[go: up one dir, main page]

WO2024111609A1 - Ｋｒａｓ変異型がん治療剤 - Google Patents

Ｋｒａｓ変異型がん治療剤 Download PDF

Info

Publication number
WO2024111609A1
WO2024111609A1 PCT/JP2023/041919 JP2023041919W WO2024111609A1 WO 2024111609 A1 WO2024111609 A1 WO 2024111609A1 JP 2023041919 W JP2023041919 W JP 2023041919W WO 2024111609 A1 WO2024111609 A1 WO 2024111609A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
inhibitor
kras
cancer
sirpα
therapeutic agent
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
PCT/JP2023/041919
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
寛倫 衣斐
雄太 足立
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Aichi Prefecture
Original Assignee
Aichi Prefecture
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Aichi Prefecture filed Critical Aichi Prefecture
Priority to JP2024560177A priority Critical patent/JPWO2024111609A1/ja
Publication of WO2024111609A1 publication Critical patent/WO2024111609A1/ja
Anticipated expiration legal-status Critical
Ceased legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A61K31/416—1,2-Diazoles condensed with carbocyclic ring systems, e.g. indazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00

Definitions

  • the present invention relates to a therapeutic agent for KRAS mutant cancer, a pharmaceutical composition for treating KRAS mutant cancer, a method for treating KRAS mutant cancer, etc.
  • KRAS also known as K-RAS or K-ras
  • K-RAS gene mutations are one of the most frequently occurring gene mutations in cancer, and are known to be deeply involved in the development, proliferation, and progression of cancer.
  • KRAS gene mutations are found in 5%, 40%, and 90% of lung cancer, colon cancer, and pancreatic cancer, which are the leading causes of cancer deaths by site, respectively.
  • KRAS is a major component of the MAPK (mitogen-activated protein kinase) signaling pathway, but mutations in KRAS lead to cell cancer, and mutated KRAS activates many downstream signaling proteins such as MAPK, promoting the survival and proliferation of tumor cells (Non-Patent Document 1). Therefore, there has been a long awaited need for a therapeutic drug that can suppress tumor cells by targeting KRAS.
  • MAPK mitogen-activated protein kinase
  • sotorasib a specific inhibitor for the KRAS G12C mutation, was approved. Furthermore, adagrasib has also been developed as another KRAS G12C inhibitor, achieving the practical application of KRAS inhibitors, which had previously been described as "undruggable.”
  • the response rate of monotherapy with KRAS inhibitors is less than 50%, and the high efficacy that was previously expected has not been achieved.
  • the response rate of monotherapy with KRAS G12C inhibitors is only about 40%, but the cause and mechanism of this has not been clarified.
  • the object of the present invention is to provide a new combination therapy to improve the therapeutic effect of KRAS inhibitors against KRAS mutant cancers.
  • Non-Patent Document 1 MYC is a transcription factor that is overexpressed in many cancers and has been shown to increase the expression of CD47 (Casey, S. C., et al., Science, 2016, 352(6282):227-231.).
  • CD47 is expressed in blood cells and cancer cells, and binds as a ligand to SIRP ⁇ , a receptor expressed on macrophages.
  • Signals mediated by CD47 and SIRP ⁇ are also known as "Don't eat me" signals because they suppress the phagocytic activity of macrophages and other cells.
  • the present inventors added a KRAS inhibitor to lung cancer cell lines and colon cancer cell lines with KRAS mutations such as KRAS G12C and KRAS G12D, and comprehensively analyzed immune checkpoint-related factors whose expression levels change.
  • KRAS G12C and KRAS G12D KRAS mutations
  • KRAS G12D KRAS G12D
  • comprehensively analyzed immune checkpoint-related factors whose expression levels change As a result, contrary to the above prediction, it was found that the expression level of the CD47 gene was greatly increased in the presence of a KRAS inhibitor. This result suggests that a KRAS inhibitor paradoxically enhances the "Don't eat me signal" mediated by CD47, enabling cancer cells to evade the immune system.
  • the present inventors further discovered that the combined use of a KRAS inhibitor and an anti-CD47 antibody can dramatically improve the therapeutic effect against KRAS mutant cancers, and have completed the present invention.
  • the present invention is based on the above new findings and provides the following.
  • a therapeutic agent for treating KRAS mutant cancer comprising a CD47 inhibitor and/or a SIRP ⁇ inhibitor as an active ingredient, The therapeutic agent for KRAS mutant cancer, wherein the CD47 inhibitor and/or the SIRP ⁇ inhibitor is administered in combination with a KRAS inhibitor.
  • a therapeutic agent for treating KRAS mutant cancer comprising a KRAS inhibitor as an active ingredient, The therapeutic agent for KRAS mutant cancer, wherein the KRAS inhibitor is administered in combination with a CD47 inhibitor and/or a SIRP ⁇ inhibitor.
  • the anti-CD47 antibody is selected from the group consisting of magrolimab, AO-176, IBI188, IMC-002, AK117, ZL-1201, TQB2928, lemzoparimab, SRF231, CC-90002, HX009, IBI322, and PF-07257876.
  • the KRAS mutant cancer therapeutic agent according to (3) wherein the Fc fusion protein is TTI-621, TTI-622, evoluptor, or SL-172154.
  • the anti-SIRP ⁇ antibody is BI-765063/OSE172, GS-189, CC-95251, or ADU-1805.
  • the KRAS mutant cancer therapeutic agent according to any one of (1) to (7), wherein the KRAS inhibitor is selected from the group consisting of a KRAS G12C inhibitor, a KRAS G12D inhibitor, a KRAS G12V inhibitor, a KRAS G13C inhibitor, and a pan-KRAS inhibitor.
  • the KRAS G12C inhibitor is selected from the group consisting of sotrasib, adagrasib, JDQ443, and LY3537982.
  • a pharmaceutical composition for treating KRAS mutant cancer comprising the KRAS mutant cancer therapeutic agent according to any one of (1) to (12).
  • the present invention provides a new combination therapy for improving the therapeutic effect of KRAS inhibitors against KRAS mutant cancers.
  • the results of an analysis of survival time in the pleural dissemination model based on the day of LLC cell line transplantation are shown below.
  • the "*" in the figure indicates a significant difference (P ⁇ 0.001) based on the Log-rank test.
  • a KRAS mutant cancer therapeutic agent comprises a CD47 inhibitor and/or a SIRP ⁇ inhibitor as an active ingredient, and the CD47 inhibitor and/or the SIRP ⁇ inhibitor is administered in combination with a KRAS inhibitor.
  • the KRAS mutant cancer therapeutic agent of the present invention comprises a KRAS inhibitor as an active ingredient, and the KRAS inhibitor is administered in combination with a CD47 inhibitor and/or a SIRP ⁇ inhibitor.
  • treatment refers to the alleviation or elimination of symptoms associated with a disease, and/or the prevention or suppression of the progression of the disease, as well as the cure of the disease.
  • an “antibody” may be an immunoglobulin of any class (e.g., IgG, IgE, IgM, IgA, IgD, and IgY) or any subclass (e.g., IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1, and IgA2) that can specifically bind to and recognize an antigen.
  • An antibody may also be a recombinant antibody, a synthetic antibody, a chimeric antibody, or a humanized antibody.
  • fragment of an antibody refers to an antibody fragment that exhibits immune reactivity to an antigen.
  • fragments include Fab, Fab', F(ab') 2 , Fv fragments, Fv fragments stabilized by disulfide bonds (dsFv), (dsFv) 2 , bispecific dsFv (dsFv-dsFv'), diabodies stabilized by disulfide bonds (dsdiabodies), single-chain antibody molecules (scFv), dimeric scFvs (bivalent diabodies), multispecific antibodies, heavy chain antibodies such as camelized single domain antibodies (camelized antibodies; VHH antibodies), nanobodies, domain antibodies, and bivalent domain antibodies.
  • cancer is not limited, but examples include adenocarcinoma, squamous cell carcinoma, small cell carcinoma, and large cell carcinoma.
  • Specific types of cancer include, for example, malignant melanoma, oral cancer, laryngeal cancer, pharyngeal cancer, thyroid cancer, lung cancer, breast cancer, esophageal cancer, gastric cancer, colorectal cancer (including colon cancer and rectal cancer), small intestine cancer, bladder cancer, prostate cancer, testicular cancer, uterine cancer, cervical cancer, endometrial cancer, ovarian cancer, stomach cancer, kidney cancer, liver cancer, pancreatic cancer, biliary tract cancer (including gallbladder cancer and bile duct cancer), brain tumor, head and neck cancer, mesothelioma, osteosarcoma, soft tissue sarcoma, glioma, pediatric tumors such as neuroblastoma, blood cancer, lymphoma, and myeloma.
  • KRAS mutant cancer includes any cancer that expresses a mutated KRAS protein.
  • the KRAS mutant cancer may be any of the cancers described above, but is preferably a solid cancer.
  • KRAS mutant solid cancers include, but are not limited to, KRAS mutant lung cancer (e.g., non-small cell lung cancer), colon cancer (e.g., colorectal cancer), pancreatic cancer, bile duct cancer, gallbladder cancer, endometrial cancer, cervical cancer, ovarian cancer, bladder cancer, and thyroid cancer.
  • KRAS mutations in KRAS mutant cancers are mutations that may cause cancer or promote the survival or proliferation of cancer cells, such as gain-of-function or activation mutations.
  • Known KRAS mutations in KRAS mutant cancers include G12X, G13X, Q61X, and A146X.
  • X refers to any amino acid other than the amino acid residue in the wild-type sequence, and in the example of "G12X", it means that the glycine at codon 12 has been replaced with the amino acid X other than glycine.
  • Specific examples of KRAS G12X mutations include KRAS G12D, KRAS G12C, and KRAS G12V.
  • an example of a KRAS G13X mutation is KRAS G13C
  • an example of a KRAS Q61X mutation is KRAS Q61K
  • an example of a KRAS A146X mutation is A146T mutation.
  • KRAS inhibitor refers to a drug capable of inhibiting the function of KRAS protein and/or suppressing the expression of KRAS protein.
  • the KRAS inhibitor may be a small molecule compound, a peptide, or a nucleic acid drug.
  • the peptide may be an antibody or an antibody fragment.
  • KRAS inhibitors can be classified into KRAS G12C inhibitors, KRAS G12D inhibitors, KRAS G12V inhibitors, KRAS G13C inhibitors, KRAS Q61K inhibitors, and KRAS A146T inhibitors, which have high inhibitory activity against KRAS proteins having specific mutations, as well as pan-KRAS inhibitors, whose inhibitory activity does not depend on the type of mutation, and the like, and the KRAS inhibitor may be any of them.
  • KRAS inhibitors are those that have inhibitory activity against mutant KRAS in KRAS mutant cancers targeted by the therapeutic agent or pharmaceutical composition of the present invention, and for example, in the case of KRAS G12C mutation, KRAS G12C inhibitors or pan-KRAS inhibitors are preferred, and in the case of KRAS G12D mutation, KRAS G12D inhibitors or pan-KRAS inhibitors are preferred.
  • KRAS G12C inhibitors include sotorasib, adagrasib, JDQ443, LY3537982, RG6330, and RMC-6291.
  • KRAS G12D inhibitors include MRTX1133, RMC-9805, and ASP3082.
  • KRAS G13C inhibitors include RMC-8839.
  • pan-KRAS inhibitors include BI1701963, RMC-6236, LUNA18, BI-2865, and BI-2493.
  • CD47 Cluster of Differentiation 47
  • IAP integrated protein
  • CD47 is a five-transmembrane protein that functions as a ligand for SIRP ⁇ , which will be described later.
  • CD47 is presented on the surface of various cells, including cancer cells and blood cells, and inhibits the phagocytic action of SIRP ⁇ by binding as a ligand to SIRP ⁇ on macrophages and dendritic cells, so its function is sometimes called the "Don't eat me” signal. It is known that CD47 expression is increased by the activation of MYC (Casey, S. C., et al., Science, 2016, 352(6282):227-231.).
  • SIRP ⁇ signal regulatory protein ⁇
  • phagocytes such as macrophages and dendritic cells.
  • SIRP ⁇ is also known as CD172a.
  • CD47 inhibitor refers to a drug capable of inhibiting the function of CD47 and/or suppressing the expression of CD47.
  • the CD47 inhibitor may be a low molecular weight compound, a peptide, or a nucleic acid drug.
  • the peptide may be an antibody or an antibody fragment.
  • the nucleic acid drug may be, for example, an aptamer.
  • the CD47 inhibitor is an anti-CD47 antibody or a fragment thereof.
  • anti-CD47 antibodies include magrolimab, AO-176, IBI188, IMC-002, AK117, ZL-1201, TQB2928, lemzoparimab (TJC4), SRF231, CC-90002, HX009, IBI322, and PF-07257876.
  • the CD47 inhibitor is an Fc fusion protein containing the extracellular domain of SIRP ⁇ .
  • Fc fusion protein containing the extracellular domain of SIRP ⁇ refers to a fusion polypeptide containing the extracellular domain of SIRP ⁇ and the Fc domain of an immunoglobulin.
  • Fc fusion proteins containing the extracellular domain of SIRP ⁇ include TTI-621, TTI-622, evolupercept (ALX148), and SL-172154.
  • Evolupercept is a fusion protein of the N-terminal fragment of SIRP ⁇ and an IgG1 fragment, and SL-172154 is known as a SIRPa-Fc-CD40L fusion protein.
  • the CD47 inhibitor is a nucleic acid drug that controls the expression of the CD47 gene.
  • nucleic acid drugs that control the expression of the CD47 gene include antisense nucleic acids, siRNA, shRNA, and miRNA.
  • siRNA is a short double-stranded RNA molecule
  • shRNA is a hairpin RNA that can be processed by Dicer in vivo to generate siRNA.
  • siRNA and shRNA can be introduced into cells in vitro or in vivo, for example, together with a transfection reagent such as lipofectamine.
  • siRNA and shRNA can be incorporated into a vector and introduced into cells.
  • SIRP ⁇ inhibitor refers to a drug capable of inhibiting the function of SIRP ⁇ and/or suppressing the expression of SIRP ⁇ .
  • the SIRP ⁇ inhibitor may be a low molecular weight compound, a peptide, or a nucleic acid drug.
  • the peptide may be an antibody or an antibody fragment.
  • the nucleic acid drug may be, for example, an aptamer.
  • the SIRP ⁇ inhibitor is an anti-SIRP ⁇ antibody or a fragment thereof.
  • anti-SIRP ⁇ antibodies include BI-765063/OSE172, GS-189, CC-95251, and ADU-1805.
  • the SIRP ⁇ inhibitor is a nucleic acid drug that controls the expression of the SIRP ⁇ gene.
  • nucleic acid drugs that control the expression of the SIRP ⁇ gene include antisense nucleic acids, siRNA, shRNA, and miRNA.
  • CD47 inhibitors and SIRP ⁇ inhibitors see literature such as Maute, R. et al., Immuno-oncology and Technology, 2022, 13(C):1-13.
  • the KRAS inhibitor and the CD47 inhibitor and/or the SIRP ⁇ inhibitor are further administered in combination with an immune checkpoint inhibitor.
  • the KRAS mutant cancer therapeutic agent of the present invention contains a CD47 inhibitor and/or a SIRP ⁇ inhibitor as an active ingredient, and the CD47 inhibitor and/or the SIRP ⁇ inhibitor are administered in combination with a KRAS inhibitor and an immune checkpoint inhibitor.
  • the KRAS mutant cancer therapeutic agent of the present invention contains a KRAS inhibitor as an active ingredient, and the KRAS inhibitor is administered in combination with a CD47 inhibitor and/or a SIRP ⁇ inhibitor and an immune checkpoint inhibitor.
  • immune checkpoint inhibitor refers to a molecule that can inhibit cancer cells from evading the host immune response.
  • immune checkpoint inhibitors include, for example, PD-1 inhibitors, PD-L1 inhibitors, CTLA-4 inhibitors, Lag-3 inhibitors, Tim-3 inhibitors, TIGIT inhibitors, and BTLA inhibitors.
  • the immune checkpoint inhibitor may be an anti-PD-1 antibody or a fragment thereof, an anti-PD-L1 antibody or a fragment thereof, an anti-CTLA-4 antibody or a fragment thereof, or an anti-Lag-3 antibody or a fragment thereof, and specific examples include antibodies and fragments thereof such as pembrolizumab, nivolumab, atezolizumab, durvalumumab, avelumab, tislelizumab, cemiplimab, dostallimab, tremelimumab, and ipilimumab.
  • administered in combination or “used in combination” means, in principle, that two or more drugs are administered to the same individual by any method, and the administration method and timing of each drug administered in combination may be the same or different.
  • drugs that target two or more molecules can also be administered as single agents such as multispecific antibodies or complexes, and in this specification, this case is also included in “administered in combination.”
  • the method of administration of KRAS mutant cancer therapeutic agents shall conform to the explanation of the pharmaceutical composition for treating KRAS mutant cancer described below, and will not be explained here.
  • the above-mentioned CD47 inhibitor or SIRP ⁇ inhibitor can be administered in combination with an immune checkpoint inhibitor as a bispecific antibody
  • bispecific antibodies include anti-CD47/PD-1 bispecific antibodies, anti-CD47/PD-L1 bispecific antibodies, anti-CD47/CTLA-4 bispecific antibodies, anti-SIRP ⁇ /PD-1 bispecific antibodies, anti-SIRP ⁇ /PD-L1 bispecific antibodies, and anti-SIRP ⁇ /CTLA-4 bispecific antibodies.
  • Specific examples of anti-CD47/PD-1 bispecific antibodies or anti-CD47/PD-L1 bispecific antibodies include HX009, IBI322, and PF-07257876.
  • composition for treating KRAS mutant cancer in one embodiment of the present invention, a pharmaceutical composition for treating KRAS mutant cancer is provided.
  • the pharmaceutical composition for treating KRAS mutant cancer of the present invention comprises any one of the above-mentioned KRAS mutant cancer therapeutic agents and can treat KRAS mutant cancer.
  • the pharmaceutical composition for treating KRAS mutant cancer of the present invention includes an active ingredient as an essential component, and a pharma- ceutical acceptable carrier or other drug as an optional component.
  • the pharmaceutical composition for treating KRAS mutant cancer of the present invention may be composed of only the active ingredient. However, in order to facilitate the formation of a dosage form and to maintain the pharmacological effect and/or dosage form of the active ingredient, it is preferable that the pharmaceutical composition is composed of a pharmaceutical composition that includes a pharma- ceutical acceptable carrier, which will be described later.
  • the active ingredient in the pharmaceutical composition for treating KRAS mutant cancer of the present invention is a KRAS mutant cancer therapeutic agent.
  • the composition has already been described in detail above, so a detailed description thereof will be omitted here.
  • the number of KRAS mutant cancer therapeutic agents contained in the pharmaceutical composition for treating KRAS mutant cancer of the present invention is not limited, and may be one or more.
  • “Pharmaceutically acceptable carrier” refers to a solvent and/or additive that can be commonly used in the field of pharmaceutical formulation technology and that is little or not harmful to living organisms.
  • Examples of pharma- ceutically acceptable solvents include water, ethanol, propylene glycol, ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitan fatty acid esters, etc. These are preferably sterilized and, if necessary, adjusted to be isotonic with blood.
  • pharma- ceutically acceptable additives include, for example, excipients, binders, disintegrants, fillers, emulsifiers, flow regulators, lubricants, etc.
  • Excipients include, for example, sugars such as monosaccharides, disaccharides, cyclodextrins, and polysaccharides (more specifically, including, but not limited to, glucose, sucrose, lactose, raffinose, mannitol, sorbitol, inositol, dextrin, maltodextrin, starch, and cellulose), metal salts (e.g., sodium chloride, sodium or calcium phosphate, calcium sulfate, magnesium sulfate, calcium carbonate), citric acid, tartaric acid, glycine, low, medium, or high molecular weight polyethylene glycols (PEGs), pluronics, kaolin, silicic acid, or combinations thereof.
  • sugars such as monosaccharides, disaccharides, cyclodextrins, and polysaccharides (more specifically, including, but not limited to, glucose, sucrose, lactose, raffinose
  • Binders include, for example, starch paste made from corn, wheat, rice, or potato starch, simple syrup, glucose solution, gelatin, tragacanth, methylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose, sodium carboxymethylcellulose, shellac, and/or polyvinylpyrrolidone.
  • Disintegrants include, for example, the above-mentioned starches, lactose, carboxymethyl starch, cross-linked polyvinylpyrrolidone, agar, sodium hydrogen carbonate, calcium carbonate, alginic acid or sodium alginate, polyoxyethylene sorbitan fatty acid esters, sodium lauryl sulfate, monoglyceride stearate, or salts thereof.
  • fillers include the above-mentioned sugars and/or calcium phosphates (e.g., tricalcium phosphate or calcium hydrogen phosphate).
  • emulsifiers examples include sorbitan fatty acid esters, glycerin fatty acid esters, sucrose fatty acid esters, and propylene glycol fatty acid esters.
  • flow regulators and lubricants examples include silicates, talc, stearates, or polyethylene glycol.
  • the formulation may contain, as necessary, dissolution aids (solubilizers), suspending agents, diluents, surfactants, stabilizers, absorption promoters (e.g., quaternary ammonium salts, sodium lauryl sulfate), bulking agents, moisturizers (e.g., glycerin, starch), adsorbents (e.g., starch, lactose, kaolin, bentonite, colloidal silicic acid), coating agents, preservatives, antioxidants, buffers, etc.
  • dissolution aids solubilizers
  • suspending agents e.g., diluents, surfactants, stabilizers, absorption promoters (e.g., quaternary ammonium salts, sodium lauryl sulfate), bulking agents, moisturizers (e.g., glycerin, starch), adsorbents (e.g., starch, lactose, kaolin
  • the pharmaceutical composition for treating KRAS mutant cancer of the present invention may contain other drugs to the extent that the pharmacological effect of the active ingredient is not lost.
  • other drugs include drugs that have a therapeutic effect against KRAS mutant cancer, similar to the KRAS mutant cancer treatment agent.
  • the dosage form of the pharmaceutical composition for treating KRAS mutant cancer of the present invention is not particularly limited as long as it does not or hardly inactivates the active ingredient, the KRAS mutant cancer therapeutic agent of the present invention, and is capable of fully exerting its pharmacological effect in vivo after administration.
  • Dosage forms can be classified into liquid dosage forms or solid dosage forms (including semi-solid dosage forms such as gels) depending on their form, but the pharmaceutical composition for treating KRAS mutant cancer of the present invention may be either of them.
  • Dosage forms can also be broadly classified into oral dosage forms and parenteral dosage forms depending on the method of administration, but either of these may be used.
  • Specific dosage forms include, for oral dosage forms, liquid dosage forms such as suspensions, emulsions, and syrups, and solid dosage forms such as powders (including powders, powders, and candy powders), granules, tablets, capsules, sublingual tablets, and lozenges.
  • liquid dosage forms such as injections, suspensions, and emulsions are examples.
  • the pharmaceutical composition for treating KRAS mutant cancer of the present invention can be administered by any method known in the art, so long as it is a method that can administer an effective amount of the KRAS mutant cancer therapeutic agent of the present invention, which is an active ingredient, to a living body for the treatment of KRAS mutant cancer.
  • effective amount refers to the amount of an active ingredient required to exert its function, i.e., in this invention, the amount of a therapeutic agent required to treat KRAS mutant cancer, and which causes little or no harmful side effects to the living body to which it is applied. This effective amount may vary depending on conditions such as information about the subject, the route of administration, and the number of doses.
  • subject refers to an individual animal to which the KRAS mutant cancer therapeutic agent or pharmaceutical composition for treating KRAS mutant cancer of the present invention is applied. Specifically, it refers to a mammal, including, for example, primates, pet animals, livestock, and sports animals, and humans are particularly preferred.
  • Subject information refers to various individual information about the subject, including, for example, the subject's age, weight, sex, general health condition, drug sensitivity, and whether or not the subject is taking any medication. The effective amount and the dosage calculated based thereon are determined by the judgment of a physician or veterinarian depending on the information about each individual subject. When it is necessary to administer a large amount of the pharmaceutical composition for treating KRAS mutant cancer of the present invention to obtain a sufficient effect in treating KRAS mutant cancer, it can be administered in several divided doses to reduce the burden on the subject.
  • the pharmaceutical composition for treating KRAS mutant cancer of the present invention may be administered either systemically or locally.
  • systemic administration include intravascular injection such as intravenous injection and oral administration.
  • local administration include intratumoral administration, rectal administration, and intraperitoneal administration.
  • Preferred administration methods are intravenous administration, subcutaneous administration, intratumoral administration, and oral administration.
  • DDS drug delivery system
  • the dosage or intake is appropriately selected depending on the age, body weight, symptoms, health condition, type of composition, etc. of the subject. For example, based on the weight of the KRAS mutant cancer therapeutic agent, it may be 0.001 mg/kg/day to 1000 mg/kg/day, 0.01 mg/kg/day to 500 mg/kg/day, 0.1 mg/kg/day to 200 mg/kg/day, 1 mg/kg/day to 100 mg/kg/day, 5 mg/kg/day to 50 mg/kg/day, or 10 mg/kg/day.
  • the pharmaceutical composition for treating KRAS mutant cancer of the present invention includes a CD47 inhibitor and/or a SIRP ⁇ inhibitor, and the CD47 inhibitor and/or the SIRP ⁇ inhibitor are administered in combination with a KRAS inhibitor.
  • the KRAS inhibitor and the CD47 inhibitor and/or the SIRP ⁇ inhibitor can also be administered in combination with an immune checkpoint inhibitor.
  • the pharmaceutical composition for treating KRAS mutant cancer of the present invention includes a KRAS inhibitor, and the KRAS inhibitor is administered in combination with a CD47 inhibitor and/or a SIRP ⁇ inhibitor.
  • the KRAS inhibitor and the CD47 inhibitor and/or the SIRP ⁇ inhibitor can also be administered in combination with an immune checkpoint inhibitor.
  • the pharmaceutical composition for treating KRAS mutant cancer of the present invention contains a CD47 inhibitor and/or a SIRP ⁇ inhibitor and an immune checkpoint inhibitor, and the CD47 inhibitor and/or the SIRP ⁇ inhibitor and the immune checkpoint inhibitor are administered in combination with a KRAS inhibitor.
  • the KRAS inhibitor may be administered orally, and/or the CD47 inhibitor and/or the SIRP ⁇ inhibitor may be administered intravenously. Additionally, the immune checkpoint inhibitor may be administered intravenously.
  • the CD47 inhibitor and/or SIRP ⁇ inhibitor and the immune checkpoint inhibitor can be co-administered.
  • the co-administration may be intravenous.
  • KRAS mutant cancer includes any cancer expressing mutated KRAS protein, for example, solid cancer.
  • KRAS mutant solid cancer is not particularly limited, but may be, for example, KRAS mutant lung cancer (e.g., non-small cell lung cancer), colon cancer (e.g., colorectal cancer), pancreatic cancer, bile duct cancer, gallbladder cancer, endometrial cancer, cervical cancer, ovarian cancer, bladder cancer, or thyroid cancer.
  • a method for treating KRAS mutant cancer includes a step of administering a KRAS inhibitor to a subject and a step of administering a CD47 inhibitor and/or a SIRP ⁇ inhibitor to a subject as essential steps, and includes a step of administering an immune checkpoint inhibitor to a subject as an optional step.
  • the subject may be a human or a non-human animal.
  • the step of administering a CD47 inhibitor and/or a SIRP ⁇ inhibitor to a subject may be a step of co-administering a CD47 inhibitor and/or a SIRP ⁇ inhibitor and an immune checkpoint inhibitor.
  • a KRAS inhibitor typically 0.01 g to 10 g, 0.1 g to 5 g, or 0.5 g to 2 g of the KRAS inhibitor can be administered once to several times a day, every other day, every third day, once a week, or once every two weeks.
  • the KRAS inhibitor can be administered, for example, orally.
  • a CD47 inhibitor and/or a SIRP ⁇ inhibitor typically 0.1 mg to 10 g, 1 mg to 5 g, 10 mg to 2 g, 100 mg to 1 g, or 200 mg to 500 mg of a CD47 inhibitor and/or a SIRP ⁇ inhibitor can be administered once to several times a week, every two weeks, every three weeks, every four weeks, once a month, once every two months, every six months, or once a year.
  • the CD47 inhibitor and/or the SIRP ⁇ inhibitor can be administered, for example, intravenously.
  • an immune checkpoint inhibitor typically 0.1 mg to 10 g, 1 mg to 5 g, 10 mg to 2 g, 100 mg to 1 g, or 200 mg to 500 mg of the immune checkpoint inhibitor can be administered once to several times a week, every two weeks, every three weeks, every four weeks, once a month, once every two months, every six months, or once a year.
  • the immune checkpoint inhibitor can be administered, for example, intravenously.
  • an agent for enhancing the therapeutic effect of a KRAS inhibitor against KRAS mutant cancer which consists of or contains a CD47 inhibitor and/or a SIRP ⁇ inhibitor.
  • an agent for enhancing the combined therapeutic effect of a KRAS inhibitor and an immune checkpoint inhibitor against KRAS mutant cancer which consists of or contains a CD47 inhibitor and/or a SIRP ⁇ inhibitor.
  • KRAS mutant cancer therapeutic agents in the treatment of KRAS mutant cancer.
  • a CD47 inhibitor and/or a SIRP ⁇ inhibitor for use in enhancing the therapeutic effect of a KRAS inhibitor.
  • a KRAS inhibitor in the manufacture of a medicament for treating a KRAS mutant cancer, wherein the KRAS inhibitor is administered in combination with a CD47 inhibitor and/or a SIRP ⁇ inhibitor.
  • the KRAS inhibitor and the CD47 inhibitor and/or the SIRP ⁇ inhibitor may further be administered in combination with an immune checkpoint inhibitor.
  • a CD47 inhibitor and/or a SIRP ⁇ inhibitor in the manufacture of a medicament for treating a KRAS mutant cancer, wherein the CD47 inhibitor and/or the SIRP ⁇ inhibitor are administered in combination with a KRAS inhibitor.
  • the CD47 inhibitor and/or the SIRP ⁇ inhibitor and the KRAS inhibitor may further be administered in combination with an immune checkpoint inhibitor.
  • Example 1 Verification of the macrophage accumulation promoting effect of KRAS inhibitors (the purpose) An inhibitor for the KRAS G12C mutation was approved in 2021. However, the response rate of the single agent against KRAS mutant tumors is only about 40%, and combination therapy with an immune checkpoint inhibitor is seen as a promising way to further improve the response rate. In this example, we examine the dynamics of macrophages in tumor tissue to examine the effect of the KRAS G12C inhibitor on the tumor immune environment.
  • LLC cell line As a cancer cell line with KRAS G12C mutation, a cell line (hereinafter simply referred to as "LLC cell line”) was prepared by knocking out the NRAS gene in the LCC mouse lung cancer cell line (JCRB, JCRB1348) with KRAS G12C mutation and NRAS mutation. After culturing this LLC cell line in RPMI medium, 5 ⁇ 105 cells were transplanted into the thoracic cavity of mice (C57BL/6JJcl, male, 4-6 weeks old) to prepare a thoracic dissemination model. From day 7 to day 10 after cell transplantation, 100 ⁇ L of 50 mg/kg of the KRAS G12C inhibitor Sotorasib (MCE, HY-114277) was orally administered every day.
  • MCE KRAS G12C inhibitor Sotorasib
  • Tumor tissue was isolated from the mice on day 3 of KRAS G12C inhibitor treatment, sections were prepared from the tumor tissue, and stained with the macrophage-specific marker F4/80 (APC anti-mouse F4/80, BioLegend, 123116).
  • Example 2 Verification of the CD47 expression induction effect by KRAS inhibitors (the purpose) We will investigate immune checkpoint-related molecules induced by KRAS inhibitors.
  • the colon cancer cell line SNU-407 which has a KRAS G12D mutation, was exposed to 1 ⁇ M of a KRAS G12D inhibitor (MRTX1133), and proteins were extracted 72 hours later.
  • MRTX1133 a KRAS G12D inhibitor
  • the results of detecting CD47 by Western blotting are shown in Figure 3. It was revealed that exposure to the KRAS G12D inhibitor significantly increased the expression level of CD47 protein.
  • CD47 is known as a "Don't eat me signal" that inhibits phagocytosis by macrophages. It is generally known that CD47 is controlled by myc downstream of KRAS, and it is believed that KRAS inhibitors suppress CD47 expression. However, the results of Examples 1 and 2 revealed that KRAS G12C inhibitors induce macrophage infiltration into tumor tissue while enhancing CD47 expression in tumor cells. This suggests the possibility that KRAS G12C inhibitors enhance the "Don't eat me signal" by enhancing CD47 expression, thereby contributing to immune checkpoint inhibitor resistance.
  • Example 3 Verification of anti-tumor effect of anti-CD47 antibody in resistance to KRAS inhibitor/anti-PD-L1 antibody combination therapy (the purpose)
  • KRAS inhibitors increase CD47 expression in cancer cells.
  • Increased CD47 expression leads to enhanced "Don't eat me signaling" and may contribute to resistance to immune checkpoint inhibitors. Therefore, in this Example, we examine whether immune checkpoint inhibitor resistance can be overcome by combining a CD47 inhibitor with a KRAS G12C inhibitor.
  • a pleural dissemination model was prepared in the same manner as in Example 1, and then the KRAS G12C inhibitor monotherapy group was treated with the above-mentioned method.
  • the KRAS G12C inhibitor/anti-PD-L1 antibody group in addition to the KRAS G12C inhibitor, 2.5 mg/mL of the anti-PD-L1 antibody Tecentriq (Chugai Pharmaceutical, 21K010Y) was intraperitoneally administered to the mice twice a week at 100 ⁇ L.
  • the above-mentioned anti-PD-L1 antibody and 0.5 mg/mL of the anti-CD47 antibody were intraperitoneally administered to the mice three times a week at 100 ⁇ L.
  • Example 4 Analysis of survival time (the purpose) We will verify that the combination of KRAS G12C inhibitor with CD47 inhibitor increases survival time in a pleural dissemination model.
  • the survival rate of mice was analyzed over a one-year period based on the start date of treatment for the LLC thoracic dissemination model.
  • Example 5 Verification of the CD47 expression induction effect of pan-KRAS inhibitor (the purpose) The effect of pan-KRAS inhibitors on enhancing CD47 expression in tumor cells will be examined.
  • KRAS G12C mutant lung cancer cell lines NCI-H358 and LU65, were exposed to 1 ⁇ M of a pan-RAS inhibitor (BI-2865), and after 72 hours, the cells were fixed with paraformaldehyde and expression was detected by FACS using CD47 antibody and fluorescent secondary antibody.
  • a pan-RAS inhibitor BI-2865

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本発明の目的は、KRAS変異型がんに対するKRAS阻害剤の治療効果を改善するための新たな併用療法を提供することを課題とする。　CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤を有効成分として含む、KRAS変異型がん治療剤であって、前記CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤は、KRAS阻害剤と組み合わせて投与される、前記KRAS変異型がん治療剤を提供する。

Description

ＫＲＡＳ変異型がん治療剤
　本発明は、KRAS変異型がん治療剤、及びKRAS変異型がん治療用医薬組成物、KRAS変異型がん治療方法等に関する。
　KRAS（K-RAS又はK-rasともいう）遺伝子変異は、がんで最も高頻度に認める遺伝子変異の一つであり、がんの発生、増殖、進展等に深く関与することが知られている。部位別がん死亡率の上位を占める肺がん、大腸がん、及び膵臓がんでは、それぞれその5％、40％、及び90％にKRAS遺伝子変異が認められる。
　正常細胞において、KRASはMAPK（マイトジェン活性化プロテインキナーゼ）シグナル伝達経路の主要構成タンパク質である一方、KRASの変異は細胞のがん化につながり、変異したKRASはMAPK等の多くの下流シグナルタンパク質を活性化し、腫瘍細胞の生存や増殖を促進する（非特許文献１）。それ故、KRASを標的として腫瘍細胞を抑制し得る治療薬が長年待ち望まれていた。
　KRASタンパク質の活性を直接阻害する薬剤の開発は困難とされ、有効な治療法が長年同定されていなかったが、2021年にKRAS G12C変異に対する特異的阻害剤ソトラシブが承認された。さらに別のKRAS G12C阻害剤としてアダグラシブも開発され、「アンドラッガブル」と言われてきたKRAS阻害剤の実用化が達成された。
　しかしながら、KRAS阻害剤の単剤による治療では奏効率が50％に満たず、従前より期待されていたような高い効率は達成されていない。例えばKRAS G12C阻害剤の単剤での奏効率は40％程度に留まることが報告されているが、その原因や機序については明らかにされていない。
　したがって、KRAS変異型がんに対するKRAS阻害剤の奏効率をさらに向上させるための新たな治療方法の開発が望まれている。
Angelina, V. V., et al., Cancer Cell, 2018, 34(5):807-822.e7.
　本発明の目的は、KRAS変異型がんに対するKRAS阻害剤の治療効果を改善するための新たな併用療法を提供することである。
　KRAS変異型がんでは、活性化したKRASがMYCの活性化を通じて腫瘍細胞の生存や増殖を促進することがよく知られている（非特許文献１）。MYCは、多くのがんにおいて過剰発現している転写因子であり、CD47の発現を上昇させることが示されている（Casey, S. C., et al., Science, 2016, 352(6282):227-231.）。CD47は、血球細胞やがん細胞等で発現し、マクロファージ上で発現する受容体であるSIRPαにリガンドとして結合する。CD47及びSIRPαによって媒介されるシグナルは、マクロファージ等の貪食作用を抑制することから、「Don't eat me」シグナルとしても知られている。
　上述の2つの文献はいずれも当該分野において非常によく引用される論文であり、上記知見から、KRAS変異型がんでは、活性化したKRASによってMYCが活性化され、その結果としてCD47の発現が上昇し、「Don't eat me」シグナルの増強に基づいてがん細胞は免疫による認識を回避していると考えられる。したがって、KRAS阻害剤によってKRASの活性を抑制すれば、MYCの活性化は抑制され、CD47が媒介する「Don't eat me」シグナルも抑制されると予想される。
　本発明者らは、上記課題を解決するために、KRAS G12CやKRAS G12D等のKRAS変異を有する肺がん細胞株や大腸がん細胞株にKRAS阻害剤を添加し、発現量が変化する免疫チェックポイント関連因子を網羅的に解析した。その結果、上記予測に反して、KRAS阻害剤の存在下においてCD47遺伝子の発現量が大きく上昇することを見出した。この結果から、KRAS阻害剤は、CD47によって媒介される「Don't eat meシグナル」を逆説的に増強し、がん細胞の免疫回避を可能としていることが示唆された。本発明者らはこの知見に基づき、KRAS阻害剤と抗CD47抗体とを併用することによって、KRAS変異型がんに対する治療効果を飛躍的に改善できることをさらに見出し、本発明を完成させるに至った。
　本発明は上記新たな知見に基づくもので、以下を提供する。
（１）CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤を有効成分として含む、KRAS変異型がん治療剤であって、
　前記CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤は、KRAS阻害剤と組み合わせて投与される、前記KRAS変異型がん治療剤。
（２）KRAS阻害剤を有効成分として含む、KRAS変異型がん治療剤であって、
　前記KRAS阻害剤は、CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤と組み合わせて投与される、前記KRAS変異型がん治療剤。
（３）前記CD47阻害剤が、抗CD47抗体又はその断片、SIRPαの細胞外領域を含むFc融合タンパク質、又はCD47遺伝子の発現を制御する核酸医薬である、（１）又は（２）に記載のKRAS変異型がん治療剤。
（４）前記抗CD47抗体が、マグロリマブ、AO-176、IBI188、IMC-002、AK117、ZL-1201、TQB2928、レムゾパリマブ、SRF231、CC-90002、HX009、IBI322、及びPF-07257876からなる群から選択される、（３）に記載のKRAS変異型がん治療剤。
（５）前記Fc融合タンパク質が、TTI-621、TTI-622、エボルパセプト、又はSL-172154である、（３）に記載のKRAS変異型がん治療剤。
（６）前記SIRPα阻害剤が、抗SIRPα抗体又はその断片、又はSIRPα遺伝子の発現を制御する核酸医薬である、（１）又は（２）に記載のKRAS変異型がん治療剤。
（７）前記抗SIRPα抗体が、BI-765063/OSE172、GS-189、CC-95251、又はADU-1805である、（６）に記載のKRAS変異型がん治療剤。
（８）前記KRAS阻害剤が、KRAS G12C阻害剤、KRAS G12D阻害剤、KRAS G12V阻害剤、KRAS G13C阻害剤、及び汎KRAS阻害剤からなる群から選択される、（１）～（７）のいずれかに記載のKRAS変異型がん治療剤。
（９）前記KRAS G12C阻害剤が、ソトラシブ、アダグラシブ、JDQ443、及びLY3537982からなる群から選択される、（８）に記載のKRAS変異型がん治療剤。
（１０）前記汎KRAS阻害剤が、BI1701963、RMC-6236、LUNA18、BI-2865、及びBI-2493からなる群から選択される、（８）に記載のKRAS変異型がん治療剤。
（１１）前記KRAS阻害剤並びに前記CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤が、さらに免疫チェックポイント阻害剤と組み合わせて投与される、（１）～（１０）のいずれかに記載のKRAS変異型がん治療剤。
（１２）前記免疫チェックポイント阻害剤が、PD-1阻害剤、PD-L1阻害剤、又はCTLA-4阻害剤である、（１１）に記載のKRAS変異型がん治療剤。
（１３）（１）～（１２）のいずれかに記載のKRAS変異型がん治療剤を含む、KRAS変異型がん治療用医薬組成物。
（１４）前記KRAS変異型がんが、肺がん、大腸がん、膵臓がん、及び胆管がんからなる群から選択される、（１３）に記載のKRAS変異型がん治療用医薬組成物。
（１５）前記CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤が、静脈投与される、（１３）又は（１４）に記載のKRAS変異型がん治療用医薬組成物。
（１６）前記KRAS阻害剤が、経口投与される、（１３）～（１５）のいずれかに記載のKRAS変異型がん治療用医薬組成物。
（１７）CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤からなる、KRAS変異型がんに対するKRAS阻害剤の治療効果増強剤。
　本明細書は本願の優先権の基礎となる日本国特許出願番号2022-187560号の開示内容を包含する。
　本発明によれば、KRAS変異型がんに対するKRAS阻害剤の治療効果を改善するための新たな併用療法が提供される。
KRAS G12C変異を有するLLCマウス肺がん細胞株を胸腔に移植し、KRAS G12C阻害剤（Sotorasib）を投与したマウスの腫瘍組織を免疫組織化学染色した結果、KRAS G12C阻害剤を投与したマウスの腫瘍組織では、マクロファージが顕著に浸潤することが示された。 KRAS G12C変異を有する肺がん細胞株NCI-H358及びLU65をKRAS G12C阻害剤（Sotorasib）に曝露させた結果、CD47タンパク質の発現が上昇していることがウエスタンブロッティングにより示された。 KRAS G12D変異を有する大腸がん細胞株SNU-407をKRAS G12D阻害剤（MRTX1133）に曝露させた結果、CD47タンパク質の発現が上昇していることがウエスタンブロッティングにより示された。 KRAS G12C変異を有する肺がん細胞株であるNCI-H358及びLU65、及びLLC細胞株をKRAS G12C阻害剤（Sotorasib）の存在下又は非存在下で培養した後、CD47の細胞表面発現をFACSにより検出した結果を示す。図は、n=3の平均値を示し、エラーバーは標準偏差を示す。 KRAS G12C変異を有するLLCマウス肺がん細胞株を胸腔に移植し、各種阻害剤の異なる組み合わせを投与した投与群において、腫瘍組織の体積を測定した結果を、移植時の体積からの倍率変化で示す。グラフの各点はn=8の平均値を示し、エラーバーは標準誤差を示す。 LLC細胞株の移植日を基準として胸腔播種モデルの生存期間を解析した結果を示す。図中に示す「＊」は、Log-rank検定に基づく有意差（P < 0.001）を示す。 KRAS G12C変異を有する肺がん細胞株であるNCI-H358及びLU65細胞株を汎KRAS阻害剤（BI-2865）の存在下又は非存在下で培養した後、CD47の細胞表面発現をFACSにより検出した結果を示す。図は、n=3の平均値を示し、エラーバーは標準偏差を示す。
（KRAS変異型がん治療剤）
　本発明の一態様において、KRAS変異型がん治療剤が提供される。本発明のKRAS変異型がん治療剤は、CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤を有効成分として含み、CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤は、KRAS阻害剤と組み合わせて投与される。或いは、本発明のKRAS変異型がん治療剤は、KRAS阻害剤を有効成分として含み、KRAS阻害剤は、CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤と組み合わせて投与される。
　本明細書において「治療」とは、疾患の罹患に伴う症状の緩和又は除去、及び／又は疾患の進行の阻止又は抑制、並びに疾患の治癒をいう。
　本明細書において「抗体」は、抗原に特異的に結合し、かつそれを認識することのできる任意のクラス（例えば、IgG、IgE、IgM、IgA、IgD、及びIgY）又は任意のサブクラス（例えば、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1、及びIgA2）の免疫グロブリンであってもよい。抗体はまた、組換え抗体、合成抗体、キメラ抗体、又はヒト化抗体であってもよい。
　本明細書において抗体の「断片」は、抗原に対して免疫応答性を示す抗体断片である。例えば、Fab、Fab'、F(ab')2、Fvフラグメント、ジスルフィド結合により安定化したFvフラグメント（dsFv）、(dsFv)2、二重特異性dsFv（dsFv-dsFv'）、ジスルフィド結合により安定化したディアボディ（dsディアボディ）、単鎖抗体分子（scFv）、二量体scFv（2価ディアボディ）、多重特異性抗体、ラクダ化シングルドメイン抗体（ラクダ化抗体；VHH抗体）等の重鎖抗体、ナノボディ、ドメイン抗体、及び2価ドメイン抗体等が該当する。
　本明細書において「がん」の種類は限定しないが、例えば、腺がん、扁平上皮がん、小細胞がん及び大細胞がん等が挙げられる。具体的ながんの種類としては、例えば、悪性黒色腫、口腔がん、喉頭がん、咽頭がん、甲状腺がん、肺がん、乳がん、食道がん、胃がん、大腸がん（結腸がん及び直腸がんを含む）、小腸がん、膀胱がん、前立腺がん、精巣がん、子宮体がん、子宮頚がん、子宮内膜がん、卵巣がん、胃がん、腎がん、肝がん、膵がん、胆道がん（胆嚢がん及び胆管がんを含む）、脳腫瘍、頭頸部がん、中皮腫、骨肉腫、軟部肉腫、神経膠腫、神経芽腫を始めとする小児腫瘍、血液がん、リンパ腫、骨髄腫等が挙げられる。
　本明細書において「KRAS変異型がん」には、変異したKRASタンパク質を発現する任意のがんが包含される。KRAS変異型がんは、上述の任意のがんであってもよいが、好ましくは固形がんである。KRAS変異型の固形がんは、特に制限されないが、例えばKRAS変異型の肺がん（例：非小細胞肺がん）、大腸がん（例：結腸直腸がん）、膵臓がん、胆管がん、胆嚢がん、子宮内膜がん、子宮頚がん、卵巣がん、膀胱がん、及び甲状腺がんを挙げることができる。
　KRAS変異型がんにおけるKRAS変異は、がんを引き起こし得る、又はがん細胞の生存や増殖を促進し得る変異であり、例えば機能獲得型又は活性化型の変異である。KRAS変異型がんにおける公知のKRAS変異として、G12X、G13X、Q61X、及びA146X等が挙げられる。本明細書において「KRAS G12X」又は「G12X」等という場合、「X」は野生型配列におけるアミノ酸残基以外の任意のアミノ酸を示し、「G12X」の例ではコドン12のグリシンがグリシン以外のアミノ酸Xで置換されていることを意味する。具体的なKRAS G12X変異としては、KRAS G12D、KRAS G12C、及びKRAS G12Vが例示される。また、KRAS G13X変異としてはKRAS G13Cが例示され、KRAS Q61X変異としてはKRAS Q61Kが例示され、KRAS A146X変異としてはA146T変異が例示される。
　本明細書において「KRAS阻害剤」とは、KRASタンパク質の機能を阻害する、及び／又はKRASタンパク質の発現を抑制することが可能な薬剤を意味する。KRAS阻害剤は、低分子化合物、ペプチド、又は核酸医薬であってもよい。ペプチドは、抗体又は抗体断片であってもよい。KRAS阻害剤は、その標的となるKRASタンパク質の変異等の種類によって、特定の変異を有するKRASタンパク質に対して高い阻害活性を有する、KRAS G12C阻害剤、KRAS G12D阻害剤、KRAS G12V阻害剤、KRAS G13C阻害剤、KRAS Q61K阻害剤、及びKRAS A146T阻害剤、並びに阻害活性が変異の種類に依存しない汎KRAS阻害剤等に分類することができるが、KRAS阻害剤はそのいずれであってもよい。好ましいKRAS阻害剤は、本発明の治療剤又は医薬組成物が対象とするKRAS変異型がんにおける変異型KRASに対して阻害活性を有するKRAS阻害剤であり、例えばKRAS G12C変異であればKRAS G12C阻害剤又は汎KRAS阻害剤が好ましく、KRAS G12D変異であればKRAS G12D阻害剤又は汎KRAS阻害剤が好ましい。KRAS G12C阻害剤としては、例えばソトラシブ（Sotorasib）、アダグラシブ（Adagrasib）、JDQ443、LY3537982、RG6330、及びRMC-6291が挙げられる。また、KRAS G12D阻害剤の例としては、MRTX1133、RMC-9805、及びASP3082が挙げられる。KRAS G13C阻害剤の例としては、RMC-8839が挙げられる。汎KRAS阻害剤の例としては、BI1701963、RMC-6236、LUNA18、BI-2865、及びBI-2493が挙げられる。
　「CD47（Cluster of Differentiation 47)」は、IAP（integrin associated protein）とも呼ばれ、後述するSIRPαのリガンドとして機能する5回膜貫通型の膜タンパク質である。CD47はがん細胞や血球細胞等の様々な細胞の表面に提示され、マクロファージや樹状細胞上のSIRPαにリガンドとして結合することによって、その貪食作用を抑制するため、その機能は「Don't eat me」シグナルと呼ばれることもある。CD47の発現は、MYCの活性化によって上昇することが知られている（Casey, S. C., et al., Science, 2016, 352(6282):227-231.）。
　「SIRPα（signal regulatory protein α）」は、CD47の受容体として機能する膜タンパク質であり、マクロファージや樹状細胞等の貪食細胞の細胞表面上に発現する。SIRPαは、CD172aとしても知られている。
　本明細書において「CD47阻害剤」とは、CD47の機能を阻害する、及び／又はCD47の発現を抑制することが可能な薬剤を意味する。CD47阻害剤は、低分子化合物、ペプチド、又は核酸医薬であってもよい。ペプチドは、抗体又は抗体断片であってもよい。核酸医薬は、例えばアプタマーであってもよい。
　一実施形態において、CD47阻害剤は、抗CD47抗体又はその断片である。抗CD47抗体の例としては、マグロリマブ、AO-176、IBI188、IMC-002、AK117、ZL-1201、TQB2928、レムゾパリマブ（TJC4）、SRF231、CC-90002、HX009、IBI322、及びPF-07257876を挙げることができる。
　一実施形態において、CD47阻害剤は、SIRPαの細胞外領域を含むFc融合タンパク質である。本明細書において「SIRPαの細胞外領域を含むFc融合タンパク質」とは、SIRPαの細胞外領域及び免疫グロブリンのFc領域を含む融合ポリペプチドをいう。SIRPαの細胞外領域を含むFc融合タンパク質の例としては、TTI-621、TTI-622、エボルパセプト（ALX148）、及びSL-172154を挙げることができる。なお、エボルパセプトはSIRPαのN末端側断片とIgG1断片の融合タンパク質であり、SL-172154はSIRPa-Fc-CD40L融合タンパク質として知られている。
　一実施形態において、CD47阻害剤は、CD47遺伝子の発現を制御する核酸医薬である。CD47遺伝子の発現を制御する核酸医薬の例としては、アンチセンス核酸、siRNA、shRNA、及びmiRNAが挙げられる。例えばsiRNAは、短鎖二本鎖RNA分子であり、shRNAは、生体内でダイサーによってプロセシングされてsiRNAを生成することができるヘアピン型RNAである。siRNA及びshRNAは、例えばリポフェクタミン等のトランスフェクション試薬と共に、in vitro又はin vivoで細胞内に導入することができる。或いは、siRNA及びshRNAはベクターに組み込んで細胞内に導入することもできる。
　本明細書において「SIRPα阻害剤」とは、SIRPαの機能を阻害する、及び／又はSIRPαの発現を抑制することが可能な薬剤を意味する。SIRPα阻害剤は、低分子化合物、ペプチド、又は核酸医薬であってもよい。ペプチドは、抗体又は抗体断片であってもよい。核酸医薬は、例えばアプタマーであってもよい。
　一実施形態において、SIRPα阻害剤は、抗SIRPα抗体又はその断片である。抗SIRPα抗体の例としては、BI-765063/OSE172、GS-189、CC-95251、及びADU-1805を挙げることができる。
　一実施形態において、SIRPα阻害剤は、SIRPα遺伝子の発現を制御する核酸医薬である。SIRPα遺伝子の発現を制御する核酸医薬の例としては、アンチセンス核酸、siRNA、shRNA、及びmiRNAが挙げられる。
　CD47阻害剤やSIRPα阻害剤の公知の例については、Maute, R. et al., Immuno-oncology and Technology, 2022, 13(C):1-13等の文献を参照することができる。
　SIRPαの阻害は、CD47の阻害と同様に、マクロファージの貪食を亢進し得ることが知られている（Abdreheva, G. et al., J Immunol February 15, 2021, 206 (4) 712-721）。それ故、KRAS阻害剤と抗SIRPα抗体との併用は、KRAS阻害剤とCD47阻害剤との併用と同様に、KRAS阻害剤のKRAS変異型がんに対する治療効果を向上させることができる。
　本発明の一実施形態において、KRAS阻害剤並びにCD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤は、さらに免疫チェックポイント阻害剤と組み合わせて投与される。例えば、本発明のKRAS変異型がん治療剤は、CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤を有効成分として含み、CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤は、KRAS阻害剤及び免疫チェックポイント阻害剤と組み合わせて投与される。或いは、本発明のKRAS変異型がん治療剤は、KRAS阻害剤を有効成分として含み、KRAS阻害剤は、CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤並びに免疫チェックポイント阻害剤と組み合わせて投与される。
　本明細書において「免疫チェックポイント阻害剤」とは、がん細胞による宿主免疫応答の回避を阻害し得る分子を意味する。免疫チェックポイント阻害剤の例は、当技術分野において公知であり、例えばPD-1阻害剤、PD-L1阻害剤、CTLA-4阻害剤、Lag-3阻害剤、Tim-3阻害剤、TIGIT阻害剤、及びBTLA阻害剤が挙げられる。より具体的には、抗PD-1抗体又はその断片、抗PD-L1抗体又はその断片、抗CTLA-4抗体又はその断片、又は抗Lag-3抗体又はその断片であってもよく、具体例としてはペムブロリズマブ、ニボルマブ、アテゾリズマブ、デュルバルムマブ、アベルマブ、チスレリズマブ、セミプリマブ、ドスタルリマブ、トレメリムマブ、及びイピリムマブ等の抗体やその断片が挙げられる。
　本明細書において「組み合わせて投与する」又は「併用する」とは、原則として2以上の薬剤が同一個体に対して任意の方法で投与されることを意味し、組み合わせて投与される各薬剤の投与方法や投与時期は同一でも或いは異なっていてもよい。但し、2以上の分子を標的とする薬剤を多重特異性抗体や複合体等の単剤として投与することも可能であり、本明細書ではこの場合も「組み合わせて投与する」ことに含まれるものとする。なお、KRAS変異型がん治療剤の投与方法については、後述するKRAS変異型がん治療用医薬組成物についての説明に準じるものとし、ここでの説明は省略する。
　例えば、上述のCD47阻害剤又はSIRPα阻害剤と免疫チェックポイント阻害剤との組み合わせを二重特異性抗体として投与することが可能であり、そのような二重特異性抗体として抗CD47/PD-1二重特異性抗体、抗CD47/PD-L1二重特異性抗体、抗CD47/CTLA-4二重特異性抗体、抗SIRPα/PD-1二重特異性抗体、抗SIRPα/PD-L1二重特異性抗体、及び抗SIRPα/CTLA-4二重特異性抗体等が例示される。抗D47/PD-1二重特異性抗体又は抗CD47/PD-L1二重特異性抗体の具体例としては、HX009、IBI322、及びPF-07257876が挙げられる。
（KRAS変異型がん治療用医薬組成物）
　本発明の一態様において、KRAS変異型がん治療用医薬組成物が提供される。本発明のKRAS変異型がん治療用医薬組成物は、上述のいずれかのKRAS変異型がん治療剤を含み、KRAS変異型がんを治療することができる。
　本発明のKRAS変異型がん治療用医薬組成物は、必須の構成成分として有効成分を、また選択成分として薬学的に許容可能な担体、又は他の薬剤を包含する。本発明のKRAS変異型がん治療用医薬組成物は、有効成分のみで構成することもできる。しかし、剤形形成を容易にし、有効成分の薬理効果及び／又は剤形を維持するためには後述する薬学的に許容可能な担体を包含した医薬組成物として構成されていることが好ましい。
（１）本発明の医薬組成物を構成する成分
　本発明のKRAS変異型がん治療用医薬組成物を構成する各成分について具体的に説明をする。
　本発明のKRAS変異型がん治療用医薬組成物における有効成分は、KRAS変異型がん治療剤である。その構成については、上で既に詳述していることから、ここではその具体的な説明を省略する。なお、本発明のKRAS変異型がん治療用医薬組成物に含まれるKRAS変異型がん治療剤の数は限定せず、１つ又は複数であってもよい。
　「薬学的に許容可能な担体」とは、製剤技術分野において通常使用し得る溶媒及び／又は添加剤であって、生体に対して有害性がほとんどないか又は全くないものをいう。
　薬学的に許容可能な溶媒には、例えば、水、エタノール、プロピレングリコール、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類等が挙げられる。これらは、殺菌されていることが望ましく、必要に応じて血液と等張に調整されていることが好ましい。
　また、薬学的に許容可能な添加剤には、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、充填剤、乳化剤、流動添加調節剤、滑沢剤等が挙げられる。
　賦形剤としては、例えば、単糖、二糖類、シクロデキストリン及び多糖類のような糖（より具体的には、限定はしないが、グルコース、スクロース、ラクトース、ラフィノース、マンニトール、ソルビトール、イノシトール、デキストリン、マルトデキストリン、デンプン及びセルロースを含む）、金属塩（例えば、塩化ナトリウム、リン酸ナトリウム若しくはリン酸カルシウム、硫酸カルシウム、硫酸マグネシウム、炭酸カルシウム)、クエン酸、酒石酸、グリシン、低、中又は高分子量のポリエチレングリコール（PEG）、プルロニック、カオリン、ケイ酸、或いはそれらの組み合わせが挙げられる。
　結合剤としては、例えば、トウモロコシ、コムギ、コメ、若しくはジャガイモのデンプンを用いたデンプン糊、単シロップ、グルコース液、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、セラック及び／又はポリビニルピロリドン等が挙げられる。
　崩壊剤としては、例えば、前記デンプンや、乳糖、カルボキシメチルデンプン、架橋ポリビニルピロリドン、アガー、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、アルギン酸若しくはアルギン酸ナトリウム、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド又はそれらの塩が挙げられる。
　充填剤としては、例えば、前記糖及び／又はリン酸カルシウム（例えば、リン酸三カルシウム、若しくはリン酸水素カルシウム）が挙げられる。
　乳化剤としては、例えば、ソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステルが挙げられる。
　流動添加調節剤及び滑沢剤としては、例えば、ケイ酸塩、タルク、ステアリン酸塩又はポリエチレングリコールが挙げられる。
　上記の添加剤の他、必要に応じて溶解補助剤（可溶化剤）、懸濁剤、希釈剤、界面活性剤、安定剤、吸収促進剤（例えば、第４級アンモニウム塩類、ラウリル硫酸ナトリウム）、増量剤、保湿剤（例えば、グリセリン、澱粉）、吸着剤（例えば、澱粉、乳糖、カオリン、ベントナイト、コロイド状ケイ酸）、コーティング剤、保存剤、抗酸化剤、緩衝剤等を含むこともできる。
　本発明のKRAS変異型がん治療用医薬組成物は、上記有効成分が有する薬理効果を失わない範囲において、他の薬剤を含有することもできる。ここで「他の薬剤」とは、KRAS変異型がん治療剤と同様にKRAS変異型がんに対して治療効果を有する薬剤等が挙げられる。
（２）剤形
　本発明のKRAS変異型がん治療用医薬組成物の剤形は、有効成分である本発明のKRAS変異型がん治療剤を不活化させないか、させにくく、かつ投与後に生体内でその薬理効果を十分に発揮し得る剤形であれば特に限定しない。
　剤形は、その形態により液体剤形又は固体剤形（ゲルのような半固体剤形を含む）に分類できるが、本発明のKRAS変異型がん治療用医薬組成物は、そのいずれであってもよい。また剤形は投与方法により経口剤形と非経口剤形とに大別できるが、これに関してもいずれであってもよい。
　具体的な剤形としては、経口剤形であれば、例えば、懸濁剤、乳剤、及びシロップ剤のような液体剤形、散剤（粉剤、粉末剤、飴粉剤を含む）、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、舌下剤、及びトローチ剤等の固体剤形が挙げられる。また、非経口剤形であれば、例えば、注射剤、懸濁剤、乳剤等の液体剤形が挙げられる。
（３）投与方法
　本発明のKRAS変異型がん治療用医薬組成物は、KRAS変異型がんの治療のために、有効成分である本発明のKRAS変異型がん治療剤を生体に有効量投与することができる方法であれば、当該分野で公知のあらゆる方法を適用することができる。
　本明細書において「有効量」とは、有効成分がその機能を発揮する上で必要な量、すなわち、本発明では治療剤がKRAS変異型がんを治療する上で必要な量であって、かつそれを適用する生体に対して有害な副作用をほとんど又は全く付与しない量をいう。この有効量は、被験体の情報、投与経路、及び投与回数等の条件によって変化し得る。
　「被験体」又は「対象」とは、本発明のKRAS変異型がん治療剤やKRAS変異型がん治療用医薬組成物の適用対象となる動物個体をいう。具体的には哺乳動物であり、例えば霊長類、ペット動物、家畜類、競技用動物等を含む哺乳動物であり、特にヒトが好ましい。「被験体の情報」とは、被験体の様々な個体情報であって、例えば、被験体の年齢、体重、性別、全身の健康状態、薬剤感受性、服用中の医薬品の有無等を含む。有効量、及びそれに基づいて算出される投与量は、個々の被験体の情報等に応じて医師又は獣医師の判断によって決定される。KRAS変異型がんの治療の十分な効果を得る上で、本発明のKRAS変異型がん治療用医薬組成物を大量投与する必要がある場合、被験者に対する負担軽減のために、数回に分割して投与することもできる。
　本発明のKRAS変異型がん治療用医薬組成物の投与方法は、全身投与又は局所投与のいずれであってもよい。全身投与の例としては、静脈注射等の血管内注射や経口投与等が挙げられる。また局所投与の例としては、腫瘍内投与、直腸投与、腹腔内投与等が挙げられる。好ましい投与方法は、静脈投与、皮下投与、腫瘍内投与、又は経口投与である。例えば、経口投与の場合には、有効成分を消化酵素による分解から保護するために適当なDDS（薬剤送達システム）を用いる等、適切な処置を施すことが好ましい。
　本発明のKRAS変異型がん治療用医薬組成物を投与又は摂取する場合、その投与量又は摂取量は、対象の年齢、体重、症状、健康状態、組成物の種類等に応じて、適宜選択される。例えば、KRAS変異型がん治療剤の重量に基づいて、0.001 mg/kg/日～1000 mg/kg/日、0.01 mg/kg/日～500 mg/kg/日、0.1 mg/kg/日～200 mg/kg/日、1 mg/kg/日～100 mg/kg/日、5 mg/kg/日～50 mg/kg/日、又は10 mg/kg/日であってもよい。例えば0.0001～100 mg/kg体重の範囲で1日1回～数回、2日毎、3日毎、1週間毎、2週間毎、3週間毎、4週間毎、1か月毎、2か月毎、半年毎、又は1年毎に投与することも可能である。
　一実施形態において、本発明のKRAS変異型がん治療用医薬組成物は、CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤を含み、CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤は、KRAS阻害剤と組み合わせて投与される。本実施形態において、KRAS阻害剤並びにCD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤は、さらに免疫チェックポイント阻害剤と組み合わせて投与することもできる。
　一実施形態において、本発明のKRAS変異型がん治療用医薬組成物は、KRAS阻害剤を含み、KRAS阻害剤は、CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤と組み合わせて投与される。本実施形態において、KRAS阻害剤並びにCD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤は、さらに免疫チェックポイント阻害剤と組み合わせて投与することもできる。
　一実施形態において、本発明のKRAS変異型がん治療用医薬組成物は、CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤並びに免疫チェックポイント阻害剤を含み、CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤並びに免疫チェックポイント阻害剤は、KRAS阻害剤と組み合わせて投与される。
　上記いずれかの実施形態において、KRAS阻害剤は経口投与することができ、並びに／又はCD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤は静脈投与することができる。さらに、免疫チェックポイント阻害剤を静脈投与してもよい。
　さらなる実施形態において、CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤、並びに免疫チェックポイント阻害剤を共投与することができる。共投与は、静脈投与であってもよい。
（４）対象疾患
　本発明の医薬組成物が対象とするがんは、KRAS変異型がんである。KRAS変異型がんは、変異したKRASタンパク質を発現する任意のがんが包含され、例えば固形がんである。KRAS変異型の固形がんは、特に制限されないが、例えばKRAS変異型の肺がん（例：非小細胞肺がん）、大腸がん（例：結腸直腸がん）、膵臓がん、胆管がん、胆嚢がん、子宮内膜がん、子宮頚がん、卵巣がん、膀胱がん、又は甲状腺がんであってもよい。
（KRAS変異型がん治療方法）
　本発明の一態様において、KRAS変異型がん治療方法が提供される。本発明のKRAS変異型がん治療方法は、KRAS阻害剤を対象に投与する工程、並びにCD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤を対象に投与する工程を必須工程として含み、免疫チェックポイント阻害剤を対象に投与する工程を選択工程として含む。対象はヒト又は非ヒト動物であってもよい。CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤を対象に投与する工程は、CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤と免疫チェックポイント阻害剤とを共投与する工程であってもよい。
　KRAS阻害剤を対象に投与する工程では、通常は0.01 g～10 g、0.1 g～5 g、又は0.5 g～2 gのKRAS阻害剤を1日1回～数回、2日毎、3日毎、1週間毎、2週間毎に投与することができる。KRAS阻害剤の投与は、例えば経口投与である。
　CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤を対象に投与する工程では、通常は0.1 mg～10 g、1 mg～5 g、10 mg～2 g、100 mg～1 g、又は200 mg～500 mgのCD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤を週1回～数回、2週間毎、3週間毎、4週間毎、1月毎、2月毎、半年毎、又は1年毎に投与することができる。CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤の投与は、例えば静脈投与である。
　免疫チェックポイント阻害剤を対象に投与する工程では、通常は0.1 mg～10 g、1 mg～5 g、10 mg～2 g、100 mg～1 g、又は200 mg～500 mgの免疫チェックポイント阻害剤を週1回～数回、2週間毎、3週間毎、4週間毎、1月毎、2月毎、半年毎、又は、1年毎に投与することができる。免疫チェックポイント阻害剤の投与は、例えば静脈投与である。
（他の態様）
　CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤からなる、又はそれを含む、KRAS変異型がんに対するKRAS阻害剤の治療効果増強剤もまた提供される。また、CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤からなる、又はそれを含む、KRAS変異型がんに対するKRAS阻害剤及び免疫チェックポイント阻害剤の併用治療効果増強剤もまた提供される。
　KRAS変異型がんの治療における、上述のいずれかのKRAS変異型がん治療剤の使用も提供される。また、KRAS阻害剤の治療効果を増強する使用のためのCD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤もまた提供される。
　さらにまた、KRAS変異型がんを治療するための医薬の製造における、KRAS阻害剤の使用もまた提供され、ここでKRAS阻害剤はCD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤と組み合わせて投与される。当該使用では、KRAS阻害剤並びにCD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤は、さらに免疫チェックポイント阻害剤と組み合わせて投与することもできる。また、KRAS変異型がんを治療するための医薬の製造における、CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤の使用もまた提供され、ここでCD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤はKRAS阻害剤と組み合わせて投与される。当該使用では、CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤並びにKRAS阻害剤は、さらに免疫チェックポイント阻害剤と組み合わせて投与することもできる。
＜実施例１：KRAS阻害剤によるマクロファージ集簇促進効果の検証＞
（目的）
　KRAS G12C変異に対する阻害剤は2021年に承認された。しかしながら、その単剤でのKRAS変異腫瘍に対する奏効率は40％程度にとどまっており、奏効率をさらに改善する方法として免疫チェックポイント阻害剤との併用療法が有望視されている。本実施例では、KRAS G12C阻害剤が腫瘍免疫環境に与える影響を検討するために、腫瘍組織におけるマクロファージの動態を検討する。
（方法と結果）
　KRAS G12C変異を有するがん細胞株として、KRAS G12C変異及びNRAS変異を有するLCCマウス肺がん細胞株（JCRB, JCRB1348）において、NRAS遺伝子をノックアウトした細胞株（以下、単に「LLC細胞株」と称する）を作製した。このLLC細胞株をRPMI培地で培養した後、5×105個の細胞をマウス（C57BL/6JJcl、雄、4～6週齢）の胸腔に移植することで胸腔播種モデルを作製した。細胞移植から7日目～10日目、50 mg/kgのKRAS G12C阻害剤Sotorasib（MCE, HY-114277）を経口投与で毎日100 μL投与した。
　KRAS G12C阻害剤から3日目にマウスから腫瘍組織を単離し、腫瘍組織から切片を作製し、マクロファージ特異的マーカーであるF4/80（APC anti-mouse F4/80, BioLegend, 123116）を用いて染色した。
　結果を図1に示す。KRAS G12C阻害剤を投与しなかった対照群では、腫瘍組織においてマクロファージの集簇は認められなかった。一方で、KRAS G12C阻害剤の投与群では、マクロファージが腫瘍組織に顕著に集簇することが明らかになった。この結果から、KRAS G12C阻害剤がマクロファージの腫瘍組織への浸潤を誘導することが明らかになった。
＜実施例２：KRAS阻害剤によるCD47発現誘導効果の検証＞
（目的）
　KRAS阻害剤により誘導される免疫チェックポイント関連分子を検討する。
（方法と結果）
（１）CD47の同定
　KRAS G12C変異肺がん細胞株であるNCI-H358（ATCC, CRL-5807）を1 μMのKRAS G12C阻害剤（Sotorasib）を含むRPMI培地、又はKRAS G12C阻害剤を含まない培地で培養した。培養後の細胞からRNAを回収し、RNAシークエンスによりRNAの発現を網羅的に解析する検討を行った結果、KRAS G12C阻害剤の存在下で発現量が大きく増加する遺伝子として、CD47遺伝子を同定した。
（２）ウエスタンブロッティング
　KRAS G12C変異を有する肺がん細胞株として、NCI-H358及びLU65（JCRB, JCRB0079）にKRAS G12C阻害剤を曝露させた後、72時間後にタンパク質を抽出した。ウエスタンブロッティングによりCD47を検出した結果を図2に示す。NCI-H358及びLU65のいずれにおいても、KRAS G12C阻害剤への暴露によりCD47タンパク質発現量が顕著に増加することが明らかになった。
　同様に、KRAS G12D変異を有する大腸がん細胞株SNU-407に1 μMのKRAS G12D阻害剤（MRTX1133）を曝露させた後、72時間後にタンパク質を抽出した。ウエスタンブロッティングによりCD47を検出した結果を図3に示す。KRAS G12D阻害剤への暴露によりCD47タンパク質発現量が顕著に増加することが明らかになった。
（３）FACS
　次にFACSにより、CD47分子の細胞表面における発現変化を検討した。KRAS G12C変異肺がん細胞株であるLLC、NCI-H358、及びLU65の各細胞株に対してKRAS G12C阻害剤を曝露させ、72時間後にパラホルムアルデヒドで固定し、CD47抗体及び蛍光2次抗体を用いて発現を検出した結果を図4に示す。LLC、NCI-H358、及びLU65のいずれにおいても、KRAS G12C阻害剤の曝露後にCD47の細胞表面発現が増加することが明らかになった。
　CD47はマクロファージの貪食を阻害する「Don't eat meシグナル」として知られている。一般的には、CD47はKRASの下流でmycによって制御されていることが知られており、KRAS阻害剤によりCD47の発現は抑制されると考えられる。しかしながら、実施例１～２の結果から、KRAS G12C阻害剤はマクロファージの腫瘍組織への浸潤を誘導する一方で、腫瘍細胞のCD47発現を増強することが明らかとなった。このことから、KRAS G12C阻害剤は、CD47発現の増強に基づいて「Don't eat meシグナル」を増強し、免疫チェックポイント阻害剤耐性に寄与している可能性が考慮された。
＜実施例３：KRAS阻害剤/抗PD-L1抗体併用療法耐性における抗CD47抗体の抗腫瘍効果の検証＞
（目的）
　実施例１～２の結果から、KRAS阻害剤によりがん細胞においてCD47の発現が上昇することが明らかになった。CD47の発現の上昇は「Don't eat meシグナル」の増強をもたらし、免疫チェックポイント阻害剤の耐性に寄与する可能性がある。そこで本実施例では、KRAS G12C阻害剤に対してCD47阻害剤を併用することによって、免疫チェックポイント阻害剤耐性を克服できるかを検討する。
（方法と結果）
　実施例１と同様の方法で胸腔播種モデルを作製した後に、KRAS G12C阻害剤単剤群では上記の方法で、「KRAS G12C阻害剤／抗PD-L1抗体投与群」では、KRAS G12C阻害剤に加えて、2.5 mg/mLの抗PD-L1抗体テセントリク（中外製薬, 21K010Y）を腹腔内投与によってマウスに週2回100 μL投与し、「KRAS G12C阻害剤／抗CD47抗体／抗PD-L1抗体投与群」では、KRAS G12C阻害剤に加えて、上述の抗PD-L1抗体及び0.5mg/mLの抗CD47抗体（InVivoMAb anti-mouse/human/rat CD47；BioXcell, BE0283）を腹腔内投与によってマウスに週3回100 μL投与した。
　上記治療を行う過程で吸入麻酔下にて週2回CT撮影を行い、腫瘍組織及び貯留胸水の体積を算出し、経時的変化を測定した結果を図5に示す。KRAS G12C阻害剤／抗PD-L1抗体投与群において認められていた薬剤耐性が、抗CD47抗体を併用したKRAS G12C阻害剤／抗CD47抗体／抗PD-L1抗体投与群で克服できていることが明らかとなった。
　以上の結果から、KRAS G12C変異を有する腫瘍に対し、KRAS G12C阻害剤、抗PD-L1抗体、抗CD47抗体の3剤を併用することによって、抗腫瘍効果を飛躍的に改善できることが実証された。
＜実施例４：生存期間の解析＞
（目的）
　KRAS G12C阻害剤に対してCD47阻害剤を併用することによって、胸腔播種モデルの生存期間が増加することを検証する。
（方法と結果）
　実施例3と同様の方法で胸腔播種モデルを作製し、実施例3と同様の用量及び投与頻度で各種薬剤を以下の投与群に投与した：Control群（n=10）、KRAS G12C阻害剤（Sotorasib）投与群（n=10）、抗PD-L1抗体（Atezolizumab）投与群（n=9）、抗CD47抗体投与群（n=10）、KRAS G12C阻害剤／抗PD-L1抗体投与群（n=12）、抗PD-L1抗体／抗CD47抗体投与群（n=13）、KRAS G12C阻害剤／抗CD47抗体投与群（n=12）、及びKRAS G12C阻害剤／抗CD47抗体／抗PD-L1抗体投与群（n=13）。LLC胸腔播種モデルに対する治療開始日を基準として、1年間に亘ってマウスの生存割合を解析した。
　結果を図6に示す。KRAS G12C阻害剤／抗CD47抗体／抗PD-L1抗体投与群では驚くべきことに半数以上のマウスが1年以上に亘って生存し、KRAS G12C阻害剤／抗PD-L1抗体投与群、抗PD-L1抗体／抗CD47抗体投与群、KRAS G12C阻害剤／抗CD47抗体投与群と比較して、生存期間が有意に増加することが示された（Log-rank検定、p < 0.001）。
　以上の結果から、KRAS G12C阻害剤、抗PD-L1抗体、抗CD47抗体の3剤を併用することによって、KRAS G12C変異を有する腫瘍モデルマウスの生存期間を飛躍的に延長できることが実証された。
＜実施例５：汎KRAS阻害剤によるCD47発現誘導効果の検証＞
（目的）
　汎KRAS阻害剤について腫瘍細胞のCD47発現を増強する効果を検証する。
（方法と結果）
　KRAS G12C変異肺がん細胞株であるNCI-H358及びLU65の各細胞株に対して1μMの汎RAS阻害剤（BI-2865）を曝露させ、72時間後にパラホルムアルデヒドで固定し、CD47抗体及び蛍光2次抗体を用いてFACSにより発現を検出した。
　結果を図7に示す。汎KRAS阻害剤の曝露後、NCI-H358及びLU65の両細胞株でCD47の細胞表面発現が増加することが明らかになった。この結果は実施例２の結果と共に、KRAS阻害剤はその種類に依らず腫瘍細胞のCD47発現を増強することを示している。
　本明細書で引用した全ての刊行物、特許及び特許出願はそのまま引用により本明細書に組み入れられるものとする。

Claims (17)

  1. 　CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤を有効成分として含む、KRAS変異型がん治療剤であって、
    　前記CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤は、KRAS阻害剤と組み合わせて投与される、前記KRAS変異型がん治療剤。
  2. 　KRAS阻害剤を有効成分として含む、KRAS変異型がん治療剤であって、
    　前記KRAS阻害剤は、CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤と組み合わせて投与される、前記KRAS変異型がん治療剤。
  3. 　前記CD47阻害剤が、抗CD47抗体又はその断片、SIRPαの細胞外領域を含むFc融合タンパク質、又はCD47遺伝子の発現を制御する核酸医薬である、請求項１又は２に記載のKRAS変異型がん治療剤。
  4. 　前記抗CD47抗体が、マグロリマブ、AO-176、IBI188、IMC-002、AK117、ZL-1201、TQB2928、レムゾパリマブ、SRF231、CC-90002、HX009、IBI322、及びPF-07257876からなる群から選択される、請求項３に記載のKRAS変異型がん治療剤。
  5. 　前記Fc融合タンパク質が、TTI-621、TTI-622、エボルパセプト、又はSL-172154である、請求項３に記載のKRAS変異型がん治療剤。
  6. 　前記SIRPα阻害剤が、抗SIRPα抗体又はその断片、又はSIRPα遺伝子の発現を制御する核酸医薬である、請求項１又は２に記載のKRAS変異型がん治療剤。
  7. 　前記抗SIRPα抗体が、BI-765063/OSE172、GS-189、CC-95251、又はADU-1805である、請求項６に記載のKRAS変異型がん治療剤。
  8. 　前記KRAS阻害剤が、KRAS G12C阻害剤、KRAS G12D阻害剤、KRAS G12V阻害剤、KRAS G13C阻害剤、及び汎KRAS阻害剤からなる群から選択される、請求項１又は２に記載のKRAS変異型がん治療剤。
  9. 　前記KRAS G12C阻害剤が、ソトラシブ、アダグラシブ、JDQ443、及びLY3537982からなる群から選択される、請求項８に記載のKRAS変異型がん治療剤。
  10. 　前記汎KRAS阻害剤が、BI1701963、RMC-6236、LUNA18、BI-2865、及びBI-2493からなる群から選択される、請求項８に記載のKRAS変異型がん治療剤。
  11. 　前記KRAS阻害剤並びに前記CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤が、さらに免疫チェックポイント阻害剤と組み合わせて投与される、請求項１又は２に記載のKRAS変異型がん治療剤。
  12. 　前記免疫チェックポイント阻害剤が、PD-1阻害剤、PD-L1阻害剤、又はCTLA-4阻害剤である、請求項１１に記載のKRAS変異型がん治療剤。
  13. 　請求項１又は２に記載のKRAS変異型がん治療剤を含む、KRAS変異型がん治療用医薬組成物。
  14. 　前記KRAS変異型がんが、肺がん、大腸がん、膵臓がん、及び胆管がんからなる群から選択される、請求項１３に記載のKRAS変異型がん治療用医薬組成物。
  15. 　前記CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤が、静脈投与される、請求項１３に記載のKRAS変異型がん治療用医薬組成物。
  16. 　前記KRAS阻害剤が、経口投与される、請求項１３に記載のKRAS変異型がん治療用医薬組成物。
  17. 　CD47阻害剤及び／又はSIRPα阻害剤からなる、KRAS変異型がんに対するKRAS阻害剤の治療効果増強剤。
PCT/JP2023/041919 2022-11-24 2023-11-22 Ｋｒａｓ変異型がん治療剤 Ceased WO2024111609A1 (ja)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2024560177A JPWO2024111609A1 (ja) 2022-11-24 2023-11-22

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2022-187560 2022-11-24
JP2022187560 2022-11-24

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2024111609A1 true WO2024111609A1 (ja) 2024-05-30

Family

ID=91196180

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2023/041919 Ceased WO2024111609A1 (ja) 2022-11-24 2023-11-22 Ｋｒａｓ変異型がん治療剤

Country Status (2)

Country Link
JP (1) JPWO2024111609A1 (ja)
WO (1) WO2024111609A1 (ja)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US12458647B2 (en) 2022-09-29 2025-11-04 Guangzhou Joyo Pharmatech Co., Ltd. Macrocyclic derivative and use thereof

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2020106647A2 (en) * 2018-11-19 2020-05-28 Amgen Inc. Combination therapy including a krasg12c inhibitor and one or more additional pharmaceutically active agents for the treatment of cancers
JP2022548791A (ja) * 2019-09-24 2022-11-21 ミラティ セラピューティクス， インコーポレイテッド 組み合わせ療法
WO2023165615A1 (en) * 2022-03-04 2023-09-07 I-Mab Biopharma Co., Ltd. Combination therapies comprising a kras inhibitor for the treatment of cancer

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2020106647A2 (en) * 2018-11-19 2020-05-28 Amgen Inc. Combination therapy including a krasg12c inhibitor and one or more additional pharmaceutically active agents for the treatment of cancers
JP2022548791A (ja) * 2019-09-24 2022-11-21 ミラティ セラピューティクス， インコーポレイテッド 組み合わせ療法
WO2023165615A1 (en) * 2022-03-04 2023-09-07 I-Mab Biopharma Co., Ltd. Combination therapies comprising a kras inhibitor for the treatment of cancer

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
HU HUANHUAN, CHENG RONGJIE, WANG YANBO, WANG XIAOJUN, WU JIANZHUANG, KONG YAN, ZHAN SHOUBIN, ZHOU ZHEN, ZHU HONGYU, YU RANRAN, LIA: "Oncogenic KRAS signaling drives evasion of innate immune surveillance in lung adenocarcinoma by activating CD47", JOURNAL OF CLINICAL INVESTIGATION, vol. 133, no. 2, 17 January 2023 (2023-01-17), pages 1 - 18, XP093088510, DOI: 10.1172/JCI153470 *
JUDE CANON, KAREN REX, ANNE Y. SAIKI, CHRISTOPHER MOHR, KEEGAN COOKE, DHANASHRI BAGAL, KEVIN GAIDA, TYLER HOLT, CHARLES G. KNUTSON: "The clinical KRAS(G12C) inhibitor AMG 510 drives anti-tumour immunity", NATURE, vol. 575, no. 7781, 7 November 2019 (2019-11-07), pages 217 - 223, XP055770919, DOI: 10.1038/s41586-019-1694-1 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US12458647B2 (en) 2022-09-29 2025-11-04 Guangzhou Joyo Pharmatech Co., Ltd. Macrocyclic derivative and use thereof

Also Published As

Publication number Publication date
JPWO2024111609A1 (ja) 2024-05-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Wang et al. Role of tumor microenvironment in cancer progression and therapeutic strategy
US20230406958A1 (en) Methods and compositions relating to anti-chi3l1 antibody reagents
JP6894952B2 (ja) 癌治療のためのｐｄ−１拮抗薬およびｖｅｇｆｒ阻害剤の組み合わせ
JP6774421B2 (ja) がんの治療のための方法、組成物、及びキット
RU2702332C2 (ru) Антитела к в7-н1 и к ctla-4 для лечения немелкоклеточного рака легкого
US20210246208A1 (en) Combined inhibition of pd-1/pd-l1, tgfb and dna-pk for the treatment of cancer
Do et al. First-in-human, first-in-class, phase I trial of the fucosylation inhibitor SGN-2FF in patients with advanced solid tumors
JP6865177B2 (ja) 医薬組み合わせおよびその使用
JP2022064906A (ja) ｕＰＡＲＡＰを標的にする抗体薬物複合体
Chen et al. A bispecific antibody targeting HER2 and PD-L1 inhibits tumor growth with superior efficacy
Shibata et al. Y-box binding protein-1 contributes to both HER2/ErbB2 expression and lapatinib sensitivity in human gastric cancer cells
JP2021534094A (ja) 未分化リンパ腫キナーゼ阻害剤と組み合わせてｅｇｆ／ｅｇｆｒ経路を抑制するための方法および組成物
JP2024028805A (ja) がん処置のための坑ｉｌ－８抗体及び坑ｐｄ－１抗体を用いる組合せ治療
JPWO2020027100A1 (ja) 抗体−薬物コンジュゲート投与による転移性脳腫瘍の治療
US20220195059A1 (en) Rank Pathway Inhibitors in Combination with CDK Inhibitors
JP2022504468A (ja) 転移性膵臓腺癌の処置
WO2024111609A1 (ja) Ｋｒａｓ変異型がん治療剤
KR20240082379A (ko) 암 치료 방법 및 이의 약제학적 조성물
JP2023512276A (ja) 癌及び癌転移の治療のための併用療法
Liu et al. Development and evaluation of a novel anti-colorectal cancer monoclonal antibody, WL5
WO2024054848A1 (en) Enhancement of phagocytosis
US20210214442A1 (en) Neoadjuvant cancer treatment with immunotoxin and checkpoint inhibitor combination
CN119604533A (zh) 抗紧密连接蛋白-1抗体治疗胆管癌的用途
WO2025088835A1 (ja) ヒト化抗ｃｋａｐ４抗体又はその抗原結合性断片
WO2024101382A1 (ja) 免疫チェックポイントの調節に用いるための組成物

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 23894613

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2024560177

Country of ref document: JP

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 23894613

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1