[go: up one dir, main page]

WO2025062101A1 - Extrait de citrus aurantium et son utilisation en tant qu'agent cosmetique - Google Patents

Extrait de citrus aurantium et son utilisation en tant qu'agent cosmetique Download PDF

Info

Publication number
WO2025062101A1
WO2025062101A1 PCT/FR2024/051227 FR2024051227W WO2025062101A1 WO 2025062101 A1 WO2025062101 A1 WO 2025062101A1 FR 2024051227 W FR2024051227 W FR 2024051227W WO 2025062101 A1 WO2025062101 A1 WO 2025062101A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
skin
extract
cosmetic
bacterial
citrus aurantium
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
PCT/FR2024/051227
Other languages
English (en)
Inventor
Joan ATTIA
Romain DUROUX
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Lucas Meyer Cosmetics SAS
Original Assignee
Lucas Meyer Cosmetics SAS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Lucas Meyer Cosmetics SAS filed Critical Lucas Meyer Cosmetics SAS
Publication of WO2025062101A1 publication Critical patent/WO2025062101A1/fr
Pending legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/005—Preparations for sensitive skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/75—Rutaceae (Rue family)
    • A61K36/752—Citrus, e.g. lime, orange or lemon
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/007—Preparations for dry skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A61K2236/333—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using mixed solvents, e.g. 70% EtOH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/74—Biological properties of particular ingredients
    • A61K2800/75—Anti-irritant
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/49—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds
    • A61K8/4973—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with oxygen as the only hetero atom
    • A61K8/498—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with oxygen as the only hetero atom having 6-membered rings or their condensed derivatives, e.g. coumarin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/60—Sugars; Derivatives thereof
    • A61K8/602—Glycosides, e.g. rutin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/10—Anti-acne agents

Definitions

  • the present invention relates to the field of cosmetic active ingredients and their uses, in particular for combating the effects of bacterial stress on the skin.
  • the skin is the first barrier protecting the body from external aggressions.
  • This organ is composed of several layers of tissue.
  • We distinguish (i) the epidermis which is the outermost part of the skin, (ii) the dermis, a connective tissue made up of fibroblasts and an extracellular matrix which ensures the functions of cohesion and nutrition of the skin, and (iii) the hypodermis made up of adipocytes.
  • the epidermis is made up of several cellular layers of keratinocytes.
  • the germinative layer of the epidermis called the basal layer, containing, in particular, skin stem cells, the spinous layer, Stratum spinosum, made up of several layers of polygonal cells, the granular layer, Stratum granulosum, comprising one to three layers of flattened cells containing cytoplasmic inclusions, the keratohyaline grains, and finally, the horny layer, Stratum corneum which is composed of anucleated and keratin-rich cells called comeocytes which correspond to the terminal stage of keratinocyte differentiation.
  • the outermost cells of the stratum corneum are continually shed and replaced by cells from a lower layer, in a process called desquamation.
  • Cell regeneration of the stratum corneum is based on a process of cell maturation in which cells from the basal layer of the epidermis differentiate and gradually migrate through the different layers of the epidermis until they reach the stratum corneum in the form of comeocytes.
  • the cells of the stratum corneum are linked together by epidermal lipids. These lipids create a protective barrier and have a water-retaining power.
  • the skin can become dry, tight and rough.
  • the epidermis is also covered with an emulsion of water and lipids (fats), called the hydrolipidic film.
  • This film renewed by secretions from the sebaceous and sweat glands, helps keep the skin supple and acts as an additional barrier against pathogens and irritants.
  • the skin is a true organ providing a barrier function that protects our body against multiple external aggressions, whether microbiological, chemical or mechanical.
  • the skin is supported in this protective function by the skin microbiota (also known as skin flora) made up of various types of microorganisms including bacteria such as Staphylococcus epidermidis.
  • the skin microbiota prevents the pathogenic germ from attaching and can secrete bacteriocins and other toxins while the skin's innate immune system is activated, involving the release of pro-inflammatory cytokines, the recruitment of immune cells such as neutrophils, NK cells and macrophages and the secretion of antibacterial peptides.
  • the balance between the skin and the skin microbiota is fragile. Due to repeated aggressions of all kinds, the skin can become more reactive, more sensitive and respond disproportionately to bacterial stress resulting from bacteria present in the environment, but also generated, in certain circumstances, by commensal bacteria. This disproportionate inflammatory reaction can further impair its barrier function and increase its reactivity to external aggressions. Indeed, a reduction in the skin's barrier function leads to an increase in its permeability to irritants and an alteration in its capacity to retain water. The skin suffers from dry skin and irritants can penetrate deeper into the epidermis, leading in particular to inflammatory reactions. Eventually, the skin's tolerance threshold decreases, the skin becomes drier, rougher and more red, and skin discomfort sets in. This is called sensitive or reactive skin.
  • the invention relates to the cosmetic use of a Citrus fruit extract, more precisely an extract of C. aurantium as a cosmetic agent protecting healthy skin against bacterial stress.
  • the C. aurantium fruit extract is preferably a hydroalcoholic and hydrolyzed extract.
  • the extract can be prepared from immature C. aurantium fruits, including whole fruits in ground and dried form.
  • the bacterial stress results from exposure of the skin to bacterial secretome, e.g., produced by commensal bacteria, preferably S. aureus, S. epidermidis and C. acnes and/or to endotoxin present in the environment.
  • bacterial secretome e.g., produced by commensal bacteria, preferably S. aureus, S. epidermidis and C. acnes and/or to endotoxin present in the environment.
  • the extract of the invention may be used to normalize the skin's response to bacterial stress and/or to increase the skin's tolerance to bacterial stress.
  • the extract of the invention is used to prevent, alleviate, and/or treat one or more non-pathological alterations of the skin induced by bacterial stress, for example, a decrease in the skin's barrier function, a decrease in skin hydration, an increase in skin roughness, the appearance of redness, a loss of evenness of skin tone, a loss of suppleness, a loss of skin radiance, and combinations thereof.
  • the extract is further used as a cosmetic agent to prevent, alleviate, soothe, or treat skin discomfort resulting from exposure of the skin to bacterial stress.
  • the extract according to the invention can in particular act as an activator of the TAS2R14 signaling pathway, preferably as an agonist of the TAS2R14 receptor.
  • the extract is applied to sensitive skin, acne-prone skin, or atopic-prone skin.
  • the subject of the invention is an extract of Citrus fruit, namely Citrus aurantium, obtained by a process comprising the following steps:
  • the extract may be prepared from whole fruits of Citrus aurantium, preferably whole immature fruits, especially in crushed and dried form.
  • An additional subject matter according to the invention is a cosmetic ingredient comprising the extract as defined herein in a cosmetically acceptable vehicle selected from the group consisting of triethyl citrate, glycerol, alkanediols such as propanediol, propylene glycol, butylene glycol, pentylene glycol, ketal esters e.g. ketal levulinates such as methyl or ethyl levulinate or glycerol ketal levulinate, water, and mixtures thereof.
  • a cosmetically acceptable vehicle selected from the group consisting of triethyl citrate, glycerol, alkanediols such as propanediol, propylene glycol, butylene glycol, pentylene glycol, ketal esters e.g. ketal levulinates such as methyl or ethyl levulinate or glycerol ketal levulinate, water, and mixtures thereof.
  • the invention also relates to a cosmetic composition intended to protect the skin against bacterial stress comprising the extract or cosmetic ingredient as defined herein and one or more cosmetically acceptable excipients.
  • the cosmetic composition according to the invention may be in the form of a cosmetic treatment, a makeup product or a body hygiene product preferably chosen from the group consisting of a lotion, a milk, a serum, an aqueous or oily gel, an emulsion, a cream, a gel-cream, a treatment water, an ointment, a balm, a foundation, a spray, a mascara, a stick, a lipstick, a gloss, a mousse, a deodorant, a nourishing mask, a shower gel, a cleansing oil, a soap, a shampoo or a conditioner, a mask or a hair oil.
  • a cosmetic treatment preferably chosen from the group consisting of a lotion, a milk, a serum, an aqueous or oily gel, an emulsion, a cream, a gel-cream, a treatment water, an ointment, a balm, a foundation, a spray, a mascara, a stick, a lipstick,
  • the invention also relates to a method for manufacturing a Citrus extract, preferably Citrus aurantium, comprising the following steps:
  • a hydrolysis step preferably using an acidic aqueous solution, for example a concentrated aqueous acid solution.
  • the hydroalcoholic solvent may be an alcohol/water mixture in a volume ratio ranging from 5.0 to 15.0.
  • the alcohol is preferably chosen from the group consisting of ethanol, isopropanol, and glycerol.
  • the invention relates to a cosmetic method for protecting healthy skin against bacterial stress comprising the topical application of a Citrus aurantium fruit extract as defined herein, wherein the Citrus aurantium fruit extract is present as a cosmetic active agent.
  • Citrus aurantium fruit extract can be used as a cosmetic active agent to normalize the skin's response to bacterial stress and/or to increase the skin's tolerance to bacterial stress.
  • Citrus aurantium fruit extract can be used as an activator of the TAS2R14 signaling pathway in the skin.
  • the extract according to the invention is applied to the skin in the form of a cosmetic composition.
  • Figure 1 shows the results of Example 2. Exposure of skin explants to the bacterial secretome (bacterial secretome) results in a significant increase in the expression of the IL1a and IL-8 genes and a significant decrease in the expression of the TAS2R14 gene compared to skin explants not exposed to the secretome (Untreated).
  • the extract according to the invention makes it possible to counteract the effects of the bacterial secretome on the expression of the genes coding for IL1a, IL-8 and TAS2R14 (bacterial secretome + Extract according to the invention).
  • Figure 2 shows the results of Example 2. Exposure of skin fibroblasts to IL1- ⁇ stimulates IL-8 production. Incubation of fibroblasts with the extract according to the invention significantly reduces IL-8 production. This effect is blocked in the presence of SBA, a TAS2R14 antagonist.
  • Figure 3 shows the results of Example 3. Exposure of skin fibroblasts to LPS leads to an increase in IL-8 production by the cells (IL-8 group).
  • the Applicant has developed a new extract of Citrus aurantium prepared by hydroalcoholic extraction followed by a hydrolysis step. Surprisingly, the Applicant has shown that this extract was capable of modulating the immune response induced in skin explants by exposure to a bacterial secretome obtained from the culture medium of bacteria present in the human skin microbiota, namely Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus and Cutibacterium acnes.
  • the extract according to the invention thus made it possible to significantly reduce the expression of several pro-inflammatory genes.
  • the extract according to the invention also made it possible to prevent the reduction in the expression of a bitter taste receptor, namely TAS2R14: the level of expression of TAS2R14 in skin explants exposed to the bacterial secretome but treated with the extract according to the invention is similar to that observed for control explants, not exposed to the bacterial secretome.
  • the Applicant also showed that the extract according to the invention was capable of reducing IL-1a-induced IL-8 production in skin fibroblasts and that this effect was inhibited in the presence of SBA, a TAS2R14 antagonist.
  • the extract according to the invention was capable of protecting skin fibroblasts against the pro-inflammatory effect induced by bacterial lipopolysaccharides, which are endotoxins, major constituents of the wall of Gram-negative bacteria.
  • the extract according to the invention proved to be significantly more effective than an equivalent non-hydrolyzed extract or than hesperetin tested at a dose equivalent to its content in the extract.
  • Such a result underlines that the effect of the extract results specifically from its composition, in particular in aglycone compounds.
  • the present invention also relates to a cosmetic ingredient or a cosmetic composition comprising an extract according to the invention, as well as a cosmetic process comprising the application of an extract according to the invention, e.g. formulated in the form of a cosmetic composition, to the skin.
  • the invention relates to a hydroalcoholic and hydrolyzed extract of Citrus.
  • Citrus extracts can be obtained from an aerial part of the plant, for example, leaves, stems, flowers, fruits and mixtures thereof.
  • the extract is obtained from Citrus fruits, i.e., from whole fruits, any part of the whole fruit and combinations thereof.
  • Citrus means any plant species, including plant varieties, belonging to the genus Citrus.
  • Citrus species include, but are not limited to, Citrus sinensis, Citrus aurantium, Citrus bergamia Risso, and Citrus reticulata.
  • the extract according to the invention is obtained from the fruits of Citrus aurantium, also called bitter orange.
  • the extract according to the invention can be prepared from immature fruits, that is to say, fruits having a level of maturity unsuitable for use in the agri-food sector.
  • the extract according to the invention can be prepared from fruits discarded during harvesting, and therefore from by-products of agricultural activity.
  • the extract according to the invention can be prepared from the whole fruit or from any part of the fruit, in particular the skin and/or the bark, in particular from the bark or from any part thereof such as the epicarp, the mesocarp, the endocarp and their combinations.
  • the extract according to the invention is prepared from the whole fruit of Citrus aurantium.
  • the extract according to the invention is prepared from the whole immature fruit of Citrus aurantium.
  • hydroalcoholic refers to an extract whose manufacturing process includes a hydroalcoholic extraction step, i.e. an extraction using a water/alcohol mixture.
  • the extract according to the invention is said to be “hydrolyzed”.
  • a hydrolyzed extract refers to an extract whose manufacturing process includes a hydrolysis step, i.e. a step in which certain covalent bonds present in the extracted molecules are broken by reaction with a water molecule.
  • the hydrolysis can be of any type, in particular acid hydrolysis (i.e. hydrolysis catalyzed by the presence of an acid), basic hydrolysis (i.e. hydrolysis catalyzed by the presence of a base) or enzymatic hydrolysis.
  • the extract according to the invention is prepared by a method comprising the following steps:
  • Step (a) Before carrying out step (a), the Citrus aurantium fruit may undergo one or more treatments such as washing, drying, grinding, cryogenic grinding, freezing, drying and combinations thereof.
  • the Citrus aurantium fruit is preferably dried and ground before carrying out step (a).
  • Step (a) is a solid-liquid extraction step.
  • the hydroalcoholic solvent used in step (a) is typically a mixture of water with an alcohol.
  • alcohol includes lower alcohols, in particular C2-C5, glycerin, C2-C5 alkanediols and mixtures thereof.
  • the alcohol may be selected from glycerin, ethanol, propanol, butanol, isomers thereof such as isopropanol, fo/-butanol, pentanol, ethylene glycol, 1,3-propanediol, and mixtures thereof.
  • Preferred solvents are ethanol, isopropanol, and glycerol.
  • the “alcohol/water” volume ratio in the hydroalcoholic mixture is typically in a range from 0.01 to 20.0, for example from about 1 to about 15.0, for example from about 5.0 to about 15.0, for example from about 7.0 to about 8.0.
  • a preferred “alcohol/water” mixture is an “EtOH/water” mixture, for example, in a volume ratio of 5.0 to 10.0, for example 7.0 to 8.0.
  • the volume of hydroalcoholic solvent used in step (a) is preferably sufficient to cover the Citrus aurantium fruits.
  • the volume of hydroalcoholic solvent is generally between 1 L and 30 L, preferably from 5 L to 15 L per kg of Citrus fruits.
  • Step (a) can be carried out with stirring.
  • Step (a) can be carried out at room temperature or at a higher temperature.
  • step (a) is carried out under reflux for a sufficient time to allow efficient extraction of the molecules of interest.
  • the extraction step (a) can last between a few minutes to a few hours, for example between 10 min and 6 h, preferably from 1 h to 3 h.
  • the liquid phase and the solid phase of the reaction medium are separated. Any method allowing such separation can be used, such as filtration or centrifugation.
  • the liquid phase is recovered and is condensed, at least partially, preferably under reduced pressure.
  • the residue obtained can be directly used in step (b).
  • Step (b) is a hydrolysis step.
  • the purpose of this step is in particular to cleave the flavonoid heterosides present in the extract so as to release the aglycone parts of these compounds.
  • step (b) makes it possible to convert hesperidin into hesperetin and naringin into naringenin.
  • step (b) allows almost total conversion (of at least 90 mol%) of the hesperidin and naringin present in the extract obtained in step (a).
  • step (b) is carried out by acid hydrolysis, for example using a concentrated aqueous solution of hydrochloric acid at a concentration of between 0.2N and 2N, for example an aqueous HCl 1N solution.
  • the acid can be a solution of sulfuric acid or nitric acid, said solution also having a molarity of between 0.2 N and 2 N, e.g. 1 N.
  • Step (b) can be carried out at room temperature or at a higher temperature.
  • the reaction medium is refluxed, for example in the case of acid hydrolysis.
  • the reaction can last from a few minutes to a few hours, for example from 10 min to 5 h.
  • the reaction medium can be cooled and then filtered.
  • the filtrate can be brought back to a pH of approximately 5.0 to 6.0 in order to precipitate the extract.
  • the precipitated extract can be recovered by any known method, for example by filtration.
  • the precipitate thus recovered can be washed, dried and/or ground.
  • the extract according to the invention can therefore be obtained in the form of a powder.
  • This extract can be directly implemented in the uses and methods described in the present application.
  • the preparation process may comprise one or more additional steps, in particular a step of formulating the extract in a suitable vehicle.
  • the Citrus aurantium extract according to the invention may be diluted in a solvent, for example chosen from triethyl citrate, glycerol (also called glycerin), alkanediols such as propanediol, butylene glycol, pentylene glycol and their isomers, ketal esters, e.g. ketal levulinates such as methyl or ethyl levulinate or glycerol ketal levulinate, water, and mixtures thereof.
  • the extract according to the invention can also be encapsulated in a vectorization system, for example liposomes, or dissolved in a suitable solvent and then absorbed onto a solid support such as maltodextrin.
  • the extract according to the invention may be formulated in a mixture of glycerol/water or alkanediol/water.
  • it is a C2-C5 alkanediol/water mixture.
  • Said alkanediol is preferably a propanediol such as 1,3-propanediol and 1,2-propanediol (propylene glycol).
  • the extract is generally present in a content ranging from 0.1% to 10%, e/g. approximately 1% by weight of the total weight of the formulation.
  • Antioxidant and preservative-type compounds i.e. compounds with certain antibacterial or bacteriostatic activities
  • compounds with certain antibacterial or bacteriostatic activities such as caprylyl glycol or glycerol caprylate or agents to adjust the pH (e.g. buffering agent) can also be added to the formulation.
  • the present invention also relates to the process for preparing the extract according to the invention described above, as such.
  • the extract according to the invention comprises from 18% to 35% of hesperetin and from 8% to 20% of naringenin.
  • the extract according to the invention comprises less than 3.0%, preferably less than 1.0% or less than 0.5% by weight of naringin and hesperidin,
  • the above percentages are expressed by weight relative to the total dry point of the extract.
  • the quantitative composition of the extract can be determined in particular by HPLC analysis, as illustrated in the examples.
  • the invention also relates to the non-therapeutic, cosmetic use of a hydroalcoholic, hydrolyzed extract obtained from the fruit of Citrus aurantium as described herein as a cosmetic agent.
  • the extract according to the invention is intended for topical application, preferably on healthy skin including a healthy scalp.
  • the commensal flora includes, in addition to bacteria, other microbial agents such as fungi like Malassezia furfur or Candida albicans or mites like the Demodex genus.
  • Such alterations include, but are not limited to: decreased skin barrier function, decreased skin hydration, increased skin roughness, the appearance of redness, loss of evenness of skin tone, loss of suppleness, loss of skin radiance and combinations thereof.
  • the extract according to the invention is used as a cosmetic agent to prevent, alleviate, soothe or treat skin discomfort resulting from exposure of the skin to bacterial (or microbial) stress.
  • Skin discomfort means a set of unpleasant sensations, not linked to a pathology, such as feelings of tightness, tingling, itching, or heating, sensations of dry or dehydrated skin, transient redness and combinations of these.
  • the extract according to the invention in particular the extract of the fruit of Citrus aurantium as described herein, can be used for:
  • the Extract according to the invention is used on sensitive skin or on skin with atopic tendency.
  • Sensitive, reactive or intolerant skin is defined as skin characterized by disproportionate reactivity to external factors (such as bacterial stress) that causes skin discomfort. This increased reactivity may result from a non-pathological alteration, of the skin's barrier function which reduces the skin's tolerance threshold to external stimuli.
  • Atopic-prone skin means sensitive skin in an individual who has suffered from atopic dermatitis, and/or has an allergic background, i.e. has a history of allergies and/or has a family history of allergies.
  • the phenomenon of "sensitive skin” can also be caused or accentuated by dysbiosis of the skin microbiota, that is to say by an imbalance of the skin microbiota (also called skin flora), as observed in certain skins with atopic tendency.
  • the extract according to the invention is used to normalize the skin's response to bacterial stress, and/or increase the skin's tolerance to bacterial stress.
  • the extract according to the invention can be used in particular in sensitive or atopic-prone skin.
  • the Applicant is of the opinion that the protective action of the Extract according to the invention against bacterial stress is linked to the activation of the TAS2R14 signaling pathway.
  • the extract according to the invention is used as an activating agent of the TAS2R14 signaling pathway in the skin.
  • the extract according to the invention can be used as an agonist of the TAS2R14 receptor.
  • the extract according to the invention can be used to prevent an imbalance (or dysbiosis) of the skin microbiota and/or to promote the rebalancing of the skin microbiota.
  • an imbalance or dysbiosis
  • the Applicant is of the opinion that an exaggerated immune response of the skin against bacterial stress can be accompanied by an increase in the expression of microorganism receptors (TLR), or even an increase in numerous inflammatory factors disrupting the balance between the skin and the skin microbiota.
  • TLR microorganism receptors
  • the disruption of this balance can affect the composition of the skin microbiota by promoting the expansion of certain bacterial strains to the detriment of others, leading to dysbiosis.
  • Acne-prone skin or blemish-prone skin refers to a healthy skin type that is prone to developing blackheads and pimples.
  • the appearance of these skin imperfections may be associated with an imbalance in the microbiota, and in particular with overexposure of the skin to so-called acne-prone strains of C. acnes, such as phylotype 1A1 strains.
  • the extract according to the invention can be used on acne-prone skin or blemish-prone skin.
  • the extract according to the invention is administered topically, that is to say applied to an area of the skin or one of its appendages, including the scalp.
  • This is preferably a healthy area of skin or scalp, i.e. one that does not have wounds or skin pathologies, particularly those due to a bacterial infection.
  • the extract according to the invention can be used in all types of subjects, in particular in subjects with sensitive, reactive or atopic-prone skin or in a subject with skin with imperfections.
  • the subject may be of any age and/or gender.
  • the subject may be an infant, a child, an elderly person (over 65 years old), or a woman of any age with sensitive or reactive skin.
  • the subject is at least 3 years old, for example, at least 12 years old.
  • the extract according to the invention preferably the hydroalcoholic, hydrolyzed extract of Citrus aurantium fruit, is applied to the skin in the form of a cosmetic composition.
  • the extract according to the invention is typically integrated into a cosmetic composition as an active cosmetic agent.
  • the extract according to the invention represents at least 0.0001%, for example at least 0.001% by weight of the composition.
  • the extract is generally present in a content ranging from 0.0001% to 10% by weight, preferably from 0.0005% to 5% by weight, more preferably from 0.005% to 1% by weight relative to the total weight of said composition.
  • composition which is also an object of the present invention, may comprise one or more cosmetically acceptable excipients.
  • Cosmetically acceptable excipients generally represent at least ù, for example at least 60%, 70% or 90% by weight relative to the total weight of the composition. They may represent from 50% to 99.9999% by weight, preferably from 60% to 99.9995%, for example from 70% to 99.995% by weight relative to the total weight of the composition.
  • composition may also include one or more additional active ingredients with a cosmetic effect.
  • said cosmetic composition comprises:
  • said composition comprises
  • active ingredient with a cosmetic effect means a compound capable of exerting at least one cosmetic effect on the skin or its appendages.
  • the additional active agent may exert any non-therapeutic effect aimed at modifying and/or improving the appearance of the skin or mucous membranes such as the lips, protecting them from external aggressions, or preventing and/or correcting phenomena linked to their aging.
  • the additional active agent(s) with a cosmetic effect may be chosen from the group consisting of vitamins, sunscreens and filters, anti-aging agents, lipid-replenishing agents, anti-wrinkle agents, tightening agents, anti-redness agents, emollient agents, antioxidants, firming agents, moisturizing agents, soothing agents, scrubbing or exfoliating agents, mattifying agents, sebum-regulating agents, lightening active ingredients, anti-blemish active ingredients, moisturizing agents and combinations thereof.
  • the composition may comprise an active ingredient chosen from an anti-wrinkle agent, an anti-redness agent, a moisturizing active ingredient, an emollient agent, a lipid-replenishing agent, a soothing agent, an anti-blemish agent, a filter or a sunscreen, and combinations thereof.
  • an active ingredient chosen from an anti-wrinkle agent, an anti-redness agent, a moisturizing active ingredient, an emollient agent, a lipid-replenishing agent, a soothing agent, an anti-blemish agent, a filter or a sunscreen, and combinations thereof.
  • moisturizing agents include urea, pidolic acid (PCA) and its derivatives, in particular its salts such as arginine PCA, chitosan PCA, its copper (Copper PCA), magnesium (magnesium PCA), sodium (sodium PCA) or zinc salts, ethylhexyl PCA, calcium gluconate, hyaluronic acid and its salts and other glycosaminoglycans, hyaluronic acid, fructose, glucose, isomaltose, lactose, trehalose, polydextrose, sucrose (Sucrose), maltitol, mannitol, sorbitol, xylitol and other carbohydrates and derivatives, polyethylene glycols such as PEG-7, PEG-8, PEG-10, PEG-12 or PEG-14, glycerin, propylene glycol, pentylene glycol, butylene glycol, butanediol, betaine
  • lipid-replenishing or nourishing agents we can cite vegetable oils such as olive oil, sweet almond oil, evening primrose oil, borage oil, shea butter, fatty acids, triglycerides, and ceramides.
  • emollient agents include coconut oil, cetearyl alcohol, petrolatum, liquid paraffin, lanolin, polyglycerides of fatty acids and combinations thereof.
  • soothing agents include allantoin, panthenol, bisabolol, extracts of aloe, marigold (Calendula officinalis), birch (e.g. Betula alba), oat seedlings, licorice, or willow herb (Epilobium angustifolium).
  • antioxidant agents examples include HMR (hydroxy methyl resorcinol), ascorbic acid and its derivatives, BHT (Butyl Hydroxy Toluene), vitamin B9, histidine hydrochloride, vitamin E and its derivatives, or an extract of willow herb (Epilobium augustifolium).
  • anti-redness agents examples include saponins, flavonoids, ruscogenins, esculosides, and extracts containing them, for example Ruscus extracts, as well as certain essential oils, for example rosemary.
  • anti-blemish agents examples include extracts such as licorice (Glycyrrhyza glabra), jackfruit extract (Artocarpus heterophyllus), Rumex extract (R.occidentalis), plant extracts belonging to the citrus genus, resveratrol, peptides such as oligopeptide-68, nonapeptide-1, kojic acid, magnesium ascorbyl phosphate and combinations thereof.
  • the cosmetic composition according to the invention comprises at least one additional plant extract, in addition to the extract according to the invention.
  • the plant extract may be of any type. It may in particular be an essential oil, an extract obtained by decoction, extraction or maceration using an organic solvent such as an alkane, an ester, an ether, or a glycolic solution or by supercritical fluid extraction.
  • These extracts can have antioxidant, soothing, anti-aging or lightening (anti-blemish) properties or be present to add a fragrant note to the composition.
  • the cosmetically acceptable excipient(s) present in the cosmetic composition may be chosen from diluting agents, dispersing agents, gelling agents, emollients, vectorizing agents such as polycationic polymers. or phospholipids, gums, resins, solvents, in particular lower alcohols, including ethanol, isopropanol, dipropylene glycol, butylene glycol, propanediol, glycerin, sorbitol, and propylene glycol, fillers such as modified and polymerized starches, titanium dioxide, or a metal stearate, preservatives, essential oils, pearlescent agents, colorants, odor absorbers, pH regulating agents or neutralizing agents, lubricating agents, thickening agents, surfactants including anionic, cationic, amphoteric or non-ionic surfactants, humectants such as glycerin or sorbitol, wetting agents, dispersing agents, perfumes, organic or mineral pigments such as iron oxides, oily
  • the extract according to the invention can be incorporated into any type of composition.
  • it is a composition having a form suitable for topical administration, in particular suitable for application to the skin or scalp.
  • Said cosmetic composition can be in the form of aqueous, hydroalcoholic solutions, oil-in-water (O/W) or water-in-oil (W/O) emulsions or multiple emulsions (triple: W/O/W or O/W/O), nanoemulsions, in particular O/W nanoemulsions, aqueous gels, dispersions or even a powder.
  • composition according to the invention may be in the form of a lotion, a milk, a cream, an ointment, a balm including a lip balm, a gel, a mousse, a solution, a serum, or an aerosol,
  • composition according to the invention may also be in the form of a cosmetic or dermocosmetic product of any type. It may be a cosmetic treatment, or a makeup or body hygiene product, for example a lotion, a milk, a serum, an aqueous or oily gel, an emulsion, a cream, a gel-cream, a treatment water, an ointment, a balm, a foundation, a spray, a mascara, a stick, a lipstick, a gloss, a mousse, a deodorant, a nourishing mask, a shower gel, a cleansing oil, a soap, a shampoo or a conditioner, a mask or a hair oil.
  • a cosmetic treatment or a makeup or body hygiene product
  • a lotion for example a lotion, a milk, a serum, an aqueous or oily gel, an emulsion, a cream, a gel-cream, a treatment water, an ointment, a balm, a foundation, a spray
  • the extract may be present in a facial care cream.
  • the extract according to the invention can be incorporated as such into the cosmetic composition according to the invention, or in the form of a cosmetic ingredient.
  • the invention relates to a cosmetic ingredient comprising the extract according to the invention, preferably a hydroalcoholic and hydrolyzed extract of C. aurantium in a cosmetically acceptable vehicle.
  • vehicle is typically chosen from triethyl citrate, glycerol (also called glycerin), alkanediols such as propylene glycol, butylene glycol, pentylene glycol, ketal esters e.g. ketal levulinates such as methyl or ethyl levulinate or glycerol ketal levulinate, water, and mixtures thereof.
  • the vehicle is a mixture of glycerol/water or alkanediol/water in a volume ratio of 0.2 to 10.
  • Antioxidant and preservative-type compounds such as caprylyl glycol or glycerol caprylate or a buffering agent may also be added to the cosmetic ingredient.
  • the extract represents at least 0.05% by weight and generally at most 10%, preferably at most 5% by weight or even at most 3% by weight of the cosmetic ingredient.
  • the extract according to the invention is generally present in a content of 0.1% to 10%, for example from 0.0% to 5.0% by weight in the cosmetic ingredient according to the invention.
  • An additional subject matter of the invention is a non-therapeutic, cosmetic method of a subject comprising administering a cosmetically effective amount of a Citrus extract as described herein, according to the invention, preferably a hydroalcoholic and hydrolyzed extract of C. aurantium topically, to said subject.
  • the extract is typically applied to the area to be treated in the form of a cosmetic composition or product described above.
  • the cosmetic process according to the invention is implemented to obtain one or more cosmetic effects as described above. It is notably implemented to protect the skin against the effects of bacterial stress.
  • the cosmetic process according to the invention can be implemented to relieve or prevent skin discomfort, notably sensations of irritation, tingling, tightness, itching, dry skin, dehydrated skin or skin redness or to maintain or improve the barrier function in skin exposed to bacterial stress.
  • the process according to the invention can be implemented to prevent, alleviate and/or treat one or more non-pathological alterations of the skin caused by exposure to bacterial stress.
  • the subject may have sensitive, reactive or atopic skin.
  • the extract according to the invention can be used in the method as an agent for modulating or normalizing the response of skin cells to bacterial stress, for increasing the tolerance threshold of the skin to bacterial stress and/or for maintaining the barrier function of the skin exposed to bacterial stress.
  • the extract according to the invention can be used as an activating agent of the TAS2R14 signaling pathway.
  • an extract obtained from previously dried and ground C. aurantium fruits is preferably used, by a process comprising a hydroalcoholic extraction step followed by a hydrolysis step.
  • the dose to be administered and the frequency of administration of the extract according to the invention vary according to the desired cosmetic effect, the area of application (skin or scalp), the characteristics of the individual, in particular their sex, age and skin type.
  • the extract according to the invention can be applied at least once a week, or even 2 to 3 times a week, or daily when the area to be treated is the scalp.
  • the extract according to the invention can be applied once or twice a day, typically in the morning and/or evening, when the area to be treated is an area of skin on the body, neck, face, or hands.
  • the subject can apply a dose of 0.5 g to 2 g of cosmetic composition comprising from 0.001% to 0.5% by weight of extract according to the invention to his face, morning and evening.
  • Example 1 preparation of the extract according to the invention and chemical characterization
  • Immature bitter oranges (Citrus Aurantium) were dried and crushed. They were then placed in a hydroalcoholic solvent (EtOH/ELO at a volume ratio of 6.5 to 8.5) and heated for 2°C at a temperature ranging from 45°C to 55°C.
  • the reaction mixture is then cooled and the precipitated extract is drained and then washed with a NaOH solution in a quantity of 1/20 (W/V) at a pH of 5-6.
  • the powder obtained is then dried and ground to give the extract according to the invention.
  • the obtained extract was characterized by HPLC analysis with an Agilent Poroshel 120 SB C18 column (150 mm x 4.6 mm, 2.7 pm).
  • the mobile phase consists of a mixture of water and acetonitrile with 0.1% (V/V) trifluoroacetic acid in each phase.
  • the injected quantity is 3 pL, at a flow rate of 1 mL/min. Detection is carried out at 272 nm.
  • the extract according to the invention mainly comprises:
  • the percentages are expressed in mass relative to the total mass of the composition.
  • Example 2 The extract according to the invention protects against attacks caused by bacterial secretomes.
  • Staphylococcus epidermidis ATCC 14990
  • Staphylococcus aureus ATCC 29213
  • Cutibacterium acnes ATCC 6919
  • Staphylococci were grown on Mueller-Hinton agar medium (MH, OXOID) and C. acnes on MH agar supplemented with 5% defibrinated horse blood (Thermo Scientific).
  • Bacterial cultures were incubated at 37 °C under aerobic conditions for staphylococci and anaerobic conditions for C. acnes.
  • strains were grown in Epilife medium (Gibco) for 20 h at 37 °C with orbital shaking at 200 rpm.
  • Skin samples were obtained from mammoplasties or abdominoplasties. After mechanical dissociation of the hypodermis, the skin pieces containing the dermis and epidermis were washed 3 times in PBS. 8 mm diameter biopsies were then taken and cultured on 500 ⁇ m diameter nylon filters (Sefar) in 12-well plates. The explants were cultured in DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium, GlutaMAXTM Supplement, Gibco) supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS, Gibco), decomplemented FBS and 1% penicillin-streptomycin (Gibco) and incubated at 37 °C in a humid atmosphere with 5% CO2.
  • DMEM Dulbecco's Modified Eagle Medium, GlutaMAXTM Supplement, Gibco
  • the explants were treated with 10 pL of the extract according to the invention at 0.1 mg/mL for 1 h and then stimulated for 24 h with 10 pL of the mixture of secretomes deposited on a cellulose disc (diameter 6 mm) on the surface of the explant (topical stimulation on the stratum corneum).
  • the explants were lysed in 1 mL of RAI buffer from the NucleoSpin® RNA extraction kit (Macherey & Nagel) supplemented with 10 ⁇ L of 0-mercaptoethanol (Sigma-Aldrich) containing 300 mg of glass beads (diameter less than 106 ⁇ m, Sigma) and cryogenically ground at 0°C using the Cryolys tissue homogenizer (Bertin technologies) at 8800 rpm (4 cycles of 20 seconds interspersed with 30-second pauses) then centrifuged for 10 min at 11,000 g. The cell lysates were stored at -80°C until extraction.
  • Table 1 Modulation of the expression of the IL-1a, IL-8 and TAS2R14 genes in skin explants exposed to the bacterial secretome +/- with the extract according to the invention versus control explants (not exposed to the bacterial secretome and not treated with the extract according to the invention).
  • TAS2R14 receptor antagonist was used to block the activation of this receptor in human dermal fibroblasts (NHDF).
  • NHDFs were isolated from human dermis (women aged 30, 39 and 53 years) and maintained in a specific medium composed of DMEM (Dutscher, L0060-500) containing 10% serum (Sigma, F7524), 1% antibiotics (penicillin/streptomycin/Sigma, P0781) at 37°C under 5% CO2 and 95% humidity.
  • DMEM Dutscher, L0060-500
  • antibiotics penicillin/streptomycin/Sigma, P0781
  • NHDFs were seeded at a concentration of 2.10 4 cells/well in microplates in complete DMEM. After 1 day, the medium with serum was removed and the cells were treated with the TAS2R14 antagonist, sulfamoyl-benzoic acid (SBA at 500pM) for 1 hour. Then, IL1- ⁇ , an inducer of IL-8 production, was added in the presence or absence of the extract according to the invention. After 24h, the supernatants were collected and the IL-8 released by the fibroblasts was determined by ELISA (DY208, R&D System). Cell viability was also measured (MTS, Promega, G111).
  • SBA sulfamoyl-benzoic acid
  • ELISA enzyme-linked immunosorbent assay
  • ELISA enzyme-linked immunosorbent assay
  • the absorbance of each well is then measured by a plate reader at 450 nm, with a correction at 540 nm.
  • the results are reported as the percentage of IL-8 synthesis relative to cell viability.
  • the data obtained and the percentage changes were subjected to the t test.
  • Two-way Student's t-test for paired data. The statistical significance value is p ⁇ 0.05 (*p ⁇ 0.05, **p ⁇ 0.01, ***p ⁇ 0.001).
  • the level of IL-8 production was similar to that of cells treated with IL-1a alone: in other words, the protective effect of the extract according to the invention was no longer visible.
  • the protective effect of the extract according to the invention involves an action on the TAS2R14 receptor.
  • Example 4 The extract according to the invention has a protective effect against bacterial toxins which is superior to that of hesperetin, hesperidin and a non-hydrolyzed bitter orange extract.
  • the objective of this study was to evaluate the effects of the extract according to the invention on the inflammatory response of human dermal fibroblasts (NHDF) induced by lipopolysaccharides (LPS), bacterial endotoxins.
  • NHDF human dermal fibroblasts
  • LPS lipopolysaccharides
  • NHDFs are fibroblasts isolated from human dermis and maintained in a specific medium composed of DMEM (Dutscher, L0060-500) containing 10% serum (Sigma, F7524), 1% antibiotics (penicillin/streptomycin/Sigma #P0781) at 37°C under 5% CO2 and 95% humidity.
  • DMEM Dutscher, L0060-500
  • antibiotics penicillin/streptomycin/Sigma #P0781
  • NHDFs were seeded at a concentration of 2.10 4 cells/well in microplates in complete DMEM. After 1 day, the medium with serum was removed and the cells were treated with 100 ng/mL LPS, as an inducer of IL-8 production, in the presence/absence of the extract according to the invention, a classic orange extract bitter (i.e., the precursor extract before hydrolysis), hesperetin, or positive control (dexamethasone at 1 OUM). Hesperetin was used at a concentration of 8 and 4 M, which corresponds to the concentration present in the extract according to the invention at 0.01 mg/mL and 0.005 mg/mL, respectively.
  • ELISA enzyme-linked immunosorbent assay
  • the obtained data and percentage changes were subjected to the Fisher LSD one-way ANOVA test.
  • the statistical significance value is p ⁇ 0.05 (*p ⁇ 0.05, **p ⁇ 0.01, ***p ⁇ 0.001).
  • the extract according to the invention has a protective effect against LPS-induced IL-8 production that is greater than a bitter orange extract without hydrolysis (-21% and -23% at 0.01 mg/mL and 0.005 mg/mL, respectively).
  • hesperetin alone is much less effective in counteracting the effect of LPS than the extract according to the invention: such a result demonstrates that the protective action of the extract according to the invention results from its complex composition, said composition making it possible to potentiate the effect of hesperetin.
  • Example 5 Effect of the extract on irritation and sensitivity (HRIPT test)
  • the objective of this study was to determine the potential of the extract according to the invention to cause skin irritation and/or induce sensitization after repeated patch applications.
  • Protocol A total of 120 male and female subjects, aged 18 to 70 years, were selected to participate in the study. This clinical study includes an induction phase, a challenge phase, and a new challenge test.
  • the induction phase the extract according to the invention is applied to the same site on the back of each subject three times a week for a total of nine applications, with 24-hour rest periods, except for Friday applications, which allows a 48-hour rest period.
  • the extract according to the invention is tested at 1 mg/mL.
  • the test sites are examined at each visit to verify the absence of skin irritation before proceeding with a new application of the extract according to the invention. Approximately 10 to 21 days after the last visit of the induction phase, the subjects return to the laboratory for the challenge phase.
  • test product is applied to a blank site on the back under a suitable patch and is removed by clinic staff approximately 24 hours later.
  • the test sites are examined for signs of skin irritation or sensitization.
  • a subject may be asked to return to the laboratory for a repeat challenge if reactions indicating sensitization are observed during the challenge phase.
  • the test product is applied to a blank site under the same conditions as during the challenge phase, and the subject is examined for skin reactions. Any visible irritation is recorded.
  • Example 6 Example of a cosmetic product incorporating the extract according to the invention Day cream comprising 1% of a cosmetic ingredient comprising 1% by weight of the extract according to the invention prepared according to Example 1 in 1,3-propanediol (final percentage of the extract according to the invention in the cream: 0.01% by weight).

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

La présente demande concerne un extrait de Citrus, de préférence obtenu à partir de fruits de Citrus aurantium, par extraction hydroalcoolique et hydrolyse, et son utilisation en tant qu'agent cosmétique pour protéger la peau contre le stress bactérien. La présente demande concerne également une composition comprenant un tel extrait ainsi qu'un procédé de fabrication dudit extrait.

Description

EXTRAIT DE CITRUS AURANTIUM ET SON UTILISATION EN TANT QU’ AGENT COSMETIQUE
DOMAINE TECHNIQUE
La présente Invention se rapporte au domaine des actifs cosmétiques et de leurs utilisations notamment pour lutter contre les effets du stress bactérien sur la peau.
CONTEXTE DE L’INVENTION
La peau est la première barrière protégeant l’organisme des agressions extérieures. Cet organe est composé par plusieurs couches de tissu. On distingue (i) l’épiderme qui est la partie la plus externe de la peau, (ii) le derme, un tissu conjonctif constitué de fibroblastes et d’une matrice extracellulaire qui assure les fonctions de cohésion et de nutrition de la peau, et (iii) l’hypoderme constitué d’adipocytes.
L’épiderme est constitué par plusieurs strates cellulaires de kératinocytes. On distingue, entre autres, la couche germinative de l'épiderme, appelée couche basale, contenant, notamment, les cellules souches cutanées, la couche épineuse, Stratum spinosum, constituée de plusieurs couches de cellules polygonales, la couche granuleuse, Stratum granulosum, comprenant une à trois couches de cellules aplaties contenant des inclusions cytoplasmiques, les grains de kératohyaline, et enfin, le couche cornée, Stratum corneum qui est composée de cellules anucléés et riches en kératine appelées coméocytes qui correspondent au stade terminal de différenciation des kératinocytes.
Les cellules les plus externes de la couche cornée sont continuellement éliminées et remplacées par les cellules d’une couche inférieure, selon un processus appelé desquamation. La régénération cellulaire de la couche cornée est basée sur un processus de maturation cellulaire dans lequel les cellules de la couche basale de l’épiderme se différencient et migrent progressivement à travers les différentes strates de l’épiderme jusqu’à arriver à la couche cornée sous la forme de coméocytes.
Par ailleurs, les cellules de la couche cornée sont liées entre elles par l’intermédiaire des lipides épidermiques. Ces lipides créent une barrière protectrice et ont un pouvoir hydro- rétenteur. En cas de carence en lipides, la peau peut devenir sèche, tiraillée et rugueuse. L’épiderme est, de plus, recouvert d’une émulsion d'eau et de lipides (graisses), appelée film hydrolipidique. Ce film, renouvelé par les sécrétions des glandes sébacées et sudoripares, aide à garder une peau souple et agit comme une barrière supplémentaire contre les agents pathogènes et les agents irritants. Bien plus qu’une enveloppe externe, la peau est un véritable organe assurant une fonction barrière qui protège notre organisme contre les multiples agressions extérieures, qu’elles soient d’ordre microbiologique, chimique ou mécanique. La peau est épaulée dans cette fonction protectrice par le microbiote cutané (aussi connu sous le nom de flore cutanée) constitué par divers types de microorganismes dont des bactéries telles que Staphylococcus epidermidis. Lorsqu’un germe pathogène tente de pénétrer l’organisme via l’épiderme, la peau et le microbiote cutané peuvent agir de concert pour contrecarrer cette agression : le microbiote cutané empêche le germe pathogène de se fixer et peut sécréter des bactériocines et autres toxines alors que le système immunitaire inné de la peau est activé, impliquant la libération de cytokines pro-inflammatoires, le recrutement de cellules immunitaires telles que les neutrophiles, les cellules NK et les macrophages et la sécrétion de peptides antibactériens.
L’équilibre existant entre la peau et le microbiote cutané est fragile. A cause des agressions répétées de tout ordre, la peau peut devenir plus réactive, plus sensible et répondre de manière disproportionnée au stress bactérien résultant des bactéries présentes dans l’environnement, mais également généré, dans certaines circonstances, par les bactéries commensales. Cette réaction inflammatoire disproportionnée peut altérer encore plus sa fonction barrière et augmenter sa réactivité aux agressions extérieures. En effet, une diminution de la fonction barrière de la peau entraîne une augmentation de sa perméabilité aux agents irritants et une altération de sa capacité à retenir l’eau. La peau souffre de sécheresse cutanée et les agents irritants peuvent pénétrer plus profondément dans l’épiderme, entraînant notamment des réactions inflammatoires. A terme, le seuil de tolérance de la peau diminue, la peau devient plus sèche, rugueuse et présente de rougeurs, l’inconfort cutané s’installe. On parle alors de peau sensible ou réactive.
La prise en charge des peaux sensibles est basée essentiellement sur l’utilisation de produits cosmétiques capables de nourrir intensément la peau et de soulager les sensations d’inconfort. Elle repose sur l’utilisation combinée d’agents hydratants, émollients et d’agents relipidants pour nourrir et assouplir la peau.
Néanmoins, de tels traitements ne visent pas à corriger l’ hyperréactivité de la peau vis-à-vis des toxines sécrétées par les bactéries présentes à la surface de la peau.
Il existe donc un besoin de nouveaux agents cosmétiques capables de protéger la peau contre les effets du stress bactérien. RESUME DE L’INVENTION
L’Invention concerne l’utilisation cosmétique d’un extrait de fruit de Citrus, plus précisément un extrait de C. aurantium en tant qu’ agent cosmétique protecteur de la peau saine contre le stress bactérien.
L’extrait de fruit de C. aurantium est, de préférence, un extrait hydroalcoolique et hydrolysé. L’extrait peut être préparé à partir de fruits immatures de C. aurantium, notamment de fruits entiers sous forme broyée et séchée.
Dans certains modes de réalisation, le stress bactérien résulte de l’exposition de la peau au sécrétome bactérien, par exemple produit par des bactéries commensales, de préférence S. aureus, S. epidermidis et C. acnés et/ou à une endotoxine présente dans l’environnement.
L’extrait selon l’invention peut être utilisé pour normaliser la réponse de la peau au stress bactérien et/ou pour augmenter la tolérance de la peau au stress bactérien. Dans certains modes de réalisation, l’extrait selon l’invention est utilisé pour prévenir, atténuer et/ou traiter une ou plusieurs altérations non pathologiques de la peau induites par le stress bactérien, par exemple une diminution de la fonction barrière de la peau, une diminution de l’hydratation de la peau, une augmentation de la rugosité de la peau, l’apparition de rougeurs, une perte d’homogénéité du teint, une perte de souplesse, une perte d’éclat de la peau et les combinaisons de celles-ci. Dans d’autres modes de réalisation, l’extrait est en outre utilisé en tant qu’agent cosmétique pour prévenir, atténuer, apaiser ou traiter l’inconfort cutané résultant de l’exposition de la peau à un stress bactérien.
L’extrait selon l’invention peut notamment agir en tant qu’activateur de la voie de signalisation du TAS2R14, de préférence en tant qu’agoniste du récepteur TAS2R14.
Dans certains modes de réalisation, l’extrait est appliqué sur une peau sensible, une peau à tendance acnéique ou sur peau à tendance atopique.
Selon un aspect particulier, l’invention a pour objet un extrait de fruit de Citrus, à savoir de Citrus aurantium, obtenu par un procédé comprenant les étapes suivantes :
(a) l’extraction d’un fruit de Citrus, à savoir un fruit de Citrus aurantium à l’aide d’un solvant hydroalcoolique, et
(b) l’hydrolyse de l’extrait obtenu à l’étape (a)
L’extrait peut être préparé à partir de fruits entiers de Citrus aurantium, de préférence des fruits immatures entiers, en particulier sous forme broyée et séchée.
Un objet supplémentaire selon l’invention est un ingrédient cosmétique comprenant l’extrait tel que défini ici dans un véhicule cosmétiquement acceptable choisi parmi le groupe constitué par le citrate de triéthyle, le glycérol, les alcanediols tels que le propanediol, le propylène glycol, le butylène glycol, le pentylène glycol, les esters de cétal par ex. les lévulinates de cétal tels que le lévulinate de méthyle ou d'éthyle ou le lévulinate de cétal de glycérol, l'eau, et leurs mélanges.
L’invention a également pour objet une composition cosmétique destinée à protéger la peau contre le stress bactérien comprenant l’extrait ou l’ingrédient cosmétique tel que défini ici et un ou plusieurs excipients acceptables sur le plan cosmétique.
La composition cosmétique selon l’invention peut se présenter sous la forme d’un soin cosmétique, d’un produit de maquillage ou d’un produit d’hygiène corporelle de préférence choisi dans le groupe constitué par une lotion, un lait, un sérum, un gel aqueux ou huileux, une émulsion, une crème, un gel-crème, une eau de soin, une pommade, un baume, un fond de teint, un spray, un mascara, un stick, un rouge à lèvre, un gloss, une mousse, un déodorant, un masque nourrissant, un gel douche, une huile lavante, un savon, un shampooing ou un après-shampooing, un masque ou une huile pour cheveux.
Enfin, l’invention a également pour objet un procédé de fabrication d’un extrait de Citrus, de préférence de Citrus aurantium comprenant les étapes suivantes :
- l’extraction de fruits de Citrus, de préférence sous forme broyée et séchée, à l’aide d’un solvant hydroalcoolique, et
- une étape d’hydrolyse, de préférence à l’aide d’une solution aqueuse acide, par exemple une solution aqueuse concentrée d’acide.
Le solvant hydroalcoolique peut être un mélange alcool/cau selon un rapport volumique allant de 5,0 à 15,0. L’alcool est de préférence choisi parmi le groupe constitué par l’éthanol, l’isopropanol, et le glycerol.
Selon un aspect supplémentaire, l’invention a pour objet un procédé cosmétique pour protéger la peau saine contre le stress bactérien comprenant l’application topique d’un extrait de fruit de Citrus aurantium tel que défini ici, dans lequel l’extrait de fruit de Citrus aurantium est présent en tant qu’ agent actif cosmétique.
L’extrait de fruit de Citrus aurantium peut être utilisé en tant qu’agent actif cosmétique pour normaliser la réponse de la peau au stress bactérien et/ou pour augmenter la tolérance de la peau au stress bactérien. En particulier l’extrait de fruit de Citrus aurantium peut être utilisé en tant qu’activateur de la voie de signalisation du TAS2R14 au niveau de la peau.
Typiquement, l’extrait selon l’invention est appliqué sur la peau sous la forme d’une composition cosmétique. FIGURES
La Figure 1 montre les résultats de l’Exemple 2. L’exposition des expiants de peau au sécrétome bactérien (sécrétome bactérien) entraine une augmentation significative de l’expression des gènes ILla et IL-8 et une diminution significative de l’expression du gène TAS2R14 par rapport aux expiants de peau non-exposés au sécrétome (Non traité). L’extrait selon l’invention permet de contrecarrer les effets du sécrétome bactérien sur l’expression des gènes codant pour ILla, IL-8 et TAS2R14 (sécrétome bactérien + Extrait selon l’invention).
La Figure 2 montre les résultats de l’Exemple 2. L’exposition des fibroblastes cutanés à IL1- a stimule la production d’IL-8. L’incubation des fibroblastes avec l’extrait selon l’invention permet de diminuer significativement la production d’IL-8. Cet effet est bloqué en présence de SBA, un antagoniste de TAS2R14.
La Figure 3 montre les résultats de l’Exemple 3. L’exposition des fibroblastes cutanés au LPS entraine une augmentation de la production d’IL-8 par les cellules (groupe IL-8). L’extrait selon l’invention utilisé à une dose de 0,01 mg/ml ou 0,05 mg/ml diminue de manière significative la production d’Il-8, et ceci de manière similaire à la dexaméthasone testée à 10 pM. L’hespéridine n’a pas d’effet notable sur la production d’IL-8. Un extrait non hydrolysé (extrait orange amère) et l’hespérétine diminue la production d’IL-8 mais de manière beaucoup moins efficace que l’ Extrait selon l’invention.
DESCRIPTION DETAILLEE DE L’INVENTION
Après de longue recherche, la Demanderesse a mis au point un nouvel extrait de Citrus aurantium préparé par extraction hydroalcoolique suivie d’une étape d’hydrolyse. De manière surprenante, la Demanderesse a montré que cet extrait était capable de moduler la réponse immunitaire induite chez des expiants de peau par exposition à un sécrétome bactérien obtenu à partir du milieu de culture de bactéries présentes dans le microbiote cutané humain, à savoir Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus et Cutibacterium acnés. L’extrait selon l’invention a ainsi permis de diminuer de manière significative l’expression de plusieurs gènes pro-inflammatoires. L’extrait selon l’invention a permis également de prévenir la diminution de l’expression d’un récepteur au goût amer à savoir TAS2R14: le niveau d’expression de TAS2R14 chez les expiants de peau exposé au sécrétome bactérien mais traité avec l’extrait selon l’invention est similaire à celui observé pour les expiants témoins, non-exposés au sécrétome bactérien. La Demanderesse a également montré que l’extrait selon l’invention était capable de réduire la production d’IL-8 induite par IL- la chez les fibroblastes cutanés et que cet effet était inhibé en présence de SBA, un antagoniste de TAS2R14. Ces résultats suggèrent fortement que l’extrait selon l’invention agit, au moins en partie, en activant la voie de signalisation de TAS2R14.
La Demanderesse a également montré que l’extrait selon l’invention était capable de protéger les fibroblastes cutanés contre l’effet pro-inflammatoire induit par les lipopolysaccharides bactériens, qui sont à endotoxines, constituants majeurs de la paroi des bactéries à gram négatif De manière notable, l’extrait selon l’invention s’est révélé significativement plus efficace qu’un extrait équivalent non hydrolysé ou que l’hespérétine testée à une dose équivalente à sa teneur dans l’extrait. Un tel résultat souligne que l’effet de l’extrait résulte spécifiquement de sa composition, notamment en composés aglycones.
Enfin, la Demanderesse a démontré que l’application répétée de l’extrait selon l’invention sur la peau était bien tolérée et ne générait pas d’effet de sensibilisation ou d’irritation.
Ainsi, selon un premier aspect, l’invention concerne un extrait hydroalcoolique et hydrolysé d’une espèce de Citrus, en particulier du fruit de Citrus aurantium (également connu sous le nom d’orange amère) et son utilisation en tant qu’agent cosmétique.
L’extrait selon l’invention peut être utilisé en tant qu’agent protecteur de la peau contre le stress bactérien.
Plus précisément, l’extrait selon l’invention peut être utilisé pour protéger la peau contre les altérations non-pathologiques de la peau résultant de son exposition à un stress bactérien, notamment à un sécrétome bactérien. Selon un aspect particulier, l’invention a pour objet l’utilisation cosmétique d’un extrait selon l’invention en tant qu’agent cosmétique pour équilibrer ou normaliser la réponse immunitaire innée de la peau contre un stress bactérien. Selon un aspect additionnel, l’extrait selon l’invention utilisé dans le domaine cosmétique pour renforcer la fonction barrière cutanée et/ou maintenir ou augmenter la résistance ou la tolérance de la peau contre une agression ou un stress extérieur, en particulier d’origine microbienne.
La présente Invention a également pour objet un ingrédient cosmétique ou une composition cosmétique comprenant un extrait selon l’invention, ainsi qu’un procédé cosmétique comprenant l’application d’un extrait selon l’invention, e.g. formulé sous la forme d’une composition cosmétique, sur la peau.
Figure imgf000008_0001
Selon un premier aspect, l’invention a pour objet un extrait hydroalcoolique et hydro lysé de Citrus.
Les extraits de Citrus peuvent être obtenus à partir d’une partie aérienne de la plante, par exemple les feuilles, les tiges, les fleurs, les fruits et leurs mélanges. Dans le cadre de la présente invention, l’extrait est obtenu à partir de fruits de Citrus, c’est-à-dire à partir de fruits entiers, de toute partie du fruit entier et des combinaisons de ceux-ci.
On entend par Citrus toute espèce végétale, y compris les variétés végétales, appartenant au genre Citrus. Les espèces de Citrus englobent, sans y être limitées, Citrus sinensis, Citrus aurantium, Citrus bergamia Risso, et Citrus reticulata.
L’extrait selon l’invention est obtenu à partir de fruits de Citrus aurantium, également appelé orange amère.
De manière avantageuse, l’extrait selon l’invention peut être préparé à partir de fruits immatures, c’est-à-dire présentant un niveau de maturité inadapté à une utilisation dans le domaine agroalimentaire. En d’autres termes, l’extrait selon l’invention peut être préparé à partir de fruits écartés pendant la récolte, et donc à partir de sous-produit de l’activité agricole.
L’extrait selon l’invention peut être préparé à partir du fruit entier ou de toute partie du fruit, notamment la peau et/ou l’écorce, en particulier de l’écorce ou de toute partie de celle-ci comme l’épicarpe, le mésocarpe, l’endocarpe et leurs combinaisons.
De préférence, l’extrait selon l’invention est préparé à partir du fruit entier de Citrus aurantium. Avantageusement, l’extrait selon l’invention est préparé à partir du fruit immature entier de Citrus aurantium.
L’extrait selon l’invention est dit « hydroalcoolique ». Au sens de l’invention, un extrait hydroalcoolique se réfère à un extrait dont le procédé de fabrication comprend une étape d’extraction hydroalcoolique, c’est-à-dire une extraction à l’aide d’un mélange eau/alcool.
L’extrait selon l’invention est dit « hydrolysé ». Au sens de l’invention, un extrait hydrolysé se réfère à un extrait dont le procédé de fabrication comprend une étape d’hydrolyse, c’est- à-dire une étape dans laquelle certaines liaisons covalentes présentes dans les molécules extraites sont rompues par réaction avec une molécule d’eau. L’hydrolyse peut être de tout type, notamment une hydrolyse acide (à savoir une hydrolyse catalysée par la présence d’un acide), une hydrolyse basique (à savoir une hydrolyse catalysée par la présence d’une base) ou une hydrolyse enzymatique. Dans certains modes de réalisation, l’extrait selon l’invention est préparé par un procédé comprenant les étapes suivantes :
(a) L’extraction d’un fruit de Citrus, à savoir un fruit de Citrus aurantium à l’aide d’un solvant hydroalcoolique,
(b) L’hydrolyse de l’extrait obtenu à l’étape (a)
Avant la mise en œuvre de l’étape (a), le fruit de Citrus aurantium, peut subir un ou plusieurs traitements tels qu’un lavage, un séchage, un broyage, un cryobroyage, une congélation, un séchage et les combinaisons de ceux-ci. Le fruit de Citrus aurantium est de préférence séché et broyé avant la mise en œuvre de l’étape (a). L’étape (a) est une étape d’extraction solide - liquide.
Le solvant hydroalcoolique mis en œuvre à l’étape (a) est typiquement un mélange d’eau avec un alcool. Au sens de l’invention, le terme « alcool » englobe les alcools inférieurs, notamment en C2-C5, la glycérine, les alcanediols en C2-C5 et les mélanges de ceux-ci.
A titre d’exemple, l’alcool peut être choisi parmi la glycérine, l’éthanol, le propanol, le butanol, les isomères de ceux-ci tels que l’isopropanol, le fô/ -butanol, le pentanol, l’éthylène glycol, le 1,3-propanediol, et les mélanges de ceux-ci. Les solvants préférés sont l’éthanol, l’isopropanol, et le glycerol
Le rapport volumique « alcool/eau » dans le mélange hydroalcoolique est typiquement compris dans une gamme allant de 0,01 à 20,0 par exemple d’environ 1 à environ 15,0, par exemple d’environ 5,0 à environ 15,0, par exemple d’environ 7,0 à environ 8,0.
Un mélange « alcool/eau » préféré est un mélange « EtOH/eau » par exemple selon un rapport volumique 5,0 à 10,0, par exemple de 7,0 à 8,0.
Le volume de solvant hydroalcoolique utilisé à l’étape (a) est de préférence suffisant pour recouvrir les fruits de Citrus aurantium. En général, le volume de solvant hydroalcoolique est généralement compris entre IL et 30L, de préférence de 5 L à 15 L par kg de fruits de Citrus. L’étape (a) peut être réalisée sous agitation. L’étape (a) peut être réalisée à température ambiante ou à une température plus élevée. De préférence, l’étape (a) est réalisée sous reflux pendant une durée suffisante pour permettre une extraction efficace des molécules d’intérêt. Typiquement, l’étape (a) d’extraction peut durer entre quelques minutes à quelques heures, par exemple entre 10 min et 6h, de préférence de Ih à 3h.
A l’issue de l’extraction, on sépare la phase liquide et la phase solide du milieu réactionnel. Toute méthode permettant une telle séparation peut être mise en couvre, comme la filtration ou la centrifugation. La phase liquide est récupérée et est condensée, au moins partiellement, de préférence sous pression réduite. Le résidu obtenu peut être directement mis en œuvre dans l’étape (b).
L’étape (b) est une étape d’hydrolyse. Cette étape a notamment pour but de cliver les hétérosides flavonoïdes présents dans l’extrait de manière à libérer les parties aglycones de ces composés. Atitre d’exemple, l’étape (b) permet de convertir l’hespéridine en hespérétine et la naringine en naringénine. De préférence, l’étape (b) permet une conversion quasi-totale (d’au moins 90% molar) de l’hespéridine et de la naringine présente dans l’extrait obtenu à l’étape (a) .
Cette étape peut être mise en œuvre en mettant en contact le résidu obtenu à l’étape (a) avec une solution aqueuse acide, une solution aqueuse basique ou en présence d’une enzyme telle que la Rhamnosidases, hesperedinase, la P-glucosidase, la P-glucosidase et leurs combinaions. On peut notamment utiliser des cocktails d’enzyme commerciaux tel que le mélange Snailase commercialisé par Abbexa. Dans un mode de réalisation préféré, l’étape (b) est réalisée par hydrolyse acide, par exemple à l’aide d’une solution aqueuse concentrée en acide chlorhydrique à une concentration comprise entre 0.2N et 2N, par exemple une solution aqueuse HCl IN. Dans un autre mode de réalisation préféré, l’acide peut être une solution d’acide sulfurique ou d’acide nitrique, ladite solution ayant également une molarité comprise entre 0.2 N et 2 N, e.g. 1 N.
L’étape (b) peut être mise en œuvre à température ambiante ou à une température plus élevée. Typiquement, le milieu réactionnel est mis à reflux, par exemple dans le cas d’une hydrolyse acide. La réaction peut durer de quelques minutes à quelques heures par exemple de 10 min à 5h. A l’issue de l’étape de reflux, le milieu réactionnel peut être refroidi puis filtré. Le filtrat peut être ramené à un pH d’environ 5,0 à 6,0 afin de faire précipiter l’extrait. L’extrait précipité peut être récupéré par toute méthode connue, par exemple par filtration. Le précipité ainsi récupéré peut être lavé, séché et/ou broyé.
L’extrait selon l’invention peut donc être obtenu sous la forme d’une poudre. Cet extrait peut être directement mis en œuvre dans les utilisations et procédés décrits dans la présente demande.
Le cas échéant, le procédé de préparation peut comprendre une ou plusieurs étapes supplémentaires, notamment une étape de formulation de l’extrait dans un véhicule adapté. Par exemple, l'extrait de Citrus aurantium selon l'invention peut être dilué dans un solvant par exemple choisi parmi le citrate de triéthyle, le glycérol (également appelé glycérine), les alcanediols tels que le propanediol, le butylène glycol, le pentylène glycol et leurs isomères, les esters de cétal par ex. les lévulinates de cétal tels que le lévulinate de méthyle ou d’éthyle ou le lévulinate de cétal de glycérol, l'eau, et leurs mélanges. L’extrait selon l’invention peut également être encapsulé dans un système de vectorisation, par exemple des liposomes, ou dissout dans un solvant adapté puis absorbé sur un support solide comme la maltodextrine.
A titre d’exemple, l'extrait selon l’invention peut être formulé dans un mélange de glycérol/eau ou alcanediol/eau. De préférence, il s’agit d’un mélange alcanediol en C2- C5/eau. Ledit alcanediol est de préférence un propanediol tel que le 1,3-propanediol et le 1 ,2-propanediol (propylène glycol). L’extrait présent généralement en une teneur allant de 0,1% à 10%, e/g. environ 1% en poids du poids total de la formulation.
Des composés antioxydants et de type conservateur (à savoir des composés ayant certaines activités antibactériennes ou bactériostatiques) tels que le caprylyl glycol ou le caprylate de glycérol ou encore des agents pour ajuster le pH (e.g. agent tampon) peuvent également être ajoutés dans la formulation.
Il va de soi que la présente Invention se rapporte aussi au procédé de préparation de l’extrait selon l’invention ci-dessus décrit, en tant que tel.
Dans un mode particulier de réalisation, l’extrait selon l’invention comprend de 18% à 35% d’hespérétine et de 8% à 20% de naringénine.
De préférence, l’extrait selon l’invention comprend moins de 3,0%, de préférence moins de 1,0% ou moins de 0,5% en poids de naringine et d’hespéridine,
Les pourcentages ci-dessus sont exprimés en poids par rapport au point total sec de l’extrait. La composition quantitative de l’extrait peut être notamment déterminée par analyse HPLC, comme cela est illustré dans les exemples.
• Utilisations, procédés et compositions cosmétiques selon l’invention :
Selon un autre aspect, l’invention a également pour objet l’utilisation cosmétique, non- thérapeutique, d’un extrait hydroalcoolique, hydrolysé obtenu à partir du fruit de Citrus aurantium tel que décrit ici en tant qu’agent cosmétique. L’extrait selon l’invention est destiné à une application topique de préférence sur une peau saine y compris un cuir chevelu sain.
On entend par « effet cosmétique » tout effet non-thérapeutique visant à modifier et/ou améliorer l’aspect de la peau ou des muqueuses comme les lèvres, à les protéger des agressions externes, notamment du stress bactérien, à prévenir, traiter et/ou à corriger les altérations non pathologiques de la peau ou de ses annexes et/ou à prévenir ou traiter des sensations d’inconfort de la peau ou de l’une de ses annexes (autrement dit l’inconfort cutané). On entend par « altérations non-pathologiques » toute altération des propriétés sensorielles, mécaniques ou visuelles de la peau, sans que ces altérations soient causées ou associées à une pathologie.
Au sens de l’invention, le terme « peau » désigne toute partie de la peau du corps humain, en particulier la peau du visage, y compris les lèvres et les paupières, le cuir chevelu, le cou, la peau des mains et la peau des pieds. Les annexes de la peau englobent les ongles, les poils, les sourcils, les cils et les cheveux, de préférence les cheveux.
Au sens de l’invention, on entend par « peau saine » une peau qui ne présente pas de lésion ou de pathologie telle qu’une infection cutanée.
L’utilisation cosmétique selon l’invention n’englobe pas le traitement ou la prévention de pathologies, notamment de pathologies cutanées telles que les infections cutanées notamment des infections cutanées bactériennes ou autres pathologies liées à des bactéries. Selon un aspect particulier, l’invention concerne l’utilisation cosmétique, non-thérapeutique d’un extrait hydroalcoolique et hydrolysé, de Citrus aurantium tel que décrit ici, en tant qu’agent protecteur de la peau contre le stress bactérien.
Au sens de l’invention, on entend par « stress bactérien », l’exposition de la peau à certaines souches bactériennes, et/ou à des biomolécules issues de bactéries. Le stress bactérien peut être notamment causé par des biomolécules issues des bactéries présentes dans l’environnement ou sur la peau, par exemple les bactéries environnementales. Les biomolécules bactériennes englobent notamment les sécrétomes bactériens et les endotoxines, par exemple présentes dans l’environnement. L’exposition de la peau à certaines souches bactériennes et/ou au sécrétome bactérien et/ou aux endotoxines, notamment environnementales, sans qu’il y ait infection bactérienne, peut engendrer une réponse disproportionnée de la peau, notamment inflammatoire, entraînant des altérations non-pathologiques de la peau à terme.
Au sens de l’invention, le terme « sécrétome » renvoie à l’ensemble des biomolécules, sécrétées par les bactéries. Il s’agit principalement d’une partie du protéome localisé au niveau de l’enveloppe bactérienne ou sécrété dans le milieu extracellulaire. Le sécrétome bactérien englobe notamment des exotoxines et des enzymes. Le sécrétome peut être issu de bactéries appartenant à la flore commensale, ou à la flore transitoire de la peau, ou encore à des bactéries présentes dans l’environnement. Dans certains modes de réalisation, le sécrétome bactérien est un sécrétome de bactéries commensales. Les bactérises commensales de la peau, englobent sans y être limitées, des bactéries du genre Staphylococcus (e.g. S. epidermidis ou S. aureus), Corynebacterium, Cubacterium (e.g. C. acnes), Lactobacillus et Streptococcus.
Dans certains modes de réalisation, l’extrait selon l’invention est utilisé en tant qu’agent pour protéger la peau contre le stress résultant de l’exposition de la peau à un sécrétome bactérien, notamment de S. epidermidis, S. aureus, et/ou C. acnes.
Au sens de l’invention, on entend par « endotoxine » des molécules complexes présentes dans la paroi des bactéries Gram négatives. Ces molécules sont libérées lors de la multiplication ou de la lyse des bactéries, et persistent longtemps dans l’environnement et résistent à de nombreux agents chimiques ou physiques. A titre d’exemple, les LPS sont des endotoxines. Au sens de l’invention on entend par « exotoxine » est une toxine sécrétée par une bactérie lorsqu'elle est encore vivante, contrairement à une endotoxine qui, elle, est libérée lors de la phase croissance ou lors de la lyse cellulaire. L'exotoxine est généralement de nature protéique. Dans un mode particulier de réalisation, l’extrait selon l’invention est utilisé en tant qu’agent protecteur de la peau contre le stress résultant de l’exposition de la peau à une toxine bactérienne, par exemple une endotoxine ou une exotoxine, de préférence provenant d’une bactérie commensale.
Dans un autre mode particulier de réalisation, l’extrait selon l’invention est utilisé en tant qu’agent protecteur de la peau contre le stress bactérien résultant de l’exposition de la peau à une exotoxine environnementale.
La flore commensale comprend, en plus des bactéries, d’autres agents microbiens tels que des champignons comme Malassezia furfur ou Candida albicans ou les acariens comme les acariens du genre Demodex.
Plus généralement, l’extrait selon l’invention est utilisé en tant qu’agent protecteur de la peau contre le stress résultant de l’exposition de la peau à un stress microbien. De préférence, le stress microbien résulte des microorganismes présents dans le microbiote cutané ou de biomolécules provenant de microorganismes présents dans l’environnement.
On entend par « agent protecteur contre le stress bactérien » ou « agent protecteur contre le stress microbien», un agent cosmétique capable de prévenir, traiter et/ou atténuer une ou des altérations non pathologiques de la peau ou de ses annexes et/ou à prévenir ou traiter des sensations d’inconfort de la peau ou de l’une de ses annexes, résultant de l’exposition de la peau au stress bactérien (ou microbien), notamment en normalisant la réponse de le peau au stress bactérien (ou microbien) et/ou en augmentant la résistance ou la tolérance de la peau au stress bactérien (ou microbien). En effet, l’exposition de la peau au stress bactérien (ou microbien), et/ou une réponse disproportionnée de la peau à ce stress peut engendrer une altération des propriétés barrière, visuelle et/ou mécanique de la peau.
Dans certains modes de réalisation, l’extrait selon l’invention est utilisé en tant qu’agent cosmétique pour prévenir, atténuer et/ou traiter une ou plusieurs altérations non pathologiques de la peau causées par l’exposition à un stress bactérien.
De telles altérations comprennent, sans y être limitées : une diminution de la fonction barrière de la peau, une diminution de l’hydratation de la peau, une augmentation de la rugosité de la peau, l’apparition de rougeurs, une perte d’homogénéité du teint, une perte de souplesse, une perte d’éclat de la peau et les combinaisons de ceux-ci.
Dans d’autres modes de réalisation, l’extrait selon l’invention est utilisé en tant qu’agent cosmétique pour prévenir, atténuer, apaiser ou traiter l’inconfort cutané résultant de l’exposition de la peau à un stress bactérien (ou microbien).
On entend par « inconfort cutané » un ensemble de sensations désagréables, non liées à une pathologie, telles que des sensations de tiraillements, de picotements, de démangeaisons, ou d’échauffements, des sensations de peau sèche ou déshydratée, des rougeurs transitoires et les combinaisons ceux-ci.
A titre d’exemple, l’extrait selon l’invention, en particulier l’extrait du fruit de Citrus aurantium tel que décrit ici peut être utilisé pour:
- diminuer, soulager ou prévenir les sensations de tiraillements, de picotements et/ou de démangeaisons, et/ou
- diminuer, soulager ou prévenir les sensations de sécheresse ou de déshydratation cutanée, et/ou
- traiter ou prévenir les rougeurs transitoires, et/ou
- diminuer, soulager ou prévenir l’inconfort de la peau ou du cuir chevelu, et/ou
- augmenter la tolérance de la peau, et/ou
- améliorer ou maintenir l’effet barrière de la peau, et/ou
- rendre la peau moins rugueuse et/ou plus souple.
Dans certains modes de réalisation, l’Extrait selon l’invention est utilisé sur une peau sensible ou sur peau à tendance atopique.
On entend par « peau sensible, réactive ou intolérante » une peau caractérisée par une réactivité disproportionnée à des facteurs extérieurs (tel que le stress bactérien) qui provoque un inconfort cutané. Cette réactivité accrue peut résulter d’une altération, non-pathologique, de la fonction barrière de la peau qui diminue le seuil de tolérance de la peau vis-à-vis des stimuli extérieurs.
On entend par « peau à tendance atopique » une peau sensible chez un individu ayant souffert de dermatite atopique, et/ou ayant un terrain allergique c’est-à-dire ayant des antécédents d’allergie et/ou ayant une histoire familiale d’allergie.
Le phénomène de « peau sensible » peut être également causée ou accentuée par une dysbiose du microbiote cutané, c’est-à-dire par un déséquilibre du microbiote cutané (également appelé flore cutanée), comme observée chez certaines peaux à tendance atopique. Dans certains modes de réalisation, l’extrait selon l’invention est utilisé pour normaliser la réponse de la peau à un stress bactérien, et/ou augmenter la tolérance de la peau à un stress bactérien. Dans ce cas, l’extrait selon l’invention peut être utilisé notamment chez une peau sensible ou à tendance atopique.
Sans vouloir être lié par une quelconque théorie, la Demanderesse est d’avis que l’action protectrice de l’ Extrait selon l’invention vis-à-vis du stress bactérien est liée à l’activation de la voie de signalisation TAS2R14.
Ainsi dans certains modes de réalisation, l’extrait selon l’invention est utilisé en tant qu’agent activateur de la voie de signalisation de TAS2R14 au niveau de la peau. En particulier, l’extrait selon l’invention peut être utilisé en tant qu’agoniste du récepteur TAS2R14.
Dans certains modes de réalisation, l’extrait selon l’invention peut être utilisé pour prévenir un déséquilibre (ou dysbiose) du microbiote cutané et/ou pour favoriser le rééquilibre du microbiote cutané. En effet, sans vouloir être lié par une quelconque théorie, la Demanderesse est d’avis qu’une réponse immunitaire exagérée de la peau contre le stress bactérien peut être accompagnée par une augmentation de l’expression de récepteurs aux microorganismes (TLR), ou encore une augmentation de nombreux facteurs inflammatoires perturbant l’équilibre entre la peau et le microbiote cutané. La perturbation de cet équilibre peut porter atteinte à la composition du microbiote cutané en favorisant l’expansion de certaines souches bactériennes au détriment des autres, entraînant une dysbiose.
On entend par « peau à tendance acnéique » ou « peau ayant une tendance aux imperfections » fait référence à un type de peau saine ayant une tendance à développer des comédons et des boutons. L’apparition de ces imperfections cutanées peut être associée à un déséquilibre du microbiote, et en particulier à une surexposition de la peau aux souches de C. acnés dites acnéiques, telles que les souches de phylotype 1A1. Dans certains modes de réalisation, l’extrait selon l’invention peut être utilisé chez une peau à tendance acnéique ou une peau à imperfection. L’extrait selon l’invention est administré par voie topique, c’est-à-dire appliqué sur une zone de la peau ou l’une de ses annexes, y compris le cuir chevelu.
Il s’agit de préférence d’une zone saine de la peau ou du cuir chevelu c’est-à-dire ne présentant pas de plaies ou de pathologies cutanées, notamment dues à une infection bactérienne.
L’extrait selon l’invention peut être utilisé chez tout type de sujets, en particulier chez les sujets présentant une peau sensible, réactive ou à tendance atopique ou encore chez un sujet présentant une peau à imperfections.
Le sujet peut être de tout âge et/ou de tout sexe. A titre d’exemple, le sujet peut être un nourrisson, un enfant, une personne âgée (de plus de 65 ans) ou une femme de tout âge ayant une peau sensible ou réactive. De préférence, le sujet est âgé d’au moins 3 ans, par exemple d’au moins 12 ans.
Dans certains modes de réalisation, l’extrait selon l’invention, de préférence l’extrait hydroalcoolique, hydrolysé de fruit de Citrus aurantium, est appliqué sur la peau sous la forme d’une composition cosmétique.
Ainsi, l’extrait selon l’invention est typiquement intégré dans une composition cosmétique en tant d’agent cosmétique actif.
L’extrait selon l’invention représente au moins 0,0001%, par exemple au moins 0,001% en poids de la composition. L’extrait est généralement présent en une teneur allant de 0,0001% à 10% en poids, de préférence de 0,0005% à 5% en poids, de manière plus préférée de 0,005% à 1% en poids par rapport au poids total de ladite composition.
Ladite composition, qui est aussi un objet de la présente Invention, peut comprendre un ou plusieurs excipients acceptables sur le plan cosmétique.
Les excipients acceptables sur le plan cosmétique représentent généralement au moins ù, par exemple au moins 60%, 70% ou 90% en poids par rapport au poids total de la composition. Ils peuvent représenter de 50% à 99,9999% en poids, de préférence de 60% à 99,9995%, par exemple de 70% à 99,995% en poids par rapport au poids total de la composition.
La composition peut de plus comprendre un ou plusieurs principes actifs additionnels à effet cosmétique.
Typiquement, ladite composition cosmétique comprend :
- de 0,0001% à 10% d’extrait selon l’invention,
- de 0% à 20% d’un ou plusieurs agents actifs additionnels à effet cosmétique, et - de 70% à 99,9999% d’un ou plusieurs excipients acceptables sur le plan cosmétique, les pourcentages étant exprimés en poids par rapport au poids total de la composition cosmétique.
Dans certains modes de réalisation, ladite composition comprend
- de 0,001% à 5% en poids d’un extrait selon l’invention,
- de 0,001% à 10% d’un ou plusieurs agents actifs additionnels à effet cosmétique, et
- de 85% à 99,998 % d’un ou plusieurs excipients acceptables sur le plan cosmétique.
On entend par « principe actif à effet cosmétique, agent actif à effet cosmétique, agent cosmétique ou actif à effet cosmétique » un composé capable d’exercer au moins un effet cosmétique sur la peau ou ses annexes. L’agent actif additionnel peut exercer tout effet non- thérapeutique visant à modifier et/ou améliorer l’aspect de la peau ou des muqueuses comme les lèvres, à les protéger des agressions externes, ou encore à prévenir et/ou à corriger les phénomènes liés à leur vieillissement.
Le ou les agents actifs additionnels à effet cosmétique peuvent être choisis parmi le groupe constitué par les vitamines, les filtres et écrans solaires, les agents antiâges, les agents relipidants, les agents antirides, les agents tenseurs, les agents anti-rougeurs, les agents émollients, les antioxydants, les agents raffermissants, les agents hydratants, les agents apaisants, les agents gommants ou exfoliants, les agents mâtifïants, les agents séborégulateurs, les actifs éclaircissants, les actifs anti-tâches, les agents hydratants et leurs combinaisons.
A titre d’exemple, la composition peut comprendre un actif choisi parmi un agent antiride, un agent anti-rougeur, un actif hydratant, un agent émollient, un agent relipidant, un agent apaisant, un agent anti-tâche, un filtre ou un écran solaire, et leurs combinaisons.
A titre d’exemple d’agents hydratants, on peut citer l’urée, l’acide pidolique (PCA) et ses dérivés en particulier ses sels tels que l’arginine PCA, le chitosan PCA, ses sels de cuivre (Cuivre PCA), de magnésium (magnésium PCA), de sodium (sodium PCA) ou de zinc, l’éthylhéxyl PCA, le gluconate de calcium, l’acide hyaluronique et ses sels et autres glycosaminoglycanes, l’acide hyaluronique le fructose, le glucose, l’isomaltose, le lactose, le tréhalose, le polydextrose, le saccharose (Sucrose), le maltitol, le mannitol, le sorbitol, le xylitol et les autres hydrates de carbones et dérivés, les polyéthylène glycols tels que les PEG-7, PEG-8, PEG- 10, PEG- 12 ou PEG- 14, la glycérine, le propylène glycol, le pentylène glycol, le butylène glycol, le butanediol, la bétaïne, la citrulline, le collagène et ses dérivés, l’histidine, les hydrolysats de soie, de kératine ou de soja, les extraits de plante riches en polysaccharides et/ou polyphénols, par exemple les extraits d’Aloès, bleuet (Centaurea cyanus), et les combinaisons de ceux-ci.
A titre d’agents relipidants ou nourrissants, on peut citer les huiles végétales telles que l’huile d’olive, l’huile d’amande douce, l’huile d’onagre, l’huile de bourrache, le beurre de karité, les acides gras, les triglycérides, et les céramides.
A titre d’exemple d’agents émollients, on peut citer l'huile de coco, le l'alcool cétéarylique, la vaseline, la paraffine liquide, la lanoline les polyglycérides d’acides gras et leurs combinaisons.
A titre d’exemple d’agents apaisants, on peut citer l’allantoïne, le panthénol, le bisabolol, les extraits d’aloès, de souci (Calendula officinalis), de bouleau (par exemple Betula alba), de plantules d’avoine, de réglisse, ou d’épilobe (Epilobium angustifolium).
A titre d’exemple d’agents antioxydants, on peut citer le HMR (hydroxy méthyl résorcinol), l’acide ascorbique et ses dérivés, le BHT (Butyl Hydroxy Toluene) la vitamine B9, le chlorhydrate d’histidine, la vitamine E et ses dérivés, ou un extrait d’épilobe (Epilobium augustifolium) .
A titre d’agents anti-rougeurs, on peut citer les saponines, les flavonoïdes, les ruscogénines, les esculosides, et les extraits les contenant, par exemples les extraits de Ruscus, ainsi que certaines huiles essentielles, par exemple de romarin.
A titre d’exemple d’agents anti-tâches, on peut citer des extraits comme la réglisse (Glycyrrhyza glabra), l’extrait de jackfruit (Artocarpus heterophyllus), les extrait de Rumex (R.occidentalis), les extraits de plante appartenant au genre citrus, le resveratrol, les peptides comme l’oligopeptide-68, le nonapeptide-1, l’acide kojique, le magnésium ascorbyl phosphate et les combinaisons de ceux-ci.
Dans certains modes de réalisation, la composition cosmétique selon l’invention comprend au moins un extrait supplémentaire de plante, en plus de l’extrait selon l’invention. L’extrait de plante peut être de tout type. Il peut s’agir notamment d’une huile essentielle, d’un extrait obtenu par décoction, extraction ou macération à l’aide d’un solvant organique tel qu’un alcane, un ester, un éther, ou une solution glycolique ou encore par extraction par fluide supercritique.
Ces extraits peuvent avoir des propriétés antioxydante, apaisante, antiâge ou éclaircissante (anti-tâche) ou être présents pour apporter une note parfumée à la composition.
Le ou les excipients acceptables sur le plan cosmétique présents dans la composition cosmétique peuvent être choisis parmi les agents diluants, les agents dispersants, les agents gélifiants, les émollients, les agents de vectorisation comme les polymères polycationiques ou les phospholipides, les gommes, les résines, les solvants en particulier les alcools inférieurs notamment l’éthanol, l’isopropanol, le dipropylène glycol, le butylène glycol, le propanediol, la glycérine, le sorbitol, et le propylène glycol, les charges telles que les amidons modifiés et polymérisés, le dioxyde de titane, ou un stéarate métallique, les conservateurs, les huiles essentielles, les agents nacrés, les colorants, les absorbeurs d’odeur, les agents régulateurs du pH ou les agents neutralisants, les agents lubrifiants, les agents épaississants, les tensio-actifs dont les tensio-actifs anioniques, cationiques, amphotères ou non ioniques, les humectants tels que la glycérine ou le sorbitol, les agents mouillants, les agents dispersants, les parfums, les pigments organiques ou encore minéraux comme les oxydes de fer, les agents huileux comme les huiles ou des graisses d’origine végétale, les graisses d’origine animale, les huiles de synthèse comme la vaseline, les huiles de silicone, les esters d’alcool gras, des huiles fluorées, des cires, des argiles modifiées, des bentonites, des sels métalliques d’acide gras, la silice, du mica, les agents conservateurs, des véhicules tels qu’une eau minérale, thermale ou florale, et/ou d’autres substances utilisées couramment en formulation dans le domaine cosmétique ou pharmaceutique.
L’extrait selon l’invention peut être incorporé dans n’importe quel type de composition. De préférence, il s’agit d’une composition ayant une forme adaptée à l’administration topique, en particulier adaptée à une application sur la peau ou le cuir chevelu. Ladite composition cosmétique peut se présenter sous la forme de solutions aqueuses, hydroalcooliques, d’émulsions huile-dans-eau (H/E) ou eau-dans huile (E/H) ou d’émulsions multiples (triple : E/H/E ou H/E/H), de nanoémulsions, en particulier des nanoémulsions H/E, de gels aqueux, de dispersions ou encore d’une poudre.
La composition selon l’invention peut se présenter sous la forme d’une lotion, d’un lait, d’une crème, d’un onguent, d’un baume y compris d’un baume à lèvres, d’un gel, d’une mousse, d’une solution, d’un sérum, ou d’un aérosol,
De manière plus générale, la composition selon l’invention peut se présenter également sous la forme d’un produit cosmétique ou dermocosmétique de tout type. Il peut s’agir d’un soin cosmétique, ou d’un produit de maquillage ou d’hygiène corporelle, par exemple une lotion, un lait, un sérum, un gel aqueux ou huileux, une émulsion, une crème, un gel-crème, une eau de soin, une pommade, un baume, un fond de teint, un spray, un mascara, un stick, un rouge à lèvre, un gloss, une mousse, un déodorant, un masque nourrissant, un gel douche, une huile lavante, un savon, un shampooing ou un après-shampooing, un masque ou une huile pour cheveux.
A titre d’illustration, l’extrait peut être présent dans une crème de soin pour le visage. L’extrait selon l’invention peut être incorporé tel quel dans la composition cosmétique selon l’invention, ou sous la forme d’un ingrédient cosmétique.
Selon un aspect particulier, l’invention concerne un ingrédient cosmétique comprenant l’extrait selon l’invention, de préférence un extrait hydroalcoolique et hydrolysé de C. aurantium dans un véhicule cosmétiquement acceptable. Le véhicule est typiquement choisi parmi le citrate de triéthyle, le glycérol (également appelé glycérine), les alcanediols tels que le propylène glycol, le butylène glycol, le pentylène glycol, les esters de cétal par ex. les lévulinates de cétal tels que le lévulinate de méthyle ou d'éthyle ou le lévulinate de cétal de glycérol, l'eau, et leurs mélanges. Par exemple, le véhicule est un mélange de glycérol/eau ou alcanediol/eau selon un rapport volumique de 0,2 à 10. Des composés antioxydants et de type conservateur tels que le caprylyl glycol ou le caprylate de glycérol ou encore un agent tampon peuvent également être ajoutés dans l’ingrédient cosmétique. L’extrait représente au moins 0,05% en poids et généralement au plus 10%, de préférence au plus 5% en poids voire au plus 3% en poids de l’ingrédient cosmétique. L’extrait selon l’invention est généralement présent en une teneur de 0,1% à 10%, par exemple de 0,% à 5,0% en poids dans l’ingrédient cosmétique selon l’invention.
Un objet supplémentaire selon l’invention est un procédé cosmétique, non-thérapeutique, d’un sujet comprenant l’administration d’une quantité cosmétiquement efficace d’un extrait de Citrus tel que décrit ici, selon l’invention, de préférence un extrait hydroalcoolique et hydrolysé de C. aurantium par voie topique, audit sujet. L’extrait est typiquement appliqué sur la zone à traiter sous la forme d’une composition ou d’un produit cosmétique ci-dessus décrit.
Le procédé cosmétique selon l’invention est mis en œuvre pour obtenir un ou plusieurs effets cosmétiques tels que décrits ci-avant. Il est notamment mis en œuvre pour protéger la peau contre les effets du stress bactériens. Par exemple, le procédé cosmétique selon l’invention peut être mis en oeuvre pour soulager ou prévenir l’inconfort cutané, notamment les sensations d’irritation, picotement, tiraillement, démangeaison, de peau sèche, ou de peau déshydratée ou les rougeurs cutanées ou encore pour maintenir ou améliorer la fonction barrière chez une peau exposée à un stress bactérien. A titre d’exemple, supplémentaire, le procédé selon l’invention peut être mis en œuvre pour prévenir, atténuer et/ou traiter une ou plusieurs altérations non pathologiques de la peau causées par l’exposition à un stress bactérien.
Le sujet peut présenter une peau sensible, réactive ou à tendance atopique. L’extrait selon l’invention peut être utilisé dans le procédé comme agent pour moduler ou normaliser la réponse des cellules de la peau au stress bactérien, pour augmenter le seuil de tolérance de la peau au stress bactérien et/ou pour maintenir la fonction barrière de la peau exposée à un stress bactérien. L’extrait selon l’invention peut être utilisé comme agent activateur de la voie de signalisation TAS2R14.
Dans les méthodes et utilisations cosmétiques selon l’invention, on utilise de préférence un extrait obtenu à partir de fruits de C. aurantium, préalablement séchés et broyés, par un procédé comprenant une étape d’extraction hydroalcoolique suivie d’une étape d’hydrolyse. Dans les méthodes et utilisations cosmétiques selon l’invention, la dose à administrer et la fréquence d’administration de l’extrait selon l’invention varient en fonction de l’effet cosmétique recherché, de la zone d’application (peau ou cuir chevelu), des caractéristiques de l’individu, en particulier de son sexe, de son âge et de son type de peau.
Typiquement, l’extrait selon l’invention peut être appliqué au moins une fois par semaine, voire 2 à 3 fois par semaine, ou quotidiennement lorsque la zone à traiter est le cuir chevelu. A titre d’exemple supplémentaire, l’extrait selon l’invention peut être appliqué une à deux fois par jour, typiquement le matin et/ou le soir, lorsque la zone à traiter est une zone de peau du corps, du cou, du visage, ou des mains.
A titre d’exemple, le sujet peut appliquer une dose de 0,5 g à 2 g de composition cosmétique comprenant de 0,001% à 0,5% % en poids d’extrait selon l’invention sur son visage, matin et soir.
Les traitements ci-dessus décrits peuvent durer plusieurs semaines, voire plusieurs mois. D’autres aspects et avantages de la présente Invention apparaîtront à la lecture des exemples qui suivent, qui doivent être considérés comme illustratifs et en aucun cas comme limitatifs.
EXEMPLES
Exemple 1 : préparation de l’extrait selon l’invention et caractérisation chimique
Des oranges amères immatures (Citrus Aurantium) ont été séchées et broyées. Elles ont été ensuite mises dans un solvant hydroalcoolique (EtOH/ELO selon un rapport volumique de 6,5 à 8,5) et est chauffé pendant 2°C à une température allant de 45°C à 55°C.
Ce mélange a ensuite été centrifugé afin d’enlever les résidus d’oranges. La phase liquide a été récupérée puis filtrée. Le solvant a été ensuite évaporé sous pression réduite. Le résidu obtenu a été ajouté dans une solution aqueuse d’acide chloridrique HCl (0.5N-1N) selon un rapport d’un 1 kg de résidu pour 20 L de solution aqueuse (P/V) et porté à reflux entre 2h et 4h afin d’effectuer une étape d’hydrolyse complète. L’étape d’hydrolyse sert notamment à cliver les hétéroside flavonoïde présents dans l’extrait de manière à libérer les parties aglycones de ces composés. L’extrait précipite au cours de la réaction d’hydrolyse.
Le mélange réactionnel est ensuite refroidi et l’extrait précipité est essoré puis lavé avec une solution de NaOH en quantité 1/20 (P/V) à un pH 5-6. La poudre obtenue est ensuite séchée et broyée pour donner l’extrait selon l’invention.
L’extrait obtenu a été caractérisé par analyse HPLC avec une colonne Agilent Poroshel 120 SB C18 (150 mm x4.6 mm, 2.7pm). La phase mobile est constituée d’un mélange eau et acétonitrile avec 0.1 % (V/V) d’acide trifluoroacétique dans chaque phase. La quantité injectée est 3 pL, à un débit de 1 mL/min. La détection est effectuée à 272 nm.
L’extrait selon l’invention comprend principalement :
- Hespérétine entre 22% - 35%
- Naringénine entre 10% - 20%
- Hespéridine < 1,0%
-Naringine <1,0 %
Les pourcentages sont exprimés en masse par rapport à la masse totale de la composition.
Exemple 2 : L’extrait selon l’invention protège contre les agressions causées par les sécrétomes bactériens .
Objectif : L'objectif de cette étude était de montrer que l’extrait selon l’invention exerce une action protectrice vis-à-vis des agressions causées par des toxines libérées par des bactéries présentes naturellement sur la peau.
Protocole :
Préparation des sécrétomes bactériens
Les souches bactériennes de Staphylococcus epidermidis (ATCC 14990), de Staphylococcus aureus (ATCC 29213) et de Cutibacterium acnés (ATCC 6919) ont été utilisées pour cette étude. Les staphylocoques ont été cultivés sur milieu gélosé Mueller-Hinton (MH, OXOID) et C. acnés sur gélose MH supplémentée avec 5 % de sang de cheval défibriné (Thermo Scientific). Les cultures bactériennes ont été incubées à 37 °C en conditions aérobie pour les staphylocoques et anaérobie pour C. acnés. Pour la production des sécrétomes, les souches ont été cultivées dans du milieu Epilife (Gibco) pendant 20 h à 37 ° C sous agitation orbitale à 200 tr / min. Les cultures bactériennes ont ensuite été centrifugées à 9 000 g pendant 15 min et les surnageants ont été récupérés puis filtrés sur des membranes de pores de 0, 22 iim (Sarstedt) avant d'être stockés à -80 ° C jusqu'à utilisation. Le mélange des trois sécrétomes (S. epidermidis, S. aureus et C. acnés) a été réalisé en proportion équivalente (vol /vol).
Culture d’explants ex vivo et conditions de stimulation
Les prélèvements de peau ont été obtenus à partir de de plasties mammaires ou abdominales. Après dissociation mécanique de l’hypoderme, les morceaux de peau contenant le derme et l’épiderme ont été lavés 3 fois dans du PBS. Des biopsies de 8 mm de diamètre ont ensuite été réalisées puis mises en culture sur des filtres en Nylon de 500 pm de diamètre (Sefar) en plaques de 12 puits. Les expiants ont été cultivés dans du DMEM (« Dulbecco's Modified Eagle Medium, GlutaMAX™ Supplement », Gibco) supplémenté par 10 % de sérum de veau fœtal (SVF, Gibco) SVF décomplémenté et 1 % de pénicilline-streptomycine (Gibco) et incubés à 37 °C dans une atmosphère humide avec 5 % de CO2. Les expiants ont été traités par 10 pL de l’extrait selon l’invention à O.lmg/mL pendant 1 hpuis stimulés pendant 24 h par 10 pL du mélange de sécrétomes déposés sur un disque en cellulose (diamètre 6 mm) à la surface de l’explant (stimulation topique sur la couche cornée,).
A l’issu de la période d’incubation, les expiants ont été lysés dans 1 mL de tampon RAI du kit d’extraction d’ARN NucleoSpin® (Macherey & Nagel) supplémenté par 10 pL de 0- mercaptoéthanol (Sigma- Aldrich) contenant 300 mg de billes de verre (diamètre inférieur à 106 pm, Sigma) et cryobroyés à 0°C en utilisant l’homogénéiseur de tissus Cryolys (Bertin technologies) à 8800 rpm (4 cycles de 20 secondes entrecoupés de pause de 30 secondes) puis centrifugés 10 min à 11 000 g. Les lysats cellulaires ont été conservés à -80 °C jusqu’à l’extraction.
Extraction des acides nucléiques, rétrotranscription
L’ARN total a été extrait en utilisant les recommandations du kit d’extraction d’ARN NucleoSpin® (Macherey & Nagel). Les concentrations en ARN et la pureté de l’échantillon ont été évaluées en utilisant le spectrophotomètre Nanodrop 2000 (Thermo Fisher Scientific). Ensuite, la transcription inverse a été réalisée à partir d’ 1 pg des extraits d’ARN en utilisant le kit SuperScript II (Invitrogen). Les ADNc ainsi obtenus ont été dilués au l/10ème dans de l’eau ultrapure et ont été conservés à 4 °C avant utilisation ou stockés à - 20°C. PCR quantitative en temps réel
A partir des ADNc générés par la rétrotranscription, une analyse transcriptionnelle par PCR quantitative a été réalisée en plaque 96 puits et lue par le LightCyler 480 (Roche) où chaque puit (échantillon) contient 5 ul de SYBR Green Master Mix (AceQ qPCR, Vazyme) comprenant le SYBR Green, la Taq polymérase, le MgC12 et les dNTP, ainsi que 1 pM d’amorces oligonucléotidiques sens et antisens, et 2 ul d’ADNc dilué au l/10ème. L’expression des gènes a été normalisée avec les gènes de ménage GAPDH (Glycéraldéhyde-3 -phosphate Déshydrogénase) et 28S (protéine ribosomale 28S), permettant de réaliser l’expression relative rapportée aux gènes de ménage calculé ainsi : 2- ACT où ACT = CT gène d’intérêt - CT moyenne des gènes de ménage, ou alors l’expression des transcrits a été rapportée à la condition contrôle dans les expérimentations selon la méthode des AACT :2-AACT avec AACT = ACT (contrôle) - ACT (échantillon).
Résultats :
Les résultats sont illustrés à la Figure 1. Au cours de cette étude, il a été constaté que le sécrétome libéré par le mélange bactérien composé de C. Acnés, S.Aureus et S.Epidermidis induit une augmentation de l’inflammation de la peau. En effet, une augmentation significative des marqueurs pro-inflammatoires (IL- la et IL-8) a été montrée pour les expiants traités avec le sécrétome bactérien par rapport aux expiants témoin. De plus, on observe également une diminution significative du niveau d’expression du récepteur TAS2R14 chez les expiants traités avec le sécrétome bactérien par rapport aux expiants témoin.
Le traitement des expiants de peau avec l’extrait selon l’invention permet de diminuer de manière très significative la réponse immunitaire inflammatoire induite par le sécrétome bactérien au niveau de l’explant de peau. .En effet, l’extrait selon l’invention a permis de prévenir de manière significative l’augmentation de l’expression de plusieurs gènes proinflammatoires. L’extrait a permis également de prévenir la diminution de l’expression du récepteur au goût amer (TAS2R14) : le niveau d’expression de TAS2R14 chez les expiants de peau exposé au sécrétome bactérien mais traité avec l’extrait selon l’invention est similaire à celui observé pour les expiants témoins. Cela démontre que l'extrait selon l’invention permet de protéger la peau contre les toxines produites par les bactéries naturellement présentes au niveau du microbiote cutané.
[Table 1]
Figure imgf000025_0001
Tableau 1 : modulation de l’expression des gènes IL-la, IL-8 et TAS2R14 chez les expiants de peau exposés au sécrétome bactérien +/- avec l’extrait selon l’invention versus les Expiants contrôles (non exposés au sécrétome bactérien et non traité avec l’extrait selon l’invention).
Exemple 3 : Implication de la voie TAS2R14 (extrait +/-SBA, U-73122)
Objectif : L'objectif de cette étude était de montrer que l’effet protecteur de l'extrait selon l’invention vis-à-vis des toxines bactériennes est médiée par l’activation du récepteur TAS2R14. Pour vérifier cela, un antagoniste du récepteur TAS2R14 a été utilisé afin de bloquer l’activation de ce récepteur chez des fibroblastes du derme humain (NHDF).
Protocole : Les NHDF ont été isolés à partir du derme humain (femmes de 30, 39 et 53 ans) et maintenus dans un milieu spécifique composé de DMEM (Dutscher, L0060-500) contenant 10 % de sérum (Sigma, F7524), 1 % d’antibiotiques (pénicilline / streptomycine / Sigma, P0781) à 37 °C sous 5 % de CO2 et 95 % d’humidité.
Les NHDF ont été ensemencés à la concentration de 2.104 cellules/puits dans des microplaques dans du DMEM complet. Après 1 jour, le milieu avec le sérum a été retiré et les cellules ont été traitées avec l'antagoniste TAS2R14, l’acide sulfamoyl-benzoique (SBA à 500pM) pendant 1 heure. Ensuite, l’ILl-a, un inducteur de la production d’IL-8, a été ajouté en présence ou non de l’extrait selon l’invention. Après 24h, les surnageants ont été collectés et l’IL-8 libéré par les fibroblastes a été déterminé par ELISA (DY208, R&D System). La viabilité des cellules a également été mesurée (MTS, Promega, Gll ll). ELISA (enzyme- linked immunosorbent assay) est une technique d’essai sur plaque conçue pour détecter et quantifier des peptides, des protéines ou des hormones dans les surnageants cellulaires. Suivant les indications du fournisseur pour les dilutions d’anticorps, l’absorption de chaque puits est ensuite mesurée par un lecteur de plaque à 450 nm, avec une correction à 540 nm. Les résultats sont indiqués en pourcentage de synthèse d’IL-8 rapporté à la viabilité cellulaire. Les données obtenues et les variations de pourcentage ont été soumises au test t de Student à deux voies pour les données appariées. La valeur de signification statistique est p<0,05 (*p<0,05, **p<0,01, ***p<0,001).
Analyses statistiques
Les données obtenues et les variations de pourcentage ont été soumises au test Iway ANOVA (Kruskal- Wallis). La valeur de signification statistique est p<0,05 (#p<0,l, *p<0,05, **p<0,01, ***p<0,001).
Résultats : Les résultats sont illustrés à la Figure 2. Comme prévu, l'IL-la a induit la production d'IL8 par les NHDF. Lorsque l’ajout d’IL-la est réalisé en présence de l’extrait selon l’invention, l’induction de la production d’IL8 est diminuée d’environ 30% à la concentration de 0,01 mg/mL.
Lorsque les cellules ont été traitées simultanément avec l'IL-la et l’extrait selon l’invention en présence de SBA, un antagoniste de TAS2R14, le niveau de production d’IL-8 est similaire à celui des cellules traitées avec l'IL-la seulement : en d’autres termes, l’effet protecteur de l’extrait selon l’invention n’est plus visible. Un tel résultat confirme que l’effet protecteur de l’extrait selon l’invention implique une action sur le récepteur TAS2R14
Exemple 4 : L’extrait selon l’invention a un effet protecteur contre les toxines bactériennes qui est supérieur à celui de l’hespérétine, de l’hespéridine et d’un extrait d’orange amère non-hydrolysé
Objectif : L’objectif de cette étude était d’évaluer les effets de l’extrait selon l’invention sur la réponse inflammatoire des fibroblastes du derme humain (NHDF) induite par les lipopolysaccharides (LPS), des endotoxines bactériennes.
Protocole : Les NHDF sont des fibroblastes isolés du derme humain et maintenus dans un milieu spécifique composé de DMEM (Dutscher, L0060-500) contenant 10% de sérum (Sigma, F7524), 1% d’antibiotiques (pénicilline / streptomycine / Sigma #P0781) à 37 °C sous 5 % de CO2 et 95 % d’humidité.
Les NHDF ont été ensemencées à la concentration de 2.104 cellules/puits dans des microplaques dans du DMEM complet. Après 1 jour, le milieu avec le sérum a été retiré et les cellules ont été traitées avec du LPS à 100 ng/mL, comme inducteur de la production d'IL-8, en présence/absence de l’extrait selon l’invention, d’un extrait classique d’orange amère (c’est-à-dire l’extrait précuseur avant hydrolyse), de l’hespérétine, de ou de contrôle positif (dexaméthasone à I OUM). L’hespérétine a été utilisée à une concentration de 8 et 4 M, qui correspond à la concentration présente dans l’extrait selon l’invention à 0,01mg/mL et 0,005 mg/mL, respectivement. À la fin de la période d'incubation, les surnageants ont été recueillis et l'IL-8 libéré par les fibroblastes a été déterminé par ELISA (DY208, R&D System) et la viabilité des cellules par un test de viabilité (MTS, Promega, G1111). L'ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) est une technique d’essai sur plaque conçue pour détecter et quantifier des peptides, des protéines ou des hormones dans les surnageants de cellules. Suivant les indications du fournisseur pour les dilutions d’anticorps, l’absorption de chaque puits est ensuite mesurée par un lecteur de plaque à 450 nm, avec une correction à 540 nm. Les résultats sont indiqués en pourcentage de la synthèse d'IL-8 rapportée à la viabilité cellulaire.
Analyses statistiques
Les données obtenues et les variations de pourcentage ont été soumises au test ANOVA-one way Fisher LSD. La valeur de signification statistique est p<0,05 (*p<0,05, **p<0,01, ***p<0,001).
Résultats :
Les résultats sont illustrés à la Figure 3. Comme prévu, le LPS active la production d'IL-8 au niveau des NHDF. La dexaméthasone a diminué de manière significative la production d’IL-8.. Après 24 heures de traitement, l’extrait selon l’invention réduit de manière significative la production d’IL-8 de 49% et 41% à 0,01 et 0,005 mg/ml, respectivement. On note que la diminution de la production d’IL-8 obtenue avec l’extrait selon l’invention est similaire à celle obtenue avec la dexaméthasone.
On note que l’extrait selon l’invention a un effet protecteur contre la production d’IL-8 induite par les LPS plus important qu’un extrait d’orange amère sans l’hydrolyse (-21% et - 23% à 0,01 mg/mL et 0,005mg/mL, respectivement). De manière notable, on note qu’à une dose équivalente à celle contenue dans l’extrait selon L’Invention, l’hespérétine seule est beaucoup moins efficace pour contrecarrer l’effet du LPS que l’extrait selon l’invention : un tel résultat démontre que l’action protectrice de l’extrait selon l’invention résulte de sa composition complexe, ladite composition permettant de potentialiser l’effet de l’hespérétine. Exemple 5 : Effet de l’extrait sur l’irritation et la sensibilité (HRIPT test)
Objectif : L'objectif de cette étude était de déterminer le potentiel de l’extrait selon l’invention à provoquer une irritation cutanée et/ou à induire une sensibilisation après des applications répétées de patchs.
Protocole : Au total, 120 sujets masculins et féminins, âgés de 18 à 70 ans ont été sélectionnés pour participer à l’étude. Cette étude clinique comprend une phase d’induction, une phase de provocation et, un nouveau test de provocation. Au cours de la phase d’induction, l’extrait selon l’invention est appliqué au même endroit sur le dos de chaque sujet trois fois par semaine pour un total de neuf applications, avec des périodes de repos de 24 heures, à l'exception des applications du vendredi, ce qui permet une période de repos de 48 heures. L’extrait selon l’invention est testé à Img/mL. Les sites d'essai sont examinés à chaque visite pour vérifier l'absence d'irritation cutanée avant de procéder à une nouvelle application de l’extrait selon l’invention. Environ 10 à 21 jours après la dernière visite de la phase d’induction, les sujets reviennent au laboratoire pour la phase de provocation. Le produit testé est appliqué sur un site vierge du dos sous un patch approprié et est retiré par le personnel de la clinique environ 24 heures plus tard. Les sites de test sont examinés pour détecter tout signe d’irritation cutanée ou de sensibilisation. Il peut être demandé à un sujet de revenir au laboratoire pour un nouveau test de provocation si des réactions indiquant une sensibilisation sont observées au cours de la phase de provocation. Au cours de cette phase, le produit testé est appliqué sur un site vierge dans les mêmes conditions que lors de la phase de provocation, et le sujet est examiné pour détecter les réactions cutanées. Toute irritation visible est enregistrée.
Le système de notation dermique suivant a été utilisé : 0 : Aucune réaction cutanée visible + : Érythème à peine perceptible 1+ : Érythème léger 2+ : Érythème bien défini 3+ : Érythème et œdème sévères 4+ : Érythème et œdème avec vésiculation
Résultats :
Sur la base de la population testée, 116 sujets ont finalisé l’étude.
L’étude a montré que l’extrait selon l’invention est très bien toléré : l’Extrait n’a pas induit d’érythème et ou induit une sensibilisation. L’Extrait selon l’invention ne présente pas de risque significatif d'irritation cutanée ou de sensibilisation. Les 116 volontaires ayant finalisés l’étude ont tous présenté un score de « 0 »
Exemple 6 : Exemple d’un produit cosmétique intégrant l’extrait selon l’invention Crème de jour comprenant 1% d’un ingrédient cosmétique comprenant 1% en poids de l’extrait selon l’invention préparé selon l’Example 1 dans le 1,3-propanediol (pourcentage final de l’extrait selon l’invention dans la crème : 0,01% en poids).
Figure imgf000029_0001

Claims

REVENDICATIONS
1. Utilisation cosmétique d’un extrait de fruit de Citrus aurantium en tant qu’ agent cosmétique pour protéger la peau saine contre le stress bactérien.
2. Utilisation selon la revendication 1, dans laquelle l’extrait de fruit de Citrus aurantium est un extrait hydroalcoolique et hydro lysé.
3. Utilisation selon la revendication 1 ou 2, dans laquelle l’extrait est obtenu à partir de fruits immatures de C. aurantium.
4. Utilisation selon Tune quelconque des revendications 1 à 3, dans laquelle l’extrait est obtenu à partir de fruits entiers immatures de C. aurantium sous forme broyée et séchée.
5. Utilisation selon Tune quelconque des revendications 1 à 4 dans laquelle l’extrait est utilisé en tant qu’ agent cosmétique pour normaliser la réponse de la peau au stress bactérien et/ou pour augmenter la tolérance de la peau au stress bactérien.
6. Utilisation selon Tune quelconque des revendications 1 à 5 dans laquelle le stress bactérien résulte de l’exposition de la peau à un sécrétome bactérien et/ou à l’exposition de la peau à une endotoxine présente dans l’environnement.
7. Utilisation selon la revendication 6 dans laquelle le stress bactérien résulte de l’exposition de la peau à un sécrétome bactérien produit par des bactéries commensales.
8. Utilisation selon la revendication 7 dans laquelle le sécrétome bactérien est produit par une ou plusieurs espèces bactériennes choisies parmi S. aureus, S. epidermidis et C. acnés.
9. Utilisation selon Tune quelconque des revendications 1 à 8 dans laquelle l’extrait est utilisé en outre pour prévenir, atténuer et/ou traiter une ou plusieurs altérations non pathologiques de la peau induites par le stress bactérien, par exemple une diminution de la fonction barrière de la peau, une diminution de l’hydratation de la peau, une augmentation de la rugosité de la peau, l’apparition de rougeurs, une perte d’homogénéité du teint, une perte de souplesse, une perte d’éclat de la peau et les combinaisons de celles-ci.
10. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 9 dans laquelle l’extrait est en outre utilisé en tant qu’ agent cosmétique pour prévenir, atténuer, apaiser ou traiter l’inconfort cutané résultant de l’exposition de la peau à un stress bactérien.
11. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 10 dans laquelle l’extrait agit en tant qu’ activateur de la voie de signalisation du TAS2R14, de préférence en tant qu’agoniste du récepteur TAS2R14.
12. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 11 dans laquelle l’extrait est appliqué sur une peau sensible, une peau à tendance acnéique ou sur peau à tendance atopique.
13. Extrait de fruit de Citrus aurantium, obtenu par un procédé comprenant les étapes suivantes :
(a) l’extraction d’un fruit de Citrus aurantium, de préférence un fruit entier de C. aurantium sous forme séchée et broyée, à l’aide d’un solvant hydroalcoolique, et
(b) l’hydrolyse de l’extrait obtenu à l’étape (a).
14. Extrait selon la revendication 13, ledit extrait comprenant moins de 3,0%, en poids de naringine et d’hespéridine par rapport à son poids sec.
15. Ingrédient cosmétique comprenant l’extrait selon la revendication 13 ou 14 dans un véhicule cosmétiquement acceptable choisi parmi le groupe constitué par le citrate de triéthyle, le glycérol, les alcanediols tels que le propanediol, le propylène glycol, le butylène glycol, le pentylène glycol, les esters de cétal par ex. les lévulinates de cétal tels que le lévulinate de méthyle ou d'éthyle ou le lévulinate de cétal de glycérol, l'eau, et leurs mélanges.
16. Composition cosmétique destinée à protéger la peau contre le stress bactérien comprenant l’extrait selon la revendication 13 ou 14 ou l’ingrédient cosmétique selon la revendication 15 et un ou plusieurs excipients acceptables sur le plan cosmétique.
17. Composition cosmétique selon la revendication 16 caractérisée en ce qu’elle se présente sous la forme d’un soin cosmétique, d’un produit de maquillage ou d’un produit d’hygiène corporelle de préférence choisi dans le groupe constitué par une lotion, un lait, un sérum, un gel aqueux ou huileux, une émulsion, une crème, un gel-crème, une eau de soin, une pommade, un baume, un fond de teint, un spray, un mascara, un stick, un rouge à lèvre, un gloss, une mousse, un déodorant, un masque nourrissant, un gel douche, une huile lavante, un savon, un shampooing ou un après-shampooing, un masque ou une huile pour cheveux.
18. Procédé de fabrication d’un extrait de de fruit de Citrus aurantium comprenant les étapes suivantes :
- l’extraction d’un fruit de Citrus aurantium, de préférence un fruit entier immature sous forme broyée et séchée, à l’aide d’un solvant hydroalcoolique, et
- une étape d’hydrolyse, de préférence à l’aide d’une solution aqueuse acide.
19. Procédé selon la revendication 18 dans lequel le solvant hydroalcoolique est un mélange alcool/eau selon un rapport volumique allant de 5,0 à 15,0 et dans lequel l’alcool est choisi parmi le groupe constitué par l’éthanol, l’isopropanol, et le glycérol.
20. Procédé cosmétique pour protéger la peau saine contre le stress bactérien comprenant l’application topique d’un extrait de fruit de Citrus aurantium de préférence tel que défini dans l’une quelconque des revendications 2-3 ou 13-14, dans lequel l’extrait de fruit de Citrus aurantium est présent en tant qu’ agent actif cosmétique.
21. Procédé cosmétique selon la revendication 20 dans lequel l’extrait de fruit de Citrus aurantium est utilisé en tant qu’ agent actif cosmétique pour normaliser la réponse de la peau au stress bactérien et/ou pour augmenter la tolérance de la peau au stress bactérien.
22. Procédé cosmétique selon les revendications 20 et 21, dans lequel l’extrait de fruit de Citrus aurantium est utilisé en tant qu’ activateur de la voie de signalisation du TAS2R14 au niveau de la peau.
23. Procédé cosmétique selon l’une quelconque des revendications 20 à 23 dans lequel l’extrait de fruit de Citrus aurantium est appliqué sur la peau sous la forme d’une composition cosmétique telle que définie dans la revendication! 6.
PCT/FR2024/051227 2023-09-19 2024-09-18 Extrait de citrus aurantium et son utilisation en tant qu'agent cosmetique Pending WO2025062101A1 (fr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR2309875A FR3152983A1 (fr) 2023-09-19 2023-09-19 EXTRAIT DE CITRUS et SON UTILISATION EN TANT QU’AGENT COSMETIQUE
FRFR2309875 2023-09-19

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2025062101A1 true WO2025062101A1 (fr) 2025-03-27

Family

ID=89308542

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/FR2024/051227 Pending WO2025062101A1 (fr) 2023-09-19 2024-09-18 Extrait de citrus aurantium et son utilisation en tant qu'agent cosmetique

Country Status (2)

Country Link
FR (1) FR3152983A1 (fr)
WO (1) WO2025062101A1 (fr)

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100375047B1 (ko) * 2000-01-21 2003-03-08 오광석 나린진 또는 나린게닌을 유효 성분으로 함유하는알코올대사 촉진을 위한 건강음료조성물
US20100068309A1 (en) * 2006-12-08 2010-03-18 Pola Chemical Industries Inc. Method of evaluating skin barrier function, method of screening material for enhancing skin barrier function using the evaluating method, the material for enhancing skin barrier function, and cosmetic containing the material for enhancing skin barrier function
CN101909586A (zh) * 2007-12-27 2010-12-08 花王株式会社 粉刺肌肤用皮肤外用剂
CN102432575A (zh) * 2012-01-19 2012-05-02 西安小草植物科技有限责任公司 一种从枳实中提取高纯度橙皮素的方法
WO2014075563A1 (fr) * 2012-11-15 2014-05-22 上海家化联合股份有限公司 Composé antimicrobien de la médecine chinoise traditionnelle à base de flavonoïdes totaux
JP2021113168A (ja) * 2020-01-18 2021-08-05 株式会社 きものブレイン 美容シート
CN115350130A (zh) * 2022-09-22 2022-11-18 欧诗漫生物股份有限公司 一种具有即时舒缓作用的化妆品组合物、化妆品及其制备方法

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR3008892B1 (fr) * 2013-07-23 2016-01-29 Sarl Candau Composition pour creme de soins cutanes
KR102750413B1 (ko) * 2021-04-29 2025-01-09 국민대학교산학협력단 유자 추출물을 포함하는 피부 미생물 균총 개선용 조성물
KR102298659B1 (ko) * 2021-06-15 2021-09-06 주식회사 에런케이 풋귤 추출물을 포함하는 피부 진정용 화장료 조성물
KR20230080174A (ko) * 2021-11-29 2023-06-07 휴먼코스메틱 주식회사 미성숙 탱자 열매 추출물을 포함하는 항산화, 항염증 및 여드름의 예방 및 치료용 조성물
CN115919961B (zh) * 2022-11-22 2023-10-03 常熟雷允上制药有限公司 一种天佛参口服液及其制备方法和应用

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100375047B1 (ko) * 2000-01-21 2003-03-08 오광석 나린진 또는 나린게닌을 유효 성분으로 함유하는알코올대사 촉진을 위한 건강음료조성물
US20100068309A1 (en) * 2006-12-08 2010-03-18 Pola Chemical Industries Inc. Method of evaluating skin barrier function, method of screening material for enhancing skin barrier function using the evaluating method, the material for enhancing skin barrier function, and cosmetic containing the material for enhancing skin barrier function
CN101909586A (zh) * 2007-12-27 2010-12-08 花王株式会社 粉刺肌肤用皮肤外用剂
CN102432575A (zh) * 2012-01-19 2012-05-02 西安小草植物科技有限责任公司 一种从枳实中提取高纯度橙皮素的方法
WO2014075563A1 (fr) * 2012-11-15 2014-05-22 上海家化联合股份有限公司 Composé antimicrobien de la médecine chinoise traditionnelle à base de flavonoïdes totaux
JP2021113168A (ja) * 2020-01-18 2021-08-05 株式会社 きものブレイン 美容シート
CN115350130A (zh) * 2022-09-22 2022-11-18 欧诗漫生物股份有限公司 一种具有即时舒缓作用的化妆品组合物、化妆品及其制备方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BURNETT CHRISTINA ET AL: "Safety Assessment of Citrus Peel-Derived Ingredients as Used in Cosmetics", no. 3_suppl, 1 December 2021 (2021-12-01), pages 77S - 99S, XP009558501, ISSN: 0730-0913, Retrieved from the Internet <URL:https://journals.sagepub.com/doi/abs/10.1177/10915818211032617> DOI: 10.1177/10915818211032617 *
SURYAWANSHI JYOTSNA A: "An overview of Citrus aurantium used in treatment of various diseases", 1 July 2011 (2011-07-01), pages 390 - 395, XP093228429, Retrieved from the Internet <URL:https://italisvital.info/wp-content/uploads/2021/04/Citrus-aurantium.pdf> *

Also Published As

Publication number Publication date
FR3152983A1 (fr) 2025-03-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP3525889B1 (fr) Extrait d&#39;anigozanthos flavidus pour son utilisation cosmétique
TWI581809B (zh) 用於刺激ｍａｇｐ-１以改善皮膚外觀之組合物及方法
EP3054963B1 (fr) Utilisation cosmétique et/ou dermatologique d&#39;un extrait de feuilles d&#39;hamamelis virginiana
CN109152724B (zh) 掌状红皮藻和茉莉的协同提取物、包含该协同提取物的组合物及其用途
FR3018191A1 (fr) Utilisations cosmetiques de la swertiamarine
FR2928548A1 (fr) Substances augmentant le seuil d&#39;activation des cellules immunes
KR102004322B1 (ko) 자귀나무껍질, 숙근안개초, 시계꽃, 권백 및 딜 혼합추출물을 함유하는 화장료 조성물
EP2691074A1 (fr) Composition a base de camellia japonica et polygonum hydropiper pour protection de la peau
FR2829928A1 (fr) Composition cosmetique pour le soin de la peau et des cheveux de l&#39;homme
FR3110422A1 (fr) Absolue de Lavandula pour son utilisation cosmétique
FR2928549A1 (fr) Utilisation d&#39;un extrait de l&#39;orchidee brassocattleya marcella koss en tant qu&#39;actif pour prevenir ou retarder l&#39;apparition des signes du vieillissement cutane
EP3801778B1 (fr) Utilisation d&#39;un extrait de bixa orellana
KR20210090870A (ko) 마이크로바이옴을 이용한 피부 장벽 개선 효과가 우수한 화장료 조성물
EP3043873A1 (fr) Utilisation cosmetique ou dermatologique d&#39;un extrait de tapirira guyanensis
FR3097762A1 (fr) Utilisation d&#39;un extrait hydro-alcoolique d&#39;Onagre pour hydrater la peau et améliorer la fonction barrière
WO2025062101A1 (fr) Extrait de citrus aurantium et son utilisation en tant qu&#39;agent cosmetique
FR3031458B1 (fr) Extraits de salade, compositions et utilisations
EP4009940B1 (fr) Nouvelle utilisation cosmétique d&#39;un extrait d&#39;epilobium angustifolium
EP2811977B1 (fr) Utilisation d&#39;un extrait de feuille de pommier dans une composition cosmetique pour le raffermissement de la peau
FR3158043A1 (fr) Combinaison d’actifs cosmétiques pour maintenir ou rééquilibrer le microbiote cutané
FR3018685B1 (fr) Applications cosmetiques et pharmaceutiques de la salicaire
FR3110421A1 (fr) Extrait de Narcissus poeticus pour son utilisation cosmétique
FR3013593A1 (fr) Utilisation d&#39;un extrait de carpobrotus edulis dans une composition cosmetique
FR3098119A1 (fr) Procede d’obtention d’une infusion thermale botanique
FR3099992A1 (fr) Utilisation cosmetique d&#39;un extrait de sedum spectabile en tant agent amincissant, et compositions contenant un tel extrait

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 24783776

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1