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WO2019077268A1 - Cosmetic composition for active prevention of the signs of ageing - Google Patents

Cosmetic composition for active prevention of the signs of ageing Download PDF

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Publication number
WO2019077268A1
WO2019077268A1 PCT/FR2018/052580 FR2018052580W WO2019077268A1 WO 2019077268 A1 WO2019077268 A1 WO 2019077268A1 FR 2018052580 W FR2018052580 W FR 2018052580W WO 2019077268 A1 WO2019077268 A1 WO 2019077268A1
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WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
iris
extract
skin
weight
cosmetic composition
Prior art date
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Ceased
Application number
PCT/FR2018/052580
Other languages
French (fr)
Inventor
Marielle Moreau
Carine Nizard
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
LVMH Recherche GIE
Original Assignee
LVMH Recherche GIE
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by LVMH Recherche GIE filed Critical LVMH Recherche GIE
Publication of WO2019077268A1 publication Critical patent/WO2019077268A1/en
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Ceased legal-status Critical Current

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    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
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    • A61Q19/08Anti-ageing preparations
    • AHUMAN NECESSITIES
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    • A61K2800/74Biological properties of particular ingredients
    • A61K2800/78Enzyme modulators, e.g. Enzyme agonists

Definitions

  • the present invention relates to the field of skin aging, and more specifically the prevention of the appearance of the first signs of age otherwise known as 'pre-aging'.
  • Skin aging has for many years mobilized research efforts to identify new assets and / or new technologies aimed at decreasing and / or correcting the signs of aging, in particular visible signs such as wrinkles, the loss of elasticity and sagging of the skin that appear and then increase with age and are particularly characteristic of mature skin.
  • an iridescent extract of the genus Iris chosen in particular from an extract of a species selected from the group consisting of Iris florentina, Iris germanica, Iris pallida or Iris pallasii, preferably Iris florentina,
  • an iridescent extract of the genus Iris chosen in particular from an extract of a species selected from the group consisting of Iris florentina, Iris germanica, Iris pallida or Iris pallasii, preferably Iris florentina,
  • pre-aging in the sense of the present invention is meant the 'invisible signs' upstream of the appearance of the visible signs of age.
  • the purpose of the invention and therefore to act on these cell phenomena of 'pre-aging', upstream of 'aging', in order to have a skin more resistant to the effects of oxidative stress, for a skin that looks younger more long time.
  • 'early signs of age' are meant the very first signs of aging, distinct from the advanced clinical signs of aging, described above and in the prior art. These first signs result from the first cellular damage induced by oxidative stress and notably involving oxidation, glycation or glycoxidation of proteins.
  • the iridescent extract of the Iris genus is used in a content ranging from 0.0001% to 0.1% by weight of dry matter (active ingredient), preferably 0.001% by weight. % to 0.01% by weight of dry matter (active ingredient) relative to the total weight of the composition containing it.
  • the invention makes it possible to reduce the oxidation and / or glycoxidation phenomena induced by oxidative stress and thus prevent and / or delay the appearance of the first signs of age.
  • the Iris extract prevents and / or delays the appearance of the first signs of skin aging related to oxidation and / or glycoxidation phenomena induced by oxidative stress.
  • oxidative stress according to the invention is meant in particular a stress resulting from the toxic effects of dicarbonyl compounds (eg glyoxal and methylglyoxal) on proteins.
  • dicarbonyl compounds eg glyoxal and methylglyoxal
  • ROS reactive oxygen species
  • oxidation and / or glycoxidation phenomena is also generally meant the reaction of a reducing sugar (glucose) or the abovementioned dicarbonyl compounds (glyoxal and methylglyoxal), with proteins, leading to the formation of advanced glycation products (AGEs).
  • AGEs advanced glycation products
  • the presence of these glycation adducts on the proteins causes their denaturation and the inactivation of the enzymes.
  • the Iris extract of the invention strengthens the natural system of antioxidant defense of the skin.
  • it will be an extract of rhizome, preferably an extract of rhizome Iris florentina.
  • a solvent or a mixture of solvents chosen from water is chosen, the C 1 -C 4 alcohols, such as ethanol, glycols, such as ethylene glycol, glycerol, butylene glycol and propylene glycol, and mixtures thereof.
  • the plant material is extracted with water.
  • Extraction can be carried out under reflux or by maceration at room temperature.
  • Ultrasound during extraction is advantageously used in order to improve the mass yield of said extraction.
  • the invention also relates to a cosmetic care method, in particular intended for young skin (subjects aged 20 to 35), for preventing and / or delaying the appearance of the first signs of skin aging, in particular linked to the phenomena of glycation and / or glycoxidation induced by oxidative stress, comprising the application to said skin of at least one cosmetic composition comprising at least one iridescent extract of the genus Iris selected in particular from an extract of a species selected from the group consisting of Iris florentina, Iris germanica, Iris pallida or Iris pallasii, preferably Iris florentina.
  • the cosmetic treatment method according to the invention comprises the application on the skin of a composition comprising, in a physiologically acceptable medium, at least:
  • a red algae extract such as that sold by Silab under the name TELOSOMYL ®.
  • SILAB red algae extract
  • SILAB SILAB
  • This extract limits the alteration of the telosome, the protective cap of telomeres.
  • TELOSOMYL ® stimulates the expression of telosome proteins, thus limiting the shortening of telomeres.
  • TELOSOMYL ® preserves the replicative potential of fibroblasts. Longevity is maintained, and programmed aging of the skin delayed.
  • protection agent and / or stimulating the activity of the epidermal stem cells is meant in particular an agent capable of maintaining the number and / or the activity of the epidermal stem cells, for example in an oxidative stress condition.
  • an agent may for example be selected by a clonogenicity test which is based on the ability of the stem cells to adhere to a support and divide to form large colonies (> 4mm 2 ).
  • the first step of isolating these cells is to prepare a suspension of epidermal cells which is then seeded on a feeder layer of 3T3 fibroblasts whose mitotic activity is blocked by mitomycin.
  • This support makes it possible: (1) to select the basal cells of the epidermis containing the stem cells and (2) to ensure the growth of cells with a high dividing capacity which then form colonies of daughter cells.
  • the cells with the highest ability to divide and form large colonies are from the epidermal strain population. Smaller colonies do not come from stem cells.
  • vitamin E phosphate or "tocopherol phosphate” according to the invention is meant in particular a tocopherol phosphate in the form of a base or a cosmetically acceptable salt.
  • an alkali metal salt preferably sodium salt, is preferred.
  • a tocopherol phosphate or a salt thereof can thus advantageously be used in the composition of the invention, in combination with the Iris extract of the invention, to obtain a protective effect of epidermal stem cells.
  • the cosmetic composition of the invention comprises an iridescent extract of the genus Iris and at least one agent that protects and / or stimulates the activity of the epidermal cells chosen from the group consisting of a red algae extract, tocopherol phosphate or one of its salts and preferably their mixture.
  • an Iridaceae extract of the genus Iris chosen in particular from an extract of a species chosen from the group consisting of Iris florentina, Iris germanica, Iris pallida or Iris pallasii, preferably Iris florentina, for its effect at the molecular level by decreasing the production of reactive oxygen species;
  • telomeres for its effect at the cellular level by an action on the protection of the telomeres, which delays the entry into senescence of the cells;
  • the invention therefore also relates to a cosmetic composition for topical application to the skin comprising, in a physiologically acceptable medium, at least:
  • the iridescent extract of the genus Iris is an extract of rhizome of Iris florentina.
  • the cosmetic composition of the invention may also comprise other active agents which may be chosen in particular from hydrating agents such as hyaluronic acid or glycerol, smoothing agents or else anti-wrinkle agents such as adenosine, complexes of natural or synthetic polymers producing on the skin tensor films at the time of application to the skin, or else anti-aging agents, more particularly extracts of plants obtained by methods known to those skilled in the art and which act on biological targets of the superficial or deep layers of the skin in particular, the epidermis, and the dermis, to maintain the elasticity of the skin, to produce a plumping effect, to ensure the renewal or the repair of tissues, the maintenance skin barrier or acting on the complexion of the skin. It can also be lightening or whitening active acting on the tasks that can appear with age, especially on the hands.
  • active agents which may be chosen in particular from hydrating agents such as hyaluronic acid or glycerol, smoothing agents or else anti-wrinkle agents such as adeno
  • UVB such as synthesis filters associated or not with filters consisting of particles capable of attenuating the effects of this radiation on the skin, self-tanning agents, pigments, fillers, preservatives, perfumes, absorbers odor, cosmetic or pharmaceutical active ingredients, essential oils, vitamins, essential fatty acids, surfactants, film-forming polymers, trace elements, film-forming polymers, chemical or mineral filters, moisturizing agents or water thermals, natural polymers such as polysaccharides or polypeptides, cellulose derivatives, or synthetic polymers, and optionally in addition to at least one other cosmetic active agent.
  • synthesis filters associated or not with filters consisting of particles capable of attenuating the effects of this radiation on the skin self-tanning agents, pigments, fillers, preservatives, perfumes, absorbers odor, cosmetic or pharmaceutical active ingredients, essential oils, vitamins, essential fatty acids, surfactants, film-forming polymers, trace elements, film-forming polymers, chemical or mineral filters, moisturizing agents or water thermals, natural polymers such as
  • the cosmetic composition according to the invention advantageously comprises an aqueous phase and may advantageously be in any of the forms normally used for topical application, in the form of an aqueous, hydro-alcoholic or oily solution, of an oil-in-oil emulsion. water or water-in-oil, an aqueous gel, or in any other form for topical application.
  • This composition may be more or less fluid and have the appearance of a white or colored cream, an ointment, a milk, a lotion, a serum, a paste, a mousse or a gel. It can optionally be applied to the skin in the form of an aerosol or by means of a patch or a mask or an applicator.
  • composition according to the invention is a cream present in a cosmetic kit comprising in addition at least one serum comprising at least one antioxidant.
  • the cell mats are washed with 1X PBS (Invitrogen) to remove dead cells, various cell debris and serum from the trypsin inhibitor medium.
  • 1X PBS Invitrogen
  • TrypLE TM Express Enzyme (Invitrogen) are added and left for 10 minutes at 37 ° C to dissociate the cells.
  • the cells are collected in a Protein LoBind Eppendorf tube. The wells are rinsed with 500 ⁇ l of supplemented DMEM and added to each tube. After centrifugation at 1500 x g for 5 minutes, the cell pellet is rinsed twice with 1 ml of 1X PBS buffer. The cell pellets are taken up in 70 ⁇ l of Cellytic Lysis Buffer (Sigma) and are stored at -80 ° C.
  • Reagents B, A and S are the reagents of said Biorad DC protein assay kit.
  • BSA stock solution 5mg / ml (Sigma, A2153, 4 ° C), aliquoted and frozen at -20 ° C.
  • the range is prepared in Eppendorf tubes stored at 4 ° C maximum 2 months.
  • Reagent A is prepared extemporaneously (stable for one week); 20 ⁇ of reagent S are added to 1 ml of reagent A (the reagent S is added if the samples contain detergents).
  • Reagents A, B and S of the kit are stored at room temperature. • Protocol
  • sample to be assayed diluted to 1 / 2.5
  • reagent A 25 ⁇ of reagent A 'are introduced into each well and stirred vigorously.
  • the protein lysates are thawed and then centrifuged at 4 ° C. at 150,000 ⁇ g for 15 minutes.
  • reaction mixture is prepared extemporaneously and incubated for 5 min at 37 ° C.
  • the slope corresponding to the reaction rate is calculated in the exponential phase (at the initial T time and the final T time) from the fluorescence emitted in Fluorescence Units (FU) every 2 minutes. after subtraction of the fluorescence emitted in the White.
  • Methylglyoxal (MG) in the presence of reduced glutathione (GSH) as cofactor at 2 ⁇ each are incubated 5min at 37 ° C in 50mM sodium phosphate buffer at pH 6.6 to produce hemithioacetate, the substrate of Glyoxalase 1 (GL01).
  • GSH reduced glutathione
  • the activity of the enzyme is evaluated by measuring every minute for 10 minutes the increase in absorbance measured at 240 nm bound to S-Dlactoylglutathion formed.
  • the Iris florentina extract significantly increases the glyoxalase activity by 17%.
  • the first step of isolating these cells is to prepare a suspension of epidermal cells which is then seeded on a feeder layer of 3T3 fibroblasts whose mitotic activity is blocked by mitomycin.
  • a serum is prepared according to the composition below:
  • Rhizome extract of iris florentina (1) 0.01% (M. S *)

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Abstract

Cosmetic composition for active prevention of the signs of ageing. The present invention particularly relates to the cosmetic use of at least one extract from at least one iridaceous plant of the genus Iris, as an agent for preventing and/or delaying the appearance of the first signs of cutaneous ageing, in particular those linked with oxidation and/or glycoxidation phenomena brought about by an oxidising stress, and a cosmetic composition for topical application to the skin comprising at least (i) an extract from an iridaceous plant of the genus Iris, (ii) an extract from red algae and (iii) a tocopherol phosphate or one of the salts thereof.

Description

Composition cosmétique de prévention active des signes de l'âge. DOMAINE TECHNIQUE DE L'INVENTION  Cosmetic composition of active prevention signs of age. TECHNICAL FIELD OF THE INVENTION

La présente invention concerne le domaine du vieillissement cutané, et plus précisément la prévention de l'apparition des premiers signes de l'âge autrement nommé 'pré-vieillissement'.  The present invention relates to the field of skin aging, and more specifically the prevention of the appearance of the first signs of age otherwise known as 'pre-aging'.

ETAT DE L'ART STATE OF THE ART

Le vieillissement cutané a depuis de nombreuses années mobilisé les efforts de recherche pour identifier de nouveaux actifs et/ou nouvelles technologies visant à diminuer et/ou corriger les signes de l'âge, en particulier les signes visibles tels que les rides, la perte d'élasticité et l'affaissement de la peau qui apparaissent puis augmentent avec l'âge et sont notamment caractéristiques des peaux matures.  Skin aging has for many years mobilized research efforts to identify new assets and / or new technologies aimed at decreasing and / or correcting the signs of aging, in particular visible signs such as wrinkles, the loss of elasticity and sagging of the skin that appear and then increase with age and are particularly characteristic of mature skin.

Dans le cadre de la présente invention, on s'intéresse à la prévention active de l'apparition des premiers signes de l'âge, domaine pour lequel il subsiste encore le besoin de développer de nouvelles compositions cosmétiques, en particulier adaptées aux peaux jeunes (20-35 ans). On parle de « pré-aging » ou « pré-vieillissement », en amont des phénomènes de vieillissement chronologique, également appelé vieillissement intrinsèque et de vieillissement photo-induit, également appelé vieillissement extrinsèque.  In the context of the present invention, we are interested in the active prevention of the appearance of the first signs of age, a field for which there still remains the need to develop new cosmetic compositions, in particular adapted to young skin ( 20-35 years). We speak of "pre-aging" or "pre-aging", upstream of chronological aging phenomena, also called intrinsic aging and photo-induced aging, also called extrinsic aging.

La peau est continuellement soumise à de multiples agressions qui peuvent accélérer son processus naturel de vieillissement. Elle est particulièrement sensible au stress oxydant généré à la fois par le fonctionnement normal de notre organisme et par des éléments extérieurs tels que la pollution atmosphérique, le rayonnement solaire ou encore le tabac. Ce stress oxydant se caractérise par la production d'Espèces Réactives de l'Oxygène (ERO) qui peuvent réagir avec tous les composants cellulaires, entraînant leur modification par oxydation et une altération de leur fonction. Cela conduit notamment à une diminution progressive des fonctions cellulaires suite à l'agrégation (pontage) des macromolécules. Afin de contrer l'action des ERO, les cellules ont développé des mécanismes de défenses, enzymatiques ou non. On parle de 'système naturel de défense antioxydant de la peau'. Mais ces mécanismes de protection sont également perturbés au cours du vieillissement. The skin is continually subjected to multiple aggressions that can accelerate its natural aging process. It is particularly sensitive to oxidative stress generated both by the normal functioning of our body and by external elements such as air pollution, solar radiation or even tobacco. This oxidative stress is characterized by the production of Reactive Oxygen Species (ROS) that can react with all cellular components, causing their modification by oxidation and an alteration of their function. This leads in particular to a gradual decrease in cell functions following the aggregation (bridging) of macromolecules. In order to counteract the action of the ROS, the cells have developed defense mechanisms, enzymatic or otherwise. We speak of 'natural system of antioxidant defense of the skin'. But these protective mechanisms are also disturbed during aging.

Il a été récemment mis en évidence par l'équipe de Radjei S et al. (Expérimental Dermatology, 2016, 25, 475-494) la présence d'un système enzymatique glyoxalase au niveau de l'épiderme, jouant un rôle protecteur contre les dommages oxydatifs induits par les espèces réactives de l'oxygène (ERO) tels que le glyoxal (GO) et le méthylglyoxal (MG). La glyoxalase élimine le glyoxal (GO) et le méthylgiyoxal (MG). Ainsi cette enzyme prévient leur accumulation et les phénomènes de glycation subséquents, résultant de la réaction de composés carbonylés tels que GO et MG avec les protéines de la peau conduisant à des produits de glycation avancés (AGE). L'élimination de composés carbonylés (glyoxal et méthylgiyoxal) est donc primordiale pour protéger la peau des phénomènes de glycation impliqués dans le vieillissement cutané. It was recently highlighted by the team of Radjei S et al. (Experimental Dermatology, 2016, 25, 475-494) the presence of an enzymatic glyoxalase system at the level of the epidermis, playing a protective role against oxidative damage induced by reactive oxygen species (ROS) such as the glyoxal (GO) and methylglyoxal (MG). The Glyoxalase removes glyoxal (GO) and methylgloxal (MG). Thus this enzyme prevents their accumulation and subsequent glycation phenomena, resulting from the reaction of carbonyl compounds such as GO and MG with skin proteins leading to advanced glycation products (AGE). The elimination of carbonyl compounds (glyoxal and methylglyoxal) is therefore essential to protect the skin from the glycation phenomena involved in skin aging.

Selon un mode particulier, le 'système naturel de défense antioxydant de la peau' selon l'invention implique la glyoxalase. C'est dans ce contexte que la Demanderesse a mis en évidence, de façon surprenante, qu'un extrait d'Iris était capable d'augmenter l'activité de la glyoxalase, permettant ainsi d'agir directement sur le système naturel de défense antioxydant de la peau pour le renforcer et retarder ainsi l'apparition des signes de l'âge.  According to one particular embodiment, the 'natural antioxidant defense system of the skin' according to the invention involves glyoxalase. It is in this context that the Applicant has demonstrated, surprisingly, that an Iris extract was able to increase the activity of glyoxalase, thus allowing to act directly on the natural system of antioxidant defense of the skin to strengthen it and thus delay the appearance of signs of age.

L'utilisation d'un extrait d'Iris en cosmétique est déjà connue, notamment de la demande JPS60-201249 de Shiseido publiée en 1987, pour prévenir des signes 'visibles' avancés du vieillissement, en particulier la rugosité de la peau et l'affaissement de la peau, plutôt caractéristiques des peaux matures. On connaît aussi des demandes WO 97/003556 de la société L'OREAL et WO 02/234229 de la société SILAB, les effets d'un extrait d'Iris sur la diminution des rides via un effet de relaxation du tissu cutané ou une inhibition de l'activité de la collagénase au niveau du derme, visant encore une fois des signes avancés du vieillissement.  The use of an extract of Iris in cosmetics is already known, in particular from the Shiseido JPS60-201249 application published in 1987, to prevent advanced 'visible' signs of aging, in particular the roughness of the skin and the skin. sagging skin, rather characteristic of mature skin. Applications WO 97/003556 from the company L'OREAL and WO 02/234229 from the company SILAB are also known, the effects of an iris extract on the reduction of wrinkles via a skin tissue relaxation effect or an inhibition collagenase activity in the dermis, again targeting advanced signs of aging.

Mais à la connaissance de la Demanderesse, c'est la première fois que l'on démontre l'effet d'un extrait d'Iris sur l'activité de la glyoxalase et son rôle dans la prévention active de l'apparition des premiers signes de l'âge ('pré-vieillissement'). But to the knowledge of the Applicant, this is the first time that we demonstrate the effect of an Iris extract on the activity of glyoxalase and its role in the active prevention of the appearance of the first signs of age ('pre-aging').

RESUME DE L'INVENTION SUMMARY OF THE INVENTION

Un premier objet de l'invention concerne donc une composition cosmétique pour application topique sur la peau comprenant, dans un milieu physiologiquement acceptable, au moins : A first subject of the invention therefore relates to a cosmetic composition for topical application to the skin comprising, in a physiologically acceptable medium, at least:

(i) un extrait d'Iridacée du genre Iris, choisi notamment parmi un extrait d'une espèce choisie parmi le groupe constitué de Iris florentina, Iris germanica, Iris pallida ou Iris pallasii, de préférence Iris florentina, (i) an iridescent extract of the genus Iris, chosen in particular from an extract of a species selected from the group consisting of Iris florentina, Iris germanica, Iris pallida or Iris pallasii, preferably Iris florentina,

(ii) un extrait d'algue rouge, de préférence de l'espèce Kappaphycus alvarezii et (iii) un phosphate de tocophérol ou l'un de ses sels, de préférence un tocophéryl phosphate sodique. (ii) an extract of red algae, preferably of the species Kappaphycus alvarezii and (iii) a tocopherol phosphate or a salt thereof, preferably a tocopheryl sodium phosphate.

De préférencej'extrait d'Iridacée du genre Iris est un extrait de rhizome d'Iris florentina. Preferably the iridescent extract of the genus Iris is an extract of Iris florentina rhizome.

Un autre objet de l'invention est un procédé de soin cosmétique, destiné notamment aux peaux jeunes (sujets ayant de préférence entre 20 et 35 ans, de préférence encore entre 20 et 30 ans), pour prévenir et/ou retarder l'apparition des premiers signes du vieillissement cutané, notamment liés aux phénomènes de glycation et/ou glycoxydation induits par un stress oxydant, comprenant l'application sur ladite peau d'au moins une composition cosmétique comprenant au moins un extrait d'Iridacée du genre Iris choisi notamment parmi un extrait d'une espèce choisie parmi le groupe constitué de Iris florentina, Iris germanica, Iris pallida ou Iris pallasii, de préférence Iris florentina. Selon un mode particulier, ledit procédé comprend l'application sur ladite peau, d'au moins une composition cosmétique pour application topique sur la peau comprenant, dans un milieu physiologiquement acceptable, au moins : Another object of the invention is a cosmetic care method, intended in particular for young skin (subjects preferably between 20 and 35 years, preferably still between 20 and 30 years), for preventing and / or delaying the onset of first signs of cutaneous aging, in particular linked to the glycation and / or glycoxidation phenomena induced by oxidative stress, comprising the application to said skin of at least one cosmetic composition comprising at least one iridescent extract of the genus Iris selected in particular from an extract of a species selected from the group consisting of Iris florentina, Iris germanica, Iris pallida or Iris pallasii, preferably Iris florentina. According to one particular embodiment, said method comprises the application to said skin of at least one cosmetic composition for topical application to the skin comprising, in a physiologically acceptable medium, at least:

(i) un extrait d'Iridacée du genre Iris, choisi notamment parmi un extrait d'une espèce choisie parmi le groupe constitué de Iris florentina, Iris germanica, Iris pallida ou Iris pallasii, de préférence Iris florentina, (i) an iridescent extract of the genus Iris, chosen in particular from an extract of a species selected from the group consisting of Iris florentina, Iris germanica, Iris pallida or Iris pallasii, preferably Iris florentina,

(ii) un extrait d'algue rouge, de préférence de l'espèce Kappaphycus alvarezii et (ii) an extract of red algae, preferably of the species Kappaphycus alvarezii and

(iii) un phosphate de tocophérol ou l'un de ses sels, de préférence un tocophéryl phosphate sodique.  (iii) a tocopherol phosphate or a salt thereof, preferably a tocopheryl sodium phosphate.

Un autre objet de l'invention concerne donc l'utilisation cosmétique d'au moins un extrait d'au moins une Iridacée du genre Iris, choisi notamment parmi un extrait d'une espèce choisie parmi le groupe constitué de Iris florentina, Iris germanica, Iris pallida ou Iris pallasii, de préférence Iris florentina, comme agent pour prévenir et/ou retarder l'apparition des premiers signes du vieillissement cutané, autrement nommé 'pré-vieillissement', liés notamment à des phénomènes d'oxydation et/ou glycoxydation induits par un stress oxydant. DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION Another subject of the invention therefore relates to the cosmetic use of at least one extract of at least one Iridaceae of the genus Iris, chosen especially from an extract of a species chosen from the group consisting of Iris florentina, Iris germanica, Iris pallida or Iris pallasii, preferably Iris florentina, as an agent for preventing and / or delaying the appearance of the first signs of skin aging, otherwise known as 'pre-aging', linked in particular to phenomena of oxidation and / or glycoxidation induced by oxidative stress. DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

Le 'vieillissement cutané' est un processus physiologique normal, impliquant des facteurs intrinsèques (génétique, hormonal, maladies...) et extrinsèques (UV, stress, agressions climatiques, pollution...), et qui s'amplifie au cours de la vie d'un individu du fait d'un déclin de son système de défense et de son besoin croissant en antioxydants.  'Skin aging' is a normal physiological process, involving intrinsic factors (genetic, hormonal, disease ...) and extrinsic (UV, stress, climatic aggressions, pollution ...), and which increases during the life of an individual due to a decline in his defense system and his growing need for antioxidants.

Les modifications au niveau de la couche cornée, de l'épiderme, de la jonction épidermique et du derme varient en fonction de l'âge de l'individu et se manifestent par des 'signes visibles' du vieillissement, qui progressent avec l'âge, plus ou moins vite en fonction de l'individu et de son environnement (facteurs intrinsèques et extrinsèques). Ces 'signes visibles' de l'âge sont notamment la perte d'élasticité, de tonicité et/ou de fermeté de la peau, les rides au niveau du front, du contour des yeux et des lèvres, au niveau du cou, la perte des volumes du visage, et les tâches pigmentaires.  Changes in the stratum corneum, epidermis, epidermal junction and dermis vary with age and are manifested by 'visible signs' of aging, which progress with age , more or less quickly depending on the individual and his environment (intrinsic and extrinsic factors). These 'visible signs' of age include loss of elasticity, tone and / or firmness of the skin, wrinkles in the forehead, around the eyes and lips, in the neck, loss volumes of the face, and pigmentary spots.

Par 'pré-vieillissement' au sens de la présente invention, on entend les 'signes invisibles' en amont de l'apparition des signes visibles de l'âge. Ces 'signes invisibles' ou 'signes cellulaires' de l'âge, par opposition à 'signes visibles' autrement nommés 'signes cliniques' de l'âge, comprennent les dommages cellulaires induits par un stress oxydant et impliquant notamment des oxydations, glycations ou glycoxydations de protéines. By "pre-aging" in the sense of the present invention is meant the 'invisible signs' upstream of the appearance of the visible signs of age. These 'invisible signs' or 'cellular signs' of age, as opposed to 'visible signs', otherwise known as 'clinical signs' of age, include cellular damage induced by oxidative stress and in particular involving oxidation, glycation or glycoxidation of proteins.

Il a en effet été démontré que sur des peaux de donneurs d'âges différents, la proportion de protéines carbonylées et glyquées augmente de manière significative en fonction de l'âge (Petropoulos, I. et al. (2000) : Increase of oxidatively modifiée! protein is associated with a decrease of proteasome activity and content in aging epidermal cells. The Journals of Gerontology Séries a: Biological Sciences and Médical Sciences, 55(5), B220-7.). It has been demonstrated that on skins of donors of different ages, the proportion of carbonylated and glycated proteins increases significantly with age (Petropoulos, I. et al., 2000): Increase of oxidatively modified The Journals of Gerontology Series a: Biological Sciences and Medical Sciences, 55 (5), B220-7.

Le but de l'invention et donc d'agir sur ces phénomènes cellulaires de 'pré-vieillissement', en amont du 'vieillissement', afin d'avoir une peau plus résistante aux effets du stress oxydant, pour une peau qui paraît jeune plus longtemps. The purpose of the invention and therefore to act on these cell phenomena of 'pre-aging', upstream of 'aging', in order to have a skin more resistant to the effects of oxidative stress, for a skin that looks younger more long time.

La présente invention vise ainsi à renforcer le système naturel de défense antioxydant de la peau et prévenir et/ou retarder ainsi activement l'apparition des premiers signes de l'âge ('pré-vieillissement'). The present invention thus aims to strengthen the natural system of antioxidant defense of the skin and thus prevent and / or actively delay the appearance of the first signs of age ('pre-aging').

Par 'premiers signes de l'âge', on entend les tous premiers signes de l'âge, distincts des signes cliniques avancés du vieillissement, décrits ci-dessus et dans l'art antérieur. Ces premiers signes résultent des premiers dommages cellulaires induits par un stress oxydant et impliquant notamment des oxydations, glycations ou glycoxydations de protéines. L'invention porte donc notamment sur l'utilisation d'au moins un extrait d'au moins une Iridacée du genre Iris dans une composition cosmétique, choisi notamment parmi un extrait d'une espèce choisie parmi le groupe constitué de Iris florentina, Iris germanica, Iris pallida ou Iris pallasii, de préférence Iris florentina, comme agent pour prévenir et/ou retarder l'apparition des premiers signes du vieillissement cutané ('pré-vieillissement'). By 'early signs of age' are meant the very first signs of aging, distinct from the advanced clinical signs of aging, described above and in the prior art. These first signs result from the first cellular damage induced by oxidative stress and notably involving oxidation, glycation or glycoxidation of proteins. The invention thus relates in particular to the use of at least one extract of at least one Iridaceae of the genus Iris in a cosmetic composition, chosen especially from an extract of a species selected from the group consisting of Iris florentina, Iris germanica , Iris pallida or Iris pallasii, preferably Iris florentina, as an agent for preventing and / or delaying the appearance of the first signs of skin aging ('pre-aging').

Selon un mode particulier de l'invention, l'extrait d'Iridacée du genre Iris est mis en œuvre en une teneur allant de 0,0001 % à 0,1 % en poids de matière sèche (matière active), de préférence de 0,001 % à 0,01 % en poids de matière sèche (matière active) par rapport au poids total de la composition le contenant. According to a particular embodiment of the invention, the iridescent extract of the Iris genus is used in a content ranging from 0.0001% to 0.1% by weight of dry matter (active ingredient), preferably 0.001% by weight. % to 0.01% by weight of dry matter (active ingredient) relative to the total weight of the composition containing it.

Selon un mode particulier, l'invention permet de diminuer les phénomènes d'oxydation et/ou glycoxydation induits par un stress oxydant et ainsi prévenir et/ou retarder l'apparition des premiers signes de l'âge. According to one particular embodiment, the invention makes it possible to reduce the oxidation and / or glycoxidation phenomena induced by oxidative stress and thus prevent and / or delay the appearance of the first signs of age.

Ainsi selon un mode particulier, l'extrait d'Iris prévient et/ou retarde l'apparition des premiers signes du vieillissement cutané liés à des phénomènes d'oxydation et/ou glycoxydation induits par un stress oxydant. Par 'stress oxydant' selon l'invention, on entend notamment un stress résultant des effets toxiques de composés dicarbonylés (ex : glyoxal et méthylglyoxal) sur les protéines. On parle plus généralement de 'stress oxydant' généré par le fonctionnement normal de notre organisme et par des éléments extérieurs (pollution, rayonnement UV), qui se caractérise par la production d'espèces réactives de l'oxygène (ERO ou ROS) qui peuvent réagir avec tous les composants cellulaires, en particulier les protéines et l'ADN, entraînant leur modification par oxydation. Thus according to a particular mode, the Iris extract prevents and / or delays the appearance of the first signs of skin aging related to oxidation and / or glycoxidation phenomena induced by oxidative stress. By "oxidative stress" according to the invention is meant in particular a stress resulting from the toxic effects of dicarbonyl compounds (eg glyoxal and methylglyoxal) on proteins. We speak more generally about 'oxidative stress' generated by the normal functioning of our organism and by external elements (pollution, UV radiation), which is characterized by the production of reactive oxygen species (ROS or ROS) that can react with all cellular components, in particular proteins and DNA, causing their modification by oxidation.

Par 'phénomènes d'oxydation et/ou glycoxydation' selon l'invention (on parle aussi généralement de 'glycation'), on entend notamment la réaction d'un sucre réducteur (glucose) ou des composés dicarbonylés précités (glyoxal et méthylglyoxal), avec les protéines, conduisant à la formation des produits de glycation avancés (AGE). La présence de ces adduits de glycation sur les protéines entraîne leur dénaturation et l'inactivation des enzymes. Selon un mode particulier de l'invention, l'extrait d'Iris de l'invention renforce le système naturel de défense antioxydant de la peau. By "oxidation and / or glycoxidation phenomena" according to the invention ("glycation") is also generally meant the reaction of a reducing sugar (glucose) or the abovementioned dicarbonyl compounds (glyoxal and methylglyoxal), with proteins, leading to the formation of advanced glycation products (AGEs). The presence of these glycation adducts on the proteins causes their denaturation and the inactivation of the enzymes. According to a particular embodiment of the invention, the Iris extract of the invention strengthens the natural system of antioxidant defense of the skin.

Selon un mode particulier de l'invention, l'extrait d'Iris de l'invention augmente l'activité de la glyoxalase des cellules de la peau, en particulier des cellules souches épidermiques. According to a particular embodiment of the invention, the Iris extract of the invention increases the activity of the glyoxalase of skin cells, in particular epidermal stem cells.

Par 'cellules souches épidermiques' selon l'invention, on entend notamment des cellules à fort potentiel de clonogénicité localisées préférentiellement au niveau de la couche basale de l'épiderme. Lesdites cellules, qui constituent une petite population de cellules de la peau, possèdent la plus forte capacité à se diviser et à former de larges colonies comparativement à d'autres cellules cutanées. By "epidermal stem cells" according to the invention is meant in particular cells with a high potential for clonogenicity localized preferentially at the level of the basal layer of the epidermis. The cells, which make up a small population of skin cells, have the highest ability to divide and form large colonies compared to other skin cells.

Extrait d'iris Iris extract

Selon un mode préféré de l'invention, l'extrait d'au moins une Iridacée du genre Iris est choisi parmi un extrait d'une espèce choisie parmi le groupe constitué d'Iris florentina, Iris germanica, Iris pallida ou Iris pallasii, de préférence Iris florentina.  According to a preferred embodiment of the invention, the extract of at least one Iridaceae of the genus Iris is chosen from an extract of a species chosen from the group consisting of Iris florentina, Iris germanica, Iris pallida or Iris pallasii, of preferably Iris florentina.

Selon un mode particulier, il s'agira d'un extrait de rhizome, de préférence d'un extrait de rhizome d'Iris florentina.  According to a particular mode, it will be an extract of rhizome, preferably an extract of rhizome Iris florentina.

L'extrait d'Iris peut être mélangé sous forme de poudre à une composition pour application topique sur la peau, ou peut être sous la forme d'un extrait liquide obtenu par extraction en présence d'un solvant approprié, de préférence au moins un solvant polaire cosmétiquement acceptable.  The Iris extract may be mixed in powder form with a composition for topical application to the skin, or may be in the form of a liquid extract obtained by extraction in the presence of a suitable solvent, preferably at least one polar solvent cosmetically acceptable.

Préalablement à l'étape d'extraction elle-même, le matériel végétal peut avoir été séché et/ou broyé.  Prior to the extraction stage itself, the plant material may have been dried and / or milled.

L'extrait peut être préparé par différents procédés d'extraction connus de l'homme du métier. The extract may be prepared by various extraction methods known to those skilled in the art.

Avantageusement, l'extraction est de préférence réalisée par mise en contact du matériel végétal sélectionné avec un solvant polaire ou un mélange de solvants polaires. Selon la présente invention, l'expression « solvant polaire » signifie que le solvant a une valeur d'indice de Polarité qui est égale ou supérieure à une valeur de 4. L'indice de polarité est une grandeur calculée sur la base de grandeurs thermodynamiques (de solubilité et de changement d'état) qui met en évidence le caractère plus ou moins polaire d'une molécule. On se reportera, pour les indices de polarité des solvants, à l'article de L.R. SNYDER : Classification of the solvent properties of common liquids ; Journal of Chromatography, 92 (1974), 223-230. Les solvants polaires préférés sont ceux constitués d'un composé comprenant au moins une liaison covalente polaire de type O-H. Advantageously, the extraction is preferably carried out by contacting the selected plant material with a polar solvent or a mixture of polar solvents. According to the present invention, the term "polar solvent" means that the solvent has a Polarity Index value that is equal to or greater than a value of 4. The polarity index is a quantity calculated on the basis of thermodynamic magnitudes. (of solubility and change of state) which highlights the more or less polar nature of a molecule. For the solvent polarity indices, refer to the article by LR SNYDER: Classification of the solvent properties of common liquids; Journal of Chromatography, 92 (1974), 223-230. Preferred polar solvents are those consisting of a compound comprising at least one polar covalent bond of OH type.

A titre de solvant polaire particulièrement préféré, on choisit un solvant ou un mélange de solvants choisi(s) parmi l'eau, les alcools en C1-C4, tel que l'éthanol, les glycols, tels que l'éthylène glycol, le glycérol, le butylèneglycol et le propylèneglycol, et leurs mélanges.  As a particularly preferred polar solvent, a solvent or a mixture of solvents chosen from water is chosen, the C 1 -C 4 alcohols, such as ethanol, glycols, such as ethylene glycol, glycerol, butylene glycol and propylene glycol, and mixtures thereof.

Selon une mise en œuvre préférée, on extrait le matériel végétal à l'aide d'eau. According to a preferred embodiment, the plant material is extracted with water.

L'extraction peut être menée à chaud par reflux ou bien par macération à température ambiante. Extraction can be carried out under reflux or by maceration at room temperature.

On utilise avantageusement les ultrasons en cours d'extraction afin d'améliorer le rendement massique de ladite extraction. Ultrasound during extraction is advantageously used in order to improve the mass yield of said extraction.

Le procédé d'extraction comprend avantageusement une étape de filtration visant à séparer la phase liquide du matériel végétal épuisé. The extraction process advantageously comprises a filtration step for separating the liquid phase from the spent plant material.

On peut reproduire le cycle d'extraction puis filtration, plusieurs fois afin d'épuiser le matériel végétal des substances ayant une affinité pour le solvant d'extraction. The extraction cycle and then filtration can be repeated several times in order to exhaust the plant material of substances having an affinity for the extraction solvent.

Le procédé d'extraction peut également comprendre au moins une étape de décoloration et/ou de purification, par exemple sous la forme d'un traitement de l'extrait par une solution d'au moins un solvant polaire en présence de particules de charbon actif. On élimine ainsi notamment la chlorophylle extraite par le solvant.  The extraction process may also comprise at least one fading and / or purification step, for example in the form of a treatment of the extract with a solution of at least one polar solvent in the presence of activated carbon particles. . This eliminates chlorophyll extracted by the solvent.

Le procédé d'extraction peut en outre être complété par une étape d'élimination partielle ou totale des solvants d'extraction.  The extraction process may further be completed by a step of partial or total elimination of extraction solvents.

On peut avantageusement concentrer l'extrait en éliminant une partie du solvant ou du mélange du solvant d'extraction.  The extract can advantageously be concentrated by removing a part of the solvent or of the mixture of the extraction solvent.

On peut ainsi obtenir un concentré aqueux dépourvu d'une quantité significative de solvants organiques ou bien encore, en éliminant tout le solvant d'extraction, obtenir un résidu sec. It is thus possible to obtain an aqueous concentrate that does not contain a significant quantity of organic solvents, or else, by eliminating all the extraction solvent, to obtain a dry residue.

De façon alternative, le produit de l'étape d'extraction peut être, lyophilisé ou atomisé pour se présenter sous la forme d'une poudre. Alternatively, the product of the extraction step may be freeze-dried or atomized to be in the form of a powder.

L'extrait végétal polaire tel que décrit précédemment peut être utilisé dans une composition cosmétique sous la forme d'une poudre ou bien être remis en solution ou en suspension dans au moins un solvant cosmétiquement acceptable, qui peut être identique ou différent de celui ayant servi à l'extraction. The polar plant extract as described above may be used in a cosmetic composition in the form of a powder or may be put back in solution or in suspension in at least one cosmetically acceptable solvent, which may be identical to or different from that which has served to extraction.

Selon une variante préférée, l'extrait concentré d'Iris est remis en solution dans de l'eau. On parlera de solution d'extrait d'Iris ou extrait aqueux d'Iris selon l'invention. L'extrait aqueux comprend en outre avantageusement au moins un agent antioxydant, en particulier du phénoxyéthanol. According to a preferred variant, the concentrated Iris extract is redissolved in water. We speak of solution of Iris extract or aqueous extract of Iris according to the invention. The aqueous extract further advantageously comprises at least one antioxidant, in particular phenoxyethanol.

Selon un mode particulier, l'extrait d'Iris, en particulier d'Iris florentina est susceptible d'être obtenu par un procédé comprenant les étapes suivantes : According to one particular embodiment, the Iris extract, in particular of Iris florentina, can be obtained by a process comprising the following steps:

- le broyage du rhizome de la plante,  - the grinding of the rhizome of the plant,

- extraction de la matière végétale par entraînement à la vapeur d'eau (« steam distillation »), - extraction of vegetable matter by steam distillation,

- filtration puis éventuellement remise en solution de l'extrait obtenu dans un solvant ou un mélange de solvants polaires. - Filtration and optionally re-solution of the extract obtained in a solvent or a mixture of polar solvents.

On pourra utiliser alternativement les formes poudre, liquide concentré ou liquide dilué (solution d'extrait ou extrait aqueux) de l'extrait d'Iris dans la préparation de compositions cosmétiques. Selon un mode particulier et préféré de l'invention, on utilisera l'extrait d'Iris selon l'invention sous forme de solution d'extrait d'Iris (extrait aqueux) dans la préparation de compositions cosmétiques. The powder, concentrated liquid or diluted liquid (extract solution or aqueous extract) forms of the Iris extract may alternatively be used in the preparation of cosmetic compositions. According to a particular and preferred embodiment of the invention, the Iris extract according to the invention will be used in the form of Iris extract solution (aqueous extract) in the preparation of cosmetic compositions.

Selon un mode particulier préféré, l'extrait d'Iris se présente sous la forme d'un extrait aqueux d'Iris florentina, de préférence d'un extrait aqueux de rhizome d'Iris florentina. According to one particular preferred embodiment, the Iris extract is in the form of an aqueous extract of Iris florentina, preferably an aqueous extract of Iris florentina rhizome.

En particulier, l'extrait d'Iris florentina obtenu par hydrodistillation du rhizome d 'Iris florentina est en solution dans l'eau et comprend avantageusement un antioxydant, tel que le phénoxyéthanol. In particular, the Iris florentina extract obtained by hydrodistillation of the rhizome of Iris florentina is in solution in water and advantageously comprises an antioxidant, such as phenoxyethanol.

On utilisera avantageusement l'extrait d'Iris de dénomination INCI 'Water and Iris Florentina root extract and phénoxyéthanol' tel que celui commercialisé sous la dénomination Vegebios® d'Iris de Florence 1 ,5P par la société SOLABIA. La quantité d'extrait sec (matière sèche = matière active) dans cette solution commerciale aqueuse est d'environ 0,5% en poids d'extrait sec par rapport au poids total de la solution commerciale. Use will advantageously extract Iris INCI 'Water and Iris Florentina root extract and phenoxyethanol' such as that marketed under the name Vegebios ® Iris Florence 1 5P by Solabia. The amount of dry extract (dry matter = active ingredient) in this aqueous commercial solution is about 0.5% by weight of dry extract relative to the total weight of the commercial solution.

L'invention porte également sur un procédé de soin cosmétique, notamment destiné aux peaux jeunes (sujets ayant de 20 à 35 ans), pour prévenir et/ou retarder l'apparition des premiers signes du vieillissement cutané, notamment liés aux phénomènes de glycation et/ou glycoxydation induits par un stress oxydant, comprenant l'application sur ladite peau d'au moins une composition cosmétique comprenant au moins un extrait d'Iridacée du genre Iris choisi notamment parmi un extrait d'une espèce choisie parmi le groupe constitué de Iris florentina, Iris germanica, Iris pallida ou Iris pallasii, de préférence Iris florentina. Selon un mode particulier, la composition cosmétique comprenant au moins un extrait d'Iridacée du genre Iris est appliquée sur une peau jeune, en particulier sur la peau d'un sujet ayant de 20 à 40 ans, de préférence de 20 à 35 ans, de préférence encore de 20 à 30 ans. Selon un mode particulier, la composition est appliquée sur la peau du corps et/ou du visage et/ou du cou, en particulier la peau du visage et/ou du cou, en particulier la peau du visage. Selon un mode particulier, la composition est appliquée sur la peau du visage d'un sujet de 20 à 25 ans. The invention also relates to a cosmetic care method, in particular intended for young skin (subjects aged 20 to 35), for preventing and / or delaying the appearance of the first signs of skin aging, in particular linked to the phenomena of glycation and / or glycoxidation induced by oxidative stress, comprising the application to said skin of at least one cosmetic composition comprising at least one iridescent extract of the genus Iris selected in particular from an extract of a species selected from the group consisting of Iris florentina, Iris germanica, Iris pallida or Iris pallasii, preferably Iris florentina. According to one particular embodiment, the cosmetic composition comprising at least one iridescent extract of the Iris genus is applied to young skin, in particular to the skin of a subject having a period of 20 to 40 years, preferably 20 to 35 years, preferably still 20 to 30 years. According to a particular mode, the composition is applied to the skin of the body and / or of the face and / or of the neck, in particular the skin of the face and / or of the neck, in particular the skin of the face. According to one particular embodiment, the composition is applied to the skin of the face of a subject from 20 to 25 years old.

Selon un mode particulier, la composition est appliquée sur la peau du visage d'un sujet de 25 à 30 ans.  According to a particular embodiment, the composition is applied to the skin of the face of a subject of 25 to 30 years.

Selon un autre mode particulier, la composition est appliquée sur la peau du visage d'un sujet de 30 à 35 ans. According to another particular mode, the composition is applied to the skin of the face of a subject from 30 to 35 years.

Selon un mode particulier et préféré, le procédé de soin cosmétique selon l'invention comprend l'application sur la peau d'une composition comprenant, dans un milieu physiologiquement acceptable, au moins : According to a particular and preferred embodiment, the cosmetic treatment method according to the invention comprises the application on the skin of a composition comprising, in a physiologically acceptable medium, at least:

(i) un extrait d'Iridacée du genre Iris, de préférence de l'espèce Iris florentina, de préférence encore un extrait de rhizome d'Iris florentina,  (i) an iridescent extract of the genus Iris, preferably of the species Iris florentina, more preferably an extract of rhizome of Iris florentina,

(ii) un extrait d'algue rouge, de préférence de l'espèce Kappaphycus alvarezii et (ii) an extract of red algae, preferably of the species Kappaphycus alvarezii and

(iii) un phosphate de tocophérol ou l'un de ses sels, de préférence un tocophéryl phosphate sodique. (iii) a tocopherol phosphate or a salt thereof, preferably a tocopheryl sodium phosphate.

Selon un mode particulier et préféré, une telle composition est appliquée sur la peau d'un sujet ayant de 20 à 40 ans, de préférence de 20 à 35 ans, de préférence encore de 20 à 30 ans. Actifs additionnels  According to a particular and preferred embodiment, such a composition is applied to the skin of a subject having 20 to 40 years, preferably 20 to 35 years, more preferably 20 to 30 years. Additional assets

Selon un mode préféré de l'invention, la composition cosmétique comprend en outre au moins un agent protecteur et/ou stimulant l'activité des cellules de l'épiderme, en particulier des cellules souches épidermiques. Par 'agent protecteur et/ou stimulant l'activité des cellules épidermiques' selon l'invention, on entend notamment un agent capable de maintenir le nombre et/ou l'activité des cellules épidermiques, par exemple en condition de stress oxydant. Un tel agent peut par exemple être sélectionné pour son effet sur la protection des télomères, qui retarde l'entrée en sénescence des cellules. On peut notamment utiliser comme agent à effet protecteur et/ou stimulant l'activité des cellules épidermiques, un extrait d'algue rouge, un phosphate de tocophérol ou l'un de ses sels, et de préférence leur mélange. Par « extrait d'algue rouge » selon l'invention, on entend notamment un extrait obtenu à partir de l'espèce Kappaphycus alvarezii. According to a preferred embodiment of the invention, the cosmetic composition further comprises at least one agent that protects and / or stimulates the activity of the cells of the epidermis, in particular epidermal stem cells. By "protective agent and / or stimulating the activity of the epidermal cells" according to the invention is meant in particular an agent capable of maintaining the number and / or the activity of the epidermal cells, for example under oxidative stress conditions. Such an agent may, for example, be selected for its effect on telomere protection, which delays the senescence of the cells. It is possible in particular to use as agent with protective effect and / or stimulating the activity of epidermal cells, an extract of red algae, a tocopherol phosphate or one of its salts, and preferably their mixture. By "red algae extract" according to the invention is meant in particular an extract obtained from the species Kappaphycus alvarezii.

Selon un mode particulier, on utilisera un extrait d'algue rouge (Kappaphycus alvarezii) riche en galactanes, tel que celui commercialisé par la société SILAB sous la dénomination TELOSOMYL®. Un tel extrait, décrit dans la demande de brevet FR 3047172 (SILAB), est obtenu par hydrolyse d'une poudre d'algues rouge de l'espèce Kappaphycus alvarezii, séparation des phases soluble et insoluble, et filtration de façon à collecter la fraction aqueuse comprenant en particulier des biopolymères. Cet extrait limite l'altération du télosome, la coiffe protectrice des télomères. En effet, TELOSOMYL® stimule l'expression des protéines du télosome, limitant ainsi le raccourcissement des télomères. TELOSOMYL® préserve le potentiel réplicatif des fibroblastes. La longévité est maintenue, et le vieillissement programmé de la peau, retardé. In a particular embodiment, use a red algae extract (Kappahycus alvarezii) rich galactans, such as that sold by Silab under the name TELOSOMYL ®. Such an extract, described in the patent application FR 3047172 (SILAB), is obtained by hydrolysis of a red algae powder of the Kappaphycus alvarezii species, separation of the soluble and insoluble phases, and filtration so as to collect the fraction aqueous composition comprising in particular biopolymers. This extract limits the alteration of the telosome, the protective cap of telomeres. Indeed, TELOSOMYL ® stimulates the expression of telosome proteins, thus limiting the shortening of telomeres. TELOSOMYL ® preserves the replicative potential of fibroblasts. Longevity is maintained, and programmed aging of the skin delayed.

La teneur en extrait d'algue rouge dans la composition de l'invention ira notamment de 0,001 % à 1 % en poids, de préférence de 0,01 à 0,1 % en poids d'extrait sec (matière active) par rapport au poids total de la composition.  The content of red algae extract in the composition of the invention will in particular range from 0.001% to 1% by weight, preferably from 0.01 to 0.1% by weight of dry extract (active ingredient) relative to total weight of the composition.

Par 'agent protecteur et/ou stimulant l'activité des cellules souches épidermiques' selon l'invention, on entend notamment un agent capable de maintenir le nombre et/ou l'activité des cellules souches épidermiques, par exemple en condition de stress oxydant. Un tel agent peut par exemple être sélectionné par un test de clonogénicité qui repose sur la capacité qu'ont les cellules souches à adhérer à un support et se diviser pour former de larges colonies (>4mm2). By "protective agent and / or stimulating the activity of the epidermal stem cells" according to the invention is meant in particular an agent capable of maintaining the number and / or the activity of the epidermal stem cells, for example in an oxidative stress condition. Such an agent may for example be selected by a clonogenicity test which is based on the ability of the stem cells to adhere to a support and divide to form large colonies (> 4mm 2 ).

Il est admis que l'homéostasie de l'épiderme interfolliculaire, compartiment cutané qui est en renouvellement permanent, est maintenue par une petite population de cellules dites souches, localisée dans la couche cellulaire basale de l'épiderme.  It is admitted that the homeostasis of the interfollicular epidermis, a skin compartment that is in constant renewal, is maintained by a small population of so-called stem cells, located in the basal cell layer of the epidermis.

Pour étudier cette population de cellules, le test effectué, dit de clonogénicité, repose sur la capacité qu'ont ces cellules souches à adhérer à un support et à se diviser pour former une population importante de cellules filles regroupées sous forme de colonies (Barrandon et al., Proc. Nati. Acad. Sci. USA 84 (1987), 2302-2306). L'analyse du nombre et de la taille des colonies permet de caractériser les cellules souches de l'épiderme et d'évaluer notamment l'action protectrice d'un actif ('agent protecteur et/ou stimulant l'activité des cellules souches épidermiques') lors d'un stress. In order to study this population of cells, the so-called clonogenicity test is based on the ability of these stem cells to adhere to a support and to divide to form a large population of daughter cells grouped as colonies (Barrandon et al. al., Proc Natl Acad Sci USA 84 (1987), 2302-2306). The analysis of the number and size of the colonies makes it possible to characterize the stem cells of the epidermis and to evaluate in particular the protective action of an active agent ('protective agent and / or stimulating the activity of epidermal stem cells') during stress.

La première étape d'isolation de ces cellules consiste à préparer une suspension de cellules épidermiques que l'on ensemence ensuite sur une couche nourricière de fibroblastes 3T3 dont l'activité mitotique est bloquée par la mitomycine.  The first step of isolating these cells is to prepare a suspension of epidermal cells which is then seeded on a feeder layer of 3T3 fibroblasts whose mitotic activity is blocked by mitomycin.

Ce support permet : (1 ) de sélectionner les cellules basales de l'épiderme contenant les cellules souches et (2) d'assurer la croissance des cellules à forte capacité de division qui forment alors des colonies de cellules filles. Les cellules possédant la plus forte capacité à se diviser et à former de larges colonies (>4mm2) sont issues de la population souche épidermique. Les colonies de plus petites tailles ne sont pas issues des cellules souches.  This support makes it possible: (1) to select the basal cells of the epidermis containing the stem cells and (2) to ensure the growth of cells with a high dividing capacity which then form colonies of daughter cells. The cells with the highest ability to divide and form large colonies (> 4mm2) are from the epidermal strain population. Smaller colonies do not come from stem cells.

Comme agent protecteur et/ou stimulant l'activité des cellules souches épidermiques, on peut citer notamment le phosphate de tocophérol ou l'un de ses sels, dont l'effet protecteur sur les cellules souches est illustré ci-après dans les exemples. As protecting agent and / or stimulating the activity of epidermal stem cells, there may be mentioned in particular tocopherol phosphate or a salt thereof, the protective effect on stem cells is illustrated below in the examples.

Par « vitamine E phosphate » ou « phosphate de tocophérol » selon l'invention, on entend notamment un phosphate de tocophérol sous la forme d'une base ou d'un sel cosmétiquement acceptable. Dans le cas d'un sel de phosphate de tocophérol, on préfère un sel de métal alcalin, de préférence de sel de sodium. By "vitamin E phosphate" or "tocopherol phosphate" according to the invention is meant in particular a tocopherol phosphate in the form of a base or a cosmetically acceptable salt. In the case of a tocopherol phosphate salt, an alkali metal salt, preferably sodium salt, is preferred.

Avantageusement, le phosphate de tocophérol est l'alpha-tocophérol phosphate, le béta- tocophérol phosphate, le delta-tocophérol phosphate ou le gamma-tocophérol phosphate, et plus particulièrement l'alpha tocophérol phosphate autrement nommé alpha tocophéryl phosphate.  Advantageously, the tocopherol phosphate is alpha-tocopherol phosphate, beta-tocopherol phosphate, delta-tocopherol phosphate or gamma-tocopherol phosphate, and more particularly alpha tocopherol phosphate, otherwise known as alpha tocopheryl phosphate.

Un phosphate de tocophérol ou l'un de ses sels peut ainsi avantageusement être utilisé dans la composition de l'invention, en association avec l'extrait d'Iris de l'invention, pour obtenir un effet protecteur des cellules souches épidermiques.  A tocopherol phosphate or a salt thereof can thus advantageously be used in the composition of the invention, in combination with the Iris extract of the invention, to obtain a protective effect of epidermal stem cells.

On associe de préférence un extrait d'Iris forentina et le phosphate de tocopherol ou un de ses sels, de préférence un tocophéryl phosphate sodique de dénomination INCI : sodium tocophéryl phosphate. La teneur en phosphate de tocophérol dans la composition de l'invention ira notamment de 0,001 % à 0,1 % en poids, de préférence de 0,01 % à 0,1 % en poids par rapport au poids total de la composition.  An extract of Iris forentina is preferably combined with the tocopherol phosphate or a salt thereof, preferably a sodium tocopheryl phosphate of the INCI name: sodium tocopheryl phosphate. The content of tocopherol phosphate in the composition of the invention will in particular range from 0.001% to 0.1% by weight, preferably from 0.01% to 0.1% by weight relative to the total weight of the composition.

La composition peut en outre comprendre d'autres dérivés du tocopherol, tels que des esters de tocophérol différents du phosphate de tocophérol, pour produire un effet antioxydant protecteur de la composition cosmétique mais dépourvu d'effet biologique. On citera par exemple l'acétate de tocophérol comme ester de tocopherol antioxydant de la composition. The composition may further comprise other tocopherol derivatives, such as tocopherol esters other than tocopherol phosphate, to produce an antioxidant effect. protective of the cosmetic composition but devoid of biological effect. For example, tocopherol acetate may be mentioned as the antioxidant tocopherol ester of the composition.

Ainsi, selon un mode préféré de l'invention, la composition cosmétique de l'invention comprend un extrait d'Iridacée du genre Iris et au moins un agent protecteur et/ou stimulant l'activité des cellules épidermiques choisi dans le groupe constitué par un extrait d'algue rouge, le phosphate de tocophérol ou l'un de ses sels et de préférence leur mélange. Thus, according to a preferred embodiment of the invention, the cosmetic composition of the invention comprises an iridescent extract of the genus Iris and at least one agent that protects and / or stimulates the activity of the epidermal cells chosen from the group consisting of a red algae extract, tocopherol phosphate or one of its salts and preferably their mixture.

La composition cosmétique de l'invention comprendra avantageusement : The cosmetic composition of the invention will advantageously comprise:

- un extrait d'Iridacée du genre Iris choisi notamment parmi un extrait d'une espèce choisie parmi le groupe constitué de Iris florentina, Iris germanica, Iris pallida ou Iris pallasii, de préférence Iris florentina, pour son effet au niveau moléculaire en diminuant la production des espèces réactives à l'oxygène ;  an Iridaceae extract of the genus Iris chosen in particular from an extract of a species chosen from the group consisting of Iris florentina, Iris germanica, Iris pallida or Iris pallasii, preferably Iris florentina, for its effect at the molecular level by decreasing the production of reactive oxygen species;

un extrait d'algue rouge pour son effet au niveau cellulaire par une action sur la protection des télomères, qui retarde l'entrée en sénescence des cellules ;  a red alga extract for its effect at the cellular level by an action on the protection of the telomeres, which delays the entry into senescence of the cells;

- un phosphate de tocophérol, en particulier l'alpha-tocophérol phosphate, ou l'un de ses sels, pour son effet au niveau tissulaire par une action sur la protection des cellules souches. L'invention porte donc également sur une composition cosmétique pour application topique sur la peau comprenant, dans un milieu physiologiquement acceptable, au moins :  a tocopherol phosphate, in particular alpha-tocopherol phosphate, or one of its salts, for its effect at the tissue level by an action on the protection of the stem cells. The invention therefore also relates to a cosmetic composition for topical application to the skin comprising, in a physiologically acceptable medium, at least:

(i) un extrait d'Iridacée du genre Iris, choisi notammennt parmi un extrait d'une espèce choisie parmi le groupe constitué de Iris florentina, Iris germanica, Iris pallida ou Iris pallasii, de préférence Iris florentina,  (i) an iridescent extract of the genus Iris selected in particular from an extract of a species selected from the group consisting of Iris florentina, Iris germanica, Iris pallida or Iris pallasii, preferably Iris florentina,

(ii) un extrait d'algue rouge, de préférence de l'espèce Kappaphycus alvarezii et (ii) an extract of red algae, preferably of the species Kappaphycus alvarezii and

(iii) un phosphate de tocophérol ou l'un de ses sels, de préférence un tocophéryl phosphate sodique. (iii) a tocopherol phosphate or a salt thereof, preferably a tocopheryl sodium phosphate.

Selon un mode particulier et préféré, l'extrait d'Iridacée du genre Iris est un extrait de rhizome d'Iris florentina. According to a particular and preferred embodiment, the iridescent extract of the genus Iris is an extract of rhizome of Iris florentina.

Les teneurs en extrait d'Iridacée, en extrait d'algue rouge et en phosphate de tocophérol sont telles que décrites précédemment. En particulier, l'extrait d'Iridacée du genre Iris est mis en œuvre dans la composition de l'invention en une teneur allant de 0,001 % à 0, 1 % en poids de matière sèche, de préférence de 0,001 % à 0,01 % en poids de matière sèche par rapport au poids total de la composition. La teneur en extrait d'algue rouge dans la composition de l'invention ira notamment de 0,001 % à 1 % en poids, de préférence de 0,01 à 0,1 % en poids d'extrait sec (matière active) par rapport au poids total de la composition. The contents of Iridaceae extract, red algae extract and tocopherol phosphate are as described above. In particular, the iridescent extract of the Iris genus is used in the composition of the invention in a content ranging from 0.001% to 0.1% by weight of dry matter, preferably from 0.001% to 0.01% by weight. % by weight of dry matter relative to the total weight of the composition. The content of red algae extract in the composition of the invention will in particular range from 0.001% to 1% by weight, preferably from 0.01 to 0.1% by weight of dry extract (active ingredient) relative to total weight of the composition.

La teneur en phosphate de tocophérol dans la composition de l'invention ira notamment de 0,001 % à 0, 1 % en poids, de préférence de 0,01 % à 0, 1 % en poids par rapport au poids total de la composition.  The content of tocopherol phosphate in the composition of the invention will in particular range from 0.001% to 0.1% by weight, preferably from 0.01% to 0.1% by weight relative to the total weight of the composition.

Selon un mode particulier et préféré, l'extrait d'Iridacée du genre Iris, l'extrait d'algue rouge et le phosphate de tocophérol sont conditionnés dans une même composition cosmétique. According to a particular and preferred embodiment, the iridescent extract of the genus Iris, the red algae extract and the tocopherol phosphate are packaged in the same cosmetic composition.

La composition cosmétique de l'invention peut également comprendre d'autres actifs qui peuvent être notamment choisis parmi des agents hydratants tels que l'acide hyaluronique ou le glycérol, des agents lissants ou encore des agents anti-rides tels que l'adénosine, des complexes de polymères naturels ou synthétiques produisant sur la peau des films tenseurs au moment de l'application sur la peau, ou bien encore des actifs anti-âge, plus particulièrement des extraits de plantes obtenus par des procédés connus de l'homme du métier et qui agissent sur des cibles biologiques des couches superficielles ou profondes de la peau en particulier, l'épiderme, et le derme, pour maintenir l'élasticité de la peau, produire un effet repulpant, assurer le renouvellement ou la réparation des tissus, le maintien de la barrière cutanée ou agissant sur le teint de la peau. Il peut également s'agir d'actifs éclaircissants ou blanchissants agissant sur les tâches pouvant apparaître avec l'âge, notamment sur les mains. The cosmetic composition of the invention may also comprise other active agents which may be chosen in particular from hydrating agents such as hyaluronic acid or glycerol, smoothing agents or else anti-wrinkle agents such as adenosine, complexes of natural or synthetic polymers producing on the skin tensor films at the time of application to the skin, or else anti-aging agents, more particularly extracts of plants obtained by methods known to those skilled in the art and which act on biological targets of the superficial or deep layers of the skin in particular, the epidermis, and the dermis, to maintain the elasticity of the skin, to produce a plumping effect, to ensure the renewal or the repair of tissues, the maintenance skin barrier or acting on the complexion of the skin. It can also be lightening or whitening active acting on the tasks that can appear with age, especially on the hands.

Galénique galenic

La composition cosmétique de l'invention comprendra généralement au moins un excipient cosmétiquement acceptable.  The cosmetic composition of the invention will generally comprise at least one cosmetically acceptable excipient.

Par 'excipient cosmétiquement acceptable', on entend une substance dépourvue d'effet cosmétique ou biologique en tant que telle, mais utile à l'incorporation de l'agent actif dans la composition cosmétique, à la mise en forme de ladite composition, ou encore à sa stabilité au cours du temps. L'excipient est avantageusement choisi parmi des solvants, des co-solvants (éthanol, le glycérol, l'alcool benzylique), des épaississants, des diluants, des antioxydants, des colorants, des filtres chimiques ou physiques contre les rayonnements solaires de type UVA et UVB tels que les filtres de synthèse associés ou non à des filtres constitués de particules capables d'atténuer les effets de ce rayonnement sur la peau, des agents auto-bronzants, des pigments, des charges, des conservateurs, des parfums, des absorbeurs d'odeur, des actifs cosmétiques ou pharmaceutiques, des huiles essentielles, des vitamines, des acides gras essentiels, des tensioactifs, des polymères filmogènes, des oligo-éléments, des polymères filmogènes, des filtres chimiques ou minéraux, des agents hydratants ou des eaux thermales, des polymères naturels tels que des polysaccharides ou des polypeptides, des dérivés de cellulose, ou encore des polymères synthétiques, et de façon optionnelle en outre au moins un autre agent actif cosmétique. By "cosmetically acceptable excipient" is meant a substance devoid of any cosmetic or biological effect as such, but useful for the incorporation of the active agent into the cosmetic composition, the shaping of said composition, or to its stability over time. The excipient is advantageously chosen from solvents, co-solvents (ethanol, glycerol, benzyl alcohol), thickeners, diluents, antioxidants, dyes, chemical or physical filters against UVA-type solar radiation. and UVB such as synthesis filters associated or not with filters consisting of particles capable of attenuating the effects of this radiation on the skin, self-tanning agents, pigments, fillers, preservatives, perfumes, absorbers odor, cosmetic or pharmaceutical active ingredients, essential oils, vitamins, essential fatty acids, surfactants, film-forming polymers, trace elements, film-forming polymers, chemical or mineral filters, moisturizing agents or water thermals, natural polymers such as polysaccharides or polypeptides, cellulose derivatives, or synthetic polymers, and optionally in addition to at least one other cosmetic active agent.

La composition cosmétique selon l'invention comprend avantageusement une phase aqueuse et peut avantageusement se présenter sous toutes les formes normalement utilisées pour une application topique, sous forme d'une solution aqueuse, hydro-alcoolique ou huileuse, d'une émulsion huile-dans-eau ou eau-dans-huile, d'un gel aqueux, ou sous toute autre forme pour application topique. The cosmetic composition according to the invention advantageously comprises an aqueous phase and may advantageously be in any of the forms normally used for topical application, in the form of an aqueous, hydro-alcoholic or oily solution, of an oil-in-oil emulsion. water or water-in-oil, an aqueous gel, or in any other form for topical application.

Cette composition peut être plus ou moins fluide et avoir l'aspect d'une crème blanche ou colorée, d'une pommade, d'un lait, d'une lotion, d'un sérum, d'une pâte, d'une mousse ou d'un gel. Elle peut éventuellement être appliquée sur la peau sous forme d'aérosol ou au moyen d'un patch ou d'un masque ou d'un applicateur.  This composition may be more or less fluid and have the appearance of a white or colored cream, an ointment, a milk, a lotion, a serum, a paste, a mousse or a gel. It can optionally be applied to the skin in the form of an aerosol or by means of a patch or a mask or an applicator.

Avantageusement, la composition cosmétique selon l'invention est une émulsion sous la forme d'une crème de jour, d'une crème de nuit, d'une crème solaire ou d'une crème après- soleil.  Advantageously, the cosmetic composition according to the invention is an emulsion in the form of a day cream, a night cream, a sunscreen or an after-sun cream.

Selon un mode particulier, la composition selon l'invention est une crème présente dans un kit cosmétique comprenant en outre au moins un sérum comprenant au moins un antioxydant. L'invention va désormais être illustrée par les exemples non limitatifs suivants.  According to one particular embodiment, the composition according to the invention is a cream present in a cosmetic kit comprising in addition at least one serum comprising at least one antioxidant. The invention will now be illustrated by the following nonlimiting examples.

Sauf indication contraire, les pourcentages sont exprimés en poids par rapport au poids total de ladite composition. EXEMPLES Unless otherwise indicated, the percentages are expressed by weight relative to the total weight of said composition. EXAMPLES

Exemple 1 : Effet d'un extrait d'Iris sur l'activité de la glyoxalase 1.1 Matériels et méthodes Example 1 Effect of an Iris Extract on the Activity of Glyoxalase 1.1 Materials and Methods

Culture de cellules  Cell culture

250000 cellules KHN967 P6 sont ensemencées dans des puits de plaque 6 (Costar) dans le milieu Epilife complet (Life Technologies). Pendant 4 jours à 37°C dans une atmosphère humide avec 5%. Chaque point est réalisé en triplicate.  250000 KHN967 P6 cells are seeded in 6 wells (Costar) in the complete Epilife medium (Life Technologies). During 4 days at 37 ° C in a humid atmosphere with 5%. Each point is made in triplicate.

Traitement Treatment

La solution de VEGEBIOS® IRIS FLORENCE 1.5P, comprend 0,5% en poids de matière sèche de rhizome d'Iris florentina, est ajoutée à 0,31 % en poids dans le milieu Epilife complet puis filtrée sur 0,22μΜ.  The VEGEBIOS® IRIS FLORENCE 1.5P solution comprises 0.5% by weight of dry matter of Iris florentina rhizome, is added to 0.31% by weight in the complete Epilife medium and then filtered through 0.22μΜ.

Le milieu est remplacé par ce milieu de traitement pendant 6h. The medium is replaced by this treatment medium for 6 hours.

Extraction des protéines Protein extraction

Après traitement, les tapis cellulaires sont lavés avec du PBS 1X (Invitrogen) afin d'éliminer les cellules mortes, les différents débris cellulaires et le sérum du milieu, inhibiteur de la trypsine.  After treatment, the cell mats are washed with 1X PBS (Invitrogen) to remove dead cells, various cell debris and serum from the trypsin inhibitor medium.

500 μΙ de TrypLE™ Express Enzyme (Invitrogen) sont ajoutés et laissés pendant 10 minutes à 37°C pour dissocier les cellules.  500 μl of TrypLE ™ Express Enzyme (Invitrogen) are added and left for 10 minutes at 37 ° C to dissociate the cells.

Les cellules sont collectées dans un tube Protein LoBind Eppendorf. Les puits sont rincés avec 500 μΙ de DMEM supplémentés et ajoutés dans chaque tube. Après centrifugation à 1500 x g pendant 5 minutes, le culot cellulaire est rincé 2 fois avec 1 ml de tampon PBS 1X. Les culots cellulaires sont repris dans 70μΙ de Tampon de lyse Cellytic (Sigma) et sont conservés à -80°C.  The cells are collected in a Protein LoBind Eppendorf tube. The wells are rinsed with 500 μl of supplemented DMEM and added to each tube. After centrifugation at 1500 x g for 5 minutes, the cell pellet is rinsed twice with 1 ml of 1X PBS buffer. The cell pellets are taken up in 70 μl of Cellytic Lysis Buffer (Sigma) and are stored at -80 ° C.

Les extraits cellulaires sont décongelés et la lyse des cellules est complétée mécaniquement par sonification au Bioruptor (Diagenode) ; en 5 cycles de 8 secondes ON' et 30 secondes OFF' à 4°C. Les surnageants sont récupérés et conservés à 4°C après centrifugation 15 minutes, 4°C, 14 000 x g. Dosape des protéines (PC protein assay ; Biorad) The cell extracts are thawed and the lysis of the cells is mechanically completed by sonification with Bioruptor (Diagenode); in 5 cycles of 8 seconds ON 'and 30 seconds OFF' at 4 ° C. The supernatants are recovered and stored at 4 ° C. after centrifugation for 15 minutes, 4 ° C., 14,000 × g. Protein Dosage (PC Protein Assay, Biorad)

Réactif B (500-01 14)  Reagent B (500-01 14)

Réactif A (500-01 13)  Reagent A (500-01 13)

Réactif S (500-01 15)  Reagent S (500-01 15)

Les réactifs B, A et S sont les réactifs dudit kit DC protein assay de Biorad. Reagents B, A and S are the reagents of said Biorad DC protein assay kit.

• Préparation de la gamme étalon et réactif • Preparation of the standard and reagent range

Solution mère de BSA: 5mg/ml (Sigma ; A2153 ; 4°C), aliquotée et congelée à -20°C. BSA stock solution: 5mg / ml (Sigma, A2153, 4 ° C), aliquoted and frozen at -20 ° C.

La gamme est préparée dans des tubes Eppendorf conservée à 4°C maximum 2 mois. The range is prepared in Eppendorf tubes stored at 4 ° C maximum 2 months.

Tableau 1 : Table 1:

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Figure imgf000017_0001

Le réactif A est préparé extemporanément (stable pendant une semaine) ; 20μί de réactif S sont ajoutés à 1 ml de réactif A (le réactif S est ajouté si les échantillons contiennent des détergents). Reagent A is prepared extemporaneously (stable for one week); 20 μί of reagent S are added to 1 ml of reagent A (the reagent S is added if the samples contain detergents).

Les réactifs A, B et S du kit se conservent à température ambiante. • Protocole  Reagents A, B and S of the kit are stored at room temperature. • Protocol

Dans une plaque 96 puits (Costar) sont introduits en quadruplicate :  In a 96-well plate (Costar) are introduced in quadruplicate:

- 5 μΙ d'H20 pour le zéro - 5 μΙ de tampon de lyse pour le blanc échantillon - 5 μΙ of H 2 0 for the zero - 5 μΙ lysis buffer for sample blank

- 5 μΙ de solution stock pour la gamme  - 5 μΙ of stock solution for the range

- 5 μΙ d'échantillon à doser (dilué au 1/2,5 ) 25 μΙ de réactif A' sont introduits dans chaque puits et agités fortement.  - 5 μΙ of sample to be assayed (diluted to 1 / 2.5) 25 μΙ of reagent A 'are introduced into each well and stirred vigorously.

Après 5 minutes, 200 μΙ de réactif B sont ajoutés dans chaque puits.  After 5 minutes, 200 μl of reagent B are added to each well.

Après agitation de la plaque ; l'absorbance est lue à 750 nm après 15min.  After stirring the plate; the absorbance is read at 750 nm after 15 minutes.

Dosage de l'activité glvoxalase I (GLQ1) Assay of glvoxalase I activity (GLQ1)

· Réactifs  · Reagents

- Tampon sodium phosphate 100 mM pH 6,6 :  - 100 mM sodium phosphate buffer pH 6.6:

200ml de solution phosphate monophasique (Sigma) à 100mM sont ajustés au pH 6,6 avec une solution de phosphate dibasique (Sigma) environ 6,6ml.  200ml of monophase phosphate solution (Sigma) at 100mM are adjusted to pH 6.6 with a dibasic phosphate solution (Sigma) about 6.6ml.

- Solution de Methylglyoxal (MG) à 10mM :  - Methylglyoxal (MG) solution at 10mM:

15,8 μΙ à partir de la solution de Methylglyoxal à environ 40% dans l'eau (Sigma) sont ajouté à 10ml de tampon sodium phosphate 100 mM pH 6,6.  15.8 μl from the solution of Methylglyoxal at approximately 40% in water (Sigma) are added to 10 ml of 100 mM sodium phosphate buffer pH 6.6.

- Solution de L-Glutathione reduced (GSH) à 10mM:  - Solution of L-Glutathione reduced (GSH) at 10mM:

30,7 mg de Glutathione reduced (Sigma) sont solubilisés dans 10ml le tampon phosphate. · Protocole  30.7 mg of Glutathione reduced (Sigma) are solubilized in 10 ml of the phosphate buffer. · Protocol

Les lysats protéiques sont décongelés puis centrifugés à 4°C à 150000 x g pendant 15 minutes.  The protein lysates are thawed and then centrifuged at 4 ° C. at 150,000 × g for 15 minutes.

Dans une plaque Plaque UV-Star 96 puits (Dutscher), on dépose 15 μg de protéines par puits.  In a 96-well UV-Star Plate (Dutscher) plate, 15 μg of protein per well is deposited.

Le mélange réactionnel est préparé extemporanément et incubé 5 min à 37°C.  The reaction mixture is prepared extemporaneously and incubated for 5 min at 37 ° C.

Tableau 2 :  Table 2:

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La formation du lactoyiglutathione absorbé à 240 nm est mesurée toutes les minutes pendant 10 min au spectrophotomètre Fluostar Oméga (BMG) dans une atmosphère à 37°C. 1.2 Résultats The formation of lactoyiglutathione absorbed at 240 nm is measured every minute for 10 min on the Fluostar Omega spectrophotometer (BMG) in an atmosphere at 37 ° C. 1.2 Results

A l'aide du logiciel Mars, la pente correspondant à la vitesse de réaction est calculée dans la phase exponentielle (au temps T initial et au temps T final) à partir de la fluorescence émise en Unités de Fluorescence (FU) toutes les 2 minutes après soustraction de la fluorescence émise dans le Blanc. Using the Mars software, the slope corresponding to the reaction rate is calculated in the exponential phase (at the initial T time and the final T time) from the fluorescence emitted in Fluorescence Units (FU) every 2 minutes. after subtraction of the fluorescence emitted in the White.

• Vitesse AAbs/AT • Speed AAbs / AT

= essai 2 0nm- ABS blanc 7 0nml final- [ABS essai 7 0nm' ABS blanc 7 0nml initial  = test 2 0nm- white ABS 7 0nml final- [ABS test 7 0nm 'white ABS 7 initial 0nm

T final-T initial  Final T-T

• Activité = Vitesse/mg de protéines · Effet actif en % • Activity = Speed / mg of protein · Active effect in%

= (Activité traité - activité témoin ) X 100  = (Activity treated - control activity) X 100

Activité témoin  Sample activity

Les résultats sont présentés dans le tableau 3 ci-dessous. The results are shown in Table 3 below.

Tableau 3 Table 3

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Figure imgf000019_0001

significatif quand p<0,01  significant when p <0.01

Le Méthylglyoxal (MG) en présence de gluthation réduit (GSH) comme cofacteur à 2μΜ chacun sont incubés 5min à 37°C dans un tampon phosphate de sodium à 50mM au pH 6,6 pour produire l'hémithioacétate, le substrat de la Glyoxalase 1 (GL01 ). Après addition de^g de protéines de lysat épidermique, l'activité de l'enzyme est évaluée par la mesure toutes les minutes pendant 10 minutes de l'augmentation de l'absorbance mesurée à 240 nm lié au S-Dlactoylglutathion formé. Methylglyoxal (MG) in the presence of reduced glutathione (GSH) as cofactor at 2μΜ each are incubated 5min at 37 ° C in 50mM sodium phosphate buffer at pH 6.6 to produce hemithioacetate, the substrate of Glyoxalase 1 (GL01). After addition of 1 g of epidermal lysate protein, the activity of the enzyme is evaluated by measuring every minute for 10 minutes the increase in absorbance measured at 240 nm bound to S-Dlactoylglutathion formed.

Selon les conditions de dosage l'extrait d'Iris florentina augmente significativement l'activité glyoxalase de 17%.  Depending on the assay conditions the Iris florentina extract significantly increases the glyoxalase activity by 17%.

Exemple 2 : Effet de l'alpha tocophéryl phosphate sur la protection des cellules souches épidermiques Example 2 Effect of Alpha Tocopheryl Phosphate on the Protection of Epidermal Stem Cells

Pour étudier l'effet de l'alpha tocophéryl phosphate sur une population de cellules souches épidermiques, le test effectué, dit de clonogénicité, repose sur la capacité qu'ont ces cellules souches à adhérer à un support et à se diviser pour former une population importante de cellules filles regroupées sous forme de colonies (Barrandon et al., Proc. Nati. Acad. Sci. USA 84 (1987), 2302-2306). L'analyse du nombre et de la taille des colonies permet de caractériser les cellules souches de l'épiderme et d'évaluer notamment l'action protectrice d'un actif lors d'un stress. To study the effect of alpha tocopheryl phosphate on an epidermal stem cell population, the so-called clonogenicity test is based on the ability of these stem cells to adhere to a support and to divide into a population. large number of daughter cells grouped in colonies (Barrandon et al., Proc Natl Acad Sci USA 84 (1987), 2302-2306). The analysis of the number and size of the colonies makes it possible to characterize the stem cells of the epidermis and in particular to evaluate the protective action of an active agent during a stress.

La première étape d'isolation de ces cellules consiste à préparer une suspension de cellules épidermiques que l'on ensemence ensuite sur une couche nourricière de fibroblastes 3T3 dont l'activité mitotique est bloquée par la mitomycine.  The first step of isolating these cells is to prepare a suspension of epidermal cells which is then seeded on a feeder layer of 3T3 fibroblasts whose mitotic activity is blocked by mitomycin.

Ce support permet: (1 ) de sélectionner les cellules basales de l'épiderme contenant les cellules souches et (2) d'assurer la croissance des cellules à forte capacité de division qui forment alors des colonies de cellules filles. Les cellules possédant la plus forte capacité à se diviser et à former de larges colonies (>4mm2) sont issues de la population souche épidermique. Les colonies de plus petites tailles ne sont pas issues des cellules souches L'effet protecteur de l'alpha tocophéryl phosphate est mis en évidence selon cette méthode de culture. Dans une première étape, les kératinocytes sont traités avec 1 pg/ml de d'alpha tocophéryl phosphate pendant 24H puis soumises à un stress oxydatif par le peroxyde d'hydrogène pendant 15 min. Elles sont réensemencées à très faible densité ce qui permet leur croissance individualisée. Après 7 jours de culture, les colonies cellulaires formées à partir de chaque kératinocyte sont colorées, dénombrées par analyse d'image en fonction de leur taille pour évaluer la quantité de cellules souches de la culture cellulaire initiale  This support makes it possible: (1) to select the basal cells of the epidermis containing the stem cells and (2) to ensure the growth of cells with a high dividing capacity which then form colonies of daughter cells. The cells with the highest ability to divide and form large colonies (> 4mm2) are from the epidermal strain population. The smaller colonies are not derived from stem cells The protective effect of alpha tocopheryl phosphate is demonstrated by this method of culture. In a first step, the keratinocytes are treated with 1 μg / ml of alpha tocopheryl phosphate for 24 h and then subjected to oxidative stress by hydrogen peroxide for 15 min. They are reseeded at very low density which allows their individualized growth. After 7 days of culture, the cell colonies formed from each keratinocyte are stained, counted by image analysis according to their size to evaluate the amount of stem cells of the initial cell culture.

On constate que le traitement par l'alpha tocophéryl phosphate dans ces conditions permet de maintenir le nombre important de larges colonies (supérieures à 4mm2) lors d'un stress oxydatif de +104% comparé au nombre de larges colonies en absence de traitement. Les larges colonies étant issues de cellules souches, l'alpha tocophéryl phosphate protège donc cette population particulière de cellules. Exemple 3 : Formulations It is noted that the treatment with alpha tocopheryl phosphate under these conditions makes it possible to maintain the large number of large colonies (greater than 4 mm 2) during an oxidative stress of + 104% compared to the number of large colonies in the absence of treatment. As large colonies are derived from stem cells, alpha tocopheryl phosphate thus protects this particular cell population. Example 3 Formulations

Crème de jour (émulsion huile-dans-eau) On prépare la composition suivante Day cream (oil-in-water emulsion) The following composition is prepared

Extrait de rhizome d'iris florentina (1) 0,005% (% M.S*)  Rhizome extract of iris florentina (1) 0.005% (% M.S *)

Extrait de Kappaphycus Alvarezii (2) 0,03% (% M.S*)  Extract of Kappaphycus Alvarezii (2) 0.03% (% M.S *)

Tocopheryl phosphate sodique 0,02%  Tocopheryl sodium phosphate 0.02%

Glycéryl stéarate + PEG-100 stéarate 5,0%  Glyceryl stearate + PEG-100 stearate 5.0%

Polyisobutène hydrogéné 4,0%  Hydrogenated Polyisobutene 4.0%

Magnésium ascorbyl phosphate 3,0%  Magnesium ascorbyl phosphate 3.0%

Tricaprylate /caprate de glycérol 3,0%  Tricaprylate / glycerol caprate 3.0%

Squalane 3,0%  Squalane 3.0%

Glycérine 3,0%  Glycerin 3.0%

Beurre de karité 1 ,5%  Shea butter 1, 5%

Cétéaryl octanoate 1 ,5%  Cetearyl octanoate 1, 5%

Alcool cétylique 1 ,0%  Cetyl alcohol 1, 0%

Alcool stéarylique 1 ,0%  Stearyl alcohol 1, 0%

Diméthicone 1 ,0%  Dimethicone 1, 0%

Gomme xanthane 0,3%  0.3% xanthan gum

Acide citrique 0,1 %  0.1% citric acid

Citrate de sodium 0,1 %  Sodium citrate 0.1%

Adenosine 0,05%  Adenosine 0.05%

Neutralisant, Parfum, Conservateurs qs.  Neutralizer, Perfume, Preservatives qs.

Eau qsp. 100%  Water qs. 100%

% M.S* : % de matière sèche dans la composition totale.  % M.S *:% dry matter in the total composition.

(1) : VEGEBIOS IRIS FLORENCE 1.5P à 0,5% en poids de matière sèche d'extrait (1): VEGEBIOS IRIS FLORENCE 1.5P at 0.5% by weight of extract dry matter

(2) TELOSOMYL®, 0,6% de matière sèche d'extrait La phase aqueuse et la phase huileuse sont préparées séparément puis mélangées sleon le mode classique de formulation d'une émulsion. (2) TELOSOMYL®, 0.6% extract solids The aqueous phase and the oily phase are prepared separately and then mixed in the conventional emulsion formulation mode.

L'utilisation de cette crème, de par son action son action anti-oxydante et la protection de la matrice extracellulaire permet également d'atténuer ou retarder les tout premiers signes de vieillissement de la peau chez des sujets jeunes de moins de 35 ans. Sérum Visage éclaircissant The use of this cream, through its action its antioxidant action and the protection of the extracellular matrix also helps to mitigate or delay the first signs of aging of the skin in young people under 35 years. Lightening Face Serum

On prépare un sérum selon la composition ci-dessous : A serum is prepared according to the composition below:

Extrait de rhizome d'iris florentina (1) 0,01% (M. S*) Rhizome extract of iris florentina (1) 0.01% (M. S *)

Extrait de Kappaphycus Alvarezii (2) 0, 05% (M. S*)  Extract of Kappaphycus Alvarezii (2) 0, 05% (M. S *)

Tocopheryl phosphate sodique 0, 02%  Tocopheryl sodium phosphate 0.02%

Glycérine 2 %  Glycerin 2%

Gomme xanthane 0,25 %  0.25% xanthan gum

Polymethylsilsesquioxane 2 %  Polymethylsilsesquioxane 2%

Alcool ethylique 2 %  2% ethyl alcohol

Acide lactique 1 %  Lactic acid 1%

Polyacrylate 0,50%  Polyacrylate 0.50%

Dimethicone copolyol 0,25%  Dimethicone copolyol 0.25%

Neutralisant, Parfum, Conservateur qs  Neutralizer, Fragrance, Preservative qs

Eau qsp 100%  Water qs 100%

% M. S* : % de matière sèche dans la composition totale. % M. S *:% dry matter in the total composition.

(1) : VEGEBIOS IRIS FLORENCE 1.5P à 0,5% en poids de matière sèche d'extrait(1): VEGEBIOS IRIS FLORENCE 1.5P at 0.5% by weight of extract dry matter

(2) TELOSOMYL®, 0,6% de matière sèche d'extrait (2) TELOSOMYL®, 0.6% extract dry matter

Une goutte sérum, s'applique sur le visage généralement avant l'application d' crème pour le visage. Ce sérum s'utilise habituellement par cures d'une à deux semaines A serum drop, applied on the face usually before the application of face cream. This serum is usually used for one to two weeks

Claims

REVENDICATIONS Composition cosmétique pour application topique sur la peau comprenant, dans un milieu physiologiquement acceptable, au moins : Cosmetic composition for topical application to the skin comprising, in a physiologically acceptable medium, at least: (i) un extrait d'Iridacée du genre Iris, choisi notamment parmi un extrait d'une espèce choisie parmi le groupe constitué de Iris florentina, Iris germanica, Iris pallida ou Iris pallasii, de préférence Iris florentina, (i) an iridescent extract of the genus Iris, chosen in particular from an extract of a species selected from the group consisting of Iris florentina, Iris germanica, Iris pallida or Iris pallasii, preferably Iris florentina, (ii) un extrait d'algue rouge, de préférence de l'espèce Kappaphycus alvarezii et (ii) an extract of red algae, preferably of the species Kappaphycus alvarezii and (iii) un phosphate de tocophérol ou l'un de ses sels, de préférence un tocophéryl phosphate sodique.  (iii) a tocopherol phosphate or a salt thereof, preferably a tocopheryl sodium phosphate. Composition cosmétique selon la revendication 1 , caractérisée en ce que l'extrait d'au moins une Iridacée du genre Iris est un extrait de rhizome d'Iris florentina. Cosmetic composition according to Claim 1, characterized in that the extract of at least one Iridaceae of the genus Iris is an extract of rhizome of Iris florentina. Composition cosmétique selon la revendication 1 ou la revendication 2, caractérisée en ce que l'extrait d'Iridacée du genre Iris est mis en œuvre en une teneur allant de 0,001 % à 0,1 % en poids de matière sèche, de préférence de 0,001 % à 0,01 % en poids de matière sèche par rapport au poids total de la composition. Cosmetic composition according to Claim 1 or Claim 2, characterized in that the iridescent extract of the Iris genus is used in a content ranging from 0.001% to 0.1% by weight of dry matter, preferably 0.001% by weight. % to 0.01% by weight of dry matter relative to the total weight of the composition. Composition cosmétique selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que la teneur en extrait d'algue rouge va de 0,001 % à 1 % en poids, de préférence de 0,01 à 0,1 % en poids d'extrait sec (matière active) par rapport au poids total de la composition. Cosmetic composition according to any one of Claims 1 to 3, characterized in that the content of extract of red algae ranges from 0.001% to 1% by weight, preferably from 0.01 to 0.1% by weight of dry extract (active ingredient) relative to the total weight of the composition. Composition cosmétique selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que la teneur en phosphate de tocophérol va de 0,001 % à 0,1 % en poids, de préférence de 0,01 % à 0,1 % en poids par rapport au poids total de la composition. Cosmetic composition according to any one of Claims 1 to 4, characterized in that the content of tocopherol phosphate ranges from 0.001% to 0.1% by weight, preferably from 0.01% to 0.1% by weight. relative to the total weight of the composition. 6. Procédé de soin cosmétique pour prévenir et/ou retarder l'apparition des premiers signes du vieillissement cutané, notamment liés aux phénomènes de glycation et/ou glycoxydation induits par un stress oxydant, comprenant l'application sur ladite peau d'au moins une composition cosmétique telle que définie dans l'une quelconque des revendications 1 à 5. 6. Cosmetic treatment method for preventing and / or delaying the appearance of the first signs of skin aging, in particular related to the phenomena of glycation and / or glycoxidation induced by oxidative stress, comprising the application on said skin of at least one cosmetic composition as defined in any one of claims 1 to 5. Procédé de soin cosmétique selon la revendication 6, caractérisé en ce que la composition cosmétique est appliquée sur une peau jeune, en particulier un sujet ayant de 20 à 40 ans, en particulier de 20 à 35 ans, de préférence de 20 à 30 ans. Cosmetic treatment method according to claim 6, characterized in that the cosmetic composition is applied to a young skin, in particular a subject having 20 to 40 years, in particular 20 to 35 years, preferably 20 to 30 years. Utilisation cosmétique d'au moins un extrait d'au moins une Iridacée du genre Iris, choisi notamment parmi un extrait d'une espèce choisie parmi le groupe constitué de Iris florentina, Iris germanica, Iris pallida ou Iris pallasii, de préférence Iris florentina, comme agent pour prévenir et/ou retarder l'apparition des premiers signes du vieillissement cutané liés notamment à des phénomènes d'oxydation et/ou glycoxydation induits par un stress oxydant. Cosmetic use of at least one extract of at least one Iridaceae of the genus Iris, chosen especially from an extract of a species selected from the group consisting of Iris florentina, Iris germanica, Iris pallida or Iris pallasii, preferably Iris florentina, as an agent for preventing and / or delaying the appearance of the first signs of cutaneous aging linked in particular to oxidation and / or glycoxidation phenomena induced by oxidative stress. Utilisation cosmétique selon la revendication 8, dans laquelle l'extrait d'Iris renforce le système naturel de défense antioxydant de la peau, notamment en augmentant l'activité de la glyoxalase des cellules de la peau, en particulier des cellules souches épidermiques. Cosmetic use according to claim 8, in which the Iris extract enhances the natural system of antioxidant defense of the skin, in particular by increasing the activity of the glyoxalase of the skin cells, in particular epidermal stem cells. 10. Utilisation selon l'une des revendications 8 ou 9, dans laquelle l'extrait d'Iridacée du genre Iris est mis en œuvre en une teneur allant de 0,001 % à 0, 1 % en poids de matière sèche, de préférence de 0,001 % à 0,01 % en poids de matière sèche par rapport au poids total de la composition. 10. Use according to one of claims 8 or 9, wherein the iridescent extract of the genus Iris is used in a content ranging from 0.001% to 0.1% by weight of dry matter, preferably 0.001%. % to 0.01% by weight of dry matter relative to the total weight of the composition. 1 1 . Procédé de soin cosmétique pour prévenir et/ou retarder l'apparition des premiers signes du vieillissement cutané, notamment liés aux phénomènes de glycation et/ou glycoxydation induits par un stress oxydant, comprenant l'application sur la peau d'un sujet ayant de 20 à 40 ans, en particulier de 20 à1 1. Cosmetic treatment method for preventing and / or delaying the appearance of the first signs of skin aging, in particular related to the phenomena of glycation and / or glycoxidation induced by oxidative stress, comprising the application to the skin of a subject having 20 at 40, especially 20 to 35 ans, de préférence de 20 à 30 ans, d'au moins une composition cosmétique comprenant au moins un extrait d'Iridacée du genre Iris choisi notamment parmi un extrait d'une espèce choisie parmi le groupe constitué de Iris florentina, Iris germanica, Iris pallida ou Iris pallasii, de préférence Iris florentina. 35 years, preferably from 20 to 30 years, of at least one cosmetic composition comprising at least one Iridaceae extract of the genus Iris chosen in particular from an extract of a species selected from the group consisting of Iris florentina, Iris germanica, Iris pallida or Iris pallasii, preferably Iris florentina.
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