＝7.2Hz,1H),8.08(d,J＝8.8Hz,3H),7.81(s,1H),7.58(d,J＝8.4Hz,2H),6.98(d,J＝4.4Hz,2H),6.89-6.85(m,1H),5.37-5.32(m,1H),3.76-3.67(m,4H),3.59(s,3H),3.10(s,2H),2.98(s,2H),2.92-2.85(m,1H),2.74-2.60(m,2H),2.02-1.97(m,1H),1.84(s,2H),1.75-1.68(m,4H).
制备例221.化合物A137的合成
在20-25℃下，将化合物A128-1(50.0mg，96.4μmol，1.00当量)、化合物A137-0(46.3mg，192μmol，2.00当量)、RuPhos(4.50mg，9.64μmol，0.100当量)、tBuONa(18.5mg，192μmol，2.00当量)、Pd2(dba)3(8.83mg，9.64μmol，0.100当量)和DMF(2.50mL)加入10mL平行反应瓶中，置换氮气三次后将混合物于90℃反应2小时。LCMS显示剩余53％的化合物A128-1(RT＝0.579min)，并且检测到14.7％的目标质谱(RT＝0.618min)。在真空环境下将反应液过滤，浓缩后采用柱层析纯化(SiO2，石油醚:乙酸乙酯＝5:2，Rf＝0.450)，得到化合物A137-1(140mg，190μmol，收率24.7％，纯度92.0％)，为黄色固体。
在20-25℃下，将Pd/C(70.0mg，65.7μmol，10％)和Pd(OH)2/C(70.0mg，190μmol，20％)在氩气氛围下缓慢加入35mL氢化瓶中，再依次加入化合物A137-1(140mg，190μmol，1.00当量)、THF(7.00mL)和DMF(1.40mL)。置换H2(20Psi)三次后将混合物于25-30℃反应16小时。LCMS显示化合物A137-1反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.452min)。将混合物脱气并用Ar吹扫3次。混合物通过硅藻土过滤，在25℃下用THF(20.0mL*3)洗涤。在40℃和真空环境下浓缩后得到化合物A137-2(110mg，169μmol，收率88.7％，纯度76.4％)，为黄色油状物。
在20-25℃下，将化合物A137-2(110mg，169μmol，1.00当量)、TFA(1.54g，13.5mmol， 1.00mL，80.0当量)和DCM(1.00mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，在20-25℃下反应1小时。LCMS显示化合物A137-2反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.264min)。将混合物在40-45℃下浓缩，得到化合物A137-3(235mg，粗品，TFA)，为黄色油状物。
在20-25℃下，将化合物A137-3(160mg，272μmol，1.00当量，TFA)、化合物Int 4(113mg，272μmol，1.00当量)、DMF(8.00mL)和HOAc(326mg，5.44mmol，311μL，20.0当量)加入10mL平行反应瓶中，将混合物于20-25℃反应1小时。在0-5℃下，添加NaBH(OAc)3(230mg，1.09mmol，4.00当量)至反应液中。将混合物于20-25℃反应1小时。LC-MS显示剩余3.2％的化合物A137-3(RT＝0.262min)，并且检测到49.96％的目标质谱(RT＝0.39min)。在真空环境中将反应液过滤，浓缩，并且采用制备型HPLC(TFA条件；柱：Welch Xtimate C18 150*25mm*5μm；流动相：[水(TFA)-ACN]；梯度：30％-50％B，10分钟以上)纯化。浓缩后得到化合物A137(61.0mg，66.8μmol，收率24.5％，纯度98.5％，TFA)，为灰白色固体。LCMS:m/z＝785.1(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),11.08(s,1H),9.20-9.13(m,1H),9.18-9.13(s,1H),8.48-8.36(m,2H),8.23(dd,J＝0.8,7.6Hz,1H),8.13(d,J＝8.6Hz,2H),8.07-8.01(s,1H),7.84(s,1H),7.68(d,J＝8.6Hz,2H),7.00-6.82(m,3H),5.41-5.28(m,1H),4.14(s,2H),3.87(s,1H),3.62(s,3H),3.06-2.82(m,3H),2.77-2.55(m,4H),2.43-2.28(m,1H),2.16-1.91(m,4H),1.87-1.63(m,4H).
制备例222.化合物A138的合成
在20-25℃下，将化合物Int 3(200mg，547μmol，1.00当量)、化合物A138-0(197mg，821μmol，1.50当量)和tBuONa(105mg，1.10mmol，2.00当量)加入10mL平行反应瓶中，再于氮气保护下添加RuPhos(25.5mg，54.7μmol，0.100当量)、Pd2(dba)3(50.1mg，54.7μmol，0.100当量)和DMF(4.00mL)至反应瓶中。置换三次氮气后，将混合物在氮气保护下在90℃反应2小时。LC-MS显示剩余24％的化合物Int 3(RT＝0.352min)，并且检测到33％的目标质谱(RT＝0.452min)。将反应液过滤，浓缩后采用高效液相色谱纯化。浓缩后得到化合物A138-1(200mg，397μmol，收率18.1％，纯度99.0％)，为黄色油状物。
在20-25℃下，将化合物A138-1(200mg，397μmol，1.00当量)、ACN(4.00mL)和TFA(6.14g，53.8mmol，4.00mL，135当量)加入10mL平行反应瓶中，反应1小时。LCMS 显示化合物A138-1反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.239min)。将反应液浓缩，得到化合物A138-2(200mg，粗品，TFA)，为黄色油状物。
在20-25℃下，将化合物Int 4(150mg，361μmol，1.00当量)、化合物A138-2(190mg，361μmol，1.00当量，TFA)、DMF(8.00mL)、THF(40.0mL)和KOAc(71.0mg，723μmol，2.00当量)加入100mL三口圆底烧瓶中，将混合物于20-25℃反应1小时。在20-25℃下，添加NaBH(OAc)3(230mg，1.09mmol，3.00当量)至反应液中。将混合物于20-25℃反应12小时。LC-MS显示化合物A138-2反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.379min)。将反应液过滤，浓缩后采用高效液相色谱纯化。浓缩并且冻干，得到化合物A138(60.8mg，64.2μmol，收率17.7％，纯度95.0％，TFA)，为灰白色固体。LCMS:m/z＝785.1(M+H)+.1HNMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),11.07(s,1H),9.50-9.37(s,1H),9.12(s,1H),8.49-8.37(m,2H),8.23(d,J＝7.6Hz,1H),8.14(d,J＝8.4Hz,2H),8.05(s,1H),7.85(s,1H),7.71-7.63(m,2H),6.85(t,J＝8.2Hz,1H),6.58-6.52(m,1H),6.30(d,J＝8.4Hz,1H),5.33-5.21(m,1H),4.37(d,J＝3.8Hz,2H),3.88-3.79(m,1H),3.61(s,3H),3.10-2.98(m,1H),2.97-2.81(m,2H),2.71-2.57(m,5H),2.32(d,J＝1.8Hz,1H),2.29-2.20(m,1H),2.08-1.92(m,2H),1.91-1.65(m,4H).
制备例223.化合物A139的合成
在20-25℃下，将化合物A128-1(300mg，578μmol，1.00当量)、化合物A139-0(261mg，1.16mmol，2.00当量)和RuPhos(27.0mg，57.8μmol，0.100当量)加入50mL三口圆底烧瓶中。再加入t-BuONa(111mg，1.16mmol，2.00当量)、Pd2(dba)3(52.9mg，57.8μmol，0.100当量)和DMF(15.0mL)，置换3次氮气，升温至90℃反应2小时。LC-MS显示剩余约11％的化合物A128-1，并且检测到53.7％的目标质谱。将反应液过滤，浓缩滤液。粗产物采用柱层析纯化，并且浓缩，得到化合物A139-1(190mg，280μmol，收率24.2％，纯度97.7％)，为黄色固体。
在20-25℃下，将Pd/C(170mg，159μmol，10.0％)和Pd(OH)2/C(170mg，20.0％)加入75mL氢化瓶中。在氩气下再加入THF(17.0mL)和DMF(3.40mL)中的化合物A139-1(340mg，502μmol，1.00当量)，置换3次氢气，升温至20-30℃，反应16小时。LC-MS显示化合物A139-1反应完全，并且检测到目标质谱。反应液通过硅藻土过滤，浓缩滤液。浓缩后得到化合物A139-2(380mg，粗品)，为黄色油状物。
在20-25℃下，将化合物A139-2(340mg，653μmol，1.00当量)和DCM(6.60mL)加入100mL单口瓶中。再加入TFA(5.37g，47.1mmol，3.50mL，72.1当量)，在20-25℃下反应1小时。LC-MS显示化合物A139-2反应完全，并且检测到目标质谱。将反应液直接浓缩，得到化合物A139-3(732mg，粗品，TFA)，为黄色油状物。
在20-25℃下，将化合物A139-3(350mg，659μmol，1.00当量，TFA)、化合物Int 4(274mg，659μmol，1.00当量)、DMF(8.40mL)和THF(42.0mL)加入250mL单口瓶中。再加入KOAc(129mg，1.32mmol，2.00当量)，在20-25℃反应1小时，然后加入NaBH(OAc)3(279mg，1.32mmol，2.00当量)，在20-25℃反应12小时。LCMS显示剩余约39.5％的化合物Int 4，并且检测到约47.4％的目标质谱。将反应液过滤，滤液直接浓缩，粗产物用制备型HPLC纯化，得到化合物A139(141mg，158μmol，收率24.0％，纯度99.2％，TFA)，为黄色固体。LCMS:m/z＝771.5(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),11.09(d,J＝4.0Hz,1H),9.12(s,1H),8.48-8.36(m,2H),8.23(d,J＝7.6Hz,1H),8.14(d,J＝8.4Hz,2H),8.08(s,1H),7.84(s,1H),7.73(dd,J＝3.2,8.6Hz,2H),7.05-6.83(m,3H),5.40-5.30(m,1H),4.54-4.41(m,2H),3.58(d,J＝10.2Hz,3H),3.24-3.04(m,5H),2.94-2.81(m,2H),2.66(m,4H),2.35-2.29(m,1H),2.17-1.92(m,4H).
制备例224.化合物A140的合成
在20-25℃下，将化合物Int 3(100mg，274μmol，1.00当量)、化合物A140-0(98.9mg，411μmol，1.50当量)和二噁烷(2.00mL)加入250mL单口瓶中。再加入RuPhos(12.8mg，27.4μmol，0.10当量)、Pd2(dba)3(25.1mg，27.4μmol，0.10当量)和t-BuONa(52.7mg，548μmol，2.00当量)。在90℃下反应2小时。LC-MS显示剩余约11.9％的化合物Int 3，并且检测到目标质谱。将反应液冷却到20-25℃，倒入5％的醋酸溶液中，过滤。粗产物用制备型HPLC纯化，冻干，得到化合物A140-1(80.0mg，159μmol，收率14.5％，纯度99.4％)， 为粉红色固体。
在20-25℃下，将化合物A140-1(80.0mg，159μmol，1.00当量)和DCM(8.00mL)加入100mL单口瓶中。再加入TFA(3.07g，26.9mmol，2.00mL，168当量)，在20-25℃下反应2小时。LC-MS显示化合物A140-1反应完全，并且检测到目标质谱。将反应液直接浓缩，得到化合物A140-2(95.0mg，粗品，TFA)，为黄色固体。
在20-25℃下，将化合物A140-2(95.0mg，239μmol，1.00当量)、化合物Int 4(96.4mg，239μmol，1.00当量)、DMF(5.00mL)和THF(20.0mL)加入250mL单口瓶中。再加入KOAc(46.9mg，478μmol，2.00当量)，在20-25℃下反应1小时，然后加入NaBH(OAc)3(151mg，717μmol，3.00当量)，在20-25℃下反应12小时。LC-MS显示化合物A140-2反应完全，并且检测到目标质谱。将反应液直接浓缩，粗产物用制备型HPLC纯化，得到化合物A140(52.0mg，55.7μmol，收率23.3％，纯度96.4％，TFA)，为粉红色固体。LCMS:m/z＝785.4(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.8(s,1H),11.1(s,1H),10.1-10.0(m,1H),9.12(s,1H),8.47-8.39(m,2H),8.23(d,J＝7.6Hz,1H),8.15(d,J＝8.0Hz,2H),8.05(s,1H),7.85(s,1H),7.73(d,J＝8.0Hz,2H),6.98-6.87(m,3H),5.37-5.33(m,1H),4.48(s,2H),3.63(s,3H),3.15-3.00(m,4H),2.90-2.84(m,2H),2.75-2.59(m,4H),2.21-2.12(m,1H),2.07(s,1H),2.02-1.96(m,1H),1.92-1.82(m,3H),1.76(s,2H).
制备例225.化合物A141的合成
在20-25℃下，将化合物Int 3(200mg，520μmol，1.00当量)、化合物A141-0(187mg，780μmol，1.50当量)和DMF(8.00mL)加入100mL三口圆底烧瓶中。再加入RuPhos(48.5mg，104μmol，0.20当量)、Pd2(dba)3(95.3mg，104μmol，0.20当量)和tBuONa(150mg，1.56mmol，3.00当量)，置换3次氮气，升温至90℃反应2.5小时。LCMS显示化合物Int3反应完全，并且检测到目标质谱。将反应液冷却到20-25℃，倒入5％的醋酸溶液中，过滤，浓缩滤液。粗产物用制备型HPLC纯化，并且浓缩，得到化合物A141-1(430mg，777μmol，收率29.8％，纯度90.0％)，为黄色固体。
在20-25℃下，将化合物A141-1(430mg，777μmol，1.00当量)和DCM(8.60mL)加入100mL单口瓶中。再加入TFA(1.54g，13.4mmol，1.00mL，17.3当量)，在20-25℃下反应1小时。LCMS显示化合物A141-1反应完全，并且检测到目标质谱。将反应液直 接浓缩，得到化合物A141-2(660mg，粗品，TFA)，为黄色油状物。
在20-25℃下，将化合物A141-2(460mg，899μmol，1.00当量，TFA)、化合物Int 4(362mg，899μmol，1.00当量)、DMF(23.0mL)和THF(92.0mL)加入250mL单口瓶中。再加入KOAc(264mg，2.70mmol，3.00当量)，在20-25℃下反应1小时，然后加入NaBH(OAc)3(762mg，3.60mmol，4.00当量)，在20-25℃下反应17小时。LCMS显示化合物A141-2反应完全，并且检测到目标质谱。将反应液直接浓缩，粗产物用制备型HPLC纯化，得到化合物A141(199mg，216μmol，收率21.9％，纯度97.5％，TFA)，为白色固体。LCMS:m/z＝785.3(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.8(s,1H),11.1(d,J＝4.0Hz,1H),9.69-9.61(m,1H),9.11(d,J＝4.4Hz,1H),8.47-8.39(m,2H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),8.14(t,J＝8.0Hz,2H),8.05(s,1H),7.84(s,1H),7.70-7.64(m,2H),7.00-6.94(m,2H),6.90-6.87(m,1H),5.38-5.32(m,1H),4.39(d,J＝22.8Hz,2H),3.35(t,J＝11.6Hz,3H),3.17-3.03(m,5H),2.90-2.60(m,5H),2.01-1.80(m,8H).
制备例226.化合物A142的合成
在20-25℃下，将化合物A142-1(6.50g，30.6mmol，1.00当量)、化合物A142-0(10.2g，39.8mmol，1.30当量)、K2CO3(12.7g，91.8mmol，3.00当量)和DMF(162mL)加入250mL单口瓶中。在100℃下反应12小时。LCMS显示化合物A142-1反应完全，并且检测到目标质谱。将反应液直接浓缩，粗产物用柱层析纯化，得到化合物A142-2(10.4g，24.2mmol，收率58.2％，纯度90.8％)，为白色固体。
在20-25℃下，将Pd/C(3.00g，2.82mmol，10％)加入250mL氢化瓶中。在氩气下再加入MeOH(60.0mL)中的化合物A142-2(6.00g，13.9mmol，1.00当量)，置换3次氢气，在20-25℃和15Psi下反应12小时。LCMS显示化合物A142-2反应完全，并且检测到目标质谱。反应液通过硅藻土过滤，并且浓缩滤液。浓缩后得到化合物A142-3(2.85g，10.4 mmol，收率74.8％，纯度93.8％)，为黄色油状物。
在20-25℃下，将化合物Int 3(60.0mg，156μmol，1.00当量)、化合物A142-3(85.0mg，312μmol，2.00当量)和tBuONa(30.0mg，312μmol，2.00当量)加入100mL三口圆底烧瓶中。再加入RuPhos(7.29mg，15.6μmol，0.100当量)、Pd2(dba)3(14.3mg，15.6μmol，0.100当量)和DMF(4.00mL)，置换3次氮气，升温至90℃反应1.5小时。LCMS显示剩余约31.3％的化合物Int 3，并且检测到目标质谱。将反应液过滤，浓缩滤液。粗产物用制备型HPLC纯化，并且浓缩，得到化合物A142-4(60.0mg，111μmol，收率23.8％，纯度95.3％)，为黄色固体。
在20-25℃下，将化合物A142-4(60.0mg，111μmol，1.00当量)和DCM(3.00mL)加入100mL单口瓶中。再加入TFA(5.17g，45.3mmol，3.37mL，406当量)，在20-25℃下反应1小时。LCMS显示化合物A141-4反应完全，并且检测到目标质谱。将反应液直接浓缩，得到化合物A142-5(150mg，粗品，TFA)，为黄色油状物。
在20-25℃下，将化合物A142-5(150mg，238μmol，1.00当量，TFA)、化合物Int 4(99.3mg，238μmol，1.00当量)、DMF(3.60mL)和THF(18.0mL)加入250mL单口瓶中。再加入KOAc(46.7mg，476μmol，2.00当量)，在20-25℃下反应1小时，然后加入NaBH(OAc)3(100mg，476μmol，2.00当量)，在20-25℃下反应12小时。LCMS显示剩余约36.6％的化合物A142-5，并且检测到目标质谱。将反应液直接过滤，浓缩，粗产物用制备型HPLC纯化，得到化合物A142(51.3mg，42.8μmol，收率17.9％，纯度95.2％，TFA)，为白色固体。LCMS:m/z＝800.2(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),11.06(s,1H),9.10(s,1H),8.49-8.37(m,2H),8.23(d,J＝7.6Hz,1H),8.18-7.98(m,3H),7.84(s,1H),7.64(s,2H),6.94-6.85(s,1H),6.59(d,J＝7.6Hz,2H),5.53-5.35(m,1H),5.35-5.25(m,1H),4.54-4.24(m,2H),4.03-3.85(m,1H),3.63(s,3H),3.27-2.81(m,7H),2.54-2.33(s,7H),2.35-2.28(m,2H),2.01-1.89(m,2H).
制备例227.化合物A143的合成
在25℃下，将化合物Int 9-0(2.50g，15.0mmol，1.00当量)加入甲苯(10.0mL)中，再加入化合物Int 9-1(4.31g，59.8mmol，4.10mL，4.00当量)，升温至100℃反应16小时。LCMS显示化合物Int 9-0反应完全，检测到62.9％的目标产物。降温至25℃，加入甲基叔 丁基醚(20.0mL)，继续降温至0℃搅拌0.5小时，过滤，滤饼用石油醚(10.0mL)洗涤，滤饼减压干燥，得到化合物Int 9-2(3.56g，14.82mmol，99.1％收率，99.6％纯度)，为白色固体，将其直接用于下一步反应。
在25℃，将化合物Int 9-2(3.56g，14.8mmol，1.00当量)加入乙酸(18.0mL)中，加入化合物Int 9-3(7.10g，118mmol，6.36mL，7.98当量)，升温至120℃反应16小时。LCMS显示原料已经反应完全，检测到产物主峰。将反应液倒入HCl(0.50M，62.0mL)中，在25℃搅拌1小时，过滤，滤饼用冷水(39.0mL)洗涤，滤饼减压干燥，得到化合物Int 9(2.84g，9.75mmol，收率65.7％，纯度90.7％)，为黄色固体。
在-10-25℃下，将化合物A143-a(3.00g，13.0mmol，1.00当量)和DCM(30.0mL)加入250mL三口圆底烧瓶中。再加入吡啶三氧化硫络合物(7.26g，45.6mmol，3.50当量)、DIEA(6.73g，52.1mmol，9.08mL，4.00当量)和DMSO(8.14g，104mmol，8.14mL，8.00当量)，在-10-25℃下反应4小时。薄层色谱TLC(二氯甲烷:甲醇＝20:1)检测显示化合物A143-a(Rf＝0.2)反应完全，生成一个主点(Rf＝0.3)。分别加入水(80.0mL)和二氯甲烷(250mL)，分液后用二氯甲烷(60.0mL)萃取3次，合并有机相并用饱和盐水(80.0mL)洗涤，硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩，得到化合物A143-0(1.35g，5.91mmol，收率45.4％)，为黄色油状物。
在10-20℃下，将化合物A25(193mg，0.84mmol，1.00当量)、A143-0(96.0mg，0.84mmol，1.00当量)、AcOH(202mg，3.37mmol，0.19mL，4.00当量)和DMF(4.00mL)加入100mL三口圆底烧瓶中。再加入NaBH(OAc)3(358mg，1.69mmol，2.00当量)，在10-20℃下反应12小时。LC-MS显示化合物A25反应完全，并且检测到68.2％的目标质谱。倒入饱和Na2CO3(28.0mL)中，过滤，用水(4.00mL)洗涤滤饼，滤饼浓缩干燥。粗产物用制备型HPLC纯化，得到化合物A143-1(300mg，0.41mmol，收率48.4％，纯度91.5％)，为 黄色固体。
在15-20℃下，将化合物A143-1(300mg，0.41mmol，1.00当量)和DCM(3.00mL)加入100mL三口圆底烧瓶中。再加入TFA(4.21g，36.9mmol，2.74mL，90.3当量)，在20℃下反应1.5小时。LC-MS显示化合物A143-1反应完全，并且检测到94.3％的目标质谱。讲反应液浓缩，得到化合物A143-2(551mg，粗品，7TFA)，为棕色固体。
在25℃下，将化合物A143-2(551mg，0.40mmol，1.00当量，7TFA)、化合物Int 9(141mg，0.48mmol，1.20当量)和DMF(11.0mL)加入100mL三口圆底烧瓶中。在0℃下，再加入DIEA(520mg，4.02mmol，0.70mL，10.0当量)和HATU(184mg，0.48mmol，1.20当量)，在25℃下反应16小时。LCMS显示化合物A143-2反应完全，并且检测到75.3％的目标质谱。将反应液浓缩，粗产物用制备型HPLC纯化，得到化合物A143(195mg，0.24mmol，收率58.6％，纯度98.9％)，为乳白色固体。LCMS:m/z＝818.2(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.35(s,1H),8.87(s,1H),8.43-8.39(m,2H),8.21(d,J＝7.6Hz,1H),7.95(s,1H),7.78(d,J＝9.2Hz,2H),7.71(s,1H),7.37-7.34(m,1H),7.32(d,J＝2.0Hz,1H),7.16(d,J＝8.8Hz,1H),7.07(d,J＝9.2Hz,2H),3.84(s,3H),3.60(t,J＝6.8Hz,3H),3.50-3.49(m,5H),3.19(s,4H),2.69-2.66(m,3H),2.60-2.54(m,5H),2.47-2.36(m,4H).
制备例228.化合物A144的合成
在20℃下，将化合物A121-2(600mg，0.48mmol，1.00当量，6TFA)、化合物Int 9(141mg，0.48mmol，1.20当量)和DMF(12.0mL)加入100mL三口圆底烧瓶中。在0℃下，再加入DIEA(556mg，4.30mmol，0.75mL，9.00当量)和HATU(218mg，0.57mmol，1.20当量)，在20℃下反应16小时。LCMS显示化合物A121-2反应完全，并且检测到69.1％的目标质谱。将反应液浓缩，粗产物用制备型HPLC纯化，得到化合物A144(227mg，0.28mmol，收率58.2％，纯度100％)，为黄色固体。LCMS:m/z＝817.3(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.34(s,1H),8.87(s,1H),8.44-8.39(m,2H),8.21(d,J＝7.2Hz,1H),7.79(s,1H),7.78(d,J＝9.2Hz,2H),7.71(s,1H),7.36(d,J＝8.4Hz,1H),7.32(d,J＝2.0Hz,1H),7.15(d,J＝8.8Hz,1H),7.07(d,J＝9.2Hz,2H),4.56-4.21(m,1H),3.84(s,4H),3.61-3.58(m,2H),3.21(s,4H),3.12-2.75(m,2H),2.70-2.67(m,2H),2.60-2.51(m,4H), 2.38-2.34(m,2H),1.71-1.53(m,3H),1.46-1.43(m,2H),1.14-1.10(m,2H).
制备例229.化合物A145的合成
在20-25℃下，将化合物A145-a(43.7g，454mmol，1.00当量)、Cs2CO3(370g，1.14mol，2.50当量)和DMF(440mL)加入1000mL单口瓶中。用氮气换气3次，再加入BnBr(81.6g，477mmol，56.7mL，1.05当量)，在20-25℃下反应1小时。TLC显示化合物A145-a反应完全，并且检测到新点。将反应液直接倒入水里，用乙酸乙酯萃取，用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩，得到化合物A145-b(96.2g，粗品)，为黄色油状物。
在20-25℃下，将化合物A145-b(96.2g，516mmol，1.00当量)和DCM(520mL)加入1000mL单口瓶中。用氮气换气3次，再加入DAST(333g，2.07mol，273mL，4.00当量)，在20-25℃下反应12小时。TLC显示化合物A145-b反应完全，并且检测到新点。将反应液直接倒入甲醇(600mL)中，直接浓缩，采用柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝50:1至20:1)纯化，得到化合物A145-c(96.2g，粗品)，为黄色油状物。
在20-25℃下，将Pd(OH)2/C(24.0g，34.1mmol，20％)加入2.00L氢化瓶中。在氩气下再加入化合物A145-c(24.0g，114mmol，1.00当量)、MeOH(480mL)和HCl(2M，172mL，3.00当量)，置换3次氢气，升温至20-50℃反应12小时。LCMS显示化合物A145-c反应完全，并且检测到新点。反应液通过硅藻土过滤，浓缩滤液，得到化合物A145-d(17.2g，105mmol，收率92.1％，纯度95.0％，HCl)，为黄色油状物。
在20-25℃下，将化合物A145-d(12.7g，107mmol，1.00当量)和H2SO4(127mL)加入500mL三口圆底烧瓶中。再加入HNO3(27.5g，284mmol，19.7mL，65％，2.65当量)， 置换3次氮气，在0-5℃反应10分钟，升温至115℃反应12小时。TLC显示化合物A145-d反应完全，并且检测到新点。将反应液倒入水中，用碳酸氢钠调节pH＝8，用乙酸乙酯萃取，用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩滤液，得到化合物A145-0(25.8g，158mmol，收率73.5％)，为黄色固体。
在20-25℃下，将化合物A145-0(4.00g，24.5mmol，1.00当量)、4-(4-BOC-1-哌嗪基)苯硼酸(8.26g，26.9mmol，1.10当量)、Cu(OAc)2(534mg，2.94mmol，0.12当量)和DMF(40.0mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，再加入吡啶(5.82g，73.5mmol，5.94mL，3.00当量)，置换3次氮气，升温至60℃，反应12小时。LC-MS显示化合物A145-0反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.556min)。倒入水(200mL)中，用乙酸乙酯(200mL)萃取3次，合并的有机相用饱和盐水(200mL)洗涤，硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩，得到化合物A145-1(7.80g，15.4mmol，收率63.1％，纯度84.1％)，为黄色固体。
在20-25℃下，将Pd/C(1.53g，1.43mmol，10％)加入1.00L氢化瓶中，在Ar氛围下，再加入化合物A145-1(7.80g，15.4mmol，1.00当量)和THF(400mL)，置换3次氢气，在H2(15Psi)和25℃下反应12小时。LC-MS显示化合物A145-1反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.428min)。置换3次Ar，过滤反应液，滤饼用四氢呋喃(500mL)洗涤，收集滤液，浓缩，并且干燥，得到化合物A145-2(5.62g，14.2mmol，收率92.2％)，为黄色固体。
在20-25℃下，将化合物A145-2(3.50g，8.90mmol，1.00当量)、6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(1.73g，9.07mmol，1.02当量)和DCM(35.0mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，在0-5℃下，再加入EDCI(2.05g，10.6mmol，1.20当量)，在0℃下反应1小时。LC-MS显示化合物A145-2反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.608min)。倒入水(100mL)中，用乙酸乙酯(100mL)萃取3次，合并的有机相用饱和碳酸氢钠溶液(100mL)洗涤，硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩，得到化合物A145-3(4.80g，7.90mmol，收率88.7％，纯度93.2％)，为黄色固体。
在20-25℃下，将化合物A145-3(2.27g，3.73mmol，1.00当量)和DCM(60.0mL)加入250mL三口圆底烧瓶中，再加入TFA(46.0g，403mmol，30.0mL)，在25℃下反应1小时。LC-MS显示化合物A145-3反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.397min)。将反应液浓缩，得到化合物A42(4.50g，3.26mmol，收率87.2％，纯度91.5％，TFA)，为黄色油状物。
在20-25℃下，将化合物A42(1.00g，1.96mmol，1.00当量，TFA)，化合物A145-4(445mg，1.96mmol，1.00当量)，KOAc(385mg，3.92mmol，2.00当量)和THF(200mL)和 DMF(40.0mL)加入500mL三口圆底烧瓶中，25℃，反应1小时。再加入NaBH(OAc)3(1.25g，5.89mmol，3.00当量)，25℃，反应1小时。LC-MS显示化合物A42反应完全，并且检测到目标质谱(RT＝0.468min)。将反应液浓缩，得到黄色油状化合物A145-5(1.13g，1.43mmol，收率72.6％，纯度85.5％)。
在20-25℃下，将化合物A145-5(1.13g，1.43mmol，1.00当量)和DCM(30.0mL)加入100mL三口圆底烧瓶中，再加入TFA(14.8g，130mmol，9.66mL，91.2当量)，在20-25℃下反应1小时。LC-MS显示化合物A145-5反应完全(RT＝0.372min)，并且检测到目标质谱。将反应液浓缩，倒入水(30.0mL)中，用二氯甲烷(30.0mL)萃取3次，合并的有机相用饱和盐水(50.0mL)洗涤，硫酸钠干燥，过滤，并且浓缩，得到化合物A145-6(792mg，1.14mmol，收率79.6％，纯度82.8％，TFA)，为黄色油状物。
在20-25℃下，将化合物A145-6(250mg，358μmol，1.00当量，TFA)、化合物Int 7(118mg，430μmol，1.20当量)和DMSO(5.00mL)加入40.0mL平行反应瓶中，再加入DIEA(138mg，1.08mmol，187μL，3.00当量)，升温至110℃，反应12小时。LC-MS显示化合物A145-6反应完全(RT＝0.449min)，并且检测到目标质谱。将反应液浓缩，粗产物用制备型HPLC纯化，得到化合物A145(53.3mg，62.8μmol，收率17.5％，纯度98.2％，TFA)，为黄色固体。LCMS:m/z＝834.5(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.08(s,1H),10.27(s,1H),8.84(s,1H),8.42-8.40(m,2H),8.24-8.23(m,1H),7.77(d,J＝8.8Hz,2H),7.67(d,J＝8.4Hz,1H),7.34(d,J＝2.0Hz,1H),7.29-7.25(m,1H),7.17(d,J＝8.8Hz,2H),5.09-5.04(m,1H),4.04(d,J＝12.4Hz,2H),3.94(d,J＝12.4Hz,2H),3.62(d,J＝10.8Hz,3H),3.29-3.21(m,4H),3.16(d,J＝11.6Hz,2H),3.07-2.98(m,3H),2.96-2.81(m,2H),2.03-2.00(m,1H),1.78(d,J＝13.2Hz,2H),1.66(d,J＝3.2Hz,3H),1.27-1.23(m,2H).
制备例230.化合物A146的合成
在20-25℃下，将化合物A42(500mg，980μmol，1.00当量)、化合物A146-0(209mg，980μmol，1.00当量)、KOAc(192mg，1.96mmol，2.00当量)、DMF(20.0mL)和THF(100mL)加入25mL三口圆底烧瓶中。在0-5℃下，再加入NaBH(OAc)3(623mg，2.94mmol，3.00当量)。在25℃下反应12小时。LC-MS显示化合物A42反应完全(RT＝0.458min)， 并且检测到目标质谱。将反应液浓缩，得到化合物A146-1(568mg，713μmol，收率72.7％，纯度83.4％)，为黄色油状物。
在20-25℃下，将化合物A146-1(568mg，713.77μmol，1.00当量)和DCM(12.0mL)加入40.0mL平行反应瓶中，再加入TFA(7.27g，63.7mmol，5.68mL)，在25℃下反应1小时。LC-MS显示化合物A146-1反应完全(RT＝0.366min)，并且检测到目标质谱。将反应液浓缩，粗产物用制备型HPLC纯化，得到化合物A146-2(321mg，504μmol，收率70.7％，纯度88.6％，TFA)，为黄色固体。
在20-25℃下，将化合物A146-2(267mg，419μmol，1.00当量，TFA)、化合物Int 7(139mg，503μmol，1.20当量)和DMSO(5.50mL)加入40.0mL平行反应瓶中，再加入DIEA(162mg，1.26mmol，219μL，3.00当量)，升温至110℃，反应12小时。LC-MS显示化合物A146-2反应完全(RT＝0.440min)，并且检测到目标质谱。将反应液浓缩，粗产物用制备型HPLC纯化，得到化合物A146(84.8mg，99.0μmol，收率23.6％，纯度95.7％，TFA)，为黄色固体。LCMS:m/z＝820.4(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.09(s,1H),10.28(s,1H),8.84(s,1H),8.43-8.40(m,2H),8.25-8.22(m,1H),7.77(d,J＝8.8Hz,2H),7.69(d,J＝8.8Hz,1H),7.44-7.38(m,1H),7.30-7.28(m,1H),7.18(d,J＝8.8Hz,2H),5.10-5.05(m,1H),4.12(d,J＝13.2Hz,2H),3.92(d,J＝10.4Hz,3H),3.63(s,2H),3.18-3.15(m,4H),2.89-2.86(m,1H),2.61-2.54(m,4H),2.15-2.25(m,1H),2.04-2.01(m,1H),1.87(d,J＝11.2Hz,2H),1.31-1.23(m,3H).
制备例231.化合物A147的合成
在20-25℃下，将化合物A42(770mg，1.55mmol，1.00当量)、化合物A143-0(3.53g，15.45mmol，10当量)、HOAc(1.86g，30.9mmol，1.77mL，20.0当量)和DMF(16.0mL)加入40mL平行反应瓶中，在25℃下反应1小时。在0℃下，再加入NaBH(OAc)3(1.31g，6.18mmol，4.00当量)，在25℃下反应1小时。LC-MS显示化合物A42反应完全(RT＝0.422 min)，并且检测到目标质谱。将反应液浓缩，得到化合物A147-1(665mg，836μmol，收率54.1％，纯度85.4％)，为黄色固体。
在20-25℃下，将化合物A147-1(665mg，836μmol，1.00当量)和DCM(14.0mL)加入40mL平行反应瓶中，再加入TFA(10.2g，90.2mmol，6.7mL)，在25℃下反应1小时。LC-MS显示化合物A147-1反应完全(RT＝0.367min)，并且检测到目标质谱。将反应液浓缩，得到化合物A147-2(520mg，750μmol，收率89.7％，纯度TFA)，为黄色固体。
在20-25℃下，将化合物Int 9(198mg，750μmol，1.00当量)、TEA(227mg，2.25mmol，313μL，3.00当量)和DCM(10.0mL)加入100mL三口圆底烧瓶中(R1)，在0-5℃下，再加入HATU(371mg，976μmol，1.30当量)，在0-5℃下反应1小时。在25℃下，将化合物A147-2(0.52g，750μmol，1.00当量，TFA)和DMF(2.00mL)加入10mL单口瓶中(R2)。在0-5℃下，将R2中的混合溶液加入到R1中的混合溶液中，在20-25℃下反应1小时。LC-MS显示化合物A147-2反应完全(RT＝0.397min)，并且检测到目标质谱。将反应液浓缩，粗产物用制备型HPLC纯化，得到化合物A147(30.5mg，36.4μmol，收率4.86％，纯度98.4％，TFA)，为乳白色固体。LCMS:m/z＝825.5(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ10.36(s,1H),10.29(s,1H),8.83(s,1H),8.44-8.40(m,2H),8.21(d,J＝7.0Hz,1H),7.76(d,J＝9.2Hz,2H),7.43-7.39(m,2H),7.30(s,1H),7.20-7.14(m,2H),3.86(s,3H),3.62-3.59(m,17H),3.33-3.23(m,6H),2.69(t,J＝6.4Hz,2H).
制备例232.化合物A148的合成
在20-25℃下,将化合物Int 9(114mg，432μmol，1.00当量)、TEA(131mg，1.30mmol，180μL，3.00当量)和DCM(6.00mL)加入40ml单口瓶瓶中。在0-5℃下加入HATU(164mg，432μmol，1.00当量)，在0-5℃下搅拌1小时。在0-5℃下，将化合物A145-6(301mg，432μmol，1.00当量，TFA)、TEA(43.8mg，432.μmol，60.2μL，3.00当量)和DMF(10.0mL)加入平行反应瓶中。反应在25℃下搅拌1小时。LCMS显示化合物A145-6反应完全，并且检测到目标质谱。将反应液浓缩，粗产物用制备型HPLC纯化，并且冻干，得到化合物A148(83.3mg，99.3μmol，收率22.9％，纯度98.1％，TFA)，为白色固体。LCMS:m/z＝824.4(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ10.35(s,1H),10.28(s,1H),8.84(s,1H),8.44-8.40(m,2H),8.24(d,J＝6.8,1H),7.77(d,J＝8.8Hz,2H),7.39-7.36(m,1H),7.33-7.30(m,1H), 7.18-7.15(m,3H),3.95(d,J＝12,2H),3.85(s,3H),3.63-3.58(m,4H),3.37-3.35(m,2H),3.24-3.22(m,5H),3.21-3.03(m,3H),2.70-2.67(m,3H),1.68-1.64(m,5H),1.21-1.12(m,2H).
制备例233.化合物A149的合成
在20-25℃下，将甲苯(50.0mL)加入250ml三口瓶中。将化合物A149-1加入反应瓶中。将(Bu4N)Ac(11.5g，38.2mmol，11.6mL，1.50当量)加入反应瓶中。置换氮气三次。在20-25℃下，将TMSN3(5.88g，51.0mmol，6.71mL，2.00当量)在氮气氛围下加入反应瓶中。在20-25℃下，搅拌0.5小时。升温至105℃，搅拌4小时。LCMS显示化合物A149-1反应完全，并且检测到目标产物。将反应液冷却至20-25℃。在氮气氛围下倒入200mL冰水中。用乙酸乙酯萃取3次，收集有机相，用300ml盐水洗涤有机相3次，无水硫酸钠干燥后过滤，在35℃下真空浓缩，得到化合物A149-2(6.11g，25.1mmol，收率98.4％，纯度98.2％)。
在20-25℃.下，将化合物A149-2(6.11g，25.1mmol，1.00当量)、化合物A149-0(8.44g，37.6mmol，1.50当量)、K2CO3(10.4g，75.2mmol，3.00当量)和DMF(60.0mL)加入100ml三口瓶中。升温至100℃搅拌12小时。LCMS显示化合物A149-2反应完全，并且检测到目标产物。冷却至20-25℃，将反应液在氮气氛围下倒入0-5℃的水中。分别用200ml乙酸乙酯萃取反应液三次，收集有机相，用300ml盐水洗涤三次，经无水硫酸钠干燥后过滤，有机相在真空和45℃下浓缩，得到粗品。粗品经制备型HPLC纯化，并且冻干，得到化合物A149-3(5.80g，15.1mmol，收率60.4％，纯度100％)。
在20℃和氮气氛围下，将化合物A149-3(3.10g，8.11mmol，1.00当量)、BPD(3.09g，12.1mmol，1.50当量)、KOAc(2.39g，24.3mmol，3.00当量)、Pd(dppf)2·CH2Cl2(1.32g，1.62mmol，0.20当量)和DMF(20.0mL)加入250ml三口反应瓶中。升温至100℃搅拌12小时。LCMS显示化合物A149-3反应完全，并且检测到目标产物。将100ml水加入反应 中，分别用200ml乙酸乙酯萃取3次反应液，合并有机相，分别用100ml盐水洗涤3次，合并有机相，经无水硫酸钠干燥后过滤，有机相在真空和40℃下浓缩，得到化合物A149-4(3.70g，7.64mmol，收率94.1％，纯度88.6％)。
在20-25℃下，将化合物A149-4(3.70g，7.64mmol，1.00当量)加入100ml三口瓶中。在20-25℃下，将NaIO4(3.27g，15.2mmol，846μL，2.00当量)、高碘酸(222mg，977μmol，222μL，0.12当量)、H2O(18.5mL)和THF(37.0mL)加入反应瓶中。在20-25℃下搅拌16小时。LCMS显示化合物A149-4反应完全，并且检测到目标产物。将10M NaOH(20.0ml)水溶液缓慢加入反应液中，调节pH为7.0。在0-5℃下加入100ml饱和Na2SO3水溶液。分别用300ml乙酸乙酯萃取3次，有机相用300ml盐水洗涤1次，经无水硫酸钠干燥后浓缩，粗品经制备型HPLC(TFA体系)纯化。馏分用100ml乙酸乙酯萃取3次，有机相用300ml盐水洗涤1次，经无水硫酸钠干燥，并且浓缩，得到化合物A149-5(1.40g，3.83mmol，收率50.1％，纯度94.9％)。
在20-25℃下，将化合物A149-5(1.40g，3.83mmol，1.00当量)、化合物Int 1(2.38g，7.65mmol，2.00当量)、Cu(OAc)2(347mg，1.91mmol，0.50当量)、TEA(1.16g，11.4mmol，1.60mL，3.00当量)、TMEDA(444mg，3.83mmol，577μL，1.00当量)和DMF(10.0mL)加入100ml单口反应瓶中。升温至70℃后搅拌12小时。LCMS显示剩余16.4％的化合物A149-5，并且检测到目标产物。将反应液浓缩，得到粗品，粗品经制备型HPLC纯化，馏分用200ml乙酸乙酯萃取3次，有机相用200ml盐水洗涤3次，经无水硫酸钠干燥，并且浓缩，得到化合物A149-6(320mg，452μmol，收率11.8％，纯度84.9％)。
在20-25℃下，将化合物A149-6(320mg，452μmol，1.00当量)、TFA(1.03g，9.05mmol，672μL，20.0当量)和DCM(1.00mL)加入100ml三口瓶中。在20-25℃下搅拌1小时。LCMS显示化合物A149-6反应完全，并且检测到目标产物。将反应液浓缩后加入5.00ml饱和NaHCO3水溶液。用20ml乙酸乙酯萃取3次，有机相用20ml盐水洗涤3次，经无水硫酸钠干燥，并且浓缩，得到化合物A149-7(210mg，328μmol，收率72.7％，纯度78.4％)。
在20-25℃下，将化合物A149-7(150mg，235μmol，1.00当量)、化合物Int 7(77.8mg，281μmol，1.20当量)、DIEA(91.1mg，704μmol，122μL，3.00当量)和DMSO(1.00mL)加入100ml单口瓶中。升温至85℃搅拌24小时。LCMS显示剩余14.1％的化合物A149-7，并且检测到目标产物。将反应液浓缩，经制备型HPLC纯化，将馏分冻干，得到化合物A149(23.7mg，29.9μmol，收率12.7％，纯度95.7％)。LCMS:m/z＝757.0(M+H)+.1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.05(s,1H),8.99(s,1H),8.46-8.40(m,2H),8.21(d,J ＝7.2Hz,1H),8.00(s,1H),7.91(d,J＝8.4Hz,2H),7.79(s,1H),7.53(d,J＝8.0Hz,1H),7.41(d,J＝8.4Hz,2H),7.22(t,J＝5.6Hz,1H),6.95(s,1H),6.95-6.84(m,1H),5.07-5.02(m,1H),4.82(t,J＝5.6Hz,2H),4.29(s,2H),3.85(d,J＝4.4Hz,2H),2.87-2.85(m,1H),2.59-2.54(m,2H),2.00-1.96(m,1H).
制备例234.化合物A150的合成
步骤A：4-(丙-2-炔-1-基氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在0℃下，向4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4g，19.9mmol，1.0当量)的四氢呋喃(50mL)溶液中加入氢化钠(1.0g，23.8mmol，60％纯度)。反应液在氮气保护下0℃搅拌反应半小时。然后加入3-溴丙-1-炔(2.4g，19.9mmol，1.0当量)，反应在室温下搅拌16小时。反应完全后，用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状物，3g，产率63％)。
步骤B：4-((3-(1-(2,6-二氧基哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)丙-2-炔-1-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向3-(4-溴-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(1g，3.0mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入4-(丙-2-炔-1-基氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.1g，4.4mmol，1.5当量)、Pd(PPh3)2Cl2(210mg，0.3mmol，0.1当量)、碘化亚铜(110mg，0.6mmol，0.2当量)、碳酸铯(2.9g，8.9mmol，3.0当量)和4A分子筛(400mg)。反应液在氮气保护下90℃搅拌反应2小时。反应完全后，反应液加水淬灭，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状物，600mg，产率41％)。
步骤C：3-(3-甲基-2-氧代-4-(3-(哌啶-4-基氧基)丙-1-炔-1-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在0℃下，向4-((3-(1-(2,6-二氧基哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4- 基)丙-2-炔-1-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(300mg，0.604mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入盐酸/1,4-二氧六环(5mL，4M)。反应液在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，220mg，产率92％)。
步骤D：N-(3-(二氟甲基)-1-((1r,4r)-4-(4-((3-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)丙-2-炔-1-基)氧基)哌啶-1-基)甲基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向3-(3-甲基-2-氧代-4-(3-(哌啶-4-基氧基)丙-1-炔-1-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(300mg，0.8mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)和甲醇(2.0mL)的溶液中加入N-(3-(二氟甲基)-1-((1r,4r)-4-甲酰基环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(315mg，0.8mmol，1.0当量)和醋酸(0.02mL)。反应液在室温下搅拌反应半小时。然后三乙酰氧基硼氢化钠(481mg，2.3mmol，3.0当量)加入到反应液中，反应液在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，反应液加水淬灭，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，25mg，产率4％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.12(s,1H),10.10(s,1H),8.42-8.35(m,2H),8.32(s,1H),8.23-8.15(m,1H),7.30-7.01(m,4H),5.42-5.34(m,1H),4.47(s,2H),4.24-4.17(m,1H),3.64(s,3H),3.59-3.54(m,1H),2.94-2.84(m,1H),2.76-2.60(m,4H),2.16-1.99(m,7H),1.91-1.84(m,4H),1.82-1.70(m,2H),1.63-1.54(m,1H),1.54-1.42(m,2H),1.10-0.96(m,2H).LC/MS(ESI):m/z 797[M+H]+.
制备例235.化合物A151的合成
步骤A：N-(3-羰基-1-((1r,4r)-4-((4-((3-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)丙-2-炔-1-基)氧基)哌啶-1-基)甲基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向3-(3-甲基-2-氧代-4-(3-(哌啶-4-基氧基)丙-1-炔-1-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(300mg，0.8mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入N-(3-氨基-1-((1r,4r)-4-甲酰基环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(310mg，0.8mmol，1.0当量)和醋酸(0.02mL)。反应液在室温下搅拌反应半小时。然后三乙酰氧基硼氢化钠(481mg，2.3mmol，3.0当量)加入到反应液中，反应液在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，反应液加水淬灭，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤， 无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，30mg，产率5％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(s,1H),11.13(s,1H),8.46-8.42(m,1H),8.42-8.34(m,2H),8.19(d,J＝7.4Hz,1H),7.63(s,1H),7.55(s,1H),7.18(d,J＝7.7Hz,1H),7.12(d,J＝7.7Hz,1H),7.06-7.01(m,1H),5.45-5.36(m,1H),4.49(s,2H),4.28-4.18(m,1H),3.65(s,3H),2.94-2.85(m,1H),2.79-2.72(m,2H),2.71-2.60(m,2H),2.28-2.16(m,4H),2.14-1.98(m,4H),1.96-1.88(m,4H),1.85-1.76(m,2H),1.66-1.51(m,3H),1.13-1.01(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 790[M+H]+.
制备例236.化合物A152的合成
步骤A：4-(((甲基磺酰基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸苄酯
在0℃下，向4-(羟甲基)六氢吡啶-1-甲酸苄酯(5g，20mmol，1.0当量)的二氯甲烷(60mL)溶液中加入三乙胺(4.2mL，30mmol，1.5当量)和甲基磺酰氯(2.8g，24mmol，1.2当量)。反应液在氮气保护下0℃搅拌反应0.5小时。反应完全后，用水淬灭，二氯甲烷萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状物，6g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤B：4-(((1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸苄酯
在0℃下，向4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2g，10.1mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(50mL)溶液中分批加入60重量％氢化钠(1g，25.2mmol，2.5当量)。反应混合物室温下搅拌0.5小时。向上述反应液中继续加入4-(((甲基磺酰基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸苄酯(3.3g，10.1mmol，1.0当量)。反应混合物在60℃氮气保护下搅拌反应4.5小时。反应完全后，用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色液体，500mg，产率11％)。
步骤C：4-(哌啶-4-基甲氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(((1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸苄酯(280mg，0.6 mmol，1.0当量)的甲醇(5mL)溶液中加入10％钯碳(50mg，0.75mmol，1.0当量)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌2小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状物，150mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤D：4-((1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)甲氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(哌啶-4-基甲氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(150mg，0.5mmol，1.0当量)和3-(2,4-二氧代六氢嘧啶-1-基)-4-甲氧基苯甲酸(150mg，0.6mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中加入N-甲基吗啉(277μL,2.5mmol，5.0当量)和HATU(287mg，0.8mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，150mg，产率55％)。
步骤E：1-(2-甲氧基-5-(4-(哌啶-4-基氧基)甲基)哌啶-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在0℃下，向4-((1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)甲氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(250mg，0.5mmol，1.0当量)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入三氟乙酸(3mL)。反应液在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，200mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤F：N-(3-羰基-1-((1r,4r)-4-((4-((1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)甲氧基)哌啶-1-基)甲基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-(2-甲氧基-5-(4-(哌啶-4-基氧基)甲基)哌啶-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(217mg，0.5mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2mL)溶液中加入三乙胺(0.2mL)。反应液在室温下搅拌反应5分钟。向上述反应液中依次加入N-(3-氨基甲酰基-1-((1R,4R)-4-甲酰基环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(200mg，0.5mmol，1.0当量)和乙酸(0.3mL)。反应液在室温下搅拌反应15小时。接着继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(155mg，0.7mmol，1.5当量)。反应液在室温下额外搅拌反应1小时。反应完成后，用水淬灭，乙酸乙酯萃取三次。减压浓缩，残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，27.3mg，产率7％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(s,1H),10.33(s,1H),8.43-8.35(m,3H),8.18(dd,J＝7.4,1.2Hz,1H),8.15(s,1H),7.63(s,1H),7.54(s,1H),7.36(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),7.32(d,J＝2.0Hz,1H),7.15(d,J＝8.8Hz,1H),4.27-4.16(m,1H),3.84(s,3H),3.59(t,J＝6.4Hz,2H),3.28-3.23(m,7H),2.67(td,J＝10.6,5.2Hz,4H), 2.14-2.03(m,6H),1.94-1.87(m,2H),1.83-1.78(m,4H),1.73-1.64(m,2H),1.62-1.53(m,2H),1.42(dt,J＝14.4,7.2Hz,2H),1.17-1.00(m,4H).LC-MS(ESI):m/z 838[M+H]+.
制备例237.化合物A153的合成
步骤A：(1s,4s)-4-((甲磺酰基)氧基)环己烷-1-甲酸甲酯
在0℃下，向(1s,4s)-4-羟基环己烷-1-甲酸甲酯(20g，126.6mmol，1.0当量)和三乙胺(25.62g，253.2mmol，2.0当量)的二氯甲烷(200mL)溶液中加入MsCl(17.4g，151.92mmol，1.2当量)的二氯甲烷(20mL)溶液。反应液在氮气保护下室温条件反应2小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠溶液中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到标题化合物(黄色油状物，25g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤B：(1r,4r)-4-(3-(二氟甲基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)环己烷-1-甲酸甲酯
在室温下，向3-(二氟甲基)-4-硝基-1H-吡唑(5g，30.7mmol，1.0当量)和(1s,4s)-4-((甲磺酰基)氧基)环己烷-1-甲酸甲酯(8.7g，36.8mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(50mL)溶液中加入碳酸钾(8.5g，61.4mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下80℃条件反应16小时。反应完全后，反应液倒入冰水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，2.5g，产率27％)。
步骤C：(1r,4r)-4-(4-氨基-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-1-基)环己烷-1-甲酸甲酯
在室温下，向(1r,4r)-4-(3-(二氟甲基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)环己烷-1-甲酸甲酯(2.5g，8.3mmol，1.0当量)的甲醇(30mL)溶液中加入10％钯碳(250mg，0.1mmol，10重量％)。反应液在氢气置换三次，后氢气保护下25℃条件反应4小时。反应完全后，反应液过滤，用甲醇清洗两遍。滤液减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，2.1g，产率93％)。
步骤D：(1r,4r)-4-(3-(二氟甲基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)环己烷 -1-甲酸甲酯
在0℃下，向(1r,4r)-4-(4-氨基-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-1-基)环己烷-1-甲酸甲酯(1.6g，5.9mmol，1.0当量)和6-(三氟甲基)吡啶甲酸(1.12g，5.9mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶液中加入DIEA(1.19g，11.8mmol，2当量)和HATU(3.36g，8.8mmol，1.5当量)。反应液在室温下搅拌1小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，2.1g，产率81％)。
步骤E：N-(3-(二氟甲基)-1-((1r,4r)-4-(羟甲基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃，氮气保护下向(1r,4r)-4-(3-(二氟甲基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)环己烷-1-甲酸甲酯(2.1g，4.7mmol，1.0当量)的四氢呋喃(20mL)溶液中加入硼氢化锂(4.7mL，9.4mmol，2M，于THF中)。反应液在室温下搅拌2小时。反应完全后，反应液倒入柠檬酸水溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(淡黄色固体，1.2g，产率61％)。
步骤F：N-(3-(二氟甲基)-1-((1r,4r)-4-甲酰基环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向N-(3-(二氟甲基)-1-((1r,4r)-4-(羟甲基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(1.2g，2.9mmol，1.0当量)的二氯甲烷(12mL)溶液中加入DMP(2.46g，5.8mmol，2.0当量)。反应液在室温下搅拌12小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠水溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到标题化合物(无色油状物，1.0g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤G：4-(吡啶-4-基氧基)甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(羟甲基)哌啶甲酸叔丁酯(5g，23.2mmol，1.0当量)的四氢呋喃(50mL)溶液中加入吡啶-4-醇(2.21g，23.2mmol，1.0当量)、三苯基膦(12.5g，46.5mmol，2.0当量)和DIAD(9.5g，46.5mmol，9.0mL，2.0当量)。反应液在氮气保护下25℃搅拌反应16小时。反应完全后，反应液加水淬灭，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经反相柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，2.0g，产率30％)。
步骤H：4-(哌啶-4-基氧基)甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(吡啶-4-基氧基)甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2g，6.84mmol，1.0当量)的乙醇(20mL)溶液中加入二氧化铂(1.55g，6.84mmol，1.0当量)。反应液在氢气置换三次后，在氢气保护下40℃搅拌反应16小时。反应完全后，反应液过滤，滤液减压浓缩。残余物加入碳酸氢钠溶液，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到标题化合物(无色油状物，600mg，产率30％)。
步骤I：4-(((1-(((1r,4r)-4-(3-(二氟甲基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)环己基)甲基)哌啶-4-基)氧基)甲基)-哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向N-(3-(二氟甲基)-1-((1r,4r)-4-甲酰基环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(100mg，0.24mmol，1.0当量)的二氯乙烷(2.0mL)溶液中加入4-(哌啶-4-基氧基)甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(86mg，0.29mmol，1.2当量)和乙酸(0.02mL)。反应液在室温条件下反应半小时。然后三乙酰氧基硼氢化钠(153mg，0.72mmol，3.0当量)加入到反应液中，反应液在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，反应液加入水溶液，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，90mg，产率54％)。
步骤J：N-(3-(二氟甲基)-1-((1r,4r)-4-((4-(哌啶-4-基甲氧基)哌啶-1-基)甲基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向4-(((1-(((1r,4r)-4-(3-(二氟甲基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)环己基)甲基)哌啶-4-基)氧基)甲基)-哌啶-1-甲酸叔丁酯(100mg，0.24mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(2.0mL)溶液中加入盐酸/1,4-二氧六环(1mL，4M)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液加入碳酸氢钠溶液，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到标题化合物(棕色固体，75mg，产率97％)。
步骤K：N-(3-(二氟甲基)-1-((1r,4r)-4-(4-((1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)甲氧基)哌啶-1-基)甲基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃下，向N-(3-(二氟甲基)-1-((1r,4r)-4-((4-(哌啶-4-基甲氧基)哌啶-1-基)甲基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(75mg，0.13mmol，1.0当量)和3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酸(34mg，0.13mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)溶液中加入DIPEA(50.3mg，0.39mmol，3当量)和HATU(74mg，0.20mmol，1.5当量)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三 次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，16mg，产率15％)。
制备例238.化合物A154的合成
步骤A：(1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酸(300mg，1.14mmol，1.03当量)和哌啶-4-基氨基甲酸叔丁酯(227mg，1.1mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入50重量％T3P乙酸乙酯溶液(722mg，2.2mmol，2.0当量)和DIEA(440mg，3.4mmol，3.0当量)。反应混合物在室温搅拌反应2小时。反应完全后，用水稀释，乙酸乙酯萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，残余物经柱色谱分离得到标题化合物(白色固体，360mg，产率71％)。
步骤B：1-5-(4-氨基哌啶-1-羰基)-2-甲氧基苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在0℃下，向(1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.22mmol，1.0当量)中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(5mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(白色油状物，70mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：4-((1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向1-5-(4-氨基哌啶-1-羰基)-2-甲氧基苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(70mg，0.2mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2mL)和四氢呋喃(2mL)溶液中加入三乙胺(0.08mL，0.6mmol，3.0当量)、4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(40mg，0.2mmol，1.0当量)和钛酸四异丙酯(57mg，0.2mmol，1.01当量)。反应混合物在室温搅拌反应3天。向上述混合液中加入三乙酰氧基硼氢化钠(43mg，0.20mmol，1.0当量)。反应混合物在室温搅拌反 应3小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，加压浓缩。残余物经柱色谱分离得到标题化合物(白色固体，60mg，产率56％)。
步骤D：1-(2-甲氧基-5-(4-(哌啶-4-基氨基)哌啶-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在0℃下，向4-((1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(60mg，0.113mmol，1.0当量)中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(5mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，45mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-((1r,4r)-4-((4-((1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)氨基)哌啶-1-基)甲基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-(2-甲氧基-5-(4-(哌啶-4-基氨基)哌啶-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(200mg，0.46mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)和二氯甲烷(5mL)溶液中加入三乙胺(0.19mL，1.3mmol，3.0当量)并搅拌15分钟，再加入乙酸(0.08mL，1.3mmol，3.0当量)和N-(3-羰基-1-((1r,4r)-4-甲酰基环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(190mg，0.46mmol，1.0当量)。反应混合液在室温搅拌反应18小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(491mg，2.3mmol，5.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应3小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，40mg，产率10％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(s,1H),10.33(s,1H),8.40(dt,J＝15.5,11.1Hz,3H),8.19(d,J＝7.5Hz,1H),7.64(s,1H),7.54(s,1H),7.43-7.24(m,2H),7.16(d,J＝8.6Hz,1H),4.22(s,1H),3.84(s,3H),3.60(t,J＝6.7Hz,2H),2.99(s,2H),2.89-2.72(m,3H),2.68(t,J＝6.3Hz,2H),2.57-2.53(m,2H),2.14-2.00(m,4H),1.95-1.69(m,10H),1.57(s,2H),1.21(d,J＝11.9Hz,4H),1.10-0.95(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 823[M+H]+.
制备例239.化合物A155的合成
步骤A：(1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)(甲基)氨基甲酸酯
在室温下，向3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酸(300mg，1.1mmol，1.0当量)和甲基(哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(227mg，1.1mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入50重量％T3P乙酸乙酯溶液(722mg，2.2mmol，2.0当量)和DIEA(440mg，3.4mmol，3.0当量)。反应混合物在室温搅拌反应2小时。反应完全后，用水稀释，乙酸乙酯萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，残余物经柱色谱分离得到标题化合物(白色固体，360mg，产率71％)。
步骤B：1-(2-甲氧基-5-(4-(甲氨基)哌啶-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在0℃下，向(1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)(甲基)氨基甲酸酯(360mg，0.75mmol，1.0当量)中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(5mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，250mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：4-((1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)(甲基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向1-(2-甲氧基-5-(4-(甲氨基)哌啶-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(360mg，1mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2mL)和二氯甲烷(2mL)溶液中加入三乙胺(0.41mL，3mmol，3.0当量)并搅拌15分钟，再加入乙酸(0.17mL，2.99mmol，3.0当量)和4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(199mg，1.0mmol，1.0当量)。反应混合液在室温搅拌反应18小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(630mg，3mmol，3.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应3小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，200mg，产率37％)。
步骤D：1-(2-甲氧基-5-(4-(甲基(哌啶-4-基)氨基)哌啶-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在0℃下，向4-((1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)(甲基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.37mmol，1.0当量)中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(5mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，150mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：N-(3-羰基-1-((1r,4r)-4-((4-((1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)(甲基)氨基)哌啶-1-基)甲基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-(2-甲氧基-5-(4-(甲基(哌啶-4-基)氨基)哌啶-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(200mg，0.451mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)和二氯甲烷(5mL)溶液中加入三乙胺(0.2mL，1.3mmol，1.3当量)并搅拌15分钟，再加入乙酸(0.07mL，1.3mmol，1.3当量)和N-(3-羰基-1-((1r,4r)-4-甲酰基环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(184mg，0.45mmol，1.0当量)。反应混合液在室温搅拌反应18小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(475mg，2.2mmol，5.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应3小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，30mg，产率8％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.66(s,1H),8.49-8.31(m,2H),8.10(t,J＝7.7Hz,1H),7.85(d,J＝7.6Hz,1H),7.51-7.34(m,2H),7.01(d,J＝8.3Hz,1H),6.80-6.69(m,1H),5.73(s,1H),4.62(s,1H),4.10(s,1H),3.90(s,3H),3.72(s,2H),3.14-2.69(m,10H),2.34(s,3H),2.29-1.72(m,19H).LC-MS(ESI):m/z 837[M+H]+.
制备例240.化合物A156的合成
步骤A：4-((1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酸(257mg，0.974mmol) 和4-(哌啶-4-基甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(250mg，0.89mmol)的乙腈(5mL)溶液中加入50重量％T3P乙酸乙酯溶液(563mg，1.77mmol)和DIEA(345mg，2.66mmol)。反应混合物在室温搅拌反应2小时。反应完全后，用水稀释，乙酸乙酯萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱分离得到标题化合物(白色固体，350mg，产率74％)。
步骤B：1-(2-甲氧基-5-(4-(哌啶-4-基甲基)哌啶-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在0℃下，向4-((1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(300mg，0.57mmol)中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(5mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应液减压浓缩得到标题化合物(白色固体，200mg，产率82％)。
步骤C：N-(3-氨基甲酰基-1-((1r,4r)-4-((4-((1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)甲基)哌啶-1-基甲基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-(2-甲氧基-5-(4-(哌啶-4-基甲基)哌啶-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(200mg，0.47mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入三乙胺(0.2mL，1.40mmol)、乙酸(0.04mL，0.70mmol)和N-(3-羰基-1-((1r,4r)-4-甲酰基环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(210mg，0.51mmol)。反应混合液在室温搅拌反应18小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(295mg，1.40mmol)。反应混合物在室温下搅拌反应3小时。反应完全后，加水稀释，二氯甲烷萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，40mg，产率10％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(s,1H),10.33(s,1H),8.49-8.28(m,3H),8.18(d,J＝7.2Hz,1H),7.63(s,1H),7.54(s,1H),7.35(d,J＝8.4Hz,1H),7.31(d,J＝1.6Hz,1H),7.15(d,J＝8.4Hz,1H),4.22(t,J＝11.6Hz,2H),3.84(s,3H),3.59(t,J＝6.4Hz,2H),2.80(d,J＝10.4Hz,4H),2.68(t,J＝6.4Hz,2H),2.09(d,J＝7.2Hz,4H),1.98-1.74(m,6H),1.61(d,J＝10.8Hz,6H),1.43-1.20(m,2H),1.19-0.94(m,8H).LC-MS(ESI):m/z 822[M+H]+.
制备例241.化合物A157的合成
步骤A：4-((4-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酸(200mg，0.757mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(4mL)溶液中加入HATU(345mg，0.908mmol，1.2当量)和DIPEA(293mg，2.27mmol，3.0当量)。反应液在室温条件下搅拌15分钟。然后加入4-(哌嗪-1-基甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(219mg，0.772mmol，1.02当量)。反应液在氮气保护下25℃搅拌反应2小时。反应完全后，反应液加水淬灭，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(棕色固体，330mg，产率82％)。
步骤B：1-(2-甲氧基-5-(4-(哌啶-4-基甲基)哌嗪-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮盐酸盐
在室温下，向4-((4-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(330mg，0.623mmol，1.0当量)的二氧六环(5mL)溶液中加入盐酸/二氧六环(5mL，4M)。反应液在室温条件下搅拌3小时。反应完全后，反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，280mg，粗品)。
步骤C：N-(3-羰基-1-((1r,4r)-4-((4-(4-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)哌啶-1-基)甲酯)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-(2-甲氧基-5-(4-(哌啶-4-基甲基)哌嗪-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮盐酸盐(100mg，0.215mmol，1.0当量)的1,2-二氯乙烷(4mL)溶液中加入三乙胺(43mg，0.429mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下搅拌20分钟。然后加入N-(3-羰基-1-((1r,4r)-4-甲酰基环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(92mg，0.225mmol，1.05当量)和乙酸(80mg，0.429mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下25℃搅拌反应1小时。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(91mg，0.430mmol，2.0当量)，反应液在室温条件下搅拌16小时。反应完全后，反应液加碳酸氢钠溶液淬灭，二氯甲烷萃取三次， 混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，40mg，产率23％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(s,1H),10.33(s,1H),8.43(d,J＝3.0Hz,1H),8.38(dd,J＝14.4,6.7Hz,2H),8.19(s,1H),7.58(d,J＝37.8Hz,2H),7.38(d,J＝8.5Hz,1H),7.34(d,J＝1.9Hz,1H),7.16(d,J＝8.6Hz,1H),4.22(s,1H),3.84(s,3H),3.61(d,J＝6.6Hz,2H),2.83(d,J＝9.9Hz,2H),2.68(t,J＝6.5Hz,2H),2.54(s,4H),2.35(s,4H),2.15(d,J＝6.4Hz,4H),2.09(d,J＝10.8Hz,2H),1.88(t,J＝10.9Hz,4H),1.81(d,J＝12.4Hz,2H),1.68(d,J＝12.1Hz,2H),1.54(d,J＝44.5Hz,2H),1.08(dd,J＝26.1,11.8Hz,4H).LC-MS(ESI):m/z 823[M+H]+.
制备例242.化合物A158的合成
步骤A：4-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酸(300mg，1.14mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(6.0mL)溶液中加入DIPEA(440mg，3.41mmol，3.0当量)和HATU(518mg，1.36mmol，1.2当量)。反应液在室温条件下反应15分钟。然后加入哌嗪-1-甲酸叔丁酯(211mg，1.14mmol，1.0当量)。反应在氮气保护下室温反应2小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(棕色固体，480mg，产率98％)。
步骤B：1-(2-甲氧基-5-(哌嗪-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮盐酸盐
在室温下，向4-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(500mg，1.16mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(5.0mL)溶液中加入盐酸/1,4-二氧六环(5mL，4M)。反应液在室温条件下反应3小时。反应完全后，反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，360mg，粗品)。
步骤C：4-((4-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向1-(2-甲氧基-5-(哌嗪-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮盐酸盐(360mg，0.976mmol，1.0当量)的1,2-二氯乙烷(10.0mL)溶液中加入三乙胺(198mg，1.95mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应15分钟。后加入4-甲酰基-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(222mg，0.976mmol，1.0当量)和乙酸(117mg，1.95mmol，2.0当量)。反应在氮气保护下室温反应1小时。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(414mg，1.95mmol，2.0当量)，反应在室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠溶液中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，220mg，产率41％)。
步骤D：1-(2-甲氧基-5-(4-(4-甲基哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮盐酸盐
在室温下，向4-((4-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(220mg，0.405mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(10.0mL)溶液中加入盐酸/1,4-二氧六环(3mL，4M)。反应液室温条件下反应3小时。反应完全后，反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(棕色固体，180mg，粗品)。
步骤E：N-(3-羰基-1-((1r,4r)-4-((4-(4-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)-4-甲基哌啶-1-基)甲酯)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-(2-甲氧基-5-(4-(4-甲基哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮盐酸盐(150mg，0.312mmol)的1,2-二氯乙烷(5.0mL)溶液中加入三乙胺(63.2mg，0.625mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应20分钟。然后加入N-(3-羰基-1-((1r,4r)-4-甲酰基环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(154mg，0.375mmol，1.2当量)和乙酸(37.5mg，0.625mmol，2.0当量)。反应在氮气保护下室温反应1小时。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(132mg，0.625mmol，2.0当量)，反应在室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠溶液中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，136mg，产率52％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(s,1H),10.34(s,1H),8.38(dd,J＝14.4,6.8Hz,2H),8.22-8.15(m,2H),7.59(d,J＝33.8Hz,2H),7.38(dd,J＝8.5,2.1Hz,1H),7.34(d,J＝2.1Hz,1H),7.16(d,J＝8.6Hz,1H),4.23(t,J＝11.7Hz,2H),3.84(s, 3H),3.66(s,2H),3.63-3.57(m,4H),2.68(t,J＝6.5Hz,2H),2.54(d,J＝4.5Hz,2H),2.49-2.41(m,3H),2.27(dd,J＝26.7,8.4Hz,4H),2.16(s,2H),2.09(d,J＝10.8Hz,2H),1.98-1.72(m,4H),1.62(s,1H),1.51(t,J＝9.7Hz,2H),1.27(d,J＝12.3Hz,2H),1.17-0.99(m,2H),0.89(s,3H).LC-MS(ESI):m/z 837[M+H]+.
制备例243.化合物A159的合成
步骤A：4-((1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在0℃下，向3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酸(200mg，0.757mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)溶液中加入DIPEA(195mg，1.51mmol，2.0当量)和HATU(431mg，1.13mmol，1.5当量)。反应液在室温条件下反应15分钟。然后加入4-(哌啶-4-基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(218mg，0.772mmol，1.02当量)，反应液在室温条件下搅拌2小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(棕色固体，200mg，产率49％)。
步骤B：1-(2-甲氧基-5-(4-(哌嗪-1-基甲基)哌啶-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在室温下，向4-((1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.378mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(5.0mL)溶液中加入盐酸/1,4-二氧六环(5mL，4M)。反应液在室温条件下反应3小时。反应完全后，反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，120mg，粗品)。
步骤C：N-(3-羰基-1-((1r,4r)-4-((4-((1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)甲基]环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-(2-甲氧基-5-(4-(哌嗪-1-基甲基)哌啶-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(120mg，0.258mmol，1.0当量)的1,2-二氯乙烷(4.0mL)溶液中加入三乙胺(52mg，0.515mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应20分钟。后加入N-(3-羰基-1-((1r,4r)-4-甲酰基环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(110.69mg，0.270 mmol，1.05当量)和乙酸(96mg，0.515mmol，2.0当量)。反应在氮气保护下室温反应1小时。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(109.mg，0.515mmol，2.0当量)，反应在室温条件下反应16小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠溶液中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，46.2mg，产率22％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(s,1H),10.33(s,1H),8.43(s,1H),8.40(d,J＝6.0Hz,1H),8.36(d,J＝7.8Hz,1H),8.19(d,J＝7.6Hz,1H),7.63(s,1H),7.54(s,1H),7.39-7.34(m,1H),7.31(d,J＝2.0Hz,1H),7.15(d,J＝8.6Hz,1H),4.23(t,J＝11.8Hz,1H),3.84(s,3H),3.60(t,J＝6.6Hz,3H),2.68(t,J＝6.6Hz,2H),2.35(s,8H),2.16-2.03(m,7H),1.95-1.85(m,3H),1.84-1.67(m,5H),1.58(s,1H),1.23(s,1H),1.10-1.00(m,4H).LC-MS(ESI):m/z 823[M+H]+.
制备例244.化合物A160的合成
步骤A：3-(吡啶-4-基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在0℃下，向3-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(350mg，1.91mmol，1.0当量)的四氢呋喃(1mL)溶液中加入1M 9-硼双环[3.3.1]壬烷(9-BBN)(3.9mL，3.9mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下60℃搅拌反应5小时。反应完全后，冷却至室温，反应液直接用于下一步。向上述反应液加入四氢呋喃(5mL)和水(1mL)，继续加入4-溴吡啶(158mg，1.0mmol，0.5当量)、磷酸钾(424.5mg，2.0mmol，1.0当量)和Pd(dppf)Cl2·DCM(163.7mg，0.2mmol，0.1当量)。反应液在氮气保护下60℃搅拌反应13小时。反应完全后，冷却至室温，用水稀释，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱分离得到标题化合物(黄色固体，200mg，产率76％)。
步骤B：3-(哌啶-4-基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向3-(吡啶-4-基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.8mmol，1.0当量) 的甲醇(5mL)溶液中加入二氧化铂(50mg)和乙酸(0.1mL)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌2小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，180mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：4-((1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-基)甲基)哌啶-1-甲酸苄酯
在室温下，向3-(哌啶-4-基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.7mmol，1.0当量)的水(3mL)和二氯甲烷(3mL)溶液中加入碳酸氢钠(626mg，7mmol，10.0当量)和氯甲酸卞酯(190.7mg，1.1mmol，1.5当量)。反应混合物在室温搅拌反应2小时。反应完全后，用水稀释，二氯甲烷萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱分离得到标题化合物(白色固体，150mg，产率50％)。
步骤D：4-(吡咯烷-3-基甲基)哌啶-1-甲酸苄酯
在0℃下，向4-((1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-基)甲基)哌啶-1-甲酸苄酯(200mg，0.5mmol，1.0当量)中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(3mL，12mmol，24当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，150mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：4-((1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)吡咯烷-3-基)甲基)哌啶-1-甲酸苄酯
在室温下，向4-(吡咯烷-3-基甲基)哌啶-1-甲酸苄酯(151.2mg，0.5mmol，1.0当量)和3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酸(158.5mg，0.6mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入N-甲基吗啉(0.3mL，2.5mmol，2.0当量)和HATU(285.2mg，0.8mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应5小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，250mg，产率91％)。
步骤F：1-(2-甲氧基-5-(3-(哌啶-4-基甲基)吡咯烷-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在室温下，向4-((1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)吡咯烷-3-基)甲基)哌啶-1-甲酸苄酯(200mg，0.4mmol，1.0当量)的乙醇(5mL)溶液中加入10％钯碳(50mg)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌2小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，120mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤G：N-(3-羰基-1-((1r,4r)-4-((4-((1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)吡咯烷-3-基)甲基)哌啶-1-基)甲基]环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰 胺
在室温下，向N-(3-羰基-1-((1r,4r)-4-甲酰基环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(118.5mg，0.3mmol，1.0当量)和1-(2-甲氧基-5-(3-(哌啶-4-基甲基)吡咯烷-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(120mg，0.3mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入乙酸(0.1mL)。反应混合液在室温搅拌反应5小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(122.7mg，0.6mmol，1.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，24.6mg，产率11％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.72(s,1H),10.34(s,1H),8.51-8.31(m,3H),8.26-8.12(m,2H),7.63(s,1H),7.53(d,J＝10.4Hz,2H),7.48(d,J＝2.0Hz,1H),7.14(d,J＝8.4Hz,1H),4.31-4.22(m,1H),3.85(s,3H),3.76-3.32(m,6H),3.17-2.98(m,1H),2.97-2.80(m,2H),2.69(t,J＝6.5Hz,2H),2.43-2.15(m,3H),2.10-1.78(m,8H),1.75-1.40(m,5H),1.37-1.03(m,6H).LC-MS(ESI):m/z 808[M+H]+.
制备例245.化合物A161的合成
步骤A：4-((1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-3-基)甲基)哌嗪-1-甲酸苄酯
在室温下，向哌嗪-1-甲酸苄酯(2g，9.08mmol，1.0当量)的二氯甲烷(25mL)溶液中加入3-甲酰基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.8g，9.08mmol，1.0当量)。反应混合液在室温搅拌反应2小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(3.1g，14.5mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应18小时。反应完全后，加饱和碳酸氢钠溶液和水稀释，二氯甲烷萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，3.5g，产率95％)。
步骤B：4-(吡咯烷-3-基甲基)哌嗪-1-甲酸苄酯
在0℃下，向4-((1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-3-基)甲基)哌嗪-1-甲酸苄酯(3.5g，8.67mmol，1.0当量)中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(5mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应3小时。反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状物，2.8g，粗品)，无需纯化直接用于 下一步。
步骤C：4-((1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)吡咯烷-3-基)甲基)哌嗪-1-甲酸苄酯
在室温下，向4-(吡咯烷-3-基甲基)哌嗪-1-甲酸苄酯(459mg，1.51mmol，2.0当量)和3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酸(200mg，0.76mmol，1.0当量)的乙腈(6mL)溶液中加入50重量％T3P乙酸乙酯溶液(289mg，0.908mmol，1.2当量)和DIEA(0.7mL，3.78mmol，5.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应18小时。反应完全后，加28％氨水和水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，210mg，产率50％)。
步骤D：1-(2-甲氧基-5-(3-(哌嗪-1-基甲基)吡咯烷-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在室温下，向4-((1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)吡咯烷-3-基)甲基)哌嗪-1-甲酸苄酯(200mg，0.36mmol，1.0当量)的四氢呋喃(10mL)溶液中加入10％钯碳(38mg，0.36mmol，1.0当量)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌2小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状物，100mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：N-(3-羰基-1-((1r,4r)-4-((4-((1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)吡咯烷-3-基)甲基)哌嗪-1-基)甲基]环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-(2-甲氧基-5-(3-(哌嗪-1-基甲基)吡咯烷-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(101mg，0.24mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入N-(3-羰基-1-((1r,4r)-4-甲酰基环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(100mg，0.24mmol，1.0当量)。反应混合液在室温搅拌反应2小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(55mg，0.49mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应18小时。反应完全后，加饱和碳酸氢钠溶液和水稀释，二氯甲烷萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，20mg，产率10％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(s,1H),10.34(s,1H),8.45-8.32(m,3H),8.19(d,J＝7.4Hz,1H),7.64(s,1H),7.50(dd,J＝21.3,7.2Hz,3H),7.15(d,J＝4.7Hz,1H),4.23(s,1H),3.85(s,3H),3.61-3.45(m,5H),3.21(d,J＝19.6Hz,2H),2.69(t,J＝6.0Hz,2H),2.43-2.23(m,9H),2.08(s,4H),1.85(d,J＝37.2Hz,6H),1.58(s,2H),1.04(s,2H).LC-MS(ESI):m/z 809 [M+H]+.
制备例246.化合物A162的合成
步骤A：N-(3-羰基-1-((1r,4r)-4-甲酰基环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向N-(3-羰基-1-((1r,4r)-4-(羟甲基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(1g，2.4mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)和N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入DMP(0.87g，7.2mmol，3.0当量)。反应液氮气保护下在室温条件搅拌半小时。反应完全后，反应液倒入氯化铵溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，900mg，粗品)。
步骤B：N-(3-羰基-1-((1r,4r)-4-((Z)-(2-甲苯磺酰肼基)甲基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向N-(3-羰基-1-((1r,4r)-4-甲酰基环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(1g，2.4mmol，1.0当量)的甲醇(10mL)溶液中加入4-甲苯磺酰肼(327mg，2.64mmol，1.1当量)。反应液氮气保护下在室温条件搅拌半小时。反应完全后，反应液过滤，滤液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，900mg，产率92％)。
步骤C：4-(((1r,4r)-4-(3-羰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)环己基)甲基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯
在室温下，向N-(3-羰基-1-((1r,4r)-4-((Z)-(2-甲苯磺酰肼基)甲基)环己基)-1H-吡唑-4- 基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(900mg，1.5mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(10mL)溶液中加入(1-(叔丁氧基羰基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)硼酸(389mg，1.7mmol，1.1当量)和碳酸钾(538mg，3.8mmol，2.5当量)。反应液氮气保护下在110℃条件搅拌半小时。反应完全后，反应液倒入水中，用1M HCl调节pH到5-6。乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，380mg，产率42％)。
步骤D：4-(((1r,4r)-4-(3-羰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)环己基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(((1r,4r)-4-(3-羰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)环己基)甲基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(360mg，1.5mmol，1.0当量)的甲醇(5mL)溶液中加入二氧化铂(20mg，10％wt.)。反应液氢气置换三次，氢气保护下在室温条件搅拌半小时。反应完全后，反应液过滤，甲醇洗涤三次，滤液减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，100mg，产率33％)。
步骤E：N-(3-羰基-1-((1r,4r)-4-(哌啶-4-基甲基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃下，向4-(((1r,4r)-4-(3-羰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)环己基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(100mg，0.17mmol，1.0当量)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入三氟乙酸(2mL)。反应液在室温条件搅拌半小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠溶液中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，78mg，粗品)。
步骤F：3-((4-(((1r,4r)-4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)环己基)甲基)哌啶-1-基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在0℃下，向N-(3-羰基-1-((1r,4r)-4-(哌啶-4-基甲基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(100mg，0.17mmol，1.0当量)的1,2-二氯乙烷(2.0mL)和甲醇(2.0mL)的溶液中加入3-甲酰基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(62.46mg，0.34mmol，2.0当量)。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(109.mg，0.515mmol，2.0当量)和乙酸(0.2mL)，反应在室温条件下反应半小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状，80mg，产率58％)。
步骤G：N-(3-氨基甲酰基-1-((1r,4r)-4-((1-(吡咯烷-3-基甲基)哌啶-4-基)甲基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃下，向3-((4-(((1r,4r)-4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)环己基)甲基)哌啶-1-基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(80mg，0.12mmol，1.0当量)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入三氟乙酸(2mL)。反应液在室温条件搅拌半小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠溶液中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状物，62mg，粗品)。
步骤H：N-(3-氨基甲酰基-1-((1r,4r)-4-((1-(1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)吡咯烷-3-基)甲基)哌啶-4-基甲基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃下，向N-(3-氨基甲酰基-1-((1r,4r)-4-((1-(吡咯烷-3-基甲基)哌啶-4-基)甲基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(62mg，0.11mmol，1.0当量)和3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酸(32mg，0.12mmol，1.1当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中加入DIPEA(82mg，0.33mmol，3.0当量)和HATU(63mg，0.16mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温条件反应半小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，14.3mg，产率16％)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ11.66(s,1H),8.43-8.31(m,2H),8.16-8.04(m,1H),7.85(d,J＝7.2Hz,1H),7.64-7.41(m,3H),7.03-6.96(m,1H),6.80-6.58(m,1H),5.56-5.36(m,1H),4.18-4.01(m,1H),3.98-3.83(m,4H),3.77-3.54(m,4H),3.40-3.11(m,3H),2.88-2.71(m,3H),2.68-2.53(m,2H),2.38-2.06(m,6H),1.95-1.86(m,3H),1.39-1.17(m,8H),1.14-1.05(m,2H),0.89-0.81(m,1H).LC-MS(ESI):m/z 808[M+H]+.
制备例247.化合物A163的合成
步骤A：(1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酸(500mg，1.89mmol，1.0当量)和吡咯烷-3-基氨基甲酸叔丁酯(388mg，2.081mmol，1.1当量)的乙腈(10mL)溶液中加入50重量％T3P乙酸乙酯溶液(900mg，2.83mmol，1.5当量)和DIEA(980mg，7.57 mmol，4.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应18小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，600mg，产率73％)。
步骤B：1-(5-(3-氨基吡咯烷-1-羰基)-2-甲氧基苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在0℃下，向(1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(600mg，1.38mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(5mL，20mmol，15当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应液减压浓缩得到标题化合物(白色固体，500mg，产率95％)。
步骤C：4-((1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)吡咯烷-3-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向1-(5-(3-氨基吡咯烷-1-羰基)-2-甲氧基苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(500mg，1.5mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入三乙胺(0.21mL，1.5mmol，1.0当量)并室温搅拌15分钟。再加入乙酸(0.5mL)和4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(900mg，4.51mmol，3.0当量)。反应混合液在室温搅拌反应18小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(950mg，4.51mmol，3.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，加水稀释，二氯甲烷萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，300mg，产率38％)。
步骤D：1-(2-甲氧基-5-(3-(哌啶-4-基氨基)吡咯烷-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在0℃下，向4-((1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)吡咯烷-3-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(300mg，0.58mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5mL)中加入4M HCl1,4-二氧六环溶液(1.5mL，6.0mmol，10.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应液减压浓缩得到标题化合物(白色固体，240mg，产率91％)。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-((1r,4r)-4-((4-((1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)吡咯烷-3-基)氨基)哌啶-1-基)甲基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-(2-甲氧基-5-(3-(哌啶-4-基氨基)吡咯烷-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(240mg，0.72mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入三乙胺(0.100mL，0.72mmol，1.0当量)并室温搅拌15分钟。再加入乙酸(0.5mL)和N-(3-羰基-1-((1r,4r)-4-甲酰基环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(355mg，0.87mmol，1.2当量)。反 应混合液在室温搅拌反应18小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(457mg，2.17mmol，3.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，加水稀释，二氯甲烷萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，148mg，产率25％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(s,1H),10.33(s,1H),8.48-8.30(m,3H),8.24-8.15(m,1H),7.64(s,1H),7.51(dd,J＝14.4,12.4Hz,3H),7.15(d,J＝8.4Hz,1H),4.32-4.15(m,1H),3.85(s,3H),3.67-3.51(m,4H),3.44(s,2H),3.23-3.15(m,1H),2.84-2.63(m,4H),2.37-2.18(m,1H),2.16-2.01(m,4H),1.97-1.49(m,12H),1.32-0.88(m,4H).LC-MS(ESI):m/z 809[M+H]+.
制备例248.化合物A164的合成
步骤A：4-((1s,4s)-4-羟基环己基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向双(2-氯乙基)氨基甲酸叔丁酯(10.0g，41.3mmol，1.0当量)和(1s,4s)-4-氨基环己烷-1-醇(5.0g，43.8mmol，1.1当量)的1,4-二氧六环(100mL)溶液中加入碳酸钾(17.1g，124mmol，3.0当量)和碘化钾(20.6g，124mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下110℃搅拌反应16小时。反应完全后，反应液冷却至室温，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，800mg，产率7％)。
步骤B：4-((1s,4s)-4-((甲磺酰基)氧基)环己基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在0℃下，向4-((1s,4s)-4-羟基环己基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(438mg，1.5mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入三乙胺(0.3mL，2.3mmol，1.5当量)和甲基磺酰氯(211.7mg，1.8mmol，1.2当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应3小时。反应完全后，反应液用水淬灭，二氯甲烷萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，低温减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，410mg，粗品)，无需纯化直接用于 下一步。
步骤C：4-氨基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向4-硝基-1H-吡唑-3-甲酰胺(2g，12.8mmol，1.0当量)的甲醇(25mL)溶液中加入10％钯碳(200mg)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌3小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物(无色油状物，1.4g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤D：N-(3-氨基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向4-氨基-1H-吡唑-3-甲酰胺(1.4g，11.1mmol，1.0当量)和6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(2.3g，12.2mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(15mL)溶液中加入EDCI(3.2g，16.7mmol，1.5当量)、HOBt(2.3g，16.7mmol，1.5当量)和三乙胺(4.6mL，33.3mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应3小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.9g，产率57％)。
步骤E：4-((1r,4r)-4-(3-羰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)环己基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向N-(3-氨基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(310.4mg，1.0mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(8mL)溶液中加入4-((1s,4s)-4-((甲磺酰基)氧基)环己基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(376mg，1.0mmol，1.0当量)和碳酸铯(506.9mg，1.6mmol，1.6当量)。反应液在氮气保护下70℃搅拌反应3小时。反应完全后，用饱和氯化铵水溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，120mg，产率20％)。
步骤F：N-(3-氨基-1-((1r,4r)-4-(哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃下，向4-((1r,4r)-4-(3-羰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)环己基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(110mg，0.19mmol，1.0当量)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入三氟乙酸(3mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，90mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤G：1-(5-(4-(2-羟乙基)哌啶-1-羰基)-2-甲氧基苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在室温下，向3-(2,4-二氧代六氢嘧啶-1-基)-4-甲氧基苯甲酸(1g，3.8mmol，1.0当量)、2-(哌啶-4-基)乙烷-1-醇(0.5g，4.2mmol，1.2当量)和4-甲基吗啉(2.1mL)的N,N-二甲基甲 酰胺(12mL)溶液中加入HATU(2.1g，5.7mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1g，产率70％)。
步骤H：2-(1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)乙醛
在室温下，向1-(5-(4-(2-羟乙基)哌啶-1-羰基)-2-甲氧基苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(600mg，1.6mmol，1.0当量)的二甲基亚砜(6mL)溶液中加入IBX(895mg，3.2mmol，2.0当量)。反应液在室温搅拌反应0.5小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经反相柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，500mg，产率83％)。
步骤I：N-(3-氨基-1-((1r,4r)-4-(4-(2-(1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向2-(1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)乙醛(100mg，0.27mmol，1.0当量)和N-(3-氨基-1-((1r,4r)-4-(哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(124.6mg，0.27mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中加入三乙胺(0.2mL)并搅拌15分钟，再加入乙酸(0.2mL)。反应混合液在室温搅拌反应5小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(85.2mg，0.40mmol，1.5当量)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，甲酸盐，33.8mg，产率15％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(s,1H),10.34(s,1H),8.46-8.31(m,3H),8.20-8.17(m,1H),8.16(s,1H),7.64(s,1H),7.55(s,1H),7.36(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),7.32(d,J＝2.0Hz,1H),7.15(d,J＝8.4Hz,1H),4.71-4.05(m,4H),3.84(s,3H),3.61(d,J＝6.8Hz,2H),3.07-2.77(m,2H),2.68(t,J＝6.8Hz,2H),2.57(ddd,J＝15.2,9.2,5.2Hz,4H),2.47-2.31(m,6H),2.17-2.08(m,2H),1.98-1.78(m,4H),1.75-1.50(m,3H),1.47-1.32(m,4H),1.18-1.01(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 823[M+H]+.
制备例249.化合物A165的合成
步骤A：4-((1-(2-氟-4-硝基苯基)哌啶-4-基)甲氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向1,2-二氟-4-硝基苯(128mg，0.8mmol，1.1当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入4-(哌啶-4-基甲氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.7mmol，1.0当量)和DIEA(173mg，1.3mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下80℃搅拌反应5小时。反应完全后，反应液冷却至室温，用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状物，200mg，产率68％)。
步骤B：4-((1-(4-氨基-2-氟苯基)哌啶-4-基)甲氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-((1-(2-氟-4-硝基苯基)哌啶-4-基)甲氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.5mmol，1当量)的2,2,2-三氟乙醇(10mL)溶液中加入10％钯碳(49mg，0.5mmol，1.0当量)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌2小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状物，150mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：4-((1-(4-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)甲氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-((1-(4-氨基-2-氟苯基)哌啶-4-基)甲氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(150mg，0.4mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(2mL)溶液中加入3-溴哌啶-2,6-二酮(141mg，0.8mmol，2.0当量)和DIEA(95mg，0.8mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下80℃搅拌反应16小时。反应完全后，反应液冷却至室温，用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(蓝色油状物，70mg，产率37％)。
步骤D：3-((3-氟-4-(4-(哌啶-4-基氧基)甲基)哌啶-1-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮
在0℃下，向4-((1-(4-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)甲氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(70mg，0.1mmol，1.0当量)中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(3mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，50 mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-((1r,4r)-4-((4-(1-(4-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)甲氧基)哌啶-1-基)甲基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向3-((3-氟-4-(4-(哌啶-4-基氧基)甲基)哌啶-1-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(50mg，0.1mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入三乙胺(0.02mL，0.1mmol 1.0当量)并搅拌15分钟，再加入乙酸(0.007mL，0.1mmol，1.0当量)和N-(3-羰基-1-((1r,4r)-4-甲酰基环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(49mg，0.1mmol，1.0当量)。反应混合液在室温搅拌反应0.5小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(51mg，0.2mmol，2.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，15mg，产率15％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.70(s,1H),10.76(s,1H),8.44-8.34(m,3H),8.22-8.17(m,1H),7.64(s,1H),7.53(s,1H),6.90-6.76(m,1H),6.58-6.37(m,2H),5.80-5.72(m,1H),4.30-4.15(m,2H),3.28(d,J＝6.2Hz,2H),3.10(d,J＝10.8Hz,2H),2.76-2.58(m,5H),2.14-2.01(m,8H),1.93-1.70(m,9H),1.62-1.27(m,7H),1.11-1.02(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 812[M+H]+.
制备例250.化合物A166的合成
步骤A：1-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)-1H-吡咯-3-甲醛
在0℃下，向3-(3-(4-(3-(羟甲基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(100mg，0.26mmol，1.0当量)的二氯甲烷(4mL)溶液中加入戴斯-马丁氧化剂(220mg，0.52mmol，2.0当量)。反应混合物室温下搅拌3小时。反应完全后，反应液过滤，滤液加压浓缩。残余物经薄层色谱纯化得到标题化合物(白色固体，60mg，产率60％)。
步骤B：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((1-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)-1H-吡咯-3-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基]-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲 基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)-1H-吡咯-3-甲醛(60mg，0.16mmol，1.0当量)和N-(3-氨基-1-((1r,4r)-4-(哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(57.5mg，0.12mmol，0.8当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2mL)溶液中加入乙酸(2.81mg，0.05mmol，0.3当量)。反应混合液在室温搅拌反应0.5小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(66mg，0.31mmol，2.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应3小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，9.5mg，产率7％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.05(s,1H),8.87(s,1H),8.46-8.38(m,2H),8.21(d,J＝7.6Hz,1H),7.95(s,1H),7.79-7.72(m,6H),7.71(s,1H),7.45(d,J＝12.8Hz,2H),7.07(d,J＝8.4Hz,2H),6.30(s,1H),5.24(dd,J＝12.8,5.2Hz,1H),3.45(s,3H),3.41(s,2H),3.23(s,4H),2.93-2.87(m,1H),2.87-2.65(m,5H),2.65-2.57(m,1H),2.15(s,1H).LC-MS(ESI):m/z 823[M+H]+.
制备例251.化合物A167的合成
步骤A：1-(4-溴苯基)-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向4-溴苯硼酸(2g，10mmol，1.0当量)和乙酸(0.1mL)的二氯甲烷(20mL)溶液中加入4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(3.41g，20mmol，2.0当量)、三乙胺(2.8mL，20mmol)、醋酸铜(2.7g，15mmol，1.0当量)和4A分子筛(2g)。反应液氧气保护下在室温条件搅拌16小时。反应完全后，反应液倒入水中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.4g，产率43％)。
步骤B：1-(4-(4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-基)苯基)-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向1-(4-溴苯基)-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(700mg，2.15mmol，1.0当量)、4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶(559mg，3.23mmol，1.5当量)的甲苯(20mL)溶液中加入BINAP(267.7mg，0.43mmol，0.2当量)、Pd2(dba)3(196mg，0.22mmol，0.1当量)和碳酸铯(2.1g，6.45mmol，3.0当量)。反应液氮气保护下在110℃条件搅拌16小时。反应完全后，反应液冷却到室温，倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状，400mg，产率44％)。
步骤C：1-(4-(4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-基)苯基)-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸
在室温下，向1-(4-(4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-基)苯基)-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯的甲醇/四氢呋喃/水(16mL，10/1/5)溶液中加入氢氧化锂(8.6mg，0.36mmol，1.5当量)。反应液在室温条件搅拌1小时。反应完全后，反应液减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，92mg，产率95％)。
步骤D：1-(4-(4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-基)苯基)-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在0℃下，向1-(4-(4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-基)苯基)-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸(92mg，0.23mmol，1.0当量)和氯化铵(13.8mg，0.27mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)溶液中加入DIEA(119mg，0.92mmol，4当量)和HATU(173mg，0.46mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，80mg，产率87％)。
步骤E：4-氨基-1-(4-(4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-基)苯基)-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向1-(4-(4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-基)苯基)-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酰胺(80mg，0.2mmol，1.0当量)的甲醇(15mL)溶液中加入10％钯碳(24mg)。反应液氢气置换三次。在氢气保护下室温条件反应1小时。反应完全后，反应液过滤，滤饼用甲醇洗涤三次，滤液减压浓缩纯化得到标题化合物(黄色固体，68mg，产率91％)。
步骤F：N-(3-羰基-1-(4-(4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃下，向4-氨基-1-(4-(4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-基)苯基)-1H-吡唑-3-甲酰胺(68mg，0.18mmol，1.0当量)和6-(三氟甲基)吡啶甲酸(34.4mg，0.18mmol，1当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)溶液中加入DIEA(93mg，0.72mmol，4当量)和HATU(138mg，0.36 mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，80mg，产率81％)。
步骤G：N-(3-羰基-1-(4-(4-(2-氧乙基)哌啶-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，N-(3-羰基-1-(4-(4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(80mg，0.15mmol，1.0当量)在甲酸(5mL)的混合溶液在室温条件下反应2小时。反应完全后，反应液减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，70mg，产率93％)。
步骤H：4-(2-(1-(4-(3-氨基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向N-(3-羰基-1-(4-(4-(2-氧乙基)哌啶-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(70mg，0.14mmol，1.0当量)和哌嗪-1-甲酸叔丁酯(31.2mg，0.17mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)溶液中加入乙酸(0.004mL，0.07mmol，0.5当量)。反应液在室温条件下反应1小时。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(115mg，0.56mmol，4.0当量)，反应在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，65mg，产率69％)。
步骤I：哌嗪-1-甲酸叔丁酯N-(3-氨基-1-(4-(2-(哌嗪-1-基)乙基)哌啶-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向4-(2-(1-(4-(3-氨基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(65mg，0.097mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入三氟乙酸(3mL)。反应液在室温条件反应1小时。反应完全后，反应液减压浓缩纯化得到标题化合物(黄色固体，54mg，粗品)。
步骤J：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-基)乙基)哌啶-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃下，向哌嗪-1-甲酸叔丁酯N-(3-氨基-1-(4-(2-(哌嗪-1-基)乙基)哌啶-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(54mg，0.095mmol，1.0当量)和3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酸(25mg，0.095mmol，1当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)溶液中加入DIEA(49mg，0.38mmol，4当量)和HATU(71.8mg，0.189mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三 次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，7mg，产率9％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.37(s,1H),8.87(s,1H),8.49-8.35(m,2H),8.21(d,J＝7.5Hz,1H),7.93(s,1H),7.81-7.66(m,3H),7.43(d,J＝17.0Hz,2H),7.20(d,J＝8.3Hz,1H),7.08(d,J＝9.0Hz,2H),3.86(s,3H),3.78(m,2H),3.59(m,3H),3.22-3.03(m,3H),2.79-2.66(m,5H),2.00(m,1H),1.84-1.74(m,2H),1.70-1.41(m,4H),1.37-1.19(m,5H).LC-MS(ESI):m/z 817[M+H]+.
制备例252.化合物A168的合成
步骤A：(E)-4-(2-乙氧基-2-氧代亚乙基)-3,3-二氟哌啶-1-甲酸叔丁酯
在0℃氮气保护下，向(2-乙氧基-2-氧乙基)膦酸二乙酯(1.9g，8.5mmol，1.0当量)的四氢呋喃(80mL)溶液中分批加入60重量％氢化钠(0.2g，8.5mmol，1.0当量)。反应混合物室温下搅拌1小时。向上述反应液中继续加入3,3-二氟-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(2g，8.5mmol，1.0当量)。反应混合物在氮气保护0℃下搅拌反应2小时。反应完全后，反应液用水淬灭，乙酸乙酯萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.0g，产率39％)。
步骤B：4-(2-乙氧基-2-氧乙基)-3,3-二氟哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向(E)-4-(2-乙氧基-2-氧代亚乙基)-3,3-二氟哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.2g，3.9mmol，1.0当量)的甲醇(25mL)溶液中加入10％钯碳(400mg)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌3小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状物，1.2g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：3,3-二氟-4-(2-羟乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在0℃氮气保护下，向4-(2-乙氧基-2-氧乙基)-3,3-二氟哌啶-1-甲酸叔丁酯(600mg，2.0mmol，1.0当量)的四氢呋喃(15mL)溶液中分批加入四氢锂铝(148.2mg，3.9mmol，2.0当量)。反应混合物室温下搅拌0.5小时。反应混合物在氮气保护下室温搅拌反应0.5小时。反应完全后，反应液用四氢呋喃稀释，用十水合硫酸钠淬灭，过滤。滤液减压浓缩得到粗 品标题化合物(黄色油状物，400mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤D：2-(3,3-二氟哌啶-4-基)乙烷-1-醇
在0℃下，向3,3-二氟-4-(2-羟乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(400mg，1.5mmol，1.0当量)中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(5mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状物，200mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：1-(5-(3,3-二氟-4-(2-羟乙基)哌啶-1-羰基)-2-甲氧基苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在室温下，向3-(2,4-二氧代六氢嘧啶-1-基)-4-甲氧基苯甲酸(319.9mg，1.2mmol，1.0当量)和2-(3,3-二氟哌啶-4-基)乙烷-1-醇(200mg，1.2mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入HATU(690.6mg，1.8mmol，1.5当量)和N-甲基吗啉(0.67mL，6.1mmol，5.0当量)。反应混合物室温下搅拌1小时。反应完全后，将反应液用饱和氯化铵水溶液稀释，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，300mg，产率60％)。
步骤F：2-(1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)-3,3-二氟哌啶-4-基)乙醛
在室温下，向1-(5-(3,3-二氟-4-(2-羟乙基)哌啶-1-羰基)-2-甲氧基苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(300mg，0.7mmol，1.0当量)的二甲基亚砜(5mL)溶液中加入IBX(408.4mg，1.4mmol，2.0当量)。反应液在室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经反相柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，50mg，产率17％)。
步骤G：N-(3-羰基-1-(4-(4-(2-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)-3,3-二氟哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-[4-(哌嗪-1-基)苯基]-4-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)吡唑-3-甲酰胺(56.1mg，0.12mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入三乙胺(0.2mL)并搅拌5分钟，再加入乙酸(0.3mL)和2-(1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)-3,3-二氟哌啶-4-基)乙醛(50mg，0.12mmol，1.0当量)。反应混合液在室温搅拌反应15小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(51mg，0.24mmol，2.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体， 24.6mg，产率24％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.35(s,1H),8.88(s,1H),8.47-8.36(m,2H),8.26(s,1H),8.21(dd,J＝7.6,1.2Hz,1H),7.95(s,1H),7.79(d,J＝9.1Hz,2H),7.71(s,1H),7.40(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),7.36(d,J＝2.0Hz,1H),7.19(d,J＝8.6Hz,1H),7.07(d,J＝9.2Hz,2H),3.98(d,J＝44.6Hz,2H),3.86(s,3H),3.61(t,J＝6.4Hz,2H),3.21(d,J＝4.8Hz,6H),2.69(t,J＝6.6Hz,2H),2.58-2.51(m,4H),2.48-2.36(m,2H),2.27-2.07(m,1H),1.92(s,2H),1.47-1.31(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 853[M+H]+.
制备例253.化合物A169的合成
步骤A：5-氨基-4-(5-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-1-氧代异吲哚-2-基)-5-氧代戊酸
在室温下，向3-(5-溴-1-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-2-基)六氢吡啶-2,6-二酮(500mg，1.5mmol，1.0当量)和4-(二甲氧基甲基)哌啶(369mg，2.3mmol，1.5当量)的1,4-二氧六环(10mL)溶液中加入碳酸铯(1.5g，4.6mmol，3.0当量)和Pd-PEPPSI-IHept-Cl(150mg，0.16mmol，0.1当量)。反应混合物在氮气保护下100℃搅拌反应16小时。反应完全后，冷却至室温，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(棕色固体，300mg，产率42％)。
步骤B：3-(5-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-1-氧代异吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向5-氨基-4-(5-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-1-氧代异吲哚-2-基)-5-氧代戊酸(300mg，0.72mmol，1.0当量)的乙腈(10mL)溶液中加入N,N'-羰基二咪唑(231mg，1.4mmol，2.0当量)。反应混合物在氮气保护下100℃搅拌反应3小时。反应完全后，冷却至室温，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(棕色固体，300mg，产率42％)。
步骤C：1-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-4-甲醛
在室温下，向3-(5-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-1-氧代异吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮(100mg，0.25mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入三氟乙酸(1mL)。反应混合物在氮气保护下室温搅拌反应0.5小时。反应完全后，反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状物，90mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤D：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚-5-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)哌啶-4-甲醛(100mg，0.28mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入0.1mL醋酸和N-(3-氨基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(155mg，0.32mmol，1.5当量)。反应混合液在室温搅拌反应2小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(118mg，0.56mmol，2.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应2小时。反应完全后，加水稀释，二氯甲烷萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱和HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，18.7mg，产率8％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),10.95(s,1H),8.88(s,1H),8.48-8.37(m,2H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),7.95(s,1H),7.80(d,J＝8.8Hz,2H),7.71(s,1H),7.51(d,J＝8.8Hz,1H),7.07(dd,J＝12.4,8.5Hz,4H),5.05(dd,J＝13.2,5.2Hz,1H),4.27(dd,J＝49.8,16.7Hz,2H),3.90(d,J＝12.8Hz,2H),3.23(s,6H),2.85(t,J＝10.8Hz,3H),2.59(d,J＝19.0Hz,1H),2.36(d,J＝18.0Hz,1H),2.24(d,J＝6.4Hz,2H),1.98(s,1H),1.83(d,J＝11.2Hz,3H),1.22(d,J＝13.2Hz,3H).LC-MS(ESI)m/z:799[M+H]+.
制备例254.化合物A170的合成
步骤A：3,3-二氟-4-甲酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯
在0℃下，向3,3-二氟-4-(羟甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(500mg，1.9mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入戴斯-马丁氧化剂(843mg，1.9mmol，1.0当量)。反应混合物室温下搅拌2小时。反应完全后，用饱和硫代硫酸钠和碳酸氢钠溶液淬灭，搅拌0.5小时。混合液用二氯甲烷萃取三次，混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品标题化合物(无色油状物，500mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤B：4-((4-(4-(3-氨基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-3,3-二氟哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向3,3-二氟-4-甲酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(500mg，2.0mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入N-(3-氨基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(921mg，2.0mmol，1.0当量)。反应混合液在室温搅拌反应2小时。向上述反应 液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(846mg，4.0mmol，2.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应2小时。反应完全后，加水稀释，二氯甲烷萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(棕色固体，250mg，产率18％)。
步骤C：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(((3,3-二氟哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃下，向4-((4-(4-(3-氨基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)-3,3-二氟哌啶-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.3mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(2mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应0.5小时。反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，120mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤D：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚-5-基)-3,3-二氟哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(((3,3-二氟哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(120mg，0.20mmol，1.0当量)和3-(5-溴-1-氧代异吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮(72.1mg，0.2mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(10mL)溶液中加入碳酸铯(198.4mg，0.6mmol，3.0当量)和Pd-PEPPSI-IHept-Cl(30.4mg，0.03mmol，0.1当量)。反应混合物在氮气保护下100℃搅拌反应16小时。反应完全后，冷却至室温，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱和HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，15.3mg，产率9％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.70(s,1H),8.73(s,1H),8.37(d,J＝7.4Hz,1H),8.04(s,1H),7.95(s,1H),7.80(d,J＝7.7Hz,1H),7.69(d,J＝8.0Hz,1H),7.57(d,J＝8.3Hz,2H),6.97-6.75(m,5H),,5.56(s,1H),5.13(d,J＝10.4Hz,1H),4.36(d,J＝15.6Hz,1H),4.20(d,J＝15.8Hz,1H),3.92(s,1H),3.77(s,1H),3.20(s,4H),3.05(dd,J＝28.4,13.1Hz,1H),2.87-2.62(m,,6H),2.52-2.35(m,3H),2.35-1.97(m,5H).LC-MS(ESI)m/z:835[M+H]+.
制备例255.化合物A171的合成
步骤A：4-(4-(羟甲基)哌啶-1-基)苯甲酸甲酯
在室温下，向哌啶-4-基甲醇(11.21g，97.314mmol，3.0当量)和4-氟苯甲酸甲酯(5g，32.438mmol，1.0当量)的二甲基亚砜(150mL)溶液中加入碳酸钾(13.45g，97.314mmol，3.0当量)。反应液在100℃下搅拌18小时。反应完全后，冷却至室温，用水稀释，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，7g，产率86％)。
步骤B：4-(4-(羟甲基)哌啶-1-基)苯甲酸
在0℃下，向4-(4-(羟甲基)哌啶-1-基)苯甲酸甲酯(3g，12.033mmol，1.0当量)的甲醇(12mL)和四氢呋喃(12mL)的混合溶液中加入氢氧化钠(0.96g，24.066mmol，2.0当量)。反应液在50℃搅拌反应18小时。反应完全后，冷却至室温，固体析出，过滤。滤饼用水洗涤，干燥完全后得到粗品标题化合物(白色固体，2.3g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：N-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(4-(羟甲基)哌啶-1-基)苯甲酰胺
在室温下，向4-(4-(羟甲基)哌啶-1-基)苯甲酸(1.6g，6.800mmol，1.0当量)和3-氨基哌啶-2,6-二酮盐酸盐(1.31g，10.201mmol，1.5当量)的二氯甲烷(80mL)溶液中加入N-羟基-7-氮杂苯并三氮唑(0.19g，1.360mmol，0.2当量)、HATU(5.17g，13.601mmol，2.0当量)和DIEA(5.27g，40.802mmol，6.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1.1g，产率47％)。
步骤D：N-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(4-甲酰基哌啶-1-基)苯甲酰胺
在0℃下，向N-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(4-(羟甲基)哌啶-1-基)苯甲酰胺(100mg，0.290mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入戴斯-马丁氧化剂(184.20mg，0.434mmol，1.5当量)。反应混合物室温下搅拌18小时。反应完全后，用水淬灭。混合液用二氯甲烷 萃取三次，混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，68mg，产率68％)。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((1-(4-(2,6-二氧哌啶-3-基)氨基甲酰基)苯基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向N-(3-氨基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺盐酸盐(90.98mg，0.198mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入DIEA(51.18mg，0.396mmol，2.0当量)并搅拌5分钟，再加入乙酸(0.034mL，0.594mmol，3.0当量)和N-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(4-甲酰基哌啶-1-基)苯甲酰胺(68mg，0.198mmol，1.0当量)。反应混合液在室温搅拌反应0.5小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(124.42mg，1.980mmol，10当量)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，25mg，产率16％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),10.84(s,1H),10.54(s,1H),8.93(s,1H),8.58(d,J＝8.3Hz,1H),8.47-8.38(m,2H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),7.97(s,1H),7.85(dd,J＝19.3,8.8Hz,4H),7.74(s,1H),7.20(t,J＝12.4Hz,4H),4.82-4.70(m,1H),3.94-3.83(m,8H),3.37-3.31(m,2H),3.16-3.12(m,2H),3.00(s,1H),2.84-2.76(m,1H),2.21-2.09(m,2H),2.03-1.95(m,3H),1.51-1.42(m,2H),1.28-1.19(s,2H).LC-MS(ESI):m/z 787[M+H]+.
制备例256.化合物A172的合成
步骤A：3-(苄基(甲基)氨基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向3-溴哌啶-2,6-二酮(3g，15.6mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶液中加入N-甲基-1-苯基甲胺(4.7g，39.1mmol，2.5当量)。反应混合物室温下搅拌16小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(紫色固体，2.6g，产率71％)。
步骤B：3-(甲氨基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐
在室温下，向3-(苄基(甲基)氨基)哌啶-2,6-二酮(2g，8.6mmol，1.0当量)的乙酸乙酯(25mL)溶液中加入10％钯碳(0.6g，5.6mmol)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌16小时。反应完毕，过滤，滤液中加入HCl乙酸乙酯溶液，减压浓缩得到标题化合物(紫色固体，1.3g，产率84％)。
步骤C：4-(4-(羟甲基)哌啶-1-基)苯甲酸
在0℃下，向4-(4-(羟甲基)哌啶-1-基)苯甲酸甲酯(1g，4.0mmol，1.0当量)的甲醇(8mL)、四氢呋喃(8mL)和水(8mL)的混合溶液中加入氢氧化钠(0.64g，16.0mmol，4.0当量)。反应液在50℃下室温搅拌反应16小时。反应完全后，反应液用稀释的2N HCl溶液调节PH 2-3，粗产品析出。过滤，干燥完全后得到标题化合物(粉色固体，0.6g，产率63％)。
步骤D：N-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(4-(羟甲基)哌啶-1-基)-N-甲基苯甲酰胺
在室温下，向4-(4-(羟甲基)哌啶-1-基)苯甲酸(400mg，1.7mmol，1.0当量)和3-(甲氨基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(483mg，3.4mmol，2.0当量)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入DIEA(219mg，1.7mmol，1.0当量)和HATU(646mg，1.7mmol，1.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应16小时。反应完全后，加水稀释，粗产品析出。过滤，干燥完全后得到标题化合物(蓝色固体，410mg，产率69％)。
步骤E：N-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(4-甲酰基哌啶-1-基)-N-甲基苯甲酰胺
在0℃下，向N-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(4-(羟甲基)哌啶-1-基)-N-甲基苯甲酰胺(100mg，0.29mmol，1.0当量)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入戴斯-马丁氧化剂(212mg，4.5mmol，1.5当量)。反应混合物在氮气保护下室温搅拌3小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，80mg，产率80％)。
步骤F：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((1-(4-(2,6-二氧哌啶-3-基)(甲基)氨基甲酰基)苯基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向N-(2,6-二氧哌啶-3-基)-4-(4-甲酰基哌啶-1-基)-N-甲基苯甲酰胺(100mg，0.28mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入0.1mL醋酸，N-(3-氨基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(192mg，0.42mmol，1.5当量)和DIEA(72mg，0.56mmol，2.0当量)并搅拌5分钟，再加入乙酸(84mg，1.4mmol，5.0当量)。反应混合液在室温搅拌反应0.5小时。向上述反应液中继续加入氰基硼氢化钠(38mg，0.56mmol，2.0当量)。反应混合物在氮气保护下室温搅拌反应16小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，17mg，产率8％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),10.86(s,1H),9.33(s,1H),8.93(s,1H),8.52-8.34(m,2H), 8.22(d,J＝7.3Hz,1H),7.99-7.68(m,4H),7.39-7.23(m,2H),7.17(s,1H),7.02-6.89(m,2H),5.24-4.48(m,1H),3.97-3.61(m,5H),3.28-3.06(m,6H),2.95-2.71(m,6H),2.47-2.14(m,3H),2.13-1.81(m,4H),1.37-1.22(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 801[M+H]+.
制备例257.化合物A173的合成
步骤A：4-(2-(4-(4-(3-氨基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)哌嗪1-甲酸叔丁酯
在室温下，向N-(3-氨基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺盐酸盐(650mg，1.5mmol，1.25当量)和4-(2-氯乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(300mg，1.2mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入碳酸钾(13.45g，97.314mmol，3.0当量)。反应液在90℃下搅拌16小时。反应完全后，冷却至室温，用水稀释，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，500mg，产率62％)。
步骤B：N-(3-氨基-1-(4-(4-(2-(哌嗪-1-基)乙基)哌嗪-1-酰基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺盐酸盐
在0℃下，向4-(2-(4-(4-(3-氨基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)哌嗪1-甲酸叔丁酯(500mg，0.75mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5mL)中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(3mL，12mmol，16当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应液减压浓缩得到标题化合物(白色固体，380mg，产率90％)。
步骤C：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(2-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-5-基)哌嗪-1-基)乙基)哌嗪1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向N-(3-氨基-1-(4-(4-(2-(哌嗪-1-基)乙基)哌嗪-1-酰基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺盐酸盐(150mg，0.27mmol，1.0当量)和2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟异吲哚啉-1,3-二酮(73mg，0.27mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入DIEA(34mg，0.27mmol，1.0当量)。反应混合物在90℃下搅拌反应18小时。反应完全后，冷却至室温，用水稀释，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗 涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，20mg，产率10％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.08(s,1H),8.88(s,1H),8.43(dd,J＝16.6,7.4Hz,2H),8.21(d,J＝7.6Hz,1H),7.94(s,1H),7.79(d,J＝9.1Hz,2H),7.72-7.66(m,2H),7.34(s,1H),7.26(d,J＝8.6Hz,1H),7.08(d,J＝9.2Hz,2H),5.07(d,J＝12.9,5.4Hz,1H),3.44(s,6H),3.21(s,6H),2.58(d,J＝3.7Hz,12H).LC-MS(ESI)m/z:828[M+H]+.
制备例258.化合物A174的合成
步骤A：1-苄基-1H-吡唑-3-甲醛
在室温下，向1H-吡唑-3-甲醛(23g，240mmol，1.0当量)和碳酸铯(156g，480mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(250mL)溶液中加入溴化苄(49g，288mmol，1.0当量)。反应液在室温条件搅拌16小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(无色油状物，41g，产率91％)。
步骤B：1-苄基-3-(二氟甲基)-1H-吡唑
在0℃下，向1-苄基-1H-吡唑-3-甲醛(40g，215.2mmol，1.0当量)的二氯甲烷(30mL)溶液中加入二乙胺基三氟化硫(138.4g，428mmol，4.0当量)。反应液在室温条件搅拌5小时。反应完全后，反应液在0℃下用甲醇淬灭，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，25g，产率57％)。
步骤C：3-(二氟甲基)-1H-吡唑
在室温下，向1-苄基-3-(二氟甲基)-1H-吡唑(25g，120mmol，1.0当量)的甲醇(250mL)溶液中加入10％氢氧化钯碳(2.5g，1.2mmol)。反应液氢气置换三次，在氢气保护下40℃搅拌12小时。反应完全后，反应液过滤，用甲醇洗涤三次，滤液减压浓缩得到粗品标题 化合物(无色油状物，12g，粗品)。
步骤D：3-(二氟甲基)-4-硝基-1H-吡唑
在0℃下，向3-(二氟甲基)-1H-吡唑(17g，144mmol，1.0当量)的硫酸(200mL)溶液中缓慢加入浓硝酸(34.7g，358mmol)。反应液搅拌10分钟后，反应液升温110℃搅拌12小时。反应完全后，反应液降至室温，倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到标题化合物(无色油状，17g，产率74％)。
步骤E：1-(4-溴苯基)-3-(二氟甲基)-4-硝基-1H-吡唑
在室温下，向3-(二氟甲基)-4-硝基-1H-吡唑(6.0g，36.8mmol，1.0当量)和(4-溴苯基)硼酸(11g，55.2mmol，1.5当量)的二氯甲烷(20mL)溶液中加入醋酸铜(8.7g，47.8mmol，1.3当量)和2mL三乙胺。反应液氧气保护下在室温条件搅拌16小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，5.5g，产率47％)。
步骤F：4-(4-(3-(二氟甲基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向1-(4-溴苯基)-3-(二氟甲基)-4-硝基-1H-吡唑(5.1g，16.1mmol，1.0当量)和哌嗪-1-甲酸叔丁酯(4.5g，24.2mmol，1.2当量)的甲苯(20mL)溶液中加入BINAP(1.97g，3.2mmol)、碳酸铯(15.7g，48.3mmol，3.0当量)和Pd2(dba)3(1.5g，1.6mmol，0.1当量)。反应液氮气保护下在90℃条件搅拌16小时。反应完全后，反应液减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(棕色固体，4.9g，产率72％)。
步骤G：4-(4-(4-氨基-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(4-(3-(二氟甲基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(4.9g，11.6mmol，1.0当量)的甲醇(250mL)溶液中加入10％钯碳(500mg，0.1mmol)。反应液氢气置换三次，在氢气保护下室温搅拌4小时。反应完全后，反应液过滤，用甲醇洗涤三次，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，4.1g，粗品)。
步骤H：4-(4-(3-(二氟甲基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在0℃下，向4-(4-(4-氨基-3-(二氟甲基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(3g，7.6mmol，1.0当量)和6-(三氟甲基)吡啶甲酸(1.46g，7.6mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(30mL)溶液中加入DIPEA(1.96g，15.2mmol，2.0当量)和HATU(4.33g，11.4mmol，1.5当量)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱 色谱纯化得到标题化合物(淡黄色固体，2.5g，产率58％)。
步骤I：N-(3-(二氟甲基)-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃下，向4-(4-(3-(二氟甲基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(2.5g，4.42mmol，1.0当量)的二氯甲烷(12mL)溶液中加入盐酸/1,4-二氧六环(12mL,4M)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到标题化合物(棕色固体，1.8g，产率97％)。
步骤J：4-(2-(4-(4-(3-(二氟甲基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)哌嗪基-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向N-(3-(二氟甲基)-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(700mg，1.50mmol，1.0当量)的1,2-二氯乙烷(10mL)溶液中加入4-(2-氧乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(410mg，1.80mmol，1.2当量)和乙酸(0.02mL)。反应液在室温条件下反应半小时。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(954mg，4.50mmol，3.0当量)，反应液在室温条件下搅拌1小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，520mg，产率62％)。
步骤K：N-(3-(二氟甲基)-1-(4-(4-(2-(哌嗪-1-基)乙基)哌嗪-1-酰基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向4-(2-(4-(4-(3-(二氟甲基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)哌嗪基-1-甲酸叔丁酯(250mg，0.37mmol，1.0当量)的二氯甲烷(1mL)溶液中加入盐酸/1,4-二氧六环(2mL,4M)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩标题化合物(棕色固体，180mg，产率85％)。
步骤L：N-(3-(二氟甲基)-1-(4-(4-(2-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-5-基)哌嗪-1-基)乙基)哌嗪1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃下，向N-(3-(二氟甲基)-1-(4-(4-(2-(哌嗪-1-基)乙基)哌嗪-1-酰基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(180mg，0.31mmol，1.0当量)和2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟异吲哚啉-1,3-二酮(128mg，0.47mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中加入DIPEA(120mg，0.62mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应16小时。反应完全 后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，20mg，产率8％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.09(s,1H),10.27(s,1H),8.84(s,1H),8.46-8.37(m,2H),8.26-8.21(m,1H),7.76(d,J＝8.9Hz,3H),7.50-7.14(m,5H),5.15-5.04(m,1H),4.16-3.58(m,10H),3.30-3.13(m,8H),2.95-2.83(m,2H),2.64-2.52(m,3H),2.08-1.98(m,1H).LC-MS(ESI):m/z 835[M+H]+.
制备例259.化合物A175的合成
步骤A：1-(5-(4-(羟甲基)哌啶-1-羰基)-2-甲氧基苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在室温下，向3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酸(800mg，3.03mmol，1.0当量)和哌啶-4-基甲醇(348.7mg，3.03mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入N-甲基吗啉(1.67mL，15.1mmol，5.0当量)和HATU(1.7g，4.5mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，900mg，产率82％)。
步骤B：1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-甲醛
室温下，向1-(5-(4-(羟甲基)哌啶-1-羰基)-2-甲氧基苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(300mg，0.8mmol，1.0当量)的二甲基亚砜(5mL)溶液中加入IBX(464.9mg，1.6mmol，2.0当量)。反应液室温搅拌反应1小时。反应完成后，用饱和碳酸氢钠和硫代硫酸钠溶液淬灭，二氯甲烷萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，250mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：1N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向N-(3-氨基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺盐酸盐(367.5mg，0.8mmol，1.0当量)的甲醇(5mL)溶液中加入三乙胺(0.2mL)。反应液在室温下搅拌反应5分钟。向上述反应液中依次1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-甲醛(287.5mg，0.8mmol，1.0当量)和乙酸(0.3mL)。反应液在室温下 搅拌反应15小时。接着继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(253.1mg，1.2mmol，1.5当量)。反应液在室温下额外搅拌反应3小时。反应完成后，用水淬灭，二氯甲烷萃取三次。减压浓缩，残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，21.3mg，产率4％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.34(s,1H),8.89(d,J＝10.2Hz,1H),8.45(d,J＝7.6Hz,1H),8.40(t,J＝7.6Hz,1H),8.21(d,J＝7.6Hz,1H),7.95(s,1H),7.80(t,J＝9.8Hz,2H),7.71(s,1H),7.37(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),7.33(d,J＝2.0Hz,1H),7.16(d,J＝8.4Hz,1H),7.07(d,J＝9.2Hz,2H),3.85(s,3H),3.65-3.57(m,2H),3.39-3.36(m,4H),3.33-3.30(m,2H),3.24-3.16(m,4H),2.73-2.65(m,2H),2.54-2.52(m,2H),2.26-2.19(m,2H),1.92-1.66(m,3H),1.10(qd,J＝13.2,3.6Hz,2H).LC-MS(ESI):m/z 802[M+H]+.
制备例260.化合物A176的合成
步骤A：N-(3-(二氟甲基)-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向4-(4-(3-(二氟甲基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.0g，1.76mmol，1.0当量)的二氯甲烷(6.0mL)溶液中加入三氟乙酸(3.0mL)。反应液在室温条件反应1小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠溶液中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状，800mg，粗品)。
步骤B：4-((4-(4-(3-(二氟甲基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向N-(3-(二氟甲基)-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(164mg，0.352mmol，1.0当量)和4-甲酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(150mg，0.703mmol，2.0当量)的1,2-二氯乙烷(2.0mL)溶液中加入乙酸(0.004mL，0.07mmol，0.5当量)。反应液在室温条件下反应半小时。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(224mg，1.05mmol，3.0当量)，反应在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液倒入水中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到 标题化合物(黄色固体，150mg，产率64％)。
步骤C：N-(3-(二氟甲基)-1-(4-(4-(哌啶-4-基甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃下，向4-((4-(4-(3-(二氟甲基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(150mg，0.226mmol，1.0当量)的二氯甲烷(1.0mL)溶液中加入三氟乙酸(0.5mL)。反应液在室温条件反应1小时。反应完全后，反应液倒入碳酸氢钠溶液中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到标题化合物(黄色油状，120mg，产率94％)。
步骤D：N-(3-(二氟甲基)-1-(4-(4-((1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃下，向N-(3-(二氟甲基)-1-(4-(4-(哌啶-4-基甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(100mg，0.177mmol，1.0当量)和3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酸(51.6mg，0.195mmol，1.1当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)溶液中加入DIPEA(0.088mL，0.532mmol，3.0当量)和HATU(101mg，0.266mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温反应1小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，40mg，产率28％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.34(s,1H),10.26(s,1H),8.79(s,1H),8.46-8.35(m,2H),8.21-8.18(m,1H),7.69(d,J＝8.9Hz,2H),7.46-7.26(m,3H),7.17-7.14(m,1H),7.07(d,J＝9.0Hz,2H),4.64-4.16(m,1H),3.84(s,3H),3.60(t,J＝6.6Hz,2H),3.27-2.87(m,8H),2.68(t,J＝6.5Hz,2H),2.66-2.53(m,3H),2.40-2.18(m,2H),1.96-1.85(m,1H),1.81-1.65(m,2H),1.18-1.05(m,2H).LC-MS(ESI):m/z810[M+H]+.
制备例261.化合物A177的合成
步骤A：1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-5-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮
在室温下，向1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-5-溴-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(400mg，0.78mmol，1.0当量)和4-(二甲氧基甲基)哌啶(263mg，1.2mmol，1.5当量)的1,4-二氧六环(10mL)溶液中加入碳酸铯(760mg，2.34mmol，3.0当量)、Ruphos(72mg，0.14mmol，0.2当量)和Ruphos Pd G1(127mg，0.14mmol，0.2当量)。反应混合物在氮气保护下100℃搅拌反应16小时。反应完全后，冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，350mg，产率76％)。
步骤B：3-(5-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-5-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(350mg，0.59mmol，1.0当量)的乙醇(5mL)溶液中加入10％钯碳(200mg)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下50℃搅拌16小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，200mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：1-(1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)哌啶-4-甲醛
在0℃下，向3-(5-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(200mg，0.48mmol，1.0当量)中加入甲酸(2mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完毕，反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(无色油状物，100mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤D：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-(1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)哌啶-4-甲醛(50mg，0.14mmol，1.0当量)和N-(3-氨基-1-((1r,4r)-4-(哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(62mg，0.14mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入乙酸(5滴)。反应混合液在室温搅拌反应1小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(115mg，0.54mmol，4.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应5分钟。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，15.6mg，产率14％)。1H NMR (400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.06(s,1H),8.88(s,1H),8.47-8.36(m,2H),8.21(d,J＝7.6Hz,1H),7.95(s,1H),7.79(d,J＝9.1Hz,2H),7.71(s,1H),7.08(d,J＝9.3Hz,2H),6.93(d,J＝8.6Hz,1H),6.83(s,1H),6.64(d,J＝10.7Hz,1H),5.31-5.26(m,1H),3.60(d,J＝11.3Hz,2H),3.31-3.29(m,5H),3.26-3.21(m,4H),2.92-2.84(m,1H),2.67-2.61(m,3H),2.54-2.53(m,1H),2.27-2.22(m,2H),2.00-1.96(m,1H),1.83(d,J＝11.8Hz,2H),1.73-1.66(m,1H),1.27-1.23(m,4H).LC-MS(ESI):m/z 814[M+H]+.
制备例262.化合物A178的合成
步骤A：3-(4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向3-(4-溴-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(500mg，1.4mmol，1.0当量)和4-(二甲氧基甲基)哌啶(353mg，2.2mmol，1.5当量)的1,4-二氧六环(10mL)溶液中加入碳酸铯(1.4g，4.4mmol，3.0当量)和Pd-PEPPSI-IHept-Cl(144mg，0.15mmol，0.1当量)。反应混合物在氮气保护下120℃搅拌反应16小时。反应完全后，冷却至室温，倒入5％乙酸冰水溶液中，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，120mg，产率19％)。
步骤B：1-(-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-甲醛
向3-(4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(120mg，0.29mmol，1.0当量)中加入甲酸(3mL)。反应混合物在30℃搅拌反应1小时。反应完全后，减压浓缩得到粗品标题化合物(棕色油状物，100mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-(-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基) 哌啶-4-甲醛(100mg，0.27mmol，1.0当量)和N-(3-氨基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(124mg，0.27mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入醋酸(0.02mL，0.27mmol，0.1当量)并搅拌0.5小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(171mg，0.81mmol，3.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应2小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，48mg，产率21％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.08(s,1H),8.88(s,1H),8.45(d,J＝7.6Hz,1H),8.39(t,J＝7.8Hz,1H),8.21(d,J＝7.6Hz,1H),7.94(s,1H),7.79(d,J＝8.9Hz,2H),7.70(s,1H),7.08(d,J＝8.6Hz,2H),7.00-6.94(m,1H),6.92-6.85(m,2H),5.45-5.27(m,1H),3.63(s,3H),3.27-3.19(m,4H),3.15-3.09(m,2H),2.94-2.85(m,1H),2.74-2.59(m,4H),2.55-2.53(m,4H),2.27(d,J＝5.0Hz,2H),2.04-1.96(m,1H),1.85(d,J＝11.9Hz,2H),1.74-1.63(m,1H),1.35(d,J＝10.3Hz,2H).LC/MS(ESI):m/z 814(M+H)+.
制备例263.化合物A179的合成
步骤A：4-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-5-溴-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(700mg，0.39mmol，1.0当量)、哌嗪-1-甲酸叔丁酯(108mg，0.58mmol，1.5当量)的1,4-二氧六环(10mL)溶液中加入X-Phos(37mg，0.078mmol，0.2当量)、Pd2(dba)3(71mg，0.078mmol，0.2当量)和碳酸铯(380mg，1.17mmol，3.0当量)。反应液氮气保护下在90℃条件搅拌16小时。反应完全后，反应液冷却到室温，倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，180mg，产率74％)。
步骤B：4-(1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(180mg，0.29mmol，1.0当量)的乙醇(15mL)溶液中加入10％钯碳(180mg)。反应液氢气置换三次。在氢气保护下50℃条件反应16小时。反应完全后，反应液过滤，滤饼用乙醇洗涤三次，滤液减压浓缩纯化得到标题化合物(白色固体，110mg，产率86％)。
步骤C：3-(3-甲基-2-氧代-5-(哌嗪-1-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向4-(1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(110mg，0.25mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入三氟乙酸(2mL)。反应液在室温条件反应1小时。反应完全后，反应液减压浓缩纯化得到标题化合物(黄色固体，80mg，三氟乙酸盐粗品)。
步骤D：2-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)哌嗪-1-基)乙酸叔丁酯
在室温下，向3-(3-甲基-2-氧代-5-(哌嗪-1-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(80mg，0.23mmol，1.0当量)和2-溴乙酸叔丁酯(67mg，0.345mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入DIEA(149mg，1.15mmol，5当量)。反应液在氮气保护下室温条件反应5小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，80mg，产率76％)。
步骤E：2-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)哌嗪-1-基)乙酸
在室温下，向2-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)哌嗪-1-基)乙酸叔丁酯(80mg，0.175mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入三氟乙酸(2mL)。反应液在室温条件反应1小时。反应完全后，反应液减压浓缩纯化得到标题化合物(黄色固体，65mg，三氟乙酸盐粗品)。
步骤F：N-(3-羰基-1-(4-(4-(2-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)哌嗪-1-基)乙酰基)哌津-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃下，向2-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)哌嗪-1-基)乙酸(65mg，0.16mmol，1.0当量)和N-(3-氨基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(88mg，0.19mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(8.0mL) 溶液中加入DIEA(83.2mg，0.64mmol，4当量)和HATU(121.6mg，0.32mmol，2.0当量)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，15.1mg，产率15％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.85-11.74(m,1H),11.07(s,1H),8.90(s,1H),8.51-8.34(m,2H),8.22(d,J＝7.5Hz,1H),7.95(s,1H),7.81(t,J＝16.5Hz,2H),7.73(s,1H),7.14(d,J＝7.3Hz,2H),6.94(d,J＝32.1Hz,2H),6.69(s,1H),5.30(d,J＝9.0Hz,1H),4.48(s,1H),3.76-3.56(m,8H),3.29-3.09(m,8H),2.91(m,2H),2.76-2.59(m,5H),2.00(d,J＝7.3Hz,1H).LC-MS(ESI):m/z 843[M+H]+.
制备例264.化合物A180的合成
步骤A：4-(2-(4-(4-(3-氨基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)哌嗪1-甲酸叔丁酯
在室温下，向1-[4-(哌嗪-1-基)苯基]-4-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)吡唑-3-甲酰胺(2.0g，4.353mmol，1.0当量)和4-(2-氯乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.08g，4.353mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶液中加入碳酸钾(2.41g，17.413mmol，3.0当量)和碘化钠(0.13g，0.871mmol，0.2当量)。反应液在氮气保护下70℃搅拌反应16小时。反应完全后，反应液冷却至室温，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，2.6g，产率89％)。
步骤B：N-(3-氨基-1-(4-(4-(2-(哌嗪-1-基)乙基)哌嗪-1-酰基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃下，向4-(2-(4-(4-(3-氨基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)哌嗪1-甲酸叔丁酯(2.6g，3.871mmol，1.0当量)的二氯甲烷(20mL)溶液中加入三氟乙酸(5mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，反应液用1N氢氧化钠溶液调节PH 8-9。二氯甲烷萃取三次，混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，1.8g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：N-(3-羰基-1-(4-(4-(2-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌嗪-1-基)乙基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向N-(3-氨基-1-(4-(4-(2-(哌嗪-1-基)乙基)哌嗪-1-酰基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(400mg，0.700mmol，1.0当量)和3-(4-溴-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(260.30mg，0.770mmol，1.1当量)的1,4-二氧六环(10mL)溶液中加入碳酸铯(684.00mg，2.099mmol，3.0当量)和Pd-PEPPSI-IHept-Cl(68.09mg，0.070mmol，0.1当量)。反应混合物在氮气保护下120℃搅拌反应16小时。反应完全后，冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，14mg，产率3％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.09(s,1H),8.88(s,1H),8.45-8.38(m,2H),8.21(s,1H),7.95(s,1H),7.79(d,J＝8.8Hz,2H),7.71(s,1H),7.08(d,J＝8.8Hz,2H),6.99-6.90(m,3H),5.37-5.32(m,1H),3.63(s,3H),3.22(s,4H),2.98-2.91(m,8H),2.60(s,4H),2.55(s,4H),2.33(s,1H),2.00(d,J＝7.4Hz,2H),1.75(s,1H).LC-MS(ESI):m/z 829[M+H]+.
制备例265.化合物A181的合成
步骤A：4-(2-羟乙基)哌啶-1-甲酸苄酯
在0℃下，向2-(哌啶-4-基)乙烷-1-醇(12.5g，96.7mmol，1.0当量)的二氯甲烷(250mL)和水(250mL)溶液中加入碳酸钠(41g，387.0mmol，4.0当量)和氯甲酸卞酯(19.8g，116.1mmol，1.2当量)。反应液在室温搅拌反应6小时。反应完全后，反应液用水淬灭，二氯甲烷萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，低温减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状物，17.5g，69％)。
步骤B：4-(2-氧乙基)哌啶-1-甲酸苄酯
在0℃下，向4-(2-羟乙基)哌啶-1-甲酸苄酯(12.5g，47.5mmol，1.0当量)的二氯甲烷 (150mL)溶液中加入戴斯马丁氧化剂(22.2g，52.2mmol，1.1当量)。反应混合物在室温下搅拌3小时。反应完全后，用饱和碳酸氢钠溶液淬灭，搅拌0.5小时。混合液用二氯甲烷萃取三次，混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状物，10g，产率80％)。
步骤C：4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-甲酸苄酯
在0℃下，向4-(2-氧乙基)哌啶-1-甲酸苄酯(10g，38.2mmol，1.0当量)的甲醇(100mL)溶液中加入三甲氧基甲烷(4.2mL，38.2mmol，1.0当量)和对甲苯磺酸(0.66g，3.8mmol，0.1当量)。反应液在15℃搅拌反应1小时。反应完全后，反应液用水淬灭，二氯甲烷萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，低温减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状物，11g，粗品)。
步骤D：4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶
在室温下，向4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-甲酸苄酯(11g，35.8mmol，1.0当量)的甲醇(110mL)溶液中加入10％氢氧化钯碳(1g)。反应液在氢气保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌24小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(无色油状物，6g，产率97％)。
步骤E：1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-5-(4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮
在室温下，向1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-5-溴-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(500mg，1.0mmol，1.0当量)和4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶(252mg，1.5mmol，1.5当量)的1,4-二氧六环(5mL)溶液中加入碳酸铯(946mg，3.0mmol，3.0当量)、Ru-phos(45mg，0.1mmol，0.1当量)和Ru-Phos Pd G1(79mg，0.1mmol，0.1当量)。反应混合物在氮气保护下100℃搅拌反应16小时。反应完全后，冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，400mg，产率68％)。
步骤F：3-(5-(4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-5-(4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(200mg，0.3mmol，1.0当量)的乙醇(5mL)溶液中加入10％氢氧化钯碳(200mg)。反应液在氢气保护下抽换气三次并且在氢气下50℃搅拌16小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，100mg， 粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤G：2-(1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)哌啶-4-基)乙醛
在0℃下，向3-(5-(4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(100mg，0.232mmol，1.0当量)中加入甲酸(4mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完毕，反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(白色油状物，80mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤G：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(2-(1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向2-(1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)哌啶-4-基)乙醛(80mg，0.2mmol，1.0当量)和N-(3-氨基-1-((1r,4r)-4-(哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(96mg，0.2mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中加入乙酸(5滴)。反应混合液在室温搅拌反应1小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(176mg，0.8mmol，4.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应5分钟。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，20.3mg，产率12％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.06(s,1H),8.88(s,1H),8.45(d,J＝7.5Hz,1H),8.40(t,J＝7.8Hz,1H),8.22-8.20(m,1H),7.95(s,1H),7.79(d,J＝9.0Hz,2H),7.71(s,1H),7.08(d,J＝9.2Hz,2H),6.92(d,J＝8.6Hz,1H),6.82(d,J＝2.0Hz,1H),6.63(dd,J＝8.7,1.9Hz,1H),5.29(dd,J＝12.9,5.2Hz,1H),3.57(d,J＝12.1Hz,2H),3.30(s,3H),3.24-3.20(m,4H),2.91-2.85(m,1H),2.73-2.66(m,1H),2.65-2.56(m,4H),2.55-2.52(m,4H),2.42-2.38(m,2H),2.01-1.96(m,1H),1.79(d,J＝12.0Hz,2H),1.48-1.45(m,2H),1.36-1.29(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 828[M+H]+.
制备例266.化合物A182的合成
步骤A：4-(2-氧乙基)哌啶-1-甲酸苄酯
在0℃下，向4-(2-羟乙基)哌啶-1-甲酸苄酯(1g，3.8mmol，1.0当量)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入戴斯马丁氧化剂(2.4g，5.7mmol，1.5当量)。反应混合物30℃下搅拌3小时。反应完全后，用饱和碳酸氢钠溶液淬灭，搅拌0.5小时。混合液用二氯甲烷萃取三次，混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状物，700mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤B：4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-甲酸苄酯
在室温下，向4-(2-氧乙基)哌啶-1-甲酸苄酯(700mg，2.7mmol，1.0当量)和三甲氧基甲烷(0.44mL，4.0mmol，1.5当量)的甲醇(100mL)溶液中加入4-甲基苯磺酸(46mg，0.7mmol，0.25当量)。反应液在氮气保护下30℃搅拌反应5小时。反应液减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状物，500mg，产率61％)。
步骤C：4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶
在室温下，向4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-甲酸苄酯(500mg，1.6mmol，1.0当量)的四氢呋喃(10mL)溶液中加入10％钯碳(173mg，0.1当量)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下30℃搅拌4小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状物，250mg，产率89％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤D：3-(4-(4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶(250mg，1.4mmol，1.0当量)和3-(4-溴-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(488mg，1.4mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(10mL)溶液中加入碳酸铯(940mg，2.9mmol，2.0当量)和Pd-PEPPSI-IHept-Cl(70mg，0.07mmol，0.05当量)。反应混合物在氮气保护下120℃搅拌反应5小时。反应完全后，冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，150mg，产率24％)。
步骤E：2-(1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-基)乙醛
在室温下，向3-(4-(4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(150mg，0.35mmol，1.0当量)中加入甲酸(5mL)。反应液在30℃下搅拌反应2小时。反应完全后，反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(120mg，粗品)。
步骤F：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(2-(1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向2-(1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-基)乙醛(80mg，0.21mmol，1.0当量)和N-(3-氨基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(95.61mg，0.21mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入乙酸(0.012mL，0.21mmol，1.0当量)。反应混合液在室温搅拌反应1小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(88mg，0.42mmol，2.0当量)。反应混合物在30℃下搅拌反应3小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，20mg，产率12％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.08(s,1H),8.88(s,1H),8.48-8.35(m,2H),8.21(d,J＝6.7Hz,1H),7.95(s,1H),7.79(d,J＝9.1Hz,2H),7.71(s,1H),7.08(d,J＝9.2Hz,2H),7.00-6.82(m,3H),5.35(dd,J＝12.5,5.3Hz,1H),3.63(s,3H),3.26-3.18(m,5H),3.10(d,J＝11.2Hz,2H),2.94-2.84(m,1H),2.78-2.62(m,4H),2.61-2.53(m,4H),2.44-2.39(m,2H),2.04-1.95(m,1H),1.81(d,J＝10.8Hz,2H),1.53-1.38(m,4H).LC-MS(ESI):m/z 828[M+H]+.
制备例267.化合物A183的合成
步骤A：3-(2-羟乙基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
在0℃下，向1-{[(2-甲基丙-2-基)氧基]羰基}四氢-1H-吡咯-3-基)乙酸(2g，8.7mmol， 1.0当量)的四氢呋喃(3mL)溶液中加入1M硼烷四氢呋喃溶液(10mL，10mmol，1.1当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应18小时。反应完全后，加入甲醇淬灭并搅拌1小时。减压浓缩，残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状物，1.8g，产率96％)。
步骤B：2-(吡咯烷-3-基)乙烷-1-醇盐酸盐
在0℃下，向3-(2-羟乙基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(500mg，2.3mmol，1.0当量)中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(5mL，20mmol，9当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状物，300mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：1-(5-(3-(2-羟乙基)吡咯烷-1-羰基)-2-甲氧基苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在室温下，向3-(2,4-二氧代六氢嘧啶-1-基)-4-甲氧基苯甲酸(600mg，2.3mmol，1.0当量)和2-(吡咯烷-3-基)乙烷-1-醇盐酸盐(261.5mg，2.31mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入N-甲基吗啉(1.3mL，11.4mmol，5.0当量)和HATU(1.3g，3.4mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，700mg，产率85％)。
步骤D：2-(1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)吡咯烷-3-基)乙醛
在室温下，向1-(5-(3-(2-羟乙基)吡咯烷-1-羰基)-2-甲氧基苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(500mg，1.4mmol，1.0当量)的二甲基亚砜(10mL)溶液中加入IBX(775mg，2.8mmol，2.0当量)。反应液在室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经反相柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，300mg，产率60％)。
步骤E：N-(3-羰基-1-(4-(4-(2-(1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)吡咯烷-3-基)乙基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-[4-(哌嗪-1-基)苯基]-4-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)吡唑-3-甲酰胺盐酸盐(191.8mg，0.4mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入DIEA(0.2mL)并搅拌5分钟，再加入乙酸(0.3mL)和2-(1-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)吡咯烷-3-基)乙醛(150mg，0.4mmol，1.0当量)。反应混合液在室温搅拌反应15小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(154.6mg，0.7mmol，1.8当量)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体， 20.2mg，产率6％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.33(s,1H),8.88(s,1H),8.49-8.35(m,2H),8.21(dd,J＝7.6,1.2Hz,1H),7.95(s,1H),7.78(d,J＝8.6Hz,2H),7.71(s,1H),7.54(dd,J＝8.6,2.0Hz,1H),7.49(d,J＝3.6Hz,1H),7.17-7.00(m,3H),3.83(d,J＝16.6Hz,3H),3.72-3.42(m,5H),3.24-3.05(m,5H),2.66(dt,J＝10.2,7.2Hz,2H),2.55(ddd,J＝4.8,3.6,1.0Hz,2H),2.46(dd,J＝8.8,5.2Hz,2H),2.40(dd,J＝10.6,6.8Hz,1H),2.35-2.28(m,1H),2.25-2.11(m,1H),2.09-1.97(m,1H),1.68-1.48(m,3H).LC-MS(ESI):m/z 803[M+H]+.
制备例268.化合物A184的合成
步骤A：3-(3-(2-羟乙基)吡咯烷-1-基)苯甲酸乙酯
在室温下，向3-溴苯甲酸乙酯(2.5g，10.91mmol，1.0当量)和2-(吡咯烷-3-基)乙烷-1-醇(1.9g，16.37mmol，1.5当量)的1,4-二氧六环(50mL)溶液中加入碳酸铯(10.7g，32.74mmol，3.0当量)、S-Phos(0.9g，2.18mmol，0.2当量)和Pd(OAc)2(0.25g，1.09mmol，0.1当量)。反应混合物在氮气保护下100℃搅拌反应16小时。反应完全后，冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，2.2g，产率77％)。
步骤B：3-(3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)吡咯烷-1-基)苯甲酸乙酯
在0℃下，向3-(3-(2-羟乙基)吡咯烷-1-基)苯甲酸乙酯(2.2g，8.35mmol，1.0当量)和咪唑(1.1g，16.71mmol，2.0当量)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入叔丁基二甲基氯硅烷(1.9g，12.53mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应3小时。反应完全后，反应液用水淬灭，二氯甲烷萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(无色液体，2.1g，产率67％)。
步骤C：3-(3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)吡咯烷-1-基)苯甲酰肼
在0℃下，向3-(3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)吡咯烷-1-基)苯甲酸乙酯(2.1 g，5.561mmol.)的乙醇(15mL)中加入80％水合肼(15mL)。反应液在氮气保护下80℃搅拌反应16小时。反应完毕，反应液冷却至室温，用水淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(无色液体，1.9g，产率94％)。
步骤D：2-(3-(3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)吡咯烷-1-基)苯甲酰基)-N-甲基肼-1-甲酰胺
在室温下，向3-(3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)吡咯烷-1-基)苯甲酰肼(1.9g，5.23mmol，1.0当量)和2,5-二氧代吡咯烷-1-基甲基氨基甲酸酯(1.1g，7.84mmol，1.5当量)的乙腈(20mL)溶液中加入DIEA(2.0g，15.67mmol，3.0当量)。反应混合物在氮气保护下室温搅拌反应16小时。反应完全后，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品标题化合物(米白色固体，2.1g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：5-(3-(3-(2-羟乙基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮
在0℃下，向2-(3-(3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)吡咯烷-1-基)苯甲酰基)-N-甲基肼-1-甲酰胺(2.1g，4.99mmo,1.0当量)中加入氢氧化钠水溶液(25.0mL，14.98mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下100℃搅拌反应5小时。反应完毕，反应液冷却至室温，用水淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1.2g，产率83％)。
步骤F：5-(3-(3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮
在0℃下，向5-(3-(3-(2-羟乙基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮(1.2g，4.16mmol，1.0当量)和咪唑(0.57g，8.32mmol，2.0当量)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入叔丁基二甲基氯硅烷(0.9g，6.24mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应18小时。反应完全后，反应液用水淬灭，二氯甲烷萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1.1g，产率66％)。
步骤G：3-(3-(-3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在0℃氮气保护下，向5-(3-(3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮(1.1g，2.73mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺 (10mL)溶液中分批加入60重量％氢化钠(0.3g，8.20mmol，3.0当量)。反应混合物室温下搅拌1小时。向上述反应液中继续加入3-溴哌啶-2,6-二酮(1.1g，5.46mmol，2.0当量)。反应混合物在氮气保护下40℃搅拌反应4小时。反应完全后，用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，0.92g，产率66％)。
步骤H：3-(3-(-3-(3-(2-羟乙基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在0℃下，向3-(3-(3-(3-(2-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)乙基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(0.92g，1.79mmol 1.0当量)的四氢呋喃(10mL)中加入1N四丁基氟化铵四氢呋喃溶液(3.91mL，3.91mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应3小时。反应完毕，反应液冷却至室温，用水淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经薄层色谱纯化得到标题化合物(白色固体，450mg，产率63％)。
步骤I：2-(1-(3-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)吡咯烷-3-基)乙醛
在0℃下，向3-(3-(-3-(3-(2-羟乙基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(400mg，0.78mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入戴斯-马丁氧化剂(495.4mg，1.17mmol，1.5当量)。反应混合物室温下搅拌3小时。反应完全后，反应液过滤，滤液加压浓缩。残余物经薄层色谱纯化得到标题化合物(白色固体，140mg，产率45％)。
步骤J：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(2-(3-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)吡咯烷-3-基)乙基)哌嗪-1-基)苯基]-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向2-(1-(3-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)吡咯烷-3-基)乙醛(90mg，0.23mmol，1.0当量)和N-(3-氨基-1-((1r,4r)-4-(哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(93.6mg，0.20mmol，0.87当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中加入乙酸(4.1mg，0.07mmol，0.3当量)。反应混合液在室温搅拌反应0.5小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(143.3mg，0.68mmol，3.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白 色固体，15.6mg，产率14％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.04(s,1H),8.88(s,1H),8.47-8.36(m,2H),8.21(d,J＝6.8Hz,1H),7.95(s,1H),7.78(d,J＝9.2Hz,2H),7.70(s,1H),7.30(t,J＝7.8Hz,1H),7.08(d,J＝9.2Hz,2H),6.84(d,J＝7.8Hz,1H),6.73-6.66(m,2H),5.21(dd,J＝12.8,5.2Hz,1H),3.51-3.44(m,2H),3.30(s,3H),3.22(s,5H),2.95-2.84(m,2H),2.64-2.53(m,5H),2.48-2.39(m,3H),2.34-2.27(m,1H),2.18-2.06(m,2H),1.71-1.60(m,3H).LC-MS(ESI):m/z 841[M+H]+.
制备例269.化合物A185的合成
步骤A：4-(3-(2-羟乙基)吡咯烷-1-基)苯甲酸乙酯
在0℃下，向4-氟苯甲酸乙酯(6.0g，35.68mmol，1.0当量)和2-(吡咯烷-3-基)乙烷-1-醇(6.2g，53.52mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)溶液中加入碳酸钾(14.8g，107.04mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护条件下80℃反应1小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(无色油状物，2.3g，产率24％)。
步骤B：4-(3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)吡咯烷-1-基)苯甲酸乙酯
在0℃下，向4-(3-(2-羟乙基)吡咯烷-1-基)苯甲酸乙酯(2.2g，8.35mmol，1.0当量)和咪唑(1.1g，16.71mmol，2.0当量)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入叔丁基二甲基氯硅烷(1.9g，12.53mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护条件下室温反应3小时。反应完全后，反应液倒入水中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(无色油状物，2.1g，产率67％)。
步骤C：4-(3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)吡咯烷-1-基)苯甲酰肼
在室温下，向4-(3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)吡咯烷-1-基)苯甲酸乙酯(2.1g，5.561mmol，1.0当量)的乙醇(15mL)溶液中加入80％水合肼(15mL)。反应液在氮气保 护条件下80℃反应16小时。反应完全后，反应液降至室温，倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(无色油状物，1.9g，产率94％)。
步骤D：2-(4-(3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)吡咯烷-1-基)苯甲酰基)-N-甲基肼-1-甲酰胺
在室温下，向4-(3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)吡咯烷-1-基)苯甲酰肼(1.9g，5.23mmol，1.0当量)和2,5-二氧代吡咯烷-1-基甲基氨基甲酸酯(1.1g，7.84mmol，1.5当量)的乙腈(20mL)溶液中加入DIPEA(2.0g，15.67mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护条件下室温反应16小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到标题化合物(灰白色固体，2.1g，产率96％)。
步骤E：5-(4-(3-(2-羟乙基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮
在室温下，向氢氧化钠溶液(25.0mL，14.98mmol，3.0当量)中加入2-(4-(3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)吡咯烷-1-基)苯甲酰基)-N-甲基肼-1-甲酰胺(2.1g，4.99mmol，1.0当量)。反应液在氮气保护下100℃条件反应16小时。反应完全后，反应液降至室温，倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1.2g，产率83％)。
步骤F：5-(4-(3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮
在0℃下，向5-(4-(3-(2-羟乙基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮(1.2g，4.16mmol，1.0当量)和咪唑(0.57g，8.32mmol，2.0当量)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入叔丁基二甲基氯硅烷(0.9g，6.24mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护条件下室温反应18小时。反应完全后，反应液倒入水中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1.1g，产率66％)。
步骤G：3-(3-(4-(3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在0℃下，向5-(4-(3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮(1.1g，2.73mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入60％氢化钠(0.3g，8.20mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护条件下0℃反应1 小时。然后加入3-溴哌啶-2,6-二酮(1.1g，5.46mmol，2.0当量)，反应液在氮气保护条件下40℃反应4小时。反应完全后，反应液倒入氯化铵溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，0.92g，产率66％)。
步骤H：3-(3-(4-(3-(2-羟乙基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向3-(3-(4-(3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(0.92g，1.79mmol 1.0当量)的四氢呋喃(10mL)溶液中加入1M四丁基氟化铵(3.91mL，3.91mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护条件下室温反应3小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经薄层色谱纯化得到标题化合物(白色固体，0.45g，产率63％)。
步骤I：2-(1-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)吡咯烷-3-基)乙醛
在室温下，向3-(3-(4-(3-(2-羟乙基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(400mg，0.78mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入戴斯-马丁氧化剂(495mg，1.17mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护条件下室温反应3小时。反应完全后，反应液过滤，减压浓缩。残余物经薄层色谱纯化得到标题化合物(白色固体，140mg，产率45％)。
步骤J：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(2-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)吡咯烷-3-基)乙基)哌嗪-1-基)苯)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向2-(1-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)吡咯烷-3-基)乙醛(90mg，0.23mmol，1.0当量)和N-(3-氨基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(94mg，0.20mmol，0.87当量)的N,N-二甲基甲酰胺(30mL)溶液中加入乙酸(4mg，0.07mmol，0.3当量)。反应液在室温条件下反应半小时。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(143mg，0.68mmol，3.0当量)，反应液在室温条件下搅拌1小时。反应完全后，反应液经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，17.6mg，产率9％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.02(s,1H),8.88(s,1H),8.52-8.30(m,2H),8.21(d,J＝8.0Hz,1H),7.95(s,1H),7.80(d,J＝8.8Hz,2H),7.71(s,1H),7.48(d,J ＝8.8Hz,2H),7.09(d,J＝8.8Hz,2H),6.62(d,J＝8.8Hz,2H),5.17(dd,J＝12.4,5.2Hz,1H),3.55-3.48(m,1H),3.41-3.38(m,1H),3.30(s,3H),3.29-3.23(m,5H),2.95(t,J＝8.8Hz,1H),2.89-2.82(m,1H),2.68-2.58(m,5H),2.45-2.40(m,2H),2.33(s,2H),2.14(d,J＝28.0Hz,2H),1.68(s,3H).LC-MS(ESI):m/z 841[M+H]+.
制备例270.化合物A186的合成
步骤A：3-(3-(羟甲基)吡咯烷-1-基)苯甲酸乙酯
在室温下，向3-溴苯甲酸乙酯(5.0g，21.83mmol，1.0当量)、吡咯烷-3-基甲醇(2.65g，26.19mmol，1.2当量)的1,4-二氧六环(10mL)溶液中加入BINAP(1.36g，2.18mmol，0.1当量)、Pd2(dba)3(1.0g，1.09mmol，0.05当量)和碳酸铯(21.34g，65.48mmol，3.0当量)。反应液氮气保护下在100℃条件搅拌16小时。反应完全后，反应液冷却到室温，倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，3.0g，产率55％)。
步骤B：3-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)吡咯烷-1-基)苯甲酸乙酯
在0℃下，向3-(3-(羟甲基)吡咯烷-1-基)苯甲酸乙酯(3.0g，12.03mmol，1.0当量)和咪唑(2.05g，30.08mmol，2.5当量)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入叔丁基二甲基氯硅烷(2.18g，14.44mmol，1.2当量)。反应液在氮气保护条件下室温反应3小时。反应完全后，反应液倒入水中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，3.0g，产率68％)。
步骤C：3-(3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)吡咯烷-1-基)苯甲酰肼
在室温下，向3-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)吡咯烷-1-基)苯甲酸乙酯(3.0g，8.25mmo,1.0当量)的乙醇(15mL)溶液中加入80％水合肼(15mL)。反应液在氮气保护条件下80℃反应16小时。反应完全后，反应液降至室温，倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混 合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，2.5g，产率86％)。
步骤D：2-(3-(3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)吡咯烷-1-基)苯甲酰基)-N-甲基肼-1-甲酰胺
在室温下，向3-(3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)吡咯烷-1-基)苯甲酰肼(2.5g，7.15mmol，1.0当量)和2,5-二氧代吡咯烷-1-基甲基氨基甲酸酯(1.23g，7.15mmol，1.0当量)的乙腈(25mL)溶液中加入DIEA(1.84g，14.3mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护条件下室温反应16小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到标题化合物(灰白色固体，2.6g，产率89％)。
步骤E：5-(3-(3-(羟甲基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮
在室温下，向氢氧化钠溶液(26.15mL，15.97mmol，2.5当量)中加入2-(3-(3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)吡咯烷-1-基)苯甲酰基)-N-甲基肼-1-甲酰胺(2.6g，6.39mmol，1.0当量)。反应液在氮气保护下100℃条件反应5小时。反应完全后，反应液降至室温，倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1.6g，产率91％)。
步骤F：5-(3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮
在0℃下，向5-(3-(3-(羟甲基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮(1.6g，5.83mmol，1.0当量)和咪唑(0.79g，11.67mmol，2.0当量)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入叔丁基二甲基氯硅烷(1.05g，6.99mmol，1.2当量)。反应液在氮气保护条件下室温反应3小时。反应完全后，反应液倒入水中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1.5g，产率66％)。
步骤G：3-(3-(-3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在0℃下，向5-(3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮(1.5g，3.86mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入60％氢化钠(0.46g，11.58mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护条件下0℃反应半小时。然后加入3-溴哌啶-2,6-二酮(1.48g，7.72mmol，2.0当量)，反应液在氮气保护条件下 室温反应4小时。反应完全后，反应液倒入氯化铵溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，0.8g，产率41％)。
步骤H：3-(-3-(3-(羟甲基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向3-(3-(-3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(800mg，1.60mmol，1.0当量)的四氢呋喃(5mL)溶液中加入1M四丁基氟化铵(3.2mL，3.2mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护条件下室温反应3小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经薄层色谱纯化纯化得到标题化合物(白色固体，0.26g，产率42％)。
步骤I：1-(3-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)吡咯烷-3-甲醛
在室温下，向3-(-3-(3-(羟甲基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(100mg，0.26mmol，1.0当量)的二氯甲烷(4mL)溶液中加入戴斯-马丁氧化剂(220mg，0.52mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护条件下室温反应3小时。反应完全后，反应液过滤，减压浓缩。残余物经薄层色谱纯化纯化得到标题化合物(白色固体，60mg，产率60％)。
步骤J:N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((1-(3-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)吡咯烷-3-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基]-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-(3-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)吡咯烷-3-甲醛(60mg，0.16mmol，1.0当量)和N-(3-氨基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(58mg，0.12mmol，0.8当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2mL)溶液中加入乙酸(3mg，0.05mmol，0.3当量)。反应液在室温条件下反应半小时。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(66mg，0.31mmol，2.0当量)，反应液在室温条件下搅拌3小时。反应完全后，反应液经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，6.1mg，产率5％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.04(s,1H),8.89(s,1H),8.48-8.37(m,2H),8.21(d,J＝7.6Hz,1H),7.95(s,1H),7.80(d,J＝8.8Hz,2H),7.71(s,1H),7.31(t,J＝8.0Hz,1H),7.10(d,J＝9.2Hz,2H),6.86(d,J＝7.6Hz,1H),6.71(d,J＝8.0Hz,2H),5.21(dd,J＝12.8,5.3Hz, 1H),3.41(s,3H),3.31(s,3H),3.26(d,J＝10.8Hz,5H),3.08-3.02(m,1H),2.95-2.76(m,2H),2.62(d,J＝17.2Hz,5H),2.49-2.41(m,2H),2.18-2.07(m,2H),1.84-1.71(m,1H).LC-MS(ESI):m/z 827[M+H]+.
制备例271.化合物A187的合成
步骤A：4-(3-(羟甲基)吡咯烷-1-基)苯甲酸乙酯
在室温下，向4-溴苯甲酸乙酯(5.0g，21.83mmol，1.0当量)和吡咯烷-3-基甲醇(2.65g，26.19mmol，1.2当量)的1,4-二氧六环(50mL)溶液中加入碳酸铯(21.34g，65.48mmol，3.0当量)、BINAP(1.36g，2.18mmol，0.1当量)和Pd2(dba)3(1.0g，1.09mmol，0.05当量)。反应混合物在氮气保护下100℃搅拌反应16小时。反应完全后，冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，3.0g，产率55％)。
步骤B：4-(3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)吡咯烷-1-基)苯甲酸乙酯
在0℃下，向4-(3-(羟甲基)吡咯烷-1-基)苯甲酸乙酯(3.0g，12.03mmol，1.0当量)和咪唑(2.05g，30.08mmol，2.5当量)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入叔丁基二甲基氯硅烷(2.18g，14.44mmol，1.2当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应3小时。反应完全后，反应液用水淬灭，二氯甲烷萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，3.0g，产率68％)。
步骤C：4-(3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)吡咯烷-1-基)苯甲酰肼
在0℃下，向4-(3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)吡咯烷-1-基)苯甲酸乙酯(3.0g，8.25mmo,1.0当量)的乙醇(15mL)中加入80％水合肼(15mL)。反应液在氮气保护下80℃搅拌反应16小时。反应完毕，反应液冷却至室温，用水淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，2.5g，产率86％)。
步骤D：2-(4-(3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)吡咯烷-1-基)苯甲酰基)-N-甲基 肼-1-甲酰胺
在室温下，向4-(3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)吡咯烷-1-基)苯甲酰肼(2.5g，7.15mmol，1.0当量)和2,5-二氧代吡咯烷-1-基甲基氨基甲酸酯(1.23g，7.15mmol，1.0当量)的乙腈(25mL)溶液中加入DIEA(1.84g，14.3mmol，2.0当量)。反应混合物在氮气保护下室温搅拌反应16小时。反应完全后，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品标题化合物(米白色固体，2.6g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：5-(4-(3-(羟甲基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮
在0℃下，向2-(4-(3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)吡咯烷-1-基)苯甲酰基)-N-甲基肼-1-甲酰胺(2.6g，6.39mmol，1.0当量)中加入氢氧化钠水溶液(26.15mL，15.97mmol，2.5当量)。反应液在氮气保护下100℃搅拌反应5小时。反应完毕，反应液冷却至室温，用水淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1.6g，产率91％)。
步骤F：5-(4-(3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮
在0℃下，向5-(4-(3-(羟甲基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮(1.6g，5.83mmol，1.0当量)和咪唑(0.79g，11.67mmol，2.0当量)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入叔丁基二甲基氯硅烷(1.05g，6.99mmol，1.2当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应3小时。反应完全后，反应液用水淬灭，二氯甲烷萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1.5g，产率66％)。
步骤G：3-(3-(4-(3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在0℃氮气保护下，向5-(4-(3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮(1.5g，3.86mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶液中分批加入60重量％氢化钠(0.46g，11.58mmol，3.0当量)。反应混合物室温下搅拌0.5小时。向上述反应液中继续加入3-溴哌啶-2,6-二酮(1.48g，7.72mmol，2.0当量)。反应混合物在氮气保护下室温搅拌反应4小时。反应完全后，用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，0.8g，产率41％)。
步骤H：3-(3-(4-(3-(羟甲基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在0℃下，向3-(3-(4-(3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(800mg，1.60mmol，1.0当量)的四氢呋喃(5mL)中加入1N四丁基氟化铵四氢呋喃溶液(3.2mL，3.2mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应3小时。反应完毕，反应液冷却至室温，用水淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经薄层色谱纯化得到标题化合物(白色固体，260mg，产率42％)。
步骤I：1-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)吡咯烷-3-甲醛
在0℃下，向3-(3-(4-(3-(羟甲基)吡咯烷-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(100mg，0.26mmol，1.0当量)的二氯甲烷(4mL)溶液中加入戴斯-马丁氧化剂(220mg，0.52mmol，2.0当量)。反应混合物室温下搅拌3小时。反应完全后，反应液过滤，滤液加压浓缩。残余物经薄层色谱纯化得到标题化合物(白色固体，60mg，产率60％)。
步骤J：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((1-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)吡咯烷-3-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基]-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)吡咯烷-3-甲醛(60mg，0.16mmol，1.0当量)和N-(3-氨基-1-((1r,4r)-4-(哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(57.5mg，0.12mmol，0.8当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2mL)溶液中加入乙酸(2.81mg，0.05mmol，0.3当量)。反应混合液在室温搅拌反应0.5小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(66mg，0.31mmol，2.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，6.1mg，产率5％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.02(s,1H),8.88(s,1H),8.46-8.38(m,2H),8.21(d,J＝7.2Hz,1H),7.95(s,1H),7.79(d,J＝8.8Hz,2H),7.70(s,1H),7.49(d,J＝8.4Hz,2H),7.09(d,J＝9.2Hz,2H),6.63(d,J＝8.8Hz,2H),5.17(dd,J＝12.8,5.6Hz,1H),3.26-3.24(m,10H),3.08-3.05(m,1H),2.91-2.84(m,2H),2.67-2.56(m,4H),2.44-2.42(m,2H),2.33(s,1H),2.12-1.99(m,3H),1.79-1.77(m,1H),1.46(s,1H),0.87-0.84 (m,1H).LC-MS(ESI):m/z 827[M+H]+.
制备例272.化合物A188的合成
步骤A：3-(4-(羟甲基)哌啶-1-基)苯甲酸乙酯
在室温下，向4-溴苯甲酸乙酯(3.0g，13.09mmol，1.0当量)和哌啶-4-基甲醇(2.3g，19.65mmol，1.5当量)的1,4-二氧六环(50mL)溶液中加入碳酸铯(12.8g，39.29mmol，3.0当量)、S-Phos(1.1g，2.62mmol，0.2当量)和Pd(OAc)2(0.3g，1.31mmol，0.1当量)。反应混合物在氮气保护下100℃搅拌反应16小时。反应完全后，冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，3.0g，产率43％)。
步骤B：3-(4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-基)苯甲酸乙酯
在0℃下，向3-(4-(羟甲基)哌啶-1-基)苯甲酸乙酯(1.5g，5.70mmol，1.0当量)和咪唑(0.8g，11.39mmol，2.0当量)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入叔丁基二甲基氯硅烷(1.3g，8.55mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应3小时。反应完全后，反应液用水淬灭，二氯甲烷萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1.7g，产率77％)。
步骤C：3-(4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-基)苯甲酰肼
在0℃下，向3-(4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-基)苯甲酸乙酯(1.7g，4.37mmol，1.0当量)的乙醇(15mL)中加入80％水合肼(15mL)。反应液在氮气保护下80℃搅拌反应16小时。反应完毕，反应液冷却至室温，用水淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱 纯化得到标题化合物(白色固体，1.1g，产率68％)。
步骤D：2-(3-(4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-基)苯甲酰基)-N-甲基肼-1-甲酰胺
在室温下，向3-(4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-基)苯甲酰肼(1.1g，2.89mmol，1.0当量)和2,5-二氧代吡咯烷-1-基甲基氨基甲酸酯(0.8g，4.33mmol，1.5当量)的乙腈(25mL)溶液中加入DIEA(1.1g，8.66mmol，3.0当量)。反应混合物在氮气保护下室温搅拌反应16小时。反应完全后，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品标题化合物(米白色固体，1.1g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：5-(3-(4-(羟甲基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮
在0℃下，向2-(3-(4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-基)苯甲酰基)-N-甲基肼-1-甲酰胺(1.1g，2.62mmol，1.0当量)中加入氢氧化钠水溶液(13.1mL，7.85mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下100℃搅拌反应5小时。反应完毕，反应液冷却至室温，用水淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，0.6g，产率80％)。
步骤F：5-(3-(4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮
在0℃下，向5-(3-(4-(羟甲基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮(0.6g，2.08mmol，1.0当量)和咪唑(0.29g，4.16mmol，2.0当量)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入叔丁基二甲基氯硅烷(0.5g，3.12mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应3小时。反应完全后，反应液用水淬灭，二氯甲烷萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，0.6g，产率72％)。
步骤G：3-(3-(4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在0℃氮气保护下，向5-(3-(4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮(0.6g，1.37mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中分批加入60重量％氢化钠(150mg，4.10mmol，3.0当量)。反应混合物室温下搅拌1小时。向上述反应液中继续加入3-溴哌啶-2,6-二酮(1.1g，5.46mmol，4.0当量)。反应混合物在氮气保护下室温搅拌反应4小时。反应完全后，用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯 萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，530mg，产率76％)。
步骤H：3-(3-(4-(羟甲基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在0℃下，向3-(3-(4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(480mg，0.93mmol，1.0当量)的四氢呋喃(5mL)中加入1N四丁基氟化铵四氢呋喃溶液(1.87mL，1.87mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应3小时。反应完毕，反应液冷却至室温，用水淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，240mg，产率64％)。
步骤I：1-(3-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)哌啶-4-甲醛
在0℃下，向3-(3-(4-(羟甲基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(120mg，0.30mmol，1.0当量)的二氯甲烷(4mL)溶液中加入戴斯-马丁氧化剂(178.38mg，0.42mmol，1.5当量)。反应混合物室温下搅拌3小时。反应完全后，反应液过滤，滤液加压浓缩。残余物经薄层色谱纯化得到标题化合物(白色固体，64mg，产率54％)。
步骤J：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((1-(3-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基]-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-(3-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)哌啶-4-甲醛(60mg，0.15mmol，1.0当量)和N-(3-氨基-1-((1r,4r)-4-(哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(55.5mg，0.12mmol，0.8当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2mL)溶液中加入乙酸(2.7mg，0.05mmol，0.3当量)。反应混合液在室温搅拌反应0.5小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(95.6mg，0.45mmol，3.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应3小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，16.2mg，产率13％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.04(s,1H),8.88(s,1H),8.52-8.33(m,2H),8.21(d,J＝8.0Hz,1H),8.19-8.18(m,1H),7.95(s,1H),7.79(d,J＝9.2Hz,2H),7.71(s,1H),7.35(t,J＝8.0Hz,1H),7.10(dd,J＝17.2,8.4Hz,4H),7.01(d,J＝ 7.6Hz,1H),5.22(dd,J＝12.8,5.6Hz,1H),3.77(d,J＝12.4Hz,2H),3.34(s,4H),3.22(s,4H),2.94-2.83(m,1H),2.74(t,J＝11.2Hz,2H),2.65-2.58(m,1H),2.52(s,3H),2.49-2.46(m,1H),2.23(d,J＝6.8Hz,2H),2.15-2.07(m,1H),1.84-1.75(m,3H),1.27-1.19(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 841[M+H]+.
制备例273.化合物A189的合成
步骤A：4-(4-(羟甲基)哌啶-1-基)苯甲酸乙酯
在室温下，向4-溴苯甲酸乙酯(6.0g，26.19mmol，1.0当量)和哌啶-4-基甲醇(4.5g，39.29mmol，1.5当量)的1,4-二氧六环(50mL)溶液中加入碳酸铯(25.6g，78.58mmol，3.0当量)、S-Phos(2.15g，5.24mmol，0.2当量)和Pd(OAc)2(0.6g，2.62mmol，0.1当量)。反应合物在氮气保护下100℃搅拌反应16小时。反应完全后，冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，3.0g，产率43％)。
步骤B：4-(4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-基)苯甲酸乙酯
在0℃下，向4-(4-(羟甲基)哌啶-1-基)苯甲酸乙酯(3.0g，11.39mmol，1.0当量)和咪唑(1.6g，22.78mmol，2.0当量)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入叔丁基二甲基氯硅烷(2.6g，17.09mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应3小时。反应完全后，反应液用水淬灭，二氯甲烷萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，3.3g，产率77％)。
步骤C：4-(4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-基)苯甲酰肼
在0℃下，向4-(4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-基)苯甲酸乙酯(3.3g，8.74mmo,1.0当量)的乙醇(15mL)中加入80％水合肼(15mL)。反应液在氮气保护下80℃搅拌反应16小时。反应完毕，反应液冷却至室温，用水淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯 化得到标题化合物(白色固体，2.1g，产率66％)。
步骤D：2-(4-(4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-基)苯甲酰基)-N-甲基肼-1-甲酰胺
在室温下，向4-(4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-基)苯甲酰肼(2.1g，5.78mmol，1.0当量)和2,5-二氧代吡咯烷-1-基甲基氨基甲酸酯(1.5g，8.66mmol，1.5当量)的乙腈(25mL)溶液中加入DIPEA(2.2g，17.33mmol，3.0当量)。反应混合物在氮气保护下室温搅拌反应16小时。反应完全后，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品标题化合物(米白色固体，2.2g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：5-(4-(4-(羟甲基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮
在0℃下，向2-(4-(4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-基)苯甲酰基)-N-甲基肼-1-甲酰胺(2.2g，5.23mmol，1.0当量)中加入氢氧化钠水溶液(26.15mL，15.69mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下100℃搅拌反应5小时。反应完毕，反应液冷却至室温，用水淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1.2g，产率80％)。
步骤F：5-(4-(4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮
在0℃下，向5-(4-(4-(羟甲基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮(1.2g，4.16mmol，1.0当量)和咪唑(0.57g，8.32mmol，2.0当量)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入叔丁基二甲基氯硅烷(0.9g，6.24mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应3小时。反应完全后，反应液用水淬灭，二氯甲烷萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1.2g，产率72％)。
步骤G：3-(3-(4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在0℃氮气保护下，向5-(4-(4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮(1.1g，2.73mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中分批加入60重量％氢化钠(0.3g，8.20mmol，3.0当量)。反应混合物室温下搅拌0.5小时。向上述反应液中继续加入3-溴哌啶-2,6-二酮(1.1g，5.46mmol，2.0当量)。反应混合物在氮气保护下室温搅拌反应4小时。反应完全后，用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯 萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，530mg，产率38％)。
步骤H：3-(3-(4-(4-(羟甲基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在0℃下，向3-(3-(4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(480mg，0.93mmol，1.0当量)的四氢呋喃(5mL)中加入1N四丁基氟化铵四氢呋喃溶液(1.87mL，1.87mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应3小时。反应完毕，反应液冷却至室温，用水淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经薄层色谱纯化得到标题化合物(白色固体，240mg，产率64％)。
步骤I：1-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)哌啶-4-甲醛
在0℃下，向3-(3-(4-(4-(羟甲基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(120mg，0.30mmol，1.0当量)的二氯甲烷(4mL)溶液中加入戴斯-马丁氧化剂(178.38mg，0.42mmol，1.5当量)。反应混合物室温下搅拌3小时。反应完全后，反应液过滤，滤液加压浓缩。残余物经薄层色谱纯化得到标题化合物(白色固体，64mg，产率54％)。
步骤J：叔丁基N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((1-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基]-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)哌啶-4-甲醛(60mg，0.15mmol，1.0当量)和N-(3-氨基-1-((1r,4r)-4-(哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(55.5mg，0.12mmol，0.8当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2mL)溶液中加入乙酸(2.7mg，0.05mmol，0.3当量)。反应混合液在室温搅拌反应0.5小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(95.6mg，0.45mmol，3.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，24.8mg，产率20％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.02(s,1H),8.88(s,1H),8.47-8.37(m,2H),8.24-8.18(m,1H),8.14(s,1H),7.95(s,1H),7.79(d,J＝9.2Hz,2H),7.71(s,1H),7.51(d,J＝8.8Hz,2H),7.06(dd,J＝19.6,9.2Hz,4H),5.18(dd,J＝12.6,5.2Hz, 1H),3.85(d,J＝12.4Hz,2H),3.31(s,4H),3.23(s,4H),2.91-2.75(m,3H),2.65-2.59(m,1H),2.55-2.52(m,3H),2.48-2.44(m,1H),2.27-2.20(m,2H),2.14-2.07(m,1H),1.87-1.76(m,3H),1.26-1.16(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 841[M+H]+.
制备例274.化合物A190的合成
步骤A：3-(4-(2-羟乙基)哌啶-1-基)苯甲酸乙酯
在室温下，向3-溴苯甲酸乙酯(10.0g，43.16mmol，1.0当量)和2-(吡咯烷-3-基)乙烷-1-醇(6.76g，52.38mmol，1.2当量)的二甲基亚砜(100mL)溶液中加入碳酸钾(18.10g，130.96mmol，3.0当量)、L-脯氨酸(0.50g，4.36mmol，0.1当量)和碘化亚铜(1.66g，8.74mmol，0.2当量)。反应液在氮气保护条件下100℃反应12小时。反应完全后，反应液降至室温，倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，4.2g，产率35％)。
步骤B：3-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌啶-1-基)苯甲酸乙酯
在0℃下，向3-(4-(2-羟乙基)哌啶-1-基)苯甲酸乙酯(3.8g，13.70mmol，1.0当量)和咪唑(1.87g，27.40mmol，2.0当量)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入叔丁基二甲基氯硅烷(3.1g，20.55mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护条件下室温反应3小时。反应完全后，反应液倒入水中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，3.3g，产率62％)。
步骤C：3-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌啶-1-基)苯甲酰肼
在室温下，向3-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌啶-1-基)苯甲酸乙酯(3.3g，8.43mmol，1.0当量)的乙醇(15mL)溶液中加入80％水合肼(15mL)。反应液在氮气保护条件下80℃反应16小时。反应完全后，反应液降至室温，倒入水中，乙酸乙酯萃取三次， 混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，2.6g，产率82％)。
步骤D：2-(3-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌啶-1-基)苯甲酰基)-N-甲基肼-1-甲酰胺
在室温下，向3-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌啶-1-基)苯甲酰肼(2.6g，6.89mmol，1.0当量)和2,5-二氧代吡咯烷-1-基甲基氨基甲酸酯(1.42g，8.26mmol，1.2当量)的乙腈(30mL)溶液中加入DIEA(1.78g，13.77mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护条件下室温反应16小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到标题化合物(灰白色固体，2.5g，粗品)。
步骤E：5-(3-(4-(2-羟乙基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮
在室温下，向氢氧化钠溶液(30mL，23.0mmol，4.0当量)中加入2-(3-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌啶-1-基)苯甲酰基)-N-甲基肼-1-甲酰胺(2.5g，5.75mmol，1.0当量)。反应液在氮气保护下100℃条件反应5小时。反应完全后，反应液降至室温，倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1.6g，产率92％)。
步骤F：5-(3-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮
在0℃下，向5-(3-(4-(2-羟乙基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮(1.6g，5.29mmol，1.0当量)和咪唑(1.6g，5.29mmol，1.0当量)的二氯甲烷(20mL)溶液中加入叔丁基二甲基氯硅烷(0.96g，6.35mmol，1.2当量)。反应液在氮气保护条件下室温反应3小时。反应完全后，反应液倒入水中，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1.2g，产率54％)。
步骤G：3-(3-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在0℃下，向5-(3-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮(600mg，1.44mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入60％氢化钠(173mg，4.32mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护条件下0℃反应半小时。然后加入3-溴哌啶-2,6-二酮(553mg，2.88mmol，2.0当量)，反应液在氮气保 护条件下室温反应4小时。反应完全后，反应液倒入氯化铵溶液中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，0.5g，产率65％)。
步骤H：3-(3-(4-(2-羟乙基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向3-(3-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(500mg，0.95mmol，1.0当量)的四氢呋喃(10mL)溶液中加入1M四丁基氟化铵(1.9mL，1.9mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护条件下室温反应3小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经薄层色谱纯化纯化得到标题化合物(白色固体，0.26g，产率66％)。
步骤I：2-(1-(3-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)哌啶-4-基)乙醛
在室温下，向3-(3-(4-(2-羟乙基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(150mg，0.36mmol，1.0当量)的二氯甲烷(4mL)溶液中加入戴斯-马丁氧化剂(307mg，0.73mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护条件下室温反应3小时。反应完全后，反应液过滤，减压浓缩。残余物经薄层色谱纯化纯化得到标题化合物(黄色固体，100mg，产率67％)。
步骤J：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(2-(3-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-基)苯基]-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向2-(1-(3-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)哌啶-4-基)乙醛(100mg，0.24mmol，1.0当量)和N-(3-氨基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(89mg，0.19mmol，0.8当量)的N,N-二甲基甲酰胺(30mL)溶液中加入乙酸(4mg，0.07mmol，0.3当量)。反应液在室温条件下反应半小时。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(103mg，0.49mmol，2.0当量)，反应液在室温条件下搅拌1小时。反应完全后，反应液经HPLC纯化得到标题化合物(灰白色固体，75.3mg，产率36％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.05(s,1H),8.88(s,1H),8.48-8.36(m,2H),8.21(d,J＝7.6Hz,1H),7.95(s,1H),7.79(d,J＝8.8Hz,2H),7.71(s,1H),7.34(t,J＝8.0Hz,1H),7.09(dd,J＝15.6,8.8Hz,4H),7.01(d,J＝7.6Hz,1H),5.22(dd,J＝ 12.8,5.2Hz,1H),3.74(d,J＝12.4Hz,2H),3.31(s,3H),3.21(s,4H),2.94-2.83(m,1H),2.67(dt,J＝17.6,12.8Hz,3H),2.54(s,4H),2.47(d,J＝4.4Hz,1H),2.41(d,J＝7.2Hz,2H),2.17-2.07(m,1H),1.78(d,J＝14.0Hz,2H),1.46(s,3H),1.27(dd,J＝20.4,9.6Hz,2H).LC-MS(ESI):m/z 855[M+H]+.
制备例275.化合物A191的合成
步骤A：4-(4-(2-羟乙基)哌啶-1-基)苯甲酸乙酯
在室温下，向4-氟苯甲酸乙酯(5.0g，29.73mmol，1.0当量)和2-(哌啶-4-基)乙烷-1-醇(4.61g，35.68mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(50mL)溶液中加入碳酸钾(17.1g，124mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下110℃搅拌反应16小时。反应完全后，反应液冷却至室温，用饱和氯化铵溶液稀释，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，3.8g，产率46％)。
步骤B：4-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌啶-1-基)苯甲酸乙酯
在0℃下，向4-(4-(2-羟乙基)哌啶-1-基)苯甲酸乙酯(3.8g，13.70mmol，1.0当量)和咪唑(1.87g，27.40mmol，2.0当量)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入叔丁基二甲基氯硅烷(3.1g，20.55mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应3小时。反应完全后，反应液用水淬灭，二氯甲烷萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，3.3g，产率61％)。
步骤C：4-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌啶-1-基)苯甲酰肼
在0℃下，向4-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌啶-1-基)苯甲酸乙酯(3.3g，8.43mmol，1.0当量)的乙醇(15mL)中加入80％水合肼(15mL)。反应液在氮气保护下80℃搅拌反应16小时。反应完毕，反应液冷却至室温，用水淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合 有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，2.6g，产率82％)。
步骤D：2-(4-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌啶-1-基)苯甲酰基)-N-甲基肼-1-甲酰胺
在室温下，向4-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌啶-1-基)苯甲酰肼(2.6g，6.89mmol，1.0当量)和2,5-二氧代吡咯烷-1-基甲基氨基甲酸酯(1.42g，8.26mmol，1.2当量)的乙腈(30mL)溶液中加入DIPEA(1.78g，13.77mmol，2.0当量)。反应混合物在氮气保护下室温搅拌反应16小时。反应完全后，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品标题化合物(米白色固体，2.5g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：5-(4-(4-(2-羟乙基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮
在0℃下，向2-(4-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌啶-1-基)苯甲酰基)-N-甲基肼-1-甲酰胺(2.5g，5.75mmol，1.0当量)中加入氢氧化钠水溶液(30mL，23.0mmol，4.0当量)。反应液在氮气保护下100℃搅拌反应5小时。反应完毕，反应液冷却至室温，用水淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1.6g，产率92％)。
步骤F：5-(4-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮
在0℃下，向5-(4-(4-(2-羟乙基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮(1.6g，5.29mmol，1.0当量)和咪唑(0.72g，10.58mmol，2.0当量)的二氯甲烷(20mL)溶液中加入叔丁基二甲基氯硅烷(0.96g，6.35mmol，1.2当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应3小时。反应完全后，反应液用水淬灭，二氯甲烷萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1.2g，产率54％)。
步骤G：3-(3-(4-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在0℃氮气保护下，向5-(4-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮(600mg，1.44mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中分批加入60重量％氢化钠(173mg，4.32mmol，3.0当量)。反应混合物室温下搅拌0.5小时。向上述反应液中继续加入3-溴哌啶-2,6-二酮(553mg，2.88mmol，2.0 当量)。反应混合物在氮气保护下室温搅拌反应4小时。反应完全后，用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，500mg，产率65％)。
步骤H：3-(3-(4-(4-(2-羟乙基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在0℃下，向3-(3-(4-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(500mg，0.95mmol，1.0当量)的四氢呋喃(5mL)中加入1N四丁基氟化铵四氢呋喃溶液(1.9mL，1.9mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应3小时。反应完毕，反应液冷却至室温，用水淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经薄层色谱纯化得到标题化合物(白色固体，260mg，产率66％)。
步骤I：2-(1-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)哌啶-4-基)乙醛
在0℃下，向3-(3-(4-(4-(2-羟乙基)哌啶-1-基)苯基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(150mg，0.36mmol，1.0当量)的二氯甲烷(4mL)溶液中加入戴斯-马丁氧化剂(307mg，0.73mmol，2.0当量)。反应混合物室温下搅拌3小时。反应完全后，反应液过滤，滤液加压浓缩。残余物经薄层色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，100mg，产率67％)。
步骤J：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(2-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-基)苯基]-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向2-(1-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)哌啶-4-基)乙醛(100mg，0.24mmol，1.0当量)和N-(3-氨基-1-((1r,4r)-4-(哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(89.3mg，0.19mmol，0.8当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2mL)溶液中加入乙酸(4.38mg，0.07mmol，0.3当量)。反应混合液在室温搅拌反应0.5小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(103mg，0.49mmol，2.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应3小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，75.3mg，产率36％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.02(s,1H),8.88(s,1H),8.46-8.37(m,2H),8.21(dd,J＝7.6,1.2Hz,1H),7.95(s,1H),7.79(d,J＝8.8Hz, 2H),7.71(s,1H),7.50(d,J＝8.8Hz,2H),7.05(dd,J＝20.0,9.2Hz,4H),5.18(dd,J＝12.4,5.2Hz,1H),3.84(d,J＝12.8Hz,2H),3.31(s,6H),3.21(s,4H),2.89-2.83(m,1H),2.79-2.73(m,2H),2.64-2.51(m,4H),2.41-2.37(m,2H),2.12-2.07(m,1H),1.80-1.77(m,2H),1.48-1.44(m,2H),1.29-1.23(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 855[M+H]+.
制备例276.化合物A192的合成
步骤A：(1-(4-硝基苯基)哌啶-4-基)甲醇
在室温下，向4-氟-1-硝基苯(1.5g，10.6mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(50mL)溶液中加入哌啶-4-基甲醇(1.84g，15.9mmol，1.5当量)和碳酸钾(2.94g，21.3mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下60℃搅拌反应15小时。反应完全后，反应液冷却至室温，用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，2.5g，产率99％)。
步骤B：4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-1-(4-硝基苯基)哌啶
在室温下，向(1-(4-硝基苯基)哌啶-4-基)甲醇(2.50g，9.98mmol，1.0当量)的二氯甲烷(50mL)溶液中加入咪唑(1.0g，14.98mmol，1.5当量)和叔丁基二甲基氯化硅(2.26g，14.98mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应15小时。反应完全后，用二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，2.1g，产率58％)。
步骤C：4-(4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-基)苯胺
在室温下，向4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-1-(4-硝基苯基)哌啶(2.1g，5.99mmol，1.0当量)的甲醇(50mL)溶液中加入10％钯碳(1.0g，9.39mmol，1.5当量)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌18小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状物，1.6g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤D：(4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-基)苯基)氨基甲酸甲酯
在0℃下，向4-(4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-基)苯胺(1.6g，4.99 mmol，1.0当量)的二氯甲烷(30mL)溶液中加入三乙胺(2.1mL，14.97mmol，3.0当量)和氯甲酸甲酯(0.5mL，5.99mmol，1.2当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应3小时。反应完全后，用二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.1g，产率58％)。
步骤E：1-(4-(4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在0℃下，向(4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-基)苯基)氨基甲酸甲酯(1.1g，2.91mmol，1.0当量)的四氢呋喃(50mL)溶液中加入叔丁醇钾(0.36g，3.20mmol，1.1当量)和丙烯酰胺(0.41g，5.81mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下60℃搅拌反应3小时。反应完全后，反应液冷却至室温，倒入冰乙酸溶液中，乙酸乙酯萃取三次，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(米白色固体，220mg，产率18％)。
步骤F：1-(4-(4-(羟甲基)哌啶-1-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在0℃下，向1-(4-(4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌啶-1-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(220mg，0.53mmol，1.0当量)中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(2mL，8.0mmol，15.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应6小时。反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，100mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤G：1-(4-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)哌啶-4-甲醛
在室温下，向1-(4-(4-(羟甲基)哌啶-1-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(100mg，0.33mmol，1.0当量)的二甲基亚砜(5.0mL)溶液中加入IBX(166mg，0.59mmol，1.5当量)。反应液在室温搅拌反应6小时。反应完全后,用水稀释，反应液用乙酸乙酯萃取，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，60mg，产率60％)。
步骤H：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((1-(4-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向N-(3-氨基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺盐酸盐(96.1mg，0.21mmol，1.05当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入三乙胺(0.1mL)并搅拌10分钟，再加入乙酸(0.2mL)和1-(4-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)哌啶-4-甲醛(60mg，0.20mmol，1.0当量)。反应混合液在室温搅拌反应5小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(18.8mg，0.30mmol，1.5当量)。反应混合物在室温下搅 拌反应2小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，27mg，产率18％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.25(s,1H),8.88(s,1H),8.53-8.35(m,2H),8.21(d,J＝7.7Hz,1H),7.95(s,1H),7.79(d,J＝9.1Hz,2H),7.71(s,1H),7.11(dd,J＝20.7,9.1Hz,4H),6.93(d,J＝9.0Hz,2H),3.69(t,J＝6.7Hz,4H),3.35(s,2H),3.30-3.29(m,2H),3.23(s,4H),2.68(t,J＝6.7Hz,4H),2.24(d,J＝7.0Hz,2H),1.82(d,J＝13.2Hz,2H),1.74(s,1H),1.24(s,2H).LC-MS(ESI):m/z 745[M+H]+.
制备例277.化合物A193的合成
步骤A：2-(1-(4-硝基苯基)哌啶-4-基)乙烷-1-醇
在室温下，向4-氟-1-硝基苯(3g，21.3mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(50.0mL)溶液中加入2-(哌啶-4-基)乙烷-1-醇(3.3g，25.2mmol，1.2当量)和碳酸钾(5.9g，42.5mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下60℃搅拌反应15小时。反应完全后，反应液冷却至室温，用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，3.9g，产率73％)。
步骤B：4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-1-(4-硝基苯基)哌啶
在室温下，向2-(1-(4-硝基苯基)哌啶-4-基)乙烷-1-醇(3g，12.0mmol，1.0当量)的二氯甲烷(50mL)溶液中加入咪唑(1.2g，18.0mmol，1.5当量)和叔丁基二甲基氯化硅(2.7g，18.0mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应15小时。反应完全后，用二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，4.0g，产率92％)。
步骤C：4-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌啶-1-基)苯胺
在室温下，向4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-1-(4-硝基苯基)哌啶(3.8g，10.4mmol，1.0当量)的乙醇(50mL)溶液中加入10％钯碳(200mg)。反应液在氢气球保护下抽换 气三次并且在氢气下室温搅拌2小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，2.5g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤D：(4-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌啶-1-基)苯基)氨基甲酸甲酯
在0℃下，向4-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌啶-1-基)苯胺(5g，14.9mmol，1.0当量)的二氯甲烷(30mL)溶液中加入三乙胺(6.2mL，44.8mmol，3.0当量)和氯甲酸甲酯(1.4mL，17.9mmol，1.2当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应3小时。反应完全后，用二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，2.5g，产率43％)。
步骤E：1-(4-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌啶-1-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在0℃下，向(4-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌啶-1-基)苯基)氨基甲酸甲酯(1.3g，3.1mmol，1.0当量)的无水四氢呋喃(50mL)溶液中加入叔丁醇钾(0.69g，6.1mmol，2.0当量)和丙烯酰胺(0.33g，4.6mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下60℃搅拌反应3小时。反应完全后，反应液冷却至室温，倒入冰乙酸溶液中，乙酸乙酯萃取三次，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(米白色固体，400mg，产率30％)。
步骤F：1-(4-(4-(2-羟乙基)哌啶-1-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在0℃下，向1-(4-(4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌啶-1-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(400mg，0.93mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(1mL)溶液中加入4M HCl1,4-二氧六环溶液(5mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应6小时。反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，200mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤G：2-(1-(4-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)哌啶-4-基)乙醛
在室温下，向1-(4-(4-(2-羟乙基)哌啶-1-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(300mg，0.9mmol，1.0当量)的二甲基亚砜(5.0mL)溶液中加入IBX(529.4mg，1.8mmol，2.0当量)。反应液在室温搅拌反应3小时。反应完全后,用水稀释，反应液用乙酸乙酯萃取，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经反相柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，150mg，产率50％)。
步骤H：N-(3-氨基-1-(4-(2-(1-(4-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-基)苯基]-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向N-(3-氨基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺 盐酸盐(98.3mg，0.2mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入三乙胺(0.1mL)并搅拌10分钟，再加入乙酸(0.2mL)和2-(1-(4-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)哌啶-4-基)乙醛(75mg，0.2mmol，1.0当量)。反应混合液在室温搅拌反应15小时。向上述反应液中继续加入氰基硼氢化钠(100.3mg，0.5mmol，2.5当量)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，16.2mg，产率9％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.25(s,1H),8.88(s,1H),8.42(d,J＝17.2Hz,2H),8.21(d,J＝7.6Hz,1H),7.95(s,1H),7.79(d,J＝9.2Hz,2H),7.71(s,1H),7.13(d,J＝8.8Hz,2H),7.08(d,J＝9.2Hz,2H),6.92(d,J＝9.2Hz,2H),3.73-3.61(m,4H),3.23-3.18(m,4H),2.71-2.60(m,4H),2.55-2.51(m,4H),2.43-2.35(m,2H),1.82-1.71(m,2H),1.52-1.41(m,3H),1.31-1.21(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 759[M+H]+.
制备例278.化合物A194的合成
步骤A：4-(2,2-二甲氧基乙基)-1-(2-氟-4-硝基苯基)哌啶
在室温下，向4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶(2.5g，14.4mmol，1.0当量)和1,2-二氟-4-硝基苯(2.8g，17.3mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶液中加入碳酸钾(6g，43.2mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下80℃搅拌反应16小时。反应完全后，反应液冷却至室温，用饱和氯化铵溶液稀释，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，3.4g，产率75％)。
步骤B：4-(4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-基)-3-氟苯胺
在室温下，向4-(2,2-二甲氧基乙基)-1-(2-氟-4-硝基苯基)哌啶(1.3g，4.1mmol，1当量)的乙醇(10mL)溶液中加入10％钯碳(400mg)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌2小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状物，1g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：3-((4-(4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-基)-3-氟苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向4-(4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-基)-3-氟苯胺(1.3g，4.6mmol，1.0当量)和3-溴哌啶-2,6-二酮(1.8g，9.2mmol，2.0当量)的1,4-二氧六环(10mL)溶液中加入DIEA(1.6mL，9.2mmol，2.0当量)。反应混合物在氮气保护下80℃搅拌反应16小时。反应完全后，冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.3g，产率71％)。
步骤D：2-(1-(4-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)乙醛
在0℃下，向3-((4-(4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-基)-3-氟苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(300mg，0.7mmol，1.0当量)中加入甲酸(3mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完毕，反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状物，185mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：N-(3-羰基-1-(4-(4-(2-(4-(((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向2-(1-(4-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)乙醛(88mg，0.2mmol，1当量)和N-(3-氨基-1-((1r,4r)-4-(哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(100mg，0.2mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中加入乙酸(0.5mL，8.7mmol，44当量)。反应混合液在室温搅拌反应0.5小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(103mg，0.49mmol，2.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，30mg，产率15％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.77(s,1H),8.88(s,1H),8.47-8.37(m,2H),8.23-8.19(m,1H),7.98-7.68(m,4H),7.12-7.05(m,2H),6.86-6.79(m,1H),6.53-6.46(m,1H),6.43-6.38(m,1H),5.82-5.73(m,1H),4.30-4.20(m,1H),3.27-3.17(m,4H),3.13-3.07(m,2H),2.79-2.64(m,2H),2.62-2.53(m,5H),2.12-2.05(m,1H),2.02-1.97(m,1H),1.90-1.81(m,1H),1.78-1.70(m,2H),1.51-1.27(m,7H).LC-MS(ESI):m/z 791[M+H]+.
制备例279.化合物A195的合成
步骤A：4-(二甲氧基甲基)-1-(2-氟-4-硝基苯基)哌啶
在室温下，向4-(二甲氧基甲基)哌啶(3.0g，18.8mmol，1.5当量)和4-(二甲氧基甲基)哌啶(2.0g，13.6mmol，1.0当量)的二甲基亚砜(20mL)溶液中加入三乙胺(3.6mL，25.2mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下90℃搅拌反应16小时。反应完全后，反应液冷却至室温，用饱和氯化铵溶液稀释，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，3.6g，产率98％)。
步骤B：4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-氟苯胺
在室温下，向4-(二甲氧基甲基)-1-(2-氟-4-硝基苯基)哌啶(3.0g，10.0mmol，1.0当量)的甲醇(10mL)和四氢呋喃(10mL)溶液中加入10％钯碳(600mg)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌2小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，2.4g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：3-((4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-氟苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-氟苯胺(2.4g，8.9mmol，1.0当量)和3-3-溴哌啶-2,6-二酮(3.4g，17.8mmol，2.0当量)的1,4-二氧六环(10mL)溶液中加入DIEA(3mL，17.8mmol，2.0当量)。反应混合物在氮气保护下80℃搅拌反应16小时。反应完全后，冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(棕色固体，400mg，产率15％)。
步骤D：1-(4-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲醛
在0℃下，向3-((4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-氟苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(400mg，1.0mmol，1.0当量)中加入甲酸(5mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完毕，反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状物，200mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((1-(4-(2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-(4-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲醛(200mg，0.6mmol，1.0当量)和N-(3-氨基-1-((1r,4r)-4-(哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(220mg，0.48mmol，0.8当量)的N,N-二甲基甲酰胺(6mL)溶液中加入乙酸(0.3mL)。反应混合液在室温搅拌反应1小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(506mg，2.4mmol，4.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，饱和碳酸氢钠 溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，50mg，产率11％).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),10.78(s,1H),8.89(s,1H),8.49-8.33(m,2H),8.27-8.17(m,1H),7.95(s,1H),7.82-7.75(m,2H),7.72(s,1H),7.08(d,J＝9.2Hz,2H),6.92-6.81(m,1H),6.55-6.39(m,2H),5.79(d,J＝7.6Hz,1H),4.34-4.20(m,1H),3.52-3.35(m,1H),3.28-3.18(m,4H),3.16-3.10(m,2H),2.78-2.69(m,1H),2.61-2.52(m,6H),2.34-2.17(m,2H),2.14-2.06(m,1H),1.93-1.83(m,1H),1.82-1.72(m,2H),1.69-1.58(m,1H),1.33-1.24(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 777[M+H]+.
制备例280.化合物A196的合成
步骤A：4-(2,2-二甲氧基乙基)-1-(3-硝基苯基)哌啶
在室温下，向1,2-二氟-4-硝基苯(1.5g，9.5mmol，1.5当量)和2-(六氢吡啶-4-基)-1,1-二甲氧基乙烷(1g，5.7mmol，1.0当量)的二甲基亚砜(10mL)溶液中加入三乙胺(1.6mL，2.0当量)。反应液在氮气保护下90℃搅拌反应16小时。反应完全后，反应液冷却至室温，用饱和氯化铵溶液稀释，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，855mg，产率51％)。
步骤B：3-(4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-基)苯胺
在室温下，向4-(2,2-二甲氧基乙基)-1-(3-硝基苯基)哌啶(850mg，2.9mmol，1.0当量)的乙醇(10mL)溶液中加入10％钯碳(200mg)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌2小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，750mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：3-((3-(4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向3-(4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-基)苯胺(220mg，0.8mmol，1.0当量)和3-3-溴哌啶-2,6-二酮(320mg，1.7mmol，2.0当量)的1,4-二氧六环(2mL)溶液中加入DIEA(0.27mL,1.6mmol，2.0当量)。反应混合物在氮气保护下80℃搅拌反应16小时。反应完 全后，冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(蓝色固体，181mg，产率58％)。
步骤D：2-(1-(3-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)苯基)哌啶-4-基)乙醛
在0℃下，向3-((3-(4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(180mg，0.5mmol，1.0当量)中加入甲酸(5mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完毕，反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状物，150mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(2-(1-(3-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)苯基)哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向2-(1-(3-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)苯基)哌啶-4-基)乙醛(180mg，0.55mmol，1.0当量)和N-(3-氨基-1-((1r,4r)-4-(哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(251mg，0.55mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(6mL)溶液中加入乙酸(0.3mL)。反应混合液在室温搅拌反应1小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(461mg，2.0mmol，4当量)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，饱和碳酸氢钠溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，18mg，产率5％).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.76(s,1H),8.88(s,1H),8.47-8.37(m,2H),8.21(d,J＝7.6Hz,1H),8.17(s,1H),7.95(s,1H),7.78(d,J＝9.0Hz,2H),7.70(s,1H),7.08(d,J＝9.1Hz,2H),6.90(t,J＝8.0Hz,1H),6.26(s,1H),6.19(d,J＝8.1Hz,1H),6.11(d,J＝7.9Hz,1H),5.59(d,J＝7.4Hz,1H),4.36-4.27(m,1H),3.59(d,J＝11.2Hz,4H),3.22(s,4H),2.73(dd,J＝11.9,5.4Hz,1H),2.57(dd,J＝15.5,11.0Hz,6H),2.39(d,J＝6.6Hz,2H),2.13-2.06(m,1H),1.86(dd,J＝12.0,3.9Hz,1H),1.74(d,J＝11.8Hz,2H),1.44(s,2H),1.25(d,J＝10.8Hz,2H).LC-MS(ESI):m/z 773[M+H]+.
制备例281.化合物A197的合成
步骤A：4-(二甲氧基甲基)-1-(3-硝基苯基)哌啶
在室温下，向4-(二甲氧基甲基)哌啶(2.7g，17.0mmol，1.2当量)和1-氟-3-硝基苯(2.0g，14.2mmol，1.0当量)的二甲基亚砜(20mL)溶液中加入DIE A(7.5mL，42.5mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下120℃搅拌反应16小时。反应完全后，反应液冷却至室温，用饱和氯化铵溶液稀释，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状物，2g，产率50％)。
步骤B：3-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)苯胺
在室温下，向4-(二甲氧基甲基)-1-(3-硝基苯基)哌啶(2g，7.1mmol，1.0当量)的乙醇(20mL)溶液中加入10％钯碳(400mg)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌2小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，1.6g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：3-((3-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向3-溴哌啶-2,6-二酮(1.5g，8.0mmol，2.0当量)和3-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)苯胺(1g，4.0mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(20mL)溶液中加入DIEA(1.4mL，8.0mmol，2.0当量)。反应混合物在氮气保护下80℃搅拌反应16小时。反应完全后，冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状物，150mg，产率82％)。
步骤D：1-(3-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)苯基)哌啶-4-甲醛
在0℃下，向3-((3-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(200mg，0.6mmol，1.0当量)中加入甲酸(5mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完毕，反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状物，150mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((1-(3-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)苯基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-(3-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)苯基)哌啶-4-甲醛(100mg，0.3mmol，1.0当量)和N-(3-氨基-1-((1r,4r)-4-(哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(116mg，0.3mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入乙酸(5滴)。反应混合液在室温搅拌反应0.5小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(267mg，1.3mmol，4.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应1.5小时。反应完全后，饱和碳酸氢钠溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物 经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，15mg，产率6％).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.75(s,1H),8.88(s,1H),8.43(dd,J＝16.8,7.7Hz,2H),8.21(dd,J＝7.6,1.2Hz,1H),7.95(s,1H),7.79(d,J＝9.0Hz,2H),7.71(s,1H),7.08(d,J＝9.1Hz,2H),6.90(t,J＝8.1Hz,1H),6.27(s,1H),6.22-6.17(m,1H),6.11(d,J＝7.8Hz,1H),5.60(d,J＝7.5Hz,1H),4.41-4.19(m,1H),3.86-3.53(m,2H),3.22(s,6H),2.80-2.58(m,6H),2.25-2.19(m,2H),2.13-2.07(m,1H),1.90-1.64(m,4H),1.26-1.16(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 759[M+H]+.
制备例282.化合物A198的合成
步骤A：7-(3-硝基苯基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向1-氟-3-硝基苯(374mg，2.7mmol，1.0当量)和2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯(500mg，2.2mmol，1.2当量)的二甲基亚砜(5mL)溶液中加入DIEA(857mg，6.6mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下120℃搅拌反应16小时。反应完全后，反应液冷却至室温，用饱和氯化铵溶液稀释，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，0.7g，产率91％)。
步骤B：7-(3-氨基苯基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向7-(3-硝基苯基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯(700mg，2.0mmol，1.0当量)的乙醇(10mL)溶液中加入10％钯碳(300mg)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌2小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，600mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：7-(3-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)苯基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向7-(3-氨基苯基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯(200mg，0.6mmol，1.0当量)和3-溴哌啶-2,6-二酮(181,0.95mmol，1.5当量)的1,4-二氧六环(2mL)溶液中加入DIEA(0.3mL，1.9mmol，3.0当量)。反应混合物在氮气保护下80℃搅拌反应12小时。反应完全后，冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，100mg，产率37％)。
步骤D：3-((3-(2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮
在0℃下，向7-(3-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)苯基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯(100mg，0.2mmol，1.0当量)的乙腈(2mL)溶液中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(1mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应16小时。反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(棕色固体，70mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((7-(3-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)苯基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向3-((3-(2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(50mg，0.2mmol，1.0当量)和N-(3-氨基-1-((1r,4r)-4-(哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(62mg，0.2mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入三乙胺(0.4mL，2.0mmol，10.0当量)。反应混合液在室温搅拌反应0.5小时。向上述反应液中继续加入乙酸(0.2mL，0.4mmol，2.0当量)和三乙酰氧基硼氢化钠(194mg，0.4mmol，2.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，饱和碳酸氢钠溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，25mg，产率21％).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.74(s,1H),9.00(s,1H),8.47-8.36(m,2H),8.25-8.18(m,1H),8.01(s,1H),7.95-7.90(m,2H),7.76(s,1H),7.53-7.46(m,2H),6.87-6.81(m,1H),5.96(d,J＝8.1Hz,1H),5.84(s,1H),5.80(d,J＝8.0Hz,1H),5.55-5.47(m,1H),4.33-4.25(m,1H),3.67(s,2H),3.29-3.18(m,4H),3.18-3.07(m,2H),2.79-2.66(m,2H),2.61-2.59(m,1H),2.56-2.53(m,1H),2.47-2.42(m,1H),2.13-2.06(m,1H),1.97-1.88(m,2H),1.83-1.78(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 716[M+H]+.
制备例283.化合物A199的合成
步骤A：7-(4-硝基苯基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向1-氟-4-硝基苯(0.94g，6.6mmol，1.5当量)和2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯(1g，4.4mmol，1.0当量)的二甲基亚砜(20mL)溶液中加入三乙胺(1.8mL，13.2mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下90℃搅拌反应3小时。反应完全后，反应液冷却 至室温，用饱和氯化铵溶液稀释，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.4g，产率91％)。
步骤B：7-(4-氨基苯基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向7-(4-硝基苯基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯(1.4g，4.0mmol，1.0当量)的乙醇(20mL)溶液中加入10％钯碳(500mg)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌2小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，1.2g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：7-(4-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)苯基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向7-(4-氨基苯基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯(1.0g，3.2mmol，1.0当量)和3-溴哌啶-2,6-二酮(1.21g，6.3mmol，2.0当量)的1,4-二氧六环(10mL)溶液中加入DIEA(0.56mL，6.3mmol，2.0当量)。反应混合物在氮气保护下80℃搅拌反应16小时。反应完全后，冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，500mg，产率37％)。
步骤D：3-((4-(2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮
在0℃下，向7-(4-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)苯基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯(500mg，1.2mmol，1.0当量)的二氯甲烷(4mL)溶液中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(1mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(蓝色固体，300mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(7-(4-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)苯基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向3-((4-(2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(300mg，0.9mmol，1.0当量)和N-(3-氨基-1-((1r,4r)-4-(哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(368mg，0.9mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入三乙胺(0.057mL，0.4mmol，2.0当量)并搅拌10分钟。加入乙酸(0.2mL，1mmol，5.0当量)，反应混合液在室温搅拌反应20分钟。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(578mg，2.7mmol，3.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应16小时。反应完全后，饱和碳酸氢钠溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(蓝色固体，16.5mg，产率2％).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.73(s,1H),9.00(s,1H),8.42(dd,J＝16.7,9.0Hz,2H),8.22(d,J ＝7.7Hz,1H),8.15(s,1H),8.02(s,1H),7.93(d,J＝8.4Hz,2H),7.77(s,1H),7.50(d,J＝8.3Hz,2H),6.62(d,J＝8.4Hz,2H),6.37(d,J＝8.4Hz,2H),5.04(s,1H),4.11(d,J＝5.8Hz,1H),3.68(s,2H),3.15(d,J＝8.3Hz,2H),3.07(d,J＝8.8Hz,2H),2.76-2.55(m,6H),2.15-2.08(m,1H),1.97-1.88(m,2H),1.86-1.77(m,3H).LC-MS(ESI):m/z 716[M+H]+.
制备例284.化合物A200的合成
步骤A：7-(2-氟-4-硝基苯基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向1,2-二氟-4-硝基苯(1.48g，9.3mmol，1.5当量)和2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯(1.4g，6.2mmol，1.0当量)的二甲基亚砜(20mL)溶液中加入碳酸钾(1.71g，12.4mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下100℃搅拌反应16小时。反应完全后，反应液冷却至室温，用饱和氯化铵溶液稀释，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.8g，产率79％)。
步骤B：7-(4-氨基-2-氟苯基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向7-(2-氟-4-硝基苯基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯(500mg，1.4mmol，1.0当量)的乙醇(10mL)溶液中加入10％钯碳(100mg)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌4小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，0.5g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：7-(4-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向7-(4-氨基-2-氟苯基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯(500mg，1.5mmol，1.0当量)和3-溴哌啶-2,6-二酮(571mg，3mmol，2.0当量)的1,4-二氧六环(5mL)溶液中加入DIPEA(0.5mL，3mmol，2.0当量)。反应混合物在氮气保护下80℃搅拌反应16小时。反应完全后，冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(灰色固体，250mg，产率38％)。
步骤D：3-((3-氟-4-(2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮
在0℃下，向7-(4-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯(250mg，0.56mmol，1.0当量)的二氯甲烷(6mL)溶液中加入三氟乙酸(2mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(棕色固体，188mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：N-(3-氨基-1-(4-(7-(4-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向3-((3-氟-4-(2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(100mg，0.29mmol，1.0当量)和N-(3-氨基-1-((1r,4r)-4-(哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(116mg，0.29mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入三乙胺(几滴)并搅拌10分钟。加入乙酸(0.017mL，0.29mmol，1.0当量)，反应混合液在室温搅拌反应1小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(122mg，0.58mmol，2.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应2小时。反应完全后，饱和碳酸氢钠溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(紫色固体，15.5mg，产率7％).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.75(s,1H),9.00(s,1H),8.47-8.38(m,2H),8.22(d,J＝8.4Hz,1H),8.01(s,1H),7.93(d,J＝8.5Hz,2H),7.76(s,1H),7.48(d,J＝8.5Hz,2H),6.60-6.47(m,2H),6.41-6.35(m,1H),5.51(d,J＝7.7Hz,1H),4.23-4.16(m,1H),3.65(s,2H),3.19-3.14(m,3H),3.08-3.05(m,1H),2.74-2.56(m,5H),2.45-2.41(m,1H),2.13-2.05(m,1H),1.92-1.77(m,5H).LC-MS(ESI):m/z734[M+H]+.
制备例285.化合物A201的合成
步骤A：7-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酸(200mg，0.8mmol，1.0当量)和2-甲基丙烷-2-基2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸酯(205.6mg，0.9mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入N-甲基吗啉(0.42mL，3.8mmol，5.0当量)和HATU(431.7mg，1.1mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残 余物经柱色谱纯化得到标题化合物(粉色固体，238mg，产率66％)。
步骤B：1-(2-甲氧基-5-(2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在0℃下，向7-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯(300mg，0.6mmol，1.0当量)的乙腈(5mL)溶液中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(5mL，20mmol，33当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状物，200mg，产率84％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：N-(3-氨基-1-(4-((7-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-(2-甲氧基-5-(2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(200mg，0.5mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(6mL)溶液中加入DIEA(0.1mL)并搅拌5分钟，再加入乙酸(0.2mL)和N-(3-氨基甲酰基-1-(4-甲酰基苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(216.6mg，0.5mmol，1.0当量)。反应混合液在室温搅拌反应15小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(113.3mg，0.5mmol，1.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，26.8mg，产率7％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),10.32(d,J＝7.2Hz,1H),9.01(s,1H),8.47(t,J＝7.2Hz,1H),8.40(t,J＝7.6Hz,1H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),8.15(s,1H),8.01(s,1H),7.95(d,J＝8.0Hz,1H),7.90(d,J＝8.4Hz,1H),7.77(s,1H),7.51(dd,J＝18.8,9.6Hz,3H),7.40(d,J＝8.4Hz,1H),7.14(dd,J＝12.8,8.8Hz,1H),3.85(d,J＝11.2Hz,3H),3.63(dd,J＝20.2,13.6Hz,4H),3.49(s,2H),3.40(dd,J＝10.8,6.8Hz,3H),2.72-2.56(m,4H),2.45-2.27(m,1H),1.93-1.61(m,4H).LC-MS(ESI):m/z 760[M+H]+.
制备例286.化合物A202的合成
步骤A：3-((4-溴苯基)氨基)丙酸
在室温下，向4-溴苯胺(15.0g，87.2mmol，1.0当量)的水(250mL)和乙酸(50mL)的溶液中加入丙烯酸(1.4mL，20mmol，1.0当量)。反应混合物在氮气保护下80℃搅拌反应18 小时。反应完全后，反应液冷却至室温，倒入水中，乙酸乙酯萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状物，21g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤B：1-(4-溴苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在室温下，向3-((4-溴苯基)氨基)丙酸(21.0g，86.1mmol，1.0当量)的乙酸(250mL)溶液中加入尿素(10.3g，172.1mmol，2.0当量)。反应混合物在氮气保护下120℃搅拌反应18小时。反应完全后，反应液冷却至室温，倒入水(200mL)中并搅拌2小时。过滤，滤饼用水洗涤两次，干燥完全得到粗品标题化合物(灰色固体，17g，产率74％)。
步骤C：7-(4-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向1-(4-溴苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(300mg，1.1mmol，1.0当量)和2-甲基丙烷-2-基2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸酯(277.5mg，1.2mmol，1.1当量)的1,4-二氧六环(5mL)溶液中加入碳酸铯(1.1g，3.3mmol，3.0当量)和Pd-PEPPSI-Ihept-Cl(54.22mg，0.05mmol，0.05当量)。反应混合物在氮气保护下100℃搅拌反应5小时。反应完全后，冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，220mg，产率48％)。
步骤D：1-(4-(2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮盐酸盐
在0℃下，向7-(4-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯(220mg，0.5mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入4M HCl甲醇溶液(1mL，4.0mmol，8.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，160mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：N-(3-氨基-1-(4-(7-(4-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-(4-(2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮盐酸盐(160mg，0.5mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)和甲醇(1mL)的溶液中加入N-(3-氨基甲酰基-1-(4-甲酰基苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(246.3mg，0.6mmol，1.1当量)和氰基硼氢化钠(64.0mg，1.0mmol，2.0当量)。反应混合液在室温搅拌反应16小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，33mg，产率9％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.19(s,1H),9.00(s,1H),8.50-8.37(m,2H),8.22(d,J＝6.9Hz,1H),8.01(s,1H),7.93(d,J＝8.6Hz,2H),7.76(s,1H),7.49(d,J＝8.6Hz, 2H),7.07(d,J＝8.7Hz,2H),6.48(d,J＝8.9Hz,2H),3.65(t,J＝5.5Hz,4H),3.21(dd,J＝34.4,9.1Hz,4H),2.67(d,J＝6.6Hz,2H),2.57(dd,J＝23.6,8.2Hz,3H),2.45(d,J＝8.9Hz,1H),2.04-1.90(m,2H),1.82(s,2H).LC-MS(ESI):m/z 702[M+H]+.
制备例287.化合物A203的合成
步骤A：7-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-5-溴-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(400mg，0.78mmol，1.0当量)和2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯(272mg，1.2mmol，1.5当量)的1,4-二氧六环(10mL)溶液中加入碳酸铯(760mg，2.34mmol，3.0当量)、Ru-Phos(72mg，0.14mmol，0.2当量)和Ru-Phos Pd G1(127mg，0.14mmol，0.2当量)。反应混合物在氮气保护下100℃搅拌反应16小时。反应完全后，冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，330mg，产率66％)。
步骤B：7-(1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向7-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯(330mg，0.50mmol，1.0当量)的乙醇(10mL)溶液中加入10％钯碳(300mg)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下50℃搅拌2小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，200mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：3-(3-甲基-2-氧代-5-(2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在0℃下，向7-(1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯(100mg，0.2mmol，1.0当量)的乙腈(5mL)溶液中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(1mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应16小时。反应液 减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，79mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((7-(1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向3-(3-甲基-2-氧代-5-(2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(79mg，0.2mmol，1.0当量)和N-(3-氨基-1-((1r,4r)-4-(哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(82mg，0.2mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入三乙胺(0.057mL，0.4mmol，2.0当量)并搅拌10分钟。加入乙酸(0.2mL，1mmol，5.0当量)，反应混合液在室温搅拌反应20分钟。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(258mg，1.2mmol，6.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，饱和碳酸氢钠溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，37.2mg，产率24％).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.03(s,1H),9.00(s,1H),8.50-8.32(m,2H),8.21(d,J＝6.7Hz,1H),8.01(s,1H),7.93(d,J＝8.6Hz,2H),7.76(s,1H),7.49(d,J＝8.5Hz,2H),6.88(d,J＝8.5Hz,1H),6.36(d,J＝2.0Hz,1H),6.19(dd,J＝8.6,2.0Hz,1H),5.25(dd,J＝12.8,5.3Hz,1H),3.67(s,2H),3.28(d,J＝5.7Hz,3H),3.27-3.15(m,4H),2.93-2.82(m,1H),2.73-2.54(m,5H),2.48-2.45(m,1H),2.03-1.91(m,3H),1.86-1.79(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 771[M+H]+.
制备例288.化合物A204的合成
步骤A：3-(2,4-二氧代-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲醛
在室温下，向3-碘-4-甲氧基苯甲醛(1000mg，4.650mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中的加入3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(1249.97mg，5.115mmol，1.2当量)、碳酸铯(3030.18mg，9.300mmol，2.0当量)和碘化亚铜(88.35mg，0.465mmol，0.1当量)和(1R,2R)-(-)-1,2-二氨基环己烷(106.20mg，0.930mmol，0.2当量)。反应液在氮气保护下100℃搅拌反应16小时。反应完全后，反应液冷却至室温，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥， 过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状物，300mg，产率17％)。
步骤B：3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲醛
在0℃下，向3-(2,4-二氧代-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲醛(300mg，0.793mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入三氟乙酸(0.061mL，0.793mmol，1.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应0.5小时。反应完全后，减压浓缩。残余物溶于乙腈(100mL)中，加入氨水(3mL)，混合物室温搅拌反应0.5小时。混合液用饱和氯化铵稀释，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状物，121mg，产率62％)。
步骤C：N-(3-羰基-1-(4-(7-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苄基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-羰基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲醛(120mg，0.483mmol，1.0当量)和N-(1-(4-(2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-羰基)苯基)-3-甲酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(267.75mg，0.508mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液搅拌30分钟。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(307.36mg，1.450mmol，3.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应2小时。反应完全后，饱和碳酸氢钠溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，40mg，产率11％).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.81(s,1H),10.28(s,1H),9.10(d,J＝4.8Hz,1H),8.48-8.45(m,1H),8.41(t,J＝7.6Hz,1H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),8.08-8.04(m,3H),7.82(d,J＝7.6Hz,1H),7.72-7.65(m,2H),7.28-7.00(m,3H),3.78(d,J＝9.6Hz,3H),3.58-3.46(m,8H),2.66-2.54(m,4H),2.44-2.30(m,2H),1.94-1.67(m,4H).LC-MS(ESI)m/z:760[M+H]+.
制备例289.化合物A205的合成
步骤A：8-(3-硝基苯基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向1-氟-3-硝基苯(352mg，2.5mmol，1.2当量)和2-甲基丙烷-2-基2,8-二 氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸酯(500mg，2.1mmol，1.0当量)的二甲基亚砜(10mL)溶液中加入DIEA(1.1mL，6.2mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下100℃搅拌反应16小时。反应完全后，反应液冷却至室温，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，190mg，产率25％)。
步骤B：8-(3-氨基苯基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向8-(3-硝基苯基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯(190mg，0.5mmol，1.0当量)的甲醇(10mL)溶液中加入10％钯碳(40mg)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌2小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，160mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：8-(3-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)苯基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向8-(3-氨基苯基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯(160mg，0.5mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(0.3mL)溶液中加入3-溴六氢吡啶-2,6-二酮(185mg，1mmol，2.0当量)和DIEA(0.2mL，2mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下100℃搅拌反应16小时。反应完全后，反应液冷却至室温，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，90mg，产率42％)。
步骤D：3-((3-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮
在0℃下，向8-(3-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)苯基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯(90mg，0.2mmol，1.0当量)的乙腈(5mL)溶液中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(1mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，70mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：N-(3-羰基-1-(4-((8-(3-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)苯基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向3-((3-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(70mg，0.2mmol，1.0当量)和1-(4-甲酰基苯基)-4-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)吡唑-3-甲酰胺(82mg，0.2mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入三乙胺(0.057mL，0.4mmol，2.0当量)并搅拌10分钟，再加入乙酸(0.2mL，1mmol，5.0当量)。反应混合液在室温搅拌反应20分钟。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(258mg，1.2mmol，6.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取 三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，44.6mg，产率30％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.74(s,1H),9.00(s,1H),8.48-8.37(m,2H),8.18(dd,J＝25.4,5.0Hz,2H),8.01(s,1H),7.94(d,J＝8.4Hz,2H),7.77(s,1H),7.49(d,J＝8.3Hz,2H),6.88(t,J＝8.0Hz,1H),6.26(s,1H),6.18(d,J＝8.2Hz,1H),6.10(d,J＝7.8Hz,1H),5.58(d,J＝7.6Hz,1H),4.33-4.26(m,1H),3.67-3.63(m,2H),3.07-2.98(m,4H),2.77-2.68(m,1H),2.64-2.54(m,3H),2.45-2.40(m,2H),2.12-2.04(m,1H),1.90-1.79(m,1H),1.68-1.57(m,6H).LC-MS(ESI):m/z 730[M+H]+.
制备例290.化合物A206的合成
步骤A：8-(4-硝基苯基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯(500mg，2.1mmol，1当量)和1-氟-4-硝基苯(440mg，3.1mmol，1.5当量)的二甲基亚砜(5mL)溶液中加入DIEA(1.1mL，6.2mmol，3当量)。反应液在氮气保护下120℃搅拌反应16小时。反应完全后，反应液冷却至室温，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，670mg，产率89％)。
步骤B：8-(4-氨基苯基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向8-(4-硝基苯基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯(670mg，1.8mmol，1.0当量)的乙醇(15mL)溶液中加入10％钯碳(118mg)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌2小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，580mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：8-(4-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)苯基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向8-(4-氨基苯基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯(580mg，1.7mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(4.0mL)溶液中加入3-溴六氢吡啶-2,6-二酮(672mg，3.5mmol，2.0当量)和DIEA(610μL,3.50mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下85℃搅拌反应16小时。反应完全后，反应液冷却至室温，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(棕 色固体，300mg，产率38％)。
步骤D：3-((4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮
在0℃下，向8-(4-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)苯基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯(300mg，678μmol,1.0当量)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(4mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(棕色固体，200mg，产率粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(8-(4-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)苯基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向3-((4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(200mg，584μmol,1.0当量)和N-(3-氨基甲酰基-1-(4-甲酰基苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(236mg，584μmol,1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入三乙胺(407μL,2.9mmol，5.0当量)并搅拌10分钟，再加入乙酸(1.0mL)。反应混合液在室温搅拌反应10分钟。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(743mg，3.5mmol，6.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(棕色固体，33.8mg，产率8％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.74(s,1H),9.01(s,1H),8.48-8.38(m,2H),8.25-8.20(m,1H),8.15(s,1H),8.01(s,1H),7.96-7.92(m,2H),7.77(s,1H),7.49(d,J＝8.3Hz,2H),6.80-6.70(m,2H),6.62-6.53(m,2H),5.44-5.21(m,1H),4.25-4.08(m,1H),3.66(s,2H),2.93-2.82(m,4H),2.75-2.67(m,1H),2.63-2.53(m,3H),2.42(s,2H),2.14-2.06(m,1H),1.87-1.77(m,1H),1.68-1.58(m,6H).LC-MS(ESI):m/z 730[M+H]+.
制备例291.化合物A207的合成
步骤A：8-(2-氟-4-硝基苯基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯(500mg，2.1mmol，1.0当量)和1,2-二氟-4-硝基苯(397mg，2.5mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶液中加入碳酸钾(575mg，4.2mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下80℃搅拌反应6小时。反应完全 后，反应液冷却至室温，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，700mg，产率89％)。
步骤B：8-(4-氨基-2-氟苯基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向8-(2-氟-4-硝基苯基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯(700mg，1.8mmol，1.0当量)的甲醇(15mL)溶液中加入10％钯碳(100mg)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌16小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，550mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：8-(4-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向8-(4-氨基-2-氟苯基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯(500mg，1.4mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(2mL)溶液中加入3-溴六氢吡啶-2,6-二酮(550mg，2.9mmol，2.0当量)和DIEA(0.5mL，2.9mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下80℃搅拌反应16小时。反应完全后，反应液冷却至室温，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(绿色固体，500mg，产率76％)。
步骤D：3-((3-氟-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮
在0℃下，向8-(4-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯(200mg，0.4mmol，1.0当量)的乙腈(8mL)溶液中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(1.6mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，130mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：N-(3-氨基-1-(4-(8-(4-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向N-(3-氨基甲酰基-1-(4-甲酰基苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(120mg，0.3mmol，1.0当量)和3-((3-氟-4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(107mg，0.3mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(6mL)溶液中加入三乙胺(0.057mL，0.4mmol，2.0当量)并搅拌10分钟，再加入乙酸(0.2mL，1mmol，5.0当量)。反应混合液在室温搅拌反应30分钟。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(126mg，0.6mmol，2.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，40mg，产率18％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H), 10.77(s,1H),9.03(s,1H),8.47-8.39(m,2H),8.23-8.21(m,1H),8.14(s,1H),8.03-7.97(m,3H),7.79(s,1H),7.58-7.52(m,2H),6.83(t,J＝9.4Hz,1H),6.52-6.45(m,1H),6.42-6.37(m,1H),5.78(d,J＝7.6Hz,1H),4.28-4.21(m,1H),3.94-3.72(m,2H),2.83-2.66(m,8H),2.60-2.53(m,2H),2.10-2.04(m,1H),1.87-1.79(m,1H),1.73-1.63(m,6H).LC-MS(ESI):m/z 748[M+H]+.
制备例292.化合物A208的合成
步骤A：3-((2-甲氧基-5-(甲氧羰基)苯基)氨基)丙酸
在室温下，向3-氨基-4-甲氧基苯甲酸甲酯(15g，82.8mmol，1.0当量)的水(250mL)和乙酸(50mL)溶液中加入丙-2-烯酸(6g，82.8mmol，1.0当量)。反应混合物在氮气保护下120℃搅拌反应18小时。反应完全后，反应液冷却至室温，倒入水中，乙酸乙酯萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到粗品标题化合物(灰色固体，20g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤B：3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酸甲酯
在室温下，向3-((2-甲氧基-5-(甲氧羰基)苯基)氨基)丙酸(25g，98.7mmol，1.0当量)的乙酸(250mL)溶液中加入尿素(11.9g，197.4mmol，2.0当量)。反应混合物在氮气保护下120℃搅拌反应18小时。反应完全后，反应液冷却至室温，倒入冰水(200mL)中并搅拌2小时。过滤，滤饼用水洗涤两次，干燥完全得到粗品标题化合物(灰色固体，14g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酸
在0℃下，向3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酸甲酯(8g，28.75mmol，1.0当量)的四氢呋喃(90mL)的混合溶液中滴加1M氢氧化钠(143.75mL，143.75mmol，5.0当量)溶液。反应液室温搅拌反应18小时。反应完全后，减压旋除甲醇和四氢呋喃溶剂并用稀释的1N HCl溶液调节PH 3-4。混合液溶于浓盐酸(100mL)中，在100℃搅拌反应1.5小时。减压浓缩，残余物用水稀释，过滤出析出固体，滤饼用水洗涤两次，干燥完全后得 到粗品标题化合物(灰色固体，6g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤D：8-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酸(150mg，0.6mmol，1.0当量)和2-甲基丙烷-2-基2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸酯(163.7mg，0.7mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(4mL)溶液中加入N-甲基吗啉(312μL,2.8mmol，5.0当量)和HATU(324mg，0.8mmol，1.4当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(粉色固体，214.2mg，产率78％)。
步骤E：1-(2-甲氧基-5-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在0℃下，向8-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯的二氯甲烷(3mL)溶液中加入三氟甲酸(2mL)。反应液室温搅拌反应1小时。反应完全后，减压浓缩得到粗品标题化合物(橙色油状物，230mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤F：N-(3-氨基-1-(4-((8-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-(2-甲氧基-5-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(115mg，0.3mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2mL)溶液中加入DIEA(0.2mL)并搅拌25分钟，再加入乙酸(0.3mL)和1-(4-甲酰基苯基)-4-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)吡唑-3-甲酰胺(216.6mg，0.5mmol，1.0当量)。反应混合液在室温搅拌反应15小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(171mg，0.81mmol，3.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，29.3mg，产率9％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.33(s,1H),9.01(s,1H),8.46(d,J＝7.6Hz,1H),8.40(t,J＝7.6Hz,1H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),8.14(s,1H),8.01(s,1H),7.95(d,J＝8.4Hz,2H),7.78(s,1H),7.49(d,J＝8.4Hz,2H),7.36(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),7.32(d,J＝2.0Hz,1H),7.15(d,J＝8.6Hz,1H),3.84(s,3H),3.73-3.68(m,2H),3.60(d,J＝6.8Hz,2H),3.47-3.37(m,6H),2.73-2.62(m,4H),1.68(t,J＝6.8Hz,2H),1.61-1.46(m,4H).LC-MS(ESI):m/z 774[M+H]+.
制备例293.化合物A209的合成
步骤A：N-(3-氨基-1-(4-(8-(4-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向1-(4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮盐酸盐(90mg，0.3mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入三乙胺(0.1mL)并且混合液在0℃下搅拌10分钟。向混合液中加入N-(3-氨基甲酰基-1-(4-甲酰基苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(110.5mg，0.3mmol，1.0当量)和乙酸(0.2mL)。反应混合液在室温搅拌反应18小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(34.4mg，0.5mmol，2.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应2小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，15.6mg，产率8％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.24(s,1H),9.00(s,1H),8.42(d,J＝18.0Hz,2H),8.22(d,J＝7.7Hz,1H),8.06-7.88(m,3H),7.77(s,1H),7.48(d,J＝8.5Hz,2H),7.12(d,J＝8.9Hz,2H),6.92(d,J＝9.0Hz,2H),3.68(t,J＝6.7Hz,2H),3.63(s,2H),3.18-3.06(m,4H),2.67(t,J＝6.7Hz,2H),2.58(t,J＝6.9Hz,2H),2.40(s,2H),1.63(s,6H).LC-MS(ESI):m/z 716(M+H)+.
制备例294.化合物A210的合成
步骤A：N-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-1,1-二苯基甲亚胺
在室温下，向2,6-双(苄氧基)-3-溴吡啶(25g，67.6mmol，1当量)和二苯甲酮亚胺(14.7g，81mmol，1.2当量)的1,4-二氧六环(200mL)溶液中加入碳酸铯(44g，135mmol，2当量)、Pd2(dba)3(6.19g，6.76mmol，0.1当量)和BINAP(8.4g，6.76mmol，0.1当量)。反 应混合物在氮气保护下100℃搅拌反应16小时。反应完全后，冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状物，31g，产率98％)。
步骤B：2,6-双(苄氧基)吡啶-3-胺
在0℃下，向N-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-1,1-二苯基甲亚胺(31g，65.8mmol，1.0当量)的四氢呋喃(150mL)溶液中加入2M HCl稀溶液(30mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应液减压浓缩，粗品打浆(EtOAc/PE(20mL，1/10)),过滤，滤饼完全干燥后得到标题化合物(黄色固体，15g，产率74％)。
步骤C：2,6-双(苄氧基)-N-(4-溴-2-硝基苯基)吡啶-3-胺
在室温下，向4-溴-1-氟-2-硝基苯(8.58g，39mmol，1.0当量)和2,6-双(苄氧基)吡啶-3-胺(12g，39.2mmol，1.0当量)的N-甲基吡咯烷酮(120mL)溶液中加入DIEA(34.7mL，195.8mmol，5.0当量)。反应液在氮气保护下100℃搅拌反应56小时。反应完全后，反应液冷却至室温，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。粗品打浆(EtOAc/PE(20mL，1/10)),过滤，滤饼完全干燥后得到标题化合物(黄色固体，10g，产率50％)。
步骤D：N1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-4-溴苯-1,2-二胺
在室温下，向2,6-双(苄氧基)-N-(4-溴-2-硝基苯基)吡啶-3-胺(10g，19.7mmol，1.0当量)的乙醇(50mL)和水(50mL)的溶液中加入铁粉(5.5g，98.7mmol，5.0当量)和氯化铵(5.2g，98.7mmol，5.0当量)。反应混合物在70℃搅拌反应16小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物(棕色固体，7g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-5-溴-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮
在0℃下，向N1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-4-溴苯-1,2-二胺(7g，14.6mmol,1.0当量)的二氯甲烷(50mL)溶液中加入吡啶(1.1mL，14.6mmol.1.0当量)并搅拌5分钟。向上述混合液中滴加三光气(4.3g，14.6mmol，1.0当量)的二氯甲烷溶液。反应混合物在室温搅拌反应16小时。反应完全后，用冰水淬灭，二氯甲烷萃取三次，混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(米白色固体，4.6g，产率62％)。
步骤F：1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-5-溴-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮
在0℃氮气保护下，向1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-5-溴-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(4.6g，9.1mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(40mL)溶液中分批加入60重量％氢化 钠(0.9g，22.8mmol，2.5当量)。反应混合物室温下搅拌0.5小时。向上述反应液中继续加入碘化钾(3.2g，22.8mmol，2.5当量)。反应混合物在室温氮气保护下0℃搅拌反应1小时。反应完全后，用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，4g，产率85％)。
步骤G：8-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-5-溴-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(400mg，0.78mmol，1.0当量)和2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯(288mg，1.2mmol，1.5当量)的1,4-二氧六环(10mL)溶液中的加入Ru-Phos Pd G1(127mg，0.14mmol，0.2当量)、Ru-Phos(72mg，0.14mmol，0.2当量)和碳酸铯(760mg，2.34mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下100℃搅拌反应16小时。反应完全后，反应液冷却至室温，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，350mg，产率66％)。
步骤H：8-(1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向8-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯(350mg，0.52mmol，1.0当量)的乙醇(10mL)溶液中加入10％氢氧化钯碳(300mg)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下50℃搅拌16小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物(白色固体，200mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤I：3-(3-甲基-2-氧代-5-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在0℃下，向8-(1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯(100mg，0.2mmol，1.0当量)的乙腈(5mL)溶液中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(1mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应液减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，79mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤J：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((8-(1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向3-(3-甲基-2-氧代-5-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(79mg，0.2mmol，1.0当量)和N-(3-氨基甲酰基-1-(4-甲酰基苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(82mg，0.2mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入三乙胺(0.057mL，0.4mmol，2.0当量)并搅拌10分钟，再加入乙酸(0.2mL，1mmol，5.0当量)。反应混合液在室温搅拌反应20分钟。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(258mg，1.2mmol，6.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，47.1mg，产率30％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),11.06(s,1H),9.01(s,1H),8.49-8.38(m,2H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),8.16(s,1H),8.02(s,1H),7.94(d,J＝8.5Hz,2H),7.78(s,1H),7.50(d,J＝8.4Hz,2H),6.92(d,J＝8.6Hz,1H),6.83(d,J＝1.7Hz,1H),6.64(d,J＝8.6Hz,1H),5.28(dd,J＝12.7,5.1Hz,1H),3.65(s,2H),3.30(s,3H),3.05(s,4H),2.87(d,J＝11.3Hz,1H),2.68(s,1H),2.61(d,J＝6.9Hz,3H),2.43(s,2H),2.02-1.93(m,1H),1.66(dd,J＝13.7,6.2Hz,6H).LC-MS(ESI):m/z 785[M+H]+.
制备例295.化合物A211的合成
步骤A：N-(1-(4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-羰基)苯基)-3-甲酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃下，向2-(4-(3-氨基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯甲酰基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯(120mg，0.187mmol，1.0当量)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入三氟乙酸(3mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，减压浓缩。残余物溶于乙酸乙酯(30mL)中，有机相用饱和碳酸氢钠和盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，90mg，粗品)。
步骤B：N-(3-羰基-1-(4-(8-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苄基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-羰基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向3-(2,4-二氧代六氢嘧啶-1-基)-4-甲氧基苯-1-甲醛(90mg，0.363mmol，2.0当量)和N-(1-(4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-羰基)苯基)-3-甲酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(90mg，0.166mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中加入乙酸(cat.,1滴)。反应混合液在室温搅拌反应30分钟。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼 氢化钠(111mg，0.524mmol，3.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应16小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，30mg，产率23％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),10.27(d,J＝11.2Hz,1H),9.10(d,J＝4.3Hz,1H),8.46(d,J＝7.8Hz,1H),8.41(t,J＝7.8Hz,1H),8.22(d,J＝7.7Hz,1H),8.12-8.02(m,3H),7.82(s,1H),7.70(dd,J＝13.0,8.6Hz,2H),7.27-7.09(m,2H),7.04(dd,J＝18.3,8.5Hz,1H),3.78(d,J＝13.5Hz,3H),3.60-3.50(m,4H),3.43(s,4H),2.71-2.61(m,2H),2.34(d,J＝11.9Hz,3H),2.17(s,1H),1.77(dd,J＝15.7,8.1Hz,2H),1.60(s,2H),1.47(s,2H).LC-MS(ESI)m/z:774[M+H]+.
制备例296.化合物A212的合成
步骤A：3-(2,4-二氧代-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)四氢嘧啶-1(2H)-基)苯甲醛
在室温下，向3-碘苯-1-甲醛(2g，8.6mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(20mL)溶液中的加入3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(2.5g，10mmol，1.2当量)、碳酸铯(8.4g，26mmol，3.0当量)和碘化亚铜(0.7g，3.5mmol，0.4当量)和(1R,2S)-N1,N2-二甲基环己烷-1,2-二胺(0.5g，3.5mmol，0.4当量)。反应液在氮气保护下100℃搅拌反应16小时。反应完全后，反应液冷却至室温，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，522mg，产率16％)。
步骤B：8-(3-(2,4-二氧代-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)四氢嘧啶-1(2H)-基)苄基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向3-(2,4-二氧代-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)四氢嘧啶-1(2H)-基)苯甲醛(522mg，1.5mmol，1.2当量)和2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯(300mg，1.3mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(8mL)溶液中加入乙酸(0.7mL，12.5mmol，10.0当量)。反应混合液在室温搅拌反应1小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(794mg，3.7mmol，3.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应2小时。反应完全后，加水 稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，80mg，产率11％)。
步骤C：1-(3-((2,8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)甲基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在0℃下，向8-(3-(2,4-二氧代-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)四氢嘧啶-1(2H)-基)苄基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯(80mg，0.2mmol，1.0当量)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入三氟乙酸(1mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，50mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤D：N-(3-羰基-1-(4-(8-(3-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)苄基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-羰基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向4-(3-氨基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯甲酸(84mg，0.2mmol，2.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(4mL)溶液中加入1-(3-((2,8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)甲基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(50mg，0.1mmol，1.0当量)、DIEA(0.05mL，0.3mmol，3当量)和HATU(102mg，0.3mmol，3当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，15mg，产率15％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.81(s,1H),10.36(d,J＝11.6Hz,1H),9.11(s,1H),8.46(s,1H),8.41(t,J＝7.7Hz,1H),8.23(d,J＝7.5Hz,1H),8.09-8.05(m,2H),7.82(s,2H),7.74-7.67(m,2H),7.38-7.15(m,4H),3.84-3.74(m,4H),3.64-3.61(m,2H),2.78-2.66(m,3H),2.62-2.53(m,2H),2.33-2.25(m,1H),2.04-1.74(m,3H),1.69-1.59(m,2H),1.55-1.48(m,2H),1.24(s,1H).LC-MS(ESI):m/z 744[M+H]+.
制备例297.化合物A213的合成
步骤A：8-(3-硝基苄基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向3-硝基苯-1-甲醛(629mg，4.2mmol，2.0当量)和2-甲基丙烷-2-基2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸酯(90mg，0.166mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入乙 酸(5滴)。反应混合液在室温搅拌反应10分钟。向上述反应液中继续加入氰基硼氢化钠(261mg，4.2mmol，2.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应2小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，520mg，产率67％)。
步骤B：8-(3-氨基苄基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向8-(3-硝基苄基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯(500mg，1.3mmol，1.0当量)的乙醇(15mL)溶液中加入10％钯碳(142mg)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌18小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物(白色固体，400mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：8-(3-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)苄基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向8-(3-氨基苄基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯(400mg，2.2mmol，1.0当量)中加入DIPEA(0.4mL，4.4mmol，2.0当量)和3-溴哌啶-2,6-二酮(444mg，4.4mmol，2.0当量)。反应混合物80℃下搅拌16小时。反应完全后，冷却至室温，溶于二氯甲烷/甲醇(10:1)混合溶液中，过滤。滤饼粗品经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，200mg，产率38％)。
步骤D：3-((3-((2,8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)甲基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮
在0℃下，向8-(3-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)苄基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯(200mg，0.5mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入三氟乙酸(1mL)。反应液在氮气保护下30℃搅拌反应0.5小时。反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，120mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：N-(3-羰基-1-(4-(8-(3-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)苄基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-羰基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向3-((3-((2,8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)甲基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(50mg，0.15mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入4-(3-氨基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯甲酸(71mg，0.17mmol，1.2当量)、DIPEA(0.2mL，0.3mmol)和HATU(107mg，0.3mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下30℃搅拌反应2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，30mg，产率28％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.81(s,1H),10.83(d,J＝9.7Hz,1H),9.17(d,J＝43.2Hz,2H),8.48-8.39(m,2H),8.23(d,J＝7.5Hz,1H),8.08(d,J＝8.5Hz,2H),7.83(s,1H),7.73(d,J＝8.2Hz,2H), 7.19(t,J＝7.7Hz,1H),6.79-6.62(m,3H),6.10(s,1H),4.38-4.04(m,3H),3.52(d,J＝34.3Hz,4H),3.09(s,2H),2.91-2.56(m,3H),2.17-1.59(m,9H).LC-MS(ESI):m/z 758[M+H]+.
制备例298.化合物A214的合成
步骤A：8-(4-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸酯
在室温下，向1-(4-溴苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(200mg，0.7mmol，1.0当量)和2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯(214mg，0.9mmol，1.2当量)的1,4-二氧六环(5mL)溶液中加入碳酸铯(726mg，2.3mmol，l,3当量)和Pd-PEPPSI-Ihept-Cl(36mg，0.04mmol，0.05当量)。反应混合物在氮气保护下100℃搅拌反应5小时。反应完全后，冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，127mg，产率40％)。
步骤B：1-(4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮盐酸盐
在0℃下，向8-(4-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸酯(127mg，0.3mmol，1.0当量)的乙酸乙酯(5mL)溶液中加入4M HCl甲醇溶液(1mL，4.0mmol，8.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。滤液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，90mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：N-(3-羰基-1-(4-(8-(4-(2,4-二氧基四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-羰基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向4-(3-氨基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯甲酸(132mg，0.3mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入1-(4-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸-8-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮盐酸盐(90mg，0.3mmol，1.0当量)、DIPEA(177mg，1.4mmol，5.0当量)和HATU(208mg，0.5mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，17.4mg，产率10％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(d,J＝4.2Hz,1H),10.25(d,J＝11.2Hz,1H),9.10(d,J＝7.2Hz,1H),8.50-8.36(m,2H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),8.07(d,J＝7.8Hz,3H),7.82(s,1H),7.73(dd,J＝18.8,8.6Hz,2H),7.13(dd,J＝19.0,8.8Hz,2H),6.94(dd,J＝28.3,8.9Hz,2H),3.69(dt,J＝16.2,6.6Hz,2H),3.63-3.53(m,2H),3.43(s,1H),3.37(s,1H), 3.24(s,1H),3.16(d,J＝9.3Hz,2H),3.07(d,J＝6.2Hz,1H),2.67(dt,J＝13.2,6.7Hz,2H),1.84(dt,J＝18.8,7.0Hz,2H),1.74(d,J＝13.9Hz,2H),1.60(s,2H).LC-MS(ESI):m/z 730[M+H]+.
制备例299.化合物A215的合成
步骤A：7-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟异吲哚啉-1,3-二酮(1.0g，3.62mmol，1.0当量)和2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯(0.9g，3.98mmol，1.1当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入DIEA(1.4g，10.86mmol，3.0当量)。反应液在90℃下搅拌5小时。反应完全后，冷却至室温，用水稀释，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，0.8g，产率46％)。
步骤B：2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮
在0℃下，向7-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-甲酸叔丁酯(300mg，0.62mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5mL)中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(1.5mL，6.00mmol，10.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，200mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((7-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(200mg，0.52mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入三乙胺(132mg，1.31mmol，2.5当量)并搅拌5分钟，再加入乙酸(188mg，3.14mmol，6.0当量)和N-(3-氨基甲酰基-1-(4-甲酰基苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(211mg，0.52mmol，1.0当量)。反应混合液在室温搅拌反应18小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(131mg，2.04mmol，4.0当量)。反应混合物在40℃下搅拌反应2小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，42.4mg，产率11％)。1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.06(s,1H),9.00(s,1H),8.47-8.37(m,2H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),8.14(s,1H),8.01(s,1H),7.94(d,J＝8.5Hz,2H),7.77(s,1H),7.63(d,J＝8.4Hz,1H),7.51(d,J＝8.5Hz,2H),6.90(d,J＝1.8Hz,1H),6.82-6.77(m,1H),5.05(m,1H),3.71(s,2H),3.46-3.41(m,3H),3.39-3.35(m,3H),2.93-2.83(m,1H),2.76-2.64(m,2H),2.62-2.59(m,1H),2.56-2.53(m,1H),2.07-1.96(m,3H),1.88-1.78(m,2H).LC-MS(ESI)m/z:770[M+H]+.
制备例300.化合物A216的合成
步骤A：5-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁酯
在室温下，向2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟异吲哚啉-1,3-二酮(200mg，0.72mmol，1.0当量)的二甲基亚砜(10mL)溶液中加入三乙胺(0.20mL，1.45mmol，2.0当量)和六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁酯(169mg，0.8mmol，1.1当量)。反应混合物在氮气保护下90℃搅拌反应18小时。反应完全后，冷却至室温，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，150mg，产率44％)。
步骤B：2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)异吲哚啉-1,3-二酮
在0℃下，向5-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁酯(150mg，0.32mmol，1.0当量)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入三氟乙酸(3mL)。反应混合物在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状物，120mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((5-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基)六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)异吲哚啉-1,3-二酮(120mg，0.33mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入三乙胺(0.07mL)。反应液在室温下搅拌反应5分钟。向上述反应液中依次N-(3-氨基甲酰基-1-(4-甲酰基苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(158mg，0.39mmol，1.2当量)和乙酸(0.04mL，0.65mmol，2.0当量)。反应液在室温下搅拌反应0.5小时。接着继续加入三乙酰氧 基硼氢化钠(137mg，0.65mmol，2.0当量)。反应液在室温下额外搅拌反应1小时。反应完成后，用水淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，50mg，产率20％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.78(s,1H),11.06(s,1H),8.99(s,1H),8.48-8.36(m,2H),8.21(d,J＝7.5Hz,1H),7.99(s,1H),7.92(d,J＝8.4Hz,2H),7.75(s,1H),7.66(d,J＝8.4Hz,1H),7.46(d,J＝8.4Hz,2H),6.98(s,1H),6.88(d,J＝8.5Hz,1H),5.16-4.92(m,1H),3.71-3.66(m,2H),3.65(s,2H),3.40-3.37(m,2H),3.04-2.97(m,2H),2.94-2.82(m,1H),2.66-2.52(m,6H),2.08-1.93(m,1H).LC-MS(ESI):m/z 756[M+H]+.
制备例301.化合物A217的合成
步骤A：6-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)-2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟异吲哚啉-1,3-二酮(200mg，0.72mmol，1.0当量)的二甲基亚砜(10mL)溶液中加入三乙胺TEA(1mL)和2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁酯(172mg，0.87mmol，1.2当量)。反应混合物在氮气保护下90℃搅拌反应18小时。反应完全后，冷却至室温，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，204mg，产率62％)。
步骤B：2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮
在0℃下，向6-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)-2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁酯(80mg，0.18mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入三氟乙酸(1mL)。反应混合物在室温下搅拌反应0.5小时。反应完全后，减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，60mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((6-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)-2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-2-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(60mg，0.17mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入三乙胺(0.1mL)。反 应液在室温下搅拌反应10分钟。向上述反应液中依次N-(3-氨基甲酰基-1-(4-甲酰基苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(82mg，0.2mmol，1.2当量)和乙酸(0.2mL)。反应液在室温下搅拌反应0.5小时。接着继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(71.76mg，0.339mmol，2.0当量)。反应液在室温下额外搅拌反应2小时。反应完成后，用水淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，28mg，产率22％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.06(s,1H),9.00(s,1H),8.47-8.38(m,2H),8.21(d,J＝7.6Hz,1H),8.01(s,1H),7.93(d,J＝8.2Hz,2H),7.76(s,1H),7.64(d,J＝8.1Hz,1H),7.45(d,J＝8.3Hz,2H),6.79(s,1H),6.65(d,J＝8.0Hz,1H),5.08-5.02(m,1H),4.13(s,4H),3.62(s,2H),3.38(s,4H),2.91-2.83(m,1H),2.62-2.51(m,2H),2.04-1.98(m,1H).LC-MS(ESI):m/z 742[M+H]+.
制备例302.化合物A218的合成
步骤A：8-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟异吲哚啉-1,3-二酮(700mg，2.534mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(15mL)溶液中加入2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯(730mg，3.037mmol，1.2当量)和DIEA(980mg，7.582mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下100℃搅拌反应2小时。反应完全后，反应液冷却至室温，用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状物，900mg，产率64％)。
步骤B：2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)异吲哚啉-1,3-二酮
在0℃下，向8-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯(400mg，0.806mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(1.5mL，6.0mmol，7.4当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，300mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((8-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)-2,8- 二氮杂螺[4.5]癸-2-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)异吲哚啉-1,3-二酮(100mg，0.248mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中加入三乙胺(0.05mL，0.360mmol，1.5当量)并搅拌30分钟，再加入乙酸(0.06mL，1.048mmol，4.2当量)和N-(3-氨基甲酰基-1-(4-甲酰基苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(120mg，0.303mmol，1.2当量)。反应混合液在室温搅拌反应18小时。向上述反应液中继续加入氰基硼氢化钠(50mg，0.796mmol，3.2当量)。反应混合物在40℃下搅拌反应2小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，18mg，产率9％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.07(s,1H),9.01(s,1H),8.47-8.37(m,2H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),8.14(s,1H),8.01(s,1H),7.94(d,J＝8.2Hz,2H),7.77(s,1H),7.64(d,J＝8.5Hz,1H),7.49(d,J＝8.3Hz,2H),7.31(s,1H),7.23(d,J＝8.9Hz,1H),5.06(dd,J＝12.8,5.3Hz,1H),3.68(s,2H),3.48(s,2H),3.44-3.42(m,2H),2.91-2.84(m,1H),2.67-2.57(m,3H),2.56-2.54(m,1H),2.47(s,2H),2.04-1.96(m,1H),1.70-1.65(m,2H),1.65-1.54(m,4H).LC-MS(ESI):m/z 784[M+H]+.
制备例303.化合物A219的合成
步骤A：2-(4-溴亚苄基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-甲酸叔丁酯
在0℃下，向2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬-7-甲酸叔丁酯(2g，8.357mmol，1.0当量)和[(4-溴苯基)甲基]膦酸二乙酯(2.82g，9.193mmol，1.1当量)的四氢呋喃(9mL)溶液中加入叔丁醇钾(1.87g，16.715mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应3小时。反应完 全后，反应液倒入饱和氯化铵水溶液中，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，2g，产率61％)。
步骤B：2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)亚苄基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-甲酸叔丁酯
在室温下，向2-(4-溴亚苄基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-甲酸叔丁酯(2g，5.098mmol，1.0当量)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,-5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊烷(1.94g，7.646mmol，1.5当量)的1,4-二氧六环(20mL)溶液中加入乙酸钾(1.00g，10.195mmol，2.0当量)和Pd(dppf)Cl2(0.37g，0.510mmol，0.1当量)。反应液在氧气保护下90℃搅拌反应3小时。反应完全后，冷却至室温，用饱和氯化铵溶液稀释，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1.7g，产率76％)。
步骤C：(4-((7-(叔丁氧基羰基)-7-氮杂螺[3.5]壬-2-亚基)甲基)苯基)硼酸
在0℃下，向2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)亚苄基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-甲酸叔丁酯(1.7g，3.869mmol，1.0当量)的四氢呋喃(12mL)和水(4mL)的溶液中加入高碘酸钠(2.48g，11.607mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应16小时。反应完全后，反应液过滤，滤液倒入饱和碳酸氢钠水溶液中，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1.3g，产率94％)。
步骤D：2-(4-(3-(甲氧羰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)亚苄基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-甲酸酯
在室温下，向(4-((7-(叔丁氧基羰基)-7-氮杂螺[3.5]壬-2-亚基)甲基)苯基)硼酸(1.3g，3.639mmol，1.0当量)、4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(0.93g，5.458mmol，1.5当量)、碳酸铯(3.56g，10.916mmol，3.0当量)和吡啶(1.766mL，21.833mmol，5.0当量)的乙腈(13mL)溶液中加入醋酸铜(1.17g，5.84mmol，1.0当量)。反应液在氧气保护下80℃搅拌反应16小时。反应完全后，反应液过滤，滤液用水稀释，二氯甲烷萃取三次。接着混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，530mg，产率30％)。
步骤E：2-(4-(4-氨基-3-(甲氧羰基)-1H-吡唑-1-基)苄基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-甲酸叔丁酯
在室温下，向2-(4-(3-(甲氧羰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)亚苄基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-甲酸酯(530mg，1.098mmol，1.0当量)的甲醇(5mL)溶液中加入10％钯碳(1168.87mg，10.984 mmol，10当量)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下室温搅拌3小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状物，390mg，产率78％)。
步骤F：2-(4-(3-(甲氧羰基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苄基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-甲酸叔丁酯
在室温下，向2-(4-(4-氨基-3-(甲氧羰基)-1H-吡唑-1-基)苄基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-甲酸叔丁酯(390mg，0.858mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(163.96mg，0.858mmol，1.0当量)、DIEA(443.56mg，3.432mmol，4.0当量)和HATU(489.34mg，1.287mmol)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，250mg，产率46％)。
步骤G：1-(4-((7-(叔丁氧基羰基)-7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)甲基)苯基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸
在0℃下，向2-(4-(3-(甲氧羰基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苄基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-甲酸叔丁酯(250mg，0.398mmol，1.0当量)的四氢呋喃(2mL)、甲醇(1mL)和水(1mL)的混合溶液中加入氢氧化锂(41.78mg，0.996mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，反应液用稀释的1N HCl溶液调节PH 5-6。混合液乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，200mg，产率82％)。
步骤H：2-(4-(3-氨基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苄基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-甲酸叔丁酯
在室温下，向1-(4-((7-(叔丁氧基羰基)-7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)甲基)苯基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸(220mg，0.359mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中加入氯化铵(38.35mg，0.717mmol，2.0当量)、DIEA(92.68mg，0.717mmol，2.0当量)和HATU(204.48mg，0.538mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，200mg，产率91％)。
步骤I：N-(1-(4-((7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)甲基)苯基)-3-甲酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃下，向2-(4-(3-氨基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苄基)-7-氮杂 螺[3.5]壬-7-甲酸叔丁酯(200mg，0.326mmol，1.0当量)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入三氟乙酸(0.5mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，用1N NaOH稀溶液淬灭，二氯甲烷萃取三次，混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状物，150mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤J：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((7-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)-7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向N-(1-(4-((7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)甲基)苯基)-3-甲酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(150mg，0.293mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2mL)溶液中加入2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟异吲哚啉-1,3-二酮(161.68mg，0.585mmol，2.0当量)和DIEA(75.65mg，0.585mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下90℃搅拌反应1小时。反应完全后，冷却至室温，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，20mg，产率9％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.07(s,1H),8.98(s,1H),8.45(d,J＝7.5Hz,1H),8.40(s,1H),8.21(s,1H),8.00(s,1H),7.87(d,J＝8.8Hz,2H),7.77(s,1H),7.63(d,J＝8.6Hz,1H),7.34(s,2H),7.31(d,J＝2.0Hz,1H),7.23(d,J＝6.6Hz,1H),5.08-5.04(m,1H),3.45-3.38(m,4H),2.88(d,J＝5.8Hz,1H),2.77-2.74(m,2H),2.65-2.57(m,2H),1.97-1.94(m,2H),1.64(s,4H),1.58-1.53(m,4H).LC-MS(ESI):m/z 769[M+H]+.
制备例304.化合物A220的合成
步骤A：2-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-8-甲酸叔丁酯
在0℃下，向2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟异吲哚啉-1,3-二酮(500mg，1.81mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入2,8-二氮杂螺[4.5]癸-8-甲酸叔丁酯(479mg，1.99mmol，1.1当量)和DIEA(702mg，5.43mmol，3.0当量)。反应混合物在90℃下搅拌5小时。反应完全后，用水淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，280mg，产率31％)。
步骤B：2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮
在0℃下，向2-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-8-甲酸叔丁酯(280mg，0.564mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入4M HCl 1,4二氧六环溶液(1.5mL，6.00mmol，10.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，200mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((2-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(200mg，0.504mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入三乙胺(102mg，1.01mmol，2.0当量)并搅拌5分钟，再加入N-(3-氨基甲酰基-1-(4-甲酰基苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺和乙酸(151mg，2.52mmol，5.0当量)。反应混合液在室温搅拌反应18小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(95.1mg，1.51mmol，3.0当量)。反应混合物在40℃下搅拌反应2小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，100mg，产率25％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.06(s,1H),9.01(s,1H),8.52-8.32(m,2H),8.21(d,J＝7.6Hz,1H),8.01(s,1H),7.94(d,J＝8.5Hz,2H),7.77(s,1H),7.64(d,J＝8.4Hz,1H),7.48(d,J＝8.5Hz,2H),6.92(s,1H),6.84-6.78(m,1H),5.09-5.01(m,1H),3.58(s,2H),3.50-3.44(m,2H),3.41-3.36(m,2H),3.30(s,2H),2.94-2.82(m,1H),2.62-2.54(m,2H),2.45-2.32(m,2H),2.05-1.95(m,1H),1.94-1.82(m,2H),1.66-1.53(m,4H).LC-MS(ESI)m/z 784[M+H]+.
制备例305.化合物A221的合成
步骤A：2-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-7-氮杂螺[3.5]壬-1-烯-7-甲酸叔丁酯
在-78℃氮气保护下，向2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬-7-甲酸叔丁酯(2g，8.3mmol，1.0当量)的四氢呋喃(10mL)溶液中缓慢加入1M双(三甲基甲硅烷基)酰胺锂四氢呋喃溶液(16.6 mL，16.6mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下-78℃搅拌反应1小时。向上述反应液中继续加入1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲磺酰胺(3.3g，9.2mmol，1.1当量)。反应液缓慢升至室温并在氮气保护下室温搅拌反应18小时。反应完全后，用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(无色油状物，2g，产率64％)。
步骤B：2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-7-氮杂螺[3.5]壬-1-烯-7-甲酸叔丁酯
在室温下，向2-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-7-氮杂螺[3.5]壬-1-烯-7-甲酸叔丁酯(2g，5.4mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(20mL)溶液中加入4,4,4',4',5,5',5'，5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧杂硼烷)(1.4g，5.4mmol，1.0当量)、Pd(dppf)Cl2(0.4g，0.5mmol，0.1当量)和乙酸钾(1.1g，10.8mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下80℃下搅拌3小时。反应完全后，反应液无需处理直接用于下一步。
步骤C：2-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)-7-氮杂螺[3.5]壬-1-烯-7-甲酸叔丁酯
在室温下，向2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-7-氮杂螺[3.5]壬-1-烯-7-甲酸叔丁酯(2g，5.8mmol，1.0当量)和5-溴-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮(1.9g，5.8mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(30mL)和水(3mL)的溶液中加入碳酸钠(1.8g，17.2mmol，3.0当量)和Pd(dppf)Cl2(0.42g，0.58mmol，0.1当量)。反应混合物在氮气保护下80℃搅拌反应3小时。反应完全后，冷却至室温，加入水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.5g，产率55％)。
步骤D：2-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-甲酸叔丁酯
在室温下，向2-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)-7-氮杂螺[3.5]壬-1-烯-7-甲酸叔丁酯(500mg，1.0mmol，1.0当量)的四氢呋喃(10mL)溶液中加入10％钯碳(100mg)。反应液在氢气球保护下抽换气三次并且在氢气下40℃搅拌16小时。反应完毕，过滤，滤液减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，400mg，产率80％)。
步骤E：2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮
在0℃下，向2-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-甲酸叔丁酯(400mg，0.8mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(2mL，8mmol，10当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应0.5小时。反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(白色固体，300mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤F:N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((2-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)异吲哚啉-1,3-二酮(300mg，0.8mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入N-(3-氨基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(348mg，0.9mmol，1.1当量)。反应混合液在室温搅拌反应2小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(829mg，3.9mmol，5.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应2小时。反应完全后，加水稀释，二氯甲烷萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，52mg，产率9％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.79(s,1H),11.12(s,1H),9.01(s,1H),8.46(d,J＝7.5Hz,1H),8.40(t,J＝7.8Hz,1H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),8.01(s,1H),7.94(d,J＝8.3Hz,2H),7.84(d,J＝7.7Hz,1H),7.78(s,1H),7.76-7.71(m,2H),7.48(d,J＝8.3Hz,2H),5.14(dd,J＝12.9,5.3Hz,1H),3.72(p,J＝9.2Hz,1H),3.52(s,2H),2.96-2.80(m,1H),2.65-2.52(m,2H),2.42(s,2H),2.29(t,J＝9.9Hz,3H),2.11-2.01(m,1H),1.94-1.82(m,2H),1.76(s,2H),1.57(s,2H).LC-MS(ESI):m/z 769[M+H]+.
制备例306.化合物A222的合成
步骤A：9-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯
在室温下，向2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟异吲哚啉-1,3-二酮(700mg，2.534mmol，1.0当量)和3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁酯(709mg，2.788mmol，1.1当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入DIEA(981mg，7.62mmol，3.0当量)。反应液在90℃下搅拌5小时。反应完全后，冷却至室温，用水稀释，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，700mg，产率54％)。
步骤B：2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮
在0℃下，向9-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一 烷-3-甲酸叔丁酯(300mg，1.036mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5mL)中加入三氟乙酸(1mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，200mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((9-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)-3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(3,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮(200mg，0.487mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入三乙胺(123mg，1.21mmol，2.5当量)并搅拌5分钟，再加入乙酸(292mg，4.87mmol，6.0当量)和N-(3-氨基甲酰基-1-(4-甲酰基苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(196mg，0.487mmol，1.0当量)。反应混合液在室温搅拌反应18小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(131mg，2.04mmol，4.0当量)。反应混合物在40℃下搅拌反应2小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，41.2mg，产率11％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.07(s,1H),9.01(s,1H),8.47-8.38(m,2H),8.22(d,J＝7.5Hz,1H),8.15(s,1H),8.01(s,1H),7.94(d,J＝8.6Hz,2H),7.77(s,1H),7.65(d,J＝8.6Hz,1H),7.47(d,J＝8.5Hz,2H),7.30(s,1H),7.22(d,J＝8.7Hz,1H),5.14-4.94(m,1H),3.57(s,2H),3.49-3.42(m,5H),2.92-2.82(m,1H),2.68-2.54(m,2H),2.43-2.39(m,3H),2.06-1.97(m,1H),1.59-1.46(m,8H).LC-MS(ESI):m/z 798[M+H]+.
制备例307.化合物A223的合成
步骤A：2-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-甲酸叔丁酯
在室温下，向2-氨基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(200mg，0.83mmol，1.0当量)的二甲基亚砜(5mL)溶液中加入三乙胺TEA(0.2mL)和2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟异吲哚啉-1,3-二酮(200mg，0.83mmol，1.0当量)。反应混合物在氮气保护下100℃搅拌反应18小时。反应完全后，冷却至室温，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，320mg，产率77％)。
步骤B：5-(7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)氨基)-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮
在0℃下，向2-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-甲酸叔丁酯(100mg，0.2mmol，1.0当量)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入三氟乙酸(1mL)。反应混合物在室温下搅拌反应0.5小时。反应完全后，减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，75mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(2-(((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向5-(7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)氨基)-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮(75mg，0.19mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中加入三乙胺(0.1mL)。反应液在室温下搅拌反应10分钟。向上述反应液中依次加入1-(4-甲酰基苯基)-4-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)吡唑-3-甲酰胺(91.56mg，0.227mmol，1.2当量)和乙酸(0.2mL)。反应液在室温下搅拌反应0.5小时。接着继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(80.17mg，0.38mmol，2.0当量)。反应液在室温下额外搅拌反应2小时。反应完成后，用水淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，25mg，产率17％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.05(s,1H),9.02(s,1H),8.46(d,J＝7.7Hz,1H),8.42-8.38(m,1H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),8.14(s,0.5H),8.00(s,1H),7.95(d,J＝8.4Hz,2H),7.77(s,1H),7.56(d,J＝8.3Hz,1H),7.49(d,J＝8.4Hz,2H),7.35(d,J＝5.9Hz,1H),6.86(s,1H),6.78(d,J＝8.4Hz,1H),5.03(dd,J＝12.9,5.4Hz,1H),4.03-3.97(m,1H),3.60(s,2H),2.86(d,J＝11.9Hz,1H),2.62-2.52(m,2H),2.47(s,2H),2.40-2.30(m,4H),2.02-1.97(m,1H),1.76(s,1H),1.70-1.57(m,6H).LC-MS(ESI):m/z 784[M+H]+.
制备例308.化合物A224的合成
步骤A：7-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟异吲哚啉-1,3-二酮(500mg，1.810mmol，1.0当量)和2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(450mg，1.99mmol，1.1当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入DIEA(701mg，5.43mmol，3.0当量)。反应液在90℃下搅拌5 小时。反应完全后，冷却至室温，用水稀释，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，500mg，产率57％)。
步骤B：2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(2,7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)异吲哚啉-1,3-二酮在0℃下，向7-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬-2-甲酸叔丁酯(500mg，1.04mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5mL)中加入三氟乙酸(1mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，300mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((2-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(2,7-二氮杂螺[3.5]壬-7-基)异吲哚啉-1,3-二酮(200mg，0.52mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入三乙胺(132mg，1.31mmol，2.5当量)并搅拌5分钟，再加入乙酸(188mg，3.14mmol，6.0当量)和N-(3-氨基甲酰基-1-(4-甲酰基苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(211mg，0.52mmol，1.0当量)。反应混合液在室温搅拌反应18小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(131mg，2.04mmol，4.0当量)。反应混合物在40℃下搅拌反应2小时。反应完全后，冷却至室温，加水淬灭，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，33.8mg，产率8％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),11.06(s,1H),9.01(s,1H),8.47-8.37(m,2H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),8.14(s,1H),8.01(s,1H),7.95(d,J＝8.6Hz,2H),7.78(s,1H),7.63(d,J＝8.3Hz,1H),7.48(d,J＝8.5Hz,2H),6.78(d,J＝1.8Hz,1H),6.68-6.62(m,1H),5.09-5.01(m,1H),3.76(s,4H),3.53(s,2H),2.94-2.81(m,1H),2.69-2.52(m,2H),2.48-2.30(m,4H),2.03-1.96(m,1H),1.85-1.72(m,4H).LC-MS(ESI)m/z:770[M+H]+.
制备例309.化合物A225的合成
步骤A：2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-甲基异吲哚啉-1,3-二酮
在室温下，向5-甲基异苯并呋喃-1,3-二酮(2g，12.3mmol，1.0当量)的乙酸(20mL)溶液中加入3-氨基哌啶-2,6-二酮(2.03g，12.3mmol，1.0当量)和乙酸钾(2.42g，24.7mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下110℃搅拌反应16小时。反应完全后，反应液冷却至室温，用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(棕色固体，3.3g，粗品)。
步骤B：5-(溴甲基)-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮
在室温下，向2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-甲基异吲哚啉-1,3-二酮(3.3g，12.1mmol，1.0当量)的乙腈(35mL)溶液中加入N-溴代丁二酰亚胺(2.59g，14.5mmol，1.2当量)和偶氮二异丁腈(0.30g，1.82mmol，0.15当量)。反应液在氮气保护下90℃搅拌反应16小时。反应完全后，反应液冷却至室温，用水稀释并搅拌，固体析出后过滤。粗品乙酸乙酯洗涤，完全干燥后得到标题化合物(棕色固体，3.5g，粗品)。
步骤C：2-(4-(3-氨基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苄基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯
在室温下，向N-(3-氨基甲酰基-1-(4-甲酰基苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(700mg，1.74mmol，1.0当量)的1,2-二氯乙烷(15mL)溶液中加入2,8-二氮杂螺[4.5]癸-8-甲酸叔丁酯(459mg，1.91mmol，1.1当量)。反应混合液在室温搅拌反应2小时。向上述反应液中继续加入三乙酰氧基硼氢化钠(736mg，3.47mmol，2.0当量)。反应混合物在室温下搅拌反应16小时。反应完全后，加水稀释，二氯甲烷萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，700mg，产率64％)。
步骤D：N-(1-(4-((2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)甲基)苯基)-3-甲酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
向2-(4-(3-氨基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苄基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯(700mg，1.12mmol，1.0当量)的二氯甲烷(20mL)溶液中加入4M HCl 1,4-二氧六环溶液(5mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应3小时。反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(棕色油状物，550mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((8-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)甲基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)甲基苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向N-(1-(4-((2,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-基)甲基)苯基)-3-甲酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(200mg，0.379mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2mL)溶液中加入5-(溴甲基)-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮(133mg，0.379mmol，1.0当量)和DIEA(98.mg，0.758mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下50℃搅拌反应2小时。反应完全后，反应液冷却至室温，用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，150mg，产率50％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),11.16(s,1H),10.62(s,1H),10.03(s,1H),9.12(s,1H),8.43(dt,J＝15.5,7.6Hz,2H),8.23(dd,J＝7.6,1.0Hz,1H),8.14(d,J＝8.0Hz,2H),8.08(s,1H),8.07-8.01(m,2H),7.95(d,J＝6.9Hz,1H),7.85(s,1H),7.71(d,J＝7.6Hz,2H),5.19(dd,J＝12.7,5.4Hz,1H),4.48(d,J＝29.4Hz,4H),3.53(d,J＝19.0Hz,2H),3.34(s,4H),3.12(s,3H),2.96-2.81(m,1H),2.71-2.52(m,2H),2.09-2.06(m,2H),1.87-1.76(m,4H).LC-MS(ESI):m/z 798[M+H]+.
制备例310.化合物A226的合成
步骤A：8-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)氨基)-2-氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向8-氨基-2-氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯(217mg，0.8mmol，1.0当量)的二甲基亚砜(10mL)溶液中加入三乙胺(0.2mL，1.6mmol，2.0当量)和2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟异吲哚啉-1,3-二酮(200mg，0.8mmol，1.0当量)。反应混合物在氮气保护下90℃搅拌反应18小时。反应完全后，冷却至室温，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，混合有机 相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，180mg，产率45％)。
步骤B：5-(2-氮杂螺[4.5]癸-8-基)氨基)-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮
在0℃下，向8-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)氨基)-2-氮杂螺[4.5]癸-2-甲酸叔丁酯(180mg，0.4mmol，1.0当量)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入三氟乙酸(3mL)。反应混合物在室温下搅拌反应0.5小时。反应完全后，减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色固体，140mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((8-((2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)氨基)-2-氮杂螺[4.5]癸-2-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向5-(2-氮杂螺[4.5]癸-8-基)氨基)-2-(2,6-二氧哌啶-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮(140mg，0.35mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入三乙胺(35mg，0.35mmol，1.0当量)。反应液在室温下搅拌反应10分钟。向上述反应液中依次加入N-(3-氨基甲酰基-1-(4-甲酰基苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(165mg，0.4mmol，1.2当量)和乙酸(20mg，0.3mmol，1.0当量)。反应液在室温下搅拌反应0.5小时。接着继续加入三乙酰氧基硼氢化钠((145mg，0.7mmol，2.0当量)。反应液在室温下额外搅拌反应1小时。反应完成后，用水淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，100mg，产率37％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.04(s,1H),9.02(s,1H),8.48-8.34(m,2H),8.22(d,J＝7.4Hz,1H),8.13(s,0.77H),8.03-7.92(m,3H),7.78(s,1H),7.56-7.47(m,3H),6.98-6.92(m,1H),6.90-6.81(m,1H),5.02(dd,J＝12.3,4.7Hz,1H),3.74(d,J＝14.9Hz,2H),2.85(d,J＝12.1Hz,1H),2.69(s,2H),2.57-2.53(m,2H),2.46-2.30(m,2H),2.02-1.96(m,1H),1.84(d,J＝10.9Hz,2H),1.74-1.58(m,4H),1.51-1.43(m,2H),1.36-1.29(m,2H),1.18(s,1H).LC-MS(ESI):m/z 798[M+H]+.
制备例311.化合物A227的合成
步骤A：2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(3-(羟甲基)吡咯烷-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮
在室温下，向2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟异吲哚啉-1,3-二酮(1.1g，3.9mmol，1.0当量)的N-甲基吡咯烷酮(11mL)溶液中加入N,N-二异丙基乙胺(1.54g，11.9mmol，3.0当量)和 四氢-1H-吡咯-3-基甲醇(0.4g，3.9mmol，1.0当量)。反应混合物在120℃下搅拌0.5小时。反应完全后，用水淬灭，乙酸乙酯萃取三次。混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经反相柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.2g，产率81％)。LC-MS(ESI)m/z 358[M+H]+.
步骤B：1-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)吡咯烷-3-甲醛
在0℃下，向2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-(3-(羟甲基)吡咯烷-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮(800mg，2.2mmol，1.0当量)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入DMP(1.4g，3.3mmol，1.5当量)。反应混合物氮气保护室温下搅拌2小时。反应完全后，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，700mg，产率84％)。LC-MS(ESI)m/z:356[M+H]+.
步骤C：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基)吡咯烷-3-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基)吡咯烷-3-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(388mg，0.84mmol，1.0当量)的甲醇(20mL)溶液中加入三乙胺(0.117mL，0.84mmol，1.0当量)并搅拌5分钟，再加入醋酸(0.097mL，1.69mmol，2.0当量)和1-(2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-1,3-二氧异吲哚啉-5-基)吡咯烷-3-甲醛(300mg，0.84mmol，1.0当量)。反应混合液在室温搅拌反应18小时。向上述反应液中继续加入氰基硼氢化钠(212.21mg，3.4mmol，4.0当量)。反应混合物在40℃下搅拌反应2小时。反应完全后，加水稀释，乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，40mg，产率6％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.06(s,1H),8.88(s,1H),8.46-8.37(m,2H),8.21(d,J＝7.7Hz,1H),8.15(s,1H),7.95(s,1H),7.79(d,J＝9.0Hz,2H),7.71(s,1H),7.64(d,J＝8.4Hz,1H),7.09(d,J＝9.1Hz,2H),6.91(s,1H),6.82(d,J＝8.6Hz,1H),5.09-5.03(m,1H),3.63-3.57(m,1H),3.51(s,1H),3.43(t,J＝8.6Hz,1H),3.24(s,4H),3.20-3.14(m,1H),2.87(dd,J＝21.5,9.9Hz,1H),2.69-2.55(m,7H),2.43(d,J＝7.3Hz,2H),2.16(d,J＝6.6Hz,1H),2.04-1.97(m,1H),1.81-1.78(m,1H).LC-MS(ESI)m/z:799[M+H]+.
制备例312.化合物A228的合成
步骤A：1-(4-溴苯基)-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(4g，23.4mmol，1.0当量)和(4-溴苯基)硼酸(4.7g，23.4mmol，1.0当量)的二氯甲烷(40mL)溶液中加入醋酸铜(4.3g，23.4mmol，1.0当量)和三乙胺(6.5mL，46.8mmol，2.0当量)。反应液在氧气保护条件下室温反应16小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，3g，产率39％)。
步骤B：1-(4-(4-(((叔丁氧羰基)氨基)哌啶-1-基)苯基)-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在室温下，向1-(4-溴苯基)-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(2.4g，7.4mmol，1.0当量)和哌啶-4-基氨基甲酸叔丁酯(2.4g，7.4mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(100mL)溶液中加入碳酸铯(4.8g，14.7mmol，2.0当量)、BINAP(461mg，0.74mmol，0.1当量)和Pd2(dba)3(678mg，0.74mmol，0.1当量)。反应液在氮气保护条件下100℃反应16小时。反应完全后，反应液降至室温，倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.7g，产率52％)。
步骤C：(1-(4-(3-氨基甲酰基-4-硝基-1H-吡唑-1-基)苯基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，1-(4-(4-(((叔丁氧羰基)氨基)哌啶-1-基)苯基)-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(1.7g，3.816mmol，1.0当量)的氨/甲醇(20mL，2mol/L.)溶液在80℃反应16小时。反应完全后，反应液减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，1.5g，粗品)。
步骤D：(1-(4-(4-氨基-3-氨基甲酰基-1H-吡唑-1-基)苯基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向(1-(4-(3-氨基甲酰基-4-硝基-1H-吡唑-1-基)苯基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(1.5g，3.5mmol，1.0当量)的四氢呋喃/甲醇(8/8mL)溶液加入10％钯碳(150mg，10重 量％)。反应液氢气置换三次，在氢气保护下室温反应16小时。反应完全后，反应液过滤，用甲醇洗涤三次，滤液减压浓缩得到标题化合物(棕色固体，1.1g，粗品)。
步骤E：(1-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯
在0℃下，向(1-(4-(4-氨基-3-氨基甲酰基-1H-吡唑-1-基)苯基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(1.1g，2.6mmol，1.0当量)和6-(三氟甲基)吡啶甲酸(0.5g，2.6mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(30mL)溶液中加入DIEA(1.0g，0.7mmol，7.7当量)和HATU(1.2g，3.1mmol，1.2当量)。反应液在室温条件下反应4小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.2g，产率82％)。
步骤F：N-(1-(4-(4-氨基哌啶-1-基)苯基)-3-氨基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃下，向(1-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，0.9mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入盐酸/1,4-二氧六环(5mL，4M)。反应液在室温条件下反应1小时。反应完全后，反应液减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，0.4g，粗品)。
步骤G：2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(3-(羟甲基)吡咯烷-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮
在0℃下，向2-(2,6-二氧哌啶-3-基)-5-氟异吲哚啉-1,3-二酮(500mg，1.8mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(30mL)溶液中加入吡咯烷-3-基甲醇(183mg，1.8mmol，1.0当量)和DIEA(1.0g，0.7mmol，7.7当量)。反应液在80℃条件下反应16小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，390mg，产率60％)。
步骤H：1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-5-基)吡咯烷-3-甲醛
在室温下，向2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(3-(羟甲基)吡咯烷-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮(300mg，0.8mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入戴斯-马丁氧化剂(427mg，1.0mmol，1.2当量)。反应液在氮气保护条件下室温反应1.5小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，220mg，产率74％)。
步骤I：N-(3-羰基-1-(4-(4-((1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚-5-基)吡咯烷-3-基)甲基)氨基)哌啶-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在室温下，向N-(1-(4-(4-氨基哌啶-1-基)苯基)-3-氨基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(187mg，0.5mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1,3-二氧代异吲哚啉-5-基)吡咯烷-3-甲醛(250mg，0.7mmol，1.4当量)和乙酸(0.02mL)。反应液在室温条件下反应半小时。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(336mg，1.6mmol，3.0当量)，反应液在室温条件下搅拌1小时。反应完全后，反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，20mg，产率7％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.06(s,1H),8.86(s,1H),8.48-8.37(m,2H),8.25-8.19(m,1H),7.97-7.91(m,1H),7.80-7.74(m,2H),7.70(s,1H),7.64(d,J＝8.4Hz,1H),7.12-7.02(m,2H),6.94-6.88(m,1H),6.86-6.78(m,1H),5.09-5.01(m,1H),3.80-3.70(m,2H),3.62-3.53(m,1H),3.53-3.46(m,2H),3.23-3.16(m,2H),2.89(s,1H),2.86-2.79(m,2H),2.73(s,1H),2.69-2.59(m,3H),2.58-2.53(m,1H),2.48-2.43(m,1H),2.21-2.10(m,1H),2.07-1.97(m,1H),1.98-1.89(m,2H),1.86-1.75(m,1H),1.48-1.33(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 813[M+H]+.
制备例313.化合物A298的合成
步骤A：1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-4-(4-(((叔丁基二甲基硅氧基)甲基)-3,3-二氟哌啶-1-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮
将1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-4-溴-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(1.0g，1.94mmol，1.0当量),4-(((叔丁基二甲基硅氧基)甲基)-3,3-二氟哌啶(515mg，1.94mmol，1.0当量),Ruphos(181mg，0.39mmol，0.2当量),Ruphos Pd G1(317mg，0.39mmol，0.2当量)和碳酸铯(1.89g，5.82mmol，3.0当量)加入二氧六环(30ml)中，在100℃、氮气下搅拌16小时。然后将溶液用水(50mL)稀释，用乙酸乙酯(50mL)萃取。合并有机层用水(50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩。将残渣用硅胶柱色谱法(100-200目硅胶，0-100％乙酸乙酯在PE中)纯化，得到标题化合物(黄色固体，700mg，收率51％)。
步骤B：3-(4-(3,3-二氟-4-(羟甲基)哌啶-1-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
将1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-4-(4-(((叔丁基二甲基硅氧基)甲基)-3,3-二氟哌啶-1-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(700mg，1.0mmol，1.0当量)加入到乙醇(15mL) 中，并在25℃下加入钯碳(500mg，重量百分比为10％)和氢氧化钯碳(200mg，重量百分比为10％)。将混合物用氢气脱气三次，并在60℃、氢气气氛下搅拌16小时。将所得溶液通过硅胶垫过滤，并在减压下浓缩，得到白色固体(白色固体，300.0mg，收率73％)。
步骤C：1-(1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-3,3-二氟哌啶-4-甲醛
将3-(4-(3,3-二氟-4-(羟甲基)哌啶-1-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(300mg，0.73mmol，1.0当量)加入到二氯甲烷(20mL)中，并在0℃下加入戴斯-马丁(622mg，1.46mmol，2.0当量)。将混合物在0℃下搅拌2小时。然后将所得溶液用50mL饱和硫代硫酸钠溶液稀释，并用二氯甲烷(100mL×3)萃取。合并有机层，用水(100mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩以得到标题化合物(白色固体，250mg，产率84％)。
步骤D：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-((1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-3,3-二氟哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向1-(1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-3,3-二氟哌啶-4-甲醛(251mg，0.62mmol，1.0当量)的DMF(10mL)溶液中加入N-(3-氨甲基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡咯烷酰胺(283mg，0.62mmol，1.0当量)和乙酸(0.5mL)，然后混合物在25℃搅拌1小时。然后向混合物中加入醋酸硼氢化钠(526mg，2.48mmol，4.0当量)。将混合物在25℃搅拌30分钟。得到的溶液用水(50mL)稀释，用乙酸乙酯(50mL×3)提取。有机层用盐水(50mL)洗涤，用硫酸钠干燥，在减压下浓缩。残渣用预先制备的HPLC纯化，得到标题化合物(白色固体，40.6mg，收率8％)。LC-MS(ESI):m/z 850[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.10(s,1H),8.88(s,1H),8.48-8.35(m,2H),8.21(dd,J＝7.6,1.0Hz,1H),7.95(s,1H),7.79(d,J＝9.1Hz,2H),7.71(s,1H),7.09(d,J＝9.2Hz,2H),7.04-6.93(m,3H),5.43-5.30(m,1H),3.61(s,3H),3.41-3.30(m,4H),3.27-3.13(m,6H),2.94-2.78(m,2H),2.76-2.60(m,5H),2.39-2.24(m,1H),2.12-1.96(m,2H),1.81-1.43(m,1H).
制备例314.化合物A299的合成
步骤A：3,3-二氟-4-亚甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯
在0℃下，向搅拌着的甲基三苯基溴化鏻(113g，318.8mmol，1.5当量)的四氢呋喃(300mL)溶液中加入叔丁醇钾(35.7g，318.8mmol，1.5当量)。将反应混合物在氮气保护下常温搅拌1小时。然后将其冷却至0℃，并加入溶解于四氢呋喃(200mL)的3,3-二氟-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(50g，212.5mmol，1.0当量)溶液。在氮气保护下常温搅拌16小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(亮油状，30g，产率60％)。
步骤B：3,3-二氟-4-(羟甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向搅拌着的3,3-二氟-4-亚甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(30g，128.75mmol，1.0当量)的四氢呋喃(500mL)溶液中逐滴加入硼烷四氢呋喃(257.5mL，257.52mmol，2.0当量，1M)。将反应液在氮气保护下70℃搅拌2小时。将反应液冷却至0℃，并在相同温度下向混合物中加入氢氧化钠(366mL，733.08mmol，2mol/L，5.7当量)溶液和双氧水(360mL，24.43mmol，0.2当量,wt＝30％)。将反应混合物在氮气保护下40℃搅拌过夜。反应完全后，将反应液冰水淬灭，并用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(亮油状，10g，产率31％)。
步骤C：(3,3-二氟哌啶-4-基)甲醇
在室温下，向搅拌着的3,3-二氟-4-(羟甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.0g，3.98mmol，1.0当量)的乙腈(20mL)溶液中加入HCl(4M在1,4-二氧六环中,10mL)。将反应混合物在氮气保护下室温搅拌4小时。反应完全后，将反应溶液在减压下浓缩,得到标题化合物(白色固体，500mg，粗品)。
步骤D：4-(((叔丁基二甲基硅氧基)甲基)-3,3-二氟哌啶
在室温下，向(3,3-二氟哌啶-4-基)甲醇(500mg，粗品)二氯甲烷(20mL)溶液中加入三乙胺(2.29mL，16.53mmol，5.0当量)，咪唑(450mg，6.61,2.0当量)和叔丁基二甲基氯硅 烷(744mg，4.96mmol，1.5当量)。将反应混合物在氮气保护下室温搅拌过夜。反应完全后，将反应液冰水淬灭，并用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(亮油状，500mg，两步产率56％)。
步骤E：1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-5-(4-(((叔丁基二甲基硅氧基)甲基)-3,3-二氟哌啶-1-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮
在室温下，向1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-5-溴-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(1.0g，1.94mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环溶液中加入4-(((叔丁基二甲基硅氧基)甲基)-3,3-二氟哌啶(515mg，1.94mmol，1.0当量),RuPhos(181mg，0.39mmol，0.2当量),Ru-Phos Pd G1(317mg，0.39mmol，0.2当量)和碳酸铯(1.9g，5.82mmol，3.0当量)。将反应液在氮气保护下100℃搅拌16小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，700mg，产率51％)。
步骤F：3-(5-(4-(((叔丁基二甲基硅氧基)甲基)-3,3-二氟哌啶-1-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-5-(4-(((叔丁基二甲基硅氧基)甲基)-3,3-二氟哌啶-1-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(350mg，0.50mmol，1.0当量)的乙醇溶液(12mL)中加入10％的湿钯碳(350mg，w.t＝10％)。反应液在氢气保护下室温搅拌16小时。反应完全后，将反应液用硅胶土过滤，减压浓缩，得到标题化合物(无色油状，250mg，收率96％)。
步骤G：3-(5-(3,3-二氟-4-(羟甲基)哌啶-1-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向搅拌着的3-(5-(4-(((叔丁基二甲基硅氧基)甲基)-3,3-二氟哌啶-1-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(260mg，0.497mmol，1.0当量)的乙腈(9mL)溶液中加入HCl(4M在1,4-二氧六环中，3mL)。将反应混合物在氮气保护下室温搅拌0.5小时。反应完全后，将反应溶液在减压下浓缩,得到标题化合物(白色固体，200mg，粗品)。
步骤H：1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3,3-二氟哌啶-4-甲醛
在室温下，向3-(5-(3,3-二氟-4-(羟甲基)哌啶-1-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(120mg，粗品)的二甲基亚砜(10mL)溶液中加入2-碘酰基苯甲酸 (329mg，1.18mmol，4.0当量)。将反应混合物在氮气保护下30℃搅拌50分钟。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，60mg，两步产率50％)。
步骤I：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-((1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3,3-二氟哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下,向1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3,3-二氟哌啶-4-甲醛(60mg，0.15mmol，1.0当量)的DMF(3mL)溶液中加入N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(68mg，0.15mmol，1.0当量)和3滴乙酸。室温下搅拌反应1小时后加入三乙酰氧基硼氢化钠(94mg，0.44mmol，3.0当量)。反应液在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(灰白色固体，2.2mg，产率2％)。LC-MS(ESI):m/z 850[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.79(s,1H),11.07(s,1H),8.88(s,1H),8.46-8.38(m,2H),8.23-8.19(m,1H),7.95(s,1H),7.80(d,J＝9.0Hz,2H),7.71(s,1H),7.10(d,J＝9.1Hz,2H),6.96(d,J＝8.6Hz,1H),6.91(d,1H),6.69(d,J＝8.5Hz,1H),5.30(dd,J＝12.8,5.4Hz,1H),3.84-3.75(m,1H),3.61(d,J＝12.1Hz,1H),3.35-3.34(m,1H),3.30-3.28(m,1H),3.27-3.21(m,5H),3.09-3.00(m,1H),2.89-2.78(m,2H),2.72-2.57(m,6H),2.47-2.42(m,2H),2.36-2.30(m,1H),2.11-2.06(m,1H),2.01-1.97(m,1H),1.63-1.54(m,1H).
制备例315.化合物A300的合成
步骤A：(E)-4-(2-乙氧基-2-氧代亚乙基)-3,3-二氟哌啶-1-甲酸叔丁酯
在0℃,N2下，向乙基2-(二乙氧基磷酰)乙酸乙酯(9.1g，40.43mmol，1.0当量)的DMF(100mL)溶液中，加入在矿物油中含量为60％的钠氢(1.5g，60.64mmol，1.5当量)。然后 在0℃下搅拌混合物30分钟后缓慢滴加3,3-二氟-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(9.5g，40.4 3mmol，1.0当量)的DMF(50mL)溶液，所得混合物在室温下搅拌2小时。反应完毕后，用0℃左右的饱和氯化铵水溶液淬灭，然后加入乙酸乙酯萃取三次，有机相依次用水、饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，3g，产率23％)。
步骤B：4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-3,3-二氟哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向(E)-4-(2-乙氧基-2-氧代亚乙基)-3,3-二氟哌啶-1-甲酸叔丁酯(3g，9.84mmol，1.0当量)的EtOH(50mL)溶液中加入10％Pd/C(600mg，wt＝10％)。将混合物用氢气换气三次，然后在50℃、氢气气氛下搅拌反应14小时。反应完全后，所得溶液用硅藻土垫过滤并浓缩，得到标题化合物(白色固体，2.8g，产率93％)。
步骤C：3,3-二氟-4-(2-羟乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛下于0℃，向4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-3,3-二氟哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.8g，9.12mmol，1.0当量)的四氢呋喃(30mL)溶液中加入四氢铝锂(10.9mL，27.36mmol，3.0当量，2.5M四氢呋喃溶液)。将反应混合物在0℃、氮气气氛下搅拌2小时。将所得溶液在0℃下用十水合硫代硫酸钠淬灭。然后过滤并减压浓缩以得到粗品标题化合物(明亮的油状物，1.6g，粗品)。
步骤D：2-(3,3-二氟哌啶-4-基)-1-乙醇
将3,3-二氟-4-(2-羟乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.6g，粗品)溶解在二氧六环(30mL，4M盐酸二氧六环溶液)中，在0℃下搅拌1小时。将所得溶液浓缩至干，残留物用甲基叔丁基醚洗涤，在真空下干燥，得到粗品标题化合物(白色固体，900mg，粗品)。
步骤E：4-(2-((叔丁基二甲基硅氧基)乙基)-3,3-二氟哌啶
将2-(3,3-二氟哌啶-4-基)-1-乙醇(900mg，5.45mmol，1.0当量)溶解在二氯甲烷(15mL)中，在0℃下加入咪唑(556mg，8.18mmol，1.5当量)和叔丁基二甲基氯硅烷(985mg，6.5mmol，1.2当量)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。将混合物用冰水淬灭，用20mL二氯甲烷(3次)提取。合并有机层，用饱和食盐水(20mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(油状物，1.2g，三步产率79％)。
步骤F：1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-4-(4-(2-((叔丁基二甲基硅氧基)乙基)-3,3-二氟哌啶-1-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮
将1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-4-溴-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(1.9g，3.58mmol，1.0当量),4-(2-((叔丁基二甲基硅氧基)乙基)-3,3-二氟哌啶(1.0g，3.58mmol，1.0当 量),Ruphos(334mg，0.72mmol，0.2当量),Ruphos Pd G1(292mg，0.36mmol，0.1当量)和碳酸铯(3.5g，10.75mmol，3.0当量)加入1,4-二氧六环(30mL)中，在氮气气氛下于100℃搅拌16小时。然后用50mL水稀释溶液，用乙酸乙酯(50mL×3)萃取。合并有机层用饱和食盐水(30mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，400mg，产率16％)。
步骤G：3-(4-(3,3-二氟-4-(2-羟乙基)哌啶-1-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
向乙醇(15mL)中加入1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-4-(4-(2-((叔丁基二甲基硅氧基)乙基)-3,3-二氟哌啶-1-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(400mg，0.56mmol，1.0当量)后，加入Pd/C(300mg，重量百分比为10％)和Pd(OH)2/C(100mg，重量百分比为10％)。将混合物用氢气脱气三次，然后在60℃下用氢气球搅拌14小时。将所得溶液通过硅藻土过滤，浓缩后得到粗品标题化合物(白色固体，200mg，产率85％)。
步骤H：2-(1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-3,3-二氟哌啶-4-基)乙醛
向二氯甲烷(8mL)中加入3-(4-(3,3-二氟-4-(2-羟乙基)哌啶-1-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(200mg，0.47mmol，1.0当量)后，加入戴斯-马丁氧化剂(151mg，0.71mmol，1.5当量)。反应混合物在室温下搅拌1小时。然后将所得溶液用水稀释至20mL，用二氯甲烷(20mL×3)萃取。合并有机层用饱和食盐水(30mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩后得到粗品标题化合物(白色固体，130mg，粗品)。
步骤I：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(2-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-3,3-二氟哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
向搅拌的DMF(10mL)溶液中加入2-(1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-3,3-二氟哌啶-4-基)乙醛(130mg，粗品)、醋酸(0.5mL)和N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(142mg，0.31mmol，1.0当量)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。然后在相同温度下向混合物中加入三乙酰基硼氢化钠(196mg，0.93mmol，3.0当量)。反应混合物在室温下搅拌30分钟。将所得溶液在减压下浓缩。用柱色谱纯化后作为粗产品。然后将粗产品通过制备HPLC纯化,得到标题化合物(白色固体，28.6mg，产率11％)。LC-MS(ESI):m/z 864[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.79(s,1H),11.09(s,1H),8.91-8.86(m,1H),8.48-8.37(m,2H),8.21(d, J＝7.4Hz,1H),7.95(s,1H),7.79(d,J＝8.7Hz,2H),7.71(s,1H),7.09(d,J＝8.9Hz,2H),7.04-6.92(m,3H),5.37(dd,J＝12.5,5.3Hz,1H),3.61(s,3H),3.26-3.21(m,4H),3.20-3.04(m,2H),2.95-2.63(m,4H),2.62-2.52(m,5H),2.47-2.40(m,2H),2.09-1.93(m,4H),1.72-1.55(m,1H),1.51-1.39(m,1H).
制备例316.化合物A301的合成
步骤A：(3,3-二氟-1-(2-氟-4-硝基苯基)哌啶-4-基)甲醇
在室温下，将(3,3-二氟哌啶-4-基)甲醇(500mg，3.31mmol，1.0当量)，1,2-二氟-4-硝基苯(631mg，4.0mmol，1.2当量)和三乙胺(1.4mL，9.93mmol，3.0当量)混合在二甲基亚砜(10mL)中。反应液在氮气保护下90℃搅拌16小时。反应完全后，将反应液用二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，700mg，产率73％)。
步骤B：3,3-二氟-1-(2-氟-4-硝基苯基)哌啶-4-甲醛
在室温下，向(3,3-二氟-1-(2-氟-4-硝基苯基)哌啶-4-基)甲醇(500mg，1.72mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入戴斯-马丁氧化剂(1.5g，3.45mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下25℃搅拌4小时。反应完全后，将反应液用二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状，630mg，产率99％)。
步骤C：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-((3,3-二氟-1-(2-氟-4-硝基苯基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向3,3-二氟-1-(2-氟-4-硝基苯基)哌啶-4-甲醛(198mg，0.69mmol，1.0当量)和N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(300mg，0.65mmol，1.0当量)的DMF(10mL)中加入醋酸(12mg，0.06mmol，0.1当量)，反应液在氮气保护下25℃下搅拌1小时，加入醋酸硼氢化(554mg，2.61mmol，4.0当量)。反应完 全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，200mg，产率42％)。
步骤D：N-(1-(4-(4-((1-(4-氨基-2-氟苯基)-3,3-二氟哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-3-氨基甲酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下,将N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-((3,3-二氟-1-(2-氟-4-硝基苯基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(120mg，0.16mmol，1.0当量),铁粉(92mg，1.64mmol，10.0当量)和氯化铵(88mg，1.64mmol，10.0当量)溶解在四氢呋喃(10mL)和水(3mL)中，反应液在氮气保护下70℃搅拌16小时。反应完全后，溶液通过硅藻土垫过，二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到标题化合(黄色固体，100mg，产率87％)。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-((1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)-3,3-二氟哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，将N-(1-(4-(4-((1-(4-氨基-2-氟苯基)-3,3-二氟哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-3-氨基甲酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(100mg，0.14mmol，1.0当量)，3-溴-2,6-哌啶二酮(108mg，0.57mmol，4.0当量)和碳酸氢钠(47mg，0.57mmol，4.0当量)溶解在二氧六环(2mL)中，反应液在氮气保护下80℃搅拌5小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经高效液相色谱法得到标题化合物(黄色固体，10mg，产率10％)(0.5甲酸盐)。LC-MS(ESI):m/z 813[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.79(s,1H),10.78(s,1H),8.88(s,1H),8.47-8.38(m,2H),8.21(d,J＝7.6Hz,1H),8.17(s,1H),7.95(s,1H),7.79(d,J＝8.7Hz,2H),7.71(s,1H),7.09(d,J＝9.0Hz,2H),6.87(t,J＝9.3Hz,1H),6.48(dd,J＝35.2,11.7Hz,2H),5.89(d,J＝7.8Hz,1H),4.31-4.24(m,1H),3.24-3.18(m,6H),3.17-3.13(m,2H),3.02-2.91(m,2H),2.70-2.64(m,3H),2.61-2.56(m,2H),2.35-2.20(m,2H),2.10-2.03(m,2H),1.89-1.81(m,1H),1.58-1.50(m,1H).
制备例317.化合物A302的合成
步骤A：4-(2-(4-(3-氨基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-基) 乙基)哌嗪1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(2-(4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(500mg，1.1mmol，1.0当量)、4-(2-氯乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(546mg，2.2mmol，2.0当量)的乙腈(25mL)溶液中加入碘化钾(183mg，1.1mmol，1.0当量)和碳酸钾(455mg，3.3mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下80℃搅拌反应2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，400mg，产率54％)。
步骤B：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(2-(哌嗪-1-基)乙基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下,向4-(2-(4-(3-氨基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)哌嗪1-甲酸叔丁酯(400mg，0.6mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入4M盐酸-二氧六环(2mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌2小时。反应完全后，减压浓缩，得到标题化合物(白色固体，310mg，粗品)。
步骤C：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)哌嗪-1-基)乙基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(2-(哌嗪-1-基)乙基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(114mg，粗品)、3-(5-溴-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮(200mg，0.35mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(10mL)溶液中加入PEPPSI-IHept-Cl(17mg，17.5umol，0.05当量)和碳酸铯(341g，1.05mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下110℃搅拌反应16小时。反应完全后，将反应液用醋酸水溶液淬灭，二氯甲烷萃取，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，2mg，产率7％)。LC-MS(ESI):m/z 814[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.80(s,1H),10.95(s,1H),8.92(s,1H),8.42(d,J＝13.6Hz,2H),8.22(d,J＝7.4Hz,1H),7.94(s,1H),7.86(d,J＝6.1Hz,2H),7.74(s,1H),7.58(d,J＝5.6Hz,1H),7.16(s,5H),5.06(d,J＝12.0Hz,1H),4.29(dd,J＝48.9,16.7Hz,4H),3.26-3.14(m,9H),2.91(s,2H),2.74-2.60(m,3H),2.42-2.32(m,2H),2.00-1.94(m,1H).
制备例318.化合物A303的合成
步骤A：N-(3-氨甲酰基-1-(4-((1-(3-(2,4-二氧四氢嘧啶-1(2H)基)-4-甲氧基苯甲酰基)吡咯烷-3-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺盐酸盐
在室温下，向N-(3-氨甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺盐酸盐(133mg，0.3mmol，1.0当量)和1-(3-(2,4-二氧四氢嘧啶-1(2H)基)-4-甲氧基苯甲酰基)吡咯烷-3-甲醛(100mg，0.3mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入三乙胺(0.1mL)。反应液搅拌5分钟后，醋酸(0.2mL)加到反应液中，接着继续搅拌15小时。三乙酰氧基醋酸硼氢化钠(95mg，0.5mmol，1.5当量)加到反应液中，继续搅拌1小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，27.2mg，产率11％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.11(d,J＝58.8Hz,1H),10.35(s,1H),8.92(s,1H),8.42(dt,J＝15.4,7.6Hz,2H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),7.97(s,1H),7.86(s,2H),7.74(s,1H),7.55(d,J＝19.4Hz,2H),7.17(d,J＝8.0Hz,3H),3.98-3.80(m,6H),3.72-3.50(m,6H),3.43-3.08(m,7H),2.87-2.64(m,3H),2.23-2.09(m,1H),1.83-1.70(m,1H).LC-MS(ESI):m/z 789[M+H]+.
制备例319.化合物A304的合成
步骤A：1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-5-(3-(羟甲基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮的混合物
在室温下，向1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-5-溴-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(1.0g，1.94mmol，1.0当量)的DMF(15mL)溶液中加入吡咯烷-3-基甲醇(0.2g，1.94mmol，1.0当量),Pd2(dba)3(180mg，0.2mmol，0.2当量),X-Phos(180mg，0.2mmol，0.4当量)和Cs2CO3(1.9g，5.8mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下100℃搅拌反应5小时。反 应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，200mg，产率19％)。
步骤B：3-(5-(3-(羟甲基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在室温下,向1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-5-(3-(羟甲基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮的混合物(200mg，0.37mmol，1.0当量)的乙醇(10mL)溶液中加入10％的湿钯碳(226mg)。反应液在氢气保护下60℃搅拌3小时。反应完全后，将反应液用硅胶土过滤，减压浓缩，得到标题化合物(白色固体，50mg，产率37％)。
步骤C：1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)吡咯烷-3-甲醛
室温下,向3-(5-(3-(羟甲基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(50mg，0.14mmol，1.0当量)的DMSO(30mL)溶液中加入SO3.Py(222mg，1.4mmol，10.0当量)和三乙胺(0.39mL，2.8mmol，20.0当量)。反应液在室温下搅拌1小时。反应完全后，将反应液用二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。产物直接用于下一步，无需纯化。
步骤D：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-((1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)吡咯烷-3-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)吡咯烷-3-甲醛(45mg，粗品)的DMF(5mL)溶液中加入N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(58mg，0.13mmol，1.0当量)和5滴乙酸。室温下搅拌反应2小时后加入三乙酰氧基硼氢化钠(134mg，0.65mmol，5.0当量)。反应液在室温下搅拌1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，4.5mg，产率4％)。LC-MS(ESI):m/z 800.8[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.79(s,1H),11.04(s,1H),8.88(s,1H),8.48-8.36(m,2H),8.21(d,J＝8.7Hz,1H),7.95(s,1H),7.79(d,J＝9.1Hz,2H),7.71(s,1H),7.09(d,J＝9.2Hz,2H),6.89(d,J＝8.5Hz,1H),6.39(d,J＝1.9Hz,1H),6.23(d,J＝6.7Hz,1H),5.26(dd,J＝12.8,5.3Hz,1H),3.44-3.35(m,2H),3.30(s,3H),3.27-3.23(m,4H),3.04-2.97(m,1H),2.96-2.85(m,1H),2.71-2.52(m,8H),2.46-2.38(m,2H),2.17-2.08(m,1H),2.02-1.94(m,1H),1.79-1.68(m,1H).
制备例320.化合物A305的合成
步骤A：3-(((叔丁基二苯基硅氧基)甲基)吡咯烷
向搅拌的吡咯烷-3-基甲醇(500mg，4.9mmol，1.0当量)和叔丁基二苯基氯硅(1.5g，5.4mmol，1.1当量)在二氯甲烷(5mL)中的混合物中加入DMAP(60mg，0.49mmol，0.1当量)和三乙胺(2.0mL，14.8mmol，3.0当量)。反应液在室温下搅拌2小时。将反应混合物倒入水中，用二氯甲烷萃取，有机层依次用饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物通过硅胶柱色谱纯化得到标题化合物(透明油状物，600mg，产率35％)。
步骤B：1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-4-(3-(((叔丁基二苯基硅)氧基)甲基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮
向搅拌的1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-4-溴-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(1.0g，1.9mmol，1.0当量)和3-(((叔丁基二苯基硅氧基)甲基)吡咯烷(657mg，1.9mmol，1.0当量)在二氧六环(10mL)中的混合物中加入碳酸铯(1.8g，5.8mmol，3.0当量)和RuPhos Pd G3(162mg，0.19mmol，0.1当量)。反应液用氮气置换三次，然后在氮气气氛下100℃搅拌18小时。将反应混合物倒入水中，然后用乙酸乙酯萃取，有机层依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物通过硅胶柱色谱法纯化得到标题化合物(透明油状物，500mg，产率33％)。
步骤C：1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-4-(3-(羟甲基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮
在室温下，将1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-4-(3-(((叔丁基二苯基硅)氧基)甲基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(400mg，0.5mmol，1.0当量)加入TBAF(4mL，浓度是1的四氢呋喃溶液)溶液中，然后反应液在室温下搅拌1小时。反应完毕后，用乙酸乙酯稀释，再加入水溶液进行萃取。有机层依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物通过硅胶柱色谱法纯化得到标题化合物(白色固体，200mg，产率72％)。
步骤D：1-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基) 吡咯烷-3-甲醛
在室温下，向1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-4-(3-(羟甲基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(100mg，0.2mmol，1.0当量)的二氯甲烷(1mL)溶液中加入戴斯-马丁氧化剂(170mg，0.4mmol，2.0当量)。反应液在室温下搅拌4小时。反应完毕后，将反应混合物倒入水中，然后用二氯甲烷萃取，有机层依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物通过硅胶柱色谱法纯化得到标题化合物(透明油状物，60mg，产率54％)。
步骤E：N-(1-(4-(4-((1-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)吡咯烷-3-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-3-氨基甲酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向1-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)吡咯烷-3-甲醛(60mg，0.1mmol，1.0当量)和N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(103mg，0.2mmol，2.0当量)的DMF(3mL)溶液中加入AcOH(0.12mL，2.0mmol，20当量)和氰基硼氢化钠(35mg，0.6mmol，3.0当量)。然后反应液在室温下搅拌18小时，反应完毕后，将反应混合物倒入水中，加入用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，5mg，产率4％)。
步骤F：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-((1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)吡咯烷-3-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向N-(1-(4-(4-((1-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)吡咯烷-3-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-3-氨基甲酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(5mg，0.005mmol，1.0当量)的乙醇(3mL)溶液中分别加入质量比为10％的湿Pd(OH)2(11mg，0.07mmol，1.0当量)和质量比为10％的湿Pd/C(10mg，0.09mmol，18当量)。反应液在50℃下搅拌18小时，反应完毕后，将反应液浓缩，得到残留物。残留物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，1.7mg，产率41％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),11.10(s,1H),9.46(s,1H),8.94(s,1H),8.47-8.38(m,2H),8.23(d,J＝7.5Hz,1H),7.95(s,1H),7.88(d,J＝8.7Hz,2H),7.75(s,1H),7.19(d,J＝8.8Hz,2H),7.02-6.96(m,2H),6.92-6.88(m,1H),5.40-5.33(m,1H),3.99-3.91(m,2H),3.62(s,3H),3.18-3.01(m,7H),2.95-2.79(m,4H),2.77-2.59(m,3H),2.28-2.23(m,1H),2.05-1.95(m,2H),1.77-1.68(m,1H).LC-MS(ESI):m/z 800.4[M+H]+.
制备例321.化合物A307的合成
步骤A：1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-5-(3-(2-羟乙基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮
在室温下，向2-(吡咯烷-3-基)-1-乙醇(670mg，5.81mmol，1.5当量)的DMF(10mL)溶液中加入1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-5-溴-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(2g，3.87mmol，1.0当量),Pd2(dba)3(350mg，0.39mmol，0.1当量),X-Phos(370mg，0.78mmol，0.2当量)和碳酸铯(3.8g，11.62mmol，3.0当量)。将混合物用氮气脱气三次后在100℃、氮气气氛下搅拌2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，300mg，产率13％)。
步骤B：3-(5-(3-(2-羟乙基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-5-(3-(2-羟乙基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(180mg，0.33mmol，1.0当量)的乙醇(10mL)溶液中加入10％的湿钯碳(360mg)。混合物用氢气脱气3次后再60℃、氢气气氛下搅拌3小时。将所得溶液通过垫硅藻土过滤并浓缩，得到标题化合物(白色固体，100mg，产率78％)。
步骤C：2-(1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)吡咯烷-3-基)乙醛
在室温下，向3-(5-(3-(2-羟乙基)吡咯烷-1-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(100mg，0.27mmol，1.0当量)在二甲基亚砜(5mL)中的混合物中加入吡啶三氧化硫(428mg，2.7mmol，10.0当量)和TEA(0.75mL，5.4mmol，20.0当量)。将反应物在25℃下搅拌1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。得到标题化合物(黄色固体，99mg，粗品)。
步骤D：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(2-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢 -1H-苯并[d]咪唑-5-基)吡咯烷-3-基)乙基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺甲酸酯
在室温下，向2-(1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)吡咯烷-3-基)乙醛(99mg，粗品)的DMF(5mL)溶液中加入N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(123mg，0.27mmol，1.0当量)和几滴醋酸。将混合物在室温下搅拌1小时。然后加入醋酸硼氢化钠(211mg，1.0mmol，4.0当量)，在室温下搅拌1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，6.2mg，产率3％)。LC-MS(ESI):m/z 814[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.79(s,1H),11.04(s,1H),8.88(s,1H),8.43(dd,J＝16.9,7.6Hz,2H),8.22(s,1H),8.17(s,1H),7.95(s,1H),7.79(d,J＝9.0Hz,2H),7.71(s,1H),7.08(d,J＝9.2Hz,2H),6.89(d,J＝8.6Hz,1H),6.37(s,1H),6.21(d,J＝8.7Hz,1H),5.26(dd,J＝12.9,5.3Hz,1H),3.48-3.42(m,2H),3.29(s,3H),3.25-3.20(m,6H),2.92-2.84(m,2H),2.75-2.60(m,2H),2.59-2.53(m,4H),2.45-2.41(m,2H),2.33-2.28(m,1H),2.17-2.12(m,1H),2.02-1.95(m,1H),1.67-1.63(m,2H).
制备例322.化合物A308的合成
步骤A：1-(叔丁氧羰基)-3,3-二氟哌啶-4-基4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸酯
在室温下，向3,3-二氟-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.8mmol，1.0当量)的DMF(3mL)溶液中加入CDI(136mg，0.8mmol，1.0当量)。反应液在室温下搅拌1小时。接着N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(194mg，0.4mmol，0.5当量)和DIEA(0.2mL，1.1mmol，1.5当量)加入，反应液在60℃继续反应15小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，150mg，产率27％)。
步骤B：3,3-二氟哌啶-4-基4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1- 基)苯基)哌嗪-1-甲酸酯
将1-(叔丁氧羰基)-3,3-二氟哌啶-4-基4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸酯(250mg，0.3mmol，1.0当量)的盐酸-二氧六环溶液(4mol/L)(5mL)在室温下搅拌2小时。反应完毕后，反应液浓缩得到标题化合物(黄色固体，200mg，粗品)。
步骤C：1-(3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)-3,3-二氟哌啶-4-基4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸酯
在室温下，向3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酸(85mg，0.3mmol，1.0当量)和3,3-二氟哌啶-4-基4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸酯(200mg，粗品)的DMF(5mL)溶液中加入N-甲基吗啉(0.2mL，1.6mmol，1.0当量)和HATU(183mg，0.5mmol，1.5当量)。反应液室温搅拌2小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相依次用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，27.8mg，产率10％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.36(s,1H),8.90(s,1H),8.53-8.33(m,2H),8.21(d,J＝7.6Hz,1H),7.96(s,1H),7.83(d,J＝8.8Hz,2H),7.72(s,1H),7.49-7.36(m,2H),7.20(d,J＝8.6Hz,1H),7.13(d,J＝9.2Hz,2H),5.32-5.13(m,1H),3.91-3.79(m,5H),3.78-3.39(m,8H),3.34-3.12(m,4H),2.69(t,J＝4.0Hz,2H),2.10-1.95(m,1H),1.91-1.74(m,1H).LC-MS(ESI):m/z 869[M+H]+.
制备例323.化合物A309的合成
步骤A：4-((4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苄基)哌嗪-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
室温下，向4-(哌嗪-1-甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.7mmol，1.0当量)和N-(3-氨甲酰基-1-(4-甲酰基苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(285mg，0.7mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入醋酸(0.1mL)。反应液在室温搅拌过夜，接着三乙酰氧基硼氢化钠(223mg，1.1mmol，1.5当量)加入反应液，继续搅拌1小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化 合物(黄色固体，150mg，产率32％)。
步骤B：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((4-(哌啶-4-基甲基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
将4-((4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苄基)哌嗪-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(150mg，0.2mmol，1.0当量)加入盐酸-二氧六环溶液(4mol/L)(5mL)在室温下搅拌2小时。反应完毕后，反应液浓缩得到标题化合物(黄色油状物，100mg，粗品)。
步骤C：N-(3-氨甲酰基-1-(4-(4-((1-(3-(2,4-二氧四氢嘧啶-1(2H)基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
室温下，向N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((4-(哌啶-4-基甲基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(100mg，粗品)的DMF(5mL)溶液中加入N-甲基吗啉(0.1mL，0.9mmol，5.0当量)和HATU(100mg，0.3mmol，1.5当量)。反应液室温搅拌18小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，30mg，两步产率21％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),10.33(s,1H),9.01(s,1H),8.44(dd,J＝17.6,7.8Hz,2H),8.22(d,J＝7.8Hz,1H),8.01(s,1H),7.94(d,J＝8.4Hz,2H),7.77(s,1H),7.46(d,J＝8.4Hz,2H),7.36(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),7.31(d,J＝2.0Hz,1H),7.15(d,J＝8.4Hz,1H),4.64-4.03(m,1H),3.97-3.71(m,4H),3.63-3.56(m,2H),3.54-3.48(m,2H),3.08-2.75(m,2H),2.68(t,J＝6.6Hz,2H),2.45-2.22(m,7H),2.15(d,J＝6.8Hz,2H),1.82-1.59(m,3H),1.12-0.99(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 817[M+H]+.
制备例324.化合物A310的合成
步骤A：叔丁基4-(4-(4-(3-氨甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰氨基)-1H-吡唑-1-基)苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸酯
室温下，向4-(3-氨甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰氨基)-1H-吡唑-1-基)苯甲酸(500mg，1.2mmol，1.0当量)和HATU(680mg，1.8mmol，1.5当量)的DMF(10mL)溶液中加 入4-(哌嗪-1-甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(372mg，1.312mmol，1.1当量)和DIEA(0.6mL，3.577mmol，3.0当量)。反应液室温下搅拌反应1小时。反应完毕后，反应液用水稀释，乙酸乙酯萃取。有机相依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状物，410mg，产率50％)。
步骤B：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(哌啶-4-基甲基)哌嗪-1-甲酰基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
向叔丁基4-(4-(4-(3-氨甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰氨基)-1H-吡唑-1-基)苯甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)哌啶-1-甲酸酯(410mg，0.6mmol，1.0当量)的乙酸乙酯(5mL)溶液中加入盐酸-甲醇溶液(4mol/L)(1mL)。反应液在室温下搅拌1小时。反应完毕后，反应液浓缩得到标题化合物(黄色固体，330mg，粗品)。
步骤C：N-(3-氨甲酰基-1-(4-((1-(3-(2,4-二氧四氢嘧啶-1(2H)基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-羰基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺三氟乙酸盐
室温下，向3-(2,4-二氧四氢嘧啶-1(2H)基)-4-甲氧基苯甲酸(100mg，0.4mmol，1.0当量)和HATU(187mg，0.5mmol，1.5当量)的DMF(5mL)溶液中加入N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(哌啶-4-基甲基)哌嗪-1-甲酰基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(330mg，粗品)和DIEA(0.3mL，1.9mmol，5.0当量)。反应液室温继续搅拌1小时。反应完毕后，反应液用水稀释，乙酸乙酯萃取。有机相依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，三氟乙酸盐,26.7mg，产率8％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.81(s,1H),10.34(s,1H),9.54(s,1H),9.13(s,1H),8.50-8.36(m,2H),8.23(d,J＝6.7Hz,1H),8.13(d,J＝8.5Hz,2H),8.07(s,1H),7.85(s,1H),7.66(d,J＝8.3Hz,2H),7.38(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),7.33(d,J＝2.1Hz,1H),7.17(d,J＝8.6Hz,1H),4.41(s,2H),3.85(s,3H),3.60(t,J＝6.6Hz,4H),3.09(s,7H),2.69(t,J＝6.6Hz,2H),2.13(s,1H),2.04-1.50(m,3H),1.44-1.08(m,4H).LC-MS(ESI):m/z 831[M+H]+.
制备例325.化合物A311的合成
步骤A：4-(1-叔丁氧羰基)吡咯烷-3-羰基)哌嗪-1-甲酸苄酯
室温下，向1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-3-甲酸(1g，4.6mmol，1.0当量)和1-甲酸苄基哌嗪(1g，4.6mmol，1.0当量)的DMF(13mL)溶液中加入DIEA(2.4mL，13.9mmol，3.0当量)和HATU(2.7g，7.0mmol，1.5当量)。反应液在室温下继续搅拌5小时。反应完毕后，反应液用水稀释，乙酸乙酯萃取。有机相依次用食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(无色油状物，1.2g，产率62％)。
步骤B：4-(吡咯烷-3-甲酰基)哌嗪-1-甲酸苄酯
4-(1-叔丁氧羰基)吡咯烷-3-羰基)哌嗪-1-甲酸苄酯(300mg，0.7mmol，1.0当量)的盐酸-二氧六环溶液(4mol/L)(5mL)在室温下搅拌2小时。反应完毕后，反应液浓缩得到标题化合物(黄色油状物，200mg，粗品)。
步骤C：4-(1-(3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)吡咯烷-3-甲酰基)哌嗪-1-甲酸苄酯
室温下，向3-(2,4-二氧四氢嘧啶-1(2H)基)-4-甲氧基苯甲酸(209mg，0.8mmol，1.1当量)和4-(吡咯烷-3-甲酰基)哌嗪-1-甲酸苄酯(200mg，粗品)的DMF(5mL)溶液中加入N-甲基吗啉(0.4mL，3.6mmol，5.0当量)和HATU(410mg，1.1mmol，1.5当量)。反应液室温继续搅拌18小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相依次食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，300mg，两步产率74％)。
步骤D：1-(2-甲氧基-5-(3-(哌嗪-1-羰基)吡咯烷-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
向4-(1-(3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)吡咯烷-3-甲酰基)哌嗪-1-甲酸苄酯(200mg，0.4mmol，1.0当量)的乙醇(5mL)溶液中加入10％Pd/C(40mg)。反应混合物用氢气置换三次，在氢气氛围中继续反应2小时。反应完毕后，反应液过滤，滤液浓缩得到标题化合物(黄色固体，130mg，产率85％)。
步骤E：N-(3-氨甲酰基-1-(4-(4-(1-(3-(2,4-二氧四氢嘧啶-1(2H)基)-4-甲氧基苯甲酰基)吡咯烷-3-羰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
室温下，向N-(3-氨甲酰基-1-(4-甲酰基苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(188.0mg，0.5mmol，1.0当量)和1-(2-甲氧基-5-(3-(哌嗪-1-羰基)吡咯烷-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(200mg，0.5mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入醋酸(0.1mL)。反应液在室温下搅拌15小时。三乙酰氧基醋酸硼氢化钠(147mg，0.7mmol，1.5当 量)加入，反应液继续搅拌1小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相浓缩后，残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，27.8mg，产率7％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.33(s,1H),9.01(s,1H),8.50-8.35(m,2H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),8.01(s,1H),7.95(d,J＝7.8Hz,2H),7.78(s,1H),7.58-7.43(m,4H),7.15(d,J＝8.6Hz,1H),3.85(s,3H),3.71-3.39(m,12H),2.68(t,J＝6.4Hz,2H),2.44-2.31(m,4H),2.23-1.74(m,3H).LC-MS(ESI):m/z 817[M+H]+.
制备例326.化合物A312的合成
步骤A：4-(1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-3-基)甲基)哌嗪-1-甲酸苄酯
室温下，向3-甲酰基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.0g，5.0mmol，1.0当量)和哌嗪-1-甲酸苄酯(1.2g，5.5mmol，1.1当量)的二氯甲烷(20mL)溶液中加入醋酸(0.1mL)。反应液在室温下搅拌2小时。接着三乙酰氧基醋酸硼氢化钠(1.6g，7.5mmol，1.5当量)加入，继续搅拌2小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状物，1.4g，产率69％)。
步骤B：4-(吡咯烷-3-基甲基)哌嗪-1-甲酸苄酯
将4-(1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-3-基)甲基)哌嗪-1-甲酸苄酯(700mg，1.7mmol，1.0当量)加入盐酸-二氧六环溶液(4mol/L)(5mL)溶液中，然后反应液在室温下搅拌过夜。反应完毕后，反应液浓缩得到标题化合物(白色固体，500mg，粗品)。
步骤C：4-(1-(3-(2,4-二氧四氢嘧啶-1(2H)基)-4-甲氧基苯甲酰基)吡咯烷-3-基)甲基)哌嗪-1-甲酸苄酯
室温下，向3-(2,4-二氧四氢嘧啶-1(2H)基)-4-甲氧基苯甲酸(457mg，1.7mmol，1.0当量)和4-(吡咯烷-3-基甲基)哌嗪-1-甲酸苄酯(500mg，粗品)和N-甲基吗啉(1.0mL，8.6mmol，5.0当量)的DMF(20mL)溶液中加入和HATU(986mg，2.6mmol，1.5当量)。反应液室温继续搅拌过夜。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相依次用饱和食盐水 洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，500mg，产率53％)。
步骤D：1-(2-甲氧基-5-(3-(哌嗪-1-甲基)吡咯烷-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
向4-(1-(3-(2,4-二氧四氢嘧啶-1(2H)基)-4-甲氧基苯甲酰基)吡咯烷-3-基)甲基)哌嗪-1-甲酸苄酯(200mg，0.4mmol，1.0当量)的乙醇(5mL)溶液中加入10％Pd/C(40mg)。反应混合物用氢气置换三次，在氢气氛围中继续反应2小时。反应完毕后，反应液过滤，滤液浓缩得到标题化合物(黄色固体，150mg，产率99％)。
步骤E：N-(3-氨甲酰基-1-(4-(4-((1-(3-(2,4-二氧四氢嘧啶-1(2H)基)-4-甲氧基苯甲酰基)吡咯烷-3-基)甲基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
室温下，向N-(3-氨甲酰基-1-(4-甲酰基苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(291mg，0.7mmol，1.0当量)和1-(2-甲氧基-5-(3-(哌嗪-1-甲基)吡咯烷-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(300mg，0.7mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入醋酸(0.1mL)。反应液在室温下搅拌15小时。三乙酰氧基醋酸硼氢化钠(228.4mg，1.1mmol，1.5当量)加入，反应液继续搅拌1小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，35mg，产率6％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.33(d,J＝5.2Hz,1H),9.00(s,1H),8.48-8.38(m,2H),8.22(d,J＝6.8Hz,1H),8.01(s,1H),7.96-7.88(m,2H),7.77(s,1H),7.56-7.41(m,4H),7.18-7.08(m,1H),3.85(s,3H),3.70-3.35(m,8H),3.29-3.12(m,2H),2.68(t,J＝6.4Hz,2H),2.45-2.18(m,9H),2.02-1.84(m,1H),1.65-1.48(m,1H).LC-MS(ESI):m/z 803[M+H]+.
制备例327.化合物A313的合成
步骤A：N-(3-氨甲酰基-1-(4-((1-(3-(2,4-二氧四氢嘧啶-1(2H)基)-4-甲氧基苯甲酰基)吡咯烷-3-基)甲基)哌嗪-1-羰基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺三氟乙酸盐
室温下，向4-(3-氨甲酰基-4(6-(三氟甲基)吡啶甲酰氨基)-1H-吡唑-1-基)苯甲酸(100mg，0.2mmol，1.0当量)和1-(2-甲氧基-5-(3-(哌嗪-1-甲基)吡咯烷-1-羰基)苯基)二氢嘧啶 -2,4(1H,3H)-二酮(117mg，0.2mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入N-甲基吗啉(0.1mL，0.7mmol，3.0当量)和HATU(136mg，0.3mmol，3.0当量)。反应液室温继续搅拌18小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相浓缩后，残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，35mg，产率19％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.81(s,1H),10.35(s,1H),9.54(s,1H),9.14(s,1H),8.50-8.38(m,2H),8.23(d,J＝6.8Hz,1H),8.14(s,2H),8.07(s,1H),7.86(s,1H),7.68(d,J＝8.4Hz,2H),7.55(d,J＝8.4Hz,1H),7.50(s,1H),7.17(d,J＝8.8Hz,1H),4.81-4.14(m,1H),3.86(s,3H),3.83-3.48(m,8H),3.34-3.09(m,7H),2.78-2.59(m,3H),2.23-2.04(m,1H),1.79-1.62(m,1H).LC-MS(ESI):m/z 817[M+H]+.
制备例328.化合物A314的合成
步骤A：4-(4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苄基)哌嗪-1-甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(哌嗪-1-甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(250mg，0.8mmol，1.0当量)和N-(3-氨基甲酰基-1-(4-甲酰基苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(373mg，0.9mmol，1.1当量)的DMF(7mL)溶液中加入醋酸(0.3mL)。反应液室温下继续搅拌15小时，接着三乙酰氧基硼氢化钠(355mg，1.7mmol，2.0当量)加入反应液。反应混合物继续搅拌2小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相浓缩后，残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状物，90mg，产率15％)。
步骤B：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((4-(哌啶-4-甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
将4-(4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苄基)哌嗪-1-甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(90mg，0.1mmol，1.0当量)加入盐酸-二氧六环溶液(4mol/L)(4mL)在室温下搅拌2小时。反应完毕后，反应液浓缩得到标题化合物(黄色固体，70mg，粗品)。
步骤C：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((4-(1-(3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺三氟乙酸盐
在室温下，向N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((4-(哌啶-4-甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-1H-吡唑 -4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(70mg，粗品)和3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酸(35mg，0.1mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入N-甲基吗啉(0.1mL，0.6mmol，5.0当量)和HATU(68mg，0.2mmol，1.5当量)。反应液室温继续搅拌16小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，27.6mg，产率26％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),10.34(s,1H),10.09(s,1H),9.12(s,1H),8.52-8.34(m,2H),8.24(d,J＝7.4Hz,1H),8.15(d,J＝8.2Hz,2H),8.05(s,1H),7.85(s,1H),7.67(d,J＝8.2Hz,2H),7.39(d,J＝8.4Hz,1H),7.35(s,1H),7.17(d,J＝8.6Hz,1H),4.32(d,J＝69.0Hz,4H),3.85(s,3H),3.60(t,J＝6.5Hz,2H),3.36(s,4H),3.01(dd,J＝36.7,26.2Hz,7H),2.69(t,J＝6.3Hz,2H),1.69(s,2H),1.58-1.43(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 831[M+H]+.
制备例329.化合物A315的合成
步骤A：(7-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯
在室温氮气保护下，向(7-氮杂螺环[3.5]-2-壬烷基)氨基甲酸叔丁酯(2.8g，12mmol，1.5当量)的1,4-二氧六环(48mL)溶液中加入1-(2,6-双(苄氧基))吡啶-3-基)-4-溴-3-2-甲基-1,3-二氢2H-苯并[d]咪唑-2-酮(4g，8mmol，1.0当量),Pd2(dba)3(1g，1.2mmol，0.15当量)和Xant Phos(680mg，1.2mmol，0.15当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应18小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，2.8g，产率52％)。
步骤B：(7-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯
在0℃下，向(7-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，0.74mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入NaH(44mg，1.11mmol，1.5当量，在矿物油中分散度为60％)。反应液在氮 气气氛下0℃搅拌30分钟。然后往上述反应混合物中加入碘甲烷(158mg，1.11mmol，1.5当量)，并在室温下搅拌过夜。反应完全后，将反应液用饱和氯化铵水溶液淬灭，乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，490mg，收率96％)。
步骤C：(7-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向(7-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(490mg，0.71mmol，1.0当量)的四氢呋喃(5mL)溶液中加入10％的湿Pd/C(0.2g)和10％的湿Pd(OH)2/C(0.2g)，反应液在氢气气氛下脱气三次，并在氢气气氛下室温搅拌过夜。反应完全后，反应液通过硅藻土过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，280mg，产率77％)。
步骤D：3-(3-甲基-4-(2-(甲基氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在冰水浴下，向(7-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(280mg，0.55mmol，1.0当量)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入三氟乙酸(1.5mL)。然后反应液在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液减压浓缩，残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，180mg，产率80％)。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(甲基(7-(3-甲基-2-氧代-1-(6-氧代哌啶-3-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)氨基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在氮气保护下，向N-(3-氨基甲酰基-1-(4-甲酰基苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(80mg，0.20mmol，1.0当量)和3-(3-甲基-4-(2-(甲基氨基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(106mg，0.26mmol，1.3当量)的DMF(3mL)溶液中依次加入硫酸镁(150mg)和三乙酰基硼氢化钠(126mg，0.60mmol，3.0当量)。将该混合物在氮气气氛下室温搅拌过夜反应。反应完全后，过滤反应混合物，滤液减压浓缩，残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，30mg，产率19％)。LC-MS(ESI):m/z 785[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),11.08(s,1H),9.01(s,1H),8.47-8.37(m,2H),8.21(d,J＝7.6Hz,1H),8.16(s,1H),8.02(s,1H),7.94(d,J＝8.5Hz,2H),7.77(s,1H),7.46(d,J＝8.4Hz,2H),6.97(t,J＝7.9Hz,1H),6.92-6.84(m,2H),5.39-5.30(m, 1H),3.63(s,3H),3.40(s,2H),2.99-2.84(m,4H),2.76-2.58(m,4H),2.27-2.15(m,1H),2.04-1.94(m,5H),1.81-1.61(m,6H).
制备例330.化合物A316的合成
步骤A：7-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯
在室温氮气保护下，向2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(339mg，1.48mmol，1.0当量)的甲苯(48mL)溶液中加入3-(4-溴-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(500mg，1.48mmol，1.0当量),NaHMDS(541mg，2.96mmol，2.0当量)和Ruphos(138mg，0.23mmol，0.15当量)，随后加入Ruphos Pd G2(116mg，0.15mmol，0.1当量)。反应液在氮气保护下100℃下搅拌反应3小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇，梯度：0-10％甲醇)得到标题化合物(黄色油状物，270mg，产率37％)。
步骤B：3-(3-甲基-2-氧代-4-(2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-2,3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向7-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(250mg，0.50mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入TFA(1mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，将反应液减压浓缩，残余物用饱和碳酸氢钠溶液中和并用二氯甲烷萃取三次。有机相合并，减压浓缩得到标题化合物(白色固体，150mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(2-(7-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)乙基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温氮气保护下，向N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(2-氧代乙基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(110mg，0.26mmol，1.0当量)，3-(3-甲基-2-氧代-4-(2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-2,3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(101mg，粗品)的DMF(2mL)溶液中加入AcOH(0.01mL，0.02mmol，0.1当量)和NaBH(OAc)3(117mg，0.53mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应半小时。反应完全后，将反应液用饱和碳酸氢钠溶液淬 灭，乙酸乙酯萃取两次。合并有机相，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经制备HPLC(C18，30％-90％乙腈含0.1％甲酸的水溶液)纯化得到标题化合物(白色固体，8.8mg，产率4％)。LC-MS(ESI):m/z 785.4[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.08(s,1H),8.99(s,1H),8.47-8.38(m,2H),8.21(s,1H),8.00(s,1H),7.89(d,J＝8.5Hz,2H),7.76(s,1H),7.40(d,J＝8.5Hz,2H),7.03-6.92(m,1H),6.87(t,J＝7.7Hz,2H),5.36-5.32(m,1H),3.62(s,3H),3.22-2.82(m,8H),2.76-2.61(m,7H),2.00-1.99(m,1H),1.88-1.83(m,4H).
制备例331.化合物A317的合成
步骤A：2-((4-碘苄基)氧基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯
在冰水浴下，向2-羟基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(960mg，3.98mmol，1.0当量)的四氢呋喃(10mL)溶液中分批加入氢化钠(238mg，6.0mmol，60％分散在矿物油中,1.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌半小时。随后加入1-(溴甲基)-4-碘苯(1.182g，3.98mmol，1.0当量)。反应在室温下继续搅拌6小时。反应完毕后，将反应液在0℃下用饱和氯化铵淬灭，并用二氯甲烷萃取两次。合并有机相依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.18g，产率65％)。
步骤B：2-((4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苄基)氧基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯
在氮气保护下，向2-((4-碘苄基)氧基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(458mg，1.0mmol，1.0当量)和N-(3-氨基甲酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(300mg，1.0mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中依次加入磷酸钾(638mg，3.0mmol，3.0当量),碘化亚铜(95mg，0.5mmol，0.5当量)和反式-(1R,2R)-N,N'-二甲基1,2-环己烷二胺(170mg，1.0mmol，1.0当量)。反应液用氮气置换三次，在氮气保护下80℃搅拌反应16小时。反应完毕后，将反应液用水稀释，并用乙酸乙酯萃取。有机相依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，0.45g，产率29％)。
步骤C：N-(1-(4-(((7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氧基)甲基)苯基)-3-氨基甲酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向2-((4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苄基)氧基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(25mg，0.04mmol，1.0当量)的DCM(15mL)溶液中加入三氟乙酸(1mL)。反应液在室温下搅拌30分钟。反应完全后，减压浓缩，直接用于下一步，无需纯化。
步骤D：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(((7-((1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氧基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下,向N-(1-(4-(((7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氧基)甲基)苯基)-3-氨基甲酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(20mg，粗品)的DMF(5mL)溶液中加入1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲醛(15mg，0.04mol，1.0当量)和5滴乙酸。室温下搅拌反应2小时后加入三乙酰氧基硼氢化钠(48mg，0.23mmol，6.0当量)。反应液在室温下搅拌1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，25.4mg，产率79％)。LC-MS(ESI):m/z 846[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),10.77(s,1H),9.02(s,1H),8.48-8.36(m,2H),8.22(d,J＝7.7Hz,1H),8.03(s,1H),7.97(d,J＝8.5Hz,2H),7.78(s,1H),7.52-7.46(m,2H),6.86-6.74(m,1H),6.48(d,J＝15.0Hz,1H),6.40(d,J＝8.6Hz,1H),5.77(d,J＝7.6Hz,1H),4.41(s,2H),4.28-4.20(m,1H),4.11-4.02(m,1H),3.13-3.06(m,2H),2.78-2.67(m,1H),2.60-2.52(m,3H),2.34-2.17(m,4H),2.16-2.05(m,5H),1.89-1.80(m,1H),1.77-1.62(m,4H),1.60-1.48(m,5H),1.26-1.14(m,2H).
制备例332.化合物A318的合成
步骤A：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((7-(3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向N-(1-(4-((7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)甲基)苯基)-3-氨基甲酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(70mg，0.137mmol，1.0当量)和3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酸(46mg，0.178mmol，1.3当量)的DMF(5mL)溶液中，加入HATU(67 mg，0.178mmol，1.3当量)和DIEA(53mg，0.410mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，30.8mg，收率29％)。LC-MS(ESI):m/z 759[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.33(s,1H),8.97(s,1H),8.51-8.32(m,2H),8.23(s,1H),7.99(s,1H),7.84(t,J＝24.2Hz,3H),7.33(dt,J＝8.4,2.6Hz,4H),7.15(d,J＝8.6Hz,1H),3.84(s,3H),3.59(t,J＝6.6Hz,4H),2.76(d,J＝7.4Hz,2H),2.68(t,J＝6.5Hz,2H),2.55(d,J＝8.1Hz,1H),1.93(t,J＝9.7Hz,2H),1.62-1.43(m,6H),1.25(d,J＝6.5Hz,2H).
制备例333.化合物A319的合成
步骤A：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((7-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温氮气保护下，向3-(3-甲基-2-氧代-4-(2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-2,3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(80mg，粗品)和N-(3-氨基甲酰基-1-(4-甲酰基苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(84mg，0.21mmol，1.0当量)的DMF(2mL)溶液中加入AcOH(0.01mL，0.02mmol，0.1当量)和NaBH(OAc)3(92mg，0.42mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应半小时。反应完全后，用饱和碳酸氢钠溶液在0℃淬灭反应液,并用乙酸乙酯萃取两次。有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经制备HPLC(C18,30％-90％乙腈的含0.1％甲酸水溶液)纯化得到标题化合物(白色固体，25.1mg，产率15％)。LC-MS(ESI):m/z 771.4[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),11.08(s,1H),9.00(s,1H),8.49-8.37(m,2H),8.22(d,J＝7.5Hz,1H),8.01(s,1H),7.93(d,J＝8.4Hz,2H),7.77(s,1H),7.46(d,J＝8.4Hz,2H),6.96(t,J＝7.9Hz,1H),6.87(t,J＝7.3Hz,2H),5.36-5.32(m,1H),3.71(s,2H),3.62(s,3H),3.17-2.95(m,6H),2.91-2.84(m,1H),2.72-2.58(m,4H),2.01-1.95(m,3H),1.83-1.75(m,2H).
制备例334.化合物A320的合成
步骤A：(7-(1-(2,6-二苄氧基))吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-7-氮杂螺环[3.5]壬烷-2-基)氨基甲酸酯
在室温氮气保护下，向(7-氮杂螺环[3.5]-2-壬烷基)氨基甲酸叔丁酯(2.8g，12mmol，1.5当量)的1,4-二氧六环(48mL)溶液中加入1-(2,6-双(苄氧基))吡啶-3-基)-4-溴-3-2-甲基-1,3-二氢2H-苯并[d]咪唑-2-酮(4g，8mmol，1.0当量),Pd2(dba)3(1g，1.2mmol，0.15当量)和Xant Phos(680mg，1.2mmol，0.15当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应18小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯，梯度：0-20％乙酸乙酯)纯化得到标题化合物(黄色固体，2.8g，产率52％)。
步骤B：(7-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基))-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢1H-苯并[d]咪唑-4-基)-7-氮杂螺环[3.5]壬烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，(7-(1-(2,6-二苄氧基))吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-7-氮杂螺环[3.5]壬烷-2-基)氨基甲酸酯叔丁酯(1g，1.48mmol，1.0当量)的四氢呋喃(20mL)溶液中分批加入10％质量分数的氢氧化钯碳(0.5g)和10％质量分数的Pd/C(0.5g)。反应液用氮气置换三次后，在一个大气压氢气氛围下室温搅拌反应18小时。反应完全后，将反应液用硅藻土过滤，滤液用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯，梯度：0-20％乙酸乙酯)纯化得到标题化合物(黄色固体，650mg，产率88％)。
步骤C：3-(4-(2-氨基-7-氮杂螺环[3.5]壬烷-7-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，(7-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基))-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢1H-苯并[d]咪唑-4-基)-7-氮杂螺环[3.5]壬烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(120mg，0.2mmol，1.0当量)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入TFA(3mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液减压浓缩得到标题化合物(白色固体，70mg，粗品)，粗产物无需纯化直接用于下一步反应。
步骤D：N-(3-氨甲酰基-1-(4-((7-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基))-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢1H-苯并[d]咪唑-4-基)-7-氮杂螺环[3.5]壬烷-2-基)氨甲酰基)苯基)-1H吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向4-(3-氨甲酰基-4-(6(三氟甲基))吡啶氨甲酰基)-1H吡唑-1-基)苯甲酸(95mg，0.22mmol，1.2当量)的DMF(3mL)溶液中加入HATU(90mg，0.06mmol，0.22mmol，1.2当量)，3-(4-(2-氨基-7-氮杂螺环[3.5]壬烷-7-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(75mg，粗品)和DIEA(85mg，0.6mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经制备HPLC(色谱柱：YMC-Actus Triart C18，10-50％乙腈的含有0.1％氨水水溶液)纯化得到标题化合物(白色固体，25.5mg，产率16.8％)。LC-MS(ESI):m/z 799[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.81(s,1H),11.09(s,1H),9.14(s,1H),8.74(d,J＝7.4Hz,1H),8.49-8.38(m,2H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),8.14-8.12(m,3H),8.06-8.04(m,2H),7.83(s,1H),7.00-6.85(m,3H),5.37-5.33(m,1H),4.52-4.46(m,1H),3.64(s,3H),3.08-2.98(m,1H),2.90-2.85(m,2H),2.82-2.74(m,1H),2.72-2.64(m,2H),2.64-2.56(m,1H),2.46-2.36(m,1H),2.26-2.11(m,1H),2.05-1.96(m,2H),1.94-1.83(m,2H),1.83-1.75(m,2H),1.75-1.69(m,1H).
制备例335.化合物A321的合成
步骤A：1-(4-溴苯基)-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯
在氧气保护下，向4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(25g，150mmol，1.0当量)和(4-溴苯基)硼烷二醇(29.3g，0.15mol，1.0当量)的二氯甲烷(300mL)溶液中依次加入醋酸铜(32.1g，0.16mol，1.1当量),TEA(40.4g，0.38mol，2.5当量)。反应液用氧气置换三次，在氧气保护下40℃搅拌反应16小时。反应完全后，将反应液用水稀释，并用二氯甲烷萃取。有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱(洗脱剂：甲醇/ 二氯甲烷，梯度：0-10％甲醇)纯化得到标题化合物(黄色固体，13.0g，产率27％)。
步骤B：1-(4-溴苯基)-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，将1-(4-溴苯基)-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(12.2g，37.2mmol，1.0当量)中加入氨甲醇溶液(260mL，5M)，反应液在封管中室温搅拌过夜。反应完全后，将反应液减压浓缩得到标题化合物(白色固体，11.0g，产率95％)。
步骤C：4-氨基-1-(4-溴苯基)-1H-吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向1-(4-溴苯基)-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酰胺(8.4g，25.8mmol，1.0当量)的乙醇(160mL)和水(80mL)溶液加入还原铁粉(8.4g，150mmol，5.8当量),NH4Cl(14.1g，260mmol，10.1当量)。反应液氮气保护下在80℃下搅拌过夜反应。反应完全后，将反应液过滤，滤饼用二氯甲烷洗涤两次。将滤液依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇，梯度：0-10％甲醇)纯化后得到标题化合物(白色固体，4.0g，产率52％)。
步骤D：N-(1-(4-溴苯基)-3-氨基甲酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(2.67g，13.5mmol，1.0当量)的DMF(30mL)溶液加入DIEA(43.5g，33.8mmol，2.5当量)，4-氨基-1-(4-溴苯基)-1H-吡唑-3-甲酰胺(4.0g，13.5mmol，1.0当量)和HATU(6.1g，6.2mmol，1.2当量)。反应液在室温下搅拌反应3小时。反应完全后，将反应液用二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇，梯度：0-10％甲醇)纯化后得到标题化合物(白色固体，4.5g，产率74％)。
步骤E：(Z)-N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(2-乙氧基乙烯基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在氮气保护下，向N-(1-(4-溴苯基)-3-氨基甲酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(1.0g，2.02mmol，1.0当量)和(Z)-2-(2-乙氧基乙烯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(440mg，2.02mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(15mL)和水(3mL)溶液中依次加入碳酸铯(1.44g，4.40mmol，2.2当量)和Pd(PPh3)4(250mg，0.22mmol，0.1当量)。反应液用氮气置换三次，在氮气保护下80℃搅拌反应半小时。反应完全后，将反应液用水稀释，并用乙酸乙酯萃取。有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇，梯度：0-10％甲醇)纯化得到标题化合物(黄色固体，810mg，产率90％)。
步骤F：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(2-氧代乙基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰 胺
在冰水浴下，向(Z)-N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(2-乙氧基乙烯基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(700mg，1.56mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入三氟乙酸(2mL)。反应液在0℃搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液缓慢滴入冰水冷却的5％碳酸氢钠水溶液中，分层，水相用二氯甲烷萃取。有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经初步纯化后得到标题化合物(黄色固体，粗品)。
步骤G：2-(4-(3-氨基甲酰-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苯基)乙酸
在室温下，向N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(2-氧代乙基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(243mg，粗品)的叔丁醇(3mL)和水(3mL)溶液加入2-甲基-2-丁烯(818mg，11.7mmol，20当量)，磷酸二氢钠(210mg，1.479mmol，2.5当量)和NaClO2(136mg，1.75mmol，3.0当量)。反应液在室温搅拌反应16小时。反应完全后，将反应液用二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇，梯度：0-10％甲醇)纯化后得到标题化合物(黄色固体，233mg，产率93％)。
步骤H：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(2-(7-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并咪唑-4-基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)-2-氧代乙基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向2-(4-(3-氨基甲酰-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苯基)乙酸(110mg，0.25mmol，1.0当量)的DMF(2mL)溶液加入DIEA(65mg，0.51mmol，2.0当量)，3-(3-甲基-2-氧代-4-(2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-2,3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(97mg，0.25mmol，1.0当量)和HATU(135mg，0.36mmol，1.4当量)。反应液在室温搅拌反应3小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经制备HPLC(C18，10-50％乙腈的含有0.1％FA水溶液)纯化得到标题化合物(黄色固体，5.2mg，产率3％)。LC-MS(ESI):m/z 799.4[M+H]+.1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.09(s,1H),9.01(s,1H),8.55-8.31(m,2H),8.22-8.19(m,1H),8.01-7.90(m,3H),7.77-7.75(m,1H),7.46-7.39(m,2H),7.00-6.85(m,3H),5.39-5.29(m,1H),4.15-3.83(m,2H),3.69-3.50(m,6H),3.15-2.82(m,5H),2.72-2.62(m,2H),2.05-1.81(m,6H).
制备例336.化合物A322的合成
步骤A：((1-(4-(羟甲基)苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯
在0℃条件下，向4-(3-(N-(叔丁氧基羰基)氨磺酰基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H吡唑-1-基)苯甲酸甲酯(2.5g，3.8mmol，1.0当量)的四氢呋喃(100ml)溶液中缓慢加入四氢铝锂(150mg，3.8mmol，1.0当量)。反应液在0℃下搅拌40分钟。反应液用十水硫酸钠淬灭，向处理体系中加入四氢呋喃和甲醇，过滤并且滤液浓缩得的(1-(4-(羟甲基)苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺基)-1H吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(白色固体，2g，收率80％)。
步骤B：((1-(4-甲酰基苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向(1-(4-(羟甲基)苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(2.0g，3.2mmol，1.0当量)在四氢呋喃(400ml)中的溶液中加入戴斯-马丁氧化剂(1.5g，3.5mmol，1.1当量)。反应液在室温下搅拌2小时。反应液用碳酸氢钠水溶液淬灭，用四氢呋喃萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，有机层在减压下浓缩至干，用甲醇打浆，过滤收集滤饼得到((1-(4-甲酰基苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(白色固体，1.6g，产率80％)。
步骤C：((1-(4-(((7-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氨基)甲基)苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，3-(4-(2-氨基-7-氮杂螺环[3.5]壬烷-7-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(150mg，0.38mmol，1.0当量)和((1-(4-甲酰基苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(236mg，0.38mmol，1.0当量)的DMF(3mL)溶液中加入NaBH(OAc)3(424mg，2.0mmol，5.0当量)和硫酸镁(160mg，1.33mmol，6.6当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应18小时。反 应完全后，反应液用乙酸乙酯稀释，加水至固体析出，过滤，将滤饼减压干燥得到标题化合物(白色固体，100mg，产率94％)，粗品无需纯化直接用于下一步反应。
步骤D：N-(1-(4-(((7-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氨基)甲基)苯基)-3-氨磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在室温下，((1-(4-(((7-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氨基)甲基)苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.1mmol，1.0当量)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入三氟乙酸(3mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液减压浓缩，残余物经制备HPLC(YMC-Actus Triart C18，10-50％乙腈的含有0.1％TFA水溶液)纯化得到标题化合物(白色固体，25.8mg，产率32％)。LC-MS(ESI):m/z 819[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.24(s,1H),11.32(s,1H),11.08(s,1H),9.09(s,1H),8.28-8.19(m,2H),8.17-8.04(m,3H),7.93(s,1H),7.90-7.87(m,2H),7.56(d,J＝8.4Hz,2H),7.22(d,J＝2.2Hz,1H),6.98-6.94(m,1H),6.90-6.84(m,2H),5.37-5.31(m,1H),3.76(s,3H),3.36-3.33(m,3H),2.92-2.88(m,3H),2.70-2.59(m,5H),2.27-2.24(m,1H),2.01-1.97(m,2H),1.71-1.35(m,6H).
制备例337.化合物A324的合成
步骤A：N-(1-(4-(2-(1-(3-(2,4-二氧四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-基)苯基)-3-磺酰氨基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在室温下，向N-(1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-3-氨基磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺盐酸盐(100mg，0.2mmol，1.0当量)和2-(1-(3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)乙醛(76mg，0.2mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入三乙胺(0.2mL)。反应液在室温下搅拌15分钟，接着醋酸(0.3mL)加入到混合物中，反应液继续搅拌15小时。三乙酰氧基硼氢化钠(68mg，0.3mmol，1.6当量)加入，反应液在室温下继续搅拌1小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相浓缩后，残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，28.2mg，产率16％)。1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ11.32(s,1H),10.35(s,1H),9.72(s,1H),9.00(s,1H),8.25(d,J＝7.8Hz,1H),8.14(t,J＝7.7Hz,1H),8.07(d,J＝7.4Hz,1H),7.99(s,2H),7.93(d,J＝1.9Hz,1H),7.81(d,J＝8.9Hz,2H),7.39(d,J＝8.4Hz,1H),7.34(d,J＝1.7Hz,1H),7.25-7.15(m,4H),3.97(d,J＝12.2Hz,2H),3.86(s,4H),3.62(dd,J＝13.7,7.5Hz,5H),3.29-2.87(m,8H),2.70(t,J＝6.5Hz,2H),1.68(d,J＝8.4Hz,5H),1.18(d,J＝10.5Hz,2H).LC-MS(ESI):m/z 851[M+H]+.
制备例338.化合物A325的合成
步骤A：3-(苄硫基)-4-硝基-1H-吡唑
在室温下，向3-溴-4-硝基-1H-吡唑(20g，104mmol，1.0当量)的二氧六环(1L)溶液中加入苯基甲硫醇(14g，114mmol，1.1当量)、Pd2(dba)3(9.5g，10.4mmol，0.1当量)、Xant Phos(12g，20mmol，0.2当量)和DIEA(40.4g，312mmol，3.0当量)。将反应混合物在100℃、氮气气氛下搅拌16小时。将反应混合物倒入冰水中并用乙酸乙酯萃取，然后依次用饱和盐水洗涤有机层，无水硫酸钠干燥并浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯在二氯甲烷中洗脱(梯度：0-20％)，得到3-(苄硫基)-4-硝基-1H-吡唑(浅黄色固体，13g，产率53％)。
步骤B：3-(苄硫基)-1-(4-溴苯基)-4-硝基-1H-吡唑
在室温下，向3-(苄硫基)-4-硝基-1H-吡唑(13g，55.2mmol，1.0当量)的DMF(300mL)溶液中加入(4-溴苯基)硼二醇(12.2g，60.7mmol，1.1当量)、乙酸铜一水合物(1.1g，5.5mmol，0.1当量)和吡啶(13.4毫升，165.7mmol，3.0当量)。将反应混合物在80℃、氧气气氛下搅拌16小时。过滤反应混合物，将滤液倒入冰水中并用乙酸乙酯萃取，用盐水洗涤有机层，用无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物通过硅胶柱色谱法纯化，用二氯甲烷在石油醚中洗脱(梯度：0-70％)，得到3-(苄硫基)-1-(4-溴苯基)-4-硝基-1H-吡唑(浅黄色固体，13g， 产率60％)。
步骤C：1-(4-溴苯基)-4-硝基-1H-吡唑-3-磺酰氯
在室温下，向3-(苄硫基)-1-(4-溴苯基)-4-硝基-1H-吡唑(13g，33.3mmol，1.0当量)在MeCN(200mL)中的溶液中加入盐酸水溶液(100mL，3M在H2O中)和NCS(17.7g，133.2mmol，l4.0当量)。将反应混合物在室温下搅拌3小时。将反应混合物倒入冰水中并用乙酸乙酯萃取，用饱和食盐水洗涤有机层，用无水硫酸钠干燥并浓缩，得到1-(4-溴苯基)-4-硝基-1H-吡唑-3-磺酰氯(浅黄色油状，12g，产率98％)。
步骤D：1-(4-溴苯基)-N,N-双(2,4-二甲氧基苄基)-4-硝基-1H-吡唑-3-磺酰胺
在室温下，向1-(4-溴苯基)-4-硝基-1H-吡唑-3-磺酰氯(12g，32.7mmol，1.0当量)的四氢呋喃(200mL)中的溶液中加入双(2，4-二甲氧基苄基)胺(10.3g，32.7mmol，1.0当量)和DIEA(4.2g，32.7mmol，1.0当量)。将反应混合物在60℃下搅拌2小时。将反应混合物倒入冰水中并用乙酸乙酯萃取，用盐水洗涤有机层，用无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物通过硅胶柱色谱法纯化，用二氯甲烷在石油醚中洗脱(梯度：0-50％)得到1-(4-溴苯基)-N,N-双(2,4-二甲氧基苄基)-4-硝基-1H-吡唑-3-磺酰胺(浅黄色固体，13g，产率61％)。
步骤E：4-(4-(3-(N,N-双(2,4-二甲氧基苄基)氨磺酰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向1-(4-溴苯基)-N,N-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-4-硝基吡唑-3-磺酰胺(11g，16.9mmol，1.0当量)的二氧六环(500mL)溶液中加入哌嗪-1-甲酸叔丁酯(3.8g，20.3mmol，1.5当量)、Pd2(dba)3(1.5g，1.6mmol，0.1当量)、Xant Phos(1.9g，3.3mmol，0.2当量)和碳酸铯(16.6g，50.9mmol，3.0当量)。将反应混合物在105℃、氮气气氛下搅拌16小时。过滤反应混合物，将滤液倒入冰水中并用乙酸乙酯萃取，用饱和食盐水洗涤有机层，用无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物通过硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯在二氯甲烷中洗脱(梯度：0-30％)，得到4-(4-(3-(N,N-双(2,4-二甲氧基苄基)氨磺酰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(淡黄色固体，7.5g，产率59％)。
步骤F：4-(4-(4-氨基-3-(N,N-双(2,4-二甲氧基苄基)氨磺酰基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(4-(3-(N,N-双(2,4-二甲氧基苄基)氨磺酰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(7.5g，9.9mmol，1.0当量)的四氢呋喃(100mL)和甲醇(100mL)溶液中加入Pd/C(800mg)。将反应混合物在40℃、氢气气氛下搅拌16小时。过滤反应混合物并浓缩滤液，得到4-(4-(4-氨基-3-(N,N-双(2,4-二甲氧基苄基)氨磺酰基)-1H-吡唑-1-基)苯基) 哌嗪-1-甲酸叔丁酯(淡黄色固体，6.5g，产率90％)。
步骤G：4-(4-(3-(N,N-双(2,4-二甲氧基苄基)氨磺酰基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
向6-[2-(3,4,5,6-四氢-2H-吡喃-2-基)吡唑-3-基]吡啶-2-甲酸(2.9g，10.7mmol，1.0当量)在乙腈(200mL)中的溶液中加入HATU(5.1g，13.4mmol，1.3当量)、DIEA(3.4g，26.9mmol，3.0当量)和4-(4-(4-氨基-3-(N,N-双(2,4-二甲氧基苄基)氨磺酰基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(6.5g，8.9mmol，0.9当量)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物倒入冰水中并用乙酸乙酯萃取，用饱和食盐水洗涤有机层，用无水硫酸钠干燥并浓缩。残留物通过硅胶柱色谱法纯化，用乙酸乙酯在石油醚中洗脱(梯度：0-60％)，得到4-(4-(3-(N,N-双(2,4-二甲氧基苄基)氨磺酰基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(淡黄色固体，6.5g，产率74％)。
步骤H：N-(1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-3-氨磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
将4-(4-(3-(N,N-双(2,4-二甲氧基苄基)氨磺酰基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(6.5g，6.6mmol，1.0当量)加入4M盐酸-二氧六环(50mL)中。将反应混合物在60℃下搅拌4小时。将反应混合物真空浓缩，得到N-(1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-3-氨磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺(紫色固体，3.2g，粗品)。
步骤I：N-(1-(4-(4-((1-(-4-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-3-氨磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
向N-(1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-3-氨磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺(148mg，0.3mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入醋酸(0.5mL)和1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲醛(100mg，0.3mol，1.0当量)。将反应混合物在室温下搅拌16小时，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(316mg，1.5mmol，5.0当量)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。将反应混合物浓缩。残留物用硅胶柱色谱法纯化，用甲醇在二氯甲烷中洗脱(梯度：0-10％)，得到残留物。残留物经HPLC纯化得到N-(1-(4-(((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-3-氨磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺(白色固体，28mg，产率11％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.21(s,1H),11.33(s,1H),10.97-10.44(m,1H),8.95(s,1H),8.24(d,J＝7.5Hz,1H),8.12(d,J＝7.4Hz,1H),8.07(d,J＝7.3Hz,1H),7.98-7.62(m,5H),7.23(s,1H),7.10(d,J＝9.0Hz,2H),6.84 (t,J＝9.2Hz,1H),6.50(d,J＝14.8Hz,1H),6.42(d,J＝8.5Hz,1H),5.79(d,J＝7.9Hz,1H),4.26(s,1H),3.24(s,4H),3.17-3.08(m,2H),2.74(t,J＝12.4Hz,1H),2.62-2.54(m,5H),2.25(d,J＝6.7Hz,2H),2.08(s,2H),1.91-1.76(m,3H),1.65(s,1H),1.35-1.19(m,3H).LC-MS(ESI):m/z 811[M+H]+.
制备例339.化合物A326的合成
步骤A：1-[2,6-双(苄基氧基)吡啶-3-基]-3-甲基-5-[4-(2,4-二氧杂戊-3-基)六氢吡啶-1-基]-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-2-酮
在室温下，向1-[2,6-双(苄基氧基)吡啶-3-基]-5-溴-3-甲基-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-2-酮(1.0g，1.94mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(20ml)溶液中加入,4-(二甲氧基甲基)-哌啶(463mg，2.9mmol，1.5当量),Ruphos(180mg，0.39mmol，0.2当量),Ruphos Pd G1(154mg，0.19mmol，0.1当量)，碳酸铯(1.9g，5.82mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下100℃搅拌反应16小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，600mg，产率52％)。
步骤B：3-{3-甲基-2-氧亚基-5-[4-(2,4-二氧杂戊-3-基)六氢吡啶-1-基]苯并[d]咪唑-1-基}六氢吡啶-2,6-二酮
在室温下，向1-[2,6-双(苄基氧基)吡啶-3-基]-3-甲基-5-[4-(2,4-二氧杂戊-3-基)六氢吡啶-1-基]-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-2-酮(600mg，1.01mmol，1.0当量)的乙醇(20mL)溶液中加入10％的湿钯碳(300mg)和10％的湿氢氧化钯碳(100mg)反应液在氢气保护下室温搅拌反应16小时。反应完全后，将反应液用硅胶土过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，400mg，产率95％)。
步骤C：1-[1-(2,6-二氧亚基六氢吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧亚基苯并[d]咪唑-5-基]六氢吡啶-4-甲醛
将3-{3-甲基-2-氧亚基-5-[4-(2,4-二氧杂戊-3-基)六氢吡啶-1-基]苯并[d]咪唑-1-基}六氢吡啶-2,6-二酮(200mg，0.48mmol，1.0当量)溶于甲酸(3mL)中，在60℃搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液减压浓缩得到标题化合物(绿色油状物，170mg，粗品)，无需纯化， 直接用于下一步。
步骤D：N-[3-(氨基二氧亚基-λ6-硫基)-1-{4-[4-({1-[1-(2,6-二氧亚基六氢吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧亚基苯并[d]咪唑-5-基]六氢吡啶-4-基}甲基)哌嗪-1-基]苯基}吡唑-4-基]-6-(2H-吡唑-3-基)吡啶-2-甲酰胺
在室温下，向1-[1-(2,6-二氧亚基六氢吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧亚基苯并[d]咪唑-5-基]六氢吡啶-4-甲醛(170mg，粗品)的DMF(10mL)溶液中加入N-[3-(氨基二氧亚基-λ6-硫基)-1-[4-(哌嗪-1-基)苯基]吡唑-4-基]-6-(2H-吡唑-3-基)吡啶-2-甲酰胺(201mg，0.44mmol，1.0当量)和5滴乙酸。室温下搅拌反应2小时后加入三乙酰氧基硼氢化钠(484mg，2.31mmol，5.0当量)。反应液在室温下搅拌反应30分钟。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(灰白色固体，25.0mg，产率6％)。LC-MS(ESI):m/z 848[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.31-13.07(m,1H),11.32(s,1H),11.06(s,1H),8.95(s,1H),8.24(d,J＝7.8Hz,1H),8.12(t,J＝7.6Hz,1H),8.07(d,J＝7.5Hz,1H),7.95(s,3H),7.73(d,J＝9.0Hz,2H),7.22(s,1H),7.10(d,J＝9.1Hz,2H),6.93(d,J＝8.6Hz,1H),6.83(d,J＝1.8Hz,1H),6.64(d,J＝8.6Hz,1H),5.32-5.27(m,1H),3.60(d,J＝11.8Hz,2H),3.31(s,3H),3.26-3.21(m,4H),2.93-2.85(m,1H),2.75-2.58(m,5H),2.56-2.52(m,3H),2.27-2.22(m,2H),2.03-1.93(m,2H),1.87-1.81(m,2H),1.74-1.65(m,1H),1.35-1.30(m,1H).
制备例340.化合物A327的合成
步骤A：1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-甲醛
在室温下，向3-(4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(550mg，1.2mmol，1.0当量)加入8mL甲酸，反应液在氮气保护下60℃搅拌反应2小时。反应完全后，将反应液减压浓缩。直接得到标题化合物(黄色油状液体，400mg，粗品)。
步骤B：N-(1-(4-(4-((1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-3-氨磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
将1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-甲醛(120mg，0.32mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入N-(1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-3-氨基磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺(176mg，0.36mmol，1.2当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应30分钟，然后加入醋酸硼氢化钠(342mg，1.62mmol，5.0当量)反应液继续在室温搅拌反应3小时。最后反应液倒入碳酸氢钠溶液(20mL)中，用二氯甲烷萃取3次。有机相用无水硫酸钠干燥并且减压浓缩反应液在氮气保护下零下60℃搅拌反应30分钟，然后缓慢升到室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC制备分离纯化得到标题化合物(白色固体，39mg，产率14％)。LC-MS(ESI):m/z 848.6[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.20(s,1H),11.32(s,1H),11.09(s,1H),8.95(s,1H),8.24(d,J＝7.8Hz,1H),8.12(t,J＝7.7Hz,1H),8.07(d,J＝7.4Hz,1H),7.96(d,J＝9.1Hz,3H),7.73(d,J＝9.0Hz,2H),7.22(s,1H),7.10(d,J＝9.2Hz,2H),6.98(t,J＝7.9Hz,1H),6.89(dd,J＝16.1,7.8Hz,2H),5.35(dd,J＝12.7,5.3Hz,1H),3.64(s,3H),3.27-3.21(m,4H),3.16-3.09(m,2H),2.92-2.84(m,1H),2.75-2.66(m,3H),2.66-2.56(m,2H),2.56-2.52(m,4H),2.32-2.23(m,2H),2.02-1.97(m,1H),1.89-1.83(m,2H),1.76-1.66(m,1H),1.38-1.33(m,1H).
制备例341.化合物A328的合成
步骤A：N-(1-(4-(4-(1-(3-(2,4-二氧四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)吡咯烷-3-乙基)哌嗪-1-基)苯基)-3-磺酰氨基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺三氟乙酸盐
室温下，向N-(1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-3-氨基磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺盐酸盐(165mg，0.3mmol，1.0当量)和2-(1-(3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)吡咯烷-3-基)乙醛(120mg，0.3mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入三乙胺(0.2mL)。反应液在室温下搅拌15分钟，接着醋酸(0.3mL)加入到混合物中，反应液继续搅拌15小时。三乙酰氧基硼氢化钠(106mg，0.5mmol，1.6当量)加入，反应液在室温下继续搅拌1小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相浓缩后，残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，39.3mg，产率14％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.21(s,1H),11.31(s,1H),10.35(s,1H),9.58(s,1H),8.99(s,1H),8.24(d,J＝7.6Hz,1H),8.13(t,J＝7.6Hz,1H),8.07(d,J＝7.2Hz,1H),7.98(s,2H),7.93(s,1H),7.81(d, J＝8.4Hz,2H),7.55(d,J＝8.4Hz,1H),7.49(d,J＝2.0Hz,1H),7.24-7.13(m,4H),3.99(dt,J＝20.0,9.8Hz,2H),3.86(s,3H),3.72-3.57(m,8H),3.27-3.07(m,6H),2.73-2.64(m,2H),2.25-2.00(m,2H),1.92-1.68(m,2H),1.67-1.53(m,1H).LC-MS(ESI):m/z 837[M+H]+.
制备例342.化合物A329的合成
步骤A：N-(1-(4-(4-((1-(3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)吡咯烷-3-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-3-氨基磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺三氟乙酸盐
室温下，向N-(1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-3-氨基磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺盐酸盐(171mg，0.3mmol，1.0当量)和1-(3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)吡咯烷-3-甲醛(120mg，0.3mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入三乙胺(0.1mL)。反应液在室温下搅拌15分钟，接着醋酸(0.2mL)加入到混合物中，反应液继续搅拌15小时。三乙酰氧基硼氢化钠(146mg，0.6mmol，2.0当量)加入，反应液在室温下继续搅拌1小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相浓缩后，残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，50.9mg，产率18％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.19(s,1H),11.31(s,1H),10.36(s,1H),9.51(s,1H),8.99(s,1H),8.24(d,J＝7.9Hz,1H),8.13(t,J＝7.7Hz,1H),8.07(d,J＝7.5Hz,1H),7.98(s,2H),7.93(s,1H),7.80(s,2H),7.56(d,J＝8.7Hz,1H),7.51(d,J＝2.0Hz,1H),7.19(dd,J＝19.2,5.4Hz,4H),3.95(s,2H),3.86(s,3H),3.81(s,1H),3.61(d,J＝6.7Hz,7H),3.37-3.27(m,3H),3.15(d,J＝12.8Hz,3H),2.70(t,J＝6.6Hz,3H),2.10(d,J＝22.0Hz,1H),1.71(s,1H).LC-MS(ESI):m/z 823[M+H]+.
制备例343.化合物A330-Int的合成
步骤A：4-(3-溴-4-硝基-1H-吡唑-1-基)苯甲酸甲酯
在室温下，向3-溴-4-硝基-1H-吡唑(150g，0.79mol，1.0当量)，4-甲氧羰基苯基硼酸(185g，1.03mol，1.3当量)和吡啶(315g，3.9mol，5.0当量)的二氯甲烷(900mL)的溶液中加入醋酸铜(213g，1.2mol，1.5当量)。反应液在氧气保护下室温搅拌反应18小时。反应完全后，反应混合物通过硅藻土过滤，滤饼用二氯甲烷洗涤。将合并的滤液在减压下浓缩干。粗残留物通过在硅胶色谱柱纯化，得到4-(3-溴-4-硝基-1H-吡唑-1-基)苯甲酸甲酯(白色固体，65g，收率25％)。
步骤B：4-(3-(苄硫基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)苯甲酸甲酯
在室温下，向4-(3-溴-4-硝基-1H-吡唑-1-基)苯甲酸甲酯(60g，0.181mol，1.0当量)、苯基甲硫醇(21.8g，0.175mmol，1.0当量)和DIEA(27g，0.21mol，1.1当量)的1,4-二氧六环(800mL)溶液中加入Pd2(dba)3(16.8g，18.5mmol，0.1当量)和Xant Phos(21.3g，36.9mmol，0.2当量)。反应液氮气置换3次，在氮气保护下100℃搅拌反应18小时。反应完毕，冷却至室温，乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到4-(3-(苄硫基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)苯甲酸甲酯(黄色固体，42g，收率62％)。
步骤C：4-(3-(氯磺酰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)苯甲酸甲酯
在0℃下，向4-(3-(苄硫基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)苯甲酸甲酯(15g，40.6mmol，1.0当量)的醋酸(150mL)和水(25mL)溶液中加入N-氯代丁二酰亚胺(16.2g，121.9mmol，3.0当量)，反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，反应液用乙酸乙酯萃取，混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到4-(3-(氯磺酰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)苯甲酸甲酯(白色固体，9g，收率65％)。
步骤D：4-(4-硝基-3-氨基磺酰基-1H-吡唑-1-基)苯甲酸甲酯
在0℃下，向4-(3-(氯磺酰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)苯甲酸甲酯(9g，26.1mmol，1.0当量)的乙腈(100mL)溶液中加入25wt％氨水溶液(30mL)。将反应液在室温下搅拌1小时。 反应液在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，减压浓缩，残余物经用水打浆纯化得到4-(4-硝基-3-氨基磺酰基-1H-吡唑-1-基)苯甲酸甲酯(白色固体，6.6g，收率78％)。
步骤E：4-(3-(N-(叔丁氧基羰基)氨磺酰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)苯甲酸甲酯
在室温下，向4-(4-硝基-3-氨基磺酰基-1H-吡唑-1-基)苯甲酸甲酯(6.6g，20.2mmol，1.0当量)和三乙胺(6.1g，60.6mmol，3.0当量)在四氢呋喃(300ml)中的溶液中加入二碳酸二叔丁酯(8.8g，40.4mmol，2.0当量)。将反应液室温下搅拌过夜。将反应液倒入水中,用乙酸乙酯萃取。合并的有机层并用食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，有机相减压下浓缩。残余物经柱色谱纯化得到4-(3-(N-(叔丁氧基羰基)氨磺酰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)苯甲酸甲酯(白色固体，5.0g，收率58％)。
步骤F：4-(4-氨基-3-(N-(叔丁氧基羰基)氨磺酰基)-1H-吡唑-1-基)苯甲酸甲酯
在室温下，向4-(3-(N-(叔丁氧基羰基)氨磺酰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)苯甲酸甲酯(5.0g，11.7mmol，1.0当量)的四氢呋喃(100mL)和甲醇(20mL)溶液中加入10％Pd/C(500mg)。氢气置换三次，将反应液在氢气下在室温下搅拌1小时。反应液用硅藻土过滤掉钯碳，并浓缩滤液得到4-(4-氨基-3-(N-(叔丁氧基羰基)氨磺酰基)-1H-吡唑-1-基)苯甲酸甲酯(白色固体，4g，收率86％)。
步骤G：4-(3-(N-(叔丁氧基羰基)氨磺酰基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯甲酸甲酯
在室温下，向4-(4-氨基-3-(N-(叔丁氧基羰基)氨磺酰基)-1H-吡唑-1-基)苯甲酸甲酯(3.5g，8.8mol，1.0当量)、6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酸(2.9g，10.6mmol，1.2当量)和DIEA(3.5g，26.5mol，3.0当量)在DMF(50mL)中的溶液中加入HATU(3.8g，11.2mmol，1.3当量)。将反应液在室温下搅拌3小时。反应液倒入水中，并用乙酸乙酯萃取。将有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，有机相减压下浓缩。残余物经柱色谱纯化得到4-(3-(N-(叔丁氧基羰基)氨磺酰基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯甲酸甲酯(白色固体，4g，收率70％)。
步骤H：4-(3-(N-(叔丁氧基羰基)氨磺酰基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯甲酸
在室温下，向4-(3-(N-(叔丁氧基羰基)氨磺酰基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯甲酸甲酯(1.5g，2.3mol，1.0当量)在甲醇(5mL)、四氢呋喃(10mL)和水(10ml)中的溶液中加入氢氧化锂(500mg，23mmol，10当量)。反应液在室温下搅拌3小时。用水稀释反应液，用乙酸乙酯反萃，水相用3N稀盐酸溶液调节至 pH＝3。将析出的固体过滤，滤饼干燥得到4-(3-(N-(叔丁氧羰基)氨磺酰基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H吡唑-1-基)苯甲酸(白色固体，1.2g，收率77％)。LC-MS(ESI):m/z 638.3[M+H]+.
制备例344.化合物A330的合成
步骤A：4-氨基-1-(2,6-二(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮
室温下，向1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-4-溴-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(5.0g，9.7mmol，1.0当量)，磷酸钾(2.3g，10.7mmol，1.1当量)，碘化亚铜(0.2g，0.97mmol，0.1当量)和N1-苄基-N2-(5-甲基-2-联苯基)乙二酰胺(0.3g，0.97mmol，0.1当量)的二甲亚砜(80mL)溶液中加入27％氨水(80mL)。反应液在氮气氛围下90℃闷罐反应24小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相用依次用饱和食盐水多次洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物经乙酸乙酯-石油醚打浆得到标题化合物(黄色固体，4.0g，产率91％)。
步骤B：叔丁基9-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基甲酰基)-3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸酯
室温下，向4-氨基-1-(2,6-二(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(609mg，1.3mmol，1.0当量)和3-(叔丁氧羰基)-3-氮杂螺[5.5]十一烷-9-甲酸(400mg，1.3mmol，1.0当量)的DMF(10mL)溶液中加入N-甲基咪唑(331mg，4.0mmol，3.0当量)和TCFH(566mg，2.0mmol，1.5当量)。反应液在室温下搅拌15小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相依次用用食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，600mg，产率61％)。
步骤C：叔丁基9-((1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)甲基)-3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸酯
室温下，叔丁基9-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基甲酰基)-3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸酯(600mg，0.8mmol，1.0当量)加入到硼 烷-二甲硫醚的四氢呋喃(2mol/L)(10mL)溶液中。反应液氮气保护下室温搅拌15小时。反应完毕后，反应液冷却到0℃，慢慢滴加甲醇(10mL)，接着继续搅拌1小时。反应液浓缩后，残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，400mg，产率68％)。
步骤D：叔丁基9-((1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)甲基)-3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸
室温下，向叔丁基9-((1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)甲基)-3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸酯(400mg，0.6mmol，1.0当量)的乙醇(10mL)溶液中加入10％Pd/C(80mg)。反应液氢气置换3次，接着在氢气氛围中于50℃继续搅拌15小时。反应完毕后，过滤除去Pd/C,滤液浓缩得到标题化合物(黄色固体，150mg，产率50％)。
步骤E：3-(4-((3-氮杂螺[5.5]十一烷基-9-基)甲基)氨基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐
将叔丁基9-((1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)甲基)-3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-甲酸(150mg，0.3mmol，1.0当量)加入盐酸-二氧六环溶液(4mol/L)(4mL)在室温下搅拌1小时。反应完毕后，反应液浓缩得到标题化合物(黄色固体，100mg，粗品)。
步骤F：叔丁基((1-(4-(9-((1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)甲基)-3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)-4-(6-(1-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸酯
室温下，向3-(4-((3-氮杂螺[5.5]十一烷基-9-基)甲基)氨基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(100mg，粗品)和4-(3-(N-(叔丁氧羰基)磺酰基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰氨基)-1H-吡唑-1-基)苯甲酸(145mg，0.2mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入N-甲基吗啉(0.08mL，0.7mmol，3.0当量)和HATU(130mg，0.3mmol，1.5当量)。反应液室温继续搅拌2小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，100mg，产率42％)。
步骤G：N-(1-(4-(9-((1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)甲基)-3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)-3-磺酰氨基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
室温下，向叔丁基((1-(4-(9-((1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d] 咪唑-4-基)氨基)甲基)-3-氮杂螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)-4-(6-(1-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸酯(80mg，0.1mmol，1.0当量)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入三氟乙酸(3mL)。反应液室温搅拌2小时。浓缩后，残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，20mg，产率8％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.22(s,1H),11.33(s,1H),11.06(s,1H),9.17(s,1H),8.33-7.90(m,8H),7.60(d,J＝6.8Hz,2H),7.23(s,1H),6.86(s,1H),6.46(d,J＝29.0Hz,2H),5.29(s,1H),5.01(s,1H),3.82-3.57(m,5H),3.06-2.81(m,4H),2.76-2.55(m,3H),2.05-1.92(m,1H),1.80-1.47(m,7H),1.39-1.10(m,6H).LC-MS(ESI):m/z 875[M+H]+.
制备例345.化合物A331的合成
步骤A：4-(1-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-4-溴-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(500mg，0.968mmol，1.0当量),4-(哌啶-4-甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(288mg，0.968mmol，1.0当量)和碳酸铯(946mg，2.905mmol，3.0当量)的二氧六环(10mL)溶液中加入Pd2(dba)3(89mg，0.097mmol，0.1当量)和Xant Phos(112mg，0.194mmol，0.2当量)。反应液氮气保护下于100℃搅拌过夜。反应完毕后，反应液冷却到室温，倒入饱和氯化铵水溶液中，乙酸乙酯萃取。有机相干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，424mg，产率60％)。
步骤B：4-(1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(1-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.273mmol，1.0当量)的乙醇(20mL)溶液中加入10％Pd/C(80mg)。反应液在氢气氛围中于50℃搅拌过夜。反应完毕后，反应液过滤，滤液浓缩得到标题化合物(黄色固体，150mg，产率100％)。
步骤C：3-(3-甲基-2-氧代-4-(4-(哌嗪-1-甲酰基)哌啶-1-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向4-(1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-甲酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(150mg，0.270mmol，1.0当量)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入三氟乙酸(2mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌2小时，接着用稀氢氧化钠水溶液(1mol/L)碱化，二氯甲烷萃取。有机相干燥，过滤，浓缩得到标题化合物(黄色油状物，120mg，粗品)。
步骤D：叔丁基((1-(4-(1-(1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-羰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3基)磺酰基)氨基甲酸酯
室温下，向3-(3-甲基-2-氧代-4-(4-(哌嗪-1-甲酰基)哌啶-1-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(120mg，粗品)和((1-(4-甲酰基苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶氨基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(164mg，0.264mmol，1.0当量)的DMF(5mL)的溶液中加入醋酸(0.3mL)。反应液室温搅拌过夜。接着三乙酰氧基硼氢化钠(168mg，0.792mmol，3.0当量)加入，反应继续搅拌1小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，30mg，产率13％)。
步骤E：N-(1-(4-((4-(1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-甲酰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-3-氨基磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
室温下，向叔丁基((1-(4-(1-(1-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-羰基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3基)磺酰基)氨基甲酸酯(30mg，0.028mmol，1.0当量)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入三氟乙酸(1mL)。反应液室温搅拌2小时。浓缩后，残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，4mg，产率16％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.21(s,1H),11.34(s,1H),11.09(s,1H),9.11(s,1H),8.25(d,J＝5.1Hz,1H),8.08(dd,J＝17.8,10.4Hz,3H),7.94(d,J＝6.8Hz,2H),7.57-7.23(m,4H),7.01-6.87(m,3H),5.36(dd,J＝11.9,5.1Hz,1H),3.77-3.55(m,10H),3.13(d,J＝10.2Hz,2H),2.96-2.59(m,9H),2.03-1.98(m,1H),1.84-1.71(m,4H).LC-MS(ESI):m/z 876[M+H]+.
制备例346.化合物A332的合成
步骤A：4-(4-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌嗪-1-甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-4-溴-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(550mg，1.1mmol，1.0当量),4-(哌嗪-1-甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(348mg，1.2mmol，1.1当量)和碳酸铯(694mg，2.1mmol，2.0当量)的二氧六环(15mL)溶液中加入Pd2(dba)3(97mg，0.1mmol，0.1当量)和Xant Phos(61mg，0.1mmol，0.1当量)。反应液氮气保护下于110℃搅拌18小时。反应完毕后，反应液冷却到室温，倾倒入饱和氯化铵水溶液中，乙酸乙酯萃取。有机相干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，660mg，产率84％)。
步骤B：4-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌嗪-1-甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(4-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌嗪-1-甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(550mg，0.7mmol，1.0当量)的甲醇(10mL)溶液中加入10％Pd/C(159mg)和10％Pd(OH)2/C(210mg)。反应液在氢气氛围中于60℃搅拌过夜。反应完毕后，反应液过滤，滤液浓缩得到标题化合物(黄色油状物，440mg，产率96％)。
步骤C：3-(3-甲基-2-氧代-4-(4-(哌啶-4-甲酰基)哌嗪-1-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向4-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌嗪-1-甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.4mmol，1.0当量)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入三氟乙酸(1mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌2小时，接着减压浓缩得到标题化合物(黄色油状物，150mg，粗品)。
步骤D：叔丁基((1-(4-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌嗪-1-羰基)哌啶-1-基)甲基)苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸酯
在室温下，向3-(3-甲基-2-氧代-4-(4-(哌啶-4-甲酰基)哌嗪-1-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(150mg，粗品)和((1-(4-甲酰基苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶氨基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(226mg，0.4mmol，1.3当量)的DMF(5mL)的溶液中加入醋酸(0.05mL)。反应液室温搅拌过夜。接着三乙酰氧基硼氢化钠(209mg，1.0mmol，3.0当量)加入，反应继续搅拌3小时。反应完毕后，反应液用反相柱色谱(C18)纯化得到标题化合物(白色固体，70mg，两步产率20％)。
步骤E：N-(1-(4-((4-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌嗪-1-甲酰基)哌啶-1-基)甲基)苯基)-3-氨基磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在室温下，向叔丁基((1-(4-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌嗪-1-羰基)哌啶-1-基)甲基)苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸酯(70mg，0.07mmol，1.0当量)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入三氟乙酸(1mL)。反应液室温搅拌1小时。浓缩后，残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，10mg，产率17％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.20(s,1H),11.32(s,1H),11.09(s,1H),9.08(s,1H),8.24(d,J＝7.7Hz,1H),8.18-8.05(m,3H),8.03(s,1H),7.94(s,1H),7.88(d,J＝8.5Hz,2H),7.51(d,J＝8.5Hz,2H),7.22(d,J＝2.0Hz,1H),7.02-6.96(m,1H),6.92(dd,J＝7.3,4.7Hz,2H),5.36(dd,J＝12.6,5.2Hz,1H),4.45(s,1H),4.01(s,1H),3.65(s,3H),3.55(s,2H),3.07(s,2H),2.91(d,J＝10.1Hz,1H),2.87(d,J＝11.3Hz,4H),2.76-2.63(m,4H),2.60(s,1H),2.13-1.99(m,3H),1.71-1.60(m,4H).LC-MS(ESI):m/z 876[M+H]+.
制备例347.化合物A333的合成
步骤A：叔丁基7-(2-(((苄氧基)羰基)氨基)乙基)-2,7-双氮杂螺[4.4]壬烷-2-甲酸酯
室温下，向叔丁基2,7-双氮杂螺[4.4]壬烷-2-甲酸酯(1g，4.4mmol，1.0当量)的乙腈(15mL)溶液中加入DIEA(2.3mL，13.3mmol，3.0当量)和2-溴乙基氨基甲酸苄酯(1.1g，4.4mmol，1.0当量)。反应液室温继续搅拌18小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲 烷萃取。有机相依次用食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状物，1.0g，产率56％)。
步骤B：叔丁基7-(2-氨基乙基)-2,7-双氮杂螺[4.4]壬烷-2-甲酸酯
室温下，向叔丁基7-(2-(((苄氧基)羰基)氨基)乙基)-2,7-双氮杂螺[4.4]壬烷-2-甲酸酯(800mg，2.0mmol，1.0当量)的乙醇(10mL)溶液中加入10％Pd/C(100mg)。反应液氢气置换3次，接着在氢气氛围中于25℃继续搅拌2小时。反应完毕后，过滤除去Pd/C,滤液浓缩得到标题化合物(黄色油状物，500mg，产率94％)。
步骤C：叔丁基7-(2-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)乙基)-2,7-双氮杂螺[4.4]壬烷-2-甲酸酯
室温下，向1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-4-溴-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(1.4g，2.7mmol，1.0当量)和叔丁基7-(2-氨基乙基)-2,7-双氮杂螺[4.4]壬烷-2-甲酸酯(740mg，2.7mmol，1.0当量)的二氧六环(15mL)溶液中加入碳酸铯(2.7g，8.2mmol，3.0当量)，RuPhos Pd G3(230mg，0.27mmol，0.1当量)和RuPhos(128mg，0.27mmol，0.1当量)。反应液在氮气保护下于100℃搅拌15小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，900mg，产率46％)。
步骤D：叔丁基7-(2-(1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)乙基)-2,7-双氮杂螺[4.4]壬烷-2-甲酸酯
室温下，向叔丁基7-(2-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)乙基)-2,7-双氮杂螺[4.4]壬烷-2-甲酸酯(520mg，0.7mmol，1.0当量)的乙醇(10mL)溶液中加入10％Pd/C(100mg)和10％Pd(OH)2/C(100mg)。反应液氢气置换3次，接着在氢气氛围中于50℃继续搅拌18小时。反应完毕后，过滤，滤液浓缩得到标题化合物(黄色固体，200mg，产率51％)。
步骤E：3-(4-(2-(2,7-双氮杂螺[4.4]壬-2-基)乙基)氨基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐
将叔丁基7-(2-(1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)乙基)-2,7-双氮杂螺[4.4]壬烷-2-甲酸酯(200mg，0.4mmol，1.0当量)加入盐酸-二氧六环溶液(4mol/L)(4mL)在室温下搅拌1小时。反应完毕后，反应液浓缩得到标题化合物(黄色固体，160mg，粗品)。
步骤F：N-(1-(4-(7-((1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4- 基)氨基)乙基)-2,7-双氮杂螺[4.4]壬烷-2-羰基)苯基)-3-磺胺酰-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
室温下，向3-(4-(2-(2,7-双氮杂螺[4.4]壬-2-基)乙基)氨基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(120mg，粗品)和4-(3-(N-(叔丁氧羰基)磺酰基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰氨基)-1H-吡唑-1-基)苯甲酸(165mg，0.26mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入N-甲基吗啉(78mg，0.78mmol，3.0当量)和HATU(147mg，0.4mmol，1.5当量)。反应液室温继续搅拌18小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物溶解在三氟乙酸(3mL)中，继续搅拌2小时。反应液浓缩后，残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，34mg，产率41％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.21(s,1H),11.33(s,1H),11.05(s,1H),9.16(s,1H),8.25(d,J＝7.6Hz,1H),8.13(dd,J＝16.8,7.6Hz,2H),8.08(s,2H),7.97(t,J＝8.4Hz,3H),7.67(d,J＝8.8Hz,2H),7.22(d,J＝2.4Hz,1H),6.88(t,J＝8.0Hz,1H),6.52(d,J＝7.6Hz,1H),6.43(d,J＝8.0Hz,1H),5.32(dd,J＝12.4,5.2Hz,1H),5.09(s,1H),3.89-3.79(m,1H),3.77-3.67(m,1H),3.61(s,3H),3.56-3.39(m,3H),3.19-3.12(m,2H),2.93-2.81(m,3H),2.78-2.55(m,7H),2.05-1.93(m,1H).LC-MS(ESI):m/z 862[M+H]+.
制备例348.化合物A334的合成
步骤A：N-(1-(4-(6-(2-(1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)乙基)-2,6-双氮杂螺[3.3]庚烷-2-基)甲基)苯基)-3-磺胺酰-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
室温下，向叔丁基(1-(4-甲酰基苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰氨基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸酯(156mg，0.25mmol，1.0当量)和3-(4-(2-(2,6-双氮杂螺[3.3]庚-2-基)乙基)氨基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮三氟乙酸盐(100mg，0.25mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入三乙胺(0.2mL)。反应液在室温下反应0.5小时。接着加入醋酸(0.3mL)反应液中，继续搅拌18小时。三乙酰氧基硼氢化钠(79mg，0.38mmol，1.5当量)加入，继续搅拌1小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓 缩。残余物溶解在三氟乙酸(3mL)中，室温下继续搅拌2小时。浓缩后，残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，7.6mg，产率21％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.21(s,1H),11.32(s,1H),11.06(s,1H),9.11(s,1H),8.25(d,J＝8.0Hz,1H),8.16-8.12(m,1H),8.09-8.03(m,3H),7.98-7.89(m,3H),7.48(d,J＝33.6Hz,2H),7.22(d,J＝2.4Hz,1H),6.90(t,J＝8.0Hz,1H),6.57(d,J＝7.6Hz,1H),6.46(d,J＝8.4Hz,1H),5.30(dd,J＝12.8,5.2Hz,2H),4.32-3.98(m,5H),3.80-3.53(m,6H),3.31-3.19(m,6H),2.93-2.82(m,1H),2.72-2.59(m,2H),2.02-1.92(m,1H).LC-MS(ESI):m/z 820[M+H]+.
制备例349.化合物A335的合成
步骤A：4-(丙-2-烯-1-氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在0℃下，向4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.0g，9.95mmol，1.0当量)的四氢呋喃(20mL)溶液中加入氢化钠(477mg，11.94mmol，1.2当量,60％分散在矿物油中)。然后将混合物在0℃搅拌反应30分钟。然后，向反应混合物中加入3-溴丙-1-炔(1.76g，14.93mmol，1.5当量)溶液，反应液在室温下搅拌反应过夜。反应完全后，将反应液缓慢加入冰水中，并用乙酸乙酯萃取两次。合并有机相，用食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯，梯度：0-50％乙酸乙酯)纯化得到标题化合物(黄色固体，2.0g，产率84％)。
步骤B：4-((3-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)丙-2-炔-1-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在氮气保护下，向4-(丙-2-烯-1-氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(425mg，1.78mmol，2.0当量)和3-(4-溴-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(300mg，0.89mmol，1.0当量)的二甲亚砜(4mL)溶液中加入碳酸铯(871mg，2.67mmol，3.0当量)、碘化亚铜(169mg，0.18mmol，0.2当量)和Pd(PPh)3Cl2(125mg，0.18mmol，0.2当量)。反应液用氮气置换三次，在氮气保护下90℃搅拌过夜。反应完全后，将反应液缓慢加入到冰水中，分层，水相乙酸乙酯萃取。合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯，梯度：0-67％乙酸乙酯)纯化得到标 题化合物(棕色固体，300mg，产率68％)。
步骤C：3-(3-甲基-2-氧代-4-(3-(哌啶-4-基氧基)丙-1-炔-1-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在冰水浴下，向4-((3-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)丙-2-炔-1-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(300mg，0.60mmol，1.0当量)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入三氟乙酸(1.0mL)。然后反应液在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液减压浓缩得到标题化合物(黄色油状，230mg，粗品)。
步骤D：((1-(4-((3-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)丙-2-炔-1-基)氧基)哌啶-1-羰基)苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(3-(N-(叔丁氧基羰基)氨磺酰基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苯甲酸(200mg，0.31mmol，1.0当量)和3-(3-甲基-2-氧代-4-(3-(哌啶-4-基氧基)丙-1-炔-1-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(249mg，粗品)的DMF(3mL)溶液中加入DIEA(243mg，1.88mmol，6.0当量)和T3P(293mg，0.46mmol，1.5当量，50％的乙酸乙酯溶液)。将混合物在室温下搅拌过夜反应。反应完全后，将反应液缓慢加入冰水中，并用乙酸乙酯萃取两次。合并有机相，用食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到标题化合物(棕色固体，150mg，产率47％)。
步骤E：N-(1-(4-(4-((3-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)丙-2-炔-1-基)氧基)哌啶-1-羰基)苯基)-3-氨磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在冰水浴下，向((1-(4-((3-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)丙-2-炔-1-基)氧基)哌啶-1-羰基)苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(150mg，0.15mmol，1.0当量)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入三氟乙酸(1mL)。然后反应液在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液在减压下浓缩，残余物通过制备HPLC(C18，10-95％乙腈的含有0.1％FA水溶液)纯化得到标题化合物(白色固体，30mg，产率41％)。LC-MS(ESI):m/z 832[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.20(s,1H),11.33(s,1H),11.12(s,1H),9.16(s,1H),8.25(d,J＝7.6Hz,1H),8.15-8.11(m,1H),8.09-8.07(m,3H),8.01-7.99(m,2H),7.95-7.74(m,1H),7.61(d,J＝8.6Hz,2H),7.24-7.21(m,1H),7.19-7.17(m,1H),7.14-7.12(m,1H),7.03(t,J＝7.8Hz,1H),5.44-5.36(m,1H),4.53(s,2H),4.03-3.95(m,1H),3.88-3.84(m,1H),3.59(s,3H), 3.55-3.46(m,2H),2.92-2.84(m,1H),2.73-2.64(m,2H),2.05-1.88(m,4H),1.56-1.54(m,2H).
制备例350.化合物A336的合成
步骤A：4-(丁-3-炔-1-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向哌嗪-1-甲酸叔丁酯(4g，21.5mmol，1.0当量)的乙腈(40mL)溶液中加入K2CO3(7.4g，53.75mmol，2.5当量)和4-溴丁-1-炔(3g，22.6mmol，1.0当量)。反应液在室温下搅拌16小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯，梯度：0-15％乙酸乙酯)纯化得到标题化合物(黄色油状物，3g，产率59％)。
步骤B：4-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)丁-3-炔-1-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(丁-3-炔-1-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(422mg，1.8mmol，1.5当量)和3-(4-溴-3-甲基-2-氧代-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)咪唑-1-基]哌啶-2,6-二酮(400mg，1.18mmol，1.0当量)的二甲亚砜(5mL)溶液中依次加入Cs2CO3(1.15g，3.54mmol，3当量)，Pd(pph3)2Cl2(83mg，0.12mmol，0.1当量)和碘化亚铜(23mg，0.12mmol，0.1当量)。反应液用氮气置换三次，在氮气保护下90℃搅拌反应2小时。反应完全后，将反应液用水稀释，并用乙酸乙酯萃取。有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯，梯度：0-50％乙酸乙酯)纯化得到标题化合物(黄色固体，350mg，产率60％)。
步骤C：3-(3-甲基-2-氧代-4-(4-(哌嗪-1-基)丁-1-炔-1-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在0℃下，向4-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)丁-3-炔-1-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(150mg，0.3mmol，1.0当量)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入TFA(1mL，15mmol，50当量)，然后将溶液在室温下搅拌30分钟。将反应液减压浓缩，残余物通过制备HPLC(YMC-Actus Triart C18，30-90％乙腈的含有0.1％氨水水溶液)纯化得到标题化合物(黄色固体，90mg，产率76％)。
步骤D：((1-(4-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)丁-3-炔-1-基)哌嗪-1-羰基)苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向3-(3-甲基-2-甲基-2-氧代-4-(4-(哌嗪-1-基)丁-1-炔-1-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(75mg，0.19mmol，1.2当量)的DMF(3mL)溶液中依次加入4-(3-(N-(叔丁氧羰基)氨基磺酰基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苯甲酸(100mg，0.16mmol，1当量)，DIEA(62mg，0.48mmol，3当量)和HATU(73mg，0.19mmol，1.2当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，100mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步反应。
步骤E：N-(1-(4-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)丁-3-炔-1-基)哌嗪-1-羰基)苯基)-3-氨磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在0℃下，向((1-(4-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)丁-3-炔-1-基)哌嗪-1-羰基)苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，粗品)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入三氟乙酸(1mL)，然后将溶液在室温下搅拌反应30分钟。反应完全后减压下浓缩，残余物通过制备HPLC(YMC-Actus Triart C18，25-90％乙腈的含有0.1％氨水水溶液)纯化得到标题化合物(白色固体，29mg，两步产率35％)。LC-MS(ESI):m/z 831[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.21(s,1H),11.33(s,1H),11.11(s,1H),9.17(s,1H),8.26-8.24(m,1H),8.15-8.12(m,1H),9.09-8.08(m,3H),8.02-8.00(m,2H),7.95(s,1H),7.62(d,J＝8.6Hz,2H),7.23(s,1H),7.12(d,J＝8.0Hz,1H),7.06(d,J＝7.0Hz,1H),7.00(t,J＝7.8Hz,1H),5.41-5.37(m,1H),3.69(s,3H),2.94-2.84(m,3H),2.79-2.57(m,11H),2.11-1.91(m,2H).
制备例351.化合物A337的合成
步骤A：5-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁酯
将混合物1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-4-溴-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(2.0g，3.87mmol，1.0当量)，六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁酯(0.82g，3.87mmol，1.0当量)，2-二环己基磷-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯(0.36g，0.76mmol，0.2当量)，Ru-Phos Pd G1(0.32g，0.39mmol，0.1当量)和碳酸铯(3.79g，11.62mmol，3.0当量)溶于二氧六环(100mL)在氮气保护下100℃搅拌反应16小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(无色透明液体，1.1g，产率44％)。
步骤B：1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-4-(六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮
在室温下，向5-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁酯(1.1g，1.69mmol，1.0当量)的乙腈(20mL)溶液中加入盐酸-二氧六环溶液(10mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，900mg，粗品)。
步骤C：(2-(5-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-4-(六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(900mg，粗品)的二氯甲烷(20mL)溶液中加入三乙胺(0.46mL，3.28mmol，2.0当量)，醋酸(0.38mL，6.57mmol，4.0当量)和甲基(2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(284mg，1.64mmol，1.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应30分钟，然后相同温度下加入三乙酰氧基硼氢化钠(697mg，3.28mmol，2.0当量)。反应液继续在 氮气保护下室温搅拌反应3小时。反应完全后，将反应液用二氯甲烷稀释，依次碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(无色透明液体，800mg，产率69％)。
步骤D：2-(5-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向(2-(5-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(800mg，1.13mmol，1.0当量)的乙醇(30mL)溶液中加入钯碳(120mg，质量分数＝10％)。反应液在氢气保护下室温搅拌反应12小时，反应完全后，将反应液用硅藻土过滤，滤液通过减压浓缩得到标题化合物(黄色液体，500mg，产率80％)。
步骤E：3-(3-甲基-4-(5-(2-(甲基氨基)乙基)六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向2-(5-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，0.95mmol，1.0当量)的乙腈(20mL)溶液中加入4M盐酸-二氧六环溶液(10mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时，反应完全后，将反应液通过减压浓缩得到标题化合物(白色固体，350mg，粗品)。
步骤F：叔丁基((4-(6-(1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1-(4-((2-(5-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)乙基)(甲基)氨基)甲基)苯基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸酯
在室温下，向3-(3-甲基-4-(5-(2-(甲基氨基)乙基)六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(130mg，粗品)的DMF(20mL)溶液中加入三乙胺(0.09mL，0.61mmol，2.0当量)，醋酸(0.09mL，1.52mmol，5.0当量)和((1-(4-甲酰基苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶氨基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(227mg，0.37mmol，1.2当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应30分钟，然后相同温度下反应液中加入三乙酰氧基硼氢化钠(129mg，0.61mmol，2.0当量)。反应液继续在氮气保护下室温搅拌反应4小时。反应完全后，将反应液倒入50mL中并且有黄色固体析出，然后黄色固体溶于20mL的乙酸乙酯中，固体过滤，减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，80mg，两步产率28％)。
步骤G：N-(1-(4-(((2-(5-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d] 咪唑-4-基)六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)乙基)(甲基)氨基)甲基)苯基)-3-氨基磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在室温下，向叔丁基((4-(6-(1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1-(4-((2-(5-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)乙基)(甲基)氨基)甲基)苯基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸酯(80mg，0.08mmol，1.0当量)的乙腈(10mL)溶液中加入盐酸-二氧六环溶液(5mL)。反应液在氮气保护下50℃搅拌反应2小时，反应完全后，将反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，26.0mg，产率36％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ13.21(s,1H),11.32(s,1H),11.08(s,1H),9.07(s,1H),8.27-8.22(m,1H),8.18(s,1H),8.13(t,J＝7.7Hz,1H),8.09-8.06(m,1H),8.04-8.01(m,1H),7.93(s,1H),7.88-7.83(m,2H),7.51(d,J＝8.5Hz,2H),7.25-7.20(m,1H),6.99-6.91(m,2H),6.89-6.83(m,1H),5.34(dd,J＝12.5,5.3Hz,1H),3.63(s,3H),3.59(s,2H),3.16-3.11(m,2H),2.92-2.86(m,1H),2.85-2.78(m,4H),2.72-2.67(m,1H),2.65-2.60(m,4H),2.59-2.52(m,5H),2.20(s,3H),2.02-1.97(m,1H).
制备例352.化合物A338的合成
步骤A：N-(1-(4-(5-(2-(1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)乙基)六氢吡咯[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)甲基)苯基)-3-磺胺甲酰-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
室温下，向叔丁基(1-(4-甲酰基苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰氨基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸酯(150mg，0.24mmol，1.0当量)和3-(4-(2-(六氢吡咯[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)乙基)氨基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(100mg，0.24mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入三乙胺(0.2mL)。反应液在室温下反应0.5小时。接着加入醋酸(0.3mL)反应液中，继续搅拌18小时。三乙酰氧基硼氢化钠(77mg，0.36mmol，1.5当量)加入，继续搅拌1小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物溶解在三氟乙酸(3mL)中，室温下继续搅拌2小时。浓缩后，残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，80mg，产率32％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.23(s,1H),11.32(s,1H),11.07(s,1H),9.17(s,1H),8.25(d,J＝7.2Hz,1H),8.14(t,J＝7.6Hz,1H), 8.08(d,J＝8.0Hz,5H),7.93(s,1H),7.74-7.61(m,2H),7.22(d,J＝2.4Hz,1H),6.92(t,J＝8.0Hz,1H),6.60(d,J＝8.0Hz,1H),6.51(d,J＝6.8Hz,1H),5.68-5.07(m,2H),4.53-4.33(m,2H),4.00-3.90(m,2H),3.76-3.71(m,3H),3.64(s,3H),3.49-3.35(m,6H),3.20-3.09(m,2H),2.97-2.81(m,2H),2.73-2.60(m,2H),1.99-1.89(m,1H).LC-MS(ESI):m/z 834[M+H]+.
制备例353.化合物A339的合成
步骤A：叔丁基5-(2-(((苄氧基)羰基)氨基)乙基)六氢吡咯[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸酯
室温下，向叔丁基六氢吡咯[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸酯(1g，4.7mmol，1.0当量)的乙腈(15mL)溶液中加入DIEA(2.5mL，14.1mmol，3.0当量)和2-溴乙基氨基甲酸苄酯(1.2g，4.7mmol，1.0当量)。反应液室温继续搅拌18小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状物，0.8g，产率44％)。
步骤B：5-(2-氨基乙基)六氢吡咯[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁酯
室温下，向叔丁基5-(2-(((苄氧基)羰基)氨基)乙基)六氢吡咯[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸酯(800mg，2.0mmol，1.0当量)的乙醇(10mL)溶液中加入10％Pd/C(100mg)。反应液氢气置换3次，接着在氢气氛围中于25℃继续搅拌2小时。反应完毕后，过滤除去Pd/C,滤液浓缩得到标题化合物(黄色油状物，300mg，产率57％)。
步骤C：叔丁基5-(2-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)乙基)六氢吡咯[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸酯
室温下，向1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-4-溴-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(1.3g，2.6mmol，1.0当量)和5-(2-氨基乙基)六氢吡咯[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁酯(660mg，2.6mmol，1.0当量)的二氧六环(15mL)溶液中加入碳酸铯(2.5g，7.8mmol，3.0当量)，RuPhos Pd G3(216mg，0.26mmol，0.1当量)和RuPhos(120mg，0.26mmol，0.1当量)。反应液在氮气保护下于100℃搅拌15小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.0g，产率56％)。
步骤D：叔丁基5-(2-(1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)乙基)六氢吡咯[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸酯
室温下，向叔丁基5-(2-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)乙基)六氢吡咯[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸酯(900mg，1.3mmol，1.0当量)的乙醇(15mL)溶液中加入10％Pd/C(100mg)和10％Pd(OH)2/C(100mg)。反应液氢气置换3次，接着在氢气氛围中于50℃继续搅拌18小时。反应完毕后，过滤，滤液浓缩得到标题化合物(黄色固体，400mg，产率60％)。
步骤E：3-(4-(2-(六氢吡咯[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)乙基)氨基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐
叔丁基5-(2-(1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)乙基)六氢吡咯[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸酯(400mg，0.8mmol，1.0当量)的盐酸-二氧六环溶液(4mol/L)(5mL)在室温下搅拌1小时。反应完毕后，反应液浓缩得到标题化合物(黄色固体，280mg，粗品)。
步骤F：N-(1-(4-(5-((1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)乙基)八氢吡咯[3,4-c]吡咯-2-羰基)苯基)-3-磺胺酰-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
室温下，向4-(3-(N-(叔丁氧羰基)磺酰基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰氨基)-1H-吡唑-1-基)苯甲酸(155mg，0.24mmol，1.0当量)和3-(4-(2-(六氢吡咯[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)乙基)氨基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(108mg，粗品)的DMF(5mL)溶液中加入N-甲基吗啉(74mg，0.73mmol，3.0当量)和HATU(138mg，0.36mmol，1.5当量)。反应液室温继续搅拌18小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物溶解在三氟乙酸(3mL)中，继续搅拌2小时。反应液浓缩后，残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，28mg，产率43％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)13.21(s,1H),11.33(s,1H),11.05(s,1H),9.16(s,1H),8.25(d,J＝7.6Hz,1H),8.13(dd,J＝16.6,7.6Hz,2H),8.08(s,2H),7.97(t,J＝8.8Hz,3H),7.67(d,J＝8.8Hz,2H),7.22(d,J＝2.4Hz,1H),6.88(t,J＝8.0Hz,1H),6.52(d,J＝7.6Hz,1H),6.43(d,J＝8.0Hz,1H),5.32(dd,J＝12.4,5.2Hz,1H),5.09(s,1H),3.89-3.79(m,1H),3.77-3.67(m,1H),3.61(s,3H),3.56-3.39(m,3H),3.19-3.12(m,2H),2.93-2.81(m,3H),2.78-2.55(m,7H),2.05-1.93(m,1H).LC-MS(ESI):m/z 848[M+H]+.
制备例354.化合物A340的合成
步骤A：((1-(4-((4-((3-(1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)丙-2-炔基-1-基)氧基)哌啶-1-基)甲基)苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑酰胺基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸酯
在氮气保护下，向((1-(4-甲酰基苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶氨基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(50mg，0.08mmol，1.0当量)，3-(3-甲基-2-氧代-4-(3-(哌啶-4-基氧基)丙-1-炔-1-基)-2,3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(32mg，0.08mmol，1.0当量)的DMF(2mL)溶液中加入AcOH(0.01mL，0.02mmol，0.1当量)和NaBH(OAc)3(59mg，0.26mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应半小时。反应完全后，反应液用饱和碳酸氢钠溶液淬灭并用乙酸乙酯萃取两次。有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经制备HPLC(C18，10-50％乙腈的含有0.1％FA水溶液)纯化得到标题化合物(白色固体，35.1mg，产率44％)。
步骤B：N-(1-(4-((4-((3-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)丙-2-炔-1-基)氧基)哌啶-1-基)甲基)苯基)-3-氨基磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在室温下，((1-(4-((4-((3-(1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)丙-2-炔基-1-基)氧基)哌啶-1-基)甲基)苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡唑酰胺基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸酯(35mg，0.04mmol，1.0当量)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入TFA(1mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应3小时。残余物经HPLC(C18，10-50％乙腈的含有0.1％FA水溶液)得到标题化合物(白色固体，5.0mg，产率18％)。LC-MS(ESI):m/z 818.4[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.20(s,1H),11.32(s,1H),11.12(s,1H),9.07(s,1H),8.24(d,J＝7.3Hz,1H),8.19-8.10(m,2H),8.06-8.03(m,2H),7.94(s,1H),7.87(d,J＝8.5Hz,2H),7.50(d,J＝8.4Hz,2H),7.22(s,1H),7.17(d,J＝7.7Hz,1H),7.12(d,J＝7.2Hz,1H),7.07-6.99(m,1H),5.42-5.38(m,1H),4.48(s,2H),3.64(s,3H),3.62-3.57(m,1H),3.54(s,2H),2.92-2.85(m,1H),2.72-2.61(m,4H),2.23-2.12(m,2H),2.07-2.00(m,1H),1.95-1.86(m,2H),1.59-1.48(m,2H).
制备例355.化合物A341的合成
步骤A：7-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬烷-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-4-溴-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(500mg，0.97mmol，1.0当量),2,7-二氮杂螺[4.4]壬烷-2-甲酸叔丁酯(329mg，1.5mmol，1.5当量)和碳酸铯(946mg，2.9mmol，3.0当量)的二氧六环(10mL)溶液中加入Pd2(dba)3(89mg，0.1mmol，0.1当量)和Xant Phos(112mg，0.2mmol，0.2当量)。反应液氮气保护下于100℃搅拌12小时。反应完毕后，反应液冷却到室温，过滤，滤饼用二氯甲烷洗涤。滤液浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，600mg，产率94％)。
步骤B：1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-4-(2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮
在室温下，向7-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬烷-2-甲酸叔丁酯(300mg，0.5mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入三氟乙酸(3mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌1小时，接着减压浓缩得到标题化合物(黄色油状物，200mg，粗品)。
步骤C：(2-(7-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬烷-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-4-(2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(200mg，0.4mmol，1.0当量)的DMF(5mL)的溶液中加入(2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(135mg，0.8mmol，2.0当量)。反应液室温搅拌1小时。接着三乙 酰氧基硼氢化钠(270mg，1.3mmol，3.0当量)加入，反应继续搅拌过夜。反应完毕后，反应液用饱和碳酸氢钠水溶液碱化，乙酸乙酯萃取。有机相饱和食盐水洗涤，干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，150mg，产率58％)。
步骤D：(2-(7-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向(2-(7-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬烷-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(150mg，0.2mmol，1.0当量)的乙醇(10mL)溶液中加入10％Pd/C(26mg)。反应液在氢气氛围中于60℃搅拌过夜。反应完毕后，反应液过滤，滤液浓缩得到标题化合物(黄色固体，100mg，产率78％)。
步骤E：3-(4-(7-(2-氨基乙基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向(2-(7-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.2mmol，1.0当量)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入三氟乙酸(1mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌2小时，接着减压浓缩得到标题化合物(黄色油状物，70mg，粗品)。
步骤F：叔丁基((1-(4-((2-(7-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)乙基)氨基甲酰基)苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲氨基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸酯
在室温下，向3-(4-(7-(2-氨基乙基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(70mg，0.2mmol，1.0当量)，4-(3-(N-(叔丁氧羰基)氨基磺酰基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苯甲酸(91mg，0.2mmol，1.0当量)和DIEA(127mg，1.0mmol，5.0当量)的DMF(5mL)的溶液中加入HATU(94mg，0.2mmol，1.0当量)。反应液室温搅拌5小时。反应完毕后，反应液用饱和氯化铵水溶液稀释，乙酸乙酯萃取。有机相用饱和食盐水洗涤，干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，40mg，产率25％)。
步骤G：N-(1-(4-((2-(7-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)乙基)氨基甲酰基)苯基)-3-氨磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺甲酸盐
在室温下，向叔丁基((1-(4-((2-(7-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)乙基)氨基甲酰基)苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃 -2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲氨基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸酯(40mg，0.04mmol，1.0当量)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入三氟乙酸(1mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌1小时。反应完毕后，反应液减压浓缩，残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，11mg，产率31％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.20(s,1H),11.33(s,1H),11.08(s,1H),9.19(s,1H),8.58(t,J＝5.4Hz,1H),8.25(d,J＝7.6Hz,1H),8.17(s,0.6H),8.14(t,J＝7.7Hz,1H),8.08(d,J＝6.9Hz,3H),8.03(s,4H),7.94(s,1H),7.22(d,J＝2.1Hz,1H),6.99-6.92(m,2H),6.85(d,J＝6.5Hz,1H),5.35(dd,J＝12.3,4.5Hz,1H),3.60(s,3H),3.44-3.40(m,2H),3.13-3.05(m,3H),3.00-2.83(m,3H),2.76-2.62(m,6H),2.56(d,J＝8.8Hz,1H),2.03-1.81(m,5H).LC-MS(ESI):m/z 862[M+H]+.
制备例356.化合物A343的合成
步骤A：叔丁基6-(2-(((苄氧基)羰基)氨基)乙基)-2,6-双氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸酯
室温下，向叔丁基2,6-双氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸酯(1g，5.0mmol，1.0当量)的乙腈(10mL)溶液中加入DIEA(2.7mL，15.0mmol，3.0当量)和2-溴乙基氨基甲酸苄酯(1.3g，5.0mmol，1.0当量)。反应液室温继续搅拌18小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状物，1.1g，产率58％)。
步骤B：叔丁基6-(2-氨基乙基)-2,6-双氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸酯
室温下，向叔丁基6-(2-(((苄氧基)羰基)氨基)乙基)-2,6-双氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸酯(1.0g，2.7mmol，1.0当量)的乙醇(10mL)溶液中加入10％Pd/C(100mg)。反应液氢气置换3次，接着在氢气氛围中于25℃继续搅拌2小时。反应完毕后，过滤除去Pd/C,滤液浓缩得到标题化合物(黄色油状物，600mg，产率93％)。
步骤C：叔丁基6-(2-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)乙基)-2,6-双氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸酯
室温下，向1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-4-溴-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(1.7g，3.3mmol，1.0当量)和叔丁基6-(2-氨基乙基)-2,6-双氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸酯(800mg，3.3mmol，1.0当量)的二氧六环(15mL)溶液中加入碳酸铯(3.2g，9.9mmol，3.0当量)，RuPhos Pd G3(278mg，0.33mmol，0.1当量)和RuPhos(155mg，0.33mmol，0.1当量)。反应液在氮气保护下于100℃搅拌15小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，900mg，产率40％)。
步骤D：叔丁基6-(2-(1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)乙基)-2,6-双氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸酯
室温下，向叔丁基6-(2-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)乙基)-2,6-双氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸酯(800mg，1.2mmol，1.0当量)的乙醇(15mL)溶液中加入10％Pd/C(100mg)和10％Pd(OH)2/C(100mg)。反应液氢气置换3次，接着在氢气氛围中于50℃继续搅拌18小时。反应完毕后，过滤，滤液浓缩得到标题化合物(黄色固体，400mg，产率68％)。
步骤E：3-(4-(2-(2,6-双氮杂螺[3.3]庚-2-基)乙基)氨基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮三氟乙酸盐
叔丁基6-(2-(1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)乙基)-2,6-双氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸酯(400mg，0.8mmol，1.0当量)溶解在三氟乙酸(5mL)，接着反应液在室温下搅拌1小时。反应完毕后，反应液浓缩得到标题化合物(黄色固体，300mg，粗品)。
步骤F：N-(1-(4-(6-((1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)乙基)-2,6-双氮杂螺[3.3]庚烷-2-羰基)苯基)-3-磺酰氨基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
室温下，向4-(3-(N-(叔丁氧羰基)磺酰基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰氨基)-1H-吡唑-1-基)苯甲酸(128mg，0.2mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入N-甲基吗啉(0.5mL)和HATU(114mg，0.3mmol，1.5当量)。反应液室温搅拌1小时。接着3-(4-(2-(2,6-双氮杂螺[3.3]庚-2-基)乙基)氨基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮三氟乙酸盐(102mg，粗品)的DMF(1mL)溶液加入到反应液中，反应液室温继续搅拌1小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相依次饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物溶解在三氟乙酸(3mL)中，继续搅 拌2小时。反应液浓缩后，残余物经HPLC纯化得到标题化合物(粉色固体，13.9mg，产率21％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.21(s,1H),11.32(s,1H),11.06(s,1H),9.19(s,1H),8.27-8.19(m,2H),8.10(dd,J＝18.2,7.2Hz,3H),8.02(d,J＝8.8Hz,2H),7.94(s,1H),7.84(d,J＝8.8Hz,2H),7.22(d,J＝2.0Hz,1H),6.87(t,J＝8.0Hz,1H),6.50(d,J＝7.6Hz,1H),6.41(d,J＝8.0Hz,1H),5.36-5.22(m,1H),5.06(s,1H),4.47(s,2H),4.16(s,2H),3.61(s,3H),3.37(s,4H),3.05-2.99(m,2H),2.92-2.84(m,1H),2.71-2.61(m,4H),2.02-1.91(m,1H).LC-MS(ESI):m/z 834[M+H]+.
制备例357.化合物A348的合成
步骤A：3-((3-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)丙-2-炔-1-基)氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
在氮气保护下，向3-(丙-2-炔-1-基氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(424mg，2.01mmol，2.0当量)和3-(4-溴-3-甲基-2-氧代-2-氧代-2.3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2.6-二酮(340mg，1.01mmol，1.0当量)的二甲亚砜(6mL)溶液中加入碳酸铯(980mg，3.0mmol，3.0当量)，碘化亚铜(38mg，0.20mmol，0.2当量)和双三苯基磷二氯化钯(141mg，0.20mmol，0.2当量)。反应液用氮气置换三次,在氮气保护下90℃搅拌反应16小时。反应完全后，将反应液用水稀释，并用乙酸乙酯萃取。有机相依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯，梯度：0-70％乙酸乙酯)纯化得到标题化合物(黄色固体，80mg，产率17％)。
步骤B：3-(4-(3-(氮杂环丁烷-3-基氧基)丙-1-炔-1-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在冰水浴下，向3-((3-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)丙-2-炔-1-基)氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(80mg，0.17mmol，1.0当量)二氯甲烷(1mL)溶液中加入三氟乙酸(1.0mL)。反应液在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，减压浓缩得到标题化合物(黄色油状，60mg，粗品)，粗产物不经纯化直接用于下一步反应。
步骤C：((1-(4-(3-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4- 基)丙-2-炔-1-基)氧基)氮杂环丁烷-1-羰基)苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(3-(N-(叔丁氧基羰基)氨磺酰基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H吡唑-1-基)苯甲酸(104mg，0.16mmol，1.0当量)和3-(4-(3-(氮杂环丁烷-3-基氧基)丙-1-炔-1-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(60mg，0.16mmol，1.0当量)的DMF(2mL)溶液中加入DIEA(105mg，0.82mmol，5.0当量)和T3P(156mg，0.24mmol，1.5当量，50％质量分数的DMF溶液)。反应液在室温下搅拌反应4小时。反应完全后，将反应液缓慢加入冰水中，并用乙酸乙酯萃取两次。合并有机相，用食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到标题化合物(黄色油状，150mg，粗品)。
步骤D：N-(1-(4-(3-(3-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[D]咪唑-4-基)丙-2-炔-1-基)氧基)氮杂环丁烷-1-羰基)苯基)-3-氨磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在冰水浴下，向((1-(4-(3-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)丙-2-炔-1-基)氧基)氮杂环丁烷-1-羰基)苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(150mg，0.15mmol，1.0当量)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入三氟乙酸(1mL)。将反应液在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，减压浓缩，经HPLC(C18,15-95％乙腈的含有0.1％FA水溶液)纯化得到标题化合物(白色固体，26.0mg，三步产率21％)。LC-MS(ESI):m/z 804[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.20(s,1H),11.32(s,1H),11.12(s,1H),9.18(s,1H),8.25(d,J＝7.8Hz,1H),8.15-8.11(m,1H),8.08-8.07(m,3H),8.02(d,J＝8.7Hz,2H),7.94(s,1H),7.85(d,J＝8.7Hz,2H),7.22(d,J＝2.0Hz,1H),7.19(d,J＝7.8Hz,1H),7.14(d,J＝7.3Hz,1H),7.04(t,J＝7.9Hz,1H),5.43-5.37(m,1H),4.66-4.57(m,2H),4.53(s,2H),4.39-4.29(m,2H),4.04-3.94(m,1H),3.64(s,3H),2.92-2.84(m,1H),2.75-2.61(m,2H),2.04-2.00(m,1H).
制备例358.化合物A349的合成
步骤A：4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(4-氰基吡啶酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
向4-(4-(4-氨基-3-氨基甲酰基-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(500mg，1.3 mmol，1.0当量)的乙腈(20mL)溶液中加入4-氰基吡啶甲酸(210mg，1.4mmol，1.1当量)、DIEA(0.7mL，3.9mmol，3.0当量)和50％T3P的乙酸乙酯溶液(1.6mL，2.6mmol，2.0当量)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，500mg，产率75％)。
步骤B：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-4-氰基吡啶甲酰胺
在室温下，将4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(4-氰基吡啶酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(500mg，0.9mmol，1.0当量)加入到TFA(2mL)和DCM(6mL)中的混合溶液中。将反应混合物搅拌2小时，后经浓缩得到标题化合物(白色固体，400mg，粗品)。
步骤C：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-((1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-4-氰基吡啶酰胺
在室温下，向N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-4-氰基吡啶甲酰胺(100mg，0.24mmol，1.0当量)的DMF(3mL)溶液中加入AcOH(1mL)和1-(4-(2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲醛(88mg，0.26mmol，1.1当量)。将反应混合物在室温下搅拌16小时，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(151mg，0.71mmol，3.0当量)。在室温下继续搅拌1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，66.4mg，产率38％)。LC-MS(ESI):m/z 734[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.67(s,1H),10.77(s,1H),9.01(d,J＝5.2Hz,1H),8.89(s,1H),8.51(s,1H),8.19(dd,J＝5.2,1.6Hz,1H),7.95(s,1H),7.79(d,J＝9.2Hz,2H),7.68(s,1H),7.08(d,J＝9.2Hz,2H),6.84(t,J＝9.2Hz,1H),6.50(dd,J＝15.2,2.4Hz,1H),6.45-6.35(m,1H),5.78(d,J＝7.6Hz,1H),4.36-4.15(m,1H),3.27-3.05(m,6H),2.73-2.70(m,1H),2.56-2.52(m,7H),2.30-2.25(m,2H),2.15-2.02(m,1H),1.93-1.73(m,3H),1.65-1.62(m,1H),1.28-1.25(m,2H).
制备例359.化合物A350的合成
步骤A：4-(2-氧代乙基)哌啶-1-甲酸苄酯
在冰浴下，向4-(2-羟乙基)哌啶-1-甲酸苄酯(2.6g，9.9mmol，1.0当量)的二氯甲烷(30mL)的溶液中逐份加入戴斯-马丁试剂(6.3g，14.8mmol，1.5当量)。反应液在室温下继续搅拌2小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相食盐水洗涤，干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(无色油状物，2.4g，产率93％)。
步骤B：4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-甲酸苄酯
在冰浴下，向4-(2-氧代乙基)哌啶-1-甲酸苄酯(2.4g，9.2mmol，1.0当量)和原甲酸三甲酯(5.0mL，46mmol，5.0当量)的甲醇(20mL)溶液中加入对甲苯磺酸(0.2g，0.92mmol，0.1当量)。反应液在氮气保护下室温继续搅拌3小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相食盐水洗涤，干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(无色油状物，2.6g，产率92％)。
步骤C：4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶
在室温下，向4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-甲酸苄酯(2.6g，8.5mmol，1.0当量)的四氢呋喃(30mL)溶液中加入10％Pd/C(0.18g)。反应置换氢气三次，反应液在氢气氛围于室温继续搅拌2小时。反应完毕后，反应液过滤，滤液浓缩得到标题化合物(无色油状物，1.2g，产率82％)。
步骤D：1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-4-(4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮
在室温下，向4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶(300mg，1.7mmol，1.0当量)，1-(2,6-二(苄氧基)吡啶-3-基)-4-溴-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(894mg，1.7mmol，1.0当量)和碳酸铯(1.1g，3.5mmol，2.0当量)的二氧六环(15mL)溶液中加入Xant Phos(200mg，0.34mmol，0.2当量)和Pd2(dba)3(158mg，0.17mmol，0.1当量)。反应液在氮气氛围下于110℃继续搅拌18小时。反应完毕后，反应液冷却到室温，加饱和氯化铵水溶液稀释，乙 酸乙酯萃取。有机相用饱和食盐水洗涤，干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，500mg，产率47％)。
步骤E：3-(4-(4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-4-(4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(300mg，0.5mmol，1.0当量)的乙醇(30mL)溶液中加入10％Pd/C(18mg)和10％Pd(OH)2/C(21mg)。反应液氢气置换三次，在氢气氛围中于60℃搅拌过夜。反应完毕后，反应液过滤，滤液浓缩得到标题化合物(黄色固体，200mg，产率94％)。
步骤F：2-(1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-基)乙醛
将3-(4-(4-(2,2-二甲氧基乙基)哌啶-1-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(200mg，0.47mmol，1.0当量)加入甲酸(5mL)溶液中，在室温下搅拌1小时。反应完毕后，反应液浓缩得到标题化合物(黄色油状物，170mg，粗品)。
步骤G：N-(1-(4-(4-(2-(1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-基)苯基)-3-氨磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在室温下，向2-(1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-基)乙醛(80mg，粗品)和N-(1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-3-氨基磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺盐酸盐(111mg，0.21mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入醋酸(0.1mL)。反应液室温搅拌过夜。接着往反应液里加入三乙酰氧基硼氢化钠(132mg，0.62mmol，1.0当量)，反应继续搅拌2小时。反应完毕后，反应液用饱和氯化铵水溶液稀释，乙酸乙酯/四氢呋喃(1/1)混合溶剂萃取。有机相干燥，过滤，浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，18.1mg，产率10％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.20(s,1H),11.31(s,1H),11.09(s,1H),8.95(s,1H),8.24(d,J＝7.6Hz,1H),8.16-8.09(m,2H),8.07(d,J＝7.5Hz,1H),7.96(d,J＝11.1Hz,2H),7.74(d,J＝9.0Hz,2H),7.22(d,J＝2.0Hz,1H),7.11(d,J＝9.2Hz,2H),6.99-6.83(m,3H),5.39-5.28(m,1H),3.63(s,3H),3.27-3.04(m,8H),2.92-2.82(m,1H),2.74-2.56(m,8H),2.00(d,J＝5.3Hz,1H),1.81(d,J＝10.1Hz,2H),1.57-1.37(m,5H).LC-MS(ESI):m/z 862[M+H]+.
制备例360.化合物A351的合成
步骤A：((1-(4-((3-((3-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)丙-2-炔-1-基)氧基)氮杂环丁烷-1-基)甲基)苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯
在氮气保护下，向(1-(4-甲酰基苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(270mg，0.43mmol，1.0当量)和3-(4-(3-(氮杂环丁烷-3-基氧基)丙-1-炔-1-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(160mg，0.43mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入三乙酰基硼氢化钠(277mg，1.3mmol，3.0当量)和硫酸镁(160mg)。反应液在室温下搅拌反应2小时。反应完全后，将反应液缓慢倒入水中并过滤，收集滤饼，并用(石油醚/乙酸乙酯，10％乙酸乙酯)打浆得到标题化合物(黄色固体，300mg，产率71％)。
步骤B：N-(1-(4-((3-(3-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)丙-2-炔-1-基)氧基)氮杂环丁烷-1-基)甲基)苯基)-3-氨磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在室温下，向((1-(4-((3-((3-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)丙-2-炔-1-基)氧基)氮杂环丁烷-1-基)甲基)苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(300mg，0.31mmol，1.0当量)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入三氟乙酸(2mL)。将反应液在室温下搅拌反应30分钟。反应完全后，减压浓缩，残余物经制备HPLC(C18,25-95％乙腈的含有0.1％氨水水溶液)纯化得到标题化合物(白色固体，25mg，产率10％)。LC-MS(ESI):m/z 790[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.20(s,1H),11.32(s,1H),11.11(s,1H),9.07(s,1H),8.25-8.23(m,1H),8.14-8.10(m,1H),8.08-8.06(m,1H),8.03-8.00(m,2H),7.96-7.93(m,1H),7.85(d,J＝7.8Hz,2H),7.46(d,J＝8.0Hz,2H),7.22-7.16(m,2H),7.12-7.10(m,1H),7.05-7.01(m,1H),5.42-5.37(m,1H),4.42(s,2H),4.33-4.30(m,1H),3.66(s,2H),3.63(s,3H),3.59-3.56(m,2H),3.02-2.99(m,2H),2.90-2.85(m,1H),2.68-2.65(m,1H),2.04-1.98(m,2H).
制备例361.化合物A352的合成
步骤A：4-(1-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
室温下，向1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-4-溴-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(500mg，0.97mmol，1.0当量)，4-(哌啶-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(391mg，1.45mmol，1.5当量)和碳酸铯(631mg，1.94mmol，2.0当量)的二氧六环(10mL)加入Pd2(dba)3(88mg，0.097mmol，0.1当量)和Xant Phos(112mg，0.19mmol，0.2当量)。反应液在氮气氛围下于110℃继续搅拌18小时。反应完毕后，反应液冷却到室温，加饱和氯化铵水溶液稀释，乙酸乙酯萃取。有机相饱和食盐水洗涤，干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，200mg，产率29％)。
步骤B：4-(1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
室温下，向4-(1-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.28mmol，1.0当量)的乙醇(20mL)溶液中加入10％Pd/C(6mg)和10％Pd(OH)2/C(8mg)。反应液氢气置换三次，在氢气氛围中于60℃搅拌过夜。反应完毕后，反应液过滤，滤液浓缩得到标题化合物(黄色固体，100mg，产率67％)。
步骤C：3-(3-甲基-2-氧代-4-(4-(哌嗪-1-基)哌啶-1-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
室温下，向4-(1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(100mg，0.19mmol，1.0当量)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入三氟乙酸(1.5mL)。反应液室温搅拌1小时。反应液浓缩得到标题化合物(黄色固体，80mg，粗品)。
步骤D：叔丁基(1-(4-(4-(1-(1-(1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-4-(6-(1-四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基) 吡啶甲酰氨基)氨基甲酸酯
室温下，向3-(3-甲基-2-氧代-4-(4-(哌嗪-1-基)哌啶-1-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(80mg，粗品)和叔丁基(1-(4-甲酰基苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰氨基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸酯(116mg，0.19mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入醋酸(0.1mL)。反应液室温搅拌过夜。接着三乙酰氧基硼氢化钠(119mg，0.563mmol，3.0当量)加入，反应继续搅拌2小时。反应完毕后，反应液用饱和氯化铵水溶液稀释，乙酸乙酯/四氢呋喃(1/1)混合溶剂萃取。有机相干燥，过滤，浓缩。残余物经制备薄层色谱纯化得到目标化合物(黄色固体，50mg，产率26％)。
步骤E：N-(1-(4-(4-(1-(1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-3-磺胺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
室温下，向叔丁基(1-(4-(4-(1-(1-(1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-4-(6-(1-四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰氨基)氨基甲酸酯(50mg，0.048mmol，1.0当量)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入三氟乙酸(1mL)。反应液在室温下搅拌1小时。反应液浓缩后，残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，12.2mg，产率29％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.20(s,1H),11.33(s,1H),11.09(s,1H),9.08(s,1H),8.24(d,J＝7.5Hz,1H),8.16-8.07(m,2H),8.01-7.83(m,4H),7.50(d,J＝8.5Hz,2H),7.23(d,J＝1.6Hz,1H),6.97(t,J＝7.9Hz,1H),6.91-6.84(m,2H),5.38-5.29(m,1H),3.62(s,3H),3.53(s,2H),3.30(s,2H),3.14(d,J＝11.0Hz,2H),2.92-2.83(m,1H),2.74-2.63(m,4H),2.60-2.54(m,3H),2.46-2.39(m,3H),2.33-2.28(m,1H),2.02-1.96(m,1H),1.89(d,J＝10.3Hz,2H),1.68-1.53(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 848[M+H]+.
制备例362.化合物A353的合成
步骤A：4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(5-氰基吡啶酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(4-(4-氨基-3-氨基甲酰基-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(500mg，1.3mmol，1.0当量)的乙腈(20mL)溶液中加入5-氰基吡啶甲酸(210mg，1.4mmol， 1.1当量)、DIEA(0.7mL，3.9mmol，3.0当量)和50％T3P的EA溶液(1.6g，2.6mmol，2.0当量)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。过滤反应混合物，干燥滤饼后得到标题化合物(白色固体，500mg，产率75％)。
步骤B：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-5-氰基吡啶酰胺
在室温下，将4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(5-氰基吡啶酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(500mg，0.9mmol，1.0当量)加入到TFA(2mL)和DCM(6mL)的混合物中。将反应混合物在室温下搅拌2小时。将反应混合物浓缩，得到标题化合物(白色固体，400mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-((1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-5-氰基吡啶酰胺
在室温下，向N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-5-氰基吡啶酰胺(100mg，0.24mmol，1.0当量)的DMF(3mL)溶液中加入AcOH(1mL)和1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲醛(88mg，0.26mmol，1.1当量)。将反应混合物在室温下搅拌16小时，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(151mg，0.71mmol，3.0当量)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，25.0mg，产率14％)。LC-MS(ESI):m/z 734[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.84(s,1H),10.79(s,1H),9.27(dd,J＝6.0,2.0Hz,2H),8.88(s,1H),8.74(s,1H),8.02(s,1H),7.88(d,J＝8.8Hz,2H),7.81(s,1H),7.18(d,J＝9.2Hz,2H),6.90(s,1H),6.53(d,J＝14.8Hz,1H),6.45(d,J＝8.4Hz,1H),4.28(dd,J＝11.2,4.8Hz,1H),3.94(d,J＝10.8Hz,2H),3.64(s,2H),3.17-3.12(m,8H),2.76-2.64(m,3H),2.61-2.55(m,2H),2.13-2.05(m,1H),1.98(s,1H),1.86(d,J＝12.0Hz,3H),1.43(d,J＝11.6Hz,2H).
制备例363.化合物A354的合成
步骤A：6-(((1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4- 基)氨基)甲基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向6-甲酰基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁酯(100mg，0.444mmol，1.0当量)的1,2-二氯乙烷(3mL)溶液中加入4-氨基-1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并咪唑-2-酮(201mg，0.444mmol，1.0当量)，醋酸(0.003mL，0.044mmol，0.1当量)和氰基硼氢化钠(83.68mg，1.332mmol，3.0当量)。反应液在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，155mg，产率53％)。
步骤B：6-(((1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)甲基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁酯
在氮气氛下，向6-(((1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)甲基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁酯(150mg，0.227mmol，1.0当量)的无水四氢呋喃(3mL)溶液中加入DMF(0.6mL),10％Pd/C(48mg)和10％Pd(OH)2/C(32mg)。然后用氢气球置换三次，反应液在氢气球氛围下室温搅拌反应16小时。反应完全后，将反应液用硅藻土过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物(棕色油状物，100mg，产率91％)。
步骤C：3-(4-(((2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)甲基)氨基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在0度下，向6-(((1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)甲基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁酯(100mg，0.207mmol，1.0当量)的无水二氯甲烷(3mL)溶液中加入三氟乙酸(1mL)。反应液在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液减压浓缩得到标题化合物(棕色油状物，100mg，粗品)。
步骤D：((1-(4-(6-(((1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)甲基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-羰基)苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向3-(4-(((2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)甲基)氨基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(100mg，粗品)和4-(3-(N-(叔丁氧羰基)氨基磺酰基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苯甲酸(144mg，0.261mmol，1.0当量)的DMF(3mL)溶液中加入DIEA(101mg，0.782mmol，3.0当量)和HATU(149mg，0.391mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到标题化合物(棕色油状物，70mg，产率29％)。
步骤E：N-(1-(4-(6-(((1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)甲基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-羰基)苯基)-3-氨基磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶甲酰胺
在0度下，向((1-(4-(6-(((1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)甲基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-羰基)苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(70mg，0.076mmol，1.0当量)的无水二氯甲烷(3mL)溶液中加入三氟乙酸(1mL)。反应液在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液减压浓缩。残余物经HPLC制备纯化得到标题化合物(粉红色固体，20.8mg，产率33％)。LC-MS(ESI):m/z 819[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.32(s,1H),11.05(s,1H),9.18(s,1H),8.24(d,J＝6.9Hz,1H),8.14(t,J＝7.7Hz,1H),8.08(d,J＝5.3Hz,3H),8.01(d,J＝8.5Hz,2H),7.93(d,J＝1.8Hz,1H),7.83(d,J＝8.3Hz,2H),7.22(d,J＝2.2Hz,1H),6.86(t,J＝8.0Hz,1H),6.51(d,J＝7.8Hz,1H),6.42(d,J＝8.2Hz,1H),5.32-5.26(m,1H),4.41(s,1H),4.33(s,1H),4.11(s,1H),4.03(s,1H),3.60(s,3H),3.10-3.05(m,2H),2.92(s,1H),2.71-2.64(m,1H),2.61(d,J＝17.0Hz,1H),2.35(d,J＝11.5Hz,2H),2.04-1.92(m,3H),1.41(d,J＝12.3Hz,1H),1.25-1.19(m,1H).
制备例364.化合物A355的合成
步骤A：4-(4-(苄氧基)-2-氟苯基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯
在室温氮气保护下，向4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(3g，9.7mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(30mL)和水(5mL)溶液中加入4-(苄氧基)-1-溴-2-氟苯(5.4g，19.4mmol，2.0当量)、碳酸钠(2g，19.4mmol，2.0当量)和Pd(dppf)Cl2(350mg，0.48mmol，0.05当量)。反应液在氮气氛围下换气三次，氮气保护下80℃搅拌反应4小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯，梯度：0-30％ 乙酸乙酯)纯化得到标题化合物(白色固体，3g，产率80％)。
步骤B：4-(2-氟-4-羟基苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温氮气保护下，向4-(4-(苄氧基)-2-氟苯基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(3g，7.8mmol，1.0当量)的甲醇(30mL)的溶液中加入10％钯碳(300mg，21.56mmol，0.1当量)。反应液在氢气氛围下换气三次，氢气保护下室温搅拌反应6小时。反应完全后，将反应液过滤，减压浓缩得到标题化合物(白色固体，2g，产率87％)。
步骤C：叔丁基-4-(4-((2,6-二氧哌啶-3-基)氧基)-2-氟苯基)哌啶-1-甲酸酯
在室温下将4-(2-氟-4-羟基苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.3g，4.40mmol，1.0当量)溶于四氢呋喃(20mL),缓慢加入氢化钠(60％含量，0.26g，6.60mmol，1.5当量)并且室温搅拌30分钟。把3-溴哌啶-2,6-二酮(1.69g，8.80mmol，2.0当量)加入反应液后，反应液在60℃反应过夜。将反应液倒入饱和氯化铵溶液并用乙酸乙酯萃取3次，有机相用饱和食盐水洗2次，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯，梯度：0-60％乙酸乙酯)纯化得到标题化合物(白色固体，0.6g，产率40％)。
步骤D：3-(3-氟-4-(哌啶-4-基)苯氧基)哌啶-2,6-二酮
将叔丁基-4-(4-((2,6-二氧哌啶-3-基)氧基)-2-氟苯基)哌啶-1-甲酸酯(300mg，0.74mmol，1.0当量)溶于二氯甲烷和三氟乙酸的(3:1)混合溶液中，室温搅拌2小时。减压浓缩得到标题化合物(黄色油状化合物，200mg，粗品)。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(4-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氧基)-2-氟苯基)哌啶-1-羰基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
把3-(3-氟-4-(哌啶-4-基)苯氧基)哌啶-2,6-二酮(200mg，0.65mmol，1.0当量)和4-硝基苯基4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸酯(407mg，0.65mmol，1.0当量)溶于DMF(5mL)加入DIEA(0.3mL，1.96mmol，2.0当量)和DMAP(79mg，0.65mmol，1.0当量)在90℃条件下反应过夜。直接制备分离，冻干，得到目标化合物(黄色固体，48mg，产率9％)。LC-MS(ESI):m/z 792(M+H)+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.94(s,1H),8.90(s,1H),8.47-8.37(m,2H),8.21(dd,J＝7.6,1.0Hz,1H),7.96(s,1H),7.82(d,J＝9.2Hz,2H),7.71(s,1H),7.24(t,J＝8.8Hz,1H),7.11(d,J＝9.2Hz,2H),6.85(ddd,J＝11.0,10.6,2.5Hz,2H),5.22(dd,J＝11.0,5.2Hz,1H),3.78(d,J＝12.8Hz,2H),3.50(d,J＝3.6Hz,1H),3.33(d,J＝4.8Hz,4H),3.24(s,4H),2.90(t,J＝11.6Hz,2H),2.71-2.57(m,2H),2.22-2.10(m,2H),1.72(d,J＝10.8Hz,2H),1.25(dd,J＝10.8,4.8Hz,2H).
制备例365.化合物A356的合成
步骤A：4-(2-((1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(2-氨基乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(457mg，1.74mmol，1.5当量)，1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-4-溴-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(600mg，1.16mmol，1.0当量)，碳酸铯(1136mg，3.49mmol，3.0当量)的无水1,4-二氧六环(10mL)混合液中加入RuPhos(108mg，0.23mmol，0.2当量)，RuPhos Pd G3(97mg，0.12mmol，0.1当量)。反应液在氮气保护下，100℃搅拌反应18小时。反应完全后，将反应液减压浓缩干，再用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，350mg，产率47％)。
步骤B：4-(2-((1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(2-((1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(300mg，0.45mmol，1.0当量)的四氢呋喃(30mL)和DMF(7mL)的混合溶液中加入10％的氢氧化钯(70mg)和10％的钯碳(70mg)，氢气球保护下，室温搅拌反应18小时。LC-MS检测未反应完全，将反应液用硅藻土过滤，补加10％的氢氧化钯(70mg)和10％的钯碳(70mg)，氢气球保护下，室温搅拌反应5小时。将反应液用硅藻土过滤，滤饼减压浓缩干燥，再用乙醚打浆，过滤，减压干燥。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，55mg，产率25％)。
步骤C：3-(3-甲基-2-氧代-4-(2-(哌嗪-1-基)乙基)氨基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，将4-(2-((1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(55mg，0.113mmol，1.0当量)，三氟乙酸(1mL)，二氯甲烷(3mL)加入到反应瓶中。反应液室温搅拌反应3小时。反应完全后，将反应液减压浓缩干，再用乙醚打浆，过滤，减压干燥得到标题化合物(白色固体，40mg，粗品)。
步骤D：叔丁基(1-(4-(4-(2-((1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)乙基)哌嗪-1-羰基)苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲氨基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸酯
在室温下，向3-(3-甲基-2-氧代-4-(2-(哌嗪-1-基)乙基)氨基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(40mg，0.104mmol，粗品)和4-(3-(N-(叔丁氧基羰基)氨磺酰基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苯甲酸(57mg，0.104mmol，1.0当量),DIEA(40mg，0.311mmol，3.0当量)的DMF(3mL)溶液中加入HATU(59mg，0.155mmol，1.5当量)。室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液减压浓缩干，再用10％氢氧化钠溶液打浆一分钟，再用二氯甲烷稀释，过滤，减压干燥得到标题化合物(白色固体，60mg，产率63％)。
步骤E：N-(1-(4-(4-(2-((1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)乙基)哌嗪-1-羰基)苯基)-3-氨磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在室温下，将叔丁基(1-(4-(4-(2-((1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)氨基)乙基)哌嗪-1-羰基)苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶甲氨基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸酯(60mg，0.065mmol，1.0当量)，三氟乙酸(1mL)，二氯甲烷(3mL)加入到反应瓶中。反应液室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液减压浓缩干，残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，1.9mg，产率4％)。LC-MS(ESI):m/z 822.6[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.22(s,1H),11.34(s,1H),11.07(s,1H),9.17(s,1H),8.26(d,J＝8.1Hz,1H),8.14(s,1H),8.09(d,J＝7.4Hz,2H),8.02(d,J＝8.6Hz,2H),7.96(s,1H),7.62(d,J＝8.4Hz,2H),7.23(s,1H),6.88(t,J＝8.1Hz,1H),6.51(d,J＝7.2Hz,1H),6.44(d,J＝7.9Hz,1H),5.35-5.25(m,1H),5.16(s,1H),3.65(s,3H),3.20-3.18(m,4H),2.94-2.92(m,1H),2.91-2.85(m,2H),2.72-2.65(m,4H),2.64-2.59(m,2H),2.36-2.32(m,2H),2.04-1.91(m,2H).
制备例366.化合物A357的合成
步骤A：((1-(4-(羟甲基)苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶氨基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯
在冰水浴下，向4-(3-(N-(叔丁氧羰基)氨基磺酰基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苯甲酸甲酯(500mg，0.76mmol，1.0当量)的四氢呋喃(30mL)溶液中分批加入LiAlH4(150mg，3.84mmol，5.0当量)。加入完毕，反应液在氮气保护下25℃搅拌反应16小时。反应完全后，反应液在冰水浴下，依次用水(0.15mL)，15％的氢氧化钠溶液(0.15mL，15％wt)和水(0.45mL)淬灭。混合液用乙酸乙酯稀释，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇，梯度：0-10％甲醇)纯化得到标题化合物(黄色固体，450mg，产率94％)。
步骤B：((1-(4-甲酰基苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶氨基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯
在冰水浴下，向((1-(4-(羟甲基)苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶氨基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，0.64mmol，1.0当量)的DMSO(10mL)溶液中加入IBX(560mg，2.0mmol，3.1当量)。将反应液在90℃下搅拌反应过夜。反应完全后，将反应液缓慢倒入冰水浴冷却的饱和碳酸氢钠水溶液中，分层，水相二氯甲烷萃取。合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物在室温下用打浆纯化得到标题化合物(黄色固体，350mg，产率88％)。
步骤C：2-(4-(3-(N-(叔丁氧羰基)氨基磺酰基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苄基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯
在室温下，向((1-(4-甲酰基苯基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶氨基)-1H-吡唑-3-基)磺酰基)氨基甲酸叔丁酯(310mg，0.5mmol，1.0当量)的DMF(2mL)溶液加入2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯(144mg，0.6mmol，1.0当量),Ti(OEt)4(0.05mL)。反应液在室温搅拌反应15分钟。然后加入NaBH(OAc)3(232mg，1.5mmol，3.0当 量)，反应液在室温下继续搅拌反应半小时。反应完全后，将反应液倒入冰水中，用乙酸乙酯萃取两次。合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇，梯度：0-10％甲醇)纯化后得到标题化合物(黄色油状物，400mg，产率95％)。
步骤D：N-(1-(4-((2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)甲基)苯基)-3-氨基磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在冰水浴下，把2-(4-(3-(N-(叔丁氧羰基)氨基磺酰基)-4-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苄基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁酯(350mg，0.41mmol，1.0当量)加入4M的盐酸-二氧六环(3mL)溶液中。反应液在0℃下搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液缓慢滴入冰水冷却的5％碳酸氢钠水溶液中，分层，水相用二氯甲烷萃取。有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩后得到标题化合物(黄色油状物，160mg，粗品)。
步骤E：N-(1-(4-((8-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-羰基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)甲基)苯基)-3-氨基磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺
在室温下，向1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-甲酸(27mg，0.09mmol，1.0当量)的乙腈(1mL)溶液中依次加入N-(1-(4-((2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)甲基)苯基)-3-氨基磺酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶酰胺(50mg，粗品),TCFH(37mg，0.13mmol，1.4当量)和NMI(1.0mL)。反应液在室温下搅拌反应3小时。反应完全后，将反应液用二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经制备HPLC(C18,10-50％乙腈的含有0.1％FA水溶液)纯化得到标题化合物(白色固体，6.6mg，产率9％)。LC-MS(ESI):m/z 847.4[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.21(s,1H),11.33(s,1H),11.13(s,1H),9.08(s,1H),8.32-8.19(m,1H),8.18-8.10(m,1H),8.09-8.06(m,1H),8.04-7.98(m,1H),7.97-7.92(m,1H),7.89-7.81(m,2H),7.54-7.43(m,2H),7.26-7.15(m,2H),7.12-7.04(m,1H),6.97-6.90(m,1H),5.49-5.33(m,1H),3.73-3.60(m,3H),2.97-2.83(m,3H),2.79-2.54(m,6H),2.41-2.29(m,3H),2.10-1.95(m,2H),1.73-1.37(m,7H).
制备例367.化合物A358的合成
步骤A：(7-(2-氟-4-硝基苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(2.1mL，24.98mmol，1.0当量)的二甲基亚砜(50mL)溶液中入碳酸钾(861mg，6.24mmol，3.0当量)和1,2-二氟-4-硝基苯(397mg，2.5mmol，1.2当量)。反应液在氮气保护下60℃搅拌反应4小时。完成后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，2.7g，产率91％)。
步骤B：(7-(4-氨基-2-氟苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向(7-(2-氟-4-硝基苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，1.52mmol，1.0当量)的乙醇溶液中加入10％Pd/C(300mg)。反应液用氢气置换3次，反应液在氢气下反应14个小时。反应液用硅藻土过滤，并浓缩得到标题化合物(灰色固体，410mg，产率91％)。
步骤C：(7-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯
在室温下，向(7-(4-氨基-2-氟苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(450mg，24.98mmol，1.0当量)的乙腈(5ml)溶液中加入碳酸氢钠(541mg，6.45mmol，5.0当量)和3-溴-2,6-哌啶二酮(495mg，2.58mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下80℃搅拌反应14小时。完成后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(灰色固体，350mg，产率59％)。
步骤D：3-((4-(2-氨基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-3-氟苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮
在0℃下，向(7-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(120mg，0.26mmol，1.0当量)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入三氟乙酸(1mL)和反应液在氮气保护下0℃搅拌反应30分钟。反应液浓缩得到标题化合物(棕色油状物，93mg，粗品)。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(((7-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)氨基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺甲酸盐
在室温下,向3-((4-(2-氨基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-3-氟苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(93mg，粗品)的DMF(5mL)溶液中加入N-(3-氨基甲酰基-1-(4-甲酰基苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(124mg，0.31mmol，1.2当量)和5滴乙酸。室温下搅拌反应2小时后加入三乙酰氧基硼氢化钠(326mg，1.56mmol，6.0当量)。反应液在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(灰白色固体，25.2mg，两步产率13％)。LC-MS(ESI):m/z 748[m+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.79(s,1H),10.77(s,1H),9.03(d,J＝9.0Hz,1H),8.46(d,J＝7.4Hz,1H),8.40(t,J＝7.8Hz,1H),8.24-8.21(m,1H),8.20(s,1HCOOH),8.02(s,1H),7.95(d,J＝8.6Hz,2H),7.77(s,1H),7.52(d,J＝8.5Hz,2H),6.86-6.77(m,1H),6.49(dd,J＝14.9,2.5Hz,1H),6.40(dd,J＝8.7,2.3Hz,1H),5.77(d,J＝7.7Hz,1H),4.29-4.20(m,1H),3.74(s,2H),3.31-3.27(m,1H),2.79-2.74(m,2H),2.74-2.67(m,3H),2.62-2.54(m,1H),2.11-2.04(m,3H),1.90-1.79(m,1H),1.65-1.56(m,6H).
制备例368.化合物A359的合成
步骤A：2-(4-溴亚苄基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯
在冰浴下，在氮气保护下向2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(5g，20.893mmol，1.0当量)和(4-溴苄基)膦酸二乙酯(9.6g，31.340mmol，1.5当量)的四氢呋喃(50mL)溶液中加入叔丁醇钾(4.7g，41.787mmol，2.0当量)。反应液继续搅拌3小时，接着倒入饱和氯化铵水溶液中，乙酸乙酯萃取。有机相干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，6.4g，产率78％)。
步骤B：2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯
在室温下，向2-(4-溴亚苄基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(6.4g，16.312mmol，1.0当量)，联硼酸频那醇酯(5.0g，19.575mmol，1.2当量)和醋酸钾(3.2g，32.624mmol，2.0当量)的二氧六环(70mL)溶液中加入Pd(dppf)Cl2(1.2g，1.631mmol，0.1当量)。反应液在氮气氛围于90℃搅拌3小时。反应完毕后，反应液冷却到室温，倾倒入饱和氯化铵水溶液中，乙酸乙酯萃取。有机相干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，5.9g，产率82％)。
步骤C：(4-((7-(叔丁氧羰基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-亚基)甲基)苯基)硼酸
在室温下，向2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(5.9g，13.427mmol，1.0当量)的四氢呋喃(60mL)和水(20mL)溶液中加入高碘酸钠(11.5g，53.710mmol，4.0当量)。反应液在氮气氛围下室温搅拌16小时。反应液过滤，滤液倒入饱和碳酸氢钠水溶液中，乙酸乙酯萃取。有机相干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，3.2g，产率67％)。
步骤D：2-(4-(3-(甲氧羰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)苯亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯
在室温下，向(4-((7-(叔丁氧羰基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-亚基)甲基)苯基)硼酸(3.2g，8.957mmol，1.0当量)，4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(2.3g，13.436mmol，1.5当量),碳酸铯(8.8g，26.871mmol，3.0当量)和吡啶(4.3mL，53.742mmol，6.0当量)的乙腈(30mL)溶液中加入醋酸铜(0.4g，1.791mmol，0.2当量)。反应液在氧气氛围中于80℃搅拌16小时。反应完毕后，反应液冷却到室温，过滤，滤液浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.5g，产率35％)。
步骤E：2-(4-(4-氨基-3-(甲氧羰基)-1H-吡唑-1-基)苄基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯
在室温下，向2-(4-(3-(甲氧羰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)苯亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(1.5g，3.109mmol，1.0当量)的甲醇(15mL)溶液中加入10％Pd/C(6.6g)。反应液在氢气氛围中室温搅拌3小时。反应液过滤，滤液浓缩得到标题化合物(黄色固体，1.3g，产率92％)。
步骤F：2-(4-(3-(甲氧羰基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苄基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯
在室温下，向2-(4-(4-氨基-3-(甲氧羰基)-1H-吡唑-1-基)苄基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(1.3g，2.860mmol，1.0当量)，6-三氟甲基吡啶甲酸(0.6g，2.860mmol，1.0当量) 和DIEA(0.7g，5.720mmol，2.0当量)的DMF(13mL)溶液中加入HATU(1.6g，4.290mmol，1.5当量)。反应液室温搅拌2小时，饱和氯化铵水溶液稀释，乙酸乙酯萃取。有机相干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.5g，产率84％)。
步骤G：1-(4-((7-(叔丁氧羰基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)甲基)苯基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-3-甲酸
在室温下，向2-(4-(3-(甲氧羰基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苄基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(1.5g，2.390mmol，1.0当量)的四氢呋喃(10mL)，甲醇(5mL)，水(2.5mL)溶液中加入氢氧化锂(0.5g，11.949mmol，5.0当量)。反应液室温搅拌2小时，稀盐酸(1mol/L)酸化，乙酸乙酯萃取。有机相干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.1g，粗品)。
步骤H：2-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苄基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯
在室温下，向1-(4-((7-(叔丁氧羰基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)甲基)苯基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-3-甲酸(1.1g，1.793mmol，1.0当量)，氯化铵(0.48g，8.963mmol，5.0当量)和DIEA(0.5g，3.585mmol，2.0当量)的DMF(11mL)溶液中加入HATU(1.0g，2.689mmol，1.5当量)。反应液室温搅拌2小时，然后饱和氯化铵水溶液稀释，乙酸乙酯萃取。有机相干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，900mg，产率82％)。
步骤I：N-(1-(4-((7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)甲基)苯基)-3-氨基甲酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向2-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苄基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(900mg，1.469mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入三氟乙酸(2.5mL)。反应液室温搅拌2小时，接着用稀氢氧化钠水溶液(1mol/L)碱化，二氯甲烷萃取。有机相干燥，过滤，浓缩得到标题化合物(黄色油状物，600mg，产率80％)。
步骤J：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((7-(2-氟-4-硝基苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向N-(1-(4-((7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)甲基)苯基)-3-氨基甲酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(350mg，0.683mmol，1.0当量)和1,2-二氟-4-硝基苯(130mg，0.819mmol，1.2当量)的乙腈(4mL)溶液中加入DIEA(177mg，1.366mmol，2.0当量)。反应液氮气保护下于80℃搅拌2小时。反应完毕后，反应液冷却到室温，饱和氯化铵水 溶液稀释，乙酸乙酯萃取。有机相干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，460mg，产率93％)。
步骤K：N-(1-(4-((7-(4-氨基-2-氟苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)甲基)苯基)-3-氨基甲酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((7-(2-氟-4-硝基苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(460mg，0.635mmol，1.0当量)的四氢呋喃(6mL)和水(2mL)溶液中加入氯化铵(170mg，3.177mmol，5.0当量)和还原铁粉(355mg，6.353mmol，10当量)。反应液氮气保护下于70℃搅拌2小时。反应完毕后，反应液冷却到室温，饱和氯化铵水溶液稀释，乙酸乙酯萃取。有机相干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，240mg，产率61％)。
步骤L：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-((7-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向N-(1-(4-((7-(4-氨基-2-氟苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)甲基)苯基)-3-氨基甲酰基-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(200mg，0.322mmol，1.0当量)和3-溴哌啶-2,6-二酮(93mg，0.483mmol，1.5当量)的DMF(2mL)溶液中加入碳酸氢钠(54mg，0.643mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下于80℃搅拌16小时。反应完毕后，反应液经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，60mg，产率25％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.81(s,1H),8.98(s,1H),8.46-8.39(m,2H),8.22(d,J＝7.5Hz,1H),7.99(s,1H),7.89(d,J＝8.4Hz,2H),7.77(s,1H),7.36(d,J＝8.5Hz,2H),6.93-6.20(m,3H),4.34(d,J＝9.5Hz,1H),3.16-2.96(m,2H),2.81-2.66(m,4H),2.60-2.52(m,2H),2.09-1.75(m,9H),1.62-1.56(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 733[M+H]+.
制备例369.化合物A360的合成
步骤A：2-(1-(2-氟-4-硝基苯基)吡咯烷-3-基)乙醇
向2-(吡咯烷-3-基)乙醇盐酸盐(1g，8.68mmol，1.2当量)的乙腈(10mL)溶液中加入1,2-二氟-4-硝基苯(1.15g，7.23mmol，1.0当量)和DIEA(5.9mL，21.7mmol，3.0当量)。将混合物在80℃下搅拌3小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食 盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.2g，产率62％)。
步骤B：2-(1-(2-氟-4-硝基苯基)吡咯烷-3-基)乙醛
在-78℃下，向草酰氯(0.8mL，9.45mmol，2.0当量)在二氯甲烷(15mL)中的溶液中加入二甲基亚砜(1.4mL，18.9mmol，4.0当量)，并在-78℃下搅拌反应15分钟，然后加入2-(1-(2-氟-4-硝基苯基)吡咯烷-3-基)乙醇(1.2g，4.72mmol，1.0当量)。混合物在-78℃下搅拌15分钟，加入三乙胺(2.6mL，18.9mmol，4.0当量)，然后在-78℃下搅拌30分钟。反应完全后，将反应液用二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状，1g，产率80％)。
步骤C：3-(3,3-二甲氧基丙基)-1-(2-氟-4-硝基苯基)吡咯烷
向原甲酸三甲酯(0.65mL，5.94mmol，1.5当量)在甲醇(10mL)中的溶液中加入2-(1-(2-氟-4-硝基苯基)吡咯烷-3-基)乙醛(1g，3.96mmol，1.0当量)和对甲苯磺酸一水合物(0.3g，1.59mmol，0.4当量)。将混合物在室温下搅拌30分钟。将混合物在80℃下搅拌3小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1g，产率77％)
步骤D：4-(3-(3,3-二甲氧基丙基)吡咯烷-1-基)-3-氟苯胺
向3-(3,3-二甲氧基丙基)-1-(2-氟-4-硝基苯基)吡咯烷(1g，3.21mmol，1.0当量)在乙醇(20mL)中的溶液中加入10％湿钯碳(300mg)。将混合物用氢气脱气3次，并使用氢气球在25℃下搅拌2小时。用硅藻土过滤所得溶液并浓缩，得到标题化合物(白色固体，500mg，产率53％)。
步骤E：3-((4-(3-(3,3-二甲氧基丙基)吡咯烷-1-基)-3-氟苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮
向3-溴-2,6-哌啶二酮(680mg，3.55mmol，2.0当量)的1,4-二氧六环(0.5mL)溶液中添加4-(3-(3,3-二甲氧基丙基)吡咯烷-1-基)-3-氟苯胺(500mg，1.77mmol，1.0当量)和DIEA(0.62mL，3.55mol，2.0当量)。将混合物在80℃下搅拌3小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状，500mg，产率68％)
步骤F：2-(1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)吡咯烷-3-基)乙醛
将3-((4-(3-(3,3-二甲氧基丙基)吡咯烷-1-基)-3-氟苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(500mg，1.27mmol，1.0当量)在甲酸(10mL)中的溶液在60℃下搅拌2小时。将所得溶液在减压下浓缩得到标题化合物(绿色油状，300mg，粗品)。
步骤G：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(2-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)吡咯烷-3-基)乙基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
向N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(413mg，0.9mmol，0.9当量)的DMF(10mL)溶液中加入醋酸和2-(1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)吡咯烷-3-基)乙醛(300mg，粗品)。将混合物在室温下搅拌1小时，然后加入醋酸硼氢化钠(949mg，4.5mmol，5.0当量)在室温搅拌1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(蓝色固体，25mg，两步产率3％)。LC-MS(ESI):m/z 777[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.80(s,1H),10.77(s,1H),8.92-8.90(m,1H),8.47-8.40(m,2H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),7.96(s,1H),7.84(d,J＝8.5Hz,2H),7.73(s,1H),7.14(d,J＝8.7Hz,2H),6.65-6.60(m,1H),6.53(d,J＝15.5Hz,1H),6.43-6.39(m,1H),5.56(d,J＝7.6Hz,1H),4.24-4.18(m,1H),3.24-3.12(m,8H),2.90-2.84(m,2H),2.75-2.67(m,2H),2.62-2.58(m,1H),2.34-2.17(m,2H),2.12-1.96(m,4H),1.89-1.83(m,1H),1.79-1.70(m,2H),1.60-1.54(m,1H).
制备例370.化合物A361的合成
步骤A：(1-(2-氟-4-硝基苯基)吡咯烷-3-基)甲醇
在室温下，向1,2-二氟-4-硝基苯(4g，25.14mmol，1.0当量)的乙腈(50mL)溶液中加入吡咯烷-3-基甲醇(3.1g，30.17mmol，2.0当量)和DIEA(13.4mL，75.43mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下80℃搅拌反应3小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，4.5g，产率75％)。
步骤B：1-(2-氟-4-硝基苯基)吡咯烷-3-甲醛
在-60℃下，向草酰氯(2.1mL，24.98mmol，1.0当量)的二氯甲烷(50mL)溶液中缓慢滴加DMSO(3.6mL，49.95mmol，1.0当量)。反应液在氮气保护下-60℃搅拌反应15分钟，然后滴加(1-(2-氟-4-硝基苯基)吡咯烷-3-基)甲醇(3g，12.49mmol，1.0当量)(稀释在二氯甲烷溶液中)。反应液继续在-60℃搅拌反应15分钟，最后滴加三乙胺(7.0mL，49.95mmol， 3.0当量)。反应液在氮气保护下-60℃搅拌反应30分钟，然后缓慢升到室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，2.7g，产率91％)。
步骤C：3-(二甲氧基甲基)-1-(2-氟-4-硝基苯基)吡咯烷
在室温下,向1-(2-氟-4-硝基苯基)吡咯烷-3-甲醛(2.7g，11.33mmol，1.0当量)的甲醇(30mL)溶液中加入原甲酸三甲酯(1.9mL，17.0mmol，1.5当量)和对甲苯磺酸(0.8g，4.53mmol，0.4当量)。反应液在室温下搅拌2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，2.4g，产率74％)。
步骤D：4-(3-(二甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)-3-氟苯胺
在室温下,向3-(二甲氧基甲基)-1-(2-氟-4-硝基苯基)吡咯烷(500mg，1.76mmol，1.0当量)的甲醇(10mL)溶液中加入10％的湿钯碳(100mg)。反应液在氢气保护下室温搅拌3小时。反应完全后，将反应液用硅胶土过滤，减压浓缩，得到标题化合物(白色固体，440mg，产率98％)。
步骤E：3-((4-(3-(二甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)-3-氟苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮
在室温下,向4-(3-(二甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)-3-氟苯胺(440mg，1.81mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(2mL)溶液中加入3-溴-2,6-哌啶二酮(695mg，3.62mmol，2.0当量)和DIEA(0.6mL，3.62mmol，2.0当量)。反应液在100℃搅拌反应2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(紫色固体，470mg，产率71％)。
步骤F：1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)吡咯烷-3-甲醛
将3-((4-(3-(二甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)-3-氟苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(170mg，0.47mmol，1.0当量)加入甲酸(5mL)中的溶液在60℃下搅拌2小时。TLC显示反应完成。减压浓缩混合物，直接用于下一步。
步骤G：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-((1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)吡咯烷-3-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺甲酸酯
在室温下，向1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)吡咯烷-3-甲醛(140mg，粗品)的DMF(10mL)溶液中加入N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(201mg，0.44mmol，1.0当量)和5滴乙酸。室温下搅拌反应2小时后加入三乙酰氧基硼氢化钠(465mg，2.19mmol，5.0当量)。反应液在室温下搅拌反 应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(灰白色固体，25.0mg，产率7％)。LC-MS(ESI):m/z 764[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.79(s,1H),10.76(s,1H),8.88(s,1H),8.45(d,J＝7.5Hz,1H),8.40(t,J＝7.8Hz,1H),8.21(d,J＝7.6Hz,1H),8.14(s,0.7HCOOH),7.95(s,1H),7.79(d,J＝9.1Hz,2H),7.71(s,1H),7.08(d,J＝9.1Hz,2H),6.66-6.59(m,1H),6.52(dd,J＝15.8,2.4Hz,1H),6.40(dd,J＝8.7,2.2Hz,1H),5.55(d,J＝7.5Hz,1H),4.20(dd,J＝10.7,5.8Hz,1H),3.23(d,J＝4.5Hz,6H),3.15(t,J＝6.6Hz,2H),2.97-2.92(m,1H),2.79-2.69(m,1H),2.64-2.54(m,5H),2.39(t,J＝7.0Hz,2H),2.14-2.07(m,1H),2.05-1.98(m,1H),1.85(td,J＝12.2,4.6Hz,1H),1.65-1.55(m,1H).
制备例371.化合物A362的合成
步骤A：1-(2-氟-4-硝基苯基)哌啶-4-甲酸叔丁酯
在室温下，向1,2-二氟-4-硝基苯(2g，12.58mmol，1.0当量)的乙腈(35mL)溶液中加入哌啶-4-甲酸叔丁酯(2.6g，13.84mmol，1.1当量)和DIEA(5.5mL，31.45mmol，2.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应8小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.5g，产率37％)。
步骤B：1-(4-氨基-2-氟苯基)哌啶-4-甲酸叔丁酯
在室温下,向1-(2-氟-4-硝基苯基)哌啶-4-甲酸叔丁酯(1.5g，4.63mmol，1.0当量)的乙酸乙酯(40mL)溶液中加入10％的湿钯碳(300mg)。反应液在氢气保护下室温搅拌6小时。反应完全后，将反应液用硅胶土过滤，减压浓缩，得到标题化合物(无色油状，1.3g，产率96％)。
步骤C：1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲酸叔丁酯
在室温下，向1-(4-氨基-2-氟苯基)哌啶-4-甲酸叔丁酯(1.3g，4.42mmol，1.0当量)的DMF(30mL)混和溶液中加入3-溴-2,6-哌啶二酮(1.0g，5.75mmol，1.3当量)和碳酸氢钠(930mg，11.05mmol，2.5当量)。反应液在氮气保护下60℃搅拌6小时。反应完全后，将 反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，800mg，产率45％)。
步骤D：1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲酸
在室温下，向1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲酸叔丁酯(200mg，0.49mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)中的溶液加入三氟乙酸(2mL)。反应液在室温下搅拌3小时。反应完全后，将反应液在减压下浓缩，得到标题化合物(棕色固体，170mg，产率99％)。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲酰基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在0℃下,向1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲酸(170mg，0.49mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(335mg，0.73mmol，1.5当量),HATU(370mg，0.97mmol，2.0当量)和DIEA(0.25mL，1.46mmol，3.0当量)。反应液在室温下搅拌1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，25.3mg，产率7％)。LC-MS(ESI):m/z 791[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.79(s,1H),10.78(s,1H),8.90(s,1H),8.48-8.36(m,2H),8.21(d,J＝7.6Hz,1H),7.96(s,1H),7.83(d,J＝8.4Hz,2H),7.72(s,1H),7.12(d,J＝8.4Hz,2H),6.84(t,J＝9.1Hz,1H),6.51(d,J＝14.8Hz,1H),6.43(d,J＝8.6Hz,1H),5.81(d,J＝7.7Hz,1H),4.32-4.20(m,1H),3.74-3.61(m,4H),3.29-3.11(m,8H),2.77-2.73(m,1H),2.68-2.66(m,1H),2.62-2.57(m,1H),2.08-2.07(m,1H),1.90-1.82(m,1H),1.78-1.68(m,4H).
制备例372.化合物A363的合成
步骤A：1-(4-(4-(叔丁氧羰基)哌嗪-1-基)苯基)-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸
在室温下，将4-(4-(3-(甲氧羰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(2g，4.46mmol，1.0当量)溶解在四氢呋喃(20mL)和水(5mL)的混合溶液中，加入氢氧化锂一水合物(330mg，13.92mmol，3.0当量)。反应液在室温下搅拌1小时。反应完全后，将反应液用水稀释，用2N盐酸调pH至4-5，加入乙酸乙酯萃取，有机相依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到标题化合物(棕色固体，1.8g，产率93％)。
步骤B：4-(4-(3-(环丙基氨基甲酰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下，将1-(4-(4-(叔丁氧羰基)哌嗪-1-基)苯基)-4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸(1.8g，4.32mmol，1.0当量)，环丙胺(0.4g，6.47mmol，1.5当量)和HATU(2.5g，12.96mmol，1.5当量)溶解在二氯甲烷(30mL)溶液中，加入N,N-二异丙基乙胺(2.3mL，13.92mmol，3.0当量)。反应液在室温下搅拌1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.6g，产率81％)。
步骤C：4-(4-(4-氨基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下，将4-(4-(3-(环丙基氨基甲酰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.5g，3.3mmol，1.0当量)溶解在无水甲醇(30mL)溶液中，加入10％湿钯碳(0.15g，w.t.＝10％)。反应液在氢气氛围下室温搅拌4小时。反应完全后，将反应液过滤，减压浓缩得到标题化合物(白色固体，1.4g，产率99％)。
步骤D：4-(4-(3-(环丙基氨基甲酰基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下，将4-(4-(4-氨基-3-(环丙基氨基甲酰基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.3g，3.05mmol，1.0当量)，6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸(0.6g，3.35mmol，1.1当量)和HATU(2.3g，6.1mmol，2.0当量)溶解在DMF(15mL)溶液中，加入N,N-二异丙基乙胺(1.65mL，9.15mmol，3.0当量)。反应液在室温下搅拌1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.7g，产率93％)。
步骤E：N-(3-(环丙基氨基甲酰基)-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，将4-(4-(3-(环丙基氨基甲酰基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.7g，2.84mmol，1.0当量)溶解于乙腈(20mL)溶液中，加入4M盐酸二氧六环溶液(2ml)。反应液在室温下搅拌1小时。反应完全后，将反应液减压浓缩得 到标题化合物(白色固体，1.2g，粗品)。
步骤F：N-(3-(环丙基氨基甲酰基)-1-(4-(4-((1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向N-(3-(环丙基氨基甲酰基)-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(150mg，0.3mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲醛(100mg，0.26mmol，1.0当量)和3滴乙酸。室温下搅拌2小时后加入三乙酰氧基硼氢化钠(126mg，0.60mmol，2.0当量)。反应液在室温下搅拌1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(灰色固体，25mg，产率10％)。LC-MS(ESI):m/z 817[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.61(s,1H),10.78(s,1H),8.90(s,1H),8.52(d,J＝4.6Hz,1H),8.46(d,J＝7.6Hz,1H),8.40(t,J＝7.8Hz,1H),8.22(d,J＝7.7Hz,1H),8.15(s,1H),7.79(d,J＝9.0Hz,2H),7.06(d,J＝9.2Hz,2H),6.83(t,J＝9.3Hz,1H),6.50(dd,J＝15.0,2.4Hz,1H),6.42(dd,J＝8.7,2.1Hz,1H),5.78(d,J＝7.6Hz,1H),4.32-4.18(m,1H),3.25-3.19(m,4H),3.14-3.07(m,2H),2.99-2.93(m,1H),2.78-2.69(m,1H),2.62-2.56(m,2H),2.56-2.52(m,3H),2.27-2.18(m,2H),2.13-2.04(m,1H),1.91-1.76(m,3H),1.68-1.56(m,1H),1.31-1.22(m,2H),0.75-0.68(m,4H).
制备例373.化合物A364的合成
步骤A：4-(2-氟-4-硝基苯基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯
在室温下，向1-溴-2-氟-4-硝基苯(5g，22.73mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(50mL)和水(5mL)混合溶液中加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(8.4g，27.27mmol，1.2当量)，碳酸钾(9.4g，68.19mmol，3.0当量)和Pd(dppf)Cl2(1.7g，2.27mmol，0.1当量)。反应液在氮气保护下90℃搅拌反应3小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，3g，产率41％)。
步骤B：4-(4-氨基-2-氟苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(2-氟-4-硝基苯基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(3g，9.32mmol，1.0当量)的乙醇(30mL)溶液中加入钯碳(1g，w.t.＝10％)，碳酸钾(9.4g，68.19mmol，3.0当量)和Pd(dppf)Cl2(1.7g，2.27mmol，0.1当量)。反应液在氢气保护下室温搅拌反应过夜。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，过滤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，2g，产率73％)。
步骤C：4-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(4-氨基-2-氟苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(2g，6.8mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(5mL)溶液中加入3-溴-2,6-哌啶二酮(3.9g，20.41mmol，3.0当量),DIEA(2.4mL，13.6mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下90℃搅拌反应过夜。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，3g，产率41％)。
步骤D：3-((3-氟-4-(哌啶-4-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向4-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(800mg，1.96mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入三氟乙酸(3mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，减压浓缩得到标题化合物(白色固体，600mg，粗品)。
步骤E：4-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-1-甲酸4-硝基苯酯
在室温下，向3-((3-氟-4-(哌啶-4-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(600mg，粗品)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入4-硝基苯基氯甲酸酯(594mg，2.96mmol，1.5当量)和DIEA(0.7mL，3.93mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，400mg，两步产率43％)。
步骤F：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-1-甲酰基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向4-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-1-甲酸4-硝基苯酯(400mg，0.85mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(469mg，1.02mmol，1.2当量)和DIEA(0.3mL，1.7mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下100℃搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(51mg，产率7％)。LC-MS(ESI):m/z 792[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.79(s,1H),10.79(s,1H),8.90(s,1H),8.47-8.34(m,2H),8.21(d,J＝7.6 Hz,1H),7.96(s,1H),7.82(d,J＝9.0Hz,2H),7.71(s,1H),7.11(d,J＝9.1Hz,2H),7.00(t,J＝8.9Hz,1H),6.45(dd,J＝11.8,4.2Hz,2H),6.03(d,J＝7.7Hz,1H),4.37-4.25(m,1H),3.80-3.69(m,2H),3.35-3.32(m,2H),3.31-3.29(m,2H),3.28-3.20(m,4H),2.91-2.69(m,4H),2.61-2.54(m,1H),2.12-2.04(m,1H),1.92-1.81(m,1H),1.72-1.65(m,2H),1.64-1.51(m,2H).
制备例374.化合物A365的合成
步骤A：8-(2-氟-4-硝基苯基)-8-氮杂-1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷
在室温下，向1,2-二氟-4-硝基苯(10.0g，62.89mmol，1.0当量)的乙腈(150mL)溶液中加入8-氮杂-1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷(9.9g，69.18mmol，1.1当量)和DIEA(27mL,157.23mmol，2.5当量)。反应液在氮气保护下80℃搅拌反应16小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，17.1g，产率99％)。
步骤B：3-氟-4-(8-氮杂-1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)苯胺
在室温下,向8-(2-氟-4-硝基苯基)-8-氮杂-1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷(5.0g，17.73mmol，1.0当量)的乙酸乙酯(60mL)溶液中加入10％的湿钯碳(500mg)。反应液在氢气保护下室温搅拌3小时。反应完全后，将反应液用硅胶土过滤，减压浓缩，得到标题化合物(黄色固体，4.4g，产率98％)。
步骤C：3-{[3-氟-4-(8-氮杂-1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)苯基]氨基}六氢吡啶-2,6-二酮
在室温下,向3-氟-4-(8-氮杂-1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)苯胺(2.0g，7.94mmol，1.0当量)的DMF(25mL)溶液中加入碳酸氢钠(1.3g，15.87mmol，2.0当量)和3-溴六氢吡啶-2,6-二酮(1.8g，9.53mmol，1.2当量)。反应液在60℃搅拌反应12小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，800mg，产率28％)。
步骤D：3-{[3-氟-4-(4-氧亚基六氢吡啶-1-基)苯基]氨基}六氢吡啶-2,6-二酮
将3-{[3-氟-4-(8-氮杂-1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)苯基]氨基}六氢吡啶-2,6-二酮(400mg，1.1mmol，1.0当量)溶在甲酸(5mL)中，在80℃搅拌反应10小时。反应完全后，将 反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(棕色固体，140mg，产率40％)。
步骤E：1-{4-[4-(1-{4-[(2,6-二氧亚基六氢吡啶-3-基)氨基]-2-氟苯基}六氢吡啶-4-基)哌嗪-1-基]苯基}-4-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)吡唑-3-甲酰胺
在室温下,向3-{[3-氟-4-(4-氧亚基六氢吡啶-1-基)苯基]氨基}六氢吡啶-2,6-二酮(140mg，0.44mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入1-[4-(哌嗪-1-基)苯基]-4-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)吡唑-3-甲酰胺(201mg，0.44mmol，1.0当量)和5滴乙酸。室温下搅拌反应2小时后加入三乙酰氧基硼氢化钠(465mg，2.19mmol，5.0当量)。反应液在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(灰白色固体，25.0mg，产率7％)。LC-MS(ESI):m/z 763[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.80(s,1H),10.79(s,1H),8.92(s,1H),8.48-8.37(m,2H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),8.14(s,0.3HCOOH),7.96(s,1H),7.85(d,J＝8.8Hz,2H),7.74(s,1H),7.16(d,J＝8.9Hz,2H),6.87(t,J＝9.3Hz,1H),6.52(d,J＝14.9Hz,1H),6.44(d,J＝8.8Hz,1H),5.85(d,J＝7.8Hz,1H),4.32-4.22(m,1H),3.31-3.17(m,10H),2.78-2.70(m,1H),2.70-2.52(m,4H),2.14-2.00(m,3H),1.92-1.83(m,1H),1.81-1.67(m,2H).
制备例375.化合物A366的合成
步骤A：8-[(2-氟-4-硝基苯基)甲基]-8-氮杂-1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷
在室温下,将2-氟-4-硝基苯甲醛(2.3g，53.25mmol，1.0当量)溶于二氯甲烷(90mL)中，加入2-氟-4-硝基苯-1-甲醛(8.18g，58.58mmol，1.1当量)，相同温度下搅拌1小时。然后向混合溶液中加入NaBH4(6.0g，159.76mmol，3.0当量)。室温搅拌2小时。反应完全后，将反应液用二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，14.0g，产率89％)。
步骤B：3-氟-4-(8-氮杂-1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基甲基)苯胺
在室温下,向8-[(2-氟-4-硝基苯基)甲基]-8-氮杂-1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷(6.4g，21.62mmol，1.0量)的水(10mL)和乙醇(50mL)溶液中加入铁单质(4.8g，86.49mmol，4.0当量) 和NH4Cl(9.2g，172.97mmol，8.0当量)。反应液在60℃下搅拌1小时。反应完全后，将反应液通过硅藻土过滤，后依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，4.7g，产率82％)。
步骤C：3-{[3-氟-4-(8-氮杂-1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基甲基)苯基]氨基}六氢吡啶-2,6-二酮
在室温下，向3-氟-4-(8-氮杂-1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基甲基)苯胺(4.7g，17.67mmol，1.0当量)在1,4-二氧六环的溶液中，加入3-溴六氢吡啶-2,6-二酮(6.8g，35.34mmol，2.0当量)和DIEA(9.2g，52.9mmol，3.0当量),反应液在80℃下搅拌12小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1.3g，产率20％)。
步骤D：3-({3-氟-4-[(4-氧亚基六氢吡啶-1-基)甲基]苯基}氨基)六氢吡啶-2,6-二酮
在室温下，将3-{[3-氟-4-(8-氮杂-1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基甲基)苯基]氨基}六氢吡啶-2,6-二酮(400mg，1.06mmol，1.0当量)在甲酸(6mL)中的溶液在80℃下搅拌4小时。反应完全后，反应液用硅藻土过滤，后依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到标题化合物(黄色油状，500mg，产率68％)。
步骤E：1-(4-{4-[1-({4-[(2,6-二氧亚基六氢吡啶-3-基)氨基]-2-氟苯基}甲基)六氢吡啶-4-基]哌嗪-1-基}苯基)-4-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向3-({3-氟-4-[(4-氧亚基六氢吡啶-1-基)甲基]苯基}氨基)六氢吡啶-2,6-二酮(200mg，0.6mmol，1.0当量)和1-[4-(哌嗪-1-基)苯基]-4-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)吡唑-3-甲酰胺(276mg，0.6mol，1.0当量)。反应液在60℃下搅拌1小时后向加入NaBH(OAc)3(506mg，2.4mmol，4.0当量),反应液在室温搅拌2小时。用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥,减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到粗产物，该粗产物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，500mg，产率68％)。LC-MS(ESI):m/z 777.5[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.80(s,1H),8.87(s,1H),8.45(d,J＝7.6Hz,1H),8.39(t,J＝7.8Hz,1H),8.21(d,J＝7.7Hz,1H),7.94(s,1H),7.77(d,J＝9.0Hz,2H),7.70(s,1H),7.08-7.00(m,3H),6.50-6.41(m,2H),6.13(d,J＝7.7Hz,1H),4.37-4.29(m,1H),3.35(s,2H),3.20-3.17(m,4H),2.88-2.83(m,2H),2.78-2.71(m,1H),2.65-2.55(m,5H),2.24-2.18(m,1H),2.13-2.06(m,1H),1.99-1.88(m,3H),1.79-1.72(m,2H),1.46-1.37(m,2H).
制备例376.化合物A367的合成
步骤A：4-(1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向3-((3-氟-4-(4-氧代哌啶-1-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(500mg，1.57mmol，1.0当量)的DMF(10mL)溶液中加入哌嗪-1-甲酸叔丁酯(292mg，1.57mmol，1.0当量)和3滴乙酸。室温下搅拌反应2小时后加入三乙酰氧基硼氢化钠(660mg，3.13mmol，2.0当量)。反应液在室温下搅拌1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，300mg，产率39％)。
步骤B：3-((3-氟-4-(4-(哌嗪-1-基)哌啶-1-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向4-(1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(300mg，0.61mmol，1.0当量)的乙腈(10mL)溶液中加入4M盐酸二氧六环溶液(2mL)。反应液在室温下搅拌1小时。反应完全后，将反应液减压浓缩得到标题化合物(白色固体，240mg，粗品)，无需纯化，直接用于下一步。
步骤C：1-(4-{[4-(1-{4-[(2,6-二氧亚基六氢吡啶-3-基)氨基]-2-氟苯基}六氢吡啶-4-基)哌嗪-1-基]甲基}苯基)-4-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)吡唑-3-甲酰胺甲酸盐
在室温下，向3-((3-氟-4-(4-(哌嗪-1-基)哌啶-1-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(100mg，粗品)的DMF(5mL)溶液中加入N-(3-氨基甲酰基-1-(4-甲酰基苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(103mg，0.26mmol，1.0当量)和3滴乙酸。室温下搅拌2小时后加入三乙酰氧基硼氢化钠(109mg，0.52mmol，2.0当量)。反应液在室温下搅拌1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(灰色固体，25mg，产率12％)。LC-MS(ESI):m/z 777[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.80(s,1H),10.77(s,1H),9.01(s,1H),8.50-8.36(m,2H),8.25-8.19(m,1H),8.17(s,1.3HCOOH),8.02(s,1H),7.97-7.91(m,2H),7.78(s,1H),7.56-7.43(m,2H),6.82(t,J＝9.3Hz,1H),6.57-6.45(m,1H),6.44-6.35(m,1H),5.79(d,J＝7.6Hz,1H),4.27-4.23(m,1H),3.53(s,2H),3.19-3.12(m,2H),2.78-2.62(m,2H),2.62-2.53(m,6H),2.49-2.27(m,5H),2.12-2.04(m,1H),1.90-1.78(m,3H),1.61-1.48(m,2H).
制备例377.化合物A368的合成
步骤A：1-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-甲酸叔丁酯
在室温下，4-哌啶甲酸叔丁酯(323mg，1.74mmol，1.5当量)，1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-4-溴-3-甲基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(600mg，1.16mmol，1.0当量)，碳酸铯(1136mg，3.49mmol，3.0当量)的无水1,4-二氧六环(5mL)混合液中加入RuPhos(108mg，0.23mmol，0.2当量)，RuPhos Pd G3(97.3mg，0.12mmol，0.1当量)。反应液在氮气保护下，100℃搅拌反应18小时。反应完全后，将反应液减压浓缩干，再用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，220mg，产率30.5％)。
步骤B：1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-甲酸叔丁酯
在室温下，向1-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-甲酸叔丁酯(220mg，0.35mmol，1.0当量)的四氢呋喃(20mL)和N,N-二甲基甲酰胺(5mL)的混合溶液中加入氢氧化钯(70mg)和钯碳(70mg)，氢气球保护下，室温搅拌反应18小时。LC-MS检测未反应完全，将反应液过滤，补加氢氧化钯(70mg)和钯碳(70mg)，氢气球保护下，室温搅拌反应5小时。将反应液过滤，滤液减压浓缩干，再用乙醚打浆，过滤，减压干燥得到标题化合物(白色固体，120mg，产率76.5％)。
步骤C：1-(1-(2,6-二羟基吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-甲酸
在室温下，将1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-甲酸叔丁酯(100mg，0.226mmol，1.0当量)，三氟乙酸(3mL)，二氯甲烷(6mL)加入到反应瓶中。反应液室温搅拌反应3小时。反应完全后，将反应液减压浓缩干，再用乙醚打浆，过滤，减压干燥得到标题化合物(白色固体，110mg，产率126％)。
步骤D：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢 -1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-羰基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向1-(1-(2,6-二羟基吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-甲酸(110mg，0.29mmol，1.0当量)和N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(131mg，0.29mmol，1.0当量)，DIEA(184mg，1.42mmol，5.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入HATU(162mg，0.43mmol，1.5当量)。室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液减压浓缩干，再用二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，52mg，产率22％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),11.09(s,1H),8.91(s,1H),8.48-8.37(m,2H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),7.96(s,1H),7.83(d,J＝9.0Hz,2H),7.72(s,1H),7.13(d,J＝9.2Hz,2H),7.00(t,J＝7.9Hz,1H),6.92-6.88(m,2H),5.36(dd,J＝12.5,5.3Hz,1H),3.74-3.70(m,4H),3.65(s,3H),3.20-3.14(m,7H),2.93-2.79(m,4H),2.74-2.60(m,2H),1.90-1.76(m,4H).LC-MS(ESI):m/z 828.4[M+H]+.
制备例378.化合物A369的合成
步骤A：N-{3-[(环丙基氨基)羰基]-1-{4-[4-({1-[1-(2,6-二氧亚基六氢吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧亚基苯并[d]咪唑-4-基]六氢吡啶-4-基}甲基)哌嗪-1-基]苯基}吡唑-4-基}-6-(三氟甲基)吡啶-2-甲酰胺甲酸盐
向N-环丙基-1-[4-(哌嗪-1-基)苯基]-4-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)吡唑-3-甲酰胺(140mg，0.28mmol，1.0当量)和1-[1-(2,6-二氧亚基六氢吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧亚基苯并[d]咪唑-4-基]六氢吡啶-4-甲醛(104mg，0.28mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入醋酸(0.2mL，3.36mmol，12.0当量)室温搅拌1小时。再加入硼氢化钠(42mg，1.12mmol，4.0当量)然后在室温下搅拌两小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(灰白色固体，25.0mg，产率10％)。LC-MS(ESI):m/z 854[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.61(s,1H),11.09(s,1H),8.90(s,1H),8.52(d,J＝4.5Hz,1H),8.48-8.45(m,1H),8.40(t,J＝7.8Hz,1H),8.24-8.21(m,1H),8.16(s,1H),7.80(d,J＝9.0Hz,2H),7.07(d,J＝9.1Hz,2H),7.00-6.96(m,1H),6.92-6.85(m,2H),5.35(dd,J＝12.6,5.2Hz,1H),3.63(s,3H),3.24-3.22(m,4H),3.13(d,J＝10.2Hz,2H),2.97-2.94(m,1H),2.90-2.85(m,1H),2.75-2.64 (m,4H),2.60-2.53(m,4H),2.31-2.25(m,2H),2.02-1.97(m,1H),1.88-1.83(m,2H),1.74-1.65(m,1H),1.40-1.29(m,2H),0.75-0.69(m,4H).
制备例379.化合物A370的合成
步骤A：4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸苄酯
在室温下，向4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-1-甲酸苄酯(300mg，0.87mmol，1.5当量)的1,4-二氧六环(3mL)和水(1mL)溶液中加入1-[2,6-双(氧化苄基)吡啶-3-基]-4-溴-3-甲基-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-2-酮(300mg，0.58mmol，1.0当量)，Pd(PPh3)4(67.3mg，0.06mmol，0.1当量),Na2CO3(185mg，1.75mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下80℃搅拌反应过夜。反应完全后，混合物中加入水，并用乙酸乙酯萃取。合并的有机层用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯，梯度：0-30％乙酸乙酯)得到标题化合物(白色固体，270mg，产率71％)。
步骤B：3-(3-甲基-2-氧代-4-(哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在室温氢气保护下，将4-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸苄酯(270mg，0.414mmol，1.0当量)溶于DMF(3mL)和THF(3mL)中，然后分别加入质量分数为10％的Pd/C(4mg)和质量分数为10％的Pd(OH)2/C(6mg)。将反应体系用氢气置换三次，在1个大气压氢气氛围下搅拌过夜。将反应液过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，140mg，产率99％)。
步骤C：4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸对硝基苯酯
在0℃下，在N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(300mg，0.65mmol，1.0当量)的THF(3mL)溶液中依次加入TEA(198mg，1.96mmol，3.0当量)和4-硝基苯基氯甲酸酯(395mg，1.96mmol，3.0当量)。将该混合物在室温搅拌 反应3小时，反应完全后加入水，用乙酸乙酯萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯，梯度：0-20％乙酸乙酯)得到标题化合物(黄色固体，130mg，产率32％)。
步骤D：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-1-羰基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
向3-(3-甲基-2-氧代-4-(哌啶-4-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(70mg，0.20mmol，1.0当量)的DMF(3mL)溶液中加入TEA(0.1mL，0.61mmol，3.0当量)和4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸对硝基苯酯(125mg，0.20mmol，1.0当量)。将混合物在90℃下搅拌过夜反应。将反应液减压浓缩，粗品经制备HPLC(C18,20-95％乙腈的含有0.1％FA水溶液)纯化得到标题化合物(黄色固体，35mg，产率21％)。LC-MS(ESI):m/z 827.8[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.25-11.02(m,1H),8.90(s,1H),8.56-8.31(m,2H),8.21(d,J＝7.4Hz,1H),7.96(s,1H),7.82(d,J＝9.1Hz,2H),7.71(s,1H),7.12(d,J＝9.3Hz,2H),7.03-6.97(m,3H),5.52-5.12(m,1H),3.80(d,J＝11.9Hz,2H),3.62(s,3H),3.27-3.25(m,4H),3.01-2.95(m,4H),2.79-2.64(m,3H),2.07(s,2H),2.03-2.01(m,2H),1.88-1.81(m,2H),1.77m 1.66(m,2H).
制备例380.化合物A371的合成
步骤A：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺双(2,2,2-三氟乙酸盐)
向1-{4-[4-(六氢吡啶-4-基)哌嗪-1-基]苯基}-4-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)吡唑-3-甲酰胺(100mg，0.18mmo,1.0当量)在二氧六环(10mL)中的混合物中加入3-(4-溴-3-甲基-2-氧代苯并[d]咪唑-1-基)六氢吡啶-2,6-二酮(68.5mg，0.2mmol，1.2当量),Pd PEPPSI IHept Cl(14.7mg，0.018mmol，0.1当量)和碳酸铯(180mg，0.553mmol，3.0当量)。将混合物在110℃下搅拌16小时。将反应混合物倒入乙酸溶液中，并在真空中浓缩，得到残留物。残余物经HPLC纯化得到标题化合物N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺双(2,2,2-三氟乙酸盐)(5.7mg，三氟乙酸盐,3％)。1H NMR(400 MHz,DMSO)δ11.42(s,1H),11.14(s,1H),11.07-10.97(m,1H),10.45(s,1H),9.06(s,1H),8.95(d,J＝9.1Hz,1H),8.79(s,1H),8.47(d,J＝7.6Hz,1H),8.41(t,J＝7.8Hz,1H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),7.97(d,J＝9.0Hz,2H),7.22(d,J＝9.1Hz,2H),7.18-7.13(m,1H),7.10(dd,J＝7.1,4.9Hz,2H),5.45(dd,J＝12.7,5.3Hz,1H),3.98(s,3H),3.49(s,6H),3.22(s,4H),3.03-2.86(m,4H),2.84-2.71(m,1H),2.66(d,J＝16.4Hz,1H),2.34(d,J＝11.7Hz,2H),2.09(d,J＝6.8Hz,1H),1.95(d,J＝13.2Hz,2H).LC-MS(ESI):m/z 800[M+H]+.
制备例381.化合物A372的合成
步骤A：3-(3-甲基-2-氧代-4-乙烯基-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向3-(4-溴-3-甲基-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)咪唑-1-基哌啶-2,6-二酮(300mg，0.89mmol，1.0当量)和乙烯三氟硼酸钾(357mg，2.67mmol，3.0当量)的1,4-二氧六环(5mL)和水(1mL)的溶液中依次加入Pd(dppf)Cl2(65mg，0.09mmol，0.1当量)和碳酸铯(578mg，1.78mmol，3.0当量)。反应混合物用氮气换气三次，在氮气保护下90℃的搅拌反应16小时。混合物用水稀释，乙酸乙酯萃取，有几相依次用饱和盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，150mg，产率59％)。
步骤B：1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并咪唑-4-甲醛
在室温下，向3-(3-甲基-2-氧代-4-乙烯基-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)哌啶-2,6-二酮(130mg，0.46mmol，1.0当量)在1,4-二氧六环(4mL)和水(0.5mL)的溶液中加入二水合锇酸钾(168mg，0.46mmol，1.0当量)和N-甲基吗啉氧化物(27mg，0.23mmol，0.5当量)。将混合物在室温下搅拌5分钟，然后加入高碘酸钠(197mg，0.91mmol，2.0当量)，反应液在室温下搅拌反应16小时。将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用饱和亚硫酸钠水溶液和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。残余物经柱色谱(洗脱剂：乙酸乙酯/石油醚，梯度：0-50％乙酸乙酯)纯化得到标题化合物(棕色固体，67.1mg，产率51％)。
步骤C：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(1-((1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲基)哌啶-4-基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温条件下，向N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(哌啶-4-基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(27mg，0.09mmol，1.0当量)和1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并咪唑-4-甲醛(26mg，0.09mmol，1.0当量)的DMF(2mL)溶液中加入AcOH(0.01mL，0.02mmol，0.2当量)，随后加入醋酸硼氢化钠(57mg，0.27mmol，3.0当量)，反应液在氮气保护室温下搅拌反应半小时。反应液在冰水浴下用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭，用二氯甲烷萃取两次。合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残留物经制备HPLC(C18,20％-95％的乙腈含0.1％的氨水水溶液)纯化得到标题化合物(白色固体，26.1mg，收率36％)。LC-MS(ESI):m/z 814.4[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.07(s,1H),8.87(s,1H),8.48-8.33(m,2H),8.21(d,J＝7.6Hz,1H),7.94(s,1H),7.77(d,J＝9.1Hz,2H),7.70(s,1H),7.08-7.04(m,3H),6.96(t,J＝7.7Hz,1H),6.88(d,J＝7.4Hz,1H),5.49-5.27(m,1H),3.69(s,3H),3.63(s,2H),3.21-3.14(m,4H),2.98-2.82(m,3H),2.73-2.55(m,6H),2.33-2.26(m,1H),2.02-1.97(m,3H),1.78-1.75(m,2H),1.44-1.39(m,2H).
制备例382.化合物A373的合成
步骤A：4-(1-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向1-[2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基]-4-溴-3-甲基-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-2-酮(1.0g，1.937mmol，1.0当量)的二氧六环(20mL)溶液中加入2-甲基丙烷-2-基-4-(六氢吡啶-4-基)哌嗪-1-甲酸酯(0.63g，2.324mmol，1.2当量),Xant Phos(0.22g，0.387mmol，0.2当量),Cs2CO3(1.26g，3.873mmol，2.0当量),Pd2(dba)3(0.18g，0.194mmol，0.1当量)。反应液在氮气保护下110℃搅拌反应10小时。反应完全后，将反应液减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，500mg，产率36％)。
步骤B：4-(1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(1-(1-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪 唑-4-基)哌啶-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(250mg，0.355mmol，1.2当量)的甲醇(20mL)溶液中加入10％湿Pd/C(75mg，0.071mmol，0.2当量)。反应液在氢气球下60℃搅拌反应10小时。反应完全后，将反应液过滤，减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状，130mg，产率69％)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：3-(3-甲基-2-氧代-4-(4-(哌嗪-1-基)哌啶-1-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)吡啶-2,6(1H,3H)-二酮
在室温下，4-(1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(130mg，0.247mmol，1.0当量)的TFA/DCM＝1/4(5mL)溶液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液减压浓缩得到粗品标题化合物(黄色油状，100mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤D：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(1-(1-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-基)哌嗪-1-基)甲基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺甲酸盐
在室温下，向3-(3-甲基-2-氧代-4-(4-(哌嗪-1-基)哌啶-1-基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)吡啶-2,6(1H,3H)-二酮(100mg，粗品)的甲醇(10mL)溶液中加入1-(4-甲酰基苯基)-4-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)吡唑-3-甲酰胺(114mg，0.283mmol，1.2当量),氰基硼酸钠(44mg，0.707mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应10小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，50mg，两步的产率26％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.80(s,1H),11.09(s,1H),9.01(s,1H),8.49-8.37(m,2H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),8.15(s,1H),8.02(s,1H),7.95(d,J＝8.2Hz,2H),7.78(s,1H),7.48(d,J＝8.2Hz,2H),7.02-6.84(m,3H),5.37-5.29(m,1H),3.62(s,3H),3.56(s,2H),3.17-3.13(m,2H),2.92-2.85(m,1H),2.74-2.60(m,8H),2.48-2.41(m,4H),2.03-1.89(m,4H),1.71-1.58(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 813.8[M+H]+.
制备例383.化合物A374的合成
步骤A：4-(4-羟基环己基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
室温下，向叔丁基哌嗪-1-甲酸酯(3.3g，17.5mmol，1.0当量)和4-羟基环己烷-1-酮(2.0g，17.5mmol，1.0当量)的二氯甲烷(30mL)溶液中加入醋酸(3mL，52.6mmol，3.0当量)。反应液室温搅拌15小时，接着三乙酰氧基硼氢化钠(5.5g，26.3mmol，1.5当量)加入到反应液，反应液继续搅拌1小时。反应完毕后，反应液过滤，滤液浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，2.0g，产率40％)。
步骤B：4-(4-((甲基磺酰基)氧)环己基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在冰浴下，向4-(4-羟基环己基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(739mg，2.6mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入甲烷磺酰氯(357mg，3.1mmol，1.2当量)和三乙胺(0.5mL，3.9mmol，1.5当量)。反应液在冰浴下继续反应3小时。反应液加水稀释，二氯甲烷萃取。有机相饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤。滤液浓缩得到标题化合物(白色固体，0.41g，产率44％)。
步骤C：4-(4-(3-氨甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰氨基)-1H-吡唑-1-基)环己基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
室温下，向4-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)-1H-吡唑-3-甲酰胺(780mg，2.6mmol，1.0当量)的DMF(15mL)溶液中加入4-(4-((甲基磺酰基)氧)环己基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(945mg，2.6mmol，1.0当量)和碳酸铯(1.3g，3.9mmol，1.5当量)。反应液70℃下搅拌18小时。反应完毕后，反应液冷却，加水稀释，二氯甲烷萃取。有机相依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，780mg，产率53％)。
步骤D：N-(3-氨甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺盐酸盐
4-(4-(3-氨甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶甲酰氨基)-1H-吡唑-1-基)环己基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(250mg，0.4mmol，1.0当量)的盐酸-二氧六环溶液(4mol/L)(5mL)在室温下搅拌1小时。反应完毕后，反应液浓缩得到标题化合物(白色固体，200mg，粗品)。
步骤E：N-(3-氨甲酰基-1-(4-(4-(4-(2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
室温下，向1-(4-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲醛(147mg，0.4mmol，1.0当量)和N-(3-氨甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺盐酸盐(200mg，粗品)的DMF(5mL)溶液中加入三乙胺(0.2mL)。反应液在室温下反应0.5小时。接着醋酸(0.3mL)加入反应液中，继续搅拌15小时。三乙酰氧基硼氢化钠(140mg， 0.7mmol，1.5当量)加入，继续搅拌1小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相浓缩后，残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，36mg，产率10％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.72(s,1H),10.81(s,1H),8.48(s,1H),8.44-8.35(m,2H),8.20(d,J＝7.2Hz,1H),7.60(d,J＝10.6Hz,2H),7.03(s,1H),6.57(d,J＝15.2Hz,1H),6.49(d,J＝8.4Hz,1H),5.99-4.94(m,2H),4.39-4.24(m,2H),3.84-2.95(m,10H),2.95-2.65(m,5H),2.63-2.54(m,1H),2.29-2.01(m,5H),1.99-1.76(m,6H),1.74-1.58(m,2H),1.55-1.26(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 783[M+H]+.
制备例384.化合物A377的合成
步骤A：5-苄氧基-2-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)吡啶
在室温下，向5-(苄氧基)-2-溴吡啶(5.0g，18.94mmol，1.0当量)和4-(二甲氧基甲基)哌啶(4.5g，28.41mmol，1.5当量)的1,4-二氧六环(60mL)溶液中加入Ruphos(1.8g，3.79mmol，0.2当量),Ruphos Pd G1(0.6g，2.65mmol，0.1当量)和碳酸铯(5.5g，56.82mmol，3.0当量)反应液在氮气保护下90℃搅拌反应16小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，2.7g，产率42％)。
步骤B：6-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)吡啶-3-醇
在室温下，向5-苄氧基-2-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)吡啶(2.7g，7.89mmol，1.0当量)的甲醇(30mL)溶液中加入10％的湿钯碳(300mg)。反应液在氢气保护下室温搅拌16小时。反应完全后，将反应液用硅胶土过滤，减压浓缩，得到标题化合物(白色固体，1.8g，产率91％)。
步骤C：3-((6-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)吡啶-3-基)氧基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向6-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)吡啶-3-醇(800mg，3.17mmol，1.0当量)的DMF(15mL)溶液中，在0℃的条件下加入60％在矿物油里的氢化钠(380mg，6.35mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下0℃搅拌反应30分钟，然后反应液在氮气保护0℃的条件下向其中加入3-溴-2,6-二氢吡啶酮(913mg，4.76mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下 常温搅拌反应2小时。反应完全后，将反应液用氯化铵淬灭，后用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，200mg，产率17％)。
步骤D：1-(5-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-甲醛
在室温下，3-((6-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)吡啶-3-基)氧基)哌啶-2,6-二酮(200mg，0.55mmol，1.0当量)在甲酸(5mL)溶液中，在50℃搅拌反应30分钟。反应完全后，将反应液减压浓缩得到标题化合物(绿色油状物，160mg，产率92％)，无需纯化，直接用于下一步。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-((1-(5-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向1-(5-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-甲醛(160mg，0.50mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(255mg，0.55mmol，1.0当量)和乙酸(0.1mL)。室温下搅拌反应2小时后加入三乙酰氧基硼氢化钠(425mg，2.0mmol，4.0当量)。反应液在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(灰白色固体，26.0mg，产率7％)。LC-MS(ESI):m/z 761[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),10.91(s,1H),8.88(s,1H),8.50-8.33(m,2H),8.21(d,J＝7.2Hz,1H),7.94(d,J＝10.3Hz,2H),7.81-7.68(m,3H),7.32(d,J＝9.2Hz,1H),7.08(d,J＝8.1Hz,2H),6.79(d,J＝8.9Hz,1H),4.99(dd,J＝10.5,4.4Hz,1H),4.15(d,J＝12.2Hz,2H),3.26-3.17(m,4H),2.86-2.55(m,5H),2.55-2.51(m,4H),2.23-2.20(m,2H),2.15-2.08(m,1H),1.82-1.71(m,3H),1.19-1.07(m,2H).
制备例385.化合物A378的合成
步骤A：3-氟-4-(8-氮杂-1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)苯甲酸甲酯
在室温下，向3,4-二氟苯甲酸甲酯(1.0g，5.8mmol，1.0当量)的二甲亚砜(20mL)溶液中加入8-氮杂-1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷(1.0g，6.971mmol，1.2当量)和碳酸钾(2.4g，17.4 mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下80℃搅拌反应16小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.2g，产率70％)。
步骤B：3-氟-4-(8-氮杂-1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)苯甲酸
在室温下，将3-氟-4-(8-氮杂-1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)苯甲酸甲酯(1.2g，4.06mmol，1.0当量)加入THF(15mL)和水(7.5mL)中的溶液中，加入氢氧化锂(0.26g，6.1mmol，1.5当量)。混合物在室温下搅拌1小时。将反应液液浓缩得到标题化合物(黄色固体，1.0g，粗品)。
步骤C：N-(2,6-二氧亚基六氢吡啶-3-基)-3-氟-4-(8-氮杂-1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)苯甲酰胺
在DMF(18mL)溶液中加入3-氟-4-(8-氮杂-1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)苯甲酸(1g，粗品),3-氨基-2,6-哌啶二酮(0.46g，3.56mmol，1.0当量),HATU(2.7g，7.1mmol，2.0当量)和DIEA(2.3g，17.78mmol，5.0当量)。在25℃下搅拌2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，600mg，产率43％)。
步骤D：N-(2,6-二氧亚基六氢吡啶-3-基)-3-氟-4-(4-氧亚基六氢吡啶-1-基)苯甲酰胺
N-(2,6-二氧亚基六氢吡啶-3-基)-3-氟-4-(8-氮杂-1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)苯甲酰胺(600mg，1.5mmol，1.0当量)在甲酸(5mL)溶液中，在60℃搅拌反应16小时。反应完全后，将反应液减压浓缩得到标题化合物(黄色油状物，300mg，粗品)，无需纯化，直接用于下一步。
步骤E：1-(4-{4-[1-(4-{[(2,6-二氧亚基六氢吡啶-3-基)氨基]羰基}-2-氟苯基)六氢吡啶-4-基]哌嗪-1-基}苯基)-4-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)吡唑-3-甲酰胺
在室温下，向N-(2,6-二氧亚基六氢吡啶-3-基)-3-氟-4-(4-氧亚基六氢吡啶-1-基)苯甲酰胺(200mg，粗品)的DMF(10mL)溶液中加入1-[4-(哌嗪-1-基)苯基]-4-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)吡唑-3-甲酰胺(151mg，0.43mmol，1.0当量)和5滴乙酸。室温下搅拌反应1小时后加入三乙酰氧基硼氢化钠(465mg，2.19mmol，5.0当量)。反应液在室温下搅拌反应2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，20mg，产率6％)。LC-MS(ESI):m/z 791.4[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.86(s,1H),8.88(s,1H),8.66(d,J＝8.3Hz,1H),8.46-8.38(m,2H),8.22(s,1H),7.95(s,1H), 7.81-7.77(m,2H),7.72-7.61(m,3H),7.14-7.06(m,3H),4.80-4.72(m,1H),3.59-3.55(m,2H),3.23(s,4H),2.82-2.74(m,3H),2.72-2.67(m,4H),2.59-2.53(m,1H),2.44-2.41(m,1H),2.14-2.07(m,1H),1.98-1.90(m,3H),1.66-1.57(m,2H).
制备例386.化合物A379的合成
步骤A：5-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶甲酸甲酯
向1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(2.2g，15.48mmol，1.2当量)在二甲亚砜(20mL)中的溶液中加入5-氟吡啶-2-甲酸甲酯(2.0g，12.9mmol，1.0当量)和碳酸钾(2.1g，15.49mmol，1.2当量)。将混合物在110℃下搅拌1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.7g，产率45％)。
步骤B：5-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶甲酸
向5-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶甲酸甲酯(1.7g，6.12mmol，1.0当量)在四氢呋喃(10mL)/水(2mL)中的溶液中加入氢氧化锂(0.51g，12.23mmol，2.0当量)。将混合物在室温下搅拌1小时。将所得溶液浓缩，得到氢氧化锂盐形式的标题化合物(黄色固体，1.4g，粗品)。
步骤C：N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶酰胺
在0℃下，向3-氨基-2,6-哌啶二酮(0.48g，3.79mmol，1.0当量)的DMF(20mL)溶液中加入5-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶甲酸(1g，粗品),HATU(2.88g，7.58mmol，2.0当量)和DIEA(1.3mL，7.58mmmol，2.0当量)。将混合物在0℃下搅拌30分钟。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1g，产率67％)。
步骤D：N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(4-氧代哌啶-1-基)吡啶酰胺
将N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶酰胺(1g，2.67mmol，1.0当量)在甲酸(10mL)中的溶液在60℃下搅拌2小时。将所得溶液浓缩，得到标题化合物(绿色油状，500mg，粗品)。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(1-(6-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基甲酰基)吡啶-3-基) 哌啶-4-基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
向N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(695mg，1.52mmol，1.0当量)在DMF(10mL)中的溶液中加入醋酸(0.1mL)和N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(4-氧代哌啶-1-基)吡啶酰胺(500mg，粗品)。将混合物在25℃下搅拌1小时，然后加入醋酸硼氢化钠(1277mg，6.06mmol，4.0当量)。将反应在25℃下搅拌1小时。将所得溶液用饱和碳酸氢钠溶液萃灭，然后用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，25.1mg，产率2％)。LC-MS(ESI):m/z 774[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.80(s,1H),10.86(s,1H),8.88(s,1H),8.72(s,1H),8.53-8.30(m,3H),8.22(s,1H),7.97(s,1H),7.79(t,J＝24.9Hz,3H),7.43(s,1H),7.07(s,2H),4.84-4.55(m,1H),4.24-3.75(m,2H),3.26-3.07(m,5H),3.04-2.84(m,2H),2.73-2.61(m,4H),2.30-2.10(m,1H),2.09-1.83(m,4H),1.67-1.45(m,2H).
制备例387.化合物A380的合成
步骤A：N-(3-氨甲酰基-1-(4-((1-(1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
室温下，向1-(1-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-4-基)哌啶-4-甲醛(120mg，0.3mmol，1.0当量)和N-(3-氨甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺盐酸盐(150mg，0.3mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入三乙胺(0.2mL)。反应液在室温下反应0.5小时。接着醋酸(0.3mL)加入反应液中，继续搅拌15小时。三乙酰氧基硼氢化钠(103mg，0.5mmol，1.6当量)加入，继续搅拌1小时。反应完毕后，反应液用水稀释，二氯甲烷萃取。有机相浓缩后，残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，34mg，产率13％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.72(s,1H),11.10(s,1H),8.48(s,1H),8.45-8.35(m,2H),8.20(dd,J＝7.2,1.2Hz,1H),7.60(d,J＝6.8Hz,2H),7.00(t,J＝8.0Hz,1H),6.90(t,J＝8.0Hz,2H),5.43-5.29(m,1H),4.33(t,J＝11.6Hz,1H),3.64(s,3H),3.46(s,4H),3.15(d,J＝10.0Hz,6H),2.94-2.58(m,8H),2.28-2.12(m,4H),2.05-1.78(m,6H),1.71-1.55(m,2H),1.49-1.29(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 820[M+H]+.
制备例388.化合物A383的合成
步骤A：5-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-2-硝基吡啶
在室温下，向5-氟-2-硝基吡啶(2g，14.08mmol，1.0当量)的乙腈(20mL)溶液中入DIEA(7.3mL，42.25mmol，3.0当量)和(六氢吡啶-4-基)二甲氧基甲烷(3.36g，21.13mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下80℃搅拌反应2小时。完成后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，3.8g，产率98％)。
步骤B：[1-(6-氨基吡啶-3-基)六氢吡啶-4-基]二甲氧基甲烷
在室温下，向5-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-2-硝基吡啶(1.5g，5.33mmol，1.0当量)的乙醇溶液中加入10％Pd/C(300mg)。反应液用氢气置换3次，反应液在氢气下反应3个小时。反应液用硅藻土过滤，并浓缩得到标题化合物(灰色固体，1.4g，产率93％)。
步骤C：3-((5-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)吡啶-2-基)氨基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向[1-(6-氨基吡啶-3-基)六氢吡啶-4-基]二甲氧基甲烷(500mg，1.99mmol，1.0当量)的乙腈(5mL)溶液中加入碳酸氢钠(836mg，9.96mmol，5.0当量)和3-溴六氢吡啶-2,6-二酮(764mg，3.98mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下80℃搅拌反应16小时。完成后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(蓝色固体，300mg，产率41％)。
步骤D：1-(6-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)吡啶-3-基)哌啶-4-甲醛
在0℃下，将3-((5-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)吡啶-2-基)氨基)哌啶-2,6-二酮(0.2g，0.55mmol，1.0当量)加入甲酸(5ml)溶液中，反应液在氮气保护下60℃搅拌反应2小时。反应液浓缩得到标题化合物(黄色固体，174mg，产率99％)。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-((1-(6-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)吡啶-3-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下,向1-(6-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)吡啶-3-基)哌啶-4-甲醛(150mg，0.47mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(220mg，0.47mmol，1.0当量)和5滴乙酸。室温下搅拌 反应2小时后加入三乙酰氧基硼氢化钠(606mg，2.85mmol，6.0当量)。反应液在室温下搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(灰白色固体，25mg，产率7％)。LC-MS(ESI):m/z 760[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.83-11.77(m,1H),10.73(s,1H),8.88(s,1H),8.45(d,J＝7.5Hz,1H),8.40(t,J＝7.7Hz,1H),8.21(d,J＝7.6Hz,1H),8.14(s,1H),7.95(s,1H),7.79(d,J＝9.0Hz,2H),7.71(s,1H),7.65(d,J＝2.8Hz,1H),7.26-7.18(m,1H),7.08(d,J＝9.1Hz,2H),6.54(d,J＝9.0Hz,1H),6.38(d,J＝7.5Hz,1H),4.71-4.60(m,1H),3.43-3.33(m,4H),3.25-3.19(m,4H),2.79-2.69(m,1H),2.58-2.55(m,1H),2.55-2.52(m,4H),2.26-2.20(m,2H),2.13-2.06(m,1H),2.03-1.93(m,1H),1.84-1.77(m,2H),1.68-1.59(m,1H),1.29-1.20(m,2H).
制备例389.化合物A384的合成
步骤A：4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-氰基吡啶酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
向4-(4-(4-氨基-3-氨基甲酰基-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(500mg，1.29mmol，1.0当量)的乙腈(20mL)溶液中加入6-氰基-2-吡啶甲酸(210mg，1.42mmol，1.1当量)，DIEA(0.7mL，3.87mmol，3.0当量)和质量比为50％在乙酸乙酯溶液中的T3P(1641mg，2.58mmol，2.0当量)。反应混合物在氮气气氛下室温搅拌16小时。反应析出固体，过滤即可得到标题化合物(白色固体，500mg，产率75％)。
步骤B：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-氰基吡啶脒盐酸盐
将4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-氰基吡啶酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(500mg，0.9mmol，1.0当量)加入4M的盐酸-二氧六环(10mL)溶液中，反应混合物在室温下搅拌2小时。反应完全后，将反应液减压浓缩得到标题化合物(白色固体，400mg，产率99％)。
步骤C：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-((1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-氰基吡啶酰胺
向N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-氰基吡啶脒盐酸盐(100mg，粗品)的DMF(5mL)溶液中加入醋酸(0.5mL)和1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲醛(88mg，0.26mmol，1.1当量)。反应混合物在室温下搅拌16小时，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(151mg，0.71mmol，3.0当量)。在继续室温搅拌1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，33mg，产率19％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.67(s,1H),10.80(s,1H),9.47(s,1H),8.93(s,1H),8.45(dd,J＝7.2,1.8Hz,1H),8.40-8.31(m,2H),7.98(s,1H),7.88(d,J＝9.0Hz,2H),7.76(s,1H),7.19(d,J＝9.1Hz,2H),6.97(d,J＝8.7Hz,1H),6.55(d,J＝14.9Hz,1H),6.47(d,J＝8.0Hz,1H),4.30(dd,J＝11.3,4.6Hz,1H),4.02-3.86(m,4H),3.21(d,J＝19.5Hz,8H),2.73(ddd,J＝20.1,12.7,6.7Hz,4H),2.16-1.97(m,2H),1.89(d,J＝5.8Hz,3H),1.47(d,J＝12.9Hz,2H).LC-MS(ESI):m/z 417[M+H]+.
制备例390.化合物A385的合成
步骤A：4-(4-(4-氨基-3-(甲氧基羰基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
向4-(4-(3-(甲氧基羰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的甲醇(60mL)溶液中加入10％的Pd/C(1g)。反应混合物在氢气气氛下脱气三次，然后在氢气环境下室温搅拌16小时。反应完全后，反应液经过硅藻土过滤，浓缩滤液。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(棕色固体，4.5g，产率81％)。
步骤B：4-(4-(4-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(甲氧基羰基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
向4-(4-(4-氨基-3-(甲氧基羰基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(4.5g，11.21mmol，1.0当量)的二氯甲烷(50mL)中加入DMAP(140mg，1.12mmol，0.1当量)，三乙 胺(3.1mL，22.42mmol，2.0当量)和氯甲酸苄酯(1.9mL，13.45mmol，1.2当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，将反应液用二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(棕色固体，6g，产率100％)。
步骤C：4-(4-(4-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在氮气气氛、-78℃下，向4-(4-(4-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(甲氧基羰基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(6g，11.20mmol，1.0当量)的四氢呋喃(60mL)溶液中加入溴化甲镁(33.6mL，33.60mmol，3.0当量，浓度为1.0M的四氢呋喃溶液)。反应混合物在氮气气氛下-78℃搅拌1小时。反应完全后，反应液中加入饱和氯化铵水溶液进行淬灭，用乙酸乙酯萃取。有机层依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(棕色固体，5g，产率83％)。
步骤D：4-(4-(4-氨基-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
向4-(4-(4-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(5g，9.33mmol，1.0当量)的甲醇(50mL)溶液中加入10％的Pd/C(1g)。反应液用氢气置换三次，然后再氢气气氛下室温搅拌16小时。反应完全后，反应液经硅藻土过滤，减压浓缩滤液。残余物混合物在H2下于恒温搅拌16小时。过滤反应混合物，浓缩滤液。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(棕色固体，2.2g，产率59％)。
步骤E：4-(4-(4-(5-氰基烟酰胺基)-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
向5-氰基烟酸(1g，6.75mmol，1.0当量)的乙腈(10mL)溶液中加入4-(4-(4-氨基-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(27g，6.75mmol，1.0当量)，三乙胺(1.9mL，13.50mmol，2.0当量)和T3P(6.44mL，10.13mmol，1.5当量，质量比为50％的乙酸乙酯溶液)。反应混合物在室温下搅拌16小时。反应完全后，反应液析出固体，将反应混合物过滤，用乙腈淋洗滤饼，浓缩滤饼得到标题化合物(黄色固体，950mg，产率26％)。
步骤F：5-氰基-N-(3-(2-羟基丙-2-基)-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)烟酰胺
向4-(4-(4-(5-氰基烟酰胺基)-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.38mmol，1.0当量)的二氯甲烷(6mL)溶液中加入4M的盐酸二氧六环溶液(2mL)。反应混合物在室温下搅拌2小时。反应完全后，浓缩反应混合物，得到标题化合物(棕色固体，200mg，粗品)。
步骤G：5-氰基-N-(1-(4-(4-((1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基)烟酰胺
向5-氰基-N-(3-(2-羟基丙-2-基)-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)烟酰胺(200mg，粗品)的DMF(5mL)溶液中加入三乙胺(47mg，0.46mmol，0.8当量)。反应混合物在氮气气氛下室温搅拌15分钟，然后加入醋酸(173mg，0.93mmol，1.7当量)和1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲醛(185mg，0.56mmol，1.0当量)。反应混合物继续搅拌16小时，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(293mg，1.39mmol，2.5当量)。反应混合物在室温下搅拌1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，21.2mg，6.11％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.77(s,1H),10.20(s,1H),9.24(d,J＝2.0Hz,1H),9.22(d,J＝2.0Hz,1H),8.66-8.65(t,J＝2.1Hz,1H),8.64(s,1H),7.62-7.60(d,J＝8.8Hz,2H),7.04-702(d,J＝8.8Hz,2H),6.84-6.81(t,J＝9.2Hz,1H),6.52-6.48(dd,1H),6.43-6.41(m,1H),5.94(s,1H),5.79-5.77(d,J＝7.6Hz,1H),4.28-4.22(m,1H),3.30(s,1H),3.17(s,4H),3.14-3.11(m,2H),2.77-2.69(m,1H),2.59-2.56(m,2H),2.54(m,4H),2.24-2.23(d,J＝6.8Hz,2H),2.11-2.07(m,1H),1.86-1.83(m,1H),1.80-1.77(m,2H),1.59(m,1H),1.59(s,6H),1.32-1.23(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 749[M+H]+.
制备例391.化合物A386的合成
步骤A：4-(4-(4-(6-氰基-2-吡啶氨基)-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
向4-(4-(4-氨基-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(500mg，1.29mmol，1.0当量)的乙腈(20mL)溶液中加入6-氰基-2-吡啶甲酸(210mg，1.42mmol，1.1当量)，DIEA(0.7mL，3.87mmol，3.0当量)和T3P(1641mg，2.58mmol，2.0当量，质量比为50％的乙酸乙酯溶液)。反应混合物在室温下搅拌16小时。反应完全后，反应液中析出白色固体，过滤反应混合物，浓缩滤饼，得到标题化合物(白色固体，500mg，产率75％)。
步骤B：6-氰基-N-(3-(2-羟基丙-2-基)-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)吡啶酰胺
将4-(4-(4-(6-氰基-2-吡啶氨基)-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(500mg，0.9mmol，1.0当量)加入三氟乙酸(2mL)和二氯甲烷(6mL)混合溶液中。反应 混合物在室温下搅拌2小时。浓缩反应混合物，得到标题化合物(白色固体，400mg，粗品)。
步骤C：6-氰基-N-(1-(4-(4-((1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶酰胺
向6-氰基-N-(3-(2-羟基丙-2-基)-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)吡啶酰胺(100mg，粗品)的DMF(5mL)溶液中加入醋酸(0.5mL)和1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲醛(88mg，0.26mmol，1.1当量)。反应混合物在室温下搅拌16小时，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(151mg，0.71mmol，3.0当量)。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，50mg，两步产率29％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.14(s,1H),10.77(s,1H),8.74(s,1H),8.43(dd,J＝7.6,1.6Hz,1H),8.40-8.23(m,2H),7.61(d,J＝9.2Hz,2H),7.03(d,J＝9.2Hz,2H),6.83(t,J＝9.2Hz,1H),6.50(dd,J＝15.2,2.4Hz,1H),6.41(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),6.07(s,1H),5.78(d,J＝7.6Hz,1H),4.32-4.12(m,1H),3.36(d,J＝5.2Hz,2H),3.19-3.06(m,6H),2.72(m,1H),2.60-2.51(m,5H),2.24(s,2H),2.11-2.00(m,1H),1.88-1.73(m,3H),1.62(s,1H),1.58(s,6H),1.37-1.20(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 749[M+H]+.
制备例392.化合物A387的合成
N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-4-氰基吡啶酰胺
向N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-4-氰基吡啶甲酰胺(200mg，0.48mmol，1.8当量)和3-((3-氟-4-(4-氧代哌啶-1-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(88mg，0.26mmol，1.0当量)的DMF(3mL)溶液中加入AcOH(1mL)。将反应混合物在室温下搅拌16小时，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(506mg，2.4mmol，9.2当量)。在室温下搅拌1小时后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，5.8mg，产率5％)。LC-MS(ESI):m/z 720[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.67(s,1H),10.77(s,1H),9.01(d,J＝5.2Hz,1H),8.89(s,1H),8.51(s,1H),8.18(dd,J＝4.8,1.6Hz,1H),7.96(s,1H),7.79(d,J＝9.2Hz, 2H),7.67(s,1H),7.08(d,J＝9.2Hz,2H),6.84(t,J＝9.2Hz,1H),6.50(d,J＝15.2Hz,1H),6.42(d,J＝8.8Hz,1H),5.79(d,J＝7.6Hz,1H),4.25(s,1H),3.21-3.15(m,6H),2.69-2.65(m,4H),2.60(d,J＝9.6Hz,2H),2.34-2.31(m,1H),2.07-2.03(m,2H),1.87-1.53(m,3H),1.59-1.54(m,3H).
制备例393.化合物A388的合成
N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-氰基吡啶酰胺
向N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-氰基吡啶甲酰胺(200mg，0.48mmol，1.0当量)和3-((3-氟-4-(4-氧代哌啶-1-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(153mg，0.48mmol，1.0当量)的DMF(3mL)溶液中加入AcOH(1mL)。反应混合物在室温下搅拌16小时，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(506mg，2.4mmol，5.0当量)。将反应混合物在室温下搅拌1小时。经制备纯化得标题化合物(白色固体，10mg，产率3％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.67(s,1H),10.78(s,1H),8.93(s,1H),8.44(dd,J＝7.2,2.0Hz,1H),8.38-8.31(m,2H),7.98(s,1H),7.88(d,J＝9.2Hz,2H),7.75(s,1H),7.20(d,J＝9.2Hz,2H),6.88(t,J＝9.2Hz,1H),6.58-6.39(m,2H),4.27(dd,J＝11.4,4.8Hz,1H),4.00(d,J＝12.6Hz,2H),3.76-3.68(m,4H),3.33-3.21(m,4H),3.12-2.97(m,2H),2.88-2.60(m,3H),2.25-2.03(m,3H),1.94-1.72(m,3H).LC-MS(ESI):m/z 720[M+H]+.
制备例394.化合物A389的合成
步骤A：5-氰基-N-(1-(4-(4-(1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)哌嗪-1-基)苯基)-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基)烟酰胺
室温下，向5-氰基-N-(3-(2-羟基丙烷-2-基)-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)烟酰胺(100mg，0.21mmol，1.0当量)的DMF(3mL)溶液中加入TEA(21.6mg，0.21mmol，1.0当量)。反应液搅拌反应15分钟后，加入醋酸(25.6mg，0.43mmol，2.0当量)和3-((3-氟-4-(4-氧代哌啶-1-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(68.2mg，0.21mmol，1.0当量)。反应液继续搅拌 16小时。随后加入醋酸硼氢化钠(135mg，0.64mmol，3.0当量)。搅拌1小时后，将反应液过滤，滤液经制备分离得到标题化合物(白色固体，5.2mg，产率3％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.77(s,1H),10.20(s,1H),9.23(dd,J＝6.2,2.0Hz,2H),8.65(dd,J＝5.2,3.1Hz,2H),7.61(d,J＝9.2Hz,2H),7.03(d,J＝9.2Hz,2H),6.84(t,J＝9.2Hz,1H),6.51(dd,J＝15.2,2.3Hz,1H),6.41(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),5.95(s,1H),5.79(d,J＝7.6Hz,1H),4.25(t,J＝11.6Hz,1H),3.20-3.17(m,6H),2.78-2.72(m,1H),2.68(s,4H),2.61-2.58(m,2H),2.56-2.54(m,1H),2.36-2.31(m,1H),2.11-2.08(m,1H),1.88-1.83(m,3H),1.63-1.55(m,8H).
制备例395.化合物A390的合成
6-氰基-N-(1-(4-(4-(1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)哌嗪-1-基)苯基)-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶酰胺
向6-氰基-N-(3-(2-羟基丙烷-2-基)-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)吡啶甲酰胺(100mg，0.24mmol，1.0当量)的DMF(3mL)溶液中加入AcOH(0.5mL)和3-((3-氟-4-(4-氧代哌啶-1-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(88mg，0.26mmol，1.1当量)。将反应混合物在室温下搅拌16小时，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(151mg，0.71mmol，3.0当量)。将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经制备分离得到标题化合物(黄色固体，2.5mg，产率2％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.14(s,1H),10.78(s,1H),8.74(s,1H),8.44(d,J＝7.6Hz,1H),8.40-8.25(m,2H),7.61(d,J＝7.6Hz,2H),7.04(d,J＝8.0Hz,2H),6.84(t,J＝9.2Hz,1H),6.51(d,J＝15.2Hz,1H),6.42(d,J＝8.4Hz,1H),6.07(s,1H),5.79(d,J＝7.6Hz,1H),4.26(s,1H),3.18(s,6H),2.69(s,4H),2.59(s,2H),2.34(s,1H),2.07(s,1H),2.00(d,J＝7.8Hz,2H),1.86(s,3H),1.59(s,7H),1.46(s,1H).LC-MS(ESI):m/z 735[M+H]+.
制备例396.化合物A391的合成
步骤A：7-苄氧基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯
向7-羟基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(2.41g，9.99mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(50mL)溶液中加入NaH(60％)(0.8g，19.97mmol，2.0当量)。将混合物在室温下搅拌0.5小时，然后逐滴加入(溴甲基)苯(1.42mL，11.98mmol，1.2当量)。将混合物在室温下搅拌1小时。反应完全后反应液用水稀释，乙酸乙酯萃取。有机相用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残余物经过柱色谱纯化得到标题化合物(无色油状物，1.95g，产率59％)。
步骤B：7-苄氧基-2-氮杂螺[3.5]壬烷
向7-苄氧基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(1g，3.02mmol，1.0当量)的二氯甲烷(20mL)溶液中加入三氟乙酸(10mL)。反应物在室温下搅拌0.5小时。反应液用油泵抽干，得到标题化合物(黄色油状，697mg，粗品)直接用于下一步。
步骤C：1-(4-(7-(苄氧基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
向7-苄氧基-2-氮杂螺[3.5]壬烷(697mg，3.01mmol，1.0当量)和1-(4-溴苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(811mg，3.01mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(30mL)溶液中加入碳酸铯(2.95g，9.04mmol，3.0当量)和(SP-4-1)-[1,3-双[2,6-双(1-丙基丁基)苯基]-4,5-二氯-1，3-二氢-2H-咪唑-2-亚基]二氯(3-氯吡啶-κN)-钯(293mg，0.30mmol，0.1当量)。反应液在氮气保护下100℃搅拌3小时。反应物冷却至室温后用水稀释，乙酸乙酯萃取。有机相用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并浓缩。残余物通过柱色谱纯化，得到标题化合物(淡黄色固体，600mg，产率47％)。
步骤D：1-(4-(7-羟基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
将1-(4-(7-(苄氧基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(600mg，1.43mmol，1.0当量)分散于乙醇(20mL)和四氢呋喃(20mL)中的混合溶液中，加入10％Pd/C(300mg，50％w.t)。反应液在氢气气氛下50℃搅拌4天。反应液垫硅藻土过滤，滤液浓缩得到标题化合物(白色固体，350mg，产率74％)。
步骤E：1-(4-(7-氧代-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
向1-(4-(7-羟基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(205mg，0.62mmol，1.0当量)的DMSO(5mL)溶液中加入IBX(349mg，1.24mmol，2.0当量)。将混合物在80℃下搅拌2小时。反应液冷却后用水稀释，用乙酸乙酯萃取。有机相用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残余物通过柱色谱纯化，得到标题化合物(黄色固体，100mg，产率49％)。
步骤F：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(2-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-2-氮杂螺 [3.5]壬烷-7-基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
向1-(4-(7-氧代-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(100mg，0.31mmol，1.0当量)和N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(140mg，0.31mol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入三乙胺(309mg，3.05mmol，10.0当量)。将混合物在室温下搅拌3分钟，然后加入冰醋酸(275mg，4.58mmol，15.0当量)。搅拌0.5小时后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(194mg，0.92mmol，3.0当量)。反应液在室温下搅拌过夜。过滤后，滤液经HPLC制备得标题化合物(白色固体，54.7mg，产率23％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),10.23(s,1H),8.93(s,1H),8.55-8.30(m,2H),8.22(dd,J＝7.5,1.2Hz,1H),7.95(s,1H),7.88(d,J＝9.0Hz,2H),7.75(s,1H),7.19(t,J＝7.3Hz,2H),7.10(t,J＝7.3Hz,2H),6.42(d,J＝8.8Hz,2H),3.99(d,J＝13.0Hz,2H),3.66(t,J＝6.7Hz,2H),3.64-3.58(m,4H),3.52(s,2H),3.29-3.19(m,3H),3.05(t,J＝12.2Hz,2H),2.68(t,J＝6.7Hz,2H),2.08(d,J＝10.2Hz,4H),1.69-1.43(m,4H).
制备例397.化合物A392的合成
步骤A：2-(甲氧基亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸苄酯
在-78℃氮气保护下，向(甲氧基甲基)三苯基氯化膦(7.53g，21.95mmol，3.0当量)的四氢呋喃(70mL)、叔丁醇(3mL)的悬浮液中加入叔丁醇钾(2.46g，21.95mmol，3.0当量)。在0℃下搅拌1小时后，向反应液中加入2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸苄酯(2g，7.32mmol，1.0当量)的四氢呋喃(10mL)溶液。反应在20℃下搅拌16小时。将反应物倒入水中，用乙酸乙酯萃取两次。有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(1.4g，产率63％)。
步骤B：2-(二甲氧基甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸苄酯
将2-(甲氧基亚甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸苄酯(1.2g，3.98mmol)的甲酸(10mL) 溶液在20℃下搅拌过夜。将所得溶液浓缩后，溶解在甲醇(20mL)中。向溶液中加入对甲基苯磺酸(69mg，0.40mmol，0.2当量)和原甲酸三甲酯(1.31mL，11.94mmol，1.5当量)。将反应物在70℃下搅拌16小时。减压浓缩后，残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(棕色固体，400mg，产率30％)。
步骤C：2-(二甲氧基甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷
氢气氛围下(1个大气压)，将2-(二甲氧基甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸苄酯(400mg，1.20mmol)和10％w.t钯炭(120mg)在甲醇(10mL)中搅拌2小时。用硅藻土过滤所得溶液，减压浓缩，得到标题化合物(棕色油状，200mg，粗品)。
步骤D：1-(4-(2-(二甲氧基甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
氮气氛围下，将2-(二甲氧基甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷(200mg，1.00mmol，1.0当量)、1-(4-溴苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(130mg，0.48mmol，0.48当量)、Pd PEPPSI IpentCl(98mg，0.10mmol，0.1当量)和碳酸铯(327mg，1.00mol，1.0当量)在1,4-二氧六环(15mL)中的混合物120℃搅拌过夜。将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(棕色固体，160mg，产率41％)。
步骤E：7-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲醛
将1-(4-(2-(二甲氧基甲基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(160mg，0.41mmol)在甲酸(5mL)溶液中50℃下搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩。残余物通过制备分离纯化得到标题化合物(黄色固体，120mg，产率86％)。
步骤F：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-((7-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
将7-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲醛(120mg，0.35mmol，1当量)，N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(210mg，0.42mmol，1.2当量)、三乙胺(0.07mL，0.53mmol，1.5当量)和三乙酰氧基硼氢化钠(111mg，0.53mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液在30℃下搅拌过夜。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，5mg，产率2％)。LC-MS(ESI):m/z 785[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.25(s,1H),8.87(s,1H),8.48-8.36(m,2H),8.21(d,J＝7.6Hz,1H),7.95(s,1H),7.78(d,J＝9.0Hz,2H),7.70(s, 1H),7.13(d,J＝8.8Hz,2H),7.07(d,J＝9.1Hz,2H),6.93(d,J＝8.9Hz,2H),3.72-3.62(m,2H),3.28-3.18(m,4H),3.15-3.01(m,6H),2.72-2.62(m,3H),2.46-2.36(m,3H),2.07-1.87(m,3H),1.70(s,2H),1.58(s,2H),1.52-1.43(m,2H).
制备例398.化合物A393的合成
步骤A：2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸
将2-(叔丁氧羰基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸(200mg，0.74mmol)在二氯甲烷(3mL)和三氟乙酸(1mL)的混合液中室温下搅拌1小时。然后将混合物浓缩，得到标题化合物(黄色油状物，210mg，粗品)。
步骤B：2-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸
向2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸(200mg，1.18mmol，1.0当量)的二氧六环(2mL)和水(2mL)的混合溶液中加入碳酸钠(375.80mg，3.55mmol，3.0当量)和(9H-芴-9-基)甲基(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)碳酸酯(478.42mg，1.42mmol，1.2当量)。反应液室温搅拌过夜。反应完全后把反应液倒入饱和氯化铵溶液，乙酸乙酯萃取。有机相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤，然后浓缩。浓缩液柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，400mg，产率86％)。
步骤C：2-((9H-芴-9-基)甲基)7-(叔丁基)2-氮杂螺[3.5]壬烷-2,7-二甲酸酯
向2-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸(400mg，1.02mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入二碳酸二叔丁酯(0.47mL，2.04mmol，2.0当量)，三乙胺(0.71mL，5.11mmol，5.0当量)和4-二甲氨基吡啶(12.48mg，0.10mmol，0.1当量)。将反应液在室温下搅拌2小时。反应液倒入水中，并用乙酸乙酯萃取。将有机相用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，有机相减压下浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，350mg，产率77％)。
步骤D：2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯
向2-((9H-芴-9-基)甲基)7-(叔丁基)2-氮杂螺[3.5]壬烷-2,7-二甲酸酯(350mg，0.78mmol)的二氯甲烷(4mL)溶液中加入哌啶(1mL)。将反应液在室温下搅拌30分钟。反应液倒入水中，并用二氯甲烷萃取。将有机相用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，有机相减压下浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状，100mg，产率57％)。
步骤E：2-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯
向1-(4-溴苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(100mg，0.37mmol，1.0当量)，2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(100mg，0.44mmol，1.19当量)and Pd-PEPPSI-IPentCl(36.15mg，0.04mmol，0.1当量)的二氧六环(5mL)溶液中加入碳酸铯(242.16mg，0.74mmol，2.0当量)。反应液氮气置换3次，反应液在氮气保护下120℃搅拌过夜。反应完毕，冷却至室温，乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，50mg，产率33％)。
步骤F：2-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸
将2-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(50mg，0.12mmol)的甲酸(3mL)溶液在40℃搅拌1小时。反应液直接浓缩得到标题化合物(白色固体，40mg，产率93％)。
步骤G：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(2-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羰基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
室温下，向2-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸(40mg，0.11mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中加入HATU(64mg，0.17mmol，1.5当量)，DIEA(72mg，0.56mmol，5.0当量)和N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(57mg，0.12mmol，1.0当量)。反应液室温下搅拌1小时。反应完全后，把反应液倒入饱和氯化铵水溶液，乙酸乙酯萃取。有机相用无水硫酸钠干燥后浓缩。粗品经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，9.5mg，产率11％)。LC-MS(ESI):m/z 799[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.23(d,J＝3.0Hz,1H),8.90(d,J＝3.3Hz,1H),8.50-8.35(m,2H),8.24-8.18(m,1H),7.96(s,1H),7.83(d,J＝4.4Hz,2H),7.72(s,1H),7.16-7.05(m,4H),6.43(d,J＝4.5Hz,2H),3.75-3.59(m,9H),3.32-3.16(m,5H),2.71-2.64(m,3H),1.94(d,J＝11.0Hz,2H),1.69-1.55(m,4H),1.51-1.40(m,2H).
制备例399.化合物A394的合成
步骤A：7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸
在室温下，向7-(叔丁氧羰基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸(500mg，1.86mmol，1.0当量)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入三氟乙酸(1mL)。反应液室温搅拌1小时。反应完全后，反应液直接减压浓缩得到标题化合物(黄色油状物，300mg，粗品)，直接用于下一步。
步骤B：7-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸
在室温下，向7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸(300mg，1.77mmol，1.0当量)在1,4-二氧六环(4mL)和水(1mL)中的溶液中加入(9H-芴-9-基)甲基(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)碳酸酯(658mg，1.95mmol，1.1当量)和碳酸钠(564mg，5.32mmol，3.0当量)。将反应液在室温下搅拌18小时。反应液倒入水中，并用乙酸乙酯萃取。将有机相用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，有机相减压下浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，600mg，收率86％)。
步骤C：7-((9H-芴-9-基)甲基)2-(叔丁基)7-氮杂螺[3.5]壬烷-2,7-二甲酸酯
在室温下，向7-(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸(600mg，1.53mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入吡啶(0.87mL，10.73mmol，7.0当量)，4-二甲氨基吡啶(187mg，1.53mmol，1.0当量)和二碳酸二叔丁酯(1.67g，7.66mmol，5.0当量)。将反应液在室温下搅拌2小时，然后倒入水中，并用乙酸乙酯萃取。将有机相用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，有机相减压下浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，470mg，收率69％)。
步骤D：7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯
室温下，在7-((9H-芴-9-基)甲基)2-(叔丁基)7-氮杂螺[3.5]壬烷-2,7-二甲酸酯(470mg，1.05mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(4mL)溶液中加入哌啶(1mL)。在室温下搅拌30分钟后，反应液倒入水中，并用二氯甲烷萃取。将有机相用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，有机相减压下浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状物，80mg，收率34％)。
步骤E：7-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯
室温下，向7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(89mg，0.36mmol，1.0当量)和1-(4-溴苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(96mg，0.36mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(2mL)溶液中加入Pd-PEPPSI-IPentCl(35mg，0.04mmol，0.1当量)和碳酸铯(347mg，1.07mmol，3.0当量)。反应液氮气置换3次，在氮气保护下110℃搅拌18小时。反应完毕，冷却至室温，乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状物，40mg，收率27％)。
步骤F：7-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸
室温下，将7-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(40mg，0.10mmol，1.0当量)的甲酸(2mL)溶液搅拌2小时。反应完全后，反应液直接减压浓缩得到标题化合物(黑色油状物，30mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤G：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(7-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-羰基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
室温下，向7-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸(30mg，0.08mmol，1.0当量)和N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(39mg，0.08mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2mL)溶液中加入HATU(48mg，0.13mmol，1.5当量)和N,N-二异丙基乙胺(54mg，0.42mmol，5.0当量)。将反应液在室温下搅拌1小时。反应液倒入水中，并用乙酸乙酯萃取。将有机相用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，有机相减压下浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，8.2mg，产率12％)。LC-MS(ESI):m/z 799.6[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),10.25(s,1H),8.90(s,1H),8.47-8.38(m,2H),8.24-8.19(m,1H),7.96(s,1H),7.85-7.80(m,2H),7.72(s,1H),7.16-7.08(m,4H),6.97-6.89(m,2H),3.72-3.67(m,2H),3.66-3.59(m,2H),3.55-3.47(m,2H),3.43-3.39(m,1H),3.23-3.18(m,4H),3.16-3.11(m,2H),3.07-3.01(m,2H),2.71-2.65(m,2H),2.05-1.97(m,4H),1.78-1.71(m,2H),1.60-1.53(m,2H).
制备例400.化合物A395的合成
步骤A：4-(5-(3-(甲氧羰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向(6-(4-(叔丁氧羰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)硼酸(1g，3.2mmol，1.0当量)的DMF(10mL)溶液中加入4-硝基-1H-吡唑-3-甲酸甲酯(0.6g，3.5mmol，1.1当量)， Cu(OAc)2(60mg，0.3mmol，0.1当量)和吡啶(0.7mL，9.7mmol，3.0当量)。反应混合物在80℃的氧气环境下搅拌16小时。将反应混合物过滤，滤液倒入冰水中，用乙酸乙酯萃取，有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩。残留物经硅胶柱色谱纯化得到标题化合物(浅黄色固体，700mg，产率50％)。
步骤B：4-(5-(3-氨基甲酰基-4-硝基-1H-吡唑-1-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(5-(3-(甲氧羰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(700mg，1.6mmol，1.0当量)的THF(5mL)溶液中加入氨水(5mL)。反应混合物在80℃下搅拌16小时。浓缩反应混合物。残留物经硅胶柱色谱纯化得到(黄色固体，500mg，产率74％)。
步骤C：4-(5-(4-氨基-3-氨基甲酰基-1H-吡唑-1-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(5-(3-氨基甲酰基-4-硝基-1H-吡唑-1-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(500mg，1.1mmol，1.0当量)的MeOH(5mL)溶液中加入10％Pd/C(127mg)。然后反应混合物用氢气置换三次，在氢气气氛下室温搅拌16小时。反应完全后，将反应液用硅藻土过滤，滤液在真空下浓缩得到(黄色固体，400mg，粗品)。
步骤D：4-(5-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶酰胺基)-1H-吡唑-1-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(5-(4-氨基-3-氨基甲酰基-1H-吡唑-1-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(150mg，粗品)的乙腈(5mL)溶液中加入6-(三氟甲基)吡啶甲酸(88mg，0.46mmol，1.2当量)，DIEA(0.3mL，1.95mmol，5.0当量)和T3P(496mg，0.78mmol，质量比为50％，2.0当量)。反应混合物在室温下搅拌16小时。过滤反应混合物，浓缩滤饼。残留物经硅胶柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，180mg，两步产率83％)。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
将4-(5-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶酰胺基)-1H-吡唑-1-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(180mg，0.3mmol)溶于4M盐酸-二氧六环(5mL)溶液中。反应混合物在室温下搅拌2小时。反应完全后，反应混合物减压浓缩得到表题化合物(白色固体，140mg，粗品)。
步骤F：N-(3-氨基甲酰基-1-(6-(4-((1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
向N-(3-氨基甲酰基-1-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺 (100mg，粗品)在DMF(5mL)中的溶液中加入AcOH(0.5mL)和1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲醛(79mg，0.24mmol，1.1当量)。反应混合物在室温下搅拌16小时，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(228mg，1.05mmol，5.0当量)。反应混合物在室温下搅拌1小时。将反应混合物倒入冰水中并过滤。收集滤饼。残留物经预高效液相色谱纯化得到标题化合物(白色固体，35mg，0.04mmol，两步收率21％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),10.78(s,1H),8.92(s,1H),8.69(d,J＝2.8Hz,1H),8.48-8.35(m,2H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),8.11(dd,J＝9.2,2.7Hz,1H),7.97(s,1H),7.74(s,1H),7.00(d,J＝9.3Hz,1H),6.84(t,J＝9.3Hz,1H),6.51(dd,J＝14.9,2.3Hz,1H),6.43(d,J＝8.7Hz,1H),5.79(d,J＝7.6Hz,1H),4.35-4.15(m,1H),3.57(s,4H),3.13(d,J＝11.3Hz,3H),2.74(ddd,J＝17.3,12.1,5.3Hz,1H),2.63-2.53(m,4H),2.24(d,J＝7.0Hz,2H),2.17-2.02(m,1H),1.93-1.74(m,3H),1.65(s,1H),1.28(dd,J＝20.8,11.3Hz,2H).LC-MS(ESI):m/z 778[M+H]+.
制备例401.化合物A396的合成
步骤A：2-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-5-硝基吡啶
在室温下，向2-氟-5-硝基吡啶(5g，35.2mmol，1.0当量)和4-(二甲氧基甲基)哌啶(6.7g，42.2mmol，1.2当量)的二甲基亚砜(60mL)溶液中加入DIEA(12.3mL，70.4mmol，2.0当量)。反应混合物在80℃下搅拌12小时。反应完全后，反应液用100mL水稀释，并用乙酸乙酯(100mL×3)萃取。有机层依次用饱和食盐水(100mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，8.1g，产率82％)。
步骤B：6-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)吡啶-3-胺
在室温下，向2-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-5-硝基吡啶(2.5g，8.9mmol，1.0当量)的乙醇(40mL)溶液中加入10％Pd/C(0.3g)。反应混合物在室温下搅拌16小时。反应完全后，通过硅藻土过滤，滤液减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.8g，产率81％)。
步骤C：3-((6-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)吡啶-3-基)氨基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向6-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)吡啶-3-胺(1.8g，7.2mmol，1.0当量)和3-溴哌啶-2,6-二酮(1.7g，8.6mmol，1.2当量)的二氧六环(25mL)溶液中加入DIEA(1.9g，14.3mmol，2.0当量)。反应混合物在80℃下搅拌12小时。反应完全后，反应液用100mL水稀释，并用乙酸乙酯(100mL×3)萃取。有机层依次用饱和食盐水(100mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.2g，收率46％)
步骤D：1-(5-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-4-甲醛
在室温下，将3-((6-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)吡啶-3-基)氨基)哌啶-2,6-二酮(200mg，0.6mmol，1.0当量)加入甲酸(5mL)溶液中，反应混合物在室温下搅拌1小时。反应完全后，将反应液减压浓缩得到标题化合物(绿色油状物，170mg，粗品)。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-((1-(5-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，将1-(5-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-4-甲醛(170mg，粗品)和N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(247mg，0.5mmol，1.0当量)加入DMF(5mL)溶液中，然后反应液在室温下搅拌30分钟。将NaBH(OAc)3(456mg，2.1mmol，4.0当量)加入上述反应液中。反应混合物在室温下搅拌1小时。反应完全后，反应液用100mL水稀释，并用乙酸乙酯(30mL×3)萃取。有机层依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，59.6mg，收率15％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.76(s,1H),8.90-8.85(m,1H),8.46-8.37(m,2H),8.21(d,J＝6.8Hz,1H),7.95(s,1H),7.79(d,J＝9.0Hz,2H),7.74-7.65(m,2H),7.11-7.01(m,3H),6.68(d,J＝9.1Hz,1H),5.36(d,J＝7.4Hz,1H),4.33-3.95(m,3H),3.25-3.19(m,4H),2.81-2.55(m,5H),2.54-2.52(m,2H),2.24-2.19(m,2H),2.14-2.08(m,1H),1.88-1.70(m,4H),1.25-1.06(m,3H).LC-MS(ESI):m/z 760[M+H]+.
制备例402.化合物A397的合成
步骤A：1-(4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
向4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯甲酸(600mg，2.5mmol，1.0当量)的DMF(10mL)溶液中加入4-(二甲氧基甲基)哌啶(489mg，3.1mmol，1.2当量)，HOBT(692mg，5.0mmol， 2.0当量)，EDCI(982mg，5.0mmol，2.0当量)和DIEA(1.3mL，7.5mmol，3.0当量)。反应混合物在氮气气氛下室温搅拌16小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，300mg，产率31％)。
步骤B：1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯甲酰基)哌啶-4-甲醛
将1-(4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-羰基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(100mg，0.27mmol，1.0当量)加入甲酸(5mL)溶液中然后室温搅拌1小时。反应完全后，反应液减压浓缩得到标题化合物(白色固体，85mg，粗品)。
步骤C：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-((1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯甲酰基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯甲酰基)哌啶-4-甲醛(114mg，粗品)的DMF(10mL)溶液中加入醋酸(32mg，0.17mmol，0.5当量)，N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(167mg，0.36mmol，1.0当量)，反应液搅拌1小时。然后将NaBH(OAc)3(216mg，0.69mmol，2.0当量)加入到上述反应液中。反应混合物在室温条件下20分钟。反应完全后，将所得反应液经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，30mg，收率11％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.43(s,1H),8.87(s,1H),8.48-8.34(m,2H),8.21(d,J＝7.6Hz,1H),7.94(s,1H),7.78(d,J＝9.0Hz,2H),7.71(s,1H),7.40(s,4H),7.07(d,J＝9.1Hz,2H),3.87-3.80(m,2H),3.31-3.28(m,2H),3.24-3.15(m,4H),3.14-2.74(m,2H),2.74-2.69(m,2H),2.27-2.19(m,2H),2.08-2.06(m,4H),1.91-1.68(m,3H),1.17-1.03(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 773[M+H]+.
制备例403.化合物A398的合成
步骤A：2,2-二甲氧基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸苄酯
在室温下，向2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸苄酯(1g，3.66mmol，1.0当量)的甲醇(5mL)溶液中加入原甲酸三甲酯(10mL)、对甲苯磺酸(35mg，0.183mmol，0.05当量)。反应液在65℃下搅拌过夜。反应完全后，将反应液浓缩，然后用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到标题化合物(无色油状，1.16g，粗品)， 无需纯化直接用于下一步。
步骤B：2,2-二甲氧基-7-氮杂螺[3.5]壬烷
在室温下，向2,2-二甲氧基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸苄酯(1.16g，3.66mmol，1.0当量)的甲醇(4mL)溶液中加入10％湿钯碳(110mg)。反应液氢气氛围下室温搅拌1小时。反应完全后，反应液用布氏漏斗过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物(白色固体，600mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：1-(4-(2,2-二甲氧基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在室温下，向2,2-二甲氧基-7-氮杂螺[3.5]壬烷(600mg，3.24mmol，1.0当量)和1-(4-溴苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(870mg，3.24mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(15mL)溶液中加入Pd-PEPPSI-IPentCl(158mg，0.162mmol，0.05当量)和碳酸铯(2.1g，6.48mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下120℃搅拌过夜。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经色谱柱纯化得到标题化合物(黄色固体，70mg，产率6％)。
步骤D：1-(4-(2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在室温下，向1-(4-(2,2-二甲氧基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(70mg，0.188mmol，1.0当量)中加入甲酸(7mL)。反应液在50℃搅拌反应2小时。反应完全后，将反应液减压浓缩得到标题化合物(黄色油状，60mg，产率98％)。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(7-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向1-(4-(2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(60mg，0.183mmol，1.0当量)和N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(84mg，0.183mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(6mL)溶液中然后加入醋酸(0.12mL，2.09mmol，11.0当量)并搅拌1小时。然后向反应液中加入三乙酰氧基硼氢化钠(78mg，0.366mmol，2.0当量)并在50℃下搅拌2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，5.5mg，产率4％)。LC-MS(ESI):m/z 771[M+H]+.1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),10.26(s,1H),8.88(s,1H),8.47-8.37(m,2H),8.21(d,J＝7.6Hz,1H),7.95(s,1H),7.79(d,J＝9.0Hz,2H),7.71(s,1H),7.13(d,J＝8.9Hz,2H),7.08(d,J＝9.2Hz,2H),6.93(d,J＝9.0Hz,2H),3.69(t,J＝6.7Hz,2H),3.22(s,4H),3.14(s,2H),3.06(s,2H),2.78-2.72(m,1H),2.68(t,J＝6.7Hz,2H),2.41(s,4H),2.04-1.97(m, 2H),1.68-1.58(m,6H).
制备例404.化合物A399的合成
步骤A：2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-酮
在室温下，向7-氧代-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(1.0g，4.2mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入盐酸二氧六环溶液(4.0M，10.5mL，42mmol，10当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌2小时。反应完全后，将反应液减压浓缩得到标题化合物(白色固体，580mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤B：7-氧代-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸苄酯
在0℃下，向2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-酮(580mg，4.17mmol，1.0当量)的四氢呋喃(12mL)和水(4mL)的混合溶液中依次加入碳酸钠(883mg，8.34mmol，2.0当量)和N-(苄氧羰基氧基)琥珀酰亚胺(1.1g，4.59mmol，1.1当量)。反应液在室温下搅拌16小时。反应完全后，反应液加入水稀释，用乙酸乙酯萃取三次，合并有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1.0g，产率88％)。
步骤C：7-(甲氧基亚甲基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸苄酯
0℃下，在(甲氧基甲基)三苯基氯化膦(3.7g，10.9mmol，3.0当量)的四氢呋喃(30mL)溶液中加入叔丁醇钾(1.2g，10.9mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下搅拌1小时。然后0℃下加入7-氧代-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸苄酯(1.0g，3.7mmol，1.0当量)的四氢呋喃(10mL)溶液，室温搅拌过夜。反应完全后，0℃下反应液加入饱和氯化铵水溶液淬灭，用乙酸乙酯萃取三次，合并有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1.0g，产率91％)。
步骤D：7-(二甲氧基甲基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸苄酯
将7-(甲氧基亚甲基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸苄酯(1.0g，3.3mmol，1.0当量)和甲酸(12.7g，66.3mmol，20.0当量)的混合物在室温下搅拌2小时，然后减压浓缩除去反应混合物中的甲酸。粗品溶解在甲醇(20mL)中，加入三甲氧基甲烷(0.5mL，4.9mmol，1.5当量)和4-甲基苯磺酸(0.06g，0.3mmol，0.1当量)。用氮气吹扫反应混合物三次，然后在氮 气保护下室温搅拌过夜。反应完全后，反应液加入水淬灭，用乙酸乙酯萃取三次，合并有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1.0g，产率90％)。
步骤E：7-(二甲氧基甲基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷
在室温下，向含有7-(二甲氧基甲基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸苄酯(1.0g，3.0mmol，1.0当量)的甲醇(20mL)溶液中加入10％湿钯碳(0.2g)，反应体系用氢气置换三次。混合物在氢气氛围下室温搅拌2小时。反应完全后，过滤反应混合物并减压浓缩，得到标题化合物(白色固体，500mg，粗品)，无需进一步纯化即可直接使用。
步骤F：1-(4-(7-(二甲氧基甲基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮
在室温下，向7-(二甲氧基甲基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷(500mg，2.5mmol，1.0当量)和1-(4-溴苯基)二氢嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(506mg，1.9mmol，0.75当量)的1,4-二氧六环(10mL)溶液中，加入(SP-4-1)-[1,3-双[2,6-双(1-丙基丁基)苯基]-4,5-二氯-1,3-二氢-2H-咪唑-2-亚基]二氯(3-氯吡啶-κN)-钯(122mg，0.1mmol，0.05当量)和碳酸铯(2.5g，7.5mmol，3.0当量)。反应体系用氮气置换三次，然后在氮气保护下加热至110℃搅拌16个小时。反应完全后，冷却至室温，反应液加入水淬灭之后用乙酸乙酯萃取三次，合并有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，500mg，产率51％)。
步骤G：2-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲醛
将1-(4-(7-(二甲氧基甲基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H，3H)-二酮(500mg，1.3mmol，1.0当量)的甲酸(10mL)溶液在50℃下搅拌2小时。反应完全后，将混合物减压浓缩得到标题化合物(无色油状物，500mg，粗品)，无需进一步纯化即可直接使用。
步骤H：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-((2-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下向2-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲醛(220mg，0.6mmol，1.0当量)和N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(296mg，0.6mol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入醋酸(24mg，0.1mmol，0.2当量)。反应体系在室温下搅拌1小时后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(272mg，1.3mmol，2.0当量)，然后继续搅拌1小时。反应完全后，反应液加入饱和氯化铵水溶液， 用二氯甲烷萃取三次，合并有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，25.8mg，产率5％)。LC-MS(ESI):m/z 785.5[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.70(s,1H),10.13(s,1H),8.79(s,1H),8.37-8.28(m,2H),8.12(d,J＝7.6Hz,1H),7.85(s,1H),7.73-7.59(m,3H),6.99(d,J＝8.6Hz,4H),6.30(d,J＝8.7Hz,2H),3.57(t,J＝6.7Hz,2H),3.41(d,J＝21.1Hz,4H),3.23-3.18(m,4H),3.11(s,4H),2.58(t,J＝6.7Hz,2H),2.06(s,2H),1.80(d,J＝12.6Hz,2H),1.63(d,J＝11.6Hz,2H),1.48-1.34(m,3H),0.94-0.79(m,2H).
制备例405.化合物A400的合成
步骤A：1-(4-溴苯基)-3-(4-甲氧基苄基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在室温下，向1-(4-溴苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(500mg，1.86mmol，1.0当量)和Cs2CO3(726mg，2.23mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)混合物中加入1-氯甲基-4-甲氧基苯(378mg，2.42mmol，1.3当量)。反应液室温搅拌过夜。反应完成后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，600mg，产率82％)。
步骤B：7-(叔丁基)2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)7-氮杂螺[3.5]壬烷-2,7-二甲酸酯
在室温下，向二氯甲烷(20mL)中加入N-羟基邻苯二甲酰亚胺(670mg，4.08mmol，1.1当量)，DCC(840mg，4.08mmol，1.1当量)和DMAP(50mg，0.37mmol，0.1当量)。将反应液降温至0℃后加入7-(叔丁氧羰基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸(1.0g，3.71mmol，1.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌过夜。反应完成后，将反应液用二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，700mg，产率45％)。
步骤C：2-(4-(3-(4-甲氧基苄基)-2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯
在室温下，向1-(4-溴苯基)-3-(4-甲氧基苄基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(500mg，1.28mmol，1.0当量)和7-(叔丁基)2-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)7-氮杂螺[3.5]壬烷-2,7-二甲酸酯 (700mg，1.93mmol，1.5当量)的N,N-二甲基乙酰胺(15mL)溶液中加入2,6-二甲基-1,4-二乙基二氢吡啶-3,5-二甲酸酯(HE，650mg，2.57mmol，2.0当量)，NiBr2-dtbbpy(125mg，0.26mmol，0.2当量)和NaHCO3(215mg，2.57mmol，2.0当量)。反应液氮气保护下在18W390nm光照下室温搅拌4小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经反相柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，200mg，产率29％)。
步骤D：1-(4-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在室温下，向2-(4-(3-(4-甲氧基苄基)-2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(200mg，0.37mmol)的三氟乙酸(5mL)中加入三氟甲磺酸(0.5mL)。反应液加热至60℃搅拌3小时。反应液通过减压浓缩后，残余物用饱和的NaHCO3溶液调节pH到7到8，经冻干后得到标题化合物(黄色固体，200mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(2-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羰基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向1-(4-(7-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(200mg，0.20mmol，2.0当量)和4-硝基苯基4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸酯(60mg，0.10mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中加入DIEA(24mg，0.19mmol，2.0当量)和DMAP(1mg，0.01mmol，0.1当量)。反应液在氮气保护下60℃搅拌16小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，21.9mg，产率28％)。LC-MS(ESI):m/z 799[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.33(s,1H),8.90(s,1H),8.46-8.38(m,2H),8.21(dd,J＝7.6,1.1Hz,1H),7.96(s,1H),7.82(d,J＝9.1Hz,2H),7.71(s,1H),7.25(s,4H),7.11(d,J＝9.2Hz,2H),3.76(t,J＝6.7Hz,2H),3.58-3.49(m,1H),3.29(d,J＝3.6Hz,4H),3.23(s,6H),3.10(s,2H),2.70(t,J＝6.7Hz,2H),2.27(t,J＝10.2Hz,2H),1.85(t,J＝10.5Hz,2H),1.71(s,2H),1.53(s,2H).
制备例406.化合物A401的合成
步骤A：7-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-2-氮杂螺[3.5]壬-6-烯-2-甲酸叔丁酯
在-60℃、氮气气氛下，向7-氧代-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(2g，8.35mmol，1.0当量)的THF(20mL)溶液中加入双(三甲基硅基)氮化锂(10mL，10.03mmol，1M在THF中，1.2当量)。反应混合物在此条件下搅拌30分钟后，往反应混合物中加入1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲磺酰胺(3.6g，10.03mmol，1.2当量)。然后反应液在氮气气氛下室温搅拌2小时。反应完全后，加入饱和氯化铵水溶液淬灭，然后用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(无色油状物，2.5g，产率80％)。
步骤B：7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-2-氮杂螺[3.5]壬-6-烯-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向7-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-2-氮杂螺[3.5]壬-6-烯-2-甲酸叔丁酯(2.5g，6.73mmol，1.0当量)的DMF(20mL)溶液中加入醋酸钾(1.3g，13.46mmol，2.0当量)，4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼烷(2.1g，8.07mmol，1.2当量)和Pd(dppf)Cl2(0.5g，0.67mmol，0.1当量)。反应液在氮气气氛下70℃搅拌4小时。反应完全后，加入饱和氯化铵水溶液淬灭，然后用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，2g，产率85％)。
步骤C：7-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-2-氮杂螺[3.5]壬-6-烯-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-2-氮杂螺[3.5]壬-6-烯-2-甲酸叔丁酯(2g，5.72mmol，1.0当量)的二氧六环(20mL)和水(2mL)混合溶液中加入1-(4-溴苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(1.5g，5.72mmol，1.0当量)，Pd(dppf)Cl2(0.4g，0.57mmol，0.1当量)和K3PO4(2.4g，11.45mmol，2.0当量)。反应混合物在氮气气氛下脱气三次， 然后在氮气气氛下100℃搅拌4小时。反应完全后，将反应液冷却至室温后用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1.2g，产率51％)。
步骤D：7-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯
在室温下，向7-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-2-氮杂螺[3.5]壬-6-烯-2-甲酸叔丁酯(1.2g，2.91mmol，1.0当量)的THF(20mL)溶液中加入10％的Pd/C(0.2g)。反应混合物在氢气气氛下室温搅拌12小时。反应完全后，将反应混合物通过硅藻土过滤，收集滤液，减压浓缩得到标题化合物(白色固体，1g，粗品)。
步骤E：1-(4-(2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在室温下，向7-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(300mg，粗品)的二氯甲烷(6mL)溶液中加入三氟乙酸(2mL)。反应液在室温下搅拌2小时。反应完全后，将反应液减压浓缩得到标题化合物(白色固体，200mg，粗品)。
步骤F：4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸4-硝基苯基酯
在室温下，向N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(300mg，0.65mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入DIEA(253mg，1.95mmol，3.0当量)和4-硝基苯基氯甲酸酯(393mg，1.95mmol，3.0当量)。反应混合物在室温下搅拌1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，350mg，产率86％)。
步骤G：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(7-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-羰基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温，向1-(4-(2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(180mg，粗品)和4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸4-硝基苯基酯(359mg，0.57mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入DIEA(222mg，1.72mmol，3.0当量)。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，72.6mg，产率16％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.33(s,1H),8.90(s,1H),8.43(d,J＝12.5Hz,2H),8.22(d,J＝6.6Hz,1H),7.96(s,1H),7.86-7.68(m,3H),7.24(s,4H),7.10(d,J＝7.7Hz,2H),3.76(s,4H),3.62(s,2H),3.42(s,2H),3.21(s,4H),2.89(s,1H),2.71(d,J＝16.0Hz,3H),1.94(d,J＝10.2Hz,2H),1.71(s,2H),1.50(dd,J＝36.8,12.5Hz,4H),1.23(s, 1H).LC-MS(ESI):m/z 799[M+H]+.
制备例407.化合物A402的合成
步骤A：3-((2-氟-5-(甲氧羰基)苯基)氨基)丙酸
在室温下，将3-氨基-4-氟苯甲酸甲酯(5g，29.5mmol，1.0当量)和丙烯酸(2.13g，29.5mmol，1.0当量)加入水(20mL)和醋酸(4mL)溶液中。反应液在氮气气氛下120℃搅拌16小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，2.5g，产率35％)。
步骤B：3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-氟苯甲酸甲酯
在室温下，将3-((2-氟-5-(甲氧羰基)苯基)氨基)丙酸(2g，8.3mmol，1.0当量)和脲(4.02g，16.6mmol，2.0当量)加入醋酸(20mL)溶液中。反应液在氮气气氛下120℃搅拌16小时。反应完全后，将反应液减压浓缩，残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，600mg，收率27％)。
步骤C：3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-氟苯甲酸
在室温下，向3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-氟苯甲酸甲酯(600mg，2.25mmol，1.0当量)的甲醇(20mL)和四氢呋喃(20mL)溶液中，加入氢氧化钠(450mg，11.3mmol，5.0当量)在水(4mL)中的混合物。反应液在氮气气氛下室温搅拌1小时。反应完全后所得混合物在真空下浓缩。残余物用1N盐酸溶液处理，加入乙酸乙酯萃取得到的混合物。有机相拥无水硫酸钠干燥，过滤后，减压浓缩滤液。残余物加入盐酸水溶液(20mL，4N)，所得混合物在100℃下搅拌1小时。反应完全后，冷却至室温加入20mL冰水稀释，析出固体，过滤收集沉淀的固体，并用二乙醚洗涤，浓缩得到标题化合物(黄色固体，150mg，产率26％)。
步骤D：4-(2-(4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶 酰胺(500mg，1.1mmol，1.0当量)的DMF(10mL)溶液中，加入4-(2-溴乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(318mg，1.1mmol，1.当量)，醋酸(6mg，0.11mmol，0.1当量)。反应液在室温下搅拌30分钟，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(344mg，1.7mmol，1.5当量)。反应混合物在室温下搅拌12小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，400mg，产率55％)。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(2-(哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向4-(2-(4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(400mg，0.6mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入三氟乙酸(2mL)。反应混合物在室温下搅拌1小时。反应完全后，将反应液浓缩得到标题化合物(黄色油状物，320mg，粗品)。
步骤F：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(2-(1-(3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-氟苯甲酰基)哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺三氟乙酸盐
在室温下，向3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-氟苯甲酸(150mg，0.6mmol，1.0当量)的DMF(4mL)溶液中，加入N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(2-(哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(320mg，粗品)，HATU(452mg，1.2mmol，2.0当量)和DIEA(154mg，1.2mmol，2.0当量)。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，35mg，产率7％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),10.54(s,1H),9.56(s,1H),8.93(s,1H),8.42(dt,J＝15.4,7.6Hz,2H),8.22(d,J＝7.5Hz,1H),7.95(s,1H),7.87(d,J＝9.0Hz,2H),7.75(s,1H),7.51(d,J＝7.5Hz,1H),7.40(d,J＝8.1Hz,2H),7.18(d,J＝9.2Hz,2H),4.45(s,1H),3.96(d,J＝12.6Hz,3H),3.84(s,1H),3.76(t,J＝6.6Hz,3H),3.62(d,J＝10.9Hz,3H),3.11(dd,J＝41.4,11.4Hz,5H),2.74(t,J＝6.6Hz,2H),1.76(s,1H),1.67(s,4H),1.18(d,J＝13.3Hz,2H).LC-MS(ESI):m/z 805[M+H]+.
制备例408.化合物A403的合成
步骤A：3-甲酰基氮杂环丁烷-1-甲酸苄酯
在0℃下，向3-(羟甲基)氮杂环丁烷-1-甲酸苄基酯(2g，9.04mmol，1.0当量)的二氯甲烷(30mL)溶液中，分批加入Dess-Martin(5.8g，13.56mmol，1.5当量)。反应混合物在氮气气氛下室温搅拌2小时。反应完全后，加入水淬灭反应混合物，然后用二氯甲烷萃取。合并的有机层依次用饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(无色油状物，1.65g，产率83％)。
步骤B：3-(二甲氧基甲基)氮杂环丁烷-1-甲酸苄酯
在0℃、氮气气氛下，向3-甲酰基氮杂环丁烷-1-甲酸苄酯(1.65g，7.53mmol，1.0当量)的甲醇(20mL)溶液中加入三甲氧基甲烷(4.1mL，37.63mmol，5.0当量)，对甲苯磺酸(130mg，0.75mmol，0.1当量)。反应混合物在氮气气氛下室温搅拌4小时。反应完全后，加入水淬灭反应混合物，然后用二氯甲烷萃取。合并的有机层依次用饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(无色油状物，1.6g，产率80％)。
步骤C：3-(二甲氧基甲基)氮杂环丁烷
在室温下，向3-(二甲氧基甲基)氮杂环丁烷-1-甲酸苄酯(1.6g，6.03mmol，1.0当量)的四氢呋喃(20mL)溶液中加入10％Pd/C(0.6g)。反应混合物氢气气氛下室温搅拌2小时。反应完全后，反应混合物经硅藻土过滤，减压浓缩滤液得到标题化合物(黄色油状物，700mg，粗品)，直接用于下一步，无需进一步纯化。
步骤D：1-(4-(3-(二甲氧基甲基)氮杂环丁烷-1-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在室温下，向1-(4-溴苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(130mg，0.48mmol，1.0当量)的二氧六环(4mL)溶液中加入3-(二甲氧基甲基)氮杂环丁烷(95mg，粗品)，Cs2CO3(315mg，0.97mmol，2.0当量)和Pd-PEPPSI-IpentCl(47mg，0.05mmol，0.1当量)。反应混合物在氮气气氛下脱气三次，然后在氮气气氛下100℃搅拌18小时。反应完全后，反应液 冷却至室温后，将反应混合物倒入饱和氯化铵水溶液中，并用乙酸乙酯萃取。有机层依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，90mg，产率58％)。
步骤E：1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)氮杂环丁烷-3-甲醛
将1-(4-(3-(二甲氧基甲基)氮杂环丁烷-1-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(90mg，0.28mmol，1.0当量)加入甲酸(4mL)溶液中，然后反应液在60℃下搅拌1小时。减压浓缩混合物，得到标题化合物(黄色油状物，70mg，粗品)，直接用于下一步，无需进一步纯化。
步骤F：N-(3-氨基甲酰基-1-((1r,4r)-4-(4-((1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)氮杂环丁烷-3-基)甲基)哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)氮杂环丁烷-3-甲醛(70mg，粗品)的DMF(5mL)溶液中加入N-(3-氨基甲酰基-1-((1r、4r)-4-(哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺盐酸盐(119mg，0.26mmol，1.0当量)，三乙胺(0.1mL)，并将反应混合物在室温下搅拌15分钟。然后向上述混合物中加入AcOH(0.4mL)，混合物在室温下搅拌过夜。之后加入NaBH(OAc)3(29mg，0.77mmol，3.0当量)，所得混合物在室温下搅拌2小时。反应完全后加入饱和氯化铵水溶液淬灭反应，用乙酸乙酯和四氢呋喃的混合溶剂(1:1)萃取。有机层经无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，27.0mg，产率14％)。1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.46-8.42(m,2H),8.40(s,1H),8.28(t,J＝7.8Hz,1H),8.03(d,J＝7.8Hz,1H),7.14(d,J＝8.8Hz,2H),6.50(d,J＝8.8Hz,2H),4.84-4.82(m,1H),4.35-4.26(m,1H),4.02(t,J＝7.4Hz,2H),3.77(t,J＝6.8Hz,2H),3.59-3.53(m,2H),3.33-3.32(m,1H),3.11-2.90(m,6H),2.85(d,J＝7.2Hz,2H),2.79(t,J＝6.8Hz,4H),2.34-2.21(m,4H),2.05-1.94(m,2H),1.71-1.61(m,2H).LC-MS(ESI):m/z723[M+H]+.
制备例409.化合物A404的合成
步骤A：2,6-双(苄氧基)-3-(4-溴-2,6-二氟苯基)吡啶
在室温下，向2,6-双(苄氧基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)吡啶(5g，11.98mmol，1.0当量)和5-溴-1,3-二氟-2-碘苯(4.6g，14.38mmol，1.2当量)的1,4-二氧六环(50mL)和水(10mL)中加入碳酸钾(3.3g，23.96mmol，2.0当量)和Pd(dppf)Cl2(880mg，1.20mmol，0.1当量)。然后反应液在氮气气氛下脱气三次后加热至回流搅拌5小时。反应完全后，反应液冷却至室温，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，2.749g，产率48％)。
步骤B：1-(4-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3,5-二氟苯基)氮杂环丁烷-3-甲酸叔丁酯
在室温下，向2,6-双(苄氧基)-3-(4-溴-2,6-二氟苯基)吡啶(220mg，0.46mmol，1.0当量)和氮杂环丁烷-3-甲酸叔丁酯盐酸盐(72mg，0.46mmol，1.0当量)的1,4-二氧六环(5mL)和甲苯(3mL)中加入Cs2CO3(300mg，0.91mmol，2.0当量)和Ruphos Pd G3(38mg，0.05mmol，0.1当量)。反应液在氮气气氛下脱气三次后，加热到100℃搅拌5小时。反应完全后，反应液冷却至室温，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，170mg，产率67％)。
步骤C：1-(4-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3,5-二氟苯基)氮杂环丁烷-3-甲酸叔丁酯
在室温下，向1-(4-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3,5-二氟苯基)氮杂环丁烷-3-甲酸叔丁酯(170mg，0.304mmol，1.0当量)的乙醇(5mL)中的溶液中加入10％的Pd/C(50mg)和10％Pd(OH)2/C(50mg)。反应混合物在氢气气氛下脱气三次后室温搅拌12小时。反应完全后，反应液经硅藻土过滤后，减压浓缩滤液得到标题化合物(黄色固体，83mg，粗品)，直接使用，无需进一步纯化。
步骤D：1-(4-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3,5-二氟苯基)氮杂环丁烷-3-甲酸
在室温下，向1-(4-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3,5-二氟苯基)氮杂环丁烷-3-甲酸叔丁酯(83mg，粗品)的二氯甲烷(1mL)溶液中加入三氟乙酸(0.5mL)。反应混合物在室温下搅拌2小时。反应完全后，将反应液减压浓缩。残余物加入乙酸乙酯稀释，依次用饱和碳酸氢钠、水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到标题化合物(无色油状物，65mg，粗品)，直接使用，无需进一步纯化。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-((1r,4r)-4-(4-(1-(4-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3,5-二氟苯基)氮杂环丁烷-3-甲酰基)哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向1-(4-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3,5-二氟苯基)氮杂环丁烷-3-甲酸(65mg，粗品)的DMF(1mL)溶液中加入N-(3-氨基甲酰基-1-((1r,4r)-4-(哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4- 基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺盐酸盐(121mg，0.26mmol，1.3当量)，NMM(81mg，0.80mmol，4.0当量)和HATU(114mg，0.30mmol，1.5当量)。反应混合物在室温下搅拌2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，25mg，三步产率16％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(s,1H),10.86(s,1H),8.46-8.33(m,3H),8.18(d,J＝7.4Hz,1H),7.65(s,1H),7.54(s,1H),6.16(d,J＝11.2Hz,2H),4.23(t,J＝7.2Hz,1H),4.10-3.98(m,4H),3.91(d,J＝6.5Hz,2H),3.83(d,J＝7.7Hz,1H),3.46(s,4H),3.30(s,2H),2.81-2.74(m,1H),2.44-2.41(m,2H),2.18-2.01(m,4H),1.98-1.79(m,5H),1.48-1.40(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 772[M+H]+.
制备例410.化合物A405的合成
步骤A：(4-(3-氧环丁基)苯基)氨基甲酸苄酯
室温下，向(4-溴苯基)氨基甲酸苄酯(700mg，2.3mmol，1.0当量)和3-氧环丁烷-1-甲酸(521.8mg，4.6mmol，2.0当量)的N,N-二甲基乙酰胺(18.0mL)溶液中加入NiCl2·dtbbpy(91.00mg，0.23mmol，0.1当量)，碳酸铯(1.1g，3.4mmol，1.5当量)，邻苯二甲酰亚胺(403.7mg，2.7mmol，1.15当量)和[Ir(dtbbpy)[dF(CF3)ppy]2]PF6(256.5mg，0.23mmol，0.1当量)。反应混合物在450nm LEDs光照下室温搅拌18小时。反应完毕后，反应液乙酸乙酯稀释，食盐水洗涤。水层乙酸乙酯萃取。联合有机相，干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，500mg，产率74％)。
步骤B：(4-(3,3-二甲氧基环丁基)苯基)氨基甲酸苄酯
室温下，向(4-(3-氧环丁基)苯基)氨基甲酸苄酯(600mg，2.0mmol，1.0当量)的甲醇(10.0mL)溶液中加入原甲酸三甲酯(0.4mL，4.0mmol，2.0当量)和对甲苯磺酸(38.6mg，0.2mmol，0.1当量)。反应混合物室温搅拌2小时。反应完毕后，反应液用水稀释，乙酸乙酯萃取。有机相无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄 色固体，300mg，产率43％)。
步骤C：4-(3,3-二甲氧基环丁基)苯胺
室温下，向(4-(3,3-二甲氧基环丁基)苯基)氨基甲酸苄酯(350mg，1.0mmol，1.0当量)的甲醇(5.0mL)溶液中加入10％钯碳(50mg)。反应混合物在氢气氛围中室温搅拌2小时。反应完毕后，反应液过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物(黄色油状物，150mg，粗品)，未经进一步纯化。
步骤D：3-(4-(3,3-二甲氧基环丁基苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮
室温下，向4-(3,3-二甲氧基环丁基)苯胺(212mg，1.0mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入碳酸氢钠(171.9mg，2.0mmol，1.0当量)和3-溴哌啶-2,6-二酮(392.8mg，2.0mmol，1.0当量)。反应混合物氮气保护下在80℃搅拌16小时。反应完毕后，冷却到室温，加水稀释，乙酸乙酯萃取。有机相食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，160mg，产率49％)。
步骤E：3-(4-(3-氧环丁基苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮
3-(4-(3,3-二甲氧基环丁基苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(80mg，0.3mmol，1.0当量)的甲酸(4.0mL)溶液氮气保护下在60℃搅拌1小时。反应完毕后，冷却到室温。反应液减压浓缩得到标题化合物(黄色油状物，50mg，产率73％)。
步骤F：N-(3-氨甲酰基-1-(1r,4r)-4-(4-(3-(4-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)苯基)环丁基)哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
室温下，向3-(4-(3-氧环丁基苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(29.3mg，0.11mmol，1.0当量)和N-(3-氨甲酰基-1-((1r,4r)-4-(哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺盐酸盐(50mg，0.11mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)溶液中加入三乙胺(0.1mL)。反应混合物搅拌15分钟。接着醋酸(0.44mL)加入，反应混合物室温搅拌过夜。三乙酰氧基硼氢化钠(68mg，0.32mmol，3.0当量)加入，反应混合物继续搅拌2小时。反应完毕后，反应混合物用饱和氯化铵水溶液稀释，乙酸乙酯萃取。有机相干燥，过滤，浓缩。残余物乙酸乙酯和四氢呋喃混合溶剂萃取。有机相干燥，过滤，减压浓缩。残余物经制备纯化得到标题化合物(灰色固体，32.5mg，产率42％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.72(s,1H),10.77(s,1H),8.46(s,1H),8.43-8.35(m,2H),8.23-8.15(m,1H),7.59(d,J＝8.0Hz,2H),7.02(d,J＝8.4Hz,2H),6.64(d,J＝8.4Hz,2H),4.36-4.25(m,2H),3.41-3.28(m,6H),3.09-2.86(m,4H),2.82-2.70(m,2H),2.61-2.54(m,2H),2.30-1.98(m,8H),1.94-1.80(m,3H),1.66-1.49(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 722[M+H]+.
制备例411.化合物A406的合成
步骤A：3,3-二甲氧基吡咯烷-1-甲酸苄酯
在0℃氮气气氛下，向3-氧代吡咯烷-1-甲酸苄酯(1.5g，6.84mmol，1.0当量)的甲醇(20mL)溶液中，分批次加入PPTS(170mg，0.68mmol，0.1当量)。反应混合物在氮气气氛下50℃下搅拌过夜。反应完全后，反应液冷却至室温后，用二氯甲烷稀释反应混合物，依次用饱和碳酸氢钠水溶液和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(无色油状物，1.8g，产率99％)。
步骤B：3,3-二甲氧基吡咯烷
在室温下，向3,3-二甲氧基吡咯烷-1-甲酸苄酯(1.8g，6.79mmol，1.0当量)的四氢呋喃(30mL)溶液中加入10％的Pd/C(300mg)。反应液在氢气气氛下脱气三次，然后在室温下搅拌2小时。反应完全后，反应液经硅藻土过滤，减压浓缩滤液得到标题化合物(无色油状物，800mg，粗品)，直接用于下一步，无需进一步纯化。
步骤C：1-(4-(3,3-二甲氧基吡咯烷-1-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在室温下，向3,3-二甲氧基吡咯烷(200mg，粗品)的二氧六环(4mL)溶液中加入1-(4-溴苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(200mg，0.75mmol，1.0当量)，Cs2CO3(484mg，1.49mmol，2.0当量)和Pd-PEPPSI-IpentCl(72mg，0.07mmol，0.1当量)。反应液在氮气气氛下脱气三次后升至100℃搅拌过夜。反应完全后，反应液冷却至室温，将反应混合物倒入饱和氯化铵水溶液中，加入乙酸乙酯萃取，有机层依次用饱和食盐水和水洗涤，无水硫酸钠干燥。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(棕色固体，140mg，产率59％)。
步骤D：1-(4-(3-氧代吡咯烷-1-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在室温下，向1-(4-(3,3-二甲氧基吡咯烷-1-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(80mg，0.25mmol，1.0当量)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入甲酸(2mL)。所得混合物在室温下搅拌30分钟。反应完全后，反应液减压浓缩得到标题化合物(棕色固体，140mg，粗品)，直接 用于下一步，无需进一步纯化。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-((1r,4r)-4-(4-(1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)吡咯烷-3-基)哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向1-(4-(3-氧代吡咯烷-1-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(80mg，粗品)的四氢呋喃(10mL)溶液中加入N-(3-氨基甲酰基-1-((1r,4r)-4-(哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺盐酸盐(136mg，0.29mmol，1.0当量)，DIEA(0.2mL)并将反应混合物在氮气气氛下室温搅拌5分钟。然后向上述混合物中加入醋酸(0.5mL)和NaBH3CN(74mg，1.17mmol，4.0当量)，继续在该条件下搅拌过夜。反应完全后，反应液加入水淬灭，用乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，24.5mg，产率12％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.72(s,1H),10.22(s,1H),9.35(s,0.5H),8.47(s,1H),8.44-8.35(m,2H),8.20(dd,J＝7.3,1.3Hz,1H),7.61(s,1H),7.58(s,1H),7.12(d,J＝8.6Hz,2H),6.57(d,J＝8.6Hz,2H),4.39-4.29(m,1H),3.68(t,J＝6.7Hz,2H),3.45-3.36(m,6H),3.29-3.21(m,3H),3.20-3.02(m,5H),2.68(t,J＝6.7Hz,2H),2.31-2.16(m,5H),1.98-1.85(m,3H),1.73-1.58(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 723[M+H]+.
制备例412.化合物A407的合成
步骤A：1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)吡咯烷-3-甲酸叔丁酯
将1-(4-溴苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(250mg，0.93mmol，1.0当量)，吡咯烷-3-甲酸叔丁酯(239mg，1.40mmol，1.5当量)，Cs2CO3(605mg，1.86mmol，2.0当量)和Pd-PEPPSI-IpentCl(90mg，0.09mmol，0.1当量)加入二氧六环(6mL)溶液中，反应液在氮气气氛下脱气三次，然后在此条件下100℃搅拌过夜。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，223mg，产率67％)。
步骤B：1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)吡咯烷-3-甲酸
在室温下，向1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)吡咯烷-3-甲酸叔丁酯(60mg， 0.17mmol，1.0当量)的DCM(1mL)溶液中加入三氟乙酸(2mL)。反应混合物在室温下搅拌1小时。减压浓缩反应混合物，得到1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)吡咯烷-3-甲酸(黄色油状物，52mg，粗品)。粗产物直接用于下一步，无需进一步纯化。
步骤C：N-(3-氨基甲酰基-1-((1r,4r)-4-(4-(1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)吡咯烷-3-羰基)哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)吡咯烷-3-甲酸(50mg，粗品)和N-(3-氨基甲酰基-1-((1r,4r)-4-(哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺盐酸盐(77mg，0.17mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入NMM(0.04mL，0.33mmol，2.0当量)和HATU(94mg，0.25mmol，1.5当量)。反应混合物在25℃下搅拌1小时。反应完全后，将反应液用二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，27.6mg，产率21％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(s,1H),10.21(s,1H),8.44(s,1H),8.38(dd,J＝14.6,7.0Hz,2H),8.19(dd,J＝7.5,1.2Hz,1H),7.64(s,1H),7.55(s,1H),7.10(d,J＝9.0Hz,2H),6.53(d,J＝9.0Hz,2H),4.25(t,J＝11.6Hz,1H),3.67(t,J＝6.7Hz,2H),3.60-3.41(m,6H),3.35(d,J＝3.9Hz,1H),3.31-3.24(m,4H),2.68(t,J＝6.7Hz,2H),2.56-2.50(m,2H),2.46-2.42(m,1H),2.21-2.06(m,4H),1.98-1.80(m,4H),1.53-1.39(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 751[M+H]+.
制备例413.化合物A408的合成
步骤A：1-(4-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3,5-二氟苯基)吡咯烷-3-甲酸
室温下，向1-(4-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3,5-二氟苯基)吡咯烷-3-甲酸叔丁酯(90mg，0.23mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5.0mL)溶液中加入三氟乙酸(1.0mL)。反应混合物室温搅拌2小时。反应完毕后，反应液减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，80mg，粗品)。
步骤B：N-(3-氨甲酰基-1-(1r,4r)-4-(4-(1-(4-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3,5-二氟苯基)吡咯烷-3-羰基)哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
室温下，向1-(4-(2,6-二氧哌啶-3-基)-3,5-二氟苯基)吡咯烷-3-甲酸(80mg，0.24mmol，1.0当量)和N-(3-氨甲酰基-1-((1r,4r)-4-(哌嗪-1-基)环己基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶 酰胺盐酸盐(142mg，0.28mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)溶液中加入N-甲基吗啡啉(100mg，0.99mmol，5.0当量)和HATU(100mg，0.99mmol，5.0当量)。反应混合物室温下搅拌1小时。反应完毕后，反应液经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，37.1mg，产率24％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(s,1H),10.84(s,1H),8.44(s,1H),8.42-8.35(m,2H),8.19(dd,J＝7.5,1.2Hz,1H),7.64(s,1H),7.55(s,1H),6.22(d,J＝12.1Hz,2H),4.24(t,J＝11.8Hz,1H),4.04-4.00(m,1H),3.57-3.42(m,6H),3.37-3.35(m,2H),3.28-3.22(m,2H),2.83-2.74(m,1H),2.58-2.52(m,2H),2.44-2.41(m,2H),2.18-2.06(m,5H),2.03-1.80(m,6H),1.50-1.42(m,2H)；LC-MS(ESI):m/z 786[M+H]+.
制备例414.化合物A409的合成
步骤A：1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)氮杂环丁烷-3-甲酸叔丁酯
在室温下，向氮杂环丁烷-3-甲酸叔丁酯(400mg，2.54mmol，1.0当量)的二氧六环(10mL)溶液中加入1-(4-溴苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(685mg，2.54mmol，1.0当量)，Pd-PEPPSI-IpentCl(248mg，0.25mmol，0.1当量)和碳酸铯(2487mg，7.63mmol，3.0当量)。反应液在氮气气氛下100℃搅拌16小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，330mg，产率38％)。
步骤B：1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)氮杂环丁烷-3-甲酸
在室温下，将1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)氮杂环丁烷-3-甲酸叔丁酯(150mg，0.43mmol，1.0当量)加入二氯甲烷(10mL)和三氟乙酸(4mL)溶液中，反应液在氮气气氛下室温搅拌2小时。反应完全后，将反应液减压浓缩得到标题化合物(黄色油状物，120mg，粗品)。
步骤C：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)氮杂环丁烷-3-甲酰基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)氮杂环丁烷-3-甲酸(100mg，粗品)的DMF(10mL)混合溶液中加入N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(318mg，0.69mmol，2.0当量)，HATU(263mg，0.69mmol， 2.0当量)和DIEA(89mg，0.69mmol，2.0当量)。反应混合物在氮气气氛下0℃搅拌30分钟。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(灰色固体，61mg，两步产率23％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.80(s,1H),10.24(s,1H),8.90(s,1H),8.58-8.32(m,2H),8.21(dd,J＝7.6,1.2Hz,1H),7.96(s,1H),7.92-7.79(m,2H),7.72(s,1H),7.25-6.99(m,4H),6.60-6.38(m,2H),4.18-3.99(m,2H),3.96-3.86(m,2H),3.75-3.61(m,4H),3.56-3.45(m,2H),3.29-3.19(m,4H),2.71-2.66(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 731[M+H]+.
制备例415.化合物A410的合成
步骤A：1-(4-(3-(二甲氧基甲基)氮杂环丁烷-1-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
将1-(4-溴苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(200mg，0.74mmol，1.0当量)、(氮杂环丁烷-3-基)二甲氧基甲烷(117mg，0.89mmol，1.2当量)、Pd-PEPPSI-IPentCl(72mg，0.07mol，0.1当量)和Cs2CO3(726mg，2.23mmol，3.0当量)在二氧六环(15mL)中的混合物在氮气保护下110℃搅拌过夜。过滤后，滤液用水(100mL)稀释，并用乙酸乙酯(100mL×3)提取。合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(棕色固体，100mg，产率42％)。
步骤B：1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)氮杂环丁烷-3-甲醛
将甲基1-(4-(3-(二甲氧基甲基)氮杂环丁烷-1-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(150mg，0.31mmol，1.0当量)在HCOOH(5mL)中的溶液加热至50℃并搅拌3小时。过滤后，将所得溶液减压浓缩，得到1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)氮杂环丁烷-3-甲醛(棕色油状物，60mg，收率70％)。
步骤C：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-((1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)氮杂环丁烷-3-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
向N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(100mg，0.22mmol，1.0当量)的DMF(10mL)溶液中加入TEA(0.06mL，0.44mmol，2.0当量)、AcOH(0.05mL，0.88mmol，4.0当量)和1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基) 氮杂环丁烷-3-甲醛(60mg，0.22mmol，1.0当量)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟。然后将NaBH(OAc)3(92mg，0.44mmol，2.0当量)加入到溶液中。后将反应混合物在60℃下搅拌3小时。将所得溶液倒入100mL水中，并用乙酸乙酯(100mL×3)萃取。合并有机层用盐水(100mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，并减压浓缩。残余物经过反相制备纯化、冻干得到标题化合物(白色固体，16.1mg，收率10％)。LC-MS(ESI):m/z 717[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.23(s,1H),8.88(s,1H),8.48-8.36(m,2H),8.24-8.18(m,1H),7.95(s,1H),7.79(d,J＝9.1Hz,2H),7.70(s,1H),7.15-7.03(m,4H),6.43(d,J＝8.8Hz,2H),3.95(t,J＝7.4Hz,2H),3.67(t,J＝6.7Hz,2H),3.50-3.46(m,4H),3.25-3.20(m,4H),2.70-2.68(m,1H),2.66-2.63(m,2H),2.59-2.53(m,4H).
制备例416.化合物A411的合成
步骤A：1-(4-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3,5-二氟苯基)氮杂环丁烷-3-甲酸
在室温下，向1-(4-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3,5-二氟苯基)氮杂环丁烷-3-甲酸叔丁酯(100mg，0.26mmol，1.0当量)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入三氟乙酸(1mL)。反应混合物在室温下搅拌1小时。反应完全后，反应混合物在真空中浓缩，无需进一步纯化即可用于下一步。
步骤B：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(1-(4-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3,5-二氟苯基)氮杂环丁烷-3-甲酰基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在0℃下，向1-(4-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3,5-二氟苯基)氮杂环丁烷-3-甲酸(85mg，粗品)和N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(120mg，0.26mmol，1.0当量)的DMF(4mL)溶液中加入HATU(199mg，0.52mmol，2.0当量)和DIEA(0.2mL，1.05mmol，4.0当量)。然后反应混合物在室温下搅拌30分钟。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，30mg，产率15％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.79(s,1H),10.86(s,1H),8.90(s,1H),8.51-8.33(m,2H),8.21(d,J＝7.6Hz,1H),7.96(s,1H),7.83(d,J＝8.9Hz,2H),7.72(s,1H),7.12(d,J＝9.0Hz,2H),6.18(d,J＝11.1Hz,2H),4.11-4.02(m,3H),4.00-3.89(m,3H),3.71-3.62(m,2H),3.56-3.46(m,2H),3.29-3.17(m, 4H),2.84-2.73(m,1H),2.67(s,1H),2.13-2.01(m,1H),1.99-1.93(m,1H).LC-MS(ESI):m/z 766.4[M+H]+.
制备例417.化合物A412的合成
步骤A：3,3-二甲氧基吡咯烷-1-甲酸苄酯
在室温下，向3-氧代吡咯烷-1-甲酸苄酯(3.2g，14.6mmol，1.0当量)的超干甲醇(3mL)溶液中加入4-甲基苯磺酸吡啶(0.18g，0.73mmol，0.05当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌18小时。反应完全后，反应液倒入水中，并用乙酸乙酯萃取。将有机相用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，有机相减压下浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(无色油状物，2.2g，收率57％)。
步骤B：3,3-二甲氧基吡咯烷
在室温下，向3,3-二甲氧基吡咯烷-1-甲酸苄酯(2.2g，8.29mmol，1.0当量)的甲醇(22mL)溶液中加入10％湿钯碳(0.22g)。反应液在氢气下室温搅拌3小时。反应完全后，反应液过滤减压浓缩得到标题化合物(黄色油状物，1g，粗品)，不需要纯化直接用于下一步。
步骤C：1-(4-(3,3-二甲氧基吡咯烷-1-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在室温下，向3,3-二甲氧基吡咯烷(146mg，1.11mmol，1.5当量)、1-(4-溴苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(200mg，0.74mmol，1.0当量)和Pd-PEPPSI-IPentCl(726mg，2.23mmol，0.1当量)的1,4-二氧六环(4mL)溶液中加入碳酸铯(726mg，2.23mmol，3.0当量)。反应液氮气置换3次，在氮气保护下110℃搅拌18小时。反应完毕，冷却至室温，乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状物，200mg，收率84％)。
步骤D：1-(4-(3-氧代吡咯烷-1-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在室温下，1-(4-(3,3-二甲氧基吡咯烷-1-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(200mg，0.63mmol，1.0当量)的甲酸(2mL)溶液搅拌2小时。反应完全后，反应液直接减压浓缩得到标题化合物(黑色油状物，150mg，收率88％)，不需要纯化直接用于下一步。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)吡咯烷-3- 基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(252mg，0.55mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入三乙胺(0.5mL)调至pH到10，搅拌10分钟后加入乙酸(2mL)调至pH到3，搅拌5分钟。向反应液中加入1-(4-(3-氧代吡咯烷-1-基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(150mg，0.55mmol，1.0当量)并在室温下搅拌1小时。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(232mg，1.1mmol，2.0当量)。将反应液在室温下搅拌18小时。反应液倒入水中，并用乙酸乙酯萃取。将有机相用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，有机相减压下浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(棕色固体，12.9mg，产率3％)。LC-MS(ESI):m/z 717.6[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),10.25(s,1H),8.94(s,1H),8.49-8.35(m,2H),8.24-8.19(m,1H),7.96(s,1H),7.90-7.84(m,2H),7.75(s,1H),7.22-7.14(m,4H),6.66(d,J＝8.9Hz,2H),4.17-3.92(m,2H),3.72-3.65(m,3H),3.62-3.49(m,3H),3.34-3.22(m,4H),3.18-2.98(m,2H),2.75-2.63(m,2H),2.34-2.23(m,1H),1.36-1.14(m,2H).
制备例418.化合物A413的合成
步骤A：1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)吡咯烷-3-甲酸
将1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)吡咯烷-3-甲酸叔丁酯(60mg，0.17mmol，1.0当量)，DCM(3mL)和TFA(1mL)的混合物在25℃下搅拌30分钟。减压浓缩所得溶液，得到1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)吡咯烷-3-甲酸(黄色油状物，50mg，粗品)。
步骤B：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)吡咯烷-3-羰基)哌嗪-1-基)苯)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
向1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)吡咯烷-3-甲酸(45mg，0.15mmol，1.0当量)在DMF(3mL)的溶液中0℃下加入N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(68mg，0.15mol，1.0当量)，HATU(113mg，0.30mmol，2.0当量)和DIEA(77mg，0.6mmol，4.0当量)。将该混合物在0℃下搅拌30分钟。通过制备HPLC直接纯化所得溶液，得到N-(3-甲酰基-1-(4-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苯基)吡咯烷-3-羰基)哌嗪-1-基)苯基]-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(黄色固体28mg，产率25％)。LC-MS(ESI):m/z 745[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.21(s,1H),8.90(s,1H),8.51-8.38(m,2H),8.25-8.19(m,1H),7.96(s,1H),7.86-7.80(m, 2H),7.72(s,1H),7.16-7.08(m,4H),6.55(d,J＝8.9Hz,2H),3.80-3.72(m,2H),3.71-3.64(m,4H),3.63-3.55(m,1H),3.53-3.47(m,1H),3.41-3.33(m,2H),3.30-3.27(m,2H),3.25-3.19(m,2H),2.70-2.66(m,2H),2.25-2.12(m,2H),2.07(s,1H).
制备例419.化合物A414的合成
步骤A：1-(4-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3,5-二氟苯基)吡咯烷-3-甲酸叔丁酯
向2,6-双(苄基氧基)-3-(4-溴-2,6-二氟苯基)吡啶(1.7g，3.53mmol，1.0当量)的甲苯(15mL)溶液中加入四氢吡咯-3-甲酸-2-甲基丙-2-基酯(0.73g，4.24mmol，1.2当量)、RuPhos Pd G3(0.29g，0.35mmol，0.1当量)、RuPhos(0.32g，0.7mmol，0.2当量)和碳酸铯(2.88g，8.83mmol，2.5当量)。在氮气保护下，将混合物在100℃下搅拌18小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状，500mg，收率25％)。
步骤B：1-(4-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3,5-二氟苯基)吡咯烷-3-甲酸叔丁酯
向1-(4-(2,6-双(苄氧基)吡啶-3-基)-3,5-二氟苯基)吡咯烷-3-甲酸叔丁酯(500mg，0.87mmol，1.0当量)的乙醇(5mL)溶液中加入10％Pd/C(50mg)。将混合物在60℃的氢气氛围下搅拌18小时。过滤后，将滤液减压浓缩，得到标题化合物(黄色固体，333mg，收率97％)。
步骤C：1-(4-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3,5-二氟苯基)吡咯烷-3-甲酸
将1-(4-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3,5-二氟苯基)吡咯烷-3-甲酸叔丁酯(150mg，0.38mmol，1.0当量)在二氯甲烷(10mL)和三氟乙酸(4mL)中的混合物在25℃下搅拌2小时。减压浓缩所得溶液，得到标题化合物(黄色油状，120mg，收率89％)。
步骤D：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(1-(4-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3,5-二氟苯基)吡咯烷-3-羰基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
向-(4-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3,5-二氟苯基)吡咯烷-3-甲酸(100mg，0.35mmol，1.0当量)在DMF(10mL)中的混合物中加入N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(318mg，0.69mmol，2.0当量)、HATU(263mg，0.691mmol，2.0当量)和DIEA(89mg，0.69mmol，2.0当量)，在0℃下在氮气下搅拌30分钟。将所得溶液倒入30mL水中，过滤并减压浓缩，残余物通过制备纯化，得到标题化合物(灰色固体， 84mg，收率37％)。LC-MS(ESI):m/z 780[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.84(s,1H),8.90(s,1H),8.52-8.32(m,2H),8.21(dd,J＝7.6,1.2Hz,1H),7.96(s,1H),7.86-7.81(m,2H),7.72(s,1H),7.16-7.11(m,2H),6.27-6.22(m,2H),4.02(dd,J＝12.6,5.1Hz,1H),3.78-3.71(m,2H),3.70-3.63(m,2H),3.63-3.56(m,1H),3.52-3.46(m,1H),3.41-3.33(m,2H),3.30-3.26(m,3H),3.25-3.19(m,2H),2.84-2.73(m,1H),2.55-2.51(m,1H),2.26-2.12(m,2H),2.08-2.03(m,1H),1.97-1.90(m,1H).
制备例420.化合物A415的合成
步骤A：1-(5-(苄氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-甲酸叔丁酯
将哌啶-4-甲酸叔丁酯(1g，5.37mmol，1.0当量)和5-(苄氧基)-2-溴吡啶(1.69g，6.44mmol，1.2当量)，RuPhos Pd G3(449mg，0.53mmol，0.1当量)，Cs2CO3(5.24g，16.1mmol，3.0当量)在1,4-二氧六环(10mL)溶液中的混合物在氮气保护下110℃搅拌3小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，500mg，产率25％)。
步骤B：1-(5-羟基吡啶-2-基)哌啶-4-甲酸叔丁酯
将1-(5-(苄氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-甲酸叔丁酯(450mg，1.22mmol，1.0当量)溶于乙醇(10mL)中，加入10％湿钯碳(50mg)，然后在氢气氛围下室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液过滤，母液减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，330mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：1-(5-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-甲酸叔丁酯
在-5℃氮气保护下，向1-(5-羟基吡啶-2-基)哌啶-4-甲酸叔丁酯(300mg，1.07mmol，1.0当量)的四氢呋喃(5mL)溶液中加入钠氢(120mg，3.21mmol，3.0当量)。混合物在氮气保护下搅拌反应15分钟。向反应液中加入3-溴哌啶-2,6-二酮(250mg，1.28mmol，1.2当量)，反应液在-5℃搅拌1小时。反应完全后，将反应液用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯 萃取，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，220mg，产率54％)。
步骤D：1-(5-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-甲酸
向1-(5-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-甲酸叔丁酯(180mg，0.46mmol，1.0当量)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入三氟乙酸(2mL)。反应液在室温搅拌30分钟。反应完全后，将反应液减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，150mg，粗品)。无需纯化直接用于下一步。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(1-(5-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-羰基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向1-(5-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-甲酸(100mg，0.29mmol，1.0当量)和N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(151mg，0.32mmol，1.1当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入HATU(136mg，0.35mmol，1.2当量)，DIEA(115mg，0.87mmol，3.0当量)。反应液在室温搅拌30分钟。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，25mg，产率11％)。LC-MS(ESI):m/z 775[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.91(s,1H),8.90(s,1H),8.54-8.32(m,2H),8.21(d,J＝7.3Hz,1H),8.04-7.88(m,2H),7.83(d,J＝8.9Hz,2H),7.72(s,1H),7.38-7.32(m,1H),7.12(d,J＝9.2Hz,2H),6.82(d,J＝9.1Hz,1H),5.02-4.98(m,1H),4.20-4.17(m,2H),3.73-3.63(m,4H),3.27-3.20(m,4H),2.89-2.80(m,2H),2.74-2.52(m,2H),2.25-2.15(m,1H),2.13-1.96(m,2H),1.71-1.57(m,4H).
制备例421.化合物A416的合成
步骤A：5-羟基-3',6'-二氢-[2,4'-联吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯
向6-溴吡啶-3-醇(5g，28.7mmol，1.0当量)和4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2- 基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(13.3g，16.3mmol，1.5当量)的乙醇(20mL)，甲苯(40mL)和水(10mL)混合溶液中加入Pd(dppf)Cl2(800mg，1.08mmol，0.05当量)和Na2CO3(6.1g，57.4mmol，2.0当量)。反应混合物在氮气气氛下脱气三次，并在100℃下搅拌3小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，5.1g，产率63％)。
步骤B：4-(5-羟基吡啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
向5-羟基-3',6'-二氢-[2,4'-联吡啶]-1'(2'H)-甲酸叔丁酯(2.5g，9.06mmol，1.0当量)的甲醇(40mL)中溶液中加入5％的湿Pd/C(200mg)。反应混合物在氢气气氛下脱气三次，并在25℃的氢气气氛下搅拌过夜。通过硅藻土过滤收集滤液，减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，1.8g，粗品)。
步骤C：4-(5-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
向4-(5-羟基吡啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.7g，粗品)和3-溴哌啶-2,6-二酮(2.3g，12.2mmol，2.0当量)的四氢呋喃(60mL)的溶液中加入NaH(488mg，12.2mmol，2.0当量，在矿物油中的分散度为60％)。反应混合物在氮气气氛下45℃搅拌18小时。反应完全后，用水淬灭混合物，并用乙酸乙酯萃取两次。合并的有机层依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，2.0g，产率84％)。
步骤D：3-((6-(哌啶-4-基)吡啶-3-基)氧基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐
向4-(5-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.2g，3.08mmol，1.0当量)的二氯甲烷(20mL)溶液中加入4M盐酸-二氧六环(2.5mL)。反应完全后，将反应混合物减压浓缩至干，得到标题化合物(黄色固体，975mg，粗品)。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(4-(5-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-1-甲酰基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
向4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸4-硝基苯酯(312mg，0.5mmol，1.0当量)和3-((6-(哌啶-4-基)吡啶-3-基)氧基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(145mg，粗品)的DMF(3mL)溶液中加入DIEA(129mg，1.0mmol，2.0当量)。反应混合物在80℃下搅拌3小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，25.0mg，产率6％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.97(s,1H),8.89(s,1H),8.46-8.38(m,2H),8.26(d,J＝3.0Hz,1H),8.21(d,J＝7.6Hz,1H),7.96(s,1H),7.82(d,J＝9.0Hz,2H),7.71(s,1H),7.42-7.38(m,1H),7.24(d,J＝8.7Hz,1H),7.11(d,J＝9.1Hz, 2H),5.29-5.23(m,1H),3.76(d,J＝12.5Hz,2H),3.26-3.23(m,4H),2.94-2.81(m,4H),2.72-2.58(m,4H),2.26-2.16(m,2H),2.04-1.94(m,1H),1.84-1.78(m,2H),1.73-1.65(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 775[M+H]+.
制备例422.化合物A417的合成
步骤A：4-(5-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(5-氨基吡啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(500mg，1.80mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中的加入3-溴哌啶-2,6-二酮(518mg，2.70mmol，1.5当量)和碳酸氢钠(758mg，9.02mmol，5.0当量)。反应混合物在100℃下搅拌48小时。反应完全后，加入饱和氯化铵水溶液稀释反应液，然后加入乙酸乙酯萃取。有机层依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，200mg，产率28％)。
步骤B：3-((6-(哌啶-4-基)吡啶-3-基)氨基)哌啶-2,6-二酮
在0℃时，向4-(5-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.51mmol，1.0当量)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入三氟乙酸(2mL)。反应混合物在室温下搅拌18小时，反应完全后，将反应液浓缩至干。残余物加入二氯甲烷和饱和碳酸氢钠水溶液进行萃取。有机层依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，120mg，产率81％)。
步骤C：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(4-(5-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-甲酰基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向3-((6-(哌啶-4-基)吡啶-3-基)氨基)哌啶-2,6-二酮(100mg，0.34mmol，1.0当量)的DMF(3mL)溶液中加入DIEA(150mg，1.16mmol，3.4当量)和4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸4-硝基苯酯(212mg，0.34mmol，1.0当量)。反应混合物在室温下搅拌30分钟。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得 到标题化合物(白色固体，40.0mg，产率15％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.80(s,1H),8.89(s,1H),8.49-8.36(m,2H),8.25-8.19(m,1H),8.02-7.90(m,2H),7.82(d,J＝9.0Hz,2H),7.71(s,1H),7.11(d,J＝9.2Hz,2H),7.03-6.93(m,2H),5.96(d,J＝7.8Hz,1H),4.40-4.27(m,1H),3.81-3.70(m,2H),3.38-3.33(m,2H),3.30-3.28(m,1H),3.27-3.20(m,4H),2.93-2.82(m,2H),2.74-2.66(m,2H),2.65-2.52(m,2H),2.14-2.07(m,1H),1.95-1.85(m,1H),1.82-1.72(m,2H),1.70-1.57(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 774[M+H]+.
制备例423.化合物A418的合成
步骤A：3-(4-甲氧基苄基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在室温下，向二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(7g，61.35mmol，1.0当量)的DMF(140mL)溶液中加入Cs2CO3(40g，122.69mmol，2.0当量)和PMBCl(12.3g，78.35mmol，1.28当量)。反应混合物在氮气气氛下室温搅拌过夜。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，6g，产率40％)。
步骤B：4-(溴甲基)-2-氟-1-碘苯
在室温下，向2-氟-1-碘-4-甲基苯(10g，42.36mmol，1.0当量)的CCl4(100mL)溶液中，加入BPO(0.5g，2.12mmol，0.05当量)和NBS(8.7g，48.72mmol，1.15当量)。反应混合物在氮气气氛下75℃搅拌过夜。反应完全后，将反应液冷却至室温，倒入水中中，用乙酸乙酯萃取。有机层依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，11g，产率82％)。
步骤C：1-(3-氟-4-碘苄基)-3-(4-甲氧基苄基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在0℃下，向3-(4-甲氧基苄基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(1.0g，4.09mmol，1.0当量)的DMF(10mL)溶液中，然后在氮气气氛下加入NaH(200mg，8.18mmol，在矿物油中分散度为60％，2.0当量)，反应混合物在氮气气氛下室温搅拌20分钟。在0℃下，向上述混 合物中滴加4-(溴甲基)-2-氟-1-碘苯(1.0g，3.27mmol，0.8当量)的DMF(10mL)中的溶液，所得混合物在室温下搅拌2小时。反应完全后，用饱和氯化铵水溶液淬灭反应混合物，并用乙酸乙酯萃取两次。有机层依次用饱和盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(无色油，600mg，收率31％)。
步骤D：4-(2-氟-4-((3-(4-甲氧基苄基)-2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)甲基)苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向1-(3-氟-4-碘苄基)-3-(4-甲氧基苄基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(300mg，0.64mmol，1.0当量)和4-(三氟-l4-硼烷基)哌啶-1-甲酸叔丁酯钾盐(280mg，0.96mmol，1.5当量)在1,4-二氧六环(3mL)中，加入Cs2CO3(313mg，0.96mmol，1.0当量)，[4,4'-双(1,1-二甲基乙基)-2,2'-联吡啶]二氯化镍(II)(13mg，0.03mmol，0.05当量)和Ir[dF(CF3)ppy]2bpy-PF6(16mg，0.02mmol，0.03当量)，反应混合物在氮气气氛下脱气三次，室温下在白光下搅拌16小时。反应完全后用水稀释混合物，用乙酸乙酯萃取两次。合并有机层用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(无色油状物，230mg，产率68％)。
步骤E：1-(3-氟-4-(哌啶-4-基)苄基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮三氟乙酸盐
在室温下，将4-(2-氟-4-((3-(4-甲氧基苄基)-2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)甲基)苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(230mg，0.43mmol，1.0当量)加入三氟甲磺酸(1mL)和三氟乙酸(4mL)溶液中，然后反应液在80℃下搅拌过夜。反应完全后，冷却至室温，将反应液经经HPLC纯化得到标题化合物(无色油状物，100mg，产率75％)。
步骤F：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(4-((2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯基)哌啶-1-甲酰基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向1-(3-氟-4-(哌啶-4-基)苄基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮三氟乙酸盐(100mg，0.25mmol，1.0当量)的DMF(2mL)中加入4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸4-硝基苯酯(100mg，0.16mmol，0.67当量)和DIEA(96mg，0.74mmol，3.0当量)，反应混合物在氮气气氛下100℃下搅拌过夜。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，23.0mg，产率12％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.21(s,1H),8.90(d,J＝2.4Hz,1H),8.48-8.36(m,2H),8.21(d,J＝8.1Hz,1H),7.96(s,1H),7.82(d,J＝6.6Hz,2H),7.71(s,1H),7.33(d,J＝9.8Hz,1H),7.13-7.05(m,4H),4.49(s,2H),3.83-3.73(m,2H),3.38-3.34(m,2H),3.26-3.21(m,4H), 3.08-2.81(m,4H),2.60-2.51(m,5H),1.76-1.60(m,4H).LC-MS(ESI):m/z 791[M+H]+.
制备例424.化合物A419的合成
步骤A：4-(4-(1,3-二氧戊环-2-基)哌啶-1-基)-3-氟苯甲腈
在室温下，在3,4-二氟苯腈(1.77g，12.7mmol，1.0当量)的二甲基亚砜(15mL)溶液中加入碳酸钾(5.27g，38.2mmol，3.0当量)和4-(1,3-二氧戊环-2-基)哌啶(2.0g，12.7mmol，1.0当量)，在70℃下搅拌反应3小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，2.25g，收率64％)。
步骤B：(4-(4-(1,3-二氧戊环-2-基)哌啶-1-基)-3-氟苯基)甲胺
在室温下，将雷尼镍(316mg，1.45mmol，0.2当量)加入到4-(4-(1,3-二氧戊环-2-基)哌啶-1-基)-3-氟苯甲腈(2.0g，7.24mmol，1.0当量)的甲醇(30mL)溶液中，在氢气气氛下室温搅拌过夜。将混合物过滤后浓缩得到标题化合物(白色固体，1.96g，粗品)，无需进一步提纯，直接用于下一步。
步骤C：(4-(4-(1,3-二氧戊环-2-基)哌啶-1-基)-3-氟苄基)氨基甲酸甲酯
在室温下，在(4-(4-(1,3-二氧戊环-2-基)哌啶-1-基)-3-氟苯基)甲胺(1.96g，6.99mmol，1.0当量)的四氢呋喃(10mL)溶液中加入氯甲酸甲酯(0.55mL，7.13mmol，1.2当量)，室温搅拌2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，980mg，产率41％)。
步骤D：1-(4-(4-(1,3-二氧戊环-2-基)哌啶-1-基)-3-氟苄基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在室温下，向(4-(4-(1,3-二氧戊环-2-基)哌啶-1-基)-3-氟苄基)氨基甲酸甲酯(950mg，2.81mmol，1.0当量)的叔丁醇(10mL)溶液中加入丙烯酰胺(998mg，14.0mmol，4.98当量)和叔丁醇钾(945mg，8.42mmol，3.0当量)，将反应混合物在55℃下搅拌过夜。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，270mg，产率25％)。
步骤E：1-(4-((2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲醛
在室温下，向装有1-(4-(4-(1,3-二氧戊环-2-基)哌啶-1-基)-3-氟苄基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(270mg，0.72mmol，1.0当量)的烧瓶中加入甲酸(3mL)，并将反应混合物在60℃下搅拌3小时。将反应液用乙酸乙酯稀释，用饱和NaHCO3水溶液中和，有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，225mg，粗品)，无需进一步提纯，直接用于下一步。
步骤F：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-((1-(4-((2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(265mg，0.58mmol，1.2当量)的N，N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中加入三乙胺(0.07mL，0.48mmol，0.1当量)。在室温下搅拌20分钟后，向混合物中加入醋酸(0.03mL，0.48mmol，0.1当量)和1-(4-((2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲醛(160mg，0.48mmol，1.0当量)，并在室温下继续搅拌30分钟。然后向混合物中加入氰基硼氢化钠(60mg，0.96mmol，2.0当量)，并在室温下搅拌2小时。用乙酸乙酯稀释混合物，用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩至干燥。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，20mg，产率5％)。LC-MS(ESI):m/z 777[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.19(s,1H),8.88(s,1H),8.47-8.37(m,2H),8.21(dd,J＝7.6,1.0Hz,1H),7.95(s,1H),7.79(d,J＝9.1Hz,2H),7.71(s,1H),7.10-6.98(m,5H),4.43(s,2H),3.37-3.34(m,2H),3.28(t,J＝6.8Hz,3H),3.25-3.19(m,4H),2.68-2.62(m,2H),2.55-2.52(m,5H),2.25(d,J＝7.0Hz,2H),1.83(d,J＝12.5Hz,2H),1.74-1.64(m,1H),1.34-1.23(m,2H).
制备例425.化合物A420的合成
步骤A：4-(二甲氧基甲基)-1-(4-硝基苄基)哌啶
在0℃下，将对硝基苯甲醛(5.0g，33.11mmol，1.0当量)和4-(二甲氧基甲基)哌啶(6.3g，39.73mmol，1.2当量)溶解在二氯甲烷(50mL)搅拌1小时，然后加入醋酸硼氢化钠(14g，66.22mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌2小时。反应完全后，将反应液用二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经 柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，5g，产率51％)。
步骤B：4-((4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)甲基)苯胺
在室温下，将4-(二甲氧基甲基)-1-(4-硝基苄基)哌啶(3.0g，10.2mmol，1.0当量)，铁粉(2.3g，40.8mmol，4.0当量)和氯化铵(4.4g，81.63mmol，8.0当量)溶解在水(10mL)和乙醇(25mL)中。反应液在氮气保护下60℃下搅拌2小时。反应完全后，溶液通过硅藻土垫过滤，用乙酸乙酯萃取。依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，在减压下浓缩得到标题化合物(黄色油状，2.5g，产率93％)。
步骤C：(4-((4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)甲基)苯基)氨基甲酸甲酯
在0℃下，向4-((4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)甲基)苯胺(1.0g，3.79mmol，1.0当量)和吡啶(10mL，11.36mmol，3.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入氯甲烷酸甲酯(0.6mL，7.58mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下0℃下搅拌30分钟。反应完全后，将反应液用二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，1.0g，产率82％)。
步骤D：1-(4-((4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)甲基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在室温下，将(4-((4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)甲基)苯基)氨基甲酸甲酯(1.0g，3.11mmol，1.0当量)，丙烯酰胺(0.26g，3.73mmol，1.2当量)和叔丁醇钾(0.52g，4.67mmol，1.5当量)加入叔丁醇(10mL)。反应液在氮气保护下60℃下搅拌16小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，200mg，产率18％)。
步骤E：1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苄基)哌啶-4-甲醛
在室温下，将1-(4-((4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)甲基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(200mg，0.55mmol，1.0当量)溶解在甲酸(4mL)中，反应液在氮气保护下25℃下搅拌1小时。反应完全后，在减压下浓缩得到标题化合物(无色油，170mg，粗品)。
步骤F：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-((1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苄基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺甲酸盐
在室温下，向1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苄基)哌啶-4-甲醛(144mg，0.46mmol，1.0当量)和1-[4-(哌嗪-1-基)苯基]-4-({[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]羰基}氨基)吡唑-3-甲酰胺(200mg，0.43mmol，1.0当量)的DMF(10mL)溶液中滴加5滴醋酸。反应液在氮气保护下25℃下搅拌1小时，加入醋酸硼氢化钠(543mg，1.72mmol，4.0当量)。反应液在氮气保护下25℃搅拌10分钟。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和 食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经高效液相色谱法纯化得到标题化合物(白色固体，38mg，产率12％)。LC-MS(ESI):m/z 759[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.79(s,1H),10.35(s,1H),8.87(s,1H),8.46-8.37(m,2H),8.21(d,J＝7.5Hz,1H),8.15(s,1H),7.94(s,1H),7.78(d,J＝9.0Hz,2H),7.71(s,1H),7.29(q,J＝8.6Hz,4H),7.07(d,J＝9.1Hz,2H),3.78(t,J＝6.7Hz,2H),3.49-3.46(m,2H),3.28-3.12(m,8H),2.83(d,J＝11.1Hz,2H),2.70(t,J＝6.6Hz,2H),2.21-2.17(m,2H),2.02-1.93(m,2H),1.73-1.67(m,2H),1.59-1.50(m,1H),1.19-1.10(m,2H).
制备例426.化合物A421的合成
步骤A：1-(4-(苄氧基)-2-氟苯基)-4-(1,3-二氧戊环-2-基)哌啶
在室温下，向4-(1,3-二氧戊环-2-基)哌啶(1g，6.36mmol，1.0当量)，4-(苄氧基)-1-溴-2-氟苯(2.7g，9.54mmol，1.5当量)和叔丁醇钠(1.8g，19.08mmol，3.0当量)的甲苯(12mL)溶液中加入Pd2(dba)3(582mg，0.64mmol，0.1当量)和BIANP(792mg，1.27mmol，0.2当量)。然后反应混合物在氮气气氛下脱气三次,并在110℃下搅拌5小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，2.0g，产率88％)。
步骤B：4-(4-(1,3-二氧戊环-2-基)哌啶-1-基)-3-氟苯酚
在室温下，向1-(4-(苄氧基)-2-氟苯基)-4-(1,3-二氧戊环-2-基)哌啶(1.5g，4.20mmol，1.0当量)的甲醇(20mL)溶液中加入Pd/C(0.3g，5％wt.)。反应混合物在氢气气氛下脱气三次,并在氢气气氛下于室温搅拌过夜。反应完全后，将反应液经硅藻土过滤,浓缩滤液得到标题化合物(黄色固体，1.1g，粗品)。
步骤C：3-(4-(4-(1,3-二氧戊环-2-基)哌啶-1-基)-3-氟苯氧基)哌啶-2,6-二酮
在0℃下,向4-(4-(1,3-二氧戊环-2-基)哌啶-1-基)-3-氟苯酚(1.1g，粗品)的DMF(11mL)中的溶液中加入NaH(250mg，6.17mmol，1.5当量,在矿物油中分散度为60％)。反应液在氮气气氛下0℃搅拌30分钟。向上述反应混合物中加入3-溴哌啶-2,6-二酮(948mg，4.94mmol，1.2当量)。反应液在室温下搅拌3小时。反应完全后，加入饱和的氯化铵水溶液淬灭反应液,然后用乙酸乙酯萃取，有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥， 减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，800mg，两步收率51％)。
步骤D：1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氧基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲醛
在室温下，将3-(4-(4-(1,3-二氧戊环-2-基)哌啶-1-基)-3-氟苯氧基)哌啶-2,6-二酮(500mg，1.32mmol，1.0当量)加入到水(3mL)和甲酸(3mL)溶液中，反应液在50℃下搅拌6小时。反应完全后，加入饱和碳酸氢钠碱化反应液,然后用乙酸乙酯萃取，有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到标题化合物(黄色油状物,310mg，粗品)。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-((1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氧基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(110mg，0.24mmol，1.0当量)的1,2-二氯乙烷(4mL)溶液中加入三乙胺(24mg，0.24mmol，1.0当量)，反应混合物在室温下搅拌5分钟。之后向反应液中中加入醋酸(14mg，0.24mmol，1.0当量)和1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氧基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲醛(96mg，粗品),并继续反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，25.3mg，产率14％)。LC-MS(ESI):m/z 778[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.92(s,1H),8.88(s,1H),8.46-8.37(m,2H),8.23-8.19(m,1H),7.95(s,1H),7.79(d,J＝9.0Hz,2H),7.71(s,1H),7.08(d,J＝9.1Hz,2H),6.98(t,J＝9.5Hz,1H),6.92-6.87(m,1H),6.79-6.75(m,1H),5.15-5.10(m,1H),3.30(s,1H),3.25-3.19(m,6H),2.74-2.59(m,4H),2.58-2.53(m,3H),2.27-2.22(m,2H),2.20-2.07(m,2H),1.85-1.79(m,2H),1.72-1.63(m,1H),1.35-1.26(m,2H).
制备例427.化合物A422的合成
步骤A：2-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯甲酸甲酯
在0℃下，向2,4-二氟苯甲酸甲酯(5g，29.05mmol，1.0当量)的DMF(50mL)溶液中 加入1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(4.2g，29.05mmol，1.0当量)，反应混合物在0℃下搅拌1小时。然后向上述反应混合物中加入DIEA(5mL)，继续在室温下搅拌2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(棕色固体，5.0g，产率58％)。
步骤B：2-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯甲酸
在室温下，将2-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯甲酸甲酯(5g，16.93mmol，1.0当量)和氢氧化锂一水合物(1.4g，33.86mmol，2.0当量)加入四氢呋喃(45mL)和水(15mL)的溶液中。反应混合物在在室温条件下搅拌2小时。反应完全后，反应液减压浓缩得到标题化合物(棕色固体，3g，粗品)。
步骤C：N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-2-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯甲酰胺
向2-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯甲酸(2g，粗品)的DMF(20mL)中的溶液中加入3-氨基哌啶-2,6-二酮(0.9g，7.11mmol，1.0当量)，HATU(5.4g，14.22mmol，2.0当量)和DIEA(2.8g，21.33mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，1.0g，产率36％)。
步骤D：N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-2-氟-4-(4-氧代哌啶-1-基)苯甲酰胺
在室温下，将N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-2-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯甲酰胺(1g，2.56mmol，1.0当量)溶于甲酸(15mL)溶液中。反应混合液在80℃下搅拌12小时。反应完全后，将反应液减压浓缩得到标题化合物(棕色固体，350mg，粗品)。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基甲酰基)-3-氟苯基)哌啶-4-基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-2-氟-4-(4-氧代哌啶-1-基)苯甲酰胺(350mg，粗品)的DMF(10mL)溶液中加入N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(463mg，1.01mmol，1.0当量)和AcOH(0.012mL，0.20mmol，0.5当量)。反应液在氮气气氛下室温搅拌2小时。然后往反应液中加入NaBH(OAc)3(854mg，4.03mmol，4.0当量)。继续搅拌1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，13.2mg，收率2％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.81-11.77(m,1H),10.85(s,1H),8.93(s,1H),8.46-8.38(m,2H),8.22(dd,J＝7.5,1.1Hz,1H),8.09-8.03(m,1H), 7.97-7.85(m,3H),7.75(s,1H),7.66(t,J＝9.2Hz,1H),7.18(d,J＝9.2Hz,2H),6.93-6.84(m,2H),4.78-4.68(m,1H),4.05(dd,J＝51.4,12.5Hz,4H),3.71-3.63(m,2H),3.30-3.16(m,3H),3.09-3.00(m,2H),2.96-2.86(m,2H),2.82-2.71(m,1H),2.55-2.52(m,1H),2.19-2.14(m,2H),2.11-1.95(m,2H),1.75-1.61(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 792[M+H]+.
制备例428.化合物A423的合成
步骤A：4-(1,3-二氧戊环-2-基)-1-(2-甲氧基-4-硝基苯基)哌啶
室温下，向4-(1,3-二氧戊环-2-基)哌啶(1.1g，7.01mmol，1.0当量)和1-氟-2-甲氧基-4-硝基苯(1.56g，9.11mmol，1.3当量)的乙腈(15mL)溶液中加入三乙胺(2.12g，21.03mmol，3.0当量)。反应液在90℃搅拌过夜。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.4g，产率65％)。
步骤B：4-(4-(1,3-二氧戊环-2-基)哌啶-1-基)-3-甲氧基苯胺
氮气保护下，向4-(1,3-二氧戊环-2-基)-1-(2-甲氧基-4-硝基苯基)哌啶(1.4g，4.55mmol，1.0当量)的乙醇(20mL)溶液中加入10％湿钯碳(200mg)。将混合物在H2气氛下脱气三次，并在H2气氛下搅拌过夜。反应完全后，将混合物过滤，滤液浓缩得到标题化合物(棕色固体，1.0g，产率79％)。
步骤C：3-((4-(4-(1,3-二氧戊环-2-基)哌啶-1-基)-3-甲氧基苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向4-(4-(1,3-二氧戊环-2-基)哌啶-1-基)-3-甲氧基苯胺(500mg，1.80mmol，1.0当量)和3-溴哌啶-2,6-二酮(687mg，3.60mmol，2.0当量)的N,N-二甲基乙酰胺(10mL)溶液中加入碳酸氢钠(453mg，5.40mmol，3.0当量)。反应液在80℃搅拌过夜。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(棕色固体，350mg，产率50％)。
步骤D：1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-甲氧基苯基)哌啶-4-甲醛
在室温下，向3-((4-(4-(1,3-二氧戊环-2-基)哌啶-1-基)-3-甲氧基苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(350mg，0.90mmol，1.0当量)的四氢呋喃(4mL)溶液中加入稀盐酸(4mL，1N)。反应液在40℃搅拌过夜。反应完全后，将反应液用饱和碳酸氢钠水溶液中和，乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到标题化合物(棕色固体，150mg，产率48％)。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-((1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-甲氧基苯基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
向N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(100mg，0.22mmol，1.0当量)的1,2-二氯乙烷(2mL)溶液中加入三乙胺(22mg，0.33mmol，1.0当量)，室温搅拌10分钟。反应液加入醋酸(13mg，0.33mmol，1.0当量)和1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-甲氧基苯基)哌啶-4-甲醛(150mg，0.44mmol，2.0当量)，室温搅拌1小时。然后加入NaBH(OAc)3(277mg，1.32mmol，6.0当量)并搅拌过夜。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，残余物经HPLC纯化得到标题化合物(灰色固体，12mg，产率7％)。LC-MS(ESI):m/z 789[M+H]+.1HNMR(400MHz,CD3OD-d4)δ8.87(s,1H),8.47(d,J＝7.8Hz,1H),8.30(t,J＝7.8Hz,1H),8.05(d,J＝7.9Hz,1H),7.74(d,J＝9.1Hz,2H),7.12(d,J＝9.1Hz,2H),6.89(d,J＝8.5Hz,1H),6.46(d,J＝2.4Hz,1H),6.34-6.26(m,1H),4.29-4.23(m,1H),3.85(s,3H),3.51-3.46(m,1H),3.22-2.99(m,1H),2.87-2.73(m,2H),2.69-2.63(m,4H),2.63-2.54(m,2H),2.40-2.31(m,3H),1.97-1.85(m,3H),1.78-1.67(m,1H),1.65-1.36(m,3H),1.34-1.26(m,3H).
制备例429.化合物A424的合成
步骤A：4-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯
向1-溴-2-甲氧基-4-硝基苯(2.5g，10.9mmol，1.0当量)的二氧六环(30mL)和水(10mL)溶液中加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(6.7g，16.3mmol，1.5当量)、Pd(PPh3)4(1.3g，1.08mmol，0.05当量)和Na2CO3(4.5g，32.6mmol，3.0当量)。反应混合物在氮气气氛下脱气三次，然后在氮气气氛下80℃搅拌 18小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，3.5g，产率96％)。
步骤B：4-(4-氨基-2-甲氧基苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
向4-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(600mg，1.79mmol，1.0当量)的甲醇(6mL)溶液中加入5％的湿钯碳(200mg)。反应混合物在氢气气氛下脱气三次，然后在氢气气氛下50℃搅拌18小时。反应完全后，将反应液用硅藻土过滤，滤液减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，500mg，粗品)。
步骤C：4-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-甲氧基苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
向4-(4-氨基-2-甲氧基苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(500mg，粗品)和3-溴哌啶-2,6-二酮(470mg，2.46mmol，1.5当量)的DMF(5mL)溶液中加入碳酸钠(521mg，4.92mmol，3.0当量)。反应混合物在100℃下搅拌18小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，200mg，两步收率29％)。
步骤D：3-((3-甲氧基-4-(哌啶-4-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐
向4-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-甲氧基苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.48mmol，1.0当量)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入4M盐酸-二氧六环(2mL)。反应液在室温下搅拌2小时。反应完全后，将反应液减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，150mg，粗品)。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-甲氧基苯基)哌啶-1-甲酰基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
向4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸4-硝基苯酯(80mg，0.13mmol，1.0当量)的DMF(3mL)溶液中加入3-((3-甲氧基-4-(哌啶-4-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(90mg，粗品)和DIEA(83mg，0.65mmol，5.0当量)。反应液在氮气气氛下90℃搅拌18小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，32mg，产率31％)。LC-MS(ESI):m/z 803[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.77(s,1H),8.89(s,1H),8.43(dd,J＝17.1,7.7Hz,2H),8.21(d,J＝7.7Hz,1H),7.96(s,1H),7.82(d,J＝9.0Hz,2H),7.71(s,1H),7.11(d,J＝9.2Hz,2H),6.86(d,J＝8.3Hz,1H),6.35(d,J＝2.0Hz,1H),6.22(d,J＝8.5Hz,1H),5.71(d,J＝7.4Hz,1H),4.31(dd,J＝14.0,10.0Hz,1H),3.75(d,J＝14.2Hz,2H),3.72(s,3H),3.24(d,J＝3.5Hz,4H),2.95-2.51 (m,9H),2.15-2.08(m,1H),1.91-1.84(m,1H),1.66(dd,J＝13.4,1.9Hz,2H),1.56-1.46(m,2H).
制备例430.化合物A425的合成
步骤A：8-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷
在室温下，向1-氟-2-甲氧基-4-硝基苯(1.5g，8.77mmol，1.0当量)和1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(1.51g，10.5mmol，1.2当量)的DMF(15mL)溶液中加入碳酸钾(1.82g，13.2mmol，1.5当量)。将混合物在60℃下搅拌过夜。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.7g，产率68％)。
步骤B：3-甲氧基-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯胺
在室温下，向8-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(1.7g，5.78mmol，1.0当量)的乙醇(20mL)溶液中加入10％湿钯碳(0.3g)。将混合物在氢气氛围中室温搅拌过夜。反应完全后，过滤混合物，将滤液浓缩至干，得到标题化合物(黄色固体，1.2g，产率79％)。
步骤C：3-((3-甲氧基-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向3-甲氧基-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯胺(1.2g，4.54mmol，1.0当量)和3-溴哌啶-2,6-二酮(1.05g，5.45mmol，1.2当量)的N,N-二甲基乙酰胺(12mL)溶液中加入碳酸氢钠(763mg，9.08mmol，2当量)。将混合物在80℃下搅拌过夜。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(棕色固体，320mg，产率19％)。
步骤D：3-((3-甲氧基-4-(4-氧代哌啶-1-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮
将3-((3-甲氧基-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(320mg，0.85mmol，1.0当量)的水(0.5mL)和甲酸(5mL)溶液在室温下搅拌48小时。用饱和碳酸氢钠水溶液中和，用乙酸乙酯萃取。将有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状，60mg，产率21％)。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-甲氧基苯基)哌 啶-4-基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(83mg，0.18mmol，1.0当量)和3-((3-甲氧基-4-(4-氧代哌啶-1-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(60mg，0.18mmol，1.0当量)的DMF(3mL)溶液中加入TEA(18mg，0.18mmol，1.0当量)，搅拌10分钟后，加入醋酸(11mg，0.18mmol，1.0当量)。继续搅拌30分钟后，加入氰基硼氢化钠(17mg，0.27mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌4小时。反应完全后，加水淬灭，乙酸乙酯萃取。合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(灰色固体，20.5mg，产率15％)。LC-MS(ESI):m/z 775[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.76(s,1H),8.88(s,1H),8.51-8.32(m,2H),8.21(d,J＝7.8Hz,1H),7.95(s,1H),7.79(d,J＝9.0Hz,2H),7.71(s,1H),7.09(d,J＝9.1Hz,2H),6.69(d,J＝8.5Hz,1H),6.37(s,1H),6.17(d,J＝6.8Hz,1H),5.51(d,J＝7.4Hz,1H),4.31-4.18(m,1H),3.72(s,3H),3.25-3.20(m,8H),2.80-2.65(m,5H),2.62-2.56(m,1H),2.40-2.32(m,1H),2.11(d,J＝8.4Hz,1H),1.91-1.79(m,3H),1.64-1.52(m,2H).
制备例431.化合物A426-Int的合成
步骤A-D：1-(4-溴苯基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡咯-3-甲酸乙酯
化合物1-(4-溴苯基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡咯-3-甲酸乙酯的合成参照A47(步骤A-D)的方法，经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，4g，四步总收率5％)。
步骤E：4-(4-(3-(乙氧羰基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡咯-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
氮气保护下，在1-(4-溴苯基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡咯-3-甲酸乙酯(1.0g，2.1mmol，1.0当量)和哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.42g，2.3mmol，1.1当量)的二氧六环(15mL)溶液 中，加入Pd2(dba)3(0.19g，0.2mmol，0.1当量)，Xantphos(0.24g，0.4mmol，0.2当量)和Cs2CO3(2g，6.2mmol，3.0当量)。反应液90℃下搅拌5小时。反应通过硅藻土过滤，滤液经过真空浓缩以后得到残留物。将残留物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，0.74g，收率61％)。
步骤F-G：4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡咯-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
化合物4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡咯-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯的合成参照A47(步骤E&F)的方法，经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，520mg，两步总收率70％)。
步骤H：N-(4-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡咯-3-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺盐酸盐
将4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡咯-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(520mg，0.9mmol，1.0当量)溶于4N HCl-二氧六环(10mL)中，反应搅拌2小时。反应液真空浓缩得到标题化合物(黄色固体，450mg，收率96％)。
制备例432.化合物A426的合成
步骤A：4-(2-氟-4-硝基苯基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯
在氮气保护下，将化合物1-溴-2-氟-4-硝基苯(5.0g，22.7mmol，1.0当量)和4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(8.4g，27.27mmol，1.2当量)溶于二氧六环(50mL)和H2O(50mL)中，向此体系中加入Pd(dppf)Cl2(1.7g，2.27mmol，0.1当量)和K2CO3(9.4g，68.19mmol，3.0当量)，在90℃下搅拌3小时。反应混合物通过硅藻土过滤，向滤液中加入H2O(80mL)，乙酸乙酯萃取(50mL×3).萃取液用饱 和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，真空浓缩以后得到粗品。将残留物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，3g，收率41％)。
步骤B：4-(4-氨基-2-氟苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
将化合物4-(2-氟-4-硝基苯基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(3.0g，9.32mmol，1.0当量)溶于EtOH(30.0mL)中，加入Pd/C(1g，w.t.＝10％)。在H2氛围下，反应液在室温下搅拌16小时。反应混合物通过硅藻土过滤，滤液经过真空浓缩以后得到标题化合物(黄色固体，2.0g，收率73％)。
步骤C：4-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
将化合物4-(4-氨基-2-氟苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.0g，6.8mmol，1.0当量)溶于二氧六环(5.0mL)中，向体系中加入3-溴哌啶-2,6-二酮(3.91g，20.41mmol，3.0当量)和DIEA(2.4mL，13.6mmol，2.0当量)。在90℃下搅拌16小时。向反应体系中加入H2O(30mL)，乙酸乙酯萃取(30mL×3).萃取液用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，真空浓缩以后得到粗品，将粗品经柱层析纯化得到标题化合物(黄色固体，3.0g，收率41％)。
步骤D：3-((3-氟-4-(哌啶-4-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮
将化合物4-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(873mg，2.15mmol，1.0当量)溶于4N HCl-二氧六环(8.0mL)中，室温搅拌1小时。反应液真空浓缩后得到标题化合物(绿色固体，657mg，粗品)。
步骤E：4-硝基苯基4-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-1-甲酸酯
将化合物3-((3-氟-4-(哌啶-4-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(360mg，1.18mmol，1.0当量)溶于DCM(5mL)中。冰浴下，向此体系中加入DIEA(457.14mg，3.54mmol，3.0当量)和4-硝基苯基碳酰氯(356.45mg，1.77mmol，1.5当量)。反应体系在30℃下搅拌0.5小时。将反应混合物倒入水中，用DCM(50mL×2)萃取。合并有机层用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥并浓缩。残余物经柱层析纯化得到标题化合物(绿色固体，550mg，产率99％)。
步骤F：N-(4-氨基甲酰基-1-(4-(4-(4-(4-(4-(2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-1-羰基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡咯-3-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
将化合物4-硝基苯基-4-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-1-甲酸酯(100mg，0.21mmol，1.0当量)溶于DMF(2mL)。向此体系中加入N-(4-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡咯-3-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(194.89mg，0.43mmol，2.0当量)和DIEA(137 37mg，1.06mmol.5.0当量)。反应体系在100℃下搅拌48小时。通过制备分离得到标题化合物(黄色固体，31.2mg，产率18％)。LC-MS(ESI):m/z 790.3[M+H]+。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ12.23(s,1H),10.79(s,1H),8.42-8.33(m,2H),8.16(d,J＝7.4Hz,1H),7.96(d,J＝2.2Hz,1H),7.89(d,J＝2.2Hz,1H),7.64(s,1H),7.43(d,J＝8.8Hz,2H),7.25(s,1H),7.12(d,J＝8.9Hz,2H),7.00(t,J＝8.8Hz,1H),6.51-6.38(m,2H),4.31(dd,J＝11.5,4.7Hz,1H),3.76(d,J＝12.4Hz,2H),3.32(s,4H),3.21(s,4H),2.90-2.69(m,4H),2.59(s,1H),2.12-2.02(m,1H),1.92-1.82(m,1H),1.71-1.53(m,4H).
制备例433.化合物A427的合成
步骤A：N-(4-氨基甲酰基-1-(4-(4-((1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡咯-3-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
将化合物1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲醛(60mg，0.18mmol，1.0当量)和N-(4-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡咯-3-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺盐酸盐(90mg，0.18mmol，1.0当量)溶于DMF(5mL)中，向体系中加入两滴TEA，让体系保持碱性。搅拌5分钟以后加入HOAc(0.1mL，0.36mmol，2.0当量)。30分钟以后，NaBH(OAc)3(152mg，0.72mmol，4.0当量)分批加入到反应体系中.反应16小时以后，向反应体系中加入H2O(20mL)，乙酸乙酯萃取(20mL×3)。萃取液用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，真空浓缩以后得到粗品。粗产品经过制备分离得到标题化合物(白色固体，42mg，收率30％)。LC-MS(ESI):m/z 776.2[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.23(s,1H),10.77(s,1H),8.48-8.29(m,2H),8.16(dd,J＝7.5,1.1Hz,1H),7.94(d,J＝2.5Hz,1H),7.88(d,J＝2.4Hz,1H),7.64(s,1H),7.46-7.36(m,2H),7.25(s,1H),7.13-7.03(m,2H),6.91-6.79(m,1H),6.50(dd,J＝14.9,2.5Hz,1H),6.42(dd,J＝8.8,2.3Hz,1H),5.78(d,J＝7.6Hz,1H),4.33-4.18(m,1H),3.25-3.15(m,4H),3.12(d,J＝11.0Hz,2H),2.77-2.67(m,1H),2.60-2.51(m,7H),2.29-2.19(m,2H),2.12-2.05(m,1H),1.90-1.75(m,3H),1.68-1.57(m,1H),1.33-1.22(m,2H).
制备例434.化合物A428的合成
步骤A：N-(4-氨基甲酰基-1-(4-(4-(1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡咯-3-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
化合物N-(4-氨基甲酰基-1-(4-(4-(1-(4-(4-(2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡咯-3-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺的合成参照A427的方法，经制备分离得到标题化合物(黄色固体，22mg，收率13％)。LC-MS(ESI):m/z 762.2[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.23(s,1H),10.77(s,1H),8.47-8.33(m,2H),8.16(dd,J＝7.5,1.2Hz,1H),7.94(d,J＝2.5Hz,1H),7.88(d,J＝2.4Hz,1H),7.64(s,1H),7.43-7.38(m,2H),7.25(s,1H),7.12-7.06(m,2H),6.84(t,J＝9.4Hz,1H),6.56-6.47(m,1H),6.42(d,J＝8.3Hz,1H),5.79(d,J＝7.7Hz,1H),4.33-4.17(m,1H),3.22-3.15(m,6H),2.76-2.67(m,5H),2.62-2.54(m,3H),2.35-2.29(m,1H),2.13-2.04(m,1H),1.92-1.80(m,3H),1.67-1.54(m,2H).
制备例435.化合物A429的合成
步骤A：3-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯甲腈
在氮气气氛下，向3,4-二氟苯甲腈(10g，71.9mmol，1.0当量)和1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(10g，69.9mmol，1.02当量)在DMSO(100mL)中的混合物中加入碳酸钾(30.2g，211mmol，3.02当量)。将混合物在氮气气氛下脱气三次，并在60℃下搅拌2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，13g，产率71％)。
步骤B：(3-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯
在氮气气氛下，向3-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基)苯甲腈(14g，53.4mmol，1.0当量)的THF(30mL)和MeOH(40mL)混合溶液中加入二碳酸二叔丁酯(23.2g，107mmol，2.00当量)、氯化镍(12.7g，53.4mmol，1.0当量)和硼氢化钠(20.2g，534mmol，10当量)。将混合物在25℃下搅拌7小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体状，7.0g，收率36％)。
步骤C：(3-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基)苯基)甲胺
向(3-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基)苄基)氨基甲酸叔丁酯(7.0g，19.1mmol，1.0当量)的二氯甲烷(50mL)溶液中加入氯化氢的1,4-二氧六环溶液(50mL)，反应液在25℃下搅拌1小时。用饱和碳酸氢钠水溶液碱化，用乙酸乙酯萃取。有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状物，4.1g，产率81％)。
步骤D：(3-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基)苄基)氨基甲酸甲酯
在氮气气氛下，向(3-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基)苯基)甲胺(2.0g，7.5mmol，1.0当量)的二氯甲烷(20mL)溶液中加入氯甲酸甲酯(0.84g，8.93mmol，1.20当量)。将混合物在25℃下搅拌2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1.3g，产率54％)。
步骤E：1-(3-氟-4-(1,4-二氧-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基)苄基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
在氮气气氛下，向(3-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基)苄基)氨基甲酸甲酯(1.3g，4.0mmol，1.0当量)的叔丁醇(10mL)溶液中加入叔丁醇钾(1.3g，11.6mmol，2.9当量)和丙烯酰胺(1.42g，20.0mmol，5.0当量)。将混合物在60℃下搅拌12小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，800mg，产率55％)。
步骤F：1-(3-氟-4-(4-氧代哌啶-1-基)苄基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
将1-(3-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基)苄基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(800mg，2.18mmol，1.0当量)的甲酸(8mL)溶液在50℃下搅拌3小时。将反应液用乙酸乙酯稀释，用饱和NaHCO3溶液水溶液碱化，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状，401mg，产率58％)。
步骤G：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(1-(4-((2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)甲基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
向1-(3-氟-4-(4-氧代哌啶-1-基)苄基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(200mg，0.62mmol，1.0当量)和N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(284mg，0.62mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入3滴醋酸并搅拌2小时，然后加入氰基硼氢化钠(231mg，3.7mmol，6.2当量)。将混合物在室温下搅拌过夜。反应完全后，将反应液用水淬灭，后用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。粗产品经过HPLC纯化，得到标题化合物(白色固体，20.1mg，收率4％)。LC-MS (ESI):m/z 763[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.19(s,1H),8.88(s,1H),8.47-8.35(m,2H),8.23-8.19(m,1H),7.95(s,1H),7.84-7.76(m,2H),7.70(s,1H),7.10-7.00(m,5H),4.43(s,2H),3.43-3.38(m,2H),3.35(s,1H),3.28-3.26(m,2H),3.24-3.20(m,4H),2.71-2.66(m,6H),2.55-2.53(m,2H),1.96-1.85(m,2H),1.66-1.56(m,2H).
制备例436.化合物A430的合成
步骤A：8-(4-(苄氧基)-2-氟苯基)-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷
在室温下，向1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(2g，14.0mmol，1.0当量)，4-苄氧基-1-溴-2-氟苯(4.32g，15.4mmol，1.1当量)和叔丁醇钠(4.03g，41.9mmol，3当量)的甲苯混合物中加入三(二亚苄基丙酮)二钯(640mg，0.7mmol，0.05当量)和1,1'-联萘-2,2'-双二苯膦(870mg，1.4mmol，0.10当量)。将混合物在氮气保护下110℃搅拌三小时。用乙酸乙酯稀释混合物，用水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残余物经柱层析纯化，得到标题化合物(黄色固体，2.5g，产率52％)。
步骤B：3-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯酚
在室温下，向8-(4-(苄氧基)-2-氟苯基)-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(2.5g，7.28mmol，1.0当量)的甲醇(35mL)溶液中加入10％Pd/C(0.5g)，将混合物在氢气氛围下室温搅拌过夜。反应完全后，过滤混合物，将滤液浓缩至干，得到标题化合物(黄色固体，1.7g，产率92％)。
步骤C：3-(3-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯氧基)哌啶-2,6-二酮
在0℃下，向3-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯酚(1.3g，5.13mol，1.0当量)的DMF(25mL)溶液中加入钠氢(310mg，7.7mmol，1.5当量，60％分散于矿物油中)。半小时后，0℃下向混合物中加入3-溴哌啶-2,6-二酮(1.08g，5.65mmol，1.1当量)。将混合物在室温下搅拌3小时。饱和氯化铵水溶液淬灭后，用乙酸乙酯萃取。有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，70mg，产率37％)。
步骤D：3-(3-氟-4-(4-氧代哌啶-1-基)苯氧基)哌啶-2,6-二酮
将3-(3-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯氧基)哌啶-2,6-二酮(300mg，0.82mmol，1.0当量)的水(3mL)和甲酸(3mL)溶液在50℃下搅拌六小时。用饱和碳酸氢钠水溶液中和，用乙酸乙酯萃取。有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状，150mg，产率57％)。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氧基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(300mg，0.65mmol，2.2当量)和3-(3-氟-4-(4-氧代哌啶-1-基)苯氧基)哌啶-2,6-二酮(100mg，0.22mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中加入一滴HOAc并搅拌16小时。然后加入醋酸硼氢化钠(231mg，1.1mmol，5.0当量)，在25℃下搅拌2小时。将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经制备分离得到标题化合物(白色固体，7mg，产率3％)。LC-MS(ESI):m/z 764[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.93(s,1H),8.89(s,1H),8.48-8.36(m,2H),8.24-8.17(m,1H),7.95(s,1H),7.85-7.76(m,2H),7.71(s,1H),7.26-7.08(m,2H),7.04-6.96(m,1H),6.95-6.87(m,1H),6.81-6.73(m,1H),5.24-5.01(m,1H),3.20-3.10(m,2H),3.06-2.77(m,4H),2.74-2.62(m,4H),2.60-2.52(m,2H),2.47-2.31(m,1H),2.25-1.91(m,5H),1.88-1.34(m,3H).
制备例437.化合物A431的合成
步骤A：8-(5-(苄氧基)吡啶-2-基)-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷
向5-苄氧基-2-溴吡啶(2.0g，7.60mmol，1.0当量)和1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(2.17g，15.1mmol，2当量)的1,4-二氧六环(20mL)溶液中加入Ruphos-Pd-G3(0.90g，1.1mmol，0.15当量)及Cs2CO3(7.43g，21.4mmol，3.0当量)。将混合物在氮气气氛下置换三次，并在100℃下搅拌2小时。将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，750mg，产率30％)。
步骤B：6-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶-3-醇
向8-(5-(苄氧基)吡啶-2-基)-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(750mg，2.30mmol，1.0当 量)的乙醇(10mL)溶液中加入10％湿钯碳(0.27g)。将混合物在氢气气氛下室温搅拌过夜。过滤混合物将滤液浓缩至干，得到标题化合物(黄色固体，200mg，产率37％)。
步骤C：3-((6-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶-3-基)氧基)哌啶-2,6-二酮
在0℃下，向6-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶-3-醇(200mg，0.84，1.0当量)的DMF(3mL)溶液中加入NaH(50mg，1.26mmol，1.5当量，60％分散于矿物油中)。0℃下搅拌10分钟后，继续向混合物中加入3-溴哌啶-2,6-二酮(193mg，1.01mmol，1.2当量)。将混合物在室温下搅拌3小时。用饱和氯化铵水溶液淬灭混合物。用乙酸乙酯萃取，有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，200mg，产率69％)。
步骤D：3-((6-(4-氧代哌啶-1-基)吡啶-3-基)氧基)哌啶-2,6-二酮
将3-((6-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶-3-基)氧基)哌啶-2,6-二酮(200mg，0.58mmol，1.0当量)的甲酸(3mL)溶液在50℃下搅拌6小时。用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭后，用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩至干得到标题化合物(黄色油状，100mg，产率57％)。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(1-(5-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
向N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(303mg，0.66mmol，2.0当量)和3-((6-(4-氧代哌啶-1-基)吡啶-3-基)氧基)哌啶-2,6-二酮(100mg，0.33mmol，1.0当量)的DMF(3mL)溶液中醋酸(0.2mL)。室温搅拌2小时后，在反应液中加入三乙酰氧基硼氢化钠(231mg，1.11mmol，5.0当量)。将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC制备得到标题化合物(白色固体，1.7mg，产率1％)。LC-MS(ESI):m/z 747[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.92(s,1H),8.92(s,1H),8.92(s,1H),8.46-8.38(m,2H),8.21(d,J＝7.5Hz,1H),7.95(d,J＝2.6Hz,2H),7.87(d,J＝8.9Hz,2H),7.74(s,1H),7.38(d,J＝6.4Hz,1H),7.25(s,1H),7.13(s,1H),6.92(d,J＝9.2Hz,1H),5.15-4.94(m,1H),4.39-4.32(m,2H),3.99-3.93(m,2H),3.65-3.62(m,2H),3.15-3.11(m,2H),2.81-2.75(m,2H),2.67-2.62(m,2H),2.22-2.12(m,4H),2.01-1.96(m,1H),1.72-1.50(m,3H).
制备例438.化合物A432的合成
步骤A：8-(5-硝基吡啶-2-基)-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷
向2-氟-5-硝基吡啶(10g，70.1mmol，1.0当量)的乙腈(200mL)溶液中加入碳酸钠(13.6g，128mmol，1.8当量)，1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(5.5g，48.3mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下70℃搅拌2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，10g，产率53％)。
步骤B：6-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶-3-胺
向8-(5-硝基吡啶-2-基)-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(10.0g，37.7mmol，1.0当量)的甲醇(100mL)溶液中加入Pd/C(1.0g，10％wt.)。反应液再用氢气球置换三次并在氢气氛围下室温搅拌过夜。反应完全后，反应液过滤再减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，6g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：3-((6-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶-3-基)氨基)哌啶-2,6-二酮
向6-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶-3-胺(3.0g，12.7mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(25mL)溶液中加入3-溴哌啶-2,6-二酮(2.4g，12.7mmol，1.0当量)和DIEA(4.91g，38.1mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下45℃过夜。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，3g，产率68％)。
步骤D：3-((6-(4-氧代哌啶-1-基)吡啶-3-基)氨基)哌啶-2,6-二酮
向3-((6-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶-3-基)氨基)哌啶-2,6-二酮(2.0g，5.78mmol，1.0当量)的水(1mL)溶液中加入甲酸(10mL)。反应液25℃搅拌6小时。反应完全后，将反应液用饱和碳酸氢钠水溶液中和，乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，310mg，产率18％)。
步骤E：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(1-(5-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向3-((6-(4-氧代哌啶-1-基)吡啶-3-基)氨基)哌啶-2,6-二酮(302mg，1.0mmol，2.0当量)和N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(230mg，0.5mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3mL)和醋酸(0.1mL)溶液中加入NaBH3CN(199mg，3.0mmol，6.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌过夜。反应完全后，将反应液减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，20mg，产率3％)。LC-MS(ESI):m/z 746[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),11.35(s,1H),10.86(s,1H),8.93(s,1H),8.46-8.38(m,2H),8.23-8.19(m,1H),7.96(s,1H),7.89-7.85(m,2H),7.77-7.69(m,2H),7.43-7.36(m,2H),7.18(d,J＝9.1Hz,2H),4.46-4.26(m,4H),3.97-3.93(m,4H),3.70-3.53(m,4H),3.32-3.19(m,4H),3.10(t,J＝12.1Hz,2H),2.71-2.63(m,1H),2.13-2.07(m,1H),1.93-1.85(m,2H).
制备例439.化合物A433的合成
步骤A：6-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺环[4.5]癸-8-基)烟酸甲酯
在室温氮气保护下，向6-氟烟酸甲酯(5g，32.2mmol，1.0当量)的乙腈(200mL)溶液中加入碳酸钠(6.83g，64.4mmol，2.0当量),1,4-二氧杂-8-氮杂螺环[4.5]癸烷(5.5g，48.3mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下90℃搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯，梯度：0-30％乙酸乙酯)纯化得到标题化合物(白色固体，6.1g，产率68％)。
步骤B：6-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺环[4.5]癸-8-基)烟酸锂
在室温氮气保护下，向6-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺环[4.5]癸-8-基)烟酸甲酯(3g，10.8mmol，1.0当量)的四氢呋喃(30mL)和水(6mL)的溶液中加入氢氧化锂(517mg，21.56mmol，2.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液减压浓缩得到标题化合物(白色固体，2.71g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤C：N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-6-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺环[4.5]癸-8-基)烟酰胺
在室温氮气保护下，向6-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺环[4.5]癸-8-基)烟酸锂(1.6g，5.9mmol，1.2当量)的N,N-二甲基甲酰胺(15mL)溶液中加入HATU(1.93g，5.9mmol，1.2当量)，3- 氨基哌啶-2,6-二酮(632mg，4.9mmol，1.0当量)和DIEA(1.89g，14.7mmol，3.0当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇，梯度：0-5％甲醇)纯化得到标题化合物(黄色固体，1.6g，产率87％)。
步骤D：N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-6-(4-氧代哌啶-1-基)烟酰胺
在室温氮气保护下，向N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-6-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺环[4.5]癸-8-基)烟酰胺(800mg，2.1mmol，1.0当量)的四氢呋喃(2mL)溶液中加入稀盐酸(4mL，2N)。反应液在氮气保护下50℃搅拌反应1小时。反应完全后，将反应液用饱和碳酸氢钠水溶液中和，乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇，梯度：0-5％甲醇)纯化得到标题化合物(黄色固体，400mg，产率58％)。
步骤E：N-(3-氨甲酰基-1-(4-(4-(1-(5-((2,6-二氧代哌啶-3-基))氨甲酰基)氮[杂]苯-2-基)哌啶-4-基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-6-(4-氧代哌啶-1-基)烟酰胺(216mg，0.66mmol，3.0当量)和N-(3-氨甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基))苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(100mg，0.22mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中加入NaBH(OAc)3(231mg，1.1mmol，5.0当量)，MgSO4(100mg，0.83mmol，3.7当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应过夜。反应完全后，将反应液减压浓缩。残余物经HPLC(色谱柱：YMC-Actus Triart C18，洗脱剂：0.1％NH3.H2O的去离子水/乙腈，梯度：10-95％乙腈)纯化得到标题化合物(白色固体，12.5mg，产率7％)。LC-MS(ESI):m/z 774[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.78(s,1H),10.84(s,1H),8.87(s,1H),8.61(d,J＝2.4Hz,1H),8.53(d,J＝8.3Hz,1H),8.44(d,J＝7.6Hz,1H),8.41-8.36(m,1H),8.23-8.19(m,1H),7.99-7.88(m,2H),7.77(d,J＝9.0Hz,2H),7.69(s,1H),7.06(d,J＝9.1Hz,2H),6.90(d,J＝9.2Hz,1H),4.81-4.69(m,1H),4.51-4.42(m,2H),3.22-3.18(m,4H),2.96-2.89(m,2H),2.82-2.75(m,1H),2.70-2.64(m,4H),2.61-2.54(m,2H),2.14-2.05(m,1H),1.99-1.94(m,1H),1.92-1.86(m,2H),1.46-1.37(m,2H).
制备例440.化合物A434-Int的合成
步骤A：4-(4-(4-氨基-3-(甲氧羰基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(4-(3-(甲氧基羰基)-4-硝基-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(10mg，23.18mmol，1.0当量)和氯化铵(6.2g，115.89mmol，5.0当量)在无水乙醇(100mL)和水(30mL)中的混合物中加入铁粉(6.47g，115.89mmol，5.0当量)。混合物在90℃下搅拌1.5小时。混合物趁热在沸石上过滤。滤液用水稀释并用乙酸乙酯萃取。有机层依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到标题化合物(浅黄色固体，9.2g，粗品)。
步骤B：4-(4-(3-(甲氧基羰基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在0℃，将4-(4-(4-氨基-3-(甲氧羰基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(900mg，粗品)和DIEA(869mg，6.73mmol，3.0当量)加入DMF(15mL)溶液中，然后添加6-(三氟甲基)吡啶甲酸(471mg，2.47mmol，1.1当量)和HATU(1.3g，3.36mmol，1.5当量)。混合物在室温下搅拌1小时。将混合物倒入冷水中析出固体，过滤得到标题化合物(浅黄色固体，1.05g，收率82％)。
步骤C：4-(4-(3-(2-羟基丙-2-基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(4-(3-(甲氧基羰基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(300mg，0.52mmol，1.0当量)的四氢呋喃(5mL)和二氯甲烷(5mL)溶液中加入甲烷单溴化镁(2.6mL，7.83mmol，15.0当量)。反应混合物在室温下搅拌过夜。反应完全后加入饱和低温的氯化铵水溶液淬灭，并用二氯甲烷萃取两次。有机层依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，180mg，产率60％)。
步骤D：N-(3-(2-羟基丙-2-基)-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向4-(4-(3-(2-羟基丙-2-基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(300mg，0.52mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入4M盐酸- 二氧六环(5mL)。反应液在室温下搅拌1小时。反应完全后，用1N氢氧化钠溶液水溶液将反应液的pH值调至6，并用二氯甲烷萃取。有机层依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥并浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，130mg，产率52％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.20(s,1H),8.74(s,1H),8.41(dd,J＝16.5,7.5Hz,2H),8.18(d,J＝6.7Hz,1H),7.60(d,J＝9.0Hz,2H),7.01(d,J＝9.1Hz,2H),5.93(s,1H),3.11-3.03(m,4H),2.88-2.80(m,4H),1.58(s,6H),1.23(s,1H).
制备例441.化合物A434的合成
步骤A：4-(二甲氧基甲基)-1-(2-氟-4-硝基苯基)哌啶
在室温下，向1,2-二氟-4-硝基苯(6g，37.72mmol，1.0当量)的二甲基亚砜(60mL)溶液中，加入4-(二甲氧基甲基)哌啶(6.6g，41.49mmol，1.1当量)和DIEA(20.0mL，113.15mmol，3.0当量)。反应液在氮气气氛下100℃搅拌2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，11.2g，产率99％)。
步骤B：4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-氟苯胺
在室温下，向4-(二甲氧基甲基)-1-(2-氟-4-硝基苯基)哌啶(5g，16.76mmol，1.0当量)的甲醇(100mL)溶液中加入Pd/C(1g，w.t.＝10％)。反应液在氮气气氛下脱气三次，然后在氮气气氛下室温搅拌3小时。反应完全后，所得溶液经硅藻土过滤并浓缩得到标题化合物(黄色固体，4.4g，产率99％)。
步骤C：3-((4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-氟苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-氟苯胺(500mg，1.87mmol，1.0当量)的二氧六环(5mL)溶液中加入3-溴哌啶-2,6-二酮(718mg，3.74mmol，2.0当量)和DIEA(0.66mL，3.74mmol，2.0当量)。反应混合液在氮气气氛下80℃下搅拌18小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，480mg，产率68％)。
步骤D：1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲醛
在室温下，将3-((4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-氟苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(100mg，0.264mmol，1.0当量)加入甲酸(5mL)溶液中，反应液在氮气气氛下室温搅拌2小时。反应完全后，减压浓缩反应混合物，直接用于下一步
步骤E：N-(1-(4-(4-((1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲醛(93mg，粗品)的DMF(10mL)溶液中加入N-(3-(2-羟基丙-2-基)-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(140mg，0.30mmol，1.0当量)，滴加几滴醋酸并搅拌2小时，然后加入NaBH(OAc)3(249mg，1.18mmol，4.0当量)。反应液在室温条件下搅拌1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，38.8mg，产率17％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.20(s,1H),10.78(s,1H),8.75(s,1H),8.46-8.35(m,2H),8.18(d,J＝7.6Hz,1H),7.61(d,J＝8.9Hz,2H),7.03(d,J＝9.0Hz,2H),6.83(t,J＝9.3Hz,1H),6.60-6.29(m,2H),5.93(s,1H),5.78(d,J＝7.6Hz,1H),4.36-4.10(m,1H),3.21-3.06(m,6H),2.79-2.68(m,1H),2.68-2.51(m,7H),2.29-2.18(m,2H),2.14-2.05(m,1H),1.91-1.73(m,3H),1.66-1.55(m,7H),1.33-1.21(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 791.6[M+H]+.
制备例442.化合物A435的合成
步骤A：1-(2-氟-4-硝基苯基)哌啶-4-甲酸叔丁酯
在室温下，向1,2-二氟-4-硝基苯(2g，12.58mmol，1.0当量)和哌啶-4-甲酸叔丁酯(2.6g，13.84mmol，1.1当量)在乙腈(35mL)的溶液中加入DIEA(5.5mL，31.45mmol，2.5当量)，然后反应混合物在氮气气氛下80℃搅拌8小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.5g，产率37％)。
步骤B：1-(4-氨基-2-氟苯基)哌啶-4-甲酸叔丁酯
在室温下，向1-(2-氟-4-硝基苯基)哌啶-4-甲酸叔丁酯(1.5g，4.63mmol，1.0当量)的乙酸乙酯(40mL)溶液中加入Pd-C(300mg，w.t.＝10％)。反应液在氢气气氛下脱气三次，并在氢气气氛下室温搅拌6小时。反应完全后，所得溶液经硅藻土过滤并浓缩得到标题化合物(棕色油状物，1.3g，粗品)。
步骤C：1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲酸叔丁酯
在室温下，分别将1-(4-氨基-2-氟苯基)哌啶-4-甲酸叔丁酯(1.3g，粗品)，3-溴哌啶-2,6-二酮(1.0g，5.75mmol，1.3当量)和NaHCO3(930mg，11.05mmol，2.5当量)加入DMF(30mL)溶液中，反应液在氮气气氛下60℃搅拌6小时反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，800mg，两步收率45％)。
步骤D：1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲酸
在室温下，向1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲酸叔丁酯(200mg，0.49mmol，1.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入三氟乙酸(2mL)，然后反应液在室温下搅拌3小时。反应完全后，将反应液减压浓缩得到标题化合物(棕色固体，170mg，粗品)。
步骤E：N-(1-(4-(4-(1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲酰基)哌嗪-1-基)苯基)-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在0℃下，向1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲酸(150mg，粗品)和N-(3-(2-羟基丙-2-基)-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(204mg，0.43mmol，1.0当量)的DMF(5mL)溶液中，加入HATU(245mg，0.64mmol，1.5当量)和DIEA(111mg，0.86mmol，2.0当量)。混合物在恒温条件下搅拌1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，28.9mg，产率8％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.20(s,1H),10.79(s,1H),8.77(s,1H),8.46-8.34(m,2H),8.18(d,J＝7.6Hz,1H),7.65(d,J＝9.0Hz,2H),7.08(d,J＝9.1Hz,2H),6.99-6.82(m,1H),6.63-6.40(m,2H),6.06-5.59(m,2H),4.43-4.12(m,1H),3.75-3.61(m,4H),3.26-3.10(m,6H),2.87-2.66(m,3H),2.61-2.51(m,2H),2.12-2.05(m,1H),1.93-1.65(m,5H),1.58(s,6H).LC-MS(ESI):m/z 806[M+H]+.
制备例443.化合物A436的合成
步骤A：4-(2-氟-4-硝基苯基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯
在室温下，向1-溴-2-氟-4-硝基苯(5.0g，22.73mmol，1.0当量)的二氧六环(50mL)和水(5mL)的溶液中加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(8.4g，27.27mmol，1.2当量)，K2CO3(9.4g，68.19mmol，3.0当量)和Pd(dppf)Cl2(1.7g，2.27mmol，0.1当量)。反应混合物在氮气气氛下90℃搅拌3小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，3g，收率41％)。
步骤B：4-(4-氨基-2-氟苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(2-氟-4-硝基苯基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(3.0g，9.32mmol，1.0当量)的乙醇(30mL)中的溶液中加入Pd-C(1g，w.t.＝10％)。反应混合物用氢气脱气三次，并在氢气气氛下室温搅拌16小时。反应完全后，反应液经硅藻土过滤，减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，2.0g，粗品)。
步骤C：4-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(4-氨基-2-氟苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.0g，粗品)的二氧六环(20mL)溶液中加入3-溴哌啶-2,6-二酮(3.9g，20.41mmol，3.0当量)和DIEA(2.4mL，13.6mmol，2.0当量)。反应液在氮气气氛下90℃搅拌16小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，3.0g，两步收率41％)。
步骤D：3-((3-氟-4-(哌啶-4-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向4-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(900mg，2.2mmol，1.0当量)的二氯甲烷(6mL)溶液中加入三氟乙酸(1.5mL)。反应液在氮气气氛下室温下搅拌1小时。反应完全后，将反应液减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，0.6g，粗品)。
步骤E：4-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-1-甲酸4-硝基苯酯
在室温下，向3-((3-氟-4-(哌啶-4-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(600mg，粗品)的二氯甲 烷(15mL)溶液中加入4-硝基苯基氯甲酸酯(594mg，2.9mmol，1.5当量)和DIEA(508mg，3.9mmol，2.0当量)。反应液在氮气气氛下室温搅拌1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，200mg，两步收率22％)。
步骤F：N-(1-(4-(4-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-1-甲酰基)哌嗪-1-基)苯基)-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向4-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-1-甲酸4-硝基苯酯(200mg，0.4mmol，1.0当量)的DMF(10mL)溶液中加入DIEA(164.8mg，1.2mmol，3.0当量)和N-(3-(2-羟基丙-2-基)-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(303mg，0.6mmol，1.5当量)。反应液在氮气气氛下100℃搅拌1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，26.1mg，收率8％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.21(s,1H),10.79(s,1H),8.77(s,1H),8.46-8.32(m,2H),8.18(d,J＝7.6Hz,1H),7.64(d,J＝8.9Hz,2H),7.10-6.97(m,3H),6.51-6.42(m,2H),6.03(d,J＝7.7Hz,1H),5.95(s,1H),4.40-4.27(m,1H),3.81-3.72(m,2H),3.33-3.28(m,4H),3.21-3.13(m,4H),2.90-2.72(m,4H),2.61-2.55(m,1H),2.13-2.05(m,1H),1.92-1.80(m,1H),1.75-1.66(m,2H),1.66-1.59(m,2H),1.58(s,6H).LC-MS(ESI):m/z 803[M+H]+.
制备例444.化合物A437的合成
步骤A：5-苄氧基-2-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)吡啶
将5-(苄基氧基)-2-溴吡啶(5.0g，18.9mmol，1.0当量)和4-(二甲氧基甲基)哌啶(4.5g，28.4mmol，1.5当量)在1,4-二氧六环(60mL)中搅拌后的混合物中加入Ruphos(1.8g，3.83mmol，0.2当量)，Ruphos Pd G1(0.6g，2.72mmol，0.14当量)和碳酸铯(5.5g，56.8mmol，3.0当量)。将反应混合物在90℃，氮气气氛下搅拌16小时。将混合物用冰冷却的饱和氯化铵溶液淬灭，混合液乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色油状物，2.7g，产率42％)。
步骤B：6-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)吡啶-3-醇
将5-苄氧基-2-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)吡啶(2.7g，7.91mmol，1.0当量)在甲醇(30mL)中搅拌均匀，室温下加入Pd/C 10％(0.3g以重量计11％)。将混合物用氢气脱气三次，然后在常温下用氢气球搅拌16小时，将混合物在减压条件下过滤浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1.8g，产率91％)。
步骤C：3-((6-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)吡啶-3-基)氧)哌啶-2,6-二酮
将6-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)吡啶-3-醇(800mg，3.21mmol，1.0当量)在DMF(15mL)中搅拌后，在0℃下加入NaH(60％在矿物油中，254mg，6.42mmol，2.0当量)。反应混合物在氮气气氛下，0℃搅拌30分钟。然后在0℃下加入3-溴哌啶-2,6-二酮(913mg，4.81mmol，1.5当量)，室温搅拌2小时。将所得溶液在0℃下用氯化铵水溶液淬灭，混合液乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，200mg，产率17％)。
步骤D：1-(5-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-甲醛
将3-((6-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)吡啶-3-基)氧基)哌啶-2,6-二酮(200mg，0.62mmol，1.0当量)与甲酸(5mL)混合，在50℃下搅拌30分钟。所得溶液在减压下浓缩，得到标题化合物(黄色油状物，160mg，产率92％)。
步骤E：N-(1-(4-(4-(1-(5-(2,6-二氧哌啶-3-基)氧)吡啶-2-基)哌啶-4-基)甲基)哌啶-1-基)苯基)-3-(2-羟基丙基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
1-(5-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-甲醛(50mg，0.16mmol，1.0当量)、1滴HOAc和N-(3-(2-羟丙基)-1-(4-(哌啶-1-酰基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(75mg，0.16mmol，1.0当量)在DMF(6mL)中的混合物在室温下搅拌2小时。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(133mg，0.63mmol，4.0当量)，反应液继续室温搅拌1小时。将所得溶液在0℃下用氯化铵水溶液淬灭。混合液乙酸乙酯萃取三次，混合有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残余物经柱色谱纯化后作为粗产品。然后将粗产品通过制备HPLC纯化，得到标题化合物(白色固体，28mg，产率23％)。LC-MS(ESI):m/z 776[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.21(s,1H),10.92(s,1H),8.75(s,1H),8.47-8.35(m,2H),8.18(d,J＝7.6Hz,1H),7.93(d,J＝3.0Hz,1H),7.61(d,J＝8.9Hz,2H),7.32(dd,J＝9.2,3.0Hz,1H),7.03(d,J＝9.1Hz,2H),6.79(d,J＝9.3Hz,1H),5.94(s,1H),4.99(dd,J＝10.6,5.0Hz,1H),4.14(d,J＝12.5Hz,2H),3.49-3.29(m,4H),3.17(s,4H),2.75-2.55(m,4H),2.25-2.16(m,3H),2.15-2.08(m,1H),1.88-1.68(m,3H),1.58(s,6H), 1.17-1.06(m,2H).
制备例445.化合物A438的合成
步骤A：1-(5-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-4-甲醛
在室温下，将3-((6-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)吡啶-3-基)氨基)哌啶-2,6-二酮(170mg，0.6mmol，1.0当量)加入到甲酸(5mL)溶液中，反应混合物在室温条件下搅拌1小时。反应完全后，将反应液减压浓缩，得到标题化合物(绿色油状物，140mg，粗品)。
步骤B：N-(1-(4-(4-((1-(5-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺甲酸盐
在室温下，向1-(5-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-4-甲醛(140mg，粗品)的DMF(5mL)溶液中加入N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(210mg，0.5mmol，1.0当量)，反应混合物在氮气气氛下室温搅拌30分钟后，加入NaBH(OAc)3(456mg，2.1mmol，4.0当量)继续搅拌1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，38.8mg，产率17％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.21(s,1H),10.77(s,1H),8.75(s,1H),8.47-8.42(m,1H),8.41-8.34(m,1H),8.18(dd,J＝7.6,0.9Hz,1H),8.15(s,1H),7.70(d,J＝2.9Hz,1H),7.61(d,J＝9.0Hz,2H),7.06-7.00(m,3H),6.68(d,J＝9.0Hz,1H),5.93(s,1H),5.36(s,1H),4.20(dd,J＝10.9,4.2Hz,1H),4.01(d,J＝12.5Hz,2H),3.17(s,4H),2.76-2.71(m,1H),2.69-2.64(m,1H),2.62-2.58(m,2H),2.56-2.51(m,4H),2.23(d,J＝6.7Hz,2H),2.15-2.08(m,1H),1.91-1.83(m,1H),1.80-1.68(m,3H),1.58(s,6H),1.19-1.09(m,2H).LC-MS(ESI):m/z 774[M+H]+.
制备例446.化合物A439的合成
步骤A：N-(1-(4-(4-(1-(-4-((2,6-二氧哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)哌嗪-1-基)苯 基)-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向N-(3-(2-羟基丙-2-基)-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(100mg，0.21mmol，1.0当量)和3-(3-氟-4-(4-氧代哌啶-1-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(102mg，0.32mmol，1.5当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中加入三乙胺(0.1mL，0.63mmol，3.0当量)。反应液于室温下搅拌10分钟，加入醋酸(63mg，1.05mmol，5.0当量)。反应液在室温下搅拌过夜，随后加入三乙酰氧基硼氢化钠(134mg，1.63mmol，3.0当量)。反应液在25℃搅拌反应2小时。反应完全后，经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，71.4mg，产率44％)。LC-MS(ESI):m/z 778[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.20(s,1H),10.77(s,1H),8.75(s,1H),8.46-8.31(m,2H),8.18(dd,J＝7.6,1.0Hz,1H),7.66-7.55(m,2H),7.07-6.98(m,2H),6.89-6.79(m,1H),6.54-6.47(m,1H),6.45-6.36(m,1H),5.93(s,1H),5.79(d,J＝7.6Hz,1H),4.31-4.20(m,1H),3.22-3.13(m,6H),2.79-2.71(m,1H),2.70-2.64(m,4H),2.62-2.54(m,3H),2.37-2.30(m,1H),2.12-2.04(m,1H),1.90-1.81(m,3H),1.64-1.54(m,8H).
制备例447.化合物A440的合成
步骤A：8-(5-(苄氧基)吡啶-2-基)-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷
向5-(苄氧基)-2-溴吡啶(1g，3.8mmol，1.0当量)和1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(651mg，4.5mmol，1.2当量)的二氧六环(50mL)溶液中加入Pd2(dba)3(347mg，0.4mmol，0.1当量)，BINAP(472mg，0.8mmol，0.2当量)和2-甲基-2-丙醇钠(728mg，7.6mmol，2.0当量)。反应混合物在氮气气氛下脱气三次，然后加热到120℃搅拌18小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，800mg，产率65％)。
步骤B：6-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶-3-醇
向8-(5-(苄氧基)吡啶-2-基)-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(800mg，2.5mmol，1.0当量)的乙醇(50mL)溶液中加入Pd-C(150mg，w.t.＝10％)。反应混合物用氢气脱气3次，然后 在氢气气氛下室温搅拌4小时。反应完全后，反应混合物经硅藻土垫过滤，减压浓缩，得到标题化合物(黄色固体，520mg，产率90％)。
步骤C：3-((6-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶-3-基)氧基)哌啶-2,6-二酮
在0℃时，向6-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶-3-醇(520mg，2.2mmol，1.0当量)的THF(50mL)中加入NaH(176mg，4.4mmol，2.0当量,质量比为60％)。反应混合物在0℃氮气环境下搅拌10分钟。然后在0℃下加入3-溴哌啶-2,6-二酮(845mg，4.4mmol，2.0当量)。反应混合物氮气气氛下60℃搅拌2小时。反应完全后，反应液加入饱和氯化铵淬灭，用乙酸乙酯萃取，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，500mg，产率65％)。
步骤D：3-((6-(4-氧代哌啶-1-基)吡啶-3-基)氧基)哌啶-2,6-二酮
将3-((6-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶-3-基)氧基)哌啶-2,6-二酮(150mg，0.4mmol，1.0当量)加入甲酸(3mL)溶液中，反应混合物在70℃下搅拌16小时。反应完全后，减压浓缩混合物，得到标题化合物(黄色油，130mg，粗品)。
步骤E：N-(1-(4-(4-(1-(5-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氧基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)哌嗪-1-基)苯基)-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
向N-(3-(2-羟基丙-2-基)-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(204mg，0.4mmol，1.0当量)的DMF(3mL)溶液中加入3-((6-(4-氧代哌啶-1-基)吡啶-3-基)氧基)哌啶-2,6-二酮(130mg，粗品)，醋酸(0.2mL)。反应混合物在氮气气氛下室温搅拌16小时，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(181mg，0.8mmol，2.0当量)。反应混合物在室温下搅拌1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(浅黄色固体，37.5mg，产率11％)。LC-MS(ESI):m/z 762[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.19(s,1H),10.91(s,1H),8.74(s,1H),8.46-8.35(m,2H),8.20-8.15(m,1H),7.93(d,J＝3.1Hz,1H),7.60(d,J＝9.1Hz,2H),7.33(dd,J＝9.2,3.1Hz,1H),7.02(d,J＝9.2Hz,2H),6.82(d,J＝9.3Hz,1H),5.93(s,1H),5.00(dd,J＝10.6,5.0Hz,1H),4.19(d,J＝12.9Hz,2H),3.16(s,4H),2.74(t,J＝11.5Hz,2H),2.67(s,4H),2.64-2.55(m,2H),2.45(s,1H),2.23-2.07(m,2H),1.87(d,J＝10.6Hz,2H),1.57(s,6H),1.43(dd,J＝22.2,10.4Hz,2H).
制备例448.化合物A441的合成
步骤A：8-(5-硝基吡啶-2-基)-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷
在室温下，向8-氮杂-1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷(1g，6.98mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(15mL)溶液中加入2-氯-5-硝基吡啶(1.33g，8.38mmol，1.2当量)和DIEA(3.2mL，20.95mmol，3.0当量)。然后将反应混合物在80℃下搅拌2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.2g，产率65％)。
步骤B：6-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶-3-胺
在室温下，向8-(5-硝基吡啶-2-基)-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(1.2g，4.52mmol，1.0当量)的乙醇(40mL)溶液中加入10％的钯/碳(0.12g，1.13mmol，0.25当量)。反应液在氢气(1atm)氛围中室温搅拌18小时。反应完全后，反应液通过硅藻土过滤并减压浓缩得到标题化合物(黄色固体，900mg，粗品)。无需纯化直接用于下一步。
步骤C：3-((6-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶-3-基)氨基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向6-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶-3-胺(900mg，3.83mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(15mL)溶液中加入3-溴哌啶-2,6-二酮(881mg，4.59mmol，1.2当量)和碳酸氢钠(964mg，11.48mmol，3.0当量)。然后将反应混合物在90℃下搅拌18小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(棕色固体，500mg，产率38％)。
步骤D：3-((6-(4-氧代哌啶-1-基)吡啶-3-基)氨基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，将3-((6-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶-3-基)氨基)哌啶-2,6-二酮(200mg，0.58mmol，1.0当量)溶解于甲酸(5mL)中，将反应液合物在70℃下搅拌3小时。反应完全后，将反应液减压浓缩。得到标题化合物(棕色固体，150mg，粗品)。无需纯化直接用于下一步。
步骤E：N-(1-(4-(4-(1-(5-(2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)哌嗪-1-基) 苯基)-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向3-((6-(4-氧代哌啶-1-基)吡啶-3-基)氨基)哌啶-2,6-二酮(150mg，0.5mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中加入N-(3-(2-羟基丙-2-基)-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基乙基)吡啶酰胺(235mg，0.5mol，1.0当量)和乙酸(0.1mL，3.5当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应16小时。然后向反应液中加入三乙酰氧基硼氢化钠(523mg，2.48mmol，5.0当量)。将反应混合物再次搅拌2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经制备纯化得到标题化合物(棕色固体，5.8mg，产率2％)。1H NMR(400MHz,MeOD-d4,甲酸盐)δ8.71(s,1H),8.45-8.42(m,2H),8.28(t,J＝7.8Hz,1H),8.02(d,J＝7.8Hz,1H),7.74(d,J＝2.9Hz,1H),7.62(d,J＝8.9Hz,2H),7.19(dd,J＝9.0,2.8Hz,1H),7.10(d,J＝8.9Hz,2H),6.82(d,J＝8.9Hz,1H),4.20(dd,J＝11.7,4.8Hz,1H),4.12(dd,J＝18.3,6.1Hz,2H),3.45-3.25(m,5H),3.10-3.02(m,4H),2.87-2.67(m,5H),2.39-2.19(m,1H),2.11(dd,J＝16.8,6.1Hz,2H),2.05-1.85(m,2H),1.67(s,6H).LC-MS(ESI):m/z 761.5[M+H]+.
制备例449.化合物A442的合成
步骤A：2-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯甲酸乙酯
将2,4-二氟苯甲酸乙酯(1g，5.37mmol，1.0当量)，1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(0.85g，5.91mmol，1.1当量)，DIEA(2.1g，16.12mmol，3.0当量)和DMSO(10mL)的混合物加热到80℃反应16小时。反应混合物用水稀释，用乙酸乙酯萃取三次，合并的有机相用水和饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到粗产物，经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1g，收率57％)。
步骤B：2-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯甲酸
将2-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯甲酸乙酯(1g，3.23mmol，1.0当量)溶解在甲醇(10mL)中，降温至0℃加入氢氧化钠溶液(2N，5mL)，室温反应2小时。反应混合物用1N盐酸调节pH至3，用乙酸乙酯萃取三次，合并的有机相用水和饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到标题化合物(白色固体，900mg，产率94％)。
步骤C：N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-2-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯甲酰 胺
冰浴下，向2-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯甲酸(900mg，3.2mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(15mL)溶液中加入3-氨基哌啶-2,6-二酮(492mg，3.84mmol，1.2当量)，DIEA(1.24g，9.6mmol，3.0当量)和HATU(1.8g，4.80mmol，1.5当量)。室温反应2小时后，反应混合物用水稀释，用乙酸乙酯萃取三次，合并的有机相用水和饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到粗产物，经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1g，产率76％)。
步骤D：N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-2-氟-4-(4-氧代哌啶-1-基)苯甲酰胺
将N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-2-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯甲酰胺(1g，2.55mmol)溶解在甲酸(5mL)中，加热到80℃反应2小时。反应混合物浓缩得到标题化合物(黄色固体，700mg，粗品)。
步骤E：N-(1-(4-(4-(1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基甲酰基)-3-氟苯基)哌啶-4-基)哌嗪-1-基)苯基)-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
将化合物N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-2-氟-4-(4-氧代哌啶-1-基)苯甲酰胺(100mg，0.29mmol，1.0当量)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中，加入醋酸(0.1mL)和N-(3-(2-羟基丙-2-基)-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(205mg，0.43mmol，1.5当量)，室温搅拌1小时后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(16mg，0.43mmol，1.5当量)，室温继续搅拌2小时。反应混合物用水稀释，用乙酸乙酯萃取三次，合并的有机相用水和饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到粗产物，经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，42mg，产率17％)。LC-MS(ESI):m/z 806[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.21(s,1H),10.85(s,1H),8.79(s,1H),8.41(dt,J＝15.5,7.6Hz,2H),8.19(d,J＝7.5Hz,1H),8.09-8.04(m,1H),7.67(dd,J＝16.5,8.9Hz,3H),7.13(d,J＝9.3Hz,2H),6.92-6.85(m,2H),5.96(s,1H),4.78-4.69(m,1H),4.11(d,J＝12.1Hz,2H),3.91(d,J＝12.2Hz,2H),3.66(d,J＝11.1Hz,2H),3.24(d,J＝9.6Hz,3H),3.01(t,J＝12.2Hz,2H),2.90(t,J＝12.3Hz,2H),2.77(dd,J＝21.7,8.9Hz,1H),2.54(s,1H),2.15(t,J＝13.2Hz,3H),2.01(d,J＝5.7Hz,1H),1.69(d,J＝9.4Hz,2H),1.58(s,6H).
制备例450.化合物A443的合成
步骤A：3-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯甲酸乙酯
将3,4-二氟苯甲酸乙酯(1g，5.37mmol，1.0当量)加入DMSO(10mL)溶液中，加入1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(0.92g，6.45mmol，1.2当量)和DIEA(2.08g，16.12mmol，3当量)。将反应混合物在60℃下搅拌过夜。冷至室温后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.4g，产率84％)。
步骤B：3-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯甲酸
室温下，在3-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯甲酸乙酯(1.4g，4.53mmol，1.0当量)的MeOH(15mL)和水(5mL)溶液中，加入LiOH(1.9g，45.26mmol，10.0当量)。将反应混合物在50℃下搅拌过夜。冷至室温后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.2g，产率94％)。
步骤C：N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯甲酰胺
在室温下向3-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯甲酸(1.2g，4.27mmol，1.0当量)的DMF(10mL)溶液中，加入3-氨基哌啶-2,6-二酮(0.66g，5.12mmol，1.2当量)、HATU(1.95g，5.12mmol，1.2当量)和DIEA(1.65g，12.80mmol，3.0当量)。反应混合物在室温下搅拌2小时后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1g，产率60％)。
步骤D：N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-氟-4-(4-氧代哌啶-1-基)苯甲酰胺
将N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯甲酰胺(500mg，1.28mmol)的甲酸(5mL)溶液在50℃下搅拌3小时。后将反应液真空浓缩得到标题化合物(黄色固体，300mg，产率68％)。
步骤E：N-(1-(4-(4-(1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基甲酰基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)哌嗪-1-基)苯基)-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
将N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-3-氟-4-(4-氧代哌啶-1-基)苯甲酰胺(200mg，0.58mmol， 1.0当量)和N-(3-(2-羟基丙-2-基)-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(410mg，0.86mmol，1.48当量)加入MeOH(5mL)中，再加入HOAc(21mg，0.12mmol，0.2当量)并搅拌16小时。然后加入醋酸硼氢化钠(181mg，2.88mmol，4.96当量)，在25℃下搅拌2小时。将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经制备分离得到标题化合物(白色固体，44mg，产率9％)。LC-MS(ESI):m/z 806[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.20(s,1H),10.85(s,1H),8.74(s,1H),8.66(d,J＝8.3Hz,1H),8.44-8.36(m,2H),8.18(d,J＝7.9Hz,1H),7.67-7.59(m,4H),7.11(t,J＝8.8Hz,1H),7.03(d,J＝9.1Hz,2H),5.93(s,1H),4.79-4.72(m,1H),3.56(d,J＝11.2Hz,2H),3.21-3.14(m,5H),2.83-2.74(m,3H),2.69(s,4H),2.58-2.42(m,2H),2.14-2.06(m,1H),1.99-1.89(m,3H),1.66-1.59(m,1H),1.58(s,6H).
制备例451.化合物A444的合成
步骤A：1-(4-氰基-2-氟苯基)哌啶-4-甲酸叔丁酯
在室温下，向3,4-二氟苯腈(5g，35.9mmol，1.0当量)和哌啶-4-甲酸叔丁酯(6.66g，35.9mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(75mL)溶液中加入N,N-二异丙基乙胺(19mL，108mmol，3.0当量)。反应液120℃下反应16小时。后将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，4.5g，产率41％)。
步骤B：1-(4-(1-氨基环丙基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲酸叔丁酯
在-25℃下，向1-(4-氰基-2-氟苯基)哌啶-4-甲酸叔丁酯(2g，6.57mmol，1.0当量)的四氢呋喃(30.0mL)溶液中加入钛酸四异丙酯(2.05g，7.23mmol，1.1当量)，紧接着加入乙基溴化镁溶液(14.5mL，14.5mmol，2.2当量，1M在THF中)。搅拌1小时后，加入BF3OEt2(1.87g，13.1mmol，2.0当量)，后再搅拌0.5小时。反应完全后，加入3N HCl淬灭反应，再用3N NaOH调节pH至9。用DCM稀释，盐水洗涤，分离有机层。用DCM提取水层， 无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，500mg，产率23％)。
步骤C：1-(2-氟-4-(1-((甲氧羰基)氨基)环丙基)苯基)哌啶-4-甲酸叔丁酯
在0℃下，依次向1-(4-(1-氨基环丙基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲酸叔丁酯(400mg，1.2mmol，1.0当量)和三乙胺(4.8mL，3.0当量)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入氯甲酸甲酯(135mg，1.44mmol，1.2当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌反应2小时。反应完全后，将反应液用二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，120mg，产率26％)。
步骤D：1-(4-(1-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)环丙基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲酸叔丁酯
在室温下，依次向1-(2-氟-4-(1-((甲氧羰基)氨基)环丙基)苯基)哌啶-4-甲酸叔丁酯(100mg，0.25mmol，1.0当量)的叔丁醇(10mL)溶液中加入丙烯酰胺(36mg，0.5mmol，2.0当量)和叔丁醇钾(43mg，0.38mmol，1.5当量)。反应液在氮气保护下60℃搅拌16小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，30mg，产率28％)。
步骤E：1-(4-(1-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)环丙基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲酸
在0℃下，向1-(4-(1-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)环丙基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲酸叔丁酯(30mg，0.07mmol，1.0当量)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入三氟乙酸(1mL)。反应液在氮气保护下室温搅拌半小时。反应完全后，减压浓缩，得到标题化合物(白色固体，25mg，产率96％)。
步骤F：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(1-(4-(1-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)环丙基)-2-氟苯基)哌啶-4-羰基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向1-(4-(1-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)环丙基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲酸(25mg，0.07mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(6mL)溶液中加入HATU(53mg，0.14mmol，2.0当量)，N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(39mg，0.08mmol，1.2当量)和DIEA(36mg，0.28mmol，4.0当量)。反应液室温搅拌半小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，2.0mg，产率4％)。LC-MS(ESI):m/z 817[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.09(s,1H),8.90(s,1H),8.48-8.35(m,2H),8.25-8.15(m,1H),7.96(s,1H),7.83(d,J＝9.1Hz,2H),7.72(s,1H),7.12(d,J＝9.2Hz,2H),7.00-6.91(m,3H),3.76-3.60(m,4H),3.44(t,J＝6.6Hz,2H),3.36(m, 1H),3.28-3.16(m,4H),2.92-2.78(m,1H),2.78-2.69(m,2H),2.59-2.53(m,3H),1.79-1.70(m,4H),1.34-1.29(m,2H),1.26-1.19(m,2H).
制备例452.化合物A445的合成
步骤A：4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-氟苯腈
将3,4-二氟苯腈(5.0g，35.9mmol，1.0当量)、4-(二甲氧基甲基)哌啶(6.3g，39.5mmol，1.1当量)和DIEA(13.9g，108mmol，3.0当量)的DMF(75mL)溶液在120℃氮气条件下搅拌16小时。冷却至室温后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，7.5g，产率75％)。
步骤B：1-(4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-氟苯基)环丙烷-1-胺
在-25℃下，向4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-氟苯腈(2.0g，7.19mmol，1.0当量)的四氢呋喃(30mL)溶液中加入钛酸四异丙酯(2.25g，7.90mmol，1.1当量)，然后加入乙基溴化镁四氢呋喃溶液(2M，7.9mL，15.8mmol，2.2当量)。搅拌1小时后，加入三氟化硼乙醚(1.8mL，14.4mmol，2当量)，再搅拌0.5小时。-25℃下，加入3N HCl使反应猝灭。用3N NaOH将pH调至9左右。用二氯甲烷稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，500mg，产率22％)。
步骤C：3-((1-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-氟苯基)环丙基)氨基)丙酰胺
向含有1-(4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-氟苯基)环丙烷-1-胺(1.1g，2.14mmol，1.0当量)的乙醇(40mL)溶液中，加入丙烯酰胺(1.5g，21.4mmol，10.0当量)和三乙胺(0.6mL，4.28mmol，2.0当量)，并将混合物在80℃下搅拌过夜。反应完成后，将反应混合物用乙酸乙酯稀释，用饱和盐水洗涤，分离有机层。用乙酸乙酯提取水层，然后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗产物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，275mg，产率34％)。
步骤D：1-(1-(4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-氟苯基)环丙基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
向含有3-((1-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-氟苯基)环丙基)氨基)丙酰胺(220mg，0.58 mmol，1.0当量)的乙腈(10mL)溶液中，加入N,N'-羰基二咪唑(470mg，2.89mmol，5.0当量)和碳酸铯(566mg，1.74mmol，3.0当量)，并将混合物在90℃下搅拌过夜。将反应混合物用乙酸乙酯稀释，用饱和食盐水洗涤，分离有机层。用乙酸乙酯提取水层，然后将用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗产物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，170mg，产率72％)。
步骤E：1-(4-(1-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)环丙基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲醛
向含有1-(1-(4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-氟苯基)环丙基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(170mg，0.42mmol，1.0当量)的烧瓶中加入甲酸(3mL)。将反应物在室温下搅拌2小时后，将反应混合物浓缩，得到粗品化合物(白色固体，150mg，粗品)，无需进一步纯化直接用于下一步。
步骤F：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-((1-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)环丙基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向含有1-(4-(1-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)环丙基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲醛(150mg，0.42mmol，1.0当量)的超干甲醇(5mL)溶液中加入三乙胺(0.12mL，0.83mmol，2.0当量)和N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(192mg，0.42mmol，1.0当量)。将反应混合物在室温下搅拌10分钟，然后加入醋酸(0.12mL，2.09mmol，5.0当量)并搅拌30分钟。在室温下向反应液中加入三乙酰氧基硼氢化钠(264mg，1.25mmol，3.0当量)并搅拌过夜。浓缩后，残余物经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，65mg，产率19％)。LCMS(ESI):m/z 803[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),10.10(s,1H),8.93(s,1H),8.49-8.36(m,2H),8.22(d,J＝7.5Hz,1H),7.98-7.73(m,4H),7.18(d,J＝9.1Hz,2H),7.00-6.93(m,3H),3.93(d,J＝10.6Hz,2H),3.65(d,J＝9.9Hz,2H),3.45(t,J＝6.7Hz,2H),3.35(d,J＝12.1Hz,2H),3.17(d,J＝8.0Hz,6H),2.69(t,J＝11.2Hz,2H),2.55(t,J＝6.6Hz,2H),2.01(s,1H),1.88(d,J＝11.2Hz,2H),1.50-1.37(m,2H),1.32(s,2H),1.21(s,2H).
制备例453.化合物A446的合成
步骤A：3-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯甲腈
向3,4-二氟苯甲腈(5g，35.9mmol，1.0当量)和1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(4.9g，34.2mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(50mL)溶液中加入碳酸钾(18.9g，136.9mmol，4.0当量)，然后在120℃下搅拌16小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，8.4g，收率87％)。
步骤B：1-(3-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯基)环丙烷-1-胺
向3-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯甲腈(8.4g，32mmol，1.0当量)的四氢呋喃(100mL)溶液中加入钛酸四异丙酯(10g，35.2mmol，1.1当量)，在氮气下室温搅拌10分钟。然后在-78℃下加入乙基溴化镁(3M四氢呋喃溶液，23.5mL，70.5mmol，2.2当量)。-78℃下搅拌1小时后，加入三氟化硼乙醚溶液(9.1g，64.1mmol，2.0当量)，升至室温继续搅拌30分钟。将所得溶液倒入饱和碳酸氢胺溶液中，用乙酸乙酯萃取。合并有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，3g，收率30％)。
步骤C：3-((1-(3-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯基)环丙基)氨基)丙酰胺
向1-(3-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯基)环丙烷-1-胺(1.5g，5.1mmol，1.0当量)和三乙胺(1.4mL，10.3mmol，2.0当量)的乙醇(20mL)溶液中加入丙烯酰胺(3.6g，51.3mmol，10.0当量)，并在80℃下搅拌16小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，1g，收率54％)。
步骤D：1-(1-(3-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯基)环丙基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
向3-((1-(3-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯基)环丙基)氨基)丙酰胺(500mg，1.4mmol，1.0当量)的乙腈(10mL)溶液中加入N,N'-羰基二咪唑(1.1g，6.9mmol，5.0当量)和碳酸铯(2.2g，6.9mmol，5.0当量)，在90℃下搅拌2小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，200mg，收率37％)。
步骤E：1-(1-(3-氟-4-(4-氧代哌啶-1-基)苯基)环丙基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
将1-(1-(3-氟-4-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)苯基)环丙基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(200mg，0.5mmol，1.0当量)加入甲酸(10mL)中，在80℃下搅拌16小 时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，100mg，收率56％)。
步骤F：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(1-(4-(1-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)环丙基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
向1-(1-(3-氟-4-(4-氧代哌啶-1-基)苯基)环丙基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(100mg，0.3mmol，1.0当量)和N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(133mg，0.3mol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入醋酸(0.02mL，0.3mmol，1.0当量)。在25℃下搅拌4小时后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(122mg，0.6mmol，2.0当量)搅拌1小时。将所得溶液倒入水中，用乙酸乙酯萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。将残余物经制备纯化得到标题化合物(白色固体，30mg，产率13％)。LC-MS(ESI):m/z 789[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),10.10(s,1H),8.94(s,1H),8.42(dt,J＝15.5,7.7Hz,2H),8.22(d,J＝7.5Hz,1H),7.96(s,1H),7.88(d,J＝8.8Hz,2H),7.75(s,1H),7.20(d,J＝8.8Hz,2H),7.09-6.76(m,3H),4.00(d,J＝12.8Hz,2H),3.68(d,J＝11.8Hz,2H),3.51-3.43(m,6H),3.28-3.25(m,1H),3.06(t,J＝12.3Hz,2H),2.71(t,J＝11.8Hz,2H),2.57-2.53(m,2H),2.20(d,J＝11.7Hz,2H),1.88-1.77(m,2H),1.36-1.31(m,2H),1.24-1.21(m,2H).
制备例454.化合物A447的合成
步骤A：4-(二甲氧基甲基)-1-(2-氟-4-硝基苯基)哌啶
在室温下，向4-(二甲氧基甲基)哌啶(5g，31.40mmol，1.0当量)和1,2-二氟-4-硝基苯(5.0g，31.40mmol，1.0当量)的乙腈(50mL)溶液加入碳酸钾(8.7g，62.80mmol，2.0当量)。反应液在80℃条件下反应3小时。反应液用硅藻土过滤并浓缩旋干。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，8g，产率85％)。
步骤B：4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-氟苯胺
在室温下，向4-(二甲氧基甲基)-1-(2-氟-4-硝基苯基)哌啶(8g，26.82mmol，1.0当量)的甲醇(100mL)溶液中加入10％的钯碳(0.8g)。反应液在室温条件下反应过夜。反应液用 硅藻土过滤并浓缩旋干得到4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-氟苯胺(棕色固体，7g，粗品)，粗品直接用于下一步反应。
步骤C：2,6-双(苄氧基)-N-(4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-氟苯基)吡啶-3-胺
在室温下，向4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-氟苯胺(2g，粗品)，2,6-双(苄氧基)-3-溴吡啶(3.3g，8.94mmol，1.2当量)，Xant Phos(0.9g，1.491mmol，0.2当量)和碳酸铯(7.3g，22.36mmol，3.0当量)的二氧六环(30mL)溶液中加入三(二亚苄基丙酮)钯(0.7g，0.74mmol，0.1当量)。反应液在110℃条件下过夜。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，2.5g，两步产率60％)。
步骤D：2,6-双(苄氧基)-N-(4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-氟苯基)-N-甲基吡啶-3-胺
在0℃下，向2,6-双(苄氧基)-N-(4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-氟苯基)吡啶-3-胺(2.5g，4.48mmol，1.0当量)的DMF(30mL)中加入氢化钠(0.1g，5.38mmol，质量比60％，1.2当量)。30分钟后再0℃下加入碘甲烷(0.6mL，6.72mmol，1.5当量)。反应液在室温下搅拌反应3小时。反应液用氯化铵饱和溶液淬灭，并用乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤。有机相拥硫酸钠干燥并浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，2g，产率78％)。
步骤E：3-((4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-氟苯基)(甲基)氨基)哌啶-2,6-二酮
在室温下，向2,6-双(苄氧基)-N-(4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-氟苯基)-N-甲基吡啶-3-胺(2g，3.49mmol，1.0当量)的乙醇(50mL)溶液中加入10％钯碳(0.5g)和氢氧化钯碳(0.5g)。反应液在氢气保护条件下50℃过夜。反应液用硅藻土过滤并浓缩旋干。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(灰色固体，600mg，产率44％)。
步骤F：1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)(甲基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲醛
在室温下，将3-((4-(4-(二甲氧基甲基)哌啶-1-基)-3-氟苯基)(甲基)氨基)哌啶-2,6-二酮(200mg，0.51mmol，1.0当量)加入甲酸(5mL)溶液在室温下反应过夜。反应液浓缩干燥得到标题化合物(黄色固体，176mg，粗品)并直接用于下一步。
步骤G：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-((1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)(甲基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺甲酸盐
在室温下，向1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)(甲基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲醛(176mg，粗品)和N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(279 mg，0.61mmol，1.2当量)的DMF(5mL)溶液中加入三乙胺(0.2mL，1.01mmol，2.0当量)，室温搅拌5分钟后加入冰乙酸(0.1mL，0.51mmol，1.0当量)，室温反应1小时后加入三乙酰氧基硼氢化钠(213mg，1.01mmol，2.0当量)。反应液在室温下搅拌反应3小时。反应完全后，将反应液经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，38.8mg，两步产率10％)。LC-MS(ESI):m/z 791[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),10.78(s,1H),8.88(s,1H),8.49-8.37(m,2H),8.33(s,1H),8.22(d,J＝6.9Hz,1H),7.95(s,1H),7.79(d,J＝9.1Hz,2H),7.71(s,1H),7.09(d,J＝9.2Hz,2H),6.96-6.86(m,1H),6.67(dd,J＝16.1,2.6Hz,1H),6.58-6.49(m,1H),4.80(dd,J＝12.5,4.8Hz,1H),3.25-3.14(m,9H),2.81(dd,J＝13.5,5.5Hz,1H),2.69(s,3H),2.62-2.54(m,4H),2.35-2.29(m,1H),2.25(d,J＝7.4Hz,2H),1.84(dd,J＝25.0,8.2Hz,3H),1.66(s,1H),1.29(d,J＝9.6Hz,2H).
制备例455.化合物A448的合成
步骤A：4-(4-(3-(4-甲氧基苄基)-2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苄基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
在室温下，向4-(4-溴苄基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(500mg，1.42mmol，1.0当量)的甲苯(10mL)溶液中加入3-(4-甲氧基苄基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(398mg，1.70mmol，1.2当量)，Pd2(dba)3(128mg，0.14mmol，0.1当量)，BrettPhos(80mg，0.14mmol，0.1当量)，K2CO3(588mg，4.26mmol，3.0当量)。反应液在氮气气氛下脱气三次，并在100℃下搅拌18小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，280mg，产率39％)。
步骤B：1-(4-(哌啶-4-基甲基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
向4-(4-(3-(4-甲氧基苄基)-2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苄基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(280mg，0.55mmol，1.0当量)的三氟乙酸(5mL)溶液中加入TfOH(1mL)。反应混合物在80℃下搅拌18小时。反应完全后，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，110mg，产率70％)。
步骤C：N-(3-氨基甲酰基-1-(4-(4-(4-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)苄基)哌啶-1-甲酰基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
向1-(4-(哌啶-4-基甲基)苯基)二氢嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(70mg，0.24mmol，1.0当量) 的DMF(2mL)中加入4-(4-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶氨基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-甲酸4-硝基苯酯(152mg，0.24mmol，1.0当量)和DIEA(93mg，0.72mmol，3.0当量)。反应混合物在氮气气氛下100℃搅拌18小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，30mg，产率16％)。LC-MS(ESI):m/z 773[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),10.33(s,1H),8.89(s,1H),8.46-8.38(m,2H),8.21(d,J＝7.1Hz,1H),7.95(s,1H),7.81(d,J＝9.0Hz,2H),7.71(s,1H),7.25-7.18(m,4H),7.10(d,J＝9.1Hz,2H),3.77(t,J＝6.6Hz,2H),3.66-3.61(m,2H),3.29-3.25(m,6H),3.23-3.20(m,4H),2.72-2.67(m,4H),1.71-1.65(m,1H),1.61-1.56(m,2H),1.20-1.12(m,2H).
制备例456.化合物A449的合成
步骤A：3,3'-二甲基O'1,O1-(苯基-l3-碘二基)双(双环[1.1.1]戊烷-1,3-二甲酸酯)
向含有碘苯二乙酸(10g，30.8mmol，1.0当量)的甲苯(100mL)溶液中加入3-(甲氧羰基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸(5.25g，30.8mmol，1.0当量)。在氮气保护下，反应液70℃搅拌5小时。将所得混合物浓缩至干，用甲苯打浆去除过量乙酸，得到标题化合物(白色固体，16.5g，产率98％)。
步骤B：1-(3-(甲氧羰基)双环[1.1.1]戊-1-基)-1H-吡唑-3-甲酸叔丁酯
向3,3'-二甲基O'1,O1-(苯基-l3-碘二基)双(双环[1.1.1]戊烷-1,3-二甲酸酯)(16.5g，30.3mmol，1.0当量)和1H-吡唑-3-甲酸叔丁酯(5.1g，30.3mmol，1.0当量)的N,N-二甲基乙酰胺(160mL)溶液中加入氯化亚铜(1.5g，15.2mmol，0.5当量)，BPhen(7.1g，21.2mmol，0.7当量)。反应液在氮气保护下室温搅拌1小时。反应完全后，用水淬灭，后用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得 到标题化合物(白色固体，6.4g，产率72％)。
步骤C：3-(3-(叔丁氧羰基)-1H-吡唑-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸
向1-(3-(甲氧羰基)双环[1.1.1]戊-1-基)-1H-吡唑-3-甲酸叔丁酯(6.4g，21.9mmol，1.0当量)的MeOH(50mL)和H2O(10mL)的混合溶液中加入NaOH(2.2g，54.7mmol，2.5当量)。反应在室温下搅拌1小时。反应完全后，用饱和柠檬酸溶液将反应液中和至pH＝2，用DCM萃取两次。将有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到标题化合物(白色固体，4.7g，产率77％)。
步骤D：1-(3-(((苄氧基)羰基)氨基)双环[1.1.1]戊-1-基)-1H-吡唑-3-甲酸叔丁酯
向3-(3-(叔丁氧羰基)-1H-吡唑-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸(4.7g，16.9mmol，1.0当量)的甲苯(50mL)和苄醇(5mL)混合溶液中加入DIEA(5.9mL，33.8mmol，2.0当量)和叠氮磷酸二苯酯(4.7mL，22mmol，1.3当量)。反应液在100℃下搅拌5小时。反应完全后，将反应液用水淬灭，后用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，4.6g，产率71％)。
步骤E：1-(3-氨基双环[1.1.1]戊-1-基)-1H-吡唑-3-甲酸叔丁酯
向1-(3-(((苄氧基)羰基)氨基)双环[1.1.1]戊-1-基)-1H-吡唑-3-甲酸叔丁酯(4.6g，12.0mmol，1.0当量)的乙醇(50mL)溶液中加入10％的湿基氢氧化钯碳(2g)。反应液在氢气氛围下室温搅拌3小时。反应完全后，将反应液用硅胶土过滤，减压浓缩，得到标题化合物(无色油状，3g，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤F：4-(3-(3-(叔丁氧羰基)-1H-吡唑-1-基)双环[1.1.1]戊-1-基)哌嗪-1-甲酸苄酯
在室温下，向含有1-(3-氨基双环[1.1.1]戊-1-基)-1H-吡唑-3-甲酸叔丁酯(3g，12.0mmol，1.0当量)、双(2-氧代乙基)氨基甲酸苄酯(7.08g，30.1mmol，2.5当量)的二氯甲烷(30mL)甲醇(10mL)混合溶液中加入乙酸(6.7g，36.1mmol，3.0当量)。搅拌2小时后，一次性加入氰基硼氢化钠(2.3g，36.1mmol，3.0当量)，并继续搅拌16小时。反应完全后，将反应液用水淬灭，用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，3.3g，产率61％)。
步骤G：1-(3-(4-((苄氧基)羰基)哌嗪-1-基)双环[1.1.1]戊-1-基)-1H-吡唑-3-甲酸
向4-(3-(3-(叔丁氧羰基)-1H-吡唑-1-基)双环[1.1.1]戊-1-基)哌嗪-1-甲酸苄酯(3.3g，7.3mmol，1.0当量)的DCM(30mL)溶液中加TFA(10mL)。反应液在25℃下搅拌2小时。反应完全后，减压浓缩所得溶液，得到标题化合物(无色油状，2.5g，粗品)无需纯化直接用于下一步。
步骤H：4-(3-(3-(甲氧羰基)-1H-吡唑-1-基)双环[1.1.1]戊-1-基)哌嗪-1-甲酸苄酯
向1-(3-(4-((苄氧基)羰基)哌嗪-1-基)双环[1.1.1]戊-1-基)-1H-吡唑-3-甲酸(2.5g，6.3mmol，1.0当量)的MeOH(30mL)溶液中加入浓硫酸(0.34mL，6.3mmol，1.0当量)。反应液在氮气保护下80℃搅拌2小时。反应完全后，将反应液缓慢倒入饱和碳酸氢钠水溶液中淬灭，用乙酸乙酯萃取，有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，1.5g，产率58％)。
步骤I：4-(3-(4-溴-3-(甲氧羰基)-1H-吡唑-1-基)双环[1.1.1]戊-1-基)哌嗪-1-甲酸苄酯
向4-(3-(3-(甲氧羰基)-1H-吡唑-1-基)双环[1.1.1]戊-1-基)哌嗪-1-甲酸苄酯(1.5g，3.7mmol，1.0当量)的乙酸(20mL)溶液中加入溴(5.8g，36.5mmol，10.0当量)。反应液在室温下搅拌过夜。反应完全后，将反应液用饱和硫代硫酸钠水溶液淬灭，后用乙酸乙酯萃取，有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，400mg，产率22％)。
步骤J：4-(3-(4-((二苯基亚甲基)氨基)-3-(甲氧羰基)-1H-吡唑-1-基)双环[1.1.1]戊-1-基)哌嗪-1-甲酸苄酯
25℃下，向4-(3-(4-溴-3-(甲氧羰基)-1H-吡唑-1-基)双环[1.1.1]戊-1-基)哌嗪-1-甲酸苄酯(400mg，0.8mmol，1.0当量)和二苯甲酮亚胺(296mg，1.6mmol，2.0当量)的1,4-二氧六环(10mL)溶液中加入Pd2(dba)3(75mg，0.08mmol，0.1当量)，Xant-Phos(95mg，0.16mmol，0.2当量)和Cs2CO3(799mg，2.5mmol，3.0当量)。在氮气保护下，反应液在100℃搅拌8小时。反应完全后，将反应液用水淬灭，后用乙酸乙酯萃取，有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，300mg，产率62％)。
步骤K：4-(3-(4-氨基-3-(甲氧羰基)-1H-吡唑-1-基)双环[1.1.1]戊-1-基)哌嗪-1-甲酸苄酯
向4-(3-(4-((二苯基亚甲基)氨基)-3-(甲氧羰基)-1H-吡唑-1-基)双环[1.1.1]戊-1-基)哌嗪-1-甲酸苄酯(300mg，0.51mmol，1.0当量)的四氢呋喃(8mL)溶液中加入2N HCl(2mL)。反应液在25℃下搅拌1小时。反应完全后，将反应液用饱和碳酸氢钠中和，后用乙酸乙酯萃取，有机相依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，200mg，产率93％)。
步骤L：4-(3-(3-(甲氧羰基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶酰胺基)-1H-吡唑-1-基)双环[1.1.1]戊-1-基)哌嗪-1-甲酸苄酯
室温下，向4-(3-(4-氨基-3-(甲氧羰基)-1H-吡唑-1-基)双环[1.1.1]戊-1-基)哌嗪-1-甲酸苄 酯(200mg，0.5mmol，1.0当量)、6-(三氟甲基)吡啶甲酸(180mg，0.9mmol，2.0当量)和HATU(357mg，0.9mol，2.0当量)的DMF(10mL)溶液中加入DIEA(0.2mL，1.4mmol，3.0当量)。反应液在25℃下搅拌1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，150mg，产率53％)。
步骤M：1-(3-(4-((苄氧基)羰基)哌嗪-1-基)双环[1.1.1]戊-1-基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸
向4-(3-(3-(甲氧羰基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶酰胺基)-1H-吡唑-1-基)双环[1.1.1]戊-1-基)哌嗪-1-甲酸苄酯(150mg，0.25mmol，1.0当量)的四氢呋喃和水(4mL：2mL)混合溶液中加入氢氧化锂(53mg，1.25mmol，5.0当量)。反应液在25℃下搅拌1小时。反应完全后，将反应液减压浓缩得到标题锂盐化合物(黄色固体，130mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤N：4-(3-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶酰胺基)-1H-吡唑-1-基)双环[1.1.1]戊-1-基)哌嗪-1-甲酸苄酯
室温下，向1-(3-(4-((苄氧基)羰基)哌嗪-1-基)双环[1.1.1]戊-1-基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶酰胺基)-1H-吡唑-3-甲酸(130mg，0.2mmol，1.0当量)、氯化铵(59mg，1.1mmol，5.0当量)和HATU(169mg，0.44mmol，2.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入DIEA(0.1mL，0.7mmol，3.0当量)。反应液在25℃下搅拌1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(白色固体，100mg，产率77％)。
步骤O：N-(3-氨基甲酰基-1-(3-(哌嗪-1-基)双环[1.1.1]戊-1-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
向4-(3-(3-氨基甲酰基-4-(6-(三氟甲基)吡啶酰胺基)-1H-吡唑-1-基)双环[1.1.1]戊-1-基)哌嗪-1-甲酸苄酯(100mg，0.17mmol，1.0当量)的乙醇(10mL)溶液中加入10％湿基氢氧化钯碳(50mg)。反应液在氢气氛围下室温搅拌3小时。反应完全后，将反应液用硅胶土过滤，减压浓缩，得到标题化合物(白色固体，60mg，粗品)，无需纯化直接用于下一步。
步骤P：N-(3-氨基甲酰基-1-(3-(4-((1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)甲基)哌嗪-1-基)双环[1.1.1]戊-1-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向N-(3-氨基甲酰基-1-(3-(哌嗪-1-基)双环[1.1.1]戊-1-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(20mg，0.04mmol，1.0当量)和1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基) 氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-甲醛(30mg，0.09mmol，2.0当量)的DMF(5mL)溶液中加入3滴乙酸并搅拌2小时，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(47mg，0.2mmol，5.0当量)。反应液在室温下搅拌1小时。反应完全后，将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。粗产品经HPLC纯化得到标题化合物(白色固体，7.5mg，产率22％)。LC-MS(ESI):m/z 767[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.75(s,1H),10.77(s,1H),8.44-8.36(m,3H),8.19(dd,J＝7.3,1.3Hz,1H),7.67(d,J＝38.6Hz,2H),6.83(t,J＝9.3Hz,1H),6.50(dd,J＝15.0,2.4Hz,1H),6.41(dd,J＝8.7,2.2Hz,1H),5.78(d,J＝7.7Hz,1H),4.31-4.19(m,1H),3.14-3.06(m,2H),2.77-2.68(m,1H),2.62-2.51(m,4H),2.48-2.43(m,4H),2.42-2.37(m,2H),2.36-2.32(m,1H),2.32-2.26(m,6H),2.23-2.14(m,2H),2.13-2.06(m,1H),1.90-1.81(m,1H),1.80-1.72(m,2H),1.66-1.52(m,1H),1.29-1.19(m,2H).
制备例457.化合物A450的合成
N-(3-氨基甲酰基-1-(3-(4-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-1-羰基)哌嗪-1-基)双环[1.1.1]戊-1-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在25℃下，向N-(3-氨基甲酰基-1-(3-(哌嗪-1-基)双环[1.1.1]戊-1-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(20mg，0.04mmol，1.0当量)和4-硝基苯基4-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-1-甲酸酯(25mg，0.05mmol，1.2当量)的DMF(3mL)溶液中加入DIEA(20μL，09mmol，2.0当量)。在氮气保护下，将混合物在100℃下搅拌16小时。反应完全后，将反应液用水淬灭，后用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。粗产品经过HPLC纯化，得到标题化合物(白色固体，2mg，产率6％)。LC-MS(ESI):m/z 781[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.75(s,1H),10.78(s,1H),8.45-8.36(m,3H),8.22-8.17(m,1H),7.73(s,1H),7.62(s,1H),6.99(t,J＝8.8Hz,1H),6.53-6.37(m,2H),6.02(d,J＝7.7Hz,1H),4.35-4.28(m,1H),3.72-3.66(m,2H),3.22-3.16(m,4H),2.85-2.80(m,2H),2.74-2.69(m,1H),2.58-2.55(m,1H),2.48-2.44(m,4H),2.36-2.33(m,1H),2.33-2.28(m,6H),2.14-2.08(m,1H),1.91-1.84(m,1H),1.70-1.64(m,2H),1.61-1.52(m,2H).
制备例458.化合物A451的合成
N-(3-氨基甲酰基-1-(3-(4-(1-(4-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基)-2-氟苯基)哌啶-4-基)哌嗪-1-基)双环[1.1.1]戊-1-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向N-(3-氨基甲酰基-1-(3-(哌嗪-1-基)双环[1.1.1]戊-1-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(20mg，0.04mmol，1.0当量)和3-((3-氟-4-(4-氧代哌啶-1-基)苯基)氨基)哌啶-2,6-二酮(20mg，0.06mmol，1.5当量)的DMF(5mL)溶液中加入3滴醋酸并搅拌2小时，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(47mg，0.2mmol，5.0当量)。反应液在室温下搅拌1小时。反应完全后，将反应液用水淬灭，后用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。粗产品经过HPLC纯化，得到标题化合物(白色固体，2mg，产率7％)。LC-MS(ESI):m/z 753[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.75(s,1H),10.78(s,1H),8.40(dd,J＝7.0,4.8Hz,3H),8.19(dd,J＝7.4,1.3Hz,1H),7.72(s,1H),7.62(s,1H),6.83(t,J＝9.4Hz,1H),6.50(dd,J＝15.0,2.4Hz,1H),6.41(dd,J＝8.7,2.0Hz,1H),5.79(d,J＝7.6Hz,1H),4.30-4.19(m,1H),3.21-3.13(m,2H),2.76-2.70(m,1H),2.62-2.53(m,7H),2.49-2.43(m,4H),2.34-2.31(m,1H),2.31-2.28(m,6H),2.11-2.06(m,1H),1.90-1.77(m,3H),1.62-1.49(m,2H).
制备例459.化合物A452的合成
步骤A：5-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶甲酸甲酯
向5-溴吡啶甲酸甲酯(5.0g，23.1mmol，1.0当量)和1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(5.0g，35.0mmol，1.5当量)的无水甲苯(80mL)溶液中加入Pd2(dba)3(1.9g，2mmol，0.1当量)、2-双环己基膦-2',6'-二甲氧基联苯(2.7g，4mmol，0.2当量)和磷酸钾(14.6g，69mmol，3.0当量)。在氮气保护下，反应液90℃搅拌15小时。反应混合物通过硅藻土过滤，滤液经真空浓缩得到残留物。将残留物经经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，4.7g，收率73％)。
步骤B：5-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶甲酸
将化合物5-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶甲酸甲酯(4.0g，14.3mmol，1.0 当量)溶于四氢呋喃(40mL)和水(4mL)混合溶剂中。然后加入氢氧化锂(0.9g，21.4mmol，1.5当量)。搅拌2小时后，反应液真空浓缩得到标题化合物(黄色固体，3.8g，粗品)。
步骤C：N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶甲酰胺
将化合物5-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶甲酸(1.0g，4.0mmol，1.0当量)和3-氨基哌啶-2,6-二酮盐酸盐(1.0g，6.0mmol，1.5当量)溶于二氯甲烷(20mL)中，然后加入HATU(2.3g，6.0mmol，1.5当量)和DIEA(2mL)。在室温下搅拌5小时后，将反应液倒入水中，用二氯甲烷萃取。萃取液用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，真空浓缩以后得到残留物。残余物经柱色谱纯化得到标题化合物(黄色固体，620mg，收率50％)。
步骤D：N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(4-氧代哌啶-1-基)吡啶酰胺
将化合物N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶甲酰胺(600mg，1.8mmol，1.0当量)溶于甲酸(10mL)中，80℃搅拌15小时。反应液真空浓缩得到标题化合物(黄色固体，460mg，粗品)。
步骤E：N-(4-氨基甲酰基-1-(4-(4-(1-(6-((2,6-二氧代哌啶-3-基)氨基甲酰基)吡啶-3-基)哌啶-4-基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡咯-3-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
在室温下，向N-(4-氨基甲酰基-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡咯-3-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(73mg，0.16mmol，1.0当量)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入三乙胺调至pH到10，搅拌10分钟后加入乙酸调至pH到3。搅拌5分钟后，向反应液中加入N-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(4-氧代哌啶-1-基)吡啶酰胺(53mg，0.16mmol，1.0当量)并继续搅拌1小时。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(66mg，0.31mmol，2.0当量)。搅拌18小时后，将反应液倒入水中，并用乙酸乙酯萃取。将有机相用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，有机相减压下浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，4.8mg，收率4％)。LC-MS(ESI):m/z 773.3[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.24(s,1H),10.86(s,1H),8.74(d,J＝8.2Hz,1H),8.46-8.35(m,3H),8.17(dd,J＝7.4,1.1Hz,1H),7.98(d,J＝2.4Hz,1H),7.92-7.86(m,2H),7.67(s,1H),7.50(dd,J＝12.7,5.9Hz,3H),7.29(s,1H),7.18(d,J＝9.0Hz,2H),4.84-4.69(m,1H),4.27-4.08(m,2H),4.04-3.89(m,2H),3.72-3.62(m,2H),3.60-3.54(m,1H),3.28-3.22(m,2H),3.09-2.99(m,2H),2.98-2.89(m,2H),2.85-2.76(m,1H),2.57-2.52(m,1H),2.26-2.15(m,3H),2.06-1.99(m,1H),1.81-1.70(m,2H).
制备例460.化合物A453的合成
N-(1-(4-(4-(2-(1-(3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-氟苯甲酰基)哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-基)苯基)-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
向N-(3-(2-羟基丙-2-基)-1-(4-(4-(2-(哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺(200mg，0.34mmol，1.0当量)和3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-氟苯甲酸(86mg，0.34mmol，1.0当量)的DMF(4mL)溶液中加入HATU(259mg，0.68mmol，2.0当量)和DIEA(88mg，0.68mmol，2.0当量)。将反应混合物在25℃下搅拌1小时。将反应液用乙酸乙酯稀释，依次用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩。残余物经制备分离得到标题化合物(白色固体，20mg，产率7％)。LC-MS(ESI)m/z:820[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.19(s,1H),10.53(s,1H),8.73(s,1H),8.48-8.38(m,2H),8.17(d,J＝7.4Hz,1H),7.60(d,J＝6.8Hz,2H),7.49(d,J＝6.7Hz,1H),7.37(d,J＝6.1Hz,2H),7.02(d,J＝6.8Hz,2H),5.93(s,1H),4.43(s,1H),3.75(s,3H),3.55-3.45(m,4H),3.15(s,4H),2.72(s,3H),2.36(s,2H),1.81-1.71(m,2H),1.57(s,6H),1.44(s,2H),1.26-1.13(m,4H).
制备例461.化合物A454的合成
步骤A：4-(2-(4-(4-(3-(2-羟基丙-2-基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
向N-(3-(2-羟基丙-2-基)-1-(4-(哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(500mg，1.05mmol，1.0当量)和4-(2-氧代乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(370mg，1.26mmol，1.2当量)的DMF(5mL)溶液中加入三乙酰氧基硼氢化钠(120mg，3.16mmol，3.0当量)。将溶液在室温下搅拌3小时。通过反相柱层析纯化得到标题化合物(白色固体，400mg，产率55％)。
步骤B：N-(3-(2-羟基丙-2-基)-1-(4-(4-(2-(哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺
在0℃下，向4-(2-(4-(4-(3-(2-羟基丙-2-基)-4-(6-(三氟甲基)吡啶酰胺基)-1H-吡唑-1-基)苯基)哌嗪-1-基)乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(350mg，0.51mmol，1当量)的二氯甲烷(30mL)溶液中滴加4M盐酸二氧六环溶液(15mL)。室温下搅拌2小时后，反应液用饱和碳酸氢 钠溶液将pH值调至8左右，并用二氯甲烷萃取。有机相用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥并减压浓缩，得到标题化合物(黄色固体，290mg，产率97％)。
步骤C：N-(1-(4-(4-(2-(1-(3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酰基)哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-基)苯基)-3-(2-羟基丙-2-基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶酰胺
向N-(3-(2-羟基丙-2-基)-1-(4-(4-(2-(哌啶-4-基)乙基)哌嗪-1-基)苯基)-1H-吡唑-4-基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酰胺(290mg，0.50mmol，1当量)和3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酸(131mg，0.50mmol，1当量)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入DIEA(192mg，1.50mmol，3当量)和HATU(226mg，0.59mmol，1.2当量)。将混合物在室温下搅拌1小时。用水稀释混合物并用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，无水硫酸钠干燥并减压浓缩。残余物经HPLC纯化得到标题化合物(黄色固体，51.4mg，产率12％)。LC-MS(ESI):m/z 832[M+H]+.1H NMR(400MHz,MeOD-d4)δ8.70(s,1H),8.44(d,J＝7.8Hz,1H),8.28(t,J＝7.9Hz,1H),8.02(d,J＝7.6Hz,1H),7.59(d,J＝9.0Hz,2H),7.45(dd,J＝8.5,2.1Hz,1H),7.39(d,J＝2.1Hz,1H),7.19(d,J＝8.6Hz,1H),7.08(d,J＝9.1Hz,2H),4.58(s,1H),3.93(s,4H),3.77-3.66(m,2H),3.28-3.21(m,4H),3.13(brs,1H),2.95-2.77(m,3H),2.68(d,J＝4.6Hz,4H),2.56-2.46(m,2H),1.96-1.73(m,2H),1.67(brs,7H),1.61-1.49(m,2H),1.36-1.14(m,2H).
实施例1：激酶活性测试
化合物抑制IRAK4激酶活性测试
用KinEASE-STK S1丝/苏氨酸激酶试剂盒(Cisbio)检测化合物对IRAK4激酶活性的抑制作用，具体方法如下：将化合物溶解于二甲基亚砜中，再用二甲基亚砜进行3倍等梯度稀释，使测试化合物在反应体系中的终浓度范围为5,000nM至0.0254nM，加入终浓度为8nM的激酶后室温温育15分钟，再依次加入终浓度为400nM的生物素化STK1底物和80μM三磷酸腺苷(ATP)，在37℃下温育90分钟。随后向反应体系中加入偶联有铕系元素化合物的抗磷酸化丝/苏氨酸抗体和偶联有链霉亲和素修饰的XL665以终止反应，在室温下温育1小时后，在酶标仪EnVision(PerkinElmer)上以HTRF模式读取各孔在发射波长620nm和665nm处的荧光强度，使用公式比率＝(665nm/620nm)×104算出比率值。通过公式：抑制％＝[1-(信号样品-信号min)/(信号max-信号min)]×100，计算化合物在各浓度下的抑制率，进而通过XLfit中Fit Modela(205)拟合量效曲线以对数浓度-抑制率进行非线性曲线拟合，得出化合物对蛋白活性抑制的IC50值。
表1


A代表IC50<0.1μM，B代表0.1μM<IC50<1.0μM，C代表IC50>1.0μM。
实施例2.化合物对THP1中的IRAK4的降解
接种0.6mL THP-1细胞(ATCC)至12孔细胞培养板(Greiner，665180)，细胞密度为6×105个/孔。细胞板置于5％二氧化碳培养箱中37℃培养，加入0.6mL测试化合物溶液，化合物终浓度为0.15至10,000nM，培养24小时后，收集细胞至1.5mL离心管中，1,000rpm离心5分钟。细胞沉淀用1×PBS清洗1次，重悬的细胞用60μL裂解液(细胞裂解液为RIPA Lysis Buffer Strong(GenStar)，补充混合蛋白酶抑制剂鸡尾酒片剂(Roche))，冰上静置30分钟后12,000g、4℃离心15分钟，取上清液用蛋白免疫印迹法(Western Blot，WB)分别检测IRAK4蛋白水平。
上述细胞裂解上清液中总蛋白浓度用BCA蛋白质定量试剂盒(NCM)测定。根据BCA检测的总蛋白浓度，用细胞裂解液和5X SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(碧云天)调整至2μg/μL，95℃金属浴5分钟，然后置于冰上冰浴5分钟后作为蛋白免疫印迹法的上样样品。用10％SDS-PAGE胶进行蛋白电泳，上样量为20μL(总蛋白40μg)，Tris-SDS电泳，采用80V恒压，电泳结束后，把胶条上的蛋白转至0.2μm PVDF膜上(Immobilon)，0.5A、20V半干转转膜60分钟。转膜结束后将膜放入5％脱脂奶粉中室温温育2小时。封闭结束后，PVDF膜分别进行IRAK4一抗(Abcam)温育，4℃过夜。用TBST缓冲液(20mM Tris-HCL pH8.0，150mM NaCl，0.05％Tween-20)洗涤膜达30分钟，用二抗(爱必信)室温温育2小时，最后用超敏ECL化学发光试剂盒(新赛美)温育1分钟以发光显色，利用化学发光成像 系统(赛智)进行显色和蛋白图谱拍照。蛋白图谱通过Image J分析软件进行灰度值分析。计算各样品的灰度校正值。再与DMSO单独处理的对照组灰度校正值对比计算降解率。
表2




对于DC50，A代表DC50<0.1μM，B代表0.1μM<DC50<1.0μM，C代表DC50>1.0μM；对于最大降解率Dmax，A代表Dmax>60％，B代表40％<Dmax<60％，C代表Dmax<40％。
实施例3.检测R848刺激下IL-6释放的抑制
冻存的人PBMC(Biotechnologies，PB010C-W)复苏后重悬至RPMI-1640培养基(Gibco，22400-105)，其补充有10％胎牛血清(Gibco，10099-141)、100U/mL青霉 素和100μg/mL链霉素(Gibco，15140122)。随后在96孔透明细胞板(Corning，3599)中每孔加入190μL的PBMC，使细胞密度为1×105个/孔。细胞板置于5％CO2培养箱中37℃培养30分钟后，在相应的铺有细胞的孔中加入5μL的稀释后的化合物溶液，使化合物的终浓度在0.046至3,000nM范围内。DMSO终浓度为0.1％。加药处理的细胞板置于5％CO2培养箱中37℃培养24小时后，加入5μL R848(MCE，HY-13740)，终浓度为10μg/mL。细胞板再次置于5％CO2培养箱中37℃培养5小时后，1,000rpm离心1分钟，每孔取100μL细胞上清液转移至新的96孔透明细胞板中，用于IL-6浓度测试。
白介素-6(IL-6)ELISA检测
使用Human IL-6(白细胞介素6)ELISA KIT(4Bio，CHE0009-048)测定R848诱导人PBMC细胞上清液中的IL-6浓度。按照产品说明书配置不同浓度的IL-6标准液，浓度范围为3.9～250pg/mL。取100μL各浓度的IL-6标准液和预先稀释好的待测细胞上清液样品分别加入到包被的抗IL-6抗体并封闭的透明96孔板中，37℃孵育1.5小时；按照产品说明书步骤，洗涤，加入100μL生物素化抗体，37℃孵育1小时；洗涤、加入100μL酶结合物工作液，37℃孵育30分钟，洗涤，加入100μL显色剂，37℃孵育10-20分钟；加入终止液100μL终止反应。反应结束后，在酶标仪Envision(PerkinElmer)上以吸光度模式测定在450nm OD值，通过各浓度IL-6标准液的校正OD值绘制标准曲线，再根据待测样品的校正OD值在标准曲线上的相应浓度，确定各细胞上清液中的IL-6浓度。再与0.1％DMSO单独处理的对照组IL-6浓度进行比较，计算化合物在各浓度下的抑制率，进而通过GraphPad Prism 9以浓度-抑制率进行非线性曲线拟合，计算化合物的IC50值。
表3

A代表IC50<0.01μM，B代表0.01μM<IC50<0.03μM，C代表0.03μM<IC50<0.1μM。
实施例4.药代动力学检测
本实验旨在研究化合物在大鼠经静脉注射以及口服的药物代谢动力学特性。
实验方案：每个化合物的检测使用6只雄性健康SD大鼠，随机分为2组，每组3只，体重180-220g。大鼠给药前禁食过夜(10-14小时)，饮水自由，给药4小时后恢复饮食。 化合物配置采用溶媒5％DMSO+10％solutol+85％生理盐水(w/v)，其中对照化合物1、A169、A173、A178和A195静脉注射组剂量为2mg/kg，给药体积2mL/kg；口服组剂量为10mg/kg，给药体积10mL/kg。A170、A177和A180静脉注射组剂量为1mg/kg，给药体积1mL/kg；口服组剂量为5mg/kg，给药体积5mL/kg。给药前采集空白血，给药后按照预定时间点(0.083h、0.25h、0.5h、1h、2h、4h、8h、24h)经颈静脉或其他合适方式采血0.2mL至EDTA-K2抗凝管中，6800g离心6min分离血浆。实验结束后，使用液相-质谱联用分析系统(LC-MS/MS)对血浆中化合物的浓度进行定量检测。通过不同时间点的血药浓度数据，运用Phoenix WinNonlin8.3.5计算药代动力学参数。
表4
对照化合物1：

Claims (31)

  1. 一种式(III)的化合物，或其药用盐、酯、溶剂化物或立体异构体：
    其中，
    Q3和Q4所在的环结构选自以下结构：
    环P为吡啶基、吡唑并嘧啶基或吡咯并哒嗪基；
    R1选自-OR1a、-COR1a、-CONR1aR1b、-S(O)(NR1a)R1b、-SO2NR1aR1b、任选取代的烷基，其中R1a和R1b独立地选自氢、氘、任选取代的烷基和任选取代的环烷基；
    R2选自任选取代的环烷基、任选取代的杂环基以及任选取代的苯基、吡啶基和嘧啶基；
    R3选自氰基、任选取代的烷基和任选取代的杂芳基。
  2. 一种式(II)的化合物，或其药用盐、酯、溶剂化物或立体异构体：
    A-L-E   (II)
    A部分具有以下结构：
    其中Q3和Q4所在的环结构选自以下结构：
    环P为吡啶基、吡唑并嘧啶基或吡咯并哒嗪基；
    R1选自-OR1a、-COR1a、-CONR1aR1b、-S(O)(NR1a)R1b、-SO2NR1aR1b、任选取代的烷基，其中R1a和R1b独立地选自氢、氘、任选取代的烷基和任选取代的环烷基；
    R2’选自任选取代的亚环烷基、任选取代的亚杂环基、任选取代的亚苯基和亚吡啶基；
    R3选自氰基、任选取代的烷基和任选取代的杂芳基；并且
    A部分通过R2’的环原子与L部分相连；
    L部分具有以下结构：
    -L1-L2-L3-L4-L5-式(L)
    其中：
    L1、L3和L5独立地不存在或选自-Rm-、-Rm-Rn-、-Rm-O-Rn-、-Rm-C(O)-Rn-、-Rm-C(O)O-Rn-、-Rm-OC(O)-Rn-、-Rm-NRx-Rn-、-Rm-C(O)NRx-Rn-、-Rm-NRxC(O)-Rn-、-Rm-S(O)-Rn-、-Rm-S(O)NRx-Rn-、-Rm-NRxS(O)-Rn-、-Rm-S(O)2-Rn-、-Rm-S(O)2NRx-Rn-、-Rm-NRxS(O)2-Rn-、-Rm-NRxC(O)NRy-Rn-、-Rm-OC(O)NRx-Rn-、-Rm-NRxC(O)O-Rn-、-(CH2CH2O)g-或-(OCH2CH2)g-，其中Rm和Rn独立地选自键、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烷氧基、任选取代的亚环烷基或任选取代的亚杂环基，Rx和Ry独立地选自氢、氘、任选取代的烷基、任选取代的环烷基或任选取代的杂环基，并且g为1-20的整数；
    L2和L4独立地不存在或选自任选取代的亚环烷基、任选取代的亚杂环基、任选取代的亚芳基或任选取代的亚杂芳基；并且
    E部分具有以下结构：

    其中RE1选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、氨基、硝基、氰基、任选取代的烷基、任选取代的烷氧基、任选取代的环烷基或任选取代的杂环基，RE2选自氢、氘或卤素，REL1选自键、-CH2-、-NH-、-NCH3-、-O-、-CONH-或-CONCH3-，REL2选自键或-CH2-，并且p为1、2、3、4或5；
    RE1a选自-COCH(CH3)OH、-COCH3、-CON(CH3)2、-CO(CH2)2CH(NH2)COOH或-COCH(NH2)(CH2)2COOH，RE2a选自-CH2OCOOC(CH3)3或-CH2OCOC(CH3)3。
  3. 根据权利要求1或2所述的化合物，其中R1选自被独立地选自卤素和羟基的一个或多个取代基取代的烷基(例如甲基、乙基、丙基(例如异丙基))：
  4. 根据权利要求1或2所述的化合物，其中R1a和R1b独立地选自：氢；氘；烷基(例如甲基、乙基、丙基(例如异丙基))；环烷基(例如环丙基)；以及被独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的烷基(例如甲基、乙基、丙基(例如异丙基))和环烷基(例如环丙基)：氘、卤素(例如氟)、羟基、巯基、氨基、氰基和硝基。
  5. 根据权利要求1所述的化合物，其中R2选自任选取代的环丁基、环戊基、环己基、双环[1.1.1]戊基或双环[2.2.2]辛基；任选取代的哌啶基、氮杂环丁基、氮杂环戊基或1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸基或7-氮杂螺[3.5]壬基；任选取代的苯基、吡啶基或嘧啶基。
  6. 根据权利要求1所述的化合物，其中R2选自未被取代的环烷基、杂环基、苯基、吡啶基；以及被独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的环烷基、杂环基、苯基、吡啶基：氘、卤素(例如氟或溴)、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、-OR2a、-NR2aR2b、-COR2a、-COOR2a、-CONR2aR2b、-NR2aCOR2b、-OCOR2a、任选取代的烷基和任选取代的杂环基，其中R2a和R2b独立地选自氢、氘、任选取代的烷基和任选取代的杂环基。
  7. 根据权利要求1所述的化合物，其中R2a和R2b独立地选自氢、氘、烷基(例如甲基)、被卤素取代的烷基、杂环基(例如哌嗪基)、被烷基取代的杂环基。
  8. 根据权利要求1所述的化合物，其中R2选自被独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的环烷基、杂环基、苯基、吡啶基：
    烷基；
    杂环基；
    被选自-OR2c、-NR2cR2d、-COR2c、-COOR2c、-CONR2cR2d和/或-NR2cCOR2d的一个或多个取代基取代的烷基(例如甲基)或杂环基(例如哌嗪基)，其中R2c和R2d独立地选自氢、氘、烷基(例如甲基)、苯基；
    被选自烷基(例如甲基)的一个或多个取代基取代的杂环基(例如哌嗪基)。
  9. 根据权利要求1所述的化合物，其中R2选自苯基；以及被独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的苯基：氘；卤素(例如氟或溴)；-OR2a、-NR2aR2b、-COR2a、-COOR2a、-CONR2aR2b、-NR2aCOR2b、-OCOR2a，其中R2a和R2b独立地选自氢、氘、烷基(例如甲基)和杂环基(例如哌嗪基)；烷基(例如甲基)、杂环基(例如哌嗪基)和被独立地选自以下各项的一个或多个取代基取代的烷基(例如甲基)或杂环基(例如哌嗪基)：-OR2c、-NR2cR2d、-COR2c、-COOR2c、-CONR2cR2d和/或-NR2cCOR2d，其中R2c和R2d独立地选自氢、氘、烷基(例如甲基)、苯基。
  10. 根据权利要求1或2所述的化合物，其中R3选自被卤素(例如氟)取代的烷基(例如甲基)，诸如三氟甲基。
  11. 根据权利要求1或2所述的化合物，其中R3选自含有一个或多个氮环原子的5元杂芳基。
  12. 根据权利要求2所述的化合物，其中R2’选自任选地被选自以下各项的一个或多 个取代基取代的亚环烷基、亚杂环基、亚苯基和亚吡啶基：氘、卤素、羟基、巯基、氨基、氰基、硝基、醛基、羧基、烷基。
  13. 根据权利要求2所述的化合物，其中R2’选自任选取代的亚环丁基、亚环戊基、亚环己基、亚双环[1.1.1]戊基或亚双环[2.2.2]辛基；任选取代的亚哌啶基、亚氮杂环丁基、亚氮杂环戊基、1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]亚癸基或7-氮杂螺[3.5]亚壬基；任选取代的亚苯基或亚吡啶基。
  14. 根据权利要求2所述的化合物，其中L1、L3和L5独立地不存在或选自-Rm-、-Rm-O-Rn-、-Rm-C(O)-Rn-、-Rm-C(O)O-Rn-、-Rm-OC(O)-Rn-、-Rm-NRx-Rn-、-Rm-C(O)NRx-Rn-、-Rm-NRxC(O)-Rn-或其中Rm和Rn独立地选自键或任选取代的亚烷基，Rx独立地选自氢、氘或任选取代的烷基。
  15. 根据权利要求2所述的化合物，其中Rm和Rn独立地选自键或任选地被卤素(例如氟)取代的亚烷基(例如C1-4亚烷基，诸如亚甲基或亚乙基)。
  16. 根据权利要求2所述的化合物，其中Rx独立地选自氢、氘或烷基(例如C1-4亚烷基，诸如亚甲基和亚乙基)。
  17. 根据权利要求2所述的化合物，其中L2选自任选取代的亚杂环基。
  18. 根据权利要求2所述的化合物，其中L2和L4独立地选自含有一个或两个氮杂原子的3-12元亚杂环基，其任选地被选自卤素(例如氟)和/或烷基(例如甲基)的一个或多个取代基取代。
  19. 根据权利要求2所述的化合物，其中L2和L4独立地选自：

  20. 根据权利要求2所述的化合物，其中L1不存在或选自-Rm-、-Rm-O-Rn-、-Rm-C(O)-Rn-、-Rm-C(O)O-Rn-、-Rm-OC(O)-Rn-、-Rm-NRx-Rn-、-Rm-C(O)NRx-Rn-或-Rm-NRxC(O)-Rn-，其中Rm和Rn独立地选自键或亚烷基(例如亚甲基或亚乙基)，Rx独立地选自氢、氘或烷基(例如甲基)。
  21. 根据权利要求2所述的化合物，其中L1不存在或选自-CH2-、-CH2CH2-、-CH2O-、-C(O)-、-CH2C(O)-、-CH2NH-、-NHCH2-、-CH2N(CH3)-、-C(O)NH-。
  22. 根据权利要求2所述的化合物，其中L3不存在或选自-Rm-、-Rm-O-Rn-、-Rm-C(O)-Rn-、-Rm-C(O)O-Rn-、-Rm-OC(O)-Rn-、-Rm-NRx-Rn-、-Rm-C(O)NRx-Rn-或-Rm-NRxC(O)-Rn-，其中Rm和Rn独立地选自键或亚烷基(例如亚甲基或亚乙基)，Rx独立地选自氢、氘或烷基(例如甲基)。
  23. 根据权利要求2所述的化合物，其中L3不存在或选自-CH2-、-CH2CH2-、-OCH2-、-C(O)-、-C(O)CH2-、-C(O)O-、-NH-、-NHCH2-、-N(CH3)-。
  24. 根据权利要求2所述的化合物，其中L5不存在或选自-Rm-、-Rm-C(O)-Rn-、-Rm-NRx-Rn-或其中Rm和Rn独立地选自键或亚烷基(例如亚甲基或亚乙基)，Rx独立地选自氢、氘或烷基(例如甲基)。
  25. 根据权利要求2所述的化合物，其中L5不存在或选自-CH2-、-C(O)-、-NH-或
  26. 根据权利要求2所述的化合物，其中E部分具有以下结构：

  27. 根据权利要求2所述的化合物，其中RE1选自氢、氘、卤素、羟基、巯基、氨基、硝基、氰基、烷基、烷氧基，RE2选自氢、氘或卤素，REL1选自键、-CH2-、-NH-、-NCH3-、-O-、-CONH-或-CONCH3-，REL2选自键、-CH2-或亚环丙基，并且p为1或2。
  28. 根据权利要求2所述的化合物，其中RE1选自氢、氘、卤素(例如氟)和甲氧基。
  29. 根据权利要求2所述的化合物，其中RE2选自氢或氘。
  30. 一种药用组合物，所述药物组合物包含根据权利要求1-29中任一项所述的化合物或其药用盐、酯、溶剂化物或立体异构体，以及药学上可接受的辅料。
  31. 一种治疗或预防由IRAK蛋白介导的疾病的方法，所述方法包括向有需要的患者施用根据权利要求1-29中任一项所述的化合物或根据权利要求30所述的组合物。
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