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WO2024105265A1 - Limosilactobacillus mucosae et désordres nécessitant un accroissement du niveau de glp-1 - Google Patents

Limosilactobacillus mucosae et désordres nécessitant un accroissement du niveau de glp-1 Download PDF

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WO2024105265A1
WO2024105265A1 PCT/EP2023/082290 EP2023082290W WO2024105265A1 WO 2024105265 A1 WO2024105265 A1 WO 2024105265A1 EP 2023082290 W EP2023082290 W EP 2023082290W WO 2024105265 A1 WO2024105265 A1 WO 2024105265A1
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WO
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mucosae
subjects
strain
cncm
subject
Prior art date
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PCT/EP2023/082290
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English (en)
Inventor
Isabelle Savary-Auzeloux
Muriel Thomas
Christophe Chassard
Muriel GIRON
Dominique Dardevet
Marianne JARZAGUET
Camille MAYEUR
Françoise JOLY
Stéphanie BORNES
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Assistance Publique Hopitaux de Paris APHP
Universite Clermont Auvergne
Institut Enseignement Superieur et Recherche en Alimentation Sante Animale Sciences Agronomiques et Environnement
Universite Paris Cite
Institut des Sciences et Industries du Vivant et de lEnvironnement AgroParisTech
Universite Paris Saclay
Institut National de Recherche pour lAgriculture lAlimentation et lEnvironnement
Original Assignee
Assistance Publique Hopitaux de Paris APHP
Universite Clermont Auvergne
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Universite Paris Saclay
Institut National de Recherche pour lAgriculture lAlimentation et lEnvironnement
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    • C12R2001/865—Saccharomyces cerevisiae

Definitions

  • the present invention relates to new probiotic and prebiotic agents making it possible to stimulate the synthesis of GLP-1 by intestinal cells.
  • the invention relates to a bacterial strain of the species Limosilactobacillus mucosae, or a lysate or culture supernatant thereof for its use in the prevention and/or treatment of disorders requiring an increase in the level of GLP- 1 in a subject in need, said disorders being chosen from (i) a disorder linked to dysregulation of insulin sensitivity and/or blood sugar and/or (ii) loss of muscle mass and/or muscle function .
  • the invention concerns the non-therapeutic use of a bacterial strain of the species Limosilactobacillus mucosae, to maintain or increase muscle mass and/or function in a subject in need, in particular in a subject selected from a malnourished subject, an elderly subject, in particular a malnourished elderly subject, and a subject practicing intense physical exercise.
  • the invention concerns the bacterial strain Limosilactobacillus mucosae deposited with the CNCM under accession number CNCM 1-5661.
  • GLP-1 a digestive peptide produced by the enteroendocrine cells of the distal ileum and the colon following ingestion of the meal, has numerous metabolic effects including the regulation of insulin secretion by the pancreas (but also of food intake and transit ) (Laurindo et al. GLP-la: Going beyond Traditional Use. Int J Mol Sci. 2022 Jan 10;23(2)).
  • GLP-1 analogues are currently used to improve glucose tolerance in patients and a role for GLP-1 in Parkinson's disease and the regulation of mood disorders is even mentioned.
  • GLP1 receptor agonists are frequently used to treat type II diabetes and obesity (Laurindo et al. GLP-la: Going beyond Traditional Use. Int J Mol Sci. 2022 Jan 10;23(2).
  • Alzheimer's Femminella et al., “Evaluating the Effects of the Novel GLP-1 Analogue Liraglutide in Alzheimer's Disease: Study Protocol for a Randomized Controlled Trial (ELAD Study).” Trials 20, no 1 (April 3, 2019): 191) or Parkinson's disease (Athauda et al., “Exenatide Once Weekly versus Placebo in Parkinson's Disease: A Randomised, Double-Blind, Placebo-Controlled Trial”. Lancet (London , England) 390, no 10103 (October 7, 2017): 1664 75).
  • GLP-1 agonists could have a beneficial impact on body composition, particularly on the preservation of muscle mass, including, but not limited to, in obese or diabetic individuals (Osaka et al ., “Favorable Appendicular Skeletal Muscle Mass Changes in Older Patients With Type 2 Diabetes Receiving GLP-1 Receptor Agonist and Basal Insulin Co-Therapy”. , “Improvement of Muscle Wasting by Glucagon-like Peptide-1 Receptor Agonist in Muscle Atrophy”.
  • L. reuteri through different mechanisms and metabolites, is capable of controlling body weight and obesity, or improving insulin sensitivity and glucose homeostasis (Abuqwider et al. Limosilactobacillus reuteri in Health and Disease 2022, 10, 522). Furthermore, it has been demonstrated, for example, that the bacterial strain L.
  • the invention relates to a bacterial strain of the species Limosilactobacillus mucosae, or a lysate or a culture supernatant thereof, for its use in the prevention and/or treatment of disorders requiring an increase in the production of GLP-1 in a subject in need, said disorders being chosen from (i) a disorder linked to dysregulation of insulin sensitivity and/or blood sugar and (ii) loss of muscle mass and/or of muscle function.
  • the subject in need is a subject having an indication for administration based on GLP-1 receptor agonists.
  • a subject having an indication for administration based on GLP-1 agonists is chosen from the list consisting of insulin-resistant subjects such as diabetic subjects, overweight subjects, in particular obese subjects, subjects having undergone metabolic surgery, subjects seeking to regulate their appetite, subjects suffering from liver diseases, subjects suffering from cardiovascular pathologies, in particular suffering from cardiovascular pathologies linked to diabetes, subjects suffering from inflammation, in particular inflammation linked to diabetes and/or metabolic syndrome, affected subjects by sarcopenia, in subjects affected by cachexia; and subjects suffering from neurodegenerative diseases.
  • the disorder is a disorder linked to dysregulation of insulin sensitivity and/or blood sugar chosen from prediabetes, type 1 diabetes and type 2 diabetes.
  • the disorder is a loss of muscle mass and/or function and in that the subject in need is chosen from elderly subjects affected by sarcopenia, overweight subjects and obese subjects affected by sarcopenic obesity and subject to a diet, diabetic or prediabetic subjects, and/or subjects affected by cachexia, in particular linked to cancer, inflammatory bowel disease or chronic obstructive pulmonary disease, to immobilization, in a situation of “serious burns”, septic or having suffered a viral infection, in a convalescence and/or immobilization, and/or resection of the intestine or intestinal malabsorption.
  • the bacterial strain is chosen from the strain of the species L. mucosae deposited with the CNCM under the accession number CNCM 1-5661, the strain of the species L. mucosae deposited with the DSM under the accession number DSM 13345, the strain of the species L. mucosae deposited with the DSM under the accession number DSM 13346, the strain of the species L. mucosae deposited with the DSM under the accession number DSM 102820, or a mixture thereof, and in particular is the strain of the species Z. mucosae deposited with the CNCM under the accession number CNCM 1-5661.
  • the bacteria of the species L. mucosae are in a living or dead form, preferably in a living form.
  • the bacterial strain may be included in a composition comprising a physiologically acceptable medium, in particular in an oral composition, and more particularly in an oral composition chosen from the group consisting of a food product, a drink, a pharmaceutical product, a nutraceutical, a food additive, a food supplement, a dairy product and a living biotherapeutic product (LBPs).
  • a physiologically acceptable medium in particular in an oral composition, and more particularly in an oral composition chosen from the group consisting of a food product, a drink, a pharmaceutical product, a nutraceutical, a food additive, a food supplement, a dairy product and a living biotherapeutic product (LBPs).
  • the composition further comprises one or more other probiotic bacterial strains, in particular chosen from the species Bifidobacterium longum, Bifidobacterium lactis, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium adolescentis, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus salivarius , Lactococcus lactis, Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis, Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces boulardii, Faecalibacterium prausnitzii, Akkermansia muciniphila, Blautia faecis, Faecalibacteium prausnitzii, Streptococcus Thermophilus or mixtures thereof, preferably chosen from the group consisting of Bifi
  • composition further comprises one or more prebiotics.
  • the invention relates to the non-therapeutic use of a bacterial strain of the species Limosilactobacillus mucosae, or a lysate or a culture supernatant thereof, in particular as defined according to the invention, for maintain or increase muscle mass and/or function in a subject in need, in particular in a subject selected from a malnourished subject, an elderly subject, in particular a malnourished elderly subject, and a subject practicing intense physical exercise.
  • the invention concerns the bacterial strain Limosilactobacillus mucosae deposited with the CNCM under accession number CNCM 1-5661.
  • FIG 1 represents the concentration of GLP-1 in the supernatant of intestinal neuroendocrine cells from SCT-1 mice after 4 hours of incubation in the presence of the different bacteria and conditions tested.
  • the abscissa axis represents the different conditions tested, namely, from left to right: strain 1 (L. casei 7), strain 2 (L. casei 2), strain 3 (L. camelliae), strain 4 (L. salivarius), strain 5 (L. rhamnosus), strain 6 (L. reuleri), strain CNCM 1-5661 (L. mucosae) and control (negative - in sterile cell medium).
  • the y axis provides the GLP-1 concentration in pg/mL.
  • FIG 2 represents the concentration of GLP-1 in the supernatant of intestinal neuroendocrine cells from SCT-1 mice as a function of the incubation time in the presence of the strain CNCM 1-5661 (L. mucosae).
  • the abscissa axis represents the incubation time, namely, from left to right: 3 hours of incubation, 4 hours of incubation and 5 hours.
  • the y axis provides the GLP-1 concentration in pg/mL.
  • FIG 3 represents the concentration of GLP-1 in the supernatant of intestinal neuroendocrine cells from SCT-1 mice after 3 hours of incubation in the presence of different bacteria of the species L. mucosae at different bacterial concentrations.
  • the abscissa axis represents the different conditions tested, namely, from left to right: the control (negative control, sterile cell medium), the Lacticaseibacillus casei strain (strain A - negative control, ⁇ 5.10 9 CFU/mL), the strain CNCM 1-5661 (strain B - positive control, -5.10 9 CFU/mL), strain CNCM 1-5661 diluted 1/10 (strain B diluted - -5.10 8 CFU/mL), strain DSM 13345 (strain C - -2.10 9 CFU/mL), strain DSM 13345 diluted 1/10 (strain C diluted - -2.10 8 CFU/mL), strain DSM 13346 (strain D — 4.10 9 CFU/m
  • the y axis provides the GLP-1 concentration in pg/mL. Significant difference (P ⁇ 0.05). Same comment as above, there is a clear difference between the total absence of secretion detected (for the negative control conditions) and the detectable secretion of GLP-1 in the conditions with Z. mucosae bacteria, all strains combined, but no statistics were calculated (not enough data) and did not seem necessary for the results.
  • FIG 4 represents the weight of the muscles of the hind leg of rats (in mg/g of rat) for different groups of aged rats (20 months) after one month of study.
  • the groups of rats studied are, from left to right, on the x-axis: rats fed ad libitum (AL), rats restricted to 75-80% of ad libitum (R), rats restricted and supplemented in Z. mucosae strain CNCM-I5661 (R+L mucosae 15561), rats restricted and supplemented with Z. casei (R+L casei).
  • the inventors have carried out in-depth work to identify the capacity of a species of bacteria, the Limosilactobacillus mucosae species, to treat and/or prevent disorders requiring an increase in the production of GLP-1 in a subject in need. .
  • Limosilactobacillus mucosae is abundant in patients with short bowel syndrome (Joly et al, biochemistry 2010; PMID: 20172013) and is capable of colonizing a tract virgin digestive (axenic animal) after fecal transfer (Gillard et al; Front Physiol. 2017); this indicates that this species is a digestive tract commensal.
  • This ability of Limosilactobacillus mucosae to increase the synthesis of the intestinal peptide GLP-1 and to be present in the digestive tract is important because this peptide has numerous metabolic pleiotropic effects in the host, in particular, it improves insulin secretion. by the pancreas, promotes glucose tolerance and therefore optimizes/improves the energy and nitrogen metabolisms of the host.
  • the inventors showed that the administration of a strain of Limosilactobacillus mucosae made it possible to increase muscle mass in a sarcopenic rodent model.
  • the present invention relates to the use of a bacterial strain of the species Limosilactobacillus mucosae, or a lysate or culture supernatant thereof.
  • lysate is used interchangeably to designate the entire lysate obtained by lysis of the microorganism concerned or only a fraction thereof.
  • Obtaining dead bacterial cells can be carried out by any method known to those skilled in the art.
  • the bacterial cell lysate is made up of all or part of the intracellular biological constituents and the constituents of the cell walls and membranes. It contains in particular the cellular cytoplasmic fraction containing enzymes such as lactic acid dehydrogenase, phosphatases, phosphoketolases and transaldolases.
  • the constituents of cell walls are in particular peptidoglycan, murein or mucopeptide and teichoic acid and the constituents of cell membranes are composed of glycerophospholipids.
  • a bacterial cell lysate can be obtained by different technologies, such as for example by exposing bacterial cells to osmotic shock, thermal shock, or ultrasound. More particularly, this lysate can be obtained according to the technology described in US patent 4,464,362.
  • culture supernatant is meant within the meaning of the present invention the culture medium in which the bacterial strains remained during their cultivation, which can also be designated by the term “extracellular medium” in the present description.
  • the culture supernatant may include the metabolites produced and secreted by the bacteria, also called extracellular metabolites. Examples of metabolites are, for example, peptides, glycopeptides or lipopeptides produced by the bacteria.
  • the culture supernatant can be crude or have undergone one or more steps to filter it, concentrate it, freeze-dry it, heat it, etc. These techniques for transforming the culture supernatant of a bacteria are known to those skilled in the art.
  • the composition of the culture supernatant varies depending on the conditions and cell culture methods of the bacterial strain. It mainly includes extracellular metabolites when the biomass is growing or only active. But also potentially intracellular metabolites for cultures at the end of the stationary phase and when microbial lysis is significantly greater. A portion of the cells died and some lost their membrane integrity during lysis, as a result of which the supernatant will include cell walls from dead cells but also intracellular metabolites.
  • the culture supernatant may also include bacterial cells of the species Limosilactobacillus mucosae, in living or dead form.
  • Limosilactobacillus mucosae is a rod-shaped bacterial species of lactic acid bacteria first isolated from pig intestines. It exhibits mucus adhesion activity.
  • Limosilactobacillus mucosae is a strictly anaerobic gram-positive bacterium, which can however multiply to a reduced extent in the presence of oxygen.
  • This bacterial species is described in particular by Roos et al. (2000, International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology, Vol. 50 (1): 251-258).
  • This bacterial species is described in the human microbiota of patients with short bowel syndrome (Drastic changes in fecal and mucosa-associated microbiota in adult patients with short bowel syndrome. Joly F, Mayeur C, Bruneau A, Noordine ML, Meylheuc T, Langella P, Messing B, Duée PH, Cherbuy C, Thomas M.Biochemistry 2010 Jul;92(7):753-61)
  • Limosilactobacillus mucosae can also be defined in the literature as Lactobacillus mucosae.
  • a bacterial strain of L. mucosae suitable according to the invention can be derived from feces of subjects suffering from short bowel syndrome.
  • a bacterial strain according to the invention is chosen from the strain of the species L. mucosae deposited with the CNCM under the accession number CNCM 1-5661, the strain of the species Z. mucosae deposited with the DSM under accession number DSM 13345, the strain of the species L. mucosae deposited with the DSM under accession number DSM 13346, the strain of the species Z. mucosae deposited with the DSM under accession number DSM 102820, or a mixture thereof, and in particular is the strain of the species L. mucosae deposited with the CNCM under accession number CNCM 1- 5661.
  • the bacterial strains of the species L. mucosae are in a living or dead form, preferably in a living form.
  • dead bacterial strain we mean, within the meaning of the invention, a bacterial cell which is definitely no longer capable of multiplying and consequently of forming a colony in culture. Unlike a lysate, a dead bacterial strain can retain all of its membrane integrity.
  • a dead bacterial strain can be obtained by any known cell death method.
  • the dead bacterial cells according to the invention can in particular be obtained by exposure to high heat (for example by exposure to a UHT protocol).
  • living(s) designates living bacterial cells, including stabilized bacterial cells, i.e. i.e. viable and revivable bacterial cells (by all known stabilization methods, for example by freezing, freeze-drying or spray drying).
  • compositions The present description also relates to a composition comprising a bacterial strain of the species Limosilactobacillus mucosae, or a lysate or culture supernatant thereof.
  • a bacterial strain according to the invention is included in a composition comprising a physiologically acceptable medium.
  • physiologically acceptable medium are intended to designate a medium which is compatible with the organism of the individual to whom said composition must be administered.
  • This may be, for example, a non-toxic solvent such as water.
  • the medium can also be a food, in particular when the bacterial strain according to the invention is included in a nutritional composition, as defined below.
  • the medium may also be a mucus, such as snail mucus.
  • a mucus suitable as a medium according to the present invention can in particular be obtained as described in Gillard et al. (Enhanced Ghrelin Levels and Hypothalamic Orexigenic AgRP and NPY Neuropeptide Expression in Models of Jejuno-Colonic Short Bowel Syndrome, Sci Rep. 2016 Jun 21;6:28345).
  • said medium is compatible with oral administration.
  • a composition as described may be a nutritional composition.
  • composition according to the present description can be a nutritional composition intended for undernourished elderly people, overweight people, undernourished for example due to the practice of a diet.
  • the present description also relates to a pharmaceutical composition
  • a pharmaceutical composition comprising a bacterial strain of the species L. mucosae, or a lysate or a culture supernatant thereof, which is intended for subjects presenting, or likely to present, a pathology on which said composition has a prophylactic or therapeutic effect.
  • a composition according to the present description consists of a pharmaceutical composition when it is intended to prevent or treat dysregulation of insulin sensitivity and/or blood sugar, as in the case of diabetes or prediabetes. .
  • a composition comprising a bacterial strain of the species L. mucosae does not differ in its characteristics general conditions set out in the description, depending on whether it is a nutritional composition or a therapeutic composition.
  • a pharmaceutical composition is distinguished from a nutritional composition by the fact that the pharmaceutical composition has, in the subject to whom it is administered, a preventive effect and/or a treatment effect for a disease.
  • Each of these compositions also meets its own regulations and is distinguished by their mode of action. Indeed, pharmaceutical compositions exert a “pharmacological, immunological or metabolic action”; while nutritional compositions have a “nutritional or physiological” effect.
  • the bacterial strain of the species L. mucosae is used as the only bacterial strain present in the composition.
  • the bacterial strain of the species Z. mucosae is combined with bacteria of one or more other probiotic bacterial strains, which includes commensal probiotic bacterial strains.
  • probiotics include strains of bacteria belonging to the following genera: Bifidobacterium, Lactobacillus, Lactococcus, Enterococcus, Streptococcus, Kluyveromyces, Saccharomyces, Candida, Blautia, Faecalibacterium, Akkermansia, and combinations thereof.
  • Probiotics can be chosen in the following group group: bifidobacterium longum, bifidobacterium lactis, bifidobacterium patent, bifidobacterium infantis, bifidobacterium adolescentis, lactobacillus acidophilus, lacticase Bacillus paracasei (now lacticaseibacillus paracasei), lactobacillus salivarius (now Ligilactobacillus salivarius), Lactobacillus lactis (now Lactobacillus delbrueckii subsp.
  • Lactis Lactobacillus rhamnosus (now Lacticaseibacillus rhamnosus), Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus plantarum (now Lactiplantibacillus plantarum subsp. Plantarum), Lactococcus lac tis, Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis, Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces boulardii, Akkermansia muciniphila, Blautia faecis, Faecalibacteium prausnitzii, Streptococcus thermophilus or their mixtures.
  • a composition as described further comprises one or more other probiotic bacterial strains, in particular chosen from the species Bifidobacterium longum, Bifidobacterium lactis, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium adolescentis, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus salivarius, Lactococcus lactis, Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis, Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces boulardii, Faecalibacterium prausnitzii, Akkermansia muciniphila, Blautia faecis, Streptococcus Thermophilus or mixtures thereof, preferably selected from the group consisting of Bifido bacterium longum, Bifid
  • the composition is free of any other bacteria of the Lactobacillus species.
  • the composition also includes one or more prebiotics.
  • prebiotic is used in its conventional sense in the state of the art. Prebiotics consist of food substances that promote the growth of probiotic bacteria, including bacteria included in the microbiota.
  • Non-limiting examples of prebiotics include: oligosaccharides optionally containing fructose, galactose, mannose; dietary fibers, in particular fermentable fibers, soy fibers; inulin; human milk oligosaccharides (HMO); polyphenols; chicory, mucus, and combinations thereof.
  • the preferred prebiotics are fructo-oligosaccharides (FOS), galacto-oligosaccharides (GOS), isomalto-oligosaccharides (IMO), xylo-oligosaccharides (XOS), arabino-xylo-oligosaccharides (AXOS), mannan-oligosaccharides (MOS), soy oligosaccharides, glycosyl sucrose (GS), lactosucrose (LS), lactulose (LA), palatinose- oligosaccharides (PAO), malto-oligosaccharides, resistant starches, gums and/or hydrolysates thereof, pectins and/or hydrolysates thereof, or combinations thereof.
  • FOS fructo-oligosaccharides
  • GOS galacto-oligosaccharides
  • IMO isomalto-oligosaccharides
  • XOS xylo-oligosaccharides
  • AXOS
  • Prebiotics can also include peptides, proteins and complex secretions of peptides, sugars, sulfur such as mucus (intestinal mucus for example).
  • mucus intestinal mucus for example.
  • a positive effect of mannan oligosaccharides and L. mucosae was tested (PMID: 34879142; J Anim Sci. 2021 Dec 1;99(12)). It has also been shown that a high-fiber diet can induce the culture of L. mucosae (Lactobacillus Mucosae Strain Promoted by a High-Fiber Diet Microorganisms. 2020 Aug 12;8(8):1225. PMID: 32806628)
  • the composition comprises the association between a probiotic and a prebiotic, which is then called “symbiotic”.
  • symbiotic is used in its conventional sense in the state of the art. The aim of synbiotics is to improve the survival of the probiotic and increase its biological properties.
  • Non-limiting examples of symbiotics include the association bifidobacteria/fructo-oligosaccharides, lactobacilli/lactilol or even bididobacteria/galacto-oligosaccharides.
  • the composition additionally comprises one or more vitamins.
  • the vitamins can be folic acid, vitamin B 12 and vitamin B6, especially folic acid and vitamin B 12, especially folic acid.
  • the composition includes one or more vitamins that are fat soluble, for example one or more of vitamin A, vitamin D, vitamin E and vitamin K or water soluble, such as vitamin C.
  • the composition includes one or more polyphenols, such as flavanols, flavanones, flavonols, hydroxy cinnamic acids, and anthocyanins.
  • polyphenols such as flavanols, flavanones, flavonols, hydroxy cinnamic acids, and anthocyanins.
  • the composition further comprises one or more minerals.
  • the minerals can be chosen from sodium, potassium, chloride, calcium, phosphate, magnesium, iron, zinc, copper, selenium, manganese, fluorine, iodine, chromium or molybdenum. Minerals are usually added in the form of salt. Minerals can be added alone or in combination.
  • a composition according to the present disclosure generally includes supports or vehicles.
  • “Supports” or “vehicles” designate materials suitable for administration and include any material known in the state of the art, such as, for example, any liquid, gel, solvent, liquid diluent, solubilizing agent or other, which is non-toxic and which does not interact with the components of the composition in a deleterious manner.
  • nutritionally acceptable carriers include, for example, water, saline solutions, alcohols, silicones, waxes, petroleum jelly, vegetable oils, polyethylene glycols, propylene glycol, liposomes, sugars, gelatin, lactose, amylose, magnesium stearate, talc, surfactants, silicic acid, viscous paraffin, perfume oil, monoglycerides and diglycerides of fatty acids, fatty acid esters of petroleum, hydroxymethylcellulose, polyvinylpyrrolidone, etc.
  • the composition further comprises any other ingredient or excipient known to be used in the type of composition in question.
  • ingredients include: proteins, amino acids, carbohydrates, oligosaccharides, lipids, nucleotides, nucleosides, other vitamins, minerals, bacterial metabolites, bio-active molecules and other micronutrients.
  • a bacterial strain according to the invention can be combined with proteins in order to limit muscle wasting in the subject to whom it is administered.
  • a bacterial strain according to the invention can be combined with n-3 polyunsaturated fatty acids in order to increase the insulin sensitivity of subjects.
  • the composition contains a source of carbohydrates, for example in the form of prebiotics, or prebiotics when they are present in the composition.
  • a source of carbohydrates typically found in infant formula, such as lactose, sucrose, maltodextrin, starch, and mixtures thereof, may be used, although the preferred source of carbohydrate is lactose.
  • a composition according to the present disclosure consists of a nutritional composition.
  • the nutritional composition is selected from complete food compositions, dietary supplements, nutraceutical compositions and others.
  • the composition of the present disclosure may be used as a food ingredient and/or animal feed ingredient.
  • the food ingredient may be in the form of a solution or a solid, depending on the use and/or the method of application and/or the method of administration.
  • the term "food” refers to liquid (i.e., beverage), solid, or semi-solid dietary compositions, particularly total food (food replacement) compositions. , which do not require additional nutrients or food supplement compositions. Dietary supplement compositions do not completely replace the provision of nutrients by other means.
  • the term "food ingredient” includes a formulation that is or may be added to functional foods or foodstuffs as a dietary supplement.
  • nutritional food or “nutraceutical” or “functional” is meant a food material which contains ingredients having beneficial effects on health or capable of improving physiological functions.
  • food supplement we mean a food material intended to supplement a normal diet.
  • a dietary supplement is a concentrated source of nutrients or other substances that have a nutritional or physiological effect, when taken alone or in combination in small quantities.
  • “functional food” is used to designate food materials and corresponding products to which importance is attributed not only because of their nutritional and taste value but also because of the presence of ingredients having effects beneficial physiological.
  • the composition is a fermented dairy product or milk-based product, which is preferably administered or ingested orally one or more times per day.
  • Fermented dairy products include milk-based products, such as (but not limited to) desserts, yogurts, yogurt drinks, cottage cheese, kefir, fermented milk drinks, buttermilk , cheeses, salad dressings, low-fat spreads, cream cheese, soy drinks, ice cream, etc.
  • the composition is a fermented product based on plant matrices.
  • the nutritional and/or nutritional supplement compositions may be non-dairy or non-fermented dairy products.
  • Unfermented dairy products can include ice cream, nutrition bars and seasonings, and others.
  • Non-dairy products may include powdered drinks and nutrition bars, etc.
  • the products may be manufactured using known methods, such as adding an effective amount of a bacterial strain of the species L. mucosae, or a combination of bacteria including the bacterial strain of the species L. mucosae, to a food base, such as skimmed milk or milk or a milk-based composition, and carry out fermentation using any known technique.
  • the composition is a beverage that may be a functional beverage or a therapeutic beverage, a thirst-quenching beverage, or a conventional beverage.
  • the composition according to the present description can be used as an ingredient for carbonated drinks, a fruit juice or a drink comprising whey proteins, teas, cocoa drinks, milk drinks, yogurts. including drinking yoghurts, cheeses, ice creams, popsicles and desserts, confectionery, biscuits, cakes and cake mixes, snacks, healthy foods and drinks, icings, acidified soy drink/juice, aseptic/reduced chocolate drink, bar mixes, powdered drink mixes, calcium-enriched soy milk and chocolate, calcium-enriched coffee drink.
  • the composition includes any other ingredient or excipient known to be used in the type of composition in question.
  • ingredients include: proteins, amino acids, carbohydrates, oligosaccharides, lipids, prebiotics or probiotics, nucleotides, nucleosides, other vitamins, minerals and other micronutrients. .
  • bacterial strains of the species L. mucosae are administered to the subject in the form of a pharmaceutical composition, thereby could correspond to a Live Biotherapeutic type product product (LBP) reference: Front Med (Lausanne) Rouanet et al2020 Jun 19;7:237. doi:10.3389/fmed.2020.00237.
  • LBP Live Biotherapeutic type product product
  • bacteria of interest can be combined with pharmaceutically acceptable excipients, and optionally sustained release matrices, such as biodegradable polymers, to form therapeutic compositions.
  • pharmaceutically refers to molecular entities and compositions that do not produce an adverse reaction, allergic or other reaction when administered to a mammal, particularly humans, as applicable.
  • a pharmaceutically acceptable carrier or excipient means a non-toxic solid, semi-solid or liquid filler, diluent, encapsulating material or formulation aid of any type.
  • the active ingredient or the combination of active ingredients, active ingredients may be administered in a form of unitary administration, mixed with conventional pharmaceutical carriers, to animals and human beings.
  • Suitable unit dosage forms include oral administration forms such as tablets, gel capsules, powders, granules and oral suspensions or solutions, sublingual and buccal administration forms, aerosols, implants, subcutaneous, transdermal, topical, intraperitoneal, intramuscular, intravenous, subcutaneous, transdermal, intrathecal and intranasal administration forms and rectal administration forms.
  • oral administration forms such as tablets, gel capsules, powders, granules and oral suspensions or solutions
  • sublingual and buccal administration forms such as tablets, gel capsules, powders, granules and oral suspensions or solutions
  • sublingual and buccal administration forms such as a prefferably administrable formulation
  • aerosols such as a pharmaceutically acceptable for an injectable formulation.
  • sterile saline solutions monosodium or disodium phosphate, sodium, potassium, calcium or magnesium chloride and the like or mixtures of these salts
  • dry compositions in particular lyophilized, which by addition, depending on the case, of sterilized water or physiological serum, allows the constitution of injectable solutions.
  • Pharmaceutical forms suitable for injectable use include sterile aqueous solutions or dispersions; formulations comprising sesame oil, peanut oil or aqueous propylene glycol; and sterile powders for the extemporaneous preparation of sterile injectable solutions or dispersions. In all cases, the shape must be sterile and must be fluid to the point that it can be easily tightened.
  • the pharmaceutical composition must be stable under the manufacturing and storage conditions and must be preserved from the contaminating action of microorganisms, such as bacteria and fungi.
  • Solutions comprising the compounds of the disclosure in free base or pharmacologically acceptable salt form may be prepared in water suitably mixed with a surfactant, such as hydroxypropylcellulose.
  • Dispersions can also be prepared in glycerol, liquid polyethylene glycols and mixtures thereof, and in oils. Under ordinary conditions of storage and use, these preparations contain a preservative to prevent the growth of microorganisms.
  • the at least one bacterial strain of the species L. mucosae according to the present description can be formulated in a composition in a neutral form or in salt form.
  • Pharmaceutically acceptable salts include acid addition salts (formed with the free amino groups of the protein) and which are formed with inorganic acids such as, for example, hydrochloric or phosphoric acids, or organic acids such as acetic, oxalic, tartaric, mandelic, and similar acids. Salts formed with free carboxyl groups can also be derived from inorganic bases such as, for example, sodium, potassium, ammonium, calcium or ferric hydroxides, and from organic bases such as isopropylamine, trimethylamine , histidine, procaine and the like.
  • inorganic acids such as, for example, hydrochloric or phosphoric acids, or organic acids such as acetic, oxalic, tartaric, mandelic, and similar acids.
  • Salts formed with free carboxyl groups can also be derived from inorganic bases such as, for example, sodium, potassium, ammonium, calcium or ferric hydroxides, and from organic bases such as isopropylamine, trimethylamine , his
  • a bacterial strain according to the invention is included in an oral composition, and more particularly in an oral composition chosen from the group consisting of a food product, a drink, a pharmaceutical product, a nutraceutical, a food additive, a food supplement, a dairy product and a living biotherapeutic product (LBPs).
  • an oral composition chosen from the group consisting of a food product, a drink, a pharmaceutical product, a nutraceutical, a food additive, a food supplement, a dairy product and a living biotherapeutic product (LBPs).
  • the term "therapeutically effective amount” is an equivalent term which refers to the amount of a therapy (e.g., a prophylactic or therapeutic agent), which is sufficient to reduce the severity and/or duration of a disease, improve one or more of its symptoms, prevent the progression of a disease or cause the regression of a disease, or which is sufficient to result in the prevention of the development, recurrence, onset or progression of a disease or one or more of its symptoms, or enhance or improve the prophylactic and/or therapeutic effect(s) of another therapy (e.g., another agent therapeutic) useful for treating an illness.
  • a therapy e.g., a prophylactic or therapeutic agent
  • mucosae are present in a quantity sufficient to induce a reduction in insulin resistance in the subject treated.
  • the measurement of insulin resistance in a subject can be carried out using any technique known to those skilled in the art.
  • the measurement of insulin resistance in a subject is carried out by calculating the HOMA IR index, as illustrated in the examples.
  • the HOMA IR method (for “HomeOstasis Model Assessment for Insulin Resistance”), which was developed from the mathematical modeling of the quantitative responses of the main organs of glucose metabolism.
  • the HOMA IR index value is obtained using a plasma insulin or C-peptide value and fasting blood glucose (Sheen, 2007, Therapy, Vol. 62: 311-318).
  • the occurrence and/or level of insulin resistance can also be established by measuring fasting blood sugar, by measuring fasting insulinemia or by the OGTT test (for “Oral Glucose Tolerance Test”, or “provoked hyperglycemia test” - See for example, “Measurement of insulin resistance and glucose tolerance”, 2006, Haute AutorInstitut de Santé (HAS), France).
  • the bacteria(s) may be present in various forms, for example in liquid form or in powder form.
  • the bacteria(s) may be in freeze-dried form.
  • the quantity of bacteria of the species L. mucosae which is provided to the subject may be variable, depending on the physiological state of said subject, and in particular depending on the level of imbalance nutrient intake in relation to the nutrient requirement of said subject.
  • the quantity of bacteria of the species L. mucosae which must be provided to said subject can be easily adapted by those skilled in the art.
  • the composition comprises an amount of bacteria of the species L. mucosae which is suitable for daily intake, preferably daily oral intake, of at least 10 3 colony forming units (or “CFU” for “Colony Forming Units”).
  • the daily intake, in particular the daily oral intake, of bacteria of the species L. mucosae is at most 10 13 colony forming units (or “CFU” for “Colony Forming Units”).
  • the quantity of these probiotic bacteria is determined by those skilled in the art based on their general knowledge.
  • the quantity of these other probiotic bacteria can vary from 10 3 to 10 13 other probiotic bacteria.
  • a composition according to the present disclosure generally includes supports or vehicles.
  • “Supports” or “vehicles” designate materials suitable for administration and include any material known in the state of the art, such as, for example, any liquid, gel, solvent, liquid diluent, solubilizing agent or other, which is non-toxic and which does not interact with the components of the composition in a deleterious manner.
  • nutritionally acceptable carriers include, for example, water, saline solutions, alcohols, silicones, waxes, petroleum jelly, vegetable oils, polyethylene glycols, propylene glycol, liposomes, sugars, gelatin, lactose, amylose, magnesium stearate, talc, surfactants, silicic acid, viscous paraffin, perfume oil, monoglycerides and diglycerides of fatty acids, fatty acid esters of petroleum, hydroxymethylcellulose, polyvinylpyrrolidone, etc.
  • composition in the form of a pharmaceutical composition comprising one or more pharmaceutically acceptable excipients.
  • Such a pharmaceutical composition can be presented in the form of packaging comprising a plurality of dosage units.
  • doctor unit is used in its conventional sense in pharmacy (e.g. a pill, a capsule, a tablet, the contents of an ampoule, etc.).
  • GLP-1 is a peptide that has numerous metabolic effects in the host, in particular, it improves insulin secretion by the pancreas, promotes glucose tolerance and therefore optimizes the energy and nitrogen metabolisms of the host.
  • bacteria of the Limosilactobacillus mucosae type make it possible to increase the production of GLP-1 in vitro, and thus to prevent or limit the metabolic effects of pathologies or conditions linked to a deficiency in the action of GLP-1: state of insulin resistance (for example type II diabetes), metabolic diseases difficulty regulating food intake, regulation of transit disorders, etc.
  • a bacterial strain of the species L. mucosae according to the invention or a composition comprising it are mainly intended to prevent and/or treat:
  • the loss of muscle mass and/or muscle function is linked to insulin resistance.
  • a bacterial strain of the species L. mucosae according to the invention or a composition comprising it may in particular be useful in the prevention and/or treatment of disorders linked to transit or disorders of appetite regulation.
  • the bacterial strain is included in a composition comprising a physiologically acceptable medium, as defined above.
  • prevent means the reduction to a lesser degree of the risk or probability of occurrence of a given phenomenon, that is to say, in the present invention, disorders requiring an increase in the level of GLP-1.
  • treat or “treatment” means the relief or attenuation of pathological processes, or the relief or attenuation of one or more symptoms linked to a pathological process, and in particular to the one of the disorders described in the application requiring an increase in the level of GLP-1.
  • the present description concerns the nutritional uses and the therapeutic uses of a bacterial strain or of a composition as defined in the present application.
  • compositional characteristics including a nutritional composition and a therapeutic composition, including in various embodiments, are described in detail herein, which includes the amounts of active ingredient(s). ), especially the quantities of bacteria of the species L. mucosae included in these compositions.
  • Dysregulation of insulin sensitivity such as the appearance of insulin resistance, or insulin resistance, describes a situation where liver, muscle and fat cells, for example, become resistant to insulin. There is then less glucose entering these cells and it remains in the blood. In response to insulin resistance, pancreatic insulin-secreting cells tend to produce more insulin (hyperinsulinemia) and may eventually become exhausted. Insulin production then becomes insufficient and the blood glucose level becomes too high (hyperglycemia). Insulin resistance can also involve other metabolisms regulated by insulin such as protein metabolism. Indeed, insulin, combined with meals, is a major stimulator of muscle protein anabolism. Insulin resistance therefore contributes to muscle wasting due to a lack of anabolism in the muscle, particularly when eating a meal.
  • Blood sugar regulation is the process by which the level of glucose in the blood, known as blood sugar, is kept close to a value that is beneficial for the body. This regulation is part of the processes for maintaining homeostasis within the body. Normal fasting blood sugar in humans is statistically between 0.70 and 1.10 g/L. When blood sugar levels are abnormally higher or lower than this threshold, we speak of dysregulation.
  • the main disorders linked to dysregulation of insulin sensitivity and/or blood sugar according to this text are prediabetes, type 1 diabetes and type 2 diabetes. They may or may not be caused by obesity.
  • the activation of receptors expressed at the level of insulin cells (P) and certain peripheral tissues by GLP-1 stimulates insulin secretion (insulinotropic effect) but also activates the transcription of the insulin gene and increases insulin biosynthesis and inhibits the release of glucagon (static glucagon effect).
  • prediabetes we mean a physiopathological state characterized, in particular, by high blood sugar levels compared to normal, but below the threshold for defining type 2 diabetes. Fasting blood sugar levels are considered to be (i) normal between 0.70 and 1.10 g/1, (ii) sign of prediabetes between 1.10 and 1.25 g/1 and (iii) sign of diabetes when > 1.25 g/1. Prediabetes generally does not cause symptoms, but is often associated with obesity, dyslipidemia, and hypertension. It is a risk factor for cardiovascular diseases. Prediabetes is characterized, in particular, by glucose intolerance.
  • GLP1 Stimulation of insulin and glucagon secretion by the pancreas by GLP1 controls glycemic excursions, by reducing fasting blood sugar. GLP1 induces glucose uptake and hepatic storage and inhibits gluconeogenesis. Furthermore, and in addition to increasing insulin secretion, GLP1 also plays a role in improving insulin sensitivity in many tissues, including muscle (Muller et al., 2019, Mol Metab).
  • type 1 diabetes or “DTI”, we mean a chronic disease which is characterized by the total absence of insulin production in an individual. The person living with type 1 diabetes therefore depends on daily insulin injections or an insulin pump to ensure their survival.
  • GLP1 plays many roles in blood sugar control, including controlling the stimulation of insulin and glucagon secretion, glucose uptake and hepatic storage, inhibition of gluconeogenesis, and improvement of insulin sensitivity of many tissues.
  • type 2 diabetes or “T2D”, we mean a chronic disease which occurs when the pancreas does not produce enough insulin (blood sugar regulating hormone), or when the body is not able to use the insulin it produces effectively.
  • the disorder linked to the dysregulation of blood sugar is type 2 diabetes.
  • the disorder to be prevented and/or treated is a loss of muscle mass and/or function, characterized in that the subject in need is chosen from among elderly subjects affected by sarcopenia, subjects in overweight and obese subjects affected by sarcopenic obesity and subject to a diet, subjects affected by cachexia, in particular linked to cancer, inflammatory bowel disease or chronic obstructive pulmonary disease, immobilized subjects , diabetic or prediabetic subjects, “serious burn” subjects, septic or having suffered a viral infection, convalescent and/or immobilized subjects, and subjects having undergone intestinal resection or presenting intestinal malabsorption.
  • the subject in need is chosen from among elderly subjects affected by sarcopenia, subjects in overweight and obese subjects affected by sarcopenic obesity and subject to a diet, subjects affected by cachexia, in particular linked to cancer, inflammatory bowel disease or chronic obstructive pulmonary disease, immobilized subjects , diabetic or prediabetic subjects, “serious burn” subjects, septic or having suffered
  • Subjects who have lost muscle mass in the above-mentioned states are generally resistant to the anabolic action of the meal and/or the action of insulin. If subjects experiencing significant muscle wasting are often insulin-resistant, not all insulin-resistant or prediabetic subjects are necessarily in a situation of muscle wasting, which is a phenomenon that can set in gradually over time, with muscle wasting. and the development of insulin resistance strongly linked metabolically (Daily and Park, 2022 Cells - DOI: 10.3390/cells 11030338)
  • GLP-1 has advantageous properties making it possible to optimize the energy use of nutrients and limit muscle wasting (Hong et al., Journal of Cachexia, Sarcopenia and Muscle 2019; 10: 903-918 ), particularly in insulin-resistant individuals (Massimo et al., The Impact of Glucose-Lowering Drugs on Sarcopenia in Type 2 Diabetes: Current Evidence and Underlying Mechanisms. Cells 2021, 10, 1958).
  • the loss of muscle mass can be measured by different technologies known to those skilled in the art such as for example upper arm circumference, bioelectrical impedance, bioenergetic X-ray sorptiometry (DXA) and CT scanning (Mareschal et al, 2019 Journal of Clinical Medicine, doi: 10.3390/jcm8071040).
  • DXA bioenergetic X-ray sorptiometry
  • CT scanning Mareschal et al, 2019 Journal of Clinical Medicine, doi: 10.3390/jcm8071040.
  • the loss of muscle function can be measured by different technologies known to those skilled in the art, such as the grip test (grip test using a dynamometer), walking speed 6 minutes, 30 s chair stand test, SPPB test (Short Physical Performance Battery) which combines speed of walking, balance, chair rise), the “time to get up and go” test ( consists of getting up from the chair, walking 3 meters, turning around and sitting down again) (Beaudart et al 2019, Calcified Tissue International, doi: 0.1007/s00223-019-00545-w).
  • yielderly subject within the meaning of this description, is meant a human subject or a non-human mammalian subject, including a pet animal such as a dog or cat, which shows signs of senescence such as an alteration metabolic functions (e.g. absorption, digestion, excretion, tissue and organ dysfunction), locomotor difficulties and reduced resistance to external aggressions.
  • an alteration metabolic functions e.g. absorption, digestion, excretion, tissue and organ dysfunction
  • locomotor difficulties e.g. absorption, digestion, excretion, tissue and organ dysfunction
  • reduced resistance to external aggressions e.g. absorption, digestion, excretion, tissue and organ dysfunction
  • yielderly subject in the case of a canine, in particular a dog, we mean a subject having (i) more than 12 years of age for a canine, in particular a dog, of small size or (ii ) more than 9 years for a canine, in particular a dog, of medium size, or (iii) more than 7 years, for a canine, in particular a dog, of large size.
  • elderly subject in the case of a feline, in particular a cat, we mean a subject over 13 years old.
  • Sarcopenia (a word from the Greek which can be translated as “lack of flesh”), initially defined by a loss of skeletal muscle mass, is currently characterized by a loss of muscle mass associated with functional degradation (European Working Group on Sarcopenia in Older People (EWGSOP) - Cruz Jentoft et al, 2019 Age and Aging). After building up to the age of 20 to 30, muscle mass decreases by about 1% per year, even in healthy people. This process accelerates between the ages of 50 and 60. Sarcopenia impacts physical performance, promotes walking disorders and constitutes a factor of fragility and increased risk of dependence, particularly in the elderly.
  • sarcopenia does not only affect the elderly but also insulin-resistant populations such as the obese, we therefore speak of sarcopenic obesity (Working Group from European Society for Clinical Nutrition and Metabolism (ESPEN) and European Association for the Study of Obesity (EASO) - Donini et al, 2022, Obesity Facts).
  • This muscle wasting can also occur over shorter periods of time, particularly in intense catabolic situations such as cancers and associated powerful treatments such as chemotherapy. In this case, we rather speak of cachexia (see below).
  • Sarcopenia is associated with an increased risk of falls and fractures leading to immobilization which, in turn, aggravates sarcopenia. We are thus witnessing a “snowball” effect amplifying the loss of muscle mass and function linked to age.
  • obese is meant a physiopathological state in which an individual presents, in particular, weight gain and excess adipose tissue, generally induced by an obesogenic diet, including, in particular, excessive consumption of high-calorie foods, genetic predispositions or insufficient or non-existent sports practice.
  • An individual declared obese has a body mass index (BMI) greater than 30.
  • the body mass index according to an official definition from the World Health Organization (WHO), is the indicator of health risks. associated with overweight and underweight.
  • WHO World Health Organization
  • a BMI value is associated with a specific body shape according to the classification given by the WHO.
  • an “overweight individual” means an individual whose condition is not physiopathological. An overweight individual often also has excess fatty tissue. An individual is generally considered to be overweight when they have a body mass index (BMI) between 25 and 30.
  • BMI body mass index
  • Cachexia a profound weakening of the body, is characterized in particular by the wasting of adipose tissue and muscles. It is common in many diseases, including cancers that are difficult, if not impossible, to control or cure and, as specified above, occurs over much shorter periods of time (days to weeks). Cancers, particularly those of the pancreas and stomach, cause severe cachexia. Patients can lose 10 to 20% of their body mass. Cachexia can also be linked to other catabolic pathologies such as inflammatory bowel disease or chronic obstructive pulmonary disease, viral infection or sepsis.
  • GLP-1 can help optimize the use of nutrients. Indeed, we see in patients who have undergone intestinal resection, an increased production of GLP1 (Jeppesen et al 2000, Gut; Gillard et al 2017, Front Physiol) making it possible to adapt intestinal motility and optimize metabolism of the host with the least supply of nitrogen and energy nutrients. The repercussions will be particularly notable on the energy (fat mass) and nitrogen (lean mass and muscle mass) stocks of the subjects. An improvement in the intestinal secretion of GLP-1 by these patients, notably via the provision of a GLP-1 secreting probiotic, is therefore favorable in these subjects.
  • the subject to be treated is a subject presenting an indication for administration based on GLP-1 receptor agonists.
  • An individual with an indication for administration of GLP-1 receptor agonists is an individual suffering from a disorder or disease that can be treated or whose symptoms can be alleviated by administration to said individual. one or more GLP-1 receptor agonists.
  • GLP-1 receptor agonists are most often synthetic peptides whose polypeptide sequence is close to that of GLP-1 and which act by binding to GLP-1 receptors, generally with increased stability compared to GLP. -1 endogenous.
  • GLP-1 receptor agonists examples include exenatide, liraglutide, dulaglutide, semaglutide, tirzepatide, lixisenatide, albiglutide, exenatide QW, BI 456906 mazdutide (IBI362; LY3305677), retatrutide (LY3437943), danuglipron, exendin-4, or cotadutide.
  • the subject presenting an indication for administration based on GLP-1 receptor agonists is chosen from the list consisting of insulin-resistant subjects such as diabetic subjects, overweight subjects, particularly obese subjects, subjects who have undergone metabolic surgery, subjects seeking to regulate their appetite, subjects suffering from liver diseases, subjects suffering from cardiovascular pathologies, in particular suffering from cardiovascular pathologies linked to diabetes, subjects suffering from inflammation linked to diabetes and/or metabolic syndrome, subjects affected by sarcopenia, subjects affected by cachexia; and subjects suffering from neurodegenerative diseases.
  • Metabolic surgery we mean a type of surgery which aims to treat a metabolic disease by surgical methods.
  • Metabolic surgery also known as diabetes or sugar surgery, includes surgical procedures that control both diabetes and obesity. These may include surgical interventions to regulate appetite, gastric emptying, food preference and/or taste.
  • Liver diseases for which administration based on GLP-1 agonists may be indicated are, for example, non-alcoholic steatohepatitis (NASH).
  • NASH non-alcoholic steatohepatitis
  • Cardiovascular pathologies for which administration based on GLP-1 agonists may be indicated include atherosclerosis, myocardial infarction, stroke, or alteration of the lipid profile (total cholesterol, LDL cholesterol). , HDL/LDL ratio).
  • Neurodegenerative diseases for which administration based on GLP-1 agonists may be indicated include Alzheimer's disease or Parkinson's disease.
  • the subject to be prevented and/or treated is chosen from elderly subjects affected by sarcopenia, overweight subjects and obese subjects affected by sarcopenic obesity and subject to a diet.
  • the description also describes a method of preventing and/or treating disorders requiring an increase in the level of GLP-1 in a subject in need thereof, said use being chosen from (i) the prevention or treatment of a disorder linked to deregulation of insulin resistance and/or blood sugar and (ii) prevention or treatment of loss of muscle mass and/or muscle function, characterized in that it comprises at least one step of administration of a bacterial strain of the species Limosilactobacillus mucosae.
  • the invention relates to the non-therapeutic use of a bacterial strain of the species L. mucosae according to the invention or of a composition comprising it for maintaining or increasing muscle mass and/or function in a subject. in need, in particular in a subject selected from a malnourished subject, an elderly subject, in particular a malnourished elderly subject, and a subject practicing intense physical exercise.
  • undernourished we mean, within the meaning of this description, a “state of an organism in nutritional imbalance” (See, “Diagnosis of undernutrition in children and adults – Method Recommendations for clinical practice » November 2019, High Authority of Health and French Nutrition Federation), said imbalance being characterized by a negative energy and/or protein balance.
  • This definition encompasses a plurality of situations that can lead to a state of undernutrition, such as a deficit in isolated nutrient intake, an increase in expenditure or losses leading to an imbalance. This term also covers subjects with heightened nutritional needs.
  • the imbalance inherent in undernutrition leads to deleterious effects on the body, accompanied by measurable changes in bodily functions and/or body composition, these changes which may be associated with a worsening of the progression of diseases which may affect the subject. .
  • Intense physical exercise we mean physical activity requiring significant effort which causes a decrease in breathing and an acceleration in the heart rate. Intense physical activity is characterized by a MET (Metabolic Equivalent of Task - 1 MET corresponds to the oxygen intake of 3.5 mL per kilogram of body weight per minute) greater than 6. The MET evaluates the ratio between energy consumption during physical effort and energy consumption at rest.
  • GLP-1 may constitute an interesting complementary strategy to help optimize blood sugar management and strengthen insulin sensitivity. Intense physical activity also leads to stimulation of GLP-1 production.
  • the present text also describes a method for maintaining or increasing muscle mass and/or function in a subject in need, in particular in a subject selected from a malnourished subject, an elderly subject, in particular a malnourished elderly subject, and a subject practicing intense physical exercise, comprising at least the step of administering to the subject in need at least one bacterial strain of the species Limosilactobacillus mucosae.
  • the present invention relates to the strain of the species Limosilactobacillus mucosae deposited with the CNCM under accession number CNCM 1-5661.
  • Lactobacillus isolates originating from the feces of gnotobiotic animals previously transplanted with the feces of a patient with short bowel syndrome were tested. These lactobacilli have a strong tropism for the intestine, as these strains are abundant in the feces of patients with short bowel syndrome and are capable of colonizing the digestive tract of axenic rats.
  • the inventors carried out an initial morphological, phenotypic and genomic characterization by sequencing the 16S gene, and divided the isolates into 6 species and 1 to 2 isolates per species were selected, for a total of 7 strains.
  • the 6 species are:
  • Lacticaseibacillus casei strain 1 and strain 2
  • Lacticaseibacillus camelliae (strain 3)
  • strains were characterized by functional tests at INRAE in Aurillac (Unotti Mixte de für sur le Fromage Aurillac, UMR 0545).
  • This strain corresponds to the species Limosilactobacillus mucosae.
  • the Control group corresponds to a culture of intestinal cells in a sterile medium (no production of GLP-1)
  • the STC-1 cells came from an ATCC collection (Reference STC-1, CRL-3254TM) and were cultured and prepared for their co-incubation the day before the experiment.
  • the bacteria which had been frozen in a dry pellet were thawed on the day of the experiment and taken up in a culture medium without FCS or antibiotics. They have been prepared by successive dilution to respect the following MOI (Multiplicity of Infection): 1:10, 1:100 and 1:1000.
  • the STC-1 cells were washed and then the medium containing the bacteria was added. After 4 h of coculture, the supernatants were collected and counted. Then the supernatants were stored, as well as the cells at -80°C for the subsequent determination of GLP-1.
  • the quantity of GLP-1 was determined by elisa according to the instructions of the supplier Assay Genie (ELISA GLP-1 Mouse (ELISA GLP-1 Mouse (ELISA GLP-1 Mouse ref: MOFI00854)).
  • GLP-1 production is expressed in pg/ml.
  • Control STC-1 cells in the presence of culture medium
  • MOI 10 (number of bacteria added for one STC-1 cell
  • CNCM-I5661 bacteria were cultured in MRS medium (supplier BD, reference: 288130, reconstitution made according to the supplier's instructions), then centrifuged and frozen in the form of dry pellets. The dry pellets were then resuspended in the STC cell culture medium.
  • V indicates that the CNCM-I5661 bacteria were cultured in “veganMRS” medium (BIOKAR supplier, reference: BK176HA, reconstitution made according to the supplier's instructions), then centrifuged and frozen in the form of dry pellets. The dry pellets were then resuspended in the STC-1 cell culture medium.
  • 61C-10 incubation of STC-1 cells in the presence of the CNCM-I5661 strain.
  • ME 10 (10 times more bacteria than STC-1 cells)
  • 61C-100 incubation of STC-1 cells in the presence of the CNCM-I5661 strain.
  • ME 100 (100 times more bacteria than STC-1 cells)
  • 61C-1000 incubation of STC-1 cells in the presence of the CNCM-I5661 strain.
  • ME 1000 (1000 times more bacteria than STC-1 cells)
  • results shown in the table above indicate a dose effect of the strain and also show that the strain retains its functions even if it is cultivated in another medium.
  • the presence of the CNCM-5661 strain induces the production of the enterohormone GLP-1 by STC-1 cells. This production is all the more important as the number of bacteria increases. This production is not observed in the presence of strains of the species Lacticaseibacillus casei, which come from the same patient.
  • the pro-GLP-1 effect of the CNCM 1-5661 strain is not dependent on the culture medium used for the cultivation of the strain.
  • GLP-1 increased as a function of the contact time between the bacteria of the CNCM 1-5661 strain and the intestinal cells (see Figure 2).
  • the bacteria were placed in an acidic medium (pH 2.5 and 3) for 45 and 90 minutes, corresponding to average residence times of the food bolus in the stomach before passing into the duodenum.
  • the bacteria showed very good resistance to the gastric medium (composition: HCl, pepsin, NaCl), with no significant difference between the incubation times and the two pHs tested (p > 0.05, Fisher exact test).
  • the inventors also tested the survival of bacteria under conditions encountered downstream of the stomach which include the presence of bile salts.
  • the survival of the CNCM 1-5661 strain was therefore tested in the presence of bile salts after 1h, 2h, 3h and 4h of incubation at 37°C.
  • the bacteria showed very good resistance to bile salts, with no significant difference between incubation times (p > 0.05, Fisher exact test).
  • the inventors determined its ability to adhere to human intestinal Caco-2 cells. Determination of the viable number of lactic acid bacteria adhering to intestinal cells has was carried out after 3 hours of contact with Caco-2 cells at an MOI (multiplicity of infection) value of 0.1, 1, 10 and 100.
  • the CNCM 1-5661 strain has a satisfactory percentage of adhesion and similar to other microorganisms, without any significant difference between the MOIs tested (p>0.05, Fisher exact test).
  • DSM 13345 Three other strains were therefore tested: DSM 13345, DSM 13346, and DSM 102820.
  • the strains CNCM 1-5661 (as a positive control) and a strain of L. Casei (negative control, which does not induce the synthesis of GLP- 1) were also used:
  • Control sterile cell medium
  • strains B to E were diluted 1/10 .
  • the results, presented in Figure 3, show that in the presence of all strains of the species Limosilactobacillus mucosae tested, synthesis of GLP-1 by SCT-1 cells was observed. In addition, this production of GLP-1 is dose dependent.
  • the inventors measured the capacity of the L. mucosae strain CNCM 1-5661 according to the invention (shown to be capable of inducing the synthesis of GLP-1 by SCT-1 cells in culture) and a strain of the species L. casei outside the invention (non-inducing GLP-1 production) on the muscle mass of a fragile aged rat model.
  • the inventors carried out an in vivo study over a period of 1 month on aged rats (20 months) according to the following groups:
  • the animals were sacrificed at the end of the experiment, weighed, and the muscles of the hind leg (gastrocnemius, Extensor digitorum longus, Soleus, Tibialis anterior) were excised and weighed. The sum of the weights of these 4 muscles was calculated and reduced to the weight of the animals.

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Abstract

La présente invention concerne une souche bactérienne de l'espèce Limosilactobacillus mucosae, ou un lysat ou un surnageant de culture de celle-ci, pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement de désordres nécessitant un accroissement de la production de GLP-1 chez un sujet en ayant besoin, lesdites désordres étant choisis parmi (i) un désordre lié à une dérégulation de l'insulino-sensibilité et/ou de la glycémie et (ii) la perte de masse musculaire et/ou de fonction musculaire.

Description

Description
Titre : Limosilactobacillus mucosae et désordres nécessitant un accroissement du niveau de GLP-1
Domaine technique
La présente invention concerne de nouveaux agents probiotiques et prébiotiques permettant de stimuler la synthèse de GLP-1 par les cellules intestinales.
En particulier, l’invention concerne une souche bactérienne de l’espèce Limosilactobacillus mucosae, ou un lysat ou un surnageant de culture de celle-ci pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement de désordres nécessitant un accroissement du niveau de GLP-1 chez un sujet en ayant besoin, lesdits désordres étant choisis parmi (i) un désordre lié à une dérégulation l’insulino-sensibilité et/ou de la glycémie et/ou (ii) la perte de masse musculaire et/ou de fonction musculaire. Elle concerne également l’utilisation non thérapeutique d’une souche bactérienne de l’espèce Limosilactobacillus mucosae, pour maintenir ou accroître la masse et/ou la fonction musculaire chez un sujet en ayant besoin, en particulier chez un sujet sélectionné parmi un sujet dénutri, un sujet âgé, en particulier un sujet âgé dénutri, et un sujet pratiquant un exercice physique intense. Enfin, l’invention concerne la souche bactérienne Limosilactobacillus mucosae déposée auprès de la CNCM sous le numéro d’accession CNCM 1-5661.
Technique antérieure
La proportion des personnes âgées (65 ans et plus) est amenée à représenter un tiers de la population française à l’horizon 2050. Cette population est très hétérogène et se caractérise, pour les extrêmes, par des individus en bonne santé, actifs, en bon état nutritionnel, peu sarcopéniques (perte de masse et de fonction musculaire liée à l’âge) et vivant en général chez eux. A l’inverse, il existe (au même âge) une population âgée dénutrie et fortement sarcopénique, généralement dépendante et vivant en institution et en état de sous nutrition chronique (Buckinx et al., Burden of frailty in the elderly population : perspectives for a public health challenge. Archives of public health = Archives beiges de santé publique. 2015;73(1): 19). En parallèle, dans certains pays occidentaux, les individus en surpoids ou obèses représentent plus de la moitié de la population. Une partie de cette population, outre une susceptibilité accrue à développer du diabète ou des pathologies cardiovasculaires, peut également présenter une fonte musculaire accrue qui peut diminuer l’autonomie de ces personnes et surtout limiter la marge de manœuvre lors des traitements de l’obésité par l’utilisation des régimes hypocaloriques (Barazzoni et al., Sarcopenic Obesity: Time to Meet the Challenge. Obesity facts. 2018; 11(4):294-305). En outre, la perte de masse et de fonction musculaire peut également toucher des individus de manière ponctuelle au cours de leur vie, en fonction de leur parcours et de leurs expériences. C’est notamment le cas des sujets « grand brûlés », des immobilisés, des cancéreux ou encore des sujets ayant subi une résection intestinale ou présentant des malabsorptions intestinales.
Des données récentes suggèrent un lien causal entre l’activité du microbiote intestinal et diverses pathologies en lien avec des dérégulations du métabolisme des nutriments et T insulino-rési stance (Marchesi et al. The gut microbiota and host health: a new clinical frontier [Review], Gut. 2016 Feb;65(2):330-9). Ces données suggèrent ainsi l’intérêt de développer des stratégies probiotiques. En outre, des études de physiologie comparative se focalisent sur des situations physiopathologiques où des individus présentaient des adaptations métaboliques favorables à une préservation de l’insulino-sensibilité, de la masse musculaire et/ou à une meilleure efficacité d’utilisation métabolique des nutriments.
Il a été observé que certains lactobacilles étaient sur-représentés chez des individus ayant subi une résection de l’intestin (Mayeur et al. Extensive Intestinal Resection Triggers Behavioral Adaptation, Intestinal Remodeling and Microbiota Transition in Short Bowel Syndrome [Review], Microorganisms. 2016 Mar 8;4(1)). Le tractus digestif et le microbiote de ces patients présentent la particularité de s’être adaptés métaboliquement pour maintenir leur anabolisme énergético-azoté malgré des capacités d’absorption intestinale des aliments réduites (Gillard et al. Enhanced Ghrelin Levels and Hypothalamic Orexigenic AgRP and NPY Neuropeptide Expression in Models of Jejuno-Colonic Short Bowel Syndrome. Scientific reports. 2016 Jun 21 ;6:28345).
Une étude de transfert de ces bactéries à des rats axéniques a montré une augmentation des concentrations de peptides plasmatiques comme la leptine, la ghréline et le GLP-1, augurant d’une augmentation de la sensibilité à l’insuline et d’une augmentation de l’efficacité de récupération énergétique chez ces animaux (Gillard L, Mayeur C, Robert V, et al. Microbiota Is Involved in Post-resection Adaptation in Humans with Short Bowel Syndrome. Frontiers in physiology. 2017;8:224). En effet, le GLP-1, peptide digestif produit par les cellules entéro-endocrines de l’iléon distal et du colon suite à l’ingestion du repas, a de nombreux effets métaboliques dont la régulation de la sécrétion de l’insuline par le pancréas (mais aussi de la prise alimentaire et du transit) (Laurindo et al. GLP-la: Going beyond Traditional Use. Int J Mol Sci. 2022 Jan 10;23(2)). Des analogues du GLP-1 sont d’ailleurs actuellement utilisés pour améliorer la tolérance au glucose chez les patients et un rôle du GLP-1 dans la maladie de Parkinson et la régulation des troubles de l’humeur est même évoquée. Des agonistes du récepteur à GLP1 sont fréquemment utilisés pour traiter le diabète de type II et l’obésité (Laurindo et al. GLP-la: Going beyond Traditional Use. Int J Mol Sci. 2022 Jan 10;23(2). Leur utilisation a également été suggérée dans de nombreux autres désordres tels que la régulation de l’appétit (Aldawsari et al., « The Efficacy of GLP-1 Analogues on Appetite Parameters, Gastric Emptying, Food Preference and Taste Among Adults with Obesity: Systematic Review of Randomized Controlled Trials ». Diabetes, Metabolic Syndrome and Obesity: Targets and Therapy 16 (2023) : 575 95), les maladies hépatiques (Newsome et al., « A Placebo-Controlled Trial of Subcutaneous Semaglutide in Nonalcoholic Steatohepatitis ». New England Journal of Medicine 384, no 12 (25 mars 2021): 1113 24), ou les maladies dégénératives tel qu’ Alzheimer (Femminella et al., « Evaluating the Effects of the Novel GLP-1 Analogue Liraglutide in Alzheimer’s Disease: Study Protocol for a Randomised Controlled Trial (ELAD Study) ». Trials 20, no 1 (3 avril 2019): 191) ou la maladie de Parkinson (Athauda et al., « Exenatide Once Weekly versus Placebo in Parkinson’s Disease: A Randomised, Double-Blind, Placebo-Controlled Trial ». Lancet (London, England) 390, no 10103 (7 octobre 2017): 1664 75).
En particulier, il a été démontré que certains agonistes de GLP-1 pouvaient avoir un impact bénéfique sur la composition du corps, notamment sur la préservation de la masse musculaire, y compris, mais pas seulement, chez des individus obèses ou diabétiques (Osakaet al., « Favorable Appendicular Skeletal Muscle Mass Changes in Older Patients With Type 2 Diabetes Receiving GLP-1 Receptor Agonist and Basal Insulin Co-Therapy ». Clinical Medicine Insights: Endocrinology and Diabetes 16 (1 janvier 2023): 11795514231161884 or Hong et al., « Amelioration of Muscle Wasting by Glucagon-like Peptide-1 Receptor Agonist in Muscle Atrophy ». J Cachexia Sarcopenia Muscle 10, no 4 (août 2019): 903 18) ou des individus âgés (Abdulla et al., « Glucagon-like Peptide 1 Infusions Overcome Anabolic Resistance to Feeding in Older Human Muscle ». Aging Cell 19, no 9 (2020): e!3202). Si des bactéries résidentes dans la partie distale de l’intestin (colon, iléon distal) sont capables de stimuler la synthèse endogène de GLP-1, tous les effets métaboliques associés à GLP-1 et décrits ci-dessus peuvent être attendus.
Les effets bénéfiques sur l’Homme de certaines bactéries du genre Lactobacillus sont connus dans l’art. Par exemple, il est connu que L. reuteri, par différents mécanismes et métabolites, est capable de contrôler le poids du corps et l’obésité, ou encore d’améliorer la sensibilité à l’insuline et l’homéostase du glucose (Abuqwider et al. Limosilactobacillus reuteri in Health and Disease. Microorganisms 2022, 10, 522). En outre, il a été démontré par exemple que la souche bactérienne L. fermentum MG4295 pouvait améliorer l’hyperglycémie chez des souris présentant un régime riche en graisses et que cette souche bactérienne présentait des propriétés favorables à son utilisation en tant que probiotique (Kim et al., Limosilactobacillus fermentum MG4295 Improves Hyperglycemia in High-Fat Diet-Induced Mice. Foods2022, 11, 231).
Par ailleurs, il est connu dans l’art que certaines souches de l’espèce L. mucosae pourraient présenter des potentiels probiotiques, par exemple sur le métabolisme des lipides et notamment sur le contrôle de l’hyperlipémie (CN111979145 Al), mais également dans le traitement des troubles de la mémoire, des troubles de l’apprentissage, des désordres mentaux et des maladies inflammatoires (EP 3 715 449 A2) ou encore dans la protection contre certaines maladies cardiovasculaires (Ryan et al., BMC Microbiology (2019) 19:33).
Toutefois, à la connaissance des inventeurs, il n’a jamais été suggéré par le passé qu’une souche bactérienne de l’espèce L. mucosae puisse présenter des propriétés probiotiques permettant la prévention et/ou le traitement de désordres nécessitant un accroissement de la production de GLP-1 chez un sujet en ayant besoin.
Ainsi, il demeure un besoin de proposer de nouvelles compositions probiotiques permettant de stimuler la production de GLP-1, aux fins de, selon les sujets concernés, (i) prévenir ou traiter un désordre lié à une dérégulation de l’insulino-sensibilité et/ou de la glycémie ou (ii) prévenir ou traiter une perte de masse musculaire et/ou une perte de fonction musculaire.
Exposé de l’invention De manière surprenante, il est montré dans les exemples qu’une souche bactérienne de l’espèce Limosilactobacillus mucosae, ou un lysat ou un surnageant de culture de celle-ci, induit, ou accroit, la production de la protéine GLP-1, en particulier par les cellules intestinales d’un sujet humain.
Selon un premier objet, l’invention concerne une souche bactérienne de l’espèce Limosilactobacillus mucosae, ou un lysat ou un surnageant de culture de celle-ci, pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement de désordres nécessitant un accroissement de la production de GLP-1 chez un sujet en ayant besoin, lesdits désordres étant choisis parmi (i) un désordre lié à une dérégulation de l’insulino-sensibilité et/ou de la glycémie et (ii) la perte de masse musculaire et/ou de fonction musculaire.
Selon un mode de réalisation particulier, le sujet en ayant besoin est un sujet présentant une indication pour une administration à base d’agonistes de récepteurs de GLP- 1. En particulier, un sujet présentant une indication pour une administration à base d’agonistes de récepteurs de GLP-1 est choisi dans la liste consistant en des sujets insulino- résistants tels que des sujets diabétiques, des sujets en surpoids, en particulier des sujets obèses, des sujets ayant subi une chirurgie métabolique, des sujets cherchant à réguler leur appétit, des sujets souffrant de maladies hépatiques, des sujets souffrant de pathologies cardiovasculaires, en particulier souffrant de pathologies cardiovasculaires liées au diabète, de sujets souffrant d’inflammation, en particulier d’inflammation liée au diabète et/ou à un syndrome métabolique, les sujets affectés par une sarcopénie, de sujets affectés d’une cachexie ; et des sujets souffrant de maladies neurodégénératives.
Selon un mode de réalisation, le désordre est un désordre lié à une dérégulation de l’insulino-sensibilité et/ou de la glycémie choisi parmi le prédiabète, le diabète de type 1 et le diabète de type 2.
Selon un mode de réalisation, le désordre est une perte de masse et/ou de fonction musculaire et en ce que le sujet en ayant besoin est choisi parmi les sujets âgés affectés par une sarcopénie, les sujets en surpoids et les sujets obèses affectés d’une obésité sarcopénique et soumis à un régime alimentaire, les sujets diabétiques ou prédiabétiques, et/ou les sujets affectés d’une cachexie, notamment liée à un cancer, à une maladie inflammatoire de l’intestin ou à une bronchopneumopathie chronique obstructive, à une immobilisation, à une situation de « grands brûlés », septiques ou ayant subi une infection virale, à une convalescence et/ou à une immobilisation, et/ou à une résection de l’intestin ou des malabsorptions intestinales.
En particulier, la souche bactérienne est choisie parmi la souche de l’espèce L. mucosae déposée auprès de la CNCM sous le numéro d’accession CNCM 1-5661, la souche de l’espèce L. mucosae déposée auprès de la DSM sous le numéro d’accession DSM 13345, la souche de l’espèce L. mucosae déposée auprès de la DSM sous le numéro d’accession DSM 13346, la souche de l’espèce L. mucosae déposée auprès de la DSM sous le numéro d’accession DSM 102820, ou un mélange de celles-ci, et en particulier est la souche de l’espèce Z. mucosae déposée auprès de la CNCM sous le numéro d’accession CNCM 1-5661.
Selon un mode de réalisation, les bactéries de l’espèce L. mucosae sont sous une forme vivante ou morte, de préférence sous une forme vivante.
En particulier, la souche bactérienne peut être comprise dans une composition comprenant un milieu physiologiquement acceptable, en particulier dans une composition orale, et plus particulièrement dans une composition orale choisie dans le groupe constitué d’un produit alimentaire, une boisson, un produit pharmaceutique, un nutraceutique, un additif alimentaire, un complément alimentaire, un produit laitier et un produit de biothérapie vivant (LBPs).
Particulièrement, la composition comprend en outre une ou plusieurs autres souches bactériennes probiotiques, en particulier choisies parmi les espèces Bifidobacterium longum, Bifidobacterium lactis, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium adolescentis, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus salivarius, Lactococcus lactis, Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis, Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces boulardii, Faecalibacterium prausnitzii, Akkermansia muciniphila, Blautia faecis, Faecalibacteium prausnitzii, Streptococcus Thermophilus ou leurs mélanges, de préférence choisis dans le groupe constitué par Bifidobacterium longum NCC3001 (ATCC BAA-999), Bifidobacterium longum NCC2705 (CNCM 1-2618), Bifidobacterium longum NCC490 (CNCM 1-2170), Bifidobacterium lactis NCC2818 (CNCM 1-3446), Bifidobacterium breve souche A, Lactobacillus johnsonii NCC533 (CNCM 1-1225), Enterococcus faecium SF 68 (NCC2768 ; NCIMB10415), Lactobacillus casei (CNCM 1-5662 et CNCM 1-5663), Streptococcus thermophilus (CNCM I-5334)et leurs combinaisons. Selon un mode de réalisation particulier, la composition est dépourvue de toute autre bactérie de l’espèce Lactobacillus.
En particulier, la composition comprend en outre un ou plusieurs prébiotiques.
Selon un second objet, l’invention concerne l’utilisation non thérapeutique d’une souche bactérienne de l’espèce Limosilactobacillus mucosae, ou un lysat ou un surnageant de culture de celle-ci, en particulier telle que définie selon l’invention, pour maintenir ou accroître la masse et/ou la fonction musculaire chez un sujet en ayant besoin, en particulier chez un sujet sélectionné parmi un sujet dénutri, un sujet âgé, en particulier un sujet âgé dénutri, et un sujet pratiquant un exercice physique intense.
Enfin, l’invention concerne la souche bactérienne Limosilactobacillus mucosae déposée auprès de la CNCM sous le numéro d’accession CNCM 1-5661.
Brève description des dessins
[Fig 1] représente la concentration de GLP-1 dans le surnageant des cellules intestinales neuroendocrines de souris SCT-1 après 4h d’incubation en présence des différentes bactéries et conditions testées. L’axe des abscisses représente les différentes conditions testées, à savoir, de gauche à droite : la souche 1 (L. casei 7), la souche 2 (L. casei 2), la souche 3 (L. camelliae), la souche 4 (L. salivarius), la souche 5 (L. rhamnosus), la souche 6 (L. reuleri), la souche CNCM 1-5661 (L. mucosae) et le témoin (négatif - dans un milieu cellulaire stérile). L’axe des ordonnées fournit la concentration en GLP-1 en pg/mL.
[Fig 2] représente la concentration de GLP-1 dans le surnageant des cellules intestinales neuroendocrines de souris SCT-1 en fonction du temps d’incubation en présence de la souche CNCM 1-5661 (L. mucosae). L’axe des abscisses représente le temps d’incubation, à savoir, de gauche à droite : 3h d’incubation, 4h d’incubation et 5h. L’axe des ordonnées fournit la concentration en GLP-1 en pg/mL.
[Fig 3] représente la concentration de GLP-1 dans le surnageant des cellules intestinales neuroendocrines de souris SCT-1 après 3h d’incubation en présence des différentes bactéries de l’espèce L. mucosae à des concentrations bactériennes différentes. L’axe des abscisses représente les différentes conditions testées, à savoir, de gauche à droite : le témoin (témoin négatif, milieu cellulaire stérile), la souche Lacticaseibacillus casei (souche A - contrôle négatif, ~5.109 UFC/mL), la souche CNCM 1-5661 (souche B - contrôle positif, -5.109 UFC/mL), la souche CNCM 1-5661 diluée au l/10ème (souche B diluée - -5.108 UFC/mL), la souche DSM 13345 (souche C - -2.109 UFC/mL), la souche DSM 13345 diluée au 1/10ème (souche C diluée - -2.108 UFC/mL), la souche DSM 13346 (souche D — 4.109 UFC/mL), la souche DSM 13346 diluée au l/10ème (souche D diluée — 4.108 UFC/mL), la souche DSM 102820 (souche E - -5.109 UFC/mL), et la souche DSM 102820 diluée au l/10ème (souche E diluée — 5.108 UFC/mL). L’axe des ordonnées fournit la concentration en GLP-1 en pg/mL. Différence significative (P<0,05). Même commentaire que précédemment, il y a une différence nette entre l’absence totale de sécrétion détectée (pour les conditions les témoins négatifs) et la sécrétion détectable de GLP-1 dans les conditions avec les bactéries Z. mucosae, toutes souches confondues, mais aucune statistique n’a été calculée (pas suffisamment de données) et ne nous a paru nécessaire en vue des résultats.
[Fig 4] représente le poids des muscles de la patte arrière de rats (en mg/g de rat) pour différents groupes de rats âgés (20 mois) après un mois d’étude. Les groupes de rats étudiés sont, de gauche à droite, sur l’axe des abscisses : les rats nourris ad libitum (AL), les rats restreints à 75-80% de l’ad libitum (R), les rats restreints et supplémentés en Z. mucosae de la souche CNCM-I5661 (R+L mucosae 15561), les rats restreints et supplémentés avec une Z. casei (R+L casei).
Description détaillée
Les inventeurs ont conduit des travaux approfondis afin d’identifier la capacité d’une espèce de bactéries, l’espèce Limosilactobacillus mucosae, à traiter et/ou prévenir des désordres nécessitant un accroissement de la production de GLP-1 chez un sujet en ayant besoin.
En effet, les inventeurs ont montré de manière inattendue que des souches de Limosilactobacillus mucosae étaient capables de stimuler la synthèse de GLP-1 par des cellules intestinales in vitro alors que d’autres souches d’espèces de lactobacilles distinctes ne sont pas capables d’induire cette synthèse de GLP-1 par les cellules intestinales. Par ailleurs, Limosilactobacillus mucosae a montré une bonne capacité de résistance aux conditions environnementales rencontrées dans l’intestin (pH acide de l’estomac et sels biliaires) ainsi qu’une bonne capacité d’adhérence aux cellules intestinales. Limosilactobacillus mucosae est abondante chez des patients atteints du syndrome de grêle court (Joly et al, biochimie 2010 ; PMID: 20172013) et est capable de coloniser un tractus digestif vierge (animal axénique) après transfert fécal (Gillard et al ; Front Physiol. 2017) ; cela indique que cette espèce est un commensal du tractus digestif. Cette capacité des Limosilactobacillus mucosae à accroître la synthèse du peptide intestinal GLP-1 et à être présente dans le tractus digestif est importante car ce peptide a de nombreux effets pléiotropes métaboliques chez l’hôte, en particulier, il améliore la sécrétion de l’insuline par le pancréas, favorise la tolérance au glucose et donc optimise/améliore les métabolismes énergétiques et azotés de l’hôte. Enfin, les inventeurs ont montré que l’administration d’une souche de Limosilactobacillus mucosae permettait d’augmenter la masse musculaire dans un modèle de rongeur sarcopénique.
Limosilactobacillus mucosae
La présente invention concerne l’utilisation d’une souche bactérienne de l’espèce Limosilactobacillus mucosae, ou un lysat ou un surnageant de culture de celle-ci.
Au sens de la présente invention, le terme « lysat » est utilisé indifféremment pour désigner l'intégralité du lysat obtenu par lyse du microorganisme concerné ou seulement une fraction de celui-ci.
L'obtention de cellules bactériennes mortes peut être effectuée par toute méthode connue de l'homme du métier.
Le lysat de cellules bactériennes est formé en tout ou partie des constituants biologiques intracellulaires et des constituants des parois et membranes cellulaires. Il contient notamment la fraction cytoplasmique cellulaire renfermant les enzymes tels que la déhydrogénase d'acide lactique, les phosphatases, les phosphokétolases et les transaldolases. A titre illustratif, les constituants des parois cellulaires sont notamment le peptidoglycane, la muréine ou mucopeptide et l'acide teichoique et les constituants des membranes cellulaires sont composés de glycérophospholipides.
Un lysat cellulaire bactérien peut être obtenu par différentes technologies, telles que par exemple par exposition des cellules bactériennes à un choc osmotique, à un choc thermique, ou bien à des ultrasons. Plus particulièrement, ce lysat peut être obtenu selon la technologie décrite dans le brevet US 4 464 362.
Par « surnageant de culture » on désigne au sens de la présente invention le milieu de culture dans lequel les souches bactériennes ont séjourné lors de leur culture, qui peut être également désigné par le terme « milieu extracellulaire » dans la présente description. En particulier, le surnageant de culture peut comprendre les métabolites produits et sécrétés par la bactérie, également appelés métabolites extracellulaires. Des exemples de métabolites sont par exemple des peptides, des glycopeptides ou des lipopeptides produits par la bactérie. Le surnageant de culture peut être brut ou avoir subi une ou plusieurs étapes pour le filtrer, le concentrer, le lyophiliser, le chauffer, etc. Ces techniques de transformation du surnageant de culture d’une bactérie sont connues de l’homme du métier.
La composition du surnageant de culture varie en fonction des conditions et des procédés de culture cellulaire de la souche bactérienne. Il comprend principalement des métabolites extracellulaires quand la biomasse est en croissance ou seulement active. Mais aussi potentiellement des métabolites intracellulaires pour des cultures en fin de phase stationnaire et quand la lyse microbienne est significativement plus importante. Une partie des cellules sont mortes et certaines ont perdu leur intégrité membranaire en lysant, en conséquence de quoi le surnageant comprendra des parois cellulaires issues des cellules mortes mais aussi des métabolites intracellulaires.
Par ailleurs, le surnageant de culture peut comprendre en outre des cellules bactériennes de l’espèce Limosilactobacillus mucosae, sous forme vivantes ou mortes.
Limosilactobacillus mucosae est une espèce bactérienne en forme de bâtonnet de bactéries lactiques isolées pour la première fois dans des intestins de porc. Elle présente une activité d’adhésion au mucus.
Limosilactobacillus mucosae est une bactérie gram-positive anaérobie stricte, qui peut toutefois se multiplier de manière réduite en présence d’oxygène. Cette espèce bactérienne est décrite notamment par Roos et al. (2000, International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology, Vol. 50 (1) : 251-258). Cette espèce bactérienne est décrite dans le microbiote humain de patients atteints de syndrome de grêle court (Drastic changes in fecal and mucosa-associated microbiota in adult patients with short bowel syndrome. Joly F, Mayeur C, Bruneau A, Noordine ML, Meylheuc T, Langella P, Messing B, Duée PH, Cherbuy C, Thomas M.Biochimie. 2010 Jul;92(7):753-61)
Concernant la désignation de certains probiotiques, et en particulier des bactéries du genre Lactobacillus, il est important de noter les changements récents intervenus dans leur classification taxonomique, comme cela est rapporté dans l’article de Zheng et al. (2020, Int. J Syst Evol Microbiol, Vol. 70 : 2782-2858). Ainsi, certains probiotiques du genre Lactobacillus documentés dans la littérature publiée précédemment à ces changements taxonomiques sont aujourd’hui désignés selon la nouvelle nomenclature en vigueur.
Ainsi, l’espèce bactérienne connue aujourd’hui sous le nom Limosilactobacillus mucosae peut également être définie dans la littérature sous le nom de Lactobacillus mucosae.
Une souche bactérienne de L. mucosae convenant selon l’invention peut être issue de matières fécales de sujets atteints de syndrome de grêle court.
Selon un mode de réalisation particulier, une souche bactérienne selon l’invention est choisie parmi la souche de l’espèce L. mucosae déposée auprès de la CNCM sous le numéro d’accession CNCM 1-5661, la souche de l’espèce Z. mucosae déposée auprès de la DSM sous le numéro d’accession DSM 13345, la souche de l’espèce L. mucosae déposée auprès de la DSM sous le numéro d’accession DSM 13346, la souche de l’espèceZ. mucosae déposée auprès de la DSM sous le numéro d’accession DSM 102820, ou un mélange de celles-ci, et en particulier est la souche de l’espèce L. mucosae déposée auprès de la CNCM sous le numéro d’accession CNCM 1-5661.
Selon un mode de réalisation particulier, les souches bactériennes de l’espèce L. mucosae sont sous une forme vivante ou morte, de préférence sous une forme vivante.
Par « souche bactérienne morte » on entend, au sens de l’invention, une cellule bactérienne qui n’est définitivement plus capable de se multiplier et en conséquence de former une colonie en culture. A la différence d’un lysat, une souche bactérienne morte peut conserver toute son intégrité membranaire.
Une souche bactérienne morte peut être obtenue par toute méthode de mort cellulaire connue. Selon un mode de réalisation particulier de l’invention, les cellules bactériennes mortes selon l’invention peuvent notamment être obtenues par exposition à une forte chaleur (par exemple par exposition à un protocole UHT).
Ainsi, au sens de la présente invention, et notamment dans les exemples du présent texte, le terme « vivante(s) », sauf indication contraire, désigne des cellules bactériennes vivantes, y compris les cellules bactériennes stabilisées, c’est-à-dire des cellules bactériennes viables et revivifiables (par toutes les méthodes de stabilisation connues, par exemple par la congélation, la lyophilisation ou le séchage par atomisation).
Compositions La présente description concerne aussi une composition comprenant une souche bactérienne de l’espèce Limosilactobacillus mucosae, ou un lysat ou un surnageant de culture de celle-ci.
Ainsi, selon un mode de réalisation particulier, une souche bactérienne selon l’invention est comprise dans une composition comprenant un milieu physiologiquement acceptable.
Les termes « milieu physiologiquement acceptable » sont destinés à désigner un milieu qui est compatible avec l’organisme de l’individu auquel ladite composition doit être administrée. Il peut s’agir, par exemple, d’un solvant non toxique tel que l’eau. Le milieu peut également être un aliment, en particulier lorsque la souche bactérienne selon l’invention est comprise dans une composition nutritionnelle, telle que définie plus bas. Le milieu peut également être un mucus, tel que le mucus d’escargot. Un mucus convenant comme milieu selon la présente invention peut notamment être obtenu comme décrit dans Gillard et al. (Enhanced Ghrelin Levels and Hypothalamic Orexigenic AgRP and NPY Neuropeptide Expression in Models of Jejuno-Colonic Short Bowel Syndrome, Sci Rep. 2016 Jun 21;6:28345).
En particulier, ledit milieu est compatible avec une administration orale.
Une composition telle que décrite peut être une composition nutritionnelle.
A titre d’exemple, un sujet sportif chez lequel il est nécessaire de maintenir ou d’augmenter la masse musculaire, ne présente pas de pathologie et ne nécessite qu’un apport de nature nutritionnelle. Selon un autre exemple, la composition selon la présente description peut être une composition nutritionnelle destinée à des personnes âgées dénutries, à des personnes en surpoids, dénutries par exemple du fait de la pratique d’un régime alimentaire.
La présente description concerne aussi une composition pharmaceutique comprenant une souche bactérienne de l’espèce L. mucosae, ou un lysat ou un surnageant de culture de celle-ci, qui est destinée à des sujets présentant, ou susceptibles de présenter, une pathologie sur laquelle ladite composition possède un effet prophylactique ou thérapeutique. A titre d’exemple, une composition selon la présente description consiste en une composition pharmaceutique lorsqu’elle est destinée à prévenir ou traiter une dérégulation de l’insulino- sensibilité et/ou de la glycémie, comme dans le cas du diabète ou du prédiabète.
Toutefois, sauf si cela est précisé spécifiquement, une composition comprenant une souche bactérienne de l’espèce L. mucosae ne diffère pas dans ses caractéristiques générales exposées dans la description, selon qu’il s’agit d’une composition nutritionnelle ou d’une composition thérapeutique. Ainsi, pour l’essentiel, une composition pharmaceutique se distingue d’une composition nutritionnelle par le fait que la composition pharmaceutique possède, chez le sujet auquel elle est administrée, un effet de prévention et/ou un effet de traitement d’une maladie. Chacune de ces compositions répond en outre à des règlementations qui lui sont propres et se distinguent par leur mode d’action. En effet, les compositions pharmaceutiques exercent une « action pharmacologique, immunologique ou métabolique »; alors que les compositions nutritionnelles ont un effet « nutritionnel ou physiologique ».
Dans certains modes de réalisation d’une composition selon la description, la souche bactérienne de l’espèce L. mucosae est utilisée comme la seule souche bactérienne présente dans la composition.
Dans certains autres modes de réalisation d’une composition selon la description, la souche bactérienne de l’espèce Z. mucosae est combinée à des bactéries d’une ou plusieurs autres souches bactériennes probiotiques, ce qui englobe des souches bactériennes probiotiques commensales.
Des exemples non limitatifs de probiotiques englobent les souches de bactéries appartenant aux genres suivants: Bifidobacterium, Lactobacillus, Lactococcus, Enterococcus, Streptococcus, Kluyveromyces, Saccharomyces, Candida, Blautia, Faecalibacterium, Akkermansia, et leurs combinaisons.
Les probiotiques peuvent être choisis dans le groupe constitué par les espèces bactériennes suivantes : Bifidobacterium longum, Bifidobacterium lactis, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium adolescentis, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei (désormais Lacticaseibacillus casei), Lactobacillus paracasei (désormais Lacticaseibacillus paracasei), Lactobacillus salivarius (désormais Ligilactobacillus salivarius), Lactobacillus lactis (désormais Lactobacillus delbrueckii subsp. Lactis), Lactobacillus rhamnosus (désormais Lacticaseibacillus rhamnosus), Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus plantarum (désormais Lactiplantibacillus plantarum subsp. Plantarum), Lactococcus lactis, Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis, Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces boulardii, Akkermansia muciniphila, Blautia faecis, Faecalibacteium prausnitzii, Streptococcus thermophilus ou leurs mélanges. Selon un mode de réalisation particulier, une composition telle que décrite comprend en outre une ou plusieurs autres souches bactériennes probiotiques, en particulier choisies parmi les espèces Bifidobacterium longum, Bifidobacterium lactis, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium adolescentis, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus salivarius, Lactococcus lactis, Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis, Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces boulardii, Faecalibacterium prausnitzii, Akkermansia muciniphila, Blautia faecis, Streptococcus Thermophilus ou leurs mélanges, de préférence choisis dans le groupe constitué par Bifidobacterium longum NCC3001 (ATCC BAA-999), Bifidobacterium longum NCC2705 (CNCM 1-2618- cité dans CA2761573 Al), Bifidobacterium longum NCC490 (CNCM 1-2170 - cité dans W02006037922 Al), Bifidobacterium lactis NCC2818 (CNCM 1-3446 - cité dans W02008116916 Al), Bifidobacterium breve souche A, Lactobacillus johnsonii NCC533 (CNCM 1-1225 - cité dans WO2017060468), Enterococcus faecium SF 68 (NCC2768 ; NCIMB10415), Lactobacillus casei (CNCM 1-5662 et CNCM 1-5663 - cités dans Giron et al., Front Nutr. 2022; 9: 928798, Published online 2022 Aug 10), Streptococcus thermophilus (CNCM 1-5334 - cité dans EP3826655 Bl) et leurs combinaisons.
Dans un mode de réalisation particulier, la composition est dépourvue de toute autre bactérie de l’espèce Lactobacillus.
Dans certains modes de réalisation, la composition comprend aussi un ou plusieurs prébiotiques. Le terme « prébiotique » est utilisé dans son sens conventionnel dans l’état de la technique. Les prébiotiques consistent en des substances alimentaires favorisant la croissance de bactéries probiotiques, y compris les bactéries comprises dans le microbiote.
Des exemples non limitatifs de prébiotiques comprennent : les oligosaccharides contenant éventuellement du fructose, du galactose, du mannose ; les fibres alimentaires, en particulier les fibres fermentescibles, les fibres de soja ; l'inuline ; les oligosaccharides du lait humain (HMO) ; les polyphénols ; la chicorée, le mucus, et leurs combinaisons. Les prébiotiques préférés sont les fructo-oligosaccharides (FOS), les galacto-oligosaccharides (GOS), les isomalto-oligosaccharides (IMO), les xylo-oligosaccharides (XOS), les arabino- xylo-oligosaccharides (AXOS), les mannan-oligosaccharides (MOS), les oligosaccharides de soja, glycosyl sucrose (GS), lactosucrose (LS), lactulose (LA), palatinose- oligosaccharides (PAO), malto-oligosaccharides, les amidons résistants, les gommes et/ou hydrolysats de celles-ci, pectines et/ou hydrolysats de celles-ci, ou des combinaisons de ceux-ci.
Les prébiotiques peuvent également comprendre des peptides, des protéines et des sécrétions complexes de peptides, de sucres, de soufre comme le mucus (mucus intestinal par exemple). Chez le porc, il a été testé un effet positif de oligosaccharides mannane et de L. mucosae (PMID: 34879142 ; J Anim Sci. 2021 Dec 1 ;99(12)). Il a également été montré qu’un régime riche en fibres permettait d’induire la culture de L. mucosae (Lactobacillus Mucosae Strain Promoted by a High-Fiber Diet Microorganisms. 2020 Aug 12;8(8):1225. PMID: 32806628)
Dans certains modes de réalisation, la composition comprend l’association entre un probiotique et un prébiotique, que l’on appelle alors « symbiotique ». Le terme « symbiotique » est utilisé dans son sens conventionnel dans l’état de la technique. Les symbiotiques ont pour objectif d’améliorer la survie du probiotique et d’accroître ses propriétés biologiques.
Des exemples non limitatifs de symbiotiques comprennent l'association bifidobactéries/fructo-oligosaccharides, lactobacilles/lactilol ou encore bididobactéries/galacto-oligosaccharides.
Dans certains modes de réalisation, la composition comprend de plus une ou plusieurs vitamines. Les vitamines peuvent être l'acide folique, la vitamine B 12 et la vitamine B6, en particulier l'acide folique et la vitamine B 12, plus particulièrement l'acide folique. Dans certains modes de réalisation, la composition comprend une ou plusieurs vitamines qui sont liposolubles, par exemple une ou plusieurs vitamines parmi la vitamine A, la vitamine D, la vitamine E et la vitamine K ou hydrosolubles, telle que la vitamine C.
Dans certains modes de réalisation, la composition comprend un ou plusieurs polyphénols, tels que les flavanols, les flavanones, les flavonols, les acides hydroxy cinnamiques et les anthocyanes.
Dans certains modes de réalisation, la composition comprend en outre un ou plusieurs minéraux. Les minéraux peuvent être choisis parmi le sodium, le potassium, le chlorure, le calcium, le phosphate, le magnésium, le fer, le zinc, le cuivre, le sélénium, le manganèse, le fluor, l'iode, le chrome ou le molybdène. Les minéraux sont généralement ajoutés sous forme de sel. Les minéraux peuvent être ajoutés seuls ou en combinaison. Dans certains modes de réalisation, une composition selon la présente description comprend généralement des supports ou des véhicules. Les "supports" ou "véhicules" désignent des matériaux adaptés à l'administration et comprennent tout matériau connu dans l’état de la technique, tel que, par exemple, tout liquide, gel, solvant, diluant liquide, agent solubilisant ou autre, qui est non toxique et qui n'interagit pas avec les composants de la composition de manière délétère. Des exemples de supports nutritionnellement acceptables comprennent, par exemple, l'eau, les solutions salines, les alcools, les silicones, les cires, la vaseline, les huiles végétales, les polyéthylèneglycols, le propylèneglycol, les liposomes, les sucres, la gélatine, le lactose, l'amylose, le stéarate de magnésium, le talc, les agents tensioactifs, l'acide silicique, la paraffine visqueuse, l'huile de parfum, les monoglycérides et diglycérides d'acides gras, les esters d'acides gras de pétrole, l'hydroxyméthylcellulose, la polyvinylpyrrolidone, etc..
Dans certains modes de réalisation, la composition comprend de plus tout autre ingrédient ou excipient connu pour être employé dans le type de composition en question. Des exemples non limitatifs de tels ingrédients comprennent : des protéines, des acides aminés, des glucides, des oligosaccharides, des lipides, des nucléotides, des nucléosides, d'autres vitamines, des minéraux, des métabolites bactériens, des molécules bio-actives et d'autres micronutriments.
Par exemple, une souche bactérienne selon l’invention peut être combinée avec des protéines afin de limiter la fonte musculaire du sujet à qui elle est administrée.
Selon un autre exemple, une souche bactérienne selon l’invention peut être combinée avec des acides gras polyinsaturés n-3 afin d’augmenter l’insulino-sensibilité des sujets.
Dans certains modes de réalisation, la composition contient une source de glucides, par exemple sous forme des prébiotiques, ou des prébiotiques lorsqu’ils sont présents dans la composition. Toute source de glucides que l'on trouve habituellement dans les préparations pour nourrissons, comme le lactose, le saccharose, la maltodextrine, l'amidon et leurs mélanges, peut être utilisée, bien que la source préférée de glucides soit le lactose.
Dans certains modes de réalisation, une composition selon la présente description consiste en une composition nutritionnelle. Dans certains modes de réalisation, la composition nutritionnelle est choisie parmi les compositions alimentaires complètes, les compléments alimentaires, les compositions nutraceutiques et autres. La composition de la présente description peut être utilisée en tant qu'ingrédient alimentaire et/ou ingrédient d'aliments pour animaux. L'ingrédient alimentaire peut se présenter sous la forme d'une solution ou d'un solide, selon l'utilisation et/ou le mode d'application et/ou le mode d'administration. Tel qu'il est utilisé ici, le terme "aliment" fait référence à des compositions diététiques liquides (c'est-à-dire des boissons), solides ou semi-solides, en particulier des compositions alimentaires totales (remplacement d'aliments), qui ne nécessitent pas d'apport supplémentaire de nutriments ou des compositions de compléments alimentaires. Les compositions de compléments alimentaires ne remplacent pas complètement l'apport de nutriments par d'autres moyens. Tel qu'utilisé dans la présente description, le terme "ingrédient alimentaire" englobe une formulation qui est ou peut être ajoutée à des aliments fonctionnels ou à des denrées alimentaires en tant que complément alimentaire. Par "aliment nutritionnel" ou "nutraceutique" ou "fonctionnel", on entend une matière alimentaire qui contient des ingrédients ayant des effets bénéfiques sur la santé ou capables d'améliorer les fonctions physiologiques. Par "complément alimentaire", on entend une matière alimentaire ayant pour finalité de compléter un régime alimentaire normal. Un complément alimentaire est une source concentrée de nutriments ou d'autres substances ayant un effet nutritionnel ou physiologique, lorsqu'ils sont pris seuls ou en combinaison en petites quantités. Selon la présente description, "aliment fonctionnel" est utilisé pour désigner les matières alimentaires et les produits correspondants auxquels on attribue de l'importance non seulement en raison de leur valeur nutritionnelle et gustative mais aussi en raison de la présence d'ingrédients ayant des effets physiologiques bénéfiques.
Dans certains modes de réalisation, la composition est un produit laitier fermenté ou un produit à base de lait, qui est de préférence administrée ou ingérée par voie orale une ou plusieurs fois par jour. Les produits laitiers fermentés comprennent les produits à base de lait, tels que (mais sans s'y limiter) les desserts, les yaourts, les boissons au yaourt, le fromage blanc, le kéfir, les boissons à base de lait fermenté, le babeurre, les fromages, les vinaigrettes, les pâtes à tartiner à faible teneur en matières grasses, le fromage frais, les boissons à base de soja, la crème glacée, etc. Dans certains modes de réalisation, la composition est un produit fermenté à base de matrices végétales.
En variante, dans certains modes de réalisation, les compositions nutritionnelles et/ou de compléments nutritionnels peuvent être des produits non laitiers ou laitiers non fermentés. Les produits laitiers non fermentés peuvent inclure les crèmes glacées, les barres nutritionnelles et les assaisonnements, et autres. Les produits non laitiers peuvent comprendre des boissons en poudre et des barres nutritionnelles, etc. Les produits peuvent être fabriqués en utilisant des méthodes connues, telles que l'ajout d'une quantité efficace d'une souche bactérienne de l’espèce L. mucosae, ou d’une combinaison de bactéries incluant la souche bactérienne de l’espèce L. mucosae, à une base alimentaire, telle que du lait écrémé ou du lait ou une composition à base de lait, et réaliser une fermentation selon toute technique connue. Dans certains modes de réalisation, la composition est une boisson qui peut être une boisson fonctionnelle ou une boisson thérapeutique, une boisson désaltérante ou une boisson conventionnelle. À titre d'exemple, la composition selon la présente description peut être utilisée comme ingrédient pour des boissons gazeuses, un jus de fruit ou une boisson comprenant des protéines de lactosérum, des thés, des boissons au cacao, des boissons au lait, des yaourts y compris des yaourts à boire, des fromages, des crèmes glacées, des glaces à l'eau et des desserts, des confiseries, des biscuits, des gâteaux et des préparations pour gâteaux, des snacks, des aliments et boissons équilibrés, des glaçages, boisson de soja/jus acidifié, boisson au chocolat aseptique/rapportée, mélanges pour barres, préparations en poudre pour boissons, lait de soja et chocolat enrichi en calcium, boisson au café enrichie en calcium.
Dans certains modes de réalisation, la composition comprend tout autre ingrédient ou excipient connu pour être employé dans le type de composition en question. Des exemples non limitatifs de tels ingrédients comprennent : des protéines, des acides aminés, des glucides, des oligosaccharides, des lipides, des prébiotiques ou des probiotiques, des nucléotides, des nucléosides, d'autres vitamines, des minéraux et d'autres mi cronutriments .
Dans certains autres modes de réalisation, des souches bactériennes de l’espèce L. mucosae, le cas échéant en combinaison avec des bactéries probiotiques d’une ou plusieurs autres souches, sont administrées au sujet sous la forme d'une composition pharmaceutique, ce qui pourrait correspondre à un produit de type Live Biotherapeutic product (LBP) reference : Front Med (Lausanne) Rouanet et al2020 Jun 19;7:237. doi: 10.3389/fmed.2020.00237 . Par exemple, les bactéries d’intérêt peuvent être combinées avec des excipients pharmaceutiquement acceptables, et éventuellement des matrices à libération prolongée, telles que des polymères biodégradables, pour former des compositions thérapeutiques. Les termes "pharmaceutiquement" ou "pharmaceutiquement acceptable" désignent des entités moléculaires et des compositions qui ne produisent pas de réaction indésirable, de réaction allergique ou autre lorsqu'elles sont administrées à un mammifère, en particulier à l'homme, selon le cas. Un support ou excipient pharmaceutiquement acceptable désigne une charge, un diluant, un matériau d'encapsulation ou un auxiliaire de formulation non toxique, solide, semi-solide ou liquide, de n'importe quel type. Dans les compositions pharmaceutiques de la présente description pour une administration orale, sublinguale, sous-cutanée, intramusculaire, intraveineuse, transdermique, locale ou rectale, l’ingrédient actif ou la combinaison d’ingrédients actifs ingrédients actifs, peut être administré sous une forme d'administration unitaire, en mélange avec des supports pharmaceutiques classiques, à des animaux et des êtres humains. Les formes d'administration unitaires appropriées comprennent les formes d'administration par voie orale telles que les comprimés, les capsules de gel, les poudres, les granules et les suspensions ou solutions orales, les formes d'administration sublinguale et buccale, les aérosols, les implants, les formes d'administration sous-cutanée, transdermique, topique, intrapéritonéale, intramusculaire, intraveineuse, sous-cutanée, transdermique, intrathécale et intranasale et les formes d'administration rectale. Typiquement, les compositions pharmaceutiques contiennent des véhicules qui sont pharmaceutiquement acceptables pour une formulation susceptible d'être injectée. Il peut s'agir notamment de solutions salines isotoniques, stériles (phosphate monosodique ou disodique, chlorure de sodium, de potassium, de calcium ou de magnésium et similaires ou de mélanges de ces sels), ou de compositions sèches, notamment lyophilisées, qui par addition, selon le cas, d'eau stérilisée ou de sérum physiologique, permettent la constitution de solutions injectables. Les formes pharmaceutiques adaptées à l'usage injectable comprennent les solutions ou dispersions aqueuses stériles ; les formulations comprenant de l'huile de sésame, de l'huile d'arachide ou du propylène glycol aqueux ; et les poudres stériles pour la préparation extemporanée de solutions ou dispersions stériles injectables. Dans tous les cas, la forme doit être stérile et doit être fluide au point de pouvoir être facilement serrée. La composition pharmaceutique doit être stable dans les conditions de fabrication et de stockage et doit être préservée de l'action contaminante des microorganismes, tels que les bactéries et les champignons. Les solutions comprenant les composés de la divulgation sous forme de base libre ou de sels pharmacologiquement acceptables peuvent être préparées dans de l'eau mélangée de manière appropriée avec un agent tensioactif, tel que l'hydroxypropylcellulose. Des dispersions peuvent également être préparées dans du glycérol, des polyéthylèneglycols liquides et leurs mélanges, ainsi que dans des huiles. Dans des conditions ordinaires de stockage et d'utilisation, ces préparations contiennent un conservateur pour empêcher la croissance des micro-organismes. L'au moins une souche bactérienne de l’espèce L. mucosae selon la présente description peut être formulée dans une composition sous une forme neutre ou sous forme de sel. Les sels pharmaceutiquement acceptables comprennent les sels d'addition d'acide (formés avec les groupes amino libres de la protéine) et qui sont formés avec des acides inorganiques tels que, par exemple, les acides chlorhydrique ou phosphorique, ou des acides organiques tels que les acides acétique, oxalique, tartrique, mandélique, et similaires. Les sels formés avec les groupes carboxyle libres peuvent également être dérivés de bases inorganiques telles que, par exemple, les hydroxydes de sodium, de potassium, d'ammonium, de calcium ou ferriques, et de bases organiques telles que l'isopropylamine, la triméthylamine, l'histidine, la procaine et similaires.
Selon un mode de réalisation particulier, une souche bactérienne selon l’invention est comprise dans une composition orale, et plus particulièrement dans une composition orale choisie dans le groupe constitué d’un produit alimentaire, une boisson, un produit pharmaceutique, un nutraceutique, un additif alimentaire, un complément alimentaire, un produit laitier et un produit de biothérapie vivant (LBPs).
Au sens de la présente description, le terme "quantité thérapeutiquement efficace" est une expression équivalente qui se réfère à la quantité d'une thérapie (par ex, un agent prophylactique ou thérapeutique), qui est suffisante pour réduire la gravité et/ou la durée d'une maladie, améliorer un ou plusieurs de ses symptômes, empêcher la progression d'une maladie ou provoquer la régression d'une maladie, ou qui est suffisante pour aboutir à la prévention du développement, de la récurrence, de l'apparition ou de la progression d'une maladie ou d'un ou plusieurs de ses symptômes, ou renforcer ou améliorer le ou les effets prophylactiques et/ou thérapeutiques d'une autre thérapie (par exemple, un autre agent thérapeutique) utile pour traiter une maladie. Typiquement, dans une composition pharmaceutique selon la présente description, les souches bactériennes de l’espèce L. mucosae sont présentes en une quantité suffisante pour induire une réduction de l’insulinorésistance chez le sujet traité. La mesure de T insulino-rési stance chez un sujet peut être réalisée selon toute technique connue de l’homme du métier. De manière préférée, la mesure de l’insulino-résistance chez un sujet est réalisée par le calcul de l’indice HOMA IR, comme illustré dans les exemples. La méthode HOMA IR (pour « HomeOstasis Model Assessement for Insulin Resistance »), qui a été développée à partir de la modélisation mathématique des réponses quantitatives des principaux organes du métabolisme du glucose. La valeur de l’indice HOMA IR est obtenue à l’aide d’une valeur plasmatique d’insuline ou de C-peptide et de glycémie à jeun (Sheen, 2007, Thérapie, Vol. 62 : 311-318). La survenue et/ou le niveau d’insulino-résistance peut aussi être établi par la mesure de la glycémie à jeun, par la mesure de l’insulinémie à jeun ou encore par le test OGTT (pour « Oral Glucose Tolerance Test », ou « épreuve d’hyperglycémie provoquée » - Voir par exemple, « Mesure de l’insulinorésistance et de la tolérance au glucose », 2006, Haute Autorité de Santé (HAS), France).
Dans une composition selon la description, qu’il s’agisse d’une composition nutritionnelle ou alimentaire, le cas échéant d’un complément alimentaire, ou qu’il s’agisse d’une composition pharmaceutique, la ou les bactéries peuvent se présenter sous des formes variées, par exemple sous forme liquide ou sous forme de poudre. La ou les bactéries peuvent se présenter sous forme lyophilisée.
La quantité de bactéries de l’espèce L. mucosae qui est apportée au sujet peut être variable, selon l’état physiologique dudit sujet, et notamment selon le niveau de déséquilibre apport en nutriments par rapport au besoin en nutriments dudit sujet. La quantité de bactéries de l’espèce L. mucosae qui doit être apportée audit sujet peut être aisément adaptée par l’homme du métier.
Dans des modes de réalisation préférés, que la composition soit une composition nutritionnelle ou une composition pharmaceutique, la composition comprend une quantité de bactéries de l’espèce L. mucosae qui est appropriée pour un apport quotidien, de préférence un apport oral quotidien, d’au moins 103 unités formant colonies (ou « CFU » pour « Colony Forming Units »). Dans ces modes de réalisation préférés, l’apport quotidien, en particulier l’apport oral quotidien, en bactéries de l’espèce L. mucosae est au plus de 1013 unités formant colonies (ou « CFU » pour « Colony Forming Units »).
Dans les modes de réalisation dans lesquels la composition comprend de plus d’autres bactéries probiotiques, la quantité de ces bactéries probiotiques est déterminée par l’homme du métier sur la base de ses connaissances générales. La quantité de ces autres bactéries probiotiques peut varier de 103 à 1013 autres bactéries probiotiques.
Dans certains modes de réalisation, une composition selon la présente description comprend généralement des supports ou des véhicules. Les "supports" ou "véhicules" désignent des matériaux adaptés à l'administration et comprennent tout matériau connu dans l’état de la technique, tel que, par exemple, tout liquide, gel, solvant, diluant liquide, agent solubilisant ou autre, qui est non toxique et qui n'interagit pas avec les composants de la composition de manière délétère. Des exemples de supports nutritionnellement acceptables comprennent, par exemple, l'eau, les solutions salines, les alcools, les silicones, les cires, la vaseline, les huiles végétales, les polyéthylèneglycols, le propylèneglycol, les liposomes, les sucres, la gélatine, le lactose, l'amylose, le stéarate de magnésium, le talc, les agents tensioactifs, l'acide silicique, la paraffine visqueuse, l'huile de parfum, les monoglycérides et diglycérides d'acides gras, les esters d'acides gras de pétrole, l'hydroxyméthylcellulose, la polyvinylpyrrolidone, etc..
Dans d’autres modes de réalisation d’une composition selon la présente description, ladite composition se présente sous la forme d’une composition pharmaceutique comprenant un ou plusieurs excipients pharmaceutiquement acceptables.
Une telle composition pharmaceutique peut être présentée sous la forme d’un emballage comprenant une pluralité d’unités de dosage.
Le terme « unité de dosage » est utilisé dans son sens conventionnel en pharmacie (par exemple une pilule, une gélule, un comprimé, le contenu d’une ampoule, etc.).
Utilisations
GLP-1 est un peptide qui a de nombreux effets métaboliques chez l’hôte, en particulier, il améliore la sécrétion de l’insuline par le pancréas, favorise la tolérance au glucose et donc optimise les métabolismes énergétiques et azotés de l’hôte. Les inventeurs ont montré de manière surprenante que les bactéries de type Limosilactobacillus mucosae permettaient d’accroître la production de GLP-1 in vitro, et ainsi de prévenir ou limiter les effets métaboliques de pathologies ou états liés à un déficit d’action du GLP-1 : état d’insulino résistance (par exemple diabète de type II), maladies métaboliques difficulté de régulation de la prise alimentaire, régulation des troubles du transit, etc.
Comme cela apparaîtra dans la description, une souche bactérienne de l’espèce L. mucosae selon l’invention ou une composition la comprenant sont principalement destinées à prévenir et/ou traiter :
(i) un désordre lié à une dérégulation de l’insulino-sensibilité et/ou de la glycémie, ou
(ii) la perte de masse musculaire et/ou de fonction musculaire.
Selon un mode de réalisation particulier, la perte de masse musculaire et/ou de fonction musculaire est liée à une insulino-résistance.
Ces désordres sont liés à un déficit d’action du GLP-1.
Une souche bactérienne de l’espèce L. mucosae selon l’invention ou une composition la comprenant peuvent notamment être utiles dans la prévention et /ou le traitement de désordres liés au transit ou de désordres de la régulation de l’appétit.
Selon un mode de réalisation particulier, la souche bactérienne est comprise dans une composition comprenant un milieu physiologiquement acceptable, telle que définie plus haut.
Dans le contexte de la présente description, le terme « prévenir » ou « prévention » désigne la réduction à un degré moindre du risque ou de la probabilité d’occurrence d’un phénomène donné, c’est-à-dire, dans la présente invention, les désordres nécessitant un accroissement du niveau de GLP-1.
Dans le présent texte, on entend par « traiter » ou « traitement » le soulagement ou l’atténuation de processus pathologiques, ou le soulagement ou l’atténuation d’un ou plusieurs symptômes liés à un processus pathologique, et en particulier à l’un des désordres décrits dans la demande nécessitant un accroissement du niveau de GLP-1. La présente description concerne les utilisations nutritionnelles et les utilisations thérapeutiques d’une souche bactérienne ou d’une composition telle que définie dans la présente demande.
Les caractéristiques de composition, y compris d’une composition nutritionnelle et d’une composition thérapeutique, y compris dans divers modes de réalisation, sont décrites en détail dans la présente description, ce qui inclut les quantités d’ingrédient(s) actif(s), spécialement les quantités de bactéries de l’espèce L. mucosae comprises dans ces compositions.
(i) Désordres liés à la dérégulation de l’insulino-sensibilité et/ou de la glycémie
Une dérégulation de la sensibilité à l’insuline, comme notamment l’apparition d’une résistance à l'insuline, ou insulino-rési stance, décrit une situation où les cellules hépatiques, musculaires et adipeuses par exemple deviennent résistantes à l'insuline. Il y a alors moins de glucose qui entre dans ces cellules et celui-ci reste dans le sang. En réponse à la résistance à l'insuline, les cellules pancréatiques sécrétant l'insuline ont tendance à en produire davantage (hyperinsulinémie) et peuvent finir par s'épuiser. La production d'insuline devient alors insuffisante et le taux de glucose dans le sang trop élevé (hyperglycémie). La résistance à l’insuline peut également concerner d’autres métabolismes régulés par l’insuline comme le métabolisme protéique. En effet, l’insuline, combinée au repas, est un stimulateur majeur de l’anabolisme protéique musculaire. La résistance à l’insuline contribue donc à ce titre à la fonte musculaire par défaut d’anabolisme dans le muscle, lors notamment à la prise du repas.
La régulation de la glycémie est le processus par lequel le taux de glucose dans le sang, dit glycémie, est maintenu proche d'une valeur bénéfique pour l'organisme. Cette régulation fait partie des processus de maintien de l'homéostasie au sein de l'organisme. La glycémie à jeun normale chez l'homme est statistiquement comprise entre 0.70 et 1.10 g/L. Lorsque la glycémie est anormalement supérieure ou inférieure à ce seuil, on parle de dérégulation.
Les principaux désordres liés à une dérégulation de l’insulino-sensibilité et/ou de la glycémie selon le présent texte sont le prédiabète, le diabète de type 1 et le diabète de type 2. Ils peuvent être causé par l’obésité ou non. Or, l’activation des récepteurs exprimés au niveau des cellules à insuline (P) et de certains tissus périphériques par le GLP-1 stimule la sécrétion d’insuline (effet insulinotropic) mais aussi active la transcription du gène de l’insuline et augmente la biosynthèse d’insuline et inhibe la libération du glucagon (effet glucagon statique).
Par « prédiabète », on entend désigner un état physiopathologique caractérisé, notamment, par une glycémie élevée par rapport à la normale, mais inférieure au seuil de définition du diabète de type 2. Une glycémie à jeun est considérée comme étant (i) normale entre 0.70 et 1.10 g/1, (ii) signe de prédiabète entre 1.10 et 1.25 g/1 et (iii) signe de diabète quand > 1.25 g/1. Le prédiabète n’induit généralement pas de symptômes, mais est souvent associé à une obésité, une dyslipidémie, et de l’hypertension. C’est un facteur de risque de maladies cardiovasculaires. Le prédiabète se caractérise, notamment, par une intolérance au glucose. La stimulation de la sécrétion de l’insuline et du glucagon par le pancréas par GLP1 contrôle les excursions glycémiques, par réduction de la glycémie à jeun. GLP1 induit le captage du glucose et son stockage hépatique et inhibe la néoglucogenèse. Par ailleurs, et de manière complémentaire à l’augmentation de la sécrétion d’insuline, GLP1 joue aussi un rôle dans l’amélioration de la sensibilité à l’insuline de nombreux tissus, incluant le muscle (Muller et al., 2019, Mol Metab).
Par « diabète de type 1 » ou « DTI », on entend désigner une maladie chronique qui se caractérise par l’absence totale de production d’insuline chez un individu. La personne vivant avec le diabète de type 1 dépend donc d’injections quotidiennes d’insuline ou d’une pompe à insuline pour assurer sa survie. Comme expliqué ci-dessus pour le prédiabète, le GLP1 joue de nombreux rôles dans le contrôle de la glycémie, notamment par le contrôle de la stimulation de la sécrétion d’insuline et de glucagon, le captage du glucose et son stockage hépatique, l’inhibition de la néoglucogenèse, et l’amélioration de la sensibilité à l’insuline de nombreux tissus.
Par « diabète de type 2 » ou « DT2 », on entend désigner une maladie chronique qui se déclare lorsque le pancréas ne produit pas suffisamment d’insuline (hormone régulatrice de la glycémie), ou lorsque l’organisme n’est pas capable d’utiliser efficacement l’insuline qu’il produit.
Selon un mode de réalisation particulier, le désordre lié à la dérégulation de la glycémie est un diabète de type 2. (ii) Perte de la masse musculaire et/ou de la fonction musculaire
Selon un mode de réalisation particulier, le désordre à prévenir et/ou traiter est une perte de masse et/ou de fonction musculaire, caractérisée en ce que le sujet en ayant besoin est choisi parmi les sujets âgés affectés par une sarcopénie, les sujets en surpoids et les sujets obèses affectés d’une obésité sarcopénique et soumis à un régime alimentaire, les sujets affectés d’une cachexie, notamment liée à un cancer, à une maladie inflammatoire de l’intestin ou à une bronchopneumopathie chronique obstructive, les sujets immobilisés, les sujets diabétiques ou prédiabétiques, les sujets « grands brûlés », septiques ou ayant subi une infection virale, les sujets en convalescence et/ou immobilisés, et les sujets ayant subi une résection de l’intestin ou présentant des malabsorptions intestinales.
Les sujets ayant perdu de la masse musculaire dans les états sus-cités sont généralement résistants à l’action anabolique du repas et/ou à l’action de l’insuline. Si les sujets subissant une fonte musculaire importante sont souvent insulino-résistants, tous les sujets insulino-résistants ou prédiabétiques ne sont pas nécessairement en situation de fonte musculaire qui est un phénomène qui peut s’installer progressivement au cours du temps, avec la fonte musculaire et le développement de l’insulino-rési stance fortement liés métaboliquement (Daily and Park, 2022 Cells - DOI : 10.3390/cells 11030338)
En effet, il est connu que le GLP-1 présente des propriétés avantageuses permettant d’optimiser l’utilisation énergétique des nutriments et limiter la fonte musculaire (Hong et al., Journal of Cachexia, Sarcopenia and Muscle 2019; 10: 903-918), notamment chez des individus insulino-résistants (Massimo et al., The Impact of Glucose-Lowering Drugs on Sarcopenia in Type 2 Diabetes: Current Evidence and Underlying Mechanisms. Cells 2021, 10, 1958).
La perte de la masse musculaire peut être mesurée par différentes technologies connues de l’homme de l’art comme par exemple le périmètre brachial, l’impédance bioélectrique, Tabsorptiométrie bioénergétique à rayons X (DXA) et la tomodensitométrie (Mareschal et al, 2019 Journal of Clinical Medicine, doi: 10.3390/jcm8071040).
La perte de la fonction musculaire (force, puissance, performances physique) peut être mesurée par différentes technologies connues de l’homme de l’art comme par exemple le grip test (test de préhension utilisant un dynamomètre), vitesse de marche 6 minutes, 30 s chair stand test (lever de chaise), test SPPB (Short Physical Performance Battery) qui combine de la vitesse de marche, d’équilibre, de lever de chaise), le test « time to get up and go » (consiste à se lever de chaise, marcher 3 mètre, demi-tour et se rasseoir) (Beaudart et al 2019, Calcified Tissue International, doi : 0.1007/s00223-019-00545-w ).
Par « sujet âgé », au sens de la présente description, on entend un sujet humain ou un sujet mammifère non humain, y compris un animal de compagnie tel que le chien ou le chat, qui présente des signes de sénescence tels qu’une altération de fonctions métaboliques (par exemple absorption, digestion, excrétion, dysfonctionnement de tissus et organes), de difficultés locomotrices et d’une résistance réduite aux agressions extérieures. Par « sujet âgé », ou « personne âgée », s’agissant d’un humain, on entend un sujet ayant 65 ans ou plus. Par « sujet âgé », s’agissant d’un canin, en particulier d’un chien, on entend un sujet ayant (i) plus de 12 ans pour un canin, en particulier d’un chien, de petite taille ou (ii) plus de 9 ans pour un canin, en particulier d’un chien, de taille moyenne, ou (iii) plus de 7 ans, pour un canin, en particulier d’un chien, de grande taille. Par « sujet âgé », s’agissant d’un félin, en particulier d’un chat, on entend un sujet ayant plus de 13 ans.
La sarcopénie (mot issu du grec qui peut être traduit par « manque de chair »), initialement définie par une perte de masse squelettique musculaire, est actuellement caractérisée par une perte de masse musculaire associée à une dégradation fonctionnelle (European Working Group on Sarcopenia in Older People (EWGSOP) - Cruz Jentoft et al, 2019 Age and Aging). Après s’être développée jusqu’à l’âge de 20 à 30 ans, la masse musculaire diminue d’environ 1 % par an, même chez les personnes en bonne santé. Ce processus s’accélère entre 50 et 60 ans. La sarcopénie retentit sur les performances physiques, favorise les troubles de la marche et constitue un facteur de fragilité et de risque accru de dépendance, en particulier chez les personnes âgées. A noter que la sarcopénie ne touche pas uniquement les personnes âgées mais également des populations insulino- résistantes comme les obèses, on parle ainsi d’obésité sarcopénique (Working Group from European Society for Clinical Nutrition and Metabolism (ESPEN) and European Association for the Study of Obesity (EASO) - Donini et al, 2022, Obesity Facts). Cette fonte musculaire peut également intervenir sur des pas de temps plus courts, en particulier dans les situations cataboliques intenses tels les cancers et les traitements puissants associés comme les chimiothérapies. Dans ce cas, on parle plutôt de cachexie (voir plus bas). La sarcopénie est associée à une augmentation du risque de chutes et de fractures entraînant des immobilisations qui, à leur tour, viennent aggraver la sarcopénie. On assiste ainsi à un effet « boule de neige » amplificateur de la perte de masse et de fonction musculaire liée à l’âge.
Par « obésité », on entend désigner un état physiopathologique dans lequel un individu présente, notamment, une prise de poids et un excès de tissu adipeux, généralement induit par un régime obésogène, comprenant, notamment, une consommation excessive d’aliments caloriques, des prédispositions génétiques ou une pratique sportive insuffisante ou inexistante. Un individu déclaré comme obèse possède un indice de masse corporel (IMC) supérieur à 30. L’indice de masse corporel, selon une définition officielle de l’Organisme Mondiale de la Santé (OMS), est l’indicateur des risques pour la santé associée à un poids excessif et à un poids insuffisant. L’IMC se calcule en divisant le poids de l’individu (en kilogrammes) par sa taille (en mètres) élevée au carré. Une valeur d’IMC est associée à une corpulence spécifique selon la classification donnée par l’OMS.
A la différence d’un individu « obèse », on entend par un « individu en surpoids » un individu dont l’état n’est pas physiopathologique. Un individu en surpoids présente souvent également un excès de tissu adipeux. On considère généralement qu’un individu est en surpoids lorsqu’il possède un indice de masse corporel (IMC) compris entre 25 et 30.
On parle d’obésité sarcopénique lorsqu’un individu présente à la fois un excès de masse grasse et une réduction de la masse maigre musculaire. Cet état clinique touche le plus souvent des personnes âgées.
La « cachexie », affaiblissement profond de l’organisme, se caractérise en particulier par la fonte du tissu adipeux et des muscles. Elle est fréquente dans de nombreuses maladies, dont les cancers difficiles, voire impossible, à contrôler ou à guérir et comme précisé plus haut, intervient sur des durée beaucoup plus courtes (jours à semaines). Les cancers, en particulier ceux du pancréas et de l'estomac, entraînent une cachexie sévère. Les patients peuvent perdre 10 à 20% de leur masse corporelle. La cachexie peut également être liée à d’autres pathologies cataboliques comme une maladie inflammatoire de l’intestin ou à une bronchopneumopathie chronique obstructive, une infection virale ou un sepsis.
Il a été montré que la diminution de la mobilité est associée à une baisse de l’indice de masse musculaire et la force musculaire. Ceci est également vrai à l’inverse, car la réduction de la mobilité et de l’activité physique au sens large peut aggraver ou générer l’apparition de sarcopénie. Les sujets immobilisés sont donc susceptibles de développer une perte de masse et/ou de fonction musculaire. Il peut notamment s’agir, dans le cadre du présent texte, de sujets en convalescence et/ou immobilisés après une chute.
Les sujets dits « grands brûlés », comme dans le cas des pathologies induisant un hypermétabolisme (sepsis, attaque virale, voire cancer), se caractérisent par des besoins importants en macro et micronutriments pour répondre aux besoins accrus liés à la pathologie, en particulier dû au processus de cicatrisation (pour les « grands brûlés ») et à la réponse inflammatoire (Knuth et al 2021, American Journal of Physiology. Cell Physiology). Par ailleurs, du fait d’une inflammation élevée, on assiste généralement à l’établissement d’une résistance à l’effet anabolique du repas et à une résistance à l'insuline mentionnée plus haut comme déterminante dans l’obésité et la sarcopénie chez les sujets âgés.
Chez les sujets présentant des malabsorptions intestinales, ou ayant subi une résection intestinale, le GLP-1 peut permettre d’optimiser au mieux l’utilisation des nutriments. En effet, on constate chez les patients ayant subi une résection intestinale, une production accrue de GLP1 (Jeppesen et al 2000, Gut ; Gillard et al 2017, Front Physiol) permettant d’adapter la motilité intestinale et d’optimiser métabolisme de l’hôte au moindre apport de nutriments azotés et énergétiques. Les répercussions seront notamment notables sur les stocks énergétiques (masse grasse) et azotée (masse maigre et masse musculaire) des sujets. Une amélioration de la sécrétion intestinale de GLP-1 par ces patients, via notamment l’apport d’un probiotique GLP-1 secréteur est donc favorable chez ces sujets.
Selon un mode de réalisation particulier, le sujet à traiter, autrement appelé sujet en ayant besoin, est sujet un présentant une indication pour une administration à base d’agonistes de récepteurs de GLP-1. Un individu présentant une indication pour une administration à base d’agonistes de récepteurs de GLP-1 est un individu souffrant d’un désordre ou d’une maladie qui peut être traitée ou dont les symptômes peuvent être atténués par l’administration audit individu d’un ou plusieurs agonistes de récepteurs de GLP-1.
Les agonistes des récepteurs de GLP-1 sont le plus souvent des peptides synthétiques dont la séquence polypeptidique est proche de celle du GLP-1 et qui agissent en se fixant sur les récepteurs du GLP-1, généralement avec une stabilité accrue par rapport au GLP-1 endogène.
Des exemples d’agonistes de récepteurs de GLP-1 sont notamment l’exenatide, le liraglutide, le dulaglutide, le semaglutide, le tirzepatide, le lixisenatide, l’albiglutide, 1’ exenatide QW, le BI 456906 mazdutide (IBI362; LY3305677), le retatrutide (LY3437943), le danuglipron, 1’ exendin-4, ou le cotadutide.
Selon un mode de réalisation particulier, le sujet présentant une indication pour une administration à base d’agonistes de récepteurs de GLP-1 est choisi dans la liste consistant en des sujets insulino-résistants tels que des sujets diabétiques, des sujets en surpoids, en particulier des sujets obèses, des sujets ayant subi une chirurgie métabolique, des sujets cherchant à réguler leur appétit, des sujets souffrant de maladies hépatiques, des sujets souffrant de pathologies cardiovasculaires, en particulier souffrant de pathologies cardiovasculaires liées au diabète, de sujets souffrant d’inflammation liée au diabète et/ou à un syndrome métabolique, les sujets affectés par une sarcopénie, de sujets affectés d’une cachexie ; et des sujets souffrant de maladies neurodégénératives.
Par « chirurgie métabolique » on entend un type de chirurgie qui vise à traiter une maladie métabolique par des méthodes chirurgicales. La chirurgie métabolique, également connue sous le nom de chirurgie du diabète ou du sucre, comprend des interventions chirurgicales qui permettent de contrôler à la fois le diabète et l’obésité. Il peut s’agir d’interventions chirurgicales permettant la régulation de l’appétit, la vidange gastrique, la préférence alimentaire et/ou le goût.
Des maladies hépatiques pour lesquelles une administration à base d’agonistes de GLP-1 peut être indiquée sont par exemple la stéatohépatite non alcoolique (NASH).
Des pathologies cardiovasculaires pour lesquelles une administration à base d’agonistes de GLP-1 peut être indiquée sont notamment l’athérosclérose, l’infarctus du myocarde, l’accident vasculaire cérébral, ou l’altération du profil lipidique (cholestérol total, LDL cholestérol, ratio HDL/LDL).
Des maladies neurodégénératives pour lesquelles une administration à base d’agonistes de GLP-1 peut être indiquée sont notamment la maladie d’Alzheimer ou la maladie de Parkinson.
Selon un mode de réalisation particulier, le sujet à prévenir et/ou traiter est choisi parmi les sujets âgés affectés par une sarcopénie, les sujets en surpoids et les sujets obèses affectés d’une obésité sarcopénique et soumis à un régime alimentaire. La description décrit également une méthode de prévention et/ou de traitement de désordres nécessitant un accroissement du niveau de GLP-1 chez un sujet en ayant besoin, ladite utilisation étant choisie parmi (i) la prévention ou le traitement d’un désordre lié à une dérégulation de l’insulino-rési stance et/ou de la glycémie et (ii) la prévention ou le traitement de la perte de masse musculaire et/ou de fonction musculaire, caractérisée en ce qu’elle comprend au moins une étape d’administration d’une souche bactérienne de l’espèce Limosilactobacillus mucosae.
En outre, l’invention concerne l’utilisation non thérapeutique d’une souche bactérienne de l’espèce L. mucosae selon l’invention ou d’une composition la comprenant pour maintenir ou accroître la masse et/ou la fonction musculaire chez un sujet en ayant besoin, en particulier chez un sujet sélectionné parmi un sujet dénutri, un sujet âgé, en particulier un sujet âgé dénutri, et un sujet pratiquant un exercice physique intense.
Par « dénutri », on entend, au sens de la présente description, un « état d’un organisme en déséquilibre nutritionnel » (Voir, « Diagnostic de la dénutrition de l’enfant et de l’adulte - Méthode Recommandations pour la pratique clinique », Novembre 2019, Haute Autorité de Santé et Fédération Française de Nutrition), ledit déséquilibre étant caractérisé par un bilan énergétique et/ou protéique négatif. Cette définition englobe une pluralité de situations pouvant conduire à un état de dénutrition, comme un déficit d’apport isolé en nutriments, un accroissement des dépenses ou des pertes induisant un déséquilibre. Ce terme couvre également les sujets ayant des besoins nutritionnels exacerbés. Le déséquilibre inhérent à la dénutrition conduit à des effets délétères sur le corps, accompagnés de changements mesurables des fonctions corporelles et/ou de la composition corporelle, ces changements pouvant être associés à une aggravation de l’évolution de maladies desquelles peut être affecté le sujet.
Les « sujets âgés » sont définis plus haut.
Par « exercice physique intense », on entend une activité physique nécessitant un effort important qui entraîne une diminution du souffle et une accélération de la fréquence cardiaque. Une activité physique intense est caractérisée par un MET (Metabolic Equivalent of Task (en français : Equivalent métabolique) - 1 MET correspond à la prise d’oxygène de 3,5 mL par kilogramme de poids corporel par minute) supérieur à 6. Le MET évalue le ratio entre la consommation d’énergie au cours de l’effort physique et la consommation d’énergie au repos. Lors de l’exercice physique, et notamment chez des sujets insulino-résistants, le GLP-1 peut constituer une stratégie complémentaire intéressante pour aider à optimiser la gestion de la glycémie et reforcer l’insulino-sensibilité. Une activité physique intense entraîne également une stimulation de la production de GLP-1.
Le présent texte décrit également une méthode pour maintenir ou accroître la masse et/ou la fonction musculaire chez un sujet en ayant besoin, en particulier chez un sujet sélectionné parmi un sujet dénutri, un sujet âgé, en particulier un sujet âgé dénutri, et un sujet pratiquant un exercice physique intense, comprenant au moins l’étape d’administrer au sujet en ayant besoin au moins une souche bactérienne de l’espèce Limosilactobacillus mucosae.
Enfin, la présente invention concerne la souche de l’espèce Limosilactobacillus mucosae déposée auprès de la CNCM sous le numéro d’accession CNCM 1-5661.
L’invention est décrite ci-dessous de façon plus détaillée au moyen des exemples suivants qui sont présentés à titre d’illustration.
Exemple
1. Sélection de souches bactériennes capables de faire secréter du GLP-1
Soixante et un isolats de Lactobacillus originaires de fèces d’animaux gnotobiotiques préalablement transplantés avec les matières fécales d’un patient avec un syndrome de grêle court ont été testés. Ces lactobacilles ont un tropisme fort pour l’intestin, car ces souches sont abondantes dans les matières fécales de patients atteints de syndrome de grêle court et sont capables de coloniser le tractus digestif de rats axéniques.
Les inventeurs ont procédé à une première caractérisation morphologique, phénotypique et génomique par séquençage du gène 16S, et ont réparti les isolats en 6 espèces et 1 à 2 isolats par espèce ont été sélectionnés, pour un total de 7 souches.
Les 6 espèces sont :
Lacticaseibacillus casei (souche 1 et souche 2),
Lacticaseibacillus camelliae, (souche 3)
Ligilactobacillus salivarius, (souche 4)
Lacticaseibacillus rhamnosus. (souche 5) Limosilactobacillus reuteri, (souche 6)
Limosilactobacillus mucosae, (souche CNCM 1-5661, aussi appelée souche I-
5661)
Les souches ont été caractérisées par des tests fonctionnels à l’INRAE d’ Aurillac (Unité Mixte de Recherche sur le Fromage Aurillac, UMR 0545).
L’ensemble des souches isolées ci-dessus ont été mises en incubation sur des cellules intestinales neuroendocrines de souris SCT-1. Après incubation de 109 bactéries avec 2xl06 cellules SCT-1 à 80% de confluence pendant 4h à 37°C et 5% de CO2, le surnageant cellulaire a été récupéré et un peptide, le GLP-1, a été dosé (par méthode ELISA) dans ce surnageant.
Les résultats sont présentés dans la Figure 1.
Sur l’ensemble des souches testées, aucune n’a permis de mettre en évidence une synthèse significative de GLP-1 dans le milieu de culture, sauf la souche CNCM 1-5661 qui s’est traduite par une production très significative (P<0.05) de GLP-1 dans le milieu.
En effet, parmi toutes les souches provenant du même donneur, seule la souche de l’espèce Z. mucosae CNCM 1-5661 a permis spécifiquement d’augmenter 25 fois plus la production de GLP-1. Quand des bactéries lactiques de l’espèce Lacticaseibacillus casei, qui ont été isolées du même patient, ont été incubées dans les mêmes conditions, aucune libération de GLP-1 n’a été observée (résultats non présentés ici - voir exemple 4 et résultats associés ci-après).
Cette souche correspond à l’espèce Limosilactobacillus mucosae.
Le groupe Témoin correspond à une culture des cellules intestinales dans un milieu stérile (aucune production de GLP-1)
Résultats de l’induction de la sécrétion de GLP-1 par les cellules STC-L
Les cellules STC-1 provenant d’une collection ATCC (Reference STC-1, CRL- 3254™) et ont été mises en culture et préparées pour leur co-incubation la veille de l’expérience. Les bactéries qui avaient été congelées en culot sec ont été décongelées le jour de l’expérience et reprises dans un milieu de culture sans SVF ou antibiotique. Elles ont été préparées par dilution successives pour respecter les MOI (Multiplicity of Infection) suivantes : 1 : 10, 1 : 100 et 1 : 1000.
Les cellules STC-1, ont été lavées puis le milieu contenant la bactérie a été ajouté. Après 4h de coculture, les surnageants ont été récupérés et dénombrés. Puis les surnageants ont été conservés, ainsi que les cellules à -80°C pour le dosage ultérieur de GLP- 1. La quantité de GLP-1 a été déterminée par elisa selon les instructions du fournisseur Assay Genie (ELISA GLP-1 Mouse (ref : MOFI00854)).
La production de GLP-1 est exprimée en pg/ml.
Les définitions des termes utilisés dans le Tableau 1 ci-après sont données ici : Témoin : cellules STC-1 en présence de milieu de culture
MOI : 10 (nombre de bactéries ajoutées pour une cellule STC-1
C : indique que les bactéries CNCM-I5661 ont été cultivées dans du milieu MRS (fournisseur BD, référence : 288130, reconstitution faite selon les instructions du fournisseur), puis centrifugées et congelées sous forme de culots secs. Les culots secs ont ensuite été resuspendus dans le milieu de culture des cellules STC.
V : indique que les bactéries CNCM-I5661 ont été cultivées dans du milieu « veganMRS » (fournisseur BIOKAR, référence : BK176HA, reconstitution faite selon les instructions du fournisseur), puis centrifugées et congelées sous forme de culots secs. Les culots secs ont ensuite été resuspendus dans le milieu de culture des cellules STC-1.
61C-10 : incubation de cellules STC-1 en présence de la souche CNCM-I5661. MOI : 10 (10 fois plus de bactéries que de cellules STC-1)
61C-100 : incubation de cellules STC-1 en présence de la souche CNCM-I5661. MOI : 100 (100 fois plus de bactéries que de cellules STC-1)
61C-1000 : incubation de cellules STC-1 en présence de la souche CNCM-I5661. MOI : 1000 (1000 fois plus de bactéries que de cellules STC-1)
[Tableau 1]
Figure imgf000036_0001
Les résultats montrés dans le tableau ci-dessus indiquent un effet-dose de la souche et montrent aussi que la souche garde ses fonctions même si elle est cultivée dans un autre milieu.
Conclusion : la présence de la souche CNCM-5661 induit la production de l’entéro-hormone GLP-1 par les cellules STC-1. Cette production est d’autant plus importante que le nombre de bactéries augmente. Cette production n’est pas observée en présence de souches de l’espèce Lacticaseibacillus casei, qui proviennent du même patient. L’effet pro-GLP-1 de la souche CNCM 1-5661 n’est pas dépendant du milieu de culture utilisé pour la culture de la souche.
Par ailleurs, les inventeurs ont montré que la production de GLP-1 augmentait en fonction du temps de contact entre les bactéries de la souche CNCM 1-5661 et les cellules intestinales (voir la Figure 2).
2- Capacité de la souche CNCM 1-5661 à survivre en milieu intestinal
Pour déterminer si la souche CNCM 1-5661 est capable de survivre dans le milieu intestinal, divers tests ont été pratiqués.
Tolérance de la bactérie à l’acidité gastrique (estomac) Les bactéries ont été mises en milieu acide (pH 2,5 et 3) durant 45 et 90 minutes, correspondant à des temps moyens de résidence du bol alimentaire dans l’estomac avant passage dans le duodénum.
Les bactéries ont montré une très bonne résistance au milieu gastrique (composition : HCl, pepsine, NaCl), avec aucune différence significative entre les temps d’incubation et les deux pH testés (p > 0.05, Fisher exact test).
Les résultats sont présentés dans le tableau 2 ci-dessous.
[Tableau 2]
Figure imgf000037_0001
- Tolérance de la bactérie à l’acidité gastrique (sels biliaires)
Les inventeurs ont également testé la survie des bactéries dans des conditions rencontrées en aval de l’estomac qui incluent la présence de sels biliaires. La survie de la souche CNCM 1-5661 a donc été testée en présence de sels biliaires après Ih, 2h, 3h et 4h d’incubation à 37 °C.
Les bactéries ont montré une très bonne résistance aux sels biliaires, avec aucune différence significative entre les temps d’incubation (p > 0.05, Fisher exact test).
Les résultats sont présentés dans le tableau 3 ci-dessous.
[Tableau 3]
Figure imgf000037_0002
3- Capacité de la souche CNCM 1-5661 à adhérer aux cellules intestinales
Enfin, pour estimer le potentiel probiotique de la souche CNCM 1-5661, les inventeurs ont déterminé sa capacité à adhérer aux cellules intestinales humaines Caco-2. La détermination du nombre viable de bactéries lactiques adhérentes aux cellules intestinales a été réalisée après 3h de contact avec les cellules Caco-2 à une valeur de MOI (multiplicité de l’infection) de 0,1, 1, 10 et 100.
La souche CNCM 1-5661 a un pourcentage d’adhérence satisfaisant et similaire à d’autres micro-organismes, sans aucune différence significative entre les MOI testées (p>0.05, Fisher exact test).
Les résultats sont présentés dans le tableau 4 ci-dessous. [Tableau 4]
Figure imgf000038_0001
4- Elargissement des propriétés décrites sur la souche CNCM 1-5661 à l’ensemble de l’espèce Limosilactobacillus mucosae
La capacité d’autres souches de l’espèce Limosilactobacillus mucosae à permettre la sécrétion de GLP-1 par les cellules SCT-1 en culture a été testée sur d’autres souches de l’espèce Limosilactobacillus mucosae afin de déterminer si l’effet bénéfique observé sur la souche L. mucosae CNCM 1-5661 est également applicable à d’autres souches de la même espèce.
Trois autres souches ont donc été testées : DSM 13345, DSM 13346, et DSM 102820. Les souches CNCM 1-5661 (comme témoin positif) et une souche de L. Casei (témoin négatif, qui n’induit pas la synthèse de GLP-1) ont également été utilisées :
Témoin : milieu cellulaire stérile ;
Souche L. casei (témoin négatif) -5.109 UFC/mL (souche A) ;
L. mucosae CNCM 1-5661 (témoin positif) -5.109 UFC/mL (souche B) ;
- L. mucosae DSM 13345 (S32T) -2.109 UFC/mL (souche C) ;
L. mucosae DSM 13346 -4.109 UFC/mL (souche D) ;
L. mucosae DSM 102820 -5.109 UFC/mL (souche E) ;
Dans les conditions « diluée », les souches B à E ont été diluées au 1/10e. Les résultats, présentés dans la Figure 3, montrent qu’en présence de toutes les souches de l’espèce Limosilactobacillus mucosae testées, une synthèse de GLP-1 par les cellules SCT-1 a été observée. En outre, cette production de GLP-1 est dose dépendante.
5- Effet de la souche CNCM 1-5661 sur la masse musculaire d’un modèle de rat âgé fragile
Pour estimer l’effet probiotique anabolique sur des cibles du GLP-1, les inventeurs ont mesuré la capacité de la souche L. mucosae CNCM 1-5661 selon l’invention (montrée comme capable d’induire la synthèse de GLP-1 par les cellules SCT-1 en culture) et d’une souche de l’espèce L. casei hors invention (non inductrice de production de GLP- 1) sur la masse musculaire d’un modèle de rat âgé fragile.
Les inventeurs ont réalisé une étude in vivo sur une durée de 1 mois sur des rats âgés (20 mois) selon les groupes suivants :
- groupe nourri ad libitum (n= 15) ;
- groupe nourri à 75-80% de l’ad libitum (pour mimer la malnutrition des personnes âgées, un des facteurs de fragilité) (n=16) ;
- groupe nourri à 75-80% de l’ad libitum supplémenté chaque jour avec la bactérie CNCM 1-5661 (109 CFU) (n=13) ; et
- groupe nourri à 75-80% de l’ad libitum supplémenté chaque jour avec une bactérie de l’espèce Limosilactobacillus casei (109 CFU) (n=16).
Les animaux ont été sacrifiés à la fin de l’expérience, pesés, et les muscles de la patte arrière (gastrocnémius, Extensor digitorum longus, Soleus, Tibialis anterior) ont été excisés et pesés. La somme des poids de ces 4 muscles a été calculée et ramenée au poids des animaux.
Les résultats sont présentés en Figure 4 et montrent que seule la supplémentation en Z. mucosae CNCM-I5661 a permis aux rats restreints d’augmenter leur masse musculaire relativement aux animaux nourris ad libitum (P=0.01) et restreints (tendance , P=0.092).
Par ailleurs, la masse musculaire est similaire dans les groupes AL, R et R + L casei, suggérant qu’à la différence de L mucosae CNCM-I5661, L casei n’a pas permis d’augmenter la masse musculaire. Ceci suggère un effet spécifique de la lactobacille L mucosae CNCMI-I5661 d’augmenter la masse musculaire dans le modèle de rongeur âgé fragile contrairement à d’autres lactobacilles.
TRAITÉ DE BUDAPEST SUR LA RECONNAISSANCE INTERNATIONALE DU DÉPÔT DES MICRO-ORGANISMES AUX FINS DE LA PROCÉDURE EN MATIÈRE DE BREVETS
FORMULE INTERNATIONALE
Figure imgf000041_0001
Figure imgf000041_0002

Claims

Revendications
1. Souche bactérienne de 1 ’ espèce Limosilactobacillus mucosae, ou un ly sat ou un surnageant de culture de celle-ci, pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement de désordres nécessitant un accroissement de la production de GLP-1 chez un sujet en ayant besoin, lesdits désordres étant choisis parmi (i) un désordre lié à une dérégulation de l’insulino-sensibilité et/ou de la glycémie et (ii) la perte de masse musculaire et/ou de fonction musculaire.
2. Souche bactérienne pour son utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que le sujet en ayant besoin est un sujet présentant une indication pour une administration à base d’agonistes de récepteurs de GLP-1.
3. Souche bactérienne pour son utilisation la revendication 2, caractérisée en ce que le sujet présentant une indication pour une administration à base d’agonistes de récepteurs de GLP-1 est choisi dans la liste consistant en des sujets insulino-résistants tels que des sujets diabétiques, des sujets en surpoids, en particulier des sujets obèses, des sujets ayant subi une chirurgie métabolique, des sujets cherchant à réguler leur appétit, des sujets souffrant de maladies hépatiques, des sujets souffrant de pathologies cardiovasculaires, en particulier souffrant de pathologies cardiovasculaires liées au diabète, de sujets souffrant d’inflammation, en particulier d’inflammation liée au diabète et/ou à un syndrome métabolique, les sujets affectés par une sarcopénie, de sujets affectés d’une cachexie; et des sujets souffrant de maladies neurodégénératives.
4. Souche bactérienne pour son utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que le désordre est un désordre lié à une dérégulation de l’insulino-sensibilité et/ou de la glycémie choisi parmi le prédiabète, le diabète de type 1 et le diabète de type 2.
5. Souche bactérienne pour son utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que le désordre est une perte de masse et/ou de fonction musculaire et en ce que le sujet en ayant besoin est choisi parmi les sujets âgés affectés par une sarcopénie, les sujets en surpoids et les sujets obèses affectés d’une obésité sarcopénique et soumis à un régime alimentaire, les sujets diabétiques ou prédiabétiques, et/ou les sujets affectés d’une cachexie, notamment liée à un cancer, à une maladie inflammatoire de l’intestin ou à une bronchopneumopathie chronique obstructive, à une immobilisation, à une situation de « grands brûlés », septiques ou ayant subi une infection virale, à une convalescence et/ou à une immobilisation, et/ou à une résection de l’intestin ou des malabsorptions intestinales.
6. Souche bactérienne pour son utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisée en ce que la souche bactérienne est choisie parmi la souche de l’espèce L. mucosae déposées auprès de la CNCM sous le numéro d’accession CNCM I- 5661, la souche de l’espèce L. mucosae déposée auprès de la DSM sous le numéro d’accession DSM 13345, la souche de l’espèce Z. mucosae déposée auprès de la DSM sous le numéro d’accession DSM 13346, la souche de l’espèce Z. mucosae déposée auprès de la DSM sous le numéro d’accession DSM 102820, ou un mélange de celles-ci, et en particulier est la souche de l’espèce L. mucosae déposée auprès de la CNCM sous le numéro d’accession CNCM 1-5661.
7. Souche bactérienne pour son utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisée en ce que les bactéries de l’espèce L. mucosae sont sous une forme vivante ou morte, de préférence sous une forme vivante.
8. Souche bactérienne pour son utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisée en ce que la souche bactérienne est comprise dans une composition comprenant un milieu physiologiquement acceptable, en particulier dans une composition orale, et plus particulièrement dans une composition orale choisie dans le groupe constitué d’un produit alimentaire, une boisson, un produit pharmaceutique, un nutraceutique, un additif alimentaire, un complément alimentaire, un produit laitier et un produit de biothérapie vivant (LBPs).
9. Souche bactérienne pour son utilisation selon la revendication 8, caractérisée en ce que la composition comprend en outre une ou plusieurs autres souches bactériennes probiotiques, en particulier choisies parmi les espèces Bifidobacterium longum, Bifidobacterium lactis, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium adolescentis, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus salivarius, Lactococcus lactis, Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis, Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces boulardii, Faecalibacterium prausnitzii, Akkermansia muciniphila, Blautia faecis, Faecalibacteium prausnitzii, Streptococcus Thermophilus ou leurs mélanges, de préférence choisis dans le groupe constitué par Bifidobacterium longum NCC3001 (ATCC BAA-999), Bifidobacterium longum NCC2705 (CNCM 1-2618), Bifidobacterium longum NCC490 (CNCM 1-2170), Bifidobacterium lactis NCC2818 (CNCM 1-3446), Bifidobacterium breve souche A, Lactobacillus johnsonii NCC533 (CNCM 1-1225), Enterococcus faecium SF 68 (NCC2768 ; NCIMB10415), Lactobacillus casei (CNCM 1-5662 et CNCM 1-5663), Streptococcus thermophilus (CNCM 1-5334 ) et leurs combinaisons.
10. Souche bactérienne pour son utilisation selon la revendication 8, caractérisée en ce que la composition est dépourvue de toute autre bactérie de l’espèce Lactobacillus.
11. Souche bactérienne pour son utilisation selon l’une quelconque des revendications 8à 10, caractérisée en ce que la composition comprend en outre un ou plusieurs prébiotiques.
12. Utilisation non thérapeutique d’une souche bactérienne de l’espèce
Limosilactobacillus mucosae, ou un lysat ou un surnageant de culture de celle-ci, en particulier telle que définie dans l’une quelconque des revendications 6 à 11, pour maintenir ou accroître la masse et/ou la fonction musculaire chez un sujet en ayant besoin, en particulier chez un sujet sélectionné parmi un sujet dénutri, un sujet âgé, en particulier un sujet âgé dénutri, et un sujet pratiquant un exercice physique intense.
13. Souche bactérienne Limosilactobacillus mucosae déposée auprès de la
CNCM sous le numéro d’accession CNCM 1-5661.
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JP2025528253A JP2025537795A (ja) 2022-11-17 2023-11-17 リモシラクトバチルス・ムコサエ（Ｌｉｍｏｓｉｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｕｃｏｓａｅ）及びＧＬＰ－１増加を必要とする障害
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN118638695A (zh) * 2024-07-16 2024-09-13 新疆农业大学 一株产阿魏酸酯酶的粘液乳杆菌q2、菌悬液及制备方法和应用
CN119776241A (zh) * 2025-03-12 2025-04-08 民生中科嘉亿(山东)生物工程有限公司 改善肌少症性肥胖的乳酸乳球菌乳亚种jyll-51及其菌剂和应用
CN118638695B (zh) * 2024-07-16 2025-12-12 新疆农业大学 一株产阿魏酸酯酶的粘液乳杆菌q2、菌悬液及制备方法和应用

Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4464362A (en) 1980-06-27 1984-08-07 Estee Lauder Inc. Topical skin repair composition
WO2006037922A1 (fr) 2004-10-04 2006-04-13 L'oreal Composition cosmetique et/ou dermatologique pour peaux sensibles
WO2008116916A1 (fr) 2007-03-28 2008-10-02 Nestec S.A. Symbiotique utilisé pour améliorer le microbiote intestinal
CA2761573A1 (fr) 2009-05-11 2010-11-18 Nestec S.A. Bifidobacterium longum ncc2705 (cncm 1-2618) et troubles immunitaires
WO2017060468A1 (fr) 2015-10-07 2017-04-13 Galderma Research & Development Composition contenant des bactéries d'acide lactique et son utilisation pour traiter la dermatite atopique
EP3715449A2 (fr) 2017-11-20 2020-09-30 University - Industry Cooperation Group of Kyung Hee University Nouvelles bactéries lactiques et leur utilisation
CN111979145A (zh) 2020-08-07 2020-11-24 上海交通大学 人源的粘膜乳杆菌及其用途
WO2022065330A1 (fr) * 2020-09-23 2022-03-31 雪印メグミルク株式会社 Agent de prévention de l'atrophie musculaire
EP3826655B1 (fr) 2018-07-26 2022-10-19 Institut national de recherche pour l'agriculture, l'alimentation et l'environnement Souche de streptococcus thermophilius cnrz160 pour le traitement et la prévention de l'inflammation intestinale et des désordres associés, chez un individu

Patent Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4464362A (en) 1980-06-27 1984-08-07 Estee Lauder Inc. Topical skin repair composition
WO2006037922A1 (fr) 2004-10-04 2006-04-13 L'oreal Composition cosmetique et/ou dermatologique pour peaux sensibles
WO2008116916A1 (fr) 2007-03-28 2008-10-02 Nestec S.A. Symbiotique utilisé pour améliorer le microbiote intestinal
CA2761573A1 (fr) 2009-05-11 2010-11-18 Nestec S.A. Bifidobacterium longum ncc2705 (cncm 1-2618) et troubles immunitaires
WO2017060468A1 (fr) 2015-10-07 2017-04-13 Galderma Research & Development Composition contenant des bactéries d'acide lactique et son utilisation pour traiter la dermatite atopique
EP3715449A2 (fr) 2017-11-20 2020-09-30 University - Industry Cooperation Group of Kyung Hee University Nouvelles bactéries lactiques et leur utilisation
EP3826655B1 (fr) 2018-07-26 2022-10-19 Institut national de recherche pour l'agriculture, l'alimentation et l'environnement Souche de streptococcus thermophilius cnrz160 pour le traitement et la prévention de l'inflammation intestinale et des désordres associés, chez un individu
CN111979145A (zh) 2020-08-07 2020-11-24 上海交通大学 人源的粘膜乳杆菌及其用途
CN111979145B (zh) * 2020-08-07 2022-06-28 上海交通大学 人源的粘膜乳杆菌及其用途
WO2022065330A1 (fr) * 2020-09-23 2022-03-31 雪印メグミルク株式会社 Agent de prévention de l'atrophie musculaire

Non-Patent Citations (38)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
"Lactobacillus Mucosae Strain Promoted", HIGH-FIBER DIET MICROORGANISMS, vol. 8, no. 8, 12 August 2020 (2020-08-12), pages 1225
ABDULLA ET AL.: "Glucagon-like Peptide 1 Infusions Overcome Anabolic Résistance to Feeding in Older Human Muscle", AGING CELL, vol. 19, no. 9, 2020, pages 13202
ABUQWIDER ET AL.: "Limosilactobacillus reuteri in Health and Disease", MICROORGANISMS, vol. 10, 2022, pages 522
ALDAWSARI ET AL.: "The Efficacy of GLP-1 Analogues on Appetite Parameters, Gastric Emptying, Food Preference and Taste Among Adults with Obesity: Systematic Review of Randomized Controlled Trials", DIABÈTES, METABOLIC SYNDROME AND OBESITY: TARGETS AND THERAPY, vol. 16, 2023, pages 757 - 95
ATHAUDA ET AL.: "Exenatide Once Weekly versus Placebo in Parkinson's Disease: A Randomised, Double-Blind, Placebo-Controlled Trial", LANCET (LONDON, ENGLAND, vol. 390, no. 10103, 7 October 2017 (2017-10-07), pages 1554 - 75, XP085230321, DOI: 10.1016/S0140-6736(17)31585-4
BARAZZONI ET AL.: "Sarcopenic Obesity: Time to Meet the Challenge", OBESITY FACTS, vol. 11, no. 4, 2018, pages 294 - 305
BEAUDART ET AL., CALCIFIED TISSUE INTERNATIONAL, 2019
BELGUESMIA YANATH ET AL: "In vitro probiotic properties of selected lactobacilli and multi-strain consortium on immune function, gut barrier strengthening and gut hormone secretion", JOURNAL OF FUNCTIONAL FOODS, vol. 57, 2019, pages 382 - 391, XP085687645, ISSN: 1756-4646, DOI: 10.1016/J.JFF.2019.04.028 *
BUCKINX ET AL.: "Burden of frailty in the elderly population : perspectives for a public health challenge", ARCHIVES OF PUBLIC HEALTH = ARCHIVES BELGES DE SANTÉ PUBLIQUE, vol. 73, no. 1, 2015, pages 19, XP021215909, DOI: 10.1186/s13690-015-0068-x
FEMMINELLA ET AL.: "Evaluating the Effects of the Novel GLP-1 Analogue Liraglutide in Alzheimer's Disease: Study Protocol for a Randomised Controlled Trial (ELAD Study", TRIALS, vol. 20, no. 1, 3 April 2019 (2019-04-03), pages 191
GILLARD ET AL., FRONT PHYSIOL, 2017
GILLARD ET AL.: "Enhanced Ghrelin Levels and Hypothalamic Orexigenic AgRP and NPY Neuropeptide Expression in Models of Jejuno-Colonic Short Bowel Syndrome", SCIENTIFIC REPORTS, vol. 6, 21 June 2016 (2016-06-21), pages 28345
GILLARD LMAYEUR CROBERT V ET AL.: "Microbiota Is Involved in Post-resection Adaptation in Humans with Short Bowel Syndrome", FRONTIERS IN PHYSIOLOGY, vol. 8, 2017, pages 224
GILLARD: "Enhanced Ghrelin Levels and Hypothalamic Orexigenic AgRP and NPY Neuropeptide Expression in Models of Jejuno-Colonic Short Bowel Syndrome", SCI REP, vol. 6, 21 June 2016 (2016-06-21), pages 28345
GIRON ET AL., FRONT NUTR, vol. 9, 10 August 2022 (2022-08-10)
HONG ET AL., JOURNAL OF CACHEXIA, SARCOPENIA AND MUSCLE, vol. 10, 2019, pages 903 - 918
HONG ET AL.: "Amelioration of Muscle Wasting by Glucagon-like Peptide-1 Receptor Agonist in Muscle Atrophy", J CACHEXIA SARCOPENIA MUSCLE, vol. 10, no. 4, August 2019 (2019-08-01), pages 903 - 18
J ANIM SCI., vol. 99, no. 12, 1 December 2021 (2021-12-01)
JOLY ET AL., BIOCHIMIE, 2010
JOLY FMAYEUR CBRUNEAU ANOORDINE MLMEYLHEUC TLANGELLA PMESSING BDUÉE PHCHERBUY CTHOMAS M: "Drastic changes in fecal and mucosa-associated microbiota in adult patients with short bowel syndrome", BIOCHIMIE, vol. 92, no. 7, July 2010 (2010-07-01), pages 753 - 61, XP027078132, DOI: 10.1016/j.biochi.2010.02.015
KIM ET AL.: "Limosilactobacillus fermentum MG4295 Improves Hyperglycemia in High-Fat Diet-Induced Mice", FOODS, vol. 11, 2022, pages 231
KNUTH ET AL., AMERICAN JOURNAL OF PHYSIOLOGY. CELL PHYSIOLOGY, 2021
LAURINDO ET AL.: "GLP-1a: Going beyond Traditional Use", INT J MOL SCI, vol. 23, no. 2, 10 January 2022 (2022-01-10)
LAURINDO ET AL.: "GLP-la: Going beyond Traditional Use", INT J MOL SCI, vol. 23, no. 2, 10 January 2022 (2022-01-10)
MARCHESI ET AL.: "The gut microbiota and host health: a new clinical frontier [Review", GUT, vol. 65, no. 2, February 2016 (2016-02-01), pages 330 - 9, XP055359999, DOI: 10.1136/gutjnl-2015-309990
MARESCHAL ET AL., JOURNAL OF CLINICAL MEDICINE, 2019
MASSIMINO ELENA ET AL: "The Impact of Glucose-Lowering Drugs on Sarcopenia in Type 2 Diabetes: Current Evidence and Underlying Mechanisms", CELLS, vol. 10, no. 8, 1 August 2021 (2021-08-01), pages 1958, XP093051149, DOI: 10.3390/cells10081958 *
MASSIMO ET AL.: "The Impact of Glucose-Lowering Drugs on Sarcopenia in Type 2 Diabètes: Current Evidence and Underlying Mechanisms", CELLS, vol. 10, 2021, pages 1958
MAYEUR ET AL.: "Extensive Intestinal Resection Triggers Behavioral Adaptation, Intestinal Remodeling and Microbiota Transition in Short Bowel Syndrome [Review", MICROORGANISMS, vol. 4, no. 1, 8 March 2016 (2016-03-08)
MULLER ET AL., MOL METAB, 2019
NEWSOME ET AL.: "A Placebo-Controlled Trial of Subcutaneous Semaglutide in Nonalcoholic Steatohepatitis", NEW ENGLAND JOURNAL OF MEDICINE, vol. 384, no. 12, 25 March 2021 (2021-03-25), pages 1113 - 24, XP093097870, DOI: 10.1056/NEJMoa2028395
OSAKA ET AL.: "Favorable Appendicular Skeletal Muscle Mass Changes in Older Patients With Type 2 Diabètes Receiving GLP-1 Receptor Agonist and Basal Insulin Co-Therapy", CLINICAL MEDICINE INSIGHTS: ENDOCRINOLOGY AND DIABÈTES, vol. 16, 1 January 2023 (2023-01-01)
ROOS ET AL., INTERNATIONAL JOURNAL OF SYSTEMATIC AND EVOLUTIONARY MICROBIOLOGY, vol. 50, no. 1, 2000, pages 251 - 258
ROUANET ET AL., FRONT MED (LAUSANNE, vol. 7, 19 June 2020 (2020-06-19), pages 237
RYAN ET AL., BMC MICROBIOLOGY, vol. 19, 2019, pages 33
SHEEN, THÉRAPIE, vol. 62, 2007, pages 311 - 318
ZHANG ZHE ET AL: "Evaluation of probiotics for improving and regulation metabolism relevant to type 2 diabetes in vitro", JOURNAL OF FUNCTIONAL FOODS, ELSEVIER BV, NL, vol. 64, 10 November 2019 (2019-11-10), XP085973617, ISSN: 1756-4646, [retrieved on 20191110], DOI: 10.1016/J.JFF.2019.103664 *
ZHENG ET AL., INT. J SYST EVOL MICROBIOL, vol. 70, 2020, pages 2782 - 2858

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN118638695A (zh) * 2024-07-16 2024-09-13 新疆农业大学 一株产阿魏酸酯酶的粘液乳杆菌q2、菌悬液及制备方法和应用
CN118638695B (zh) * 2024-07-16 2025-12-12 新疆农业大学 一株产阿魏酸酯酶的粘液乳杆菌q2、菌悬液及制备方法和应用
CN119776241A (zh) * 2025-03-12 2025-04-08 民生中科嘉亿(山东)生物工程有限公司 改善肌少症性肥胖的乳酸乳球菌乳亚种jyll-51及其菌剂和应用

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