WO1999039714A1

WO1999039714A1 - Medicaments destines a des troubles neurologiques

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Publication number: WO1999039714A1
Application number: PCT/JP1999/000502
Authority: WO
Inventors: Yorimasa Suwa; Noboru Yoshioka; Yoshihiko Sumi; Takami Arai; Katsutoshi Sakurai; Toshitaka Nabeshima; Kiyofumi Yamada
Original assignee: Teijin Ltd
Current assignee: Teijin Ltd
Priority date: 1998-02-06
Filing date: 1999-02-05
Publication date: 1999-08-12
Anticipated expiration: 2000-08-06
Also published as: EP1053748A4; AU2299499A; EP1053748A1; AU753080B2; JPH11228417A; CA2321257A1; KR20010040596A

Description

明細書神経障害治療剤技術分野

本発明は、神経障害治療剤に関する。さらに詳しくは、特定の構造を持つプロス夕グランジン類を活性成分として含有する神経障害治療剤に関する。

従来の技術

神経系においては、神経細胞が突起（軸索あるいは樹状突起）を伸ばし、シナブスを介して、神経細胞間でネットワークを形成したり、あるいは筋肉細胞、皮膚細胞等と連絡することによって、初めてその機能を果たすことが可能となる。また、このような突起を介した細胞間の連絡によって、互いに伝達物質や栄養因子をやりとりすることにより、細胞の生存そのものも維持されている。

このため、神経細胞そのものは致命的な障害を受けていない場合でも、-神経突起が障害を受けると、神経機能は低下し、さらには神経細胞自体も死に至る。外傷等により軸索が切断される場合だけでなく、神経障害に起因する多くの疾患の初期や、障害を受けた部位の周囲においても、このような神経突起の障害がまず起こっているものと考えられる。

したがって、神経突起の障害を修復するような作用を有する薬剤は、神経障害に起因する多くの疾患や、外傷による神経の損傷等において極めて有効であるものと考えられる。

神経障害に起因する疾患としては、アルツハイマー型痴呆、パーキンソン病、多発性硬化症、側索硬化症、糖尿病性末梢神経障害（二ユートパシー）などが挙げられる。その中でも、高齢化社会を迎えて、アルツハイマー型痴呆患者の増加が深刻な社会問題になっている。

従来、アルツハイマー型痴呆の治療に用いられてきた薬剤は、脳循環代謝賦活薬に分類されるものと、アセチルコリン神経系賦活薬に分類されるものに大別でさる。脳循環代謝賦活薬は、元来、脳血管の障害とその後の後遺症に対する薬剤であつて、神経障害を直接的に修復するものではなく、痴呆症状に対する有効性は低レ^ また、アセチルコリン神経系賦活薬は、アルツハイマー病患者でァセチルコリン神経系の障害が著しいという病理的所見に基づいて開発され、アルッハイマ —型痴呆治療薬として現在唯一使用が認められているものであるが、実際のアルッハイマ一型痴呆では、障害を受けるのはァセチルコリン神経系のみではないことが明らかになつており、その効果には限界があると考えられている。

このような現状から、新規薬効に基づくアルツハイマー型痴呆の治療薬開発が強く望まれており、とりわけ、前述した神経突起の障害を修復するような作用を有する薬剤は、もし実用化されればアルツハイマー型痴呆の治療において最も高い有効性を示すであろうことが期待されている。

従来、痴呆症治療薬の探索に用いられてきた薬物評価系は、 in vi tro の系としては、ァセチルコリンエステラーゼ等の神経伝達物質分解酵素の阻害活性測定系、脳切片を用いた神経伝達物質増加活性の測定系、あるいは後根神経節細胞や PC1 細胞等を用いた神経突起の伸長促進あるいは神経細胞死抑制活性の測定系が主なものであり、 in vivo の系としては、スコポラミンを投与したり、電気的に破壊する等の方法でァセチルコリン神経系を特異的に障害するモデル、脳虚血あるいは二酸化炭素により低酸素ストレスを与えて障害を惹起するモデルが主なものであった。

これらの評価系の多くは、ァセチルコリン神経系賦活薬や脳循環代謝賦活薬の評価系としては合理的なものであるが、実際の痴呆症、特にアルツハイマー型痴呆とは病因的にも病理的にも大きな隔たりがあり、新規の痴呆症治療薬の評価を行うのに十分なものではない。

神経突起の伸長促進活性を測定する系についても、生体内では、突起を伸ばす側の神経細胞のみでなく、伸びてきた突起とシナプスを介して連絡する受け手側の細胞、神経細胞の周囲に存在するグリア細胞等が存在し、これらの細胞から産生、放出される種々の因子によつて突起の伸長の速度や方向性が決定されると考えられることから、従来の系は、神経細胞の突起伸長に及ぼす化合物の活性を評価する系としては、十分なものではない。

アルツハイマー型痴呆患者の脳内では、皮質内嗔野の神経細胞の脱落が、最も初期の病変として起こっている。本発明者らはこれに着目し、幼弱ラットの脳から皮質内嗅野と海馬を含む部分の組織を切り出して、シャーレ内で培養することにより、切り出す時に切断された内嗅野細胞の軸索を再び伸長させ、脳内に存在するのと同様な海馬歯状回への神経投射を再生させることに成功している（Eu r ope an J ou rna l o f Neu r o s c i enc e, vo l. 6, . 1026-1037参照）。

また、アルツハイマー型痴呆は脳内に老人斑が形成されることが大きな特徴であり、この老人斑の主成分である )3蛋白が、脳内で凝集してアミロイドを形成し、脳組織に沈着するのに伴って、神経毒性を発揮することが、アルツハイマー型痴呆の主たる原因であると考えられる証拠が蓄積してきている。本発明者らはこの点に着目し、浸透圧ポンプをラッドの背部皮下に埋め込んで、 /3蛋白を脳室内に持続投与することにより、学習記憶能が低下するモデルを作成することに成功している (Neu r o s c i enc e Le t t e r s, vo l. 170, pp. 63— 66、 1994参照）。

上記の、脳組織培養を用いた神経軸索伸長再生系、および蛋白脳室内持続注入モデルは、病理的および病因的な観点からヒトのアルツハイマー型痴呆治療薬の評価系として極めて合理的なものである。また、それと同時に、神経障害に起因する疾患全般あるいは外傷による神経損傷の治療薬の活性を評価するのにも適した系でもある。

一方、プロスタグランジン類は、従来より、血小板凝集抑制、血管拡張性血圧降下、胃酸分泌抑制、平滑筋収縮、細胞保護、利尿等の多彩な活性を有することが明らかになつており、天然のプロスタグランジン類および、化学的あるいは生物学的安定性を付与したその誘導体は、特に、産婦人科領域、消化器領域、循環器領域、および眼科領域において医薬品としての開発も行われてきた。

脳および神経領域に関しては、これまで医薬品として開発された例はないが、特定のプロスタグランジン類が、脳の神経細胞保護作用を示すことが報告されてる ( Ne u r o s c i enc e Le t t e r s, vo l. 160， pp. 106、 1993および特開平 8-245498号公報参照）。

しかしながら、プロスタグランジン類が神経突起の障害を修復する作用を有すること、およびアルツハイマー型痴呆治療薬としての可能性を有することは、これまで知られていない。

発明の開示

本発明の目的は、神経障害に起因する疾患あるいは外傷による神経損傷に対する治療薬を提供することにある。神経障害に起因する疾患としては、ァルツハイマ一型痴呆、パーキンソン病、多発性硬化症、側索硬化症、糖尿病性末梢神経障害（二ユートパシー）などの痴呆あるいは運動不全を伴う神経変性疾患、および脳梗塞や脳卒中による脳機能障害があげられる。

本発明者は、このような目的達成のために鋭意研究を重ねた結果、脳組織培養系を用いた神経軸索伸延促進度の測定方法を新規に作成し、該測定方法および蛋白脳室内持続注入によるアルツハイマー型痴呆動物モデルを評価系として用いることにより、特定の構造を有するプロスタグランジン類が上記目的を達成し得ることを知見して本発明を完成するに至つた。

すなわち、本発明は下記式（I) 、

[ここで、 R¹は水素原子、

アルキル基または 1当量のカチオンを表し； R²は水素原子、メチル基またはビニル基を表し； R³は直鎖もしくは分岐鎖 C ₃〜 C i 0アルキル基、直鎖もしくは分岐鎖 C ₃〜 C i ₀アルケニル基、直鎖もしくは分岐鎖 C₃〜C_lt)アルキニル基、置換されていてもよい c₃〜c₁₀シクロアルキル基、置換されていてもよいフエニル基、置換されていてもよいフエノキシ基、または（置換されていてもよいフエニル基、置換されていてもよいフエノキシ基、もしくは置換されていてもよい c₃〜c 1₀シクロアルキル基）で置換されている直鎖もしくは分岐鎖〜(:₆アルキル基を表し； nは 0または 1を表し Aは — CH₂— CH₂—、 -CH = CH—または一 O— CH₂—を表し； Xは— CH₂— CH₂—、 — CH ( H 2) — CH₂—、 _CH = CH—、 — C (NH₂) =CH—または _C≡C 一を表し；結合

は

を表す。但し、 Aが—〇— CH₂—であるときおよび Xが— CH (NH₂) _CH₂—または— CH (NH₂) =CH—であるとき、統合方向は逆であつてもよい、

下記式 (ΙΠ) 、

ここで、 R R²、 R³、 Xおよび nの定義は上記式（I) に同じであり、そして A¹は _CH₂— CH₂—または— CH=CH—を表す。但し、 Xが— CH (NH₂) — CH₂—または一 C (NH₂) =CH_であるとき、結合方向は逆であってもよい、

または下記式（IV)

ここで、尺¹、 R²、 R A、 Xおよび nの定義は、但し書きも含めて上記式（I) に同じである、

で表されるプロスタグランジン類およびノまたはその光学異性体を活性成分として含有する神経障害治療剤である。

図面の簡単な説明

図 1は、 SDラット脳の水平断スライスの一例の概略説明図である。

図 2は、 SDラット脳の水平断スライスを用いる、神経軸索伸長促進活性の評価のための、培養試料作成の説明図である。

発明の好ましい実施の形態

上記式（I) 、上記式 0Π) および上記式（IV) 中、 R¹は水素原子、じェ〜じ i。アルキル基または 1当量のカチオンを表す。

かかる（^〜(^。アルキル基としては、例えばメチル、ェチル、 n—プロピル、 i s o—プロピル、 n—ブチル、 s e c—ブチル、 t e r t—ブチル、 n—ペンチル、 n—へキシル、 n—ヘプチル、 n—ォクチル、 n—ノニル、 n—デシル基を挙げることができる。特に (^〜 ₃アルキル基が好ましく、なかでもメチル基が好ましい。

また、 1当量のカチオンとしては、例えばナトリウム、カリウム、リチウム、ルビシゥム、セシウム、 1 2カルシウム、 1 2マグネシウム、 1 Z 3アルミニゥムが'好ましい。なかでもリチウムやナトリウムが好ましい。

R ²は水素原子、メチル基またはビニル基を表す。特に、 n = 0の場合は水素原子が、 n = lの場合はメチル基が好ましい。

3は直鎖もしくは分岐鎖 C ₃〜 C i _Qアルキル基、直鎖もしくは分岐鎖 C ₃〜 C i

。アルケニル基、直鎖もしくは分岐鎖

。アルキニル基、置換されていてもよい ^〜(^。シクロアルキル基、置換されていてもよいフエニル基、置換されていてもよいフエノキシ基、または（置換されていてもよいフエニル基、置換されていてもよいフエノキシ基もしくは置換されていてもよい

。シクロアルキル基）で置換されている直鎖もしくは分岐鎖〜アルキル基を表す。かかる直鎖もしくは分岐鎖 C ₃〜C i _Qアルキル基としては、例えば n -プロピル、 n—ブチル、 n—ペンチル、 n—へキシル、 n—ヘプチル、 n—ォクチル、 n—デシル、 1—メチルペンチル、 1—メチルへキシル、 1， 1一ジメチルペンチル、 2—メチルペンチル、 2—メチルへキシル、 5—メチルへキシル、 2 , 5 —ジメチルへキシル基が挙げられる。なかでも n—プチル、 n—ペンチル、 n— へキシル、（R) —もしくは（S ) —もしくは（R S ) —1—メチルペンチル、 (R) 一もしくは（S ) —もしくは（R S ) - 2—メチルへキシル基が好ましい。特に c ₃〜c ₆のアルキル基が好ましく、なかでもブチル基やペンチル基が好ましい。

直鎖もしくは分岐鎖

。アルケニル基の例としては、 2—ブテニル、 2 —ペンテニル、 3—ペンテニル、 2—へキセニル、 4—へキセニル、 2—メチル —4—へキセニル、 2， 6—ジメチル一 5—ヘプテニル基等が挙げられる。

直鎖もしくは分岐鎖 C ₃〜Cェ。アルキニル基としては、例えば 2—プチニル、 2—ペンチニル、 3—ペンチニル、 2—へキシニル、 3—へキシニル、 4—へキシニル、 2—ォクチニル、 5—デシニル、 1一メチル—3—ペンチニル、 1ーメチル—3 _へキシニル、 2—メチル—4—へキシニル基が挙げられる。特に C ₅ 〜C ₇のアルキニル基が好ましく、なかでも 3—ペンチニル、 1一メチル _ 3— ペンチニル、 3 _へキシニル、 1一メチル— 3—へキシニル基が好ましい。

置換されていてもよい C ₃〜C _{1 Q}シクロアルキル基のシクロアルキル基部分としては、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロへキシル、シクロへプチル、シクロォクチル基が挙げられ、その置換基部分としては、例えば〜アルキル基、ハロゲン原子を挙げることができる。かかる置換基は複数個存在していてもよい。

置換されていてもよい (^〜(：ェ。シクロアルキル基の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロへキシル、シクロへプチル、シクロォクチル、（(^〜（：アルキルシクロペンチル、（じェ〜じアルキルシク口へキシル、ジメチルシクロペンチル、ジメチルシクロへキシル、クロロシクロペンチル、ブロモシクロへキシル、ョードシクロペンチル、フルォロシクロへキシル基が挙げられる。特に c ₅〜c ₆のシクロアルキル基が好ましく、なかでもシクロペンチル基ゃシクロへキシル基が好ましい。

置換されていてもよいフエニル基、置換されていてもよいフエノキシ基の置換基としては、例えばハロゲン原子、ヒドロキシル基、 c ₂〜c ₇ァシルォキシ基、ハロゲン原子で置換されていてもよい (^〜(: ₄アルキル基、ハ口ゲン原子で置換されていてもよい c ₁〜c₄アルコキシル基、二トリル基、カルボキシル基または (C i C e) アルコキシカルポニル基が挙げられる。かかるハロゲン原子としては、フッ素、塩素または臭素原子が好ましく、特にフッ素または塩素原子が好ましい。また、 c ₂〜c ₇ァシルォキシ基としては、例えばァセトキシ、プロピオ二ルォキシ、 n—プチリルォキシ、 i s o—プチリルォキシ、 n—バレリルォキシ、 i s o—バレリルォキシ、力プロィルォキシ、ェナンチルォキシまたはべンゾィルォキシ基を挙げることができる。さらに、ハロゲン原子で置換されていてもよい C^ C^アルキル基としては、メチル、ェチル、 n—プロピル、 i s o _プロピル、 n—プチル、クロロメチル、ジクロロメチル、トリフルォロメチル基を好ましいものとして挙げることができる。また、ハロゲン原子で置換されていてもよい C i〜C ₄アルコキシ基としては、例えばメトキシ、エトキシ、 n—プロボキシ、 i s o—プロポキシ、 n—ブトキシ、クロロメトキシ、ジクロロメトキシ、トリフルォロメトキシ基を好ましいものとして挙げることができる。また、（c ェ〜じ^ アルコキシカルボニル基としては、例えばメトキシカルボニル、ェトキシカルボニル、ブトキシカルボニル、へキシルォキシカルボ二ル基を挙げることができる。

置換フエニル基または置換フエノキシ基は、上記した置換基を 1〜 3個、好ましくは 1個持つことができる。

(置換されていてもよいフエニル基、置換されていてもよいフエノキシ基もしくは置換されていてもよい C ₃〜C ₂。シクロアルキル基）で置換されている直鎖もしくは分岐鎖 (^〜：₆アルキル基のうちで、置換されていてもよいフエニル基、置換されていてもよいフエノキシ基としては前記のものをそのまま好適に挙げることができる。

また、 C g C i。シクロアルキル基としても前記のものをそのまま好適に挙げることができる。そしてその置換基も、上記した置換フエニルゃ置換フエノキシ基の置換基と同様のものが挙げられる。また、直鎖もしくは分岐鎖 ^〜( ₆アルキル基としては、メチル、ェチル、プロピル、 i s o—プロピル、プチル、 i s o—ブチル、 s e c—ブチル、 t 一ブチル、ペンチル基、へキシル基などを挙げることができる。置換基はその任意の位置に結合していてもよい。

上記式（I ) で表されるプロスタグランジン類および Zまたはその光学異性体のなかでも、

—で、 R ¹ R ²、 R ³、および nの定義は上記式（I ) に同じである, で表されるプロスタグランジン類および zまたはその光学異性体が好ましい。上記式（I) および上記式（IV) 中、 Aが—〇一 CH₂_を表す場合には、そのメチレン基（_CH₂—）が力ルポキシル基（一 COOR¹) に結合したものが好ましい。また、上記式（I) 、上記式（m) 、および上記式 ay) 中、 Xが— CH (NH₂) — CH₂—または一 C (NH₂). =CH—を表す場合、ァミノ基が結合した炭素原子がシクロペンタン環に結合したものが好ましい。

本発明で活性成分として用いられるプロスタグランジン類を具体的に挙げると、以下のようになる。

(1) 9 (〇）一メタノー Δ⁶ (^{9 a})—プロスタグランジン I i (イソ力ルバサイクリン）

(2) 20—メチル一9 (〇）一メタノ一 Δ⁶ (^{9 α})—プロスタグランジン I i

(3) 16—メチル一9 (〇）一メタノ一 Δ⁶ (^{9 α}) —プロスタグランジン I

(4) 16, 16—ジメチル一 9 (〇）一メタノ一 Δ⁶ (^9α) —プロスタグランジン Iェ

(5) 17—メチル一 9 (Ο) —メタノ一 Δ⁶ (^9a) —プロスタグランジン I

(6) 17， 20—ジメチルー 9 (〇）一メタノ一Δ⁶ (^{9 α}) —プロスタグランジン Iェ

(7) (6) の（17R) —体

(8) (6) の（17 S) —体

(9) 15—メチル一 9 (Ο) —メタノ一 Δ⁶ (^{9 £t}) —プロスタグランジン I i

(10) 17， 18—デヒドロ一 9 (〇）一メタノ一 Δ⁶ (^9a) —プロスタグランジン I

(11) 20—イソプロピリデン _ 17—メチル一 9 (〇）ーメタノ一 Δ⁶ (⁹ ^α)—プロスタグランジン I丄

(12) 18, 18， 19， 19—テトラデヒドロー 16—メチル—9 (Ο) —メタノ一 Δ^{6 (9α)}—プロスタグランジン I丄

(13) 18, 19—ジデヒドロ一 16—メチルー 9 (〇）ーメタノ一Δ ^{6 (9} ^α)—プロスタグランジン I丄 (14) (3) , (12) ，（13) の（16 S) —体

(15) (3) , (12) ，（13) の（16R) -体

(16) 16, 17, 18, 19 20—ペン夕ノル _ 15—シクロペンチル一 9 (0) —メタノ一 Δ⁶ —ブロスタグランジン I

(17) 16, 17, 18, 19, 20—ペン夕ノル一 15—シクロへキシル — 9 (O) —メタノー Δ⁶ —プロスタグランジン I

(18) 17, 18, 19, 20—テトラノル一 16— (p—フルオロフエノキシ）一 9 (〇）一メタノ一 Δ⁶ —プロスタグランジン I

(19) 17, 18, 19, 20—テトラノル— 16—シクロへキシルー 9 (〇） —メタノ一 Δ^{6 (9α)}—プロスタグランジン I i

(20) 15—デォキシ一 16—ヒドロキシ一 9 (O) —メタノ一厶 ⁶ (^9α)— プロスタグランジン Iェ

(21) 15—デォキシ一 16—ヒドロキシ— 16—メチル一9 (〇） —メタノ一 Δ^{6 (9α)}—プロスタグランジン I

(22) (20) , (21) の（16 S) —体

(23) (20) （21) の（16 R) -体

(24) (1) ' (23) のメチルエステル

(25) (1) ' (23) のェチルエステル

(26) (1) （23) のブチルエステル

(27) (1) ' (23) のナトリウム塩

(28) (1) - (23) のカリウム塩

(29) (1) ' (23) のアンモニゥム塩

(30) (1) （29) の化合物の 8位、 9位、 1 1位、 12位、 1 5位についての立体異性体

(31) 17, 1 8, 19, 20—テトラノル一 16 ― (m—卜リル）一 9 (O) ーメタノ- 6 (9α) 一プロスタグランジン I

(32) 17 , 1 8, 19, 20—テトラノル一 16 - (o—卜リル）一 9 (O) ーメタノ-一△ 6 (9 a) —プロスタグランジン I o oノ 1 7 1 o i? ^ U ァ Pノノノレ Ό _ 「ノレノノ

- ^ 7 ノ - _ Λ 6 (9 a) フ。ロス々ラノノ、ノノ T 1

Q Q ( 1 ς ^)

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u o Ο Ο ン <J I 1^··

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*J ^ の千）し丁フ千）し

( ^ 7 ) d d Q d の V 丁午）し丁フ）し

u οノ d ^ * QJ のキ )し Tフ Jし

(39) (31) (35) のナトリウム塩

(40) (31) (35) のカリウム塩

(41) (31) (35) のアンモニゥム塩

(42) (5E) (16RS) 一 16—メチルー 9 (O) —メタノープロス

1₂

(43) (5E) (16 S) —16 20—ジメチルー 3—ォキサ— 13 L 4, 18, 8, 9 19一へキサデヒドロ一 9 (〇）一メタノ一プロス夕

■ 2

(44) (5E) - (16R) —16, 20—ジメチル— 3—ォキサ一 13,

14, 18, 18 19, 19一へキサデヒドロ一 9 (0) —メタノープロス夕グランジン I ₂

(45) (5E) - (16RS) — 16 20—ジメチルー 3—ォキサ _ 13 14 18, 18 19, 19 キサデヒドロー 9 (〇）一メタノープロス夕グランジン I ₂

(46) (5E) - (16 S) —16 20—ジメチル— 3—ォキサ— 13 14, 18, 18, 19, 19—へキサデヒドロ一 9 (O) ーメタノ一プロス夕グランジン 1₂—トリスー（ヒドロキシメチル）一ァミノメタン塩

(47) 16—メチルー 18, 18 19 19—テトラデヒドロー 5 , 6 7—トリノル一 4, 8—インタ一一 m—フエ二レン一プロスタグランジン I ₂

(48) 16—メチルー 18, 18 19, 19—テトラデヒドロ一 5 6 7—トリノル一 4, 8一^ Γンタ一一 m—フエ二レン一プロスタグランジン I ₂— メチルエステル

(49) 18， 18， 19， 19ーテトラデヒドロ一 5, 6， 7—トリノルー

4, 8—インタ m—フエ二レン一プロスタグランジン I ₂

(50) 18， 18, 19, 19—テトラデヒドロー 5, 6， 7—トリノル一 4, 8—イン夕一一 m—フエ二レン一プロスタグランジン I ₂—メチルエステル

(51) 20—メチル—18, 18, 19， 19—テトラデヒドロー 5 , 6, 7—トリノル _4， 8—インタ—— m—フエ二レン一プロスタグランジン I ₂

(52) 20—メチルー 18, 18, 19, 19—テトラデヒド 'ロー 5 , 6, 7—トリノル一 4， 8—イン夕一一 m—フエ二レン一プロスタグランジン I ₂_ メチルエステル

(53) 16, 20—ジメチルー 18， 18， 19， 19—テトラデヒドロ— 5， 6， 7—トリノ^/一 4, 8—イン夕一一 m—フエ二レン一プロスタグランジン 1₂

(54) 16, 20—ジメチルー 18， 18， 19， 19—テトラデヒドロー 5, 6, 7—トリノルー 4, 8—インタ一一 m—フエ二レン一プロスタグランジン I ₂—メチルエステル

(55) 20—ェチル—16—メチル—18, 18, 19， 19—テトラデヒドロー 5， 6， 7—トリノル一 4, 8—イン夕一一 m—フエ二レン一プロスタグランジン I ₂

(56) 20—ェチルー 16—メチルー 18， 18， 19， 19ーテトラデヒドロ一 5, 6， 7—トリノル一 4， 8—インタ一一 m—フエ二レン一プロスタグランジン I ₂—メチルエステル

(57) 16—メチル—2， 3， 18， 18, 19， 19—へキサデヒドロ—

5, 6, 7—トリノル一 4, 8—インタ一一 m—フエ二レン一プロスタグランジン I ₂

(58) 16—メチル—2， 3， 18， 18， 19， 19—へキサデヒドロ— 5, 6, 7—トリノル一 4， 8—イン夕一一 m—フエ二レン一プロスタグランジン I。一メチルエステル (59) 2， 3， 18， 18， 19， 19一へキサデヒドロ— 5， 6， 7—トリノル一 4， 8一インタ一一 m—フエ二レン一プロスタグランジン I ₂

(60) 16—メチル— 13, 14， 18, 18， 19， 19—へキサデヒド口一 5， 6, 7—トリノルー 4， 8—インタ一一 m—フエ二レン一プロス夕グランジン 1₂

(61) 16—メチル— 13, 14， 18, 18， 19， 19—へキサデヒド口一 5， 6, 7—トリノル一 4， 8—インタ一一 m—フエ二レン一プロスタグランジン I ₂—メチルエステル

(62) 20—メチル— 19, 19， 20， 20—テトラデヒドロー 5 , 6, 7—トリノルー 4， 8 fンタ一一 m—フエ二レン一プロスタグランジン I ₂

(63) 17, 17, 18， 18—テトラデヒドロ一 5， 6， 7—トリノル一 4, 8—インタ一一 m—フエ二レン一プロスタグランジン I ₂

(64) 7—ォキソ一プロスタグランジン I ₂

(65) (64) と [R— (R*， S*) ] -a- [1— (メチルァミノ）ェチル] ベンゼンメタノールの混合物（1 : 1)

また、本発明においては、上に列挙した化合物の光学異性体、あるいは上記化合物とその光学異性体との任意の割合の混合物を用いることもできる。

次に、本発明において本発明者らが新規に開発した神経軸索伸長促進活性の評価方法について説明する。

この方法は、脳あるいは神経組織片を培養したときの神経軸索の伸長促進を指標とする生理活性評価法であって、生後哺乳類の脳あるいは神経組織を材料として用い、培地の存在する部分と組織片の存在する部分を空間的に分け、しかも組織片への培地の浸透を許すような支持体の上表面で培養し、かかる支持体が神経軸索の伸長を許容させる領域であり、しかも観察の対象となる領域でもあることを特徵とする生理活性評価方法である。

ここで、「脳あるいは神経組織片」とは生きた動物から摘出した脳および神経系の一部であって、神経軸索を伸ばし得る神経細胞を含んだものを意味する。その大きさは、最大径 2 cm以下、厚さ 0. 5 mm以下のスライス状のものがよく、好ましくは最大径は 2 mm以下がよい。

本評価方法は、培養中に存在する神経細胞の細胞体から伸びている軸索の長さそのもの、あるいはそれを反映するパラメーターを計測するものである。その計測の方法は、脳あるいは神経組織片に含まれる構造の内、特に軸索を可視化することによる。このためには、顕微鏡などを含む光学'画像装置を用いた方法、あるいは培養組織片に組織染色を施したうえでの光学 ·画像装置を用いた方法を用いることができる。

ここで、組織染色の方法としては、

b i o c y t i n、

b i o t i n d e x t r a n>

PHA— L (Pha s e o l u s vu l g a r i s— l euc o agg 1 u t i n i n) 、

D i I (1, 1' -d i oc t ade cy l -3, 3， 3' ， 3' — t e t r ame t y l i ndoc a r bo cyan i ne p e r c h l o r a t e)

などの軸索にそって輸送される標識用の化合物を使った方法、あるいは抗ニュー口フィラメント抗体などの抗体を用いた方法を挙げることができる。

また、「哺乳類」とは実験動物一般を指すが、げっ歯類、特にラットを用いるのがよい。そして、「生後の哺乳類」は生後 7日齢またはそれ以降の動物がよい。さらに、「支持体」とは、培養用の液体培地と培養する組織片とを空間的に隔離し、しかも培地に含まれる有効成分が組織片に浸透するようにデザィンされたものをいう。例えば、適当な厚さのゲル状のコラーゲン層があげられる。そして、かかるコラーゲン層は、ポリ力一ポネ一ト製のメンブレンフィルターのような、コラーゲン層を物理的に支持することができる、適当な大きさの穴の開いた膜の上に付着させるとよい。つまり、コラーゲン層を付着させた膜の下面を培地に浸け、ゲル状コラーゲン層の上表面に組織片を置いて培養することになる。

本評価系は、内嗅野の細胞を含む組織片と、海馬の細胞を含む組織片とを組み合わせた共培養を行うことにより構成される。両組織片の間の距離は 0. 1mm 以上 lmm以下がよい。この場合の組織片の調製方法も、脳をいつたんスライスにしてから必要部分を切り抜く方法がよい。

前述の脳あるいは神経組織片の培養は、無血清条件下で行われる。このような培地としては、 DMEM : F 12 (1 : 1) 培地からグルタミン酸、ァスパラギン酸を減少させたもの、または除いたもので、トランスフェリン、インスリン、ハイド口コーチゾン、セレン化ナトリウム、プロゲステロン、グルタミンが添加されたものがよい。その場合の濃度はグルタミン酸以下各々、 7mgZL未満、 6. 5mgZL未満、 10-20 Omg/L 、 1-2 Omg/L, 2- 100 n M、 2- 100 nM, 2_100nM、 l_20mMがよい。

本発明の神経障害治療剤の適用対象については、特に限定はない。本発明の薬剤は、特に哺乳類に対して有用であり、なかでも家畜、実験動物、愛玩動物、ヒ卜に対して好適に用いられる。

本発明の神経障害治療剤は、動物あるいは人間の疾患の治療に用いることができる。対象疾患は特に限定されず、神経障害に起因するものであればよい。例えば、脳あるいは神経系の変性性疾患、具体的には、アルツハイマー病、パーキンソン病、多発性硬化症、側索硬化症、糖尿病性末梢神経障害（ニューロパシー）などの、痴呆あるいは運動不全を伴う脳あるいは神経系の変性性疾患、あるいは脳梗塞 ·脳卒中による脳機能障害であり、また外傷による神経損傷にも用いることができる。

投与方法は特には限定されないが、好ましくは経口投与、経皮投与、経鼻投与、静脈内注射、腹腔内投与、直腸内投与あるいは脳室内投与が挙げられる。

本発明に係るプロスタグランジン類、またはその塩、または包接化合物を臨床に適応するに際しては、有効成分としてのプロスタグランジン類を固体または液体等の薬学的に許容される担体とからなる医薬組成物とし、さらに必要に応じて希釈剤、すなわち賦形剤、安定剤等の添加剤を加えて製剤とすることが好ましい。治療的投与に使用すべき本発明のプロスタグランジン類の注射投与製剤は、通常滅菌状態でなければならない。滅菌性は孔径 0. 2

などの滅菌濾過膜を通して濾過することによつて容易に達成される。かかる医薬組成物において上記有効成分の担体成分に対する割合は、例えば 0. 0 1〜9 0 %W/Wの間で変動させることができる。治療的有効投与量は、投与方法、年令、対象疾患などにもよるが、 0 . 0 1 g〜l 0◦ O mg Z日ノ人が可能で、好ましくは 0. 0 1 g〜l O mgZ日 Z人である。個々の投与経路について、薬学でよく知られている方法によって各化合物について個別に体内への吸収効率を決定するのが望ましい。

剤形及び投与形態としては、顆粒剤、細粒剤、散剤、丸剤、錠剤、カプセル剤もしくは液剤等の剤形にして経口投与してもよいし、または、座剤、エアゾル剤、あるいは軟膏及び皮膚パッチなどの局部製剤などにして非経口投与してもよい。注射剤として静脈内投与、動脈内投与、筋肉内投与、皮下投与してもよい。また注射用の粉末にして用時調製してもよい。さらに、経鼻投与、腹腔内投与、直腸内投与あるいは脳室内投与とすることもできる。

経口、経腸もしくは非経口投与に適した医薬用の有機または無機の、固体または液体の担体もしくは希釈剤を、本発明に係るプロスタグランジン類を医薬製剤として調製するために用いることができる。

錠剤、カプセル剤などに組み込み得る代表的な担体もしくは希釈剤は、ァカシァ、トウモロコシ澱粉またはゼラチンなどの結合剤、微結晶性セルロースなどの賦形剤、トウモロコシ澱粉やアルギン酸などの崩壊剤、ステアリン酸マグネシゥムなどの潤滑剤、蔗糖や乳糖などの甘味料を挙げることができる。剤形がカプセルである場合には、上記の物質に加えて脂肪油などの液体担体を含有してもよい。様々な種類の他の物質を被覆剤として、あるいは投与単位の物理形状の改良剤として使用することができる。注射用の滅菌組成物は従来の医薬的方法に従つて製剤化することができる。例えば水や天然の植物油などの賦形剤ゃォレイン酸ェチルなどの合成脂肪賦形剤に活性化合物を溶解または懸濁することが好ましい。クェン酸塩、酢酸塩、リン酸塩などの緩衝剤、ァスコルビン酸などの抗酸ィ匕剤を許容されている医薬的方法に従って組み込むこともできる。

錠剤の形態にするには、例えば乳糖、デンプン、結晶セルロースなどの賦形剤；カルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、ポリビニルピロリドンなどの結合剤；アルギン酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウムなどの崩壊剤等を用いて通常の方法により成形することができる。

丸剤、散剤、顆粒剤も同様に、上記の賦形剤等を用いて通常の方法によって成形することができる。液剤、懸濁剤は、例えばトリカプリリン、トリァセチンなどのグリセリンエステル類、エタノール等のアルコール類などを用いて通常の方法によって成形される。カプセル剤は顆粒剤、散剤あるいは液剤などをゼラチンなどのカプセルに充填することによって成形される。

経口投与の製剤として、本発明に係るプロスタグランジン類は、シクロデキストリン包接化合物に変換することもできる。包接化合物はシクロデキストリンを水および/または水と混合しやすい有機溶媒に溶解した溶解液を、プロス夕ダランジン類を水と混合しやすい有機溶媒に溶解した溶解液に加えることにより調製される。混合物を熱した後、減圧濃縮か、あるいは冷却下でのフィルター濾過あるいはデカンテ一ションにより生成物を分離することにより、目的のシクロデキストリン包接化合物が単離される。有機溶媒と水の比率は出発物と生成物の溶解性によって変ィ匕する。シクロデキストリン包接化合物調製中の温度は 7 0 を超えないことがましい。ひ一、 ]3—あるいはアーシクロデキストリンあるいはそれらの混合物のいずれも、シクロデキス卜リン包接化合物の調製に用いることができる。プロスタグランジン類は、シクロデキストリン包接化合物へ変換することにより安定性を上昇させることができる。

皮下、筋肉内、静脈内投与の剤型としては、水性あるいは非水性溶液剤などの形態にある注射剤がある。水性溶液剤は例えば生理食塩水などが用いられる。非水性溶液剤は、例えばプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油、ォレイン酸ェチルなどが用いられ、これらに必要に応じて防腐剤、安定剤などが添加される。注射剤はバクテリア保留フィル夕一を通す濾過、殺菌剤の配合等の処置を適宜行うことによって無菌化される。

経皮投与の剤型としては、例えば軟膏剤、クリーム剤などが挙げられ、軟膏剤はヒマシ油、ォリーブ油などの油脂類；ワセリン等を用いて、クリーム剤は脂肪油；ジエチレングリコール、ソルビタンモノ脂肪酸エステルなどの乳化剤等を用いて通常の方法によって成形される。

直腸投与のためには、ゼラチンソフトカプセルなどの通常の座剤が用いられる。非経口投与の製剤は、乳濁剤として投与することもできる。すなわち、大豆油等の植物油と、レシチン等のリン脂質と、本発明に係るイソ力ルバサイクリン類との均一溶液に水を加え、例えば加圧噴射ホモジナイザー、超音波ホモジナイザ一などのホモジナイザ一により均質化を行った脂肪乳剤なども注射剤として使用できる。

上記記述から明らかなとおり、本発明によれば、さらに、上記（I ) 、（m) または（IV) で表されるプロスタグランジン類およびまたはその光学異性体の、神経障害治療のための活性成分としての使用、並びに上記（I ) 、（m) または

(IV) で表されるプロスタグランジン類および Zまたはその光学異性体を、神経障害を持つ患者に、神経障害を治療するのに有効量で投与することを特徴とする神経障害治療法、が同様に提供されることが理解されよう。

実施例

以下、実施例により本発明をさらに詳述する。

参考例 1

神経軸索伸長促進活性の評価方法（1 )

生後 7日齢の S Dラット脳を水平断にて切り、内嗅野と海馬とを共に含む平面を得る（以下、「水平断スライス」という。図 1参照。図 1中、 aは生後ラットの大脳半球および周辺の図であり、 bは水平断の一部でありそして Cはと内嗅野海馬を含む部分である。内嗅野から海馬歯状回へ軸索を伸ばす神経細胞が描かれている）。このようにして作製した 3 2 5 imの厚さの水平断スライスから、内嗅野部分のスライス断片および海馬歯状回部分のスライス断片を調製する。この海馬歯状回スライスと内嗅野スライスを両スライス間の距離が 5 0 0 m程度になるようにして、ゲル状コラーゲン層上で、 5 % F C S入り培地を用いて培養する。コラーゲン層は、市販の支持枠にはられた細かい穴の開いたポリエチレンテレフタレ一ト製の膜の上にコラ一ゲンゲルをコートすることにより作製する（図 2参照）。培養を開始して 24時間後に、被験物質を含む無血清培地に交換し、さらに 1 日間あるいは 4日間培養する。その後、 b i o c y t i nの結晶粉末を内嗅野スライスの上に乗せ、さらに 1日間培養を行う（このような培養を行うことにより、スライス中の神経細胞の軸索がコラーゲン層内に伸延してくる。また、添加した b i o c y t i nは内嗅野の神経細胞に取り込まれ、軸索内を順行輸送されて、軸索全体に存在するようになる）。

培養後のスライスをパラホルムアルデヒドで固定し、標識した a V i d i nを用いて軸索（b i o c y t i nの存在する部分）を染色する。

染色された標本の写真を撮り、写真の上で内嗅野スライスからコラーゲン層に出た軸索の占有する領域の輪郭を描き、その描かれた輪郭に囲まれた部分の面積を算出することにより、軸索の伸長度を測定する。

参考例 2

神経軸索伸長促進活性の評価方法（2)

スライスの作成、培養および培養後の染色は参考例 1と同様にして行う。

染色された標本の写真を撮り、コラーゲン層中の、内嗅野スライスから一定の距離 (200 ^m) にある一定の長さ（750 ^m) の線分を通過する軸索の本数を数えることにより、軸索の伸長度を測定する。

参考例 3

モーリス水迷路を用いた短期作業記憶の測定方法

モーリス（M o r r i s )の方法 (J ou rna l o f Neu r o s c i e nc e Me t hod s, Vo l. 11， pp. 47-60, 1984) に準じて行う。

透明アクリル製のプラットホーム（直径 10cm、高さ 25cm)とプラットホームが水に隠れるように 27 cmの高さまで水を張った青色塩化ビニール製の円形のプ —ル（直径 140 cm、高さ 45 cm)を用いる。プールを 4つの象限に分割し、そのうちの第 4象限中央（プール中央より 35 cm)にプラットホームを設置し、またプールの周囲には空間的な手がかりとして電球や画用紙を設置する。記憶獲得試行として、ラットの頭をプールの壁に向けて第 1、 2、 3象限の 3つの象限のそれぞれの中央、および第 1と第 2象限、第 1と第 3象限の境界の 5地点から不規則にラットをプール内に入れる。プラットホームにたどり着いてから 15秒間滞在した場合は、プラットホームを認識しているとし、 15秒以内に再び泳ぎだした場合には認識していないとして測定を継続する。 1 試行あたりの最大観察時間は 90秒とし、 1日 2試行行い、連続 5日間（計 10試行)行う。

その翌日からの 3日間で作業記憶試験を行い、プール上に設置したビデオカメラを用いて、ラットを水中に投入してからプラットホームに到達するまでの時間 (escape l atency)を測定する。作業記憶試験の第 1日目は、プラットホームの位置を学習訓練時の場所から左に 180度移動する（第 2象限)。記憶獲得試行と同様に、ラットの頭をプールの壁に向けてプール内に入れ escape l at encyを測定する。プラットホームにたどり着いてから 15秒間滞在した場合、ラットをホームケージに戻す（1s t t r i al)。 1分後、再びラットをプール内に入れ escape l at ency を測定し、プラットホームに 15秒間滞在させた後ホームケージに戻す。これを 4 回繰り返す（2nd - 5 th t r i al s)。ラットの投入地点は第 1、 3、 4象限の 3つの象限のそれぞれの中央、および第 1と第 4象限、第 3と第 4象限の境界の 5地点とする。作業記憶試験 2日目には学習訓練時の位置から 90度（第 1象限)、 3 日目には 270度（第 3象限)プラットホームを移動させて同様に測定する。なお各試行の最大観測時間は 90秒とする。 1日 5試行で合計 3日間（合計 15試行）行い、 2から 5試行の平均 escape l atencyを作業記憶の指標とする。

参考例 4

ステツプスル一型受動回避試験によるラットの学習記憶能の測定方法

実験装置は、ギロチンドアで仕切られた 2室で構成されるステップスルー型受動的回避反応装置を使用する。すなわち、一方の部屋は透明アクリルボードからなる明室（床 15 cm X 25 cm、高さ 15 cm) で、他方は黒色アクリルボードからなる暗室（大きさ同じ）である。また、喑室の床には、 15讓間隔に直径 4腿のステンレス製グリッドを設け、ダリッドは電気ショックを加えるための装置（ショックジェネレータースクランブラー）と接続する。

まず 1分間、ギロチンドアを開けて装置内をラットに自由探索させた後、ドアを閉めて、獲得試行としてラットを明室に入れ、 30秒後にドアを開ける。ラットの四肢が暗室に入った後にドアを閉め、ただちに電気ショックを負荷する。電気ショックの強度は、 0. 5 mA、 5 sec とする。その後、ただちにラットを明室に入れ、同様の手順でギロチンドアを開けても、 120秒間明室にとどまるようになるまで、訓練を繰り返す。獲得試行の 24時間後に保持試行としてラットを明室に入れ、 30 秒後にギロチンドアを開けてから四肢が暗室に入るまでの時間を測定 (s tep-through lat ency) する。保持試行時の最大観察時間は 300秒とする。参考例 5

ί3蛋白脳室内持続注入によるアルツハイマー型痴呆動物モデルの作成

7週齢の Wi s tar系雄ラット（体重 220- 250 g)を使用する（N=5- 10)。

β-アミロイド蛋白（卜 40) あるいは β-アミロイド蛋白（卜 42) を、 35%ァセト二トリル /0. に溶解し、 300 pmol/day となるようにミニ浸透圧ポンプ (volume 230 μΐ, 0. 5 μΐ/hour)に注入し、ポリエチレンチューブを介して歯科用注射針とつなぐ。コントロール群には、 β-アミロイド蛋白（40-1)を注入したポンプをつなぐ。ラットを pentobarbi tal (50 mg/kg, i. p. )により麻酔した後、頭皮を切開し、脳図譜にしたがってマイクロドリルで頭蓋骨に穴を開け、針の先端が側脳室（A = -0. 3腿， L = 1. 2讓， H = 4. 5画）内になるように注射針を揷入し、歯科用セメントで固定する。浸透圧ポンプは、背部皮下に埋め込む。

ミニ浸透圧ポンプの埋め込み手術の 9日後から、水迷路試験を参考例 3に示した方法で行うか、あるいは 1 3、 1 4日目に受動回避試験を参考例 4に示した方法で行うことにより、 B-アミロイド蛋白（卜 40)あるいは β-アミロイド蛋白 (1-42)投与群では、 β-アミロイド蛋白（40- 1)投与群に比べて、学習記憶能が低下していることを確認する。

実施例 1

神経軸索伸長促進活性の ff ffi ( 1 )

披験化合物：（1 6 S ) — 1 5—デォキシー 1 6—ヒドロキシ— 1 6 _メチル - 9 (〇）一メタノ一 Δ ⁶ (^{9 α})—プロスタグランジン I i

参考例 1の評価方法で、神経軸索伸長促進活性を測定した。実験 1、 2および 3では被験物質を添加して 1日間培養後に b i o c y t i n を添加し、実験 4では被験物質を添加して 4日間培養後に b i 0 c y t i nを添

いずれの実験においても軸索伸長促進作用が検出され（実験 2は、有意水準： p<0. 05) 、本化合物が軸索伸長促進作用を有することが明らかになつた。

参考例 3の CNTFの効果に比較して、添加後 1日間培養の場合でも軸索伸長作用が検出されたことから、本化合物の効果は直接的に軸索伸長を促進することによるものである可能性が高いと考えられた。実施例 2

神経軸索伸長促進活性の評価 (2)

披験化合物：（16S) — 15—デォキシー 16—ヒドロキシー 16—メチル —9 (O) —メタノ一厶 ⁶ (^9α)—プロスタグランジン I L

参考例 2の評価方法を用いた（標本は実施例 1の実験 2と同じものである）。結果を以下に示す。

この測定方法においても被験物質の軸索伸長促進作用が検出された（有意水準： Pく 0. 05) 。

本例に用いた参考例 2の軸索伸長測定方法は、参考例 1の測定方法に比べ、より正確に軸索伸長度を測定する方法である。したがって、本例の結果は、本化合物が軸索伸長促進作用を有することを、より確実に示すものと考えられた。実施例 3

神経軸索伸長促進活性の評価 (3)

被験化合物： 9 (O) —メタノー Δ⁶ (^9α)—プロスタグランジン I i (イソカルパサイクリン）

参考例 1と同様の評価方法を用いた。ただし、海馬歯状回スライスと内嗅野スライスとの最接近距離を lmmにし、また、被験物質を添加して培養 4日目に、化合物の濃度は同じにして、培地交換をもう一度行い、全体で 7日間の培養を行つた。

結果を以下に示す。コラーゲン層上に伸長している神経軸索が占有する面積比を、コントロール（1. 16mm²) を 1として算出した。平均値土標準誤差

(単位：規格化された面積）被験化合物無添加 1. 00± 0. 36 (n=5) 被験化合物 0. 01 iM 3. 69±0. 29 (n = 5) 本化合物が軸索伸長促進作用を有することが明らかになった（有意水準： p< 0. 05) 。

実施例 4

神経軸索伸長促進活性の評価（4)

被験化合物： 9 (〇）一メ夕ノ一 Δ^{6 (9α)}—プロスタグランジン Iェ（イソカルバサイクリン）のメチルエステル体

実施例 3と全く同じ方法で実験を行った。

結果を以下に示す。コラーゲン層上に伸長している神経軸索が占有する面積比を、コントロール（1. 16mm²) を 1として算出した。

本化合物が軸索伸長促進作用を有することが明らかになった（有意水準： P< 0. 05) 。

実施例 5

学習記憶障害改善効果の測定（1)

披験化合物：（16 S) — 15—デォキシ— 16—ヒドロキシ— 16—メチル —9 (〇）一メタノー Δ⁶ (⁹ 一プロスタグランジン I 丄

参考例 3および 5の評価方法で、学習記憶障害改善作用を測定した。披験化合物はリン酸緩衝食塩水に溶解し、 B-アミロイド蛋白を注入するのと同様に、浸透圧ポンプを用いて注入した。本実施例 5では、ラットの右側脳室に β-アミロイド蛋白（40-1)あるいは β-アミロイド蛋白（卜 40)を、左側脳室にリン酸緩衝食塩水あるレ ^は披験化合物溶液を注入した。

(実験 1)

すなわち、以上の実験において、本化合物は学習記憶障害改善作用を示した。実施例 Θ

学習記憶障害改善効果の測定（2)

被験化合物：（16S) —15—デォキシ— 16—ヒドロキシ— 16_メチル —9 (〇）一メタノ一厶 ⁶ (^9α)—プロスタグランジン I丄

参考例 3および 5の評価方法で、学習記憶障害改善作用を測定した。披験化合物は β_アミロイド蛋白溶液に溶解し、浸透圧ポンプを用いて、 β-アミロイド蛋白と同時に注入した。

すなわち、本化合物は学習記憶障害改善作用を示した（有意水準： p<0. 05)。実施例 7

学習記憶障害改善効果の測定（3)

披験化合物：（16 S) — 15—デォキシ— 16—ヒドロキシ— 16_メチル -9 (〇）一メタノー Δ⁶ (^9a)—プロスタグランジン I丄

参考例 4および 5の評価方法で、学習記憶障害改善作用を測定した。披験化合物は β-アミロイド蛋白溶液に溶解し、浸透圧ポンプを用いて、 β-アミロイド蛋白と同時に注入した。

(実験 1)

保持試行時に暗室に移動した時間平均値土標準誤差（単位：秒） β—アミロイド蛋白（40- 1)

266.3 ± 23.6 (n=6)

300 pmol/day投与群

β -アミロイド蛋白（卜 42)

147.5 ± 54.8 (n=4)

300 pmol/day投与群

B-アミロイド蛋白（卜 42)

300 pmol/dayおよび被験化合物 12 300.0 土 0.0 (n=4)

imol/day投与群

β-アミロイド蛋白（卜 42)

300 pmol/dayおよび被験化合物 120 262.1 + 37.9 (n=7)

fmol/day投与群 (実験 2)

保持試行時に暗室に移動した時間平均値士標準誤差（単位：秒） β-アミロイド蛋白（40-1)

255.6 ± 29.6 (n=8)

300 pmol/day投与群

β-アミロイド蛋白（1-42)

147.6 士 38.2 (n=8)

300 Dmol/dav投与群

B -アミロイド蛋白 α - 42)

300 pmol/dayおよび被験化合物 1.2 188.1 ± 52.9 (n=7)

f i m luou 1 i / /H uav j 又" "^ 十

β -アミロイド蛋白（卜 42)

300 pmol/dayおよび被験化合物 12 244.5 ± 37.6 (n=8)

fmol/day投与群

β -アミロイド蛋白（卜 42)

00 pmol/dayおよび被験化合物 120 244.0 ± 35.8 (n=8)

fmol/day投与群

(実験 3)

保持試行時に暗室に移動した時間平均値土標準誤差（単位：秒） β -アミロイド蛋白（40- 1)

277.3 土 22.7 (n=3)

300 pmol/day投与群

β-アミロイド蛋白（1-42)

79.5 ± 18.0 (n=4)

300 pmol/day投与群

β -アミロイド蛋白（卜 42)

00 pmol/dayおよび被験化合物 1.2 186.0 ± 41.2 (n=4)

fmol/day投与群

β -アミロイド蛋白（卜 42)

00 pmol/dayおよび被験化合物 120 241.0 士 59.0 (n=4)

fmol/day投与群

(実験 4 )

すなわち、以上の実験において、本化合物は用量依存的な学習記憶障害改善作用を示した。

発明の効果 ― 本発明の薬剤は、例えばアルツハイマー型痴呆、パーキンソン病、多発性硬化症、側索硬化症、糖尿病性末梢神経障害（二ユートパシー）などの、痴呆あるいは運動不全を伴う脳あるいは神経の変性性疾患の治療薬となりうる。また脳梗塞 ·脳卒中などによる脳機能障害の改善薬ともなりうるものである。また外傷による神経損傷の治療薬にもなりうるものである。

Claims

請求の範囲

1. 下記式（ I )

ここで、 R¹は水素原子、 Cェ〜じ^アルキル基または 1当量のカチオンを表し； R²は水素原子、メチル基またはビニル基を表し； R³は直鎖もしくは分岐鎖 C ₃〜 C i 0アルキル基、直鎖もしくは分岐鎖 C ₃〜 C i 0アルケニル基、直鎖もしくは分岐鎖 C₃〜C₁₀アルキニル基、置換されていてもよい C 3〜C₁₀シクロアルキル基、置換されていてもよいフエニル基、置換されていてもよいフエノキシ基、または（置換されていてもよいフエニル基、置換されていてもよいフエノキシ基もしくは置換されていてもよい C₃〜C₁₀ シクロアルキル基）で置換されている直鎖もしくは分岐鎖 Ci Ceアルキル基を表し； nは 0または 1を表し； Aは — CH₂— CH₂—、 — CH = C H—またはー0— CH₂—を表し； Xは— CH₂— CH₂—、 -CH (NH₂) — CH₂—、一CH=CH―、一 C (NH₂) =CH—または一 C≡C—を表し；結合

を表す、但し Aが—〇_CH₇—であるときおよび Xが— CH (NHJ - CH₂—または— C (NH₂) =CH—であるとき、結合方向は逆であってもよい、

で表されるプロスタグランジン類およびノまたはその光学異性体を活性成分として含有する神経障害治療剤。

2. 下記式（Π)

ここで、 R R²、 R³および nの定義は上記式（I) に同じである、で表されるプロスタグランジン類および Zまたはその光学異性体を活性成分として含有する神経障害治療剤。

3. 上記式（Π) において、 R¹が水素原子またはメチル基である請求項 2に記載の神経障害治療剤。

4. 上記式（Π) において、 R¹が水素原子またはメチル基であり、 nが 0であり、 R ²が水素原子でありそして R ³がべンチル基である請求項 2に記載の神経

5. 上記式（Π) において、 R¹が水素原子またはメチル基であり、 nが 1であり、 R ²がメチル基でありそして R ³がブチル基である

請求項 2に記載の神経障害治療剤。

6. 下記式（IE)

H

ここで、 R R²、 ³, Xおよび nの定義は上記式 (I) に同じでありそして A¹は— CH₂— CH₂—または— CH=CH—を表す、但し Xが— CH (NH₂) — CH₂—または— C (NH₂) =CH—であるとき結合方向は逆であってもよい、

で表されるプロスタグランジン類および/またはその光学異性体を活性成分として含有する神経障害治療剤。

7. 下記式（IV)

H

ここで、 R¹, R²、 R³、 A、 Xおよび nの定義は、但し書きも含めて、上記式（I) に同じである、

8. 上記式（I) 、（ΠΙ) または（IV) で表されるプロスタグランジン類および zまたはその光学異性体を活性成分として含有する、ァルツハイマ一型痴呆症、パーキンソン病、多発性硬化症、側索硬化症、糖尿病性末梢神経障害、学習記憶障害、神経損傷、脳梗塞による脳機能障害および脳卒中による脳機能障害よりなる群から選ばれる神経障害のための治療剤。

9. 上記式 ( I ) 、 (ΠΙ) または（IV) で表されるプロスタグランジン類および Zまたはその光学異性体の、神経障害治療のための活性成分としての使用。

1 0 . 上記式（I ) 、（m) または（IV) で表されるプロスタグランジン類および/またはその光学異性体を、神経障害を持つ患者に、神経障害を治療するのに有効量で投与することを特徴とする神経障害治療法。