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WO2023047708A1 - 抗老化剤、化粧品、おしぼり及び衛生用品 - Google Patents

抗老化剤、化粧品、おしぼり及び衛生用品 Download PDF

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WO2023047708A1
WO2023047708A1 PCT/JP2022/022408 JP2022022408W WO2023047708A1 WO 2023047708 A1 WO2023047708 A1 WO 2023047708A1 JP 2022022408 W JP2022022408 W JP 2022022408W WO 2023047708 A1 WO2023047708 A1 WO 2023047708A1
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Definitions

  • the present invention relates to anti-aging agents, cosmetics, wet towels and sanitary products.
  • Glycation reaction, oxidation reaction, and chronic inflammatory reaction have been pointed out as the three major aging reactions of the living body. Accumulation of reactive oxygen species (ROS) resulting from these reactions is known to be the causative agent of various aging effects. . The same is true for skin cells, and it is believed that suppression of oxidation and glycation is effective in suppressing the occurrence of wrinkles, spots, dullness, and sagging.
  • ROS reactive oxygen species
  • Glycation is a non-enzymatic chemical reaction of amino acid residues in various proteins to produce advanced glycation end products (AGEs).
  • AGEs play an important role in aging throughout the organism and are involved in a wide variety of diseases. For example, AGE concentrations in skin collagen increase with age and are higher in diabetic patients than in age-matched healthy individuals. Furthermore, intracellular AGE formation and accumulation are known to be involved in skin aging, Alzheimer's disease, hypertension, arteriosclerosis and osteoporosis.
  • AGE receptors activate intracellular signaling pathways, are particularly linked to inflammation, and are involved in ROS accumulation and AGE degradation/removal. In order to prevent or delay cellular senescence, it is required to suppress the former activity and promote the latter activity.
  • the former AGE receptors include RAGE, AGE-R2 and the like, and the latter AGE receptors include FEEL-1, FEEL-2, AGE-R1, AGE-R3, CD36 and the like.
  • Non-Patent Document 1 and 2 Suppressing ROS accumulation and activating antioxidants such as superoxide dismutase (SOD) are important for suppressing aging.
  • SOD superoxide dismutase
  • AQP-1,-3 a water permeable protein present on the surface of cell membranes, are involved in skin moisturization and anti-aging. It has also been shown that AQP-1,-3 is decreased by oxidative stress (eg, Non-Patent Document 3). Elastin is a core protein of elastic fibers, is considered to be the cause of wrinkle formation, and is deeply involved in skin regeneration.
  • Hsp heat shock proteins
  • PM compounds polyoxometalates
  • An object of the present invention is to provide an anti-aging agent using a polyacid compound and cosmetics containing this anti-aging agent, and to provide wet towels and sanitary products containing this cosmetic.
  • an anti - aging agent comprising K11H [(VO) 3 ( SbW9O33 ) 2 ] and/or Na9 [ SbW9O33 ] ; (2) the anti-aging agent according to (1) having an anti-glycation effect; (3) the anti-aging agent according to (2), which promotes the expression of at least one of FEEL-1, FEEL-2, CD36, AGE-R1 and AGE-R3; (4) the anti-aging agent according to (2), which promotes the expression of at least one of Hsp104, gp96, Hsp90, Hsp70, Hsp60 and Hsp32; (5) The anti-aging agent according to (1), which has an anti-oxidative stress effect, (6) The anti-aging agent according to (1) having skin moisturizing action, (7) The anti-aging agent according to (6), which has a skin moisturizing action by at least one of AQP-1 expression, AQP-3 expression, hyaluronic acid secreti
  • an anti-aging agent using a polyacid compound and cosmetics containing this anti-aging agent. Further, according to the present invention, it is possible to provide wet towels and sanitary products containing this cosmetic product.
  • 1 is a graph showing the expression of AGE receptors in the study of antiglycation activity in Examples. 1 is a graph showing the expression of heat shock proteins in the study of anti-glycation activity in Examples. 1 is a graph showing the measurement results of ROS in the study of anti-glycation activity in Examples. 1 is a graph showing the measurement results of SOD in the study of anti-glycation activity in Examples. 1 is a graph showing the measurement results of cell viability in the study of antioxidant activity in Examples. 4 is a graph showing the results of ROS measurement in the examination of antioxidant activity in Examples. 4 is a graph showing the results of SOD measurement in the examination of antioxidant activity in Examples. 1 is a graph showing AQP-1 mRNA levels in the study of antioxidant activity in Examples.
  • 1 is a graph showing the mRNA level of AQP-3 in the examination of antioxidant activity in Examples. 1 is a graph showing the amount of hyaluronic acid produced in the examination of antioxidant activity in Examples. 1 is a graph showing the amount of elastin produced in the examination of antioxidant activity in Examples.
  • the anti-aging agent of the present invention is described below.
  • the anti-aging agent of the present invention comprises K 11 H[(VO) 3 (SbW 9 O 33 ) 2 ] and/or Na 9 [SbW 9 O 33 ].
  • K 11 H[(VO) 3 (SbW 9 O 33 ) 2 ] (hereinafter sometimes referred to as VB2) and Na 9 [SbW 9 O 33 ] (hereinafter sometimes referred to as VB3) are polyoxometalates (PM It is a compound belonging to the metal oxide cluster called polyacid compounds.
  • the PM compound is a metal oxide cluster compound having polyacid ions, and each compound belonging to the PM compound is described in the Royal Society of Chemistry, Journal of Materials Chemistry, Vol. 15, pp. 4773-4782, 2005. As described, each has unique biological activities, such as antibacterial and antiviral activities.
  • the polyacid compound refers to a metal oxide cluster compound composed of transition metal elements (W (VI), V (V), etc.), and oxygen atoms are usually 4 or 6 coordinated to metal atoms. It has a structure in which tetrahedrons or octahedrons are used as basic units and these basic units are linked via edges or vertices.
  • the polyacid compounds used in the present invention are K 11 H[(VO) 3 (SbW 9 O 33 ) 2 ] and Na 9 [SbW 9 O 33 ], which may be used alone, You may use what prescribed two types at a predetermined ratio.
  • the compounding ratio when two types are prescribed at a predetermined ratio is not particularly limited, but Na 9 [SbW 9 O 33 ] is It is preferably 0.1 to 30 mol, more preferably 10 to 20 mol. Further, it is particularly preferable to use 17.3 mol of Na 9 [SbW 9 O 33 ] per 1 mol of K 11 H[(VO) 3 (SbW 9 O 33 ) 2 ].
  • VOSO 4 may be used in addition to K 11 H[(VO) 3 (SbW 9 O 33 ) 2 ] and Na 9 [SbW 9 O 33 ] as metal oxides.
  • VOSO4 is a vanadium compound characterized by the diatomic ion VO2 + . As for physiological activity, it is described in International Publication No. 99/17782 and the like that it has a blood sugar lowering effect.
  • VOSO 4 it is preferable to use 0.1 to 20 mol, and 4 to 8 mol, of VOSO 4 per 1 mol of K 11 H[(VO) 3 (SbW 9 O 33 ) 2 ]. It is more preferable to use Moreover, it is particularly preferable to use 5.5 mol of VOSO 4 per 1 mol of K 11 H[(VO) 3 (SbW 9 O 33 ) 2 ].
  • the use of the anti-aging agent of the present invention is not particularly limited, it can be blended in cosmetics, for example.
  • cosmetics include lotions, milky lotions, facial cleansers, cleansers, serums, creams, foundations, eyebrows, mascara, eyeshadows, eyeliners, lipsticks, glosses, cheeks, face powders, and nail polishes.
  • form of cosmetics liquid, cream, solid, stick, powder and other forms can be adopted.
  • Cosmetics can be produced by mixing and stirring optional components selected from cosmetic raw materials such as chelating agents, antioxidants, thickeners, and pH adjusters.
  • Moisturizers include fulvic acid, hyaluronic acid, royal jelly, glycerin, and soybean extract.
  • the fragrance is not particularly limited, but examples thereof include fragrance ingredients having fragrances such as citrus, peppermint, lavender, kuromoji, magnolia magnolia, cypress, cedar, and fir. can be used.
  • the proportion of the anti-aging agent blended in the cosmetic can be appropriately adjusted according to the purpose of use, but the proportion of the anti-aging agent blended in the cosmetic is preferably 0.0001 to 80% by weight. , more preferably 0.003 to 50% by weight, more preferably 0.005 to 30% by weight.
  • the above cosmetics may be contained in known wet towels such as paper wet towels, non-woven wet towels, and cloth wet towels.
  • a towel can be used as the cloth towel, and cotton or the like is used as the material of the towel.
  • sanitary goods such as hand soap and hand wash.
  • Cell culture Human dermal fibroblasts (Normal Human Dermal Fibroblasts (NHDF), juvenile foreskin (C-12300, PromoCell) were grown at 37°C in a 5% CO 2 incubator using a dedicated medium, Fibroblast Growth Medium (C-23010, PromoCell). cultured.
  • NHDF Normal Human Dermal Fibroblasts
  • C-12300 juvenile foreskin
  • human skin fibroblasts were not treated with AGE, and the above VB2 and VB3 diluted to exactly 1/1000 were added and kept at 37°C for 4 hours.
  • human skin fibroblasts were treated with AGE and kept at 37° C. for 4 hours without adding VB2 or VB3.
  • human dermal fibroblasts were not treated with AGEs and were kept at 37° C. for 4 hours without addition of VB2 or VB3.
  • Trizol reagent Ambion
  • AGE receptors FEEL-1, FEEL-2, CD- 36, AGE-R1, AGE-R2, AGE-R3 and RAGE
  • Hsp104, gp96, Hsp90, Hsp70, Hsp60 and Hsp32 heat shock proteins
  • Fig. 1 shows the measurement results for AGE receptors
  • Fig. 2 shows the measurement results for heat shock proteins.
  • samples added with VB2 and VB3 are shown as VB2(+) AGE and VB3(+) AGE, respectively, and these values are compared with the AGE single stimulation group. showed that.
  • samples added with VB2 and VB3 are shown as VB2 alone and VB3 alone, respectively, and these values are shown in comparison with the untreated group.
  • Hsp heat shock protein
  • human dermal fibroblasts were not treated with AGE and were kept at 37°C for 4 hours without the addition of VB2 or VB3.
  • Human dermal fibroblasts treated with AGE 100 ⁇ g/mL and kept at 37° C. for 4 hours without adding VB2 or VB3 (denoted as “AGE” in FIGS. 3 and 4). also took measurements.
  • Intracellular ROS was measured using fluorescence using dichlorofluorescin diacetate (DCF-DA; Invitrogen, Carlsbad, CA, USA). Specifically, after washing the cells with PBS, 10 ⁇ M DCF-DA was incubated at 37° C. for 20 minutes. Intracellular ROS levels were measured at an excitation wavelength of 525 nm using fluorescence intensity using the microplate reader (SYNERGY/HT, BioTek, Japan). The results are shown in FIG. FIG. 3 shows the results of each sample when Control is 100%.
  • DCF-DA dichlorofluorescin diacetate
  • SOD superoxide
  • FIG. 5 which is a graph showing the results
  • the samples to which VB2 or VB3 was added after the addition of hydrogen peroxide are denoted as “H2O2-VB2” and “H2O2-VB3.”
  • the samples to which hydrogen was added are indicated as “VB2-H2O2” and “VB3-H2O2", respectively.
  • VB2 and VB3 were added at concentrations of 1 ⁇ g/mL, 10 ⁇ g/mL, 100 ⁇ g/mL and 300 ⁇ g/mL, respectively.
  • human skin fibroblasts without hydrogen peroxide, VB2, or VB3 were treated in the same manner as above and measured as a control.
  • a sample to which no VB2 or VB3 was added (denoted as "H2O2" in FIG. 5) was also processed and measured in the same manner as above.
  • the cell counting-8 kit (DOJINDO:, Japan) was used to measure the number of viable cells in human skin fibroblasts. It was expressed as a survival ratio (% of Control) by colorimetry (450 nm) with control cells. The results are shown in FIG.
  • the cell survival rate was 59% when human skin fibroblasts were subjected to oxidative stress with 0.2 mM hydrogen peroxide.
  • VB2 or VB3 was added after the same oxidative stress, the cell viability increased in a concentration-dependent manner, with a maximum viability of 76% for VB2 at 300 ⁇ g/mL and 78% for VB3 at 300 ⁇ g/mL. rice field.
  • the survival rate of cells to which VB2 or VB3 had been added in advance was significantly increased in a dose-dependent manner when similar oxidative stress was subsequently applied.
  • Figures 6 and 7 show the measurement results of intracellular ROS and superoxide (SOD), respectively. 6 and 7 show the results of each sample when Control is 100%.
  • AQP-1 and AQP-3 were measured by qRT-PCR, and the measurement results were obtained by the ⁇ Ct method.
  • the results for AQP-1 are shown in FIG. 8, and the results for AQP-3 are shown in FIG.
  • the qRT-PCR method is specifically described in the "qRT-PCR method" below.
  • Quantitative PCR was used to measure the mRNA levels of AQP-1 and AQP-3, which are factors involved in skin moisturization. It was found that the mRNA levels of AQP-1 and AQP-3 expressed in It was confirmed that this decrease was repaired by adding VB2 or VB3 before or after oxidative stress was applied, ie a phenomenon in which the mRNA levels of AQP-1 and AQP-3 were increased. The repair ability was observed in VB2 or VB3 regardless of whether VB2 or VB3 was added before or after the application of oxidative stress.
  • the group to which VB2 or VB3 was added prior to the application of oxidative stress tended to have stronger repair ability than the group to which VB2 or VB3 was added after the application of oxidative stress. Also, no significant difference was observed between VB2 and VB3.
  • the amount of hyaluronic acid and elastin produced was measured by the ELISA method.
  • the results of measuring the amount of hyaluronic acid secreted into the culture supernatant from human skin fibroblasts by ELISA are shown in FIG. 10, and the results of measuring the amount of intracellular elastin produced by ELISA are shown in FIG.
  • the results are shown in terms of hyaluronic acid concentration in FIG. 10, and in terms of the ratio to the control value in FIG.
  • the amount of hyaluronic acid decreased to about half of the control due to the application of oxidative stress, but the amount of hyaluronic acid tended to recover by adding VB2 or VB3.
  • the group to which VB2 or VB3 was added prior to the application of oxidative stress tended to have stronger repair ability than the group to which VB2 or VB3 was added after the application of oxidative stress. No significant difference was observed between VB2 and VB3.
  • the amount of elastin produced was suppressed to 56% of the control by applying oxidative stress.
  • Addition of VB2 or VB3 after oxidative stress could not restore the suppressed elastin production.
  • pre-addition of VB2 or VB3 prior to application of oxidative stress significantly restored elastin production.
  • VB2, 100 ⁇ g/mL or higher, and VB3, 300 ⁇ g/mL showed significantly higher yields than the control.
  • qRT-PCR method The qRT-PCR method used to measure the above AGE receptors, heat shock proteins, aquaporins, hyaluronic acid and elastin will be explained.
  • 500 ng of the obtained total RNA is used as a template for PCR, cDNA synthesis by reverse transcription reaction (RT reaction) and quantitative PCR can be performed in one test tube.
  • PCR was performed using the Luna Universal One-Step qRT-PCR Kit.
  • the PCR device used was Takara's Thermal Cycler Dice Real Time System II.
  • As one reaction system Luna Universal One-Step Reaction Mix (2x) 10 ⁇ L, Luna WarmStart RT Enzyme Mix (20x) 1 ⁇ L, Forward primer (10 ⁇ M) 0.8 ⁇ L, Reverse primer, 0.8 ⁇ L and Total RNA as a template for the above PCR and adjusted to 20 ⁇ L with Nuclease-free Water.
  • the reaction was carried out under the conditions of 1 cycle of 30 seconds at 95°C and 50 cycles of 5 seconds at 95°C and 30 seconds at 60°C. A 4-fold or more change in mRNA expression (2 cycles for PCR reaction) was determined as a significant difference.
  • C-terminal truncated RAGE C-RAGE
  • N-terminal truncated RAGE N-RAGE
  • Hsp that is expressed and protects cells when cells are stressed by heat, ultraviolet rays, active oxygen, etc.
  • Hsp104 has been shown to restore aggregated proteins
  • gp96 is involved in intracellular antigen presentation
  • Hsp90 targets only select proteins and assists maturation
  • Hsp70 regulates protein folding, trafficking and degradation. to control quality.
  • Hsp60 is involved in protein folding maintenance in mitochondria and membrane permeation of proteins to mitochondria, etc.
  • Hsp32 is involved in heme degradation, and heme degradation products have antioxidant effects.
  • Both VB2 and VB3 were shown to induce Hsps that maintain intracellular protein quality in AGE-stressed cells.
  • Fibroblasts are known to play a role in moisturizing the epidermis, and the presence of aquaporins, receptors involved in the influx of water molecules into the cells, has attracted attention.
  • fibroblasts express AQP-1 and AQP-3.
  • hyaluronic acid secreted from cells is effective in moisturizing the skin.
  • oxidative stress actually decreased both the mRNA expression of AQP-1 and AQP-3 and the secretion of hyaluronic acid.
  • Addition of VB2 or VB3 improved both AQP-1 and AQP-3 mRNA levels and hyaluronic acid secretion. The ameliorative effect was stronger when VB2 or VB3 existed before oxidative stress was applied.
  • hyaluronic acid In humans, half of hyaluronic acid exists in the skin. While hyaluronic acid is reduced from the epidermis due to aging, hyaluronic acid still remains in the dermis, which leads to age-related loss of moisture, loss of elasticity, and atrophy of the skin. Using VB2 or VB3 has been shown to restore lost hyaluronic acid.
  • VB2 and VB3 which are polyacid compounds that have been reported to have antibacterial and antiviral activities, are pleiotropic, and almost It also exhibited anti-glycation and antioxidant effects. Addition of VB2 or VB3 alone to cells did not alter various parameters. This indicated that both VB2 and VB3 are useful as skin anti-aging agents.

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Abstract

Ｋ１１Ｈ［（ＶＯ）３（ＳｂＷ９Ｏ３３）２］および／またはＮａ９［ＳｂＷ９Ｏ３３］を含む抗老化剤。

Description

抗老化剤、化粧品、おしぼり及び衛生用品
　本発明は、抗老化剤、化粧品、おしぼり及び衛生用品に関するものである。
　生体の三大老化反応として、糖化反応、酸化反応、慢性炎症反応が指摘される中、これらの反応の結果生じる活性酸素種（ROS）の蓄積が種々の老化作用の原因物質として知られている。それは肌細胞も同様で、酸化、糖化の抑制によりシワ、シミ、くすみ、たるみなどの発生の抑制に功奏すると考えられている。
　糖化反応は、種々のタンパク質中のアミノ酸残基の非酵素的化学反応であり、高度な糖化最終産物(AGE)を生成する。AGEは、生物体全体の老化において重要な役割を果たし、広範な種々の疾患に関与する。例えば、皮膚コラーゲン中のAGE濃度は加齢とともに増加し、同年齢の健常人よりも糖尿病患者で高い。さらに、細胞内のAGEの形成および蓄積は、皮膚老化、アルツハイマー病、高血圧、動脈硬化および骨粗鬆症に関与することが知られている。
　AGEの受容体としては、細胞内シグナル経路を活性化し、特に炎症に結びつき、ROSの蓄積に関わるものと、AGEの分解・除去に関わるものがある。細胞老化を防ぐ、または遅らせるためには、前者の働きを抑え、後者の働きを促進することが求められる。前者のAGE受容体としては、RAGE、AGE-R2等が挙げられ、後者のAGE受容体としては、FEEL-1、FEEL-2、AGE-R1、AGE-R3、CD36等が挙げられる。
　酸化ストレスとして過酸化水素暴露などで生成されるROSによるDNA, タンパク質、脂質の損傷は、老化の促進や老年疾患の発症、重篤化において重要な役割を果たしている（例えば、非特許文献１および２）。ROSの蓄積を抑制しSuperoxide dismutase (SOD)などの抗酸化物質を活性化することが老化を抑制するためには重要である。
　皮膚の保湿や抗老化において、線維芽細胞の活性化に伴うヒアルロン酸分泌の上昇、Elastinの生成や細胞膜表面に存在する水分子透過タンパク、アクアポリン(AQP)-1,-3が関係していることが示されており、酸化ストレスによってAQP-1,-3が減少することも明らかとなった（例えば、非特許文献３）。
　Elastinは、弾性繊維のコアタンパク質であり、しわ形成の原因とされ、皮膚の再生に深く関わっている。
　また、近年、細胞が熱や紫外線、活性酸素等からストレスを受けた際に発現し、細胞を保護するタンパク質であるヒートショックプロテイン（Ｈｓｐ）が注目され、ヒートショックプロテインの発現誘導剤が提案されている（例えば、特許文献１参照）。
　また、金属酸化物の一種で、多彩な構造体を形成するポリ酸化合物（Polyoxometalates; PM化合物）は、これまでに数百種類が合成されており、抗腫瘍活性や、抗ウイルス活性、あるいは抗菌活性を有するものが見出されている。しかし、ポリ酸化合物のROS等に対する有用性や、その他の物質に対する汎用性についての知見は得られていなかった。
国際公開第２０１２／０４３８０８号
Kawanishi S, Hiraku Y, and Oikawa S. Mechanism of guanine-specific DNA damage by oxidative stress and its role in carcinogenesis and aging. Mutat Res, 488:65-76, 2001 Saxena S, Vekaria H, Sullivan PG, and Seifert AW. Connective tissue fibroblasts from highly regenerative mammals are refractory to ROS-induced cellular senescence. Nat Commun. 27;10(1):4400, 2019 Xu Y, Yao H, Wang Q, Xu W, Liu K, Zhang J, Zhao H, Hou G. Aquaporin-3 Attenuates Oxidative Stress-Induced Nucleus Pulposus Cell Apoptosis Through Regulating the P38 MAPK Pathway. Cell Physiol Biochem. 50(5):1687-1697, 2018
　本発明の目的は、ポリ酸化合物を用いた抗老化剤およびこの抗老化剤を含む化粧品を提供すること、また、この化粧品を含むおしぼり及び衛生用品を提供することである。
　本発明者らは鋭意検討の結果、所定のポリ酸化合物を用いることにより上記目的が達成されることを見出し、本発明の完成に至った。
　すなわち、本発明によれば、
（１）　Ｋ１１Ｈ［（ＶＯ）３（ＳｂＷ９Ｏ３３）２］および／またはＮａ９［ＳｂＷ９Ｏ３３］を含む抗老化剤、
（２）　抗糖化作用を有する（１）記載の抗老化剤、
（３）　FEEL-1、FEEL-2、CD36、AGE-R1およびAGE-R3のうちの少なくとも１種の発現を促進させる（２）記載の抗老化剤、
（４）　Hsp104、gp96、Hsp90、Hsp70、Hsp60およびHsp32のうちの少なくとも１種の発現を促進させる（２）記載の抗老化剤、
（５）　抗酸化ストレス作用を有する（１）記載の抗老化剤、
（６）　皮膚の保湿作用を有する（１）記載の抗老化剤、
（７）　AQP-1の発現、AQP-3の発現、ヒアルロン酸の分泌、およびElastinの生成のうちの少なくとも１つにより前記皮膚の保湿作用を有する（６）記載の抗老化剤、
（８）　（１）～（７）の何れかに記載の抗老化剤を配合させた化粧品、
（９）　（８）記載の化粧品を含有させたおしぼり、
（１０）　（８）記載の化粧品を含有させた衛生用品
が提供される。
　本発明によれば、ポリ酸化合物を用いた抗老化剤およびこの抗老化剤を含む化粧品を提供することができる。また、本発明によれば、この化粧品を含むおしぼり及び衛生用品を提供することができる。
実施例の抗糖化作用の検討におけるAGE受容体の発現を示すグラフである。 実施例の抗糖化作用の検討におけるヒートショックプロテインの発現を示すグラフである。 実施例の抗糖化作用の検討におけるROSの測定結果を示すグラフである。 実施例の抗糖化作用の検討におけるSODの測定結果を示すグラフである。 実施例の抗酸化作用の検討における細胞生存率の測定結果を示すグラフである。 実施例の抗酸化作用の検討におけるROSの測定結果を示すグラフである。 実施例の抗酸化作用の検討におけるSODの測定結果を示すグラフである。 実施例の抗酸化作用の検討におけるAQP-1のmRNAレベルを示すグラフである。 実施例の抗酸化作用の検討におけるAQP-3のmRNAレベルを示すグラフである。 実施例の抗酸化作用の検討におけるヒアルロン酸の生成量を示すグラフである。 実施例の抗酸化作用の検討におけるElastinの生成量を示すグラフである。
　以下、本発明の抗老化剤について説明する。本発明の抗老化剤は、Ｋ１１Ｈ［（ＶＯ）３（ＳｂＷ９Ｏ３３）２］および／またはＮａ９［ＳｂＷ９Ｏ３３］を含む。
　Ｋ１１Ｈ［（ＶＯ）３（ＳｂＷ９Ｏ３３）２］（以下、VB2ということがある。）およびＮａ９［ＳｂＷ９Ｏ３３］（以下、VB3ということがある。）は、polyoxometalates（ＰＭ化合物、ポリ酸化合物）と呼ばれる金属酸化物クラスターに属する化合物である。ここで、ＰＭ化合物は、ポリ酸イオンを有する金属酸化物クラスター化合物であり、ＰＭ化合物に属する各化合物は、Journal of Materials Chemistry、１５巻、４７７３－４７８２ページ、２００５年、英国王立化学会に記載されているように抗菌活性や抗ウイルス活性など、それぞれに特有の生物活性を有する。なお、ポリ酸化合物とは、遷移金属元素（Ｗ（ＶＩ）、Ｖ（Ｖ）など）によって構成される金属酸化物クラスター化合物をいい、金属原子などに酸素原子が、通常４又は６配位した四面体又は八面体を基本単位として、この基本単位が稜又は頂点を介して結合した構造を有するものである。
　ここで、本発明において用いるポリ酸化合物は、Ｋ１１Ｈ［（ＶＯ）３（ＳｂＷ９Ｏ３３）２］、Ｎａ９［ＳｂＷ９Ｏ３３］であり、これらは単独で用いてもよいし、２種類を所定の割合で処方したものを用いてもよい。２種類を所定の割合で処方する場合の配合比は、特に制限されないが、Ｋ１１Ｈ［（ＶＯ）３（ＳｂＷ９Ｏ３３）２］　１モルに対し、Ｎａ９［ＳｂＷ９Ｏ３３］は好ましくは０．１～３０モル、より好ましくは１０～２０モルである。また、Ｋ１１Ｈ［（ＶＯ）３（ＳｂＷ９Ｏ３３）２］　１モルに対し、Ｎａ９［ＳｂＷ９Ｏ３３］を１７．３モル用いることが特に好ましい。
　また、本発明において、金属酸化物として、Ｋ１１Ｈ［（ＶＯ）３（ＳｂＷ９Ｏ３３）２］およびＮａ９［ＳｂＷ９Ｏ３３］に加えて、ＶＯＳＯ４を用いてもよい。ＶＯＳＯ４は、二原子イオンＶＯ２＋を特徴とするバナジウム化合物である。なお、生理活性としては、国際公開第９９／１７７８２号等に血糖値降下作用を有する旨が記載されている。ここで、ＶＯＳＯ４を用いる場合には、Ｋ１１Ｈ［（ＶＯ）３（ＳｂＷ９Ｏ３３）２］　１モルに対し、ＶＯＳＯ４を０．１～２０モル用いることが好ましく、４～８モル用いることがより好ましい。また、Ｋ１１Ｈ［（ＶＯ）３（ＳｂＷ９Ｏ３３）２］　１モルに対し、ＶＯＳＯ４を５．５モル用いることが特に好ましい。
　また、本発明の抗老化剤の用途は特に限定されないが、例えば、化粧品に配合することができる。化粧品としては、化粧水、乳液、洗顔料、クレンジング、美容液、クリーム、ファンデーション、アイブロー、マスカラ、アイシャドウ、アイライン、口紅、グロス、チーク、白粉、マニキュア等が挙げられる。また、化粧品の形態としては、液体、クリーム、固体、スティック、粉末等の形態を採用することができる。
　化粧品の製造方法は特に限定されないが、例えば、ポリ酸の水溶液に水、アルコール類、油剤、保湿剤、美白剤、紫外線防止剤、抗しわ剤、ピーリング剤、香料、着色料、界面活性剤、キレート剤、酸化防止剤、増粘剤、ｐＨ調整剤等の化粧品原料から選ばれる任意の成分を混合・撹拌することにより化粧品を製造することができる。
　保湿剤としてはフルボ酸、ヒアルロン酸、ローヤルゼリー、グリセリン、ダイズエキス等が挙げられる。また、香料としては、特に限定されないが、たとえば、シトラス、ペパーミント、ラベンダー、クロモジ、ニオイコブシ、ヒノキ、スギ、モミ等の香りを有する香料成分が挙げることができ、これらの香りを有するアロマオイル等を用いることができる。
　上記化粧品中に配合される抗老化剤の割合は、使用目的に応じて適宜調整することができるが、上記化粧品中に配合される抗老化剤の割合は、好ましくは０．０００１～８０重量％、より好ましくは０．００３～５０重量％、さらに好ましくは０．００５～３０重量％である。
　また、上記の化粧品を紙製おしぼり、不織布製おしぼりおよび布製おしぼりなど公知のおしぼりに含有させてもよい。布製おしぼりとしては、たとえば、タオルを用いることができ、タオルの素材としては、綿等が用いられる。また、ハンドソープや手指洗浄液等の衛生用品に含有させてもよい。
　以下に、実施例を挙げて本発明を説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。なお、本実施例における部および％は、特記しない限り重量基準である。また、測定結果の統計的有意性はｔ検定により判断し、Ｐ＜0.05である場合に、２群の差に統計学的な有意性があると判断した。
　（ポリ酸化合物の準備）
　Ｋ１１Ｈ［（ＶＯ）３（ＳｂＷ９Ｏ３３）２］（以下、VB2ということがある。）およびＮａ９［ＳｂＷ９Ｏ３３］（以下、VB3ということがある。）の原末をそれぞれ合成した。得られた原末を乳鉢ですりつぶし、超純水に溶解し、フィルター（ポアサイズ0.45μm）を通過させ、VB2およびVB3の水溶液をそれぞれ得た。ここで、得られた水溶液の濃度は、VB2水溶液が115μg/mLであり、VB3水溶液が1000μg/mLであった。
　（試薬）
　ＤＬ－グリセルアルデヒドおよび過酸化水素は、和光純薬工業株式会社より購入し、ウシ血清由来アルブミン（フラクションV）は、シグマアルドリッチ社から購入した。
　（AGEの準備）
　ウシ血清由来アルブミン（25mg/mL）をDL－グリセルアルデヒドに溶解させ０．１Mとしたリン酸緩衝生理食塩水（pH 7.4；以下、「PBS」ということがある。）中で３７℃、１週間培養することによりAGEを得た。
　（細胞の培養）
　ヒト皮膚線維芽細胞（Normal Human Dermal Fibroblasts (NHDF), juvenile foreskin (C-12300, PromoCell)は、専用培地、Fibroblast Growth Medium（C-23010, PromoCell）を用いて３７℃、５％ＣＯ２インキュベーターで培養した。
　＜抗糖化作用の検討＞
　（ＡＧＥ受容体およびヒートショックプロテインの発現の測定）
　まず、VBとAGEの共存群として、ヒト皮膚線維芽細胞をAGE（100μg/mL）で処理し、正確に1/1000量に希釈した上記のVB2（希釈後の濃度：115ng/mL）およびVB3（希釈後の濃度：1000ng/mL）をそれぞれ添加して37℃にて4時間保持した。
　また、VB単独刺激群として、ヒト皮膚線維芽細胞に対してAGEによる処理を行わず、正確に1/1000量に希釈した上記のVB2およびVB3をそれぞれ添加して37℃にて4時間保持した。さらに、AGE単独刺激群として、ヒト皮膚線維芽細胞をAGEで処理し、VB2もVB3も添加せずに37℃にて4時間保持した。また、無処置群として、ヒト皮膚線維芽細胞に対してAGEによる処理を行わず、VB2もVB3も添加せずに、37℃にて4時間保持した。
　そして、細胞からTrizol reagent (Ambion)を用いてtotal RNAを抽出し、qRT-PCR（one-step quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction）法にてAGE受容体（FEEL-1、FEEL-2、CD-36、AGE-R1、AGE-R2、AGE-R3およびRAGE）およびヒートショックプロテイン（Hsp104、gp96、Hsp90、Hsp70、Hsp60およびHsp32）のmRNAレベルを測定した。
　qRT-PCR法について、具体的には、後述の「qRT-PCR法」にて記載する。
　AGE受容体についての測定結果を図１に、ヒートショックプロテインについての測定結果を図２にそれぞれ示す。図１および図２においては、AGEとVBの共存群について、VB2およびVB3を添加したサンプルをVB2(+)AGEおよびVB3(+)AGEとしてそれぞれ示し、これらはAGE単独刺激群との比較で値を示した。また、ＶＢ単独刺激群について、VB2およびVB3を添加したサンプルをVB2 aloneおよびVB3 aloneとしてそれぞれ示し、これらは無処置群との比較で値を示した。
　図１に示すように、VB単独刺激群では、AGE受容体のmRNAレベルに有意な変動はなかった。一方、AGEとVBの共存群では、AGE単独刺激群におけるAGE受容体のmRNAレベルと比較して、VB2 (+)AGE、VB3(+)AGEはともにFEEL-1, FEEL-2, RAGEのmRNAレベルを有意に上昇させた。
　また、皮膚線維芽細胞にVB2、VB3をそれぞれ添加した場合に、ストレス応答としてのヒートショックプロテイン（以下、Hspということがある。）のmRNAの誘導能を検討したところ、図２に示すようにVB単独刺激群では、各種HspのmRNAレベルの変動はなかった。一方、AGEとVBの共存群では、AGE単独刺激群と比較して、検討したHspの中でHsp90以外の全てのHspのmRNAレベルが有意に上昇した。
　（AGEに対する細胞内活性酸素（ROS）およびSuperoxide(SOD)の測定）
　ヒト皮膚線維芽細胞をAGE（100μg/mL）で処理し、VB2およびVB3をそれぞれ添加して37℃にて4時間保持した。ここで、VB2およびVB3は、1μg/mL、10μg/mL、100μg/mLおよび300μg/mLの濃度のものをそれぞれ添加した。結果を示すグラフである図３および図４において、VB2を添加したものは「VB2-AGE」、VB3を添加したものは「VB3-AGE」と表記した。
　なお、Controlとして、ヒト皮膚線維芽細胞に対してAGEに処理を行わず、VB2もVB3も添加せずに37℃にて4時間保持したものについても測定を行い、また、AGE単独刺激群として、ヒト皮膚線維芽細胞をAGE（100μg/mL）で処理し、VB2もVB3も添加せずに37℃にて4時間保持したもの（図３および図４において「AGE」と表記した。）についても、測定を行った。
　細胞内ROSの測定は、fluorescence using dichlorofluorescin diacetate (DCF-DA; Invitrogen, Carlsbad, CA, USA)を用いて行った。具体的には、細胞をPBSで洗浄したのち、10μM DCF-DAを37℃で20分間インキュベーションした。細胞内ROSレベルはfluorescence intensity using the micro plate reader (SYNERGY/HT, BioTek, Japan)を用いて525nmの励起波長を計測した。結果を図３に示す。図３においては、Controlを１００％としたときの各サンプルの結果を示した。
　また、Superoxide(SOD)の測定は、SOD Assay Kit (Cayman Chemical, Ann arbor, MI, USA)を用いて測定した。各種の処理を終えた細胞を24時間培養した後、Lysis bufferを添加し、ホモジナイズして遠心した。そして、10μLの各サンプルをそれぞれ200μLのxanthine oxidaseと室温で混合した。30分後、450nmの吸光度を測定した。結果を図４に示す。
図４においては、Controlを100%としたときの各サンプルの結果を示した。
　＜抗酸化作用の検討＞
　（細胞生存率の測定）
　0.2mMの過酸化水素を添加した培養液で、ヒト皮膚線維芽細胞を２時間インキュベーションしたのち、PBSで洗浄除去し、通常の培地に入れ替えて培養を継続した。VB2およびVB3は、それぞれ過酸化水素を添加する前後のいずれかのタイミングで添加し、４時間共培養した。そののち、細胞または培養液を回収した。
　結果を示すグラフである図５において、過酸化水素を添加した後にVB2またはVB3を加えたサンプルを「H2O2-VB2」、「H2O2-VB3」とそれぞれ表記し、VB2またはVB3を加えた後に過酸化水素を添加したサンプルを「VB2-H2O2」、「VB3-H2O2」とそれぞれ表記した。
　ここで、VB2およびVB3は、1μg/mL、10μg/mL、100μg/mLおよび300μg/mLの濃度のものをそれぞれ添加した。
　なお、ヒト皮膚線維芽細胞に過酸化水素もVB2もVB3も加えないものについて、上記と同様に処理を行い、Controlとして測定を行った。また、VB2またはVB3を添加しないサンプル（図５において「H2O2」と表記した。）についても上記と同様に処理を行い、測定を行った。
　ヒト皮膚線維芽細胞における細胞生存数の測定は、Cell counting-8 kit (DOJINDO:, Japan)を用いて行った。Controlの細胞との比色(450nm)により、生存比率（% of Control）として表示した。結果を図５に示した。
　図５に示すようにヒト皮膚線維芽細胞に0.2mMの過酸化水素による酸化ストレスを与えた際の細胞生存率は59％であった。同様の酸化ストレスを与えた後にVB2またはVB3を添加した際の細胞生存率は濃度依存的に上昇し、最大生存率はVB2、300μg/mLの76%、VB3、300μg/mLの78％であった。一方あらかじめVB2またはVB3を添加した細胞に同様の酸化ストレスを後から与えた場合の細胞生存率は、濃度依存的に有意な上昇を示した。具体的には、酸化ストレス付与後にVB2またはVB3を添加したサンプルと比較しても、酸化ストレス付与前にVB2またはVB3を添加した場合には、10μg/mL以上で有意な差が認められるほどの上昇を示した。
　（過酸化水素に対する細胞内活性酸素（ROS）産生およびSuperoxide(SOD)の測定）
　上記「細胞生存率の測定」に記載した手順により、ヒト皮膚線維芽細胞の処理、培養（共培養）を行い、細胞または培養液を回収した。用いたVB2、VB3の濃度、および、結果を示すグラフである図６および図７におけるサンプルの表記も上記「細胞生存率の測定」と同様である。
　細胞内ROSの測定およびSuperoxide(SOD)の測定は、上記「AGEに対する細胞内活性酸素（ROS）産生およびSuperoxide(SOD)の測定」に記載の方法とそれぞれ同様の方法により行った。
　細胞内ROSおよびSuperoxide(SOD)の測定結果をそれぞれ図６および図７に示す。図６および図７においては、Controlを100%としたときの各サンプルの結果を示した。
　酸化ストレスで生成されたROSに対する抑制効果を検討したところ、図６に示すように、細胞内の蛍光量は酸化ストレスによって正常細胞の370%に上昇した。その酸化ストレスの前後においてVB2またはVB3を添加した場合、VB2およびVB3の両方でROSの産生が濃度依存的に抑制された。特に、酸化ストレスを付与する前に予めVB2で処理した場合において、よりROSの産生は抑制された。
　また、図７に示すように、SOD量は、VB2もVB3も添加しない場合には酸化ストレスによってControlの56%に抑制された。その酸化ストレスの前後にVB2またはVB3を添加した場合、SOD量を濃度依存的に回復させる傾向にあった。またVB2またはVB3を酸化ストレスを付与する前に加えた場合と、後で加えた場合との差も、VB2とVB3を用いた場合の差も明確ではなかった。
　（アクアポリンの分泌刺激効果の検討）
　上記「細胞生存率の測定」に記載した手順により、ヒト皮膚線維芽細胞の処理、培養（共培養）を行い、細胞または培養液を回収した。結果を示すグラフである図８および図９におけるサンプルの表記も上記「細胞生存率の測定」と同様である。
　アクアポリンの測定は、AQP-１およびAQP-3についてqRT-PCR法により行い、測定結果は、ΔΔCt法により求めた。AQP-1についての結果を図８、AQP-3についての結果を図９にそれぞれ示す。qRT-PCR法について、具体的には、後述の「qRT-PCR法」にて記載する。
　皮膚の保湿に関わる因子として、AQP-1およびAQP-3について各mRNAレベルを定量PCRで測定したところ、図８および図９に示すように、ヒト皮膚線維芽細胞に酸化ストレスを与えると細胞表面に発現するAQP-1およびAQP-3のmRNAレベルが低下することが明らかとなった。この低下に対して、酸化ストレスを付与する前または後においてVB2またはVB3をそれぞれ加えると修復する現象、すなわちAQP-1およびAQP-3のmRNAレベルが増加する現象が確認された。その修復能力はVB2またはVB3の添加が酸化ストレスの付与の前後に関わらずVB2またはVB3で認められた。このうち、酸化ストレスを付与する前に予めVB2またはVB3を加えた群の方が、酸化ストレスを付与した後にVB2またはVB3を加えた群よりも修復能力が強い傾向にあった。また、VB2とVB3との間に有意差は認められなかった。
　（皮膚の保湿効果に関わるヒアルロン酸およびElastinの生成量）
　上記「細胞生存率の測定」に記載した手順により、ヒト皮膚線維芽細胞の処理、培養（共培養）を行い、細胞または培養液を回収した。用いたVB2、VB3の濃度、および、結果を示すグラフである図１０および図１１におけるサンプルの表記も上記「細胞生存率の測定」と同様である。
　ヒアルロン酸及びElastinの生成量の測定は、ELISA法により行った。ヒト皮膚線維芽細胞から培養上清中に分泌されるヒアルロン酸量をELISA法により測定した結果を図１０に、細胞内Elastin生成量をELISA法により測定した結果を図１１にそれぞれ示した。なお、図１０においてはヒアルロン酸濃度にて、また、図１１においてはControlの値に対する比率にて結果を示した。
　図１０に示すように、ヒアルロン酸の量は、酸化ストレスの付与によりControlの約半分に減少するが、VB2またはVB3を添加することによりヒアルロン酸の量が回復する傾向にあった。その中でも、酸化ストレスを付与する前に予めVB2またはVB3を添加した群の方が、酸化ストレスを付与した後にVB2またはVB3を添加した群よりも修復能力が強い傾向にあった。VB2とVB3とを用いた場合において、有意差は認められなかった。
　また、図１１に示すように、Elastin生成量は酸化ストレスの付与によりControlの56％に抑制された。VB2またはVB3を酸化ストレス付与後に添加しても、抑制されたElastin生成量を回復することはできなかった。しかし、酸化ストレスを付与する前に予めVB2またはVB3を添加することによって、著しいElastin生成量の回復が示された。特にVB2、100μg/mL以上、およびVB3、300μg/mLではControl以上の有意に高い生成量を示した。
　（qRT-PCR法）
　上記のAGE受容体、ヒートショックプロテイン、アクアポリン、ヒアルロン酸およびElastinの測定に用いるqRT-PCR法について、説明する。qRT-PCR法は、得られたTotal RNA 500 ngをPCRのテンプレートとし、逆転写反応（Reverse Transcriptase；RT反応）によるcDNA合成と、定量PCRを１つの試験管内で行うことができるOne step RT-PCRをLuna Universal One-Step qRT-PCR Kitを用いて行った。
　PCR装置は、Takara製、Thermal Cycler Dice Real Time System IIを用いた。１つの反応系として、Luna Universal One-Step Reaction Mix (2x) 10μL、 Luna WarmStart RT Enzyme Mix (20x) 1μL、Forward primer (10μM) 0.8μL、Reverse primer, 0.8μLおよび上記PCRのテンプレートとしてのTotal RNAを用い、Nuclease-free Waterで20μLになるように調整した。
　反応は95℃にて30秒を1サイクル、さらに95℃にて5秒および60℃にて30秒のサイクルを50サイクルの条件にて行った。mRNAの発現として４倍以上変動したもの(PCR反応として２サイクル)を有意な差と判定した。
　本発明では、抗菌・抗ウイルス活性を有することが報告されている２種類のPM化合物(VB2およびVB3)の汎用性を追求するため、皮膚における抗老化作用に着目してAGE刺激に対する反応及び過酸化水素を用いた酸化ストレスの付与に対する数種抗酸化作用について検討を行った。
　これによれば、VB2またはVB3を単独で正常な皮膚線維芽細胞に添加しても細胞内に大きな変化は与えないが、AGE刺激や、酸化ストレスが負荷された際に抑制的な働きが発現する可能性が示唆された。
　ヒト皮膚線維芽細胞は皮膚真皮に存在しながら表皮の角化細胞と並んで表皮の状態を左右する重要な細胞である。
　図１および図２に示すようにヒト皮膚線維芽細胞に対してVB2、VB3は単独でAGE受容体及びHspのmRNA発現に影響を及ぼすようなことは無かった。
　しかし、図１に示すようにヒト皮膚線維芽細胞にAGEを添加した際にVB2、VB3はほぼ同じようにAGE受容体、特にFEEL-1、FEEL-2およびRAGEのmRNAレベルを上昇させた。FEEL-1、FEEL-2は、細胞外のAGEをEndocytosisによって細胞内へ取り込み、Lysosomeでの分解処理を手助けする。RAGEも上昇したが、図３で検証したROSの上昇を抑制する反応が認められた。この矛盾はRAGEのスプライス変異体の産生を刺激するという仮定によって説明できる。すなわち、RAGEの全長型(full length RAGE: F-RAGE)に加えて、細胞内でRAGEタンパク質の2種類のスプライシングバリアントが産生されることが知られている。一つは細胞膜から放出される可溶性RAGEタンパク質であるRAGEの細胞内ドメイン欠損型(C末端切断型RAGE: C-RAGE)であり、もう一つは細胞外Vドメイン欠損型(N末端切断型RAGE: N-RAGE)である。
　また、細胞が熱や紫外線、活性酸素等からストレスを受けた際に発現し、細胞を保護するHspについて検討した（図２）。
　Hsp104は凝集したタンパク質を元に戻す機能が示され、gp96は細胞内抗原提示に関与し、Hsp90は厳選されたタンパク質だけを対象に成熟を助け、Hsp70はタンパク質のフォールディングや輸送や分解を制御することで品質を管理する。また、Hsp60はミトコンドリアにおけるタンパク質をフォールディング維持、ミトコンドリア等へのタンパク質の膜透過に関与し、Hsp32はヘム分解に関与しヘム分解生成物は抗酸化作用を有する。VB2、VB3は共にAGEストレスを受けた細胞において、細胞内タンパク質の品質を保持するようなHspを誘導することが示された。
　また、図５に示すように細胞生存率が約40％低下するような過酸化水素による酸化ストレスを与える実験系において、酸化ストレスを付与する前後のそれぞれにおいて、VB2またはVB3を添加したが、酸化ストレスを付与する前にVB2またはVB3を添加した方が細胞生存率は高く、より強い細胞保護作用が認められた。
　また、図６に示すように、酸化ストレスの付与によって細胞内のROSは上昇したが、VB2、VB3共に抑制効果が濃度依存的に認められ、やはり酸化ストレスを付与する前にVB2またはVB3を添加した方が効果は強いものであった。また、図７に示すように、それらと連動するように抗酸化物質の１つであるSODが、酸化ストレスによる消失を回復させる傾向が認められた。しかし、SODなどの抗酸化物質の存在だけではROSの消失は説明することはできないと考えられる。
　線維芽細胞は表皮の保湿の役割があることは知られており、細胞内への水分子流入に関わる受容体、アクアポリンの存在が注目されている。特に線維芽細胞ではAQP-1、AQP-3の発現が認められる。また細胞から分泌されるヒアルロン酸が皮膚の保湿に効果的であることもすでに報告されている。図８～図１０に示すように実際に酸化ストレスによってAQP-1およびAQP-3のmRNA発現も、ヒアルロン酸の分泌量も減少していた。そこにVB2またはVB3を添加することで、AQP-1およびAQP-3のmRNAレベルも、ヒアルロン酸の分泌量も改善がされた。改善作用は、酸化ストレスを付与する前からVB2またはVB3が予め存在していた方が強かった。
　ヒトではヒアルロン酸の半分は皮膚に存在する。老化によって表皮からヒアルロン酸が減少する一方、真皮ではまだヒアルロン酸は残っていて、このことが、加齢による皮膚の水分低下、弾力性の低下や萎縮につながる。VB2またはVB3を用いるによって、減少したヒアルロン酸を回復させることが示された。
　また、酸化ストレスの付与によってコラーゲンやElastinの減少をもたらし、続いてwrinklesの形成と皮膚再生の減少をもたらすことが報告されており、図１１に示すように、Elastinの増強効果は皮膚の再生に有効な作用となる。
　以上より、抗菌・抗ウイルス活性を有することが報告されているポリ酸化合物であるVB2およびVB3が、AGEや過酸化水素による皮膚線維芽細胞へのストレスに対して多面的に、またどちらもほぼ同様に抗糖化、抗酸化作用を示した。VB2またはVB3を単独で細胞に添加しても、様々なパラメーターに変動は見られなかった。このことから、VB2またはVB3は共に皮膚の抗老化作用物質として有用であることが示された。
 

Claims (10)

  1. 　Ｋ１１Ｈ［（ＶＯ）３（ＳｂＷ９Ｏ３３）２］および／またはＮａ９［ＳｂＷ９Ｏ３３］を含む抗老化剤。
  2. 　抗糖化作用を有する請求項１記載の抗老化剤。
  3. 　FEEL-1、FEEL-2、CD36、AGE-R1およびAGE-R3のうちの少なくとも１種の発現を促進させる請求項２記載の抗老化剤。
  4. 　Hsp104、gp96、Hsp90、Hsp70、Hsp60およびHsp32のうちの少なくとも１種の発現を促進させる請求項２記載の抗老化剤。
  5. 　抗酸化ストレス作用を有する請求項１記載の抗老化剤。
  6. 　皮膚の保湿作用を有する請求項１記載の抗老化剤。
  7. 　AQP-1の発現、AQP-3の発現、ヒアルロン酸の分泌、およびElastinの生成のうちの少なくとも１つにより前記皮膚の保湿作用を有する請求項６記載の抗老化剤。
  8. 　請求項１～７の何れかに記載の抗老化剤を配合させた化粧品。
  9. 　請求項８記載の化粧品を含有させたおしぼり。
  10. 　請求項８記載の化粧品を含有させた衛生用品。
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