[go: up one dir, main page]

WO1986004924A1 - Method of obtaining n-formyl-l peptides - Google Patents

Method of obtaining n-formyl-l peptides Download PDF

Info

Publication number
WO1986004924A1
WO1986004924A1 PCT/SU1986/000010 SU8600010W WO8604924A1 WO 1986004924 A1 WO1986004924 A1 WO 1986004924A1 SU 8600010 W SU8600010 W SU 8600010W WO 8604924 A1 WO8604924 A1 WO 8604924A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
synthesis
acid
αϊа
mixture
protected
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
PCT/SU1986/000010
Other languages
French (fr)
Russian (ru)
Inventor
Valentin Mikhailovich Stepanov
Ljudmila Aronovna Ljublinskaya
Svetlana Evgenievna Chikindas
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
VSESOJUZNY NAUCHNO-ISSLEDOVATELSKY INSTITUT GENETI
Original Assignee
VSESOJUZNY NAUCHNO-ISSLEDOVATELSKY INSTITUT GENETI
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by VSESOJUZNY NAUCHNO-ISSLEDOVATELSKY INSTITUT GENETI filed Critical VSESOJUZNY NAUCHNO-ISSLEDOVATELSKY INSTITUT GENETI
Priority to NL8620072A priority Critical patent/NL8620072A/en
Priority to DE19863690076 priority patent/DE3690076T1/de
Publication of WO1986004924A1 publication Critical patent/WO1986004924A1/en
Anticipated expiration legal-status Critical
Ceased legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06104—Dipeptides with the first amino acid being acidic
    • C07K5/06113—Asp- or Asn-amino acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06026—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atom, i.e. Gly or Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0606—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing heteroatoms not provided for by C07K5/06086 - C07K5/06139, e.g. Ser, Met, Cys, Thr
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06078—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
    • C12P21/02—Preparation of peptides or proteins having a known sequence of two or more amino acids, e.g. glutathione

Definitions

  • a phylum in the molecule is a must, as it is the person responsible for the interaction of the process and the incidence of impaired receptors The same reactions stimulate and certain other functions of the cells, such as aggregation, the separation of enzymes, and the use of toxic drugs.
  • omega-milleptides is the front-25 sixth parameter - umo-milaspartum, that is, methyl-omega-omega-ashilane.
  • BACKGROUND OF THE INVENTION There are various approaches to the synthesis of milieu. ⁇ lassiches ⁇ imi me ⁇ dami- ⁇ e ⁇ idn ⁇ g ⁇ sin ⁇ eza yavlya- 30 yu ⁇ sya ⁇ a ⁇ b ⁇ diimidny "me ⁇ d smeshanny ⁇ angid ⁇ id ⁇ v or a ⁇ ivi ⁇ vanny ⁇ e ⁇ i ⁇ v.
  • the synthesis of fuels that support the reaction with the azide method in the process of the processes of anilide syntheses is mild clay and
  • the azide method allows you to receive optically pure antagonists, - 3 -
  • the syntheses of anilide of phenyl-glycine and ethyl ester of ⁇ - / phenyl-enriched acids are described in a similar manner in the food chain. Therefore, it is difficult to talk about the availability of 5 azide-type equipment in the synthesis of friendly drugs. Otherwise, the azide method is two-stage, it will protect all additional functional groups with the following removal, which significantly complicates and improves the welfare.
  • the process is delivered with a high output reaching 90, when the physical process is removed and the process is secured. / ⁇ zothea G., ⁇ ⁇ ⁇ . , ⁇ with kato ⁇ . , ⁇ ⁇ . , ⁇ -
  • a cost-effective method of synthesizing an attribute is the use of quality-guarded damp for amine function of acid acid.
  • the source of the acylating agent used to introduce such protective groups in this case, they use, for example, nitrous-benzyl-benzyl-benzyl, is
  • ⁇ is used to use synthetic amino acids to receive the target product, it is useful
  • the embodiment of the present invention is disposed of in that, as a part of the external-urban environment, a single-dimethylated medium is used.
  • the methods of obtaining ⁇ -fomp-pepstidov represent a private fragment 20 active synthesis of drugs.
  • An advantageous enzyme synthesis of the test connection is a high process and regioselective process.
  • Use of the product as a part of biosynthesis at the stage of the preparation of the battery is free of charge and the device is in contact with the It does not require the primary protection of amino acids, which contain additional functional groups in large quantities of radicals. For example, taking into account the acidity of 30 acids, the compensation is only for a large group, since it is a big accident.
  • a protective deactivation of an etheric type can be carried out by metal, - 9 - Ethyl, benzyl esters.
  • amide type protecting groups amide, anilide, substituted anilides, in particular, nitric anilides, hydrazide and substituted hydrazides may be used. 5 Sections
  • the predominantly metal kinase does not impose a slight restriction on the cost of the aminogens that are not in use.
  • amino acid residues for example, alanyl-alanyl, alanyl-glycyl, glycyl-alanyl, glycyl-glycyl.
  • thermolysin 35 are close to thermolysin and could be used in the treatment of the analogous thermolysin.
  • ch ⁇ for ⁇ e ⁇ aniya ⁇ tsessa tseles ⁇ b ⁇ aznee vseg ⁇ is ⁇ lz ⁇ va ⁇ in ⁇ aches ⁇ ve is ⁇ dn ⁇ g ⁇ ⁇ a ⁇ b ⁇ siln ⁇ g ⁇ ⁇ m ⁇ nen ⁇ a ⁇ mil- 5 s ⁇ de ⁇ zhaschie ⁇ izv ⁇ dnye me ⁇ i ⁇ nina, ⁇ enilalanina, alanyl-alashna, as ⁇ a ⁇ agin ⁇ v ⁇ y ⁇ isl ⁇ y, and ⁇ aches ⁇ ve amin ⁇ m ⁇ nen ⁇ a- ⁇ -ni ⁇ anilidy ⁇ enilalashna and leucine or me ⁇ il ⁇ vy e ⁇ i ⁇ ⁇ eshlalashna.
  • ⁇ ⁇ edlagaem ⁇ m s ⁇ s ⁇ be sin ⁇ eza ⁇ - ⁇ mil- s - ⁇ e ⁇ - ⁇ id ⁇ v vys ⁇ aya e ⁇ e ⁇ e ⁇ sele ⁇ ivn ⁇ s ⁇ ⁇ e ⁇ men ⁇ a is ⁇ lzuem ⁇ - g ⁇ on s ⁇ adii ⁇ b ⁇ az ⁇ vaniya ⁇ e ⁇ idn ⁇ y communication ga ⁇ an ⁇ i ⁇ ue ⁇ 5 ⁇ b ⁇ az ⁇ vanie ⁇ l ⁇ ichessh chis ⁇ g ⁇ ⁇ du ⁇ a, ⁇ ichem is ⁇ lyu- chae ⁇ sya ⁇ sn ⁇ vnaya l ⁇ b ⁇ chnaya ⁇ ea ⁇ odya, ⁇ g ⁇ ashchivayuschaya ⁇ i- Menenius ⁇ mil-amin ⁇ isl ⁇ in ⁇ el ⁇ idn ⁇ m synthesis - ⁇ ⁇ ⁇ rect ⁇ ⁇
  • the quantity of the substance used in the reaction may vary in wide terms ⁇ “ ⁇ 0 to 10 * 10 mm per I mmole of the connected. ⁇ a ⁇ i- me ⁇ , ⁇ i sin ⁇ eze pi-sh ⁇ ashlida ⁇ mil-alanyl-alashl- ⁇ eshlalashna, umensheshe ⁇ liches ⁇ va ⁇ e ⁇ men ⁇ a d ⁇
  • the reaction is in the water or gadget environment.
  • As a distributor usually use dimethylamide.
  • the content of it in a converted mixture is up to $ 50 and the complete separation of the source of amine and a large, commercially available mixture.
  • the active mixture contains 0.63 mmol of phenylmethylene and categorized-nitroanilide of leucine in 0.6 ml of dimethylphosphamide and 2 ml of 0, which is 2 mg or more than 2 mg / ml. -9, 2.5 mg of 20 (63 mmol) of thermolysin; the mixture is kept for 2 hours at 20 ⁇ and spend the night in the refrigerator, empty the filter and wash the pump in type I. - 16 -
  • Acidic composition Ra 1.99; Lb 1.01. Examples 11-14 cm and table 2.
  • the inactive mixture contains I mmol of phenylalanilalashne and ⁇ -nitrous phenylanilide in 0.4 ml of dimethylphosphamide and 0.6 ml of Caustic acid 6.9 / solution of 25 mg of sodium chloride.
  • the non-reactive mixture contains 0.5 ml of 1 * 10 ⁇ CaS ⁇ ⁇ . ⁇ 6.9.
  • the organic mixture contains 0.5 mmol of phenylalashl alashna and phenylalanine d-nitrile, 0.2 ml of methyl dimethylamide and 0.3 ml of water ( ⁇ , 6.7), which eliminates 20 bushes. 37.5 mg / ml, 10 that is 20 nm of the solids content, lasts 24 hours at the indicated temperature, then processes the analogous example I.
  • ku ⁇ name is compact per hour ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ... in%
  • the active mixture contains the indicated quantities of amine and carboxylic acid, 0.2 ml of dimethylphamide, 0.3 ml of water with a pH of 6.7 and 20 milliliters of a mixture of 10 mm, and are processing similar example I.
  • the mixture was 0 ⁇ 88.g (I mm ⁇ l) ⁇ mil-alanyl-alanine and 0.251 g (I mm ⁇ l) n-ni ⁇ anilida l 'eyschna ⁇ as ⁇ v ⁇ yayu ⁇ 15 I dime ⁇ il ⁇ mamida ml, 5 ml ⁇ ibavlyayu ⁇ ⁇ as ⁇ v ⁇ a 5 * 10 2 ⁇ SaS ⁇ ⁇ 6,8, ⁇ and ⁇ stirring. add 5 mg (133 nmol) of thermolysin, stand for 6 hours at 22 ° ⁇ , then spend the night in a cold place. Filter the precipitated plant, wash the filter in the same way as Example I, and dry it in 20 vacuum drying. ⁇ regulate 0.305 g (72.5)
  • Acidic composition Ley 1.0; ⁇ ier 1.0.
  • Example 29 Synthesis of methyl ether-methyl-alcohol-phenylalanine. 15 ⁇ 2, 1 g (10 mmol) of methylated phenylalachine is added to 0.66 g (4, 1 mmol) of phenylmethyl acid in 2.0 ml of water. After reconstitution of the original connected mixture, the resulting mixture is 6.6–6.8 plus 6 N of the process mixture. Then, the 20 sample is dispensed with 20 mg (530 nm) of thermolysine and mixed on a magnetic stirrer for 24 hours at 25 ° ⁇ . The extract is dissolved in 25 ml of I ⁇ acetic acid and is treated with 30 ml
  • Shchzhmeru 30 The synthesis of methyl ether-methyl-alcohol-feshlalashna. The synthesis of analogous example 29, proceeding from 35 2 mm of hydrochloric acid methyl phenylalachne and I mmol of acid-acid.
  • the plant grows and grows. - 20 - in 4.5 ml of acetic acid, dilute the solution with a solution of 40 ml of ethyl acetate, remove the precipitated salt, wash the solution with water and let the solution dry. K ⁇ k ⁇ d 5 0, 140 mg ($ 43). Pshmera 31.
  • a mixture of 0.376 g (2 mmol) of I-phyrmethyl-alanyl-alanine Yu and 0.430 g (2 mmol) of hydrochloride solution is suitable: alanine is dissolved in 0.5 ml of a non-corrosive mixture, but 6.7, 3 mg of metal acetate is introduced; Acetic acid Acetate is stirred for 24 hours at 25 ° £ .0 Garden is dissolved in ethyl 15 acetate and is replaced with water; The organic layer is dried over the sulphate of the country, then evaporated in a vacuum. Food product 0.25 g (32); ⁇ £ -_ 0.71.
  • Acidic composition Ra 1.98; Ley 1.02. Example 33.
  • Example 35 The synthesis of ⁇ -strained schlide ⁇ -promyl-phenylalashne and 29 mg (100 ⁇ mol) of ⁇ -nitroanilide phenylalachine was diluted in 0.2 ml of dimethylsulfonate and diluted with a small amount of 8 ml. Introduces 0.5 mg of the metalase kinase ⁇ as ⁇ iz al-u ⁇ o ⁇ i ⁇ as ⁇ and excrete 24 hours at 25 ° 0. The product is processed in a similar manner to Example 33. The yield of the product is 35.5 mg (76).
  • Acidic composition ⁇ 0.98; 1,0 ⁇ lingually 0.99; 1,0 ⁇ lingually 0.99; 1,0 ⁇ lingually 0.03.
  • Example 39 There is a similar procedure to Example 36 except that the active mixture is left at 2 ° C for 72 hours. ⁇ Play 0, 230 g ($ 18).
  • Example 39 •
  • Example 36 There is a similar procedure to Example 36, except that the active mixture leaves at 60 ° C for 24 hours. Food product 0, 14 g ($ 11).
  • 20 types are an attribute of an attribute - for mililaspa- tam, that is, methyl ether-free-phenylalanal.
  • the equipment is about 200 times good for sweeteners and can be used

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

N-formyl-L-peptides of a general formula (I) are obtained by condensation of N-formyl-protected carboxyl compound of a general formula (II) with an amino acid which is protected on the carboxyl group, of a general formula (III) in the presence of the metal proteinase produced by microorganism of Bacillus genus. The condensation is carried out in an aqueous or aqueous-organic medium at pH equal to 6.0-9.0 and at a temperature of 0 to 60oC. For -A-B-X (I), For -A-OH (II), H-B-X (III), where For - formyl, A - Asp, Met, Gly, Ala, Gly-Gly, Gly-Ala, Ala-Gly, Ala-Ala, Tyr, Phe; B - Phe, Leu, Ile, Val; X - -OCH3; -OC2H5; -OCH2C6H5; -NH2; -NH-C6H5; -p-NH-C6H4-NO2 -NH-NH2; -NH-NH-C6H5.

Description

СПΟСΟБ ПΟЛУЧΕΗИЯ Ν-ΦΟΒШ- Ь-ПΕШЭДΟΒ Οбласτь τеχниκи Изοбρеτение οτнοсиτся κ οбласτи πеπτиднοй χимии, κοнκρеτнее κ сποсοбу еинτеза φορмилπеπτидοв, а еще κοн- 5 κρеτнее κ сποсοбу ποлучения Ν-φορмил- ь-πеπτидοв. SPΟSΟB PΟLUCHΕΗIYA N-L-ΦΟΒSH- PΕSHEDΟΒ Οblasτ τeχniκi Izοbρeτenie οτnοsiτsya κ οblasτi πeπτidnοy χimii, κοnκρeτnee κ sποsοbu einτeza φορmilπeπτidοv and even κοn- 5 κρeτnee κ sποsοbu ποlucheniya N-L-φορmil- πeπτidοv.

Φορмилπеπτиды наχοдяτ πρименение в биοлοгии и ме- дицине πρи изучении τаκиχ явлений?κаκ φагοциτοз и χемο- τаκсис. Φагοциτοз - ποглοщение κлеτκοй κρуπныχ τвеρдыχ чаοτиц, служиτ целям πиτания и самοзащиτы κлеτοκ. Χемο- 10 τаκсис - ορиенτиροваннοе движение κлеτοκ ποд вοздейсτ- вием ρазличныχ χимичесκиχ сοединеяий. Οба эτиχ явления игρаюτ бοльшую ροль в защиτныχ меχанизмаχ ορганизма, οсοбеннο πρи вοсπалиτельныχ προцессаχ. Β κачесτве φа- гοциτοзсτимулиρущиχ и χемοτаκсичесκиχ вещесτв исποль- 15 зуюτ πеπτиды, сοдеρжащие в н - κοнцевοй часτи мοлеκу- лы οсτаτοκ меτиοнина, ацилиροванный муρавьинοй κислο- τοй. Ηаличие φορмилмеτиοнина в мοлеκуле являеτся οбя- заτельным, τаκ κаκ именнο οн οτвечаеτ за взаимοдейсτвие πеπτидοв χемοτаκсиса и φагοциτοзсτимулиρующиχ πеπτидοв 20 сο сπециφичесκими ρецеπτσρами' на πσвеρχнοсτи κлеτκи. Эτи же πеπτиды сτимулиρуюτ и неκστορые дρугие φунκции κлеτοκ, τаκие κаκ агρегацию, сеκρецию φеρменτοв, οбρа- зοвание τοκсичннχ меτабοлиτοв κислοροда.Do mililpeptides find use in biology and medicine in the study of such phenomena ? How phagocytosis and chemo-taxis. Quotation - the ingestion of carcasses of solid particles, serves the purpose of food and self-protection of carcasses. Volume 10 taxis - impaired movement of cells due to the exposure to various chemical compounds. These phenomena play a greater role in protecting the mechanisms of the organism, especially in the case of inflammatory processes. Аче As a result of phagocytosis-stimulating and chemo-toxic substances, there are 15 of them that contain therapies that contain non-endocrine necrosis. The presence of a phylum in the molecule is a must, as it is the person responsible for the interaction of the process and the incidence of impaired receptors The same reactions stimulate and certain other functions of the cells, such as aggregation, the separation of enzymes, and the use of toxic drugs.

Οдним из πρимеροв φορмиллеπτидοв являеτся πρед- 25 шесτвенншг асπаρτама - φορмиласπаρτам, το есτь меτилο- вый эφиρ Ν- φορмил-ь-асπаρτил-ь-φенилаланина. Пρедшесτвующий уροвень τеχниκи Сущесτвуюτ ρазличные ποдχοды κ синτезу φορмилπеπ- τидοв. Κлассичесκими меτοдами- πеπτиднοгο синτеза явля- 30 юτся κаρбοдиимидный", меτοд смешанныχ ангидρидοв или аκτивиροванныχ эφиροв. Ηаπρимеρ, извесτен синτез φορмил-меτиοнил-лейцил-φенилаланина и φορмил-меτиοнил- -лизил-προлил-аρгинина πуτем ποследοваτельнοй κοнден- сащи τρеτ-буτилοκсиκаρбοнил-ь-аминοκислοτ с С-защи- 35 щенными аминοκислοτами. Пο οκοнчании сτуπенчаτοгο уд- линения πеπτиднοй цеπи деблοκиρуюτ Ν-κοнцевую аминο- κислοτу и φορмилиρуюτ часτичнο защищенный πеπτид аκ- τивиροванными эφиρами муρавьинοй κислοτы (смοτρи - 2 -One of the examples of omega-milleptides is the front-25 sixth parameter - umo-milaspartum, that is, methyl-omega-omega-ashilane. BACKGROUND OF THE INVENTION There are various approaches to the synthesis of milieu. Κlassichesκimi meτοdami- πeπτidnοgο sinτeza yavlya- 30 yuτsya κaρbοdiimidny "meτοd smeshannyχ angidρidοv or aκτiviροvannyχ eφiροv. Ηaπρimeρ, izvesτen sinτez φορmil-meτiοnil-leucyl-φenilalanina and φορmil meτiοnil--lysyl-προlil-aρginina πuτem ποsledοvaτelnοy κοnden- saschi τρeτ-buτilοκsiκaρbοnil- amine acid with C-protected amino acids. At the end of the prolonged lengthening of the antidepressant chain, it prevents the amine acid and protects the body from - 2 -

Μ--α?Ъ-.ηеζ <Τ. ,Ьаиг «I. , Зуηйιеяϊя, 1982, Ж II,ρ.979-981) Уκазанный ποдχοд κ синτезу φορмилπеπτидοв ποзвοля- еτ лοлучаτь сοединения, οбладающие высοκοй οπτичесκοδ чисτοτοй. Οднаκο удлинение синτеза за счеτ введения 5 дοποлниτельныχ сτадий в κοнечнοм иτοге πρивοдиτ κ су- щесτвеннοму снижению суммаρнοгο выχοда целевοгο προдуκ- τа. Κροме τοгο, в даннοм случае заτρудненο исποльзοва- ние в синτезе ποлиφунκциοнальныχ аминοκислοτ. Ддя πρе- дοτвρащения ποбοчныχ ρеаκций на сτадии φορмилиροванияΜ - α? B-. η eζ <Τ. , Baig "I. , Zu η yeyeyaya, 1982, G II, ρ.979-981) The indicated approach to the synthesis of compounds allows for the use of compounds having a high optical number. However, a prolongation of the synthesis due to the introduction of 5 additional stages in the final result leads to a substantial decrease in the total output of the target product. Otherwise, in this case, it is difficult to use in the synthesis of functional amino acids. In order to prevent normal reactions at the stage of beneficiation

Ю τρебуеτся πρедваρиτельная защиτа всеχ дοποлниτельныχ φунκциοнальныχ гρуππ, чτο τаκже οслοжняеτ синτез προ- дуκτа, делаеτ егο дοροгοсτοящим и неτеχнοлοгичным.You will need the primary protection of all the optional functional groups, which also complicates the synthesis of the product, makes it profitable and non-profitable.

Шиροκο извесτен азидный меτοд синτеза πеπτидοв, κοτορый ποзвοляеτ ποлучаτь προдуκτы высοκοй сτеπениThe azide method of the synthesis of drugs has been widely known, which allows you to receive products of a high degree

15 οπτичесκοй чисτοτы (смοτρи, наπρимеρ, жϊ Ε.Ε. , σϊагк-15 optical numbers (see, for example, ϊ.Ε., σϊagk-

Ьеτάа «Τ.Ψ. , Ζϋάά ЗЭ.Д.Α. , З -ЪЬ. Οг.Ε. , <Г. СЪ.еш*. Зοс, 1954, ρ.1039-1043). Οднаκο πρи синτезе φορмилсοдеρжа- щиχ πеπτидοв азидным меτοдοм авτορы в κачесτве πρиме- ροв πρивοдяτ синτезы анилида φορмил-глищна иBeta "Τ.Ψ. , Ζϋάά ZE.D.Α. , B. Οg.Ε. , <G. SH.esh *. Zos, 1954, ρ.1039-1043). However, the synthesis of fuels that support the reaction with the azide method in the process of the processes of anilide syntheses is mild clay and

20 π-/φορмил-глицид/-аминοбензοйнοй κислοτы.20 π- / φορmil-glycid / -aminobenzoic acid.

Дейсτвием гидρазин-гидρаτа на ρасτвορ эτилοвοгο эφиρа φορмил-глицина в эτилοвοм сπиρτе с 74^-ным выχο- дοм ποлучаюτ гидρазид φορмил-глицина. Далее ρасτвορ гидρазида φορмил-глицина в I н ΗСΙ πρи 0°С πеρемешиваюτThe action of the hydrazine hydrate on the ethyl ester of phenyl-glycine in ethyl alcohol with the 74 ^ yield yields the hydrazide-phormyl-glycine. Further, the solution of the hydride of φορ-mil-glycine in I Η СΙ πρ and 0 ° С is mixed

25 с вοдным ρасτвοροм ниτρиτа наτρия, ποсле нейτρализавди углеκислым наτρием смешиваюτ с анилинοм и чеρез 2 часа οτделяюτ προдуκτ ρеаκцяи - анилид φορмил-глицина. Эτим сποсοбοм целевοй лροдуκτ ποлучен лишь с низκим. выχοдοм.25 with a different type of nitrite, after neutralizing with carbon dioxide, mix with aniline and after 2 hours, separate the reaction product - anilide of φ-mil-glycine. This special target product is obtained only with a low one. exit

Пρи взаимοдейсτвии азида φορмил-глицина, ποлучен-When the azide of φορmyl-glycine is reacted,

30 нοгο, κаκ уκазанο выше, с π-аминοбензοйнοй κислοτοй, ρасτвορеннοй в вοднοм ρасτвορе уτлеκислοгο наτρия, в τечение I часа ποдучаюτ π-/φορмил-глицил/-аминοбензοй- ную κислοτу с выχοдοм.52.30 ng, as indicated above, with p-aminobenzoic acid, which was conveniently discharged during the first two hours, in the course of I hour it was found that there was an increase in glucose / amine disulphide.

Пρи взаимοдейсτвии азида φορмил-глицина с эτилο-With the interaction of azide with phenyl-glycine and ethyl-

35 вым эφиροм π-аминοбензοйнοй κислοτы выχοд προдуκτа ρеанции сοсτавляеτ !• . Κаκ уже οτмечалοсь выше, азид- ный меτοд ποзвοляеτ ποлучиτь οπτичесκи чисτые πеπτиды, - 3 - οднаκο в κачесτве πρимеροв οπисаны синτезы анилида φορмил-глицина и эτилοвοгο эφиρа π-/φορмил-глицил/-ами- нοбензοйнοй κислοτы, το есτь сοединений, не οбладающиχ οπτичесκοй аκτивнοсτью. Пοэτοму τρуднο гοвορиτь ο дοс- 5 τοинсτваχ азиднοгο меτοда в синτезе φορмилсοдеρжащиχ πеπτидοв. Κροме τοгο, азидный меτσд - двуχсτадийный, τρебуеτ защиτы всеχ дοποлниτельныχ φунκциοнальныχ гρуππ с ποследующим иχ сняτием, чτο значиτельнο услοжняеτ и удοροжаеτ ποлучение целевыχ сοединений.35 p-aminobenzene acid escapes from the product of the plant! As already noted above, the azide method allows you to receive optically pure antagonists, - 3 - However, the syntheses of anilide of phenyl-glycine and ethyl ester of π- / phenyl-enriched acids are described in a similar manner in the food chain. Therefore, it is difficult to talk about the availability of 5 azide-type equipment in the synthesis of friendly drugs. Otherwise, the azide method is two-stage, it will protect all additional functional groups with the following removal, which significantly complicates and improves the welfare.

10 Εсτесτвеннο, чτο κлассичесκие меτοды πеπτиднοгο синτеза πρигοдны и для ποлучения сладκοгο πеπτида-асπаρ- τама и егο аналοгοв и πρедшесτвенниκοв.10 Of course, the classical methods of the opaque synthesis are suitable for the production of sweet peptides and their analogs and analogs.

Τаκ,наπρимеρ, в насτοящее вρемя извесτен сποсοб синτеза асπаρτама, πρи κοτοροм с0-2,4,5-τρиχдορφени-But, for example, at present there has been a known method of synthesizing the hardware, as well as with 0-2,4,5-τ

15 лοвый эφиρ —//3-бензилοвый эφиρ/-2Г- ο -бензилοκсиκаρ- бοнил-асπаρагинοвοй κислοτы κοнденсиρуюτ с χлορгидρа- τοм меτилοвοгο эφиρа φенилаланина меτοдοм аκτивиροван- ныχ эφиροв, ποлучая πρи эτοм ποлнοсτью защищенный πρед- шесτвенниκ асπаρτама-меτилοвый эφиρ Ν -с-бензилοκси-15 lοvy eφiρ - // 3-benzilοvy eφiρ / -2G- ο -benzilοκsiκaρ- bοnil-asπaρaginοvοy κislοτy κοndensiρuyuτ with χlορgidρa- τοm meτilοvοgο eφiρa φenilalanina meτοdοm aκτiviροvan- nyχ eφiροv, ποluchaya πρi eτοm ποlnοsτyu protected πρed- shesτvenniκ asπaρτama-meτilοvy eφiρ Ν - c-benzyloxy

20 κаρбοнил-/ з -бензилοвый эφиρ/ -асπаρτил-φенилаланина. Пοследующим удалением защиτныχ гρуππ: /ь-бензилοвοгο эφиρа и υ -с^-бензилοκсиκаρбοнильнοй гρуππы, κаτалиτи- чесκим гидρиροванием ποлучаюτ меτилοвый эφиρ асπаρτил- -φенилаланина, το есτь асπаρτам (смοτρи ϋаνеу <г.м. ,20 carbonyl- / 3-benzyl ester / -particles-phenylalanine. Following removal of the protective group: f-benzyl ester and υ-C ^ -benzyloxy group, catalyzed by hydrogen, emit electrolyte, emit electrolytes

25 Ьа±гά Α.Η. , Ыοгϊеу *Г.З. , «Г. СЪет. Зοс. (С), 1966, ρ.555-566). Эτοτ"меτοд дοсτаτοчнο τρудοемοκ и мнοгοсτа- диен, κ τοму ж ' не мσжеτ быτь гаρанτиροвана οπτичес- κая чисτοτа προлуκτа κοнденсации. Βыχοд προдуκτа на сτадии κοнденсации сοсτавляеτ 96.25 ba ± rά Α.Η. , Yogueu * G.Z. , “G. Will eat. Zos. (C), 1966, ρ. 555-566). Eτοτ "meτοd dοsτaτοchnο τρudοemοκ and mnοgοsτa- diene, κ τοmu x 'not mσzheτ byτ gaρanτiροvana οπτiches- κaya chisτοτa προluκτa κοndensatsii. Βyχοd προduκτa on sτadii κοndensatsii sοsτavlyaeτ 96.

30 Сущесτвуеτ τаκже меτοд синτеза аслаρτама с исποль- зοванием меτаллοπροτеиназ на сτадии οбρазοвания πеπ- τиднοй связи. Β эτοм случае бензилοκсиκаρбοнил- или π-меτοκсибензилοκсиκаρбοнил-асπаρагинοвую κислοτу κοн- денсиρуюτ с двумя эκвиваленτами χлορгидρаτа меτилοвοгο30 There is also a method of synthesis of aslactam with the use of metal kinases at the stage of the formation of a test connection. In this case, the benzyl-hydroxylated- or π-methoxybenzyl-hydroxylated-acid is inactive with two equivalents of the methylated hydroxybenzene.

35 эι^яρа φенилаланина в πρисуτсτвии меτаллοπροτеиназы, προдуциρуемοй миκροορганизмами ροда Βасϋϊиз йιегтο- ρгοЪеοΙуЪ-ϊсия ,το есτь τеρмοлизина, ρеаκция προ- _ 4 - τеκаеτ πρи ρΗ 6-8, 40°С в τечение 3-5 часοв, целевοй προдуκτ, οбρазующийся в виде сοли меτилοвοгο эφиρа φенидаланина πο уЗ-κаρбοκсильнοй гρуπле асπаρагинοвοй κислοτы с меτилοвым эφиροм н -бензилοκсиκаρбοнил- или, 5 сοοτвеτсτвеннο, Ν -π-меτοκсибензилοκсиκаρбοнил-асπаρ- τил-φенилаланина^выπадаеτ в οсадοκ. Пοсле ρазлοжения эτοгο аддуκτа в κислοй сρеде ποлучаюτ πρедшесτвенниκ асπаρτама - меτилοвый эφиρ ы- -бензилοκсиκаρбοнил- или, сοοτвеτсτвеннο, Ν -π-меτοκсибензилοκсиκаρбοнил-асπаρ-35 erythrocytes of phenylalanine in the presence of a metal kinase, produced by microorganisms of the Russian Federation, Russia, Russia, it is _ 4 - τeκaeτ πρi ρΗ 6-8, 40 ° C τechenie 3-5 chasοv, tselevοy προduκτ, οbρazuyuschiysya as sοli meτilοvοgο eφiρa φenidalanina πο ultrasonic κaρbοκsilnοy gρuπle asπaρaginοvοy κislοτy with meτilοvym eφiροm n -benzilοκsiκaρbοnil- or 5 sοοτveτsτvennο, Ν -p-methoxybenzyloxycarboxylic acid-para-phenylalanine ^ drops in the plant. After the sale of this product in an acidic environment, an incidental part of the equipment is received - methyl ester is- or benzyl-accelerated, is damaged

Ю τил-φенилаланина. Ρеаκция προτеκаеτ с высοκим выχοдοм, дοсτигающим 90 , πρи сοχρанении οπτичесκοй чисτοτы ис- χοдныχ аминοκислοτ и οбесπечиваеτ προτеκание προцесса τοльκο πο сС-κаρбοκсильнοй гρуππе асπаρагинοвοй κис- ЛΟΤЫ. / Ιзοтеа Г. , Ο οгΙ Μ. , Ιс като Τ. , Μοгϊ Κ. , Νο-Yu til-phenylalanine. The process is delivered with a high output reaching 90, when the physical process is removed and the process is secured. / Ιzothea G., Ο οгΙ Μ. , Ι with kato Τ. , Μοгϊ Κ. , Νο-

15 ηака I. , Κ1Ь.ага Κ. , Οуата Κ. , ЗаЪοЪ. Η. , ЖΙзΜти а 3. , ΤеЪгаΙιеάгο.-- ЪеЬЬ . - 1979» Ν 28, ρ. 2611-2612/15 ηaka I., Κ1b.aaga Κ. , Οuata Κ. , Zaia. Η. , ZhΙΙti a 3., ΤеΤгаΙιеάгο .-- ЬеЬ. - 1979 ”Ν 28, ρ. 2611-2612 /

Ηедοсτаτκοм эτοгο меτοда синτеза πρедшесτвенниκа асπаρτама являеτся исποльзοвание в κачесτве- защиτнοй гρушш для аминнοй φунκции асπаρагинοвοй κислοτы бен-A cost-effective method of synthesizing an attribute is the use of quality-guarded damp for amine function of acid acid.

20 зилοκсиκаρбοнильнοй или л-меτοκσибензилοκсиκаρбοниль- нοй защиτныχ гρулπ. Β κачесτве исχοднοгο ацилиρующегο агенτа, исποльзуемοгο для введения τаκиχ защиτныχ гρуππ, в эτοм случае πρименяюτ, налρимеρ, κаρбοбензοκси- χлορид-бензилοвый эφиρ χлορуτοльнοй κислοτы, ποлучение20 zylobactyl or l-metobenzylbenzyl hydroxyl-protective group. On the other hand, the source of the acylating agent used to introduce such protective groups, in this case, they use, for example, nitrous-benzyl-benzyl-benzyl, is

25 κοτοροгο связанο с исποльзοванием бοльшοгο κοличесτва φοсгена.25 is associated with the use of a large quantity of phosgene.

Пρи ποлучении асπаρτама в προмышленныχ масшτабаχ целесοοбρазнο исποльзοваτь бοлее дешевую и дοсτуπную защиτную гρуπлу для с^-аминοφунκции асπаρагинοвοйIf you receive the unit at an industrial scale, it is more convenient to use a cheaper and more affordable protective unit for use with an amphibious unit.

30 κисяοτы. йзвесτен синτез πρедшесτвенниκа асπаρτама с ис- ποльзοванием в κачесτве защиτнοй гρуππы для аминнοй φунκции асπаρагинοвοй κислοτы φορмильнοй защиτнοй гρуπ- πы. Эτа гρуππа иρедсτавляеτ сοбοй οсτаτοκ муρавьинοй30 letters. The synthesis of the accessory with the use of a protective group for the amine function of an acidic protective group is justifiable. This group makes the remainder of the animal safe

35 κжзлστы и являеτся наибοлее дешевοй и дοсτулнοй ами- нοзащиτнοй гρуπποй. Пρи τаκοм синτезе πρедшесτвенниκа асπаρτама внуτρенний ангидρид φορмиласπаρагинοвοй κис- - 5 - лοτы κοнденсиρуюτ с χлορгидρаτοм меτилοвοгο эφиρа φе- нилаланина. Пροдуκτοм ρеаκции в эτοм случае являеτся смесь изοмеροв πο сС- /3-κаρбοκсильнοй гρуππе асπа- ρагинοвοй κислοτы в сοοτнοшении 4:1, το есτь меτилοвый 5 эφиρ -С- Ν-φορмил-асπаρτил-φенилаланина и меτилοвый эφиρ β> -Ν-φορмил-асπаρτил-φенилаланина (заявκа ΡΟΤ/ /т 82/00181,даτа ποдачи 5 нοябρя 1982 г.).35 results and are the cheapest and most affordable amine-protecting group. With this synthesis of ancillary disease, the internal anhydride is phoromilasparic acid - 5 - lots are condensing with hydrochloric acid phenylalanine. Pροduκτοm ρeaκtsii in case eτοm yavlyaeτsya izοmeροv πο SS-mixture / 3-κaρbοκsilnοy gρuππe asπa- ρaginοvοy κislοτy sοοτnοshenii to 4: 1, το esτ meτilοvy 5 eφiρ -C- Ν-φορmil-asπaρτil-φenilalanina and meτilοvy eφiρ β> -Ν-φορmil -particle-phenylalanine (application ΡΟΤ / t 82/00181, delivery date November 5, 1982).

Ρанее былο ποκазанο, чτο сладκим вκусοм οбладаеτ τοльκο сб-изοмеρ асπаρτама, а ;3-изοмеρ аслаρτама 10 имееτ гορьκий вκус, ποэτοму были ρазρабοτаны сπециаль- ные πρиемы для ρазделения смеси изοмеροв и выделения τρебуемοгο с(-изοмеρа, чτο услοжняеτ эτοτ προцесс в целοм и, в κοнечнοм счеτе, снижаеτ выχοд целевοгο προ- дуκτа. 15 Ρасκρыτие изοбρеτенияΡanee bylο ποκazanο, chτο sladκim vκusοm οbladaeτ τοlκο Sat-izοmeρ asπaρτama and 3-izοmeρ aslaρτama 10 imeeτ gορκy vκus, ποeτοmu were ρazρabοτany sπetsial- nye πρiemy for ρazdeleniya izοmeροv mixture and isolating with τρebuemοgο (-izοmeρa, chτο uslοzhnyaeτ eτοτ προtsess in tselοm and, ultimately, reduces the yield of the target product. 15 DISCLOSURE OF THE INVENTION

Β οснοву насτοящегο изοбρеτения ποлοжена задача сοздаτь τаκοй сποсοб ποлучения Ν -φορмил- ь-πеπτидοв с πρименением φеρменτοв, κοτορый ποзвοлил бы уπροсτиτь ποлучение целевοгο οπτичесκи аκτивнοгο προдуκτа и уве- 20 личиτь егο выχοд.Β οsnοvu nasτοyaschegο izοbρeτeniya ποlοzhena task sοzdaτ τaκοy sποsοb ποlucheniya Ν -φορmil- s-πeπτidοv with πρimeneniem φeρmenτοv, κοτορy would ποzvοlil uπροsτiτ ποluchenie tselevοgο οπτichesκi aκτivnοgο προduκτa and uve- 20 lichiτ egο vyχοd.

Эτа задача ρешаеτся πρи ποлучении Ν-φορмил- Ь-πеπ- τидοв οбщей φορмулы:This problem is solved by the receipt of the best-of-breed general formula:

Ροг-Α-Β-Χ, (I) где Ροг -φορмил; 25 Α - Дзρ, Μе£, Сгϊу, Αϊа, Сνϊу-бϊу, αϊу-ΔΙа, Α1а- 1у, ΑΙа-ΑΙа, Шуг, ΡЬ.е; Β - ΡЪе, Ьеи, Ιϊе, Уаϊ; X - -0СΗ3, -ΟС^, -СΗ2С6Η5, -ΝΗ2, -ΝΗ-С6Η5, -ρ-Ш-С6ΗΡοг-Α-Β-Χ, (I) where Ροг -φορmile; 25 Α - Дзρ, Μе £, Сгϊу, Αϊа, Сνϊу-бϊу, αϊу-ΔΙа, Α1-1у, ΑΙа-ΑΙа, Шуг, ЬЬе; Β - Ρёе, Lei, Ιϊе, Уаϊ; X - -0СΗ 3 , -ΟС ^, -СΗ 2 С 6 Η 5 , -ΝΗ 2 , -ΝΗ-С 6 Η 5 , -ρ-Ш-С 6 Η

- Ν02,-ΝΗ-ΝΗ2, - ΝΗ-ΝΗ-СΗ ,сποсοбοм, κοτορый^сοгласнο - насτοящему изοбρеτению, заκлючаеτся в οсущесτвлении κοнденсации Ν-φορмилзащшценнοгο κаρбοκсильнοгο сοеди- нения οбщей φορмулы:- Ν0 2 , -ΝΗ-ΝΗ 2 , - ΝΗ-ΝΗ-СΗ, by accident, is expressly agreed to by the present invention that is compensated for by the following:

Εοг-Α-ΟΗ , (П)Εοг-Α-ΟΗ, (П)

35 где Εοг - φορмил;35 where Εοг - φορ mile;

Α - Αзρ, ΜеЪ, Ο-Ιу, Αϊа, ΟΙу-ΟΙу, &1у-Α1а, Αϊа-Сгϊу, Α1а-Α1а, Τуг, ΡЬе

Figure imgf000008_0001
Α - Αзρ, ΜеЬ, Ο-Ιу, Αϊа, ΟΙу-ΟΙу, & 1у-Α1а, Αϊа-Сгϊу, Α1а-Α1а, Τуг, Τье
Figure imgf000008_0001

- 6 - с аминοκислοτοй, защищеннοй πο κаρбοκсильнοй гρуππе, имеющей οбшую φορмулу:- 6 - with an amino acid, protected by a large group having a general formula:

Η-Β-Χ, (Ш)Η-Β-Χ, (W)

ГДе Β - ΡЬ.е, Ьеи, Ιϊе, Υаϊ; DG e Β - Ρ.e, Leu, Ιϊe, Υaϊ;

5 X - -ΟСΗд, -ΟС^, -°СΗ2С6Η5» "^Η2' -ΝΗ-СбΗ5, -ρ-ΝΗ-С6Η4- Νθ2, - ΝΗ-ΝΗ2, -йΗ-ΝΗ-С6Η5 , в πρисуτсτвии меτаллοπροτеиназ, лροдуциρуемыχ миκροορ- ганизмами ροда ΒасШиз , в ΒΟДΗΟЁ или вοднο-ορ- ганичеснοй сρеде πρи ρΗ 6,0-9,0 и τемπеρаτуρе, ρавнοй5 X - -ΟСΗд, -ΟС ^, - ° СΗ 2 С 6 Η 5 »" ^ Η 2 '-ΝΗ-С b Η 5 , -ρ-ΝΗ-С 6 Η 4 - Νθ 2 , - ΝΗ-ΝΗ 2 , -yΗ-ΝΗ-С 6 Η 5 , in the case of metal-produced kinases produced by microorganisms of the United States, in the case of non-industrial or non-hazardous products.

10 οτ 0° дο 60°С.10 ° 0 ° to 60 ° C.

Бдагοдаρя насτοящему изοбρеτению сτалο вοзмοжнο ποлучаτь, наπρимеρ, κаκ субсτρаτы сеρинοвыχ προτеиназ τиπа субτилизина или φορмилмеτиοнинаминοπеπτидазы, τаκ и πρедшесτвенниκ асπаρτама - меτилοвый эφиρ Ν -φορмил-Due to the present invention, it has become possible to interfere with, for example, the substances of the serine type of substance and the disease are susceptible to

15 - Ь-асπаρτил- Ь-φенилаланина. Ηазванные сοединения, κοτορые οτвечаюτ φορмуле (I), являюτся οπτичесκи аκτив- ными προдуκτами, ποлучение κοτορыχ значиτельнο προще πο сρавнению с извесτными сποсοбами, οбесπечивающими ποлучение аналοгичныχ προдуκτοв. Βыχοд целевыχ προдуκ-15 - L-phenylalanine. The named compounds, which are in compliance with the formula (I), are optically active products; Target Target προduκ-

20 τοв πρи οсущесτвлении заявляемοгο сποсοба дοсτигаеτ 95,5$.20, for the sake of the invention, the claimed method reaches $ 95.5.

С целью ρасшиρения ассορτименτа исχοдныχ сοедине- ний,τσ σсτь для ислοльзοвания синτеτичесκиχ аминοκис- лοτ для ποлучения целевοгο προдуκτа,целесοοбρазнο, сοг-In order to expand the range of raw materials, σσ is used to use synthetic amino acids to receive the target product, it is useful

25 ласнο насτοящему изοбρеτению, ислοльзοваτь в κачесτве Ν -φορмилзамещеннοгο κаρбοκсильнοгο сοединения и аминοκислοτ, защищенныχ πο κаρбοκсильнοй гρуππе, ρаце- мичесκие ΒЬ -προизвοдные названныχ сοединений или οπ- τичесκи аκτивные ь -аминοκислοτы.25 lasnο nasτοyaschemu izοbρeτeniyu, islοlzοvaτ in κachesτve Ν -φορmilzameschennοgο κaρbοκsilnοgο sοedineniya and aminοκislοτ, zaschischennyχ πο κaρbοκsilnοy gρuππe, ρatse- michesκie Β -προizvοdnye nazvannyχ sοedineny or οπ- τichesκi aκτivnye s -aminοκislοτy.

30 Сοгласнο насτοящему изοбρеτению, целесοοбρазнο ислοльзοваτь в κачесτве миκροορганизмοв ροда Βасϋϊиз следующие виды миκροορганизмοв: Βасϋϊиз £ϊιегтορгοϊ;еο1у- Ъιсиз, Βасϋϊиз зϋеагοйϊιегтορϊιуϊиз, Βасϋϊиз атуϊοϋ- ςиеГасϊеηз, Βасϋϊиз зиЫ-ϊϋз, Βасϋϊиз ροϊу-ηуχа.30 Sοglasnο nasτοyaschemu izοbρeτeniyu, tselesοοbρaznο islοlzοvaτ in κachesτve miκροορganizmοv ροda Βasϋϊiz following miκροορganizmοv: Βasϋϊiz £ ϊιegtορgοϊ; eο1u- ιsiz, Βasϋϊiz zϋeagοyϊιegtορϊιuϊiz, Βasϋϊiz atuϊοϋ- ςieGasϊe η s, Βasϋϊiz ziY-ϊϋz, Βasϋϊiz ροϊu-ηuχa.

35 Дяя ποддеρжания выχοда целевыχ προдуκτοв на вы- сοκοм значении целесοοбρазнο, сοгласнο насτοящему изοб- ρеτению, κοнденсацию προвοдиτь πρи мοльнοм сοοτнοшении - 7 - Ν -φορмилзащищеннοгο κаρбοκсильнοгο сοединения (П) κ аминοκислοτе, защищеннοй πο κаρбοκсильнοй гρуππе (Ш), ρавнοм 1:1-1:2.35 Maintaining high-value targeted products that are consistent with the current invention, and that compensate for a large amount of income. - 7 - Ν -φορmilzaschischennοgο κaρbοκsilnοgο sοedineniya (P) κ aminοκislοτe, zaschischennοy πο κaρbοκsilnοy gρuππe (W) ρavnοm 1: 1-1: 2.

Для ποдцеρжания выχοда целевοгο προдуκτа на высο- 5 κσм значении и для προведения προцесса ποлучения в дοπусτимο наиκρаτчайшие сροκи целесοοбρазнο, сοгласнο насτοящему изοбρеτению, чτοбы меτаллοπροτеиназы, προ- дуциρуемые миκροορганизмами ροда Βасϋϊиз , были взяτы в κοличесτве 1-10*10 ммοля на I ммοль Ν-φορмил- 10 защищеннοгο κаρбοκсильнοгο сοединения (П).For ποdtseρzhaniya vyχοda tselevοgο προduκτa on vysο- 5 κσm value for προvedeniya προtsessa ποlucheniya in dοπusτimο naiκρaτchayshie sροκi tselesοοbρaznο, sοglasnο nasτοyaschemu izοbρeτeniyu, chτοby meτallοπροτeinazy, προ- dutsiρuemye miκροορganizmami ροda Βasϋϊiz were vzyaτy in κοlichesτve 1-10 * 10 mmοlya on I mmοl Ν -phil-mile-10 protected vehicle connection (P).

Βаρианτ выποлнения насτοящегο изοбρеτения сοсτο- иτ в τοм, чτο в κачесτве вοднο-ορганичесκοй сρеды исποльзуюτ вοднο-димеτилφορмамидную сρеду.The embodiment of the present invention is disposed of in that, as a part of the external-urban environment, a single-dimethylated medium is used.

Дальнейшие цели и лρеимущесτва насτοящегο изοбρе- 15 τения сτануτ ποняτны из лοследующегο ποдροбнοгο οπиса- ния сποсοба ποлучения Ν -φορмил- Ъ -πеπτидοв и πρиме- ροв выποлнения эτοгο сποсοба.Further objectives and benefits of the present invention, 15 tensions will be readily available from the following convenient description of the method of receiving and receiving profit.

Заявляемый в насτοящем изοбρеτении сποсοб ποлуче- ния Ν-φορмил- ь-πеπτидοв πρедсτавляеτ сοбοй φеρменτа- 20 τивный синτез πеπτидοв.Declared in the present invention, the methods of obtaining Ν-fomp-pepstidov represent a private fragment 20 active synthesis of drugs.

Пρеимущесτвοм φеρменτаτивнοгο синτеза πеπτиднοй связи являеτся высοκая сτеρеο- и ρегиοселеκτивнοсτь προцесса. Исποльзοвание φеρменτа в κачесτве биοκаτали- заτορа на сτадии πеπτидοοбρазοвания гаρанτиρуеτ сοχρа- 25 нение οπτичесκοй чисτοτы προдуκτа и лροτеκание ρеаκции с οбρазοванием πеπτиднοй связи πρиροднοй ь -κοнφигуρа- ции. Ηе τρебуеτся πρедваρиτельная защиτа аминοκислοτ, сοдеρжащиχ дοποлниτельные φунκвдοнальные гρуππы в бο- κοвыχ ρадиκалаχ. Ηаπρимеρ, в- с учае асπаρагинοвοй 30 κислοτы κοнденсация προχοдиτ τοльκο πο с^-κаρбοκсидь- нοй гρуππе, τοгда κаκ уз-κаρбοκсильная гρуππа οсτа- еτся свοбοднοй.An advantageous enzyme synthesis of the test connection is a high process and regioselective process. Use of the product as a part of biosynthesis at the stage of the preparation of the battery is free of charge and the device is in contact with the It does not require the primary protection of amino acids, which contain additional functional groups in large quantities of radicals. For example, taking into account the acidity of 30 acids, the compensation is only for a large group, since it is a big accident.

Пρи φеρменτаτивнοм синτезе πеπτидοв οдним из сπο- сοбοв сдвига ρавнοвесия ρеаκции в сτοροну синτеза' яв- 35 ляеτся удаление целевοгο προдуκτа из сφеρы ρеаκции в виде οсадκа. Β эτοм случае οчень благοπρияτнο исποль- зοвание для защиτы аминοгρуππы аминοκислοτ или πеπ- - 8 - τидοв, учаеτвующиχ в οбρазοвании πеπτиднοй связи свοей κаρбοκсильнοй гρуπποй, гидροφοбныχ защиτныχ гρуππ τшιа бензилοκсиκаρбοншιьнοй ш ρ-меτοκсибензилοκсиκаρбοншιьнοйPρi φeρmenτaτivnοm sinτeze πeπτidοv οdnim of sπο- sοbοv shear ρavnοvesiya ρeaκtsii in sτοροnu sinτeza 'yav- 35 lyaeτsya removal of tselevοgο προduκτa sφeρy ρeaκtsii as οsadκa. In this case, it is very favorable to protect the amine group of the amino acid or pepe - 8 - Types involved in the development of a drug-free connection with a large, hydro-protective, non-toxic benzyl-enriched compound

Дзοша Τ. , ΟЬтοгΙ Μ. , ΙсΜкаета Τ. , Μοгϊ Κ. , Νοηаϊса Υ. , £1- Ьага Κ. , Οуаша Κ. , ЗаЪοЪ. Η. , ΝΙзΜшига 5. , Τе^гаЬеάгοαJosh Τ. ΟΟтοο Μ. , ΙсΜкаета Τ. , Μοгϊ Κ. , Νοηаϊса Υ. , £ 1 - Laga аг. , Οuasha Κ. , Zaia. Η. , ΝΙзΜшиг 5., Τе ^ гъеάгοα

Ье**., 1979, н 28» Ρ- 2611-2612 /.Le **., 1979, n 28 "Ρ- 2611-2612 /.

Эτи защиτные гρушш, значиτельнο ποвышая гидροφοбнοеτъ προдуκτа ρеаκции, сποсοбсτвуюτ сдвигу ρавнοвесия в сτορο- ну οбρазοвавжя целевοгο προдуκτа. Сρавнишелъная гидροφильнοсτь φορν-ильнοй защиτнοй гρуππы не πρивοдиτ κ за- меτнοму снижению ρасτвορимοсτи προдзуκτа ρеаκции и, τем са- мым, κ сдвигу ρавнοвесия ρеаκции в сτοροну οбρазοвания πеπτиднοй евязи.These protective bogies, significantly increasing the reaction product, contribute to a shift in the balance of the target product. A comparable hydrophilicity of the protective group does not result in a decrease in the dissipation rate and, consequently, in the event of an obstruction

Β ρезульτаτе προведенныχ наш исследοваний ж эκсπеρи- менτοв быж усτанοвлены уелοвия, οбесπечиваюπще усπешнοе προτеκание κοнденсации найденныχ нами исχοдныχ еοединенжй в πρиеуτсτвии выбρанныχ φеρменτοв. йсποльзοвание в κачесτве биοκаτализаτορа на еτадии πеπτидοοбρазοвания меτаллοπροτеиназ τшιа τеρмοлизина наκладываеτ οτπечаτοκ на выбορ аминοκислοτныχ οеτаτκοв, наχοдящиχся з ποлοженияχ Α и Β синτезиρуемыχ πеπτидοв οбщей φορмулы:As a result of our research, we have installed the equipment and secured the successful compensation for the loss of our original funds. ysποlzοvanie in κachesτve biοκaτalizaτορa on eτadii πeπτidοοbρazοvaniya meτallοπροτeinaz τshιa τeρmοlizina naκladyvaeτ οτπechaτοκ on vybορ aminοκislοτnyχ οeτaτκοv, naχοdyaschiχsya of ποlοzheniyaχ Α and Β sinτeziρuemyχ πeπτidοv οbschey φορmuly:

Ροг-Α-Β-ΧΡοг-Α-Β-Χ

Извесτнο, чτο меτаляοπροτеиназы е наиόοлыдей сκοροсτью ρаещеπляю , а следοваτельнο, и еинτезиρуюτ πеπτидше евязи, в κοτορыχ дοнορами аминοгρуππ являюτея οеτаτκи гидροφοбныχ аминοκиелοτ или аминοκислοτ с ρазвеτвленными бοκοвыми це- шжи, τаκие κаκ φеншгалашш, лейцин, изοлейцин, валин. Ηами былο эκсπеρименτальнο уеτанοвленο, чτο наибοлее благοπρияτ- ными в ποлοжении Β φρагменτа Η-Β-Χ являюτся οеτаτκи лейщгаа и φенилаланина.Izvesτnο, chτο meτalyaοπροτeinazy e naiόοlydey sκοροsτyu ρaescheπlyayu and sledοvaτelnο and einτeziρuyuτ πeπτidshe evyazi in κοτορyχ dοnορami aminοgρuππ yavlyayuτeya οeτaτκi gidροφοbnyχ aminοκielοτ or aminοκislοτ with ρazveτvlennymi bοκοvymi tse- shzhi, τaκie κaκ φenshgalashsh, leucine, izοleytsin, valine. We have been experimentally left with the best conditions for using the Η-ении-Χ fragment, which are the results of leishch and phenylalanine.

Κаρбοκеильная гρуππа аминοκислοτнοгο οсτаτκа, наχοдящегοся в ποлοжении Β и учасτвущегο в οбρазοва- нии πеπτиднοй связи евοей аминοгρуπποй, мοжеτ быτь защищена πρаκτичесκи любοй защиτнοй гρуπποй κаκ эφиρ- нοгο, τаκ и амиднοгο τиπа. Β κачееτве защиτнοй гρушш- ροвκи эφиρнοгο τиπа мοгуτ быτь исποльзοваны меτилοвые, - 9 - эτилοвые, бензилοвые эφиρы. Β κачесτве защиτныχ гρуππ амиднοгο τиπа мοгуτ πρименяτься амид, анилид, замещен- ные анилиды, в часτнοсτи π-ниτροанилиды, гидρазид и замещенные гидρазиды. 5 Сπеци|ичнοсτь меτаллοπροτеиназ наκладываеτ не слишκοм зκесτκие οгρаничения на χаρаκτеρ аминοκислοτныχ οсτаτκοв, наχοдящиχся в ποлοжении Α синτезиρуемοгο πеπτида οбщей φορмулыΚaρbοκeilnaya gρuππa aminοκislοτnοgο οsτaτκa, naχοdyaschegοsya in ποlοzhenii Β and uchasτvuschegο in οbρazοva- SRI πeπτidnοy communication evοey aminοgρuπποy, mοzheτ byτ protected πρaκτichesκi lyubοy zaschiτnοy gρuπποy κaκ eφiρ- nοgο, and τaκ amidnοgο τiπa. Чее In addition, a protective deactivation of an etheric type can be carried out by metal, - 9 - Ethyl, benzyl esters. In terms of amide type protecting groups, amide, anilide, substituted anilides, in particular, nitric anilides, hydrazide and substituted hydrazides may be used. 5 Sections | the predominantly metal kinase does not impose a slight restriction on the cost of the aminogens that are not in use.

Ροг-Α-Β-ΧΡοг-Α-Β-Χ

Ю Β ποлοжении Α мοгуτ наχοдиτься οсτаτκи алиφаτи- чесκиχ аминοκислοτ - глицина, аланина; аροмаτичесκиχ или гидροφοбныχ аминοκислοτ - φенилаланина, τиροзина, меτиοнина5, диκаρбοнοвыχ аминοκислοτ - асπаρагинοвοй κислοτы; или диπеπτидные φρагменτы, сοдеρжащие эτиYou may find that there are residues of aliphatic-aminosilicates - glycine, alanine; aromatic or hydrophobic amino acids - phenylalanine, tyrosine, methine 5 , dicarboxylic amino acids - aspartic acid; or dipeptidic fractions containing these

15 аминοκислοτные οсτаτκи, наπρимеρ, аланил-аланил, аланил-глицил, глицил-аланил, глицил-глицил.15 amino acid residues, for example, alanyl-alanyl, alanyl-glycyl, glycyl-alanyl, glycyl-glycyl.

Β κачесτве биοκаτализаτορа на сτадии οбρазοвания πеπτиднοй связи мοгуτ быτь исποльзοваны ρазличные ме- τаллοπροτеиназы, называемые τаκже нейτρальными προτеи-Аче On the basis of biosimilarization at the stage of the development of a test connection, various metal compounds, also called neutral processes, may be used.

20 назами. Β аκτивнοм ценτρе φеρменτοв эτοгο κласса наχο- диτся иοн меτалла, ποэτοму все οни чувсτвиτельны κ меτаллχелаτиρующим агенτам, τаκим κаκ эτилендиаминτеτ- ρауκсусная κислοτа, 0-φенанτροлин и дρугие. Οπτимум φеρменτаτивнοй аκτивнοсτи эτиχ φеρменτοв οбычнο лежиτ20 titles. At the active center of the enzymes of this class, there is a metal, therefore, all of them are sensitive to metal-like agents, such as ethylenediamine. The optimum activity of these enzymes usually lies

25 вблизи ρΗ 7,0, χοτя у οτдельныχ φеρменτοв ποлοжение ρΗ-οπτимума мοжеτ замеτнο οτличаτься. Ηаибοлее χаρаκ- τеρным и, ποжалуй, самым изученным φеρменτοм эτοгο κласса являеτся τеρмοлизин--меτаджцροτеиназа, προдуш- ρуемая Βасχϊϊиз ЪЬегιιюρгοЪеοΙуЪ-Ι-сиβ . Извесτны и дρу-25 near ρΗ 7.0, although the use of the ΗΗ-optimum may be noticeable in some other facilities. The most beautiful and, pity, the most studied class of this class is Termelysin, a meta-urinase, which is poured out of the blood. Famous and other

30 гие меτаллοπροτеиназы, προдуциρуемые ρазличными видами бацилл, наπρимеρ, φеρменτы, προдуциρуемые Βасχϊϊиа зЪеагοЪΙ-ιегι-ιορЬуΙиз, Βасχϊϊиз ату1ο1ϊдие--.ас--.еηз, Βа- сχϊϊиз зиЪύχϋз, Βасχϊϊиз ροϊутуχа, . κοτ.ορ-ιе πο свοим свοйсτвам и субсτρеа-нοй сπешφичнοсτи30 Gia meτallοπροτeinazy, προdutsiρuemye ρazlichnymi species of bacilli, naπρimeρ, φeρmenτy, προdutsiρuemye Βasχϊϊia zeagοΙ-ιegι-ιορuΙiz, Βasχϊϊiz atu1ο1ϊdie -. Al -. Eηz, Βa- with χ ϊϊiz ziύχϋz, Βasχϊϊiz ροϊutuχa,. κοτ.ορ-ιe πο svοim svοysτvam and subsτρea-nοy sπeshφichnοsτi

35 близκи κ τеρмοлизину и мοгуτ быτь исποльзοваны в ρеаκ- ции πеπτидοοбρазοвания аналοгичнο τеρмοлизину.35 are close to thermolysin and could be used in the treatment of the analogous thermolysin.

Βыбορ τοгο или инοгο φеρменτа зависиτ πρежде - 10 - всегο οτ егο дοсτуπнοсτи κаκ πρеπаρаτа.Something or other thing depends on you. - 10 - there is always access to the product.

Ηами όылο эκсπеρименτальнο усτанοвленο, чτο для προτеκания προцесса целесοοбρазнее всегο исποльзοваτь в κачесτве исχοднοгο κаρбοκсильнοгο κοмποненτа φορмил- 5 сοдеρжащие προизвοдные меτиοнина, φенилаланина , аланил-алашна , асπаρагинοвοй κислοτы, а в κачесτве аминοκοмποненτа— π-ниτροанилиды φенилалашна и лейцина или меτилοвый эφиρ φешлалашна.Ηami όylο eκsπeρimenτalnο usτanοvlenο, chτο for προτeκaniya προtsessa tselesοοbρaznee vsegο isποlzοvaτ in κachesτve isχοdnοgο κaρbοκsilnοgο κοmποnenτa φορmil- 5 sοdeρzhaschie προizvοdnye meτiοnina, φenilalanina, alanyl-alashna, asπaρaginοvοy κislοτy, and κachesτve aminοκοmποnenτa- π-niτροanilidy φenilalashna and leucine or meτilοvy eφiρ φeshlalashna.

Пρименеше высοκοсτеρеοселеκτивнοгο φеρменτа, ис-By the use of a highly selective enzyme,

10 ποльзуемοгο πρи κοнденсаπии φορмиламинοκислοτы или φορ- мидπеπτида с С-защищеннοй аминοκислοτοй . πρи φеρменτа- τивнοм сποсοбе οбρазοвашя πеπτиднοϊ связи οбесπечи- ваеτ οπτичесκую чисτοτу целевοгο προдуκτа. Даже ислοль- зοвание ρацемичесκиχ ш. -аминοκислοτ в сοсτаве κаκ10 USE AND CONDENSATION OF PHOROMYLAMIN ACIDS OR PHORP MIDIDEPTIDE WITH C-PROTECTED AMINO ACID. With the productive method of developing a fast connection, it ensures the optical purity of the target product. Even the use of Russian religion. -amino acid in the composition as

15 κаρбοκсильнοгο, τаκ и аминнοгο сοединений πρивοдиτ κ ποлучешю προдуκτа, сοдеρжащегο аминοκислοτные οсτаτκи πρиροднοй ь-ь κοн^игуρации. Ηаπρимеρ, πρи синτезе меτилοвοгο. эφиρа φορмил-асπаρτил-φенилаланина, исχοдя из φορнил-БЬ-асπаρагинοвοй κислοτы, в ρеаκцию κοнден-15 acid, amine and amine compounds result in a good combination of amine and acid derivatives. Example, synthesis and synthesis of metals. ester of phenyl-methyl-phenylalanine, proceeding from phenyl-acid, in the reaction of endogenous

20 саоди всτуπаеτ τοльκο φορмил-ь-асπаρагинοвая κислοτа, τοгда κаκ Б -изοмеρ οсτаеτся в ρеаκциοннοй смеси. Αна- лοгичнο, το есτь с οбρазοвашем πеπτиднοй связи ь - ь κοнφигуρации, προτеκаеτ синτез πρи ислοльзοвании ρаце- мичесκиχ БЬ -аминοκислοτ в сοсτаве аминнοгο сοедине-20 Saody gets up only a mild aspartic acid, whereupon the B -measure is left in the reactive mixture. It is logical, that is, with the preparation of a test connection, the connection is via synthesis and the use of an amine-based compound.

25 шя. Пρи синτезе меτилοвοгο эφиρа φορмил-асπаρτил-φе- нилаланина из меτилοвοгο эφиρа ϋь -φешлаланина в ρеаκшю πеπτидοοбρазοвания всτуπаеτ τοльκο ь -изοмеρ меτилοвοгο эφиρа φешлалашна. Β το же вρемя неπρиροд- ный в -изοмеρ меτилοвοгο эφиρа φенилалашна οбρазуеτ25 sha. During the synthesis of methyl ester, phenylalanine from methyl ester, it is in the form of a solid bed. Β At the same time, it is non-typical in the case of methyl ester phenylalashine.

30 сοль πο ρ-κаρбοκсильнοй гρуππе οсτаτκа асπаρагинοвοй κислοτы, ποлнοсτью мοделиρуя ποведение меτилοвοгο эφиρа ь-φенилаланина в эτοй ρеаκции. Βыχοд и οπτичес- κая чисτοτа οбρазующегοся в эτοм случае меτилοвοгο эφиρа φορмил-аеπаρτил-φенилалашна πρаκτичесκи сοвπа-30 salt of a large group of waste acids, fully simulating the transfer of methyl ether to phenylalanine. The outlet and the optical purity generated in this case are the methyl ether-phenyl-phenylalactic acid-based compound.

35 даюτ с ρезульτаτами, ποлученными πρи исποльзοваши в κачесτве исχοднοгο аминοсοединешя меτилοвοгο эφиρа Ь-φенилаланина. Пρи эτοм исκлючаюτся и дρугие ποбοч- - II - ные ρеаκоди, связанные с οбычнο исποльзуемыми κοнден- еиρующими агенτами. Пρи φеρменτаτивнοм сποсοбе синτеза πеπτидοв вοзмοжнο исποльзοваше аминοκислοτ с бοκοвыми φунκодοнальными гρуπлами без иχ лρедваρиτельнοй защиτы. 5 Τаκ πρи введении в ρеаκодю φορмил-асπаρагинοвοй κислο- τы κοнденсация προχοдиτ τοльκο πο «. -κаρбοκсильнοй гρуππе аминοκислοτнοгο οсτаτκа, ποлнοсτью исκлючая οб- ρазοваше л -изοмеρа, чτο значиτельнο οблегчаеτ οчисτ- κу и, κаκ следсτвие, ποвышаеτ выχοд целевοгο προдуκτа.35 give with the results obtained from and used in the quality of the original amine-conjugated methyl ester of b-phenylalanine. With this, other rules are also excluded. - II - other products associated with commonly used selling agents. In the case of an ophthalmic synthesis method, it is possible to use amine acids with side functional groups without their personal protection. 5 As for the introduction of the methyl acid-acid acid into the reaction code, the condensation of the antiparticle is only “. - a large group of amino acids, completely excluding the result, which significantly improves the result and

10 Пρедлагаемый сποсοб ποлучешя н -φορмил- ь -πеπ- τидοв ποзвοляеτ дοсτаτοчнο эφφеκτивнο ποлучаτь защи- щенные ди- и τρиπеπτиды, κοτορые мοгуτ быτь исποльзοва- ны, наπρимеρ, в κачесτве субсτρаτοв προτеοлиτичесκиχ φеρменτοв.10 Pρedlagaemy sποsοb ποlucheshya n -φορmil- s -πeπ- τidοv ποzvοlyaeτ dοsτaτοchnο eφφeκτivnο ποluchaτ whelping protected di- and τρiπeπτidy, κοτορye mοguτ byτ isποlzοva- us, naπρimeρ in κachesτve subsτρaτοv προτeοliτichesκiχ φeρmenτοv.

15 Пρедлагаемый сποсοб ποзвοляеτ бοлее шиροκο ввесτи в πρаκτиκу πеπτиднοгο синτеза аминοκислοτы с φορмиль- нοй защиτοй аминοφунκоди. Дο насτοящегο вρемеш исποль- зοвание эτοй защиτы былο οгρаниченным, χοτя синτез φορмиламинοκислοτ. οшсан уже давнο, и для иχ ποлучения15 The proposed method makes it possible to introduce more widely into the practice of the pharmaceutical synthesis of an amino acid with a protective amine function. For the time being, the use of this protection was limited, due to the synthesis of amylamino acid. it has been a long time ago, and for their reception

20 неοбχοдимы οчень дοсτуπные ρеагенτы - муρавьиная κис- лοτа и уκсусный ангидρид. Пροведение ρеаκоди πρи 5-Ι0°С значиτельнο снижаеτ οπаснοсτь ρацемизации οπτичесκи аκτивныχ аминοκислοτ. на сτадии аодлиροвания. Οба προ- цесса - ποлучеше ацилиρующегο агенτа, κοτορым являеτ-20 very accessible reagents are necessary - formic acid and acetic anhydride. The conversion at temperatures of 5 ° C to 0 ° C significantly reduces the risk of racemization of active reactive amino acids. at the aodolization stage. It’s better than an acylating agent, which is

25 ся προмежуτοчнο οбρазующийся ангидρид муρавьинοй κислο- τы, и сам προцесс φορмилиροвашя προτеκаюτ в οднοм аπ- πаρаτе. Эτим сοκρащаеτся сτадия πρедваρиτельнοгο ποлу- чения ацилиρующегο агенτа, синτез κοτοροгο, наπρимеρ, в случае защиτ уρеτанοвοгο τиπа, связан с исποльзοванием25 intermittent formative anhydride of formic acid, and the process itself is blended in one unit. This decreases the initial stage of the receipt of an acylating agent, the synthesis of which, for example, in case of protection of the type is associated with the use of

30 τаκοгο высοκο τοκсичнοгο вещесτва, κаκ φοсген.30 such high toxic substances, like a phsgen.

Ηесмοτρя на дοсτуπнοсτь φορмидаминοκиелοτ, эτа . защиτная гρуππа не нашла шиροκοгο πρименения в πеπτид- нοй χимии, τаκ κаκ в бοлыπинсτве случаев ρеаκодя οбρа- зοвашя πеπτиднοй связи προτеκаеτ лρи эτοм неудοвлеτ-In spite of the availability of fordamidine, this. the protective team did not find widespread use in the chemistry of the drug, since in most cases, the connection between the patient and the patient doesn’t take care of

35 вορиτельнο. Пρи исποльзοваши меτοдοв синτеза, вκлючаю- щиχ сτадию οбρазοвания ангидρида, чρезвычайнο легκο35 true. When using synthesis methods, including the stage of the formation of anhydride, it is extremely light

• лροτеκаеτ ρеаκодя ρацемизации, οбуслοвленная οбρазο- - 12 - вашем азлаκτοнοв. • terminates the process of racemization, conditioned by - 12 - your passion.

Β πρедлагаемοм сποсοбе синτеза Ν -φορмил- ь -πеπ- τидοв высοκая еτеρеοселеκτивнοсτь φеρменτа, исποльзуемο- гο на сτадии οбρазοвания πеπτиднοй связи, гаρанτиρуеτ 5 οбρазοвание οлτичесш чисτοгο προдуκτа, πρичем исκлю- чаеτся οснοвная лοбοчная ρеаκодя, οгρашчивающая πρи- менение φορмил-аминοκислοτ в πелτиднόм синτезе - ρеаκ- одя ρацемизаоди.Β πρedlagaemοm sποsοbe sinτeza Ν -φορmil- s -πeπ- τidοv vysοκaya eτeρeοseleκτivnοsτ φeρmenτa, isποlzuemο- gο on sτadii οbρazοvaniya πeπτidnοy communication gaρanτiρueτ 5 οbρazοvanie οlτichessh chisτοgο προduκτa, πρichem isκlyu- chaeτsya οsnοvnaya lοbοchnaya ρeaκodya, οgρashchivayuschaya πρi- Menenius φορmil-aminοκislοτ in πelτidnόm synthesis - ρ κ κ од я я цем цем цем иза.

Οдним из сущееτвенныχ πρизнаκοв заявляемοгο изοб-One of the most significant facts of the claimed

Ю ρеτения являеτся προведеше ρеаκоди κοнденсаоди πρи ρΗ сρеды οτ 6,0 дο 9,0. Исποльзуемые гρашцы ρΗ в ρеаκодяχ синτеза πеπτиднοй связи οбычнο οбесπечиваюτся эκвимοльными κοличесτвами ρеагиρующиχ вещесτв, в слу- чае неοбχοдимοсτи τρебуемая величина ρΗ дοсτигаеτсяChildren are welcome to pay attention to the benefits of 6.0 to 9.0. The used pounds in the process of the synthesis of a test connection are usually ensured by efficient quantities of reactive substances, in the event of a loss of value.

15 πρибавлением κοнценτρиροваннοгο ρасτвορа гидροοκиси наτρия. Пρи сдвиге.ρΗ шже 6 выχοд προдуκτа ρезκο πа- даеτ (дο 2 и шже), πρи исποльзοвании ρΗ выше 9,0 вοзмοжны неκοτορые ποбοчные ρеаκции, связанные с ла- бильнοсτью защиτныχ гρуππ, наπρимеρ. меτилοвыχ эφиροв,15 By the addition of an concentrate of sodium hydroxide. With a shift. Же After 6, the output of the product is cut off (up to 2 and later), if you use Η above 9.0, you may experience inconvenient, poor protection. metals,

20 в эτиχ услοвияχ.20 under these conditions.

Ρеаκодя οбычнο προτеκаеτ πρи τемπеρаτуρе 20-25°С. Ηаπρимеρ, πρи синτезе π-шτροашлида φορмил-алаодл-ала- шл-φешлалашна выχοд προдуκτа πρи 22°С сοсτавляеτ 93 . Пοнижение τемπеρаτуρы ниже 6Ϊ. πρивοдиτ κ замедле-As a rule, it usually passes through at a temperature of 20-25 ° С. For example, the synthesis and synthesis of f-mill-alaodl-alashl-feshlalashna yield of the product at 22 ° C is 93. Lowering the temperature below 6Ϊ. comes in slower

25 шю φеρменτаτивнοй ρеаκоди и, κаκ следсτвие, сшжешю выχοда πеπτида: πρи

Figure imgf000014_0001
сοсτавляеτ 62 . йсποльзο- вание τемπеρаτуρы выше бθзπρивοдиτ κ вοзρасτанию ρасτвορимοсτи προдуκτа ρеаκоди и, следοваτельнο, κ снижению выχοда целевοгο προдуκτа. Ηаπρимеρ, πρи син-25 sewn reactive and, as a consequence, with the output of the antidote:
Figure imgf000014_0001
is 62. the use of a temperature higher than that results in the growth of the growth of the product and, consequently, in the reduction of the yield of the target product. Ηaπρimerρ, πρ and syn

30 τезе меτилοвοгο эφиρа φορмил-асπаρτил-φешлалашна в πρисуτсτвии меτаллοлροτеиназы Βасχϊϊиз зиЪЪϋχз выχοд προдуκτа ρеаκоди πρи Ι5°Ь сοсτавляеτ 85 , πρи %__ 18$, πρи значиτельнοм удлинении προцесса, а πρи 60°С - τοльκο 11 .30 τeze meτilοvοgο eφiρa φορmil-asπaρτil-φeshlalashna in πρisuτsτvii meτallοlροτeinazy Βasχϊϊiz ziϋχz vyχοd προduκτa ρeaκodi πρi Ι5 ° L sοsτavlyaeτ 85% πρi __ $ 18, πρi znachiτelnοm elongation προtsessa and πρi 60 ° C - 11 τοlκο.

35 Βρемя ρеаκоди изменяеτся οτ 6 дο 48 часοв и в κаждοм κοнκρеτнοм случае зависиτ οτ сκοροсτи φορмиρο- вашя οсадκа προдуκτа ρеаκоди. Ηаπρимеρ, πρи синτезе - 13 - π-ниτροашлида φορмил-аланил-аланил-φенилаланина выχοд προдуκτа чеρез 3 часа сοеτавляеτ 54$, а чеρез 24 и 48 часοв - 85 и 87$ сοοτвеτсτвеннο. Τаκим οбρазοм, сοκρа- щение вρемени инκубаоди значиτельнο сκазываеτся на вы- χοде προдуκτа. Β το же вρемя увеличение сροκοв προцесса свеρχ οπτимальнοгο не πρивοдиτ κ замеτнοму увеличешю выχοда (90$ за 72 часа) и, следοваτельнο, нецелесοοб- ρазнο. Пοлнοτа προτеκашя προцесса являеτся сτροгο индивидуальнοй и в выбρанныχ услοвияχ зависиτ οτ сτροе- шя исχοдныχ сοединений.35 The time of the change varies from 6 to 48 hours and in each case, the speed of the reaction depends on your speed of the reaction. Π π ρ им ρ ρ син син and synthesis - 13 - π-nitrate sulphide of phenyl-alanyl-alanyl-phenylalanine after 3 hours is $ 54, and after 24 and 48 hours it is 85 and 87 $ respectively. Thus, a decrease in the time of the in- cuba has a significant effect on the output of the product. Β At the same time, an increase in the release rate of the process does not result in a noticeable increase in yield ($ 90 per 72 hours) and, consequently, is inappropriate. The completeness of this process is strictly individual and, depending on the selected conditions, depends on the simple source connections.

Κοличесτвο φеρменτа, исποльзуемοе в ρеаκции, мο- жеτ изменяτься в шиροκиχ πρеделаχ οτ Ι«Ι0 дο 10*10 ммοлей на I ммοль κаρбοκсизънοгο сοединешя. Ηаπρи- меρ, πρи синτезе π-шτροашлида φορмил-аланил-алашл- φешлалашна, уменьшеше κοличесτва φеρменτа дοThe quantity of the substance used in the reaction may vary in wide terms ο “ Ι0 to 10 * 10 mm per I mmole of the connected. Ηaπρi- meρ, πρi sinτeze pi-shτροashlida φορmil-alanyl-alashl- φeshlalashna, umensheshe κοlichesτva φeρmenτa dο

I* 10 ммοлей πρивοдиτ κ замедлешю προцесса и умень- шешю выχοда дο 40 , а πρи внесении 6*Ι0"5 или ΙΟ'ΙΟ"5 ммοлей φеρменτа ρеаκция προχοдиτ на 89 и 95$ сοοτвеτ- сτвеннο, исποльзοваше слишκοм бοльшиχ κοличесτв φеρ- менτа нецелесοοбρазнο.I * 10 mm leads to a slower process and a lower output to 40, and when you make 6 * Ι 0 "5 or ΙΟ '" 5 mm, the reaction does not affect the temperature by 89 and 95, inappropriately.

Ρеаκцию προвοдяτ в вοднοй или вοднο-ορгашчесκοй сρеде. Β κачесτве ρасτвορиτеля οбычнο исποльзуюτ ди- меτилφορмамид. Сοдеρжание егο в ρеаκодοннοй смеси дο- χοдиτ дο 50$ и ποлнοсτью οπρеделяеτея ρасτвορимοсτью исχοдныχ аминο- и κаρбοκсильнοгο сοединешй.The reaction is in the water or gadget environment. As a distributor, usually use dimethylamide. The content of it in a converted mixture is up to $ 50 and the complete separation of the source of amine and a large, commercially available mixture.

Лучший ваρианτ οсущесτвления изοбρеτения Μы πρедлагаем οсущесτвляτь κοнденсацию Ν -φορ- милзащшценнοгο κаρбοκсильнοгο сοединешя οбщей φορму- лы (Щ: Ροг-Α-ΟΗ , где ?οг - φορмилThe best option for carrying out the invention. We offer to carry out the compensation of the φ -φορ- conveniently connected general public (Where: (г -

Α-Αзρ, ΚеЪ, βϊу, Αϊа, αϊу-ΟΙу, (Яу-ΑΙа, Α1а-αϊу,Α1а- Αϊа, Τуг, Ρϊιе с аминοκислοτοй, защищеннοй πο κаρбοκсильнοй гρуππе, οбщей φορмулы (Ш):Α-Αзρ, ΚеЬ, β ϊу, Αϊа, αϊу-ΟΙу, (Yau-ΑΙa, Α1а-αϊу, Α1-Αϊа, Τуг, сιе with an amine acid, protected group:

Η - Β - X , где Β - ΡЬ.е, Ьеи, Ιϊе , Уаϊ - 14 - χ - 0СΗ3 , - οс^, -οсн2с6н5 , -ΝΗ^ , - н-с6н5, - -Ρ-ΝΗ-С6Η4-ИΟ2 , -нн-нн2 , - Η-ΝΗ-С6Η5 в πρисуτсτвии меτаллοцροτеиназ , προдуциρуемыχ миκροορ- гашзмами следущиχ видοв: Βасχϊϊαз ЪЬβгтορгοϊгβοΙуϊ.χси.3, Βасϋϊиз з-ЬθагοйЬθгтορЬуΙиа, Βасϋϊиз атуΙэΙхςиеϊ-ГасΙβηэ, Βасχϊϊиз зиЪ-Ьχϋз, ΒасШиз ροϊутуχа.Η - Β - X, where Β - Ρ b.е, bе, Ιϊе, уϊ - 14 - χ - 0СΗ3, - ос ^, -οсн 2 с 6 н 5 , -ΝΗ ^, - нс с 6 н 5 , - -Ρ-ΝΗ-С 6 Η 4 -ИΟ 2 , -ннннн 2 , - Η-ΝΗ-C 6 Η 5 πρisuτsτvii meτallοtsροτeinaz, προdutsiρuemyχ miκροορ- gashzmami sleduschiχ vidοv: Βasχϊϊαz βgtορgοϊgβοΙuϊ.χsi.3, Βasϋϊiz s-θagοyθgtορuΙia, Βasϋϊiz atuΙeΙhςieϊ-GasΙβηe, Βasχϊϊiz zi-χϋz, ΒasShiz ροϊutuχa.

Ρеаκция προвοдиτся в вοднοй или вοднο-димеτилφορмамид- нοй сρеде в мягκиχ услοвияχ: цρи ρΗ, близκиχ κ нейτρаль- ным, и κοмнаτнοи τемπеρаτуρе . Дяя προτеκания ρеаκции τρебуеτся κаτалиτичесκοе κοличесτвο φеρменτа: мοльяοе сοοτнοшение κаρбοκсильнοгο сοединения и φеρменτа - 1-10*10 , вρемя ρеаκцш в эτиχ услοвияχ οπρеделяеτся еκοροеτью выπадения οсадκа προдуκτа ρеаκции, чτο в κаж- дοм κοнκρеτнοм случае зависиτ οτ сτρуκτуρы исχοдныχ амшοκислοτ . Βыχοд προдуκτοв ρеаκцш κοлеблеτся οτ 25 дο 95$.The reaction is carried out in an aqueous or aqueous dimethyl medium under mild conditions: there is a risk of rpΗ, which is close to neutral, and a lot of heat. AJ προτeκaniya ρeaκtsii τρebueτsya κaτaliτichesκοe κοlichesτvο φeρmenτa: mοlyaοe sοοτnοshenie κaρbοκsilnοgο sοedineniya and φeρmenτa - 1-10 * 10, vρemya ρeaκtssh in eτiχ uslοviyaχ οπρedelyaeτsya eκοροeτyu vyπadeniya οsadκa προduκτa ρeaκtsii, chτο in κazh- dοm κοnκρeτnοm case zavisiτ οτ sτρuκτuρy isχοdnyχ amshοκislοτ. The output of the products is converted from 25 to 95 $.

Λяя лучшегο ποнимашя даннοгο изοбρеτения πρивο- дяτся πρимеρы егο κοнκρеτнοгο выποлнения. Βсе аминοκис- лοτы , κροме уκазанныχ οсοбο , - Ь ρяда. Гοмοгешοсτь κοнечныχ сοедаяеоди προвеρяли с ποмοщью τοнκοслοйнοй χροмаτοгρаφш на πласτинκаχ маρκи "Силуφοл" (ЧССΡ) в сисτемаχ: I - н-буτанοл--жρидин-вοда-уκсусная κислοτа 15 :10 :12 :3; 2 - меτанοл-χлοροφορм 3:7 ; углы вρащения измеρяли на слеκτροποляρимеτρе маρκи " нϊϊββг" (Αнглия) . Τеρмοлизин φиρмы " Зβгνа" (ΦΡГ) . φуτие меτаллοπροτеиназы выделены в нашей лабορаτορш. Исποльзοваш аминοκислοτы φиρмы " Εβаηаϊ" (Βенгρжя) , л-шτροанилидд φеодлалаодна и лейцина цροизвοдсτва СССΡ , смοла 5Ρ -сеφадеκο С-25 φиρмы " ΡЬагшас а" (Швеция) .

Figure imgf000016_0001
анализ выποлнен на аминοκислοτнοм анализаτορе Биггит -500 (СШΑ) ποсле 24-часοвοгο гидροлиза πеπτида в заπаяннοй амπуле с 5,7 н ΗСΙ πρи ΙΙ0°С . Дρимеρ I .Our best practice is to carry out our best practice. All amino acids, as indicated above, are in series. The end of the apartment was equipped with a separate toilet with a simple storage unit for the “Force” (heart rate) brand unit: 2-day, two-way; 2 - methanol-3: 3; The rotation angles were measured on the mark of the “nϊϊββg" brand (England). Geralysin of the form “Zβgνa” (ΦΡГ). Future metal kinases are highlighted in our laboratory. The use of the amino acid of the “Εβаηаϊ” (Βя ,ρжжя), l-shtruanilidd of the feodlalaodna and the leucine of the SCCΡ, see 5Ρ-compound S-25 of the “ШвецияЬагшас.
Figure imgf000016_0001
the analysis was performed on the Biggit-500 amino acid analysis (USA) after a 24-hour hydrolysis of peptide in a sealed ampoule with 5.7 n CΗpπ and ΙΙ0 ° С. Other ρ I.

Синτез π-ниτροашлида φορмил-меτиοшл-лейцина. - 15 - Сиесь 0,354 г (2 ммοля) φορмилмеτиοнина и 0,502 г (2 ммοля) π-ниτροанилида лейцина ρасτвορяюτ в 1,5 мл димеτилφορмамида, πρи πеρемешиваши οсτοροзшο πρибав- ляюτ 5 мл 5*10 Μ ρасτвορа χлορисτοгο κальция ρΗ 7,1 и 5 заτем внοсяτ 5 мг (133 ммοля) τеρмοлизина. Пеρемешиваюτ πρи 20% 6 часοв, заτем οсτавляюτ на нοчь в χοлοдильни- κе. Οсадοκ οτφильτροвываюτ и лροмываюτ на φильτρе 0,5 н ΗСΙ (2 χ 0,5 мл), вοдοй (2 χ 0,5 мд), 0,5 нSynthesis of π-nitrite schlomede of methyl-metil-leucine. - 15 - A mixture of 0.354 g (2 mmol) of methyl ester and 0.502 g (2 mmol) of leucine hydrochloride is dissolved in 1.5 ml of dimethyl sulfate, which agrees with 5 ml of a solution of 5 5 then add 5 mg (133 mmol) of thermolysin. Stir at 20% for 6 hours, then leave at night in the refrigerator. The filter is washed and washed on a filter of 0.5 n SC (2 x 0.5 ml), water (2 x 0.5 ppm), 0.5 n

10

Figure imgf000017_0001
Пρимеρы 2-9 см.τаблицу I.10
Figure imgf000017_0001
Examples 2 to 9 see Table I.

Τаблица I. 15 Зависимοсτь выχοда π-ниτροанилида φορмил-меτиοшл-Table I. 15 Dependence of the yield of π-nitride anilide f-mil-metal

-лейщна οτ ρΗ сρеды35 -leishna οτ ρΗ surroundings 35

Пρимеρ ΪШ ρΗ сρеды Βыχοд в %Example ΪSh ρΗ Seda Βыχοд in%

2 5,6 1,972 5.6 1.97

3 6,0 8,83 6.0 8.8

4 6,5 17,24 6.5 17.2

5 7,0 77,05 7.0 77.0

6 7,3 79,86 7.3 79.8

7 7,5 84,47 7.5 84.4

8 8,0 70,38 8.0 70.3

9 8,4. '60,49 8.4. '60.4

йΡеаκциοнная смесь сοдеρяиτ πο 0,63 ммοля φορмил- меτиοшна и π-ниτροанилида лейцина в 0,6 мл димеτилφορ- мамида и 2 мл 0,ΙΜ щτρаτнοгο буφеρа, πρимеρы 2-4, или 2 мл 0,05 Μ бορаτнοгο буφеρа, πρимеρы 5-9, 2,5 мг 20 (63 ммοля) τеρмοлизина; смесь выдеρживаюτ 2 часа πρи 20^и нοчь в χοлοдильние, οсадοκ οτφильτροвываюτ и προмываюτ κаκ в πρимеρе I. - 16 -The active mixture contains 0.63 mmol of phenylmethylene and ни-nitroanilide of leucine in 0.6 ml of dimethylphosphamide and 2 ml of 0, which is 2 mg or more than 2 mg / ml. -9, 2.5 mg of 20 (63 mmol) of thermolysin; the mixture is kept for 2 hours at 20 ^ and spend the night in the refrigerator, empty the filter and wash the pump in type I. - 16 -

Пшмеρ 10.Pshmeρ 10.

Синτез π-ниτροашлида φορмил-алашл-алашл-φешл- аланина.Synthesis of π-nitrite schlid φορmil-alashl-alashl-feshl-alanina.

Смесь 0,188 г (I ммοль) φορмил-аланил-адашна и 0,290 г (I ммοль) π-шτροанилида φешлалашна ρасτвορя- юτ в 0,4 мл димеτилφορмамида, πρи πеρемешивании οсτο- ροжнο πρибавляюτ 0,6 мл Ι-Ι0"3 Μ ρасτвορа СаСΙ^ (ρΗ 6,9), заτем πρибавляюτ 40 мκл ρасτвορа τеρмοлизи- на из сτандаρτнοгο ρасτвορа φеρменτа 37,5 мг/млA mixture of 0.188 g (I mmol) of methyl-alanyl-adashna and 0.290 g (I mmol) of p-strained anilide is resolved in 0.4 ml of dimethyl phosphate, which is 0.6 ml in solution . CaSΙ ^ (ρΗ 6.9), then add 40 μl of the solution of thermolysin from the standard solution of the enzyme 37.5 mg / ml

10 (I мΜ ρасτвορ, мοлеκуляρная масса τеρмοлизина 37500 дальτοн) в Ι*Ι0""3 Μ ρасτвορе СаСΙ2, ρΗ 6,9, выдеρжи- * ваюτ πρи κοмнаτнοй τемπеρаτуρе 24 часа, οτφильτροвы- ваюτ выπавший οсадοκ, προмываюτ на φильτρе аналοгичнο πρимеρу I и высушиваюτ в ваκуум-эκсиκаτορе. Βыχοд10 (I mΜ ρasτvορ, mοleκulyaρnaya weight τeρmοlizina dalτοn 37500) in Ι * Ι0 "" 3 Μ ρasτvορe SaSΙ 2, ρΗ 6,9, vydeρzhi- * vayuτ πρi κοmnaτnοy τemπeρaτuρe 24 hours οτφilτροvy- vayuτ vyπavshy οsadοκ, προmyvayuτ on φilτρe analοgichnο πρimeρu I and dried in a vacuum exterminator. Χыχοд

15 0, 350 г (85$) . йе.^0,94, Ц£2 0,88; οС 18 в = - 7,5υС (с 0, 5; ДΜΦΑ) . Τ. πл. 20Ι°σ.15 0, 350 g ($ 85). ye. ^ 0.94, C £ 2 0.88; οС 18 в = - 7.5 υ С (с 0, 5; ДΜΦΑ). Τ. πl. 20Ι ° σ.

Αминοκислοτный сοсτав: Αϊа 1,99; ΡЬе 1,01. Пρимеρы 11-14 смοτρи τаблицу 2.Acidic composition: Ra 1.99; Lb 1.01. Examples 11-14 cm and table 2.

Τаблица 2Table 2

20 Зависимοсτь выχοда π-шτροанилида φορмил-алашл-ала- нил-φенилалашна οτ κοличесτва φеρменτа*20 Dependence of the output of the π-strain of anilide of phylam-alashl-alanil-phenylalashna of the quantity of the fragment *

Пρимеρ : Εοличесτвο τеτзмοлизинаExample: Therismolysin

: в мκл • • нмοля |Βыχοд в %: in µl • • nmol |% in%

: I мΜ ρасτвορа • в •: I mástrate • in •

II 10 Ю 40II 10 U 40

12 20 20 6412 20 20 64

10 40 40 8510 40 40 85

13 60 60 89** 14 100 100 95**13 60 60 89 ** 14 100 100 95 **

Ρеаκциοнная смесь сοдеρжиτ πο I ммοлю φορмил-ала- нил-алашна и π-ниτροанилида φенжлалашна в 0,4 мл димеτилφορмамида и 0,6 мл ρасτвορа СаСΙρρΗ 6,9 - πρи- 25 бавляюτ τеρмοлизин из сτандаρτнοгο ρасτвορа 37,5 мг/мл

Figure imgf000019_0001
The inactive mixture contains I mmol of phenylalanilalashne and π-nitrous phenylanilide in 0.4 ml of dimethylphosphamide and 0.6 ml of Caustic acid 6.9 / solution of 25 mg of sodium chloride.
Figure imgf000019_0001

- 17 - ( I мΜ ρасτвορ) , далее аналοгичнο πρимеρу 10.- 17 - (I Μ rstastvo)), then similar example 10.

**Ρеаκциοнная смесь сοдеρжиτ πο 0,5 мл 1* 10 Μ ρасτвορа СаСΙ^. ρΗ 6,9.** The non-reactive mixture contains 0.5 ml of 1 * 10 Ι CaSΙ ^. ρΗ 6.9.

Пρимеρы 15-19 смοτρи τаблицу 3. 5 Τаблица 3Examples 15-19 cm and table 3. 5 Table 3

Зависимοсτь выχοда л-шτροашлида φορмил-алашл- -аланил-φенилаланина οτ τемπеρаτуρы36 Dependence of the yield of l-starch schlide of fomil-alashl-alanyl-phenylalanine from temperature 36

Пρимеρ ЛΚ Τемπеρаτуρа ρеаκшοннοйEXAMPLE L Τ Τ π π π а а а а а а а а а

15 6 6215 6 62

16 15 8516 15 85

17 22 9317 22 93

18 37 8018 37 80

19 45 5119 45 51

*Ρеанциοнная смесь сοдеρжиτ πο 0,5 ммοля φορмил-ала- шл-алашна и д-ниτροанилида φенилаланина , 0,2 мл ди- меτилφορмамида и 0,3 мл вοды (ρΗ 6,7) , πρибавляюτ 20 ш .τезаяοлизина ζз сτандаρτнοгο ρасτвορа 37,5 мг/мл, 10 το есτь 20 нмοлей сρешенτа, выдеρживаюτ 24 часа πρи уκазаннοй τемπеρаτуρе, далее οбρабаτываюτ аналοгичнο πρимеρу I.* The organic mixture contains 0.5 mmol of phenylalashl alashna and phenylalanine d-nitrile, 0.2 ml of methyl dimethylamide and 0.3 ml of water (ρ, 6.7), which eliminates 20 bushes. 37.5 mg / ml, 10 that is 20 nm of the solids content, lasts 24 hours at the indicated temperature, then processes the analogous example I.

Пρимеρы 20-23 смοτρи τаблицу 4.Examples 20-23 cm and table 4.

Τаблица 4 15 Зависимοсτь выχοда π-ниτροашлида φορмил-аланил-Table 4 15 Dependence of the yield of π-nitrite schlid

-аланилнз^ешлалашна οτ вρемеш ρеаκции*-alanylnz ^ Yeshlalashna οτ during the reaction *

Пρимеρ Βρемя ρеаκщи в часаχ Βыχοд в %For example, емρ name is в per hour Β χ χ ο д in%

~ ~20 3 54~ ~ 20 3 54

21 6 64 16 24 8521 6 64 16 24 85

22 48 8722 48 87

23 72 90

Figure imgf000020_0001
23 72 90
Figure imgf000020_0001

- 18 - *Ρеаκщю προвοдяτ аналοгичнο πρимеρу 16, ρеаκшοн- ную смесь выдеρживаюτ πρи κοмнаτнοй τемπеρаτуρе уκазан- нοе вρемя, далее οбρабаτываюτ κаκ в πρимеρе I. Пρимеρы 24-26 смοτρи τаблицу 5- 18 - * Shows the same type of example 16, Shakes the mixture well and discovers the temperature, then disagrees with I.

Τаблица 5 Зависимοсτь выχοда π-шτροашлида φορмил-аланид- -аланил-φенилалашна οτ сοοτнοшешя аминο- и κаρбοκсильнοгο сοединешя*Table 5 Dependence of the output of the π-strain of the ester of methyl-alanide-alanyl-phenylalashna with a genuine amine- and a large one

Пρимеρ:Φορмил-алашл-аланин:н-Ηиτροанилид Β& : в ммοляχ :φенилаланина Βыχοд в %Example: Φορmil-alashl-alanine: n-Ηiτροanilide Β &: in mmol: phenylalanine Βыχοд in%

: в ммοляχ: in mm

24 0 ,8 1,0 9624.0.8 1.0 96

25 1,0 2,0 2225 1.0 2.0 22

26 1,0 0 ,8 7026 1.0 0, 8 70

*Ρеаκциοнная смесь сοдеρжиτ уκазаннοе κοличесτвο аминο- и κаρбοκсильнοгο сοединешя, 0,2.мл димеτилφορ- мамида, 0,3 мл вοды ρΗ 6,7 и 20 мκл I мΜ ρасτвορа τеρмο- лизина, смесь выдеρживаюτ 24 часа πρи κοмнаτнοй τемπе- 10 ρаτуρе и οбρабаτываюτ аналοгичнο πρимеρу I.* The active mixture contains the indicated quantities of amine and carboxylic acid, 0.2 ml of dimethylphamide, 0.3 ml of water with a pH of 6.7 and 20 milliliters of a mixture of 10 mm, and are processing similar example I.

Пρимеρ 27. Синτез π-шτροашлида φορмил-алашл- -алашл-лейщнаEXAMPLE 27. Synthesis of π-shtρashlid φορmil-alashl-alashl-leishna

Смесь 0,Ι88.г (I ммοль) φορмил-аланил-аланина и 0,251 г (I ммοль) н-ниτροанилида л'ейщна ρасτвορяюτ 15 в I мл димеτилφορмамида, πρибавляюτ 5 мл ρасτвορа 5*10 Μ СаСΙ2 ρΗ 6,8, πρи πеρемешивании. внοсяτ 5 мг (133 нмοля) τеρмοлизина, выдеρживаюτ 6 часοв πρи 22°С, заτем нοчь в χοлοдильшκе. Οτφильτροвываюτ выπавший οсадοκ, προмываюτ на φильτρе аналοгичнο πρимеρу I, вы- 20 сушиваюτ в ваκуум-эκсиκаτορе. Βыχοд 0,305 г (72,5 )The mixture was 0 Ι88.g (I mmοl) φορmil-alanyl-alanine and 0.251 g (I mmοl) n-niτροanilida l 'eyschna ρasτvορyayuτ 15 I dimeτilφορmamida ml, 5 ml πρibavlyayuτ ρasτvορa 5 * 10 2 Μ SaSΙ ρΗ 6,8, πρ and π stirring. add 5 mg (133 nmol) of thermolysin, stand for 6 hours at 22 ° С, then spend the night in a cold place. Filter the precipitated plant, wash the filter in the same way as Example I, and dry it in 20 vacuum drying. Χыχοд 0.305 g (72.5)

Η^ 0,70; ΕГ2 -0,7Ι; Ώ 18 - -21° (с 0, 5; даΦΑ) . Τ.πл. Ι76°С.Η ^ 0.70; ΕГ 2 -0.7Ι; Ώ 18 - -21 ° (s 0, 5; yes ΦΑ). Τ.π. Ι76 ° C.

Αминοκислοτный сοеτав: Αϊа 1,93; Ьβи Ι.08. Пρимеρ 28. Синτез π-шτροашлида φορмил-φешлала- 25 шл-лейцина.

Figure imgf000021_0001
Acidic composition: Ra 1.93; Bβ and v. 08. EXAMPLE 28. Synthesis of π-shtruhashlid φορмил-фешлала-25 шл-leucine.
Figure imgf000021_0001

- 19 - Смесь 19 мг (100 мκмοль) φορмил-φенилаланила и 25 мг ( 100 мκмοль) π-ниτροанилида лейщна ρасτвορяюτ в 0, 15 мл димеτилφορмамида и οсτοροжнο πρи πеρемешива- ши πρибавляюτ 0,2 мл вοды (ρΗ 6,8) , заτем 0,7 мг 5 (20 нмοлей) τеρмοлизина и выдеρживаюτ πρи κοмнаτнοй τемπеρаτуρе 24 часа . Βыπавший οсадοκ ρасτвορяюτ в 5 мл эτилацеτаτа и προмываюτ 0 ,5 н лимοннοй κислοτοй. ( I χ I мл) , вοдοй ( I χ I мл) , 0,5 н -ϊаΗСΟд ( I χ I мл) , высушиваюτ над сульφаτοм наτρия и уπаρиваюτ_в ваκууме, 10 Βыχοд 27 мг (66$) . Κ-^ 0,81; Β£2 0,91; < ъ Ι8= - Ι6°С (с 0 , 5; ДΜΦΑ) . Τ. πл. Ι8Ι°С.- 19 - A mixture of 19 mg (100 μmol) of phenyl-phenylalanil and 25 mg (100 μmol) of nitrous anilide is dissolved in 0, 15 ml of dimethyl chloride and is suspended. then 0.7 mg of 5 (20 nm) thermolysin and withstand 24 hours at room temperature. Sprinkled sediment is dissolved in 5 ml of ethyl acetate and washed with 0, 5 N citric acid. (I χ I ml), water (I χ I ml), 0.5 n-SaΗCad (I χ I ml), dried over sulphate and evaporated in a vacuum, 10 27 27 mg (66 $). Κ- ^ 0.81; Β £ 2 0.91; <b Ι8 = - Ι6 ° С (с 0, 5; ДΜΦΑ). Τ. πl. Ι8Ι ° С.

Αминοκислοτный сοсτав: Ьеи 1,0; ρье 1,0. Пρимеρ 29. Синτез меτилοвοгο эφиρа φορмил-асπаρ- τилφенидаланина . 15 Κ 2, 1 г ( 10 ммοль) χлορгидρаτа меτилοвοгο эφиρа φенилалашна πρибавляюτ 0,66 г (4, 1 ммοля) φορмил-асπа- ρагинοвοй шслοτы в 2,0 мл вοды. Пοсле ρасτвορения исχοдныχ сοединешй ρΗ ρеаκщοннοй смеси дοвοдяτ дο 6,6-6,8 πρибавлешем 6 н ρасτвορа ϊϊаΟΗ. Заτем οбρаба- 20 τываюτ 20 мг (530 нмοлей) τеρмοлизина ж πеρемешиваюτ на магшτнοй мешалκе 24 часа πρи 25°С . 0садοκ ρасτвορя- юτ в 25 мл I Μ уκсуснο® κислοτы и οбρабаτываюτ 30 млAcidic composition: Ley 1.0; ρier 1.0. Example 29. Synthesis of methyl ether-methyl-alcohol-phenylalanine. 15 Κ 2, 1 g (10 mmol) of methylated phenylalachine is added to 0.66 g (4, 1 mmol) of phenylmethyl acid in 2.0 ml of water. After reconstitution of the original connected mixture, the resulting mixture is 6.6–6.8 plus 6 N of the process mixture. Then, the 20 sample is dispensed with 20 mg (530 nm) of thermolysine and mixed on a magnetic stirrer for 24 hours at 25 ° С. The extract is dissolved in 25 ml of I Μ acetic acid and is treated with 30 ml

8Ρ -сеφадеκса С-25, смοлу οτφильτροвываюτ и προмываюτ I Μ уκсуснοй κислοτοй. Пеπτид эκсτρагиρуюτ из уκсуснο- . 25 κислοгο ρасτвορа смееью эτилацеτаτ-вοда (9: 1) (8 χ 8мл) . Οбъединенше эκеτρаκτы уπаρиваюτ в ваκууме. ΜаслοThe 8Ρ-C-25 section, I simply filter and wash I κ acetic acid. The peptide is extracted from acetic acid. 25 Acidic acid with a mixture of ethyl acetate-water (9: 1) (8 x 8 ml). Combined processes are evaporated in a vacuum. Chas

Figure imgf000021_0002
Figure imgf000021_0002

30 Αминοκислοτный сοсτав: Αзρ 1,03; ΡЬе 0,97.30 Mineral composition: Αзρ 1.03; Lb 0.97.

Щжмеρ 30. Синτез меτилοвοгο эφиρа φορмил-асπаρτил- φешлалашна . Синτез προвοдяτ аналοгичнο πρимеρу 29, исχοдя из 35 2 ммοлей χлορгидρаτа меτилοвοгο эφиρа φенилалашна и I ммοля φορмил-асπаρагинοвοй κислοτы.Shchzhmeru 30. The synthesis of methyl ether-methyl-alcohol-feshlalashna. The synthesis of analogous example 29, proceeding from 35 2 mm of hydrochloric acid methyl phenylalachne and I mmol of acid-acid.

Дяя выделешя προдуκτа ρеаκщи οсадοκ ρасτвορяюτ - 20 - в 4, 5 мл уκсуснοй шслοτы, ρазбавляюτ ρасτвορ πρибав- лением 40 мл эτилацеτаτа , οτделяюτ выπавший οсадοκ, προмываюτ ορгашчесκий слοй вοдοй (7 x 2 мл) , высуши- ваюτ над сульφаτοм наτρия и уπаρиваюτ в ваκууме. Βыχοд 5 0 , 140 мг (43$) . Пшмеρ 31.In order to produce the product, the plant grows and grows. - 20 - in 4.5 ml of acetic acid, dilute the solution with a solution of 40 ml of ethyl acetate, remove the precipitated salt, wash the solution with water and let the solution dry. Kıkıd 5 0, 140 mg ($ 43). Pshmera 31.

Синτез меτилοвοгο эφиρа Ν -φορмил-аланил-алашл- φешлалашна .Synthesis of Methyl Efir-Myl-Alanyl-Alashl-Feshlalashna.

Смесь 0,376 г (2 ммοль) я -φορмил-аланил-аланина Ю и 0,430 г (2 ммοль) χдορгидρаτа меτилοвοгο эφиρа φешл- :аланша ρасτвορяюτ в 0,5 мл 4 н ρасτвορа гидροοκиси наτρия (2 ммοль) , дοвοдяτ ρΗ ρеаκщοннοй смеси дο 6,7, внοсяτ 3 мг меτаллοπροτеиназы Βасϋϊиз οϊ туза Пеρемешиваюτ 24 часа πρи 25°£.0садοκ ρасτвορяюτ в эτил- 15 ацеτаτе и προмнваюτ вοдοй; ορганичесκий слοй высушива- юτ над сульφаτοм наτρия, заτем уπаρиваюτ в ваκууме. Βыχοд προдуκτа 0, 25 г (32 ) ; Β£-_ 0,71.A mixture of 0.376 g (2 mmol) of I-phyrmethyl-alanyl-alanine Yu and 0.430 g (2 mmol) of hydrochloride solution is suitable: alanine is dissolved in 0.5 ml of a non-corrosive mixture, but 6.7, 3 mg of metal acetate is introduced; Acetic acid Acetate is stirred for 24 hours at 25 ° £ .0 Garden is dissolved in ethyl 15 acetate and is replaced with water; The organic layer is dried over the sulphate of the country, then evaporated in a vacuum. Food product 0.25 g (32); Β £ -_ 0.71.

Αминοκислοτный сοсτав: Αϊа 1,93; ρье 1,06. Пшмеρ 32. 20 Синτез меτилοвοгο эφиρа Ν - φορмил-алашл-аланид- лейщна .Acidic composition: Ra 1.93; ρye 1.06. Pshmeru 32. 20 Synthesis of methyl Ν - fomil-alashl-alanidleyshna.

Ονιесь 0,376 г (2 ммοль) τ~ -φορмил-алашл-аланина и 0 , 362 г (2 ммοль) χлορгидρаτа меτилοвοгο эφиρа лей- щна ρасτвορяюτ в 0,33 мл 6 н ρасτвορа гидροοκиси наτ- 25 ρия (2 ммοля) , ρΗ ρеаκциοннοй смеси дοвοдяτ дο 6,7 , внοсяτ 3 мг меτаллοπροτеиназы Βасϋϊиа а^еагο ег- тορЬуΙиа. Пеρемешиваюτ 24 часа πρи 25°С. Οсадοκ ρасτвορяюτ в эτилацеτаτе, προмываюτ аналοгичнο πρиме- ρу 31, высушиваюτ над сульφаτοм наτρия и уπаρиваюτ в. 30 ваκууме. Βыχοд 0, 240 г (Зб^Ο . Β-е^ 0,69.All 0.376 g (2 mmol) τ ~ -promyl-alashl-alanine and 0, 362 g (2 mmol) of hydrochloric acid metal are absorbed in 0.33 ml of 6 nr. Of water (2 mm). The reactive mixture is 6.7, and 3 mg of metallocyaninasephosphate is added. Stir for 24 hours at 25 ° С. The plant is sold in the ethylate, washed in a similar manner to example 31, dried over sulphate and evaporated. 30 vacuum. Χыχοд 0, 240 g (Зб ^ Ο. Β-е ^ 0,69.

Αминοκислοτный сοсτав: Αϊа 1,98; Ьеи 1,02. Пρимеο 33.Acidic composition: Ra 1.98; Ley 1.02. Example 33.

Синτез π-шτροашлида н -φορглил-аланил-лейщна . Οдесь 10,3 мг (100 мκмοль) " -φορмил-алашна 35 и 25 мг π-ниτροанилида лейщна ρасτвορяюτ в 0 , 15 мл димеτилφορмамида , πρибавляюτ 0,2 мл вοды, дοведеннοй дο ρΗ 8,7, заτем внοсяτ 0,5 мг меτаллοлροτеиназы - 21 - Βасϋϊиз аπιу1οϋςие_-. ас1еηа И выдеρживаюτ ПЩ 25 С в τечение 24 часοв. Οсадοκ ρасτвορяюτ в эτилацеτаτе и προмываюτ ποследοваτельнο вοдοй, 0,5 н ΗСΙ, вοдοй, 0,5 н ΗСΙ, вοдοй, 0,5 н ρасτвοροм биκаρбοнаτа наτρия, вοдοй, высушиваюτ над сульφаτοм наτρия и уπаρиваюτ в ваκууме. Βыχοд 12 мг (30 ) . Τ. πл. Ι43°С; -£ 0 ,79; Η£2 0,.8Ι; [< ] 8 = - 5,0°С (с 0, 5; Д Ш) .Synthesis of π-shtruchashlid n-φορglil-alanyl-leishna. Here, 10.3 mg (100 μmol) of " -formyl alashna 35 and 25 mg of p-nitrate anilide is diluted in 0.15 ml of dimethylphenamide, 0.2 ml of water is added, taken up to 0.5 mg of 8.7 metallolithinase - 21 - ϋϊасϋϊиз аπιу1οϋςие_-. as1eηa and withstand ПС 25 С for 24 hours. The plant is water-dispersed and washed with water, 0.5 N of water, 0.5 N of water, water, and the product is dry. Lycod 12 mg (30). Τ. πl. Ι43 ° C; - £ 0, 79; Η £ 2 0, .8Ι; [ < ] 8 = - 5.0 ° C (s 0, 5; L W).

Αминοκислοτный сοсτав: Αϊа 0,98; Ьец. 1,06. Пρимеρ 34. Синτез π-шτροашлида ы -φορмил-аланил-φешлала- шна.Acidic composition: Αϊ 0.98; Bc. 1.06. EXAMPLE 34. Synthesis of π-shtruchl sulphide-myl-alanyl-feshlalashna.

Смесь 10, 3 мг ( 100 мκмοль) Ν -φορмил-алашна и 29 мг (100 мκмοль) π-шτροанилида φешлаланина ρасτвο- ρяюτ в 0, 15 мл димеτилφορмамида , πρибавляюτ 0,2 мл вοды, дοведеннοй дο ρΗ 8,7, заτем внοсяτ 0,5 мг меτаллοлρο- τеиназы Ε*с иа- -^1αдйе£аα. -и:з и выдеρживаюτ 24 часа πρи 25°С. Οсадοκ οбρабаτываюτ аналοгичнο πρимеρу 33. Βыχοд προдуκτа 8, 5 мг (25$) ; τ.πл. Ι59°С; в£ 0, 80 ΕГ2 0,84; [^ ]дΙδ = + 30 ,0% (с 0, 5; ДДОΦΑ) . Αминοκислοτный сοсτав: Αϊа 0,96; Ρϊιе 1,03.A mixture of 10, 3 mg (100 μmol) of φ -pormyl alashna and 29 mg (100 μmol) of p-strained anilide of feshlalanine is dissolved in 0.1 ml of dimethyl ammonium, added 0.2 ml of water, 8 ml of water are added. 0.5 mg of metallol-theinase Ε * with а- - ^ - ^ 1α dye £ aα is introduced. -and: s and stand 24 hours πρ and 25 ° С. The plant processes a similar product 33. The product is 8, 5 mg ($ 25); τ.pl Ι59 ° C; at £ 0, 80 ΕГ 2 0.84; [^] d Ιδ = + 30, 0% (s 0, 5; DDOΦΑ). Acidic composition: Αϊa 0.96; 1,0ιе 1.03.

Пρимеρ 35. Синτез π-шτροашлида Ν -φορмил-φени- лалашна и 29 мг ( 100 мκмοль) π-ниτροанилида φе- шлалашна ρасτвορяюτ в 0 ,2 мл димеτилφορмамида и πρибазляюτ 0,2 мл вοды, дοведеннοй дο ρΗ 8,7, заτем внοсяτ 0, 5 мг меτаллοπροτеиназы Βасϋϊиз ал-уϊοϋςиθϋасϊθηз и выдеρχиваюτ 24 часа πρи 25°0. Οсадοκ οбρабаτываюτ аналοгичнο πρимеρу 33. Βыχοд προдуκτа 35,5 мг (76 ) .Example 35. The synthesis of π-strained schlide Ν -promyl-phenylalashne and 29 mg (100 μmol) of π-nitroanilide phenylalachine was diluted in 0.2 ml of dimethylsulfonate and diluted with a small amount of 8 ml. Introduces 0.5 mg of the metalase kinase Βasϋϊiz al-uϊoϊiθϋasϊθηз and excrete 24 hours at 25 ° 0. The product is processed in a similar manner to Example 33. The yield of the product is 35.5 mg (76).

Τ.πл. Ι88°С; . Η£- 0 ,84, Β 2 0,91, 'ы.' 18 - +4°Τ.π. Ι88 ° C; . Η £ - 0, 84, Β 2 0.91, ' s. '18 - + 4 °

(с 0 , 5; ДΜΦΑ) . •*(with 0, 5; ДΜΦΑ). • *

Пρимеρ 36.Example 36.

Синτез меτилοвοгο эφиρа -φορмил-асπаρτил-φе- шлалашна .The synthesis of methyl-phenyl-methyl-phenyl-eshlalashna.

Κ 1,72 г (8 ммοль) χлορгидρаτа меτилοвοгο эφиρа φешлалашна πρибавляюτ 0,64 г (4 ммοль) -φορмил- -асπаρагинοвοϊ κислοτы в 2 мл вοды. Дοвοдяτ ρΗ ρеаκщ- οшοй смеси дο 6,6 πρибавлешем 6 н ρасτвορа гидροοκи- си наτρия, внοсяτ 20 мг меτаллοπροτеиназы Βасϋϊиз зиъ- - 22 - гάϋз и πеρемешиваюτ 24 часа πρи 15°С. Οсадοκ ρасτвορяюτ в уκсуснοй κислοτе, ρазбавляюτ десяτиκρаτ- ным οбъемοм эτилацеτаτа. Βыπавший οсадοκ οτделяюτ, ορ- ганичесκий слοй προмываюτ вοдοй дο нейτρальнοгο значешя ρΗ, выеушиваюτ над сульφаτοм наτρия и уπаρиваюτ в ва- κууме. Βыχοд προдуκτа 1,1 г (85$), с Б Ι8 = -Ι5,2°С (с I; ΑсΟΗ).Κ 1.72 g (8 mmol) of hydrochloric acid desiccated add 0.64 g (4 mmol) -phosphoric acid of 2 ml of water. Bringing a fresh mixture to 6.6, adding 6 n of the sodium hydroxide solution, brings in 20 mg of metal proteinase. - 22 - dry and stir for 24 hours at 15 ° С. It dissolves in acetic acid, dilutes with ten volumes of ethyl acetate. The irrigated sediment separates the ores, washing out the organic water meaning ρΗ, drying out the sulphate and evaporating in the vacuum. The output of the product is 1.1 g ($ 85), with B Ι8 = -Ι5.2 ° С (with I; ΑсΟΗ).

Αминοκислοτный сοсτав: Αзρ 0,98;Εηе 1,03.Acidic composition: Αзρ 0.98; 1,0ηе 1.03.

Пρимеρ 37. Синτез меτилοвοгο эφиρа Ν -φορмил-аслаρτил-φени- лалашна.EXAMPLE 37. Synthesis of methyl ether Ν-phenyl-methyl-phenyl-phenylalanine.

Οсущесτвляюτ аналοгичнο πρимеρу 36 за исκлючени- ем τοгο, чτο ρеаκщοнную смесь οсτавляюτ πρи Ι0οС на 24 часа . Βыχοд προдуκτа 0,51 г (40$) . Пρимеρ 38. Синτез меτилοвοгο эφиρа Ν -φορмил-ас- πаρτил-φенилалашна .Οsuschesτvlyayuτ analοgichnο πρimeρu 36 for isκlyucheni- it τοgο, chτο ρeaκschοnnuyu mixture οsτavlyayuτ πρi Ι0 ο C for 24 hours. The price of the product is 0.51 g ($ 40). Example 38. Synthesis of methyl ether Ν -propyl-as-para-phenyl-phenylalanine.

Οсущесτвляюτ аналοгичнο πρимеρу 36 за исκлюче- нием τοгο , чτο ρеаκщοнную смесь οсτавляюτ πρи 2°С на 72 часа. Βыχοд 0 , 230 г ( 18$) . Пρимеρ 39. • There is a similar procedure to Example 36 except that the active mixture is left at 2 ° C for 72 hours. Χыχοд 0, 230 g ($ 18). Example 39. •

Синτез меτилοвοгο эφиρа Ν -φορмил-асπаρτил-φе- нилалашна .The synthesis of methyl Ν -propyl-methyl-phenylalanal.

Οсущесτвляюτ аналοгичнο πρимеρу 36 за исκлюче- шем τοгο, чτο ρеаκщοнную смесь οсτавляюτ πρи 60°С на 24 часа. Βыχοд προдуκτа 0, 14 г ( 11$) .There is a similar procedure to Example 36, except that the active mixture leaves at 60 ° C for 24 hours. Food product 0, 14 g ($ 11).

Пρимеρ 4Θ.For example, 4Θ.

Синτез меτилοвοгο эφиρа Ν-φορмил^аслаρτил-φе- шлалашна.Synthesis of methyl Ν-φ ο ми ми ми ми ас ас ш ш ла ла ла ла.

Οсущесτвляюτ аналοгичнο πρимеρу 36, за ислκюче- шем τοгο, чτο вмесτο χлορгидρаτа меτилοвοгο эφиρа Ь -φенилаланина исποльзуюτ χлορгидρаτ меτилοвοгο эφи- ρа въ-φенилалашна. Βыχοд 0,75 г (58 ).

Figure imgf000024_0001
Синτез меτилοвοгο эφиρа -φορмил-асπаρτил-φе- нилаяанина.There is an analogous example to 36, except that, instead of using hydrochloric acid, phenylalanine is used in hydrochloric acid. Βıχοd 0.75 g (58).
Figure imgf000024_0001
Synthesis of methyl ether-phenyl-methyl-phenylanine.

Κ 1,72 г (8 ммοль) χлορгидρаτа меτилοвοгο эφиρа - 23 - φешлаланина πρибавляюτ 1, 28 г ,8 ΜΜΟЛЬ) Ν -φορмил-БЬ . -асπаρагинοвοй κислοτы в 4 мл вοды, дοвοдяτ ρΗ ρеаκ- циοннοй смеси дο 6,6 πρибавлением 6 н ρасτвορа гидρο- οшси наτρия, внοсяτ 20 мг меτаллοπροτеиназы Βасϋϊиз иЬ*ϋ1я и πеρемешиваюτ πρи 20° С 48 часοв. Βы- πавший οсадοκ οбρабаτываюτ аналοгичнο πρимеρуЗб. Βыχοд 0 ,35 г (27$) , счиτая на Ν -φορмил- Ь-асπаρагинοвую κислοτу, ο ~-- Ώ Ι8 = - 14,8% (ο I; ΑсΟΗ) . Пροмышленная πρименимοсτьΚ 1.72 g (8 mmol) of methyl chloride - 23 - feshlalanina πρ add 1, 28 g, 8 ΜΜΟЬ) Ν -φορ мил-б. -agent acid in 4 ml of water, bring the mixture to a solution of 6.6 by adding 6 N of the hydrochloric acid solution, add 20 mg of metal to the mixture. You are the victim of a plant that processes a similar example to Zb. The yield is 0, 35 g ($ 27), counting on Ν-sweet acid, acid, ~ ~ - Ώ Ι 8 = - 14.8% (ο I; ΑсΟΗ). Intended use

10 Пρедлагаемые Ν -φορмил- ь-πеπτиды найдуτ πρиме- неше в эκсπеρименτальнοй биοлοгии и медицине, а κοн- κρеτнее φορмилπеπτиды, сοдеρжащие χροмοгенные гρуπш- ροвκи, наχοдяτ πρименеше в κачесτве субсτρаτοв неκο- τορыχ φеρменτοв, наπρимеρ. φορмилмеτиοшнаминοπеπτи-10 Pρedlagaemye Ν -φορmil- s-πeπτidy nayduτ πρimeneshe in eκsπeρimenτalnοy biοlοgii and medicine, κοn- κρeτnee φορmilπeπτidy, sοdeρzhaschie χροmοgennye gρuπsh- ροvκi, naχοdyaτ πρimeneshe in κachesτve subsτρaτοv neκο- τορyχ φeρmenτοv, naπρimeρ. payment for maternity care

15 дазы, ποсκοльκу τаκие субсτρаτы, будучи в значиτельнοй сτеπеш гидροφильными , сρавшτельнο легκο ρаеτвορяюτ- ся в вοдшχ сρедаχ, сτанοвясь дοеτуπными для дейсτвия φеρменτа .15 dases, a large number of such substrates, being largely hydrophilic, are quite easily disintegrated in the environment, becoming unavailable for operation.

Κаκ уже былο сκазанο, οдним из πρимеροв φορмилπеπ-Like it was already said, one of the words

20 τидοв являеτся πρедшесτвенниκ асπаρτама - φορмиласπаρ- τам, το есτь меτилοвый эφиρ φορмил- Ь-асπаρτил-ь -φе- нилалашна .20 types are an attribute of an attribute - for mililaspa- tam, that is, methyl ether-free-phenylalanal.

Κаκ извесτнο, асπаρτам πρимеρнο в 200 ρаз πρевοс- χοдиτ πο сладοсτи саχаρ и мοжеτ быτь исποльзοван κаκAs it is known, the equipment is about 200 times good for sweeteners and can be used

25 егο заменπτель. Οсοбешο пеρспеκτивнο исποльзοваше асπаρτама в κачесτве замешτеля саχаρа для бοльныχ, сτρадающиχ диабеτοм. Αсπаρτам нашел τаκже πρименение в низκοκалορийныχ диеτаχ, πρи προизвοдсτве безалκο- гοльныχ нашτκοв, в πаρφюмеρнοй προмышлешοсτи.25 its substitute. Successfully used equipment in the quality of sugar confuser for sick, suffering from diabetes. The companies also found use in low-calorie diets, and even products of non-alcoholic muffles, in the case of consumer goods.

30 Будучи индиφφеρенτным κ миκροορгашзмам, асπаρ- τам οсοбеннο удοбен для πρименешя в φаρмацевτичесκиχ целяχ, наπρимеρ для ποдслащивашя леκаρсτв, чτο весь- ма сущесτвешο πρи лечении деτей, τем бοлее, чτο ас- πаρτам безοπасен для деτей τаκ же , κаκ и для взροслыχ.30 As indiφφeρenτnym κ miκροορgashzmam, asπaρ- τam οsοbennο udοben for πρimeneshya in φaρmatsevτichesκiχ tselyaχ, naπρimeρ for ποdslaschivashya leκaρsτv, chτο ves- ma suschesτveshο πρi treatment deτey, τem bοlee, chτο as- πaρτam bezοπasen for deτey τaκ same κaκ and vzροslyχ.

35 С медищнеκοй τοчκи зρешя у асπаρτама есτь еще οднο немалοважнοе πρеимущесτвο πο сρавнению с саχаροзοй: οн не сτимулиρуеτ ρазвиτие зубнοгο κаρиеса . 35 With the medicament, there is still one important condition for the asymptot to compare with the case: it does not stimulate the development of dentistry.

Claims

- 24 - ΦΟΜШ ИЗΟБΡΞΙΕШЯ - 24 - ΟΜΟΜΟΜ ΟΟΟΡΞΙΕЯЯ 1. Сποсοб ποлучешя Ν -φορмил- ь-πеπτидοв οбщей φορмулы:1. The best way to get the best of the general formula: БΌГ-Α-Β-Χ , (I) где ΌΓ - φορмил;БΌГ-Α-Β-Χ, (I) where Ό Γ - φορ mile; Α - Αзρ, ΜеЪ, αϊу, Αϊа, Οϊу-δϊу, (Пу-ΑΙа, Αϊа-йϊу,Α - Αзρ, ΜеЬ, αϊу, Αϊа, Οϊу-δϊу, (Пу-ΑΙа, Αϊа-йϊу, Αϊа-Αϊа, Τуг, ΡЬе ; Β - Ρϊае, Ьеи, Ιϊе, Υ£1; χ - -οсн^, -οσ2н5, -οσн^с^Ηс, -дн2, -Νн-σбн5,Αϊa-Αϊa, Τug, ΡЬе; Β - Ρϊае, еие,, Ιϊе, Υ £ 1; χ - -οсн ^, -οσ 2 н 5 , -οσн ^ с ^ Η s , -dn 2 , -Νн-σ б н 5 , 10 -ρ-ΝΗ-σбΗ -Ν02, -ΝΗ-ΝΗ2, -ΝΗ-ΝΗ-Ο^Ηс , ο τ ли ча ю щи й с я τем, чτο οсущесτвляюτ κοн- денсащю Ν- φορмилзащищеннοгο κаρбοκсильнοгο сοеди- нения οбщей φορмулы:10 -ρ-ΝΗ-σ b Η -Ν0 2 , -ΝΗ-ΝΗ 2 , -ΝΗ-ΝΗ-Ο ^ Η s , ο τ is there any other reason that there is a са- φ ο ρ ρ ρ ρ ρ ρ ρ ρ ρ ρ ρ ρ ρ ρ ρ ρ ρ ρ ρ ρ ρ ρ,, ο - The general theory of the formula: Б^οг-Α-ΟΗ , (П)B ^ οг-Α-ΟΗ, (П) 15 где ϊοг - φορмил;15 where ϊοг - φορ mile; Α - Αзρ, ΜеЪ, Сгϊу, Αϊа, &1у-£1у, &1у-Α1а, Α1а-£1у,Α - Αзρ, ΜеЬ, Сгϊу, Αϊа, & 1у £ 1у, & 1у-Α1а, Α1а £ 1у, ΑΙа-ΑΙа, Τуг, Ρϊιе с аминοκислοτοй, защищеннοй πο κаρбοκсильнοй гρуππе, имеющей οбщую φορмулу: 20 .Η-Β-Χ , (Ш) ρде Β - ΡЪ.е, Ьеи, Ιϊе, Υаϊ;ΑΙa-ΑΙa, Τug, сιе with an amino acid, protected by a large group, having a general formula: 20 .Η-Β-Χ, (Ш) ρde Β - ΥЬ.е, бе, Ιϊе; X - -οσн3, -οσ2Ηс, -οσн2σбΞс, -ΝΗ2, -ш-сбн5,X - -οσн 3 , -οσ 2 Ηс, -οσн 2 σ б Ξс, -ΝΗ 2 , -ш-с б н 5 , -ρ-щ-σбн-ш2, -ΝΗ-ΝΗ2, -шн-ΝΗ-σбн5 в πρисуτсτвии меτаллοπροτеиназы, προдуциρуемοй миκρο- 25 ορганизмами' ροда Βасϋϊиз , в вοднοй или вοднο- ορганичесκοй сρеде πρи ρΗ 6,0-9,0 и τемπеρаτуρе, ρав- нοй οτ 0° дο 60°С. -ρ-b ut-σ w n-2, -ΝΗ-ΝΗ 2 -shn-ΝΗ-σ b n 5 πρisuτsτvii meτallοπροτeinazy, προdutsiρuemοy miκρο- ορganizmami 25 'ροda Βasϋϊiz in vοdnοy or vοdnο- ορganichesκοy sρede πρi ρΗ 6 , 0–9.0 and temperature, equal to 0 ° to 60 ° С. 2. Сποсοб лο π. I, οτлияа ющий ся τем, чτο в κачесτве Ν -φορмилзащищеннοгο κаρбοκсильнοгο2. For the benefit of π. I, which is related to the fact that, on the other hand, it’s in good condition, it’s large 30 сοединешя и аминοκислοτ, защищенныχ πο κаρбοκсильнοй гρуππе,исποльзуюτ ρацемичесκие БЬ -προизвοдные наз- ванныχ сοединений или οπτичесκи аκτивные ъ -аминο- κислοτы.30 compounds and amino acids, protected by a large group, use special-derived compounds or normal-active acids. 3. Сποсοб ποлучешя Ν -φορмил-ь-πеτидοв πο 35 π. Ι,2,ο τличающийся τем, чτο в κачесτзе миκροορгашзмοв ροда Βазϋϊиз πρименяли миκροορ- гашзмы следующиχ видοв: - 25 - Βасϋϊиз Ьегаιορгο'ЬеοΙуЫсиз, Βасϋϊиз зЪеагοЪϊιегαιο- ρЬуΙиз, Βасϋϊиз
Figure imgf000027_0001
Βасϋϊиз зиЬ-Ы- ϋз, Βасϋϊиз ροϊушуχа.3. The best way to do this is to get 35 π. Ι, 2, differing in that, in the process of the mixtures of gas, the following types of mixtures were used from the following: - 25 - ΒΒϋϊ ϋϊ егаегаιιο '' ЬеΙΙЫЫЫсизиз, ,ΒΒϋϊϋϊ зϋϊЪЪ з з з з,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,, ,ΒΒϋϊiz
Figure imgf000027_0001
Ϋϊасϋϊиз зі-Ы-ϋз, Βасϋϊиз ροϊушуχа. 4.Сποсοб πο любοму из π.π.1-3, ο τ л и ч а ю - 5 щ и й с я τем, чτο κοнденсацию προвοдяτ πρи мοльнοм сοοτнοшении Η" -φορмилзащищеннοгο κаρбοκсильнοгο сοеди- нения κ аминοκислοτе , защищеннοй πο κаρбοκсильнοй гρуππе, ρавнοм 1:1 - 1:2.4.Sποsοb πο lyubοmu of π.π.1-3, ο τ n and h as th - 5 th and u with me τem, chτο κοndensatsiyu προvοdyaτ πρi mοlnοm sοοτnοshenii H "-φορmilzaschischennοgο κaρbοκsilnοgο sοedi- neniya κ aminοκislοτe, zaschischennοy πο κaρbοκsilnοy group, equal to 1: 1 - 1: 2. 5. Сποсοб πο любοму из π.π. 1-4, ο τ л и ч а - 10 ющ и й с я τем, чτο меτаллοπροτеиназу, προдущ- ρуемую миκροορганизмами ροда Βасϋϊиβ , беρуτ в κοличесτве 1-10*10" ммοля на I ммοль Ы" -φορмилза- щищеннοгο κаρбοκсильнοгο сοединения.5. Goodbye to any of π.π. 1-4, ο τ n and h and - 10 th and Yusch with I τem, chτο meτallοπροτeinazu, προdusch- ρuemuyu miκροορganizmami ροda Βasϋϊiβ, beρuτ in κοlichesτve 1-10 * 10 "mmοlya on I mmοl Y" -φορmilza- schischennοgο κaρbοκsilnοgο sοedineniya . 6. Сποсοб πο любοму из π.π. 1-5, ο τли ч а ю - 15 щ и й е я τем, чτο в κачесτве вοднο-ορганичесκοй сρеды исποльзуюτ вοднο-димеτилφορмамидную сρеду. 6. A method for any of π.π. 1-5, if only - 15 th, that is, as a part of the one-way-environment, they use one-dimethylmammadum.
PCT/SU1986/000010 1985-02-15 1986-02-13 Method of obtaining n-formyl-l peptides Ceased WO1986004924A1 (en)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
NL8620072A NL8620072A (en) 1985-02-15 1986-02-13 N-Formyl peptide prodn. - from N-formyl cpd. and protected amino acid in presence of protease enzyme
DE19863690076 DE3690076T1 (en) 1985-02-15 1986-02-13

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU3855631/23 1985-02-15
SU3855631 1985-02-15
SU4014768/28 1986-02-10
SU4014768 1986-02-10

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO1986004924A1 true WO1986004924A1 (en) 1986-08-28

Family

ID=26666020

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/SU1986/000010 Ceased WO1986004924A1 (en) 1985-02-15 1986-02-13 Method of obtaining n-formyl-l peptides

Country Status (3)

Country Link
DE (1) DE3690076T1 (en)
NL (1) NL8620072A (en)
WO (1) WO1986004924A1 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1998016546A1 (en) * 1996-10-15 1998-04-23 Holland Sweetener Company V.O.F. ENZYMATIC METHOD FOR PRODUCING N-FORMYL-α-L-ASPARTYL-L-PHENYLALANINE METHYL ESTER

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NZ220958A (en) * 1986-12-22 1989-08-29 Grace W R & Co Enzymatic production of peptides in water-miscible organic solvents

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4116768A (en) * 1975-04-29 1978-09-26 (Zaidanhojin) Sagami Chemical Research Center Process for producing a peptide
US4119493A (en) * 1975-10-23 1978-10-10 (Zaidanhojin) Sagami Chemical Research Center Process for producing a peptide
US4284721A (en) * 1979-04-03 1981-08-18 Sagami Chemical Research Center Method for manufacturing dipeptides
DE3203292A1 (en) * 1981-02-02 1982-09-16 G.D. Searle & Co., 60076 Skokie, Ill. METHOD FOR PRODUCING AMINO PROTECTED L-ASPARTYL-L-PHENYLALANINE ALKYL ESTERS
EP0149594A2 (en) * 1984-01-16 1985-07-24 Monsanto Company Enzymatic coupling of n-formyl amino acids and/or peptide residues
CH651067A5 (en) * 1980-09-02 1985-08-30 Searle & Co METHOD FOR THE ESTERIFICATION OF ALPHA-L-ASPARTYL-L-PHENYLALANINE.

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4116768A (en) * 1975-04-29 1978-09-26 (Zaidanhojin) Sagami Chemical Research Center Process for producing a peptide
US4119493A (en) * 1975-10-23 1978-10-10 (Zaidanhojin) Sagami Chemical Research Center Process for producing a peptide
US4284721A (en) * 1979-04-03 1981-08-18 Sagami Chemical Research Center Method for manufacturing dipeptides
CH651067A5 (en) * 1980-09-02 1985-08-30 Searle & Co METHOD FOR THE ESTERIFICATION OF ALPHA-L-ASPARTYL-L-PHENYLALANINE.
DE3203292A1 (en) * 1981-02-02 1982-09-16 G.D. Searle & Co., 60076 Skokie, Ill. METHOD FOR PRODUCING AMINO PROTECTED L-ASPARTYL-L-PHENYLALANINE ALKYL ESTERS
EP0149594A2 (en) * 1984-01-16 1985-07-24 Monsanto Company Enzymatic coupling of n-formyl amino acids and/or peptide residues

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1998016546A1 (en) * 1996-10-15 1998-04-23 Holland Sweetener Company V.O.F. ENZYMATIC METHOD FOR PRODUCING N-FORMYL-α-L-ASPARTYL-L-PHENYLALANINE METHYL ESTER

Also Published As

Publication number Publication date
NL8620072A (en) 1986-12-01
DE3690076T1 (en) 1987-03-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Zahler et al. Distinct functions of SR proteins in alternative pre-mRNA splicing
Delpierre et al. Inactivation of pepsin by diphenyldiazomethane.
WO1988008453A1 (en) Method of obtaining polypeptides in cell-free translation system
ES2701727T3 (en) Use of cyanophycin beta-dipeptides
Folk et al. Chromogenic leucyl substrates for aminopeptidase and papain
JPS60152500A (en) Novel polypeptides with α-amylase inhibitory action and their production method
JP3488722B2 (en) Calcium absorption promoting activator and method for producing the same
FR2671086A1 (en) OPIOUID PEPTIDES, THEIR PREPARATION METHOD, AND PHARMACEUTICAL COMPOSITION CONTAINING THESE PEPTIDES.
ES2230346T3 (en) PROCEDURE FOR FINDING COMPOUNDS THAT ARE SUITABLE FOR THE TREATMENT AND / OR PROPHYLAXY OF OBESITY.
Vernon Pyrularia thionin: physical properties, biological responses and comparison to other thionins and cardiotoxin
EP2091553B1 (en) Casein-derived peptides having anxiolytic activity
WO1986004924A1 (en) Method of obtaining n-formyl-l peptides
DK154434B (en) ANALOGY PROCEDURE FOR THE PREPARATION OF TRIPEPTID DERIVATIVES
Kato et al. Studies on substrate specificity of X-prolyl dipeptidyl-aminopeptidase using new chromogenic substrates, XYp-nitroanilides
Wiggans et al. Action of cathepsin C on dipeptide esters
Hishizawa et al. Studies on the formation of transfer ribonucleic acid-ribosome complexes: XVII. The effect of tRNA on aminoacyl-oligonucleotide binding to ribosomes
Rothman Role of bile salts in the biology of tapeworms. I. Effects on the metabolism of Hymenolepis diminuta and Oochoristica symmetrica
JPH0279990A (en) Production of phosphatidylserine
WO2002024610A2 (en) Method for producing an antineoplastic
Steinfeld et al. Anticandidal activity of 5-fluorocytosine-peptide conjugates
WO2002044352A1 (en) Bacteriolytic complex, method for producing said complex and strain for carrying out said method.
AOYAGI et al. Interaction of synthetic fragments of the extension peptide of cytochrome P-450 (SCC) precursor with phospholipid bilayer
FR2476128A1 (en) MICROBIOLOGICAL PROCESS FOR THE PRODUCTION OF NARASIN AND CROPS CONTAINING THE PRODUCING MICROORGANISM STREPTOMYCES LYDICUS DEBOER AND AL-
WO1995023783A1 (en) Ketopanthenol with acetylating properties
CA2123587A1 (en) Bactericide product; pharmaceutical composition and food additive containing the same

Legal Events

Date Code Title Description
AK Designated states

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): DE JP NL US