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WO2022106791A1 - Aliment ameliore destine a l'elevage des crevettes comprenant de la farine de hermetia illucens - Google Patents

Aliment ameliore destine a l'elevage des crevettes comprenant de la farine de hermetia illucens Download PDF

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Publication number
WO2022106791A1
WO2022106791A1 PCT/FR2021/052049 FR2021052049W WO2022106791A1 WO 2022106791 A1 WO2022106791 A1 WO 2022106791A1 FR 2021052049 W FR2021052049 W FR 2021052049W WO 2022106791 A1 WO2022106791 A1 WO 2022106791A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
meal
food
shrimp
virus
animal
Prior art date
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Ceased
Application number
PCT/FR2021/052049
Other languages
English (en)
Inventor
Clément RAY
Maye WALRAVEN
Andrew Richardson
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Innovafeed SAS
Original Assignee
Innovafeed SAS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Innovafeed SAS filed Critical Innovafeed SAS
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Priority to PE2023001694A priority patent/PE20240134A1/es
Publication of WO2022106791A1 publication Critical patent/WO2022106791A1/fr
Anticipated expiration legal-status Critical
Ceased legal-status Critical Current

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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K10/00—Animal feeding-stuffs
    • A23K10/20—Animal feeding-stuffs from material of animal origin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
    • A23K50/80—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for aquatic animals, e.g. fish, crustaceans or molluscs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/56—Materials from animals other than mammals
    • A61K35/63—Arthropods
    • A61K35/64—Insects, e.g. bees, wasps or fleas
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
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    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
    • Y02A40/80—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
    • Y02A40/81—Aquaculture, e.g. of fish

Definitions

  • TITLE IMPROVED FEED FOR SHRIMP FARMING CONTAINING HERMETIA ILLUCENS MEAL
  • the invention relates to the field of feeding decapods comprising insect meal. It relates more particularly to an improved food intended for the rearing of shrimps comprising flour from the larvae of the black soldier fly of the Hermetic/illucens species. It improves weight gain, growth rate and feed conversion rate as well as resistance to infection in shrimp.
  • Shrimp farming is a branch of aquaculture whose commercial production continues to increase, stimulated by significant demand from territories such as the United States, Japan and Western Europe.
  • the vast majority of farmed prawns belong to the family Penaeidae and two species, the whiteleg prawn (Litopenaeus vannamei) and the giant tiger prawn (Penaeus monodon), account for nearly 80% of all farms.
  • manufacturers In order to meet the increase in global demand, manufacturers must produce increased volumes of shrimp, which represents significant farming costs, in particular for feeding these animals throughout their farming cycle. .
  • Shrimp feed is usually made from fishmeal.
  • the Pacific white shrimp (Litopenaeus vannamei) is the most produced shrimp species in the world, with production volumes exceeding 4.1 million metric tonnes in 2016 (FAO 2018).
  • FAO 2018 The Pacific white shrimp industry, there is a need to find high-performance feed ingredients that can be produced sustainably. and to improve the efficiency of production systems in order to supply larger volumes while putting less pressure on natural resources.
  • Patent CN108576485 discloses a food composed of Hermetic/lllucens insect meal for feeding fish.
  • the document CN110432381 describes in particular a health food derived from insects for shrimp fry.
  • the feed consists of the following ingredients, in part by weight: Black soldier fly dry powder 15% - 20%, fishmeal 5% - 10%, peanut meal 15% - 25%, meal 10% - 28 %, mixed oil 2 - 5%, soy flour 5 - 15%, corn flour 10 - 25%.
  • Black soldier fly dry powder is used to provide disease resistance in shrimp fry, increase growth rate and improve survival rate.
  • the inventors have developed a food intended for shrimp farming comprising a portion of Hermetia illucens flour in combination with fish meal; this feed improves the performance of shrimp farms compared to an equivalent conventional feed based on fishmeal.
  • the present invention relates to a food intended for the breeding of shrimps allowing an improvement in the yield of the breeding comprising, instead of the 5 to 30% of fish meal of a conventional food, from 5 to 30% of flour animal meal consisting of fishmeal and Hermetia illucens larvae meal, characterized in that said Hermetia illucens larvae meal represents between 40 and 60% of said animal meal.
  • the present invention also relates to the use of this food for improving weight gain, growth rate and feed conversion rate and resistance to infection in shrimp.
  • the inventors have developed a food intended for shrimp farming comprising Hermetic/illucens (HI) larvae meal, and which, quite surprisingly, makes it possible to achieve a yield significantly higher than that observed for a equivalent food containing fish meal instead of HI meal. This improvement in yield is observed on several key parameters in aquaculture.
  • HI Hermetic/illucens
  • This parameter is economically essential to control the cost of production in aquaculture, since thanks to this feed, the shrimp reach the same weight from a lower quantity of feed.
  • the use of a food as described in the present application makes it possible to improve the resistance of shrimp to infections during farming. This results in a lower mortality rate.
  • the use of this food makes it possible to increase resistance to viral infections, in particular with respect to the virus responsible for the white spot syndrome which is very widespread in shrimps, but more generally present in decapods.
  • the use of this food also makes it possible to increase resistance to bacterial infections, in particular vis-à-vis the Vibrio bacterium responsible for the syndrome of acute hepatopancreatic necrosis.
  • a first object of the present invention relates to a food intended for the breeding of shrimps making it possible to improve the yield of the breeding, comprising from 5 to 30% of animal meal consisting of fish meal and meal of Hermetic/ illucens, characterized in that said Hermetic/illucens larva meal represents between 40 and 60% of said animal meal.
  • food for shrimp farming is meant any food used in aquaculture, used as food in the diet of farmed shrimp. In the context of the invention, it is a food comprising between 5% and 30% of animal meal consisting of fish meal and HI meal.
  • animal flour is meant a flour produced from animals, in particular marine animals such as fish and crustaceans, insects or other animals such as poultry, alone or in a mixture.
  • the animal meal comprises fishmeal.
  • the HI meal represents between 50 and 60% of the animal meal; this embodiment is particularly suitable for improving the resistance to infection of shrimp.
  • the shrimps are chosen from the species Litopenaeus vannamei, Litopenaeus stylirostris and Penaeus monodon.
  • the HI flour is obtained via a mechanical preparation process, without chemical treatment, without extraction in a solvent.
  • a mechanical process can be a mechanical extraction of the solid part of the previously ground and heated larvae, followed by drying and grinding of this solid part to obtain flour.
  • the main advantage of the HI flour obtained by mechanical preparation is that it has not been transformed by a chemical treatment step, such as for example an enzymolysis step.
  • the components of the HI flour are maintained in their original form, thus allowing a greater concentration of said components and an undenatured HI flour.
  • the larvae of H. illucens used for the manufacture of flour are preferably whole.
  • the food intended for shrimp farming is used to improve the yield of said shrimp farming.
  • Yield includes shrimp growth performance which is assessed on weight gain, growth rate and feed conversion rate, and resistance to infection.
  • the use of a food according to the invention improves the weight gain and the growth rate of said shrimps.
  • the shrimps fed with the food comprising 5 to 30% of animal meal consisting of fish meal and HI meal, characterized in that the Hermetic/illucens (HI) larvae meal represents 30 to 60% of the said animal meal, grow and grow faster and bigger than shrimp fed an equivalent diet containing fishmeal instead of HL meal
  • the use of a feed according to the invention also improves the feed conversion rate of said shrimp.
  • the shrimps fed with the food comprising 5 to 30% of animal meal consisting of fish meal and HI meal, characterized in that the Hermetic/illucens (HI) larvae meal represents 40 to 60% of the said animal meal, have a greater capacity to transform feed into biomass than shrimp fed with an equivalent feed containing fishmeal instead of HL meal
  • the use of a food according to the invention improves the resistance to infections of said shrimps. It therefore helps to preserve the health of the shrimp by preventing the occurrence of an infection.
  • the shrimps fed with the food comprising 5 to 30% of animal meal consisting of fish meal and HI meal, characterized in that the Hermetic/illucens (HI) larvae meal represents 40 to 60% of the said animal meal, resist infection better than shrimp fed a diet containing fishmeal instead of HL meal
  • WSSV White Spot Syndrome Virus
  • HPV Hepatopancreatic Parvovirus
  • MBV Monodont Bac
  • the food according to the invention makes it possible to prevent an infection caused by the virus responsible for the white spot syndrome.
  • the shrimps fed with the food according to the invention also resist better to bacterial infections such as:
  • Necrotic hepatopancreatitis caused by: gram-negative bacterial species, intracytoplasmic alphaproteobacterium (species not yet determined)
  • the food can therefore be used to prevent bacterial infection is caused by V. harveyi, V. parahaemolyticus, V. penaecida, V. nigripulcritudo, V. vulnificus, Leucothrix sp., Thiothrix sp., Flexibacter sp., Cytophaga sp. , Flavobacterium sp., intracytoplasmic gram negative bacteria species of alphaproteobacterium, Mycobacterium sp., in particular Mycobacterium marinum, or Mycobacterium fortuitum.
  • the food helps prevent the onset of severe hepatopancreatic necrosis syndrome caused by V. parahaemolyticus.
  • Figure 1 Graphic representation of average weight gain (%) as a function of the food ingested.
  • the horizontal line materializes the observation of a weight gain compared to the control food whose animal meal is entirely composed of fish meal up to 30% (food without HI meal).
  • the oblique line materializes the positive trend observed on weight gain. Values associated with the same letter do not show any significant difference between them (Fisher test, p > 0.05).
  • Figure 2 Graphical representation of average weight gain (%) as a function of the food ingested.
  • the horizontal line materializes the observation of a weight gain compared to the control food whose animal meal is entirely composed of fish meal up to 30% (food without HI meal).
  • the dotted line materializes the positive trend observed on weight gain.
  • the values associated with the same letter do not show any significant difference between them (Fisher test, p > 0.05).
  • Figure 3 Graphic representation of the average conversion index according to the food ingested.
  • the horizontal line materializes the observation of a conversion index compared to the control food whose animal meal is entirely composed of fish meal up to 30% (food without HI meal).
  • the dotted line materializes the trend observed on the conversion index compared to the control food.
  • the values associated with the same letter do not show any significant difference between them (Fisher test, p > 0.05).
  • Figure 4 Graphic representation of average weight gain (g), specific growth rate (%/day) and feed conversion rate as a function of the food ingested.
  • CTRL corresponds to the control food whose animal meal is entirely composed of fish meal up to 15%.
  • A, B and C correspond to improved foods in which the HI meal represents respectively 30%, 50% and 70% of the animal meal made up of fish meal and HL meal The values associated with the same letter do not show any difference significant difference between them (Fisher test, p > 0.05).
  • FIG. 5 Graphic representation of the results collected during the experimentation with the AHPNS pathogen. “Mock” corresponds to the negative control group for the disease, “CTRL” to the positive control group for the disease. The shrimps of these two groups were fed with the control food whose animal meal is entirely composed of fish meal up to 15%. A, B and C correspond to improved foods in which the HI meal represents respectively 30%, 50% and 70% of the animal meal made up of fish meal and HL meal The values associated with the same letter do not show any difference significant difference between them (Fisher test, p > 0.05).
  • FIG. 6 Graphical representation of results collected during experimentation with the WSSV pathogen.
  • “Mock” corresponds to the negative control group for the disease
  • “CTRL” to the positive control group for the disease.
  • the shrimp in these two groups were fed with the control food whose animal meal is entirely composed of fish meal up to 15%.
  • A, B and C correspond to the improved foods in which the HI meal represents 30%, 50% and 70% of the animal meal consisting of fishmeal and HI meal respectively.
  • the values associated with the same letter do not show any significant difference between them (Fisher test, p > 0.05).
  • EXAMPLE 1 Improvement of the yield of a shrimp farm L stylirostris by the supply of an improved food comprising Hermetia illucens flour
  • the transfer was carried out 7 days before the start of the study in order to acclimatize the animals to the experimental conditions. During this period, an individual weighing of the animals and their marking were carried out in order to establish the initial individual weights and allow their identification throughout the breeding period. On the day of tagging, the density was reduced to 6 individuals/tank. Thus, the final individual weights and survival can be evaluated at the end of the study period.
  • Control plan The temperature (°C) was monitored daily (07:30 and 16:00). Siphoning of remains, purging and counting of the number of shrimp per tank (survival monitoring) were also carried out 5 times a week (excluding weekends and public holidays). Where appropriate, observations have recorded regarding moulting periods, animal behavior or any other parameter of interest.
  • Hermetic/ illucens flour The temperature (°C) was monitored daily (07:30 and 16:00). Siphoning of remains, purging and counting of the number of shrimp per tank (survival monitoring) were also carried out 5 times a week (excluding weekends and public holidays). Where appropriate, observations have recorded regarding moulting periods, animal behavior or any other parameter of interest.
  • the flour is obtained from H. Illucens larvae which are heated, mechanically separated into 3 phases (mechanical extraction, without the use of solvent), dried and then ground.
  • the larvae are slaughtered by immersion in water heated to approximately 70°C.
  • the devitalized larvae are crushed then brought to at least 90°C.
  • the product thus obtained is mechanically separated into 3 phases: the solid part (cake), a liquid part containing water-soluble nutrients (glue water) and the oil.
  • the flour made up of the cake, glue water and antioxidant, is dried.
  • the output humidity of the flour is between 5 and 10%.
  • the flour is ground.
  • the particle size of the flour leaving the grinder is less than 2 mm.
  • compositions include, in addition to animal and vegetable meal, the ingredients conventionally contained in shrimp feed, namely: oil, amino acids, vitamins and minerals.
  • Feeds 1 to 7, the composition of which is described in Table 1, are obtained by replacing, in a 1:1 ratio, an increasing part of the fish meal contained in the control feed with HL meal. This makes it possible to obtain foodstuffs which comprise approximately 30% by weight of animal meal consisting of fish meal and HI meal, and which have different HI meal contents of this animal meal, equal to the fish meal replacement rate of the control food with HI flour (Table 2).
  • the control food represents an equivalent food containing fishmeal instead of HL meal
  • Table 2 Mean values obtained in weight gain, quantity of food ingested and conversion index accompanied by their standard deviations according to the different experimental foods. The values associated with the same letter do not show any significant difference between them (Fisher test, p > 0.05).
  • animal meal fish meal + HI meal
  • Table 2 shows the results in Table 2, as well as in Figure 1. It is observed that foods 2 to 5, which correspond to a flour content of HI ranging from 20 to 61% of the 30% of animal meal (fish meal + HI meal), showed significantly higher weight gains than that observed for the control food. In particular, it is observed that foods 4 and 5, characterized in that the HI meal represents respectively 39% and 61% of the animal meal, show weight gains almost twice as great as the control group.
  • the conversion index makes it possible to obtain an objective measurement coupling both feed and growth data.
  • the CI therefore makes it possible to provide information on the capacity of transformation of the feed into animal biomass.
  • the results show that the IC of foods with Hermetic/illucens flour tends to be numerically lower than with the control food, which implies that for the same quantity, or even a lower quantity of ingested food, shrimp fed a diet comprising HI meal showed greater weight gain than those fed an equivalent diet containing fish meal instead of HL meal
  • EXAMPLE 2 Improvement of the yield of a shrimp farm L stylirostris by the supply of an improved feed comprising Hermetia illucens flour Materials and methods
  • the transfer was carried out 7 days before the start of the study in order to acclimatize the animals to the experimental conditions. During this period, an individual weighing of the animals and their marking were carried out in order to establish the initial individual weights and allow their identification throughout the breeding period. On the day of tagging, the density was reduced to 6 individuals/tank. Thus, the final individual weights and survival could be evaluated at the end of the study period.
  • Control plan The temperature (°C) was monitored daily (07:30 and 16:00). Siphoning of remains, purging and counting of the number of shrimp per tank (survival monitoring) were also carried out 5 times a week (excluding weekends and public holidays). Where appropriate, observations were recorded regarding moulting periods, animal behavior or any other parameter of interest.
  • compositions include, in addition to animal and vegetable meal, the ingredients conventionally contained in shrimp feed, namely: oil, amino acids, vitamins and minerals.
  • Feeds 1 to 7, the composition of which is described in Table 3, are obtained by substituting in a 1:1 ratio an increasing part of fish meal contained in the control feed with HL meal. This makes it possible to obtain feeds which comprise 30% by weight of animal meal consisting of fish meal and HI meal, and which have different contents of HI meal of this animal meal, equal to the rate of replacement of the fish meal of the food control with HI flour (Table 4).
  • the control food represents an equivalent food containing fishmeal instead of HL meal
  • EXAMPLE 3 Improvement of the yield of a Litopenaeus vannamei shrimp farm by providing an improved food comprising Hermetia illucens flour
  • the experimental area consists of 12 290L tanks.
  • the shrimp larvae were reared in a recirculating water system containing artificial seawater at a salinity of 20 g L 1 .
  • a complete biological/mechanical filter and regular water changes kept the total ammonia (NH3 / NH 4 + ) content below 0.05 mg Ll and the nitrite (NO2 ) content below or equal to 0, 8 mg L 1 .
  • the water temperature was kept constant at 27°C ⁇ 1°C by means of an automatic temperature control system.
  • a total of 1200 shrimp with an average body weight of approximately 0.1 g were used to randomly compose 12 groups of 100 individuals. Each group was housed in a feeding unit. Each experimental diet was assigned 3 feeding units. The total weights of the groups were measured at the start of the experiment and at 28 days.
  • HI flour was added to the other ingredients (fish flour, vegetable flours, amino acids, vitamins and minerals...) and everything was carefully homogenized.
  • a feed binder and water were added.
  • the resulting paste was passed through a granulation machine. The temperature during the procedure did not exceed 50°C. 2 kg of each feed were produced.
  • Feeds A, B and C are obtained by replacing, in a 1:1 ratio, an increasing part of the fish meal contained in the control feed with HL meal. This makes it possible to to obtain foods that include 15% by weight of animal meal consisting of fish meal and HI meal, and which have different HI meal contents of this animal meal, equal to the replacement rate of fish meal of the control food with HI flour (Table 6). For each of the feeds thus obtained, the control feed represents an equivalent feed containing fish meal instead of HL meal.
  • Table 5 Food composition in % (main ingredients) During the experimental period, food was automatically distributed 6 times a day. The groups of shrimp received their respective diet according to a daily ration calculated from the average weight of the shrimp (standard percentage of the weight) and adjusted daily according to the expected growth, the observed mortality and the food consumption per group. .
  • the shrimp used in this experiment are certified Specific Pathogen Free (SPF) for the following pathogens: IMNV, EHP, WSSV, TSV, YHV, NHP-B, IHHNV, CMNV, PvNV, MBV, HPV, AHPND / EMS, BP .
  • Triplicate groups of shrimp were fed the foods described in Table 5 for 28 days. This procedure made it possible to evaluate the effect of these foods on the growth performance of shrimp.
  • Three days before the start of the pathogen resistance test the shrimp were transferred to 10L infection units filled with artificial seawater (1 shrimp per unit) to allow their acclimatization. For the test of resistance to the virus responsible for the white spot syndrome, 3 blocks of 10 individuals each were formed from shrimp from each of groups A, B and C.
  • 1 block for the negative control (Mock) and 3 for the positive control were made from shrimp from the CTRL group.
  • the shrimp were inoculated orally with the virus preparation. After inoculation, the shrimp were fed twice daily with their respective diet. Clinical signs of disease and mortality were monitored twice daily.
  • the same protocol was implemented for the test for resistance to the bacterium responsible for severe pancreatic necrosis syndrome, with the exception of the pathogen which is a bacterium and which was inoculated by immersion.
  • the WSSV Thai-1 strain (Escobedo-Bonilla et al., 2005) was used in this experiment. A stock of this virus is stored at -70°C. This strain was previously isolated in Thailand from naturally infected Penaeus monodon and passaged once in the crayfish Pacifastacus leniusculus (Jiravanichpaisal et al., 2001) as follows. Frozen stock of crayfish gill suspension (certified free of other major shrimp pathogens) was injected into Litopenaeus vannamei without a specific pathogen (SPF) to amplify the virus.
  • SPF specific pathogen
  • the resulting infected shrimp carcasses were used to prepare a suspension of WSSV and immediately frozen. The level of infection was then determined according to the procedure described by Escobedo Bonilla et al. (2005). This inoculum was used to infect shrimp intramuscularly. The resulting infected carcasses were used to prepare the solid inoculum of WSSV, which was used in the oral infection experiment. Uninfected shrimp carcasses subjected to the same procedure but inoculated with a virus-free suspension were used to prepare a blank solid inoculum (Mock).
  • the bacterium used in this experiment is a Vibrio parahaemolyticus isolated from AHPNS/EMS infected shrimp. More specifically, the AHPND/EMS specific TW01 strain was used in this experiment. This bacterium was isolated from infected shrimp ponds in Thailand. A stock of this bacterium is stored at -70°C. After thawing, the stock was aseptically inoculated into culture medium and cultured under standard conditions. Quantitated suspensions of TW01 were used to inoculate shrimp by immersion.
  • the results show a decreasing trend in feed conversion rate correlated with the increase in HI meal content in animal meal.
  • the feed conversion rate is significantly lower for diets B and C, which correspond to HI meal contents of 50% and 70% respectively of 15% animal meal, than for the CTRL diet.
  • the mortality of the CTRL control group is between 50 and 80% while that of the Mock control group (negative control for the disease) was 0%.
  • the mortality of the CTRL control group is between 50 and 80% and that of the Mock control group (negative control for the disease) is 0%. That demonstrates the validity of the protocol.
  • a general trend is observed showing a higher survival of shrimp fed with foods A, B and C than in the positive control group. From a statistical point of view, this improvement is significant for the group fed with food A.
  • These results suggest that the inclusion of HI meal in the shrimp diet can improve their resistance to WSSV significantly at a level in HI meal animal meal (or equivalently, a rate of replacement of fish meal by HI meal) of 30%.
  • the reduction in mortality observed with foods B and C suggests that there is in general partial protection of shrimp from WSSV infection when replacing fishmeal with HI meal in shrimp growing diets. A replacement rate of 40 to 60% of fishmeal by HI meal could be interesting for this application.
  • HI meal may help improve shrimp survival from AHPNS and WSSV pathogen infection when used to replace fishmeal in shrimp diets.

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Abstract

L'invention a trait au domaine de l'alimentation des décapodes comprenant de la farine animale. Elle concerne plus particulièrement, un aliment amélioré destiné à l'élevage des crevettes qui permet d'obtenir un meilleur rendement chez les crevettes et qui comprend de la farine de larve de mouche soldat noire de l'espèce Hermetia illucens.

Description

DESCRIPTION
TITRE : ALIMENT AMELIORE DESTINE A L'ELEVAGE DES CREVETTES COMPRENANT DE LA FARINE DE HERMETIA ILLUCENS
L'invention a trait au domaine de l'alimentation des décapodes comprenant de la farine d'insecte. Elle concerne plus particulièrement, un aliment amélioré destiné à l'élevage des crevettes comprenant de la farine de larve de mouche soldat noire de l'espèce Hermetic/ illucens. Il permet d'améliorer le gain de poids, la vitesse de croissance et le taux de conversion alimentaire ainsi que la résistance aux infections des crevettes.
DOMAINE DE L'INVENTION
L'élevage de crevettes est une branche de l'aquaculture dont la production commerciale ne cesse d'augmenter, stimulé par une demande importante des territoires comme les Etats-Unis, le Japon et l'Europe occidentale. La grande majorité des crevettes d’élevage appartiennent à la famille des Penaeidae et deux espèces, la crevette à pattes blanches (Litopenaeus vannamei) et la crevette géante tigrée (Penaeus monodon), représentent près de 80 % de tous les élevages. Afin de répondre à l'augmentation de la demande mondiale, les industriels doivent produire des volumes accrus de crevettes, ce qui représente des coûts d'élevage importants, en particulier pour l'alimentation de ces animaux tout au long de leur cycle d'élevage. Les aliments destinés aux crevettes sont généralement composés de farine de poisson (« Fish meal »). En plus d'être coûteuse, la farine de poisson a une empreinte écologique importante, car elle est produite à partir de ressources épuisables et les volumes nécessaires à l'approvisionnement des filières pénéicoles et plus généralement aquacoles sont considérables. En effet, aujourd'hui, la consommation de volumes importants de farine de poisson par les crevettes est indispensable pour que ces dernières aient des mensurations optimales, propres à la consommation humaine.
Cette monoculture industrielle est très sensible aux maladies. Ces dernières ont provoqué plusieurs épidémies à grande échelle au sein de certaines populations de crevettes d’élevage. Parmi les maladies fréquentes, on retrouve le syndrome de nécrose hépato pancréatique sévère ou encore le syndrome des taches blanches.
La crevette blanche du Pacifique (Litopenaeus vannamei) est l’espèce de crevette la plus produite au monde, avec des volumes de production dépassant 4,1 millions de tonnes métriques en 2016 (FAO 2018). Pour soutenir la croissance de l’industrie de la crevette blanche du Pacifique, il est nécessaire de trouver des ingrédients alimentaires performants, qui peuvent être produits de manière durable et d'améliorer l’efficacité des systèmes de production afin de fournir des volumes plus importants tout en exerçant moins de pression sur les ressources naturelles.
Protéger à la fois le potentiel à long terme de l’industrie et préserver les ressources naturelles est un défi croissant, non seulement dans le contexte de la production de L. vannamei, mais également dans tous les systèmes modernes de production alimentaire.
Les ingrédients d’origine végétale sont donc devenus, au cours des dernières décennies, des ingrédients couramment utilisés dans la formulation des aliments aquacoles (Barrows et al. 2007, Gatlin et al. 2007, Oliva-Teles et al. 2015). Ils ont ainsi été utilisés avec succès pour remplacer une partie de la farine de poisson dans les formules de ces aliments. Cependant, les protéines végétales présentent certaines limites nutritionnelles pour les aliments aquacoles : présence de facteurs antinutritionnels, niveaux élevés de fibres et de polysaccharides non amylacés, acides gras inadéquats, profils déséquilibrés d’acides aminés essentiels, et digestibilité et appétence réduites. En outre, une substitution complète de la farine de poisson par des ingrédients végétaux peut entraîner des pressions supplémentaires sur les ressources agricoles essentielles et sur l'environnement (par exemple la déforestation liée à la culture du soja). Ainsi, des efforts de recherche ont été déployés pour trouver des ingrédients de substitution plus performants.
De ce fait, les industriels se tournent vers de nouvelles alternatives à la farine de poisson. De plus en plus d'aliments, notamment dans les élevages de poisson, intègrent de la farine d'insecte. En effet, la production de farine d'insecte est plus respectueuse de l'environnement et peut être issue d'un élevage reposant sur le modèle du vertical farming, ce qui se traduit par une surface au sol nécessaire moindre par rapport à d'autres élevages.
L'art antérieur rapporte des exemples d'utilisation de farine d'insecte comme substituant à la farine de poisson. Le brevet CN108576485 divulgue un aliment composé de farine d'insecte Hermetic/ lllucens pour nourrir des poissons.
Il est également connu de l'état de l'art que l'inclusion de la farine de HI dans le régime des décapodes peut améliorer la résistance aux maladies des alevins de crevettes. Le document CN110432381 décrit notamment un aliment de santé dérivé d’insectes pour les alevins de crevettes. L'aliment comprend les ingrédients, en partie en poids, suivants : Poudre sèche de mouche soldat noire 15% - 20%, farine de poisson 5% - 10%, farine d’arachide 15% - 25%, farine 10% - 28%, huile mélangée 2 - 5%, farine de soja 5 - 15%, farine de maïs 10 - 25%. La poudre sèche de mouche soldat noire est utilisée pour permettre la résistance face aux maladies des alevins de crevettes, augmenter le taux de croissance et améliorer le taux de survie. L'article de Mastoraki et al. (2019) rapporte une étude comparative de deux régimes alimentaires comprenant de la farine d'insectes, notamment de HI, combinée soit à une farine végétale, soit à une farine de poisson. Dans ces essais, le taux d'inclusion de la farine de HI est de 7,8%. Cette étude montre une amélioration des performances de croissance des crevettes nourries avec les formulations contenant de la farine d'insecte HI ou de Musca domestica et de la farine de poisson comparé à une alimentation comprenant de la farine de Tenebrio molitor.
Néanmoins, il est généralement connu de l'état de la technique que les aliments à base d'insecte, et notamment Hermetia lllucens, lorsqu'ils sont substitués à la farine de poisson, ne permettent pas d'obtenir un gain de poids et un poids final convenables par rapport à la farine de poisson. A ce titre, l'article « Evaluation of Black Soldier Fly (Hermetia lllucens) larvae meal as partial or total replacement of marine fish meal in practicals diets for pacific white shrimp (Litopenaeus vannamei) » (Cummins et al. 2017) décrit des compositions comprenant de la farine de HI obtenue par extraction alcoolique, combinée à la farine de soja. Dans ces essais, le taux d'inclusion de la farine de HI est compris entre 7% et 36%. Aucune différence significative en termes de performance de croissance, ni de survie n'a été observée chez les crevettes dont le régime comprenait de la farine de HI. Cet article conclut que la croissance des crevettes nourries avec un aliment comprenant de la farine de poisson et de la farine de HI est plus faible que celui de crevettes nourries avec de la farine de poisson.
Compte tenu des défis alimentaires actuels et futurs, l'aquaculture est une solution prometteuse à l'échelle mondiale ; les industriels sont à la recherche de solutions pour améliorer le rendement des élevages de crevettes.
EXPOSE DE L'INVENTION
Les inventeurs ont mis au point un aliment destiné à l'élevage de crevettes comprenant une part de farine de Hermetia illucens en association avec de la farine de poisson ; cet aliment permet une amélioration du rendement des élevages des crevettes par rapport à un aliment conventionnel équivalent à base de farine de poisson.
Ainsi, la présente invention concerne un aliment destiné à l'élevage de crevettes permettant une amélioration du rendement de l'élevage comprenant, au lieu des 5 à 30% de farine de poisson d'un aliment conventionnel, de 5 à 30% de farine animale constituée de farine de poisson et de farine de larve de Hermetia illucens, caractérisé en ce que ladite farine de larve de Hermetia illucens représente entre 40 et 60% de ladite farine animale. La présente invention concerne également l'utilisation de cet aliment pour l'amélioration du gain de poids, de la vitesse de croissance et du taux de conversion alimentaire et la résistance aux infections des crevettes.
AVANTAGES DE L'INVENTION
Les inventeurs ont élaboré un aliment destiné à l'élevage de crevettes comprenant de la farine de larve de Hermetic/ illucens (HI), et qui, de manière tout à fait surprenante, permet d'atteindre un rendement significativement supérieur à celui observé pour un aliment équivalent contenant de la farine de poisson au lieu de la farine de HI. Cette amélioration du rendement est observée sur plusieurs paramètres clés en aquaculture.
Tout d'abord, lorsque cet aliment est utilisé dans l'alimentation des crevettes, on observe une amélioration significative des performances de croissance. Les crevettes nourries avec cet aliment ont un gain de poids plus élevé et grossissent plus rapidement que celles nourries avec une alimentation classique à base de farine de poisson. Une amélioration de la vitesse de croissance implique que les décapodes atteignent un poids donné en un temps réduit, ce qui se traduit par une diminution des coûts fixes de production.
L'utilisation de cet aliment permet également d'améliorer le taux de conversion alimentaire. Ce paramètre est économiquement essentiel pour maîtriser le coût de production en aquaculture, puisque grâce à cet aliment, les crevettes atteignent le même poids à partir d'une quantité inférieure d'aliment.
Enfin, l'utilisation d'un aliment tel que décrit dans la présente demande permet d'améliorer la résistance des crevettes aux infections en cours d'élevage. Ceci se traduit par une baisse du taux de mortalité. En particulier, l'utilisation de cet aliment permet d'augmenter la résistance aux infections virales, notamment vis-à-vis du virus responsable du syndrome des taches blanches très répandu chez les crevettes, mais plus généralement présent chez les décapodes. L'utilisation de cet aliment permet également d'augmenter la résistance aux infections bactériennes, notamment vis-à-vis de la bactérie Vibrio responsable du syndrome de la nécrose hépatopancréatique aiguë.
DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION Un premier objet de la présente invention concerne un aliment destiné à l'élevage de crevettes permettant d'améliorer le rendement de l'élevage, comprenant de 5 à 30% de farine animale constituée de farine de poisson et de farine de larve de Hermetic/ illucens, caractérisé en ce que ladite farine de larve de Hermetic/ illucens représente entre 40 et 60% de ladite farine animale.
Par « aliment destiné à l'élevage de crevettes » on entend tout aliment utilisé en aquaculture, utilisé comme nourriture dans le régime alimentaire des crevettes d'élevages. Dans le cadre de l'invention, il s'agit d'un aliment comprenant entre 5% et 30% de farine animale constituée de farine de poisson et de farine de HI.
Par « farine animale » on entend une farine produite à partir d'animaux, notamment d'animaux marins tels que les poissons et crustacés, d'insectes ou d'autres animaux tels que les volailles, seule ou en mélange. Dans un mode de réalisation préféré, la farine animale comprend de la farine de poisson.
Dans un mode de réalisation préféré, la farine de HI représente entre 50 et 60% de la farine animale ; ce mode de réalisation est particulièrement adapté pour améliorer la résistance aux infections des crevettes.
Par « amélioration du rendement de l'élevage de crevettes » on entend l'amélioration du gain de poids, de la vitesse de croissance et du taux de conversion alimentaire par rapport aux performances des crevettes nourries avec un aliment équivalent classique (ou dit « conventionnel ») contenant de la farine de poisson au lieu de la farine de HI. De plus, la notion de rendement couvre aussi le fait que l'aliment permet une meilleure résistance aux infections ; en minimisant la mortalité au sein de l'élevage, la production globale est améliorée.
Dans un mode de réalisation particulier, les crevettes sont choisies parmi les espèces Litopenaeus vannamei, Litopenaeus stylirostris et Penaeus monodon.
Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, la farine de HI est obtenue via un procédé de préparation mécanique, sans traitement chimique, sans extraction dans un solvant. Un tel procédé mécanique peut être une extraction mécanique de la partie solide des larves préalablement broyées et chauffées, suivie d'un séchage et d'un broyage de cette partie solide pour obtenir de la farine.
La farine de HI obtenue par préparation mécanique a pour principal avantage de ne pas avoir été transformée par une étape de traitement chimique, telle que par exemple une étape d'enzymolyse. Les composants de la farine de HI sont maintenus sous leur forme initiale, permettant ainsi une plus grande concentration de lesdits composants et une farine de HI non dénaturée. Quel que soit le procédé, les larves de H. illucens utilisées pour la fabrication de la farine sont de préférence entières.
Dans un second objet de l'invention, l'aliment destiné à l'élevage de crevettes, est utilisé pour améliorer le rendement dudit élevage de crevettes.
Le rendement comprend les performances de croissance de la crevette qui sont évaluées sur le gain de poids, la vitesse de croissance et le taux de conversion alimentaire, et la résistance aux infections.
L'utilisation d'un aliment selon l'invention améliore le gain de poids et la vitesse de croissance desdites crevettes. Les crevettes nourries avec l'aliment comprenant 5 à 30% de farine animale constituée de farine de poisson et de farine de HI, caractérisé en ce que la farine de larve Hermetic/ illucens (HI) représente 30 à 60% de ladite farine animale, grandissent et grossissent plus vite et davantage que des crevettes nourries avec un aliment équivalent contenant de la farine de poisson au lieu de la farine de HL
L'utilisation d'un aliment selon l'invention améliore aussi le taux de conversion alimentaire des desdites crevettes. Les crevettes nourries avec l'aliment comprenant 5 à 30% de farine animale constituée de farine de poisson et de farine de HI, caractérisé en ce que la farine de larve Hermetic/ illucens (HI) représente 40 à 60% de ladite farine animale, ont une capacité de transformation de l'aliment en biomasse plus important que les crevettes nourries avec un aliment équivalent contenant de la farine de poisson au lieu de la farine de HL
Enfin, l'utilisation d'un aliment selon l'invention améliore la résistance aux infections desdites crevettes. Il permet donc de préserver la santé des crevettes en prévenant la survenue d'une infection. Les crevettes nourries avec l'aliment comprenant 5 à 30% de farine animale constituée de farine de poisson et de farine de HI, caractérisé en ce que la farine de larve Hermetic/ illucens (HI) représente 40 à 60% de ladite farine animale, résistent mieux aux infections que les crevettes nourries avec un aliment contenant de la farine de poisson au lieu de la farine de HL
On remarque notamment une résistance plus importante aux infections virales. L'infection virale peut être causée par un virus choisi parmi le virus responsable du syndrome des points blancs (WSSV) - ADNdb, le parvovirus hépatopancréatique (HPV) - ADNsb, le baculovirus du monodonte (MBV) - ADNdb, le virus responsable de la nécrose hypodermique et hématopoïétique infectieuse (IHHNV) - ADNs, le virus responsable du syndrome de la coquille lâche (LSS) - ADNdb, le virus de Laem-Singh (LSNV) - ARNdb, le virus associé à Gill (GAV) - ARNsb, le virus responsable du syndrome de Taura - ssRNA , le Virus responsable de la myonécrose infectieuse (IMNV) - dsRNA (ADNdb = ADN double brin ; ADNsb = ADN simple brin ; ARNsb = ARN simple brin).
Dans un mode de réalisation préféré, l'aliment selon l'invention permet de prévenir une infection causée par le virus responsable du syndrome des taches blanches.
Les crevettes nourries avec l'aliment selon l'invention résistent également mieux aux infections bactériennes telles que :
• Vibriosis cause par : Vibrio’s such as V. harveyi, V. parahaemolyticus, V. penaecida, V. nigripulcritudo, et V. vulnificus
• Les maladies bactériennes filamenteuses causes par : Leucothrix sp., Thiothrix sp., Flexibacter sp., Cytophaga sp., Flavobacterium sp.
• Hépatopancréatite nécrotique (NHP) causée par: des espèces de bactéries gram négative, intracytoplasmique d'alphaproteobacterium (espèces pas encore déterminées)
• Mycobactériose causée par : Mycobacterium marinum, Mycobacterium fortuitum, et plus généralement Mycobacterium sp.
L'aliment peut donc être utilisé pour prévenir une infection bactérienne est causée par V. harveyi, V. parahaemolyticus, V. penaecida, V. nigripulcritudo, V. vulnificus, Leucothrix sp., Thiothrix sp., Flexibacter sp., Cytophaga sp., Flavobacterium sp., des espèces de bactéries gram négative intracytoplasmiques d'alphaproteobacterium, Mycobacterium sp., en particulier Mycobacterium marinum, ou Mycobacterium fortuitum.
Dans un mode de réalisation préféré, l'aliment permet de prévenir l'apparition du syndrome de nécrose hépato pancréatique sévère causé par V. parahaemolyticus.
La présente invention sera mieux comprise à la lecture des exemples qui suivent, fournis à titre d'illustration et ne devant en aucun cas être considérés comme limitant la portée de la présente invention.
DESCRIPTION DES FIGURES
Figure 1 : Représentation graphique du gain de poids moyen (%) en fonction de l'aliment ingéré. La ligne horizontale matérialise l'observation d'un gain de poids par rapport à l'aliment contrôle dont la farine animale est entièrement composée de farine de poisson à hauteur de 30% (aliment sans farine de HI). La ligne oblique matérialise la tendance positive observée sur le gain de poids. Les valeurs associées à une même lettre ne présentent pas de différence significative entre elles (test de Fisher, p > 0,05).
Figure 2 : Représentation graphique du gain de poids moyen (%) en fonction de l'aliment ingéré. La ligne horizontale matérialise l'observation d'un gain de poids par rapport à l'aliment contrôle dont la farine animale est entièrement composée de farine de poisson à hauteur de 30% (aliment sans farine de HI). La ligne en pointillés matérialise la tendance positive observée sur le gain de poids. Les valeurs associées à une même lettre ne présentent pas de différence significative entre elles (test de Fisher, p > 0,05).
Figure 3 : Représentation graphique de l'indice de conversion moyen en fonction de l'aliment ingéré. La ligne horizontale matérialise l'observation d'un indice de conversion par rapport à l'aliment contrôle dont la farine animale est entièrement composée de farine de poisson à hauteur de 30% (aliment sans farine de HI). La ligne en pointillés matérialise la tendance observée sur l'indice de conversion par rapport à l'aliment contrôle. Les valeurs associées à une même lettre ne présentent pas de différence significative entre elles (test de Fisher, p > 0,05).
Figure 4 : Représentation graphique du gain de poids (g), du taux de croissance spécifique (%/jour) et du taux de conversion alimentaire moyens en fonction de l'aliment ingéré. CTRL correspond à l'aliment contrôle dont la farine animale est entièrement composée de farine de poisson à hauteur de 15%. A, B et C correspondent aux aliments améliorés dans lesquels la farine de HI représente respectivement 30%, 50% et 70% de la farine animale constituée de farine de poisson et de farine de HL Les valeurs associées à une même lettre ne présentent pas de différence significative entre elles (test de Fisher, p > 0,05).
Figure 5 : Représentation graphique des résultats recueillis lors de l'expérimentation avec le pathogène AHPNS. « Mock » correspond au groupe contrôle négatif pour la maladie, « CTRL » au groupe contrôle positif pour la maladie. Les crevettes de ces deux groupes ont été nourries avec l'aliment contrôle dont la farine animale est entièrement composée de farine de poisson à hauteur de 15%. A, B et C correspondent aux aliments améliorés dans lesquels la farine de HI représente respectivement 30%, 50% et 70% de la farine animale constituée de farine de poisson et de farine de HL Les valeurs associées à une même lettre ne présentent pas de différence significative entre elles (test de Fisher, p > 0,05).
Figure 6 : Représentation graphique des résultats recueillis lors de l'expérimentation avec le pathogène WSSV. « Mock » correspond au groupe contrôle négatif pour la maladie, « CTRL » au groupe contrôle positif pour la maladie. Les crevettes de ces deux groupes ont été nourries avec l'aliment contrôle dont la farine animale est entièrement composée de farine de poisson à hauteur de 15%. A, B et C correspondent aux aliments améliorés dans lesquels la farine de HI représente respectivement 30%, 50% et 70% de la farine animale constituée de farine de poisson et de farine de HI. Les valeurs associées à une même lettre ne présentent pas de différence significative entre elles (test de Fisher, p > 0,05).
EXEMPLES
EXEMPLE 1 : Amélioration du rendement d'un élevage de crevettes L stylirostris par l'apport d'un aliment amélioré comprenant de la farine de Hermetia illucens
Matériel et méthodes
Conditions expérimentales : Cette expérience a été réalisée sur des crevettes de l'espèce L. stylirostris. La zone expérimentale est constituée de 40 bacs de 50L et leur cuve d'approvisionnement en eau. Un renouvellement en eau de mer de 100% par heure a été appliqué à l'ensemble des bacs. La qualité de l'approvisionnement en eau de mer est assurée par un système de filtration mécanique. De plus, une thermorégulation de l'eau a été réalisée par le biais d'un « groupe froid » et/ou de résistances dans les cuves. Seule la salinité (salinité naturelle avoisinant les 35%o) et la photopériode ne disposent pas de système de contrôle continu. Cette expérimentation a été effectuée avec des animaux provenant d'un bassin de soutien (Ifremer/LEAD-NC) d'un poids moyen initial 5,83±l,23g et à une densité de 7 individus/bac. Le transfert a été réalisé 7 jours avant le début de l'étude afin d'acclimater les animaux aux conditions expérimentales. Pendant cette période, une pesée individuelle des animaux et leur marquage ont été effectués afin d'établir les poids initiaux individuels et permettre leur identification tout au long de la période d'élevage. Au jour du marquage, la densité a été ramenée à 6 individus/bac. Ainsi, les poids individuels finaux et la survie pourront être évalués en fin de période d'étude.
Plan de contrôle : La température (°C) a été suivie quotidiennement (07:30 et 16:00). Un siphonage des restes, une purge et un comptage du nombre de crevette par bac (suivi de la survie) ont également été effectués 5 fois par semaine (hors week-end et jours fériés). Le cas échéant, des observations ont été consignées concernant les périodes de mues, le comportement des animaux ou tout autre paramètre d'intérêt. de la farine de Hermetic/ illucens
La farine est obtenue à partir des larves H. Illucens qui sont chauffées, séparées mécaniquement en 3 phases (extraction mécanique, sans utilisation de solvant), séchées puis broyées.
Les larves sont abattues par immersion dans une eau chauffée à environ 70°C. Les larves dévitalisées sont broyées puis portées au minimum à 90°C. Le produit ainsi obtenu est séparé mécaniquement en 3 phases : la partie solide (gâteau), une partie liquide contenant des nutriments hydrosolubles (eau de colle) et l'huile. La farine, composée du gâteau, de l’eau de colle et d'antioxydant, est séchée. L'humidité en sortie de la farine est entre 5 et 10%. Enfin, la farine est broyée. La granulométrie de la farine en sortie de broyeur est inférieure à 2 mm.
Préparation et caractéristiques des aliments expérimentaux cibles :
Les compositions comprennent en plus des farines animales et végétales, les ingrédients contenus classiquement dans les aliments pour crevettes à savoir : huile, acides aminés, vitamines et minéraux. Les aliments 1 à 7, dont la composition est décrite dans le Tableau 1, sont obtenus en substituant dans un ratio 1:1 une part croissante de farine de poisson contenue dans l'aliment contrôle par de la farine de HL Cela permet d'obtenir des aliments qui comprennent environ 30% en poids de farine animale constituée de farine de poisson et de farine de HI, et qui présentent différentes teneurs en farine de HI de cette farine animale, égales au taux de remplacement de la farine de poisson de l'aliment contrôle par de la farine de HI (Tableau 2). Pour chacun des aliments 1 à 7, l'aliment contrôle représente un aliment équivalent contenant de la farine de poisson au lieu de la farine de HL
Figure imgf000011_0001
Tableau 1 : Composition des aliments en % (ingrédients principaux)
Formules de calcul des paramètres étudiés dans cette étude :
- Gain de poids (GP ; %) = [(Pfinai-Pinitiai) * 100] / Pinitiai où P est le poids individuel ;
- Quantité ingérée (Ing. ; g/individu) = ingéré/Nb où Q est la quantité d'aliment ingéré et Nb le nombre d'individus ;
- Indice de conversion (IC) = Ing. / GP, qui correspond au taux de conversion alimentaire
Résultats
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Tableau 2 : Valeurs moyennes obtenues en gain de poids, quantité d'aliment ingéré et indice de conversion accompagnées de leurs écarts-types en fonction des différents aliments expérimentaux. Les valeurs associées à une même lettre ne présentent pas de différence significative entre elles (test de Fisher, p > 0,05). (* farine animale = farine de poisson + farine de HI) Concernant le gain de poids, les résultats sont présentés au Tableau 2, ainsi qu'à la Figure 1. On observe que les aliments 2 à 5, qui correspondent à une teneur en farine de HI allant de 20 à 61% des 30% de farine animale (farine de poisson + farine de HI), présentent des gains de poids significativement plus élevés que celui observé pour l'aliment contrôle. En particulier, on observe que les aliments 4 et 5, caractérisés en ce que la farine de HI représente respectivement 39% et 61% de la farine animale, montrent des gains de poids près de deux fois supérieurs au groupe contrôle.
En ce qui concerne la prise alimentaire, on observe des quantités ingérées plus élevées que celle observée pour l'aliment contrôle, ce qui traduit une appétence supérieure. Les résultats indiquent par ailleurs une tendance numérique entre la quantité d'aliment ingéré et la teneur en HI de la farine animale entre 10% et 29%. En particulier, la quantité ingérée pour l'aliment 3, qui correspond à une teneur en farine de HI dans la farine animale de 29%, est significativement plus élevée que celle associée à l'aliment contrôle.
L'indice de conversion permet d'obtenir une mesure objective couplant à la fois les données d'ingérés et de croissance. L'IC permet donc d'informer sur la capacité de transformation de l'aliment en biomasse des animaux. Dans cette expérimentation, les résultats montrent que l' IC des aliments avec de la farine de Hermetic/ illucens tend à être numériquement plus faible qu'avec l'aliment contrôle, ce qui implique que pour une même quantité, voire une quantité inférieure d'aliment ingéré, les crevettes nourries avec un aliment comprenant de la farine de HI présentent un gain de poids plus élevé que celles nourries avec un aliment équivalent contenant de la farine de poisson au lieu de la farine de HL
Conclusion Ces expériences, qui ont consisté à substituer dans un ratio 1:1 de la farine de poisson par de la farine de HI (en prenant pour référence un aliment classique à base de farine de poisson), démontrent de meilleures performances de croissance avec des aliments dont la farine animale comporte de la farine de HI par rapport à un aliment équivalent contenant de la farine de poisson au lieu de la farine de HL
EXEMPLE 2 : Amélioration du rendement d'un élevage de crevettes L stylirostris par l'apport d'un aliment amélioré comprenant de la farine de Hermetia illucens Matériels et méthodes
Conditions expérimentales : Cette expérience a été réalisée sur des crevettes de l'espèce L. stylirostris. La zone expérimentale est constituée de 40 bacs de 50L et leur cuve d'approvisionnement en eau. Un renouvellement en eau de mer de 100% par heure a été appliqué à l'ensemble des bacs. La qualité de l'approvisionnement en eau de mer est assurée par un système de filtration mécanique. De plus, une thermorégulation de l'eau a été réalisée par le biais d'un « groupe froid » et/ou de résistance dans les cuves. Seule la salinité (salinité naturelle avoisinant les 35%o) et la photopériode ne disposent pas de système de contrôle continu. Cette expérimentation a été effectuée avec des animaux provenant d'un bassin de soutien (Ifremer/LEAD-NC) d'un poids moyen initial 5,83±l,23g et à une densité de 7 individus/bac. Le transfert a été réalisé 7 jours avant le début de l'étude afin d'acclimater les animaux aux conditions expérimentales. Pendant cette période, une pesée individuelle des animaux et leur marquage ont été effectués afin d'établir les poids initiaux individuels et permettre leur identification tout au long de la période d'élevage. Au jour du marquage, la densité a été ramenée à 6 individus/bac. Ainsi, les poids individuels finaux et la survie ont pu être évalués en fin de période d'étude.
Plan de contrôle : La température (°C) a été suivie quotidiennement (07:30 et 16:00). Un siphonage des restes, une purge et un comptage du nombre de crevette par bac (suivi de la survie) ont également été effectués 5 fois par semaine (hors week-end et jours fériés). Le cas échéant, des observations ont été consignées concernant les périodes de mues, le comportement des animaux ou tout autre paramètre d'intérêt.
Préparation et caractéristiques des aliments expérimentaux cibles :
Les compositions comprennent en plus des farines animales et végétales, les ingrédients contenus classiquement dans les aliments pour crevettes à savoir : huile, acides aminés, vitamines et minéraux. Les aliments 1 à 7, dont la composition est décrite dans le Tableau 3, sont obtenus en substituant dans un ratio 1:1 une part croissante de farine de poisson contenue dans l'aliment contrôle par de la farine de HL Cela permet d'obtenir des aliments qui comprennent 30% en poids de farine animale constituée de farine de poisson et de farine de HI, et qui présentent différentes teneurs en farine de HI de cette farine animale, égales au taux de remplacement de la farine de poisson de l'aliment contrôle par de la farine de HI (Tableau 4). Pour chacun des aliments 1 à 7, l'aliment contrôle représente un aliment équivalent contenant de la farine de poisson au lieu de la farine de HL
Figure imgf000015_0001
Tableau 3 : Composition des aliments en % (ingrédients principaux)
Formules de calcul des paramètres étudiés dans cette étude :
Les paramètres étudiés dans les mêmes que dans l'Exemple 1.
Résultats
Figure imgf000015_0002
Tableau 4 : Valeurs moyennes obtenues en gain de poids, quantité d'aliment ingéré et indice de conversion accompagnées de leurs écarts-types en fonction des différents aliments expérimentaux. Les valeurs associées à une même lettre ne présentent pas de différence significative entre elles (test de Fisher, p > 0,05). (* farine animale = farine de poisson + farine de HI)
Concernant le gain de poids, les résultats sont présentés au Tableau 4, ainsi qu'à la Figure 2. On observe des gains de poids supérieurs à celui de l'aliment contrôle pour les aliments 2 à 7. Même si les gains de poids ne présentent pas de différence significative par rapport à l'aliment contrôle, une tendance linéaire peut être observée. Par ailleurs, l'aliment 7, qui correspond à une teneur en farine de HI de 40% des 30% de farine animale (farine de poisson + farine de HI), présente un gain de poids significativement plus élevé que celui observé pour l'aliment contrôle.
En ce qui concerne la prise alimentaire, aucune différence significative n'est observée, ce qui traduit une appétence équivalente.
Enfin, concernant l'indice de conversion, une représentation graphique des résultats est présentée à la Figure 3. Les résultats montrent que l'indice de conversion des aliments avec de la farine de Hermetic/ illucens tend à être numériquement plus faible qu'avec l'aliment contrôle, ce qui implique que pour une même quantité, voire une quantité inférieure d'aliment ingéré, les crevettes nourries avec un aliment comprenant de la farine de HI présentent un gain de poids plus élevé que celles nourries avec un aliment équivalent contenant de la farine de poisson au lieu de la farine de HL
Conclusion : Ces expériences, qui ont consisté à substituer dans un ratio 1:1 de la farine de poisson par de la farine de HI (en prenant pour référence un aliment classique à base de farine de poisson), démontrent un gain de poids amélioré avec un aliment dont la farine animale comporte 40% de farine de HI par rapport à un aliment équivalent sans farine de HL Les résultats relatifs à l'indice de conservation font apparaître une diminution, comparé à l'indice de conversion de l'aliment contrôle.
EXEMPLE 3 : Amélioration du rendement d'un élevage de crevettes Litopenaeus vannamei par l'apport d'un aliment amélioré comprenant de la farine de Hermetia illucens
Matériels et méthodes Conditions expérimentales : Ces expériences ont été réalisées sur des crevettes de l'espèce Litopenaeus vannamei.
La zone expérimentale est constituée de 12 bacs de 290L. Les larves de crevettes ont été élevées dans un système de recirculation d’eau contenant de l’eau de mer artificielle à une salinité de 20 g L 1. Un filtre biologique / mécanique complet et des changements d’eau réguliers ont permis de conserver la teneur en ammoniac total (NH3 / NH4 +) inférieure à 0,05 mg L-l et la teneur en nitrites (NO2 ) inférieure ou égale à 0,8 mg L 1. La température de l'eau a été maintenue constante à 27°C ± 1°C au moyen d’un système de contrôle de la température automatique. Un total de 1200 crevettes d’un poids corporel moyen d’environ 0,1 g a été utilisé pour composer au hasard 12 groupes de 100 individus. Chaque groupe était logé dans une unité d’alimentation. Chaque régime expérimental a été attribué à 3 unités d'alimentation. Les poids totaux des groupes ont été mesurés au début de l'expérimentation et à 28 jours.
Préparation et caractéristiques des aliments expérimentaux :
De la farine de HI a été ajoutée aux autres ingrédients (farine de poisson, farines végétales, acides aminés, vitamines et minéraux...) et le tout a été homogénéisé soigneusement. Afin de granuler les mélanges résultants, un liant d’alimentation et de l’eau ont été ajoutés. La pâte résultante a été passée à travers une machine de granulation. La température pendant la procédure n'a pas dépassé 50°C. 2 kg de chaque aliment ont été produits.
Les aliments A, B et C, dont la composition est décrite dans le Tableau 5, sont obtenus en substituant dans un ratio 1:1 une part croissante de farine de poisson contenue dans l'aliment contrôle par de la farine de HL Cela permet d'obtenir des aliments qui comprennent 15% en poids de farine animale constituée de farine de poisson et de farine de HI, et qui présentent différentes teneurs en farine de HI de cette farine animale, égales au taux de remplacement de la farine de poisson de l'aliment contrôle par de la farine de HI (Tableau 6). Pour chacun des aliments ainsi obtenus, l'aliment contrôle représente un aliment équivalent contenant de la farine de poisson au lieu de la farine de HL
Figure imgf000017_0001
Tableau 5 : Composition des aliments en % (ingrédients principaux) Pendant la période d’expérimentation, les aliments ont été distribués automatiquement 6 fois par jour. Les groupes de crevettes ont reçu leur régime respectif selon une ration quotidienne calculée à partir du poids moyen des crevettes (pourcentage standard du poids) et ajustée quotidiennement en fonction de la croissance attendue, de la mortalité observée et de la consommation d'aliment par groupe.
La performance a été évaluée selon les paramètres suivants :
- Gain de poids
- Taux de croissance spécifique (TCS ; %/jour) = [(In Pfinai - In Pinitiai)* 100] / 1 où t est la durée en jours
- Taux de conversion d’alimentation
Taux de survie
Les crevettes utilisées dans cette expérimentation sont certifiées exemptes de pathogènes spécifiques (SPF) pour les agents pathogènes suivants : IMNV, EHP, WSSV, TSV, YHV, NHP-B, IHHNV, CMNV, PvNV, MBV, HPV, AHPND / EMS, BP. Des groupes en triplicata de crevettes ont été nourris avec les aliments décrits dans le Tableau 5 pendant 28 jours. Cette procédure a permis d'évaluer l’effet de ces aliments sur les performances de croissance des crevettes. Trois jours avant le début du test de résistance aux pathogènes, les crevettes ont été transférées dans des unités d'infection de 10L remplies d'eau de mer artificielle (1 crevette par unité) pour permettre leur acclimatation. Pour le test de résistance au virus responsable du syndrome des taches blanches, 3 blocs de 10 individus chacun ont été formés à partir des crevettes de chacun des groupes A, B et C. 1 bloc pour le contrôle négatif (Mock) et 3 pour le contrôle positif ont été constitués à partir des crevettes du groupe CTRL. Les crevettes ont été inoculées par voie orale avec la préparation virale. Après l'inoculation, les crevettes ont été nourries deux fois par jour avec leur régime respectif. Les signes cliniques de maladie et de mortalité ont été suivis deux fois par jour. Le même protocole a été mis en oeuvre pour le test de résistance à la bactérie responsable du syndrome de nécrose pancréatique sévère, à l'exception du pathogène qui est une bactérie et qui a été inoculé par immersion.
Préparation virale
La souche WSSV Thai-1 (Escobedo-Bonilla et al., 2005) a été utilisée dans cette expérience. Un stock de ce virus est conservé à -70°C. Cette souche a été précédemment isolée en Thaïlande à partir de Penaeus monodon infecté naturellement et passée une fois dans l’écrevisse Pacifastacus leniusculus (Jiravanichpaisal et al., 2001) comme suit. Un stock congelé de suspension branchiale d'écrevisses (certifié exempt d'autres agents pathogènes majeurs de la crevette) a été injecté dans Litopenaeus vannamei sans pathogène spécifique (SPF) pour amplifier le virus.
Les carcasses de crevettes infectées résultantes ont été utilisées pour préparer une suspension de WSSV et immédiatement congelées. Le niveau d'infection a ensuite été déterminé selon la procédure décrite par Escobedo Bonilla et al. (2005). Cet inoculum a été utilisé pour infecter les crevettes par voie intramusculaire. Les carcasses infectées résultantes ont été utilisées pour préparer l'inoculum solide de WSSV, qui a été utilisé dans l'expérience d'infection orale. Des carcasses non infectées de crevettes soumises à la même procédure mais inoculées avec une suspension sans virus ont été utilisées pour préparer un inoculum solide à blanc (Mock).
Préparation bactérienne
La bactérie utilisée dans cette expérience est un Vibrio parahaemolyticus isolé à partir de crevettes infectées par AHPNS / EMS. De manière plus spécifique, c'est la souche TW01 spécifique AHPND / EMS qui a été utilisée dans cette expérimentation. Cette bactérie a été isolée de bassins de crevettes infectés en Thaïlande. Un stock de cette bactérie est conservé à -70°C. Après décongélation, le stock a été inoculé de manière aseptique dans un milieu de culture et cultivé dans des conditions standard. Des suspensions quantifiées de TW01 ont été utilisées pour inoculer les crevettes par immersion.
Résultats
Résultats sur les performances de croissance
Les résultats sur les performances de croissance sont présentés au Tableau 6.
Figure imgf000019_0001
Tableau 6 : Valeurs moyennes obtenues en gain de poids, taux de croissance spécifique et taux de conversion alimentaire accompagnées de leurs écarts-types en fonction des différents aliments expérimentaux. Les valeurs associées à une même lettre ne présentent pas de différence significative entre elles (test de Fisher, p > 0,05). (* farine animale = farine de poisson + farine de HI)
Tous les groupes de crevettes nourries avec de la farine de Hermetic/ illucens ont présenté une performance significativement plus élevée par rapport au groupe contrôle à la fois pour le gain de poids et pour le taux de croissance spécifique. Les résultats sont présentés au Tableau 6, ainsi qu'à la Figure 4. On observe une amélioration globale significative du gain de poids et de la vitesse de croissance (mesurée par le taux de croissance spécifique) chez les crevettes nourries avec les aliments A, B et C par rapport aux crevettes nourries avec un aliment équivalent sans farine de HI (CTRL). Cette amélioration est proportionnelle à la teneur en farine de Hermetic/ illucens dans la farine animale.
Les résultats montrent également une tendance décroissante du taux de conversion alimentaire corrélée à l'augmentation de la teneur en farine de HI dans la farine animale. En particulier, le taux de conversion d’alimentation est significativement plus bas pour les régimes B et C, qui correspondent à des teneurs en farine de HI de 50% et 70% respectivement des 15% de farine animale, que pour le régime CTRL.
Résultats sur le pathogène AHPNS :
Figure imgf000020_0001
Tableau 7 : Valeurs moyennes obtenues en mortalité finale dans le test de résistance au AHPNS accompagnées de leurs écarts-types en fonction des différents aliments expérimentaux. Les valeurs associées à une même lettre ne présentent pas de différence significative entre elles (test de Fisher, p > 0,05). (* farine animale = farine de poisson + farine de HI) Les résultats sont présentés au Tableau 7, ainsi qu'à la Figure 5.
Comme attendu, la mortalité du groupe contrôle CTRL (contrôle positif de la maladie) est comprise entre 50 et 80% alors que celle du groupe contrôle Mock (contrôle négatif pour la maladie) était de 0%. Cela démontre la validité du protocole. Aucune différence significative de mortalité n'a été observées entre les groupes nourris avec les aliments A et B et le groupe CTRL. Cela démontre que le remplacement de la farine de poisson par de la farine de HI n'entraîne pas d'augmentation de la mortalité face à la bactérie responsable du syndrome de la nécrose hépatopancréatique aiguë. Une réduction significative de la mortalité est observée avec l'aliment C, qui correspond à une teneur en HI de la farine animale de 70%.
Ces résultats suggèrent qu’il existe une protection partielle des crevettes à une infection au AHPNS lors du remplacement de la farine de poisson par de la farine de HI dans les régimes de croissance des crevettes. Une teneur en farine de HI de la farine animale (ou de manière équivalente, un taux de remplacement de la farine de poisson par de la farine de HI) de 55 à 60% pourrait être intéressante pour cette application.
Résultats sur le pathogène WSSV :
Figure imgf000021_0001
Tableau 8 : Valeurs moyennes obtenues en mortalité finale dans le test de résistance au WSSV accompagnées de leurs écarts-types en fonction des différents aliments expérimentaux. Les valeurs associées à une même lettre ne présentent pas de différence significative entre elles (test de Fisher, p > 0,05). (* farine animale = farine de poisson + farine de HI)
Les résultats sont présentés à la Figure 6.
Comme attendu, la mortalité du groupe contrôle CTRL (contrôle positif pour la maladie) est comprise entre 50 et 80% et celle du groupe contrôle Mock (contrôle négatif pour la maladie) est de 0%. Cela démontre la validité du protocole. On observe une tendance générale montrant une survie plus élevée des crevettes nourries avec les aliments A, B et C que dans le groupe contrôle positif. D'un point de vue statistique, cette amélioration est significative pour le groupe nourri avec l'aliment A. Ces résultats suggèrent que l'inclusion de farine HI dans le régime alimentaire des crevettes peut améliorer leur résistance au WSSV de manière significative à une teneur en farine de HI de la farine animale (ou de manière équivalente, un taux de remplacement de la farine de poisson par de la farine de HI) de 30%. La réduction de mortalité observée avec les aliments B et C suggère qu’il existe en général une protection partielle des crevettes à une infection au WSSV lors du remplacement de la farine de poisson par de la farine de HI dans les régimes de croissance des crevettes. Un taux de remplacement de 40 à 60% de farine de poisson par de la farine de HI pourrait être intéressant pour cette application.
Conclusion Ces expériences, qui ont consisté à substituer dans un ratio 1:1 de la farine de poisson par de la farine de HI (en prenant pour référence un aliment classique à base de farine de poisson), montrent de meilleures performances de croissance des crevettes nourries avec des aliments dont la farine animale comporte de la farine de HI par rapport à un aliment équivalent contenant de la farine de poisson au lieu de la farine de HI.
De plus, on observe une protection partielle des crevettes à une infection au AHPNS et au WSSV lors du remplacement de la farine de poisson par de la farine de HI dans les régimes de croissance des crevettes. La farine de HI pourrait aider à améliorer la survie des crevettes à une infection aux pathogènes AHPNS et WSSV lorsqu'elle est utilisée pour remplacer la farine de poisson dans l'alimentation des crevettes.

Claims

22 REVENDICATIONS
1. Aliment destiné à l'élevage de crevettes permettant d'améliorer le rendement de l'élevage, comprenant de 5 à 30% de farine animale constituée de farine de poisson et de farine de larve de Hermetic/ illucens, caractérisé en ce que ladite farine de larve de Hermetic/ illucens représente entre 40 et 60% de ladite farine animale.
2. Utilisation d'un aliment tel que défini à la revendication 1, pour améliorer le gain de poids desdites crevettes.
3. Utilisation d'un aliment tel que défini à la revendication 1, pour améliorer la vitesse de croissance desdites crevettes.
4. Utilisation d'un aliment tel que défini à la revendication 1, pour améliorer le taux de conversion alimentaire.
5. Utilisation selon l'une des revendications 2 à 4, dans laquelle lesdites crevettes sont choisies parmi les espèces Litopenaeus vcmnamei, Litopenaeus stylirostris et Penaeus monodon.
6. Aliment tel que défini à la revendication 1, pour son utilisation pour améliorer la résistance desdites crevettes aux infections.
7. Aliment selon la revendication 6 pour son utilisation selon la revendication 6, pour améliorer la résistance aux infections virales.
8. Aliment selon la revendication 7 pour son utilisation selon la revendication 7, dans laquelle l'infection virale est causée par un virus choisi parmi le virus du syndrome des points blancs(WSSV), un parvovirus hépatopancréatique (HPV), le baculovirus du monodonte (MBV), le virus de la nécrose hypodermique et hématopoïétique infectieuse (IHHNV), le virus responsable du syndrome de la coquille lâche (LSS), le virus de Laem-Singh (LSNV), le virus associé à Gill (GAV), le virus responsable du syndrome de Taura, le virus responsable de la myonécrose infectieuse (IMNV).
9. Aliment selon la revendication 8 pour son utilisation selon la revendication 8, pour améliorer la résistance au virus responsable du syndrome des taches blanches.
10. Aliment selon la revendication 6 pour son utilisation selon la revendication 6, pour améliorer la résistance aux infections bactériennes.
11. Aliment selon la revendication 10, pour son utilisation selon la revendication 10, dans laquelle l'infection bactérienne est causée par V. harveyi, V. parahaemolyticus, V. penaecida, V. nigripulcritudo, V. vulnificus, Leucothrix sp., Thiothrix sp., Flexibacter sp., Cytophaga sp., Flavobacterium sp., des espèces de bactéries gram négative intracytoplasmiques d'alphaproteobacterium, Mycobacterium sp
12. Aliment selon la revendication 11, pour son utilisation selon la revendication 11 pour prévenir l'apparition du syndrome de nécrose hépato-pancréatique sévère.
13. Aliment selon l'une des revendications 6 à 12 pour son utilisation selon l'une des revendications 6 à 12, dans laquelle lesdites crevettes sont choisies parmi les espèces Litopenaeus vannamei, Litopenaeus stylirostris et Penaeus monodon.
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