WO2016048994A3 - Systèmes et procédés acellulaires de synthèse de protéines en gouttelettes et autres compartiments - Google Patents
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Abstract
De manière générale, cette invention concerne la synthèse acellulaire de protéines en gouttelettes microfluidiques. Les gouttelettes peuvent être utilisées pour encapsuler l'information génétique (ADN/ARN), et par la technique de la synthèse acellulaire de protéines, fournir une liaison entre l'information génétique et l'information fonctionnelle, p. ex., l'activité de la protéine exprimée, et peuvent être utilisées pour convertir l'information fonctionnelle en un signal détectable permettant, par exemple, de trier les gouttelettes et de récupérer l'information génétique associée aux gouttes. Dans un jeu de modes de réalisation, des gouttelettes microfluidiques contenant un système acellulaire de synthèse de protéines conçu pour détecter toute interaction protéine-protéine (p. ex., systèmes in vitro à deux hybrides ou IVT2H) peuvent être utilisées pour le criblage à haut débit, p. ex., de liants protéiques. Ce système à deux hybrides basé sur des gouttes peut comprendre deux protéines de fusion (ou plus) qui peuvent se lier l'une à l'autre de façon que leur liaison produise un complexe capable de produire un acide nucléique, l'acide nucléique pouvant être exprimé pour produire une protéine. Dans certains modes de réalisation, la protéine peut être produite dans un système acellulaire. La protéine peut être fluorescente ou déterminable autrement, de façon que la détermination de la protéine puisse être utilisée pour permettre la mise en œuvre de dosages dans les gouttelettes, pour permettre le tri des gouttelettes, ou autre, p. ex. comme discuté ci-dessous, par exemple, à des fins de criblage ou autres applications.
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