[go: up one dir, main page]

WO2018039972A1 - Inhibitors of cellular metabolic processes - Google Patents

Inhibitors of cellular metabolic processes Download PDF

Info

Publication number
WO2018039972A1
WO2018039972A1 PCT/CN2016/097524 CN2016097524W WO2018039972A1 WO 2018039972 A1 WO2018039972 A1 WO 2018039972A1 CN 2016097524 W CN2016097524 W CN 2016097524W WO 2018039972 A1 WO2018039972 A1 WO 2018039972A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
mmol
compound
methoxyphenyl
pyrimidin
ring
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
PCT/CN2016/097524
Other languages
French (fr)
Inventor
Jeremy M. Travins
Zenon D. Konteatis
Zhihua Sui
Zhixiong Ye
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Agios Pharmaceuticals Inc
Original Assignee
Agios Pharmaceuticals Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Agios Pharmaceuticals Inc filed Critical Agios Pharmaceuticals Inc
Priority to PCT/CN2016/097524 priority Critical patent/WO2018039972A1/en
Priority to CA3034705A priority patent/CA3034705C/en
Priority to BR112019003914-7A priority patent/BR112019003914B1/en
Priority to PE2019000437A priority patent/PE20190761A1/en
Priority to IL265115A priority patent/IL265115B/en
Priority to SG11201901747VA priority patent/SG11201901747VA/en
Priority to UAA201902825A priority patent/UA125852C2/en
Priority to PCT/US2017/049439 priority patent/WO2018045071A1/en
Priority to JP2019531597A priority patent/JP6832430B2/en
Priority to MA046092A priority patent/MA46092A/en
Priority to NZ751515A priority patent/NZ751515B2/en
Priority to AU2017319500A priority patent/AU2017319500C1/en
Priority to CN201780066270.4A priority patent/CN109890822B/en
Priority to CR20190157A priority patent/CR20190157A/en
Priority to KR1020197009218A priority patent/KR102411150B1/en
Priority to MX2019002303A priority patent/MX390277B/en
Priority to US15/691,408 priority patent/US10329298B2/en
Priority to EP17764997.7A priority patent/EP3507290A1/en
Priority to ARP170102433A priority patent/AR109495A1/en
Priority to TW106129811A priority patent/TWI762505B/en
Publication of WO2018039972A1 publication Critical patent/WO2018039972A1/en
Priority to US16/219,735 priority patent/US10800782B2/en
Priority to PH12019500368A priority patent/PH12019500368A1/en
Priority to NI201900019A priority patent/NI201900019A/en
Priority to CL2019000511A priority patent/CL2019000511A1/en
Anticipated expiration legal-status Critical
Priority to CONC2019/0002237A priority patent/CO2019002237A2/en
Priority to US17/000,411 priority patent/US11325914B1/en
Priority to AU2020277158A priority patent/AU2020277158A1/en
Priority to JP2021014131A priority patent/JP2021073269A/en
Priority to US17/689,209 priority patent/USRE49934E1/en
Ceased legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00

Definitions

  • the present invention relates to organic compounds useful for therapy and/or prophylaxis in a mammal, and in particular to inhibitors of MAT2A enzyme which are useful for treating certain cancers.
  • Methionine adenosyltransferase also known as S-adenosylmethionine synthetase is a cellular enzyme that catalyzes the synthesis of S-adenosyl methionine (SAM or AdoMet) from methionine and ATP and is considered the rate-limiting step of the methionine cycle.
  • SAM is the propylamino donor in polyamine biosynthesis and the principal methyl donor for DNA methylation and is involved in gene transcription and cellular proliferation as well as the production of secondary metabolites.
  • MATlA and MAT2A encode two distinct catalytic MAT isoforms.
  • a third gene, MAT2B encodes a MAT2A regulatory subunit.
  • MATlA is specifically expressed in the adult liver, whereas MAT2A is widely distributed.
  • MAT isoforms differ in catalytic kinetics and regulatory properties, MATlA-expressing cells have considerably higher SAM levels than do MAT2A-expressing cells. It has been found that hypomethylation of the MAT2A promoter and histone acetylation causes upregulation of MAT2A expression.
  • MAT1A In hepatocellular carcinoma (HCC) , the downregulation of MAT1A and the up-regulation of MAT2A occur, which is known as the MAT1A: MAT2A switch.
  • the switch accompanied with up-regulation of MAT2B, results in lower SAM contents, which provide a growth advantage to hepatoma cells.
  • MAT2A plays a crucial role in facilitating the growth of hepatoma cells, it is a target for antineoplastic therapy. Recent studies have shown that silencing by using small interfering RNA substantially suppresses growth and induces apoptosis in hepatoma cells.
  • MTAP methylthioadenosine phosphorylase
  • MTA methylthioadenosine
  • the adenine is salvaged to generate adenosine monophosphate, and the 5-methylthioribose-1-phosphate is converted to methionine and formate. Because of this salvage pathway, MTA can serve as an alternative purine source when de novo purine synthesis is blocked, e.g., with antimetabolites, such as L-alanosine.
  • MTAP deficiency is not only found in tissue culture cells but the deficiency is also present in primary leukemias, gliomas, melanomas, pancreatic cancers, non-small cell lung cancers (NSLC) , bladder cancers, astrocytomas, osteosarcomas, head and neck cancers, myxoid chondrosarcomas, ovarian cancers, endometrial cancers, breast cancers, soft tissue sarcomas, non-Hodgkin lymphomas, and mesotheliomas.
  • the gene encoding for human MTAP maps to region 9p21 on human chromosome 9p.
  • This region also contains the tumor suppressor genes p16INK4A (also known as CDKN2A) , and pl5INK4B. These genes code for p16 and p15, which are inhibitors of the cyclin D-dependent kinases cdk4 and cdk6, respectively.
  • the pl6INK4A transcript can alternatively be ARF spliced into a transcript encoding pl4ARF.
  • pl4ARF binds to MDM2 and prevents degradation of p53 (Pomerantz et al. (1998) Cell 92: 713-723) .
  • the 9p21 chromosomal region is of interest because it is frequently homozygously deleted in a variety of cancers, including leukemias, NSLC, pancreatic cancers, gliomas, melanomas, and mesothelioma. The deletions often inactivate more than one gene. For example, Cairns et al. ( (1995) Nat. Gen.
  • ring A and ring B are independently a carbocycle or a heterocycle each optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, amino, carboxy, CN, oxo, alkyl, alkoxy and alkylamino wherein said alkyl, alkoxy and alkylamino are optionally substituted with hydroxy, halogen, amino, carboxy, CN and oxo;
  • ring C is a carbocycle or a heterocycle each optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, amino, carboxy, CN, oxo, alkyl, alkoxy and alkylamino wherein said alkyl, alkoxy and alkylamino are optionally substituted with hydroxy, halogen, amino, carboxy, CN and oxo; and
  • R 1 is H or alkyl, a carbocycle or a heterocycle each optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, amino, NO 2 , CN, oxo, carboxy, alkoxycarbonyl, alkoxyalkyl, aminocarbonyl, alkyl, acyl, alkoxy, alkylamino aryl, aralkyl, heteroaryl, heteroaralkyl, aryloxy, aralkoxy, heteroaryloxy and heteroaralkoxy wherein said alkyl, alkoxy, alkylamino, alkoxycarbonyl, alkoxyalkyl, aminocarbonyl, aryl, aralkyl, heteroaryl, heteroaralkyl, aryloxy, aralkoxy, heteroaryloxy and heteroaralkoxy are optionally substituted with hydroxy, halogen, amino, alkylamino, carboxy, CN or oxo.
  • compositions comprising compounds of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof and a pharmaceutically acceptable carrier.
  • a method for treating a disease or condition mediated by the overexpression of MAT2A in a mammal in need thereof comprising administering to said mammal an effective amount of a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • a method of treating an MTAP null cancer in a subject comprising administering to the subject an effective amount of a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • Acyl means a carbonyl containing substituent represented by the formula -C (O) -R in which R is H, alkyl, a carbocycle, a heterocycle, carbocycle-substituted alkyl or heterocycle-substituted alkyl wherein the alkyl, alkoxy, carbocycle and heterocycle are as defined herein.
  • Acyl groups include alkanoyl (e.g. acetyl) , aroyl (e.g. benzoyl) , and heteroaroyl.
  • Alkyl means a branched or unbranched, saturated or unsaturated (i.e. alkenyl, alkynyl) aliphatic hydrocarbon group, in an embodiment, having up to 12 carbon atoms unless otherwise specified.
  • alkylamino When used as part of another term, for example “alkylamino” , the alkyl portion may be a saturated hydrocarbon chain, however also includes unsaturated hydrocarbon carbon chains such as “alkenylamino” and “alkynylamino.
  • alkyl groups are methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, iso-butyl, sec-butyl, tert-butyl, n-pentyl, 2-methylbutyl, 2, 2-dimethylpropyl, n-hexyl, 2-methylpentyl, 2, 2-dimethylbutyl, n-heptyl, 3-heptyl, 2-methylhexyl, and the like.
  • lower alkyl C 1 -C 4 alkyl and “alkyl of 1 to 4 carbon atoms” are synonymous and used interchangeably to mean methyl, ethyl, 1-propyl, isopropyl, cyclopropyl, 1-butyl, sec-butyl or t-butyl.
  • substituted alkyl groups may contain one, for example two, three or four substituents which may be the same or different.
  • Amino means primary (i.e. –NH 2 ) , secondary (i.e. –NRH) and tertiary (i.e. –NRR) amines in which R is H, alkyl, a carbocycle, a heterocycle, carbocycle-substituted alkyl or heterocycle-substituted alkyl.
  • Particular secondary and tertiary amines are alkylamine, dialkylamine, arylamine, diarylamine, aralkylamine and diaralkylamine wherein the alkyl is as herein defined and optionally substituted.
  • Particular secondary and tertiary amines are methylamine, ethylamine, propylamine, isopropylamine, phenylamine, benzylamine dimethylamine, diethylamine, dipropylamine and disopropylamine.
  • Aryl when used alone or as part of another term means a carbocyclic aromatic group whether or not fused having the number of carbon atoms designated or if no number is designated, up to 14 carbon atoms.
  • Particular aryl groups are phenyl, naphthyl, biphenyl, phenanthrenyl, naphthacenyl, and the like (see e.g. Lang’s Handbook of Chemistry (Dean, J. A., ed) 13 th ed. Table 7-2 [1985] ) .
  • a particular aryl is phenyl.
  • Substituted phenyl or substituted aryl means a phenyl group or aryl group substituted with one, two, three, four or five, for example 1-2, 1-3 or 1-4 substituents chosen, unless otherwise specified, from halogen (F, Cl, Br, I) , hydroxy, protected hydroxy, cyano, nitro, alkyl (for example C 1 -C 6 alkyl) , alkoxy (for example C 1 -C 6 alkoxy) , benzyloxy, carboxy, protected carboxy, carboxymethyl, protected carboxymethyl, hydroxymethyl, protected hydroxymethyl, aminomethyl, protected aminomethyl, trifluoromethyl, alkylsulfonylamino, alkylsulfonylaminoalkyl, arylsulfonylamino, arylsulonylaminoalkyl, heterocyclylsulfonylamino, heterocyclylsulfonylaminoalkyl, heterocycl
  • One or more methyne (CH) and/or methylene (CH 2 ) groups in these substituents may in turn be substituted with a similar group as those denoted above.
  • substituted phenyl includes but is not limited to a mono-or di (halo) phenyl group such as 2-chlorophenyl, 2-bromophenyl, 4-chlorophenyl, 2, 6-dichlorophenyl, 2, 5-dichlorophenyl, 3, 4-dichlorophenyl, 3-chlorophenyl, 3-bromophenyl, 4-bromophenyl, 3, 4-dibromophenyl, 3-chloro-4-fluorophenyl, 2-fluorophenyl and the like; a mono-or di (hydroxy) phenyl group such as 4-hydroxyphenyl, 3-hydroxyphenyl, 2, 4-dihydroxyphenyl, the protected-hydroxy derivatives thereof and the like; a nitrophenyl group such as
  • substituted phenyl represents disubstituted phenyl groups where the substituents are different, for example, 3-methyl-4-hydroxyphenyl, 3-chloro-4-hydroxyphenyl, 2-methoxy-4-bromophenyl, 4-ethyl-2-hydroxyphenyl, 3-hydroxy-4-nitrophenyl, 2-hydroxy-4-chlorophenyl, and the like, as well as trisubstituted phenyl groups where the substituents are different, for example 3-methoxy-4-benzyloxy-6-methyl sulfonylamino, 3-methoxy-4-benzyloxy-6-phenyl sulfonylamino, and tetrasubstituted phenyl groups where the substituents are different such as 3-methoxy-4-benzyloxy-5-methyl-6-phenyl sulfonylamino.
  • Particular substituted phenyl groups include the 2-chlorophenyl, 2-aminophenyl, 2-bromophenyl, 3-methoxyphenyl, 3-ethoxy-phenyl, 4-benzyloxyphenyl, 4-methoxyphenyl, 3-ethoxy-4-benzyloxyphenyl, 3, 4-diethoxyphenyl, 3-methoxy-4-benzyloxyphenyl, 3-methoxy-4- (1-chloromethyl) benzyloxy-phenyl, 3-methoxy-4- (1-chloromethyl) benzyloxy-6-methyl sulfonyl aminophenyl groups.
  • Fused aryl rings may also be substituted with any, for example 1, 2 or 3, of the substituents specified herein in the same manner as substituted alkyl groups.
  • Carbocyclyl refers to a mono-, bi-, or tricyclic carbon ring having 3 to 14 carbon atoms, for example 3 to 7 carbon atoms, which may be saturated, unsaturated, partially unsaturated, aromatic (aryl) or non-aromatic having the number of atoms designated, generally from 5 to about 14 ring atoms.
  • Particular saturated carbocyclic groups are cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl and cyclohexyl groups.
  • a particular saturated carbocycle is cyclopropyl.
  • Another particular saturated carbocycle is cyclohexyl.
  • Particular unsaturated carbocycles are aromatic e.g. aryl groups as previously defined, for example phenyl.
  • Particular partially unsaturated carbocyclic groups are cyclobutene, cyclopentene, cyclohexene and cycloheptene.
  • substituted carbocyclyl “carbocycle” and “carbocyclo” mean these groups substituted by the same substituents as the “substituted alkyl” group unless specified otherwise.
  • Heterocyclic group “heterocyclic” , “heterocycle” , “heterocyclyl” , or “heterocyclo” alone and when used as a moiety in a complex group such as a heterocycloalkyl group, are used interchangeably and refer to any mono-, bi-, or tricyclic, saturated, unsaturated, partially unsaturated, aromatic (heteroaryl) or non-aromatic ring having the number of atoms designated, generally from 5 to about 14 ring atoms, where the ring atoms are carbon and at least one heteroatom (nitrogen, sulfur or oxygen) , for example 1 to 4 heteroatoms.
  • a 5-membered ring has 0 to 2 double bonds and 6-or 7-membered ring has 0 to 3 double bonds and the nitrogen or sulfur heteroatoms may optionally be oxidized (e.g. SO, SO 2 ) , and any nitrogen heteroatom may optionally be quaternized.
  • non-aromatic heterocycles are morpholinyl (morpholino) , pyrrolidinyl, oxiranyl, oxetanyl, tetrahydrofuranyl, 2, 3-dihydrofuranyl, 2H-pyranyl, tetrahydropyranyl, thiiranyl, thietanyl, tetrahydrothietanyl, aziridinyl, azetidinyl, 1-methyl-2-pyrrolyl, piperazinyl and piperidinyl.
  • a “heterocycloalkyl” group is a heterocycle group as defined above covalently bonded to an alkyl group as defined above.
  • Particular 5-membered heterocycles containing a sulfur or oxygen atom and one to three nitrogen atoms are thiazolyl, in particular thiazol-2-yl and thiazol-2-yl N-oxide, thiadiazolyl, in particular 1, 3, 4-thiadiazol-5-yl and 1, 2, 4-thiadiazol-5-yl, oxazolyl, for example oxazol-2-yl, and oxadiazolyl, such as 1, 3, 4-oxadiazol-5-yl, and 1, 2, 4-oxadiazol-5-yl.
  • Particular 5-membered ring heterocycles containing 2 to 4 nitrogen atoms include imidazolyl, such as imidazol-2-yl; triazolyl, such as 1, 3, 4-triazol-5-yl; 1, 2, 3-triazol-5-yl, 1, 2, 4-triazol-5-yl, and tetrazolyl, such as 1H-tetrazol-5-yl.
  • Particular benzo-fused 5-membered heterocycles are benzoxazol-2-yl, benzthiazol-2-yl and benzimidazol-2-yl.
  • Particular 6-membered heterocycles contain one to three nitrogen atoms and optionally a sulfur or oxygen atom, for example pyridyl, such as pyrid-2-yl, pyrid-3-yl, and pyrid-4-yl; pyrimidyl, such as pyrimid-2-yl and pyrimid-4-yl; triazinyl, such as 1, 3, 4-triazin-2-yl and 1, 3, 5-triazin-4-yl; pyridazinyl, in particular pyridazin-3-yl, and pyrazinyl.
  • pyridyl such as pyrid-2-yl, pyrid-3-yl, and pyrid-4-yl
  • pyrimidyl such as pyrimid-2-yl and pyrimid-4-yl
  • triazinyl such as 1, 3, 4-triazin-2-yl and 1, 3, 5-triazin-4-yl
  • pyridine N-oxides and pyridazine N-oxides and the pyridyl, pyrimid-2-yl, pyrimid-4-yl, pyridazinyl and the 1, 3, 4-triazin-2-yl groups are a particular group.
  • Substituents for “optionally substituted heterocycles” , and further examples of the 5-and 6-membered ring systems discussed above can be found in W. Druckheimer et al., U.S. Patent No. 4,278,793.
  • such optionally substittuted heterocycle groups are substituted with hydroxyl, alkyl, alkoxy, acyl, halogen, mercapto, oxo, carboxyl, acyl, halo-substituted alkyl, amino, cyano, nitro, amidino and guanidino.
  • Heteroaryl alone and when used as a moiety in a complex group such as a heteroaralkyl group, refers to any mono-, bi-, or tricyclic aromatic ring system having the number of atoms designated where at least one ring is a 5-, 6-or 7-membered ring containing from one to four heteroatoms selected from the group nitrogen, oxygen, and sulfur, and in a particular embodiment at least one heteroatom is nitrogen (Lang’s Handbook of Chemistry, supra) . Included in the definition are any bicyclic groups where any of the above heteroaryl rings are fused to a benzene ring. Particular heteroaryls incorporate a nitrogen or oxygen heteroatom.
  • heteroaryl whether substituted or unsubstituted groups denoted by the term “heteroaryl” : thienyl, furyl, imidazolyl, pyrazolyl, thiazolyl, isothiazolyl, oxazolyl, isoxazolyl, triazolyl, thiadiazolyl, oxadiazolyl, tetrazolyl, thiatriazolyl, oxatriazolyl, pyridyl, pyrimidyl, pyrazinyl, pyridazinyl, thiazinyl, oxazinyl, triazinyl, thiadiazinyl, oxadiazinyl, dithiazinyl, dioxazinyl, oxathiazinyl, tetrazinyl, thiatriazinyl, oxatriazinyl, dithiadiazin
  • a particular “heteroaryl” is: 1, 3-thiazol-2-yl, 4- (carboxymethyl) -5-methyl-1, 3-thiazol-2-yl, 4- (carboxymethyl) -5-methyl-1, 3-thiazol-2-yl sodium salt, 1, 2, 4-thiadiazol-5-yl, 3-methyl-1, 2, 4-thiadiazol-5-yl, 1, 3, 4-triazol-5-yl, 2-methyl-1, 3, 4-triazol-5-yl, 2-hydroxy-1, 3, 4-triazol-5-yl, 2-carboxy-4-methyl-1, 3, 4-triazol-5-yl sodium salt, 2-carboxy-4-methyl-1, 3, 4-triazol-5-yl, 1, 3-oxazol-2-yl, 1, 3, 4-oxadiazol-5-yl, 2-methyl-1, 3, 4-oxadiazol-5-yl, 2- (hydroxymethyl) -1, 3, 4-oxadiazol-5-yl, 1, 2, 4-oxadiazol-5-yl, 1, 3, 4-thiadiazol-5-yl, 2-thio
  • heteroaryl includes; 4- (carboxymethyl) -5-methyl-1, 3-thiazol-2-yl, 1, 3, 4-triazol-5-yl, 2-methyl-1, 3, 4-triazol-5-yl, 1H-tetrazol-5-yl, 1-methyl-1H-tetrazol-5-yl, 1- (1- (dimethylamino) eth-2-yl) -1H-tetrazol-5-yl, 1- (carboxymethyl) -1H-tetrazol-5-yl, 1- (methylsulfonic acid) -1H-tetrazol-5-yl, 1, 2, 3-triazol-5-yl, 1, 4, 5, 6-tetrahydro-5, 6-dioxo-4-methyl-as-triazin-3-yl, 1, 4, 5, 6-tetrahydro-4- (2-formylmethyl) -5, 6-dioxo-as-triazin-3-yl, 2, 5-dihydro-5-oxo-6-
  • “Inhibitor” means a compound which prevents or reduces the amount of synthesis of S-adenosylmethionine (SAM) from methionine and ATP by MAT2A. In an embodiment, an inhibitor binds to MAT2A.
  • SAM S-adenosylmethionine
  • Optionally substituted unless otherwise specified means that a group may be unsubstituted or substituted by one or more (e.g. 2, 3 or 4) of the substituents listed for that group in which said substituents may be the same or different.
  • an optionally substituted group has 1 substituent.
  • an optionally substituted group has 2 substituents.
  • an optionally substituted group has 3 substituents.
  • “Pharmaceutically acceptable salts” include both acid and base addition salts.
  • compounds of the invention are in the form of a pharmaceutically acceptable salt.
  • “Pharmaceutically acceptable acid addition salt” refers to those salts which retain the biological effectiveness and properties of the free bases and which are not biologically or otherwise undesirable, formed with inorganic acids such as hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, nitric acid, carbonic acid, phosphoric acid and the like, and organic acids may be selected from aliphatic, cycloaliphatic, aromatic, araliphatic, heterocyclic, carboxylic, and sulfonic classes of organic acids such as formic acid, acetic acid, propionic acid, glycolic acid, gluconic acid, lactic acid, pyruvic acid, oxalic acid, malic acid, maleic acid, maloneic acid, succinic acid, fumaric acid, tartaric acid, citric acid, aspartic acid, ascorbic acid, glutamic acid, an
  • “Pharmaceutically acceptable base addition salts” include those derived from inorganic bases such as sodium, potassium, lithium, ammonium, calcium, magnesium, iron, zinc, copper, manganese, aluminum salts and the like. Particularly base addition salts are the ammonium, potassium, sodium, calcium and magnesium salts.
  • Salts derived from pharmaceutically acceptable organic nontoxic bases includes salts of primary, secondary, and tertiary amines, substituted amines including naturally occurring substituted amines, cyclic amines and basic ion exchange resins, such as isopropylamine, trimethylamine, diethylamine, triethylamine, tripropylamine, ethanolamine, 2-diethylaminoethanol, trimethamine, dicyclohexylamine, lysine, arginine, histidine, caffeine, procaine, hydrabamine, choline, betaine, ethylenediamine, glucosamine, methylglucamine, theobromine, purines, piperizine, piperidine, N-ethylpiperidine, polyamine resins and the like.
  • basic ion exchange resins such as isopropylamine, trimethylamine, diethylamine, triethylamine, tripropylamine, ethanolamine, 2-diethylamin
  • Particularly organic non-toxic bases are isopropylamine, diethylamine, ethanolamine, trimethamine, dicyclohexylamine, choline, and caffeine.
  • the compound of the invention is a salt.
  • the compound of the invention is a pharmaceutically acceptable salt.
  • the compound of the invention is an acetate.
  • the compound of the invention is a benzoate salt.
  • the compound of the invention is a besylate salt.
  • the compound of the invention is a bitartrate salt.
  • the compound of the invention is a bromide salt.
  • the compound of the invention is a carbonate salt.
  • the compound of the invention is a chloride salt.
  • the compound of the invention is a citrate salt. In an embodiment, the compound of the invention is an edetate salt. In an embodiment, the compound of the invention is an edisylate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a estolate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a fumerate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a gluceptate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a gluconate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a hydrobromide salt. In an embodiment, the compound of the invention is a hydrochloride salt. In an embodiment, the compound of the invention is an iodide salt. In an embodiment, the compound of the invention is a lactate salt.
  • the compound of the invention is a lactobionate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a malate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a maleate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a madelate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a mesylate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a methyl bromide salt.
  • the compound of the invention is a methyl sulfate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a mcate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a napsylate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a nitrate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a pamoate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a phosphate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a disphosphate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a salicylate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a disalicylate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a stearate salt.
  • the compound of the invention is a succinate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a sulfate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a tartrate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a tosylate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a triethiodide salt. In an embodiment, the compound of the invention is a valerate salt. In an embodiment, the compound of the invention is an aluminum salt. In an embodiment, the compound of the invention is a benzathine salt. In an embodiment, the compound of the invention is a calcium salt. In an embodiment, the compound of the invention is a ethylenediamine salt. In an embodiment, the compound of the invention is a lysine salt.
  • the compound of the invention is a magnesium salt. In an embodiment, the compound of the invention is a meglumine salt. In an embodiment, the compound of the invention is a potassium salt. In an embodiment, the compound of the invention is a procaine salt. In an embodiment, the compound of the invention is a sodium salt. In an embodiment, the compound of the invention is a tromethamine salt. In an embodiment, the compound of the invention is a zinc salt.
  • Compounds of the invention may exist in different tautomeric forms. In an embodiment, the compounds are in the form as drawn or named. In another embodiment, the compounds are in a tautomeric form other than as drawn or named. Compounds of the inventions may exist as one or a mixture of salts and solvate forms. For example a compound of the invention may be substantially pure in one particular salt or solvate form or else may be mixtures of two or more salt or solvate forms. In an embodiment, the compounds are in solvate form. In a particular embodiment, the compounds exist as hydrates.
  • the present invention provides compounds having the general formula I:
  • ring A and ring B are independently a carbocycle or a heterocycle each optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, amino, carboxy, CN, oxo, alkyl, alkoxy and alkylamino wherein said alkyl, alkoxy and alkylamino are optionally substituted with hydroxy, halogen, amino, carboxy, CN and oxo;
  • ring C is is a carbocycle or a heterocycle each optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, amino, carboxy, CN, oxo, alkyl, alkoxy, alkylamino, acyl, acylamino, acyloxy, cycloalkoxy, a carbocycle or a heterocycle wherein said alkyl, alkoxy, alkylamino, acyl, acylamino, acyloxy, cycloalkoxy, carbocycle and heterocycle are optionally substituted with hydroxy, halogen, NH 2 , carboxy, CN, oxo, a carbocycle or a heterocycle wherein said carbocycle and heterocycle are optionally substitued with OH, oxo, amino, halo and haloalkyl;
  • R 1 is H or alkyl, a carbocycle or a heterocycle each optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, amino, NO 2 , CN, oxo, carboxy, alkoxycarbonyl, alkoxyalkyl, aminocarbonyl, alkyl, acyl, alkoxy, alkylamino aryl, aralkyl, heteroaryl, heteroaralkyl, aryloxy, aralkoxy, heteroaryloxy and heteroaralkoxy wherein said alkyl, alkoxy, alkylamino, alkoxycarbonyl, alkoxyalkyl, aminocarbonyl, aryl, aralkyl, heteroaryl, heteroaralkyl, aryloxy, aralkoxy, heteroaryloxy and heteroaralkoxy are optionally substituted with hydroxy, halogen, amino, alkylamino, carboxy, CN or oxo.
  • ring A and ring B are independently a carbocycle or a heterocycle each optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, amino, carboxy, CN, oxo, alkyl, alkoxy and alkylamino wherein said alkyl, alkoxy and alkylamino are optionally substituted with hydroxy, halogen, amino, carboxy, CN and oxo.
  • said optionally substituted carbocycle is aromatic.
  • ring A or ring B is optionally substituted phenyl.
  • said phenyl is substituted with one or more groups consisting of halogen, amino, hydroxy and alkoxy.
  • ring A or ring B is phenyl substituted with one or more groups consisting of F, Cl, NH 2 and OH.
  • ring A is phenyl.
  • ring A is 2-fluorophenyl.
  • ring A is 3-fluorophenyl.
  • ring A is 3-chlorophenyl.
  • ring A is 4-aminophenyl.
  • ring A is 4-hydroxyphenyl.
  • Ring A is a carbocycle or a heterocycle each optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, NH 2 , carboxy, CN, oxo, alkyl, alkoxy and alkylamino wherein said alkyl, alkoxy and alkylamino are optionally substituted with hydroxy, halogen, NH 2 , carboxy, CN and oxo.
  • ring A is an optionally substituted carbocycle is saturated or partially unsaturated.
  • said saturated or partially unsaturated carbocycle is substituted with one or more of the group consisting of hydroxy, halogen, NH 2 , carboxy, CN, oxo, alkyl, alkoxy and alkylamino wherein said alkyl, alkoxy and alkylamino are optionally substituted with hydroxy, halogen, NH 2 , carboxy, CN and oxo.
  • said said saturated or partially unsaturated carbocycle is substituted with one or more halogen.
  • said halogen is one or two F.
  • ring A is optionally substituted cyclohex-1-en-yl.
  • said saturated or partially unsaturated ring is deuterated.
  • said ring is fully deuterated.
  • ring A is cyclohex-1-en-1-yl (E) .
  • ring A is ( 2 H 9 ) cyclohex-1-en-1-yl.
  • ring A is cyclohexa-E, Z-1, 3-dien-1-yl.
  • ring A is 4, 4-difluorocyclohex-1-en-1-yl.
  • ring A is cyclopent-E1-en-1yl.
  • ring A is cyclopentyl.
  • ring A is a heterocycle optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, NH 2 , carboxy, CN, oxo, alkyl, alkoxy and alkylamino wherein said alkyl, alkoxy and alkylamino are optionally substituted with hydroxy, halogen, NH 2 , carboxy, CN and oxo.
  • said heterocycle is aromatic i.e. heteroaryl.
  • said heteroaryl is pyridine.
  • said heteroaryl is pyridin-3-yl.
  • said heteroaryl is pyridin-2-yl.
  • said heteroaryl is pyrazole.
  • ring A is 4-methoxypyridin-3-yl. In a particular embodiment, ring A is pyridin-2-yl. In a particular embodiment, ring A is 1H-pyrazol-4-yl. In an embodiment, ring A is 1H-pyrrol-3-yl.
  • said heterocycle is non-aromatic. In an embodiment, said heterocycle is substituted with halogen or alkoxy. In an embodiment, said halogen is one or two F.
  • said heterocycle is deuterated. In an embodiment, said heterocycle is fully deuterated.
  • ring A is piperidin-1-yl. In a particular embodiment, ring A is ( 2 H 10 ) piperidin-1-yl. In a particular embodiment, ring A is 4, 4-difluoropiperidin-1-yl. In a particular embodiment, ring A is 5, 6-dihydro-2H-pyran-3-yl (Z) . In a particular embodiment, ring A is 3, 6-dihydro-2H-pyran-4-yl. In a particular embodiment, ring A is 1H-pyrrol-3-yl. In a particular embodiment, ring A is 1H-pyrrol-1-yl. In a particular embodiment, ring A is tetrahydrofuran-3-yl. In a particular embodiment, ring A is 3, 3-difluoropyrrolidin-1-yl.
  • ring A is 3, 6-dihydro-2H-pyran-4-yl.
  • Ring B is a carbocycle or a heterocycle each optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, NH 2 , carboxy, CN, oxo, alkyl, alkoxy and alkylamino wherein said alkyl, alkoxy and alkylamino are optionally substituted with hydroxy, halogen, NH 2 , carboxy, CN and oxo.
  • ring B is phenyl.
  • ring B is 2-fluorophenyl.
  • ring B is 3-fluorophenyl.
  • ring B is 3-chlorophenyl.
  • ring B is 4-aminophenyl. In a particular embodiment ring B is 4-hydroxyphenyl.
  • ring B is an optionally substituted carbocycle that is saturated or partially unsaturated. In an embodiment said saturated or partially unsaturated carbocycle is substituted with one or more of the group consisting of hydroxy, halogen, NH 2 , carboxy, CN, oxo, alkyl, alkoxy and alkylamino wherein said alkyl, alkoxy and alkylamino are optionally substituted with hydroxy, halogen, NH 2 , carboxy, CN or oxo. In an embodiment said said saturated or partially unsaturated carbocycle is substituted with one or more halogen.
  • said halogen is one or two F.
  • ring B is optionally substituted cyclohex-1-en-yl.
  • said saturated or partially unsaturated ring is deuterated.
  • said ring is fully deuterated.
  • ring B is cyclohex-1-en-1-yl (E) .
  • ring B is ( 2 H 9 ) cyclohex-1-en-1-yl.
  • ring B is cyclohexa-E, Z-1, 3-dien-1-yl.
  • ring B is 4, 4-difluorocyclohex-1-en-1-yl.
  • ring B is cyclopent-E1-en-1yl.
  • ring B is cyclopentyl.
  • ring B is a heterocycle optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, NH 2 , carboxy, CN, oxo, alkyl, alkoxy and alkylamino wherein said alkyl, alkoxy and alkylamino are optionally substituted with hydroxy, halogen, NH 2 , carboxy, CN and oxo.
  • said heterocycle is aromatic i.e. heteroaryl.
  • said heteroaryl is pyridine.
  • said heteroaryl is pyridin-3-yl.
  • said heteroaryl is pyridin-2-yl.
  • said heteroaryl is pyrazole.
  • ring B is 4-methoxypyridin-3-yl. In a particular embodiment, ring B is pyridin-2-yl. In a particular embodiment, ring B is 1H-pyrazol-4-yl. In an embodiment, ring B is 1H-pyrrol-3-yl.
  • said heterocycle is non-aromatic. In an embodiment, said heterocycle is substituted with halogen or alkoxy. In an embodiment, said halogen is one or two F. In an embodiment, said heterocycle is deuterated. In an embodiment, said heterocycle is fully deuterated.
  • ring B is piperidin-1-yl. In a particular embodiment, ring B is ( 2 H 10 ) piperidin-1-yl. In a particular embodiment, ring B is 4, 4-difluoropiperidin-1-yl. In a particular embodiment, ring B is 5, 6-dihydro-2H-pyran-3-yl (Z) .
  • ring B is 3, 6-dihydro-2H-pyran-4-yl. In a particular embodiment, ring B is 1H-pyrrol-3-yl. In a particular embodiment, ring B is 1H-pyrrol-1-yl. In a particular embodiment, ring B is tetrahydrofuran-3-yl. In a particular embodiment, ring B is 3, 3-difluoropyrrolidin-1-yl.
  • ring B is 3, 6-dihydro-2H-pyran-4-yl.
  • ring A and ring B are the same as defined herein. In an embodiment ring A and ring B are both phenyl. In an embodiment, ring A and ring B are different and are as defined herein. In an embodiment, ring A is phenyl and ring B is selected from the group consisting of 2-fluorophenyl, 3-fluorophenyl, 4-aminophenyl, 4-hydroxyphenyl, 4-methoxypyridin-3-yl, pyridin-2-yl, 1H-pyrazol-4-yl, 3, 6-dihydro-2H-pyran-4-yl, and 1H-pyrrol-3-yl,.
  • ring B is phenyl and ring A is selected from the group consisting of 2-fluorophenyl, 3-fluorophenyl, 3-chlorophenyl, piperidin-1-yl, ( 2 H 10 ) piperidin-1-yl, 4, 4-difluoropiperidin-1-yl, cyclohex-1-en-1-yl (E) , ( 2 H 9 ) cyclohex-1-en-1-yl, cyclohexa-E, Z-1, 3-dien-1-yl, 4, 4-difluorocyclohex-1-en-1-yl, 5, 6-dihydro-2H-pyran-3-yl (Z) , 3, 6-dihydro-2H-pyran-4-yl, cyclopentyl, cyclopent-E1-en-1yl, 1H-pyrrol-3-yl, 1H-pyrrol-1-yl, tetrahydrofuran-3-yl, and 3, 3-difluor
  • ring B is phenyl and ring A is cyclohex-1-en-1-yl (E) .
  • ring B is phenyl and ring A is 2-fluorophenyl.
  • ring B is phenyl and ring A is 3-fluorophenyl.
  • ring B is phenyl and ring A is 3-chlorophenyl.
  • ring B is phenyl and ring A is piperidin-1-yl.
  • ring B is phenyl and ring A is ( 2 H 10 ) piperidin-1-yl.
  • ring B is phenyl and ring A is 4, 4-difluoropiperidin-1-yl. In an embodiment, ring B is phenyl and ring A is cyclohex-1-en-1-yl (E) . In an embodiment, ring B is phenyl and ring A is ( 2 H 9 ) cyclohex-1-en-1-yl.
  • ring B is phenyl and ring A is cyclohexa-E, Z-1, 3-dien-1-yl. In an embodiment, ring B is phenyl and ring A is 4, 4-difluorocyclohex-1-en-1-yl. In an embodiment, ring B is phenyl and ring A is 5, 6-dihydro-2H-pyran-3-yl (Z) . In an embodiment, ring B is phenyl and ring A is 3, 6-dihydro-2H-pyran-4-yl. In an embodiment, ring B is phenyl and ring A is cyclopentyl.
  • ring B is phenyl and ring A is cyclopent-E1-en-1yl. In an embodiment, ring B is phenyl and ring A is 1H-pyrrol-3-yl. In an embodiment, ring B is phenyl and ring A is 1H-pyrrol-1-yl. In an embodiment, ring B is phenyl and ring A is tetrahydrofuran-3-yl. In an embodiment, ring B is phenyl and ring A is 3, 3-difluoropyrrolidin-1-yl. In an embodiment, ring B is pyridin-2-yl and ring A is phenyl.
  • Ring C is is a carbocycle or a heterocycle each optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, amino, carboxy, CN, oxo, alkyl, alkoxy, alkylamino, acyl, acylamino, acyloxy, cycloalkoxy, a carbocycle or a heterocycle wherein said alkyl, alkoxy, alkylamino, acyl, acylamino, acyloxy, cycloalkoxy, carbocycle and heterocycle are optionally substituted with hydroxy, halogen, NH 2 , carboxy, CN, oxo, a carbocycle or a heterocycle wherein said carbocycle and heterocycle are optionally substitued with OH, oxo, amino, halo and haloalkyl.
  • ring C is a carbocycle or a heterocycle each optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, amino, carboxy, CN, oxo, alkyl, alkoxy and alkylamino wherein said alkyl, alkoxy and alkylamino are optionally substituted with hydroxy, halogen, amino, carboxy, CN and oxo.
  • ring C is a carbocycle optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, amino, carboxy, CN, oxo, phosphate, sulfate, alkyl, alkoxy, alkylamino, acyl, acylamino, acyloxy, cycloalkoxy, a carbocycle or a heterocycle wherein said alkyl, alkoxy, alkylamino, acyl, acylamino, acyloxy, cycloalkoxy, carbocycle and heterocycle are optionally substituted with hydroxy, halogen, NH 2 , carboxy, CN, oxo, phosphate, sulfate, a carbocycle or a heterocycle wherein said carbocycle and heterocycle are optionally substitued with OH, oxo, amino, halo and haloalkyl.
  • substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, amino
  • said optionally substituted carbocycle is aromatic i.e. aryl.
  • said aryl group is substituted with one or more substituents selected from the group consisting of OH, amino, halogen, alkyl, alkoxy and cycloalkoxy wherein said alkyl, alkoxy, cycloalkoxy are optionally substituted with one or more OH, halogen, amino, oxo, a carbocycle or heterocycle wherein said carbocycle and heterocycle are optionally substituted with hydroxy, halogen, oxo, alkyl and haloalkyl.
  • said aryl group is optionally substituted with OH, halogen, alkoxy, amino, haloalkoxy, aminoethoxy and hydroxyethoxy.
  • said aryl group is phenyl.
  • ring C is phenyl.
  • ring C is phenyl substituted with OH, F, Cl, methyl, methoxy, ethoxy, trifluoromethoxy, 2, 2, 2-trifluoroethoxy, dimethylaminoethoxy, 2-hydroxyethoxy and phosphate.
  • ring C is 3-hydroxyphenyl.
  • ring C is 4-hydroxyphenyl.
  • ring C is 4-chlorophenyl.
  • ring C is 4-fluorophenyl. In a particular embodiment ring C is 4-methoxyphenyl. In a particular embodiment ring C is 4-ethoxyphenyl. In a particular embodiment ring C is 4-trifluoromethoxyphenyl. In a particular embodiment ring C is 4-hydroxy-2-methylphenyl. In a particular embodiment ring C is 4-hydroxy-2-methoxyphenyl. In a particular embodiment ring C is 3, 4-dihydroxyphenyl. In a particular embodiment ring C is 4- (2, 2, 2-trifluoroethoxy) phenyl. In a particular embodiment ring C is 4- (2- (dimethylamino) ethoxy) phenyl.
  • ring C is 3-fluoro-4-hydroxyphenyl. In a particular embodiment ring C is 3-fluoro-4-methoxyphenyl. In a particular embodiment ring C is 2-chloro-4-hydroxyphenyl. In a particular embodiment ring C is 2-fluoro-4-methoxyphenyl. In a particular embodiment ring C is 3-amino-4-hydroxyphenyl. In a particular embodiment ring C is 3-amino-4-fluorophenyl. In a particular embodiment ring C is 3- (N, N-dimethylaminoethoxy) -4-hydroxyphenyl. In a particular embodiment ring C is 3-chloro-2-hydroxyphenyl. In a particular embodiment ring C is 3-hydroxyethoxy-4-hydroxyphenyl. In another embodiment, ring C is selected from the group consisting of:
  • ring C is a heterocycle optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, amino, carboxyl, CN, oxo, phosphate, sulfate, alkyl, alkoxy, alkylamino, acyl, acylamino, acyloxy, cycloalkoxy, a carbocycle or a heterocycle wherein said alkyl, alkoxy, alkylamino, acyl, acylamino, acyloxy, cycloalkoxy, carbocycle and heterocycle are optionally substituted with hydroxy, halogen, NH 2 , carboxy, CN, oxo, phosphate, sulfate, a carbocycle or a heterocycle wherein said carbocycle and heterocycle are optionally substitued with OH, oxo, amino, halo and haloalkyl.
  • substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, amino
  • said optionally substituted heterocycle is aromatic i.e. heteroaryl.
  • said heteroaryl is optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of OH, amino, halogen, alkyl, alkoxy and cycloalkoxy wherein said alkyl, alkoxy and cycloalkoxy are optionally substituted with one or more OH, halogen, amino, oxo, a carbocycle or heterocycle wherein said carbocycle and heterocycle are optionally substituted with hydroxy, halogen, oxo, alkyl and haloalkyl.
  • ring C is a heteroaryl group optionally substituted with OH, amino, alkyl, carboxyl, alkyl, alkoxy and cycloalkoxy wherein said alkyl is optionally substituted with OH, amino, oxo, alkoxy, a heterocycle optionally substituted with oxo and wherein said cycloalkoxy is optionally substituted with OH.
  • ring C is 6-methoxypyridin-3-yl.
  • ring C is 2-methoxypyridin-4-yl.
  • ring C is 1H-pyrazol-4-yl.
  • ring C is quinolin-6-yl.
  • ring C is 2-methylquinolin-6-yl. In an embodiment, ring C is 2-methoxyquinolin-6-yl. In an embodiment, ring C is 2-hydroxymethylquinolin-6-yl. In an embodiment, ring C is 3-hydroxy-2-methylquinolin-6-yl. In an embodiment, ring C is 2-aminoquniazolin-6-yl. In an embodiment, ring C is 4-aminoquinazolin-6-yl. In an embodiment, ring C is cinnolin-6-yl. In an embodiment, ring C is quinoxalin-6-yl. In an embodiment, ring C is 2-chloroquinoxalin-6-yl.
  • ring C is 3-chloroquinoxalin-6-yl. In an embodiment, ring C is 3-aminoquinoxalin-6-yl. In an embodiment, ring C is 3-hydroxyquinoxalin-6-yl. In an embodiment, ring C is 3-methoxyquinoxalin-6-yl. In an embodiment, ring C is 1, 8-naphthyridin-3-yl. In an embodiment, ring C is imidazo [1, 2-a] pyridin-6-yl.
  • ring C is optionally substituted benzo [d] thiazol-6-yl. In another embodiment, ring C is selected from the group consisting of
  • ring C is optionally substituted 1H-benzo [d] imidazol-5-yl. In another embodiment, ring C is selected from the group consisting of
  • ring C is optionally substituted quinolin-6-yl. In another embodiment, ring C is selected from the group consisting of
  • ring C is selected from the group consisting of
  • R 1 is H or alkyl, a carbocycle or a heterocycle each optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, NH 2 , NO 2 , carboxy, alkoxycarbonyl, alkoxyalkyl, alkylaminocarbonyl, CN, oxo, alkyl, acyl, alkoxy and alkylamino wherein said alkyl, alkoxy, alkylamino, alkoxycarbonyl, alkoxyalkyl and alkylaminocarbonyl are optionally substituted with hydroxy, halogen, amino, alkylamino, carboxy, CN and oxo.
  • R 1 is alkyl optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, NH 2 , NO 2 , carboxy, alkoxycarbonyl, alkylaminocarbonyl, CN, oxo, alkyl, acyl, alkoxy and alkylamino wherein said alkyl, alkoxy, alkylamino, alkoxycarbonyl, alkylaminocarbonyl are optionally substituted with hydroxy, halogen, NH 2 , alkylamino, carboxy, CN and oxo.
  • R 1 is alkyl substituted with OH and oxo.
  • R 1 is hydroxyethanoyl.
  • R 1 is a carbocycle optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, NH 2 , NO 2 , carboxy, alkoxycarbonyl, alkylaminocarbonyl, CN, oxo, alkyl, acyl, alkoxy and alkylamino wherein said alkyl, alkoxy, alkylamino, alkoxycarbonyl, alkylaminocarbonyl are optionally substituted with hydroxy, halogen, NH 2 , alkylamino, carboxy, CN and oxo.
  • R 1 is a heterocycle optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, NH 2 , NO 2 , carboxy, alkoxycarbonyl, alkylaminocarbonyl, CN, oxo, alkyl, acyl, alkoxy and alkylamino wherein said alkyl, alkoxy, alkylamino, alkoxycarbonyl, alkylaminocarbonyl are optionally substituted with hydroxy, halogen, NH 2 , alkylamino, carboxy, CN and oxo.
  • said optionally substituted heterocycle is pyridyl, pyrazinyl, pyrimidinyl, pyridazinyl, 1, 3, 5-triazinyl or 1, 2, 4-triazinyl.
  • said optionally substituted heterocycle is pyridin-2-yl, pyrazin-2-yl, pyrimidin-2-yl, pyrimidin-4-yl, pyrimidin-5-yl, pyridazin-3-yl, 1, 3, 5-triazin-2-yl or 1, 2, 4-triazin-3-yl.
  • R 1 is pyridyl, pyrazinyl, pyrimidinyl, pyridazinyl, 1, 3, 5-triazinyl or 1, 2, 4-triazinyl each of which is optionally substituted with one or more F, Cl, CN, OH, NO 2 , NH 2 , NHMe –C (O) NH 2 and methoxy.
  • the substituent is F, Cl, CN or OH.
  • said optionally substituted heterocycle is pyridin-2-yl, pyrazin-2-yl, pyrimidin-2-yl, pyrimidin-4-yl, pyrimidin-5-yl, pyridazin-3-yl, 1, 3, 5-triazin-2-yl or 1, 2, 4-triazin-3-yl each of which is optionally substituted with one or more F, Cl, CN, OH, NO 2 , NH 2 , NHMe –C (O) NH 2 and methoxy.
  • the substituent is F, Cl, CN or OH.
  • R 1 is selected from the group consisting of
  • R 1 is a 5-member heterocycle optionally substituted with OH, amino, alkyl, alkoxy and alkoxyalkyl wherein said alkyl, alkoxy and alkoxyalkyl are optionally substituted with one or more OH, oxo, amino, alkoxy and acyloxy.
  • R 1 is imidazole, pyrazolyl, isoxazole, thiazolyl, 4, 5-dihydrothiazolyl, 1H-1, 2, 4-triazolyl, 2H-1, 2, 3-triazolyl, 1, 3, 4-oxadiazolyl, 1, 2, 5-oxadiazolyl, 1, 2, 4-thiadiazolyl or 1, 3, 4-thiadiazol-2-yl optionally substituted with OH, amino, alkyl, alkoxy, alkoxyalkyl, wherein said alkyl, alkoxy and alkoxyalkyl groups are optionally substituted with OH, oxo and amino.
  • R1 is imidazol-2-yl, imidazol-4-yl, pyrazol-3-yl, pyrazol-5-yl, isoxazol-3-yl, isoxazol-4-yl, isoxazol-5-yl, thiazol-2-yl, 4, 5-dihydrothiazol-2-yl, 1H-1, 2, 4-triazol-3-yl, 2H-1, 2, 3-triazol-4-yl, 1, 3, 4-oxadiazol-2-yl, 1, 2, 5-oxadiazol-3-yl, 1, 2, 4-thiadiazol-5-yl or1, 3, 4-thiadiazol-2-yl optionally substituted with OH, amino, alkyl, alkoxy, alkoxyalkyl, wherein said alkyl, alkoxy and alkoxyalkyl groups are optionally substituted with OH, oxo and amino.
  • R 1 is selected from the group consisting of
  • H may be in any isotopic form, including 1H, 2H (D or deuterium) , and 3H (T or tritium) ;
  • C may be in any isotopic form, including 11C, 12C, 13C, and 14C;
  • N may be in any isotopic form, including 13N, 14N and 15N;
  • O may be in any isotopic form, including 15O, 16O and 18O;
  • F may be in any isotopic form, including 18F; and the like.
  • the compound is enriched in a specific isotopic form of H, C, N, O and/or F by at least about 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, or 99%.
  • Such compounds may be referred to as “isotopologues” and may be useful of the methods of treatment disclosed herein or may be useful in assays for detection of the compound, for example, in competition assays to test other non-isotope containing compounds.
  • compounds of the invention comprise an isotope.
  • the isotope is deuterium.
  • Particular compounds of formula (I) include the following:
  • prodrugs of the compounds described above include known amino-protecting and carboxy-protecting groups which are released, for example hydrolyzed, to yield the parent compound under physiologic conditions.
  • a particular class of prodrugs are compounds in which a nitrogen atom in an amino, amidino, aminoalkyleneamino, iminoalkyleneamino or guanidino group is substituted with a hydroxy (OH) group, an alkylcarbonyl (-CO-R) group, an alkoxycarbonyl (-CO-OR) , an acyloxyalkyl-alkoxycarbonyl (-CO-O-R-O-CO-R) group where R is a monovalent or divalent group and as defined above or a group having the formula -C (O) -O-CP1P2-haloalkyl, where P1 and P2 are the same or different and are H, lower alkyl, lower alkoxy, cyano, halo lower alkyl
  • the nitrogen atom is one of the nitrogen atoms of the amidino group of the compounds of the invention.
  • These prodrug compounds are prepared reacting the compounds of the invention described above with an activated acyl compound to bond a nitrogen atom in the compound of the invention to the carbonyl of the activated acyl compound.
  • Suitable activated carbonyl compounds contain a good leaving group bonded to the carbonyl carbon and include acyl halides, acyl amines, acyl pyridinium salts, acyl alkoxides, in particular acyl phenoxides such as p-nitrophenoxy acyl, dinitrophenoxy acyl, fluorophenoxy acyl, and difluorophenoxy acyl.
  • the reactions are generally exothermic and are carried out in inert solvents at reduced temperatures such as –78 to about 50C.
  • the reactions are usually also carried out in the presence of an inorganic base such as potassium carbonate or sodium bicarbonate, or an organic base such as an amine, including pyridine, triethylamine, etc.
  • an inorganic base such as potassium carbonate or sodium bicarbonate
  • an organic base such as an amine, including pyridine, triethylamine, etc.
  • step A of scheme 1 acetate starting material a incorporating ring C is reacted with dimethyl carbonate in presence of a suitable strong base such as potassium t-butoxide to provide dimethyl malonate intermediate b which is reacted in a suitable solvent such as xylene with intermediate c , 1H-pyrazol-5-amine substiuted with rings A and B, to provide the 5-hydroxy substituted pyrazolopyrimidone intermediate d incorporating rings A, B and C.
  • the 5-hydroxy group is then converted to the chloro intermediate e by reacting with phosphoryl chloride which also converts the 7-keto group to a chloro.
  • the 7-chloro group is converted to a methoxy group in step D by reacting intermediate e with sodium methoxide to give intermediate f which is then aminated at the 5-position of the pyrazolopyrimidone ring in step E by reacting with the amine intermediate g in the presence of a palladium catalyst to give intermediate h .
  • the 7-methoxy group is hydrolyzed to a ketone in step F to give the final product of formula (I) .
  • Aminopyrazole intermediate c from scheme 1 may be prepared using standard organic synthetic techniques from commercially available starting materials and reagents.
  • Scheme 2 illustrates a general procedure for preparing the intermediate.
  • Acetonitrile intermediate m incorporating ring A is reacted with ester n incorporating ring B with an appropriate base catalyst such as sodium hexamethyldisilazide to form 3-oxo-propanenitrile intermediate o containing both ring A and ring B. This is then reacted with hydrazine hydrate to form 5-aminopyrazolo intermediate c which may be used in scheme 1 to prepare compounds of the invention.
  • an appropriate base catalyst such as sodium hexamethyldisilazide
  • R 1 is as defined herein.
  • X is Cl.
  • the reaction is catalyzed with a palladium complex.
  • the reaction is catalyzed with a palladium-Xantphos complex.
  • the reaction is catalyzed with Pd (OAc) 2 -Xantphos complex.
  • the reaction is performed in dioxane solvent.
  • reaction is performed in methanol.
  • reaction is heated.
  • the MAT2A enzyme catalyzes the synthesis of S-adenosyl methionine (SAM) from methionine and ATP in cells. Accordingly, in another aspect of the invention there is provided a method of inhibiting the synthesis of SAM in a cell from methionine and ATP comprising introducing into said cell an effective amount of a compound of formula (I) or a salt thereof.
  • compounds of formula (I) may be used to identify other compounds that are inhibitors of MAT2A, for example, in a competition assay for binding to MAT2A or for the inhibition of SAM production. Binding to MAT2A or the inhibition of SAM by a test compound having a detectable label can be measured with and without the presence of an unlabelled compound of the invention.
  • a method for treating a cancer mediated by the overexpression of MAT2A comprising contacting said cancer with an effective amount of a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • a method for treating a disease or condition mediated by the overexpression of MAT2A in a mammal comprising administering to said mammal an effective amount of a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • the cancer is neuroblastoma, intestine carcinoma such as rectum carcinoma, colon carcinoma, familiary adenomatous polyposis carcinoma and hereditary non-polyposis colorectal cancer, esophageal carcinoma, labial carcinoma, larynx carcinoma, hypopharynx carcinoma, tong carcinoma, salivary gland carcinoma, gastric carcinoma, adenocarcinoma, medullary thyroidea carcinoma, papillary thyroidea carcinoma, renal carcinoma, kidney parenchym carcinoma, ovarian carcinoma, cervix carcinoma, uterine corpus carcinoma, endometrium carcinoma, chorion carcinoma, pancreatic carcinoma, prostate carcinoma, testis carcinoma, breast carcinoma, urinary carcinoma, melanoma, brain tumors such as glioblastoma, astrocytoma, meningioma, medulloblastoma and peripheral neuroectodermal tumors, Hodgkin lymphoma, non-Hodgkin lymphoma, Burkitt lymphom
  • the cancer is lung cancer, non-small cell lung (NSCL) cancer, bronchioloalviolar cell lung cancer, bone cancer, pancreatic cancer, skin cancer, cancer of the head or neck, cutaneous or intraocular melanoma, uterine cancer, ovarian cancer, rectal cancer, cancer of the anal region, stomach cancer, gastric cancer, colon cancer, breast cancer, uterine cancer, carcinoma of the fallopian tubes, carcinoma of the endometrium, carcinoma of the cervix, carcinoma of the vagina, carcinoma of the vulva, Hodgkin's Disease, cancer of the esophagus, cancer of the small intestine, cancer of the endocrine system, cancer of the thyroid gland, cancer of the parathyroid gland, cancer of the adrenal gland, sarcoma of soft tissue, cancer of the urethra, cancer of the penis, prostate cancer, cancer of the bladder, cancer of the kidney or ureter, renal cell carcinoma, carcinoma of the renal pelvis, mesothelioma, he
  • Methylthioadenosine phosphorylase is an enzyme found in all normal tissues that catalyzes the conversion of methylthioadenosine (MTA) into adenine and 5-methylthioribose-1-phosphate.
  • MTA methylthioadenosine
  • the adenine is salvaged to generate adenosine monophosphate, and the 5-methylthioribose-1-phosphate is converted to methionine and formate. Because of this salvage pathway, MTA can serve as an alternative purine source when de novo purine synthesis is blocked, e.g., with antimetabolites, such as L-alanosine.
  • Many human and murine malignant cells lack MTAP activity.
  • MTAP deficiency is not only found in tissue culture cells but the deficiency is also present in primary leukemias, gliomas, melanomas, pancreatic cancers, non-small cell lung cancers (NSLC) , bladder cancers, astrocytomas, osteosarcomas, head and neck cancers, myxoid chondrosarcomas, ovarian cancers, endometrial cancers, breast cancers, soft tissue sarcomas, non-Hodgkin lymphomas, and mesotheliomas.
  • NSLC non-small cell lung cancers
  • a method for treating a cancer in a subject wherein said is characterized by a reduction or absence of MTAP expression or absence of the MTAP gene or reduced function of MTAP protein said method comprising administering to the subject a therapeutically effective amount of a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • the MTAP null cancer is leukemia, glioma, melanoma, pancreatic, non-small cell lung cancer (NSLC) , bladder cancer, astrocytoma, osteosarcoma, head and neck cancer, myxoid chondrosarcoma, ovarian cancer, endometrial cancer, breast cancer, soft tissue sarcoma, non-Hodgkin lymphoma or mesothelioma.
  • the MTAP null cancer is pancreatic cancer.
  • the MTAP null cancer is bladder cancer, melanoma, brain cancer, lung cancer, pancreatic cancer, breast cancer, esophageal cancer, head and neck cancer, kidney cancer, colon cancer, diffuse large B cell lymphoma (DLBCL) , acute lymphoblastic leukemia (ALL) or mantle cell lymphoma (MCL) .
  • the MTAP null cancer is pancreatic cancer.
  • the MTAP null cancer is gastric cancer.
  • the cancer is colon cancer.
  • the MTAP null cancer is liver cancer.
  • the MTAP null cancer is GBM.
  • the MTAP null cancer is bladder cancer.
  • the MTAP null cancer is esophageal cancer. In an embodiment, the MTAP null cancer is breast cancer. In an embodiment, the MTAP null cancer is NSCLC. In an embodiment, the MTAP null cancer is MCL. In an embodiment, the MTAP null cancer is DLBCL. In an embodiment, the MTAP null cancer is ALL.
  • the present invention provides a method for treating a cancer in a subject wherein said cancer is characterized by reduction or absence of MTAP expression or absence of the MTAP gene or reduced function of MTAP protein said method comprising administering to the subject a therapeutically effective amount of a compound of formula (I) , wherein said cancer is further characterized by the presence of mutant KRAS or mutant p53.
  • a method of treating an MTAP null cancer having a mutant KRAS or mutant p53 in a subject comprising administering to the subject an effective amount of a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • the cancer is MTAP null and KRAS mutant.
  • the cancer is MTAP null and p53 mutant.
  • the cancer is MTAP null, KRAS mutant and p53 mutant.
  • mutant KRAS, or KRAS mutation is meant KRAS protein incorporating an activating mutation that alters its normal function and the gene encoding such a protein.
  • a mutant KRAS protein may incorporate a single amino acid substitution at position 12 or 13.
  • the KRAS mutant incorporates a G12X or G13X substitution.
  • the substitution is G12V, G12R, G12C or G13D.
  • the substitution is G13D.
  • mutant p53 or “p53 mutation” is meant p53 protein (or gene encoding said protein) incorporating a mutation that inhibits or eliminates its tumor suppressor function.
  • said p53 mutation is, Y126_splice, K132Q, M133K, R174fs, R175H, R196*, C238S, C242Y, G245S, R248W, R248Q, I255T, D259V, S261_splice, R267P, R273C, R282W, A159V or R280K.
  • the foregoing cancer is non-small cell lung cancer (NSCLC) , pancreatic cancer, head and neck cancer, gastric cancer, breast cancer, colon cancer or ovarian cancer.
  • Suitable cytostatic chemotherapy compounds include, but are not limited to (i) antimetabolites, such as cytarabine, fludarabine, 5-fluoro-2‘-deoxyuiridine, gemcitabine, hydroxyurea or methotrexate; (ii) DNA-fragmenting agents, such as bleomycin, (iii) DNA-crosslinking agents, such as chlorambucil, cisplatin, cyclophosphamide or nitrogen mustard; (iv) intercalating agents such as adriamycin (doxorubicin) or mitoxantrone; (v) protein synthesis inhibitors, such as L-asparaginase, cycloheximide, puromycin or diphtheria toxin; (Vi) topoisomerase I poisons, such as camptothecin or topotecan; (vii) topo
  • antimetabolites such as cytarabine, fludarabine, 5-fluoro-2‘-deoxyuir
  • compounds of the present invention are coadministered with a cytostatic compound selected from the group consisting of cisplatin, doxorubicin, taxol, taxotere and mitomycin C.
  • the cytostatic compound is doxorubicin.
  • compounds of the invention may be used alone as an immuno-oncology therapy or in combination with an immuno-oncology therapy.
  • the compound of the invention is administered prior to, concomitantly with, or following administration of an immune checkpoint inhibitor.
  • the checkpoint inhibitor is a PD-1 inhibitor.
  • the checkpoint inhibitor is a PD-L1 inhibitor.
  • the checkpoint inhibitor is ipilimumab. In an embodiment, the checkpoint inhibitor is pembrolizumab. In an embodiment, the checkpoint inhibitor is nivolumab. In an embodiment, the checkpoint inhibitor is atezolizumab.
  • the compounds of the present invention can be also used in combination with radiation therapy.
  • radiation therapy refers to the use of electromagnetic or particulate radiation in the treatment of neoplasia. Radiation therapy is based on the principle that high-dose radiation delivered to a target area will result in the death of reproducing cells in both tumor and normal tissues.
  • the radiation dosage regimen is generally defined in terms of radiation absorbed dose (rad) , time and fractionation, and must be carefully defined by the oncologist.
  • the amount of radiation a patient receives will depend on various consideration but the two most important considerations are the location of the tumor in relation to other critical structures or organs of the body, and the extent to which the tumor has spread.
  • radiotherapeutic agents are provided in, but not limited to, radiation therapy and is known in the art (Hellman, Principles of Radiation Therapy, Cancer, in Principles I and Practice of Oncology, 24875 (Devita et al., 4th ed., vol 1, 1993) .
  • Recent advances in radiation therapy include three-dimensional conformal external beam radiation, intensity modulated radiation therapy (IMRT) , stereotactic radiosurgery and brachytherapy (interstitial radiation therapy) , the latter placing the source of radiation directly into the tumor as implanted "seeds" .
  • IMRT intensity modulated radiation therapy
  • brachytherapy interstitial radiation therapy
  • Ionizing radiation with beta-emitting radionuclides is considered the most useful for radiotherapeutic applications because of the moderate linear energy transfer (LET) of the ionizing particle (electron) and its intermediate range (typically several millimeters in tissue) .
  • LET linear energy transfer
  • Gamma rays deliver dosage at lower levels over much greater distances.
  • Alpha particles represent the other extreme, they deliver very high LET dosage, but have an extremely limited range and must, therefore, be in intimate contact with the cells of the tissue to be treated.
  • alpha emitters are generally heavy metals, which limits the possible chemistry and presents undue hazards from leakage of radionuclide from the area to be treated. Depending on the tumor to be treated all kinds of emitters are conceivable within the scope of the present invention.
  • the present invention encompasses types of non-ionizing radiation like e.g. ultraviolet (UV) radiation, high energy visible light, microwave radiation (hyperthermia therapy) , infrared (IR) radiation and lasers.
  • UV radiation is applied.
  • the invention also includes pharmaceutical compositions or medicaments containing the compounds of the invention and a pharmaceutically acceptable carrier, as well as methods of using the compounds of the invention to prepare such compositions and medicaments.
  • the compounds of formula (I) used in the methods of the invention are formulated by mixing at ambient temperature at the appropriate pH, and at the desired degree of purity, with physiologically acceptable carriers, i.e., carriers that are non-toxic to recipients at the dosages and concentrations employed into a galenical administration form.
  • physiologically acceptable carriers i.e., carriers that are non-toxic to recipients at the dosages and concentrations employed into a galenical administration form.
  • the pH of the formulation depends mainly on the particular use and the concentration of compound, but may range anywhere from about 3 to about 8.
  • Formulation in an acetate buffer at pH 5 is a suitable embodiment.
  • the inhibitory compound for use herein is sterile. The compound ordinarily will be stored as a solid composition, although lyophilized formulations or aqueous solutions are acceptable.
  • compositions of the invention may comprise a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and one or more polymer (s) as part of a solid dispersion (e.g., an amorphous solid dispersion) .
  • the solid dispersion further comprises one or more surfactants.
  • the pharmaceutical composition comprising a compound of the invention is a solid spray-dried disperson.
  • Pharmaceutical compositions comprising solid dispersions of a compound of the invention in a matrix may provide improved chemical and physical properties and can be prepared by forming a homogeneous solution or melt of the compound of the invention and matrix material followed by solidifying the mixture by cooling, or removal of the solvent.
  • a dispersion refers to a disperse system in which one substance, the dispersed phase, is distributed, in discrete units, throughout a second substance (the continuous phase or vehicle) .
  • the size of the dispersed phase can vary considerably (e.g., colloidal particles of nanometer dimension, to multiple microns in size) .
  • the dispersed phases can be solids, liquids, or gases. In the case of a solid dispersion, the dispersed and continuous phases are both solids.
  • a solid dispersion can include a crystalline therapeutically active compound (dispersed phase) in an amorphous polymer (s) (continuous phase) , or alternatively, an amorphous therapeutically active compound (dispersed phase) in an amorphous polymer (continuous phase) .
  • An amorphous solid dispersion generally refers to a solid dispersion of two or more components, such as a compound of the invention and polymer (or plurality of polymers) , but possibly containing other components such as surfactants or other pharmaceutical excipients, where the compound of the invention is in the amorphous phase.
  • an amorphous solid dispersion includes the polymer (s) (and optionally a surfactant) constituting the dispersed phase, and the compound of the invention constitutes the continuous phase. In some embodiments, an amorphous solid dispersion includes the polymer (s) (and optionally a surfactant) constituting the continuous phase, and the compound of the invention constitutes the dispersed phase.
  • An exemplary solid dispersion is a co-precipitate or a co-melt of a compound of the invention with one or more polymer (s) .
  • a "co-precipitate" is produced after dissolving a compound of the invention and one or more polymers in a solvent or solvent mixture followed by the removal of the solvent or solvent mixture. Sometimes the one or more polymers can be suspended in the solvent or solvent mixture.
  • the solvent or solvent mixture includes organic solvents and supercritical fluids.
  • the solvent or solvent mixture can also contain a non-volatile solvent.
  • a "co-melt” is produced after heating a compound of the invention and one or more polymers to melt, optionally in the presence of a solvent or solvent mixture, followed by mixing, removal of at least a portion of the solvent if applicable, and cooling to room temperature at a selected rate.
  • solid dispersions are prepared by adding a solution of a therapeutically active compound and solid polymers followed by mixing and removal of the solvent or solvent mixture.
  • vacuum drying, spray drying, tray drying, lyophilization, and other drying procedures may be applied. Applying any of these methods using appropriate processing parameters, according to this disclosure, would provide the particular therapeutically active compound in an amorphous state in the final solid dispersion product.
  • composition of the invention will be formulated, dosed, and administered in a fashion consistent with good medical practice.
  • Factors for consideration in this context include the particular disorder being treated, the particular mammal being treated, the clinical condition of the individual patient, the cause of the disorder, the site of delivery of the agent, the method of administration, the scheduling of administration, and other factors known to medical practitioners.
  • the “effective amount” of the compound to be administered will be governed by such considerations, and is the minimum amount necessary to inhibit MAT2A activity. Such amount may be below the amount that is toxic to normal cells, or the mammal as a whole.
  • the initial pharmaceutically effective amount of the compound of the invention administered parenterally per dose will be in the range of about 0.01-2000 mg/kg, for example about 0.1 to 20 mg/kg of patient body weight per day, with the typical initial range of compound used being 0.3 to 15 mg/kg/day.
  • Oral unit dosage forms, such as tablets and capsules, may contain from about 25 to about 200 mg of the compound of the invention.
  • the compound of the invention may be administered by any suitable means, including oral, topical, transdermal, parenteral, subcutaneous, intraperitoneal, intrapulmonary, and intranasal, and, if desired for local treatment, intralesional administration.
  • Parenteral infusions include intramuscular, intravenous, intraarterial, intraperitoneal, or subcutaneous administration.
  • An example of a suitable oral dosage form is a tablet containing about 1mg, 2mg, 5mg, 10gm, 15mg 25mg, 50mg, 100mg, 250mg, 500mg, 750mg, 1000mg, 1250mg, 1500mg, 1750mg or 2000mg of the compound of the invention compounded with about 90-30 mg anhydrous lactose, about 5-40 mg sodium croscarmellose, about 5-30mg polyvinylpyrrolidone (PVP) K30, and about 1-10 mg magnesium stearate.
  • the powdered ingredients are first mixed together and then mixed with a solution of the PVP.
  • An aerosol formulation can be prepared by dissolving the compound, for example 5-400 mg, of the invention in a suitable buffer solution, e.g. a phosphate buffer, adding a tonicifier, e.g. a salt such sodium chloride, if desired.
  • a suitable buffer solution e.g. a phosphate buffer
  • a tonicifier e.g. a salt such sodium chloride
  • the solution is typically filtered, e.g. using a 0.2 micron filter, to remove impurities and contaminants.
  • the reagents were purchased from commercial sources (such as Alfa, Acros, Sigma Aldrich, TCI and Shanghai Chemical Reagent Company) , and used without further purification. Flash chromatography was performed on an Ez Purifier III using column with silica gel particles of 200-300 mesh. Analytical and preparative thin layer chromatography (TLC) plates were HSGF 254 (0.15-0.2 mm thickness, Shanghai Anbang Company, China) . Nuclear magnetic resonance (NMR) spectra were obtained on a Brucker AMX-400 NMR (Brucker, Switzerland) . Chemical shifts were reported in parts per million (ppm, ⁇ ) downfield from tetramethylsilane.
  • TLC Analytical and preparative thin layer chromatography
  • Step C 5, 7-dichloro-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine
  • Step D 5-chloro-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine
  • Step E 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-N- (pyridazin-3-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine
  • Step F 6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-5- (pyridazin-3-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
  • Step E was performed using appropriate amine 9, base (Cs 2 CO 3 , K 2 CO 3 , Na 2 CO 3 , and etc. ) and catalyst/ligand under microwave or thermal heating, in 1, 4-dioxane unless otherwise noted.
  • Step F was performed using 5 mL of 4M HCl in dioxane unless otherwise noted. Purifications were performed using the methods used in Example 1, unless otherwise noted.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (500 mg, 1.13 mmol) , pyridin-2-amine (213 mg, 2.26 mmol) , Pd (OAc) 2 (50 mg, 0.23 mmol) , xantphos (165 mg, 0.28 mmol) , and Na 2 CO 3 (240 mg, 2.26 mmol) in 1, 4-dioxane (10 mL) under heating at 100 °C for 4h under N 2 .
  • LC-MS m/z 500.0 (M+H) + .
  • Step F 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-N- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (300 mg, 0.6 mmol) was dissolved in HCl/1, 4-dioxane (5 mL) . The solution was stirred at r.t. overnight. The precipitate was filtered off and washed with CH 2 Cl 2 (3*1 mL) to give a yellow solid. The solid was then dissolved in CH 2 Cl 2 /MeOH (10/1, 3 mL) . After 3 mL of NH 3 -MeOH was added, the solution was stirred at r.t. overnight. The precipitate was filtered off and washed with H 2 O (3*3 mL) and MeOH (3*1 mL) , and dried in vacuo to give the title compound as a light yellow solid.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (500 mg, 1.13 mmol) , pyridin-3-amine (117 mg, 1.24 mmol) , Pd (OAc) 2 (25 mg, 0.113 mmol) , xantphos (131 mg, 0.226 mmol) , Cs 2 CO 3 (737 mg, 2.26 mmo) in dioxane (20 mL) under heating to 110 °C for 4h under N 2 .
  • LC-MS m/z 500.2 (M+H) + .
  • Step F To a solution of 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-N- (pyridin-3-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (150 mg, 0.309 mmol) in MeOH (10 mL) was added 4N HCl solution in dioxane (10 mL) . The reaction mixture was heated to 50 °C for 2h. The mixture was concentrated in vacuo. The residue was suspended in saturated NaHCO 3 solution.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (300 mg, 0.68 mmol) , 6-aminonicotinonitrile (161.7 mg, 1.36 mmol) , palladium diacetate (30.5 mg, 0.14 mmol) , Xantphos (117.8 mg, 0.20 mmol) and Cesium carbonate (553.0 mg, 1.70 mmol) in 1, 4-dioxane (10 mL) under heating to 110 °C for 12 hours under nitrogen atmosphere.
  • LC-MS m/z 525.2 (M+H) + .
  • Step F The solution of 6- ( (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) nicotinonitrile (40 mg, 0.07 mmol) in HCl solution (1.0 M in 1, 4-dioxane, 6 mL) was stirred at room temperature for 12 hours. The mixture was concentrated, and NH 4 OH (5 mL) was added thereto.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (220 mg, 0.5mmol) , 5-fluoropyridin-2-amine (112 mg, 1.0 mmol) , Pd (OAc) 2 (56 mg, 0.25 mmol) , xantphos (173 mg, 0.3 mmol) , Cs 2 CO 3 (117 mg, 1.1mmo) in dioxane (20 mL) under heating to 100 °C for 4h under N 2 .
  • LC-MS m/z 518.2 (M+H) + .
  • Step F To a solution of N- (5-fluoropyridin-2-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (50 mg, 0.10 mmol) in MeOH (10 mL) was added 4N HCl solution in dioxane (10 mL) . The reaction mixture was heated to 50 °C for 2h. The mixture was concentrated in vacuo. The residue was suspended in saturated NaHCO 3 solution.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (200 mg, 0.45 mmol) , 5-chloropyridin-2-amine (135 mg, 0.9 mmol) , Pd (OAc) 2 (51 mg, 0.23 mmol) , xantphos (156 mg, 0.27 mmol) , and Na 2 CO 3 (105 mg, 0.9 mmol) in 1, 4-dioxane (5 mL) under heating at 100 °C for 16h under N 2 .
  • LC-MS m/z 533.9, 535.9 (M+H) + .
  • Step F N- (5-chloropyridin-2-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (80 mg, 0.15 mmol) was dissolved in HCl-1, 4-dioxane (5 mL) . The solution was stirred at r.t. overnight. The precipitate was filtered off and washed with CH 2 Cl 2 (3 mL) to give a yellow solid. The solid was then dissolved in CH 2 Cl 2 /MeOH (10/1, 2 mL) . After 1 mL of NH 3 -MeOH was added, the solution was stirred at r.t. overnight. The precipitate was filtered off and washed with H 2 O (3 mL) and MeOH (3 mL) , and dried in vacuo to give the title compound 7 as a light yellow solid.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (500mg, 1.13mmol) and 5-nitropyridin-2-amine (472mg, 3.39 mmol, 3 eq) and Pd (OAc) 2 (51 mg, 0.23 mmol, 0.2 eq) , Xantphos (262mg, 0.45 mmol, 0.4 eq) and Na 2 CO 3 (360 mg, 3.394 mmol, 3 eq) in 1.4-dioxane (10 mL) was stirred and warmed up to 100 °C under microwave irradiation for 1 hours under N 2 atmosphere.
  • Step F A solution of 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -N- (5-nitropyridin-2-yl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (50 mg, 0.092 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (10 mL) was stirred at room temperature for 3 hours. The reaction mixture was concentrate in vacuo, The residue was dissolved in 7N amine in methanol and stirred at room temperature for 2h. The mixture was concentrated in vacuo.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (160 mg, 0.362 mmol) , 5- (tert-butyldimethylsilyloxy) pyridin-2-amine (162 mg, 0.724 mmol) , palladium (II) acetate (16 mg, 0.0724 mmol) , xantphos (84 mg, 0.145 mmol) and sodium carbonate (77 mg, 0.724 mmol) in 1.4-dioxane (10 mL) under heating to reflux for 4 hours under nitrogen atmosphere.
  • LC-MS m/z 630.3 (M+H) + .
  • Step F A mixture of N- (5- (tert-butyldimethyl -silyloxy) pyridin-2-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (80 mg, 0.127 mmol) and HCl solution (4N in dioxane, 10 mL) was stirred at room temperature for 6 h. Then conc. HCl (0.5 mL) was added into the mixture. The resulting mixture was stirred at the same temperature for 4 h. The mixture was quenched with ammonia solution (7N in methanol) to pH 7 and concentrated to dryness.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (80 mg, 0.18 mmol) and 2-aminopyridin-4-ol (30 mg, 0.27 mmol, 1.5 eq) and Pd (OAc) 2 (6.1 mg, 0.03 mmol, 0.15 eq) , Xantphos (15.7 mg, 0.03 mmol, 0.15 eq) and Cs 2 CO 3 (120 mg, 0.36 mmol, 2.0 eq) in 1.4-dioxane (3 mL) at 110°Cfor 1h under microwave raditation under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 516.0 (M+H) + .
  • Step F A solution of 2- ( (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) pyridin-4-ol (40 mg, 0.08 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (10 mL) was stirred at 30 °C for 2 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuum. The residue was purified to obtain the title compound as a white solid.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (200 mg, 0.45 mmol) , 6-fluoropyridin-2-amine (101 mg, 0.9 mmol) , Pd (OAc) 2 (20 mg, 0.09 mmol) , xantphos (65 mg, 0.11 mmol) , and Cs 2 CO 3 (293 mg, 0.9 mmol) in 1, 4-dioxane (5 mL) under heating at 100 °C for 16h under N 2 .
  • LC-MS m/z 518.1 (M+H) + .
  • Step F N- (6-fluoropyridin-2-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (120 mg, 0.23 mmol) was dissolved in HCl-1, 4-dioxane (5 mL) . The solution was stirred at r.t. overnight. The precipitate was filtered off and washed with CH 2 Cl 2 (3 mL) to give a yellow solid. The solid was then dissolved in CH 2 Cl 2 /MeOH (10/1, 2 mL) . After 1 mL of NH 3 -MeOH was added, the solution was stirred at r.t. overnight. The precipitate was filtered off and washed with H 2 O (3 mL) and MeOH (3 mL) , and dried in vacuo to give the title compound 7 as a light yellow solid.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (800 mg, 1.8 mmol) and 6-aminopicolinonitrile (281 mg, 2.36 mmol, 1.3 eq) and Pd (OAc) 2 (61.2 mg, 0.27 mmol, 0.15 eq) , Xantphos (157.4 mg, 0.27 mmol, 0.15 eq) and Cs 2 CO 3 (1.2 g, 3.63 mmol, 2.0 eq) in 1.4-dioxane (15 mL) at 110°C for 1h under microwave irradiation under N 2 atmosphere. .
  • LC-MS m/z 524.9 (M+H) + .
  • Step F A solution of 6- ( (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) picolinonitrile (220 mg, 0.42 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (10 mL) was stirred at 30 °C for 5 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuum.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (200 mg, 0.452 mmol) and 2-aminoisonicotinonitrile (108 mg, 0.9 mmol) and Pd (OAc) 2 (102 mg, 0.434 mmol) , Xantphos (315 mg, 0.54 mmol) and Cs 2 CO 3 (327 mg, 1.0 mmol) in 1.4-dioxane (10 mL) under heating to 110 °C for 1 hour through microwave irradiation under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 525.2 (M+H) + .
  • Step F A mixture of 2- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-ylamino) isonicotinonitrile (15 mg, 0.03 mmol) in HCl solution (4 M in dioxane, 1 mL) was stirred at room temperature overnight. The mixture was quenched with NH 3 solution (7M in methanol) to pH 7-8 and then evaporated to dryness.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (440 mg, 1 mmol) , pyrimidin-4-amine (190 mg, 2 mmol, 2 eq. ) , Pd (OAc) 2 (22 mg, 0.1 mmol, 0.1 eq. ) , Xantphos (116 mg, 0.2 mmol, 0.2 eq. ) and Cs 2 CO 3 (390 mg, 1.2 mmol, 1.2 eq. ) in 1.4-dioxane (10 mL) under heating at 100 °C through microwave irradiation for 1 hour under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 501.5 (M+H) + .
  • Step F A solution of 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-N- (pyrimidin-4-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (260 mg, 0.52 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (10 mL) was stirred at r.t. for 16 hours. Solvent and volatile were removed in vacuo. Then 20 mL MeOH was added. The resultant mixture was stirred for 5min and filtered. The filter cake was washed with EA (10mL) and PE (10mL) , and dried to give the title compound as a yellow solid.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (237 mg, 0.538 mmol) , pyrimidine-4, 6-diamine (118.2 mg, 1.07 mmol, 2 eq. ) , Pd (OAc) 2 (60 mg, 0.269 mmol, 0.5 eq. ) , Xantphos (186.5 mg, 0.322 mmol, 0.6 eq. ) and Na 2 CO 3 (125 mg, 1.184 mmol, 2.2 eq. ) in 1.4-dioxane (5 mL) under heating at 100 °C for 3 hour under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 516.5 (M+H) + .
  • Step F A solution of N4- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) pyrimidine-4, 6-diamine (90 mg, 0.17 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (3 mL) was stirred at r.t. for 3 hours. Solvent and volatile were removed in vacuo. The resultant solid was washed with dioxane and dried to give the title compound as a yellow solid.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (300 mg, 0.67 mmol) , 2-methoxypyrimidin-4-amine (169 mg, 1.25 mmol) , Pd (OAc) 2 (48mg, 0.067mmol) , xantphos (72 mg, 0.13mmol) , Cs 2 CO 3 (409 mg, 1.25 mmo) in dioxane (20 mL) under heating to 110 °C for 4h under N 2 .
  • LC-MS m/z 531.2 (M+H) + .
  • Step F To a solution of 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -N- (2-methoxypyrimidin-4-yl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (100 mg, 0.19mmol) in MeOH (10 mL) was added 4N HCl solution in dioxane (10 mL) . The reaction mixture was heated to 50 °C for 2h. The mixture was concentrated in vacuo. The residue was suspended in saturated NaHCO 3 solution.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (200 mg, 0.4535 mmol) , pyrimidin-2-amine (86 mg, 0.91 mmol, 2 eq. ) , Pd (OAc) 2 (102 mg, 0.4535 mmol, 1 eq. ) , Xantphos (314.5 mg, 0.54 mmol, 1.2 eq. ) and Cs 2 CO 3 (327 mg, 1 mmol, 2.2 eq. ) in 1.4-dioxane (4 mL) under heating at 110 °C for 1 hour through microwave irradiation under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 501.6 (M+H) + .
  • Step F A solution of 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-N- (pyrimidin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (60 mg, 0.12 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (10 mL) was stirred at r.t. for 2 hours. Solvent and volatile were removed in vacuo. The residue was dissolved in DCM (5 mL) and treated with saturated NaHCO 3 . The organic phase was separated and washed with brine, dried over anhydrous Na 2 SO 4 and concentrated in vacuo. The residue was purified to afford the title compound as a yellow solid.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (220 mg, 0.5 mmol) , 5-chloropyrimidin-2-amine (129 mg, 1.0 mmol) , palladium diacetate (56 mg, 0.2 mmol) , Xantphos (173 mg, 0.3 mmol) and sodium carbonate (117 mg, 1.1 mmol) in 1, 4-dioxane (20 mL) under refluxing for 4 hours under nitrogen atmosphere.
  • LC-MS m/z 535.1 (M+H) + .
  • Step F The solution of N- (5-chloropyrimidin-2-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (50 mg, 0.1 mmol) in HCl solution (4.0 M in 1, 4-dioxane, 5 mL) was stirred at room temperature for 2 hours. The mixture was concentrated, and NH 4 OH (8 mL) was added thereto.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (132mg, 0.3mmol) and N- (6-aminopyridazin-3-yl) acetamide (93mg, 0.2mmol, 2 eq) and Pd (OAc) 2 (10 mg, 0.04 mmol, 0.4eq) , Xantphos (24mg, 0.04 mmol, 0.4 eq) and Cs 2 CO 3 (65mg, 0.2 mmol, 2 eq) in 1.4-dioxane (5 mL) under heating at 120 °Cthrough microwave irradiation for 1 hours under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 558.2 (M+H) + .
  • Step F A mixture of N- (6- ( (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) pyridazin-3-yl) acetamide (55.7 mg, 0.1 mmol) and potassium tert-butoxide in 1.4-dioxane (5 mL) was stirred at 100 °C for 16 hours. The mixture was filtered and concentrated in vacuo.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (200mg, 0.453mmol) and 6-methoxypyridazin-3-amine (169.8mg, 1.358 mmol, 3 eq) , Pd (OAc) 2 (20.3 mg, 0.091 mmol, 0.2 eq) , Xant-phos (104.7mg, 0.181 mmol, 0.4 eq) and Na 2 CO 3 (143.9 mg, 1.358 mmol, 3 eq) in 1.4-dioxane (5 mL) under heating at 100 °C through microwave irradiation for 1 hour under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 531.2 (M+H) + .
  • Step F A solution of 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -N- (6-methoxypyridazin-3-yl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (50 mg, 0.094 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (10 mL) was stirred at room temperature for 3 hours. The reaction mixture was concentrate in vacuo, The resultant solid was washed with methanol and concentrated to give the title compound as a white solid.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (200 mg, 0.45 mmol) , 6-chloropyridazin-3-amine (101 mg, 0.9 mmol, 2 eq. ) , and Pd (OAc) 2 (20 mg, 0.09 mmol, 0.2 eq. ) , Xantphos (65 mg, 0.11 mmol, 0.3 eq. ) and Cs 2 CO 3 (293 mg, 0.9 mmol, 2.0 eq. ) in 1.4-dioxane (5 mL) under heating at 120 °Cthrough microwave irradiation for 1 hour under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 534.9, 536.9 (M+H) + .
  • Step F The solution of N- (6-chloropyridazin-3-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (60 mg, 0.12 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (5 mL) was stirred at r.t. overnight. Solvent and volatile were removed in vacuo. The residue was dissolved in DCM (5 mL) and treated with saturated NaHCO 3 . The organic phase was separated and washed with brine, dried over anhydrous Na 2 SO 4 and concentrated in vacuo. The residue was purified to afford the title compound as a yellow solid.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (100 mg, 0.230 mmol) , pyrazin-2-amine (44 mg, 0.460 mmol) , palladium (II) acetate (57 mg, 0.250 mmol) , xantphos (160 mg, 0.276 mmol) and cesium carbonate (165 mg, 0.506 mmol) in 1, 4-dioxane (10 mL) under heating at 100 °C through microwave irradiation for 1 hour under nitrogen atmosphere.
  • LC-MS m/z 501.2 (M+H) + .
  • Step F A mixture of 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-N- (pyrazin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (50 mg, 0.0996 mmol) in hydrogen chloride solution (4 M in dioxane, 3 mL) was stirred at room temperature for 10 hours. The mixture was evaporated to dryness. The residue was resolved in dichloromethane solution (with 10 %methanol) , basified with aqueous ammonia to pH 8, and then evaporated to dryness.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (150 mg, 0.34 mmol) and 3-aminopyrazin-2-ol (49 mg, 0.44 mmol, 1.3 eq) , Pd (OAc) 2 (11 mg, 0.05 mmol, 0.15 eq) , Xantphos (29 mg, 0.05 mmol, 0.15 eq) and Cs 2 CO 3 (221 mg, 0.68 mmol, 2.0 eq) in 1.4-dioxane (10 mL) . under heating at 110 °C through microwave irradiation for 1 hour under nitrogen atmosphere.
  • LC-MS m/z 516.9 (M+H) + .
  • Step F A solution of 3- ( (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) pyrazin-2-ol (15 mg, 0.03 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (5 mL) was stirred at 30 °C for 5 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuum. The residue was purified to obtain the title compound as a white solid.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (500 mg, 1.13 mmol) , 5-aminopyrazine-2-carbonitrile (163 mg, 1.36 mmol) , tris (dibenzylideneacetone) dipalladium (0) (311 mg, 0.34 mmol) , xantphos (216 mg, 0.374 mmol) and sodium carbonate (264 mg, 2.5 mmol) in 1, 4-dioxane (20 mL) under heating to reflux for 1 hour under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 526.2 (M+H) + .
  • Step F To a solution of 5- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-ylamino) pyrazine-2-carbonitrile (100 mg, 0.19 mmol) in dichloromethane (6 mL) was added HCl solution (4M in dioxane, 10 mL) . The reaction mixture was stirred at room temperature for 16h. The reaction mixture was quenched with ammonia solution (7M in methanol) to pH 7-8, and then evaporated to dryness.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (440 mg, 1.0 mmol) , pyrazine-2, 5-diamine (293 mg, 2.0 mmol) , palladium (II) acetate (112 mg, 0.50 mmol) , xantphos (347 mg, 0.6 mmol) and cesium carbonate (1.2 g, 4.0 mmol) in 1, 4-dioxane (20 mL) under heating at 110 °C for 1 hour through microwave irradiation under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 516.2 (M+H) + .
  • Step F A mixture of N 2 - (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) pyrazine-2, 5-diamine (50 mg, 0.10 mmol) in hydrogen chloride solution (4 M in dioxane, 5 mL) was stirred at room temperature for 16 hours. The mixture was evaporated to dryness. The residue was resolved in dichloromethane solution (with 10 %methanol) , basified with aqueous ammonia to pH 8 and then evaporated to dryness.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (500 mg, 1.13 mmol) , 6-aminopyrazine-2-carbonitrile (163 mg, 1.36 mmol) , palladium (II) acetate (84 mg, 0.374 mmol) , xantphos (215 mg, 0.374 mmol) and cesium carbonate (741 mg, 2.27 mmol) in 1, 4-dioxane (10 mL) under heating at 110 °C for 1 hour through microwave irradiation under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 526.2 (M+H) + .
  • Step F To a solution of 6- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-ylamino) pyrazine-2-carbonitrile (100 mg, 0.19 mmol) in dichloromethane (6 mL) was added HCl solution (4M in dioxane, 2 mL) . The reaction mixture was stirred at room temperature for 18 h. The mixture was evaporated to dryness. The residue was resolved in dichloromethane solution (with 10 %methanol) and washed with aqueous sodium bicarbonate to pH 8. The organic phase was dried over sodium sulfate and evaporated to dryness.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (800 mg, 1.81 mmol) , 1, 3, 5-triazin-2-amine (348 mg, 3.62 mmol) , and Pd (OAc) 2 (81 mg, 0.36 mmol) , Xantphos (260 mg, 0.45 mmol) and Na 2 CO 3 (384 mg, 3.62 mmol) in 1.4-dioxane (15 mL) under heating at 120 °C for 4 hours under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 502.0 (M+H) + .
  • Step F 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-N- (1, 3, 5-triazin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (500 mg, 1.0 mmol) was dissolved in HCl-1, 4-dioxane (10 mL) . The solution was stirred at r.t. for 2h. The precipitate was filtered off and washed with CH 2 Cl 2 (3*1 mL) to give a yellow solid. The solid was then dissolved in CH 2 Cl 2 /MeOH (10/1, 3 mL) . After 3 mL of NH 3 -MeOH was added, the solution was stirred at r.t. overnight. The precipitate was filtered off and washed with H 2 O (3*2 mL) and MeOH (3*1 mL) , and dried in vacuo to give the title compound as a light yellow solid.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (220 mg, 0.5 mmol) , 1, 2, 4-triazin-5-amine (100 mg, 1.0 mmol) , palladium (II) acetate (56 mg, 0.25 mmol) , xantphos (170 mg, 0.30 mmol) and cesium carbonate (375 mg, 1.1 mmol) in 1, 4-dioxane (15 mL) under heating at 105 °C through microwave irradiation for 45 min under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 502.2 (M+H) + .
  • Step F A mixture of 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-N- (1, 2, 4-triazin-5-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (100 mg, 0.20 mmol) in hydrogen chloride solution (4 M in dioxane, 15 mL) was stirred at room temperature for 4 hours. The mixture was evaporated to dryness. The residue was resolved in dichloromethane solution (with 10 %methanol) , basified with aqueous ammonia to pH 8 and then evaporated to dryness.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (500 mg, 1.13 mmol) , 1, 3, 5-triazine-2, 4-diamine (189 mg, 1.7 mmol, 1.5 eq) , Pd (OAc) 2 (38 mg, 0.17 mmol, 0.15 eq) , Xantphos (98 mg, 0.17 mmol, 0.15 eq) and Cs 2 CO 3 (360 mg, 3.34 mmol, 3.0 eq) in 1.4-dioxane (15 mL) under heating at 105 °C through microwave irradiation for 1 hour under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 516.9 (M+H) + .
  • Step F A solution of 5- ( (4-amino-1, 3, 5-triazin-2-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (156 mg, 0.3 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (5 mL) was stirred at 30 °C for 5 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuum. The residue was purified to obtain the title compound as a white solid.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (249 mg, 0.57 mmol) , N2-methyl-1, 3, 5-triazine-2, 4-diamine (106 mg, 0.85 mmol, 1.5 eq. ) , Pd (OAc) 2 (64 mg, 0.28 mmol, 0.5 eq. ) , Xantphos (197 mg, 0.34 mmol, 0.6 eq. ) and Cs 2 CO 3 (370 mg, 1.13 mmol, 2.0 eq. ) in 1.4-dioxane (10 mL) under heating at 100 °C through microwave irradiation for 1 hour under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 531.0 (M+H) + .
  • Step F A solution of N 2 - (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) -N4-methyl-1, 3, 5-triazine-2, 4-diamine (100 mg, 0.19 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (15 mL) was stirred at r.t. for 6 hours. Solvent and volatile were removed in vacuo. The residue was purified to afford the title compound as a yellow solid.
  • Step A 5- ( (4-methoxy-1, 3, 5-triazin-2-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
  • Step B 5- ( (4-hydroxy-1, 3, 5-triazin-2-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
  • the filter cake was purified to obtain 5- ( (4-hydroxy-1, 3, 5-triazin-2-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one as a yellow solid.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (220 mg, 0.5 mmol) , thiazol-2-amine (100 mg, 1.0 mmol, 2 eq. ) , Pd (OAc) 2 (56 mg, 0.25 mmol, 0.5 eq. ) , Xantphos (174 mg, 0.3 mmol, 0.6 eq. ) and Na 2 CO 3 (117 mg, 1.1 mmol, 2.2 eq. ) in 1.4-dioxane (5 mL) under heating at 100 °C for 3 h under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 506.1 (M+H) + .
  • Step F The solution of N- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) thiazol-2-amine (110 mg, 0.23 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (10 mL) was stirred at r.t. for 10 h. The precipitate was collected and washed with EA to afford the title compound as a yellow solid.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (400 mg, 0.9 mmol) , isoxazol-3-amine (150 mg, 1.8 mmol, 2 eq. ) , Pd (OAc) 2 (20 mg, 0.09 mmol, 0.1 eq. ) , Xantphos (104 mg, 0.18 mmol, 0.2 eq. ) and Na 2 CO 3 (190 mg, 1.8mmol, 2eq. ) in 1.4-dioxane (5 mL) under heating at 100 °C for 16 hours under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 490.5 (M+H) + .
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (150 mg, 0.34 mmol) and isoxazol-4-amine (57 mg, 0.68 mmol, 2.0 eq) , Pd (OAc) 2 (16 mg, 0.07 mmol, 0.2 eq) , Xantphos (41 mg, 0.07 mmol, 0.2 eq) and Cs 2 CO 3 (442 mg, 1.36 mmol, 4.0 eq) in 1.4-dioxane (10 mL) under heating at 100 °C through microwave irradiation for 1 hour under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 490.2 (M+H) + .
  • Step F A solution of N- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) isoxazol-4-amine (38 mg, 0.08 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (5 mL) was stirred at 30 °Cfor 5 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuum. The residue was purified to obtain the title compound as a white solid.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (100 mg, 0.226 mmol) , 1-methyl-1H-imidazol-2-amine (33 mg, 0.340 mmol) , tris (dibenzylideneacetone) dipalladium (0) (206 mg, 0.226 mmol) , xantphos (130 mg, 0.226 mmol) and sodium carbonate (48 mg, 0.515 mmol) in 1, 4-dioxane (5 mL) under heating at 110 °C through microwave irradiation for 1 hour under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 503.2 (M+H) + .
  • Step F A mixture of 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -N- (1-methyl-1H-imidazol-2-yl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (50 mg, 1 mmol) in hydrogen chloride solution (4 M in dioxane, 10 mL) was stirred at 70 °C for 16 h. The mixture was evaporated to dryness. The residue was resolved in dichloromethane solution (with 10 %methanol) and washed with aqueous sodium bicarbonate to pH 8. The organic phase was dried over sodium sulfate and evaporated to dryness.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (441 mg, 1.0 mmol) , 1H-imidazol-2-amine (83 mg, 1 mmol, 2 eq. ) , Pd 2 (dba) 3 (91.5 mg, 0.1 mmol, 0.1 eq. ) , Xantphos (115.6 mg, 0.2 mmol, 0.2 eq. ) and Na 2 CO 3 (212 mg, 2mmol, 2eq. ) in toluene (40 mL) under heating at 105 °C for 5 hour under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 489.5 (M+H) + .
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (441 mg, 1.0 mmol) , thiazol-2-amine (102 mg, 1 mmol, 2 eq. ) , Pd 2 (dba) 3 (91.5 mg, 0.1 mmol, 0.1 eq. ) , Xantphos (115.6 mg, 0.2 mmol, 0.2 eq. ) and Na 2 CO 3 (212 mg, 2mmol, 2eq. ) in toluene (40 mL) under heating at 105 °C for 5 hour under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 506.5 (M+H) + .
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (442mg, 1 . 0mmol) and 1, 3, 4-thiadiazol-2-amine (101mg, 1.0 mmol, 1 eq) and Pd (OAc) 2 (91.5 mg, 0.1 mmol, 0.1 eq) , Xant-phos (115.6mg, 0.2mmol, 0.2 eq) and Na 2 CO 3 (212mg, 2.0mmol, 2.0 eq) in toluene (40 mL) under heating at 110 °C for 5 hour under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 507.1 (M+H) + .
  • Step F A mixture of N- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) -1, 3, 4-thiadiazol-2-amine (112mg, 0.2mmol) in 4N HCl in 1.4-dioxane (15 mL) was stirred at room temperature overnight. The reaction mixture was concentrate in vacuo. The residue was stirred with methanol and saturated sodium hydrogen carbonate solution. The precipitates were collected by filtration and dried to afford the title compound as a white solid.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (600 mg, 1.36 mmol) and 1, 3, 4-thiadiazole-2, 5-diamine (315 mg, 2.72 mmol, 2 eq. ) , Pd (OAc) 2 (306 mg, 0.1.36 mmol, 1 eq. ) , Xantphos (786 mg, 1.36 mmol, 1 eq. ) and Cs 2 CO 3 (887 mg, 2.72 mmol, 2.0 eq. ) in 1.4-dioxane (18 mL) under heating at 120 °Cthrough microwave irradiation for 1 hour under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 522.0 (M+H) + .
  • Step F A solution of N2- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) -1, 3, 4-thiadiazole-2, 5-diamine (100 mg, 0.19 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (5 mL) was stirred at r.t. overnight. Solvent and volatile were removed in vacuo. The residue was dissolved in DCM (5 mL) and basified with saturated NaHCO 3 . The organic phase was separated and washed with brine, dried over anhydrous Na 2 SO 4 and concentrated in vacuo. The residue was purified to afford the title compound as a yellow solid.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (442mg, 1 . 0mmol) and 5-methoxy-1, 3, 4-thiadiazol-2-amine (113mg, 1.0 mmol, 1 eq) , Pd (OAc) 2 (91.5 mg, 0.1 mmol, 0.1 eq) , Xant-phos (115.6mg, 0.2mmol, 0.2 eq) and Na 2 CO 3 (212mg, 2.0mmol, 2.0 eq) in toluene (40 mL) under heating at 110 °C for 5 hour under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 537.1 (M+H) + .
  • Step F A mixture of 5-methoxy-N- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) -1, 3, 4-thiadiazol-2-amine (51.8mg, 0.1mmol) in 4N HCl in 1.4-dioxane (15 mL) was stirred at room temperature overnight. The reaction mixture was concentrate in vacuo. The residue was stirred with methanol and saturated sodium hydrogen carbonate solution. The solid was collected by filtration and dried to afford the title compound as a white solid.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (600 mg, 1.3 mmol) and 1, 2, 4-thiadiazol-5-amine (179 mg, 1.77 mmol, 1.3 eq) , Pd (OAc) 2 (46 mg, 0.2 mmol, 0.15 eq) , Xantphos (118 mg, 0.2 mmol, 0.15 eq) and Cs 2 CO 3 (844 mg, 2.72 mmol, 2.0 eq) in 1.4-dioxane (15 mL) under heating at 100C through microwave irradiation for 1 hour under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 506.9H) + .
  • Step F A solution of N- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) -1, 2, 4-thiadiazol-5-amine (214 mg, 0.42 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (15 mL) was stirred at 30 °C for 5 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuum. The residue was purified to obtain the title compound as a white solid.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (400 mg, 0.91 mmol) and 3-methoxy-1, 2, 4-thiadiazol-5-amine (155 mg, 1.18 mmol, 1.3 eq) , Pd (OAc) 2 (11 mg, 0.14 mmol, 0.15 eq) , Xantphos (78.7 mg, 0.14 mmol, 0.15 eq) and Cs 2 CO 3 (590 mg, 1.8 mmol, 2.0 eq) in 1.4-dioxane (10 mL) under heating at 110 °C through microwave irradiation for 1 hour under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 537.0 (M+H) + .
  • Step F A solution of 3-methoxy-N- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) -1, 2, 4-thiadiazol-5-amine (100 mg, 0.19 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (5 mL) was stirred at 30 °C for 5 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuum. The residue was purified to obtain the title compound as a white solid.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (220 mg, 0.5 mmol) , N3- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) -1, 2, 5-oxadiazole-3, 4-diamine (101 mg, 1.0 mmol, 2.0 eq) , Pd (OAc) 2 (11 mg, 0.05 mmol, 0.1 eq) , Xantphos (116 mg, 0.2 mmol, 0.4 eq) and Cs 2 CO 3 (325 mg, 1.0 mmol, 2.0 eq) in 1.4-dioxane (10 mL) under heating at 100 °C through microwave irradiation for 1 hour under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 506.1 (M+H) + .
  • Step F A solution of N3- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) -1, 2, 5-oxadiazole-3, 4-diamine (237 mg, 0.47 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (20 mL) was stirred at 30 °C for 5 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuum. The residue was purified by to obtain the title compound as a white solid.
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (500 mg, 1.13 mmol) , ethyl 5-aminothiazole-4-carboxylate (292.3 mg, 1.70 mmol) , and Pd (OAc) 2 (76.2 mg, 0.34 mmol) , Xantphos (196.4 mg, 0.34 mmol) and Cs 2 CO 3 (553.0 mg, 0.34 mmol) in 1.4-dioxane (10 mL) under heating at 120 °C through microwave irradiation for 1.5 hours under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 578.3 (M+H) + .
  • Step F A solution of ethyl 5- ( (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) thiazole-4-carboxylate (450 mg, 0.78mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (16 mL) was stirred at r.t. for 18hours. The mixture was concentrated, and saturated NaHCO 3 (10 mL) was added. The precipitate was filtered and washed with water (4 mL) .
  • Step E stoichiometry: Intermediate 5 (200 mg, 0.450 mmol) , 1H-pyrrolo [2, 3-c] pyridin-5-amine (120 mg, 0.90 mmol) , palladium (II) acetate (50 mg, 0.225 mmol) , xantphos (196 mg, 0.340 mmol) and potassium carbonate (124 mg, 0.90 mmol) in 1, 4-dioxane (10 mL) under heating at 100 °Cthrough microwave irradiation for 1 hour under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 539.2 (M+H) + .
  • Step F A mixture of 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-N- (1H-pyrrolo [2, 3-c] pyridin-5-yl) -pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (80 mg, 0.148 mmol) in hydrogen chloride solution (4 M in dioxane, 5 mL) was stirred at room temperature for 16 hours. The mixture was evaporated to dryness. The residue was resolved in dichloromethane solution (with 10 %methanol) , basified with aqueous ammonia to pH 8, and then evaporated to dryness.
  • This compound was prepared according to the procedure for preparing compound 101 by using Intermediate 8 as 4- (cyclohex-1-en-1-yl) -3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine in step B.
  • Step B To a solution of dimethyl 2- (4-methoxyphenyl) malonate (39.6 g, 166 mmol) in tri-n-butylamine (80 ml) at 198 °C was added 4-cyclohexenyl-3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine (47.3 g, 199 mmol) in portions, and the resultant mixture was stirred for 1 h at 198 °C. The mixture was cooled to the room temperature, and solvent was decanted. THF (150 mL) and HCl (6N, 600 mL) were added with stirring vigorously for 0.5 h.
  • Step C A solution of 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -5-hydroxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (47.0 g, 104 mmol) in phosphorus oxychloride (100 mL) was stirred at reflux for 16 hrs. The solvent was removed in vacuum. The residue was added slowly to methanol (100 mL) cooled at 0°C.
  • Step D To a solution of 5, 7-dichloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (40 g, 88 mmol) in dichloromethane (400 ml) at 0 °C was added sodium methoxide (30%in methanol, 80 g) dropwise. The resultant mixture was stirred for 10 min at 0 °C. The reaction was quenched by adding ice water (100 mL) and extracted with dichloromethane (200 mL) three times.
  • This compound was prepared according to the procedure for preparing compound 101 by using Intermediate 1 as methyl 2- (quinolin-6-yl) acetate in step A.
  • Step A To dimethyl carbonate (150 mL) cooled at 0 °C was added potassium tert-butanolate (24 g, 216 mmol) in portions. The resultant mixture was stirred at 0 °C for 1 hour. Methyl 2- (quinolin-6-yl) acetate (20 g, 100 mmol) was added. The resultant mixture was slowly warmed up to room temperature and stirred for 1 hour. The reaction mixture was heated to 80 °C with stirring overnight.
  • Step B A suspension of dimethyl 2- (quinolin-6-yl) malonate (13 g, 50 mmol) and 3, 4-diphenyl-1H-pyrazol-5-amine (11.8 g, 50 mmol) in tributylamine (100 mL) was stirred at 185 °C for 4 hours. After cooling to room temperature, the mixture was filtered. The residue was diluted with DCM (450 mL) , washed with saturated NH 4 Cl (150 ml) and brine (100 ml) , dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated in vacuo.
  • Step C The solution of 2, 3-diphenyl-6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine-5, 7 (4H, 6H) -dione (18 g, 42 mmol) , DMAP (1 g) and PCl 5 (80 mg) in POCl 3 (180 ml) was stirred at 100 °C overnight. After cooling to room temperature, the solvent was removed by vacuum. The residue was cooled to 0 °C. MeOH (60mL) was added to quench the reaction.
  • Step D To a solution of 6- (5, 7-dichloro-2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline (13.0 g, crude, 27.8 mmol) in DCM/MeOH (200 mL, 1: 1) cooled at 0 °C was added sodium methoxide (14.9 mL, 5.0 M in methanol) dropwise. Then the mixture was stirred at 0 °C for 1 hour. Saturated NH 4 Cl (150 mL) was added to quench the reaction.
  • This compound was prepared according to the procedure for preparing compound 101 by using Intermediate 1 as methyl 2- (quinolin-6-yl) acetate e in step A and Intermediate 8 as 4- (cyclohex-1-en-1-yl) -3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine in step B.
  • Step B A suspension of dimethyl 2- (quinolin-6-yl) malonate (1.95 g, 7.52 mmol) and 4- (cyclohex-1-en-1-yl) -3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine (1.8 g, 7.52 mmol) in tributylamine (20 mL) was stirred at 185 °C for 4 hours. After cooling to room temperature, the mixture was filtered. The residue was diluted with DCM (150 mL) , washed with saturated NH 4 Cl (50 ml) and brine (50 ml) , dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated in vacuo.
  • Step C The solution of 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -2-phenyl-6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine-5, 7 (4H, 6H) -dione (3.1 g, 7.13 mmol) in POCl 3 (12 ml) was stirred at 110 °C overnight. After cooling to room temperature, the solvent was removed by vacuum. MeOH (60mL) was added slowly to the residue cooled at 0 °C to quench the reaction.
  • Step D To a solution of 6- (5, 7-dichloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline (300 mg, crude, 0.64 mmol) in DCM/MeOH (6 mL, 1: 1) cooled at 0 °C was added sodium methoxide (0.64 mL, 5.0 M in methanol) dropwise. Then the mixture was stirred at 0 °C for 1 hour. Saturated NH 4 Cl (50 mL) was added to quench the reaction.
  • This compound was prepared according to the procedure for preparing compound 101 by using Intermediate 1 as methyl 2- (quinoxalin-6-yl) acetate in step A and Intermediate 8 as 4- (cyclohex-1-en-1-yl) -3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine in step B.
  • Step A To dimethyl carbonate (30 mL) cooled at 0 °C was added potassium tert-butanolate (3.8 g, 34.12 mmol) in portions. The resultant mixture was stirred at 0 °C for 1 hour. Methyl 2- (quinoxalin-6-yl) acetate (2.3 g, 11.37 mmol) was added. The resultant mixture was slowly warmed up to room temperature and stirred for 1 hour. The reaction mixture was heated to 90 °C and stirred for 1.5 hours.
  • Step B A suspension of 4- (cyclohex-1-en-1-yl) -3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine (1.93 g, 8.07 mmol) and dimethyl 2- (quinoxalin-6-yl) malonate (2.1 g, 8.07 mmol) in tributylamine (20 mL) was stirred at 175 °C for 2 hours. After cooling to room temperature, the mixture was filtered. The residue was diluted with DCM (150 mL) , washed with saturated NH 4 Cl (50 ml) and brine (30 ml) , dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated in vacuo.
  • Step C The solution of 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -2-phenyl-6- (quinoxalin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine-5, 7 (4H, 6H) -dione (1.0 g, 2.30 mmol) in POCl 3 (6 ml) in a sealed tube was stirred at 110 °C for 8 hours. After cooling to room temperature, the solvent was removed by vacuum. The residue was cooled to 0 °C. MeOH (6 mL) was added to quench the reaction.
  • Step D To a solution of 6- (5, 7-dichloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoxaline (800 mg, crude, 2.30 mmol) in DCM/MeOH (20 mL, 1: 1) cooled at 0 °C was added sodium methoxide (2.3 mL, 5.0 M in methanol) dropwise. Then the mixture was stirred at 0 °C for 1 hour. Saturated NH 4 Cl (50 mL) was added to quench the reaction.
  • Step E stoichiometry: 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (200mg, 0.0449 mol) , pyridin-2-amine (63.4m g, 0.674 mol, 1.5 eq. ) , Pd (OAc) 2 (20.2mg, 0.0898 mol, 0.2 eq. ) , Xantphos (52mg, 0.0898 mol, 0.2 eq. ) and K 2 CO 3 (265mg, 1.12mol, 2.5eq. ) in dioxnae (5mL) under heating at 120 °C for 1 hour under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 504.9 (M+H) + .
  • Step E stoichiometry: 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (200 mg, 0.45 mmol) , pyridin-3-amine (85 mg, 0.90 mmol) , Pd (OAc) 2 (36mg, 0.045mmol) , xantphos (58 mg, 0.09mmol) , and CS 2 CO 3 (293 mg, 0.90 mmo) in dioxane (20 mL) under heating at 110 °C for 4 hours under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 504.2 (M+H) + .
  • Step F To a solution of 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-N- (pyridin-3-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (60 mg, 0.12mmol) in MeOH (10 mL) was added 4N HCl solution in dioxane (10 mL) . The reaction mixture was heated to 50 °C for 2h. The mixture was concentrated in vacuo. The crude product was basified with saturated NaHCO 3 solution.
  • Step E stoichiometry: 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (400mg, 0.897mmol) and pyrimidin-4-amine (255.9mg, 2.691 mmol, 3 eq) , Pd (OAc) 2 (40.3mg, 0.179 mmol, 0.2 eq) , Xant-phos (578.6mg, 0.359 mmol, 0.4 eq) and Cs 2 CO 3 (285.2 mg, 2.691 mmol, 3 eq) in 1.4-dioxane (10 mL) under heating at 100 °Cthrough microwave irradiation for 1 hour under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 505.0 (M+H) + .
  • Step F A solution of 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-N- (pyrimidin-4-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (100 mg, 0.198mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (10 mL) was stirred at room temperature for 3 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuo. The residue was dissolved in 7N NH 3 in methanol and stirred at room temperature for 2 hours. The precipitates were filtered, washed with methanol, and dried to afford the title compund as a white solid.
  • Step E stoichiometry: 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (200 mg, 0.452 mmol) and 2-methoxypyrimidin-4-amine (113 mg, 0.904 mmol) and Pd (OAc) 2 (31 mg, 0.136 mmol) , Xantphos (157 mg, 0.272 mmol) and Na 2 CO 3 (96 g, 0.904 mmol) in 1.4-dioxane (10 mL) under heating at 110 °C for 4 hours under N 2 atmosphere.
  • Step F A mixture of 3-cyclohexenyl-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -N- (2-methoxy-pyrimidin-4-yl) -2-phenyl-pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (55 mg, 0.103 mmol) and HCl solution (4N in dioxane, 6 mL) was stirred at room temperature overnight. The mixture was quenched with NH 3 solution (7N in methanol) to pH 7 and concentrated to dryness.
  • Step E stoichiometry: 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (150 mg, 0.34 mmol) and pyridazin-3-amine (65 mg, 0.68 mmol, 2.0 eq) , Pd (OAc) 2 (16 mg, 0.07 mmol, 0.2 eq) , Xantphos (41 mg, 0.07 mmol, 0.2 eq) and Cs 2 CO 3 (442 mg, 1.36 mmol, 4.0 eq) in 1.4-dioxane (10 mL) under heating at 100 °C for 1 hour through microwave irradiation under nitrogen atmosphere.
  • LC-MS m/z 504.9 (M+H) + .
  • Step F A solution of 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-N- (pyridazin-3-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (70 mg, 0.14 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (15 mL) was stirred at 30 °C for 5 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuum. The residue was purified to obtain the title compound as a white solid.
  • Step E stoichiometry: 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (200 mg, 0.450 mmol) and pyrazin-2-amine (86 mg, 0.900 mmol, 2 eq) and palladium (II) acetate (111 mg, 0.495 mmol, 1.1 eq) , Xantphos (312 mg, 0.540 mmol, 1.2 eq) and sodium carbonate (323 mg, 0.990 mmol, 2.2 eq) in 1.4-dioxane (10mL) under heating at 100 °C through microwave irradiation for 1 hour under nitrogen atmosphere.
  • LC-MS m/z 505.2 (M+H) + .
  • Step E stoichiometry: 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (500 mg, 1.07 mmol) , 5-aminopyrazine-2-carbonitrile (257 mg, 2.15 mmol) , palladium (II) acetate (48 mg, 0.214 mmol) , xantphos (124 mg, 0.214 mmol) and sodium carbonate (230 mg, 0.215 mmol) in 1, 4-dioxane (10 mL) under heating at 110 °C for 4 hours under nitrogen atmosphere.
  • LC-MS m/z 530.2 (M+H) + .
  • Step F A mixture of 5- (3-cyclohexenyl-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-ylamino) pyrazine-2-carbonitrile (170 mg, 0.321 mmol) in hydrogen chloride solution (4 M in dioxane, 5 mL) was stirred at room temperature for 16 h. The mixture was evaporated to dryness. The residue was resolved in dichloromethane solution (with 10 %methanol) and washed with aqueous sodium bicarbonate to pH 8. The organic phase was dried over sodium sulfate and evaporated to dryness.
  • Step E stoichiometry: 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (44mg, 0.0998 mmol) , pyrazine-2, 5-diamine (30 mg, 0.204 mmol) , palladium (II) acetate (22 mg, 0.0998 mmol) , xantphos (70 mg, 0.121 mmol) and cesium carbonate (130 g, 0.4 mmol) in 1, 4-dioxane (6 mL) under heating at 110 °C for 1 hour under nitrogen atmosphere.
  • LC-MS m/z 520.2 (M+H) + .
  • Step F A mixture of N 2 - (3-cyclohexenyl-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) pyrazine-2, 5-diamine (90 mg, 0.18 mmol) in hydrogen chloride solution (4 M in dioxane, 5 mL) was stirred at 50 °C for 3 hours. The mixture was evaporated to dryness. The residue was resolved in dichloromethane solution (with 10 %methanol) , basified with aqueous ammonia to pH 8, and then evaporated to dryness.
  • Step E stoichiometry: 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (150 mg, 0.34 mmol) and 1, 2, 4-triazin-3-amine (65 mg, 0.68 mmol, 2.0 eq) , Pd (OAc) 2 (16 mg, 0.07 mmol, 0.2 eq) , Xantphos (41 mg, 0.07 mmol, 0.2 eq) and Cs 2 CO 3 (442 mg, 1.36 mmol, 4.0 eq) in 1.4-dioxane (10 mL) under heating at 100 °C for 1 hour through microwave irradiation under nitrogen atmosphere.
  • LC-MS m/z 505.9 (M+H) + .
  • Step F A solution of 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-N- (1, 2, 4-triazin-3-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (30 mg, 0.06 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (15 mL) was stirred at 30 °C for 5 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuum. The residue was purified to obtain the title compound as a white solid.
  • Step E stoichiometry: 5-chloro-3-cyclohexenyl-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (110 mg, 0.25 mmol) , 1, 2, 4-triazin-5-amine (50 mg, 0.50 mmol) , palladium (II) acetate (28 mg, 0.125 mmol) , xantphos (87 mg, 0.15 mmol) and cesium carbonate (180 mg, 0.55 mmol) in 1, 4-dioxane (15 mL) under heating at 105 °C through microwave irradiation for 45 min under nitrogen atmosphere.
  • LC-MS m/z 506.2 (M+H) + .
  • Step F A mixture of 3-cyclohexenyl-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-N- (1, 2, 4-triazin-5-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (50 mg, 0.10 mmol) in hydrogen chloride solution (4 M in dioxane, 5 mL) was stirred at room temperature for 4 hours. The mixture was evaporated to dryness. The residue was resolved in dichloromethane solution (with 10 %methanol) , basified with aqueous ammonia to pH 8, and then evaporated to dryness.
  • Step E stoichiometry: 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (222 g, 0.5 mmol) , 1, 3, 5-triazine-2, 4-diamine (83 mg, 0.75 mmol, 1.5 eq. ) , Pd (OAc) 2 (23 mg, 0.1 mmol, 0.2 eq. ) , Xantphos (115 mg, 0.2 mmol, 0.4 eq. ) and Cs 2 CO 3 (195 mg, 0.6 mmol, 12 eq. ) in 1.4-dioxane (4 mL) under heating at 100 °C through microwave irradiation for 1 hour under N 2 atmosphere.
  • LC-MS m/z 521.0 (M+H) + .
  • Step F The solution of N 2 - (3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) -1, 3, 5-triazine-2, 4-diamine (80 mg, 0.15 mmol) in HCl-1, 4-dioxane (5 mL) .
  • the solution was stirred at r.t. for 6 h. Solvent and volatile were removed in vacuo.
  • the residue was dissolved in DCM (5 mL) and treated with saturated NaHCO 3 .
  • the organic phase was separated and washed with brine, dried over anhydrous Na 2 SO 4 and concentrated in vacuo.
  • the residue was purified to afford the title compound as a yellow solid.
  • Step E stoichiometry: 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (1.0 g, 2.24 mmol) , isoxazol-3-amine (377.1 mg, 4.48 mmol) , and palladium diacetate (101.0 mg, 0.45 mmol) , Xantphos (388.8 mg, 0.67 mmol) and sodium carbonate (474.8 mg, 4.48 mmol) in 1, 4-dioxane (50 mL) under heating at 110 °C for 12 hours under nitrogen atmosphere.
  • LC-MS m/z 494.2 (M+H) + .
  • Step F A solution of N- (3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) isoxazol-3-amine (450 mg, 0.91mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (40 mL) was stirred at r.t. for 2 hours. The mixture was concentrated at low temperature ( ⁇ 25°C) , and saturated NaHCO 3 (8 mL) was added. The precipitate was filtered.
  • Step E stoichiometry: 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (220 mg, 0.5 mmol) , 1, 2, 4-thiadiazol-5-amine (101 mg, 1.0 mmol, 2.0 eq) , Pd (OAc) 2 (22 mg, 0.1 mmol, 0.2 eq) , Xantphos (57.8 mg, 0.1 mmol, 0.2 eq) and Cs 2 CO 3 (325 mg, 1.0 mmol, 2.0 eq) in 1.4-dioxane (10 mL) under heating at 100 °C for 1 hour through microwave irradiation under nitrogen atmosphere.
  • LC-MS m/z 511.2 (M+H) + .
  • Step F A solution of N- (3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) -1, 2, 4-thiadiazol-5-amine (51 mg, 0.1 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (10 mL) was stirred at 30 °C for 5 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuum. The residue was purified to obtain the title compound as a white solid.
  • Step E stoichiometry: 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (446mg, 1 . 0mmol) , 1, 3, 4-thiadiazol-2-amine (101mg, 1.0 mmol, 1 eq) and Pd (OAc) 2 (91.5 mg, 0.1 mmol, 0.1 eq) , xant-phos (115.6mg, 0.2mmol, 0.2 eq) and Na 2 CO 3 (212mg, 2.0mmol, 2.0 eq) in toluene (40 mL) . under heating at 110 °C for 5 hour under nitrogen atmosphere.
  • LC-MS m/z 511.2 (M+H) + .
  • Step F A mixture of N- (3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) -1, 3, 4-thiadiazol-2-aminein (102mg, 0.2mmol) in 4N HCl in 1.4-dioxane (15 mL) was stirred at room temperature overnight. The mixture was concentrated in vacuo. The residue was basified with saturated sodium hydrogen carbonate solution. The precipitate was collected by filtration and dried to afford the title compound as a yellowish solid.
  • 1 H NMR (DMSO-d 6 ) ⁇ 13.77 (br.
  • Step E stoichiometry: 6- (5-chloro-7-methoxy-2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline (600 mg, 1.3 mmol) , pyrimidin-4-amine (148 mg, 1.56 mmol, 1.2 eq) , Pd (OAc) 2 (43.7 mg, 0.19 mmol, 0.15 eq) , Xantphos (112 mg, 0.19 mmol, 0.15 eq) and Cs 2 CO 3 (844 mg, 2.6 mmol, 2.0 eq) in 1.4-dioxane (15 mL) under heating at 110 °C through microwave irradiation for 1 hour under nitrogen atmosphere.
  • LC-MS m/z 521.9 (M+H) + .
  • Step F A solution of 7-methoxy-2, 3-diphenyl-N- (pyrimidin-4-yl) -6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (271 mg, 0.52 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (15 mL) was stirred at 30 °C for 5 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuum. The residue was purified to obtain the title compound as a white solid.
  • Step E stoichiometry: 6- (5-chloro-7-methoxy-2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline (100 mg, 0.216 mmol) , isoxazol-3-amine (92 mg, 0.432 mmol) , palladium (II) acetate (53 mg, 0.238 mmol) , xantphos (150 mg, 0.259 mmol) and sodium carbonate (51mg, 0.475 mmol) in 1, 4-dioxane (10 mL) under heating at 100 °C through microwave irradiation for 1 hour under nitrogen atmosphere.
  • LC-MS m/z 511.2 (M+H) + .
  • Step F A mixture of N- (7-methoxy-2, 3-diphenyl-6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) isoxazol-3-amine (90 mg, 0.097 mmol) in hydrogen chloride solution (4 M in dioxane, 4 mL) was stirred at room temperature for 10 h. The mixture was evaporated to dryness. The residue was resolved in dichloromethane solution (with 10 %methanol) , basified with aqueous ammonia to pH 8, and then evaporated to dryness.
  • Step E stoichiometry: 6- (5-chloro-7-methoxy-2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline (230 mg, 0.5 mmol) and acetamide (59 mg, 1.0 mmol, 2.0 eq) , Pd (OAc) 2 (11 mg, 0.05 mmol, 0.1 eq) , Xantphos (116 mg, 0.2 mmol, 0.4 eq) and Cs 2 CO 3 (325 mg, 1.0 mmol, 2.0 eq) in 1.4-dioxane (10 mL) under heating at 100 °C through microwave irradiation for 1 hour under nitrogen atmosphere.
  • LC-MS m/z 586.2 (M+H) + .
  • Step F A solution of N- (7-methoxy-2, 3-diphenyl-6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) acetamide (100 mg, 0.21 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (20 mL) was stirred at 30 °C for 5 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuum. The residue was purified to obtain the title compound as a white solid.
  • Step A 2- (benzyloxy) -N- (7-oxo-2, 3-diphenyl-6- (quinolin-6-yl) -4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) acetamide
  • Step B 2-hydroxy-N- (7-oxo-2, 3-diphenyl-6- (quinolin-6-yl) -4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) acetamide
  • Step E stoichiometry: 6- (5-chloro-3-cyclohexenyl-7-methoxy-2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline (380 mg, 0.814 mmol) , pyridin-2-amine (153 mg, 1.63 mmol) , palladium (II) acetate (18 mg, 0.0814 mmol) , xantphos (45 mg, 0.0814 mmol) and sodium carbonate (173 mg, 1.63 mmol) in 1, 4-dioxane (10 mL) under heating at 110 °C for 1 hour through microwave irradiation under nitrogen atmosphere.
  • LC-MS m/z 525.2 (M+H) + .
  • Step F A mixture of 7-methoxy-2, 3-diphenyl-N- (pyrazin-2-yl) -6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (125 mg, 0.238 mmol) in hydrogen chloride solution (4 M in dioxane, 5 mL) was stirred at room temperature for 16 h. The mixture was evaporated to dryness. The residue was resolved in dichloromethane solution (with 10 %methanol) and washed with aqueous sodium bicarbonate to pH 8. The organic phase was dried over sodium sulfate and evaporated to dryness.
  • Step E stoichiometry: 6- (5-chloro-3-cyclohexenyl-7-methoxy-2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline (120 mg, 0.257 mmol) , pyrazin-2-amine (50 mg, 0.515 mmol) , palladium (II) acetate (11 mg, 0.050 mmol) , xantphos (32 mg, 0.055 mmol) and cesium carbonate (171 mg, 0.515 mmol) in 1, 4-dioxane (5 mL) under heating at 110 °C for 1 hour through microwave irradiation under nitrogen atmosphere.
  • LC-MS m/z 526.2 (M+H) + .
  • Step F A mixture of 7-methoxy-2, 3-diphenyl-N- (pyrazin-2-yl) -6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (70 mg, 0.133 mmol) in hydrogen chloride solution (4 M in dioxane, 5 mL) was stirred at room temperature for 4 h. The mixture was evaporated to dryness. The residue was resolved in dichloromethane solution (with 10 %methanol) and washed with aqueous sodium bicarbonate to pH 8. The organic phase was dried over sodium sulfate and evaporated to dryness.
  • Step E stoichiometry: 6- (5-chloro-3-cyclohexenyl-7-methoxy-2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline (240 mg, 0.510 mmol) , isoxazol-3-amine (218 mg, 1.02 mmol) , palladium (II) acetate (126 mg, 0.560 mmol) , xantphos (354 mg, 0.612 mmol) and sodium carbonate (119 mg, 1.12 mmol) in 1, 4-dioxane (10 mL) under heating at 100 °C for 16 hours under nitrogen atmosphere.
  • LC-MS m/z 515.2 (M+H) + .
  • Step F A mixture of N- (3-cyclohexenyl-7-methoxy-2-phenyl-6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) isoxazol-3-amine (50 mg, 0.097 mmol) in hydrogen chloride solution (4 M in dioxane, 4 mL) was stirred at room temperature for 2 h. The mixture was evaporated to dryness. The residue was resolved in dichloromethane solution (with 10 %methanol) , basified with aqueous ammonia to pH 8, and then evaporated to dryness.
  • Step A N- (3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-2-phenyl-6- (quinoxalin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) isoxazol-3-amine
  • Step B 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -5- (isoxazol-3-ylamino) -2-phenyl-6- (quinoxalin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
  • N- (3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-2-phenyl-6- (quinoxalin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) isoxazol-3-amine (12 mg, 0.02mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (2 mL) was stirred at r.t. for 2 hours. The mixture was concentrated, and saturated NaHCO 3 (3 mL) was added.
  • Step A 2- (3-chlorophenyl) -3-oxo-3-phenylpropanenitrile
  • reaction was quenched by saturated NH 4 Cl (150 mL) , extracted with ethyl acetate (200 mL) , washed with water (60 mL) and brine (60 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated to obtain crude product (16 g) which was directly used in the next step without further purification.
  • Step B 4- (3-chlorophenyl) -3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine
  • Step C 3- (3-chlorophenyl) -5-hydroxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
  • Step D 5, 7-dichloro-3- (3-chlorophenyl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine
  • Step E 5-chloro-3- (3-chlorophenyl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine
  • Step F 3- (3-chlorophenyl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-N- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine
  • Step G 3- (3-chlorophenyl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-5- (pyridin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
  • Step A 2- (2-fluorophenyl) -3-oxo-3-phenylpropanenitrile
  • Step B 4- (2-fluorophenyl) -3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine
  • step C 3- (2-fluorophenyl) -5-hydroxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
  • Step D 5, 7-dichloro-3- (2-fluorophenyl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine
  • Step E 5-chloro-3- (2-fluorophenyl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine
  • Step F 3- (2-fluorophenyl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-N- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine
  • Step G 3- (2-fluorophenyl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-5- (pyridin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
  • Step B 4-phenyl-3- (pyridin-2-yl) -1H-pyrazol-5-amine
  • Step C 6- (4-methoxyphenyl) -3-phenyl-2- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine-5, 7 (4H, 6H) -dione
  • Step D 5, 7-dichloro-6- (4-methoxyphenyl) -3-phenyl-2- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine
  • Step E 5-chloro-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -3-phenyl-2- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine
  • Step F 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -3-phenyl-N, 2-di (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine
  • Step G 6- (4-methoxyphenyl) -3-phenyl-2- (pyridin-2-yl) -5- (pyridin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
  • Step A 5-hydroxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-3- (piperidin-1-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
  • Step B 5, 7-dichloro-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-3- (piperidin-1-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine
  • Step C 5-chloro-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-3- (piperidin-1-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine
  • Step D 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-3- (piperidin-1-yl) -N- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine
  • Step E 6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-3- (piperidin-1-yl) -5- (pyridin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
  • Step A 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-N- (1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine
  • Step B 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-N- (1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine
  • Step C 5- ( (1H-pyrazol-3-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
  • This compound was prepared according to the procedure for preparing compound 182 by using Intermediate 5 as 5-methoxy-1- (4-methoxybenzyl) -1H-pyrazol-3-amine in step A.
  • Step A A suspension of 5-chloro-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (441 mg, 1 mmol) , 5-methoxy-1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-amine (243 mg, 1 mmol, 1 eq. ) , Pd (OAc) 2 (44.8 mg, 0.2 mmol, 0.2 eq. ) , Xantphos (57.8 mg, 0.1 mmol, 0.1 eq. ) and Cs 2 CO 3 (650 mg, 2mmol, 2eq.
  • Step B A mixture of 7-methoxy-N- (5-methoxy-1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -3-phenyl-2- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (800mg, 1.23mmol) and sodium 2-methylpropan-2-olate (197mg, 4.9mmol) in dioxane (10 mL) was stirred at 100°C for 2h.
  • Step C A solution of 5- ( (5-methoxy-1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (100 mg, 0.19 mmol) in 4M HCl in dioxane (5 mL) was stirred at r.t. for 1 hour. Solvent and volatile were removed in vacuo. The residue was dissolved in DCM (5 mL) and treated with saturated NaHCO 3 . The organic phase was separated and washed with brine, dried over anhydrous Na 2 SO 4 , and concentrated in vacuo. The residue was purified to afford the title compound as a white solid.
  • Step A 6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-5- ( (1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-imidazol-4-yl) amino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
  • Step B 5- ( (1H-imidazol-4-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
  • This compound was prepared according to The procedure for preparing compound 182 by using Intermediate 5 as 2- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -2H-1, 2, 3-triazol-4-amine in step A.
  • Step A A suspension of 5-chloro-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (50 mg, 0.11 mmol) , 2- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -2H-1, 2, 3-triazol-4-amine (31 mg, 0.147 mmol, 1.3 eq. ) , Pd (OAc) 2 (5.1 mg, 0.027 mmol, 0.2 eq. ) , Xantphos (13.1 mg, 0.027mmol, 0.2 eq. ) and Cs 2 CO 3 (66.7 mg, 0.283mmol, 2.5eq.
  • Step B A solution of 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-N- (2- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -2H-1, 2, 3-triazol-4-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (110 mg, 0.18 mmol) and KO t Bu (50 mg, 0.44 mmol) in 1.4-dioxane (5 mL) was stirred at reflux for 2 hours.

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

The invention provides inhibitor compounds of MAT2A that are useful as therapeutic agents for treating malignancies wherein the compounds have the general formula (I) : wherein ring A, ring B, ring C and, R1 are as described herein.

Description

INHIBITORS OF CELLULAR METABOLIC PROCESSES FIELD OF THE INVENTION
The present invention relates to organic compounds useful for therapy and/or prophylaxis in a mammal, and in particular to inhibitors of MAT2A enzyme which are useful for treating certain cancers.
BACKGROUND OF THE INVENTION
Methionine adenosyltransferase (MAT) also known as S-adenosylmethionine synthetase is a cellular enzyme that catalyzes the synthesis of S-adenosyl methionine (SAM or AdoMet) from methionine and ATP and is considered the rate-limiting step of the methionine cycle. SAM is the propylamino donor in polyamine biosynthesis and the principal methyl donor for DNA methylation and is involved in gene transcription and cellular proliferation as well as the production of secondary metabolites.
Two genes, MATlA and MAT2A, encode two distinct catalytic MAT isoforms. A third gene, MAT2B, encodes a MAT2A regulatory subunit. MATlA is specifically expressed in the adult liver, whereas MAT2A is widely distributed. Because MAT isoforms differ in catalytic kinetics and regulatory properties, MATlA-expressing cells have considerably higher SAM levels than do MAT2A-expressing cells. It has been found that hypomethylation of the MAT2A promoter and histone acetylation causes upregulation of MAT2A expression.
In hepatocellular carcinoma (HCC) , the downregulation of MAT1A and the up-regulation of MAT2A occur, which is known as the MAT1A: MAT2A switch. The switch, accompanied with up-regulation of MAT2B, results in lower SAM contents, which provide a growth advantage to hepatoma cells. Because MAT2A plays a crucial role in facilitating the growth of hepatoma cells, it is a target for antineoplastic therapy. Recent studies have shown that silencing by using small interfering RNA substantially suppresses growth and induces apoptosis in hepatoma cells.
It has been reported by Marjon et al (Cell Reports, Cell Reports 15, 574–587) that cancer cell lines that are MTAP deficient are particularly sensitive to inhibition of MAT2A. MTAP (methylthioadenosine phosphorylase) is an enzyme widely expressed in normal tissues that catalyzes the conversion of methylthioadenosine (MTA) into adenine and 5-methylthioribose-1-phosphate. The adenine is salvaged to generate adenosine monophosphate, and the 5-methylthioribose-1-phosphate is converted to methionine and formate. Because of this salvage pathway, MTA can serve as an alternative purine source when de novo purine synthesis is blocked, e.g., with antimetabolites, such as L-alanosine.
Many human and murine malignant cells lack MTAP activity. MTAP deficiency is not only found in tissue culture cells but the deficiency is also present in primary leukemias, gliomas, melanomas, pancreatic cancers, non-small cell lung cancers (NSLC) , bladder cancers, astrocytomas, osteosarcomas, head and neck cancers, myxoid chondrosarcomas, ovarian cancers, endometrial cancers, breast cancers, soft tissue sarcomas, non-Hodgkin lymphomas, and mesotheliomas. The gene encoding for human MTAP maps to region 9p21 on human chromosome 9p. This region also contains the tumor suppressor genes p16INK4A (also known as CDKN2A) , and pl5INK4B. These genes code for p16 and p15, which are inhibitors of the cyclin D-dependent kinases cdk4 and cdk6, respectively.
The pl6INK4A transcript can alternatively be ARF spliced into a transcript encoding pl4ARF. pl4ARF binds to MDM2 and prevents degradation of p53 (Pomerantz et al. (1998) Cell 92: 713-723) . The 9p21 chromosomal region is of interest because it is frequently homozygously deleted in a variety of cancers, including leukemias, NSLC, pancreatic cancers, gliomas, melanomas, and mesothelioma. The deletions often inactivate more than one gene. For example, Cairns et al. ( (1995) Nat. Gen. 11: 210--212) reported that after studying more than 500 primary tumors, almost all the deletions identified in such tumors involved a 170 kb region containing MTAP, pl4ARF and Pl6INK4A. Carson et al (WO 99/67634) reported that a correlation exists between the stage of tumor development and loss of homozygosity of the gene encoding MTAP and the gene encoding  p16. For example, deletion of the MTAP gene, but not pl6INK4A was reported to be indicative of a cancer at an early stage of development, whereas deletion of the genes encoding for p16 and MTAP was reported to be indicative of a cancer at a more advanced stage of tumor development. Garcia-Castellano et al reported that in some osteosarcoma patients, the MTAP gene was present at diagnosis but was deleted at a later time point (Garcia-Castellano et al., supra) .
SUMMARY OF THE INVENTION
In an aspect of the present invention there is provided a compound of formula (I) or a salt or isotopologue thereof:
Figure PCTCN2016097524-appb-000001
wherein:
ring A and ring B are independently a carbocycle or a heterocycle each optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, amino, carboxy, CN, oxo, alkyl, alkoxy and alkylamino wherein said alkyl, alkoxy and alkylamino are optionally substituted with hydroxy, halogen, amino, carboxy, CN and oxo；
ring C is a carbocycle or a heterocycle each optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, amino, carboxy, CN, oxo, alkyl, alkoxy and alkylamino wherein said alkyl, alkoxy and alkylamino are optionally substituted with hydroxy, halogen, amino, carboxy, CN and oxo； and
R1 is H or alkyl, a carbocycle or a heterocycle each optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, amino, NO2, CN, oxo, carboxy, alkoxycarbonyl, alkoxyalkyl, aminocarbonyl, alkyl, acyl, alkoxy, alkylamino aryl, aralkyl, heteroaryl, heteroaralkyl, aryloxy, aralkoxy, heteroaryloxy and heteroaralkoxy wherein said alkyl, alkoxy, alkylamino, alkoxycarbonyl, alkoxyalkyl, aminocarbonyl, aryl, aralkyl, heteroaryl, heteroaralkyl, aryloxy, aralkoxy, heteroaryloxy and heteroaralkoxy are optionally substituted with hydroxy, halogen, amino, alkylamino, carboxy, CN or oxo.
In another aspect of the invention, there are provided pharmaceutical compositions comprising compounds of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof and a pharmaceutically acceptable carrier.
In an aspect of the present invention there is provided a method for treating a disease or condition mediated by the overexpression of MAT2A in a mammal in need thereof, comprising administering to said mammal an effective amount of a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
In another aspect of the invention, there is provided a method of treating an MTAP null cancer in a subject comprising administering to the subject an effective amount of a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
“Acyl” means a carbonyl containing substituent represented by the formula -C (O) -R in which R is H, alkyl, a carbocycle, a heterocycle, carbocycle-substituted alkyl or heterocycle-substituted alkyl wherein the alkyl, alkoxy, carbocycle and heterocycle are as defined herein. Acyl groups include alkanoyl (e.g. acetyl) , aroyl (e.g. benzoyl) , and heteroaroyl.
“Alkyl” means a branched or unbranched, saturated or unsaturated (i.e. alkenyl, alkynyl) aliphatic hydrocarbon group, in an embodiment, having up to 12 carbon atoms unless otherwise specified. When used as part of another term, for example “alkylamino” , the alkyl portion may be a saturated hydrocarbon chain, however also includes unsaturated hydrocarbon carbon chains such as “alkenylamino” and “alkynylamino. Examples of particular alkyl groups are methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, iso-butyl, sec-butyl, tert-butyl, n-pentyl, 2-methylbutyl, 2, 2-dimethylpropyl, n-hexyl, 2-methylpentyl, 2, 2-dimethylbutyl, n-heptyl, 3-heptyl, 2-methylhexyl, and the like. The terms “lower alkyl” “C1-C4 alkyl” and “alkyl of 1 to 4 carbon atoms” are synonymous and used interchangeably to mean methyl, ethyl, 1-propyl, isopropyl, cyclopropyl, 1-butyl, sec-butyl or t-butyl. Unless specified, substituted alkyl groups may contain one, for example two, three or four substituents which may be the same or different.
“Amino” means primary (i.e. –NH2) , secondary (i.e. –NRH) and tertiary (i.e. –NRR) amines in which R is H, alkyl, a carbocycle, a heterocycle, carbocycle-substituted alkyl or heterocycle-substituted alkyl. Particular secondary and tertiary amines are alkylamine, dialkylamine,  arylamine, diarylamine, aralkylamine and diaralkylamine wherein the alkyl is as herein defined and optionally substituted. Particular secondary and tertiary amines are methylamine, ethylamine, propylamine, isopropylamine, phenylamine, benzylamine dimethylamine, diethylamine, dipropylamine and disopropylamine.
“Aryl” when used alone or as part of another term means a carbocyclic aromatic group whether or not fused having the number of carbon atoms designated or if no number is designated, up to 14 carbon atoms. Particular aryl groups are phenyl, naphthyl, biphenyl, phenanthrenyl, naphthacenyl, and the like (see e.g. Lang’s Handbook of Chemistry (Dean, J. A., ed) 13th ed. Table 7-2 [1985] ) . A particular aryl is phenyl. Substituted phenyl or substituted aryl means a phenyl group or aryl group substituted with one, two, three, four or five, for example 1-2, 1-3 or 1-4 substituents chosen, unless otherwise specified, from halogen (F, Cl, Br, I) , hydroxy, protected hydroxy, cyano, nitro, alkyl (for example C1-C6 alkyl) , alkoxy (for example C1-C6 alkoxy) , benzyloxy, carboxy, protected carboxy, carboxymethyl, protected carboxymethyl, hydroxymethyl, protected hydroxymethyl, aminomethyl, protected aminomethyl, trifluoromethyl, alkylsulfonylamino, alkylsulfonylaminoalkyl, arylsulfonylamino, arylsulonylaminoalkyl, heterocyclylsulfonylamino, heterocyclylsulfonylaminoalkyl, heterocyclyl, aryl, or other groups specified. One or more methyne (CH) and/or methylene (CH2) groups in these substituents may in turn be substituted with a similar group as those denoted above. Examples of the term “substituted phenyl” includes but is not limited to a mono-or di (halo) phenyl group such as 2-chlorophenyl, 2-bromophenyl, 4-chlorophenyl, 2, 6-dichlorophenyl, 2, 5-dichlorophenyl, 3, 4-dichlorophenyl, 3-chlorophenyl, 3-bromophenyl, 4-bromophenyl, 3, 4-dibromophenyl, 3-chloro-4-fluorophenyl, 2-fluorophenyl and the like； a mono-or di (hydroxy) phenyl group such as 4-hydroxyphenyl, 3-hydroxyphenyl, 2, 4-dihydroxyphenyl, the protected-hydroxy derivatives thereof and the like； a nitrophenyl group such as 3-or 4-nitrophenyl； a cyanophenyl group, for example, 4-cyanophenyl； a mono-or di (lower alkyl) phenyl group such as 4-methylphenyl, 2, 4-dimethylphenyl, 2-methylphenyl, 4- (iso-propyl) phenyl, 4-ethylphenyl, 3- (n-propyl) phenyl and the like； a mono or di (alkoxy) phenyl group, for example, 3, 4-dimethoxyphenyl, 3-methoxy-4-benzyloxyphenyl, 3-methoxy-4- (1-chloromethyl) benzyloxy-phenyl, 3-ethoxyphenyl, 4- (isopropoxy) phenyl, 4- (t-butoxy) phenyl, 3-ethoxy-4-methoxyphenyl and the like； 3-or 4-trifluoromethylphenyl； a mono-or dicarboxyphenyl or (protected carboxy) phenyl group such 4-carboxyphenyl, ； a mono-or di (hydroxymethyl) phenyl or (protected hydroxymethyl) phenyl such as 3- (protected hydroxymethyl) phenyl or 3, 4-di (hydroxymethyl) phenyl； a mono-or di (aminomethyl) phenyl or (protected aminomethyl) phenyl such as 2- (aminomethyl) phenyl or 2, 4- (protected aminomethyl) phenyl； or a mono-or di (N- (methylsulfonylamino) ) phenyl such as 3- (N-methylsulfonylamino) ) phenyl. Also, the term  “substituted phenyl” represents disubstituted phenyl groups where the substituents are different, for example, 3-methyl-4-hydroxyphenyl, 3-chloro-4-hydroxyphenyl, 2-methoxy-4-bromophenyl, 4-ethyl-2-hydroxyphenyl, 3-hydroxy-4-nitrophenyl, 2-hydroxy-4-chlorophenyl, and the like, as well as trisubstituted phenyl groups where the substituents are different, for example 3-methoxy-4-benzyloxy-6-methyl sulfonylamino, 3-methoxy-4-benzyloxy-6-phenyl sulfonylamino, and tetrasubstituted phenyl groups where the substituents are different such as 3-methoxy-4-benzyloxy-5-methyl-6-phenyl sulfonylamino. Particular substituted phenyl groups include the 2-chlorophenyl, 2-aminophenyl, 2-bromophenyl, 3-methoxyphenyl, 3-ethoxy-phenyl, 4-benzyloxyphenyl, 4-methoxyphenyl, 3-ethoxy-4-benzyloxyphenyl, 3, 4-diethoxyphenyl, 3-methoxy-4-benzyloxyphenyl, 3-methoxy-4- (1-chloromethyl) benzyloxy-phenyl, 3-methoxy-4- (1-chloromethyl) benzyloxy -6-methyl sulfonyl aminophenyl groups. Fused aryl rings may also be substituted with any, for example 1, 2 or 3, of the substituents specified herein in the same manner as substituted alkyl groups.
“Carbocyclyl” , “carbocyclylic” , “carbocycle” and “carbocyclo” alone and when used as a moiety in a complex group such as a carbocycloalkyl group, refers to a mono-, bi-, or tricyclic carbon ring having 3 to 14 carbon atoms, for example 3 to 7 carbon atoms, which may be saturated, unsaturated, partially unsaturated, aromatic (aryl) or non-aromatic having the number of atoms designated, generally from 5 to about 14 ring atoms. Particular saturated carbocyclic groups are cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl and cyclohexyl groups. A particular saturated carbocycle is cyclopropyl. Another particular saturated carbocycle is cyclohexyl. Particular unsaturated carbocycles are aromatic e.g. aryl groups as previously defined, for example phenyl. Particular partially unsaturated carbocyclic groups are cyclobutene, cyclopentene, cyclohexene and cycloheptene. The terms “substituted carbocyclyl” , “carbocycle” and “carbocyclo” mean these groups substituted by the same substituents as the “substituted alkyl” group unless specified otherwise.
“Heterocyclic group” , “heterocyclic” , “heterocycle” , “heterocyclyl” , or “heterocyclo” alone and when used as a moiety in a complex group such as a heterocycloalkyl group, are used interchangeably and refer to any mono-, bi-, or tricyclic, saturated, unsaturated, partially unsaturated, aromatic (heteroaryl) or non-aromatic ring having the number of atoms designated, generally from 5 to about 14 ring atoms, where the ring atoms are carbon and at least one heteroatom (nitrogen, sulfur or oxygen) , for example 1 to 4 heteroatoms. Typically, a 5-membered ring has 0 to 2 double bonds and 6-or 7-membered ring has 0 to 3 double bonds and the nitrogen or sulfur heteroatoms may optionally be oxidized (e.g. SO, SO2) , and any nitrogen heteroatom may  optionally be quaternized. Particular non-aromatic heterocycles are morpholinyl (morpholino) , pyrrolidinyl, oxiranyl, oxetanyl, tetrahydrofuranyl, 2, 3-dihydrofuranyl, 2H-pyranyl, tetrahydropyranyl, thiiranyl, thietanyl, tetrahydrothietanyl, aziridinyl, azetidinyl, 1-methyl-2-pyrrolyl, piperazinyl and piperidinyl. A “heterocycloalkyl” group is a heterocycle group as defined above covalently bonded to an alkyl group as defined above. Particular 5-membered heterocycles containing a sulfur or oxygen atom and one to three nitrogen atoms are thiazolyl, in particular thiazol-2-yl and thiazol-2-yl N-oxide, thiadiazolyl, in particular 1, 3, 4-thiadiazol-5-yl and 1, 2, 4-thiadiazol-5-yl, oxazolyl, for example oxazol-2-yl, and oxadiazolyl, such as 1, 3, 4-oxadiazol-5-yl, and 1, 2, 4-oxadiazol-5-yl. Particular 5-membered ring heterocycles containing 2 to 4 nitrogen atoms include imidazolyl, such as imidazol-2-yl； triazolyl, such as 1, 3, 4-triazol-5-yl； 1, 2, 3-triazol-5-yl, 1, 2, 4-triazol-5-yl, and tetrazolyl, such as 1H-tetrazol-5-yl. Particular benzo-fused 5-membered heterocycles are benzoxazol-2-yl, benzthiazol-2-yl and benzimidazol-2-yl. Particular 6-membered heterocycles contain one to three nitrogen atoms and optionally a sulfur or oxygen atom, for example pyridyl, such as pyrid-2-yl, pyrid-3-yl, and pyrid-4-yl； pyrimidyl, such as pyrimid-2-yl and pyrimid-4-yl； triazinyl, such as 1, 3, 4-triazin-2-yl and 1, 3, 5-triazin-4-yl； pyridazinyl, in particular pyridazin-3-yl, and pyrazinyl. The pyridine N-oxides and pyridazine N-oxides and the pyridyl, pyrimid-2-yl, pyrimid-4-yl, pyridazinyl and the 1, 3, 4-triazin-2-yl groups, are a particular group. Substituents for “optionally substituted heterocycles” , and further examples of the 5-and 6-membered ring systems discussed above can be found in W. Druckheimer et al., U.S. Patent No. 4,278,793. In a particular embodiment, such optionally substittuted heterocycle groups are substituted with hydroxyl, alkyl, alkoxy, acyl, halogen, mercapto, oxo, carboxyl, acyl, halo-substituted alkyl, amino, cyano, nitro, amidino and guanidino.
“Heteroaryl” alone and when used as a moiety in a complex group such as a heteroaralkyl group, refers to any mono-, bi-, or tricyclic aromatic ring system having the number of atoms designated where at least one ring is a 5-, 6-or 7-membered ring containing from one to four heteroatoms selected from the group nitrogen, oxygen, and sulfur, and in a particular embodiment at least one heteroatom is nitrogen (Lang’s Handbook of Chemistry, supra) . Included in the definition are any bicyclic groups where any of the above heteroaryl rings are fused to a benzene ring. Particular heteroaryls incorporate a nitrogen or oxygen heteroatom. The following ring systems are examples of the heteroaryl (whether substituted or unsubstituted) groups denoted by the term “heteroaryl” : thienyl, furyl, imidazolyl, pyrazolyl, thiazolyl, isothiazolyl, oxazolyl, isoxazolyl, triazolyl, thiadiazolyl, oxadiazolyl, tetrazolyl, thiatriazolyl, oxatriazolyl, pyridyl, pyrimidyl, pyrazinyl, pyridazinyl, thiazinyl, oxazinyl, triazinyl, thiadiazinyl, oxadiazinyl, dithiazinyl, dioxazinyl, oxathiazinyl, tetrazinyl, thiatriazinyl, oxatriazinyl, dithiadiazinyl, imidazolinyl,  dihydropyrimidyl, tetrahydropyrimidyl, tetrazolo [1, 5-b] pyridazinyl and purinyl, as well as benzo-fused derivatives, for example benzoxazolyl, benzofuryl, benzothiazolyl, benzothiadiazolyl, benzotriazolyl, benzoimidazolyl and indolyl. A particular “heteroaryl” is: 1, 3-thiazol-2-yl, 4- (carboxymethyl) -5-methyl-1, 3-thiazol-2-yl, 4- (carboxymethyl) -5-methyl-1, 3-thiazol-2-yl sodium salt, 1, 2, 4-thiadiazol-5-yl, 3-methyl-1, 2, 4-thiadiazol-5-yl, 1, 3, 4-triazol-5-yl, 2-methyl-1, 3, 4-triazol-5-yl, 2-hydroxy-1, 3, 4-triazol-5-yl, 2-carboxy-4-methyl-1, 3, 4-triazol-5-yl sodium salt, 2-carboxy-4-methyl-1, 3, 4-triazol-5-yl, 1, 3-oxazol-2-yl, 1, 3, 4-oxadiazol-5-yl, 2-methyl-1, 3, 4-oxadiazol-5-yl, 2- (hydroxymethyl) -1, 3, 4-oxadiazol-5-yl, 1, 2, 4-oxadiazol-5-yl, 1, 3, 4-thiadiazol-5-yl, 2-thiol-1, 3, 4-thiadiazol-5-yl, 2- (methylthio) -1, 3, 4-thiadiazol-5-yl, 2-amino-1, 3, 4-thiadiazol-5-yl, 1H-tetrazol-5-yl, 1-methyl-1H-tetrazol-5-yl, 1- (1- (dimethylamino) eth-2-yl) -1H-tetrazol-5-yl, 1- (carboxymethyl) -1H-tetrazol-5-yl, 1- (methylsulfonic acid) -1H-tetrazol-5-yl, 2-methyl-1H-tetrazol-5-yl, 1, 2, 3-triazol-5-yl, 1-methyl-1, 2, 3-triazol-5-yl, 2-methyl-1, 2, 3-triazol-5-yl, 4-methyl-1, 2, 3-triazol-5-yl, pyrid-2-yl N-oxide, 6-methoxy-2- (n-oxide) -pyridaz-3-yl, 6-hydroxypyridaz-3-yl, 1-methylpyrid-2-yl, 1-methylpyrid-4-yl, 2-hydroxypyrimid-4-yl, 1, 4, 5, 6-tetrahydro-5, 6-dioxo-4-methyl-as-triazin-3-yl, 1, 4, 5, 6-tetrahydro-4- (formylmethyl) -5, 6-dioxo-as-triazin-3-yl, 2, 5-dihydro-5-oxo-6-hydroxy-astriazin-3-yl, 2, 5-dihydro-5-oxo-6-hydroxy-2-methyl-as-triazin-3-yl, 2, 5-dihydro-5-oxo-6-methoxy-2-methyl-as-triazin-3-yl, 2, 5-dihydro-5-oxo-as-triazin-3-yl, 2, 5-dihydro-5-oxo-2-methyl-as-triazin-3-yl, 2, 5-dihydro-5-oxo-2, 6-dimethyl-as-triazin-3-yl, tetrazolo [1, 5-b] pyridazin-6-yl and 8-aminotetrazolo [1, 5-b] -pyridazin-6-yl. An alternative group of “heteroaryl” includes； 4- (carboxymethyl) -5-methyl-1, 3-thiazol-2-yl, 1, 3, 4-triazol-5-yl, 2-methyl-1, 3, 4-triazol-5-yl, 1H-tetrazol-5-yl, 1-methyl-1H-tetrazol-5-yl, 1- (1- (dimethylamino) eth-2-yl) -1H-tetrazol-5-yl, 1- (carboxymethyl) -1H-tetrazol-5-yl, 1- (methylsulfonic acid) -1H-tetrazol-5-yl, 1, 2, 3-triazol-5-yl, 1, 4, 5, 6-tetrahydro-5, 6-dioxo-4-methyl-as-triazin-3-yl, 1, 4, 5, 6-tetrahydro-4- (2-formylmethyl) -5, 6-dioxo-as-triazin-3-yl, 2, 5-dihydro-5-oxo-6-hydroxy-2-methyl-as-triazin-3-yl, tetrazolo [1, 5-b] pyridazin-6-yl, and 8-aminotetrazolo [1, 5-b] pyridazin-6-yl. Heteroaryl groups are optionally substituted as described for heterocycles.
“Inhibitor” means a compound which prevents or reduces the amount of synthesis of S-adenosylmethionine (SAM) from methionine and ATP by MAT2A. In an embodiment, an inhibitor binds to MAT2A.
“Optionally substituted” unless otherwise specified means that a group may be unsubstituted or substituted by one or more (e.g. 2, 3 or 4) of the substituents listed for that group in which said substituents may be the same or different. In an embodiment, an optionally substituted group has  1 substituent. In another embodiment an optionally substituted group has 2 substituents. In another embodiment an optionally substituted group has 3 substituents.
“Pharmaceutically acceptable salts” include both acid and base addition salts. In an embodiment, compounds of the invention are in the form of a pharmaceutically acceptable salt. “Pharmaceutically acceptable acid addition salt” refers to those salts which retain the biological effectiveness and properties of the free bases and which are not biologically or otherwise undesirable, formed with inorganic acids such as hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, nitric acid, carbonic acid, phosphoric acid and the like, and organic acids may be selected from aliphatic, cycloaliphatic, aromatic, araliphatic, heterocyclic, carboxylic, and sulfonic classes of organic acids such as formic acid, acetic acid, propionic acid, glycolic acid, gluconic acid, lactic acid, pyruvic acid, oxalic acid, malic acid, maleic acid, maloneic acid, succinic acid, fumaric acid, tartaric acid, citric acid, aspartic acid, ascorbic acid, glutamic acid, anthranilic acid, benzoic acid, cinnamic acid, mandelic acid, embonic acid, phenylacetic acid, methanesulfonic acid, ethanesulfonic acid, p-toluenesulfonic acid, salicyclic acid and the like. “Pharmaceutically acceptable base addition salts” include those derived from inorganic bases such as sodium, potassium, lithium, ammonium, calcium, magnesium, iron, zinc, copper, manganese, aluminum salts and the like. Particularly base addition salts are the ammonium, potassium, sodium, calcium and magnesium salts. Salts derived from pharmaceutically acceptable organic nontoxic bases includes salts of primary, secondary, and tertiary amines, substituted amines including naturally occurring substituted amines, cyclic amines and basic ion exchange resins, such as isopropylamine, trimethylamine, diethylamine, triethylamine, tripropylamine, ethanolamine, 2-diethylaminoethanol, trimethamine, dicyclohexylamine, lysine, arginine, histidine, caffeine, procaine, hydrabamine, choline, betaine, ethylenediamine, glucosamine, methylglucamine, theobromine, purines, piperizine, piperidine, N-ethylpiperidine, polyamine resins and the like. Particularly organic non-toxic bases are isopropylamine, diethylamine, ethanolamine, trimethamine, dicyclohexylamine, choline, and caffeine. In an embodiment the compound of the invention is a salt. In an embodiment, the compound of the invention is a pharmaceutically acceptable salt. In an embodiment, the compound of the invention is an acetate. In an embodiment, the compound of the invention is a benzoate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a besylate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a bitartrate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a bromide salt. In an embodiment, the compound of the invention is a carbonate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a chloride salt. In an embodiment, the compound of the invention is a citrate salt. In an embodiment, the compound of the invention is an edetate salt. In an embodiment, the compound of the invention is an edisylate salt. In an embodiment, the  compound of the invention is a estolate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a fumerate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a gluceptate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a gluconate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a hydrobromide salt. In an embodiment, the compound of the invention is a hydrochloride salt. In an embodiment, the compound of the invention is an iodide salt. In an embodiment, the compound of the invention is a lactate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a lactobionate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a malate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a maleate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a madelate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a mesylate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a methyl bromide salt.
In an embodiment, the compound of the invention is a methyl sulfate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a mcate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a napsylate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a nitrate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a pamoate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a phosphate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a disphosphate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a salicylate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a disalicylate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a stearate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a succinate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a sulfate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a tartrate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a tosylate salt. In an embodiment, the compound of the invention is a triethiodide salt. In an embodiment, the compound of the invention is a valerate salt. In an embodiment, the compound of the invention is an aluminum salt. In an embodiment, the compound of the invention is a benzathine salt. In an embodiment, the compound of the invention is a calcium salt. In an embodiment, the compound of the invention is a ethylenediamine salt. In an embodiment, the compound of the invention is a lysine salt. In an embodiment, the compound of the invention is a magnesium salt. In an embodiment, the compound of the invention is a meglumine salt. In an embodiment, the compound of the invention is a potassium salt. In an embodiment, the compound of the invention is a procaine salt. In an embodiment, the compound of the invention is a sodium salt. In an embodiment, the compound of the invention is a tromethamine salt. In an embodiment, the compound of the invention is a zinc salt.
Compounds of the invention may exist in different tautomeric forms. In an embodiment, the compounds are in the form as drawn or named. In another embodiment, the compounds are in a tautomeric form other than as drawn or named. Compounds of the inventions may exist as one or  a mixture of salts and solvate forms. For example a compound of the invention may be substantially pure in one particular salt or solvate form or else may be mixtures of two or more salt or solvate forms. In an embodiment, the compounds are in solvate form. In a particular embodiment, the compounds exist as hydrates.
The present invention provides compounds having the general formula I:
Figure PCTCN2016097524-appb-000002
wherein:
ring A and ring B are independently a carbocycle or a heterocycle each optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, amino, carboxy, CN, oxo, alkyl, alkoxy and alkylamino wherein said alkyl, alkoxy and alkylamino are optionally substituted with hydroxy, halogen, amino, carboxy, CN and oxo；
ring C is is a carbocycle or a heterocycle each optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, amino, carboxy, CN, oxo, alkyl, alkoxy, alkylamino, acyl, acylamino, acyloxy, cycloalkoxy, a carbocycle or a heterocycle wherein said alkyl, alkoxy, alkylamino, acyl, acylamino, acyloxy, cycloalkoxy, carbocycle and heterocycle are optionally substituted with hydroxy, halogen, NH2, carboxy, CN, oxo, a carbocycle or a heterocycle wherein said carbocycle and heterocycle are optionally substitued with OH, oxo, amino, halo and haloalkyl；
R1 is H or alkyl, a carbocycle or a heterocycle each optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, amino, NO2, CN, oxo, carboxy, alkoxycarbonyl, alkoxyalkyl, aminocarbonyl, alkyl, acyl, alkoxy, alkylamino aryl, aralkyl, heteroaryl, heteroaralkyl, aryloxy, aralkoxy, heteroaryloxy and heteroaralkoxy wherein said alkyl, alkoxy, alkylamino, alkoxycarbonyl, alkoxyalkyl, aminocarbonyl, aryl, aralkyl, heteroaryl, heteroaralkyl, aryloxy, aralkoxy, heteroaryloxy and heteroaralkoxy are optionally substituted with hydroxy, halogen, amino, alkylamino, carboxy, CN or oxo.
In an embodiment of the invention, ring A and ring B are independently a carbocycle or a heterocycle each optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, amino, carboxy, CN, oxo, alkyl, alkoxy and alkylamino wherein  said alkyl, alkoxy and alkylamino are optionally substituted with hydroxy, halogen, amino, carboxy, CN and oxo. In another embodiment, said optionally substituted carbocycle is aromatic. In another embodiment ring A or ring B is optionally substituted phenyl. In an embodiment, said phenyl is substituted with one or more groups consisting of halogen, amino, hydroxy and alkoxy. In an embodiment ring A or ring B is phenyl substituted with one or more groups consisting of F, Cl, NH2 and OH. In a particular embodiment ring A is phenyl. In a particular embodiment ring A is 2-fluorophenyl. In a particular embodiment ring A is 3-fluorophenyl. In a particular embodiment ring A is 3-chlorophenyl. In a particular embodiment ring A is 4-aminophenyl. In a particular embodiment ring A is 4-hydroxyphenyl.
Ring A is a carbocycle or a heterocycle each optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, NH2, carboxy, CN, oxo, alkyl, alkoxy and alkylamino wherein said alkyl, alkoxy and alkylamino are optionally substituted with hydroxy, halogen, NH2, carboxy, CN and oxo. In an embodiment, ring A is an optionally substituted carbocycle is saturated or partially unsaturated. In an embodiment said saturated or partially unsaturated carbocycle is substituted with one or more of the group consisting of hydroxy, halogen, NH2, carboxy, CN, oxo, alkyl, alkoxy and alkylamino wherein said alkyl, alkoxy and alkylamino are optionally substituted with hydroxy, halogen, NH2, carboxy, CN and oxo. In an embodiment said said saturated or partially unsaturated carbocycle is substituted with one or more halogen. In an embodiment, said halogen is one or two F. In a particular embodiment, ring A is optionally substituted cyclohex-1-en-yl. In an embodiment, said saturated or partially unsaturated ring is deuterated. In a particular embodiment, said ring is fully deuterated. In a particular embodiment ring A is cyclohex-1-en-1-yl (E) . In a particular embodiment ring A is (2H9) cyclohex-1-en-1-yl. In a particular embodiment ring A is cyclohexa-E, Z-1, 3-dien-1-yl. In a particular embodiment ring A is 4, 4-difluorocyclohex-1-en-1-yl. In a particular embodiment ring A is cyclopent-E1-en-1yl. In a particular embodiment ring A is cyclopentyl.
In an embodiment ring A is a heterocycle optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, NH2, carboxy, CN, oxo, alkyl, alkoxy and alkylamino wherein said alkyl, alkoxy and alkylamino are optionally substituted with hydroxy, halogen, NH2, carboxy, CN and oxo. In an embodiment, said heterocycle is aromatic i.e. heteroaryl. In an embodiment said heteroaryl is pyridine. In an embodiment said heteroaryl is pyridin-3-yl. In an embodiment said heteroaryl is pyridin-2-yl. In an embodiment said heteroaryl is pyrazole. In a particular embodiment, ring A is 4-methoxypyridin-3-yl. In a particular embodiment, ring A is  pyridin-2-yl. In a particular embodiment, ring A is 1H-pyrazol-4-yl. In an embodiment, ring A is 1H-pyrrol-3-yl.
In an embodiment, said heterocycle is non-aromatic. In an embodiment, said heterocycle is substituted with halogen or alkoxy. In an embodiment, said halogen is one or two F.
In an embodiment, said heterocycle is deuterated. In an embodiment, said heterocycle is fully deuterated. In a particular embodiment, ring A is piperidin-1-yl. In a particular embodiment, ring A is (2H10) piperidin-1-yl. In a particular embodiment, ring A is 4, 4-difluoropiperidin-1-yl. In a particular embodiment, ring A is 5, 6-dihydro-2H-pyran-3-yl (Z) . In a particular embodiment, ring A is 3, 6-dihydro-2H-pyran-4-yl. In a particular embodiment, ring A is 1H-pyrrol-3-yl. In a particular embodiment, ring A is 1H-pyrrol-1-yl. In a particular embodiment, ring A is tetrahydrofuran-3-yl. In a particular embodiment, ring A is 3, 3-difluoropyrrolidin-1-yl.
In a particular embodiment, ring A is 3, 6-dihydro-2H-pyran-4-yl.
Ring B is a carbocycle or a heterocycle each optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, NH2, carboxy, CN, oxo, alkyl, alkoxy and alkylamino wherein said alkyl, alkoxy and alkylamino are optionally substituted with hydroxy, halogen, NH2, carboxy, CN and oxo. In a particular embodiment ring B is phenyl. In a particular embodiment ring B is 2-fluorophenyl. In a particular embodiment ring B is 3-fluorophenyl. In a particular embodiment ring B is 3-chlorophenyl. In a particular embodiment ring B is 4-aminophenyl. In a particular embodiment ring B is 4-hydroxyphenyl. In an embodiment, ring B is an optionally substituted carbocycle that is saturated or partially unsaturated. In an embodiment said saturated or partially unsaturated carbocycle is substituted with one or more of the group consisting of hydroxy, halogen, NH2, carboxy, CN, oxo, alkyl, alkoxy and alkylamino wherein said alkyl, alkoxy and alkylamino are optionally substituted with hydroxy, halogen, NH2, carboxy, CN or oxo. In an embodiment said said saturated or partially unsaturated carbocycle is substituted with one or more halogen. In an embodiment, said halogen is one or two F. In a particular embodiment, ring B is optionally substituted cyclohex-1-en-yl. In an embodiment, said saturated or partially unsaturated ring is deuterated. In a particular embodiment, said ring is fully deuterated. In a particular embodiment ring B is cyclohex-1-en-1-yl (E) . In a particular embodiment ring B is (2H9) cyclohex-1-en-1-yl. In a particular embodiment ring B is cyclohexa-E, Z-1, 3-dien-1-yl. In a particular embodiment ring B is 4, 4-difluorocyclohex-1-en-1-yl. In a particular embodiment ring B is cyclopent-E1-en-1yl. In a particular embodiment ring B is cyclopentyl.
In an embodiment ring B is a heterocycle optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, NH2, carboxy, CN, oxo, alkyl, alkoxy and alkylamino wherein said alkyl, alkoxy and alkylamino are optionally substituted with hydroxy, halogen, NH2, carboxy, CN and oxo. In an embodiment, said heterocycle is aromatic i.e. heteroaryl. In an embodiment said heteroaryl is pyridine. In an embodiment said heteroaryl is pyridin-3-yl. In an embodiment said heteroaryl is pyridin-2-yl. In an embodiment said heteroaryl is pyrazole. In a particular embodiment, ring B is 4-methoxypyridin-3-yl. In a particular embodiment, ring B is pyridin-2-yl. In a particular embodiment, ring B is 1H-pyrazol-4-yl. In an embodiment, ring B is 1H-pyrrol-3-yl.
In an embodiment, said heterocycle is non-aromatic. In an embodiment, said heterocycle is substituted with halogen or alkoxy. In an embodiment, said halogen is one or two F. In an embodiment, said heterocycle is deuterated. In an embodiment, said heterocycle is fully deuterated. In a particular embodiment, ring B is piperidin-1-yl. In a particular embodiment, ring B is (2H10) piperidin-1-yl. In a particular embodiment, ring B is 4, 4-difluoropiperidin-1-yl. In a particular embodiment, ring B is 5, 6-dihydro-2H-pyran-3-yl (Z) . In a particular embodiment, ring B is 3, 6-dihydro-2H-pyran-4-yl. In a particular embodiment, ring B is 1H-pyrrol-3-yl. In a particular embodiment, ring B is 1H-pyrrol-1-yl. In a particular embodiment, ring B is tetrahydrofuran-3-yl. In a particular embodiment, ring B is 3, 3-difluoropyrrolidin-1-yl.
In a particular embodiment, ring B is 3, 6-dihydro-2H-pyran-4-yl.
In a particular embodiment, ring A and ring B are the same as defined herein. In an embodiment ring A and ring B are both phenyl. In an embodiment, ring A and ring B are different and are as defined herein. In an embodiment, ring A is phenyl and ring B is selected from the group consisting of 2-fluorophenyl, 3-fluorophenyl, 4-aminophenyl, 4-hydroxyphenyl, 4-methoxypyridin-3-yl, pyridin-2-yl, 1H-pyrazol-4-yl, 3, 6-dihydro-2H-pyran-4-yl, and 1H-pyrrol-3-yl,. In an embodiment, ring B is phenyl and ring A is selected from the group consisting of 2-fluorophenyl, 3-fluorophenyl, 3-chlorophenyl, piperidin-1-yl, (2H10) piperidin-1-yl, 4, 4-difluoropiperidin-1-yl, cyclohex-1-en-1-yl (E) , (2H9) cyclohex-1-en-1-yl, cyclohexa-E, Z-1, 3-dien-1-yl, 4, 4-difluorocyclohex-1-en-1-yl, 5, 6-dihydro-2H-pyran-3-yl (Z) , 3, 6-dihydro-2H-pyran-4-yl, cyclopentyl, cyclopent-E1-en-1yl, 1H-pyrrol-3-yl, 1H-pyrrol-1-yl, tetrahydrofuran-3-yl, and 3, 3-difluoropyrrolidin-1-yl.
In an embodiment, ring B is phenyl and ring A is cyclohex-1-en-1-yl (E) . In an embodiment, ring B is phenyl and ring A is 2-fluorophenyl. In an embodiment, ring B is phenyl and ring A is 3-fluorophenyl. In an embodiment, ring B is phenyl and ring A is 3-chlorophenyl. In an embodiment,  ring B is phenyl and ring A is piperidin-1-yl. In an embodiment, ring B is phenyl and ring A is (2H10) piperidin-1-yl. In an embodiment, ring B is phenyl and ring A is 4, 4-difluoropiperidin-1-yl. In an embodiment, ring B is phenyl and ring A is cyclohex-1-en-1-yl (E) . In an embodiment, ring B is phenyl and ring A is (2H9) cyclohex-1-en-1-yl.
In an embodiment, ring B is phenyl and ring A is cyclohexa-E, Z-1, 3-dien-1-yl. In an embodiment, ring B is phenyl and ring A is 4, 4-difluorocyclohex-1-en-1-yl. In an embodiment, ring B is phenyl and ring A is 5, 6-dihydro-2H-pyran-3-yl (Z) . In an embodiment, ring B is phenyl and ring A is 3, 6-dihydro-2H-pyran-4-yl. In an embodiment, ring B is phenyl and ring A is cyclopentyl.
In an embodiment, ring B is phenyl and ring A is cyclopent-E1-en-1yl. In an embodiment, ring B is phenyl and ring A is 1H-pyrrol-3-yl. In an embodiment, ring B is phenyl and ring A is 1H-pyrrol-1-yl. In an embodiment, ring B is phenyl and ring A is tetrahydrofuran-3-yl. In an embodiment, ring B is phenyl and ring A is 3, 3-difluoropyrrolidin-1-yl. In an embodiment, ring B is pyridin-2-yl and ring A is phenyl.
Ring C is is a carbocycle or a heterocycle each optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, amino, carboxy, CN, oxo, alkyl, alkoxy, alkylamino, acyl, acylamino, acyloxy, cycloalkoxy, a carbocycle or a heterocycle wherein said alkyl, alkoxy, alkylamino, acyl, acylamino, acyloxy, cycloalkoxy, carbocycle and heterocycle are optionally substituted with hydroxy, halogen, NH2, carboxy, CN, oxo, a carbocycle or a heterocycle wherein said carbocycle and heterocycle are optionally substitued with OH, oxo, amino, halo and haloalkyl. In an embodiment, ring C is a carbocycle or a heterocycle each optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, amino, carboxy, CN, oxo, alkyl, alkoxy and alkylamino wherein said alkyl, alkoxy and alkylamino are optionally substituted with hydroxy, halogen, amino, carboxy, CN and oxo. In an embodiment, ring C is a carbocycle optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, amino, carboxy, CN, oxo, phosphate, sulfate, alkyl, alkoxy, alkylamino, acyl, acylamino, acyloxy, cycloalkoxy, a carbocycle or a heterocycle wherein said alkyl, alkoxy, alkylamino, acyl, acylamino, acyloxy, cycloalkoxy, carbocycle and heterocycle are optionally substituted with hydroxy, halogen, NH2, carboxy, CN, oxo, phosphate, sulfate, a carbocycle or a heterocycle wherein said carbocycle and heterocycle are optionally substitued with OH, oxo, amino, halo and haloalkyl. In an embodiment, said optionally substituted carbocycle is aromatic i.e. aryl. In an embodiment, said aryl group is substituted with one or more substituents selected from the group consisting of OH, amino, halogen, alkyl, alkoxy and cycloalkoxy wherein said alkyl, alkoxy, cycloalkoxy are optionally substituted with one or more OH, halogen, amino, oxo, a carbocycle or heterocycle wherein said carbocycle and heterocycle are optionally substituted  with hydroxy, halogen, oxo, alkyl and haloalkyl. In an embodiment, said aryl group is optionally substituted with OH, halogen, alkoxy, amino, haloalkoxy, aminoethoxy and hydroxyethoxy. In an embodiment, said aryl group is phenyl. In an embodiment, ring C is phenyl. In an embodiment, ring C is phenyl substituted with OH, F, Cl, methyl, methoxy, ethoxy, trifluoromethoxy, 2, 2, 2-trifluoroethoxy, dimethylaminoethoxy, 2-hydroxyethoxy and phosphate. In a particular embodiment ring C is 3-hydroxyphenyl. In a particular embodiment ring C is 4-hydroxyphenyl. In a particular embodiment ring C is 4-chlorophenyl. In a particular embodiment ring C is 4-fluorophenyl. In a particular embodiment ring C is 4-methoxyphenyl. In a particular embodiment ring C is 4-ethoxyphenyl. In a particular embodiment ring C is 4-trifluoromethoxyphenyl. In a particular embodiment ring C is 4-hydroxy-2-methylphenyl. In a particular embodiment ring C is 4-hydroxy-2-methoxyphenyl. In a particular embodiment ring C is 3, 4-dihydroxyphenyl. In a particular embodiment ring C is 4- (2, 2, 2-trifluoroethoxy) phenyl. In a particular embodiment ring C is 4- (2- (dimethylamino) ethoxy) phenyl. In a particular embodiment ring C is 3-fluoro-4-hydroxyphenyl. In a particular embodiment ring C is 3-fluoro-4-methoxyphenyl. In a particular embodiment ring C is 2-chloro-4-hydroxyphenyl. In a particular embodiment ring C is 2-fluoro-4-methoxyphenyl. In a particular embodiment ring C is 3-amino-4-hydroxyphenyl. In a particular embodiment ring C is 3-amino-4-fluorophenyl. In a particular embodiment ring C is 3- (N, N-dimethylaminoethoxy) -4-hydroxyphenyl. In a particular embodiment ring C is 3-chloro-2-hydroxyphenyl. In a particular embodiment ring C is 3-hydroxyethoxy-4-hydroxyphenyl. In another embodiment, ring C is selected from the group consisting of:
Figure PCTCN2016097524-appb-000003
In an embodiment, ring C is a heterocycle optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, amino, carboxyl, CN, oxo, phosphate, sulfate, alkyl, alkoxy, alkylamino, acyl, acylamino, acyloxy, cycloalkoxy, a carbocycle or a heterocycle wherein said alkyl, alkoxy, alkylamino, acyl, acylamino, acyloxy, cycloalkoxy, carbocycle and heterocycle are optionally substituted with hydroxy, halogen, NH2, carboxy, CN, oxo, phosphate, sulfate, a carbocycle or a heterocycle wherein said carbocycle and heterocycle are  optionally substitued with OH, oxo, amino, halo and haloalkyl. In an embodiment, said optionally substituted heterocycle is aromatic i.e. heteroaryl. In an embodiment, said heteroaryl is optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of OH, amino, halogen, alkyl, alkoxy and cycloalkoxy wherein said alkyl, alkoxy and cycloalkoxy are optionally substituted with one or more OH, halogen, amino, oxo, a carbocycle or heterocycle wherein said carbocycle and heterocycle are optionally substituted with hydroxy, halogen, oxo, alkyl and haloalkyl. In an embodiment, ring C is a heteroaryl group optionally substituted with OH, amino, alkyl, carboxyl, alkyl, alkoxy and cycloalkoxy wherein said alkyl is optionally substituted with OH, amino, oxo, alkoxy, a heterocycle optionally substituted with oxo and wherein said cycloalkoxy is optionally substituted with OH. In an embodiment, ring C is 6-methoxypyridin-3-yl. In an embodiment, ring C is 2-methoxypyridin-4-yl. In an embodiment, ring C is 1H-pyrazol-4-yl. In an embodiment, ring C is quinolin-6-yl. In an embodiment, ring C is 2-methylquinolin-6-yl. In an embodiment, ring C is 2-methoxyquinolin-6-yl. In an embodiment, ring C is 2-hydroxymethylquinolin-6-yl. In an embodiment, ring C is 3-hydroxy-2-methylquinolin-6-yl. In an embodiment, ring C is 2-aminoquniazolin-6-yl. In an embodiment, ring C is 4-aminoquinazolin-6-yl. In an embodiment, ring C is cinnolin-6-yl. In an embodiment, ring C is quinoxalin-6-yl. In an embodiment, ring C is 2-chloroquinoxalin-6-yl. In an embodiment, ring C is 3-chloroquinoxalin-6-yl. In an embodiment, ring C is 3-aminoquinoxalin-6-yl. In an embodiment, ring C is 3-hydroxyquinoxalin-6-yl. In an embodiment, ring C is 3-methoxyquinoxalin-6-yl. In an embodiment, ring C is 1, 8-naphthyridin-3-yl. In an embodiment, ring C is imidazo [1, 2-a] pyridin-6-yl.
In an embodiment, ring C is optionally substituted benzo [d] thiazol-6-yl. In another embodiment, ring C is selected from the group consisting of
Figure PCTCN2016097524-appb-000004
In another embodiment, ring C is optionally substituted 1H-benzo [d] imidazol-5-yl. In another embodiment, ring C is selected from the group consisting of
Figure PCTCN2016097524-appb-000005
In another embodiment, ring C is optionally substituted quinolin-6-yl. In another embodiment, ring C is selected from the group consisting of
Figure PCTCN2016097524-appb-000006
In another embodiment, ring C is selected from the group consisting of
Figure PCTCN2016097524-appb-000007
R1 is H or alkyl, a carbocycle or a heterocycle each optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, NH2, NO2, carboxy, alkoxycarbonyl, alkoxyalkyl, alkylaminocarbonyl, CN, oxo, alkyl, acyl, alkoxy and alkylamino wherein said alkyl, alkoxy, alkylamino, alkoxycarbonyl, alkoxyalkyl and alkylaminocarbonyl are optionally substituted with hydroxy, halogen, amino, alkylamino, carboxy, CN and oxo. In an embodiment, R1 is alkyl optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, NH2, NO2, carboxy, alkoxycarbonyl, alkylaminocarbonyl, CN, oxo, alkyl, acyl, alkoxy and alkylamino wherein said alkyl, alkoxy, alkylamino, alkoxycarbonyl, alkylaminocarbonyl are optionally substituted with hydroxy, halogen, NH2, alkylamino, carboxy, CN and oxo. In an embodiment, R1 is alkyl substituted with OH and oxo. In an embodiment, R1 is hydroxyethanoyl. In an embodiment, R1 is a carbocycle optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, NH2, NO2, carboxy, alkoxycarbonyl, alkylaminocarbonyl, CN, oxo, alkyl, acyl, alkoxy and alkylamino wherein said alkyl, alkoxy, alkylamino, alkoxycarbonyl, alkylaminocarbonyl are optionally substituted with hydroxy, halogen, NH2, alkylamino, carboxy, CN and oxo. In an  embodiment, R1 is a heterocycle optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy, halogen, NH2, NO2, carboxy, alkoxycarbonyl, alkylaminocarbonyl, CN, oxo, alkyl, acyl, alkoxy and alkylamino wherein said alkyl, alkoxy, alkylamino, alkoxycarbonyl, alkylaminocarbonyl are optionally substituted with hydroxy, halogen, NH2, alkylamino, carboxy, CN and oxo. In an embodiment, said optionally substituted heterocycle is pyridyl, pyrazinyl, pyrimidinyl, pyridazinyl, 1, 3, 5-triazinyl or 1, 2, 4-triazinyl. In an embodiment, said optionally substituted heterocycle is pyridin-2-yl, pyrazin-2-yl, pyrimidin-2-yl, pyrimidin-4-yl, pyrimidin-5-yl, pyridazin-3-yl, 1, 3, 5-triazin-2-yl or 1, 2, 4-triazin-3-yl. In an embodiment, R1 is pyridyl, pyrazinyl, pyrimidinyl, pyridazinyl, 1, 3, 5-triazinyl or 1, 2, 4-triazinyl each of which is optionally substituted with one or more F, Cl, CN, OH, NO2, NH2 , NHMe –C (O) NH2 and methoxy. In an embodiment the substituent is F, Cl, CN or OH. In an embodiment, said optionally substituted heterocycle is pyridin-2-yl, pyrazin-2-yl, pyrimidin-2-yl, pyrimidin-4-yl, pyrimidin-5-yl, pyridazin-3-yl, 1, 3, 5-triazin-2-yl or 1, 2, 4-triazin-3-yl each of which is optionally substituted with one or more F, Cl, CN, OH, NO2, NH2 , NHMe –C (O) NH2 and methoxy. In an embodiment the substituent is F, Cl, CN or OH.
In an embodiment, R1 is selected from the group consisting of
Figure PCTCN2016097524-appb-000008
Figure PCTCN2016097524-appb-000009
In an embodiment, R1 is a 5-member heterocycle optionally substituted with OH, amino, alkyl, alkoxy and alkoxyalkyl wherein said alkyl, alkoxy and alkoxyalkyl are optionally substituted with one or more OH, oxo, amino, alkoxy and acyloxy.
In an embodiment, R1 is imidazole, pyrazolyl, isoxazole, thiazolyl, 4, 5-dihydrothiazolyl, 1H-1, 2, 4-triazolyl, 2H-1, 2, 3-triazolyl, 1, 3, 4-oxadiazolyl, 1, 2, 5-oxadiazolyl, 1, 2, 4-thiadiazolyl or 1, 3, 4-thiadiazol-2-yl optionally substituted with OH, amino, alkyl, alkoxy, alkoxyalkyl, wherein said alkyl, alkoxy and alkoxyalkyl groups are optionally substituted with OH, oxo and amino.
In an embodiment, R1 is imidazol-2-yl, imidazol-4-yl, pyrazol-3-yl, pyrazol-5-yl, isoxazol-3-yl, isoxazol-4-yl, isoxazol-5-yl, thiazol-2-yl, 4, 5-dihydrothiazol-2-yl, 1H-1, 2, 4-triazol-3-yl, 2H-1, 2, 3-triazol-4-yl, 1, 3, 4-oxadiazol-2-yl, 1, 2, 5-oxadiazol-3-yl, 1, 2, 4-thiadiazol-5-yl or1, 3, 4-thiadiazol-2-yl optionally substituted with OH, amino, alkyl, alkoxy, alkoxyalkyl, wherein said alkyl, alkoxy and alkoxyalkyl groups are optionally substituted with OH, oxo and amino.
In an embodiment, R1 is selected from the group consisting of
Figure PCTCN2016097524-appb-000010
Figure PCTCN2016097524-appb-000011
Compounds of the invention may also comprise one or more isotopic substitutions. For example, H may be in any isotopic form, including 1H, 2H (D or deuterium) , and 3H (T or tritium) ； C may be in any isotopic form, including 11C, 12C, 13C, and 14C； N may be in any isotopic form, including 13N, 14N and 15N； O may be in any isotopic form, including 15O, 16O and 18O； F may be in any isotopic form, including 18F； and the like. For example, the compound is enriched in a specific isotopic form of H, C, N, O and/or F by at least about 60％, 65％, 70％, 75％, 80％, 85％, 90％, 95％, 96％, 97％, 98％, or 99％. Such compounds may be referred to as “isotopologues” and may be useful of the methods of treatment disclosed herein or may be useful in assays for detection of the compound, for example, in competition assays to test other non-isotope containing compounds. In an embodiment, compounds of the invention comprise an isotope. In an embodiment the isotope is deuterium.
Particular compounds of formula (I) include the following:
Figure PCTCN2016097524-appb-000012
Figure PCTCN2016097524-appb-000013
Figure PCTCN2016097524-appb-000014
Figure PCTCN2016097524-appb-000015
Figure PCTCN2016097524-appb-000016
Figure PCTCN2016097524-appb-000017
Figure PCTCN2016097524-appb-000018
Figure PCTCN2016097524-appb-000019
Figure PCTCN2016097524-appb-000020
Figure PCTCN2016097524-appb-000021
Figure PCTCN2016097524-appb-000022
The invention also encompasses prodrugs of the compounds described above. Suitable prodrugs where applicable include known amino-protecting and carboxy-protecting groups which are released, for example hydrolyzed, to yield the parent compound under physiologic conditions. A particular class of prodrugs are compounds in which a nitrogen atom in an amino, amidino, aminoalkyleneamino, iminoalkyleneamino or guanidino group is substituted with a hydroxy (OH) group, an alkylcarbonyl (-CO-R) group, an alkoxycarbonyl (-CO-OR) , an acyloxyalkyl-alkoxycarbonyl (-CO-O-R-O-CO-R) group where R is a monovalent or divalent group and as defined above or a group having the formula -C (O) -O-CP1P2-haloalkyl, where P1 and P2 are the same or different and are H, lower alkyl, lower alkoxy, cyano, halo lower alkyl or aryl. In a particular embodiment, the nitrogen atom is one of the nitrogen atoms of the amidino group of the compounds of the invention. These prodrug compounds are prepared reacting the compounds of the invention described above with an activated acyl compound to bond a nitrogen atom in the compound of the invention to the carbonyl of the activated acyl compound. Suitable activated carbonyl compounds contain a good leaving group bonded to the carbonyl carbon and include acyl halides, acyl amines, acyl pyridinium salts, acyl alkoxides, in particular acyl phenoxides such as p-nitrophenoxy acyl, dinitrophenoxy acyl, fluorophenoxy acyl, and difluorophenoxy acyl. The reactions are generally exothermic and are carried out in inert solvents at reduced temperatures such as –78 to about 50C. The reactions are usually also carried out in the presence of an inorganic base such as potassium carbonate or sodium bicarbonate, or an organic base such as an  amine, including pyridine, triethylamine, etc. One manner of preparing prodrugs is described in USSN 08/843,369 filed April 15, 1997 (corresponding to PCT publication WO9846576) the contents of which are incorporated herein by reference in their entirety.
Compounds of the invention may exist in different resonance forms and that all such resonance forms are within the scope of the invention herein.
Compounds of the invention are prepared using standard organic synthetic techniques from commercially available starting materials and reagents. It will be appreciated that synthetic procedures employed in the preparation of compounds of the invention will depend on the particular substituents present in a compound and that various protection and deprotection steps that are standard in organic synthesis may be required but may not be illustrated in the following general schemes. In a particular, compounds of the invention may be prepared by the general Scheme 1.
Scheme 1
Figure PCTCN2016097524-appb-000023
In step A of scheme 1, acetate starting material a incorporating ring C is reacted with dimethyl carbonate in presence of a suitable strong base such as potassium t-butoxide to provide dimethyl  malonate intermediate b which is reacted in a suitable solvent such as xylene with intermediate c, 1H-pyrazol-5-amine substiuted with rings A and B, to provide the 5-hydroxy substituted pyrazolopyrimidone intermediate d incorporating rings A, B and C. The 5-hydroxy group is then converted to the chloro intermediate e by reacting with phosphoryl chloride which also converts the 7-keto group to a chloro. The 7-chloro group is converted to a methoxy group in step D by reacting intermediate e with sodium methoxide to give intermediate f which is then aminated at the 5-position of the pyrazolopyrimidone ring in step E by reacting with the amine intermediate g in the presence of a palladium catalyst to give intermediate h. Finally, the 7-methoxy group is hydrolyzed to a ketone in step F to give the final product of formula (I) .
Aminopyrazole intermediate c from scheme 1 may be prepared using standard organic synthetic techniques from commercially available starting materials and reagents. Scheme 2 illustrates a general procedure for preparing the intermediate.
Scheme 2
Figure PCTCN2016097524-appb-000024
Acetonitrile intermediate m incorporating ring A is reacted with ester n incorporating ring B with an appropriate base catalyst such as sodium hexamethyldisilazide to form 3-oxo-propanenitrile intermediate o containing both ring A and ring B. This is then reacted with hydrazine hydrate to form 5-aminopyrazolo intermediate c which may be used in scheme 1 to prepare compounds of the invention.
In an aspect of the invention, there is provided a process for preparing a compound of formula (I)
Figure PCTCN2016097524-appb-000025
wherein ring A, ring B, ring C and R1 are as defined herein, comprising hydrolyzingr a compound of formula h
Figure PCTCN2016097524-appb-000026
There is provided a process for preparing a compound of formula h
Figure PCTCN2016097524-appb-000027
comprising reacting a compound having the formula f
Figure PCTCN2016097524-appb-000028
wherein X is a halogen, with an amine of formula g
Figure PCTCN2016097524-appb-000029
wherein R1 is as defined herein.
In an embodiment, X is Cl. In an embodiment, the reaction is catalyzed with a palladium complex. In an embodiment, the reaction is catalyzed with a palladium-Xantphos complex. In an embodiment, the reaction is catalyzed with Pd (OAc) 2-Xantphos complex. In an embodiment the reaction is performed in dioxane solvent.
In an embodiment, there is provided a process for preparing a compound of formula f
Figure PCTCN2016097524-appb-000030
comprising reacting a compound of formula e
Figure PCTCN2016097524-appb-000031
with sodium methoxide. In an embodiment the reaction is performed in methanol.
In an embodiment, there is provided a process for preparing a compound of formula e
Figure PCTCN2016097524-appb-000032
comprising reacting a compound of formula d
Figure PCTCN2016097524-appb-000033
with phosphoryl chloride. In an embodiment, the reaction is heated.
In an embodiment, there is provided a process for preparing a compound of formula d
Figure PCTCN2016097524-appb-000034
comprising reacting a compound of formula c
Figure PCTCN2016097524-appb-000035
with a compound of formula b
Figure PCTCN2016097524-appb-000036
In an embodiment, there is provided a process for preparing a compound of formula b
Figure PCTCN2016097524-appb-000037
comprising reacting a compound of formula a
Figure PCTCN2016097524-appb-000038
with dimethyl carbonate.
The MAT2A enzyme catalyzes the synthesis of S-adenosyl methionine (SAM) from methionine and ATP in cells. Accordingly, in another aspect of the invention there is provided a method of inhibiting the synthesis of SAM in a cell from methionine and ATP comprising introducing into said cell an effective amount of a compound of formula (I) or a salt thereof. In another aspect of the invention, compounds of formula (I) may be used to identify other compounds that are inhibitors of MAT2A, for example, in a competition assay for binding to MAT2A or for the inhibition of SAM production. Binding to MAT2A or the inhibition of SAM by a test compound  having a detectable label can be measured with and without the presence of an unlabelled compound of the invention.
Overexpression of the enzyme MAT2A has been demonstrated to mediate certain cancers. Accordingly, in an aspect of the invention there is provided a method for treating a cancer mediated by the overexpression of MAT2A comprising contacting said cancer with an effective amount of a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof. In another aspect of the present invention there is provided a method for treating a disease or condition mediated by the overexpression of MAT2A in a mammal, comprising administering to said mammal an effective amount of a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof. In an embodiment, the cancer is neuroblastoma, intestine carcinoma such as rectum carcinoma, colon carcinoma, familiary adenomatous polyposis carcinoma and hereditary non-polyposis colorectal cancer, esophageal carcinoma, labial carcinoma, larynx carcinoma, hypopharynx carcinoma, tong carcinoma, salivary gland carcinoma, gastric carcinoma, adenocarcinoma, medullary thyroidea carcinoma, papillary thyroidea carcinoma, renal carcinoma, kidney parenchym carcinoma, ovarian carcinoma, cervix carcinoma, uterine corpus carcinoma, endometrium carcinoma, chorion carcinoma, pancreatic carcinoma, prostate carcinoma, testis carcinoma, breast carcinoma, urinary carcinoma, melanoma, brain tumors such as glioblastoma, astrocytoma, meningioma, medulloblastoma and peripheral neuroectodermal tumors, Hodgkin lymphoma, non-Hodgkin lymphoma, Burkitt lymphoma, acute lymphatic leukemia (ALL) , chronic lymphatic leukemia (CLL) , acute myeloid leukemia (AML) , chronic myeloid leukemia (CML) , adult T-cell leukemia, hepatocellular carcinoma, gall bladder carcinoma, bronchial carcinoma, small cell lung carcinoma, non-small cell lung carcinoma, multiple myeloma, basalioma, teratoma, retinoblastoma, choroidea melanoma, seminoma, rhabdomyo sarcoma, craniopharyngeoma, osteosarcoma, chondrosarcoma, myosarcoma, liposarcoma, fibrosarcoma, Ewing sarcoma and plasmocytoma. In an embodiment, the cancer is lung cancer, non-small cell lung (NSCL) cancer, bronchioloalviolar cell lung cancer, bone cancer, pancreatic cancer, skin cancer, cancer of the head or neck, cutaneous or intraocular melanoma, uterine cancer, ovarian cancer, rectal cancer, cancer of the anal region, stomach cancer, gastric cancer, colon cancer, breast cancer, uterine cancer, carcinoma of the fallopian tubes, carcinoma of the endometrium, carcinoma of the cervix, carcinoma of the vagina, carcinoma of the vulva, Hodgkin's Disease, cancer of the esophagus, cancer of the small intestine, cancer of the endocrine system, cancer of the thyroid gland, cancer of the parathyroid gland, cancer of the adrenal gland, sarcoma of soft tissue, cancer of the urethra, cancer of the penis, prostate cancer, cancer of the bladder, cancer of the kidney or ureter, renal cell carcinoma, carcinoma of the renal pelvis, mesothelioma, hepatocellular cancer, biliary cancer,  chronic or acute leukemia, lymphocytic lymphomas, neoplasms of the central nervous system (CNS) , spinal axis tumors, brain stem glioma, glioblastoma multiforme, astrocytomas, schwannomas, ependymomas, medulloblastomas, meningiomas, squamous cell carcinomas, pituitary adenomas, including refractory versions of any of the above cancers, or a combination of one or more of the above cancers.
Methylthioadenosine phosphorylase (MTAP) is an enzyme found in all normal tissues that catalyzes the conversion of methylthioadenosine (MTA) into adenine and 5-methylthioribose-1-phosphate. The adenine is salvaged to generate adenosine monophosphate, and the 5-methylthioribose-1-phosphate is converted to methionine and formate. Because of this salvage pathway, MTA can serve as an alternative purine source when de novo purine synthesis is blocked, e.g., with antimetabolites, such as L-alanosine. Many human and murine malignant cells lack MTAP activity. MTAP deficiency is not only found in tissue culture cells but the deficiency is also present in primary leukemias, gliomas, melanomas, pancreatic cancers, non-small cell lung cancers (NSLC) , bladder cancers, astrocytomas, osteosarcomas, head and neck cancers, myxoid chondrosarcomas, ovarian cancers, endometrial cancers, breast cancers, soft tissue sarcomas, non-Hodgkin lymphomas, and mesotheliomas. It has been reported by Marjon et al (Cell Reports, Cell Reports 15, 574–587) , incorporated herein by reference, that proliferation of cancer cells that are MTAP null is inhibited by knocking down MAT2A expression with shRNA which was confirmed using small molecule inhibitors of MAT2A such as those of the present invention. Accordingly, in an embodiment of the invention there is provided a method for treating a cancer in a subject wherein said is characterized by a reduction or absence of MTAP expression or absence of the MTAP gene or reduced function of MTAP protein said method comprising administering to the subject a therapeutically effective amount of a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof. In another embodiment, there is provided a method of treating an MTAP null cancer in a subject comprising administering to the subject an effective amount of a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof. In an embodiment, the MTAP null cancer is leukemia, glioma, melanoma, pancreatic, non-small cell lung cancer (NSLC) , bladder cancer, astrocytoma, osteosarcoma, head and neck cancer, myxoid chondrosarcoma, ovarian cancer, endometrial cancer, breast cancer, soft tissue sarcoma, non-Hodgkin lymphoma or mesothelioma. In an embodiment, the MTAP null cancer is pancreatic cancer. In an embodiment, the MTAP null cancer is bladder cancer, melanoma, brain cancer, lung cancer, pancreatic cancer, breast cancer, esophageal cancer, head and neck cancer, kidney cancer, colon cancer, diffuse large B cell lymphoma (DLBCL) , acute lymphoblastic leukemia (ALL) or mantle cell lymphoma (MCL) . In an embodiment, the MTAP null cancer is pancreatic cancer. In an embodiment, the MTAP null  cancer is gastric cancer. In an embodiment, the cancer is colon cancer. In an embodiment, the MTAP null cancer is liver cancer. In an embodiment, the MTAP null cancer is GBM. In an embodiment, the MTAP null cancer is bladder cancer. In an embodiment, the MTAP null cancer is esophageal cancer. In an embodiment, the MTAP null cancer is breast cancer. In an embodiment, the MTAP null cancer is NSCLC. In an embodiment, the MTAP null cancer is MCL. In an embodiment, the MTAP null cancer is DLBCL. In an embodiment, the MTAP null cancer is ALL.
Genomic analysis of MTAP null cell lines revealed that in cell lines that also incorporate a KRAS mutation or a p53 mutation were sensitive to MAT2A inhibition. Accordingly, the present invention provides a method for treating a cancer in a subject wherein said cancer is characterized by reduction or absence of MTAP expression or absence of the MTAP gene or reduced function of MTAP protein said method comprising administering to the subject a therapeutically effective amount of a compound of formula (I) , wherein said cancer is further characterized by the presence of mutant KRAS or mutant p53. In another aspect of the invention there is provided a method of treating an MTAP null cancer having a mutant KRAS or mutant p53 in a subject comprising administering to the subject an effective amount of a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof. In an embodiment, the cancer is MTAP null and KRAS mutant. In an embodiment, the cancer is MTAP null and p53 mutant. In an embodiment, the cancer is MTAP null, KRAS mutant and p53 mutant. By mutant KRAS, or KRAS mutation, is meant KRAS protein incorporating an activating mutation that alters its normal function and the gene encoding such a protein. For example, a mutant KRAS protein may incorporate a single amino acid substitution at position 12 or 13. In a particular embodiment, the KRAS mutant incorporates a G12X or G13X substitution. In a particular embodiment, the substitution is G12V, G12R, G12C or G13D. In another embodiment, the substitution is G13D. By “mutant p53” or “p53 mutation” is meant p53 protein (or gene encoding said protein) incorporating a mutation that inhibits or eliminates its tumor suppressor function. In an embodiment, said p53 mutation is, Y126_splice, K132Q, M133K, R174fs, R175H, R196*, C238S, C242Y, G245S, R248W, R248Q, I255T, D259V, S261_splice, R267P, R273C, R282W, A159V or R280K. In an embodiment, the foregoing cancer is non-small cell lung cancer (NSCLC) , pancreatic cancer, head and neck cancer, gastric cancer, breast cancer, colon cancer or ovarian cancer.
The compounds may be administered prior to, concomitantly with, or following administration of radiation therapy or cytostatic or antineoplastic chemotherapy. Suitable cytostatic chemotherapy compounds include, but are not limited to (i) antimetabolites, such as cytarabine, fludarabine, 5-fluoro-2‘-deoxyuiridine, gemcitabine, hydroxyurea or methotrexate； (ii) DNA-fragmenting agents, such as bleomycin, (iii) DNA-crosslinking agents, such as chlorambucil, cisplatin, cyclophosphamide or nitrogen mustard； (iv) intercalating agents such as adriamycin (doxorubicin) or mitoxantrone； (v) protein synthesis inhibitors, such as L-asparaginase, cycloheximide, puromycin or diphtheria toxin； (Vi) topoisomerase I poisons, such as camptothecin or topotecan； (vii) topoisomerase II poisons, such as etoposide (VP-16) or teniposide； (viii) microtubule-directed agents, such as colcemid, colchicine, paclitaxel, vinblastine or vincristine； (ix) kinase inhibitors such as flavopiridol, staurosporin, STI571 (CPG 57148B) or UCN-01 (7-hydroxystaurosporine) ； (x) miscellaneous investigational agents such as thioplatin, PS-341, phenylbutyrate, ET-18-OCH3, or farnesyl transferase inhibitors (L-739749, L-744832) ； polyphenols such as quercetin, resveratrol, piceatannol, epigallocatechine gallate, theaflavins, flavanols, procyanidins, betulinic acid and derivatives thereof； (xi) hormones such as glucocorticoids or fenretinide； (xii) hormone antagonists, such as tamoxifen, finasteride or LHRH antagonists. In a particular embodiment, compounds of the present invention are coadministered with a cytostatic compound selected from the group consisting of cisplatin, doxorubicin, taxol, taxotere and mitomycin C. In a particular embodiment, the cytostatic compound is doxorubicin. In another embodiment, compounds of the invention may be used alone as an immuno-oncology therapy or in combination with an immuno-oncology therapy. In an embodiment, the compound of the invention is administered prior to, concomitantly with, or following administration of an immune checkpoint inhibitor. In an embodiment, the checkpoint inhibitor is a PD-1 inhibitor. In an embodiment, the checkpoint inhibitor is a PD-L1 inhibitor. In an embodiment, the checkpoint inhibitor is ipilimumab. In an embodiment, the checkpoint inhibitor is pembrolizumab. In an embodiment, the checkpoint inhibitor is nivolumab. In an embodiment, the checkpoint inhibitor is atezolizumab.
The compounds of the present invention can be also used in combination with radiation therapy. The phrase "radiation therapy" refers to the use of electromagnetic or particulate radiation in the treatment of neoplasia. Radiation therapy is based on the principle that high-dose radiation delivered to a target area will result in the death of reproducing cells in both tumor and normal tissues. The radiation dosage regimen is generally defined in terms of radiation absorbed dose (rad) , time and fractionation, and must be carefully defined by the oncologist. The amount of radiation a patient receives will depend on various consideration but the two most important considerations are the location of the tumor in relation to other critical structures or organs of the body, and the extent  to which the tumor has spread. Examples of radiotherapeutic agents are provided in, but not limited to, radiation therapy and is known in the art (Hellman, Principles of Radiation Therapy, Cancer, in Principles I and Practice of Oncology, 24875 (Devita et al., 4th ed., vol 1, 1993) . Recent advances in radiation therapy include three-dimensional conformal external beam radiation, intensity modulated radiation therapy (IMRT) , stereotactic radiosurgery and brachytherapy (interstitial radiation therapy) , the latter placing the source of radiation directly into the tumor as implanted "seeds" . These newer treatment modalities deliver greater doses of radiation to the tumor, which accounts for their increased effectiveness when compared to standard external beam radiation therapy. Ionizing radiation with beta-emitting radionuclides is considered the most useful for radiotherapeutic applications because of the moderate linear energy transfer (LET) of the ionizing particle (electron) and its intermediate range (typically several millimeters in tissue) . Gamma rays deliver dosage at lower levels over much greater distances. Alpha particles represent the other extreme, they deliver very high LET dosage, but have an extremely limited range and must, therefore, be in intimate contact with the cells of the tissue to be treated. In addition, alpha emitters are generally heavy metals, which limits the possible chemistry and presents undue hazards from leakage of radionuclide from the area to be treated. Depending on the tumor to be treated all kinds of emitters are conceivable within the scope of the present invention. Furthermore, the present invention encompasses types of non-ionizing radiation like e.g. ultraviolet (UV) radiation, high energy visible light, microwave radiation (hyperthermia therapy) , infrared (IR) radiation and lasers. In a particular embodiment of the present invention UV radiation is applied.
The invention also includes pharmaceutical compositions or medicaments containing the compounds of the invention and a pharmaceutically acceptable carrier, as well as methods of using the compounds of the invention to prepare such compositions and medicaments. Typically, the compounds of formula (I) used in the methods of the invention are formulated by mixing at ambient temperature at the appropriate pH, and at the desired degree of purity, with physiologically acceptable carriers, i.e., carriers that are non-toxic to recipients at the dosages and concentrations employed into a galenical administration form. The pH of the formulation depends mainly on the particular use and the concentration of compound, but may range anywhere from about 3 to about 8. Formulation in an acetate buffer at pH 5 is a suitable embodiment. In an embodiment, the inhibitory compound for use herein is sterile. The compound ordinarily will be stored as a solid composition, although lyophilized formulations or aqueous solutions are acceptable.
In another embodiment, pharmaceutical compositions of the invention may comprise a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and one or more  polymer (s) as part of a solid dispersion (e.g., an amorphous solid dispersion) . In an embodiment, the solid dispersion further comprises one or more surfactants. In an embodiment, the pharmaceutical composition comprising a compound of the invention is a solid spray-dried disperson. Pharmaceutical compositions comprising solid dispersions of a compound of the invention in a matrix may provide improved chemical and physical properties and can be prepared by forming a homogeneous solution or melt of the compound of the invention and matrix material followed by solidifying the mixture by cooling, or removal of the solvent. Such solid dispersions may show enhanced bioavailability when administered orally relative to oral compositions comprising the undispersed compound. A dispersion refers to a disperse system in which one substance, the dispersed phase, is distributed, in discrete units, throughout a second substance (the continuous phase or vehicle) . The size of the dispersed phase can vary considerably (e.g., colloidal particles of nanometer dimension, to multiple microns in size) . In general, the dispersed phases can be solids, liquids, or gases. In the case of a solid dispersion, the dispersed and continuous phases are both solids. In pharmaceutical applications, a solid dispersion can include a crystalline therapeutically active compound (dispersed phase) in an amorphous polymer (s) (continuous phase) , or alternatively, an amorphous therapeutically active compound (dispersed phase) in an amorphous polymer (continuous phase) . An amorphous solid dispersion generally refers to a solid dispersion of two or more components, such as a compound of the invention and polymer (or plurality of polymers) , but possibly containing other components such as surfactants or other pharmaceutical excipients, where the compound of the invention is in the amorphous phase. In some embodiments, an amorphous solid dispersion includes the polymer (s) (and optionally a surfactant) constituting the dispersed phase, and the compound of the invention constitutes the continuous phase. In some embodiments, an amorphous solid dispersion includes the polymer (s) (and optionally a surfactant) constituting the continuous phase, and the compound of the invention constitutes the dispersed phase.
An exemplary solid dispersion is a co-precipitate or a co-melt of a compound of the invention with one or more polymer (s) . A "co-precipitate" is produced after dissolving a compound of the invention and one or more polymers in a solvent or solvent mixture followed by the removal of the solvent or solvent mixture. Sometimes the one or more polymers can be suspended in the solvent or solvent mixture. The solvent or solvent  mixture includes organic solvents and supercritical fluids. The solvent or solvent mixture can also contain a non-volatile solvent. A "co-melt" is produced after heating a compound of the invention and one or more polymers to melt, optionally in the presence of a solvent or solvent mixture, followed by mixing, removal of at least a portion of the solvent if applicable, and cooling to room temperature at a selected rate. In some cases, solid dispersions are prepared by adding a solution of a therapeutically active compound and solid polymers followed by mixing and removal of the solvent or solvent mixture. To remove the solvent or solvent mixture, vacuum drying, spray drying, tray drying, lyophilization, and other drying procedures may be applied. Applying any of these methods using appropriate processing parameters, according to this disclosure, would provide the particular therapeutically active compound in an amorphous state in the final solid dispersion product.
The composition of the invention will be formulated, dosed, and administered in a fashion consistent with good medical practice. Factors for consideration in this context include the particular disorder being treated, the particular mammal being treated, the clinical condition of the individual patient, the cause of the disorder, the site of delivery of the agent, the method of administration, the scheduling of administration, and other factors known to medical practitioners. The “effective amount” of the compound to be administered will be governed by such considerations, and is the minimum amount necessary to inhibit MAT2A activity. Such amount may be below the amount that is toxic to normal cells, or the mammal as a whole. Generally, the initial pharmaceutically effective amount of the compound of the invention administered parenterally per dose will be in the range of about 0.01-2000 mg/kg, for example about 0.1 to 20 mg/kg of patient body weight per day, with the typical initial range of compound used being 0.3 to 15 mg/kg/day. Oral unit dosage forms, such as tablets and capsules, may contain from about 25 to about 200 mg of the compound of the invention.
The compound of the invention may be administered by any suitable means, including oral, topical, transdermal, parenteral, subcutaneous, intraperitoneal, intrapulmonary, and intranasal, and, if desired for local treatment, intralesional administration. Parenteral infusions include intramuscular, intravenous, intraarterial, intraperitoneal, or subcutaneous administration. An example of a suitable oral dosage form is a tablet containing about 1mg, 2mg, 5mg, 10gm, 15mg 25mg, 50mg, 100mg, 250mg, 500mg, 750mg, 1000mg, 1250mg, 1500mg, 1750mg or 2000mg of the compound of the invention compounded with about 90-30 mg anhydrous lactose, about 5-40 mg sodium  croscarmellose, about 5-30mg polyvinylpyrrolidone (PVP) K30, and about 1-10 mg magnesium stearate. The powdered ingredients are first mixed together and then mixed with a solution of the PVP. The resulting composition can be dried, granulated, mixed with the magnesium stearate and compressed to tablet form using conventional equipment. An aerosol formulation can be prepared by dissolving the compound, for example 5-400 mg, of the invention in a suitable buffer solution, e.g. a phosphate buffer, adding a tonicifier, e.g. a salt such sodium chloride, if desired. The solution is typically filtered, e.g. using a 0.2 micron filter, to remove impurities and contaminants. 
EXAMPLES
The invention will be more fully understood by reference to the following examples. They should not, however, be construed as limiting the scope of the invention. Reagents and solvents were obtained from commercial sources and used as received.
Abbreviations list:
anhy.         anhydrous
aq.           aqueous
min           minute (s)              -Spectrum
mL            milliliter
mmol          millimole (s)
mol           mole (s)
MS            mass spectrometry
NMR           nuclear magnetic resonance
TLC           thin layer chromatography
HPLC          high-performance liquid chromatography
RT(r.t. )     room temperature
Spectrum:
Hz            hertz
δ            chemical shift
J             coupling constant
s             singlet
d             doublet
t             triplet
q            quartet
m            multiplet
br           broad
qd           quartet of doublets
dquin        doublet of quintets
dd           doublet of doublets
dt           doublet of triplets
Solvents and Reagents:
CHCl3        chloroform
DCM          dichloromethane
DMF          dimethylformamide
Et2O         diethyl ether
EtOH         ethyl alcohol
EtOAc        ethyl acetate
EA           ethyl acetate
MeOH         methyl alcohol
MeCN         acetonitrile
PE           petroleum ether
THF          tetrahydrofuran
AcOH         acetic acid
HCl          hydrochloric acid
H2SO4        sulfuric acid
NH4Cl        ammonium chloride
KOH          potassium hydroxide
NaOH         sodium hydroxide
K2CO3        potassium carbonate
Na2CO3       sodium carbonate
TFA          trifluoroacetic acid
Na2SO4       sodium sulfate
NaBH4        sodium borohydride
NaHCO3       sodium bicarbonate
LiHMDS       lithium hexamethyldisilylamide
NaHMDS       sodium hexamethyldisilylamide
LAH          lithium aluminum hydride
NaBH4        sodium borohydride
LDA          lithium diisopropylamide
Et3N         triethylamine
DMAP         4- (dimethylamino) pyridine
DIPEA        N, N-diisopropylethylamine
NH4OH        ammonium hydroxide
EDCI         1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide
HOBt         1-hydroxybenzotriazole
HATU         O- (7-azabenzotriazol-1-yl) -N, N, N', N'-tetra-methyluronium
Xphos        2-Dicyclohexylphosphino-2′, 4′, 6′-triisopropylbiphenyl
BINAP        2, 2’ -bis (diphenylphosphanyl) -1, 1’ -binaphthyl
Example 1 Synthesis of Compounds
General experimental notes:
In the following examples, the reagents (chemicals) were purchased from commercial sources (such as Alfa, Acros, Sigma Aldrich, TCI and Shanghai Chemical Reagent Company) , and used without further purification. Flash chromatography was performed on an Ez Purifier III using column with silica gel particles of 200-300 mesh. Analytical and preparative thin layer chromatography (TLC) plates were HSGF 254 (0.15-0.2 mm thickness, Shanghai Anbang Company, China) . Nuclear magnetic resonance (NMR) spectra were obtained on a Brucker AMX-400 NMR (Brucker, Switzerland) . Chemical shifts were reported in parts per million (ppm, δ) downfield from tetramethylsilane. Mass spectra were given with electrospray ionization (ESI) from a Waters LCT TOF Mass Spectrometer (Waters, USA) . HPLC chromatographs were record on an Agilent 1200 Liquid Chromatography (Agilent, USA, column: Ultimate 4.6mmx50mm, 5μm, mobile phase A: 0.1％formic acid in water； mobile phase B: acetonitrile) . Microwave reactions were run on an Initiator 2.5 Microwave Synthesizer (Biotage, Sweden) .
Compound 101
6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-5- (pyridazin-3-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000039
Step A: Dimethyl 2- (4-methoxyphenyl) malonate
Figure PCTCN2016097524-appb-000040
To dimethyl carbonate (3.2L) was added slowly t-BuOK (500 g) at 0 ℃ and the mixture was stirred for 1 h at room temperature. Then methyl 2- (4-methoxyphenyl) acetate (400 g) was added dropwise over 2 h and stirred at room temperature overnight. The reaction was quenched with water (1.5 L) , followed by extraction with EA (1L*3) . The combined organic layers was washed with brine (1L) , dried over anhydrous Na2SO4, and concentrated in vacuo. The residue was purified by flash chromatography eluting with PE/EA (20/1～5/1) to obtain the desired product as white solid (400g) .
1H NMR (CHLOROFORM-d) : δ 7.33 (d, J ＝ 8.6 Hz, 2H) , 6.90 (d, J ＝ 8.9 Hz, 2H) , 4.61 (s, 1H) , 3.80 (s, 3H) , 3.75 (s, 6H) .
Step B:
5-hydroxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000041
The mixture of 3, 4-diphenyl-1H-pyrazol-5-amine 8 (470g, 2mol) and dimethyl-2- (4-methoxyphenyl) -malonate 2 (571g, 2.4mol, 1.2 eq. ) in xylene (5 L) was refluxed for 18h. The white precipitate was filtered off and washed with DCM (5L) to afford the title compound as white solid (610g) which was used in the next step without further purification.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 11.57 (br. s, 1H) , 7.26 -7.49 (m, 12H) , 6.90 -6.99 (m, 2H) , 3.78 (s, 3H) . LC-MS: m/z 410.2 (M+H) +.
Step C: 5, 7-dichloro-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine
Figure PCTCN2016097524-appb-000042
The 6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine-5, 7 (4H, 6H) -dioxane (300g, 0.73mol) and phosphorus oxychloride (1200 mL, 12.90mol) were added into a 2L bottle. The reaction mixture was stirred at 100 ℃ for 16 h. TLC indicated that the reaction was complete. The solvent and volatile were removed in vacuo and the residue was dissolved in DCM (500 mL) . The mixture was added dropwise into the MeOH (2500 mL) at 0 ℃. A yellow suspension formed during the course of addition. The mixture was stirred at RT for 2h and the precipitate was collected by filtration and dried in vacuo to give desired product as yellow solid (290g) which was used in the next step without further purification. LC-MS: m/z 446.1, 448.1 (M+H) +.
Step D: 5-chloro-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine
Figure PCTCN2016097524-appb-000043
The 5, 7-dichloro-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine 4 (1.78 kg, 4 mol) and DCM (20 L) were added into the 30L reactor. The mixture was cooled to -10 ℃. The sodium methoxide (1.48L, 8mol, 30％in MeOH) was dropwise such that the internal temperature is maintained below 0 ℃. The reaction mixture was stirred at RT for 2h. TLC indicated that the reaction was completed. The ice water (10L) was added and the reaction mixture was stirred at RT for 1h. The organic layer was collected and the aqueous layer was extracted with DCM (5L*1) . The combined organic layers were dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated. The residue was dissolved in DCM (15L) and the MeOH (60L) was added. The turbid liquid was stirred at RT for 3h and the precipitate was collected by filtration and dried in vacuo to give the title Intermediate 5 as a yellow solid (1.35 kg) .
1H NMR (CHLOROFORM-d) : δ 7.66 -7.73 (m, 2H) , 7.53 -7.61 (m, 2H) , 7.30 -7.46 (m, 8H) , 7.00 -7.09 (m, 2H) , 4.16 (s, 3H) , 3.92 (s, 3H) . LC-MS: m/z 442.1 (M+H) +.
Step E: 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-N- (pyridazin-3-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000044
A suspension of Intermediate 5, 5-chloro-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine, (600 mg, 1.36 mmol) , 3-aminopyridazine (258 mg, 2.72 mmol, 2 eq. ) , Pd (OAc) 2 (61 mg, 0.27 mmol, 0.2 eq. ) , Xantphos (197 mg, 0.34 mmol, 0.25 eq. ) and Cs2CO3 (890 mg, 2.72 mmol, 2.0 eq. ) in 1.4-dioxane (5 mL) was stirred at 120 ℃ through microwave  irradiation for 1 hour under N2 atmosphere. The mixture was filtered through celite and the filtrate was concentrated in vacuo. The residue was purified by flash chromatography to afford the desired product 6 as a yellow solid. LC-MS: m/z 501.0 (M+H) +.
Step F: 6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-5- (pyridazin-3-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000045
A solution of Intermediate 6 (360 mg, 0.72 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (5 mL) was stirred at r.t. for 2 hours. Solvent and volatile were removed in vacuo. The residue was dissolved in DCM (5 mL) and treated with aq saturated NaHCO3. The organic phase was separated and washed with brine, dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated in vacuo. The residue was purified to afford the desired product 7 as a yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 15.25 (br. s., 1H) , 9.21 (br. s., 1H) , 8.86 (br. s., 1H) , 7.63 (br. s., 2H) , 7.44 -7.58 (m, 4H) , 7.28 -7.44 (m, 8H) , 7.05 (d, J ＝ 8.6 Hz, 2H) , 3.82 (s, 3H) . LC-MS: m/z 486.9 (M+H) +.
The following compounds were prepared according to the procedure for compound 101, step E and F, starting from intermediate 5 therein. Step E was performed using appropriate amine 9, base (Cs2CO3, K2CO3, Na2CO3, and etc. ) and catalyst/ligand under microwave or thermal heating, in 1, 4-dioxane unless otherwise noted. Step F was performed using 5 mL of 4M HCl in dioxane unless otherwise noted. Purifications were performed using the methods used in Example 1, unless otherwise noted.
Compound 102
6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-5- (pyridin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000046
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (500 mg, 1.13 mmol) , pyridin-2-amine (213 mg, 2.26 mmol) , Pd (OAc) 2 (50 mg, 0.23 mmol) , xantphos (165 mg, 0.28 mmol) , and Na2CO3 (240 mg, 2.26 mmol) in 1, 4-dioxane (10 mL) under heating at 100 ℃ for 4h under N2. LC-MS: m/z 500.0 (M+H) +.
Step F: 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-N- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (300 mg, 0.6 mmol) was dissolved in HCl/1, 4-dioxane (5 mL) . The solution was stirred at r.t. overnight. The precipitate was filtered off and washed with CH2Cl2 (3*1 mL) to give a yellow solid. The solid was then dissolved in CH2Cl2/MeOH (10/1, 3 mL) . After 3 mL of NH3-MeOH was added, the solution was stirred at r.t. overnight. The precipitate was filtered off and washed with H2O (3*3 mL) and MeOH (3*1 mL) , and dried in vacuo to give the title compound as a light yellow solid.
1H NMR (TRIFLUOROACETIC ACID-d) : δ 8.05 -8.15 (m, 1H) , 7.79 (d, J ＝ 5.6 Hz, 1H) , 7.59 (d, J ＝ 7.2 Hz, 2H) , 7.46 -7.56 (m, 6H) , 7.36 -7.46 (m, 4H) , 7.25 -7.34 (m, 2H) , 7.16 (d, J ＝8.8 Hz, 2H) , 3.97 (s, 3H) . LC-MS: m/z 486.2 (M+H) +.
Compound 103
6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-5- (pyridin-3-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000047
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (500 mg, 1.13 mmol) , pyridin-3-amine (117 mg, 1.24 mmol) , Pd (OAc) 2 (25 mg, 0.113 mmol) , xantphos (131 mg, 0.226 mmol) , Cs2CO3 (737 mg, 2.26 mmo) in dioxane (20 mL) under heating to 110 ℃ for 4h under N2. LC-MS: m/z 500.2 (M+H) +.
Step F: To a solution of 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-N- (pyridin-3-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (150 mg, 0.309 mmol) in MeOH (10 mL) was added 4N HCl solution in dioxane (10 mL) . The reaction mixture was heated to 50 ℃ for 2h. The mixture was concentrated in vacuo. The residue was suspended in saturated NaHCO3 solution. The solid was collected by filtration to give the desired product 6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-5- (pyridin-3-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 8.48 (br. s., 1H) , 8.30 (br. s., 1H) , 8.10 (d, J ＝ 4.6 Hz, 1H) , 7.71 (br. s., 1H) , 7.46 (br. s., 3H) , 7.14 -7.41 (m, 11H) , 6.93 (d, J ＝ 8.1 Hz, 2H) , 3.76 (s, 3H) . LC-MS: m/z 486.2 (M+H) +.
Compound 104
6- ( (6- (4-methoxyphenyl) -7-oxo-2, 3-diphenyl-4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) nicotinonitrile
Figure PCTCN2016097524-appb-000048
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (300 mg, 0.68 mmol) , 6-aminonicotinonitrile (161.7 mg, 1.36 mmol) , palladium diacetate (30.5 mg, 0.14 mmol) , Xantphos (117.8 mg, 0.20 mmol) and Cesium carbonate (553.0 mg, 1.70 mmol) in 1, 4-dioxane (10 mL) under heating to 110 ℃ for 12 hours under nitrogen atmosphere. LC-MS: m/z 525.2 (M+H) +.
Step F: The solution of 6- ( (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) nicotinonitrile (40 mg, 0.07 mmol) in HCl solution (1.0 M in 1, 4-dioxane, 6 mL) was stirred at room temperature for 12 hours. The mixture was concentrated, and NH4OH (5 mL) was added thereto. The precipitate was filtered, washed with water (10 mL) and dried to obtain 6- ( (6- (4-methoxyphenyl) -7-oxo-2, 3-diphenyl-4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) nicotinonitrile as a yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 14.21 (br. s., 1H) , 9.53 (s, 1H) , 8.53 (d, J ＝ 2.1 Hz, 1H) , 8.11 (dd, J ＝8.9, 2.1 Hz, 1H) , 7.50 -7.62 (m, 4H) , 7.36 -7.45 (m, 6H) , 7.29 -7.36 (m, 3H) , 7.03 (d, J ＝ 8.6 Hz, 2H) , 3.82 (s, 3H) . LC-MS: m/z 511.3 (M+H) +.
Compound 105
5- ( (5-fluoropyridin-2-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000049
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (220 mg, 0.5mmol) , 5-fluoropyridin-2-amine (112 mg, 1.0 mmol) , Pd (OAc) 2 (56 mg, 0.25 mmol) , xantphos (173 mg, 0.3 mmol) , Cs2CO3 (117 mg, 1.1mmo) in dioxane (20 mL) under heating to 100 ℃ for 4h under N2. LC-MS: m/z 518.2 (M+H) +.
Step F: To a solution of N- (5-fluoropyridin-2-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (50 mg, 0.10 mmol) in MeOH (10 mL) was added 4N HCl solution in dioxane (10 mL) . The reaction mixture was heated to 50 ℃ for 2h. The mixture was concentrated in vacuo. The residue was suspended in saturated NaHCO3 solution. The solid was collected by filtration to give the desired product 5- ( (5-fluoropyridin-2-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 14.87 (br. s., 1H) , 9.08 (s, 1H) , 7.94 -8.07 (m, 1H) , 7.71 -7.88 (m, 1H) , 7.50 -7.64 (m, 4H) , 7.38 -7.44 (m, 6H) , 7.29 -7.35 (m, J ＝ 8.5 Hz, 2H) , 6.99 -7.10 (m, J ＝ 8.5 Hz, 2H) , 3.83 (s, 3H) . LC-MS: m/z 503.9 (M+H) +.
Compound 106
5- ( (5-chloropyridin-2-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000050
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (200 mg, 0.45 mmol) , 5-chloropyridin-2-amine (135 mg, 0.9 mmol) , Pd (OAc) 2 (51 mg, 0.23 mmol) , xantphos (156 mg, 0.27 mmol) , and Na2CO3 (105 mg, 0.9 mmol) in 1, 4-dioxane (5 mL) under heating at 100 ℃ for 16h under N2. LC-MS: m/z 533.9, 535.9 (M+H) +.
Step F: N- (5-chloropyridin-2-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (80 mg, 0.15 mmol) was dissolved in HCl-1, 4-dioxane (5 mL) . The solution was stirred at r.t. overnight. The precipitate was filtered off and washed with CH2Cl2 (3 mL) to give a yellow solid. The solid was then dissolved in CH2Cl2/MeOH (10/1, 2 mL) . After 1 mL of NH3-MeOH was added, the solution was stirred at r.t. overnight. The precipitate was filtered off and washed with H2O (3 mL) and MeOH (3 mL) , and dried in vacuo to give the title compound 7 as a light yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 14.72 (s, 1H) , 9.16 (s, 1H) , 8.01 (s, 1H) , 7.88 (d, J ＝ 9.2 Hz, 1H) , 7.49 -7.66 (m, 4H) , 7.40 (d, J ＝ 7.2 Hz, 9H) , 7.32 (d, J ＝ 8.2 Hz, 2H) , 7.04 (d, J ＝ 8.2 Hz, 2H) , 3.82 (s, 3H) . LC-MS: m/z 519.9, 521.9 (M+H) + .
Compound 107
6- (4-methoxyphenyl) -5- ( (5-nitropyridin-2-yl) amino) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000051
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (500mg, 1.13mmol) and 5-nitropyridin-2-amine (472mg, 3.39 mmol, 3 eq) and Pd (OAc) 2 (51 mg, 0.23 mmol, 0.2 eq) , Xantphos (262mg, 0.45 mmol, 0.4 eq) and Na2CO3 (360 mg, 3.394 mmol, 3 eq) in 1.4-dioxane (10 mL) was stirred and warmed up to 100 ℃ under microwave irradiation for 1 hours under N2 atmosphere.
1H NMR (DMSO-d6) δ 9.03 (d, J ＝ 2.7 Hz, 1H) , 8.55 -8.66 (m, 2H) , 8.12 (s, 1H) , 7.58 -7.65 (m, 2H) , 7.43 -7.54 (m, 9H) , 7.31 -7.36 (m, 1H) , 7.19 (d, J ＝ 8.5 Hz, 2H) , 4.16 (s, 3H) , 3.87 (s, 3H) . LC-MS: m/z 545.2 (M+H) +.
Step F: A solution of 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -N- (5-nitropyridin-2-yl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (50 mg, 0.092 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (10 mL) was stirred at room temperature for 3 hours. The reaction mixture was concentrate in vacuo, The residue was dissolved in 7N amine in methanol and stirred at room temperature for 2h. The mixture was concentrated in vacuo. The resultant solid was washed with water to give 6- (4-methoxyphenyl) -5- ( (5-nitropyridin-2-yl) amino) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one. 1H NMR (DMSO-d6) δ: 13.95 (br. s., 1 H) , 9.82 -9.91 (m, 1 H) , 8.85 (br. s., 1 H) , 8.45 (br. s., 1 H) , 7.54 (dd, J＝6.18, 2.96 Hz, 4 H) , 7.37 -7.45 (m, 5 H) , 7.33 (m, J＝8.86 Hz, 2 H) , 7.02 (m, J＝8.60 Hz, 2 H) , 3.81 (s, 3 H) . LC-MS: m/z 531.0 (M+H) +.
Compound 108
5- (5-hydroxypyridin-2-ylamino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000052
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (160 mg, 0.362 mmol) , 5- (tert-butyldimethylsilyloxy) pyridin-2-amine (162 mg, 0.724 mmol) , palladium (II) acetate (16 mg, 0.0724 mmol) , xantphos (84 mg, 0.145 mmol) and sodium carbonate (77 mg, 0.724 mmol) in 1.4-dioxane (10 mL) under heating to reflux for 4 hours under nitrogen atmosphere. LC-MS: m/z 630.3 (M+H) +.
Step F: A mixture of N- (5- (tert-butyldimethyl -silyloxy) pyridin-2-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (80 mg, 0.127 mmol) and HCl solution (4N in dioxane, 10 mL) was stirred at room temperature for 6 h. Then conc. HCl (0.5 mL) was added into the mixture. The resulting mixture was stirred at the same temperature for 4 h. The mixture was quenched with ammonia solution (7N in methanol) to pH 7 and concentrated to dryness. The crude was washed with water and methanol to afford 5- (5-hydroxypyridin-2-ylamino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one as a white solid.
1H NMR (TFA-d) : δ 7.71-7.80 (m, 1 H) , 7.57 (d, J＝7.32 Hz, 2 H) , 7.44-7.54 (m, 7 H) 7.30-7.43 (m, 4 H) , 7.18 (d, J＝9.46 Hz, 1 H) , 7.13 (d, J＝8.54 Hz, 2 H) , 3.94 (s, 3 H) . LC-MS: m/z 502.4 (M+H) +.
Compound 109
5- ( (4-hydroxypyridin-2-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000053
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (80 mg, 0.18 mmol) and 2-aminopyridin-4-ol (30 mg, 0.27 mmol, 1.5 eq) and Pd (OAc) 2 (6.1 mg, 0.03 mmol, 0.15 eq) , Xantphos (15.7 mg, 0.03 mmol, 0.15 eq) and Cs2CO3 (120 mg, 0.36 mmol, 2.0 eq) in 1.4-dioxane (3 mL) at 110℃for 1h under microwave raditation under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 516.0 (M+H) +.
Step F: A solution of 2- ( (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) pyridin-4-ol (40 mg, 0.08 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (10 mL) was stirred at 30 ℃ for 2 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuum. The residue was purified to obtain the title compound as a white solid.
1H NMR (CHLOROFORM-d) : δ 7.66 (s, 1H) , 7.57 (d, J ＝ 7.2 Hz, 2H) , 7.54 –7.44 (m, 6H) , 7.44 –7.34 (m, 4H) , 7.11 (s, 2H) , 6.72 (m, 2H) , 3.99 (s, 1H) , 3.94 (s, 3H) . LC-MS: m/z 502.0 (M+H) +.
Compound 110
5- ( (6-fluoropyridin-2-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000054
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (200 mg, 0.45 mmol) , 6-fluoropyridin-2-amine (101 mg, 0.9 mmol) , Pd (OAc) 2 (20 mg, 0.09 mmol) , xantphos (65 mg, 0.11 mmol) , and Cs2CO3 (293 mg, 0.9 mmol) in 1, 4-dioxane (5 mL) under heating at 100 ℃ for 16h under N2. LC-MS: m/z 518.1 (M+H) +.
Step F: N- (6-fluoropyridin-2-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (120 mg, 0.23 mmol) was dissolved in HCl-1, 4-dioxane (5 mL) . The solution was stirred at r.t. overnight. The precipitate was filtered off and washed with CH2Cl2 (3 mL) to give a yellow solid. The solid was then dissolved in CH2Cl2/MeOH (10/1, 2 mL) . After 1 mL of NH3-MeOH was added, the solution was stirred at r.t. overnight. The precipitate was filtered off and washed with H2O (3 mL) and MeOH (3 mL) , and dried in vacuo to give the title compound 7 as a light yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 13.33 (s, 1H) , 9.16 (s, 1H) , 7.86 (q, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.54-7.48 (m, 2H) , 7.34 -7.48 (m, 8H) , 7.32 (d, J ＝ 8.6 Hz, 2H) , 7.09 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.03 (d, J ＝ 8.6 Hz, 2H) , 6.73 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 3.81 (s, 3H) . LC-MS: m/z 503.9 (M+H) + .
Compound 111
6- ( (6- (4-methoxyphenyl) -7-oxo-2, 3-diphenyl-4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) picolinonitrile
Figure PCTCN2016097524-appb-000055
Compound 112 6- ( (6- (4-methoxyphenyl) -7-oxo-2, 3-diphenyl-4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) picolinamide
Figure PCTCN2016097524-appb-000056
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (800 mg, 1.8 mmol) and 6-aminopicolinonitrile (281 mg, 2.36 mmol, 1.3 eq) and Pd (OAc) 2 (61.2 mg, 0.27 mmol, 0.15 eq) , Xantphos (157.4 mg, 0.27 mmol, 0.15 eq) and Cs2CO3 (1.2 g, 3.63 mmol, 2.0 eq) in 1.4-dioxane (15 mL) at 110℃ for 1h under microwave irradiation under N2 atmosphere. . LC-MS: m/z 524.9 (M+H) +.
Step F: A solution of 6- ( (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) picolinonitrile (220 mg, 0.42 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (10 mL) was stirred at 30 ℃ for 5 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuum. The residue was purified to obtain the title compounds 6- ( (6- (4-methoxyphenyl) -7-oxo-2, 3-diphenyl-4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) picolinonitrile as a white solid and 6- ( (6- (4-methoxyphenyl) -7-oxo-2, 3-diphenyl-4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) picolinamide as a white solid.
6- ( (6- (4-methoxyphenyl) -7-oxo-2, 3-diphenyl-4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) picolinonitrile
1H NMR (DMSO-d6) δ: 12.69 (s, 1H) , 9.31 (s, 1H) , 7.87 (dd, J ＝ 8.8, 7.6 Hz, 1H) , 7.60 (d, J ＝7.2 Hz, 1H) , 7.54 –7.45 (m, 4H) , 7.44 –7.34 (m, 7H) , 7.32 (d, J ＝ 8.8 Hz, 2H) , 7.01 (d, J ＝ 8.8 Hz, 2H) , 3.80 (s, 3H) . LC-MS: m/z 510.9 (M+H) +.
6- ( (6- (4-methoxyphenyl) -7-oxo-2, 3-diphenyl-4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) picolinamide
1H NMR (DMSO-d6) δ: 12.42 (s, 1H) , 9.00 (s, 1H) , 7.97 (s, 1H) , 7.79 (t, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.55 –7.43 (m, 4H) , 7.37 (m, 10H) , 7.19 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.00 (d, J ＝ 8.4 Hz, 2H) , 3.79 (s, 3H) . LC-MS: m/z 529.0 (M+H) +.
Compound 113
5- (3-hydroxypyridin-2-ylamino) -6- (4-methoxy-phenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000057
A suspension of Intermediate 5 (200 mg, 0.452 mmol) , 3- (tert-butyl-dimethylsilyloxy) pyridin-2-amine (202 mg, 0.904 mmol) , palladium (II) acetate (31 mg, 0.136 mmol) , xantphos (157 mg, 0.272 mmol) and sodium carbonate (96 mg, 0.904 mmol) in 1.4-dioxane (10 mL) was stirred and heated to reflux for 4 hours under nitrogen atmosphere. The reaction was then cooled to room temperature and filtered. The filtrate was concentrated in vacuum. The residue was mixed with dichloromethane. The precipitate was filtered and washed with dichloromethane to afford 5- (3-hydroxypyridin-2-ylamino) -6- (4-methoxy-phenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one as a grey solid.
1H NMR (TFA-d) : δ 8.33 (d, J＝8.33 Hz, 1 H) , 7.99 (d, J＝5.10 Hz, 1 H) , 7.56 -7.71 (m, 8 H) , 7.48 -7.54 (m, 4 H) , 7.42 (dd, J＝8.33, 5.91 Hz, 1 H) , 7.34 (d, J＝8.60 Hz, 2 H) , 4.10 (s, 3 H) . LC-MS: m/z 502.4 (M+H) +.
Compound 114
2- (6- (4-methoxyphenyl) -7-oxo-2, 3-diphenyl-4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-ylamino) isonicotinonitrile
Figure PCTCN2016097524-appb-000058
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (200 mg, 0.452 mmol) and 2-aminoisonicotinonitrile (108 mg, 0.9 mmol) and Pd (OAc) 2 (102 mg, 0.434 mmol) , Xantphos (315 mg, 0.54 mmol) and Cs2CO3 (327 mg, 1.0 mmol) in 1.4-dioxane (10 mL) under heating to 110 ℃ for 1 hour through microwave irradiation under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 525.2 (M+H) +.
Step F: A mixture of 2- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-ylamino) isonicotinonitrile (15 mg, 0.03 mmol) in HCl solution (4 M in dioxane, 1 mL) was stirred at room temperature overnight. The mixture was quenched with NH3 solution (7M in methanol) to pH 7-8 and then evaporated to dryness. The crude was purified to afford 6- (4-methoxyphenyl) -5- (2-methoxypyrimidin-4-ylamino) -2, 3-diphenyl pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 8.25 (d, J＝5.37 Hz, 1 H) , 7.77 (s, 1 H) , 7.49 -7.63 (m, 4 H) , 7.37 -7.47 (m, 7 H) , 7.34 (m, J＝8.60 Hz, 2 H) , 7.06 (m, J＝8.60 Hz, 2 H) , 3.84 (s, 3H) . LC-MS: m/z 511.2 (M+H) +.
Compound 115
2- (6- (4-methoxyphenyl) -7-oxo-2, 3-diphenyl-4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-ylamino) pyrimidine-5-carbonitrile
Figure PCTCN2016097524-appb-000059
A mixture of Intermediate 5 (200 mg, 0.452 mmol) and 2-aminopyrimidine-5-carbonitrile (108 mg, 0.904 mmol) and Pd (OAc) 2 (31 mg, 0.136 mmol) , Xantphos (157 mg, 0.272 mmol) and Na2CO3 (96 g, 0.904 mmol) in 1.4-dioxane (10 mL) was stirred and heated to reflux for 4 hours under N2 atmosphere. The reaction was then cooled to room temperature and filtered. The filtrate was concentrated in vacuum. The crude was purified to afford 2- (6- (4-methoxyphenyl) -7-oxo-2, 3-diphenyl-4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-ylamino) pyrimidine-5-carbonitrile as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 12.77 (bs, 1 H) , 10.27 (bs, 1 H) , 8.88 (s., 2 H) , 7.43 -7.52 (m, 4 H) , 7.35 -7.40 (m, 4 H) , 7.32 (d, J＝7.63 Hz, 2 H) , 7.25 (d, J＝8.54 Hz, 2 H) , 6.93 (d, J＝8.24 Hz, 2 H) , 3.76 (s, 3 H) . LC-MS: m/z 512.2 (M+H) +.
Compound 116
6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-5- (pyrimidin-4-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000060
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (440 mg, 1 mmol) , pyrimidin-4-amine (190 mg, 2 mmol, 2 eq. ) , Pd (OAc) 2 (22 mg, 0.1 mmol, 0.1 eq. ) , Xantphos (116 mg, 0.2 mmol, 0.2 eq. ) and Cs2CO3 (390 mg, 1.2 mmol, 1.2 eq. ) in 1.4-dioxane (10 mL) under heating at 100 ℃ through microwave irradiation for 1 hour under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 501.5 (M+H) +.
Step F: A solution of 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-N- (pyrimidin-4-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (260 mg, 0.52 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (10 mL) was stirred at r.t. for 16 hours. Solvent and volatile were removed in vacuo. Then 20 mL MeOH was added. The resultant mixture was stirred for 5min and filtered. The filter cake was washed with EA (10mL) and PE (10mL) , and dried to give the title compound as a yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 13.13 (s, 1H) , 11.25 (s, 1H) , 8.90 (s, 1H) , 8.45 (d, J ＝ 7.0 Hz, 1H) , 7.44 -7.53 (m, 4H) , 7.25 -7.42 (m, 7H) , 7.18 (d, J ＝ 6.4 Hz, 1H) , 6.95 (d, J ＝ 8.8 Hz, 2H) , 3.77 (s, 3H) . LC-MS: m/z 487.0 (M+H) +.
Compound 117
5- ( (6-aminopyrimidin-4-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000061
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (237 mg, 0.538 mmol) , pyrimidine-4, 6-diamine (118.2 mg, 1.07 mmol, 2 eq. ) , Pd (OAc) 2 (60 mg, 0.269 mmol, 0.5 eq. ) , Xantphos (186.5 mg, 0.322 mmol, 0.6 eq. ) and Na2CO3 (125 mg, 1.184 mmol, 2.2 eq. ) in 1.4-dioxane (5 mL) under heating at 100 ℃ for 3 hour under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 516.5 (M+H) +.
Step F: A solution of N4- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) pyrimidine-4, 6-diamine (90 mg, 0.17 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (3 mL) was stirred at r.t. for 3 hours. Solvent and volatile were removed in vacuo. The resultant solid was washed with dioxane and dried to give the title compound as a yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 13.54 (br. s., 1H) , 9.94 (br. s., 1H) , 8.27 (s, 1H) , 7.82 (br. s., 2H) , 7.43 -7.52 (m, 4H) , 7.31 -7.42 (m, 6H) , 7.28 (d, J ＝ 8.6 Hz, 2H) , 6.98 (d, J ＝ 8.6 Hz, 2H) , 6.02 (br. s., 1H) , 3.78 (s, 3H) . LC-MS: m/z 502.9 (M+H) +.
Compound 118
6- (4-methoxyphenyl) -5- ( (2-methoxypyrimidin-4-yl) amino) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000062
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (300 mg, 0.67 mmol) , 2-methoxypyrimidin-4-amine (169 mg, 1.25 mmol) , Pd (OAc) 2 (48mg, 0.067mmol) , xantphos (72 mg, 0.13mmol) , Cs2CO3 (409 mg, 1.25 mmo) in dioxane (20 mL) under heating to 110 ℃ for 4h under N2. LC-MS: m/z 531.2 (M+H) +.
Step F: To a solution of 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -N- (2-methoxypyrimidin-4-yl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (100 mg, 0.19mmol) in MeOH (10 mL) was added 4N HCl solution in dioxane (10 mL) . The reaction mixture was heated to 50 ℃ for 2h. The mixture was concentrated in vacuo. The residue was suspended in saturated NaHCO3 solution. The solid was collected by filtration to give the desired product 6- (4-methoxyphenyl) -5- ( (2-methoxypyrimidin-4-yl) amino) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one.
1H NMR (TFA) : δ 8.30 (d, J ＝ 7.0 Hz, 1H) , 7.63 -7.78 (m, 3H) , 7.40 -7.63 (m, 8H) , 7.27 (d, J ＝ 7.5 Hz, 2H) , 7.04 (d, J ＝ 7.0 Hz, 1H) , 3.98 (s, 3H) , 3.48 (s, 3H) . LC-MS: m/z 517.0 (M+H) +.
Compound 119
5- ( 2-hydroxypyrimidin-4-ylamino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000063
A mixture of 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -N- (2-methoxypyrimidin-4-yl) -2, 3-diphenyl-pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (126 mg, 0.244 mmol) and conc. HCl (10 mL) was heated to reflux for 2 days. The mixture was quenched with ammonia solution (7N in methanol) to pH 7 and concentrated to dryness. The crude was washed with water and methanol to afford 5- (2-hydroxypyrimidin-4-ylamino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 7.52 (d, J＝6.71 Hz, 3 H) , 7.45 (d, J＝6.71 Hz, 2 H) , 7.20-7.40 (m, 9 H) , 7.05-7.19 (m, 2 H) , 6.99 (bs, 2 H) , 3.80 (s, 3 H) . LC-MS: m/z 503.2 (M+H) +.
Compound 120
6- ( 4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-5- (pyrimidin-5-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000064
A suspension of Intermediate 5 (500mg, 1.13mmol) and pyrimidin-5-amine (323mg, 3.39 mmol, 3 eq) and Pd (OAc) 2 (51 mg, 0.23 mmol, 0.2 eq) , Xantphos (262mg, 0.45 mmol, 0.4 eq) and Na2CO3 (356 mg, 3.39 mmol, 3 eq) in 1.4-dioxane (10 mL) was stirred and warmed up to 100 ℃with microwave irradiation for 1 hours under N2 atmosphere. The reaction was then cooled to r.t. and filtered. The filter cake was washed with water and purified to obtain 6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-5- (pyrimidin-5-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 8.65 (s, 2 H) , 8.52 (br. s., 1 H) , 7.54 (d, J＝8.87 Hz, 1 H) , 7.34 -7.49 (m, 8 H) , 7.31 (br. s., 3 H) , 6.93 (br. s., 1 H) , 3.68 -3.84 (m, 3 H ) . LC-MS : m/z 487.0 (M+H) +.
Compound 121
6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-5- (pyrimidin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000065
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (200 mg, 0.4535 mmol) , pyrimidin-2-amine (86 mg, 0.91 mmol, 2 eq. ) , Pd (OAc) 2 (102 mg, 0.4535 mmol, 1 eq. ) , Xantphos (314.5 mg, 0.54 mmol, 1.2 eq. ) and Cs2CO3 (327 mg, 1 mmol, 2.2 eq. ) in 1.4-dioxane (4 mL) under heating at 110 ℃ for 1 hour through microwave irradiation under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 501.6 (M+H) +.
Step F: A solution of 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-N- (pyrimidin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (60 mg, 0.12 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (10 mL) was  stirred at r.t. for 2 hours. Solvent and volatile were removed in vacuo. The residue was dissolved in DCM (5 mL) and treated with saturated NaHCO3. The organic phase was separated and washed with brine, dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated in vacuo. The residue was purified to afford the title compound as a yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 14.08 (br. s., 1 H) , 8.60 (s, 1 H) , 8.57 (d, J＝4.84 Hz, 2 H) , 7.52 -7.62 (m, 4 H) , 7.40 -7.49 (m, 6 H) , 7.37 (d, J＝8.60 Hz, 2 H) , 7.18 (t, J＝4.97 Hz, 1 H) , 7.08 (d, J＝8.60 Hz, 2 H) , 3.84 (s, 3 H) . LC-MS: m/z 487.2 (M+H) +.
Compound 122
5- ( (5-chloropyrimidin-2-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000066
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (220 mg, 0.5 mmol) , 5-chloropyrimidin-2-amine (129 mg, 1.0 mmol) , palladium diacetate (56 mg, 0.2 mmol) , Xantphos (173 mg, 0.3 mmol) and sodium carbonate (117 mg, 1.1 mmol) in 1, 4-dioxane (20 mL) under refluxing for 4 hours under nitrogen atmosphere. LC-MS: m/z 535.1 (M+H) +.
Step F: The solution of N- (5-chloropyrimidin-2-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (50 mg, 0.1 mmol) in HCl solution (4.0 M in 1, 4-dioxane, 5 mL) was stirred at room temperature for 2 hours. The mixture was concentrated, and NH4OH (8 mL) was added thereto. The precipitate was filtered, washed with water (10 mL) and dried to obtain 6- ( (6- (4-methoxyphenyl) -7-oxo-2, 3-diphenyl-4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) nicotinonitrile as a yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 13.13 (s, 1H) , 9.27 (s., 1H) , 8.60 (s, 2H) , 7.29-7.55 (m, 12H) , 7.00 (d, J ＝ 8.4 Hz, 2H) , 3.80 (s, 3H) . LC-MS: m/z 520.9 (M+H) +.
Compound 123
5- ( (6-aminopyridazin-3-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000067
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (132mg, 0.3mmol) and N- (6-aminopyridazin-3-yl) acetamide (93mg, 0.2mmol, 2 eq) and Pd (OAc) 2 (10 mg, 0.04 mmol, 0.4eq) , Xantphos (24mg, 0.04 mmol, 0.4 eq) and Cs2CO3 (65mg, 0.2 mmol, 2 eq) in 1.4-dioxane (5 mL) under heating at 120 ℃through microwave irradiation for 1 hours under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 558.2 (M+H) +.
Step F: A mixture of N- (6- ( (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) pyridazin-3-yl) acetamide (55.7 mg, 0.1 mmol) and potassium tert-butoxide in 1.4-dioxane (5 mL) was stirred at 100 ℃ for 16 hours. The mixture was filtered and concentrated in vacuo. The residue was purified to give 5- ( (6-aminopyridazin-3-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 7.50 (br. s., 2 H) , 7.40 (br. s., 3 H) , 7.33 (d, J＝8.86 Hz, 8 H) , 7.04 (d, J＝8.06 Hz, 3 H) , 6.89 (br. s., 1 H) , 3.82 (s, 4 H) . LC-MS: m/z 502.1 (M+H) +.
Compound 124
6- (4-methoxyphenyl) -5- ( (6-methoxypyridazin-3-yl) amino) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000068
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (200mg, 0.453mmol) and 6-methoxypyridazin-3-amine (169.8mg, 1.358 mmol, 3 eq) , Pd (OAc) 2 (20.3 mg, 0.091 mmol, 0.2 eq) , Xant-phos (104.7mg, 0.181 mmol, 0.4 eq) and Na2CO3 (143.9 mg, 1.358 mmol, 3 eq) in 1.4-dioxane (5 mL) under heating at 100 ℃ through microwave irradiation for 1 hour under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 531.2 (M+H) +.
Step F: A solution of 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -N- (6-methoxypyridazin-3-yl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (50 mg, 0.094 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (10 mL) was stirred at room temperature for 3 hours. The reaction mixture was concentrate in vacuo, The resultant solid was washed with methanol and concentrated to give the title compound as a white solid.
1H NMR (CHLOROFORM-d) : δ 7.74 (d, J＝9.46 Hz, 1 H) , 7.59 (d, J＝9.46 Hz, 1 H) , 7.22 -7.48 (m, 12 H) , 7.07 (d, J＝6.41 Hz, 2 H) , 4.07 (s, 3 H) , 3.88 (s, 3 H) . LC-MS: m/z 517.0 (M+H) +.
Compound 125
5- ( (6-chloropyridazin-3-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000069
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (200 mg, 0.45 mmol) , 6-chloropyridazin-3-amine (101 mg, 0.9 mmol, 2 eq. ) , and Pd (OAc) 2 (20 mg, 0.09 mmol, 0.2 eq. ) , Xantphos (65 mg, 0.11 mmol, 0.3 eq. ) and Cs2CO3 (293 mg, 0.9 mmol, 2.0 eq. ) in 1.4-dioxane (5 mL) under heating at 120 ℃through microwave irradiation for 1 hour under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 534.9, 536.9 (M+H) +.
Step F: The solution of N- (6-chloropyridazin-3-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (60 mg, 0.12 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (5 mL) was stirred at r.t. overnight. Solvent and volatile were removed in vacuo. The residue was dissolved in DCM (5 mL) and treated with saturated NaHCO3. The organic phase was separated  and washed with brine, dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated in vacuo. The residue was purified to afford the title compound as a yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6/TRIFLUOROACETIC ACID-d (v: 1/5) ) : δ 7.73 (d, J ＝ 9.4 Hz, 1H) , 7.65 (d, J ＝ 9.4 Hz, 1H) , 7.42 -7.54 (m, 4H) , 7.31 -7.40 (m, 8H) , 7.01 (d, J ＝ 8.6 Hz, 2H) , 3.80 (s, 3H) . LC-MS: m/z 520.9, 522.9 (M+H) + .
Compound 126
6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-5- (pyrazin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000070
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (100 mg, 0.230 mmol) , pyrazin-2-amine (44 mg, 0.460 mmol) , palladium (II) acetate (57 mg, 0.250 mmol) , xantphos (160 mg, 0.276 mmol) and cesium carbonate (165 mg, 0.506 mmol) in 1, 4-dioxane (10 mL) under heating at 100 ℃ through microwave irradiation for 1 hour under nitrogen atmosphere. LC-MS: m/z 501.2 (M+H) +.
Step F: A mixture of 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-N- (pyrazin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (50 mg, 0.0996 mmol) in hydrogen chloride solution (4 M in dioxane, 3 mL) was stirred at room temperature for 10 hours. The mixture was evaporated to dryness. The residue was resolved in dichloromethane solution (with 10 ％methanol) , basified with aqueous ammonia to pH 8, and then evaporated to dryness. The crude product was purified to afford 6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-5- (pyrazin-2-ylamino) -pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one as white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 14.27 (br. s., 1 H) , 9.93 (s., 1 H) , 9.38 (s, 1 H) , 8.61 (s, 1 H) , 8.23 (s, 1 H) , 8.08 (s., 1 H) , 7.56 (m, 5 H) , 7.36 (d, J＝8.60 Hz, 5 H) , 7.06 (d, J＝8.33 Hz, 3 H) , 3.83 (s, 3 H) .LC-MS: m/z 487.2 (M+H) +.
Compound 127
5- ( (3-hydroxypyrazin-2-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000071
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (150 mg, 0.34 mmol) and 3-aminopyrazin-2-ol (49 mg, 0.44 mmol, 1.3 eq) , Pd (OAc) 2 (11 mg, 0.05 mmol, 0.15 eq) , Xantphos (29 mg, 0.05 mmol, 0.15 eq) and Cs2CO3 (221 mg, 0.68 mmol, 2.0 eq) in 1.4-dioxane (10 mL) . under heating at 110 ℃ through microwave irradiation for 1 hour under nitrogen atmosphere. LC-MS: m/z 516.9 (M+H) +.
Step F: A solution of 3- ( (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) pyrazin-2-ol (15 mg, 0.03 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (5 mL) was stirred at 30 ℃ for 5 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuum. The residue was purified to obtain the title compound as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 14.12 (br. s., 1H) , 12.64 (br. s., 1H) , 8.50 (s, 1H) , 7.51 -7.65 (m, 4H) , 7.33 -7.47 (m, 8H) , 7.02 -7.17 (m, 3H) , 6.78 (d, J ＝ 4.4 Hz, 1H) , 3.85 (s, 3H) . LC-MS: m/z 503.0 (M+H) +.
Compound 128
5- ( (3-aminopyrazin-2-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000072
A suspension of Intermediate 5 (500 mg, 1.13 mmol) , pyrazine-2, 3-diamine (249 mg, 2.26 mmol, 2 eq. ) , Pd (OAc) 2 (254 mg, 1.13 mmol, 1 eq. ) , Xantphos (653 mg, 1.13 mmol, 1 eq. ) and Cs2CO3 (737 mg, 2.26 mmol, 2.0 eq. ) in 1.4-dioxane (15 mL) was stirred at 120 ℃ through microwave  irradiation for 1 hour under N2 atmosphere. The mixture was filtered through celite, and the filtrate was concentrated in vacuo. The residue was purified to afford the title compound as a white solid.
1H NMR (TRIFLUOROACETIC ACID-d) : δ 7.49 -7.64 (m, 6H) , 7.36 -7.49 (m, 7H) , 7.33 (d, J ＝ 4.0 Hz, 1H) , 7.12 (d, J ＝ 8.6 Hz, 2H) , 3.91 (s, 3H) . LC-MS: m/z 502.1 (M+H) +.
Compound 129
5- (6- (4-methoxyphenyl) -7-oxo-2, 3-diphenyl-4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-ylamino) pyrazine-2-carbonitrile
Figure PCTCN2016097524-appb-000073
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (500 mg, 1.13 mmol) , 5-aminopyrazine-2-carbonitrile (163 mg, 1.36 mmol) , tris (dibenzylideneacetone) dipalladium (0) (311 mg, 0.34 mmol) , xantphos (216 mg, 0.374 mmol) and sodium carbonate (264 mg, 2.5 mmol) in 1, 4-dioxane (20 mL) under heating to reflux for 1 hour under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 526.2 (M+H) +.
Step F: To a solution of 5- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-ylamino) pyrazine-2-carbonitrile (100 mg, 0.19 mmol) in dichloromethane (6 mL) was added HCl solution (4M in dioxane, 10 mL) . The reaction mixture was stirred at room temperature for 16h. The reaction mixture was quenched with ammonia solution (7M in methanol) to pH 7-8, and then evaporated to dryness. The crude product was washed with cold methanol to give 5- (6- (4-methoxyphenyl) -7-oxo-2, 3-diphenyl-4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-ylamino) pyrazine-2-carbonitrile as a yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 9.79 (s, 1 H) , 8.60 (s, 1 H) , 7.95 (s, 1 H) , 7.57 (d, J＝6.45 Hz, 2 H) , 7.47 (d, J＝7.25 Hz, 2 H) , 7.27 -7.42 (m, 7 H) , 7.17 (d, J＝6.72 Hz, 1 H) , 7.01 (d, J＝8.33 Hz, 2 H) , 3.81 (s, 3 H) . LC-MS: m/z 512.2 (M+H) +.
Compound 130
5- ( (5-aminopyrazin-2-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000074
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (440 mg, 1.0 mmol) , pyrazine-2, 5-diamine (293 mg, 2.0 mmol) , palladium (II) acetate (112 mg, 0.50 mmol) , xantphos (347 mg, 0.6 mmol) and cesium carbonate (1.2 g, 4.0 mmol) in 1, 4-dioxane (20 mL) under heating at 110 ℃ for 1 hour through microwave irradiation under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 516.2 (M+H) +.
Step F: A mixture of N2- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) pyrazine-2, 5-diamine (50 mg, 0.10 mmol) in hydrogen chloride solution (4 M in dioxane, 5 mL) was stirred at room temperature for 16 hours. The mixture was evaporated to dryness. The residue was resolved in dichloromethane solution (with 10 ％methanol) , basified with aqueous ammonia to pH 8 and then evaporated to dryness. The crude product was purified to afford 5- (5-aminopyrazin-2-ylamino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 14.30 (s, 1H) , 8.77 (s., 1H) , 8.07 (s, 1H) , 7.54 -7.51 (m, 4H) , 731-7.43 (m, 7H) , 7.05 (d, J ＝ 8.4 Hz, 2H) , 6.23 (s., 2H) , 3.83 (s, 1H) . LC-MS: m/z 502.0 (M+H) +.
Compound 131
6- (6- (4-methoxyphenyl) -7-oxo-2, 3-diphenyl-4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-ylamino) pyrazine-2-carbonitrile
Figure PCTCN2016097524-appb-000075
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (500 mg, 1.13 mmol) , 6-aminopyrazine-2-carbonitrile (163 mg, 1.36 mmol) , palladium (II) acetate (84 mg, 0.374 mmol) , xantphos (215 mg, 0.374 mmol) and cesium carbonate (741 mg, 2.27 mmol) in 1, 4-dioxane (10 mL) under heating at 110 ℃ for 1 hour through microwave irradiation under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 526.2 (M+H) +.
Step F: To a solution of 6- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-ylamino) pyrazine-2-carbonitrile (100 mg, 0.19 mmol) in dichloromethane (6 mL) was added HCl solution (4M in dioxane, 2 mL) . The reaction mixture was stirred at room temperature for 18 h. The mixture was evaporated to dryness. The residue was resolved in dichloromethane solution (with 10 ％methanol) and washed with aqueous sodium bicarbonate to pH 8. The organic phase was dried over sodium sulfate and evaporated to dryness. The crude product was purified to afford 6- (6- (4-methoxyphenyl) -7-oxo-2, 3-diphenyl-4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-ylamino) -pyrazine-2-carbonitrile as a yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 8.57 -8.71 (m, 2 H) 7.44 -7.65 (m, 4 H) 7.21 -7.42 (m, 8 H) 6.99 (d, J＝8.55 Hz, 2 H) , 3.80 (s, 3 H) . LC-MS: m/z 512.2 (M+H) +.
Compound 132
5- ( (1, 3, 5-triazin-2-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000076
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (800 mg, 1.81 mmol) , 1, 3, 5-triazin-2-amine (348 mg, 3.62 mmol) , and Pd (OAc) 2 (81 mg, 0.36 mmol) , Xantphos (260 mg, 0.45 mmol) and Na2CO3 (384 mg, 3.62 mmol) in 1.4-dioxane (15 mL) under heating at 120 ℃ for 4 hours under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 502.0 (M+H) +.
Step F: 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-N- (1, 3, 5-triazin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (500 mg, 1.0 mmol) was dissolved in HCl-1, 4-dioxane (10 mL) . The solution was stirred at r.t. for 2h. The precipitate was filtered off and washed with CH2Cl2 (3*1 mL) to give a yellow solid. The solid was then dissolved in CH2Cl2/MeOH (10/1, 3 mL) . After 3 mL of NH3-MeOH was added, the solution was stirred at r.t. overnight. The precipitate was filtered off and washed with H2O (3*2 mL) and MeOH (3*1 mL) , and dried in vacuo to give the title compound as a light yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 12.71 (br. s, 1H) , 10.24 (br. s., 1H) , 8.70 (s, 2H) , 7.41 -7.50 (m, 4H) , 7.29 -7.41 (m, 6H) , 7.21 -7.27 (m, 2H) , 6.93 (d, J ＝ 8.6 Hz, 2H) , 3.76 (s, 3H) . LC-MS: m/z 488.0 (M+H) +.
Compound 133
5- ( (1, 2, 4-triazin-5-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000077
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (220 mg, 0.5 mmol) , 1, 2, 4-triazin-5-amine (100 mg, 1.0 mmol) , palladium (II) acetate (56 mg, 0.25 mmol) , xantphos (170 mg, 0.30 mmol) and cesium carbonate (375 mg, 1.1 mmol) in 1, 4-dioxane (15 mL) under heating at 105 ℃ through microwave irradiation for 45 min under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 502.2 (M+H) +.
Step F: A mixture of 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-N- (1, 2, 4-triazin-5-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (100 mg, 0.20 mmol) in hydrogen chloride solution (4 M in dioxane, 15 mL) was stirred at room temperature for 4 hours. The mixture was evaporated to dryness. The residue was resolved in dichloromethane solution (with 10 ％methanol) , basified with aqueous ammonia to pH 8 and then evaporated to dryness. The crude product was purified to afford 5- (1, 2, 4-triazin-5-ylamino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one as white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 9.14 (s, 1H) , 8.74 (s., 1H) , 7.31-7.51 (m, 12H) , 6.76 (d, J ＝ 8.6 Hz, 2H) , 3.79 (s, 3H) . LC-MS: m/z 488.2 (M+H) +.
Compound 134
5- ( (4-amino-1, 3, 5-triazin-2-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000078
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (500 mg, 1.13 mmol) , 1, 3, 5-triazine-2, 4-diamine (189 mg, 1.7 mmol, 1.5 eq) , Pd (OAc) 2 (38 mg, 0.17 mmol, 0.15 eq) , Xantphos (98 mg, 0.17 mmol, 0.15 eq) and Cs2CO3 (360 mg, 3.34 mmol, 3.0 eq) in 1.4-dioxane (15 mL) under heating at 105 ℃ through microwave irradiation for 1 hour under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 516.9 (M+H) +.
Step F: A solution of 5- ( (4-amino-1, 3, 5-triazin-2-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (156 mg, 0.3 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (5 mL) was stirred at 30 ℃ for 5 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuum. The residue was purified to obtain the title compound as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 13.80 (s, 1H) , 8.17 (s, 2H) , 7.66 (s, 1H) , 7.51 (m, 4H) , 7.38 (dd, J ＝ 9.8, 6.1 Hz, 7H) , 7.33 (d, J ＝ 8.0 Hz, 2H) , 7.03 (d, J ＝ 8.4 Hz, 2H) , 3.80 (s, 3H) . LC-MS: m/z 503.0 (M+H) +.
Compound 135
6- (4-methoxyphenyl) -5- ( (4- (methylamino) -1, 3, 5-triazin-2-yl) amino) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000079
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (249 mg, 0.57 mmol) , N2-methyl-1, 3, 5-triazine-2, 4-diamine (106 mg, 0.85 mmol, 1.5 eq. ) , Pd (OAc) 2 (64 mg, 0.28 mmol, 0.5 eq. ) , Xantphos (197 mg, 0.34 mmol, 0.6 eq. ) and Cs2CO3 (370 mg, 1.13 mmol, 2.0 eq. ) in 1.4-dioxane (10 mL) under heating at 100 ℃ through microwave irradiation for 1 hour under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 531.0 (M+H) +.
Step F: A solution of N2- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) -N4-methyl-1, 3, 5-triazine-2, 4-diamine (100 mg, 0.19 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (15 mL) was stirred at r.t. for 6 hours. Solvent and volatile were removed in vacuo. The residue was purified to afford the title compound as a yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6&TRIFLUOROACETIC ACID-d (v: 1/5) ) : δ 8.40 (s, 1H) , 7.55 (d, J ＝ 6.2 Hz, 2H) , 7.33 -7.47 (m, 10H) , 7.04 (d, J ＝ 8.6 Hz, 2H) , 3.84 (s, 3H) , 2.08 (s, 3H) . LC-MS: m/z 517.0 (M+H) +.
Compound 136
5- ( (4-hydroxy-1, 3, 5-triazin-2-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000080
Step A: 5- ( (4-methoxy-1, 3, 5-triazin-2-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000081
The mixture of 5-chloro-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (1.0 g, 2.26 mmol) , 4-methoxy-1, 3, 5-triazin-2-amine (424.7 mg, 3.39 mmol) , palladium diacetate (253.7 mg, 1.13 mmol) , Xantphos (784.6 mg, 1.36 mmol) and sodium carbonate (383.3 mg, 3.62 mmol) in 1, 4-dioxane (40 mL) was refluxed for 12 hours under nitrogen atmosphere. After cooling to room temperature, the mixture was filtered with celite, diluted with DCM (150 mL) , washed with saturated brine (50mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated to drynesss. The residue was purified to obtain 5- ( (4-methoxy-1, 3, 5-triazin-2-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one as yellow solid. LC-MS: m/z 518.2 (M+H) +.
Step B: 5- ( (4-hydroxy-1, 3, 5-triazin-2-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000082
A solution of 5- ( (4-methoxy-1, 3, 5-triazin-2-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (350 mg, 0.68mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (40 mL) was stirred at r.t. for 16 hours. The mixture was concentrated, and saturated NaHCO3 (10 mL) was added. The precipitate was filtered. The filter cake was purified to obtain 5- ( (4-hydroxy-1, 3, 5-triazin-2-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one as a yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 8.07 (br. s., 1H) , 7.47 (br. s., 3H) , 7.16 -7.43 (m, 15H) , 6.94 (br. s., 2H) , 3.78 (s, 3H) . LC-MS: m/z 504.3 (M+H) +.
Compound 137
6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-5- (thiazol-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000083
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (220 mg, 0.5 mmol) , thiazol-2-amine (100 mg, 1.0 mmol, 2 eq. ) , Pd (OAc) 2 (56 mg, 0.25 mmol, 0.5 eq. ) , Xantphos (174 mg, 0.3 mmol, 0.6 eq. ) and Na2CO3 (117 mg, 1.1 mmol, 2.2 eq. ) in 1.4-dioxane (5 mL) under heating at 100 ℃ for 3 h under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 506.1 (M+H) +.
Step F: The solution of N- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) thiazol-2-amine (110 mg, 0.23 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (10 mL) was stirred at r.t. for 10 h. The precipitate was collected and washed with EA to afford the title compound as a yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 10.39 (br. s., 1H) , 7.47 -7.58 (m, 4H) , 7.35 -7.46 (m, 6H) , 7.27 -7.35 (m, 3H) , 7.21 (d, J ＝ 3.6 Hz, 1H) , 7.06 (d, J ＝ 8.8 Hz, 2H) , 3.83 (s, 3H) . LC-MS: m/z 491.9 (M+H) +.
Compound 138
5- (isoxazol-3-ylamino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000084
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (400 mg, 0.9 mmol) , isoxazol-3-amine (150 mg, 1.8 mmol, 2 eq. ) , Pd (OAc) 2 (20 mg, 0.09 mmol, 0.1 eq. ) , Xantphos (104 mg, 0.18 mmol, 0.2 eq. ) and Na2CO3 (190 mg, 1.8mmol, 2eq. ) in 1.4-dioxane (5 mL) under heating at 100 ℃ for 16 hours under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 490.5 (M+H) +.
Step F: A solution of 5- (isoxazol-3-ylamino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (90 mg, 0.17 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (3 mL) was stirred at r.t. for 2 hours. Solvent and volatile were removed in vacuo. The mixture was basified with NaHCO3 solution to PH＝8 and concentrated in vacuo. The resultant solid was washed with MeOH (5 mL) and water (2mL) , and filtered to give the the title compound as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 12.01 (s, 1H) , 9.39 (s, 1H) , 8.75 (d, J ＝ 1.9 Hz, 1H) , 7.45 -7.52 (m, 3H) , 7.36 -7.45 (m, 6H) , 7.30 -7.36 (m, J ＝ 8.6 Hz, 2H) , 6.99 -7.10 (m, J ＝ 8.9 Hz, 2H) , 6.49 (d, J ＝1.9 Hz, 1H) , 3.83 (s, 3H) . LC-MS: m/z 476.5 (M+H) +.
Compound 139
5- (isoxazol-4-ylamino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000085
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (150 mg, 0.34 mmol) and isoxazol-4-amine (57 mg, 0.68 mmol, 2.0 eq) , Pd (OAc) 2 (16 mg, 0.07 mmol, 0.2 eq) , Xantphos (41 mg, 0.07 mmol, 0.2 eq) and Cs2CO3 (442 mg, 1.36 mmol, 4.0 eq) in 1.4-dioxane (10 mL) under heating at 100 ℃ through microwave irradiation for 1 hour under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 490.2 (M+H) +.
Step F: A solution of N- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) isoxazol-4-amine (38 mg, 0.08 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (5 mL) was stirred at 30 ℃for 5 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuum. The residue was purified to obtain the title compound as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 9.24 (br. s., 1H) , 8.74 (br. s., 1H) , 7.98 (br. s., 1H) , 7.31 -7.45 (m, 6H) , 7.09 -7.31 (m, 9H) , 7.04 (br. s., 2H) , 3.81 (br. s., 3H) . LC-MS: m/z 476.1 (M+H) +.
Compound 140
5- (isoxazol-5-ylamino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000086
A suspension of intermediate 5 (100 mg, 0.22 mmol) , isoxazol-5-amine (23 mg, 0.27 mmol, 1.2 eq. ) , Pd (OAc) 2 (20 mg, 0.09 mmol, 0.4 eq. ) , Xantphos (53 mg, 0.09mmol, 0.4 eq. ) and K2CO3 (63 mg, 0.45 mmol, 2.5eq. ) in dioxnae (4 mL) was stirred at 100 ℃ through microwave  irradiation for 1 hour under N2 atmosphere. The mixture was filtered through celite and the filtrate was concentrated in vacuo. The residue was purified to afford the title compound as a white solid. 1H NMR (DMSO-d6) : δ 12.38 (br. s., 1H) , 10.40 (br. s., 1H) , 7.24 -7.54 (m, 15H) , 7.00 (d, J ＝8.1 Hz, 2H) , 3.81 (s, 3H) . LC-MS: m/z 475.9 (M+H) +.
Compound 141
6- (4-methoxyphenyl) -5- (1-methyl-1H-imidazol-2-ylamino) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000087
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (100 mg, 0.226 mmol) , 1-methyl-1H-imidazol-2-amine (33 mg, 0.340 mmol) , tris (dibenzylideneacetone) dipalladium (0) (206 mg, 0.226 mmol) , xantphos (130 mg, 0.226 mmol) and sodium carbonate (48 mg, 0.515 mmol) in 1, 4-dioxane (5 mL) under heating at 110 ℃ through microwave irradiation for 1 hour under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 503.2 (M+H) +.
Step F: A mixture of 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -N- (1-methyl-1H-imidazol-2-yl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (50 mg, 1 mmol) in hydrogen chloride solution (4 M in dioxane, 10 mL) was stirred at 70 ℃ for 16 h. The mixture was evaporated to dryness. The residue was resolved in dichloromethane solution (with 10 ％methanol) and washed with aqueous sodium bicarbonate to pH 8. The organic phase was dried over sodium sulfate and evaporated to dryness. The crude product was purified to afford 6- (4-methoxyphenyl) -5- (1-methyl-1H-imidazol-2-ylamino) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 7.49-7.31 (m, 14 H) , 6.99 (d, J＝7.63 Hz, 2 H) , 3.78 (s, 3 H) , 3.52 (s, 3 H) .LC-MS: m/z 489.2 (M+H) +.
Compound 142
5- ( (1H-imidazol-2-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000088
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (441 mg, 1.0 mmol) , 1H-imidazol-2-amine (83 mg, 1 mmol, 2 eq. ) , Pd2 (dba) 3 (91.5 mg, 0.1 mmol, 0.1 eq. ) , Xantphos (115.6 mg, 0.2 mmol, 0.2 eq. ) and Na2CO3 (212 mg, 2mmol, 2eq. ) in toluene (40 mL) under heating at 105 ℃ for 5 hour under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 489.5 (M+H) +.
Step F: A solution of N- (1H-imidazol-2-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (40 mg, 0.08 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (15 mL) was stirred at r.t. for 16 hours. Solvent and volatile were removed in vacuo. The resultant residue was basified with NaHCO3 solution to PH＝8 and concentrated to give the crude product which was purified to afford the title compound as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 12.73 (br. s., 1H) , 7.51 (br. s., 2H) , 7.39 -7.48 (m, 6H) , 7.21 -7.39 (m, 3H) , 7.06 (s, 3H) , 3.81 (s, 3H) . LC-MS: m/z 475.5 (M+H) +.
Compound 143
5- ( (4, 5-dihydrothiazol-2-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000089
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (441 mg, 1.0 mmol) , thiazol-2-amine (102 mg, 1 mmol, 2 eq. ) , Pd2 (dba) 3 (91.5 mg, 0.1 mmol, 0.1 eq. ) , Xantphos (115.6 mg, 0.2 mmol, 0.2 eq. ) and Na2CO3 (212 mg, 2mmol, 2eq. ) in toluene (40 mL) under heating at 105 ℃ for 5 hour under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 506.5 (M+H) +.
Step F: A solution of N- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) thiazol-2-amine (40 mg, 0.08 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (15 mL) was stirred at r.t. for 16 hours. Solvent and volatile were removed in vacuo. The resultant residue was basified with NaHCO3 solution to PH＝8 and concentrated to give the crude product which was purified to afford the title compound as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 7.31 -7.49 (m, 9H) , 7.26 (d, J ＝ 8.5 Hz, 3H) , 6.94 (br. s., 2H) , 3.78 (s, 3H) , 3.60 (br. s., 1H) , 3.50 (br. s., 1H) , 3.31 (br. s., 2H) . LC-MS: m/z 494.5 (M+H) +.
Compound 144
5- ( (1, 3, 4-thiadiazol-2-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000090
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (442mg, 1 . 0mmol) and 1, 3, 4-thiadiazol-2-amine (101mg, 1.0 mmol, 1 eq) and Pd (OAc) 2 (91.5 mg, 0.1 mmol, 0.1 eq) , Xant-phos (115.6mg, 0.2mmol, 0.2 eq) and Na2CO3 (212mg, 2.0mmol, 2.0 eq) in toluene (40 mL) under heating at 110 ℃ for 5 hour under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 507.1 (M+H) +.
Step F: A mixture of N- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) -1, 3, 4-thiadiazol-2-amine (112mg, 0.2mmol) in 4N HCl in 1.4-dioxane (15 mL) was stirred at room temperature overnight. The reaction mixture was concentrate in vacuo. The residue was stirred with methanol and saturated sodium hydrogen carbonate solution. The precipitates were collected by filtration and dried to afford the title compound as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 13.83 (br. s., 1 H) , 10.57 (br. s., 1 H) , 9.05 (br. s., 1 H) , 7.54 (br. s., 4 H) , 7.42 (br. s., 5 H) , 7.34 (br. s., 3 H) , 7.08 (d, J＝7.79 Hz, 2 H) , 3.85 (s, 3 H) . LC-MS: m/z 493.1 (M+H) +.
Compound 145
5- ( (5-amino-1, 3, 4-thiadiazol-2-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000091
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (600 mg, 1.36 mmol) and 1, 3, 4-thiadiazole-2, 5-diamine (315 mg, 2.72 mmol, 2 eq. ) , Pd (OAc) 2 (306 mg, 0.1.36 mmol, 1 eq. ) , Xantphos (786 mg, 1.36 mmol, 1 eq. ) and Cs2CO3 (887 mg, 2.72 mmol, 2.0 eq. ) in 1.4-dioxane (18 mL) under heating at 120 ℃through microwave irradiation for 1 hour under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 522.0 (M+H) +.
Step F: A solution of N2- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) -1, 3, 4-thiadiazole-2, 5-diamine (100 mg, 0.19 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (5 mL) was stirred at r.t. overnight. Solvent and volatile were removed in vacuo. The residue was dissolved in DCM (5 mL) and basified with saturated NaHCO3. The organic phase was separated and washed with brine, dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated in vacuo. The residue was purified to afford the title compound as a yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 9.96 (br. s., 1H) , 7.37 -7.57 (m, 9H) , 7.32 -7.37 (m, 1H) , 7.29 (d, J ＝8.6 Hz, 2H) , 7.04 (d, J ＝ 8.6 Hz, 2H) , 3.82 (s, 3H) . LC-MS: m/z 508.0 (M+H) +.
Compound 146
5- ( (5-hydroxy-1, 3, 4-thiadiazol-2-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000092
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (442mg, 1 . 0mmol) and 5-methoxy-1, 3, 4-thiadiazol-2-amine (113mg, 1.0 mmol, 1 eq) , Pd (OAc) 2 (91.5 mg, 0.1 mmol, 0.1 eq) , Xant-phos (115.6mg, 0.2mmol, 0.2 eq) and Na2CO3 (212mg, 2.0mmol, 2.0 eq) in toluene (40 mL) under heating at 110 ℃ for 5 hour under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 537.1 (M+H) +.
Step F: A mixture of 5-methoxy-N- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) -1, 3, 4-thiadiazol-2-amine (51.8mg, 0.1mmol) in 4N HCl in 1.4-dioxane (15 mL) was stirred at room temperature overnight. The reaction mixture was concentrate in vacuo. The residue was stirred with methanol and saturated sodium hydrogen carbonate solution. The solid was collected by filtration and dried to afford the title compound as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 12.43 (s, 0.5 H) , 12.12 (s, 0.5 H) , 11.87 (s, 0.5 H) , 9.80 (s, 0.5H) , 7.50 (br. s., 3 H) , 7.41 (br. s., 4 H) , 7.30 (br. s., 4 H) , 7.04 (d, J＝8.55 Hz, 2 H) , 3.82 (s, 3 H) . LC-MS: m/z 509.1 (M+H) +.
Compound 147
5- ( (1, 2, 4-thiadiazol-5-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000093
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (600 mg, 1.3 mmol) and 1, 2, 4-thiadiazol-5-amine (179 mg, 1.77 mmol, 1.3 eq) , Pd (OAc) 2 (46 mg, 0.2 mmol, 0.15 eq) , Xantphos (118 mg, 0.2 mmol, 0.15 eq) and Cs2CO3 (844 mg, 2.72 mmol, 2.0 eq) in 1.4-dioxane (15 mL) under heating at 100C through microwave irradiation for 1 hour under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 506.9H) +.
Step F: A solution of N- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) -1, 2, 4-thiadiazol-5-amine (214 mg, 0.42 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (15 mL) was stirred at 30 ℃ for 5 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuum. The residue was purified to obtain the title compound as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) δ: 10.13 (s, 1H) , 8.21 (s, 1H) , 7.55 (dd, J ＝ 7.6, 1.6 Hz, 2H) , 7.53 –7.38 (m, 8H) , 7.35 (d, J ＝ 8.8 Hz, 2H) , 7.06 (d, J ＝ 8.8 Hz, 2H) , 6.28 (s, 2H) , 3.84 (s, 3H) . LC-MS: m/z 492.9 (M+H) +.
Compound 148
5- ( (3-methoxy-1, 2, 4-thiadiazol-5-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000094
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (400 mg, 0.91 mmol) and 3-methoxy-1, 2, 4-thiadiazol-5-amine (155 mg, 1.18 mmol, 1.3 eq) , Pd (OAc) 2 (11 mg, 0.14 mmol, 0.15 eq) , Xantphos (78.7 mg, 0.14 mmol, 0.15 eq) and Cs2CO3 (590 mg, 1.8 mmol, 2.0 eq) in 1.4-dioxane (10 mL) under heating at 110 ℃ through microwave irradiation for 1 hour under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 537.0 (M+H) +.
Step F: A solution of 3-methoxy-N- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) -1, 2, 4-thiadiazol-5-amine (100 mg, 0.19 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (5 mL) was stirred at 30 ℃ for 5 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuum. The residue was purified to obtain the title compound as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 10.27 (s, 1H) , 7.57 –7.52 (m, 2H) , 7.51 –7.36 (m, 8H) , 7.31 (d, J ＝ 8.4 Hz, 2H) , 7.04 (d, J ＝ 8.8 Hz, 2H) , 3.82 (s, 6H) . LC-MS: m/z 523.0 (M+H) +.
Compound 149
5- ( (4-amino-1, 2, 5-oxadiazol-3-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000095
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (220 mg, 0.5 mmol) , N3- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) -1, 2, 5-oxadiazole-3, 4-diamine (101 mg, 1.0 mmol, 2.0 eq) , Pd (OAc) 2 (11 mg, 0.05 mmol, 0.1 eq) , Xantphos (116 mg, 0.2 mmol, 0.4 eq) and Cs2CO3  (325 mg, 1.0 mmol, 2.0 eq) in 1.4-dioxane (10 mL) under heating at 100 ℃ through microwave irradiation for 1 hour under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 506.1 (M+H) +.
Step F: A solution of N3- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) -1, 2, 5-oxadiazole-3, 4-diamine (237 mg, 0.47 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (20 mL) was stirred at 30 ℃ for 5 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuum. The residue was purified by to obtain the title compound as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 8.51 (br. s., 1H) , 7.25 -7.55 (m, 12H) , 7.00 (d, J ＝ 8.8 Hz, 2H) , 3.79 (s, 3H) . LC-MS: m/z 492.1 (M+H) +.
Compound 150
ethyl 5- ( (6- (4-methoxyphenyl) -7-oxo-2, 3-diphenyl-4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) thiazole-4-carboxylate
Figure PCTCN2016097524-appb-000096
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (500 mg, 1.13 mmol) , ethyl 5-aminothiazole-4-carboxylate (292.3 mg, 1.70 mmol) , and Pd (OAc) 2 (76.2 mg, 0.34 mmol) , Xantphos (196.4 mg, 0.34 mmol) and Cs2CO3 (553.0 mg, 0.34 mmol) in 1.4-dioxane (10 mL) under heating at 120 ℃ through microwave irradiation for 1.5 hours under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 578.3 (M+H) +.
Step F: A solution of ethyl 5- ( (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) thiazole-4-carboxylate (450 mg, 0.78mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (16 mL) was stirred at r.t. for 18hours. The mixture was concentrated, and saturated NaHCO3 (10 mL) was added. The precipitate was filtered and washed with water (4 mL) . The solid was suspended in MeOH (10 mL) with stirring and filtered to obtain ethyl 5- ( (6- (4-methoxyphenyl) -7-oxo-2, 3-diphenyl-4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) thiazole-4-carboxylate as a yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 10.03 (s, 1H) , 8.30 (s, 1H) , 7.50 -7.63 (m, 4H) , 7.29 -7.45 (m, 7H) , 7.14 -7.26 (m, 1H) , 7.04 (d, J ＝ 8.9 Hz, 2H) , 4.12 (q, J ＝ 7.0 Hz, 2H) , 3.83 (s, 3H) , 1.17 (t, J ＝7.1 Hz, 3H) . LC-MS: m/z 564.3 (M+H) +.
Compound 151
5- ( (1H-pyrrolo [2, 3-c] pyridin-5-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000097
Step E stoichiometry: Intermediate 5 (200 mg, 0.450 mmol) , 1H-pyrrolo [2, 3-c] pyridin-5-amine (120 mg, 0.90 mmol) , palladium (II) acetate (50 mg, 0.225 mmol) , xantphos (196 mg, 0.340 mmol) and potassium carbonate (124 mg, 0.90 mmol) in 1, 4-dioxane (10 mL) under heating at 100 ℃through microwave irradiation for 1 hour under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 539.2 (M+H) +.
Step F: A mixture of 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-N- (1H-pyrrolo [2, 3-c] pyridin-5-yl) -pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (80 mg, 0.148 mmol) in hydrogen chloride solution (4 M in dioxane, 5 mL) was stirred at room temperature for 16 hours. The mixture was evaporated to dryness. The residue was resolved in dichloromethane solution (with 10 ％methanol) , basified with aqueous ammonia to pH 8, and then evaporated to dryness. The crude product was purified to afford 5- (1H-pyrrolo [2, 3-c] pyridin-5-ylamino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one as white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 16.31 (s, 1H) , 11.56 (s., 1H) , 8.61 (s, H) , 8.25 (s, 1H) , 7.72-7.35 (m, 14H) , 7.07 (d, J ＝ 8.8 Hz, 2H) , 6.44 (s., 1H) , 3.85 (s, 1H) . LC-MS: m/z 525.2 (M+H) +.
5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine
Figure PCTCN2016097524-appb-000098
This compound was prepared according to the procedure for preparing compound 101 by using Intermediate 8 as 4- (cyclohex-1-en-1-yl) -3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine in step B.
Step B: To a solution of dimethyl 2- (4-methoxyphenyl) malonate (39.6 g, 166 mmol) in tri-n-butylamine (80 ml) at 198 ℃ was added 4-cyclohexenyl-3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine (47.3 g, 199 mmol) in portions, and the resultant mixture was stirred for 1 h at 198 ℃. The mixture was cooled to the room temperature, and solvent was decanted. THF (150 mL) and HCl (6N, 600 mL) were added with stirring vigorously for 0.5 h. The precipitates were collected by filtration, washed with methanol, and dried under reduced pressure to give 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -5-hydroxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (48 g) as a yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 7.74 (d, J＝6.98 Hz, 5 H) , 7.31 -7.49 (m, 11 H) , 6.94 (d, J＝8.60 Hz, 5 H) , 5.80 (br. s., 1 H) , 3.78 (s, 8 H) , 2.15 (br. s., 5 H) , 2.02 (br. s., 5 H) , 1.65 (br. s., 10 H) . LC-MS: m/z 414.2 (M+H) +.
Step C: A solution of 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -5-hydroxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (47.0 g, 104 mmol) in phosphorus oxychloride (100 mL) was stirred at reflux for 16 hrs. The solvent was removed in vacuum. The residue was added slowly to methanol (100 mL) cooled at 0℃. The precipitates were collected by filtration, washed with methanol, and dried under reduced pressure to give 5, 7-dichloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (50 g) as a yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 1.70 (d, J＝4.57 Hz, 4 H) 2.20 (br. s., 4 H) 3.84 (s, 4 H) 5.87 (br. s., 1 H) 7.10 (d, J＝8.60 Hz, 2 H) 7.36 -7.56 (m, 5 H) 7.82 (d, J＝7.25 Hz, 2 H) . LC-MS: m/z 450.2 (M+H) +.
Step D: To a solution of 5, 7-dichloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (40 g, 88 mmol) in dichloromethane (400 ml) at 0 ℃ was added sodium methoxide (30％in methanol, 80 g) dropwise. The resultant mixture was stirred for 10 min at 0 ℃. The reaction was quenched by adding ice water (100 mL) and extracted with dichloromethane (200 mL) three times. The combined organic layers were washed with brine (200 ml) , dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated in vacuum. The residue was suspended in MeOH (50 mL) . The precipitates were collected by filtration, washed with MeOH, and dried under reduced pressure to give 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine as a yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 7.78 -7.91 (m, 2H) , 7.42 -7.58 (m, 3H) , 7.33 -7.42 (m, J ＝ 8.9 Hz, 2H) , 7.00 -7.14 (m, J ＝ 8.9 Hz, 2H) , 5.83 (br. s., 1H) , 4.14 (s, 3H) , 3.84 (s, 3H) , 2.20 (d, J ＝ 5.9 Hz, 4H) , 1.61 -1.77 (m, 4H) . LC-MS: m/z 446.1 (M+H) +.
6- (5-chloro-7-methoxy-2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline
Figure PCTCN2016097524-appb-000099
This compound was prepared according to the procedure for preparing compound 101 by using Intermediate 1 as methyl 2- (quinolin-6-yl) acetate in step A.
Step A: To dimethyl carbonate (150 mL) cooled at 0 ℃ was added potassium tert-butanolate (24 g, 216 mmol) in portions. The resultant mixture was stirred at 0 ℃ for 1 hour. Methyl 2- (quinolin-6-yl) acetate (20 g, 100 mmol) was added. The resultant mixture was slowly warmed up to room temperature and stirred for 1 hour. The reaction mixture was heated to 80 ℃ with stirring overnight. After cooling to room temperature, the mixture was diluted with EtOAc (1500 mL) , washed with saturated NH4Cl (300 mL) and brine (250 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated in vacuo. The residue was purified by flash column (petroleum ether/ethyl acetate＝3: 1) to obtain dimethyl 2- (quinolin-6-yl) malonate (18.0 g) as a yellow solid. LC-MS: m/z 260.1 (M+H) +.
Step B: A suspension of dimethyl 2- (quinolin-6-yl) malonate (13 g, 50 mmol) and 3, 4-diphenyl-1H-pyrazol-5-amine (11.8 g, 50 mmol) in tributylamine (100 mL) was stirred at 185 ℃ for 4 hours. After cooling to room temperature, the mixture was filtered. The residue was diluted with DCM (450 mL) , washed with saturated NH4Cl (150 ml) and brine (100 ml) , dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated in vacuo. The residue was purified by flash column (DCM: MeOH＝15: 1) to obtain 2, 3-diphenyl-6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine-5, 7 (4H, 6H) -dione (18 g) as a yellow solid. LC-MS: m/z 431.2 (M+H) +.
Step C: The solution of 2, 3-diphenyl-6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine-5, 7 (4H, 6H) -dione (18 g, 42 mmol) , DMAP (1 g) and PCl5 (80 mg) in POCl3 (180 ml) was stirred at 100 ℃ overnight. After cooling to room temperature, the solvent was removed by vacuum. The residue was cooled to 0 ℃. MeOH (60mL) was added to quench the reaction. The resultant mixture was diluted with DCM (450 ml) , washed with saturated NaHCO3 (150 ml) and brine (100 ml) , dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated to afford crude product of 6- (5, 7-dichloro-2, 3- diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline (13 g) which was used in the next step without further purification. LC-MS: m/z 467.1 (M+H) +.
Step D: To a solution of 6- (5, 7-dichloro-2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline (13.0 g, crude, 27.8 mmol) in DCM/MeOH (200 mL, 1: 1) cooled at 0 ℃ was added sodium methoxide (14.9 mL, 5.0 M in methanol) dropwise. Then the mixture was stirred at 0 ℃ for 1 hour. Saturated NH4Cl (150 mL) was added to quench the reaction. The resultant mixture was extracted with DCM (500 mL) , washed with brine (150 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated in vacuo. The residue was purified by flash column (DCM/MeOH＝ 40: 1) to obtain 6- (5-chloro-7-methoxy-2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline as a pale yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 9.01 (dd, J ＝ 4.2, 1.7 Hz, 1H) , 8.45 -8.52 (m, 1H) , 8.13 -8.21 (m, 2H) , 7.88 (dd, J ＝ 8.6, 1.9 Hz, 1H) , 7.59 -7.68 (m, 3H) , 7.42 -7.48 (m, 7H) , 7.34 -7.41 (m, 1H) , 4.25 (s, 3H) . LC-MS: m/z 463.1 (M+H) +.
6- (5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline
Figure PCTCN2016097524-appb-000100
This compound was prepared according to the procedure for preparing compound 101 by using Intermediate 1 as methyl 2- (quinolin-6-yl) acetate e in step A and Intermediate 8 as 4- (cyclohex-1-en-1-yl) -3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine in step B.
Step B: A suspension of dimethyl 2- (quinolin-6-yl) malonate (1.95 g, 7.52 mmol) and 4- (cyclohex-1-en-1-yl) -3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine (1.8 g, 7.52 mmol) in tributylamine (20 mL) was stirred at 185 ℃ for 4 hours. After cooling to room temperature, the mixture was filtered. The residue was diluted with DCM (150 mL) , washed with saturated NH4Cl (50 ml) and brine (50 ml) , dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated in vacuo. The residue was purified by flash column (DCM: MeOH＝15: 1) to obtain 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -2-phenyl-6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine-5, 7 (4H, 6H) -dione (3.1 g) as a yellow solid. LC-MS: m/z 435.2 (M+H) +.
Step C: The solution of 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -2-phenyl-6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine-5, 7 (4H, 6H) -dione (3.1 g, 7.13 mmol) in POCl3 (12 ml) was stirred at 110 ℃ overnight. After cooling to room temperature, the solvent was removed by vacuum. MeOH (60mL) was added slowly to the residue cooled at 0 ℃ to quench the reaction. The resultant mixture was diluted with DCM (150 ml) , washed with saturated NaHCO3 (50 ml) and brine (50 ml) , dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated to afford crude product of 6- (5, 7-dichloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline (1.3 g) which was used in the next step without further purification. LC-MS: m/z 471.9 (M+H) +.
Step D: To a solution of 6- (5, 7-dichloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline (300 mg, crude, 0.64 mmol) in DCM/MeOH (6 mL, 1: 1) cooled at 0 ℃ was added sodium methoxide (0.64 mL, 5.0 M in methanol) dropwise. Then the mixture was stirred at 0 ℃ for 1 hour. Saturated NH4Cl (50 mL) was added to quench the reaction. The resultant mixture was extracted with DCM (150 mL) , washed with brine (50 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated in vacuo. The residue was purified by flash column (DCM/MeOH＝40: 1) to obtain 6- (5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline as a off-white solid.
1H NMR (CHLOROFORM-d) : δ 9.28 (d, J ＝ 3.8 Hz, 1H) , 8.76 (d, J ＝ 8.6 Hz, 2H) , 8.11 (s, 1H) , 7.80 -8.03 (m, 4H) , 7.36 -7.57 (m, 3H) , 5.99 (br. s., 1H) , 3.75 (s, 3H) , 2.20 -2.37 (m, 4H) , 1.67 -1.87 (m, 4H) . LC-MS: m/z 467.2 (M+H) +.
6- (5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoxaline
Figure PCTCN2016097524-appb-000101
This compound was prepared according to the procedure for preparing compound 101 by using Intermediate 1 as methyl 2- (quinoxalin-6-yl) acetate in step A and Intermediate 8 as 4- (cyclohex-1-en-1-yl) -3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine in step B.
Step A: To dimethyl carbonate (30 mL) cooled at 0 ℃ was added potassium tert-butanolate (3.8 g, 34.12 mmol) in portions. The resultant mixture was stirred at 0 ℃ for 1 hour. Methyl 2- (quinoxalin-6-yl) acetate (2.3 g, 11.37 mmol) was added. The resultant mixture was slowly warmed up to room temperature and stirred for 1 hour. The reaction mixture was heated to 90 ℃ and stirred for 1.5 hours. After cooling to room temperature, the mixture was diluted with EtOAc (150 mL) , washed with saturated NH4Cl (80 mL) and brine (50 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated in vacuo. The residue was purified by flash column (petroleum ether/ethyl acetate＝3: 1) to obtain dimethyl 2- (quinoxalin-6-yl) malonate (2.0 g) as a yellow solid. 1H NMR (CHLOROFORM-d) : δ 8.89 (s, 2H) , 8.10 -8.19 (m, 2H) , 7.91 (dd, J ＝ 8.7, 2.0 Hz, 1H) , 4.95 (s, 1H) , 3.82 (s, 6H) . LC-MS: m/z 261.1 (M+H) +.
Step B: A suspension of 4- (cyclohex-1-en-1-yl) -3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine (1.93 g, 8.07 mmol) and dimethyl 2- (quinoxalin-6-yl) malonate (2.1 g, 8.07 mmol) in tributylamine (20 mL) was stirred at 175 ℃ for 2 hours. After cooling to room temperature, the mixture was filtered. The residue was diluted with DCM (150 mL) , washed with saturated NH4Cl (50 ml) and brine (30 ml) , dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated in vacuo. The residue was purified by flash column (DCM: MeOH＝15: 1) to obtain 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -2-phenyl-6- (quinoxalin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine-5, 7 (4H, 6H) -dione (2.2 g) as a yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 10.11 (br. s., 1H) , 9.07 (br. s., 1H) , 8.79 (s, 1H) , 8.73 (s, 1H) , 8.58 (s, 1H) , 8.51 (d, J ＝ 8.9 Hz, 1H) , 7.85 (d, J ＝ 8.9 Hz, 1H) , 7.71 (d, J ＝ 7.3 Hz, 2H) , 7.27 -7.46 (m, 3H) , 5.69 (br. s., 1H) , 2.14 (br. s., 2H) , 2.00 (br. s., 2H) , 1.60 -1.68 (m, 4H) . LC-MS: m/z 436.2 (M+H) +.
Step C: The solution of 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -2-phenyl-6- (quinoxalin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine-5, 7 (4H, 6H) -dione (1.0 g, 2.30 mmol) in POCl3 (6 ml) in a sealed tube was stirred at 110 ℃ for 8 hours. After cooling to room temperature, the solvent was removed by vacuum. The residue was cooled to 0 ℃. MeOH (6 mL) was added to quench the reaction. The resultant mixture was diluted with DCM (150 ml) , washed with saturated NaHCO3 (50 ml) and brine (30 ml) , dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated to afford crude product of 6- (5, 7-dichloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoxaline (800 mg) which was used in the next step without further purification. LC-MS: m/z 472.1 (M+H) +.
Step D: To a solution of 6- (5, 7-dichloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoxaline (800 mg, crude, 2.30 mmol) in DCM/MeOH (20 mL, 1: 1) cooled at 0 ℃ was added sodium methoxide (2.3 mL, 5.0 M in methanol) dropwise. Then the mixture was  stirred at 0 ℃ for 1 hour. Saturated NH4Cl (50 mL) was added to quench the reaction. The resultant mixture was extracted with DCM (100 mL) , washed with brine (30 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated in vacuo. The residue was purified by flash column (DCM/MeOH＝40: 1) to obtain 6- (5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoxaline as a brown solid.
1H NMR (CHLOROFORM-d) : δ 8.98 (s, 2H) , 8.29 (d, J ＝ 8.9 Hz, 1H) , 8.24 (d, J ＝ 1.6 Hz, 1H) , 7.92 (dd, J ＝ 7.9, 1.5 Hz, 2H) , 7.86 (dd, J ＝ 8.6, 1.9 Hz, 1H) , 7.41 -7.55 (m, 3H) , 5.98 (dt, J ＝3.6, 1.9 Hz, 1H) , 4.26 -4.37 (m, 3H) , 2.33 (br. s., 2H) , 2.19 -2.30 (m, 2H) , 1.71 -1.85 (m, 4H) . LC-MS: m/z 468.2 (M+H) +.
The following compounds were prepared according to Example 1, step E and F, starting from 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine.
Compound 153
3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-5- (pyridin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000102
Step E stoichiometry: 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (200mg, 0.0449 mol) , pyridin-2-amine (63.4m g, 0.674 mol, 1.5 eq. ) , Pd (OAc) 2 (20.2mg, 0.0898 mol, 0.2 eq. ) , Xantphos (52mg, 0.0898 mol, 0.2 eq. ) and K2CO3 (265mg, 1.12mol, 2.5eq. ) in dioxnae (5mL) under heating at 120 ℃ for 1 hour under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 504.9 (M+H) +.
Step F: A solution of 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl -N-(pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (120mg, 0.22 mol) in 4M HCl /1.4-dioxane (3mL) was stirred at r.t. for 16 hours. The reaction mixture was basified with NaHCO3 solution to PH＝8 and filtered to afford the title compound as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 9.09 (br. s., 1H) , 8.20 (d, J ＝ 4.3 Hz, 1H) , 7.82 (t, J ＝ 7.3 Hz, 1H) , 7.73 (d, J ＝ 7.3 Hz, 2H) , 7.38 -7.51 (m, 3H) , 7.28 -7.38 (m, 3H) , 7.10 -7.17 (m, 1H) , 7.03 (d, J ＝ 8.5 Hz, 2H) , 6.06 (br. s., 1H) , 3.82 (s, 3H) , 2.34 (br. s., 2H) , 2.06 (br. s., 2H) , 1.65 -1.79 (m, 4H) . LC-MS: m/z 490.2 (M+H) +.
Compound 154
3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-5- (pyridin-3-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000103
Step E stoichiometry: 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (200 mg, 0.45 mmol) , pyridin-3-amine (85 mg, 0.90 mmol) , Pd (OAc) 2 (36mg, 0.045mmol) , xantphos (58 mg, 0.09mmol) , and CS2CO3 (293 mg, 0.90 mmo) in dioxane (20 mL) under heating at 110 ℃ for 4 hours under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 504.2 (M+H) +.
Step F: To a solution of 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-N- (pyridin-3-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (60 mg, 0.12mmol) in MeOH (10 mL) was added 4N HCl solution in dioxane (10 mL) . The reaction mixture was heated to 50 ℃ for 2h. The mixture was concentrated in vacuo. The crude product was basified with saturated NaHCO3 solution. The precipitate was collected by filtration to give the desired product 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-5- (pyridin-3-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 8.69 (br. s., 1H) , 8.31 (d, J ＝ 5.4 Hz, 1H) , 8.17 (d, J ＝ 8.3 Hz, 1H) , 7.71 -7.83 (m, 3H) , 7.39 -7.52 (m, 3H) , 7.24 -7.33 (m, J ＝ 8.6 Hz, 2H) , 6.81 -6.94 (m, J ＝ 8.9 Hz, 2H) , 5.88 (br. s., 1H) , 3.73 (s, 3H) , 2.14 (br. s., 2H) , 2.02 -2.12 (m, 2H) , 1.56 -1.74 (m, 4H) . LC-MS: m/z 490.2 (M+H) +.
Compound 155
3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-5- (pyrimidin-4-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000104
Step E stoichiometry: 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (400mg, 0.897mmol) and pyrimidin-4-amine (255.9mg, 2.691 mmol, 3 eq) , Pd (OAc) 2 (40.3mg, 0.179 mmol, 0.2 eq) , Xant-phos (578.6mg, 0.359 mmol, 0.4 eq) and Cs2CO3 (285.2 mg, 2.691 mmol, 3 eq) in 1.4-dioxane (10 mL) under heating at 100 ℃through microwave irradiation for 1 hour under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 505.0 (M+H) +.
Step F: A solution of 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-N- (pyrimidin-4-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (100 mg, 0.198mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (10 mL) was stirred at room temperature for 3 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuo. The residue was dissolved in 7N NH3 in methanol and stirred at room temperature for 2 hours. The precipitates were filtered, washed with methanol, and dried to afford the title compund as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 8.98 (s, 1 H) , 8.49 (d, J＝7.02 Hz, 1 H) , 7.79 (d, J＝7.32 Hz, 2 H) , 7.41 -7.52 (m, 3 H) , 7.27 (m, J＝8.54 Hz, 2 H) , 7.18 (d, J＝6.41 Hz, 1 H) , 6.93 (m, J＝8.54 Hz, 2 H) , 5.87 (br. s., 1 H) , 2.18 (br. s., 2 H) , 2.06 (br. s., 2 H) , 1.67 (br. s., 4 H) . LC-MS: m/z 491.0 (M+H) +.
Compound 156
3-cyclohexenyl-6- (4-methoxyphenyl) -5- (2-methoxypyrimidin-4-ylamino) -2-phenyl-pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000105
Step E stoichiometry: 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (200 mg, 0.452 mmol) and 2-methoxypyrimidin-4-amine (113 mg, 0.904 mmol) and Pd (OAc) 2 (31 mg, 0.136 mmol) , Xantphos (157 mg, 0.272 mmol) and Na2CO3 (96 g, 0.904 mmol) in 1.4-dioxane (10 mL) under heating at 110 ℃ for 4 hours under N2 atmosphere.
1HNMR (DMSO-d6) δ 8.46 (d, J＝5.6 Hz, 1 H) , 8.14 (d, J＝5.6 Hz, 1 H) , 7.81 d, J＝7.2 Hz, 2 H) , 7.56 (s, 1 H) , 7.42 –7.51 (m, 4 H) , 7.16 -7.18 (m, 2 H) , 5.88 (bs, 1 H) , 4.11 (s, 3 H) , 3.86 (s, 3 H) , 3.80 (s, 3 H) , 2.22 -2.27 (m, 4 H) , 1.70 -1.75 (m, 4 H) . LC-MS: m/z 535.2 (M+H) +.
Step F: A mixture of 3-cyclohexenyl-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -N- (2-methoxy-pyrimidin-4-yl) -2-phenyl-pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (55 mg, 0.103 mmol) and HCl solution (4N in dioxane, 6 mL) was stirred at room temperature overnight. The mixture was quenched with NH3 solution (7N in methanol) to pH 7 and concentrated to dryness. The crude was washed with water and methanol to afford 3-cyclohexenyl-6- (4-methoxyphenyl) -5- (2-methoxypyrimidin-4-ylamino) -2-phenyl-pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one as a grey solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 13.82 (s, 1 H) , 9.38 (s, 1 H) , 8.28 (d, J＝5.80 Hz, 1 H) , 7.75 (d, J＝7.32 Hz, 2 H) , 7.45-7.51 (m, 2 H) , 7.42 (d, J＝7.32 Hz, 1 H) , 7.29 (m, J＝8.54 Hz, 2 H) , 7.02 (m, J＝8.85 Hz, 2 H) , 6.86 (d, J＝5.80 Hz, 1 H) , 5.99 (s, 1 H) , 3.92 (s, 3 H) , 3.81 (s, 3 H) , 2.28 (bs, 2 H) 2.06 (bs, 2 H) , 1.70 (bs, 4 H) . LC-MS: m/z 521.5 (M+H) +.
Compound 157
3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-5- (pyridazin-3-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000106
Step E stoichiometry: 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (150 mg, 0.34 mmol) and pyridazin-3-amine (65 mg, 0.68 mmol, 2.0 eq) , Pd (OAc) 2 (16 mg, 0.07 mmol, 0.2 eq) , Xantphos (41 mg, 0.07 mmol, 0.2 eq) and Cs2CO3  (442 mg, 1.36 mmol, 4.0 eq) in 1.4-dioxane (10 mL) under heating at 100 ℃ for 1 hour through microwave irradiation under nitrogen atmosphere. LC-MS: m/z 504.9 (M+H) +.
Step F: A solution of 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-N- (pyridazin-3-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (70 mg, 0.14 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (15 mL) was stirred at 30 ℃ for 5 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuum. The residue was purified to obtain the title compound as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 15.09 (s, 1H) , 9.18 (s, 1H) , 8.92 (d, J ＝ 2.8 Hz, 1H) , 7.74 (d, J ＝ 7.2 Hz, 2H) , 7.66 (d, J ＝ 6.0 Hz, 2H) , 7.46 -7.53 (m, 2H) , 7.43 (d, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 7.30 -7.39 (m, J ＝8.6 Hz, 2H) , 6.98 -7.11 (m, J ＝ 8.6 Hz, 2H) , 6.07 (br. s., 1H) , 3.83 (s, 3H) , 2.32 -2.38 (m, 2H) , 2.07 (br. s., 2H) , 1.70 (br. s., 4H) . LC-MS: m/z 491.1 (M+H) +.
Compound 158
3-cyclohexenyl-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-5- (pyrazin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000107
Step E stoichiometry: 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (200 mg, 0.450 mmol) and pyrazin-2-amine (86 mg, 0.900 mmol, 2 eq) and palladium (II) acetate (111 mg, 0.495 mmol, 1.1 eq) , Xantphos (312 mg, 0.540 mmol, 1.2 eq) and sodium carbonate (323 mg, 0.990 mmol, 2.2 eq) in 1.4-dioxane (10mL) under heating at 100 ℃ through microwave irradiation for 1 hour under nitrogen atmosphere. LC-MS: m/z 505.2 (M+H) +.
Step F: A solution of 3-cyclohexenyl-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-N- (pyrazin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (150 mg, 0.30 mmol) in 4M HCl/1.4-dioxane (5 mL) was stirred at room temperature for 24 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuo. The residue was dissolved in dichloromethane: methanol ＝ 10: 1 (10 mL) and washed with saturated sodium carbonate (5 mL) twice to pH 8. The organic layer was concentrated in vacuo. The resulting residue was purified to give 3-cyclohexenyl-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-5- (pyrazin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 3.90 (s, 1 H) , 9.35 (s, 1 H) , 8.64 (s, 1 H) , 8.25 (d, J＝2.75 Hz, 1 H) , 8.20 (dd, J＝2.75, 1.22 Hz, 1 H) , 7.67 -7.77 (m, 2 H) 7.44 -7.53 (m, 2 H) , 7.37 -7.44 (m, 1 H) , 7.27 -7.36 (m, 2 H) , 6.98 -7.06 (m, 2 H) , 6.04 (br. s., 1 H) 3.81 (s, 3H) , 2.34 (br. s., 2 H) , 2.05 (br. s., 2 H) , 1.70 (d, J＝4.88 Hz, 4 H) . LC-MS: m/z 491.2 (M+H) +.
Compound 159
5- (3-cyclohexenyl-6- (4-methoxyphenyl) -7-oxo-2-phenyl-4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-ylamino) pyrazine-2-carbonitrile
Figure PCTCN2016097524-appb-000108
Step E stoichiometry: 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (500 mg, 1.07 mmol) , 5-aminopyrazine-2-carbonitrile (257 mg, 2.15 mmol) , palladium (II) acetate (48 mg, 0.214 mmol) , xantphos (124 mg, 0.214 mmol) and sodium carbonate (230 mg, 0.215 mmol) in 1, 4-dioxane (10 mL) under heating at 110 ℃ for 4 hours under nitrogen atmosphere. LC-MS: m/z 530.2 (M+H) +.
Step F: A mixture of 5- (3-cyclohexenyl-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-ylamino) pyrazine-2-carbonitrile (170 mg, 0.321 mmol) in hydrogen chloride solution (4 M in dioxane, 5 mL) was stirred at room temperature for 16 h. The mixture was evaporated to dryness. The residue was resolved in dichloromethane solution (with 10 ％methanol) and washed with aqueous sodium bicarbonate to pH 8. The organic phase was dried over sodium sulfate and evaporated to dryness. The crude product was purified to afford 5- (3-cyclohexenyl-6- (4-methoxyphenyl) -7-oxo-2-phenyl-4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-ylamino) pyrazine-2-carbonitrile as a yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 12.76 (br. s., 1 H) , 10.15 (br. s., 1 H) , 8.73 (s, 1 H) 8.44 (br. s., 1 H) , 7.75 (d, J＝7.02 Hz, 2 H) , 7.36 -7.54 (m, 3 H) , 7.28 (m, J＝8.54 Hz, 2 H) , 6.97 (m, J＝8.55 Hz, 2 H) , 5.92 (br. s., 1 H) , 3.78 (s, 3 H) , 2.25 (br. s., 2 H) , 2.04 (br. s., 2 H) , 1.68 (br. s., 4 H) . LC-MS: m/z 516.2 (M+H) +.
Compound 160
5- ( (5-aminopyrazin-2-yl) amino) -3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000109
Step E stoichiometry: 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (44mg, 0.0998 mmol) , pyrazine-2, 5-diamine (30 mg, 0.204 mmol) , palladium (II) acetate (22 mg, 0.0998 mmol) , xantphos (70 mg, 0.121 mmol) and cesium carbonate (130 g, 0.4 mmol) in 1, 4-dioxane (6 mL) under heating at 110 ℃ for 1 hour under nitrogen atmosphere. LC-MS: m/z 520.2 (M+H) +.
Step F: A mixture of N2- (3-cyclohexenyl-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) pyrazine-2, 5-diamine (90 mg, 0.18 mmol) in hydrogen chloride solution (4 M in dioxane, 5 mL) was stirred at 50 ℃ for 3 hours. The mixture was evaporated to dryness. The residue was resolved in dichloromethane solution (with 10 ％methanol) , basified with aqueous ammonia to pH 8, and then evaporated to dryness. The crude product was purified to afford 5- (5-aminopyrazin-2-ylamino) -3-cyclohexenyl-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one as white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 13.92 (s, 1H) , 8.70 (s, 1H) , 8.08 (d, J ＝ 1.2 Hz, 1H) , 7.71 (d, J ＝ 7.0 Hz, 2H) , 7.56 (s, 1H) , 7.44 -7.51 (m, 2H) , 7.41 (d, J ＝ 7.3 Hz, 1H) , 7.27 -7.33 (m, J ＝ 8.9 Hz, 2H) , 7.01 -7.07 (m, J ＝ 8.9 Hz, 2H) , 6.23 (s, 2H) , 6.04 (br. s., 1H) , 3.83 (s, 3H) , 2.33 (br. s., 2H) , 2.04 (br. s., 2H) , 1.71 (br. s., 4H) . LC-MS: m/z 506.2 (M+H) +.
Compound 161
5- ( (1, 2, 4-triazin-3-yl) amino) -3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000110
Step E stoichiometry: 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (150 mg, 0.34 mmol) and 1, 2, 4-triazin-3-amine (65 mg, 0.68 mmol, 2.0 eq) , Pd (OAc) 2 (16 mg, 0.07 mmol, 0.2 eq) , Xantphos (41 mg, 0.07 mmol, 0.2 eq) and Cs2CO3 (442 mg, 1.36 mmol, 4.0 eq) in 1.4-dioxane (10 mL) under heating at 100 ℃ for 1 hour through microwave irradiation under nitrogen atmosphere. LC-MS: m/z 505.9 (M+H) +.
Step F: A solution of 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-N- (1, 2, 4-triazin-3-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (30 mg, 0.06 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (15 mL) was stirred at 30 ℃ for 5 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuum. The residue was purified to obtain the title compound as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 12.81 (s, 1H) , 9.78 (s, 1H) , 8.92 (s, 1H) , 8.51 (s, 1H) , 7.77 (d, J ＝ 7.2 Hz, 2H) , 7.39 -7.52 (m, 3H) , 7.26 (d, J ＝8.0 Hz, 2H) , 6.93 (d, J ＝ 8.0 Hz, 2H) , 3.76 (s, 3H) , 2.21 (br. s., 2H) , 2.06 (br. s., 2H) , 1.66 (br. s., 4H) . LC-MS: m/z 492.0 (M+H) +.
Compound 162
5- ( (1, 2, 4-triazin-5-yl) amino) -3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000111
Step E stoichiometry: 5-chloro-3-cyclohexenyl-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (110 mg, 0.25 mmol) , 1, 2, 4-triazin-5-amine (50 mg, 0.50 mmol) , palladium (II) acetate (28 mg, 0.125 mmol) , xantphos (87 mg, 0.15 mmol) and cesium carbonate (180 mg, 0.55 mmol) in 1, 4-dioxane (15 mL) under heating at 105 ℃ through microwave irradiation for 45 min under nitrogen atmosphere. LC-MS: m/z 506.2 (M+H) +.
Step F: A mixture of 3-cyclohexenyl-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-N- (1, 2, 4-triazin-5-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (50 mg, 0.10 mmol) in hydrogen chloride solution (4 M in dioxane, 5 mL) was stirred at room temperature for 4 hours. The mixture was evaporated to dryness. The residue was resolved in dichloromethane solution (with 10 ％methanol) , basified with aqueous ammonia to pH 8, and then evaporated to dryness. The crude product was purified to afford 5- (1, 2, 4-triazin-5-ylamino) -3-cyclohexenyl-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 9.02 (s, 1H) , 8.64 (br. s., 1H) , 7.77 (d, J ＝ 7.0 Hz, 2H) , 7.38 -7.54 (m, 3H) , 7.26 (d, J ＝ 8.6 Hz, 2H) , 6.92 (d, J ＝ 8.9 Hz, 2H) , 5.85 (br. s., 1H) , 3.76 (s, 3H) , 2.18 (br. s., 2H) , 2.05 (br. s., 2H) , 1.66 (br. s., 4H) . LC-MS: m/z 492.2 (M+H) +.
Compound 163
5- ( (1, 3, 5-triazin-2-yl) amino) -3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000112
A suspension of 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (500mg, 1.121mmol) and 1, 3, 5-triazin-2-amine (323.2mg, 3.364 mmol, 3 eq) , Pd (OAc) 2 (50.3 mg, 0.224 mmol, 0.2 eq) , Xant-phos (259.5mg, 0.453 mmol, 0.4 eq) and Cs2CO3 (1.09 g, 3.364 mmol, 3 eq) in 1.4-dioxane (10 mL) was stirred and warmed up to 100 ℃ through microwave irradiation for 1 hour under N2 atmosphere. The reaction was then cooled to room temperature, diluted with saturated sodium hydrogen carbonate solution, and extracted with EtOAc (20X3 mL) . The combined organic layers were washed with brine (20 mL) , dried  over anhydrous sodium sulfate, and concentrated in vacuum. The residue was purified to obtain the title compound as a white solid.
1H NMR (CHLOROFORM-d) : δ 12.85 (br. s., 1 H) , 8.85 (s, 2 H) , 7.88 (d, J＝6.18 Hz, 2 H) , 7.76 (br. s., 1 H) , 7.35 -7.48 (m, 4 H) , 7.08 (d, J＝8.06 Hz, 2 H) , 6.09 (br. s., 1 H) , 3.89 (s, 2 H) , 2.37 (br. s., 2 H) , 2.12 (br. s., 2 H) , 1.77 (br. s., 3 H) , 1.68 (br. s., 1 H) , 1.23 -1.39 (m, 1 H) . LC-MS : m/z 492.0 (M+H) +.
Compound 164
5- ( (4-amino-1, 3, 5-triazin-2-yl) amino) -3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000113
Step E stoichiometry: 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (222 g, 0.5 mmol) , 1, 3, 5-triazine-2, 4-diamine (83 mg, 0.75 mmol, 1.5 eq. ) , Pd (OAc) 2 (23 mg, 0.1 mmol, 0.2 eq. ) , Xantphos (115 mg, 0.2 mmol, 0.4 eq. ) and Cs2CO3 (195 mg, 0.6 mmol, 12 eq. ) in 1.4-dioxane (4 mL) under heating at 100 ℃ through microwave irradiation for 1 hour under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 521.0 (M+H) +.
Step F: The solution of N2- (3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) -1, 3, 5-triazine-2, 4-diamine (80 mg, 0.15 mmol) in HCl-1, 4-dioxane (5 mL) . The solution was stirred at r.t. for 6 h. Solvent and volatile were removed in vacuo. The residue was dissolved in DCM (5 mL) and treated with saturated NaHCO3. The organic phase was separated and washed with brine, dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated in vacuo. The residue was purified to afford the title compound as a yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 8.28 (br. s., 1H) , 7.74 (d, J ＝ 7.2 Hz, 2H) , 7.38 -7.52 (m, 4H) , 7.31 (d, J ＝ 8.2 Hz, 2H) , 7.03 (d, J ＝ 8.2 Hz, 2H) , 5.96 (br. s., 1H) , 3.80 (s, 3H) , 2.26 (br. s., 2H) , 2.04 (br. s., 2H) , 1.68 (br. s., 4H) . LC-MS: m/z 507.0 (M+H) +.
Compound 165
3- (cyclohex-1-en-1-yl) -5- (isoxazol-3-ylamino) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000114
Step E stoichiometry: 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (1.0 g, 2.24 mmol) , isoxazol-3-amine (377.1 mg, 4.48 mmol) , and palladium diacetate (101.0 mg, 0.45 mmol) , Xantphos (388.8 mg, 0.67 mmol) and sodium carbonate (474.8 mg, 4.48 mmol) in 1, 4-dioxane (50 mL) under heating at 110 ℃ for 12 hours under nitrogen atmosphere. LC-MS: m/z 494.2 (M+H) +.
Step F: A solution of N- (3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) isoxazol-3-amine (450 mg, 0.91mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (40 mL) was stirred at r.t. for 2 hours. The mixture was concentrated at low temperature (<25℃) , and saturated NaHCO3 (8 mL) was added. The precipitate was filtered. The filter cake was suspended in DCM/MeOH (14 mL, 1: 6) , filtered and washed with MeOH (3 mL) to obtain 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -5- (isoxazol-3-ylamino) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 11.97 (s, 1H) , 9.40 (s, 1H) , 8.79 (s, 1H) , 7.72 (d, J ＝ 7.3 Hz, 2H) , 7.37 -7.56 (m, 3H) , 7.23 -7.37 (m, J ＝ 8.5 Hz, 2H) , 6.98 -7.13 (m, J ＝ 8.5 Hz, 2H) , 6.51 (s, 1H) , 6.03 (br. s., 1H) , 3.82 (s, 3H) , 2.28 (br. s., 2H) , 2.03 (br. s., 2H) , 1.68 (br. s., 4H) . LC-MS: m/z 480.2 (M+H) +.
Compound 166
5- ( (1, 2, 4-thiadiazol-5-yl) amino) -3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000115
Step E stoichiometry: 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (220 mg, 0.5 mmol) , 1, 2, 4-thiadiazol-5-amine (101 mg, 1.0 mmol, 2.0 eq) , Pd (OAc) 2 (22 mg, 0.1 mmol, 0.2 eq) , Xantphos (57.8 mg, 0.1 mmol, 0.2 eq) and Cs2CO3 (325 mg, 1.0 mmol, 2.0 eq) in 1.4-dioxane (10 mL) under heating at 100 ℃ for 1 hour through microwave irradiation under nitrogen atmosphere. LC-MS: m/z 511.2 (M+H) +.
Step F: A solution of N- (3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) -1, 2, 4-thiadiazol-5-amine (51 mg, 0.1 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (10 mL) was stirred at 30 ℃ for 5 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuum. The residue was purified to obtain the title compound as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 8.23 (s, 1H) , 7.77 (d, J ＝ 7.0 Hz, 2H) , 7.51 (d, J ＝ 7.2 Hz, 3H) , 7.29 -7.35 (d, J ＝ 8.4 Hz, 2H) , 7.01 -7.09 (d, J ＝ 8.0 Hz, 2H) , 5.95 (br. s., 1H) , 3.83 (s, 3H) , 2.24 (br. s., 4H) , 1.74 (br. s., 4H) . LC-MS: m/z 497.1 (M+H) +.
Compound 167
5- ( (1, 3, 4-thiadiazol-2-yl) amino) -3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000116
Step E stoichiometry: 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (446mg, 1 . 0mmol) , 1, 3, 4-thiadiazol-2-amine (101mg, 1.0 mmol, 1 eq) and Pd (OAc) 2 (91.5 mg, 0.1 mmol, 0.1 eq) , xant-phos (115.6mg, 0.2mmol, 0.2 eq) and Na2CO3 (212mg, 2.0mmol, 2.0 eq) in toluene (40 mL) . under heating at 110 ℃ for 5 hour under nitrogen atmosphere. LC-MS: m/z 511.2 (M+H) +.
Step F: A mixture of N- (3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) -1, 3, 4-thiadiazol-2-aminein (102mg, 0.2mmol) in 4N HCl in 1.4-dioxane (15 mL) was stirred at room temperature overnight. The mixture was concentrated in vacuo. The residue was basified with saturated sodium hydrogen carbonate solution. The precipitate was collected by filtration and dried to afford the title compound as a yellowish solid. 1H NMR (DMSO-d6) : δ 13.77 (br. s., 0.5H) , 10.56 (br. s., 0.5H) , 9.09 (br. s., 1 H) , 7.74 (d, J＝7.02 Hz, 2 H) , 7.40 -7.57 (m, 3 H) , 7.31 (m, J＝8.24 Hz, 2 H) , 7.05 (m, J＝8.55 Hz, 2 H) , 6.03 (br. s., 1 H) , 3.83 (s, 3 H) , 2.29 (br. s., 2 H) , 2.08 (br. s., 2 H) , 1.70 (br. s., 4 H) . LC-MS: m/z 497.1 (M+H) +.
The following compounds were prepared according to the procedure for preparing compound 101, step E-F, starting from 6- (5-chloro-7-methoxy-2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline.
Compound 168
2, 3-diphenyl-5- (pyridin-2-ylamino) -6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000117
A mixture of 6- (5-chloro-7-methoxy-2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline (250 mg, 0.541 mmol) , pyridin-2-amine (102 mg, 1.08 mmol) , palladium (II) acetate (121 mg, 0.541 mmol) , xantphos (296 mg, 0.541 mmol) and cesium carbonate (354 mg, 1.08 mmol) in 1, 4-dioxane (10 mL) was stirred under nitrogen atmosphere in a sealed tube and heated to 110 ℃under microwave for 1 hour. The reaction was then cooled to room temperature and filtered. The  filtrate was concentrated in vacuum. The crude product was purified to afford 2, 3-diphenyl-5- (pyridin-2-ylamino) -6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one as yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 15.93 (br. s., 1 H) , 9.36 (s, 1 H) , 8.74 (d, J＝8.06 Hz, 1 H) , 8.16 -8.34 (m, 2 H) , 8.07 (d, J＝3.76 Hz, 1 H) , 7.99 (d, J＝8.33 Hz, 1 H) , 7.75 -7.85 (m, 2 H) , 7.60 (t, J＝7.52 Hz, 4 H) , 7.39 -7.54 (m, 5 H) , 7.21 -7.28 (m, 1 H) , 7.09 -7.17 (m, 1 H) , 6.98 (s, 1 H) . LC-MS: m/z 507.2 (M+H) +.
Compound 169
2, 3-diphenyl-5- (pyrimidin-4-ylamino) -6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000118
Step E stoichiometry: 6- (5-chloro-7-methoxy-2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline (600 mg, 1.3 mmol) , pyrimidin-4-amine (148 mg, 1.56 mmol, 1.2 eq) , Pd (OAc) 2 (43.7 mg, 0.19 mmol, 0.15 eq) , Xantphos (112 mg, 0.19 mmol, 0.15 eq) and Cs2CO3 (844 mg, 2.6 mmol, 2.0 eq) in 1.4-dioxane (15 mL) under heating at 110 ℃ through microwave irradiation for 1 hour under nitrogen atmosphere. LC-MS: m/z 521.9 (M+H) +.
Step F: A solution of 7-methoxy-2, 3-diphenyl-N- (pyrimidin-4-yl) -6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (271 mg, 0.52 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (15 mL) was stirred at 30 ℃ for 5 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuum. The residue was purified to obtain the title compound as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 14.65 (s, 1H) , 9.64 (s, 1H) , 8.92 (s, 1H) , 8.43 (m, 4H) , 8.12 –7.96 (m, 2H) , 7.83 (d, J ＝ 8.0 Hz, 2H) , 7.55 (m, 3H) , 7.50 (d, J ＝ 6.8 Hz, 2H) , 7.37 (s, 4H) , 7.19 (s, 1H) . LC-MS: m/z 507.9 (M+H) +.
Compound 170
5- (isoxazol-3-ylamino) -2, 3-diphenyl-6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000119
Step E stoichiometry: 6- (5-chloro-7-methoxy-2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline (100 mg, 0.216 mmol) , isoxazol-3-amine (92 mg, 0.432 mmol) , palladium (II) acetate (53 mg, 0.238 mmol) , xantphos (150 mg, 0.259 mmol) and sodium carbonate (51mg, 0.475 mmol) in 1, 4-dioxane (10 mL) under heating at 100 ℃ through microwave irradiation for 1 hour under nitrogen atmosphere. LC-MS: m/z 511.2 (M+H) +.
Step F: A mixture of N- (7-methoxy-2, 3-diphenyl-6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) isoxazol-3-amine (90 mg, 0.097 mmol) in hydrogen chloride solution (4 M in dioxane, 4 mL) was stirred at room temperature for 10 h. The mixture was evaporated to dryness. The residue was resolved in dichloromethane solution (with 10 ％methanol) , basified with aqueous ammonia to pH 8, and then evaporated to dryness. The crude product was purified to afford 5- (isoxazol-3-ylamino) -2, 3-diphenyl-6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one as white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 9.39 (d, J＝4.03 Hz, 1 H) , 9.31 (d, J＝8.33 Hz, 1 H) , 8.75 (d, J＝1.61 Hz, 1 H) , 8.51 (s, 1 H) , 8.39 (d, J＝8.87 Hz, 1 H) , 8.25 (d, J＝8.87 Hz, 1 H) , 8.17 (dd, J＝8.33, 5.37 Hz, 1 H) , 7.47-7.58 (m, 4 H) , 7.31-7.46 (m, 6 H) , 6.44 (bs, 1 H) . LC-MS: m/z 497.2 (M+H) +.
Compound 171
ethyl 5- ( (7-oxo-2, 3-diphenyl-6- (quinolin-6-yl) -4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) -1, 3, 4-oxadiazole-2-carboxylate
Figure PCTCN2016097524-appb-000120
A suspension of 6- (5-chloro-7-methoxy-2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline (200 mg, 0.43 mmol) , ethyl 5-amino-1, 3, 4-oxadiazole-2-carboxylate (135 mg, 0.86 mmol, 2 eq. ) , Pd (OAc) 2 (20 mg, 0.09 mmol, 0.2 eq. ) , Xantphos (75 mg, 0.13 mmol, 0.3 eq. ) and Cs2CO3 (282 mg, 0.87 mmol, 2.0 eq. ) in 1.4-dioxane (5 mL) was stirred at 100 ℃ for 16 h under N2 atmosphere. The mixture was filtered through celite, and the filtrate was concentrated in vacuo. The residue was purified to afford the title compound as a orange solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 12.55 (br. s., 1H) , 9.10 (br. s., 1H) , 8.85 (br. s., 1H) , 8.31 (br. s., 1H) , 8.15 -8.23 (m, 1H) , 8.04 -8.15 (m, 1H) , 7.84 (br. s., 1H) , 7.42 -7.60 (m, 4H) , 7.38 (d, J ＝ 6.2 Hz, 7H) , 4.32 (q, J ＝ 7.2 Hz, 2H) , 1.28 (t, J ＝ 7.2 Hz, 3H) . LC-MS: m/z 570.0 (M+H) +.
Compound 172
N- (7-oxo-2, 3-diphenyl-6- (quinolin-6-yl) -4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) acetamide
Figure PCTCN2016097524-appb-000121
Step E stoichiometry: 6- (5-chloro-7-methoxy-2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline (230 mg, 0.5 mmol) and acetamide (59 mg, 1.0 mmol, 2.0 eq) , Pd (OAc) 2 (11 mg, 0.05 mmol, 0.1 eq) , Xantphos (116 mg, 0.2 mmol, 0.4 eq) and Cs2CO3 (325 mg, 1.0 mmol, 2.0 eq) in  1.4-dioxane (10 mL) under heating at 100 ℃ through microwave irradiation for 1 hour under nitrogen atmosphere. LC-MS: m/z 586.2 (M+H) +.
Step F: A solution of N- (7-methoxy-2, 3-diphenyl-6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) acetamide (100 mg, 0.21 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (20 mL) was stirred at 30 ℃ for 5 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuum. The residue was purified to obtain the title compound as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 12.96 (br. s., 1H) , 10.12 (br. s., 1H) , 8.92 (br. s., 1H) , 8.40 (br. s., 1H) , 8.05 (br. s., 1H) , 7.99 (br. s., 1H) , 7.76 (d, J ＝ 8.6 Hz, 1H) , 7.42 -7.64 (m, 5H) , 7.30 -7.42 (m, 5H) , 1.86 -2.03 (m, 3H) . LC-MS: m/z 472.0 (M+H) +.
Compound 173
2-hydroxy-N- (7-oxo-2, 3-diphenyl-6- (quinolin-6-yl) -4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) acetamide
Figure PCTCN2016097524-appb-000122
Step A: 2- (benzyloxy) -N- (7-oxo-2, 3-diphenyl-6- (quinolin-6-yl) -4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) acetamide
Figure PCTCN2016097524-appb-000123
A suspension of 6- (5-chloro-7-methoxy-2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline (200 g, 0.43 mmol) , 2- (benzyloxy) acetamide (143 mg, 0.86 mmol, 2 eq. ) , Pd (OAc) 2 (20 mg, 0.09 mmol, 0.2 eq. ) , Xantphos (75 mg, 0.13 mmol, 0.3 eq. ) and Cs2CO3 (282 mg, 0.86 mmol, 2 eq. ) in 1.4-dioxane (5 mL) was stirred at 100 ℃ through microwave irradiation for 1 hour under N2 atmosphere. The mixture was filtered through celite and the filtrate was concentrated in vacuo. The residue was purified by prep-TLC (DCM/MeOH ＝ 10/1) to afford the desired product as a yellow solid (120 mg) .
1H NMR (DMSO-d6) : δ 12.66 (br. s., 1H) , 9.65 (br. s., 1H) , 8.91 (br. s., 1H) , 8.33 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.96 -8.06 (m, 2H) , 7.74 -7.82 (m, 1H) , 7.44 -7.56 (m, 4H) , 7.33 -7.44 (m, 7H) , 7.13 -7.23 (m, 3H) , 7.01 (d, J ＝ 7.3 Hz, 2H) , 4.32 (s, 2H) , 3.97 (s, 2H) . LC-MS: m/z 578.0 (M+H) +.
Step B: 2-hydroxy-N- (7-oxo-2, 3-diphenyl-6- (quinolin-6-yl) -4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) acetamide
Figure PCTCN2016097524-appb-000124
To a solution of 2- (benzyloxy) -N- (7-oxo-2, 3-diphenyl-6- (quinolin-6-yl) -4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) acetamide (90 mg, 0.156mmol) in DCM (5 mL) was added BBr3 (156 mg, 0.623 mmol, 4 eq. ) at 0 ℃. The mixture was stirred at r.t. for 2h. The reaction was quenched with MeOH at 0 ℃ and evaporated. The residue was purified to afford the title compound as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 12.67 (br. s., 1H) , 10.91 (br. s., 1H) , 8.79 -8.93 (m, 1H) , 8.28 -8.40 (m, 1H) , 7.90 -8.09 (m, 2H) , 7.73 -7.85 (m, 1H) , 7.26 -7.56 (m, 11H) , 6.20 (br. s., 1H) , 3.85 (br. s., 2H) . LC-MS: m/z 487.9 (M+H) +.
The following compounds were prepared according to the procedure for preparing compound 101, step E-F) , starting from 6- (5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline.
Compound 174
3-cyclohexenyl-2-phenyl-5- (pyridin-2-ylamino) -6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000125
Step E stoichiometry: 6- (5-chloro-3-cyclohexenyl-7-methoxy-2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline (380 mg, 0.814 mmol) , pyridin-2-amine (153 mg, 1.63 mmol) , palladium (II) acetate (18 mg, 0.0814 mmol) , xantphos (45 mg, 0.0814 mmol) and sodium carbonate (173 mg, 1.63 mmol) in 1, 4-dioxane (10 mL) under heating at 110 ℃ for 1 hour through microwave irradiation under nitrogen atmosphere. LC-MS: m/z 525.2 (M+H) +.
Step F: A mixture of 7-methoxy-2, 3-diphenyl-N- (pyrazin-2-yl) -6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (125 mg, 0.238 mmol) in hydrogen chloride solution (4 M in dioxane, 5 mL) was stirred at room temperature for 16 h. The mixture was evaporated to dryness. The residue was resolved in dichloromethane solution (with 10 ％methanol) and washed with aqueous sodium bicarbonate to pH 8. The organic phase was dried over sodium sulfate and evaporated to dryness. The crude product was purified to afford 3-cyclohexenyl-2-phenyl-5- (pyridin-2-ylamino) -6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] -pyrimidin-7 (4H) -one as a yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 15.37 (br. s., 1 H) , 9.35 (s, 1 H) , 9.18 (br. s., 1 H) , 8.87 (d, J＝8.24 Hz, 1 H) , 8.18 -8.36 (m, 3 H) , 8.04 (d, J＝8.55 Hz, 1 H) , 7.88 (dd, J＝7.93, 4.88 Hz, 1 H) , 7.81 (t, J＝7.02 Hz, 1 H) , 7.75 (d, J＝7.63 Hz, 2 H) , 7.47 -7.56 (m, 2 H) , 7.38 -7.46 (m, 1 H) , 7.22 (d, J＝8.54 Hz, 1 H) , 7.10 -7.18 (m, 1 H) , 6.11 (br. s., 1 H) , 2.38 (br. s., 2 H) , 2.09 (s, 2 H) , 1.73 (br. s., 4 H) . LC-MS: m/z 511.2 (M+H) +.
Compound 175
3-cyclohexenyl-2-phenyl-5- (pyrazin-2-ylamino) -6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000126
Step E stoichiometry: 6- (5-chloro-3-cyclohexenyl-7-methoxy-2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline (120 mg, 0.257 mmol) , pyrazin-2-amine (50 mg, 0.515 mmol) , palladium (II) acetate (11 mg, 0.050 mmol) , xantphos (32 mg, 0.055 mmol) and cesium carbonate (171 mg, 0.515 mmol) in 1, 4-dioxane (5 mL) under heating at 110 ℃ for 1 hour through microwave irradiation under nitrogen atmosphere. LC-MS: m/z 526.2 (M+H) +.
Step F: A mixture of 7-methoxy-2, 3-diphenyl-N- (pyrazin-2-yl) -6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (70 mg, 0.133 mmol) in hydrogen chloride solution (4 M in dioxane, 5 mL) was stirred at room temperature for 4 h. The mixture was evaporated to dryness. The residue was resolved in dichloromethane solution (with 10 ％methanol) and washed with aqueous sodium bicarbonate to pH 8. The organic phase was dried over sodium sulfate and evaporated to dryness. The crude product was purified to afford 2, 3-diphenyl-5- (pyrazin-2-ylamino) -6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one as a yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 14.04 (s, 1 H) , 9.57 (s, 1 H) , 8.94 (br. s., 1 H) , 8.55 (s, 1 H) , 8.41 (d, J＝7.93 Hz, 1 H) , 8.24 (s, 1 H) , 8.26 (s, 1 H) , 8.04 -8.13 (m, 2 H) , 7.81 (d, J＝8.54 Hz, 1 H) , 7.75 (d, J＝7.32 Hz, 2 H) , 7.57 (br. s., 1 H) , 7.47 -7.53 (m, 2 H) , 7.44 (d, J＝7.02 Hz, 2 H) , 2.36 (br. s., 2H) , 2.09 (br. s., 2 H) , 1.72 (br. s., 4 H) . LC-MS: m/z 512.2 (M+H) +.
Compound 176
3-cyclohexenyl-5- (isoxazol-3-ylamino) -2-phenyl-6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000127
Step E stoichiometry: 6- (5-chloro-3-cyclohexenyl-7-methoxy-2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline (240 mg, 0.510 mmol) , isoxazol-3-amine (218 mg, 1.02 mmol) , palladium (II) acetate (126 mg, 0.560 mmol) , xantphos (354 mg, 0.612 mmol) and sodium carbonate (119 mg, 1.12 mmol) in 1, 4-dioxane (10 mL) under heating at 100 ℃ for 16 hours under nitrogen atmosphere. LC-MS: m/z 515.2 (M+H) +.
Step F: A mixture of N- (3-cyclohexenyl-7-methoxy-2-phenyl-6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) isoxazol-3-amine (50 mg, 0.097 mmol) in hydrogen chloride solution (4 M in dioxane, 4 mL) was stirred at room temperature for 2 h. The mixture was evaporated to dryness. The residue was resolved in dichloromethane solution (with 10 ％methanol) , basified with aqueous ammonia to pH 8, and then evaporated to dryness. The crude product was purified to afford 3-cyclohexenyl-5- (isoxazol-3-ylamino) -2-phenyl-6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 9.39 (d, J＝4.30 Hz, 1 H) , 9.29 (d, J＝8.33 Hz, 1 H) , 8.78 (s, 1 H) , 8.48 (s, 1 H) , 8.40 (d, J＝8.86 Hz, 1 H) , 8.23 (d, J＝8.86 Hz, 1 H) , 8.16 (dd, J＝8.19, 5.51 Hz, 1 H) , 7.75 (d, J＝7.25 Hz, 2 H) 7.38-7.59 (m, 4 H) , 7.36 (bs, 1 H) , 6.43 (s, 1 H) , 6.06 (bs, 1 H) , 2.30 (bs, 2 H) , 2.06 (bs, 2 H) , 1.70 (bs, 2 H) 1.23 (bs, 2 H) . LC-MS: m/z 501.2 (M+H) +.
Compound 177
3- (cyclohex-1-en-1-yl) -5- (isoxazol-3-ylamino) -2-phenyl-6- (quinoxalin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000128
Step A: N- (3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-2-phenyl-6- (quinoxalin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) isoxazol-3-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000129
The solution of 6- (5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoxaline (80 mg, 0.17 mmol) , isoxazol-3-amine (43.1 mg, 0.51 mmol) , palladium diacetate (19.2 mg, 0.09 mmol) , Xantphos (59.4 mg, 0.10 mmol) and sodium carbonate (54.1 mg, 0.51 mmol) in 1, 4-dioxane (8 mL) was refluxed for 12 hours under nitrogen atmosphere. After cooling to room temperature, the mixture was concentrated to dryness. The residue was purified by flash column (DCM: MeOH＝30: 1) to obtain N- (3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-2-phenyl-6-(quinoxalin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) isoxazol-3-amine (12 mg) as yellow solid. LC-MS: m/z 516.2 (M+H) +.
Step B: 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -5- (isoxazol-3-ylamino) -2-phenyl-6- (quinoxalin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000130
A solution of N- (3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-2-phenyl-6- (quinoxalin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) isoxazol-3-amine (12 mg, 0.02mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (2 mL) was stirred at r.t. for 2 hours. The mixture was concentrated, and saturated NaHCO3 (3 mL) was added. The precipitate was filtered, washed with water (1 mL) and MeOH (1 mL) , and dried to obtain 3-(cyclohex-1-en-1-yl) -5- (isoxazol-3-ylamino) -2-phenyl-6- (quinoxalin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one as a yellow solid.
1H NMR (TFA-d) : δ 8.97 (s, 2H) , 8.74 (d, J ＝ 1.6 Hz, 1H) , 8.14 -8.22 (m, 2H) , 7.91 (dd, J ＝ 8.6, 1.9 Hz, 1H) , 7.75 (d, J ＝ 7.0 Hz, 2H) , 7.36 -7.54 (m, 3H) , 6.42 (d, J ＝ 1.9 Hz, 1H) , 6.07 (br. s., 1H) , 2.30 (br. s., 2H) , 2.06 (d, J ＝ 7.0 Hz, 2H) , 1.70 (br. s., 4H) . LC-MS: m/z 502.2 (M+H) +.
Compound 178
3- (3-chlorophenyl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-5- (pyridin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000131
Figure PCTCN2016097524-appb-000132
Step A: 2- (3-chlorophenyl) -3-oxo-3-phenylpropanenitrile
Figure PCTCN2016097524-appb-000133
To a solution of 2- (3-chlorophenyl) acetonitrile (6.0 g, 39.58 mmol) in THF (40 mL) cooled at-78 ℃ was added NaHMDS (29.7 mL, 59.37 mmol, 2.0 M in THF) dropwise. After addition, the mixture was stirred at -78 ℃ for 1 hour. Then benzoyl chloride (5.5 mL, 47.50 mmol) was added dropwise. The reaction was slowly warmed to room temperature and stirred for 12 hours. The reaction was quenched by saturated NH4Cl (150 mL) , extracted with ethyl acetate (200 mL) , washed with water (60 mL) and brine (60 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated to obtain crude product (16 g) which was directly used in the next step without further purification.
Step B: 4- (3-chlorophenyl) -3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000134
The solution of 2- (3-chlorophenyl) -3-oxo-3-phenylpropanenitrile (16 g, crude) and NH2NH2 (11.5 mL, 237.48 mmol) in EtOH/AcOH (80 mL/20 mL) was stirred at 80 ℃ for 6 hours. After cooling to room temperature, the mixture was concentrated by vacuum. The residue was diluted with EtOAc (200 mL) , washed with saturated NaHCO3 (100 mL) and brine (50 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated. The residue was purified by flash column (petroleum ether/ethyl acetate＝3: 1) to obtain 4- (3-chlorophenyl) -3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine (1.6 g) as a yellow solid.
1H NMR (CHLOROFORM-d) : δ 7.79 -7.85 (m, 3H) , 7.51 -7.56 (m, 1H) , 7.42 -7.48 (m, 3H) , 7.29 -7.36 (m, 2H) . LC-MS: m/z 270.1 (M+H) +.
Step C: 3- (3-chlorophenyl) -5-hydroxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000135
The suspention of 4- (3-chlorophenyl) -3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine (1.6 g, 5.93 mmol) and dimethyl 2- (4-methoxyphenyl) malonate (1.7 g, 7.12 mmol) in xylene (30 mL) was stirred at 150 ℃ for 12 hours. After cooling to room temperature, the mixture was filtered and washed with MeOH (2 mL) to obtain 3- (3-chlorophenyl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine-5, 7 (4H, 6H) -dione (830 mg) as a white solid. LC-MS: m/z 444.1 (M+H) +.
Step D: 5, 7-dichloro-3- (3-chlorophenyl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine
Figure PCTCN2016097524-appb-000136
The solution of 3- (3-chlorophenyl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine-5, 7 (4H, 6H) -dione (800 mg, 1.80 mmol) , N, N-dimethylaniline (436.8 mg, 3.60 mmol) and pentachlorophosphorane (375.3 mg, 1.80 mmol) in POCl3 (8 mL) in a sealed tube was stirred at 100 ℃ for 8 hours. After cooling to room temperature, the solvent was removed by vacuum. The residue was cooled to 0 ℃ and basified by adding MeOH (6 mL) . The precipitate was filtered to obtain 5, 7-dichloro-3- (3-chlorophenyl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (700 mg) as a yellow solid. LC-MS: m/z 480.1 (M+H) +.
Step E: 5-chloro-3- (3-chlorophenyl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine
Figure PCTCN2016097524-appb-000137
To the solution of 5, 7-dichloro-3- (3-chlorophenyl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (700 mg, 1.46 mmol) in DCM/MeOH (20 mL, 1: 1) cooled at 0 ℃ was added sodium methanolate (0.9 mL, 5.0 M in methanol) dropwise. Then the mixture was stirred at 0 ℃ for 15 minutes. Saturated NH4Cl (50 mL) was added to quench the reaction. The mixture was extracted with DCM (100 mL) , washed with brine (30 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated. The residue was purified by flash column (petroleum ether/ethyl acetate/DCM＝20: 1: 1) to obtain 5-chloro-3- (3-chlorophenyl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (520 mg) as a yellow solid.
1H NMR (CHLOROFORM-d) : δ 7.64 -7.68 (m, 2H) , 7.56 -7.59 (m, 1H) , 7.39 -7.45 (m, 4H) , 7.34 -7.37 (m, 2H) , 7.30 -7.33 (m, 2H) , 7.03 -7.08 (m, 2H) , 4.16 (s, 3H) , 3.92 (s, 3H) . LC-MS: m/z 476.1 (M+H) +.
Step F: 3- (3-chlorophenyl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-N- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000138
The mixture of 5-chloro-3- (3-chlorophenyl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo- [1, 5-a] pyrimidine (120 mg, 0.25 mmol) , pyridin-2-amine (47.4 mg, 0.50 mmol) , palladium diacetate (28.3 mg, 0.13 mmol) , Xantphos (72.9 mg, 0.13 mmol) and cesium carbonate (123.1 mg, 0.38 mmol) in 1, 4-dioxane (6 mL) was reacted in microwave reactor at 120 ℃ for 1.5 hours under nitrogen atmosphere. After cooling to room temperature, the mixture was filtered with celite, diluted with DCM (100 mL) , washed with saturated brine (30mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated to dryness. The residue was purified by flash column (petroleum ether/ethyl acetate /DCM/＝6: 1: 1) to obtain 3- (3-chlorophenyl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-N- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (78 mg) as a yellow solid. LC-MS: m/z 534.2 (M+H) +.
Step G: 3- (3-chlorophenyl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-5- (pyridin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000139
A solution of 3- (3-chlorophenyl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-N- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (70 mg, 0.13mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (6 mL) was stirred at r.t. for 3 hours. The mixture was concentrated, and saturated NaHCO3 (6 mL) was added. The precipitate was filtered and washed with water (3 mL) . The solid was suspended in DCM/MeOH (5 mL, 1: 1) , filtered, and washed with MeOH (2 mL) to obtain 3- (3-chlorophenyl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-5- (pyridin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one as a yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 15.73 (s, 1H) , 9.05 (s, 1H) , 8.11 (d, J ＝ 3.8 Hz, 1H) , 7.81 (t, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 7.53 -7.60 (m, 4H) , 7.40 -7.50 (m, 4H) , 7.30 -7.38 (m, 4H) , 7.09 -7.15 (m, 1H) , 7.07 (d, J ＝ 8.6 Hz, 2H) , 3.85 (s, 3H) . LC-MS: m/z 520.3 (M+H) +.
Compound 179
3- (2-fluorophenyl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-5- (pyridin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000140
Step A: 2- (2-fluorophenyl) -3-oxo-3-phenylpropanenitrile
Figure PCTCN2016097524-appb-000141
To a solution of 2- (2-fluorophenyl) acetonitrile (5.4 g, 40 mmol) in anhydrous THF (50 mL) was added dropwise of LDA (26 mL, 52 mmol, 1.3 eq) at -78℃. After addition, the mixture was stirred at -78℃ for 0.5 h. Then methyl benzoate (6.0 g, 44 mmol, 1.1 eq) in THF (10 mL) was added slowly and stirred at RT overnight. The suspension was quenched with NH4Cl solution (30 mL) and extracted with EA. The organic phase was washed with water and brine, dried over anhydrous Na2SO4, filtered, and concentrated under reduced pressure to give 2- (2-fluorophenyl) -3-oxo-3-phenylpropanenitrile (12 g, crude) which was used directly to the next step without further purification. LC-MS: m/z 240.1 (M+H) +.
Step B: 4- (2-fluorophenyl) -3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000142
To a solution of 2- (2-fluorophenyl) -3-oxo-3-phenylpropanenitrile (12 g, 40 mmol) in EtOH (80 mL) and AcOH (20 mL) was added hydrazine hydrate (4.48 g, 80 mmol, 2.0 eq) . Then the reaction mixture was stirred at reflux for 4h. The solvents were removed in vacuo, and the residue was adjusted to 8～9 with saturated sodium bicarbonate solution. The mixture was extracted with EtOAc, dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography on silica gel (EtOAc/PE＝1/1) to afford the desired product (1.3 g) . LC-MS: m/z 254.1 (M+H) +.
step C: 3- (2-fluorophenyl) -5-hydroxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000143
The dimethyl 2- (4-methoxyphenyl) malonate (886 mg, 3.7 mol, 1.2 eq) , 4- (2-fluorophenyl) -3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine (780 mg, 3.1 mol, 1.0eq) and xylene (15 mL) were added into the 100 mL bottle and heated to 150℃for 8h. The reaction mixture was then cooled to room temperature.
The mixture was filtered off, and the filter cake was washed with PE to afford the desired product 3- (2-fluorophenyl) -5-hydroxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (1 g) as a white solid. LC-MS: m/z 427.9 (M+H) +.
Step D: 5, 7-dichloro-3- (2-fluorophenyl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine
Figure PCTCN2016097524-appb-000144
A solution of 3- (2-fluorophenyl) -5-hydroxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (1.0 g, 2.3 mmol) in phosphorus oxychloride (10 mL) was heated to reflux overnight. The mixture was concentrated under reduced pressure. The residue was added slowly into MeOH (10 mL) and filtered. The filter cake was washed with MeOH to afford the desired product 5, 7-dichloro-3- (2-fluorophenyl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (890 mg) as a white solid. LC-MS: m/z 464.1 (M+H) +.
Step E: 5-chloro-3- (2-fluorophenyl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine
Figure PCTCN2016097524-appb-000145
To a solution of 5, 7-dichloro-3- (2-fluorophenyl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (463 mg, 1 mmol) in DCM (10 mL) and MeOH (10 mL) cooled at 0℃ was added dropwise the sodium methoxide (1 mL, 5mol, 30％in MeOH) . Then the reaction mixture was stirred at 0℃ for 0.5h. The suspension was quenched with NH4Cl solution (30 mL) and extracted with EA. The combined organic phase was washed with water and brine, dried over anhydrous Na2SO4, filtered, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography on silica gel (EtOAc/PE＝1/5) to afford the desired product. 5-chloro-3- (2-fluorophenyl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (390 mg) . LC-MS: m/z 460.1 (M+H) +.
Step F: 3- (2-fluorophenyl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-N- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000146
A suspension of 5-chloro-3- (2-fluorophenyl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (230 mg, 0.5 mmol) , pyridin-2-amine (94 mg, 1 mmol, 2.0 eq) , Pd (OAc) 2 (22 mg, 0.1 mmol, 20 mol％) , Xantphos (115 mg, 0.2 mmol, 40 mol％) and Cs2CO3  (325 mg, 1 mmol, 2.0 eq) in 1.4-dioxane (10 mL) in a 10mL microwave vial was heated at 100℃under microwave irradiation for 1h under N2 atmosphere. The reaction was then cooled and filtered. The dark filtrate was concentrated in vacuum. The residue was purified by column chromatography on silica gel (EtOAc/PE＝1/4) to afford the desired product 3- (2-fluorophenyl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-N- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (100 mg) . LC-MS: m/z 518.2 (M+H) +.
Step G: 3- (2-fluorophenyl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-5- (pyridin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000147
A solution of 3- (2-fluorophenyl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-N- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (85 mg, 0.16 mmol) in 4M HCl in 1.4-dioxane (10 mL) was stirred at 30 ℃ for 18 hours. The reaction mixture was concentrated in vacuum. The residue was stirred with EA (10 mL) and PE (5 mL) at rt for 30 min. The precipitate was filtered off to afford the title compound as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 8.04 (d, J ＝ 4.8 Hz, 1H) , 7.89 (s, 1H) , 7.49 -7.59 (m, 3H) , 7.31 -7.45 (m, 9H) , 7.11 (t, J ＝ 6.4 Hz, 1H) , 7.03 (d, J ＝ 8.4 Hz, 2H) , 3.82 (s, 3H) . LC-MS: m/z 504.0 (M+H) +.
Compound 180
6- (4-methoxyphenyl) -3-phenyl-2- (pyridin-2-yl) -5- (pyridin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000148
Step A: 3-oxo-2-phenyl-3- (pyridin-2-yl) propanenitrile
Figure PCTCN2016097524-appb-000149
To a solution of methyl picolinate (20 g, 0.15mol) and 2-phenylacetonitrile (20 g, 0.18 mol) in THF (200 mL) was added slowly NaHDMS (80 mL, 2 mmol/mL) at 0 ℃. Then the reaction  mixture was stirred for 1h at 0 ℃ and allowed to room temperature overnight. The mixture was poured into water and extracted with ethyl acetate (100 mL*3) . The organic layer was dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, and concentrated in vacuo to give 3-oxo-2-phenyl-3- (pyridin-2-yl) propanenitrile (crude, 25 g) . LC-MS: m/z 223.3 (M+H) +.
Step B: 4-phenyl-3- (pyridin-2-yl) -1H-pyrazol-5-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000150
To a solution of 3-oxo-2-phenyl-3- (pyridin-2-yl) propanenitrile (25 g, 0.126 mol) in EtOH (200 mL) was added AcOH (20 mL) . The reaction mixture was heated to 60 ℃ for 10 minutes, and then hydrazine monohydrate (7 g, 0.138 mol) was added dropwise via a syringe. Then the reaction mixture was stirred for 4h at 60 ℃. The mixture was concentrated to dryness. The residue was poured into water and extracted with ethyl acetate (100 mL*3) . The organic layer was dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and concentrated to give the crude product. The crude product was purified by column chromatography on silica gel (eluting PE/EA＝2: 1) to give 4-phenyl-3- (pyridin-2-yl) -1H-pyrazol-5-amine (3g) . LC-MS: m/z 237.2 (M+H) +.
Step C: 6- (4-methoxyphenyl) -3-phenyl-2- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine-5, 7 (4H, 6H) -dione
Figure PCTCN2016097524-appb-000151
A solution of 4-phenyl-3- (pyridin-2-yl) -1H-pyrazol-5-amine (1.5 g, 6.35 mmol) and dimethyl 2- (4-methoxyphenyl) malonate (1.67 g, 7.0 mmol) in toluene (50 mL) was heated to 140 ℃overnight. The reaction mixture was cooled to room temperature. The precipitate was filtered off to give 6- (4-methoxyphenyl) -3-phenyl-2- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine-5, 7 (4H, 6H) -dione (1.2 g) . LC-MS: m/z 411.2 (M+H) +.
Step D: 5, 7-dichloro-6- (4-methoxyphenyl) -3-phenyl-2- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine
Figure PCTCN2016097524-appb-000152
A solution of 6- (4-methoxyphenyl) -3-phenyl-2- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine-5, 7 (4H, 6H) -dione (1g, 2.44 mmol) in POCl3 (15 mL) in a sealed tube was heated to 120 ℃overnight. The reaction mixture was cooled to room temperature and concentrated in vacuo. The residue was adjusted to PH＝7 by adding saturated NaHCO3 solution, extracted with ethyl acetate (50 mL*3) , filtered, and concentrated to dryness. The residue was purified by column chromatography on silica gel (eluting PE/EA＝10: 1) to give 5, 7-dichloro-6- (4-methoxyphenyl) -3-phenyl-2- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (900 mg) . LC-MS: m/z 447.3 (M+H) +.
Step E: 5-chloro-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -3-phenyl-2- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine
Figure PCTCN2016097524-appb-000153
To a solution of 5, 7-dichloro-6- (4-methoxyphenyl) -3-phenyl-2- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (900 mg, 2.0 mmol) in MeOH (50 mL) was added NaOMe (0.5 mL, 5.0 mmol/mL) at 0 ℃. The reaction mixture was stirred for 30 mins. The mixture was adjusted to PH＝7 by adding 1N HCl solution. Then the mixture was poured into water and extracted with ethyl acetate, dried over anhydrous Na2SO4, filtered, and concentrated. The resultant solid was washed with ethyl acetate to give the desired product 5-chloro-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -3-phenyl-2- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (500 mg) . LC-MS: m/z 443.4 (M+H) +.
Step F: 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -3-phenyl-N, 2-di (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000154
A mixture of 5-chloro-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -3-phenyl-2- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (150 mg, 0.34 mmol) , pyridin-2-amine (35 mg, 0.37 mmol) , Pd (OAc) 2 (7.6 mg, 0.034 mmol) , xantphos (40 mg, 0.068 mmol) , and Cs2CO3 (222 mg) in dioxane (5 mL) was heated to 120 ℃ for 2h under N2. The mixture was cooled to room temperature and concentrated in vacuo. The residue was purified by column chromatography on silica gel (eluting DCM/MeOH＝20: 1) to give the desired product (crude, 80 mg) , which was used directly to the next step without further purification.
Step G: 6- (4-methoxyphenyl) -3-phenyl-2- (pyridin-2-yl) -5- (pyridin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000155
To a solution of 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -3-phenyl-N, 2-di (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (crude 80 mg) in MeOH (5 mL) was added HCl in dioxane (5 mL, 4mmol/mL) . The reaction mixture was stirred for 30 mins. The reaction mixture was concentrated in vacuo. The residue was basified with saturated NaHCO3. The solid was collected by filtration to give the desired product 6- (4-methoxyphenyl) -3-phenyl-2- (pyridin-2-yl) -5- (pyridin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 15.86 (s, 1H) , 9.05 (s, 1H) , 8.52 (d, J ＝ 4.8 Hz, 1H) , 7.98 -8.10 (m, 1H) , 7.92 (d, J ＝ 3.8 Hz, 2H) , 7.80 (s, 1H) , 7.45 -7.60 (m, 4H) , 7.27 -7.45 (m, 5H) , 7.00 -7.14 (m, 3H) , 3.84 (s, 3H) . LC-MS: m/z 487.2 (M+H) +.
Compound 181
6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-3- (piperidin-1-yl) -5- (pyridin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000156
Step A: 5-hydroxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-3- (piperidin-1-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000157
A suspension of 3-phenyl-4- (piperidin-1-yl) -1H-pyrazol-5-amine (2g, 8.254mmol) and dimethyl 2- (4-methoxyphenyl) malonate (2.95g, 12.38mmol) in tributylamine (25mL) was warmed up to180 ℃ for 2.5 hours under N2 protection. The mixture was cooled to the room temperature and stirred with petroleum ether. The precipitates was filtered and washed with EtOAc to afford 5-hydroxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-3- (piperidin-1-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (3g) as a yellow solid. LC-MS: m/z 417.2 (M+H) +.
Step B: 5, 7-dichloro-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-3- (piperidin-1-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine
Figure PCTCN2016097524-appb-000158
The solution of 5-hydroxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-3- (piperidin-1-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (3g, 7.203mmol) in POCl3 (30 mL) was warmed up to 100 ℃ overnight. The reaction mixture was concentrated to remove POCl3. The residue was basified with saturated sodium hydrogen carbonate solution at 0 ℃, and extracted with EtOAc (3X30 mL) . The combined organic layers were washed with brine (30 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated in vacuum to afford crude product (2.5g) as a yellow solid. LC-MS: m/z 453.1 (M+H) +.
Step C: 5-chloro-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-3- (piperidin-1-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine
Figure PCTCN2016097524-appb-000159
To a solution of 5, 7-dichloro-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-3- (piperidin-1-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (1g, 2.4mmol) in methanol (20 mL) was added MeONa (30％wt in methanol, 1.3 mL, 7.2mmol) at 0 ℃ and stirred at 0 ℃ for 3 hours. The reaction was quenched with ice water at 0 ℃, diluted with saturated sodium hydrogen carbonate solution at 0 ℃, and extracted with EtOAc (2X20 mL) . The combined organic layers were washed with brine (30 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated in vacuum. The residue was purified by silica gel column (DCM: MeOH＝30: 1) to afford 5-chloro-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-3- (piperidin-1-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (550mg) as a yellow solid. LC-MS: m/z 449.2 (M+H) +.
Step D: 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-3- (piperidin-1-yl) -N- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000160
A suspension of 5-chloro-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-3- (piperidin-1-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (200mg, 0.446mmol) , pyridin-2-amine (125mg, 12.38 mmol, 3 eq) , Pd (OAc) 2 (20mg, 0.089 mmol, 0.2 eq) , Xant-phos (103mg, 0.178mmol, 0.4 eq) and Na2CO3 (188mg, 1.782 mmol, 4 eq) in 1, 4-dioxane (5 mL) was stirred and warmed up to 100 ℃ through microwave irradiation for 1 hour under N2 atmosphere. The reaction was cooled to room temperature, diluted with saturated sodium hydrogen carbonate solution, and extracted with EtOAc (2X30 mL) . The combined organic layers were washed with brine (20 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated in vacuum. The residue was purified by pre-TLC (eluting DCM/MeOH＝20: 1) to obtain 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-3- (piperidin-1-yl) -N- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (80mg) as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) δ 8.49 (d, J＝5.64 Hz, 1 H) , 8.21 -8.38 (m, 2 H) , 8.07 (d, J＝7.25 Hz, 2 H) , 7.36 -7.60 (m, 6 H) , 7.16 (d, J＝8.60 Hz, 2 H) , 4.13 (s, 3 H) , 3.86 (s, 3 H) , 3.51 (br. s., 4 H) , 1.80 (br. s., 4 H) , 1.60 (br. s., 2 H) . LC-MS: m/z 507.2 (M+H) +.
Step E: 6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-3- (piperidin-1-yl) -5- (pyridin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000161
A solution of 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-3- (piperidin-1-yl) -N- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (100 mg, 0.198mmol) in 4.0M HCl in 1.4-dioxane (10 mL) was stirred at room temperature for 2 hours. The reaction mixture was concentrate in vacuo. The residue was dissolved in 7N NH3 in methanol and concentrated in vacuo. The resultant residue was purified to afford the title compound as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 8.31 (d, J＝4.88 Hz, 1 H) , 8.12 (d, J＝7.63 Hz, 2 H) , 7.94 (t, J＝7.32 Hz, 1 H) , 7.41 -7.53 (m, 4 H) , 7.34 (m, J＝8.55 Hz, 2 H) , 7.19 (t, J＝6.26 Hz, 1 H) , 7.03 (m, J＝8.55 Hz, 2 H) , 3.82 (s, 3 H) , 3.20 (br. s., 4 H) , 1.73 (br. s., 4 H) , 1.53 -1.68 (m, 2 H) . LC-MS: m/z 493.4 (M+H) +.
Compound 182
5- ( (1H-pyrazol-3-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000162
Step A: 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-N- (1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine
A suspension of 5-chloro-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (500 mg, 1.1 mmol) and 1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-amine (314mg, 1.47 mmol) and Pd (OAc) 2 (38 mg, 0.16 mmol) , Xantphos (98 mg, 0.16 mmol) and Cs2CO3 (740 mg, 2.2 mmol) in 1.4-dioxane (10 mL) was stirred and heated to reflux for 16 hours under N2 atmosphere. The reaction was monitored by LC-MS until the complete conversion of the starting material. The reaction was then cooled to r.t. and filtered. The dark filtrate was concentrated in vacuum and purified by flash column chromatography eluting with DCM: MeOH ＝ 40: 1 to obtain the Intermediate 2 (500mg) as a white solid. LC-MS: m/z 619.5 (M+H) +.
Step B: 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-N- (1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine
The Intermediate 2 (500mg, 0.81mmol) and sodium 2-methylpropan-2-olate (155mg, 1.62mmol) in dioxane was stirred at 110℃ for 1h under MW. The mixture was acidified to PH＝7 and  concentrated to give the crude product which was directly used to the next step without further purification. LC-MS: m/z 605.3 (M+H) +.
Step C: 5- ( (1H-pyrazol-3-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
The Intermediate 3 (300 mg, 0.49mmol) in DCM (5 mL) and TFA (5 mL) was stirred at 60℃ for 1h.Then the mixture was concentrated to give the crude product which was added into ammonia water (5 mL) and stirred on for 1h. The mixture was concentrated and purified to give the desired product.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 13.46 (s, 1H) , 12.67 (br. s., 1H) , 8.96 (br. s., 1H) , 7.70 (br. s., 1H) , 7.47 -7.58 (m, 4H) , 7.35 -7.43 (m, 6H) , 7.29 (s, 1H) , 7.06 (d, J ＝ 8.6 Hz, 2H) , 6.00 -6.09 (m, 1H) , 3.84 (s, 3H) . LC-MS: m/z 475.5 (M+H) +.
Compound 183
5- ( (5-methoxy-1H-pyrazol-3-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000163
This compound was prepared according to the procedure for preparing compound 182 by using Intermediate 5 as 5-methoxy-1- (4-methoxybenzyl) -1H-pyrazol-3-amine in step A.
Step A: A suspension of 5-chloro-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (441 mg, 1 mmol) , 5-methoxy-1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-amine (243 mg, 1 mmol, 1 eq. ) , Pd (OAc) 2 (44.8 mg, 0.2 mmol, 0.2 eq. ) , Xantphos (57.8 mg, 0.1 mmol, 0.1 eq. ) and Cs2CO3 (650 mg, 2mmol, 2eq. ) in 1.4-dioxane (5 mL) was stirred at 110 ℃for 16 hour under N2 atmosphere. The mixture was filtered through celite, and the filtrate was concentrated in vacuo. The crude product was directly used in the next step without further purification. LC-MS: m/z 649.4 (M+H) +
Step B: A mixture of 7-methoxy-N- (5-methoxy-1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -3-phenyl-2- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (800mg,  1.23mmol) and sodium 2-methylpropan-2-olate (197mg, 4.9mmol) in dioxane (10 mL) was stirred at 100℃ for 2h. The mixture was acidified to PH＝7 and concentrated to give the crude product which was purified by silica gel chromatography (DCM: MeOH ＝ 40: 1) to afford 5- ( (5-methoxy-1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3 -diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (300mg) as gray solid. LC-MS: m/z 635.3 (M+H) +.
Step C: A solution of 5- ( (5-methoxy-1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (100 mg, 0.19 mmol) in 4M HCl in dioxane (5 mL) was stirred at r.t. for 1 hour. Solvent and volatile were removed in vacuo. The residue was dissolved in DCM (5 mL) and treated with saturated NaHCO3. The organic phase was separated and washed with brine, dried over anhydrous Na2SO4, and concentrated in vacuo. The residue was purified to afford the title compound as a white solid.
1H NMR (CHLOROFORM-d) : δ 7.49 -7.66 (m, 3H) , 7.45 (br. s., 3H) , 7.37 (br. s., 4H) , 7.31 (br. s., 4H) , 7.06 (br. s., 2H) , 5.27 (br. s., 1H) , 3.84 (s, 3H) , 3.87 (s, 3H) . LC-MS: m/z 505.5 (M+H) +.
Compound 184
5- ( (1H-imidazol-4-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000164
Step A: 6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-5- ( (1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-imidazol-4-yl) amino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000165
A mixture of 5-chloro-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (300 mg, 0.68 mmol) , 1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-imidazol-4-amine (289.7 mg, 1.36 mmol) , palladium diacetate (30.5 mg, 0.14 mmol) , Xantphos (117.8 mg, 0.20 mmol) and cesium carbonate (486.6 mg, 1.49 mmol) in 1, 4-dioxane (8 mL) was reacted in microwave reactor at 120 ℃ for 45 minutes under nitrogen atmosphere. After cooling to room temperature, the mixture was filtered with celite, diluted with DCM (100 mL) , washed with saturated NH4Cl (30 mL) and brine (30 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated to dryness. The residue was purified by pre-TLC (DCM: MeOH＝40: 1) to obtain 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-N- (1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-imidazol-4-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (110 mg, yellow solid) and 6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-5- ( (1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-imidazol-4-yl) amino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (40 mg, yellow solid) . LC-MS: m/z 605.3 (M+H) +.
Step B: 5- ( (1H-imidazol-4-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000166
To the solution of 6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-5- ( (1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-imidazol-4-yl) amino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (40 mg, 0.1 mmol) in DCM (1.5 mL) cooled to 0 ℃ was added TFA (1.5 mL) dropwise. Then the mixture was stirred at room temperature for 8h. The mixture was concentrated, and NaOH (1 M) was added till PH>7. The precipitate was filtered, washed with water, and dried to afford pure product as a white solid.
1H NMR (TFA-d) : δ 8.54 (s, 1H) , 7.41 -7.67 (m, 11H) , 7.37 (d, J ＝ 7.3 Hz, 2H) , 7.22 (d, J ＝ 8.6 Hz, 2H) , 4.05 (s, 3H) . LC-MS: m/z 475.4 (M+H) +.
Compound 185
5- ( (2H-1, 2, 3-triazol-4-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000167
This compound was prepared according to The procedure for preparing compound 182 by using Intermediate 5 as 2- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -2H-1, 2, 3-triazol-4-amine in step A.
Step A: A suspension of 5-chloro-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (50 mg, 0.11 mmol) , 2- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -2H-1, 2, 3-triazol-4-amine (31 mg, 0.147 mmol, 1.3 eq. ) , Pd (OAc) 2 (5.1 mg, 0.027 mmol, 0.2 eq. ) , Xantphos (13.1 mg, 0.027mmol, 0.2 eq. ) and Cs2CO3 (66.7 mg, 0.283mmol, 2.5eq. ) in dioxnae (6 mL) was stirred at 100 ℃ for 1 hour under N2 atmosphere inmicrowave. The mixture was filtered through celite, and the filtrate was concentrated in vacuo. The residue was purified by flash chromatography (PE: EA ＝ 2/1) to afford 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-N- (2- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -2H-1, 2, 3-triazol-4-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (30 mg) as a white solid. LC-MS: m/z 619.9 (M+H) +.
Step B: A solution of 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-N- (2- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -2H-1, 2, 3-triazol-4-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (110 mg, 0.18 mmol) and KOtBu (50 mg, 0.44 mmol) in 1.4-dioxane (5 mL) was stirred at reflux for 2 hours. Solvent and volatile were removed in vacuo to afford 6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-5- ( (2- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -2H-1, 2, 3-triazol-4-yl) amino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (130 mg) which was directly used in the next step without further purification. LC-MS: m/z 605.9 (M+H) +.
Step C: A solution of 6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-5- ( (2- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) -methyl) -2H-1, 2, 3-triazol-4-yl) amino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (130 mg, 0.21 mmol) in TFA (10 mL) was stirred at r.t. for 1 hours. Solvent and volatile were removed in vacuo. The residue was basified with NH3. H2O to PH＝8 and concentrated to give the crude product which was purified to afford the title compound as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 7.44 -7.62 (m, 5H) , 7.24 -7.43 (m, 9H) , 7.04 (d, J ＝ 8.1 Hz, 2H) , 3.81 (s, 3H) . LC-MS: m/z 476.3 (M+H) +.
Compound 186
5- ( (5-amino-1H-pyrazol-3-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000168
Step A: N3- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) -1- (4-methoxybenzyl) -1H-pyrazole-3, 5-diamine
Figure PCTCN2016097524-appb-000169
A suspension of 5-chloro-7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] -pyrimidine (300 mg, 0.68 mmol) , 1- (4-methoxybenzyl) -1H-pyrazole-3, 5-diamine (296 mg, 1.36 mmol, 2 eq. ) , Pd (OAc) 2 (30 mg, 0.14 mmol, 0.2 eq. ) , Xantphos (156 mg, 0.27 mmol, 0.4 eq. ) and Cs2CO3 (441 mg, 1.36mmol, 2eq. ) in 1.4-dioxane (20 mL) was stirred at 100 ℃ for 16 hour under N2 atmosphere. The mixture was filtered through celite, and the filtrate was concentrated in vacuo. The residue was purified by flash chromatography (DCM: MeOH ＝ 50/1) to afford N3- (7- methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) -1- (4-methoxybenzyl) -1H-pyrazole-3, 5-diamine (220 mg) as a white solid. LC-MS: m/z 625.5 (M+H) +.
Step B: 5- ( (5-amino-1- (4-methoxybenzyl) -1H-pyrazol-3-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000170
A solution of N3- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) -1- (4-methoxybenzyl) -1H-pyrazole-3, 5-diamine (160 mg, 0.26 mmol) in MeOH (3 mL) was added 4N NaOH in MeOH (4 mL) and stirred at 80 ℃ for 2 hours. Solvent and volatile were removed in vacuo. The residue was partitioned between water (30 mL) and EA (50 mL) . The EA layer was dried and concentrated to give 5- ( (5-amino-1- (4-methoxybenzyl) -1H-pyrazol-3-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (20 mg) as a white solid. LC-MS: m/z 610.5 (M+H) +.
Step C: 5- ( (5-amino-1H-pyrazol-3-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000171
To a 5- ( (5-amino-1- (4-methoxybenzyl) -1H-pyrazol-3-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (20mg, 0.03mmol) in TFA (2 mL) was added Tf2O (0.5 mL) . The resultant mixture was stirred at rt for 4h. Then the mixture was concentrated below 40 ℃, and purified to give the title compound as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 13.94 (br. s., 1H) , 11.27 (br. s., 1H) , 8.67 (s, 1H) , 7.44 -7.56 (m, 4H) , 7.31 -7.40 (m, 6H) , 7.21 -7.30 (m, J ＝ 8.3 Hz, 2H) , 6.95 -7.06 (m, J ＝ 8.6 Hz, 2H) , 5.25 (br. s., 2H) , 5.13 (s, 1H) , 3.82 (s, 3H) . LC-MS: m/z 490.1 (M+H) +.
Compound 187
5- ( (1H-pyrazol-3-yl) amino) -2, 3-diphenyl-6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000172
Step A: 2, 3-diphenyl-6- (quinolin-6-yl) -5- ( (1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-yl) amino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000173
A suspension of 6- (5-chloro-7-methoxy-2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline (300 mg, 0.65mmol) , 1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-amine (166 mg, 0.78 mmol, 1.2 eq. ) , Pd (OAc) 2 (30 mg, 0.13 mmol, 0.2 eq. ) , Xantphos (28 mg, 0.13mmol, 0.2 eq. ) and K2CO3 (147 g, 1.30 mmol, 2.0eq. ) in dioxnae (10 mL) was stirred at 90 ℃ for 4 hour. The mixture was filtered through celite, and the filtrate was concentrated in vacuo. The residue was purified by flash chromatography (PE/EA/DCM ＝ 10/1/1) to afford 2, 3-diphenyl-6- (quinolin-6-yl) -5- ( (1- ( (2-  (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol -3-yl) amino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (90 mg) as a white solid. LC-MS: m/z 625.9 (M+H) +.
Step B: 5- ( (1H-pyrazol-3-yl) amino) -2, 3-diphenyl-6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000174
A solution of 2, 3-diphenyl-6- (quinolin-6-yl) -5- ( (1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol -3-yl) amino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (90 mg, 0.14mmol) in TFA (8 mL) was stirred at rt for 1 hour. Solvent and volatile were removed in vacuo. The mixture was basified with ammonia to PH＝8 and concentrated to give the crude product which was purified by pre-HPLC to afford the title compound as a white solid.
1H NMR (TFA-d) : δ 9.32 (br. s., 1H) , 9.25 (br. s., 1H) , 8.66 (br. s., 1H) , 8.57 (d, J ＝ 8.3 Hz, 1H) , 8.43 (br. s., 1H) , 8.25 (br. s., 1H) , 7.80 (br. s., 2H) , 7.64 (s, 3H) , 7.68 (s, 2H) , 7.57 (br. s., 4H) , 6.27 (br. s., 1H) . LC-MS: m/z 496.2 (M+H) +.
Compound 188
5- ( (5-methyl-1H-pyrazol-3-yl) amino) -2, 3-diphenyl-6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000175
This compound was prepared according to the procedure for preparing compound 182 by using Intermediate 1 as 6- (5-chloro-7-methoxy-2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline and Intermediate 5 as 5-methyl-1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-amine in step A .
Step E stoichiometry: 6- (5-chloro-7-methoxy-2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline (200 mg, 0.432 mmol) , 5-methyl-1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-amine (147  mg, 0.65 mmol) , Pd (OAc) 2 (10 mg, 0.043 mmol) , xantphos (50 mg, 0.086 mmol) , Cs2CO3 (281 mg, 0.86 mmo) in dioxane (15 mL) under heating to 110 ℃ overnight under N2. LC-MS: m/z 640.3 (M+H) +.
Step F: To a solution of 5- ( (5-methyl-1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-yl) amino) -2, 3-diphenyl-6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (40 mg, 0.63 mmol) in DCM (90 mL) was added TFA (3 mL) . The reaction mixture was stirred for 30 mins at room temperature. The mixture was concentrated in vacuo. The residue was basified with ammonia (4 mL) and concentrated to dryness. The crude product was purified to give the desired product.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 13.65 (br. s., 1H) , 12.35 (br. s., 1H) , 9.15 (br. s., 1H) , 8.94 (d, J ＝ 3.0 Hz, 1H) , 8.42 (d, J ＝ 8.3 Hz, 1H) , 8.10 (d, J ＝ 8.6 Hz, 1H) , 8.02 (s, 1H) , 7.77 (d, J ＝ 7.0 Hz, 1H) , 7.48 -7.59 (m, 4H) , 7.26 -7.47 (m, 5H) , 5.74 (s, 1H) , 2.18 (s, 3H) . LC-MS: m/z 509.9 (M+H) +.
Compound 189
5- ( (1H-pyrazol-5-yl) amino) -3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000176
Step A: 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-N- (1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000177
A mixture of 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (300 mg, 0.67 mmol) , 1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-amine (430.8 mg, 2.02 mmol) , palladium diacetate (30.2 mg, 0.13 mmol) , Xantphos (116.8 mg, 0.20 mmol) and cesium carbonate (438.4 mg, 1.35 mmol) in 1, 4-dioxane (6 mL) was reacted in microwave reactor at 100 ℃ under N2 atmosphere for 45 minutes. After cooling to room temperature, the reaction mixture was diluted with DCM (100 mL) , filtered with celite, washed with aqueous NH4Cl (30 mL) and saturated brine (30 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated. The residue was purified by flash column (petroleum ether/ethyl acetate＝ 4: 1) to obtain 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-N- (1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (220 mg) as a yellow solid. LC-MS: m/z 623.3 (M+H) +.
Step B: 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-5- ( (1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-yl) amino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000178
The solution of 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-N- (1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (220 mg, 0.35 mmol) , sodium tert-butoxide (67.9 mg, 0.71 mmol) and water (3 drops) in 1, 4-dioxane (8 mL) was reacted in microwave reactor at 100 ℃ for 1.5 hours. After cooling to room temperature, the mixture was diluted with DCM (100 mL) , washed with water (25 mL) and brine (25 mL) , dried  over anhydrous sodium sulfate and concentrated. MeOH (4 mL) was added to the residue, and the precipitate was filtered, washed with MeOH (4 mL) to obtain 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-5- ( (1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-yl) amino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (130 mg) as a yellow solid. LC-MS: m/z 609.3 (M+H) +.
Step C: 5- ( (1H-pyrazol-5-yl) amino) -3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000179
The solution of 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-5- ( (1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-yl) amino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (130 mg, 0.21 mmol) in TFA/DCM (2 mL/1 mL) was stirred at room temperature for 4 hours. The mixture was concentrated, and NH4OH (5 mL) was added. The precipitate was filtered, washed with water (5 mL) and MeOH (2 mL) to obtain 5- ( (1H-pyrazol-5-yl) amino) -3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one as a yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 13.30 (s, 1H) , 12.77 (br. s., 1H) , 8.90 (s, 1H) , 7.72 (d, J ＝ 7.3 Hz, 2H) , 7.44 -7.53 (m, 2H) , 7.37 -7.44 (m, 1H) , 7.28 (d, J ＝ 8.6 Hz, 2H) , 7.14 (s, 0.5H) , 6.97 -7.08 (m, 2.5H) , 6.09 (s, 1H) , 6.01 (br. s., 1H) , 3.80 -3.88 (m, 3H) , 2.38 (br. s., 2H) , 2.04 (br. s., 2H) , 1.61 -1.83 (m, 4H) . LC-MS: m/z 479.1 (M+H) +.
Compound 190
5- ( (1H-pyrazol-5-yl) amino) -3- (cyclohex-1-en-1-yl) -2-phenyl-6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000180
Step A: 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -2-phenyl-6- (quinolin-6-yl) -5- ( (1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-yl) amino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000181
A suspension of 6- (5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoline (350m g, 0.8 mmol) and 1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-amine (356.4 mg, 1.7 mmol) and Pd (OAc) 2 (206.3 mg, 0.9 mmol) , Xantphos (579.9 mg, 1.0 mmol) and Cs2CO3 (597.7m g, 1.8 mmol) in 1.4-dioxane (8 mL) was stirred and heated to reflux for 12 hours under N2 atmosphere. The reaction was then cooled to r.t. and filtered with celite, diluted with DCM (60 mL) , washed with saturated ammonium chloride (30 mL) and brine (30 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated to dryness. The residue was purified by flash column (DCM: MeOH＝25: 1) to obtain 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -2-phenyl-6- (quinolin-6-yl) -5- ( (1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-yl) amino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (160 mg) as a brown solid. LC-MS: m/z 630.3 (M+H) +.
Step B: 5- ( (1H-pyrazol-5-yl) amino) -3- (cyclohex-1-en-1-yl) -2-phenyl-6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000182
To the solution of 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -2-phenyl-6- (quinolin-6-yl) -5- ( (1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-yl) amino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (60 mg, 0.1 mmol) in DCM (1 mL) cooled to 0 ℃ was added TFA (2 mL) dropwise. The mixture was then stirred at room temperature for 2h. The mixture was concentrated, and NH4OH (5 mL) was added. The mixture was filtered, washed with water (4 mL) and methanol (1.5 mL) to obtain 5- ( (1H-pyrazol-5-yl) amino) -3- (cyclohex-1-en-1-yl) -2-phenyl-6- (quinolin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one as a yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 13.37 (br. s., 1H) , 9.13 (br. s., 1H) , 8.88 -8.98 (m, 1H) , 8.41 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 8.09 (d, J ＝ 8.9 Hz, 1H) , 8.00 (s, 1H) , 7.67 -7.82 (m, 4H) , 7.33 -7.63 (m, 5H) , 6.02 (br. s., 2H) , 2.38 (br. s., 2H) , 2.09 (br. s., 2H) , 1.72 (br. s., 4H) . LC-MS: m/z 500.2 (M+H) +.
Compound 191
3- (cyclohex-1-en-1-yl) -2-phenyl-6- (quinoxalin-6-yl) -5- ( (1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-yl) amino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000183
Step A: 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-2-phenyl-6- (quinoxalin-6-yl) -N- (1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000184
A mixture of 6- (5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) quinoxaline (150 mg, 0.32 mmol) , 1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-amine (137.0 mg, 0.65 mmol) , palladium diacetate (14.5 mg, 0.05 mmol) , Xantphos (55.5 mg, 0.10 mmol) and cesium carbonate (209.5 mg, 0.65 mmol) in 1, 4-dioxane (6 mL) was reacted in microwave reactor at 100 ℃ under N2 atmosphere for 45 minutes. After cooling to room temperature, the reaction mixture was diluted with DCM (100 mL) , filtered with celite, washed with aqueous NH4Cl (30 mL) and saturated brine (30 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated. The residue was purified by pre-TLC (DCM/MeOH＝30: 1) to obtain 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-2-phenyl-6- (quinoxalin-6-yl) -N- (1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (80 mg) as a brown solid. LC-MS: m/z 645.3 (M+H) +.
Step B: 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -2-phenyl-6- (quinoxalin-6-yl) -5- ( (1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-yl) amino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000185
The solution of 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-2-phenyl-6- (quinoxalin-6-yl) -N- (1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (80 mg, 0.1 mmol) and tBuOK (83.5 mg, 0.7 mmol) in dioxane/H2O (6 mL/1 mL) was stirred at 100 ℃ for 8h. After cooling to room temperature, the mixture was diluted with DCM (60 mL) , washed with water (30 mL) and brine (20 mL) , dried over Na2SO4 and concentrated to dryness. The residue  was purified by pre-TLC (DCM: MeOH＝15: 1) to afford yellow solid (50 mg) . LC-MS: m/z 631.3 (M+H) +.
Step C: 5- ( (1H-pyrazol-5-yl) amino) -3- (cyclohex-1-en-1-yl) -2-phenyl-6- (quinoxalin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000186
To the solution of 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -2-phenyl-6- (quinoxalin-6-yl) -5- ( (1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-yl) amino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (50 mg, 0.05 mmol) in DCM (1.5 mL) cooled to 0 ℃ was added TFA (1.5 mL) dropwise. The mixture was then stirred at room temperature for 2h. The mixture was concentrated, and NH4OH (5 mL) was added. The mixture was filtered. The filter cake was purified to obtain 5- ( (1H-pyrazol-5-yl) amino) -3- (cyclohex-1-en-1-yl) -2-phenyl-6- (quinoxalin-6-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one as a yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 13.38 (br. s., 1H) , 12.83 (br. s., 1H) , 9.29 (br. s., 1H) , 8.97 (s, 2H) , 8.17 (d, J ＝ 8.5 Hz, 1H) , 8.11 (d, J ＝ 1.5 Hz, 1H) , 7.89 (d, J ＝ 8.5 Hz, 1H) , 7.74 (d, J ＝ 7.0 Hz, 3H) , 7.45 -7.52 (m, 2H) , 7.37 -7.44 (m, 1H) , 6.04 (br. s., 1H) , 5.97 (br. s., 1H) , 2.39 (br. s., 2H) , 2.03 -2.11 (m, 2H) , 1.72 (d, J ＝ 4.0 Hz, 5H) . LC-MS: m/z 501.2 (M+H) +.
Compound 192
6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-5- (thiazol-4-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000187
Figure PCTCN2016097524-appb-000188
Step A:
7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000189
A suspension of Intermediate 1 (880 mg, 2 mmol) , NH3/dioxane (0.4N, 15 mL, 6.0 mmol, 3 eq) and tBuBrettphos Pd G3 (540 mg, 0.4 mmol, 0.2 eq) , tBuBrettphos (98 mg, 0.2 mmol, 0.1 eq) , t-BuONa (580 mg, 6 mmol, 3.0 eq) and 1.4-dioxane (4 mL) in a 25 mL microwave vial under N2 atmosphere. The vial was sealed and heated for 1h at a constant temperature of 50℃. The reaction was then cooled to r.t. and filtered. The dark filtrate was concentrated in vacuum and purified by flash column chromatography silica gel (DCM/MeOH＝20: 1) to obtain the Intermediate 2 (400 mg) .
1H NMR (DMSO-d6) : δ 7.47 -7.56 (m, 2H) , 7.29 -7.43 (m, 10H) , 7.19 -7.25 (m, 1H) , 7.08 (d, J ＝ 8.8 Hz, 2H) , 6.48 -5.96 (s, 2H) , 4.03 (s, 3H) , 3.82 (s, 3H) . LC-MS: m/z 423.2 (M+H) +.
Step B: N- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) thiazol-4-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000190
A suspension of Intermediate 2 (84 mg, 0.2 mmol) , 4-bromothiazole (164 mg, 1.0 mmol, 5 eq) , tBuBrettphos Pd G3 (54 mg, 0.04 mmol, 0.2 eq) , tBuBrettphos (9.8 mg, 0.02 mmol, 0.1 eq) , t-BuONa (58 mg, 0.6 mmol, 3.0 eq) and 1.4-dioxane (2 mL) in a 10 mL microwave vial under N2 atmosphere. The vial was sealed and heated for 1h at a constant temperature of 80℃. The reaction was then cooled to r.t. and filtered. The dark filtrate was concentrated in vacuum and purified by flash column chromatography silica gel (DCM/MeOH＝20: 1) to give the Intermediate 3 (40 mg) as a white solid. LC-MS: m/z 406.1 (M+H) +.
Step C: 6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-5- (thiazol-4-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
A mixture of Intermediate 3 (40 mg, 0.08 mmol) in HCl/dioxane (5 mL, 1N) was stirred at RT for 1 h. The mixture was then concentrated under reduced pressure. The residue was purified to afford the desired product 4.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 9.04 (d, J ＝ 2.4 Hz, 1H) , 7.48 -7.59 (m, 4H) , 7.35 -7.44 (m, 6H) , 7.28 -7.34 (m, J ＝ 8.8 Hz, 2H) , 7.12 (d, J ＝ 2.4 Hz, 1H) , 7.01 -7.09 (m, J ＝ 9.2 Hz, 2H) , 3.83 (s, 3H) . LC-MS: m/z 492.1 (M+H) +.
Compound 152
5- ( [1, 2, 4] triazolo [1, 5-c] pyrimidin-7-ylamino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000191
This compound was prepared according to the procedures for preparing compound 192, step B-C, starting from 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine.
Step B stoichiometry: 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (210 mg, 0.5 mmol) , 7-chloro- [1, 2, 4] triazolo [1, 5-c] pyrimidine (135 mg, 0.9 mmol) , Pd (OAc) 2 (62 mg, 0.25 mmol, 0.5 eq. ) , xantphos (310 mg, 0.5 mmol, 1 eq. ) , and Cs2CO3 (500 mg, 1.5 mmol, 3 eq. ) in 1, 4-dioxane (15 mL) under heating at 100 ℃ through microwave irradiation for 1 hour under N2 atmosphere. LC-MS: m/z 541.2 (M+H) +.
Step C: The solution of N- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) - [1, 2, 4] triazolo [1, 5-c] pyrimidin-7-amine (100 mg, 0.19 mmol) in HCl-1, 4-dioxane (15 mL) was stirred at r.t. for 3h. Solvent and volatile were removed in vacuo. The residue was dissolved in DCM (5 mL) and treated with saturated NaHCO3. The organic phase was separated and washed with brine, dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated in vacuo. The residue was purified to afford the title compound as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 12.73 (br. s., 1H) , 9.59 (br. s., 1H) , 9.33 (br. s., 1H) , 8.47 (s, 1H) , 7.43 -7.65 (m, 5H) , 7.24 -7.43 (m, 7H) , 7.12 (s., 1H) , 6.96 (d, J ＝ 8.2 Hz, 2H) , 3.76 (s, 3H) . LC-MS: m/z 527.2 (M+H) +.
Compound 193
5- ( (1H-pyrazol-3-yl) amino) -6- (4-hydroxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000192
To a solution of 5- ( (1H-pyrazol-3-yl) amino) -6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (Compound 182, 50 mg, 0.11 mmol) in anhydrous DCM (5 mL) was added a solution of BBr3 (40 mg, 0.16 mmol, 1.5eq) in DCM (0.5 mL) at -78℃. The reaction  mixture was stirred at 0℃ for 2h. The suspension was quenched with MeOH at -78℃ and extracted with EA. The combined organic phase was washed with water and brine, dried over anhydrous Na2SO4, filtered, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified to afford the desired product 5- ( (1H-pyrazol-3-yl) amino) -6- (4-hydroxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 13.45 (s, 1H) , 12.66 (s, 1H) , 9.48 (s, 1H) , 8.89 (s, 1H) , 7.70 (s, 1H) , 7.51 (d, J ＝ 7.2 Hz, 4H) , 7.38 (t, J ＝ 7.6 Hz, 6H) , 7.16 (d, J ＝ 8.4 Hz, 2H) , 6.68 (d, J ＝ 8.4 Hz, 2H) , 6.08 (s, 1H) . LC-MS: m/z 461.7 (M+H) +.
Compound 194
3-cyclohexenyl-6- (4-hydroxyphenyl) -2-phenyl-5- (pyrazin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000193
A mixture of 3-cyclohexenyl-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl-5- (pyrazin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (Compoundd 158, 100 mg, 0.204 mmol) and BBr3 (1M in dichloromethane, 5 mL) was stirred at room temperature for 1 h. The mixture was quenched with methanol at 0 ℃, and then evaporated to dryness. The crude was purified to afford 3-cyclohexenyl-6- (4-hydroxyphenyl) -2-phenyl-5- (pyrazin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 13.87 (s, 1 H) , 9.52 (s, 1 H) , 9.28 (s, 1 H) , 8.62 (s, 1 H) , 8.24 (d, J＝2.75 Hz, 1 H) , 8.20 (s, 1 H) , 7.73 (d, J＝7.02 Hz, 2 H) , 7.39 -7.52 (m, 3 H) , 7.20 (d, J＝8.54 Hz, 2 H) , 6.85 (d, J＝8.24 Hz, 2 H) , 6.04 (br. s., 1 H) , 2.33 (br. s., 2 H) , 2.04 (br. s., 2 H) , 1.59 -1.77 (m, 4 H) .LC-MS: m/z 477.2 (M+H) +.
Compound 195
5- ( (1H-1, 2, 4-triazol-3-yl) amino) -6- (4-hydroxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000194
Intermediate 1 was prepared according to the procedure for preparing compound 101 (step A-E) by using Intermediate 9 as 1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-1, 2, 4-triazol-3-amine in step E. LC-MS: m/z 620.3 (M+H) +.
Step A: To the solution of 7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-N- (1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-1, 2, 4-triazol-3-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine 1 (80 mg, 0.1 mmol) in DCM (2 mL) cooled to 0 ℃ was added BBr3 (1.0 M in DCM, 1.5 mL) dropwise . The mixture was then stirred at 0 ℃ for 2h. The reaction was quenched by careful adding MeOH and concentrated in vacuo. The residue was suspend in NH4OH. The precipitates were filtered and washed with water (3 mL) and MeOH (2 mL) to give a yellow solid which was purified again to give the pure product.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 14.10 (br. s., 1H) , 13.12 (br. s., 1H) , 9.51 (br. s., 1H) , 9.00 (br. s., 1H) , 8.54 (br. s., 1H) , 7.46 -7.59 (m, 4H) , 7.29 -7.45 (m, 6H) , 7.18 (d, J ＝ 8.1 Hz, 2H) , 6.88 (d, J ＝8.3 Hz, 2H) . LC-MS: m/z 462.3 (M+H) +.
Compound 196
6- (2-methylbenzo [d] thiazol-6-yl) -2, 3-diphenyl-5- (pyridin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000195
Figure PCTCN2016097524-appb-000196
Step A: dimethyl 2- (2-methylbenzo [d] thiazol-6-yl) malonate
Figure PCTCN2016097524-appb-000197
A mixture of 6-bromo-2-methylbenzo [d] thiazole (4.5 g, 19.7mmol) , dimethyl malonate (5.2g, 39.4mmol) , Pd (OAc) 2 (882mg, 3.94mmol) , t-BuMePhos (2.45g, 7.88mmol) , and K3PO4 (9.5g, 45.3mmol) in 100 mL of anhydrous toluene was stirred at 80℃ under N2 atmosphere for 16h. The mixture was filtered and concentrated. The residue was purified by silica gel column (PE: EA＝5: 1) to afford Intermediate 2 as white solid (3.6g) .
1H NMR (CHLOROFORM-d) : δ 7.82 -8.04 (m, 2H) , 7.48 (dd, J ＝ 8.3, 1.9 Hz, 1H) , 4.79 (s, 1H) , 3.79 (s, 7H) , 2.86 (s, 3H) . LC-MS: m/z 280.5 (M+H) +.
Step B: 5-hydroxy-6- (2-methylbenzo [d] thiazol-6-yl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin -7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000198
A mixture of dimethyl 2- (2-methylbenzo [d] thiazol-6-yl) malonate (3 g, 10.7mmol) and 3, 4-diphenyl-1H-pyrazol-5-amine (2.1g, 8.9mmol) in TEA (20 mL) was stirred at 150℃ for 4h. The mixture was then cooled to r.t. and filtered. The precipitates were suspended in a mixed solution  of 2 mL THF and 20 mL HCl (1M) and stirred at r.t. for 0.5h. The solid was filtered and washed with EA (10 mL) to give the desired product as a white solid (2.7g) which was directly used to the next step without further purification. LC-MS: m/z 451.2 (M+H) +.
Step C: 6- (5, 7-dichloro-2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) -2-methylbenzo [d] thiazole
Figure PCTCN2016097524-appb-000199
A mixture of Intermediate 3 (2.7g, 6mmol) in POCl3 (20 mL) was stirred at 120℃ overnight in a sealed tube. The mixture was concentrated. The residue was basified with NaHCO3 solution to PH＝7, extracted with DCM (10 mL X 3) , dried, concentrated and purified by silica gel column (PE: EA ＝3: 1) to give Intermediate 4 (2.1g) as yellow solid. LC-MS: m/z 487.3 (M+H) +.
Step D: 6- (5-chloro-7-methoxy-2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) -2-methylbenzo [d] thiazole
Figure PCTCN2016097524-appb-000200
The Intermediate 4 (2.1g, 4.3mmol) was dissolved in DCM (10 mL) and MeOH (20 mL) at 0℃. NaOMe (464mg, 8.6mmol) in MeOH (5 mL) was added dropwise and stirred on for 16h at r.t. The mixture was concentrated. The residue was purified by silica gel column (PE: EA ＝ 5: 1) to give the desired product 5 (1.6g) as white solid.
1H NMR (CHLOROFORM-d) : δ 8.07 (d, J ＝ 8.2 Hz, 1H) , 7.86 (d, J ＝ 1.2 Hz, 1H) , 7.66 (dd, J ＝7.0, 2.4 Hz, 2H) , 7.54 (d, J ＝ 7.0 Hz, 2H) , 7.48 (dd, J ＝ 8.5, 1.5 Hz, 1H) , 7.35 -7.43 (m, 5H) , 7.32 (d, J ＝ 7.3 Hz, 1H) , 4.19 (s, 3H) , 2.90 (s, 3H) . LC-MS: m/z 483.6 (M+H) +.
Step E: 6- (2-methylbenzo [d] thiazol-6-yl) -2, 3-diphenyl-5- (pyridin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000201
A suspension of Intermediate 5 (482 g, 1 mmol) , pyrazin-2-amine (94mg, 1 mmol) , Pd (OAc) 2 (42.2 mg, 0.2 mmol) , Xantphos (23.1mg, 0.4 mmol) and Cs2CO3 (652m g, 2 mmol) in 1.4-dioxane (10 mL) was stirred and heated to reflux for 16 hours under N2 atmosphere. The reaction was monitored by LC-MS until the complete conversion of the starting material. The reaction mixture was then cooled to r.t. and filtered. The dark filtrate was concentrated in vacuum and purified to obtain the title compound 6 as a white solid.
1H NMR (CHLOROFORM-d) : δ 15.25 (s, 1H) , 8.05 (d, J ＝ 4.0 Hz, 1H) , 7.92 -8.01 (m, 2H) , 7.60 -7.70 (m, 4H) , 7.45 -7.53 (m, 5H) , 7.39 (dd, J ＝ 6.1, 2.4 Hz, 1H) , 7.28 (d, J ＝ 4.0 Hz, 3H) , 6.97 (dd, J ＝ 7.2, 5.0 Hz, 2H) , 2.71 (s, 3H) . LC-MS: m/z 527.5 (M+H) +.
Compound 197
6- (3, 4-dihydro-2H-benzo [b] [1, 4] oxazin-6-yl) -2, 3-diphenyl-5- (pyridin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000202
Figure PCTCN2016097524-appb-000203
Step A: 6-bromo-4- (4-methoxybenzyl) -3, 4-dihydro-2H-benzo [b] [1, 4] oxazine
Figure PCTCN2016097524-appb-000204
To the mixture of 6-bromo-3, 4-dihydro-2H-benzo [b] [1, 4] oxazine (10g, 47mmol) and K2CO3 (13g, 94mmol) in DMF (100 mL) . was added 1- (chloromethyl) -4-methoxybenzene (8.8g, 56mmol) . The mixture was stirred at r.t. for 16h. The mixture was poured into water (30 mL) and extracted with EA (30Ml X 3) . The combined organic layers were dried, concentrated and purified by silica gel column (PE: EA＝5: 1) to give the desired product (11g) as a white solid.
1H NMR (CHLOROFORM-d) : δ 7.12 -7.20 (m, J ＝ 8.5 Hz, 2H) , 6.84 -6.90 (m, 2H) , 6.80 (d, J ＝ 2.1 Hz, 1H) , 6.61 -6.73 (m, 2H) , 4.32 (s, 2H) , 4.15 -4.20 (m, 2H) , 3.76 -3.80 (m, 3H) , 3.22 -3.30 (m, 2H) . LC-MS: m/z 334.5 (M+H) +.
Step B: dimethyl 2- (4- (4-methoxybenzyl) -3, 4-dihydro-2H-benzo [b] [1, 4] oxazin-6-yl) malonate
Figure PCTCN2016097524-appb-000205
A mixture of Intermediate 2 (5.5 g, 16.5mmol) , dimethyl malonate (2.6g, 19.8mmol) Pd (OAc) 2 (370mg, 1.65mmol) , t-BuMePhos (1.96g, 3.63mmol) , and K3PO4 (8g, 37.95mmol) in 30 mL of anhydrous toluene was stirred at 80℃ under N2 atmosphere for 16h. The mixture was filtered and concentrated. The residue was purified by silica gel column (PE: EA＝4: 1) to afford Intermediate 3 (5.7g) as a wihte solid.
1H NMR (CHLOROFORM-d) : δ 7.18 -7.24 (m, J ＝ 8.9 Hz, 2H) , 6.83 -6.89 (m, J ＝ 8.5 Hz, 2H) , 6.73 -6.79 (m, 2H) , 6.62 (d, J ＝ 10.1 Hz, 1H) , 4.48 (s, 1H) , 4.38 (s, 2H) , 4.20 -4.26 (m, 2H) , 3.79 (s, 3H) , 3.69 (s, 6H) , 3.24 -3.31 (m, 2H) . LC-MS: m/z 386.5 (M+H) +.
Step C: 5-hydroxy-6- (4- (4-methoxybenzyl) -3, 4-dihydro-2H-benzo [b] [1, 4] oxazin-6-yl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000206
A mixture of Intermediate 3 (1.5 g, 3.8mmol) and 3, 4-diphenyl-1H-pyrazol-5-amine (760mg, 3.2mmol) in TEA (20 mL) was stirred at 150℃ for 4h. The mixture was then cooled to r.t. and filtered. The filter cake was suspended in a mixed solution of 2 mL THF and 20 mL HCl (1M) and stirred at r.t. for 0.5h. The precipitate was filtered and washed with EA (10 mL) to give the product (1.3g) as a white solid which was directly used to the next step without further purification. LC-MS: m/z 557.2 (M+H) +.
Step D: 6- (5, 7-dichloro-2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) -3, 4-dihydro-2H-benzo [b] [1, 4] oxazine
Figure PCTCN2016097524-appb-000207
The Intermediate 4 (1.3g, 2.3mmol) was dissolved in POCl3 (15 mL) and stirred at 120℃ overnight in a sealed tube. The mixture was concentrated and basified with NaHCO3 solution to  PH＝7. The resultant mixture was extracted with DCM (10 mL X3) , dried, and concentrated to give crude Intermediate 5 (2.1g) as a yellow solid. LC-MS: m/z 473.3 (M+H) +.
Step E: 6- (5-chloro-7-methoxy-2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-6-yl) -3, 4-dihydro -2H-benzo [b] [1, 4] oxazine
Figure PCTCN2016097524-appb-000208
The Intermediate 5 (500mg, 1.06mmol) was dissolved in DCM (5 mL) and MeOH (10 mL) at 0℃. NaOMe (114mg, 2.11mmol) in MeOH (5 mL) was added dropwise and stirred on for 16h at r.t. The mixture was concentrated and purified by silica gel column (PE: EA ＝ 6: 1) to give the desired product (230mg) as a white solid.
1H NMR (CHLOROFORM-d) : δ 7.64 -7.71 (m, 2H) , 7.51 -7.59 (m, 2H) , 7.36 -7.44 (m, 5H) , 7.32 (d, J ＝ 7.3 Hz, 1H) , 6.91 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 6.64 -6.75 (m, 2H) , 4.32 -4.40 (m, 2H) , 4.15 -4.19 (m, 3H) , 3.48 -3.55 (m, 2H) . LC-MS: m/z 469.4 (M+H) +.
Step F: 6- (3, 4-dihydro-2H-benzo [b] [1, 4] oxazin-6-yl) -7-methoxy-2, 3-diphenyl-N- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000209
A suspension of Intermediate 6 (200mg, 0.43 mmol) , pyrazin-2-amine (48mg, 0.51 mmol) , Pd (OAc) 2 (9.6 mg, 0.043 mmol) , Xantphos (49.6mg, 0.086 mmol) and Cs2CO3 (280m g, 0.86 mmol) in 1.4-dioxane (10 mL) was heated to reflux for 16 hours under N2 atmosphere. The reaction was monitored by LC-MS until the complete conversion of the starting material. The reaction mixture was then cooled to r.t. and filtered. The dark filtrate was concentrated in vacuum and purified by flash column chromatography eluting with DCM: MeOH ＝ 40: 1 to obtain the Intermediate 7 (120mg) as a white solid.
1H NMR (CHLOROFORM-d) : δ 8.79 (d, J ＝ 8.5 Hz, 1H) , 8.18 (dd, J ＝ 4.9, 0.9 Hz, 1H) , 7.61 -7.71 (m, 5H) , 7.48 (s, 1H) , 7.30 -7.44 (m, 6H) , 6.89 -6.97 (m, 2H) , 6.63 -6.75 (m, 2H) , 4.34 (t, J ＝ 4.3 Hz, 2H) , 4.08 -4.11 (m, 3H) , 3.50 (d, J ＝ 4.3 Hz, 2H) . LC-MS: m/z 527.2 (M+H) +.
Step G: 6- (3, 4-dihydro-2H-benzo [b] [1, 4] oxazin-6-yl) -2, 3-diphenyl-5- (pyridin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000210
A solution of Intermediate 7 (50m g, 0.095 mmol) in HCl (5 mL, 4M in 1.4-dioxane) was stirred at room temperature for 16 h. The mixture was concentrated, basified with ammonia (5 mL, 7M in MeOH) and concentrated in vacuo. The resultant solid was washed with water to give the title compound 8 as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 15.73 (s, 1H) , 8.92 (s, 1H) , 8.03 (d, J ＝ 4.0 Hz, 1H) , 7.78 (br. s., 1H) , 7.51 -7.60 (m, 4H) , 7.32 -7.47 (m, 7H) , 7.09 (d, J ＝ 5.8 Hz, 1H) , 6.74 (d, J ＝ 7.9 Hz, 1H) , 6.62 (d, J ＝ 1.8 Hz, 1H) , 6.46 -6.54 (m, 1H) , 5.85 (br. s., 1H) , 4.19 (br. s., 2H) , 3.34-3.35 (m, 2H) . LC-MS: m/z 513.5 (M+H) +.
Compound 198
6- (4-methyl-3, 4-dihydro-2H-benzo [b] [1, 4] oxazin-6-yl) -2, 3-diphenyl-5- (pyridin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000211
Step A: 7-methoxy-6- (4-methyl-3, 4-dihydro-2H-benzo [b] [1, 4] oxazin-6-yl) -2, 3-diphenyl-N- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000212
6- (3, 4-dihydro-2H-benzo [b] [1, 4] oxazin-6-yl) -7-methoxy-2, 3-diphenyl-N- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-amine (50mg, 0.095mmol) in THF (10 mL) was cooled to 0℃, HCOOH (5.2mg, 0.114mmol) was added and stirred for 5mins. BH3 THF (0.19 mL, 1M) was added dropwise at 0℃, and the mixture was slowly warmed to r.t. and stirred on for 4h. The reaction was quenched by careful adding NaHCO3 solution. The resultant mixture was extracted with DCM (10 mL X 3) , dried, and concentrated. The residue was purified by silica gel column (PE: EA ＝ 3: 1 ) to afford Intermediate 2 (30mg) as a light yellow solid.
1H NMR (CHLOROFORM-d) : δ 8.83 (d, J ＝ 8.2 Hz, 1H) , 8.17 (d, J ＝ 4.3 Hz, 1H) , 7.59 -7.73 (m, 5H) , 7.35 -7.43 (m, 5H) , 7.26 -7.30 (m, 1H) , 6.93 (d, J ＝ 7.9 Hz, 2H) , 6.64 -6.75 (m, 2H) , 4.39 (t, J ＝ 4.1 Hz, 2H) , 4.07 -4.12 (m, 3H) , 3.37 (d, J ＝ 4.3 Hz, 2H) , 2.90 (s, 3H) . LC-MS: m/z 541.3 (M+H) +.
Step B: 6- (4-methyl-3, 4-dihydro-2H-benzo [b] [1, 4] oxazin-6-yl) -2, 3-diphenyl-5- (pyridin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000213
The Intermediate 2 (30mg, 0.056mmol) in HCl (10 mL, 4M in dioxane) was stirred at r.t. for 2h. The mixture was concentrated, basified with ammonia (5 mL, 7M in MeOH) and concentrated in vacuo. The crude solid was washed with water to afford the title compound 3 as a white solid.
1H NMR (CHLOROFORM-d) : δ 8.07 (d, J ＝ 4.6 Hz, 1H) , 7.76 (br. s., 2H) , 7.65 (br. s., 1H) , 7.45 -7.52 (m, 4H) , 7.31 -7.41 (m, 5H) , 6.98 (br. s., 1H) , 6.81 -6.92 (m, 2H) , 6.62 -6.76 (m, 2H) , 4.37 (br. s., 2H) , 3.35 (br. s., 2H) , 2.92 (s, 3H) . LC-MS: m/z 527.5 (M+H) +.
Compound 199
N-ethyl-5- ( (7-oxo-2, 3-diphenyl-6- (quinolin-6-yl) -4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) -1, 3, 4-oxadiazole-2-carboxamide
Figure PCTCN2016097524-appb-000214
Step A: To a solution of 1 (20 mg, mmol) in THF (2 mL) was added ethylamine (aq. 0.1 mL ) in a sealed tube, and the mixture was stirred at 50 ℃ overnight. The mixture was evaporated, and residue was purified to afford the desired product 2 as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 12.67 (br. s., 1H) , 8.63 -8.92 (m, 2H) , 8.28 -8.34 (m, 2H) , 8.03 (s, 1H) , 7.92 (s, 2H) , 7.49 -7.55 (m, 2H) , 7.41 -7.49 (m, 3H) , 7.31 -7.40 (m, 6H) , 3.18 (dt, J ＝ 13.2, 7.2 Hz, 2H) , 1.04 (t, J ＝ 7.2 Hz, 3H) . LC-MS: m/z 569.0 (M+H) +.
Compound 200
(E) -2-hydroxy-1- (6- (4-methoxyphenyl) -7-oxo-2, 3-diphenyl-4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) guanidine
Figure PCTCN2016097524-appb-000215
Figure PCTCN2016097524-appb-000216
Step A: N- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenyl-4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) cyanamide
Figure PCTCN2016097524-appb-000217
A mixture of Intermediate 1 (441 mg, 1 mmol) , NH2CN (210 mg, 5.0 mmol, 5 eq) , t-BuBrettphos Pd G3 (170 mg, 0.2 mmol, 0.2 eq) , t-BuBrettphos (49 mg, 0.1 mmol, 0.1 eq) and t-BuONa (288 mg, 3.0 mmol, 3.0 eq) in 1.4-dioxane (12 mL) in a sealed microwave vial (25 mL) under N2 atmosphere was heated to 80℃for 1h. The reaction mixture was then cooled to r.t. and filtered.
The dark filtrate was concentrated in vacuum and purified by flash column chromatography sillica gel (DCM/MeOH＝100: 1) to obtain Intermediate 2 (180 mg) . LC-MS: m/z 448.1 (M+H) +
Step B: (E) -2-hydroxy-1- (7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2, 3-diphenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) guanidine
Figure PCTCN2016097524-appb-000218
To a mixture of Intermediate 2 (100 mg, 0.22 mmol) and DIPEA (145 mg, 1.12 mmol, 5.0 eq) in EtOH (5 mL) was added Hydroxylamine hydrochloride (47 mg, 0.67 mmol, 3.0 eq) . Then the reaction mixture was stirred at r.t. overnight. The mixture was partitioned between EA and H2O.
The combined organic phase was washed with water and brine, dried over anhydrous Na2SO4, filtered, and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography on silica gel to afford the desired Intermediate 3 (30 mg) . LC-MS: m/z 481.1 (M+H) +.
Step C: (E) -2-hydroxy-1- (6- (4-methoxyphenyl) -7-oxo-2, 3-diphenyl-4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) guanidine
Figure PCTCN2016097524-appb-000219
A mixture of Intermediate 3 (30 mg, 0.06 mmol) in HCl/dioxane (5 mL, 1N) was stirred at r.t. for 1 h. The mixture was then concentrated under reduced pressure. The residue was purified to afford the desired compound 4.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 7.23 -7.52 (m, 12H) , 7.01 (d, J ＝ 9.2 Hz, 2H) , 3.81 (s, 3H) . LC-MS: m/z 467.2 (M+H) +.
Compound 201
(S) - (3- ( (6- (4-methoxyphenyl) -7-oxo-2, 3-diphenyl-4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) -1H-pyrazol-1-yl) methyl 2-amino-3-methylbutanoate
Figure PCTCN2016097524-appb-000220
Step A: (S) -chloromethyl 2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -3-methylbutanoate
To a solution of Intermediate 1 (1.4 g, 6.6 mmol) in DCM/H2O (10 mL/10 mL) were added chloromethyl sulfochloridate 6 (1.3 g, 7.9 mmol, 1.2 eq. ) , NaHCO3 (4 eq) and tetrabutylammonium hydrogensulfate (0.1 eq. ) . The mixture was stirred at r.t. overnight. The organic phase was separated, and the water phase was extracted with DCM (3*10 mL) . The combined organic phase was washed with brine, dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated in vacuo. The residue was purified by flash chromatography to afford the desired product 2 as a colorless oil (1.5 g) . LC-MS: m/z 266.2 (M+H) +.
Step B: (S) - (3- ( (6- (4-methoxyphenyl) -7-oxo-2, 3-diphenyl-4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) -1H-pyrazol-1-yl) methyl 2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -3-methylbutanoate
To a solution of Intermediate 3 (300 mg, mmol) in DMF (20 mL) was added sodium hydride (3 eq. ) at 0 ℃. (S) -chloromethyl 2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -3-methylbutanoate 2 (3 eq. ) was added dropwise after the mixture was stirred at 0 ℃ for 30 min. Then the mixture was stirred at r.t. overnight. The mixture was poured into water (100 mL) and extracted with DCM (3*20 mL) , the combined organic phase was washed with brine, dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated in vacuo. The residue was purified by flash chromatography to afford the desired product 4 as a white solid. (240 mg) 
1H NMR (DMSO-d6) : δ 13.07 (s, 1H) , 9.11 (s, 1H) , 7.95 (s, 1H) , 7.83 (d, J ＝ 2.8 Hz, 1H) , 7.49 -7.57 (m, 4H) , 7.36 -7.42 (m, 6H) , 7.28 (d, J ＝ 8.6 Hz, 2H) , 7.05 (d, J ＝ 8.6 Hz, 2H) , 6.14 (d, J ＝2.8 Hz, 1H) , 5.97 (d, J ＝ 10.8 Hz, 1H) , 5.77 (d, J ＝ 10.8 Hz, 1H) , 3.83 (s, 3H) , 3.76 -3.81 (m, 1H) , 1.84 (dt, J ＝ 13.2, 6.8 Hz, 1H) , 1.35 (s, 9H) , 0.74 (d, J ＝ 6.8 Hz, 3H) , 0.71 (d, J ＝ 6.8 Hz, 3H) . LC-MS: m/z 704.1 (M+H) +
Step C: (S) - (3- ( (6- (4-methoxyphenyl) -7-oxo-2, 3-diphenyl-4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) -1H-pyrazol-1-yl) methyl 2-amino-3-methylbutanoate
To a solution of Intermediate 4 (220 mg, 0.31 mmol) in DCM (1 mL) was added HCl-dixane (4 mol/L, 5 mL) at 0 ℃. The mixture was stirred at r.t. for 1h. The white precipitate was filtered off and mixed with DCM (5 mL) and aq. NaHCO3 solution. The organic phase was washed with brine, dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated in vacuo. The residue was purified by to afford the desired product 5 as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 8.14 (s, 1H) , 7.75 (br. s., 1H) , 7.51 (d, J ＝ 6.2 Hz, 2H) , 7.45 (br. s., 2H) , 7.34 (br. s., 6H) , 7.27 (d, J ＝ 8.4 Hz, 2H) , 7.10 -7.23 (m, 1H) , 7.03 (d, J ＝ 8.4 Hz, 2H) , 5.87 - 6.02 (m, 2H) , 3.81 (s, 3H) , 3.52 -3.69 (m, 1H) , 1.79 -2.05 (m, 1H) , 0.78 (br. s., 6H) . LC-MS: m/z 604.0 (M+H) +.
Compound 202
3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -2- (pyridin-2-yl) -5- (pyridin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000221
Step A: 4-chloro-6-hydrazinylpyrimidin-5-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000222
A suspension of 4, 6-dichloropyrimidin-5-amine (12 g, 73 mmol) and N2H4-H2O (20 g, 402 mmol, 5.5 eq. ) in THF (30 mL) was stirred at rt for 50 hours. The mixture was poured into water and filtered. The filter cake was washed with water to give 4-chloro-6-hydrazinylpyrimidin-5-amine (9 g, 79％yield) as a white solid. LC-MS: m/z 160.2 (M+H) +.
Step B: 5-chloro-1, 2-dihydropyrimido [5, 4-e] [1, 2, 4] triazine
Figure PCTCN2016097524-appb-000223
To a suspension of 4-chloro-6-hydrazinylpyrimidin-5-amine (9 g, 57.6 mmol) in triethyl orthoformate (150 mL) was added con HCl (2 ml) . The resultant mixture was stirred at 100 ℃ for 6 hour. The reaction mixture was cooled to rt and filtered. The filter cake was washed with methyl tert-butyl ether to give 5-chloro-1, 2-dihydropyrimido [5, 4-e] [1, 2, 4] triazine (6 g, 62％yield) as a brown solid. LC-MS: m/z 170.2 (M+H) +.
Step C: ethyl 6-amino-1, 2, 4-triazine-5-carboxylate
Figure PCTCN2016097524-appb-000224
To a suspension of 5-chloro-1, 2-dihydropyrimido [5, 4-e] [1, 2, 4] triazine (5.5 g, 32.5 mmol) in EtOH (250 mL) was added Br2 (3.1 ml) in EtOH (50 mL) dropwise over 10 min. Then water (5ml) was added, and the resultant mixture was stirred at rt for 2 days. The reaction mixture was filtered. The filter cake was basified with NaHCO3 aq. solution to PH 9-10 and extracted with DCM (15 ml*6) . The DCM layer was dried and concentrated to give ethyl 6-amino-1, 2, 4-triazine-5-carboxylate (3 g, 55％yield) as a brown solid.
1H NMR (CDCl3) : δ 9.27 (s, 1H) , 6.75 (s, 2H) , 4.54-4.49 (m, 2H) , 1.49-1.46 (t, J ＝12.0 Hz, 3H) . LC-MS: m/z 169.2 (M+H) +.
Step D: methyl 6- ( (3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) -1, 2, 4-triazine-5-carboxylate
Figure PCTCN2016097524-appb-000225
A suspension of 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (250 mg, 0.56 mmol) , ethyl 6-amino-1, 2, 4-triazine-5-carboxylate (104 mg, 0.62 mmol, 1.1 eq. ) , Pd2 (dba) 3 (514mg, 0.56 mmol, 1.0 eq. ) , Xantphos (325 mg, 0.56 mmol, 1.0 eq. ) and Na2CO3 (119 mg, 1.12mmol, 2eq. ) in 1.4-dioxane (15 mL) was stirred at 110 ℃ through microwave irradiation for 1 hour under N2 atmosphere. The mixture was filtered through celite, and the filtrate was concentrated in vacuo. The residue was purified by flash chromatography (PE: EA ＝ 1/1) to afford methyl 6- ( (3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) -1, 2, 4-triazine-5-carboxylate (567mg, 18％yield) as a white solid. LC-MS: m/z 564.5 (M+H) +.
Step E: 6- ( (3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -7-oxo-2-phenyl-4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) -1, 2, 4-triazine-5-carboxylic acid
A solution of methyl 6- ( (3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2-phenylpyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) -1, 2, 4-triazine-5-carboxylate (57.8mg, 0.1 mmol) in con HCl (3 ml) was heated at 60 ℃ for 2 hours. Solvent and volatile were removed in vacuo to give 6- ( (3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -7-oxo-2-phenyl-4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) -1, 2, 4-triazine-5-carboxylic acid (58 mg, 95％yield) as a brown solid. LC-MS: m/z 536.2 (M+H) +.
Step F: 5- ( (1, 2, 4-triazin-6-yl) amino) -3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -2-phenyl pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000227
6- ( (3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -7-oxo-2-phenyl-4, 7-dihydropyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-5-yl) amino) -1, 2, 4-triazine-5-carboxylic acid (180mg, 0.34mmol) in CH3CN (5mL) was heated at 80 ℃ for 4h. Then the mixture was concentrated in vacuo. The residue was purified to afford the title compound as a yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 11.10 (s, 1H) , 10.65 (s, 1H) , 7.89-7.88 (m, 2H) , 7.77-7.76 (m, 1H) , 7.54-7.43 (m, 4H) , 7.35-7.33 (d, J ＝ 8.0 Hz, 2H) , 7.03-7.01 (d, J ＝ 8.0 Hz, 2H) , 5.30 (s, 1H) , 3.81 (s, 3H) , 2.16-2.05 (m, 2H) , 1.95-1.91 (m, 2H) , 1.68-1.64 (m, 4H) . LC-MS: m/z 492.2 (M+H) +.
Compound 203
3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -2- (pyridin-2-yl) -5- (pyridin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000228
Figure PCTCN2016097524-appb-000229
Step A: 3-oxo-3- (pyridin-2-yl) propanenitrile
Figure PCTCN2016097524-appb-000230
To a solution of methyl picolinate (13 g, 95 mmol) and acetonitrile (5.8 g, 142 mmol) in THF (150 ml) was added slowly NaHDMS (2 mol/L, 71 ml, 142 mmol) at 0 ℃. Then the reaction mixture was stirred at 0 ℃ for 0.5h and allowed to warm up to room temperature for 2h. The reaction was quenched with water, adjusted with HCl (2 mol/L) to pH ＝ 7, and extracted with DCM (100 ml*3) . The combined organic layers were washed with brine , dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated in vacuo to give 3-oxo-3- (pyridin-2-yl) propanenitrile (12 g, 87 ％yield) as a dark brown solid.
1H NMR (CHLOROFORM-d) δ : 8.70 (dd, J ＝ 4.8, 0.6 Hz, 1H) , 8.03 -8.17 (m, 1H) , 7.92 (td, J ＝7.8, 1.6 Hz, 1H) , 7.58 (ddd, J ＝ 7.6, 4.8, 1.4 Hz, 1H) , 4.40 (s, 2H) . LC-MS: m/z 147.1 (M+H) +.
Step B: 1- (4-methoxybenzyl) -3- (pyridin-2-yl) -1H-pyrazol-5-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000231
To a solution of 3-oxo-3- (pyridin-2-yl) propanenitrile (10 g, 68 mmol) in EtOH (80 ml) was added (4-methoxybenzyl) hydrazine hydrochloride (15.5 g, 82 mmol, 1.2 eq) and triethylamine (13.8 g, 137 mmol, 2 eq. ) . The reaction mixture was refluxed for 2h under N2 protection. Then the mixture was evaporated in vacuo. The residue was dissolved in EA (100 mL) , washed with water, and extracted with EA (100 ml*2) . The combined organic phase was washed with brine, dried over  anhydrous sodium sulfate, and concentrated in vacuo to give the crude product as a yellow solid. The crude product was suspended in t-BuOMe (100 mL) , stirred for 0.5h and filtered off to give 1- (4-methoxybenzyl) -3- (pyridin-2-yl) -1H-pyrazol-5-amine as a pale yellow solid (15.1 g, 79％yield) .
1H NMR (DMSO-d6) δ : 8.50 (d, J ＝ 4.8 Hz, 1H) , 7.77 -7.83 (m, 1H) , 7.73 (dd, J ＝ 7.6, 1.6 Hz, 1H) , 7.11 -7.26 (m, 3H) , 6.84 -6.90 (m, 2H) , 5.89 (s, 1H) , 5.41 (s, 2H) , 5.12 (s, 2H) , 3.71 (s, 3H) . LC-MS: m/z 281.2 (M+H) +.
Step C: 4- (cyclohex-1-en-1-yl) -1- (4-methoxybenzyl) -3- (pyridin-2-yl) -1H-pyrazol-5-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000232
To a solution of 1- (4-methoxybenzyl) -3- (pyridin-2-yl) -1H-pyrazol-5-amine (15.0 g, 54 mmol) in acetic acid (100 mL) was added cyclohexanone (5.3 g, 54 mmol, 1eq. ) . The mixture was stirred at 90℃ for 1h. Then another 1 eq. of cyclohexanone was added, and the mixture was stirred at 90℃ for 1h. Solvent was removed in vacuo. The resultant residue was dissolved in EA (100 mL) and treated with saturated NaHCO3. The organic phase was separated, and the water phase was extracted with EA (100 mL*2) . The combined organic phase was washed with brine, dried over anhydrous Na2SO4, and concentrated in vacuo. The residue was purified by flash chromatography (MeOH/DCM＝1/20) to give 4- (cyclohex-1-en-1-yl) -1- (4-methoxybenzyl) -3- (pyridin-2-yl) -1H-pyrazol-5-amine as a brown solid (6.8 g, 35％yield) .
1H NMR (DMSO-d6) δ : 8.49 (d, J ＝ 4.4 Hz, 1H) , 7.72 (t, J ＝ 7.2 Hz, 1H) , 7.65 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 7.07 -7.29 (m, 3H) , 6.88 (d, J ＝ 8.8 Hz, 2H) , 5.47 (br. s., 1H) , 5.14 (s, 2H) , 4.94 (br. s., 2H) , 3.71 (s, 3H) , 2.12 (br. s., 2H) , 1.98 (br. s., 2H) , 1.59 (br. s., 4H) . LC-MS: m/z 361.2 (M+H) +.
Step D: 4- (cyclohex-1-en-1-yl) -3- (pyridin-2-yl) -1H-pyrazol-5-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000233
The solution of 4- (cyclohex-1-en-1-yl) -1- (4-methoxybenzyl) -3- (pyridin-2-yl) -1H-pyrazol-5-amine (6.8 g, 19 mmol) in TFA/ (CF3SO2) 2O (30 mL/10 mL) was stirred at 50℃ for 1h. The solvent was removed in vacuo. The residue was dissolved in EA (50 mL) and treated with saturated NaHCO3.
The organic phase was separated, and the water phase was extracted with EA (50 mL*2) . The combined organic phase was washed with brine, dried over anhydrous Na2SO4, and concentrated in vacuo. The residue was dissolved in NH3/MeOH (7 mol/L, 50 mL) , and hydrazine hydrate (g, mmol, 2 eq. ) was added. The mixture was stirred at r.t. overnight. Solvent was removed in vacuo and the residue was purified by flash chromatography (MeOH/DCM 1/20) to give 4- (cyclohex-1-en-1-yl) -3- (pyridin-2-yl) -1H-pyrazol-5-amine (3.6 g, 79％yield) as a brown solid. LC-MS: m/z 241.2 (M+H) +.
Step E: 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -5-hydroxy-6- (4-methoxyphenyl) -2- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000234
A solution of 4-phenyl-3- (pyridin-2-yl) -1H-pyrazol-5-amine (3.6 g, 15 mmol) and dimethyl 2- (4-methoxyphenyl) malonate (7.2 g, 30 mmol, 2 eq. ) in xylene (50 ml) was refluxed for 8h. The reaction mixture was cooled to room temperature. The precipitate was filtered off and washed with MeOH to give 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -5-hydroxy-6- (4-methoxyphenyl) -2- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (4.0 g, 64％yield) as a yellow solid. LC-MS: m/z 415.2 (M+H) +.
Step F: 5, 7-dichloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -2- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine
Figure PCTCN2016097524-appb-000235
The solution of 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -5-hydroxy-6- (4-methoxyphenyl) -2- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one (4.0 g, 10 mmol) in POCl3 (30 ml) in a sealed tube was stirred at 120 ℃ overnight. The reaction mixture was cooled to room temperature and concentrated in vacuo. The residue was dissolved in DCM (50 mL) and poured into ice-water (100 mL) . The mixture was adjusted to PH＝7 by adding saturated NaHCO3 solution. The organic phase was separated, and the water phase was extracted with DCM (50 ml*2) . The combined organic phase  was washed with brine, dried over anhydrous Na2SO4, and concentrated in vacuo. The residue was purified by column chromatography on silica gel (eluting PE/EA＝1: 1) to give 5, 7-dichloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -2- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (2.8 g, 64％yield) as a yellow solid. LC-MS: m/z 451.1, 453.1 (M+H) +.
Step G: 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine
Figure PCTCN2016097524-appb-000236
To a solution of 5, 7-dichloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -2- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (2.8 g, 6 mmol) in DCM (50 ml) was added NaOMe (6.2 mL, 5.0 mol/L in MeOH) at 0 ℃. The reaction mixture was stirred at 0 ℃ for 10 min and poured into ice-water (100 mL) . The organic phase was separated, and the water phase was extracted with DCM (50 ml*2) . The combined organic phase was washed with brine, dried over anhydrous Na2SO4, and concentrated in vacuo to give 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (2.7 g, 97％yield) as a yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) δ : 8.70 (dt, J ＝ 4.8, 1.2 Hz, 1H) , 7.91 -7.96 (m, 2H) , 7.42 -7.47 (m, 1H) , 7.39 (d, J ＝ 8.6 Hz, 2H) , 7.07 (d, J ＝ 8.6 Hz, 2H) , 5.82 (br. s., 1H) , 4.12 (s, 3H) , 3.83 (s, 3H) , 2.09 -2.24 (m, 4H) , 1.56 -1.75 (m, 4H) . LC-MS: m/z 447.2, 449.2 (M+H) +.
Step H: 3- (cyclohex-1-en-1-yl) -6- (4-methoxyphenyl) -2- (pyridin-2-yl) -5- (pyridin-2-ylamino) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidin-7 (4H) -one
Figure PCTCN2016097524-appb-000237
A suspension of 5-chloro-3- (cyclohex-1-en-1-yl) -7-methoxy-6- (4-methoxyphenyl) -2- (pyridin-2-yl) pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine (300 mg, 0.67 mmol) , pyridin-2-amine (126 mg, 1.34 mmol, 2 eq. ) , Pd (OAc) 2 (90 mg, 0.40 mmol, 0.6 eq. ) , Xantphos (232 mg, 0.40 mmol, 0.6 eq. ) and Cs2CO3 (437 mg, 1.34 mmol, 2.0 eq. ) in 1.4-dioxane (10 mL) was stirred at 130 ℃ through microwave  irradiation for 1.5 hour under N2 atmosphere. The mixture was filtered through celite, and the filtrate was concentrated in vacuo. The resultant residue was purified to afford the title compound as a yellow solid.
1H NMR (DMSO-d6) δ : 8.67 (d, J ＝ 8.2 Hz, 1H) , 8.42 (br. s., 1H) , 8.12 (d, J ＝ 4.4 Hz, 1H) , 7.73 (t, J ＝ 7.2 Hz, 1H) , 7.60 -7.69 (m, 1H) , 7.41 -7.52 (m, 1H) , 7.24 -7.39 (m, 3H) , 7.20 (s, 1H) , 7.08 (d, J ＝ 7.6 Hz, 2H) , 6.89 -6.98 (m, 1H) , 5.97 (br. s., 1H) , 3.82 (s, 3H) , 2.20 (br. s., 4H) , 1.66 (br. s., 4H) . LC-MS: m/z 491.2 (M+H) +.
3, 4-diphenyl-1H-pyrazol-5-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000238
Step A: 3-oxo-2, 3-diphenylpropanenitrile
To a solution of 2-phenylacetonitrile 1 (10 g, 85.3 mmol) and methyl benzoate 4 (12.2 g, 90 mmol) in THF (100 mL) was added sodium hydride (6.8 g, 170 mmol) at 0 ℃. After addition, the mixture was stirred at room temperature overnight. The mixture was quenched with 1 M hydrochloric acid to pH 6. The organic phase was dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under reduced pressure to dryness. The residue was added petroleum ether (60 mL) and the turbid liquid was stirred at room temperature for 3h. The precipitate was collected by filtration and dried in vacuo to afford 3-oxo-2, 3-diphenylpropanenitrile 2 (15.3 g) as a white solid. LC-MS: m/z 222.1 (M+H) +.
Step B: 3, 4-diphenyl-1H-pyrazol-5-amine
A mixture of 3-oxo-2, 3-diphenylpropanenitrile (15 g, 67.8 mmol) , hydrazine hydrate (7.6 g, 150 mmol) , acetic acid (15 mL) and the ethanol (60 mL) was heated to reflux overnight. The mixture was evaporated to remove ethanol and the residue was adjusted to pH 8 with saturated solution of sodium bicarbonate at 0 ℃. The mixture was extracted with ethyl acetate (80 mL) twice, and the combined organic phase was washed with brine, dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated in vacuum to dryness. The resulting solid was recrystallized from  2-methoxy-2-methylpropane to give 3, 4-diphenyl-1H-pyrazol-5-amine (16 g) as a white solid. LC-MS: m/z 236.1 (M+H) +.
3- (2-fluorophenyl) -4-phenyl-1H-pyrazol-5-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000239
This compound was prepared according to the procedures for preparing intermediate 3, 4-diphenyl-1H-pyrazol-5-amine by using compound 4 as methyl 2-fluorobenzoate.
Step A stoichiometry: 2-phenylacetonitrile (5 g, 42.6 mmol) , methyl 2-fluorobenzoate (6.9 g, 45 mmol) and sodium hydride (3.4 g, 85 mmol) in THF (60 mL) under cooling at 0 ℃. LC-MS: m/z 240.1 (M+H) +.
Step B stoichiometry: 3- (2-fluorophenyl) -3-oxo-2-phenylpropanenitrile (3.25 g, 13.6 mmol) , hydrazine hydrate (1.5 g, 30 mmol) , acetic acid (3 mL) and the ethanol (15 mL) under heating to reflux overnight. LC-MS: m/z 254.2 (M+H) +.
3-phenyl-4- ( (2H10) piperidin-1-yl) -1H-pyrazol-5-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000240
Step A: 2- ( (2H10) piperidin-1-yl) acetonitrile
The mixture of piperidine-d10 (100 mg, 1.04 mmol, 1 eq. ) , 2-bromoacetonitrile (150 mg, 1.2 eq. ) , and K2CO3 (276 mg, 2 eq. ) in CH3CN (5 mL) was stirred at 70 ℃ overnight. Then the mixture was cooled to r.t. and filtered, the filtrate was poured into water (30 mL) and extracted with EA (10 mL*3) . The combined organic phase was washed with brine, dried over anhydrous Na2SO4  and concentrated in vacuo to afford Intermediate 2 which was directly used to the next step without further purification. LC-MS: m/z 135.0 (M+H) +.
Step B: 3-oxo-3-phenyl-2- ( (2H10) piperidin-1-yl) propanenitrile
To a mixture of Intermediate 2 (115 mg, 0.86 mmol, 1 eq. ) and methyl benzoate (140 mg, 1.03 mmol, 1.2 eq. ) in THF (8 mL) was added NaHMDS (2M in THF, 0.52 mL, 1.2 eq. ) at 0 ℃. The mixture was stirred at r.t. overnight. The reaction mixture was diluted with EA (10 mL) and quenched with saturated NH4Cl. The organic phase was separated, washed with brine, dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated in vacuo. The residue was purified by flash chromatography to afford the desired Intermediate 3 as a white solid. LC-MS: m/z 239.1 (M+H) +.
Step C: 3-phenyl-4- ( (2H10) piperidin-1-yl) -1H-pyrazol-5-amine
The mixture of Intermediate 3 (169 mg, 0.71 mmol, 1 eq. ) and hydrazine (71 mg, 1.42 mmol, 2 eq. ) in EtOH/AcOH (5/1, 5 mL/1 mL) was refluxed for 5h. Then the mixture was cooled to r.t. and evaporated. The residue was dissolved in EA (5 mL) and neutralized with 10％NaHCO3. The organic phase was separated, and the the water phase was extracted with EA (5 mL*3) . The combined organic phase was washed with brine, dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated in vacuo. The residue was purified by flash chromatography to afford the desired product 4 as a white solid.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 11.52 (br. s., 1H) , 7.85 (d, J ＝ 7.6 Hz, 2H) , 7.38 (t, J ＝ 7.6 Hz, 2H) , 7.22 -7.29 (m, 1H) , 4.35 (br. s., 2H) . LC-MS: m/z 253.1 (M+H) +.
3-phenyl-4- (piperidin-1-yl) -1H-pyrazol-5-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000241
This compound was prepared according to the procedure for preparing intermediate 3-phenyl-4- ( (2H10) piperidin-1-yl) -1H-pyrazol-5-amine, step B-C, starting from 2- (piperidin-1-yl) acetonitrile. Step B stoichiometry: 2- (piperidin-1-yl) acetonitrile (7.8 g, 62 mmol, 1 eq. ) , methyl benzoate (9.4g, 68 mmol, 1.1 eq. ) and NaHMDS (2 M in THF, 46 mL, 1.5 eq. ) in THF (300 mL) at 0 ℃-r.t..
Step C stoichiometry: 3-oxo-3-phenyl-2- (piperidin-1-yl) propanenitrile (5g, 21.902mmol) and hydrazine hydrate (3.3g, 65.706mmol) in EtOH/AcOH (5/1, 30 mL/6 mL) under heating to reflux for 16h under N2 protection.
1H NMR (DMSO-d6) : δ1.52 (br. s., 1H) , 7.82 (br. s., 2H) , 7.36 (t, J ＝ 7.2 Hz, 2H) , 7.25 (d, J ＝ 7.3 Hz, 1H) , 4.28 (br. s., 2H) , 2.88 (t, J ＝ 5.0 Hz, 3H) , 1.55 (br. s., 3H) , 1.46 (d, J ＝ 4.0 Hz, 2H) . LC-MS: m/z 243.2 (M+H) +.
4- (4, 4-difluoropiperidin-1-yl) -3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000242
This compound was prepared according to the procedure for preparing intermediate 3-phenyl-4- ( (2H10) piperidin-1-yl) -1H-pyrazol-5-amine, step A-C, starting from 4, 4-difluoropiperidine hydrochloride salt. Step A stoichiometry: 4, 4-difluoropiperidine hydrochloride salt (1.0 g, 6.3 mmol, 1 eq. ) , 2-bromoacetonitrile (761 mg, 6.3mmol, 1 eq. ) , triethylamine (2.2 g, 22.2 mmol, 3.5 eq. ) in THF (30 mL) under heating at 60 ℃ overnight. LC-MS: m/z 161.0 (M+H) +. Step B stoichiometry: 2- (4, 4-difluoropiperidin-1-yl) acetonitrile (500 mg, 3.1 mmol, 1 eq. ) , methyl benzoate (467 mg, 3.4 mmol, 1.1 eq. ) and NaHMDS (2 M in THF, 2.3 mL, 1.5 eq. ) in THF (30 mL) at 0 ℃-r.t. . Step C stoichiometry: 2- (4, 4-difluoropiperidin-1-yl) -3-oxo-3-phenylpropanenitrile (380 mg, 1.44 mmol, 1 eq. ) and hydrazine hydrate (144 mg, 2.88 mmol, 2 eq. ) in EtOH/AcOH (5/1, 15 mL/3 mL) under heating to reflux for 6h. LC-MS: m/z 279.1 (M+H) +.
4- (cyclohex-1-en-1-yl) -3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000243
Step A: 4- (cyclohex-1-en-1-yl) -3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine
A suspension of amino-pyrazole (10 g, 62.9 mmol) and cyclohexanone (13 mL, 126 mmol) and 4-methylbenzenesulfonic acid hydrate (11.4 g, 62.9 mmol) in 1.4-dioxane (50 mL) was stirred for 8 hours at 90℃. The precipitate was collected by filtration and washed with acetonitrile to afford crude product which was recrystallized from methanol to afford 4-cyclohexenyl-3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine (4.18 g) as white solid.
1H NMR (Chloroform-d) : δ 7.51 (d, J ＝ 6.98 Hz, 2H) , 7.31 -7.43 (m, 3H) , 5.81 (br. s., 1H) , 2.19 (br. s., 2H) , 1.98 (d, J ＝ 1.88 Hz, 2H) , 1.59 -1.70 (m, 4H) . LC-MS: m/z 240.1 (M+H) +.
4- (cyclohex-1-en-1-yl) -3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000244
Step A: 1- (4-methoxybenzyl) -3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine
A mixture of 3-oxo-3-phenylpropanenitrile (14.5 g, 0.1 mmol) , (4-methoxybenzyl) hydrazine (15.2 g, 0.1 mmol) , acetic acid (40 mL) and ethanol (150 mL) was heated to 85 ℃ overnight. The mixture was cooled to room temperature and poured to water (300 mL) . The mixture was basified by adding aqueous sodium hydroxide at 0 ℃ to pH 7-8. The resulting suspension was filtrated. The filter cake was washed with water, dried in vacuum to afford 1- (4-methoxybenzyl) -3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine (14.4 g) as a white solid.
1H NMR (Chloroform-d) : δ 7.79 (d, J ＝ 8.8 Hz, 2 H) , 7.38 –7.42 (m, 2 H) , 7.28-7.38 (m, 1 H) , 7.19 (d, J ＝ 8.8 Hz, 2 H) , 6.89 (d, J ＝ 8.8 Hz, 2 H) , 5.91 (s, 1 H) , 5.24 (s, 2 H) , 3.81 (s, 3 H) . LC-MS: m/z 280.1 (M+H) +.
Step B: 4- (cyclohex-1-en-1-yl) -1- (4-methoxybenzyl) -3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine
A mixture of 1- (4-methoxybenzyl) -3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine (9 g, 32.5 mmol) and cyclohexanone (6.4 g, 65.0 mmol) in acetic acid (50 mL) was stirred at room temperature for 16 h.
The mixture was poured to water (150 mL) . Aqueous sodium hydroxide was added into the mixture at 0 ℃ to pH 7-8. The resulting mixture was extracted with ethyl acetate (60 mL) three times. The combined organic phase was washed with brine, dried over anhydrous sodium sulfate and evaporated to dryness. The residue was purified with column chromatography (ethyl acetate: petroleum ether＝1: 3) on silica gel to afford 4-cyclohexenyl-1- (4-methoxybenzyl) -3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine (6.5 g) as a white solid. LC-MS: m/z 360.2 (M+H) +.
Step C: 4- (cyclohex-1-en-1-yl) -3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine
A mixture of 4-cyclohexenyl-1- (4-methoxybenzyl) -3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine (6.0 g, 16.7 mmol) and trifluoromethanesulfonic anhydride (12 mL) in trifluoroacetic acid (36 mL) was stirred at 30 ℃ for 2 h. The mixture was poured to water (50 mL) . Aqueous sodium hydroxide was added into the mixture at 0 ℃ to pH 7-8. The mixture was extracted with ethyl acetate (60 mL) three times. The combined organic phase was washed with brine, dried over anhydrous sodium sulfate and evaporated to dryness. The residue was purified with column chromatography (methanol: dichloromrthane＝1: 20) on silica gel to afford 4-cyclohexenyl-3-phenyl-1H-pyrazol-5-amine (2.6 g) as a white solid.
1H NMR (Chloroform-d) δ 7.51 (d, J ＝ 6.98 Hz, 2 H) , 7.31 -7.43 (m, 3H) , 5.81 (br. s., 1H) , 2.19 (br. s., 2H) , 1.98 (d, J ＝ 1.88 Hz, 2H) , 1.59 -1.70 (m, 4H) . LC-MS: m/z 240.1 (M+H) +.
4-methoxy-1, 3, 5-triazin-2-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000245
Step A: 4-chloro-1, 3, 5-triazin-2-amine
2,4-dichloro-1, 3, 5-triazine (8.0 g, 53.3 mmol) was added in portions to 200 mL of NH4OH at -20 ℃.After addition, the mixture was stirred at -20 ℃ for 10mins, and then filtered, washed with water and dried to give 4-chloro-1, 3, 5-triazin-2-amine (5.7 g) as a yellow solid which was used to the next step without further purification. LC-MS: m/z 131.1 (M+H) +.
Step B: 4-methoxy-1, 3, 5-triazin-2-amine
To the solution of 4-chloro-1, 3, 5-triazin-2-amine (5.7 g, 44.0 mmol) in MeOH (100 mL) cooled to 0 ℃ was added CH3ONa (35.2 mL, 176.1 mmol, 5.0 M) dropwise. Then the mixture was stirred  at room temperature for 1h. Half of the solvent was removed by vacuum, and the precipitate was filtered, washed with water to afford 4-methoxy-1, 3, 5-triazin-2-amine as a white solid (1.0 g) . LC-MS: m/z 127.1 (M+H) +.
N2-methyl-1, 3, 5-triazine-2, 4-diamine
Figure PCTCN2016097524-appb-000246
Step A: The mixture of 4-chloro-1, 3, 5-triazin-2-amine (200 mg, 1.5 mmol) in MeNH2/THF (2mol/L, 10 mL) was stirred at r.t. for 10 min. The mixture was concentrated in vacuo, and the residue was purified by flash chromatography (DCM/MeOH 10/1) to afford the desired product as a white solid. (106 mg) . LC-MS: m/z 125.9 (M+H) +.
1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000247
Step A: 3-nitro-1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazole
A mixture of compound 1 (10g, 0.089mmol) and Cs2CO3 (1.9g, 0.116mmol) in DMF (10 mL) was stirred at r.t. for 16h. The mixture was diluted with water (20 mL) and extracted with EA (20 mL X 3) . The organic layer was dried, concentrated and purified by silica gel chromatography (PE: EA ＝ 3: 1) to afford compound 2 (9g) as a white solid.
1H NMR (400 MHz, CHLOROFORM-d) : δ 0.01 -0.03 (m, 9 H) 0.91 -0.99 (m, 2 H) 3.59 -3.66 (m, 2 H) 5.53 (s, 2 H) 7.01 (d, J＝2.69 Hz, 1 H) 7.69 (d, J＝2.69 Hz, 1 H) . LC-MS: m/z 244.5 (M+H) +.
Step B: 1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-amine
The compound 2 (9g, 0.037mmol) and Pd/C (0.9g) in MeOH (30 mL) was stirred at r.t. for 16h under H2 atmosphere. The mixture was filtered and concentrated to give the crude product which was directly used to the next step without further purification. LC-MS: m/z 214.5 (M+H) +.
2- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -2H-1, 2, 3-triazol-4-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000248
This compound was prepared according to the procedures for preparing 1- ( (2- (trimethylsilyl) ethoxy) methyl) -1H-pyrazol-3-amine by using intermediate 1 as 4-nitro-2H-1, 2, 3-triazole.
1H NMR (DMSO-d6) : δ 7.00 (s, 1H) , 5.35 (s, 2H) , 5.13 (s, 2H) , 3.49 -3.58 (m, 2H) , 0.69 -0.89 (m, 2H) , -0.04 (s, 9H) . LC-MS: m/z 215.2 (M+H) +.
1- (4-methoxybenzyl) -1H-pyrazole-3, 5-diamine
Figure PCTCN2016097524-appb-000249
Step A: The mixture of malononitrile (1.9g, 0.028mmol) and (4-methoxybenzyl) hydrazine hydrochloride (5.4g, 0.028mmol) in EtOH (20 mL) and TEA (3 mL) was heated to reflux for 16h. The mixture was concentrated to dryness. The residue was suspended in water and extracted with EA (10 mL X3) . The combined organic layers were dried and concentrated to give the crude product which was directly used to the next step without further purification. LC-MS: m/z 219.5 (M+H) +.
Methyl 2- (2, 3-dihydrobenzo [b] [1, 4] dioxin-6-yl) acetate
Figure PCTCN2016097524-appb-000250
To a solution of methyl 2- (3, 4-dihydroxyphenyl) acetate (4 g, 0.022 mol) in DMF (20 mL) were added 1, 2-dibromoethane (4.09 g, 0.022 mol) and K2CO3 (6 g, 0.044mol) . The reaction mixture was heated to 80 ℃ for 4h. The reaction mixture was then poured into water, extracted with ethyl acetate, dried over anhydrous Na2SO4, filtered, and concentrated to dryness. The residue was purified by column chromatography on silica gel (eluting PE/EA＝10: 1) to give the desired product (1.3 g) .
1H NMR (DMSO-d6) : δ 6.73 -6.81 (m, 3H) , 6.65 -6.73 (m, 1H) , 4.16 -4.27 (m, 5H) , 3.55 (s, 3H) . LC-MS: m/z 223.1 (M+H) +.
3- (tert-butyldimethylsilyloxy) pyridin-2-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000251
Step A: To a mixture of 2-aminopyridin-3-ol (220 mg, 2 mmol) , 1H-imidazole (204 mg, 3 mmol) in chloroform (20 mL) was added tert-butylchlorodimethylsilane (302 mg, 2 mmol) slowly at room temperature. Then the reaction mixture was stirred at room temperature overnight. The mixture was evaporated to dryness. The residue was purified by column chromatography on silica gel (methanol: dichloromethane＝1: 50) to afford 3- (tert-butyl-dimethylsilyloxy) pyridin-2-amine (360 mg) as a white solid. LC-MS m/z: 225.1 (M+H) +.
5- ( (tert-butyldimethylsilyl) oxy) pyridin-2-amine
Figure PCTCN2016097524-appb-000252
This compound was prepared according to 3- (tert-butyldimethylsilyloxy) pyridin-2-amine by using Intermediate 1 as 6-aminopyridin-3-ol in step A. LC-MS m/z: 225.1 (M+H) +.
Example 2 Biochemical Assay
In the reaction catalyzed by MAT2A enzyme, L-Met and ATP were converted to SAM, inorganic phosphate, and inorganic diphosphate. Measurement of MAT2A enzymatic activity was made by direct chemical detection of the inorganic phosphate upon the addition of sulfuric acid and ammonium molybdate to the enzymatic reaction mixture, which stochiometrically formed highly chromogenic malachite green phosphomolydbate with an absorption maxima at 620 to 650 nM. The concentration of malachite green phosphomolydbdate produced in the detection reaction is thus directly related to the quantity of product produced by the MAT2A enzyme. Multiple commercial kits exist for this method of phosphate detection and quantification, such as PiColorLock Gold (Innova Biosciences) .
Typical reaction was performed in 50 μl final volume, containing buffer (Tris, pH 8.0, 50 mM KCl, 15 mM MgCl2, 300 uM EDTA, bovine serum albumin at 0.005％w/v) and 1μg/ml MAT2A. Compounds were added in 1 ul of DMSO at the desired concentration； a typical dose response curve contained ten points with three-fold dilution between compound concentrations. The mixture of Mat2a enzyme and inhibitor was preincubated for 60 minutes at 25C； the enzymatic reaction was started with the addition of L-Met and ATP to a final concentration of 80 uM and 100 uM respectively. The reaction was allowed to proceed for 60 minutes at room temperature then halted by the addition of 13 ul of PiColor Lock reagent. After a further 5 minutes of incubation at room temperature, 5 ul of PiColor Stabilizer was added and the reactions were further incubated at 25C for 25 minutes. Quantitative measurement of product produced was determined by spectrophotometric analysis at 623 nM and comparison to a phosphate standard curve.
Recombinant MAT2A protein was expressed in SF9 insect cells and purified by metal chelate affinity chromatography, using methods well known in the art. After expression of His6-tagged  MAT2A cells were disrupted by 4 passes through an M-Yl 10 Micro fluidizer (Microfluidics) set to 500 psi, and then centrifuged at 22,000 rcf for 20 min at 4℃. The supernatant was harvested and loaded at 15cm/h on a Histrap FF 5*1ml column (GE) which was equilibrated with 50mM Tris, 500mM NaCl, pH7.4. Host cell contaminants were removed by washing the column with equilibration buffer followed by equilibration buffer containing 20mM imidazole and 60mM imidazole to baseline. MAT2A protein was eluted by the addition of buffer containing 250 mM imidazole, dialized into 50 mM NaCl, 50 mM Tris, pH 7.4, flash frozen in liquid nitrogen, and stored at -80C until use.
Compounds of the invention shown in Table 1 were tested in the foregoing assay and determined to inhibit MAT2A with an IC50 of less than 500nM.
Example 3 Cellular Assay of target engagement (SAM)
Measurement of MAT2A activity in cells was made by direct quantitation of the abundance of the product of its enzymatic activity, SAM. Cancer cells were treated with candidate MAT2A inhibitors for a suitable incubation period, and the cells were then lysed using a reagent which quenched any further enzyme activity. Soluble metabolites including SAM were collected and SAM itself was directly measured from the lysate using quantitative LC/MS.
A typical assay was performed using an HCT116 human colon carcinoma cell line which was genetically engineered to delete the MTAP gene (commercially available from Horizon Discovery) . This cell line was utilized because it was determined that loss of the MTAP gene predicts sensitivity to MAT2A inhibitors. Cells were plated in 96-well dishes at appropriate cell density. Following 24 hours, cells were then treated with the candidate MAT2A inhibitor. Prior to addition to cells, the compound was first serially diluted in DMSO, typically as a 3-fold serial dilution with 10 dose points. Compound was then transferred to a working stock plate in cell culture media by adding 5 ul of compound in DMSO to 495 ul of cell culture media. This working stock was then added to cells via a further 5-fold dilution, by adding 25 ul of working stock to 100 ul of cells in culture media. Following compound addition, cells were incubated at 37℃ /5％CO2 for 4 hrs.
To quantitate SAM levels following compound treatment, cells were gently washed once in Ammonium Carbonate buffer (75mM at pH 7.4) , placed on dry ice, and lysed with metabolite extraction buffer (80％cold methanol and 20％acetic acid containing 50 ng/ml of deuterated d3SAM) . Following centrifugation at 4℃ at 3200 rpm for 30 minutes, the supernatant was  collected and stored at -80℃ until analysis by Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (LC/MS) . LC/MS analysis was performed using an Xevo TQS (Milford, MA) operating in positive electrospray mode, with chromatographic separation using a Waters Acquity BEH Amide column. Multiple Reaction Monitoring data was acquired for SAM and the d3SAM standard, using MRM transitions of 399.2/250.1 amu and 402.2/250.1 amu, respectively. In a typical LC/MS analysis, the initial flow rate was 0.5ml/min of 25％H2O: ACN (95/5, v/v) -1％FA -10mM NH4OAc (Mobile Phase A) , 75％H2O: ACN (5/95, v/v) -1％FA -10mM NH4OAc (Mobile Phase B) , at 0.2 min 25 ％MA , at 0.5 min 65％MA, at 1.1min 25％MA with a total run time of 2.5 minutes Approximately 75％of the compounds shown in Table 1 were tested in the foregoing assay and determined to inhibit synthesis of SAM with an IC50 of less than 1 μM with fewer than 5 of those compounds having an IC50 above 500 nM and a majority having an IC50 less than 100 nM.
Example 4 Assay for Inhibition of Cellular Proliferation
Test compound impact on cancer cell growth was assessed by treating cancer cells with compound for 4 days and then measuring proliferation using an ATP-based cell proliferation readout (Cell Titer Glo, Promega Corporation) .
In a typical assay an isogenic pair of HCT116 human colon carcinoma cell lines which vary only in MTAP deletion status (HCT116 MTAP+/+ and HCT116 MTAP-/-) were plated in 96-well dishes at appropriate cell density. Following 24 hours, cells were then treated with the candidate MAT2A inhibitor. Prior to addition to cells, the compound was first serially diluted in DMSO, typically as a 3-fold serial dilution with 10 dose points. Compound was then transferred to a working stock plate in cell culture media by adding 5 ul of compound in DMSO to 495 ul of cell culture media. This working stock was then added to cells via a further 5-fold dilution, by adding 25 ul of working stock to 100 ul of cells in culture media. Following compound addition, cells were incubated at 37℃ /5％CO2 for 4 days.
To measure inhibition of cellular proliferation, cells were allowed to equilibrate to room temperature for 30 minutes, and were then treated with 125 ul of Cell Titer Glo reagent. The plate was then shaken for 15 minutes to ensure complete mixing and full cell lysis. Luminescent signal of the Cell Titer Glo reagent was then measured using a plate-based luminometer and normalized via an ATP standard curve. This luminescence measure was converted to a proliferation index by subtracting from each datapoint the ATP luminescence measured from a control cell plate that was measured at the time of compound treatment (ie, day 0) . Compound activity was then represented  as a ％change in proliferation relative to a within-plate DMSO control. Approximately 75％of the compounds disclosed in Table 1 were tested in the foregoing assay. Approximately two thirds of those compounds inhibited proliferation in the assay with an IC50 of less than 5 μM and one third inhibited proliferation with an IC50 of less than 1 μM.

Claims (28)

  1. A compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof：
    Figure PCTCN2016097524-appb-100001
    wherein：
    ring A and ring B are independently a carbocycle or a heterocycle each optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy， halogen， amino， carboxy， CN， oxo， alkyl， alkoxy and alkylamino wherein said alkyl， alkoxy and alkylamino are optionally substituted with hydroxy， halogen， amino， carboxy， CN and oxo；
    ring C is a carbocycle or a heterocycle each optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy， halogen， amino， carboxy， CN， oxo， alkyl， alkoxy and alkylamino wherein said alkyl， alkoxy and alkylamino are optionally substituted with hydroxy， halogen， amino， carboxy， CN and oxo； and
    R1 is H or alkyl， acarbocycle or a heterocycle each optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy， halogen， amino， NO2， CN， oxo， carboxy， alkoxycarbonyl， alkoxyalkyl， aminocarbonyl， alkyl， acyl， alkoxy， alkylamino aryl， aralkyl， heteroaryl， heteroaralkyl， aryloxy， aralkoxy， heteroaryloxy and heteroaralkoxy wherein said alkyl， alkoxy， alkylamino， alkoxycarbonyl， alkoxyalkyl， aminocarbonyl， aryl， aralkyl， heteroaryl， heteroaralkyl， aryloxy， aralkoxy， heteroaryloxy and heteroaralkoxy are optionally substituted with hydroxy， halogen， amino， alkylamino， carboxy， CN or oxo.
  2. The compound of claim 1， wherein ring A is an optionally substituted carbocycle substituted with one or more of the group consisting of hydroxy， halogen， NH2， carboxy， CN， oxo， alkyl， alkoxy and alkylamino wherein said alkyl， alkoxy and alkylamino are optionally substituted with hydroxy， halogen， NH2， carboxy， CN and oxo.
  3. The compound of claim 1， wherein ring A is phenyl.
  4. The compound of claim 1， wherein ring A is cyclohex-1-en-1-yl.
  5. The compound of claim 1， wherein， ring B is an optionally substituted carbocycle substituted with one or more of the group consisting of hydroxy， halogen， NH2， carboxy， CN， oxo， alkyl， alkoxy and alkylamino wherein said alkyl， alkoxy and alkylamino are optionally substituted with hydroxy， halogen， NH2， carboxy， CN or oxo.
  6. The compound of claim 1， wherein ring B is cyclohex-1-en-1-yl， (2H9) cyclohex-1-en-1-yl， cyclohexan-1， 3-dien-1-yl， 4， 4-difluorocyclohex-1-en-1-yl， cyclopent-1-en-1yl， cyclopentyl， pyridin-3-yl， pyridin-2-yl， 4-methoxypyridin-3-yl， pyridin-2-yl， 1H-pyrazol-4-yl， 1H-pyrrol-3-yl， 4， 4-difluoropiperidin-1-yl， 5， 6-dihydro-2H-pyran-3-yl， 3， 6-dihydro-2H-pyran-4-yl， 1H-pyrrol-3-yl， 1H-pyrrol-1-yl， tetrahydrofuran-3-yl， 3， 3-difluoropyrrolidin-1-yl or 3， 6-dihydro-2H-pyran-4-yl.
  7. The compound of claim 1， wherein ring B is phenyl.
  8. The compound of claim 1， wherein ring A is cyclohex-1-en-1-yl and ring B is phenyl.
  9. The compound of claim 1， wherein ring C is is a carbocycle or a heterocycle each optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy， halogen， amino， carboxy， CN， oxo， alkyl， alkoxy and alkylamino wherein said alkyl， alkoxy and alkylamino are optionally substituted with hydroxy， halogen， amino， carboxy， CN and oxo.
  10. The compound of claim 1， wherein ring C is 4-hydroxyphenyl， 4-chlorophenyl， 4-fluorophenyl， 4-methoxyphenyl， 4-ethoxyphenyl， 4-trifluoromethoxyphenyl， 4-hydroxy-2-methylphenyl， 4-hydroxy-2-methoxyphenyl， 3， 4-dihydroxyphenyl， 4- (2， 2， 2-trifluoroethoxy) phenyl， 4- (2- (dimethylamino) ethoxy) phenyl， 3-fluoro-4-hydroxyphenyl， 3-fluoro-4-methoxyphenyl， 2-chloro-4-hydroxyphenyl， 2-fluoro-4-methoxyphenyl， 3-amino-4-hydroxyphenyl， 3-amino-4-fluorophenyl， 3- (N， N-dimethylaminoethoxy) -4-hydroxyphenyl， 3-chloro-2-hydroxyphenyl， 3-hydroxyethoxy-4-hydroxyphenyl
    Figure PCTCN2016097524-appb-100002
  11. The compound of claim 1， wherem ring C is 6-methoxypyridin-3-yl， 2-methoxypyridin-4-yl， 1H-pyrazol-4-yl， quinolin-6-yl， 2-methylquinolin-6-yl， 2-methoxyquinolin-6-yl， 2-hydroxymethylquinolin-6-yl， 3-hydroxy-2-methylquinolin-6-yl， 2-aminoquniazolin-6-yl， 4-aminoquinazolin-6-yl， cinnolin-6-yl， quinoxalin-6-yl， 2-chloroquinoxalin-6-yl， 3-chloroquinoxalin-6-yl， 3-aminoquinoxalin-6-yl， 3-hydroxyquinoxalin-6-yl， 3-methoxyquinoxalin-6-yl， 1， 8-naphthyridin-3-yl， imidazo [1， 2-a] pyridin-6-yl，
    Figure PCTCN2016097524-appb-100003
    Figure PCTCN2016097524-appb-100004
  12. The compound of claim 1， wherein ring C is 4-methoxyphenyl.
  13. The compound of claim 1， wherein R1 is a heterocycle optionally substituted with one or more substituents selected from the group consisting of hydroxy， halogen， NH2， NO2， carboxy， alkoxycarbonyl， alkylaminocarbonyl， CN， oxo， alkyl， acyl， alkoxy and alkylamino wherein said alkyl， alkoxy， alkylamino， alkoxycarbonyl， alkylaminocarbonyl are optionally substituted with hydroxy， halogen， NH2， alkylamino， carboxy， CN and oxo.
  14. The compound of claim 1， wherein R1 is pyridin-2-yl， pyrazin-2-yl， pyrimidin-2-yl， pyrimidin-4-yl， pyrimidin-5-yl， pyridazin-3-yl， 1， 3， 5-triazin-2-yl， 1， 2， 4-triazin-3-yl each of which is optionally substituted with one or more F， Cl， CN， OH， NO2， NH2， NHMe-C (O) NH2 and methoxy.
  15. The compound of claim 1， wherein R1 is selected from the group consisting of
    Figure PCTCN2016097524-appb-100005
    Figure PCTCN2016097524-appb-100006
  16. The compound of claim 1， wherein R1 is selected from the group consisting of
    Figure PCTCN2016097524-appb-100007
    Figure PCTCN2016097524-appb-100008
  17. A method for inhibiting the synthesis of S-adenosyl methionine (SAM) from methionine and ATP by MAT2A in a cell， comprising introducing into said cell an effective amount of a compound of formula (I) or a salt thereof.
  18. A method for treating a disease or condition mediated by the overexpression of MAT2A in a mammal， comprising administering to said mammal an effective amount of a compound of any one of claims 1-19.
  19. The method of claim 20， wherein said disease or condition is cancer.
  20. The method of claim 21， wherein said cancer is neuroblastoma， rectum carcinoma， colon carcinoma， familiary adenomatous polyposis carcinoma and hereditary non-polyposis colorectal cancer， esophageal carcinoma， labial carcinoma， larynx carcinoma， hypopharynx carcinoma， tong carcinoma， salivary gland carcinoma， gastric carcinoma， adenocarcinoma， medullary thyroidea carcinoma， papillary thyroidea carcinoma， renal carcinoma， kidney parenchym carcinoma， ovarian carcinoma， cervix carcinoma， uterine corpus carcinoma， endometrium carcinoma， chorion carcinoma， pancreatic carcinoma， prostate carcinoma， testis carcinoma， breast carcinoma， urinary carcinoma， melanoma， brain tumors such as glioblastoma， astrocytoma， meningioma， medulloblastoma and peripheral neuroectodermal tumors， Hodgkin lymphoma， non-Hodgkin lymphoma， Burkitt lymphoma， acute lymphatic leukemia (ALL) ， chronic lymphatic leukemia (CLL) ， acute myeloid leukemia (AML) ， chronic myeloid leukemia (CML) ， adult T-cell leukemia lymphoma， hepatocellular carcinoma， gall bladder carcinoma， bronchial carcinoma， small  cell lung carcinoma， non-small cell lung carcinoma， multiple myeloma， basalioma， teratoma， retinoblastoma， choroidea melanoma， seminoma， rhabdomyo sarcoma， craniopharyngeoma， osteosarcoma， chondrosarcoma， myosarcoma， liposarcoma， fibrosarcoma， Ewing sarcoma or plasmocytoma.
  21. A method for treating a cancer in a subject wherein said is characterized by a reduction or absence MTAP expression or absence of the MTAP gene or reduced function of MTAP protein said method comprising administering to the subject a therapeutically effective amount of a compound according to any one of claims 1-1 9 or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  22. The method of claim 23， wherein said cancer is MTAP null.
  23. The method of claim 23 or 24， wherein said cancer has a KRAS mutation.
  24. The method of claim 25， wherein said KRAS mutation is an amino acid substitution at residue 12 or 13.
  25. The method of claim 25， wherein said KRAS mutation is G12C， G12R， G12V or G13D.
  26. The method of claim 23 or 24， wherein said cancer has a p53 mutation.
  27. The method of claim 28， wherein said p53 mutation is Y126_splice， K132Q， M133K， R174fs， R175H， R196*， C238S， C242Y， G245S， R248W， R248Q， I255T， D259V， S261_splice， R267P， R273C， R282W， A159V or R280K.
  28. A pharmaceutical composition comprising a compound according to any one of claims 1-19 or a pharmaceutically acceptable salt thereof and a pharmaceutically acceptable carrier.
PCT/CN2016/097524 2016-08-31 2016-08-31 Inhibitors of cellular metabolic processes Ceased WO2018039972A1 (en)

Priority Applications (29)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/CN2016/097524 WO2018039972A1 (en) 2016-08-31 2016-08-31 Inhibitors of cellular metabolic processes
US15/691,408 US10329298B2 (en) 2016-08-31 2017-08-30 Inhibitors of cellular metabolic processes
MX2019002303A MX390277B (en) 2016-08-31 2017-08-30 INHIBITORS OF CELLULAR METABOLIC PROCESSES.
PE2019000437A PE20190761A1 (en) 2016-08-31 2017-08-30 CELLULAR METABOLIC PROCESS INHIBITORS
IL265115A IL265115B (en) 2016-08-31 2017-08-30 Inhibitors of cellular metabolic processes
SG11201901747VA SG11201901747VA (en) 2016-08-31 2017-08-30 Inhibitors of cellular metabolic processes
UAA201902825A UA125852C2 (en) 2016-08-31 2017-08-30 INHIBITORS OF CELLULAR METABOLIC PROCESSES
PCT/US2017/049439 WO2018045071A1 (en) 2016-08-31 2017-08-30 Inhibitors of cellular metabolic processes
JP2019531597A JP6832430B2 (en) 2016-08-31 2017-08-30 Inhibitors of cell metabolism
MA046092A MA46092A (en) 2016-08-31 2017-08-30 CELLULAR METABOLIC PROCESS INHIBITORS
NZ751515A NZ751515B2 (en) 2016-08-31 2017-08-30 Inhibitors of cellular metabolic processes
AU2017319500A AU2017319500C1 (en) 2016-08-31 2017-08-30 Inhibitors of cellular metabolic processes
CN201780066270.4A CN109890822B (en) 2016-08-31 2017-08-30 Inhibitors of cellular metabolic processes
CR20190157A CR20190157A (en) 2016-08-31 2017-08-30 Inhibitors of cellular metabolic processes
KR1020197009218A KR102411150B1 (en) 2016-08-31 2017-08-30 inhibitors of cellular metabolic processes
CA3034705A CA3034705C (en) 2016-08-31 2017-08-30 Inhibitors of cellular metabolic processes
EP17764997.7A EP3507290A1 (en) 2016-08-31 2017-08-30 Inhibitors of cellular metabolic processes
BR112019003914-7A BR112019003914B1 (en) 2016-08-31 2017-08-30 INHIBITORS OF CELLULAR METABOLIC PROCESSES
TW106129811A TWI762505B (en) 2016-08-31 2017-08-31 Inhibitors of cellular metabolic processes
ARP170102433A AR109495A1 (en) 2016-08-31 2017-08-31 INHIBITORS OF CELLULAR METABOLIC PROCESSES
US16/219,735 US10800782B2 (en) 2016-08-31 2018-12-13 Inhibitors of cellular metabolic processes
PH12019500368A PH12019500368A1 (en) 2016-08-31 2019-02-21 Inhibitors of cellular metabolic processes
NI201900019A NI201900019A (en) 2016-08-31 2019-02-26 CELLULAR METABOLIC PROCESS INHIBITORS
CL2019000511A CL2019000511A1 (en) 2016-08-31 2019-02-26 Inhibitors of cellular metabolic processes.
CONC2019/0002237A CO2019002237A2 (en) 2016-08-31 2019-03-11 Inhibitors of cellular metabolic processes
US17/000,411 US11325914B1 (en) 2016-08-31 2020-08-24 Inhibitors of cellular metabolic processes
AU2020277158A AU2020277158A1 (en) 2016-08-31 2020-11-25 Inhibitors of cellular metabolic processes
JP2021014131A JP2021073269A (en) 2016-08-31 2021-02-01 Inhibitor of cell metabolism process
US17/689,209 USRE49934E1 (en) 2016-08-31 2022-03-08 Inhibitors of cellular metabolic processes

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/CN2016/097524 WO2018039972A1 (en) 2016-08-31 2016-08-31 Inhibitors of cellular metabolic processes

Related Child Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
US15/691,408 Continuation-In-Part US10329298B2 (en) 2016-08-31 2017-08-30 Inhibitors of cellular metabolic processes
US17/689,209 Continuation-In-Part USRE49934E1 (en) 2016-08-31 2022-03-08 Inhibitors of cellular metabolic processes

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2018039972A1 true WO2018039972A1 (en) 2018-03-08

Family

ID=61299736

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/CN2016/097524 Ceased WO2018039972A1 (en) 2016-08-31 2016-08-31 Inhibitors of cellular metabolic processes

Country Status (2)

Country Link
AR (1) AR109495A1 (en)
WO (1) WO2018039972A1 (en)

Cited By (34)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10329298B2 (en) 2016-08-31 2019-06-25 Agios Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of cellular metabolic processes
WO2019191470A1 (en) * 2018-03-30 2019-10-03 Agios Pharmaceuticals, Inc. Heterobicyclic inhibitors of mat2a and methods of use for treating cancer
US10738056B2 (en) 2017-09-15 2020-08-11 Aduro Biotech Inc. Pyrazolopyrimidinone compounds and uses thereof
WO2020168032A1 (en) * 2019-02-13 2020-08-20 Agios Pharmaceuticals, Inc. Combination therapies for use in treating cancer
WO2021139775A1 (en) * 2020-01-10 2021-07-15 江苏先声药业有限公司 Pyridone compound and application
WO2021252678A1 (en) * 2020-06-10 2021-12-16 Ideaya Biosciences, Inc. Heteroaryl alkylene substituted 2-oxoquinazoline derivatives as methionine adenosyltransferase 2a inhibitors
WO2021252680A1 (en) * 2020-06-10 2021-12-16 Ideaya Biosciences, Inc. 4-arylquinazoline derivatives as methionine adenosyltransferase 2a inhibitors
WO2021252681A1 (en) * 2020-06-10 2021-12-16 Ideaya Biosciences, Inc. Quinolinone derivatives as methionine adenosyltransferase 2a inhibitors
WO2021252679A1 (en) * 2020-06-10 2021-12-16 Ideaya Biosciences, Inc. 2-aminoquinazolinone derivatives as methionine adenosyltransferase 2a inhibitors
CN113999232A (en) * 2020-07-28 2022-02-01 南京正大天晴制药有限公司 MAT2A inhibitors
WO2022026892A1 (en) * 2020-07-31 2022-02-03 Tango Therapeutics, Inc. Piperidin-1- yl-n-pyrydi ne-3-yl-2-oxoacet am ide derivatives useful for the treatment of mtap-deficient and/or mt a-accumulating cancers
WO2022036033A3 (en) * 2020-08-12 2022-04-21 Servier Pharmaceuticals, Llc Solid state forms of an organic compound
WO2022078403A1 (en) * 2020-10-15 2022-04-21 江苏先声药业有限公司 Substituted pyridone compound and application
WO2022115521A1 (en) * 2020-11-25 2022-06-02 Servier Pharmaceuticals, Llc (heteo)aryl substituted pyrrolo-, pyrazolo- and triazolopyridazine derivates as mat2a inhibitors
WO2022143864A1 (en) 2020-12-31 2022-07-07 江苏先声药业有限公司 Tricyclic compound and use thereof
CN114728167A (en) * 2019-11-25 2022-07-08 安进公司 Heterocyclic compounds as delta-5 desaturase inhibitors and methods of use
US11414442B2 (en) * 2017-08-21 2022-08-16 Navigen, Inc. ARF6 inhibitors and related methods
WO2023083210A1 (en) * 2021-11-09 2023-05-19 上海海雁医药科技有限公司 Substituted naphthyridinone derivative, and pharmaceutical composition thereof and use thereof
WO2023114507A1 (en) * 2021-12-17 2023-06-22 Tango Therapeutics, Inc. Crystalline form of n-(6-amino-5-methylpyridin-3-yl)-2-(benzo[d]thiazol-5-yl)-5-methylpiperidin-1-yl)-2-oxoacetamide, pharmaceutical compositions and methods of use thereof
CN116283994A (en) * 2021-12-20 2023-06-23 艾立康药业股份有限公司 Heterocyclic compounds as MAT2A inhibitors
CN116406271A (en) * 2020-07-14 2023-07-07 江苏先声药业有限公司 Bicyclic compounds
CN116425721A (en) * 2022-12-19 2023-07-14 艾立康药业股份有限公司 Bicyclic compounds as MAT2A inhibitors
WO2023155004A1 (en) * 2022-02-15 2023-08-24 Inversago Pharma Inc. Pyrazolopyrimidines, compositions comprising them and uses thereof
WO2023185811A1 (en) 2022-03-29 2023-10-05 首药控股(北京)股份有限公司 Novel heterocyclic compound
CN116987084A (en) * 2022-04-26 2023-11-03 上海交通大学 Pyrazolopyrimidine compound and salt, solvate, composition and application thereof
WO2024002024A1 (en) 2022-06-27 2024-01-04 石药集团中奇制药技术（石家庄）有限公司 Tricyclic compounds and uses thereof
US11986471B2 (en) 2018-07-18 2024-05-21 Tango Therapeutics, Inc. Compounds and methods of use
WO2024153244A1 (en) * 2023-01-20 2024-07-25 南京再明医药有限公司 Nitrogen-containing compound
WO2025166260A1 (en) 2024-02-02 2025-08-07 Ideaya Biosciences, Inc. Amide substituted tricyclic guanidino compounds as prmt5 inhibitors
WO2025166229A1 (en) 2024-02-02 2025-08-07 Ideaya Biosciences, Inc. Tricyclic amidino compounds as prmt5 inhibitors
WO2025166257A1 (en) 2024-02-02 2025-08-07 Ideaya Biosciences, Inc. Amide substituted triheterocyclic guanidino compounds as prmt5 inhibitors
WO2025166274A1 (en) 2024-02-02 2025-08-07 Ideaya Biosciences, Inc. Tricyclic guanidino compounds as prmt5 inhibitors
WO2025166215A1 (en) 2024-02-02 2025-08-07 Ideaya Biosciences, Inc. Triheterocyclic guanidino compounds as prmt5 inhibitors
US12403137B2 (en) 2019-10-28 2025-09-02 Tango Therapeutics, Inc. Compounds and methods of use

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH07253630A (en) * 1994-03-15 1995-10-03 Konica Corp Direct positive silver halide color photographic sensitive material and formation of direct positive color image

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH07253630A (en) * 1994-03-15 1995-10-03 Konica Corp Direct positive silver halide color photographic sensitive material and formation of direct positive color image

Cited By (56)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
USRE49934E1 (en) 2016-08-31 2024-04-23 Servier Pharmaceuticals Llc Inhibitors of cellular metabolic processes
US11325914B1 (en) 2016-08-31 2022-05-10 Servier Pharmaceuticals Llc Inhibitors of cellular metabolic processes
US10329298B2 (en) 2016-08-31 2019-06-25 Agios Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of cellular metabolic processes
US10800782B2 (en) 2016-08-31 2020-10-13 Agios Pharmaceutical, Inc. Inhibitors of cellular metabolic processes
US11414442B2 (en) * 2017-08-21 2022-08-16 Navigen, Inc. ARF6 inhibitors and related methods
US10738056B2 (en) 2017-09-15 2020-08-11 Aduro Biotech Inc. Pyrazolopyrimidinone compounds and uses thereof
CN111936499A (en) * 2018-03-30 2020-11-13 安吉奥斯医药品有限公司 Heterobicyclic inhibitors of MAT2A and methods for treating cancer
CN111936499B (en) * 2018-03-30 2023-09-19 法国施维雅药厂 Heterobicyclic inhibitors of MAT2A and methods for treating cancer
WO2019191470A1 (en) * 2018-03-30 2019-10-03 Agios Pharmaceuticals, Inc. Heterobicyclic inhibitors of mat2a and methods of use for treating cancer
JP7350005B2 (en) 2018-03-30 2023-09-25 レ ラボラトワール セルヴィエ Heterobicyclic inhibitors of MAT2A and methods of use for the treatment of cancer
JP2021519783A (en) * 2018-03-30 2021-08-12 アジオス ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド Complex bicyclic inhibitors of MAT2A and how to use them for the treatment of cancer
US11524960B2 (en) 2018-03-30 2022-12-13 Servier Pharmaceuticals Llc Heterobicyclic inhibitors of MAT2A and methods of use for treating cancer
TWI719437B (en) * 2018-03-30 2021-02-21 美商阿吉歐斯製藥公司 Heterobicyclic inhibitors of mat2a and methods of use for treating cancer
AU2019243289B2 (en) * 2018-03-30 2023-01-12 Les Laboratoires Servier Heterobicyclic inhibitors of MAT2A and methods of use for treating cancer
US11986471B2 (en) 2018-07-18 2024-05-21 Tango Therapeutics, Inc. Compounds and methods of use
WO2020168032A1 (en) * 2019-02-13 2020-08-20 Agios Pharmaceuticals, Inc. Combination therapies for use in treating cancer
US12403137B2 (en) 2019-10-28 2025-09-02 Tango Therapeutics, Inc. Compounds and methods of use
US12448396B2 (en) 2019-11-25 2025-10-21 Amgen Inc. Methods of using heterocyclic compounds as Delta-5 Desaturase inhibitors
CN114728167A (en) * 2019-11-25 2022-07-08 安进公司 Heterocyclic compounds as delta-5 desaturase inhibitors and methods of use
CN114728167B (en) * 2019-11-25 2024-03-19 安进公司 Heterocyclic compounds as delta-5 desaturase inhibitors and methods of use
WO2021139775A1 (en) * 2020-01-10 2021-07-15 江苏先声药业有限公司 Pyridone compound and application
WO2021252679A1 (en) * 2020-06-10 2021-12-16 Ideaya Biosciences, Inc. 2-aminoquinazolinone derivatives as methionine adenosyltransferase 2a inhibitors
WO2021252681A1 (en) * 2020-06-10 2021-12-16 Ideaya Biosciences, Inc. Quinolinone derivatives as methionine adenosyltransferase 2a inhibitors
WO2021252680A1 (en) * 2020-06-10 2021-12-16 Ideaya Biosciences, Inc. 4-arylquinazoline derivatives as methionine adenosyltransferase 2a inhibitors
WO2021252678A1 (en) * 2020-06-10 2021-12-16 Ideaya Biosciences, Inc. Heteroaryl alkylene substituted 2-oxoquinazoline derivatives as methionine adenosyltransferase 2a inhibitors
CN116406271A (en) * 2020-07-14 2023-07-07 江苏先声药业有限公司 Bicyclic compounds
CN113999232B (en) * 2020-07-28 2025-01-07 南京正大天晴制药有限公司 MAT2A inhibitors
CN113999232A (en) * 2020-07-28 2022-02-01 南京正大天晴制药有限公司 MAT2A inhibitors
US11999727B2 (en) 2020-07-31 2024-06-04 Tango Therapeutics, Inc. Compounds and methods of use
US11492350B2 (en) 2020-07-31 2022-11-08 Tango Therapeutics, Inc. Compounds and methods of use
WO2022026892A1 (en) * 2020-07-31 2022-02-03 Tango Therapeutics, Inc. Piperidin-1- yl-n-pyrydi ne-3-yl-2-oxoacet am ide derivatives useful for the treatment of mtap-deficient and/or mt a-accumulating cancers
JP2023536589A (en) * 2020-07-31 2023-08-28 タンゴ セラピューティクス， インコーポレイテッド Piperidin-1-yl-N-pyridin-3-yl-2-oxoacetamide derivatives useful for treating MTAP-deficient and/or MTA-accumulating cancers
US12304907B2 (en) 2020-07-31 2025-05-20 Tango Therapeutics, Inc. Compounds and methods of use
US12264154B2 (en) 2020-07-31 2025-04-01 Tango Therapeutics, Inc. Compounds and methods of use
WO2022036033A3 (en) * 2020-08-12 2022-04-21 Servier Pharmaceuticals, Llc Solid state forms of an organic compound
WO2022078403A1 (en) * 2020-10-15 2022-04-21 江苏先声药业有限公司 Substituted pyridone compound and application
WO2022115521A1 (en) * 2020-11-25 2022-06-02 Servier Pharmaceuticals, Llc (heteo)aryl substituted pyrrolo-, pyrazolo- and triazolopyridazine derivates as mat2a inhibitors
WO2022143864A1 (en) 2020-12-31 2022-07-07 江苏先声药业有限公司 Tricyclic compound and use thereof
WO2023083210A1 (en) * 2021-11-09 2023-05-19 上海海雁医药科技有限公司 Substituted naphthyridinone derivative, and pharmaceutical composition thereof and use thereof
WO2023114507A1 (en) * 2021-12-17 2023-06-22 Tango Therapeutics, Inc. Crystalline form of n-(6-amino-5-methylpyridin-3-yl)-2-(benzo[d]thiazol-5-yl)-5-methylpiperidin-1-yl)-2-oxoacetamide, pharmaceutical compositions and methods of use thereof
CN116283994A (en) * 2021-12-20 2023-06-23 艾立康药业股份有限公司 Heterocyclic compounds as MAT2A inhibitors
CN116283994B (en) * 2021-12-20 2025-01-07 艾立康药业股份有限公司 Heterocyclic compounds as MAT2A inhibitors
JP7731007B2 (en) 2022-02-15 2025-08-28 ノヴォ ノルディスク アー／エス Pyrazolopyrimidines, compositions containing them, and uses thereof - Patent Application 20070122997
WO2023155004A1 (en) * 2022-02-15 2023-08-24 Inversago Pharma Inc. Pyrazolopyrimidines, compositions comprising them and uses thereof
JP2025505553A (en) * 2022-02-15 2025-02-28 ノヴォ ノルディスク アー／エス PYRAZOLOPYRIMIDINES, COMPOSITIONS CONTAINING THEM, AND USES THEREOF - Patent application
WO2023185811A1 (en) 2022-03-29 2023-10-05 首药控股(北京)股份有限公司 Novel heterocyclic compound
CN116987084A (en) * 2022-04-26 2023-11-03 上海交通大学 Pyrazolopyrimidine compound and salt, solvate, composition and application thereof
WO2024002024A1 (en) 2022-06-27 2024-01-04 石药集团中奇制药技术（石家庄）有限公司 Tricyclic compounds and uses thereof
CN116425721A (en) * 2022-12-19 2023-07-14 艾立康药业股份有限公司 Bicyclic compounds as MAT2A inhibitors
CN116425721B (en) * 2022-12-19 2024-02-02 艾立康药业股份有限公司 Bicyclic compounds as MAT2A inhibitors
WO2024153244A1 (en) * 2023-01-20 2024-07-25 南京再明医药有限公司 Nitrogen-containing compound
WO2025166229A1 (en) 2024-02-02 2025-08-07 Ideaya Biosciences, Inc. Tricyclic amidino compounds as prmt5 inhibitors
WO2025166257A1 (en) 2024-02-02 2025-08-07 Ideaya Biosciences, Inc. Amide substituted triheterocyclic guanidino compounds as prmt5 inhibitors
WO2025166274A1 (en) 2024-02-02 2025-08-07 Ideaya Biosciences, Inc. Tricyclic guanidino compounds as prmt5 inhibitors
WO2025166215A1 (en) 2024-02-02 2025-08-07 Ideaya Biosciences, Inc. Triheterocyclic guanidino compounds as prmt5 inhibitors
WO2025166260A1 (en) 2024-02-02 2025-08-07 Ideaya Biosciences, Inc. Amide substituted tricyclic guanidino compounds as prmt5 inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
AR109495A1 (en) 2018-12-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
USRE49934E1 (en) Inhibitors of cellular metabolic processes
WO2018039972A1 (en) Inhibitors of cellular metabolic processes
EP3774805B1 (en) Heterobicyclic inhibitors of mat2a and methods of use for treating cancer
CA3142340A1 (en) Heterobicyclic inhibitors of mat2a and methods of use for treating cancer
WO2022115521A1 (en) (heteo)aryl substituted pyrrolo-, pyrazolo- and triazolopyridazine derivates as mat2a inhibitors
BR112019003914B1 (en) INHIBITORS OF CELLULAR METABOLIC PROCESSES
EA042905B1 (en) INHIBITORS OF CELL METABOLIC PROCESSES
HK40049450A (en) Heterobicyclic inhibitors of mat2a and methods of use for treating cancer
HK40049450B (en) Heterobicyclic inhibitors of mat2a and methods of use for treating cancer
HK40061678A (en) Aza-heterobicyclic inhibitors of mat2a and methods of use for treating cancer
HK40061678B (en) Aza-heterobicyclic inhibitors of mat2a and methods of use for treating cancer

Legal Events

Date Code Title Description
WA Withdrawal of international application
NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE