[go: up one dir, main page]

WO2025017161A1 - Dispositif de filtration d'objets cellulaires mesoscopiques en suspension - Google Patents

Dispositif de filtration d'objets cellulaires mesoscopiques en suspension Download PDF

Info

Publication number
WO2025017161A1
WO2025017161A1 PCT/EP2024/070474 EP2024070474W WO2025017161A1 WO 2025017161 A1 WO2025017161 A1 WO 2025017161A1 EP 2024070474 W EP2024070474 W EP 2024070474W WO 2025017161 A1 WO2025017161 A1 WO 2025017161A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
ocms
port
solution
filtration device
filter membrane
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
PCT/EP2024/070474
Other languages
English (en)
Inventor
Clément Pierre Etienne Rieu
Michael Lanero Fidalgo
Elisa LUQUET
Justine PLETENKA
Maxime FEYEUX
Andrea Beth Leonard
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Treefrog Therapeutics SAS
Original Assignee
Treefrog Therapeutics SAS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from FR2307689A external-priority patent/FR3151223A1/fr
Application filed by Treefrog Therapeutics SAS filed Critical Treefrog Therapeutics SAS
Publication of WO2025017161A1 publication Critical patent/WO2025017161A1/fr
Pending legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M25/00—Means for supporting, enclosing or fixing the microorganisms, e.g. immunocoatings
    • C12M25/16—Particles; Beads; Granular material; Encapsulation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M33/00—Means for introduction, transport, positioning, extraction, harvesting, peeling or sampling of biological material in or from the apparatus
    • C12M33/14—Means for introduction, transport, positioning, extraction, harvesting, peeling or sampling of biological material in or from the apparatus with filters, sieves or membranes

Definitions

  • the present invention relates to the technical field of devices for filtering suspended mesoscopic cellular objects.
  • OCMS Suspended mesoscopic cellular objects
  • OCMS comprise a set of objects whose dimensions vary between 5 pm and 5 mm, which are in suspension and which comprise at least one eukaryotic cell, encapsulated or not.
  • OCMS comprise suspended human cells, microtissues, spheroids, cell aggregates, embryoid bodies, encapsulated or not.
  • OCMS filtration modules comprising a body comprising a filter membrane intended to retain the OCMS but for example capable of allowing the solution in which the OCMS are bathed to pass through.
  • filtration techniques exist, in particular frontal filtration, where the OCMS are injected in a normal manner at the plane of the filter membrane. This technique can cause the accumulation and compaction of the OCMS on the membrane which can prevent the good filtration of the OCMS, damage them and clog the filter.
  • Another filtration technique is tangential filtration, where the OCMS in solution are injected through a porous tube to the solution but not to the OCMS, in which the solution is drawn through the wall of the tube, while the OCMS pass through the tube.
  • This tangential filtration technique minimizes the risk of accumulation and compaction.
  • the disadvantage of this technique is that it relies on complex filters to manufacture and that it hardly allows a complete rinsing of the OCMS. Indeed, there is always a residual proportion of soaking solution after rinsing due to the fact that the OCMS are not confined in a compartment and multiple rinsing steps are required to reach the desired concentration of rinsing solution.
  • Another filtration technique is notably centrifugal filtration which does not use a membrane but the difference in density of OCMS compared to the soaking/rinsing solution to separate OCMS and solution.
  • This technique requires heavy equipment (centrifuge), expensive and complex to set up.
  • the present invention aims to overcome these drawbacks.
  • the invention therefore relates to a device for filtering suspended mesoscopic cellular objects (OCMS) comprising a body comprising at least a first port and a second port and a filter membrane extending along a plane P in the body, thus defining two compartments and capable of preventing the passage of the OCMS from one compartment to the other, the first port being intended for the injection and withdrawal of the OCMS bathed in a soaking solution and/or a rinsing solution and the second port being intended for the withdrawal and injection of the soaking solution and/or the rinsing solution.
  • OCMS suspended mesoscopic cellular objects
  • the injection into the first port is carried out in a direction D not substantially orthogonal to the plane P of the filter membrane.
  • the injection into the first port is a confined tangential of the OCMS and thus makes it possible not to create any accumulation or damage to the OCMS.
  • a tangential flow or vortex in the filtration device reduces damage to the OCMS by keeping the OCMS moving.
  • the body is configured such that the shortest path of an OCMS in the body between its injection and its withdrawal is a curved trajectory, passing through only one of the two compartments.
  • only one of the compartments is configured to receive the OCMS injected through the first port, with both compartments configured to have a soaking solution and/or a rinsing solution pass through them.
  • the device for filtering suspended mesoscopic cellular objects comprises a body comprising a first port and a second port and a filter membrane extending along a plane P in the body, thus defining two compartments and capable of preventing the passage of the OCMS from one compartment to the other, the first port being intended for the injection and withdrawal of the OCMS bathed in a soaking solution and/or a rinsing solution and the second port being intended for the withdrawal and injection of the soaking solution and/or the rinsing solution, the first port being a single port in the first compartment.
  • OCMS also refers to cellular microcompartments.
  • the OCMS preferably the cellular microcompartments, injected through the first port into a first compartment are stored in this first compartment until they are withdrawn through the first port.
  • a single port in the first compartment of the filtration device allows the injection and withdrawal of OCMS bathed in a soaking solution through the same port, thus reducing the number of channels and the use of tubes and also making it possible to obtain a more compact filtration device.
  • the use of a single port for the injection and withdrawal of the OCMS, preferably the cellular microcompartments, bathed in a soaking solution and/or the rinsing solution makes it possible to reduce the number of constituent elements of the filtration device, thus limiting the impact of the environment such as risks of external contamination at the ports.
  • the direction D is parallel to the plane P.
  • the body comprises an inner casing with edges having a rounded shape and the useful section of the filter membrane has the shape of a circle or an ellipse.
  • the implementation of rounded edges makes it possible to reduce the corners inside the body of the device, thus limiting the accumulation of OCMS in the corners and making it possible to avoid the loss of OCMS stuck in the device during the OCMS recovery phases. This also makes it possible to limit the dead volume and therefore the volume necessary to rinse the OCMS.
  • the body has a perforated shape or a shape having a cavity in its envelope. It may in particular be a toric shape, the envelope of which is a surface generated by a closed generating curve, in particular a circle or an ellipse, circulating on another closed directrix curve, in particular a circle.
  • This cavity or hole formed in the envelope makes it possible to create or reinforce a circular circulation of the OCMS in the body, and therefore to avoid a phenomenon of clogging of the filtering device.
  • the body has a toric shape and the useful section of the filter membrane has the shape of a circle or an ellipse.
  • the toric shape makes it possible to increase the swirl effect for the OCMS while greatly reducing the dead volume inside the body, thus limiting the volume necessary to rinse the OCMS.
  • any section perpendicular to the plane P of the compartment intended to receive the OCMS has a surface strictly less than the useful surface of the filter membrane.
  • any section perpendicular to the plane P of the compartment intended to receive the OCMS has a surface area twice, five times and preferably ten times smaller than the useful surface area of the filter membrane.
  • Tangential injection associated with such a difference in dimension allows the OCMS to be injected with a certain flow rate, promoting the swirl, while allowing the concentration of a certain number of OCMS inside the body of the filtration device and minimizing the dead volume.
  • the injection into the second port is also done in a non-orthogonal direction, and preferably parallel, to the plane P of the filter membrane. The second tangential injection makes it possible to promote swirl flows inside the body of the filtration device.
  • the soaking solution is a solution allowing cell culture.
  • the OCMS are thus maintained in a favorable environment and are not degraded.
  • the soaking solution contains ions from the following list: calcium, iron, barium, strontium, barium, iron, copper, lead, aluminum, magnesium, preferably calcium, iron, barium.
  • ions from the following list: calcium, iron, barium, strontium, barium, iron, copper, lead, aluminum, magnesium, preferably calcium, iron, barium.
  • the addition of such ions is of great interest for the good performance of the OCMS.
  • the filter membrane comprises a microfabric covered with a fibrous membrane.
  • the implementation of such a filter membrane makes it possible to maintain control over the type of OCMS to be filtered, preferably over the type of cellular microcompartment to be filtered.
  • the filter membrane is capable of filtering cellular microcompartments having a largest dimension of between 120 and 700 micrometers, preferably between 200 pm and 400 pm, preferably between 200 pm and 350 pm, even more preferably 200 pm and 300 pm, in particular between 200 pm and 250 pm.
  • the filter membrane comprises porosities of less than 100 micrometers, or even less than 50 micrometers, or even less than 10 micrometers.
  • the filter membrane is capable of filtering cellular microcompartments having a largest dimension of less than 600 micrometers, the filter membrane comprises porosities of less than 100 micrometers.
  • smallest dimension of a microcompartment within the meaning of the invention, we mean the value of the smallest Feret diameter of said microcompartment.
  • Ferret diameter of a microcompartment we mean the distance "d" between two tangents to said microcompartment (or to said part), these two tangents being parallel, such that the entire projection of said microcompartment (or of said part) is between these two parallel tangents.
  • a Ferret diameter of the internal part of the microcompartment is measured between two interfaces of the internal part and the external layer of the microcompartment, i.e. the distance "d" between two tangents to said internal part, these two tangents being parallel, such that the entire projection of said internal part is between these two parallel tangents.
  • the device comprises two compartments having different volumes.
  • the compartment intended to receive OCMS, preferably cellular microcompartments, bathed in a soaking solution and/or a rinsing solution has a volume greater than the compartment intended to receive the soaking solution and/or the rinsing solution.
  • the difference in volume advantageously makes it possible to improve the efficiency and the quantity of microcompartments harvested.
  • the compartment intended to receive cellular microcompartments bathed in a soaking solution and/or a rinsing solution has a volume at least 50% greater than the microcompartment intended to receive the soaking solution and/or the rinsing solution.
  • the filter membrane is capable of allowing other OCMS to pass, preferably other cellular microcompartments, of a different type contained in the soaking solution. This characteristic allows in particular filtering of a certain type of OCMS, preferably cellular microcompartments.
  • the filter membrane is capable of allowing other OCMS of a different type contained in the soaking solution to pass through. This feature in particular allows filtering of a certain type of OCMS.
  • the invention also relates to a method of accumulating OCMS comprising the following steps:
  • the OCMS accumulation process is continuous.
  • the OCMS can thus be collected as quickly as they are produced, thereby minimizing the residence time in the soaking solution.
  • the invention also relates to a method for cleaning OCMS comprising the following steps:
  • tangential flow reduces damage to OCMS by minimizing contact with the filter membrane during the cleaning process.
  • the cleaning method further comprises a step of injecting the rinsing solution into the second port and recovering the OCMS cleaned by the first port.
  • the invention also relates to a cell encapsulation system, the system comprising at least two containers, one of the containers comprising a cell solution and the other of the containers comprising a solution capable of gelling, an encapsulation device comprising a fluidic chip comprising main and secondary inlets each connected to one of the containers via a distributor and capable of forming a concentric jet from the solutions supplied by the distributors, the encapsulation device being arranged such that the jet splits, at the outlet of the encapsulation device, into drops of which the outer layer is the solution capable of gelling and the core the cell solution, a gelling bath arranged downstream of the encapsulation device to collect the drops formed by the encapsulation device and arranged to cause gelling of the outer layer of each drop during its immersion in the bath, and a filtration device according to the invention.
  • the gelling bath and a single-use closed harvesting system are connected to the first port of the filtration device, in particular by a flow valve.
  • the encapsulation system comprises a control unit arranged to control a solution displacement device for injecting OCMS bathing in the soaking solution of the gelling bath into the first compartment of the filtration device via the first port, the OCMS being stopped by the filter membrane and accumulated in a first compartment of the filtration device, and said soaking solution being evacuated from the filtration device, passing from the first compartment to the second compartment via the filter membrane and then via the second port.
  • a waste container may be connected to the second port of the filtration device to receive the evacuated soaking solution.
  • control unit is arranged to control a solution moving device to inject a soaking solution into the second compartment of the filtration device through the second port, said solution being evacuated from the filtration device by passing from the second compartment to the first compartment via the filter membrane and then via the first port by recovering the OCMS accumulated in the first compartment during the previous step.
  • a container of a soaking solution may be connected to the second port of the filtration device to inject the soaking solution.
  • the control unit may be arranged to control the flow valve to direct the OCMS recovered by the soaking solution to the single-use closed collection system.
  • control unit is arranged to control a solution displacement device to inject a rinsing solution into the first compartment of the filtration device via the first port, said rinsing solution being evacuated from the filtration device, passing from the first compartment, to rinse the accumulated OCMS, to the second compartment via the filter membrane and then via the second port.
  • FIG.l is a perspective view of an exemplary embodiment of a filtration device according to the invention.
  • FIG.2 is a schematic view of an exemplary embodiment according to the invention.
  • FIG.3 is a perspective view of an exemplary embodiment of a filtration device according to the invention.
  • FIG.4 is a half-sectional view of Figure 3 along the section plane AA,
  • FIG.5 is a half-sectional view of another exemplary embodiment of the invention.
  • FIG.6 is a schematic view of an exemplary embodiment with two filtration devices according to the invention.
  • the invention aims to filter suspended mesoscopic cellular objects, known as OCMS.
  • the invention designated by the reference 1 as a whole and illustrated in FIG. 1 relates to a filtration device comprising a body 2 comprising a filter membrane 3 which extends in the body 2 along a plane P.
  • the body 2 of the filtration device 1 comprises an inner casing 4 having rounded edges.
  • the inner casing 4 has the shape of a burger, i.e. a cylindrical shape with a rounded upper edge surface and a rounded lower edge surface.
  • the inner casing 3 of the body 2 has the shape of a donut, that is to say a toric shape.
  • the filtration device 1 is symmetrical with respect to the filter membrane 3.
  • Other non-symmetrical embodiments illustrated in Figures 3, 4 and 5 are also compatible with the invention.
  • the part intended to receive OCMS may comprise larger volume dimensions than the part on the other side of the filter membrane 3 or vice versa.
  • the filter membrane 3 extends along a plane P in the body 2 of the filtration device 1.
  • the filter membrane 3 extends to the edges of the inner casing 4 of the body 2 of the filtration device 1.
  • the useful section of the filter membrane 3 has the shape of a circle.
  • the useful section of the filter membrane 3 has the shape of an ellipse.
  • the filter membrane 3 comprises a fiber membrane capable of preventing the passage of the OCMS.
  • the filter membrane 3 is therefore adapted according to the type of OCMS implemented.
  • MSCOs mesoscopic cellular objects
  • the OCMS are bathed in a soaking solution.
  • the soaking solution allows cell culture.
  • the OCMS are cells encapsulated in alginate microcompartments and the soaking solution contains Calcium Chloride CaCI2.
  • the filter membrane 3 comprises a microfabric covered with a fiber membrane.
  • the fiber membrane contains a material of the wide mesh textile type (mesh), nylon, or PET.
  • Other filter materials, OCMS, are used in the context of the invention.
  • the filter membrane comprises porosities of less than 100 micrometers.
  • the filter membrane comprises porosities less than 100 micrometers.
  • the filter membrane 3 is capable of filtering at least one type of OCMS and is also capable of allowing another type of OCMS to pass through.
  • the mesh can thus be adapted according to the dimensions of the OCMS to be filtered.
  • the body 2 of the filtration device 1 comprises a first port 5 intended for a tangential injection of the OCMS bathed in a soaking solution.
  • the first port 5 comprises for its purposes a cylindrical shape which extends substantially in a direction D belonging to a plane P' parallel to the plane P of the filter membrane 3 as it appears in figure 1.
  • the second port 6 is located in the second part of the body 2, on the other side of the filter membrane 3. According to the embodiment illustrated in FIGS. 1 and 2, the second port 6 does not allow tangential injection into the body 2 of the filtration device 1. According to the embodiment illustrated in particular in FIGS. 3, 4 and 5, the second port 6 is also suitable for tangential injection into the body 2 of the filtration device 1.
  • the first port 5 comprises an inlet 7 and an injection channel 8.
  • the injection channel 8 allows tangential injection into the inner casing 4 of the body 2 of the filtration device 1.
  • the body 2 of the filtration device 1 comprises more than two inlet and outlet ports thus allowing the injection of different types of solution or OCMS on each side of the filter membrane 3.
  • the filtration device 1 according to the invention is used for different functions.
  • the filtration device 1 is notably used for various processes such as OCSM accumulation and OCMS cleaning.
  • a first use of the filtration device 1 relates to an OCMS accumulation process.
  • a first step of the OCMS accumulation method consists of injecting OCMS bathed in the soaking solution into the first port 5 of the OCMS filtration device 1 according to the invention.
  • the injection is carried out at a flow rate Q1 for a time T1.
  • the flow rate Q1 is 130 mL/min and the time T1 is 45 s.
  • the OCMS are stopped by the filter membrane 3.
  • a portion of the soaking solution is discharged through the second port 6 of the filtration device 1.
  • a second step in the OCMS accumulation process is a flow reversal. To do this, the previously evacuated soaking solution is injected into the second port 6.
  • the OCMS accumulated in the filtration device 1 during the first step of the OCMS accumulation process are then recovered via the first port 5.
  • Such a method of accumulating OCMS using the filtration device 1 according to the invention can advantageously be continuous by repeating the two steps described.
  • a second use of the filtration device 1 according to the invention relates to a method of cleaning OCMS.
  • a first step of the OCMS cleaning process consists of injecting OCMS bathed in a soaking solution into the first port 5 of the filtration device 1 at a flow rate Q2, and filtering the OCMS by the filter membrane 3 and recovering a portion of the soaking solution through the second port 6 for a time T2.
  • the flow rate Q2 is 260 mL/min and the time T2 is 15 s.
  • a second step of the OCMS cleaning process consists of injecting a rinsing solution into the first port 5 at a flow rate Q3 for a given time T3, the rinsing solution then replacing the soaking solution and recovering the soaking solution mixed with the rinsing solution and then the rinsing solution alone via the second port 6.
  • the flow rate Q3 is 250 ml/min and the time T3 is 20 s.
  • a third step consists of the inversion of the flow with the injection into the second port 6 of the rinsing solution according to a flow rate Q4 and the recovery of the cleaned OCMS by the first port 5 for a time T4.
  • the flow rate Q4 is 250 mL/min and the time T4 is 10 s.
  • Such an OCMS cleaning method using the filtration device 1 according to the invention can advantageously be continuous by repeating the three steps described.
  • FIG. 6 illustrates the implementation of the two processes described above in series.
  • a first filtration device 1 is used for an OCMS accumulation process and a second filtration device is used for an OCMS cleaning process.
  • Two filtration devices 1 intervene to accumulate the produced OCMS and transfer them, and to wash the OCMS with a rinsing solution and to collect the OCMS in a closed single-use system.
  • a flow valve 10 is interposed between the two respective first ports of the two filtration devices 1. And the steps described above can take place continuously.
  • the first port 5 of a first filtration device 1 is connected to the first port 5 of a second filtration device 1 in order to be able to directly inject accumulated OCMS. by the first filtration device 1 and to clean them using the second filtration device 1.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Separation Using Semi-Permeable Membranes (AREA)

Abstract

L'invention concerne un dispositif de filtration (1) d'objets cellulaires mesoscopiques en suspension (OCMS) comportant un corps (2) comprenant au moins un premier port (5) et un deuxième port (6) et une membrane filtrante (3) s'étendant selon un plan P dans le corps (2) définissant ainsi deux compartiments et apte à empêcher le passages des OCMS d'un compartiment à l'autre, le premier port (5) étant destiné à l'injection et au soutirage des OCMS baignés dans une solution de trempage et/ou une solution de rinçage et le deuxième port (6) étant destiné au soutirage et à l'injection de la solution de trempage et/ou de la solution de rinçage. Selon l'invention, l'injection dans le premier port (5) se fait selon une direction D non sensiblement orthogonale au plan P de la membrane filtrante (3).

Description

DISPOSITIF DE FILTRATION D'OBJETS CELLULAIRES MESOSCOPIQUES EN SUSPENSION
Domaine technique
La présente invention concerne le domaine technique des dispositifs de filtration d'objets cellulaires mesoscopiques en suspension.
Les objets cellulaires mesoscopiques en suspension, ci-après nommés OCMS, comprennent un ensemble d'objets dont la dimension varie entre 5pm et 5mm, qui sont en suspension et qui comprennent au moins une cellule eucaryote, encapsulée ou non. Par exemple, les OCMS comprennent des cellules humaine en suspension, des microtissus, des sphéroïdes, agrégats cellulaires, « embryoid bodies », encapsulés ou non.
Etat de l'art
Dans le domaine ci-dessus, il est connu des modules de filtration d'OCMS comprenant un corps comportant une membrane filtrante destinée à retenir les OCMS mais par exemple apte à laisser passer la solution dans laquelle les OCMS baignent.
Plusieurs techniques de filtrations existent, en particulier la filtration frontale, où les OCMS sont injectés de manière normale au plan de la membrane filtrante. Cette technique peut provoquer l'accumulation et la compaction des OCMS sur la membrane qui peut empêcher la bonne filtration des OCMS, les endommager et boucher le filtre.
Une autre technique de filtration est la filtration tangentielle, où les OCMS en solution sont injectés à travers un tube poreux à la solution mais pas aux OCMS, dans lequel la solution est soutirée à travers la paroi du tube, tandis que les OCMS traversent le tube. Cette technique de filtration tangentielle permet de minimiser le risque d'accumulation et de compaction. L'inconvénient de cette technique est qu'elle repose sur des filtres complexes à fabriquer et qu'elle ne permette que difficilement un rinçage complet des OCMS. En effet, il reste toujours une proportion résiduelle de solution de trempage après rinçage due au fait que les OCMS ne sont pas confinés dans un compartiment et il faut de multiples étapes de rinçage pour atteindre la concentration en solution de rinçage souhaitée.
Une autre technique de filtration est notamment la filtration par centrifugation qui n'utilise pas de membrane mais la différence de densité des OCMS par rapport à la solution de trempage/rinçage pour séparer OCMS et solution. Cette technique nécessite des équipements lourds (centrifugeuse), coûteuse et complexe à mettre en place.
La présente invention vise à pallier ces inconvénients.
Résumé de l'invention L'invention concerne donc un dispositif de filtration d'objets cellulaires mesoscopiques en suspension (OCMS) comportant un corps comprenant au moins un premier port et un deuxième port et une membrane filtrante s'étendant selon un plan P dans le corps définissant ainsi deux compartiments et apte à empêcher le passages des OCMS d'un compartiment à l'autre, le premier port étant destiné à l'injection et au soutirage des OCMS baignés dans une solution de trempage et/ou une solution de rinçage et le deuxième port étant destiné au soutirage et à l'injection de la solution de trempage et/ou de la solution de rinçage.
Selon l'invention, l'injection dans le premier port se fait selon une direction D non sensiblement orthogonale au plan P de la membrane filtrante.
Avantageusement, l'injection dans le premier port est une tangentielle confinée des OCMS et permet ainsi de ne pas créer d'accumulation ni d'endommagement des OCMS.
Un flux tangentiel ou un tourbillon dans le dispositif de filtration réduit les dommages causés aux OCMS en maintenant les OCMS en mouvement.
Dans un mode de réalisation, le corps est conçu de sorte que le chemin le plus court d'un OCMS dans le corps entre son injection et son soutirage soit une trajectoire courbée, passant au travers d'un seul des deux compartiments. De préférence, seul l'un des compartiments est conçu pour recevoir les OCMS injectés par le premier port, les deux compartiments étant conçus pour être traversés par une solution de trempage et/ou une solution de rinçage.
Le dispositif de filtration d'objets cellulaires mesoscopiques en suspension (OCMS) comporte un corps comprenant un premier port et un deuxième port et une membrane filtrante s'étendant selon un plan P dans le corps définissant ainsi deux compartiments et apte à empêcher le passages des OCMS d'un compartiment à l'autre, le premier port étant destiné à l'injection et au soutirage des OCMS baignés dans une solution de trempage et/ou une solution de rinçage et le deuxième port étant destiné au soutirage et à l'injection de la solution de trempage et/ou de la solution de rinçage, le premier port étant un port unique dans le premier compartiment.
Les OCMS désignent également des microcompartiments cellulaires.
Dans cet exemple, les OCMS, préférentiellement les microcompartiments cellulaires, injectés par le premier port dans un premier compartiment sont stockés dans ce premier compartiment jusqu'à leur soutirage par le premier port.
La mise en œuvre d'un port unique dans le premier compartiment du dispositif de filtration selon l'invention permet l'injection et le soutirage des OCMS baignés dans une solution de trempage au travers du même port réduisant ainsi le nombre de canaux et l'utilisation de tubes et permettant également d'obtenir un dispositif de filtration plus compact. Avantageusement, l'utilisation d'un port unique pour l'injection et le soutirage des OCMS, préférentiellement les microcompartiments cellulaires, baignés dans une solution de trempage et/ou la solution de rinçage permet de réduire le nombre d'éléments constitutifs du dispositif de filtration limitant ainsi l'impact de l'environnement tel que des risques de contaminations extérieures au niveau des ports.
Selon une caractéristique de l'invention, la direction D est parallèle au plan P.
Selon une forme de réalisation de l'invention, le corps comprend une enveloppe intérieure avec des bords ayant une forme arrondie et la section utile de la membrane filtrante a la forme d'un cercle ou d'une ellipse. La mise en œuvre de bords arrondis permet de réduire les recoins à l'intérieur du corps du dispositif limitant ainsi l'accumulation des OCMS dans les recoins et permettant d'éviter la perte d'OCMS coincés dans le dispositif lors des phases de récupération des OCMS. Cela permet aussi de limiter le volume mort et donc le volume nécessaire pour rincer les OCMS.
Dans un mode de réalisation de l'invention, le corps présente une forme trouée ou présentant une cavité dans son enveloppe. Il pourra notamment s'agir d'une forme torique, dont l'enveloppe est une surface engendrée par une courbe génératrice fermée, notamment un cercle ou une ellipse, circulant sur une autre courbe directrice fermée, notamment un cercle. Cette cavité ou ce trou formée dans l'enveloppe permet de créer ou de renforcer une circulation circulaire des OCMS dans le corps, et donc d'éviter un phénomène d'engorgement du dispositif de filtrage.
Selon un exemple de réalisation de l'invention, le corps comporte une forme torique et la section utile de la membrane filtrante a la forme d'un cercle ou d'une ellipse. Avantageusement, la forme torique permet d'augmenter l'effet de tourbillon pour les OCMS tout en réduisant fortement le volume mort à l'intérieur du corps limitant ainsi le volume nécessaire pour rincer les OCMS.
Selon une caractéristique de l'invention, toute section perpendiculaire au plan P du compartiment destiné à recevoir les OCMS a une surface strictement inférieure à la surface utile de la membrane filtrante.
Selon une autre caractéristique de l'invention, toute section perpendiculaire au plan P du compartiment destiné à recevoir les OCMS a une surface deux fois, cinq fois et de préférence dix fois inférieure à la surface utile de la membrane filtrante.
L'injection tangentielle associée à une telle différence de dimension permet d'injecter les OCMS avec un certain débit, favorisant le tourbillon, tout en permettant la concentration d'un certain nombre d'OCMS à l'intérieur du corps du dispositif de filtration et de minimiser le volume mort. Selon une caractéristique de l'invention, l'injection dans le deuxième port se fait également selon une direction non orthogonale, et préférentiellement parallèle, au plan P de la membrane filtrante. La deuxième injection tangentielle permet de favoriser les flux en tourbillon à l'intérieur du corps du dispositif de filtration.
Selon encore une autre caractéristique de l'invention, la solution de trempage est une solution permettant la culture cellulaire. Les OCMS sont ainsi maintenus dans un milieu favorable et ne sont pas dégradés.
Selon une caractéristique de l'invention, la solution de trempage contient des ions parmi la liste suivante : calcium, fer, barium, strontium, barium, fer cuivre plomb, aluminium, magnésium, préférentiellement calcium, fer, barium. L'ajout de tels ions a un intérêt fort pour la bonne tenue des OCMS.
Selon une autre caractéristique de l'invention, la membrane filtrante comprend un microtissu recouvert d'une membrane fibrée. La mise en œuvre d'une telle membrane filtrante permet de garder un contrôle sur le type d'OCMS à filtrer, préférentiellement sur le type de microcompartiment cellulaire à filtrer.
Selon une autre forme de réalisation de l'invention, la membrane filtrante est apte à filtrer des microcompartiments cellulaires présentant une plus grande dimension comprise entre 120 et 700 micromètres, préférentiellement comprise entre 200 pm et 400 pm, préférentiellement entre 200 pm et 350 pm, encore plus préférentiellement 200 pm et 300 pm, notamment entre 200pm et 250 pm. Le cas échéant, la membrane filtrante comprend des porosités inférieures à 100 micromètres, voire inférieures à 50 micromètres, voire inférieures à 10 micromètres. De préférence, la membrane filtrante est apte à filtrer des microcompartiments cellulaires comportant une plus grande dimension inférieure à 600 micromètres, la membrane filtrante comprend des porosités inférieures à 100 micromètres.
Par « plus petite dimension » d'un microcompartiment au sens de l'invention, on entend la valeur du plus petit diamètre de Feret dudit microcompartiment.
Par « diamètre de Feret » d'un microcompartiment selon l'invention, on entend la distance « d » comprise entre deux tangentes audit microcompartiment (ou à ladite partie), ces deux tangentes étant parallèles, de telle sorte que l'ensemble de la projection dudit microcompartiment (ou de ladite partie) soit compris entre ces deux tangentes parallèles. Un diamètre de Ferret de la partie interne du microcompartiment est mesuré entre deux interfaces de la partie interne et de la couche externe du microcompartiment, c'est-à-dire la distance « d » comprise entre deux tangentes à ladite partie interne, ces deux tangentes étant parallèles, de telle sorte que l'ensemble de la projection de ladite partie interne soit compris entre ces deux tangentes parallèles. Selon une autre caractéristique de l'invention, le dispositif comprend deux compartiments présentant des volumes différents. Préférentiellement, le compartiment destiné à recevoir des OCMS, préférentiellement des microcompartiments cellulaires, baignés dans une solution de trempage et/ou une solution de rinçage présente un volume supérieur au compartiment destiné à recevoir la solution de trempage et/ou de la solution de rinçage. La différence de volume permet avantageusement d'améliorer l'efficience et la quantité de microcompartiments récolté. Préférentiellement, le compartiment destiné à recevoir des microcompartiments cellulaires baignés dans une solution de trempage et/ou une solution de rinçage présente un volume au moins 50% plus important que le microcompartiment destiné à recevoir la solution de trempage et/ou de la solution de rinçage.
Selon une forme de réalisation de l'invention, la membrane filtrante est apte à laisser passer d'autres OCMS, préférentiellement d'autres microcompartiments cellulaires, d'un type différent contenu dans la solution de trempage. Cette caractéristique permet notamment un filtrage d'un certain type d'OCMS, préférentiellement de microcompartiments cellulaires.
Selon une forme de réalisation de l'invention, la membrane filtrante est apte à laisser passer d'autres OCMS d'un type différent contenu dans la solution de trempage. Cette caractéristique permet notamment un filtrage d'un certain type d'OCMS.
L'invention concerne également un procédé d'accumulation d'OCMS comprenant les étapes suivantes :
- Injection d'OCMS baignés dans la solution de trempage dans un premier port d'un dispositif de filtration d'OCMS selon l'invention, filtration des OCMS par la membrane filtrante et récupération d'une partie de la solution de trempage par le deuxième port,
- Injection de la solution de trempage dans le deuxième port et récupération des OCMS accumulés par le premier port.
Selon une forme de réalisation de l'invention, le procédé d'accumulation d'OCMS se fait en continue. Les OCMS peuvent ainsi être collectés aussi vite qu'ils sont produits minimisant ainsi le temps de séjour dans la solution de trempage.
L'invention concerne également un procédé de nettoyage d'OCMS comprenant les étapes suivantes :
- Injection d'OCMS baignés dans une solution de trempage dans un premier port d'un dispositif de filtration d'OCMS selon l'invention, filtration des OCMS par la membrane filtrante et récupération de la solution de trempage et de la solution de rinçage par le deuxième port,
- Injection d'une solution de rinçage dans le premier port donné destinée à remplacer la solution de trempage et récupération des deux solutions AA et de rinçage par le deuxième port. Avantageusement, le flux tangentiel réduit les dommages causés aux OCMS en minimisant le contact avec la membrane filtrante pendant le procédé de nettoyage.
Selon une caractéristique de l'invention, le procédé de nettoyage comprend en outre une étape d'injection de la solution de rinçage dans le deuxième port et récupération des OCMS nettoyés par le premier port.
L'invention porte aussi sur un système d'encapsulation de cellules, le système comportant au moins deux conteneurs, l'un des conteneurs comportant une solution de cellules et l'autre des conteneurs comportant une solution apte à gélifier, un dispositif d'encapsulation comprenant une puce fluidique comportant des entrées principale et secondaire étant chacune reliée à l'un des conteneurs via un distributeur et apte à former un jet concentrique à partir des solutions fournies par les distributeurs, le dispositif d'encapsulation étant agencé de sorte que le jet se fractionne, en sortie du dispositif d'encapsulation, en gouttes dont la couche extérieure est la solution apte à gélifier et le cœur la solution de cellules, un bain de gélification agencé en aval du dispositif d'encapsulation pour collecter les gouttes formées par le dispositif d'encapsulation et agencé pour provoquer une gélification de la couche extérieure de chaque goutte lors de son immersion dans le bain, et un dispositif de filtration selon l'invention.
Avantageusement, le bain de gélification et un système de récolte fermé à usage unique sont reliés au premier port du dispositif de filtration, notamment par une valve de débit.
Dans un exemple de réalisation de l'invention, le système d'encapsulation selon l'invention comporte une unité de contrôle agencée pour contrôler un dispositif de déplacement de solution pour injecter des OCMS baignant dans la solution de trempage du bain de gélification dans le premier compartiment du dispositif de filtration via le premier port, les OCMS étant arrêtés par la membrane filtrante et accumulés dans un premier compartiment du dispositif filtrant, et ladite solution de trempage étant évacuée du dispositif de filtrage, en passant du premier compartiment au deuxième compartiment en passant par la membrane filtrante puis par le deuxième port. Un conteneur de déchets pourra être relié au deuxième port du dispositif de filtration pour recevoir la solution de trempage évacuée.
Avantageusement, l'unité de contrôle est agencée pour contrôler un dispositif de déplacement de solution pour injecter une solution de trempage dans le deuxième compartiment du dispositif de filtration par le deuxième port, ladite solution étant évacuée du dispositif de filtrage en passant du deuxième compartiment au premier compartiment en passant par la membrane filtrante puis par le premier port en récupérant les OCMS accumulés dans le premier compartiment lors de l'étape précédente. Un conteneur d'une solution de trempage pourra être relié au deuxième port du dispositif de filtration pour injecter la solution de trempage. L'unité de contrôle pourra être agencée pour contrôler la valve de débit pour diriger les OCMS récupérés par la solution de trempage vers le système de récolte fermé à usage unique.
De façon alternative ou cumulative, notamment au préalable de l'étape de récupération des OCMS accumulés, l'unité de contrôle est agencée pour contrôler un dispositif de déplacement de solution pour injecter une solution de rinçage dans le premier compartiment du dispositif de filtration par le premier port, ladite solution de rinçage étant évacuée du dispositif de filtrage, en passant du premier compartiment, pour rincer les OCMS accumulés, au deuxième compartiment en passant par la membrane filtrante puis par le deuxième port.
Bien entendu, les différentes caractéristiques, variantes et formes de réalisation de l'invention peuvent être associées les unes avec les autres selon diverses combinaisons dans la mesure où elles ne sont pas incompatibles ou exclusives les unes des autres.
De plus, diverses autres caractéristiques de l'invention ressortent de la description annexée effectuée en référence aux dessins qui illustrent des formes, non limitatives, de réalisation de l'invention et où :
Brèves descriptions des Figures :
[Fig.l] est une vue en perspective d'un exemple de réalisation d'un dispositif de filtration selon l'invention,
[Fig.2] est une vue schématique d'un exemple de réalisation selon l'invention,
[Fig.3] est une vue en perspective d'un exemple de réalisation d'un dispositif de filtration selon l'invention,
[Fig.4] est une vue en demi-coupe de la figure 3 selon le plan de coupe AA,
[Fig.5] est une vue en demi-coupe d'une autre exemple de réalisation de l'invention , et
[Fig.6] est une vue schématique d'un exemple de réalisation avec deux dispositifs de filtration selon l'invention.
Description détaillée de l'invention
Il est à noter que sur ces figures les éléments structurels et/ou fonctionnels communs aux différentes variantes peuvent présenter les mêmes références.
L'invention vise à filtrer des d'objets cellulaires mesoscopiques en suspension, dits OCMS.
A ces fins, l'invention désignée par la référence 1 dans son ensemble et illustrée à la figure 1 concerne un dispositif de filtration comprenant un corps 2 comportant une membrane filtrante 3 qui s'étend dans le corps 2 selon un plan P.
Selon l'invention, le corps 2 du dispositif de filtration 1 comprend une enveloppe intérieure 4 comportant des bords arrondies. Selon une forme de réalisation de l'invention notamment illustrée aux figures 2 et 5, l'enveloppe intérieure 4 a la forme d'un burger, c'est-à-dire une forme cylindrique avec une surface de bord supérieure arrondie et une surface de bord inférieure arrondie.
Selon la forme de réalisation illustrée aux figures 3 et 4, l'enveloppe intérieure 3 du corps 2 a la forme d'un donut, c'est-à-dire une forme torique.
Selon la forme de réalisation illustrée à la figure 2, le dispositif de filtration 1 est symétrique par rapport à la membrane filtrante 3. D'autres formes de réalisation non symétriques illustrées aux figures 3, 4 et 5 sont également compatibles avec l'invention. Par exemple, la partie destinée à recevoir des OCMS peut comprendre des dimensions volumiques plus importantes que la partie de l'autre côté de la membrane filtrante 3 ou inversement.
La membrane filtrante 3 s'étend selon un plan P dans le corps 2 du dispositif de filtration 1. La membrane filtrante 3 s'étend à jusqu'aux bords de l'enveloppe intérieure 4 du corps 2 du dispositif de filtration 1. Selon les formes de réalisation illustrées, la section utile de la membrane filtrante 3 a la forme d'un cercle. Selon d'autres formes de réalisation non illustrées, la section utile de la membrane filtrante 3 a la forme d'une ellipse.
Afin de retenir les OCMS, la membrane filtrante 3 comprend une membrane fibrée apte à empêcher le passage des OCMS.
La membrane filtrante 3 est donc adaptée selon le type d'OCMS mis en œuvre.
Les objets cellulaires mesoscopiques en suspension (OCMS) désignent des cellules uniques ou microtissus, mais également des cellules encapsulées dans des microcompartiments d'alginate.
Les OCMS baignent dans une solution de trempage. Avantageusement, la solution de trempage permet la culture cellulaire. Par exemple, les OCMS sont des cellules encapsulées dans des microcompartiments d'alginate et la solution de trempage contient du Chlorure de Calcium CaCI2.
Selon une forme de réalisation de l'invention, la membrane filtrante 3 comprend un microtissu recouvert d'une membrane fibrée. La membrane fibrée contient un matériau de type textile à maille large (mesh), nylon, ou encore PET. D'autres matériaux filtrants les OCMS sont utilisés dans le cadre de l'invention.
Selon une forme de réalisation de l'invention, pour des OCSMS, et plus particulièrement pour des microcompartiments cellulaires, comportant une plus grande dimension comprise entre 120 et 700 micromètres, la membrane filtrante comprend des porosités inférieures à 100 micromètres. Selon une forme de réalisation de l'invention, pour des OCSMS, et plus particulièrement pour des microcompartiments cellulaires, comportant une plus grande dimension inférieure à 600 micromètres, la membrane filtrante comprend des porosités inférieures à 100 micromètres.
Selon une forme de réalisation de l'invention, la membrane filtrante 3 est apte à filtrer au moins un type d'OCMS et est également apte à laisser passer un autre type d'OCMS. Le maillage peut ainsi être adapté selon les dimensions des OCMS à filtrer.
Le corps 2 du dispositif de filtration 1 comprend un premier port 5 destiné à une injection tangentielle des OCMS baignés dans une solution de trempage.
Le premier port 5 comprend à ses fins une forme cylindrique qui s'étend sensiblement selon une direction D appartenant à un plan P' parallèle au plan P de la membrane filtrante 3 tel qui l'apparait à la figure 1.
Le deuxième port 6 est situé dans la deuxième partie du corps 2, de l'autre côté de la membrane filtrante 3. Selon la forme de réalisation illustrée aux figures 1 et 2, le deuxième port 6 ne permet pas une injection tangentielle dans le corps 2 du dispositif de filtration 1. Selon la forme de réalisation notamment illustrée aux figures 3, 4 et 5 deuxième port 6 est également apte à une injection tangentielle dans le corps 2 du dispositif de filtration 1.
Selon la forme de réalisation illustrée à la figure 1, le premier port 5 comprend une entrée 7 et un canal d'injection 8.
Le canal d'injection 8 permet une injection tangentielle dans l'enveloppe intérieure 4 du corps 2 du dispositif de filtration 1.
Selon d'autres formes de réalisation non illustrées, le corps 2 du dispositif de filtration 1 comprend plus de deux ports d'entrée et sortie permettant ainsi l'injection de différents types de solution ou d'OCMS de chaque côté de la membrane filtrante 3.
Le dispositif de filtration 1 selon l'invention est utilisé pour différentes fonctions.
Le dispositif de filtration 1 est notamment utilisé pour divers procédés tels que l'accumulation d'OCSM et le nettoyage d'OCMS.
Une première utilisation du dispositif de filtration 1 porte sur un procédé d'accumulation d'OCMS.
Une première étape du procédé d'accumulation d'OCMS consiste en l'injection d'OCMS baignés dans la solution de trempage dans le premier port 5 du dispositif de filtration 1 d'OCMS selon l'invention. L'injection se fait selon un débit Q1 pendant un temps Tl. Par exemple, le débit Q1 vaut 130mL/mn et le temps Tl vaut 45 s. Les OCMS sont arrêtés par la membrane filtrante 3. Une partie de la solution de trempage est évacuée par le deuxième port 6 du dispositif de filtration 1. Une deuxième étape du procédé d'accumulation d'OCMS consiste en une inversion du flux. Pour se faire, l'injection de la solution de trempage précédemment évacuée se fait dans le deuxième port 6.
Les OCMS accumulés dans le dispositif de filtration 1 lors de la première étape du procédé d'accumulation d'OCMS sont alors récupérées par le premier port 5.
Un tel procédé d'accumulation d'OCMS utilisant le dispositif de filtration 1 selon l'invention peut avantageusement être en continue en répétant les deux étapes décrites.
Une deuxième utilisation du dispositif de filtration 1 selon l'invention concerne un procédé de nettoyage d'OCMS.
Une première étape du procédé de nettoyage d'OCMS consiste en l'injection d'OCMS baignés dans une solution de trempage dans le premier port 5 du dispositif de filtration 1 selon un débit Q2, et la filtration des OCMS par la membrane filtrante 3 et la récupération d'une partie de la solution de trempage par le deuxième port 6 pendant un temps T2. Par exemple, le débit Q2 vaut 260 mL/mn et le temps T2 vaut 15 s.
Une deuxième étape du procédé de nettoyage d'OCMS consiste en l'injection d'une solution de rinçage dans le premier port 5 selon un débit Q3 pendant un temps T3 donné, la solution de rinçage remplaçant alors la solution de trempage et récupération de la solution de trempage mélangé à la solution de rinçage puis de la solution de rinçage seule par le deuxième port 6. Par exemple, le débit Q3 vaut 250 ml/mn et le temps T3 vaut 20 s.
Une troisième étape consiste en l'inversion du flux avec l'injection dans le deuxième port 6 de la solution de rinçage selon un débit Q4 et de la récupération des OCMS nettoyés par le premier port 5 pendant un temps T4. Par exemple, le débit Q4 vaut 250 mL/mn et le temps T4 vaut 10 s.
Un tel procédé de nettoyage d'OCMS utilisant le dispositif de filtration 1 selon l'invention peut avantageusement être en continue en répétant les trois étapes décrites.
La figure 6 illustre la mise en œuvre des deux procédés décrits ci-dessus en série. Un premier dispositif de filtration 1 est utilisé pour un procédé d'accumulation d'OCMS et un deuxième dispositif de filtration est utilisé pour un procédé de nettoyage des OCMS.
Deux dispositifs de filtration 1 interviennent pour accumuler les OCMS produites et les transférer, et pour laver les OCMS avec une solution de rinçage et pour récolter les OCMS dans un système fermé à usage unique. Pour se faire une valve de débit 10 est interposée entre les deux premiers ports respectifs des deux dispositifs de filtration 1. Et les étapes décrites ci-dessus peuvent avoir lieu en continue.
Le premier port 5 d'un premier dispositif de filtration 1 est relié au premier port 5 d'un deuxième dispositif de filtration 1 afin de pouvoir injecter directement des OCMS accumulés par le premier dispositif de filtration 1 et de les nettoyer grâce au deuxième dispositif de filtration 1.
D'autres formes d'architecture peuvent être mises en forme selon l'utilisation de l'invention.
Bien entendu, diverses autres modifications peuvent être apportées à l'invention dans le cadre des revendications annexées.

Claims

REVENDICATIONS
[Revendication 1] Dispositif de filtration (1) d'objets cellulaires mesoscopiques en suspension (OCMS) comportant un corps (2) comprenant au moins un premier port (5) et un deuxième port (6) et une membrane filtrante (3) s'étendant selon un plan P dans le corps (2) définissant ainsi deux compartiments et apte à empêcher le passages des OCMS d'un compartiment à l'autre, le premier port (5) étant destiné à l'injection et au soutirage des OCMS baignés dans une solution de trempage et/ou une solution de rinçage et le deuxième port (6) étant destiné au soutirage et à l'injection de la solution de trempage et/ou de la solution de rinçage, caractérisé en ce que l'injection dans le premier port (5) se fait selon une direction D non sensiblement orthogonale au plan P de la membrane filtrante (3).
[Revendication 2] Dispositif de filtration (1) selon la revendication précédente dans lequel la direction D est parallèle au plan P.
[Revendication 3] Dispositif de filtration (1) selon l'une des revendications précédentes dans lequel le corps (2) comprend une enveloppe intérieure avec des bords ayant une forme arrondie et la section utile de la membrane filtrante (3) a la forme d'un cercle ou d'une ellipse.
[Revendication 4] Dispositif de filtration (1) selon l'une des revendications précédentes dans lequel toute section perpendiculaire au plan P du compartiment destiné à recevoir les OCMS a une surface strictement inférieure à la surface utile de la membrane filtrante (3).
[Revendication 5] Dispositif de filtration (1) selon la revendication précédente dans lequel toute section perpendiculaire au plan P du compartiment destiné à recevoir les OCMS a une surface deux fois, cinq fois et de préférence dix fois inférieure à la surface utile de la membrane filtrante.
[Revendication 6] Dispositif de filtration (1) selon l'une des revendications précédentes dans lequel le corps (2) comporte une forme torique et la section utile de la membrane filtrante (3) a la forme d'un cercle ou d'une ellipse.
[Revendication 7] Dispositif de filtration (1) selon l'une des revendications précédentes dans lequel l'injection dans le deuxième port (6) se fait également selon une direction non orthogonale, et préférentiellement parallèle, au plan P de la membrane filtrante (3).
[Revendication 8] Dispositif de filtration (1) selon l'une des revendications précédentes dans lequel la solution de trempage est une solution permettant la culture cellulaire.
[Revendication 9] Dispositif de filtration (1) selon la revendication précédente dans lequel la solution de trempage contient des ions parmi la liste suivante : calcium, fer, barium, strontium, barium, fer cuivre plomb, aluminium, magnésium, préférentiellement calcium, fer, barium.
[Revendication 10] Dispositif de filtration (1) selon l'une des revendications précédentes dans lequel la membrane filtrante (3) comprend un microtissu recouvert d'une membrane fibrée.
[Revendication 11] Dispositif de filtration (1) selon l'une des revendications précédentes dans lequel la membrane filtrante (3) est apte à laisser passer d'autres OCMS d'un type différent contenu dans la solution de trempage.
[Revendication 12] Procédé d'accumulation d'OCMS comprenant les étapes suivantes :
- Injection d'OCMS baignés dans la solution de trempage dans un premier port (5) d'un dispositif de filtration (1) selon l'une des revendications 1 à 11, filtration des OCMS par la membrane filtrante (3) et récupération d'une partie de la solution de trempage par le deuxième port (6),
- Injection de la solution de trempage dans le deuxième port (6) et récupération des OCMS accumulés par le premier port (5).
[Revendication 13] Procédé de nettoyage d'OCMS comprenant les étapes suivantes :
- Injection d'OCMS baignés dans une solution de trempage dans un premier port (5) d'un dispositif de filtration (1) selon l'une des revendications 1 à 11, filtration des OCMS par la membrane filtrante (3) et récupération de la solution de trempage et de la solution de rinçage par le deuxième port (6),
- Injection d'une solution de rinçage dans le premier port (5) donné destinée à remplacer la solution de trempage et récupération des deux solutions AA et de rinçage par le deuxième port (6).
[Revendication 14] Procédé de nettoyage d'OCMS selon la revendication précédente comprenant en outre une étape d'injection de la solution de rinçage dans le deuxième port (6) et récupération des OCMS nettoyés par le premier port (5).
[Revendication 15] Système d'encapsulation de cellules, le système comportant au moins :
- deux conteneurs, l'un des conteneurs comportant une solution de cellules et l'autre des conteneurs comportant une solution apte à gélifier,
- un dispositif d'encapsulation comprenant une puce fluidique comportant des entrées principale et secondaire étant chacune reliée à l'un des conteneurs via un distributeur et apte à former un jet concentrique à partir des solutions fournies par les distributeurs, le dispositif d'encapsulation étant agencé de sorte que le jet se fractionne, en sortie du dispositif d'encapsulation, en gouttes dont la couche extérieure est la solution apte à gélifier et le cœur la solution de cellules,
- un bain de gélification agencé en aval du dispositif d'encapsulation pour collecter les gouttes formées par le dispositif d'encapsulation et agencé pour provoquer une gélification de la couche extérieure de chaque goutte lors de son immersion dans le bain, et
- un dispositif de filtration (1) selon l'une des revendications 1 à 11.
PCT/EP2024/070474 2023-07-18 2024-07-18 Dispositif de filtration d'objets cellulaires mesoscopiques en suspension Pending WO2025017161A1 (fr)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR2307689A FR3151223A1 (fr) 2023-07-18 2023-07-18 Dispositif de filtration d’objets cellulaires mesoscopiques en suspension
FRFR2307689 2023-07-18
FRFR2400748 2024-01-25
FR2400748A FR3151339A1 (fr) 2023-07-18 2024-01-25 Optimisation de la culture cellulaire en trois dimensions

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2025017161A1 true WO2025017161A1 (fr) 2025-01-23

Family

ID=92142006

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/EP2024/070474 Pending WO2025017161A1 (fr) 2023-07-18 2024-07-18 Dispositif de filtration d'objets cellulaires mesoscopiques en suspension
PCT/EP2024/070473 Pending WO2025017160A1 (fr) 2023-07-18 2024-07-18 Optimisation de la culture cellulaire en trois dimensions

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/EP2024/070473 Pending WO2025017160A1 (fr) 2023-07-18 2024-07-18 Optimisation de la culture cellulaire en trois dimensions

Country Status (1)

Country Link
WO (2) WO2025017161A1 (fr)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107937257A (zh) * 2017-11-27 2018-04-20 长春理工大学 一种循环肿瘤细胞分离芯片及其检测方法
US20190112565A1 (en) * 2016-06-30 2019-04-18 Fujifilm Corporation Membrane separation method of cell suspension, and cell culture device
US11000780B1 (en) * 2019-12-06 2021-05-11 AnuCell Biosystems Limited Torus reactor for a combined cell isolator and bioreactor
EP3848451A1 (fr) * 2018-09-11 2021-07-14 Nissan Chemical Corporation Dispositif de séparation et procédé de séparation de matériau à séparer l'utilisant

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0659217B2 (ja) * 1985-08-06 1994-08-10 三井東圧化学株式会社 固定化酵素の製造方法及びその方法に用いるための装置
JPS6251957A (ja) * 1985-08-30 1987-03-06 Hitachi Ltd 海藻ゲル包括菌体粒子ゲル製造装置及び方法
US20120208255A1 (en) * 2011-02-14 2012-08-16 Geosynfuels, Llc Apparatus and process for production of an encapsulated cell product
US11390835B2 (en) * 2015-05-08 2022-07-19 University Of Florida Research Foundation, Inc. Growth media for three-dimensional cell culture

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20190112565A1 (en) * 2016-06-30 2019-04-18 Fujifilm Corporation Membrane separation method of cell suspension, and cell culture device
CN107937257A (zh) * 2017-11-27 2018-04-20 长春理工大学 一种循环肿瘤细胞分离芯片及其检测方法
EP3848451A1 (fr) * 2018-09-11 2021-07-14 Nissan Chemical Corporation Dispositif de séparation et procédé de séparation de matériau à séparer l'utilisant
US11000780B1 (en) * 2019-12-06 2021-05-11 AnuCell Biosystems Limited Torus reactor for a combined cell isolator and bioreactor

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
MINGLIN MA ET AL: "Core-Shell Hydrogel Microcapsules for Improved Islets Encapsulation", ADVANCED HEALTHCARE MATERIALS, WILEY - V C H VERLAG GMBH & CO. KGAA, DE, vol. 2, no. 5, 3 December 2012 (2012-12-03), pages 667 - 672, XP072466093, ISSN: 2192-2640, DOI: 10.1002/ADHM.201200341 *

Also Published As

Publication number Publication date
WO2025017160A1 (fr) 2025-01-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FR2902799A1 (fr) Procede et unite de preparation d'un echantillon pour l'analyse microbiologique d'un liquide
CA2151186A1 (fr) Element inorganique multicanal pour la filtration d'un fluide
WO2007095771A1 (fr) Chambre de centrifugation circulaire pour la separation du sang
FR2970422A1 (fr) Nouvelle geometrie d'elements de filtration
WO2007098623A1 (fr) Procede et chambre de centrifugation pour le lavage et la separation en continu de constituants sanguins
EP2919915A1 (fr) Dispositif de filtration d'eau de piscine
FR3059246A1 (fr) Systeme de filtration d'une solution comportant des microalgues en vue de leur recolte
EP0120750B1 (fr) Appareil de filtration tangentielle et installation comportant un tel appareil
WO2025017161A1 (fr) Dispositif de filtration d'objets cellulaires mesoscopiques en suspension
EP1562694A1 (fr) Membrane pour filtration tangentielle et son procede de fabrication
EP0353154B1 (fr) Perfectionnements aux dispositifs pour éliminer les boules usées des installations de nettoyage de faisceaux tubulaires
EP2705132A1 (fr) Procédé pour la récolte de microalgues et dispositif pour la mise en oeuvre de ce procédé
FR3151223A1 (fr) Dispositif de filtration d’objets cellulaires mesoscopiques en suspension
FR2899438A1 (fr) Dispositif pour separer les uns des autres le pedoncules de fruits regroupes en grappes.
WO2015071594A1 (fr) Dispositif à filtration améliorée pour retenir des cellules contenues dans un échantillon liquide.
CA2552021C (fr) Dispositif de filtration integrant une boucle et une pompe de circulation
CN115960702A (zh) 一种外泌体过滤装置
EP1349643A1 (fr) Decolmatage d'un filtre a fibres creuses fonctionnant en mode frontal
FR3076739A1 (fr) Element de filtration d’eau a fibres creuses et module de filtration integrant un tel element de filtration
WO2015071593A1 (fr) Dispositif de filtration de fluide biologique
WO2019025670A1 (fr) Système de récolte de micro-algues et d'exsudats de micro- algues dans une eau de culture chargée, comportant une circulation tangentielle sur une membrane filtrante
EP4197641B1 (fr) Membrane de collecte de particules aéroportées
CN201613111U (zh) 一种中空纤维膜组件
FR3148721A1 (fr) Dispositif d’extraction de plasma et procede associe
WO2000075076A1 (fr) Cartouche filtrante pour appareil domestique de traitement de l'eau

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 24748842

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1