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WO2024053574A1 - 新規なオリゴ糖、該オリゴ糖の製造中間体、及びそれらの製造方法 - Google Patents

新規なオリゴ糖、該オリゴ糖の製造中間体、及びそれらの製造方法 Download PDF

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WO2024053574A1
WO2024053574A1 PCT/JP2023/032064 JP2023032064W WO2024053574A1 WO 2024053574 A1 WO2024053574 A1 WO 2024053574A1 JP 2023032064 W JP2023032064 W JP 2023032064W WO 2024053574 A1 WO2024053574 A1 WO 2024053574A1
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WO
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group
formula
phenyl group
following formula
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PCT/JP2023/032064
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English (en)
French (fr)
Inventor
剛 上田
龍生 伊東
竜也 中村
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Daiichi Sankyo Co Ltd
Original Assignee
Daiichi Sankyo Co Ltd
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Publication date
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    • A61K47/6889—Conjugates wherein the antibody being the modifying agent and wherein the linker, binder or spacer confers particular properties to the conjugates, e.g. peptidic enzyme-labile linkers or acid-labile linkers, providing for an acid-labile immuno conjugate wherein the drug may be released from its antibody conjugated part in an acidic, e.g. tumoural or environment
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    • C07H15/20—Carbocyclic rings
    • C07H15/203—Monocyclic carbocyclic rings other than cyclohexane rings; Bicyclic carbocyclic ring systems
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    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
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    • C07H3/06—Oligosaccharides, i.e. having three to five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Definitions

  • the present invention relates to a novel oligosaccharide that is a bibranched glycan having an ⁇ 2,6-sialic acid structure at the non-reducing end, a method for producing the oligosaccharide, an intermediate thereof, and a method for producing the intermediate.
  • Non-Patent Document 1 Non-Patent Document 1
  • Non-Patent Document 2 N-linked sugar chains can be obtained from chicken egg yolk by combining an enzymatic method and a chemical method.
  • these methods can synthesize the desired sugar chain in fewer steps than pure chemical synthesis, they require the procurement of a large amount of egg yolk, and the subsequent isolation and purification from the egg yolk, as well as the water-solubility after chemical conversion. Purification of unprotected sugar chains also often requires special techniques and purification equipment (Patent Documents 1 to 4).
  • Non-Patent Document 9 the reaction yield tends to decrease as the number of benzyl groups in the substrate increases (Non-Patent Document 9), and it has been desired to develop a milder and more efficient method that can be applied to complex substrates.
  • improved conditions using ⁇ -pinene as an additive have been reported (Non-Patent Document 10), but even with this method, the yield is low for complex substrates having multiple benzyl groups. remains at a moderate level (Non-Patent Document 11). From the above background, it is desired to develop a de-2-naphthylmethylation reaction that can deprotect the protecting group of the 2-naphthylmethyl group and obtain the deprotected product in high yield under milder conditions. There is.
  • liquid phase synthesis and solid phase synthesis are known as methods for chemically synthesizing oligosaccharide chains.
  • the liquid phase synthesis method allows the use of ordinary organic synthesis techniques, making it easy to track the reaction and scale up the process, it requires post-treatment and purification for each step, which requires time and effort.
  • solid-phase synthesis is advantageous in that automated synthesis is possible and rapid production is possible, but there are limits to scale-up due to equipment constraints, and low reactivity makes it difficult to perform sugar elongation reactions. It is necessary to use an excessive amount of the sugar donor, which makes it unsuitable for industrial mass synthesis, and it also has the disadvantage that it is difficult to check the progress of the reaction at intermediate stages (Patent Document 5).
  • Non-Patent Documents 12 to 16 are examples of tags that cause precipitation, distribution, adsorption, etc. specifically in certain environments. These methods combine the advantages of liquid-phase and solid-phase synthesis methods; in other words, the reaction can be carried out in a homogeneous system, making analysis easy, and the characteristics of tags are used to reduce the risk of interaction with reagent debris. Separation is possible.
  • Non-Patent Document 16 a method in which untagged compounds are separated by using a branched long-chain alkane as a hydrophobic tag and adsorbing the reaction solution with octadecyl-modified silica gel.
  • the use of a tag is essential, and a desorption step is necessary, and as the substrate region becomes larger than the tag as oligomerization progresses, the physical properties of the substrate gradually become more dominant. This had the disadvantage that the function of the tag was weakened. Therefore, in the method for producing oligosaccharide chains, there is a need for a method that can purify oligosaccharides more efficiently.
  • the Troc group requires deprotection reaction conditions using zinc/AcOH or a long reaction time using an excess amount of lithium hydroxide, and in complex sugar chains, decomposition of the substrate occurs under the deprotection reaction conditions.
  • deprotecting phthaloyl groups there is a problem in that the amidation of sialic acid ester moieties proceeds as a side reaction due to the use of an excessive amount of ethylenediamine.To avoid this, it is necessary to selectively remove ester moieties in advance. Two steps of hydrolysis followed by deprotection are required.
  • sulfonyl groups are deprotected using sodium metal under reaction conditions that are difficult to scale up.
  • An object of the present invention is to provide a novel oligosaccharide that is a bibranched glycan having an ⁇ 2,6-sialic acid structure at the non-reducing end, a method for producing the oligosaccharide, an intermediate thereof, and a method for producing the intermediate. It is to be.
  • the present inventors have made intensive studies and have developed a novel oligonucleotide represented by the following formula A-22, which is a biantennary glycan having an ⁇ 2,6-sialic acid structure at the non-reducing end.
  • the present invention was completed by discovering a novel method for efficiently producing sugars and oligosaccharides, intermediates thereof, and methods for producing intermediates thereof.
  • the present invention relates to the following, but is not limited thereto.
  • the following formula A-22 An oligosaccharide represented by ), the method comprising: (Step I-1) Formula A-3: The compound represented by the following formula A-5: By forming an ⁇ -1,3-glycosidic bond and an ⁇ -1,6-glycosidic bond with the compound represented by, the following formula A-6: The following formula A-8, including the step of producing a compound represented by: A step of producing a compound represented by (Step I-2) The compound represented by the formula A-8 is converted into the compound represented by the following formula A-9: A compound represented by (in the formula, it is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups) and ⁇ -1 ,4-glycosidic bond, the following formula A-10: A compound represented by (wherein R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phen
  • formula A-18 A compound represented by (wherein R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups, M + is a sodium ion, a lithium ion, a potassium ion, or a protonated triethylamine cation): A compound represented by (wherein R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups, M + is a sodium ion, a lithium ion, a potassium ion, or a protonated triethylamine cation); (Step I-5) The compound represented by the above formula A-20 is converted into the compound represented by the following formula A-21: A step of producing an oligosaccharide represented by the formula A-22 by reacting with a compound represented
  • step I-2 the compound represented by the formula A-10 is reacted with a strong base in the presence of an alkyl ester of perfluorocarboxylic acid to produce the compound represented by the formula A-11.
  • the alkyl ester of perfluorocarboxylic acid is methyl trifluoroacetate, ethyl trifluoroacetate, propyl trifluoroacetate, isopropyl trifluoroacetate, butyl trifluoroacetate, methyl pentafluoropropionate, ethyl pentafluoropropionate, pentafluoropropion Acid propyl, isopropyl pentafluoropropionate, butyl pentafluoropropionate, methyl heptafluorobutyrate, ethyl heptafluorobutyrate, propyl heptafluorobutyrate, isopropyl heptafluorobutyrate, butyl heptafluorobutyrate, methyl nonafluorovalerate, nonafluorovalerate Ethyl, propyl trifluoroacetate, isopropyl trifluoroacetate
  • the strong base is sodium, lithium, and potassium salts of metal amides; sodium, lithium, potassium, cesium, and barium salts of C 1 -C 20 alkoxides; sodium hydride, potassium hydride, and hydrogen.
  • DBU diazabicycloundecene
  • DBN diazabicyclononene
  • TMG 1,1,3,3-tetramethylguanidine
  • the step of producing the compound represented by the formula A-11 by reacting the compound represented by the formula A-10 with a strong base in the presence of an alkyl ester of perfluorocarboxylic acid comprises C 1 -C 10 alcohol solvent alone, or in combination with a C 1 to C 10 alcohol solvent and an amide solvent, an ether solvent, an ester solvent, an aromatic solvent, a halogen solvent, a hydrocarbon solvent, or a nitrile solvent.
  • step I-3 the amino group in the compound represented by formula A-14 is protected with an aryloxycarbonyl (COOAr) group to produce a compound represented by formula A-15, [1] The method according to any one of ⁇ [10].
  • step I-3 the step of producing the compound represented by the formula A-15 from the compound represented by the formula A-14 is performed using sodium hydrogen carbonate, potassium hydrogen carbonate, disodium hydrogen phosphate, or hydrogen phosphate.
  • the fluorous alcohol is hexafluoro-2-propanol (HFIP), 2,2,2-trifluoroethanol (TFE), 2,2,3,3,4,4,5,5-octafluoro-1-pene.
  • HFIP hexafluoro-2-propanol
  • TFE 2,2,2-trifluoroethanol
  • the method according to [15], wherein the method is selected from the group consisting of tanol, nonafluoro-tert-butyl alcohol, and combinations thereof.
  • the method according to [15] or [16] wherein the reaction is carried out at -35°C to 70°C.
  • the method according to [15] or [16] wherein the reaction is carried out at -30°C to -10°C.
  • a method for producing the following formula A-10: A compound represented by (R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups) is A method comprising reacting with a strong base in the presence of an alkyl ester of a fluorocarboxylic acid.
  • the alkyl ester of perfluorocarboxylic acid is methyl trifluoroacetate, ethyl trifluoroacetate, propyl trifluoroacetate, isopropyl trifluoroacetate, butyl trifluoroacetate, methyl pentafluoropropionate, ethyl pentafluoropropionate, pentafluoropropion Acid propyl, isopropyl pentafluoropropionate, butyl pentafluoropropionate, methyl heptafluorobutyrate, ethyl heptafluorobutyrate, propyl heptafluorobutyrate, isopropyl heptafluorobutyrate, butyl heptafluorobutyrate, methyl nonafluorovalerate, nonafluorovalerate Ethyl, propyl nonafluorovalerate, isopropyl nonafluorova
  • the strong base is sodium, lithium, and potassium salts of metal amides; sodium, lithium, potassium, cesium, and barium salts of C 1 -C 20 alkoxides; sodium hydride, potassium hydride, and hydrogen.
  • DBU diazabicycloundecene
  • DBN diazabicyclononene
  • TMG 1,1,3,3-tetramethylguanidine
  • R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group is substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups
  • R 5 is an aryloxycarbonyl (COOAr) group, an acetyl (Ac) group, or a 2,2,2-trichloroethoxycarbonyl (Troc) group
  • R 6 is a hydrogen atom.
  • R 5 and R 6 form a phthalimide group together with the nitrogen atom to which they are bonded
  • R 5 is an aryloxycarbonyl (COOAr) group, an acetyl (Ac) group, or a 2,2,2-trichloroethoxycarbonyl (Troc) group
  • R 6 is a hydrogen atom, or R 5 and R 6 together with the nitrogen atom to which they are attached form a phthalimide group
  • a method comprising the step of producing a compound represented by formula A-17 by forming a ⁇ -1,4-glycosidic bond with a compound represented by formula A-17.
  • R 5 is an aryloxycarbonyl (COOAr) group.
  • the following formula A-18 A compound represented by (wherein R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups, M + is a sodium ion, a lithium ion, a potassium ion, or a protonated triethylamine cation), the method of producing a compound having the following formula A-17: A compound represented by (wherein R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups) , R 5 is an aryloxycarbonyl (COOAr) group, an acetyl (Ac) group, or a 2,2,2-trichloroethoxycarbonyl (Troc)
  • Formula A-14-FMA A compound represented by (wherein R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups) .
  • R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups
  • R 5 is an aryloxycarbonyl (COOAr) group, an acetyl (Ac) group, or a 2,2,2-trichloroethoxycarbonyl (Troc) group
  • R 6 is a hydrogen atom
  • R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups
  • R 5 is an aryloxycarbonyl (COOAr) group, an acetyl (Ac) group, or a 2,2,2-trichloroethoxycarbonyl (Troc) group
  • R 6 is a hydrogen atom
  • the following formula A-18-FF A compound represented by (wherein R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups) Or its salt.
  • the following formula A-19-FF A compound represented by (wherein R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups) Or its salt.
  • A-20-FF A compound represented by (wherein R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups) Or its salt.
  • R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups
  • A'-20-FF A compound represented by or a salt thereof.
  • a method for producing a sugar chain remodeling antibody or its Fc region-containing molecule comprising the method according to any one of [1] to [14] to obtain a compound represented by formula A-22, and The obtained compound represented by formula A-22 is reacted with an acceptor molecule, which is an antibody having a core GlcNAc to which fucose may be added as an N297-linked sugar chain or a molecule containing its Fc region, to form the sugar chain.
  • a method comprising remodeling an antibody or Fc region-containing molecule thereof.
  • the production method according to [41] further comprising a step of reacting the azide group (N 3 -) with a molecule having an alkyne structure.
  • the molecule having an alkyne structure is selected from chemotherapeutic agents, molecular target drugs, immune stimulants, toxins, antibacterial agents, antiviral agents, diagnostic agents, proteins, peptides, amino acids, nucleic acids, antigens, vitamins, and hormones.
  • a method for producing an antibody-drug conjugate, comprising the method according to any one of [41] to [43].
  • step I-1 after stopping the reaction between the compound represented by the formula A-3 and the compound represented by the formula A-5, the generated compound represented by the formula A-6 and impurities are A hydrophobic carrier and water are added to the water-soluble organic solvent containing the compound, the compound represented by the formula A-6 is adsorbed into the hydrophobic carrier, and then filtered and the hydrophobic carrier is added to the water-soluble organic solvent.
  • the impurities are removed by washing with a mixed solution of the above formula A-6 and the above water, and then the compound represented by the above formula A-6 is eluted from the above hydrophobic carrier using an organic solvent.
  • step I-2 after stopping the reaction between the compound represented by the formula A-8 and the compound represented by the formula A-9, the generated compound represented by the formula A-10 and impurities are removed.
  • a hydrophobic carrier and water are added to the water-soluble organic solvent containing the compound, the compound represented by the formula A-10 is adsorbed into the hydrophobic carrier, and then filtered and the hydrophobic carrier is added to the water-soluble organic solvent.
  • the impurities are removed by washing with a mixed solution of the above formula A-10 and the above water, and then the compound represented by the above formula A-10 is eluted from the above hydrophobic carrier using an organic solvent.
  • the method according to any one of [1] to [14] and [45], which comprises purifying the compound represented by A-10.
  • step I-3 after stopping the reaction between the compound represented by the formula A-11 and the compound represented by the formula A-12, the generated compound represented by the formula A-13 and impurities are removed.
  • a hydrophobic carrier and water are added to the water-soluble organic solvent containing the compound, the compound represented by the formula A-13 is adsorbed into the hydrophobic carrier, and then filtered and the hydrophobic carrier is added to the water-soluble organic solvent.
  • the impurities are removed by washing with a mixed solution of the above formula A-13 and the above water, and then the compound represented by the above formula A-13 is eluted from the above hydrophobic carrier using an organic solvent.
  • the method according to any one of [1] to [14], [45], and [46], which comprises purifying the compound represented by A-13.
  • step I-3 a hydrophobic carrier and water are added to the produced water-soluble organic solvent containing the compound represented by the formula A-14 and impurities, and the formula A-14 is added to the hydrophobic carrier.
  • the compound represented by is adsorbed, and the impurities are removed by filtering and washing the hydrophobic carrier with a mixed solution of the water-soluble organic solvent and the water.
  • [1] to [14] and [45] to [47] comprising purifying the compound represented by the formula A-14 by eluting the compound represented by the formula A-14 from the hydrophobic carrier. ]
  • step I-4 after stopping the reaction between the compound represented by the formula A-15 and the compound represented by the formula A-16, the generated compound represented by the formula A-17 and impurities are removed.
  • a hydrophobic carrier and water are added to the water-soluble organic solvent containing the compound, the compound represented by the formula A-17 is adsorbed into the hydrophobic carrier, and then filtered and the hydrophobic carrier is added to the water-soluble organic solvent.
  • the impurities are removed by washing with a mixed solution of the above formula A-17 and the above water, and then the compound represented by the above formula A-17 is eluted from the above hydrophobic carrier using an organic solvent.
  • the method according to any one of [1] to [14] and [45] to [48], which comprises purifying the compound represented by A-17.
  • the resin for filling reverse phase partition chromatography is poly(styrene/divinylbenzene) polymer gel resin, polystyrene-divinylbenzene resin, polyhydroxy methacrylate resin, styrene vinylbenzene copolymer resin, polyvinyl alcohol resin, polystyrene resin, polymethacrylate.
  • the method according to [55] which is selected from the group consisting of resin, chemically bonded silica gel resin, and combinations thereof.
  • the chemically bonded silica gel resin includes (1) a resin obtained by reacting silica gel with a silane coupling agent, (2) silica gel containing dimethyloctadecyl, octadecyl, trimethyloctadecyl, dimethyloctyl, octyl, butyl, ethyl, and methyl.
  • the water-soluble organic solvent may be a water-soluble alcohol solvent, a water-soluble nitrile solvent, a water-soluble ether solvent, a water-soluble ketone solvent, a water-soluble amide solvent, a water-soluble sulfoxide solvent, or the aforementioned water-soluble organic solvent.
  • the organic solvent used in the step of eluting the target product from the hydrophobic carrier may be a nitrile solvent, an ether solvent, an ester solvent, a ketone solvent, a halogen solvent, an aromatic solvent, or any of the above solvents.
  • a method comprising purifying the compound represented by the formula A-6 by eluting the compound represented by the formula A-6 from the hydrophobic carrier.
  • a purification method comprising: adding a hydrophobic carrier and water to a water-soluble organic solvent containing the compound represented by the formula A-10 and impurities; The impurities are removed by filtering and washing the hydrophobic carrier with a mixed solution of the water-soluble organic solvent and water.
  • a method comprising purifying the compound represented by formula A-10 by eluting the compound represented by formula A-10 from the hydrophobic carrier.
  • Formula A-13 A compound represented by (wherein R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups)
  • a purification method comprising: adding a hydrophobic carrier and water to a water-soluble organic solvent containing the compound represented by the formula A-13 and impurities; The impurities are removed by filtering and washing the hydrophobic carrier with a mixed solution of the water-soluble organic solvent and water.
  • a method comprising purifying the compound represented by formula A-13 by eluting the compound represented by formula A-13 from the hydrophobic carrier.
  • a purification method comprising: adding a hydrophobic carrier and water to a water-soluble organic solvent containing the compound represented by the formula A-14 and impurities; The impurities are removed by filtering and washing the hydrophobic carrier with a mixed solution of the water-soluble organic solvent and water.
  • a method comprising purifying the compound represented by formula A-14 by eluting the compound represented by formula A-14 from the hydrophobic carrier.
  • R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups
  • R 5 is an aryloxycarbonyl (COOAr) group, an acetyl (Ac) group, or a 2,2,2-trichloroethoxycarbonyl (Troc) group
  • R 6 is a hydrogen atom, or R 5 and R 6 form a phthalimide group together with the nitrogen atom to which they are bonded.
  • the compound represented by the formula A-17 is adsorbed into the hydrophobic carrier by adding a hydrophobic carrier and water, and then filtered and the hydrophobic carrier is treated with a mixed solution of the water-soluble organic solvent and the water.
  • the impurities are removed by washing, and the compound represented by the formula A-17 is then eluted from the hydrophobic carrier using an organic solvent.
  • a method comprising refining. [67] The method according to [62], wherein the impurities include a sugar compound other than the compound represented by the formula A-6 and/or a compound derived from a reaction reagent for obtaining the compound to be purified.
  • the impurities include a sugar compound other than the compound represented by the formula A-17 and/or a compound derived from a reaction reagent for obtaining the compound to be purified.
  • the hydrophobic carrier is a resin for reverse phase partition chromatography packing.
  • the resin for filling reverse phase partition chromatography is poly(styrene/divinylbenzene) polymer gel resin, polystyrene-divinylbenzene resin, polyhydroxy methacrylate resin, styrene vinylbenzene copolymer resin, polyvinyl alcohol resin, polystyrene resin, polymethacrylate.
  • the chemically bonded silica gel resin includes (1) a resin obtained by reacting silica gel with a silane coupling agent, (2) silica gel containing dimethyloctadecyl, octadecyl, trimethyloctadecyl, dimethyloctyl, octyl, butyl, ethyl, and methyl.
  • the water-soluble organic solvent is a water-soluble alcohol solvent, a water-soluble nitrile solvent, a water-soluble ether solvent, a water-soluble ketone solvent, a water-soluble amide solvent, a water-soluble sulfoxide solvent, or the aforementioned water-soluble organic solvent.
  • the organic solvent used in the step of eluting the target product from the hydrophobic carrier may be a nitrile solvent, an ether solvent, an ester solvent, a ketone solvent, a halogen solvent, an aromatic solvent, or any of the above solvents.
  • the present invention relates to, but is not limited to: [1] The following formula A'-22: A method for producing an oligosaccharide represented by (Step I-1)
  • Formula A-3 The compound represented by the following formula A-5: By forming an ⁇ -1,3-glycosidic bond and an ⁇ -1,6-glycosidic bond with the compound represented by, the following formula A-6:
  • the following formula A-8 including the step of producing a compound represented by: A step of producing a compound represented by (Step I-2)
  • the compound represented by the above formula A-8 is converted into the compound represented by the following formula A'-9:
  • the following formula A'-11 including the step of producing a compound represented by: A step of producing a compound represented by (Step I-3)
  • the compound represented by the above formula A'-11 is converted to the following formula A-12: By forming a ⁇
  • R 5 and R 6 together with the nitrogen atom to which they are attached form a phthalimide group By removing the group, a compound of the above formula A'-15 is produced (wherein R 5 and R 6 together with the nitrogen atom to which they are attached form a phthalimide group) process, (Step I-4)
  • the compound represented by the above formula A'-15 is converted into the following formula A-16: By forming a ⁇ -1,4-glycosidic bond with the compound represented by, the following formula A'-17:
  • formula A'-18 By removing the protecting group and the acyl protecting group of the hydroxyl group, formula A'-18: wherein M + is a sodium ion, a lithium ion, a potassium ion, or a protonated triethylamine cation: A step of producing a compound represented by (Step I-5) The compound represented by the above formula A'-20 is converted into the compound represented by the following formula A-21: A step of producing an oligosaccharide represented by the formula A'-22 by reacting with a compound represented by including methods.
  • the generated compound represented by the formula A-6 and impurities are A hydrophobic carrier and water are added to the water-soluble organic solvent containing the compound, the compound represented by the formula A-6 is adsorbed into the hydrophobic carrier, and then filtered and the hydrophobic carrier is added to the water-soluble organic solvent.
  • the impurities are removed by washing with a mixed solution of the above formula A-6 and the above water, and then the compound represented by the above formula A-6 is eluted from the above hydrophobic carrier using an organic solvent.
  • step I-2 after stopping the reaction between the compound represented by the formula A-8 and the compound represented by the formula A'-9, the generated compound represented by the formula A'-10 and contaminants A hydrophobic carrier and water are added to a water-soluble organic solvent containing a compound, the compound represented by the formula A'-10 is adsorbed into the hydrophobic carrier, and then filtered and the hydrophobic carrier is added to the water-soluble organic solvent.
  • the impurities are removed by washing with a mixed solution of a hydrophobic organic solvent and the water, and then the compound represented by the formula A'-10 is eluted from the hydrophobic carrier using an organic solvent.
  • step I-3 after stopping the reaction between the compound represented by the formula A'-11 and the compound represented by the formula A-12, the generated compound represented by the formula A'-13 and contaminants A hydrophobic carrier and water are added to a water-soluble organic solvent containing a compound, the compound represented by the formula A'-13 is adsorbed into the hydrophobic carrier, and then filtered and the hydrophobic carrier is added to the water-soluble organic solvent.
  • the impurities are removed by washing with a mixed solution of a hydrophobic organic solvent and the water, and then the compound represented by the formula A'-13 is eluted from the hydrophobic carrier using an organic solvent.
  • step I-3 a hydrophobic carrier and water are added to the produced water-soluble organic solvent containing the compound represented by the formula A'-14 and impurities, and the formula A' is added to the hydrophobic carrier. -14 is adsorbed, the impurities are removed by filtering and washing the hydrophobic carrier with a mixed solution of the water-soluble organic solvent and the water, and then the organic solvent is removed. Any one of [1] to [8], comprising purifying the compound represented by the formula A'-14 by eluting the compound represented by the formula A'-14 from the hydrophobic carrier using The method described in paragraph 1.
  • step I-4 after stopping the reaction between the compound represented by the formula A'-15 and the compound represented by the formula A-16, the generated compound represented by the formula A'-17 and contaminants A hydrophobic carrier and water are added to a water-soluble organic solvent containing a compound, the compound represented by the formula A'-17 is adsorbed into the hydrophobic carrier, and then filtered and the hydrophobic carrier is added to the water-soluble organic solvent.
  • the impurities are removed by washing with a mixed solution of a hydrophobic organic solvent and the water, and then the compound represented by the formula A'-17 is eluted from the hydrophobic carrier using an organic solvent.
  • the resin for filling reverse phase partition chromatography is poly(styrene/divinylbenzene) polymer gel resin, polystyrene-divinylbenzene resin, polyhydroxy methacrylate resin, styrene vinylbenzene copolymer resin, polyvinyl alcohol resin, polystyrene resin, polymethacrylate.
  • the chemically bonded silica gel resin includes (1) a resin obtained by reacting silica gel with a silane coupling agent, (2) silica gel containing dimethyloctadecyl, octadecyl, trimethyloctadecyl, dimethyloctyl, octyl, butyl, ethyl, and methyl.
  • the water-soluble organic solvent may be a water-soluble alcohol solvent, a water-soluble nitrile solvent, a water-soluble ether solvent, a water-soluble ketone solvent, a water-soluble amide solvent, a water-soluble sulfoxide solvent, or the aforementioned water-soluble organic solvent.
  • the organic solvent used in the step of eluting the target product from the hydrophobic carrier may be a nitrile solvent, an ether solvent, an ester solvent, a ketone solvent, a halogen solvent, an aromatic solvent, or any of the above solvents.
  • step I-2 the compound represented by the formula A'-10 is reacted with a strong base in the presence of an alkyl ester of perfluorocarboxylic acid, thereby producing the compound represented by the formula A'-11.
  • the alkyl ester of perfluorocarboxylic acid is methyl trifluoroacetate, ethyl trifluoroacetate, propyl trifluoroacetate, isopropyl trifluoroacetate, butyl trifluoroacetate, methyl pentafluoropropionate, ethyl pentafluoropropionate, pentafluoropropion Acid propyl, isopropyl pentafluoropropionate, butyl pentafluoropropionate, methyl heptafluorobutyrate, ethyl heptafluorobutyrate, propyl heptafluorobutyrate, isopropyl heptafluorobutyrate, butyl heptafluorobutyrate, methyl nonafluorovalerate, nonafluorovalerate Ethyl, propyl nonafluorovalerate, isopropyl nonafluorova
  • the strong base is sodium, lithium, and potassium salts of metal amides; sodium, lithium, potassium, cesium, and barium salts of C 1 -C 20 alkoxides; sodium hydride, potassium hydride, and hydrogen.
  • the step of producing the compound represented by the formula A'-11 by reacting the compound represented by the formula A'-10 with a strong base in the presence of an alkyl ester of perfluorocarboxylic acid comprises C1 to It is carried out in a C10 alcohol solvent alone, or a mixture of a C1 to C10 alcohol solvent with an amide solvent, an ether solvent, an ester solvent, an aromatic solvent, a halogen solvent, a hydrocarbon solvent, or a nitrile solvent.
  • step I-3 the amino group in the compound represented by formula A'-14 is protected with an aryloxycarbonyl (COOAr) group to produce a compound represented by formula A'-15. 1] to [27].
  • step I-3 the step of producing the compound represented by the formula A'-15 from the compound represented by the formula A'-14 is performed using sodium hydrogen carbonate, potassium hydrogen carbonate, disodium hydrogen phosphate, or phosphorus.
  • Formula A-5 A method for producing a compound represented by the following formula: A-4: The compound represented by formula A-4 is reacted with 2,3-dichloro-5,6-dicyano-p-benzoquinone (DDQ) in a mixed solvent of fluorous alcohol and water to obtain the compound represented by formula A-4. A method comprising producing a compound represented by the formula A-5 by eliminating the 2-naphthylmethyl group.
  • the fluorous alcohol is hexafluoro-2-propanol (HFIP), 2,2,2-trifluoroethanol (TFE), 2,2,3,3,4,4,5,5-octafluoro-1-pene.
  • a method comprising purifying the compound represented by the formula A-6 by eluting the compound represented by the formula A-6 from the hydrophobic carrier.
  • the following formula A'-10 A method for purifying a compound represented by the formula A'-10, wherein a hydrophobic carrier and water are added to a water-soluble organic solvent containing the compound represented by the formula A'-10 and impurities; The compound represented by A'-10 is adsorbed, and the impurities are removed by filtering and washing the hydrophobic carrier with a mixed solution of the water-soluble organic solvent and water.
  • a method comprising purifying the compound represented by the formula A'-10 by eluting the compound represented by the formula A'-10 from the hydrophobic carrier using a solvent.
  • the following formula A'-13 A method for purifying a compound represented by the formula A'-13, which comprises adding a hydrophobic carrier and water to a water-soluble organic solvent containing the compound represented by the formula A'-13 and impurities, and purifying the compound represented by the formula A'-13 into the hydrophobic carrier.
  • the compound represented by A'-13 is adsorbed, and the impurities are removed by filtering and washing the hydrophobic carrier with a mixed solution of the water-soluble organic solvent and water.
  • a method comprising purifying the compound represented by the formula A'-13 by eluting the compound represented by the formula A'-13 from the hydrophobic carrier using a solvent.
  • the following formula A'-14 A method for purifying a compound represented by the formula A'-14, which comprises adding a hydrophobic carrier and water to a water-soluble organic solvent containing the compound represented by the formula A'-14 and impurities, and purifying the compound represented by the formula A'-14 into the hydrophobic carrier.
  • the compound represented by A'-14 is adsorbed, and the impurities are removed by filtering and washing the hydrophobic carrier with a mixed solution of the water-soluble organic solvent and water.
  • a method comprising purifying the compound represented by the formula A'-14 by eluting the compound represented by the formula A'-14 from the hydrophobic carrier using a solvent.
  • the following formula A'-17 A compound represented by (wherein R 5 is an aryloxycarbonyl (COOAr) group, an acetyl (Ac) group, or a 2,2,2-trichloroethoxycarbonyl (Troc) group, and R 6 is hydrogen or R 5 and R 6 form a phthalimide group together with the nitrogen atom to which they are bonded, the method for purifying a compound represented by the above formula A'-17 and impurities.
  • a hydrophobic carrier and water are added to a water-soluble organic solvent containing the above, and the compound represented by the formula A'-17 is adsorbed into the hydrophobic carrier, and then filtered and the hydrophobic carrier is added to the water-soluble organic solvent.
  • the impurities are removed by washing with a mixed solution of an organic solvent and the water, and then the compound represented by the formula A'-17 is eluted from the hydrophobic carrier using an organic solvent.
  • a method comprising purifying the compound represented by the formula A'-17.
  • the impurities include a sugar compound other than the compound represented by the formula A'-17, and/or a compound derived from a reaction reagent for obtaining the compound to be purified.
  • the hydrophobic carrier is a resin for reverse phase partition chromatography packing.
  • the resin for filling reverse phase partition chromatography is poly(styrene/divinylbenzene) polymer gel resin, polystyrene-divinylbenzene resin, polyhydroxy methacrylate resin, styrene vinylbenzene copolymer resin, polyvinyl alcohol resin, polystyrene resin, polymethacrylate.
  • the chemically bonded silica gel resin includes (1) a resin obtained by reacting silica gel with a silane coupling agent, (2) silica gel containing dimethyloctadecyl, octadecyl, trimethyloctadecyl, dimethyloctyl, octyl, butyl, ethyl, and methyl.
  • the water-soluble organic solvent is a water-soluble alcohol solvent, a water-soluble nitrile solvent, a water-soluble ether solvent, a water-soluble ketone solvent, a water-soluble amide solvent, a water-soluble sulfoxide solvent, or the aforementioned water-soluble organic solvent.
  • the method according to [48], wherein the water-soluble nitrile solvent is acetonitrile.
  • the organic solvent used in the step of eluting the target product from the hydrophobic carrier may be a nitrile solvent, an ether solvent, an ester solvent, a ketone solvent, a halogen solvent, an aromatic solvent, or any of the above solvents.
  • the alkyl ester of perfluorocarboxylic acid is methyl trifluoroacetate, ethyl trifluoroacetate, propyl trifluoroacetate, isopropyl trifluoroacetate, butyl trifluoroacetate, methyl pentafluoropropionate, ethyl pentafluoropropionate, pentafluoropropion Acid propyl, isopropyl pentafluoropropionate, butyl pentafluoropropionate, methyl heptafluorobutyrate, ethyl heptafluorobutyrate, propyl heptafluorobutyrate, isopropyl heptafluorobutyrate, butyl heptafluorobutyrate, methyl nonafluorovalerate, nonafluorovalerate Ethyl, propyl nonafluorovalerate, isopropyl nonafluorova
  • the strong base includes sodium, lithium, and potassium salts of metal amides; sodium, lithium, potassium, cesium, and barium salts of C 1 -C 20 alkoxides; sodium hydride, potassium hydride, and hydrogen.
  • DBU diazabicycloundecene
  • DBN diazabicyclononene
  • TMG 1,1,3,3-tetramethylguanidine
  • the present invention provides an oligosaccharide represented by the above formula A-22 and a novel method for producing the same, as well as a production intermediate for the oligosaccharide and a method for producing the same.
  • the method for producing the compounds represented by formulas A-2 to A-14 is briefly shown below.
  • the method for producing the compounds represented by formulas A-15 to A-22 is briefly shown below.
  • oligosaccharide represented by formula A-22 a novel oligosaccharide represented by formula A-22 and a novel method for producing the same are provided.
  • the oligosaccharide represented by formula A-22 means the following oligosaccharide.
  • the novel synthesis scheme for the oligosaccharide represented by the above formula A-22 includes the following steps I-1 to I-5.
  • R 1 in oligosaccharides and compounds is a C 1 -C 6 alkyl group or a phenyl group, where the phenyl group has 1 to 3 (i.e., 1, 2 , or 3) C 1 -C 6 alkoxy groups.
  • the phenyl group may be unsubstituted.
  • C x -C y alkyl group refers to a straight, branched, or cyclic saturated aliphatic hydrocarbon group containing x to y carbons.
  • straight chain saturated aliphatic hydrocarbon groups include methyl, ethyl, n-propyl, n-butyl, n-pentyl, n-hexyl, etc.
  • hydrocarbon groups include isopropyl, isobutyl, tert-butyl, sec-butyl, isopentyl, tert-pentyl, sec-pentyl, isohexyl, tert-hexyl, sec-hexyl, and the like.
  • alkyl group also includes a cyclic saturated aliphatic hydrocarbon group, that is, “cycloalkyl”, and the “cycloalkyl” may include a fused or bridged ring system. good.
  • cycloalkyl include, for example, cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, and the like.
  • alkoxy group refers to an alkyl group attached through an oxygen (ie, alkyl-O-), where the alkyl group is as defined above.
  • alkoxy groups include, for example, methoxy, ethoxy, propoxy, tert-butoxy, and the like.
  • the substituent "R 1 " in the oligosaccharide and the compound is preferably n-propyl, n-butyl, n-pentyl, n-hexyl, isopropyl, isobutyl, tert-butyl, isopentyl, tert- -pentyl, sec-pentyl, cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, 4-methoxyphenyl, 3-methoxyphenyl, 2-methoxyphenyl, 3,4-dimethoxyphenyl, 2,4-dimethoxyphenyl, 2,3-dimethoxy Phenyl, 3,4,5-trimethoxyphenyl, or phenyl, more preferably isopropyl, isobutyl, tert-butyl, 4-methoxyphenyl, 3-methoxyphenyl, or 2-methoxyphenyl,
  • the present invention includes, in one aspect, "salts" of oligosaccharides represented by formula A-22 and novel intermediates thereof (for example, compounds represented by formulas A-2 to A-20). ” is also included.
  • a salt can be formed at the carboxyl group, amino group, etc. in the oligosaccharide represented by formula A-22 and the compound used for producing the oligosaccharide.
  • Salts that may be formed include, for example, inorganic acids such as hydrochloric, sulfuric, hydrobromic, phosphoric; or acetic, propionic, trimethylacetic, tert-butylacetic, hexanoic, succinic, malic, fumaric acids; acid, and acid addition salts formed with organic acids such as tartaric acid, citric acid, benzoic acid, methanesulfonic acid, and ethanesulfonic acid. Salts can also be formed when the acidic protons present can react with inorganic or organic bases, such as sodium hydroxide, potassium hydroxide, sodium carbonate, calcium hydroxide, lithium hydroxide, etc.
  • Organic bases include, but are not limited to, ethanolamine, diethanolamine, triethanolamine, triethylamine, and the like.
  • the "salt" is preferably a pharmaceutically acceptable salt.
  • Step I-1 is based on formula A-3: The compound represented by the following formula A-5: By forming an ⁇ -1,3-glycosidic bond and an ⁇ -1,6-glycosidic bond with the compound represented by, the following formula A-6: The following formula A-8, including the step of producing a compound represented by: This is a process of producing a compound represented by The step I-1 includes the following steps I-1-1 to I-1-3.
  • step I-1-1 the compound represented by the formula A-3 and the compound represented by the formula A-5 are formed by forming an ⁇ -1,3-glycosidic bond and an ⁇ -1,6-glycosidic bond.
  • This is a process for producing the compound represented by -6.
  • This step can be carried out by using or applying a known method, but preferably, for example, by the method shown in Example 32 or 55.
  • Molecular sieve 4A powder and trimethylsilyl trifluoromethanesulfonate are sequentially added to the compound in an organic solvent (toluene, etc.) to form a compound represented by the above formula A-5, an ⁇ -1,3-glycosidic bond, and an ⁇ -1,3-glycosidic bond.
  • TMSOTf trimethylsilyl trifluoromethanesulfonate
  • the compound represented by formula A-3 can be produced by the following steps, but the production method is not limited to this method.
  • the following formula A-1 The compound represented by (3,4,6-tri-O-benzyl-1,2-O-(1-methoxyethylidene)- ⁇ -D-mannopyranose) is mixed with water and p-TsOH .
  • the following formula A-2 produces the compound shown in This step can be suitably performed, for example, by the method shown in Example 29 or 52.
  • a compound represented by formula A-3 is produced by adding, for example, trichloroacetonitrile and diazabicycloundecene (DBU) to the compound represented by formula A-2.
  • DBU diazabicycloundecene
  • the compound represented by the formula A-5 is obtained by first producing a compound represented by the following formula A-4, and then producing a compound represented by the formula A-5 from the compound.
  • the compound represented by formula A-4 is produced by the following steps X-1 to X-14, or the following steps X-1 to X-8 + X-15 to X-16. . Details of each step are illustrated below, but each step can also be carried out using a conventional method for monosaccharide or oligosaccharide production, or by applying such a conventional method.
  • Step X-1 is the following formula C-1:
  • the compound represented by formula C-1 which is the starting material for this step, can be produced by a known method, or a commercially available product can be used.
  • a commercially available compound represented by formula C-1 includes, for example, 1,2:5,6-di-O-isopropylidene- ⁇ -D-glucofuranose manufactured by Sigma-Aldrich. This step can be carried out by using or applying a known method, but preferably by the method shown in Example 1, for example.
  • step X-2 the compound represented by formula C-2 is converted into the following formula C-3 by acid hydrolysis of isopropylidene at two locations and pyranose ring formation:
  • This is a process for producing a compound represented by This step can be performed by using or applying a known method, but preferably can be performed by the method shown in Example 2, for example.
  • step X-3 the hydroxyl group on the compound represented by formula C-3 is protected with an acetyl group to form the following formula C-4:
  • This is a process for producing a compound represented by This step can be carried out by using or applying a known method, but preferably by the method shown in Example 3, for example.
  • step X-4 only the acetyl group in the acetyloxy group bonded to the 1st carbon of the compound represented by formula C-4 is selectively removed, thereby producing the following formula C-5:
  • This is a process for producing a compound represented by This step can be carried out by using or applying a known method, but preferably by the method shown in Example 3, for example.
  • the step of producing the compound represented by formula C-5 from the compound represented by formula C-3 above may be carried out in one pot, for example, as shown in Example 3.
  • step X-5 the compound represented by formula C-5 is reacted with trichloroacetonitrile to produce the following formula C-6:
  • This is a process for producing a compound represented by This step can be performed by using or applying a known method, but preferably can be performed by the method shown in Example 4, for example.
  • Step X-6 converts the compound represented by formula C-6 into the following formula C-7:
  • a compound represented by the following formula C-8 This is a process for producing a compound represented by The compound represented by formula C-7 can be produced by known methods, or commercially available products can be used.
  • a commercially available product of the compound represented by formula C-7 for example, 4-methoxyphenyl 3,6-di-O-benzyl-2-deoxy-2-phthalimido- ⁇ -D-glucopyranoside manufactured by Tokyo Chemical Industry Co., Ltd. can be mentioned.
  • This step can be carried out by using or applying a known method, but preferably by the method shown in Example 5, for example.
  • step X-7 the acetyl group is removed from the compound represented by formula C-8 to form the following formula C-9:
  • This is a process for producing a compound represented by This step can be performed by using or applying a known method, but preferably can be performed by the method shown in Example 6, for example.
  • step This is a step of producing a compound represented by 9. It has been reported that the elimination reaction of the acetyl group is performed using sodium methoxide in methanol (Org.Biomol.Chem., 2018, 16, 4720-4727), but in that case, ring-opening of the phthalimide group Undesirable side reactions may also occur at the same time. On the other hand, by using a method of reaction with a strong alkoxide base in the presence of an alkyl ester of perfluorocarboxylic acid, it is possible to eliminate the acetyl group while suppressing ring opening of the phthalimide group. Become.
  • alkyl ester of perfluorocarboxylic acid used in the above step is not limited as long as the reaction proceeds, but includes methyl trifluoroacetate, ethyl trifluoroacetate, propyl trifluoroacetate, isopropyl trifluoroacetate, butyl trifluoroacetate.
  • strong base is not limited as long as the reaction proceeds, but includes, for example, sodium salt, lithium salt, and potassium salt of metal amide; sodium salt, lithium salt, potassium salt, and cesium salt of C 1 to C 20 alkoxide.
  • DBU zabicycloundecene
  • DBN diazabicyclononene
  • TMG 1,1,3,3-tetramethylguanidine
  • the sodium salt, lithium salt, and potassium salt of alkoxide include lithium methoxide, sodium methoxide, potassium methoxide, lithium ethoxide, sodium ethoxide, potassium ethoxide, lithium isopropoxide, sodium isopropoxide, and potassium isopropoxide.
  • the solvent in this step is not limited as long as the reaction proceeds, but for example, the reaction may be carried out in a C 1 to C 10 alcohol solvent alone, or a C 1 to C 10 alcohol solvent and an amide solvent (dimethylformamide, dimethylacetamide).
  • ether solvents tetrahydrofuran, dimethoxyethane, cyclopentyl methyl ether, etc.
  • ester solvents ethyl acetate, etc.
  • aromatic solvents toluene, etc.
  • halogen solvents diichloromethane, etc.
  • hydrocarbon solvents hexane, etc.
  • a mixed solvent with a nitrile solvent such as acetonitrile
  • methanol or a mixed solvent system of methanol and tetrahydrofuran can be used, but it is not limited to these. isn't it.
  • C 1 to C 10 alcohol solvent C 1 to C 5 alcohols (methanol, ethanol, propanol, butanol, etc.) can be suitably used.
  • the reaction temperature in this step is not limited as long as the reaction proceeds, but is, for example, -20°C to 80°C, preferably 0°C to 70°C, more preferably 20°C to 65°C, particularly preferably , 40°C to 60°C.
  • step X-8 in the compound represented by formula C-9, the hydroxyl groups bonded to the 4- and 6-position carbons of D-glucopyranoside are selectively protected using benzaldehyde dimethyl acetal to produce the following Formula C-10:
  • This is a process for producing a compound represented by This step can be carried out by using or applying a known method, but preferably by the method shown in Example 7, for example.
  • Step X-9 the compound represented by the formula C-10 is subjected to desorption selected from the group consisting of trifluoromethanesulfonyloxy group, nonafluorobutanesulfonyloxy group, 2-nitrobenzenesulfonyloxy group, and 4-nitrobenzenesulfonyloxy group.
  • This step can be carried out by using or applying a known method for imparting a leaving group, but preferably by the method shown in Example 8, for example.
  • the "compound imparting a leaving group selected from the group consisting of trifluoromethanesulfonyloxy group, nonafluorobutanesulfonyloxy group, 2-nitrobenzenesulfonyloxy group, and 4-nitrobenzenesulfonyloxy group” includes, for example , trifluoromethanesulfonic anhydride, nonafluoro-1-butanesulfonyl fluoride, bis(nonafluoro-1-butanesulfonic acid) anhydride, 2-nitrobenzenesulfonyl chloride, or 4-nitrobenzenesulfonyl chloride, preferably can include trifluoromethanesulfonic anhydride.
  • the solvent in this step is not limited as long as the reaction proceeds, but examples include ethyl acetate, toluene, dichloromethane, acetonitrile, cyclopentyl methyl ether, or tert-butyl methyl ether, and preferably ethyl acetate, Mention may be made of toluene or dichloromethane.
  • the reaction temperature in this step is not limited as long as the reaction proceeds, but may be, for example, -40°C to 60°C, preferably -30°C to 40°C, more preferably -20°C to 10°C. Can be done.
  • This step can be suitably performed in the presence of a base.
  • the base used in this step is not particularly limited as long as the reaction proceeds, but examples include 1-methylimidazole, pyridine, 4-dimethylaminopyridine, picoline, lutidine, and collidine, and preferably 1 -Methylimidazole may be mentioned.
  • step X-10 the compound represented by formula C-11 is reacted with cesium acetate or tetrabutylammonium acetate to produce the following formula C-12:
  • C-12 By producing a compound represented by the formula (wherein X 2 is an acetyl group) or by reacting a compound represented by the formula C-11 with tetrabutylammonium benzoate, the following formula C- 12: This is a process for producing a compound represented by (in the formula, X 2 is a benzoyl group).
  • the solvent in this step is not limited as long as the reaction proceeds, but examples include dimethylsulfoxide, dimethylformamide, dimethylacetamide, N-methylpyrrolidone, N,N-dimethylimidazolidinone, sulfolane, tetrahydrofuran, and acetonitrile.
  • dimethyl sulfoxide is used.
  • the reaction temperature in this step is not limited as long as the reaction proceeds, but for example, 20°C to 80°C, preferably 23°C to 70°C, more preferably 26°C to 60°C, particularly preferably, Examples include 30°C to 50°C.
  • step X-11 in the compound represented by formula C-12, the X 2 group is eliminated and the phthalimide group is ring-opened to form the following formula C-13:
  • This is a process for producing a compound represented by This step can be carried out by using or applying a known hydrolysis method, but preferably by the method shown in Example 9, for example.
  • the generated compound represented by formula C-13 may be used as it is in the next step as it is dissolved in the solvent, or it may be isolated and purified by recrystallization.
  • a great advantage of the compound represented by formula C-13 is that it can be isolated and purified by crystallization, and crystallization can almost completely remove impurities with similar structures that are difficult to remove by column purification. In this case, a compound represented by formula C-13 with an HPLC purity of 99% or more can be obtained.
  • Isolation and purification by recrystallization in this step can be carried out, for example, by completely removing the solvent from a state dissolved in the solvent by drying under reduced pressure, or by using tetrahydrofuran as a good solvent in the presence of a trace amount of water.
  • a method of dropping isopropanol as a poor solvent can be mentioned.
  • Recrystallization in this step can also be performed using seed crystals of the compound represented by formula C-13.
  • seed crystals for example, use tetrahydrofuran as a good solvent, drop a portion of isopropanol as a poor solvent in the presence of a small amount of water, add the seed crystals, check for crystal precipitation, and then drop the remaining isopropanol. Crystallization can be performed by
  • the step of producing the compound represented by formula C-13 from the compound represented by formula C-11 above may be carried out in one pot, for example, as shown in Example 9.
  • step X-12 the ring-opened phthalimide group in the compound represented by formula C-13 is ring-closed by dehydration condensation to form the following formula C-14:
  • This is a process for producing a compound represented by This step can be carried out by using or applying a known method, but preferably by the method shown in Example 10, for example.
  • step X-13 in the compound represented by formula C-14, the hydroxyl group bonded to the carbon at the 2-position of D-mannopyranoside is protected with a benzyl group to form the following formula C-15:
  • This is a process for producing a compound represented by This step can be carried out by using or applying a known method, but preferably by the method shown in Example 11, for example.
  • step The method includes a step of producing a compound represented by formula C-15 by protecting a hydroxyl group with a benzyl group. Ring opening of phthalimide can be suppressed by performing step X-15 in the presence of lithium tert-butoxide or lithium tert-amoxide. Furthermore, compared to general conditions using sodium hydride, it can be carried out safely and scale-up is easier.
  • the solvent in this step is not limited as long as the reaction proceeds, but examples thereof include dimethylacetamide, dimethylformamide, N-methylpyrrolidone, and N,N-dimethylimidazolidinone.
  • dimethylacetamide is used. can be mentioned.
  • the reaction temperature in this step is not limited as long as the reaction proceeds, but for example, -20°C to 100°C, preferably -15°C to 70°C, particularly preferably -10°C to 50°C. Can be done.
  • Step X-14 is carried out by selectively reducing the benzylidene protecting group in the compound represented by formula C-15 (for more details, see Angew. Chem. Int. Ed. 2005, 44, 1665-1668 ), the following formula A-4 in which only the hydroxyl group bonded to the 6-position carbon of D-mannopyranoside is deprotected:
  • This is a process for producing a compound represented by This step can be carried out by using or applying a known method, but preferably by the method shown in Example 12, for example.
  • the generated compound represented by formula A-4 may be used as it is in the next step as it is dissolved in the solvent, or it may be isolated and purified by column purification or the like.
  • the stereoinversion of glucose ⁇ mannose is performed using a redox reaction instead of steps X-9 to X-12, which include steps for performing using an S N 2 reaction.
  • the method includes steps X-15 and X-16 shown below.
  • step X-15 in the compound represented by formula C-10, the 2-position of D-glucopyranoside is oxidized to produce the following formula C-16: This is a process for producing a compound represented by This step can be performed by using or applying a known method.
  • step X-16 in the compound represented by formula C-16, the ketone group bonded to the 2-position carbon of 2-keto-D-glucopyranoside is reduced to produce the following formula C-14:
  • This is a process for producing a compound represented by This step can be performed by using or applying a known method.
  • the solvent in this step is not limited as long as the reaction proceeds, but examples include diethyl ether, cyclopentyl methyl ether, tert-butyl methyl ether, diisopropyl ether, dipropyl ether, dibutyl ether, and 1,4-dioxane. Preferred is tetrahydrofuran.
  • the reaction temperature in this step is not limited as long as the reaction proceeds, and can be, for example, -80°C to 20°C. Note that, as described below, the optimal reaction temperature differs depending on the reducing agent used.
  • the oxo group bonded to the 2-position carbon of 2-keto-D-glucopyranoside in the compound represented by formula C-16 is L-selectride, LS-selectride, lithium diisobutyl -tert-butoxyaluminum hydride (LDBBA), with the following formula W:
  • L-selectride LS-selectride
  • LLBBA lithium diisobutyl -tert-butoxyaluminum hydride
  • W A compound represented by (wherein R 3 is the following formula: in the presence of a reducing agent selected from the group consisting of di-tert-butyl methyl phenoxide or hydride, with the proviso that at least two R 3 are di-tert-butyl methyl phenoxide), and combinations thereof. will be returned.
  • the stereoselectivity is low (about 7:3), and it is difficult to efficiently obtain the desired stereoinversion from Glc to Man (Org. Biomol. Chem., 2018, 16, 4720-4727).
  • the selectivity of the stereoinversion from Glc to Man is greatly improved compared to when NaBH 4 is used (93.6:6.4-98. 1:1.9).
  • a compound in which three R 3 's are di-tert-butylmethylphenoxide can be prepared by adding 0.0 It can be obtained by adding dibutylhydroxytoluene (885.41 mg, 4.02 mmol) at °C and then stirring at 25 °C.
  • the compound in which two R 3 's are di-tert-butylmethyl phenoxide can be prepared by using 2 molar equivalents of dibutylhydroxytoluene for 1 molar equivalent of lithium aluminum hydride in a similar manner. You can get it by doing this.
  • the reaction temperature in this step is not limited as long as the reaction proceeds, but when L-selectride, LS-selectride or LDBBA is used as the reducing agent, the reaction temperature is preferably -80°C. -20°C, more preferably -80°C to -30°C, still more preferably -80°C to -40°C, particularly preferably -80°C to -50°C, reduction
  • the reaction temperature is preferably -20°C to 20°C, more preferably -15°C to 15°C, particularly preferably -10°C to 10°C. °C can be mentioned. Therefore, a compound represented by formula W is particularly suitable as a reducing agent for use in this step in that the reaction proceeds at a temperature that is easier to handle.
  • a compound represented by formula A-5 is produced from the compound represented by formula A-4.
  • the step comprises combining a compound represented by formula A-4 with DDQ (2,3-dichloro-5,6-dicyano-p-benzoquinone) in a mixed solvent of fluorous alcohol and water.
  • producing an oligosaccharide represented by the above formula A-5 by reacting and eliminating the 2-naphthylmethyl group in the compound represented by the above formula A-4 (de-2-naphthylmethylation reaction); It can be preferably carried out, for example, by the method shown in Example 31 or 54.
  • a substrate such as a sugar in which a 2-naphthylmethyl group is bonded via an oxygen atom is de-2-naphthylmethylated in high yield under mild conditions. product can be obtained. No deterioration of stirring properties or adhesion to the container wall due to the by-product 2,3-dichloro-5,6-dicyano-p-benzohydroquinone was observed, and the reaction could be carried out with good reproducibility. It is also suitable for mass synthesis of materials.
  • a method for producing an oligosaccharide represented by the above formula A-5 which comprises adding a compound represented by formula A-4 to DDQ (2) in a mixed solvent of fluorous alcohol and water. , 3-dichloro-5,6-dicyano-p-benzoquinone) to eliminate the 2-naphthylmethyl group in the compound of formula A-5.
  • fluorous alcohol is not limited as long as the reaction proceeds, but preferably hexafluoro-2-propanol (HFIP), 2,2,2-trifluoroethanol (TFE), 2,2,3,3,4 , 4,5,5-octafluoro-1-pentanol, nonafluoro-tert-butyl alcohol, and combinations thereof.
  • HFIP hexafluoro-2-propanol
  • TFE 2,2,2-trifluoroethanol
  • 2,2,3,3,4 2,2,3,3,4 , 4,5,5-octafluoro-1-pentanol
  • nonafluoro-tert-butyl alcohol and combinations thereof.
  • the above de-2-naphthylmethylation reaction is not limited as long as the reaction proceeds, but it is preferably carried out at -35°C to 70°C, more preferably at -30°C to -10°C.
  • the compound represented by formula A-6 can be obtained in a purified form by the following purification method.
  • the purification method includes stopping the reaction between the compound represented by the above formula A-3 and the above formula A-5, and then containing the generated compound represented by the above formula A-6 and impurities.
  • a hydrophobic carrier and water are added to a water-soluble organic solvent to adsorb the compound represented by the above formula A-6 into the hydrophobic carrier, and then filtered and the hydrophobic carrier is combined with the water-soluble organic solvent and water.
  • Contaminants are removed by washing with a mixed solution of the above formula A-6, and then the compound represented by the above formula A-6 is eluted from the hydrophobic carrier using an organic solvent.
  • the present invention makes use of the hydrophobicity of the substrate itself, thereby reducing the number of steps for tag desorption and preventing a decrease in tag functionality during oligomerization. This makes it possible to produce oligosaccharides more efficiently.
  • the compound represented by formula A-6 can be easily separated and purified from the decomposition product derived from the compound represented by formula A-4 by the purification method described above.
  • the purification of the compound represented by the above formula A-6 is not limited to the purification in this step I-1-1. Therefore, in one embodiment of the present invention, a hydrophobic carrier and water are added to a water-soluble organic solvent containing the compound represented by the above formula A-6 and impurities, and the above formula A-6 is added to the hydrophobic carrier.
  • the compound represented by the above formula is adsorbed, and impurities are removed by filtering and washing the hydrophobic carrier with a mixed solution of the water-soluble organic solvent and water.
  • a method comprising purifying the compound represented by formula A-6 above by eluting the compound represented by A-6 from a hydrophobic carrier.
  • the above purification method is also applicable to the purification of organic compounds other than sugar compounds.
  • an oligosaccharide (protected oligosaccharide) having a sugar chain structure consisting of 3 to 15 sugar residues with one or all of the hydroxyl groups in the sugar protected is preferably purified.
  • the sugar chain protecting group includes, but is not limited to, alkyl ether, benzyl ether, silyl ether, ester, and carbonate ester.
  • impurities refer to compounds and reagents other than the protected oligosaccharide (in this step, the compound represented by the above formula A-6), including the reagents used in the synthesis reaction of the protected oligosaccharide, their remains, and the protected oligosaccharide. It mainly refers to sugars other than the protected oligosaccharide, such as monosaccharide or disaccharide compounds used in the elongation reaction, or by-products produced by the deprotection reaction of the protected oligosaccharide.
  • hydrophobic carrier refers to a hydrophobic adsorption material that adsorbs specific compounds including sugar compounds.
  • “ is poly(styrene/divinylbenzene) polymer gel resin, polystyrene-divinylbenzene resin, polyhydroxy methacrylate resin, styrene vinylbenzene copolymer resin, polyvinyl alcohol resin, polystyrene resin, polymethacrylate resin, chemically bonded silica gel resin, and combinations thereof, but are not limited thereto.
  • the above-mentioned "chemically bonded silica gel resin” includes (1) a resin obtained by reacting silica gel with a silane coupling agent, (2) silica gel containing dimethyloctadecyl, octadecyl, trimethyloctadecyl, dimethyloctyl, octyl, butyl, ethyl , a resin obtained by chemically bonding a methyl, phenyl, cyanopropyl, or aminopropyl group, (3) a resin obtained by chemically bonding a docosyl or triacontyl group to silica gel, and (4) a resin obtained from the above (1) to Although selected from the group consisting of combinations (3), octadecyl group-bonded silica gel resin (ODS resin) is preferably used, but is not limited thereto.
  • ODS resin octadecyl group-bonded silica gel resin
  • water-soluble organic solvent is not particularly limited, but includes water-soluble alcohol solvents (preferably C 1 to C 4 ), water-soluble nitrile solvents (acetonitrile, etc.), water-soluble ether solvents ( Tetrahydrofuran, etc.), water-soluble ketone solvents (acetone, etc.), water-soluble amide solvents (dimethylformamide, etc.), or water-soluble sulfoxide solvents (dimethyl sulfoxide, etc.) can be used, and acetonitrile is preferably used. Can be done.
  • water-soluble alcohol solvents preferably C 1 to C 4
  • water-soluble nitrile solvents acetonitrile, etc.
  • water-soluble ether solvents Tetrahydrofuran, etc.
  • water-soluble ketone solvents acetone, etc.
  • water-soluble amide solvents dimethylformamide, etc.
  • water-soluble sulfoxide solvents dimethyl sulfoxide, etc.
  • the "organic solvent” used in the process of elution of the target product from the hydrophobic carrier is not particularly limited, but includes nitrile solvents (acetonitrile, etc.), ether solvents (tetrahydrofuran, etc.), ester solvents ( Ethyl acetate, etc.), ketone solvents (acetone, etc.), halogen solvents (dichloromethane, etc.), or aromatic solvents (toluene, etc.), or a mixed solvent containing at least one of the above solvent systems can be used. , acetonitrile, ethyl acetate, tetrahydrofuran, and toluene can be suitably used.
  • the above purification step is not particularly limited, but can be carried out at a temperature of 0°C to 50°C.
  • the compound represented by the above formula A-8 can be produced from the compound represented by the above formula A-6 by the following steps I-1-2 to I-1-3. However, it is not limited to these manufacturing processes.
  • step I-1-2 the 4-methoxyphenyl group is deprotected from the compound represented by the above formula A-6 to obtain the formula A-7: This is a process of producing a compound represented by
  • this step comprises reacting the compound represented by the above formula A-6 with ⁇ 3-iodane in a fluorous alcohol and water to deprotect the 4-methoxyphenyl group.
  • This is a step of producing a compound represented by A-7.
  • This step can be suitably performed, for example, by the method shown in Example 33 or 56.
  • ⁇ 3-iodane means a trivalent hypervalent iodine compound.
  • a compound represented by the formula R 4a -I(OR 4b ) 2 (wherein R 4a is an unsubstituted or substituted phenyl group, and R 4b is H, acetoxy, trifluoroacetoxy , tosyloxy, methanesulfonyloxy, and combinations thereof).
  • R 4a may be a "substituted phenyl group", and the substituent includes, for example, a linear or branched saturated or unsaturated hydrocarbon group, an oxygen-containing group (alkoxy, ester etc.), nitrogen-containing groups (cyano, azide, etc.), halogen atoms (for example, fluorine atoms, chlorine atoms, bromine atoms, iodine atoms), etc., but more preferably hydrocarbon groups, oxygen-containing substituents, halogen It is an atom.
  • substituents contain carbon, for example, those having 1 to 5 carbons, or those having 1 to 3 carbons can be suitably used.
  • ⁇ 3-iodane examples include [bis(trifluoroacetoxy)iodo]benzene (PIFA), [hydroxy(tosyloxy)iodo]benzene (HTIB), (diacetoxyiodo)benzene (PIDA), [bis(trifluoroacetoxy)iodo]benzene (PIFA), [hydroxy(tosyloxy)iodo]benzene (HTIB), Examples include, but are not limited to, acetoxy)iodo]pentafluorobenzene, and [hydroxy(methanesulfonyloxy)iodo]benzene.
  • fluorous alcohol used in the above step means a fluorine-containing alcohol compound in which all carbons except those bonded to hydroxyl groups contain fluorine. As long as fluorine substitution is allowed, it is preferred that the fluorous alcohol has more fluorine.
  • Fluorous alcohols include, but are not limited to, fluorous aliphatic alcohols.
  • the hydrocarbon moiety in the fluorous aliphatic alcohol may be saturated or unsaturated, linear or branched, and cyclic.
  • the fluorous aliphatic alcohol is, for example, a fluorous C 2 -C 8 aliphatic alcohol, preferably a fluorous C 2 -C 5 aliphatic alcohol, more preferably a fluorous C 2 -C 3 aliphatic alcohol.
  • fluorous alcohols include hexafluoro 2-propanol (HFIP), 2,2,2-trifluoroethanol (TFE), 2,2,3,3,4,4,5,5-octafluoro-1 -pentanol, nonafluoro-tert-butyl alcohol, and combinations thereof.
  • HFIP hexafluoro 2-propanol
  • HFIP hexafluoro 2-propanol
  • This step is performed in the coexistence of the fluorous alcohol and "water".
  • the amount of water can be appropriately set from the viewpoint of achieving a high yield of the product, but for example, about 1.0 equivalent or more in molar ratio to the compound represented by formula A-6, It may be about 1.5 equivalents or more, about 2.0 equivalents or more, or about 2.5 equivalents or more, and may be about 10 or less, about 8 or less, about It can be 5 or less, or about 3 or less.
  • an "additive" may be further added to the fluorous alcohol and water.
  • the additive is preferably selected from the group consisting of sodium dihydrogen phosphate, potassium dihydrogen phosphate, disodium hydrogen phosphate, trifluoroacetic acid, and combinations thereof.
  • the amount of the additive can be set appropriately, for example, about 0.5 to 8 equivalents, about 1 to 6 equivalents, or about 1.5 to 5 equivalents relative to the compound represented by formula A-6. obtain.
  • Step I-1-3 is a step of producing a compound represented by the above formula A-8 from a compound represented by the above formula A-7. This step can be carried out by using or applying a known method, but preferably by the method shown in Example 34 or 57, for example.
  • this step comprises converting the compound represented by the above formula A-7 into 2,2,2-trifluoro-N-phenylacetimidoyl chloride (TFPC) in the presence of N-methylimidazole.
  • TFPC 2,2,2-trifluoro-N-phenylacetimidoyl chloride
  • This is a step of producing a compound represented by the above formula A-8 by reacting with.
  • DBU can also be used instead of N-methylimidazole.
  • the solvent in this step is not limited as long as the reaction proceeds, but examples include dichloromethane, toluene, ethyl acetate, acetonitrile, or tetrahydrofuran, and dichloromethane is preferred.
  • the reaction temperature in this step is not limited as long as the reaction proceeds, but is preferably -20°C to 40°C, more preferably -10°C to 35°C, particularly preferably 0°C to 30°C. can be mentioned.
  • This step is preferably performed in the presence of a dehydrating agent.
  • the dehydrating agent in this step is not limited as long as the reaction progresses, but examples include molecular sieves, and preferably molecular sieves 4A powder with a powder particle size of 10 ⁇ m or less.
  • the generated compound represented by formula A-8 can be used as it is in the next step as long as it is dissolved in the solvent after the operation to remove the base used in the reaction.
  • it can be isolated and purified by column purification or the like. Isolation and purification using a column include, for example, isolation and purification using silica gel as a stationary phase and dichloromethane or a toluene-ethyl acetate mixed solvent system as a mobile phase.
  • Step I-2 the compound represented by the above formula A-8 is converted into the following formula A-9:
  • the following formula A-11 A compound represented by (wherein R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups)
  • Step I-2 includes the following steps I-2-1 and I-2-2.
  • Step I-2-1 produces a compound represented by formula A-10 by forming a ⁇ -1,4-glycosidic bond between a compound represented by formula A-8 and a compound represented by formula A-9. It is a process.
  • the compound represented by formula A-9 can be produced by known methods, or commercially available products can be used.
  • As a commercially available product of the compound represented by formula A'-9 (a compound represented by formula A-9, in which R 1 is 4-methoxyphenyl), for example, 4 manufactured by Tokyo Chemical Industry Co., Ltd. -methoxyphenyl 3,6-di-O-benzyl-2-deoxy-2-phthalimido- ⁇ -D-glucopyranoside.
  • the compound represented by the formula A''-9 can be obtained by subjecting the compound represented by the formula A-12 produced as described below to the treatment shown in Example 59 to obtain isopropyl 4-O-acetyl 3,6-di-O-benzyl-2-deoxy-2-(1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)- ⁇ -D-glucopyranoside (formula F''- 1) is obtained, and the compound represented by formula F''-1 is further subjected to the treatment shown in Example 60 to obtain a compound represented by formula A''-9. Can be done.
  • This step which is a step of producing a compound represented by formula A-10, can be performed by using or applying a known method, but preferably, for example, by the method shown in Example 35 or 61. It can be carried out.
  • the compound represented by formula A-10 can be obtained in a purified form by the following purification method.
  • the purification method includes stopping the reaction between the compound represented by the above formula A-8 and the above formula A-9, and then containing the generated compound represented by the above formula A-10 and impurities.
  • a hydrophobic carrier and water are added to a water-soluble organic solvent, and the compound represented by the above formula A-10 is adsorbed into the hydrophobic carrier, and then filtered and the hydrophobic carrier is combined with the water-soluble organic solvent and water.
  • Contaminants are removed by washing with a mixed solution of the above formula A-10, and then the compound represented by the above formula A-10 is eluted from the hydrophobic carrier using an organic solvent.
  • the compound represented by formula A-9 which is a monosaccharide
  • the compound represented by formula A-10 which is a pentasaccharide
  • hexane which is a typical column solvent system.
  • - Separation was difficult under ethyl acetate conditions as they had the same Rf value, but by using the purification method of the present invention, it has become possible to easily separate monosaccharides and pentasaccharides that are extremely similar in polarity. became.
  • a hydrophobic carrier and water are added to a water-soluble organic solvent containing the compound represented by the above formula A-10 and impurities, and the above formula A-10 is added to the hydrophobic carrier.
  • the compound represented by the above formula is adsorbed, and impurities are removed by filtering and washing the hydrophobic carrier with a mixed solution of the water-soluble organic solvent and water.
  • a method comprising purifying the compound represented by formula A-10 above by eluting the compound represented by A-10 from a hydrophobic carrier.
  • impurities refer to compounds and reagents other than the protected oligosaccharide (in this step, the compound represented by formula A-10), including the reagents used in the synthesis reaction of the protected oligosaccharide and their remains, and the components of the protected oligosaccharide. It mainly refers to sugars other than the protected oligosaccharide, such as monosaccharide or disaccharide compounds used in the elongation reaction, or by-products produced by the deprotection reaction of the protected oligosaccharide.
  • Step I-2-2 is a step of producing a compound represented by formula A-11 from a compound represented by formula A-10.
  • this step I-2-2 involves reacting the compound represented by formula A-10 with a strong base in the presence of an alkyl ester of perfluorocarboxylic acid in a solvent to remove an acetyl group.
  • This is a step of producing a compound represented by formula A-11 by separating (deacetylation reaction), and can be preferably carried out, for example, by the method shown in Example 36 or 62.
  • the deacetylation reaction can be carried out in the same manner as the deacetylation reaction described in step By using the reaction method, it becomes possible to perform the deacetylation reaction while suppressing ring opening of the phthalimide group.
  • step X-7 The alkyl ester of perfluorocarboxylic acid, strong base, solvent, and reaction temperature of the step used in this step are as described in step X-7 above.
  • step I-3 the compound represented by the above formula A-11 is converted into the following formula A-12:
  • a compound represented by (wherein R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups) is produced, and then the phthaloyl group which is a protecting group for the amino group on the compound represented by the above formula A-13 and the acetyl group on the hydroxyl group are removed to obtain the following formula A-14:
  • the amino group in the compound represented by formula A-14 is converted into an aryloxycarbonyl (COOAr)
  • Step I-3-1 is to form a compound represented by the above formula A-13 by forming a ⁇ -1,2-glycosidic bond between the compound represented by the above formula A-11 and the compound represented by the above formula A-12. This is the process of generating.
  • the above-mentioned glycosidic bonding step can be performed by using or applying a known method, and preferably can be performed by the method shown in Example 37 or 63, for example.
  • the compound represented by formula A-12 can be produced as follows.
  • the compound represented by formula A-13 may be purified as described below.
  • substep Z-2 comprises reacting a compound of formula F-1 with ⁇ 3-iodane in a fluorous alcohol and water to eliminate the 4-methoxyphenyl group.
  • This is a step for producing a compound represented by formula F-2, and can be preferably carried out, for example, by the method shown in Example 14.
  • This step can be carried out according to the above step I-1-2, and the fluorous alcohol and ⁇ 3-iodane used in this step are the same as those used in the above step I-1-2. can be used.
  • substep Z-3 is carried out by reacting with 2,2,2-trifluoro-N-phenylacetimidoyl chloride (TFPC) in the presence of N-methylimidazole.
  • TFPC 2,2,2-trifluoro-N-phenylacetimidoyl chloride
  • This is a step of producing the compound represented by A-12, and can be preferably carried out, for example, by the method shown in Example 15 or 58.
  • the equivalent weight of TFPC can be reduced compared to, for example, using potassium carbonate. This makes it possible to obtain the desired product in high yield.
  • the solvent and reaction temperature used, as well as the fact that it is preferably carried out in the presence of a dehydrating agent, and that it may be isolated and purified by column purification etc. are the same as in the above step I-1-3. It is.
  • the compound represented by formula A-13 can be obtained in a purified form by the following purification method.
  • the purification method includes stopping the reaction between the compound represented by the above formula A-11 and the above formula A-12, and then containing the generated compound represented by the above formula A-13 and impurities.
  • a hydrophobic carrier and water are added to a water-soluble organic solvent to adsorb the compound represented by the above formula A-13 into the hydrophobic carrier, and then filtered and the hydrophobic carrier is added to the water-soluble organic solvent.
  • Contaminants are removed by washing with a mixed solution with water, and then the compound represented by the above formula A-13 is eluted from the hydrophobic carrier using an organic solvent.
  • the purification method uses a small amount of hydrophobic carrier to produce a large amount of high-quality oligosaccharides in the liquid phase synthesis of oligosaccharide chains. And it has become possible to manufacture efficiently.
  • a hydrophobic carrier and water are added to a water-soluble organic solvent containing the compound represented by the above formula A-13 and impurities, and the above formula A-13 is added to the hydrophobic carrier.
  • the compound represented by formula A is adsorbed, and impurities are removed by filtering and washing the hydrophobic carrier with a mixed solution of the above-mentioned soluble organic solvent and water.
  • a method comprising purifying the compound represented by formula A-13 above by eluting the compound represented by formula A-13 from a hydrophobic carrier.
  • contaminants refer to compounds and reagents other than the protected oligosaccharide (in this step, the compound represented by formula A-13), including the reagents used in the synthesis reaction of the protected oligosaccharide, their remains, and the components of the protected oligosaccharide. It mainly refers to sugars other than the protected oligosaccharide, such as monosaccharide or disaccharide compounds used in the elongation reaction, or by-products produced by the deprotection reaction of the protected oligosaccharide.
  • hydrophobic carrier reverse phase partition chromatography packing resin, etc.
  • water-soluble organic solvent water-soluble organic solvent
  • organic solvent organic solvent
  • Step I-3-2 removes the phthaloyl group that is a protecting group for the amino group on the compound represented by formula A-13 and the acetyl group on the hydroxyl group to produce a compound represented by formula A-14. It is a process.
  • This step can be suitably carried out, for example, by the method shown in Example 38 or 64, for example, by adding n-butanol and ethylenediamine to a solution containing the compound represented by formula A-13. However, it is not limited to these methods. Also, after adding the above n-butanol and ethylenediamine, adding an acid (for example, fumaric acid) and stirring, seed crystals are inoculated, and then the formula A-14 is added.
  • an acid for example, fumaric acid
  • Crystals of the acid salt (eg, fumarate) of the compound shown may be obtained (see, eg, Example 64).
  • analogs (isomers, etc.) of the compound represented by formula A-14 can be removed by filtration, making it possible to achieve high purity.
  • fumaric acid can be suitably used as the "acid” to be added, but is not limited thereto.
  • the compound represented by formula A-14 can be obtained in a purified form by the following purification method.
  • the purification method involves adding a hydrophobic carrier and water to a water-soluble organic solvent containing the compound represented by the formula A-14 and impurities produced as described above, and adding the above formula to the hydrophobic carrier.
  • the compound represented by A-14 is adsorbed, and impurities are removed by filtering and washing the hydrophobic carrier with a mixed solution of the water-soluble organic solvent and water.
  • the method includes purifying the compound represented by the above formula A-14 by eluting the compound represented by the above formula A-14 from a hydrophobic carrier.
  • a hydrophobic carrier and water are added to a water-soluble organic solvent containing the compound represented by the above formula A-14 and impurities, and the above formula A-14 is added to the hydrophobic carrier.
  • the compound represented by the above formula is adsorbed, and impurities are removed by filtering and washing the hydrophobic carrier with a mixed solution of the water-soluble organic solvent and water.
  • a method comprising purifying the compound represented by formula A-14 above by eluting the compound represented by A-14 from a hydrophobic carrier.
  • contaminants refer to compounds and reagents other than the protected oligosaccharide (in this step, the compound represented by formula A-14), including the reagents used in the synthesis reaction of the protected oligosaccharide, their remains, and the components of the protected oligosaccharide. It mainly refers to sugars other than the protected oligosaccharide, such as monosaccharide or disaccharide compounds used in the elongation reaction, or by-products produced by the deprotection reaction of the protected oligosaccharide.
  • Step I-3-3 converts the amino group in the compound represented by formula A-14 into an aryloxycarbonyl (COOAr) group, an acetyl (Ac) group, a 2,2,2-trichloroethoxycarbonyl (Troc) group, and a phthaloyl (Phth) group to protect the compound represented by the above formula A-15 (wherein R 5 is an aryloxycarbonyl (COOAr) group, an acetyl (Ac) group, or 2 , 2,2-trichloroethoxycarbonyl (Troc) group, and R 6 is a hydrogen atom, or R 5 and R 6 together with the nitrogen atom to which they are bonded form a phthalimide group.
  • COOAr aryloxycarbonyl
  • Ac acetyl
  • Troc 2,2,2-trichloroethoxycarbonyl
  • Phth phthaloyl
  • the temporary protecting group on the nitrogen of glucosamine is selected from aryloxycarbonyl (COOAr) group, 2,2,2-trichloroethoxycarbonyl (Troc) group, and phthaloyl (Phth) group.
  • COOAr aryloxycarbonyl
  • Troc 2,2,2-trichloroethoxycarbonyl
  • Phth phthaloyl
  • the above-mentioned disadvantages can be avoided by protecting with a protecting group such as -NHAc and deprotecting it after the glycosylation reaction to form an -NHAc group.
  • aryl (Ar) group in aryloxycarbonyl means a group produced by removing one hydrogen atom on an aromatic ring in an aromatic hydrocarbon, and includes, but is not limited to, a phenyl group, 2-naphthyl group, 1-naphthyl group, 2-pyridyl group, 3-pyridyl group, nitrophenyl group, chlorophenyl group, fluorophenyl group, bromophenyl group, iodophenyl group, methoxyphenyl group, and C 1 -C 4 alkyl group Examples include phenyl group, preferably phenyl group.
  • glycosylation reaction of the aryloxycarbonyl (COOAr) group proceeds better than other protecting groups, and the subsequent deprotection reaction can be carried out under suitable conditions such as general hydrolysis conditions at room temperature within 1 hour. It has been found that deprotection of
  • the above step can be suitably carried out, for example, by the method shown in Example 39 or 65, for example, a solution of the compound of formula A-14 in tetrahydrofuran is added with tetrahydrofuran and sodium bicarbonate, hydrogen carbonate.
  • a solution of the compound of formula A-14 in tetrahydrofuran is added with tetrahydrofuran and sodium bicarbonate, hydrogen carbonate.
  • This can be carried out, without limitation, by adding an aqueous solution of potassium, disodium hydrogen phosphate, or dipotassium hydrogen phosphate (preferably sodium hydrogen carbonate is used) in water.
  • the compound shown by the above formula A-15 can be obtained. (wherein R 5 and R 6 together with the nitrogen atom to which they are attached form a phthalimide group) may be produced.
  • the selective removal of the acetyl group can be performed under methyl trifluoroacetate conditions, but is not limited thereto. This step brings about the same result as when a phthaloyl (Phth) group is selected as the protecting group for the amino group in the compound represented by the above formula A-14 in Steps I-3-2 and I-3-3. .
  • step I-4 the compound represented by the above formula A-15 is converted into the following formula A-16:
  • a compound represented by (wherein R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups, R 5 is an aryloxycarbonyl (COOAr) group, an acetyl (Ac) group, or a 2,2,2-trichloroethoxycarbonyl (Troc) group, and R 6 is a hydrogen atom, or R 5 and R 6 forms a phthalimide group together with the nitrogen atom to which they are bonded), and then the protecting group of the amino group in the compound represented by formula A-17 is removed to form the following formula A.
  • R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups
  • R 5 is an aryloxycarbony
  • step I-4 includes the following steps I-4-1 to I-4-4.
  • This step is a step of producing a compound represented by the formula A-17 by forming a ⁇ -1,4-glycosidic bond between the compound represented by the above formula A-15 and the compound represented by the above formula A-16.
  • the above-mentioned glycosidic bonding step can be performed by using or applying a known method, and preferably can be performed by the method shown in Example 40 or 66, for example.
  • the compound represented by the above formula A-16 can be produced as in the following substeps V-1 to V-11.
  • This process includes as an essential small step V-7, which will be described later, in which a disaccharide block is synthesized by linking two molecules of monosaccharide with an ⁇ -2,6-glycosidic bond, but other than that, the monosaccharide Alternatively, it can be carried out using a conventional method for oligosaccharide production or by applying such a conventional method.
  • step V includes the following substeps.
  • the small process V-1 is the following formula G-1:
  • the compound represented by formula G-1 which is the starting material of this step, is a compound identified as CAS number 100759-10-2, and can be produced by known methods, for example, as described in Examples 16 and 17. It can be manufactured by the method shown. This step can be carried out by using or applying a known method, but preferably by the method shown in Example 18, for example.
  • this step is a step of solid-phase extraction of the compound represented by formula G-3 by contacting a solvent in which the generated compound represented by formula G-3 is dissolved with silica gel. including. Since the unreacted compound represented by formula G-2 and the desorbed benzaldehyde are not adsorbed to silica gel, the compound represented by formula G-3 can be efficiently purified through this step.
  • Examples of the solvent for dissolving the compound represented by formula G-3 include toluene, heptane, dichloromethane, chloroform, or a combination thereof, preferably toluene, dichloromethane, chloroform, or a combination thereof. Combinations may be mentioned, particularly preferably toluene, but not limited thereto.
  • silica gel used in this step examples include silica gel in an amount of 2 to 5 times the amount of the raw material, preferably silica gel in an amount of 2 to 4 times the amount of the raw material, and more preferably Preferably, the amount of silica gel is about 3 times that of the raw material.
  • the solvent for eluting the compound represented by formula G-3 adsorbed on silica gel is not particularly limited as long as it does not dissolve silica gel and can elute the target product, but examples include cyclopentyl methyl ether. , ethyl acetate, or tert-butyl methyl ether.
  • Sub-process V-3 is the following formula G-4:
  • the compound represented by formula G-4 which is the starting material for this step, can be produced by a known method, or a commercially available product can be used.
  • a commercially available product of the compound represented by formula G-4 for example, N-acetylneuraminic acid manufactured by Tokyo Kasei Kogyo may be mentioned.
  • This step can be carried out by using or applying a known method, but preferably by the method shown in Example 20, for example.
  • Substep V-5 is the following formula G-7 by reacting the compound represented by formula G-6 with 2,2,2-trifluoro-N-phenylacetimidoyl chloride (TFPC):
  • TFPC 2,2,2-trifluoro-N-phenylacetimidoyl chloride
  • this step is a step of producing a compound represented by formula G-7 by reacting a compound represented by formula G-6 with TFPC in the presence of N-methylimidazole.
  • N-methylimidazole is used as the base in this step, compared to when K 2 CO 3 is used, it is possible to reduce the equivalent amount of TFPC, and even in that case, the target product can be obtained in high yield. Obtainable. Since TFPC is an expensive reagent, improving the yield of the process is extremely beneficial for commercial production.
  • the solvent in this step is not limited as long as the reaction proceeds, but examples include dichloromethane, toluene, ethyl acetate, acetonitrile, or tetrahydrofuran, and dichloromethane is preferred.
  • the reaction temperature in this step is not limited as long as the reaction proceeds, but is preferably 0°C to 40°C, more preferably 0°C to 35°C, particularly preferably 0°C to 30°C. Can be done.
  • This step is preferably performed in the presence of a dehydrating agent.
  • the dehydrating agent in this step is not limited as long as the reaction progresses, but examples include molecular sieves, and preferably molecular sieves 4A powder with a powder particle size of 10 ⁇ m or less.
  • the generated compound represented by formula G-8 may be used as it is in the next step as it is dissolved in the solvent, or it may be isolated and purified by recrystallization.
  • the great advantage of the compound represented by formula G-8 is that it can be isolated and purified by crystallization, and the compound represented by formula G-8 with HPLC purity of 99% or more can be obtained by crystallization. Since it does not contain any impurities, it becomes possible to carry out the glycosylation reaction in the next step stably. Isolation and purification by recrystallization can be carried out, for example, by adding heptane to a solution of cyclopentyl methyl ether and crystallizing it.
  • This step can be suitably performed in the presence of a Lewis acid.
  • the Lewis acid in this step is not limited as long as the reaction proceeds, but examples include trimethylsilyl trifluoromethanesulfonate, triisopropylsilyl trifluoromethanesulfonate, and tert-butyldimethylsilyl trifluoromethanesulfonate, which are preferably can include trimethylsilyl trifluoromethanesulfonate.
  • the solvent in this step is not limited as long as the reaction proceeds, but examples include cyclopentyl methyl ether, diisopropyl ether, tert-butyl methyl ether, diethyl ether, dibutyl ether, dipropyl ether, 1,4-dioxane, dichloromethane, , 2-dichloroethane, toluene, chlorobenzene, trifluoromethylbenzene, propionitrile or acetonitrile, preferably cyclopentyl methyl ether.
  • the reaction temperature in this step is not limited as long as the reaction proceeds, but for example, -78°C to 0°C, preferably -78°C to -20°C, more preferably -78°C to -30°C, Particularly preferred is -78°C to -40°C.
  • This step is not limited as long as the reaction proceeds, but for example, a mixed solution of a compound represented by formula G-8 and a compound represented by formula G-3 (preferably a mixed solution of cyclopentyl methyl ether) is mixed with a Lewis acid (preferably a cyclopentyl methyl ether solution), or a solution of the compound represented by formula G-8 (preferably a cyclopentyl methyl ether solution) is added dropwise to a Lewis acid and a solution of the compound represented by formula G-3 (preferably a cyclopentyl methyl ether solution).
  • a mixed solution of a compound represented by formula G-8 and a compound represented by formula G-3 preferably a mixed solution of cyclopentyl methyl ether
  • a Lewis acid preferably a cyclopentyl methyl ether solution
  • a solution of the compound represented by formula G-8 preferably a cyclopentyl methyl ether solution
  • the dropping time is not limited as long as the reaction proceeds, but for example, 30 minutes to 5 hours, preferably 1 hour to 4 hours, more preferably 2 hours to 3.5 hours, particularly preferably about 3 hours. It's time.
  • this step includes solid-phase extraction of the compound represented by Formula G-9 by contacting a solvent in which the compound represented by Formula G-9 is dissolved with silica gel.
  • N-phenyltrifluoroacetamide which is produced as a by-product in the glycosylation reaction, and other trace impurities that are not adsorbed on silica gel in toluene solvent are not adsorbed on silica gel, so this process efficiently converts the compound represented by formula G-9. It can be refined well.
  • Examples of the solvent for dissolving the compound represented by formula G-9 include toluene, heptane, dichloromethane, chloroform, or a combination thereof, preferably toluene, dichloromethane, chloroform, or a combination thereof. Combinations may be mentioned, particularly preferably toluene, but not limited thereto.
  • silica gel used in this step examples include silica gel in an amount of 2 to 5 times the amount of the raw material, preferably silica gel in an amount of 2 to 4 times the amount of the raw material, and more preferably Preferably, the amount of silica gel is about 3.5 times the amount of the raw material.
  • the solvent for eluting the compound represented by formula G-9 adsorbed on silica gel is not particularly limited as long as it does not dissolve silica gel and can elute the target product, but examples include ethyl acetate, Examples include cyclopentyl methyl ether and tert-butyl methyl ether, and preferably ethyl acetate.
  • This step can be performed, for example, by the method shown in Example 24.
  • this step includes solid-phase extraction of the compound represented by Formula G-11 by contacting a solvent in which the compound represented by Formula G-11 is dissolved with silica gel.
  • By-products such as the diacetyl form of the compound represented by formula G-3 produced by acetylation of the compound represented by formula G-3 used in excess in the upstream glycosylation reaction are not adsorbed on silica gel.
  • the compound represented by formula G-11 can be efficiently purified.
  • Examples of the solvent for dissolving the compound represented by formula G-11 include toluene, heptane, dichloromethane, chloroform, or a combination thereof, preferably toluene, dichloromethane, chloroform, or a combination thereof. Combinations may be mentioned, particularly preferably toluene, but not limited thereto.
  • silica gel used in this step examples include silica gel in an amount of 2 to 5 times the amount of the raw material, preferably silica gel in an amount of 2 to 4 times the amount of the raw material, and more preferably Preferably, the amount of silica gel is about 3.5 times the amount of the raw material.
  • the solvent for eluting the compound represented by formula G-11 adsorbed on silica gel is not particularly limited as long as it does not dissolve silica gel and can elute the target product, but examples include ethyl acetate, Examples include cyclopentyl methyl ether and tert-butyl methyl ether, and preferably ethyl acetate.
  • ⁇ Small process V-10> in the sub-step V-10, in the compound represented by the formula G-11, the allyl group bonded to the carbon at the 1-position of D-galactopyranoside is removed to produce the following formula G-12:
  • This is a process for producing a compound represented by This step can be carried out by using or applying a known method, but preferably by the method shown in Example 27-1, for example.
  • the compound represented by formula G-12 includes a compound represented by formula G-11 and carbonylchlorohydridotris(triphenylphosphine)ruthenium(II).
  • the solution is stirred, and then water and 1,3-dibromo-5,5-dimethylhydantoin, iodine, or N-bromosuccinimide are added to the solution and stirred. It can also be produced by removing the allyl group bonded via oxygen to the 1st carbon of D-galactopyranoside.
  • the solvent used in this step tetrahydrofuran, tetrahydropyran, cyclopentyl methyl ether, toluene, 2-methyltetrahydrofuran, 1,2-dimethoxyethane, t-butyl methyl ether, etc. may be used, and the isomerization temperature is , for example, at 40 to 65°C.
  • Substep V-11 is a compound represented by formula G-12, by reacting with 2,2,2-trifluoro-N-phenylacetimidoyl chloride (TFPC) to produce a compound represented by formula A-16 above.
  • TFPC 2,2,2-trifluoro-N-phenylacetimidoyl chloride
  • This step can be performed by using or applying a known method, but preferably, it can be performed by the method shown in Example 28, for example.
  • the compound represented by formula A-17 can be obtained in a purified form by the following purification method.
  • the purification method includes stopping the reaction between the compound represented by the above formula A-15 and the above formula A-16, and then containing the generated compound represented by the above formula A-17 and impurities.
  • a hydrophobic carrier and water are added to a water-soluble organic solvent to adsorb the compound represented by the above formula A-17 into the hydrophobic carrier, and then filtered and the hydrophobic carrier is combined with the water-soluble organic solvent and water.
  • Contaminants are removed by washing with a mixed solution of the above formula A-17, and then the compound represented by the above formula A-17 is eluted from the hydrophobic carrier using an organic solvent.
  • a hydrophobic carrier and water are added to a water-soluble organic solvent containing the compound represented by the above formula A-17 and impurities, and the above formula A-17 is added to the hydrophobic carrier.
  • the compound represented by the above formula is adsorbed, and impurities are removed by filtering and washing the hydrophobic carrier with a mixed solution of the water-soluble organic solvent and water.
  • a method comprising purifying the compound represented by formula A-17 above by eluting the compound represented by A-17 from a hydrophobic carrier.
  • impurities refer to compounds and reagents other than the protected oligosaccharide (in this step, the compound represented by formula A-17), including the reagents used in the synthesis reaction of the protected oligosaccharide and their remains, and the components of the protected oligosaccharide. It mainly refers to sugars other than the protected oligosaccharide, such as monosaccharide or disaccharide compounds used in the elongation reaction, or by-products produced by the deprotection reaction of the protected oligosaccharide.
  • This step is a step of removing the protecting group for the amino group and the acyl protecting group for the hydroxyl group on the compound represented by the formula A-17 to produce the compound represented by the formula A-18.
  • the above-mentioned removal (deprotection) of the protecting group of the amino group can be carried out by using or applying a known method, but preferably, it can be carried out by the method shown in Example 43 or 67, for example. For example, it can be carried out by sequentially adding 1,2-dimethoxyethane and an aqueous solution of potassium hydroxide, sodium hydroxide, or lithium hydroxide, but is not limited thereto.
  • M + is preferably, but not limited to, a sodium ion, a lithium ion, a potassium ion, or a protonated triethylamine cation.
  • the compound represented by formula A-18 obtained in the above step can be isolated as its free form (compound represented by formula A-18-FF) by a known or well-known method.
  • the compound represented by formula A-18 is a form of "salt" of the compound represented by formula A-18-FF, but as stated above, salts are formed at the hydroxyl group, amino group, etc. in the compound.
  • Steps I-4-3 to I-4-4 below are exemplary embodiments for producing a compound represented by formula A-20 from a compound represented by formula A-18, It is not limited to the process.
  • Step I-4-3> the amino group on the compound represented by formula A-18 is protected with an acetyl group to form the following formula A-19:
  • a compound represented by (wherein R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups, M + is a sodium ion, lithium ion, potassium ion, or protonated triethylamine cation).
  • the above-mentioned protection of the amino group with the acetyl group can be carried out by using or applying a known method, and preferably by the method shown in Example 44 or 68, for example.
  • Step I-4-4> This step is a step in which the benzyl group is removed from the benzyloxy group on the compound represented by Formula A-19 to produce the compound represented by Formula A-20 above.
  • the above benzyl group can be removed by using or applying a known method, but preferably by the method shown in Example 45 or 69, for example, formula A-- This can be carried out by adding N-methylpyrrolidone and Pd/C to the compound represented by No. 19, and performing the following steps: reduced pressure ⁇ nitrogen substitution and hydrogen pressurization ⁇ depressurization, but the method is not limited thereto.
  • step I-5 the compound represented by the above formula A-20 is converted into the following formula A-21, which is an azido-PEG linker:
  • This process includes a step of producing an oligosaccharide represented by the above formula A-22 by reacting with a compound represented by (11-azido-3,6,9-trioxaundecane-1-amine).
  • the compound represented by the above formula A-20 and the compound represented by the formula A-21 can be bonded by using or applying a known method, but preferably, for example, Example 51 or 70
  • a solution containing a compound represented by formula A-20 is added with a compound represented by formula A-21, N-ethyldiisopropylamine, and hexafluorophosphoric acid (benzotriazole-1).
  • the compound represented by formula A-21 has a purity measured by HPLC (herein also referred to as "HPLC purity" It preferably has a purity of 95% or more, more preferably 96% or more or 97% or more, even more preferably 98% or more or 99% or more.
  • HPLC purity a purity measured by HPLC
  • the purpose of purifying the compound represented by A-21 is that the commercially available reagent for the compound contains several other impurities, including dimers, and the conventional technology
  • the present inventors found that three types of tartaric acid derivatives represented by the above formula E-1 (where R 7 is a hydrogen atom) , methyl group, or methoxy group), the compound represented by formula A-21 forms a one-to-one salt with their tartaric acid derivative, and can be isolated as a crystal.
  • the resulting compound represented by the above formula E-2 is a new crystalline compound, and after isolation, separation with ethyl acetate/hydrochloric acid aqueous solution, etc., subsequent freeing, and extraction yield a higher HPLC purity than before purification. (preferably HPLC purity of 95% or more).
  • An exemplary method of the above purification method is as follows. First, the compound represented by Formula E-1 is added to a solution of the compound represented by Formula A-21 in a solvent such as acetonitrile and water, stirred, and after confirming dissolution, a solvent such as acetonitrile is added. The obtained slurry liquid is concentrated under reduced pressure, and the precipitated crystals are filtered by stirring the slurry liquid. The filtered crystals are washed with acetonitrile and dried under reduced pressure to obtain crystals of the compound represented by formula E-2 (crystal production step).
  • a compound represented by can be obtained. More preferably, it can be carried out by the methods shown in Examples 46 to 50, for example.
  • the purification of the compound represented by the above formula A-21 is not limited to the purification in this step. Therefore, in one embodiment of the present invention, the compound represented by the above formula E-1 (wherein R 7 is a hydrogen atom, a methyl group, or a methoxy a step of adding a group) to produce a crystalline compound represented by the above formula E-2 (wherein R 7 is a hydrogen atom, a methyl group, or a methoxy group); Also provided is a method for purifying a compound represented by Formula A-21, comprising the steps of isolating the compound represented by Formula A-21, and then extracting the compound represented by Formula A-21 from the isolated crystalline compound.
  • the desired oligosaccharide represented by the above formula A-22 can be obtained by the method of the present invention including the above steps I-1 to I-5. Further, the oligosaccharide intermediate represented by the above formula A-22 is useful in the production of the oligosaccharide, but is not limited to the production of the oligosaccharide, and can be applied to all kinds of uses. Therefore, the present invention provides an oligosaccharide represented by the above formula A-22 and an intermediate thereof.
  • the following formula A-8 A compound represented by (wherein R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups) is provided.
  • the following formula A-10 A compound represented by (wherein R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups) is provided.
  • a compound represented by (wherein R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups) is provided.
  • the following formula A-13 A compound represented by (wherein R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups) is provided.
  • a compound represented by (wherein R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups) is provided.
  • the following formula A-15 A compound represented by (wherein R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups, R 5 is an aryloxycarbonyl (COOAr) group, an acetyl (Ac) group, or a 2,2,2-trichloroethoxycarbonyl (Troc) group, and R 6 is a hydrogen atom, or R 5 and R 6 form a phthalimide group together with the nitrogen atom to which they are attached.
  • R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups
  • R 5 is an aryloxycarbonyl (COOAr) group, an acetyl (Ac) group, or a 2,2,2-trichloroethoxycarbonyl (Troc) group
  • R 6
  • the following formula A-17 A compound represented by (wherein R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups, R 5 is an aryloxycarbonyl (COOAr) group, an acetyl (Ac) group, or a 2,2,2-trichloroethoxycarbonyl (Troc) group, and R 6 is a hydrogen atom, or R 5 and R 6 form a phthalimide group together with the nitrogen atom to which they are attached.
  • R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups
  • R 5 is an aryloxycarbonyl (COOAr) group, an acetyl (Ac) group, or a 2,2,2-trichloroethoxycarbonyl (Troc) group
  • R 6
  • formula A-18-FF A compound represented by (wherein R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups) or its salt is provided.
  • the following formula A-18 A compound represented by (wherein R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups, M + is a sodium ion, a lithium ion, a potassium ion, or a protonated triethylamine cation).
  • the following formula A-19-FF A compound represented by (wherein R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups) or its salt is provided.
  • the following formula A-19 A compound represented by (wherein R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups, M + is a sodium ion, a lithium ion, a potassium ion, or a protonated triethylamine cation).
  • formula A-20-FF A compound represented by (wherein R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups) or its salt is provided.
  • the following formula A-20 A compound represented by (wherein R 1 is a C 1 to C 6 alkyl group or a phenyl group, and the phenyl group may be substituted with 1 to 3 C 1 to C 6 alkoxy groups, M + is a sodium ion, a lithium ion, a potassium ion, or a protonated triethylamine cation).
  • a biantennary glycan having an ⁇ 2,6-sialic acid structure at the non-reducing end i.e., an oligosaccharide represented by formula A-22
  • a glycoprotein, etc. in particular, a sugar chain remodeling antibody or Provided are novel glycoproteins, etc., which are used as donor molecules in synthesizing the FC region-containing molecules (or antibody-drug conjugates), and novel methods for producing the same.
  • the oligosaccharide represented by formula A-22 obtained by the production method of the present invention can be used to synthesize glycoproteins (particularly sugar chain remodeling antibodies or Fc region-containing molecules, or antibody-drug conjugates).
  • glycoproteins particularly sugar chain remodeling antibodies or Fc region-containing molecules, or antibody-drug conjugates.
  • hydrolases are used to excise heterogeneous sugar chains attached to proteins (antibodies, etc.), leaving only N-acetylglucosamine (GlcNAc) at the end, and GlcNAc is added. (hereinafter referred to as "acceptor molecule”).
  • acceptor molecule N-acetylglucosamine
  • donor molecule a separately prepared arbitrary sugar chain is prepared (hereinafter referred to as a "donor molecule”), and the acceptor molecule and donor molecule are linked using a glycosyltransferase. This allows the synthesis of uniform glycoproteins with arbitrary sugar chain structures.
  • the oligosaccharide represented by formula A-22 produced using the novel production method of the present invention can be produced by activating the terminal structure of the homogeneous glycoprotein (especially glycoprotein). It can be used as a donor molecule when synthesizing a chain remodeling antibody or its Fc region-containing molecule.
  • sugar chain means a structural unit in which two or more monosaccharides are linked through glycosidic bonds.
  • a specific monosaccharide or sugar chain may be abbreviated as, for example, "GlcNAc-”.
  • the oxygen atom or nitrogen atom that belongs to the glycosidic bond with another structural unit at the reducing end is not included in the abbreviation representing the sugar chain, unless there is a special definition. Displayed as not included.
  • a sugar chain when described as a symbol (for example, GlcNAc, etc.), unless otherwise defined, the symbol includes up to the carbon at the reducing end and is attributed to an N- or O-glycosidic bond. N or O shall not be included in the symbol.
  • glycoprotein refers to a protein in which sugar chains are bound to some of the amino acids that constitute the protein.
  • the "glycoprotein” is a sugar chain remodeling antibody or its Fc region-containing molecule. Therefore, in one aspect of the present invention, the step of obtaining a sugar chain donor molecule includes the novel method for producing an oligosaccharide of the present invention, and the sugar chain donor molecule may have fucose added thereto as an N297-linked sugar chain.
  • a method for producing a sugar chain remodeling antibody or an Fc region-containing molecule thereof which includes a step of reacting an antibody having core GlcNAc or an acceptor molecule that is an Fc region-containing molecule thereof.
  • core GlcNAc is GlcNAc at the reducing end of the N297-linked sugar chain.
  • the term "sugar chain donor molecule” refers to a molecule that plays a role in providing a sugar chain to an acceptor molecule.
  • the sugar chain donor molecule is an oligosaccharide represented by formula A-22.
  • the oligosaccharide represented by formula A-22 is an oligosaccharide in which R 1 is a 4-methoxyphenyl group or an isopropyl group, but the oligosaccharide is not limited thereto.
  • an oligosaccharide in which R 1 is a 4-methoxyphenyl group substituted with an isopropyl group is used instead of the compound represented by formula A'-9, in which the 4-methoxyphenyl group of the compound is substituted with an isopropyl group. It can be produced by using a substituted compound (compound represented by formula A''-9) (see Example 13, Example 60, etc.).
  • acceptor molecule means a molecule that receives a sugar chain from a sugar chain donor molecule.
  • the "acceptor molecule” is not particularly limited as long as it is a molecule capable of receiving a sugar chain from a sugar chain donor molecule, but preferably a sugar chain-cleaved antibody or its Fc region in which most of the sugar chains have been cleaved from the antibody. More preferably, an antibody having a core GlcNAc or a molecule containing its Fc region can be mentioned.
  • the sugar chain that is partially cleaved in the sugar chain-cleaved antibody is an N-linked sugar chain or an O-linked sugar chain, preferably an N-linked sugar chain.
  • N-linked sugar chains are bonded to amino acid side chains of antibodies via N-glycosidic bonds
  • O-linked sugar chains are bonded to amino acid side chains of antibodies via O-glycosidic bonds.
  • the antibody as the "acceptor molecule” is preferably IgG, more preferably IgG1, IgG2 or IgG4.
  • IgG has a well-conserved N-linked sugar chain (hereinafter referred to as "Asn297-linked sugar chain or N297-linked sugar chain”) at the 297th asparagine residue (hereinafter referred to as "Asn297 or N297”) in the Fc region of its heavy chain. ) and is known to contribute to the activity and dynamics of antibody molecules (Eon-Duval, A. et al, Biotechnol. Prog. 2012, 28, 608-622, Sanglier-Cianferani, S., Anal. Chem. 2013, 85, 715-736).
  • each amino acid sequence in the constant region of IgG is well conserved, and in a report by Edelman et al. (Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 63, 78-85, (1969)), each amino acid sequence is It is specified by the EU number (EU INDEX).
  • EU number EU INDEX
  • Asn297 to which an N-linked sugar chain is added in the Fc region, corresponds to position 297 in the EU number, and even if the actual amino acid position changes due to molecular fragmentation or region deletion, the EU number Amino acids are uniquely identified by numbering.
  • the "acceptor molecule” is an antibody having core GlcNAc as an N297-linked sugar chain or a molecule containing its Fc region.
  • Other monosaccharides or sugar chains may be added to the core GlcNAc as the N297-linked sugar chain, for example, fucose may be added. Therefore, in one aspect of the present invention, the "acceptor molecule” is an antibody having a core GlcNAc to which fucose may be added as an N297-linked sugar chain or an Fc region-containing molecule thereof.
  • the step of reacting the sugar chain donor molecule with the acceptor molecule can be performed by any reaction method as long as the reaction proceeds. or reaction conditions can be used.
  • the sugar chain remodeling antibody or its Fc region-containing molecule can be produced by the method shown in the following formula, for example, according to the methods described in WO2018/003983 and WO2022/050300.
  • the antibody of interest (1d) is isolated between GlcNAc ⁇ 1 and 4GlcNAc in the chitobiose structure at the reducing end using a hydrolase such as wild-type Endo-S enzyme in a buffer solution (phosphate buffer, etc.) from 0°C to 40°C.
  • the hydrolysis reaction of the glycosidic bonds is carried out.
  • the reaction time is 10 minutes to 72 hours, preferably 1 hour to 16 hours. Wild-type Endo-S enzyme etc. is used in an amount of 0.005 mg to 10 mg, preferably 0.01 mg to 3 mg, per 100 mg of antibody (1d).
  • a purification method that is appropriate for the reaction scale. It is purified by (affinity chromatography, hydroxyapatite column, cation exchange chromatography, multimode chromatography, etc.) to obtain (Fuc ⁇ 1,6)GlcNAc antibody (2d).
  • step D-2 process In this step, the oligosaccharide represented by formula A-22 is reacted with the (Fuc ⁇ 1,6)GlcNAc antibody (2d) obtained in step D-1 by a transglycosylation reaction using two types of Endo enzymes.
  • the target product (3d) is produced by preparing a reaction solution containing the sugar chain remodeling antibody (3d) and purifying it by an appropriate method.
  • enzyme A Endo-S-like enzyme
  • enzyme B Endo-M-like enzyme
  • enzyme-A refers to endo- ⁇ -N-acetylglucosaminidase that uses N297-linked sugar chains of Fc-containing molecules (eg, antibodies) as substrates.
  • Enzyme A includes Endo-S, Endo-S2 (EndoS-49), Endo-Si, Endo-Sd, Endo-Se, or Endo-Sz, and Endo-S variants thereof with reduced hydrolytic activity. , Endo-S2 (Endo-S49) variant, Endo-Si variant, Endo-Sd variant, Endo-Se variant, Endo-Sz variant, etc.
  • Preferred enzymes A are Endo-S D233Q, Endo-S D233Q/Q303L, Endo-S D233Q/E350A, Endo-S D233Q/E350Q, Endo-S D233Q/E350D, Endo-S D233Q/E350N, Endo-S D233Q/D405A, Endo-S2 D184M, Endo-S2 T138Q, Endo-S2 D184Q, Endo-S2 D184Q/Q250L, Endo-S2 D184Q/E289Q, Endo-S2 D184M/Q250L, Endo-S2 D184M/E289Q, Endo-S2 D182Q, Endo-S2 D226Q, Endo-S2 T227Q, Endo-S2 T228Q, Endo-Si D241Q/Q311L, Endo-Si D241Q/E360Q, Endo-Si D241M, Endo-Si D24
  • enzyme-B refers to endo- ⁇ -N-acetylglucosaminidase that uses the sugar chain of the sugar chain donor molecule as a substrate, in particular, the enzyme that uses the sugar chain of the sugar chain donor molecule as a substrate but does not contain N297-linked sugar chains. It refers to endo- ⁇ -N-acetylglucosaminidase that does not serve as a substrate (in other words, has low reactivity to N297-linked sugar chains, preferably extremely low reactivity).
  • Enzyme B includes Endo-M, Endo-Om, Endo-CC, or Endo-Rp and Endo-M mutants, Endo-Om mutants, Endo-CC mutants, or Endo-Rp with reduced hydrolysis activity. Examples include -Rp mutants.
  • Preferred enzymes B are Endo-M N175Q, Endo-M N175Q/Y217F, Endo-CC N180H, Endo-Om N194Q, Endo-Rp N172Q, Endo-Rp N172H, Endo-Rp N172A, Endo-Rp N172C, Endo -Rp N172D, Endo-Rp N172E, Endo-Rp N172G, Endo-Rp N172I, Endo-Rp N172L, Endo-Rp N172M, Endo-Rp N172P, Endo-Rp N172S , Endo-Rp N172T, Endo-Rp N172V, Endo -Rp W278F/S216V, Endo-Rp W278F/N246D, Endo-Rp W278F/D276N, Endo-Rp W278F/A310D, Endo-Rp W278F/N172D/F307Y, End
  • the antibody (2d) is converted into an oligosaccharide represented by formula A-22 in a buffer solution (Tris buffer, etc.) in the presence of glycosyltransferases enzyme A (Endo-S-like enzyme) and enzyme B (Endo-M-like enzyme).
  • a sugar chain transfer reaction is carried out by reacting with.
  • the reaction temperature can be appropriately selected depending on the optimum temperature of the enzyme used, but is usually 15 to 50°C, preferably 25 to 40°C.
  • the reaction time can be appropriately selected from 2 hours to 48 hours.
  • concentration of the aqueous antibody solution can be performed according to common operations A to C described in WO2020/050406.
  • the method for producing a sugar chain remodeling antibody or its Fc region-containing molecule further provides the method for producing a sugar chain remodeling antibody or its Fc region-containing molecule, in which each of the two azide groups (N 3 -) at the terminal of the compound represented by formula A-22 or It may also include a step of reacting both with a molecule having an alkyne structure.
  • the reaction step may be carried out either before or after the step of reacting the sugar chain donor molecule with the acceptor molecule.
  • the "molecule having an alkyne structure” may be any molecule as long as it has an alkyne structure, and includes, for example, a chemotherapeutic agent, a molecular target drug, an immune activator, a toxin, an antibacterial agent, an antiviral Mention may be made of agents, diagnostic agents, proteins, peptides, amino acids, nucleic acids, antigens, vitamins and hormones.
  • any reaction method or reaction condition can be used as long as the reaction proceeds. For example, any known method ( WO2019/065964, WO2020/050406, etc.).
  • step D-2 the sugar chain remodeling antibody (3d) obtained in step D-2 above and a molecule having an alkyne structure are reacted with SPAAC (strain -promoted azide-alkyne cycloaddition: J. Am. Chem. Soc. 2004, 126, 15046-15047).
  • SPAAC strain -promoted azide-alkyne cycloaddition: J. Am. Chem. Soc. 2004, 126, 15046-15047.
  • an antibody-drug conjugate which includes the method for producing the sugar chain remodeling antibody or its Fc region-containing molecule.
  • the antibodies and drugs included in the "antibody-drug conjugate" are not limited as long as they produce the desired effect, and any antibody and drug can be used depending on the purpose.
  • examples of the method for producing the antibody-drug conjugate include, but are not limited to, a method including the above-mentioned step D-1, step D-2, and SPAAC reaction.
  • antibody-drug conjugate refers to a complex in which a drug is bound to an antibody via a linker.
  • the "antibody drug conjugate” has the following formula (XIII): It is indicated by. m 1 ranges from 1 to 10 and indicates the number of drug bonds per antibody molecule in the antibody-drug conjugate.
  • Ab represents an antibody or a functional fragment of the antibody
  • L represents a linker connecting Ab and D
  • D represents a drug.
  • Antibodies used in the present invention include full bodies and functional fragments of antibodies.
  • "Functional fragment of an antibody” is also called “antigen-binding fragment of an antibody” and means a partial fragment of an antibody that has antigen-binding activity, and includes Fab, F(ab') 2 , Fv, scFv. , diabodies, linear antibodies, and multispecific antibodies formed from antibody fragments.
  • Antigen-binding fragments of antibodies also include Fab', which is a monovalent fragment of the variable region of an antibody obtained by treating F(ab') 2 under reducing conditions.
  • the molecules are not limited to these molecules as long as they have the ability to bind to the antigen.
  • these antigen-binding fragments include not only full-length antibody protein molecules treated with appropriate enzymes, but also proteins produced in appropriate host cells using genetically engineered antibody genes. It will be done.
  • antibodies may be derived from any species, but are preferably human, rat, mouse, and rabbit. When derived from a species other than human, it is preferable to chimerize or humanize using well-known techniques. Further, in the present invention, the antibody may be a polyclonal antibody or a monoclonal antibody, but a monoclonal antibody is preferable. Monoclonal antibodies include monoclonal antibodies derived from non-human animals such as rat antibodies, mouse antibodies, rabbit antibodies, chimeric antibodies, humanized antibodies, human antibodies, functional fragments thereof, or modified bodies thereof.
  • the antibodies used in the present invention are not limited as long as they have the desired effect, but include, for example, anti-HER2 antibodies, anti-HER3 antibodies, anti-DLL3 antibodies, anti-FAP antibodies, anti-CDH11 antibodies, anti-CDH6 antibodies, and anti-A33 antibodies.
  • anti-CanAg antibody anti-CD19 antibody, anti-CD20 antibody, anti-CD22 antibody, anti-CD30 antibody, anti-CD33 antibody, anti-CD56 antibody, anti-CD70 antibody, anti-CD98 antibody, anti-TROP2 antibody, anti-CEA antibody, anti-Cripto antibody, anti- EphA2 antibody, anti-G250 antibody, anti-MUC1 antibody, anti-GPNMB antibody, anti-Integrin antibody, anti-PSMA antibody, anti-Tenascin-C antibody, anti-SLC44A4 antibody, anti-Mesothelin antibody, anti-ENPP3 antibody, anti-CD47 antibody, anti-EGFR antibody, anti- Examples include GPR20 antibody or anti-DR5 antibody.
  • the antibodies used in the production of the antibody-drug conjugates of the present invention are obtained by immunizing animals with polypeptides that serve as antigens using methods commonly practiced in this field, and collecting and purifying the antibodies produced in vivo. You can get it by doing
  • the origin of the antigen is not limited to humans, and animals can also be immunized with antigens derived from non-human animals such as mice and rats.
  • antibodies applicable to human diseases can be selected by testing the cross-reactivity between antibodies that bind to the obtained foreign antigen and human antigens.
  • hybridomas can be established by fusing antibody-producing cells that produce antibodies against antigens with myeloma cells, and monoclonal antibodies can also be obtained.
  • the antigen can be obtained by causing a host cell to produce a gene encoding an antigen protein through genetic manipulation.
  • the humanized antibodies used to produce the antibody-drug conjugates of the present invention can be prepared by known methods (for example, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 81, 6851-6855, (1984), Nature ( 1986) 321, p. 522-525, WO90/07861).
  • anti-HER2 antibodies US5821337, WO2004/008099, WO2020/050406, etc.
  • anti-CD33 antibodies WO2014/057687, WO2020/050406, etc.
  • anti-EphA2 antibodies WO2009/028639, WO2020/050406, etc.
  • Anti-CDH6 antibody WO2018/212136, WO2020/050406, etc.
  • anti-CD70 antibodies WO2004/073656, WO2007/038637, etc.
  • anti-TROP2 antibodies WO2015/098099, etc.
  • anti-EGFR antibodies WO1998/050433, WO2002/0927 71 etc.
  • the drugs used in the present invention include, but are not limited to, pharmaceutically active compounds, such as chemotherapeutic agents, molecular target drugs, immune activators, toxins, antibacterial agents, and antivirals, as long as they have the desired effect. agents, diagnostic agents, proteins, peptides, amino acids, nucleic acids, antigens, vitamins, hormones, etc.
  • Drug D has the following formula, for example: (wherein the asterisk indicates that it is bonded to linker L).
  • the linker L that connects the antibody Ab and the drug D has the following formula: -Lb-La-Lp-Lc-* (Here, an asterisk indicates binding to drug D).
  • Lp exhibits or does not have a linker consisting of an amino acid sequence that is cleavable in the target cell, and specific examples include -GGFG-, -GGPI-, -GGVA-, -GGFM-, -GGVCit-, -GGFCit-, -GGICit-, -GGPL-, -GGAQ- or -GGPP-.
  • Lb represents a spacer that connects La and Ab sugar chains or remodeled sugar chains, and specific examples thereof include, for example, or (In the structural formula of Lb shown above, the asterisk indicates that it is bonded to La, and the wavy line indicates that it is bonded to the sugar chain of Ab or a remodeled sugar chain.) .
  • B is a 1,4-phenyl group, 2,5-pyridyl group, 3,6-pyridyl group, 2,5-pyrimidyl group or 2,5-thienyl group.
  • room temperature is 15°C to 35°C.
  • Silica gel chromatography uses Biotage Sfar HC D (20 ⁇ m, manufactured by Biotage), and reverse phase column chromatography uses Universal Column ODS Premium 30 ⁇ m L size (manufactured by Yamazen Co., Ltd.) and Inject colu. mn ODS L size (manufactured by Yamazen Co., Ltd.), preparative HPLC was carried out using Agilent Preparative HPLC System (manufactured by Agilent Technology). The preparative column used was XBridge Prep OBD (5 ⁇ m, C18, 130 ⁇ , 250 ⁇ 30 mm, manufactured by Waters).
  • Ethyl acetate (2.4 L) and water (600 mL) were added to the acetonitrile layer to separate the layers to obtain an organic layer A and an aqueous layer.
  • a mixed solution of ethyl acetate (1.5 L) and tetrahydrofuran (1.5 L) was added to the aqueous layer again to separate the layers to obtain an organic layer B and an aqueous layer.
  • Organic layers A and B were mixed, washed with saturated brine (600 mL), and then concentrated under reduced pressure until the liquid volume reached 1.5 L (precipitation of crystals was confirmed during the concentration stage).
  • ethyl acetate (4.5 L) was added, and the mixture was concentrated again until the liquid volume reached 3 L.
  • the reaction solution was cooled to 10° C., and 1-methylpiperazine (60.97 g, 608.73 mmol) was added. After stirring at 35°C for 18 hours, completion of the reaction was confirmed by HPLC, and the mixture was cooled to 0°C. After adjusting the pH to 6.36 with 6N hydrochloric acid (480 mL), it was diluted with heptane (375 mL) and the organic layer and aqueous layer were separated. The organic layer was washed with a saturated aqueous sodium hydrogen carbonate solution (450 mL) and water (450 mL), and then concentrated under reduced pressure until the liquid volume reached 450 mL.
  • 1-methylpiperazine 60.97 g, 608.73 mmol
  • Silica gel 60N (manufactured by Kanto Kagaku, particle size: 40-50 ⁇ m, 150 g) was added to this solution, stirred for 1.5 hours, and then filtered. The silica gel was washed with dichloromethane (1.5 L), and the filtrate was concentrated under reduced pressure to a volume of 450 mL. Furthermore, dichloromethane (1.5 L) was added and concentrated until the liquid volume became 450 mL. -(2,2,2-trichloroethanimidoyl)-D-glycero-hexopyranose (compound represented by formula C-6) was obtained as a dichloromethane solution. This product was used as it was in the next step.
  • Trimethylsilyl trifluoromethanesulfonate (10.41 g, 46.83 mmol) was added dropwise to this suspension over 20 minutes, followed by stirring for 3 hours. After confirming the completion of the reaction by HPLC, triethylamine (23.69 g, 234.13 mmol) was added. After filtering the suspension, it was washed with ethyl acetate (2.8 L), and the filtrate was concentrated under reduced pressure until the liquid volume became 1.4 L. Furthermore, ethyl acetate (4.2 L) was added and concentrated until the liquid volume became 1.4 L, and the same operation was repeated once more.
  • Methyl isobutyl ketone (2.1 L) was added to the obtained crude compound represented by formula C-8 (350.00 g) and dissolved at 50°C, and then ethylcyclohexane (1.4 L) was added over 1 hour. dripped.
  • the reaction solution was cooled to 25° C., and acetic acid (1.76 g, 29.29 mmol) and ethyl acetate (300 mL) were added in this order. This solution was washed twice with a 1% aqueous sodium chloride solution (300 mL), and then concentrated under reduced pressure until the liquid volume became 90 mL. Add ethyl acetate (450 mL) and concentrate again until the liquid volume reaches 90 mL. Add acetonitrile (450 mL) and concentrate until the liquid volume reaches 90 mL.
  • 1-methylimidazole (12.03 g, 146.47 mmol) was added and concentrated until the liquid volume was 90 mL, and 4-methoxyphenyl 3,6-di-O-benzyl-4-O- ⁇ 4,6- O-Benzylidene-3-O-[(naphthalen-2-yl)methyl]- ⁇ -D-glucopyranosyl ⁇ -2-deoxy-2-(1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindole- 2-yl)- ⁇ -D-glucopyranoside (compound represented by formula C-10) was obtained as a toluene solution containing 1-methylimidazole. This product was used as it was in the next step.
  • Example 8 4-methoxyphenyl 3,6-di-O-benzyl-4-O- ⁇ 4,6-O-benzylidene-3-O-[(naphthalen-2-yl)methyl]-2-O-(trifluoromethanesulfonyl )- ⁇ -D-glucopyranosyl ⁇ -2-deoxy-2-(1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)- ⁇ -D-glucopyranoside (represented by formula C-11) compound (wherein X1 is a Tf group)
  • Trifluoromethanesulfonic anhydride (16.53 g, 58.59 mmol) was added dropwise to this solution over 1 hour, followed by stirring for 30 minutes. After confirming the completion of the reaction by HPLC, water (300 mL) was added and the mixture was separated into an organic layer and an aqueous layer. The organic layer was washed twice with water (300 mL) and once with a saturated aqueous sodium chloride solution (150 mL), and then concentrated under reduced pressure until the liquid volume became 90 mL.
  • Tetrahydrofuran (300 mL) was added to the separated organic layer, and the mixture was concentrated under reduced pressure until the liquid volume became 150 mL. Tetrahydrofuran (300 mL) was added, and the mixture was concentrated again until the liquid volume became 90 mL, and the internal temperature was adjusted to 45°C.
  • reaction solution was cooled to 0° C., ethyl acetate (90 mL) and water (60 mL) were added, and 6N hydrochloric acid was added under strong stirring until the pH reached 7. After separating the organic layer and the aqueous layer, the organic layer was washed with water (60 mL) and saturated brine (30 mL). This solution was concentrated under reduced pressure until the liquid volume reached 12 mL.
  • Acetic acid (0.72 g, 11.95 mmol) was added to this solution and filtered. After washing Molecular Sieve 4A with ethyl acetate (90 mL), water (60 mL) was added and the mixture was separated. After washing the organic layer twice with water (60 mL), it was concentrated under reduced pressure until the liquid volume reached 12 mL. Add toluene (30 mL), concentrate again until the liquid volume reaches 12 mL, add toluene (18 mL) and silica gel 60N (spherical, manufactured by Kanto Kagaku, particle size: 40-50 ⁇ m) (9 g), and stir at 25 °C for 30 minutes. did.
  • Example 12 4-methoxyphenyl 3,6-di-O-benzyl-2-deoxy-4-O- ⁇ 2,4-di-O-benzyl-3-O-[(naphthalen-2-yl)methyl]- ⁇ - D-mannopyranosyl ⁇ -2-(1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)- ⁇ -D-glucopyranoside (compound represented by formula A-4)
  • borane-tetrahydrofuran complex (0.91 mol/L tetrahydrofuran solution) (18.06 mL, 16.43 mmol) and copper(II) trifluoroacetate (0.59 g, 1.64 mmol) were added for 3 hours. Stirred. After confirming the completion of the reaction by HPLC, methanol (5.5 mL) was added, and the mixture was further stirred for 30 minutes. This solution was filtered, and after washing the molecular sieve 4A with ethyl acetate (110 mL), 0.5N hydrochloric acid (55 mL) was added and stirred for 30 minutes.
  • the obtained organic layer was concentrated under reduced pressure to 490 mL (precipitation of crystals was confirmed during concentration), and heptane (735 mL) was added dropwise.
  • the obtained slurry liquid was cooled to 0° C.-5° C., stirred at the same temperature for 1 hour, and precipitated crystals were filtered.
  • the filtered crystals were washed with a mixture of ethyl acetate and heptane (39/118 mL) at 0°C to 5°C and dried under reduced pressure at 40°C to give 4-O-acetyl-3,6-di-O-benzyl.
  • N-methylimidazole (3.40 g, 41.39 mmol) and 2,2,2-trifluoro-N-phenylacetimidoyl chloride (8.20 g, 39.51 mmol) were sequentially added at 0° C. under nitrogen, The mixture was stirred at the same temperature for 18 hours. After confirming the completion of the reaction by HPLC, the reaction solution was filtered and washed with dichloromethane (100 mL). The filtrate was filtered through a neutral silica gel pad (silica gel 60N, manufactured by Kanto Kagaku, particle size: 40-50 ⁇ m, 60 g) filled with dichloromethane, and 100 mL portions were collected.
  • a neutral silica gel pad sica gel 60N, manufactured by Kanto Kagaku, particle size: 40-50 ⁇ m, 60 g
  • the silica gel pad was washed with dichloromethane (400 mL, 100 mL fractions) and ethyl acetate/dichloromethane (1:4, 400 mL, 100 mL fractions), and the selected fractions were concentrated until the liquid volume reached 40 mL. Add toluene (200 mL) and concentrate again until the liquid volume reaches 40 mL. Add toluene (200 mL) and concentrate until the liquid volume reaches 40 mL.
  • nBuOH 200 mL was added dropwise to this concentrated solution over 30 minutes, and the mixture was stirred at room temperature for 1 hour. Thereafter, the reaction solution was concentrated under reduced pressure to a liquid volume of 80 mL, and stirred at room temperature overnight. The suspension was filtered, the crystals were washed with nBuOH (40 mL) at 0°C, and dried under reduced pressure at 40°C to obtain allyl ⁇ -D-galactopyranoside (compound represented by G-0) ( 8.41 g, yield 34.4%) was obtained as white crystals.
  • the temperature of the obtained concentrate was adjusted to 15°C, water (20 mL) and ethyl acetate (722 mL) were added, and after stirring at 25°C for 1 hour, the slurry liquid was cooled to 0°C-5°C, and The mixture was stirred at room temperature for 2 hours.
  • reaction solution was cooled to 15° C.
  • acetic anhydride (12.05 g, 118.03 mmol) was added, and the mixture was stirred at the same temperature for 47 hours.
  • methanol 40 mL was added, the temperature was adjusted to 25°C, and the mixture was stirred at the same temperature for 2 hours.
  • sodium acetate (0.97 g, 11.82 mmol) was added, and the mixture was further stirred at the same temperature for 1 hour.
  • the reaction solution was concentrated under reduced pressure to 120 mL, and after cooling to 0°C-5°C, ethyl acetate (403 mL) and water (161 mL) were added, and while stirring at 0°C-5°C, triethylamine was added to adjust the pH to 7. Adjusted to 0.
  • the organic layer obtained by liquid separation was washed twice with 10% brine (121 mL) and concentrated under reduced pressure to 200 mL. Ethyl acetate (605 mL) was added to the concentrated solution, and the mixture was again concentrated under reduced pressure to 200 mL.
  • N-methylimidazole 11.03 g, 134.33 mmol
  • the reaction solution was filtered and washed with dichloromethane (88 mL) to obtain a filtrate.
  • the resulting filtrate was cooled to 0°C, cold water (440 mL) was added, and while stirring at 0°C to 5°C, triethylamine was added to adjust the pH to 7.5. After stirring at 0° C.-5° C.
  • the obtained filtrate was concentrated under reduced pressure (until the weight became 59 g), and cyclopentyl methyl ether (23 mL) was added.
  • the temperature of the solution was adjusted to 20°C, heptane (156 mL) was added dropwise over 15 minutes, and the mixture was stirred at the same temperature for 1 hour.
  • heptane 312 mL was added dropwise over 1 hour, the precipitated crystals were filtered, the filtered crystals were washed with heptane (78 mL), and dried under reduced pressure at 35°C.
  • cyclopentyl methyl ether was added to the obtained mixed solution to adjust the total volume to 350 mL (cyclopentyl methyl ether mixed solution of the compound represented by formula G-3 and the compound represented by formula G-8).
  • Cyclopentyl methyl ether (525 mL) and Molecular Sieves 4A powder (powder particle size 10 ⁇ m or less) (17.5 g) were added to a separate container, and after cooling to -60°C, trimethylsilyl trifluoromethanesulfonate (4.2 mL, 23.24 mmol) was added. added.
  • Example 27-1 4-O-acetyl-2,3-di-O-benzoyl-6-O-[4,7,8,9-tetra-O-acetyl-3,5-dideoxy-5-(diacetylamino)-1- Methyl-D-glycero- ⁇ -D-galacto-non-2-uropyranosyl]-D-galactopyranose (compound represented by formula G-12)
  • Toluene (383 mL), chloroform (197 mL), and neutral silica gel (Silica Gel 60N, manufactured by Kanto Kagaku, particle size: 40-50 ⁇ m, 145 g) were added to the concentrated solution and stirred for 30 minutes to allow the product to be adsorbed on the silica gel. After that, it was filtered. After washing the silica gel solid phase containing the product with a mixture of toluene and chloroform (2/1, 4350 mL) (discard the filtrate from washing), desorb the target substance from the silica gel solid phase containing the product with ethyl acetate (870 mL). I let it happen.
  • SH silica gel (29.00 g) was added to the obtained ethyl acetate solution, and after stirring for 30 minutes, it was filtered and washed with ethyl acetate (145 mL) to obtain an ethyl acetate solution containing the target product.
  • the obtained solution was concentrated under reduced pressure to 58 mL, toluene (145 mL) was added, and the solution was concentrated under reduced pressure again to 58 mL.
  • the concentrated solution was purified with a silica gel column (silica gel 60N, manufactured by Kanto Kagaku, particle size: 40-50 ⁇ m, 290 g, mobile phase hexane/ethyl acetate 50/50 to 30/70), and the selected fractions were concentrated under reduced pressure to 29 mL.
  • Ethyl acetate (290 mL) and activated carbon (Shirasagi A, 14.5 g) were added to the concentrated solution, and after stirring for 30 minutes, it was filtered and washed with ethyl acetate (87 mL) to obtain a purified ethyl acetate solution containing the target product.
  • Ta silica gel column
  • Example 27-2 4-O-acetyl-2,3-di-O-benzoyl-6-O-[4,7,8,9-tetra-O-acetyl-3,5-dideoxy-5-(diacetylamino)-1- Methyl-D-glycero- ⁇ -D-galacto-non-2-uropyranosyl]-D-galactopyranose (compound represented by formula G-12) Instead of Example 27-1, a compound represented by the above formula G-12 was synthesized as in this example.
  • the obtained organic layer was washed with 5% brine (25 mL), purified Shirasagi (2.0 g) was added to the organic layer, stirred for 1 hour, filtered, and washed with ethyl acetate (50 mL).
  • the obtained filtrate was concentrated under reduced pressure to 6.5 mL, ethyl acetate (25 mL) was added, and the mixture was again concentrated under reduced pressure to 6.5 mL for the purpose of dehydration.
  • 2-propanol 100 mL was added, seed crystals were inoculated, and the mixture was stirred for 16 hours. After confirming the precipitation of crystals, the resulting slurry was concentrated under reduced pressure to 30 mL.
  • Example 28 4-O-acetyl-2,3-di-O-benzoyl-6-O-[4,7,8,9-tetra-O-acetyl-3,5-dideoxy-5-(diacetylamino)-1- Methyl-D-glycero- ⁇ -D-galacto-non-2-uropyranosyl]-1-O-(2,2,2-trifluoro-N-phenylethanimidoyl)-D-galactopyranose (formula A-16 )
  • the filtrate was filtered through a neutral silica gel pad (silica gel 60N, Kanto Chemical Co., Ltd., particle size: 40-50 ⁇ m, 60 g) filled with dichloromethane, and 100 mL portions were collected.
  • the silica gel pad was washed with ethyl acetate/dichloromethane (1:9, 1000 mL, 200 mL each), and the selected fractions were concentrated under reduced pressure.
  • 5% aqueous sodium bicarbonate 400 mL was added to the reaction mixture to separate the mixture. 20% brine (200 mL) was added to the organic layer to separate the layers. The organic layer was concentrated under reduced pressure to 80 mL, toluene (400 mL) was added, and the mixture was concentrated under reduced pressure to a liquid volume of 80 mL. Toluene (400 mL) was added again, and the mixture was concentrated under reduced pressure to a liquid volume of 80 mL.
  • Example 30 A toluene solution (78.9 mmol) of 2-O-acetyl-3,4,6-tri-O-benzyl-D-mannopyranose (compound represented by formula A-2) was added to a 1 L flask, and trichloroacetonitrile ( 12 mL, 118 mmol) and DBU (119 ⁇ L, 0.789 mmol) were added. Stirred at 0° C. for 2 hours under nitrogen.
  • 2,3-dichloro-5,6-dicyano-p-benzoquinone (4.63 g, 20.4 mmol) was added at ⁇ 20° C. under nitrogen, and the mixture was stirred at the same temperature for 6 hours. After confirming the completion of the reaction by HPLC, an aqueous solution of sodium sulfite (1.17 g, 9.25 mmol) dissolved in water (10 mL) was added, and the mixture was stirred overnight.
  • Dichloromethane 300 mL was added, and after separation and washing with an aqueous solution of sodium sulfite (4 g) and sodium hydrogen carbonate (4 g) dissolved in water (200 mL), the organic layer was concentrated under reduced pressure to 60 mL, and ethyl acetate (300 mL) was added. added. After washing the organic layer with 5% sodium bicarbonate solution (200 mL) and 20% brine (100 mL), it was concentrated under reduced pressure to 40 mL, toluene (400 mL) was added, and the mixture was concentrated under reduced pressure to 40 mL.
  • silica gel 60N manufactured by Kanto Kagaku, particle size: 40-50 ⁇ m, 60 g
  • heptane 40 mL was added dropwise over 30 minutes to adsorb the target product onto the silica gel, which was then filtered. After washing the silica gel with toluene/heptane (7/2, 400 mL) (the filtrate was discarded), the target product was desorbed with ethyl acetate/toluene (1/1, 700 mL).
  • a compound represented by formula A-5 was synthesized from a compound represented by formula A-4 by changing the reaction conditions.
  • the table below shows each reaction condition and the yield of the compound represented by formula A-5 (measured by HPLC).
  • ⁇ Entry 1 The reaction proceeded with a moderate yield under the conditions of the conventional method.
  • ⁇ Entry 2 The reaction proceeded with a high yield by using HFIP.
  • - Entries 3 and 4 Deprotection by acid and hydrogenolysis resulted in low yields.
  • Trimethylsilyl trifluoromethanesulfonate (0.683 mL, 3.78 mmol) was added dropwise at ⁇ 20° C. under nitrogen over 1 hour, and the mixture was stirred at the same temperature for 1 hour.
  • triethylamine (1.06 mL, 7.56 mmol) was added and stirred at room temperature for 30 minutes.
  • the reaction solution was filtered through Celite and washed with acetonitrile (178 mL). The filtrate was concentrated under reduced pressure to obtain a concentrated residue (the concentrated residue was divided into two parts: 12.8 g of raw material and 5.0 g).
  • the obtained organic layer was concentrated under reduced pressure to 55 mL, then toluene (693 mL) was added and concentrated under reduced pressure again to 55 mL.
  • Toluene (97 mL) and dichloromethane (42 mL) were added, and silica gel 60N (manufactured by Kanto Kagaku, particle size: 40-50 ⁇ m, 83 g) was added.
  • Heptane (166 mL) was added dropwise over 30 minutes to adsorb the target product onto silica gel, which was then filtered.
  • N-methylimidazole 125 ⁇ L, 1.57 mmol
  • 2,2,2-trifluoro-N-phenylacetimidoyl chloride 250 ⁇ L, 1.57 mmol
  • the reaction solution was filtered through a neutral silica gel pad (silica gel 60N, manufactured by Kanto Kagaku, particle size: 40-50 ⁇ m, 84 g) filled with dichloromethane.
  • Trimethylsilyl trifluoromethanesulfonate (392 ⁇ L, 2.16 mmol) was added dropwise over 5 minutes at ⁇ 7° C. under nitrogen, and the mixture was stirred at the same temperature for 1 hour. After confirming the completion of the reaction by HPLC, triethylamine (802 ⁇ L, 5.76 mmol) was added and stirred at room temperature for 30 minutes. The reaction solution was filtered through Celite and washed with acetonitrile (283 mL).
  • the filtrate was concentrated under reduced pressure to 56 mL, and acetonitrile (283 mL) and silica gel 120RP-18 for reverse phase (manufactured by Kanto Kagaku, particle size: 40-50 ⁇ m, 85 g) were added.
  • Water (254 mL) was added dropwise over 30 minutes to adsorb the target product onto the solid phase, which was then filtered. It was washed with acetonitrile/water (4/3, 283 mL) and acetonitrile/water (3/1, 848 mL) in this order (the filtrate was discarded), and the target product was desorbed with acetonitrile (1.13 L).
  • Triisopropylsilyl trifluoromethanesulfonate (973 ⁇ L, 3.63 mmol) was added dropwise over 5 minutes at ⁇ 62° C. under nitrogen, and the mixture was stirred at the same temperature for 8 hours. Since completion of the reaction could not be confirmed by HPLC, triisopropylsilyl trifluoromethanesulfonate (486 ⁇ L, 1.81 mmol) was added dropwise over 5 minutes, and the mixture was stirred at the same temperature for 3 hours.
  • the filtrate was concentrated under reduced pressure to 55 mL, and acetonitrile (277 mL) and silica gel 120RP-18 for reverse phase (manufactured by Kanto Kagaku, particle size: 40-50 ⁇ m, 83.1 g) were added.
  • Water (249 mL) was added dropwise over 30 minutes to adsorb the target substance on the solid phase, and then filtered. After washing the solid phase with acetonitrile/water (4/3, 277 mL) and acetonitrile/water (3/1, 831 mL) in this order (discard the washing solution), desorb the target substance from the solid phase with acetonitrile (1.1 L). I let it happen.
  • Heptane (94 mL) was added dropwise over 30 minutes to adsorb the target product on the solid phase, and then filtered. After washing the solid phase with toluene/heptane (7/3, 626 mL) (the washing liquid was discarded), the target product was desorbed from the solid phase with ethyl acetate/toluene (1/2, 1.1 L).
  • the filtrate was concentrated under reduced pressure to 70 mL, acetonitrile (348 mL) was added, and the mixture was concentrated again under reduced pressure to 70 mL.
  • Acetonitrile (348 mL) and silica gel 120RP-18 for reverse phase were added.
  • Water (313 mL) was added dropwise over 30 minutes to adsorb the target product onto the solid phase, and then filtered.
  • 2,2,2-Trichloroethyl chloroformate (44 ⁇ L, 0.325 mmol) was added dropwise over 10 minutes, followed by stirring for 3 hours. After confirming the completion of the reaction by HPLC, ethyl acetate (2 mL) was added, and the mixture was washed twice with water (2 mL). The organic layer was washed with 20% brine (1 mL), dried over sodium sulfate, filtered, and concentrated.
  • a 3M aqueous lithium hydroxide solution (7.9 mL) was added at room temperature under argon, and the mixture was stirred at the same temperature for 1 hour. After confirming the completion of the reaction by HPLC, 25% saline (31 mL) was added and the mixture was separated. At this time, white insoluble matter remained in the organic layer. Furthermore, 25% saline (31 mL) was added to the organic layer to separate the layers.
  • Acetic anhydride (1.1 mL) was added under argon at an external temperature of 4°C, and the mixture was stirred at the same temperature for 30 minutes. After confirming the completion of the reaction by HPLC, the reaction solution was concentrated under reduced pressure. Tetrahydrofuran (62 mL), 25% brine (31 mL) and water (16 mL) were added to the concentrated residue to separate the layers. At this time, white insoluble matter remained in the organic layer. Further, 25% brine (31 mL) and water (16 mL) were added to the organic layer to separate the layers.
  • Example 46 The compound represented by formula A-21 was purified according to Synthesis Scheme 5 below.
  • the compound shown in the lower left below has the formula E-1: This is an example of a compound in which "R 7 " in the compound represented by (in the formula, R 7 is a hydrogen atom, a methyl group, or a methoxy group) is methyl. [Synthesis scheme 5]
  • 11-azido-3,6,9-trioxaundecane-1-amine (compound represented by formula A-21) (10.0 g, 45.82 mmol, 94.3% HPLC purity) in acetonitrile (24 mL) and water
  • the obtained slurry liquid was concentrated under reduced pressure to 200 mL, the slurry liquid was stirred at 25°C for 30 minutes, and the precipitated crystals were filtered.
  • the filtered crystals were washed with acetonitrile (30 mL) and dried under reduced pressure at 40°C to obtain 11-azido-3,6,9-trioxaundecane-1-amine (-)-di-p-toluoyl-L-.
  • Tartrate (compound represented by formula E-2-PTTA) (24.40 g, yield 88.0%, HPLC purity 99.2%) was obtained as white crystals (melting point 152° C.).
  • the slurry liquid was stirred at 25° C. for 30 minutes, and the precipitated crystals were filtered.
  • the filtered crystals were washed with acetonitrile (15 mL) and dried under reduced pressure at 40°C to obtain 11-azido-3,6,9-trioxaundecane-1-amine (-)-dibenzoyl-L-tartrate (formula A compound represented by E-2-BZTA (10.6 g, yield 80%) was obtained as white crystals (melting point 131°C).
  • Example 47 11-azido-3,6,9-trioxaundecane-1-amine (-)-di-p-toluoyl-L-tartrate obtained in Example 47 (compound represented by formula E-2-PTTA)
  • Concentrated hydrochloric acid (2.41 g, 23.82 mmol) was added to a solution of (12.0 g, 19.85 mmol) in ethyl acetate (120 mL) and water (18 mL), and the mixture was stirred at 25°C and then separated.
  • the resulting aqueous layer was washed twice with ethyl acetate (120 mL), and after adjusting the pH to 11 with a 10N aqueous sodium hydroxide solution (2.15 mL, 21.50 mmol), sodium chloride (0.6 g) was added and dissolved. .
  • Dichloromethane (120 mL) was added, stirred, and then separated to obtain an organic layer. Furthermore, dichloromethane (120 mL) was added to the aqueous layer, and after stirring, the layers were separated, and the resulting organic layers were combined. The combined organic layers were concentrated under reduced pressure to 12 mL, acetonitrile (120 mL) was added, and the mixture was concentrated under reduced pressure to 12 mL.
  • the fraction containing the target product is concentrated under reduced pressure and then lyophilized to produce 4-methoxyphenyl N-(2- ⁇ 2-[2-(2-azidoethoxy)ethoxy]ethoxy ⁇ ethyl)-5-acetyl-neuramamide.
  • 5% aqueous sodium bicarbonate 600 mL was added to the reaction solution to separate the mixture. 20% brine (300 mL) was added to the organic layer to separate the layers. The organic layer was concentrated under reduced pressure to 120 mL, toluene (600 mL) was added, and the mixture was concentrated under reduced pressure to a liquid volume of 120 mL. Toluene (600 mL) was added again, and the mixture was concentrated under reduced pressure to a liquid volume of 120 mL.
  • a toluene solution (118.44 mmol) of 2-O-acetyl-3,4,6-tri-O-benzyl-D-mannopyranose (compound represented by formula A-2) was added to a 1 L flask, and trichloroacetonitrile ( 25.6 g, 178 mmol) and DBU (180 ⁇ L, 1.18 mmol) were added. Stirred at 0° C. for 6 hours under argon.
  • 2,3-dichloro-5,6-dicyano-p-benzoquinone (6.95 g, 31.6 mmol) was added at ⁇ 20° C. under argon, and the mixture was stirred at the same temperature for 19 hours.
  • an aqueous solution of sodium sulfite (1.75 g) dissolved in water (15 mL) was added, and the mixture was stirred at 0° C. for 3 hours.
  • Toluene 120 mL was added, followed by silica gel 60N (90 g). While stirring, heptane (60 mL) was added dropwise over 1 hour to adsorb the target product onto silica gel, which was then filtered. After washing the silica gel with toluene/heptane (7/2, 600 mL) (the filtrate was discarded), the target product was desorbed with ethyl acetate/toluene (1/1, 1350 mL).
  • silica gel 120RP-18 for reverse phase (manufactured by Kanto Kagaku, particle size 40-50 ⁇ m, 180 g) was added. While stirring, water (240 mL) was added dropwise over 1 hour to adsorb the target product onto the solid phase, which was then filtered. After washing the solid phase with acetonitrile/water (20/8, 1.68 L) (the filtrate was discarded), the target product was desorbed with ethyl acetate/acetonitrile (1/1, 1.2 L).
  • dichloromethane (240 mL) and molecular sieve 4A powder (10 ⁇ m or less, 21 g) were added, and the mixture was cooled to 0°C.
  • DBU (5.1 g, 33.4 mmol)
  • 2,2,2-trifluoro-N-phenylacetimidoyl chloride (6.4 g, 30.6 mmol) were added at the same temperature under argon and stirred for 3 hours. .
  • the mixture was filtered and washed with cooled dichloromethane (120 mL).
  • the filtrate was filtered through a neutral silica gel pad (silica gel 60N, manufactured by Kanto Kagaku, particle size: 40-50 ⁇ m, 120 g) filled with dichloromethane (the filtrate was separated).
  • the silica gel pad was washed with 10% ethyl acetate/dichloromethane (840 mL and 180 mL each), and the main distillate was concentrated under reduced pressure to 90 mL.
  • the silica pad was washed with 5% ethyl acetate/dichloromethane (400 mL) at 0-5° C. (the filtrate was divided into 4 fractions). The selected fractions were mixed, concentrated to dryness to 40 mL, added toluene (100 mL), and concentrated under reduced pressure again to 40 mL to give 4-O-acetyl-3,6-di-O-benzyl-2-deoxy-2.
  • Acetonitrile (255 mL) and silica gel 120RP-18 for reverse phase were added. While stirring, water (90 mL) was added dropwise over 1 hour to adsorb the target product onto the solid phase, which was then filtered. It was washed with acetonitrile/water (20/6, 390 mL) (the filtrate was discarded), and the target product was desorbed with ethyl acetate/acetonitrile (1/2, 675 mL).
  • a dichloromethane solution (15 mL) of t-butyldimethylsilyl trifluoromethanesulfonate (2.55 mL, 11.13 mmol) was added dropwise at ⁇ 62° C. under argon over 2 hours, and the mixture was stirred at the same temperature for 2 hours.
  • a dichloromethane solution (7.5 mL) of t-butyldimethylsilyl trifluoromethanesulfonate (1.27 mL, 5.55 mmol) was added dropwise over 1 hour, and the mixture was stirred at the same temperature for 2 hours.
  • the desorption solution was concentrated under reduced pressure to 60 mL, isopropyl acetate (327 mL) was added, and the mixture was concentrated under reduced pressure to 65 mL.
  • Tetrahydrofuran (131 mL) and fumaric acid (7.21 g, 62.11 mmol) were added, and after confirming complete dissolution, isopropyl acetate (654 mL) was added and stirred at an internal temperature of around 21° C. for 2 hours. Seed crystals were inoculated and stirred overnight at the same temperature.
  • the slurry liquid was cooled to 3° C., and after stirring for 3 hours, heptane (131 mL) was added dropwise over 4 hours, and the mixture was stirred overnight.
  • the obtained organic layer was concentrated under reduced pressure to 54 mL, and acetonitrile (216 mL) and silica gel 120RP-18 for reverse phase (manufactured by Kanto Kagaku, particle size 40-50 ⁇ m, 81 g) were added. While stirring, water (95 mL) was added dropwise over 1 hour to adsorb the target product onto the solid phase, which was then filtered. After washing with acetonitrile/water (10/3.5, 364 mL) (the washing liquid was discarded), the target product was desorbed from the solid phase with acetonitrile/ethyl acetate (2/1, 1215 mL).
  • the desorption solution was concentrated under reduced pressure to 54 mL, toluene (270 mL) was added, and concentrated under reduced pressure to 54 mL to obtain isopropyl 3,6-di-O-benzyl-2-deoxy-2-[(phenoxycarbonyl)amino]- ⁇ .
  • Acetic anhydride (12.8 mL) was added dropwise over 1 hour under argon at an external temperature of 0-5°C, and the mixture was stirred at the same temperature for 1 hour. Thereafter, triethylamine (9.44 mL) and acetic anhydride (4.25 mL) were added, and after confirming the completion of the reaction by HPLC, methanol (122 mL) was added and stirred at 0-5° C. overnight. DMAP (9.2 mg) was added, and after stirring at the same temperature for 1 hour, the reaction solution was concentrated under reduced pressure to 72 mL. Acetonitrile (243 mL) was added to the concentrated residue, and the mixture was concentrated under reduced pressure to 72 mL.
  • Depressurization ⁇ argon replacement was repeated three times, pre-treated product ASCA-2 (manufactured by N.E. Chemcat, 13.5 g) was added, pressure reduction ⁇ argon replacement was repeated three times, and hydrogen pressurization ⁇ depressurization was repeated three times. .
  • the mixture was strongly stirred for 4 hours at an external temperature of 40° C. and a hydrogen pressure of 0.5 MPa. After confirming the completion of the reaction by HPLC, the reaction solution was filtered under reduced pressure in a glove box purged with argon, and the filtrate was washed with degassed methanol (180 mL).
  • Diisopropylethylamine (2.4 mL) was added to the filtrate, and the mixture was concentrated under reduced pressure to 32 mL.
  • the above operation on a 2.8 mmol scale was repeated three times, and the resulting solutions were combined to obtain 96 mL (equivalent to 8.4 mmol) of a solution.
  • Acetonitrile (270 mL) was added to the obtained solution, and the solution was dehydrated and concentrated under reduced pressure to 96 mL.
  • ASCA-2 was pretreated using the following method. After cooling a slurry of ASCA-2 (31.2 g) in DMF (54 mL) to 0-5° C. under argon, purified water (13.5 mL) and concentrated hydrochloric acid (13.5 mL) were added dropwise. After stirring at 20-30°C for 1 hour, the mixture was filtered under argon and washed with purified water (594 mL) to obtain pretreated product ASCA-2 (40.5 g).

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Abstract

【課題】本発明の課題は、非還元末端にα２，６－シアル酸構造を有する２分岐型グリカンである新規なオリゴ糖及び当該オリゴ糖の製造方法、並びにその中間体及びその中間体の製造方法を提供することである。 【解決手段】以下の式Ａ－２２：で示される新規なオリゴ糖、図１に示される当該オリゴ糖の製造方法、並びにその中間体及びその中間体の製造方法を提供する。

Description

新規なオリゴ糖、該オリゴ糖の製造中間体、及びそれらの製造方法
　本発明は、非還元末端にα２，６－シアル酸構造を有する２分岐型グリカンである新規なオリゴ糖及び当該オリゴ糖の製造方法、並びにその中間体及びその中間体の製造方法に関する。
　タンパク質の糖鎖付加（グリコシル化）は、タンパク質の機能及び構造に大きな影響を与えることが知られている。中でもＮ－結合型糖鎖は、タンパク質の生理活性に深く関わっており、その中で、非還元末端にα２，６－シアル酸構造を有する２分岐型Ｎ－グリカンは、抗体依存性細胞傷害活性（ＡＤＣＣ活性）、補体依存性細胞傷害活性（ＣＤＣ活性）を高める上で最適な構造であることが報告されている（非特許文献１）。
　糖鎖を利用した医薬品を開発、商用化する上で、高純度な糖鎖を安定的に大量かつ産業上利用できる価格で製造できることが望まれる。これまでに報告されているα２，６－シアリル糖鎖の合成は、１）天然抽出物の分離精製、あるいは主骨格前駆体の化学合成と酵素化学変換を組み合わせた半化学合成法、２）純化学合成法の２つの方法に大別される。
　例えば、半化学合成法としては、鶏卵の卵黄から、酵素を用いた手法と化学的な手法とを組み合わせることによって、Ｎ－結合型糖鎖を取得できることが報告されている（非特許文献２）。これらの手法は、純化学合成に比べて少ない工程数で目的とする糖鎖を合成できる一方で、大量の卵黄の調達が必要となり、その後の卵黄からの単離精製、化学変換後の水溶性無保護糖鎖の精製にも特殊な技術、精製装置が必要となる場合が多い（特許文献１～４）。
　一方、α２，６－シアリル糖鎖の純化学合成法としては、下記の報告例がある。
（１）α２，６－シアリル部位を有する複合型１１糖グリカンの全合成（非特許文献３）
（２）α２，６－シアリル部位を有するイムノグロルビンＧ１３糖ペプチドの全合成（非特許文献４）
（３）コアフコースを含むα２，６－シアリル１２糖Ｎ－結合型糖鎖の全合成（非特許文献５）
（４）３位がフッ素化されたα２，６－シアリル１０糖オリゴ糖鎖の全合成（非特許文献６）
（５）非対称に重水素化されたα２，６－シアリル２分岐型１１糖オリゴ糖鎖並びに４分岐型１７糖オリゴ糖鎖の全合成（非特許文献7）
　糖鎖の純化学合成は、堅牢な製造法を確立した場合、通常の低分子化合物と同様、単糖からの誘導を行うことで、製造数量の自由度は極めて高いものと考えられる。また、保護基で修飾された糖の変換を行うため、大部分の精製操作は非水溶性化合物の取り扱いとなり、作業の煩雑さ、作業工数は半化学合成法に比べて、有意に軽減されることが期待できる。更に確立した化学合成手法を応用することで多種の非天然型糖鎖を容易に合成することができる。
　一方、上記に記載した過去の報告例では、１）β－マンノシド部、α－シアリル部の構築などの難易度の高い糖パーツの変換、また、それらの連結工程において、低選択性、低収率の工程が存在していること、２）糖パーツ変換、及び、連結工程のいずれにおいても、スケールアップに不向きなシリカゲルカラムクロマト精製を工程毎に多用しており、反応で副生する異性体、不純物の除去を目的として、多くの工程でのクロマト精密分取精製操作が必須であること、の二点が合成上の大きな課題として挙げられる。
　以上のように、糖鎖の純化学合成法は、大量合成を志向する上で、半化学合成法に比べて潜在的なメリットを有しているものの、収率、選択性、効率性、コストの観点で、十分に技術開発が進んでいる状態とは言い難く、実際の大量合成法として採用された例は極めて少ない。
　フタロイル基によって保護された糖誘導体において、脱アシル化が必要となる場合がある。しかながら、系内に微量水分が存在した場合、フタルイミド基は塩基性条件において容易に開環反応が進行するため、系内の水分量を厳密に制御する必要性があり、ｐｐｍオーダーの水分値であっても開環を完全に抑制することは困難である。従って、フタルイミド基の開環を抑制しつつ、脱アシル化を高収率で進行することができる手法が求められている。
　また、水酸基（複数可）を有するオリゴ糖鎖等の化学合成において、効率的に目的とする化合物を得るためには、かかる水酸基の選択的脱保護や脱保護の手法を合理的に利用する必要性があり、特に２－ナフチルメチル基は水酸基の一般的保護基として広く利用されてきた。一方、２－ナフチルメチル基の脱保護法としては、２，３－ジクロロ－５，６－ジシアノ－ｐ－ベンゾキノンをジクロロメタン－水中で利用する方法が知られており、当該手法は、幅広い基質に対して、中程度から高収率で目的とする脱保護体を与えるが、一般的にジクロロメタンと水が混和しないこと及びジクロロメタン－水に対して２，３－ジクロロ－５，６－ジシアノ－ｐ－ベンゾキノン及びその副生成物である２，３－ジクロロ－５，６－ジシアノ－ｐ－ベンゾヒドロキノンがほとんど溶解しないことから撹拌性状に影響を及ぼすため大量合成への適用に課題があった。また、適用する基質によっては必ずしも満足できる収率で目的の脱保護体が得られないケースが報告されている（非特許文献８）。また、基質におけるベンジル基の増加によって反応収率が低下する傾向があり（非特許文献９）、複雑な基質に適用可能なより温和で効率的な手法の開発が望まれていた。かかる目的を達成する手段として、β－ピネンを添加剤として用いる改良条件の報告がされているが（非特許文献１０）、当該手法を用いてもベンジル基を複数有する複雑な基質においては収率は中程度にとどまっている（非特許文献１１）。上記のような背景から、より温和な条件下において、２－ナフチルメチル基の保護基を脱保護し、高収率で脱保護体を取得できる脱２－ナフチルメチル化反応の開発が望まれている。
　さらに、オリゴ糖鎖の化学合成方法としては、液相合成法及び固相合成法が知られている。しかしながら、液相合成法は、通常の有機合成手法を用いることができるため、反応追跡やスケールアップに関しては容易であるものの、一段階ごとに後処理と精製を行うため、時間と労力がかかる欠点があり、また、固相合成法は、自動合成化が可能であり迅速に製造できる点で有利であるが、設備制約上スケールアップに制限があり、また、反応性が低いため糖伸長反応において使用される糖供与体を過剰に使用する必要があり、工業的な大量合成に適さず、また、途中段階での反応の進行状況の確認が困難という欠点がある（特許文献５）。これらの課題を解決すべく、ある環境に対して特異的に沈殿、分配、吸着等を起こす分子構造（タグ）を付加させた基質を用いてオリゴ糖を製造する手法がいくつか開発されている（特許文献６、非特許文献１２～１６）。これらの手法は、液相及び固相合成法の利点を併せ持っており、すなわち反応を均一系で行うことができるため分析が容易であるとともに、タグの特徴を利用することで試薬残骸等との分離が可能となっている。例えば、分岐長鎖アルカンを疎水性タグとして用い反応後の溶液にオクタデシル修飾シリカゲルで吸着を行うことにより、タグのついていない化合物を分離する手法が知られている（非特許文献１６）。しかしながら、いずれの手法においてもタグの使用が必須であり、その脱着工程が必要なこと及び、オリゴ化を行うにつれ基質部位の方がタグよりも大きくなっていくため、徐々に基質の物性が優位になりタグの機能が弱くなる欠点があった。従って、オリゴ糖鎖の製造方法において、より効率的にオリゴ糖を精製することができる手法が求められている。
　グリコシル化反応において、－ＮＨＡｃ基が反応基質内に存在した場合、ルイス酸との相互作用により、目的のグリコシル化反応の著しい反応性の低下がみられ、過剰量の糖供与体が反応の完結に必要となる場合が多い。このことから、アセチルグルコサミンを含むオリゴ糖鎖の合成の場合、グリコシル化反応時はグルコサミンの窒素上の一時的な保護基としてＴｒｏｃ基（非特許文献５、６及び７）、フタロイル基（非特許文献１５）、又はスルホニル基（非特許文献４）を用い、その後、脱保護を行った後、Ｎ－Ａｃ化を行う方法が採用されてきた。しかしながら、Ｔｒｏｃ基では亜鉛／ＡｃＯＨによる脱保護反応条件、あるいは、過剰量の水酸化リチウムによる長時間反応を必要とし、複雑な糖鎖においては、脱保護反応条件下において基質の分解が伴う。また、フタロイル基の脱保護では過剰量のエチレンジアミンの使用により、シアル酸エステル部位のアミド化が副反応として進行する問題点があり、これを回避するためには、事前にエステル部位を選択的に加水分解した後、脱保護を実施する２工程の処理が必要となる。さらにスルホニル基では、金属ナトリウムを用いたスケールアップ困難な反応条件下において脱保護が行われている。従って、アセチルグルコサミンを含むオリゴ糖鎖の製造方法において、グリコシル化反応の反応性を落とすことなく、なおかつ簡便にアセチル基への付け替えが可能な保護基の開発が求められている。
国際公開第２０１１／０２７８６８号 国際公開第９６／０２２５５号 国際公開第２０１４／２０８７４２号 国際公開第２０１７／１１０９８４号 国際公開第２００２／１６３８４号 特許第６００１２６７号明細書
Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．２０１５，１１２，１０６１１ ＢｅｉｌｓｔｅｉｎＪ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２０１８，１４，４１６ ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ．１９８６，２７，５７３９ Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．２００９，１３１，１６６６９－１６６７１ Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２０１６，８１，１０６００－１０６１６ Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．２０１９，１４１，６４８４－６４８８ Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２０２１，６０，２４６８６－２４６９３ Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．２００２，４，４５５１ Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．２０１８，１４０，４６３２ Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２０１７，８２，３９２６ Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２０２１，６０，１９２８７ Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔ．，４０，７４７９（１９９９） Ｓｙｎｌｅｔｔ，２００１，５９０ Ｓｙｎｌｅｔｔ，２００１，１６９３ Ｏｒｇ．Ｂｉｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．２０１８，１６，４７２０ Ｊ．ＡＭ．ＣＨＥＭ．ＳＯＣ．２００５，１２７，７２９６
　本発明の課題は、非還元末端にα２，６－シアル酸構造を有する２分岐型グリカンである新規なオリゴ糖及び当該オリゴ糖の製造方法、並びにその中間体及びその中間体の製造方法を提供することである。
　本発明者らは、上記の課題を解決するため、鋭意検討した結果、非還元末端にα２，６－シアル酸構造を有する２分岐型グリカンである下記の式Ａ－２２で示される新規なオリゴ糖、及び該オリゴ糖を効率的に製造することができる新規な方法、及びその中間体及びその中間体の製造方法を見出したことにより、本発明を完成させたものである。
　すなわち本願発明は、以下に関するが、それらに限定されるものではない。
［１］
　以下の式Ａ－２２：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000044
 で示されるオリゴ糖（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）を製造する方法であって、
（工程Ｉ－１）式Ａ－３：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000045
 で示される化合物を、以下の式Ａ－５：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000046
 で示される化合物とα－１，３－グリコシド結合及びα－１，６－グリコシド結合させることにより、以下の式Ａ－６：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000047
 で示される化合物を生成する工程を含む、以下の式Ａ－８：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000048
 で示される化合物を生成する工程、
（工程Ｉ－２）前記式Ａ－８で示される化合物を、以下の式Ａ－９：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000049
 で示される化合物（式中、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）とβ－１，４－グリコシド結合させることにより、以下の式Ａ－１０：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000050
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）を生成する工程を含む、以下の式Ａ－１１：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000051
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）を生成する工程、
（工程Ｉ－３）前記式Ａ－１１で示される化合物を、以下の式Ａ－１２：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000052
 で示される化合物とβ－１，２－グリコシド結合させることにより、以下の式Ａ－１３：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000053
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）を生成し、次いで、前記式Ａ－１３で示される化合物上のアミノ基の保護基であるフタロイル基及び水酸基上のアセチル基を除去して、以下の式Ａ－１４：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000054
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）を生成した後、前記式Ａ－１４で示される化合物中のアミノ基をアリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基、及びフタロイル（Ｐｈｔｈ）基から選択される保護基によって保護して、以下の式Ａ－１５：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000055
 で示される化合物（式中、Ｒ５は、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、若しくは２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基であり、かつ、Ｒ６は、水素原子であるか、又はＲ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）を生成するか、又は上記式Ａ－１３で示される化合物上のアセチル（Ａｃ）基を除去することによって、上記式Ａ－１５で示される化合物（式中、Ｒ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）を生成する工程、
（工程Ｉ－４）前記式Ａ－１５で示される化合物を、以下の式Ａ－１６：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000056
 で示される化合物とβ－１，４－グリコシド結合させることにより、以下の式Ａ－１７：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000057
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｒ５は、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、若しくは２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基であり、かつ、Ｒ６は、水素原子であるか、又はＲ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）を生成し、次いで、前記式Ａ－１７で示される化合物中のアミノ基の保護基及び水酸基のアシル系保護基を除去することにより、式Ａ－１８：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000058
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｍ＋は、ナトリウムイオン、リチウムイオン、カリウムイオン、又はプロトン化されたトリエチルアミンカチオンである）を生成することを含む、以下の式Ａ－２０：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000059
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｍ＋は、ナトリウムイオン、リチウムイオン、カリウムイオン、又はプロトン化されたトリエチルアミンカチオンである）を生成する工程、
（工程Ｉ－５）前記式Ａ－２０で示される化合物を、以下の式Ａ－２１：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000060
 で示される化合物と反応させることにより、前記式Ａ－２２で示されるオリゴ糖を製造する工程、
を含む、方法。
［２］
　以下の式Ａ－４：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000061
 で示される化合物を、フルオラスアルコール及び水の混合溶媒中で、２，３－ジクロロ－５，６－ジシアノ－ｐ－ベンゾキノン（ＤＤＱ）と反応させて、前記式Ａ－４で示される化合物中の２－ナフチルメチル基を脱離させることにより、前記式Ａ－５で示される化合物を生成することを含む、［１］に記載の方法。
［３］
　前記フルオラスアルコールが、ヘキサフルオロ－２－プロパノール（ＨＦＩＰ）、２，２，２－トリフルオロエタノール（ＴＦＥ）、２，２，３，３，４，４，５，５－オクタフルオロ－１－ペンタノール、ノナフルオロ－ｔｅｒｔ－ブチルアルコール及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、［２］に記載の方法。
［４］
　前記反応が、－３５℃～７０℃で行われる、［２］又は［３］に記載の方法。
［５］
　前記反応が、－３０℃～－１０℃で行われる、［２］又は［３］に記載の方法。
［６］
　前記工程Ｉ－２において、前記式Ａ－１０で示される化合物を、パーフルオロカルボン酸のアルキルエステルの存在下で、強塩基と反応させることにより、前記式Ａ－１１で示される化合物を生成することを含む、［１］～［５］のいずれか一項に記載の方法。
［７］
　前記パーフルオロカルボン酸のアルキルエステルが、トリフルオロ酢酸メチル、トリフルオロ酢酸エチル、トリフルオロ酢酸プロピル、トリフルオロ酢酸イソプロピル、トリフルオロ酢酸ブチル、ペンタフルオロプロピオン酸メチル、ペンタフルオロプロピオン酸エチル、ペンタフルオロプロピオン酸プロピル、ぺンタフルオロプロピオン酸イソプロピル、ぺンタフルオロプロピオン酸ブチル、ヘプタフルオロ酪酸メチル、ヘプタフルオロ酪酸エチル、ヘプタフルオロ酪酸プロピル、ヘプタフルオロ酪酸イソプロピル、ヘプタフルオロ酪酸ブチル、ノナフルオロ吉草酸メチル、ノナフルオロ吉草酸エチル、ノナフルオロ吉草酸プロピル、ノナフルオロ吉草酸イソプロピル、ノナフルオロ吉草酸ブチル、ウンデカフルオロカプロン酸メチル、ウンデカフルオロカプロン酸エチル、ウンデカフルオロカプロン酸プロピル、ウンデカフルオロカプロン酸イソプロピル、又はウンデカフルオロカプロン酸ブチルである、［６］に記載の方法。
［８］
　前記強塩基が、金属アミドのナトリウム塩、リチウム塩、及びカリウム塩；Ｃ１～Ｃ２０アルコキシドのナトリウム塩、リチウム塩、カリウム塩、セシウム塩、及びバリウム塩；水素化ナトリウム、水素化カリウム、水素化リチウム、ブチルリチウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸セシウム、炭酸リチウム、リン酸カリウム、リン酸ナトリウム、リン酸セシウム、リン酸リチウム、ジアザビシクロウンデセン（ＤＢＵ）、ジアザビシクロノネン（ＤＢＮ）、及び１，１，３，３－テトラメチルグアニジン（ＴＭＧ）；並びにこれらの組み合わせからなる群より選択される、［６］又は［７］に記載の方法。
［９］
　前記強塩基が、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド、ナトリウムｔｅｒｔ－ブトキシド、リチウムｔｅｒｔ－ブトキシド、又はリチウムヘキサメチルジシラジド（ＬＨＭＤＳ）である、［６］又は［７］に記載の方法。
［１０］
　前記式Ａ－１０で示される化合物を、パーフルオロカルボン酸のアルキルエステルの存在下で、強塩基と反応させることにより、前記式Ａ－１１で示される化合物を生成する工程が、Ｃ１～Ｃ１０アルコール溶媒単独中で行われるか、又はＣ１～Ｃ１０アルコール溶媒とアミド系溶媒、エーテル系溶媒、エステル系溶媒、芳香族系溶媒、ハロゲン系溶媒、炭化水素系溶媒、若しくはニトリル系溶媒との混合溶媒中で行われる、［６］～［９］のいずれか一項に記載の方法。
［１１］
　前記工程Ｉ－３において、前記式Ａ－１４で示される化合物中のアミノ基を、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基で保護することによって前記式Ａ－１５で示される化合物を生成する、［１］～［１０］のいずれか一項に記載の方法。
［１２］
　前記工程Ｉ－３において、前記式Ａ－１４で示される化合物から前記式Ａ－１５で示される化合物を生成する工程が、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、リン酸水素二ナトリウム、又はリン酸水素二カリウムの水溶液中で行われる、［１］～［１１］のいずれか一項に記載の方法。
［１３］
　前記Ｒ１が、イソプロピル又は４－メトキシフェニルである、［１］～［１２］のいずれか一項に記載の方法。
［１４］
　前記式Ａ－１６で示される化合物を生成するための工程であって、以下の式Ｇ－１１：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000062
 で示される化合物及びカルボニルクロロヒドリドトリス（トリフェニルホスフィン）ルテニウム（ＩＩ）を含む溶液を攪拌し、次いで、該溶液に水及び１，３―ジブロモ－５，５－ジメチルヒダントイン、ヨウ素、又はＮ－ブロモスクシンイミドを添加して攪拌することにより、式Ｇ－１１で示される化合物中のＤ－ガラクトピラノシドの１位の炭素に酸素を介して結合しているアリル基を脱離させて、以下の式Ｇ－１２：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000063
 で示される化合物を生成し、さらに、前記式Ｇ－１２で示される化合物中のＤ－ガラクトピラノシドの１位の炭素における水酸基を２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルアセトイミダート基に変換することにより、前記式Ａ－１６で示される化合物を生成する工程を含む、［１］～［１３］のいずれか一項に記載の方法。
［１５］
　以下の式Ａ－５：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000064
 で示される化合物を生成する方法であって、以下の式：Ａ－４：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000065
 で示される化合物を、フルオラスアルコール及び水の混合溶媒中で、ＤＤＱ（２，３－ジクロロ－５，６－ジシアノ－ｐ－ベンゾキノン）と反応させて、前記式Ａ－４で示される化合物中の２－ナフチルメチル基を脱離させることにより、前記式Ａ－５で示される化合物を生成することを含む、方法。
［１６］
　前記フルオラスアルコールが、ヘキサフルオロ－２－プロパノール（ＨＦＩＰ）、２，２，２－トリフルオロエタノール（ＴＦＥ）、２，２，３，３，４，４，５，５－オクタフルオロ－１－ペンタノール、ノナフルオロ－ｔｅｒｔ－ブチルアルコール及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、［１５］に記載の方法。
［１７］
　前記反応が、－３５℃～７０℃で行われる、［１５］又は［１６］に記載の方法。
［１８］
　前記反応が、－３０℃～－１０℃で行われる、［１５］又は［１６］に記載の方法。
［１９］
　以下の式Ａ－１１：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000066
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）を製造する方法であって、以下の式Ａ－１０：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000067
 で示される化合物（Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）を、パーフルオロカルボン酸のアルキルエステルの存在下で、強塩基と反応させる工程を含む、方法。
［２０］
　前記パーフルオロカルボン酸のアルキルエステルが、トリフルオロ酢酸メチル、トリフルオロ酢酸エチル、トリフルオロ酢酸プロピル、トリフルオロ酢酸イソプロピル、トリフルオロ酢酸ブチル、ペンタフルオロプロピオン酸メチル、ペンタフルオロプロピオン酸エチル、ペンタフルオロプロピオン酸プロピル、ぺンタフルオロプロピオン酸イソプロピル、ぺンタフルオロプロピオン酸ブチル、ヘプタフルオロ酪酸メチル、ヘプタフルオロ酪酸エチル、ヘプタフルオロ酪酸プロピル、ヘプタフルオロ酪酸イソプロピル、ヘプタフルオロ酪酸ブチル、ノナフルオロ吉草酸メチル、ノナフルオロ吉草酸エチル、ノナフルオロ吉草酸プロピル、ノナフルオロ吉草酸イソプロピル、ノナフルオロ吉草酸ブチル、ウンデカフルオロカプロン酸メチル、ウンデカフルオロカプロン酸エチル、ウンデカフルオロカプロン酸プロピル、ウンデカフルオロカプロン酸イソプロピル、又はウンデカフルオロカプロン酸ブチルである、［１９］に記載の方法。
［２１］
　前記強塩基が、金属アミドのナトリウム塩、リチウム塩、及びカリウム塩；Ｃ１～Ｃ２０アルコキシドのナトリウム塩、リチウム塩、カリウム塩、セシウム塩、及びバリウム塩；水素化ナトリウム、水素化カリウム、水素化リチウム、ブチルリチウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸セシウム、炭酸リチウム、リン酸カリウム、リン酸ナトリウム、リン酸セシウム、リン酸リチウム、ジアザビシクロウンデセン（ＤＢＵ）、ジアザビシクロノネン（ＤＢＮ）、及び１，１，３，３－テトラメチルグアニジン（ＴＭＧ）；並びにこれらの組み合わせからなる群より選択される、［１９］又は［２０］に記載の方法。
［２２］
　前記強塩基が、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド、ナトリウムｔｅｒｔ－ブトキシド、リチウムｔｅｒｔ－ブトキシド、又はリチウムヘキサメチルジシラジド（ＬＨＭＤＳ）である、［１９］又は［２０］に記載の方法。
［２３］
　前記反応が、Ｃ１～Ｃ１０アルコール溶媒単独又はＣ１～Ｃ１０アルコール溶媒とアミド系溶媒、エーテル系溶媒、エステル系溶媒、芳香族系溶媒、ハロゲン系溶媒、炭化水素系溶媒、若しくはニトリル系溶媒との混合溶媒中で行われる、［１９］～［２２］のいずれか一項に記載の方法。
［２４］
　以下の式Ａ－１７：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000068
 で示される化合物で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｒ５は、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、若しくは２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基であり、かつ、Ｒ６は、水素原子であるか、又はＲ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）を生成する方法であって、以下の式Ａ－１５：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000069
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｒ５は、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、若しくは２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基であり、かつ、Ｒ６は、水素原子であるか、又はＲ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）を生成し、次いで、以下の式Ａ－１６：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000070
 で示される化合物とβ－１，４－グリコシド結合させることにより、前記式Ａ－１７で示される化合物を生成する工程を含む、方法。
［２５］
　Ｒ５が、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基である、［２４］に記載の方法。
［２６］
　以下の式Ａ－１８：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000071
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｍ＋は、ナトリウムイオン、リチウムイオン、カリウムイオン、又はプロトン化されたトリエチルアミンカチオンである）を生成する方法であって、以下の式Ａ－１７：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000072
 で表される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｒ５は、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、若しくは２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基であり、かつ、Ｒ６は、水素原子であるか、又はＲ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）におけるアミノ基の保護基及び水酸基のアシル系保護基を除去することを含む、方法。
［２７］
　以下の式Ａ－２２：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000073
 で示されるオリゴ糖（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）。
［２８］
　以下の式Ａ’－２２：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000074
 で示されるオリゴ糖。
［２９］
　以下の式Ａ－８：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000075
 で示される化合物。
［３０］
　以下の式Ａ－１０：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000076
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）。
［３１］
　以下の式Ａ－１１：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000077
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）。
［３２］
　以下の式Ａ－１３：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000078
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）。
［３３］
　以下のＡ－１４：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000079
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）。
［３４］
　以下の式Ａ－１４－ＦＭＡ：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000080
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）。
［３５］
　以下の式Ａ－１５：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000081
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｒ５は、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、若しくは２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基であり、かつ、Ｒ６は、水素原子であるか、又はＲ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）。
［３６］
　以下の式Ａ－１７：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000082
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｒ５は、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、若しくは２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基であり、かつ、Ｒ６は、水素原子であるか、又はＲ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）。
［３７］
　以下の式Ａ－１８－ＦＦ：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000083
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）又はその塩。
［３８］
　以下の式Ａ－１９－ＦＦ：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000084
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）又はその塩。
［３９］
　以下の式Ａ－２０－ＦＦ：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000085
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）又はその塩。
［４０］
　以下の式Ａ’－２０－ＦＦ：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000086
 で表される化合物又はその塩。
［４１］
　糖鎖リモデリング抗体又はそのＦｃ領域含有分子の製造方法であって、［１］～［１４］のいずれか一項に記載の方法を含む式Ａ－２２で示される化合物を得る工程、及び、得られた式Ａ－２２で示される化合物と、Ｎ２９７結合糖鎖としてフコースが付加していてもよいコアＧｌｃＮＡｃを有する抗体又はそのＦｃ領域含有分子であるアクセプター分子とを反応させて、前記糖鎖リモデリング抗体又はそのＦｃ領域含有分子る工程を含む、方法。
［４２］
　更に、アジド基（Ｎ３－）にアルキン構造を有する分子と反応させる工程を含む、［４１］に記載の製造方法。
［４３］
　前記アルキン構造を有する分子が、化学療法剤、分子標的薬、免疫活性化剤、毒素、抗菌剤、抗ウイルス剤、診断用薬剤、タンパク質、ペプチド、アミノ酸、核酸、抗原、ビタミン及びホルモンから選択される、［４２］に記載の製造方法。
［４４］
　［４１］～［４３］のいずれか一項に記載の製造方法を含む、抗体薬物コンジュゲートの製造方法。
［４５］
　前記工程Ｉ－１において、前記式Ａ－３で示される化合物と前記式Ａ－５で示される化合物との反応を停止させた後、生成した前記式Ａ－６で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に前記式Ａ－６で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び該疎水性担体を前記水溶性有機溶媒と前記水との混合溶液で洗浄することで、前記夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて前記式Ａ－６で示される化合物を前記疎水性担体から溶出させることにより、前記式Ａ－６で示される化合物を精製することを含む、［１］～［１４］のいずれか一項に記載の方法。
［４６］
　前記工程Ｉ－２において、前記式Ａ－８で示される化合物と前記式Ａ－９で示される化合物との反応を停止させた後、生成した前記式Ａ－１０で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に前記式Ａ－１０で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び該疎水性担体を前記水溶性有機溶媒と前記水との混合溶液で洗浄することで、前記夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて前記式Ａ－１０で示される化合物を前記疎水性担体から溶出させることにより、前記式Ａ－１０で示される化合物を精製することを含む、［１］～［１４］及び［４５］のいずれか一項に記載の方法。
［４７］
　前記工程Ｉ－３において、前記式Ａ－１１で示される化合物と前記式Ａ－１２で示される化合物との反応を停止させた後、生成した前記式Ａ－１３で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に前記式Ａ－１３で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び該疎水性担体を前記水溶性有機溶媒と前記水との混合溶液で洗浄することで、前記夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて前記式Ａ－１３で示される化合物を前記疎水性担体から溶出させることにより、前記式Ａ－１３で示される化合物を精製することを含む、［１］～［１４］、［４５］、及び［４６］のいずれか一項に記載の方法。
［４８］
　前記工程Ｉ－３において、生成した前記式Ａ－１４で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に前記式Ａ－１４で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び該疎水性担体を前記水溶性有機溶媒と前記水との混合溶液で洗浄することで、前記夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて前記式Ａ－１４で示される化合物を前記疎水性担体から溶出させることにより、前記式Ａ－１４で示される化合物を精製することを含む、［１］～［１４］及び［４５］～［４７］のいずれか一項に記載の方法。
［４９］
　前記工程Ｉ－４において、前記式Ａ－１５で示される化合物と前記式Ａ－１６で示される化合物との反応を停止させた後、生成した前記式Ａ－１７で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に前記式Ａ－１７で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び該疎水性担体を前記水溶性有機溶媒と前記水との混合溶液で洗浄することで、前記夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて前記式Ａ－１７で示される化合物を前記疎水性担体から溶出させることにより、前記式Ａ－１７で示される化合物を精製することを含む、［１］～［１４］及び［４５］～［４８］のいずれか一項に記載の方法。
［５０］
　前記夾雑物が、前記式Ａ－６で示される化合物以外の糖化合物、及び／又は前記精製される化合物を得るための反応試薬由来の化合物を含む、［４５］に記載の方法。
［５１］
　前記夾雑物が、前記式Ａ－１０で示される化合物以外の糖化合物、及び／又は前記精製される化合物を得るための反応試薬由来の化合物を含む、［４６］に記載の方法。
［５２］
　前記夾雑物が、前記式Ａ－１３で示される化合物以外の糖化合物、及び／又は前記精製される化合物を得るための反応試薬由来の化合物を含む、［４７］に記載の方法。
［５３］
　前記夾雑物が、前記式Ａ－１４で示される化合物以外の糖化合物、及び／又は前記精製される化合物を得るための反応試薬由来の化合物を含む、［４８］に記載の方法。
［５４］
　前記夾雑物が、前記式Ａ－１７で示される化合物以外の糖化合物、及び／又は前記精製される化合物を得るための反応試薬由来の化合物を含む、［４９］に記載の方法。
［５５］
　前記疎水性担体が、逆相分配クロマトグラフィー充填用樹脂である、［４５］～［５４］のいずれか一項に記載の方法。
［５６］
　前記逆相分配クロマトグラフィー充填用樹脂が、ポリ（スチレン／ジビニルベンゼン）ポリマーゲル樹脂、ポリスチレン－ジビニルベンゼン樹脂、ポリヒドロキシメタクリレート樹脂、スチレンビニルベンゼン共重合体樹脂、ポリビニルアルコール樹脂、ポリスチレン樹脂、ポリメタクリレート樹脂、化学結合型シリカゲル樹脂、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、［５５］に記載の方法。
［５７］
　前記化学結合型シリカゲル樹脂が、（１）シリカゲルに、シランカップリング剤を反応させて得られる樹脂、（２）シリカゲルに、ジメチルオクタデシル、オクタデシル、トリメチルオクタデシル、ジメチルオクチル、オクチル、ブチル、エチル、メチル、フェニル、シアノプロピル、又はアミノプロピル基を化学結合して得られる樹脂、（３）シリカゲルに、ドコシル又はトリアコンチル基を化学結合して得られる樹脂、及び（４）前述の（１）～（３）の組み合わせからなる群から選択される、［５６］に記載の方法。
［５８］
　前記化学結合型シリカゲル樹脂が、オクタデシル基結合シリカゲル樹脂（ＯＤＳ樹脂）である、［５６］に記載の方法。
［５９］
　前記水溶性有機溶媒が、水溶性アルコール系溶媒、水溶性ニトリル系溶媒、水溶性エーテル系溶媒、水溶性ケトン系溶媒、水溶性アミド系溶媒、又は水溶性スルホキシド系溶媒、もしくは前述の水溶性有機溶媒系を少なくとも１種以上含む混合溶媒である、［４５］～［５６］のいずれか一項に記載の方法。
［６０］
　前記水溶性ニトリル系溶媒が、アセトニトリルである、［５９］に記載の方法。
［６１］
　前記疎水性担体から目的物の溶出工程で使用される前記有機溶媒が、ニトリル系溶媒、エーテル系溶媒、エステル系溶媒、ケトン系溶媒、ハロゲン系溶媒、芳香族系溶媒、又は前述の溶媒系を少なくとも１種以上含む混合溶媒である、［４５］～［６０］のいずれか一項に記載の方法。
［６２］
　以下の式Ａ－６：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000087
 で示される化合物の精製方法であって、前記式Ａ－６で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に前記式Ａ－６で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び該疎水性担体を前記水溶性有機溶媒と前記水との混合溶液で洗浄することで、前記夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて前記式Ａ－６で示される化合物を前記疎水性担体から溶出させることにより、前記式Ａ－６で示される化合物を精製することを含む、方法。
［６３］
　以下の式Ａ－１０：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000088
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）の精製方法であって、前記式Ａ－１０で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に前記式Ａ－１０で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び該疎水性担体を前記水溶性有機溶媒と前記水との混合溶液で洗浄することで、前記夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて前記式Ａ－１０で示される化合物を前記疎水性担体から溶出させることにより、前記式Ａ－１０で示される化合物を精製することを含む、方法。
［６４］
　以下の式Ａ－１３：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000089
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）の精製方法であって、前記式Ａ－１３で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に前記式Ａ－１３で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び該疎水性担体を前記水溶性有機溶媒と前記水との混合溶液で洗浄することで、前記夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて前記式Ａ－１３で示される化合物を前記疎水性担体から溶出させることにより、前記式Ａ－１３で示される化合物を精製することを含む、方法。
［６５］
　以下の式Ａ－１４：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000090
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）の精製方法であって、前記式Ａ－１４で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に前記式Ａ－１４で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び該疎水性担体を前記水溶性有機溶媒と前記水との混合溶液で洗浄することで、前記夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて前記式Ａ－１４で示される化合物を前記疎水性担体から溶出させることにより、前記式Ａ－１４で示される化合物を精製することを含む、方法。
［６６］
　以下の式Ａ－１７：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000091
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｒ５は、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、若しくは２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基であり、かつ、Ｒ６は、水素原子であるか、又はＲ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）の精製方法であって、前記式Ａ－１７で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に前記式Ａ－１７で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び該疎水性担体を前記水溶性有機溶媒と前記水との混合溶液で洗浄することで、前記夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて前記式Ａ－１７で示される化合物を前記疎水性担体から溶出させることにより、前記式Ａ－１７で示される化合物を精製することを含む、方法。
［６７］
　前記夾雑物が、前記式Ａ－６で示される化合物以外の糖化合物、及び／又は前記精製される化合物を得るための反応試薬由来の化合物を含む、［６２］に記載の方法。
［６８］
　前記夾雑物が、前記式Ａ－１０で示される化合物以外の糖化合物、及び／又は前記精製される化合物を得るための反応試薬由来の化合物を含む、［６３］に記載の方法。
［６９］
　前記夾雑物が、前記式Ａ－１３で示される化合物以外の糖化合物、及び／又は前記精製される化合物を得るための反応試薬由来の化合物を含む、［６４］に記載の方法。
［７０］
　前記夾雑物が、前記式Ａ－１４で示される化合物以外の糖化合物、及び／又は前記精製される化合物を得るための反応試薬由来の化合物を含む、［６５］に記載の方法。
［７１］
　前記夾雑物が、前記式Ａ－１７で示される化合物以外の糖化合物、及び／又は前記精製される化合物を得るための反応試薬由来の化合物を含む、［６６］に記載の方法。
［７２］
　前記疎水性担体が、逆相分配クロマトグラフィー充填用樹脂である、［６２］～［７１］のいずれか一項に記載の方法。
［７３］
　前記逆相分配クロマトグラフィー充填用樹脂が、ポリ（スチレン／ジビニルベンゼン）ポリマーゲル樹脂、ポリスチレン－ジビニルベンゼン樹脂、ポリヒドロキシメタクリレート樹脂、スチレンビニルベンゼン共重合体樹脂、ポリビニルアルコール樹脂、ポリスチレン樹脂、ポリメタクリレート樹脂、化学結合型シリカゲル樹脂、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、［７２］に記載の方法。
［７４］
　前記化学結合型シリカゲル樹脂が、（１）シリカゲルに、シランカップリング剤を反応させて得られる樹脂、（２）シリカゲルに、ジメチルオクタデシル、オクタデシル、トリメチルオクタデシル、ジメチルオクチル、オクチル、ブチル、エチル、メチル、フェニル、シアノプロピル、又はアミノプロピル基を化学結合して得られる樹脂、（３）シリカゲルに、ドコシル又はトリアコンチル基を化学結合して得られる樹脂、及び（４）前述の（１）～（３）の組み合わせからなる群から選択される、［７３］に記載の方法。
［７５］
　前記化学結合型シリカゲル樹脂が、オクタデシル基結合シリカゲル樹脂（ＯＤＳ樹脂）である、［７３］に記載の方法。
［７６］
　前記水溶性有機溶媒が、水溶性アルコール系溶媒、水溶性ニトリル系溶媒、水溶性エーテル系溶媒、水溶性ケトン系溶媒、水溶性アミド系溶媒、水溶性スルホキシド系溶媒、又は前述の水溶性有機溶媒系を少なくとも１種以上含む混合溶媒である、［６２］～［７５］のいずれか一項に記載の方法。
［７７］
　前記水溶性ニトリル系溶媒が、アセトニトリルである、［７６］に記載の方法。
［７８］
　前記疎水性担体から目的物の溶出工程で使用される前記有機溶媒が、ニトリル系溶媒、エーテル系溶媒、エステル系溶媒、ケトン系溶媒、ハロゲン系溶媒、芳香族系溶媒、又は前述の溶媒系を少なくとも１種以上含む混合溶媒である、［６２］～［７７］のいずれか一項に記載の方法。
　さらに、一態様において、本願発明は、以下に関するがこれに限定されない：
［１］
　以下の式Ａ’－２２：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000092
 で示されるオリゴ糖を製造する方法であって、
（工程Ｉ－１）式Ａ－３：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000093
 で示される化合物を、以下の式Ａ－５：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000094
 で示される化合物とα－１，３－グリコシド結合及びα－１，６－グリコシド結合させることにより、以下の式Ａ－６：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000095
 で示される化合物を生成する工程を含む、以下の式Ａ－８：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000096
 で示される化合物を生成する工程、
（工程Ｉ－２）前記式Ａ－８で示される化合物を、以下の式Ａ’－９：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000097
 で示される化合物とβ－１，４－グリコシド結合させることにより、以下の式Ａ’－１０：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000098
 で示される化合物を生成する工程を含む、以下の式Ａ’－１１：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000099
 で示される化合物を生成する工程、
（工程Ｉ－３）前記式Ａ’－１１で示される化合物を、以下の式Ａ－１２：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000100
 で示される化合物とβ－１，２－グリコシド結合させることにより、以下の式Ａ’－１３：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000101
 で示される化合物を生成し、次いで、前記式Ａ’－１３で示される化合物上のアミノ基の保護基であるフタロイル基及び水酸基上のアセチル基を除去して、以下の式Ａ’－１４：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000102
 で示される化合物を生成した後、前記式Ａ’－１４で示される化合物中のアミノ基をアリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基、及びフタロイル（Ｐｈｔｈ）基から選択される保護基によって保護して、以下の式Ａ’－１５：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000103
 で示される化合物（式中、Ｒ５は、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、若しくは２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基であり、かつ、Ｒ６は、水素原子であるか、又はＲ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）を生成するか、又は上記式Ａ’－１３で示される化合物上のアセチル（Ａｃ）基を除去することによって、上記式Ａ’－１５で示される化合物（式中、Ｒ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）を生成する工程、
（工程Ｉ－４）前記式Ａ’－１５で示される化合物を、以下の式Ａ－１６：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000104
 で示される化合物とβ－１，４－グリコシド結合させることにより、以下の式Ａ’－１７：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000105
 で示される化合物（式中、Ｒ５は、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、若しくは２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基であり、かつ、Ｒ６は、水素原子であるか、又はＲ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）を生成し、次いで、前記式Ａ’－１７で示される化合物中のアミノ基の保護基及び水酸基のアシル系保護基を除去することにより、式Ａ’－１８：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000106
 で示される化合物（式中、Ｍ＋は、ナトリウムイオン、リチウムイオン、カリウムイオン、又はプロトン化されたトリエチルアミンカチオンである）を生成することを含む、以下の式Ａ’－２０：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000107
 で示される化合物を生成する工程、
（工程Ｉ－５）前記式Ａ’－２０で示される化合物を、以下の式Ａ－２１：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000108
 で示される化合物と反応させることにより、前記式Ａ’－２２で示されるオリゴ糖を製造する工程、
を含む、方法。
［２］
　以下の式Ａ－４：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000109
 で示される化合物を、フルオラスアルコール及び水の混合溶媒中で、２，３－ジクロロ－５，６－ジシアノ－ｐ－ベンゾキノン（ＤＤＱ）と反応させて、前記式Ａ－４で示される化合物中の２－ナフチルメチル基を脱離させることにより、前記式Ａ－５で示される化合物を生成することを含む、［１］に記載の方法。
［３］
　前記フルオラスアルコールが、ヘキサフルオロ－２－プロパノール（ＨＦＩＰ）、２，２，２－トリフルオロエタノール（ＴＦＥ）、２，２，３，３，４，４，５，５－オクタフルオロ－１－ペンタノール、ノナフルオロ－ｔｅｒｔ－ブチルアルコール及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、［２］に記載の方法。
［４］
　前記反応が、－３５℃～７０℃で行われる、［２］又は［３］に記載の方法。
［５］
　前記反応が、－３０℃～－１０℃で行われる、［２］又は［３］に記載の方法。
［６］
　前記工程Ｉ－１において、前記式Ａ－３で示される化合物と前記式Ａ－５で示される化合物との反応を停止させた後、生成した前記式Ａ－６で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に前記式Ａ－６で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び該疎水性担体を前記水溶性有機溶媒と前記水との混合溶液で洗浄することで、前記夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて前記式Ａ－６で示される化合物を前記疎水性担体から溶出させることにより、前記式Ａ－６で示される化合物を精製することを含む、［１］～［５］のいずれか一項に記載の方法。
［７］
　前記工程Ｉ－２において、前記式Ａ－８で示される化合物と前記式Ａ’－９で示される化合物との反応を停止させた後、生成した前記式Ａ’－１０で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に前記式Ａ’－１０で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び該疎水性担体を前記水溶性有機溶媒と前記水との混合溶液で洗浄することで、前記夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて前記式Ａ’－１０で示される化合物を前記疎水性担体から溶出させることにより、前記式Ａ’－１０で示される化合物を精製することを含む、［１］～［６］のいずれか一項に記載の方法。
［８］
　前記工程Ｉ－３において、前記式Ａ’－１１で示される化合物と前記式Ａ－１２で示される化合物との反応を停止させた後、生成した前記式Ａ’－１３で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に前記式Ａ’－１３で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び該疎水性担体を前記水溶性有機溶媒と前記水との混合溶液で洗浄することで、前記夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて前記式Ａ’－１３で示される化合物を前記疎水性担体から溶出させることにより、前記式Ａ’－１３で示される化合物を精製することを含む、［１］～［７］のいずれか一項に記載の方法。
［９］
　前記工程Ｉ－３において、生成した前記式Ａ’－１４で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に前記式Ａ’－１４で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び該疎水性担体を前記水溶性有機溶媒と前記水との混合溶液で洗浄することで、前記夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて前記式Ａ’－１４で示される化合物を前記疎水性担体から溶出させることにより、前記式Ａ’－１４で示される化合物を精製することを含む、［１］～［８］のいずれか一項に記載の方法。
［１０］
　前記工程Ｉ－４において、前記式Ａ’－１５で示される化合物と前記式Ａ－１６で示される化合物との反応を停止させた後、生成した前記式Ａ’－１７で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に前記式Ａ’－１７で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び該疎水性担体を前記水溶性有機溶媒と前記水との混合溶液で洗浄することで、前記夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて前記式Ａ’－１７で示される化合物を前記疎水性担体から溶出させることにより、前記式Ａ’－１７で示される化合物を精製することを含む、［１］～［９］のいずれか一項に記載の方法。
［１１］
　前記夾雑物が、前記式Ａ－６で示される化合物以外の糖化合物、及び／又は前記精製される化合物を得るための反応試薬由来の化合物を含む、［６］に記載の方法。
［１２］
　前記夾雑物が、前記式Ａ’－１０で示される化合物以外の糖化合物、及び／又は前記精製される化合物を得るための反応試薬由来の化合物を含む、［７］に記載の方法。
［１３］
　前記夾雑物が、前記式Ａ’－１３で示される化合物以外の糖化合物、及び／又は前記精製される化合物を得るための反応試薬由来の化合物を含む、［８］に記載の方法。
［１４］
　前記夾雑物が、前記式Ａ’－１４で示される化合物以外の糖化合物、及び／又は前記精製される化合物を得るための反応試薬由来の化合物を含む、［９］に記載の方法。
［１５］
　前記夾雑物が、前記式Ａ’－１７で示される化合物以外の糖化合物、及び／又は前記精製される化合物を得るための反応試薬由来の化合物を含む、［１０］に記載の方法。
［１６］
　前記疎水性担体が、逆相分配クロマトグラフィー充填用樹脂である、［６］～［１５］のいずれか一項に記載の方法。
［１７］
　前記逆相分配クロマトグラフィー充填用樹脂が、ポリ（スチレン／ジビニルベンゼン）ポリマーゲル樹脂、ポリスチレン－ジビニルベンゼン樹脂、ポリヒドロキシメタクリレート樹脂、スチレンビニルベンゼン共重合体樹脂、ポリビニルアルコール樹脂、ポリスチレン樹脂、ポリメタクリレート樹脂、化学結合型シリカゲル樹脂、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、［１６］に記載の方法。
［１８］
　前記化学結合型シリカゲル樹脂が、（１）シリカゲルに、シランカップリング剤を反応させて得られる樹脂、（２）シリカゲルに、ジメチルオクタデシル、オクタデシル、トリメチルオクタデシル、ジメチルオクチル、オクチル、ブチル、エチル、メチル、フェニル、シアノプロピル、又はアミノプロピル基を化学結合して得られる樹脂、（３）シリカゲルに、ドコシル又はトリアコンチル基を化学結合して得られる樹脂、及び（４）前述の（１）～（３）の組み合わせからなる群から選択される、［１７］に記載の方法。
［１９］
　前記化学結合型シリカゲル樹脂が、オクタデシル基結合シリカゲル樹脂（ＯＤＳ樹脂）である、［１７］に記載の方法。
［２０］
　前記水溶性有機溶媒が、水溶性アルコール系溶媒、水溶性ニトリル系溶媒、水溶性エーテル系溶媒、水溶性ケトン系溶媒、水溶性アミド系溶媒、又は水溶性スルホキシド系溶媒、もしくは前述の水溶性有機溶媒系を少なくとも１種以上含む混合溶媒である、［６］～［１９］のいずれか一項に記載の方法。
［２１］
　前記水溶性ニトリル系溶媒が、アセトニトリルである、［２０］に記載の方法。
［２２］
　前記疎水性担体から目的物の溶出工程で使用される前記有機溶媒が、ニトリル系溶媒、エーテル系溶媒、エステル系溶媒、ケトン系溶媒、ハロゲン系溶媒、芳香族系溶媒、又は前述の溶媒系を少なくとも１種以上含む混合溶媒である、［６］～［２１］のいずれか一項に記載の方法。
［２３］
　前記工程Ｉ－２において、前記式Ａ’－１０で示される化合物を、パーフルオロカルボン酸のアルキルエステルの存在下で、強塩基と反応させることにより、前記式Ａ’－１１で示される化合物を生成することを含む、［１］～［２２］のいずれか一項に記載の方法。
［２４］
　前記パーフルオロカルボン酸のアルキルエステルが、トリフルオロ酢酸メチル、トリフルオロ酢酸エチル、トリフルオロ酢酸プロピル、トリフルオロ酢酸イソプロピル、トリフルオロ酢酸ブチル、ペンタフルオロプロピオン酸メチル、ペンタフルオロプロピオン酸エチル、ペンタフルオロプロピオン酸プロピル、ぺンタフルオロプロピオン酸イソプロピル、ぺンタフルオロプロピオン酸ブチル、ヘプタフルオロ酪酸メチル、ヘプタフルオロ酪酸エチル、ヘプタフルオロ酪酸プロピル、ヘプタフルオロ酪酸イソプロピル、ヘプタフルオロ酪酸ブチル、ノナフルオロ吉草酸メチル、ノナフルオロ吉草酸エチル、ノナフルオロ吉草酸プロピル、ノナフルオロ吉草酸イソプロピル、ノナフルオロ吉草酸ブチル、ウンデカフルオロカプロン酸メチル、ウンデカフルオロカプロン酸エチル、ウンデカフルオロカプロン酸プロピル、ウンデカフルオロカプロン酸イソプロピル、又はウンデカフルオロカプロン酸ブチルである、［２３］に記載の方法。
［２５］
　前記強塩基が、金属アミドのナトリウム塩、リチウム塩、及びカリウム塩；Ｃ１～Ｃ２０アルコキシドのナトリウム塩、リチウム塩、カリウム塩、セシウム塩、及びバリウム塩；水素化ナトリウム、水素化カリウム、水素化リチウム、ブチルリチウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸セシウム、炭酸リチウム、リン酸カリウム、リン酸ナトリウム、リン酸セシウム、リン酸リチウム、ジアザビシクロウンデセン（ＤＢＵ）、ジアザビシクロノネン（ＤＢＮ）、及び１，１，３，３－テトラメチルグアニジン（ＴＭＧ）；並びにこれらの組み合わせからなる群より選択される、［２３］又は［２４］に記載の方法。
［２６］
　前記強塩基が、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド、ナトリウムｔｅｒｔ－ブトキシド、リチウムｔｅｒｔ－ブトキシド、又はリチウムヘキサメチルジシラジド（ＬＨＭＤＳ）である、［２３］又は［２４］に記載の方法。
［２７］
　前記式Ａ’－１０で示される化合物を、パーフルオロカルボン酸のアルキルエステルの存在下で、強塩基と反応させることにより、前記式Ａ’－１１で示される化合物を生成する工程が、Ｃ１～Ｃ１０アルコール溶媒単独中で行われるか、又はＣ１～Ｃ１０アルコール溶媒とアミド系溶媒、エーテル系溶媒、エステル系溶媒、芳香族系溶媒、ハロゲン系溶媒、炭化水素系溶媒、若しくはニトリル系溶媒との混合溶媒中で行われる、［２３］～［２６］のいずれか一項に記載の方法。
［２８］
　前記工程Ｉ－３において、前記式Ａ’－１４で示される化合物中のアミノ基を、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基で保護することによって前記式Ａ’－１５で示される化合物を生成する、［１］～［２７］のいずれか一項に記載の方法。
［２９］
　前記工程Ｉ－３において、前記式Ａ’－１４で示される化合物から前記式Ａ’－１５で示される化合物を生成する工程が、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、リン酸水素二ナトリウム、又はリン酸水素二カリウムの水溶液中で行われる、［１］～［２８］のいずれか一項に記載の方法。
［３０］
　以下の式Ａ－５：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000110
 で示される化合物を生成する方法であって、以下の式：Ａ－４：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000111
 で示される化合物を、フルオラスアルコール及び水の混合溶媒中で、２，３－ジクロロ－５，６－ジシアノ－ｐ－ベンゾキノン（ＤＤＱ）と反応させて、前記式Ａ－４で示される化合物中の２－ナフチルメチル基を脱離させることにより、前記式Ａ－５で示される化合物を生成することを含む、方法。
［３１］
　前記フルオラスアルコールが、ヘキサフルオロ－２－プロパノール（ＨＦＩＰ）、２，２，２－トリフルオロエタノール（ＴＦＥ）、２，２，３，３，４，４，５，５－オクタフルオロ－１－ペンタノール、ノナフルオロ－ｔｅｒｔ－ブチルアルコール及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、［３０］に記載の方法。
［３２］
　前記反応が、－３５℃～７０℃で行われる、［３０］又は［３１］に記載の方法。
［３３］
　前記反応が、－３０℃～－１０℃で行われる、［３０］又は［３１］に記載の方法。
［３４］
　以下の式Ａ－６：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000112
 で示される化合物の精製方法であって、前記式Ａ－６で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に前記式Ａ－６で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び該疎水性担体を前記水溶性有機溶媒と前記水との混合溶液で洗浄することで、前記夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて前記式Ａ－６で示される化合物を前記疎水性担体から溶出させることにより、前記式Ａ－６で示される化合物を精製することを含む、方法。
［３５］
　以下の式Ａ’－１０：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000113
 で示される化合物の精製方法であって、前記式Ａ’－１０で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に前記式Ａ’－１０で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び該疎水性担体を前記水溶性有機溶媒と前記水との混合溶液で洗浄することで、前記夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて前記式Ａ’－１０で示される化合物を前記疎水性担体から溶出させることにより、前記式Ａ’－１０で示される化合物を精製することを含む、方法。
［３６］
　以下の式Ａ’－１３：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000114
 で示される化合物の精製方法であって、前記式Ａ’－１３で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に前記式Ａ’－１３で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び該疎水性担体を前記水溶性有機溶媒と前記水との混合溶液で洗浄することで、前記夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて前記式Ａ’－１３で示される化合物を前記疎水性担体から溶出させることにより、前記式Ａ’－１３で示される化合物を精製することを含む、方法。
［３７］
　以下の式Ａ’－１４：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000115
 で示される化合物の精製方法であって、前記式Ａ’－１４で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に前記式Ａ’－１４で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び該疎水性担体を前記水溶性有機溶媒と前記水との混合溶液で洗浄することで、前記夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて前記式Ａ’－１４で示される化合物を前記疎水性担体から溶出させることにより、前記式Ａ’－１４で示される化合物を精製することを含む、方法。
［３８］
　以下の式Ａ’－１７：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000116
 で示される化合物（式中、Ｒ５は、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、若しくは２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基であり、かつ、Ｒ６は、水素原子であるか、又はＲ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）の精製方法であって、前記式Ａ’－１７で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に前記式Ａ’－１７で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び該疎水性担体を前記水溶性有機溶媒と前記水との混合溶液で洗浄することで、前記夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて前記式Ａ’－１７で示される化合物を前記疎水性担体から溶出させることにより、前記式Ａ’－１７で示される化合物を精製することを含む、方法。
［３９］
　前記夾雑物が、前記式Ａ－６で示される化合物以外の糖化合物、及び／又は前記精製される化合物を得るための反応試薬由来の化合物を含む、［３４］に記載の方法。
［４０］
　前記夾雑物が、前記式Ａ’－１０で示される化合物以外の糖化合物、及び／又は前記精製される化合物を得るための反応試薬由来の化合物を含む、［３５］に記載の方法。
［４１］
　前記夾雑物が、前記式Ａ’－１３で示される化合物以外の糖化合物、及び／又は前記精製される化合物を得るための反応試薬由来の化合物を含む、［３６］に記載の方法。
［４２］
　前記夾雑物が、前記式Ａ’－１４で示される化合物以外の糖化合物、及び／又は前記精製される化合物を得るための反応試薬由来の化合物を含む、［３７］に記載の方法。
［４３］
　前記夾雑物が、前記式Ａ’－１７で示される化合物以外の糖化合物、及び／又は前記精製される化合物を得るための反応試薬由来の化合物を含む、［３８］に記載の方法。
［４４］
　前記疎水性担体が、逆相分配クロマトグラフィー充填用樹脂である、［３４］～［４３］のいずれか一項に記載の方法。
［４５］
　前記逆相分配クロマトグラフィー充填用樹脂が、ポリ（スチレン／ジビニルベンゼン）ポリマーゲル樹脂、ポリスチレン－ジビニルベンゼン樹脂、ポリヒドロキシメタクリレート樹脂、スチレンビニルベンゼン共重合体樹脂、ポリビニルアルコール樹脂、ポリスチレン樹脂、ポリメタクリレート樹脂、化学結合型シリカゲル樹脂、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、［４４］に記載の方法。
［４６］
　前記化学結合型シリカゲル樹脂が、（１）シリカゲルに、シランカップリング剤を反応させて得られる樹脂、（２）シリカゲルに、ジメチルオクタデシル、オクタデシル、トリメチルオクタデシル、ジメチルオクチル、オクチル、ブチル、エチル、メチル、フェニル、シアノプロピル、又はアミノプロピル基を化学結合して得られる樹脂、（３）シリカゲルに、ドコシル又はトリアコンチル基を化学結合して得られる樹脂、及び（４）前述の（１）～（３）の組み合わせからなる群から選択される、［４５］に記載の方法。
［４７］
　前記化学結合型シリカゲル樹脂が、オクタデシル基結合シリカゲル樹脂（ＯＤＳ樹脂）である、［４５］に記載の方法。
［４８］
　前記水溶性有機溶媒が、水溶性アルコール系溶媒、水溶性ニトリル系溶媒、水溶性エーテル系溶媒、水溶性ケトン系溶媒、水溶性アミド系溶媒、水溶性スルホキシド系溶媒、又は前述の水溶性有機溶媒系を少なくとも１種以上含む混合溶媒である、［３４］～［４７］のいずれか一項に記載の方法。
［４９］
　前記水溶性ニトリル系溶媒が、アセトニトリルである、［４８］に記載の方法。
［５０］
　前記疎水性担体から目的物の溶出工程で使用される前記有機溶媒が、ニトリル系溶媒、エーテル系溶媒、エステル系溶媒、ケトン系溶媒、ハロゲン系溶媒、芳香族系溶媒、又は前述の溶媒系を少なくとも１種以上含む混合溶媒である、［３４］～［４９］のいずれか一項に記載の方法。
［５１］
　以下の式Ａ’－１１：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000117
 で示される化合物を製造する方法であって、以下の式Ａ’－１０：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000118
 で示される化合物を、パーフルオロカルボン酸のアルキルエステルの存在下で、強塩基と反応させる工程を含む、方法。
［５２］
　前記パーフルオロカルボン酸のアルキルエステルが、トリフルオロ酢酸メチル、トリフルオロ酢酸エチル、トリフルオロ酢酸プロピル、トリフルオロ酢酸イソプロピル、トリフルオロ酢酸ブチル、ペンタフルオロプロピオン酸メチル、ペンタフルオロプロピオン酸エチル、ペンタフルオロプロピオン酸プロピル、ぺンタフルオロプロピオン酸イソプロピル、ぺンタフルオロプロピオン酸ブチル、ヘプタフルオロ酪酸メチル、ヘプタフルオロ酪酸エチル、ヘプタフルオロ酪酸プロピル、ヘプタフルオロ酪酸イソプロピル、ヘプタフルオロ酪酸ブチル、ノナフルオロ吉草酸メチル、ノナフルオロ吉草酸エチル、ノナフルオロ吉草酸プロピル、ノナフルオロ吉草酸イソプロピル、ノナフルオロ吉草酸ブチル、ウンデカフルオロカプロン酸メチル、ウンデカフルオロカプロン酸エチル、ウンデカフルオロカプロン酸プロピル、ウンデカフルオロカプロン酸イソプロピル、又はウンデカフルオロカプロン酸ブチルである、［５１］に記載の方法。
［５３］
　前記強塩基が、金属アミドのナトリウム塩、リチウム塩、及びカリウム塩；Ｃ１～Ｃ２０アルコキシドのナトリウム塩、リチウム塩、カリウム塩、セシウム塩、及びバリウム塩；水素化ナトリウム、水素化カリウム、水素化リチウム、ブチルリチウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸セシウム、炭酸リチウム、リン酸カリウム、リン酸ナトリウム、リン酸セシウム、リン酸リチウム、ジアザビシクロウンデセン（ＤＢＵ）、ジアザビシクロノネン（ＤＢＮ）、及び１，１，３，３－テトラメチルグアニジン（ＴＭＧ）；並びにこれらの組み合わせからなる群より選択される、［５１］又は［５２］に記載の方法。
［５４］
　前記強塩基が、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド、ナトリウムｔｅｒｔ－ブトキシド、リチウムｔｅｒｔ－ブトキシド、又はリチウムヘキサメチルジシラジド（ＬＨＭＤＳ）である、［５１］又は［５２］に記載の方法。
［５５］
　前記反応が、Ｃ１～Ｃ１０アルコール溶媒単独又はＣ１～Ｃ１０アルコール溶媒とアミド系溶媒、エーテル系溶媒、エステル系溶媒、芳香族系溶媒、ハロゲン系溶媒、炭化水素系溶媒、若しくはニトリル系溶媒との混合溶媒中で行われる、［５１］～［５４］のいずれか一項に記載の方法。
［５６］
　以下の式Ａ’－１７：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000119
 で示される化合物で示される化合物（式中、Ｒ５は、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、若しくは２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基であり、かつ、Ｒ６は、水素原子であるか、又はＲ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）を生成する方法であって、以下の式Ａ’－１５：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000120
 で示される化合物（式中、Ｒ５は、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、若しくは２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基であり、かつ、Ｒ６は、水素原子であるか、又はＲ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）を生成し、次いで、以下の式Ａ－１６：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000121
 で示される化合物とβ－１，４－グリコシド結合させることにより、前記式Ａ’－１７で示される化合物を生成する工程を含む、方法。
［５７］
　Ｒ５が、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基である、［５６］に記載の方法。
［５８］
　以下の式Ａ’－１８：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000122
 で示される化合物（式中、Ｍ＋は、ナトリウムイオン、リチウムイオン、カリウムイオン、又はプロトン化されたトリエチルアミンカチオンである）を生成する方法であって、以下の式Ａ’－１７：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000123
 で示される化合物（式中、Ｒ５は、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、若しくは２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基であり、かつ、Ｒ６は、水素原子であるか、又はＲ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）におけるアミノ基の保護基及び水酸基のアシル系保護基を除去することを含む、方法。
［５９］
　以下の式Ａ’－２２：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000124
 で示されるオリゴ糖。
［６０］
　以下の式Ａ’－８：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000125
 で示される化合物。
［６１］
　以下の式Ａ’－１０：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000126
 で示される化合物。
［６２］
　以下の式Ａ’－１１：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000127
 で示される化合物。
［６３］
　以下の式Ａ’－１３：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000128
 で示される化合物。
［６４］
　以下のＡ’－１４：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000129
 で示される化合物。
［６５］
　以下の式Ａ’－１５：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000130
 で示される化合物（式中、Ｒ５は、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、若しくは２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基であり、かつ、Ｒ６は、水素原子であるか、又はＲ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）。
［６６］
　以下の式Ａ’－１７：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000131
 で示される化合物（式中、Ｒ５は、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、若しくは２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基であり、かつ、Ｒ６は、水素原子であるか、又はＲ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）。
［６７］
　以下の式Ａ’－１８：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000132
 で示される化合物（式中、Ｍ＋は、ナトリウムイオン、リチウムイオン、カリウムイオン、又はプロトン化されたトリエチルアミンカチオンである）。
［６８］
　以下の式Ａ’－１９：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000133
 で示される化合物（式中、Ｍ＋は、ナトリウムイオン、リチウムイオン、カリウムイオン、又はプロトン化されたトリエチルアミンカチオンである）。
［６９］
　以下の式Ａ’－２０：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000134
 で示される化合物（式中、Ｍ＋は、ナトリウムイオン、リチウムイオン、カリウムイオン、又はプロトン化されたトリエチルアミンカチオンである）。
　本発明により、上記式Ａ－２２で示されるオリゴ糖及びその新規製造方法、並びに当該オリゴ糖の製造中間体及びその製造方法が提供される。
本発明において提供される上記式Ａ－２２で示されるオリゴ糖の新規製造方法の一例を部分的に簡略に示すものであり、より具体的には、式Ａ－１で示される化合物を出発物質として式Ａ－２～式Ａ－１４で示される化合物の製造方法を簡略に示している。 本発明において提供される上記式Ａ－２２で示されるオリゴ糖の新規製造方法の一例を部分的に簡略に示すものであり、より具体的には、式Ａ－１４で示される化合物を出発物質として式Ａ－１５～式Ａ－２２で示される化合物の製造方法を簡略に示している。
　以下、本発明を実施するための好適な形態について説明する。なお、以下に説明する実施形態は、本発明の代表的な実施形態の一例を示したものであり、これによって本発明の範囲が狭く解釈されることはない。
＜１．式Ａ－２２で示されるオリゴ糖の製造方法＞
　本発明の一態様において、式Ａ－２２で示される新規オリゴ糖及びその新規製造方法が提供される。本発明において、式Ａ－２２で示されるオリゴ糖は、以下のオリゴ糖を意味する。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000135
　上記式Ａ－２２で示されるオリゴ糖の新規合成スキームは、以下の工程Ｉ－１～工程Ｉ－５を含む。
　本明細書全体を通して、オリゴ糖及び化合物中の置換基「Ｒ１」は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個（すなわち、１個、２個、又は３個）のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい。該フェニル基は、非置換であってもよい。
　本明細書で使用する場合、「Ｃｘ～Ｃｙアルキル基」という用語は、ｘ～ｙ個の炭素を含有する直鎖、分岐鎖、又は環状の飽和脂肪族炭化水素基を指す。ここで、直鎖の飽和脂肪族炭化水素基の例としては、例えば、メチル、エチル、ｎ－プロピル、ｎ－ブチル、ｎ－ペンチル、ｎ－ヘキシルなどが挙げられ、分枝鎖の飽和脂肪族炭化水素基の例としては、例えば、イソプロピル、イソブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ｓｅｃ－ブチル、イソペンチル、ｔｅｒｔ－ペンチル、ｓｅｃ－ペンチル、イソヘキシル、ｔｅｒｔ－ヘキシル、ｓｅｃ－ヘキシルなどが挙げられる。また、「アルキル基」には、上記の通り、環状の飽和脂肪族炭化水素基、すなわち、「シクロアルキル」も含まれ、該「シクロアルキル」には縮合又は架橋した環系が含まれてもよい。シクロアルキルの例としては、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどが挙げられる。
　本明細書で使用する場合、「アルコキシ基」という用語は、酸素を介して結合しているアルキル基（すなわち、アルキル－Ｏ－）を指し、該アルキル基は上記で定義した通りである。アルコキシ基の例としては、例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ｔｅｒｔ－ブトキシなどが挙げられる。
　本発明の一態様において、オリゴ糖及び化合物中の置換基「Ｒ１」は、好ましくはｎ－プロピル、ｎ－ブチル、ｎ－ペンチル、ｎ－ヘキシル、イソプロピル、イソブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、イソペンチル、ｔｅｒｔ－ペンチル、ｓｅｃ－ペンチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、４－メトキシフェニル、３－メトキシフェニル、２－メトキシフェニル、３,４－ジメトキシフェニル、２,４－ジメトキシフェニル、２,３－ジメトキシフェニル、３,４,５－トリメトキシフェニル、又は、フェニルであり、より好ましくはイソプロピル、イソブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、４－メトキシフェニル、３－メトキシフェニル、又は、２－メトキシフェニルであり、さらに好ましくはイソプロピル又は４－メトキシフェニルである。
　本願明細書全体を通して、本発明には、一態様において、式Ａ－２２で示されるオリゴ糖及びその新規な製造中間体（例えば、式Ａ－２～Ａ－２０で示される化合物）の「塩」も含まれる。例えば、式Ａ－２２で示されるオリゴ糖及び当該オリゴ糖の製造に使用される化合物中のカルボキシル基、アミノ基等において塩を形成することできる。形成され得る塩には、例えば、塩酸、硫酸、臭化水素酸、リン酸等の無機酸；又は酢酸、プロピオン酸、トリメチル酢酸、第三級ブチル酢酸、ヘキサン酸、コハク酸、リンゴ酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸等の有機酸で形成される酸付加塩が含まれる。また、存在する酸性プロトンが無機又は有機塩基と反応できる場合にも塩を形成することができ、無機塩基には、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、水酸化カルシウム、水酸化リチウム等が含まれ、有機塩基には、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トリエチルアミン等が含まれるが、これらに限定するものではない。「塩」は、一態様において、薬学的に許容される塩であることが好ましい。
＜工程Ｉ－１＞
　工程Ｉ－１は、式Ａ－３：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000136
 で示される化合物を、以下の式Ａ－５：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000137
 で示される化合物とα－１，３－グリコシド結合及びα－１，６－グリコシド結合させることにより、以下の式Ａ－６：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000138
 で示される化合物を生成する工程を含む、以下の式Ａ－８：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000139
 で示される化合物を生成する工程である。当該工程Ｉ－１は、以下の工程Ｉ－１－１～工程Ｉ－１－３を含む。
＜工程Ｉ－１－１＞
　工程Ｉ－１－１は、式Ａ－３で示される化合物と式Ａ－５で示される化合物とをα－１，３－グリコシド結合及びα－１，６－グリコシド結合させることにより、式Ａ－６で示される化合物を製造する工程である。本工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例３２又は５５に示した方法によって行うことができ、例えば、式Ａ－３で示される化合物を、有機溶媒（トルエン等）中、モレキュラーシーブ４Ａ粉末、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル（ＴＭＳＯＴｆ）を順次添加して、上記式Ａ－５で示される化合物とα－１，３－グリコシド結合及びα－１，６－グリコシド結合させることにより、上記式Ａ－６で示される化合物を生成することができる。また、出発材料である式Ａ－３で示される化合物及び式Ａ－５で示される化合物は、以下のようにして製造することができる。
＜式Ａ－３で示される化合物の製造＞
　本発明の一態様において、式Ａ－３で示される化合物は、以下の工程により製造することができるが、当該製造方法に限定するものではない。
　まず、以下の式Ａ－１：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000140
 で示される化合物（３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－１，２－Ｏ－（１－メトキシエチリデン）－β－Ｄ－マンノピラノース）を、例えば、水及びｐ－ＴｓＯＨ・Ｈ２Ｏを添加し、次いで、トリエチルアミンと反応させることにより、以下の式Ａ－２：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000141
 で示される化合物を生成する。本工程は、好適には、例えば実施例２９又は５２に示した方法によって行うことができる。
　次いで、式Ａ－２で示される化合物に、例えば、トリクロロアセトニトリル及びジアザビシクロウンデセン（ＤＢＵ）を添加することにより、式Ａ－３で示される化合物を製造する。本工程は、好適には、例えば実施例３０又は５３に示した方法によって行うことができる。
＜式Ａ－５で示される化合物の製造＞
　式Ａ－５で示される化合物は、まず以下の式Ａ－４で示される化合物を製造し、次いで、当該化合物から式Ａ－５で示される化合物を製造する。
　本発明の一態様において、式Ａ－４で示される化合物は、以下の工程Ｘ－１～工程Ｘ－１４、又は以下の工程Ｘ－１～Ｘ－８＋Ｘ－１５～Ｘ－１６により製造される。以下には、各工程の詳細を例示するが、各工程は、単糖又はオリゴ糖製造における常法を用いて、又はこのような常法を応用することによって、実施することもできる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000142
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000143
＜工程Ｘ－１＞
　工程Ｘ－１は、以下の式Ｃ－１：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000144
 で示される化合物の３位の炭素に結合している水酸基を、２－ナフチルメチル（ＮＡＰ）基で保護することにより、以下の式Ｃ－２：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000145
 で示される化合物を製造する工程である。本工程の出発物質である式Ｃ－１で示される化合物は、既知の方法によって製造することができ、又は、市販品を使用することができる。式Ｃ－１で示される化合物の市販品としては、例えば、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ社製の１，２：５，６－ジ－Ｏ－イソプロピリデン－α－Ｄ－グルコフラノースを挙げることができる。本工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例１に示した方法によって行うことができる。
＜工程Ｘ－２＞
　工程Ｘ－２は、式Ｃ－２で示される化合物を、二箇所のイソプロピリデンの酸加水分解とピラノース環形成により、以下の式Ｃ－３：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000146
 で示される化合物を製造する工程である。本工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例２に示した方法によって行うことができる。
＜工程Ｘ－３＞
　工程Ｘ－３は、式Ｃ－３で示される化合物上の水酸基をアセチル基にて保護することにより、以下の式Ｃ－４：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000147
 で示される化合物を製造する工程である。本工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例３に示した方法によって行うことができる。
＜工程Ｘ－４＞
　工程Ｘ－４は、式Ｃ－４で示される化合物の１位の炭素に結合しているアセチルオキシ基におけるアセチル基のみを選択的に脱離させることにより、以下の式Ｃ－５：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000148
 で示される化合物を製造する工程である。本工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例３に示した方法によって行うことができる。
　上記の式Ｃ－３で示される化合物から式Ｃ－５で示される化合物の製造の工程は、例えば、実施例３に示すように、ワンポットで行ってもよい。
＜工程Ｘ－５＞
　工程Ｘ－５は、式Ｃ－５で示される化合物をトリクロロアセトニトリルと反応させることにより、以下の式Ｃ－６：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000149
 で示される化合物を製造する工程である。本工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例４に示した方法によって行うことができる。
＜工程Ｘ－６＞
　工程Ｘ－６は、式Ｃ－６で示される化合物を、以下の式Ｃ－７：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000150
 で示される化合物と反応させることにより、以下の式Ｃ－８：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000151
 で示される化合物を製造する工程である。式Ｃ－７で示される化合物は、既知の方法によって製造することができ、又は、市販品を使用することができる。式Ｃ－７で示される化合物の市販品としては、例えば、東京化成工業株式会社製の４－メトキシフェニル３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－フタルイミド－β－Ｄ－グルコピラノシドを挙げることができる。本工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例５に示した方法によって行うことができる。
＜工程Ｘ－７＞
　工程Ｘ－７は、式Ｃ－８で示される化合物より、アセチル基を脱離させることにより、以下の式Ｃ－９：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000152
 で示される化合物を製造する工程である。本工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例６に示した方法によって行うことができる。
　本発明の一態様において、工程Ｘ－７は、式Ｃ－８で示される化合物を、トリフルオロ酢酸エステルの存在下で、強塩基と反応させてアセチル基を脱離させることにより、式Ｃ－９で示される化合物を生成させる工程である。当該アセチル基の脱離反応を、メタノール中ナトリウムメトキシドを用いて行うことが報告されているが（Ｏｒｇ．Ｂｉｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２０１８，１６，４７２０－４７２７）、その場合、フタルイミド基の開環という所望しない副反応も同時に生じ得る。他方、パーフルオロカルボン酸のアルキルエステルの存在下で、アルコキシド系の強塩基と反応させるという手法を用いることにより、フタルイミド基の開環を抑制しながら、アセチル基の脱離を行うことが可能となる。
　上記工程で使用される「パーフルオロカルボン酸のアルキルエステル」は、反応が進行する限り制限されないが、トリフルオロ酢酸メチル、トリフルオロ酢酸エチル、トリフルオロ酢酸プロピル、トリフルオロ酢酸イソプロピル、トリフルオロ酢酸ブチル、ペンタフルオロプロピオン酸メチル、ペンタフルオロプロピオン酸エチル、ペンタフルオロプロピオン酸プロピル、ぺンタフルオロプロピオン酸イソプロピル、ぺンタフルオロプロピオン酸ブチル、ヘプタフルオロ酪酸メチル、ヘプタフルオロ酪酸エチル、ヘプタフルオロ酪酸プロピル、ヘプタフルオロ酪酸イソプロピル、ヘプタフルオロ酪酸ブチル、ノナフルオロ吉草酸メチル、ノナフルオロ吉草酸エチル、ノナフルオロ吉草酸プロピル、ノナフルオロ吉草酸イソプロピル、ノナフルオロ吉草酸ブチル、ウンデカフルオロカプロン酸メチル、ウンデカフルオロカプロン酸エチル、ウンデカフルオロカプロン酸プロピル、ウンデカフルオロカプロン酸イソプロピル、及びウンデカフルオロカプロン酸ブチルであり、好適には、トリフルオロ酢酸メチルが使用される。
　上記の「強塩基」としては、反応が進行する限り制限されないが、例えば、金属アミドのナトリウム塩、リチウム塩、及びカリウム塩；Ｃ１～Ｃ２０アルコキシドのナトリウム塩、リチウム塩、カリウム塩、セシウム塩、及びバリウム塩；水素化ナトリウム、水素化カリウム、水素化リチウム、ブチルリチウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸セシウム、炭酸リチウム、リン酸カリウム、リン酸ナトリウム、リン酸セシウム、リン酸リチウム、ジアザビシクロウンデセン（ＤＢＵ）、ジアザビシクロノネン（ＤＢＮ）、及び１，１，３，３－テトラメチルグアニジン（ＴＭＧ）；並びにこれらの組み合わせからなる群より選択され、例えば、Ｃ１～Ｃ２０アルコキシドのナトリウム塩、リチウム塩、カリウム塩としては、リチウムメトキシド、ナトリウムメトキシド、カリウムメトキシド、リチウムエトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウムエトキシド、リチウムイソプロポキシド、ナトリウムイソプロポキシド、カリウムイソプロポキシド、リチウムｔｅｒｔ－ブトキシド、ナトリウムｔｅｒｔ－ブトキシド、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド、リチウムｔｅｒｔ－ペントキシド、ナトリウムｔｅｒｔ－ペントキシド、又はカリウムｔｅｒｔ－ペントキシドを挙げることができ、特に好適には、ナトリウムｔｅｒｔ－ブトキシド、リチウムｔｅｒｔ－ブトキシド、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド、リチウムヘキサメチルジシラジド（ＬＨＭＤＳ）を挙げることができる。
　本工程における溶媒としては、反応が進行する限り制限されないが、例えば、Ｃ１～Ｃ１０アルコール溶媒単独中で行われるか、又はＣ１～Ｃ１０アルコール溶媒とアミド系溶媒（ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド等）、エーテル系溶媒（テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン、シクロペンチルメチルエーテル等）、エステル系溶媒（酢酸エチル等）、芳香族系溶媒（トルエン等）、ハロゲン系溶媒（ジクロロメタン等）、炭化水素系溶媒（ヘキサン等）若しくはニトリル系溶媒（アセトニトリル等）との混合溶媒を使用することができるが、好適には、メタノール、又はメタノールとテトラヒドロフランの混合溶媒系を使用することができるが、これらに限定されるものではない。なお、上記の「Ｃ１～Ｃ１０アルコール溶媒」は、より多くの炭素数を有するアルコールも代替可能である一方、入手のし易さや便宜性から、Ｃ１～Ｃ５アルコール（メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール等）を好適に利用できる。
　本工程の反応温度は、反応が進行する限り制限されないが、例えば、－２０℃～８０℃、好適には、０℃～７０℃、より好適には、２０℃～６５℃、特に好適には、４０℃～６０℃を挙げることができる。
＜工程Ｘ－８＞
　工程Ｘ－８は、式Ｃ－９で示される化合物において、Ｄ－グルコピラノシドの４位及び６位の炭素に結合している水酸基を、ベンズアルデヒドジメチルアセタールを用いて選択的に保護することにより、以下の式Ｃ－１０：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000153
 で示される化合物を製造する工程である。本工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例７に示した方法によって行うことができる。
＜工程Ｘ－９＞
　工程Ｘ－９は、式Ｃ－１０で示される化合物を、トリフルオロメタンスルホニルオキシ基、ノナフルオロブタンスルホニルオキシ基、２－ニトロベンゼンスルホニルオキシ基及び４－ニトロベンゼンスルホニルオキシ基からなる群より選択される脱離基を付与する化合物と反応させることにより、以下の式Ｃ－１１：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000154
 で示される化合物（式中、Ｘ１は、トリフルオロメタンスルホニル基、ノナフルオロブタンスルホニル基、２－ニトロベンゼンスルホニル基及び４－ニトロベンゼンスルホニル基からなる群より選択される置換基を示す）を製造する工程である。本工程は、既知の脱離基付与方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例８に示した方法によって行うことができる。
　本工程において、「トリフルオロメタンスルホニルオキシ基、ノナフルオロブタンスルホニルオキシ基、２－ニトロベンゼンスルホニルオキシ基及び４－ニトロベンゼンスルホニルオキシ基からなる群より選択される脱離基を付与する化合物」としては、例えば、トリフルオロメタンスルホン酸無水物、ノナフルオロ－１－ブタンスルホニル＝フルオリド、ビス（ノナフルオロ－１－ブタンスルホン酸）無水物、２－ニトロベンゼンスルホニルクロリド、又は４－ニトロベンゼンスルホニルクロリドを挙げることができ、好適には、トリフルオロメタンスルホン酸無水物を挙げることができる。
　本工程における溶媒としては、反応が進行する限り制限されないが、例えば、酢酸エチル、トルエン、ジクロロメタン、アセトニトリル、シクロペンチルメチルエーテル、又はｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテルを挙げることができ、好適には、酢酸エチル、トルエン又はジクロロメタンを挙げることができる。
　本工程の反応温度は、反応が進行する限り制限されないが、例えば、－４０℃～６０℃、好適には、－３０℃～４０℃、より好適には、－２０℃～１０℃を挙げることができる。
　本工程は、好適には、塩基の存在下で行うことができる。本工程に用いられる塩基としては、反応が進行する限り特に限定されないが、例えば、１－メチルイミダゾール、ピリジン、４－ジメチルアミノピリジン、ピコリン、ルチジン又はコリジンを挙げることができ、好適には、１－メチルイミダゾールを挙げることができる。
＜工程Ｘ－１０＞
　工程Ｘ－１０は、式Ｃ－１１で示される化合物を、酢酸セシウム又はテトラブチルアンモニウムアセテートと反応させることにより、以下の式Ｃ－１２：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000155
 で示される化合物（式中、Ｘ２は、アセチル基である）を製造するか、又は、式Ｃ－１１で示される化合物を、安息香酸テトラブチルアンモニウムと反応させることにより、以下の式Ｃ－１２：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000156
 で示される化合物（式中、Ｘ２は、ベンゾイル基である）を製造する工程である。グルコース→マンノースの立体反転は公知の変換反応があるが、β－グリコシド結合で連結したグルコース－グルコサミン２糖のＤ－グルコピラノシド３位の炭素に結合する水酸基の保護基が２－ナフチルメチル（Ｎａｐ）基である場合の変換は報告されていない。当該方法を採用することにより、グルコース→マンノースの立体反転を達成でき、高収率かつ高選択的にβ－グリコシド結合で連結したマンノース－グルコサミン２糖骨格を構築することができる。
　本工程における溶媒としては、反応が進行する限り制限されないが、例えば、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチルピロリドン、Ｎ，Ｎ－ジメチルイミダゾリジノン、スルホラン、テトラヒドロフラン又はアセトニトリルを挙げることができ、好適には、ジメチルスルホキシドを挙げることができる。
　本工程の反応温度は、反応が進行する限り制限されないが、例えば、２０℃～８０℃、好適には、２３℃～７０℃、より好適には、２６℃～６０℃、特に好適には、３０℃～５０℃を挙げることができる。
＜工程Ｘ－１１＞
　工程Ｘ－１１は、式Ｃ－１２で示される化合物において、Ｘ２基を脱離させるともに、フタルイミド基を開環させることにより、以下の式Ｃ－１３：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000157
 で示される化合物を製造する工程である。本工程は、既知の加水分解方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例９に示した方法によって行うことができる。
　本工程において、生成された式Ｃ－１３で示される化合物は、溶媒中に溶けているものを次工程にそのまま使用してもよく、又は、再結晶化により単離・精製することもできる。式Ｃ－１３で示される化合物は、結晶化により単離・精製できる点が大きな利点であり、結晶化により、カラム精製では除去が難しい類似構造を有する不純物をほぼ完全に除去することができる。この場合、ＨＰＬＣ純度で９９％以上の式Ｃ－１３で示される化合物を取得することができる。
　本工程における再結晶化による単離・精製は、例えば、溶媒に溶けている状態から減圧乾燥操作により溶媒を完全に除去する方法、あるいは、テトラヒドロフランを良溶媒として使用し、微量の水存在下、貧溶媒としてイソプロパノールを滴下する方法を挙げることができる。
　本工程における再結晶化は、式Ｃ－１３で示される化合物の種晶を用いて行うこともできる。種晶を用いる場合、例えば、テトラヒドロフランを良溶媒として使用し、微量の水存在下、貧溶媒としてイソプロパノールを一部滴下、種晶を添加後、結晶析出を確認し、残りのイソプロパノールを滴下する方法により結晶化を行うことができる。
　上記の式Ｃ－１１で示される化合物から式Ｃ－１３で示される化合物の製造の工程は、例えば、実施例９に示すように、ワンポットで行ってもよい。
＜工程Ｘ－１２＞
　工程Ｘ－１２は、式Ｃ－１３で示される化合物における開環したフタルイミド基を脱水縮合により閉環することにより、以下の式Ｃ－１４：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000158
 で示される化合物を製造する工程である。本工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例１０に示した方法によって行うことができる。
＜工程Ｘ－１３＞
　工程Ｘ－１３は、式Ｃ－１４で示される化合物において、Ｄ－マンノピラノシドの２位の炭素に結合している水酸基をベンジル基で保護することにより、以下の式Ｃ－１５：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000159
 で示される化合物を製造する工程である。本工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例１１に示した方法によって行うことができる。
　本発明の一態様において、工程Ｘ－１３は、リチウムｔｅｒｔ－ブトキシド又はリチウムｔｅｒｔ－アモキシドの存在下で、式Ｃ－１４で示される化合物において、Ｄ－マンノピラノシドの２位の炭素に結合している水酸基をベンジル基で保護することにより、式Ｃ－１５で示される化合物を製造する工程を含む。工程Ｘ－１５を、リチウムｔｅｒｔ－ブトキシド又はリチウムｔｅｒｔ－アモキシドの存在下で行うことにより、フタルイミドの開環を抑制できる。また、水素化ナトリウムを使った一般的条件に比べ、安全に実施可能であり、スケールアップも容易となる。
　本工程における溶媒としては、反応が進行する限り制限されないが、例えば、ジメチルアセトアミド、ジメチルホルムアミド、Ｎ－メチルピロリドン、Ｎ，Ｎ－ジメチルイミダゾリジノンを挙げることができ、好適には、ジメチルアセトアミドを挙げることができる。
　本工程の反応温度は、反応が進行する限り制限されないが、例えば、－２０℃～１００℃、好適には、－１５℃～７０℃、特に好適には、－１０℃～５０℃を挙げることができる。
＜工程Ｘ－１４＞
　工程Ｘ－１４は、式Ｃ－１５で示される化合物において、ベンジリデン保護基を選択的に還元することにより（より詳細には、Ａｎｇｅｗ．　Ｃｈｅｍ．　Ｉｎｔ．　Ｅｄ．　２００５，　４４，　１６６５－１６６８を参照のこと）、Ｄ－マンノピラノシドの６位の炭素に結合している水酸基のみが脱保護された、以下の式Ａ－４：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000160
 で示される化合物を製造する工程である。本工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例１２に示した方法によって行うことができる。
　本工程において、生成された式Ａ－４で示される化合物は、溶媒中に溶けているものを次工程にそのまま使用してもよく、又は、カラム精製等により単離・精製することもできる。
　本発明の一態様において、グルコース→マンノースの立体反転を、ＳＮ２反応を利用して実行するための工程を含む工程Ｘ－９～Ｘ－１２に代えて、酸化還元反応を利用して実行するための以下に示す工程Ｘ－１５及びＸ－１６を含む。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000161
＜工程Ｘ－１５＞
　工程Ｘ－１５は、式Ｃ－１０で示される化合物において、Ｄ－グルコピラノシドの２位を酸化することにより、以下の式Ｃ－１６：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000162
 で示される化合物を製造する工程である。本工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができる。
＜工程Ｘ－１６＞
　工程Ｘ－１６は、式Ｃ－１６で示される化合物において、２－ケト－Ｄ－グルコピラノシドの２位の炭素に結合しているケトン基を還元することにより、以下の式Ｃ－１４：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000163
 で示される化合物を製造する工程である。本工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができる。
　本工程における溶媒としては、反応が進行する限り制限されないが、例えば、ジエチルエーテル、シクロペンチルメチルエーテル、ｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ジプロピルエーテル、ジブチルエーテル、１，４－ジオキサンを挙げることができ、好適には、テトラヒドロフランを挙げることができる。
　本工程の反応温度は、反応が進行する限り制限されないが、例えば、－８０℃～２０℃を挙げることができる。なお、以下に記載するとおり、使用する還元剤に応じて、最適な反応温度が異なる。
　本発明の一態様において、式Ｃ－１６で示される化合物における、２－ケト－Ｄ－グルコピラノシドの２位の炭素に結合しているオキソ基は、Ｌ－セレクトリド、ＬＳ－セレクトリド、リチウムジイソブチル－ｔｅｒｔ－ブトキシアルミニウムヒドリド（ＬＤＢＢＡ）、以下の式Ｗ：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000164
 で示される化合物（式中、Ｒ３は、以下の式：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000165
 で示されるジｔｅｒｔ－ブチルメチルフェノキシド又はヒドリドであり、但し、少なくとも２つのＲ３は、ジｔｅｒｔ－ブチルメチルフェノキシドである）、及びこれらの組み合わせからなる群より選択される還元剤の存在下で還元される。当該還元工程においては、例えば、ＮａＢＨ４を用いた場合、立体選択性が低く（７：３程度）、所期のＧｌｃ→Ｍａｎへの立体反転を効率良く得ることは困難であった（Ｏｒｇ．Ｂｉｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２０１８，１６，４７２０－４７２７）。他方、上に挙げた還元剤を用いた場合、ＮａＢＨ４を用いた場合と比較して、Ｇｌｃ→Ｍａｎへの立体反転の選択性が大きく改善される（９３．６：６．４～９８．１：１．９）。
　式Ｗで示される化合物のうち、３つのＲ３がジｔｅｒｔ－ブチルメチルフェノキシドである化合物は、例えば、リチウムアルミニウムヒドリド（５０．０ｍｇ，１．３２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン懸濁液（２ｍＬ）に、０℃でジブチルヒドロキシトルエン（８８５．４１ｍｇ，４．０２ｍｍｏｌ）を添加した後、２５℃で攪拌することにより、得ることができる。式Ｗで示される化合物のうち、２つのＲ３がジｔｅｒｔ－ブチルメチルフェノキシドである化合物は、同様の手法において、１モル当量のリチウムアルミニウムヒドリドに対して、２モル当量のジブチルヒドロキシトルエンを用いることで得ることができる。
　上記のとおり、本工程の反応温度は、反応が進行する限り制限されないが、還元剤として、Ｌ－セレクトリド、ＬＳ－セレクトリド又はＬＤＢＢＡを用いる場合、反応温度は、好適には、－８０℃～－２０℃、より好適には、－８０℃～－３０℃、さらに好適には、－８０℃～－４０℃、特に好適には、－８０℃～－５０℃を挙げることができ、還元剤として、式Ｗで示される化合物を用いる場合、反応温度は、好適には、－２０℃～２０℃、より好適には、－１５℃～１５℃、特に好適には、－１０℃～１０℃を挙げることができる。従って、より取り扱い易い温度で反応が進行するという点において、本工程に用いられる還元剤として、特に好適なものは、式Ｗで示される化合物である。
　次いで、式Ａ－４で示される化合物から式Ａ－５で示される化合物を生成する。本発明の一態様において、当該工程は、式Ａ－４で示される化合物を、フルオラスアルコール及び水の混合溶媒中で、ＤＤＱ（２，３－ジクロロ－５，６－ジシアノ－ｐ－ベンゾキノン）と反応させて、上記式Ａ－４で示される化合物中の２－ナフチルメチル基を脱離させること（脱２－ナフチルメチル化反応）により、上記式Ａ－５で示されるオリゴ糖を生成することを含み、好適には、例えば、実施例３１又は５４に示した方法によって行うことができる。
　上記脱２－ナフチルメチル化反応について、本願発明者らは、フルオラスアルコール及び水中で、２－ナフチルメチル基が酸素原子を介して結合された基質に２，３－ジクロロ－５，６－ジシアノ－ｐ－ベンゾキノンを反応（作用）させることにより温和な条件下において、良好な撹拌性状状態で反応を実施でき、なおかつ高収率で脱２－ナフチルメチル化生成物が取得できることを見出したものである。以下、当該脱２－ナフチルメチル化反応の利点をさらにより詳細に説明する。上記の本発明の脱２－ナフチルメチル化反応では、２－ナフチルメチル基が酸素原子を介して結合された糖等の基質から、温和な条件下において、高収率で脱２－ナフチルメチル化生成物を取得することができる。副生成物である２，３－ジクロロ－５，６－ジシアノ－ｐ－ベンゾヒドロキノンによる撹拌性状の悪化や容器壁面への付着等も見られず、再現性よく反応を実施可能であり、かかる生成物の大量合成にも適している。また、ＨＦＩＰ－Ｈ２Ｏの異常凝固点降下により、反応温度を－３０℃まで下げても溶媒の凝固は確認されず、反応基質の反応性に応じて、広い温度範囲を適用可能である（融点ＨＦＩＰ：－３．３℃、Ｈ２Ｏ：０℃）。また、ベンジル基を複数有する式Ａ－５で示される化合物の脱ナフチルメチル化反応を行う際に、酸化剤としてＤＤＱ、溶媒としてＨＦＩＰ－Ｈ２Ｏを用いることで従来条件に比べて、優れた選択性で反応進行することを見出した。本変換反応に対しては、多くの報告例では、ジクロロメタン－水系の二層系反応条件が適用されるが、その場合、複数存在するベンジル基の脱ベンジル化が一定速度で進行し、収率は中程度に留まる。β－ピネンを添加剤として用いる改良条件の報告例はあるものの（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２０１７，８２，３９２６等を参照）、複数箇所のＢｎ基を有した化合物に対しては、収率は中程度に留まる（Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２０２１，６０，１９２８７．等を参照）。更に、特に、式Ａ－５で示される化合物のような４か所以上のベンジル基を持つような基質に対する選択性に関しては、十分な理解がなされていない。また、ジクロロメタン－水系においてはＤＤＱ及びＤＤＱ由来の副生物が攪拌性状の悪化を引き起こす課題があり、大量合成に適した反応条件とは言えない。一方で、本法のＤＤＱ／ＨＦＩＰ－Ｈ２Ｏ系では、４か所のベンジル基を有する式Ａ－５で示される化合物において、９５％以上の高い選択性を実現した。本法は、上述したようなＤＤＱ由来の攪拌性状の悪化は確認されない。更に、ＨＦＩＰ－Ｈ２Ｏの異常凝固点降下により、反応温度を－３０℃まで下げても溶媒の凝固は確認されず、反応基質の反応性に応じて、広い温度範囲を適用可能である（融点ＨＦＩＰ：－３．３℃、Ｈ２Ｏ：０℃）。
　なお、上記の脱２－ナフチルメチル化反応は、本工程Ｉ－１－１での反応に限られない。従って、本発明の一態様において、上記式Ａ－５で示されるオリゴ糖を製造する方法であって、式Ａ－４で示される化合物を、フルオラスアルコール及び水の混合溶媒中で、ＤＤＱ（２，３－ジクロロ－５，６－ジシアノ－ｐ－ベンゾキノン）と反応させて、式Ａ－５で示される化合物中の２－ナフチルメチル基を脱離させる工程を含む、方法も提供される。
　上記「フルオラスアルコール」は、反応が進行する限り制限されないが、好ましくは、ヘキサフルオロ２－プロパノール（ＨＦＩＰ）、２，２，２－トリフルオロエタノール（ＴＦＥ）、２，２，３，３，４，４，５，５－オクタフルオロ－１－ペンタノール、ノナフルオロ－ｔｅｒｔ－ブチルアルコール及びこれらの組み合わせからなる群から選択される。
　上記の脱２－ナフチルメチル化反応は、反応が進行する限り制限されないが、－３５℃～７０℃で行うことが好ましく、－３０℃～－１０℃で行われることがより好ましい。
＜式Ａ－６で示される化合物の精製＞
　本工程Ｉ－１－１では、以下の精製方法により、式Ａ－６で示される化合物を精製された形態で得ることができる。当該精製方法としては、上記式Ａ－３で示される化合物と上記式Ａ－５で示される化合物との反応を停止させた後、生成した上記式Ａ－６で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に上記式Ａ－６で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び疎水性担体を上記水溶性有機溶媒と水との混合溶液で洗浄することで、夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて上記式Ａ－６で示される化合物を疎水性担体から溶出させることにより、上記式Ａ－６で示される化合物を精製することを含む。当該精製方法より、オリゴ糖鎖の液相合成において、グリコシル化反応後に残留する試薬残骸や糖供与体及び糖受容体由来の不純物を、少量の疎水性担体を用いて洗浄操作を行うことで、簡便に除去でき、これら不純物による反応阻害及び副反応も抑制できるため、高品質のオリゴ糖を大量かつ効率的に製造することが可能となった。また、本願発明は従来開発されてきた手法と比較して、基質自身が有する疎水性を利用することにより、タグ脱着の工程数の削減及びオリゴ化時のタグの機能性の低下を防ぐことが可能となっており、より効率的にオリゴ糖を製造することが可能である。特に、本工程では、上記精製方法により、式Ａ－６で示される化合物を式Ａ－４で示される化合物由来の分解物から容易に分離精製することができる。
　なお、上記の式Ａ－６で示される化合物の精製は、本工程Ｉ－１－１での精製に限られない。従って、本発明の一態様において、上記式Ａ－６で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に上記式Ａ－６で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び該疎水性担体を上記水溶性有機溶媒と水との混合溶液で洗浄することで、夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて上記式Ａ－６で示される化合物を疎水性担体から溶出させることにより、上記式Ａ－６で示される化合物を精製することを含む、方法も提供される。さらに、上記の精製方法は、糖化合物以外の有機化合物の精製についても適用可能である。また、精製される有機化合物が糖化合物である場合、糖中の水酸基の一又は全部が保護された３～１５糖残基からなる糖鎖構造を有するオリゴ糖（保護オリゴ糖）を好適に精製することができ、この際の糖鎖の保護基としては、アルキルエーテル、ベンジルエーテル、シリルエーテル、エステル、炭酸エステルが含まれるが、これらに限定されない。
　上記「夾雑物」とは、保護オリゴ糖（本工程では、上記式Ａ－６で示される化合物）以外の化合物や試薬を指し、保護オリゴ糖の合成反応に用いる試薬やその残骸、保護オリゴ糖の伸長反応に用いる単糖若しくは２糖化合物等の保護オリゴ糖以外の糖、又は保護オリゴ糖の脱保護反応によって生じる副生成物を主に意味する。
　上記「疎水性担体」とは、糖化合物を含む特定の化合物に吸着する疎水性の吸着材料を指し、例えば、逆相分配クロマトグラフィー充填用樹脂が挙げられ、「逆相分配クロマトグラフィー充填用樹脂」は、ポリ（スチレン／ジビニルベンゼン）ポリマーゲル樹脂、ポリスチレン－ジビニルベンゼン樹脂、ポリヒドロキシメタクリレート樹脂、スチレンビニルベンゼン共重合体樹脂、ポリビニルアルコール樹脂、ポリスチレン樹脂、ポリメタクリレート樹脂、化学結合型シリカゲル樹脂、及びこれらの組み合わせからなる群から選択されるが、これらに限定されない。
　上記「化学結合型シリカゲル樹脂」は、（１）シリカゲルに、シランカップリング剤を反応させて得られる樹脂、（２）シリカゲルに、ジメチルオクタデシル、オクタデシル、トリメチルオクタデシル、ジメチルオクチル、オクチル、ブチル、エチル、メチル、フェニル、シアノプロピル、又はアミノプロピル基を化学結合して得られる樹脂、（３）シリカゲルに、ドコシル又はトリアコンチル基を化学結合して得られる樹脂、及び（４）前述の（１）～（３）の組み合わせからなる群から選択されるが、オクタデシル基結合シリカゲル樹脂（ＯＤＳ樹脂）が好適に使用されるが、これらに限定されない。
　上記「水溶性有機溶媒」は、特に限定されるものではないが、水溶性アルコール系溶媒（好適にはＣ１～Ｃ４）、水溶性ニトリル系溶媒（アセトニトリル等）、水溶性エーテル系溶媒（テトラヒドロフラン等）、水溶性ケトン系溶媒（アセトン等）、水溶性アミド系溶媒（ジメチルホルムアミド等）、又は水溶性スルホキシド系溶媒（ジメチルスルホキシド等）を使用することができ、アセトニトリルを好適に使用することができる。
　上記の疎水性担体から目的物の溶出工程で使用される「有機溶媒」は、特に限定されるものではないが、ニトリル系溶媒（アセトニトリル等）、エーテル系溶媒（テトラヒドロフラン等）、エステル系溶媒（酢酸エチル等）、ケトン系溶媒（アセトン等）、ハロゲン系溶媒（ジクロロメタン等）、又は芳香族系溶媒（トルエン等）、又は前述の溶媒系を少なくとも１種以上含む混合溶媒を使用することができ、アセトニトリル、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、トルエンを好適に使用することができる。
　上記の精製工程は、特に限定されるものではないが、０℃～５０℃の温度で行うことができる。
　上記Ｉ－１－１工程後、以下の工程Ｉ－１－２～Ｉ－１－３により、上記式Ａ－６で示される化合物から、上記式Ａ－８で示される化合物を製造することができるが、これらの製造工程に限定するものではない。
＜工程Ｉ－１－２＞
　工程Ｉ－１－２は、上記式Ａ－６で示される化合物から４－メトキシフェニル基を脱保護することにより、式Ａ－７：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000166
 で示される化合物を生成する工程である。
　本発明の一態様において、本工程は、上記式Ａ－６で示される化合物を、フルオラスアルコール及び水中で、λ３－ヨーダンと反応させて、４－メトキシフェニル基を脱保護することにより、上記式Ａ－７で示される化合物を生成する工程である。本工程は、好適には、例えば、実施例３３又は５６に示した方法によって行うことができる。
　上記「λ３－ヨーダン」とは、三価の超原子価ヨウ素化合物を意味する。一実施形態において、式Ｒ４a－Ｉ（ＯＲ４ｂ）２で表される化合物である（式中、Ｒ４aは、無置換又は置換フェニル基であり、Ｒ４ｂは、Ｈ、アセトキシ、トリフルオロアセトキシ、トシルオキシ、メタンスルホニルオキシ、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される）。上記式の定義の通り、Ｒ４aは「置換フェニル基」であってもよく、当該置換基としては、例えば、直鎖若しくは分枝状飽和又は不飽和炭化水素基、含酸素基（アルコキシ、エステル等）、含窒素基（シアノ、アジド等）、ハロゲン原子（例えば、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子）等が挙げられるが、より好ましくは、炭化水素基、含酸素置換基、ハロゲン原子である。これらの置換基が炭素を含む場合、例えば、炭素を１～５個有するもの、又は炭素を１～３個有するものを好適に使用できる。λ３－ヨーダンの具体例には、［ビス（トリフルオロアセトキシ）ヨード］ベンゼン（ＰＩＦＡ）、［ヒドロキシ（トシルオキシ）ヨード］ベンゼン（ＨＴＩＢ）、（ジアセトキシヨード）ベンゼン（ＰＩＤＡ）、［ビス（トリフルオロアセトキシ）ヨード］ペンタフルオロベンゼン、及び［ヒドロキシ（メタンスルホニルオキシ）ヨード］ベンゼンが挙げられるが、これに限定されるものではない。
　上記工程で使用される「フルオラスアルコール」とは、水酸基に結合している炭素を除くすべての炭素がフッ素を有するフッ素含有アルコール化合物を意味する。フッ素置換が許容される限り、フルオラスアルコールは、より多くのフッ素を有することが好ましい。フルオラスアルコールには、フルオラス脂肪族アルコールが含まれるが、これに限定されるものではない。フルオラス脂肪族アルコール中の炭化水素部分は、飽和又は不飽和であってもよく、直鎖状又は分枝状であってもよく、環式であってもよい。フルオラス脂肪族アルコールは、例えば、フルオラスＣ２～Ｃ８脂肪族アルコールであり、好ましくは、フルオラスＣ２～Ｃ５脂肪族アルコールであり、より好ましくは、フルオラスＣ２～Ｃ３脂肪族アルコールである。フルオラスアルコールの具体例としては、ヘキサフルオロ２－プロパノール（ＨＦＩＰ）、２，２，２－トリフルオロエタノール（ＴＦＥ）、２，２，３，３，４，４，５，５－オクタフルオロ－１－ペンタノール、ノナフルオロ－ｔｅｒｔ－ブチルアルコール、及びこれらの組み合わせからなる群が挙げられるが、これらに限定されるものではない。好適には、ヘキサフルオロ２－プロパノール（ＨＦＩＰ）が使用される。
　本工程は、上記フルオラスアルコールと「水」との共存下において行われる。水の量は、生成物の高収率を達成するための観点等から適宜設定することができるが、例えば、式Ａ－６で示される化合物に対してモル比で約１．０当量以上、約１．５当量以上、約２．０当量以上、又は約２．５当量以上であり得、また、式Ａ－６で示される化合物に対して体積比で約１０以下、約８以下、約５以下、又は約３以下であり得る。
　本工程では、フルオラスアルコール及び水中に、さらに「添加剤」を添加してもよい。添加剤は、好ましくは、リン酸二水素ナトリウム、リン酸二水素カリウム、リン酸水素二ナトリウム、トリフルオロ酢酸、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される。添加剤の量は、適宜設定することができ、例えば、式Ａ－６で示される化合物に対して約０．５～８当量、約１～６当量、又は約１．５～５当量であり得る。
＜工程Ｉ－１－３＞
　工程Ｉ－１－３は、上記式Ａ－７で示される化合物から上記式Ａ－８で示される化合物を生成する工程である。本工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例３４又は５７に示した方法によって行うことができる。
　本発明の一態様において、本工程は、上記式Ａ－７で示される化合物を、Ｎ－メチルイミダゾールの存在下で、２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルアセトイミドイルクロリド（ＴＦＰＣ）と反応させることにより、上記式Ａ－８で示される化合物を生成する工程である。Ｎ－メチルイミダゾールに代えて、ＤＢＵを用いることもできる。使用する塩基として上記Ｎ－メチルイミダゾール又はＤＢＵを用いることにより、例えば炭酸カリウムを用いた場合と比較して、ＴＦＰＣの当量を削減することが可能となり、高収率で目的物を得ることができる。ＴＦＰＣは高価な試薬であるから、当該工程の収率が向上することは、商業生産上、非常に有益である。
　本工程における溶媒としては、反応が進行する限り制限されないが、例えば、ジクロロメタン、トルエン、酢酸エチル、アセトニトリル、又はテトラヒドロフランを挙げることができ、好適には、ジクロロメタンを挙げることができる。
　本工程の反応温度は、反応が進行する限り制限されないが、好適には、－２０℃～４０℃、より好適には、－１０℃～３５℃、特に好適には、０℃～３０℃を挙げることができる。
　本工程は、好適には、脱水剤の存在下で行われる。本工程における脱水剤としては、反応が進行する限り制限されないが、例えば、モレキュラーシーブスを挙げることができ、好適には、粉末粒径１０μｍ以下のモレキュラーシーブス４Ａ粉末を挙げることができる。
　本工程において、生成された式Ａ－８で示される化合物は、反応で使用した塩基を除去する操作を行った後であれば、溶媒中に溶けているものを次工程にそのまま使用してもよく、又は、カラム精製等により単離・精製することもできる。カラムを用いた単離・精製としては、例えば、固定相としてシリカゲル、移動相としてジクロロメタン又はトルエン－酢酸エチル混合溶媒系を用いた単離・精製を挙げることができる。
＜工程Ｉ－２＞
　工程Ｉ－２は、上記式Ａ－８で示される化合物を、以下の式Ａ－９：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000167
 で示される化合物とβ－１，４－グリコシド結合させることにより、以下の式Ａ－１０：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000168
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）を生成する工程を含む、以下の式Ａ－１１：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000169
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）を生成する工程である。工程Ｉ－２は、以下の工程Ｉ－２－１～工程Ｉ－２－２を含む。
＜工程Ｉ－２－１＞
　工程Ｉ－２－１は、式Ａ－８で示される化合物を、式Ａ－９で示される化合物とβ－１，４－グリコシド結合させることにより、式Ａ－１０で示される化合物を生成する工程である。式Ａ－９で示される化合物は、既知の方法によって製造することができ、又は、市販品を使用することができる。式Ａ’－９（式Ａ－９で示される化合物において、式中のＲ１が４－メトキシフェニルである化合物）で示される化合物の市販品としては、例えば、東京化成工業株式会社製の４－メトキシフェニル３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－フタルイミド－β－Ｄ－グルコピラノシドを挙げることができる。あるいは、式Ａ’’－９で示される化合物は、後述のようにして製造した式Ａ－１２で示される化合物に対して例えば実施例５９に示される処理を施して、イソプロピル　４－Ｏ－アセチルー３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｆ’’－１で示される化合物）を得て、さらに、式Ｆ’’－１で示される化合物に対して例えば実施例６０に示される処理を施して、式Ａ’’－９で示される化合物を得ることができる。式Ａ－１０で示される化合物を生成する工程である本工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例３５又は６１に示した方法によって行うことができる。
＜式Ａ－１０で示される化合物の精製＞
　本工程Ｉ－２－１では、以下の精製方法により、式Ａ－１０で示される化合物を精製された形態で得ることができる。当該精製方法としては、上記式Ａ－８で示される化合物と上記式Ａ－９で示される化合物との反応を停止させた後、生成した上記式Ａ－１０で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に上記式Ａ－１０で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び疎水性担体を上記水溶性有機溶媒と水との混合溶液で洗浄することで、夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて上記式Ａ－１０で示される化合物を疎水性担体から溶出させることにより、上記式Ａ－１０で示される化合物を精製することを含む。上記式Ａ－６で示される化合物の精製方法で述べたのと同様、当該精製方法では、少量の疎水性担体を用いることで、オリゴ糖鎖の液相合成において、高品質のオリゴ糖を大量かつ効率的に製造することが可能となった。特に、単糖である式Ａ－９で示される化合物及び５糖である式Ａ－１０で示される化合物は順相シリカゲルカラムクロマトグラフィーにおいて極性が極めて近く、例えば典型的なカラム溶媒系であるヘキサン－酢酸エチル条件では同一のＲｆ値であり分離は困難であったが、本発明の精製方法を利用することにより、極性の極めて近い単糖及び５糖を容易に分離することができることが可能となった。
　なお、上記の式Ａ－１０で示される化合物の精製は、本工程Ｉ－２－１での精製に限られない。従って、本発明の一態様において、上記式Ａ－１０で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に上記式Ａ－１０で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び該疎水性担体を上記水溶性有機溶媒と水との混合溶液で洗浄することで、夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて上記式Ａ－１０で示される化合物を疎水性担体から溶出させることにより、上記式Ａ－１０で示される化合物を精製することを含む、方法も提供される。
　上記「夾雑物」とは、保護オリゴ糖（本工程では、式Ａ－１０で示される化合物）以外の化合物や試薬を指し、保護オリゴ糖の合成反応に用いる試薬やその残骸、保護オリゴ糖の伸長反応に用いる単糖若しくは２糖化合物等の保護オリゴ糖以外の糖、又は保護オリゴ糖の脱保護反応によって生じる副生成物を主に意味する。なお、本工程で使用される「疎水性担体」（逆相分配クロマトグラフィー充填用樹脂等）、「水溶性有機溶媒」、「有機溶媒」、及び精製の実施温度は、上記式Ａ－６で示される化合物の精製方法で記載したものと同様である。
＜工程Ｉ－２－２＞
　工程Ｉ－２－２は、式Ａ－１０で示される化合物から式Ａ－１１で示される化合物を生成する工程である。
　本発明の一態様において、本工程Ｉ－２－２は、溶媒中、パーフルオロカルボン酸のアルキルエステルの存在下で、式Ａ－１０で示される化合物を強塩基と反応させてアセチル基を脱離させること（脱アセチル化反応）により、式Ａ－１１で示される化合物を生成させる工程であり、好適には、例えば、実施例３６又は６２に示した方法によって行うことができる。当該脱アセチル化反応は、基質が異なることを除き、工程Ｘ－７で記載する脱アセチル化反応の場合と同様に行うことができ、パーフルオロカルボン酸のアルキルエステルの存在下で、強塩基と反応させるという手法を用いることにより、フタルイミド基の開環を抑制しながら、脱アセチル化反応を行うことが可能となる。
　なお、上記の脱アセチル化反応は、本工程Ｉ－２－２での使用に限定されるものではない。従って、本発明の一態様において、上記式Ａ－１１で示される化合物を製造する方法であって、上記式Ａ－１０で示される化合物を、パーフルオロカルボン酸のアルキルエステルの存在下で、強塩基と反応させる工程を含む、方法も提供される。
　当該工程で使用されるパーフルオロカルボン酸のアルキルエステル、強塩基、溶媒、及び当該工程の反応温度は、上記工程Ｘ－７で記載した通りである。
＜工程Ｉ－３＞
　工程Ｉ－３は、上記式Ａ－１１で示される化合物を、以下の式Ａ－１２：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000170
 で示される化合物とβ－１，２－グリコシド結合させることにより、以下の式Ａ－１３：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000171
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）を生成し、次いで、上記式Ａ－１３で示される化合物上のアミノ基の保護基であるフタロイル基並びに水酸基上のアセチル基を除去して、以下の式Ａ－１４：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000172
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）を生成した後、該式Ａ－１４で示される化合物中のアミノ基をアリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基、及びフタロイル（Ｐｈｔｈ）基から選択される保護基によって保護して、以下の式Ａ－１５：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000173
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｒ５は、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、若しくは２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基であり、かつ、Ｒ６は、水素であるか、又はＲ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）を生成するか、又は上記式Ａ－１３で示される化合物）上のアセチル（Ａｃ）基を除去することによって、上記式Ａ－１５で示される化合物（式中、Ｒ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）を生成する工程を含む。本発明の一態様において、工程Ｉ－３は、以下の工程Ｉ－３－１～工程Ｉ－３－３を含む。
＜工程Ｉ－３－１＞
　工程Ｉ－３－１は、上記式Ａ－１１で示される化合物を上記式Ａ－１２で示される化合物とβ－１，２－グリコシド結合させることにより、上記式Ａ－１３で示される化合物を生成する工程である。上記のグリコシド結合工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例３７又は６３に示した方法によって行うことができる。また、式Ａ－１２で示される化合物は、以下のようにして製造することができる。さらに、式Ａ－１３で示される化合物は後述のようにして精製されてもよい。
＜式Ａ－１２で示される化合物の製造＞
　上記式Ａ－１２で示される化合物は、以下の小工程Ｚ－１～Ｚ－３のようにして製造することができる。
＜小工程Ｚ－１＞
　まず、上記工程Ｉ－２でも使用した式Ａ－９：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000174
 で示される化合物上の水酸基をアセチル基にて保護することにより、以下の式Ｆ－１：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000175
 で示される化合物を生成する。本工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例１３に示した方法によって行うことができ、式Ａ－９で示される化合物の酢酸エチル溶液に、トリエチルアミン、ジメチルアミノピリジン及び無水酢酸を添加することによって行うことができるが、当該方法に限定されない。
＜小工程Ｚ－２＞
　次いで、式Ｆ－１で示される化合物から４－メトキシフェニル基を脱離させることにより、以下の式Ｆ－２：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000176
 で示される化合物を生成する。
　本発明の一態様において、小工程Ｚ－２は、式Ｆ－１で示される化合物を、フルオラスアルコール及び水中で、λ３－ヨーダンと反応させと反応させて、４－メトキシフェニル基を脱離させることにより、式Ｆ－２で示される化合物を製造する工程であり、好適には、例えば、実施例１４に示した方法によって行うことができる。当該工程は、上記工程Ｉ－１－２に準じて行うことができ、当該工程において使用されるフルオラスアルコール及びλ３－ヨーダンは、上記工程Ｉ－１－２で使用されるものと同様のものを使用することができる。
＜小工程Ｚ－３＞
　次いで、式Ｆ－２で示される化合物を、２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルアセトイミドイルクロリド（ＴＦＰＣ）と反応させることにより、式Ａ－１２：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000177
 で示される化合物を製造する工程である。本工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができる。
　本発明の一態様において、小工程Ｚ－３は、Ｎ－メチルイミダゾールの存在下で、２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルアセトイミドイルクロリド（ＴＦＰＣ）と反応させることにより、上記式Ａ－１２で示される化合物を生成する工程であり、好適には、例えば、実施例１５又は５８に示した方法によって行うことができる。工程Ｉ－１－３での同様の反応に関して述べたように、使用する塩基として上記Ｎ－メチルイミダゾールを用いることにより、例えば炭酸カリウムを用いた場合と比較して、ＴＦＰＣの当量を削減することが可能となり、高収率で目的物を得ることができる。なお、使用される溶媒及び反応温度、また、好適には脱水剤の存在下で行われること、カラム精製等により単離・精製してもよいことも上記工程Ｉ－１－３のものと同様である。
＜式Ａ－１３で示される化合物の精製＞
　上記工程Ｉ－３－１では、以下の精製方法により、式Ａ－１３で示される化合物を精製された形態で得ることができる。当該精製方法としては、上記式Ａ－１１で示される化合物と上記式Ａ－１２で示される化合物との反応を停止させた後、生成した上記式Ａ－１３で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に上記式Ａ－１３で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び該疎水性担体を上記水溶性有機溶媒と水との混合溶液で洗浄することで、夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて上記式Ａ－１３で示される化合物を疎水性担体から溶出させることにより、上記式Ａ－１３で示される化合物を精製することを含む。上記式Ａ－６で示される化合物の精製方法で述べたのと同様、上記精製方法より、少量の疎水性担体を用いることで、オリゴ糖鎖の液相合成において、高品質のオリゴ糖を大量かつ効率的に製造することが可能となった。
　なお、上記の式Ａ－１３で示される化合物の精製は、本工程Ｉ－３－１での精製に限られない。従って、本発明の一態様において、上記式Ａ－１３で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に上記式Ａ－１３で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び該疎水性担体を上記溶性有機溶媒と水との混合溶液で洗浄することで、夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて上記式Ａ－１３で示される化合物を疎水性担体から溶出させることにより、上記式Ａ－１３で示される化合物を精製することを含む、方法も提供される。
　上記「夾雑物」とは、保護オリゴ糖（本工程では、式Ａ－１３で示される化合物）以外の化合物や試薬を指し、保護オリゴ糖の合成反応に用いる試薬やその残骸、保護オリゴ糖の伸長反応に用いる単糖若しくは２糖化合物等の保護オリゴ糖以外の糖、又は保護オリゴ糖の脱保護反応によって生じる副生成物を主に意味する。
　上記工程で使用される「疎水性担体」（逆相分配クロマトグラフィー充填用樹脂等）、「水溶性有機溶媒」、「有機溶媒」、及び精製の実施温度は、上記式Ａ－５で示される化合物の精製方法で記載したものと同様である。
＜工程Ｉ－３－２＞
　工程Ｉ－３－２は、上記式Ａ－１３で示される化合物上のアミノ基の保護基であるフタロイル基及び水酸基上のアセチル基を除去して、式Ａ－１４で示される化合物を生成する工程である。当該工程は、好適には、例えば、実施例３８又は６４に示した方法によって行うことができ、例えば、式Ａ－１３で示される化合物を含む溶液に、ｎ－ブタノール及びエチレンジアミンを添加することにより行うことができるが、これらに限定されず、また、上記ｎ－ブタノール及びエチレンジアミンを添加後に、酸（例えば、フマル酸）を添加して攪拌後、種晶を接種してから、式Ａ－１４で示される化合物の酸塩（例えば、フマル酸塩）の結晶を取得してもよい（例えば、実施例６４を参照のこと）。当該酸塩を単離することにより、式Ａ－１４で示される化合物の類似体（異性体など）を濾過で除去し、高純度化が可能となる。なお、添加する当該「酸」としては、フマル酸を好適に用いることができるが、これに限定するものではない。
＜式Ａ－１４で示される化合物の精製＞
　本工程Ｉ－３－２では、以下の精製方法により、式Ａ－１４で示される化合物を精製された形態で得ることができる。当該精製方法としては、上記のようにして生成した式Ａ－１４で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に上記式Ａ－１４で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び疎水性担体を上記水溶性有機溶媒と水との混合溶液で洗浄することで、夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて上記式Ａ－１４で示される化合物を疎水性担体から溶出させることにより、上記式Ａ－１４で示される化合物を精製することを含む。上記工程Ｉ－１－１における式Ａ－６で示される化合物の精製方法で述べたのと同様、当該精製方法では、少量の疎水性担体を用いることで、オリゴ糖鎖の液相合成において、高品質のオリゴ糖を大量かつ効率的に製造することが可能となった。
　なお、上記の式Ａ－１４で示される化合物の精製は、本工程での精製に限られない。従って、本発明の一態様において、上記式Ａ－１４で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に上記式Ａ－１４で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び該疎水性担体を上記水溶性有機溶媒と水との混合溶液で洗浄することで、夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて上記式Ａ－１４で示される化合物を疎水性担体から溶出させることにより、上記式Ａ－１４で示される化合物を精製することを含む、方法も提供される。
　上記「夾雑物」とは、保護オリゴ糖（本工程では、式Ａ－１４で示される化合物）以外の化合物や試薬を指し、保護オリゴ糖の合成反応に用いる試薬やその残骸、保護オリゴ糖の伸長反応に用いる単糖若しくは２糖化合物等の保護オリゴ糖以外の糖、又は保護オリゴ糖の脱保護反応によって生じる副生成物を主に意味する。なお、本工程で使用される「疎水性担体」（逆相分配クロマトグラフィー充填用樹脂等）、「水溶性有機溶媒」、「有機溶媒」、及び精製の実施温度は、上記工程Ｉ－１－１における式Ａ－６で示される化合物の精製方法で記載したものと同様である。
＜工程Ｉ－３－３＞
　工程Ｉ－３－３は、上記式Ａ－１４で示される化合物中のアミノ基をアリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基、及びフタロイル（Ｐｈｔｈ）基から選択される保護基によって保護して、上記式Ａ－１５で示される化合物（式中、Ｒ５は、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、若しくは２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基であり、かつ、Ｒ６は、水素原子であるか、又はＲ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）を生成する工程である。上記のようなアミノ基の保護基を導入する目的は、目的化合物（式Ａ－２２で示される化合物）の製造のためには、当該アミノ基の保護基はアセチル基とする方が直線的なルートとなり、より効率的ではあるが、次工程Ｉ－４における式Ａ－１５で示される化合物と式Ａ－１６で示される化合物とのグリコシル化反応において、アセチル基で保護されたアミノ基（－ＮＨＡｃ基）が反応基質内に存在する場合、ルイス酸との相互作用により、目的のグリコシル化反応の著しい反応性の低下がみられ、過剰量の糖供与体が反応の完結に必要となるためである。したがって、上記グリコシル化反応時はグルコサミンの窒素上の一時的な保護基としてアリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基、及びフタロイル（Ｐｈｔｈ）基から選択される保護基によって保護して、グリコシル化反応後に脱保護し、－ＮＨＡｃ基とすることにより、上記の不利益を回避することができる。また、上記保護基としては、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基を使用することが最も好ましい。アリールオキシカルボニルにおける「アリール（Ａｒ）基」は、芳香族炭化水素において芳香環上の１個の水素原子を除去することにより生成される基を意味し、限定するものではないが、フェニル基、２－ナフチル基、１－ナフチル基、２－ピリジル基、３－ピリジル基、ニトロフェニル基、クロロフェニル基、フルオロフェニル基、ブロモフェニル基、ヨードフェニル基、メトキシフェニル基、及びＣ１～Ｃ４アルキルフェニル基が挙げられ、好ましくはフェニル基である。アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基は、他の保護基よりもグリコシル化反応が良好に進行し、更にその後の脱保護反応では一般的な加水分解条件下、室温、１時間以内等の好適な条件での脱保護が可能であることが見出されている。
　上記工程は、好適には、例えば、実施例３９又は６５に示した方法によって行うことができ、例えば、テトラヒドロフラン中の式Ａ－１４で示される化合物の溶液に、テトラヒドロフラン及び炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、リン酸水素二ナトリウム、又はリン酸水素二カリウム（好適には、炭酸水素ナトリウムが使用される）を水に溶解した水溶液を添加することによって行うことができるが、これらに限定されない。
　上記工程Ｉ－３－２及び工程Ｉ－３－３に代えて、上記式Ａ－１３で示される化合物上のアセチル（Ａｃ）基を選択的に除去することによって、上記式Ａ－１５で示される化合物（式中、Ｒ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）を生成してもよい。当該アセチル基の選択的な除去は、トリフルオロ酢酸メチル条件下で行うことができるが、これに限定されない。本工程は、工程Ｉ－３－２及び工程Ｉ－３－３において、上記式Ａ－１４で示される化合物中のアミノ基の保護基としてフタロイル（Ｐｈｔｈ）基を選択した場合と同じ結果をもたらす。
＜工程Ｉ－４＞
　工程Ｉ－４は、上記式Ａ－１５で示される化合物を、以下の式Ａ－１６：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000178
 で示される化合物とβ－１，４－グリコシド結合させることにより、以下の式Ａ－１７：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000179
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｒ５は、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、若しくは２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基であり、Ｒ６は、水素原子であるか、又はＲ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）を生成し、次いで、式Ａ－１７で示される化合物中のアミノ基の保護基を除去して、以下の式Ａ－１８：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000180
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｍ＋は、ナトリウムイオン、リチウムイオン、カリウムイオン、又はプロトン化されたトリエチルアミンカチオンである）を生成する工程を含む、以下の式Ａ－２０：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000181
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｍ＋は、ナトリウムイオン、リチウムイオン、カリウムイオン、又はプロトン化されたトリエチルアミンカチオンである）を生成する工程である。本発明の一態様において、工程Ｉ－４は、以下の工程Ｉ－４－１～工程Ｉ－４－４を含む。
＜工程Ｉ－４－１＞
　本工程は、上記式Ａ－１５で示される化合物を、上記式Ａ－１６で示される化合物とβ－１，４－グリコシド結合させることにより、式Ａ－１７で示される化合物を生成する工程である。上記のグリコシド結合工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例４０又は６６に示した方法によって行うことができる。
＜式Ａ－１６で示される化合物の製造＞
　本発明の一態様において、上記式Ａ－１６で示される化合物は、以下の小工程Ｖ－１～Ｖ－１１のようにして製造することができる。当該工程は、２分子の単糖をα－２，６－グリコシド結合させて二糖ブロックを合成する後述の小工程Ｖ－７を必須の小工程として含むものであるが、それ以外については、単糖又はオリゴ糖製造における常法を用いて、又はこのような常法を応用することによって、実施することができる。
　本発明の一態様において、工程Ｖは、以下に示す小工程を含む。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000182
＜小工程Ｖ－１＞
　小工程Ｖ－１は、以下の式Ｇ－１：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000183
 で示される化合物上の水酸基をベンゾイル基で保護することにより、以下の式Ｇ－２：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000184
 で示される化合物を製造する工程である。本工程の出発物質である式Ｇ－１で示される化合物は、ＣＡＳ番号１００７５９－１０－２として特定される化合物であり、既知の方法によって製造することができ、例えば、実施例１６及び１７に示した方法によって製造することができる。本工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例１８に示した方法によって行うことができる。
＜小工程Ｖ－２＞
　小工程Ｖ－２は、式Ｇ－２で示される化合物より、ベンジリデン保護基を脱離させることにより、以下の式Ｇ－３：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000185
 で示される化合物を製造する工程である。本工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例１９に示した方法によって行うことができる。
　本発明の一態様において、本工程は、生成した式Ｇ－３で示される化合物が溶解している溶媒を、シリカゲルと接触させることにより、式Ｇ－３で示される化合物を固相抽出する工程を含む。未反応の式Ｇ－２で示される化合物や、脱離したベンズアルデヒドは、シリカゲルに吸着しないことから、当該工程により、式Ｇ－３で示される化合物を効率よく精製することできる。
　式Ｇ－３で示される化合物を溶解させるための溶媒としては、例えば、トルエン、ヘプタン、ジクロロメタン、クロロホルム、又はこれらの組み合わせを挙げることができ、好適には、トルエン、ジクロロメタン、クロロホルム、又はこれらの組み合わせを挙げることができ、特に好適には、トルエンを挙げることができるがこれらに限定されない。
　本工程におけるシリカゲルとしては、例えば、原料に対して、２～５倍量のシリカゲルを挙げることができ、好適には、原料に対して、２～４倍量のシリカゲルを挙げることができ、より好適には、原料に対して、約３倍量のシリカゲルを挙げることができる。
　本工程において、シリカゲルに吸着した式Ｇ－３で示される化合物を溶離するための溶媒としては、シリカゲルを溶解せず、目的物を溶出できる溶媒であれば特に制限されないが、例えば、シクロペンチルメチルエーテル、酢酸エチル、又はｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテルを挙げることができる。
＜小工程Ｖ－３＞
　小工程Ｖ－３は、以下の式Ｇ－４：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000186
 で示される化合物のカルボン酸をエステル化し、次いで、水を注加することにより、以下の式Ｇ－５：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000187
 で示される化合物を製造する工程である。本工程の出発物質である式Ｇ－４で示される化合物は、既知の方法によって製造することができ、又は、市販品を使用することができる。式Ｇ－４で示される化合物の市販品としては、例えば、東京化成工業製のＮ－アセチルノイラミン酸を挙げることができる。本工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例２０に示した方法によって行うことができる。
＜小工程Ｖ－４＞
　小工程Ｖ－４は、式Ｇ－５で示される化合物において、１位の炭素に結合している水酸基以外の水酸基を選択的にアセチル基で保護することにより、以下の式Ｇ－６：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000188
 で示される化合物を製造する工程である。本工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例２１に示した方法によって行うことができる。
＜小工程Ｖ－５＞
　小工程Ｖ－５は、式Ｇ－６で示される化合物を、２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルアセトイミドイルクロリド（ＴＦＰＣ）と反応させることにより、以下の式Ｇ－７：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000189
 で示される化合物を製造する工程である。本工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例２２に示した方法によって行うことができる。
　本発明の一態様において、本工程は、式Ｇ－６で示される化合物を、Ｎ－メチルイミダゾールの存在下でＴＦＰＣと反応させることにより、式Ｇ－７で示される化合物を製造する工程である。本工程における塩基として、Ｋ２ＣＯ３を用いた場合と比較して、Ｎ－メチルイミダゾールを用いた場合、ＴＦＰＣの当量を削減することが可能となり、その場合においても高収率で目的物を得ることができる。ＴＦＰＣは高価な試薬であるから、当該工程の収率が向上することは、商業生産上、非常に有益である。
　本工程における溶媒としては、反応が進行する限り制限されないが、例えば、ジクロロメタン、トルエン、酢酸エチル、アセトニトリル、又はテトラヒドロフランを挙げることができ、好適には、ジクロロメタンを挙げることができる。
　本工程の反応温度は、反応が進行する限り制限されないが、好適には、０℃～４０℃、より好適には、０℃～３５℃、特に好適には、０℃～３０℃を挙げることができる。
　本工程は、好適には、脱水剤の存在下で行われる。本工程における脱水剤としては、反応が進行する限り制限されないが、例えば、モレキュラーシーブスを挙げることができ、好適には、粉末粒径１０μｍ以下のモレキュラーシーブス４Ａ粉末を挙げることができる。
＜小工程Ｖ－６＞
　小工程Ｖ－６は、式Ｇ－７で示される化合物のアセトアミド基中の窒素原子を、ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル基で保護することにより、以下の式Ｇ－８：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000190
 で示される化合物を製造する工程である。本工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例２３に示した方法によって行うことができる。
　本工程において、生成された式Ｇ－８で示される化合物は、溶媒中に溶けているものを次工程にそのまま使用してもよく、又は、再結晶化により単離・精製することもできる。式Ｇ－８で示される化合物は、結晶化により単離・精製できる点が大きな利点であり、結晶化により、ＨＰＬＣ純度で９９％以上の式Ｇ－８で示される化合物を取得することができ、不純物を含まないため、次工程のグリコシル化反応を安定的に実施することが可能となる。再結晶化による単離・精製は、例えば、シクロペンチルメチルエーテルの溶液にヘプタンを加えて結晶化する方法により行うことができる。 
＜小工程Ｖ－７＞
　小工程Ｖ－７は、式Ｇ－８で示される化合物と、式Ｇ－３で示される化合物を、α－２，６－グリコシド結合させることにより、以下の式Ｇ－９：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000191
 で示される化合物を製造する工程である。Ｎ－アセチルノイラミン酸誘導体と、ガラクトース誘導体を、α－２，６－グリコシド結合選択的に結合させることは困難であり、例えば、式Ｇ－７で示される化合物と、式Ｇ－３で示される化合物を反応させることにより二糖を合成する方法が報告されているが（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２０１６，８１，１０６００－１０６１６）、反応の再現が容易ではなく、所期の収率、選択性を得ることができなかった。また、この反応では、スケールが上がるほど選択性が低下し、反応温度許容幅も狭く、反応熱の影響が大きいという課題もあった。当該反応の原料化合物の１つである式Ｇ－７で示される化合物は非常に高価であることから、この反応における低い再現性、収率、選択性は、特に、スケールアップが要請される商業生産上は、大きな問題であった。他方、原料化合物として、式Ｇ－７で示される化合物に代えて、ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル基を付加した式Ｇ－８で示される化合物を使用すると、再現性良く、α－２，６－グリコシド結合への高い選択性（α：β＝９３：７）を達成でき、収率も向上する。加えて、温度許容幅も広くなり、また、スケールアップした際も高い再現性、収率、選択性を達成できる。これは、商業生産上、極めて有益な効果をもたらすものである。
　本工程は、好適には、ルイス酸の存在下で行うことができる。本工程におけるルイス酸としては、反応が進行する限り制限されないが、例えば、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル、トリフルオロメタンスルホン酸トリイソプロピルシリル、トリフルオロメタンスルホン酸ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリルを挙げることができ、好適には、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリルを挙げることができる。
　本工程における溶媒としては、反応が進行する限り制限されないが、例えば、シクロペンチルメチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテル、ジエチルエーテル、ジブチルエーテル、ジプロピルエーテル、１，４－ジオキサン、ジクロロメタン、１，２－ジクロロエタン、トルエン、クロルベンゼン、トリフルオロメチルベンゼン、プロピオニトリル又はアセトニトリルを挙げることができ、好適には、シクロペンチルメチルエーテルを挙げることができる。
　本工程の反応温度は、反応が進行する限り制限されないが、例えば、－７８℃～０℃、好適には、－７８℃～－２０℃、より好適には、－７８℃～－３０℃、特に好適には、－７８℃～－４０℃を挙げることができる。
　本工程においては、１当量の式Ｇ－８で示される化合物に対して、１～３当量の式Ｇ－３で示される化合物を投入することが好適であり、１当量の式Ｇ－８で示される化合物に対して、１．４～２当量の式Ｇ－３で示される化合物を投入することがより好適である。
　本工程は、反応が進行する限り制限されないが、例えば、式Ｇ－８で示される化合物と式Ｇ－３で示される化合物の混合溶液（好適には、シクロペンチルメチルエーテル混合溶液）を、ルイス酸を含む溶液（好適には、シクロペンチルメチルエーテル溶液）に長時間滴下する、又は、式Ｇ－８で示される化合物の溶液（好適には、シクロペンチルメチルエーテル溶液）を、ルイス酸と式Ｇ－３で示される化合物を含む溶液（好適には、シクロペンチルメチルエーテル溶液）に長時間滴下することによって行うことができ、好適には、式Ｇ－８で示される化合物の溶液（好適には、シクロペンチルメチルエーテル溶液）を、ルイス酸と式Ｇ－３で示される化合物を含む溶液（好適には、シクロペンチルメチルエーテル溶液）に長時間滴下することによって行うことができる。滴下時間は、反応が進行する限り制限されないが、例えば、３０分間～５時間、好適には、１時間～４時間、より好適には２時間～３．５時間、特に好適には、約３時間である。
　本発明の一態様において、本工程は、式Ｇ－９で示される化合物が溶解している溶媒を、シリカゲルと接触させることにより、式Ｇ－９で示される化合物を固相抽出する工程を含む。グリコシル化反応で副生するＮ－フェニルトリフルオロアセトアミドや、トルエン溶媒中、シリカゲルに吸着されないその他の微量不純物は、シリカゲルに吸着しないことから、当該工程により、式Ｇ－９で示される化合物を効率よく精製することできる。
　式Ｇ－９で示される化合物を溶解させるための溶媒としては、例えば、トルエン、ヘプタン、ジクロロメタン、クロロホルム、又はこれらの組み合わせを挙げることができ、好適には、トルエン、ジクロロメタン、クロロホルム、又はこれらの組み合わせを挙げることができ、特に好適には、トルエンを挙げることができるがこれらに限定されない。
　本工程におけるシリカゲルとしては、例えば、原料に対して、２～５倍量のシリカゲルを挙げることができ、好適には、原料に対して、２～４倍量のシリカゲルを挙げることができ、より好適には、原料に対して、約３．５倍量のシリカゲルを挙げることができる。
　本工程において、シリカゲルに吸着した式Ｇ－９で示される化合物を溶離するための溶媒としては、シリカゲルを溶解せず、目的物を溶出できる溶媒であれば特に制限されないが、例えば、酢酸エチル、シクロペンチルメチルエーテル、又はｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテルを挙げることができ、好適には、酢酸エチルを挙げることができる。
　本工程は、例えば、実施例２４に示した方法によって行うことができる。
＜小工程Ｖ－８＞
　小工程Ｖ－８は、式Ｇ－９で示される化合物より、ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル基を脱離させることにより、以下の式Ｇ－１０：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000192
 で示される化合物を製造する工程である。本工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例２５に示した方法によって行うことができる。
＜小工程Ｖ－９＞
　小工程Ｖ－９は、式Ｇ－１０で示される化合物の水酸基、並びにアセトアミド基中の窒素原子をアセチル基でさらに保護することにより、以下の式Ｇ－１１：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000193
 で示される化合物を製造する工程である。本工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例２６に示した方法によって行うことができる。
　本発明の一態様において、本工程は、式Ｇ－１１で示される化合物が溶解している溶媒を、シリカゲルと接触させることにより、式Ｇ－１１で示される化合物を固相抽出する工程を含む。上流のグリコシル化反応で過剰に用いた式Ｇ―３で示される化合物がアセチル化されて生成した式Ｇ―３で示される化合物のジアセチル体等の副生成物は、シリカゲルに吸着しないことから、当該工程により、式Ｇ－１１で示される化合物を効率よく精製することできる。
　式Ｇ－１１で示される化合物を溶解させるための溶媒としては、例えば、トルエン、ヘプタン、ジクロロメタン、クロロホルム、又はこれらの組み合わせを挙げることができ、好適には、トルエン、ジクロロメタン、クロロホルム、又はこれらの組み合わせを挙げることができ、特に好適には、トルエンを挙げることができるがこれらに限定されない。
　本工程におけるシリカゲルとしては、例えば、原料に対して、２～５倍量のシリカゲルを挙げることができ、好適には、原料に対して、２～４倍量のシリカゲルを挙げることができ、より好適には、原料に対して、約３．５倍量のシリカゲルを挙げることができる。
　本工程において、シリカゲルに吸着した式Ｇ－１１で示される化合物を溶離するための溶媒としては、シリカゲルを溶解せず、目的物を溶出できる溶媒であれば特に制限されないが、例えば、酢酸エチル、シクロペンチルメチルエーテル、又はｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテルを挙げることができ、好適には、酢酸エチルを挙げることができる。
＜小工程Ｖ－１０＞
　小工程Ｖ－１０は、式Ｇ－１１で示される化合物において、Ｄ－ガラクトピラノシドの１位の炭素に結合しているアリル基を脱離させることにより、以下の式Ｇ－１２：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000194
 で示される化合物を製造する工程である。本工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例２７－１に示した方法によって行うことができる。あるいは、例えば、実施例２７－２に例示されるように、式Ｇ－１２で示される化合物は、式Ｇ－１１で示される化合物及びカルボニルクロロヒドリドトリス（トリフェニルホスフィン）ルテニウム（ＩＩ）を含む溶液を攪拌し、次いで、該溶液に水及び１，３－ジブロモ－５，５－ジメチルヒダントイン、ヨウ素、又はＮ－ブロモスクシンイミドを添加して攪拌することにより、式Ｇ－１１で示される化合物中のＤ－ガラクトピラノシドの１位の炭素に酸素を介して結合しているアリル基を脱離させることにより、製造することもできる。本工程で使用される溶媒としては、テトラヒドロフラン、テトラヒドロピラン、シクロペンチルメチルエーテル、トルエン、２－メチルテトラヒドロフラン、１，２－ジメトキシエタン、ｔ－ブチルメチルエーテル等を使用してもよく、異性化温度は、例えば４０～６５℃で行うことができる。
＜小工程Ｖ－１１＞
　小工程Ｖ－１１は、式Ｇ－１２で示される化合物を、２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルアセトイミドイルクロリド（ＴＦＰＣ）と反応させることにより、上記式Ａ－１６で示される化合物を製造する工程である。本工程は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例２８に示した方法によって行うことができる。
＜式Ａ－１７で示される化合物の精製＞
　本工程Ｉ－４－１では、以下の精製方法により、式Ａ－１７で示される化合物を精製された形態で得ることができる。当該精製方法としては、上記式Ａ－１５で示される化合物と上記式Ａ－１６で示される化合物との反応を停止させた後、生成した上記式Ａ－１７で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に上記式Ａ－１７で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び疎水性担体を上記水溶性有機溶媒と水との混合溶液で洗浄することで、夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて上記式Ａ－１７で示される化合物を疎水性担体から溶出させることにより、上記式Ａ－１７で示される化合物を精製することを含む。上記工程Ｉ－１－１における式Ａ－６で示される化合物の精製方法で述べたのと同様、当該精製方法では、少量の疎水性担体を用いることで、オリゴ糖鎖の液相合成において、高品質のオリゴ糖を大量かつ効率的に製造することが可能となった。
　なお、上記の式Ａ－１７で示される化合物の精製は、本工程での精製に限られない。従って、本発明の一態様において、上記式Ａ－１７で示される化合物及び夾雑物を含む水溶性有機溶媒に、疎水性担体及び水を添加して、該疎水性担体中に上記式Ａ－１７で示される化合物を吸着させ、次いで、ろ過及び該疎水性担体を上記水溶性有機溶媒と水との混合溶液で洗浄することで、夾雑物の除去を行い、次いで、有機溶媒を用いて上記式Ａ－１７で示される化合物を疎水性担体から溶出させることにより、上記式Ａ－１７で示される化合物を精製することを含む、方法も提供される。
　上記「夾雑物」とは、保護オリゴ糖（本工程では、式Ａ－１７で示される化合物）以外の化合物や試薬を指し、保護オリゴ糖の合成反応に用いる試薬やその残骸、保護オリゴ糖の伸長反応に用いる単糖若しくは２糖化合物等の保護オリゴ糖以外の糖、又は保護オリゴ糖の脱保護反応によって生じる副生成物を主に意味する。なお、本工程で使用される「疎水性担体」（逆相分配クロマトグラフィー充填用樹脂等）、「水溶性有機溶媒」、「有機溶媒」、及び精製の実施温度は、上記工程Ｉ－１－１における式Ａ－６で示される化合物の精製方法で記載したものと同様である。
＜工程Ｉ－４－２＞
　本工程は、式Ａ－１７で示される化合物上のアミノ基の保護基並びに水酸基のアシル系保護基を除去して、式Ａ－１８で示される化合物を生成する工程である。上記のアミノ基の保護基の除去（脱保護）は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例４３又は６７に示した方法によって行うことができ、例えば、１，２－ジメトキシエタン及び水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、又は水酸化リチウム水溶液を順次添加することによって行うことができるが、これらに限定されない。
　式Ａ－１８で示される化合物において、「Ｍ＋」は、好適には、ナトリウムイオン、リチウムイオン、カリウムイオン、又はプロトン化されたトリエチルアミンカチオンであるが、これらに限定されない。一方、上記工程で得られた式Ａ－１８で示される化合物は、既知又は周知の方法により、その遊離体（式Ａ－１８－ＦＦで示される化合物）として単離することができる。式Ａ－１８で示される化合物は、式Ａ－１８－ＦＦで示される化合物の「塩」の一形態であるが、上記で述べた通り、化合物中の水酸基やアミノ基等において塩が形成された化合物も本発明の範囲に含まれる。なお、後述の式Ａ－１９及び式Ａ－２０で示される化合物（なお、これらの遊離体は、それぞれ式Ａ－１９－ＦＦ及び式Ａ－２０－ＦＦで示される化合物である）等についても同様である。
　以下の工程Ｉ－４－３～工程Ｉ－４－４は、式Ａ－１８で示される化合物から式Ａ－２０で示される化合物を製造するための例示的な実施態様であり、これらの製造工程に限定するものではない。
＜工程Ｉ－４－３＞
　本工程は、式Ａ－１８で示される化合物上のアミノ基をアセチル基で保護して、以下の式Ａ－１９：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000195
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｍ＋は、ナトリウムイオン、リチウムイオン、カリウムイオン、又はプロトン化されたトリエチルアミンカチオンである）を生成する工程である。上記アセチル基によるアミノ基の保護は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例４４又は６８に示した方法によって行うことができる。
＜工程Ｉ－４－４＞
　本工程は、式Ａ－１９で示される化合物上のベンジルオキシ基からベンジル基を除去して、上記の式Ａ－２０で示される化合物を生成する工程である。上記のベンジル基の除去は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例４５又は６９に示した方法によって行うことができ、例えば、式Ａ－１９で示される化合物にＮ―メチルピロリドン、Ｐｄ／Ｃを加え、減圧→窒素置換及び水素加圧→解圧を行うことによって行うことができるが、これらに限定されない。
＜工程Ｉ－５＞
　工程Ｉ－５は、上記式Ａ－２０で示される化合物を、アジドＰＥＧリンカーである以下の式Ａ－２１：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000196
 で示される化合物（１１－アジド－３，６，９－トリオキサウンデカン－１－アミン）と反応させることにより、上記式Ａ－２２で示されるオリゴ糖を生成する工程を含む工程である。上記の式Ａ－２０で示される化合物と式Ａ－２１で示される化合物の結合は、既知の方法を利用又は応用することにより行うことができるが、好適には、例えば、実施例５１又は７０に示した方法によって行うことができ、例えば、式Ａ－２０で示される化合物を含む溶液に、式Ａ－２１で示される化合物、Ｎ－エチルジイソプロピルアミン、及びヘキサフルオロリン酸（ベンゾトリアゾール－１－イルオキシ）トリピロリジノホスホニウム、ブロモトリピロリジノホスホニウム＝ヘキサフルオロリン酸塩、又は４－（４，６－ジメトキシ－１，３，５－トリアジン－２－イル）－４－メチルモルホルホリニウムクロリドを順次添加した後、撹拌することによって行うことができるが、これらに限定されない。
＜式Ａ－２１で示される化合物の精製＞
　本発明の一態様において、上記の式Ａ－２１で示される化合物は、粗製の式Ａ－２１で示される化合物を含む溶液に、以下の式Ｅ－１：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000197
 で示される化合物（式中、Ｒ７は、水素原子、メチル基、又はメトキシ基である）を添加して、以下の式Ｅ－２：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000198
 で示される結晶性化合物（式中、Ｒ７は、水素原子、メチル基、又はメトキシ基である）を生成させる工程と、該結晶性化合物を単離し、次いで、該単離された結晶性化合物から式Ａ－２１で示される化合物を抽出する工程と、を含む精製方法により得られる。当該精製方法により、純度の高い式Ａ－２１で示される化合物を得ることができ、該式Ａ－２１で示される化合物は、ＨＰＬＣで測定した際の純度（本明細書では「ＨＰＬＣ純度」とも称する）として、好ましくは９５％以上、より好ましくは９６％以上又は９７％以上、さらにより好ましくは９８％以上又は９９％以上の純度を有する。このように、Ａ－２１で示される化合物を精製する目的は、当該化合物の市販の試薬中に、二量体をはじめとして、その他複数の不純物が混入しているためであり、また、従来技術では、それらの精製には厳密な蒸留精製又は煩雑なカラム精製を実施する必要があり、さらに、アジド構造を含む場合、その爆発懸念から加熱を要するような蒸留操作は適用できないという不都合があった。本発明者らは、純度の高い式Ａ－２１で示される化合物を得るための精製方法を検討した結果、上記式Ｅ－１で示される３種類の酒石酸誘導体（式中、Ｒ７が水素原子、メチル基、又はメトキシ基であるもの）を用いた際に、式Ａ－２１で示される化合物がそれらの酒石酸誘導体と１対１の塩を形成し、結晶として単離できることを見出した。得られる上記式Ｅ－２で示される化合物は新規な結晶性化合物であり、単離後、酢酸エチル／塩酸水溶液等での分液、その後のフリー化、抽出により、精製前よりも高いＨＰＬＣ純度（好適には９５％以上のＨＰＬＣ純度）を有する式Ａ－２１で示される化合物を取得することできる。
　上記の精製方法は、例示的な方法としては以下の通りである。まず、式Ａ－２１で示される化合物のアセトニトリル等の溶媒及び水の溶液に、式Ｅ－１で示される化合物を加え、攪拌し、溶解を確認後、アセトニトリル等の溶媒を添加する。得られたスラリー液を減圧濃縮し、スラリー液を攪拌することで、析出した結晶を濾過する。濾別した結晶をアセトニトリルで洗浄して、減圧乾燥することで、式Ｅ－２で示される化合物の結晶を得る（結晶生成工程）。次いで、得られた結晶性化合物の酢酸エチル及び水の溶液に濃塩酸を加え、攪拌後、分液し、得られた水層を酢酸エチル等で洗浄し、水酸化ナトリウム水溶液等で塩基性に調整後、塩化ナトリウム等を加え、溶解する。ジクロロメタン等の溶媒を加え、攪拌後、分液し、得られた有機層を減圧濃縮する。アセトニトリル等の溶媒を加え、減圧濃縮した後、得られた溶液を濾過し、アセトニトリル等の溶媒で洗浄し、得られた溶液を減圧濃縮して（抽出工程）、ＨＰＬＣ高純度の式Ａ－２１で示される化合物を得ることができる。より好適には、例えば、実施例４６～５０に示した方法によって行うことができる。
　なお、上記の式Ａ－２１で示される化合物の精製は、本工程での精製に限られない。従って、本発明の一態様において、粗製の上記式Ａ－２１で示される化合物を含む溶液に、上記式Ｅ－１で示される化合物（式中、Ｒ７は、水素原子、メチル基、又はメトキシ基である）を添加して、上記式Ｅ－２で示される結晶性化合物（式中、Ｒ７は、水素原子、メチル基、又はメトキシ基である）を生成させる工程と、該結晶性化合物を単離し、次いで、該単離された結晶性化合物から式Ａ－２１で示される化合物を抽出する工程と、を含む、式Ａ－２１で示される化合物の精製方法も提供される。
＜新規化合物＞
　上記工程Ｉ－１～Ｉ－５を含む本発明の方法によって、目的の上記式Ａ－２２で示されるオリゴ糖が得られる。また、上記式Ａ－２２で示されるオリゴ糖の中間体は、該オリゴ糖の製造において有用であるが、該オリゴ糖の製造に限定されず、あらゆる用途に適用することが可能である。従って、本発明により、上記式Ａ－２２で示されるオリゴ糖及びその中間体が提供される。
　本発明の一態様において、以下の式Ａ－２２：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000199
 で示されるオリゴ糖（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）が提供される。
　本発明の一態様において、以下の式Ａ’－２２：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000200
 で示されるオリゴ糖が提供される。
　本発明の一態様において、以下の式Ａ''－２２：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000201
 で示されるオリゴ糖が提供される。
　本発明の一態様において、以下の式Ａ－８：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000202
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）が提供される。
　本発明の一態様において、以下の式Ａ－１０：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000203
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）が提供される。
　本発明の一態様において、以下の式Ａ－１１：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000204
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）が提供される。
　本発明の一態様において、以下の式Ａ－１３：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000205
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）が提供される。
　以下のＡ－１４：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000206
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）が提供される。
　本発明の一態様において、以下の式Ａ－１４－ＦＭＡ：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000207
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）が提供される。
　本発明の一態様において、以下の式Ａ－１５：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000208
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｒ５は、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、若しくは２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基であり、かつ、Ｒ６は、水素原子であるか、又はＲ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）が提供される。
　本発明の一態様において、以下の式Ａ－１７：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000209
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｒ５は、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、若しくは２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基であり、かつ、Ｒ６は、水素原子であるか、又はＲ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）が提供される。
　本発明の一態様において、以下の式Ａ－１８－ＦＦ：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000210
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）又はその塩が提供される。
　本発明の一態様において、以下の式Ａ－１８：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000211
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｍ＋は、ナトリウムイオン、リチウムイオン、カリウムイオン、又はプロトン化されたトリエチルアミンカチオンである）が提供される。
　本発明の一態様において、以下の式Ａ－１９－ＦＦ：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000212
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）又はその塩が提供される。
　本発明の一態様において、以下の式Ａ－１９：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000213
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｍ＋は、ナトリウムイオン、リチウムイオン、カリウムイオン、又はプロトン化されたトリエチルアミンカチオンである）が提供される。
　本発明の一態様において、以下の式Ａ－２０－ＦＦ：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000214
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）又はその塩が提供される。
　本発明の一態様において、以下の式Ａ’－２０－ＦＦ：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000215
 で表される化合物又はその塩が提供される。
　本発明の一態様において、以下の式Ａ－２０：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000216
 で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｍ＋は、ナトリウムイオン、リチウムイオン、カリウムイオン、又はプロトン化されたトリエチルアミンカチオンである）が提供される。
＜糖タンパク質等及びその製造方法＞
　本発明の一態様において、非還元末端にα２，６－シアル酸構造を有する２分岐型グリカン（即ち、式Ａ－２２で示されるオリゴ糖）を糖タンパク質等（特に、糖鎖リモデリング抗体若しくはそのＦＣ領域含有分子、又は抗体薬物コンジュゲート）を合成する際のドナー分子として利用した、新規な糖タンパク質等及びその新規製造方法が提供される。以下に詳述するとおり、本発明の製造方法により得られた式Ａ－２２で示されるオリゴ糖は、糖タンパク質（特に、糖鎖リモデリング抗体若しくはＦｃ領域含有分子、又は抗体薬物コンジュゲート）の製造のために使用することができる（「ワンポット法」を用いたオリゴ糖と抗体とのコンジュゲート方法については、ＷＯ２０１８／００３９８３、ＷＯ２０２２／０５０３００、ＰＬｏＳ　ＯＮＥ　２０１８，１３，　ｅ０１９３５３４を参照のこと。また、オキサゾリン化法用いたオリゴ糖と抗体とのコンジュゲート方法については、ＷＯ２０１９／０６５９６４、ＷＯ２０２０／０５０４０６等を参照のこと）が、これに限定されず、その他の用途のために使用することもできる。
　近年、不均一な抗体の糖鎖を、酵素反応によってリモデリングし、官能基を有する糖鎖を均一に導入する方法が報告されている（ＡＣＳ　Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．２０１２，７，１１０－１２２，ＡＣＳ　Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．２０１６，７，１００５－１００８）。この糖鎖リモデリング技術を用いて、部位特異的に薬物を導入し、均一な抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）を合成する試みもなされている（Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ　Ｃｈｅｍ．２０１５，２６，２２３３－２２４２，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２０１６，５５，２３６１－２３６７，ＵＳ２０１６３６１４３６）。
　糖鎖のリモデリングでは、まず加水分解酵素を利用して、タンパク質（抗体等）に付加されている不均一な糖鎖を末端のＮ－アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）のみ残して切除し、ＧｌｃＮＡｃが付加した均一なタンパク質部分を調製する（以下、「アクセプター分子」という）。次に、別途調製した任意の糖鎖を用意し（以下、「ドナー分子」と言う）、このアクセプター分子とドナー分子とを、糖転移酵素を用いて連結する。これにより、任意の糖鎖構造を持った均一な糖タンパク質を合成できる。
　本発明の一態様において、本発明における新規製造方法を利用して製造された式Ａ－２２で示されるオリゴ糖は、その末端構造を活性化することにより、上記均一な糖タンパク質（特に、糖鎖リモデリング抗体又はそのＦｃ領域含有分子）を合成する際のドナー分子として使用することできる。
　本発明において、「糖鎖」とは、２つ以上の単糖がグリコシド結合により結合された構造単位を意味する。具体的な単糖や糖鎖を、例えば“ＧｌｃＮＡｃ－”のように、略号として標記することがある。構造式中でこれらの略号で記載した場合、還元末端で別の構造単位とのグリコシド結合に帰属する酸素原子又は窒素原子は、特別な定義がある場合を除き、当該糖鎖を表す略号には含まれないものとして表示される。
　本発明において、糖鎖の基本単位となる単糖の記載は、別に定める場合を除き、便宜上、その環構造において、環を構成する酸素原子に結合し、且つ、ヒドロキシ基（又はグリコシド結合に帰属する酸素原子）と直接結合した炭素原子を１位（シアル酸においてのみ２位）として表記する。実施例化合物の名称は、化学構造全体として付されたものであり、このルールは必ずしも適用されない。
　本発明において、糖鎖を記号（例えば、ＧｌｃＮＡｃ等）として記載する場合、別に定義される場合を除き、還元末端の炭素までを、当該記号に含めるものとし、Ｎ－又はＯ－グリコシド結合に帰属するＮ又はＯは、当該記号には含まれないものとする。
　本発明において、「糖タンパク質」とは、タンパク質を構成するアミノ酸の一部に糖鎖が結合したものを意味する。
　本発明の一態様において、「糖タンパク質」は、糖鎖リモデリング抗体又はそのＦｃ領域含有分子である。したがって、本発明の一態様において、本発明におけるオリゴ糖の新規製造方法を含む糖鎖ドナー分子を得る工程、及び、前記糖鎖ドナー分子と、Ｎ２９７結合糖鎖としてフコースが付加していてもよいコアＧｌｃＮＡｃを有する抗体又はそのＦｃ領域含有分子であるアクセプター分子とを反応させる工程を含む、糖鎖リモデリング抗体又はそのＦｃ領域含有分子の製造方法が提供される。本発明において、「コアＧｌｃＮＡｃ」とは、Ｎ２９７結合糖鎖の還元末端のＧｌｃＮＡｃである。
　本発明において、「糖鎖ドナー分子」とは、アクセプター分子に糖鎖を付与する役割を担う分子を意味する。本発明の一態様において、糖鎖ドナー分子は、式Ａ‐２２で示されるオリゴ糖である。また、本発明の好適な一態様において、式Ａ－２２で示されるオリゴ糖は、Ｒ１が４－メトキシフェニル基又はイソプロピル基であるオリゴ糖であるが、これに限定するものではない。なお、Ｒ１が４－メトキシフェニル基がイソプロピル基に置換されたオリゴ糖は、本発明において、式Ａ’－９で示される化合物の代わりに、当該化合物の４－メトキシフェニル基がイソプロピル基に置換された化合物（式Ａ’’－９で示される化合物）を用いることにより製造することができる（実施例１３、実施例６０等を参照）。
　本発明において、「アクセプター分子」は、糖鎖ドナー分子より糖鎖を受け取る分子を意味する。「アクセプター分子」は、糖鎖ドナー分子より糖鎖を受け取ることが可能な分子であれば特に限定されないが、好適には、抗体より糖鎖の大部分を切断した糖鎖切断抗体又はそのＦｃ領域含有分子を挙げることができ、より好適には、コアＧｌｃＮＡｃを有する抗体又はそのＦｃ領域含有分子を挙げることができる。糖鎖切断抗体において部分的に切断される糖鎖は、Ｎ－結合型糖鎖やＯ－結合型糖鎖であり、好ましくは、Ｎ－結合型糖鎖である。
　Ｎ－結合型糖鎖はＮ－グリコシド結合、Ｏ－結合型糖鎖はＯ－グリコシド結合により、抗体のアミノ酸側鎖と結合している。
　「アクセプター分子」としての抗体は、好適には、ＩｇＧであり、さらに好適には、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４である。
　ＩｇＧはその重鎖のＦｃ領域における２９７番目のアスパラギン残基（以下、「Ａｓｎ２９７又はＮ２９７」という）によく保存されたＮ－結合型糖鎖（以下、「Ａｓｎ２９７結合糖鎖又はＮ２９７結合糖鎖」という）を有しており、抗体分子の活性や動態等に寄与することが知られている（Ｅｏｎ－Ｄｕｖａｌ，Ａ．ｅｔ　ａｌ，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｐｒｏｇ．２０１２，２８，６０８－６２２、Ｓａｎｇｌｉｅｒ－Ｃｉａｎｆｅｒａｎｉ，Ｓ．，Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．２０１３，８５，７１５－７３６）。
　ＩｇＧの定常領域におけるアミノ酸配列はよく保存されており、Ｅｄｅｌｍａｎらの報告（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，６３，７８－８５，（１９６９））において、それぞれのアミノ酸がＥＵ番号（ＥＵ　ＩＮＤＥＸ）で特定されている。例えば、Ｆｃ領域においてＮ－結合型糖鎖が付加するＡｓｎ２９７は、ＥＵ番号において２９７位に相当するものであり、分子の断片化や領域欠損によって実際のアミノ酸位置が変動した場合であってもＥＵ番号で表示することによってアミノ酸が一義的に特定される。
　本発明の一態様において、「アクセプター分子」は、Ｎ２９７結合糖鎖としてコアＧｌｃＮＡｃを有する抗体又はそのＦｃ領域含有分子である。Ｎ２９７結合糖鎖としてのコアＧｌｃＮＡｃには、その他の単糖又は糖鎖が付加していてもよく、例えば、フコースが付加していてもよい。したがって、本発明の一態様において、「アクセプター分子」は、Ｎ２９７結合糖鎖としてフコースが付加していてもよいコアＧｌｃＮＡｃを有する抗体又はそのＦｃ領域含有分子である。
　糖鎖ドナー分子と、Ｎ２９７結合糖鎖としてフコースが付加していてもよいコアＧｌｃＮＡｃを有する抗体又はそのＦｃ領域含有分子であるアクセプター分子とを反応させる工程は、反応が進行する限り、あらゆる反応方法や反応条件を使用することができる。
　本発明において、糖鎖リモデリング抗体又はそのＦｃ領域含有分子は、例えば、ＷＯ２０１８／００３９８３及びＷＯ２０２２／０５０３００などに記載の方法に準じて、次式に示す方法で製造することができる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000217
　（Ｄ－１工程）
　本工程は、目的の抗体に対して、公知の酵素反応を用いて抗体のアミノ酸配列２９７番目のアスパラギンに結合するＮ－結合型糖鎖（Ｎ２９７結合糖鎖）の還元末端キトビオース構造のＧｌｃＮＡｃβ１－４ＧｌｃＮＡｃ間のグリコシド結合を加水分解により切断し、糖鎖切断抗体を製造する工程である。目的の抗体（１ｄ）を緩衝液（リン酸緩衝液等）中、０℃から４０℃までにおいて、野生型Ｅｎｄｏ－Ｓ酵素等の加水分解酵素を用いて還元末端のキトビオース構造のＧｌｃＮＡｃβ１と４ＧｌｃＮＡｃ間のグリコシド結合の加水分解反応を実施する。反応時間は１０分から７２時間、好ましくは１時間から1６時間である。野生型Ｅｎｄｏ－Ｓ酵素等は抗体（１ｄ）１００ｍｇに対して、０．００５ｍｇから１０ｍｇ、好ましくは０．０１ｍｇから３ｍｇを用いる。反応終了後、反応スケールに適した精製方法
(アフィニティークロマトグラフィー、ハイロドキシアパタイトカラム、陽イオン交換クロマトグラフィー、マルチモードクロマトグラフィーなど)で精製し、（Ｆｕｃα１，６）ＧｌｃＮＡｃ抗体（２ｄ）を得る。
　（Ｄ－２工程）
　本工程は、Ｄ－１工程で得られた（Ｆｕｃα１，６）ＧｌｃＮＡｃ抗体（２ｄ）に対し、２種類のＥｎｄｏ酵素を使用した糖鎖転移反応により、式Ａ‐２２で示されるオリゴ糖を反応させ、糖鎖リモデリング抗体（３ｄ）を含む反応液を準備した後に、適切な方法で精製することで、目的物である(３ｄ)を製造する工程である。
　使用する２種類のＥｎｄｏ酵素に関して、酵素Ａ（Ｅｎｄｏ－Ｓ様酵素）及び酵素Ｂ（Ｅｎｄｏ－Ｍ様酵素）を適切に組合せることができる。
　本発明において、「酵素－Ａ」は、Ｆｃ含有分子（例えば、抗体）のＮ２９７結合糖鎖を基質とするエンド－β－Ｎ－アセチルグルコサミニダーゼを意味する。酵素Ａとしては、Ｅｎｄｏ－Ｓ、Ｅｎｄｏ－Ｓ２（ＥｎｄｏＳ－４９）、Ｅｎｄｏ－Ｓｉ、Ｅｎｄｏ－Ｓｄ、Ｅｎｄｏ－Ｓｅ、又はＥｎｄｏ－Ｓｚ、及びそれらの加水分解活性を低下させたＥｎｄｏ－Ｓ変異体、　Ｅｎｄｏ－Ｓ２（Ｅｎｄｏ－Ｓ４９）変異体、Ｅｎｄｏ－Ｓｉ変異体、Ｅｎｄｏ－Ｓｄ変異体、Ｅｎｄｏ－Ｓｅ変異体、又はＥｎｄｏ－Ｓｚ変異体などを例示できる。酵素Ａとして好ましいものは、Ｅｎｄｏ－Ｓ　Ｄ２３３Ｑ　、Ｅｎｄｏ－Ｓ　Ｄ２３３Ｑ／Ｑ３０３Ｌ、Ｅｎｄｏ－Ｓ　Ｄ２３３Ｑ／Ｅ３５０Ａ、Ｅｎｄｏ－Ｓ　Ｄ２３３Ｑ／Ｅ３５０Ｑ、Ｅｎｄｏ－Ｓ　Ｄ２３３Ｑ／Ｅ３５０Ｄ、Ｅｎｄｏ－Ｓ　Ｄ２３３Ｑ／Ｅ３５０Ｎ、Ｅｎｄｏ－Ｓ　Ｄ２３３Ｑ／Ｄ４０５Ａ、Ｅｎｄｏ－Ｓ２　Ｄ１８４Ｍ、Ｅｎｄｏ－Ｓ２　Ｔ１３８Ｑ、　Ｅｎｄｏ－Ｓ２　Ｄ１８４Ｑ、Ｅｎｄｏ－Ｓ２　Ｄ１８４Ｑ／Ｑ２５０Ｌ、Ｅｎｄｏ－Ｓ２　Ｄ１８４Ｑ／Ｅ２８９Ｑ、Ｅｎｄｏ－Ｓ２　Ｄ１８４Ｍ／Ｑ２５０Ｌ、Ｅｎｄｏ－Ｓ２　Ｄ１８４Ｍ／Ｅ２８９Ｑ、Ｅｎｄｏ－Ｓ２　Ｄ１８２Ｑ、Ｅｎｄｏ－Ｓ２　Ｄ２２６Ｑ、Ｅｎｄｏ－Ｓ２　Ｔ２２７Ｑ、Ｅｎｄｏ－Ｓ２　Ｔ２２８Ｑ、Ｅｎｄｏ－Ｓｉ　Ｄ２４１Ｑ／Ｑ３１１Ｌ、Ｅｎｄｏ－Ｓｉ　Ｄ２４１Ｑ／Ｅ３６０Ｑ、Ｅｎｄｏ－Ｓｉ　Ｄ２４１Ｍ、Ｅｎｄｏ－Ｓｉ　Ｄ２４１Ｍ／Ｑ３１１Ｌ、Ｅｎｄｏ－Ｓｉ　Ｄ２４１Ｍ／Ｅ３６０Ｑ、Ｅｎｄｏ－Ｓｉ　Ｔ１９０Ｑ、Ｅｎｄｏ－Ｓｉ　Ｔ１９０／Ｄ２４１Ｑ、Ｅｎｄｏ－Ｓｉ　Ｔ１９０Ｑ／Ｄ２４１Ｍ、Ｅｎｄｏ－Ｓｉ　Ｄ２４１X１（X１は、Ｋ、Ｒ及びＤ以外のいずれかのアミノ酸残基を示し、具体的には、Ａ、Ｎ、Ｃ、Ｑ、Ｅ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｆ、Ｐ、Ｓ、Ｔ、Ｗ、Ｙ、又はＶ、好ましくは、Ａ、Ｑ、Ｅ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｆ、Ｐ、Ｓ、Ｔ、Ｗ、Ｙ、又はＶを示す）、Ｅｎｄｏ－Ｓｉ　Ｔ１９０X２（X２は、Ｆ、Ｈ、Ｋ、Ｍ、Ｑ、Ｒ、Ｗ又はＹのアミノ酸残基を示す）、Ｅｎｄｏ－Ｓｉ　Ｑ３１１X３（X３は、Ｆ、Ｎ、又はＹのアミノ酸残基を示す）Ｅｎｄｏ－Ｓｉ　Ｅ３６０Ｋ、Ｅｎｄｏ－Ｓｄ　Ｄ２３２Ｑ、Ｅｎｄｏ－Ｓｄ　Ｄ２３２Ｍ、Ｅｎｄｏ－Ｓｄ　Ｄ２３２Ｑ／Ｑ３０２Ｌ、Ｅｎｄｏ－Ｓｄ　Ｄ２３２Ｍ／Ｑ３０２Ｌ、Ｅｎｄｏ－Ｓｅ　Ｄ２３３Ｑ、Ｅｎｄｏ－Ｓｅ　Ｄ２３３Ｍ、Ｅｎｄｏ－Ｓｅ　Ｄ２３３Ｑ／Ｑ３０３Ｌ、Ｅｎｄｏ－Ｓｅ　Ｄ２３３Ｍ／Ｑ３０３Ｌ、Ｅｎｄｏ－Ｓｚ　Ｄ２３４Ｑ、Ｅｎｄｏ－Ｓｚ　Ｄ２３４Ｍ、Ｅｎｄｏ－Ｓｚ　Ｄ２３４Ｑ／Ｑ３０４Ｌ、又はＥｎｄｏ－Ｓｚ　Ｄ２３４Ｍ／Ｑ３０４Ｌなどである。
　本発明において、「酵素－Ｂ」は、糖鎖ドナー分子の糖鎖を基質とするエンド－β－Ｎ－アセチルグルコサミニダーゼ、特に、糖鎖ドナー分子の糖鎖を基質とするがＮ２９７結合糖鎖を基質としない（言い換えれば、Ｎ２９７結合糖鎖への反応性が低い、好ましくは反応性が極めて低い）エンド－β－Ｎ－アセチルグルコサミニダーゼを意味する。酵素Ｂとしては、Ｅｎｄｏ－Ｍ、Ｅｎｄｏ－Ｏｍ、Ｅｎｄｏ－ＣＣ、又はＥｎｄｏ－Ｒｐとその加水分解活性を低下させたＥｎｄｏ－Ｍ変異体、Ｅｎｄｏ－Ｏｍ変異体、Ｅｎｄｏ－ＣＣ変異体、又はＥｎｄｏ－Ｒｐ変異体などを例示できる。酵素Ｂとして好ましいものは、Ｅｎｄｏ－Ｍ　Ｎ１７５Ｑ、Ｅｎｄｏ－Ｍ　Ｎ１７５Ｑ／Ｙ２１７Ｆ、Ｅｎｄｏ－ＣＣ　Ｎ１８０Ｈ、Ｅｎｄｏ－Ｏｍ　Ｎ１９４Ｑ、Ｅｎｄｏ－Ｒｐ　Ｎ１７２Ｑ、Ｅｎｄｏ－Ｒｐ　Ｎ１７２Ｈ、Ｅｎｄｏ－Ｒｐ　Ｎ１７２Ａ、Ｅｎｄｏ－Ｒｐ　Ｎ１７２Ｃ、Ｅｎｄｏ－Ｒｐ　Ｎ１７２Ｄ、Ｅｎｄｏ－Ｒｐ　Ｎ１７２Ｅ、Ｅｎｄｏ－Ｒｐ　Ｎ１７２Ｇ、Ｅｎｄｏ－Ｒｐ　Ｎ１７２Ｉ、Ｅｎｄｏ－Ｒｐ　Ｎ１７２Ｌ、Ｅｎｄｏ－Ｒｐ　Ｎ１７２Ｍ、Ｅｎｄｏ－Ｒｐ　Ｎ１７２Ｐ、Ｅｎｄｏ－Ｒｐ　Ｎ１７２Ｓ、Ｅｎｄｏ－Ｒｐ　Ｎ１７２Ｔ、Ｅｎｄｏ－Ｒｐ　Ｎ１７２Ｖ、Ｅｎｄｏ－Ｒｐ　Ｗ２７８Ｆ／Ｓ２１６Ｖ、Ｅｎｄｏ－Ｒｐ　Ｗ２７８Ｆ／Ｎ２４６Ｄ、Ｅｎｄｏ－Ｒｐ　Ｗ２７８Ｆ／Ｄ２７６Ｎ、Ｅｎｄｏ－Ｒｐ　Ｗ２７８Ｆ／Ａ３１０Ｄ、Ｅｎｄｏ－Ｒｐ　Ｗ２７８Ｆ／Ｎ１７２Ｄ／Ｆ３０７Ｙ、Ｅｎｄｏ－Ｒｐ　Ｗ２７８Ｆ／Ｎ１７２Ｄ／Ｆ３０７Ｈ、Ｅｎｄｏ－Ｒｐ　Ｗ２７８Ｆ／Ｎ１７２Ｄ／Ａ３１０Ｄ、Ｅｎｄｏ－Ｒｐ　Ｗ２１４Ｆ／Ｆ３０７Ｙ／Ｌ３０６Ｉなどである。
　抗体（２ｄ）を緩衝液（トリス緩衝液等）中、酵素Ａ（Ｅｎｄｏ－Ｓ様酵素）及び酵素Ｂ（Ｅｎｄｏ－Ｍ様酵素）の糖転移酵素存在下、式Ａ‐２２で示されるオリゴ糖と反応させることで、糖鎖転移反応を実施する。反応温度は、用いる酵素の至適温度に応じて適宜選択することができるが、通常１５～５０℃であり、好ましくは、２５～４０℃である。反応時間は、２時間～４８時間の間で、適宜選択できる。反応終了後、反応スケールに適した精製方法（アフィニティークロマトグラフィー、ハイロドキシアパタイトカラム、陽イオン交換クロマトグラフィー、マルチモードクロマトグラフィーなど）や限外ろ過方法（限外ろ過膜）を選択し、糖鎖リモデリング抗体（３ｄ）を得ることができる。
　上記の糖鎖リモデリング抗体の調製において、抗体水溶液の濃縮、濃度測定、並びにバッファー交換は、ＷＯ２０２０／０５０４０６に記載の共通操作ＡからＣに準じて行うことができる。
　上記のように、本発明における糖鎖リモデリング抗体又はそのＦｃ領域含有分子の製造方法は、更に、式Ａ－２２で示される化合物中の末端における２つのアジド基（Ｎ３－）の各々又は両方にアルキン構造を有する分子と反応させる工程を含んでいてもよい。当該反応工程は、糖鎖ドナー分子とアクセプター分子とを反応させる工程の前後いずれに実施してもよい。本発明において、前記「アルキン構造を有する分子」は、アルキン構造を有する限りいかなる分子であってもよいが、例えば、化学療法剤、分子標的薬、免疫活性化剤、毒素、抗菌剤、抗ウイルス剤、診断用薬剤、タンパク質、ペプチド、アミノ酸、核酸、抗原、ビタミン及びホルモンを挙げることができる。本発明において、「アジド基（Ｎ３－）にアルキン構造を有する分子と反応させる工程」は、反応が進行する限り、あらゆる反応方法や反応条件を使用することができ、例えば、公知の方法（ＷＯ２０１９／０６５９６４、ＷＯ２０２０／０５０４０６など）に準じて実行することができる。例えば、「アジド基（Ｎ３－）にアルキン構造を有する分子と反応させる工程」は、上記Ｄ－２工程で得られた糖鎖リモデリング抗体（３ｄ）とアルキン構造を有する分子をＳＰＡＡＣ（ｓｔｒａｉｎ－ｐｒｏｍｏｔｅｄ　ａｚｉｄｅ－ａｌｋｙｎｅ　ｃｙｃｌｏａｄｄｉｔｉｏｎ：Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．２００４，１２６，１５０４６－１５０４７）反応により結合させることにより、実行することができる。
　本発明の一態様において、さらに、上記糖鎖リモデリング抗体又はそのＦｃ領域含有分子の製造方法を含む、抗体薬物コンジュゲートの製造方法が提供される。本発明において、「抗体薬物コンジュゲート」に含まれる抗体及び薬物は、所期の効果を奏する限り限定されず、目的に応じて、あらゆる物を使用することができる。本発明において、抗体薬物コンジュゲートの製造方法としては、例えば、上記Ｄ－１工程、Ｄ－２工程、及び、ＳＰＡＡＣ反応を含む製造方法を挙げることができるが、これに限定されない。
　本発明において、「抗体薬物コンジュゲート」とは、抗体に、薬物を、リンカーを介して結合させた複合体のことを示す。本発明の方法を使用することにより、部位特異的に薬物を導入し、均一な抗体薬物コンジュゲートを合成することができる。
　本発明において、「抗体薬物コンジュゲート」は、次式（ＸＩＩＩ）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000218
 で示される。ｍ１は１から１０の範囲であり、抗体薬物コンジュゲートにおける抗体１分子あたりの薬物結合数を示す。Ａｂは、抗体又は該抗体の機能性断片を示し、Ｌは、ＡｂとＤを連結するリンカーを示し、Ｄは薬物を示す。
　本発明において使用される抗体としては、フルボディー、抗体の機能性断片が挙げられる。「抗体の機能性断片」とは、「抗体の抗原結合断片」とも呼ばれ、抗原との結合活性を有する抗体の部分断片を意味しており、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、ｄｉａｂｏｄｙ、線状抗体及び抗体断片より形成された多特異性抗体等を含む。また、Ｆ（ａｂ’）２を還元条件下で処理した抗体の可変領域の一価の断片であるＦａｂ’も抗体の抗原結合断片に含まれる。但し、抗原との結合能を有している限りこれらの分子に限定されない。また、これらの抗原結合断片には、抗体蛋白質の全長分子を適当な酵素で処理したもののみならず、遺伝子工学的に改変された抗体遺伝子を用いて適当な宿主細胞において産生された蛋白質も含まれる。
　本発明において、抗体は、いずれの種に由来してもよいが、好ましくは、ヒト、ラット、マウス及びウサギを例示できる。ヒト以外の種に由来する場合は、周知の技術を用いて、キメラ化又はヒト化することが好ましい。また、本発明において、抗体は、ポリクローナル抗体であっても、モノクローナル抗体であってもよいが、モノクローナル抗体が好ましい。モノクローナル抗体には、ラット抗体、マウス抗体、ウサギ抗体等の非ヒト動物由来のモノクローナル抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、それらの機能性断片、又はそれらの修飾体が含まれる。
　本発明において使用される抗体としては、所期の効果を奏する限り限定されないが、例えば、抗ＨＥＲ２抗体、抗ＨＥＲ３抗体、抗ＤＬＬ３抗体、抗ＦＡＰ抗体、抗ＣＤＨ１１抗体、抗ＣＤＨ６抗体、抗Ａ３３抗体、抗ＣａｎＡｇ抗体、抗ＣＤ１９抗体、抗ＣＤ２０抗体、抗ＣＤ２２抗体、抗ＣＤ３０抗体、抗ＣＤ３３抗体、抗ＣＤ５６抗体、抗ＣＤ７０抗体、抗ＣＤ９８抗体、抗ＴＲＯＰ２抗体、抗ＣＥＡ抗体、抗Ｃｒｉｐｔｏ抗体、抗ＥｐｈＡ２抗体、抗Ｇ２５０抗体、抗ＭＵＣ１抗体、抗ＧＰＮＭＢ抗体、抗Ｉｎｔｅｇｒｉｎ抗体、抗ＰＳＭＡ抗体、抗Ｔｅｎａｓｃｉｎ－Ｃ抗体、抗ＳＬＣ４４Ａ４抗体、抗Ｍｅｓｏｔｈｅｌｉｎ抗体、抗ＥＮＰＰ３抗体、抗ＣＤ４７抗体、抗ＥＧＦＲ抗体、抗ＧＰＲ２０抗体又は抗ＤＲ５抗体が挙げられる。
　本発明の抗体薬物コンジュゲートの製造に使用される抗体は、この分野で通常実施される方法を用いて、抗原となるポリペプチドを動物に免疫し、生体内に産生される抗体を採取、精製することによって得ることができる。抗原の由来はヒトに限定されず、マウス、ラット等のヒト以外の動物に由来する抗原を動物に免疫することもできる。この場合には、取得された異種抗原に結合する抗体とヒト抗原との交差性を試験することによって、ヒトの疾患に適用可能な抗体を選別できる。
　また、公知の方法（例えば、Ｋｏｈｌｅｒ　ａｎｄ　Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ（１９７５）２５６，ｐ．４９５－４９７、Ｋｅｎｎｅｔｔ，Ｒ．ｅｄ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ　Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｐ．３６５－３６７，Ｐｌｅｎｕｍ　Ｐｒｅｓｓ，Ｎ．Ｙ．（１９８０））に従って、抗原に対する抗体を産生する抗体産生細胞とミエローマ細胞とを融合させることによってハイブリドーマを樹立し、モノクローナル抗体を得ることもできる。
　なお、抗原は抗原蛋白質をコードする遺伝子を遺伝子操作によって宿主細胞に産生させることによって得ることができる。
　本発明の抗体薬物コンジュゲートの製造に使用されるヒト化抗体は公知の方法（例えば、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，８１，６８５１－６８５５，（１９８４）、Ｎａｔｕｒｅ（１９８６）３２１，ｐ．５２２－５２５、ＷＯ９０／０７８６１）に従って取得することができる。
　例えば、抗ＨＥＲ２抗体（ＵＳ５８２１３３７、ＷＯ２００４／００８０９９、ＷＯ２０２０／０５０４０６等）、抗ＣＤ３３抗体（ＷＯ２０１４／０５７６８７、ＷＯ２０２０／０５０４０６等）、抗ＥｐｈＡ２抗体（ＷＯ２００９／０２８６３９、ＷＯ２０２０／０５０４０６等）、抗ＣＤＨ６抗体（ＷＯ２０１８／２１２１３６、ＷＯ２０２０／０５０４０６等）、抗ＣＤ７０抗体（ＷＯ２００４／０７３６５６、ＷＯ２００７／０３８６３７等）、抗ＴＲＯＰ２抗体（ＷＯ２０１５／０９８０９９等）、抗ＥＧＦＲ抗体（ＷＯ１９９８／０５０４３３、ＷＯ２００２／０９２７７１等）は、公知の手段によって取得することができる。
　本発明において使用される薬物としては、所期の効果を奏する限り限定されないが、薬学的に活性な化合物、例えば、化学療法剤、分子標的薬、免疫活性化剤、毒素、抗菌剤、抗ウイルス剤、診断用薬剤、タンパク質、ペプチド、アミノ酸、核酸、抗原、ビタミン、ホルモン等が挙げられる。
　薬物Ｄは、例えば、次式：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000219
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000220
 （式中、アステリスクはリンカーＬと結合していることを示す）で示される。
　本発明において、抗体Ａｂと薬物Ｄを連結するリンカーＬは、次の式：
－Ｌｂ－Ｌａ－Ｌｐ－Ｌｃ－＊
（ここで、アステリスクは、薬物Ｄと結合していることを示す）で示される。
　Ｌｐは、標的細胞において切断可能なアミノ酸配列からなるリンカーを示すか又は存在せず、その具体例としては、例えば、－ＧＧＦＧ－、－ＧＧＰＩ－、－ＧＧＶＡ－、－ＧＧＦＭ－、－ＧＧＶＣｉｔ－、－ＧＧＦＣｉｔ－、－ＧＧＩＣｉｔ－、－ＧＧＰＬ－、－ＧＧＡＱ－又は－ＧＧＰＰ－を挙げることができる。
　Ｌａは、
－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ２ＣＨ２）ｎ２－Ｃ（＝Ｏ）－、
－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ２ＣＨ２）ｎ２－ＣＨ２－Ｃ（＝Ｏ）－、
－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ２ＣＨ２）ｎ２－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＨ－（ＣＨ２ＣＨ２）ｎ３－Ｃ（＝Ｏ）－、
－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ２ＣＨ２）ｎ２－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＨ－（ＣＨ２ＣＨ２）ｎ３－ＣＨ２－Ｃ（＝Ｏ）－、
－Ｃ（＝Ｏ）－（ＣＨ２ＣＨ２）ｎ２－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＨ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ３－ＣＨ２－Ｃ（＝Ｏ）－、
－（ＣＨ２）ｎ４－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－、又は
－（ＣＨ２）ｎ９－Ｃ（＝Ｏ）－
（ここで、ｎ２は１～３の整数を示し、ｎ３は１～５の整数を示し、ｎ４は０～２の整数を示し、ｎ９は２～７の整数を示す）から選択されるいずれか一つを示す。
　Ｌｂは、ＬａとＡｂの糖鎖又はリモデリングされた糖鎖を結合するスペーサーを示し、その具体例としては、例えば、
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000221
 又は
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000222
 （上記で示されるＬｂの構造式において、アステリスクはＬａと結合していることを示し、波線はＡｂの糖鎖又はリモデリングされた糖鎖と結合していることを示す）を挙げることができる。
　Ｌｃは、－ＮＨ－ＣＨ２－、－ＮＨ－Ｂ－ＣＨ２－Ｏ（Ｃ＝Ｏ）－を示すか又は存在しない。ここで、Ｂは、１，４－フェニル基、２，５－ピリジル基、３，６－ピリジル基、２，５－ピリミジル基又は２，５－チエニル基である。
　以下本発明を実施例にて説明するが、本発明は当該実施例に限定されるものではない。なお、以下において、例えば、「化合物Ａ―１」又は合成スキーム中の「Ａ―１」は、「式Ａ―１で示される化合物」に対応することを示し、それ以降の化合物番号についても同様である。
　以下の実施例において、室温は１５℃～３５℃を示す。シリカゲルクロマトグラフィーはＢｉｏｔａｇｅ　Ｓｆａｒ　ＨＣ　Ｄ（２０μｍ，Ｂｉｏｔａｇｅ製）、逆相カラムクロマトグラフィーはＵｎｉｖｅｒｓａｌ　Ｃｏｌｕｍｎ　ＯＤＳ　Ｐｒｅｍｉｕｍ　３０μｍ　Ｌサイズ（山善株式会社製）とＩｎｊｅｃｔ　ｃｏｌｕｍｎ　ＯＤＳ　Ｌサイズ（山善株式会社製）、分取ＨＰＬＣはＡｇｉｌｅｎｔ　Ｐｒｅｐａｒａｔｉｖｅ　ＨＰＬＣ　Ｓｙｓｔｅｍ（Ａｇｉｌｅｎｔ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ製）を用いて実施した。分取カラムは、ＸＢｒｉｄｇｅ　Ｐｒｅｐ　ＯＢＤ（５μｍ，Ｃ１８，１３０Å，２５０×３０ｍｍ，Ｗａｔｅｒｓ製）を用いた。
　各種スペクトルデータの測定には以下の機器を用いた。１Ｈ－ＮＭＲ及び１３Ｃ－ＮＭＲスペクトルは、ＪＥＯＬ製ＥＣＺ５００Ｒ並びにＥＣＸ４００Ｐを用いて測定した。マススペクトルはＳｈｉｍａｄｚｕ　ＬＣＭＳ－２０１０及びＬＣＭＳ－２０２０（島津製作所製）、ＸＥＶＯ Ｑ－Ｔｏｆ ＭＳ（Ｗａｔｅｒｓ）、Ｑ－Ｅｘａｃｔｉｖｅ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ）を用いて測定した。
＜式Ａ－４で示される化合物の合成＞
　式Ａ－４で示される化合物を以下の合成スキーム１に従って合成した。
　［合成スキーム１］
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000223
　実施例１
　１，２：５，６－ビス－Ｏ－（１－メチルエチリデン）－３－Ｏ－（２－ナフチルメチル）－α－Ｄ－グルコフラノース（式Ｃ－２で示される化合物）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000224
　水素化ナトリウム（５５．３２ｇ，１．３８ｍｏｌ，含量：５０－７２％）のテトラヒドロフラン（９００ｍＬ）溶液を０℃に冷却後、１，２：５，６－ビス－Ｏ－（１－メチルエチリデン）－α－Ｄ－グルコフラノース（式Ｃ－１で示される化合物）（３００．００ｇ，１．１５ｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１．０５Ｌ）溶液を１時間かけて滴下した。その後、２５℃に昇温し、１，３－ジメチルー２－イミダゾリジノン（１５０ｍＬ）及び２－ブロモメチルナフタレン（２８０．３１ｇ，１．２７ｍｏｌ）を加えた。２５℃で６時間撹拌後、ＨＰＬＣで反応の終了を確認し、エチレンジアミン（無水）（１３．８５ｇ，２３０．５２ｍｍｏｌ）を加え、さらに１時間撹拌した。この溶液を０℃に冷却し、１０％クエン酸水溶液（１．２Ｌ）を１時間かけて加えた。反応液をヘプタン（３Ｌ）で希釈し、有機層と水層に分離した。有機層を水（９００ｍＬ）で洗浄後、減圧条件下、液量が９００ｍＬに達するまで濃縮した。さらにアセトニトリル（３Ｌ）を加え、再度液量が９００ｍＬに達するまで濃縮し、粗体の１，２：５，６－ビス－Ｏ－（１－メチルエチリデン）－３－Ｏ－（２－ナフチルメチル）－α－Ｄ－グルコフラノース（式Ｃ－２で示される化合物）をアセトニトリル溶液として得た。このものを次工程にそのまま使用した。
　実施例２
　３－Ｏ－（２－ナフチルメチル）－Ｄ－グルコピラノース（式Ｃ－３で示される化合物）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000225
　実施例１で得られた粗体の式Ｃ－２で示される化合物の溶液（９００ｍL）にアセトニトリル（１．５Ｌ）、水（６００ｍＬ）及び濃塩酸（１７．５１ｇ，１７２．８９ｍｍｏｌ）を加え、５５℃で１８．５時間撹拌した。ＨＰＬＣで反応の終了を確認後、反応液を０℃に冷却し、４規定水酸化ナトリウム水溶液（４３．２２ｍＬ）で系内のｐＨを６．２５に調整した。反応液をヘプタン（９００ｍＬ）で希釈し、アセトニトリル層とヘプタン層に分離した。アセトニトリル層に酢酸エチル（２．４Ｌ）及び水（６００ｍＬ）を加えて分液し、有機層Ａと水層を得た。水層に再度、酢酸エチル（１．５Ｌ）及びテトラヒドロフラン（１．５Ｌ）の混合溶液を加えて分液し、有機層Ｂと水層を得た。有機層ＡとＢを混合し、飽和食塩水（６００ｍＬ）で洗浄後、減圧条件下、液量が１．５Ｌに達するまで濃縮した（濃縮段階で結晶の析出を確認）。さらに酢酸エチル（４．５Ｌ）を加え、再度液量が３Ｌに達するまで濃縮した。この懸濁液に酢酸エチル（１．５Ｌ）及びシクロペンチルメチルエーテル（１．５Ｌ）を加え、５５℃で１時間撹拌した。ヘプタン（３Ｌ）を１．５時間かけて滴下し、１時間撹拌後、０℃に冷却した。その後、析出した結晶を濾過し、結晶を０℃に冷却した酢酸エチル（１．２Ｌ）及びヘプタン（６００ｍＬ）の混合溶液で洗浄した。得られた結晶を減圧下４０℃で乾燥し、３－Ｏ－（２－ナフチルメチル）－Ｄ－グルコピラノース（式Ｃ－３で示される化合物）（３５６．９５ｇ，収率９６．７％）を得た。
　１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ７．８５－７．９０（ｍ，４Ｈ），７．５９（ｄｄ，Ｊ＝８．０，１．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４６－７．５１（ｍ，２Ｈ），６．６９（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ），５．１２（ｄｄ，Ｊ＝５．０，３．０Ｈｚ，２Ｈ），４．９４－５．００（ｍ，２Ｈ），４．５３（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ），４．３５（ｄｄ，Ｊ＝８．０，６．５Ｈｚ，１Ｈ），３．７０（ｄｄｄ，Ｊ＝１１．５，５．０，２．０Ｈｚ，１Ｈ），３．４５－３．５０（ｍ，１Ｈ），３．２５－３．３１（ｍ，２Ｈ），３．１１－３．１６（ｍ，２Ｈ）．
　１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ１３７．３，１３２．８，１３２．３，１２７．６，１２７．５，１２７．４，１２６．１，１２６．０，１２５．６，１２５．５，９６．９，８５．４，７６．７，７４．８，７３．７，６９．９，６１．１．
　ＨＲＭＳ（ＥＳＩ－）［Ｍ－Ｈ］－　ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ１７Ｈ１９Ｏ６：３１９．１１８７；ｆｏｕｎｄ　３１９．１１７５．
　実施例３
　２，４，６－トリ－Ｏ－アセチル－３－Ｏ－（２－ナフチルメチル）－Ｄ－グルコピラノース（式Ｃ－５で示される化合物）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000226
　３－Ｏ－（２－ナフチルメチル）－Ｄ－グルコピラノース（式Ｃ－３で示される化合物）（１５０．００ｇ，４６８．２５ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（６７５ｍＬ）溶液に、トリエチルアミン（２３６．９２ｇ，２．３４ｍｏｌ）及び４－ジメチルアミノピリジン（０．２９ｇ，２．３４ｍｍｏｌ）を加えて０℃に冷却後、無水酢酸（１９５．９９ｇ，１．９２ｍｏｌ）を３０分間かけて滴下した。その後、２５℃に昇温し、３時間撹拌後、ＨＰＬＣで反応の終了を確認した。反応液を１０℃に冷却し、１ーメチルピペラジン（６０．９７ｇ，６０８．７３ｍｍｏｌ）を加えた。３５℃で１８時間撹拌後、ＨＰＬＣで反応の終了を確認し、０℃に冷却した。６規定塩酸（４８０ｍＬ）でｐＨを６．３６に調整後、ヘプタン（３７５ｍＬ）で希釈し、有機層と水層を分離した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（４５０ｍＬ）及び水（４５０ｍＬ）で洗浄後、減圧条件下、液量が４５０ｍＬに達するまで濃縮した。酢酸エチル（２．２５Ｌ）を加え、再度液量が４５０ｍＬになるまで濃縮、さらにもう１度同様の操作を繰り返した。この溶液にジクロロメタン（２．２５Ｌ）を加え、液量が４５０ｍＬになるまで濃縮、さらにもう１度同様の操作を繰り返し、粗体の２，４，６－トリ－Ｏ－アセチル－３－Ｏ－（２－ナフチルメチル）－Ｄ－グルコピラノース（式Ｃ－５で示される化合物）をジクロロメタン溶液として得た。このものを次工程にそのまま使用した。
　なお、式Ｃ－３で示される化合物→式Ｃ－５で示される化合物の工程はワンポットで実施している。
　実施例４
　２，４，６－トリ－Ｏ－アセチル－３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－１－Ｏ－（２，２，２－トリクロロエタンイミドイル）－Ｄ－グリセロ－ヘキソピラノース（式Ｃ－６で示される化合物）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000227
　実施例３で得られた粗体の２，４，６－トリ－Ｏ－アセチル－３－Ｏ－（２－ナフチルメチル）－Ｄ－グルコピラノース（式Ｃ－５で示される化合物）の溶液（４５０ｍL）に、ジクロロメタン（４５０ｍＬ）及びトリクロロアセトニトリル（３３８．０３ｇ，２．３４ｍｏｌ）を加えて０℃に冷却後、１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］－７－ウンデセン（５．７０ｇ，３７．４６ｍｍｏｌ）を滴下した。０℃で１４．５時間撹拌後、ＨＰＬＣで反応の終了を確認し、酢酸（２．２５ｇ，３７．４６ｍｍｏｌ）を加えた。この溶液にシリカゲル６０Ｎ（関東化学製，粒子径：４０－５０μｍ，１５０ｇ）を加えて１．５時間撹拌した後、濾過した。シリカゲルをジクロロメタン（１．５Ｌ）で洗浄し、濾液を減圧条件下、液量が４５０ｍＬになるまで濃縮した。さらにジクロロメタン（１．５Ｌ）を加え、液量が４５０ｍＬになるまで濃縮し、２，４，６－トリ－Ｏ－アセチル－３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－１－Ｏ－（２，２，２－トリクロロエタンイミドイル）－Ｄ－グリセロ－ヘキソピラノース（式Ｃ－６で示される化合物）をジクロロメタン溶液として得た。このものを次工程にそのまま使用した。
　実施例５
　４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－４－Ｏ－｛２，４，６－トリ－Ｏ－アセチル－３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－β－Ｄ－グルコピラノシル｝－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｃ－８で示される化合物）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000228
　実施例４で得られた２，４，６－トリ－Ｏ－アセチル－３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－１－Ｏ－（２，２，２－トリクロロエタンイミドイル）－Ｄ－グリセロ－ヘキソピラノース（式Ｃ－６で示される化合物）の溶液（４５０ｍL）に、４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｃ－７で示される化合物）（２７６．６６ｇ，４６８．２５ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（４．２Ｌ）及びモレキュラーシーブ４Ａ粉末（１０μｍ以下，８３．００ｇ）を加え、－５℃に冷却した。この懸濁液にトリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル（１０．４１ｇ，４６．８３ｍｍｏｌ）を２０分間かけて滴下した後、３時間撹拌した。ＨＰＬＣで反応の終了を確認後、トリエチルアミン（２３．６９ｇ，２３４．１３ｍｍｏｌ）を加えた。懸濁液を濾過後、酢酸エチル（２．８Ｌ）で洗浄し、濾液を減圧条件下、液量が１．４Ｌになるまで濃縮した。さらに酢酸エチル（４．２Ｌ）を加え、液量が１．４Ｌになるまで濃縮、さらにもう１度同様の操作を繰り返した。この溶液に酢酸エチル（２．８Ｌ）を加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（８３０ｍＬ）及び水（８３０ｍＬ）で洗浄し、有機層を減圧条件下、液量が８３０ｍＬになるまで濃縮した。さらに２－プロパノール（４．２Ｌ）を加え、液量が１．４Ｌになるまで濃縮後、懸濁液を６５℃に温調した。酢酸エチル（８３０ｍＬ）を加えて６５℃で２時間撹拌した後、２－プロパノール（５．５３Ｌ）を２時間かけて滴下した。この懸濁液を０℃に冷却した後、結晶を濾過し、結晶を０℃に冷却した２－プロパノール（１．４Ｌ）で洗浄した。得られた結晶を減圧下４０℃で乾燥し、４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－４－Ｏ－｛２，４，６－トリ－Ｏ－アセチル－３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－β－Ｄ－グルコピラノシル｝－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｃ－８で示される化合物）（３５５．３４ｇ，収率９０．５％， 式Ｃ－３で示される化合物基準）の粗体を得た。
　得られた粗体の式Ｃ－８で示される化合物（３５０．００ｇ）にメチルイソブチルケトン（２．１Ｌ）を加え、５０℃で溶解した後、エチルシクロヘキサン（１．４Ｌ）を１時間かけて滴下した。４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－４－Ｏ－｛２，４，６－トリ－Ｏ－アセチル－３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－β－Ｄ－グルコピラノシル｝－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｃ－８で示される化合物）（７０．００ｍｇ）を加えて１時間攪拌し、結晶の析出を確認後、エチルシクロヘキサン（４．９Ｌ）を２時間かけて滴下した。懸濁液を室温に冷却し、１４．５時間撹拌後、析出した結晶を濾過し、結晶をメチルイソブチルケトン（３５０ｍＬ）及びエチルシクロヘキサン（１．４Ｌ）の混合溶液で洗浄した。得られた結晶を減圧下４０℃で乾燥し、４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－４－Ｏ－｛２，４，６－トリ－Ｏ－アセチル－３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－β－Ｄ－グルコピラノシル｝－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｃ－８で示される化合物）（３３１．７４ｇ，収率９４．８％）を得た。
　１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．８１－７．８４（ｍ，４Ｈ），７．６９（ｂｒ，１Ｈ），７．６５（ｂｒ，３Ｈ），７．４６－７．５１（ｍ，２Ｈ），７．２８－７．３６（ｍ，６Ｈ），７．００（ｄｄ，Ｊ＝７．０，１．５Ｈｚ，２Ｈ），６．７７－６．８４（ｍ，５Ｈ），６．６６－６．６９（ｍ，２Ｈ），５．５９，（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），５．０９－５．１５（ｍ，２Ｈ），４．８２（ｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ，１Ｈ），４．７７（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．７１－４．７７（ｍ，２Ｈ），４．６０（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），４．５０（ｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ，１Ｈ），４．４５（ｄ，Ｊ＝１３．０Ｈｚ，１Ｈ），４．３６（ｄｄ，Ｊ＝１１．０，８．５Ｈｚ，１Ｈ），４．２８（ｄｄ，Ｊ＝１１．０，８．５Ｈｚ，１Ｈ），４．２０（ｄｄ，Ｊ＝１２．５，５．０Ｈｚ，１Ｈ），４．１０（ｄｄ，Ｊ＝１０．０，８．５Ｈｚ，１Ｈ），３．９９（ｄｄ，Ｊ＝１２．０，２．０Ｈｚ，１Ｈ），３．８０（ｂｒ，２Ｈ），３．６９（ｓ，３Ｈ），３．５８－３．６２（ｍ，２Ｈ），３．４４（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．０，４．５，２．５Ｈｚ，１Ｈ），１．９８（ｓ，３Ｈ），１．９３８（ｓ，３Ｈ），１．９３７（ｓ，３Ｈ）．
　１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７１．０，１６９．５，１６９．１，１５５．６，１５１．０，１３８．７，１３８．２，１３５．５，１３３．９，１３３．４，１３３．２，１２８．７，１２８．４，１２８．２３，１２８．２０，１２８．０６，１２８．０５，１２７．９，１２７．２，１２６．５，１２６．２，１２５．７，１２３．５，１１８．９，１１４．５，１００．７，９７．８，８０．６，７８．５，７６．８，７５．２，７４．８，７４．１，７３．８，７３．１，７２．１，６９．９，６７．８，６２．２，５５．７８，５５．７５，２１．１，２０．９４，２０．８５．
　ＨＲＭＳ（ＥＳＩ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋　ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ５８Ｈ５8ＮＯ１６：１０２４．３７５０；ｆｏｕｎｄ　１０２４．３７０６．
　下記文献とスペクトルの一致を確認した。
　文献１）Ｏｒｇ．Ｂｉｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２０１８，１６，４７２０－４７２７．
　実施例６
　４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－４－Ｏ－｛３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－β－Ｄ－グルコピラノシル｝－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｃ－９で示される化合物）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000229
　４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－４－Ｏ－｛２，４，６－トリ－Ｏ－アセチル－３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－β－Ｄ－グルコピラノシル｝－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｃ－８で示される化合物）（３０．００ｇ，２９．２９ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１５０ｍＬ）溶液に、メタノール（９０ｍＬ）及びトリフルオロ酢酸メチル（３．７５ｇ，２９．２９ｍｍｏｌ）を加えて２５℃で１０分間撹拌後、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（１ｍｏｌ／Ｌのテトラヒドロフラン溶液）（１４．７ｍＬ，１４．６５ｍｍｏｌ）を加えた。その後、５５℃に昇温し、２時間撹拌後、ＨＰＬＣで反応の終了を確認した。反応液を２５℃に冷却し、酢酸（１．７６ｇ，２９．２９ｍｍｏｌ）及び酢酸エチル（３００ｍＬ）の順に加えた。この溶液を１％塩化ナトリウム水溶液（３００ｍＬ）で２度洗浄後、減圧条件下、液量が９０ｍＬになるまで濃縮した。酢酸エチル（４５０ｍＬ）を加え、再度液量が９０ｍＬになるまで濃縮、さらにアセトニトリル（４５０ｍＬ）を加え、液量が９０ｍＬになるまで濃縮し、４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－４－Ｏ－｛３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－β－Ｄ－グルコピラノシル｝－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｃ－９で示される化合物）をアセトニトリル溶液として得た。このものを次工程にそのまま使用した。
　実施例７
　４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－４－Ｏ－｛４，６－Ｏ－ベンジリデン－３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－β－Ｄ－グルコピラノシル｝－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｃ－１０で示される化合物）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000230
　４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－４－Ｏ－｛３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－β－Ｄ－グルコピラノシル｝－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｃ－９で示される化合物）の溶液（９０ｍL）に、アセトニトリル（２１０ｍＬ）、ベンズアルデヒドジメチルアセタール（５．１３ｇ，３３．６９ｍｍｏｌ）及びｐ－トルエンスルホン酸一水和物（０．１７ｇ，０．８８ｍｍｏｌ）を加え、２５℃で３０分間撹拌した。この溶液にトルエン（６００ｍＬ）を加え、液量が３００ｍＬになるまで濃縮、この時点でＨＰＬＣにより反応の終了を確認した。さらに１－メチルイミダゾール（１２．０３ｇ，１４６．４７ｍｍｏｌ）を加え、液量が９０ｍＬになるまで濃縮し、４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－４－Ｏ－｛４，６－Ｏ－ベンジリデン－３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－β－Ｄ－グルコピラノシル｝－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｃ－１０で示される化合物）を１－メチルイミダゾール含有のトルエン溶液として得た。このものを次工程にそのまま使用した。
　実施例８
　４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－４－Ｏ－｛４，６－Ｏ－ベンジリデン－３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－２－Ｏ－（トリフルオロメタンスルホニル）－β－Ｄ－グルコピラノシル｝－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｃ－１１で示される化合物（式中、Ｘ１はＴｆ基である））
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000231
　実施例７で得られた４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－４－Ｏ－｛４，６－Ｏ－ベンジリデン－３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－β－Ｄ－グルコピラノシル｝－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｃ－１０で示される化合物）の溶液（９０ｍL、１－メチルイミダゾール含有）に酢酸エチル（２１０ｍＬ）を加えて、０℃に冷却した。この溶液に、トリフルオロメタンスルホン酸無水物（１６．５３ｇ，５８．５９ｍｍｏｌ）を１時間かけて滴下し、その後３０分間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応の終了を確認後、水（３００ｍＬ）を加え、有機層と水層に分離した。有機層を水（３００ｍＬ）で２度、飽和塩化ナトリウム水溶液（１５０ｍＬ）で１度洗浄後、減圧条件下、液量が９０ｍＬになるまで濃縮した。酢酸エチル（３００ｍＬ）を加え、再度液量が９０ｍＬになるまで濃縮し、４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－４－Ｏ－｛４，６－Ｏ－ベンジリデン－３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－２－Ｏ－（トリフルオロメタンスルホニル）－β－Ｄ－グルコピラノシル｝－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｃ－１１で示される化合物（式中、Ｘ１はＴｆ基である））を酢酸エチル溶液として得た。このものを次工程にそのまま使用した。
　実施例９
　４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－４－Ｏ－｛４，６－Ｏ－ベンジリデン－３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－β－Ｄ－マンノピラノシル｝－２－（２－カルボキシベンズアミド）－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｃ－１３で示される化合物）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000232
　実施例８で得られた４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－４－Ｏ－｛４，６－Ｏ－ベンジリデン－３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－２－Ｏ－（トリフルオロメタンスルホニル）－β－Ｄ－グルコピラノシル｝－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｃ－１１で示される化合物（式中、Ｘ１はＴｆ基である））の溶液（９０ｍL）にジメチルスルホキシド（１５０ｍＬ）及び酢酸テトラブチルアンモニウム（１７．６７ｇ，５８．５９ｍｍｏｌ）を加えて、３０℃に昇温し、１７時間撹拌後、ＨＰＬＣにより反応の終了を確認した。この反応液にトルエン（１５０ｍＬ）を加え、減圧条件下、液量が１６５ｍＬになるまで濃縮した。メタノール（４５ｍＬ）及び５０％水酸化ナトリウム水溶液（３．５２ｇ，８７．８８ｍｍｏｌ）を加え、２５℃で１．５時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応の終了を確認後、酢酸エチル（４５０ｍＬ）及び水（３００ｍＬ）を加えて分液した。有機層に水（３００ｍＬ）を加えて、０℃に冷却し、強撹拌下、６規定塩酸でｐＨ２．７３に調整した。分液した有機層にテトラヒドロフラン（３００ｍＬ）を加え、減圧条件下、液量が１５０ｍＬになるまで濃縮した。テトラヒドロフラン（３００ｍＬ）を加え、再度液量が９０ｍＬになるまで濃縮し、内温４５℃に温度調整した。テトラヒドロフラン（６０ｍＬ）を加えた後、２５℃に冷却し、２－プロパノール（１５０ｍＬ）及び水（１５ｍＬ）を加え、４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－４－Ｏ－｛４，６－Ｏ－ベンジリデン－３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－β－Ｄ－マンノピラノシル｝－２－（２－カルボキシベンズアミド）－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｃ－１３で示される化合物）（３０ｍｇ）を添加した。２５℃で１４時間撹拌し、結晶の析出を確認した後、２－プロパノール（２１０ｍＬ）を１時間かけて滴下し、０℃に冷却した。２時間撹拌後、析出した結晶を濾過し、結晶を０℃に冷却した２－プロパノール（１５０ｍＬ）で洗浄した。得られた結晶を減圧下４０℃で乾燥し、４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－４－Ｏ－｛４，６－Ｏ－ベンジリデン－３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－β－Ｄ－マンノピラノシル｝－２－（２－カルボキシベンズアミド）－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｃ－１３で示される化合物）（２７．７４ｇ，収率９４．３％，式Ｃ－８で示される化合物基準）を得た。
※式Ｃ－１２で示される化合物→式Ｃ－１３で示される化合物の工程はワンポットで実施した。
※種晶に関しては、反応液を一部小分けし、濃縮して固体を析出させたものを使用した。
※本反応は、東京化成工業株式会社製（製品コード：Ｔ２６９４、純度：＞９０．０％）及びＳｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ社製（製品コード：８６８４９、純度：＞９０％）の酢酸テトラブチルアンモニウムを使用すると良好に反応が進行する。その他のメーカーの酢酸テトラブチルアンモニウムを使用した際に、反応の遅延が発生したことがあるため、その場合は、酢酸セシウムを用いる代替法が好ましい（以下に詳細を記載）。
※式Ｃ－１１で示される化合物→式Ｃ－１２で示される化合物への変換は、酢酸セシウム（３当量）、ジメチルスルホキシド、５０℃、２４時間の条件においても実施可能であった。その後、同様の反応（式Ｃ－１２で示される化合物→式Ｃ－１３で示される化合物）、後処理を行うことで、式Ｃ－１３で示される化合物を取得できた。
　１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．０２（ｄｄ，Ｊ＝６．０，２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６９－７．８３（ｍ，４Ｈ），７．３８－７．４９（ｍ，１２Ｈ），７．３２－７．３４（ｍ，２Ｈ），７．１６－７．２９（ｍ，８Ｈ），６．９７（ｄｄｄ，Ｊ＝９．０，４．０，２．５Ｈｚ，２Ｈ），６．７６（ｄｄｄ，Ｊ＝９．５，３．５，２．５Ｈｚ，２Ｈ），５．５１（ｓ，１Ｈ），５．４０（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ），４．８３－４．９１（ｍ，３Ｈ），４．７６（ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，１Ｈ），４．５５（ｄ，Ｊ＝０．５Ｈｚ，１Ｈ），４．４９（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．３６（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．２６－４．３０（ｍ，１Ｈ），４．１６（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ），４．０５－４．０９（ｍ，２Ｈ），３．９９（ｄｄ，Ｊ＝３．０，０．５Ｈｚ，１Ｈ），３．９３（ｔ，Ｊ＝９．５Ｈｚ，１Ｈ），３．８０－３．８６（ｍ，２Ｈ），３．７１（ｓ，３Ｈ），３．６５－３．６９（ｍ，１Ｈ），３．５６（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ），３．５１（ｄｄ，Ｊ＝１０．０，３．５Ｈｚ，１Ｈ），３．１３（ｔｄ，Ｊ＝９．５，５．０Ｈｚ，１Ｈ）．
　１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７０．９，１６８．４，１５５．３，１５１．４，１３８．７，１３８．０，１３７．６，１３６．２，１３５．４，１３３．４，１３３．３．，１３２．２，１３２．１，１３０．７，１３０．３，１２９．２，１２８．６，１２８．４９，１２８．４５，１２８．１１，１２８．０７，１２８．０，１２７．８９，１２７．８７，１２７．８，１２６．８，１２６．４，１２６．３，１２６．２，１２５．８，１１８．６，１１４．７，１０１．７，１００．４，９９．１，７８．３，７６．７，７６．４，７５．１，７３．７，７３．３，７２．５，６９．９，６９．４，６８．５，６７．０，５５．８，５４．４．
　ＨＲＭＳ（ＥＳＩ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋　ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ５９Ｈ５８ＮＯ１４：１００４．３８５２；ｆｏｕｎｄ　１００４．３８７３．
　実施例１０
　４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－４－Ｏ－｛４，６－Ｏ－ベンジリデン－３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－β－Ｄ－マンノピラノシル｝－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｃ－１４で示される化合物）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000233
　４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－４－Ｏ－｛４，６－Ｏ－ベンジリデン－３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－β－Ｄ－マンノピラノシル｝－２－（２－カルボキシベンズアミド）－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｃ－１３で示される化合物）（６．００ｇ，５．９８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（３０ｍＬ）溶液に、１－ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物（０．１８ｇ，１．２０ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．８５ｇ，６．５７ｍｍｏｌ）及び１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド塩酸塩（１．２６ｇ，６．５７ｍｍｏｌ）を加えて４０℃に昇温し、３１時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応の終了を確認後、反応溶液を０℃に冷却後、酢酸エチル（９０ｍＬ）及び水（６０ｍＬ）を加え、強撹拌下で６規定塩酸をｐＨ７になるまで添加した。有機層と水層を分離後、有機層を水（６０ｍＬ）及び飽和食塩水（３０ｍＬ）で洗浄した。この溶液を減圧条件下、液量が１２ｍＬに達するまで濃縮した。テトラヒドロフラン（６０ｍＬ）を加え、再度液量が９ｍＬに達するまで濃縮し、粗体の４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－４－Ｏ－｛４，６－Ｏ－ベンジリデン－３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－β－Ｄ－マンノピラノシル｝－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｃ－１４で示される化合物）のテトラヒドロフラン溶液を得た。このものを次工程にそのまま使用した。
　実施例１１
　４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－４－Ｏ－｛２－Ｏ－ベンジル－４，６－Ｏ－ベンジリデン－３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－β－Ｄ－マンノピラノシル｝－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｃ－１５で示される化合物）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000234
　粗体の４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－４－Ｏ－｛４，６－Ｏ－ベンジリデン－３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－β－Ｄ－マンノピラノシル｝－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｃ－１４で示される化合物）の溶液に、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド（６０ｍＬ）、ベンジルブロミド（１．５３ｇ，８．９６ｍｍｏｌ）、トリフルオロ酢酸メチル（０．１５ｇ，１．２０ｍｍｏｌ）及びモレキュラーシーブ４Ａ（１．８ｇ）を加えて０℃に冷却し、リチウムｔｅｒｔ－ブトキシドのテトラヒドロフラン溶液（注：本溶液は、２－メチルー２－プロパノール（０．６６ｇ，８．９６ｍｍｏｌ）及びテトラヒドロフラン（２．４ｍＬ）の混合溶液を０℃に冷却し、ノルマルブチルリチウムのヘキサン溶液（１．５５ｍｏｌ／Ｌ）（５．７８ｍＬ，８．９６ｍｍｏｌ）を加えて３０分間撹拌したものを使用した）を添加して３時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応の終了を確認後、エチレンジアミン（無水）（０．１８ｇ，２．９９ｍｍｏｌ）を加え、さらに１時間撹拌した。この溶液に酢酸（０．７２ｇ，１１．９５ｍｍｏｌ）を加え、濾過した。酢酸エチル（９０ｍＬ）でモレキュラーシーブ４Ａを洗浄後、水（６０ｍＬ）を加え、分液した。有機層を水（６０ｍＬ）で２度洗浄後、減圧条件下、液量が１２ｍＬに達するまで濃縮した。トルエン（３０ｍＬ）を加え、再度液量が１２ｍＬに達するまで濃縮、トルエン（１８ｍＬ）及びシリカゲル６０Ｎ（球状、関東化学製，粒子径：４０－５０μｍ）（９ｇ）を加え、２５℃で３０分間撹拌した。懸濁液を濾過、シリカゲルをトルエン（１９１ｍＬ）及び酢酸エチル（１９ｍＬ）の混合溶液で洗浄した。濾液を減圧条件下、液量が９ｍＬに達するまで濃縮し、粗体の４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－４－Ｏ－｛２－Ｏ－ベンジル－４，６－Ｏ－ベンジリデン－３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－β－Ｄ－マンノピラノシル｝－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｃ－１５で示される化合物）のトルエン溶液を得た。
　実施例１２
　４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－４－Ｏ－｛２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－β－Ｄ－マンノピラノシル｝－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ－４で示される化合物）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000235
　得られた粗体の４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－４－Ｏ－｛２－Ｏ－ベンジル－４，６－Ｏ－ベンジリデン－３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－β－Ｄ－マンノピラノシル｝－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｃ－１５で示される化合物）の溶液（式Ｃ－１４で示される化合物基準で５．５０ｇ（５．４８ｍｍｏｌ）分を使用）に、ジクロロメタン（１６．５ｍＬ）及びモレキュラーシーブ４Ａ（５５０ｍｇ）を加えて０℃に冷却し、ボランーテトラヒドロフラン錯体（０．９１ｍｏｌ／Ｌのテトラヒドロフラン溶液）（１８．０６ｍＬ，１６．４３ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸銅（ＩＩ）（０．５９ｇ，１．６４ｍｍｏｌ）を添加して３時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応の終了を確認後、メタノール（５．５ｍＬ）を加え、さらに３０分間撹拌した。この溶液を濾過し、酢酸エチル（１１０ｍＬ）でモレキュラーシーブ４Ａを洗浄後、０．５規定塩酸（５５ｍＬ）を加え、３０分間撹拌した。有機層と水層を分離後、有機層を０．５規定塩酸（５５ｍＬ）及び飽和食塩水（２７．５ｍＬ）で洗浄し、この溶液を減圧下、濃縮乾固した。このものをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル３００ｇ，ヘキサン：酢酸エチル＝５５：４５→３０：７０）によって精製し、４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－４－Ｏ－｛２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－β－Ｄ－マンノピラノシル｝－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ－４で示される化合物）（４．９４ｇ，収率８３．６％，ＨＰＬＣ面積：９８．５４％）を得た。
　１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．６７－７．８４（ｍ，８Ｈ），７．４４－７．４９（ｍ，４Ｈ），７．４０（ｄｄ，Ｊ＝８．０，１．５Ｈｚ，１Ｈ），７．２１－７．３３（ｍ，１３Ｈ），６．８７－６．９３（ｍ，５Ｈ），６．８２（ｄｄｄ，Ｊ＝９．５，４．０，２．５Ｈｚ，２Ｈ），６．７０（ｄｄｄ，Ｊ＝９．０，４．０，２．０Ｈｚ，２Ｈ），５．６４（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），４．９４（ｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ，１Ｈ），４．９１（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ），４．９０（ｓ，２Ｈ），４．６６（ｓ，２Ｈ），４．６０（ｄ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ，１Ｈ），４．５９（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．５５（ｓ，１Ｈ），４．４０－４．４６（ｍ，３Ｈ），４．３３（ｄｄ，Ｊ＝１１．０，９．０Ｈｚ，１Ｈ），４．０６（ｄｄ，Ｊ＝９．５，８．５Ｈｚ，１Ｈ），３．８０－３．８５（ｍ，２Ｈ），３．７０－３．７６（ｍ，２Ｈ），３．７１（ｓ，３Ｈ），３．６１－３．６８（ｍ，２Ｈ），３．４５－３．４８（ｍ，１Ｈ），３．４４（ｄｄ，Ｊ＝９．５，３．０Ｈｚ，１Ｈ），３．２３（ｄｄｄ，Ｊ＝９．５，５．５，２．５Ｈｚ，１Ｈ），１．９７（ｂｒ－ｔ，１Ｈ）．
１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１５５．６，１５１．１，１３８．９，１３８．６４，１３８．５６，１３８．０，１３５．９，１３４．０，１３３．５，１３３．２，１３１．８，１２８．７，１２８．６，１２８．４，１２８．３，１２８．２０，１２８．１９，１２８．１５，１２８．１，１２０．０４，１２８．０１，１２７．９，１２７．７，１２７．６，１２７．３，１２６．４，１２６．３，１２６．１，１２５．８，１２３．６，１１９．０，１１４．６，１０１．２，９８．０，８２．６，７９．０，７７．２，７５．９，７５．４，７５．３，７５．２，７５．１，７４．８，７４．７，７３．８，７２．１，６８．７，６２．６，５５．８２，５５．７８，３４．４，３０．５．
　ＨＲＭＳ（ＥＳＩ－）［Ｍ＋ＨＣＯ２］－　ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ６７Ｈ６４ＮＯ１５：１１２２．４２８１；ｆｏｕｎｄ　１１２２．４２８５．
＜式Ａ－１２で示される化合物の合成＞
　式Ａ－１２で示される化合物を、以下の合成スキーム２に従って合成した。
　［合成スキーム２］
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000236
　実施例１３
　４－メトキシフェニル　４－Ｏ－アセチル－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｆ’－１で示される化合物）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000237
（小工程Ｚ－１）
　４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’－９で示される化合物）（５０．０ｇ，８３．９４ｍｍｏｌ）の酢酸エチル（２００ｍＬ）溶液にトリエチルアミン（１１．０４ｇ，１０９．１２ｍｍｏｌ）、ジメチルアミノピリジン（０．３１ｇ，２．５２ｍｍｏｌ）及び無水酢酸（１１．１０ｇ，１０９．１２ｍｍｏｌ）を加え、２０℃で４時間攪拌した。反応終了をＨＰＬＣにより確認後、エタノール（５００ｍＬ）及び水（１５０ｍＬ）を滴下した。スラリー液を１時間攪拌し、析出した結晶を濾過して、濾別した結晶をエタノールと水の混合液（１５０／５０ｍＬ）で洗浄して、４０℃で減圧乾燥し、４－メトキシフェニル　４－Ｏ－アセチル－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｆ’－１で示される化合物）（４９．０ｇ，収率９１％）を白色結晶として得た。
　１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．８５－７．６０（ｍ，４Ｈ），７．２４－７．３４（ｍ，５Ｈ），７．０４－７．００（ｍ，２Ｈ），６．９６－６．８７（ｍ，３Ｈ），６．８４（ｄｔ，Ｊ＝９．０，３．０Ｈｚ，２Ｈ），６．６７（ｄｔ，Ｊ＝８．５，２．５Ｈｚ，２Ｈ），５．６６（ｔ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１Ｈ），５．２２－５．１８（ｍ，１Ｈ），４．６４（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．５５－４．４８（ｍ，４Ｈ），４．３６（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），３．９０－３．８４（ｍ，１Ｈ），３．６８（ｓ，３Ｈ），３．６８－３．６４（ｍ，２Ｈ），１．９８（ｓ，３Ｈ）．
　１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１６９．６，１５５．３，１５０．６，１３７．８，１３７．５，１３３．９，１２８．２，１２８．０，１２７．７，１２７．７，１２７．５，１２７．４，１２３．３，１１８．４，１１４．３，９７．４，７６．８，７３．９，７３．７，７３．５，７２．２，６９．４，５５．４，５５．３，２０．８．
　ＨＲＭＳ（ＥＳＩ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋　ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ３７Ｈ３６ＮＯ９：６３８．２３８５；ｆｏｕｎｄ　６３８．２４０１．
　実施例１４
　４－Ｏ－アセチル－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｆ－２で示される化合物）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000238
（小工程Ｚ－２）
　４－メトキシフェニル　４－Ｏ－アセチル－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｆ’－１で示される化合物）（４９．０ｇ，７６．８４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（３９２ｍＬ）、ヘキサフルオロ２－プロパノール（２４５ｍＬ）及び水（２５ｍＬ）の溶液に、２５℃以下で［ビス（トリフルオロアセトキシ）ヨード］ベンゼン（４６．３ｇ，１０７．５８ｍｍｏｌ）を加え、同温にて４時間攪拌した。反応終了をＨＰＬＣにより確認後、酢酸エチル（１２２５ｍＬ）を加えて、氷冷した後、炭酸水素ナトリウム（２４．５ｇ）及び亜硫酸ナトリウム（２４．５ｇ）を溶解した水（４９０ｍＬ）を注加し、分液して、有機層を得た。得られた有機層を炭酸水素ナトリウム（２４．５ｇ）及び亜硫酸ナトリウム（２４．５ｇ）を溶解した水（４９０ｍＬ）で再度洗浄し、さらに２０％食塩水（２４５ｇ）で洗浄した。得られた有機層を４９０ｍＬまで減圧濃縮し（濃縮中に結晶の析出を確認した）、ヘプタン（７３５ｍＬ）を滴下した。得られたスラリー液を０℃－５℃に冷却後、同温にて１時間攪拌し、析出した結晶を濾過した。濾別した結晶を０℃－５℃の酢酸エチルとヘプタンの混合液（３９／１１８ｍＬ）で洗浄して、４０℃で減圧乾燥し、４－Ｏ－アセチル－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｆ－２で示される化合物）（３７．５ｇ，収率９２％）を白色結晶として得た。
　１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．７１－７．６５（ｍ，４Ｈ），７．３４－７．２６（ｍ，５Ｈ），７．０１－６．８７（ｍ，５Ｈ），５．３６（ｄｄ，Ｊ＝８．０，８．０ Ｈｚ，１Ｈ），５．１３（ｄｄ，Ｊ＝８．４，１０．０ Ｈｚ，１Ｈ ），４．５９（ｄ，Ｊ＝１２．４ Ｈｚ，１Ｈ），４．５４（ｓ，２Ｈ），４．５０（ｄｄ，Ｊ＝８．４，１０．４Ｈｚ，１Ｈ），４．３３（ｄ，Ｊ＝１２．４ Ｈｚ，１Ｈ），４．１７（ｄｄ，Ｊ＝８．４，１０．４ Ｈｚ，１Ｈ），３．７９（ｄｄｄ，Ｊ＝８．４，５．２，４．８ Ｈｚ，１Ｈ ），３．６１－３．５３（ｍ，２Ｈ），３．４１（ｄ，Ｊ＝８．０ Ｈｚ，１Ｈ），１．９３（ｓ，３Ｈ）．
　１３Ｃ－ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１６９．８，１６８．１，１３７．７，１３７．７，１３４．０，１３１．６，１２８．４，１２８．２，１２８．０，１２７．８． １２７．７，１２７．５，１２３．４，１１６．２，９２．９，７３．９，７３．７，７３．５，７２．２，６９．３，５７．１，２０．９．
　ＨＲＭＳ（ＥＳＩ－）［Ｍ－Ｈ］－　ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ３０Ｈ２８ＮＯ８：５３０．１８２０；ｆｏｕｎｄ　５３０．１８４１．
　実施例１５
　４－Ｏ－アセチル－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－Ｏ－［２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルエタンイミドイル］－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ－１２で示される化合物）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000239
（小工程Ｚ－３）
　４－Ｏ－アセチル－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｆ－２で示される化合物）（２０．０ｇ，３７．６３ｍｍｏｌ）を５００ｍＬナスフラスコに加え、ジクロロメタン（２００ｍＬ）及びモレキュラーシーブ４Ａ粉末（１０μｍ以下，１０．０ｇ）を加えた。窒素下、０℃にてＮ－メチルイミダゾール（３．４０ｇ，４１．３９ｍｍｏｌ）及び２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルアセトイミドイルクロリド（８．２０ｇ，３９．５１ｍｍｏｌ）を順次加え、同温にて１８時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認した後、反応液をフィルターろ過し、ジクロロメタン（１００ｍＬ）にて洗浄した。ろ液をジクロロメタンにて充填した中性シリカゲルパッド（シリカゲル６０Ｎ，関東化学製，粒子径：４０－５０μｍ，６０ｇ）でろ過し、１００ｍＬずつ分取した。シリカゲルパッドをジクロロメタン（４００ｍＬ，１００ｍＬずつ分取）及び酢酸エチル／ジクロロメタン（１：４，４００ｍＬ，１００ｍＬずつ分取）にて洗浄し、選定フラクションを、液量が４０ｍＬに達するまで濃縮した。トルエン（２００ｍＬ）を加え、再度液量が４０ｍＬに達するまで濃縮、さらにトルエン（２００ｍＬ）を加え、液量が４０ｍＬに達するまで濃縮し、粗体の４－Ｏ－アセチル－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－Ｏ－［２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルエタンイミドイル］－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ－１２で示される化合物）をトルエン溶液として得た。このものを次工程にそのまま使用した。
＜式Ａ－１６で示される化合物の合成＞
　式Ａ－１６で示される化合物を、以下の合成スキーム３に従って合成した。
　［合成スキーム３］
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000240
　まず、式Ｇ－１で示される化合物を、以下の合成スキームに従って合成した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000241
　実施例１６
　アリルα―Ｄ－ガラクトピラノシド（Ｇ－０で示される化合物）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000242
　Ｄ－ガラクトピラノース（２０．００ｇ，１１１．０１ｍｍｏｌ）を５００ｍＬ四径フラスコに添加後、アリルアルコール（２００．０ｍＬ）を加えた。窒素雰囲気下、室温にてｐ－ＴｓＯＨ・Ｈ２Ｏ（２．１１ｇ，１１．１０ｍｍｏｌ）を添加し、７０℃に昇温し、２４時間攪拌した。反応液を４０℃まで冷却し、トリエチルアミン（１．６９ｇ、１６．６５ｍｍｏｌ）を添加して５分間攪拌した後、反応液を液量１００ｍＬまで減圧濃縮した。この濃縮液にｎＢｕＯＨ（２００ｍＬ）を３０分間かけて滴下し、室温にて１時間攪拌した。その後、反応液を液量８０ｍＬまで減圧濃縮し、室温下終夜攪拌した。懸濁液をろ過し、結晶を０℃のｎＢｕＯＨ（４０ｍＬ）にて洗浄し、４０℃にて減圧乾燥を行って、アリルα―Ｄ－ガラクトピラノシド（Ｇ－０で示される化合物）（８．４１ｇ，収率３４．４％）を白色結晶として得た。
　１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＭＥＴＨＡＮＯＬ－Ｄ４）δ５．９７（ｑｄ，Ｊ＝１１．２，５．７Ｈｚ，１Ｈ），５．３３（ｄｄ，Ｊ＝１７．２，１．７Ｈｚ，１Ｈ），５．１７（ｄｄ，Ｊ＝１０．６，１．４Ｈｚ，１Ｈ），４．２２（ｄｄ，Ｊ＝１３．２，５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．０４（ｄｄ，Ｊ＝１３．０，６．０Ｈｚ，１Ｈ），３．８８（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ），３．８２－３．６６（ｍ，５Ｈ）．
　１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＭＥＴＨＡＮＯＬ－Ｄ４）δ６２．７４，６９．３６，７０．２１，７１．０８，７１．５１，７２．４９，９９．４６，１１７．４７，１３５．６９．
　ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２２１（Ｍ＋Ｈ）＋，２１９（Ｍ－Ｈ）－．
　実施例１７
　プロパ－２－エン－１－イル　４．６－Ｏ－ベンジリデン－α－Ｄ－ガラクトピラノシド（式Ｇ－１で示される化合物）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000243
　窒素雰囲気下、アセトニトリル（５．０ｍＬ）、ベンズアルデヒドジメチルアセタール（５．１８ｇ，３４．１ｍｍｏｌ）及びｐ－ＴｓＯＨ・Ｈ２Ｏ（４３１．９ｍｇ，２．２７ｍｍｏｌ）を１００ｍＬナスフラスコに添加後、アリルα―Ｄ－ガラクトピラノシド（５．００ｇ，２２．７ｍｍｏｌ）を少しずつ加えた。溶液を４０℃に昇温し、３０分間攪拌した。続いて、トリエチルアミン（３４４．６ｍｇ、３．４１ｍｍｏｌ）を添加して５分間攪拌した後、４０℃下イソプロピルアルコール（７５ｍＬ）を滴加した。反応液を液量２５ｍＬまで減圧濃縮し、０℃で終夜攪拌を行った。続いて、懸濁液をろ過後、得られた結晶を０℃に冷やしたイソプロピルアルコール（５ｍＬ）にて洗浄し、４０℃にて減圧乾燥を行ってプロパ－２－エン－１－イル　４．６－Ｏ－ベンジリデン－α－Ｄ－ガラクトピラノシド（式Ｇ－１で示される化合物）（５．３５ｇ，収率７６．３％）を白色結晶として得た。
　１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＭＥＴＨＡＮＯＬ－Ｄ４）δ７．５３－７．５２（ｄｄ，Ｊ＝７．５，２．０Ｈｚ，２Ｈ），７．３４（ｍ，３Ｈ），５．９８（ｑｄ，Ｊ＝１１．１，５．４Ｈｚ，１Ｈ），５．５９（ｓ，１Ｈ），５．３５（ｄ，Ｊ＝１８．９Ｈｚ，１Ｈ），５．１９（ｄ，Ｊ＝１０．３Ｈｚ，１Ｈ），４．９５（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１Ｈ），４．２６（ｄ，Ｊ＝３．４Ｈｚ，１Ｈ），４．２２（ｄｄ，Ｊ＝１３．２，５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．１３（ｓ，２Ｈ），４．０８（ｑ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ），３．９２（ｄｄｄ，Ｊ＝２４．１，１０．３，３．４Ｈｚ，２Ｈ），３．７４（ｓ，１Ｈ）．　１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＭＥＴＨＡＮＯＬ－Ｄ４）δ６４．６０，６９．７０，７０．０３，７０．０８，７０．３４，７８．０７，１００．２２，１０２．２８，１１７．５８，１２７．５４，１２９．０２，１２９．８６，１３５．５９，１３９．７７．
　ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３０９（Ｍ＋Ｈ）＋，３０７（Ｍ－Ｈ）－．
　実施例１８
　プロプ－２－エン－１－イル ２，３－ジ－О－ベンゾイル－４，６－О－ベンジリデン－α－Ｄ－ガラクトピラノシド（式Ｇ－２で示される化合物）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000244
（小工程Ｖ－１）
　プロプ－２－エン－１－イル ４，６－О－ベンジリデン－α－Ｄ－ガラクトピラノシド（式Ｇ－１で示される化合物）（３０．０ｇ，９７．３０ｍｍｏｌ）のピリジン（１５０ｍＬ）溶液に、塩化ベンゾイル（４７．８７ｇ，３４０．５４ｍｍｏｌ）を４０℃以下で滴下し、同温で２時間攪拌した。反応終了をＨＰＬＣにて確認後、２０℃－３０℃に冷却し、エタノール（４５０ｍＬ）を注加後、水（３００ｍＬ）を３０分間かけて滴下した。スラリー液を２０℃－３０℃で１時間攪拌後、析出した結晶を濾過し、濾別した結晶をエタノールと水の混合液（７５／７５ｍＬ）で洗浄して、４０℃で減圧乾燥し、プロプ－２－エン－１－イル ２，３－ジ－О－ベンゾイル－４，６－О－ベンジリデン－α－Ｄ－ガラクトピラノシド（式Ｇ－２で示される化合物）（４７．９ｇ，収率９５％）を白色結晶として得た。
　１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．０３－７．９８（ｍ，４Ｈ），７．５５－７．４６（ｍ，４Ｈ），７．４０－７．３０（ｍ，７Ｈ），５．９０－５．７８（ｍ，２Ｈ），５．８２（ｓ，１Ｈ），５．５７（ｓ，１Ｈ），５．４２（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ），５．３１（ｄｄ，Ｊ＝１７．２，１．７Ｈｚ，１Ｈ），５．１５（ｄｄ，Ｊ＝１．７，１０．５Ｈｚ，１Ｈ），４．６６（ｓ，２Ｈ），４．３３（ｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ，１Ｈ），４．２６（ｄｄ，Ｊ＝１２．５，４．５Ｈｚ，１Ｈ），４．１２（ｄｄ，Ｊ＝１２．５，１．０Ｈｚ，１Ｈ），４．０８（ｄｄ，Ｊ＝６．５，１３．５Ｈｚ，１Ｈ），３．９５（ｓ，１Ｈ）．
　１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１６６．１，１６５．８，１３７．５，１３３．４，１３３．２，１３３．１，１２９．８，１２９．７，１２９．５，１２９．４，１２８．８，１２８．３，１２８．１，１２６．１，１１７．５，１００．６，９６．２，７４．２，６９．３，６９．１，６８．７，６８．６，６２．４．
　ＨＲＭＳ（ＥＳＩ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋　ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ３０Ｈ２９Ｏ８：５１７．１８５７；ｆｏｕｎｄ　５１７．１８８０．
　実施例１９
　プロプ－２－エン－１－イル ２，３－ジ－О－ベンゾイル－α－Ｄ－ガラクトピラノシド（式Ｇ－３で示される化合物）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000245
（小工程Ｖ－２）
　プロプ－２－エン－１－イル ２，３－ジ－О－ベンゾイル－４，６－О－ベンジリデン－α－Ｄ－ガラクトピラノシド（式Ｇ－２で示される化合物）（４７．１ｇ，９１．１８ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（３７７ｍＬ）溶液を４５℃に加温し、水（２４ｍＬ）及び濃塩酸（９．２ｇ，９１．１８ｍｍｏｌ）を加え、同温で３０分間攪拌した。水（３５３ｍＬ）を４５℃－５０℃で３時間かけて滴下後、さらに３０分間攪拌した。反応終了をＨＰＬＣにより確認後、酢酸ナトリウム（１１．２２ｇ，１３６．７８ｍｍｏｌ）を加え、酢酸エチル（９４２ｍＬ）及び水（４７１ｍＬ）を注加し、２５℃以下に冷却後、分液して、有機層を得た。得られた有機層を水（４７１ｍＬ）で二回洗浄後、２０％食塩水（２３６ｍＬ）でさらに洗浄した。有機層を１４１ｍＬまで減圧濃縮し、トルエン（７０７ｍＬ）を加え、再度、１４１ｍＬまで減圧濃縮した。得られた濃縮液にトルエン（２３６ｍＬ）を加え、１４１ｍＬまで減圧濃縮した。濃縮液を０℃－５℃に冷却後、０℃－５℃に冷却した中性シリカゲル（シリカゲル６０Ｎ，関東化学製、粒子径：４０－５０μｍ，１４１ｇ）を含むトルエン（３３０ｍＬ）スラリー液を注加し、同温で１５分間攪拌して生成物をシリカゲルに吸着させた後、濾過した。生成物を含むシリカゲル固相を０℃－５℃のトルエン（９４２ｍＬ）で洗浄後（トルエン洗浄時のろ液は廃棄）、シクロペンチルメチルエーテル（７０７ｍＬ）で目的物をシリカゲルより脱着させ、プロプ－２－エン－１－イル ２，３－ジ－О－ベンゾイル－α－Ｄ－ガラクトピラノシド（式Ｇ－３で示される化合物）のシクロペンチルメチルエーテル溶液（定量値３６．２ｇ，定量収率９３％）を得た。本溶液を次工程に使用した。
　実施例２０
　メチル ５－アセトアミド－３，５－ジデオキシ－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノソナート 一水和物（式Ｇ－５で示される化合物）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000246
（小工程Ｖ－３）
　５－アセトアミド－３，５－ジデオキシ－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノソニック酸（式Ｇ－４で示される化合物）（４０．１ｇ，１２９．６６ｍｍｏｌ）及びオルトギ酸メチル（１５．６０ｍＬ，１４２．５９ｍｍｏｌ）のメタノール（３２１ｍＬ）溶液に硫酸（１．０ｇ，１０．２０ｍｍｏｌ）を加え、４０℃に加温し、３時間攪拌した。反応終了をＨＰＬＣにより確認後、２５℃に冷却し、ジメチルアセトアミド（４０ｍＬ）を加え、１６０ｍＬまで減圧濃縮した。得られた濃縮液を１５℃に温度調整し、水（２０ｍＬ）及び酢酸エチル（７２２ｍＬ）を注加して、２５℃で１時間攪拌後、スラリー液を０℃－５℃に冷却し、同温で２時間攪拌した。析出した結晶を濾過し、濾別した結晶を０℃－５℃の酢酸エチル（８０ｍＬ）で洗浄して、４０℃で減圧乾燥し、メチル ５－アセトアミド－３，５－ジデオキシ－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノソナート 一水和物（式Ｇ－５で示される化合物）（４１．１ｇ，収率９３％）を白色結晶として得た。
　１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ４．０７－３．９８（ｍ，２Ｈ），３．８５－３．７７（ｍ，２Ｈ），３．７８（ｓ，３Ｈ），３．７２－３．６８（ｍ，１Ｈ），３．６２（ｄｄ，Ｊ＝１０．９，５．７Ｈｚ，１Ｈ），３．４８（ｄｄ，Ｊ＝９．２，１．１Ｈｚ，１Ｈ），２．２２（ｄｄ，Ｊ＝１２．９，４．９Ｈｚ，１Ｈ），２．０２（ｓ，３Ｈ），１．８９（ｄｄ，Ｊ＝１２．６，１１．５Ｈｚ，１Ｈ）．
　１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ１７５．２，１７５．１，１７１．８，９６．６，７２．１，７２．０，７１．６，７０．１，６７．９，６４．８，５４．４，５４．３，５３．２，４０．７，２２．７，２２．７．
　ＨＲＭＳ（ＥＳＩ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋　ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ１２Ｈ２２ＮＯ９：３２４．１２８９；ｆｏｕｎｄ　３２４．１２８８．
　実施例２１
　メチル ５－アセトアミド－４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノソナート（式Ｇ－６で示される化合物）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000247
（小工程Ｖ－４）
　メチル ５－アセトアミド－３，５－ジデオキシ－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノソナート 一水和物（式Ｇ－５で示される化合物）（４０．３ｇ，１１８．０７ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（４０３ｍＬ）スラリー液を２５℃に温度調整し、無水酢酸（６０．２７ｇ，５９０．３６ｍｍｏｌ）及びパラトルエンスルホン酸一水和物（１．１２ｇ，５．８９ｍｍｏｌ）を加え、２５℃で２４時間攪拌した。その後、反応液を１５℃に冷却し、無水酢酸（１２．０５ｇ，１１８．０３ｍｍｏｌ）を加え、同温で４７時間攪拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、メタノール（４０ｍＬ）を加え、２５℃に温度調整し、同温にて２時間攪拌した。次に、酢酸ナトリウム（０．９７ｇ，１１．８２ｍｍｏｌ）を加え、更に同温にて１時間攪拌した。反応液を１２０ｍＬまで減圧濃縮し、０℃－５℃に冷却後、酢酸エチル（４０３ｍＬ）及び水（１６１ｍＬ）を注加し、０℃－５℃攪拌下、トリエチルアミンを加えて、ｐＨを７．０に調整した。分液により得られた有機層を１０％食塩水（１２１ｍＬ）で２回洗浄し、２００ｍＬまで減圧濃縮した。濃縮液に酢酸エチル（６０５ｍＬ）を加え、再度、２００ｍＬまで減圧濃縮した。濃縮液に酢酸エチル（４０ｍＬ）を加え、種晶を接種し、２５℃で４時間攪拌後、ヘプタン（３０２ｍＬ）を３０分間かけて滴下した。スラリー液を２５℃で２時間攪拌後、析出した結晶を濾過し、濾別した結晶を酢酸エチルとヘプタンの混合液（６７／１３５ｍＬ）で洗浄して、３５℃で減圧乾燥し、メチル ５－アセトアミド－４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノソナート（式Ｇ－６で示される化合物）（４４．１ｇ，収率７６％）を白色結晶として得た。
　１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ６．２８（ｄ，Ｊ＝１０．３Ｈｚ，１Ｈ），５．４１（ｄｄ，Ｊ＝４．６，２．３Ｈｚ，１Ｈ），５．２８－５．２３（ｍ，１Ｈ），５．２１－５．１４（ｍ，１Ｈ），５．０９（ｓ，１Ｈ），４．６２（ｄｄ，Ｊ＝１２．３，２．６Ｈｚ，１Ｈ），４．２８（ｄｄ，Ｊ＝１０．３，２．３Ｈｚ，１Ｈ），４．２１－４．１１（ｍ，１Ｈ），４．０４（ｄｄ，Ｊ＝１２．３，８．３Ｈｚ，１Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ），２．２４－２．２０（ｍ，２Ｈ），２．１６（ｓ，３Ｈ），２．１２（ｓ，３Ｈ），２．０３（ｓ，３Ｈ），２．０１（ｓ，３Ｈ），１．９１（ｓ，３Ｈ）．
　１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７１．５，１７１．１，１７０．８，１７０．３，１７０．２，１６８．９，９４．９，７２．１，７１．４，６９．１，６８．３，６２．５，５３．２，４９．１，３６．１，２３．０，２１．０，２０．８，２０．７，２０．７．
　ＨＲＭＳ（ＥＳＩ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋　ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ２０Ｈ３０ＮＯ１３：４９２．１７１２；ｆｏｕｎｄ　４９２．１７１２．
　実施例２２
　メチル ５－アセトアミド－４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－２－Ｏ－（２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルエタンイミドイル）－Ｄ－グリセロ－β－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノソナート（式Ｇ－７で示される化合物）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000248
（小工程Ｖ－５）
　メチル ５－アセトアミド－４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノソナート（式Ｇ－６で示される化合物）（４４．０ｇ，８９．５３ｍｍｏｌ）及びモレキュラーシーブス４Ａ粉末（粉末粒径１０μｍ以下）（２２ｇ）のジクロロメタン（３５２ｍＬ）スラリー液を２０℃に温度調整し、同温で３０分間攪拌後、２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルアセトイミドイルクロリド（２６．０２ｇ，１２５．３５ｍｍｏｌ）を加えた。続いて、Ｎ－メチルイミダゾール（１１．０３ｇ，１３４．３３ｍｍｏｌ）を滴下し、２０℃で７．５時間攪拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、反応液を濾過し、ジクロロメタン（８８ｍＬ）で洗浄して、濾液を得た。得られた濾液を０℃に冷却し、冷水（４４０ｍＬ）を加え、０℃－５℃攪拌下、トリエチルアミンを加えて、ｐＨを７．５に調整した。０℃－５℃にて３０分間攪拌後、分液し、得られた有機層を冷水（４４０ｍＬ）で２回、冷却した２０％食塩水（２２０ｍＬ）で洗浄し、８８ｍＬまで減圧濃縮した。濃縮液に酢酸エチル（４４０ｍＬ）を加え、再度、８８ｍＬまで減圧濃縮した。濃縮液にｔ－ブチルメチルエーテル（３０８ｍＬ）を加え、種晶を接種し、２０℃で４時間攪拌した。得られたスラリー液にヘプタン（２６４ｍＬ）を１時間かけて滴下し、同温にて２時間攪拌後、析出した結晶を濾過し、濾別した結晶をｔ－ブチルメチルエーテルとヘプタンの混合液（１３２／８８ｍＬ）で洗浄して、３５℃で減圧乾燥し、メチル ５－アセトアミド－４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－２－Ｏ－（２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルエタンイミドイル）－Ｄ－グリセロ－β－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノソナート（式Ｇ－７で示される化合物）（３９．５ｇ，収率６７％）を白色結晶として得た。
　１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．３０－７．２４（ｍ，２Ｈ），７．０９（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），６．７２（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），５．７６（ｄ，Ｊ＝９．７Ｈｚ，１Ｈ），５．４８－５．４５（ｍ，１Ｈ），５．３０（ｔｄ，Ｊ＝１０．９，４．８Ｈｚ，１Ｈ），５．１５－５．１０（ｍ，１Ｈ），４．６０（ｄｄ，Ｊ＝１２．６，２．３Ｈｚ，１Ｈ），４．３０（ｑ，Ｊ＝１０．３Ｈｚ，１Ｈ），４．２３（ｄｄ，Ｊ＝１０．３，２．３Ｈｚ，１Ｈ），４．１１（ｄｄ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ，７．７Ｈｚ，１Ｈ），３．８１（ｓ，３Ｈ），２．７９（ｄｄ，Ｊ＝１３．５，４．９Ｈｚ，１Ｈ），２．２１－２．１５（ｍ，１Ｈ），２．１６（ｓ，３Ｈ），２．１０（ｓ，３Ｈ），２．０７（ｓ，３Ｈ），１．９０（ｓ，３Ｈ），１．７５（ｓ，３Ｈ）．
　１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７１．０，１７０．７，１７０．４，１７０．２，１７０．１，１６５．３，１４２．６，１４１．０（ｑ，２ＪＣ－Ｆ＝３６．０Ｈｚ），１２８．８，１２４．６，１１９．０，１１５．１（ｑ，１ＪＣ－Ｆ＝２８４．４Ｈｚ），９９．７，７３．６，７１．９，６８．３，６８．０，６２．４，５３．１，４８．６，３５．６，２３．０，２０．８，２０．８，２０．７，２０．３．
　ＨＲＭＳ（ＥＳＩ＋）［Ｍ＋ＮＨ４］＋　ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ２８Ｈ３７Ｆ３Ｎ３Ｏ１３：６８０．２２７３；ｆｏｕｎｄ　６８０．２３１４．
　実施例２３
　メチル ４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－５－［アセチル（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ］－３，５－ジデオキシ－２－Ｏ－（２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルエタンイミドイル）－Ｄ－グリセロ－β－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノソナート（式Ｇ－８で示される化合物）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000249
（小工程Ｖ－６）
　メチル ５－アセトアミド－４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－２－Ｏ－（２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルエタンイミドイル）－Ｄ－グリセロ－β－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノソナート（式Ｇ－７で示される化合物）（３９．０ｇ，５８．８６ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（３９０ｍＬ）溶液に２炭酸ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（２７．０５ｇ，１２３．９４ｍｍｏｌ）及びジメチルアミノピリジン（１．８０ｇ，１４．７３ｍｍｏｌ）を加え、還流温度まで加温した。還流下で３０分間攪拌後、ＨＰＬＣにより反応終了を確認し、反応液を１１７ｍＬまで減圧濃縮した。濃縮液にトルエン（１９５ｍＬ）を加え、再度、１１７ｍＬまで減圧濃縮した。濃縮液をシリカゲル充填した漏斗（シリカゲル６０Ｎ，関東化学製、粒子径：４０－５０μｍ、１１７ｇ、トルエン湿式充填）を用いて、濾過し、トルエン・酢酸エチル混液（８／２）（９７５ｍＬ）にて洗浄して、濾液を得た。得られた濾液を減圧濃縮し（重量５９ｇとなるまで）、シクロペンチルメチルエーテル（２３ｍＬ）を加えた。溶液を２０℃に温度調整し、ヘプタン（１５６ｍＬ）を１５分間かけて滴下し、同温にて１時間攪拌した。結晶の析出を確認後、ヘプタン（３１２ｍＬ）を１時間かけて滴下し、析出した結晶を濾過し、濾別した結晶をヘプタン（７８ｍＬ）で洗浄して、３５℃で減圧乾燥し、メチル ４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－５－［アセチル（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ］－３，５－ジデオキシ－２－Ｏ－（２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルエタンイミドイル）－Ｄ－グリセロ－β－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノソナート（式Ｇ－８で示される化合物）（３７．０ｇ，収率８２％）を白色結晶として得た。
　１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）
　注）ｃａ．１／４異性体混合物として検出された。Ｍａｊｏｒ　ｉｓｏｍｅｒ：δ７．２７（ｔ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，２Ｈ），７．０９（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），６．７３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），５．７５－５．６５（ｍ，１Ｈ），５．３１（ｄ，Ｊ＝４．６Ｈｚ，１Ｈ），５．１８－５．１４（ｍ，１Ｈ），５．１５（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），４．５４（ｄｄ，Ｊ＝１２．０，２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．０８（ｄｄ，Ｊ＝１２．６，６．９Ｈｚ，１Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ），２．９０（ｄｄ，Ｊ＝１３．７，５．２Ｈｚ，１Ｈ），２．３９（ｓ，３Ｈ），２．２５（ｄｄ，Ｊ＝１３．７，１１．２Ｈｚ，１Ｈ），２．０９（ｓ，３Ｈ），２．０７（ｓ，３Ｈ），１．９９（ｓ，３Ｈ），１．７７（ｓ，３Ｈ），１．６２（ｓ，９Ｈ）．Ｍｉｎｏｒ　ｉｓｏｍｅｒ：δ　ｉｎｔｅｒ　ａｌｉａ　６．７６（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），５．８５－５．８０（ｍ，１Ｈ），５．２９－５．２５（ｍ，１Ｈ），５．２２－５．１９（ｍ，１Ｈ），４．４４（ｄ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ，１Ｈ），４．１５－４．１１（ｍ，１Ｈ），３．０３（ｄｄ，Ｊ＝１４．０，５．０Ｈｚ，１Ｈ），２．４１（ｓ，３Ｈ），２．１２（ｓ，３Ｈ），２．００（ｓ，３Ｈ），１．８８（ｓ，３Ｈ），１．７４（ｓ，３Ｈ），１．５４（ｓ，９Ｈ）．１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）　Ｍｉｘｔｕｒｅ：δ１７３．７，１７０．４，１７０．２，１７０．０，１６９．９，１６５．４，１５１．７，１４２．８，１２８．７，１２４．５，１１９．１，１００．６，８５．２，７２．８，７１．３，６７．７，６５．９，６２．０，５３．１，５２．０，３６．７，２７．９，２７．７，２６．６，２０．８，２０．７，２０．６，２０．３．ＨＲＭＳ（ＥＳＩ＋）［Ｍ＋ＮＨ４］＋　ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ３３Ｈ４５Ｆ３Ｎ３Ｏ１５：７８０．２７９７；ｆｏｕｎｄ　７８０．２８０１．
　実施例２４
　プロプ－２－エン－１－イル ２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－６－Ｏ－｛４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－５－［アセチル（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ］－３，５－ジデオキシ－１－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル｝－α－Ｄ－ガラクトピラノシド（式Ｇ－９で示される化合物）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000250
（小工程Ｖ－７）
　プロプ－２－エン－１－イル ２，３－ジ－О－ベンゾイル－α－Ｄ－ガラクトピラノシド（式Ｇ－３で示される化合物）のシクロペンチルメチルエーテル溶液（定量値３１．４６ｇ，７３．４３ｍｍｏｌ）を１０５ｍＬまで減圧濃縮した後、メチル ４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－５－［アセチル（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ］－３，５－ジデオキシ－２－Ｏ－（２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルエタンイミドイル）－Ｄ－グリセロ－β－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノソナート（式Ｇ－８で示される化合物）（３５．０ｇ，４５．８９ｍｍｏｌ）のシクロペンチルメチルエーテル（１７５ｍＬ）溶液に加えた。次に、得られた混合溶液にシクロペンチルメチルエーテルを加え、全量を３５０ｍＬに調整した（式Ｇ－３で示される化合物及び式Ｇ－８で示される化合物のシクロペンチルメチルエーテル混合溶液）。別容器にシクロペンチルメチルエーテル（５２５ｍＬ）及びモレキュラーシーブス４Ａ粉末（粉末粒径１０μｍ以下）（１７．５ｇ）を加え、－６０℃に冷却後、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル（４．２ｍＬ，２３．２４ｍｍｏｌ）を加えた。この溶液に対し、－６０℃、強攪拌下、式Ｇ－３で示される化合物及び式Ｇ－８で示される化合物のシクロペンチルメチルエーテル混合溶液を４．５時間かけて滴下し、同温にて２時間攪拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認した後、トリエチルアミン（４．５ｍＬ，３２．１２ｍｍｏｌ）を加え、反応液を０℃まで昇温した。その後、セライト５４５（３５．００ｇ）を加えた後、反応液を濾過し、シクロペンチルメチルエーテル（１７５ｍＬ）で洗浄した。ろ液に水（３５０ｍＬ）を加え、分液した。次に、有機層に０．５Ｎ塩酸水（３５０ｍＬ）を加え、２０℃で２時間攪拌した。ＨＰＬＣにより副生成物の分解を確認した後、分液して有機層を得た。有機層を水（３５０ｍＬ）及び２０％食塩水（１７５ｍＬ）で洗浄後、７０ｍＬまで減圧濃縮した。濃縮液にトルエン（７００ｍＬ）を加え、７０ｍＬまで減圧濃縮した。再度、濃縮液にトルエン（７００ｍＬ）及び中性シリカゲル（シリカゲル６０Ｎ，関東化学製、粒子径：４０－５０μｍ，１５８ｇ）を加え、２０℃で３０分間攪拌した。生成物をシリカゲルに吸着させた後、濾過し、生成物を含むシリカゲル固相をトルエン（１５７５ｍＬ）で洗浄後（トルエン洗浄時のろ液は廃棄）、酢酸エチル（８７５ｍＬ）で目的物をシリカゲルより脱着させた。得られた酢酸エチル溶液を７０ｍＬまで減圧濃縮し、トルエン（１７５ｍＬ）を加え、再度、７０ｍＬまで減圧濃縮して、プロプ－２－エン－１－イル ２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－６－Ｏ－｛４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－５－［アセチル（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ］－３，５－ジデオキシ－１－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル｝－α－Ｄ－ガラクトピラノシド（式Ｇ－９で示される化合物）のトルエン溶液を得た。本溶液を次工程に使用した。
　実施例２５
　プロプ－２－エン－１－イル ６－Ｏ－｛５－アセトアミド－４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－１－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル｝－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－α－Ｄ－ガラクトピラノシド（式Ｇ－１０で示される化合物）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000251
（小工程Ｖ－８）
　実施例２４で取得したプロプ－２－エン－１－イル ２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－６－Ｏ－｛４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－５－［アセチル（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ］－３，５－ジデオキシ－１－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル｝－α－Ｄ－ガラクトピラノシド（式Ｇ－９で示される化合物）のトルエン溶液に、ジクロロメタン（５２５ｍＬ）及びトリフルオロメタンスルホン酸銅（ＩＩ）（８．３０ｇ，２２．９５ｍｍｏｌ）を加え、４０℃で昇温し、同温にて２時間攪拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認した後、２５℃に冷却し、７０ｍＬまで減圧濃縮した。濃縮液に酢酸エチル（５２５ｍＬ）を加え、５％食塩水（３５０ｍＬ）で３回洗浄後、有機層にヘプタン（２６３ｍＬ）を加え、２０％メタノール水（５２５ｍＬ）で４回洗浄した。ＨＰＬＣにより、グリコシル化反応で副生した化合物８のβ脱離体由来の不純物が水層に除去されていることを確認後、有機層を７０ｍＬまで減圧濃縮した。濃縮液に酢酸イソプロペニル（５２５ｍＬ）を加え、３５０ｍＬまで減圧濃縮して、プロプ－２－エン－１－イル ６－Ｏ－｛５－アセトアミド－４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－１－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル｝－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－α－Ｄ－ガラクトピラノシド（式Ｇ－１０で示される化合物）の酢酸イソプロペニル溶液を得た。本溶液を次工程に使用した。
　実施例２６
　プロプ－２－エン－１－イル ４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－６－Ｏ－［４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル］－α－Ｄ－ガラクトピラノシド（式Ｇ－１１で示される化合物）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000252
（小工程Ｖ－９）
　実施例２５で取得したプロプ－２－エン－１－イル ６－Ｏ－｛５－アセトアミド－４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－１－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル｝－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－α－Ｄ－ガラクトピラノシド（式Ｇ－１０で示される化合物）の酢酸イソプロペニル溶液に、パラトルエンスルホン酸一水和物（０．８８ｇ，４．６２ｍｍｏｌ）を加え、還流温度まで昇温し（内温９０℃付近）、同温にて３時間攪拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認した後、２５℃に冷却し、トリエチルアミン（０．９５ｍＬ，６．８５ｍｍｏｌ）を加え、７０ｍＬまで減圧濃縮した。濃縮液にトルエン（３５０ｍＬ）を加え、再度、７０ｍＬまで減圧濃縮した。濃縮液にトルエン（６３０ｍＬ）を加え、中性シリカゲル（シリカゲル６０Ｎ，関東化学製、粒子径：４０－５０μｍ，１２３ｇ）を加えて、同温で３０分攪拌して生成物をシリカゲルに吸着させた後、濾過した。生成物を含むシリカゲル固相をトルエン（１９２５ｍＬ）及びトルエン／酢酸エチル混液（９７／３，１４００ｍＬ）で洗浄後（洗浄時のろ液は廃棄）、生成物を含むシリカゲル固相から酢酸エチル（１０５０ｍＬ）で目的物を脱着させ、得られた酢酸エチル溶液を減圧濃縮することにより、プロプ－２－エン－１－イル ４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－６－Ｏ－［４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル］－α－Ｄ－ガラクトピラノシド（式Ｇ－１１で示される化合物）（３０．１ｇ，収率６７％（式Ｇ－８で示される化合物基準））を白色泡沫固体として得た（０．４２当量のトルエン（約４重量％）を含む）。
　１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．９９（ｄ，Ｊ＝８．４ Ｈｚ，２Ｈ），７．８８（ｄｄ，Ｊ＝８．４，１．４ Ｈｚ，２Ｈ），７．５３－７．４７（ｍ，２Ｈ），７．３７（ｄｔ，Ｊ＝１４．７，６．９ Ｈｚ，４Ｈ），５．９０－５．８２（ｍ，１Ｈ），５．８２（ｄｄ，Ｊ＝１０．９，３．４ Ｈｚ，１Ｈ），５．７３（ｄ，Ｊ＝２．９ Ｈｚ，１Ｈ），５．５８（ｄｄ，Ｊ＝１０．９，４．０ Ｈｚ，１Ｈ），５．５１（ｔｄ，Ｊ＝１０．６，５．０ Ｈｚ，１Ｈ），５．３５－５．３０（ｍ，３Ｈ），５．１７－５．１５（ｍ，２Ｈ），４．９４（ｄｄ，Ｊ＝１０．３，１．７ Ｈｚ，１Ｈ），４．３８－４．２７（ｍ，３Ｈ），４．２０－４．１３（ｍ，２Ｈ），４．０８（ｄｄ，Ｊ＝１３．２，５．７ Ｈｚ，１Ｈ），３．９４（ｄｄ，Ｊ＝１０．３，６．３ Ｈｚ，１Ｈ），３．８２（ｓ，３Ｈ），３．５０（ｄｄ，Ｊ＝９．７，７．４ Ｈｚ，１Ｈ），２．７３（ｄｄ，Ｊ＝１３．２，５．２ Ｈｚ，１Ｈ），２．３７（ｓ，３Ｈ），２．３１（ｓ，３Ｈ），２．１９（ｓ，３Ｈ），２．１５（ｓ，３Ｈ），２．１４（ｓ，３Ｈ），２．０３（ｓ，３Ｈ），１．９７（ｓ，３Ｈ），１．８６（ｄｄ，Ｊ＝１３．２，１０．９ Ｈｚ，１Ｈ）．
　 １３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７４．５，１７３．６，１７０．５，１７０．１，１６９．９，１６９．８，１６９．６，１６７．３，１６６．０，１６５．５，１３３．５，１３３．３，１３３．１，１２９．８，１２９．５，１２９．４，１２８．４，１２８．３，１１７．５，９８．６，９５．５，７７．２，６９．８，６８．９，６８．６，６８．６，６８．３，６８．３，６７．５，６７．０，６６．７，６２．４，６１．８，５７．０，５２．９，３８．７，２７．９，２５．９，２１．０，２０．９，２０．７，２０．７，２０．６．
　ＨＲＭＳ（ＥＳＩ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋　ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ４７Ｈ５６ＮＯ２２：９８６．３２８８；ｆｏｕｎｄ　９８６．３２７７．
　得られた化合物について、下記文献とスペクトルの一致を確認した：文献４）Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２０１６，８１，１０６００－１０６１６．
　実施例２７－１
　４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－６－Ｏ－［４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル］－Ｄ－ガラクトピラノース（式Ｇ－１２で示される化合物）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000253
（小工程Ｖ－１０）
　プロプ－２－エン－１－イル ４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－６－Ｏ－［４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル］－α－Ｄ－ガラクトピラノシド（式Ｇ－１１で示される化合物）（２９．００ｇ，２９．４１ｍｍｏｌ）、１，３－ジメチルバルビツール酸（９．１９ｇ，５８．８６ｍｍｏｌ）、及びトリフェニルホスフィン（２．３１ｇ，８．８１ｍｍｏｌ）のメタノール溶液（２９０ｍＬ）を減圧、窒素置換を５回繰り返して、脱気操作を行った後、酢酸パラジウム（ＩＩ）（０．６６ｇ，２．９４ｍｍｏｌ）を加え、４０℃で１２時間攪拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認した後、トルエン（５８０ｍＬ）及び水（１０１５ｍＬ）を加え、分液し、有機層を得た。有機層を２０％メタノール水（５８０ｍＬ）で４回洗浄し、１，３－ジメチルバルビツール酸を水層に除去した後、５８ｍＬまで減圧濃縮し、トルエン（４３５ｍＬ）を加え、再度、５８ｍＬまで減圧濃縮した。濃縮液にトルエン（３８３ｍＬ）、クロロホルム（１９７ｍＬ）、及び中性シリカゲル（シリカゲル６０Ｎ，関東化学製、粒子径：４０－５０μｍ，１４５ｇ）を加えて、３０分間攪拌して生成物をシリカゲルに吸着させた後、濾過した。生成物を含むシリカゲル固相をトルエン、クロロホルム混液（２／１，４３５０ｍＬ）で洗浄後（洗浄時のろ液は廃棄）、生成物を含むシリカゲル固相から酢酸エチル（８７０ｍＬ）で目的物を脱着させた。得られた酢酸エチル溶液にＳＨシリカゲル（２９．００ｇ）を加え、３０分間攪拌後、濾過して、酢酸エチル（１４５ｍＬ）で洗浄し、目的物を含む酢酸エチル溶液を得た。得られた溶液を５８ｍＬまで減圧濃縮し、トルエン（１４５ｍＬ）を加えて、再度５８ｍＬまで減圧濃縮した。濃縮液をシリカゲルカラム精製し（シリカゲル６０Ｎ，関東化学製、粒子径：４０－５０μｍ，２９０ｇ，移動相　ヘキサン／酢酸エチル　５０／５０～３０／７０）、選定したフラクションを２９ｍＬまで減圧濃縮した。濃縮液に、酢酸エチル（２９０ｍＬ）及び活性炭（白鷺Ａ，１４．５ｇ）を加え、３０分間攪拌後、濾過して、酢酸エチル（８７ｍＬ）で洗浄し、目的物を含む精製酢酸エチル溶液を得た。得られた溶液を減圧濃縮し、４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－６－Ｏ－［４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル］－Ｄ－ガラクトピラノース（式Ｇ－１２で示される化合物）（１８．７０ｇ，収率６７％）を白色泡沫固体として得た。
　１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）Ｍａｊｏｒ　ｉｓｏｍｅｒ：δ７．９８－８．０３（ｍ，２Ｈ），７．８９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝８．９ Ｈｚ），７．５２－７．４８（ｍ，２Ｈ），７．３９－７．３４（ｍ，４Ｈ），５．９２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．３，２．９ Ｈｚ），５．８２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．４Ｈｚ），５．６８（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝２．３ Ｈｚ），５．５９－５．４８（ｍ，２Ｈ），５．３７（ｔｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５，２．５ Ｈｚ），５．１７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５ Ｈｚ），５．０２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．５ Ｈｚ），４．７４－４．７１（ｍ，１Ｈ），４．４４－４．３８（ｍ，１Ｈ），４．１６－４．０８（ｍ，２Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ），３．８０（ｍ，１Ｈ），３．６０－３．５４（ｍ，１Ｈ），２．７６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１３．０，６．０ Ｈｚ），２．３８（ｓ，３Ｈ），２．３３（ｓ，３Ｈ），２．３１（ｓ，３Ｈ），２．１５（ｓ，３Ｈ），２．１２（ｓ，３Ｈ），２．０４（ｓ，３Ｈ），１．９８（ｓ，３Ｈ），１．９３－１．８７（ｍ，１Ｈ）．
　１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）α／β ｍｉｘｔｕｒｅ：１７４．５，１７３．８，１７３．６，１７１．７，１７１．０，１７０．５，１７０．３，１７０．３，１６９．９，１６９．８，１６９．８，１６９．６，１６７．６，１６７．３，１６６．３，１６６．０，１６５．６，１６５．４，１３３．３，１３３．２，１３３．２，１３３．１，１２９．８，１２９．７，１２９．５，１２９．４，１２９．４，１２９．３，１２９．０，１２８．４，１２８．３，９９．１，９８．８，９５．９，９１．０，７２．２，７１．６，７１．５，６９．９，６９．９，６９．３，６９．３，６８．８，６８．５，６８．１，６７．５，６７．５，６７．３，６７．０，６６．６，６２．９，６２．６，６２．４，６０．３，５７．２，５６．８，５３．０，５２．９，３８．６，３８．３，２７．９，２７．８，２６．１，２５．７，２１．０，２０．９，２０．８，２０．７，２０．７，２０．６，２０．５．
　ＨＲＭＳ（ＥＳＩ－）［Ｍ＋ＨＣＯＯ］－　ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ４５Ｈ５２ＮＯ２４：９９０．２８８５；ｆｏｕｎｄ　９９０．２８７３．
　実施例２７－２
　４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－６－Ｏ－［４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル］－Ｄ－ガラクトピラノース（式Ｇ－１２で示される化合物）
　実施例２７－１に代えて、上記式Ｇ－１２で示される化合物を本実施例のように合成した。プロプ－２－エン－１－イル　４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－６－Ｏ－［４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル］－α－Ｄ－ガラクトピラノシド（式Ｇ－１１で示される化合物）（５．０ｇ，５．０７ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（２５ｍＬ）を減圧、窒素置換を３回繰り返して、脱気操作を行った後、カルボニルクロロヒドリドトリス（トリフェニルホスフィン）ルテニウム（ＩＩ）（２４．１ｍｇ，０．０３ｍｍｏｌ）を加え、５５－６０℃で３時間攪拌した。ＨＰＬＣにより異性化反応終了を確認した後、２０－２５℃に冷却し、水（５ｍＬ）及び１，３―ジブロモ－５，５－ジメチルヒダントイン（８７０ｍｇ，３．０４ｍｍｏｌ）を加え（テトラヒドロフラン５ｍＬにて洗い込み）、２０－３０℃で１時間攪拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認した後、亜硫酸ナトリウム（２５５ｍｇ）を含む１％食塩水（２５ｍＬ）及び酢酸エチル（５０ｍＬ）を加え、攪拌後、分液した。得られた有機層を５％食塩水（２５ｍＬ）で洗浄し、有機層に精製白鷺（２．０ｇ）を加え、１時間攪拌後、ろ過して、酢酸エチル（５０ｍＬ）で洗浄した。得られた濾液を６．５ｍＬまで減圧濃縮し、酢酸エチル（２５ｍＬ）を加え、脱水を目的に、再度６．５ｍＬまで減圧濃縮した。２－プロパノール（１００ｍＬ）を加え、種晶を接種し、１６時間攪拌して結晶の析出を確認後、得られたスラリー液を３０ｍＬまで減圧濃縮した。スラリー液を０－５℃に冷却し、ろ過して、得られた固体を０－５℃の２－プロパノール（２５ｍＬ）で洗浄し、３５℃で減圧乾燥して、４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－６－Ｏ－［４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル］－Ｄ－ガラクトピラノース（式Ｇ－１２で示される化合物）（３．７６ｇ，収率７８％）を白色結晶として得た（α／β混合物）。
　１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）Ｍａｊｏｒ　ｉｓｏｍｅｒ：δ７．９８－８．０３　（ｍ，２Ｈ），７．８９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝８．９Ｈｚ），７．５２－７．４８（ｍ，２Ｈ），７．３９－７．３４（ｍ，４Ｈ），５．９２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．３，２．９Ｈｚ），５．８２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．４Ｈｚ），５．６８（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝２．３Ｈｚ），５．５９－５．４８（ｍ，２Ｈ），５．３７（ｔｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５，２．５Ｈｚ），５．１７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），５．０２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ），４．７４－４．７１（ｍ，１Ｈ），４．４４－４．３８（ｍ，１Ｈ），４．１６－４．０８（ｍ，２Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ），３．８０（ｍ，１Ｈ），３．６０－３．５４（ｍ，１Ｈ），２．７６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１３．０，６．０Ｈｚ），２．３８（ｓ，３Ｈ），２．３３（ｓ，３Ｈ），２．３１（ｓ，３Ｈ），２．１５（ｓ，３Ｈ），２．１２（ｓ，３Ｈ），２．０４（ｓ，３Ｈ），１．９８（ｓ，３Ｈ），１．９３－１．８７（ｍ，１Ｈ）．
１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）α／βｍｉｘｔｕｒｅ：１７４．５，１７３．８，１７３．６，１７１．７，１７１．０，１７０．５，１７０．３，１７０．３，１６９．９，１６９．８，１６９．８，１６９．６，１６７．６，１６７．３，１６６．３，１６６．０，１６５．６，１６５．４，１３３．３，１３３．２，１３３．２，１３３．１，１２９．８，１２９．７，１２９．５，１２９．４，１２９．４，１２９．３，１２９．０，１２８．４，１２８．３，９９．１，９８．８，９５．９，９１．０，７２．２，７１．６，７１．５，６９．９，６９．９，６９．３，６９．３，６８．８，６８．５，６８．１，６７．５，６７．５，６７．３，６７．０，６６．６，６２．９，６２．６，６２．４，６０．３，５７．２，５６．８，５３．０，５２．９，３８．６，３８．３，２７．９，２７．８，２６．１，２５．７，２１．０，２０．９，２０．８，２０．７，２０．７，２０．６，２０．５．
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ－）［Ｍ＋ＨＣＯＯ］－　ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ４５Ｈ５３ＮＯ２４：９９１．２９５８；ｆｏｕｎｄ　９９０．２７８９．
　４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－６－Ｏ－［４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル］－Ｄ－ガラクトピラノース（式Ｇ－１２で示される化合物）の結晶化による精製法
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000254
　４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－６－Ｏ－［４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル］－Ｄ－ガラクトピラノース（式Ｇ－１２で示される化合物）（３．００ｇ，３．１７ｍｍｏｌ，シアリル部α／β比＝９５．７／４．３）を酢酸エチル（４ｍＬ）で溶解後、２－プロパノール（６０ｍＬ）を加え、２５℃で撹拌した後、１８ｍＬまで減圧濃縮した。スラリー液を０℃で３時間撹拌し、析出した結晶を濾過した。濾別した結晶を冷２－プロパノール（９ｍＬ）で洗浄して、４０℃で減圧乾燥し、４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－６－Ｏ－［４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル］－Ｄ－ガラクトピラノース（式Ｇ－１２で示される化合物）（２．６６ｇ，収率８８．７％，シアリル部α／β比＝＞９９．９／Ｎ．Ｄ．）を白色結晶として得た。
［分析条件］
カラム：ＣＡＰＣＥＬＬ　ＰＡＫ　ＡＤＭＥ　φ４．６×１５０ｍｍ，膜厚３μｍ
波長：２２０ｎｍ
オーブン：４０℃
溶離液： （Ａ）０．１％トリフルオロ酢酸水溶液、（Ｂ）アセトニトリル
グラジエント：　０－１５０ｍ分　（Ｂ）濃度４０％
　　　　　　　　１５０．１分　　（Ｂ）濃度９５％
　　　　　　　　　１５５分　　　（Ｂ）濃度９５％
　　　　　　　　　１５５．１分　（Ｂ）濃度４０％
　　　　　　　　　１６０分　　　（Ｂ）濃度４０％
流速：１ｍＬ／分
インジェクション：５μＬ
　実施例２８
　４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－６－Ｏ－［４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル］－１－Ｏ－（２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルエタンイミドイル）－Ｄ－ガラクトピラノース（式Ａ－１６で示される化合物）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000255
（小工程Ｖ－１１）
　４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－６－Ｏ－［４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル］－Ｄ－ガラクトピラノース（式Ｇ－１２で示される化合物）（２０．０ｇ，２１．１ｍｍｏｌ）を５００ｍＬナスフラスコに加え、ジクロロメタン（２００ｍＬ）及びモレキュラーシーブ４Ａ粉末（１０μｍ以下，１０．０ｇ）を加えて、０℃まで冷却した。窒素下、同温にてＮ－メチルイミダゾール（１．９１ｇ，２３．３ｍｍｏｌ）及び２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルアセトイミドイルクロリド（４．３９ｇ，２１．１ｍｍｏｌ）を加え、室温に昇温して２４時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認した後、反応液をフィルターろ過し、ジクロロメタン（１００ｍＬ）にて洗浄した。ろ液をジクロロメタンにて充填した中性シリカゲルパッド（シリカゲル６０Ｎ，関東化学製，粒子径：４０－５０μｍ，６０ｇ）でろ過し、１００ｍＬずつ分取した。シリカゲルパッドを酢酸エチル／ジクロロメタン（１：９，１０００ｍＬ，２００ｍＬずつ分取）にて洗浄し、選定フラクションを減圧濃縮することで、４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－６－Ｏ－［４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル］－１－Ｏ－（２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルエタンイミドイル）－Ｄ－ガラクトピラノース（式Ａ－１６で示される化合物）（２０．１ｇ，収率８５％）を白色アモルファスとして得た。
　１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．９９（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．３，１．４Ｈｚ），７．９１－７．８８（ｍ，２Ｈ），７．５９－７．５６（ｍ，１Ｈ），７．５１（ｔｔ，１Ｈ，Ｊ＝９．７，２．４Ｈｚ），７．４４－７．３４（ｍ，４Ｈ），７．１２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），７．０１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），６．８２（ｂｒｓ，１Ｈ），６．４３（ｂｒｓ，２Ｈ），５．８７－５．７７（ｍ，３Ｈ），５．５２（ｔｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．０，５．０Ｈｚ），５．３８－５．３４（ｍ，１Ｈ），５．１８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．６，１．７Ｈｚ），４．９５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．０，２．０Ｈｚ），４．５３（ｂｒｓ，１Ｈ），４．２９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１２．６，２．９Ｈｚ），４．２１－４．０９（ｍ，３Ｈ），４．０４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．０，６．０Ｈｚ），３．８４（ｓ，３Ｈ），３．５３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．３，７．４Ｈｚ），２．７６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１２．９，５．４Ｈｚ），２．３９（ｓ，３Ｈ），２．３１（ｓ，３Ｈ），２．１８（ｓ，３Ｈ），２．１７（ｓ，３Ｈ），２．１４（ｓ，３Ｈ），２．０２（ｓ，３Ｈ），１．９８（ｓ，３Ｈ），１．８６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１３．０，１１．０Ｈｚ）．　１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７４．５，１７３．５，１７０．５，１７０．１，１６９．８，１６９．７，１６９．６，１６７．２，１６５．５，１６５．４，１６５．３，１４２．９，１３３．６，１３３．３，１２９．８，１２９．７，１２９．６，１２９．５，１２９．０，１２８．７，１２８．６，１２８．５，１２８．４，１２４．２，１１９．０，９８．７，９８．５，７０．４，６９．８，６８．３，６８．２，６７．５，６７．５，６６．９，６６．７，６２．０，６１．７，６０．３，５６．９，５３．７，５２．９，３８．７，３１．７，２９．２，２７．９，２６．０，２５．８，２１．０，２１．０，２０．９，２０．８，２０．７，２０．６，２０．５．
　ＨＲＭＳ（ＥＳＩ＋）［Ｍ＋ＮＨ４］＋　ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ５２Ｈ５９Ｆ３Ｎ３Ｏ２２：１１３４．３５３７；ｆｏｕｎｄ　１１３４．３５６４．
　下記文献とスペクトルの一致を確認した。文献４）Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２０１６，８１，１０６００－１０６１６．
＜式Ａ’－２２で示される化合物の合成＞
　Ｒ１がメトキシフェニルである式Ａ－２２で示される化合物（すなわち、式Ａ’－２２で示される化合物）を以下の合成スキーム４に従って合成した。
　［合成スキーム４］
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000256
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000257
　実施例２９
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000258
　３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－１，２－Ｏ－（１－メトキシエチリデン）－β－Ｄ－マンノピラノース（式Ａ－１で示される化合物）（４０．０ｇ，７８．９ｍｍｏｌ）を１Ｌ４径フラスコに添加後、酢酸エチル（４００ｍＬ）を加えた。窒素雰囲気下、室温にて水（２ｍＬ）及びｐ－ＴｓＯＨ・Ｈ２Ｏ（４５ｍｇ，０．２３７ｍｍｏｌ）を添加し、同温にて６時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、トリエチルアミン（７．９９ｇ，７８．９ｍｍｏｌ）を加え、同温にて終夜撹拌した。ＨＰＬＣによりアセチル基の転移終了を確認後、反応液に５％重曹水（４００ｍＬ）を加え分液した。有機層に２０％食塩水（２００ｍＬ）を加え分液した。有機層を８０ｍLまで減圧濃縮し、トルエン（４００ｍＬ）を加えて、液量８０ｍLまで減圧濃縮した。再度、トルエン（４００ｍＬ）を加えて、液量８０ｍLまで減圧濃縮した。脱水トルエン（１２０ｍＬ）を加え、２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－Ｄ－マンノピラノース（式Ａ－２で示される化合物）のトルエン溶液を無色溶液として取得した。
　実施例３０
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000259
 　２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－Ｄ－マンノピラノース（式Ａ－２で示される化合物）のトルエン溶液（７８．９ｍｍｏｌ）を１Ｌフラスコに加え、トリクロロアセトニトリル（１２ｍＬ，１１８ｍｍｏｌ）及びＤＢＵ（１１９μＬ，０．７８９ｍｍｏｌ）を加えた。窒素下、０℃にて２時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、０℃にて反応液に酢酸（４５μＬ，０．７８９ｍｍｏｌ）を加え、２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－１－Ｏ－（２，２，２－トリクロロエタンイミドイル）－Ｄ－マンノピラノース（式Ａ－３で示される化合物）のトルエン溶液（７８．９ｍｍｏｌ）を褐色溶液として取得した。本溶液をそのまま次工程に使用した。
　実施例３１
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000260
　４－メトキシフェニル３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－４－Ｏ－｛２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－β－Ｄ－マンノピラノシル｝－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ－４で示される化合物）（２０．０ｇ，１８．５ｍｍｏｌ）を１Ｌ４径フラスコに加え、１，１，１，３，３，３－ヘキサフルオロ－２－プロパノール（１６０ｍＬ）に溶解させ、水（１６ｍＬ）を加えた。窒素下、－２０℃にて２，３－ジクロロ－５，６－ジシアノ－ｐ－ベンゾキノン（４．６３ｇ，２０．４ｍｍｏｌ）を加え、同温にて６時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、亜硫酸ナトリウム（１．１７ｇ，９．２５ｍｍｏｌ）を水（１０ｍＬ）に溶解した水溶液を加え、終夜撹拌した。ジクロロメタン（３００ｍＬ）を加え、亜硫酸ナトリウム（４ｇ）及び炭酸水素ナトリウム（４ｇ）を水（２００ｍＬ）に溶解した水溶液にて分液洗浄後、有機層を６０ｍLまで減圧濃縮し、酢酸エチル（３００ｍＬ）を加えた。５％重曹水（２００ｍＬ）及び２０％食塩水（１００ｍＬ）で有機層を洗浄後、４０ｍLまで減圧濃縮し、トルエン（４００ｍＬ）を加え、４０ｍLまで減圧濃縮した。トルエン（１００ｍＬ）を加え、シリカゲル６０Ｎ（関東化学製、粒子径：４０－５０μｍ、６０ｇ）を添加した。攪拌下、ヘプタン（４０ｍＬ）を３０分間かけて滴下し、目的物をシリカゲルに吸着させた後、ろ過した。トルエン／ヘプタン（７／２，４００ｍＬ）にてシリカゲルを洗浄後（ろ液は廃棄）、酢酸エチル／トルエン（１／１，７００ｍＬ）にて、目的物を脱着した。ろ液を減圧濃縮し、４－メトキシフェニル３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－４－Ｏ－（２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル）－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ－５で示される化合物）（１７．８ｇ，収率：＞９９％）を白色アモルファスとして得た。
　１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．６７（ｂｒ，４Ｈ），７．２７－７．３７（ｍ，１５Ｈ），６．８９－６．９６（ｍ，５Ｈ），６．８３（ｄｄｄ，Ｊ＝９．５，４．０，２．５Ｈｚ，２Ｈ），６．７０（ｄｄｄ，Ｊ＝９．０，４．０，２．５Ｈｚ，２Ｈ），５．６４（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），５．０２（ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，１Ｈ），４．９４（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．８２（ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，１Ｈ），４．７０（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．６６（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．６２（ｓ，１Ｈ），４．５７（ｄ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ，１Ｈ），４．５１（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．４２－４．４６（ｍ，２Ｈ），４．３３（ｄｄ，Ｊ＝１０．５，８．５Ｈｚ，１Ｈ），４．０９（ｔ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），３．６９－３．７９（ｍ，４Ｈ），３．７１（ｓ，３Ｈ），３．６５（ｄ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，１Ｈ），３．５１（ｔｄ，Ｊ＝９．０，３．５Ｈｚ，１Ｈ），３．４５（ｔ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），３．４４－３．４８（ｍ，１Ｈ），３．１７（ｍ，１Ｈ），２．２９（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），１．９２（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ）．
　１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１５５．６，１５１．０，１３８．５４，１３８．４６，１３８．３，１３７．８，１３４．１，１３１．８，１２８．８，１２８．６，１２８．３，１２８．２１，１２８．１９，１２８．１５，１２８．１，１２８．０，１２７．５，１２７．４，１２３．６，１１８．９，１１４．６，１０１．５，９７．９，７９．１，７８．５，７７．３，７６．７，７５．６，７５．４，７５．３，７４．９，７４．８，７４．４，７３．９，６８．５，６２．５，５５．８．
　ＨＲＭＳ（ＥＳＩ－）［Ｍ－Ｈ］－ｃａｌｃｄｆｏｒＣ５５Ｈ５４ＮＯ１３：９３６．３６０１；ｆｏｕｎｄ９３６．３５９２．
　下記文献とスペクトルの一致を確認した。
文献１）Ｏｒｇ．Ｂｉｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２０１８，１６，４７２０－４７２７．
　さらに、反応条件を変えて、式Ａ－４で表される化合物から式Ａ－５で表される化合物を合成した。以下の表に、各反応条件及び式Ａ－５で表される化合物の収率（ＨＰＬＣで測定）を示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000261
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000262
 ・Ｅｎｔｒｙ１：従来法の条件において中程度の収率で反応が進行した
・Ｅｎｔｒｙ２：ＨＦＩＰを用いることで高収率で反応が進行した。
・Ｅｎｔｒｙ３，４：酸及び水素化分解による脱保護は低収率の結果となった。
　実施例３２
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000263
　４－メトキシフェニル３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－４－Ｏ－（２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル）－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ－５で示される化合物）（１７．８ｇ，１８．９ｍｍｏｌ）及び２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－１－Ｏ－（２，２，２－トリクロロエタンイミドイル）－Ｄ－マンノピラノース（式Ａ－３で示される化合物）のトルエン溶液（６６．１ｍｍｏｌ相当）を１Ｌ４径フラスコに加え、トルエン（１７８ｍＬ）及びモレキュラーシーブ４Ａ粉末（１０μｍ以下，２．７ｇ）を加えた。窒素下、－２０℃にてトリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル（０．６８３ｍＬ，３．７８ｍｍｏｌ）を１時間かけて滴下し、同温にて１時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、トリエチルアミン（１．０６ｍＬ，７．５６ｍｍｏｌ）を加え、室温にて３０分間撹拌した。反応液をセライトろ過後、アセトニトリル（１７８ｍＬ）にて洗浄した。ろ液を減圧濃縮し、濃縮残渣を得た（濃縮残渣を原料１２．８ｇ分と５．０ｇ分に２分割した）。原料１２．８ｇ分の残渣にアセトニトリル（２５６ｍＬ（なお、原料５．０ｇ分も同様に処理した）を加え、逆相用シリカゲル１２０ＲＰ－１８（関東化学製、粒子径：４０－５０μｍ，３８．４ｇ）を添加した。水（１２８ｍＬ）を３０分間かけて滴下し、目的物を固相に吸着させた後、ろ過した。アセトニトリル／水（２／１，１．５３Ｌ）及びアセトニトリル／水（３／１，５１２ｍＬ）の順にて固相を洗浄後（濾液は廃棄）、アセトニトリル（１．０２Ｌ）にて目的物を脱着させた。ろ液を減圧濃縮することで、４－メトキシフェニル２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ－６で示される化合物）（１９．６ｇ（別途合成品８．１ｇ），単離収率７７％）を白色アモルファスとして得た。
　１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．６３－６．６０（ｍ，５８
Ｈ），５．５４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），５．４９（ｄｄ，Ｊ＝３．２，２．０Ｈｚ，１Ｈ），５．３４（ｂｒｔ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ），５．１３（ｂｒｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），５．０５（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．９１－４．７８（ｍ，６Ｈ），４．６９（ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ，１Ｈ），４．６３－４．５５（ｍ，６Ｈ），４．４８－４．３２（ｍ，９Ｈ），４．２１（ｔ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ，２Ｈ），４．０７（ｔ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ），４．００－３．７３（ｍ，９Ｈ），３．７０（ｓ，３Ｈ），３．６８－３．５１（ｍ，８Ｈ），３．４４（ｂｒｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），３．２１（ｂｒｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ），２．１０（ｓ，３Ｈ），１．８６（ｓ，３Ｈ）．
　１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７０．２,１７０．０,１５５．４,１５１．０,１３８．９,１３８．７,１３８．６,１３８．５,１３８．２,１３８．１,１３８．０,１３７．９,１３３．７,１３１．７,１２８．７,１２８．５，１２８．４,１２８．３,１２８．２,１２７．９,１２７．９,１２７．８,１２７．７,１２７．６,１２７．５,１２７．５,１２７．１,１２３．４,１１８．８,１１４．４,１０１．９,９９．８,９８．５,９７．７,８１．３,７９．５,７８．２,７８．０,７７．９,７６．９,７６．６,７５．２,７５．２,７５．１，７４．９，７４．７，７４．５,７４．４,７４．２,７４．２,７３．６,７３．５,７３.４,７２．４,７２．０,７１．９,７１．４,６９．４,６９．４,６８．８,６８．８,６８．３,６６.７,５５．７,２１．２,２０．９．
　ＨＲＭＳ（ＥＳＩ＋）［Ｍ＋ＮＨ４］＋ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ１１３Ｈ１１９Ｎ２Ｏ２５：１９０３．８０９６；ｆｏｕｎｄ１９０３．８０７５．
　実施例３３
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000264
　４－メトキシフェニル２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ－６で示される化合物）（２７．７ｇ，１４．６ｍｍｏｌ）を１Ｌ４径フラスコに加え、ジクロロメタン（２２２ｍＬ）、１，１，１，３，３，３－ヘキサフルオロ－２－プロパノール（１３９ｍＬ）及び水（１４ｍＬ）を加えた。窒素下、－２℃にて［ビス（トリフルオロアセトキシ）ヨード］ベンゼン（１２．６ｇ，２９．２ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（３．３６ｍＬ，４３．８ｍｍｏｌ）を添加し、同温にて２１時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、炭酸水素ナトリウム（１３．９ｇ）及び亜硫酸ナトリウム（１３．９ｇ）を水（２７７ｍＬ）に溶解した水溶液で２回洗浄後、２０％食塩水（１３８ｍＬ）を加え洗浄した。得られた有機層を５５ｍLまで減圧濃縮後、トルエン（６９３ｍＬ）を加え、５５ｍLまで再度減圧濃縮した。トルエン（９７ｍＬ）及びジクロロメタン（４２ｍＬ）を加え、シリカゲル６０Ｎ（関東化学製，粒子径：４０－５０μｍ，８３ｇ）を添加した。ヘプタン（１６６ｍＬ）を３０分間かけて滴下し、目的物をシリカゲルに吸着させた後、ろ過した。ジクロロメタン／ヘプタン（１／３，２７７ｍＬ）にて洗浄し（濾液は廃棄）、酢酸エチル／ジクロロメタン（１／４，９７０ｍＬ）にて、目的物を固相から脱着した。ろ液を減圧濃縮することで、２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノース（式Ａ－７で示される化合物）（２８．１ｇ，収率＞９９％）を白色アモルファスとして得た。
　１Ｈ―ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）σ７．７３－７．４４（ｍ，４Ｈ），７．４０－７．０７（ｍ，４４Ｈ），６．８４－６．６０（ｍ，６Ｈ），５．４８（ｄｄ，Ｊ＝３．２，２．０Ｈｚ，１Ｈ），５．３６（ｂｒｔ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），５．２１（ｂｒｓ，１Ｈ），５．１３（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），５．００（ｄ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，１Ｈ），４．８８－４．７６（ｍ，５Ｈ），４．７０（ｄ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，１Ｈ），４．６３－４．３６（ｍ，１４Ｈ），４．２６－４．１９（ｍ，２Ｈ），４．１０－３．４３（ｍ，２０Ｈ），３．２６－３．１９（ｍ，２Ｈ），２．０９（ｓ，３Ｈ），１．８９（ｓ，３Ｈ）．
　１３Ｃ―ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）σ１７０．１，１６７．９，１４９．５，１３８．６，１３８．６，１３８．５，１３８．４，１３８．３，１３７．９，１３７．９，１３７．７，１３３．６，１３１．５，１２８．６，１２８．３，１２８．２，１２８．２，１２８．０，１２７．９，１２７．８，１２７．７，１２７．６，１２７．４，１２７．４，１２７．３，１２６．９，１２３．１，１１６．１，１０１．０，９９．５，９７．９，９２．８，８０．９，７８．３，７８．０，７７．８，７６．０，７４．９，７４．９，７４．８，７４．５，７４．２，７４．１，７４．０，７３．９，７３．５，７３．４，７３．２，７２．２，７１．８，７１．６，７１．２，６９．１，６８．６，６８．３，６８．２，６６．５，５７．５，２１．０，２０．８．
　ＨＲＭＳ（ＥＳＩ＋）［Ｍ＋ＮＨ４］＋ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ１０６Ｈ１１３Ｎ２Ｏ２４ ＋：１７９８．７７１１；ｆｏｕｎｄ　１７９８．７６９０．
　実施例３４
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000265
　２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノース（式Ａ－７で示される化合物）（２８．１ｇ，１５．７ｍｍｏｌ）を１Ｌ４径フラスコに加え、ジクロロメタン（４２２ｍＬ）、モレキュラーシーブ４Ａ粉末（１０μｍ以下，１４．１ｇ）を加えて、０℃まで冷却した。窒素下、同温にてＮ－メチルイミダゾール（１．５１ｍＬ，１８．８ｍｍｏｌ）及び２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルアセトイミドイルクロリド（２．７４ｍＬ，１７．２ｍｍｏｌ）を加え、２４時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認できなかったため、Ｎ－メチルイミダゾール（１２５μＬ，１．５７ｍｍｏｌ）及び２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルアセトイミドイルクロリド（２５０μＬ，１．５７ｍｍｏｌ）を加え、０℃にて２時間撹拌した。反応液をジクロロメタンにて充填した中性シリカゲルパッド（シリカゲル６０Ｎ，関東化学製，粒子径：４０－５０μｍ，８４ｇ）でろ過した。シリカゲルパッドを１０％酢酸エチル／ジクロロメタン（８４０ｍL，１４０ｍLずつ分取）にて洗浄し、主留を減圧濃縮することで、２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－１－Ｏ－（２，２，２－トリフルオロ－N－フェニルエタンイミドイル）－β－Ｄ－グルコピラノース（式Ａ－８で示される化合物）（２８．２ｇ，収率９１％）を白色アモルファスとして得た。
　１Ｈ―ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）σ７．６４（ｍ，４Ｈ），７．４１－７．０９（ｍ，４７Ｈ），７．０１（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．８３（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），６．６９－６．５９（ｍ，５Ｈ），５．４９（ｄｄ，Ｊ＝３．２，２．０Ｈｚ，１Ｈ），５．３５（ｂｒｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），５．１３（ｂｒｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），５．０２（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），４．９１－４．７８（ｍ，５Ｈ），４．６９（ｄ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，１Ｈ），４．６３－４．５３（ｍ，６Ｈ），４．４８－４．３６（ｍ，８Ｈ），４．３６－４．０６（ｍ，５Ｈ），３．９８（ｄｄ，Ｊ＝９．２，３．２Ｈｚ，１Ｈ），３．９５－３．６１（ｍ，１３Ｈ），３．５７－３．４４（ｍ，４Ｈ），３．１６（ｂｒｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ），２．１０（ｓ，３Ｈ），１．８４（ｓ，３Ｈ）．
　１３Ｃ―ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）σ１７１．１，１７０．０，１６９．８，１３８．６，１３８．５，１３８．４，１３８．３，１３７．９，１３７．９，１３７．８，１３７．８，１３７．７，１３７．６，１３３．６，１３１．４，１２９．０，１２８．６，１２８．５，１２８．４，１２８．３，１２８．３，１２８．２，１２８．１，１２８．０，１２７．９，１２７．８，１２８．８，１２７．７，１２７．７，１２７．７，１２７．６，１２７．５，１２７．５，１２７．４，１２７．３，１２７．３，１２６．９，１２５．２，１２３．３，１０１．６，９９．６，９８．２，８１．１，７８．６，７８．０，７７．７，７７．２，７６．０，７５．５，７５．０，７４．９，７４．９，７４．８，７４．７，７４．５，７４．３，７４．２，７４．０，７３．５，７３．３，７３．３，７２．２，７１．８，７１．８，７１．２，６９．３，６８．６，６８．６，６８．１，６６．４，６０．３，５４．６，２１．４，２１．０，２１．０，２０．７，１４．１．
　ＨＲＭＳ（ＥＳＩ＋）［Ｍ＋ＮＨ４］＋ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ１１４Ｈ１１７Ｆ３Ｎ３Ｏ２４ ＋：１９６９．８００７；ｆｏｕｎｄ１９６９．７９８３．
　実施例３５
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000266
　２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－１－Ｏ－（２，２，２－トリフルオロ－N－フェニルエタンイミドイル）－β－Ｄ－グルコピラノース（式Ａ－８で示される化合物）（２８．２ｇ，１４．４ｍｍｏｌ）及び４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’－９で示される化合物）（１０．３ｇ，１７．３ｍｍｏｌ）を１Ｌ４径フラスコに加え、ジクロロメタン（４２４ｍＬ）及びモレキュラーシーブ４Ａ粉末（８．５０ｇ）を加えた。窒素下、－７℃にてトリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル（３９２μＬ，２．１６ｍｍｏｌ）を５分間かけて滴下し、同温にて１時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、トリエチルアミン（８０２μＬ，５．７６ｍｍｏｌ）を加え、室温にて３０分間撹拌した。反応液をセライトろ過し、アセトニトリル（２８３ｍＬ）にて洗浄した。ろ液を５６ｍLまで減圧濃縮し、アセトニトリル（２８３ｍＬ）及び逆相用シリカゲル１２０ＲＰ－１８（関東化学製、粒子径：４０－５０μｍ，８５ｇ）を加えた。３０分間かけて水（２５４ｍＬ）を滴下し、目的物を固相に吸着させ、ろ過した。アセトニトリル／水（４／３，２８３ｍＬ）、アセトニトリル／水（３／１，８４８ｍＬ）の順にて洗浄し（濾液は廃棄）、アセトニトリル（１．１３Ｌ）にて目的物を脱着した。ろ液を減圧濃縮し、トルエン（２８３ｍＬ）にて２度共沸することで４－メトキシフェニル　２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’－１０で示される化合物）（３１．０ｇ，９１％）を白色アモルファスとして得た。
　１Ｈ―ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）　σ　７．７８－７．４８（ｍ，８Ｈ），７．４２（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），７．３５－７．０１（ｍ，４９Ｈ），６．９８－６．８４（ｍ，４Ｈ），６．７７－６．５３（ｍ，９Ｈ），５．５０（ｄｄ，Ｊ＝３．２，１．６Ｈｚ，１Ｈ），５．４２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），５．３２（ｄｄ，Ｊ＝２．８，２．０Ｈｚ，１Ｈ），５．２１（ｄｔ，Ｊ＝８．４，４．４Ｈｚ，１Ｈ），５．１４（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．０４（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．８８－４．７６（ｍ，６Ｈ），４．６８（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），４．６３－４．６０（ｍ，３Ｈ），４．５７－４．５１（ｍ，４Ｈ），４．４８－４．３２（ｍ，１１Ｈ），４．２５－４．１３（ｍ，４Ｈ），４．０６（ｄｔ，Ｊ＝１０．０，４．０Ｈｚ，１Ｈ），４．００－３．５７（ｍ，１９Ｈ），３．５５－３．３４（ｍ，５Ｈ），３．１８（ｂｒｔ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，２Ｈ），２．０９（ｓ，３Ｈ），１．８０（ｓ，３Ｈ）
　１３Ｃ―ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）σ　１７０．２，１６９．９，１６８．２，１６７．５，１５５．３，１５０．９，１３８．９，１３８．８，１３８．７，１３８．６，１３８．４，１３８．１，１３８．１，１３８．０，１３８．０，１３７．９，１３３．９，１３３．７，１３３．６，１３１．９，１３１．７，１３１．６，１２８．７，１２８．５，１２８．５，１２８．５，１２８．４，１２８．３，１２８．２，１２７．９，１２７．９，１２７．８，１２７．８，１２７．７，１２７．６，１２７．５，１２７．４，１２７．０，１２３．６，１２３．３，１２３．２，１１８．７，１１４．３，１０２．１，９９．７，９８．４，９７．５，９７．２，８１．２，７９．８，７８．２，７８．０，７７．８，７７．４，７６．７，７６．１，７５．１，７５．１，７４．９，７４．７，７４．７，７４．６，７４．３，７４．１，７３．６，７３．４，７３．２，７２．７，７２．４，７２．０，７１．９，７１．３，６９．１，６８．８，６８．２，６８．１，６７．７，６６．６，５６．６，５５．７，５５．６，３１．１，２１．１，２０．８．
　ＨＲＭＳ（ＥＳＩ＋）［Ｍ＋ＨＮＥｔ３］＋　ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ１４７Ｈ１５６Ｎ３Ｏ３１ ＋：２４５９．０７１７；ｆｏｕｎｄ　２４５９．０７２０．
　実施例３６
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000267
　４－メトキシフェニル　２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’－１０で示される化合物）３１．０ｇ，１３．１ｍｍｏｌ）を１Ｌ４径フラスコに加え、テトラヒドロフラン（１２４ｍＬ）、メタノール（６２ｍＬ）及びトリフルオロ酢酸メチル（１．３１ｍＬ，１３．１ｍｍｏｌ）を加えた。窒素下、室温にて５分間撹拌した後、１Ｍｔ－ブトキシカリウムのテトラヒドロフラン溶液（６．６ｍＬ，６．６ｍｍｏｌ）を加えて、５０℃にて２時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、室温まで冷却した。酢酸（７５４μＬ，１３．１ｍｍｏｌ）を加えた後、酢酸エチル（３１１ｍＬ）を加え、５％食塩水（３１１ｍＬ）にて２回有機層を洗浄した。有機層を６２ｍLまで減圧濃縮し、トルエン（４６６ｍＬ）を加え、６２ｍLまで減圧濃縮し、トルエン（４６６ｍＬ）を加え、６２ｍLまで再度減圧濃縮した。トルエン（１５５ｍＬ）を加え、シリカゲル６０Ｎ（９３．３ｇ，関東化学製，粒子径：４０－５０μｍ）を添加した。ヘプタン（９３ｍＬ）を３０分間かけて滴下して、目的物を固相に吸着させた後、ろ過した。トルエン／ヘプタン（７／３，６２２ｍＬ）にて洗浄後（ろ液は廃棄）、酢酸エチル／トルエン（１／２，１．１Ｌ）にて目的物を固相より脱着した。得られた脱着液を減圧濃縮することで、４－メトキシフェニル　３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’－１１で示される化合物）（２７．７ｇ，９２％）を白色アモルファスとして得た。
　１Ｈ―ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）　σ　７．７８－７．４１（ｍ，１０Ｈ），７．３５－７．０８（ｍ，４８Ｈ），６．９７－６．９５（ｍ，２Ｈ），６．８５－６．８３（ｍ，２Ｈ），６．７７－６．５６（ｍ，１０Ｈ），５．４４（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），５．２４（ｄｄ，Ｊ＝５．６，２．８Ｈｚ，１Ｈ），５．１６（ｄ，Ｊ＝０．８Ｈｚ，１Ｈ），５．０３（ｄ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，１Ｈ），４．９６（ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，１Ｈ），４．９３（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），４．８７（ｄ，Ｊ＝１２．８Ｈｚ，１Ｈ），４．８３（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ），４．８０（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．７３（ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ，１Ｈ），４．６３－４．３０（ｍ，２０Ｈ），４．２２－４．１６（ｍ，４Ｈ），４．０７（ｄｄｄ，Ｊ＝２．４，５．６，６．８Ｈｚ，１Ｈ），３．９７－３．３６（ｍ，２５Ｈ），３．１９（ｂｒｔ，Ｊ＝１０Ｈｚ，２Ｈ），２．３８（ｂｒｓ，１Ｈ），２．１３（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）
　１３Ｃ―ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）　σ　１６８．２，１６７．４，１５５．１，１５０．８，１３８．９，１３８．８，１３８．４，１３８．４，１３８．２，１３８．２，１３８．０，１３７．９，１３７．８，１３７．７，１３３．８，１３３．５，１３１．７，１３１．４，１２８．５，１２８．４，１２８．４，１２８．２，１２８．２，１２８．１，１２８．１，１２７．８，１２７．７，１２７．７，１２７．６，１２７．５，１２７．５，１２７．４，１２７．３，１２７．２，１２６．８，１２３．５，１２３．２，１２３．０，１１８．５，１１４．１，１０１．７，１０１．４，９９．７，９７．３，９７．１，８１．６，７９．９，７９．６，７９．２，７８．２，７７．２，７６．８，７６．０，７４．９，７４．８，７４．７，７４．６，７４．５，７４．２，７４．０，７３．４，７３．２，７３．１，７２．６，７２．０，７１．９，７１．４，７１．１，６９．１，６８．７，６８．５，６７．９，６７．７，６７．６，６６．３，５６．４，５５．５，５５．４．
　ＨＲＭＳ（ＥＳＩ＋）［Ｍ＋ＨＮＥｔ３］＋　ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ１４３Ｈ１５２Ｎ３Ｏ２９ ＋：２３７５．０５０６；ｆｏｕｎｄ　２３７５．０５１４．
　実施例３７
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000268
　４－メトキシフェニル　３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’－１１で示される化合物）（２７．７ｇ，１２．１ｍｍｏｌ）、４－Ｏ－アセチル－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－Ｏ－［２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルエタンイミドイル］－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ－１２で示される化合物）（２５．７ｇ，３６．３ｍｍｏｌ）を１Ｌ４径フラスコに加え、ジクロロメタン（２７７ｍＬ）及びモレキュラーシーブ４Ａ粉末（１０μｍ以下，８．３ｇ）を加えた。窒素下、－６２℃にてトリフルオロメタンスルホン酸トリイソプロピルシリル（９７３μＬ，３．６３ｍｍｏｌ）を５分間かけて滴下し、同温にて８時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認できなかったため、トリフルオロメタンスルホン酸トリイソプロピルシリル（４８６μＬ，１．８１ｍｍｏｌ）を５分間かけて滴下し、同温にて３時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認できなかったため、トリフルオロメタンスルホン酸トリイソプロピルシリル（４８６μＬ，１．８１ｍｍｏｌ）を５分間かけて滴下し、－２０℃にて１１時間撹拌した。トリエチルアミン（１．３５ｍＬ，９．６８ｍｍｏｌ）を加え、室温にて３０分間撹拌した。反応液をセライトろ過し、アセトニトリル（２７７ｍＬ）にて洗浄した。ろ液を５５ｍＬまで減圧濃縮し、アセトニトリル（２７７ｍＬ）及び逆相用シリカゲル１２０ＲＰ－１８（関東化学製、粒子径：４０－５０μｍ，８３．１ｇ）を加えた。３０分間かけて水（２４９ｍＬ）を滴下し、固相に目的物を吸着させた後、ろ過した。アセトニトリル／水（４／３，２７７ｍＬ）、アセトニトリル／水（３／１，８３１ｍＬ）の順にて固相を洗浄後（洗浄液は廃棄）、アセトニトリル（１．１Ｌ）にて目的物を固相から脱着させた。脱着液を減圧濃縮後、酢酸エチル（５５４ｍＬ）を加えて、再度減圧濃縮することで、４－メトキシフェニル　４－Ｏ－アセチル－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［４－Ｏ－アセチル－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’－１３で示される化合物）（３９．１ｇ，９７％）を白色アモルファスとして得た。
　備考）－７８℃条件、トリフルオロメタンスルホン酸ｔ－ブチルジメチルシリルをルイス酸として用いた場合において、反応速度の向上が確認された。反応温度は昇温せず（－７８℃保持）、反応終了を確認するまで、ルイス酸０．１５当量の追加する操作により、再現性良く反応が進行した。
　１Ｈ―ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）　σ　７．８５－７．４１（ｍ，１７Ｈ），７．４１－６．６．８６（ｍ，７３Ｈ），６．８１－６．７５（ｍ，３Ｈ），６．７３－６．５６（ｍ，７Ｈ），５．４３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），５．１８（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），５．０５（ｄｔ，Ｊ＝１２．８，９．６Ｈｚ，２Ｈ），４．９６－４．７３（ｍ，９Ｈ），４．６８－３．８４（ｍ，３９Ｈ），３．８０－３．１３（ｍ，２７Ｈ），２．８２（ｄｄ，Ｊ＝１１．２，６．０Ｈｚ，１Ｈ），２．７７（ｂｒｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），２．７０（ｄｔ，Ｊ＝１０．４，４．０Ｈｚ，１Ｈ），２．６４（ｄｄ，Ｊ＝１０．４，７．２Ｈｚ，１Ｈ），２．４７（ｄｔ，Ｊ＝９．６，４．４Ｈｚ，１Ｈ），１．９１（ｓ，３Ｈ），１．８６（ｓ，３Ｈ）
　１３Ｃ―ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）　σ　１６９．５，１６９．４，１６９．３，１６８．４，１６８．０，１６７．４，１６７．１，１５５．１，１５０．７，１３８．８，１３８．７，１３８．６，１３８．４，１３８．３，１３８．２，１３８．０，１３８．０，１３７．９，１３７．６，１３３．５，１３１．８，１３１．７，１３１．５，１３１．４，１２９．０，１２８．８，１２８．７，１２８．６，１２８．３，１２８．２，１２８．１，１２８．０，１２８．０，１２７．９，１２７．８，１２７．８，１２７．６，１２７．６，１２７．５，１２７．４，１２７．４，１２７．２，１２７．２，１２７．１，１２７．０，１２６．８，１２６．０，１２５．２，１２３．４，１２３．２，１１８．５，１１４．２，１０１．７，９８．４，９７．８，９７．３，９６．９，９６．３，９５．８，８０．５，７９．６，７８．０，７７．６，７７．２，７６．５，７６．４，７５．９，７５．０，７４．８，７４．５，７４．１，７３．９，７３．６，７３．５，７３．５，７３．４，７３．３，７３．２，７３．１，７２．８，７２．５，７２．４，７２．２，７２．１，７２．０，７１．９，７０．８，７０．３，６９．７，６９．５，６９．３，６７．９，６７．４，６６．８，６０．３，５６．５，５５．５，５５．４，５５．０，５４．９，２１．４，２１．０，２０．８，２０．８，１４．１．
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ＋）［Ｍ＋ＨＮＥｔ３］＋　ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ２０３Ｈ２０６Ｎ５Ｏ４３ ＋：３４０１．４０８１；ｆｏｕｎｄ　３４０１．４０７０．
　実施例３８
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000269
　４－メトキシフェニル　４－Ｏ－アセチル－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［４－Ｏ－アセチル－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’－１３で示される化合物）（３６．１ｇ，１０．９ｍｍｏｌ）のトルエン溶液（７２ｍＬ，２ｖ）を１Ｌ４径フラスコに加え、１－ブタノール（１０８ｍＬ）を加えて窒素下、４０℃まで加温した。エチレンジアミン（１０８ｍＬ）を加えた後、９０℃に昇温して、１９時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、室温まで冷却した。反応液を７２ｍＬまで減圧濃縮し、アセトニトリル（３６１ｍＬ）及び逆相用シリカゲル１２０ＲＰ－１８（関東化学製、粒子径：４０－５０μｍ，１０８ｇ）を加えた。３０分間かけて水（３６１ｍＬ）を滴下し、目的物を固相に吸着させた後、ろ過した。アセトニトリル／水（１／１，９０３ｍＬ）にて洗浄後（洗浄液は廃棄）、アセトニトリル／テトラヒドロフラン（９／１，１．４Ｌ）にて目的物を固相より脱着した。脱着液を７２ｍＬまで減圧濃縮し、テトラヒドロフラン（５４２ｍＬ）を加えて、減圧濃縮することで、４－メトキシフェニル　２－アミノ－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［２－アミノ－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－２－アミノ－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－２－アミノ－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’－１４で示される化合物）（２８．８ｇ，９７％）を白色アモルファスとして得た。
　１Ｈ―ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）σ７．４１－７．０４（ｍ，８０Ｈ），６．９６（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），６．７８（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），５．１２－５．０９（ｍ，３Ｈ），４．９４－４．３４（ｍ，３３Ｈ），４．０７－３．３３（ｍ，３６Ｈ），３．２８－２．９８（ｍ，９Ｈ），２．８４－２．７５（ｍ，５Ｈ）．
　実施例３９
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000270
　４－メトキシフェニル　２－アミノ－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［２－アミノ－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－２－アミノ－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－２－アミノ－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’－１４で示される化合物）（３１．３ｇ，１１．６ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（６３ｍＬ）を１Ｌ４径フラスコに加え、テトラヒドロフラン（３１３ｍＬ）及び炭酸水素ナトリウム（４．７８ｇ，６９．６ｍｍｏｌ）を水（１５７ｍＬ）に溶解した水溶液を加えた。クロロギ酸フェニル（５．２６ｍＬ，５１．０ｍｍｏｌ）を添加した後、１時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、酢酸エチル（３１３ｍＬ）を加え、水（３１３ｍＬ）にて有機層を２回洗浄した。有機層を２０％食塩水（１５７ｍＬ）で洗浄した。有機層を６２ｍＬまで減圧濃縮し、トルエン（３１３ｍＬ）を加え、６２ｍＬまで減圧濃縮した。トルエン（１５７ｍＬ）を加え、シリカゲル６０Ｎ（９３．３ｇ，関東化学製，粒子径：４０－５０μｍ）を添加した。ヘプタン（９４ｍＬ）を３０分間かけて滴下し、目的物を固相に吸着させた後、ろ過した。トルエン／ヘプタン（７／３，６２６ｍＬ）にて固相を洗浄後（洗浄液は廃棄）、酢酸エチル／トルエン（１／２，１．１Ｌ）にて目的物を固相より脱着した。脱着液を減圧濃縮することで、４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’－１５で示される化合物）（３４．８ｇ，９４％）を白色アモルファスとして得た。
　１Ｈ―ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）σ　７．５３－６．９０（ｍ，１０４Ｈ），６．７６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），６．３１－５．７２（ｍ，２Ｈ），５．１９－４．１９（ｍ，４２Ｈ），４．１９－３．１１（ｍ，４１Ｈ），２．８９－２．６９（ｍ，３Ｈ）．
　１３Ｃ―ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｉｎｔｅｒａｌｉａ　σ　１５５．１，１５５．０，１５４．８，１５４．８，１５４．７，１５１．５，１５１．２，１５１．１，１５１．０，１３９．０，１３８．９，１３８．８，１３８．７，１３８．７，１３８．６，１３８．４，１３８．３，１３８．２，１３８．１，１３８．０，１３７．６１２９．４，１２９．３，１２９．２，１２８．７，１２８．６，１２８．６，１２８．５，１２８．４，１２８．３，１２８．３，１２８．２，１２８．１，１２８．０，１２７．９，１２７．８，１２７．８，１２７．７，１２７．６，１２７．５，１２７．５，１２６．２，１２５．７，１２５．４，１２５．３，１２２．３，１２１．９，１１８．０，１１４．６，１０２．０，９９．４，８０．４，７９．８，７８．３，７７．８，７７．４，７５．３，７５．１，７４．９，７４．８，７４．７，７４．７，７４．６，７４．１，７３．８，７３．６，７３．４，７３．２，７２．７，７２．２，７１．３，７１．１，７０．６，６９．９，６９．５，６９．１，５７．８，５６．８，５５．８．
　ＨＲＭＳ（ＥＳＩ＋）［Ｍ＋ＨＮＥｔ３］＋　ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ１９５Ｈ２１０Ｎ５Ｏ４１ ＋：３２７７．４４９６；ｆｏｕｎｄ　３２７７．４４９２．
　実施例４０
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000271
　４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’－１５で示される化合物）（３４．８ｇ，１０．９ｍｍｏｌ）、４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－６－Ｏ－［４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル］－１－Ｏ－（２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルエタンイミドイル）－Ｄ－ガラクトピラノース（式Ａ－１６で示される化合物）（３４．３ｇ，３２．７ｍｍｏｌ）を１Ｌ４径フラスコに加え、ジクロロメタン（５２２ｍＬ）及びモレキュラーシーブ４Ａ粉末（１０μｍ以下，５．２ｇ）を加えた。窒素下、－２０℃にてトリフルオロメタンスルホン酸ｔ－ブチルジメチルシリル（７０６μＬ，３．２７ｍｍｏｌ）を５分間かけて滴下し、－２０℃～－１６℃にて４時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、トリエチルアミン（７７７μＬ，４．３６ｍｍｏｌ）を加え、室温にて１時間撹拌した。反応液をセライトろ過し、アセトニトリル（１７４ｍＬ）にて洗浄した。ろ液を７０ｍＬまで減圧濃縮し、アセトニトリル（３４８ｍＬ）を加えて７０ｍＬまで再度減圧濃縮した。アセトニトリル（３４８ｍＬ）及び逆相用シリカゲル１２０ＲＰ－１８（関東化学製、粒子径：４０－５０μｍ，１０４ｇ）を加えた。３０分間かけて水（３１３ｍＬ）を滴下し、目的物を固相に吸着させた後、ろ過した。アセトニトリル／水（４／３，３４８ｍＬ）、アセトニトリル／水（３／１，１．１Ｌ）の順にて固相を洗浄後（洗浄液は廃棄）、アセトニトリル（２．４Ｌ）にて目的物を固相より脱着した。脱着液を減圧濃縮することで４－メトキシフェニル　４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－Ｏ－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－Ｏ－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’－１７で示される化合物）（４２．０ｇ，７６％）を白色アモルファスとして得た。
　１Ｈ―ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）　σ　８．０１－７．８５（ｍ，１８Ｈ），７．５０－６．８０（ｍ，１０４Ｈ），６．７８（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，２Ｈ），５．９２（ｄｄ，Ｊ＝１０．８，３．６Ｈｚ，１Ｈ），５．８２（ｂｒｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），５．７６－５．２６（ｍ，２１Ｈ），５．１９－５．０７（ｍ，６Ｈ），５．０４－４．０８（ｍ，６５Ｈ），４．００－３．１４（ｍ，６７Ｈ），３．８５－３．７６（３Ｈ），２．７９－２．５０（ｍ，８Ｈ），２．３８－１．９６（ｍ，４２Ｈ）．
　１３Ｃ―ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）　σ　１７４．７，１７４．６，１７３．８，１７１．９，１７０．７，１７０．５，１７０．４，１７０．３，１７０．１，１７０．０，１７０．０，１６９．９，１６９．８，１６７．８，１６７．２，１６６．２，１６５．８，１６５．５，１６５．３，１６５．２，１６５．０，１５５．３，１５４．３，１５１．５，１５１．３，１５１．１，１５１．０，１３９．１，１３８．７，１３８．４，１３８．３，１３８．１，１３３．３，１３３．３，１２９．９，１２９．８，１２９．８，１２９．７，１２９．６，１２９．５，１２９．４，１２９．３，１２９．２，１２８．７，１２８．５，１２８．４，１２８．３，１２８．２，１２８．１，１２８．０，１２７．９，１２７．７，１２７．５，１２７．４，１２５．７，１２５．４，１２５．３，１２１．９，１２１．８，１２１．７，１１８．５，１１４．６，１００．００，９９．４，９９．３，９９．１，９９．０，９５．５，９１．２，７７．４，７４．５，７４．２，７３．６，７３．５，７３．２，７３．０，７２．２，７２．０，７１．８，７１．７，７０．５，７０．１，６９．９，６９．５，６９．５，６８．６，６８．５，６８．３，６８．０，６７．７，６７．５，６７．２，６６．７，６６．６，６３．１，６２．６，６２．１，５７．４，５７．１，５７．０，５５．７，５５．０，５３．１，５３．１，５３．０，３８．９，３８．８，３２．３，２９．８，２８．１２６．７，２６．０，２５．９，２５．７，２１．１，２１．０，２０．７．
　ＨＲＭＳ（ＥＳＩ＋）［Ｍ＋ＨＮＥｔ３＋ＨＮＥｔ３］２＋　ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ２８９Ｈ３２４Ｎ８Ｏ８３ ２＋：２６１８．５７３４；ｆｏｕｎｄ　２６１８．５５５２．
　実施例４１
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000272
　４－メトキシフェニル　２－アミノ－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［２－アミノ－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－２－アミノ－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－２－アミノ－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’－１４で示される化合物）（２００ｍｇ，０．１２７ｍｍｏｌ）のシクロペンチルメチルエーテル溶液（４００μＬ）を３０ｍＬナスフラスコに加え、テトラヒドロフラン（２ｍＬ）、水（１ｍＬ）及び炭酸水素ナトリウム（４２ｍｇ，０．４９７ｍｍｏｌ）を加えた。クロロギ酸２，２，２－トリクロロエチル（４４μＬ，０．３２５ｍｍｏｌ）を１０分間かけて滴下した後、３時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、酢酸エチル（２ｍＬ）を加え、水（２ｍＬ）にて２回分液洗浄した。有機層を２０％食塩水（１ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥後、ろ別し、濃縮した。濃縮残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカ量：２０ｇ，展開溶媒：トルエン／酢酸エチル＝９／１～８／２）にて精製し、主留を減圧濃縮することで、４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－｛［（２，２，２－トリクロロエトキシ）カルボニル］アミノ｝－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－｛［（２，２，２－トリクロロエトキシ）カルボニル］アミノ｝－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－｛［（２，２，２－トリクロロエトキシ）カルボニル］アミノ｝－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－｛［（２，２，２－トリクロロエトキシ）カルボニル］アミノ｝－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｂ－１で示される化合物）（１４７ｍｇ，５８％）を白色アモルファスとして得た。
　１Ｈ―ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）σ７．３８－７．０５（ｍ，８４Ｈ），６．９０（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，２Ｈ），６．７５（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，２Ｈ），５．４８（ｓ，１Ｈ），５．２７（ｓ，１Ｈ），５．０３－４．２２（ｍ，４７Ｈ），４．０４－３．０３（ｍ，４３Ｈ），２．８８（ｍ，１Ｈ），２．７１（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）．
　１３Ｃ―ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）　σ　１５５．２，１５４．１，１５３．８，１７０．４，１５１．４，１３８．８，１３８．７，１３８．６，１３８．５，１３８．４，１３８．２，１３８．０，１３７．９，１３７．８，１３７．６，１３７．４，１２８．６，１２８．５，１２８．５，１２８．５，１２８．３，１２８．２，１２８．２，１２８．０，１２８．０，１２７．９，１２７．９，１２７．９，１２７．８，１２７．７，１２７．７，１２７．７，１２７．６，１２７．６，１２７．５，１２７．５，１２７．４，１２５．９，１１８．２，１１４．４，１０１．３，１００．２，９８．８，９９．２，９５．７，９５．６，９５．５，８０．１，７９．３，７８．９，７８．２，７７．９，７７．２，７５．０，７４．８，７４．６，７４．５，７４．４，７３．８，７３．７，７３．６，７３．５，７３．２，７３．１，７３．０，７２．７，７２．２，７１．１，７０．９，７０．７，６９．９，６９．１，６８．６，６８．３，６８．３，６６．７，５７．３，５６．８，５６．３，５５．６，５５．０，２９．７．
　ＨＲＭＳ（ＥＳＩ＋）［Ｍ＋ＨＮＥｔ３］＋　ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ１７９Ｈ１９８Ｃｌ１２Ｎ５Ｏ４１ ＋：３５００．９８０１；ｆｏｕｎｄ　３５００．９８２０．
　実施例４２
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000273
　４－メトキシフェニル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－｛［（２，２，２－トリクロロエトキシ）カルボニル］アミノ｝－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－｛［（２，２，２－トリクロロエトキシ）カルボニル］アミノ｝－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－｛［（２，２，２－トリクロロエトキシ）カルボニル］アミノ｝－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－｛［（２，２，２－トリクロロエトキシ）カルボニル］アミノ｝－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｂ－１で示される化合物）（１４７ｍｇ，４３．０μｍｏｌ）及び４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－６－Ｏ－［４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル］－１－Ｏ－（２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルエタンイミドイル）－Ｄ－ガラクトピラノース（式Ａ－１６で示される化合物）（１４５ｍｇ，０．１３０ｍｍｏｌ，３．０ｅｑ．）を３０ｍＬナスフラスコに加え、ジクロロメタン（２．２ｍＬ）及びモレキュラーシーブ４Ａ粉末（１０μｍ以下，２２ｍｇ）を加えた。窒素下、－２０℃にてトリフルオロメタンスルホン酸ｔ－ブチルジメチルシリル（２μＬ，８．７μｍｏｌ）を５分間かけて滴下し、－２０℃～０℃にて終夜撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、トリエチルアミン（２．４μＬ，４４μｍｏｌ）を加え、室温にて１時間撹拌した。反応液をセライトろ過し、ジクロロメタン（０．７ｍＬ）にて洗浄した。ろ液を水（１．５ｍＬ）にて２回分液した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥後、ろ別し、濃縮した。濃縮残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカ量：２０ｇ，展開溶媒：ヘプタン／酢酸エチル＝１／１～１／９）にて精製し、主留を減圧濃縮することで、４－メトキシフェニル　４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－Ｏ－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－｛［（２，２，２－トリクロロエトキシ）カルボニル］アミノ｝－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－Ｏ－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－｛［（２，２，２－トリクロロエトキシ）カルボニル］アミノ｝－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－｛［（２，２，２－トリクロロエトキシ）カルボニル］アミノ｝－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－｛［（２，２，２－トリクロロエトキシ）カルボニル］アミノ｝－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｂ－２で示される化合物）（１２９ｍｇ，５６．１％）を白色アモルファスとして得た。
　１Ｈ―ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）　σ　８．１２（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），８．０１－７．８６（ｍ，１２Ｈ），７．５３－６．９５（ｍ，９０Ｈ），６．７６（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），５．９０（ｄｄ，Ｊ＝３．２，１１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．８２（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），５．７４（ｄｄ，Ｊ＝４．０，８．４Ｈｚ，１Ｈ），５．６７－５．３２（ｍ，１５Ｈ），５．２５－４．０９（ｍ，６３Ｈ），３．９６－３．０２（ｍ，４８Ｈ），２．７９－２．６６（ｍ，４Ｈ），２．２３－１．９６（ｍ，４２Ｈ）．
　１３Ｃ―ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）　σ　１７４．５，１７４．５，１７４．４，１７３．６，１７３．６，１７３．５，１７１．７，１７０．６，１７０．５，１７０．３，１７０．２，１７０．０，１６９．９，１６９．９，１６９．８，１６９．８，１６９．８，１６９．７，１６９．７，１６９．７，１６９．６，１６９．６，１６９．６，１６９．３６，１５５．１，１５３．９，１５３．７，１５１．３，１３８．８，１３８．７，１３８．５，１３８．４，１３８．０，１３８．０，１３７．８，１３３．７，１３３．４，１３３．２，１３３．１，１３３．１，１３０．８，１２９．８，１２９．７，１２９．７，１２９．６，１２９．５，１２９．４，１２９．４，１２９．３，１２９．２，１２９．１，１２９．１，１２９．１，１２９．０，１２８．９，１２８．７，１２８．６，１２８．５，１２８．５，１２８．４，１２８．３，１２８．２，１２８．１，１２８．１，１２８．０，１２８．０，１２７．８，１２７．７，１２７．７，１２７．６，１２７．５，１２７．４，１２７．１，１２５．４，１１８．２，１１４．３，９９．７，９９．２，９９．１，９８．９，９８．７，９８．３，９５．７，９５．３，９２．６，７７．４，７７．２，７４．６，７４．２，７３．７，７３．３，７３．０，７２．７，７２．０，７１．５，７１．５，７１．４，７０．０，６９．８，６９．８，６９．７，６９．２，６２．９，６２．９，６２．４，６２．３，６１．８，６１．６，５７．２，５６．９，５６．８，５５．５，５４．８，５２．９，５２．９，５２．８，５２．８，３２．１，３１．８，３０．２，２９．６，２８．８，２７．９，２７．８，２６．４，２５．９，２５．８，２５．８，２５．５，２３．６，２２．９，２２．６，２１．０，２１．０，２０．９，２０．９，２０．９，２０．９，２０．８，２０．８，２０．７，２０．７，２０．７，２０．６，２０．６，２０．５，２０．６，１４．０，１４．０，１０．９．
　ＨＲＭＳ（ＥＳＩ＋）［Ｍ＋ＨＮＥｔ３＋ＨＮＥｔ３］２＋　ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ２７３Ｈ３１２Ｃｌ１２Ｎ８Ｏ８３ ２＋：２７２９．８３５５；ｆｏｕｎｄ　２７２９．８３８２．
　実施例４３
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000274
　４－メトキシフェニル　４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－Ｏ－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－Ｏ－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’－１７で示される化合物）（３．１０ｇ，０．６１６ｍｍｏｌ）を１００ｍＬナスフラスコに加え、テトラヒドロフラン（４７ｍＬ）を加えた。アルゴン下、室温にて３Ｍ水酸化リチウム水溶液（７．９ｍＬ）を添加し、同温にて１時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、２５％食塩水（３１ｍＬ）を加え分液した。この際、白色不溶物は有機層に残した。さらに有機層に２５％食塩水（３１ｍＬ）を加え分液した。得られた４－メトキシフェニル　４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－Ｏ－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－Ｏ－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’－１８で示される化合物）のテトラヒドロフラン溶液を精製することなく、次工程へ使用した。
　ＨＲＭＳ（ＥＳＩ＋）［Ｍ＋４Ｈ］４＋　ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ１９５Ｈ２３６Ｎ６Ｏ５９ ４＋：９０１．８９２４；ｆｏｕｎｄ　９０１．８８８９．
　備考）式Ｂ－２で示される化合物を用いた場合でも同様の条件において、式Ａ’－１８で示される化合物を合成可能であるが、２２時間の反応時間を要し、反応において複数の不純物が確認される。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000275
　実施例４４
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000276
　４－メトキシフェニル　４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－Ｏ－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－Ｏ－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’－１８で示される化合物）のテトラヒドロフラン溶液（４７ｍＬ，式Ａ’－１７で示される化合物　３．１ｇからの合成品）を２００ｍＬナスフラスコに加え、メタノール（３１ｍＬ）及びトリエチルアミン（２．５ｍＬ）を加えた。アルゴン下、外温４℃にて無水酢酸（１．１ｍＬ）を添加し、同温にて３０分間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、反応液を減圧濃縮した。濃縮残渣にテトラヒドロフラン（６２ｍＬ）、２５％食塩水（３１ｍＬ）及び水（１６ｍＬ）を加え分液した。この際、白色不溶物は有機層に残した。さらに有機層に２５％食塩水（３１ｍＬ）、水（１６ｍＬ）を加え分液した。有機層を１０ｍＬまで減圧濃縮し、残渣にテトラヒドロフラン（７８ｍＬ）、酢酸エチル（７８ｍＬ）を加え、減圧濃縮し、さらに酢酸エチル（７８．０ｍＬ，２５ｖ）を加え、減圧濃縮した。生じた白色固体に酢酸エチル（７８ｍＬ）を加え、室温で３０分間撹拌し、固体を濾取、酢酸エチル（７８ｍＬ）で洗浄することで４－メトキシフェニル　５－アセトアミド－３，５－ジデオキシ－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［５－アセトアミド－３，５－ジデオキシ－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’－１９で示される化合物）（２．６０ｇ，塩を含む）を取得した。
　ＨＲＭＳ（ＥＳＩ＋）［Ｍ＋３Ｈ］３＋　ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ２０３Ｈ２４３Ｎ６Ｏ６３ ３＋：１２５８．２０１５；ｆｏｕｎｄ　１２５８．１９４４．
　実施例４５
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000277
　４－メトキシフェニル　５－アセトアミド－３，５－ジデオキシ－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［５－アセトアミド－３，５－ジデオキシ－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’－１９で示される化合物）（３．７６ｇ）を１００ｍＬのオートクレーブに加え、Ｎ―メチルピロリドン（３８ｍＬ）を加えた。減圧→アルゴン置換を５回繰り返し、アルゴン雰囲気下で３０分間撹拌した。１０％Ｐｄ／Ｃ（エヌ・イーケムキャット製，ＰＥ型，５５．８％含水品，７．５ｇ）を加え、減圧→アルゴン置換を５回繰り返し、水素加圧→解圧を５回繰り返した。外温５０℃、水素圧０．５ＭＰａ下で１４時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、反応液をアルゴン置換したグローブボックス内で減圧濾過し、濾物を脱気したＮ―メチルピロリドン（７５ｍＬ）で洗浄した。濾液にシクロペンチルメチルエーテル（３８ｍＬ）を加え、１１０ｍＬまで濃縮した。この操作を３回繰り返して、脱水操作を行い、４－メトキシフェニル　５－アセトアミド－３，５－ジデオキシ－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［５－アセトアミド－３，５－ジデオキシ－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’－２０で示される化合物）のＮ―メチルピロリドン溶液を得た。本溶液をそのまま次工程へ使用した。
　備考）パラジウム濾過時は空気の混入に十分注意する必要がある。酸素の影響により残留パラジウムが大きく変動し、ＨＰＬＣ上のピーク形状もそれに伴って変化する現象が発生する。上記の現象を防ぐ目的から、反応～パラジウム濾過終了まで、不活性雰囲気下で操作を実施する。
　実施例４６
　式Ａ－２１で示される化合物を、以下の合成スキーム５に従って精製した。下記の左下に示す化合物は、式Ｅ－１：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000278
 で示される化合物（式中、Ｒ７は、水素原子、メチル基、又はメトキシ基である）中の「Ｒ７」がメチルである化合物の例示である。
［合成スキーム５］
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000279
　実施例４７
　１１－アジド－３，６，９－トリオキサウンデカン－１－アミン　（－）－ジ－ｐ－トルオイル－Ｌ－酒石酸塩（式Ｅ－２で示される化合物（Ｒ７＝Ｍｅ））
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000280
　１１－アジド－３，６，９－トリオキサウンデカン－１－アミン（式Ａ－２１で示される化合物）（１０．０ｇ，４５．８２ｍｍｏｌ，９４．３％ＨＰＬＣ純度）のアセトニトリル（２４ｍＬ）及び水（６ｍＬ）の溶液に（－）－ジ－ｐ－トルオイル－Ｌ－酒石酸（１７．７０ｇ，４５．８２ｍｍｏｌ）を加え、３５℃で攪拌し、溶解を確認後、同温にてアセトニトリル（３００ｍＬ）を１時間かけて滴下した。得られたスラリー液を２００ｍＬまで減圧濃縮し、スラリー液を２５℃で３０分間攪拌し、析出した結晶を濾過した。濾別した結晶をアセトニトリル（３０ｍＬ）で洗浄して、４０℃で減圧乾燥し、１１－アジド－３，６，９－トリオキサウンデカン－１－アミン　（－）－ジ－ｐ－トルオイル－Ｌ－酒石酸塩（式Ｅ－２－ＰＴＴＡで示される化合物）（２４．４０ｇ，収率８８．０％，９９．２％ＨＰＬＣ純度）を白色結晶として得た（融点１５２℃）。
　１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ７．８２（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，４Ｈ），　７．３０（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，４Ｈ），５．６１（ｓ，２Ｈ），３．５９（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，２Ｈ），３．５６－３．４７（ｍ，１０Ｈ），３．３９（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ），２．９１（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．３６（ｓ，６Ｈ）．　１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ１６８．０６，１６４．８０，１４３．６３，１２９．２５，１２９．１８，１２６．９３，７１．６８，６９．７２，６９．６３，６９．５９，６９．５７，６９．２０，６６．６８，４９．９６，３８．４０，２１．１４．
　なお、（－）－ジ－ｐ－トルオイル－Ｌ－酒石酸の替わりに、（＋）－ジ－ｐ－トルオイル－Ｄ－酒石酸を用いても同様の操作が可能である。
　実施例４８
　１１－アジド－３，６，９－トリオキサウンデカン－１－アミン　（－）－ジベンゾイル－Ｌ－酒石酸塩（式Ｅ－２－ＢＺＴＡで示される化合物）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000281
　１１－アジド－３，６，９－トリオキサウンデカン－１－アミン（式Ａ－２１で示される化合物）（５．０ｇ，２２．９１ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１２ｍＬ）及び水（３ｍＬ）の溶液に（－）－ジベンゾイル－Ｌ－酒石酸（８．２１ｇ，２２．９１ｍｍｏｌ）を加え、３５℃で攪拌し、溶解を確認後、同温にてアセトニトリル（１５０ｍＬ）を１時間かけて滴下した。得られたスラリー液を１２５ｍＬまで減圧濃縮し、アセトニトリル（１００ｍＬ）を加え、再度、１２５ｍＬまで減圧濃縮した。スラリー液を２５℃で３０分間攪拌し、析出した結晶を濾過した。濾別した結晶をアセトニトリル（１５ｍＬ）で洗浄して、４０℃で減圧乾燥し、１１－アジド－３，６，９－トリオキサウンデカン－１－アミン　（－）－ジベンゾイル－Ｌ－酒石酸塩（式Ｅ－２－ＢＺＴＡで示される化合物）（１０．６ｇ，収率８０％）を白色結晶として得た（融点１３１℃）。
　１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ７．９４（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，４Ｈ），７．６４（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．５１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，４Ｈ），５．６５（ｓ，２Ｈ），３．５９（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，２Ｈ），３．５６－３．４７（ｍ，１０Ｈ），３．３９（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ），２．９０（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，２Ｈ）．
　１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ１６７．９８，１６４．８６，１３３．３８，１２９．６３，１２９．２２，１２８．６６，７２．１０，６９．７３，６９．６３，６９．５９，６９．５７，６９．２１，６６．６９，４９．９７，３８．３８．
　なお、（－）－ジベンゾイル－Ｌ－酒石酸の替わりに、（＋）－ジベンゾイル－Ｄ－酒石酸を用いても同様の操作が可能である。
　実施例４９
　１１－アジド－３，６，９－トリオキサウンデカン－１－アミン　（－）－ジ－ｐ－アニソイル－Ｌ－酒石酸塩（式Ｅ－２で示される化合物（Ｒ７＝ＯＭｅ））
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000282
　１１－アジド－３，６，９－トリオキサウンデカン－１－アミン（式Ａ－２１で示される化合物）（５．０ｇ，２２．９１ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１２ｍＬ）及び水（３ｍＬ）の溶液に（－）－ジ－ｐ－アニソイル－Ｌ－酒石酸（９．５８ｇ，２２．９１ｍｍｏｌ）を加え、３５℃で攪拌し、溶解を確認後、同温にてアセトニトリル（１５０ｍＬ）を１時間かけて滴下した。得られたスラリー液を１００ｍＬまで減圧濃縮し、スラリー液を２５℃で３０分間攪拌し、析出した結晶を濾過した。濾別した結晶をアセトニトリル（１５ｍＬ）で洗浄して、４０℃で減圧乾燥し、１１－アジド－３，６，９－トリオキサウンデカン－１－アミン　（－）－ジ－ｐ－アニソイル－Ｌ－酒石酸塩（式Ｅ－２－ＰＡＴＡで示される化合物（Ｒ７＝ＯＭｅ））（１１．４ｇ，収率７８％）を白色結晶として得た（融点１５３℃）。
　１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ７．８９（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，４Ｈ），７．０２（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，４Ｈ），５．５９（ｓ，２Ｈ），３．８２（ｓ，６Ｈ），３．５９（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，２Ｈ），３．５６－３．４７（ｍ，１０Ｈ），３．３９（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ），２．９１（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ）．　１３Ｃ－ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ１６８．２５，１６４．５０，１６３．１４，１３１．３４，１２１．８８，１１３．９２，７１．６４，６９．７３，６９．６３，６９．５９，６９．２１，６６．７０，５５．４８，４９．９７，３８．３８．
　（－）－ジ－ｐ－アニソイル－Ｌ－酒石酸の替わりに、（＋）－ジ－ｐ－アニソイル－Ｄ－酒石酸を用いても同様の操作が可能である。
　実施例５０
　１１－アジド－３，６，９－トリオキサウンデカン－１－アミン（式Ａ－２１で示される化合物）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000283
　実施例４７で得られた１１－アジド－３，６，９－トリオキサウンデカン－１－アミン　（－）－ジ－ｐ－トルオイル－Ｌ－酒石酸塩（式Ｅ－２－ＰＴＴＡで示される化合物）（１２．０ｇ，１９．８５ｍｍｏｌ）の酢酸エチル（１２０ｍＬ）及び水（１８ｍＬ）の溶液に濃塩酸（２．４１ｇ，２３．８２ｍｍｏｌ）を加え、２５℃で攪拌後、分液した。得られた水層を酢酸エチル（１２０ｍＬ）で二回洗浄し、１０規定水酸化ナトリウム水溶液（２．１５ｍＬ, ２１．５０ｍｍｏｌ）でｐＨ１１に調整後、塩化ナトリウム（０．６ｇ）を加え、溶解した。ジクロロメタン（１２０ｍＬ）を加え、攪拌後、分液し、有機層を得た。更に、水層にジクロロメタン（１２０ｍＬ）を加え、攪拌後、分液し、得られた有機層を合致した。合致した有機層を１２ｍＬまで減圧濃縮し、アセトニトリル（１２０ｍＬ）を加え、１２ｍＬまで減圧濃縮した。得られた溶液を濾過し、無機塩を除去後、アセトニトリル（６ｍＬ）で洗浄し、得られた溶液を減圧濃縮して、ＨＰＬＣ純度９９．２％の１１－アジド－３，６，９－トリオキサウンデカン－１－アミン（式Ａ－２１で示される化合物）（３．７ｇ，収率８５％）を淡黄色油状化合物として得た。
　１Ｈ－ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ３．６９－３．６２（ｍ，１０Ｈ），３．５１（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ），３．３９（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ），２．８７（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ）．
＜式Ａ－２１で示される化合物の純度分析条件＞
　下記のＨＰＬＣ分析条件において、式Ａ－２１で示される化合物の純度の測定を実施した。サンプル溶液を測定後、ブランク溶液を測定し、ブランクピークを削除することにより、式Ａ－２１で示される化合物のＨＰＬＣ純度を算出した。
＜サンプル溶液の調製＞
　１０ｍＬメスフラスコに、式Ａ－２１で示される化合物５０ｍｇを秤量し、アセトニトリル２ｍＬ、トリエチルアミン１００μＬを加え、混合した。無水酢酸５０μＬを添加し、混合後、１５分静置し、式Ａ－２１で示される化合物をアセチル誘導体化した。４規定水酸化ナトリウム水溶液１５０μＬを加え、混合後、５０％アセトニトリル水でメスアップしてサンプル溶液を調製した。
＜ブランク溶液の調製＞
　１０ｍＬメスフラスコにアセトニトリル２ｍＬ、トリエチルアミン１００μＬを加え、混合した。無水酢酸５０μＬ　を添加し、混合後、１５分静置した。４規定水酸化ナトリウム水溶液１５０μＬを加え、混合後、５０％アセトニトリル水でメスアップしてサンプル溶液を調製した。
＜ＨＰＬＣ分析条件＞
使用機器：ＳＨＩＭＡＺＵ　ＨＰＬＣ（ＬＣ－２０ＡＤ）
カラム：Ｘｂｒｉｇｅ　Ｃ１８　３．５μｍ，４．６×１５０ｍｍ（Ｗａｔｅｒｓ）
移動相Ａ：１０ｍＭ　ＡｃＯＮＨ４水溶液
移動相Ｂ：ＣＨ３ＣＮ
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000284
 流速：１ｍＬ／分
検出波長：２１０ｎｍ
カラム温度：４０℃
注入量：５μＬ
保持時間：７．３分（アセチル化された式Ａ－２１で示される化合物），９．０分（アセチル化された式Ａ－２１で示される化合物の二量体）
　実施例５１
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000285
　４－メトキシフェニル　５－アセトアミド－３，５－ジデオキシ－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［５－アセトアミド－３，５－ジデオキシ－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’－２０で示される化合物）のＮ―メチルピロリドン溶液（１１０ｍＬ，式Ａ’－１９で示される化合物　３．７６ｇから誘導した溶液）をナスフラスコに加え、アルゴン気流下、１１－アジド－３，６，９－トリオキサウンデカン－１－アミン（式Ａ－２１で示される化合物）（１．０１ｇ，３．９７ｍｍｏｌ）、Ｎ－エチルジイソプロピルアミン（０．５１ｇ，３．９７ｍｍｏｌ）及びモレキュラーシーブ４Ａ粉末（１０μｍ以下，３．７６ｇ）を加え、攪拌後、ヘキサフルオロリン酸（ベンゾトリアゾール－１－イルオキシ）トリピロリジノホスホニウム（ＰｙＢｏｐ）（２．０７ｇ，３．９７ｍｍｏｌ）を加え、室温で１．５時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、反応液を濾過し、MS4AをＮ―メチルピロリドン（７．５ｍＬ）で洗浄した。濾液と洗浄液を合わせてアセトニトリル（５５５ｍＬ）に滴下後、懸濁液を遠心分離した。淡黄色固体をアセトニトリル（１１３ｍＬ及び１６５ｍＬ）で２回洗浄し、アセトニトリル（１６５ｍＬ）を加え懸濁液とし、減圧濃縮した。得られた淡黄色固体に水（７．６ｍＬ）を加え、メンブレンフィルターで濾過し、濾液をＨＰＬＣにて分取精製した（１回あたりのチャージ量：２ｍＬ）。目的物を含むフラクションを減圧濃縮した後、凍結乾燥することで、４－メトキシフェニル　Ｎ－（２－｛２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル）－５－アセチル－ノイラムアミド－（２→６）－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［Ｎ－（２－｛２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル）－５－アセチル－ノイラムアミド－（２→６）－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’－２２で示される化合物）（１．３５ｇ，収率 ５０％ (式Ａ’－１７で示される化合物からの通算収率）)を白色固体として取得した（ＨＰＬＣ純度９６．８％（検出波長２２０ｎｍ））。
　１Ｈ―ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）σ７．０４（ｄｄ，Ｊ＝６．８，２．４Ｈｚ，２Ｈ），６．９６（ｄ，Ｊ＝６．８，２．４Ｈｚ，１Ｈ），５．１４（ｓ，１Ｈ），５．０３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），４．９５（ｓ，１Ｈ），４．６２（ｍ，３Ｈ），４．４６（ｓ，１Ｈ），４．４１（ｓ，１Ｈ），４．２７（ｓ，１Ｈ），４．２１（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），４．１３（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），４．０１－３．５０（ｍ，１０５Ｈ），２．７１（ｄｄ，Ｊ＝１２．４，４．４Ｈｚ，２Ｈ），２．１０－２．０４（ｍ，１８Ｈ），１．８５（ｔ，Ｊ＝１２．４，４．４Ｈｚ，２Ｈ）
　１３Ｃ―ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）　σ　１８５．０，１８４．８，１８４．７，１８０．３，１６８．９，１６５．９，１３９．７，１３７．１，１２８．０，１２６．２，１２５．４，１２４．７，１２４．６，１２４．５，１２４．５，１２２．６，１０９．７，１０９．６，１０９．４，１０８．７，１０８．２，１０６．２，１０６．０，１０４．８，１０４．５，１０３．８，１０３．３，１０３．０，１０２．８，１０２．７，１０２．６，１０１．９，１０１．６，１０１．２，１００．８，１００．７，１００．４，１００．４，９９．８，９９．７，９９．３，９８．９，９８．６，９７．７，９７．６，９５．５，９５．１，９４．４，９４．３，９３．２，９３．０，８９．７，８９．０，８９．０，８８．７，８６．４，８５．２，７６．０，７５．６，６３．０，６２．９，６２．７，６２．７．
　ＭＳ（ＥＳＩ＋）［Ｍ＋２ＮＨ４］２＋　ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ１０７Ｈ１８４Ｎ１６Ｏ６７ ２＋：１３８３．０（ｍ／ｚ）；ｆｏｕｎｄ　１３８３．０．
＜式Ａ’’－２２で示される化合物の合成＞
　Ｒ１がイソプロピルである式Ａ－２２で示される化合物（すなわち、式Ａ’’－２２で示される化合物）を以下の合成スキーム６に従って合成した。
　［合成スキーム６］
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000286
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000287
 　実施例５２
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000288
　３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－１，２－Ｏ－（１－メトキシエチリデン）－β－Ｄ－マンノピラノース（式Ａ－１で示される化合物）（６０．０ｇ，１１８．４４ｍｍｏｌ）を１Ｌ４径フラスコに添加後、酢酸エチル（６００ｍＬ）を加えた。アルゴン雰囲気下、室温にて水（３ｍＬ）及びｐ－ＴｓＯＨ・Ｈ２Ｏ（７０ｍｇ，０．３５５ｍｍｏｌ）を添加し、同温にて６時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、トリエチルアミン（１２ｇ，１１８．４４ｍｍｏｌ）を加え、同温にて終夜撹拌した。ＨＰＬＣによりアセチル基の転移終了を確認後、反応液に５％重曹水（６００ｍＬ）を加え分液した。有機層に２０％食塩水（３００ｍＬ）を加え分液した。有機層を１２０ｍＬまで減圧濃縮し、トルエン（６００ｍＬ）を加えて、液量１２０ｍＬまで減圧濃縮した。再度、トルエン（６００ｍＬ）を加えて、液量１２０ｍＬまで減圧濃縮した。脱水トルエン（１８０ｍＬ）を加え、２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－Ｄ－マンノピラノース（式Ａ－２で示される化合物）のトルエン溶液を無色溶液として取得した。
　実施例５３
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000289
　２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－Ｄ－マンノピラノース（式Ａ－２で示される化合物）のトルエン溶液（１１８．４４ｍｍｏｌ）を１Ｌフラスコに加え、トリクロロアセトニトリル（２５．６ｇ，１７８ｍｍｏｌ）及びＤＢＵ（１８０μＬ，１．１８ｍｍｏｌ）を加えた。アルゴン下、０℃にて６時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、０℃にて反応液に酢酸（６８μＬ，１．１８ｍｍｏｌ）を加え、２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－１－Ｏ－（２，２，２－トリクロロエタンイミドイル）－Ｄ－マンノピラノース（式Ａ－３で示される化合物）のトルエン溶液（１１８．４４ｍｍｏｌ）を褐色溶液として取得した。本溶液をそのまま次工程に使用した。
　実施例５４
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000290
　４－メトキシフェニル３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－４－Ｏ－｛２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－３－Ｏ－［（ナフタレン－２－イル）メチル］－β－Ｄ－マンノピラノシル｝－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ－４で示される化合物のカラム精製品）（３０．０ｇ，２７．８ｍｍｏｌ）を１Ｌ４径フラスコに加え、１，１，１，３，３，３－ヘキサフルオロ－２－プロパノール（２４０ｍＬ）に溶解させ、水（２４ｍＬ）を加えた。アルゴン下、－２０℃にて２，３－ジクロロ－５，６－ジシアノ－ｐ－ベンゾキノン（６．９５ｇ，３１．６ｍｍｏｌ）を加え、同温にて１９時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、亜硫酸ナトリウム（１．７５ｇ）を水（１５ｍＬ）に溶解した水溶液を加え、０℃にて３時間攪拌した。ジクロロメタン（４５０ｍＬ）を加え、亜硫酸ナトリウム（６ｇ）及び炭酸水素ナトリウム（６ｇ）を水（３００ｍＬ）に溶解した水溶液にて分液洗浄後、有機層（３層分離するため、中層と下層を併せた）を９０ｍＬまで減圧濃縮し、酢酸エチル（４５０ｍＬ）を加えた。５％重曹水（３００ｍＬ）及び２０％食塩水（１２０ｍＬ）で有機層を洗浄後、９０ｍＬまで減圧濃縮し、トルエン（４５０ｍＬ）を加え、９０ｍＬまで減圧濃縮した。トルエン（１２０ｍＬ）を加え、シリカゲル６０Ｎ（９０ｇ）を添加した。攪拌下、ヘプタン（６０ｍＬ）を１時間かけて滴下し、目的物をシリカゲルに吸着させた後、ろ過した。トルエン／ヘプタン（７／２，６００ｍＬ）にてシリカゲルを洗浄後（ろ液は廃棄）、酢酸エチル／トルエン（１／１，１３５０ｍＬ）にて、目的物を脱着した。ろ液を６０ｍＬまで減圧濃縮し、４－メトキシフェニル３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－４－Ｏ－（２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル）－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ－５で示される化合物）のトルエン溶液を得た。本溶液をそのまま次工程に使用した。
　実施例５５
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000291
　４－メトキシフェニル３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－４－Ｏ－（２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル）－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ－５で示される化合物）のトルエン溶液（２７．８ｍｍｏｌ相当）及び２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－１－Ｏ－（２，２，２－トリクロロエタンイミドイル）－Ｄ－マンノピラノース（式Ａ－３で示される化合物）のトルエン溶液（８３．４ｍｍｏｌ相当）を１Ｌ４径フラスコに加え、トルエン（２７０ｍＬ）及びモレキュラーシーブ４Ａ粉末（１０μｍ以下，４．５ｇ）を加えた。アルゴン下、－２０℃にてトリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル（１．０１ｍＬ，５．５６ｍｍｏｌ）のトルエン溶液（３０ｍＬ）を２時間かけて滴下し、同温にて２時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、トリエチルアミン（１．５５ｍＬ，１３．９ｍｍｏｌ）を加え、室温にて終夜撹拌した。反応液をろ過後、アセトニトリル（３００ｍＬ）にて洗浄した。ろ液を９０ｍＬまで減圧濃縮し、アセトニトリル（６００ｍＬ）を加え、再度９０ｍＬまで減圧濃縮した。アセトニトリル（５１０ｍＬ）を添加後、逆相用シリカゲル１２０ＲＰ－１８（関東化学製、粒子径４０－５０μｍ，１８０ｇ）を添加した。攪拌下、水（２４０ｍＬ）を１時間かけて滴下し、目的物を固相に吸着させた後、ろ過した。アセトニトリル／水（２０／８，１．６８Ｌ）にて固相を洗浄後（濾液は廃棄）、酢酸エチル／アセトニトリル（１／１，１．２Ｌ）にて目的物を脱着させた。ろ液を９０ｍＬまで減圧濃縮し、トルエン（３６０ｍＬ）を加え、再度９０ｍＬまで減圧濃縮して、４－メトキシフェニル２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ－６で示される化合物）のトルエン溶液を得た。本溶液をそのまま次工程に使用した。
　実施例５６
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000292
　４－メトキシフェニル２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ－６で示される化合物）のトルエン溶液（２７．８ｍｍｏｌ相当）を２Ｌ４径フラスコに加え、ジクロロメタン（２１０ｍＬ）、１，１，１，３，３，３－ヘキサフルオロ－２－プロパノール（１５０ｍＬ）及び水（１２ｍＬ）を加えた。アルゴン下、０℃にて［ビス（トリフルオロアセトキシ）ヨード］ベンゼン（２３．９ｇ，５５．６ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（７５ｍＬ）及びトリフルオロ酢酸（９．５ｇ，８３．４ｍｍｏｌ）を添加し、同温にて１２時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、炭酸水素ナトリウム（１８ｇ）を水（２４０ｍＬ）に溶解した溶液を２０分かけて滴下した。１５分攪拌後、亜硫酸ナトリウム（１２ｇ）を水（２１０ｍＬ）に溶解した水溶液を滴下した。分液し、３層分離した中間層を採取し、９０ｍＬまで減圧濃縮した。酢酸エチル（３００ｍＬ）を添加し、食塩水（食塩２１ｇ，水１９５ｍＬ）を加え洗浄した。得られた有機層を９０ｍＬまで減圧濃縮後、トルエン（３６０ｍＬ）を加え、９０ｍＬまで再度減圧濃縮した。トルエン（１５０ｍＬ）及びジクロロメタン（６０ｍＬ）を加え、シリカゲル６０Ｎ（関東化学製，粒子径：４０－５０μｍ，１２０ｇ）を添加した。トルエン（６０ｍＬ）を滴下し、目的物をシリカゲルに吸着させた後、ろ過した。ジクロロメタン／トルエン（４／２０，７２０ｍＬ）にて洗浄し（濾液は廃棄）、酢酸エチル／ジクロロメタン（１／２，９００ｍＬ）にて、目的物を固相から脱着した。ろ液を９０ｍＬまで減圧濃縮し、トルエン（２１０ｍＬ）を加え、再度９０ｍＬまで減圧濃縮し、２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノース（式Ａ－７で示される化合物）のトルエン溶液を得た。本溶液をそのまま次工程に使用した。
　実施例５７
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000293
　２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノース（式Ａ－７で示される化合物）のトルエン溶液（２７．８ｍｍｏｌ相当）を１Ｌ４径フラスコに加え、ジクロロメタン（２４０ｍＬ）、モレキュラーシーブ４Ａ粉末（１０μｍ以下，２１ｇ）を加えて、０℃まで冷却した。アルゴン下、同温にてＤＢＵ（５．１ｇ，３３．４ｍｍｏｌ）及び２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルアセトイミドイルクロリド（６．４ｇ，３０．６ｍｍｏｌ）を加え、３時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、ろ過し、冷却したジクロロメタン（１２０ｍＬ）で洗浄した。ろ液をジクロロメタンにて充填した中性シリカゲルパッド（シリカゲル６０Ｎ，関東化学製，粒子径：４０－５０μｍ，１２０ｇ）でろ過した（ろ液を分取）。シリカゲルパッドを１０％酢酸エチル／ジクロロメタン（８４０ｍＬ，１８０ｍＬずつ分取）にて洗浄し、主留を９０ｍＬまで減圧濃縮した。トルエン（１５０ｍＬ）を加え、再度９０ｍＬまで減圧濃縮し、２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－１－Ｏ－（２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルエタンイミドイル）－β－Ｄ－グルコピラノース（式Ａ－８で示される化合物）のトルエン溶液得た。本溶液をそのまま次工程に使用した。
　実施例５８
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000294
　４－Ｏ－アセチル－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｆ－２で示される化合物）（２０．０ｇ，３７．６３ｍｍｏｌ）及びモレキュラーシーブス４Ａ粉末（粉末粒径１０μｍ以下）（１０ｇ）のトルエン（８０ｍＬ）及びジクロロメタン（１６０ｍＬ）溶液を０℃に冷却し、２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルアセトイミドイルクロリド（６．８６ｍＬ，４３．２７ｍｍｏｌ）及びＮ－メチルイミダゾール（３．６ｍＬ，４５．１６ｍｍｏｌ）を滴下した。同温にて２２時間攪拌し、反応終了をＨＰＬＣにより確認後、反応液を濾過し、トルエン（８０ｍＬ）で洗浄した。０－５℃のろ液を中性シリカゲル（シリカゲル６０Ｎ，４０－５０μｍ，７０ｇ）をジクロロメタンで充填したカラムに通液濾過し、０－５℃のジクロロメタン（４００ｍＬ）で洗浄した（濾液を８フラクションに分けた）。シリカパッドを０－５℃の５％酢酸エチル／ジクロロメタン（４００ｍＬ）で洗浄した（濾液を４フラクションに分けた）。選定したフラクションを混合し、４０ｍＬまで濃縮乾固し、トルエン（１００ｍＬ）を加え、再度４０ｍＬまで減圧濃縮して、４－Ｏ－アセチル－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－Ｏ－［２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルエタンイミドイル］－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ－１２で示される化合物）のトルエン溶液を得た。本溶液をそのまま次工程へと使用した。
　実施例５９
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000295
　４－Ｏ－アセチル－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－Ｏ－［２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルエタンイミドイル］－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ－１２で示される化合物）のトルエン溶液（Ｇｌｎ―９，２１．４ｇ，３０．４５ｍｍｏｌ相当）にジクロロメタン（１７１ｍＬ）、イソプロパノール（４．７ｍＬ，６０．９０ｍｍｏｌ）及びモレキュラーシーブス４Ａ粉末（粉末粒径１０μｍ以下）（６．４ｇ）を加え、－７０℃に冷却した。トリフルオロメタンスルホン酸ｔ－ブチルジメチルシリル（２．１ｍＬ，９．１４ｍｍｏｌ）を含むジクロロメタン溶液（２１ｍＬ）を－７０～－８０℃で２時間かけて滴下し、同温で１時間攪拌した。トリエチルアミン（２．５５ｍＬ，１８．２７ｍｍｏｌ）を加え、終夜室温で攪拌後、ろ過した。除去したモレキュラーシーブス４Ａ粉末をジクロロメタン（１０７ｍＬ）で洗浄した。ろ液を混合し、減圧濃縮した。得られた濃縮乾固品の内、一部を小分けし（式Ａ－１２で示される化合物　１９．２ｇ相当）、イソプロパノール（２８８ｍＬ）を加え、種晶を接種して終夜攪拌した。スラリー液に水（３８４ｍＬ）を３時間かけて滴下し、０－５℃で終夜攪拌後、ろ過し、結晶をイソプロパノール／水（３／４，９６ｍＬ）で洗浄して、４０℃で減圧乾燥して、イソプロピル　４－Ｏ－アセチルー３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｆ’’－１で示される化合物）（１４．１ｇ，収率９０％）を白色結晶として得た。
　１Ｈ－ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）σ７．７９－７．６９（ｍ，４Ｈ），７．３５－７．２６（ｍ，５Ｈ），７．０１－６．８８（ｍ，５Ｈ），５．２１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），５．１０（ｔ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，１Ｈ），４．６０（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．５６（ｓ，２Ｈ），４．４２（ｄｄ，Ｊ＝１０．６，９．０Ｈｚ，１Ｈ），４．３３（ｄ，Ｊ＝１２．４Ｈｚ，１Ｈ），４．２２（ｄｄ，Ｊ＝１０．８，８．４Ｈｚ，１Ｈ），３．８７（ｓｅｐｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，１Ｈ），３．７８－３．７３（ｍ，１Ｈ），３．６２（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），１．９５（ｓ，３Ｈ），１．１４（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，３Ｈ），０．８７（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，３Ｈ）．
　１３Ｃ－ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｉｎｔｅｒ　ａｌｉａ　σ１６９．７，１３８．０，１３７．７，１３３．８，１３１．５，１２８．４，１２８．１，１２７．８，１２７．７，１２７．４，１２３．５，９６．９，７３．７，７３．６，７３．４，７２．７，７２．１，７０．０，５５．７，２３．３，２１．８，２０．９．
ＭＳ（ＥＳＩ）（ｍ／ｚ）：５９６（［Ｍ＋Ｎａ］＋）．
　実施例６０
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000296
　イソプロピル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ｆ’’－１で示される化合物）（１．７４ｇ，３．０３ｍｍｏｌ）にテトラヒドロフラン（９．４５ｍＬ）、メタノール（５．３ｍＬ）及びトリフルオロ酢酸メチル（０．３１ｍＬ，３．０３ｍｍｏｌ）を加え、２０－３０℃で１５分攪拌した。ｔ－ブトキシカリウムの１Ｍテトラヒドロフラン溶液（１．５２ｍＬ，１．５２ｍｍｏｌ）を滴下し、３５－４５℃にて２．５時間攪拌した。反応終了確認後、２０－３０℃に冷却し、酢酸（１７４μＬ，３．０３ｍｍｏｌ）を加えた。酢酸エチル（２１ｍＬ）、水（１８．９ｍＬ）を加え、トリエチルアミンにてｐＨを６．０－７．０に調整した。食塩（０．２１ｇ）を加え、５分攪拌後、分液し、得られた有機層を水（１８．９ｍＬ）で２回洗浄した。有機層を６ｍＬまで減圧濃縮し、トルエン（２１ｍＬ）を加え、再び６ｍＬまで減圧濃縮した。更にトルエン（２１ｍＬ）を加え、６ｍＬまで減圧濃縮し、イソプロピル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’’－９で示される化合物）のトルエン溶液を取得した。本溶液をそのまま次工程へと使用した。
　実施例６１
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000297
　２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－１－Ｏ－（２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルエタンイミドイル）－β－Ｄ－グルコピラノース（式Ａ－８で示される化合物）（１３．９１ｍｍｏｌ）のトルエン溶液（４５ｍＬ）及びイソプロピル３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’’‐９で示される化合物）（８．８６ｇ，１６．６７ｍｍｏｌ）を１Ｌ４径フラスコに加え、トルエン（２２５ｍＬ）及びモレキュラーシーブ４Ａ粉末（６．７５ｇ）を加えた。アルゴン下、－２０～－１５℃にてトリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル（０．４ｍＬ，２．０９ｍｍｏｌ）のトルエン溶液（１５ｍＬ）を３時間かけて滴下し、同温にて２時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、トリエチルアミン（０．７７ｍＬ，５．５６ｍｍｏｌ）を加え、室温にて終夜撹拌した。反応液をろ過し、アセトニトリル（７５ｍＬ）にて洗浄した。ろ液を４５ｍＬまで減圧濃縮し、アセトニトリル（３００ｍＬ）を加え、再度４５ｍＬまで減圧濃縮した。アセトニトリル（２５５ｍＬ）及び逆相用シリカゲル１２０ＲＰ－１８（関東化学製、粒子径４０－５０μｍ，９０ｇ）を加えた。攪拌下、１時間かけて水（９０ｍＬ）を滴下し、目的物を固相に吸着させ、ろ過した。アセトニトリル／水（２０／６，３９０ｍＬ）にて洗浄し（濾液は廃棄）、酢酸エチル／アセトニトリル（１／２，６７５ｍＬ）にて目的物を脱着した。ろ液を減圧濃縮し、トルエン（１５０ｍＬ）にて２度共沸することでイソプロピル　２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’’－１０で示される化合物）のトルエン溶液を得た。この溶液をそのまま次工程に使用した。
　実施例６２
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000298
　イソプロピル　２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［２－Ｏ－アセチル－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’’－１０で示される化合物）（１３．９１ｍｍｏｌ）のトルエン溶液（４５ｍＬ）を５００ｍＬ４径フラスコに加え、テトラヒドロフラン（８２ｍＬ）、メタノール（３８ｍＬ）及びトリフルオロ酢酸メチル（１．３８ｍＬ，１３．９１ｍｍｏｌ）を加えた。アルゴン下、室温にて１５分間撹拌した後、１Ｍｔ－ブトキシカリウムのテトラヒドロフラン溶液（６．９ｍＬ，６．９ｍｍｏｌ）を加えて、４０℃にて６時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、室温まで冷却した。酢酸（０．５６ｍＬ，９．７４ｍｍｏｌ）を加えた後、酢酸エチル（１６５ｍＬ）を加え、水（１３５ｍＬ）、トリエチルアミン（０．５８ｍＬ，４．１７ｍｍｏｌ）、食塩（１．５ｇ）を加え、１５分攪拌した。分液後、有機層を水（１３５ｍＬ）にて２回洗浄した。有機層を４５ｍＬまで減圧濃縮し、トルエン（１５０ｍＬ）を加え、４５ｍＬまで減圧濃縮し、トルエン（１５０ｍＬ）を加え、４５ｍＬまで再度減圧濃縮して、イソプロピル　３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’’－１１で示される化合物）のトルエン溶液を得た。本溶液をそのまま次工程に使用した。
　実施例６３
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000299
　イソプロピル３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’’－１１で示される化合物）（１３．９１ｍｍｏｌ）のトルエン溶液（４５ｍＬ）、４－Ｏ－アセチル－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－Ｏ－［２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルエタンイミドイル］－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’’－１２で示される化合物）（２４．４ｇ，３４．７８ｍｍｏｌ）のトルエン溶液を１Ｌ４径フラスコに加え、ジクロロメタン（３００ｍＬ）及びモレキュラーシーブ４Ａ粉末（１０μｍ以下，６．０ｇ）を加えた。アルゴン下、－６２℃にてトリフルオロメタンスルホン酸ｔ－ブチルジメチルシリル（２．５５ｍＬ，１１．１３ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（１５ｍＬ）を２時間かけて滴下し、同温にて２時間撹拌した。トリフルオロメタンスルホン酸ｔ－ブチルジメチルシリル（１．２７ｍＬ，５．５５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（７．５ｍＬ）を１時間かけて滴下し、同温にて２時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認し、トリエチルアミン（３．８６ｍＬ，２７．８２ｍｍｏｌ）を加え、室温にて終夜撹拌した。反応液をろ過し、トルエン（１５０ｍＬ）にて洗浄した。ろ液を６０ｍＬまで減圧濃縮し、イソプロピル４－Ｏ－アセチル－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［４－Ｏ－アセチル－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’’－１３で示される化合物）のトルエン溶液を得た。この溶液をそのまま次工程に使用した。
　実施例６４
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000300
　イソプロピル４－Ｏ－アセチル－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［４－Ｏ－アセチル－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－（１，３－ジオキソ－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－イソインドール－２－イル）－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’’－１３で示される化合物）（１３．９１ｍｍｏｌ）のトルエン溶液（６０ｍＬ）を１Ｌ４径フラスコに加え、１－ブタノール（９０ｍＬ）、エチレンジアミン（９０ｍＬ）を加えた後、９０℃に昇温して、２１時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、室温まで冷却した。反応液を６０ｍＬまで減圧濃縮し、アセトニトリル（３９０ｍＬ）及び逆相用シリカゲル１２０ＲＰ－１８（関東化学製、粒子径４０－５０μｍ，９０ｇ）を加えた。攪拌下、１時間かけて水（３００ｍＬ）を滴下し、目的物を固相に吸着させた後、ろ過した。アセトニトリル／水（２６／２０，６９０ｍＬ）にて洗浄後（洗浄液は廃棄）、アセトニトリル／酢酸エチル（２／１，１０１３ｍＬ）にて目的物を固相より脱着した。脱着液を６０ｍＬまで減圧濃縮し、酢酸イソプロピル（３２７ｍＬ）を加え、６５ｍＬまで減圧濃縮した。テトラヒドロフラン（１３１ｍＬ）及びフマル酸（７．２１ｇ，６２．１１ｍｍｏｌ）を加え、完溶を確認後、酢酸イソプロピル（６５４ｍＬ）を添加し、内温２１℃付近で２時間攪拌した。種晶を接種し、同温下で終夜攪拌した。スラリー液を３℃まで冷却し、３時間攪拌後、ヘプタン（１３１ｍＬ）を４時間かけて滴下し、終夜攪拌した。スラリー液を濾過し、室温下で減圧乾燥することでイソプロピル２－アミノ－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［２－アミノ－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－２－アミノ－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－２－アミノ－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシド　５フマル酸塩（式Ａ’’－１４－ＦＭＡで示される化合物）（２５．９ｇ，式Ａ－４で示される化合物より通算収率６４％）を白色結晶として得た。
　１ＨＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）σ７．４４－７．０６（ｍ，８８Ｈ），６．７３（ｓ，１０Ｈ，フマル酸），５．３２（ｓ，１Ｈ），５．１６－５．００（ｍ，５Ｈ），４．９９－４．１８（ｍ，４３Ｈ），４．０８－３．３２（ｍ，３８Ｈ），３．２３－３．２１（ｍ，１Ｈ），３．０７－３．０４（ｍ，２Ｈ），２．９８－２．９２（ｍ，２Ｈ），２．８５－２．８０（ｍ，２Ｈ），１．９８（ｓ，４Ｈ，残留酢酸イソプロピル），１．２８－１．２１（ｍ，１５Ｈ、残留酢酸イソプロピルを含む）
　１３ＣＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）ｉｎｔｅｒ　ａｌｉａ　σ１７０．１，１４０．０２，１４０．００，１３９．９，１３９．８，１３９．７，１３９．６４，１３９．６２，１３９．５６，１３９．５４，１３９．５１，１３９．５，１３９．３，１３９．１，１３８．８，１３８．７，１３５．９，１２９．８，１２９．７８，１２９．７１，１２９．６４，１２９．６２，１２９．５９，１２９．５７，１２９．５３，１２９．４６，１２９．４４，１２９．４２，１２９．４，１２９．３，１２９．２８，１２９．２３，１２９．２１，１２９．０，１２８．９，１２８．８９，１２８．８７，１２８．８３，１２８．８０，１２８．７８，１２８．７，１２８．５，１２８．４，１２８．２，９９．１，８１．０，７９．６，７９．０，７６．０，７５．８，７５．６，７４．５，７４．４，７４．１，７３．４，７２．１，７０．３，６９．１，５６．３，２３．８，２２．０，２１．９．
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ＋）［Ｍ＋２Ｈ］２＋ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ１５７Ｈ１８０Ｎ４Ｏ３２ ２＋：１３１７．１３０１６；ｆｏｕｎｄ　１３１７．１３１２８．
　実施例６５
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000301
　イソプロピル　２－アミノ－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［２－アミノ－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－２－アミノ－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－２－アミノ－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシド　５フマル酸塩（式Ａ’’－１４－ＦＭＡで示される化合物）（２７ｇ，８．４ｍｍｏｌ）を１Ｌ４径フラスコに加え、テトラヒドロフラン（２１６ｍＬ）及び炭酸水素ナトリウム（１４．１ｇ）を水（２０３ｍＬ）に溶解した水溶液を加えた。クロロギ酸フェニル（４．７５ｍＬ，３７．８ｍｍｏｌ）を添加した後、１時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、クロロギ酸フェニル（０．２１ｍＬ）を加え、ピークの変動がないことを確認後、酢酸（８．６ｍＬ）を加え、ｐＨを５．２９に調整した。酢酸エチル（２７０ｍＬ）、水（１３５ｍＬ）を加え、室温下、３０分攪拌後、分液した。得られた有機層を５４ｍＬまで減圧濃縮し、アセトニトリル（２１６ｍＬ）及び逆相用シリカゲル１２０ＲＰ－１８（関東化学製、粒子径４０－５０μｍ，８１ｇ）を加えた。攪拌下、１時間かけて水（９５ｍＬ）を滴下し、目的物を固相に吸着させた後、ろ過した。アセトニトリル／水（１０／３．５，３６４ｍＬ）にて洗浄後（洗浄液は廃棄）、アセトニトリル／酢酸エチル（２／１，１２１５ｍＬ）にて目的物を固相より脱着した。脱着液を５４ｍＬまで減圧濃縮し、トルエン（２７０ｍＬ）を加え、５４ｍＬまで減圧濃縮することで、イソプロピル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’’－１５で示される化合物）のトルエン溶液を得た。本溶液をそのまま次工程に使用した。
　実施例６６
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000302
　イソプロピル　３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’’－１５で示される化合物）のトルエン溶液（８．４ｍｍｏｌ相当）、４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－６－Ｏ－［４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル］－１－Ｏ－（２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルエタンイミドイル）－Ｄ－ガラクトピラノース（式Ａ－１６に示される化合物）のトルエン溶液（２３．５２ｍｍｏｌ）を１Ｌ４径フラスコに加え、ジクロロメタン（２７０ｍＬ）及びモレキュラーシーブ４Ａ粉末（１０μｍ以下，８．１ｇ）を加えた。アルゴン下、－２０℃にてトリフルオロメタンスルホン酸ｔ－ブチルジメチルシリル（０．５８ｍＬ，２．５２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（２７ｍＬ）を３時間かけて滴下し、同温にて１時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、トリエチルアミン（４６５μＬ）を加え、自然昇温にて終夜攪拌した。反応液をろ過し、１，２―ジメトキシエタン（２７０ｍＬ）にて洗浄した。ろ液を８１ｍＬまで減圧濃縮し、イソプロピル　４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－Ｏ－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－Ｏ－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’’－１７に示される化合物）の１，２―ジメトキシエタン溶液を得た。本溶液をそのまま次工程に使用した。
　実施例６７
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000303
　イソプロピル　４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－Ｏ－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－Ｏ－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’’－１７示される化合物）の１，２―ジメトキシエタン溶液（８．４ｍｍｏｌ相当）を１Ｌ４径ナスフラスコに加え、１，２―ジメトキシエタン（２４３ｍＬ）、蒸留水（１０８ｍＬ）を加えた。アルゴン下、０－５℃にて８Ｍ水酸化カリウム水溶液（４１．９ｍＬ）を滴下し、室温まで昇温後、１時間撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、８Ｍ水酸化カリウム水溶液（４．２ｍＬ）を加え、ピークの変動がないことを確認後、酢酸（６．５ｍＬ）を加え、ｐＨを９．４７に調整した。水層を廃棄し、有機層を８１ｍＬまで減圧濃縮して、イソプロピル　４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－Ｏ－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－Ｏ－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’’－１８に示される化合物）の１，２―ジメトキシエタン溶液を得た。本溶液をそのまま次工程に使用した。
　実施例６８
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000304
　イソプロピル　４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－Ｏ－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－５－（ジアセチルアミノ）－１－Ｏ－メチル－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－４－Ｏ－アセチル－２，３－ジ－Ｏ－ベンゾイル－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－２－［（フェノキシカルボニル）アミノ］－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’’－１８に示される化合物）の１，２－ジメトキシエタン溶液（７．５６ｍｍｏｌ相当）を５００ｍＬ４径フラスコに加え、テトラヒドロフラン（２１９ｍＬ）、メタノール（９７ｍＬ）、トリエチルアミン（１９．１ｇ）を加えた。アルゴン下、外温０－５℃にて無水酢酸（１２．８ｍＬ）を１時間かけて滴下し、同温にて１時間撹拌した。その後、トリエチルアミン（９．４４ｍＬ）及び無水酢酸（４．２５ｍＬ）を追加し、ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、メタノール（１２２ｍＬ）を加え、０－５℃で終夜攪拌した。ＤＭＡＰ（９．２ｍｇ）を添加し、同温にて１時間攪拌後、反応液を７２ｍＬまで減圧濃縮した。濃縮残渣にアセトニトリル（２４３ｍＬ）を加え、７２ｍＬまで減圧濃縮した。アセトニトリル（２９１ｍＬ）及び水（１２１ｍＬ）を加え、逆相用シリカゲル１２０ＲＰ－１８（関東化学製、粒子径４０－５０μｍ，１２０ｇ）を加えた。攪拌下、１時間かけて水（３６０ｍＬ）を滴下し、目的物を固相に吸着させた後、ろ過した。アセトニトリル／水（１／４，９２０ｍＬ）にて洗浄後（洗浄液は廃棄）、アセトニトリル／メタノール（１／１，１４４０ｍＬ）にて目的物を固相より脱着した（脱着液にて別途合成した０．８４ｍｍｏｌ相当の溶液を混合した。合計８．４ｍｍｏｌ相当）。脱着液を８１ｍＬまで減圧濃縮し、テトラヒドロフラン／水（８／２，２７０ｍＬ）を加え、精製白鷺（８．１ｇ）を添加後、１５－２５℃にて１時間攪拌後、ろ過し、テトラヒドロフラン／水（８／２，１３５０ｍＬ）で洗浄した。ろ液を２７０ｍＬまで減圧濃縮した。ろ液にテトラヒドロフランを加え、テトラヒドロフラン／水（８／２）の組成に調整し、精製白鷺（８．１ｇ）を添加後、１５－２５℃にて１時間攪拌後、ろ過し、テトラヒドロフラン／水（８／２，１３５０ｍＬ）で洗浄した。ろ液にＮ－メチルピロリドン（８１ｍＬ）を加え、９５ｍＬまで減圧濃縮して、イソプロピル　５－アセトアミド－３，５－ジデオキシ－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［５－アセトアミド－３，５－ジデオキシ－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’’－１９に示される化合物）のＮ－メチルピロリドン溶液を取得した。本溶液をそのまま次工程に使用した。
　実施例６９
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000305
　イソプロピル　５－アセトアミド－３，５－ジデオキシ－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［５－アセトアミド－３，５－ジデオキシ－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－３，４，６－トリ－Ｏ－ベンジル－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－２，４－ジ－Ｏ－ベンジル－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－３，６－ジ－Ｏ－ベンジル－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’’－１９に示される化合物）のＮ－メチルピロリドン溶液（２．８ｍｍｏｌ相当）をオートクレーブに加え、メタノール（４５ｍＬ）を加えた。減圧→アルゴン置換を３回繰り返し、前処理品のＡＳＣＡ－２（エヌ・イーケムキャット製，１３．５ｇ）を加え、減圧→アルゴン置換を３回繰り返し、水素加圧→解圧を３回繰り返した。外温４０℃、水素圧０．５ＭＰａ下で４時間強撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、反応液をアルゴン置換したグローブボックス内で減圧濾過し、濾物を脱気したメタノール（１８０ｍＬ）で洗浄した。濾液にジイソプロピルエチルアミン（２．４ｍＬ）を加え、３２ｍＬまで減圧濃縮した。２．８ｍｍｏｌスケールの上記の操作を３回繰り返し、得られた溶液を合一して９６ｍＬ（８．４ｍｍｏｌ相当）の溶液を取得した。得られた溶液にアセトニトリル（２７０ｍＬ）を加え、９６ｍＬまで脱水減圧濃縮した。再度、アセトニトリル（２７０ｍＬ）を加え、９６ｍＬまで脱水減圧濃縮して、イソプロピル　５－アセトアミド－３，５－ジデオキシ－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［５－アセトアミド－３，５－ジデオキシ－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’’－２０に示される化合物）のＮ―メチルピロリドン溶液を得た。本溶液をそのまま次工程へ使用した。
　備考）ＡＳＣＡ－２は下記の手法により前処理を実施した。
アルゴン下、ＡＳＣＡ－２（３１．２ｇ）のＤＭＦ（５４ｍＬ）スラリー液を０－５℃に冷却後、精製水（１３．５ｍＬ）と濃塩酸（１３．５ｍＬ）を滴下した。２０－３０℃で１時間攪拌後、アルゴン下で濾過し、精製水（５９４ｍＬ）で洗浄し、前処理品のＡＳＣＡ－２（４０．５ｇ）を得た。
　実施例７０
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000306
　イソプロピル　５－アセトアミド－３，５－ジデオキシ－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［５－アセトアミド－３，５－ジデオキシ－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－ノン－２－ウロピラノシル－（２→６）－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’’－２０に示される化合物）のＮ―メチルピロリドン溶液（７．５６ｍｍｏｌ相当）をナスフラスコに加え、アルゴン気流下、１１－アジド－３，６，９－トリオキサウンデカン－１－アミン（式Ａ－２１に示される化合物）（４．９５ｇ，２２．６８ｍｍｏｌ）、Ｎ－エチルジイソプロピルアミン（３．９６ｍＬ，２２．６８ｍｍｏｌ）を加え、０－５℃に冷却した。同温にてブロモトリピロリジノホスホニウム＝ヘキサフルオロリン酸塩（ＰｙＢｒｏｐ）（１０．５３ｇ，２２．６８ｍｍｏｌ）を加え、室温で３０分撹拌した。ＨＰＬＣにより反応終了を確認後、Ｃｅｌｐｕｒｅ６５（３６．９ｇ）を含むアセトニトリル（７２９ｍＬ）懸濁液に反応液を滴下し、得られたスラリー液を濾過した（目的物を固体化して濾別）。濾物をアセトニトリル（１８２７ｍＬ）で洗浄し、試薬の残骸を除去後、メタノール／水（１／１，１４５８ｍＬ）で洗浄して、目的物を溶出させた。ろ液を２４３ｍＬまで減圧濃縮後、１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（３７．８ｍＬ）を加え、室温下３０分攪拌した。ＨＰＬＣによりアセチル体が目的物に収束したことを確認後、酢酸でｐＨ　６．５に調整し、凍結乾燥して、イソプロピル　Ｎ－（２－｛２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル）－５－アセチル－ノイラムアミド－（２→６）－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［Ｎ－（２－｛２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル）－５－アセチル－ノイラムアミド－（２→６）－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’’－２２に示される化合物）の粗体白色粉末を得た（１８．４ｇ，含量６４．５％，ＨＰＬＣ純度８３．２％，７糖中間体からの６工程通算Ｎｅｔ収率　５９．１％）。７糖フマル酸塩２．６７ｇ仕込み相当量の粗体を使用し、１６０ｍｇ／ｍＬとなるように濃度調整し、下記の条件にてＨＰＬＣ分取精製を実施した。精製操作を繰り返して、フラクションをＨＰＬＣ分析し、選定フラクションを混合後、減圧濃縮して、凍結乾燥を行うことにより、イソプロピル　Ｎ－（２－｛２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル）－５－アセチル－ノイラムアミド－（２→６）－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→３）－［Ｎ－（２－｛２－［２－（２－アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル）－５－アセチル－ノイラムアミド－（２→６）－β－Ｄ－ガラクトピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→２）－α－Ｄ－マンノピラノシル－（１→６）］－β－Ｄ－マンノピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシル－（１→４）－２－アセトアミド－２－デオキシ－β－Ｄ－グルコピラノシド（式Ａ’’－２２に示される化合物）の白色粉末を得た（７５０ｍｇ，７糖フマル酸塩からの通算収率３３．９％，ＨＰＬＣ純度９７．８％）。
　［精製条件］
ＨＰＬＣカラム：ＹＭＣ―Ｔｒｉａｒｔ　Ｐｒｅｐ　Ｂｉｏ２００　Ｃ８　（２０ｎｍ，１０μｍ）、３０ｍｍ×２５０ｍｍ
移動相：メタノール／水（２５／７５）
流速：３０ｍＬ／分
目的物溶出位置：３５～５５分
注入量：２ｍＬ（１６０ｍｇ／ｍＬ溶液）
フラクション：各１分
　１Ｈ－ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）σ５．１１（ｓ，１Ｈ），４．９４－４．９２（ｍ，１Ｈ），４．８３（ｓ，１Ｈ），４．７６（ｓ，１Ｈ），４．５９－４．５５（ｍ，４Ｈ），４．４３（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），４．２４（ｓ，１Ｈ），４．１８（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），４．１０（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），４．００－３．４３（ｍ，１０３Ｈ），２．６８（ｄｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，５．２Ｈｚ，２Ｈ），２．０７－２．００（ｍ，１８Ｈ），１．８３（ｔ，Ｊ＝１２．６Ｈｚ，２Ｈ），１．１７（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，３Ｈ），１．１０（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，３Ｈ）．
　１３Ｃ－ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）ｉｎｔｅｒａｌｉａ　σ　１７５．１，１７４．７，１７４．６，１６９．２，１０３．８，９９．７，９９．６，９９．５，９９．４７，９９．４４，９９．４０，９９．３６，９９．３３，９９．３１，８０．９，８０．８，８０．５，７９．７，７９．４，７７．５，７６．５，７６．２，７４．６，７４．４，７３．９，７３．８７，７３．８０，７３．６０，７３．５７，７３．５２，７２．９５，７２．９０，７２．７，７２．６，７２．５６，７２．５，７２．２６，７２．２３，７２．１８，７２．１７，７２．１４，７２．１１，７２．１０，７１．２２，７１．１５，７１．１０，７０．９，７０．７，７０．６，７０．４，７０．３，７０．２６，７０．２５，７０．２１，６９．７，６９．６，６９．５，６９．３，６９．２，６８．６，６８．４，６７．８，６７．４，６７．１，６４．２，６３．０，６２．８，６２．７５，６２．７２，６２．７，６２．０，６１．８，６１．７４，６１．６８，６１．６５，６０．２，５９．９，５５．４，５５．３，５４．９，５４．７，５４．６４，５４．６２，５１．８，５１．７，５０．２，３８．８，３８．３，３８．２，２２．５，　２２．３，２２．２，２２．１，２１．２．
　ＨＲＭＳ（ＥＳＩ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ１０３Ｈ１７７Ｎ１４Ｏ６６ ＋：２６６７．０９５０３；ｆｏｕｎｄ　２６６７．０９６６１．

Claims (44)

  1. 　以下の式Ａ－２２：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000001
     で示されるオリゴ糖（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）を製造する方法であって、（工程Ｉ－１）式Ａ－３：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000002
     で示される化合物を、以下の式Ａ－５：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000003
     で示される化合物とα－１，３－グリコシド結合及びα－１，６－グリコシド結合させることにより、以下の式Ａ－６：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000004
     で示される化合物を生成する工程を含む、以下の式Ａ－８：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000005
     で示される化合物を生成する工程、
    （工程Ｉ－２）前記式Ａ－８で示される化合物を、以下の式Ａ－９：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000006
     で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）とβ－１，４－グリコシド結合させることにより、以下の式Ａ－１０：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000007
     で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）を生成する工程を含む、以下の式Ａ－１１：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000008
     で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）を生成する工程、
    （工程Ｉ－３）前記式Ａ－１１で示される化合物を、以下の式Ａ－１２：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000009
     で示される化合物とβ－１，２－グリコシド結合させることにより、以下の式Ａ－１３：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000010
     で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）を生成し、次いで、前記式Ａ－１３で示される化合物上のアミノ基の保護基であるフタロイル基及び水酸基上のアセチル基を除去して、以下の式Ａ－１４：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000011
     で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）を生成した後、前記式Ａ－１４で示される化合物中のアミノ基をアリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基、及びフタロイル（Ｐｈｔｈ）基から選択される保護基によって保護して、以下の式Ａ－１５：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000012
     で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｒ５は、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、若しくは２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基であり、かつ、Ｒ６は、水素原子であるか、又はＲ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）を生成するか、又は上記式Ａ－１３で示される化合物上のアセチル（Ａｃ）基を除去することによって、上記式Ａ－１５で示される化合物（式中、Ｒ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）を生成する工程、
    （工程Ｉ－４）前記式Ａ－１５で示される化合物を、以下の式Ａ－１６：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000013
     で示される化合物とβ－１，４－グリコシド結合させることにより、以下の式Ａ－１７：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000014
     で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｒ５は、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、若しくは２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基であり、かつ、Ｒ６は、水素原子であるか、又はＲ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）を生成し、次いで、前記式Ａ－１７で示される化合物中のアミノ基の保護基及び水酸基のアシル系保護基を除去することにより、式Ａ－１８：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000015
     で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｍ＋は、ナトリウムイオン、リチウムイオン、カリウムイオン、又はプロトン化されたトリエチルアミンカチオンである）を生成することを含む、以下の式Ａ－２０：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000016
     で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｍ＋は、ナトリウムイオン、リチウムイオン、カリウムイオン、又はプロトン化されたトリエチルアミンカチオンである）を生成する工程、
    （工程Ｉ－５）前記式Ａ－２０で示される化合物を、以下の式Ａ－２１：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000017
     で示される化合物と反応させることにより、前記式Ａ－２２で示されるオリゴ糖を製造する工程、
    を含む、方法。
  2. 　以下の式Ａ－４：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000018
     で示される化合物を、フルオラスアルコール及び水の混合溶媒中で、２，３－ジクロロ－５，６－ジシアノ－ｐ－ベンゾキノン（ＤＤＱ）と反応させて、前記式Ａ－４で示される化合物中の２－ナフチルメチル基を脱離させることにより、前記式Ａ－５で示される化合物を生成することを含む、請求項１に記載の方法。
  3. 　前記フルオラスアルコールが、ヘキサフルオロ－２－プロパノール（ＨＦＩＰ）、２，２，２－トリフルオロエタノール（ＴＦＥ）、２，２，３，３，４，４，５，５－オクタフルオロ－１－ペンタノール、ノナフルオロ－ｔｅｒｔ－ブチルアルコール及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項２に記載の方法。
  4. 　前記反応が、－３５℃～７０℃で行われる、請求項２又は３に記載の方法。
  5. 　前記反応が、－３０℃～－１０℃で行われる、請求項２又は３に記載の方法。
  6. 　前記工程Ｉ－２において、前記式Ａ－１０で示される化合物を、パーフルオロカルボン酸のアルキルエステルの存在下で、強塩基と反応させることにより、前記式Ａ－１１で示される化合物を生成することを含む、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。
  7. 　前記パーフルオロカルボン酸のアルキルエステルが、トリフルオロ酢酸メチル、トリフルオロ酢酸エチル、トリフルオロ酢酸プロピル、トリフルオロ酢酸イソプロピル、トリフルオロ酢酸ブチル、ペンタフルオロプロピオン酸メチル、ペンタフルオロプロピオン酸エチル、ペンタフルオロプロピオン酸プロピル、ぺンタフルオロプロピオン酸イソプロピル、ぺンタフルオロプロピオン酸ブチル、ヘプタフルオロ酪酸メチル、ヘプタフルオロ酪酸エチル、ヘプタフルオロ酪酸プロピル、ヘプタフルオロ酪酸イソプロピル、ヘプタフルオロ酪酸ブチル、ノナフルオロ吉草酸メチル、ノナフルオロ吉草酸エチル、ノナフルオロ吉草酸プロピル、ノナフルオロ吉草酸イソプロピル、ノナフルオロ吉草酸ブチル、ウンデカフルオロカプロン酸メチル、ウンデカフルオロカプロン酸エチル、ウンデカフルオロカプロン酸プロピル、ウンデカフルオロカプロン酸イソプロピル、又はウンデカフルオロカプロン酸ブチルである、請求項６に記載の方法。
  8. 　前記強塩基が、金属アミドのナトリウム塩、リチウム塩、及びカリウム塩；Ｃ１～Ｃ２０アルコキシドのナトリウム塩、リチウム塩、カリウム塩、セシウム塩、及びバリウム塩；水素化ナトリウム、水素化カリウム、水素化リチウム、ブチルリチウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸セシウム、炭酸リチウム、リン酸カリウム、リン酸ナトリウム、リン酸セシウム、リン酸リチウム、ジアザビシクロウンデセン（ＤＢＵ）、ジアザビシクロノネン（ＤＢＮ）、及び１，１，３，３－テトラメチルグアニジン（ＴＭＧ）；並びにこれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項６又は７に記載の方法。
  9. 　前記強塩基が、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド、ナトリウムｔｅｒｔ－ブトキシド、リチウムｔｅｒｔ－ブトキシド、又はリチウムヘキサメチルジシラジド（ＬＨＭＤＳ）である、請求項６又は７に記載の方法。
  10. 　前記式Ａ－１０で示される化合物を、パーフルオロカルボン酸のアルキルエステルの存在下で、強塩基と反応させることにより、前記式Ａ－１１で示される化合物を生成する工程が、Ｃ１～Ｃ１０アルコール溶媒単独中で行われるか、又はＣ１～Ｃ１０アルコール溶媒とアミド系溶媒、エーテル系溶媒、エステル系溶媒、芳香族系溶媒、ハロゲン系溶媒、炭化水素系溶媒、若しくはニトリル系溶媒との混合溶媒中で行われる、請求項６～９のいずれか一項に記載の方法。
  11. 　前記工程Ｉ－３において、前記式Ａ－１４で示される化合物中のアミノ基を、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基で保護することによって前記式Ａ－１５で示される化合物を生成する、請求項１～１０のいずれか一項に記載の方法。
  12. 　前記工程Ｉ－３において、前記式Ａ－１４で示される化合物から前記式Ａ－１５で示される化合物を生成する工程が、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、リン酸水素二ナトリウム、又はリン酸水素二カリウムの水溶液中で行われる、請求項１～１１のいずれか一項に記載の方法。
  13. 　前記Ｒ１が、イソプロピル又は４－メトキシフェニルである、請求項１～１１のいずれか一項に記載の方法。
  14. 　前記式Ａ－１６で示される化合物を生成するための工程であって、以下の式Ｇ－１１：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000019
     で示される化合物及びカルボニルクロロヒドリドトリス（トリフェニルホスフィン）ルテニウム（ＩＩ）を含む溶液を攪拌し、次いで、該溶液に水及び１，３―ジブロモ－５，５－ジメチルヒダントイン、ヨウ素、又はＮ－ブロモスクシンイミドを添加して攪拌することにより、式Ｇ－１１で示される化合物中のＤ－ガラクトピラノシドの１位の炭素に酸素を介して結合しているアリル基を脱離させて、以下の式Ｇ－１２：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000020
     で示される化合物を生成し、さらに、前記式Ｇ－１２で示される化合物中のＤ－ガラクトピラノシドの１位の炭素における水酸基を２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－フェニルアセトイミダート基に変換することにより、前記式Ａ－１６で示される化合物を生成する工程を含む、請求項１～１３のいずれか一項に記載の方法。
  15. 　以下の式Ａ－５：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000021
     で示される化合物を生成する方法であって、以下の式：Ａ－４：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000022
     で示される化合物を、フルオラスアルコール及び水の混合溶媒中で、２，３－ジクロロ－５，６－ジシアノ－ｐ－ベンゾキノン（ＤＤＱ）と反応させて、前記式Ａ－４で示される化合物中の２－ナフチルメチル基を脱離させることにより、前記式Ａ－５で示される化合物を生成することを含む、方法。
  16. 　前記フルオラスアルコールが、ヘキサフルオロ－２－プロパノール（ＨＦＩＰ）、２，２，２－トリフルオロエタノール（ＴＦＥ）、２，２，３，３，４，４，５，５－オクタフルオロ－１－ペンタノール、ノナフルオロ－ｔｅｒｔ－ブチルアルコール及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１５に記載の方法。
  17. 　前記反応が、－３５℃～７０℃で行われる、請求項１５又は１６に記載の方法。
  18. 　前記反応が、－３０℃～－１０℃で行われる、請求項１５又は１６に記載の方法。
  19. 　以下の式Ａ－１１：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000023
     で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）を製造する方法であって、以下の式Ａ－１０：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000024
     で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）を、パーフルオロカルボン酸のアルキルエステルの存在下で、強塩基と反応させる工程を含む、方法。
  20. 　前記パーフルオロカルボン酸のアルキルエステルが、トリフルオロ酢酸メチル、トリフルオロ酢酸エチル、トリフルオロ酢酸プロピル、トリフルオロ酢酸イソプロピル、トリフルオロ酢酸ブチル、ペンタフルオロプロピオン酸メチル、ペンタフルオロプロピオン酸エチル、ペンタフルオロプロピオン酸プロピル、ぺンタフルオロプロピオン酸イソプロピル、ぺンタフルオロプロピオン酸ブチル、ヘプタフルオロ酪酸メチル、ヘプタフルオロ酪酸エチル、ヘプタフルオロ酪酸プロピル、ヘプタフルオロ酪酸イソプロピル、ヘプタフルオロ酪酸ブチル、ノナフルオロ吉草酸メチル、ノナフルオロ吉草酸エチル、ノナフルオロ吉草酸プロピル、ノナフルオロ吉草酸イソプロピル、ノナフルオロ吉草酸ブチル、ウンデカフルオロカプロン酸メチル、ウンデカフルオロカプロン酸エチル、ウンデカフルオロカプロン酸プロピル、ウンデカフルオロカプロン酸イソプロピル、又はウンデカフルオロカプロン酸ブチルである、請求項１９に記載の方法。
  21. 　前記強塩基が、金属アミドのナトリウム塩、リチウム塩、及びカリウム塩；Ｃ１～Ｃ２０アルコキシドのナトリウム塩、リチウム塩、カリウム塩、セシウム塩、及びバリウム塩；水素化ナトリウム、水素化カリウム、水素化リチウム、ブチルリチウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸セシウム、炭酸リチウム、リン酸カリウム、リン酸ナトリウム、リン酸セシウム、リン酸リチウム、ジアザビシクロウンデセン（ＤＢＵ）、ジアザビシクロノネン（ＤＢＮ）、及び１，１，３，３－テトラメチルグアニジン（ＴＭＧ）；並びにこれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項１９又は２０に記載の方法。
  22. 　前記強塩基が、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド、ナトリウムｔｅｒｔ－ブトキシド、リチウムｔｅｒｔ－ブトキシド、又はリチウムヘキサメチルジシラジド（ＬＨＭＤＳ）である、請求項１９又は２０に記載の方法。
  23. 　前記反応が、Ｃ１～Ｃ１０アルコール溶媒単独又はＣ１～Ｃ１０アルコール溶媒とアミド系溶媒、エーテル系溶媒、エステル系溶媒、芳香族系溶媒、ハロゲン系溶媒、炭化水素系溶媒、若しくはニトリル系溶媒との混合溶媒中で行われる、請求項１９～２２のいずれか一項に記載の方法。
  24. 　以下の式Ａ－１７：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000025
     で示される化合物で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｒ５は、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、若しくは２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基であり、かつ、Ｒ６は、水素原子であるか、又はＲ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）を生成する方法であって、以下の式Ａ－１５：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000026
     で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｒ５は、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、若しくは２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基であり、かつ、Ｒ６は、水素原子であるか、又はＲ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）を生成し、次いで、以下の式Ａ－１６：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000027
     で示される化合物とβ－１，４－グリコシド結合させることにより、前記式Ａ－１７で示される化合物を生成する工程を含む、方法。
  25. 　Ｒ５が、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基である、請求項２４に記載の方法。
  26. 　以下の式Ａ－１８：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000028
     で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｍ＋は、ナトリウムイオン、リチウムイオン、カリウムイオン、又はプロトン化されたトリエチルアミンカチオンである）を生成する方法であって、以下の式Ａ－１７：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000029
     で表される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｒ５は、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、若しくは２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基であり、かつ、Ｒ６は、水素原子であるか、又はＲ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）におけるアミノ基の保護基及び水酸基のアシル系保護基を除去することを含む、方法。
  27. 　以下の式Ａ－２２：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000030
     で示されるオリゴ糖（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）。
  28. 　以下の式Ａ’－２２：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000031
     で示されるオリゴ糖。
  29. 　以下の式Ａ－８：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000032
     で示される化合物。
  30. 　以下の式Ａ－１０：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000033
     で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）。
  31. 　以下の式Ａ－１１：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000034
     で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）。
  32. 　以下の式Ａ－１３：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000035
     で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）。
  33. 　以下のＡ－１４：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000036
     で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）。
  34. 　以下の式Ａ－１４－ＦＭＡ：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000037
     で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）。
  35. 　以下の式Ａ－１５：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000038
     で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｒ５は、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、若しくは２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基であり、かつ、Ｒ６は、水素原子であるか、又はＲ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）。
  36. 　以下の式Ａ－１７：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000039
     で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよく、Ｒ５は、アリールオキシカルボニル（ＣＯＯＡｒ）基、アセチル（Ａｃ）基、若しくは２，２，２－トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）基であり、かつ、Ｒ６は、水素原子であるか、又はＲ５及びＲ６は、これらが結合している窒素原子と一緒にフタルイミド基を形成する）。
  37. 　以下の式Ａ－１８－ＦＦ：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000040
     で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）又はその塩。
  38. 　以下の式Ａ－１９－ＦＦ：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000041
     で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）又はその塩。
  39. 　以下の式Ａ－２０－ＦＦ：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000042
     で示される化合物（式中、Ｒ１は、Ｃ１～Ｃ６アルキル基又はフェニル基であり、該フェニル基は、１～３個のＣ１～Ｃ６アルコキシ基で置換されていてもよい）又はその塩。
  40. 　以下の式Ａ’－２０－ＦＦ：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000043
     で表される化合物又はその塩。
  41. 　糖鎖リモデリング抗体又はそのＦｃ領域含有分子の製造方法であって、請求項１～１４のいずれか一項に記載の方法を含む式Ａ－２２で示されるオリゴ糖を得る工程、及び、得られた式Ａ－２２で示されるオリゴ糖と、Ｎ２９７結合糖鎖としてフコースが付加していてもよいコアＧｌｃＮＡｃを有する抗体又はそのＦｃ領域含有分子であるアクセプター分子とを反応させて、前記糖鎖リモデリング抗体又はそのＦｃ領域含有分子を得る工程を含む、方法。
  42. 　更に、アジド基（Ｎ３－）にアルキン構造を有する分子と反応させる工程を含む、請求項４１に記載の製造方法。
  43. 　前記アルキン構造を有する分子が、化学療法剤、分子標的薬、免疫活性化剤、毒素、抗菌剤、抗ウイルス剤、診断用薬剤、タンパク質、ペプチド、アミノ酸、核酸、抗原、ビタミン及びホルモンから選択される、請求項４２に記載の製造方法。
  44. 　請求項４１～４３のいずれか一項に記載の製造方法を含む、抗体薬物コンジュゲートの製造方法。
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