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WO2023062025A1 - Utilisation d'un extrait de partie de plante pour stimuler les défenses de plantes contre les virus, composition et procédés associés - Google Patents

Utilisation d'un extrait de partie de plante pour stimuler les défenses de plantes contre les virus, composition et procédés associés Download PDF

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Publication number
WO2023062025A1
WO2023062025A1 PCT/EP2022/078282 EP2022078282W WO2023062025A1 WO 2023062025 A1 WO2023062025 A1 WO 2023062025A1 EP 2022078282 W EP2022078282 W EP 2022078282W WO 2023062025 A1 WO2023062025 A1 WO 2023062025A1
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WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
plants
virus
extract
viruses
plant
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
PCT/EP2022/078282
Other languages
English (en)
Inventor
Christelle MARTINEZ-BARBREAU
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Elicir
Original Assignee
Elicir
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from FR2110751A external-priority patent/FR3127863A1/fr
Application filed by Elicir filed Critical Elicir
Priority to MX2024004381A priority Critical patent/MX2024004381A/es
Priority to AU2022362673A priority patent/AU2022362673A1/en
Priority to EP22808971.0A priority patent/EP4387456A1/fr
Priority to CA3234149A priority patent/CA3234149A1/fr
Publication of WO2023062025A1 publication Critical patent/WO2023062025A1/fr
Priority to US18/632,495 priority patent/US20240389603A1/en
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Ceased legal-status Critical Current

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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N65/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing material from algae, lichens, bryophyta, multi-cellular fungi or plants, or extracts thereof
    • A01N65/08—Magnoliopsida [dicotyledons]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N43/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds
    • A01N43/72—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with nitrogen atoms and oxygen or sulfur atoms as ring hetero atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N47/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom not being member of a ring and having no bond to a carbon or hydrogen atom, e.g. derivatives of carbonic acid
    • A01N47/40—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom not being member of a ring and having no bond to a carbon or hydrogen atom, e.g. derivatives of carbonic acid the carbon atom having a double or triple bond to nitrogen, e.g. cyanates, cyanamides
    • A01N47/46—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom not being member of a ring and having no bond to a carbon or hydrogen atom, e.g. derivatives of carbonic acid the carbon atom having a double or triple bond to nitrogen, e.g. cyanates, cyanamides containing —N=C=S groups
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01P—BIOCIDAL, PEST REPELLANT, PEST ATTRACTANT OR PLANT GROWTH REGULATORY ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR PREPARATIONS
    • A01P21/00—Plant growth regulators

Definitions

  • the present invention relates to a use of an extract of particular plants to stimulate the defenses of plants or trees against viruses, and to a composition and associated methods.
  • the present invention thus aims to reduce the effects of a virus attack.
  • plants there are pre-existing defensive means before attack by a potential pathogen or pest.
  • plants have morphological barriers.
  • it can be thick cuticles covered with hydrophobic substances (wax, cutin, suberin, etc.) preventing pathogens from entering or developing.
  • hydrophobic substances wax, cutin, suberin, etc.
  • We can observe the presence of thorns on the surfaces of the leaves and stems having a repellent power against animals (in particular herbivorous mammals), or the closure of the stomata in the leaves and the lenticels of the stems to prevent the penetration of fungal spores, bacteria, etc.
  • Plants also produce biologically active secondary metabolites and inert precursors to protect against pests. These "secondary metabolites" are not necessary for essential biological activity, such as growth and reproduction, but help the plant to adapt to its environment, which transform into active molecules during attack by a pest, an agent pathogen or after injury.
  • the plant In response to attack by a pathogen, the plant also deploys induced metabolic changes in the plant which very often cause either late and discreet defense or active and rapidly induced resistance.
  • Late defense is often linked to receptors present in the plant membrane or cell, capable of recognizing molecular signals associated with microbes or pathogens.
  • fragments of cell walls, chitin or peptide motifs from the flagellum of bacteria (exogenous elicitor), proteins (endogenous elicitor) are among the motifs, which, once perceived by the plant, can initiate a basic immune response.
  • PAMP-Triggered Immunity or “PTI”) in order to limit the invasion and delay the advance of the pathogen.
  • R genes have been isolated from various plant species (e.g. tomato, flax, rice, tobacco, Arabidospsis, sugar beet). Despite the significant diversity of the parasites to which they confer resistance (fungi, bacteria, viruses or even nematodes), their comparison reveals a strong homology of sequences as well as the conservation of structural motifs:
  • LRR domains correspond to the repetition of a motif of variable size comprising leucines. They would be involved in the mechanisms of protein-protein and protein-polysaccharide interactions
  • NBS Nucleotide Binding Site
  • NB domain associated with the LRR domain (NBS-LRR)
  • This domain composed in particular of various conserved kinase-type motifs, corresponds to a site for binding and hydrolysis of the nucleotide triphosphates ATP and GTP. It presents analogies with animal proteins potentially involved in the phenomena of apoptotic cell death, in particular APAF-1 identified in humans and CED-4 identified in Caenorhabditis elegans. All of these areas are grouped under the terminology NB-ARC (Van der Biezen and Jones, 1998).
  • TIR Toll Interleukin Receptor
  • CC Choll Interleukin Receptor
  • LZ Leucine-Zipper
  • Serine/Threonine kinase domain is present alone (for example product of the Pto gene) or, associated with an LRR domain (for example, product of the Xa21 gene). It would be involved in phosphorylation reactions during signaling cascades.
  • G proteins G proteins, ion fluxes, in particular of Ca2 + , H + , K + and Cl', activated forms of oxygen (or ROS for "Reactive Oxygen Species") and a whole cascade of phosphorylation/dephosphorylation of proteins such as MAPKs ("Mitogen-ActivatedProtein-Kinase").
  • this signal surge results phenotypically in the rapid death of cells infected by the pathogenic agent and the formation of localized necrotic lesions around the site of parasite penetration.
  • This genetically determined reaction is called a hypersensitivity reaction (or “HR”) or apoptosis (programmed cell death).
  • the defense responses are intense and particularly localized at the level of the ring of cells surrounding the HR zone. These responses include the synthesis of a broad spectrum of anti-microbial compounds such as "PR" proteins (Pathogenesis Related Protein), certain secondary metabolites with antibiotic properties, for example phytoalexins, as well as the accumulation of molecules involved in signaling pathways, including ROS and various hormones including salicylic acid.
  • PR Local Growth Factor
  • SAR Strethelial growth factor
  • SAR keeps the plant in a dormant state that enables it to resist not only the original aggressor, but also a wide range of other pests that may intervene later.
  • a phytovirus, or plant virus is a virus attacking plant organisms. These viruses have the particularity of penetrating the plant cell of their host in order to divert the mechanisms of the cell to their advantage and allow them to reproduce.
  • viruses infecting plants those whose genome consists of one or more single-stranded RNA molecules of messenger ("positive") polarity are the most important both in number (85 to 90% of known viruses) than by their economic impact. Although showing various morphologies, these viruses possess a very simple structure, the non-enveloped particles being made up of a single or a few (2 or 3) types of capsid protein (CP) subunits.
  • CP capsid protein
  • RNA viruses For example, plants use RNA interference, or RNAi, to defend themselves against many viruses.
  • RNA viruses pass through a double-stranded RNA (dsRNA) stage which is recognized by the plant as a warning signal and allows the initiation of its defense system which can lead to the elimination of the virus.
  • dsRNA double-stranded RNA
  • an effective antiviral RNAi response relies primarily on the activity of the DICER-LIKE4 ("DCL4") protein to produce the bulk of antiviral "interfering" RNAs from dsRNA ( siRNA).
  • DCL4 DICER-LIKE4
  • siRNA dsRNA
  • AGONAUTE protein ARGONAUTE protein
  • viral populations have a very high evolutionary potential. This rapid evolution leads to the appearance of viral variants capable of circumventing and adapting very quickly to the genetic resistance of plants.
  • Viruses can only survive in a living plant. They are destroyed as soon as the plant dies. They also require external agents to spread from one plant to another.
  • the present invention aims to remedy all or part of these drawbacks.
  • the present invention relates to an elicitor composition according to claim 1.
  • the action of this composition bypasses viral resistance. Bypassing a resistance results temporally in the emergence and spread of a virulent variant at the level of the cell, then of the plant, and finally at the level of the entire plot.
  • the virulence of a pathogen refers to the qualitative component of pathogenicity, i.e. the ability or not to infect a genotype carrying a given resistance. Evolutionary forces will be strongly involved in the appearance of virulent variants, which do not naturally preexist in an agroecosystem.
  • the genetic variations will therefore be linked to the variations/mutations of the AVR genes:
  • the first stage corresponds to the appearance at the cellular level of a virulent variant capable of infecting a plant possessing a resistance gene in the case of an interaction of type gene for gene. This means that it accumulates the necessary mutations in its avirulence factor to become virulent.
  • composition which is the subject of the invention, preferably in its form extracted from a rocket plant, and particularly from Eruca Sativa and from Diplotaxis tenuifolia, acts very early after its spraying, demonstrating that this composition mimics the relationship gene for gene. For example, thirty minutes after being sprayed, the preferential composition triggers a series of metabolic events which show that the defense mechanisms triggered resemble those described in a gene for gene relationship:
  • ROS reactive oxygen species
  • composition object of the invention is therefore capable of acting independently of the structure of the products of Resistance and Avirulence genes, making it possible to overcome any mutation of the virus.
  • composition which is the subject of the invention acts effectively against viruses , by acting in very early times by simulating a gene for gene interaction, which allows the plant to overcome all the weaknesses of a plant vis-à-vis a virus (too rapid appearance of variants, replication of the viruses, etc).
  • compositions that is the subject of the invention has the capacity to trigger all the defense mechanisms appearing “after” a “gene for gene” recognition phenomenon, both for viruses and for other pathogens, in particular bacteria and fungi.
  • the effectiveness of the present invention reduces the effects of viruses on plants, plants, or trees, so as to allow the plant, in particular a tree, to continue to grow correctly despite this attack, by overcoming the consequences of this attack, it that is, allowing the plant or tree to grow despite the virus, reducing or eliminating the impact of the virus.
  • the plant extract can also, in certain uses, allow the plant to eradicate certain viruses. This use can be curative or preventive.
  • the reduction of the effects of the viruses on the plants or trees attacked by these viruses comprises, in certain cases, the total or partial reduction of the symptoms.
  • plants and trees have, when their defense system is functional (in particular thanks to the stimulation obtained by the implementation of the invention), the capacity to defeat a virus.
  • the use of the composition that is the subject of the present invention aims to stimulate what plants already know how to do, but which they do not do in cases of “sensitivity”, because they do not recognize their aggressor. The decline of the pathology thus appears in certain examples of the description.
  • the extract is obtained from at least one of the following plants: Arugula, including Eruca sativa, Diplotaxis, Erucastrum and Bunias, Cakile, broccoli, plants of the Allium genera (garlic, onion, shallot , leeks and chives), common cabbage, cauliflower, Brussels sprouts, kale, mustard, wasabi, watercress, horseradish, white cabbage, field cabbage (Brassica rapa), including bok choy cabbage, Chinese cabbage and turnip, kohlrabi, collard greens, red cabbage, Chinese broccoli, broccoli rave, rapeseed, radish, Siberian wallflower, wallflower, Indian watercress, garlic grass, pilu tree, papaya tree, including its fruit.
  • Arugula including Eruca sativa, Diplotaxis, Erucastrum and Bunias, Cakile, broccoli, plants of the Allium genera (garlic, onion, shallot , leeks and chives), common cabbage, cauliflower, Brussels sprouts,
  • An eliciting composition which is the subject of the invention may comprise a total raw extract obtained by grinding and extracting the plant, in a fraction enriched in active compound(s) of such a total extract, or in one or more compounds ( s) active(s) in mixture.
  • Such a composition advantageously makes it possible, in an effective amount in a composition, to combat the symptoms of the attack of a plant or of a tree mentioned above by a virus mentioned above.
  • the extract is obtained from at least one of the following plants: Arugula, including Eruca sativa, Diplotaxis, Erucastrum and Bunias, Cakile, broccoli, common cabbage, cauliflower, Brussels sprouts , kale, mustard, watercress, white cabbage, field cabbage (Brassica rapa), including bok choy, Chinese cabbage and turnip, kohlrabi, collard greens, red cabbage, Chinese broccoli, broccoli rabe, radish , and Siberian wallflower.
  • Arugula including Eruca sativa, Diplotaxis, Erucastrum and Bunias, Cakile, broccoli, common cabbage, cauliflower, Brussels sprouts , kale, mustard, watercress, white cabbage, field cabbage (Brassica rapa), including bok choy, Chinese cabbage and turnip, kohlrabi, collard greens, red cabbage, Chinese broccoli, broccoli rabe, radish , and Siberian wallflower.
  • the extract is obtained from at least one of the following plants:
  • the extract is obtained from at least one of the plants of the species Brassica oleracea.
  • the extract is obtained from at least one plant not containing Methyl-isothiocyanate and/or Propenyl isothiocyanate.
  • the extract is obtained from at least one plant containing at least one butyl-isothiocyanate.
  • the inventor found that these isothiocyanates have favorable effects on plant growth while reducing the effects of viruses.
  • the extract is obtained from at least one plant containing 1,3-thiazepane-2-thione.
  • This compound which, due to its structure, is not an isothiocyanate has favorable effects on plant growth while reducing the effects of viruses.
  • extracts have at least one active substance which reduces the effects of viruses, the presence of their vector of diffusion and/or their colonization by insects.
  • the extract of at least one plant part is an extract obtained from a ground material of said plants, and: - said extract of at least one plant part comprises at least leaves of said plants, preferably essentially leaves and flowers, and
  • the method for obtaining said liquid extract comprises the following steps: a) a step of grinding said plants; b) filtration of the ground material obtained; and c) recovering the liquid extract obtained after filtration.
  • the term “essentially comprises” is intended here to denote by comprising at least 75%, preferably at least 95%, of leaves and flowers of said plants by weight, for example dry, relative to the total weight of the plant, before mixing with the solvent aqueous.
  • the extract is obtained by a method comprising, in addition, a step of nebulizing the liquid extract and passing the nebulized liquid extract through a stream of hot air.
  • the present invention relates to a process for reducing the effects of viruses on plants, including trees, comprising a step of applying the eliciting composition which is the subject of the invention.
  • the method is applied to reducing the effects of an attack by one of the following viruses:
  • BBTV Banana Bunchy Top Virus
  • JNO or BYDV Barley yellow dwarf virus
  • SCMV Sugarcane mosaic virus
  • MNN Maize lethal necrosis disease viruses
  • TSWV Tomato spotted wilt virus
  • Tomato mosaic virus Tomato mosaic virus, ToMV
  • the method is applied to reducing the effects of an attack of at least one of the beet yellows viruses.
  • the method is applied to reducing the effects of attack by at least one of the cucumber mosaic viruses.
  • the application of the eliciting composition is a foliar application to the plants.
  • the invention relates to a use of the eliciting composition which is the subject of the invention to reduce, on plants, including trees, the effects of an attack by one of the viruses listed above.
  • the application to the plant or tree is by foliar spraying, ground irrigation, drip, use in hydroponics, seed treatment and/or seed coating.
  • the application to the plant or the tree is done with a dilution in water of the composition between 2 g/L and 2000 g/L expressed in grams of plants on which the extraction per liter of product applied.
  • the application to the plant or the tree is done with a dilution in water of the composition between 5 g/L and 200 g/L expressed in grams of plants on which the extraction per liter of product applied.
  • said extract of at least one part of plants is a liquid extract of said plants.
  • application to the plant or tree is by foliar spray, soil drench, soil irrigation, drip, hydroponic cultivation, seed treatment and/or seed coating.
  • At least one active principle is obtained from leaves of said plants.
  • At least one active principle is obtained from flowers of said plants.
  • At least one active principle is obtained by grinding at least a part of said plants.
  • At least one active principle is obtained by aqueous extraction.
  • At least one active principle is obtained, by oil extraction, by solvent extraction, or by extraction of cakes or pastes.
  • the composition is formulated as a powder, soluble powder, wettable powder, granules, dispersible granules, or wettable or slow-release granules, to be diluted in water at the time of use.
  • the composition is formulated as a liquid, liquid soluble concentrate, emulsifiable concentrate, suspension concentrate, or ready to use.
  • the present invention relates to a process for the production of a composition which is the subject of the invention, which comprises a step of grinding at least a part of said plants, to provide a ground material, and a filtering step to extracting solid parts from said ground material and obtaining a liquid.
  • the present invention relates to a method for the physical simulation of gene for gene interaction, a composition capable of being extracted by aqueous extraction from a plant given in the claimed lists, in particular from an arugula plant, and particularly of the Eruca Sativa or Diplotaxis type or of plants genetically modified to produce this composition.
  • the process and the composition that is the subject of the invention perform an action on the plant within hours, or even in less than one hour, after the gene-for-gene interaction with the virus or its variant, thus avoiding the problem of mutations , and providing a response immediately strengthening the resistance of treated plants against viruses, bacteria, fungi and other pathogens.
  • composition which is the subject of the invention acts effectively against viruses, by acting in very early times by simulating a gene for gene interaction, which allows the plant to overcome all the weaknesses of a plant vis-à-vis a virus (too rapid appearance of variants, replication of the virus, etc.) and, more generally, of a pathogen.
  • FIG. 1 represents, in the form of a flowchart, steps of an embodiment of a process for producing and using a ground material, which is a preferred example of production of the composition which is the subject of the invention
  • Figure 2 represents dates of evaluations of beet treatments
  • Figure 3 represents numbers of Myzus persicae insects
  • Figure 4 shows incidences of the pest Myzus persicae
  • Figure 5 represents numbers of Aphis fabae insects
  • Figure 6 represents incidences of the pest Aphis fabae
  • Figure 7 shows assessments of areas infected with jaundice
  • Figure 8 shows a photograph of the untreated modality (control).
  • Figure 9 represents a photograph of the modality treated with the product PP1,
  • Figure 10 represents a photograph of the modality treated with the product PP1.
  • FIG. 11 represents a descriptive table of the processing methods of the first demonstration.
  • the eliciting composition stimulating the defenses of plants or trees reducing the effects of an attack of a virus comprises an extract of at least a part of at least one of the following plants: Rockets, including genera Eruca sativa, Diplotaxis, Erucastrum and Bunias, Cakile, plants of the genera Allium, mustard (Sinapis alba, Brassica nigra, Sinapis arvensis, Brassica juncea), wasabi (Eutrema japonicum), horseradish (Armoracia rusticana), watercress (Nasturtium officinale), plants of Brassica species rapa, Brassica ruvo, Brassica napus, Raphanus sativus, Barbarea verna, Erysimum allionii, Erysimum cheiri, Tropaeolum majus L, Alliaria petiolata, Salvadora persica, Carica papaya and Brassica oleracea.
  • Rockets including genera Eruca
  • viruses on which the eliciting composition which is the subject of the invention have been successfully tested are described below:
  • Beets are the first reservoir of jaundice viruses. It is therefore important to remove all crop residues (digging lines, trailing beets) because leaf regrowth can become sources of infection. It is also important to manage weeds well, in the plots and at the edges of the fields, because a certain number of species are hosts to vector aphids and sometimes also to jaundice viruses.
  • imidacloprid will no longer be approved from 31/7/2022, but some countries have kept it or granted exemptions, when ANSES in France withdrew all marketing authorizations for agricultural purposes.
  • Two other NNIs were withdrawn at the end of 2019 (thiamethoxam, clothianidin). Only thiamethoxam and imidacloprid were used in our territory as a coating for beet seeds.
  • the fully biosourced elicitor composition that is the subject of the invention is capable of significantly reducing, or even eliminating, the effects caused by serious plant viral diseases and up to then incurable. Toxicity testing of this composition has shown that it is non-toxic. A trial has been set up with the company Ephydia (registered trademark, BPE approved company for good environmental practices) against the beet yellows virus, the results of which are presented below.
  • Ephydia registered trademark, BPE approved company for good environmental practices
  • Beta vulgaris is a species of plants in the family of
  • Amaranthaceae It is cultivated around the world for sugar production, and in an ancillary way to make ethanol or baker's yeast from molasses made from white sugar manufacturing residues.
  • Planting rate 100,000 plants / ha
  • Planting method seedlings
  • Active substance Flonicamid 500 g/kg Function: Insecticide
  • Pre-harvest time 60 days
  • Myzus persicae green peach aphid
  • Aphis fabae black bean aphid
  • each set of four vertical bars represents, from left to right, the untreated control, the treatment with the composition that is the subject of the invention, the combination of this composition and the Teppeki and the Teppeki alone.
  • Figure 3 Number of Myzus persicae insects.
  • Figure 4 Incidence of the pest - Myzus persicae.
  • the green peach aphid, Myzus persicae is the main vector of beet yellows. It has very good capacities for transmitting moderate jaundice viruses (BChV and BMYV) as well as severe jaundice (BYV).
  • BChV and BMYV moderate jaundice viruses
  • BYV severe jaundice
  • results illustrated in FIG. 3 show that the PP1 treatment makes it possible to statistically reduce the number of aphids vectors of jaundice (except for the notation 31 DA-A, associated letter “a”) in comparison with the untreated modality. All treated modalities are statistically identical up to 14 DA-A and 41 DA-A notation (associated letters "b") and different from 21 DA-A to 35 DA-A of the modality treated with Teppeki in large overdose .
  • results illustrated in FIG. 4 show that the PP1 treatment allows a reduction in the incidence compared to the control except for the notations 10 DA-A, 21 DA-A and 31 DA-A.
  • results show that PP1 has an effect on the presence of the beet yellows vector - Myzus persicae. Aphid presence values are directly correlated with the appearance of jaundice symptoms. Therefore, the results obtained show that PP1 allows the reduction of symptoms.
  • the black bean aphid, Aphis fabae, is a secondary vector of BYV (severe jaundice), but does not transmit BChV or BMYV (moderate jaundice virus). Jaundice is never transmitted to the offspring of infected aphids.
  • Figure 7 represents an evaluation of the area infected by jaundice according to the treatments.
  • the risk period begins as soon as the first aphids appear in the plots at the earliest at the end of April at the beginning of May, i.e. from the two-leaf stage until the ground cover at the end of June.
  • the latency period is generally two to four weeks but would be shorter for severe jaundice (one to two weeks) than for moderate jaundice (four to six weeks).
  • PP1 could prove to be much more effective than the Teppeki reference product under normal application conditions. PP1 thus makes it possible to reduce the presence of vector aphids but also to limit the appearance of symptoms.
  • Figure 8 Photograph of the untreated modality - plot 401
  • Figure 9 Photograph of the modality treated with the product PP1 - plot 101
  • Figure 10 Photograph of the modality treated with the product PP1 - plot 403 Conclusions of the first demonstration.
  • PP1 would prove to be a solution to the problem of jaundice and a replacement solution for neonicotinoids.
  • the PP1 product is able to significantly reduce the incidence of beet yellows virus.
  • This test is carried out in an area known for its contamination by the cucumber mosaic virus.
  • a trial is carried out to evaluate the effectiveness of PP1 against cucumber mosaic.
  • Treatments six treatments were carried out at a rate of 14 days.
  • Chlorotic spots (more or less marked mosaic) appear on the young leaves; these can warp, wrinkle, or even dry out in severe cases. In the plots, circular disease foci are observed, which gradually spread. An early attack causes complete dieback of young plants. Affected plants have reduced growth and an altered habit.
  • a plant infected with this virus remains a carrier of the virus until it dies.
  • the incidence represents the percentage of contaminated leaves or fruits.
  • the severity represents the percentage of surface covered by the symptoms of the disease.
  • Severity and incidence were measured on 20 randomly sampled leaves for each modality.
  • Severity and incidence were measured on 20 randomly sampled leaves for each modality.
  • the eliciting composition which is the subject of the invention significantly reduces both the incidence and the severity of the effects of the viruses and significantly increases the quantity of beets harvested.
  • An extract of broccoli leaves is produced according to the protocol illustrated in FIG. 1, in liquid form, without concentration. This test is carried out in an area known for its contamination by the cucumber mosaic virus (presence of the vector). No biocontrol solution is known to date to eradicate the disease. In this context, a trial is carried out to evaluate the efficacy of PP2 against the cucumber mosaic virus (CMV).
  • Chlorotic (mosaic) spots appear on young leaves, which may become distorted, puckered, or even dry out in severe cases.
  • An early attack causes complete dieback of young plants.
  • Affected plants have reduced growth and an altered habit.
  • a plant infected with this virus remains a carrier of the virus until it dies.
  • Treatments six treatments were carried out at a rate of 14 days.
  • Severity and incidence were measured on 20 randomly sampled leaves for each modality.
  • Severity and incidence were measured on 20 randomly sampled leaves for each modality.
  • the severity and incidence were measured on 20 fruits sampled at random, for each modality. Analyzes were performed according to Newman and Keuls. The different letters express significantly different results at the 5% level. The results show the efficacy of PP2 against cucumber mosaic virus. Indeed, the notations on leaves and on fruits show that the treated plants have significantly fewer symptoms than the control plants.
  • This test is carried out in an area known for its contamination by the cucumber mosaic virus (presence of the vector).
  • Cucumber variety TYRIA, organic plants, not tolerant to mosaic virus.
  • Treatments six treatments were carried out at a rate of 14 days.
  • Severity and incidence were measured on 20 randomly sampled leaves for each modality.
  • Severity and incidence were measured on 20 randomly sampled leaves for each modality.
  • Table 11 Incidence and severity on cucumbers (Fruits) - July 20, 2020 The severity and incidence were measured on 20 fruits sampled at random, for each modality.
  • Arugula extract (“PP1”) on the tomato spotted wilt virus (“Tomato spotted wilt virus”, TSWV).
  • Tomato spotted wilt virus (TSWV) is widely distributed throughout the world in temperate and subtropical zones where it has been on the rise since the early 1980s. Emerging in France since 1987, it has a wide range of potential hosts. It is transmitted by at least nine species of thrips.
  • Tomato spotted wilt virus can take on various appearances on tomato foliage, such as leaf deformities with apical curvature of the apex, vegetation blockage, more or less contrasting mosaic, chlorotic spots and lesions becoming necrotic, more or less marked chlorosis and bronze coloration of the leaf blade or veins, accompanied by rings, small dark lesions becoming necrotic also visible on petioles and stem , anthocyaninization of the lamina.
  • Fruits are also affected. They can be "tanned” and present large arabesques and more or less concentric chlorotic rings. Dry necrotic alterations, cracks are sometimes visible. Early contamination leads to a reduction in the number and size of fruits; if they are late, the fruits grow normally but are badly colored and more or less deformed.
  • a test is carried out to evaluate the effectiveness of the eliciting composition which is the subject of the invention against the tomato TSWV virus.
  • the extracts of rocket leaves are obtained according to the protocol illustrated in FIG. 1 in their non-concentrated liquid form (extracts called “PP1”).
  • the experiment takes place in a 250m 2 rigid greenhouse equipped with openings and side vents.
  • Severity and incidence were measured on 20 randomly sampled leaves for each modality.
  • the severity and incidence were measured on 20 fruits sampled at random, for each modality.
  • Severity and incidence were measured on 20 randomly sampled leaves for each modality.
  • the severity and incidence were measured on 20 fruits sampled at random, for each modality.
  • Severity and incidence were measured on 20 randomly sampled leaves for each modality.
  • the severity and incidence were measured on 20 fruits sampled at random, for each modality.
  • Tomato mosaic virus (ToMV) is present on all continents. It is frequently found on tomato and pepper. It is serious both in open field cultivation and under cover. While its incidence has decreased significantly with the spread of resistant tomato varieties, the recent marketing of new susceptible varieties has shown how much ToMV is always ready to attack susceptible plant material.
  • the symptoms caused by the presence of this virus are very varied and are quite comparable. A slowdown in plant growth can be observed, as well as coloring anomalies that can appear on the leaflets and leaves. Other symptoms can also be expressed on the leaves, such as thinning of the veins, mottling, a mosaic of green or yellow patches with the leaf blade wrinkling and contracting.
  • the extracts of rocket leaves are obtained according to the protocol illustrated in FIG. 1 in their non-concentrated liquid form (extracts called “PP1” below).
  • the experiment takes place in a greenhouse, above-ground cultivation.
  • Analysis method Analysis of variance with a risk threshold of 5%. Ratings with the same letters are not significantly different.
  • Severity and incidence were measured on 20 randomly sampled leaves for each modality.
  • the severity and incidence were measured on 20 fruits sampled at random, for each modality.
  • Severity and incidence were measured on 20 randomly sampled leaves for each modality.
  • the severity and incidence were measured on 20 fruits sampled at random, for each modality.
  • ZYMV Zika virus
  • ZYMV is a non-persistent potyvirus transmitted by aphids. It is one of the best examples of viruses emerging in plants. Isolated for the first time in Italy and then in France in the 1970s, it spread throughout the world in a few years, sometimes causing epidemics of exceptional gravity. This recent and rapid dissemination in various types of cultivation (intensive, extensive, under shelter, open field) and very varied ecosystems (temperate, tropical, Sahelian, island) is attested by the fact that ZYMV causes very strong symptoms. ZYMV is now reported on cucurbits in virtually all of their production areas worldwide. However, its frequency can vary greatly depending on the region. Regularly encountered in tropical or subtropical regions, its epidemics are more irregular in temperate countries such as France.
  • ZYMV Zika virus
  • the experiment takes place in open fields.
  • Treatments Foliar spray - Six applications of PP1, at a rate of 14 days. Analysis method: Analysis of variance with a risk threshold of 5%. Ratings with the same letters are not significantly different.
  • Severity and incidence were measured on 20 randomly sampled leaves for each modality.
  • the severity and incidence were measured on 20 fruits sampled at random, for each modality.
  • Rose mosaic is a viral disease that affects roses (Rosa sp.). It is caused by several viruses of the llarvirus and Nepovirus genera which occur separately or more often in combination, which has led some authors to speak of the “rose mosaic viral complex”. In some cultivars, these viruses can cause flower variegation. Other infected cultivars may remain symptomless.
  • the disease is not lethal to roses, but infection has the effect of reducing plant vigor and weakening them, making them more vulnerable to transplant stress or winter injury.
  • This disease causes various symptoms on the leaves: ringspots, chlorotic lines, watermarks, mottling of the leaves, as well as yellow mosaic patterns.
  • Clues of the disease are: bright yellow zigzag patterns on the leaves, arranged symmetrically to the midrib; yellow to cream stains may be diffuse and marbling; localized browning may be reminiscent of leaf desiccation.
  • the radish extracts are obtained according to the protocol illustrated in FIG. 1 in their non-concentrated liquid form (extracts called “PP4” below).
  • the experiment takes place in a heated greenhouse.
  • Analysis method Analysis of variance with a risk threshold of 5%. Ratings with the same letters are not significantly different.
  • Severity and incidence were measured on 20 randomly sampled leaves for each modality.
  • CEI composition that is the subject of the present invention
  • the composition is extracted from leaves, stems, flowers, seeds and/or roots , according to a mode preferential extraction, with or without added water, according to the method described with reference to Figure 1.
  • the composition is preferably diluted in the spray tanks (tanks) to be sprayed at the foliar level (or other application methods described in the description of the uses)
  • the CEI composition obtained under these extraction conditions, has no direct antimicrobial activity.
  • the leaves, stems, seeds, roots and/or flowers are subject to an extraction of compounds, by a known technique, for example by pressing, by ultrasound, and/or by the use of solvents, in particular oily or aqueous.
  • plant parts are ground up and heavily diluted in water.
  • plant parts are ground without adding water.
  • the filtered ground material is then formulated in the form of a powder, by nebulization in an ascending stream of hot dry air, preferably at a temperature below 60°C.
  • the extract in liquid form is sterilized by passage at high temperature for a very short time, according to known techniques.
  • the eliciting composition that is the subject of the invention is in particular used, by application, to stimulate the defenses of plants or trees and reduce the effects of viruses, in particular the beet yellows virus and the cucumber mosaic virus.
  • CEI acts by stimulating the defenses of the plants, and by allowing the treated plants to defend themselves against these viruses.
  • CEI can be defined as an elicitor, given that the molecules possessing the property of inducing within the plant a cascade of defense reactions against pathogenic agents are called elicitors.
  • the demonstration of the eliciting activity of defense mechanisms is also demonstrated at several levels:
  • CEI has the particularity of stimulating the defenses of plants, and allowing them to react effectively, even in the case of invasive viruses, which are difficult to fight.
  • the method for manufacturing and using the composition that is the subject of the present invention comprises a step 105 of extracting an extract from said plants.
  • the extract is obtained from at least one plant not containing Methyl-isothiocyanate and/or Propenyl isothiocyanate.
  • the extract is obtained from at least one plant containing at least one butyl-isothiocyanate.
  • the inventor has observed that these isothiocyanates have favorable effects on plant growth while reducing the effects of viruses.
  • the extract is obtained from at least one plant containing 1,3-thiazepane-2-thione. The inventor has observed that this compound which, due to its structure, is not an isothiocyanate has favorable effects on the growth of the plant while reducing the effects of viruses.
  • this extraction is performed according to the following procedure:
  • the leaves, roots, stems, seeds and/or flowers of said plants are finely ground with running water, for fifteen minutes, in a suitable mixer device, in order to obtain a homogeneous ground material;
  • the ground material is filtered to separate the debris from the organs used and to obtain a green liquid without residue (the filtrate), which is the basis of the composition that is the subject of the invention or constitutes it.
  • At least one of the active principles of the ground material is obtained by oil extraction.
  • at least one of the active principles of the ground material is obtained by solvent extraction by mechanical extraction or by microwaves, or by extraction of cakes or pastes.
  • at least one of the active principles is obtained by mechanical extraction or microwave extraction.
  • the extraction step 105 includes a step of compressing the leaves, roots, stems, seeds or flowers of said plants and collecting the extracted liquid, by simple gravity or by centrifugation.
  • a simple centrifugation is implemented during the extraction step 105, to extract the liquid from the parts of said plants used.
  • the inventor has discovered that the use of this composition has a significant effect on the trees and plants mentioned above infected by the viruses mentioned above.
  • the inventor has also discovered that the eliciting composition that is the subject of the invention has biostimulating effects on the growth of the treated plants without constituting, at the doses used, a fertilizer or nourishing the treated plants.
  • the liquid composition obtained at the end of step 105 can be formulated to make it easier to use.
  • it can be used in the form of powder, soluble powder, wettable powder, granules, dispersible granules, or wettable or slow-release granules, to be diluted in water at the time of use, liquid, liquid soluble concentrate, emulsifiable concentrate, suspension concentrate, or ready to use, depending on the formulation chosen and the intended use or infused on a substrate dispersed in the soil of the culture.
  • the formulations are made from the product of the extraction step 105 according to techniques known to those skilled in the art.
  • Active moieties can potentially be purified, by any means, to facilitate formulation. Different extraction steps can be added to improve its quality.
  • the composition that is the subject of the invention can be diluted in water, depending on the dose required, at the time of its use.
  • volatile extracts are removed from the extract obtained. For example, this extract is transformed into a powder, for example by nebulization and passage of the nebulized extract in a flow of hot air, preferably ascending.
  • the biostimulant is applied in any form whatsoever (liquid formulation, powder, soluble powder, granules, dispersible granules, slow-dispersing granules, and all formulations) according to the uses and the formulation envisaged.
  • the use of the biostimulant object of the invention is preferably carried out by foliar application or foliar spraying.
  • Other modes of use of the biostimulant that is the subject of the invention are soil watering, soil irrigation, drip, hydroponic crops, or else in seed treatment and/or seed coating.
  • the leaves and flowers of said plants represent at least 75%, preferably at least 95%, of the parts of said plants on which the extraction is carried out, percentage by dry weight, relative to the total weight of these plants.
  • composition that is the subject of the invention can be used for a single application or at a rate of between one day and one hundred and twenty days, or continuously, or according to the key stages of plant development, or in accordance with good agricultural and the scheduled treatment schedule for each plant species.
  • the composition of the present invention can be mixed with other products (phytosanitary products, crop supports and fertilizing materials, fertilizers, fertilizers, biocides, or any other product intended for agriculture).
  • Application doses and application rates are adapted to plant uses and models.
  • the application doses are included, for example, between 0.001 g/L and 2000 g/L of extracted plants, preferably between 2 g/L and 2000 g/L of extracted plants and, more preferably, between 5 g/ L and 200 g/L of plants extracted, expressed in grams of plants on which the extraction was carried out per liter of product applied.
  • the doses per liter or per hectare can be adapted to the types of plants infected, the level of infection and the level of symptoms caused by the virus.
  • the doses and the rates of treatment with the composition that is the subject of the invention will also be adapted to the strategy of preventive or curative action against these viruses.
  • the plants from which the extracts used in the present invention are taken they are preferably freshly picked.
  • the plants or the parts of interest are suitably dried, in a manner known to those skilled in the art.
  • the crushing can be carried out with two crushers which are used with different blade speeds.
  • the first ground product obtained in 10 min of grinding is then poured into the second grinder having a faster blade speed.
  • the ground material is homogeneous, with no visible residue of parts of leaves, stems or flowers.
  • the amount of water added during the grinding is between 0 and 200 mL of water, preferably between 20 and 150 mL of water, and, even more preferably, between 50 and 120 mL of water, at room temperature per 100 g of leaves, stem, root, flower or seed.
  • the inventor has observed that the filtrate obtained can be kept for at least six days in a container at room temperature, without losing its activity in stimulating the defenses of plants and trees.
  • the extract of at least part of said plants can thus be a liquid extract obtained from a ground material of said plants, and:
  • said extract of at least one plant part comprises at least leaves of said plants, preferably essentially leaves, and
  • the method for obtaining said liquid extract comprises the following steps: a) a step of grinding said plants in an aqueous medium; b) filtration of the ground material obtained; and c) recovering the liquid extract obtained after filtration.
  • a drying temperature is used, and, in embodiments, coatings of the particles with other natural molecules (preferably very hydrophilic ) which allow a very good dissolution in water.
  • the formulations are conventional formulations in agriculture, in particular for phytosanitary products, intended to be transported and stored in the form of powder, etc... and to be, just before application, diluted in water.
  • the present invention relates to the use of an eliciting composition comprising a plant extract obtained as described above to stimulate the defenses of plants or trees and reduce the effects of viruses on these plants.
  • the eliciting composition that is the subject of the invention also comprises at least one of the following substances, obtained by synthesis or by extraction from plants, in particular the plants mentioned above:

Landscapes

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Abstract

La composition élicitrice stimulant des défenses des plantes ou arbres réduisant les effets d'une attaque d'un virus comporte un extrait d'au moins une partie d'au moins une des plantes suivantes : Roquettes, y compris des genres Eruca saliva, Diplotaxis, Erucastrum et Bunias, Cakile, plantes des genres Allium, moutarde (Sinapis alba, Brassica nigra, Sinapis arvensis, Brassica juncea), wasabi (Eutrema japonicum), raifort (Armoracia rusticana), cresson de fontaine (Nasturtium officinale), plantes des espèces Brassica rapa, Brassica ruvo, Brassica napus, Raphanus sativus, Barbarea verna, Erysimum allionii, Erysimum cheiri, Tropaeolum majus L, Alliaria petiolata, Salvadora persica, Carica papaya et Brassica oleracea.

Description

UTILISATION D’UN EXTRAIT DE PARTIE DE PLANTE POUR STIMULER LES DÉFENSES DE PLANTES CONTRE LES VIRUS, COMPOSITION ET PROCÉDÉS ASSOCIÉS
Domaine technique de l’invention
La présente invention concerne une utilisation d’un extrait de plantes particulières pour stimuler les défenses de plantes ou d’arbres contre les virus, et une composition et des procédés associés. La présente invention ainsi vise à réduire les effets d’une attaque de virus.
État de la technique
Dans leur lutte permanente pour la survie, les plantes, tous comme les animaux, ont développé une panoplie diversifiée de systèmes de protection et de défense, qui leur permettent de résister à des maladies infectieuses et aux parasites (champignons, bactéries, virus...). Parfois, les systèmes de protection préexistent avant tout contact de l'agent pathogène avec l'hôte mais le plus souvent, une résistance (résistance induite) se met en place après la rencontre de la plante avec son agresseur.
Pour un certain nombre des plantes, il y a des moyens défensifs qui préexistent avant l'attaque par un agent pathogène ou un ravageur potentiel. Par exemple, les plantes possèdent des barrières morphologiques. Par exemple, il peut s’agir de cuticules épaisses couvertes de substances hydrophobes (cire, cutine, subérine, etc...) empêchant les agents pathogènes d'entrer ou de se développer. On peut observer la présence d’épines sur les surfaces des feuilles et des tiges ayant un pouvoir répulsif contre les animaux (en particulier les mammifères herbivores), ou encore la fermeture des stomates dans les feuilles et les lenticelles des tiges pour éviter la pénétration de spores fongiques, de bactéries, etc...
Les plantes produisent aussi des métabolites secondaires biologiquement actifs et des précurseurs inertes pour se protéger des organismes nuisibles. Ces «métabolites secondaires» ne sont pas nécessaires à une activité biologique essentielle, comme la croissance et la reproduction, mais aident la plante à s'adapter à son environnement, qui se transforment en molécules actives pendant l'attaque par un ravageur, un agent pathogène ou après une blessure.
En réponse à l’attaque par un agent pathogène, la plante déploie aussi les modifications métaboliques induites dans la plante qui cause, très souvent, soit une défense tardive et discrète soit une résistance active et rapidement induite.
La défense tardive est souvent liée à des récepteurs présents dans la membrane ou la cellule végétale, capables de reconnaître des signaux moléculaires associés aux microbes ou agents pathogènes. Par exemple, les fragments de parois cellulaires, la chitine ou des motifs peptidiques du flagelle des bactéries (éliciteur exogène), protéines (éliciteur endogène) font partie des motifs, qui, une fois perçus par la plante, pourront initier une réponse immunitaire de base (PAMP-Triggered Immunity ou « PTI »), afin de limiter l'invasion et retarder l’avancée de l’agent pathogène.
Par contre, la reconnaissance spécifique de l'attaque d'un agent pathogène induisant une réponse rapide de l'hôte peut également restreindre ou stopper l'invasion et permet à la défense de se déclencher très rapidement. La reconnaissance des composants étrangers chez les plantes est coordonnée par des récepteurs spécialisés, qui déclenchent les réponses de défense de l’hôte après la détection de l’agent pathogène. Dans ce cas de perception spécifique, l’éliciteur est codé chez l’agent pathogène par des gènes nommés gènes d’avirulence (« AVR »). Les récepteurs de la plante reconnaissants alors le produit du gène d’avirulence, sont codés par des gènes de résistance (R) de la plante. L’interaction entre le produit du gène d’avirulence du parasite et le gène de Résistance de la plante est communément appelée « relation gène pour gène ».
Les gènes R ont été isolés d’espèces végétales variées (par exemple la tomate, le lin, le riz, le tabac, Arabidospsis, la betterave sucrière). Malgré l’importante diversité des parasites auxquels ils confèrent la résistance (champignons, bactéries, virus ou encore nématodes), leur comparaison révèle une forte homologie de séquences ainsi que la conservation de motifs structuraux :
La majorité des protéines déduites des gènes R isolés de plantes, partage différents éléments structuraux caractérisés au sein de domaines protéiques intervenant dans les mécanismes de défense chez la levure, la drosophile ou encore les vertébrés. Par analogie, la plupart des produits R combinerait un domaine récepteur et un domaine effecteur assurant respectivement deux fonctions majeures : la reconnaissance de molécules élicitrices par des mécanismes d’interactions protéine-protéine et l’activation directe ou indirecte de signaux de transduction.
Cinq principaux domaines structuraux conservés au sein des gènes R ont été distingués :
1 / La majorité des produits déduits des séquences de gènes R clonés à ce jour présente en position C-terminale un domaine LRR (« Leucine-Rich Repeats ») intra- ou extracytoplasmique. Les domaines LRR correspondent à la répétition d’un motif de taille variable comprenant des leucines. Ils interviendraient dans les mécanismes d’interactions protéine-protéine et protéinepolysaccharide
2/ Le domaine NBS (« Nucleotide Binding Site ») ou NB, associé au domaine LRR (NBS- LRR), est largement distribué au sein des gènes R clonés. Ce domaine, composé notamment de différents motifs conservés de type kinase, correspond à un site de fixation et d’hydrolyse des nucléotides triphosphates ATP et GTP. Il présente des analogies avec des protéines animales potentiellement impliquées dans les phénomènes de mort cellulaire apoptotique, notamment APAF-1 identifiée chez l’homme et CED-4 identifiée chez Caenorhabditis elegans. L’ensemble de ces domaines se regroupe sous la terminologie NB-ARC (Van der Biezen et Jones, 1998).
3 et 4/ Deux autres domaines, dits « TIR » et « CC » (ou encore « LZ »), moins fréquents au sein des gènes R identifiés, peuvent être associés, en position Nterminale, aux produits NBS- LRR. Le domaine TIR (« Toll Interleukin Receptor ») présente d’importantes homologies de séquences avec les domaines intracellulaires de récepteurs protéiques isolés de la drosophile (récepteur Toll) et de l’homme (récepteur Interleukin- 1 ). Sur la base de ces analogies, un rôle dans la cascade de signalisation cellulaire est attribué au domaine TIR. Le domaine CC (« Coiled-Coil ») ou LZ « (Leucine-Zipper ») qui peut varier en taille et en position est connu pour assurer un rôle dans l’homodimérisation ou l’hétérodimérisation des protéines. 5/ Enfin, le domaine Sérine/Thréonine kinase se présente seul (par exemple produit du gène Pto) ou, associé à un domaine LRR (par exemple, produit du gène Xa21 ). Il serait impliqué dans des réactions de phosphorylation lors de cascades de signalisation.
Dans la majorité des cas, lors d’une interaction incompatible, la défense très active, menant à une situation de résistance, toute une série d’événements se met en place à l’issue de la perception de l’agent pathogène par la plante.
L’ensemble du métabolisme des cellules infectées est sollicité et fait intervenir de nombreux mécanismes ayant pour fonction de détruire et de piéger les parasites : des protéines G, des flux ioniques, notamment de Ca2+, H+, K+ et Cl’, des formes activées d’oxygènes (ou ROS pour « Reactive Oxygen Species ») et toute une cascade de phosphorylation/déphosphorylation de protéines telles que les MAPK (« Mitogen-ActivatedProtein-Kinase »).
Le plus souvent, ce déferlement signalétique se traduit phénotypiquement par la mort rapide des cellules infectées par l’agent pathogène et la formation de lésions nécrotiques localisées autour du site de pénétration du parasite. Cette réaction à déterminisme génétique est dite réaction d’hypersensibilité (ou « HR ») ou apoptose (mort cellulaire programmée).
Les modifications métaboliques importantes permettant de confiner l’agresseur en son site de pénétration sont le résultat de l’expression de nombreux gènes de défense au niveau de la zone infectée. La mort cellulaire (« HR ») génère également des signaux qui activent la résistance locale acquise (« LAR »), au contact des lésions, et la résistance systémique acquise (SAR), à distance du site d’infection.
Lors de l’établissement de la LAR, les réponses de défenses sont intenses et tout particulièrement localisées au niveau de l’anneau de cellules entourant la zone HR. Ces réponses incluent la synthèse d’un large spectre de composés anti-microbiens tels que les protéines « PR » (Pathogenesis Related Protein), certains métabolites secondaires aux propriétés antibiotiques, par exemple les phytoalexines, ainsi que l’accumulation de molécules intervenant dans les voies de signalisation, notamment les ROS et diverses hormones dont l’acide salicylique. Ces deux niveaux de résistance locale (HR et LAR) s’accompagnent d’une résistance établie à l’échelle de la plante, la SAR, dont l’expression, plus tardive et moins intense, peut persister plusieurs semaines après l’infection. La SAR maintient la plante en un état de veille qui lui permet de résister non seulement à l’agresseur d’origine, mais aussi à une large gamme d’autres parasites pouvant intervenir ultérieurement.
La mise en place de cette résistance systémique, au niveau de tissus non infectés, dépend d’un réseau élaboré de communication intercellulaire. Des signaux libérés par les cellules exprimant la HR diffusent et atteignent d’autres cellules qui à leur tour déclenchent une réponse spécifique. L’acide salicylique, l’éthylène, l’acide jasmonique ou encore la systémine ont été reconnus depuis plusieurs années comme des messagers chimiques. Ces messagers alertent les cellules non infectées et dirigent leur métabolisme vers la mise en place de réponses de défenses, notamment, le renforcement de la paroi cellulaire, la stimulation des voies du métabolisme secondaire (enzymes du métabolisme des phénylpropanoïdes, de la voie de biosynthèse de l’éthylène et de l’acide jasmonique) et l’accumulation de protéines. Le cas particulier des virus :
Un phytovirus, ou virus de plantes, est un virus s'attaquant aux organismes végétaux. Ces virus ont la particularité de pénétrer la cellule végétale de leur hôte afin de détourner à leur profit les mécanismes de la cellule et leur permettre de se reproduire.
Parmi les virus infectant les plantes, ceux dont le génome est constitué d'une ou de plusieurs molécules d'ARN simple brin de polarité messagère (« positive ») sont les plus importants tant par leur nombre (85 à 90 % des virus connus) que par leur impact économique. Bien que présentant des morphologies variées, ces virus possèdent une structure très simple, les particules non enveloppées étant constituées d'un unique ou de quelques (2 ou 3) types de sous-unités de la protéine de capside (CP).
Par exemple, les plantes emploient l’interférence par l'ARN, ou RNAi pour se défendre contre de nombreux virus. Lors de leur phase de réplication, les virus à ARN passent par un stade ARN double brin (ARNdb) qui est reconnu par la plante comme un signal d’alerte et permet la mise en route de son système de défense qui pourra conduire à l’élimination du virus. Pour la plupart des virus à ARN, une réponse RNAi antivirale efficace s'appuie principalement sur l’activité de la protéine DICER-LIKE4 (« DCL4 ») pour produire à partir de l’ARNdb la majeure partie des ARN "interférants" antiviraux (siARN). Ces derniers sont associés à une protéine ARGONAUTE (« AGO »), afin de guider celle-ci vers l’ARN viral, ce qui entraine sa dégradation.
Les phytovirus possèdent quatre particularités essentielles par rapport aux autres agents pathogènes :
1/ Contrairement aux autres agents pathogènes, les populations virales possèdent un potentiel évolutif très élevé. Cette évolution rapide entraîne une apparition de variants viraux capables de contourner et de s’adapter très rapidement aux résistances génétiques des plantes.
2/ Les viroses végétales sont incurables par voie chimique une fois que la maladie s'est installée dans un champ. Aucun remède efficace n'existe contre les viroses végétales. Les plantes sensibles infectées conserveront le virus dans leurs tissus jusqu'à leur mort.
3/ Ce sont les cellules hôtes qui se chargent de multiplier les virus qui les parasitent. Les phytovirus peuvent infecter toutes les parties d'une plante. Seuls les méristèmes (cellules non différenciées) des bourgeons échappent à leur invasion. Ils sont le plus souvent la cause de maladies généralisées.
4/ Les virus ne peuvent survivre que dans une plante vivante. Ils sont détruits dès que la plante meurt. Ils requièrent également des agents externes pour se propager d'un végétal à un autre.
Au sein même de l’interaction virus/plante, des mécanismes très particuliers sont mis en place, différents des évènements métaboliques intervenant dans les autres interactions plantes/agent pathogènes (Bactérie, champignons, etc...).
Ainsi, les phytovirus sont des pathogènes majeurs retrouvés dans les cultures du monde entier, et représenteront une menace de plus en plus sérieuse. Parmi les maladies infectieuses émergentes, les virus représentent à eux seuls près de la moitié des pathogènes impliqués, soit 47% contre 30% pour les champignons, et seulement 16% pour les bactéries (Anderson et al., 2004).
Dans ce contexte, de nos jours, le déploiement de variétés végétales porteuses de gènes de résistance contre les phytovirus reste l’approche la plus efficace dans le contrôle de ces pathogènes viraux, afin d’utiliser la machinerie végétale de défense existante déjà mise en place. L’un des critères majeurs pour les sélectionneurs, reste d’obtenir des variétés possédant une résistance durable c’est-à-dire qui demeure efficace durant une longue période lorsque la variété est cultivée de manière intensive dans un milieu propice au développement de la maladie.
Présentation de l’invention
La présente invention vise à remédier à tout ou partie de ces inconvénients.
A cet effet, selon un premier aspect, la présente invention vise une composition élicitrice selon la revendication 1 .
L’action de cette composition contourne la résistance virale. Le contournement d’une résistance se traduit temporellement par l’émergence et la propagation d’un variant virulent à l’échelle de la cellule puis de la plante pour finir au niveau de la parcelle entière. La virulence d’un pathogène, selon la définition des phytopathologistes, désigne la composante qualitative du pouvoir pathogène c’est-à-dire la capacité ou non à infecter un génotype porteur d’une résistance donnée. Les forces évolutives vont être fortement impliquées dans l’apparition de variants virulents, qui ne préexistent pas naturellement dans un agroécosystème. Les variations génétiques vont donc être liées aux variations/mutations des gènes AVR : La première étape correspond à l’apparition au niveau cellulaire d’un variant virulent capable d’infecter une plante possédant un gène de résistance dans le cas d’une interaction de type gène pour gène. Cela signifie qu’il accumule les mutations nécessaires dans son facteur d’avirulence pour devenir virulent.
Il a été démontré que la composition objet de l’invention, préférentiellement dans sa forme extraite d’une plante de roquette, et particulièrement d’Eruca Sativa et de diplotaxis tenuifolia, agit très précocement après sa pulvérisation, démontrant que cette composition mime la relation gène pour gène. Par exemple, trente minutes après sa pulvérisation, la composition préférentielle engendre une série d’évènements métaboliques qui montrent que les mécanismes de défense déclenchés ressemblent à ceux décrit lors d’une relation gène pour gène :
1/ La production de formes réactives de l’oxygène (FAO ou ROS), dans les 30 minutes suivant la pulvérisation foliaire sur Arabidopsis thaliana. La production transitoire des espèces ou formes réactives de l'oxygène (ROS pour « reactive oxygen species ») constitue une des réponses les plus précoces suivant la reconnaissance gène-pour-gène d’un agent pathogène par la plante. Ces formes activées de l'oxygène sont produites dans les premières minutes, voire quelques heures, après rélicitation. Elles sont constituées essentiellement (O2), (OH) et (H2O2) L'accumulation importante de ces molécules, communément appelée « burst oxydatif », est souvent corrélée au contrôle de la prolifération cellulaire et de la mort cellulaire, au développement des plantes et a l'induction des réponses de défense. Dans le cas de la réponse à des agents pathogènes, ces formes réactives de l’oxygène jouent un rôle à la fois de composés antimicrobiens, dans le renforcement de la paroi cellulaire et dans la signalisation. Les changements de potentiel redox sont intégrés par la cellule, ce qui se traduit par L’activation de programmes génétiques aboutissant à la mise en place de la HR.
2/ La libération des signaux intercellulaires (phytohormones comme l’acide salicylique, L’acide jasmonique, L’éthylène) aux cellules adjacentes aux sites d’infection conditionnant à une immunisation et une augmentation de la résistance de ces derniers (LAR pour « Local Acquired Resistance ») chez le pêcher infecté par la bactériose, et traité par la composition préférentielle.
3/ immunisation de la plante entière (SAR pour « Systemic Acquired Resistance ») et phénomène de potentialisation lors d’une deuxième attaque par une parasite lorsque la plante a été préalablement traitée par cette composition.
4/ production de B-1 ,3 glucanase (PR2 Protéines) dès dix heures après pulvérisation de la composition préférentielle.
Cette composition objet de l’invention est donc capable d’agir indépendamment de la structure des produits de gènes de Résistance et d’Avirulence, permettant de surmonter toute mutation du virus.
En conclusion, alors que l’interaction entre les plantes et les virus est très particulière et différente des autres interactions plantes/parasites (aucune solution chimique possible), il est démontré que la composition objet de l’invention agit de façon efficace contre les virus, en agissant dans les temps très précoces en simulant une interaction gène pour gène, ce qui permet à la plante de palier à toutes les faiblesses d’une plante vis-à-vis d’un virus (apparition trop rapide de variants, réplication du virus, etc.).
Etant donné l’évolution rapide des virus, cette composition positionne les plantes dans un état de résistance, en agissant en aval de l’interaction entre les gènes R et AVR, afin de court- circuiter les éventuelles mutations des virus. Ainsi, la composition objet de l’invention, a la capacité de déclencher tous les mécanismes de défense apparaissant « après » un phénomène de reconnaissance « gène pour gène », tant pour les virus que pour les autres pathogènes, notamment bactéries et champignons.
L’efficacité de la présente invention réduit les effets des virus des végétaux, plantes, ou arbres, de façon à permettre à la plante, notamment arbre, de continuer correctement à croître malgré cette attaque, en surpassant les conséquences de cette attaque, c’est-à-dire en permettant à la plante ou l’arbre de se développer malgré le virus, en réduisant ou en éliminant l’impact du virus. L’extrait de plantes peut aussi, dans certaines utilisations, permettre à la plante d’éradiquer certains virus. Cette utilisation peut être curative ou préventive.
On note que la réduction des effets des virus sur les plantes ou arbres attaquées par ces virus comporte, dans certains cas, la réduction totale ou partielle des symptômes. En effet, les plantes et arbres ont, lorsque leur système de défense est fonctionnel (notamment grâce à la stimulation obtenue par la mise en oeuvre de l’invention), la capacité à vaincre un virus. L’utilisation de la composition objet de la présente invention vise à stimuler ce que les plantes savent déjà faire, mais qu’elles ne font pas dans les cas de « sensibilité », car elles ne reconnaissent pas leur agresseur. Le recul de la pathologie apparaît ainsi dans certains exemples de la description. Dans des modes de réalisation préférentiels, l’extrait est obtenu à partir d’au moins une des plantes suivantes : Roquettes, y compris Eruca sativa, Diplotaxis, Erucastrum et Bunias, Cakile, brocoli, plantes des genres Allium (ail, oignon, échalote, poireau et ciboulette), chou commun, chou-fleur, chou de Bruxelles, chou frisé, moutarde, wasabi, cresson de fontaine, raifort, chou blanc, chou champêtre (Brassica rapa), y compris le chou pak choï, chou chinois et navet, chou-rave, chou cavalier, chou rouge, brocoli chinois, brocoli-rave, colza, radis, Siberian wallflower, giroflée, cresson indien, herbe à ail, arbre de pilu, papayer, notamment de son fruit.
Une composition élicitrice objet de l’invention peut comporter un extrait brut total obtenu par broyage et extraction de la plante, en une fraction enrichie en composés(s) actif(s) d’un tel extrait total, ou en un ou plusieurs composé(s) actif(s) en mélange. Une telle composition permet avantageusement, en quantité efficace dans une composition, de combattre les symptômes de l’attaque d’une plante ou d’un arbre mentionné ci-dessus par un virus mentionné ci-dessus.
Dans des modes de réalisation préférentiels, l’extrait est obtenu à partir d’au moins une des plantes suivantes : Roquettes, y compris Eruca sativa, Diplotaxis, Erucastrum et Bunias, Cakile, brocoli, chou commun, chou-fleur, chou de Bruxelles, chou frisé, moutarde, cresson de fontaine, chou blanc, chou champêtre (Brassica rapa), y compris le chou pak choï, chou chinois et navet, chou-rave, chou cavalier, chou rouge, brocoli chinois, brocoli-rave, radis, et Siberian wallflower.
Dans des modes de réalisation préférentiels, l’extrait est obtenu à partir d’au moins une des plantes suivantes :
- Roquettes, y compris Eruca sativa, Diplotaxis, Erucastrum et Bunias,
- Cakile.
Dans des modes de réalisation préférentiels, l’extrait est obtenu à partir d’au moins une des plantes de l’espèce Brassica oleracea.
Dans des modes de réalisation préférentiels, l’extrait est obtenu à partir d’au moins une plante ne contenant pas de Methyl-isothiocyanate et/ou de Propenyl isothiocyanate.
L’inventeure a constaté que ces isothiocyanates pouvaient avoir des effets néfastes sur la croissance de la plante tout en réduisant les effets des virus.
Dans des modes de réalisation, l’extrait est obtenu à partir d’au moins une plante contenant au moins un butyl-isothiocyanate. L’inventeure a constaté que ces isothiocyanates ont des effets favorables sur la croissance de la plante tout en réduisant les effets des virus.
Dans des modes de réalisation, l’extrait est obtenu à partir d’au moins une plante contenant de la 1 ,3-thiazépane-2-thione. L’inventeure a constaté que ce composé qui, du fait de sa structure, n’est pas un isothiocyanate a des effets favorables sur la croissance de la plante tout en réduisant les effets des virus.
L’inventeure a découvert que ces extraits possèdent au moins une substance active qui réduit les effets des virus, la présence de leur vecteur de diffusion et/ou leur colonisation par les insectes.
Dans des modes de réalisation, l’extrait d’au moins une partie de plantes est un extrait obtenu à partir d’un broyât desdites plantes, et : - ledit extrait d’au moins une partie de plantes comprend au moins des feuilles des dites plantes, de préférence essentiellement des feuilles et des fleurs, et
- le procédé permettant d’obtenir ledit extrait liquide comprend les étapes suivantes : a) une étape de broyage desdites plantes ; b) la filtration du broyât obtenu ; et c) la récupération de l’extrait liquide obtenu après filtration.
On entend ici désigner par le terme « comprend essentiellement » par comprenant au moins 75%, préférentiellement au moins 95%, de feuilles et fleurs de dites plantes en poids, par exemple sec, par rapport au poids total de plante, avant mélange au solvant aqueux.
Dans des modes de réalisation, l’extrait est obtenu par un procédé comportant, de plus, une étape de nébulisation de l’extrait liquide et de passage de l’extrait liquide nébulisé dans un flux d’air chaud.
Selon un deuxième aspect, la présente invention vise un procédé de réduction des effets des virus sur les plantes, y compris arbres, comportant une étape d’application de la composition élicitrice objet de l’invention.
Dans des modes de réalisation, le procédé est appliqué à la réduction des effets d’une attaque d’un des virus suivants :
- Les virus de la jaunisse de la betterave,
- Le virus de la mosaïque du tabac,
- Le virus de la mosaïque du manioc,
- Le virus Banana Bunchy Top Virus (BBTV),
- Le virus Banana streak virus (BSV),
- Le virus de la jaunisse nanisante de l’orge (JNO ou BYDV),
- Le virus de la mosaïque du concombre,
- Le virus de la mosaïque de la canne à sucre (SCMV),
- Les virus de la maladie de la nécrose léthale du maïs (MLN, MCMV, SCMV),
- La famille de virus Potyviridae,
- Le virus de la marbrure plumeuse de la patate douce (Potyvirus), ou SPFMV,
- Le virus du rabougrissement chlorotique de la patate douce (Crinivirus), ou SPCSV et SPVD,
- Le virus de la marbrure modérée de la patate douce, ou SPMMV,
- Le virus latent de la patate douce, ou SPLV,
- Le virus des tâches chlorotiques de la patate douce ou SPCFV,
- Le virus G de la patate douce, ou SPVG,
- Le virus de l’enroulement de la patate douce, ou SPLCV,
- Le virus du fruit rugueux brun de la tomate (ToBRFV),
- Le virus de la maladie bronzée de la tomate (« Tomato spotted wilt virus », TSWV),
- Le virus de la mosaïque de la tomate (Tomato mosaic virus, ToMV),
- Le virus de la mosaïque jaune de la courgette (« Zucchini yellow mosaic virus », ou
ZYMV), - le virus de la mosaïque du rosier.
Dans des modes de réalisation, le procédé est appliqué à la réduction des effets d’une attaque d’au moins un des virus de la jaunisse de la betterave.
Dans des modes de réalisation, le procédé est appliqué à la réduction des effets d’une attaque d’au moins un des virus de la mosaïque du concombre.
Dans des modes de réalisation, l’application de la composition élicitrice est une application foliaire sur les plantes.
Selon un troisième aspect, l’invention vise une utilisation de la composition élicitrice objet de l’invention pour réduire, sur les plantes, y compris arbres, des effets d’une attaque d’un des virus listés ci-dessus.
Dans des modes de réalisation, l’application sur la plante ou l’arbre se fait par pulvérisation foliaire, arrosage au sol, goutte à goutte, utilisation en cultures hydroponiques, en traitement de semences et/ou enrobage de graines.
Dans des modes de réalisation, l’application sur la plante ou l’arbre se fait avec une dilution dans l’eau de la composition entre 2 g/L et 2000 g/L exprimé en grammes de plantes sur lesquelles a été réalisée l’extraction par litre de produit appliqué.
Dans des modes de réalisation, l’application sur la plante ou l’arbre se fait avec une dilution dans l’eau de la composition entre 5 g/L et 200 g/L exprimé en grammes de plantes sur lesquelles a été réalisée l’extraction par litre de produit appliqué.
Dans des modes de réalisation, ledit extrait d’au moins une partie de plantes est un extrait liquide des dites plantes.
Dans des modes de réalisation, l’application sur la plante ou l’arbre est réalisée par pulvérisation foliaire, arrosage du sol, irrigation du sol, goutte à goutte, culture en hydroponie, traitement des semences et/ou enrobage de graines.
Dans des modes de réalisation, au moins un principe actif est obtenu à partir de feuilles des dites plantes.
Dans des modes de réalisation, au moins un principe actif est obtenu à partir de fleurs de dites plantes.
Dans des modes de réalisation, au moins un principe actif est obtenu par broyage d’au moins une partie des dites plantes.
Dans des modes de réalisation, au moins un principe actif est obtenu par extraction aqueuse.
Dans des modes de réalisation, au moins un principe actif est obtenu, par extraction d’huile, par extraction par solvant, ou par extraction de tourteaux ou de pâtes.
Dans des modes de réalisation, la composition est formulée sous forme de poudre, poudre soluble, poudre mouillable, granulés, granulés dispersibles, ou granulés mouillables ou à diffusion lente, à diluer dans l’eau au moment de l’utilisation.
Dans des modes de réalisation, la composition est formulée sous forme de liquide, liquide concentré soluble, concentré émulsifiable, suspension concentrée, ou prête à l’emploi. Selon un quatrième aspect, la présente invention vise un procédé de production d’une composition objet de l’invention, qui comporte une étape de broyage d’au moins une partie des dites plantes, pour fournir un broyât, et une étape de filtrage pour extraire des parties solides dudit broyât et obtenir un liquide.
Les avantages, buts et caractéristiques particuliers de cette composition et de ce procédé étant similaires à ceux de la composition objet de la présente invention, ils ne sont pas rappelés ici.
Selon un cinquième aspect, la présente invention vise un procédé de simulation physique d’interaction gène pour gène, une composition susceptible d’être extraite par extraction aqueuse d’une plante donnée dans les listes revendiquées, notamment d’une plante de roquette, et particulièrement de type Eruca Sativa ou Diplotaxis ou de plantes génétiquement modifiées pour produire cette composition.
Ainsi, le procédé et la composition objet de l’invention réalisent une action sur la plante dans les heures, voire en moins d’une heure, après l’interaction gêne pour gène avec le virus ou son variant, évitant ainsi le problème des mutations, et apportant une réponse renforçant immédiatement les résistances des plantes traitées contre les virus, les bactéries, les champignons et autres pathogènes.
Alors que l’interaction entre les plantes et les virus est très particulière et différente des autres interactions plantes/parasites, puisqu’il n’y a aucune solution chimique possible, il est démontré que la composition objet de l’invention, notamment dans sa forme extraite de plantes de roquettes, et particulièrement d’Eruca Sativa ou Diplotaxis Tenuifolia, agit de façon efficace contre les virus, en agissant dans les temps très précoces en simulant une interaction gène pour gène, ce qui permet à la plante de palier à toutes les faiblesses d’une plante vis-à-vis d’un virus (apparition trop rapide de variants, réplication du virus, etc...) et, plus généralement, d’un pathogène.
Les avantages, buts et caractéristiques particulières des autres aspects de l’invention, notamment celles qui sont revendiquées, s’appliquent aussi à ce procédé et cette composition et à l’utilisation de cette composition pour simuler, dans une plante dont les résistances doivent être stimuler, une interaction gène pour gène.
Brève description des figures
D’autres avantages, buts et caractéristiques de la présente invention ressortiront de la description qui va suivre, faite dans un but explicatif et nullement limitatif, en regard du dessin annexé, dans lequel :
La figure 1 représente, sous la forme d’un logigramme, des étapes d’un mode de réalisation d’un procédé pour produire et utiliser une matière broyée, qui est un exemple préférentiel de production de la composition objet de l’invention,
La figure 2 représente des dates d’évaluations de traitements de betteraves,
La figure 3 représente des nombres d'insectes Myzus persicae,
La figure 4 représente des incidences du ravageur Myzus persicae, La figure 5 représente des nombres d'insectes Aphis fabae,
La figure 6 représente des incidences du ravageur Aphis fabae
La figure 7 représente des évaluations d’aires infectées par la jaunisse,
La figure 8 représente une photographie de la modalité non traitée (témoin),
La figure 9 représente une photographie de la modalité traitée avec le produit PP1 ,
La figure 10 représente une photographie de la modalité traitée avec le produit PP1 , et
La figure 11 représente un tableau descriptif des modalités de traitement de la première démonstration.
Description des modes de réalisation
La composition élicitrice stimulant des défenses des plantes ou arbres réduisant les effets d’une attaque d’un virus comporte un extrait d’au moins une partie d’au moins une des plantes suivantes : Roquettes, y compris des genres Eruca sativa, Diplotaxis, Erucastrum et Bunias, Cakile, plantes des genres Allium, moutarde (Sinapis alba, Brassica nigra, Sinapis arvensis, Brassica juncea), wasabi (Eutrema japonicum), raifort (Armoracia rusticana), cresson de fontaine (Nasturtium officinale), plantes des espèces Brassica rapa, Brassica ruvo, Brassica napus, Raphanus sativus, Barbarea verna, Erysimum allionii, Erysimum cheiri, Tropaeolum majus L, Alliaria petiolata, Salvadora persica, Carica papaya et Brassica oleracea.
Les modes de réalisation préférentiels et certains virus sont listés ci-dessus.
Avant de présenter les différents aspects de la présente invention, on décrit, ci-après, des virus sur lesquels a été testée avec succès la composition élicitrice objet de l’invention :
Dans un but de clarté et de concision, les démonstrations de la description qui va suivre ne couvrent pas toutes les combinaisons de plantes indiquées ci-dessus, mais illustrent l’efficacité de la présente invention dans toutes ces combinaisons.
Première démonstration : Effet de la composition élicitrice objet de l’invention contre le virus de la jaunisse de la betterave.
La betterave est le premier réservoir des virus de la jaunisse. Il est donc important d'enlever tous les résidus de récolte (cordons de déterrage, betteraves traînantes) car les repousses foliaires peuvent devenir des sources d'infection. Il est également important de bien gérer les mauvaises herbes, dans les parcelles et en bords de champs, car un certain nombre d'espèces sont hôtes de pucerons vecteurs et parfois aussi des virus de la jaunisse.
Pour lutter contre ce virus, les techniques suivantes sont utilisées :
Lutte préventive par l'utilisation de graines traitées avec un insecticide systémique dans l'enrobage (imidaclopride). Cette technique présente de loin les meilleurs résultats d'efficacité et de rémanence. Cependant il est important de noter qu’en 2018 les néonicotinoïdes ont été interdits. 2020 a été la seconde année sans néonicotinoïde (NNI) sur semences depuis 1993. L’imidaclopride a été autorisé en traitement de semences cette année-là. C’est un insecticide très efficace, neurotoxique. En conséquence, le puceron ne pique qu’une seule fois et il n’y a donc plus de contamination par rond (INRAE, 2020).
En Europe, l’imidaclopride ne sera plus homologué à partir du 31/7/2022, mais certains pays l’ont gardé ou ont accordé des dérogations, quand l’Anses en France a retiré toutes les AMM à des fins agricoles. Deux autres NNI ont été retirés fin 2019 (thiaméthoxame, clothianidine). Seuls le thiaméthoxame et l’Imidaclopride étaient utilisés sur notre territoire en enrobage de semences de betterave.
Lutte préventive par l'application, lors du semis, d'insecticides micro-granulés à longue rémanence, adaptés à la lutte contre les pucerons vecteurs de la jaunisse.
Lutte curative par des pulvérisations à base de produits aphicides.
Au jour d’aujourd’hui, les produits disponibles sont les suivants :
Le Teppeki (50 % de Flonicamide), marque déposée, est homologué depuis le 21 décembre 2018 avec les conditions d’emploi suivantes (autorisation de mise sur le marché, ou « AMM », no. 2050046) :
Dose d’homologation de 0,14 kg/ha,
Une application par an à partir du stade six feuilles vraies,
Efficace uniquement sur pucerons (sélectif des auxiliaires),
Mélange possible avec les herbicides,
Rémanence de deux semaines minimums,
Ajouter un litre d’huile selon la réglementation.
Le Movento (Spirotétramate à 100 g/l), marque déposée, a obtenu une AMM dérogatoire de 120 jours pour une utilisation en 2020 avec les conditions d’emploi suivantes :
Dose d’homologation de 0.45 l/ha,
Deux applications par an (intervalle minimum de 14 jours) à partir du stade deux feuilles jusqu'à couverture des betteraves,
Efficace uniquement sur pucerons (sélectif des auxiliaires),
Ne pas utiliser en mélange car risque de baisse d'efficacité et
Rémanence de deux semaines minimums.
Néanmoins, l’utilisation de ces deux substances actives en 2020 n’a pas permis de contrôler suffisamment les populations de pucerons sur l’ensemble du territoire. Ces deux substances ne constituent pas une solution durable. À ce stade, aucune solution chimique ou non chimique ne se rapproche en efficacité des traitements chimiques à base de NNI et ne permet de faire face à une situation exceptionnelle (INRAE, 2020)
Compte tenu du besoin urgent de trouver une solution efficace pour lutter contre la jaunisse de la betterave, la composition élicitrice intégralement biosourcée objet de l’invention est capable de réduire significativement, voire éliminer, les effets causés par des maladies virales graves des plantes et jusqu’alors incurables. Les tests de toxicité de cette composition ont démontré qu’elle n’est pas toxique. Un essai a été mis en place avec la société Ephydia (marqué déposée, société agrée BPE pour bonnes pratiques environnementales) contre le virus de la jaunisse de la betterave, dont les résultats sont présentés ci-après.
Matériel et méthodes
Matériel végétal : Beta vulgaris est une espèce de plantes de la famille des
Amaranthaceae. Elle est cultivée de par le monde pour la production sucrière, et de façon annexe pour fabriquer de l'éthanol ou de la levure boulangère issue de la mélasse confectionnée à partir des résidus de fabrication du sucre blanc.
Conditions de culture
Date de plantation : 25/03/2021
Profondeur : deux mètres
Espacement entre les rangs : 45 cm
Espacement dans le rang : 18.5 cm
Taux de plantation : 100 000 plantes / ha
Méthode de plantation : semis
Essai réalisé par : Ephydia
Largeur de la parcelle traitée : 2.7 m
Longueur de la parcelle traitée : 9.25 m
Surface de la parcelle traitée : 24.975 m2
Nombre de répétition : quatre
Texture du sol : Limoneux
Lieu de l’essai :
Ville / Commune : Combles (80)
Pays : France
Code postal : 80360
Description des traitements :
Témoin (parcelle non traitée),
Application de PP1 , à 50 % V/V,
Application de PP1 , à 50 % V/V et de Teppeki, à 0,14 kg/ha,
Application de Teppeki, à 0,14 kg/ha.
Dans cette première démonstration, des extraits d’éruca sativa et de diplotaxis tenuifolia ont été utilisés. Les résultats étant très similaires, ces deux extraits ont été regroupés sous le terme générique de « PP1 » ci-dessous.
Description de modalités de traitement
Type d’application : Application foliaire
Tableau 1 en figure 11 : Description des modalités de traitement (ou « Trt »)
Tableau 2 : Date et stade d'application des traitements
Figure imgf000015_0001
Description du produit Teppeki :
N° AMM : 2050046
Date de 1 ° autorisation du produit : 21/04/2005
Substance active : Flonicamide 500 g/kg Fonction : Insecticide
Usage : 15053106 Betterave industrielle et fourragère*Trt Part.Aer.*Pucerons
Date d’autorisation de l’usage : 12/08/2021
Dose maximum d’application : 0.14 kg/ha
Nombre maximum d’application : Une
Stade d’application : Minimum : BBCH 12
Maximum : BBCH 49
Délais avant récolte : 60 jours
Il est important de noter que le produit Teppeki n’est autorisé à être appliqué qu’une seule fois sur la culture de la betterave, cependant durant l’essai le programme a reçu trois applications du produit Teppeki et six applications du produit Teppeki seul pour la modalité référence. Donc les résultats qui suivront seront à nuancer en sachant que ces niveaux d’efficacité avec la référence ne sont jamais atteints dans les champs en conditions réelles.
Description des évaluations réalisées au cours de l’essai.
Notation pucerons à chaque application et cinq jours après chaque traitement :
Myzus persicae : puceron vert du pécher
Aphis fabae : puceron noir de la fève
Notation à l’apparition des symptômes, en cours d’été et avant la récolte
Récolte poids brut et saccharimétrie
Figure 2 : date des évaluations.
Résultats et discussion.
Dans les figures 3 à 6, chaque ensemble de quatre barres verticales représente, de gauche à droite, le témoin non traité, le traitement avec la composition objet de l’invention, la combinaison de cette composition et du Teppeki et le Teppeki seul.
Evaluation du nombre de pucerons et de l’incidence du ravageur - Myzus Persicae.
Figure 3 : Nombre d'insectes Myzus persicae.
Figure 4 : Incidence du ravageur - Myzus persicae.
Note : « DA - A » signifie « Day after treatment A » (jours après le traitement A), etc
Le puceron vert du pêcher, Myzus persicae est le principal vecteur de la jaunisse de la betterave. Il a de très bonnes capacités de transmission des virus de la jaunisse modérée (BChV et BMYV) comme de celui de la jaunisse grave (BYV).
Les résultats illustrés en figure 3 montrent que le traitement PP1 permet de diminuer statistiquement le nombre de pucerons vecteurs de la jaunisse (sauf pour la notation 31 DA-A, lettre associée « a ») en comparaison à la modalité non traitée. Toutes les modalités traitées sont statistiquement identiques jusqu’à 14 DA-A et à la notation 41 DA-A (lettres associées « b ») et différentes de 21 DA-A à 35 DA-A de la modalité traitées avec Teppeki en importante surdose.
De plus, les résultats illustrés en figure 4 montrent que le traitement PP1 permet une diminution de l’incidence par rapport au témoin sauf pour les notations 10 DA-A, 21 DA-A et 31 DA-A. Ces résultats montrent que PP1 a un effet sur la présence du vecteur de la jaunisse de la betterave- Myzus persicae. Les valeurs de présence du puceron sont directement corrélées avec l’apparition des symptômes de la jaunisse. De ce fait, les résultats obtenus montrent que PP1 permet la diminution des symptômes.
Evaluation du nombre de pucerons et de l’incidence du ravageur - Aphis Fabae.
Figure 5 : Nombre d'insectes Aphis fabae
Figure 6 : Incidence du ravageur - Aphis fabae
Le puceron noir de la fève, Aphis fabae, est un vecteur secondaire du BYV (jaunisse grave), mais ne transmet pas le BChV ni le BMYV (virus de la jaunisse modérée). La jaunisse n’est jamais transmise à la descendance des pucerons contaminés.
Les résultats illustrés en figure 5 montrent que le traitement PP1 permet de diminuer statistiquement le nombre de pucerons vecteur de la jaunisse en comparaison à la modalité non traitée, sauf à 41 DA-A (lettres associées « a »). De plus, nous pouvons observer qu’à partir de 31 DA-A, le produit PP1 est statistiquement équivalent à la référence Teppeki, même appliquée en importante surdose (lettres associées « b »).
De plus, les résultats illustrés en figure 6, montrent que le traitement PP1 permet une diminution de l’incidence par rapport au témoin sauf pour la notation 31 DA-A (lettres associées « a »).
Ces résultats montrent que PP1 a un effet sur la présence du vecteur de la jaunisse de la betterave Aphis fabae. De plus, les valeurs de présence du puceron sont directement corrélées avec l’apparition des symptômes de la jaunisse. De ce fait, ces résultats montrent que PP1 permet la diminution des symptômes.
Aires infectées par la jaunisse de la betterave (figure 7). La figure 7 représente une évaluation de l’aire infectée par la jaunisse en fonction des traitements. La période à risque commence dès l’apparition des premiers pucerons dans les parcelles au plus tôt fin avril début mai, soit à partir du stade deux feuilles jusqu’à la couverture du sol fin juin. Le temps de latence est en général de deux à quatre semaines mais serait plus court pour la jaunisse grave (une à deux semaines) que pour la jaunisse modérée (quatre à six semaines).
Dans le cas de cet essai, les pucerons Myzus persicae ont été détectés sur l’essai du 14/05/2021 au 24/06/2021 et les pucerons Aphis fabae ont été détectés sur l’essai du 09/06/2021 au 24/06/2021 . Les premiers symptômes de la maladie ont été observés le 3/09/2021 comme indiqué sur la figure 7. Ces résultats démontrent que les parcelles commencent à montrer des symptômes de la jaunisse de la betterave et que le produit PP1 est aussi efficace que la référence TEPPEKI (qui a été appliqué six fois alors qu’elle n’est appliquée qu’une seule fois en condition normale) et permet de diminuer les symptômes en comparaison à la modalité non traitée.
Ainsi, PP1 pourrait se révéler bien plus efficace que le produit de référence Teppeki en condition normale d’application. PP1 permet ainsi de diminuer la présence des pucerons vecteurs mais également de limiter l’apparition des symptômes.
Figure 8 : Photographie de la modalité non Traité - parcelle 401
Figure 9 : Photographie de la modalité traitée avec le produit PP1 - parcelle 101
Figure 10 : Photographie de la modalité traitée avec le produit PP1 - parcelle 403 Conclusions de la première démonstration.
Les données de cet essai indiquent que l'application de l'extrait de plantes PP1 par application foliaire permet de diminuer la présence des deux variétés de pucerons vecteurs de la jaunisse grave et de la jaunisse modérée. Ces données sont liées au fait que PP1 permet de diminuer les symptômes de la jaunisse. Les plantes n’ayant pas été piquées par les pucerons continuent leur photosynthèse, possèdent une bonne vigueur et continuent leur cycle de développement.
Récolte de betteraves en fonction des modalités :
Témoin : 0,8 Tonne
PP1 : 1 ,2 Tonne
PP1 + Teppeki : 1 ,3 Tonne
Teppeki : 1 ,2 Tonne
Ainsi PP1 se révélerait une solution face au problème de la jaunisse et une solution de remplacement des néonicotinoïdes. Le produit PP1 est capable de réduire significativement l’incidence du virus de la jaunisse de la betterave.
Deuxième démonstration : Effet de PP1 contre le virus de la mosaïque du concombre.
Cet essai est réalisé en zone connue pour sa contamination par le virus de la mosaïque du concombre.
Les méthodes de lutte sont généralement les suivantes :
- Limiter la présence de plantes réservoir,
- Éliminer et détruisez immédiatement les plantes qui montrent des symptômes,
- Limiter la présence de pucerons,
- Utiliser des outils propres lors des tailles et des travaux de jardinage,
- Choisir des semences ou des plants sains et
- Choisir des variétés de concombre résistantes.
Un essai est réalisé pour évaluer l’efficacité de PP1 contre la mosaïque du concombre.
Matériel végétal :
Variété STYX, plants biologiques,
Calendrier : plantation 11 avril 2021 ,
Récolte du 23 mai 2021 au 15 juillet 2021 ,
Dispositif : Tunnel de huit mètres, paillage opaque thermique micro-perforé, quatre rangs doubles (distance 0.35 m),
Irrigation : une rampe par rang de culture
Modalités : Témoins non traités (T) et plants traités avec PP1
Essai bloc à quatre répétitions
Traitements : six traitements ont été réalisés à une cadence de 14 jours.
Symptômes :
Des taches chlorotiques (mosaïque plus ou moins marquée) apparaissent sur les jeunes feuilles ; celles-ci peuvent se déformer, se gaufrer, voire se dessécher dans les cas graves. Dans les parcelles, on observe des foyers de maladie circulaires, qui s'étendent progressivement. Une attaque précoce provoque le dépérissement complet des jeunes plantes. Les plantes affectées ont une croissance réduite et un port modifié.
Une plante infectée par ce virus reste porteuse du virus jusqu'à sa mort.
Observations et mesures réalisées : - Observations : Mesures agronomiques du 23 mai 2021 au 15 juillet 2021 :
L’incidence représente le pourcentage de feuilles ou de fruits contaminés.
La sévérité représente le pourcentage de surface recouvert par les symptômes de la maladie.
Tableau 3 : Incidence et sévérité sur feuilles de concombre - 23 mai 2021
Figure imgf000019_0001
La sévérité et l’incidence ont été mesurées sur 20 feuilles prélevées de façon aléatoire, pour chaque modalité.
Tableau 4 : Incidence et sévérité sur feuilles de concombre - 15 juillet 2021
Figure imgf000019_0002
La sévérité et l’incidence ont été mesurées sur 20 feuilles prélevées de façon aléatoire, pour chaque modalité.
Tableau 5 : Incidence et sévérité sur concombres (Fruits) - 15 juillet 2021
Figure imgf000019_0003
La sévérité et l’incidence ont été mesurées sur 20 fruits prélevées de façon aléatoire, pour chaque modalité. Les analyses ont été réalisées selon Newman and Keuls. Les lettres différentes expriment des résultats significativement différents au seuil de 5%.
On observe, tant pour les feuilles que pour les fruits, la composition élicitrice objet de l’invention (PP1 ) réduit, de manière significative, tant l’incidence que la sévérité des effets des virus et augmente significative la quantité de betterave récoltée.
Les résultats montrent l’efficacité de PP1 contre le virus de la mosaïque du concombre. En effet, les notations sur feuilles et sur fruits montrent que les plants traités ont significativement moins de symptômes que les plants témoins.
Troisième démonstration : B1 / Extrait de Brocoli (« PP2 ») contre le virus de la mosaïque du concombre (CMV). Un extrait de feuilles de brocolis est réalisé selon le protocole illustré en figure 1 , sous forme liquide, sans concentration. Cet essai est réalisé en zone connue pour sa contamination par le virus de la mosaïque du concombre (présence du vecteur). Aucune solution de biocontrôle n’est connue à ce jour pour éradiquer la maladie. Dans ce contexte, un essai est réalisé pour évaluer l’efficacité de PP2 contre le virus de la mosaïque du concombre (CMV).
Symptômes :
Des taches chlorotiques (mosaïque) apparaissent sur les jeunes feuilles, qui peuvent se déformer, se gaufrer, voire se dessécher dans les cas graves. Une attaque précoce provoque le dépérissement complet des jeunes plantes. Les plantes affectées ont une croissance réduite et un port modifié. Une plante infectée par ce virus reste porteuse du virus jusqu'à sa mort.
Matériel et Méthode :
Variété de concombre : TYRIA, plants biologiques, non tolérants au virus de la mosaïque. Calendrier : plantation 08 avril 2020
Récolte : du 28 mai 2020 au 30 juillet 2020
Dispositif : Tunnel de huit mètres, palissage sur ficelle, deux rangs doubles (distance 0.35 m). Irrigation : une rampe par rang de culture
Modalités : Témoins non traités (T) et plants traités (PP2)
Disposition : Essai bloc à quatre répétitions randomisées
Traitements : six traitements ont été réalisés à une cadence de 14 jours.
Résultats :
Tableau 6 : Incidence et sévérité sur feuilles de concombre - 30 mai 2020
Figure imgf000020_0001
La sévérité et l’incidence ont été mesurées sur 20 feuilles prélevées de façon aléatoire, pour chaque modalité.
Tableau 7 : Incidence et sévérité sur feuilles de concombre - 20 juillet 2020
Figure imgf000020_0002
La sévérité et l’incidence ont été mesurées sur 20 feuilles prélevées de façon aléatoire, pour chaque modalité.
Tableau 8 : Incidence et sévérité sur concombres (Fruits) - 20 juillet 2020
Figure imgf000020_0003
La sévérité et l’incidence ont été mesurées sur 20 fruits prélevées de façon aléatoire, pour chaque modalité. Les analyses ont été réalisées selon Newman and Keuls. Les lettres différentes expriment des résultats significativement différents au seuil de 5%. Les résultats montrent l’efficacité de PP2 contre le virus de la mosaïque du concombre. En effet, les notations sur feuilles et sur fruits montrent que les plants traités ont significativement moins de symptômes que les plants témoins.
Quatrième démonstration : Extrait de choux de Bruxelles (PP3) sur virus de mosaïque du concombre (CMV). Un extrait de feuilles de Choux de Bruxelles est réalisé selon le protocole illustré en figure 1 , sous forme liquide, sans concentration.
Cet essai est réalisé en zone connue pour sa contamination par le virus de la mosaïque du concombre (présence du vecteur).
Aucune solution de biocontrôle n’est connue à ce jour pour éradiquer la maladie.
Dans ce contexte, un essai est réalisé pour évaluer l’efficacité de PP3 contre le virus de la mosaïque du concombre.
Matériel et Méthode :
Variété de concombre : TYRIA, plants biologiques, non tolérants au virus de la mosaïque.
Calendrier : plantation 08 avril 2020
Récolte : du 28 mai 2020 au 30 juillet 2020
Dispositif : Tunnel de huit mètres, palissage sur ficelle, deux rangs doubles (distance 0.35 m). Irrigation : une rampe par rang de culture
Modalités : Témoins non traités (T) et plants traités (PP3)
Disposition : Essai bloc à quatre répétitions randomisées
Traitements : six traitements ont été réalisés à une cadence de 14 jours.
Résultats :
Tableau 9 : Incidence et sévérité sur feuilles de concombre - 30 mai 2020
Figure imgf000021_0001
La sévérité et l’incidence ont été mesurées sur 20 feuilles prélevées de façon aléatoire, pour chaque modalité.
Tableau 10 : Incidence et sévérité sur feuilles de concombre - 20 juillet 2020
Figure imgf000021_0002
La sévérité et l’incidence ont été mesurées sur 20 feuilles prélevées de façon aléatoire, pour chaque modalité.
Tableau 11 : Incidence et sévérité sur concombres (Fruits) - 20 juillet 2020
Figure imgf000021_0003
La sévérité et l’incidence ont été mesurées sur 20 fruits prélevées de façon aléatoire, pour chaque modalité.
Conclusion :
Les analyses ont été réalisées selon Newman and Keuls. Les lettres différentes expriment des résultats significativement différents au seuil de 5%. Les résultats montrent l’efficacité de PP3 contre le virus de la mosaïque du concombre. En effet, les notations sur feuilles et sur fruits montrent que les plants traités ont significativement moins de symptômes que les plants témoins.
Cinquième démonstration : Extrait de roquette (« PP1 ») sur le virus de la maladie bronzée de la tomate (« Tomato spotted wilt virus », TSWV).
Le virus de la maladie bronzée de la tomate (TSWV) est largement réparti dans le monde dans les zones tempérées et subtropicales où il est en recrudescence depuis le début des années 1980. Émergeant en France depuis 1987, il dispose d'une large gamme d'hôtes potentiels. Il est transmis par au moins neuf espèces de thrips.
Les symptômes du virus de la maladie bronzée de la tomate (Tomato spotted wilt virus, TSWV) peuvent prendre divers aspects sur le feuillage de la tomate, comme des déformations foliaires avec une courbure apicale de l'apex, un blocage de la végétation, une mosaïque plus ou moins contrastée, des taches et des lésions chlorotiques devenant nécrotiques, une chlorose et une coloration bronze plus ou moins marquées du limbe ou des nervures, accompagnées d'anneaux, de Petites lésions sombres devenant nécrotiques visibles aussi sur les pétioles et la tige, une anthocyanisation du limbe.
Les fruits sont également affectés. Ils peuvent être « bronzés » et présenter de larges arabesques et anneaux chlorotiques plus ou moins concentriques. Des altérations nécrotiques sèches, des craquelures sont parfois visibles. Les contaminations précoces entraînent une réduction du nombre et de la taille des fruits ; si elles sont tardives, les fruits croissent normalement mais sont mal colorés et plus ou moins déformés.
Aucune solution de biocontrôle n’est connue à ce jour pour éradiquer la maladie.
Dans ce contexte, un essai est réalisé pour évaluer l’efficacité de la composition élicitrice objet de l’invention contre le virus TSWV de la tomate. Les extraits de feuilles de roquette (Diplotaxis) sont obtenus selon le protocole illustré en figure 1 sous leur forme liquide non concentrée (extraits appelés « PP1 »).
Matériel et Méthode :
L’expérimentation se déroule sous serre rigide de 250m2 équipée d’ouvrants et d’aérations latérales.
Dispositif expérimental : Type « blocs complets à quatre répétitions ». Parcelle élémentaire de 10 plantes.
Itinéraire technique : Semi le 30 décembre 2021 pour une plantation le 26 janvier 2022. Récolte sur quatre mois de début mars à fin juin 2022.
Modalités : Témoins (non traités), PP1 (application par pulvérisation foliaire)
Traitements : Pulvérisation foliaire
Six applications de PP1 , à une cadence de 14 jours. Méthode d’analyse : Analyse de variance avec un seuil de risque de 5%. Les notations présentant les mêmes lettres ne sont pas différentes significativement.
Résultats :
Tableau 12 : Incidence et sévérité sur feuilles de tomates - 20 mars 2022
Figure imgf000023_0001
La sévérité et l’incidence ont été mesurées sur 20 feuilles prélevées de façon aléatoire, pour chaque modalité.
Tableau 13 : Incidence et sévérité sur tomates (Fruits) - 20 mars 2022
Figure imgf000023_0002
La sévérité et l’incidence ont été mesurées sur 20 fruits prélevées de façon aléatoire, pour chaque modalité.
Tableau 14 : Incidence et sévérité sur feuilles de tomates - 25 avril 2022
Figure imgf000023_0003
La sévérité et l’incidence ont été mesurées sur 20 feuilles prélevées de façon aléatoire, pour chaque modalité.
Tableau 15 : Incidence et sévérité sur tomates (Fruits) - 25 avril 2022
Figure imgf000023_0004
La sévérité et l’incidence ont été mesurées sur 20 fruits prélevées de façon aléatoire, pour chaque modalité.
Tableau 16 : Incidence et sévérité sur feuilles de tomates - 5 juin 2022
Figure imgf000023_0005
La sévérité et l’incidence ont été mesurées sur 20 feuilles prélevées de façon aléatoire, pour chaque modalité.
Tableau 17 : Incidence et sévérité sur tomates (Fruits) - 5 juin 2022
Figure imgf000023_0006
Figure imgf000024_0001
La sévérité et l’incidence ont été mesurées sur 20 fruits prélevées de façon aléatoire, pour chaque modalité.
Les résultats montrent l’efficacité de PP1 contre la virose de la tomate (TSWV). En effet, les notations sur feuilles et sur fruits montrent que les plants traités ont significativement moins de symptômes que les plants témoins. La progression de la maladie est très ralentie par les traitements foliaires de PP1 .
Sixième démonstration : Extrait de roquette sur le virus de la mosaïque de la tomate (ToMV). Le virus de la mosaïque du tomate (Tomato mosaic virus, ToMV) est présent sur tous les continents. On le rencontre fréquemment sur tomate et piment. Il est grave aussi bien en culture de plein champ, que sous abri. Si son incidence a beaucoup diminué avec la diffusion de variétés de tomate résistantes, la récente mise sur le marché de nouvelles variétés sensibles a montré combien le ToMV était toujours prêt à attaquer du matériel végétal sensible.
Aucune solution de biocontrôle n’est connue à ce jour pour éradiquer la maladie.
Dans ce contexte, un essai est réalisé pour évaluer l’efficacité de PP1 contre le virus ToMV de la tomate.
Les symptômes occasionnés par la présence de ce virus sont très variés et sont assez comparables. On peut constater un ralentissement de la croissance des plantes, ainsi que des anomalies de coloration pouvant apparaître sur les folioles et les feuilles. D’autres symptômes peuvent encore s’exprimer, sur feuilles, comme un éclaircissement des nervures, une marbrure, une mosaïque en plages vertes, ou jaunes avec le limbe qui se gaufre et se crispe.
On peut aussi constater la chute de fleurs. Lorsque les fruits arrivent à maturité, ils sont de taille réduite et parfois plus ou moins bosselés. Ils expriment aussi des décolorations jaunes, parfois en anneaux. Ces symptômes peuvent être présents sur les fruits verts ou mûrs alors que la plante semble saine. Les infections tardives sont sans incidence sur la production.
Les extraits de feuilles de roquette (Diplotaxis) sont obtenus selon le protocole illustré en figure 1 sous leur forme liquide non concentrée (extraits appelés « PP1 » par la suite).
L’expérimentation se déroule sous serre, culture hors sol.
Dispositif expérimental : Type « blocs complets à quatre répétitions ». Parcelle élémentaire de 10 plantes.
Itinéraire technique : plantation des godets le 5 février 2020. Récolte sur cinq mois de début mars à fin juillet 2020.
Modalités : Témoins (non traités), PP1 (pulvérisation foliaire)
Traitements : Pulvérisation foliaire - Six applications de PP1 , à une cadence de 14 jours.
Méthode d’analyse : Analyse de variance avec un seuil de risque de 5%. Les notations présentant les mêmes lettres ne sont pas différentes significativement.
Résultats :
Tableau 18 : Incidence et sévérité sur feuilles de tomates - 5 mars 2020
Figure imgf000025_0001
La sévérité et l’incidence ont été mesurées sur 20 feuilles prélevées de façon aléatoire, pour chaque modalité.
Tableau 19 : Incidence et sévérité sur tomates (Fruits) - 5 mars 2020
Figure imgf000025_0002
La sévérité et l’incidence ont été mesurées sur 20 fruits prélevées de façon aléatoire, pour chaque modalité.
Tableau 20 : Incidence et sévérité sur feuilles de tomates - 30 juin 2020
Figure imgf000025_0003
La sévérité et l’incidence ont été mesurées sur 20 feuilles prélevées de façon aléatoire, pour chaque modalité.
Tableau 21 : Incidence et sévérité sur tomates (Fruits) - 30 juin 2020
Figure imgf000025_0004
La sévérité et l’incidence ont été mesurées sur 20 fruits prélevées de façon aléatoire, pour chaque modalité.
Les résultats montrent l’efficacité de PP1 contre le virus de la mosaïque de la tomate (ToMV). En effet, les notations sur feuilles et sur fruits montrent que les plants traités ont significativement moins de symptômes que les plants témoins. La progression de la maladie est très ralentie par les traitements foliaires de PP1 .
Septième démonstration : Extrait de roquette sur le virus de la mosaïque jaune de la courgette (« Zucchini yellow mosaic virus », ou ZYMV).
Le ZYMV est un potyvirus transmis par pucerons selon le mode non-persistant. C'est l'un des meilleurs exemples de virus émergent chez les plantes. Isolé pour la première fois en Italie puis en France dans les années 70, il s'est répandu en quelques années dans le monde entier, en provoquant parfois des épidémies d'une gravité exceptionnelle. Cette dissémination récente et rapide dans des types de culture diverses (intensif, extensif, sous abri, plein champ) et des écosystèmes très variés (tempérés, tropicaux, sahéliens, insulaires) est attestée par le fait que le ZYMV provoque des symptômes très forts. Le ZYMV est désormais signalé sur cucurbitacées dans pratiquement toutes leurs zones de production dans le monde. Toutefois, sa fréquence peut varier beaucoup selon les régions. Rencontré régulièrement en régions tropicales ou subtropicales, ses épidémies sont plus irrégulières dans des pays tempérés comme en France. Une enquête réalisée de 2004 à 2008 dans les principaux bassins de production français a montré que le ZYMV n'était présent que dans 11 % de 2660 échantillons analysés, principalement sur courge (23% des échantillons testés), courgette (14%) et melon (8%), et dans une moindre mesure sur concombre (3%). Dans les zones où ce virus a été détecté, les épidémies étaient généralement sévères, avec un fort impact sur le rendement. Le ZYMV provoque des symptômes très sévères de mosaïque, jaunissement, rabougrissement et déformations sur le feuillage de pratiquement toutes les cucurbitacées. Il provoque aussi des décolorations et de spectaculaires déformations des fruits qui sont alors non commercialisables. Les attaques précoces peuvent entraîner une perte totale des récoltes.
L’expérimentation se déroule en plein champs.
Dispositif expérimental : Type « blocs complets à quatre répétitions ». Parcelle élémentaire de 10 plantes.
Itinéraire technique : plantation des godets le 15 avril 2022. Récolte le 30 juin 2022.
Modalités : Témoins (non traités), PP1 (pulvérisation foliaire)
Traitements : Pulvérisation foliaire - Six applications de PP1 , à une cadence de 14 jours. Méthode d’analyse : Analyse de variance avec un seuil de risque de 5%. Les notations présentant les mêmes lettres ne sont pas différentes significativement.
Résultats :
Tableau 22 : Incidence et sévérité sur feuilles de courgettes - 30 juin 2022
Figure imgf000026_0001
La sévérité et l’incidence ont été mesurées sur 20 feuilles prélevées de façon aléatoire, pour chaque modalité.
Tableau 23 : Incidence et sévérité sur courgettes (Fruits) - 30 juin 2022
Figure imgf000026_0002
La sévérité et l’incidence ont été mesurées sur 20 fruits prélevées de façon aléatoire, pour chaque modalité.
Les résultats montrent l’efficacité de PP1 contre le virus de la mosaïque jaune de la courgette ZYMV. En effet, les notations sur feuilles et sur fruits montrent que les plants traités ont significativement moins de symptômes que les plants témoins. La progression de la maladie est très ralentie par les traitements foliaires de PP1 . Huitième démonstration : Extrait de radis (« PP4 ») sur le virus de la mosaïque du rosier.
La mosaïque du rosier est une maladie virale qui affecte les rosiers (Rosa sp.). Elle est due à plusieurs virus des genres llarvirus et Nepovirus qui interviennent séparément ou plus souvent en combinaison, ce qui a conduit certains auteurs à parler de « complexe viral de la mosaïque du rosier ». Chez certains cultivars, ces virus peuvent provoquer une panachure des fleurs. D'autres cultivars infectés peuvent rester asymptomatiques.
La maladie n'est pas létale pour les rosiers, mais l'infection a pour effet de réduire la vigueur des plantes et de les affaiblir, si bien qu'elles sont plus vulnérables au stress de la transplantation ou aux blessures hivernales.
Cette maladie provoque des symptômes variés sur les feuilles : taches annulaires, lignes chlorotiques, filigranes, marbrures des feuilles, ainsi que des motifs en mosaïque jaune.
Les indices de la maladie sont les suivants : des motifs jaune vif en zigzag sur les feuilles, disposés symétriquement par rapport à la nervure principale ; les tâches jaunes à crème peuvent être diffus et dessiner une marbrure ; des brunissements localisés peuvent rappeler un dessèchement des feuilles.
Les extraits de radis sont obtenus selon le protocole illustré en figure 1 sous leur forme liquide non concentrée (extraits appelés « PP4 » par la suite).
L’expérimentation se déroule en serre chauffée.
Dispositif expérimental : Type « blocs complets à quatre répétitions ». Parcelle élémentaire de 10 plantes.
Itinéraire technique : expérimentation réalisée sur rosiers producteurs de roses, âgés de quatre ans. Six Applications, à une cadence de 14 jours.
Modalités : Témoins (non traités), PP4 (pulvérisation foliaire)
Méthode d’analyse : Analyse de variance avec un seuil de risque de 5%. Les notations présentant les mêmes lettres ne sont pas différentes significativement.
Résultats :
Tableau 24 : Incidence et sévérité sur feuilles - 30 juin 2022
Figure imgf000027_0001
La sévérité et l’incidence ont été mesurées sur 20 feuilles prélevées de façon aléatoire, pour chaque modalité.
Les résultats montrent l’efficacité de l’extrait contre le virus de la mosaïque du rosier. En effet, les notations sur feuilles et sur fruits montrent que les plants traités ont significativement moins de symptômes que les plants témoins. La progression de la maladie est très ralentie par les traitements foliaires de PP4.
La composition objet de la présente invention, appelée par la suite « CEI » (comprenant notamment PP1 à PP4) ne correspond pas à ce que la littérature décrit 1/ La composition CEI est extrait de feuilles, tiges, fleurs, graines et/ou racines, selon un mode d’extraction préférentiel, avec ou sans eau ajoutée, selon le procédé décrit en regard de la Figure 1 . Lors de l’utilisation en champs, la composition est préférentiellement diluée dans les réservoirs (tanks) de pulvérisation pour être pulvérisée au niveau foliaire (ou autres méthodes d’application décrites dans la description des utilisations)
2/ La composition CEI, obtenue dans ces conditions d’extraction, ne possède aucune activité antimicrobienne directe.
Dans le procédé de production de CEI, les feuilles, tiges, graines, racines et/ou fleurs font l’objet d’une extraction de composés, par une technique connue, par exemple par pressage, par ultrasons, et/ou par utilisation de solvants, notamment huileux ou aqueux.
Dans des modes de réalisation de ce procédé, des parties de plantes sont broyées et fortement dilué dans l'eau. Dans des modes de réalisation de ce procédé, des parties de plantes sont broyées sans ajout d'eau. Eventuellement, le broyât filtré est ensuite formulé sous forme de poudre, par nébulisation dans un courant d’air sec chaud ascendant, préférentiellement à une température inférieure à 60 °C. Eventuellement, l’extrait sous forme liquide est stérilisé par passage en haute température de durée très courte, selon des techniques connues.
La composition élicitrice objet de l’invention est notamment utilisée, par application, pour stimuler les défenses des plantes ou arbres et réduire les effets des virus, notamment les virus de la jaunisse de la betterave et de la mosaïque du concombre.
CEI agit en stimulant les défenses des plantes, et en permettant aux plantes traitées de se défendre elles-mêmes contre ces virus.
On peut définir CEI comme un éliciteur, étant donné que les molécules possédant la propriété d’induire au sein de la plante une cascade de réactions de défense contre les agents pathogènes sont nommés éliciteurs.
La démonstration de l’activité élicitrice des mécanismes de défense est également démontrée à plusieurs niveaux : La démonstration de la production de molécules de défenses, comme l’acide jasmonique, l’acide salicylique, ou encore les peroxydases, a été réalisée après traitement par CEI, en conditions d’infections sur la betterave (Beta vulgaris subsp. vulgaris)
CEI a la particularité de stimuler les défenses des plantes, et de permettre à celles-ci de réagir efficacement, et ce même dans le cas de virus invasifs, difficiles à combattre.
Comme illustré en figure 1 , dans un mode de réalisation, le procédé de fabrication et d’utilisation de la composition objet de la présente invention comporte une étape 105 d’extraction d’un extrait de dites plantes.
Dans des modes de réalisation préférentiels, l’extrait est obtenu à partir d’au moins une plante ne contenant pas de Methyl-isothiocyanate et/ou de Propenyl isothiocyanate.
L’inventeure a constaté que ces isothiocyanates pouvaient avoir des effets néfastes sur la croissance de la plante tout en réduisant les effets des virus.
Dans des modes de réalisation, l’extrait est obtenu à partir d’au moins une plante contenant au moins un butyl-isothiocyanate. L’inventeure a constaté que ces isothiocyanates ont des effets favorables sur la croissance de la plante tout en réduisant les effets des virus. Dans des modes de réalisation, l’extrait est obtenu à partir d’au moins une plante contenant de la 1 ,3-thiazépane-2-thione. L’inventeure a constaté que ce composé qui, du fait de sa structure, n’est pas un isothiocyanate a des effets favorables sur la croissance de la plante tout en réduisant les effets des virus.
Par exemple, cette extraction est effectuée selon la procédure suivante :
- Au cours d’une étape de broyage 110, les feuilles, les racines, les tiges, les graines et/ou les fleurs de dites plantes sont finement broyées avec de l’eau courante, pendant quinze minutes, dans un appareil mixeur approprié, afin d’obtenir un broyât homogène ;
- Au cours d’une étape de filtration 115, le broyât est filtré pour séparer les débris des organes exploités et obtenir un liquide vert sans résidu (le filtrat), qui est la base de la composition objet de l’invention ou la constitue.
Dans une variante, on n’ajoute pas d’eau avant le broyage des parties de plantes sources. Dans une variante, au moins un des principes actifs de la matière broyée est obtenu par extraction d’huile. Dans une variante, au moins un des principes actifs de la matière broyée est obtenu par extraction par solvant par extraction mécanique ou par micro-ondes, ou par extraction de tourteaux ou de pâtes. Dans une variante, au moins un des principes actifs est obtenu par extraction mécanique ou extraction au micro-onde.
En variante, l’étape d’extraction 105 comporte une étape de compression des feuilles, racines, tiges, graines ou fleurs de dites plantes et de collecte du liquide extrait, par simple gravité ou par centrifugation. En variante, une simple centrifugation est mise en oeuvre au cours de l’étape d’extraction 105, pour extraire le liquide des parties de dites plantes utilisées.
Comme exposé dans la description qui va suivre, l’inventeure a découvert que l’utilisation de cette composition a un effet significatif sur les arbres et plantes mentionnés ci-dessus infectés par les virus mentionnés ci-dessus. L’inventeure a, aussi, découvert que la composition élicitrice objet de l’invention a des effets biostimulants sur la croissance des plantes traitées sans constituer, aux doses utilisées, un engrais ni nourrir les plantes traitées.
Il est noté que la composition liquide obtenue à la fin de l’étape 105 peut-être formulée pour rendre plus facile son utilisation. Par exemple, il peut être utilisée sous forme de poudre, poudre soluble, poudre mouillable, granulés, granulés dispersibles, ou granulés mouillables ou à diffusion lente, à diluer dans l’eau au moment de l’utilisation, liquide, liquide concentré soluble, concentré émulsifiable, suspension concentrée, ou prête à l’emploi, en fonction de la formulation choisie et de l’utilisation envisagée ou infusé sur un substrat dispersé dans le sol de la culture. Les formulations sont réalisées à partir du produit de l’étape d’extraction 105 selon des techniques connues de l’homme du métier.
Des fractions actives peuvent potentiellement être purifiées, par quelque moyen que ce soit, pour faciliter la formulation. Différentes étapes d’extractions peuvent être ajoutées pour améliorer sa qualité. La composition objet de l’invention peut être diluée dans l’eau, en fonction de la dose requise, au moment de son utilisation. Au cours d’une étape 120 optionnelle, on retire des extraits volatils de l’extrait obtenu. Par exemple, cet extrait est transformé en poudre, par exemple par nébulisation et passage de l’extrait nébulisé dans un flux d’air chaud, préférentiellement ascendant.
En ce qui concerne l’utilisation, au cours de l’étape 125, le biostimulant est appliqué sous quelque forme que ce soit (formulation liquide, poudre, poudre soluble, granulés, granulés dispersibles, granulés à dispersion lente, et toutes formulations) selon les usages et la formulation envisagée. L’utilisation du biostimulant objet de l’invention, est préférentiellement réalisée par application foliaire ou vaporisation foliaire. D’autres modes d’utilisation du biostimulant objet de l’invention sont l’arrosage du sol, l’irrigation du sol, le goutte à goutte, les cultures en hydroponie, ou encore en traitement des semences et/ou enrobage de graines.
Préférentiellement, les feuilles et les fleurs des dites plantes représentent au moins 75 %, préférentiellement au moins 95 %, des parties des dites plantes sur lesquelles sont réalisées l’extraction, pourcentage en poids sec, par rapport au poids total de ces plantes.
La composition objet de l’invention peut être utilisée pour une application unique ou à une cadence comprise entre un jour et cent-vingt jours, ou en continu, ou selon les stades clefs du développement végétal, ou en accord avec les bonnes pratiques agricoles et le calendrier de traitements prévus pour chaque espèce végétale. La composition de la présente invention peut être mélangée avec d’autres produits (produits phytosanitaires, supports de cultures et matières fertilisantes, fertilisants, engrais, biocides, ou quelque autre produit destiné à l’agriculture).
Les doses d’application et les cadences d’application sont adaptées aux usages et aux modèles végétaux. Les doses d’application sont comprises, par exemple, entre 0,001 g/L et 2000 g/L de plantes extraites, préférentiellement comprise entre 2 g/L et 2000 g/L de plantes extraites et, plus préférentiellement, comprises entre 5 g/L et 200 g/L de plantes extraites, exprimé en grammes de plantes sur lesquelles a été réalisée l’extraction par litre de produit appliqué.
Les doses par litre ou par hectare pourront être adaptées aux types de plantes infectées, au niveau d’infection et au niveau des symptômes causés les virus. Les doses et les cadences de traitements avec la composition objet de l’invention seront également adaptées à la stratégie d’action préventive ou curative contre ces virus.
Concernant les plantes d’où sont tirés les extraits utilisés dans la présente invention, elles sont préférentiellement fraichement cueillies. Alternativement, les plantes ou les parties d’intérêt sont convenablement séchées, de manière connue de l’homme du métier. Le broyage peut être réalisé avec deux broyeurs qui sont utilisés avec des vitesses différentes de lames. Le premier broyât obtenu en 10 min de broyage est ensuite versé dans le second broyeur ayant une vitesse de lame plus rapide. Le broyât est homogène, sans résidu visible de partie de feuilles, de tiges, ou de fleurs. La quantité d’eau ajoutée lors du broyage est compris entre 0 et 200 mL d’eau, préférentiellement entre 20 et 150 mL d’eau, et, encore plus préférentiellement, entre 50 et 120 mL d’eau, à température ambiante pour 100 g de feuilles, tige, racine, fleur ou graine.
Deux filtrations successives sont réalisées, avec un tissu de filtration en nylon (Dutcher, marque déposée) 1000 pm puis 500 pm. La filtration est réalisée à température ambiante, sans pression. Pour la récupération du filtrat qui est actif, en fonction de la quantité à pulvériser, on adapte la dilution (dose à l’hectare). Selon les usages, entre 5 g de plantes extraites par litre de bouillie à pulvériser et 2000 g de plantes extraites par litre de bouillie à pulvériser, comme décrit en regard des exemples.
L’inventeure a constaté que le filtrat obtenu se conserve au moins six jours en bidon à la température ambiante, sans perdre son activité de stimulation des défenses des plantes et arbres.
L’extrait d’au moins une partie des dites plantes peut ainsi être un extrait liquide obtenu à partir d’un broyât desdites plantes, et :
- ledit extrait d’au moins une partie de plantes comprend au moins des feuilles des dites plantes, de préférence essentiellement des feuilles, et
- le procédé permettant d’obtenir ledit extrait liquide comprend les étapes suivantes : a) une étape de broyage en milieu aqueux desdites plantes ; b) la filtration du broyât obtenu ; et c) la récupération de l’extrait liquide obtenu après filtration.
Concernant la formulation sous forme de poudre, granulés, granulés dispersibles, ou granulés à diffusion lente, on met en oeuvre une température de séchage, et, dans des modes de réalisation, des enrobages des particules par d’autres molécules naturelles (préférentiellement très hydrophiles) qui permettent une très bonne dissolution dans l’eau. Les formulations sont des formulations classiques en agriculture, notamment pour les produits phytosanitaires, destinées à être transportées et stockées sous forme de poudre, etc... et être, juste avant application, diluée dans l’eau. La présente invention concerne l’utilisation d’une composition élicitrice comportant un extrait de plante obtenu comme exposé ci-dessus pour stimuler les défenses des plantes ou arbres et réduire les effets des virus sur ces plantes.
Dans des modes de réalisation, la composition élicitrice objet de l’invention comporte, de plus, au moins une des substances suivantes, obtenu par synthèse ou par extraction depuis des plantes, notamment les plantes citées ci-dessus :
- de la 1 ,3-thiazépane-2-thione, et/ou
- un brassinostéroïde.

Claims

REVENDICATIONS
1. Composition élicitrice stimulant des défenses des plantes ou arbres réduisant les effets d’une attaque d’un virus, caractérisée en ce qu’elle comporte un extrait d’au moins une partie d’au moins une des plantes suivantes :
- Roquettes, y compris des genres Eruca sativa, Diplotaxis, Erucastrum et Bunias,
- Cakile,
- plantes de l’espèce Brassica oleracea,
- plantes des genres Allium,
- moutarde (Sinapis alba, Brassica nigra, Sinapis arvensis, Brassica juncea),
- wasabi (Eutrema japonicum),
- raifort (Armoracia rusticana),
- cresson de fontaine (Nasturtium officinale),
- plantes de l’espèce Brassica rapa,
- Plantes de l’espèce Brassica ruvo,
- Plantes de l’espèce Brassica napus,
- Plantes de l’espèce Raphanus sativus,
- Plantes de l’espèce Barbarea verna,
- Plantes de l’espèce Erysimum allionii,
- Plantes de l’espèce Erysimum cheiri,
- Plantes de l’espèce Tropaeolum majus L,
- Plantes de l’espèce Alliaria petiolata,
- Plantes de l’espèce Salvadora persica,
- Plantes de l’espèce Carica papaya.
2. Composition élicitrice stimulant des défenses des plantes ou arbres selon la revendication 1 , dans laquelle l’extrait est obtenu à partir d’au moins une des plantes suivantes : Roquettes, y compris Eruca sativa, Diplotaxis, Erucastrum et Bunias, Cakile, brocoli, plantes des genres Allium (ail, oignon, échalote, poireau et ciboulette), chou commun, chou-fleur, chou de Bruxelles, chou frisé, moutarde, wasabi, cresson de fontaine, raifort, chou blanc, chou champêtre (Brassica rapa), y compris le chou pak choï, chou chinois et navet, chou-rave, chou cavalier, chou rouge, brocoli chinois, brocoli-rave, colza, radis, Siberian wallflower, giroflée, cresson indien, herbe à ail, arbre de pilu, papayer, notamment de son fruit.
3. Composition élicitrice stimulant des défenses des plantes ou arbres selon l’une des revendications 1 ou 2, dans laquelle l’extrait est obtenu à partir d’au moins une des plantes suivantes : Roquettes, y compris Eruca sativa, Diplotaxis, Erucastrum et Bunias, Cakile, brocoli, chou commun, chou-fleur, chou de Bruxelles, chou frisé, moutarde, cresson de fontaine, chou blanc, chou champêtre (Brassica rapa), y compris le chou pak choï, chou chinois et navet, chou- rave, chou cavalier, chou rouge, brocoli chinois, brocoli-rave, radis, et Siberian wallflower.
4. Composition élicitrice stimulant des défenses des plantes ou arbres selon l’une des revendications 1 à 3, dans laquelle l’extrait est obtenu à partir d’au moins une des plantes suivantes :
- Roquettes, y compris Eruca sativa, Diplotaxis, Erucastrum et Bunias,
- Cakile.
5. Composition élicitrice stimulant des défenses des plantes ou arbres selon l’une des revendications 1 à 3, dans laquelle l’extrait est obtenu à partir d’au moins une des plantes de l’espèce Brassica oleracea.
6. Composition élicitrice stimulant des défenses des plantes ou arbres selon l’une des revendications 1 à 5, dans laquelle l’extrait est obtenu à partir d’au moins une plante ne contenant pas de Methyl-isothiocyanate et/ou de Propenyl isothiocyanate.
7. Composition élicitrice stimulant des défenses des plantes ou arbres selon l’une des revendications 1 à 6, dans laquelle l’extrait est obtenu à partir d’au moins une plante contenant au moins un butyl-isothiocyanate.
8. Composition élicitrice stimulant des défenses des plantes ou arbres selon l’une des revendications 1 à 7, dans laquelle l’extrait est obtenu à partir d’au moins une plante contenant de la 1 ,3-thiazépane-2-thione.
9. Composition élicitrice stimulant des défenses des plantes ou arbres selon l’une des revendications 1 à 8, dans laquelle ledit extrait d’au moins une partie de plantes est un extrait obtenu à partir d’un broyât desdites plantes, et :
- ledit extrait d’au moins une partie de plantes comprend au moins des feuilles des dites plantes, de préférence essentiellement des feuilles et des fleurs, et
- le procédé permettant d’obtenir ledit extrait liquide comprend les étapes suivantes : a) une étape de broyage desdites plantes ; b) la filtration du broyât obtenu ; et c) la récupération de l’extrait liquide obtenu après filtration.
10. Composition élicitrice selon la revendication 9, l’extrait est obtenu par un procédé comportant, de plus, une étape de nébulisation de l’extrait liquide et de passage de l’extrait liquide nébulisé dans un flux d’air chaud.
11 . Procédé de réduction des effets des virus sur les plantes, y compris arbres, comportant une étape d’application de la composition élicitrice selon l’une des revendications 1 à 10.
12. Procédé selon la revendication 11 , de réduction des effets d’une attaque d’un des virus suivants :
- Les virus de la jaunisse de la betterave,
- Le virus de la mosaïque du tabac,
- Le virus de la mosaïque du manioc,
- Le virus Banana Bunchy Top Virus (BBTV),
- Le virus Banana streak virus (BSV),
- Le virus de la jaunisse nanisante de l’orge (JNO ou BYDV),
- Le virus de la mosaïque du concombre,
- Le virus de la mosaïque de la canne à sucre (SCMV),
- Les virus de la maladie de la nécrose léthale du maïs (MLN, MCMV, SCMV),
- La famille de virus Potyviridae,
- Le virus de la marbrure plumeuse de la patate douce (Potyvirus), ou SPFMV,
- Le virus du rabougrissement chlorotique de la patate douce (Crinivirus), ou SPCSV et SPVD,
- Le virus de la marbrure modérée de la patate douce, ou SPMMV,
- Le virus latent de la patate douce, ou SPLV,
- Le virus des tâches chlorotiques de la patate douce ou SPCFV,
- Le virus G de la patate douce, ou SPVG,
- Le virus de l’enroulement de la patate douce, ou SPLCV,
- Le virus du fruit rugueux brun de la tomate (ToBRFV),
- Le virus de la maladie bronzée de la tomate (« Tomato spotted wilt virus », TSWV),
- Le virus de la mosaïque de la tomate (Tomato mosaic virus, ToMV),
- Le virus de la mosaïque jaune de la courgette (« Zucchini yellow mosaic virus », ou ZYMV),
- le virus de la mosaïque du rosier.
13. Procédé selon la revendication 11 , de réduction des effets d’une attaque d’au moins un des virus de la jaunisse de la betterave.
14. Procédé selon la revendication 11 , de réduction des effets d’une attaque d’au moins un des virus de la mosaïque du concombre.
15. Procédé selon l’une des revendications 11 à 14, dans lequel l’application de la composition élicitrice est une application foliaire sur les plantes.
16. Utilisation de la composition élicitrice selon l’une des revendications 1 à 10, pour réduire, sur les plantes, y compris arbres, des effets d’une attaque d’un des virus suivants :
- Les virus de la jaunisse de la betterave,
- Le virus de la mosaïque du tabac,
- Le virus de la mosaïque du manioc, - Le virus Banana Bunchy Top Virus (BBTV),
- Le virus Banana streak virus (BSV),
- Le virus de la jaunisse nanisante de l’orge (JNO ou BYDV),
- Le virus de la mosaïque du concombre,
- Le virus de la mosaïque de la canne à sucre (SCMV),
- Les virus de la maladie de la nécrose léthale du maïs (MLN, MCMV, SCMV),
- La famille de virus Potyviridae,
- Le virus de la marbrure plumeuse de la patate douce (Potyvirus), ou SPFMV,
- Le virus du rabougrissement chlorotique de la patate douce (Crinivirus), ou SPCSV et SPVD,
- Le virus de la marbrure modérée de la patate douce, ou SPMMV,
- Le virus latent de la patate douce, ou SPLV,
- Le virus des tâches chlorotiques de la patate douce ou SPCFV,
- Le virus G de la patate douce, ou SPVG,
- Le virus de l’enroulement de la patate douce, ou SPLCV,
- Le virus du fruit rugueux brun de la tomate (ToBRFV),
- Le virus de la maladie bronzée de la tomate (« Tomato spotted wilt virus », TSWV),
- Le virus de la mosaïque de la tomate (Tomato mosaic virus, ToMV),
- Le virus de la mosaïque jaune de la courgette (« Zucchini yellow mosaic virus », ou ZYMV),
- Le virus de la mosaïque du rosier.
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