WO2014163474A1 - Formulation liquide des azotobacters applicable en tant que produit biofertilisant - Google Patents
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- WO2014163474A1 WO2014163474A1 PCT/MA2014/000007 MA2014000007W WO2014163474A1 WO 2014163474 A1 WO2014163474 A1 WO 2014163474A1 MA 2014000007 W MA2014000007 W MA 2014000007W WO 2014163474 A1 WO2014163474 A1 WO 2014163474A1
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- C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
- C05F11/00—Other organic fertilisers
- C05F11/08—Organic fertilisers containing added bacterial cultures, mycelia or the like
Definitions
- Biofertilizers are defined as products containing live microorganisms that, when applied to the soil or plants, occupy the rhizosphere, or even colonize plant tissues, and stimulate plant growth, for example by increasing the uptake of nutrients and nutrients. the production of phytohormones.
- Azotobacters are aerobic free soil bacteria. They are well known for their ability to fix atmospheric nitrogen, and they are considered the most important organisms that play a significant role in the constitution of soil nitrogen fertility. It can also synthesize appreciable amounts of secondary metabolites of growth, make B-group vitamins such as nicotinic acid, pantothenic acid, biotin and improve seed germination of many crops.
- Liquid or solid Azotobacter bio-fertilizers are marketed. Recommended as biofertilizers for cereals and horticulture, including flowers and vegetables. Its application is most often by a seed or plant treatment or directly on the ground. Leaf sprays are also sometimes used. Also used for enriching a compost
- the present invention relates to a method for the oral formulation of a biofertilizing product for the fixation of atmospheric nitrogen based on two strains of azotobacters sp.
- the formulation includes a main step that begins before stopping the multiplication of two bacteria. Indeed, the formulation of the product is included in the manufacturing process.
- the isolation of the two strains described in this invention can be carried out from samples of the soil rhizosphere of Morocco.
- the protocol is as follows:
- Samples taken are placed in sterile closed polyethylene bags and stored at 4 ° C.
- the P solubilizing strains are then isolated on Rock P Agar medium after four types of successive treatments: treatment by dry grinding, heat of 50 ° C, stirring 240 rpm.min and centrifugation.
- the nitrogen-fixing strains having the ability to live on a nitrogen-free culture medium specially prepared from the soil are isolated.
- the strains are transferred to the rich medium extracted from the soil.
- the pure isolines are kept at 4 ° C for 2 months.
- the cultures are resuspended and stored in glycerol at -20 ° C.
- Test 1 free nitrogen fixation test
- Figure 1 shows that the strain capable of fixing nitrogen forms a halt blue hait tube production of the bacterium.
- Figure 1 atmospheric nitrogen fixation test. A: presence of Azotobacter strains. B: negative control
- Figure 2 germination test. Treatment of barley with azotobacter strains (B).
- Figure 3 full-scale treatment effect of cereals by the two strains azotobacters.
Landscapes
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- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
La présente invention concerne l'application d'un produit biofertilisant à base de souches bactériennes libres ayant la capacité de fixer l'azote atmosphérique. Ces deux souches appartiennent au genre d'Azotobacters. De même, l'invention concerne le procédé de formulation original qui a été inclut dés le départ dans le procédé de la production en masse de souches bactériennes. Des essais ont été effectués et sur la stabilité de la souche dans le produit et sur l'efficacité de ce dernier dans l'amélioration des rendements des cultures.
Description
Titre
FORMULATION LIQUIDE DES AZOTOBACTERS APPLICABLE EN TANT QUE PRODUIT BIOFERTILISANT
Descriptif
L'agriculture de demain sera à la fois intensive et écologique. Cette «éco-intensification» nécessite le recours à des pratiques agronomiques nouvelles, biologiques et respectueuses de l'environnement. Notre projet s'inscrit pleinement dans cette perspective stratégique et projette de développer des produits et des services adaptés à cette nouvelle donne.
On estime qu'il faudra, à l'échelle mondiale, doubler la production agricole entre 2000 et 2050. C'est donc un triple défi que le monde agricole doit relever. Il s'agit de produire plus, de produire autre chose, de produire autrement. Les bases de l'agriculture intensive vont donc changer. Des intrants fortement consommateurs d'énergie comme le travail du sol ou l'usage d'engrais azotés, voire potassiques et phosphatés, seront des facteurs de production de plus en plus onéreux.
Aujourd'hui pour répondre à cette situation nouvelle, la principale hypothèse alternative repose sur l'utilisation intensifiée des fonctionnalités du milieu naturel. Déjà des techniques dites d'agriculture de «conservation», non labour et semis direct, occupent mondialement aujourd'hui environ 95 millions d'hectares. Concernant la fertilité des sols, différentes fonctionnalités des écosystèmes peuvent être exploitées comme la minéralisation de la matière organique, la fixation symbiotique de l'azote par les légumineuses et les azotobacter, les microorganismes à fort potentiel favorisant la croissance des plantes, la capacité des plantes extractrices, à enracinement profond, de remonter des éléments issus des couches profondes du sol, et l'exploitation des mycorhizes dans la disponibilité du phosphore, sujets d'études et de valorisation agronomique dans le cadre de cette proposition.
La recherche de nouvelles stratégies, visant à maintenir ou accroître la productivité des systèmes agricoles tout en diminuant les intrants chimiques, peuvent en particulier s'appuyer sur les résultats de recherches récentes, qui ont mis en évidence l'importance cruciale des microorganismes dans le fonctionnement biologiques des sols. Ces recherches ont ainsi conduit à l'émergence de la notion de « biofertilisants », définis comme des produits contenant différents types de microorganismes ayant la capacité de favoriser la croissance des plantes par différents mécanismes encore partiellement élucidés (fixation d'azote atmosphérique, solubilisation d'éléments minéraux, synthèse de phytohormones ou précurseurs). Parmi ces microorganismes on trouve des bactéries, regroupées sous le terme Bactéries Favorisant la Croissance des Plantes (BFCP), en anglais Plant Growth-Promoting Rhizobacteria (PGPR), ainsi que des champignons, notamment mycorhiziens.
Les biofertilisants sont définis comme des produits contenant des microorganismes vivants qui, quand ils sont appliqués au sol ou sur les plantes occupent la rhizosphère, voire colonisent les tissus végétaux, et stimulent la croissance de la plante en augmentant par exemple l'assimilation des nutriments et la production des phytohormones.
Les Azotobacters sont des bactéries aérobies libres du sol. Elles sont très connues pour leur capacité de fixation de l'azote atmosphérique, et elles sont considérées comme les plus importants organismes jouant un rôle significatif dans la constitution de la fertilité azotée des sols. Elle peut aussi synthétiser des quantités appréciables de métabolites secondaires de croissance, fabriquer des vitamines du groupe B telles que acide nicotinique, acide pantothénique, biotine et améliorer la germination des semences de nombreuses cultures. Des bioengrais d'Azotobacter liquides ou sur supports solides sont commercialisés. Recommandés comme biofertilisants pour les céréales et l'horticulture, y compris les fleurs et les légumes. Son application se fait le plus souvent par un traitement des semences ou des plants ou directement au sol. Les sprays foliaires sont aussi quelquefois utilisés. Utilisé aussi pour l'enrichissement d'un compost
La présente invention concerne un procédé de formulation orignal d'un produit biofertilisant de fixation d'azote atmosphérique à base de deux souches d' azotobacters sp. La formulation comprend une étape principale qui commence avant l'arrêt de la multiplication de deux bactéries. En effet, la formulation du produit est incluse dans le procédé de fabrication.
Les deux azotobacters présentée dans cette invention a été isolé du sol agricole marocain selon le procédé suivant :
Mise en présence d'un échantillon biologique susceptible de contenir les souches fixatrices d'azote atmosphérique, avec un milieu approprié pour la sélection de souches ayant cette fonctionnalité,
- Traitement dudit échantillon du sol pour isoler les bactéries PGPR,
- L'isolement de des deux souches décrites dans cette invention peut être effectué à partir d'échantillons de la rhizosphère du sol de Maroc.
Le protocole est le suivant :
Des échantillons de la Rhizosphère d'un sol agricole de grandes cultures sont obtenus de façon stérile après avoir retiré 15 cm du sol.
Les échantillons prélevés sont placés dans des sachets stériles en polyéthylènes fermés et stockés à 4°C.
Les souches solubilisatrices du P sont ensuite isolées sur milieu Rock P Agar après quatre types de traitements successifs : traitement par le broyage à sec, la chaleur de 50°C, agitation 240 rpm.min et centrifugation.
Après traitement des échantillons, on isole les souches fixatrices d'azote ayant la capacité de vivre sur un milieu de culture Azote free préparé spécialement à partir du sol.
Les souches sont transférées sur le milieu riche extrait de sol. Les isolais purs sont maintenus à 4°C pendant 2 mois. Alternativement, les cultures sont resuspendues et conservées dans le glycérol à -20°C
Par la suite des essais d'efficacité ont été effectués pour montrer le rôle de la souche dans la fixation de l'azote et de promouvoir la croissance des plantes. D'autres tests ont été effectués également à savoir la production de phytohormones.
Essai 1 : test de fixation d'azote libre
Un simple test a été effectué pour montrer l'aptitude des souches à fixer l'azote atmosphérique. La figure 1 montre que la souche capable de fixer l'azote forme un halot bleu en hait du tube de production de la bactérie.
Essai 2 effet sur la germination
Les résultats des essais sont montrés sur la figure N°2. Les bactéries accélèrent la germination des graines et augmente le volume de la chevelue racinaire.
Essai 1 : essais sur céréale grandeur nature
Un essai a été conduit pour étudier la capacité des bactéries fixatrices d'azote Azotobacter à améliorer la nutrition azotée de l'épeautre biologique au champ. Le produit a été appliqué en traitement de semences. Les résultats sont présentés dans la figure 3. Les analyses physicochimiques ont montré qu'après le traitement du sol "avec les azotobacters il y'a une fixation de l'azote atmosphérique puis une augmentation de l'azote dans le sol en comparaison au sol non traité.
Essai 2 : stabilité du produit dans la formulation
Plusieurs formulations ont été testées pour avoir une longue stabilité des souches pendant la durée du stockage. La façon de conserver les souches était finalement d'inclure le procédé de formulation dans le procédé de production des souches.
En effet, production des souches dans leur milieu de culture industriel adapté dans la phase stationnaire de la production et avant d'arriver à la fin de la phase exponentielle on ajoute un agent de stabilisation et de conservation des deus souches.
La légende des figures
Figure 1 : test de fixation de l'azote atmosphérique. A : présence de souches d'Azotobacters. B : témoin négatif
Figure 2 : test de germination. Traitement de l'orge avec les souches azotobacters (B).
Figure 3 : effet de traitement grandeur nature des céréales par les deux souches azotobacters.
Claims
Les Revendications
1- Produit biofertilisant à base de bactéries ayant la capacité de fixer l'azote atmosphérique caractériser par ce qu'il est constitué de:
Azotobacters sp.
- Azotbacters
CMC avec une quantité qui varie de 0.01% à 0.5%
- Agent de conservation et de stabilisation avec une quantité qui varie de 5% à 10%
Eau stérile
2- Procédé de fabrication du produit de la revendication 1 caractérisé par une étape incluant le procédé de formulation par l'ajout de l'agent stabilisant avant la phase stationnaire et avant la fin de la phase exponentielle de la croissance des deux souches bactériennes.
3- Le produit de la revendication 1 et 2 est appliqué comme produit de la fertilisation agricole pour la fixation biologique de l'azote atmosphérique dans le sol et la stimulation de la croissance de plantes
4- Application du produit, selon les revendications 1, 2 et 3, pour la fertilisation agricole caractérisé par les différents types d'application à savoir traitement de semences, traitement localisé, traitement par pulvérisation sur le sol.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| MA35805 | 2013-04-05 | ||
| MA35805A MA35584B1 (fr) | 2013-04-05 | 2013-04-05 | Formulation liquide de deux souches d'azotbacter applicable entant que produit biofertilisant |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| WO2014163474A1 true WO2014163474A1 (fr) | 2014-10-09 |
Family
ID=50877630
Family Applications (1)
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|---|---|---|---|
| PCT/MA2014/000007 Ceased WO2014163474A1 (fr) | 2013-04-05 | 2014-04-01 | Formulation liquide des azotobacters applicable en tant que produit biofertilisant |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| MA (1) | MA35584B1 (fr) |
| WO (1) | WO2014163474A1 (fr) |
Cited By (1)
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- 2013-04-05 MA MA35805A patent/MA35584B1/fr unknown
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- 2014-04-01 WO PCT/MA2014/000007 patent/WO2014163474A1/fr not_active Ceased
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| "Preparation of organomineral fertiliser from coal waste - using strain of Azotobacter chroococcum VNIISKhM B-34D", DERWENT, 29 August 1994 (1994-08-29), XP002370303 * |
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| Publication number | Publication date |
|---|---|
| MA35584B1 (fr) | 2014-11-01 |
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