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WO2008032599A1 - Semiconductor nanoparticle aggregate, process for producing the semiconductor nanoparticle aggregate, and biological substance labeling agent using the semiconductor nanoparticle aggregate - Google Patents

Semiconductor nanoparticle aggregate, process for producing the semiconductor nanoparticle aggregate, and biological substance labeling agent using the semiconductor nanoparticle aggregate Download PDF

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WO2008032599A1
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WO
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semiconductor nanoparticle
semiconductor
nanoparticle aggregate
aggregate
nanoparticles
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PCT/JP2007/067181
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Naoko Furusawa
Kazuya Tsukada
Hisatake Okada
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Konica Minolta Medical and Graphic Inc
Original Assignee
Konica Minolta Medical and Graphic Inc
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Priority to JP2008534294A priority patent/JPWO2008032599A1/ja
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    • G01N33/588—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances with semiconductor nanocrystal label, e.g. quantum dots
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    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54313—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being characterised by its particulate form
    • G01N33/54346—Nanoparticles

Definitions

  • the present invention relates to a semiconductor nanoparticle aggregate, a method for producing the same, and a biomaterial labeling agent using the same.
  • nanoparticle complexes that interact with biological systems have recently gained widespread interest in the fields of biology and medicine. These complexes are considered promising as new intravascular probes for both sensing (eg imaging) and therapeutic purposes (eg drug delivery).
  • quantum dot a substance that exhibits a quantum confinement effect in a nanometer-sized semiconductor substance.
  • a quantum dot is a small lump within about 10 nm, where hundreds to thousands of semiconductor atoms are gathered.
  • the quantum dot absorbs light from an excitation source and reaches an energy excited state, the energy of the quantum dot is reduced. Releases energy equivalent to the band gap. Therefore, by adjusting the size or material composition of quantum dots, the energy band gap can be adjusted and energy in various levels of wavelength bands can be used.
  • quantum dots have the characteristic that the emission wavelength can be controlled by changing the particle size with the same composition. Compared to conventional organic fluorescent dyes, they are superior in terms of stability and light emission, and are attracting attention!
  • CdSe particles are commonly used as fluorescent materials and have achieved multicolorization due to changes in size.
  • visible light emission has a size of 5 nm to several tens of nm, which is In comparison, the movement of large biomolecules may be hindered, which is undesirable in observation. It was hoped that multiple colors could be realized at 4 nm or less! /.
  • Patent Document 1 Japanese Translation of Special Publication 2003-524147
  • Patent Document 2 JP-A-2005-172429
  • the present invention has been made in view of the above problems, and the problem to be solved is that the maximum emission wavelength of the emission spectrum in the wavelength range of 380 nm to 650 nm is different and the particle size distribution is narrow and the particle size distribution is narrow. It is to provide a semiconductor nanoparticle aggregate composed of three or more different types of semiconductor nanoparticles and a method for producing the same, and further to provide a biosubstance labeling agent using the semiconductor nanoparticle aggregate.
  • the force of at least one semiconductor nanoparticle constituting the semiconductor nanoparticle assembly is 1.3 eV or less.
  • the emission spectrum of at least one semiconductor nanoparticle constituting the semiconductor nanoparticle assembly is determined.
  • a method for producing a semiconductor nanoparticle aggregate comprising a step of classifying semiconductor nanoparticles.
  • a biological substance labeling agent wherein the semiconductor nanoparticle assembly according to any one of;! To 6 and a molecular labeling substance are bound via an organic molecule.
  • semiconductor nanoparticles comprising three or more types of semiconductor nanoparticles having different particle sizes, narrow particle size distributions, and different maximum emission wavelengths of emission spectra in a wavelength region of 380 nm to 650 nm. It is possible to provide an aggregate and a method for producing the same, and further provide a biomaterial labeling agent using the semiconductor nanoparticle aggregate.
  • the semiconductor nanoparticle aggregates have the same chemical composition, and the particle diameters are different within a particle diameter range of 1.8 to 4 nm and are within a wavelength range of 380 nm to 650 nm.
  • the semiconductor nanoparticle assembly composed of three or more types of semiconductor nanoparticles having different maximum emission wavelengths in the emission spectrum of at least three types of semiconductor nanoparticles constituting the semiconductor nanoparticle assembly
  • a common feature is that the difference is within the range of 20-OOOOnm.
  • This semiconductor nanoparticle aggregate is specifically intended for use as a labeling compound. Bind different antibodies or DNA with different sequences to the particles of each emission wavelength, Mixed with the subject to be examined, or injected into cells. This makes it possible to detect different objects at the same time, leading to a reduction in inspection time. Cell imaging has the advantage that multiple objects can be stained at the same time, and observation accuracy is improved.
  • semiconductor nanoparticle aggregate refers to a solution containing nanoparticles, a sheet in which nanoparticles are dispersed, a powder composed of nanoparticles, and the like.
  • Such a quantum dot with a small visible light emission size with a small bore radius has a problem that it is difficult to make a size by controlling the synthesis conditions.
  • the semiconductor nanoparticle aggregate of the present invention has the same chemical composition, 1. the particle size is different in the particle size range of 8 to 4 nm, and the maximum emission wavelength of the emission spectrum in the wavelength region of 380 nm to 650 nm.
  • the difference between the maximum emission wavelengths of at least three types of semiconductor nanoparticles constituting the semiconductor nanoparticle assembly is 20 to; Characterized by being in range
  • At least one semiconductor nanoparticle constituting the semiconductor nanoparticle assembly has a chemical composition in which the band gap of the Balta crystal is 1.3 eV or less. It is preferably formed of a compound.
  • the half width of the emission band of the maximum emission wavelength in the emission spectrum of at least one kind of semiconductor nanoparticles constituting the semiconductor nanoparticle aggregate is 50 nm or less. Furthermore, the half width is preferably 20 nm or less.
  • the semiconductor nanoparticles constituting the semiconductor nanoparticle aggregate of the present invention are preferably classified particles.
  • classification refers to an operation of distinguishing particle powders by particle diameter, density, shape, and the like. In the present invention, the operation is particularly distinguished by the particle diameter (size).
  • a size-exclusion chromatograph which is an embodiment of the method can be obtained by a high performance liquid chromatography (HPLC) method.
  • HPLC high performance liquid chromatography
  • Classification is preferably performed by a tomographic method. A specific description of the method will be given in the examples described later.
  • the present inventors have reduced the size of the semiconductor nanoparticles according to the present invention (hereinafter also referred to as “quantum dots”). In order to achieve this, it is necessary to reduce the exciton Bohr radius. To that end, the condition of the realization is that Balta's bandgap I of the semiconductor composition that forms the semiconductor nanoparticles (quantum dots) is 1.3 eV or less. I found out.
  • composition of semiconductors falling within this range include Si, Ge, GaSb, InAs, and InSb.
  • a B C (A and B are selected from Al, Ga and In, and C is N
  • the particle size is smaller than 1.8 nm, it cannot have a crystal structure and does not function as a quantum dot.
  • the semiconductor nanoparticle forming material according to the present invention preferably satisfies the above-mentioned conditions, but can be formed using various semiconductor materials.
  • group IV, II VI, and III V semiconductor compounds in the elementary periodic table can be used.
  • GaAs, GaN, GaPGaSb, InGaAs, InP, InN, InSb, InAs, AlAs, A1P, AlSb, and A1S are preferable.
  • Ge, Pb and Si are particularly suitable.
  • the semiconductor nanoparticles are preferably particles having a core / shell structure.
  • the semiconductor nanoparticles are so-called core / shell type semiconductor particles having a core / shell structure composed of core particles made of semiconductor nanoparticles and a shell layer covering the core particles. It is preferable that the chemical compositions of the particles and the shell layer are different.
  • the average particle size of the core particles is preferably set to! Furthermore, it is preferable that the thickness is 1.8 to 4 nm from the viewpoint of manifesting the quantum size effect.
  • the average particle diameter of the core / shell type semiconductor particles to which the shell is added is preferably 4 nm or less. This is because it enables labeling and dynamic imaging of a living body molecule.
  • the "average particle size” can be measured by a high-resolution transmission electron microscope (TEM) photo observation method or a laser scattering method.
  • TEM transmission electron microscope
  • Various semiconductor materials can be used as the semiconductor material used for the core particles. Specific examples include, for example, MgS, MgSe, MgTe, CaS, CaSe, CaTe, SrS, SrSe, SrTe, BaS, BaTe, ZnS, ZnSe, ZnTe, CdS, CdSe, CdTe, GaAs, GaP, GaSb, InGaAs, Examples include InP, InN, InSb, InAs, AlAs, A1P, AlSb, A1S, PbS, PbSe, Ge, Si, or a mixture thereof. In the present invention, a particularly preferable semiconductor material is Si.
  • a very small amount of a doping material such as Ga may be included.
  • semiconductor materials can be used as the semiconductor material used for the shell. Specific examples include, for example, ZnO, ZnS, ZnSe, ZnTe, CdO, CdS, CdSe, CdTe, MgS, MgSe, GaS, GaN, GaP, GaAs, GaSb, InAs, InN, InP, InSb, AlAs, A1N, A1P , AlSb, or a mixture thereof.
  • Preferred materials for the shell include a semiconductor material having a band gap energy higher than that of the semiconductor nanocrystal core.
  • a suitable material for the shell is a good conductivity and valence band for the core semiconducting nanocrystal.
  • the conductive band is desirably higher than the conductive band of the core semiconducting nanocrystal and the valence band is desirably lower than the valence band of the core semiconducting nanocrystal.
  • Materials with bandgap energy in the ultraviolet region for semiconducting nanocrystal cores that emit energy in the visible (eg Si, Ge, GaP) or in the near infrared (eg InP, InN, PbS, PbSe) Can be used. Specific examples include, for example, ZnS, GaN, and magnesium chalcogenide (for example, MgS, MgSe, and MgTe).
  • the semiconductor material is SiO or ZnS.
  • Examples of the production method of the liquid phase method include a precipitation method such as a coprecipitation method, a sol-gel method, a uniform precipitation method, and a reduction method.
  • the reverse micelle method, the supercritical hydrothermal synthesis method, and the like are also excellent methods for producing nanoparticles (for example, JP 2002-322468, JP 2005-239775, JP 10-10). (See 310770, JP 2000-104058, etc.).
  • the manufacturing method of the vapor phase method includes (1) a second high temperature generated by electrodeless discharge in a reduced pressure atmosphere by evaporating the opposing raw material semiconductor by the first high temperature plasma generated between the electrodes.
  • a method of synthesizing powder containing particles by reacting a raw material gas in a gas phase in a low pressure state is also preferably used.
  • a production method by a liquid phase method is particularly preferred.
  • the semiconductor nanoparticle aggregate of the present invention can be applied to a biological material fluorescent labeling agent.
  • the biological material labeling agent according to the present invention by adding the biological material labeling agent according to the present invention to a living cell or living body having a target (tracking) substance, it binds or adsorbs to the target substance, and excitation light having a predetermined wavelength is emitted to the conjugate or adsorbent.
  • the fluorescence dynamic imaging of the target (tracking) substance can be performed by detecting fluorescence of a predetermined wavelength generated from the fluorescent semiconductor fine particles in response to the excitation light. That is, the biosubstance labeling agent according to the present invention can be used with a bioimaging method (technical means for visualizing biomolecules constituting the biosubstance and dynamic phenomena thereof).
  • the surface of the semiconductor nanoparticle assembly described above is generally hydrophobic, for example, when used as a biological material labeling agent, there are problems such as aggregation of particles with poor water dispersibility if used as they are. For this reason, it is preferable to hydrophilize the shell surface of core / shell type semiconductor nanoparticles!
  • a method of hydrophilization treatment for example, there is a method of chemically and / or physically binding a surface modifier to the particle surface after removing the lipophilic group on the surface with pyridine or the like.
  • a surface modifier those having a carboxyl group or an amino group as a hydrophilic group are preferably used, and specific examples include mercaptopropionic acid, mercaptodecanoic acid, and aminoprononthiol.
  • Ge / a GeO nanoparticles 10- 5 g dispersed in Melka Putu pure water down decanoate 0. 2 g is dissolved 10 ml, stirred 40 ° C, 10 min, the surface of the shell By treating this, the surface of the inorganic nanoparticle shell can be modified with carboxyl groups.
  • the biological material labeling agent according to the present invention is obtained by binding the above-described hydrophilic treated semiconductor nanoparticles, the molecular labeling material and the organic molecule.
  • the biological substance labeling agent according to the present invention can be labeled with the biological labeling substance by specifically binding and / or reacting with the target biological substance.
  • the molecular labeling substance include nucleotide chains, antibodies, antigens, and cyclodextrin.
  • hydrophilic semiconductor nanoparticles and a molecular labeling substance are bound by organic molecules.
  • the organic molecule is not particularly limited as long as it is an organic molecule capable of binding a semiconductor nanoparticle and a molecular labeling substance.
  • proteins albumin, myoglobin, casein, and avidin, which is a kind of protein, are combined with biotin. It is also preferably used.
  • the form of the bond is not particularly limited, and examples thereof include a covalent bond, an ionic bond, a hydrogen bond, a coordinate bond, physical adsorption, and chemical adsorption. Bond stability strength Strong bond strength such as covalent bond is preferred
  • the semiconductor nanoparticles are hydrophilized with mercaptodecanoic acid
  • avidin and biotin can be used as organic molecules.
  • the carboxyl group of the hydrophilized nanoparticle is preferably covalently bonded to avidin, and avidin is further selectively bonded to biotin, and biotin is further bonded to a biological material labeling agent to label the biological material.
  • a biological material labeling agent to label the biological material.
  • the nanoparticles were classified by size exclusion chromatography, a reversed-phase ODS (octadecylsilyl group C-18) column was used as the column, and acetonitrile was used as the mobile phase. And the absorption spectrum at 365 nm was measured over time. On the other hand, absorption was confirmed in the range of 3min to 30min.
  • ODS octadecylsilyl group C-18
  • a semiconductor nanoparticle aggregate of the present invention is obtained by selecting and mixing three or more types from 1-6.
  • Sample 2 was classified by size exclusion chromatography. Using an S (octadecylsilyl group C-18) column and using acetonitrile as the mobile phase and passing through the column at a flow rate of 0.05 ml / min, the 365 nm absorption spectrum was measured over time. Absorption was confirmed in the range of 20 min.
  • composition was confirmed by XPS, it was found to be CdSe.
  • the band gap value for Balta CdSe is 1.74 eV.
  • nucleotide sequence biotinylated in the obtained avidin-conjugated nanoparticle solution is known. Were mixed and stirred to prepare oligonucleotides labeled with nanoparticles.

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Description

明 細 書
半導体ナノ粒子集合体、その製造方法、及びそれを用いた生体物質標 識剤
技術分野
[0001] 本発明は半導体ナノ粒子集合体、その製造方法、及びそれを用いた生体物質標 識剤に関する。
背景技術
[0002] ナノテクノロジーにおける最近の進歩は、ナノ粒子を、検出、診断、感知及びその 他の用途に使用することの可能性を示唆している。また、生物系と相互作用するナノ 粒子複合体は、最近生物及び医学の分野で広く関心を集めている。これらの複合体 は、感知（例えば画像化）及び治療目的（例えば薬物送達）の両方にとって新規血管 内プローブとして有望であると考えられてレ、る。
[0003] ところで、一般に、ナノ'メートルサイズの半導体物質で量子閉じ込め（quantum c onfinement)効果を示す物質は「量子ドット」と称されている。このような量子ドットは 、半導体原子が数百個から数千個集まった 10数 nm程度以内の小さな塊であるが、 励起源から光を吸収してエネルギー励起状態に達すると、量子ドットのエネルギーバ ンドギャップに相当するエネルギーを放出する。したがって、量子ドットの大きさまた は物質組成を調節すると、エネルギーバンドギャップを調節することができて様々な 水準の波長帯のエネルギーを利用することができる。
[0004] また、量子ドットは、同一組成で、粒径を変化させることで、発光波長をコントロール できるという特徴をもつ。従来技術である有機蛍光色素に比較して安定性、発光の明 るさの点で優れており注目されて!/、る。
[0005] 現在、一般的に蛍光材料として用いられているのが CdSe粒子であり、サイズ変化 による多色化を実現しているが、可視光発光のサイズが 5nm〜十数 nmと生体分子 に比較して大きぐ生体分子の動きを妨げることがあり、観察上好ましくなかった。 4n m以下で多色化を実現できることが望まれて!/、た。
[0006] 同一組成であることにより、量子ドットの比重が各色で揃うことが大きなメリットとなる 。異なる組成のナノ粒子 ·蛍光色素分子との併用は染色液の中での分離につながり 操作が非常に煩雑となることが問題であった (例えば、特許文献 1及び 2参照。）。 特許文献 1 :特表 2003— 524147号公報
特許文献 2：特開 2005— 172429号公報
発明の開示
発明が解決しょうとする課題
[0007] 本発明は、上記問題に鑑みてなされたものであり、その解決課題は、粒径が異なり 、粒径分布が狭ぐかつ 380nm〜650nmの波長領域内における発光スペクトルの 極大発光波長が異なる 3種類以上の半導体ナノ粒子からなる半導体ナノ粒子集合体 とその製造方法を提供すること、更には、当該半導体ナノ粒子集合体を利用した生 体物質標識剤を提供することである。
課題を解決するための手段
[0008] 本発明に係る上記課題は下記の手段により解決される。
[0009] 1.同一化学組成であって、 1. 8〜4nmの粒径範囲で粒径が異なり、かつ発光ス ぺクトルにおける 380nm〜650nmの波長領域内の極大発光波長が異なる 3種類以 上の半導体ナノ粒子からなる半導体ナノ粒子集合体にぉレ、て、該半導体ナノ粒子集 合体を構成する少なくとも 3種類以上の半導体ナノ粒子の極大発光波長相互の差異 力 ¾0〜100nmの範囲内であることを特徴とする半導体ナノ粒子集合体。
[0010] 2.前記 1に記載の半導体ナノ粒子集合体にお!/、て、該半導体ナノ粒子集合体を 構成する少なくとも 1種類の半導体ナノ粒子力 バルタ結晶のバンドギャップが 1. 3e V以下である化学組成の化合物で形成されたことを特徴とする半導体ナノ粒子集合 体。
[0011] 3.前記 1又は 2に記載の半導体ナノ粒子集合体において、該半導体ナノ粒子集合 体を構成する少なくとも 1種類の半導体ナノ粒子の発光スペクトルにおける極大発光 波長の発光帯の半値幅が 50nm以下であることを特徴とする半導体ナノ粒子集合体
〇
[0012] 4.前記;!〜 3のいずれか 1項に記載の半導体ナノ粒子集合体において、該半導体 ナノ粒子集合体を構成する少なくとも 1種類の半導体ナノ粒子の発光スペクトルにお ける極大発光波長の発光帯の半値幅が 20nm以下であることを特徴とする半導体ナ ノ粒子集合体。
[0013] 5.前記;!〜 4のいずれか 1項に記載の半導体ナノ粒子集合体において、該半導体 ナノ粒子集合体を構成する半導体ナノ粒子が分級された粒子であることを特徴とす る半導体ナノ粒子集合体。
[0014] 6.前記分級が高速液体クロマトグラフィー法を用いてなされたことを特徴とする前 記 5に記載の半導体ナノ粒子集合体。
[0015] 7.前記;!〜 4のいずれか 1項に記載の半導体ナノ粒子集合体の製造方法であって
、半導体ナノ粒子を分級する工程を含むことを特徴とする半導体ナノ粒子集合体の 製造方法。
[0016] 8.前記分級する工程において高速液体クロマトグラフィー法を用いることを特徴と する前記 7に記載の半導体ナノ粒子集合体の製造方法。
[0017] 9.前記;!〜 6のいずれか 1項に記載の半導体ナノ粒子集合体と分子標識物質とを 有機分子を介して結合させたことを特徴とする生体物質標識剤。
発明の効果
[0018] 本発明の上記手段により、粒径が異なり、粒径分布が狭ぐかつ 380nm〜650nm の波長領域内における発光スペクトルの極大発光波長が異なる 3種類以上の半導体 ナノ粒子からなる半導体ナノ粒子集合体とその製造方法を提供すること、更には、当 該半導体ナノ粒子集合体を利用した生体物質標識剤を提供することができる。 発明を実施するための最良の形態
[0019] 前記;!〜 6に係る発明において、半導体ナノ粒子集合体は、同一化学組成であつ て、 1. 8〜4nmの粒径範囲で粒径が異なり、かつ 380nm〜650nmの波長領域内 における発光スペクトルの極大発光波長が異なる 3種類以上の半導体ナノ粒子から なる半導体ナノ粒子集合体において、該半導体ナノ粒子集合体を構成する少なくと も 3種類以上の半導体ナノ粒子の極大発光波長相互の差異が 20〜； !OOnmの範囲 内であることを共通の特徴とする。
[0020] この半導体ナノ粒子集合体は、具体的には、標識化合物としての利用を目的として いる。各々の発光波長の粒子に異なる抗体あるいは配列の異なる DNAを結合させ、 検査を行う対象と混合、あるいは、細胞中に注入する。このことにより、異なる対象を 同時に検出することが可能となり、検査時間短縮につながる。細胞イメージングの際 には、複数の対象に同時に染色が可能となり、観察の精度が高くなるというメリットが ある。
[0021] 以下、本発明とその構成要素等について詳細な説明をする。
[0022] (半導体ナノ粒子集合体）
本発明に係る「半導体ナノ粒子集合体」とは、ナノ粒子を含有する溶液、ナノ粒子 が分散したシート、ナノ粒子からなる粉体などを指す。
[0023] このような、ボーァ半径が小さぐ可視光発光サイズの小さな量子ドットでは、合成 条件のコントロールによるサイズごとのつくりわけが難しいという問題点がある。
[0024] 本発明の半導体ナノ粒子集合体は、同一化学組成であって、 1. 8〜4nmの粒径 範囲で粒径が異なり、かつ 380nm〜650nmの波長領域内における発光スペクトル の極大発光波長が異なる 3種類以上の半導体ナノ粒子からなる半導体ナノ粒子集合 体において、該半導体ナノ粒子集合体を構成する少なくとも 3種類以上の半導体ナ ノ粒子の極大発光波長相互の差異が 20〜； !OOnmの範囲内であることを特徴とする
〇
[0025] また、本発明の半導体ナノ粒子集合体おいて、該半導体ナノ粒子集合体を構成す る少なくとも 1種類の半導体ナノ粒子が、バルタ結晶のバンドギャップが 1. 3eV以下 である化学組成の化合物で形成されたことが好ましい。
[0026] また、該半導体ナノ粒子集合体を構成する少なくとも 1種類の半導体ナノ粒子の発 光スペクトルにおける極大発光波長の発光帯の半値幅が 50nm以下であることが好 ましい。更に、当該半値巾が 20nm以下であることが好ましい。
[0027] なお、上記半値巾を実現するために、本発明の半導体ナノ粒子集合体を構成する 半導体ナノ粒子は分級された粒子であることが好ましい。ここで、「分級」とは、粒子 粉体を粒子径 ·密度 ·形状などによって区別する操作をいう。本発明では、特に粒径 (サイズ）によって区別する操作をいう。
[0028] 分級の方法としては、種々の公知の方法を使用することができる力 高速液体クロ マトグラフィー（HPLC)法により、例えば、当該方法の一態様であるサイズ排除クロマ トグラフィ一法により分級することが好ましい。当該方法の具体的説明は、後述する実 施例において説明する。
[0029] (半導体ナノ粒子）
本発明の半導体ナノ粒子集合体を構成する半導体ナノ粒子については、本発明 者らが、鋭意検討の結果、本発明に係る半導体ナノ粒子（以下「量子ドット」ともいう。 )のサイズを小さくするためにはエキシトン ボーァ半径を小さくすることが必要であり 、そのためには、半導体ナノ粒子（量子ドット）を形成する半導体組成のバルタのバン ドギヤッフ Iが 1. 3eV以下であることが実現の条件になっていることを見出した。
[0030] この条件が満たされる組成で量子ドットを作製することで 5nm以下で可視光域を網 羅することが可能となる。
[0031] この範囲に入る半導体の組成は、たとえば Si, Ge, GaSb, InAs, InSbなどが挙げ られる。
[0032] また、 III— V族の半導体では A B C (A, Bは Al, Ga, Inより選ばれる 1種、 Cは N
， P, As, Sbより選ばれる 1種）の中で、組み合わせによりバンドギャップ値が 1 · 3eV 以下になるように xの値を調整したものも、好ましく用いることが出来る。
[0033] 粒径は 1. 8nmよりも小さくなると結晶構造を持ち得なくなり、量子ドットとしての機能 を果たさなくなる。
[0034] 〈半導体ナノ粒子の形成材料〉
本発明に係る半導体ナノ粒子の形成材料としては、上述の条件を満たすものであ ることが好ましいが、種々の半導体材料を用いて形成することができる。例えば、元 素の周期表の IV族、 II VI族、及び III V族の半導体化合物を用いることができる。
[0035] II— VI族の半導体の中では、特に、 MgS、 MgSe、 MgSe、 MgTe、 CaS、 CaSe、
CaTe、 SrS、 SrSe、 SrTe、 BaS、 BaSe、 BaTe、 ZnS、 ZnSe、 ZnTe、 CdS、 CdSe
、 HgS、 HgSe及び HgTeを挙げることができる。
[0036] m—V族の半導体の中では、 GaAs、 GaN、 GaPGaSb, InGaAs, InP、 InN、 InS b、 InAs, AlAs、 A1P、 AlSb及び A1Sが好ましい。
[0037] IV族の半導体の中では、 Ge、 Pb及び Siは特に適している。
[0038] 本発明においては、半導体ナノ粒子集合体を生体物質標識剤に適用するために は、半導体ナノ粒子をコア/シェル構造を有する粒子にすることが好ましい。この場 合、半導体ナノ粒子は半導体ナノ粒子からなるコア粒子と該コア粒子を被覆するシヱ ル層とで構成されるコア/シェル構造を有する所謂コア/シェル型半導体粒子であ つて、該コア粒子とシェル層の化学組成が相異するものであることが好ましい。
[0039] また、コア粒子の平均粒径は、；!〜 4nmとすることが好ましい。更には、 1. 8〜4nm にすること力 量子サイズ効果発現の観点から好ましい。なお、シェルを加えたコア/ シェル型半導体粒子の平均粒径としても、 4nm以下にすることが好ましい。生体 1分 子に対する標識並びに動態イメージングが可能となるからである。
[0040] 上記「平均粒径」は、高分解能透過型電子顕微鏡 (TEM)写真観察による方法や レーザー散乱法により測定できる。
[0041] 以下、コア粒子とシェル層について説明する。
[0042] 〈コア粒子〉
コア粒子に用いられる半導体材料としては、種々の半導体材料を用いることができ る。具体例としては、例えば、 MgS、 MgSe、 MgTe、 CaS、 CaSe、 CaTe、 SrS、 Sr Se、 SrTe、 BaS、 BaTe、 ZnS、 ZnSe、 ZnTe、 CdS、 CdSe、 CdTe、 GaAs、 GaP、 GaSb、 InGaAs, InP、 InN、 InSb、 InAs、 AlAs、 A1P、 AlSb、 A1S、 PbS、 PbSe、 Ge、 Si、又はこれらの混合物等が挙げられる。本発明において、特に好ましい半導 体材料は、 Siである。
[0043] なお、必要があれば Gaなどのドープ材料を極微量含んでもよい。
[0044] 〈シェル層〉
シェルに用いられる半導体材料としては、種々の半導体材料を用いることができる。 具体例としては、例えば、 ZnO、 ZnS、 ZnSe、 ZnTe、 CdO、 CdS、 CdSe、 CdTe、 MgS、 MgSe、 GaS、 GaN、 GaP、 GaAs、 GaSb、 InAs、 InN、 InP、 InSb、 AlAs、 A1N、 A1P、 AlSb、又はこれらの混合物等が挙げられる。
[0045] なお、好まし!/、シェルの材料としては、半導性ナノ結晶コアより高!/、バンドギャップ エネルギーを有する半導性材料が挙げられる。
半導性微粒子結晶コアより高!/、バンドギャップエネルギーを有することに加えて、シェ ルに適切な材料は、コア半導性ナノ結晶に関して、良好な伝導性および原子価バン ドオフセットを有するべきである。従って、伝導性バンドは、コア半導性ナノ結晶の伝 導性バンドよりも望ましくは高ぐそして原子価バンドは、コア半導性ナノ結晶の原子 価バンドよりも望ましくは低い。可視で (例えば、 Si、 Ge、 GaP、）または近赤外で（例 えば、 InP、 InN、 PbS、 PbSe)エネルギーを放出する半導性ナノ結晶コアについて 、紫外線領域でバンドギャップエネルギーを有する材料が使用され得る。具体例とし ては、例えば、 ZnS、 GaNおよびマグネシウムカルコゲニド（例えば、 MgS、 MgSeお よび MgTe)が挙げられる。
[0046] 本発明にお!/、て、特に好まし!/、半導体材料は、 SiO、 ZnSである。
[0047] 〈半導体ナノ粒子の製造方法〉
本発明の半導体ナノ粒子の製造については、従来公知の種々の方法を用いること ができる。
[0048] 液相法の製造方法としては、沈殿法である、共沈法、ゾルーゲル法、均一沈殿法、 還元法などがある。そのほかに、逆ミセル法、超臨界水熱合成法、などもナノ粒子を 作製する上で優れた方法である（例えば、特開 2002— 322468号、特開 2005— 23 9775号、特開平 10— 310770号、特開 2000— 104058号公報等を参照。）。
[0049] 気相法の製造方法としては、（1)対向する原料半導体を電極間で発生させた第一 の高温プラズマによって蒸発させ、減圧雰囲気中において無電極放電で発生させた 第二の高温プラズマ中に通過させる方法 (例えば特開平 6— 279015号公報参照。 ) 、 （2)電気化学的エッチングによって、原料半導体からなる陽極からナノ粒子を分離 •除去する方法（例えば特表 2003— 515459号公報参照。）、レーザーアブレーショ ン法 (例えば特開 2004— 356163号参照。）などが用いられる。また、原料ガスを低 圧状態で気相反応させて、粒子を含む粉末を合成する方法も、好ましく用いられる。
[0050] 本発明の半導体ナノ粒子の製造方法としては、特に液相法による製造方法が好ま しい。
[0051] なお、本発明に係る半導体ナノ粒子の粒径や発光強度の均一性を実現するため に、原材料の純度、合成濃度、合成温度と時間、粒子形成後のァニール温度 '時間 等の条件を最適化して、格子欠陥が少なく結晶性の高い半導体ナノ粒子とすること を要する。 [0052] (生体物質標識剤とバイオイメージング）
本発明の半導体ナノ粒子集合体は、生体物質蛍光標識剤に適応することができる 。また、標的 (追跡)物質を有する生細胞もしくは生体に本発明に係る生体物質標識 剤を添加することで、標的物質と結合もしくは吸着し、該結合体もしくは吸着体に所 定の波長の励起光を照射し、当該励起光に応じて蛍光半導体微粒子から発生する 所定の波長の蛍光を検出することにより、上記標的（追跡)物質の蛍光動態イメージ ングを行うことができる。すなわち、本発明に係る生体物質標識剤は、バイオイメージ ング法 (生体物質を構成する生体分子やその動的現象を可視化する技術手段）に利 用すること力 Sでさる。
[0053] 〔半導体ナノ粒子集合体の親水化処理〕
上述した半導体ナノ粒子集合体表面は、一般的には、疎水性であるため、例えば 生体物質標識剤として使用する場合は、このままでは水分散性が悪ぐ粒子が凝集 してしまう等の問題があるため、コア/シェル型半導体ナノ粒子のシェルの表面を親 水化処理することが好まし!/、。
[0054] 親水化処理の方法としては例えば、表面の親油性基をピリジン等で除去した後に 粒子表面に表面修飾剤を化学的および/または物理的に結合させる方法がある。 表面修飾剤としては、親水基として、カルボキシル基 'ァミノ基を持つものが好ましく 用いられ、具体的にはメルカプトプロピオン酸、メルカプトゥンデカン酸、アミノプロノ ンチオールなどがあげられる。具体的には、例えば、 Ge/GeO型ナノ粒子 10— 5gを メルカプトゥンデカン酸 0. 2gが溶解した純水 10ml中に分散させて、 40°C、 10分間 攪拌し、シェルの表面を処理することで無機ナノ粒子のシェルの表面をカルボキシル 基で修飾すること力 Sできる。
[0055] 〔生体物質標識剤〕
本発明に係る生体物質標識剤は、上述した親水化処理された半導体ナノ粒子と、 分子標識物質と有機分子を介して結合させて得られる。
[0056] 〈分子標識物質〉
本発明に係る生体物質標識剤は分子標識物質が目的とする生体物質と特異的に 結合および/または反応することにより、生体物質の標識が可能となる。 [0057] 該分子標識物質としては例えば、ヌクレオチド鎖、抗体、抗原およびシクロデキスト リン等が挙げられる。
[0058] 〈有機分子〉
本発明に係る生体物質標識剤は、親水化処理された半導体ナノ粒子と、分子標識 物質とが有機分子により結合されている。該有機分子としては半導体ナノ粒子と分子 標識物質とを結合できる有機分子であれば特に制限はないが、例えば、タンパク質 中でも、アルブミン、ミオグロビンおよびカゼイン等、またタンパク質の一種であるアビ ジンをビォチンと共に用いることも好適に用いられる。上記結合の態様としては特に 限定されず、共有結合、イオン結合、水素結合、配位結合、物理吸着および化学吸 着等が挙げられる。結合の安定性力 共有結合などの結合力の強い結合が好ましい
〇
[0059] 具体的には、半導体ナノ粒子をメルカプトゥンデカン酸で親水化処理した場合は、 有機分子としてアビジンおよびビォチンを用いることができる。この場合親水化処理さ れたナノ粒子のカルボキシル基はアビジンと好適に共有結合し、アビジンがさらにビ ォチンと選択的に結合し、ビォチンがさらに生体物質標識剤と結合することにより生 体物質標識剤となる。
実施例
[0060] 以下、実施例により本発明をより詳細に説明するが、本発明はこれに限定されるも のではない。
[0061] 実施例 1
モノシランガス 0. 71/min,アルゴンガス 19. 31/minの混合ガスを温度 820。C圧 力 50KPaで保持した石英ガラス製の反応管に導入し 0. 5時間反応させた。このとき 反応管の下部に粉末が形成した。反応管を冷却後、粉末 lmgに対して 100mlのデ カンを混合し、超音波分散を行いデカン中に Si半導体ナノ粒子を分散した。この溶 液をサンプル 1とする。
[0062] このナノ粒子をサイズ排除クロマトグラフィーにより分級を行い、カラムには、逆相 O DS (ォクタデシルシリル基 C— 18)カラムを用いて、ァセトニトリルを移動相とし、 0. lml/minの流速でカラムを通過させ、 365nmの吸収スペクトルを経時で測定したと ころ、 3minから 30minの範囲で吸収が確認された。
[0063] 6min、 10min、 15min、 20mi、 25min、 30min、の 6点で 30秒ずつサンプリング を ί亍レヽ、サンプノレ 1— 1、 1— 2、 1— 3、 1—4、 1— 5、 1—6を作製した。
[0064] 高分解能透過型電子顕微鏡 (ΤΕΜ)写真より、半導体ナノ粒子 100個について平 均粒径及び粒径分布を測定した。
[0065] ここで、平均粒径分布 =平均粒径の ± 50%以内に入っている粒子の個数0 /0と定 義する。
[0066] 日立分光光度計 F7000を用いて上記 6種類の半導体ナノ粒子それぞれについて 、励起波長 365nmでの発光スペクトルの測定を行い、極大発光波長強度の比較を 行った。
[0067] XPSにより組成を確認したところ、 Siであることがわ力 た。バルク Siのバンドギヤッ プ値は、 1. 12eVである。
[0068] [表 1]
Figure imgf000011_0001
[0069] 以上のサンプル;!—；！〜 1—6の中から 3種類以上を選択し、混合したものが本発明 の半導体ナノ粒子集合体となる。
[0070] 比較例 1
セレン化トリオクチルホスフィン（6. 15g、 7. 5mM)および酸化トリオクチルホスフィ ン（19· 33g、 50mM)を、三口フラスコ中に 300°Cに調整した。激しく攪拌を行った 状態で、酢酸カドミウム二水和物（1 · 97g、 7. 5mM)を速やかに注入し、その後、温 度を 250°Cにたもったまま、 5時間攪拌を fiつた。
[0071] 室温まで冷却した後、エタノールを加えて遠心分離を行い、上澄みを除去した後沈 殿物をデカンに再分散し、 CdSeナノ粒子溶液であるサンプル 2を得た。
[0072] サンプル 2をサイズ排除クロマトグラフィーにより分級を行い、カラムには、逆相〇D S (ォクタデシルシリル基 C— 18)カラムを用いて、ァセトニトリルを移動相とし、 0. 05 ml/minの流速でカラムを通過させ、 365nmの吸収スペクトルを経時で測定したと ころ、 lminから 20minの範囲で吸収が確認された。
[0073] 10min、 15min、 20min、の 3点で 15秒ずつサンプリングを行い、サンプル 2— 1、
2— 2、 2— 3を作製した。
[0074] 高分解能 TEM写真より、ナノ粒子 100個について平均粒径及び粒径分布を測定 した。
[0075] ここで、平均粒径分布 =平均粒径の ± 50%以内に入っている粒子の個数0 /0と定 義する。
[0076] 日立分光光度計 F7000を用いて上記 3種類のナノ粒子それぞれについて、励起 波長 365nmでの発光スペクトルの測定を行い、極大発光波長における発光強度の 比較を行った。
[0077] XPSにより組成を確認したところ、 CdSeであることがわかった。バルタ CdSeのバン ドギャップ値は、 1. 74eVである。
[0078] [表 2]
Figure imgf000012_0001
[0079] このようにバンドギャップ力 S、本発明範囲外の CdSeでは、 4nm以下のサイズで可 視光域発光を得ることが出来ないことがわかる。
[0080] 実施例 2
実施例 1において作製した各種 Si半導体ナノ粒子をメルカプトゥンデカン酸 0. 2g を溶解した 10ml純水中に 1 X 10— 5gを再分散させ、 40°C、 10分間攪拌することで表 面が親水化処理された各種ナノ粒子を得た。
[0081] その後、表面が親水化処理された各種ナノ粒子の水溶液それぞれにアビジン 25m gを添加し 40°Cで 10分間攪拌を行い、アビジンコンジュゲートナノ粒子を作製した。
[0082] 得られたアビジンコンジュゲートナノ粒子溶液にビォチン化された塩基配列が既知 であるオリゴヌクレオチドを混合攪拌し、ナノ粒子でラベリングされたオリゴヌクレオチ ドを作製した。
[0083] さまざまな塩基配列を持つオリゴヌクレオチドを固定化した DNAチップ上に上記の ラベリングしたオリゴヌクレオチドを滴下 ·洗浄したところ、ラベリングされたオリゴヌタレ ォチドと相補的な塩基配列をもつオリゴヌクレオチドのスポットのみが紫外線照射によ り半導体ナノ粒子の粒径依存して異なる色の発光をすることが確認された。
[0084] このことより、本発明に係る半導体ナノ粒子でのオリゴヌクレオチドのラベリングが可 倉なことを確言忍すること力 Sできた。

Claims

請求の範囲
[1] 同一化学組成であって、 1. 8〜4nmの粒径範囲で粒径が異なり、かつ発光スぺタト ルにおける 380nm〜650nmの波長領域内の極大発光波長が異なる 3種類以上の 半導体ナノ粒子からなる半導体ナノ粒子集合体にぉレ、て、該半導体ナノ粒子集合体 を構成する少なくとも 3種類以上の半導体ナノ粒子の極大発光波長相互の差異が 2 0〜 1 OOnmの範囲内であることを特徴とする半導体ナノ粒子集合体。
[2] 請求の範囲第 1項に記載の半導体ナノ粒子集合体において、該半導体ナノ粒子集 合体を構成する少なくとも 1種類の半導体ナノ粒子力、バルタ結晶のバンドギャップ が 1. 3eV以下である化学組成の化合物で形成されたことを特徴とする半導体ナノ粒 子集合体。
[3] 請求の範囲第 1項又は第 2項に記載の半導体ナノ粒子集合体において、該半導体 ナノ粒子集合体を構成する少なくとも 1種類の半導体ナノ粒子の発光スペクトルにお ける極大発光波長の発光帯の半値幅が 50nm以下であることを特徴とする半導体ナ ノ粒子集合体。
[4] 請求の範囲第 1項乃至第 3項のいずれか 1項に記載の半導体ナノ粒子集合体にお いて、該半導体ナノ粒子集合体を構成する少なくとも 1種類の半導体ナノ粒子の発 光スペクトルにおける極大発光波長の発光帯の半値幅が 20nm以下であることを特 徴とする半導体ナノ粒子集合体。
[5] 請求の範囲第 1項乃至第 4項のいずれか 1項に記載の半導体ナノ粒子集合体にお
Vヽて、該半導体ナノ粒子集合体を構成する半導体ナノ粒子が分級された粒子である ことを特徴とする半導体ナノ粒子集合体。
[6] 前記分級が高速液体クロマトグラフィー法を用いてなされたことを特徴とする請求の 範囲第 5項に記載の半導体ナノ粒子集合体。
[7] 請求の範囲第 1項乃至第 4項のいずれか 1項に記載の半導体ナノ粒子集合体の製 造方法であって、半導体ナノ粒子を分級する工程を含むことを特徴とする半導体ナノ 粒子集合体の製造方法。
[8] 前記分級する工程において高速液体クロマトグラフィー法を用いることを特徴とする 請求の範囲第 7項に記載の半導体ナノ粒子集合体の製造方法。 請求の範囲第 1項乃至第 6項のいずれ力、 1項に記載の半導体ナノ粒子集合体と分子 標識物質とを有機分子を介して結合させたことを特徴とする生体物質標識剤。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008123291A1 (ja) * 2007-03-29 2008-10-16 Konica Minolta Medical & Graphic, Inc. 蛍光体標識化合物
WO2010004774A1 (ja) * 2008-07-07 2010-01-14 コニカミノルタエムジー株式会社 シリコンナノ粒子懸濁液、及び生体物質標識剤
WO2012029342A1 (ja) * 2010-08-30 2012-03-08 コニカミノルタエムジー株式会社 組織染色方法、組織評価方法および生体物質検出方法
WO2015012374A1 (ja) * 2013-07-26 2015-01-29 コニカミノルタ株式会社 病理染色液

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE102012015579A1 (de) 2012-08-08 2014-02-13 Premium Aerotec Gmbh Oberflächenschutzverfahren für Bauteile aus Aluminium bzw. Aluminiumlegierungen mit einem Nachweis einer unzulässigen Überhitzung

Citations (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH06279015A (ja) 1993-03-30 1994-10-04 Matsushita Electric Ind Co Ltd シリコン超微粒子の製造方法
JPH10310770A (ja) 1997-03-10 1998-11-24 Sony Corp 発光体の製造方法
JP2000104058A (ja) 1998-09-28 2000-04-11 Sony Corp 発光体の製造方法
JP2002322468A (ja) 2001-02-07 2002-11-08 Agfa Gevaert Nv 改良されたＺｎＳ：Ｍｎ蛍燐光体の製造
JP2003515459A (ja) 1999-10-22 2003-05-07 ザ ボード オブ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティ オブ イリノイ シリコンナノ粒子およびその製造方法
JP2003524147A (ja) 1998-09-18 2003-08-12 マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー 半導体ナノ結晶の生物学的用途
JP2004356163A (ja) 2003-05-27 2004-12-16 Toyota Central Res & Dev Lab Inc シリコン系薄膜及び光電変換素子、並びにシリコン系薄膜の製造方法
WO2005001889A2 (en) * 2003-05-07 2005-01-06 Indiana University Research & Technology Corporation Alloyed semiconductor quantum dots and concentration-gradient alloyed quantum dots, series comprising the same and methods related thereto
JP2005508493A (ja) * 2001-06-28 2005-03-31 アドヴァンスト リサーチ アンド テクノロジー インスティテュート、インコーポレイティッド 多色量子ドット標識ビーズおよびそのコンジュゲートの製造方法
JP2005172429A (ja) 2003-12-05 2005-06-30 Sony Corp 生体物質蛍光標識剤及び生体物質蛍光標識方法、並びにバイオアッセイ方法及び装置
JP2005189237A (ja) * 2003-12-05 2005-07-14 Sekisui Chem Co Ltd 光学的測定方法
JP2005239775A (ja) 2004-02-24 2005-09-08 Doshisha 蛍光体およびその製造方法

Patent Citations (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH06279015A (ja) 1993-03-30 1994-10-04 Matsushita Electric Ind Co Ltd シリコン超微粒子の製造方法
JPH10310770A (ja) 1997-03-10 1998-11-24 Sony Corp 発光体の製造方法
JP2003524147A (ja) 1998-09-18 2003-08-12 マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー 半導体ナノ結晶の生物学的用途
JP2000104058A (ja) 1998-09-28 2000-04-11 Sony Corp 発光体の製造方法
JP2003515459A (ja) 1999-10-22 2003-05-07 ザ ボード オブ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティ オブ イリノイ シリコンナノ粒子およびその製造方法
JP2002322468A (ja) 2001-02-07 2002-11-08 Agfa Gevaert Nv 改良されたＺｎＳ：Ｍｎ蛍燐光体の製造
JP2005508493A (ja) * 2001-06-28 2005-03-31 アドヴァンスト リサーチ アンド テクノロジー インスティテュート、インコーポレイティッド 多色量子ドット標識ビーズおよびそのコンジュゲートの製造方法
WO2005001889A2 (en) * 2003-05-07 2005-01-06 Indiana University Research & Technology Corporation Alloyed semiconductor quantum dots and concentration-gradient alloyed quantum dots, series comprising the same and methods related thereto
JP2004356163A (ja) 2003-05-27 2004-12-16 Toyota Central Res & Dev Lab Inc シリコン系薄膜及び光電変換素子、並びにシリコン系薄膜の製造方法
JP2005172429A (ja) 2003-12-05 2005-06-30 Sony Corp 生体物質蛍光標識剤及び生体物質蛍光標識方法、並びにバイオアッセイ方法及び装置
JP2005189237A (ja) * 2003-12-05 2005-07-14 Sekisui Chem Co Ltd 光学的測定方法
JP2005239775A (ja) 2004-02-24 2005-09-08 Doshisha 蛍光体およびその製造方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BRUCHEZ M. ET AL.: "Semiconductor nanocrystals as fluorescent biological labels", SCIENCE, vol. 281, 1998, pages 2013 - 2016, XP002125872 *
KISHINO K. ET AL.: "II-VI semiconductors on InP for green -yellow emitters", IEEE J. SCI. TOP. QUANTUM ELECTRON., vol. 8, no. 4, 2002, pages 773 - 786, XP001143534 *
NKUM R.K. ET AL.: "Band gap energies of semiconducting sulphides and selenides", MATER. SCI. ENG. B., vol. B55, no. 1/2, 1998, pages 102 - 108, XP004142056 *
WILCOXON J.P. ET AL.: "Chemical and optical properties of CdSe and CdSe/ZnS nanocrystals investigated using high-performance liquid chromatography", J. PHYS. CHEM. B., vol. 109, 2005, pages 13461 - 13471, XP003021808 *

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008123291A1 (ja) * 2007-03-29 2008-10-16 Konica Minolta Medical & Graphic, Inc. 蛍光体標識化合物
WO2010004774A1 (ja) * 2008-07-07 2010-01-14 コニカミノルタエムジー株式会社 シリコンナノ粒子懸濁液、及び生体物質標識剤
WO2012029342A1 (ja) * 2010-08-30 2012-03-08 コニカミノルタエムジー株式会社 組織染色方法、組織評価方法および生体物質検出方法
US10627325B2 (en) 2010-08-30 2020-04-21 Konica Minolta, Inc. Fluorescent marker for tissue staining containing phosphor-containing nanoparticle and method using same
US10809167B2 (en) 2010-08-30 2020-10-20 Konica Minolta, Inc. Tissue staining method with staining agent containing particle holding plural phosphors
WO2015012374A1 (ja) * 2013-07-26 2015-01-29 コニカミノルタ株式会社 病理染色液
JPWO2015012374A1 (ja) * 2013-07-26 2017-03-02 コニカミノルタ株式会社 病理染色液

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