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WO2001084113A1 - Verfahren und vorrichtung für eine filtration einer flüssigen probe insbesondere zur gewinnung von medizinischen präparaten - Google Patents

Verfahren und vorrichtung für eine filtration einer flüssigen probe insbesondere zur gewinnung von medizinischen präparaten Download PDF

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Publication number
WO2001084113A1
WO2001084113A1 PCT/DE2001/001576 DE0101576W WO0184113A1 WO 2001084113 A1 WO2001084113 A1 WO 2001084113A1 DE 0101576 W DE0101576 W DE 0101576W WO 0184113 A1 WO0184113 A1 WO 0184113A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
tube
balloon
filter
sample
receptacle
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
PCT/DE2001/001576
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Gert Schlüter
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Individual
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Priority to AU62051/01A priority Critical patent/AU6205101A/en
Priority to DE10191691T priority patent/DE10191691D2/de
Publication of WO2001084113A1 publication Critical patent/WO2001084113A1/de
Anticipated expiration legal-status Critical
Ceased legal-status Critical Current

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Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
    • G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
    • G01N1/40—Concentrating samples
    • G01N1/4077—Concentrating samples by other techniques involving separation of suspended solids
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D35/00—Filtering devices having features not specifically covered by groups B01D24/00 - B01D33/00, or for applications not specifically covered by groups B01D24/00 - B01D33/00; Auxiliary devices for filtration; Filter housing constructions

Definitions

  • the invention relates to a method and a device for a filtration, in particular for the production of medical preparations.
  • Every organism has body fluids whose cell contents are subject to increasing artifact formation due to their physiological nature against preparation steps such as centrifugation, pressure or suction filtration or improper deposition on a slide, since the cell contents are particularly sensitive to mechanical influences. This problem typically arises when leukocytes are obtained from low-volume blood samples that have been hemolyzed in the preparative preparation.
  • Another area of application relates to small-volume samples, such as those e.g. occur in cyst punctures.
  • the cerebrospinal fluid obtained by aspiration from the lumbar spaces is particularly affected by artefact formation.
  • the cerebrospinal fluid Due to its low protein content, the cerebrospinal fluid is very hostile to cells. As a result, when the cells are narrowed at a
  • the method according to claim 1 is based on the process steps of taking the sample, filling the sample in a tube placed on a filtering device, running the sample through the filtering device, running out the sample after the filtration in a pipette tube-like riser tube and collecting the filtered ones Test in a balloon attached to the riser.
  • the first process step consists in making the sample itself available.
  • the sample can be obtained by customary, known methods.
  • samples are also suitable for the method according to the invention which regularly, for example in the case of punctures, only have a small volume of approximately 5 ml to 10 ml.
  • the sample is filled into a tube placed on the filter device.
  • a cylindrical, tube-like tube is intended here.
  • the connection of the tube to the filtering device, as well as the connection of all other tubes, balloons and the like, is carried out regularly in a liquid-tight and air-tight manner.
  • the sample in the tube above the filter device will now pass through the filter device, the filtering process taking place.
  • the sample is discharged after filtration in a pipette tube-like riser and ultimately becomes the filtered sample in one
  • This filtering method according to the invention has the advantage that it does not require any mechanical action from additional external pressure and / or suction devices. Only the pressure of the liquid column inside the tube acts.
  • Another advantage of the method according to the invention is that the tube can be calibrated with regard to the receiving volume, so that exactly a certain volume of the sample is only filled.
  • Transport device the subsequent transport of the sample to a filtering device, the opening of a closure, the attachment of the transport device to the Tube or preferably directly to the filtering device and opening the second closure.
  • This measure ensures that safe transport can take place, for example between a doctor taking the sample and a laboratory, without any transfer of the sample and thus the risk of contamination.
  • the transport device is expediently designed to be regularly tubular, with an opening which is suitable for being preferably connected to the filter device in an airtight and liquid-tight manner. It is not necessary to transfer the sample.
  • closures can be designed in a conventional manner as plugs, caps or the like.
  • the use of different closures has proven itself in practice, so that the connection to the filter device or. Tube suitable opening is clearly and unmistakably marked. Different colors of the closures are already suitable for this.
  • the other closure does not have to be removed entirely. It is sufficient if it can be opened for air to enter. The actual filtering process will then begin with the opening.
  • a balloon further allows, according to the invention, that the filtered sample liquid rises in the riser tube by exerting a pressure and the particles collected on a filter surface of the filtering device are dissolved by the rising sample liquid, after which the filtering process can be continued in the usual way.
  • the filtering process will certainly continue until the level of the filtered liquid in the balloon reaches the free opening of the riser.
  • the filtering process can be continued and the filtered sample can be taken, for example.
  • a sample in the case of a penetrated balloon, a sample can first follow the filter device solely by gravity, i.e. go through without any pressurization. This makes the filtering process very gentle and ideally suited for CSF cells, for example.
  • the filtering process can also be interrupted at any time.
  • Filtering device with attached balloon turned and by placing and pressing the filter surface with the filtered particles can be obtained on a slide a preparation.
  • the receiving volume of the riser tube is advantageously used as a backwashing chamber, since the filtered sample liquid in the riser tube with a precisely metered volume will rewet the particles collected on the filter surface.
  • a device for carrying out a filtration in particular for obtaining medical preparations, is further provided according to the invention, in which, according to claim 6, the aim is to have a receptacle for a filter to which one end a standpipe is connected, which is inserted in a balloon attached, and to which a tube is connected at the other end.
  • the connections are regularly made liquid and airtight.
  • the tube which preferably has a calibrated receptacle volume, can also be designed in a further embodiment of the invention, in particular as a transport container, with two closable openings, one of which is designed for connection to the receptacle.
  • a closure for example in the form of a cap or stopper, is to be removed regularly and the transport container is then connected as a tube to the filter receptacle. The other closure is then removed, pierced or the like, so that the contents of the
  • the tube also as a transport container, is tube-like and has a predetermined volume, for example 5 ml for CSF examinations or 10 ml for body fluids present in larger samples.
  • the filtering device itself can preferably be designed in the manner of the pipette-like filtering devices according to WO 00/20092.
  • the filter for the removal of a cell print is designed with a free surface of its receptacle and protrudes into the tube.
  • the filter is held in a conical receptacle that tapers towards the free filter surface.
  • the filter cross section can be constricted towards the free surface.
  • the filter will expediently have a porosity between 4 ⁇ m and 10 ⁇ m, in particular approximately 5 ⁇ m.
  • the receptacle and the riser pipe are formed in one piece.
  • the riser tube will regularly expand in a funnel-like manner to accommodate the filter. Since the one-piece embodiment of the receptacle and the riser pipe is difficult to design, in particular in the case of a changing cross section of the receptacle, it can alternatively be provided that an expansion of the riser pipe, as formed in a funnel-like manner at least in sections, also forms part of the receptacle for the filter.
  • the riser tube also regularly serves as a receptacle for a backwash volume, so that it should regularly have a predeterminable receptacle volume, in particular a receptacle volume of approximately 0.5 ml.
  • the length of the riser pipe should then be between 6 cm and 8 cm.
  • a length of the balloon between 6 cm and 10 cm, a sufficient distance between the base of the balloon and the riser pipe is then regularly guaranteed.
  • the balloon has a penetration point.
  • This penetration point can be pierced, for example, with a needle, so that filtered liquid from the
  • Balloon can be withdrawn for example by means of a syringe.
  • a penetration point is also understood here to mean a scraper which can be cut open or cut off, so that the contents of the balloon can be emptied by squeezing through the opening thus created.
  • the interior of the balloon is exposed to external pressure through such penetration.
  • the balloon should preferably have a capacity of between 8 ml and 15 ml.
  • the outer diameter of the balloon is approximately 17 mm. This outer diameter allows the device according to the invention in conventional stands for test tubes or to use the same and thus a secure hold of the device is given during the filtering process.
  • FIG. 1 of the drawing the device 1 according to the invention for carrying out a filtration, in particular according to the method according to the invention, is shown in a section.
  • the device 1 for carrying out a filtration, in particular for obtaining medical preparations has a receptacle 2 for a filter 3.
  • a receptacle 2 for a filter 3 One end of the
  • Recording 2 is a riser pipe 4 is attached, which has an expansion 5 for this purpose, which also forms part of the recording of the filter 3.
  • the riser pipe 4 opens into a connected balloon 6 over a base 7.
  • a tube 8 is connected to the receptacle 2, the geometry of which is basically free, but which, as shown, is preferably tube-shaped.
  • the tube 8 has two openings 9, 10.
  • the tube 8 can also be used as a transport container. After taking a sample, this makes it possible to fill one of the openings 9, 10 with a suitable closure, then also to close the further opening and to send the sample, for example, for an examination in a laboratory.
  • caps, plugs or the like are suitable as closures, the closures preferably being designed differently so that the opening 10 can be easily identified, with which the tube 8 can then be connected directly to the receptacle 2 as a transport container.
  • a suitably colored stopper can, for example, releasably close the opening 10 for transport.
  • the stopper 11 closing the other opening 9 can also be designed to be removable or, as shown, can be fixed in the opening 9.
  • This stopper 11 is then to be provided with a suitable device which allows the interior of the tube 8 to be connected to the ambient pressure.
  • a valve, a suitable membrane or a penetration point for piercing the stopper 11 will be considered, so that a direct breakthrough 12 to the surroundings can be created.
  • the tube 8 has a calibrated absorption volume of, for example, 5 ml or 10 ml. This measure means that a precisely sized sample is available for filtration.
  • Suitable sealing measures are regularly provided for connecting the tube 8 to the receptacle 2 of the filter 3. These can be carried out by a tight thread 13, suitable sealing rings for a snug fit or the like.
  • the actual filter device 14 largely corresponds to that disclosed in WO 00/20 092.
  • the filter 3 projects into the tube 8 with a free surface 15, the receptacle 2 formed above.
  • the can continue Recording 2 be tapered in such a way that the filter cross-section tapers towards the free surface.
  • the filter cross section can also be constricted towards the free surface 15, for example by a circumferential triangular cross-section nose 17 protruding from the inner wall 16 of the receptacle 2.
  • the filter 3 will furthermore have a porosity of preferably between 4 ⁇ m and 10 ⁇ m, in particular 5 ⁇ m, with which it can be optimally adapted to its purposes.
  • the volume of the sample then located in the riser 4 also serves as a backwashing liquid.
  • the volume of the riser tube 4 should be well defined, for example 0.5 ml. With an outside diameter of usually 3.3 mm and a length of 80 mm, such a volume can be achieved regularly.
  • the volume is then between 8 ml and 15 ml and is thus adapted to the volume of the tube 8.
  • the outer diameter of the balloon 6 of 17 mm allows the device 1 to be placed overall in a conventional test tube holder during the filtration process.
  • the balloon 6 has a penetration point 18, here z. B. in the form of a hat to be cut off.
  • a penetration point 18 By creating this opening, alternatively, for example, also by piercing a penetration point designed for this purpose with a thin wall by means of a syringe, a connection can be created between the surroundings and the interior of the balloon 6.
  • a penetration point 18 that can be opened makes it possible to remove the filtered sample from the balloon 6 without any problems.
  • a further penetration point 19 in the form of an opening 20 can also be provided, which opening 20 can be opened and closed again, here by means of a ring 21 applied to the balloon 6. This enables only a temporary penetration of the balloon 6.
  • a further opening 23 with a diameter of, for example, 0.3 mm is provided in the ring 21, so that the ring 21 can be rotated from a position closing the opening 20 into a position can be rotated with overlapping openings 21, 23, which creates a connection between the interior of the balloon 6 and the environment.
  • the location of the opening 20 in the balloon 6 is expediently marked, for. B. a red dot, a red circumferential ring or the like.
  • the closure of the opening 20 through the ring 21 can then be reliably recognized.
  • a corresponding marking can also have the ring 21 and if this consists of a transparent polypropylene or the like, it is ensured by covering the markings that the opening 20 is released.

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Abstract

Für eine besonders schonende Filtration wird eine Probe in einem auf eine Filtriervorrichtung (14) aufgesetzten Tubus (8) abgefüllt, aus dem die Probe durch die Filtriervorrichtung (14) in ein pipettenrohrartigen Steigrohr (4) abläuft. Aus dem Steigrohr (4) austretend wird diese filtrierte Probe in einem an das Steigrohr (4) angesetzten Ballon (6) gesammelt. Hierzu wird eine Vorrichtung vorgeschlagen, die eine Aufnahme (2) für einen Filter (3) aufweist, an die einerends das Steigrohr (4) angeschlossen ist, das in dem angesetzten Ballon (6) eingeführt ist, und an die andernends der Tubus (8) angeschlossen ist.

Description

Verfahren und Vorrichtung für eine Filtration einer flüssigen Probe insbesondere zur Gewinnung von medizinischen Präparaten
Beschreibung:
Die Erfindung betrifft ein Verfahren und eine Vorrichtung für eine Filtration insbesondere zur Gewinnung von medizinischen Präparaten.
Jeder Organismus weist Körperflüssigkeiten auf, deren Zellinhalte aufgrund ihrer physiologischen Beschaffenheit gegen Präparationsschritte wie Zentrifugation, Druck- oder Saugfiltration oder unsachgemäßer Deponierung auf einem Objektträger einer zunehmenden Artefaktbildung unterliegen, da die Zellinhalte besonders empfindlich auf mechanische Einflüsse reagieren. Typischerweise stellt sich diese Problematik bei der Gewinnung von Leukozyten aus geringvolumigen Blutproben, die in der präparativen Vorbereitung hämolysiert wurden. Ein anderes Anwendungsgebiet betrifft die kleinvolumigen Proben, wie sie z.B. bei Zystenpunktaten auftreten.
Von einer Artefaktbildung besonders betroffen ist weiter die durch Aspiration aus den Lumbairäumen gewonnene Liquorflüssigkeit .
Bedingt durch ihren geringen Eiweißgehalt ist die Liquorflüssigkeit als sehr zellfeindlich anzusehen. Infolge werden bei einer Einengung der Zellen bei einer
Zentrifugation in der Umgebungsflüssigkeit und bei der Abtrennung der Zellen aus dieser durch ungünstige Änderung der onkotischen Druckverhältnisse vermehrt Zellalterationen auftreten.
Vor diesem Hintergrund stellt sich die Aufgabe, ein besonders schonendes Filtrationsverfahren und eine Vorrichtung insbesondere zur Durchführung des Verfahrens zur Verfügung zu stellen, durch die die mechanischen Einflüsse auf die Probe gering gehalten werden können, mit denen ein effektives Arbeiten ermöglicht ist und die rationell eingesetzt werden können. Dies insbesondere im Hinblick auf den hohen Stellenwert der Liquorzytologie in der exfoliativen Zytologie.
Diese Aufgabenstellung wird durch das Verfahren nach Anspruch 1 und die Vorrichtung nach Anspruch 6, insbesondere auch zur Durchführung des erfindungsgemäßen Verfahrens geeignet, gelöst.
Das Verfahren nach Anspruch 1 stellt auf die Verfahrensschritte der Entnahme der Probe, des Abfüllens der Probe in einem auf eine Filtriervorrichtung aufgesetzten Tubus, des Ablaufens der Probe durch die Filtriervorrichtung, des Auslaufens der Probe nach der Filtration in einem pipettenrohrartigen Steigrohr und des Sammeins der filtrierten Probe in einem an das Steigrohr angesetzten Ballon ab.
Der erste Verfahrensschritt besteht in der zur Verfügungsstellung der Probe selbst. Hierbei kann die Probe nach üblichen, bekannten Verfahren gewonnen werden.
Insbesondere sind für das Verfahren nach der Erfindung auch Proben geeignet, die regelmäßig, beispielsweise bei Punktationen, ein geringes Volumen von ca. 5 ml bis 10 ml nur aufweisen.
Die Probe wird in einem auf die Filtriervorrichtung aufgesetzten Tubus abgefüllt. Insbesondere ist hier an einen zylindrischen, röhrenartigen Tubus gedacht. Der Anschluß des Tubus an die Filtriervorrichtung, wie auch der Anschluß aller übrigen Rohre, Ballone und dergleichen erfolgt regelmäßig flüssigkeitsdicht und luftdicht.
Die über der Filtriervorrichtung im Tubus anstehende Probe wird nun die Filtriervorrichtung durchsetzen, wobei der Filtriervorgang erfolgt. Der Auslauf der Probe nach Filtration erfolgt in einem pipettenrohrartigen Steigrohr und wird letztlich die filtrierte Probe in einem an das
Steigrohr, wiederum luft- und flüssigkeitsdicht angesetzten Ballon gesammelt .
Es hat dieses erfindungsgemäße Filtrierverfahren den Vorteil, daß es ohne jede mechanische Einwirkung zusätzlicher äußerer Druck- und/oder Saugvorrichtungen auskommt . Es wirkt lediglich der Druck der Flüssigkeitssäule innerhalb des Tubus .
Ein weiterer Vorteil ergibt sich durch die Maßnahme, daß das pipettenrohrartige Steigrohr in dem Ballon regelmäßig mit Flüssigkeit gefüllt ist. Hierdurch werden die auf der Filteroberfläche gesammelten Partikel feucht gehalten. Dies auch gerade dann, wenn innerhalb des Tubus über der Filteroberfläche keine Probenflüssigkeit mehr ansteht.
Ein weiterer Vorteil des erfindungsgemäßen Verfahrens liegt darin, daß der Tubus hinsichtlich das Aufnahmevolumen geeicht sein kann, so daß exakt ein bestimmtes Volumen der Probe lediglich eingefüllt wird.
Von besonderem Vorteil bei dem erfindungsgemäßen Verfahren ist die Möglichkeit des Abfüllens der Probe nach ihrer Entnahme in eine insbesondere rohrartige, zwei durch Verschlüsse verschließbare Öffnungen aufweisende
Transportvorrichtung, des daran anschließenden Transportes der Probe hin zu einer Filtriervorrichtung, des Öffnen eines Verschlusses, des Ansetzens der Transportvorrichtung an den Tubus oder bevorzugt unmittelbar an die Filtriervorrichtung und des Öffnens des zweiten Verschlusses . Durch diese Maßnahme ist gewährleistet, daß ein sicherer Transport, ohne jedes Umfüllen der Probe und damit einhergehend der Gefahr einer Verunreinigung, zwischen beispielsweise einem die Probe entnehmenden Arzt und einem Labor, erfolgen kann. Hierzu wird zweckmäßigerweise die Transportvorrichtung regelmäßig rohrartig ausgebildet sein, mit einer Öffnung, die geeignet ist, bevorzugt an die Filtriervorrichtung luft- und flüssigkeitsdicht angeschlossen zu werden. Ein Umfüllen der Probe ist so nicht von Nöten.
Die Verschlüsse können in an sich üblicher Art als Stopfen, Kappen oder dergleichen mehr ausgebildet sein. Bewährt hat sich in der Praxis die Verwendung unterschiedlicher Verschlüsse, so daß die zum Anschluß an die Filtriervorrichtung resp. Tubus geeignete Öffnung deutlich und unverwechselbar gekennzeichnet ist. Hierzu eignen sich bereits unterschiedliche Farben der Verschlüsse.
Der andere Verschluß muß nicht gänzlich entfernt werden. Es reicht, wenn er für einen Lufteintritt geöffnet werden kann. Mit der Öffnung wird dann der eigentliche Filtrierprozess beginnen.
Die Verwendung eines Ballons erlaubt es erfindungsgemäß weiter, daß durch Ausüben eines Druckes die filtrierte Probenflüssigkeit im Steigrohr aufsteigt und durch die aufsteigende Probenflüssigkeit die auf einer Filteroberfläche der Filtriervorrichtung gesammelten Partikel gelöst werden, wonach der Filtriervσrgang in üblicher Weise fortgesetzt werden kann.
Je nach zu filtrierender Probe können eine erhebliche Anzahl an Zellinhalten anfallen, die die Filteroberfläche gleichsam verstopfen. Ohne in Berührung mit der Probe oder der eigentlichen Filtriervorrichtung zu kommen, kann durch diese erfindungsgemäßen Verfahrensschritte dieses Problem gelöst werden und der Filtriervorgang bis zu seinem Ende fortgesetzt werden.
Der Filtriervorgang wird sicher solange andauern, bis das Niveau der filtrierten Flüssigkeit im Ballon die freie Öffnung des Steigrohres erreicht.
Wird der Ballon weiter geeignet penetriert, kann der Filtriervorgang weiter fortgesetzt und die filtrierte Probe beispielsweise entnommen werden. Allerdings ist bevorzugt, das Volumen des Tubus bzw. Transportbehälters kleiner zu bemessen als das Aufnahmevolumen des Ballons.
Zweckmäßig hat es sich erwiesen, wenn die Penetration des Ballons lediglich zeitweise erfolgt. Es heißt dies, daß eine geöffnete Penetrationsstelle wieder geschlossen werden kann.
Infolge kann bei einem penetrierten Ballon zunächst eine Probe die Filtervorrichtung allein der Schwerkraft folgend, d.h. ohne jede Druckbeaufschlagung, durchlaufen. Damit ist der Filtriervorgang sehr schonend und bspw. für Liquorzellen bestens geeignet .
Erfolgt die Penetration lediglich zeitweise, so kann jederzeit der Filtriervorgang auch unterbrochen werden.
Insbesondere kann durch ein Schließen der Penetrationsstelle auch verhindert werden, daß im Ballon gesammelte Flüssigkeit aus dieser Öffnung austritt und auch im Steigrohr befindliche Flüssigkeit ausläuft .
Für die Gewinnung eines Präparates, beispielsweise mittels der sogenannten Printtechnik, bei der eine Zellschicht auf einen Objektträger abgedrückt wird, wird der Tubus entfernt, wodurch die einer Aufnahme des Filters vorstehende Filterober läche freigelegt ist. Es kann dann die
Filtriervorrichtung mit angesetztem Ballon gewendet und durch Aufsetzen und Abdrücken der Filteroberfläche mit den ausgefilterten Partikeln auf einem Objektträger ein Präparat gewonnen werden.
In vorteilhafter Weise wird hierbei das Aufnahmevolumen des Steigrohres als Rückspülkammer verwendet, da die im Steigrohr befindliche filtrierte Probenflüssigkeit von exakt dosierbarem Volumen die auf der Filteroberfläche gesammelten Partikel erneut benetzen wird.
Auch für die Verwendung des Steigrohres als Rückspülkammer hat es sich als äußerst zweckmäßig erwiesen, wenn eine Penetration lediglich zeitweise erfolgt . Es kann so das Rückspülen exakt gesteuert erfolgen.
Insbesondere für das voranstehend erläuterte Verfahren wird weiter nach der Erfindung eine Vorrichtung für die Durchführung einer Filtration, insbesondere zur Gewinnung medizinischer Präparate, zur Verfügung gestellt, bei der gemäß Anspruch 6 darauf abgestellt ist, daß sie eine Aufnahme für einen Filter aufweist, an die einerends ein Steigrohr angeschlossenen ist, das in einem angesetzten Ballon einführt ist, und an die andernends ein Tubus angeschlossen ist. Wie bereits erwähnt, sind auch hier die Anschlüsse flüssigkeits- und luftdicht regelmäßig ausgeführt.
Der Tubus , der bevorzugt auf ein geeichtes Aufnahmevolumen aufweist, kann in weiterer Ausgestaltung der Erfindung insbesondere als Transportbehälter auch ausgebildet sein, mit zwei durch Verschlüsse verschließbare Öffnungen, von denen eine für einen Anschluß an die Aufnahme ausgelegt ist. Hierzu ist regelmäßig ein Verschluß, beispielsweise als Kappe oder Stopfen ausgebildet, zu entfernen und erfolgt dann der Anschluß des Transportbehälters als Tubus an die Aufnahme des Filters. Es wird dann der andere Verschluß entfernt, durchstoßen oder dergleichen, so daß der Inhalt des
Transportbehälters dem atmosphärischen Druck ausgesetzt wird. In vorteilhafter Ausgestaltung ist der Tubus, auch als Transportbehälter, röhrchenartig ausgebildet und weist ein vorgegebenes Volumen auf, beispielsweise 5 ml für Liquoruntersuchungen oder 10 ml für in größeren Proben vorhandene Körperflüssigkeiten.
Die Filtriervorrichtung selbst kann bevorzugt nach der Art der pipettenartigen Filtriervorrichtungen gemäß WO 00/20092 ausgebildet sein.
Insbesondere ist auch hier daran gedacht, daß der Filter für die Abnahme eines Zellprints mit einer freien Oberfläche seiner Aufnahme vorstehend ausgebildet ist und in den Tubus hinein ragt. Hierzu gehört weiter, daß der Filter in einer konischen Aufnahme gehalten ist, die sich hin zu der freien Filteroberfläche verjüngt. Alternativ oder zusätzlich kann weiter der Filterquerschnitt hin zu der freien Oberfläche eingeschnürt sein. Ebenso wird der Filter zweckmäßigerweise eine Porigkeit zwischen 4 μm und 10 μm aufweisen, insbesondere etwa 5 μm.
In weiterer vorteilhafter Ausgestaltung kann vorgesehen sein, daß die Aufnahme und das Steigrohr einstückig ausgebildet sind. Hierzu wird das Steigrohr sich regelmäßig trichterartig auf für die Aufnahme des Filters erweitern. Da die einstückige Ausführungsform von Aufnahme und Steigrohr insbesondere bei einem sich ändernden Querschnitt der Aufnahme schwierig zu gestalten ist, kann alternativ vorgesehen werden, daß eine Aufweitung des Steigrohres, wie angesprochen trichterartig zumindest abschnittsweise ausgebildet, einen Teil der Aufnahme für den Filter mit ausbildet.
Durch diese Maßnahmen ist eine sichere flüssigkeits- und luftdichte Anbindung der einzelnen Elemente der Vorrichtung nach der Erfindung gewährleistet. Wie eingangs erläutert, dient das Steigrohr regelmäßig auch als Aufnahme für ein Rückspülvolumen, so daß es ein vorgebbares Aufnahmevolumen regelmäßig aufweisen sollte, insbesondere ein Aufnahmevolumen von etwa 0,5 ml.
Bei üblichen Querschnitten von pipettenartigen Rohren sollte die Länge des Steigrohres dann zwischen 6 cm und 8 cm betragen. Bei einer Länge des Ballons zwischen 6 cm und 10 cm ist dann regelmäßig ein ausreichender Abstand zwischen dem Grund des Ballons und dem Steigrohr gewährleistet.
In weiterer konstruktiver Ausgestaltung kann vorgesehen sein, daß der Ballon eine Penetrationsstelle aufweist. Es kann diese Penetrationsstelle beispielsweise mit einer Nadel durchstoßen werden, so daß filtrierte Flüssigkeit aus dem
Ballon beispielsweise mittels einer Spritze abgezogen werden kann. Alternativ wird hier unter einer Penetrationsstelle auch ein Hutzen verstanden, der auf- bzw. abgeschnitten werden kann, so daß der Inhalt des Ballons durch Zusammendrücken über die so geschaffene Öffnung entleert werden kann. Darüber hinaus wird durch eine solche Penetration der Innenraum des Ballons dem Außendruck ausgesetzt. Es kann weiter vorgesehen sein, eine Penetrationsstelle, bspw. In Form einer Durchbrechung der Wandung des Ballons, wiederverschließbar zu gestalten, so daß eine Penetration und damit ein Druckausgleich mit der Umgebung nur zeitweise erfolgt .
Hinsichtlich der angesprochenen Volumina von insbesondere 5 ml und 10 ml des Tubus respektive der Transportvorrichtung, sollte der Ballon ein Fassungsvermögen zwischen 8 ml und 15 ml bevorzugt aufweisen.
Für die Handhabung der Vorrichtung nach der Erfindung hat es sich weiter als zweckmäßig erwiesen, wenn der
Außendurchmesser des Ballons 17 mm etwa aufweist. Dieser Außendurchmesser erlaubt es, die Vorrichtung nach der Erfindung in üblichen Ständern für Reagenzgläser oder dergleichen einzusetzen und ist damit ein sicherer Halt der Vorrichtung während des Filtriervorganges gegeben.
Das erfindungsgemäße Verfahren und die Vorrichtung nach der Erfindung werden anhand der Zeichnung näher erläutert, in der lediglich ein Ausführungsbeispiel dargestellt ist.
In der Figur 1 der Zeichnung ist in einem Schnitt die erfindungsgemäße Vorrichtung 1 für die Durchführung einer Filtration, insbesondere nach dem erfindungsgemäßen Verfahren, gezeigt.
Die Vorrichtung 1 für die Durchführung einer Filtration, insbesondere zur Gewinnung medizinischer Präparate, weist eine Aufnahme 2 für einen Filter 3 auf. Einerends der
Aufnahme 2 ist ein Steigrohr 4 angesetzt, das zu diesem Zwecke eine Aufweitung 5 aufweist, das einen Teil der Aufnahme des Filters 3 mit ausbildet .
Alternativ ist auch eine einstückige Ausbildung des
Steigrohres und der Aufnahme des Filters durchaus möglich.
Das Steigrohr 4 mündet in einem angeschlossenen Ballon 6 über einem Grund 7.
Andernends ist an die Aufnahme 2 ein Tubus 8 angeschlossen, dessen Geometrie grundsätzlich frei bleibend ist, der jedoch bevorzugt, wie dargestellt, röhrchenartig ausgebildet ist. Infolgedessen weist der Tubus 8 zwei Öffnungen 9, 10 auf. Insbesondere in der gezeigten Ausführung kann der Tubus 8 als Transportbehälter auch Verwendung finden. Damit wird nach der Entnahme einer Probe es ermöglicht, diese bei geeignetem Verschluß einer der Öffnungen 9, 10 zu befullen, anschließend die weitere Öffnung gleichfalls zu verschließen und die Probe beispielsweise für eine Untersuchung in einem Labor zu versenden. Als Verschluß eignen sich grundsätzlich Kappen, Stopfen oder dergleichen mehr, wobei bevorzugt die Verschlüsse unterschiedlich ausgeführt sind, damit die Öffnung 10 problemlos identifiziert werde kann, mit der der Tubus 8 als Transportbehälter dann unmittelbar an die Aufnahme 2 angeschlossen werden kann.
Ein geeignet farbig markierter Stopfen kann beispielsweise wieder lösbar die Öffnung 10 für den Transport verschließen. Der die andere Öffnung 9 verschließende Stopfen 11 kann gleichfalls entfernbar ausgebildet sein oder, wie dargestellt, in der Öffnung 9 festgelegt sein. Es ist dann dieser Stopfen 11 mit einer geeigneten Vorrichtung zu versehen, die es erlaubt, den Innenraum des Tubus 8 mit dem Umgebungsdruck in Verbindung zu bringen. Hierbei wird beispielsweise an ein Ventil, eine geeignete Membran oder eine Penetrationsstelle für ein Durchstoßen des Stopfens 11 gedacht sein, so daß ein unmittelbarer Durchbruch 12 zur Umgebung geschaffen werden kann.
Regelmäßig wird, insbesondere wenn er als Transportbehälter ausgebildet ist, der Tubus 8 ein geeichtes Auf ahmevolumen von beispielsweise 5 ml oder 10 ml aufweisen. Es steht durch diese Maßnahme eine exakt bemessene Probe für eine Filtration zur Verfügung.
Für den Anschluß des Tubus 8 an die Aufnahme 2 des Filters 3 sind regelmäßig geeignete Abdichtungsmaßnahmen noch vorgesehen. Diese können durch ein dichtentes Gewinde 13, geeignete Dichtungsringe für einen passgenauen Klemmsitz oder dergleichen mehr ausgeführt werden.
Die eigentliche Filtervorrichtung 14 entspricht weitestgehend der in der WO 00 / 20 092 offenbarten.
Insbesondere ist auch hier vorgesehen, daß der Filter 3 mit einer freien Oberfläche 15, der Aufnahme 2 vorstehend ausgebildet, in den Tubus 8 hinein ragt. Weiter kann die Aufnahme 2 konisch verjüngend sein derart, daß der Filterquerschnitt sich hin zu der freien Oberfläche verjüngt. Alternativ oder zusätzlich kann der Filterquerschnitt hin zu der freien Oberfläche 15 auch eingeschnürt sein, beispielsweise durch eine der Innenwand 16 der Aufnahme 2 vorstehende, umlaufende, in Querschnitt dreiecksförmige Nase 17.
Der Filter 3 wird weiter eine Porigkeit von bevorzugt zwischen 4 μm und 10 μm, insbesondere 5 μm aufweisen, womit er seinen Verwendungszwecken bestens angepaßt werden kann.
Die über der freien Oberfläche 15 anstehende Probenflüssigkeit wird aufgrund des Luftdruckes, der Kapillarwirkung des Filters 3, sowie gegebenenfalls eines gewissen Unterdruckes im Ballon 6, den Filter 3 durchsetzen, wobei sich auf der Filteroberfläche 15 ausreichend große Partikel niederschlagen werden. Insoweit ist eine das Filtrat ausgesprochen schonende Separation gegeben.
Nachdem der Filter 3 von der Probenflüssigkeit durchsetzt wurde, wird diese im Steigrohr 4 in den Ballon 6 abgeführt.
Da beispielsweise für einen Zellprint nach Abnahme des Tubus 8 die verbleibende Vorrichtung um 180° gedreht wird, dient das dann im Steigrohr 4 befindliche Volumen der Probe auch als Rückspülflüssigkeit. Aus diesem Grunde sollte das Volumen des Steigrohres 4 wohl definiert sein, beispielsweise 0,5 ml betragen. Bei einem Außendurchmesser von üblicherweise handelsüblichen 3,3 mm und mit einer Länge von 80 mm ist ein derartiges Volumen regelmäßig erreichbar.
Der Ballon 6, vorzugsweise aus einem klarsichtigen Polyäthylen hergestellt, sollte eine Länge von etwa 8,5 mm bei den genannten Abmessungen aufweisen. Mit zweckmäßigerweise einem Außendurchmesser von 17 mm kann sein Volumen dann zwischen 8 ml und 15 ml betragen und ist so an das Volumen des Tubus 8 angepaßt .
Der Außendurchmesser des Ballons 6 von 17 mm gestattet es, während des Filtrationsvorganges die Vorrichtung 1 insgesamt in einem üblichen Reagenzglashalter abzusetzen.
Weiter weist der Ballon 6 eine Penetrationsstelle 18, hier z. B. in Form eines abzuschneidenden Hutzens auf. Durch das Schaffen dieser Öffnung, alternativ beispielsweise auch durch ein Durchstoßen einer hierfür dünnwandig ausgeführten Penetrationsstelle mittels einer Spritze, kann eine Verbindung zwischen der Umgebung und dem Innenraum des Ballons 6 geschaffen werden. Daneben ist es durch eine solche zu öffnende Penetrationsstelle 18 ermöglicht, die filtrierte Probe dem Ballon 6 problemlos zu entnehmen.
Alternativ oder zusätzlich kann eine weitere Penetrationsstelle 19 in Form einer Durchbrechung 20 noch vorgesehen sein, welche Durchbrechung 20 geöffnet und wieder geschlossen werden kann, hier durch einen auf den Ballon 6 aufgebrachten Ring 21. Es wird so eine lediglich zeitweise Penetration des Ballons 6 ermöglicht.
Die Durchbrechung 20, z. B. von einem Durchmesser von 0,2 mm, kann bspw. von einem auf der Außenfläche 22 des Ballons 6 axial verschiebbaren Ring 21 freigegeben bzw. geschlossen werden.
Alternativ, ggfls. zusätzlich, kann, wie hier dargestellt, auch vorgesehen sein, daß in dem Ring 21 eine weitere Öffnung 23 eines Durchmessers von bspw. 0,3 mm vorgesehen ist, so daß der Ring 21 durch Drehen aus einer die Durchbrechung 20 verschließenden Stellung in eine Position mit sich überdeckenden Durchbrechungen 21,23 verdrehbar ausgeführt sein kann, womit eine Verbindung zwischen dem Inneren des Ballons 6 und der Umgebung geschaffen ist. Zweckmäßigerweise wird die Stelle der Durchbrechung 20 in dem Ballon 6 markiert sein, z. B. einen roten Punkt, einen roten, umlaufenden Ring oder dergleichen mehr. Es kann dann sicher der Verschluß der Durchbrechung 20 durch den Ring 21 erkannt werden. Eine entsprechende Markierung kann auch der Ring 21 aufweisen und wenn dieser aus einem transparenten Polypropylen oder dergleichen besteht, ist durch Überdeckung der Markierungen sichergestellt, daß die Durchbrechung 20 freigegeben ist .

Claims

Patentansprüche:
1. Verfahren für eine Filtration insbesondere zur Gewinnung von medizinischen Präparaten, gekennzeichnet durch die Verf hrenssehri11e - der Entnahme der Probe,
- des Abfüllens der Probe in einen auf eine Filtriervorrichtung (14) aufgesetzten Tubus (8) ,
- des Ablaufens der Probe durch die Filtriervorrichtung (14), - des Auslaufens der Probe nach der Filtration in einem pipettenrohrartigen Steigrohr (4) und
- des Sammeins der filtrierten Probe in einem an das Steigrohr (4) angesetzten Ballon (6) .
2. Verfahren nach Anspruch 1, gekennzeichnet durch die Verfahrensschritte
- des Abfüllens der Probe in eine insbesondere rohrartige, zwei durch Verschlüsse (11) verschließbare Öffnungen (9,10) aufweisende Transportvorrichtung (8), - des Transportes der Probe hin zu der Filtriervorrichtung (14) ,
- des Öffnens eines Verschlusses,
- des Ansetzens der Transportvorrichtung (8) an den Tubus oder unmittelbar an die Filtriervorrichtung (14) und
- des Öffnens des zweiten Verschlusses (11) .
3. Verfahren nach einem oder mehreren der vorangehenden Ansprüche, gekennzeichnet durch die Verfahrensschritte
- des Ausübens eines Druckes auf den Ballon (6) derart,
- daß filtrierte Probenflüssigkeit im Steigrohr (4) aufsteigt und durch die aufsteigende Probenflüssigkeit
- die auf einer Filteroberfläche (15) der Filtriervorrichtung (14) gesammelten Partikel gelöst werden,
- wonach der Filtriervorgang fortgesetzt wird.
4. Verfahren nach einem oder mehreren der vorangehenden Ansprüche, gekennzeichnet durch den Verfahrensschritt der Penetration des Ballons (6) .
5. Verfahren nach einem oder mehreren der vorangehenden
Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die Penetration zeitweise erfolgt.
6. Verfahren nach einem oder mehreren der vorangehenden Ansprüche, gekennzeichnet durch die Verfahrensschritte
- des Entfernens des Tubus (8) und der damit einhergehenden Freilegung der einer Aufnahme (2) des Filters (3) vorstehenden Filteroberfläche (15) ,
- des Wendens der Filtriervorrichtung (14) mit angesetztem Ballon (6) und
- des Aufsetzens der Filteroberfläche (15) mit gesammelten Partikeln auf einen Objektträger zur Gewinnung eines Präparates.
7. Vorrichtung für die Durchführung einer Filtration, insbesondere zur Gewinnung medizinischer Präparate, insbesondere nach einem Verfahren gemäß der vorstehenden Ansprüche, aufweisend eine Aufnahme (2; 5) für einen Filter (3) , an die einerends ein Steigrohr (4) angeschlossen ist, das in einen angesetzten Ballon eingeführt ist, und an die andernends ein Tubus (8) angeschlossen ist .
8. Vorrichtung nach Anspruch 6, aαurch gekennzeichnet, daß der Tubus (8) als Transportbehälter mit zwei durch Verschlüsse (11) verschließbare Öffnungen (9,10) ausgebildet ist, von denen eine (9) für einen Anschluß an die Aufnahme (2) ausgelegt ist.
9. Vorrichtung nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, daß der Tubus (8) röhrchenartig ausgebildet ist.
10. Vorrichtung nach einem oder mehreren der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß das Volumen des Transportbehälters (8) vorgegeben ist.
11. Vorrichtung nach einem oder mehreren der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß der Filter (3) mit einer freien Oberfläche (15) der Aufnahme (2) vorstehend ausgebildet in den Tubus (8) hineinragt.
12. Vorrichtung nach einem oder mehreren der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß der Filter (3) in einer konischen Aufnahme (2) gehalten ist, die sich hin zu der freien Oberfläche (15) verjüngt.
13. Vorrichtung nach einem oder mehreren der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß der
Filterquerschnitt hin zu der freien Oberfläche (15) eingeschnürt ist.
14. Vorrichtung nach einem oder mehreren der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß der Filter (3) eine Porigkeit zwischen 4 μm und 10 μm aufweist.
15. Vorrichtung nach einem oder mehreren der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die Aufnahme und das Steigrohr einstückig ausgebildet sind.
16. Vorrichtung nach einem oder mehreren der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß eine AufWeitung
(5) des Steigrohres (4) einen Teil der Aufnahme mitausbildet .
17. Vorrichtung nach einem oder mehreren der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß das Steigrohr (4) ein Aufnahmevolumen von 0,5 ml aufweist.
18. Vorrichtung nach einem oder mehreren der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß das Steigrohr (4) eine Länge zwischen 6 cm und 8 cm aufweist .
19. Vorrichtung nach einem oder mehreren der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß der Ballon (6) eine Penetrationsstelle (18) aufweist.
20. Vorrichtung nach einem oder mehreren der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die Penetrationsstelle (19) wiederverschließbar ist.
21. Vorrichtung nach einem oder mehreren der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß der Ballon (6) ein Fassungsvermögen zwischen 8 ml und 15 ml aufweist.
22. Vorrichtung nach einem oder mehreren der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß der Außendurchmesser des Ballons (6) 17 mm aufweist.
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