WO2004089108A1

WO2004089108A1 - Complement alimentaire destine a l'animal, en particulier la volaille

Info

Publication number: WO2004089108A1
Application number: PCT/EP2004/050523
Authority: WO
Inventors: Thierry Picaud; Amaury Greuter
Original assignee: Phytosynthese
Current assignee: Phytosynthese
Priority date: 2003-04-14
Filing date: 2004-04-14
Publication date: 2004-10-21
Anticipated expiration: 2005-10-14
Also published as: FR2853550A1; FR2853550B1

Abstract

Complément alimentaire destiné à l'animal, caractérisé en ce qu'il contient du cinnamaldéhyde et des thiosulfinates.

Description

COMPLEMENT ALIMENTAIRE DESTINE A L'ANIMAL. EN PARTICULIER LA VOLAILLE

L'invention concerne un complément alimentaire destiné à l'animal, en particulier la volaille et le gibier à plumes. Elle se rapporte également à l'utilisation dudit complément pour la fabrication d'une composition destinée au trailement préventif ou curatif des patliologies animales, au cours desquelles une présence surnuméraire de parasites flagellés et en particulier du genre Trichomonas et Histomonas est observée.

Les flagell s uniccllulaires sont des parasites connus pour leur implication dans les troubles digestifs chez l'animal. Ces parasites se manifestent dans de multiples patliologies.

Parmi les animaux susceptibles d'être infectés, on distingue tout d'abord les volailles et en pardeulier les dindes, le gibier à plumes (perdrix cl faisans) cl plus anecdotiquement le poulet sans pour autant que celte liste soit limitative. Ces animaux développenl des pai oiogies en liaison avec la présence de Trichomonas (Tetratrichomonas gallinarum) ou d'Histomonas (H. meleagridis).

Chez la dinde, H. meleagridis est l' agent de la pathologie enlérohépalique, communément appelée Histomonose. H melagridis possède un hôte intermédiaire, Heterakis gallinarum et probablement Ascaris galli. Cette pathologie est caractérisée par des diarrhées importantes, une inflammation el une ulcération des caecums el par des lésions hépatiques sur les animaux infectés. Sous sa forme clinique. l 'histomonose se traduit par des mortalités importantes et une baisse des performances zootechniques. Sous sa forme subelinique, la présence du parasite modifie l'équilibre de la flore intestinale et entraîne des dysbactérioses, qui se mani lestent par des troubles digestifs, en raison d'une quantité anormale de germes

pathogènes (Clostridium pe ingens, E. colï).

Chez le gibier à plumes, la présence de Trichomonas est associée à une pathologie des caecums, la trichomonose.

La prévention des pathologies liées à la présence de flagellés chez la volaille est notamment effectuée par administration de Nitro-imidazole et Dimetridazole (DMZ). Cependant le Dimitridazole a été identifié comme potentiellement carcinogônc pour le consommateur, de sorte que sa commercialisation est aujourd'hui inicrditc. Le produit commercialisé sous la marque NIFURSOL^® restait seul autorisé comme additif antiflagellé mais est interdit depuis le 01/04/2003.

Le document WO 00/47069 décrit une composition destinée au irailemeni des diarrhées sécrétriecs de l'humain ou de l'animal contenant un extrait de latex riche en proanthocyanidine avec un extrait de plante, en particulier de cannelle. L'association de proanthocyanidine el de cannelle csl plus précisément utilisée dans les patliologies dans lesquelles le Clostridium perfringens est impliqué.

Le document JP 05176689 décrit une composition destinée aux animaux non terrestres, en particulier aux poissons, contenant du cinnamaldehyde.

Le document DE 3508875 décrit l'utilisation de différentes huiles essentielles, en particulier de cannelle pour stimuler la réponse immune chez l'animal.

Le document FR-A-2 502 906 décrit un additif alimentaire utilisé pour l'cngraisscmonl intensif des volailles associant notammcnl cannelle el citron.

Le document GB-A-2 321 783 décrit un complément alimentaire destiné à l'animal, en particulier le cheval, associant molasse, oxyde de calcium el extrait de plantes, en particulier de l'ail.

Le document JP 2207758 décrit un complément alimentaire destiné à traiter les maladies infectieuses du poisson à base d'huiles essentielles. La nature de ces huiles n'est pas mentionnée.

Le document GB-A-2 1 18 420 décrit un additif alimentaire pour améliorer la qualité de la viande des petits animaux (poules, lapins) à base d'huiles essentielles, notammeni de cannelle et de sulfure de diallyl en présence d'autres huiles, et par exemple l'huile de citron.

Le document EP-A-0 819 386 décrit également un complément alimentaire en vue d'améliorer la qualité de la viande, noiammcnt du porc, à base d'epices choisies dans le groupe comprenant la cannelle et l'ail.

Le document US-A-5 882701 décrit les compositions alimentaires à base de cannelle destinées aux poules pour améliorer le goût des œufs.

Le document EP-A-1 053 686 décrit un complément alimentaire associant formaline, émulsiliant, amylacétate et au moins une huile essentielle parmi lesquelles l'huile essentielle d'ail el l'huile essentielle de cannelle.

Le document EP-A-0 843 965 décrit une composition pour la protection des plantes contre les insectes, à base de cannelle cl d'un extrait d'ail.

Le problème que se propose de résoudre l'invention est de développer une nouvelle composition susceptible d'inhiber le développement des flagellés, leur propagation (activité sur Hetera is) et de limiter leur incidence sur la flore. Un autre objectif de l'invention est de proposer un produit qui soit efficace dans des quantités les plus faibles possibles.

Or, le Demandeur a constaté que de manière tout à fait inattendue, l'association de cinnamaldehyde encore dénomme trans-cinnamaldéhydc et de thiosulfinates en présence éventuellement de limonène inhibaient le développement, chez l'animal, des parasites du genre trichomonas et histomonas.

L'invention a donc pour objet un complément alimentaire destiné à l'animal, qui se caractérise en ce qu'il contient du cinnamaldehyde et des thiosulfinates.

De manière connue, les thiosulfinates répondent à la formule RS₂OR'. On utilise avantageusement mais de manière non limitative les thiosulfinates choisis dans le groupe comprenant le diallyl sulfide, le diallyl disulfide, le diallyl trisullïde, le 5-alkyl-cystéine, le 5 alkyl-mercapto-cystéinc, l'alliinc, seuls ou en mélange.

Dans un mode de réalisation avantageux, le complément alimentaire de l'invention contient en outre du limonène.

Bien entendu, le cinnamaldehyde, le limonène et les thiosulfinate peuvent être obtenus par synthèse, mais également à partir d'un extrait végétal.

Ainsi le cinnamaldehyde peut être utilisé sous la forme d'un extrait de feuilles de cannelle de Chine, connue sous la dénomination latine Cinnamomum aromaticum Nées ou de la cannelle connue sous la dénomination cinnamomum

ceylani.

De même, les thiosulfinates peuvent être utilisés sous la forme d'un extrait, notamment de bulbe d'ail (Alliwn sativum) ou de bulbe d'oignon. L'extrait peut résulter du broyage du bulbe et se présenter sous forme solide, en poudre après séchage ou, sous forme liquide après dissolution en milieu aqueux de ladite poudre.

Lorsqu'on utilise directement l'extrait d'ail sous forme de poudre, on tant que source de thiosulfmate, l'extrait représente de 20 à 50 % en poids de la composition lorsque celle-ci se présente sous forme solide. Lorsque l'extrait se présente sous forme d'une solution aqueuse, ledit extrait représente entre 0,1 et 5 % de la composition lorsqu'elle se présente elle même sous forme liquide.

Enfin, le limonène peut être utilisé sous la forme d'un extrait de péricarpe de citron (Citrus limon).

Pour obtenir un extrait le plus concentré possible en cinnamaldehyde, limonène ou thiosulfinates, les extraits peuvent se présenter sous la orme d'huile essentielle.

En effet, l'huile essentielle de cannelle contient entre 50 et 90 % en poids de cinnamaldehyde, avantageusement entre 70 et 85 % en poids. Ladite huile essentielle contient en outre du méthoxycinnamaldéhyde, en pratique à raison de 20% en poids.

L'huile essentielle d'ail contient quant à elle entre 60 et 90 % de dérivés thiosulfinates. Elle est en pratique utilisée dans la composition de l'invention lorsque cette dernière se présente sous la forme solide, éventuellement en présence d'un extrait de bulbe, sous orme de poudre.

L'huile essentielle de Citron contient entre 60 et 75 % en poids de limonène. Ladite huile essentielle contient en outre du β pinènc, en pratique à raison de 10% en poids.

Bien entendu, les huiles essentielles citées peuvent être obtenues par toutes les techniques connues de l'homme du métier, en particulier par entraînement à la vapeur ou ébullition.

Pour rendre les huiles essentielles administrablcs par voie orale, la préparation de l'invention se présente, selon un premier mode de réalisation, sous forme d'une émulsion stabilisée, dans laquelle les huiles essentielles sont dispersées dans une phase aqueuse en présence d'un agent dispersant. Prcfércntiellemcnt. l'agent dispersant est un dispersant alimentaire, notamment choisi parmi les saponines ou les tweens.

Dans ce mode de réalisation, l'huile essentielle de cannelle représente entre 5 et 15 %, avantageusement 10 % en poids de la composition. Avantageusement. l'extrait d'ail se présente sous forme d'une solution aqueuse et représente entre 0,1 et 5 %, avantageusement 1 % en poids de la composition. L'huile essentielle de citron représente entre 0,5 et 5 %, avantageusement 1.7 % en poids de la composition.

En pratique, les tweens, quand ils sont utilisés, représentent entre 20 et 40 % en poids de la composition, avantageusement 30 % en poids. S'agissant des saponines, celles-ci représentent en pratique entre 0,5 et 5 %, avantageusement 1,5 % en poids de la composition.

Dans un auU'c mode de réalisation, la préparation se présente sous forme d'une

poudre sur laquelle sont adsorbées les huiles essentielles. En pratique, la poudre est constituée de silice ou issue de remoulage, en particulier de blé. S'agissant du bulbe d'ail, celui-ci peut être avantageusement utilisé directement sous forme de poudre bien que l'huile essentielle reste une solution alternative, seule ou en combinaison avec l'extrait de bulbe.

Dans ce mode de réalisation, l'huile essentielle de cannelle représente entre 3 et 15 %, avantageusement 7 % en poids de la composition. L'extrait de bulbe d'ail, sous forme de poudre représente entre 30 et 50 %, avantageusement 40 % en poids de la composition. L'huile essentielle de citron représente entre 0,1 et 5 %, avantageusement 1 % en poids de la composition. Dans une alternative, la composition contient un extrait de bulbe d'ail sous orme de poudre et d'huile essentielle.

Dans un troisième mode de réalisation, les huiles essentielles peuvent êlre microencapsulées, en particulier par des β 3-cyclodextrines, procédé conduisant cependant à augmenter de manière importante le coût de la préparation.

La préparation est administrée comme déjà dit par voie orale. Elle peut être incorporée soit dans l'alimentation soit dans l'eau de boisson. Dès lors, l'invention a également pour objet un aliment ou une eau de boisson destinés à l'animal, incorporant le complément alimentaire ci-avant décrit.

Lorsqu'il s'agit d'une eau de boisson, la préparation sous forme d'émulsion, est incorporée a raison de 0,1 a 3 ml, avantageusement de 0,35 à 2 ml par litre d'eau de boisson.

Comme déjà dit, la préparation peut être utilisée dans toutes les patliologies animales dans lesquelles les parasites flagellés, en particulier H. meleagridis et T. gallinarum, sont impliqués.

Dès lors l'invention concerne également l'utilisation du complément alimentaire pour la fabrication d'une composition destinée au traitement préventif ou curatif des patliologies animales au cours desquelles une présence surnuméraire des parasites flagellés, en particulier H. meleagridis et T. gallinarum est observée.

En pratique, les pathologies et animaux concernés par la préparation do l'invention comprennent les histomonoscs et trichomonoscs se développant chez les volailles (en particulier, les dindes, poulets, pintades) et chez le gibier à plumes.

Lorsque la source de cinnamaldehyde, limonène et thiosulffnatc est constituée d'huiles essentielles et que la préparation est utilisée dans le cadre d'un traitement préventif, la quantité d'huile essentielle totale administrée est comprise entre 30-100 ppm dans l'aliment et 50-200 ppm dans l'eau de boisson.

En revanche, lorsqu'il s'agit d'un traitement curatif, la quantité d'huile essentielle totale administrée est comprise entre 100 et 300 ppm dans l'aliment et 100 à 300 ppm dans l'eau de boisson.

Le Demandeur a par ailleurs constaté que le cinnamaldehyde, le limonène ou les thiosulfinates pris séparément avaient, à eux seuls, une action sur les parasites flagellés.

En d'autres termes, l'invention concerne également l'utilisation de cinnamaldehyde, limonène ou thiosulfinates pris séparément, pour la préparation d'une composition destinée au traitement préventif ou curatif des patliologies

animales au cours desquelles une présence surnuméraire de parasites flagellés, en particulier du germe Trichomonas et Histomonas est observée.

L'invention et les avantages qui en découlent ressortent bien des exemples de réalisation suivants.

Figure 1 : Effets de diverses concentrations d'huile essentielle de cannelle (C. aromaticum), de citron (C. limon) et d'ail (A sativum) sur la viabilité du T. gallinarum. Les données exprimées comme la moyenne +/- σ. Les correspondances des séries de dilutions aux concentrations sont les suivantes : 1 = 2 μ /ml, 2 = l μ /ml. 3 = 0,5 μ /ml, 4 = 0,25 μ /ml. 5 = 0,125 μ /ml, 6 = 0,0625 μ /ml, 7 = 0,030 μ /ml, 8 = 0,016 μ /ml, 9 = 0,008 μ /ml, 10 = 0,004 μ /ml, 11 = 0,002 μ /ml et 12 = 0,001 μ /ml.

Figure 2 : Effets de diverses concentrations en mélange de 50:50 de 2 huiles différentes choisies parmi la Cannelle, le citron et l'ail, sur la viabilité du T gallinarum. Les données exprimées comme la moyenne +/- σ. Les correspondances des séries de dilutions aux concentrations sont les suivantes : 1 = 2 μ /ml, 2 = 1 μ /ml, 3 = 0,5 μ /ml, 4 = 0,25 μ /ml, 5 = 0,125 μ /ml, 6 = 0,0625 μ /ml, 7 = 0,030 μ /ml, 8 = 0,016 μ /ml, 9 = 0,008 μ /ml, 10 = 0,004 μ /ml, 1 1 = 0.002 μ /ml et 12 = 0.001 μ /ml.

Figure 3 : Effets de diverses concentrations d'huiles essentielles de cannelle, de citron et d'ail sur la viabilité des H. meleagridis. Les données exprimées comme la moyenne +/- σ. (Do = jour 0, Di = jour 1 et D₂ = day2).

EXEMPLE 1

Dans cet exemple, on étudie l'activité inhibilrice de 3 huiles essentielles sur Tetratrichomonas gallinarum et Histomonas meleagridis. Le Demandeur a testé l'activité in vitro de trois huiles essentielles obtenues à partir de feuilles de cannelle (Cinnamomum aromaticum) (A) (fi l), de péricarpe de Citron (Cit us limon) (B) (fig l)et de bulbes d'ail (Allium sativum) (C) (fig 1), contre les deux parasites de volailles cités précédemment. On également été testés les mélanges A/B(fig 2 + 3). A/C (uniquement sur Tetratrichomonas gallinarum) fig 2, B/C (fig 2) (uniquement sur Tetratrichomonas gallinarum et) et A/B/C (uniquement svaHistomonas meleagridis.) (fig 3).

Matériel et méthode

Les huiles essentielles ont été obtenues par hydrodistillation à partir des feuilles de cannelle, du bulbe d'ail et du pressage à froid de péricarpe de Citron. Les huiles essentielles de cannelle et de citron ont été analysées à l'aide d'un appareil de Chromatographie en Phase Gazeuse (HP-INNOWax, Hewlett Packard) équipé d'une colonne do 60.0 m, 320 μm de diamètre et d'un film nominal de 0.50 μm d'épaisseur, et d'un détecteur à ionisation de flamme. La température du four varie de 100°C à 220°C à raison de 1.5 °C/mn et avec un split ratio de 1: 100. Le temps d'élution est de 95 mn. L'huile essentielle d'ail a été analysée avec un appareil HP-INNOWax instrument (Hewlett Packard) équipé d'une colonne silice capillaire (25 m, 0.32 mm i.d., 0.33μ d'épaisseur).

L'identification des composants a été déterminée à partir de standards et en fonction des temps de rétention respectif. La composition des huiles utilisées est décrite dans le tableau 1.

Huile de Ctnnamomum aromaticum Huile de Citrw. limon Huile de Album wttvum

Composés Composition Composés Composition Composés Composition

( du pouls LOUll) (« du poids lola ) (^cb ilu pouls total)

Trans-cinnamaldchydc 79,40 Lmioncnc 71, 10 Diallyl tπsulfîdc 49, S

Eugcnol 1 ,40 Pincnc 9,^0 Diallvl disulfîdc 29,8

Liπulol 1,20 Terpiπène 8,10 Dwllyl Milfide 1,3

Coumaπnc 0,40 P-cvmcnc 1,40 Limonène 1,2

Terpinéol Traces Allvl-méth'vl disulfide 0,9

Tableau 1 composition Uiiπuque des Lon titu nls principaux d'huiles esseπiielles de Ldnnelle (Ctnnamomum aromaticum), de citron (Citru. limon) et d'ail (Album .ativum)

Souches de parasites

La souche T. gallinarum a été isolée en Tchécoslovaquie à partir des caecums d'un canaid el cultivée en milieu axémquc, Tripticasc-Yeast-Maltosc (TYM, pH 7.2), 10 % scrum de cheval à 37°C inactivé à la chaleur.

La souche de H. meleagridis HmBR-a a été isolée à partir des fèces d'un poulet infecté oralement par Heterakis gallinarum, qui avait développé des signes d'histomonose. Le parasite et sa flore d'accompagnement ont été cultivés en milieu anaérobique à 39 °C sur un milieu Stcpkowski (20).

Culture de T. gallinarum

2 ml d'aliquots de culuirc de 7^". gallinarum (5. 10⁴ parasites/ml) ont été incubes en conditions anaérobies pendant 24 h à 37^DC. Pendant ce temps, 12 dilutions des compositions A. B, C ont été préparées dans des plaques en U à 96 puits (Prolabo. Lyon. France), hydrodisperséos avec du Tween 80 (Sigma, L'Islc d'Abeau, France). La dilution initiale était 4 % ; puis 100 μl de chaque ont été ajoutés au tube de culture, de sorte que les dilutions de chacune des compositions se soient étendues de 2 μ/ml à 0,001 μ/ml. Après 24 h d'incubation, la plus basse dilution de composition dans laquelle on a observé aucun parasite actif a été définie comme concentration léthalc minimum (CLM). Puis, le nombre de parasites dans chaque tube de culture a été estimé à l'aide d'une cellule de Malassez (Polylabo, Strasbourg, France).

Le témoin négatif contient une dilution de 0,2% de Tween 80 (2 μl/ml) (sigma) et le témoin positif contient du dimelridazole à 400 μl/ml. L'activité des mélanges A/B, A/C, B/C a été évaluée en utilisant la même méthode avec une première dilution de 2 μl/ml d'un mélange de 50:50 de 2 huiles différentes.

Culture de H. meleauridis

L'activité in vitro de chaque huile A, B, C contre des meleagridis de H. a été évaluée en utilisant une technique semblable. Brièvement, 2 aliquots d'un millilitre de ce parasite ont été incubées en conditions anaérobies avec une concentration de 10 parasites/ml.

4 dilutions de chaque huile ont été préparées comme décrit ci-dessus et supplémentaires à la culture de parasite afin d'obtenir des dilutions finales s'etendant de 2 μl/ml à 0,25 μl/ml . Apres incubation pendant 24 et 48 h, le nombre de parasites actifs dans chaque culture a été estimé par coloration au bleu de trypan à 0,4 % (technique Gibco BRL, Oergy Pontoisc. France). La plus basse dilution d'huile dans laquelle on a observé aucun parasite actif a été définie comme la concentration léthale minimum (CLM). Les mélanges de 2 huiles (C. Aromaticum et C. Limon) aux proportions d'un 50:50 et de 3 huiles (C. Aromaticum, C. Limom et A. Sativum) aux proportions d'un 50:30:20 ont été également examinés contre les histomonas.

Résultats des essais

Comme le montrent les figures, l'ensemble des huiles essentielles utilisées prises seules ou en combinaison inhibent le développement de T. gallinarum et H. meleagridis, avec une efficacité supérieure lorsque les trois huiles essentielle de cannelle, ail et citron sont utilisées ensemble (figure3).

Claims

REVENDICATIONS

1/ Utilisation d'un complément alimentaire contenant du cinnamaldehyde et des thiosulfinates pour la fabrication d'une composition destinée au traitement préventif ou curatif des pathologies animales au cours desquelles une présence surnuméraire des parasites flagellés, en particulier H. meleagridis et T. gallinarum est observée.

2/ Utilisation selon la revendication 1. caractérisée en ce que les thiosulfinates sont choisis dans le groupe comprenant le diallyl sulfide. le diallyl disulfide. le diallyl trisulfidc, le 5-alkyl-cystéinc, le 5-alkyl-mcrcapto-cystéinc, l'alléinc, seuls ou en mélange.

3/ Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que le complément alimentaire contient en outre du limonène.

4/ Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que le cinnamaldehyde se présente sous la orme d'un extrait de feuille de cannelle.

5/ Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que les thiosulfinates se présentent sous la forme d'un extrait de bulbe d'ail.

6/ Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que le limonène se présente sous la forme d'un extrait de péricarpe de citron.

Il Utilisation selon la revendication 4. caractérisée en ce que l'extrait de feuille de cannelle se présente sous la forme d'une huile essentielle de cannelle.

8/ Utilisation selon la revendication 5, caractérisée en ce que l'extrait de bulbe d'ail se présente sous la forme d'une huile essentielle ou sous la forme de poudre après broyage du bulbe puis séchage, ou sous la forme de solution aqueuse après dissolution de la poudre dans l'eau.

9/ Utilisation selon la revendication 6, caractérisée en ce que l'extrait de péricarpe de citron se présente sous la forme d'une huile essentielle de citron.

10/ Utilisation selon la revendication 5, caractérisée en ce que, lorsqu'il se présente sous la forme d'une émulsion, l'huile essentielle de cannelle représente entre 5 et 15 % en poids de la composition.

11/ Utilisation selon la revendication 6, caractérisée en ce que, lorsqu'il se présente sous la forme d'une émulsion, l'extrait de bulbe d'ail se présente sous forme d'une solution aqueuse et représente entre 0,1 et 5 % en poids de la composition.

12/ Utilisation selon la revendication 7, caractérisée en ce que lorsque, lorsqu'il se présente sous la forme d'une émulsion, l'huile essentielle de citron représente entre 0,5 et 5 % en poids de la composition.

13/ Utilisation selon la revendication 4, caractérisée en ce que, lorsqu'il se présente sous la forme d'une poudre, l'huile essentielle de cannelle représente entre 3 et 15 % en poids de la composition.

14/ Utilisation selon la revendication 5, caractérisée en ce que. lorsqu'il se présente sous la forme d'une poudre, l'extrait de bulbe d'ail sous forme de poudre représente entre 30 et 50 % en poids de la composition.

15/ Utilisation selon la revendication 6, caractérisée en ce que lorsque, lorsqu'il se présente sous la forme d'une poudre, l'huile essentielle de citron représente entre 0,1 et 5 % en poids de la composition.

16/ Utilisation selon l'une des revendications 1 à 15, caractérisée en ce que le complément alimentaire est incorporé dans un aliment ou une eau de boisson.