WO2005040099A1

WO2005040099A1 - ３−置換−(２ｒ，３ｒ)−２−保護されたアミノ−３−ヒドロキシプロピオン酸誘導体の製造方法およびその中間体

Info

Publication number: WO2005040099A1
Application number: PCT/JP2004/016070
Authority: WO
Inventors: Hiroki Tanaka; Kazuyoshi Nishikawa; Ryota Hamasaki; Hirofumi Oda; Toshinori Okano; Takanori Nakajima
Original assignee: Ono Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Ono Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2003-10-23
Filing date: 2004-10-22
Publication date: 2005-05-06
Anticipated expiration: 2006-04-23
Also published as: JPWO2005040099A1

Abstract

本発明は、3-置換-(2S*,3R*)-2,3-エポキシプロピオン酸を用いた以下の(1)～(3)の3-置換-(2R,3R)-2-保護されたアミノ-3-ヒドロキシプロピオン酸誘導体の効率的な製造方法に関する。(1)3-置換-(2S*,3R*)-2,3-エポキシプロピオン酸を光学活性アミンを用いて塩とした後、光学分割し、次いでアンモニアを用いてエポキシ基を開環した後、保護基を導入する反応に付す方法、(2)3-置換-(2S*,3R*)-2,3-エポキシプロピオン酸を光学活性アミンと反応させてエポキシ基を開環し、光学分割し、次いで脱保護反応に付した後、保護基を導入する反応に付す方法、(3)3-置換-(2S*,3R*)-2,3-エポキシプロピオン酸をエステル化した後、擬似移動床式クロマトグラフィーにより光学分割し、次いでアンモニアを用いて、エポキシ基を開環した後、保護基を導入する反応に付す方法。

Description

3—置換一（2R， 3 R) 一 2—保護されたアミノー 3—ヒドロキシプロピォン酸誘導体の製造方法およびその中間体

技術分野

本発明は医薬品の原料として有用な 3—置換一（2R， 3R) 一 2—保護明

されたアミノー 3—ヒドロキシプロピオン酸誘導体の製造方法およびその製田

造中間体化合物に関する。

背景技術

3_置換一（2R， 3R) _2—保護されたアミノー 3—ヒドロキシプロピオン酸誘導体は、医薬品として有用な中間体である。例えば、（2R， 3 R) -2- (N— tーブチノレオキシカノレポ二ノレ）ァミノ一 3—シクロへキシルー 3—ヒドロキシプロピオン酸は、抗エイズ薬原料として特開 2003 - 55358 号に記載されている化合物である。この文献には、（2 S, 3R) —2, 3 一エポキシ一 3—シク口へキシルプロピオン酸をベンジルァミンで開環した後、加水素分解して（2R， 3 R) —2—アミノー 3—シクロへキシルー 3 ーヒドロキシプロピオン酸とし、 t—プチルォキシカルボニル化する（2R, 3 R) - 2 - (N— t—ブチルォキシカルボニル）アミノー 3—シクロへキシルー 3—ヒドロキシプロピオン酸の製造方法が記載されている。

また、（2R， 3 R) — 2—ァミノ一 3—シクロへキシル一 3—ヒドロキシプロピオン酸については、特開平 06- 165693号に、ラセミーエリスロー |3 —ヒドロキシアミノ酸に、 L—ァロスレオニンアルドラーゼを作用させる D —エリス口一 —ヒドロキシアミノ酸の製造法が知られている。

これらの重要な中間体である（2 S， 3 R) 一 2， 3—エポキシ一 3—シクロへキシルプロピオン酸については、先の特開 2003-55358号に 3—シク口へキシルー 2—プロペノールを不斉エポキシ化して（2R, 3 R) -2, 3—エポキシ一 3—シク口へキシルプロパノールを得、それを酸化して (2 S, 3 R) 一 2， 3—エポキシ一 3—シクロへキシルプロピオン酸とする方法が知られている。

しかし、この方法は、不斉エポキシ化工程においてハロゲン系の溶剤を使用する必要があり、工業レベルで（2R， 3 R) -2- (N_ t—ブチルォキシカルボニル）ァミノ一 3—シクロへキシル一 3—ヒドロキシプロピオン酸を得る手段としては満足できるものではない。発明の開示

医薬品またはその中間体のような有用物質を工業レベルで効率的に生産するには、個々の反応のみならず、原料から目的物質を得るまでの総合的な効率性が求められる。本発明は 3—置換— （2R, 3R) 一 2—保護されたァミノ一 3—ヒドロキシプロピオン酸誘導体、特に（2R， 3 R) 一 2— （N ― t一プチノレォキシカノレポ二ノレ）ァミノ— 3—シクロへキシノレ一 3—ヒドロキシプロピオン酸の工業レベルでの高い生産性を有する製造方法を提供することを課題とするものである。

すなわち、本発明は、

1. 3—置換一トランス一 2 _プロペン酸をタングステン酸またはその塩の存在下、過酸化水素で処理して、 3—置換一（2 S*， 3R*) _2， 3—ェポキシプロピオン酸とし、次いで

(1) (R) — 1—フエニルェチルァミン、

(2) (R) - 1 - (4—メチルフエニル) ェチルァミン、

(3) ( + ) —シス一 N—べンジルー 2— (ヒドロキシメチル) ーシク口へキシノレアミン、 (4) (R) - β一メチルフエニルェチルァミン、

(5) (R) 一 Ν—ペンジノレー 1一フエニノレエチルァミン、

(6) ( 1 R, 2 S) ― 2—アミノ— 1， 2—ジフエニルエタノール、または

(7) (R) — 1— （1一ナフチル）ェチルァミン

カら選択される光学活性アミンを用いて塩とした後、光学分割し、 3—置換 - (2 S, 3R) 一 2， 3—エポキシプロピオン酸の光学活性アミン塩とし、酸処理して 3—置換 _ (2 S， 3R) — 2, 3—エポキシプロピオン酸を得、次いでアンモニアを用いてエポキシ基を開環した後、保護基を導入する反応に付すことを特徴とする、 3—置換一（2R， 3R) —2—保護されたアミノー 3—ヒドロキシプロピオン酸誘導体の製造方法、

2. 3—置換一トランス一 2—プロペン酸をタングステン酸またはその塩の存在下、過酸化水素で処理して、 3_置換一（2 S*， 3 R*) 一 2, 3—ェポキシプロピオン酸とし、次いで

(1) (R) 一 1一フエニルェチルァミン、

(2) (R) - 1 - (4—メチルフエニル）ェチルァミン、

(3) ( + ) —シス一N—ベンジル一 2— （ヒドロキシメチル）一シクロへキシノレァミン、

(4) (R) — ]3—メチルフエニルェチルァミン、

(5) (R) —N—ベンジル— 1—フエニルェチルァミン、

(6) (1 R, 2 S) — 2—ァミノ一 1, 2—ジフエ-ルエタノール、または

(7) (R) — 1— (1—ナフチル）ェチルァミン

力ら選択される光学活性アミンを用いて、塩とした後、光学分割することを特徴とする、 3—置換一（2 S, 3 R) 一 2， 3—エポキシプロピオン酸ィ匕合物と光学活性ァミンとの塩の製造方法、 3. 3—置換一（2 S， 3 R) 一 2， 3—エポキシプロピオン酸とアンモニァを用いて、エポキシ基を開環し、次いで保護基を導入する反応に付すことを特徴とする、 3—置換一（2R, 3R) —2—保護されたアミノー 3—ヒドロキシプロピオン酸誘導体の製造方法、

4. 塩が（2 S， 3 R) 一 3—シクロへキシルー 2, 3—エポキシプロピオン酸（R) — 1一（1一ナフチル）ェチルァミン塩である前記 1、 2または 3記載の製造方法、

5. 3—置換一（2 S， 3R) -2, 3—エポキシプロピオン酸化合物と (1) (R) 一 1一フエニルェチノレアミン、

(2) (R) 一 1一（4—メチルフエニル）ェチルァミン、

(3) ( + ) 一シス一N—ペンジノレー 2— (ヒドロキシメチノレ) —シクロへキシルァミン、

(4) (R) 一 β—メチルフェニノレエチノレアミン、

(5) (R) 一 Ν—ベンジル一 1一フエ-ルェチルァミン、

(6) ( 1 R, 2 S) 一 2—ァミノ一 1， 2—ジフエニルエタノール、または

(7) (R) — 1— (1—ナフチノレ) ェチルァミン

から選択される光学活性ァミンとの塩、

6. 3—置換一（2 S, 3 R) 一 2， 3—エポキシプロピオン酸化合物の 3 位の置換基が、置換基を有していてもよい環状基または置換基を有していてもよレ、脂肪族炭化水素基である前記 5記載の塩、

7. 3—置換一（2 S, 3 R) 一 2， 3—エポキシプロピオン酸化合物の 3 位の置換基が、 1一メチルェチル基、 1—ェチルプロピル基、シクロペンチル基、シクロへキシル基、シクロへプチル基、 1— 1ーシクロペンテン一 4 ーィル基、テトラヒドロピラン一 4—ィル基である前記 6記載の塩、

8. (2 S, 3 R) 一 3—シクロへキシル一 2, 3—エポキシプロピオン酸 (R) - 1 - (1一ナフチル）ェチルァミン塩である前記 7記載の塩、 9. 3—置換一トランス一 2—プロペン酸をタングステン酸またはその塩の存在下、過酸化水素で処理して、 3—置換— （2 S*， 3R*) -2, 3—ェポキシプロピオン酸とし、次いで

(1) (R) — 1一フエニルェチルァミン、

(2) (R) - 1 - (4—メチルフエニル) ェチルァミン、

(3) (S) 一 N， N—ジメチル一 1 _フエ-ルェチルァミン、

(4) ( + ) —シス一N—べンジルー 2— (ヒドロキシメチル) ーシクロへキシルァミン、

(5) (R) — /3—メチルフエニルェチルァミン、

(6) (R) 一 N—べンジノレ _ 1一フエニノレエチノレアミン、

(7) (1 R, 2 S) _2—ァミノ一1, 2—ジフエニルエタノール、または

(8) (R) — 1— (1—ナフチノレ) ェチルァミン

から選択される光学活性ァミンと反応させてエポキシ基を開環し、光学分割し、一般式（I)

OH

r₁/^^C00H (I)

R²

(式中、 R¹は置換基を有していてもよい環状基または置換基を有していてもよい脂肪族炭化水素基を表わし、 R²は保護されたァミノ基であり、（R) - 1一フエニルェチルァミノ基、 (R) 一 1— (4一メチルフエニル）ェチルアミノ基、 (S) -N, N -ジメチル— 1—フエニルェチルァミノ基、 (+ ) —シス一 N—ベンジル一 2— (ヒドロキシメチル) ーシク口へキシルァミノ基、 (R) — j3—メチルフエニルェチルァミノ基、 (R) 一 N—ベンジルー 1一フエニルェチルァミノ基、 ( 1 R, 2 S) 一 1, 2—ジフエニルエタノール一 2—ァミノ基、または（R) - 1 - (1—ナフチル）ェチルアミノ基を表わす。）

で示される化合物とし、次いで脱保護反応に付した後、保護基を導入する反応に付すことを特徴とする、 3—置換一（2R， 3R) —2—保護されたァミノー 3—ヒドロキシプロピオン酸誘導体の製造方法、

10. 3—置換一トランス一 2—プロペン酸をタングステン酸またはその塩の存在下、過酸化水素で処理して、 3—置換一（2 S*， 3R*) 一 2， 3- エポキシプロピオン酸とし、次いで

(1) (R) 一 1—フエニルェチルァミン、

(2) (R) - 1 - (4—メチルフエニル）ェチルァミン、

(3) (S) — N, N—ジメチル一 1—フエニルェチルァミン、

(4) ( + ) 一シス一 N—ベンジルー 2一 (ヒドロキシメチノレ) —シクロへキシノレアミン、

(5) (R) — 一メチルフエニルェチルァミン、

(6) (R) 一 N—ベンジル一 1—フエニルェチルァミン、

(7) (1 R, 2 S) 一 2—ァミノ一 1, 2—ジフエ二ルエタノール、または

(8) (R) — 1一（1一ナフチル）ェチルァミン

から選択される光学活性ァミンと反応させてエポキシ基を開環し、光学分割することを特徴とする一般式（I)

(式中の記号は請求項 9と同じ意味を表わす。）

で示される化合物の製造方法、

1 1. 一般式（ I ) OH

_Ri^^^C00H (I)

2

(式中の記号は請求項 9と同じ意味を表わす。） '

で示される化合物を脱保護反応に付し、次いで保護基を導入する反応に付すことを特徴とする、 3_置換一（2R， 3R) 一 2—保護されたアミノー 3 ーヒドロキシプロピオン酸誘導体の製造方法、

12. 一般式（ I )

OH

_R1/^ ^C00H (I)

2

(式中、 R¹は置換基を有していてもよい環状基または置換基を有していてもよい脂肪族炭化水素基を表わし、 R²は保護されたァミノ基であり、（R) - 1—フエニルェチルァミノ基、 (R) - 1 - (4—メチルフエニル）ェチルアミノ基、 (S) -N, N—ジメチル一 1—フエニルェチルァミノ基、 (+ ) 一シス一 N—ベンジノレ一 2— (ヒドロキシメチノレ) —シクロへキシノレアミノ基、（R) _i3—メチルフエニルェチルァミノ基、（R) — N—ベンジル一 1一フエ-ルェチルァミノ基、（1 R， 2 S) — 1, 2—ジフエニルエタノールー 2—アミノ基、または（R) — 1一（1一ナフチル）ェチルアミノ基を表わす。 )

で示される化合物、

1 3. R²が（R) _ 1—フエ-ルェチルァミノ基である前記 1 1記載の化合物、

14. 化合物が（2R, 3 R) 一 2— ( (R) — 1—フエニルェチル）アミノー 3—シクロへキシル一3—ヒドロキシプロピオン酸である前記 1 3記載の化合物、 1 5. 3—置換一トランス一 2—プロペン酸をタングステン酸またはその塩の存在下、過酸化水素で処理して、 3—置換一（2 S*， 3R*) -2, 3- エポキシプロピオン酸とし、次いで必要に応じてエステル化した後、クロマトグラフィ一により、光学分割し、 3—置換一（2 S， 3R) — 2, 3—ェポキシプロピオン酸誘導体とし、次いでアンモニアを用いて、エポキシ基を開環し、次いで保護基を導入する反応に付すことを特徴とする、 3—置換一 (2 R, 3 R) —2—保護されたァミノ _ 3—ヒドロキシプロピオン酸誘導体の製造方法、

16. 3一置換一トランス一 2—プロペン酸をタングステン酸またはその塩の存在下、過酸化水素で処理して、 3—置換一（2 S*, 3 R*) 一 2， 3 - エポキシプロピオン酸とし、次いで必要に応じてエステルイ匕した後、クロマトグラフィ一により、光学分割し、 3—置換一（2R, 3 S) 一 2， 3—ェポキシプロピオン酸誘導体とし、次いでアンモニアを用いて、エポキシ基を開環し、次いで保護基を導入する反応に付すことを特徴とする、 3—置換一 (2 S, 3 S) — 2—保護されたァミノ一 3—ヒドロキシプロピオン酸誘導体の製造方法、

1 7. 2位のアミノ基の保護基が t一ブトキシカルボニル基またはべンジルォキシカルボニル基である前記 1、 3、 9、 1 1、 15または 16記載の製造方法、

18. 2位のアミノ基の保護基が t—ブトキシカルボニル基である前記 1、 3、 9、 1 1、 15または 16記載の製造方法、および

1 9. 3位の置換基が 1—メチルェチル基、 1一ェチルプロピル基、シク口ペンチル基、シクロへキシル基、シクロへプチル基、 1—シクロペンテン一 4—ィル基、テトラヒドロピラン一 4—ィル基である前記 1〜 3、 9〜： L 1、 1 5〜 1 7のいずれかに記載の製造方法に関する。

本発明の 3位の置換基としては、いずれの置換基であってもよく、特に限定されない。例えば、置換基を有していてもよい環状基または置換基を有していてもよ!/、脂肪族炭化水素基等が挙げられる。

本明細書中、「置換基を有していてもよい環状基」における「環状基」としては、例えば、炭素環または複素環が挙げられる。

炭素環としては、例えば C 3〜15の単環、二環または三環式炭素環、スピロ結合した二環式炭素環または架橋した二環式炭素環等が挙げられる。 C 3〜1 5の単環、二環または三環式炭素環には、 C 3〜1 5の単環、二環または三環式炭素環不飽和炭素環、その一部または全部が飽和されている炭素環が含まれる。例えば、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタン、シクロへキサン、シクロヘプタン、シクロオクタン、シクロノナン、シクロデカン、シクロウンデカン、シク口ドデカン、シクロトリデカン、シクロテトラデカン、シクロペンタデカン、シク口ペンテン、シク口へキセン、シク口ヘプテン、シクロオタテン、シク口ペンタジェン、シク口へキサジェン、シクロへプタジェン、シク口才クタジェン、ベンゼン、ペンタレン、パーヒドロペンタレン、ァズレン、パーヒドロアズレン、インデン、パーヒドロインデン、インダン、ナフタレン、ジヒドロナフタレン、テトラヒドロナフタレン、パーヒドロナフタレン、ヘプタレン、パーヒドロへプタレン、ビフエ二レン、 a s—インダセン、 sーィンダセン、ァセナフチレン、ァセナフテン、フノレオレン、フエナレン、フエナントレン、アントラセン、スピロ [4. 4] ノナン、スピロ [4. 5] デカン、スピロ [5. 5] ゥンデカン、ビシクロ [2. 2. 1 ] ヘプタン、ビシクロ [2. 2. 1] ヘプター 2—ェン、ビシクロ [3. 1. 1] ヘプタン、ビシクロ [3. 1. 1] ヘプター 2—ェン、ビシクロ [3. 2. 1] オクタン、ビシクロ [2. 2. 2] オクタン、ビシクロ [2. 2. 2] オタター 2—ェン、ァダマンタン、ノルァダマンタン環等が挙げられる。

複素環としては、例えば酸素原子、窒素原子および/または硫黄原子から選択される 1〜 5個のへテロ原子を含む、 3〜1 5員の単環、二環または三環式複素環、スピロ結合した二環式複素環または架橋した二環式複素環等が挙げられる。酸素原子、窒素原子および Zまたは硫黄原子から選択される 1 〜5個のへテロ原子を含む 3〜1 5員の単環、二環または三環式複素環には、酸素原子、窒素原子および/または硫黄原子から選択される 1〜 5個のへテ口原子を含む 3〜1 5員の単環、二環または三環式不飽和複素環、その一部または全部が飽和されている複素環が含まれる。例えばピロール、イミダゾール、トリアゾール、テトラゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、ァゼピン、ジァゼピン、フラン、ピラン、ォキセピン、チォフェン、チォピラン、チェピン、ォキサゾール、ィソォキサゾール、チアゾール、ィソチアゾール、フラザン、ォキサジァゾール、才キサジン、才キサジァジン、ォキサゼピン、ォキサジァゼピン、チアジアゾール、チアジン、チアジアジン、チアゼピン、チアジアゼピン、ィンドール、イソインドール、インドリジン、ベンゾフラン、イソべンゾフラン、ベンゾチォフエン、イソベンゾチォフェン、ジチアナフタレン、ィンダゾール、キノリン、イソキノリン、キノリジン、プリン、フタラジン、プテリジン、ナフチリジン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、ベンゾォキサゾ一/レ、ベンゾチアゾール、ベンゾイミダゾーノレ、クロメン、ベンゾ才キセピン、ベンゾ才キサゼピン、ベンゾォキサジァゼピン、ベンゾチェピン、ベンゾチアゼピン、ベンゾチアジアゼピン、ベンゾァゼピン、ベンゾジァゼピン、ベンゾフラザン、ベンゾチアジアゾーノレ、ベンゾトリァゾーノレ、カノレバゾーノレ、 ]3—力ノレポリン、ァクリジン、フエナジン、ジベンゾフラン、キサンテン、ジベンゾチォフェン、フエノチアジン、フエノキサジン、フノキサチイン、チアンスレン、フエナントリジン、フエナント口リン、ペリミジン、アジリジン、ァゼチジン、ピロリン、ピロリジン、ィミダゾリン、イミダゾリジン、トリァゾリン、トリァゾリジン、テトラゾリン、テトラゾリジン、ピラゾリン、ビラゾリジン、ジヒドロピリジン、テトラヒドロピリジン、ピぺリジン、ジヒドロビラジン、テトラヒドロピラジン、ピぺラジン、ジヒドロピリミジン、テトラヒドロピリミジン、パーヒドロピリミジン、ジヒドロピリダジン、テトラヒドロピリダジン、パーヒドロピリダジン、ジヒドロアゼピン、テトラヒドロアゼピン、パーヒドロアゼピン、ジヒドロジァゼピン、テトラヒドロジァゼピン、パーヒドロジァゼピン、ォキシラン、ォキセタン、ジヒドロフラン、テトラヒドロフラン、ジヒドロピラン、テトラヒドロピラン、ジヒド口ォキセピン、テトラヒドロォキセピン、パーヒドロ才キセピン、チイラン、チェタン、ジヒドロチォフェン、テトラヒドロチォフェン、ジヒドロチォピラン、テトラヒドロチォピラン、ジヒドロチェピン、テトラヒドロチェピン、パーヒドロチェピン、ジヒドロォキサゾール、テトラヒドロォキサゾール（ォキサゾリジン）、ジヒドロイソォキサゾール、テトラヒドロイソォキサゾーノレ (ィソォキサゾリジン) 、ジヒドロチアゾール、テトラヒドロチアゾール (チアゾリジン）、ジヒドロイソチアゾール、テトラヒドロイソチアゾール (イソチアゾリジン）、ジヒドロフラザン、テトラヒドロフラザン、ジヒド口ォキサジァゾール、テトラヒドロォキサジァゾール（ォキサジァゾリジン）、ジヒドロォキサジン、テトラヒドロォキサジン、ジヒドロォキサジァジン、テトラヒドロォキサジァジン、ジヒドロォキサゼピン、テトラヒドロォキサゼピン、パーヒドロォキサゼピン、ジヒドロォキサジァゼピン、テトラヒド口ォキサジァゼピン、パーヒドロォキサジァゼピン、ジヒドロチアジアゾール、テトラヒドロチアジアゾール (チアジアゾリジン) 、ジヒドロチアジン、テトラヒドロチアジン、ジヒドロチアジアジン、テトラヒドロチアジアジン、ジヒドロチアゼピン、テトラヒドロチアゼピン、パーヒドロチアゼピン、ジヒドロチアジアゼピン、テトラヒドロチアジアゼピン、パーヒドロチアジアゼピン、モルホリン、チオモルホリン、ォキサチアン、インドリン、イソィンドリン、ジヒドロべンゾフラン、パーヒドロべンゾフラン、ジヒドロイソベンゾフラン、ノ、。ーヒドロイソべンゾフラン、ジヒドロべンゾチオフヱン、ノヽ。ーヒドロベンゾチォフェン、ジヒドロイソベンゾチォフェン、ノヽ。ーヒドロイソベンゾチォフェン、ジヒドロインダゾーノレ、ノーヒドロインダゾール、ジヒドロキノリン、テトラヒドロキノリン、パーヒドロキノリン、ジヒドロィソキノリン、テトラヒドロイソキノリン、パーヒドロイソキノリン、ジヒドロフタラジン、テトラヒドロフタラジン、パーヒドロフタラジン、ジヒド口ナフチリジン、テトラヒドロナフチリジン、パーヒドロナフチリジン、ジヒドロキノキサリン、テトラヒドロキノキサリン、パーヒドロキノキサリン、ジヒドロキナゾリン、テトラヒドロキナゾリン、パーヒドロキナゾリン、ジヒドロシンノリン、テトラヒドロシンノリン、パーヒドロシンノリン、ベンゾォキサチアン、ジヒドロべンゾォキサジン、ジヒドロべンゾチアジン、ピラジノモノレホリン、ジヒドロベンゾォキサゾーノレ、パーヒドロべンゾ才キサゾーノレ、ジヒドロべンゾチアゾーノレ、パーヒドロべンゾチアゾーノレ、ジヒド口べンゾイミダゾーノレ、ノーヒドロべンゾイミダゾーノレ、ジヒドロべンゾァゼピン、テトラヒドロベンゾァゼピン、ジヒドロべンゾジァゼピン、テトラヒドロべンゾジァゼピン、ベンゾジォキセパン、ジヒドロベンゾォキサゼピン、テトラヒドロべンゾォキサゼピン、ジヒドロカルバゾール、テトラヒドロカルバゾール、パーヒドロカルパゾール、ジヒドロアクリジン、テトラヒドロアクリジン、パーヒドロアクリジン、ジヒドロジべンゾフラン、ジヒドロジベンゾチォフェン、テトラヒドロジべンゾフラン、テトラヒドロジベンゾチォフェン、パーヒドロジべンゾフラン、パーヒドロジベンゾチォフェン、ジォキソラン、ジォキサン、ジチオラン、ジチアン、ジォキサインダン、ベンゾジォキサン、クロマン、ベンゾジチオラン、ベンゾジチアン、ァザスピ口 [4. 4] ノナン、ァザスピロ [4. 5] デカン、ァザスピロ [5.5] ゥンデカン、ァザビシクロ [2. 2. 1] ヘプタン、ァザビシクロ [3. 1. 1] ヘプタン、ァザビシクロ [3. 2. 1] オクタン、ァザビシクロ [2. 2 . 2 ] オクタン環等が挙げられる。

「置換基を有していてもよい脂肪族炭化水素基」における「脂肪族炭化水素基」としては、「直鎖状または分枝状の脂肪族炭化水素基」が挙げられ、「直鎖状または分枝状の脂肪族炭化水素基」としては、「直鎖状または分枝状のアルキル基、ナルケニル基またはアルキニル基」が挙げられる。「直鎖状または分枝状のアルキル基」としては、例えばメチル、ェチル、プロピル、イソプロピノレ、ブチル、イソプチノレ、 sec—ブチル、 tert—ブチノレ、ペンチノレ、イソペンチノレ、ネオペンチノレ、 1—ェチノレプロピノレ、へキシノレ、へプチル、ォクチル、ノニル、デシル等の直鎖状または分枝状 C 1〜 1 0アルキル基等が挙げられる。「直鎖状または分枝状のアルケニル基」としては、 ί列えばェテニノレ、プロぺニノレ、プテニノレ、ブタジェニノレ、ペンテ二ノレ、ペンタジェェノレ、へキセニノレ、へキサジェニノレ、ヘプテニノレ、ヘプタジェ二ノレ、オタテュル、ォクタジェニル、ノネニル、ノナジェ -ル、デセ -ル、デカジェニル基等の直鎖状または分枝状 C 2〜 1 0アルケニル基等が挙げられる。「直鎖状または分枝状のアルキニル基」としては、例えばェチニル、プロピニル、ブチニル、ブタジィニル、ペンチュル、ペンタジィニル、へキシュル、へキサジィニル、へプチ二ノレ、ヘプタジィ二ノレ、ォクチ二ノレ、ォクタジィニノレ、ノュニル、ノナジィニル、デシニル、デカジィニル基等の直鎖状または分枝状 C 2〜 l 0アルキニル基等が挙げられる。

「置換基を有していてもよい環状基」または「置換基を有していてもよい脂肪族炭化水素基」における「置換基」としては、例えば、（a ) 置換されていてもよいアルキル基、 ( b ) 置換されていてもよいアルケニル基、（c ) 置換されていてもよいアルキニル基、（d ) 置換基を有していてもよい炭素環基、（e ) 置換基を有していてもよい複素環基、（f ) 置換されていてもよい水酸基、（g ) 置換されていてもよいチオール基、（h ) 置換されていてもよぃァミノ基、（ i ) 置換されていてもよい力ルバモイル基、（j ) 置換されていてもよいスルファモイル基、（k) カルボキシ基、（1) アルコキシカルボ-ル基（例えば、メトキシカルポニル、エトキシカルボニル、 t 一ブトキシカルポニル等の C l〜6ァノレコキシカルボニル基等) 、（m) スルホ基（一 S0₃H) 、 (n) スルフィノ基、（o) ホスホノ基、（p) ニト口基、（q) ォキソ基、（r) チォキソ基、（s ) シァノ基、（t ) アミジノ基、（u) イミノ基、（V) — B (OH) ₂基、（w) ハロゲン原子（例えば、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素）、（X) アルキルスルフィエル基（例えば、メチノレスノレフィニル、ェチノレスノレフィニル等の C 1〜 6アルキノレスノレフィニル基等）、 (y) ァリールスルフィニル基 (例えば、フエニルスルフィニル等の C 6〜10ァリールスルフィエル基等）、 (z) アルキルスルホ二ル基（例えば、メチルスルホニル、ェチルスルホニル等の C 1〜6アルキルスルホニル基等）、（_{a a}) ァリールスルホニル基（例えば、フエニルスルホニル等の C 6〜10ァリールスルホニル基等) 、（b b) ァシル基 (例えばホルミル、ァセチル、プロパノィル、ピバロィル等の C 1〜6アルカノィル基、例えばベンゾィル等の C 6〜 10ァリールカルボエル基等）等が挙げられ、これらの任意の置換基は置換可能な位置に 1〜 5個置換していてもよレ、。置換基としての「置換されていてもよいアルキル基」における「アルキル基」としては、例えばメチル、ェチル、プロピル、イソプロピル、プチル、イソブチノレ、 sec—プチル、 tert—ブチノレ、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、へキシル、ヘプチル、ォクチル、ノエル、デシル等の直鎖状または分枝状の C l〜l 0アルキル基等が挙げられる。ここでアルキル基の置換基としては水酸基、アミノ基、カルボキシ基、ニトロ基、モノ一またはジ一 C 1〜6アルキルアミノ基 (例えば、メチノレアミノ、ェチノレアミノ、プロピルァミノ、ジメチルァミノ、ジェチルァミノ等）、 C l〜6アルコキシ基 (例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、へキシルォキシ等）、 C l〜 6アルキルカルボニルォキシ基 (例えばァセトキシ、ェチルカルボ二ルォキシ等）、フエニル基およびハロゲン原子（例えば、フッ素、塩素、臭素、ョゥ素）等が挙げられ、これらの任意の置換基は置換可能な位置に 1〜4個置換していてもよい。置換基としての「置換されていてもよいァルケ-ル基」における「アルケニル基」としては、例えばェテニル、プロぺニル、ブテニノレ、プタジェニノレ、ペンテエノレ、ペンタジェ二ノレ、へキセェノレ、へキサジェ二ノレ、ヘプテニノレ、ヘプタジェ二ノレ、ォクテ二ノレ、ォクタジェニノレ、ノネ二ル、ノナジェ -ル、デセニル、デカジエニル基等の直鎖状または分枝状の C 2〜 1 0ァルケ-ル基等が挙げられる。ここでアルケニル基の置換基としては、前記「置換されていてもよいアルキル基」における置換基と同じ意味を表わす。置換基としての「置換されていてもよいアルキニル基」における「ァルキニル基」としては、例えばェチニル、プロビュル、ブチュル、ブタジィ二ノレ、ペンチ二ノレ、ペンタジィ二ノレ、へキシュノレ、へキサジィニル、へプチニル、ヘプタジィニル、オタチュル、ォクタジィニル、ノニニル、ノナジィニル、デシニル、デカジィニル基等の直鎖状または分枝状の C 2〜 1 0アルキ-ル基等が挙げられる。ここでアルキニル基の置換基としては、前記「置換されていてもよいアルキル基」における置換基と同じ意味を表わす。置換基としての「置換基を有していてもよい炭素環基」における炭素環としては、前記した「置換基を有していてもよい環状基」における「環状基」中の炭素環と同じ意味を表わす。ごこで炭素環の置換基としては、例えば、直鎖状または分枝状の C 1〜 1 0アルキル基（前記「置換されていてもよいアルキル基」におけるアルキル基と同じ意味を表わす。）、直鎖状または分枝状 C 2 〜 1 0アルケ-ル基（前記「置換されていてもよいアルケニル基」におけるアルケニル基と同じ意味を表わす。）、直鎖状または分枝状 C 2〜 l 0アルキニル基（前記「置換されていてもよいアルキニル基」におけるアルキニル基と同じ意味を表わす。）、水酸基、 C l〜 6アルコキシ基（例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソプチルォキシ、 tert—ブトキシ、ペンチノレオキシ、へキシルォキシ等）、チオール基、 C 1〜6アルキルチオ基（例えば、メチルチオ、ェチルチオ、プロピルチオ、イソプロピノレチォ、ブチルチオ、ィソブチノレチォ、 tert—ブチノレチ才、ペンチルチオ、へキシルチオ等) 、アミノ基、モノ一またはジ一C 1〜6アルキルアミノ基（例えば、メチルァミノ、ェチルァミノ、プロピルァミノ、イソプ口ピルァミノ、プチルァミノ、イソプチルァミノ、 tert-プチルァミノ、ペンチルァミノ、へキシルァミノ、ジメチルァミノ、ジェチルァミノ、ジプロピルァミノ、 N—メチルー N—ェチルァミノ等）、ハロゲン原子 (前記したものと同じ意味を表わす）、シァノ基、ニトロ基、トリフルォロメチル基、トリフルォロメトキシ基等が挙げられ、これらの任意の置換基は置換可能な位置に 1 ~ 5個置換していてもよい。置換基としての「置換基を有していてもよい複素環基」における複素環としては、前記した「置換基を有していてもよい環状基」における「環状基」中の複素環と同じ意味を表わす。ここで複素環の置換基としては前記した「置換基を有していてもよい炭素環基」における置換基と同じ意味を表わす。置換基としての「置換されていてもよい水酸基」、「置換されていてもよいチオール基」および「置換されていてもよぃァミノ基」における「置換基」としては、例えば（i) 置換されていてもよいアルキル基（前記したものと同じ意味を表わす）、（ii) 置換されていてもよいアルケニル基（前記したものと同じ意味を表わす）、（iii) 置換されていてもよいアルキニル基（前記したものと同じ意味を表わす）、（iv) 置換基を有していてもよい炭素環基（前記したものと同じ意味を表わす）、（V) 置換基を有していてもよい複素環基（前記したものと同じ意味を表わす）、（vi) ァシル基 (例えば、ホルミル、ァセチル、プロパノィル、ビバロイル、ブタノィル、ペンタノィル、へキサノィル等の C 1〜6アルカノィル基またはそれらの異性体基等、例えば、ベンゾィル等の C 6〜1 0芳香族炭素環カルボニル等）、（yii) 置換されていてもよい力ルバモイル基（後記したものと同じ意味を表わす。 ) 、 (viii) アルキルスルホ -ル基（例えば、メチノレスルホニル、ェチルスルホニル等の C 1〜 6アルキルスルホニル基等）、（ix) ァリ一ルスルホニル基 (例えば、フエニルスルホ-ル等の C 6〜 1 0ァリ一ルスルホニル基等）等が挙げちれる。置換基としての「置換されていてもよい力ルバモイル基」としては、無置換の力ルバモイル基、 N—モノー C l〜6ァノレキル力ルバモイノレ (例えば、 N—メチルカルバモイル、 N—ェチルカルバモイル、 N—プロピル力ルバモイル、 N—イソプロピル力ルバモイル、 N— ブチルカルバモイル、 N—イソブチルカルバモイル、 N— (tert—ブチル）力ルバモイル、 N—ペンチルカルバモイル、 N _へキシルカルバモイル等) 、 N—フエ二ルカルバモイル等の N—モノ一 C 6〜 1 0ァリール力ルバモイル N, N—ジ C 1〜6アルキル力ルバモイル (例えば、 N, N—ジメチルカルバモイル、 N, N—ジェチルカルバモイル、 N, N—ジプロピルカノレバモイル、 N, N—ジブチルカルバモイル、 N, N—ジペンチルカルバモイル、 N, N—ジへキシルカルバモイノレ、 N—メチル—N—ェチルカルバモイル等) 、 N, N—ジフエニルカノレバモイル等の N—ジー C 6〜 1 0ァリ一ルカルバモィル、 N— C 6〜1 0ァリール一 N— C 1〜6アルキル力ルバモイル (例えば、 N—フエニノレー N—メチノレカノレバモイノレ、 N—フエニノレー N—ェチノレ力ルバモイル、 N—フエ二ルー N—プロピル力ルバモイル、 N—フエ二ルー N 一プチルカルバモイル、 N—フエニル一 N—ペンチルカルバモイル、 N—フェニルー N—へキシルカルバモイル等）等が挙げられる。置換基としての「置換されていてもよいスルファモイル基」としては、無置換のスルファモイル基、 N—モノ— C 1〜6アルキルスルファモイル（例えば、 N—メチルスルファモイル、 N—ェチノレスルファモイル、 N—プロピノレスノレファモイノレ、 N 一イソプロピルスルファモイル、 N—プチルスルファモイノレ、 N—イソプチノレスルファモイル、 N— (tert—プチル) スノレファモイノレ、 N—ペンチノレスノレファモイル、 N—へキシルスルファモイル等) 、 N—フエニノレスノレフ了モイル等の N—モノー C 6〜： L 0ァリーノレスルファモイル、 N , N—ジ C l〜6

N—ジェチルスルファモイル、 N, N—ジプロピルスルファモイル、 N, N 一ジブチルスルファモイル、 N, N—ジペンチルスルファモイル、 N， N— ジへキシノレスノレファモイル、 N—メチル—N—ェチルスルファモイル等）、 N, N—ジフエニルスルファモイル等の N—ジ一 C 6 〜 1 0ァリールスルファモイル、 N - C 6 〜 1 0ァリール— N— C 1 〜 6アルキルスルファモイル (例えば、 N—フエ二ノレ一 N—メチノレスノレファモイル、 N—フエ二ルー N— ェチノレスノレファモイノレ、 N—フエニノレー N—プロピノレスノレファモイノレ、 N— フエニノレー N—ブチノレスノレファモイノレ、 N—フエ二ルー N—ペンチルスノレファモイル、 N—フエニル— N—へキシルスルフ了モイル等)等が挙げられる。

3位の置換基として好ましくは、 C 3 〜 8の単環式炭素環、酸素原子、窒素原子および/または硫黄原子から選択される 1 〜 5個のへテロ原子を含む、 3 〜 8員の単環式複素環、直鎖状または分枝状 C 1 〜 1 0アルキル基であり、より好ましくは、 1一メチ^^レエチル基、 1—ェチルプロピル基、シク口ペンチル基、シクロへキシル基、シクロへプチル基、 1ーシクロペンテン一 4一ィル基、テトラヒドロピラン一 4ーィル基であり、最も好ましくは、シクロへキシノレ基である。

本発明のァミノ基の保護基としては、特に限定されず、いずれの保護基であってもよい。

例えば、プロテクティブ ·グループス 'イン 'オーガニック ·シンセシズ、ジョン · ウィリー 'アンド ·サンズ発行、 1999年等記載されたもの等が挙げられる。好ましくは、ァセチル基、ベンゾィル基、ベンジルォキシカルボ二ル基、 t—プトキシカルボ二ル基、ァリルォキシカルボニル（A 1 1 o c ) 基、 1一メチル一 1 _ ( 4ービフエ-ル）エトキシカルボ二ノレ ( B p o c ) 基、トリフルォロアセチル基、 9—フルォレニルメトキシカルボ-ル基、ベンジル（B n ) 基、 p—メトキシベンジル基、ベンジルォキシメチル（B O M) 基、 2— （トリメチノレシリル）エトキシメチル（S EM) 基であり、より好ましくは、ベンジルォキシカルポ二ル基、 t—ブトキシカルボ-ル基であり、最も好ま,しくは、 t一ブトキシカルボニル基である。

本発明においては、特に指示しない限り異性体はこれをすベて包含する。例えば、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アルコキシ基、アルキルチオ基、アルキレン基、アルケニレン基、アルキニレン基には直鎖のものおよび分枝鎖のものが含まれる。さらに、二重結合、環、縮合環における異性体（E、 Z、シス、トランス体）、不斉炭素の存在等による異性体（R、 S体、 _a、 j8配置、ェナンチォマー、ジァステレオマー）、旋光性を有する光学活性体（D、 L、 d、 1体）、クロマトグラフ分離による極性体（高極性体、低極性体）、平衡ィヒ合物、回転異性体、これらの任意の割合の混合物、ラセミ混合物は、すべて本発明に含まれる。

本発明においては、特に断わらない限り、当業者にとって明らかなように記号は紙面の向こう側（すなわち α—配置）に結合していることを表わし、 ^ は紙面の手前側（すなわち J3—配置）に結合していることを表わし、 ^ は α—配置、 ]3—配置またはそれらの混合物であることを表わし、 Ζ は、 α—配置と /3—配置の混合物であることを表わす。

[発明の実施の形態]

本発明の製造方法の出発物質である 3—置換一トランス一 2—プロペン酸は、それ自体公知であるか、公知の方法よつて製造することができる。例えば、トランス一 3—シクロへキシルー 2—プロペン酸は、特開昭 62- 106039 号公報に記載されているように、 1 , 2 , 3 , 6—テトラヒドロベンズアルデヒドをパラジウム系触媒存在下で接触還元してへキサヒドロべンズアルデヒドとし、これと J.Chem.Soc., 26 (1928)記載の方法に従ってマロン酸を反応させることにより得ることができる。 3一置換一トランス一 2—プロペン酸誘導体は、タングステン酸またはその塩の存在下、過酸化水素で処理して 3—置換— （2 S *， 3 R *) 一 2， 3 —エポキシプロピオン酸とすることができる。タングステン酸塩としては、例えばタングステン酸ナトリゥム、タングステン酸力リゥムなどのタングステン酸のアルカリ金属塩、タングステン酸等が挙げられるが、タングステン酸ナトリウム 2水和物が好ましい。量としては、 3—置換一トランス一 2— プロペン酸に対して 0.05〜： L0モル倍が好ましく、 0.1〜0.3モル倍が最も好ましい。これに過酸化水素を加えて酸化することにより目的物を得ることができる。過酸化水素は一般に入手可能な過酸化水素水として添加すればよい。反応は、メタノール、エタノール、ァセトン等の水と任意の割合で混和する溶媒存在下で行うのが好ましい。最も好ましいのはメタノールである。濃度としてはメタノールの場合溶媒中のメタノール濃度は 1 0〜 6 0質量。 /。程度が好ましい。反応温度は、 3 0〜 6 0 °Cの範囲で好ましく行われ、 4 0 °C 前後が最も好ましい。反応時の ρ Ηは 3.0〜6.5であればよいが、 4.0〜6.0の範囲で好ましい結果が得られる。上記 ρ Η、温度の条件範囲外では反応速度の低下、または反応副生物が増加する。反応時間は、適宜設定でき、通常 1 0〜 3 0時間であるが、例えば 4 0 °C前後であれば、 1 5時間程度で終了する。

反応終了後は、チォ硫酸ナトリウム等で余分な過酸化水素を分解し、溶媒を留去した後、 p H調製の後、クロマト分離、蒸留、溶媒抽出等の公知の手法により 3—置換一（2 S *， 3 R *) - 2 , 3—エポキシプロピオン酸として得ることができる。また 3 _置換一（2 S *， 3 R *) —2 , 3—エポキシプロピオン酸とアルカリ金属の水酸化物の水溶液（例えば、水酸化ナトリウム水溶液、水酸化力リゥム水溶液等）と処理することで 3—置換一（ 2 S *， 3 R *) - 2 , 3—エポキシプロピオン酸のアルカリ金属塩として得ることもできる。 3—置換一（2 S *， 3 R *) 一 2 , 3—エポキシプロピオン酸またはその塩の光学分割方法としては、例えば、クロマトグラフィーによる方法、リパーゼ等の不斉識別可能な微生物や酵素を用いる加水分解酵素による方法、光学活性ァミンとの塩を生成させ分別晶析する方法、適当な光学活性ァミンと反応させた後分別晶析する方法等を適用することができる。

クロマトグラフィーによる光学分割に関しては通常の光学分割用充填剤や市販カラムを用いて行うことができるが、効率的な製造のためには、擬似移動床式クロマトグラフィーで行うことが好ましい。この方法は、特開平 6-170111号、特開平 6-239767号、特開平 7-89950号等により公知である。光学分割用充填剤としては、光学活性な高分子化合物、例えば多糖誘導体 (セノレロース、アミロース、一 1 , 4—キトサン、キチン、 j3— 1， 4 - マンナン、 β— 1 , 4ーキシラン、ィヌリン、 - 1 , 3—グルカン、 β— 1， 3—グルカンのエステルや力ルバメート）、ポリアタリレート誘導体、ポリアミド誘導体をシリカゲルに担持させたもの、またはポリマーそのものを粒状にしたもの、さらに光学分割能を有する低分子化合物、例えばクラウンエーテル、シクロデキストリン誘導体をシリカゲルに担持させたものを用いることができ、市販品を適宜選択して使用することもできる。例えば、それぞれダイセル化学工業 (株)製の CHIRALCEL OD (登録商標）、 CHIRALCEL OJ (登録商標）、 CHIRALCEL OF (登録商標）、 CHIRALPAKAS (登録商標）、 CHIRALPAKAD (登録商標）等を好ましい例として挙げることができる。

充填剤の平均粒径は、分割しょうとする光学異性体の種類、擬似移動床内に流通する溶媒の体積流通速度等に応じて様々に変化するのであるが、通常 1〜 1 0 0 t m、好ましくは 5〜 7 5 /z mである。最も、擬似移動床内での圧損を小さく抑制するのであれば、 1 5〜 7 5 μ mに充填剤の平均粒径を調整しておくのが望ましい。充填剤の平均粒径が上記範囲內にあると擬似移動床における圧損を少なくすることができ、例えば 1 O k g f Zcm²以下に抑制することもできる。一方、充填剤の平均粒径が大きくなればなるほど吸着理論段数は低下する。したがって、実用的な吸着理論段数が達成されることだけを考慮するなら、前記充填剤の平均粒径は、通常 1〜 50 mである。脱離液導入口に供給される脱離液としては、例えばメタノール、エタノール、イソプロパノール等のアルコール類、へキサン等の炭化水素類、ァセト二トリルなどの有機溶媒、例えば硫酸銅水溶液や過塩素酸塩水溶液等の塩を含有する水溶液を挙げることができる。いずれの脱離液が好ましいかは、光学分割しようとする化合物の種類に応じて適宜に決定される。

擬似移動床式クロマトグラフィーによる分離に際しては、溶媒への溶解性、カラムへの負荷可能量を考慮して、 3—置換一（2 S*， 3R*) -2, 3— エポキシプロピオン酸を公知の方法によって 3—置換一（2 S*, 3 R*) ― 2, 3 _エポキシプロピオン酸エステルへ変換して行うことが好ましい。ェステル化は、例えば特開昭 55- 8577号、特開平 11- 269166号、第 4版実験化学講座 22 有機合成 IV—酸 'アミノ酸'ペプチド一 44頁、平成 4年 11 月 30日発行、社団法人日本化学会編、発行所丸善株式会社等に記載の通常の方法で行われ、光学分割後は、例えば特開平 9-59229号等記載の通常の方法で脱エステル化できる。メチルエステルの場合が最も好ましい結果が得られる。擬似移動床式クロマトグラフィーによる分離は、公知の方法に準じて適宜最適条件を決められるが、試料濃度： 1 10〜250 gZl、ステップタイム： 0.75〜15分、カラム本数： 3〜20本、カラム内径：：！〜 100 c mの範囲で実施することが好ましい。フィード、ェクストラタト、ラフイネート、エリユエント、リサイクリングの各流量は、上記条件と、装置の耐圧能力により、適宜調整される。

本発明で用いられる擬似移動床式クロマトグラフィー装置を図 1に例示する。また、クロマトグラフィーによる分離では、通常の溶媒を用いた方法だけでなく、超臨界流体を媒体とした超臨界流体クロマトグラフィー、超臨界流体一擬似移動床式クロマトグラフィーも使用できる。

また、 3—置換一（2 S*， 3R*) —2， 3—エポキシプロピオン酸エステルを加水分解酵素で処理することにより、 3—置換一（ 2 S， 3 R) — 2， 3—エポキシプロピオン酸エステルを加水分解し、生成する 3—置換一（2 S, 3 R) 一 2, 3 _エポキシプロピオン酸を得ることもできる。また、同様に 3—置換— （2 S*, 3 R*) 一 2， 3—エポキシプロピオン酸エステルを加水分解酵素で処理することにより、 3—置換一（2R, 3S) -2, 3 - エポキシプロピオン酸エステルを加水分解し、残存する 3—置換一（2 S， 3R) -2, 3—エポキシプロピオン酸エステルを得ることもできる。

本発明に使用する酵素は、 3—置換— （2 S*， 3R*) — 2, 3—ェポキシプロピオン酸エステルから 3—置換一（2 S, 3 R) 一 2， 3—エポキシプロピオン酸またはそのエステルを与えるものであれば特に制限はない。微生物、植物または動物由来の市販加水分解酵素（リパーゼ、プロテアーゼ等）、各種保存菌株の微生物由来の酵素おょぴ自然界より新たに単離された微生物由来の酵素等が使用可能である。本発明において、例えば、（2 S*， 3R*) 一 3—シク口へキシルー 2， 3—エポキシプロピオン酸エステルを加水分解酵素で処理することにより、（2 S, 3 R) — 3—シクロへキシル一 2， 3 一エポキシプロピオン酸エステルを加水分解し、生成する（2 S， 3R) - 3ーシク口へキシルー 2， 3一エポキシプロピオン酸を得るために使用する市販の加水分解酵素としては、例えば、 Biocatalysts Ltd.製の Penicillium cyclopiumリパーゼ、 Novozymes社製のリポザィム IM 60 (Mucor属由来）、ノボザィム 435 (Candida 属由来）、天野ェンザィム社製のリパーゼ F (Rhizopus属由来）、リパーゼ A (Aspergillus属由来）、リパーゼ M (Mucor 属由来）、リパーゼ AY (Candida属由来）、リパーゼ D (Rhizopus属由来）、リパーゼ CE、リパーゼ GC、リパーゼ GT、リパーゼ PS- D (Pseudomonas 属由来）、アシラーゼ (Aspergillus属由来）、プロテアーゼ M (Aspergillus 属由来）、プロテアーゼ A (Aspergillus属由来）、ニューラーゼ F (Rhizopus 属由来）、プロテアーゼ S (Bacillus属由来）、プロテアーゼ P (Aspergillus 展由来) 、 Fluka製の Lipase from Pseudomonas fluorescein Lipase irom Penicillium roqueforti,名糖産業製のリパーゼ OF、旭化成製のリパーゼ、ダィセル化学製のリパーゼ S16- 19B (特開平 05-123179 号）、リパーゼ S10-071 (特開平 05- 304949号）等が挙げられる。

また、本発明において、例えば、（2 S *， 3 R *) —3—シクロへキシル一 2， 3—エポキシプロピオン酸エステルを加水分解酵素で処理することにより、 ( 2 R , 3 S ) 一 3—シク口へキシルー 2， 3一エポキシプロピオン酸エステルを加水分解し、残存する（2 S， 3 R) _ 3—シクロへキシルー 2， 3一エポキシプロピオン酸エステルを得るために使用する市販の加水分解酵素としては、例えば、 Biocatalysts Ltd.製のパンクレアティックリパーゼ (豚勝臓由来）、天野ェンザィム社製のリパーゼ L (Candida属由来）、プ口レザー（Bacillus属由来）、プロテアーゼ N (Bacillus属由来）、東洋紡製の Immobilized Lipase等が挙げられる。

本発明における 3—置換一（2 S *， 3 R *) — 2， 3—エポキシプロピオン酸エステルの加水分解反応は、次のようにして行うことができる。すなわち、反応媒体に酵素反応の基質である 3—置換— （2 S *， 3 R *) - 2 , 3 —エポキシプロピオン酸エステルを添加し、溶解または懸濁し、触媒として酵素を加える。反応媒体としては、例えば、イオン交換水または緩衝液等を用いることができる。反応液中の基質濃度としては、 0.：！〜 7 0質量％の間で特に制限はないが、基質の溶解度および変換率等を考慮して、好ましくは 0.5 〜 2 0質量％で行うことができる。また、基質の溶解性を向上させるためにァセトニトリル、ジメチルスルフォキシド等の親水性有機溶媒を系内に添加することもできる。もしくは、へキサン、トルエン等の疎水性有機溶媒を系内に添加し、水系と有機溶媒の 2相として反応することも可能である。反応温度は、酵素の至適温度と基質の安定性等を考慮して、 5〜80°C、好ましくは 10〜60°Cで行うことができる。反応液の pHは、酵素の至適 pHと基質の安定性等を考慮して、 2.0〜： 10.0、好ましくは 6.0〜9.0の範囲で行うことができる。反応の進行に伴って pHが変動する場合は、適当な中和剤を添カロし、最適 pHを維持することが望ましい。

反応終了液からの生成物の分離精製は、イオン交換樹脂を用いた分離、晶析法、蒸留、溶媒抽出等の公知の方法を組み合わせることにより行うことができる。例えば溶媒抽出による方法は次のようにして行うことができる。生成した 3—置換— （2 S， 3 R) 一 2， 3—エポキシプロピオン酸を分離精製する場合は、中性付近で一般的な有機溶媒、例えば、酢酸ェチル、へキサン、トルエン、ジェチルエーテル、塩化メチレン、クロロホノレム等を用いて抽出操作を行うことにより、 3—置換一（2R, 3 S) —2， 3—エポキシプロピオン酸エステルを抽出分離した後、抽出残渣に硫酸や塩酸等の強酸を添加し、 pHを 2.0程度に調整し、上記と同様の一般的な抽出操作を行うことにより抽出分離することができる。また、残存する 3—置換一（2 S， 3R) 一 2， 3—エポキシプロピオン酸エステル誘導体を分離精製する場合は、中性付近で上記と同様の一般的な抽出操作を行うことにより抽出分離することができる。

また、 3—置換一（2 S*， 3R*) -2, 3—エポキシプロピオン酸は光学活性ァミンとの塩を形成させ、 3—置換一（2 S， 3 R) 一 2, 3—ェポキシプロピオン酸の光学活性ァミンとの塩として分別晶析することも可能である。光学活性ァミンとしては、（R) — 1—フエニルェチルァミン、（R) — 1— (4—メチルフエニル）ェチルァミン、（+ ) —シス一 N—ベンジル —2— (ヒドロキシメチル) ーシクロへキシルァミン、 (R) 一 β—メチノレフエニルェチルァミン、（R ) —N—ベンジル一 1一フエ-ルェチルァミン、 ( 1 R, 2 S ) 一 2—アミノー 1，2—ジフエニルエタノール、（R) — 1一 ( 1一ナフチル）ェチルァミン等が用いられるが、好適な例としては（R) 一 1一（1一ナフチル）ェチルァミンが挙げられる。

分別晶析に要する光学活性ァミンの使用量は（R) —1—フユニルェチルァミンの場合、 3—置換一（2 S *， 3 R *) 一 2 , 3—エポキシプロピオン酸に対して 0.5〜1.5モル倍の範囲で用いるのが好ましい。

分別晶析時の溶媒としては、メタノール、エタノール、プロパノール、ィソプロパノール等のアルコール類、ジェチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、 t一プチルメチルエーテル等のエーテル類、酢酸メチル、酢酸ェチル等のエステル類等から適宜選択できるが、（R) —1一（1一ナフチル）ェチルァミンの場合は、酢酸ェチルが好ましく、 tーブチルメチルエーテル等の貧溶媒を添加することで晶析収率を上昇させることもできる。

晶析温度としては一 2 0〜5 0 °Cの範囲が好ましいが、 0〜1 0 °Cの範囲がさらに好ましい。晶析時間としては 5〜3 0時間である。例えば（R) — 1一（1一ナフチル）ェチルァミンの場合、 0 °Cで 1 5時間である。

晶析には種晶を用いることが出来、種晶を添加することによつて晶析時間を短縮することができる。種晶は分別晶析に用いる光学活性ァミンと同じ光学活性ァミンの 3—置換— （2 S , 3 R) —2， 3—エポキシプロピオン酸誘導体との塩を用いるのが好ましい。

単離した 3 _置換一（2 S , 3 R) —2 , 3 _エポキシプロピオン酸の光学活性ァミンとの塩を再び上記の溶媒を用いて再び分別晶析を行うことで塩のジァステレオ選択性を向上させることができる。例えば、 6 0⁰/od.e.の（2 S , 3 R ) — 3—シクロへキシルー 2 , 3—エポキシプロピオン酸塩を再ぴ分別晶析を行うことで 99.2%d.e.まで向上した。

晶析後は、遠心分離、ろ過等通常の手法により 3—置換一（2 S， 3 R) 一 2, 3—エポキシプロピオン酸の光学活性ァミンとの塩を得ることができる。

分割に用いた光学活性アミンは塩単離後のろ液おょぴ 3—置換一（2 S， 3 R) 一 2， 3—エポキシプロピオン酸の光学活性ァミンとの塩から 3—置換一（2 S, 3R) — 2, 3 _エポキシプロピオン酸誘導体を単離した後に容易に回収が可能である。

3—置換一（2 S, 3 R) -2, 3—エポキシプロピオン酸またはその塩は、 Tetrahedron Lett" 35, 31, 5023 (1990)および Synth. Commun., 3, 3, 177 (1973)等公知の記載の手法でァンモユアでェポキシ基を開環した後、公知手法 (例えば、プロテクティブ'グループス 'イン ·オーガ二ック ·シンセシズ、ジョン ' ウィリー .アンド 'サンズ発行、 1999年等記載等）によりアミンの保護基を導入する反応に付し、 3—置換一 (2R, 3R) —2—保護されたアミノー 3—ヒドロキシプロピオン酸とすることができる。例えば、ァミンの保護基が t一プチルォキシカルポニル基の場合は、特開 2003-55358号記載の方法等の公知手法により、 t—ブチルォキシカルボ二ルイヒし、 3—置換一 (2 R, 3 R) — 2— (N— t—ブチルォキシカルボニル）アミノー 3— ヒドロキシプロピオン酸とすることができる。

t一プチルォキシカルボ二ルイ匕は、例えば水と混和する有機溶媒と水との混合溶媒中、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、トリェチルァミン、ジメチルァミノピリジン等の塩基とジ— t—プチルジカーボネートの存在化で行われる。反応は通常 20〜40° ( 、 5〜25時間で終了する。

さらに、 3—置換一（2 S*， 3 R*) 一 2， 3—エポキシプロピオン酸は光学活性ァミンと反応させてエポキシ基を開環して、 3—置換一 2—保護されたァミノ一 3—ヒドロキシプロピオン酸誘導体とした後、 3—置換一（2 R, 3 R) —2—保護されたアミノー 3—ヒドロキシプロピオン酸誘導体を分別晶析させることもできる。光学活性ァミンとしては、（R) — 1一フエニルェチルァミン、（R) — 1― ( 4一メチルフエ-ル) ェチルァミン、 ( S ) — N， N—ジメチルー 1 一フエニルェチルァミン、（+ ) 一シス一 N—べンジノレ一 2 - (ヒドロキシメチル）ーシクロへキシルァミン、 (R) 一 β—メチルフェ -ルェチルァミン、 (R) —Ν—ペンジノレー 1—フエニノレエチノレアミン、 ( 1 R, 2 S ) - 2 _アミノー 1， 2—ジフエニルエタノール、（R) - 1 - ( 1—ナフチル）ェチルァミン等が用いられるが、好適な例としては、（R) — 1—フエニルェチルァミンが好ましく用いられる。

塩の誘導体化は、例えば、テトラヒドロフラン、ジォキサン、ジメトキシェタン、ジェチルエーテル等のエーテル系溶媒、例えばメタノール、ェタノール、ィソプロピルアルコール等のアルコール系溶媒、ベンゼン、トルエン等のベンゼン系溶媒、ジメチルホルムアミド等のアミド系溶媒、水、酢酸、酢酸ェチル等、またはこれらの混合溶媒中、 1〜 3当量の塩基を用いて行われる。使用する塩基は、例えば水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素力リウム、炭酸力リゥム等の無機塩基、トリェチルァミン、ピリジン等の三級アミン等である。また、開環反応に用いる光学活性アミン自体を塩基として使用してもよい。この場合、用いる光学活性ァミンの量は、 1.5〜8当量、より好ましくは 2〜 6当量となる。塩の誘導体化に用いる光学活性アミンは、それ自体を塩基として用いない場合には、基質に対して 0.5〜 5当量、より好ましくは 1〜 3当量添加する。反応は通常、 6 0〜： 1 2 0 ° (、より好ましくは 9 0〜： L 0 0 °Cで、 8〜2 4時間で終了する。

3—置換一（2 R， 3 R) 一 2—保護されたァミノ一 3—ヒドロキシプロピオン酸誘導体晶析は、この上記反応物から溶媒留去し、塩基性水溶液を添加して行われる。塩基性水溶液は、適宜塩酸水溶液などで p H調整できるが、好ましくは 9〜 1 2、より好ましくは 10.5〜： 11.5に調整する。上記で得られた、 3—置換一（2 R， 3 R) 一 2—保護されたアミノー 3 ーヒドロキシプロピオン酸誘導体は、プロテクティブ 'グループス 'イン ' オーガニック ·シンセシズ、ジョン ' ウィリー 'アンド 'サンズ発行、 5 7 9頁、 1999年等記載の公知の脱保護手法で 3—置換一（2 R， 3 R) — 2— ァミノ一 3—ヒドロキシプロピオン酸とし、前記と同様の手法により、アミンの保護基を導入する反応に付して、 3—置換一（2 R， 3 R) —2—保護されたアミノー 3—ヒドロキシプロピオン酸とすることができる。

脱保護反応は、例えば、テトラヒドロフラン、ジォキサン、ジメトキシェタン、ジェチルエーテル等のエーテル系溶媒、例えばメタノール、エタノール、イソプロピルアルコール等のアルコール系溶媒、ベンゼン、トルエン等のベンゼン系溶媒、ジメチルホルムアミド等のアミド系溶媒、水、酢酸、酢酸ェチル等、またはこれらの混合溶媒中、パラジウム一炭素、パラジウム黒、パラジウム、水酸化パラジウム、白金一炭素、二酸化白金、ニッケル、塩化ルテニウム等の触媒存在下、塩酸、硫酸、酢酸、 p—トルエンスルホン酸等の酸存在下、常圧または加圧下の水素雰囲気下で行われる。反応は通常 2 0 〜 6 0 °C、 2〜 2 0時間で終了する。

3—置換一（2 R， 3 R) 一 2—保護されたァミノ一 3—ヒドロキシプロピオン酸はクロマト分離、ろ過、濃縮、晶析、再結晶等の分離精製手段やこれらを組み合わせた手段等により精製することができる。

精製物の構造は、 — NMRスぺクトル、 ^{1 3} C— NMRスぺクトル、マススペクトル、元素分析等公知の手法により確認でき、光学純度は、光学分割カラムを用いた H P L C分析により測定することができる。

[発明の効果]

本発明によれば、 3—置換一（2 R , 3 R) —2—保護されたアミノー 3 ーヒドロキシプロピオン酸、特に（2 R， 3 R) —2— (N— t—プチルォキシカルボニル）アミノ一 3—シク口へキシル一 3—ヒドロキシプロピオン酸を高い生産性を有する工業レベルで製造することができる図面の簡単な説明

図 1は、 8本の単位カラムを有する擬似移動床を用いる、この発明の擬似移動床式クロマト分離法を示す概略説明図である。図中、 1〜8は単位カラム、 A〜Eは第 1〜5ロータリーバルブ、 7 a〜7 hは電磁弁、 1 3は脱離液供給ライン、 14はエタストラクト抜き出しライン、 1 5は光学異性体混合物含有液供給ライン、 1 6はラフィネート抜き出しライン、 1 7は循環流路、 18は循環ポンプ、 19は脱離液供給ライン (リサイクル時) を表わす。発明を実施するための最良の形態

以下に実施例に基づき本発明を詳細に説明する。

なお、以下に記載する「d.e.」は（2 S*， 3R*) 一 3—シクロへキシルー 2, 3—エポキシプロピオン酸またはその塩、あるいは（2 S*， 3 R*) 一 3—シクロへキシルー 2, 3—エポキシプロピオン酸エステルの場合、 { ([R *， S*—体の量] 一 [R*， R*—体の量] ) Z ( [R*， S*—体の量] + [R *， R*—体の量] ) } X 100で表される数値を意味し、 2—ァミノ一 3— シクロへキシルー 3—ヒドロキシプロピオン酸誘導体の場合、 { ( [R*， R *—体の量] 一 [R*， S*—体の量] ) / ( [R*, R*—体の量] + [R*， S*—体の量 ] ) } X 100で表される数値を意味し、「e.e.」は、（2 S*， 3R*)一 3—シクロへキシ^^一 2， 3—エポキシプロピオン酸またはその塩、あるいは（2 S*， 3 R*) — 3—シクロへキシルー 2， 3—エポキシプロピオン酸エステルの場合、 { ( [S, R—体の量] ― [R， S—体の量] ) / ( [S, R—体の量] + [R, S—体の量] ) } X 10◦で表される数値を、 2—アミノー 3—シクロへキシルー 3—ヒドロキシプロピオン酸誘導体の場合、 { ( [R, R—体の量] ― [S， S—体の量] ) Z ( [R， R—体の量] + [S， S—体の量] ) } X 100で表される数値を意味する。

実施例 1 ： (2 S*, 3 R*) —3—シクロへキシル一2, 3—エポキシプロピオン酸の製造（1)

トランス一 3—シクロへキシルー 2—プロペン酸 147 gにメタノール 3 56 gを加え溶解させた。これに水 306 gおよびタングステン酸ナトリウム 2水和物 32.1 gを加え、 40 °Cまでカ卩温した。加温後 25 %水酸化ナトリゥム水溶液を用いて、 pH5.0〜5.5 に調整した。調整後 30%過酸化水素水 143 gを 40°Cにて滴下した。 25%水酸化ナトリゥム水溶液を用いて P Hを 5.0〜5.5の範囲を保ちながら、 40°Cにて 15時間反応させた。反応終了後、反応液を 10°C以下まで冷却した。 40%チォ硫酸ナトリゥム水溶液を 20°C以下で過酸化水素が完全に分解されるまで滴下した。過酸化水素分解後、減圧下メタノールを留去した。メタノールを留去後、濃塩酸を添加して、反応液の pHを 2.0〜3.0に調整した。 t—プチルメチルエーテル 676 gを加え 30分以上撹拌した後、静置した。分液ロートにて下層水を分液後、上層をろ過した。このろ液を減圧下で濃縮することで淡黄色油状の（2 S*, 3 R*) 一 3—シクロへキシルー 2， 3—エポキシプロピオン酸 131 g (8 1%) を得た。

iH-NMR(CDCl₃)ppm:i.lO-1.39(m, 6H, CH₂)， 1.70-1.86(m, 5H， CH₂, CH), 2.98(dd, 1H， J=6.21, 0.81 CH), 3.30(d, 1H， J=2.16, CH)。

実施例 2 ： (2 S*, 3 R*) —3—シクロへキシル一2, 3—エポキシプロピオン酸の製造（2)

タングステン酸ナトリウム 2水和物 4.3 gに水 64.4 gを加え溶解させ、 4 0°Cに加温した。これに 40°Cでトランス一 3—シク口へキシルー 2—プロペン酸 20 gを含むメタノール溶液 35.8 gを加え、さらに 40 °Cで 30 %過酸化水素水 29.4gを滴下した。 25%水酸化ナトリゥム水溶液を用いて、反応液の p Hを 4.5〜5.0の範囲を保ち 40°Cにて 20時間反応させた。反応終了後 1 0 °C以下まで冷却し、 3 5 %重亜硫酸ナトリウムおよび 2 5 %水酸化ナトリゥム水溶液を 2 0°C以下、 p H4.0〜6.0 を保ち滴下し、過酸化水素を分解した。分解後、減圧条件下にてメタノールを留去した後、濃塩酸を用いて反応液の ρ Hを 2.0〜3.0に調整した。 t―ブチルメチルエーテル 6 7 6 g を加え 3 0分以上撹拌した後、 3 0分以上静置した。分液ロートにて下層水を分液した後、上層をろ過した。このろ液を減圧下で濃縮することで淡黄色油状の（2 S*， 3 R*) — 3—シクロへキシル一 2， 3 _エポキシプロピオン酸 16.2 g (7 3 %) を得た。

iH-NMR(CDCl₃)ppm:i.lO-1.39(m, 6H, CH₂), 1.70- 1.86(m， 5H, CH_2> CH)， 2.98(dd, 1H, J=6.21, 0.81 CH), 3.30(d, 1H, J=2.16, CH)。

比較例 1 ： (2 S*, 3 R*) — 3—シクロへキシル一 2, 3—エポキシプロピオン酸の製造（無触媒系）

トランス一 3—シクロへキシル一 2—プロペン酸 1 gにァセトン 8.6 gおよび水 1 1 gを加えた。これに 3 0 %過酸化水素水 2.2 gをカ卩ぇ 5 0 °Cで撹拌した力 S (2 S*, 3 R*) — 3—シクロへキシル一 2， 3—エポキシプロピオン酸は生成しなかった。 3 M水酸化ナトリゥム水溶液にて p Hを 3.0から 14.0 まで変化させたが、ずれの p Hにおいても目的物の生成は認められなかった。比較例 2 ： (2 S*， 3 R*) — 3—シクロへキシル一 2， 3—エポキシプロピオン酸の製造（無溶媒系）

トランスー 3—シク口へキシノレ一 2—プロペン酸 1 0 gに過酸化水素水

22.1gおよびタングステン酸ナトリウム 2水和物 1.06gを加え撹拌した。これに 2 5 %水酸化ナトリゥム水溶液を用いて、反応液の p Hを 5.0に調製した。

(2 S *, 3 R*) — 3—シクロへキシルー 2, 3—エポキシプロピオン酸溶解に必要な 5 0°Cにて pHを 4.5から 5.0に保ちながら 1 5時間反応させた。反応終了後、酢酸ェチル 4 5 gを加え分液ロートにて下層水を分液した。得られた上層を濃縮することで（2 S*， 3 R*) — 3—シクロへキシル一 2， 3一エポキシプロピオン酸 2.99 g (27 %) を含む淡黄色油状の残渣 9.0 gを得た。主な副生物はシク口へキサンカルボン酸であった。

Ή - NMR(CDCl₃)ppm:1.10- 1.39(m, 6H, CH₂), 1.70- 1.86(m， 5H， CH₂, CH), 2.98(dd, 1H, J=6.21, 0.81 CH), 3.30(d, 1H, J=2.16, CH)。

シクロへキサンカルボン酸： Ή- NMR(CDCl₃)ppm:1.10 - 1.39(m， 6H, CH₂), 1.70- 1.86(m， 4H， CH₂), 2.35(m, 1H， CH)。

実施例 3 ： (2 S*, 3 R*) — 3—シクロへキシルー 2, 3一エポキシプロピオン酸メチルの光学分割

[ (2 S*, 3R*) — 3—シクロへキシルー 2, 3—エポキシプロピオン酸メチルの合成]

(2 S*， 3R*) _3—シクロへキシルー 2， 3—エポキシプロピオン酸ナトリゥム塩 150 gをメタノール 1500mLに溶解し、硫酸 53.6gを加えて、 30〜40°Cで 5時間撹拌した。反応終了後、反応混合物を 3 °Cまで冷却し、 5 %炭酸水素ナトリゥム水溶液を加えて p Hを 7.0〜7.5に調整した。この混合物を、外温 30〜40°Cで、 8 OTo r rまで減圧することにより、メタノールを留去した。ここへ水 50 OmLを加え、 1200mLの t—プチルメチルエーテルで 2回抽出した。このようにして得た有機層を濃縮し、目的とする（2 S*， 3 R*) _ 3—シクロへキシルー 2， 3—エポキシプロピオン酸メチルを 134 g得た。

[S MB法による光学分割]

小型擬似移動床式クロマトグラフ分取装置（図 1参照）を用いて、上記実施例で合成した（2 S*， 3R*) —3—シクロへキシル一2, 3—エポキシプロピオン酸メチルの光学分割を行った。

運転を通して各種操作条件を調整し、得た最適運転条件を以下に記す。カラム：ダイセルィ匕学 (株)製 CHRALPAK (登録商標） AD、サイズ：（i> 3 cmX 10 cm、カラム本数： 8本、

移動相：メタノール 100%、

試料濃度： 1 10 g/1、

Feed流直： 4.5m L/ m i n、

Extract流量： 79mL/m i n、

Raffinate流量 : 18 mL /m i n、

Eluent流量： 92.5m L/m i n、

Recycle流量： 152mLZm i n、

Step time： 1.18m i n。

小型擬似移動床式クロマトグラフ分取装置運転の結果得られた前成分 (Raffinate) 光学純度、後成分（Extract; 目的とする異性体）光学純度および生産性を表 1に記載する。最適運転条件により、目的化合物の（2 S, 3

R) — 3—シクロへキシルー 2， 3—エポキシプロピオン酸メチルを、目的とする光学純度 98 %e.e.以上の光学純度で得ることができた。その際の生産性（小型擬似移動床式ク口マトグラフ分取装置に充填した分割剤の単位質量あたり、一日に取得できる光学活性体の質量）は、 0.96 kg-enan. /kg-csp/day にった

このようにして得た（2 S, 3 R) — 3—シクロへキシル _ 2, 3—ェポキシプロピオン酸メチル 1.0 gを、 5 mLのメタノールに溶解し、 5mLの 1 N水酸化ナトリウム水溶液を加えて 1 9 °Cで 6時間撹拌した。反応終了後、 40°Cでメタノールを留去し、塩酸を加えて系を酸性とした後、メチルターシャリーブチルエーテルにより抽出することにより、目的とする（2 S， 3 R) — 3—シクロへキシルー 2， 3—エポキシプロピオン酸を 0.89g (収率 96 %) 得た。

実施例 4 ： (2 S*， 3 R*) 一 3—シクロへキシル一 2， 3—エポキシプロピオン酸べンジルの光学分割実施例 3と同じ小型擬似移動床式クロマトダラフ分取装置を用いて、実施例 3に準じて合成した（2 S*, 3 R*) — 3—シクロへキシルー 2， 3—ェポキシプロピオン酸べンジルの光学分割を行つた。

運転を通して各種操作条件を調整し、得た最適運転条件を以下に記す。カラム：ダイセル化学 (株)製 CHRALPAK (登録商標） AD、サイズ： <|) 3 cmX 10 cm、

カラム本数： 8本、

移動相：メタノール 100 %、

試料濃度： 120 g Z 1、

Feed流量： 3.5m LZm i n、

Extract流量： 96mL/m i n、

Raffinate流量 : 13 mL Zm i n、

Eluent流量： 105.5m LZm i n、

Recycle流量： 169mLZm i n、

Step time： 1.48m i n。

小型擬似移動床式クロマトグラフ分取装置運転の結果得られた前成分 (Raffinate) 光学純度、後成分（Extract; 目的とする異性体）光学純度および生産性を表 1に記載する。最適運転条件により、最適運転条件での目的化合物の (2 S, 3 R) — 3—シク口へキシルー 2， 3一エポキシプロピオン酸べンジルを、目的とする光学純度 98 %e.e.以上の光学純度で得ることができた。その際の生産性（小型擬似移動床式クロマトグラフ分取装置に充填した分割剤の単位質量あたり、一日に取得できる光学活性体の質量）は、 0.77 kg-enan./kg-csp/day 7cつた。

このようにして得た (2 S, 3 R) 一 3—シクロへキシル _ 2， 3—ェポキシプロピオン酸ベンジル 1.0 gを、 5 mLのメタノールに溶解し、 5mLの 1 N水酸化ナトリゥム水溶液を加えて 19でで 6時間撹拌した。反応終了後、 40°Cでメタノールを留去し、塩酸を加えて系を酸性とした後、 t一ブチルメチルエーテルにより抽出することにより、目的とする（2 S， 3R) —3 ーシクロへキシルー 2， 3—エポキシプロピオン酸を 0.61g (収率 94%) 得た。

表 1

実施例 5 ：加水分解酵素を用いた (2 S*， 3R*) 一 3—シクロへキシルー 2, 3 _エポキシプロピオン酸エステルの光学分割による（2 S, 3 R) - 3—シク口へキシノレ一 2, 3一エポキシプロピオン酸またはそのエステノレの生産

(2 S*， 3R*) — 3—シクロへキシルー 2, 3—エポキシプロピオン酸エステルを基質とした加水分解反応での速度論的光学分割による（2 S， 3 R) — 3—シクロへキシル一 2, 3—エポキシプロピオン酸の生産に適した酵素の探索、および（2 S*， 3R*) — 3—シクロへキシル _ 2， 3—ェポキシプロピオン酸エステルを基質として速度論的光学分割により（2 S， 3 R) — 3—シクロへキシル一 2, 3 _エポキシプロピオン酸エステルを残存させるような酵素の探索を次のように行った。（2 S*， 3R*) — 3—シク口へキシルー 2， 3一エポキシプロピオン酸エステルが 100 g/Lとなるように調製された O.lmLのジメチルスルフォキシド溶液に 1 O OmM KP B ( H7.0) を 0.9mL加えて撹拌した。これに表 2に示した各酵素粉末をそれぞれ記載した量を加え、 30°Cで撹拌させながら反応させた。反応液は 0.1N-HC 1を lmL添加することにより停止させ、これを反応終了液とした。反応終了液を遠心分離し、不溶性成分を除去した後、生成した（2 S, 3 R) 一 3—シクロへキシノレ一 2， 3—エポキシプロピオン酸またはそのェステルを以下に示す「分析方法 1」で定量した。また、生成した（2 S， 3 R) — 3—シクロへキシルー 2, 3—エポキシプロピオン酸またはそのエステルの光学純度を以下に示す「分析方法 2」で分析した。結果おょぴ使用した各酵素量および反応時間を表 1に示す。各酵素の評価は、選択性の指標として、変換率と生成物（2 S， 3 R) 一 3—シクロへキシルー 2， 3—ェポキシプロピオン酸またはそのエステルの光学純度から導かれる鏡像体選択率 (E値， E = In [(l-c)(l-ee(S)] I In [(1- c)(l+ee(S)] = In [1 - c(l+ee(P)] I In [l-c(l-ee(P)], S：基質， P：生産物， c：変換率， ee：光学純度）を評価することによって行った。光学純度が正の値であるものは、（2 S*， 3R*) — 3—シク口へキシル _ 2， 3—エポキシプロピオン酸エステルを基質として (2 S, 3 R) — 3—シクロへキシルー 2, 3 _エポキシプロピオン酸を表に記載した E値で加水分解反応により生産するものであり、光学純度が負の値であるものは、（2 S*， 3 R*) — 3—シクロへキシルー 2， 3—ェポキシプロピオン酸エステルを基質として（2 S， 3 R) —3—シクロへキシル — 2， 3一エポキシプロピオン酸エステルを表に記載した E値で残存させる酵素である。

「分析方法 1」

カラム： Inertsil ODS- 2(15 OmmX 4.6mm) (GLサイェンス (株)製）温度： 40°C

検出： UV 21 Onm

溶離液： 5 OmM KPB(pH2.5)：ァセトニトリル = 6 ： 4

流速'： 1.0mL/min 「分析方法 2」

カラム： CHIRALPAKAS-H (ダイセル化学工業 (株)製) 温度： 25°C

検出： RI

溶離液： H/I/T= 9 5 I 5 /0.1

流： 1.0 mL/min

実施例 6 ： (2 S*， 3 R*) - 3ーシクロへキシル一 2, 3—エポキシプロピオン酸の光学分割（分別晶析）

(2 S*, 3R*) —3—シクロへキシル一2， 3—エポキシプロピオン酸 1 gを酢酸ェチル 3 gに溶解させた。溶解後（R) - 1 - (1—ナフチル）ェチルァミン 1 gおよび tーブチルメチルエーテル 1 5 gを加え混合し、 0°Cで 15時間静置した。析出した結晶をろ過し t—プチルメチルエーテル 5 gで洗浄し減圧下 40°Cで乾燥することで（2 S*， 3 R*) —3—シクロへキシルー 2， 3—エポキシプロピオン酸（R) — 1— (1—ナフチル）ェチルァミン塩 0.86 gを 86 %d.e.で得た。

[a]_D=+15.6, 86%d.e. (CHCls, 20°C, c=1.04)

(2 S*, 3 R*) 一 3—シク口へキシル一 2, 3—エポキシプロピオン酸 (R) - 1 - (1一ナフチル）ェチルァミン塩の d.e.および（2 S*， 3R*) — 3—シク口へキシル一 2， 3一エポキシプロピオン酸の e.e.は以下の方法にて決定した。

(2 S*, 3 R*) 一 3—シクロへキシル一 2， 3 _エポキシプロピオン酸 (R) - 1 - ( 1一ナフチノレ) ェチルァミン塩 1 Omgに t一ブチルメチルエーテル 1 gおよび 1 N塩酸 1 gを加えよく振り混ぜた。上層を分取し、減圧下で溶剤を留去した。残渣を H PLCにて分析することのより、光学純度を決定した。

[分析条件]

カラム： CHIRALCEL OD— H、

カラム温度： 25°C、

移動層： n—へキサン： 2—プロパノーノレ：トリフルォロ酢酸 = 90:10:0,1、流直： LOmL/min^

検出波長： 220nm、

保持時間：目的物 4.9min (2R、 3 S) 体 5.9min。

実施例 7 ： 2—アミノー 3—シク口へキシルー 2—ヒドロキシプロピオン酸誘導体の光学分割 ( (2 S*， 3 R*) 一 3—シク口へキシル一 2, 3—ェポキシプロピオン酸の開環反応による）室温で 5 OmL三口フラスコに、（2 S*， 3R*) — 3—シクロへキシル一 2, 3—エポキシプロピオン酸 5.00 g (純度： 90.6w t %) ， 2N— Na OH水溶液 14.6m Lを滴下した。 40°Cに加熱した撹拌溶液中へ、（R) — 1—フエニルェチルァミン 6.46 gを 35分かけて滴下後、 90 °Cまで加熱した。さらに同温度で 23.5時間撹拌した。反応溶液を放冷後、 1 00 m Lビーカー中の 2N— HC 1水溶液 26.6m LZ t—ブチルメチルエーテル 3.0m L の混合溶液へ、 0〜1 0°Cで反応溶液を逆滴下し、 2— ( (1 R) — 1ーフェ-ノレエチノレアミノ） — 3—シクロへキシノレ一 3—ヒドロキシプロピオン酸を晶出させた。三口フラスコを脱イオン水 1 OmLでリンスした。この撹拌溶液の pHを 3.0〜4.0に調整した。さらに室温下、 30分撹拌した。このスラリー溶液をろ過し、脱イオン水 5 OmLでリンスした。ろ物をー且取り出し、 1 0 OmLビーカー中で、脱イオン水 5 OmLと 1時間撹拌し、（R) 一 1—フヱニルェチルァミンの塩酸塩を完全に除去した。この撹拌混合物をろ過し、脱イオン水 Zアセトン (2 5mL/2 5mL) で二回リンスした。この湿結晶を 5 0〜6 0°C、真空条件下乾燥し、 2— ( (1 R) — 1一フエニノレエチノレアミノ）一 3—シクロへキシノレ一 3—ヒドロキシプロピオン酸 5.61 g (71%) を僅かに茶色が着色した白色結晶として得た。

[ジァステレオ分割]

室温で 1 OmLビーカー中、 2— ( (1 R) 一 1—フエニノレエチノレアミノ）一 3—シク口へキシルー 3—ヒドロキシプロピオン酸 8 7 5mgの 3 N— N a OH水溶液 2.0m L撹拌溶液 (pH13.72) 中へ、 1 N— HC 1水溶液 2.7 mLを滴下した（pHll.0) 。さらに同温度で 2時間撹拌した。このスラリー溶液（pHll.5) をろ過し、脱イオン水、アセトンにてリンスした。得られた湿結晶を 50〜 60 ° (：、真空乾燥条件下乾燥し、（2R, 3 R) —2— ( (1 R) 一 1一フエニノレエチルァミノ）一 3—シクロへキシルー 3—ヒドロキシプロピオン酸（2 1 1mg， 23.5%, 94.6%d.e.) を白色結晶として得た。目的物のジァステレオ比は、以下の条件で HP LC分析することにより決定した。

[H PLC分析条件]

カラム： YMC- Pack ODS-A, A - 302 (4.6mmI.D. X 150 mm),

移動相：ァセトニトリノレ /2 OmMリン酸ニ水素力リゥム（pH3.0) = 2/8

※リン酸にて pH調整、

検出波長： 254rmi、

カラム温度： 30°C、

流直： 1.0m L/mm^

注入量： 20 μ L、

保持時間：必要成分 (R, R, R)体， 13.5min.，不要成分 (S， S, R)体， 15.1 mm. 、

サンプル：試料 10 mgを MeCN 4 m Lと 1 N - HClaq ImLに溶解し調整した。

実施例 8 ： (2 R, 3 R) - 2 - (N— t—ブチルォキシカルボニル）アミノー 3—シク口へキシル— 3—ヒドロキシプロピオン酸への誘導

l O OmLガラス内筒中の（2R, 3 R) _2— ( ( 1 R) —1—フエ二ルェチルァミノ） _ 3—シクロへキシル一3—ヒドロキシプロピオン酸 1.31 g (88.9%d.e.) へ、 Me OH7.9mLおよび 1 N— Na OH水溶液 2.3mLを滴下した。引き続き、 P d (OH) ₂/C 131 mg (Aldrich, Lot.02709KF,Pd content 20%， Moisuture contents 50%) を添加した。これをォートクレーブへ移し、オートクレーブ内を、 N₂置換（5.0k g f /cm²X 3) ，漏れテスト（5.0 k g f /cm²) , H₂置換（5.0 k g f / c m² X 3 ) 後、 H₂ 充填（5.0k g f /cm²) し、 50°Cで加熱撹拌した。さらに同温度で 4時間撹拌した。放冷 ·解圧後、 3 N— N a O H水溶液 0.75m Lを滴下し、 30分撹拌した。 P d (OH) ₂ZCをろ別後、脱イオン水 2.0mLでリンスした。得られたろ液へ、室温で B o c ₂01.18gを加え、 27〜33.5°Cで 18時間撹拌した。 TLC (下記条件）にて原料消失を確認、反応溶液を濃縮後、 t一ブチルメチルエーテル 8.0tn Lを加えた。水層の pHを 3N— Na OH水溶液で pH1 3とし、不純物を逆抽出した。氷冷下、この分液下層水へ 1N— H C 1水溶液を滴下し、 pH3.25 にて（2R， 3 R) —2— (N— t_ブチルォキシカルボニ^/) アミノー 3—シクロへキシ^ ^_ 3—ヒドロキシプロピオン酸を晶出させた。氷冷下、粘性の高い状態で晶出してきたため、これを室温下撹拌することで結晶として得た。 1時間撹拌後、 PH3.2に調整し、さらに 30分撹拌した。晶出溶液をろ過し、脱イオン水でリンスした。得られた湿結晶を 50〜60°C、真空条件下乾燥し、（2R, 3 R) ー2— （N— t —ブチノレオキシカノレボニ^^) ァミノ一 3—シクロへキシルー 3—ヒドロキシプロピオン酸 908 m g (70 %, 93.3%e.e.) を白色結晶として得た。

[TLC分析条件]

展開溶媒： n- BuOH/AcOH/H₂0= 4 / 2 / 1、

発色剤：ニンヒドリン、

Rf値：原料 (脱フエネチル体） 0.54, BCHP 0.88、

目的物のジァステレオ比は以下の条件での HP LC分析で決定した。

[H PLC分析条件]

カラム： CHIRALCEL OD— H (4.6mm φ X 250mm L) 、

移動相： Hex/IPA/TFA= 95 / 5 /0.1、

検出機器： UV, 210腹、

カラム温度：室温、

流直： 1.0m L I min、

注入量： 20 μし、

保持時間：不要成分 (R， S)体， 6.89 min.，必要成分 (R, R)体， 8.38 min. 、サンプル： 1 Omgを移動相 20 m Lに溶解した。産業上の利用可能性

本発明の方法によって効率的に製造される 3 _置換一（2R， 3R) 一 2 —保護されたァミノ一 3—ヒドロキシプロピオン酸、特に（2R， 3R) 一 2― (N- t—ブチノレオキシカノレボニノレ) ァミノ _ 3—シク口へキシノレ一 3 —ヒドロキシプロピオン酸は、医薬品の原料（例えば、抗エイズ薬）として有用である。

Claims

請求の範囲 1· 3—置換一トランス一 2—プロペン酸をタングステン酸またはその塩の存在下、過酸化水素で処理して、 3—置換一（2 S*， 3R*) — 2， 3— エポキシプロピオン酸とし、次いで (1) (R) 一 1—フエ-ルェチルァミン、 (2) (R) 一 1— (4ーメチノレフエ二ノレ) ェチノレアミン、 (3) ( + ) —シス一Ν—べンジノレ _ 2— (ヒドロキシメチノレ) —シクロへキシノレアミン、 (4) (R) — β—メチルフェニルェチルァミン、 (5) (R) —Ν—ベンジルー 1 _フエニルェチルァミン、 (6) ( 1 R, 2 S) 一 2—ァミノ— 1， 2—ジフエニルエタノール、または (7) (R) — 1一（1—ナフチル）ェチルァミン力ら選択される光学活性アミンを用いて塩とした後、光学分割し、 3—置換 - (2 S, 3R) -2, 3 _エポキシプロピオン酸の光学活性アミン塩とし、酸処理して 3—置換 _ (2 S， 3R) -2, 3—エポキシプロピオン酸を得、次いでアンモニアを用いてエポキシ基を開環した後、保護基を導入する反応に付すことを特徴とする、 3—置換一（2R， 3R) 一 2 _保護されたアミノー 3—ヒドロキシプロピオン酸誘導体の製造方法。 2. 3—置換一トランス一 2—プロペン酸をタングステン酸またはその塩の存在下、過酸化水素で処理して、 3—置換— （2 S*, 3 R*) -2, 3— エポキシプロピオン酸とし、次いで

(1) (R) _ 1ーフヱニルェチルァミン、

(2) (R) - 1 - (4ーメチノレフエ二ノレ) ェチルァミン、 (3) ( + ) —シス一 N—ペンジノレー 2— （ヒドロキシメチノレ）ーシクロへキシノレアミン、

(4) (R) — β—メチルフエニルェチルァミン、

(5) (R) —Ν—べンジノレ _ 1—フエニノレエチノレアミン、

(6) (1 R, 2 S) — 2—アミノー 1， 2—ジフエニルエタノール、または

(7) (R) 一 1— (1—ナフチノレ) ェチルァミン

力ら選択される光学活性アミンを用いて、塩とした後、光学分割することを特徴とする、 3—置換一（2 S, 3 R) —2, 3—エポキシプロピオン酸化合物と光学活性ァミンとの塩の製造方法。

3. 3_置換一（2 S， 3 R) -2, 3—エポキシプロピオン酸とアンモユアを用いて、エポキシ基を開環し、次いで保護基を導入する反応に付すことを特徴とする、 3—置換一（2R， 3R) 一 2 _保護されたァミノ一3— ヒドロキシプロピオン酸誘導体の製造方法。

4. 塩が（2 S, 3 R) 一 3—シクロへキシルー 2, 3—エポキシプロピオン酸（R) — 1— (1—ナフチル）ェチルァミン塩である請求の範囲 1、 2または 3記載の製造方法。

5. 3—置換一（2 S, 3 R) 一 2， 3—エポキシプロピオン酸化合物と

(1) (R) — 1一フエニルェチルァミン、

(2) (R) — 1— (4—メチノレフエニル) ェチノレアミン、

(3) ( + ) —シス一 N—ベンジルー 2— (ヒドロキシメチル）一シクロへキシノレアミン、

(4) (R) —/3—メチルフエニルェチルァミン、 (5) (R) 一 N—ベンジル一 1—フエニルェチルァミン、

(6) (1 R, 2 S) —2—アミノー 1, 2—ジフエニルエタノール、または

(7) (R) — 1— （1—ナフチル）ェチルァミン

力 ^選択される光学活性ァミンとの塩。

6. 3—置換— （2 S, 3 R) 一 2， 3—エポキシプロピオン酸化合物の 3位の置換基が、置換基を有していてもよい環状基または置換基を有していてもよレ、脂肪族炭化水素基である請求の範囲 5記載の塩。 7. 3—置換— （2 S， 3 R) -2, 3 _エポキシプロピオン酸化合物の 3位の置換基が、 1—メチルェチル基、 1—ェチルプロピル基、シク口ペンチル基、シクロへキシル基、シクロへプチル基、 1— 1ーシクロペンテン一 4ーィル基、テトラヒドロピラン一 4—ィル基である請求の範囲 6記載の塩。

8. (2 S, 3 R) — 3—シク口へキシルー 2， 3一エポキシプロピオン酸（R) — 1— (1—ナフチル）ェチルァミン塩である請求の範囲 7記載の

9. 3—置換一トランス一 2 _プロペン酸をタングステン酸またはその塩の存在下、過酸化水素で処理して、 3—置換— （2 S*， 3 R*) 一 2， 3— エポキシプロピオン酸とし、次いで

(1) (R) 一 1一フエニルェチルァミン、

(2) (R) — 1一（4—メチルフエニル）ェチルァミン、

(3) (S) -N, N—ジメチル _ 1—フエニルェチルァミン、

(4) ( + ) 一シス一 N—ベンジルー 2― (ヒドロキシメチル) —シクロへキシノレアミン、 (5) (R) —j3—メチルフエニルェチルァミン、

(6) (R) —N—べンジルー 1一フエニルェチルァミン、

(7) (1 R, 2 S) 一 2—ァミノ一 1, 2—ジフエニルエタノール、または

(8) (R) 一 1— (1一ナフチノレ) ェチルァミン

力、ら選択される光学活性ァミンと反応させてエポキシ基を開環し、光学分割し、一般式（ I ) ）

(式中、 R¹は置換基を有していてもよい環状基または置換基を有していてもよい脂肪族炭化水素基を表わし、 R²は保護されたァミノ基であり、（R) - 1一フエニルェチルァミノ基、 (R) 一 1— (4—メチノレフエニル) ェチノレアミノ基、（S) -N, N—ジメチル _ 1—フエニルェチルァミノ基、（+ ) —シス一 N—べンジノレ一 2一 (ヒドロキシメチノレ) ーシク口へキシルァミノ基、（R) _ ]3—メチルフエニルェチルァミノ基、（R) — N—ベンジル一 1一フエ-ルェチルァミノ基、（1R, 2 S) —1, 2—ジフエニルエタノールー 2—ァミノ基、または（R) — 1— (1—ナフチル）ェチルアミノ基を表わす。）

で示される化合物とし、次いで脱保護反応に付した後、保護基を導入する反応に付すことを特徴とする、 3—置換一（2R， 3R) —2—保護されたァミノー 3—ヒドロキシプロピオン酸誘導体の製造方法。

10. 3—置換一トランス一 2—プロペン酸をタングステン酸またはその塩の存在下、過酸化水素で処理して、 3—置換一（2 S*， 3 R*) 一 2, 3 一エポキシプロピオン酸とし、次いで

(1) (R) — 1—フエニルェチルァミン、 (2) (R) 一 1一（4—メチルフエニル）ェチルァミン、

(3) (S) -N, N—ジメチルー 1—フエ-ルェチルァミン、

(4) ( + ) 一シス一 N—ベンジノレ一 2一 (ヒドロキシメチノレ) ーシクロへキシルァミン、

(5) (R) _ ]3—メチノレフエニノレエチノレアミン、

(6) (R) —N—ベンジル一 1一フエニルェチルァミン、

(7) (1 R, 2 S) 一 2—アミノー 1, 2—ジフエニルエタノール、または

(8) (R) _ 1— (1 _ナフチノレ) ェチルァミン

(式中の記号は請求項 9と同じ意味を表わす。）

で示される化合物の製造方法。

1 1. 一般式（ I )

OH

_R1 ^圆 (I)

I²

(式中の記号は請求項 9と同じ意味を表わす。）

で示される化合物を脱保護反応に付し、次いで保護基を導入する反応に付すことを特徴とする、 3—置換一（2R, 3R) —2—保護されたアミノー 3 —ヒドロキシプロピオン酸誘導体の製造方法。

12. 一般式（ I )

(式中、 R¹は置換基を有していてもよい環状基または置換基を有していてもよい脂肪族炭化水素基を表わし、 R ²は保護されたァミノ基であり、（R) — 1一フエニルェチルァミノ基、（R) - 1 - (4一メチルフエニル）ェチルアミノ基、 (S) 一 N， N—ジメチル一 1—フエニルェチルァミノ基、（+ ) —シス一N—ベンジル一 2— (ヒドロキシメチノレ) ーシクロへキシノレアミノ基、（R) — /3—メチルフエニルェチルァミノ基、（R) — N—べンジルー 1一フエニルェチルァミノ基、 (1 R, 2 S) —1, 2—ジフエニルエタノール一2—ァミノ基、または（R) - 1 - (1—ナフチル）ェチルアミノ基を表わす。 )

で示される化合物。

13. R²が (R) —1一フエニルェチルァミノ基である請求の範囲 11記載の化合物。

14. 化合物が（2R， 3 R) —2— ( (R) 一 1—フヱニルェチル）ァミノー 3—シク口へキシルー 3—ヒドロキシプロピオン酸である請求の範囲 13記載の化合物。

15. 3—置換一トランス一 2—プロペン酸をタングステン酸またはその塩の存在下、過酸化水素で処理して、 3—置換一（2 S*， 3R*) 一 2， 3 一エポキシプロピオン酸とし、次いで必要に応じてエステルイ匕した後、クロマトグラフィ一により、光学分割し、 3—置換一（2 S, 3R) — 2, 3— エポキシプロピオン酸誘導体とし、次いでアンモニアを用いて、エポキシ基を開環し、次いで保護基を導入する反応に付すことを特徴とする、 3—置換 ― (2 R, 3 R) 一 2—保護されたアミノー 3—ヒドロキシプロピオン酸誘導体の製造方法。

16. 3—置換一トランス一 2—プロペン酸をタングステン酸またはその塩の存在下、過酸化水素で処理して、 3—置換— （2 S*， 3 R*) 一 2， 3 —エポキシプロピオン酸とし、次いで必要に応じてエステル化した後、クロマトグラフィ一により、光学分割し、 3—置換一 (2R, 3 S) -2, 3— エポキシプロピオン酸誘導体とし、次いでアンモニアを用いて、エポキシ基を開環し、次いで保護基を導入する反応に付すことを特徴とする、 3—置換 - (2 S, 3 S) —2—保護されたアミノー 3—ヒドロキシプロピオン酸誘導体の製造方法。

1 7. 2位のアミノ基の保護基が t—ブトキシカルボニル基またはべンジルォキシカルボニル基である請求の範囲 1、 3、 9、 1 1、 1 5または 16 記載の製造方法。

18. 2位のアミノ基の保護基が t一ブトキシカルボニル基である請求の範囲 3、 9、 1 1、 15または 16記載の製造方法。

1 9. 3位の置換基が 1一メチルェチル基、 1—ェチルプロピル基、シク口ペンチノレ基、シクロへキシル基、シクロへプチル基、 1ーシクロペンテン —4—ィル基、テトラヒドロピラン一 4—ィル基である請求の範囲 1〜3、 9-1 1, 1 5〜17のいずれかに記載の製造方法。