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WO2022117885A1 - Produit comprenant au moins une microalgue d'eau douce capable d'être cultivée en eau salée et procédé associé - Google Patents

Produit comprenant au moins une microalgue d'eau douce capable d'être cultivée en eau salée et procédé associé Download PDF

Info

Publication number
WO2022117885A1
WO2022117885A1 PCT/EP2021/084294 EP2021084294W WO2022117885A1 WO 2022117885 A1 WO2022117885 A1 WO 2022117885A1 EP 2021084294 W EP2021084294 W EP 2021084294W WO 2022117885 A1 WO2022117885 A1 WO 2022117885A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
chlorella
microalgae
acclimatized
freshwater
salt water
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
PCT/EP2021/084294
Other languages
English (en)
Inventor
Alain Guillou
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Odontella SAS
Original Assignee
Odontella SAS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Odontella SAS filed Critical Odontella SAS
Publication of WO2022117885A1 publication Critical patent/WO2022117885A1/fr
Anticipated expiration legal-status Critical
Ceased legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G33/00—Cultivation of seaweed or algae
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/12—Unicellular algae; Culture media therefor

Definitions

  • Product comprising at least one freshwater microalga capable of being cultured in salt water and associated method
  • the invention relates to products intended for human food or animal nutrition, in particular in the form of food, drink or food supplement, comprising specific microalgae.
  • Microalgae are increasingly used for many applications, due to their remarkable properties which vary from one microalgae to another.
  • Chlorella taxonomy has evolved steadily since the discovery of Chlorella vulgaris in 1890 by Beijerinckle. Consequently, the 3 species of Chlorella approved as consumed in Europe before 1997, namely Chlorella pyrenoidosa, Chlorella vulgaris and Chlorella luteoviridis, underwent these multiple revisions: certain species were withdrawn from the genus Chlorella, others were transferred to new genres.
  • Chlorella authorized in human food are strains cultivated in fresh water, their profiles in essential amino acids and especially in fatty acids are not particularly interesting for human food. The same is true for Euglena, also authorized for human consumption in Japan, a freshwater strain, grown in freshwater, which has a fatty acid profile that is not very interesting on the nutritional aspect.
  • the microalgae of particular interest for human nutrition are marine microalgae, in particular because of their very different lipid profile from that of freshwater microalgae.
  • polyunsaturated fatty acids with long carbon chains are mainly present in marine strains.
  • the majority of marine microorganisms use these molecules in particular to maintain plasticity, fluidity of cell membranes in saline environments and cell integrity during osmotic shocks in euryhaline environments.
  • Thraustochytrids which are the subject of intensive cell cultures for the production of oil rich in DHA (acid
  • SUBSTITUTE SHEET (RULE 26) docosahexaenoic), these Thraustochytrids come from intertidal mangrove areas. Thanks to DHA, they have adapted to cope with the wide differences in salinity typical of their areas.
  • marine microalgae use polyunsaturated fatty acids with long carbon chains to resist low temperatures. We can cite the case of penguins on the ice floe whose legs resist frost thanks to the presence of colonies of marine microalgae that are highly producers of polyunsaturated fatty acids with long carbon chains.
  • DHA long-chain polyunsaturated fatty acids are of great importance for the balance and physiological functioning of humans or animals.
  • DHA is very difficult to synthesize in our body with low yields.
  • the brain of humans contains 60% fatty acid including 14% DHA and their retina is made up of 93% DHA. DHA is therefore considered an essential fatty acid, and must therefore be provided by food.
  • Some marine fungi and some marine bacteria are capable of producing polyunsaturated fatty acids with long carbon chains, but it is mainly marine microalgae that are the main producers. By serving as staple food for zooplankton, they transmit these molecules to the entire food chain present in the oceans.
  • document KR20200068484 describes a method for increasing fatty acid production by freshwater microalgae. For this, the microalgae are exposed to different salt concentrations. However, these fatty acids are neither long chain polyunsaturated fatty acids nor EPA or DHA.
  • Document CN1 11 100885 also describes a method of culturing microalgae to increase the production of oil by the microalgae. For this, this document describes an adaptation in CO2 and in light intensity of microalgae by exposing the culture to cycles of light and dark. However, these oils are not suitable for consumer products.
  • KR10183941 1 discloses an oil comprising linoleic acid (C18:2) and linolenic acid (C18:3) for consumption.
  • the culture method does not include marine microalgae.
  • EP3381301 describes a method of producing a high protein food product comprising microalgae. This document does not describe long-chain polyunsaturated fatty acids.
  • One of the objectives of the invention is therefore to provide products based on marine microalgae, in particular to meet the need for long-chain fatty acid and essential amino acid intakes for humans and the 'animal.
  • microalgae are diatoms that are very difficult to produce and therefore cannot be used on an industrial scale.
  • the invention aims to overcome these drawbacks.
  • the following presents a simplified summary of selected aspects, embodiments and examples of the present invention for the purpose of providing a basic understanding of the invention.
  • the summary of the invention is not an exhaustive overview of all aspects, embodiments and examples of the invention.
  • the sole purpose of the summary is to present selected aspects, embodiments, and examples of the invention in a concise form as an introduction to the more detailed description of aspects, embodiments and examples of the invention which follow the summary.
  • the invention relates in particular to a product intended for human or animal consumption, for example in the form of food or drink or food supplement, comprising at least one freshwater microalgae acclimatized to salt water, and/or at least one extract of such a freshwater microalgae acclimatized to saltwater, the freshwater microalgae(s) acclimatized to saltwater and/or the extract(s) of the freshwater microalgae(s) acclimated to salt water comprising at least 0.1% eicosapentaenoic acid (EPA), and/or at least 0.1% docosahexaenoic acid (DHA) by weight of material dried.
  • EPA eicosapentaenoic acid
  • DHA docosahexaenoic acid
  • the product intended for human or animal consumption may optionally include one or more of the following characteristics, alone or in combination: it comprises at least 0.1% EPA and at least 0 .1% DHA by weight of dry matter.
  • - freshwater microalgae acclimatized to salt water belong to the classes Trebouxiophyceae or Chlorophyceae. it comprises at least 0.2% EPA and/or at least 0.2% DHA by weight of dry matter.
  • Chlorella pyrenoidosa Chloroidium
  • it comprises between 0.2 and 90% by weight of biomass of at least one freshwater microalgae acclimatized to acclimated to salt water chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii , Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis and/or at least one extract of such a water microalga fresh acclimated to salt water.
  • Chlorella pyrenoidosa Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata,
  • It contains at least 0.005 g of sodium per 100 g of dry matter.
  • the freshwater microalgae(s) have been acclimatized to salt water by gradually increasing the salinity of the water in which the microalgae are grown.
  • the freshwater microalgae(s) have been acclimatized to salt water by introducing into the culture medium a solution of 0.15 g to 0.4 g of salt per 24-hour period at 10% of the initial culture volume.
  • the freshwater microalgae(s) have been acclimatized to salt water by introducing a seawater solution or a reconstituted seawater solution into the culture medium.
  • the freshwater microalgae(s) have been acclimatized to salt water by increasing the salinity of the water in which the microalgae were grown from 0/1000 to a maximum of 34/1000.
  • the freshwater microalgae(s) have been acclimatized to salt water by increasing the salinity of the water in which the microalgae have been grown for 3 to 8 months, preferably 8 to 35 weeks .
  • the freshwater microalgae(s) have been acclimatized to salt water by increasing the salinity of the water in which the microalgae have been cultured so as to select strains that are increasingly resistant to salt.
  • the freshwater microalgae(s) acclimatized to salt water have been produced by autotrophy or heterotrophy or mixotrophy in bioreactor(s) having one or more pocket(s), bag(s) ) and/or culture chamber(s) for single use, sterile, made of non-metallic, thermostable material(s) resistant to corrosion and oxidation-reduction.
  • the freshwater microalgae(s) acclimatized to salt water may have been produced by heterotrophy or mixotrophy in bioreactor(s).
  • the freshwater microalgae(s) acclimatized to saltwater and/or the extract(s) of the freshwater microalgae(s) acclimatized to saltwater comprise at least 5 g of lipids per 100 g dry matter of biomass or extract, preferably at least 10 g lipids per 100 g dry matter of biomass or extract, more preferably at least 15 g lipids per 100 g of dry matter of the biomass or of the extract, even more preferably at least 20 g of lipids per 100 g of dry matter of the biomass or of the extract.
  • the freshwater microalgae(s) acclimatized to saltwater and/or the extract(s) of the freshwater microalgae(s) acclimatized to saltwater comprise at least 400 mg of oleic acid, at least 1200 mg of alpha linolenic acid (ALA), at least 11 mg of arachidonic acid, at least 1000 mg of eicosapentaenoic acid (EPA), at least 1000 mg of docosahexaenoic acid (DHA) per 100 g dry matter of biomass or extract.
  • ALA alpha linolenic acid
  • EPA eicosapentaenoic acid
  • DHA docosahexaenoic acid
  • the freshwater microalgae(s) acclimatized to saltwater and/or the extract(s) of the freshwater microalgae(s) acclimatized to saltwater comprise at least 25 g of protein per 100 g of dry matter of biomass or extract.
  • the extract of freshwater microalgae acclimatized to salt water is in the form of a powder, a paste and/or an oily extract.
  • It has a nutritional profile substantially identical to that of freshwater microalgae acclimatized to salt water.
  • the invention relates to a method for producing a freshwater microalgae acclimated to salt water by gradually increasing the salinity of the water in which the freshwater microalgae are cultured, the or the freshwater microalgae(s) being cultured by heterotrophy or mixotrophy in bioreactor(s) having one or more disposable, sterile pouches, bags and/or culture chambers made of non-metallic heat-stable material(s) ) resistant to corrosion and oxidation-reduction, the freshwater microalgae(s) acclimatized to salt water comprising at least 0.1% of EPA and/or at least 0.1% of DHA in weight of dry matter.
  • the production process may also include autotrophic culture.
  • the gradual increase in salinity comprises dilution in water, preferably fresh water, the salinity of which is increased gradually, preferably from 0 to a maximum of 40 grams of salt per 1000 g of water. It includes the selection of salt-resistant strains up to the desired salinity, preferably a gradual selection of strains which develop a metabolism specific to the marine environment.
  • - acclimatization includes an increase in salinity in a culture medium of at least 0.15 g to 0.4 g per 24 hours at a rate of 10% of initial culture volume.
  • It comprises a step of adding a seawater solution or a reconstituted seawater solution, the seawater solution having previously undergone a thermal and/or mechanical and/or microwave treatment , a reconstituted seawater solution comprising distilled water and NaCl, KCl, CaCls, NaHCOs, MgSC .
  • the invention relates to a use of biomass of at least one freshwater microalgae acclimatized to salt water by gradually increasing the salinity of the water in which the microalgae are cultivated, said microalgae being selected from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris, Chlorella luteoviridis, and/or at least one extract of at least one such freshwater microalgae acclimatized to salt water, as enhancer and/or flavor enhancer
  • It also relates to a use of biomass of at least one freshwater microalgae acclimatized to salt water, for example by gradually increasing the salinity of the water in which the microalgae are cultivated, and/or d at least one extract of at least one such microalgae from fresh water acclimatized to salt water, as a source of proteins and/or of lipids and/or a source of polysaccharides and/or of minerals and/or trace elements in food products or beverages or food supplements, the freshwater microalgae(s) acclimatized to salt water and/or the extract(s) of the freshwater microalgae(s) acclimatized to salt water comprising at least 0.1% EPA and/or at least 0.1% DHA by weight of dry matter.
  • the invention proposes to use specific strains of freshwater microalgae, preferably freshwater microalgae authorized for human consumption or which could be authorized (in particular because of the evolution of the taxonomy), and to acclimatize them to salt water to make strains with the nutritional profiles, in particular in fatty acids and/or amino acids, specific to marine strains.
  • These marinized freshwater strains because of their adaptation to salt water, indeed have specific lipid and protein profiles of marine strains and can be used to provide essential nutritional elements for humans or animals.
  • these marinated freshwater strains or their extracts contain EPA and DHA.
  • the invention relates to the use of marinized freshwater microalgae, that is to say capable of being cultured in salt water, said microalgae being microalgae of the class Trebouxiophyceae or from the class of Chlorophyceae, for example chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophora, Chlorella vulgaris, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis and mixtures thereof.
  • Chlorella pyrenoidosa Chloroidium saccharophilum, Ch
  • the invention relates to the use of marinized freshwater microalgae, that is to say capable of being cultured in salt water, said microalgae being microalgae of the class Trebouxiophyceae or from the class of Chlorophyceae, for example chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophora, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis and mixtures thereof.
  • Chlorella pyrenoidosa Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila
  • the invention targets the use of marinized freshwater microalgae, that is to say capable of being cultured in salt water, said microalgae being microalgae of the class of Trebouxiophyceae or from the class of Chlorophyceae chosen from among Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa (also called Auxenochlorella pyrenoidosa), Chlorella luteovirdi (also called Jaagichlorella luteoviridis), Chlorella protothecoides (also called Auxenochlorella protothecoides) and mixtures thereof.
  • Chlorella vulgaris Chlorella Sorokiniana
  • Chlorella pyrenoidosa also called Auxenochlorella pyrenoidosa
  • Chlorella luteovirdi also called Jaagichlorella luteoviridis
  • Chlorella protothecoides also called Auxenochlorella protothecoides
  • freshwater microalgae belonging to the Trebouxiophyceae or Chlorophyceae classes have never been described in products for human consumption as cultivated in a marine or euryhaline environment, whereas , when adapted to salt water, they have remarkable characteristics, different from those of fresh water strains, which allow a specific use.
  • they have a particularly advantageous lipid profile to cover the recommended daily intakes of essential fatty acids of the EPA and DHA type.
  • the lipid profiles of the microalgae depend mainly on the salinity of the water, the marine or euryhaline microalgae comprising long-chain polyunsaturated fatty acids, unlike freshwater microalgae which do not produce any. .
  • Chlorella pyrenoidosa Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophora, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum; and preferably, this concerns the microalgae Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella
  • the invention relates in particular to a food product comprising one or more microalgae selected from Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella luteovirdi, Chlorella protothecoides.
  • the subject of the invention is a product intended for human or animal consumption, for example in the form of food or drink or food supplement, comprising at least one strain of a water microalgae fresh acclimated to salt water.
  • a product can be used in food or as a food supplement in humans or animals, in particular as a flavor enhancer, source of proteins of marine origin and/or source of lipids of marine origin and/or source of minerals and trace elements of marine origin, in food products, beverages or food supplements.
  • the freshwater microalgae(s) acclimatized to saltwater and/or the extract(s) of the freshwater microalgae(s) acclimatized to saltwater comprise at least 0.1% EPA and/or at least 0.1% DHA by weight of dry matter.
  • the subject of the invention is a product intended for human or animal consumption, for example in the form of food or drink or food supplement, comprising at least one strain of a freshwater microalga acclimated to salt water selected from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, and/or at least one extract of at least one strain of a freshwater microalga acclimatized to salt water chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium
  • such a product can be used in food or as a food supplement in humans or animals, in particular as a flavor enhancer, source of proteins of marine origin and/or source of lipids of marine origin. and/or source of minerals and trace elements of marine origin, in food products, beverages or food supplements.
  • Trebouxiophyceae and Chlorophyceae can be grown in autotrophic conditions outdoors or in a photobioreactor and in heterotrophic conditions in tanks by fermentation in the presence of organic matter but without light. They can also grow in mixotrophy, that is to say in the presence of organic matter and a little light. In this case, light does not act as an energy source but acts in particular on plastids to activate specific physiological functions and in particular activate the levulinic pathway.
  • salt water due to its very corrosive nature.
  • the production techniques that make it possible to achieve low production costs relate to heterotrophic or mixotrophic production in a stainless steel type metal fermenter.
  • Salt water due to its oxidation-reduction capacity, attacks both tanks and electrodes, pipes, pipes, valves and the installations quickly deteriorate and the sterilization and axenia of the culture then become difficult to maintain or even impossible.
  • the freshwater microalgae being chosen from the strains of microalgae belonging to the classes Trebouxiophyceae or Chlorophyceae, for example among Chlorella pyrenoidosa, Chlorella vulgaris, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis.
  • Trebouxiophyceae or Chlorophyceae for example among Chlorella pyrenoidosa, Chlorella vulgaris, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Co
  • the freshwater microalgae are chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus , Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis.
  • the freshwater microalgae are chosen from Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella luteovirdi, Chlorella protothecoides.
  • the present invention therefore preferably relates to freshwater microalgae belonging to the Trebouxiophyceae or Chlorophyceae classes, in particular the cited strains cultivated by heterotrophy or mixotrophy, in systems resistant to the corrosion of chloride ions which cause significant corrosion on many materials such as metals.
  • the strains of microalgae according to the invention are produced in a bioreactor that does not contain corrosive materials, since they are single-use.
  • the invention also relates to a process for producing freshwater microalgae acclimatized to salt water and then cultured by heterotrophy or mixotrophy in bioreactors having one or more single-use, sterile pockets, made of non-metallic material(s) resistant to corrosion and oxidation-reduction, in particular freshwater microalgae belonging to the classes Trebouxiophyceae or Chlorophyceae.
  • such a process makes it possible to efficiently and profitably produce freshwater microalgae, preferably acclimatized in salt water, belonging to the Trebouxiophyceae or Chlorophyceae classes such as Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella vulgaris, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, preferably Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila vacuolata, Graes
  • the subject of the invention is therefore a product intended for human or animal consumption, in the form of food or drink or food supplement, comprising at least one strain of freshwater microalgae acclimatized to salt water belonging to the classes Trebouxiophyceae or Chlorophyceae.
  • the strain of freshwater microalgae acclimatized to salt water is for example chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella vulgaris, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis and/or at least one extract of at least one of these freshwater microalgae acclimated to salt water.
  • the strain of freshwater microalgae acclimated to salt water is chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis and/or at least one extract of at least one of these freshwater microalgae acclimated to salt water
  • the subject of the invention is therefore a product intended for human or animal consumption, for example in the form of food or drink or food supplement, comprising at least one strain of acclimatized freshwater microalgae in salt water chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Chlorella vulgaris, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis and/or at least one extract of at least one of these freshwater microalgae acclimatized to salt water; preferably comprising at least one strain of freshwater
  • freshwater microalgae or strain of freshwater microalgae “acclimated to salt water” or “marinized” is meant a strain of microalgae which is capable of being cultivated in water salty, which has adapted to be grown in salt water, whereas it is initially a strain grown in fresh water.
  • the strain cultivable in fresh water has been acclimatized to salt water, in order to be able to be cultivated in salt water, so as to develop a nutritional profile, in particular in terms of fatty acids and/or essential amino acids, close to or identical to that of microalgae marines.
  • a freshwater microalgae acclimated to salt water will be a strain of water microalgae fresh belonging to the classes Trebouxiophyceae or Chlorophyceae acclimated to salt water.
  • a freshwater microalga can also correspond to a freshwater microalgae.
  • a microalgae acclimatized to salt water can correspond to a microalgae acclimatized to a salty culture medium, salty in the saline sense, with a chemical composition close to seawater.
  • the product according to the invention can be any type of food such as in particular pasta, cereal bars, prepared meals, cooked meals, dishes in the form of powders, wet paste or liquid concentrates or oily or aqueous macerate.
  • the product is a food chosen from cereal products, bakery products, sweet or savory cakes, sweet or savory biscuits, sweets, soups, sauces, vegetable crisps, condiments, oils, ready meals, products processed from marine products, dairy products. They can also include food substitutes for seafood products (fish and seafood).
  • It may also be a drink such as in particular a drink chosen from sodas, fruit juices, energy drinks, flavored waters, syrups or alcoholic drinks.
  • It may also be a food supplement which may be in particular in the form of soft or hard capsules, cachets or shockable or effervescent compressed tablets, candies, chewy sweets or drinkable ampoules.
  • the product according to the invention preferably comprises between 0.1 and 99% by weight of biomass of at least one freshwater microalgae of the class Trebouxiophyceae or the class Chlorophyceae, acclimated to salt water , and for example chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris , Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis and/or an extract of at least one of these freshwater microalgae acclimatized to salt water.
  • Chlorella pyrenoidosa Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis and/or an extract of at least one of these freshwater microalgae acclimatized to salt water.
  • the microalgae(s) of the Trebouxiophyceae class or the Chlorophyceae class of fresh water acclimatized to salt water for example chosen from among Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, and/or the extract(s) of at least one of these freshwater microalgae acclimatized to saltwater, present in the product according to the invention, comprise EPA and/or DHA
  • the microalgae(s) of the T rebouxiophyceae class or of the Chlorophyceae class of fresh water acclimatized to salt water for example chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata , Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, and/or the extract(s) of at least one of these freshwater microalgae acclimatized to saltwater, present in the product according to the invention, comprise EPA and/or DHA, preferably
  • Marinated strains of microalgae obtained from freshwater strains have a particularly interesting nutritional profile. Indeed, as explained above, these marinized strains of microalgae have a nutritional profile, particularly lipidic, not found in strains of freshwater microalgae grown conventionally in non-saline conditions. Acclimatization to salt water alters the metabolism and biochemistry of the strains cited above. An illustration of these changes is shown in Tables A through C below:
  • Table A Composition per 100 g of dry matter.
  • marinized strains of microalgae obtained from freshwater strains have a particularly advantageous nutritional profile in human or animal nutrition.
  • the marinized strains of microalgae obtained from freshwater strains have a protein profile, a lipid profile and a micronutrient profile that make it possible to participate highly in covering needs and covering the recommended daily intake.
  • the acclimatization of the aforementioned microalgae strains to salt water makes it possible to develop a nutritional profile that is not found for the same strains cultivated in fresh water.
  • Table C represents the fatty acid profile
  • a food product according to the invention may have a mass ratio of unsaturated fatty acids to saturated fatty acids greater than 1.
  • it will have a mass ratio of unsaturated fatty acid to saturated fatty acid greater than 1.5; more preferably greater than 2; and even more preferably greater than 2.5.
  • a food product according to the invention may contain EPA at a mass content greater than 0.3% of the fatty acids of the food product; preferably at a mass content greater than 1% of the fatty acids of the food product; more preferably at a mass content greater than 5% of the fatty acids of the food product; and even more preferably at a mass content greater than 10% of the fatty acids of the food product.
  • it may represent between 0.3 and 30% of the fatty acids of the food product.
  • a food product according to the invention may contain DHA at a mass content greater than 0.3% of the fatty acids of the food product; preferably at a mass content greater than 1% of the fatty acids of the food product; more preferably at a mass content greater than 5% of the fatty acids of the food product; and even more preferably at a mass content greater than 10% of the fatty acids of the food product.
  • DHA at a mass content greater than 0.3% of the fatty acids of the food product; preferably at a mass content greater than 1% of the fatty acids of the food product; more preferably at a mass content greater than 5% of the fatty acids of the food product; and even more preferably at a mass content greater than 10% of the fatty acids of the food product.
  • it may represent between 0.3 and 30% of the fatty acids of the food product.
  • a food product according to the invention comprising at least one freshwater microalgae acclimatized to salt water can have an advantageous protein, lipid and micronutrient nutritional profile contributing to the coverage of essential amino acid requirements, essential fatty acids, omega-3 as well as vitamins, minerals and trace elements.
  • a food product according to the invention comprising at least one freshwater microalgae acclimatized to salt water can have a nutritional profile in unsaturated fatty acids, in particular in omega-3, enriched with respect to a food product of the invention comprising a freshwater microalgae not acclimatized to salt water.
  • a food product according to the invention has a nutritional profile, in particular an unsaturated fatty acid content, substantially identical to that of freshwater microalgae acclimatized to salt water, for example chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, and Chlorella luteoviridis at least one extract of such a freshwater microalgae acclimatized to salt water.
  • substantially means a value varying by less than 30%, preferably by less
  • an extract within the meaning of the invention may correspond to a powder, a paste, an oily extract.
  • Such an extract can be obtained from one or more freshwater microalgae acclimatized to salt water, for example chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis and mixtures thereof.
  • the product according to the invention can also be characterized by a particular flavor provided by the presence of freshwater microalgae acclimatized to salt water chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis.
  • the product according to the invention has improved organoleptic qualities in relation to the presence of freshwater microalgae acclimatized to the selected salt water.
  • it may be taste, smell, appearance, color, texture.
  • these microalgae can be used as a enhancer and/or flavor enhancer in food products or beverages.
  • the invention also relates to the use of biomass of a freshwater microalga acclimatized to salt water chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri , Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Ch Io re I la vulgaris, Chlorella Sorokin iana, Chlorella luteoviridis and/or at least one extract of said freshwater microalgae acclimatized to salt water, as enhancer and/or flavor enhancer in food products or beverages.
  • a freshwater microalga acclimatized to salt water chosen from Chlorella
  • the invention also relates to the use of biomass chosen from a microalga of fresh water acclimated to salt water selected from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri , Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokin iana, Chlorella luteoviridis, the invention also relates to the use of biomass chosen from a microalga of fresh water acclimated to salt water selected from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella va
  • the invention also relates to the use of biomass chosen from a freshwater microalga acclimatized to salt water chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, and/or at least one extract of said microalgae of fresh water acclimatized to salt water, as a source of proteins, preferentially of proteins of marine origin, and/or of lipids, preferentially of lipids of marine origin and/or source of
  • the invention makes it possible to provide humans or animals with lipids present exclusively in marine or euryhaline microalgae, such as in particular acids polyunsaturated fats from the omega-3 family (DHA and/or EPA in particular).
  • lipids present exclusively in marine or euryhaline microalgae such as in particular acids polyunsaturated fats from the omega-3 family (DHA and/or EPA in particular).
  • DHA and/or EPA in particular acids polyunsaturated fats from the omega-3 family
  • EPA omega-3 family
  • Contaminated means, for example, the presence of heavy metals and pesticides.
  • the strains used according to the invention are obtained from freshwater strains which are acclimatized to salt water by very slow dilution of the culture medium by gradually increasing the salinity.
  • the strains used are obtained from freshwater strains which are acclimatized to salt water by dilution in water, preferably fresh water, the salinity of which is gradually increased, preferably from 0/1000 to maximum 40/1000 or maximum 34/1000 but preferably about 20/1000.
  • it is grams of salt per 1000g of water. This advantageously makes it possible to approach the salinity of seawater in a moderate way and without causing stress to the microalgae.
  • the acclimatization is carried out over 3 to 8 months, preferably about 5 months. This makes it possible to gradually select strains that are more and more resistant to salt until the desired salinity is reached.
  • the acclimatization is done, depending on the strains, by increasing the salinity in the culture medium to a minimum of 0.15 g to 0.4 g of salt per 24 hours. Acclimatization makes it possible to gradually select strains that develop a metabolism specific to the marine environment.
  • the cited strains used according to the invention are acclimatized in containers ranging from several tens of milliliters to several liters with an autotrophic or mixotrophic culture mode. Preferably ranging from 10 milliliters to 10 Liters.
  • the cited strains used according to the invention are acclimatized in containers ranging from several tens of milliliters to several liters in which a solution of 0.15 g to 0.4 g of salt is brought per period of 24 hours to 10% of the initial culture volume.
  • the invention relates to a product characterized in that the freshwater microalgae(s) have been acclimatized to salt water by gradually increasing the salinity of the water in which the microalgae are cultured, preferably by introducing into the culture medium a solution of 0.15 g to 0.4 g of salt per period of 24 h at the rate of 10% of the initial culture volume.
  • the product according to the invention is characterized in that the freshwater microalgae(s) have been acclimatized to salt water by increasing the salinity of the water, preferably fresh water, in which the microalgae have been cultivated from 0/1000 to a maximum of 34/1000 preferably grams of salt per 1000 grams of water.
  • the product according to the invention is characterized in that the freshwater microalgae(s) have been acclimatized to salt water by increasing the salinity of the water in which the microalgae were cultured for 3 to 8 months.
  • the freshwater microalgae(s) have been acclimatized to salt water by increasing the salinity of the water in which the microalgae have been cultured so as to select increasingly salt-resistant strains.
  • acclimatization can be achieved in particular by adding a seawater solution or a reconstituted seawater solution.
  • a seawater solution can correspond to seawater which has undergone heat treatment, for example in an autoclave, pasteurization or sterilization, or even a seawater solution which has undergone mechanical treatment such as filtration. for example preferably less than or equal to 2 ⁇ m, or else a solution of sea water having undergone a treatment using microwaves such as under UV for example.
  • a reconstituted seawater solution can for example correspond to a distilled water solution comprising NaCl, KCl, CaCls, NaHCOs, MgSC
  • the invention also relates to the acclimatization process as described above.
  • the culture medium of the microalgae acclimatized to salt water according to the invention is enriched with a nutrient solution adapted to the autotrophic or mixotrophic culture mode.
  • the freshwater microalgae(s) acclimatized to salt water and chosen from among the fresh water strains acclimated to salt water of the genus Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella lute, present(soviridis, ) in the product according to the invention or used for the production of extract(s) present in the product according to the invention, have been produced by heterotrophy or mixotrophy in bioreactors having one or more pouch
  • an acclimatization method may comprise a step of supplying one or more freshwater microalgae chosen from among Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis.
  • one or more freshwater microalgae chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis.
  • the method according to the invention may comprise a step of seeding the microalgae or microalgae with a culture medium in a container as described above comprising fresh water.
  • this step can include a timestamp and an identification.
  • this step may include adding different factors.
  • it may be growth medium, vitamins, minerals, trace elements, culture medium or a growth medium to which chemical components have been added.
  • it may be the addition of a culture medium, growth medium, metals, vitamins, mineral salts, sea salts, acids and other components necessary for the growth of microalgae known to man of the craft such as glucose, nitrogen, phosphate, silica, inorganic microelements, organic microelements.
  • this step may be NaNOs, NaH 2 PO 4 , NH 4 Cl, H3BO3, NaH 2 PO 4 , MnCl2, FeCl 3 , FeSO 4 , Na 2 , EDTA, ZnSO 4 , CaSO 4 , MnCl 2 , NaMo0 4 , B12, B6, B1, B8, NaCl, CH 4 N 2 O, C 2 H 4 NaO 2 , CH3COOH, ZNCI 2 , COCI 2 , NH 4 , CuSO 4 , SiOs, HNO3 BG-11 , P1 , Conway Co medium , Fe, Cu, Mn, Mo, Zn and/or buffer solution.
  • This step preferably comprises 10% inoculum relative to the volume of water used.
  • such a step can comprise one or more transplanting steps.
  • this step can correspond to the process described in Table 2.
  • the method according to the invention may comprise a step of diluting the medium by increasing the salinity of the medium.
  • this step may include an increase in NaCl salt of 0.15 to 0.4 grams of salt per 24 hours at 10% of the initial culture volume.
  • this step is carried out up to a ratio of 0/1000 to 34/1000, preferably 20/1000 grams of salt per 1000 grams of water.
  • this step of Dilution may include adding seawater or reconstituted seawater as previously described.
  • solutions can be added as described above.
  • the method according to the invention may include a stage of gradual selection of resistant strains. It is a question of selecting living strains (i.e. which have resisted the change in salinity). Strains that have not resisted (i.e. dead) are preferably eliminated.
  • the dilution and selection step are carried out over a period of 3 to 8 months.
  • Such a process can be carried out in autotrophy, heterotrophy or mixotrophy.
  • the invention also relates to a process for the production of freshwater microalgae acclimatized to salt water, for example chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri , Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokin iana, Chlorella luteoviridis, capable of entering into the composition of a product according to the invention, by heterotrophy or mixotrophy in bioreactor(s) having one or more single-use, sterile pockets, bags or culture chambers, made of non-metallic, thermostable material(
  • the microalgae are microalgae of the class Trebouxiophyceae or of the class Chlorophyceae. More preferably, the freshwater microalgae acclimated to saltwater are chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis.
  • the bioreactor is preferably a device capable of integrating in a container, a permanent stainless steel support equipped with a heating belt for the pocket or pockets, bags and/or single-use culture culture chambers.
  • Each bioreactor therefore comprises at least one pocket, bag or single-use culture chamber, that is to say which contains or has at least one pocket, bag or sterile culture chamber designed in flexible thermostable polymeric material or rigid resistant up to 300°C and in particular designed from thermostable thermoplastic polymers that can undergo sterilization.
  • the pouch, bag or culture chamber is sterile because it is made of plastics such as heat-stable single-layer or multi-layer polyethylene films or heat-stable thermoplastic polymers.
  • the non-metallic material(s) resistant to corrosion and oxidation-reduction may be chosen from plastics and single-layer or multi-layer polyethylene films.
  • Disposable pouches, bags and/or culture chambers advantageously make it possible to limit oxidation, contamination, costs and delays dependent on processes related to production (cleaning and sterilization in particular) and quality assurance actions associated (qualification of equipment, validation of related processes, etc.), optimization of flows and production cycles.
  • Pockets, bags and/or culture chambers can have volumes of a few liters to several thousand liters. Preferably, they have volumes of 1 liter to 5000 liters.
  • the process according to the invention preferably uses seawater or reconstituted seawater.
  • preliminary cultures are preferably carried out in small glass tanks, with stirring under illumination, then transferred to a fermenter containing a sterile plastic polyethylene bag.
  • the biomass is collected, the emptied bag is eliminated.
  • this process makes it possible to circumvent the problems of oxidation and contamination due to the use of seawater for the production of microalgae and in particular marine chlorella or euryhalines.
  • the invention also relates to the production of an extract of microalgae from fresh water acclimatized to salt water, for example chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri , Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Ch Io re I la vulgaris, Chlorella Sorokin iana, Chlorella luteoviridis.
  • Chlorella pyrenoidosa Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata
  • Graesiella emersonii Auxenochlor
  • the microalgae are microalgae of the T rebouxiophyceae class or of the Chlorophyceae class. More preferably, the freshwater microalgae acclimated to saltwater are chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis.
  • the freshwater microalgae acclimatized to salt water are chosen from Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella luteovirdi, Chlorella protothecoides.
  • Such an extract can be made from heat treatment.
  • one or more freshwater microalgae acclimatized to salt water can undergo dehydration or drying.
  • the heat treatment is followed by grinding, mixing.
  • the particle size can be predetermined.
  • the duration and the temperature of the grinding, of the mixing can be predetermined so as to form a paste.
  • the embodiment may include a screen step. This improves homogeneity, for example.
  • a powder is suitable for use in the manufacture of a food product according to the invention.
  • such a paste is suitable for use in the manufacture of a food product according to the invention.
  • the extract may be in the form of an oil.
  • this embodiment comprises a step of pressing, of compression so as to form an oil.
  • Such an oil is preferably suitable for use in the manufacture of a food product according to the invention.
  • the invention also relates to the use of freshwater microalgae acclimatized to salt water, for example chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella vulgaris, Chlorella luteoviridis and/or at least one extract of at least one of these acclimatized freshwater microalgae in salt water for the preparation of a food product according to the invention.
  • the microalgae are microalgae of the class Trebou
  • the invention also relates to a process for manufacturing a food product from freshwater microalgae acclimated to salt water, for example chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella luteoviridis, Chlorella sorokinoviiana and/or at least one extract of at least one of these freshwater microalgae acclimatized to salt water.
  • the microalgae are microalgae of the class Trebouxiophyceae
  • the manufacturing process comprises a step of supplying freshwater microalgae acclimatized to salt water and/or one or more extract(s) of at least one of these microalgae from fresh water acclimatized to salt water.
  • the method may comprise a step of mixing with food and/or drink ingredients, and/or aromatics and/or freshwater microalgae and/or marine microalgae and/or additives and/or binders and/or yeast and/or food and/or gas, protein extract and/or lipid extract and/or vitamin extract and/or food supplement.
  • Such a process may also comprise a cooking step according to a predetermined time and temperature and/or a cooling step according to a predetermined time and temperature and/or a hygienic treatment step (for example sterilization, pasteurization, freeze-drying, ionization) and/or a conditioning step.
  • a cooking step according to a predetermined time and temperature and/or a cooling step according to a predetermined time and temperature and/or a hygienic treatment step (for example sterilization, pasteurization, freeze-drying, ionization) and/or a conditioning step.
  • Example 1 example of a process for culture by heterotrophy of a freshwater microalga acclimatized to seawater according to the invention.
  • Salt water acclimatization is achieved by increasing salinity in the culture medium. Initially the strain is cultured in fresh water without salt, then a minimum of 0.15 g to 0.4 g of salt is added per 24 hours at a rate of 10% of the initial culture volume. [119] II. Cultivation conditions
  • the culture can be carried out according to any suitable method, such as for example the method particularly suitable for chlorella, for example described in Table 1.
  • the biomass At the end of cultivation, the biomass reaches a productivity of 40 to 200 g of dry matter per litre.
  • the biomass On leaving the bioreactor, the biomass can be centrifuged from 100 to 10,000 revolutions/minute and then dried at 80°C on a cylinder dryer.
  • Example 3 examples of lipid extracts
  • the extracts according to the invention can be derived from maceration of dehydrated or fresh biomasses or by extraction with supercritical CO2 or cold pressing of a freshwater microalgae acclimated to seawater chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokin iana, Chlorella luteoviridis, according to the invention containing lipid compounds (neutral and polar lipids, chlorophyll pigments and carotenoids) from marine strains and intended to be used in the formulation of
  • the invention relates to a lipid extract formed from freshwater microalgae acclimatized to salt water, for example chosen from Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokin iana, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella luteovirdi, Chlorella protothecoides.
  • the extracts according to the invention can be protein extracts of a freshwater microalgae acclimatized to seawater chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokin iana, Chlorella luteoviridis, according to the invention obtained as a co-product of the extraction of lipids and pigments ( cold pressure or supercritical CO2) and intended to be used in the formulation of food preparations, ready meals, drinks or food supplements.
  • Chlorella pyrenoidosa Chloroi
  • Example 5 Liquid or dehydrated soup
  • An example of a product according to the invention is a soup containing from 5 to 90% of powder of a freshwater microalgae acclimatized to seawater chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii , Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pure or mixed with food ingredients (herbs, starches, spices, algae, etc.) and/or marine microalgae (Odontella aurita, Tetraselmis chuii, Nannochloropsis sp., etc.
  • the invention relates to a liquid or dehydrated soup comprising an extract of freshwater microalgae, or freshwater microalgae, acclimated to salt water, for example chosen from Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella luteovirdi, Chlorella protothecoides.
  • An example of a product according to the invention is a cracker containing 5 to 70% powder of a freshwater microalgae acclimatized to seawater chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, according to the invention pure or mixed with food ingredients (cereal or protein flour, spices and herbs, binders, etc.) and/or marine microalgae (Odontella aurita, Tetraselmis chuii
  • the invention relates to crackers comprising an extract of freshwater microalgae, or freshwater microalgae, acclimated to salt water, for example chosen from Ch Io re I la vulgaris, Ch Io re I la Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa, Ch Io re I la luteovirdi, Ch Io re I la protothecoides.
  • An example of a product according to the invention is an energy bar containing 5 to 70% of powder of a freshwater microalgae acclimatized to seawater chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, according to the invention pure or from a protein extract in mixture with food ingredients (cereal or proteinaceous proteins, nuts, dehydrated fruits, sugar, binders, etc.) and/or marine microalgae (Odontella aurita,
  • the invention relates to an energy bar comprising an extract of freshwater microalgae, or freshwater microalgae, acclimated to salt water, for example chosen from Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella luteovirdi, Chlorella protothecoides.
  • An example of a product according to the invention is a smoothie containing 5 to 40% powder or paste (30 to 50% dry matter) of a freshwater microalgae acclimated to selected from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris , Chlorella luteoviridis, according to the invention or of a protein extract of Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, and/or Chlorella
  • the invention relates to a smoothie comprising an extract of freshwater microalgae, or freshwater microalgae, acclimatized to salt water, for example chosen from Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella luteovirdi, Chlorella protothecoides.
  • Example 9 Breads and pasta (fresh or dry)
  • An example of a product according to the invention is a bread or pasta containing 2 to 25% powder or paste (30 to 50% dry matter) of a freshwater microalga acclimatized to sea water chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, according to the invention or of a protein extract of Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana
  • the invention relates to bread and pasta (fresh or dry) comprising an extract of freshwater microalgae, or freshwater microalgae, acclimatized to salt water, for example chosen from Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella luteovirdi, Chlorella protothecoides.
  • An example of a product according to the invention is a cooked dish (such as lasagna, Shepherd's pie, pizza, etc.) containing 2 to 20% powder of a freshwater microalgae acclimatized to seawater chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella vulgaris, Chlorella luteoviridis, according to the invention pure or of a protein extract and/or of microalgae named in example 9 in a mixture with the food ingredients traditionally used for the preparation of these dishes.
  • the invention relates to a frozen ready-meal comprising an extract of freshwater microalgae, or freshwater microalgae, acclimatized to salt water, for example chosen from Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella luteovirdi , Chlorella protothecoides.
  • Example 11 Oil
  • An example of a product according to the invention is an oil obtained by cold pressing or by extraction with supercritical CO2 of dehydrated biomasses of a freshwater microalgae acclimatized to seawater chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokin iana, Chlorella luteoviridis, intended for seasonings or food preparations.
  • the invention relates to an oil formed from freshwater microalgae, acclimatized to salt water, for example chosen from Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella luteovirdi, Chlorella protothecoides.
  • Example 12 Soft drinks
  • An example of a product according to the invention is a soda containing 2 to 20% powder of a freshwater microalgae acclimatized to seawater chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis de , or protein extract (60 to 90% of dry matter) mixed with water sparkling wine (natural or with the addition of CO2 gas) and fruit extracts and/or sugars and/or food colorings.
  • a freshwater microalgae acclimatized to seawater
  • the invention relates to a soda comprising an extract of freshwater microalgae, or freshwater microalgae, acclimatized to salt water, for example chosen from Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella luteovirdi, Chlorella protothecoides.
  • Example 13 Fruit juice
  • An example of a product according to the invention is a fruit juice added with 2 to 20% powder of a freshwater microalgae acclimatized to seawater chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis de Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulteoviridis, Chlorella vulekiniana, Chlorella vulteoviridis , or protein extract (60 to 90% of the dry matter) mixed with food ingredients (s
  • the invention relates to a fruit juice comprising an extract of freshwater microalgae, or freshwater microalgae, acclimatized to salt water, for example chosen from Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella luteovirdi , Chlorella protothecoides.
  • Example 14 Food supplements in the form of hard capsules or tablets
  • An example of a product according to the invention is a food supplement in the form of a hard capsule or tablet containing 10 to 100% powder of a freshwater microalgae acclimatized to seawater chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, pure or Chlorella luteoviridis mixed with Odontella aurita powder and/or mixed with Tetraselmis chuii powder and/or spirulina.
  • Chlorella pyrenoidosa Ch
  • the invention relates to a food supplement comprising an extract of freshwater microalgae, or freshwater microalgae, acclimatized to salt water, for example chosen from Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella luteovirdi, Chlorella protothecoides.
  • salt water for example chosen from Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella luteovirdi, Chlorella protothecoides.
  • An example of a product according to the invention is a food supplement in the form of a soft gel capsule or free oil containing 10 to 100% oil from a freshwater microalgae acclimatized to sea water chosen from Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokin iana, Chlorella luteoviridis pure or mixed with oil of Odontella aurita and/or Tetraselmis chuii and/or Nannochloropsis sp. and/or mixed with Thr

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Abstract

L'invention concerne un produit destiné à la consommation humaine ou animale, sous forme d'aliment ou de boisson ou de complément alimentaire, comprenant au moins une microalgue d'eau douce acclimatée à l'eau salée choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, et/ou au moins un extrait d'au moins une microalgue d'eau douce acclimatée à l'eau salée choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis.

Description

Produit comprenant au moins une microalgue d’eau douce capable d’être cultivée en eau salée et procédé associé
[1] Domaine technique
[2] L’invention concerne des produits destinés à l’alimentation humaine ou nutrition animale, en particulier sous forme d’aliment, de boisson ou de complément alimentaire, comprenant des microalgues spécifiques.
[3] État de l’art
[4] Les microalgues sont de plus en plus utilisées pour de nombreuses applications, du fait de leurs propriétés remarquables qui varient d’une microalgue à une autre.
[5] Toutefois, pour pouvoir être utilisées pour l’alimentation humaine, les microalgues doivent bénéficier d’une autorisation règlementaire.
[6] Actuellement, seules des souches de microalgues d’eau douce bénéficient d’une telle autorisation réglementaire.
[7] Parmi les microalgues d’eau douce, la plus connue est la spiruline, qui présente un profil protéique élevé.
[8] Certaines chlorelles sont également autorisées pour l’alimentation humaine. La taxonomie des Chlorelles évolue régulièrement depuis la découverte de Chlorella vulgaris en 1890 par Beijerinckle. En conséquence, les 3 espèces de Chlorella homologuées comme consommées en Europe avant 1997, à savoir Chlorella pyrenoidosa, Chlorella vulgaris et Chlorella luteoviridis, ont subi ces multiples révisions : certaines espèces ont été retirées du genre Chlorella, d’autres ont été transférées vers de nouveaux genres.
[9] Les Chlorelles autorisées en alimentation humaines sont des souches cultivées dans l’eau douce, leurs profils en acides aminés essentiels et surtout en acides gras ne sont pas particulièrement intéressants pour l’alimentation humaine. Il en est de même pour Euglena, également autorisée pour l’alimentation humaine au Japon souche d’eau douce, cultivée en eau douce, qui possède un profil en acides gras peu intéressant sur l’aspect nutritionnel.
[10] Les microalgues particulièrement intéressantes pour la nutrition humaine sont des microalgues marines notamment du fait de leur profil lipidique très différent de celui des microalgues d’eau douce. En particulier, les acides gras polyinsaturés à longues chaines de carbone sont principalement présents chez les souches marines. En effet, la majorité des microorganismes marins utilisent ces molécules notamment pour maintenir la plasticité, fluidité des membranes cellulaires en milieux salins et l’intégrité cellulaire lors de chocs osmotiques en milieux euryhalins. On peut citer le cas des Thraustochytrides qui font l’objet de cultures cellulaires intensives pour la production d’huile riche en DHA (acide
FEUILLE DE REMPLACEMENT (RÈGLE 26) docosahexaénoïque), ces Thraustochytrides proviennent de zones de mangroves intertidales. Grace au DHA, elles se sont adaptées pour faire face aux amples différences de salinité typique de ses zones. De même, les microalgues marines utilisent les acides gras polyinsaturés à longues chaines de carbone pour résister à des températures basses. On peut citer le cas des pingouins sur la banquise dont les pattes résistent au gel grâce à la présence de colonies de microalgues marines hautement productrices d’acides gras polyinsaturés à longues chaines de carbone.
[11 ] Or, les acides gras polyinsaturés à longues chaines sont d’une grande importance pour l’équilibre et fonctionnement physiologique des humains ou des animaux. Le DHA est très difficilement synthétisé dans notre organisme avec de faibles rendements. Pourtant, le cerveau des humains contient 60 % d’acide gras dont 14% de DHA et leur rétine est constituée à 93% de DHA. Le DHA est dès lors considéré comme un acide gras indispensable, et doit donc être apporté par l’alimentation.
[12] Quelques champignons marins et quelques bactéries marines sont capables de produire des acides gras polyinsaturés à longues chaines de carbone, mais ce sont essentiellement les microalgues marines qui en sont les principales productrices. En servant d’aliment de base pour le zooplancton elles transmettent ces molécules à l’ensemble de la chaine alimentaire présente dans les océans.
[13] L’être humain et l’animal ont un besoin important en acides gras polyinsaturés à longues chaines de carbone. Par exemple, en Europe, le besoin en apport journalier recommandé par les agences sanitaires, de préférence en DHA, est de 250 mg par jour, ce qui correspond à environ 250 000 tonnes annuel.
[14] L’apport en acides gras polyinsaturés à longue chaîne des populations humaines à considérablement diminué depuis les 30 dernières années, principalement du fait de l’accroissement de la part de produits alimentaire issue de l’aquaculture marine. Les produits d’élevage n’apportant qu’une faible proportion de DHA et EPA comparativement aux produits sauvages issus de la pêche. L’EPA (Acide eïcosapentaènoïque) est également considéré comme un acide gras indispensable à l’organisme. Son apport journalier recommandé par les agences sanitaires est de préférence également de 250 mg/jour. Généralement les autorités sanitaires préconisent un apport journalier en DHA et EPA de 500 mg/jour.
[15] Il a par exemple été décrit dans le document KR20200068484 une méthode pour augmenter la production d’acide gras par des microalgues d’eau douce. Pour cela les microalgues sont exposées à différentes concentrations salines. Néanmoins, ces acides gras ne sont ni des acides gras polyinsaturés à longue chaine ni EPA ou DHA. [16] Le document CN1 11 100885 décrit également une méthode de culture de microalgue pour augmenter la production d’huile par les microalgues. Pour cela ce document décrit une adaptation en CO2 et en intensité lumineuse des microalgues en exposant la culture à des cycles de luminosité et d’obscurité. Toutefois, ces huile ne sont pas propres à des produits de consommations.
[17] Le document KR10183941 1 divulgue une huile comprenant de l’acide linoléique (C18 :2) et de l’acide linolenique (C18 :3) pour la consommation. Toutefois, la méthode de culture ne comprend pas de microalgues marine.
[18] Le document EP3381301 décrit une méthode de production d’un produit alimentaire à haute teneur en protéine comprenant des microalgues. Ce document ne décrit pas d’acide gras polyinsaturés à longue chaine.
[19] Un des objectifs de l’invention est donc de proposer des produits à base de microalgues marines, en particulier pour répondre au besoin d’apports en acides gras à longues chaînes et en acides aminés essentiels de l’être humain et de l’animal.
[20] Or, jusqu’à aujourd’hui l’utilisation de microalgues marines en alimentation humaine n’existe pas. Même si en Europe deux souches de microalgues marines Odontella aurita et Tetraselmis chuii ont bien obtenu un agrément “novel food” (nouvel aliment) pour l’alimentation humaine, cet agrément ne concerne que des matrices d’utilisation très réduites puisqu’elles ne sont autorisées que pour le segment alimentaire des pâtés types terrines et quelques condiments.
[21 ] De plus, ces microalgues sont des diatomées très difficiles à produire et donc non utilisables à l’échelle industrielle.
[22] Il existe donc un besoin important en produits destinés à la consommation humaine ou animale à base de microalgues marines palliant les inconvénients de l’art antérieur.
[23] En particulier, il existe un besoin important en produits destinés à la consommation humaine ou animale à base de microalgues marines et riche en acide gras polyinsaturés à longue chaine, plus particulièrement en EPA et DHA.
[24] Résumé de l’invention
[25] L’invention vise à pallier ces inconvénients. Ce qui suit présente un résumé simplifié d'aspects, de modes de réalisation et d'exemples sélectionnés de la présente invention dans le but de fournir une compréhension de base de l'invention. Toutefois, le résumé de l’invention ne constitue pas un aperçu exhaustif de tous les aspects, modes de réalisation et exemples de l'invention. Le seul but du résumé est de présenter des aspects, des modes de réalisation et des exemples sélectionnés de l'invention sous une forme concise en guise d'introduction à la description plus détaillée des aspects, des modes de réalisation et des exemples de l'invention qui suivent le résumé.
[26] L’invention concerne en particulier un produit destiné à la consommation humaine ou animale, par exemple sous forme d’aliment ou de boisson ou de complément alimentaire, comprenant au moins une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée, et/ou au moins un extrait d’une telle microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée, la ou les microalgue(s) d’eau douce acclimatées à l’eau salée et/ou le ou les extraits de la ou des microalgue(s) d’eau douce acclimatées à l’eau salée comprenant au moins 0,1% d’acide eicosapentaénoïque (EPA), et/ou au moins 0,1% d’acide docosahexaénoïque (DHA) en poids de matière sèche.
[27] Selon d’autres caractéristiques optionnelles du produit destiné à la consommation humaine ou animale, il peut inclure facultativement une ou plusieurs des caractéristiques suivantes, seules ou en combinaison : il comprend au moins 0,1% d’EPA et au moins 0,1% de DHA en poids de matière sèche.
- la microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée appartient aux classes Trebouxiophyceae ou Chlorophyceae. il comprend au moins 0,2% d’EPA et/ou au moins 0,2% de DHA en poids de matière sèche.
Il comprend au moins 0,2% d’EPA et au moins 0,2% de DHA en poids de matière sèche. Il comprend entre 0,2 et 90 % en poids de biomasse d’au moins une microalgue d’eau douce acclimatée à acclimatée à l’eau salée choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis et/ou d’au moins un extrait d’une telle microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée. En particulier, il comprend entre 0,2 et 90 % en poids de biomasse d’au moins une microalgue d’eau douce acclimatée à acclimatée à l’eau salée choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis et/ou d’au moins un extrait d’une telle microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée.
- il comprend entre 0,2 et 90 % en poids de biomasse d’au moins une microalgue d’eau douce acclimatée à acclimatée à l’eau salée choisie parmi Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella luteovirdi, Chlorella protothecoides et/ou d’au moins un extrait d’une telle microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée.
Il comporte au moins 0,005 g de sodium pour 100g de matière sèche. En particulier, comporte au moins 0,01 g de sodium pour 100 g de matière sèche ; de préférence au moins 0,1 g de sodium pour 100 g de matière sèche ; de façon plus préférée au moins 0,2 g de sodium pour 100 g de matière sèche; de façon encore plus préférée au moins 0,4 g de sodium pour 100 g de matière sèche.
- la ou les microalgue(s) d’eau douce ont été acclimatée(s) à l’eau salée en augmentant graduellement la salinité de l’eau dans laquelle les microalgues sont cultivées.
- la ou les microalgue(s) d’eau douce ont été acclimatée(s) à l’eau salée en introduisant dans le milieu de culture une solution de 0,15 g à 0,4 g de sel par période de 24 h à raison de 10% du volume de culture initial.
- la ou les microalgue(s) d’eau douce ont été acclimatée(s) à l’eau salée en introduisant dans le milieu de culture une solution d’eau de mer ou une solution d’eau de mer reconstituée.
- la ou les microalgue(s) d’eau douce ont été acclimatée(s) à l’eau salée en augmentant la salinité de l’eau dans laquelle les microalgues ont été cultivées de 0/1000 à maximum 34/1000.
- la ou les microalgue(s) d’eau douce ont été acclimatée(s) à l’eau salée en augmentant la salinité de l’eau dans laquelle les microalgues ont été cultivées pendant 3 à 8 mois, de préférence 8 à 35 semaines.
- la ou les microalgue(s) d’eau douce ont été acclimatée(s) à l’eau salée en augmentant la salinité de l’eau dans laquelle les microalgues ont été cultivées de façon à sélectionner les souches de plus en plus résistantes au sel.
- la ou les microalgue(s) d’eau douce acclimatée(s) à l’eau salée ont été produite(s) par autotrophie ou hétérotrophie ou mixotrophie en bioréacteur(s) présentant une ou plusieurs poche(s), sac(s) et/ou chambre(s) de culture à usage unique, stériles, en matériau(x) thermostables non métallique(s) résistant à la corrosion et à l’oxydoréduction. En particulier, la ou les microalgue(s) d’eau douce acclimatée(s) à l’eau salée peut avoir été produite par hétérotrophie ou mixotrophie en bioréacteur(s).
Il s’agit d’un produit céréalier, d’un produit de boulangerie, d’un gâteau sucré ou salé, d’un biscuit sucré ou salé, d’une sucrerie, d’une soupe, d’une sauce, d’une chips de légumes, d’un condiment, d’une huile, d’un plat cuisiné, d’un produit transformé à partir de produits marins, d’un laitage. Il est possible aussi de mentionner les aliments innovants tels que les substituts de viande.
Il s’agit d’un soda, d’un jus de fruits, d’une boisson énergétique, d’une eau aromatisée, d’un sirop ou d’une boisson alcoolisée. - la ou les microalgue(s) d’eau douce acclimatées à l’eau salée et/ou le ou les extraits de la ou des microalgue(s) d’eau douce acclimatées à l’eau salée comprennent au moins 5 g de lipides pour 100 g de matière sèche de la biomasse ou de l’extrait, de préférence au moins 10 g de lipides pour 100 g de matière sèche de la biomasse ou de l’extrait, de façon plus préférée au moins 15 g de lipides pour 100 g de matière sèche de la biomasse ou de l’extrait, de façon encore plus préférée au moins 20 g de lipides pour 100 g de matière sèche de la biomasse ou de l’extrait.
- la ou les microalgue(s) d’eau douce acclimatées à l’eau salée et/ou le ou les extraits de la ou des microalgue(s) d’eau douce acclimatées à l’eau salée comprennent au moins 400 mg d’acide oléique, au moins 1200 mg d’acide alpha linolénique (ALA), au moins 11 mg d’acide arachidonique, au moins 1000 mg d’acide eicosapentaénoïque (EPA), au moins 1000 mg d’acide docosahexaénoïque (DHA) pour 100 g de matière sèche de la biomasse ou de l’extrait.
- la ou les microalgue(s) d’eau douce acclimatées à l’eau salée et/ou le ou les extraits de la ou des microalgue(s) d’eau douce acclimatées à l’eau salée comprennent au moins 25 g de protéines pour 100 g de matière sèche de la biomasse ou de l’extrait.
- l’extrait de microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée est sous forme d’une poudre, d’une pâte et/ou d’un extrait huileux.
Il présente un profil nutritionnel sensiblement identique à celui des microalgues d’eau douce acclimatées à l’eau salée.
[28] En outre, l’invention porte sur un procédé de production d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée en augmentant graduellement la salinité de l’eau dans laquelle les microalgues d’eau douce sont cultivées, la ou les microalgue(s) d’eau douce étant cultivée par hétérotrophie ou mixotrophie en bioréacteur(s) présentant une ou plusieurs poches, sacs et/ou chambres de culture à usage unique, stériles, en matériau(x) thermostables non métallique(s) résistant à la corrosion et à l’oxydoréduction, la ou les microalgue(s) d’eau douce acclimatées à l’eau salée comprenant au moins 0,1% d’EPA et/ou au moins 0,1% de DHA en poids de matière sèche. Le procédé de production peut aussi comporter une culture en autotrophie.
[29] Selon d’autres caractéristiques optionnelles du procédé, il peut inclure facultativement une ou plusieurs des caractéristiques suivantes, seules ou en combinaison :
- l’augmentation graduelle de la salinité comprend une dilution dans de l’eau, de préférence eau douce, dont on fait augmenter la salinité graduellement en allant préférentiellement de 0 à maximum 40 grammes de sel pour 1000 g d’eau. Il comprend la sélection de souches résistantes au sel jusqu’à la salinité recherchée, de préférence une sélection graduelle des souches qui développent un métabolisme propre au milieu marin.
- l’acclimatation comprend un accroissement de la salinité dans un milieu de culture au minimum de 0,15 g à 0,4 g de par 24 heures à raison de 10% de volume de culture initial.
Il comprend une étape d’ajout d’une solution d’eau de mer ou d’une solution d’eau de mer reconstituée, la solution d’eau de mer ayant préalablement subi un traitement thermique et/ou mécanique et/ou par microondes, une solution d’eau de mer reconstituée comprenant de l’eau distillée et du NaCI, KCI, CaCIs, NaHCOs, MgSC .
[30] En outre, l’invention porte sur une utilisation de biomasse d’au moins une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée en augmentant graduellement la salinité de l’eau dans laquelle les microalgues sont cultivées, ladite microalgue étant choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, et/ou d’au moins un extrait d’au moins une telle microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée, comme rehausseur et/ou exhausteur de goût dans des produits alimentaires ou des boissons.
[31 ] Elle porte aussi sur une utilisation de biomasse d’au moins une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée, par exemple en augmentant graduellement la salinité de l’eau dans laquelle les microalgues sont cultivées, et/ou d’au moins un extrait d’au moins une telle microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée, comme source de protéines et/ou de lipides et/ou source de polysaccharides et/ou de minéraux et/ou oligo-éléments dans des produits alimentaires ou des boissons ou des compléments alimentaires, la ou les microalgue(s) d’eau douce acclimatées à l’eau salée et/ou le ou les extraits de la ou des microalgue(s) d’eau douce acclimatées à l’eau salée comprenant au moins 0,1% d’EPA et/ou au moins 0,1% de DHA en poids de matière sèche.
[32] Elle porte aussi sur une utilisation de biomasse d’au moins une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée en augmentant graduellement la salinité de l’eau dans laquelle les microalgues sont cultivées, ladite microalgue étant choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, et/ou d’au moins un extrait d’au moins une telle microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée, comme source de protéines d’origine marine et/ou de lipides d’origine marine et/ou source de polysaccharides d’origine marine et/ou de minéraux d’origine marine et/ou oligo-éléments d’origine marine dans des produits alimentaires ou des boissons ou des compléments alimentaires.
[33] En outre, pour répondre aux problèmes de l’état de la technique, l’invention propose d’utiliser des souches de microalgues spécifiques d’eau douce, préférentiellement des microalgues d’eau douce autorisées en alimentation humaine ou qui pourraient être autorisées (notamment du fait de l’évolution de la taxonomie), et de les acclimater à l’eau salée pour en faire des souches présentant les profils nutritionnels, notamment en acides gras et/ou en acides aminés, propres aux souches marines. Ces souches d’eau douce marinisées, du fait de leur adaptation à l’eau salée, présentent en effet des profils lipidiques et protéiques spécifiques de souches marines et peuvent être utilisées pour apporter des éléments nutritionnels essentiels pour l’être humain ou l’animal. De préférence, ces souches d’eau douce marinisées ou leur extraits comporte du EPA et du DHA.
[34] En particulier, l’invention vise l’utilisation de microalgues d’eau douce marinisées, c’est-à-dire capables d’être cultivées dans de l’eau salée, lesdites microalgues étant des microalgues de la classe des Trebouxiophyceae ou de la classe des Chlorophyceae, par exemple choisies parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophora, Chlorella vulgaris, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis et leurs mélanges.
[35] En particulier, l’invention vise l’utilisation de microalgues d’eau douce marinisées, c’est-à-dire capables d’être cultivées dans de l’eau salée, lesdites microalgues étant des microalgues de la classe des Trebouxiophyceae ou de la classe des Chlorophyceae, par exemple choisies parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophora, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis et leurs mélanges.
[36] De façon préférée, l’invention vise l’utilisation de microalgues d’eau douce marinisées, c’est-à-dire capables d’être cultivées dans de l’eau salée, lesdites microalgues étant des microalgues de la classe des Trebouxiophyceae ou de la classe des Chlorophyceae choisies parmi Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa (aussi appelée Auxenochlorella pyrenoidosa), Chlorella luteovirdi (aussi appelée Jaagichlorella luteoviridis), Chlorella protothecoides (aussi appelée Auxenochlorella protothecoides) et leurs mélanges.
[37] Certaines Trebouxiophyceae et Chlorophyceae d’eau douce sont industriellement cultivées dans le monde et notamment la production annuelle de biomasse sèche de chlorelle dépasse les 2 500 tonnes.
[38] Tous les travaux concernant l’alimentation humaine réalisés jusqu’à présent sur les Trebouxiophyceae et les Chlorophyceae et leurs méthodes de culture concernent l’utilisation d’eau douce et de souches qui proviennent d’environnent sans sel, d’une part parce que la très grande majorité des Trebouxiophyceae et des Chlorophyceae recensées proviennent d’environnent sans sel et d’autre part, parce que les technologies de production de souches en eau saline nécessitent de modifier de façon compliquée les technologies connues pour la production en eau douce.
[39] Or, de façon surprenante, selon l’invention, les microalgues d’eau douce appartenant aux classes Trebouxiophyceae ou Chlorophyceae, ne sont jusqu’alors jamais décrites dans des produits de consommation humaine comme cultivées en milieu marin ou euryhalin, alors que, lorsqu’elles sont adaptées à l’eau de salée, elles présentent des caractéristiques remarquables, différentes de celles des souches d’eau douce, qui permettent une utilisation spécifique. De préférence, elles présentent un profil lipidique particulièrement intéressant pour couvrir les apports recommandés journaliers en acides gras indispensables de type EPA et DHA. En particulier, selon l’invention, les profils en lipides des microalgues dépendant principalement de la salinité de l’eau, les microalgues marines ou euryhalines comprenant des acides gras polyinsaturés à longue chaîne contrairement aux microalgues d’eau douce qui n’en produisent pas.
[40] Cela concerne en particulier Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophora, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum ; et de façon préférée, cela concerne les microalgues Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophora, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum. L’invention concerne en particulier un produit alimentaire comportant une ou plusieurs microalgues sélectionnées parmi Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella luteovirdi, Chlorella protothecoides.
[41] C’est pourquoi l’invention a pour objet un produit destiné à la consommation humaine ou animale, par exemple sous forme d’aliment ou de boisson ou de complément alimentaire, comprenant au moins une souche d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée. Un tel produit peut être utilisé en alimentation ou comme complément alimentaire chez l’être humain ou l’animal, notamment comme exhausteur de goût, source de protéines d’origine marine et/ou source de lipides d’origine marine et/ou source de minéraux et d’oligo-éléments d’origine marine, dans les produits alimentaires, des boissons ou des compléments alimentaires. Comme cela sera détaillé par la suite, la ou les microalgue(s) d’eau douce acclimatées à l’eau salée et/ou le ou les extraits de la ou des microalgue(s) d’eau douce acclimatées à l’eau salée comprennent au moins 0,1% d’EPA et/ou au moins 0,1 % de DHA en poids de matière sèche.
[42] En particulier, l’invention a pour objet un produit destiné à la consommation humaine ou animale, par exemple sous forme d’aliment ou de boisson ou de complément alimentaire, comprenant au moins une souche d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, et/ou au moins un extrait d’au moins une souche d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis.
[43] Avantageusement, un tel produit peut être utilisé en alimentation ou comme complément alimentaire chez l’être humain ou l’animal, notamment comme exhausteur de goût, source de protéines d’origine marine et/ou source de lipides d’origine marine et/ou source de minéraux et d’oligo-éléments d’origine marine, dans les produits alimentaires, des boissons ou des compléments alimentaires.
[44] Les Trebouxiophyceae et Chlorophyceae peuvent être cultivées en conditions autotrophes en plein air ou en photobioréacteur et en conditions hétérotrophes en cuve par fermentation en présence de matières organiques mais sans lumière. Elles peuvent aussi croitre en mixotrophie, c’est-à-dire en présence de matières organiques et d’un peu de lumière. Dans ce cas, la lumière n’intervient pas comme source d’énergie mais agit notamment sur des plastes pour activer des fonctions physiologiques spécifiques et notamment activer la voie lévulinique.
[45] Les techniques de productions de plusieurs microalgues Trebouxiophyceae ou Chlorophyceae d’eau douce tant en autotrophie, hétérotrophie que mixotrophie sont maintenant considérées comme parfaitement maitrisées. Adapter les souches Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis à une eau salée est possible dans la mesure où l’on acclimate graduellement les souches.
[46] Néanmoins, l’utilisation de l’eau salée présente une grande contrainte pour les techniques de production existantes du fait de son caractère très corrosif. Les techniques de production qui permettent d’atteindre des coûts de productions faibles concernent la production hétérotrophe ou mixotrophe en fermenteur métallique de type inox. L’eau salée du fait de sa capacité oxydo-réductrice attaque tant les cuves que les électrodes, tuyaux, canalisations, valves et rapidement les installations se dégradent et la stérilisation et l’axénie de la culture deviennent alors difficile à conserver voire impossible.
[47] Il est par conséquent nécessaire de proposer une nouvelle approche de culture des microalgues d’eau douce acclimatées à l’eau salée permettant de palier à la corrosion et contaminations des cultures les microalgues d’eau douce étant choisies parmi les souches de microalgues d’eaux douces appartenant aux classes Trebouxiophyceae ou Chlorophyceae par exemple parmi Chlorella pyrenoidosa, Chlorella vulgaris, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis.
[48] De préférence, les microalgues d’eau douce sont choisies parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis. [49] De façon plus préférée, les microalgues d’eau douce sont choisies parmi Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella luteovirdi, Chlorella protothecoides.
[50] La présente invention concerne donc préférentiellement les microalgues d’eau douce appartenant aux classes Trebouxiophyceae ou Chlorophyceae, en particulier les souches citées cultivées par hétérotrophie ou mixotrophie, dans des systèmes résistant à la corrosion des ions chlorures qui provoquent une importante corrosion sur de nombreux matériaux tels que les métaux. Les souches de microalgues selon l’invention sont produites en bioréacteur ne présentant pas de matériaux corrosifs, car à usage unique.
[51 ] A cet effet, l’invention a aussi pour objet un procédé de production de microalgues d’eau douce acclimatée à l’eau salée et cultivée ensuite par hétérotrophie ou mixotrophie en bioréacteurs présentant une ou plusieurs poches à usage unique, stériles, en matériau(x) non métallique(s) résistants à la corrosion et à l’oxydoréduction, en particulier les microalgues d’eau douce appartenant aux classes Trebouxiophyceae ou Chlorophyceae.
[52] Avantageusement un tel procédé permet de produire de façon efficace et rentable des microalgues d’eau douce, de préférence acclimatées en eau salée, appartenant aux classes Trebouxiophyceae ou Chlorophyceae telles que Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella vulgaris, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, de préférence Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis.
[53] L’invention est à présent décrite en détails.
[54] Description détaillée de l’invention
[55] L’invention a donc pour objet un produit destiné à la consommation humaine ou animale, sous forme d’aliment ou de boisson ou de complément alimentaire, comprenant au moins une souche de microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée appartenant aux classes Trebouxiophyceae ou Chlorophyceae.
[56] La souche de microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée est par exemple choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella vulgaris, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis et/ou au moins un extrait d’au moins l’une de ces microalgues d’eau douce acclimatée à l’eau salée. En particulier, la souche de microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée est choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis et/ou au moins un extrait d’au moins l’une de ces microalgues d’eau douce acclimatée à l’eau salée
[57] En particulier, l’invention a donc pour objet un produit destiné à la consommation humaine ou animale, par exemple sous forme d’aliment ou de boisson ou de complément alimentaire, comprenant au moins une souche de microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Chlorella vulgaris, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis et/ou au moins un extrait d’au moins l’une de ces microalgues d’eau douce acclimatée à l’eau salée ; de préférence comprenant au moins une souche de microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis et/ou au moins un extrait d’au moins l’une de ces microalgues d’eau douce acclimatée à l’eau salé.
[58] Par microalgue d’eau douce ou souche de microalgue d’eau douce « acclimatée à l’eau salée » ou « marinisée » selon l’invention on entend une souche de microalgue qui est capable d’être cultivée dans l’eau salée, qui s’est adaptée pour être cultivée dans de l’eau salée, alors qu’il s’agit initialement d’une souche cultivée en eau douce. La souche cultivable en eau douce a été acclimatée à l’eau salée, pour pouvoir être cultivée en eau salée, de façon à développer un profil nutritionnel, notamment en acides gras et/ou en acides aminés essentiels, proche ou identique à celui des microalgues marines. En particulier, une microalgues d’eau douce acclimatée à l’eau salée sera une souche de microalgue d’eau douce appartenant aux classes Trebouxiophyceae ou Chlorophyceae acclimatée à l’eau salée. En outre, une microalgue d’eau douce peut aussi correspondre à une microalgue dulcicole. En outre, une microalgue acclimatée à l’eau salée peut correspondre à une microalgue acclimatée à un milieu de culture salé, salé dans le sens salin, de composition chimique proche d’une eau de mer.
[59] Le produit selon l’invention peut être tout type d’aliments tels que notamment des pâtes, barres de céréales, plats préparés, plats cuisinés, plats sous forme de poudres, de concentrés humides pâtes ou liquides ou de macérât huileux ou aqueux. Préférentiellement, le produit est un aliment choisi parmi les produits céréaliers, les produits de boulangerie, les gâteaux sucrés ou salés, les biscuits sucrés ou salés, les sucreries, les soupes, les sauces, les chips de légumes, les condiments, les huiles, les plats cuisinés, les produits transformés à partir de produits marins, les laitages. Ils peuvent aussi inclure les substituts alimentaires aux produits de la mer (poissons et fruits de mer). Il peut s’agir également d’une boisson telle que notamment une boisson choisie parmi les sodas, les jus de fruits, les boissons énergétiques, les eaux aromatisées, les sirops ou les boissons alcoolisées. Il peut s’agir aussi d’un complément alimentaire pouvant se présenter notamment sous forme de gélules souples ou dures, de cachets ou comprimés compressés choquables ou effervescents, de bonbons, de sucreries à mâcher ou d’ampoules buvables.
[60] Préférentiellement le produit selon l’invention comprend entre 0,1 et 99 % en poids de biomasse d’au moins une microalgue d’eau douce de la classe des Trebouxiophyceae ou de la classe des Chlorophyceae, acclimatée à l’eau salée, et par exemple choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis et/ou d’un extrait d’au moins une de ces microalgues d’eau douce acclimatée à l’eau salée. De préférence, elles sont choisies parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis et/ou d’un extrait d’au moins une de ces microalgues d’eau douce acclimatée à l’eau salée.
[61 ] Pour se protéger de l’eau salée, les souches marinisées de microlagues obtenues à partir de souches d’eau douce, présentent des acides gras polyinsaturés à longues chaines, tels que EPA et/ou DHA, qui rendent leurs membranes plus souple et plus adaptée à l’osmorégulation. Aussi, très préférentiellement, la ou les microalgues de la classe des Trebouxiophyceae ou de la classe des Chlorophyceae d’eau douce acclimatée à l’eau salée par exemple choisie(s) parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, et/ou le ou les extraits d’au moins une de ces microalgues d’eau douce acclimatée à l’eau salée, présente(s) dans le produit selon l’invention, comprennent de l’EPA et/ou du DHA, de façon préférée au moins 0,1 % d’EPA et/ou au moins 0,1 % de DHA en poids de matière sèche de la biomasse ou de l’extrait, encore plus préférentiellement au moins m 0,2% d’EPA et/ou au moins 0,2% de DHA.
[62] En particulier, la ou les microalgues de la classe des T rebouxiophyceae ou de la classe des Chlorophyceae d’eau douce acclimatée à l’eau salée par exemple choisie(s) parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, et/ou le ou les extraits d’au moins une de ces microalgues d’eau douce acclimatée à l’eau salée, présente(s) dans le produit selon l’invention, comprennent de l’EPA et/ou du DHA, de façon préférée au moins 0,1% d’EPA et/ou au moins 0,1% de DHA en poids de matière sèche de la biomasse ou de l’extrait, encore plus préférentiellement au moins m 0,2% d’EPA et/ou au moins 0,2% de DHA.
[63] Les souches marinisées de microalgues obtenues à partir de souches d’eau douce, présentent un profil nutritionnel particulièrement intéressant. En effet, comme expliqué précédemment, ces souches marinisées de microalgues présentent un profil nutritionnel en particulier lipidique non retrouvés dans les souches de microalgues d’eau douce cultivées classiquement en conditions non salines. L’acclimatation à l’eau salée modifie le métabolisme et la biochimie des souches citées ci-dessus. Une illustration de ces changements est représentée dans les Tableaux A à C ci-dessous :
[64] Tableau A : Composition pour 100 g de matière sèche.
Figure imgf000016_0001
Figure imgf000017_0001
[65] En outre, les souches marinisées de microalgues obtenues à partir de souches d’eau douce présentent un profil nutritionnel particulièrement avantageux en alimentation humaine ou animale. En effet, les souches marinisées de microalgues obtenues à partir de souches d’eau douce présentent un profil protéique, un profil lipidique et un profil en micronutriments qui permettent de hautement participer à la couverture des besoins et à couvrir les apports journaliers recommandés. L’acclimatation des souches de microalgues citées à l’eau salée permet de développer un profil nutritionnel qui n’est pas retrouvé pour les mêmes souches cultivées en eau douce.
[66] Le Tableau B ci-dessous illustre le profil en acides aminés essentiels.
[67] Tableau B : Profil en acides aminés essentiels (g) pour 100g de matière sèche
Figure imgf000017_0002
[68] Le tableau C représente le profil en acides gras
[69] Tableau C : Profil en acides gras (mg) pour 100g de matière sèche
Figure imgf000018_0001
[70] En outre, un produit alimentaire selon l’invention pourra présenter un ratio massique d’acides gras insaturés sur acides gras saturés supérieur à 1 . De préférence, il présentera un ratio massique d’acide gras insaturés sur acide gras saturés supérieur à 1 ,5 ; de façon plus préférée supérieur à 2 ; et de façon encore plus préférée supérieur à 2,5.
[71 ] Un produit alimentaire selon l’invention pourra comporter de l’EPA à une teneur massique supérieure à 0,3 % des acides gras du produit alimentaire ; de préférence à une teneur massique supérieure à 1 % des acides gras du produit alimentaire ; de façon plus préférée à une teneur massique supérieure à 5 % des acides gras du produit alimentaire ; et de façon encore plus préférée à une teneur massique supérieure à 10 % des acides gras du produit alimentaire. Par exemple, il pourra représenter entre 0,3 à 30 % des acides gras du produit alimentaire.
[72] Un produit alimentaire selon l’invention pourra comporter du DHA à une teneur massique supérieure à 0,3 % des acides gras du produit alimentaire ; de préférence à une teneur massique supérieure à 1 % des acides gras du produit alimentaire ; de façon plus préférée à une teneur massique supérieure à 5 % des acides gras du produit alimentaire ; et de façon encore plus préférée à une teneur massique supérieure à 10 % des acides gras du produit alimentaire. Par exemple, il pourra représenter entre 0,3 à 30 % des acides gras du produit alimentaire.
[73] Ainsi, un produit alimentaire selon l’invention comprenant au moins une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée peut présenter un profil nutritionnel en protéine, lipide et micronutriment avantageux participant à la couverture des besoins en acides aminés essentiels, en acide gras indispensables, en oméga-3 ainsi qu’en vitamines, minéraux et oligoéléments. De façon préférée, un produit alimentaire selon l’invention comprenant au moins une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée peut présenter un profil nutritionnel en acides gras insaturés, notamment en oméga-3, enrichie par rapport à un produit alimentaire l’invention comprenant une microalgue d’eau douce non acclimatée à l’eau salée.
[74] De préférence, un produit alimentaire selon l’invention présente un profil nutritionnel, en particulier une teneur en acides gras insaturés, sensiblement identique à celui de microalgues d’eau douce acclimatée à l’eau salée par exemple choisies parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis et/ou au moins un extrait d’une telle microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée. Par sensiblement on entend une valeur variant de moins de 30 % de préférence de moins de 20 % avec la valeur de référence.
[75] Par ailleurs, un extrait au sens de l’invention peut correspondre à une poudre, une pâte, un extrait huileux. Un tel extrait peut être obtenu à partir d’une ou plusieurs microalgues d’eau douce acclimatée à l’eau salée par exemple choisies parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis et leurs mélanges.
[76] Le produit selon l’invention peut être caractérisé également par une saveur particulière apportée par la présence de microalgues d’eau douce acclimatée à l’eau salée choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis. De préférence, le produit selon l’invention présente des qualités organoleptiques améliorées en relation avec la présence de microalgues d’eau douce acclimatée à l’eau salée choisie. Par exemple, il peut s’agir du goût, de l’odeur, de l’aspect, de la couleur, de la texture. En effet ces microalgues peuvent être utilisées comme rehausseur et/ou exhausteur de goût dans des produits alimentaires ou des boissons. Ainsi l’invention vise également l’utilisation de biomasse d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Ch Io re I la vulgaris, Chlorella Sorokin iana, Chlorella luteoviridis et/ou d’au moins un extrait de ladite microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée, comme rehausseur et/ou exhausteur de goût dans des produits alimentaires ou des boissons.
[77] Selon un autre aspect, du fait de la composition particulière et remarquable des microalgues d’eau douce acclimatées à l’eau salée choisies parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokin iana, Chlorella luteoviridis, l’invention a également pour objet l’utilisation de biomasse choisie parmi une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokin iana, Chlorella luteoviridis, et/ou d’au moins un extrait de ladite microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée, comme source de protéines, préférentiellement de protéines d’origine marine, et/ou de lipides, préférentiellement de lipides d’origine marine et/ou source de polysaccharides, préférentiellement de polysaccharides d’origine marine, et/ou de minéraux et/ou oligo-éléments, préférentiellement de minéraux et/ou d’oligo-éléments d’origine marine, dans des produits alimentaires ou des boissons ou des compléments alimentaires.
[78] Selon un autre aspect, en particulier l’invention a également pour objet l’utilisation de biomasse choisie parmi une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, et/ou d’au moins un extrait de ladite microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée, comme source de protéines, préférentiellement de protéines d’origine marine, et/ou de lipides, préférentiellement de lipides d’origine marine et/ou source de polysaccharides, préférentiellement de polysaccharides d’origine marine, et/ou de minéraux et/ou oligo-éléments, préférentiellement de minéraux et/ou d’oligo-éléments d’origine marine, dans des produits alimentaires ou des boissons ou des compléments alimentaires.
[79] Ainsi, l’invention permet d’apporter à l’homme ou l’animal des lipides présents exclusivement dans les microalgues marines ou euryhalines comme notamment les acides gras polyinsaturés de la famille des oméga-3 (DHA et/ou EPA en particulier). De plus, les fortes teneurs en protéines de grande qualité nutritive, les polysaccharides particuliers et les nombreux oligo-éléments de ces microalgues marines permettent d’obtenir des produits hautement nutritifs et très faiblement contaminés. On entend par contaminés par exemple la présence de métaux lourds et de pesticides.
[80] Préférentiellement, les souches utilisées selon l’invention sont obtenues à partir de souches d’eau douce qui sont acclimatées à l’eau salée par une dilution très lente du milieu de culture en faisant augmenter la salinité graduellement. De façon préférée, les souches utilisées sont obtenues à partir de souches d’eau douce qui sont acclimatées à l’eau salée par une dilution dans de l’eau, de préférence eau douce, dont on fait augmenter la salinité graduellement en allant préférentiellement de 0/1000 à maximum 40/1000 ou maximum 34/1000 mais, préférentiellement environ 20/1000. De préférence il s’agit de gramme de sel pour 1000g d’eau. Ceci permet avantageusement de se rapprocher de la salinité de l’eau de mer de façon modérée et sans provoquer un stress des microalgues. De façon préférée, l’acclimatation est réalisée sur 3 à 8 mois, préférentiellement environ 5 mois. Ceci permet de sélectionner graduellement les souches de plus en plus résistantes au sel jusqu’à la salinité recherchée. Selon un mode de réalisation adapté, l’acclimatation se fait, selon les souches, par accroissement de la salinité dans le milieu de culture au minimum de 0,15 g à 0,4 g de sel par 24 heures. L’acclimatation permet de sélectionner graduellement des souches qui développent un métabolisme propre au milieu marin.
[81 ] Préférentiellement, les souches citées utilisées selon l’invention sont acclimatées dans des contenants allant de plusieurs dizaines de millilitres à plusieurs litres avec un mode de culture autotrophe ou mixotrophe. De préférence allant de 10 millilitres à 10 Litres.
[82] Préférentiellement, les souches citées utilisées selon l’invention sont acclimatées dans des contenants allant de plusieurs dizaines de millilitres à plusieurs litres dans lesquels une solution de 0,15g à 0,4 g de sel est apportée par période de 24 h à raison de 10% du volume de culture initial.
[83] Ainsi, selon un mode de réalisation, l’invention vise un produit caractérisé en ce que la ou les microalgue(s) d’eau douce ont été acclimatée(s) à l’eau salée en augmentant graduellement la salinité de l’eau dans laquelle les microalgues sont cultivées, préférentiellement en introduisant dans le milieu de culture une solution de 0,15g à 0,4 g de sel par période de 24 h à raison de 10% du volume de culture initial.
[84] De façon préférée, le produit selon l’invention est caractérisé en ce que la ou les microalgue(s) d’eau douce ont été acclimatée(s) à l’eau salée en augmentant la salinité de l’eau, de préférence de l’eau douce, dans laquelle les microalgues ont été cultivées de 0/1000 à maximum 34/1000 de préférence grammes de sel pour 1000 grammes d’eau.
[85] Préférentiellement, le produit selon l’invention est caractérisé en ce que la ou les microalgue(s) d’eau douce ont été acclimatée(s) à l’eau salée en augmentant la salinité de l’eau dans laquelle les microalgues ont été cultivées pendant 3 à 8 mois.
[86] Selon un mode de réalisation, la ou les microalgue(s) d’eau douce ont été acclimatée(s) à l’eau salée en augmentant la salinité de l’eau dans laquelle les microalgues ont été cultivées de façon à sélectionner les souches de plus en plus résistantes au sel.
[87] Selon une variante, l’acclimatation peut être réalisée notamment en ajoutant une solution d’eau de mer ou une solution d’eau de mer reconstituée. Une solution d’eau de mer peut correspondre à de l’eau de mer qui a subi un traitement thermique par exemple en autoclave, une pasteurisation ou une stérilisation ou encore une solution d’eau de mer qui a subi un traitement mécanique comme une filtration par exemple de préférence inférieure ou égale à 2pm, ou encore une solution d’eau de mer ayant subi un traitement à l’aide de microondes tel que sous UV par exemple. Une solution d’eau de mer reconstituée peut par exemple correspondre à une solution d’eau distillée comprenant du NaCI, du KCI, du CaCIs, du NaHCOs, du MgSC
[88] Ainsi la ou les microalgue(s) d’eau douce ont été acclimatée(s) à l’eau salée en introduisant dans le milieu de culture une solution d’eau de mer ou une solution d’eau de mer reconstituée.
[89] L’invention a également pour objet le procédé d’acclimatation tel que décrit précédemment.
[90] Préférentiellement, le milieu de culture des microalgues acclimatées à l’eau salée selon l’invention, est enrichi en solution nutritive adaptée au mode de culture autotrophe ou mixotrophe.
[91 ] Selon un mode de réalisation particulièrement adapté, la ou les microalgues d’eau douce acclimatée(s) à l’eau salée, et choisie(s) parmi les souches d’eau douce acclimatées à l’eau salée du genre Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, présente(s) dans le produit selon l’invention ou utilisées pour la production d’extraits(s) présent(s) dans le produit selon l’invention, ont été produites par hétérotrophie ou mixotrophie en bioréacteurs présentant une ou plusieurs poches, sacs et/ou chambres de culture à usage unique, stériles, en matériau(x) thermostables non métallique(s) résistant à la corrosion et à l’oxydoréduction à usage unique, stériles, en matériau(x) non métallique(s) résistants à la corrosion et à l’oxydoréduction.
[92] Ainsi, un procédé d’acclimatation selon l’invention peut comprendre une étape de fourniture d’une ou plusieurs microalgues d’eau douce choisie(s) parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis. En particulier, une ou plusieurs microalgues d’eau douce choisie(s) parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis.
[93] Le procédé selon l’invention peut comprendre une étape d’ensemencement de la ou des microalgues avec un milieu de culture dans un contenant tel que décrit précédemment comprenant de l’eau douce. Optionnellement cette étape peut comprendre un horodatage et une identification. Facultativement, cette étape peut comprendre l’ajout de différents facteurs. Par exemple il peut s’agir de milieu de croissance, vitamines, minéraux, oligoéléments, milieu de culture ou un milieu de croissance auquel des composants chimiques ont été ajoutés. Par exemple il peut s’agir de l’ajout d’un milieu de culture, milieu de croissance, de métaux, de vitamines, sel minéraux, sel marins, acide et autre composants nécessaire à la croissance de microalgues connu de l’homme du métier tel que glucose, azote, phosphate, silice, microéléments inorganiques, micro-éléments organiques. Par exemple il peut s’agir de NaNOs, NaH2PO4, NH4CI, H3BO3, NaH2PO4, MnCI2, FeCI3, FeSO4, Na2, EDTA, ZnSO4, CaSO4, MnCI2, NaMo04, B12, B6, B1 , B8, NaCI, CH4N2O, C2H4NaO2, CH3COOH, ZNCI2, COCI2, NH4, CuSO4, SiOs, HNO3 BG-11 , P1 , milieu Conway Co, Fe, Cu, Mn, Mo, Zn et/ou solution tampon, De préférence cette étape comprend 10 % d’inoculum par rapport au volume d’eau utilisé. Avantageusement, une telle étape peut comprendre une ou plusieurs étapes de repiquage. De préférence cette étape peut correspondre au procédé décrit dans le tableau 2.
[94] Le procédé selon l’invention peut comprendre une étape de dilution du milieu en augmentant la salinité du milieu. Par exemple, cette étape peut comprendre une augmentation en sel NaCI de 0,15 à 0,4 gramme de sel par 24 heures à raison de 10% du volume de culture initial. De préférence cette étape est conduite jusqu’à un rapport de 0/1000 à 34/1000 de préférence 20/1000 grammes de sel pour 1000 grammes d’eau. Par ailleurs, cette étape de dilution peut comprendre l’ajout d’eau de mer ou d’eau de mer reconstituée telle que décrit précédemment. Durant cette phase d’autres composés, solutions peuvent être ajoutés tel que décrits ci-dessus. Par exemple milieu de croissance, composé organique, azote, urée, acide, nitrogène, nitrate de sodium, microéléments inorganiques et/ou organiques.
[95] Le procédé selon l’invention peut comprendre une étape de sélection graduelle des souches résistantes. Il s’agit de sélectionner les souches vivantes (i.e. qui ont résisté au changement de salinité). Les souches n’ayant pas résistées (i.e. mortes) sont de préférence éliminées.
[96] De préférence, l’étape de dilution et de sélection sont conduites sur une durée de 3 à 8 mois.
[97] De préférence un tel procédé peut être conduit en autotrophie, hétérotrophie ou mixotrophie.
[98] L’invention a également pour objet un procédé de production de microalgues d’eau douce acclimatée à l’eau salée par exemple choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokin iana, Chlorella luteoviridis, susceptibles d’entrer dans la composition d’un produit selon l’invention, par hétérotrophie ou mixotrophie en bioréacteur(s) présentant une ou plusieurs poches, sacs ou chambres de culture à usage unique, stériles, en matériau(x) thermostables non métallique(s) résistant à la corrosion et à l’oxydoréduction. De préférence, comme cela a été mentionné, les microalgues sont des microalgues de la classe des Trebouxiophyceae ou de la classe des Chlorophyceae. De façon plus préférée, les microalgues d’eau douce acclimatée à l’eau salée sont choisies parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis.
[99] Le bioréacteur est préférentiellement un appareil capable d’intégrer dans un récipient, un support permanent en acier inoxydable équipé d'une ceinture chauffant la ou les poches, sacs et/ou chambres de cultures de culture à usage unique.
[100] Chaque bioréacteur comporte donc au moins une poche, sac ou chambre de culture à usage unique c’est-à-dire qui contient ou présente au moins une poche, un sac ou une chambre de culture stérile conçus en matériel polymérique thermostable souple ou rigide résistant jusqu’à 300°C et notamment conçus à partir de polymères thermoplastiques thermostables pouvant subir une stérilisation.
[101] La poche, sac ou chambre de culture est stérile car constitué de plastiques comme des films polyéthylène mono couche ou multicouches thermostables ou de polymères thermoplastiques thermostables.
[102] Le ou les matériau(x) non métallique(s) résistant à la corrosion et à l’oxydoréduction peuvent être choisi(s) parmi les plastiques et les films polyéthylène mono couche ou multicouches.
[103] Les poches, sacs et/ou chambres de culture jetables permettent avantageusement de limiter l’oxydation, la contamination, les coûts et délais inféodés aux procédés connexes à la production (nettoyage et stérilisation notamment) et aux actions d’assurance-qualité associées (qualification des équipements, validation des procédés connexes...), optimisation des flux et des cycles de production.
[104] Les poches, sacs et/ou chambres de culture peuvent présenter des volumes de quelques litres à plusieurs milliers de litre. De préférence, ils présentent des volumes de 1 litre à 5000 litres.
[105] A la fin du cycle de culture (batch) la poche est vidée, la biomasse est récupérée et la poche éliminée.
[106] Le procédé selon l’invention, utilise préférentiellement de l’eau de mer ou de l’eau de mer reconstituée.
[107] Selon un mode de réalisation particulier de l’invention, des cultures préalables sont préférentiellement réalisées dans des petites cuves en verre, avec agitation sous éclairement, puis transférées en fermenteur contenant un sac stérile plastique en polyéthylène. Deux étapes d’amplification en Erlenmeyer et une étape d’amplification en pré-fermenteur précèdent la culture à l’échelle de fermentation. En fin de culture la biomasse est collectée, le sac vidé est éliminé.
[108] Avantageusement, ce procédé permet de contourner les problèmes d’oxydation et de contamination due à l’utilisation de l’eau de mer la production de microalgues et notamment de Chlorelles marines ou euryhalines.
[109] L’invention concerne aussi la réalisation d’un extrait de microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée par exemple choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Ch Io re I la vulgaris, Chlorella Sorokin iana, Chlorella luteoviridis. . De préférence, comme cela a été mentionné, les microalgues sont des microalgues de la classe des T rebouxiophyceae ou de la classe des Chlorophyceae. De façon plus préférée, les microalgues d’eau douce acclimatée à l’eau salée sont choisies parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis. De façon encore plus préférée, les microalgues d’eau douce acclimatée à l’eau salée sont choisies parmi Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella luteovirdi, Chlorella protothecoides.
[110] Un tel extrait peut être réalisé à partir d’un traitement thermique. Par exemple une ou plusieurs microalgues d’eau douce acclimatées à l’eau salées peuvent subir une déshydratation, un séchage. De préférence le traitement thermique est suivi par un broyage, un mixage. De préférence la granulométrie peut être prédéterminée. Par ailleurs, la durée et la température du broyage, du mixage peuvent être prédéterminées de sorte à former une pâte. Avantageusement, la réalisation peut comprendre une étape de tamis. Ceci permet d’améliorer l’homogénéité par exemple. Une telle poudre est apte à être utilisée dans la fabrication d’un produit alimentaire selon l’invention. Alternativement, une telle pâte est apte à être utilisée dans la fabrication d’un produit alimentaire selon l’invention. Selon une autre alternative, l’extrait peut être sous forme d’huile. De préférence ce mode de réalisation comprend une étape de pressage, de compression de sorte à former une huile. Une telle huile est de préférence apte à être utilisée dans la fabrication d’un produit alimentaire selon l’invention.
[11 1] L’invention concerne également l’utilisation de microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée par exemple choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella vulgaris, Chlorella luteoviridis et/ou au moins un extrait d’au moins l’une de ces microalgues d’eau douce acclimatée à l’eau salée pour la préparation d’un produit alimentaire selon l’invention. . De préférence, comme cela a été mentionné, les microalgues sont des microalgues de la classe des Trebouxiophyceae ou de la classe des Chlorophyceae.
[112] Ainsi l’invention concerne également un procédé de fabrication d’un produit alimentaire à partir de microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée par exemple choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis et/ou au moins un extrait d’au moins l’une de ces microalgues d’eau douce acclimatée à l’eau salée. De préférence, comme cela a été mentionné, les microalgues sont des microalgues de la classe des Trebouxiophyceae ou de la classe des Chlorophyceae.
[113] De préférence, le procédé de fabrication comprend une étape de fourniture de microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée et/ou d’un ou plusieurs extrait(s) d’au moins l’une de ces microalgues d’eau douce acclimatée à l’eau salée. Le procédé peut comprendre une étape de mélange avec des ingrédients alimentaires et/ou boisson, et/ou aromates et/ou microalgues d’eau douce et/ou microalgues marines et/ou additifs et/ou liants et/ou levure et/ou aliments et/ou gaz, extrait protéique et/ou extrait lipidique et/ou extrait vitaminique et/ou complément alimentaire. Un tel procédé peut également comprendre une étape de cuisson selon une durée et tune température prédéterminée et/ou une étape de refroidissement selon une durée et une température prédéterminée et/ou une étape de traitement hygiénique (par exemple stérilisation, pasteurisation, lyophilisation, ionisation) et/ou une étape de conditionnement.
[114] L’invention est à présent illustrée par des exemples non limitatifs de produits et procédés selon l’invention.
[115] Exemple 1 : exemple de procédé de culture par hétérotrophie d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer selon l’invention.
[116] Un exemple de procédé d’obtention d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteovir selon l’invention est décrit en suivant.
[117] I. Acclimatation
[118] L’acclimatation à l’eau salée est réalisée par accroissement de la salinité dans le milieu de culture. Au départ la souche est cultivée dans de l’eau douce sans sel, puis on ajoute au minimum de 0,15 g à 0,4 g de sel par 24 heures à raison de 10% du volume de culture initial. [119] II. Conditions de culture
[120] La culture peut être réalisée selon tout procédé adapté, comme par exemple le procédé particulièrement adapté aux chlorelles par exemple décrit dans le tableau 1 .
[121] En fin de culture la biomasse atteint la productivité de 40 à 200 g de matière sèche par litre.
[122] En sortie du bioréacteur la biomasse peut être centrifugée de 100 à 10000 tours/minute puis séchée à 80°C sur sécheur à cylindre.
[123] [Tableau 1]
Figure imgf000028_0001
[124] Un exemple de composition de milieu de culture P1 par hétérotrophie pouvant être utilisé est décrit dans le [Tableau 2],
[125] [Tableau 2]
Figure imgf000029_0001
[126] Exemple 3 : exemples d’extraits lipidiques
Les extraits selon l’invention peuvent être issus de macération de biomasses déshydratées ou fraiches ou par extraction au CO2 super critique ou pression à froid d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokin iana, Chlorella luteoviridis, selon l’invention contenant les composés lipidiques (lipides neutres et polaires, pigments chlorophylliens et caroténoïdes) de souches marines et destinés à entrer dans la formulation de préparations alimentaires, de plats cuisinés, de boissons ou de compléments alimentaires. En particulier, l’invention concerne un extrait lipidique formé à partir de microalgues d’eau douce acclimatée à l’eau salée par exemple choisies parmi Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokin iana, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella luteovirdi, Chlorella protothecoides.
[127] Exemple 4 : Extraits protéiques [128] Les extraits selon l’invention peuvent être des extraits protéiques d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokin iana, Chlorella luteoviridis, selon l’invention obtenue comme coproduit de l’extraction des lipides et des pigments (pression à froid ou CO2 supercritique) et destiné à entrer dans la formulation de préparations alimentaires, de plats cuisinés, de boissons ou de compléments alimentaires.
[129] Exemple 5 : Soupe liquide ou déshydratée
Un exemple de produit selon l’invention est une soupe contenant de 5 à 90 % de poudre d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pure ou en mélange avec des ingrédients alimentaires (aromates, amidons, épices, algues, etc.) et/ou de microalgues marines (Odontella aurita, Tetraselmis chuii, Nannochloropsis sp., etc.). En particulier, l’invention concerne une soupe liquide ou déshydratée comportant un extrait de microalgues d’eau douce, ou des microalgues d’eau douce, acclimatée à l’eau salée par exemple choisies parmi Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella luteovirdi, Chlorella protothecoides.
[130] Exemple 6 : Biscuits salés
[131] Un exemple de produit selon l’invention est un biscuit salé contenant de 5 à 70 % de poudre d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, selon l’invention pure ou en mélange avec des ingrédients alimentaires (farines de céréales ou de protéagineux, épices et aromates, liants, etc.) et/ou de microalgues marines (Odontella aurita, Tetraselmis chuii, Nannochloropsis sp., etc.). En particulier, l’invention concerne des biscuits salés comportant un extrait de microalgues d’eau douce, ou des microalgues d’eau douce, acclimatée à l’eau salée par exemple choisies parmi Ch Io re I la vulgaris, Ch Io relia Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa, Ch Io re I la luteovirdi, Ch Io re I la protothecoides.
[132] Exemple 7 : Barres énergétiques
Un exemple de produit selon l’invention est une barre énergétique contenant de 5 à 70 % de poudre d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, selon l’invention pure ou d’un extrait protéique en mélange avec des ingrédients alimentaires (Protéines de céréales ou de protéagineux, noix, fruits déshydratés, sucre, liants, etc.) et/ou de microalgues marines (Odontella aurita, Tetraselmis chuii, Nannochloropsis sp., etc.). En particulier, l’invention concerne une barre énergétique comportant un extrait de microalgues d’eau douce, ou des microalgues d’eau douce, acclimatée à l’eau salée par exemple choisies parmi Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella luteovirdi, Chlorella protothecoides.
[133] Exemple 8 : Smoothies
[134] Un exemple de produit selon l’invention est un smoothie contenant de 5 à 40 % de poudre ou d’une pâte (30 à 50 % de matière sèche) d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, selon l’invention ou d’un extrait protéique de de Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, et/ou Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum Chlorella saccharophila Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii Auxenochlorella protothecoides Parachlorella kessleri, Chlorella kessleriChlorella protothecoides Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanusChlorella lobophra en mélange avec des ingrédients alimentaires (fruits, lait ou boissons végétales, glucides, sucre, liants, etc.). En particulier, l’invention concerne un smoothie comportant un extrait de microalgues d’eau douce, ou des microalgues d’eau douce, acclimatée à l’eau salée par exemple choisies parmi Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella luteovirdi, Chlorella protothecoides.
[135] Exemple 9 : Pains et pâtes alimentaires (fraîches ou sèches) [136] Un exemple de produit selon l’invention est un pain ou des pâtes alimentaires contenant de 2 à 25 % de poudre ou d’une pâte (30 à 50 % de matières sèches) d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, selon l’invention ou d’un extrait protéique de de Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, et/ou d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, selon l’invention en mélange avec des ingrédients alimentaires (farines de céréales ou de protéagineux, amidon et/ou levure et/ou sel, etc.). En particulier, l’invention concerne du pain et des pâtes alimentaires (fraiches ou sèches) comportant un extrait de microalgues d’eau douce, ou des microalgues d’eau douce, acclimatée à l’eau salée par exemple choisies parmi Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella luteovirdi, Chlorella protothecoides.
[137] Exemple 10 : Plats cuisinés surgelés
[138] Un exemple de produit selon l’invention est un plat cuisiné (type lasagne, hachis Parmentier, pizza, etc.) contenants de 2 à 20 % de poudre d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, selon l’invention pure ou d’un extrait protéique et/ou de microalgues nommées dans l’exemple 9 en mélange avec les ingrédients alimentaires utilisés traditionnellement pour la confection de ces plats. En particulier, l’invention concerne un plat cuisiné surgelé comportant un extrait de microalgues d’eau douce, ou des microalgues d’eau douce, acclimatée à l’eau salée par exemple choisies parmi Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella luteovirdi, Chlorella protothecoides.
[139] Exemple 11 : Huile [140] Un exemple de produit selon l’invention est une huile obtenue par pression à froid ou par extraction au CO2 super critique de biomasses déshydratées d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokin iana, Chlorella luteoviridis, destinées à des assaisonnements ou des préparations alimentaires. Huile pure ou contenant de 1 à 90 % d’huile d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, de Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, , Chlorella luteoviridis, et/ou pure et/ou en mélange avec d’autres huiles et/ou d’autres ingrédients alimentaires et/ou de poudre d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, , Chlorella luteoviridis, pure ou en mélange avec de la poudre d’Odontella aurita et/ou de la poudre de Tetraselmis chuii et/ou Nannochloropsis sp. ou en mélange avec de la poudre de spiruline. En particulier, l’invention concerne une huile formée à partir de microalgues d’eau douce, acclimatée à l’eau salée par exemple choisies parmi Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella luteovirdi, Chlorella protothecoides.
[141] Exemple 12 : Sodas
[142] Un exemple de produit selon l’invention est un soda contenant 2 à 20 % de poudre d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, de de Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, , Chlorella luteoviridis, ou d’extrait protéique (60 à 90 % de la matière sèche) en mélange avec de l’eau pétillante (naturelle ou avec adjonction de CO2 gazeux) et des extraits de fruits et/ou sucres et/ou de colorants alimentaires. En particulier, l’invention concerne un soda comportant un extrait de microalgues d’eau douce, ou des microalgues d’eau douce, acclimatée à l’eau salée par exemple choisies parmi Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella luteovirdi, Chlorella protothecoides.
[ 143] Exemple 13 : Jus de fruit
[144] Un exemple de produit selon l’invention est un jus de fruits additionné de 2 à 20 % de poudre d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis de Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis, ou d’extrait protéique (60 à 90 % de la matière sèche) en mélange avec des ingrédients alimentaires (sucre et/ou pectine et/ou colorants alimentaires). En particulier, l’invention concerne un jus de fruit comportant un extrait de microalgues d’eau douce, ou des microalgues d’eau douce, acclimatée à l’eau salée par exemple choisies parmi Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella luteovirdi, Chlorella protothecoides.
[145] Exemple 14 : Compléments alimentaire sous forme de gélules rigides ou de comprimés
[146] Un exemple de produit selon l’invention est complément alimentaire sous forme de gélule rigide ou de comprimé contenant de 10 à 100% de poudre d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella luteoviridis pure ou en mélange avec de la poudre d’Odontella aurita et/ou en mélange avec de la poudre de Tetraselmis chuii et/ou de spiruline. En particulier, l’invention concerne un complément alimentaire comportant un extrait de microalgues d’eau douce, ou des microalgues d’eau douce, acclimatée à l’eau salée par exemple choisies parmi Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella luteovirdi, Chlorella protothecoides. [147] Exemple 15 : Compléments alimentaires sous forme de gélules molles (soft gel) ou d’huile libre
[148] Un exemple de produit selon l’invention est un complément alimentaire sous forme de gélule molle (soft gel) ou d’huile libre contenant de 10 à 100% d’huile d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau de mer choisi parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokin iana, Chlorella luteoviridis pure ou en mélange avec de l’huile d’Odontella aurita et/ou de Tetraselmis chuii et/ou de Nannochloropsis sp. et/ou en mélange avec de l’huile de Thraustochytrides (obtenues par les méthodes d’écrites dans l’exemple 8) associées ou non avec une huile végétale (Colza, olive, tournesol, noix, lin, chia, Grémil des champs, etc.)

Claims

REVENDICATIONS
[Revendication 1] Produit destiné à la consommation humaine ou animale, sous forme d’aliment ou de boisson ou de complément alimentaire, comprenant au moins une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée, et/ou au moins un extrait d’une telle microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée, la ou les microalgue(s) d’eau douce acclimatées à l’eau salée et/ou le ou les extraits de la ou des microalgue(s) d’eau douce acclimatées à l’eau salée comprenant au moins 0,1 % d’acide eicosapentaénoïque (EPA), et/ou au moins 0,1 % d’acide docosahexaénoïque (DHA) en poids de matière sèche.
[Revendication 2] Produit selon la revendication 1 , caractérisé en ce qu’il comprend au moins 0,1 % d’EPA et au moins 0,1 % de DHA en poids de matière sèche.
[Revendication 3] Produit selon l’une des revendications 1 ou 2, caractérisé en ce que la microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée appartient aux classes Trebouxiophyceae ou Chlorophyceae.
[Revendication 4] Produit selon l’une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce qu’il comprend au moins 0,2% d’EPA et/ou au moins 0,2% de DHA en poids de matière sèche, de préférence il comprend au moins 0,2% d’EPA et au moins 0,2% de DHA en poids de matière sèche.
[Revendication 5] Produit selon l’une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en ce qu’il comprend entre 0,2 et 90 % en poids de biomasse d’au moins une microalgue d’eau douce acclimatée à acclimatée à l’eau salée choisie parmi Chlorella pyrenoidosa, Chloroidium saccharophilum, Chlorella saccharophila, Coelastrella vacuolata, Graesiella emersonii, Auxenochlorella protothecoides, Parachlorella kessleri, Chlorella kessleri, Chlorella protothecoides, Scenedesmus abundans, Chlorella fusca, Scenedesmus nanus, Chlorella lobophra, Heterochlorella luteoviridis, Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokin iana, Chlorella luteoviridis et/ou d’au moins un extrait d’une telle microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée.
[Revendication 6] Produit selon l’une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisé en ce qu’il comprend entre 0,2 et 90 % en poids de biomasse d’au moins une microalgue d’eau douce acclimatée à acclimatée à l’eau salée choisie parmi Chlorella vulgaris, Chlorella Sorokiniana, Chlorella pyrenoidosa, Chlorella luteovirdi, Chlorella protothecoides et/ou d’au moins un extrait d’une telle microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée.
[Revendication 7] Produit selon l’une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisé en ce qu’il comporte au moins 0,005 g de sodium pour 100g de matière sèche.
[Revendication 8] Produit selon l’une quelconque des précédentes revendications, caractérisé en ce que la ou les microalgue(s) d’eau douce ont été acclimatée(s) à l’eau salée en augmentant graduellement la salinité de l’eau dans laquelle les microalgues sont cultivées.
[Revendication 9] Produit selon l’une quelconque des précédentes revendications, caractérisé en ce que la ou les microalgue(s) d’eau douce ont été acclimatée(s) à l’eau salée en introduisant dans le milieu de culture une solution de 0,15 g à 0,4 g de sel par période de 24 h à raison de 10% du volume de culture initial.
[Revendication 10] Produit selon l’une quelconque des précédentes revendications, caractérisé en ce que la ou les microalgue(s) d’eau douce ont été acclimatée(s) à l’eau salée en introduisant dans le milieu de culture une solution d’eau de mer ou une solution d’eau de mer reconstituée.
[Revendication 1 1] Produit selon l’une quelconque des précédentes revendications, caractérisé en ce que la ou les microalgue(s) d’eau douce ont été acclimatée(s) à l’eau salée en augmentant la salinité de l’eau dans laquelle les microalgues ont été cultivées de 0/1000 à maximum 34/1000.
[Revendication 12] Produit selon l’une quelconque des précédentes revendications, caractérisé en ce que la ou les microalgue(s) d’eau douce ont été acclimatée(s) à l’eau salée en augmentant la salinité de l’eau dans laquelle les microalgues ont été cultivées pendant 3 à 8 mois, de préférence 8 à 35 semaines.
[Revendication 13] Produit selon l’une quelconque des précédentes revendications, caractérisé en ce que la ou les microalgue(s) d’eau douce ont été acclimatée(s) à l’eau salée en augmentant la salinité de l’eau dans laquelle les microalgues ont été cultivées de façon à sélectionner les souches de plus en plus résistantes au sel.
[Revendication 14] Produit selon l’une quelconque des précédentes revendications, caractérisé en ce que la ou les microalgue(s) d’eau douce acclimatée(s) à l’eau salée ont été produite(s) par autotrophie ou hétérotrophie ou mixotrophie en bioréacteur(s) présentant une ou plusieurs poche(s), sac(s) et/ou chambre(s) de culture à usage unique, stériles, en matériau(x) thermostables non métallique(s) résistant à la corrosion et à l’oxydoréduction.
[Revendication 15] Produit selon l’une quelconque des précédentes revendications, caractérisé en ce qu’il s’agit d’un produit céréalier, d’un produit de boulangerie, d’un gâteau sucré ou salé, d’un biscuit sucré ou salé, d’une sucrerie, d’une soupe, d’une sauce, d’une chips de légumes, d’un condiment, d’une huile, d’un plat cuisiné, d’un produit transformé à partir de produits marins, d’un laitage.
[Revendication 16] Produit selon l’une quelconque des revendications 1 à 14, caractérisé en ce qu’il s’agit d’un soda, d’un jus de fruits, d’une boisson énergétique, d’une eau aromatisée, d’un sirop ou d’une boisson alcoolisée.
[Revendication 17] Produit selon l’une quelconque des précédentes revendications, caractérisé en ce que la ou les microalgue(s) d’eau douce acclimatées à l’eau salée et/ou le ou les extraits de la ou des microalgue(s) d’eau douce acclimatées à l’eau salée comprennent au moins 5 g de lipides pour 100 g de matière sèche de la biomasse ou de l’extrait, de préférence au moins 10 g de lipides pour 100 g de matière sèche de la biomasse ou de l’extrait, de façon plus préférée au moins 15 g de lipides pour 100 g de matière sèche de la biomasse ou de l’extrait, de façon encore plus préférée au moins 20 g de lipides pour 100 g de matière sèche de la biomasse ou de l’extrait.
[Revendication 18] Produit selon l’une quelconque des précédentes revendications, caractérisé en ce que la ou les microalgue(s) d’eau douce acclimatées à l’eau salée et/ou le ou les extraits de la ou des microalgue(s) d’eau douce acclimatées à l’eau salée comprennent au moins 400 mg d’acide oléique, au moins 1200 mg d’acide alpha linolénique (ALA), au moins 11 mg d’acide arachidonique, au moins 1000 mg d’acide eicosapentaénoïque (EPA), au moins 1000 mg d’acide docosahexaénoïque (DHA) pour 100 g de matière sèche de la biomasse ou de l’extrait.
[Revendication 19] Produit selon l’une quelconque des précédentes revendications, caractérisé en ce que la ou les microalgue(s) d’eau douce acclimatées à l’eau salée et/ou le ou les extraits de la ou des microalgue(s) d’eau douce acclimatées à l’eau salée comprennent au moins 25 g de protéines pour 100 g de matière sèche de la biomasse ou de l’extrait.
[Revendication 20] Produit selon l’une quelconque des précédentes revendications, caractérisé en ce que l’extrait de microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée est sous forme d’une poudre, d’une pâte et/ou d’un extrait huileux.
[Revendication 21] Produit selon l’une quelconque des précédentes revendications, caractérisé en ce qu’il présente un profil nutritionnel sensiblement identique à celui des microalgues d’eau douce acclimatées à l’eau salée.
[Revendication 22] Procédé de production d’une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée en augmentant graduellement la salinité de l’eau dans laquelle les microalgues d’eau douce sont cultivées, la ou les microalgue(s) d’eau douce étant cultivée par hétérotrophie ou mixotrophie en bioréacteur(s) présentant une ou plusieurs poches, sacs et/ou chambres de culture à usage unique, stériles, en matériau(x) thermostables non métallique(s) résistant à la corrosion et à l’oxydoréduction, la ou les microalgue(s) d’eau douce acclimatées à l’eau salée comprenant au moins 0,1 % d’EPA et/ou au moins 0,1% de DHA en poids de matière sèche.
[Revendication 23] Procédé de production selon la revendication précédente, caractérisé en ce que l’augmentation graduelle de la salinité comprend une dilution dans de l’eau, de préférence eau douce, dont on fait augmenter la salinité graduellement en allant préférentiellement de 0 à maximum 40 grammes de sel pour 1000 g d’eau.
[Revendication 24] Procédé de production selon la revendication 22 ou 23, caractérisé en ce qu’il comprend la sélection de souches résistantes au sel jusqu’à la salinité recherchée, de préférence une sélection graduelle des souches qui développent un métabolisme propre au milieu marin.
[Revendication 25] Procédé de production selon l’une quelconque des revendications 22 à 24, caractérisé en ce que l’acclimatation comprend un accroissement de la salinité dans un milieu de culture au minimum de 0,15 g à 0,4 g de par 24 heures à raison de 10% de volume de culture initial.
[Revendication 26] Procédé de production selon l’une quelconque des revendications 22 à 24, caractérisé en ce qu’il comprend une étape d’ajout d’une solution d’eau de mer ou d’une solution d’eau de mer reconstituée, la solution d’eau de mer ayant préalablement subi un traitement thermique et/ou mécanique et/ou par microondes, une solution d’eau de mer reconstituée comprenant de l’eau distillée et du NaCI, KCI, CaCIs, NaHCOs, MgSC .
[Revendication 27] Utilisation de biomasse d’au moins une microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée, par exemple en augmentant graduellement la salinité de l’eau dans laquelle les microalgues sont cultivées, et/ou d’au moins un extrait d’au moins une telle microalgue d’eau douce acclimatée à l’eau salée, comme source de protéines et/ou de lipides et/ou source de polysaccharides et/ou de minéraux et/ou oligo-éléments dans des produits alimentaires ou des boissons ou des compléments alimentaires, la ou les microalgue(s) d’eau douce acclimatées à l’eau salée et/ou le ou les extraits de la ou des microalgue(s) d’eau douce acclimatées à l’eau salée comprenant au moins 0,1% d’EPA et/ou au moins 0,1% de DHA en poids de matière sèche.
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