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WO2011110793A2 - Principe actif cosmetique raffermissant issu de piper nigrum, compositions cosmetiques l'incluant et utilisation - Google Patents

Principe actif cosmetique raffermissant issu de piper nigrum, compositions cosmetiques l'incluant et utilisation Download PDF

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WO2011110793A2
WO2011110793A2 PCT/FR2011/050498 FR2011050498W WO2011110793A2 WO 2011110793 A2 WO2011110793 A2 WO 2011110793A2 FR 2011050498 W FR2011050498 W FR 2011050498W WO 2011110793 A2 WO2011110793 A2 WO 2011110793A2
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
active ingredient
cosmetic
skin
piper nigrum
cosmetic active
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
PCT/FR2011/050498
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English (en)
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WO2011110793A3 (fr
Inventor
Jean Paufique
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Societe Industrielle Limousine dApplication Biologique SA SILAB
Original Assignee
Societe Industrielle Limousine dApplication Biologique SA SILAB
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
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Publication date
Application filed by Societe Industrielle Limousine dApplication Biologique SA SILAB filed Critical Societe Industrielle Limousine dApplication Biologique SA SILAB
Publication of WO2011110793A2 publication Critical patent/WO2011110793A2/fr
Publication of WO2011110793A3 publication Critical patent/WO2011110793A3/fr
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Ceased legal-status Critical Current

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    • A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations

Definitions

  • the present invention relates to the cosmetic use of a Piper nigrum extract as a firming active ingredient, as well as to a cosmetic skin care process for firming the skin, in particular for combating sagging skin and for strengthening the tone and firmness of aged photo skin.
  • the invention also relates to a particular cosmetic active ingredient derived from Piper nigrum and to cosmetic compositions containing this active ingredient.
  • the aging process of the skin is complex and results from both intrinsic aging or chronological aging and extrinsic aging or environmental aging.
  • the dermis is subdivided into two zones.
  • the first, superficial and fine, is located between the dermal papillae and called papillary dermis. It is formed of loose connective tissue with a high density of fibroblasts.
  • the reticular dermis and the papillary dermis possess fibroblasts with distinct morphological characteristics and biological properties.
  • the reticular dermis and the papillary dermis also differ in the composition of their respective extracellular matrix.
  • the reticular fibroblasts produce more matrix components than the papillary fibroblasts. Studies have also highlighted differences in expression, synthesis or deposition of structural and matricellular proteins, as well as growth factors and degradation enzymes.
  • Chronobiological aging is known to have little effect on the reticular dermis, while on the other hand it is sensitive to extrinsic aging.
  • UV irradiation After UV irradiation, the functionalities of the reticular dermis and its capacities of synthesis are altered: the dermis then loses of its substance and its structure leading to a strong cutaneous relaxation.
  • the objective of the present invention is to provide an effective firming cosmetic solution capable of fighting against the sagging of the cutaneous tissue and against the relaxation of the face to redraw and rejuvenate the features, in particular capable of preserving or restoring the functionalities and synthetic capacities of the reticular dermis.
  • the invention proposes to use an asset from Piper nigrum.
  • Piper nigrum or black pepper is one of 700 species of Piper. It belongs to the family Piperaceae. Its fruits also called berries are mainly used in food as a spice.
  • Piper nigrum has noticeable effects on the cutaneous level with very interesting cosmetic properties for firming the skin, in particular action capacities at the level of the reticular dermis.
  • the present invention therefore aims to use at least one extract derived from Piper nigrum as a firming cosmetic active ingredient.
  • the invention aims to use an extract derived from Piper nigrum berries.
  • the invention aims to use an oligosaccharide extract derived from Piper nigrum.
  • oligosaccharide extract or "oligosaccharide active principle” means an extract or active principle comprising oligosaccharides. It is preferably an extract comprising at least 20% of saccharides of which at least 50% in the form of oligosaccharides. Preferably, the oligosaccharides present are predominantly oligosaccharides with a degree of polymerization of between 2 and 7.
  • the invention also relates to a cosmetic active ingredient derived from Piper nigrum berries comprising in particular oligosaccharides with a degree of polymerization of between 2 and 7, as well as cosmetic compositions including at least one such active principle.
  • the active ingredients according to the invention are preferably hydrolysates.
  • the cosmetic compositions according to the invention contain from 0.01 to 20% of an active ingredient derived from Piper nigrum berries comprising oligosaccharides.
  • compositions containing an active ingredient derived from Piper nigrum are carried out topically.
  • the compositions according to the invention may be in any form allowing the application topically.
  • the invention also relates to a cosmetic skin care method, intended to firm the skin, comprising the topical application of a composition containing an active ingredient from Piper nigrum.
  • the invention thus relates to the use of at least one extract derived from Piper nigrum as a cutaneous firming cosmetic active ingredient.
  • an active ingredient derived from Piper nigrum can indeed be used as a cosmetic agent on the skin to firm the cutaneous tissues.
  • the invention is directed to the use of an oligosaccharide extract derived from Piper nigrum, comprising ⁇ -glucans and rhamnogalacturonans.
  • an active ingredient derived from Piper nigrum promotes the fight against sagging skin tissues and / or to increase the tone and firmness of the skin and / or to fight against slackening. facial skin. It allows to redraw and rejuvenate facial features.
  • the active ingredient according to the invention can specifically be used in a cosmetic composition, to act on the reticular dermis.
  • the active ingredient and / or the composition may in particular be intended to act on the functionalities and synthetic capacities of the reticular dermis, in particular to preserve these functionalities and synthesis capabilities in the face of UVA irradiation.
  • an extract of Piper nigrum may be used to enhance the functionality of the reticular dermis, in particular:
  • Cell adhesion corresponds to the set of cellular and molecular mechanisms used to adhere the cells together or with their own microenvironment via dynamic interactions that are both stable and variable.
  • Adhesion abilities can be particularly affected during extrinsic skin aging. This reduction in the adhesion capacities of the reticular fibroblasts, results in a loosening of the skin.
  • an active ingredient derived from Piper nigrum may be used to improve or preserve the adhesion capacities of the reticular fibroblasts, in particular to restore the adhesion capacities of photo-aged reticular fibroblasts.
  • the reticular fibroblasts thanks to their high adhesion capacity, anchor to the extracellular matrix and develop contractile properties via the reorganization of the filaments of their cytoskeleton. These contractile properties generate tensile forces that stimulate the organization and retraction of surrounding collagen fibers essential for continuous remodeling of the extracellular matrix. This process is necessary for the generation of skin's resistance properties.
  • an active ingredient derived from Piper nigrum can be used to improve or preserve the contraction capacities of reticular fibroblasts, in particular to restore the contractile power of photo-aged reticular fibroblasts.
  • Cell migration is an essential process for various biological events, particularly for the regeneration of damaged tissues. It is a dynamic process that includes the polarization and progressive movement of fibroblasts in a given orientation. The migration of fibroblasts is strongly modulated by the chemical characteristics (growth factors and chemo-attractant factors), and by the physical characteristics (density, rigidity, tension) of the micro matrix environment.
  • the migration capacity of the fibroblasts of the reticular dermis is essential to regenerate the damaged dermis.
  • excessive skin damage particularly UVA irradiation
  • an active ingredient derived from Piper nigrum can be used to stimulate the migration capacities of the reticular fibroblasts, so as to be able to regenerate the dermas assaulted.
  • a Piper nigrum extract may also be used to enhance the expression capacities of the matrix proteins of the reticular fibroblasts, in particular:
  • fibrillar molecules in particular collagen I and elastin
  • adhesion molecules in particular the ⁇ 2 ⁇ 1 integrin
  • CT & F Connective tissue growth factor
  • the reticular dermis is woven in its full depth with a large three-dimensional network of intertwined thick fibers of intertwined collagen and elastin that give the tissue its architecture and biomechanical properties.
  • collagens I, III and V or fibrillar collagens are arranged in a particular way to define the specific architecture of the dermis and to confer on the skin its biomechanical properties of density and resistance.
  • the reticular dermis is characterized by elastic fibers, formed of the assembly of tropoelastine monomers and stabilized under the effect of lysyl oxidase, which, because of their particular structure, can be strongly stretched and ensure the skin its elasticity.
  • synthetic fibers formed of the assembly of tropoelastine monomers and stabilized under the effect of lysyl oxidase, which, because of their particular structure, can be strongly stretched and ensure the skin its elasticity.
  • an active ingredient derived from Piper nigrum can be used to stimulate collagen I and / or elastin synthesis, in particular to restore the expression of collagen I and / or elastin in photochromic reticular fibroblasts. old.
  • Integrins are transmembrane receptors specialized in cell-cell and extracellular matrix-cell interactions. They are able to transmit signals bidirectionally to the plasma membrane, thus controlling cell behavior and tissue organization.
  • the ⁇ 2 ⁇ 1 integrin is specifically involved in the attachment of fibroblasts to collagen fibers. It modulates many signaling pathways and regulates various cellular processes including proliferation, survival and migration. It also plays a role in remodeling collagen fibers and contraction of tissue. A decrease in ⁇ 2 ⁇ 1 integrins leads to the loss of their structural and signaling role necessary for the cohesion of the cutaneous tissue and the mutual exchanges fibroblasts - extracellular matrix, and the skin loses its tonicity and its firmness. This is particularly the case when the skin is attacked, especially during UV irradiations.
  • an active ingredient derived from Piper nigrum can be used to stimulate the synthesis of ⁇ 2 ⁇ 1 integrin, in particular to restore the expression of this molecule in photo-aged reticular fibroblasts, and thus to fight against sagging skin.
  • Matrix signaling molecules CT & F or CCN2
  • CT & F or CCN2 is a matricellular protein for interaction and adhesion between fibroblasts and the extracellular matrix, which plays an important role in signal transduction.
  • the reticular fibroblasts express more CT & F than the papillary dermis cells.
  • CT & F participates in the regulation of matrix syntheses by intervening in the signaling pathways of growth factors. In particular, he mediates the inducing effects of TGF-pi on the synthesis of collagen I.
  • fibroblasts also promotes the adhesion of fibroblasts to its matrix as a molecular bridge between matrix proteins and their receptors on the surface of fibroblasts.
  • integrins or proteoglycans by binding to fibroblasts through integrins or proteoglycans, it controls the reorganization of the cytoskeleton and the formation of lamellipodia and thus regulates the ability of fibroblasts to migrate or expand in the matrix.
  • a reduction in the expression of CT & F contributes to the reduction of procollagen synthesis and affects the interaction, migration and adhesion capabilities of the dermis: the skin tissue collapses and the skin relaxes.
  • an active ingredient derived from Piper nigrum can be used to stimulate the synthesis of CT & F, in particular to restore the expression of CT & F in the photo-aged reticular fibroblasts, and thus firm the skin.
  • An extract derived from Piper nigrum can therefore be used as a cosmetic active ingredient in a cosmetic composition to preserve the adhesion, contraction and migration capacities of fibroblasts and their synthesis capacities, primary functions of the reticular dermis and targets. photo-aging, thus reinforcing the structure, strength and support properties of the skin for a firming effect. It can in particular be used as a cosmetic active ingredient inducing the synthesis of collagen I, elastin, ⁇ 2 ⁇ 1 integrin and / or CT & F in skin cells, and specifically in the reticular dermis.
  • an extract from Piper nigrum can bring tonicity and firmness to the skin and limit the ptosis of the face, especially for the exposed skin. It corrects the impact of photo-aging on the parameters related to sagging skin and allows people with photo-exposed skin to find the characteristics of a non-photo-exposed skin.
  • the Piper nigrum extract that is useful according to the invention is the active ingredient described below.
  • the invention also relates to a particular cosmetic active ingredient obtained from Piper Nigrum berries comprising oligosaccharides with a degree of polymerization of between 2 and 7.
  • it is an extract having an oligosaccharide content with a degree of polymerization of between 2 and 7 of at least 10% by total weight of the dry matter, in particular a content of between 10% and 32%. in total weight of the dry matter.
  • the oligosaccharides are in the form of ⁇ -glucans and rhamnogalacturonans.
  • the active ingredient according to the invention may also comprise other molecules, in particular proteins, phenolic compounds, uronic acids and minerals.
  • the active ingredient according to the invention does not contain piperine.
  • the active ingredient according to the invention is a hydrolyzate of Piper nigrum berries.
  • the active ingredient according to the invention is preferably in the form of a clear amber liquid. It can be defined by at least one of the features described below, preferably all.
  • the dry matter content of an active ingredient according to the invention (measured by passing in an oven at 105 ° C. in the presence of sand of a sample of initial weight given until a constant weight is obtained) can be between
  • the pH (measured by the potentiometric method at room temperature) can be between 3.0 and 6.0, preferably between 3.0 and 4.0.
  • the determination of the total sugar content can be carried out by the DUBOIS method (DUBOIS M. et al., (1956), Analytical Chemistry, 28, No. 3, pp. 350-356). In the presence of concentrated sulfuric acid and phenol, the reducing sugars give an orange-yellow compound. From a standard range, the total sugar content of a sample can be determined.
  • the total sugar level of an active ingredient from Piper nigrum according to the invention is preferably between 2 and 36 g / l, more preferably between 5 and 9 g / l.
  • the total sugar content can also be expressed as a percentage relative to the dry matter. It is included in 20% and 53%.
  • the level of each sugar is determined by means of a standard range of the synthetic sugar studied.
  • the active ingredient from Piper nigrum according to the invention is composed of the following simple sugars, in descending order: glucose, galactose, galacturonic acid, arabinose, rhamnose, mannose and fructose.
  • the particular nonlimiting active ingredient used for the illustrative tests of the invention has the following composition of simple sugars:
  • Piper nigrum according to the invention is carried out by high performance liquid chromatography.
  • the molar masses of the carbohydrates present in the active principle are presented in the following table.
  • the carbohydrates of the active principle according to the invention are therefore preferentially distributed as follows: between 40 and 50% of monosaccharides with a molecular mass of less than 180 Da and between 50 and 60% of oligosaccharides and polysaccharides with a molar mass of between 180 and 5220 Da.
  • the carbohydrate fraction of the active ingredient derived from Piper nigrum according to the invention is therefore essentially composed of glucose present in the form of monosaccharides and oligosaccharides.
  • composition of the oligosaccharides of the active ingredient derived from Piper nigrum was determined by analysis of the products obtained after activity of various enzymes on the active principle.
  • oligosaccharides have a degree of polymerization of between 2 and 7.
  • the oligosaccharides are preferably in the form of ⁇ -glucans and rhamnogalacturonans of type I.
  • the carbohydrate fraction of the active ingredient of Piper nigrum therefore comprises:
  • oligosaccharides of ⁇ -glucans and rhamnogalacturonans of type I with a degree of polymerization essentially between 2 and 7, and
  • the oligosaccharides preferably represent between 50 and 60% of the total sugars, and the simple sugars between 40 and 50%.
  • the content of total polyphenols is measured according to the following principle.
  • the polyphenols form colored compounds in the presence of potassium ferricyanide, the intensity of this coloration being proportional to the amount of polyphenols.
  • gallic acid in this case from 40 to 120 mg / l, it is possible to deduce the amount of polyphenols present in the extract.
  • the total polyphenol content of the active ingredient is preferably between 0.3 and 0.5% by total weight of dry matter.
  • the content of uronic acids is determined by the following principle: the product of galacturonic acid with sodium tetraborate, gives in the presence of meta-hydroxydiphenyl, a pink color for assay spectrophotometer at 520 nm.
  • the intensity of staining is proportional to the amount of uronic acids. Referring to a standard range of galacturonic acid, in this case from 10 to 100 mg / l, it is possible to deduce the quantity of uronic acids present in the active principle.
  • the uronic acid content of the active ingredient is preferably between 3.2 and 5.0% by total weight of dry matter.
  • the protein content is determined by the following principle: The total nitrogen is determined by the method of KJELDHAL (reference: Official Method of Analysis of the AOC 1975, 12th ed., W Horwitz, ED, New York, p. 15-60).
  • the protein content is expressed as a percentage relative to the dry matter.
  • the protein content of the active ingredient is preferably between 22.7 and 34.1% by total weight of dry matter.
  • the raw ash content is determined by the weighing of residues from incineration at 550 ° C in an electric muffle furnace (VULCANTM 3.550-NDI). The weight of the residue is calculated by deducting the tare.
  • the raw ash / mineral content is expressed as a percentage of the dry matter.
  • the mineral content of the active ingredient is preferably between 28.4 and 42.8% by total weight of dry matter.
  • the alkaloid content is determined using Dragendroff's reagent (0.1M potassium iodate, 2.9M glacial acetic acid, 1.5mM bismuth subnitrate), in visual comparison with a range of quinine.
  • the presence of a red precipitate shows the presence of alkaloid and the absence of red precipitate shows the absence of alkaloid (amount less than the sensitivity threshold of this method, ie less than 0.05 g / l).
  • the active principle according to the invention there is an absence of red precipitate. According to a preferred embodiment, the active principle according to the invention therefore does not contain alkaloid, so no piperine.
  • This study consists in determining the main fraction of the active principle according to the invention acting on the contractile power of human fibroblasts reticular.
  • Fraction A The neutral carbohydrates are purified by successive adsorption of the cationic and then anionic compounds on ionic resins.
  • Fraction B The peptides are purified by adsorption / elution on a cation exchange resin.
  • Fraction C The ash fraction is obtained by resolubilization of residues from incineration in an electric muffle furnace.
  • Fraction A consists mainly of sugar, essentially in the form of oligosaccharides with a degree of polymerization predominantly between 2 and 7.
  • the major active fraction of the cosmetic active ingredient according to the invention therefore consists of oligosaccharides, with a degree of polymerization predominantly between 2 and 7.
  • the active ingredient according to the invention can be obtained preferentially by enzymatic hydrolysis.
  • a particularly suitable method comprises at least the succession of the following steps:
  • Decolorization and deodorization steps of the soluble phase can be envisaged without modifying the active part of the active ingredients.
  • the present invention also covers cosmetic compositions including at least one active ingredient derived from Piper nigrum berries in different galenic forms, adapted for topical administration to the skin.
  • compositions may be in the form of oil-in-water emulsions, water-in-oil emulsions, multiple emulsions (water / oil / water or oil / water / oil) which may be microemulsions or nanoemulsions, or in the form of solutions, suspensions, hydrodispersion, aqueous gels or powders. They can be more or less fluid and look cream, lotion, milk, serum, ointment, gel, paste or foam, or in solid form.
  • compositions contain between 0.01% and 50%, in particular between 0.01% and 20%, by weight of active principle (s) derived from Piper nigrum berries according to the present invention, preferably between 0.5% by weight. % and 3%.
  • compositions comprise, in addition to the active agent, a physiologically acceptable and preferably cosmetically acceptable medium, that is to say which does not cause unacceptable sensations of discomfort for the user such as redness, tightness or tingling.
  • This medium usually contains water.
  • compositions according to the invention may contain as adjuvant at least one compound chosen from:
  • oils which may be chosen in particular from silicone oils, linear or cyclic, volatile or non-volatile;
  • waxes such as ozokerite, polyethylene wax, beeswax or carnauba wax;
  • surfactants preferably emulsifiers, whether they are nonionic, anionic, cationic or amphoteric;
  • co-surfactants such as linear fatty alcohols
  • humectants such as polyols such as glycerine
  • compositions are especially intended for the firming of human skin, the skin of the body or the skin of the face, in particular the care of skins having undergone a photo-aging.
  • the invention aims at a cosmetic process for the care of human skin, intended for firming the skin, comprising the topical application of a composition containing an active ingredient derived from Piper nigrum, in particular a composition containing between 0.01 and 20% by weight of active ingredient (s) derived from Piper nigrum.
  • the invention also relates to a cosmetic process for the care of human skin, intended to combat the loosening of the skin of the face and / or to strengthen the tonicity and firmness of the skin, in particular for the skins which have undergone a photo- aging, comprising the topical application of a composition containing an active ingredient derived from Piper nigrum, in particular a composition containing between 0.01 and 20% by weight of active ingredient (s) derived from Piper nigrum according to the present invention.
  • Example 1 Process for Obtaining the Active Ingredient According to the Invention
  • An example of a process for obtaining an active ingredient according to the invention comprises the implementation of the following steps:
  • This thick emulsion has a pH of 5.5.
  • Example 3 Use of an active ingredient of the invention in a tonic foam Phase A. Water QSP 100 °
  • Emulgade 1000 NI (Henkel) 1.3% itachol 2000 (Rita) 2.7%
  • Phase D. NaOH QSP pH4.5 The quantities indicated are given as a percentage of weight.
  • This emulsified foam has a pH of 4.5.
  • Phase D. NaOH Qsp pH 4.5 Amounts shown are given as percentages by weight.
  • This emulsified gel has a pH of 4.5.
  • Emulsifying B in A under a foam concentrate Emulsifying B in A under a foam concentrate
  • Example 5 Use of an Active Ingredient of the Invention in a Night Cream
  • Phase A Water QSP 100% Phase B.
  • DUB BA (Stéarinerie Dubois) 4%
  • Sorbirol L (Cesalpinia) 1%
  • This emulsified gel has a pH of 6.5.
  • Example 6 Use of an Active Ingredient of the Invention in a Day Cream
  • This emulsified gel has a pH of 6.5.
  • the objective of this study is to evaluate the effect of an active ingredient derived from Piper Nigrum on the adhesion capacity of reticular fibroblasts to collagen I.
  • the active ingredient used is that of Example 1.
  • the operating protocol is as follows.
  • human fibroblasts are seeded in a suitable culture medium and the cells are incubated at 37 ° C.
  • the cells are treated: the culture medium is removed and replaced with medium containing the active ingredient from Piper nigrum of Example 1 at 0.25 and 0.50% (V / V). The cells are then incubated again at 37 ° C. On D4, the culture medium is removed and replaced with a solution of PBS. The cells are subject or not to UVA.
  • reticular fibroblasts Normal or photo-aged reticular fibroblasts are trypsinized and inoculated with rat tail collagen I. The cells are then incubated at 37 ° C., then fixed with glutaraldehyde and stained with crystal violet. The visualization of the results is performed on a microscope coupled to an image analysis system. Quantification of the number of cells is performed via a computer program. The higher the staining, the higher the adhesion of the reticular fibroblasts.
  • the objective of this study is to evaluate the ability of an active ingredient derived from Piper Nigrum, to stimulate the contractile power of reticular fibroblasts.
  • the active ingredient used is that of Example 1.
  • the operating protocol is as follows. At 0, human reticular fibroblasts are inoculated in a suitable culture medium. The cells are then incubated at 37 ° C.
  • the cells are treated: the culture medium is removed and replaced by a medium containing the active principle of Example 1 at 0.25 and 0.50% (V / V) or vitamin C at 0.5 ⁇ g / ml. The cells are then incubated at 37 ° C. On D4, the culture medium is removed and replaced with a PBS solution. The cells are subject or not to UVA.
  • Normal or photo-aged reticular fibroblasts are added to a collagen gel made from rat tail collagen I, containing or not the active ingredient at 0.25% and 0.5% or vitamin C at 0.5 ⁇ g / ml. ml.
  • Vitamin C 0.5pg / ml 1.90
  • Vitamin C 0.5pg / ml 1.43
  • Active ingredient according to the invention 0.25% 1.15
  • Active ingredient according to the invention 0,50% 1.23 It is found that the contractile capacity of photowallic reticular fibroblasts is significantly reduced by 68% compared with normal reticular fibroblasts.
  • the purpose of this study is to evaluate the ability of the active principle of the invention to stimulate the migration capacity of the reticular fibroblasts. This study was carried out on normal and photo-aged reticular human fibroblasts obtained using a UVA irradiation.
  • the operating protocol is described following.
  • human reticular fibroblasts are seeded in suitable medium. The cells are then incubated at 37 ° C in an atmosphere containing 5% CO 2.
  • the culture medium is removed and replaced by a suitable medium.
  • the cells are subject or not to UVA. After irradiation, the culture medium is removed and replaced with medium containing the active ingredient at 0.5 and 2% (V / V).
  • Photos of the scars are taken every 10 minutes over a period of 48 hours. These images are gathered in a stack of images according to a temporal criterion.
  • the objective of this study is to evaluate the effect of an active ingredient derived from Piper Nigrum according to the invention on its ability to increase the expression of mRNAs encoding fibrillar molecules: collagen I and elastin , the adhesion molecule: ⁇ 2 ⁇ 1 integrin and the matricellular signaling molecule: CT & F.
  • the active ingredient used is that of Example 1.
  • the study was carried out by quantitative PCR on normal and photo-aged human reticular fibroblasts obtained using a UVA irradiation.
  • the operating protocol is as follows.
  • normal human reticular fibroblasts are inoculated in a suitable culture medium and the cells are then incubated at 37 ° C.
  • the cells are pre-treated: the culture medium is removed and replaced with medium containing the active principle of Example 1 at 0.5% and 1% (V / V) or TGFp-1 at lng. / ml (reference molecule). The cells are then incubated for 24 hours at 37 ° C.
  • the culture medium is removed and replaced with a PBS solution. Irradiation is performed using a UVA lamp.
  • the PBS solution is removed and replaced with a medium containing the active principle of Example 1 at 0.5% and 1% (V / V) or TGFp-1 at 1 ng / ml.
  • the cells are incubated again.
  • the cells are recovered for assaying the ⁇ 2 ⁇ 1 integrin or for assaying collagen I, elastin or CT & F.
  • the cells are recovered and the total RNAs extracted.
  • RNAs are reverse transcripts and the complementary DNAs obtained are analyzed by the quantitative PCR technique.
  • the mRNAs of the ribosomal protein S27, an internal reference reference, are also analyzed in parallel with the collagen I, I elastin mRNAs, the ⁇ 2 ⁇ 1 integrin and the CT & F. Quantification of fluorescence incorporation (SYBR Green) is measured continuously using a thermal cycler. Ct analysis (relative quantization) is performed using software.
  • the objective of this study is to study the impact on the relaxation of aging skin due to solar exposure.
  • the objective of the study is to investigate the effect of the active ingredient derived from Piper nigrum on the improvement of cutaneous parameters, and thus to study the effect of the active ingredient on the reduction of differences. between the two groups.
  • Example No. 1 formulated in a composition of Example No. 6.
  • the evaluation of the parameters related to the relaxation of the face is carried out blindly by a trained expert before and after 56 days of twice-daily application, on the parameters relating to the ptosis of the face and to the firmness.
  • the evaluation of the ptosis is carried out by visual observation of the expert skin folds formed near the ear.
  • the number of folds formed and their width are indicators of loosening of the skin of the face.
  • the expert lifts the skin with the index finger and observes how the skin regains its place.
  • a firm skin, not relaxed, has no fold at this point of the face unlike a skin marked and relaxed.
  • the evaluation of the firmness of the skin is evaluated by the expert by exerting a sustained pressure on the cheek of the volunteer using the fingers index, major and annular. A series of pressure / pressure stops is performed by sweeping an area from the nose to near the ears. These pressure successions make it possible to estimate the resistance of the skin under the fingers. The more the skin is resistant to pressure and therefore to the depression of the fingers, the more it is firm.
  • the active ingredient derived from Piper Nigrum according to the invention thus allows the group of photowallowed people to find cutaneous characteristics comparable to those of the non-photowalled group, the difference between the two groups being no longer significant at J56.
  • the active ingredient according to the invention makes it possible to correct the loosening and the sagging of the skins. photo-aged.
  • the aim of this study is to study the impact on the biomechanical properties of skin aging related to solar exposure and the effect of an active ingredient from Piper Nigrum on the biomechanical properties of the skin.
  • the study is performed against placebo.
  • the active ingredient according to the invention used is that of Example No. 1 formulated in a composition of Example No. 6.
  • the evaluation of biomechanical parameters was performed before and after 56 days of twice-daily application using a cheek cutometer ® .
  • the principle is as follows: the skin is sucked into the orifice of a 6mm diameter probe by a constant depression for a constant duration. Several successive aspirations are made. The depth of penetration of the skin into the probe is measured by means of two optical prisms placed at the opening of the probe. From the curves obtained it is possible to calculate various characteristic parameters of the mechanical properties of the skin.
  • the volunteers come to the laboratory without applying a product on the face in the morning (no cream or makeup), and measure the biomechanical properties of the cutometer ® .
  • the volunteers come to the laboratory without having applied a product on the face in the morning (neither cream nor makeup), and we measure again the biomechanical properties to the cutometer ® .
  • the active ingredient according to the invention thus plays specifically on skins having altered biomechanical properties characteristic of a greater sagging skin.
  • the active ingredient according to the invention formulated at 3% in emulsion, significantly improves the characteristic parameters of the firmness and the tonicity of the skin.

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Abstract

L'objet de l'invention est l'utilisation d'un actif issu de Piper nigrum en tant que principe actif cosmétique raffermissant, en particulier pour lutter contre le relâchement des peaux photo-vieillies. L'invention se rapporte également à un principe actif particulier issu de baies de Piper nigrum ainsi qu'à des compositions cosmétiques renfermant cet actif et à un procédé cosmétique de soin cutané pour raffermir la peau, en particulier en agissant sur les fonctionnalités et les capacités de synthèse du derme réticulaire.

Description

PRINCIPE ACTIF COSMETIQUE RAFFERMISSANT ISSU DE PIPER NIGRUM, COMPOSITIONS COSMETIQUES L'INCLUANT ET
UTILISATION
La présente invention se rapporte à l'utilisation cosmétique d'un extrait de Piper nigrum comme principe actif raffermissant, ainsi qu'à un procédé cosmétique de soin de la peau pour raffermir la peau, en particulier pour lutter contre le relâchement cutané et pour renforcer la tonicité et la fermeté des peaux photo vieillies.
L'invention se rapporte également à un principe actif cosmétique particulier issu de Piper nigrum et à des compositions cosmétiques renfermant cet actif.
Le processus de vieillissement de la peau est complexe et résulte à la fois d'un vieillissement intrinsèque ou vieillissement chronologique et d'un vieillissement extrinsèque ou vieillissement environnemental.
Le vieillissement environnemental représente cependant la majeure partie du vieillissement cutané et est principalement dû aux irradiations UV (ultraviolet) qui conduisent à des altérations des protéines de la matrice dermique entraînant ainsi la formation de rides et la perte des propriétés d'élasticité du tissu.
Le derme est subdivisé en deux zones.
La première, superficielle et fine, est située entre les papilles dermiques et dénommée derme papillaire. Il est formé de tissu conjonctif lâche avec une densité importante de f ibroblastes.
La seconde, plus profonde, est le derme réticulaire. Plus épais, il est formé d'une matrice dense de faisceaux de collagène compacts entrecroisés et entremêlés de fibres élastiques de plus en plus épaisses vers la profondeur du derme. Ces molécules fibreuses sont prédominantes sur les fibroblastes et la substance fondamentale amorphe.
Le derme réticulaire et le derme papillaire possèdent des fibroblastes avec des caractéristiques morphologiques et des propriétés biologiques distinctes. Le derme réticulaire et le derme papillaire diffèrent également dans la composition de leur matrice extracellulaire respective. Les fibroblastes réticulaires produisent d'avantage de composants matriciels que les fibroblastes papillaires. Des études ont également souligné des différences d'expression, de synthèse ou de dépôt des protéines structurales et matricellulaires, ainsi que des facteurs de croissance et des enzymes de dégradation.
On sait que le vieillissement chronobiologique affecte peu le derme réticulaire, alors qu'en revanche ce dernier est sensible au vieillissement extrinsèque. Après irradiations UV, les fonctionnalités du derme réticulaire et ses capacités de synthèse sont altérées : le derme perd alors de sa substance et de sa structure conduisant à un fort relâchement cutané.
C'est pourquoi l'objectif de la présente invention est de proposer une solution cosmétique raffermissante efficace capable de lutter contre l'affaissement du tissu cutané et contre le relâchement du visage pour redessiner et rajeunir les traits, en particulier capable de préserver ou de restaurer les fonctionnalités et les capacités de synthèse du derme réticulaire.
A cet effet l'invention propose d'utiliser un actif issu de Piper nigrum.
Le Piper nigrum ou poivre noir est l'une des 700 espèces de Piper. Il appartient à la famille des Pipéracées. Ses fruits aussi appelés baies sont essentiellement utilisés en alimentaire comme épice.
Or, de façon surprenante, Piper nigrum présente des effets notables au niveau cutané avec des propriétés cosmétiques très intéressantes pour raffermir la peau, en particulier des capacités d'action au niveau du derme réticulaire. La présente invention vise donc l'utilisation d'au moins un extrait issu de Piper nigrum en tant que principe actif cosmétique raffermissant.
Par « extrait issu de Piper nigrum » ou « principe actif issu de Piper nigrum » au sens de la présente invention on entend tout extrait aqueux, hydroglycolique ou hydrolysat obtenu à partir de Piper nigrum.
Préférentiellement l'invention vise l'utilisation d'un extrait issu de baies de Piper nigrum.
De même, de façon préférée, l'invention vise l'utilisation d'un extrait oligosaccharidique issu de Piper nigrum.
Par « extrait oligosaccharidique » ou « principe actif oligosaccharidique » au sens de la présente invention on entend un extrait ou principe actif comprenant des oligosaccharides. Il s'agit préférentiellement d'un extrait comprenant au moins 20% de saccharides dont au moins 50% sous forme d'oligosaccharides. De façon préférée, les oligosaccharides présents sont majoritairement des oligosaccharides de degré de polymérisation compris entre 2 et 7.
L'invention vise également un principe actif cosmétique issu de baies de Piper nigrum comprenant notamment des oligosaccharides de degré de polymérisation compris entre 2 et 7, ainsi que des compositions cosmétiques incluant au moins un tel principe actif.
Les principes actifs selon l'invention sont préférentiellement des hydrolysats. Les compositions cosmétiques selon l'invention contiennent 0,01 à 20% d'un actif issu de baies de Piper nigrum comprenant des oligosaccharides.
L'administration d'une composition contenant un principe actif issu de Piper nigrum selon l'invention est effectuée par voie topique. Les compositions selon l'invention peuvent se présenter sous toutes formes permettant l'application par voie topique. Enfin, l'invention a également pour objet un procédé cosmétique de soin de la peau, destiné à raffermir la peau, comprenant l'application topique d'une composition renfermant un principe actif issu de Piper nigrum.
La présente invention est maintenant décrite en détail.
UTILISATION
L'invention concerne donc l'utilisation d'au moins un extrait issu de Piper nigrum en tant que principe actif cosmétique raffermissant cutané.
Selon l'invention, un actif issu de Piper nigrum peut en effet être utilisé comme agent cosmétique sur la peau pour raffermir les tissus cutanés.
La présence d'oligosaccharides de degré de polymérisation compris entre 2 et 7 est préférée et permet notamment de lui conférer cette activité cosmétique. Préférentiellement l'invention vise l'utilisation d'un extrait oligosaccharidique issu de Piper nigrum, comprenant des a-glucanes et des rhamnogalacturonanes. De façon avantageuse, l'utilisation sur la peau d'un principe actif issu de Piper nigrum favorise la lutte contre l'affaissement des tissus cutanés et/ou à augmenter la tonicité et la fermeté de la peau et/ou à lutter contre le relâchement de la peau du visage. Il permet de redessiner et de rajeunir les traits du visage.
Le principe actif selon l'invention peut spécifiquement être utilisé dans une composition cosmétique, pour agir sur le derme réticulaire. Le principe actif et/ou la composition peuvent notamment être destinés à agir sur les fonctionnalités et les capacités de synthèse du derme réticulaire, en particulier pour préserver ces fonctionnalités et capacités de synthèse face aux irradiations UVA .
En effet, selon un premier aspect de l'invention, un extrait de Piper nigrum peut être utilisé pour renforcer la fonctionnalité du derme réticulaire, notamment :
- ses capacités d'adhésion, - ses capacités de contraction, et
- ses capacités de migration.
Capacités d'adhésion
L'adhésion cellulaire correspond à l'ensemble des mécanismes cellulaires et moléculaires mis en oeuvre pour faire adhérer les cellules entre elles ou avec leur propre microenvironnement via des interactions dynamiques à la fois stables et modulables. Les interactions spécifiques développées entre les fibroblastes et le réseau de collagène, médiées par les intégrines α2β1, permettent de donner naissance à un tissu fonctionnel assurant le maintien des couches supérieures de la peau, sa solidité et sa résistance, et conditionnent également les échanges réciproques entre les cellules et la matrice extracellulaire.
Les capacités d'adhésion peuvent notamment être affectées lors du vieillissement extrinsèque cutané. Cette diminution des capacités d'adhésion des fibroblastes réticulaires, se traduit par un relâchement de la peau.
Selon l'invention un principe actif issu de Piper nigrum peut être utilisé pour améliorer ou préserver les capacités d'adhésion des fibroblastes réticulaires, en particulier pour restaurer les capacités d'adhésion des fibroblastes réticulaires photo-vieillis.
Capacités de contraction
Les fibroblastes réticulaires, grâce à leur importante capacité d'adhésion, s'ancrent à la matrice extracellulaire et développent des propriétés contractiles via la réorganisation des filaments de leur cytosquelette. Ces propriétés contractiles génèrent des forces de tension qui stimulent l'organisation et la rétraction des fibres de collagène environnantes indispensables au remodelage continuel de la matrice extracellulaire. Ce processus est nécessaire à la génération des propriétés de résistance de la peau.
Des études de la demanderesse ont montré que les propriétés contractiles des fibroblastes réticulaires peuvent être affectées notamment par le vieillissement extrinsèque de la peau. En particulier ces études menées sur lattis de collagene ont montré que les capacités de contraction des f ibroblastes réticulaires photovieillis étaient signif icativement réduites par rapport aux fibroblastes réticulaires non photo-vieillis. En effet, le photo-vieillissement s'accompagne de fibres de collagene fragmentées, et de moindre capacité d'adhésion des fibroblastes ne permettant pas de préserver la matrice extracellulaire sous tension.
Cette altération des propriétés contractiles des fibroblastes réticulaires se traduit par une peau relâchée, qui perd tonicité et fermeté.
Selon l'invention un principe actif issu de Piper nigrum peut être utilisé pour améliorer ou préserver les capacités de contraction des fibroblastes réticulaires, en particulier pour restaurer le pouvoir contractile des fibroblastes réticulaires photo-vieillis.
Capacités de migration
La migration cellulaire est un processus essentiel pour divers événements biologiques, en particulier pour la régénération des tissus endommagés. Il s'agit d'un processus dynamique qui inclut la polarisation et le mouvement progressif des fibroblastes selon une orientation donnée. La migration des fibroblastes est fortement modulée par les caractéristiques chimiques (facteurs de croissance et facteurs chimio-attractants), et par les caractéristiques physiques (densité, rigidité, tension) du micro environnement matriciel.
La capacité de migration des fibroblastes du derme réticulaire est essentielle pour régénérer le derme agressé. En effet des agressions ex ernes de la peau, en particulier des irradiations UVA, peuvent entraîner la disparition des fibroblastes papillaires par apoptose, et les fibroblastes réticulaires qui survivent, grâce à leur plasticité et à leur dynamique importante, sont capables de migrer progressivement vers la partie supérieure du derme afin de les remplacer. Selon l'invention un principe actif issu de Piper nigrum peut être utilisé pour stimuler les capacités de migration des fibroblastes réticulaires, de façon à pouvoir régénérer les dermes agressés. Selon un autre aspect de l'invention, un extrait de Piper nigrum peut aussi être utilisé pour renforcer les capacités d'expression des protéines matricielles des fibroblastes réticulaires, notamment :
- pour stimuler l'expression des molécules fibrillaires, en particulier du collagène I et de l'élastine,
- pour stimuler l'expression des molécules d'adhésion, en particulier de l'intégrine α2β1, et
- pour stimuler l'expression des molécules matricielles de signalisation, en particulier le facteur de croissance CT&F (« Connective tissue growth factor »). Molécules fibrillaires
Le derme réticulaire est tissé dans toute sa profondeur d'un important réseau tridimensionnel de fibres épaisses de collagène et d'élastine entremêlées qui confèrent au tissu son architecture et ses propriétés biomécaniques.
La co-distribution et l'assemblage étroit des différents types de collagène forment un échafaudage complexe qui stabilise la structure de la peau et qui assure les propriétés biomécaniques du tissu. En particulier, les collagènes I, III et V ou collagènes fibrillaires sont agencés de façon particulière pour définir l'architecture spécifique du derme et conférer à la peau ses propriétés biomécaniques de densité et de résistance.
Par ailleurs, le derme réticulaire est caractérisé par des fibres élastiques, formées de l'assemblage de monomères de tropoélastine et stabilisées sous l'effet de la lysyl-oxydase, qui, de par leur structure particulière peuvent être fortement étirées et assurent à la peau son élasticité. Lorsque les synthèses de collagene, notamment de collagene I, et d'élastine sont affectées, cela se traduit par une altération des propriétés biomécaniques de la peau. Ces synthèses sont notamment diminuées au cours du vieillissement cutané extrinsèque. Le vieillissement extrinsèque affecte tout particulièrement les gènes codant pour les protéines de structure et de remodelage de la matrice extracellulaire. Les irradiations UV induisent la diminution des synthèses de collagène I ainsi que la fragmentation des fibres conduisant à l'amenuisement du réseau collagénique et à l'altération des propriétés biomécaniques de la peau. En outre le photo-vieillissement se caractérise par une accumulation massive des fibres élastiques tronquées et non fonctionnelles formant des masses amorphes dans le derme réticulaire. Le tissu cutané perd alors sa structure et sa densité et se relâche.
Selon l'invention un principe actif issu de Piper nigrum peut être utilisé pour stimuler les synthèses de collagène I et/ou d'élastine, en particulier pour restaurer l'expression de collagène I et/ou d'élastine dans les fibroblastes réticulaires photo-vieillis.
Molécules d'adhésion : intéqrines
Les intégrines sont des récepteurs transmembranaires spécialisés dans les interactions cellules-cellules et cellules-matrice extracellulaire. Elles sont capables de transmettre les signaux de façon bidirectionnelle à traders la membrane plasmique, et contrôlent ainsi le comportement cellulaire et l'organisation tissulaire.
Parmi les intégrines, l'intégrine α2β1 est spécifiquement impliquée dans l'attachement des fibroblastes aux fibres de collagène. Elle module de nombreuses voies de signalisation et régule divers processus cellulaires dont la prolifération, la survie et la migration. Elle joue également un rôle dans le remodelage des fibres de collagène et la contraction du tissu. Une diminution des intégrines α2β1 conduit à la perte de leur rôle structural et de signalisation nécessaire à la cohésion du tissu cutané et aux échanges réciproques fibroblastes - matrice extracellulaire, et la peau perd sa tonicité et sa fermeté. C'est le cas notamment lorsque la peau est agressée, notamment lors d'irradiations UV.
Selon l'invention un principe actif issu de Piper nigrum peut être utilisé pour stimuler la synthèse de l'intégrine α2β1, en particulier pour restaurer l'expression de cette molécule dans les fibroblastes réticulaires photo-vieillis, et ainsi lutter contre le relâchement cutané.
Molécules matricielles de signalisation : CT&F ou CCN2
Le CT&F ou CCN2 est une protéine matricellulaire d'interaction et d'adhérence entre les fibroblastes et la matrice extracellulaire, qui joue un rôle important dans la transduction des signaux. Les fibroblastes réticulaires expriment davantage le CT&F que les cellules du derme papillaire.
Le CT&F participe notamment à la régulation des synthèses matricielles en intervenant dans les voies de signalisation des facteurs de croissance. Il médie notamment les effe s inducteurs du TGF-pi sur la synthèse du collagène I.
Il favorise également l'adhésion des fibroblastes à sa matrice en tant que pont moléculaire entre les protéines matricielles et leurs récepteurs présents à la surface des fibroblastes. De plus, en se liant aux fibroblastes grâce aux intégrines ou aux protéoglycanes, il contrôle la réorganisation du cytosquelette et la formation des lamellipodes et régulent ainsi les capacités des fibroblastes à migrer ou à s'étendre dans la matrice.
Une réduction de l'expression de CT&F, par exemple induite en cas de vieillissement extrinsèque, contribue à la diminution de la synthèse de procollagène et affecte les capacités d'interaction, de migration et d'adhérence du derme : le tissu cutané s'affaisse et la peau se relâche. Selon l'invention un principe actif issu de Piper nigrum peut être utilisé pour stimuler la synthèse de CT&F, en particulier pour restaurer l'expression de CT&F dans les f ibroblastes réticulaires photo-vieillis, et ainsi raffermir la peau.
Un extrait issu de Piper nigrum peut donc être utilisé en tant que principe actif cosmétique dans une composition cosmétique pour préserver les capacités d'adhésion, de contraction et de migration des f ibroblastes réticulaires et leurs capacités de synthèse, fonctions premières du derme réticulaire et cibles importantes du photo-vieillissement, et ainsi renforcer les propriétés de structure, de résistance et de soutien de la peau pour un effet raffermissant. Il peut notamment être utilisé en tant que principe actif cosmétique inducteur de la synthèse de collagène I, d'élastine, d'intégrine α2β1 et/ou de CT&F dans les cellules de la peau, et spécifiquement dans le derme réticulaire.
Avantageusement, selon l'invention, un extrait issu de Piper nigrum peut apporter tonicité et fermeté à la peau et limiter la ptôse du visage, en particulier pour les peaux photo-exposées. Il permet de corriger l'impact du photo-vieillissement sur les paramètres liés au relâchement cutané et permet aux personnes ayant la peau photo-exposée de retrouver les caractéristiques d'une peau de personne non photo-exposée.
Préférentiellement, l'extrait de Piper nigrum utile selon l'invention est le principe actif décrit en suivant.
PRINCIPE ACTIF
L'invention concerne également un principe actif cosmétique particulier obtenu à partir de baies de Piper Nigrum comprenant des oligosaccharides de degré de polymérisation compris entre 2 et 7.
Préférentiellement, il s'agit d'un extrait présentant une teneur en oligosaccharides de degré de polymérisation entre 2 et 7 d'au moins 10% en poids total de la matière sèche, en particulier une teneur comprise entre 10% et 32% en poids total de la matière sèche. De façon préférée, les oligosaccharides sont sous forme d'a-glucanes et de rhamnogalacturonanes.
Le principe actif selon l'invention peut également comprendre d'autres molécules, en particulier des protéines, des composés phénoliques, des acides uroniques et des minéraux.
Préférentiellement, le principe actif selon l'invention ne contient pas de pipérine. Selon un mode de réalisation particulièrement adapté, le principe actif selon l'invention est un hydrolysat de baies de Piper nigrum.
Le principe actif selon l'invention se présente préférentiellement sous forme de liquide limpide de couleur ambré. Il peut être défini par au moins une des caractéristiques exposées ci-après, préférentiellement toutes.
Matières sèches :
Le taux de matières sèches d'un principe actif selon l'invention (mesuré par passage à l 'étuve à 105°C en présence de sable d' un échantillon de poids initial donné jusqu'à obtention d' un poids constant) peut être compris entre
8 et 100g/l, préférentiellement entre 17 et 25g/l.
Mesure du pH :
Le pH (mesuré par la méthode potentiométrique à température ambiante) peut être compris entre 3.0 et 6.0, préférentiellement entre 3.0 et 4.0. Carbohydrates :
Dosage de la teneur en sucres totaux :
Le dosage de la teneur en sucres totaux peut être réalisé par la méthode de DUBOIS (DUBOIS M. et al., (1956), Analytical chemistry, 28, n°3 p. 350-356). En présence d'acide sulfurique concentré et de phénol, les sucres réducteurs donnent un composé jaune orangé. A partir d'une gamme étalon, on peut déterminer le taux de sucres totaux d'un échantillon. Le taux de sucres totaux d'un principe actif issu de Piper nigrum selon l'invention est préférentiellement compris entre 2 et 36g/l, encore plus préférentiellement entre 5 et 9g/l.
La teneur en sucres totaux peut aussi être exprimée en pourcentage par rapport à la matière sèche. Elle est comprise en 20% et 53%.
Caractérisation des sucres simples
La caractérisation des sucres simples est réalisée par chromatographie liquide ionique.
Le taux de chaque sucre est déterminé au moyen d'une gamme étalon du sucre synthétique étudié.
Ainsi, préférentiellement, le principe actif issu de Piper nigrum selon l'invention est composé des sucres simples suivants, en ordre décroissant : glucose, galactose, acide galacturonique, arabinose, rhamnose, mannose et fructose.
Par exemple, le principe actif particulier non limitatif utilisé pour les essais illustratifs de l'invention, présen e la composition suivante en sucres simples :
Figure imgf000013_0001
Caractérisation de la taille des carbohydrates
La détermination de la taille des carbohydrates d'un principe actif issu de
Piper nigrum selon l'invention est réalisée par chromatographie liquide haute performance. Les masses molaires des carbohydrates présents dans le principe actif sont présen ées dans le tableau suivant.
Figure imgf000014_0001
Les carbohydrates du principe actif selon l'invention sont donc préférentiellement répartis comme suit : entre 40 et 50% de monosaccharides de masse moléculaire inférieure à 180Da et entre 50 et 60% d'oligosaccharides et de polysaccharides de masse molaire comprise entre 180 et 5220Da.
La fraction glucidique du principe actif issu de Piper nigrum selon l'invention est donc composée essentiellement de glucose présent sous forme de monosaccharides et d'oligosaccharides.
A titre d'exemple les masses molaires des carbohydrates présents dans le principe actif particulier non limitatif utilisé pour les essais sont présentées dans le tableau suivant.
Masse molaire (Da)
Taux de et degré de polymérisation
carbohydrates (%) correspondant
Monosaccharides MM < 180 47,7%
Oligosaccharides et
180 < MM < 5220 53,3% polysaccharides Caractérisation des oliqosaccharides
La composition des oligosaccharides du principe actif issu de Piper nigrum a été déterminée par analyse des produits obtenus après activité de diverses enzymes sur le principe actif.
La majorité des oligosaccharides présente un degré de polymérisation compris entre 2 et 7.
Les oligosaccharides sont préférentiellement sous forme d'a-glucanes et rhamnogalacturonanes de type I.
La fraction glucidique du principe actif de Piper nigrum comprend donc :
- des oligosaccharides d'a-glucanes et rhamnogalacturonanes de type I, de degré de polymérisation essentiellement compris entre 2 et 7, et
- des monosaccharides de glucose.
Les oligosaccharides représentent préférentiellement entre 50 et 60% des sucres totaux, et les sucres simples entre 40 et 50%.
Composés phénoliques :
La teneur en polyphénols totaux est mesurée selon le principe suivant. Les polyphénols forment en présence de ferricyanure de potassium des composés colorés, l ' intensité de cette coloration étant proportionnelle à la quantité de polyphénols. En se rapportant à une gamme étalon d'acide gallique, en l'occurrence de 40 à 120 mg/l, on peut déduire la quantité de polyphénols présents dans l'extrait.
La teneur en polyphénols totaux du principe actif est préférentiellement comprise entre 0.3 et 0.5% en poids total de matière sèche.
Acides uroniques :
La teneur en acides uroniques est déterminée par le principe suivant : le produit de l'acide galacturonique avec le tétraborate de sodium, donne en présence du méta-hydroxydiphényl, une coloration rose permettant le dosage au spectrophotomètre à 520 nm.
L'intensité de coloration est proportionnelle à la quantité d'acides uroniques. En se rapportant à une gamme étalon d'acide galacturonique, en l 'occurrence de 10 à 100 mg/l, on peut déduire la quantité d'acides uroniques présents dans le principe actif.
La teneur en acides uroniques du principe actif est préférentiellement comprise entre 3,2 et 5,0% en poids total de matière sèche.
Teneur en protéines :
La teneur en protéines est déterminée par le principe suivant : L'azote total est déterminé par la méthode de KJELDHAL (référence : Officiai method of analysis of the A.O.C. 1975, 12†h ed. W Horwitz, E.D., New-York, p. 15-60).
La teneur en protéines est exprimée en pourcentage par rapport à la matière sèche.
La teneur en protéines du principe actif est préférentiellement comprise entre 22,7 et 34,1% en poids total de matière sèche.
Teneur en cendres/minéraux :
La teneur en cendres brutes est dé erminée par la pesée des résidus issus de l'incinération à 550°C dans un four à moufle électrique (VULCANTM 3.550-NDI). Le poids du résidu est calculé en déduisant la tare.
La teneur en cendres brutes/minéraux est exprimée en pourcentage par rapport à la matière sèche.
La teneur en minéraux du principe actif est préférentiellement comprise entre 28,4 et 42,8% en poids total de matière sèche.
Teneur en alcaloïdes :
La teneur en alcaloïdes est déterminée à l'aide du réactif de Dragendroff (iodate de potassium 0,1M, acide acétique glacial 2,9M, subnitrate de bismuth l,5mM), en comparaison visuelle avec une gamme de quinine. La présence d'un précipité rouge montre la présence d'alcaloïde et l'absence de précipité rouge montre l'absence d'alcaloïde (quantité nférieure au seuil de sensibilité de cette méthode, à savoir Inférieure à 0,05g/l). Très préférentiellement, avec le principe actif selon l'invention, on constate une absence de précipité rouge. Selon un mode de réalisation préférée, le principe actif selon l'invention ne contient donc pas d'alcaloïde, donc pas de pipérine.
Identification de la fraction active
Afin de déterminer la fraction majoritairement active d'un principe actif selon l'invention, une étude a été réalisée. Cette étude consiste à déterminer la fraction principale du principe actif selon l'invention agissant sur le pouvoir contractile des f ibroblastes humains réticulaires.
Pour cette étude, les espèces moléculaires (carbohydrates neutres, peptides et minéraux) du principe actif issu de Piper nigrum ont été fractionnées par extraction en phase solide :
- Fraction A : Les carbohydrates neutres sont purifiés par adsorption successive des composés cationiques puis anioniques sur des résines ioniques.
- Fraction B : Les peptides sont purifiés par adsorption / élution sur une résine échangeuse de cations.
- Fraction C : La fraction cendres est obtenue par ressolubilisation des résidus issus de l'incinération dans un four à moufle électrique.
Les résultats obtenus montrent que seule la fraction A possède une efficacité sur le pouvoir contractile des f ibroblastes humains réticulaires similaire à celle du principe actif issu de Piper nigrum.
La fraction A est constituée très majoritairement de sucre essentiellement sous forme d'oligosaccharides de degré de polymérisation majoritairement compris entre 2 et 7.
La fraction active majoritaire du principe actif cosmétique selon l'invention est donc constituée d'oligosaccharides, de degré de polymérisation majoritairement compris entre 2 et 7. PROCEDE D'OBTENTION
Le principe actif selon l'invention peut être obtenu préférentiellement par hydrolyse enzymatique.
Un procédé particulièrement adapté comprend au moins la succession des étapes suivantes :
- solubilisation aqueuse de poudre de baies de Piper nigrum,
- hydrolyse enzymatique permettant d'obtenir au moins pour partie des oligosaccharides de degré de polymérisation compris entre 2 et 7,
- séparation des phases soluble et insoluble,
- inactivation enzymatique par traitement thermique,
- f iltrations et/ou f iltration stérilisante.
Des étapes de décoloration et de désodorisation de la phase soluble, peuvent être envisagées sans modif ier la partie active des principes actifs.
Les différentes étapes sont usuelles dans le domaine des extractions d'actifs à partir de plantes, et l'homme du métier est à même d'en ajuster les paramètres réactionnels sur la base de ses connaissances générales, afin d'obtenir des extraits contenant au moins des oligosaccharides.
COMPOSITIONS COSMÉTIQUES ET PROCÈDE COSMÉTIQUE DE SOIN DE LA PEAU
La présente invention couvre aussi les compositions cosmétiques incluant au moins un principe actif issu de baies de Piper nigrum dans différentes formes galéniques, adaptées à l'administration par voie topique cutanée.
Ces compositions peuvent se présen er notamment sous forme d'émulsions huile- dans-eau, émulsions eau-dans-huile, émulsions multiples (Eau/Huile/Eau ou Huile/Eau/Huile) qui peuvent être éventuellement des microémulsions ou des nanoémulsions, ou sous forme de solutions, suspensions, hydrodispersion, gels aqueux ou poudres. Elles peuvent être plus ou moins fluides et avoir l'aspect d'une crème, d'une lotion, d'un lait, d'un sérum, d'une pommade, d'un gel, d'une pâte ou d'une mousse, ou sous forme solide.
Ces compositions contiennent entre 0,01 et 50%, notamment entre 0,01 et 20%, en poids de principe(s) actif(s) issu(s) de baies de Piper nigrum selon la présente invention, préférentiellement entre 0,5% et 3%.
Ces compositions comprennent, outre l'actif, un milieu physiologiquement acceptable et de préférence cosmétiquement acceptable, c'est-à-dire qui ne provoque pas de sensations d'inconfort inacceptables pour l'utilisateur tels que des rougeurs, tiraillements ou picotements. Ce milieu contient généralement de l'eau.
Les compositions selon l'invention peuvent contenir comme adjuvant au moins un composé choisi parmi :
- les huiles, qui peuvent être choisies notamment parmi les huiles de silicone, linéaires ou cycliques, volatiles ou non volatiles ;
- les cires, telles que l'ozokérite, la cire de polyéthylène, la cire d'abeille ou la cire de carnauba ;
- les élastomères de silicone,
- les tensioactifs, de préférence émulsionnants, qu'ils soient non ioniques, anioniques, cationiques ou amphotères ;
- les co-tensioactifs, tels que les alcools gras linéaires ;
- les épaississants et/ou gélifiants,
- les humectants, tels que les polyols comme la glycérine ;
- les filtres organiques,
- les filtres inorganiques,
- les colorants, les conservateurs, les charges,
- les tenseurs,
- les séquestrants,
- les parfums, - et leurs mélanges, sans que cette liste soit limitative.
Des exemples de tels adjuvants sont cités notamment dans le Dictionnaire CTFA (International Cosmetic Ingrédient Dictionary and Handbook publié par le Personal Care Product Council).
Ces compositions sont notamment destinées au raffermissement de la peau humaine, la peau du corps ou la peau du visage, en particulier au soin des peaux ayant subi un photo-vieillissement.
L'invention vise à cet effet un procédé cosmétique de soin de la peau humaine, destiné à raffermir la peau, comprenant l'application topique d'une composition renfermant un principe actif issu de Piper nigrum, en particulier une composition renfermant entre 0,01 et 20% en poids de principe(s) actif (s) issu(s) de Piper nigrum.
L'invention vise également un procédé cosmétique de soin de la peau humaine, destiné à lutter contre le relâchement de la peau du visage et/ou à renforcer la tonicité et la fermeté de la peau, en particulier pour les peaux ayant subi un photo-vieillissement, comprenant l'application topique d'une composition renfermant un principe actif issu de Piper nigrum, en particulier une composition renfermant entre 0,01 et 20% en poids de principe(s) actif(s) issu(s) de Piper nigrum selon la présente invention.
Bien entendu, l'homme du métier veillera à choisir les éventuels composés complémentaires, actifs ou non-actifs, et/ou leur quantité, de telle sorte que les propriétés avantageuses du mélange ne soient pas, ou sensiblement pas, altérées par l'adjonction envisagée. EXEMPLES
Un exemple non limitatif de procédé d'obtention, de principe actif obtenu à partir de baies de Piper nigrum est présenté en suivant, ainsi que des exemples de composition incluant un tel principe actif. Exemple 1 : procédé d'obtention du principe actif selon l'invention
Un exemple de procédé d'obtention d'un principe actif selon l'invention, comprend la mise en oeuvre des étapes suivantes :
- solubilisation de 50g poudre de baies de Piper nigrum dans 1kg d'eau, - hydrolyse enzymatique au moyen d'une protéase,
- séparation des phases soluble et insoluble par décantation,
- inactivation enzymatique par traitement thermique à 80°C pendant au moins 5h,
- filtration afin de sélectionner les oligosaccharides de degré de polymérisation compris entre 2 et 7,
- filtration stérilisante sur 0.22μ.
Le principe actif obtenu présente les caractéristiques suivantes :
- Liquide limpide de couleur ambré présentant une odeur caractéristique
- Teneur en matière sèches : 19.4g/l
- pH = 3.6
- Teneur en sucres totaux : 6.0g/l, soit 30.9% par rapport à la matière sèche
- Teneur en protéines : 5.5g/l, soit 28.4% par rapport à la matière sèche
- Teneur en cendres de 35.6%.
- Teneur en polyphénols totaux de 0.4%.
- Teneur en acides uroniques de 4.1%.
- Absence d'alcaloïde, donc absence de pipérine.
Exemple 2 : utilisation d'un principe actif de l'invention dans un baume raffermissant évanescen
Phase A . Eau QSP 100%
Carbopol Ultrez 20 (Noveon) 0,4%
Phase B. Finester EH25 (Cornélius) 7,3%
DUB 340 (Stéarinerie Dubois) 2% DUB PTL (Stéarinerie Dubois) 6%
DUB MM (Stéarinerie Dubois) 3%
DUB PPH1 (Stéarinerie Dubois) 2%
Sophim MC30 (Sophim) 6%
Phase C. Conservateur 0,7%
Principe actif selon l'invention (exemple 1 ) 3%
Phase D. NaOH QSP pH 5,5%
Les quantités indiquées sont données en pourcentage de poids.
Cette émulsion épaisse présente un pH de 5,5.
Elle peut être obtenue par la mise en oeuvre des étapes suivantes :
- Mélanger A, bien disperser le gel à 50°C sous agitation mécanique,
- Mélanger B, chauffer A et B à 80°C, sous agitation mécanique,
- Emulsionner B dans A sous émulseur rotor stator,
- A 50°C ajouter C,
- A 30°C, ajuster le pH avec D, et laisser sous émulseur jusqu'à ce que l 'émulsion soit uniforme.
Exemple 3 : utilisation d'un principe actif de l'invention dans une mousse tonique Phase A. Eau QSP 100 °
Carbopol ETD2050 (Novéon) 0,4 %
Phase B. DUB liquide 85 (Stéarinerie Dubois) 5,7 %
Arlatone 2121 (ICI) 3 %
Emulgade 1000 NI (Henkel) 1,3 % itachol 2000 (Rita) 2,7 %
DUB G1218A (Stéarinerie Dubois) 2 %
DUB MCT 5545 (Stéarinerie Dubois) 2,3 %
Phase C. Conservateur 0,7 %
Principe actif selon l'invention (exemple 1) 3%
Phase D. NaOH QSP pH4,5 Les quantités indiquées sont données en pourcentage de poids.
Cette mousse émulsionnée présente un pH de 4,5.
Elle peut être obtenue par la mise en oeuvre des étapes suivantes :
- Mélanger A, bien disperser le gel à 50°C sous agitation mécanique, - Mélanger B, chauffer A et B à 80°C, sous agitation mécanique,
- Emulsionner B dans A sous émulseur rotor stator,
- A 40°C, additionner C,
- A 30°C, aérer I emulsion sous rotor stator tout en ajustant le pH avec D, et laisser sous forte agitation, jusqu'à l'obtention d'une mousse fine et homogène. Exemple 4 : utilisation d'un principe actif de l'invention dans une crème fluide de jour
Phase A. Eau QSP 100%
Carbopol Ultrez 20 (Noveon) 1 %
Phase B. Lanol 37T (Seppic) 2 %
Cutina E24 (Henkel) 3 %
DC 7 3101 (Dow Corning) 4 %
Pelemol 2014 (Cornélius) 5 %
DC 200 (Dow Corning) 1 %
DC 345 (Dow Corning) 1 %
DUB PTCC (Stéarinerie Dubois) 5 %
DUB Synersol (Stéarinerie Dubois) 2 %
Phase C. Conservateur 0,7 %
Principe actif selon l'invention (exemple 1) 3%
Phase D. NaOH Qsp pH 4,5 Les quantités indiquées sont données en pourcentage de poids.
Ce gel émulsionné présente un pH de 4,5.
Il peut être obtenu par la mise en oeuvre des étapes suivantes :
- Mélanger A, bien disperser le gel sous agitation mécanique, - Mélanger B,
- Chauffer A e† B à 80°C,
- Emulsionner B dans A sous émulseur,
- A 40°C ajouter C et homogénéiser,
- Ajuster le pH avec D, sous forte agitation mécanique, et continuer l'homogénéisation sous émulseur jusqu'à 30°C.
Exemple 5 : utilisation d'un principe actif de l'invention dans une crème de nuit
Phase A. Eau QSP 100 % Phase B. DUB BA (Stéarinerie Dubois) 4 %
DUB MCT 5545 (Stéarinerie Dubois) 5 %
Alcool stéarylique 4 %
DUB CGI (Stéarinerie Dubois) 5 %
DUB OK18 (Stéarinerie Dubois) 1 %
MC 30 (Sophim) 1 %
Sorbirol L (Cesalpinia) 1 %
DUB Cire A (Stéarinerie Dubois) 6,3 %
Phase C. Conservateur 0,7 %
Principe actif selon l'invention (exemple 1) 3%
Les quantités indiquées sont données en pourcentage de poids.
Ce gel émulsionné présente un pH de 6,5.
Il peut être obtenu par la mise en oeuvre des étapes suivantes :
- Mélanger A et mélanger B,
- Chauffer A et B à 80°C,
- Emulsionner B dans A sous émulseur rotor stator,
- A 40°C ajouter C, homogénéiser jusqu'au refroidissement complet. Exemple 6 : utilisation d'un principe actif de l'invention dans une crème de jour
Phase A. Eau QSP 100 %
Phase B. Lanol 99 (Seppic) 5 %
Montanov 202 (Seppic) 3 %
Montanov 68 (Seppic) 2 %
Sepigel 305 (Seppic) 0,3 %
Phase C. Conservateur 0,7 %
Principe actif selon l'invention (exemple 1) 3%
Les quantités indiquées sont données en pourcentage de poids.
Ce gel émulsionné présente un pH de 6,5.
Il peut être obtenu par la mise en oeuvre des étapes suivantes :
- Mélanger A et mélanger B,
- Chauffer A et B à 80°C,
- Emulsionner B dans A sous émulseur rotor stator,
- A 40°C ajouter C, homogénéiser jusqu'au refroidissement complet.
EVALUATION DE L'EFFET RAFFERMISSANT C»'UN PRINCIPE ACTIF ISSU DE PlPER NlSRUM
A. Etudes in Vitro
Ces études in vitro ont pour objectif de mettre en évidence l'efficacité d'un principe actif selon l'invention à la fois sur les fonctionnalités et sur les capacités de synthèse du derme réticulaire.
Elles ont été réalisées sur des f ibroblastes du derme réticulaire, obtenus à partie de plastie de peau humaine. Un protocole de prélèvement et d'isolement particulièrement adapté est décrit dans la publication J M SO ELL et al. Journal of cellular physiology, 200 :134-145 (2004). 1. Mise en évidence de l'efficacité d'un principe actif issu de Piper Niqrum sur la fonctionnalité du derme réticulaire
i. Etude des capacités d'adhésion
L'objectif de cette étude est d'évaluer l'effet d'un principe actif issu de Piper Nigrum, sur la capacité d'adhésion des fibroblastes réticulaires au collagène I.
Le principe actif utilisé est celui de l'exemple 1.
L'étude a été réalisée sur fibroblastes humains réticulaires normaux et photo-vieillis obtenus à l'aide d'une irradiation UVA.
Le protocole opératoire est le suivant.
A JO, les fibroblastes humains sont ensemencés dans un milieu de culture adapté et les cellules sont incubées à 37°C.
A J3, les cellules sont traitées : le milieu de culture est éliminé et remplacé par du milieu contenant le principe actif issu de Piper nigrum de l'exemple 1 à 0,25 et 0,50% (V/V). Les cellules sont ensuite à nouveau incubées à 37°C. A J4, Le milieu de culture est éliminé et remplacé par une solution de PBS. Les cellules sont soumises ou non aux UVA.
Les fibroblastes réticulaires normaux ou photo-vieillis sont trypsinés et ensemencés avec du collagène I de queue de rat. Les cellules sont ensuite incubées à 37°C, puis fixées au glutaraldéhyde et colorées au crystal violet. La visualisation des résultats est réalisée sur microscope couplé à un système d'analyse d'images. La quantification du nombre de cellules est effectuée par l'intermédiaire d'un programme informatique. Plus la coloration est importante, plus l'adhésion des fibroblastes réticulaires est élevée.
Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau ci-après : Efficacité / Témoin
Densité Optique (UA)
(%)
Fibroblastes reticulaires norir taux
Témoin 1.05
Principe actif selon l'invention 1.11 +6
0,25%
Principe actif selon l'invention 1.13 +8
0,50%
Fibroblastes reticulaires phot o- vieil lis
Témoin 0.68
Principe actif selon l'invention 0.79 +15
0,25%
Principe actif selon l'invention 0.87 +26
0,50%
On constate que l'adhésion des fibroblastes réticulaires photo-vieillis est réduite signif icativement de 35% par rapport aux fibroblastes réticulaires normaux.
Ces résultats montrent que l'utilisation qu'un principe actif issu de Piper nigrum selon l'invention, testé à 0.50% permet d'augmenter la capacité d'adhésion des fibroblastes photo-vieillis.
ii. Etude du pouvoir contractile
L'objectif de cette étude est d'évaluer la capacité d'un principe actif issu de Piper Nigrum, à stimuler le pouvoir contractile des fibroblastes réticulaires.
Le principe actif utilisé est celui de l'exemple 1.
L'étude a été réalisée sur fibroblastes humains réticulaires normaux et photo-vieillis obtenus à l'aide d'une irradiation UVA.
Le protocole opératoire est le suivant. A JO, les fibroblastes réticulaires humains sont ensemencés dans un milieu de culture adapté. Les cellules sont ensuite incubées à 37°C.
A J3, les cellules sont traitées : le milieu de culture est éliminé et remplacé par un milieu contenant le principe actif de l'exemple 1 à 0,25 et 0,50% (V/V) ou la vitamine C à 0,5pg/ml. Les cellules sont ensuite incubées à 37°C. A J4, le milieu de culture est éliminé et remplacé par une solution de PBS. Les cellules sont soumises ou non aux UVA.
Les fibroblastes réticulaires normaux ou photo-vieillis sont ajoutés à un gel de collagene réalisé à partir de collagene I de queue de rat contenant ou non le principe actif à 0,25% et 0,5% ou la vitamine C à 0,5pg/ml.
Après 2 heures d'incubation à 37°C, le gel est décollé par tapotements.
A J7, le diamètre des gels de collagène est mesuré.
Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau ci-dessous :
Capacité de contraction
Différence diamètre (J4-J7) (cm)
Fibroblastes réticulaires normaux
Témoin 1.48
Vitamine C 0.5pg/ml 1.90
Principe actif selon l'invention 0,50% 1.80
Fibroblastes réticulaires photo-vieillis
Témoin 0.48
Vitamine C 0.5pg/ml 1.43
Principe actif selon l'invention 0,25% 1.15
Principe actif selon l'invention 0,50% 1.23 On constate que le pouvoir contractile des f ibroblastes réticulaires photovieillis est réduit signif icativement de 68% par rapport aux fibroblastes réticulaires normaux.
Les résultats obtenus montrent qu'un principe actif issu de Piper nigrum selon l'invention, permet de diminuer le diamètre des gels de collagene, donc d'augmenter de 156% le pouvoir contractile des fibroblastes réticulaires.
iii. Etude du pouvoir de migration
Le but de cette étude est d'évaluer la capacité du principe actif de l'invention à stimuler la capacité de migration des fibroblastes réticulaires. Cette étude a été réalisée sur fibroblastes humains réticulaires normaux et photo-vieillis obtenus à l'aide d'une irradiation UVA.
Le protocole opératoire est décrit en suivant.
A JO, les fibroblastes réticulaires humains sont ensemencés dans du milieu adapté. Les cellules sont ensuite incubées à 37°C dans une atmosphère contenant 5% de COz.
A J2, deux blessures parallèles sont réalisées traversant le puits de gauche à droite.
Le milieu de culture est éliminé et remplacé par un milieu adapté. Les cellules sont soumises ou non aux UVA. Après l'irradiation, le milieu de culture est éliminé et remplacé par du milieu contenant le principe actif à 0,5 et 2% (V/V).
Des photos des cicatrices sont prises toutes les 10 minutes sur une durée de 48 heures. Ces images sont réunies en pile d'images selon un critère temporel.
A partir de ces séquences, la trajectoire des cellules choisies est suivie. Un ensemble de coordonnées de ces cellules est ainsi obtenu en fonction du temps. La distance totale parcourue est calculée en cumulant la distance séparant chaque point. Les résultats sont les suivants
Figure imgf000030_0001
Cette étude permet de montrer que la migration des fibroblastes réticulaires photo-vieillis est signif icativement réduite de 25% par rapport aux fibroblastes réticulaires normaux.
Testé à 0,5%, le principe actif issu de Piper nigrum augmente signif icativement la capacité de migration des fibroblastes réticulaires photo-vieillis de 20%.
2. Mise en évidence de l'efficacité du principe actif issu de Piper Nigrum sur l'expression des protéines matricielles
L'objectif de cette étude est d'évaluer l'effet d'un principe actif issu de Piper Nigrum selon l'invention sur sa capacité à augmenter l'expression des ARNm codant pour des molécules f ibrillaires : le collagene I et l'elastine, la molécule d'adhésion : l'intégrine α2β1 et la molécule de signalisation matricellulaire : le CT&F.
Le principe actif utilisé est celui de l'exemple 1. L'étude a été réalisée par PCR quantitative sur fibroblastes humains réticulaires normaux et photo-vieillis obtenus à l'aide d'une irradiation UVA. Le protocole opératoire est le suivant.
A JO, les fibroblastes réticulaires humains normaux sont ensemencés dans un milieu de culture adapté et les cellules sont ensuite incubées à 37°C. A Jl, les cellules sont pré-traitées : le milieu de culture est éliminé et remplacé par du milieu contenant le principe actif de l'exemple 1 à 0,5% et 1% (V/V) ou du TGFp-l à lng/ml (molécule de référence). Les cellules sont ensuite incubées pendant 24 heures à 37°C.
A J2, le milieu de culture est éliminé et remplacé par une solution de PBS. Une irradiation est réalisée à l'aide d'une lampe UVA.
La solution de PBS est éliminée et remplacée par un milieu contenant le principe actif de l'exemple 1 à 0,5% et 1% (V/V) ou TGFp-l à lng/ml. Les cellules sont de nouveau incubées.
Les cellules sont récupérées pour doser l'intégrine α2β1 ou pour doser le collagène I, I elastine ou le CT&F. Les cellules sont récupérées et les ARN totaux extraits.
Les ARN sont reverse-transcripts et les ADN complémentaires obtenus sont analysés par la technique de PCR quantitative. Les ARNm de la protéine ribosomale S27, témoin interne de référence, sont également analysés en parallèle des ARNm de collagène I, I elastine, l'intégrine α2β1 et le CT&F. La quantification de l'incorporation de fluorescence (SYBR Green) est mesurée en continu à l'aide d'un thermocycleur. L'analyse des Ct (quantification relative) est réalisée à l'aide d'une logiciel.
Les résultats obtenus pour chacune des molécule, sont présentés dans les tableaux ci-après : Collgqène I :
Figure imgf000032_0001
Elastine :
Figure imgf000032_0002
Intéqrine α2(¾1:
Figure imgf000033_0001
CT6F :
Figure imgf000033_0002
On constate que les expressions des ARNm du collagene I, de l'elastine, de l'intégrine α2β1 et du CT&F par les fibroblastes humains photo-vieillis sont respectivement réduites de 75%, 49%, 83% et de 77% par rapport aux f ibroblastes humains normaux.
Les résultats obtenus montrent qu'un principe actif issu de Piper nigrum selon l'invention, permet d'augmenter la synthèse du collagene I, de l'élastine, de l'intégrine α2β1 et du CT&F dans les f ibroblastes réticulaires photo-vieillis.
B. Etudes in Vivo
Pour ces essais, une étude préliminaire a permis d'évaluer le niveau d'exposition cumulée aux UV au cours de la vie de panélistes sur la base d'un questionnaire permettant ainsi de discriminer deux groupes de volontaires présentant un niveau d'exposition différent nommé groupe photo-vieilli et groupe non photo-vieilli :
- Groupe A - non photo-vieilli : 19 volontaires d'âge moyen 59 ans, et de phototype 3.
- Groupe B - photo-vieilli : 19 volontaires d'âge moyen 59 ans et de phototype 3.
Ces essais consistent à étudier dans un premier temps l'impact du vieillissement lié aux expositions solaires sur les propriétés biomécaniques de la peau, puis à évaluer l'effet d'un principe actif issu de Piper nigrum sur l'amélioration des paramètres cutanés de chacun des deux groupes, et enfin à étudier l'effet du principe actif sur la réduction des différences existantes entre les deux groupes sur les différents paramètres ayant trait aux propriétés biomécaniques de la peau. 1. Evaluation de l'effet anti-relâchement d'un principe actif issu de Piper Niqrum
Dans un premier temps, l 'objectif de cette étude est d'étudier l'impact sur le relâchement de la peau du vieillissement lié aux expositions solaires.
Dans un second temps, l'objectif de l'étude est d'investiguer l'effet du principe actif issu de Piper nigrum sur l'amélioration des paramètres cutanés, et ainsi d'étudier l'effet du principe actif sur la réduction des différences existantes entre les 2 groupes.
L'étude est réalisée contre placebo. Le principe actif selon l'invention qui est utilisé est celui de l'exemple n°l formulé dans une composition de l'exemple n°6.
L'évaluation des paramètres liés au relâchement du visage est réalisée en aveugle par un expert entraîné avant et après 56 jours d'applications biquotidiennes, sur les paramètres relatifs à la ptôse du visage et à la fermeté.
L'évaluation de la ptôse est réalisée par observation visuelle de l'expert des plis cutanés formés à proximité de l'oreille. Le nombre de plis formés ainsi que leur largeur sont des indicateurs de relâchement de la peau du visage. De plus, l'expert relève la peau avec l'index et observe de quelle façon la peau reprend sa place. Une peau ferme, non relâchée, ne présente aucun pli à cet endroit du visage contrairement à une peau marquée et relâchée.
L'évaluation de la fermeté de la peau est évaluée par l'expert en exerçant une pression soutenue sur la joue du volontaire à l'aide des doigts index, majeur et annulaire. Une série de pressions / arrêt de la pression est réalisée en balayant une zone allant du nez jusqu'à proximité des oreilles. Ces successions de pression permettent d'estimer la résistance de la peau sous les doigts. Plus la peau résiste à la pression et donc à l'enfoncement des doigts, plus cette dernière est ferme.
Le protocole opératoire de l'étude est le suivant.
Entre J-H et Jo, les volontaires appliquent deux fois par jour une crème placebo sur l'ensemble du visage.
A Jo , les volontaires viennent au laboratoire sans avoir appliqué de produit sur le visage le matin (ni crème, ni maquillage). Une évaluation est réalisée par l'expert.
Entre Jo et J55, les volontaires réalisent des applications biquotidiennes en hémi-visage du produit et du placebo pour les deux groupes A et B.
A J56, les volontaires viennent au laboratoire sans avoir appliqué de produit sur le visage le matin (ni crème, ni maquillage), et l'expert réalise une nouvelle évaluation.
Les résultats obtenus à Jo sont présentés dans le tableau ci-dessous :
Figure imgf000036_0001
Ces premiers résultats montrent qu'il existe une différence significative sur les paramètres relatifs au relâchement du visage évalué par un expert entraîné, entre les groupes de personnes photovieilli et non photovieilli. Une diminution significative de la fermeté ainsi qu'une augmentation de la ptôse est observée en défaveur du groupe photovieilli. Le photovieillissement a donc un réel impact au niveau des paramètres cutanés et notamment ceux liés au relâchement du visage.
Par ailleurs, les résultats obtenus avec le principe actif issu de Piper Nigrum après 56 jours de traitement sont présentés ci-après en pourcentage de variation en comparaison aux résultats obtenus avec le placebo :
Figure imgf000037_0001
On constate que dans les conditions de cette étude, en comparaison au placebo et après 56 jours d'applications biquotidiennes sur le groupe A non photovieilli et le groupe B photovieilli, un principe actif issu de Piper nigrum formulé à 3% en émulsion améliore signif icativement la fermeté de la peau (+14,3%) et limite la ptôse du visage (-8,6%) des personnes présentant une peau photovieillie. Le principe actif selon l'invention joue ainsi spécifiquement sur les peaux photovieillies présentant un relâchement cutané plus marqué.
Les résultats correspondants aux paramètres ptôse et fermeté évalués par l'expert entraîné à JO et J56 est également présenté dans les tableaux qui suivent : Paramètre Ptôse :
Figure imgf000038_0001
Paramètre fermeté
Figure imgf000038_0002
Dans les conditions de cette étude, après 56 jours d'applications biquotidiennes sur le groupe B photovieilli, un principe actif issu de Piper Nigrum selon l'invention, formulé à 3% en émulsion, améliore signif icativement la fermeté de la peau après évaluation clinique (+17,2%) et diminue la ptôse (-14,1%).
Le principe actif issu de Piper Nigrum selon l'invention permet ainsi au groupe de personnes photovieillies de retrouver des caractéristiques cutanées comparables à celles du groupe non photovieilli, la différence entre les deux groupes n'étant plus significative à J56. En compensant la perte de ferme é et en limitant le phénomène de ptôse engendrée par différents facteurs environnementaux et plus particulièrement par les UV sur le groupe photo-vieilli, le principe actif selon l'invention permet de corriger le relâchement et l'affaissement des peaux photo-vieillies.
2. Evaluation de l'effet d'un principe actif issu de Piper Nigrum sur les propriétés biomécaniques de la peau
L'objectif de cette étude est d'étudier l'impact sur les propriétés biomécaniques de la peau du vieillissement lié aux expositions solaire ainsi que l'effet d'un principe actif issu de Piper Nigrum sur les propriétés biomécaniques de la peau.
L'étude est réalisée contre placebo. Le principe actif selon l'invention utilisé est celui de l'exemple n°l formulé dans une composition de l'exemple n°6. L'évaluation des paramètres biomécaniques a été réalisée avant et après 56 jours d'applications biquotidiennes à l'aide d'un cutomètre® au niveau des joues. Le principe est le suivant : la peau est aspirée dans l'orifice d'une sonde de diamètre 6mm par une dépression constante pendant une durée constante. Plusieurs aspirations successives sont effectuées. La profondeur de pénétration de la peau dans la sonde est mesurée par le biais de deux prismes optiques placés à l'ouverture de la sonde. A partir des courbes obtenues il est possible de calculer divers paramètres caractéristiques des propriétés mécaniques de la peau.
Parmi tous les paramètres calculés à partir des courbes obtenues, la présente étude consiste à étudier :
- le paramètre X qui correspond à la tonicité de la peau ou rétractation élastique
X = (Uf-Ur) = O (1-R7) Si -X augmente, la tonicité augmente, et
- le paramètre O qui reflète la fermeté de la peau
Uf = RO
Si -RO augmente, la fermeté de la peau augmente.
Le protocole de l'étude est le suivant.
Entre J 4 et Jo,les volontaires appliquent biquotidiennement sur l'ensemble du visage une crème placebo.
A Jo, les volontaires viennent au laboratoire sans avoir appliqué de produit sur le visage le matin (ni crème, ni maquillage), et on mesure des propriétés biomécaniques au cutomètre®.
Entre Jo et J55, les volontaires appliquent de façon biquotidiennes en hémivisage le produit contenant le principe actif selon l'invention et le placebo pour les deux groupes.
A J56, les volontaires viennent au laboratoire sans avoir appliqué de produit sur le visage le matin (ni crème, ni maquillage), et on mesure à nouveau les propriétés biomécaniques au cutomètre®.
Les résultats obtenus à Jo sont présentés dans le tableau ci-dessous :
Figure imgf000040_0001
Ces premiers résultats montrent qu'il existe une différence significative sur les paramètres biomécaniques de la peau, entre les groupes de personnes « photovieilli » et « non photovieilli » d'âge moyen identique. Une diminution de la fermeté et de la tonicité de la peau est observée en défaveur du groupe photovieilli. Le photovieillissement a donc un réel impact au niveau des paramètres cutanés liés à la fermeté et à la tonicité de la peau.
Par ailleurs, les résultats obtenus avec le principe actif issu de Piper Nigrum après 56 jours de traitement sont présentés ci-après en pourcentage de variation en comparaison aux résultats obtenus avec le placebo :
Figure imgf000041_0001
On constate que, dans les conditions de cette étude, en comparaison au placebo et après 56 jours d'applications biquotidiennes sur le groupe A « non photovieilli » et le groupe B « photovieilli », le principe actif issu de Piper nigrum selon l'invention, formulé à 3% en émulsion améliore signif icativement les propriétés biomécaniques des personnes présentant une peau photovieillie.
Le principe actif selon l'invention joue ainsi spécifiquement sur les peaux présentant des propriétés biomécaniques altérées caractéristiques d'un relâchement cutané plus important.
Les résultats correspondant à l'évolution des paramètres de fermeté et de tonicité mesurés au cutomètre® à J0 et J56 sont également présentés dans les tableaux qui suivent : Paramètre de fermeté :
Figure imgf000042_0001
Paramètre de tonicité :
Figure imgf000042_0002
Dans les conditions de cette étude, après 56 jours d'applications biquotidiennes sur le groupe B photovieilli, le principe actif selon l'invention, formulé à 3% en émulsion, améliore signif icativement les paramètres caractéristiques de la fermeté et de la tonicité de la peau.
L'utilisation d'un principe actif issu de Piper nigrum selon l'invention permet ainsi au groupe de personnes photovieillies de retrouver des caractéristiques de fermeté et de tonicité comparables à celles du groupe non photovieilli, la différence entre les deux groupes n'étant plus significative à J56.

Claims

REVENDICATIONS
1. Principe actif cosmétique, caractérisé en ce qu'il est issu de baies de Piper nigrum et en ce qu'il comprend des oligosaccharides de degré de polymérisation compris entre 2 et 7.
2. Principe actif cosmétique selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il comprend au moins 10% d'oligosaccharides de degré de polymérisation compris entre 2 et 7, en poids par rapport à la teneur totale en matière sèche.
3. Principe actif cosmétique selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisée en ce que les oligosaccharides sont sous forme d'a-glucanes et de rhamnogalacturonanes.
4. Principe actif cosmétique selon l'une des précédentes revendications, caractérisé en ce qu'il comprend également des protéines et des acides uroniques.
5. Principe actif cosmétique selon l'une des précédentes revendications, caractérisé en ce qu'il comprend un taux de sucres totaux compris entre 20 et 53% en poids par rapport à la teneur total en matières sèches.
6. Principe actif cosmétique selon l'une précédentes revendications, caractérisé en ce qu'il présente au moins l'une des caractéristiques suivantes, les pourcentages étant en poids par rapport à la teneur totale en matière sèche :
- une teneur en sucres totaux comprise entre 20 e†53 %,
- une teneur en cendres comprise entre 28,4 et 42,8 %,
- une teneur en protéines comprise entre 22,7 et 34,1%.
7. Principe actif cosmétique selon l'une des précédentes revendications, caractérisé en ce qu'il présente un taux de matières sèches compris entre 17 et 25g/l et/ou un pH compris entre 3,0 et 4,0.
8. Principe actif cosmétique selon l'une des précédentes revendications, caractérisé en ce qu'il s'agit d'un hydrolysat de baies de Piper nigrum.
9. Principe actif cosmétique selon l'une des précéden es revendications, caractérisé en ce qu'il ne contient pas de pipérine.
10. Utilisation d'au moins un extrait issu de Piper nigrum en tant que principe actif cosmétique raffermissant cutané.
11. Utilisation d'au moins un extrait issu de Piper nigrum selon la revendication 10, en tant que principe actif cosmétique dans une composition cosmétique destinée à lutter contre l'affaissement des tissus cutanés et/ou à augmenter la tonicité et la fermeté de la peau.
12. Utilisation d'au moins un extrait issu de Piper nigrum selon l'une quelconque des revendications 10 ou 11, en tant que principe actif cosmétique dans une composition cosmétique destinée à lutter contre le relâchement de la peau du visage.
13. Utilisation d'au moins un extrait issu de Piper nigrum selon l'une quelconque des revendications 10 à 12, en tant que principe actif cosmétique dans une composition cosmétique destinée à agir sur le derme réticulaire.
14. Utilisation d'au moins un extrait issu de Piper nigrum selon l'une des revendications 10 à 13, en tant que principe actif cosmétique dans une composition cosmétique destinée à préserver les fonctionnalités et les capacités de synthèse du derme réticulaire face aux irradiations UV.
15. Utilisation d'au moins un extrait issu de Piper nigrum selon l'une des revendications 10 à 14, en tant que principe actif cosmétique dans une composition cosmétique destinée à augmenter l'adhésion, la contraction et la migration des cellules du derme réticulaire.
16. Utilisation d'au moins un extrait issu de Piper nigrum selon l'une quelconque des revendications 10 à 15, en tant que principe actif cosmétique inducteur de la synthèse de collagène I, d'élastine, d'intégrine α2β1 et/ou de CT&F dans les cellules du derme réticulaire.
17. Utilisation d'au moins un extrait issu de Piper nigrum selon l'une des revendications 10 à 16, dans laquelle l'extrait est un principe actif selon l'une des revendications 1 à 9.
18. Composition cosmétique pour application topique, caractérisée en ce qu'elle comprend un principe actif selon l'une des revendications 1 à 9 présent entre 0,01 et 20% en poids total de la composition.
19. Procédé cosmétique de soin de la peau humaine, destiné à raffermir la peau, comprenant l'application topique d'une composition renfermant un principe actif issu de Piper nigrum.
20. Procédé cosmétique de soin de la peau humaine, destiné à lutter contre l'affaissement des tissus cutanés, à lutter contre le relâchement de la peau du visage, et/ou à renforcer la tonicité et la fermeté de la peau comprenant l'application topique d'une composition renfermant un principe actif issu de Piper nigrum.
21. Procédé cosmétique de soin de la peau humaine selon l'une des revendications 19 ou 20, caractérisé en ce que le principe actif issu de Piper nigrum est un principe actif selon l'une des revendications 1 à 9.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH03220129A (ja) * 1990-01-22 1991-09-27 Shiseido Co Ltd 皮脂抑制剤
US6054585A (en) * 1998-12-23 2000-04-25 Sabinsa Corporation Process for making high purity piperine for nutritional use
FR2825273B1 (fr) * 2001-05-29 2006-11-24 Oreal Composition pour le traitement des signes cutanes du vieillissement
KR100846125B1 (ko) * 2007-03-30 2008-07-15 바이오스펙트럼 주식회사 피페린을 유효성분으로 포함하는 피부주름 개선용 조성물
KR100954866B1 (ko) * 2007-09-28 2010-04-28 한국생명공학연구원 호초로부터 분리된 세포접착저해 물질을 유효성분으로 하는염증성 질환 의 예방 및 치료용 조성물

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2732806A1 (fr) * 2012-11-14 2014-05-21 Coty Germany Gmbh Composition cosmétique pour augmenter la synthèse d'acide hyaluronique dans la peau et son utilisation pour réparer les rides
US9149659B2 (en) 2012-11-14 2015-10-06 Coty Germany Gmbh Cosmetic composition for increasing hyaluronic acid synthesis in skin and its use for repairing wrinkles

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