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WO2004048564A1 - 検体前処理デバイス - Google Patents

検体前処理デバイス Download PDF

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WO2004048564A1
WO2004048564A1 PCT/JP2003/015133 JP0315133W WO2004048564A1 WO 2004048564 A1 WO2004048564 A1 WO 2004048564A1 JP 0315133 W JP0315133 W JP 0315133W WO 2004048564 A1 WO2004048564 A1 WO 2004048564A1
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WO
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unit
nucleic acid
sample
holding
section
Prior art date
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PCT/JP2003/015133
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English (en)
French (fr)
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Ken Inose
Shinya Nakajima
Satoshi Hashiguchi
Jun Murakami
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Arkray Inc
Original Assignee
Arkray Inc
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Publication date
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Priority to AU2003302455A priority patent/AU2003302455A1/en
Priority to US10/536,827 priority patent/US20060134773A1/en
Priority to JP2004555058A priority patent/JP4456000B2/ja
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    • B01L2400/0644—Valves, specific forms thereof with moving parts rotary valves

Definitions

  • This article relates to a device that performs sample pre-processing. More specifically, the present invention relates to a pretreatment device for extracting a nucleic acid to be tested from a cell or the like in a nucleic acid test.
  • Genetic testing includes identification of pathogenic microorganisms that are difficult to culture, detection of pathogenic microorganisms during antibiotic treatment or at the beginning of infection, detection of antigens when dendritic antibodies are suspected, screening of pathogenic microorganisms, paternity testing, etc.
  • Individual ii ⁇ , and furthermore, genetic type diagnosis of leukemia 'solid tumors can be used to perform tests that were difficult with conventional clinical tests, such as confirmation of genetic diseases. The time to obtain the results is shorter than the method using bacterial culture, and it is effective for detecting bacteria that take a long time to culture. Furthermore, since DNA is stable depending on storage conditions, it is possible to perform tests on past samples such as frozen biopsy materials and bones.
  • the nucleic acids are electrophoresed on the prepared gel, transferred to the gel, and the recovery device is moved to the position of the target nucleic acid.
  • a method of recovering the target nucleic acid by further electrophoresis is known (for example, see Japanese Utility Model Application Laid-Open No. 5-828926).
  • the target nucleic acid is separated by electrophoresis of the nucleic acid on a plate-like electrophoresis gel, and a recovery chip is inserted near the band of the target nucleic acid to recover the nucleic acid.
  • a known method is known (see, for example, Japanese Patent Application Laid-Open No. 8-327595).
  • the purification method using a nucleic acid-adsorbing column requires centrifugation or suction, which makes automation difficult.
  • the conventional technique for recovering nucleic acid from a plate-like electrophoresis gel requires a plate-like electrophoresis gel, and performs edge electrophoresis on this plate-like electrophoresis gel. It is necessary to process the gel at the corresponding position of the target nucleic acid.
  • the time required for one test is long if this technique is used for genetic testing.
  • the gel used for electrophoresis is large, and the nucleic acid recovery rate may decrease due to bleeding of the nucleic acid band due to uneven gel.
  • larger gels require more power for electrophoresis.
  • the present invention uses the following means.
  • a sample pretreatment device including a sample introduction unit, a holding unit, a washing liquid storage unit, an eluate storage unit, and a discharge unit.
  • the function of releasing nucleic acid from a sample containing the target nucleic acid and the function of extracting and purifying the released nucleic acid can be integrated.
  • the detection sensitivity is not reduced in the pretreatment step.
  • the nucleic acid can be released from the disgusting sample in the device, and the released nucleic acid can be extracted and purified. Also, automation is easy, and the cost of pretreatment can be reduced. And it will be possible to perform the test with a familiar system.
  • FIG. 1 is a # perspective view showing the entire configuration of the pretreatment device
  • FIG. 2 is a perspective view showing the configuration of the device
  • FIG. 3 is a plan view of the same
  • FIG. 4 is a line ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ in FIG.
  • FIG. 5 is a sectional view taken along the line BB in FIG. 3
  • FIG. 6 is a view showing a step of holding the nucleic acid.
  • FIG. 7 is a view showing a step of washing the nucleic acid
  • FIG. 8 is a view showing a configuration for eluting the nucleic acid
  • FIG. 9 is a view showing a pretreatment device of the second embodiment
  • FIG. FIG. 11 is a plan view of a pretreatment device according to an embodiment
  • FIG. 11 is a diagram illustrating a nucleic acid collecting step
  • FIG. 12 is a diagram illustrating a configuration of a pretreatment device according to a fourth embodiment.
  • the pretreatment device 1 introduces a sample into the introduction unit 11, releases nucleic acid from the sample, and injects the nucleic acid into the holding unit 15, and after washing, takes out the nucleic acid.
  • the pretreatment device 1 includes a sample introduction unit, a holding unit, a washing liquid storage unit, an eluate storage unit, and a discharge unit on the base 2.
  • the groove provided on the base 2 is connected to the knob 10 and the connectors 6 and 7 for connecting the groove of the base 2 to the air pump.
  • the carrier 5 for retaining nucleic acids a silica membrane or the like can be used.
  • Actuators 8 and 9 are provided on the washing unit 3 and the eluent unit 4, respectively. When the actuators 8 and 9 are operated, the actuators 8 and 9 push the cleaning liquid unit 3 and the eluent unit 4, and the cleaning liquid and the eluate flow out onto the base 2.
  • Pretreatment device 1 introduces sample from introduction unit 11 and sends it to holding unit 15 It is.
  • the heater 12 is provided on a downward slope connecting a groove from the introduction portion 11 to the holding portion 15.
  • the sample introduced into the introduction section 11 moves on the heater 12 by gravity, capillary action, or the suction force of the pump 6 or 7.
  • the specimen is heated by the heater 12 to release nucleic acids from the specimen.
  • the washing solution storage unit 13 and the eluate solution storage unit 14 are formed in the concave portion of the base 2, and the washing solution storage unit 13 is provided with the washing solution cutout 3, and the eluate solution storage unit 14 Is provided with a storage liquid unit 4.
  • a holding portion 15, a discharge portion 16, and a sampling portion 17 are provided in the concave portion of the base 2.
  • the holder 15 is provided with a holder 5 for adsorbing and holding nucleic acids.
  • Connectors 6.7 connected to the air pump are connected to the discharge section 16 and the intake section 17 via grooves.
  • the sample injected into the introduction unit 11 moves on the heater 12 to release nucleic acid. Then, the sample is introduced into the part 15 together with the released nucleic acid, and the nucleic acid component is held by the holder 5. In this case, the sample can be smoothly introduced into the unit 15 by opening the valve 10 and sucking air from the connector 6 connected to the discharge unit 16.
  • the cleaning liquid flows out from the cleaning liquid storage section 13 and the holding section 15 is cleaned.
  • the cleaning liquid unit 3 is pushed by the actuator 9 to supply the cleaning liquid from the cleaning liquid storage unit 13 to the storage 15.
  • the cleaning liquid supplied to the holding unit 15 cleans the holding body 5 and flows to the discharge unit 16.
  • the holder 5 holds the nucleic acid, and unnecessary proteins and the like flow out to the outlet. In this case, the pulp 10 is closed, and air is sucked from the connector 6 connected to the discharge unit 16, so that the cleaning liquid can be smoothly introduced into the holding unit 15.
  • the eluate flows out from the eluate storage unit 14 to elute the nucleic acid in the holding unit 15.
  • the eluate unit 4 is pushed by the actuator 8 to supply the eluate from the eluate storage unit 14 to the holding unit 15.
  • the eluate supplied to the holding section 15 elutes the nucleic acid adsorbed on the holding body 5 and flows to the collection section 17.
  • the holder 5 releases the nucleic acid, and the held nucleic acid is supplied to the collection unit.
  • close Knob 10 and connect Connector 7 to Sampling Unit 17 By sucking more air, the eluate can smoothly flow into the collection section 17.
  • the sample introduction unit 11, the holding unit 15, the washing liquid storage unit 13, the eluate storage unit 14, and the discharge unit 16 are provided on one base 2, and each unit is provided. Since the connection is made by the groove, the nucleic acid can be easily collected on one substrate 2.
  • the pretreatment device 21 of the second embodiment the solution is circulated in the vertical direction to perform the action and elution of the nucleic acid to the insulin.
  • the pretreatment device 21 has an introduction part 22 from the top, a holding part 29, a filter 32, a gel tank 31, a negative electrode 33, a positive electrode 34, a sampling part 35, and an adsorbent storage part 23 from the top.
  • a washing liquid storage unit 26, 26, an eluate storage unit 24, and a drain tank 25 are provided.
  • a circulation path 27 connecting the respective storage units is provided in the center of the pretreatment device 21, and a pump 28 is provided in the circulation path 27.
  • a valve is provided at the connection point between the circuit 27 and each storage unit, so that the outflow and inflow of the liquid can be controlled.
  • a silica film or the like can be used as the holder of the holder 29.
  • the sample is introduced into the introduction part 22, and is introduced into the circulation path 27 via the filter 32 by the pump 28. Since the sample is introduced through the filter 32, the influence of dust contained in the sample can be eliminated. Then, the sample introduced into the circuit route 27 is supplied to the holder 29. If necessary, immediately before the sample is supplied to the holder 29, the adsorbent is discharged from the P and liquid storage unit 23, and the nucleic acid contained in the sample is adsorbed to the holder 29. is there.
  • the washing liquid flows out from the washing liquid storage unit 26, and a substance other than the nucleic acid held in the washing unit 29 is washed and washed. It is.
  • the liquid after the cleaning is discharged to the drain tank 25.
  • the eluate 24 is supplied to the holding section 29 to elute the nucleic acid adsorbed on the holding section 29.
  • the eluted nucleic acid is introduced into the gel tank 31 by electrophoresis by applying miE to the negative electrode 33 and the positive electrode 34. Then, the nucleic acid that has passed through the gel tank 31 is rubbed by the collection unit 35.
  • an introduction part 43, a sample supply path 44, a sampling part 48, a holding part 45, an eluate supply part 47, and a drain part 46 are engraved on the disk 42.
  • the disk 42 is drivable.
  • the path from the introduction part 43 to the drain part 46 is configured so that the distance from the center of the disk 42 becomes large, and the path from the eluate supply part 47 to the collection part 48 is also a disk. It is configured so that the distance from the center of 42 becomes large.
  • the sample in the introduction section 43 is supplied to the narrow section 45.
  • the nucleic acid is adsorbed on the holder of the holding section 45, and the other components are discharged to the drain section 46.
  • the disc 42 is rotated clockwise after introducing the washing solution into the introduction section 43, so that the nucleic acid adsorbed on the holder 45 can be washed.
  • the eluate is supplied to the eluate supply unit 47, and the disc 42 is rotated counterclockwise as shown in FIG. 11 (b), and the eluate is retained from the eluate supply unit 47. It is supplied to the sampling section 48 through the section 45. Thereby, the nucleic acid is collected and supplied to the nucleic acid collecting section 48 held in the holding section 45.
  • the pretreatment device 51 is composed of a first tank 53, a second tank 54, and a holding unit 52.
  • the first tank 53 and the second tank 54 have a configuration in which the bottom surface is inclined, and are configured to rise toward the part 52. Therefore, by supplying the sample to the first tank 53 or the second tank 54 and performing electrophoresis, the nucleic acid in the sample can be held in the holding section 52. Since the holding section 52 is configured to be very small in comparison with the volumes of the first tank 53 and the second tank 54, the nucleic acid can be easily concentrated in the holding section 52. Industrial applicability
  • a highly sensitive detection device By integrating the function of releasing nucleic acid from a sample and the function of extracting and purifying released nucleic acid, a highly sensitive detection device can be configured, and the detection device can be configured compactly. It is easy to carry out automatic dangling, and the cost of pretreatment can be reduced. Then, it becomes possible to carry out gene testing with a familiar system.

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Abstract

近年、ヒトゲノムの解読が進み、さまざまな生命現象と遺伝子の関連が解明されてきている。そして、この成果により、医学・医療は病態から病因へ、治療から予防へと視野を広げている。ここにおいて、遺伝子検査技術は重要な基盤となっている。そこで、核酸検査の前処理工程での検出感度の低下が生じないようにし、容易に自動化し、前処理のコストを低減し、遺伝子検査を身近なシステムとすることを課題とすし、検体導入部と、保持部と、洗浄液貯蔵部と、溶出液貯蔵部と、排出部とを備えた検体前処理デバイスを構成するものである。

Description

明 細 書
検体前処理デバイス 技術分野
本楽明は、 検体の前処理を行うデバイスに関するものである。 より詳しくは、 核酸検查において、 菌体などより検査 ¾ ^となる核酸を取出すための前処理デバ イスに関するものである。 背景技術
近年、 ヒトゲノムの解読が進み、 さまざまな生命現象と遺伝子の関連が解明さ れてきている。 そして、 この成果により、 医学 ·医療は病態から病因へ、 治療か ら予防へと視野を広げている。 ここにおいて、 遺伝子検査技術は重要な基盤とな つている。
遺伝子検査は、 培養困難な病原微生物の同定検査、 抗生物質加療中や感染初期 の病原微生物の検出、 樹亍抗体が疑われた際の抗原検出、 病原微生物の感猶原調 査、 親子鑑定などの個人 ii^、 さらに白血病'固形腫瘍の遺伝子レベルの病型診 遺伝病の確 断など従来の臨床検查では困難であつた検査を行うことがで きる。 そして、 結果を得るまでの時間が、 菌の培養を用いる手法に比べて短く、 培養に時間のかかる細菌の検出には威力を発揮する。 さらに DNAは保存条件に よっては安定しているため、 凍結生検材料、 骨など過去の検体からも検查を行う ことができる。
また、 近年増加傾向にある性感染症の検査において、 検査機会の拡大を図るベ く、 遺伝子検査が注目されている。
従来核酸の精 «縮方法としては、 フエノ一ルダク口口ホルム/エタノールを 用いた精製方法、 核酸を吸着するカラムを用いた精製方法、 磁性シリカビーズを 用いた精製方法等が知られている。
さらに、 平板状の電気泳動ゲルから核酸を回収する方法として、 作成したゲル におレ、て核酸を電気泳動し、 ゲルにぉレ、て目的とする核酸の位置に回収装置を移 動し、 更なる電気泳動により目的とする核酸を回収する方法が知られている （例 えば、 実開平 5— 8 8 2 9 6号公報を参照)。 この他に、 平板状の電気泳動ゲルにお!/ヽて、 核酸を電気泳動して目的とする核 酸を分離し、 目的とする核酸のパンド近傍に回収チップを挿入して核酸を回収す る方法が知られている （例えば、 特開平 8— 3 2 7 5 9 5号公報を参照)。
しかし、 従来核酸の精製濃縮方法にぉ 、て、 フエノール /ク口口ホルム Zエタ ノールを用いた精製方法は、 劇薬を使用するため、 高度の化学設備を必要とする ものであり、利用する環境が限定される。そして、操作に手間がかかるとともに、 高速遠心が必要となり、 自動化が困難である。 また、 高い精製精度を得ることが 困難である。
核酸を吸着する力ラムを用レ、た精製方法は、 遠心もしくは吸引操作を行う必要 があるので、 自動化が困難である。
さらに、 磁性シリカビーズを用いた精製方法は、 磁石によるビーズの回収を失 敗した場合や、 シリカビーズが磁性体より剥落した場合には、 サンプルにシリ力 が混入する可能性ある。 そして、 高い回収率を得ることが困難である。
さらに、 平板状の電気泳動ゲルから核酸を回収する従来の技術においては、 平 板状の電気泳動ゲルを必要とするとともに、 この平板状の電気泳動ゲルにぉレヽて —端電気泳動を行い、 目的核酸の該当位置のゲルを処理する必要がある。
電気泳動に用いられるゲルは、 衝撃に弱く、 生成過程により、 特性が大きくこ となる ^がある。 このため、 一般に電気泳動を行った後に、 紫外線により電気 泳動ゲルにおける目的核酸の位置を認識した後に、 目的核酸の含有量の多レヽ部分 を処理するものである。
このため、 遺伝子検査等にこの手法を利用する には、 一回の検査にかかる 時間が長くなる。 また、 電気泳動に用いるゲルが大きくゲルのムラによる核酸の パンドににじみにより核酸の回収率が低下する可能性がある。 さらに、 ゲルが大 きい には、 電気泳動に必要となる電力が大きくなる。
発明の開示
上記の課題を解決すべく、 本発明は次のような手段を用いる。
すなわち、 検体導入部と、 保持部と、 洗浄液貯蔵部と、 溶出液貯蔵部と、 排出 部とを備えた検体前処理デバイスを構成するものである。
このようなデパイスを構成することにより、 目的の核酸を含む検体から核酸を 遊離させる機能と、 遊離した核酸を抽出'精製する機能とを一体化させることに より、 前処理工程での検出感度の低下を生じなレヽようにするものである。
そして、 デバイス内で、 嫌己検体から核酸を遊離させ、 さらに、 遊離した核酸 を抽出'精製することができる。 また、 自動化が容易であり、 前処理のコストを 低減できる。そして遺 ^検査を身近なシステムで行うことが出来るようになる。 図面の簡単な説明
第 1図は前処理デバイスの全 ί權成を示す # 見図、 第 2図はデバイスの構成を 示す斜視図、 第 3図は同じく平面図、 第 4図は第 3図における Α— Α線断面図、 第 5図は第 3図における B— B線断面図、第 6図は核酸を保持する工程を示す図。 第 7図は核酸を洗浄する工程を示す図、第 8図は核酸を溶出する構成を示す図、 第 9図は第二実施例である前処理デバイスを示す図、 第 1 0図は第三実施例の前 処理デバイスの平面図、 第 1 1図は核酸の採取工程を示す図、 第 1 2図は第四実 施例の前処理デバイスの構成を示す図。
発明を実施するための最良の形態
次に、 本発明の実施の形態について図を用いて説明する。
図 1から図 5を用いて、 前処理デバイス 1の構成について説明する。
前処理デバイス 1は導入部 1 1に検体を導入し、 検体より核酸を遊離させ、 保 持部 1 5において核酸を麟し、 洗浄した後に、 核酸を取出すものである。 前処 理デバイス 1は、 基盤 2上に検体導入部と、 保持部と、 洗浄液貯蔵部と、 溶出液 貯蔵部と、 排出部とを備えたものである。 前処理デバイス 1の基盤 2上には、 検 体の導入部 1 1、 菌体'ウィルスから核酸を聽させるヒータ 1 2、 核酸を保持 する保持体 5、洗浄液ュ-ット 3、溶出液ュニット 4が配設されている。そして、 基盤 2に設けた溝にノ レブ 1 0、 基盤 2の溝をエアーポンプに接続するコネクタ 6 · 7が接続している。 核酸を保持する保持体 5としては、 シリカメンブレンな どを利用することが可能である。
そして、洗浄液ュニット 3および溶出液ュニット 4上には、ァクチユエータ 8 · 9が配設されている。 ァクチユエータ 8 · 9を作動させることにより、 このァク チユエータ 8 · 9が洗浄液ュニット 3、 溶出液ュニット 4を押して、 基盤 2上に 洗浄液、 溶出液が流出する。
前処理デバィス 1は導入部 1 1より、 検体を導入し、 保持部 1 5へと送るもの である。 基盤 2にお 、て、 図 5に示すごとく、 ヒータ 1 2は導入部 1 1より保持 部 1 5に通じる溝をつなぐ、 下りの傾斜面に設けられている。 これにより、 導入 部 1 1に導入された検体は、 重力又は、 毛細管現象、 ポンプ 6または 7の吸引力 によりヒータ 1 2上を移動する。 この際に、 ヒータ 1 2により検体を加熱し、 検 体より核酸を遊離させる。
洗浄液貯蔵部 1 3および溶出液貯蔵部 1 4は、基盤 2の凹部に構成されており、 洗浄液貯蔵部 1 3には洗浄液ュ-ット 3が配設されており、 溶出液貯蔵部 1 4に は貯蔵液ユニット 4が配設されている。 そして、 同様に基盤 2の凹部に保持部 1 5、 排出部 1 6、 採取部 1 7が設けられている。 保持部 1 5には核酸の吸着保持 をおこなう保持体 5が配設されている。 排出部 1 6およ Ό¾取部 1 7には溝を介 して、 エアーポンプに接続するコネクタ 6 · 7が接続している。
次に、 前処理デバイスによる前処理の構成について、 図 6から図 8を用いて説 明する。 まず、 導入部 1 1に注入された検体は、 ヒータ 1 2上を移動しながら核 酸を遊離させる。そして、検体は遊離した核酸とともに、 部 1 5に導入され、 核酸成分が保持体 5により保持される。 この際には、 バルブ 1 0を開き、 排出部 1 6に接続したコネクタ 6より空気を吸引することにより、 検体を円滑に 部 1 5に導入することができる。
この後、 図 7に示すごとく、 洗浄液貯蔵部 1 3より洗浄液が流出し、 保持部 1 5の洗浄を行う。 ァクチユエータ 9により、 洗浄液ュニット 3を押し、 洗浄液貯 蔵部 1 3より保^ ¾ 1 5へ洗浄液の供給を行うものである。 そして、 保持部 1 5 に供給された洗浄液は、 保持体 5を洗浄し、 排出部 1 6へと流れる。 保持体 5は 核酸を保持しており、 不必要なたんぱく質などが排出部に流出することとなる。 この際には、 パルプ 1 0を閉じ、 排出部 1 6に接続したコネクタ 6より空気を吸 引することにより、 洗浄液を円滑に保持部 1 5に導入することができる。
次に、 図 8に示すごとく、 溶出液貯蔵部 1 4より溶出液が流出し、 保持部 1 5 の核酸を溶出させる。 ァクチユエータ 8により、 溶出液ユニット 4を押し、 溶出 液貯蔵部 1 4より保持部 1 5 容出液の供給を行うものである。 そして、 保持部 1 5に供給された溶出液は、 保持体 5に吸着した核酸を溶出させ、 採取部 1 7へ と流れる。 保持体 5は核酸を放出し、 保持されていた核酸が採取部に供給される こととなる。 この際には、 ノ レブ 1 0を閉じ、 採取部 1 7に接続したコネクタ 7 より空気を吸引することにより、 溶出液を円滑に採取部 1 7へと流入させること ができる。
このように、 一つの基盤 2上に、 検体導入部 1 1と、 保持部 1 5と、 洗浄液貯 蔵部 1 3と、 溶出液貯蔵部 1 4と、 排出部 1 6とを備え、 各部を溝により接続す るので、 一つの基盤 2上においても容易に核酸の採取を行うことができる。 次に、 図 9を用いて第 2実施例について説明する。 第二実施例の前処理デパイ ス 2 1は、 液を縦方向に循環させて、 麟体への核酸の働および溶出を行うも のである。
前処理デバィス 2 1には、上部から導入部 2 2、保持部 2 9、フィルター 3 2、 ゲル槽 3 1、 負電極 3 3、 正電極 3 4、 採取部 3 5、 吸着液貯蔵部 2 3、 洗浄液 貯蔵部 2 6 · 2 6、 溶出液貯蔵部 2 4、 ドレイン槽 2 5が設けられている。 そし て、 前処理デバイス 2 1の中央には、 各貯蔵部を接続する巡回経路 2 7が配設さ れており、 巡回経路 2 7にポンプ 2 8が配設されている。 巡回回路 2 7と各貯蔵 部との接続個所にはバルブが配設されており、 液の流出および流入を制御可能に 構成しているものである。 なお、 保持部 2 9の保持体としては、 シリカ膜等を利 用できるものである。
前処理デバイス 2 1において、 検体は導入部 2 2に導入され、 ポンプ 2 8によ り、 フィルター 3 2を介して巡回経路 2 7内に導入される。 検体をフィルター 3 2を介して導入するので、検体に含まれるごみによる影響を排除できる。そして、 巡回経路 2 7に導入された検体は保持体 2 9に供給される。 必要ならば、 検体が 保持体 2 9に供給される直前には、 P及着液貯蔵部 2 3から吸着液を流出させ、 検 体中に含まれる核酸を保持部 2 9に吸着させるものである。
そして、 核酸力 S保持部 2 9に十分に保持された後に、 洗浄液貯蔵部 2 6より洗 浄液が流出し、 ィ 部 2 9に保持された核酸以外の物質を洗 、流す洗浄を行うも のである。 洗浄後の液は、 ドレイン槽 2 5へと排出される。 一定の洗浄が終了し た後には、 溶出液 2 4を保持部 2 9に供給して、 保持部 2 9に吸着した核酸を溶 出される。 そして、 溶出した核酸は、 負獻亟 3 3と正電極 3 4に miEを印加する ことにより、 電気泳動によりゲル槽 3 1内に導入される。 そして、 ゲル槽 3 1を 通過した核酸が、 採取部 3 5より揉取されるものである。
次に、 第三実施例について、 図 1 0を用いて説明する。 第三実施例の前処理デ バイス 4 1において、 ディスク 4 2上に、 導入部 4 3、 サンプル供給経路 4 4、 採取部 4 8、保持部 4 5、溶出液供給部 4 7、 ドレイン部 4 6が刻設されており、 ディスク 4 2は駆動自在に構成されている。 導入部 4 3からドレイン部 4 6に至 る経路は、 ディスク 4 2の中心からの距離が大きくなるように構成されており、 溶出液供給部 4 7から採取部 4 8に至る経路も、 ディスク 4 2の中心からの距離 が大きくなるように構成されている。
図 1 1 ( a ) に示されるごとく、 導入部 4 3に検体を導入した後に、 ディスク 4 2を時計回りに回転させると、 導入部 4 3の検体が膽部 4 5に供給される。 ここで、 核酸は保持部 4 5の保持体に吸着し、 他の成分はドレイン部 4 6に排出 される。 その後導入部 4 3に洗浄液を導入した後にディスク 4 2を時計周りに回 転させると、 保 4 5に吸着した核酸を洗浄することができる。 そして、 溶出 液供給部 4 7に溶出液を供給して、ディスク 4 2を、図 1 1 ( b )に示すごとく、 反時計回りに回転させると、 溶出液が溶出液供給部 4 7より保持部 4 5を介して 採取部 4 8に供給される。 これにより、 保持部 4 5において保持されていた核酸 力 採取部 4 8に供給されるものである。
次に、 図 1 2を用いて、 第四実施例について説明する。 第四実施例において、 前処理デバイス 5 1は、 第一槽 5 3、 第二槽 5 4、 保持部 5 2により構成されて レヽる。 第一槽 5 3および第二槽 5 4は、 底面がィ 斜した構成となっており、 部 5 2に向かって上昇する構成となっている。 このため、 第一槽 5 3もしくは第 ニ槽 5 4に検体を供給し、 電気泳動を行うことにより、 検体中の核酸を保持部 5 2におレ、て保持することができる。 保持部 5 2は第一槽 5 3およぴ第ニ槽 5 4の 容積に比べ、 非常に小さく構成されているので、 保持部 5 2において、 容易に核 酸の濃縮を行うことができる。 産業上の利用可能性
検体から核酸を遊離させる機能と、 遊離した核酸を抽出 ·精製する機能とを一 体化させることにより、 高レヽ感度の検出装置を構成でき、 検出装置をコンパクト に構成できる。 自動ィ匕が容易であり、 前処理のコストを低減できる。 そして遺伝 子検查を身近なシステムで行うことが出来るようになる。

Claims

請 求 の 範 囲
1 . 検体導入部と、 核酸の吸着を行う保持部と、 洗浄液貯蔵部と、 溶出液貯蔵 部と、 排出部とを備えたことを特徴とする検体前処理デバイス。
2. 1つの基盤上に、 検体より核酸を遊離させる検体導入部と、 核酸を保持す る保持部と、 洗浄液貯蔵部と、 溶出液貯蔵部と、 液の排出を行う排出部とを備え た請求項 1記載の検体前処理デバィス。
3. 基盤上において、 核酸を保持する保持部を、 検体より核酸を遊離させる検 体導入部、 洗浄液の排出をおこなう排出部およひ 保持部に された核酸を採 取する採取部と該基盤に設けた溝により接続したことを樹敫とする検体前処理デ ノ《イス。
4. 基盤上に、 検体より核酸を遊離させる検体導入部と、 核酸を保持する保持 部と、 核酸を回収する採取部と、 液の排出をおこなう排出部とを設け、
該採取部と排出部とにそれぞれエアポンプに接続したコネクタを接続し、 該コ ネクタの吸弓 Iにより基盤上の液の移動を制御することを特徴とする検体前処理デ バイス。
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