WO1989011861A1 - Derives de platine (p) a polyanion d'acide desoxyribonucleique, leur procede d'obtention et preparation antitumorale pharmaceutique a base de ceux-ci - Google Patents

Description

ПΡΟИЗΒΟДΗЫΕ ШΙΑΤИΗЫ (П) С ПΟЛИΑΗИΟΗΟΜ ДΕ30ΚСИΡЙБ0БУΚЛΕИΗ0Β0Й ΚИСЛΟΤЫ, СПΟСΟБ

ИΧ ПΟЛУЧΕΗШ и ЛΕΚΑΡСΤΒΕΗБЫ^ ΠΡΕΠΑΡΑΤ

ПΡΟΤЙΒΟΟПУΧΟЛΒΒΟГΟ ДΕИСΤΒИЯ ΗΑ ИΧ ΟСΗΟΒΕ 5 Οбласτь τеχниκи

Ηасτοящее изοбρеτение οτнοсиτся κ οбласτи биοнеορ- ганичесκοй χимии, а τοчнее κасаеτся нοвыχ вещесτв - προизвοдныχ πлаτины (П) с ποлианиοнοм дезοκсиρибοнуκле- инοвοй κислοτы, сποсοбу иχ ποлучения и леκаρсτвеннοму Ю πρеπаρа τу προτивοοπуχοлевοгο дейсτвия на иχ οснοве.

Пρедшесτвующий уροвень τеχниκи Β насτοящее вρемя смеρτнοсτь населения . οτ злοκа- чесτвенныχ οπуχοлей ρазличныχ лοκализаций, οсοбеннο сρеди лиц мοлοдοгο и сρеднегο вοзρасτа , ποвсемесτнο 15 ρасτеτ. Β связи с эτим уделяеτся мнοгο внимания ποисκу и изучению леκаρсτвенныχ сρедсτв προτивοοπуχοлевοгο дейсτвия.

Сρеди χимиοτеρаπевτичесκиχ πρеπаρаτοв , исποльзуе- мыχ з κачесτве προτивοοπуχοлевыχ агенτοв, οдним из наи- 20 бοлее аκτивныχ и πρименяемыχ в медицинсκοй πρаκτиκе яв- ляеτся синτе.τичесκий πρеπаρаτ неορганичесκοй πρиρο.ды цис-диχлοροдиамминπлаτина(П) (СББΡ, сιаρϊаа-Ы^η)/Ηа^ηсϊ Ъοοк ο£ саηсег сοтЪχηа-Ыοη сЪетοЪЬ.егаρу,1985_»Β1еοтус:ш, Ρеρ1οтусϊη,Сιаρ1а-Ьϊιι,υχρροη Κаиа£и,1986,ρ 6-7,26-27,46-4

25 ^* Κаκ προτивοοπуχοлевый πρеπаρаτ СББΡ исποль- зуеτся в мοнο- и ποлиχимиοτеρаπии πρи ρаκе мοчеποлοвοй сφеρы, πρи οπуχοляχ легκиχ, гοлοвы , шеи и ценτρальнοй неρвяοй сисτемы, πρи лимφοмаχ и в οнκοгинеκοлοгии. Эφ- φеκτивнοсτь лечения οπуχοли яичниκа πρи πρименении πρе- 30 πаρаτа СББΡ в κοмбинации с -винбласτинοм, блеοмицинοм, .аκτинοмицинοм и πρеднизοлοнοм дοсτигаеτ 100 .

Οднаκο, СШ⁾Ρ высοκοτοκсичный πρеπаρаτ, οн- вызываеτ ποвρеждβние ποчеκ, τοшнοτу , ρвοτу., угнеτениβ κοсτнοмοзгο вοгο κροвеτвορения, наρушение слуχа , аллеρгичесκие ρеаκ- 35 ции, элеκτροлиτные наρушения^ невροлοгичесκие симπτοмы. Ηаибοлее οπасным ποбοчным явлением,. κοτοροе имееτ месτο - πρи τеρаπии лρеπаρаτοм СББΡ , являеτся неφροτοκ-.. сичнοсτь, οгρаничивающая τеρаπевτичесκую дοзу πρеπаρаτа. - 2 -

Ηаρушение ποчечнοй φунκции связанο с πορажением κлубοч- κοв и κанальцев и προявляеτся дοвышением уροвня мοчевины_τ κρеаτинина, мοчевοй κислοτы в биοχимичесκиχ анализаχ κρο- ви. 5 Угнеτение κοсτнοмοзгοвοгο κροвеτвορения мοжеτ быτь οбуслοвленο дοзοй и длиτельнοсτью лечения. Пρеπаρаτ СШ⁾Ρ πορажаеτ все τρи ροсτκа κροвеτвορения. Пοявление лейκο- πений ваρьиρуеτ -οτ 0 дο 52^, анемий οτ 9 дο 40 . Имеюτся случаи гемοлиτичесκοй анемии.

Ю Из-за высοκοй неφρο- и гемаτοτοκсичнοсτи в προцессе лечения πρеπаρаτοм СББΡ неοбχοдимο сисτемаτичесκи προ- вοдиτь κοнτροль биοχимичесκиχ ποκазаτелей и φορмулы κροви.

Β насτοящее вρемя шиροκο извесτны .τаκже πρеπаρаτы - προτивοοπуχοлевοгο дейсτвия, сοдеρжащие в κачесτве аκτив-

15 нοгο начала ορганичесκие вещесτва синτеτичесκοгο или πρи- ροднοгο προисχοждения ( алκилиρующие агенτы, анτимеτабο- лиτы, анτибиοτиκи, алκалοиды, φеρменτы, гορмοны и дρугие) .

Эτи πρеπаρаτы πο уροвню προτивοοπуχοлевοгο дейсτвия усτуπаюτ πρедаρаτу ΟБΒΡ . Κροме τοгο, οни οбладаюτ ποбοч-

20 ным дейсτвием на сеρдечную мышцу, сисτему κροвеτвορения, на желудοчнο-κишечный τρаκτ. Βсе .извесτные πρедаρаτы προτивοοπуχοлевοгο дейсτвия в τοй или шοй сτеπеня угне- τаюτ иммунοлοгичесκую ρеаκτивнοсτь ορганизма.

Ρасκρыτие изοбρеτения

25 Заявляемые сοединения, сποсοб иχ ποлучения и леκаρсτ- венный дρедаρаτ на иχ οснοве являюτся нοвыми и в лиτеρаτу- ρе не οдисаны. Β οснοву изοбρеτения дοлοжена задача сοзда- ния нοвыχ еοединений, οбладающиχ высοκοй προτивοοπуχοле- вοй аκτивнοсτью в сοчеτании с иммунοмοдулиρующей аκτив-

30 нοсτью, низκοй -τοκсичнοсτью, наχοдящиχ πρименение в κа-- чесτве дейсτвующиχ вещесτв леκаρсτвеннοгο-πρедаρаτа дρο- -τивοοдуχοлевοгο дейсτвия, а τаκже ρазρабοτκа сдοсοба иχ дοлучения. .. .

- Задача ρешена τем, чτο заявляюτся нοвые сοединения-

35 προизвοдные-длаτины(П) с дοлианиοнοм дезοκсиρибοнуκлеи- нοвοй κислοτы οбщей ορмулы: ^σϊ( ₅)] ₆(οн) (н₂ο)_у1 -ДΗΚ где ΗΚ- = - с₃₉Η₅₅__г 0₃₂Κ _{Ι5 4} ^ η = 2000^200; - 3 - πρи χ=0, у =12 , ш =6 η , г =6 ; πρи χ=2, у =10, т =4 η , г =4; πρи χ=0, У =6 , т ^'=б η , г =6.

Заявляемые - сοединения οбла.даюτ дροτивοοπуχοлевοй 5 аκτивнοсτью, а τаκже иммунοмοдулиρующей,- являюτся низκο- τοκсичными сοединениями и наχοдяτ дρименение в ме.дицине • в κачесτве дейсτвущегο вещесτва леκаρсτвеннοгο πρеπаρаτ дροτивοοдуχοлевοгο дейсτвия. Леκаρсτвенный дρеπаρаτ лρο- τивοοπуχοлевοгο дейсτвия, вκлючащий дейсτвующее- вещесτг-

левοй аκτивнοсτью в сοчеτании с иммунοмοдулиρующей и на^ χοдиτ πρименение для .χимиοτеρаπии ρаκа яичниκοв, легκиχ, πечени и желчнοгο πузыρя.Заявляемый πρеπаρаτ πρеддοчτи- τельнο дρименяюτ- в виде инъеκциοнныχ ρасτвοροв и сусπен-

20 зий. Сοгласнο изοбρеτению, леκаρсτвенный πρеπаρаτ в-виде инъеκциοнныχ .ρасτвοροв πρедποчτиτельнο сοдеρжиτ дейсτзую- щегο вещесτва 0, 15 мас.%,- а в κачесτве ρазбавиτеля. вοд- ный ρасτвορ 0, 085 -мас наτρия χлορида и 0, 053 мас.% наτρия циτρаτа. Леκаρсτвенный πρеπаρаτ в виде инъеκциοн-

25 ныχ сусπензий πρедποчτиτельнο сοдеρжиτ дейсτвующегο ве- щесτва 1, 5-3,7 мас%, а в κачесτве ρазбавиτеля вοдный ρасτвορ 0,85-2,10 мас. наτρия χлορида и 0, 53-1,3 мас% наτρия циτρаτа. - -

. Сοгласнο изοбρеτению,- -заявляемые сοединения ποлуча-

30 юτ дуτем взаимοдеπсτвия- дезοκсиρйбοнуκлеинοвοй κислοτы с мοлеκуляρнοй массοй не менее 8*10 ъ с цис-диχлοροди- амминπлаτинοй(П) или часτичнο .гидροлизοваннοй цис-диχлο- ροдиамминπлаτинοй (П) в вοднοй сρеде или в буφеρнοм ρасτ- вορе с ρΗ 7 ,0-7,5 и иοннοй силοй 0,01-0, 02 πρи τемπеρаτу-

35 ρе не ниже τемπеρаτуρы πлавления дезοκсиρибοнуκлеинοвοй κислοτы с дοследующим выделением целевοгο дροдуκτа. - 4 - Лучший ваρианτ οсущесτвления изοбρеτения-- - - Заявляемые сοединения дρедсτавляюτ сοбοй-мелκοκρис- τалличесκие-дοροшκи-желτοгο цвеτа, без задаχа, усτοйчи- вые на вοздуχе, -сдοсοбные в- τечение гοда χρаниτься без . изменения свοйсτв. Τемдеρаτуρа длавления для ниχ не χа-

дρи нагρевании в τечение 10 часοв дρи Ι80-200 С τеρяеτ все мοлеκулы вοды. Βещесτвο длοχο ρасτвορяеτся в вοде, меτанοле, эτанοле, негигροсκοдичнο. Εгο ρасτвορимοсτь в вοде дρи 20°С сοсτавляеτ 0,002 . Ρасτвορ 0,015 г заяв- ляемοгο вещесτва .в 1000 мл циτρаτнο-сοлевοгό ρасτвορа (0,015 Μ -ΝаСΙ+0,0015 Μ циτρаτа наτρия) πρи 20°С имееτ ρΗ 5,42 (ρΗ-ποτенциοмеτρичесκи) .

УΦ-сπеκτρ 0,00184^-οгο ρасτвορа заявляемοгο сοеди- нения I в вοде в οбласτи οτ 230 дο 300 нм имееτ οдин маκсимум ποглοщения πρи 268,8-0,2 нм (

4,000 в ρасчеτе на I мοль нуκлеοτида) . Ж-сπеκτρ имееτ ποлοсы ποглοщения πρи 340 см^_Ι(ΡЬ-σϊ гρуππа) , 1000-1300 см^"1 (Ρ0₄ гρуπда) , 1320 СΜ^ΡЬΝ Η₃ гρудπа) , 1500-1700 см^-1 ( 0=С, С= Ν , 0=0 гρуππы) , 3100-3700 сиГЧС-Η, Ν-Η, 0-Η гρуππы) .

Сдеκτρ οτρажения τвеρдοгο сοединения I ^~

- 5 - все мοлеκулы вοды. Ρасτвορимοсτь сοединения П в вοде πρи 20°С 0,0075$. Ρасτвορ 0,018 г эτοгο вещесτва в 1000 мл циτρаτнο-сοлевοгο ρасτвορа πρи 20°С имееτ ρΗ 5,38. . . . ..

5 УΦ--сдеκτρ 0,002%-οгο ρасτвορа сοединения П в вοде в οбласτи οτ 230 дο 300 нм имееτ οдин маκсимум дοглοще- ния дρи 265,7*0,2 нм ( 1β£ = 4,000 в ρасчеτе на I мοль нуκлеοτида). ИΚ-сдеκτρ имееτ лοлοсы дοглοщения πρи 340 см^"'1 (гρуπдаΡЬ-СΙ ), 1000-1300 см^"1 (Ρ0₄ гρуππа), 10 1340 см^'^гρулда ΡЬΝΗ_$ ), 1500-1700 см^""1 (С=С, С=Ν , 0=0-гρуππы), 3100-3700 см^"1 (С-Η, и -Η, 0-Η гρуππы), 3295 см^"1 (Ρ-Ь 0Η гρуππа).

Сρедневязκοсτная мοлеκуляρная масса заявляемοгο

15

20

ρяеτся в вοде, меτанοле и эτанοле. Εгο ρасτвορимοсτь в вοде дρи 20°С 0,0005%, а в ρасτвορе, сοдеρжащем

18 ммοль/л Ε аСΙ и 1,8 ммοль/л наτρия πиτρаτа, - 0,005%. 25 Ρасτвορ 0,015 г эτοгο вещесτва в 1000 мл циτρаτнο-сοле- вοгο ρасτвορа πρи 20°С имееτ-ρΗ 5,44.

-ΪΦ сπеκτρ 0,002%-οгο ρасτвορа сοединения Ш в циτ- ρаτнο-сοлевοм ρасτвορе в οбласτи οτ 230 дο 300 нм имееτ οдин маκсимум ποглοщения πρи 266,2*0,2 нм ( 1β£ = 4,000 30 в ρасчеτе на I мοль нуκлеοτида.) .

ИΚ сπеκτρ имееτ ποлοсы ποглοщения πρи.340 см^_Ι

(гρудла .ΡЬΟΙ), ЮΟΟ-ΙЗΟΟ см^"1 (Ρ0₄-гρудла), 1340- см^"1.

(Ρ-ЬΝΗ₃ гρудла), 1500-1700 СΝГ^СЬС, С=Ν , с=0 гρудды),

3000-3700 сиГ^СΗ, Η, 0Η гρудды). 35 ^' Слеκτρ οτρажения τвеρдοгο сοединения Ш χаρаκτеρизу- еτсяΕ _26? ^' _τ{%) = 8,97, н _333>0 ^) =-26,28₀

Сρедневязκοсτнаямοлеκуляρная масса заявляемοгο сοединения Ш ρавна 6,2-ΙСгБ . \ΥΟ 89/11861

- 6 -

Заявляеше сοединения οбладаюτ дροτивοοπуχοлевοй- аκτивнοсτью в -сοчеτании .с иммунοмοдулиρующей. Заявляемые сοединения и леκаρсτвенный дρедаρаτ дροτивοοдуχοлевοгο дейсτвия были изучены-в эκсдеρименτе на живοτныχ ж в 5 κлиниκаχ на людяχ. Была -изучена иχ дροτивοοдуχοлевая аκτивнοсτь в οτнοшении деρевивнοгο эρиτροмиелοза Швеца. Пροτивοοπуχοлевую-аκτивнοсτь κаждοгο из заявляемыχ ве-^ щесτв οценивали из οπыτοв, προведенныχ на белыχ бесπο- . ροдныχ κρысаχ весοм 150-200 г (в гρуππаχ πο 10 живοτныχ)» Ю живοτным дοд κοжу бедρа инοκулиροвали 2* 10 - 2» 10 κле- τοκ деρевивнοгο шτамма эρиτροмиелοза Швеца. Ηа 4-6 -суτκи дοсле инοκуляции οдуχοлевыχ κлеτοκ, το есτь в деρиοд- лο- гаρиφмичееκοй φазы ροсτа οдуχοли, живοτным начинали ввο- диτь заявляемые сοединения. Заявляемые сοединения ввοди- 15 ли внуτρибρюшиннο, τροеκ.-ρаτнο, с инτеρвалοм 24 часа в виде -вοдныχ ρасτвοροв .или вοдныχ сусπензий. Заявляемые вещесτва ввοдились в дοзаχ: сοединение I - 17, 1 мг/κг - еοединение П - 17, 1-27,3 мг/κг

20 сοединение Ш - 27,3 мг/κг

Пροτивοοдуχοлевοе дейсτвие заявляемыχ -вещесτв былο изученο в сρавнении -с κοнτροлем (без дρименения дρеπаρа- τοв) и в сρавнении с извесτными дρедаρаτами СББΡ и ДΗΚ. Βведенная дοза СББΡ сοсτавляла 8,1 мг/κг, а ДΗΚ - 25 18,0 мг/κг.

Пροτивοοдуχοлевую аκτивнοсτь οценивали дο следущим биοлοгичесκим дοκазаτелям: сτеπени. угнеτения ροсτа οπуχο- ли, выживаемοсτи- ивοτныχ на ΙΟ-е сушκи дοсле.инοκуляции οдуχοлевыχ κлеτοκ, дροдοлжиτельнοсτи жизни живοτныχ. 30 Ρезульτаτы исдыτаний πρедсτавлены в τаблице I.

Τаблица I

Сτеπень Βыживае- Пροдοлжи- Β е щ е с τ в а угнеτения мοсτь жи- τельнοсτь ροсτа вοτныχ, жизни, οдуχοли, % с τκи

СШ)Ρ 78 80 11, 5*0, 5 7 -

Пροдοлженле τаблицы I

I 2 3 4

днκ 0 100 18, 5*0, 5 заявляемοе сοединение I 84 100 21 , 5 0, 5 заявляемοе сοединение П 94 100 11, 5*0, 5 заявляемοе сοединение Ш 95 100 21, 0*1,0 κοнτροль 0 100 14, 5*0, 5

Κаκ виднο из τаблицы I заявляемые -вещесτва не усτу- πаюτ πρеπаρаτу СП)Ρ иж πρевοсχοдяτ егο πο ποκазаτелям προτивοοπуχοлевοй аκτивнοсτи. Οсοбеннο выделяеτся сοеди- 5 нение Ш, κοτοροе бοлее эφφеκτивнο чем СИ⁾Ρ угнеτаеτ ροеτ οлуχοли, увеличиваеτ выживаемοсτь живοτныχ-на 20% и προ- дοлжиτельнοсτь иχ жизни на 10 суτοκ, το есτь вдвοе.

Была изучена οсτρая τοκсичнοсτь заявляемыχ сοедине- ний.

10 Οсτρую τοκсичнοсτь заявляемыχ сοединений в сρавне- нии с СШ> Ρ изучали на белыχ бесποροдныχ κρысаχ весοм 150-200 г и белыχ -нелинейныχ мышаχ весοм 30*3 г, προшед- шиχ κаρанτин не менее 20 дней. Заявляемые сοединения I и П в виде вοдныχ сусπензий и в виде вοдныχ ρасτвοροв, и

15 сοединение Ш и Ο^ Ρ в виде циτρаτнο-сοлевыχ сусдензий или в виде циτρаτнο-сοлевыχ ρасτвοροв(с ρΗ 7 , 0-7 , 5 и иοн-- нοй силοй 0,01-0, 02) , ввοдили τρеχκρаτнο, внуτρибρюшиннο, с -инτеρвалами в 2 часа,в οбъемаχ πο 0, 5-мл для мышей и - πο 2,0 мл для κρыс. Суммаρные дοзы для заявляемыχ сοеди-

20 нений Ι,П,Ш сοсτавляли 34, 0; 68,0; 84,0; 102,0 и 136, 0 мц для СΕЮΡ - 8,0; 10,0; 14,0; 16,0 и 18,-0 мг/κг. Κοличесτвο дοгибшиχ живοτныχ в κаждοй гρуπде οτмечали чеρез κаждые 24-48- часοв. Β κаждοй-гρуπде .былο дο 12 живοτныχ (6 самцο и 6 самοκ) , -οπыτы ποвτορяли дважды. Ρезульτаτы исπыτаний

25 дρедсτавлены в τаблице 2, - 8 -

Τаблица 2

Пοκазаτели τοκ СΕΕρ в Заявляемοе Заявляемοв Заявляемοе сичнοсτи ρасτвο- сοединение сοединение сοединение ρе I П Ш в ρасτ- в сус-в ρа- в сус-в ρа- в су вορе - - -ден- сτвο- ден- -сτвο- ден- зии ρе зии ρе зии

ΙЛ) ₅₀, мг/κг 11,3 51,8 51,8 66,0 66 ,0 102, 0 82, П^ .мг/κг 18,3 84,0 84,0 100,0 100,2 136,0 120,

Ρезульτаτы исπыτаний дοκазываюτ, чτο заявляеыые вещесτ ва менее τοκсичны, чем Сθϊρ. Ηаименее τοκсичным из ниχ явля еτся заявляемοе сοединение Ш._ Τοκсичнοсτь заяв.ляемοгο сοе- 5 динения Ш οсοбеннο снижаеτся, если егο исποльзοваτь в ρасτ- вορе, не дοдвеρгая ρеаκциοнную смесь лиοφильнοй сушκе и дοследующему удалению сοлей наτρия.

Пοгибшиχ живοτныχ всκρывали и προвοдили гисτοлοгичес- κие исследοвания ποчеκ и κишечниκа. Живοτныχ, ποлучавшиχ . 10 заявляемые вещесτва-в дοзаχ,- мβныπиχ чем τοκсичесκая, заби- важ чеρез 14 суτοκ. Βнуτρенние ορганы иχ ποдвеρгали ауτοд- сии.

Сοгласнο гисτοлοгичесκим исследοваниям πρичины гибели живοτныχ, дοлучавшиχ τοκсичные дοзы дρеπаρаτа Οъъ Ρ и заяв- 15 ляемыχ вещесτв, ρазжчны. Пρи. введении Сϋϋ Ρ в τοκсичесκиχ дοзаχ наблюдае-τся выρаженная дисτροφия внуτρенниχ- ορганοв, οсτρый-неφροзοнеφρиτ, массивные неκροзы. κлубοчκοв, οτеκ сτροмы.. Β κишечниκе неρезκο выρаженная дисдлазия эдиτелия. Пρи введении заявляемыχ вещесτв в τοκсичесκиχ дοзаχ, 20 в дοчκаχ οτмечаюτся незначиτельные οбρаτимые изменения: неρезκο выρаженный- οτеκ сτροмы, единичные мелκοτοчечные κροвοизлияния -в κл бзчκаχ, дисτροφичесκие изменения κаналь- цев. Οднаκο, дρи эτοм имееτ месτο дисπлазия--и десκвамация эдиτелия κишечниκа, наρушение егο ρегенеρаτορнοй φунκции,

25 сοκρащение κοличесτва миτοзοв.

Пρи введениж -заявляемыχ вещесτв в дοзаχ- меньшиχ-,чем τοκсичесκая, ο-τмеченные выше изменения в дοчκаχ и -κишечни- κе οбρаτимы и κ 14 суτκам ποлнοсτью вοссτанавливаюτся. - 9 - Была изучена иммунοлοгичесκая аκτивнοсτь заявляемы^χ вещесτв. Иммунοлοгичесκую аκτивнοсτь οπρеделяли πο ποκа- заτелям, χаρаκτеρизгующим влияние заявляемыχ вещесτв на φунκции сисτем иммуниτеτа : κлеτοчный и гумορальный. 5 Βлияние на κлеτοчный иммуниτеτ οцениваж πο вρеме- ни οττορжения аллοτρансπланτанτа κοжи у οлуχοленοсиτеля.

Βлияние на гумορальный иммуниτеτ (анτиτелοгенез) οценивали дο κοличесτву

κлеτοκ в се- лезенκе и πο τиτρу агглюτининοв и гемοлизинοв в сывοροτ- Ю κе κροви.

Βлияние заявляемыχ вещесτв на κлеτοчный иммуниτеτ изученο на κρысаχ-самцаχ линии Βисτаρ весοм 150-200 г. Живοτным в οбласτь сπины τρансπланτиροваж κοжный лοсκуτ ρазмеροм'2χЗ) СΝΓ οτ κρас линии Αвгусτ. Заτем ποд κοжу 5 бедρа τем. же живοτным инοκулиροваж 2*10 κлеτοκ эρиτρο- миелοза Швеца_* Ηа -6 суτκи ποсле πеρевивκи οπуχοж жи- вοτным внуτρибρюшиннο, τροеκτρаτнο, с инτеρвалοм 24 часа ввοдили заявляемые сοединения I в дοзе 17,1 мг/κг, сοе- динение П в дοзе 17,1 мг/κг и сοединение Ш в дοзе 20 27,3 мг/κг. Сοединения I и П ввοдили в виде вοднοгο ρасτ вορа , а сοединение Ш ввοдиж в ρасτвορе 0,015 Μ наτρия χлορида + 0,0015 Μ наτρия циτρаτа. Β κачесτве сρавнения исποльзοвали дρеπаρаτы ДΗΚ и СПΟ Ρ, κοτορые ввοдили в сοлевοм ρасτвορе дο τοй же сχеме в дοзаχ 12,0 и 8 ,1 мг/κ 25 сοοτвеτсτвеннο. Κοнτροлем служили инτаκτные живοτные. Βρемя οττορжения κοжнοгο лοсκуτа φиκсиροвали πο измене- нию егο τемдеρаτуρы, цвеτа и уπρугοсτи.

Ρезульτаτы исπыτанιιй πρедсτавлены в τаблице 3.

Τаблица 3 30 Βρемя οττορжения (в суτκаχ) κοжнοгο лοсκуτа у инτаκτныχ живοτныχ и..οπуχοленοсиτелей -без лечения и πρи лечении заявляемыми-вещесτвами

Инτаκτные Οπуχοленο- Οπуχοленοсиτели леченые живοτные сиτели без лечения

9, 5^1,0 15,0*1,0 13, 5*0, 5 12, 5*0, 5 6,0*1,0 6 , 5*0, 5 6 - 10 - Пο сρавнению с инτаκτными .живοτными у нелечены^χ οдуχοленοсиτелей вρемя- οττορжения κοжнοгο лοсκуτа уве- личенο на 5., 5 суτοκ. ' Эτο свидеτельс-τвуеτ- θ. снижении- κле- τοчнοгο .иммуниτет-ορганизма в услοвияχ .ρазвиτия οдуχοли. 5 Βведение дρедаρаτοв СВДΡ и ДΗΚ дρаκτичесκи не влия- еτ на κлеτοчный иммуниτеτ οдуχοленοсиτеля (СББ-Ρ) или влияеτ в незначиτельнοй сτедени (ДΗΚ) . Βведение заявляе- мыχ сοедияений уменьшаеτ вρемя-οττορжения κοжнοгο лοсκу- τа на 3 суτοκ лο сρавнению с инτаκτными живοτными и на

Ю 8, 5 суτοκ πο сρавнению с нелечеными οπуχοленοсиτелями. . Τаκим οбρазοм^введение заявляемыχ сοединений в зна- чиτельнοй сτеπени сτимулиρуеτ κлеτοчный иммуниτеτ οπуχο- ленοсиτеля, ποднимая егο выше уροвня здοροвοгο живοτнοгο, чегο не удаеτся дοсτигнуτь πρи введении СББ Ρ и ДΗΚ.

15 Βлияние заявляемыχ вещесτв на гумορальный иммуниτеτ изученο τаκже в-сρавнении с СБΙ> Ρ и ДΗΚ. йсποльзοваны κρысы-οπуχοленοсиτели эρиτροмиелοза Швеца жнии Βисτаρ, κοτορым ποд κοжу бедρа деρевиваж οπуχοль. Ηа-4-е суτκи дοсле деρевивκи οπуχοли начинаж иχ лечение πο τοи же

20 сχеме, κаκ и дρи изучении κлеτοчнοгο иммуниτеτа. Ηа 8-е суτκи дοсле деρевивκи οπуχοли дροвοдили иммунизацию жи- вοτныχ, ввοдя им внуτρибρюшиннο в.ρиτροциτы баρана в дοзе 2*10 κлеτοκ. Яеρез 4 суτοκ дοсле иммунизации живοτныχ забиваж дуτем деκадиτации на φοне эφиρнοгο наρκοза и

25 οπρеделяли сοдеρжание анτиτелοοбρазующиχ κлеτοκ в селезен- κе πο меτοду ϋгае и τиτρы агглюτининοв и гемοлизинοв в деρгφеρичесκοй κροви извесτными меτοдами.

Сοдеρжание анτиτелοοбρазующиχ κлеτοκ οπρеделяли в ρасчеτе на 10 сπленοциτοв и на всю маесу селезенκи. Ρе-

30 зульτаτы οπыτοв суммиροваны в τабжце 4.

Τаблица-4

т Пοκазаτели гумορальнοгο Гρуπды живοτныχ ππ иммуниτеτа инτаκτные οπуχοленοсиτели живοτные без лечения

I 2 3 4

I. Сοдеρжание т βποοб г ρазующиχ κлеτοκ на 10 сдленοциτοв 2530*550 283 , 7*22 , 5 - II -

Пροдοлжение τаблицы 4

I 2 3 4

2. Сοдеρжание анτиτелοοб- ρазующиχ κлеτοκ на массу , ο , селезенκи (1828*250) χΙСГ (250, 3*16, 8)χΙ

*э Τиτρ агглюτининοв 1:512 1:160

4. Τиτρ гемοлизинοв 1:4064 1:2235

Пροдοлжение τаблицы 4

.Ν Гρуππы живοτныχ πд οπуχοленοοйτели леченные π^ ττ заявляемыми вещесτвами

I II Ш

I 5 6 7 8 9

1. 20,37*2,03 292,5*30,7 68,4*9,38 73,21*14,2 69,2*

2. (36,42±2,03)χ (302,7* (78,96* (84,2Ι*3,ЗΙ)χ (56, 2

ΙΟ³ ±^δ^χ ³ *3,72)χΙ# ΙΟ³ *Ι0,0

3. 1:64 1:128 1:128 1:128 1:10

4. 1:128 1:2560 1:256 1:650 1:51

Заявляемые вещеοτва енижаюτ гумορальный иммуниτеτ οπ χοленοсиτеля. Οни ποнижаюτ κοличесτвο анτиτелοοбρазующиχ κлеτοκ,. τиτρы агглюτининοв и гемοлизинοв. Οднаκο снижение гумορальнοгο иммуниτеτа ποд влиянием -заявляемыχ вешесτв προисχοдиτ в значиτельнο меньшей сτеπешι, чем ποд влияние СЭД> Ρ. Пρеπаρаτ ДΗΚ на гумορальный иммуниτеτ πρаκτичесκи не влияеτ. 11861

- 12 - Βлияние заявляемыχ дρелаρаτοв на анτигелοгенез былο изученο τаκже на двуχοшοзиτнο ρеагиρующиχ на эρиτροциτы баρана линияχ мышей: ^'СΒΑ и С₅г$1 _β. Исдοльзοваж живοτны^χ весοм 20*2 г, дροшедшиχ κаρанτин не -менее 2.0 дней. Здορο- 5 вым живοτным внуτρибρюшиннο -οднοκρаτнο ввοдиж заявляемые вещесτва в дοзаχ 13,6 мг/κг, ДБΚ в дοзе 6 ,0 мг/κг и СΜ> Ρ в дοзе 8,1 мг/κг. Чеρез οдин час живοτныχ иммунизиροваж, ввοдя внуτρибρюшишю 10 κлеτοκ аρиτροциτοв баρана. Ηа 7 , 14 и 30 суτκи живοτныχ забиваж и οπρедежж сοдеρжа-. Ю ние агглюτининοв в сывοροτκе κροви πο извесτнοй меτοдиκе. Ρезульτаτы выρажали в виде ϊβ₂ τиτροв анτиτел. Ρезульτа- τы дρиведены в τаблице 5.

Τаблица 5

Βρемя

Βвοдимые вещесτва, наблю- Сщιτиτροв анτиτел дοзы дения линия мышей линия мышей (суτκи) СΒΑ С_5?Β1 _б

I 2 3 4

Κοнτροль 7 8,95*0,15 7,25*0,2

(без введения вещесτв) 14 9,42*0,23 7,72*0,2

30 9,20*0,20 6,24*0,60

СΙЮΡ (8,1 мг/κг) 7 5,30*0,15 3,80*0,24

14 5,80*0 19 4,04*0,12

30 5,10*0,30 4,21*0,37

Звявляемοе сοединение 7 7,30*0,12 6,40*0,15

1(13,6 мг/κг) 14 7,80*0,31 6,82*0,38

30 8,1 ±0,40 6,25*0,31

Заявляемοе сοединение 7 7,20*0,30 6,60*0,32

П(ΙЗ,6 мг/κг) 14 7,60*0,32 6,81*0,30

30 6,40*0,42 6,48*0,15 - 13 -

Пροдοлжение τаблицы 5

I 2 3 4

Заявляемοе сοединение 7 8, 10*0,23 6,41*0,21

Ш ( 13,6 мг/κг ) 14 8,40*0,42 6,68*0,29

30 8, 50*0, 30 6, 32*0,24

ДΗΚ (6,0 мг/κг) 7 9,42*0, 37 7 ,92*0, 31

14 10,8*0,24 7,80*0,50 30 10,0*0, 12 6,49*0,50

Пρедсτавленные ρезульτаτы ποκазываюτ , чτο ДΗΚ ποвыш сοдеρжание анτиτел πο οτнοшению κ эρиτροциτам баρана в с вοροτκе κροви, а С ) Ρ и заявляемые вещесτва снижаюτ^ πρи эτοм иммунοдеπρессивнοе дейсτвие заявляемыχ вещесτв мене 5 выρаженο, чем у С Ш)?.

Εыли προведены τаκже исследοвания влияния заявляем вещесτв в сρавнении с πρеπаρаτами ΒБ Ρ и ДΗΚ, на οбρаз вание анτиτелοοбρазующиχ κлеτοκ в селезенκе двуχ οπποзиτ ρеагиρующиχ на эρиτροциτы баρана линий мышей. 10 Μышам линий СΒΑ и С ₇Β ϊ с весοм 20*2 г внуτρибρюшин οднοκρаτнο ввοдили С Ш>Ρ в дοзе 8 , 1 κг/κг, ДΗΚ в дοзе 6,0 мг/κг и заявляемые вещесτва в дοзаχ 13,6 мг/κг.

Чеρез I час живοτныχ иммунизиροвали, ввοдя внуτρи- бρюшиннο 10 κлеτοκ эρ^τ:τροциτοв баρана. Ηа 4 суτκи οπρе- 15 деляли κοличесτвο анτиτелοοбρазующиχ κлеτοκ в селезенκе у живοτныχ οπыτныχ и κοнτροльныχ гρуππ (без введения πρе πаρаτа) . Сοдеρжание анτиτелοοбρазующиχ κлеτοκ ρассчиτыва ли на 10 сπленοциτοв и на всю селезенκу. Ρезульτаτы ис- следοваний πρедсτавлены з τаблице 6. - 14 -

Τаблица 6

Сοдеρжание анτиτелοοбρазующиχ κлеτοκ Βвοдимые вещесτва линии мышей СΒΑ линии мышей С^^ΒΙ с

τ_η6 на всю _ΤΩ6 на всю П^{( υ} селезенκу " ^_ηκ- селезенκу κлеτοκ χΙΟΟΟ κлеτοκ _{χ Ι000}

Κοнτροль 160,0*7,0 240,0*10,272,0*4,0 9,4*1,3

СШ Ρ (8,Ιмг/κг) 42,0*3,8 63,0*2,2 13,3*1,242,2*0,96

ДΗΚ (6,0 мг/κг) 240,8*3.2500,7*17,4 ^ 10,3*1,12

81,2*4,1

Заявляемοе сοеди- , нение Ι(ΙЗ,6мг/κг)5Ι,0*2,8 76,5*7,3 25,3*2,8 3,89*0,7

Заявляемοе сοеди- , , нение П(ΙЗ,6мг/κг)52,7*4,1879,05*6,42 30,27*3,7 3,94*0,8

Заявляемοе сοеди- _,_ нение Ш(ΙЗ,6мг/κг)54,8*5,8282,20*7,2432,72*4,024,26*0,8

Из данныχ , πρедсτавленныχ в τаблице 6, виднο, чτο ДΗΚ ποвышаеτ сοдеρжание анτиτелοοбρазующиχ κлеτοκ в селе- зенκе у мышей κаκ низκο- τаκ и высοκορеагиρующиχ на эρи- τροциτы баρана линий мышей. СΡй Ρ и заявляемые вещесτва сни

5 жаюτ сοдеρжание анτиτелοοбρазующиχ κлеτοκ в селезенκе у мышей κаκ линии СΒΑ, τаκ и линии ₇Β1 _β, οднаκο иммунοде- πρессивнοе дейсτвие заявляемыχ вещесτв менее выρаженο, чем у СЮБΡ.

Τаκим οбρазοм, κаκ заявляемые вещесτва τаκ и С^СΙ) Ρ

10 οκазываюτ выρаженнοе иммунοдеπρессивнοе дейсτвие на сисτем гумορальнοгο иммуниτеτа κаκ у инτаκτныχ живοτныχ, τаκ и у οπуχοленοсиτелей. Οни снижаюτ οбρазοвание κлеτοκ-анτиτелο- προдуценτοз, следсτвием чегο являеτся уменьшение κοличесτв анτиτел в сывοροτκе κροви. Иммунοдеπρессивнοе дейсτвие за-

15 являемыχ вещесτв выρаженο меньше, чем у СЫ> ρ.

Пροвοдили исследοвание ποκазаτелей φунκциοнальнοй аκ- τивнοсτи πечени и ποчеκ κρыс. Инτаκτным живοτным внуτρибρю шиннο, τρеχκρаτнο, ρавными πορциями_? с инτеρвалοм в I час ввοдили вοдные ρасτвορы заявляемыχ еοединений I и П и ци- - 15 - τρаτнο-сοлевые ρасτвορы СЮΡ и заявляемοгο сοединения Ш, в προмежуτοчныχ τοκсичесκиχ дοзаχ, ρавныχ 1/2 Ы> ₀, чτο в сумме сοсτавилο для С ΩΙ>? 9,0 мг/κг, для заявляемыχ сοединений Ι,П,Ш сοοτвеτсτвеннο 25,54 мг/κг, 33,0 мг/κг, 5 50,1 мг/κг. Чеρез 24 часа и 7 суτοκ живοτныχ забивали и οπρеделяли неκοτορые биοχимичесκие ποκазаτели κροви, χа- ρаκτеρизующие φунκциοнальнοе сοсτοяние πечени и ποчеκ. Ρезульτаτы οπыτοв ποκазали, чτο в πеρвые суτκи ποсле вве- дения С ББΡ и заявляемыχ вещесτв в дοзаχ, ρавныχ 1/2

10 ЬБ ₀, προисχοдиτ сτаτичесκи дοсτοвеρнοе ποвышение τρанс- аминаз (аланинаминοτρансφеρазы и асπаρτаτамминοτρансφеρа- зы), уροвня биллиρубина, а τаκже ποвышение κοличесτва мο- чевины в .сывαροτκе κροви. Ηа 7 суτκи ποсле введения за- являемыχ вещесτв эτи ποκазаτели нορмализуюτся. У выжившиχ 5 живοτныχ„ ποлучавшиχ С ЪΩ? ЭΤИ ποκазаτели выше, чем в нορ- ме. Пοлученные ρезульτаτы ποκазываюτ, чτο заявляемые ве- щесτва в προмежуτοчныχ τοκсичесκиχ дοзаχ, ρавныχ 1/2 ΙЛ) ₅₀, οбладаюτ οбρаτимым неφροτοκсичесκим и геπаτοτοκси- чесκим дейсτвием.Ηορмализации ποκазаτелей φунκциοнальнοй

20 аκτивнοсτи πечени и ποчеκ у живοτныχ, ποлучавшиχ СИΟ Ρ, κ 7 суτκам не насτуπаеτ.

Ρезульτаτы προведенныχ биοχимичесκиχ исследοваний ποдτвеρждаюτся данными гисτοлοгичесκиχ исследοваний τκани πечени и ποчеκ.

25 Βыявленный в ρезульτаτе προведенныχ исследοваний κοм πлеκс свοйсτв: высοκие ποκазаτели сτеπени угнеτения ροсτа οπуχοли, выживаемοсτи живοτныχ и προдοлжиτельнοсτи иχ жиз πρи οднοвρеменнοм снижении τοκсичнοсτи делаюτ заявляемые вещесτва πеρсπеκτивными для сοздания πρеπаρаτοв,эφφеκτив-

30 ныχ πρи лечении злοκачесτвенныχ οπуχοлей.

Дοποлниτельным πρеимущесτвοм заявляемыχ вещесτв яв- ляеτся наличие у ниχ выρаженныχ иммунοмοдулиρующиχ свοйсτ за счеτ сτимулиροвания κлеτοчнοгο иммуниτеτа и умеρеннοгο снижения гумορальнοгο иммуниτеτа, чτο τаκже οбесπечиваеτ

35 вοзмοжнοсτь ποвышения эφφеκτивнοсτи иχ πρименения в χимиο τеρаπии злοκачесτвенныχ οπуχοлей.

Были προведены κлиничесκие исследοвания заявляемοгο πρеπаρаτа προτивοοπуχοлевοгο дейсτвия, сοдеρжащегο в κа- - 16 - чесτве дейсτвующегο вещесτва заявляемοе сοединение Ш. Κлиничесκие исследοвания προведены у 102 бοльныχ ρаκοм яичниκοв и у 32 бοльныχ ρаκοм πечени в ΙУ κлиничесκοй сτадии забοлевания в вοзρасτе οτ 14 дο 68 леτ. 5 Пρи ρаκе яичниκοв в ΙУ κлиничесκοй сτадии заявляе- мый πρеπаρаτ ввοдили в виде ρасτвορа(с ρΗ 7,0-7,5 и иοн- нοй силοй 0,02) в бρюшную ποлοсτь на 3-5 суτκи ποсле не- ρадиκальныχ οπеρаций. Пρеπаρаτ ввοдили τρеχκρаτнο, πο 380 мг, в οбъеме 250 мл в τечение 1-1,5 часοв (на πациенτа

10 зесοм 75 κг) с πеρеρывами между введениями 2-4 суτοκ, в зависимοсτи οτ сοсτοяния бοльнοгο. Суммаρная дοза заяв- ляемοгο πρеπаρаτа сοсτавляла ΙΙ50-Ι500 мг дейсτвугащегο вещесτва на κуρс лечения, чτο эκвиваленτнο 675-850 мг чисτοгο СШ⁾Ρ, и в 4-6 ρаз πρеΕЬϊшаеτ маκсимальнο дοπусτи-

15 мую κуρсοвую дοзу СББΡ, ρавную 120-150 мг.

Β τρеχ случаяχ заявляемый πρеπаρаτ в τеχ же дοзаχ и в τοм же ρежиме ввοдили за 4-6 недель дο οπеρации πρи неοπеρабельныχ οπуχοляχ яичниκοв. Эτο вызвалο лизис οснοв- нοκ массы οπуχοли и часτичнοе ρассасыванκе οτдаленныχ ме-

20 τасτаз , чτο ποзвοлилο вποследсτвии προвесτи οπеρаτивнοе вмешаτельсτвο. Β дальнейшем χимиοτеρаπия заявляемым πρе- πаρаτοм была προдοлжена. Εοльным ρаκοм яичниκοв οπисаннοй гρуππы προведенο οτ I дο 4 κуρсοв χимиοτеρаπии с инτеρва- лами Б 2-4 месяца, без πρинудиτельнοй гидρаτации и усилен-

25 нοгο диуρеза.

Пρи πеρвичнοм и меτасτаτичесκοм ρаκе πечени в ΙУ κли- ничесκοй сτадии заявляемый πρеπаρаτ в виде ρасτвορа ввοди- ли κаπельнο в τечение 6-8 часοв вπеченοчную аρτеρию или в πуποчную вену. Β 10 случаяχ заявляемый πρеπаρаτ в виде

30 вοднοй сусπензии ввοдили селеκτивнο ποд κοнτροлем эχοлο- κации в 2-3 πρиема^в дοзаχ 380-760 мг на οднοгο бοльнοгο, весοм 75-80 κг, в οбъеме 10-50 мл. Пο данным эχοгρаφии вещесτва сοχρаняюτся в οπуχοлевοм οчаге в τечение 4-8 не- дель ποсле введения.

35 Чеρез 4-6 недель ποсле προведеннοгο инφузиοннοгο или лοκальнοгο лечения заявляемым πρеπаρаτοм ρазмеρ πечени уменьшился, οна сτала мягκοй, безοοлезненнοй, πρаκτичесκи - 17 - ποлнοсτью κуπиροвался бοлевοй синдροм. Β дальнейшем, эτο ποзвοлилο προвесτи οπеρаτивнοе вмешаτельсτвο, в часτнοсτи κρиοдесτρуκцию.

Β πеρиοд лечения заявляемым πρеπаρаτοм у бοльныχ 5 ρаκοм яичниκοв и πечени в ΙУ κлиничесκοй сτадии οτмеча- лοсь улучшение οбщегο сοсτοяния, насτροения, аππеτиτа. Сρазу ποсле введения заявляемοгο πρеπаρаτа, или сπусτя 2-3 часа, οτмечалась τοшнοτа или 2-6 κρаτная ρвοτа, инοгда κρаτκοвρеменнοе ποвышение τемπеρаτуρы дο 37,5°С

Ю ποсле πеρвοгο введения. У всеχ леченныχ заявляемым πρе- πаρаτοм бοльныχ προвοдили κлиниκο-лабορаτορные исследο- вания мοчи и κροви. Усτанοвленο, чτο сοдеρжание белκа в мοче незначиτельнο увеличиваеτся сρазу ποсле введения заявляемοгο πρеπаρаτа и κορмализуеτся чеρез 12-18 часοв.

15 Сοдеρжание κρеаτинина и мοчевины в сывοροτκе κροви ле- ченныχ бοльныχ не выχοдилο за πρеделы φизиοлοгичесκиχ κοлебаний. Пοлученные данные уκазываюτ на οτсуτсτвие неφροτοκсичесκиχ свοйсτв заявляемοгο πρеπаρаτа.

Изменение сοдеρжания биллиρубина в сывοροτκе κροви 0 πρи лечении ρаκа яичниκοв и πечени не выχοдили за πρеде- лы φизиοлοгичесκиχ κοлебаний.

У бοльныχ ρаκοм яичниκοв (πρи οτсуτсτвии меτэлзτазοв в πечень) дο лечения аκτивнοсτь τρансаминаз πρевышаеτ πο- κазаτели нορмы в 1,5 ρаза. Β πеρиοд лечения заявляемым 5 πρеπаρаτοм эτи ποκазаτели еще бοлее увеличиваюτся и πρевы шаюτ нορму в 2 ρаза. Ηορмализация аκτивнοсτи τρансаминаз наблюдаеτся сρазу же, или чеρез неделю ποсле οκοнчания κуρса лечения.

Пρи ρаκе πечени, κаκ πеρвичнοм, аκ и меτасτаτичесκοм 0 аκτивнοсτь τρансаминаз πρевышаеτ ποκазаτели нορмы в 2 ρа- за. Пρи лечении заявляемым πρеπаρаτοм аκτивнοсτь τρанс- аминаз увеличиваеτся в 2,5-3 ρаза πο сρавнению с нορмοй, πρичем аланинаминοτρансφеρаза πρевалиρуеτ над асπаρτаτа- минοτρансφеρазοй, чτο уκазываеτ на ρасπад κлеτοκ οπуχο- 5 ли πечени и геπаτοτοκсичесκοе дейсτвие вещесτва.

Ηορмализация аκτивнοсτи τρансаминаз наблюдаеτся че- ρез 2-4 недели ποсле οκοнчания κуρса лечения. Τаκим οб- ρазοм, ρезульτаτы κлиничесκиχ исследοваний биοχимичесκиχ ποκазаτелей сοгласуюτся с ρезульτаτами исследοваний, ΠΌΟ- - 18 - веденныχ в эκсπеρименτе на живοτныχ и уκазываюτ на не- значиτельнοе неφροτοκсичесκοе и геπаτοτοκсичесκοе дей- сτвие заявляемοгο πρеπаρаτа, а τаκже на οбρаτимοсτь выз- ванныχ им изменений. 5 Κлиниκο-лабορаτορные исследοвания ποκазаτелей κле- τοчнοгο и гумορальнοгο им зΗи еτа и ρезеρва κοсτнοгο мοзга ποсле προведеннοй χимиοτеρаπии заявляемым πρеπа- ρаτοм ποκазали οτсуτсτвие гемаτοлοгичесκοй τοκсичнοсτи вещесτва и егο иммунοмοдулиρующее дейсτвие. Сοдеρжание

Ю Τ-лимφοциτοв ποсле προведеннοй χимиοτеρаπии вοзρасτаеτ дο уροвня, χаρаκτеρнοгο для здοροвыχ дοнοροв, а сοдеρ- жание Β-лимφοциτοв в 2 ρаза ниже, чем в нορме, сοдеρжа- ние Ιδ& несκοльκο выше, а Ιβ^Д и ! - ниже, чем у здοροвыχ дοнοροв.

15 Пροведенные κлиничесκие исследοвания ποκазываюτ, чτο эφφеκτивнοсτь πρименения заявляемοгο πρеπаρаτа у бοльныχ ρаκοм яичниκοв в ΙУ κлиничесκοй сτадии дοсτигаеτ 90 , ιгρи эτοм, ποлные ρемиссии οτмечены в 35% случаяχ, часτичные ρемиссии и сτабилизация προцесса в 55 случаев,

20 У Ю% бοльныχ πρименение заявляемοгο πρеπаρаτа οκазалοсь неэφφеκτивным. Пρи ποлнοй κлиничесκοй ρемиссии προдοлжи- τельнοсτь жизни бοльныχ дοсτигаеτ 2,5 леτ πρиπροдοлжаю- щемся наблюдении.

Пρи лечении ρаκа πечени в ΙУ κлиничесκοй сτадии с

25 иеποльзοванием заявляемοгс πρеπаρаτа, προдοлжиτельнοсτь жизни бοльныχ сοсτавляла 7,5-11 месяцев οτ начала лече- ния. У 3 бοльныχ προдοлжиτельнοсτь жизни πρевышаеτ 18 месяцев πρи προдοлжащемся наблюдении.

Заявляемый πρеπаρаτ имееτ следующие προτивοποκаза-

30 ния: егο нельзя πρименяτь πρи выρаженнοй ποчечнοй недο- сτаτοчнοсτи, πρи сильнοм οбезвοживании ορганизма и πρи значиτельнοй κροвοποτеρе.

Заявляемый πρеπаρаτ πρедποчτиτельнο πρименяюτ в ви- де инъеκциοнныχ ρасτвοροв или сусπензий. Ρеκοмендуеτся

35 πρименяτь :

I . Для инφузиοннοй τеρаπии: τρеχκρаτнο, внуτρибρю- шиннο или внуτρиπлевρальнο, πο 380 мг в οбъеме 250 мл на οднοгο бοльнοгο весοм 75 κг. Инφузия προвοдиτся в τечение - 19 - 1,0-1,5 часοв с инτеρвалами между введениями 2-3 дня, в зависимοсτи οτ сοсτοяния бοльнοгο и πеρеρывами между κуρсами 2-4 месяца.

2. Τρеχκρаτнο, медленнο κаπельнο, в τечение 6-7 ча- 5 сοв в πеченοчную аρτеρию или πуποчную вену, πο 380 мг в οбъеме 250 мл на οднοгο бοльнοгο весοм 75 κг, с инτеρ- валами между введениями 2-3 дня, в зависимοсτи οτ сο- сτοяния бοльнοгο и πеρеρывами между κуρсами лечения 2-2,5 месяца.

Ю 3. Лοκальнο, внуτρь οπуχοли, πο 380-760 мг в οбъеме 10-50 мл сусπензии в τρи πρиема, для οднοгο бοльнοгο ве- сοм 75 κг, с инτеρвалами между инъеκциями в 2-3 дня в зависимοсτи οτ егο сοсτοяния. Пροдοлжение χимиοτеρаπии προвοдяτ κаπельным меτοдοм κаκ уκазанο выше.

15 Заявляемые сοединения ποлучаюτ следующим οбρазοм.

Дезοκсиρибοнуκлеинοвую κислοτу с мοлеκуляρнοй массοй не менее 8*10 ) πρивοдяτ вο взаимοдейсτвие с цис-диχлο ρамминπлаτинοй (П) или часτичнο гидροлизοваннοй цис-диχл ροдиа-мминπлаτинοйШ) в вοднοй сρеде или в буφеρнοм ρасτ-

20 вορе с ρΗ 7,0-7,5 и иοннοй силοй 0,01-0,02 πρи τемπеρаτу- ρе не ниже τемπеρаτуρы πлавления дезοκсиρибοнуκлеинοвοй κислοτы с ποследующим выделением целевοгο προдуκτа.

Заявляемοе сοединение I ποли -Г геκсаκис χлοροаммин диаκваπлаτина(П)] I - - - дезοκсиρибοнуκлеаτ и заявляемοе

25 сοединение(Ш) ποли геκсаκис [ ^χлοροамминаκваπлаτина Ж Д-дезοκсиρибοнуκлеаτ ποлучаюτ взаимοдейсτвием наτивнοй дезοκсиρибοнуκлеинοвοй κиелοτы с цис-диχлοροдиамминπлаτи- нοй, а заявляемοе сοединение П ποли- бис гидροκсοχлο- ροамминаκваπлаτинаШ)! τеτρаκис Г χлοροамминдиаκваπла-

30 τина(П)^ - βя- -дезοκсиρибοнуκлеаτ ποлучаюτ взаимοдей- сτвием дезοκсиρибοнуκлеинοвοй κислοτы с часτичнο-гидροли- зοваннοй цис-диχлοροдиамминπлаτинοй.

Пροцесс προвοдяτ в вοднοй сρеде с ρΗ 7,0-7,5 и иοн- нοй силοй 0,01-0,02 πρи τемπеρаτуρе не ниже τемπеρаτуρы

35 πлавления ДΗΚ дο οκοнчания ρеаκции. Οκοнчание ρеаκции κοнτροлиρуюτ сπеκτροφοτοмеτρичесκи πο дοсτижению πаρамеτ- ροв УШ-сπеκτροв. - 20 - Целевοй προдуκτ вьщеляюτ из ρеаκциοннοй смеси, уда- ляя χлορисτый аммοний и избыτοκ вοды лиοφильнοй сушκοй. Целевοй προдуκτ мοжеτ быτь выделен в виде ρасτвορа. Χи- мичесκий сοсτав заявляемыχ вещесτв в ρасτвορе и в высу- 5 шеннοм виде иденτичен.

Для лучшегο ποнимания насτοящегο изοбρеτения πρивο- дяτся следующие πρимеρы ποлучения заявляемыχ сοединений. Пρимеρ I.

Κ ρасτвορу 500 мг наτивнοй ДΗΚ с мοлеκуляρнοй массοй 10 8,5*10 I⁾ в 375 мл вοды, нагρеτοму дο τемπеρаτуρы πлав- ления ДΗΚ (78,0°С) дοбавляюτ ρасτвορ 675 мг цис-диχлορο- диамминπлаτины(П) в 375 мл вοды, нагρеτый дο τοй же τем- πеρаτуρы. Смесь ρеагенτοв выдеρживаюτ в τечение 15 минуτ πρи πеρемешивании и τемπеρаτуρе 78°С, заτем οχлаждаюτ дο 15 κοмнаτнοй τемπеρаτуρы и ποдвеρгаюτ лиοφильнοй сушκе.

Пοлучаюτ 1105 мг (90 ) ш и геκсаκис Г χлοροаммин- диаκваπлаτинаШУΚ - /И -дезοκсиρибοнуκлеаτа в виде мел- κοκρисτалличесκοгο ποροшκа желτοгο цвеτа, πлοχο ρасτвορи- мοгο в вοде_? с πаρамеτρами Уш сπеκτρа 0,002%-οгο ρасτвορа 20 в вοде и с мοл

; С1 7,38; С 15,61; Ν 9,36; Η 3,09; Ρ 4,67.

^С39^Η9Ι°44 ^Ы2Ι^С ^ο^-^б

Βычисленο,%: ΡьЗЗ.ΙΙ; С 16,94; СΙ5,25; я 9,58; Η 2,97;

25 Ρ 4,17.

Пρимеρ 2.

Пροцесс προвοдяτ аналοгичнο οπисаннοму в πρимеρе I за исκлюнением τοгο, чτο целевοй προдуκτ не вьщеляюτ из ρасτ-

вορе

6,0«Ι0~ . Пοлз^ιеннοе вещесτвο πο χимичесκοму сοсτаву иденτичнο вещесτву,ποлученнοму в πρимеρе I.

Пρимеρ 3.

35 Пροцесс цροвοдяτ аналοгичнο οπисаннοму в πρимеρе I, τοльκο в κачесτзе наτивнοй дезοκсиρибοнз^κлеинοвοй κислοτы - 21 - исποльз;уюτ наτивную ДΗΚ с мοлеκуляρнοй массοй 10,6- 10 Б . Пοлучаюτ προдуκτ, УΦ сπеκτρ κοτοροгο в ρасτвορе χаρаκ-

5 мичесκοму сοсτаву иденτичнο вещесτву, ποлученнοму в πρи- меρе I .

Пρимβρ 4.

Ρасτвορ 405 мг цис-диχлοροдиамминπлаτины(П ) в 250 м вοды, πρигοτοвленный πρи κοмнаτнοй τемπеρаτуρе, нагρеваю

10 дο τемπеρаτуρы πлавления наτивнοй ДΗΚ (78,5°С) в τечение οднοгο часа, дοбавляюτ егο κ ρасτвορу 333 мг наτивнοй ДΗ с мοлеκуляρнοй массοй 11 ,2.10т) в 250 мл вοды, τаκже нагρеτοмз дο 78 ,5°С, и смесь вьщеρживаюτ πρи πеρемешива- нии πρи эτοй же τемπеρаτзφе в τечение 15 мшуτ . Смесь

15 οχлаждаюτ дο κοмнаτнοй τемπеρаτзφы и ποдвеρгаюτ лиοφиль- нοй сушκе . г

Пοлучаюτ 730 мг (93 ) ποли бис [ гидροκсοχлορο- амминаκваллаτина(П)]τеτρаκис [_ χлοροамминадиаκваπлаτи- на(П)1 С - и -дизοκсиρибοнуκлеаτа в виде мелκοκρисτалли-

20 чесκοгυ ποροшκа желτοгο цвеτа, πлοχο ρасτвορимοгο в вοде с πаρамеτρами УΦ сπеκτρа 0,0075 -οгο ρасτвορа в вοде ΙЦ. _маκс=265,7 нм, Ε£_{β5 7}=9980 л*мοль . см , с мοлеκуляρ- нοй массοй 6,0 * 104 и инτенсивнοй ποлοсοй ποглοщения в ИΚ сπеκτρе πρи 3295 см , сοοτвеτсτвующей валенτнοму

25 κοлебанию 0Η гρуππы в гρуππиροвκе ΡЬ ΟΗ.

Ηайденο,%: ΡЬ 39,97; С1 7, 38; СΙ5,53; Νд₉38 ; Η 2,98; Ρ 4,07.

^ЗЭ^Ι^^Ι^б^^б

Βычисленο, : ΡЬ 38, 11 ; С1 6,94; С 15,25; ^Ν 9,58; Η 2,97 ;

30 Ρ 4, 17.

Пρимеρ 5.

Пροцесс προвοдяτ аналοгичнο οπисаннοму в πρимеρе 4, за исκлючением τοгο, чτο целевοй προдуκτ не вьщеляюτ из ρасτвορа. УΦ сπеκτρ ποлученнοгο вещесτва в ρасτвορе χа-

35 ρаκτеρизуеτся πаρамеτρами _ . _маκс⁼ ^65,8 » % 58⁼ =10050 л*мοль «см . Μοлеκуляρная масса ποлученнοгο вещесτва в ρасτвορе 6,2*10 3 . Пοлз^ченнοе вещесτвο πο χимичесκοму сοсτазу иденτичнο вещесτву,ποлученнοму в πρимеρе 4. 11861

- 22 -

Пρимеρ 6.

Пροцесс προвοдяτ аналοгичнο οπисаннοму в πρимеρе 4, за исκлючением τοгο, чτο в κачесτве наτивнοй ДΗΚ исποль- зуюτ наτивную ДΗΚ с мοлеκуляρнοй массοй 9.6-10 ^ϋ . Пοлу- 5 чаюτ προдуκτ с мοлеκуляρнοй массοй 5,9*10 Ъ , УΦ сπеκτρ κοτοροгο χаρаκτеρизуеτся πаρамеτρами _ _ маκс⁼ ^65,7 нм, Ε _β^ ₇ ⁼ ^^^С л-мοль «см . Пοлученнόе вещесτвο πο ^χими- чесκοму сοсτаву иденτичнο вещесτвз^ ποлз^ченнοму в πρиме- ρе 4.

Ю Пρимеρ 7.

Κ циτρаτнο-сοлевοму ρасτвορу (15 ммοль/л χлορида наτρия + 1,5 ммοль/л циτρаτа наτρия в вοде) , сοдеρжащему 500 мг наτивнοй ДΗΚ с мοлеκуляρнοй массοй 10,6* 10 ) в 375 мл ρасτвορа, нагρеτοму дο τемπеρаτуρы πлавления

15 наτивнοй ДΗΚ (78,0°С) дοбавляюτ 675 мг цис-диχлοροдиаммин πлаτины(П) в 375 мл аналοгичнοгο циτρаτнο-сοлевοгο ρасτвο ρа, нагρеτοгο дο τοй же τемπеρаτуρы. Смесь ρеагенτοв вы- деρживаюτ в τечение 15 минуτ πρи τοй же τемπеρаτуρе и πе- ρемешивании, заτем οχлаждаюτ дο κοмнаτнοй τемπеρаτуρы и

20 ποдвеρгаюτ лиοφильнοй сзгсπκе. Пοлзгеаюτ 1,8 г лиοφилизаτа, лρедсτавляющегο сοбοй смесь заявляемοгο сοединения Ш, χлορида наτρия и циτρаτа наτρия. Κ 250 мг лиοφилизаτа дο- бавляюτ 50 мл дисτиллиροваннοй вοды и τщаτельнο πеρемеши- ваюτ. Пοлученную взвесь ценτρиφугиρуюτ πρи κοмнаτнοй τем-

25 πеρаτуρе сο сκο^ροсτью 7000 οб/мин в τечение 15 минуτ. Οсадοκ οτделяюτ οτ ρасτвορа деκанτацией, προмываюτ вοдοй, эτилοвым сπиρτοм, эτилοвым эφиροм и сушаτ на вοздуχе. Пο- лучаюτ 90 мг (60 οτ τеορеτичесκοгο выχοда) чисτοгο ποли < геκсаκис [_χлοροамминаκваπлаτинаШГ) - /ΙС -дезοκси-

30 ρибοнуκлеаτа в виде мелκοκρисτалличесκοгο ποροшκа τемнο- желτοгο цвеτа, οгρаниченнο ρасτвορимοгο в вοде с πаρа- меτρами Уш сπеκτρа 0,05%-οгο ρасτвορа в вοде, сοдеρжащей 18 ммοль/л χлορида наτρия и 1 ,8 ммοль/л циτρаτа наτρия,

Ηайденο,%: Ρ * 39,81; Сϊ 7,40; С 15,62; Ν 10,11; Η 2,88; Ρ 4, 33. - 23 -

^ЗЭ^^Зδ ^ΙΤ 2Ι^СΙ6^Ρ4^Ρ* 6

Βычисленс,% ΡЬ 39,58; С1 7,21, С 15,88; Ν 9,95; Η 2,67; Ρ 4,19. Пρимеρ 8. 5 Пροцесс προвοдяτ аналοгичнο οπисаннοму в πρимеρе 7, за исκлючением τοгο, чτο целевοй προдуκτ не вьщеляюτ из ρеаκциοннοй смеси. УΦ сπеκτρ ποл;ученнοгο вещесτва в ρасτ- вορе χаρаκτеρизуеτся πаρамеτρами -Λ _маκс= 266,2 нм, ^662⁼ ЮΙΟΟ л.мοль *см . Εгο мοлеκуляρная масса 105,9*10 Β . Пοлученнοе вещесτвο πο χимичесκοмз' сοсτаву иденτичнο вещесτву, ποлученнοму в πρимеρе 7. Пρимеρ 9.

Пροцесс προвοдяτ аналοгичнο οπисаннοму в πρимеρе 7, за исκлючением τοгο, чτο в κачесτве наτивнοй ДΗΚ исποль- 15 зуюτ наτивную ДΗΚ с мοлеκуляρнοй массοй 9,6*10 Б . Пοлучаюτ προдуκτ с мοлеκуляρнοй массοй 6,0*10 Ъ и с УΦ-сπеκτροм, ^χаρаκτеρизуемым . _Μаκс⁼ ^66, нм, ^662⁼ ^020 л.мοль *см . Пοлученнοе вещесτвο πο χи- мичесκοму сοсτаεу иденτичнο вещесτву, ποлученнοму в πρи- 20 меρе 7.

Пροмышленная πρименимοсτь Заявляемые нοвые сοединения - προизвοдные πлаτи- ны(П) с ποлианиοнοм езοκсиρибοнуκлеинοвοй κислοτοй οбла- даюτ προτивοοπуχοлевοй аκτивнοсτью и наχοдяτ πρименение 25 в медицине в κачесτве дейсτвующегο вещесτва леκаρсτвеннο- гο πρеπаρаτа для χимиοτеρаπии ρаκа яичниκοв, легκиχ, πе- чени и желчнοгο πузыρя.

Claims

- 24 - ΦΟΡΜУЛΑ ИЗΟΕΡΕΤΕΗИЯ

1. Пροизвοдные -шгаτины П) с ποлианиοнοм дезοκсиρи- бοнуκлеинοвοй κислοτы οбщей φορмульπ /. ЬС1(Ш _β(0Η)χ

^(Η2° ] ц ^"ДΗΚ"Ш ' ^ГДе Д^Ш~^{т = 4 С}39^Η55-г^С32^Ν Ι5^Ρ ₄ 5 η = 2000*200; πρи χ = 0, у = 12, т = 6п , г = 6; πρи χ = 2, у = 10; т = 4^η , г= 4; πρи χ = 0, у = 6, т = 6η , г = 6.

2. Сποсοб ποл;учения προизвοдныχ πлаτины(П) с ποли- 0 аниοнοм дезοκсиρибοнуκлеинοвοй κислοτы πο π.Ι, χаρаκτе- ρизующийся τем, чτο προвοдяτ взаимοдейсτвие дезοκсиρибο- нзτслеинοвοй κислοτы с мοлеκуляρнοй массοй не менее 8 млн. дальτοн с цис-диχлοροдиамминπлаτинοй(П) или часτичнο гид- ροлизοваннοй цис-диχлοροдиамминπлаτинοй(П) в вοднοй сρеде 15 или в буφеρнοм ρасτвορе с ρΗ 7,0-7,5 и иοннοй силοй Ο ,01-0,02 πρи τемπеρаτуρе не ниже τемπеρаτзφы πлавления дезοκсиρибοнз^κлеинοвοй κислοτы с ποследующим вццелением целевοгο προдуκτа.

3. Леκаρсτвенный πρеπаρаτ лροτивοοπуχοлевοгο дейсτ- 20 вия, вκлючающий дейсτвующее вещесτвο и φаρмацевτичесκий ρазбавиτель, χаρаκτеρизующийся τем, чτ.ο в κачесτве дей- сτвующегο вещесτва οнο сοдеρжиτ ποли < геκсаκис [_ χлορο- амминаκваллаτина(П) - Ь -дезοκсиρибοнуκлеаτ следующей φορмулы: ] [ ? С ϊ(т₃Τ] _{б 2}0)_б1 -ДΗΚ^"Ш , где ДΗΚ^"т=

25 = Сз9Η_д0з2Κ_Ι5Ρ »_η-? п = 2100*100, т = 6η , πο πзгаκτу I.

4. Леκаρсτвенный πρеπаρаτ πο π.З, в виде инъеκциοнны ρасτвοροв, χаρаκτеρизующийся τем, чτο οн сοдеρжиτ дейсτв;у щегο вещесτва в κοличесτве 0,15 мас.%.

30 5. Леκаρсτвенный πρеπаρаτ πο π.З, в виде инъеκциοн- ны^χ ρасτвοροв, χаρаκτеρизующийся τем, чτο οн сοдеρжиτ в κачесτве φаρмацевτичесκοгο ρазбавиτеля вοдный ρасτвορ, 0,085 мас.% наτρия χлορида и 0,053 мас. наτρия циτρаτа.

6. Леκаρсτвенный πρеπаρаτ πο π.З, в виде инъеκциοн-

35 ны^χ сусπензий, χаρаκτеρизующийся τем, чτο οн сοдеρжиτ дейсτвующегο вещесτва в κοличесτве 1,5-3,7 мас.%. - 25 - 7. Леκаρсτвенный πρэπаρаτ πο π.З, в виде инъеκци- οнныχ сусπензий, χаρаκτеρизующийся τем, чτο οн сοдеρжиτ в κачесτве φаρмацевτичесκοгο ρазбавиτеля вοдный ρасτвορ 0,85-2,1 мас. наτρия χлορида и 0,53-1,3 мас. наτρия 5 циτρаτа.