[go: up one dir, main page]

WO1995028425A1 - Preventive for circulatory diseases - Google Patents

Preventive for circulatory diseases Download PDF

Info

Publication number
WO1995028425A1
WO1995028425A1 PCT/JP1995/000750 JP9500750W WO9528425A1 WO 1995028425 A1 WO1995028425 A1 WO 1995028425A1 JP 9500750 W JP9500750 W JP 9500750W WO 9528425 A1 WO9528425 A1 WO 9528425A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
weight
casein
molecular
low
item
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
PCT/JP1995/000750
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Ryuji Sugai
Umeji Murakami
Yukio Yamori
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Kanebo Ltd
Original Assignee
Kanebo Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Kanebo Ltd filed Critical Kanebo Ltd
Priority to EP95915336A priority Critical patent/EP0757993B1/en
Priority to DE69531103T priority patent/DE69531103T2/de
Priority to US08/727,426 priority patent/US5703212A/en
Priority to JP07526870A priority patent/JP3090950B2/ja
Priority to AU22245/95A priority patent/AU693544B2/en
Priority to NZ283815A priority patent/NZ283815A/en
Publication of WO1995028425A1 publication Critical patent/WO1995028425A1/ja
Anticipated expiration legal-status Critical
Ceased legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/01—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof
    • A61K38/012—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof from animals
    • A61K38/018—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof from animals from milk
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
    • C07K14/4732—Casein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
    • C12P21/06—Preparation of peptides or proteins produced by the hydrolysis of a peptide bond, e.g. hydrolysate products

Definitions

  • the present invention relates to an agent for preventing circulatory system wart, which has an effect of preventing the onset of circulatory system disease, particularly the onset of stroke.
  • Vascular diseases that are critical factors in human aging namely stroke (Yamori Y. et al, Jpn. Circ. J., 38, 1095. 1974), myocardial infarction (Yamori Y. et al, Atheroscl erosi s. 42, 15, 1982), animal models of cardiovascular diseases such as arteriosclerosis and cerebrovascular dementia have been developed, and these are used to prevent cardiovascular diseases by nutrition even if they have a transmission factor. Has been demonstrated to be possible. Model animals (rats with apparent hypertension) (Okamo to K., et al, Jpn. Circ.
  • the ACE inhibitor captopril suppresses the onset of stroke in SHKSP by administration of a low dose that does not decrease blood pressure.
  • An object of the present invention is to provide a cardiovascular disease preventive agent which has no side effects such as blood pressure and pulsation and has a preventive effect on the onset of circulatory disease, especially onset of stroke.
  • the present inventors searched for substances having a preventive effect on the onset of circulatory diseases, especially onset of stroke, from food materials, and as a result of intensive studies, as a result, the casein derived from milk was hydrolyzed using tribusin and partially purified. Low molecular weight peptides obtained by The fraction was found to be effective as a cardiovascular disease preventive agent, and the present invention was completed.
  • the casein used as a raw material of the trypsin hydrolyzate to be mixed with the prophylactic agent may be one widely used as an additive for foods.
  • acid casein, casein salt, rennet u Tokaze fin and the like can be Manabu up
  • trypsin of the hydrolase used in the present invention examples include trypsin which is usually used for appetizers, medicines, food additives, etc., and a mixture of other enzymes (mainly chymotrypsin). It is desirable to have as few as possible.
  • the hydrolysis conditions in the wood invention are as follows: casein, caseinate, etc. are adjusted from neutral to alkaline, made into an aqueous solution, and tribcine is reacted.
  • Preferred reaction conditions are a pH of about 7.5, a protein concentration of about 10% by weight, and a reaction time of 2 to 5 hours.
  • the hydrolysis reaction can be stopped by an ordinary method, and it is possible to completely inactivate and sterilize the enzyme cord. For example, a heat treatment such as 121 and 10 minutes is preferable.
  • the insoluble fraction is removed by centrifugation or filtration, and the molecular weight is further reduced to 300 to 500
  • An ultrafiltration membrane capable of fractionating the peptide by a degree or a labeling operation using a gel filtration carrier can be performed.
  • Specific examples of the ultrafiltration membrane include SEP1013 (manufactured by Asahi Kasei Corporation), Amicon H10P3-20 (manufactured by Grace Japan), UFP—3—E—9A ( A / G Technology Co., Ltd.), etc.
  • the gel filtration carrier examples include Cefadex G-25 (Pharmacia), Cefacryl S-100HR (Nalmacia), Biogel P-6 (ba And Toyopearl HW-40 (manufactured by Tosoh I).
  • Cefadex G-25 Pulcoa
  • Cefacryl S-100HR Naalmacia
  • Biogel P-6 ba And Toyopearl HW-40 (manufactured by Tosoh I).
  • a low molecular weight peptide fraction having a molecular weight of preferably 500 or less, more preferably 300 or less, which is used in the present invention can be obtained.
  • the form of use of the circulatory system disease preventive agent of the present invention may be any form as long as it is acceptable as a pharmaceutical or a food.
  • an oral nutritional diet, an S-tube nutritional diet, a beverage, Tablets, cold seasonings, and seasonings ⁇ are used.
  • the amount of alcohol used is preferably 0.1 to 50% by weight, more preferably 0.5 to 10% by weight, based on the total amount. Is preferred.
  • Figure 1 shows the time course of (a) systolic blood pressure and (b) when caseintribcin hydrolyzate was given to a stroke-prone 1-blood pressure spontaneous disease rat (hereinafter referred to as SHRPS). It is a figure showing change of weight.
  • ⁇ indicates the control diet group, and ⁇ indicates the peptide diet group.
  • FIG. 2 is a diagram showing (a) brain weight and (b) heart weight when casein tribusin hydrolyzate is given to SHRSP and reared for 30 weeks. The comparison between the control diet group and the beptide diet group is shown.
  • FIG. 3 is a graph showing changes in the survival rate over time when a casein tribsine degradation product was given to SHRSP and reared for 30 weeks.
  • the letter represents the beptide diet group, ⁇ represents the amino acid diet group, and ⁇ represents the ⁇ tolu diet group.
  • Example is a production example of a low molecular weight fraction of casein trypsin hydrolyzate, and a test example shows the results of a cardiovascular disease prevention test using SHRSP of the low molecular weight fraction.
  • Milk-derived casein (made by Beigner, food acid casein) 3 ks is suspended in 30 water in a 50-jar armenter (made by Mills), and the pH is adjusted to 7.5 with 10 N KOH. It was adjusted. 3 7 and kept at hand, was trypsin (Sigma Type 3, E C. 3. 4. 21. 4 ) 7. a 5 g added with stirring 4 hours digestion u
  • Efficacy of cardiovascular disease prevention was evaluated using a stroke prone Jeong model animal (SHR SP).
  • the animal test feed consisted of: (1) a peptide diet obtained by adding 10% by weight of the peptide obtained in Example 1 to a 3% salt-supplemented feed based on a SP diet manufactured by Funabashi Toyoba Co., Ltd. (2) Amino acid diet mixed with 3% salt-added feed so as to be 10% by weight by mixing amino acid so as to have the same composition as the peptide; and (3) 3% salt-added feed. Three plants were prepared for the control diet.
  • mice Male SHRS P 10 mice each were fed a peptide diet, amino acid diet, or control diet from 77 days after birth.After administration, 2, 4, 6, 8, 12, 12, 16, 20, and At 24 weeks, blood pressure and body weight were measured. After breeding for 30 weeks, survivors were examined for the occurrence of stroke (gross findings, brain weight, heart weight, etc.) in all cases. Individuals who died on the way were dissected at any time, and similar examinations were made. After 30 weeks of breeding, the number of individuals exhibiting stroke symptoms was 1 in the peptide diet group, 5 in the amino acid diet group, and 5 in the control diet group, respectively. Peptide diet was shown to suppress the onset of stroke. There were no differences in blood pressure or body weight between the groups (Fig. 1).
  • Pathological examination e.g., brain brain, heart weight, etc. was performed on deceased individuals at the time of death and on surviving individuals 30 weeks after breeding.
  • Figure 2 shows the brain and heart weights. There was a significant effect on the armpit weight and a tendency to suppress the increase in the heart weight, indicating that the peptide diet had the effect of preventing brain edema and the effect of suppressing cardiac hypertrophy.
  • Figure 3 shows the changes in the number of surviving individuals during breeding. No deaths were observed in the peptide diet group, whereas there were 5 deaths in the amino acid diet group and 5 in the control diet group. Life extension effect was confirmed in peptide diet u
  • a disintegrant 500 mg / ' ⁇ was prepared according to a conventional method using the following two prescriptions.
  • the present invention can provide a cardiovascular disease preventive agent having a preventive effect for cardiovascular diseases without side effects such as blood pressure fluctuation.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Description

明 細 書 循現器系疾患予防剤 技術分野
本発明は、 循環器系疾患発症、 特に脳卒中発症の予防効果を有する循 環器系疣患予防剤に関する。 背景技術
現代社会において食生活の変化や医療技術の発達に伴い、 高血圧症や 高脂血症等の成人病の罹患率が上昇してきている。 社会環境の変化と共 に予防医宁への関心が高まり、 安全性と予防効果を併せ持つ作用物質が 注目され求められている。 世界各国が急速な高齢化社会を迎えつつある 今日、 「健康な長寿」 への展望を確立することが現在最大の医療 ·医学 の課題である。
ヒ トの老化の決定的荽因である血管の疾患、 すなわち脳卒中 （Yamori Y. e t al, Jpn. C irc. J. , 38, 1095. 1974 ) 、 心筋梗塞 (Yamori Y. et al, Atheroscl erosi s. 42, 15, 1982) 、 動脈硬化、 脳血管性痴呆等の循環器疾 患のモデル動物が開発され、 これらを用いて循環器疾患はたとえ遣伝素 因があっても、 栄養により予防が可能であることが実証されてきた。 モ デル動物 (高血圧目然発症ラ ヅ ト） （Okamo t o K. , e t al , Jpn. Ci rc. J. , 27. 282, 1963) 、 S H R S P (脳卒中易 ¾性 S II R ) の実 験によると食塩の過剰摂取はこれらの疾患を促進し、 ある種の食品中の 栄養素はこれらの疾患を予防することが示されている。 例えば、 大豆蛋 白質、 リジン、 タウリン、 カリウム、 カルシウム、 マグネシウム、 パル ミ トレン酸等を高血圧の発症前ないし初期から投与すると、 予防効果を 示すことが明らかにされている （Yamor i Y. , e t a l . , New hor i zon in prevent ing cardi ovascular diseases, Yamori Y. and S Irasser T. eds. , Elsevi er, Ames terdam, pp. 1, 1989) 0
また、 食品中に含まれる因子の解明が進められ、 食品蛋白質由来の物 質にいろいろな生理的役割のあることがわかってきた。 これらの成人病 に対応する、 例えば、 血中コレステロール濃度抑制作用、 血圧低下作用
(Karaki H. , et al. , Comp. Biochcm. Phys i ol. , 96C, 367, 1990 ) 等を捋っ 食品素材の開発が活発に行われ、 機能性食品， 特定保健用食品の素材と して商品化されてきている。
最近、 A C E阻害薬のカプトプリルが血圧低下を示さない程度の低用 量投与により S H K S Pの脳卒中発症を抑制する効果が報告されている
(Ohta Y. , et al. , Genet i c. Hypcrtcns. , 218, 393, 1992 ) 0 しかし、 力 ブトプリルには発疹等の副作用があり、 また、 他の従来の循環器系疾患、 特に脳卒中に対して効果のある物質も、 血圧の変化等の好ましくない副 作用を併せ持つ対処療法的な目的のものであった。
そこで、 予防医字の観点から、 安全性が高く、 血圧変動等の副作用を 持たず、 循環器系疾患発症、 特に脳卒中発症に予防効果があり、 さらに 曰常摂取するのに好適な安価な物質が強く望まれている。 発明の開示
本発明の目的は、 血圧 ^動等の副作用を持たず、 循環器系疾患発症、 特に脳卒中発症に予防効果を有する循環器系疾患予防剤を提供するとこ ろにある。
本発明者らは、 循環器系疾患発症、 特に脳卒中発症の予防効果をもつ 物質を食品素材中より探索し、 鋭意検討した結果、 乳由来カゼインをト リブシンを用いて加水分解し、 部分精製して得られる低分子量べプチド 画分に、 循環器系疾患予防剤としての有効性を見出し、 本発明を完成す るに至つた。
以下、 本発明の構成について詳細に説明する。
本発明において、 予防剤に配合される トリプシン加水分解物の原料と して利用されるカゼインとしては、 食品用の添加物として広く用いられ ているもので良く、 例えば、 酸カゼイン， カゼイン塩， レンネッ トカゼ ィン等が学げられる u
また、 本発明に用いられる加水分解酵素のトリプシンとしては、 通常、 試菜用、 薬品用、 食品添加物用等として使用されている トリプシンが挙 げられ、 他の酵素 （主にキモトリブシン） の混在ができるだけ少ないも のが望ましい。
木発明における加水分解の条件としては、 カゼイン， カぜイン塩等を 中性からアルカリ性に調整し、 水溶液の状態とし、 トリブシンを反応さ せる。 好ましい反応条件としては、 PH 7. 5付近かつ蛋白質濃度は 10重量 %付近、 反応時間は 2乃至 5時間である。 加水分解反応の停止は通常の 法を用いればよく、 酵索の完全な失活と殺菌が可能な、 例えば 1 2 1 で、 1 0分簡のような加熱処理が好ましい。
本発明に用いる低分子量ペプチド画分の分離 （精製） 方法としては、 上記加水分解反応停止後、 不溶性画分を遠心分離又は濾過等により除去 し、 更に、 分子量 3 0 0 0〜 5 0 0 0程度でぺプチドを分画できる限外 滤過膜又はゲル濾過担体による等の分璽操作を筝げることができる。 限 外攄過膜としては、 具体的には， S E P 1 0 1 3 (旭化成工業社製） ， アミコン H 1 0 P 3 - 2 0 (グレースジャパン社製） ， U F P— 3— E— 9 A ( A / G Technol ogy 社製） 等が挙げられ、 ゲル濾過担体とし ては、 具体的にはセフアデックス G— 2 5 (フアルマシア社製） ， セフ アクリル S— 1 0 0 H R (ンアルマシア社製） ， バイオゲル P— 6 (バ ィォラッ ドラボラトリーズ社製） ， トヨパール HW— 4 0 (東ソ一社製) 等が举げられる。 このようにして、 本発明に用いる好ましくは分子量 5 0 0 0以下、 更に好ましくは 3 0 0 0以下の低分子量べプチド画分を得 ることができる。
本発明の循環器系疾患予防剤の使用形態としては、 医薬品又は食品と して許容されるものであれば、 どのような形態でもよいが、 特に、 経口 栄養食、 S管栄養食、 飲料、 錠剤、 冷某、 調味料^が挙げられ、 使用澳 度としては、 総量を基準として、 0. 1重量 〜 5 0重量％配合するの が好ましく、 特に 0. 5重量％〜 1 0重量 配合するのが好ましい。 図面の簡単な説明
図 1は、 カゼィントリブシン分解物を脳卒中易 ¾性 1¾血圧自然 ¾症ラ ッ ト （以下 S HRS P) に与えたときの経時的な （a) 収縮期血圧、 及 び、 （b) 体重の変化を示した図である。 □は対照食群、 〇はペプチド 食群を表す。
図 2はカゼイントリブシン分解物を S HR S Pに与え 3 0週間飼育し たときの （a) 脳重量、 及び、 （b) 心重量を示した図である。 対照食 群、 ベプチド食群の比較を表す。
図 3はカゼイン トリブシン分解物を S HRS Pに与え 3 0週間飼育し たときの経時的な生存率の変化を示した図である。 書はべプチド食群、 Δはアミノ酸食群、 □は对妝食群を表す。 発明を実施するための最良の形態
以下、 実施例、 試験例、 応用例によって本発明をさらに詳細に説明す る。 実施例はカゼィントリプシン分解物低分子量画分の製造例であり、 試験例は低分子量画分の S H R S Pを用いた循瑋器疾患予防試験結果を 不す。
実施例 1
牛乳由来カゼィン （ベニェ社製、 食品用酸カゼィン） 3 k sを 5 0 ジャーフアーメンター （ミッヮ社製） 中で 3 0 の水に懸蘅し、 1 0 N の KOHによって p Hを 7. 5に調整した。 3 7てに保温し、 トリプシ ン （シグマ社製タイプ 3、 E C. 3. 4. 21. 4) 7. 5 gを加え撹拌 しながら 4時間消化を行った u
これをジャーファーメンター内で高温加圧加熱処理 （ 1 2 1。 ( 、 1 0 分間） し、 生じた沈澱を 1 0 0 0 0 r pm、 4 °Cで連続遠心分離して除 き、 カゼイントリプシン分解溶液の上清を得た。
このようにして得られたカゼイントリブシン分解溶液 5 £を限外逋過 膜にかけ.， 髙分子≤のペプチドを除いた。 限外 ¾8過膜は旭化成工業社製 S E P 1 0 1 3 (分画分子量 3 0 0 0 ) を用いた。 透過液を凍結乾燥し、 カゼイントリブシン分解物低分子量べプチド画分 3 5 gを得た。
試験例 1
脳卒中易発旌モデル動物 （SHR S P) を用いて、 循環器系疾患予防 効菓を評価した。 動物試験用飼料は、 （1)船榇豊場社製の S P食を基本に 実施例 1で得られたぺプチドを 1 0重量％となるように 3 %食塩付加飼 料に添加したぺプチド食、 （2)ぺプチドの組成と同一になるようにァミノ 酸を混合し 1 0重量％となるように 3 %食塩付加飼料に添加したアミノ 酸食、 及び、 （3) 3 %食塩付加飼料の対照食、 の 3植類を作成した。
雄性 SHRS P各 1 0匹に生後 7 7日より、 ぺプチド食、 ァミノ酸食、 又は、 対照食を与え、 投与後、 2、 4、 6、 8、 1 2、 1 6、 2 0、 及 び、 2 4週目に、 血圧、 体重を測定した。 生存個体については 3 0週間 飼育後、 全例脳卒中の発症について （肉眼的所見、 脳重量、 心重量等） 検討を加えた。 途中で死亡した個体は随時解剖し、 同様の検討を加えた。 3 0週飼育後、 脳卒中症状を示していた個体数は、 それぞれ、 ぺブチ ド食群 1例、 アミノ酸食群 5例、 対照食群 5例であつた。 ぺプチド食に 脳卒中発症を抑制することが示された。 血圧、 体重については各群に差 異は認められなかった （図 1 ) 。
死亡した個体については死亡時に、 生存個体については飼育 3 0週後 に病理学的精査 （脳直堂、 心重量等） を行った。 そのうち、 脳重量、 心 重量については図 2に示した。 脇重量については有意な增大抑制効罘、 心重量については増大抑制傾向が認められ、 ぺプチド食に脳の浮腫を予 防する効果、 心臓の肥大を抑制する効果が示された。
飼育中の生存個体数の推移を図 3に示した。 ぺプチド食群には死亡例 が認められなかったのに対し、 アミノ酸食群 5例、 対照食群 5例の死亡 例が認められた。 ペプチド食に延命効果が確認された u
応用例 1
下記表 1の処方にて飲料 （ 1 0 0 m £ /本） を常法に従い調製した。 表 1 実施例 1の低分子量べプチド画分 1 重量部
ビートグラニュー糖 1 5 重量部
クェン酸 0 . 4 重量部
香料 0 . 2 5重量部
水 8 3 . 3 応用例 2
下記去 2処方にて、 綻剤 （ 5 0 0 m g /'Ιέ) を常法に従い調製した, 袅 2 実施例 1の低分子量ぺプチド画分 2 . 0 重量部
乳糖 2 . 2 重量部
0 . 1 重量部
カルボキシメチルセルロース 1 . 5 重量部
ヒ ドロキシプロピルセルロース 1 . 0 重量部
ステアリン酸マグネシウム 0 . 2 重量邡
デンプングリコール酸ソーダ 1 . 0 重量部 応用例 3
下記表 3処方にて、 アイスクリーム （ 1 0 0 g /カツブ） を常法に従 ぃ魏製した。
表 3 実施例 1の坻分了量ぺブチド画分 1 重量部
加糖練乳 4 重量部
脱脂粉乳 7 重量部
植物油脂 9 重量部
砂糖 1 0 直量部
卵黄 1 2 重量部
安定剤 0 . 3 重量部
乳化剤 0 . 4 重量部
番料 0 . 1 重量部
水 5 B . 1 重量部 応用例 4 下記表 4処方にて、 ヨーグルト （ l O O gZカップ） を常法に従い調 製した。
表 4 実施例 1の低分子量べプチド画分 1 重量部
牛乳 7 0 重量部
全乳 • 4 重量部
脱脂粉乳 5 重量部
ダフニュー糖 7 重量部
水 1 2 重量部
香料 1 重量部
産業上の利用 能性
本発明により、 血圧変動等の副作用を持たない循琛器系庆患の予防効 果を有する循環器系疾患予防剤を提供できることが明らかである。

Claims

請求の範囲
1 . カゼインをトリブシンを用いて加水分解後、 部分精製して得られる 低分子量べプチド画分を有効成分とすることを特徴とする循環器系疾患 予防剤。
2 . カゼインが， 酸カゼイン、 カゼイン塩、 又は、 レンネッ トカゼイン である請求の範囲第 1項記載の循環器系疾患予防剤。
3 . トリブシンが、 試薬用、 薬品用、 又は、 食品添加物用のトリブシン である請求の範囲第 i項又は第 2 ¾記載の循環器系疾患予防剤。
4 . 加水分解が、 p H 7 . 5、 カゼインタンパク質濃度 1 0重量％、 反 応時間 2〜 5時間において実施されるものである請求の範囲第 1項、 第 2項又は第 3項記载の循環器系疾患予防剤。
5 . 部分精製方法が、 分子量 5 0 0 0以下のペプチドを分画できる限外 攄過膜又はゲル濾過担体を使用するものである請求の範囲第 1項'、 第 2 項、 第 3項又は第 4項記載の循環器系疾患予防剤。
Θ . 部分精製方法が、 分子量 3 0 0 0以下のペプチドを分豳できる限外 濾過膜又はゲル瀘過担体を使甩するものである請求の範囲第 1項、 第 2 項、 第 3項、 第 4項又は第 5項記載の循環器系疾患予防剤。
7 . カゼインをトリプシンを用いて加水分解後、 部分精製して得られる 低分子量ペプチド画分を、 全量の 0 . 1〜 5 0重量％'ϋ合することを特 徵とする請求の範囲第 1項、 第 2項、 第 3項、 第 4項、 第 5項又は第 6 項記載の循環器系疾患予防剤。
8 . カゼインをトリプシンを用いて加水分解し、 その後、 部分精製する ことを特徵とする低分子量べプチド画分の製造方法。
9 . カゼインが、 酸カゼイン、 カゼイン塩、 又は、 レンネ フ トカゼイン である請求の範囲第 8項記載の低分子量べプチド画分の製造方法。
1 0 . トリブシンが、 試薬用、 薬品用、 又は、 食品添加物用のトリプシ ンである請求の範囲笫 8項乂は第 9 ¾記載の低分子量べプチド画分の製 造方法。
1 1 . 加水分解が、 P H 7 . 5、 カゼインタンパク質濃度 1 0重量％、 反応時間 2〜 5時間において実施されるものである請求の範囲第 8項、 第 9項又は笫 1 0項記載の低分子量べプチド豳分の製造方法。
1 2 . 部分精製方法が、 分子量 5 0 0 0以下のペプチドを分画できる限 外滤過膜又はゲル濾過担体を使用するものである請求の範囲第 8項、 第 9項、 第 1 0項又は第 1 1項記載の低分子量ペプチド画分の製造方法„
1 3 . 部分精製方法が、 分子量 3 0 0 0以下のペプチドを分画できる限 外濾過膜又はゲル濾過担体を使用するものである請求の範囲第 8項、 第 9項、 第 1 0項、 第 1 1項又は第 1 2項記载の低分子量ペプチド画分の 製造方法。
PCT/JP1995/000750 1994-04-19 1995-04-18 Preventive for circulatory diseases Ceased WO1995028425A1 (en)

Priority Applications (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP95915336A EP0757993B1 (en) 1994-04-19 1995-04-18 Preventive for circulatory diseases
DE69531103T DE69531103T2 (de) 1994-04-19 1995-04-18 Für kreislauferkrankungen vorbeugendes mittel
US08/727,426 US5703212A (en) 1994-04-19 1995-04-18 Preventive for circulatory diseases
JP07526870A JP3090950B2 (ja) 1994-04-19 1995-04-18 循環器系疾患予防剤
AU22245/95A AU693544B2 (en) 1994-04-19 1995-04-18 Preventive for circulatory diseases
NZ283815A NZ283815A (en) 1994-04-19 1995-04-18 Low molecular weight peptide fraction obtained by trypsin digestion for preventative treatment of cerebral strokes

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP6/104480 1994-04-19
JP10448094 1994-04-19

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO1995028425A1 true WO1995028425A1 (en) 1995-10-26

Family

ID=14381732

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP1995/000750 Ceased WO1995028425A1 (en) 1994-04-19 1995-04-18 Preventive for circulatory diseases

Country Status (8)

Country Link
US (1) US5703212A (ja)
EP (1) EP0757993B1 (ja)
JP (1) JP3090950B2 (ja)
AU (1) AU693544B2 (ja)
DE (1) DE69531103T2 (ja)
ES (1) ES2202359T3 (ja)
NZ (1) NZ283815A (ja)
WO (1) WO1995028425A1 (ja)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6514941B1 (en) 1999-12-10 2003-02-04 Campina Melkunie B.V. Method of preparing a casein hydrolysate enriched in anti-hypertensive peptides

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2019160023A1 (ja) * 2018-02-16 2019-08-22 森永乳業株式会社 脳卒中予防用組成物

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS58109425A (ja) * 1981-12-23 1983-06-29 Agency Of Ind Science & Technol アンジオテンシン転換酵素阻害剤
JPS62270533A (ja) * 1986-05-20 1987-11-24 Agency Of Ind Science & Technol 経口摂食物
JPS645497A (en) * 1987-06-27 1989-01-10 Kanebo Ltd Collection of peptide
JPH04341193A (ja) * 1991-05-14 1992-11-27 Kanebo Ltd ペプチド又はその塩の取得方法
JPH06211690A (ja) * 1993-01-21 1994-08-02 Kanebo Ltd 血中脂質抑制用摂食物

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1171052A (en) * 1968-03-18 1969-11-19 Louis Anne Gerhard Hissink Injectable Anti-Shock Preparation.
US4161520A (en) * 1976-10-14 1979-07-17 Hoffmann-La Roche Inc. Method of treating hypertension
US4361564A (en) * 1978-11-30 1982-11-30 Edwards K David G Renoprotective treatments employing vasodilator compounds
FR2491334A1 (fr) * 1980-10-03 1982-04-09 Inst Nat Sante Rech Med Nouvelles substances biologiquement actives, leur obtention a partir de caseine humaine et compositions les contenant
SE8702550D0 (sv) * 1987-06-18 1987-06-18 Anders Grubb Cysteinproteashemmare

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS58109425A (ja) * 1981-12-23 1983-06-29 Agency Of Ind Science & Technol アンジオテンシン転換酵素阻害剤
JPS62270533A (ja) * 1986-05-20 1987-11-24 Agency Of Ind Science & Technol 経口摂食物
JPS645497A (en) * 1987-06-27 1989-01-10 Kanebo Ltd Collection of peptide
JPH04341193A (ja) * 1991-05-14 1992-11-27 Kanebo Ltd ペプチド又はその塩の取得方法
JPH06211690A (ja) * 1993-01-21 1994-08-02 Kanebo Ltd 血中脂質抑制用摂食物

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
See also references of EP0757993A4 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6514941B1 (en) 1999-12-10 2003-02-04 Campina Melkunie B.V. Method of preparing a casein hydrolysate enriched in anti-hypertensive peptides

Also Published As

Publication number Publication date
ES2202359T3 (es) 2004-04-01
JP3090950B2 (ja) 2000-09-25
AU693544B2 (en) 1998-07-02
EP0757993A4 (en) 1998-10-14
NZ283815A (en) 1998-03-25
AU2224595A (en) 1995-11-10
DE69531103T2 (de) 2004-05-19
DE69531103D1 (de) 2003-07-24
EP0757993B1 (en) 2003-06-18
US5703212A (en) 1997-12-30
EP0757993A1 (en) 1997-02-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP3128244B2 (ja) カゼインホスホペプチド、これを含むカゼイン及びこれらの製造方法
EP1567022B1 (en) Sustained improver of muscular fatigue
JP5735734B2 (ja) 脂質代謝改善剤
AU2011221852B2 (en) Agent for preventing muscular atrophy
JPWO2004050118A1 (ja) プロテアーゼ阻害剤
AU2009332369B2 (en) Muscle-building agent
JP2001031586A (ja) 動脈硬化症及び動脈硬化症に起因する疾患の予防又は治療組成物
JP5118915B2 (ja) 褥瘡改善剤
JPWO2005061529A1 (ja) アンジオテンシン変換酵素阻害ペプチド
AU2018338277B2 (en) Composition for promoting energy consumption
JPH06165655A (ja) コレステロール低減用組成物
WO1995028425A1 (en) Preventive for circulatory diseases
JP6083085B2 (ja) アンジオテンシン変換酵素阻害剤およびその用途
WO1998006424A1 (fr) Inhibiteurs des metastases cancereuses administres par voie orale
AU2012319579B2 (en) Sense-improving agent
JP2001026753A (ja) 高血圧症予防又は治療用組成物
JPWO1995028425A1 (ja) 循環器系疾患予防剤
JPH07308172A (ja) 低カルシウム吸収者用カゼインホスホペプチド含有飲食品
JP2006219420A (ja) 抗高血圧剤
JP5717433B2 (ja) 胆汁酸吸着用組成物
CN112638180A (zh) 用于短期肾功能的蛋白质水解产物
JPH04210647A (ja) 胃潰瘍予防または治療のための医薬及び飲食品
HK1173653A (zh) 肌肉萎缩防止剂
JPH0223885A (ja) ペプチドの取得方法
HK1082384B (en) Sustained improver of muscular fatigue

Legal Events

Date Code Title Description
AK Designated states

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): AU JP NZ US

AL Designated countries for regional patents

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): AT BE CH DE DK ES FR GB GR IE IT LU MC NL PT SE

DFPE Request for preliminary examination filed prior to expiration of 19th month from priority date (pct application filed before 20040101)
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application
WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 283815

Country of ref document: NZ

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 08727426

Country of ref document: US

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 1995915336

Country of ref document: EP

WWP Wipo information: published in national office

Ref document number: 1995915336

Country of ref document: EP

WWG Wipo information: grant in national office

Ref document number: 1995915336

Country of ref document: EP