[go: up one dir, main page]

UA130036C2 - Спосіб лікування стійкого до інгібітору cdk4/6 раку - Google Patents

Спосіб лікування стійкого до інгібітору cdk4/6 раку

Info

Publication number
UA130036C2
UA130036C2 UAA202103017A UAA202103017A UA130036C2 UA 130036 C2 UA130036 C2 UA 130036C2 UA A202103017 A UAA202103017 A UA A202103017A UA A202103017 A UAA202103017 A UA A202103017A UA 130036 C2 UA130036 C2 UA 130036C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
elacestrant
estrogen receptor
cancer
subject
receptor alpha
Prior art date
Application number
UAA202103017A
Other languages
English (en)
Inventor
Хітіша Пател
Хитиша Пател
Тееру Біхані
Тееру Бихани
Хейке Арлт
Ніанджун Тао
Нианджун Тао
Original Assignee
Радіус Фармасеутікалс, Інк.
Радиус Фармасеутикалс, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Радіус Фармасеутікалс, Інк., Радиус Фармасеутикалс, Инк. filed Critical Радіус Фармасеутікалс, Інк.
Publication of UA130036C2 publication Critical patent/UA130036C2/uk

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/01—Hydrocarbons
    • A61K31/015—Hydrocarbons carbocyclic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/135—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline
    • A61K31/137—Arylalkylamines, e.g. amphetamine, epinephrine, salbutamol, ephedrine or methadone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/135—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline
    • A61K31/138—Aryloxyalkylamines, e.g. propranolol, tamoxifen, phenoxybenzamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4196—1,2,4-Triazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/565—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, estradiol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/565—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, estradiol
    • A61K31/566—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, estradiol having an oxo group in position 17, e.g. estrone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6883—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material
    • C12Q1/6886—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material for cancer
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/106—Pharmacogenomics, i.e. genetic variability in individual responses to drugs and drug metabolism
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/158—Expression markers

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

Винахід стосується способу лікування позитивного за естрогеновими рецепторами альфа, стійкого до інгібіторів CDK4/6 раку у суб'єкта, що має або ж естрогеновий рецептор альфа дикого типу й/або ж мутантний естрогеновий рецептор альфа, причому спосіб передбачає введення суб'єкту терапевтично ефективної кількості елацестранту, причому мутантний естрогеновий рецептор альфа містить одну або декілька мутацій, вибраних з групи, що складається з D538G, Y537X1, L536X2, P535H, V534E, S463P, V392I, E380Q і їх комбінацій, де: X1 являє собою S, N або C; а X2 являє собою R або Q.

Description

Посилання на родинні заявки
Згідно з даною заявкою заявляється пріоритет за 35 0.5.С. 5 119(е) за попередньою заявкою на видачу патенту США Мо 62/776323, поданою 6 грудня 2018 року. Весь зміст вищезгаданої заявки таким чином в усій своїй повноті включено за допомогою посилання, в тому числі креслення.
Галузь техніки, до якої належить даний винахід
Даний винахід належить до способів забезпечення протипухлинної активності із застосуванням елацестранту на стійких до інгібіторів СОК4/6 моделях раку, що несуть мутації ЕЗК1. Даний винахід також належить до способів лікування естроген-позитивних (ЕК) форм раку, що мають мутації ЕЗАК1, які можуть сприяти розвитку стійкості до інгібіторів СОК4/б, якщо рак лікують із застосуванням елацестранту.
Рівень техніки
Рак молочної залози ділиться на три підтипи за експресією трьох рецепторів: естрогенового рецептора (ЕК), прогестеронового рецептора (РК) і рецептора-2 епідермального фактора росту людини (Нег2). Надекспресія ЕК виявляється у багатьох пацієнтів з раком молочної залози. ЕК- позитивний (ЕК) рак молочної залози становить дві третини всіх випадків раку молочної залози. Крім раку молочної залози, естроген і ЕК пов'язані, наприклад, з раком яєчників, раком товстої кишки, раком передміхурової залози й раком ендометрія.
ЕК можуть бути активовані естрогеном і переміщаються в ядро для зв'язування з ДНК, таким чином регулюючи активність різних генів. Див., наприклад, Магіпо еї аї., "Евігодеп Зідпаїйпд Мийріе
РаїШуауз о Ітрасі Сепе Тгапзсгіріоп," Си. Сбепотісв 7(8): 497-508 (2006); і Неїагіпо еї аї., "Евігодеп
Кесеріоге: Ном бо Тпеу 5ідпаї апа УуУнаї Аге ТНеїг Тагдеїв5," Рпувзіої!. Кем. 87(3): 905-931 (2007).
Засоби, що пригнічують вироблення естрогену, такі як інгібітори ароматази (АЇ, наприклад, летрозол, анастрозол і екземестан), або засоби, які безпосередньо блокують активність ЕК, такі як селективні модулятори естрогенових рецепторів (5ЕКМ, наприклад, тамоксифен, тореміфен, дролоксифен, ідоксифен, ралоксифен, лазофоксифен, арзоксифен, міпроксифен, левормелоксифен і
ЕМ-652 (5СН 57068)) і селективні деструктори естрогенових рецепторів (5ЕКО, наприклад, фулвестрант, ТТА5-108 (5К16234), 7К191703, КО58668, 5000-0810 (АКМ-810), СМУ5638/ОРС974, 5АМ-927, ІСІ182780 ії А209496), застосовувалися і раніше або перебувають на стадії розробки для лікування ЕК-позитивних форм раку молочної залози.
ЗЕКМ ії АЇ часто застосовують як допоміжну системну терапію першої лінії під час лікування ЕК- позитивного раку молочної залози. АІ пригнічують продукування естрогену в периферичних тканинах шляхом блокування активності ароматази, яка перетворює андроген на естроген в організмі. Однак АЇ не можуть зупинити вироблення естрогену яєчниками. Тому АІ в основному застосовують для лікування жінок в постменопаузі. Крім того, оскільки А! більш ефективні, ніж такий 5ЕКМ, як тамоксифен, з меншою кількістю серйозних побічних ефектів, АЇ також можна застосовувати для лікування жінок у передменопаузі з пригніченою функцією яєчників. Див., наприклад, Егапсів еї аї., "Адіимапі Омагіап З,ирргеззіоп іп Ргетепорашизаї Вгеазі Сапсег," Ше М. Епаї. У. Мед., 372:436-446 (2015).
Стійкість до ендокринної терапії є складним аспектом ведення пацієнтів з раком молочної залози, позитивним за естрогеновими рецепторами (ЕК). У недавніх дослідженнях було продемонстровано, що набута стійкість може розвиватися після лікування інгібіторами ароматази внаслідок появи мутацій в гені естрогенового рецептора 1 (Е5КІ1). Іншим механізмом, пов'язаним з розвиненою де помо і набутою стійкістю, є адаптивна активація паралельних сигнальних шляхів факторів росту, а також взаємовплив між такими шляхами, в тому числі шляхами, які сприяють експресії цикліну 01 і активації циклінзалежної кінази 4 (СОК4) і СОКб (СОКаУ/6). Хоча початкове лікування такими засобами може й бути успішним, у багатьох пацієнтів зрештою виникає рецидив з розвитком стійких до лікарського засобу форм раку молочної залози. Як один з можливих механізмів розвитку такої стійкості є поява мутацій, які впливають на ЕК. Див., наприклад, Кобіпзоп еї аї!., "Асіїмайпд Е5К1 тшаїйопз іп погтопе- гезівіапі теїазіаййс Бгеаві сапсег, Маї Сепеї. 45:1446-51 (2013). Мутації в ліганд-зв'язуючому домені (ВО) ЕК виявляють у 20-40 95 зразків метастатичних ЕК-позитивних пухлин молочної залози, отриманих від пацієнтів, які отримували щонайменше одну лінію ендокринного лікування. УезеїЇвопп, еї а!.,, "ЕЗКІ тшиайопвз-а теспапізт їог асдцігей епдосгіпе гезізіапсе іп Ббгеазі сапсег, Маї. Кеу. Сіїіп.
Опсої., 12:573-83 (2015).
Отже, залишається потреба в більш надійних і ефективних націлених на ЕК засобах терапії для подолання деяких недоліків, пов'язаних з сучасними ендокринними засобами терапії, та для боротьби з розвитком стійкості до СОКА/б.
Коротке розкриття даного винаходу
За одним аспектом, даний винахід належить до способу інгібування й ослаблення стійкого до інгібіторів СОК4/6, позитивного за естрогеновими рецепторами-альфа раку у суб'єкта, який передбачає введення суб'єкту терапевтично ефективної кількості елацестранту або його фармацевтично прийнятної солі або сольвату.
Варіанти здійснення даного аспекту даного винаходу можуть включати одну або декілька з представлених далі додаткових ознак. Згідно з деякими варіантами здійснення, стійкий до інгібіторів
СОК4/6, позитивний за естрогеновими рецепторами-альфа рак є стійким до палбоциклібу, рибоциклібу, абемациклібу або їх комбінації. Згідно з деякими варіантами здійснення, стійкий до інгібіторів СОК4/6б, позитивний за естрогеновими рецепторами-альфа рак є стійким до палбоциклібу.
Згідно з деякими варіантами здійснення, стійкий до інгібіторів СОК4/6б, позитивний за естрогеновими рецепторами-альфа рак є стійким до рибоциклібу. Згідно з деякими варіантами здійснення, стійкий до інгібіторів СОК4/6б, позитивний за естрогеновими рецепторами-альфа рак є стійким до абемациклібу.
Згідно з деякими варіантами здійснення, стійкий до інгібіторів СОК4/6б, позитивний за естрогеновими рецепторами-альфа рак характеризується однією або декількома мутаціями, вибраними з групи, що складається з 05380, У537Х:, 1 536Х», Р5З5Н, М534Е, 5463Р, М392І, ЕЗ800О і їх комбінацій, де: Хі являє собою 5, М або С; а Хо являє собою К або С). Згідно з деякими варіантами здійснення, мутація являє собою У5375. Згідно з деякими варіантами здійснення, мутація являє собою 05380. Згідно з деякими варіантами здійснення, стійкий до інгібіторів СОК4/б, позитивний за естрогеновими рецепторами-альфа рак є стійким до лікарського засобу, вибраному з групи, що складається з антиестрогенів, інгібіторів ароматази та їх комбінацій. Згідно з деякими варіантами здійснення, стійкий до інгібіторів СОК4/6, позитивний за естрогеновими рецепторами-альфа рак є вибраним з групи, що складається з раку молочної залози, раку матки, раку яєчників і раку гіпофіза. Згідно з деякими варіантами здійснення, стійкий до інгібіторів СОК4/6б, позитивний за естрогеновими рецепторами- альфа рак являє собою рак на пізній стадії або метастатичний рак молочної залози. Згідно з деякими варіантами здійснення, стійкий до інгібіторів СОК4/6б, позитивний за естрогеновими рецепторами- альфа рак являє собою рак молочної залози. Згідно з деякими варіантами здійснення, суб'єктом є жінка в постменопаузі. Згідно з деякими варіантами здійснення, суб'єктом є жінка в передменопаузі.
Згідно з деякими варіантами здійснення, суб'єктом є жінка в постменопаузі, в якої був рецидив або прогресування після попереднього лікування селективними модуляторами естрогенових рецепторів (ЗЕКМ) і/або інгібіторами ароматази (А). Згідно з деякими варіантами здійснення, елацестрант вводять суб'єкту в дозі від приблизно 200 мг/доба до приблизно 500 мг/доба. Згідно з деякими варіантами здійснення, еєлацестрант вводять суб'єкту в дозі приблизно 200 мг/доба, приблизно 300 мг/доба, приблизно 400 мг/доба або приблизно 500 мг/доба. Згідно з деякими варіантами здійснення, елацестрант вводять суб'єкту в дозі, яка є максимально стерпною дозою для суб'єкта. Згідно з деякими варіантами здійснення, спосіб додатково передбачає ідентифікацію суб'єкта для лікування шляхом вимірювання підвищеної експресії одного або декількох генів, вибраних з АВІ 1, АКТІ, АКТ2,
АЇК, АРС, АК, АКІОТА, АБ5ХІТ, АТМ, АОККА, ВАР, ВАРІ, ВСІ2111, ВСЕ, ВЕКАЕ, ВКСАТ1, ВЕСАЗ2,
СсССМО1, ССМО2, ССМОЗ, ССМЕ1, СОНІ, СОК4А, СОКб6, СОКв, СОКМІА, СОКМ1В, СОКМ2А, СОКМ2В,
СЕВРА, СТММВІ, 0ОК2, ОММТЗА, Е2ЕЗ, ЕСЕК, ЕМІ4, ЕРНВ2, ЕКВВ2, ЕКВВЗ, ЕБКІ, ЕМУЗК1,
ЕВХУМУ7, ЕОЕ4, ЕСЕКІ, ЕСЕК2, ЕСЕКЗ, БІ Т3, ЕК52, НІЕТА, НКАЗ, ІСНІ, ІОН2, ІСЕТК, ЗАК2, КОМБбА,
КОК, КІЕ5В, КІТ, ККА5, ГКРІВ, МАР2КІ, МАР2К4, МСГ 1, МОМ2, МОМ4, МЕТ, МОМТ, МІ, МРІ.,
МЗНб, МТОК, МУС, МЕТ, МЕ2, МКХ2-1, МОТСНІ, МРМ, МЕА5, РОСЕКА, РІКЗСА, РІКЗК/1, РМІ, РТЕМ,
РТРКБ, КАКА, КВІ1, КЕТ, КІСТОК, КОБ51, КЕРТОК, КОМХІТ, ЗБМАОЯ4, МАКСА, 5ОХ2, ЗТКІ11, ТЕТ2,
ТРБЗ, Т5С1, 5502 ії МНІ.. Згідно з деякими варіантами здійснення, один або декілька генів вибрані з
АКТІ, АКТ2, ВКАЕ, СОК4, СОКб, РІКЗСА, РІКЗК! і МТОК. Згідно з деякими варіантами здійснення, співвідношення концентрації елацестранту або його солі або сольвату в пухлини до концентрації елацестранту або його солі або сольвату в плазмі (Т/Р) після введення становить щонайменше приблизно 15.
За іншим аспектом, даний винахід належить до способу лікування позитивного за естрогеновими рецепторами-альфа, стійкого до інгібіторів СОК4/б раку у суб'єкта, що має естрогеновий рецептор- альфа дикого типу й/(або мутантний естрогеновий рецептор-альфа, причому спосіб передбачає введення суб'єкту терапевтично ефективної кількості елацестранту або його фармацевтично прийнятної солі або сольвату, причому мутантний естрогеновий рецептор-альфа містить одну або декілька мутацій, вибраних з групи, що складається з 05380, У537Х1, 1 536Х», Р5З5Н, М534Е, 5463Р,
М3921І, ЕЗ3800О і їх комбінацій, де: Хі: являє собою 5, М або С; а Хо являє собою К або 0.
Варіанти здійснення даного аспекту даного винаходу можуть включати одну або декілька з представлених далі додаткових ознак. Згідно з деякими варіантами здійснення, стійкий до інгібіторів
СОК4/6, позитивний за естрогеновими рецепторами-альфа рак є стійким до палбоциклібу, рибоциклібу, абемациклібу або їх комбінації. Згідно з деякими варіантами здійснення, стійкий до інгібіторів СОК4/6б, позитивний за естрогеновими рецепторами-альфа рак є стійким до палбоциклібу.
Згідно з деякими варіантами здійснення, стійкий до інгібіторів СОК4/6, позитивний за естрогеновими рецепторами-альфа рак є стійким до рибоциклібу. Згідно з деякими варіантами здійснення, стійкий до інгібіторів СОК4/6б, позитивний за естрогеновими рецепторами-альфа рак є стійким до абемациклібу.
Згідно з деякими варіантами здійснення, рак є стійким до лікарського засобу, вибраному з групи, що складається з антиестрогенів, інгібіторів ароматази та їх комбінацій. Згідно з деякими варіантами здійснення, антиестрогени вибрані з групи, що складається з тамоксифену, тореміфену й фулвестранту, а інгібітори ароматази вибрані з групи, що складається з екземестану, летрозолу й анастрозолу. Згідно з деякими варіантами здійснення, стійкий до інгібіторів СОК4/6б, позитивний за естрогеновими рецепторами-альфа рак є вибраним з групи, що складається з раку молочної залози, раку матки, раку яєчників і раку гіпофіза. Згідно з деякими варіантами здійснення, рак являє собою рак на пізніх стадіях або метастатичний рак молочної залози. Згідно з деякими варіантами здійснення, рак являє собою рак молочної залози. Згідно з деякими варіантами здійснення, суб'єктом є жінка в постменопаузі. Згідно з деякими варіантами здійснення, суб'єктом є жінка в передменопаузі. Згідно з деякими варіантами здійснення, суб'єктом є жінка в постменопаузі, в якої був рецидив або прогресування після попереднього лікування за допомогою 5ЕКМ і/або АїЇ. Згідно з деякими варіантами здійснення, у суб'єкта експресується щонайменше один мутантний естрогеновий рецептор-альфа, вибраний з групи, що складається з 5380, 5375, У537М, У537С, ЕЗ8ОО, 5463Р,
І 5З6К, 15360, Р5З5Н, М3921І ї М534Е. Згідно з деякими варіантами здійснення, мутація включає 5375.
Згідно з деякими варіантами здійснення, мутація включає 05380. Згідно з деякими варіантами здійснення, спосіб додатково передбачає ідентифікацію суб'єкта для лікування шляхом вимірювання підвищеної експресії одного або декількох генів, вибраних з АВІ 1, АКТІ, АКТ2, АГ К, АРС, АК, АКІОТА,
АБХІ1, АТМ, АШККА, ВАР, ВАРІ, ВСІ2111, ВСК, ВКАЕ, ВКСАТ, ВКСА2, ССМО1, ССМО2, ССМОЗ,
ССМЕ1, СОНІ, СОК4, СОКб6, СОК8, СОКМІА, СОКМ1В, СОКМ2А, СОКМ2В, СЕВРА, СТММВ1, ОК,
ОММТЗА, Е2ЕЗ, ЕСЕК, ЕМІ 4, ЕРНВ2, ЕКВВ2, ЕКВВЗ, Е5К1, ЕМУ5КІ1, ЕВХМУ7, ЕСЕ4, ЕСЕКІ1, ЕСЕ,
ЕСЕКЗ, БІ Т3, ЕКЗ2, НІЕТА, НКА5Б, ІОСНТІ, ІОН, ІСЕТЕ, УЗАК2, КОМбА, КОК, КІЕБВ, КІТ, ККА5, І КЕРІВ,
МАР2КІ1, МАР2К4, МСІ 1, МОМ2, МОМА4, МЕТ, МОМТ, МІ, МРГ, МЗНб, МТОК, МУС, МЕТ, МЕ2, МКХ2- 1, МОТСНІ, МРМ, МКА5, РОСЕКА, РІКЗСА, РІКЗК1, РМІ, РТЕМ, РТРКО, КАКА, КВ, КЕТ, КІСТОК,
КО51, ЕРТОК, КИОМХІ, ЗМАОЯ4, ЗМАКСАЯ4, 5ОХ2, 5ТКІ11, ТЕТ2, ТРБ5З3, Т5С1, 5522 ії МНІ.. Згідно з деякими варіантами здійснення, один або декілька генів вибрані з АКТІ, АКТ2, ВКАЕ, СОК4А, СОКб,
РІКЗСА, РІКЗК і МТОК. Згідно з деякими варіантами здійснення, елацестрант вводять суб'єкту в дозі від приблизно 200 до приблизно 500 мг/доба. Згідно з деякими варіантами здійснення, елацестрант вводять суб'єкту в дозі приблизно 200 мг, приблизно 300 мг, приблизно 400 мг або приблизно 500 мг.
Згідно з деякими варіантами здійснення, елацестрант вводять суб'єкту в дозі приблизно 300 мг/доба.
Згідно з деякими варіантами здійснення, співвідношення концентрації елацестранту або його солі або сольвату в пухлини до концентрації елацестранту або його солі або сольвату в плазмі (Т/Р) після введення становить щонайменше приблизно 15.
Якщо не зазначено інше, всі використовувані в даному документі технічні та наукові терміни мають те саме значення, яке зазвичай розуміється фахівцем в галузі техніки, до якої належить даний винахід. У даному документі описані способи й матеріали для застосування в даному винаході; також можна застосовувати й інші відповідні способи та матеріали, відомі з рівня техніки. Матеріали, способи й приклади є лише ілюстративними та не передбачаються як обмежувальні. Усі публікації, заявки на патенти, патенти, послідовності, записи в базах даних та інші джерела, згадані в даному документі, включені за допомогою посилання у всій своїй повноті. У випадку суперечностей переважну силу матиме даний опис, в тому числі визначення.
Інші ознаки й переваги даного винаходу стануть очевидні з наступного докладного опису й креслень, а також з формули винаходу.
Короткий опис креслень
Представлені далі фігури наведено як приклад, і вони не призначені для обмеження обсягу даного винаходу.
Фіг. ТА. Формування стійкості до палбоциклібу у ліній клітин ЇТЕО з Е5К1: дикого типу наведено на графіку для ліній клітин, чутливих до палбоциклібу (палбоз) і стійких до палбоциклібу (палбой).
Фіг. 18. Відсоток інгібування росту (нормалізований до контролю, прийнятого за 100 95) щодо
І одІпалбоцикліб(мкМ)| наведений на графіку для ліній клітин палбоз і палбо" з Е5Р1: дикого типу.
Фіг. 1С. Фотографії результатів аналізу утворення колоній ліній клітин палбоб і палбо" з Е5Е1: дикого типу представлені для контролю та після обробки палбоциклібом (500 НМ).
Фіг. 10. Результати вестерн-блотингу, що ілюструють моделі І ТЕО, І ТЕО «з палбо, І ТЕО- палбог і
ІЇТЕО- палбогй «я палбо, що мають ген Е5Р1: дикого типу.
Фіг. 2А. Формування стійкості до палбоциклібу у ліній клітин ЇТЕО з ЕЗК1:05380 наведено на графіку для ліній клітин, чутливих до палбоциклібу (палбоз) і стійких до палбоциклібу (палбой).
Фіг. 28. Відсоток інгібування росту (нормалізований до контролю, прийнятого за 100 95) щодо
І осдІпалбоцикліб(мкМ)| наведений на графіку для ліній клітин палбоз і палбо" з Е5К1:О5380.
Фіг. 2С. Фотографії результатів аналізу утворення колоній ліній клітин палбо? і палбо"к з
ЕБЗК1:0О5386 представлені для контролю та після обробки палбоциклібом (500 нМ).
Фіг. 20. Результати вестерн-блотингу, що ілюструють моделі ТЕО, І ТЕО « палбо, І ТЕО- палбог і
Ї ТЕО- палбог" я палбо, що мають ген Е5К1:0О53856.
Фіг. ЗА. Формування стійкості до палбоциклібу у ліній клітин ТЕО з ЕЗК1:У5375 наведено на графіку для ліній клітин, чутливих до палбоциклібу (палбоз) і стійких до палбоциклібу (палбок).
Фіг. ЗВ. Відсоток інгібування росту (нормалізований до контролю, прийнятого за 100 95) щодо
Ї сдІпалбоцикліб(мкМ)| наведений на графіку для ліній клітин палбоз і палбо" з ЕЗК1:У5375.
Фіг. ЗС. Фотографії результатів аналізу утворення колоній ліній клітин палбоЗ і палбо" з
ЕБЗК1:У5375 представлені для контролю та після обробки палбоциклібом (500 нМ).
Фіг. 30. Результати вестерн-блотингу, що ілюструють моделі І ТЕО, І ТЕО «з палбо, І ТЕО- палбог і
І ТЕО- палбог я палбо, що мають ген Е5Е1:У5375.
Фіг. 4А. Формування стійкості до рибоциклібу у ліній клітин СТЕО з Е5К1: дикого типу наведено на графіку для ліній клітин, чутливих до рибоциклібу (рибо?з) і стійких до рибоциклібу (рибо").
Фіг. 48. Формування стійкості до абемациклібу у ліній клітин ТЕО з ЕЗКІ1: дикого типу наведено на графіку для ліній клітин, чутливих до абемациклібу (абемазг) і стійких до абемациклібу (абемай).
Фіг. 4С. Відсоток інгібування росту (нормалізований до контролю, прийнятого за 100 95) щодо
І одІрибоцикліб(мкм)| наведений на графіку для ліній клітин рибоз і рибо" з Е5К1: дикого типу.
Фіг. 40. Фотографії результатів аналізу утворення колоній ліній клітин рибоз і рибо" з Е5В1: дикого типу представлені для контролю та після обробки рибоциклібом (500 нм).
Фіг. 4Е. Відсоток інгібування росту (нормалізований до контролю, прийнятого за 100 95) щодо
І од(абемацикліб(мкМ)| наведений на графіку для ліній клітин абема: і абемаг" з Е5Е1: дикого типу.
Фіг. АР. Фотографії результатів аналізу утворення колоній для ліній клітин абема: і абемаг" з Е5К!1: дикого типу представлені для контролю та після обробки абемациклібом (500 нм).
Фіг. 5А. Формування стійкості до рибоциклібу в ліній клітин ТЕО з ЕЗК1:05380 наведено на графіку для ліній клітин, чутливих до рибоциклібу (рибо?з) і стійких до рибоциклібу (рибо").
Фіг. 58. Формування стійкості до абемациклібу в ліній клітин ЇТЕО з Е5БК1:05380 наведено на графіку для ліній клітин, чутливих до абемациклібу (абемазФг) і стійких до абемациклібу (абемабк).
Фіг. 50. Відсоток інгібування росту (нормалізований до контролю, прийнятого за 100 95) щодо
І одІрибоцикліб(мкМ)| наведений на графіку для ліній клітин рибоз: і рибо" з Е5В1:0О5380.
Фіг. 50. Фотографії результатів аналізу утворення колоній для ліній клітин рибоЗ і рибо" з
ЕБЗК1:0О5380 представлені для контролю та після обробки рибоциклібом (500 нм).
Фіг. 5Е. Відсоток інгібування росту (нормалізований до контролю, прийнятого за 100 95) щодо
І од(абемацикліб(мкМ)| наведений на графіку для ліній клітин абемаз: і абема" з Е5К1:0О5380.
Фіг. 5. Фотографії результатів аналізу утворення колоній для ліній клітин абема? і абема" з
ЕБЗК1:0О5386 представлені для контролю та після обробки абемациклібом (500 нМ).
Фіг. бА. Формування стійкості до рибоциклібу в ліній клітин ЇТЕО з ЕЗК1:У5375 наведено на графіку для ліній клітин, чутливих до рибоциклібу (рибоз) і стійких до рибоциклібу (рибо").
Фіг. 68. Формування стійкості до абемациклібу в ліній клітин ТЕО з ЕБК1:У5375 наведено на графіку для ліній клітин, чутливих до абемациклібу (абемазФг) і стійких до абемациклібу (абемабк).
Фіг. 6С. Відсоток інгібування росту (нормалізований до контролю, прийнятого за 100 95) щодо
І одІрибоцикліб(мкМ))| наведений на графіку для ліній клітин рибо? і рибо" з Е5Е1:Уу5375.
Фіг. 60. Фотографії результатів аналізу утворення колоній ліній клітин рибо? і рибо" з Е5К1:уУ5375 представлені для контролю та після обробки рибоциклібом (500 нм).
Фіг. 6Е. Відсоток інгібування росту (нормалізований до контролю, прийнятого за 100 95) щодо
І од(абемацикліб(мкМ)| наведений на графіку для ліній клітин абемаз: і абема" з Е5Е1:У5375.
Фіг. б6Е. Фотографії результатів аналізу утворення колоній для ліній клітин абема? і абема" з
ЕБЗК1:У5375 представлені для контролю та після обробки абемациклібом (500 нм).
Фіг. 7А. Наведені значення ЕСзхо (НМ), а відсоток інгібування росту наведений на графіку щодо
Ї од(Іелацестрант (НМ) для лінії клітин з ЕЗК1:дикого типу, чутливих до інгібіторів СОКА/6, лінії клітин палбоцикліб з ЕЗР:дикого типу, лінії клітин рибоцикліб" з ЕБР1:дикого типу та лінії клітин абемацикліб" з ЕЗК1:дикого типу.
Фіг. 7В. Наведені значення ЕСзхо (НМ), а відсоток інгібування росту наведений на графіку щодо
Ї од(Іеєлацестрант (нМ)| для лінії клітин з ЕЗК1:05380, чутливих до інгібіторів СОКА/6, лінії клітин палбоцикліб" з Е5К1:0О5380, лінії клітин рибоцикліб" з Е5К1:0О5380 і лінії клітин абемацикліб" з
ЕБК1:О5386.
Фіг. 7С. Наведені значення ЕСсхо (НМ), а відсоток інгібування росту наведений на графіку щодо
Ї од(Іеєлацестрант (НМ)| для лінії клітин з ЕБК1:У5375, чутливих до інгібіторів СОКА/6, лінії клітин палбоцикліб" з Е5Р1:У5375, лінії клітин рибоцикліб" з Е5Р1:У5375 і лінії клітин абемацикліб" з
ЕБК1:У5375.
Фіг. 8А. На фотографіях результатів аналізу утворення колоній у верхньому ряду візуалізовано зростання контрольної лінії клітин з ЕЗКІ:дикого типу, чутливої до інгібіторів СОКа4/6, лінії клітин палбоцикліб" з ЕБКТ:дикого типу, лінії клітин рибоцикліб" з Е5РМ:дикого типу та лінії клітин абемацикліб" з Е5К1:дикого типу, тоді як на фотографіях у нижньому ряду візуалізовано зростання клітин для контрольної лінії клітин з ЕБКІ1:дикого типу, чутливих до інгібіторів СОКА/6, лінії клітин палбоцикліб" з ЕБКТ:дикого типу, лінії клітин рибоцикліб" з Е5РМ:дикого типу та лінії клітин абемацикліб" з ЕЗК1:дикого типу після обробки елацестрантом (300 нм).
Фіг. 88. На фотографіях результатів аналізу утворення колоній у верхньому ряду візуалізовано зростання контрольної лінії клітин з ЕЗКІ:дикого типу, чутливої до інгібіторів СОКА/6, лінії клітин палбоцикліб" з Е2К1:О53865, лінії клітин рибоцикліб" з Е5Р1:дикого типу та лінії клітин абемацикліб" з
ЕЗК1:0О5385, тоді як на фотографіях у нижньому ряду візуалізовано зростання клітин для контрольної лінії клітин з Е5К1:0О538С, чутливих до інгібіторів СОКА/6Є, лінії клітин палбоцикліб" з Е5К1:0О5380, лінії клітин рибоцикліб" з Е5Е1:05380 та лінії клітин абемацикліб" з Е5К1:05380 після обробки елацестрантом (300 нм).
Фіг. 8С. На фотографіях результатів аналізу утворення колоній у верхньому ряду візуалізовано зростання контрольної лінії клітин з ЕЗКІ:дикого типу, чутливої до інгібіторів СОКА/6, лінії клітин палбоцикліб" з ЕЗК1:У5375, лінії клітин рибоцикліб" з ЕЗК1:дикого типу та лінії клітин абемацикліб" з
ЕЗК1:У5375, тоді як на фотографіях у нижньому ряду візуалізовано зростання клітин для контрольної лінії клітин з ЕЗ2К1:У537А, чутливих до інгібіторів СОКА/6, лінії клітин палбоцикліб" з Е5Р1:У5375, лінії клітин рибоцикліб" з Е5БК1:У5375 та лінії клітин абемацикліб" з Е5БК1:У5375 після обробки елацестрантом (300 нм).
Фіг. 9А. Середні об'єми пухлини з плином часу у безтімусних "голих" мишей, яким імплантовано
РОХ-ксенотрансплантати УУНІМ43-НІ з мутацією ЕЗК1:05380б, яких обробляли контрольним середовищем, палбоциклібом, фулвестрантом (З мг/доза) і елацестрантом (30 і 60 мг/кг).
Фіг. 98. Результати кількісної оцінки рівня білка ЕКоа були отримані шляхом побудови графіка залежності ЕКа/вінкуліну (нормалізований до контролю) щодо обробки ксенотрансплантатної РОХ- моделі УМУНІМ43-НІ, що має мутацію Е5БК1:05380б, контрольним середовищем, палбоциклібом, фулвестрантом (З мг/доза) і елацестрантом (30 і 60 мг/кг).
Фіг. 9С. Результати кількісної оцінки рівня білка Е2Е1 були отримані шляхом побудови графіка залежності Е2Е1/вінкуліну (нормалізований до контролю) щодо обробки ксенотрансплантатної РОХ- моделі УМУНІМ43-НІ, що має мутацію Е5БК1:05380б, контрольним середовищем, палбоциклібом, фулвестрантом (З мг/доза) і елацестрантом (30 і 60 мг/кг).
Фіг. 90. Результати кількісної оцінки рівня білка ССМЕТ були отримані шляхом побудови графіка залежності ССМЕ1/вінкуліну (нормалізований до контролю) щодо обробки ксенотрансплантатної РОХ- моделі УМУНІМ43-НІ, що має мутацію Е5БК1:05380б, контрольним середовищем, палбоциклібом, фулвестрантом (З мг/доза) і елацестрантом (30 і 60 мг/кг).
Фіг. 9Е. Рівні МРНК Рок визначали шляхом побудови графіка кратної зміни (нормалізованого до контролю) щодо обробки ксенотрансплантатної РОХ-моделі МУНІМ43-НІ, що має мутацію
ЕБЗК1:0О5386, контрольним середовищем, палбоциклібом, фулвестрантом (3 мг/доза) і елацестрантом (30 їі 60 мг/кг).
Фіг. 9Г. Представлені результати вестерн-блоттингу, що ілюструють ксенотрансплантатну РОХ- модель МУУНІМ43-НІ, що має мутацію ЕБ5К1:0538б, оброблену контрольним середовищем, палбоциклібом, фулвестрантом (З мг/доза) і елацестрантом (30 і 60 мг/кг).
Фіг. 10А. Результати кількісної оцінки прогестеронового рецептора (РОК) в моделях пухлинних клітин, що мають мутацію ЕЗК1: дикого типу, були отримані шляхом побудови графіка залежності рівнів МРНК РоЕ (нормалізованих до контролю) щодо обробки ліній клітин палбоз і палбог.
Фіг. 108. Результати кількісної оцінки фактору "трилисника" 1 (ТЕР) в моделях пухлинних клітин, що мають мутацію Е5КІ1: дикого типу, були отримані шляхом побудови графіка залежності рівнів
МРНК ТЕРЕТ1 (нормалізованих до контролю) щодо обробки ліній клітин палбоз і палбог".
Фіг. 10С. Результати кількісної оцінки регульованого естрогеном росту (СКЕВІ) в моделях пухлинних клітин, що мають мутацію Е5К1: дикого типу, були отримані шляхом побудови графіка залежності рівнів МРНК СРЕВІ1 (нормалізованих до контролю) щодо обробки ліній клітин палбо?: і палбог.
Фіг. 11А. Результати кількісної оцінки прогестеронового рецептора (РОК) в моделях пухлинних клітин, що мають мутацію ЕЗК1:0538С, були отримані шляхом побудови графіка залежності рівнів
МРНК РоЕ (нормалізованих до контролю) щодо обробки ліній клітин палбо? і палбог".
Фіг. 118. Результати кількісної оцінки фактору "трилисника" 1 (ТЕР) в моделях пухлинних клітин, що мають мутацію ЕЗК1:05380, були отримані шляхом побудови графіка залежності рівнів мРНК
ТЕР (нормалізованих до контролю) щодо обробки ліній клітин палбоз і палбог.
Фіг. 110. Результати кількісної оцінки регульованого естрогеном росту (СКЕВІ) в моделях пухлинних клітин, що мають мутацію ЕБ5К1:05380б, були отримані шляхом побудови графіка залежності рівнів МРНК СРЕВІ1 (нормалізованих до контролю) щодо обробки ліній клітин палбо?: і палбог.
Фіг. 12А. Результати кількісної оцінки прогестеронового рецептора (РОК) в моделях пухлинних клітин, що мають мутацію ЕБК1:У5375, були отримані шляхом побудови графіка залежності рівнів
МРНК РоЕ (нормалізованих до контролю) щодо обробки ліній клітин палбо? і палбог".
Фіг. 128. Результати кількісної оцінки фактору "трилисника" 1 (ТЕР) в моделях пухлинних клітин, що мають мутацію ЕБК1:У5375, були отримані шляхом побудови графіка залежності рівнів мРНК
ТЕЕТ1 (нормалізованих до контролю) щодо обробки ліній клітин палбо?: і палбогй.
Фіг. 120. Результати кількісної оцінки регульованого естрогеном росту (ЗКЕВІ) в моделях пухлинних клітин, що мають мутацію ЕБ5К1:У5375, були отримані шляхом побудови графіка залежності рівнів МРНК СРЕВІ1 (нормалізованих до контролю) щодо обробки ліній клітин палбо? і палбог.
Фіг. 13. На графіку представлений об'єм пухлини ксенотрансплантатної РОХ-моделі МУНІМ4З3-НІ (яку раніше не піддавали обробці) в залежності від доби обробки під час обробки моделі середовищем або комбінацією фулвестранту та палбоциклібу (дані для фулвестранту З мг/доза взяті з окремого дослідження). Пухлини з групи фулвестранту та палбоциклібу потім були повторно імплантовані в іншому дослідженні (з обробкою палбоциклібом 51941-НІ; перший пасаж), а потім оброблені середовищем, фулвестрантом (З мг/доза), палбоциклібом (25 мг/кг) і елацестрантом (30 мг/кг) з метою демонстрації, що елацестрант все ще є ефективним під час інгібування росту пухлини в РОХ-моделі, раніше обробленої комбінацією фулвестранту та палбоциклібу.
Детальне розкриття даного винаходу
В контексті даного документа елацестрант або "КАЮ1901" являє собою перорально біодоступний селективний деструктор естрогенового рецептора (5ЕКО) і має наступну хімічну структуру: о - й ах МН
СО Ди но г
Елацестрант в тому числі його солі, сольвати (наприклад, гідрат) і проліки. З доклінічних даних було видно, що елацестрант є ефективним в інгібуванні росту пухлини на моделях ЕК. раку молочної залози як з
ЕЗКІ дикого типу, так і з мутантним Е5КІ1. Згідно з деякими варіантами здійснення, описуваний в даному документі елацестрант вводять у формі біс- гідрохлоридної солі ("2НСЇ), що має наступну хімічну структуру: о а т ях МН
СО Ст, Неї но г
Дигідрохлорид елацестранту
У жінок у постменопаузі поточний стандарт лікування ЕК- форм раку, такого як рак молочної залози, передбачає інгібування шляху ЕК за допомогою: 1) інгібування синтезу естрогену (інгібіторами ароматази (АЇ)); 2) прямого зв'язування з ЕК і модуляції його активності за допомогою ЗЕКМ (наприклад, тамоксифену); і/або 3) прямого зв'язування з ЕК і індукції деструкції рецепторів за допомогою ЗЕКО (наприклад, фулвестранту). У жінок у передменопаузі поточний стандарт лікування додатково передбачає інгібування функції яєчників за допомогою оваріектомії або агоніста рилізинг- фактора лютеїнізуючого гормону (-НКН). Було показано, що додавання інгібітора циклін-залежної кінази 4/6 (СОК4/6) до ендокринного засобу в деяких випадках приблизно у два рази збільшує період дожиття без прогресування (РЕ), причому такі типи результатів привели до схвалення і застосування певних інгібіторів СОК4А/6 в комбінації або з АЇ під час призначенні лікування метастатичних форм терапією першої лінії, або в комбінації з фулвестрантом під час призначення лікування метастатичних форм терапією другої лінії. Дані, з яких видно тенденцію ЕЗК1 мутувати й ставати стійкими до АЇ і/або інгібіторів СОК4/6б, наголошують на потребі в нових і поліпшених перорально біодоступних ендокринних засобах терапії, які мають ефективність до ЕБКІ дикого типу і всіх мутантних форм
ЕБКІ1.
Додавання інгібітора циклін-залежної кінази 4/6 (СОК4/б) до ендокринного засобу приблизно у два рази збільшує період дожиття без прогресування (РЕ5), і це привело до схвалення та застосування певних інгібіторів СОК4/6 в комбінації або з АЇ під час призначення лікування метастатичних форм терапією першої лінії, або в комбінації з фулвестрантом під час призначення лікування метастатичних форм терапією або першої, або другої лінії. В описуваних у даному документі способах показано, що елацестрант індукує дозозалежне довгострокове інгібування росту в лініях ракових клітин, стійких до інгібіторів СОК4/б, незалежно від попереднього лікування або мутантного статусу ЕЗК1. Під час використання елацестранту (30 мг/кг) також спостерігали інгібування росту пухлини іп мімо у РОХ- моделей, яких раніше піддавали лікуванню палбоциклібом (» 100 діб) і/або у яких де помо розвинулася стійкість до палбоциклібу. Крім того, під час використання елацестранту спостерігали інгібуючу активність іп міїго та іп мімо у кількох стійких до інгібіторів СОК4А/6 моделей, у яких спостерігали кілька молекулярних маркерів стійкості до інгібіторів СОК4/6б, таких як без обмеження втрата Кб, надекспресія цикліну ЕТ, надекспресія Е2Е1, надекспресія цикліну 01 і надекспресія СОКб.
Було продемонстровано, що елацестрант (30 мг/кг) піддає деструкції ЕК, знижує експресію Е2Е!1 і знижує експресію цикліну ЕїЇ у РОХ-моделі УМНІМ43-НІ (стійкий до палбоциклібу/без Кб). За результатами вивчення характеристик стійкості до інгібіторів СОК4/б було видно, що у цих стійких ліній клітин зберігається ЕК, передача сигналів за участю ЕК і, що важливо, керована ЕК проліферація. Отже, наведені в даному документі результати проведених досліджень, що свідчать про ефективне застосування елацестранту як засобу лікування стійких до інгібіторів СОК4/6 форм раку з різними типами мутацій Е5КІ1, є перспективними.
Визначення
Якщо не зазначено інше, в контексті даного документа застосовують представлені далі визначення.
Застосовувані в даному документі терміни "КАО1901" і "елацестрант" відносяться до однієї та тієї ж хімічної сполуки і використовуються як взаємозамінні. "Інгібування росту" ЕКоа-позитивної пухлини в контексті даного документа може відноситися до уповільнення швидкості зростання пухлини або до повної зупинки зростання пухлини. "Регресія пухлини" або "регресія" ЕКа-позитивної пухлини в контексті даного документа може відноситися до зменшення максимального розміру пухлини. Згідно з деякими варіантами здійснення, введення описуваної в даному документі комбінації або її сольватів (наприклад, гідрату) або солей може привести в результаті до зменшення розміру пухлини в порівнянні з вихідним рівнем (тобто розміром до початку лікування) або навіть до знищення або часткового знищення пухлини. Отже, згідно з деякими варіантами здійснення, представлені в даному документі способи регресії пухлини альтернативно можна схарактеризувати як способи зменшення розміру пухлини в порівнянні з вихідним рівнем. "Пухлина" в контексті даного документа означає злоякісну пухлину і використовується як синонім терміну "рак". "Естрогеновий рецептор-альфа" або "ЕКо" в контексті даного документа відноситься до поліпептида, який містить, складається або фактично складається з амінокислотної послідовності ЕКа дикого типу, яка кодується геном Е5К1.
Пухлина, яка є "позитивною за естрогеновими рецепторами-альфа", "ЕКа-позитивною", "ЕК" або "ЕКаж" в контексті даного документа відноситься до пухлини, в якій одна або декілька клітин експресують щонайменше одну ізоформу ЕКа.
Способи лікування
Згідно з деякими варіантами здійснення, даний винахід належить до способу інгібування й ослаблення стійкого до інгібіторів СОК4/6б, позитивного за естрогеновими рецепторами-альфа раку у суб'єкта, який передбачає введення суб'єкту терапевтично ефективної кількості елацестранту або його фармацевтично прийнятної солі або сольвату.
Згідно з іншими варіантами здійснення, даний винахід належить до способу лікування позитивного за естрогеновими рецепторами-альфа, стійкого до інгібіторів СОК4/б раку у суб'єкта, що має естрогеновий рецептор-альфа дикого типу й/або мутантний естрогеновий рецептор-альфа, причому спосіб передбачає введення суб'єкту терапевтично ефективної кількості елацестранту або його фармацевтично прийнятної солі або сольвату, причому мутантний естрогеновий рецептор-альфа містить одну або декілька мутацій, вибраних з групи, що складається з 05380, У537Х!, І 536Х2, Р5З5Н,
М534Е, 5463Р, М3921І, ЕЗ800О і їх комбінацій, де: Хі являє собою 5, М або С; а Хо являє собою К або 0.
Введення елацестранту
Елацестрант або його сольвати (наприклад, гідрат) або солі під час введення суб'єкту надають терапевтичну дію на одну або декілька форм раку або пухлин. Пригнічення або регресія росту пухлини можуть бути локалізовані в окремій пухлині або в групі пухлин у конкретній тканині або в конкретному органі або можуть бути системними (тобто впливати на пухлини в усіх тканинах або органах).
Оскільки відомо, що елацестрант переважно зв'язує ЕКо, а не естрогеновий рецептор-бета (ЕКРВ), якщо не зазначено інше, естрогеновий рецептор, естрогеновий рецептор-альфа, ЕКа, ЕК і ЕКа дикого типу використовують у даному документі як взаємозамінні. Згідно з деякими варіантами здійснення,
ЕК» клітини надекспресують ЕКа. Згідно з деякими варіантами здійснення, у пацієнта є одна або декілька клітин у пухлині, що експресують одну або декілька форм ЕКВ. Згідно з деякими варіантами здійснення, ЕКа-позитивна пухлина і/або ЕКа-позитивний рак пов'язані з раком молочної залози,
матки, яєчників або гіпофіза. Згідно з деякими з таких варіантів здійснення, у пацієнта є пухлина, розташована в тканині молочної залози, матки, яєчника або гіпофіза. Згідно з такими варіантами здійснення, якщо у пацієнта є пухлина, локалізована в молочній залозі, пухлина може бути пов'язана з раком проток молочної залози, який може бути чи не бути позитивним за НЕК, а в разі НЕК2-- пухлин пухлини можуть мати високий або низький рівень експресії НЕК2. Згідно з іншими варіантами здійснення, у пацієнта є пухлина, локалізована в інший тканині або в іншому органі (наприклад, в кістці, м'язі, головному мозку), але, (а) проте, вона пов'язана з раком молочної залози, матки, яєчників або гіпофіза (наприклад, пухлини, що виникли в результаті міграції або метастазування раку молочної залози, матки, яєчників або гіпофіза). Отже, згідно з деякими варіантами здійснення представлених у даному документі способів інгібування росту пухлини або регресії пухлини, пухлина, яка є мішенню, являє собою метастатичну пухлину, та/або пухлина має надекспресію ЕК в інших органах (наприклад, кістках і/або м'язах). Згідно з деякими варіантами здійснення, пухлина, яка є мішенню, являє собою пухлину та/або рак головного мозку. Згідно з деякими варіантами здійснення, пухлина, яка є мішенню, може бути більш чутливою до лікування елацестрантом, ніж до лікування іншим 5ЕКО (наприклад, фулвестрантом, ТА5-108 (516234), 7К191703, КО58668, 5500-0810 (АКМ-810), СУМУ5638/ОРС974, 5АКМ-927 і А20О9496), інгібіторами Нег2 (наприклад, трастузумабом, лапатинібом, адо-трастузумабом, емтанзином і/або пертузумабом), засобами хімієтерапії (наприклад, абраксаном, адріаміцином, карбоплатином, цитоксаном, даунорубіцином, доксилом, еленсом, фторурацилом, гемзаром, хелавеном, лксемпрою, метотрексатом, мітоміцином, мікоксантроном, навельбіном, таксолом, таксотером, тіотепою, вінкристином і кселодою), інгібітором ароматази (наприклад, анастрозолом, ексеместаном і летрозолом), селективними модуляторами естрогенових рецепторів (наприклад, тамоксифеном, ралоксифеном, лазофоксифеном і/або тореміфеном), інгібітором ангіогенезу (наприклад, бевацизумабом) і/або ритуксимабом.
Крім демонстрації здатності елацестранту інгібувати пухлинний ріст у пухлин, що експресують ЕКа дикого типу, елацестрант характеризується здатністю інгібувати ріст пухлин, що експресують мутантну форму ЕКо, а саме У5375 ЕКа. З результатів оцінки за допомогою комп'ютерного моделювання прикладів мутацій ЕКо було видно, що жодна з цих мутацій, як очікується, не вплине на І ВО або, зокрема, не буде перешкоджати зв'язуванню елацестранту, наприклад, з ЕКа, який має одну або декілька мутацій, обраних з групи, що складається з ЕКа з мутацією У537Х, де Х являє собою 5, М або
С, ЕКа з мутацією 05380 і ЕКоа з мутацією 5463Р. Виходячи з цих результатів, в даному документі представлені способи інгібування росту або досягнення регресії пухлини, яка є позитивною за ЕКса, що має одну або декілька мутацій в ліганд-зв'язуючому домені (І ВО), вибраних з групи, що складається з
У537Х1, де Хі являє собою 5, М або С, 05380, І 536 х 2, де Хо являє собою Е або О, Р5З5Н, М534Е, 5463Р, М392І, ЕЗ80О, особливо 5375 ЕКа, у суб'єкта з раком шляхом введення суб'єкту терапевтично ефективної кількості елацестранту або його сольватів (наприклад, гідрату) або солі. "Мутантний ЕКа" в контексті даного документа відноситься до ЕКа, який містить одну або декілька замін або делецій, і його варіантів, що містять, складаються або фактично складаються з амінокислотної послідовності щонайменше з 8095, щонайменше з 85595, щонайменше з 90 95, щонайменше з 95 95, щонайменше з 97 965, щонайменше з 98 965, щонайменше з 99 95 або щонайменше з 99,5 95 ідентичності з амінокислотною послідовністю ЕКО.
Окрім інгібування росту пухлини під час раку молочної залози в ксенотрансплантатній моделі на тваринах, елацестрант характеризується значним накопиченням в пухлинних клітинах і здатністю проникати через гематоенцефалічний бар'єр. Здатність проникати через гематоенцефалічний бар'єр була підтверджена шляхом демонстрації того, що введення елацестранту значно подовжує період дожиття у ксенотрансплантатної моделі з метастазами в головному мозку. Отже, згідно з деякими варіантами здійснення представлених в даному документі способів інгібування росту пухлини або регресії пухлини, ЕКа-позитивна пухлина, яка є мішенню, локалізована в головному мозку або в іншому місці центральної нервової системи. Згідно з деякими з таких варіантів здійснення, ЕКа- позитивна пухлина переважно пов'язана з раком головного мозку. Згідно з іншими варіантами здійснення, ЕКа-позитивна пухлина являє собою метастатичну пухлину, яка переважно пов'язана з іншим типом раку, таким як рак молочної залози, матки, яєчників або гіпофіза, або пухлину, яка мігрувала з іншої тканини або іншого органу. Згідно з деякими з таких варіантів здійснення, пухлина являє собою метастази в головному мозку, такі як метастази раку молочної залози в головному мозку (ВСВМ). Згідно з деякими варіантами здійснення способів, що розкриті в даному документі, елацестрант або його сольвати (наприклад, гідрат) або солі накопичуються в одній або декількох клітинах у пухлини-мішені.
Згідно з деякими варіантами здійснення способів, що розкриті в даному документі, елацестрант або його сольвати (наприклад, гідрат) або солі переважно накопичуються в пухлині в співвідношенні
Т/Р. (концентрація елацестранту в пухлини/концентрація елацестранту в плазмі) приблизно 15 або вище, приблизно 18 або вище, приблизно 19 або вище, приблизно 20 або вище, приблизно 25 або вище, приблизно 28 або вище, приблизно 30 або вище, приблизно 33 або вище, приблизно 35 або вище або приблизно 40 або вище.
Доза
Терапевтично ефективна кількість комбінації елацестранту або його сольватів (наприклад, гідрату) або солей для застосування в розкритих в даному документі способів є кількістю, яка під час введення протягом певного інтервалу часу приводить до досягнення одного або декількох терапевтичних показників (наприклад, до уповільнення або зупинки зростання пухлини, що приводить у результаті до регресії пухлини, зникнення симптомів і т. д.). Комбінацію для застосування в розкритих у даному документі способах можна вводити суб'єкту один раз або декілька разів. Згідно з такими варіантами здійснення, за введення сполук кілька разів їх можна вводити через встановлені проміжки часу, наприклад, раз на добу, раз на дві доби, раз на тиждень або раз на місяць. Як альтернатива, їх можна вводити з нерегулярним інтервалом, наприклад, у разі потреби, виходячи із симптомів, стану здоров'я пацієнта і т. п. Терапевтично ефективну кількість комбінації можна вводити один раз на добу протягом однієї доби, щонайменше 2 діб, щонайменше 3 діб, щонайменше 4 діб, щонайменше 5 діб, щонайменше 6 діб, щонайменше 7 діб, щонайменше 10 діб або щонайменше 15 діб. Необов'язково, статус щодо раку або регрес пухлини відстежують під час або після лікування, наприклад, за допомогою РГЕ5-РЕТ-сканування суб'єкта. Дозу комбінації, яку вводять суб'єкту, можна збільшити або зменшити залежно від статусу щодо раку або регресії детектованої пухлини.
В ідеалі, терапевтично ефективна кількість не перевищує максимально стерпну дозу, за якої 50 90 або більше суб'єктів, яких лікують, відчувають нудоту або інші реакції токсичності, які перешкоджають подальшому введенню лікарського засобу. Терапевтично ефективна кількість може варіювати для суб'єкта в залежності від ряду факторів, у тому числі різноманітності й ступеня вираженості симптомів, статі, віку, маси тіла або загального стану здоров'я суб'єкта, способу введення і типу солі або сольвату, зміни сприйнятливості до лікарського засобу, конкретного типу захворювання і т. д.
Приклади терапевтично ефективних кількостей елацестранту або його сольватів (наприклад, гідрату) або солей для застосування в розкритих в даному документі способах включають без обмеження від приблизно 150 до приблизно 1500 мг, від приблизно 200 до приблизно 1500 мг, від приблизно 250 до приблизно 1500 мг або від приблизно 300 до приблизно 1500 мг дози раз на добу для суб'єктів, що мають стійкі ЕК-залежні пухлини або форми раку; від приблизно 150 до приблизно 1500 мг, від приблизно 200 до приблизно 1000 мг або від приблизно 250 до приблизно 1000 мг або від приблизно 300 до приблизно 1000 мг дози раз на добу для суб'єктів, що мають як залежні від ЕК дикого типу пухлини й/або форми раку, так і стійкі пухлини й/або форми раку; та від приблизно 300 до приблизно 500 мг, від приблизно 300 до приблизно 550 мг, від приблизно 300 до приблизно 600 мг, від приблизно 250 до приблизно 500 мг, від приблизно 250 до приблизно 550 мг, від приблизно 250 до приблизно 600 мг, від приблизно 200 до приблизно 500 мг, від приблизно 200 до приблизно 550 мг, від приблизно 200 до приблизно 600 мг, від приблизно 150 до приблизно 500 мг, від приблизно 150 до приблизно 550 мг або від приблизно 150 до приблизно 600 мг дози раз на добу для суб'єктів, що мають в основному залежні від ЕК дикого типу пухлини й/або форми раку. Згідно з деякими варіантами здійснення, доза сполуки формули І (наприклад, елацестранту) або його солі або сольвату для застосування в розкритих в даному документі способах, універсальних для дорослого суб'єкта, може становити приблизно 200 мг, 400 мг, від 30 мг до 2000 мг, від 100 до 1500 мг або від 150 до 1500 мг перорально на добу. Така добова доза може бути досягнута шляхом одноразового введення або багаторазового введення.
Доза елацестранту під час лікування раку молочної залози, в тому числі стійких форм, а також у випадках, коли експресуються один або декілька мутантних рецепторів, знаходиться в діапазоні від 100 мг до 1000 мг на добу. Наприклад, еєлацестрант можна приймати дозою по 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900 або 1000 мг на добу. Зокрема, слід відзначити 200 мг, 400 мг, 500 мг, 600 мг, 800 мг і 1000 мг на добу. Надзвичайно тривалий період напіввиведення єлацестранту у людей після перорального приймання дози робить цей варіант таким, що особливо заслуговує на увагу.
Відповідно, лікарський засіб можна вводити в кількості 200 мг два рази на добу (всього 400 мг на добу), 250 мг два рази на добу (всього 500 мг на добу), 300 мг два рази на добу (всього 600 мг на добу), 400 мг два рази на добу (800 мг на добу) або 500 мг два рази на добу (всього 1000 мг на добу).
Згідно з деякими варіантами здійснення, приймання дози є пероральним.
Згідно з деякими варіантами здійснення способів, що розкриті в даному документі, елацестрант або його сольват (наприклад, гідрат) або сіль переважно накопичуються в пухлині в співвідношенні
Т/Р. (концентрація елацестранту в пухлини/концентрація елацестранту в плазмі) приблизно 15 або вище, приблизно 18 або вище, приблизно 19 або вище, приблизно 20 або вище, приблизно 25 або вище, приблизно 28 або вище, приблизно 30 або вище, приблизно 33 або вище, приблизно 35 або вище або приблизно 40 або вище.
Елацестрант або його сольвати (наприклад, гідрат) або солі можна вводити суб'єкту один раз або декілька разів. Згідно з такими варіантами здійснення, за введення сполук кілька разів їх можна вводити через встановлені проміжки часу, наприклад, раз на добу, раз на дві доби, раз на тиждень або раз на місяць. Як альтернатива, їх можна вводити з нерегулярним інтервалом, наприклад, у разі потреби, виходячи із симптомів, стану здоров'я пацієнта і т. п.
Склад
Згідно з деякими варіантами здійснення, елацестрант або його сольвати (наприклад, гідрат) або солі вводять як частину єдиного складу. Наприклад, елацестрант або його сольвати (наприклад, гідрат) або солі складають у формі єдиного драже для перорального введення або у формі разової дози для ін'єкції. Згідно з деякими варіантами здійснення, введення сполук у формі єдиного складу покращує дотримання пацієнтом режиму та схеми лікування.
Згідно з деякими варіантами здійснення, склад, що містить елацестрант або його сольвати (наприклад, гідрат) або солі, може додатково містити один або декілька фармацевтичних наповнювачів, носіїв, допоміжних речовин і/або консервантів.
Елацестрант або його сольвати (наприклад, гідрат) або солі для застосування в розкритих у даному документі способах можна скласти у формі одиничних лікарських форм, що означає фізично дискретні одиниці, що придатні як одиничні дози для суб'єктів, що перебувають на лікуванні, причому кожна одиниця містить задану кількість активного матеріалу, розраховану для отримання необхідного терапевтичного ефекту, необов'язково в поєднанні з відповідним фармацевтичним носієм. Одинична лікарська форма може призначатися для одноразової добової дози або однієї з декількох доз, що становлять добову дозу (наприклад, приблизно від 1 до 4 або більше разів на добу). У разі застосування декількох доз, що становлять добову дозу, одинична лікарська форма може бути однаковою або різною для кожної дози. Згідно з деякими варіантами здійснення, сполуки можна скласти для контрольованого вивільнення.
Елацестрант або його сольвати (наприклад, гідрат) або солі та солі або сольвати для застосування в розкритих в даному документі способах можна скласти згідно з будь-яким доступним традиційним способом. Приклади переважних лікарських форм включають таблетку, порошок, дрібну гранулу, гранулу, таблетку з покриттям, капсулу, сироп, пастилку, засіб для інгаляції, супозиторій, ін'єкційний препарат, мазь, очну мазь, очні краплі, краплі в ніс, вушні краплі, засіб для гарячого компресу, лосьйон тощо. У складі можна застосовувати такі зазвичай використовувані добавки, як розчинник, зв'язувальна речовина, розпушувач, змащувальна речовина, барвник, ароматизатор і, за потреби, стабілізатор, емульгатор, підсилювач абсорбції, поверхнево-активна речовина, регулятор рН, антисептик, антиоксидант тощо. Крім того, приготування складу також здійснюють згідно з загальноприйнятими способами шляхом об'єднання композицій, які зазвичай застосовують як сировину для приготування фармацевтичного складу. Приклади даних композицій включають, наприклад, (1) масло, таке як соєва олія, яловичий жир і синтетичний гліцерид; (2) вуглеводень, такий як рідкий парафін, сквалан і твердий парафін; (3) складноефірне масло, таке як октилдодецилміристинова кислота й ізопропілміристинова кислота; (4) вищий спирт, такий як цетостеариловий спирт і бегеніловий спирт; (5) силіконову смолу; (6) силіконову олію; (7) поверхнево- активну речовину, таку як естер поліоксіетилену та жирної кислоти, естер сорбітану та жирної кислоти, естер гліцерину та жирної кислоти, естер поліоксіетиленсорбітану та жирної кислоти, тверде поліоксіетгиленове касторове масло і блок-сополімер поліоксіетгилену та поліоксипропілену; (8) водорозчинну макромолекулу, таку як гідроксіетилцелюлоза, поліакрилова кислота, карбоксивініловий полімер, поліетиленгліколь, полівінілпіролідон і метилцелюлоза; (9) нижчий спирт, такий як етанол та ізопропанол; (10) багатовалентний спирт, такий як гліцерин, пропіленгліколь, дипропіленгліколь та сорбіт; (11) цукор, такий як глюкоза та тростинний цукор; (12) неорганічний порошок, такий як безводна кремнієва кислота, алюмосилікат магнію та силікат алюмінію; і (13) очищену воду тощо.
Добавки для застосування у вищезгаданих складах можуть включати, наприклад, 1) лактозу, кукурудзяний крохмаль, сахарозу, глюкозу, маніт, сорбіт, кристалічну целюлозу та діоксид кремнію як розріджувач; 2) полівініловий спирт, полівініловий етер, метилцеллюлозу, етилцелюлозу, аравійську камідь, трагакант, желатин, шелак, гідроксипропілцелюлозу, гідроксипропілметилцелюлозу, полівінілпіролідон, блок-сополімер поліпропіленгліколю та поліоксіетилену, меглумін, цитрат кальцію, декстрин, пектин тощо як зв'язувальну речовину; 3) крохмаль, агар, желатиновий порошок, кристалічну целюлозу, карбонат кальцію, бікарбонат натрію, цитрат кальцію, декстрин, пектинову кислоту, карбоксиметилцеллюлозу/кальцію тощо як розпушувач; 4) стеарат магнію, тальк, поліетиленгліколь, діоксид кремнію, конденсовану рослинну олію тощо як змащувальну речовину; 5) будь-які барвники, додавання яких як барвника є прийнятним з фармацевтичної точки зору; б) какао- порошок, ментол, ароматизатор, олія м'яти перцевої, порошок кориці як ароматизатор; і 7) антиоксиданти, додавання яких є прийнятним з фармацевтичної точки зору, такі як аскорбінова кислота або альфа-тофенол.
Елацестрант або його сольвати (наприклад, гідрат) або солі для застосування в способах, що розкриті в даному документі, можна включити в фармацевтичну композицію у формі будь-якої однієї або декількох описаних в даному документі активних сполук, а також можна включити фізіологічно прийнятний носій (також званий фармацевтично прийнятним носієм, або розчином, або розріджувачем). Такі носії та розчини включають фармацевтично прийнятні солі й сольвати сполук, що застосовуються в способах за даним винаходом, і суміші, що містять дві або більше таких сполук, фармацевтично прийнятних солей таких сполук і фармацевтично прийнятних сольватів таких сполук.
Такі композиції готують згідно з прийнятними фармацевтичними процедурами, такими як ті, що описані в Кетіпдіоп'є Рпагптасешііса! 5сіепсев, 171й еайіоп, ей. АМКопзо К. Сеппаго, Маск Рибіїзпіпд
Сотрапу, Еашп, Ра. (1985), яка включена в даний документ за допомогою посилання.
Термін "фармацевтично прийнятний носій" відноситься до носія, який не викликає алергічної реакції або іншого несприятливого ефекту у пацієнтів, яким його вводять, і є сумісним з іншими інгредієнтами в складі. До фармацевтично прийнятних носіїв відносяться, наприклад, фармацевтичні розріджувачі, наповнювачі або носії, переважно обрані з урахуванням передбачуваної форми введення й узгоджуються із загальноприйнятими фармацевтичними практиками. Наприклад, до твердих носіїв/розріджувачів належать без обмеження камедь, крохмаль (наприклад, кукурудзяний крохмаль, клейстеризований крохмаль), цукор (наприклад, лактоза, маніт, сахароза, глюкоза), целюлозний матеріал (наприклад, мікрокристалічна целюлоза), акрилат (наприклад, поліметилакрилат), карбонат кальцію, оксид магнію, тальк або їх суміші. Фармацевтично прийнятні носії можуть додатково містити невеликі кількості допоміжних речовин, таких як змочувальні або емульгуючі засоби, консерванти або буфери, які збільшують термін зберігання або ефективність терапевтичного засобу.
Елацестрант або його сольвати (наприклад, гідрат) або солі у вільній формі перетворити на сіль можна за допомогою традиційних способів. Термін "сіль" у контексті даного документа не є обмеженим за умови, що сіль утворена з елацестрантом або його сольватами (наприклад, гідратом) або солями та є фармакологічно прийнятною; переважні приклади солей включають гідрогалогенідну сіль (наприклад, гідрохлорид, гідробромід, гідроіодід і т. п.), сіль неорганічної кислоти (наприклад, сульфат, нітрат, перхлорат, фосфат, карбонат, бікарбонат і т. п.), органічну карбоксилатну сіль (наприклад, ацетатну сіль, малеатну сіль, тартратну сіль, фумаратну сіль, цитратну сіль і т. п.), органічну сульфонатну сіль (наприклад, метансульфонатну сіль, етансульфонатну «сіль, бензолсульфонатну сіль, толуолсульфонатну сіль, камфорсульфонатну сіль і т. п.), сіль амінокислоти (наприклад, сіль аспартату, сіль глутамату і т. п.), сіль четвертинного амонію, сіль лужного металу (наприклад, натрієву сіль, калієву сіль і т. п.), сіль лужноземельного металу (магниевую сіль, кальцієву сіль і т. п.) і т. п. Крім того, переважною "фармакологічно прийнятною сіллю" сполук за даним винаходом є гідрохлорідна сіль, сульфатна сіль, метансульфонатна сіль, ацетатна сіль і т. п.
Ізомери елацестрату або його сольватів (наприклад, гідрату) або солей (наприклад, геометричні ізомери, оптичні ізомери, ротамери, таутомери та т. п.) можна очистити за допомогою загальних засобів розділення, в тому числі, наприклад, перекристалізації, оптичного розділення, такого як спосіб діастереомерних солей, спосіб ферментного фракціонування, різні хроматографії (наприклад, тонкошарова хроматографія, колонкова хроматографія, хроматографія на скляній колонці і т. п.), з отриманням окремого ізомеру. Термін "окремий ізомер" у даному документі включає не лише ізомер, що має чистоту 100 95, але також ізомер, що містить відмінний від цільового ізомер, який присутній навіть після традиційної операції очищення. Для елацестранту або його сольватів (наприклад, гідрату) або солей і/або фулвестранту іноді існує кристалічний поліморф, і в даний винахід включені всі їх кристалічні поліморфи. Кристалічний поліморф іноді є єдиним, а іноді представлений у формі суміші, та в даний документ включені як перший, так і друга.
Згідно з деякими варіантами здійснення, елацестрант або його сольвати (наприклад, гідрат) або солі можуть мати форму проліків, що означає, що вони мають зазнати деяких змін (наприклад, окислення або гідроліз) для досягнення своєї активної форми. Як альтернатива, елацестрант або його сольвати (наприклад, гідрат) або солі можуть являти собою сполуку, отриману шляхом перетворення вихідного пролікарського засобу на його активну форму.
Шлях введення
До шляхів введення елацестранту або його сольватів (наприклад, гідрату) або солей відносяться без обмеження місцеве введення, пероральне введення, внутрішньошкірне введення, внутрішньом'язове введення, внутрішньочеревинне введення, внутрішньовенне введення, інтравезикальна інфузія, підшкірне введення, трансдермальне введення та ведення через слизову оболонку. Згідно з деякими варіантами здійснення, шлях введення є пероральним.
Генне профілювання
Згідно з деякими варіантами здійснення, способи інгібування росту пухлини або регресії пухлини, що представлені в даному документі, додатково передбачають генне профілювання суб'єкта, причому ген, який підлягає профілюванню, являє собою один або декілька генів, вибраних з групи, що складається з АВІ1, АКТІ, АКТ2, АІ К, АРС, АК, АКІОТА, АЗХІ 1, АТМ, АШОККА, ВАР, ВАР, ВСІ 2111,
ВСЕ, ВКАЕ, ВКСА1, ВКСА2, ССМО1, ССМО2, ССМОЗ, ССМЕ1!, СОНІ, СОКа, СОКб6, СОК8, СОКМА,
СсСОКМІВ, СОКМ2А, СОКМ2В, СЕВРА, СТММВ1, ОК2, ОММТЗА, Е2ЕЗ, ЕСЕК, ЕМІ 4, ЕРНВ2, ЕКВВ2,
ЕКВВЗ, Е5КІ1, ЕМУ5КІ1, ЕВХМУУ7, ЕСЕ4, ЕОЕКІ, ЕСЕК2, ЕОЕКЗ, РІ Т3, ЕК52, НІЕТА, НКА5Б, ІОН, ІСН2,
ІСЕТК, УХАК2, КОМБбА, КОК, КІЕБВ, КІТ, ККА5, ГЕРІВ, МАР2КІ, МАР2К4, МСІ 1, МОМ2, МОМА, МЕТ,
МОМТ, МІ, МРІ, МН, МТОК, МУС, МЕТ, МЕ2, МКХ2-1, МОТСНІ, МРМ, МКА5, РОСЕКА, РІКЗСА,
РІКЗК1, РМІ, РТЕМ, РТРКО, КАКА, КВІ1, КЕТ, КІСТОК, КОБ51, КЕРТОК, КИОМХ1, БМАО4, ЗМАКСАЯ,
ЗОХ2, ЗТК11, ТЕТ2, ТР5З, Т5С21, 5502 і МНІ.. Згідно з іншими варіантами здійснення, ген, що підлягає профілюванню, являє собою один або декілька генів, вибраних з групи, що складається з АКТІ, АКТ2,
ВЕАР, СОК4, СОКб, РІКЗСА, РІКЗАК і МТОК.
Згідно з деякими варіантами здійснення, даний винахід належить до способу лікування субпопуляції пацієнтів з раком молочної залози, причому зазначена субпопуляція характеризується підвищеною експресією одного або декількох генів, розкритих вище, й лікування зазначеної субпопуляції ефективною дозою елацестранту або його сольватів (наприклад, гідрату) або солей згідно з описаними в даному розкритті варіантами здійснення приймання доз.
Коригування дози
Крім встановлення здатності елацестранту інгібувати ріст пухлини елацестрант інгібує зв'язування естрадіолу з ЕК у матці та гіпофізі. У даних експериментах зв'язування естрадіолу з ЕК в тканині матки та гіпофіза оцінювали за допомогою ЕЕЗ-РЕТ-візуалізації. Після обробки елацестрантом спостережуваний рівень зв'язування ЕК був на рівні фонового або нижче. Такі результати свідчать про те, що антагоністичний ефект елацестранту на активність ЕК можна оцінити за допомогою сканування в режимі реального часу. Виходячи з таких результатів, даний винахід належить до способів відстеження ефективності лікування елацестрантом або його сольватами (наприклад, гідратом) або солями в комбінованої терапії, що розкрита в даному документі, шляхом вимірювання зв'язування естрадіолу з ЕК в одній або декількох цільових тканинах, причому зменшення або зникнення зв'язування свідчить про ефективність.
Крім того, даний винахід належить до способів коригування дози елацестранту або його сольватів (наприклад, гідрату) або солей в комбінованій терапії, що розкрита в даному документі, виходячи зі зв'язування естрадіолу з ЕК. Згідно з деякими варіантами здійснення таких способів, зв'язування вимірюють в один і той же момент часу після одного або декількох введень першої дози сполуки.
Якщо зв'язування естрадіолу з ЕК не порушено або спостерігається його зниження нижче заданого порогу (наприклад, зниження зв'язування в порівнянні з вихідним рівнем, яке менше на 5 95, менше на 95, менше на 20 95, менше на 30 95 або менше на 50 95), першу дозу вважають занадто низькою.
Згідно з деякими варіантами здійснення, такі способи передбачають додаткову стадію введення збільшеної другої дози сполуки. Такі стадії можна повторювати, періодично збільшуючи дозу до тих пір, поки не буде досягнуто необхідне зниження зв'язування естрадіолу з ЕК. Згідно з деякими варіантами здійснення, такі способи можуть бути включені в представлені в даному документі способи інгібування росту пухлини. В таких способах зв'язування естрадіолу з ЕК може бути індикатором інгібування росту пухлини або додатковим засобом оцінки інгібування росту. Згідно з іншими варіантами здійснення, такі способи можна застосовувати в поєднанні з введенням елацестранту або його сольватів (наприклад, гідрату) або солей з метою, відмінною від інгібування росту пухлини, в тому числі, наприклад, інгібування проліферації ракових клітин.
Згідно з деякими варіантами здійснення, представлені в даному документі способи коригування дози елацестранту або його солі або сольвату (наприклад, гідрату) у комбінованій терапії передбачають: (1) введення першої дози елацестранту або його солі або сольвату (наприклад, гідрату) (наприклад, від приблизно 350 до приблизно 500 або від приблизно 200 до приблизно 600 мг/доба) протягом 3, 4, 5, б або 7 діб; (2) детекцию активності зв'язування естрадіолу з ЕК; причому: () якщо активність зв'язування ЕК не піддається детекції або нижче заданого порогового рівня, продовження введення першої дози (тобто підтримку рівня дози); або (ї) якщо активність зв'язування ЕК піддається детекції або перевищує заданий пороговий рівень, введення другої дози, яка більше, ніж перша доза (наприклад, перша доза плюс від приблизно 50 до приблизно 200 мг) протягом 3, 4, 5, 6 або 7 діб, потім перехід до стадії (3); (3) детекцию активності зв'язування естрадіолу з ЕК; причому: () якщо активність зв'язування ЕК не піддається детекції або нижче заданого порогового рівня, продовження введення другої дози (тобто підтримку рівня дози); або (ї) якщо активність зв'язування ЕК піддається детекції або перевищує заданий пороговий рівень, введення третьої дози, яка більше, ніж друга доза (наприклад, друга доза плюс від приблизно 50 до приблизно 200 мг) протягом 3, 4, 5, 6 або 7 діб, потім перехід до стадії (4); (4) повторення вищевказаних стадій до четвертої дози, п'ятої дози й т. д. до тих пір, поки не буде детектовано відсутність активності зв'язування ЕК.
Згідно з деякими варіантами здійснення, даний винахід належить до застосування РЕТ-візуалізації для детекції та/або лікування певними дозами чутливих до ЕК або стійких до ЕК форм раку.
Представлені нижче приклади наведені для кращої ілюстрації даного винаходу та не повинні інтерпретуватися як ті, що обмежують обсяг даного винаходу. У тих випадках, коли згадані конкретні матеріали, вони згадані лише з метою ілюстрації та не призначені для обмеження даного винаходу.
Спеціаліст у даній галузі техніки зможе розробити еквівалентні засоби або реагенти без використання винахідницького підходу та без виходу за межі обсягу даного винаходу. Буде зрозуміло, що в описані в даному документі процедури можна внести безліч змін, залишаючись при цьому в рамках даного винаходу. За задумом авторів даного винаходу, все такі варіанти включені в обсяг даного винаходу.
Приклади
Матеріали та способи
Тестовані сполуки
Елацестрант, який застосовували в наведених нижче прикладах, являв собою (6К)-6-(2-(М-(4-(2- (етиламін)етил)бензил)-М-етиламін)-4-метоксифеніл)-5,6,7 ,8-тетрагідронафталін-2-олу дигідрохлорид, вироблений, наприклад, компанією ІКІХ РПаптасеціїсаі5, Іпс. (Флоренція, Південна Кароліна).
Елацестрант зберігали у вигляді сухого порошку, складеного для застосування у формі гомогенної суспензії в 0,5 95 (мас./об.) метилцелюлозі в дейонізованій воді, та в разі тваринних моделей його вводили перорально. Тамоксифен, ралоксифен і естрадіол (Ег2) закуповували у 5ідта-Аіагісп (Сент-
Луїс, Міссурі) і вводили підшкірною ін'єкцією. Фулвестрант закуповували у Тосгі5 Віозсіепсе5 (Міннеаполіс, Міннесота) і вводили шляхом підшкірної ін'єкції. Якщо не зазначено інше, решта лабораторних реагентів була придбана у бідта-АЇїагісн.
Формування стійкості до інгібіторів СОК4/6
Іп міго
Клітини НСОСС1428-ІТЕО-СОКА/6, МСЕ7-У5375-СОК4/6К ії МоСЕ7-05386-СОК4/6К отримували шляхом впливу на клітини НСС1428-Ї ТЕО висхідними концентраціями відповідних СОКА/бі під час поточної підтримки таких клітин в умовах 500 нМ палбоциклібу та рибоциклібу в разі клітин палбогс і рибог" відповідно і 250 НМ абемациклібу в разі клітин абемагє.
Іп мімо
Фрагменти ксенотрансплантата, отриманого від пацієнта 51941-НІ, імплантували безтімусним "голим" мишам. Пухлини вимірювали двічі на тиждень штангенциркулем з ноніусом; об'єми розраховували за формулою: (І"М/2)0,5. Пухлини обробляли середовищем, фулвестрантом (3 мг/доза на тиждень) ї- палбоциклібом (25 мг/кг на добу) і КАЮ1901 (30 мг/кг на добу). Пухлинам, які зростали в присутності фулвестранту (3 мг/доза на тиждень) - палбоциклібу (25 мг/кг на добу), дозволяли вирости до розміру »1500 мму, а потім їх збирали й повторно трансплантували новій когорті мишей, що враховували за пасаж (Р1).
РОХ-моделі
Пухлини пересаджували у вигляді фрагментів безтімусним "голим" мишам (Ми (МСК)-Рохпіпи).
Отримані від пацієнта М/НІМ43 фрагменти ксенотрансплантата імплантували мишам після оваріектомії без додавання естрадіолу (Ногі2оп). Усіх мишей утримували в стерильному приміщенні, в індивідуально вентильованих клітках зі стерилізованими та безпиловими кукурудзяними підстилками, з необмеженим доступом до стерилізованої їжі та води, в умовах циклу зміни дня і ночі (12-14- годинний циркадний цикл штучного освітлення) і за контрольованої кімнатної температури та вологості. Пухлини вимірювали двічі на тиждень штангенциркулем з ноніусом; об'єми розраховували за формулою: (І"М/2)70,52. Елацестрант і палбоцикліб вводили перорально щодоби протягом усього періоду дослідження. Фулвестрант вводили підшкірно один раз на тиждень.
Кількісна ПЛР в режимі реального часу (КТ-ДРСК)
Ксенотрансплантатні моделі іп мімо
Пухлини наприкінці дослідження подрібнювали за допомогою імпактора сгуоРКЕР "М (Сомагів), а загальну РНК екстрагували за допомогою мінінабору КМеазу (Оіадеп) д4РСК проводили із застосуванням майстер-міксу Тадтап БРаві Мігиз 1-5їер Мавзіег Міх і зондів ТадМапТтМ (Арріїєйд
Віозувзієтв). Значення Сі за допомогою способу 2-ДДАСТ аналізували для оцінки відносних змін експресії МРНК РОК (прогестеронового рецептора) з САРОН як внутрішнього контролю.
Ксенотрансплантатні моделі іп мго
Наприкінці обробки клітини лізували буфером для лізису з 1-стадійного набору СеїЇ5-0-СІі, а лізати обробляли згідно з інструкціями виробника. ФРСОК проводили з використанням 1-стадійного майстер- міксу і зондів ТадМап м (Арріїеєд Віозузієтв). Значення Сі за допомогою способу 2-ДАСТ аналізували для оцінки відносних змін експресії МРНК Рок (прогестеронового рецептора), МРНК ЧИ (фактора 1 "трилисника") і мРНК СКЕВТІ (регульованого естрогеном росту) з САРОН як внутрішнього контролю.
Аналізи проліферації
Клітини висівали з щільністю 5000 клітин/лунка та на наступну добу обробляли відповідними схемами обробками. Життєздатність вимірювали через 7 діб інкубації з лікарським засобом, а дані нормалізували до контрольних значень, прийнятих за 100 95. Дані представлені у вигляді графіка 95 інгібування росту в порівнянні з контролем на 7-му добу.
Аналіз утворення колоній
Клітини висіювали з щільністю 1000-10000 клітин/лунка і дозволяли їм рости протягом 2-5 тижнів в залежності від лінії клітин. Процедури проводили в трьох повторностях; середовище та сполуку замінювали щотижня. Наприкінці циклу обробки клітини фіксували в параформальдегіді та фарбували кристалічним фіолетовим для візуалізації.
Вестерн-блотинг
Клітини або пухлини збирали після введення дози та аналізували експресію білка за допомогою стандартної практики, а антитіла аналізували згідно з наступним порядком: ЕКа, РЕК, Е2Е1, ССМЕЛ,
ССМЕ2, ССМО1, КЬ, рКкр, СОК2, СОКа4, СОК (Сеї! 5ідпаїїпд ТесппоїІодіе5, кат. Мо 13258; Мо 3153; Мо 3742, Мо 4129, Мо 4132, Мо 2978, Мо 9309, Мо 8516, Мо 2546, Мо 12790, Мо 13331), р107, р130 (Арбсат: ар168458, арб545) і вінкулін: Зідпта-АїЇдгісй, Мо м9131. Експресію білка кількісно оцінювали за допомогою програмного забезпечення Ал2игеброї і о нормалізували до експресії вінкуліну.
Диференціальні ефекти палбоциклібу на чутливі та стійкі лінії досліджували шляхом обробки обох ліній за допомоги 500 нМ палбоциклібу протягом 24 годин і порівняння з їх відносними контролями.
Вплив елацестранту, фулвестранту та палбоциклібу іп мімо вивчали наприкінці дослідження пухлин, які збирали через 4 години після приймання останньої дози.
Приклади
Звернемося тепер до фіг. ТА-10, де наведено створення і характеристики стійких до палбоциклібу моделей на тлі Е5КІ дикого типу та мутантного Е5КІ. На фіг. 1А стійкість до палбоциклібу в створених ліній клітин ТЕО з ЕК: дикого типу представлена на графіку для ліній клітин, чутливих до палбоциклібу (палбоз) і стійких до палбоциклібу (палбо"). На фіг. 18 відсоток інгібування росту (нормалізований до контролю, прийнятого за 100 95) щодо Іод(Іпалбоцикліб(мкМ)| наведений на графіку для ліній клітин палбо? і палбо" з ЕБК1: дикого типу. На фіг. 1С фотографії результатів аналізу утворення колоній ліній клітин палбоз і палбо" з ЕЗК1: дикого типу представлені для контролю та після обробки палбоциклібом (500 нМ). На фіг. 10 результати вестерн-блотингу проілюстровані для моделей ТЕО, ТЕО « палбо, І ТЕО- палбогк і І! ТЕЮО- палбо" ї- палбо, що мають ген Е5К1: дикого типу.
Звернемося тепер до фіг. 2А-20, де наведено створення і характеристики стійких до палбоциклібу моделей на тлі Е5БКІ! дикого типу та мутантного Е5БКІ. На фіг. 2А формування стійкості до палбоциклібу в створених ліній клітин ТЕО з Е5К1:05380 наведено на графіку для ліній клітин, чутливих до палбоциклібу (палбоз) і стійких до палбоциклібу (палбог"). На фіг. 28 відсоток інгібування росту (нормалізований до контролю, прийнятого за 100 95) щодо І одІпалбоцикліб(мкМ)| наведений на графіку для ліній клітин палбо? і палбо" з Е5Е1:0О5380. На фіг. 23 фотографії результатів аналізу утворення колоній ліній клітин палбо? і палбо" з Е5К1:05380 представлені для контролю та після обробки палбоциклібом (500 НМ). На фіг. 20 результати вестерн-блотингу, проілюстровані для моделей І ТЕО, ГТЕО-- палбо, І ТЕО- палбогє і І ТЕО- палбог -« палбо, що мають мутацію Е5К1:0О5385.
Звернемося тепер до фіг. ЗА-30, де наведено створення і характеристики стійких до палбоциклібу моделей на тлі Е5БКІ! дикого типу та мутантного Е5КІ. На фіг. ЗА формування стійкості до палбоциклібу в створених ліній клітин ЇТЕО з Е5К1:У5375 наведено на графіку для ліній клітин, чутливих до палбоциклібу (палбоз) і стійких до палбоциклібу (палбог"). На фіг. ЗВ відсоток інгібування росту (нормалізований до контролю, прийнятого за 100 95) щодо І одІпалбоцикліб(мкМ)| наведений на графіку для ліній клітин палбоЗ і палбо" з Е5К1:У5375. На фіг. ЗС для контролю та після обробки палбоциклібом (500 нМ) представлені фотографії результатів аналізу утворення колоній лінії клітин палбоз і палбо" з Е5К1:У5375. На фіг. ЗО результати вестерн-блотингу, проілюстровані для моделей
ЇТЕО, ГТЕО-- палбо, І ТЕО- палбогс і І ТЕО- палбо" я палбо, що мають мутацію Е5В1:У5375.
Звернемося тепер до фіг. 4А-4Е, де представлено створення й характеристики стійких до рибоциклібу та абемациклібу моделей на тлі Е5КІ! дикого типу та мутантного Е5К1. На фіг. 4А стійкість до рибоциклібу в створених ліній клітин ТЕО з Е5К1: дикого типу наведена на графіку для ліній клітин, чутливих до рибоциклібу (рибо?) і стійких до рибоциклібу (рибок). На фіг. 4В стійкість до абемациклібу в створених ліній клітин ЇТЕО з ЕК: дикого типу наведена на графіку для ліній клітин, чутливих до абемациклібу (абемазФг) і стійких до абемациклібу (абемаг"). На фіг. 4С відсоток інгібування росту (нормалізований до контролю, прийнятого за 100 95) щодо І одІрибоцикліб(мкМ)| представлений на графіку для ліній клітин рибо? і рибо" з Е5К1: дикого типу. На фіг. 40 фотографії результатів аналізу утворення колоній ліній клітин рибо? і рибо" з Е5К1: дикого типу представлені для контролю та після обробки рибоциклібом (500 нМ). На фіг. 4Е відсоток інгібування росту (нормалізований до контролю, прийнятого за 100 95) щодо І од(абемацикліб(мкМ)| наведений на графіку для ліній клітин абемаз і абемаг" з Е5К!1: дикого типу. На фіг. 4Е фотографії результатів аналізу утворення колоній для ліній клітин абема?з і абема" з Е5БК1!: дикого типу представлені для контролю та після обробки абемациклібом (500 нм).
Звернемося тепер до фіг. 5А-5Е, де представлено створення й характеристики стійких до рибоциклібу та абемациклібу моделей на тлі Е5КІ дикого типу та мутантного Е5К1. На фіг. 5А стійкість до рибоциклібу в створених ліній клітин ЇТЕО з Е5К1:05380 наведена на графіку для ліній клітин, чутливих до рибоциклібу (рибоЗ) і стійких до рибоциклібу (рибо"). На фіг. 5В стійкість до абемациклібу в створених ліній клітин ТЕО з Е5К1:05380 наведена на графіку для ліній клітин, чутливих до абемациклібу (абемаз) і стійких до абемациклібу (абемайк). На фіг. 5С відсоток інгібування росту (нормалізований до контролю, прийнятого за 100 95) щодо І одІрибоцикліб(мкМ)| представлений на графіку для ліній клітин рибоз і рибо" з Е5Р1:0О5380. На фіг. 50 фотографії результатів аналізу утворення колоній для ліній клітин рибоз і рибо" з ЕЗ2К1:05380с представлені для контролю та після обробки рибоциклібом (500 нМ). На фіг. 5Е відсоток інгібування росту (нормалізований до контролю, прийнятого за 100 95) щодо ІодІабемацикліб(мкМ)| наведений на графіку для ліній клітин абема: і абема" з Е5ЕК1:0О5386. На фіг. 5Е фотографії результатів аналізу утворення колоній для ліній клітин абемаз і абемаг" з Е5К1:05380 представлені для контролю та після обробки абемациклібом (500 нм).
Звернемося тепер до фіг. бА-6Е, де представлено створення й характеристики стійких до рибоциклібу та абемациклібу моделей на тлі ЕК! дикого типу та мутантного ЕЗКІ1. На фіг. бА стійкість до рибоциклібу в створених ліній клітин ЇТЕО з ЕБК1:У5375 наведена на графіку для ліній клітин, чутливих до рибоциклібу (рибоЗ) і стійких до рибоциклібу (рибо"). На фіг. 6В стійкість до абемациклібу в створених ліній клітин ЇТЕО з ЕЗК1:У5375 наведена на графіку для ліній клітин, чутливих до абемациклібу (абемаз) і стійких до абемациклібу (абемай). На фіг. 6С відсоток інгібування росту (нормалізований до контролю, прийнятого за 100 95) щодо І одІрибоцикліб(мкМ)| представлений на графіку для ліній клітин рибоЗ і рибо" з ЕЗК1:У5375. На фіг. 60 фотографії результатів аналізу утворення колоній для ліній клітин рибо? і рибо" з ЕЗК1:У5375 представлені для контролю та після обробки рибоциклібом (500 нМ). На фіг. 6Е відсоток інгібування росту (нормалізований до контролю, прийнятого за 100 95) щодо ІодІабемацикліб(мкМ)| наведений на графіку для ліній клітин абема: і абема" з Е5БР1:У5375. На фіг. бЕ фотографії результатів аналізу утворення колоній для ліній клітин абемаз і абема" з ЕЗК1:У5375 представлені для контролю та після обробки абемациклібом (500 нм).
Звернемося тепер до фіг. 7А-7С, для елацестранту спостерігали дозозалежне інгібування росту пухлини та регресію пухлини незалежно від попереднього лікування або мутантного статусу ЕЗК1. На фіг. 7А наведені значення ЕСво (НМ), а відсоток інгібування росту наведений на графіку щодо
Ї од(Іелацестрант (НМ) для лінії клітин з ЕЗК1:дикого типу, чутливих до інгібіторів СОКА/6, лінії клітин палбоцикліб" з Е5ЕЛ:дикого типу, лінії клітин рибоцикліб" з Е5ЕТ:дикого типу та лінії клітин абемацикліб" з Е5Р1:дикого типу. На фіг. 7В наведені значення ЕСбзо (НМ), а відсоток інгібування росту наведений на графіку щодо ІодІіелацестрант (НМ)| для лінії клітин з Е5К1:О05380, чутливих до інгібіторів СОКА/б, лінії клітин палбоцикліб" з Е5Р1:05380С, лінії клітин рибоцикліб" з Е5К1:0О5385 і лінії клітин абемацикліб" з ЕБР1:05380. На фіг. 7С наведені значення ЕСв5о (НМ), а відсоток інгібування росту наведений на графіку щодо І одІіелацестрант (НМ)| для лінії клітин з ЕБК1:У5375, чутливих до інгібіторів СОКА4/6, лінії клітин палбоцикліб" з Е5К1:У5375, лінії клітин рибоцикліб" з
ЕБР1:У5375 і лінії клітин абемацикліб" з ЕЗК1:У5375.
Звернемося тепер до фіг. ВА-8С, для елацестранту спостерігали довгострокове інгібування росту ліній клітин, стійких до інгібіторів СОК4/6. На фіг. ЗА представлені фотографії результатів аналізу утворення колоній, на яких у верхньому ряду візуалізовано зростання контрольної лінії клітин з
ЕБР1:дикого типу, чутливої до інгібіторів СОКА/б, лінії клітин палбоцикліб" з ЕЗК1:дикого типу, лінії клітин рибоцикліб" з Е5Е1:дикого типу та лінії клітин абемацикліб" з Е5РЕ1:дикого типу, тоді як на фотографіях у нижньому ряду візуалізовано зростання клітин для контрольної лінії клітин з
ЕЗЕ1:дикого типу, чутливих до інгібіторів СОКА/6, лінії клітин палбоцикліб" з Е5К1:дикого типу, лінії клітин рибоцикліб" з ЕЗК1:дикого типу та лінії клітин абемацикліб" з Е5Е1:дикого типу після обробки елацестрантом (300 нМ). На фіг. 88 представлені фотографії результатів аналізу утворення колоній, на яких у верхньому ряду візуалізовано зростання контрольної лінії клітин з ЕЗК'І:дикого типу, чутливих до інгібіторів СОКА/6, лінії клітин палбоцикліб" з Е5Р1:05386, лінії клітин рибоцикліб" з
ЕБР1:0О5380 і лінії клітин абемацикліб" з Е5К1:0538С, тоді як на фотографіях у нижньому ряду візуалізовано зростання клітин для контрольної лінії клітин з ЕЗК1:дикого типу, чутливих до інгібіторів
СОКУ, лінії клітин палбоцикліб" з ЕЗК1:0О5385, лінії клітин рибоцикліб" з ЕЗК1:0О5385 і лінії клітин абемацикліб" з ЕБР1:05380 після обробки елацестрантом (300 нМ). На фіг. 8С представлені фотографії результатів аналізу утворення колоній, на яких у верхньому ряду візуалізовано зростання контрольної лінії клітин з ЕК 1:дикого типу, чутливої до інгібіторів СОКА/6, лінії клітин палбоцикліб" з
ЕБЗЕ1:У5375, лінії клітин рибоцикліб" з Е5Е1:дикого типу та лінії клітин абемацикліб" з Е5К1:У5375, тоді як на фотографіях у нижньому ряду візуалізовано зростання клітин для контрольної лінії клітин з
ЕЗЕ1:У537А, чутливих до інгібіторів СОКА/6, лінії клітин палбоцикліб" з Е5К1:У5375, лінії клітин рибоцикліб" з ЕЗК1:У5375 та лінії клітин абемацикліб" з Е5К1:У5375 після обробки елацестрантом (300 нм).
Звернемося тепер до фіг. 9А-9Е, для елацестранту спостерігали інгібування росту нечутливою до палбоциклібу РЮОХ-моделі. На фіг. 9А представлені середні об'єми пухлини з плином часу у безтімусних "голих" мишей, яким імплантовано РОХ-ксенотрансплантати М/НІМ43 з мутацією
ЕБЗК1:0О5386, яких обробляли контрольним середовищем, палбоциклібом, фулвестрантом (3 мг/доза) і елацестрантом (30 і 60 мг/кг). На фіг. 98 представлені результати кількісної оцінки рівня білка ЕКа, які були отримані шляхом побудови графіка залежності ЕКа/вінкуліну (нормалізований до контролю) щодо обробки ксенотрансплантатної РОХ-моделі М/НІМ43, що має мутацію Е5К1:05380, контрольним середовищем, палбоциклібом, фулвестрантом (3 мг/доза) і елацестрантом (30 і 60 мг/кг). На фіг. 9С представлені результати кількісної оцінки рівня білка Е2ЕТ, які були отримані шляхом побудови графіка залежності Е2Е1/вінкуліну (нормалізований до контролю) щодо обробки ксенотрансплантатної
РОХ-моделі МУНІМ43, що має мутацію Е5К1:05380б, контрольним середовищем, палбоциклібом,
фулвестрантом (3 мг/доза) і елацестрантом (30 і 60 мг/кг). На фіг. 90 представлені результати кількісної оцінки рівня білла ССМЕТ (або цикліну Е1), які були отримані шляхом побудови графіка залежності рівнів МРНК РОК (нормалізованих до контролю) щодо обробки ксенотрансплантатної РОХ- моделі М/НІМ43, що має мутацію ЕБ5К1:05380б, контрольним середовищем, палбоциклібом, фулвестрантом (З мг/доза) і елацестрантом (30 і 60 мг/кг). На фіг. 9Е представлені рівні мРНК РОК, які визначали шляхом побудови графіка рівнів мРНК Рок (нормалізованих до контролю) щодо обробки ксенотрансплантатні РОХ-моделі МУНІМ43, що має мутацію Е5К1:0О5380, контрольним середовищем, палбоциклібом, фулвестрантом (3 мг/доза) і елацестрантом (30 і 60 мг/кг). На фіг. 9Е представлені результати вестерн-блоттингу, що ілюструють ксенотрансплантатну РОХ-модель М/НІМ43-НІ, що має мутацію ЕБК1:05380б, оброблену контрольним середовищем, палбоциклібом, фулвестрантом (3 мг/доза) і елацестрантом (30 і 60 мг/кг).
Звернемося тепер до фіг. 10А-10С, на яких продемонстровано, що елацестрант інгібує передачу сигналів ЕК у стійких до інгібіторів СОК4/6 моделей. На фіг. 10А показані результати кількісної оцінки прогестеронового рецептора (РОК) в моделях пухлинних клітин, що мають мутацію Е5К!1: дикого типу, які були отримані шляхом побудови графіка залежності рівнів мРНК Рок (нормалізованих до контролю) щодо обробки ліній клітин палбо? і палбо" контролем і елацестрантом (100 нМ і 1000 нм).
На фіг. 108 показані результати кількісної оцінки фактора "трилисника" 1 (ТЕР) в моделях пухлинних клітин, що мають мутацію Е5К'І1: дикого типу, які були отримані шляхом побудови графіка залежності рівнів МРНК ТЕЕ1 (нормалізованих до контролю) щодо обробки ліній клітин палбо: і палбо" контролем і елацестрантом (100 нМ і 1000 нМ). На фіг. 10С показані результати кількісної оцінки регульованого естрогеном росту (СКЕВІ) в моделях пухлинних клітин, що мають мутацію Е5К'!1: дикого типу, які були отримані шляхом побудови графіка залежності рівнів МРНК СКЕВІ1 (нормалізованих до контролю) щодо обробки ліній клітин палбо?: і палбо" контролем і елацестрантом (100 нМ і 1000 нм).
Звернемося тепер до фіг. 11А-11С, на яких продемонстровано, що елацестрант інгібує передачу сигналів ЕК у стійких до інгібіторів СОК4А/6 моделей. На фіг. 11А показані результати кількісної оцінки прогестеронового рецептора (РОК) в моделях пухлинних клітин, що мають мутацію Е5К1:0О5386, які були отримані шляхом побудови графіка залежності рівнів МРНК РоК (нормалізованих до контролю) щодо обробки ліній клітин палбоз і палбо" контролем і елацестрантом (100 нМ і 1000 нм). На фіг. 118 показані результати кількісної оцінки фактора "трилисника" 1 (ТЕЕТ) в моделях пухлинних клітин, що мають мутацію Е5К1:05380, які були отримані шляхом побудови графіка залежності рівнів мРНК
ТЕЕ1 (нормалізованих до контролю) щодо обробки ліній клітин палбо? і палбо" контролем і елацестрантом (100 нМ ї 1000 нМ). На фіг. 11С показані результати кількісної оцінки регульованого естрогеном росту (ЗКЕВІ) в моделях пухлинних клітин, що мають мутацію Е5К1:0О5380, які були отримані шляхом побудови графіка залежності рівнів МРНК СКЕВІ1 (нормалізованих до контролю) щодо обробки ліній клітин палбо?: і палбо" контролем і елацестрантом (100 нМ і 1000 нм).
Звернемося тепер до фіг. 12А-12С, на яких продемонстровано, що елацестрант інгібує передачу сигналів ЕК у стійких до інгібіторів СОК4А/6 моделей. На фіг. 12А показані результати кількісної оцінки прогестеронового рецептора (РОК) в моделях пухлинних клітин, що мають мутацію ЕЗК1:У5375, які були отримані шляхом побудови графіка залежності рівнів МРНК РоК (нормалізованих до контролю) щодо обробки ліній клітин палбо?: і палбо" контролем і елацестрантом (100 нМ і 1000 нм). На фіг. 128 показані результати кількісної оцінки фактора "трилисника" 1 (ТЕР) в моделях пухлинних клітин, що мають мутацію ЕЗК1:У5375, які були отримані шляхом побудови графіка залежності рівнів МРНК ТЕЕ1 (нормалізованих до контролю) щодо обробки ліній клітин палбоз і палбо" контролем і елацестрантом (100 нМ їі 1000 нм). На фіг. 12С показані результати кількісної оцінки регульованого естрогеном росту (СКЕВІ) в моделях пухлинних клітин, що мають мутацію ЕБК1:У5375, які були отримані шляхом побудови графіка залежності рівнів МРНК СКЕВІ1 (нормалізованих до контролю) щодо обробки ліній клітин палбо? і палбо" контролем і елацестрантом (100 нМ і 1000 нм).
Звернемося тепер до фіг. 13, на якій продемонстровано, що елацестрант інгібував ріст пухлини у
РОХ-моделі, раніше обробленій комбінацією фулвестранту та палбоциклібу. На фіг. 13 на графіку представлений об'єм пухлини ксенотрансплантатної РОХ-моделі М/НІМ43-НІ (яку раніше не піддавали обробці) в залежності від доби обробки під час обробки моделі середовищем або комбінацією фулвестранту та палбоциклібу (дані для фулвестранту З мг/доза взяті з окремого дослідження).
Пухлини з групи фулвестранту та палбоциклібу потім були повторно імплантовані в іншому дослідженні (з обробкою палбоциклібом 5Т941-НІ; перший пасаж), а потім оброблені середовищем, фулвестрантом (З мг/доза), палбоциклібом (25 мг/кг) і елацестрантом (30 мг/кг) з метою демонстрації, що елацестрант все ще є ефективним під час інгібування росту пухлини в РОХ-моделі, раніше обробленої комбінацією фулвестранту та палбоциклібу.
Інші варіанти здійснення
Усі публікації та патенти, згадані в даному розкритті, включені в даний документ за допомогою посилання в тій же мірі, як якби кожна окрема публікація або патентна заявка була спеціально та індивідуально вказана як включена за допомогою посилання. Якщо значення термінів в будь-якому з патентів або публікацій, включених за допомогою посилання, суперечить значенню термінів, що застосовуються в даному розкритті, передбачається, що значення термінів у даному розкритті має переважну силу. Більш того, в попередньому розгляді розкриті й описані лише ілюстративні варіанти здійснення даного винаходу. Спеціаліст у даній галузі техніки легко зрозуміє з такого розгляду та з доданих креслень і формули винаходу, що в них можуть бути зроблені різні зміни, модифікації та варіації що не виходять за рамки ідеї та обсягу даного винаходу, які визначені в наведеній далі формулі винаходу. ка ВМ шщ-е
ВХ да ення ни ВО ТННЕВКЯ Ве дк
Дике мні Еге Джин зам Ї БТ. порий
ЕВ днкнЕ тни
Фіг. ТА ї ВЕ 3 Я 7 77 ж ях в НЕ с те щт хе З. пе х а. і я Й дм кї К.
В ЕЕ КЗ Шок оосстннЙЙ щ Ж Мк ян я ре
ОМ
5 меггіфіресого КЕ ТВКОКО я гу. Кіжнюй й тк НК дк Дефект хе кан кн кн кн о р кт кт кн ник кн кн ке кину іїсо Паліопиклів КМТ
Фіг. 1В
ЖКовухкь СІ я но вн ї ї- Ос х : х ! а В ша в З ой вна
Чат Б о зв ши Я тка В ЕЕ п ї
ЖЖ ОК й шт х . ж СБушх мах тдди ПК ї х ОК КУ ПИЛУ ох ї а т. пох У Не пд ЕХ
З КУ УКК ККУКУкУУКкк, о з я с НЕ хо х
Гоа С ї ша с их
ОК і МВ
С ть,
Кос КО Ж ВІ ОК ЖЖ ЕХ їх ЕЕ
ШИ НЕ А А ЕК КВ З ізїкх В що з ЕК по
Грейку Ве Ок хх що ОККО ак ї БО я в и ВО Ж ла КВ ВК и КАХ х ОКУ З Кая рот щх :
КМ В ЖК ее сен Кен
ЕЗБ днкне тв
- ск в ве з г я З
З. ж щ-я в ша ж аг раза Її
ОК ша ня іш: 5 ан
Явка пінні мо нн ення,
СОКУ ве ее ее.
СЕКя і
ББК лики тної
Фіг. 10 я ам не
Мін ев
В НК
ДУМКУ ото тс юсю ск се: ВІВ НВО
Ж осхеттхюююютьттнси В, СМИЛИМИТИТМИТИСИСКТИ КУТІ РИТИ ДИТ ее тонн ї З вт ОВ хо я скіни скін ЖЖ ЖЖ ХУ скжж Ж ож ЖЖ Жжжожи ск, ож Я
Кот КХАААААААХХХЄТЄ КК КАК КАМ слюда що УК пух
ПОЗВЕ палі ТЗУХНЕ полку
Вії: кмоуциюу СТІ ЗУ
БЕК мутамк ТЛ пек, їз и ш- ж м й І -- Я і шт т Я ососожадхх ходою хо МУ юияииг ЕІ:
Б йо ме ми по ат Ся Х чехи
Е БА т К Шу Тк 1 м їх
В З щ б ве : ШЕ ї ху У ше г. а до У
Тк х Я ех
ОО о ; щої Зо НВ
ШО ТІ ж щшошоО сто ще щ
ЖЖ оз шщ Е . кома зесеосфб ооо Тая
З З ВІК
- дення 1: п І т со Ж. х порі КНУ -
І я т. те фу т, - р ж гу : те - що ще ш І
Еоє Паливо см
Ех. с Е кун
ЕК: мутант ПІКЕТ си фщ оч . Назоспиєта
Контрать го ї Х й Х ї . ОВК. я : х ї Джо кож У Е г ї
Рак ов ШО 4 как вия т ! ще ВВЕ що х ж ат 3 стокоя М БВ ай проща КОЮ ВЕ пи
МТК їж м Зоя КОХ шо п. КЗ по Кві то КЕ
ІВ ки ОКА пт
ТОЖ Ж жо НВ т. ї
ЕОМ ЖЕ пох т я ї ї ще а їх. яки ї ї ми К- ХУ : пИШК кох і ЕЗМИКЯ опе ї чених Кент нетто їх о ха шк ше КЕ х їх ках Кк кі ке ЕВ З Ж
ВН о ин ко о и фізіо М с тн
ТізлюмУ Ж ех Я В кох
ІПН ВК шо о Ен ЕВ
ОН жк но ке В ВЕ я в и
ІК и у Бо Ж жа Ж ВХ і ев ОК Ж в а ВЕ | за
ЕЗБІ: мутани ПАСИ роя се - - ж І ш ш щ ох ук ж й ей ха ке я БВ ма щу ще г: їх м г м
ЕВ 05555
ЦЧиклівн Біо ве ее)
Циклів в? 11653
Й.
СОКЯ зв пуд МО Є
Ск як її
БТЖУ о зо зо
ЕКа ен жо.
ТЗІ: музант ОБО
Фіг. 20 дом що
КЕ нМ на
УМ
КИМ, па
КІ У ЗАМ
2 М ооо ет В
КК ВВ
ЛИ КК
ДОТИКУ КА Ум нм, ша В ко шко
Є дамою 000 ЖЖ ох ооо хх хх хо хо ххю хххх хек хою ЕВ я он спа АЙ скат ск хи лпалх ть
Бета Мт
ЕВНімутавт Уа с ке ж пу т ОК ос БОБ юне о
БОЮ я тт її шу : М як як ух хе ; як МИ Вих пити Х г шт
ЕЕ і о ко джин х Пр тк іо і , Я ї І -е ЩІ т В . щ шо Ж 5 щи і ох ог і я ях Ії "з що і 5. . -Е | ку з Я я
Що : тю хжаеюктий що ! Ес шо Ме до і пходе : ай : т ще У що шх : хо Ж : - : тля
КУ ;
ЗЕ ; У м і яко Теж ВДЕ - ; - зн нн НН НН -- Я "я т т з
Тов ТЕ сті, бу У
БК ев Палонитклізі са ще - . Тк дк,
ЕЗНі мутанті КАТ
Фіг. 7Е
ТТдлих сх іздлюа милих. ежектетитук. Є у я
Кошкцрнте Скк НУ ек УЖ кю ук Кк х Х їх ї со З ї ї а я : ша. ж і і 1 СІ ж х 2 ї ї з. х : ї . Х . :
Хо ж х т :
Ху 0 Ве Х ї
Паавеб В 5 З З
ЩЕ - 3
Ж оо МК, Я я У їх
ГБ ОО ; осях З І
Я Ж х Х ;
Зенон совосонеоофноеооюоогоєонннно х їх - с Я . ». ї
З ОД у З до слямо Н х пд М ШСЗ р то З
ОН вв і що й х ПО ц п : х хх: Її 2 с я
М ет в і жо 0 Б
МАМА її. З ях БЕ Б пи, їх - І
Бо Ба з
Гол ку Ж сен 1 Б ол шо З ета ет р ще Вот Я в ; х 7 те х ЩЕ З ї АВ но 3 па Н
Зх тр чих
ЕКНЕ мутант і ЗАТ
З в щ я я
Же 00Ж о ет У еШ
Ше мое ож вважа с загальний ВО
ЕВ -5
ШЦиклін ті Б з
Пиклів Зо сю ше св ТТ ви.
ЕЕ ЗБ а певно
ЕЕ ПИМИШКИИИИИИ СПИНКИ .
ОКХ КК они ППП З
ЕКВІ: мутвні УЗА
Фіг. 30 чним сим пу СЕК К й
З а ен
ЗД КВК
ЗМ ІКП
МИ КЕВТ нн п ре Пам МЕХІКО КК КК КЕН Уккуюєк ї м нан
Х ї 5
Ук к Кк ююН ЗАМ М МАК ХАЖЖ КМКФ МАК МАЖКІ АКА ХА ЗАААФ АК: МИ лих оз г Пси що ярлттх спон.
ВЖК ВЕ ХМ -БЕТЕС. ува диКнЕ ли І ТЕГ виа
ЕБНКі дикий тних
Фіг. 4А ; " де шке се о
З ; «еВ В зни о
Мини
ЖИМ ИМЕНИ сов КК
ДК, екс НВО НИВА
Ж оддтллиттюнннннсниллкчкии КУКА УКХ ДЕ КК кю хх уж ккд,
ЦоАюннннлняннння, ї Фк саєююкккк как кн еннсттнннннх я - «ее хм Ж чн, я - доижу шо п дики і ТЕТ мм дикий тн ТЕГАМИ
ККЗ. сктаятт сгомчи
ЗК: диких ги:
Фіг. 4Е
Вася чек З -к З и х ж у
Ж у - ш мВ Я - чу ж шо ш- Я з
Фо у ол кох ; . коде х й ; к-
Ж х к і їх що : ау о ; ВЗ ой Я її ОК що З шк, що З а но де х во ж я з ЕЛ Жх,
Кен Я Ж о З в у тя ож дики 11
ІЙ з и. х і у жо
ВО шо З З в
У хх І. Ж 4
Б. ш БУ чк М
ЧО ! КОЖ зх От ; хо п З жк М
Ж с З я др
Кам Я зга х -к у - «е: ж у ле
Ж | - В Бо - З
КЕ Я шт тюиг АВ ще ; за ох Прбяє
М х Хе
Ж у ка 275 5 пеееоооссоооооооооо ооо ооо ооо ооо
Ж. ої т 3 ї Я -х Ук сх а ся « г - - 5 М 7 шк лу катів але
Газ парні клза мА
ФЕСТ Х са зі днк ІНН
Фіг. 4С
Еноопикла
Контооль (їхав нм
РО КЕ Ж п КО лит сот й ї ЗБ КО 3 шу ло хо з щх Ж «еК Я - пт З
І АВ
М КИ КК КК т й Б З о ня У жає ні В в МК
НН и в в
ТО Зк й хх х де 7 х ї ХО пл Не:
Ка шк УЖЕ п кю
РОК де КОТ К ЕК У ШЕЛЕСТ Х В те З о З о пд В : я КЖ ні х 3 пот ковВ
Оу в пов ї. ДЯ СЕ Я ДЕ тик В їх и КК, У йо МЕЖ, К: ї А БК я СЕ, У а НЕ. КТ КОЖУХ З і ЕВ КО КВ ша і ше
Ки а В В ОМ. св ОК є о м
Ок
ТУ з МЖК хі: ОВО Ж КВ о НН І М и НИ В Я
БУВ а В ВК рок ї са НЕ Я ПУХ В
ТЕ. одддяяккця КВ кнннн кн Ж кджяннний
ХК іх од КУ и т
ЕЕ дню тп
Фіг. 40 ях,
СК: ше де сх ще !
М ОН. - ї їх 5 . г с. Е хе п х ж хх З еад нео сх з
У ї с Мн я КО Е ї їх паж 1 т. МЖК и оюоюит шк, пий
КОН ї и Б
Мол зх : ї з Ще ї Б-Я -Ж - жтож ї У
ЗШ
Ж я ! х
Ж Ж ї хх ши З «вад ек їх с що З 7 що х
ЩОБХ ва х що м
Вк й ї ч ще О-ї З шк ї З
Ехо Ду 3 З -Щ о тх ї Я йо хх ї ' во" ге ї й ж ! зенефн ОВ У до і я ме еНеВеХ - ЩІ 7 прово ооо ооо ооо дово ооо
Го іабемацеюто смс
ВК прут ші ДНІ НЕ
Фіг. ЗЕ дюеменнЕлі ув Е ке ру Я ші ОТО і НМ
Гоше Май ї ї п ОБ ЖК 5 т : їх
Хдаснаї 1 і МДЕ и р ВН Зі
УМаеВІа ПВ ка о ї
КО а ; : ї
Іо жа КВ ПЕТТІ ї
МЕ В В Я В З пт їх ї ж З рано а В с ї
Їннняянкянн ВВ чякняячяякннй А АКАД ОДА ла Алляляя лях ї Я Ж ї 5 по КО Ох ї : КМ 8 З КВ жов ї Ж ОО Ж В ЖУК ш Х іх ЕЕ ВВ а дк В ще їх щ В В ВК Ж дю ою і ВВ дах «З ЕЕ дЖХ Е що Же же ОЗ ке вера
У Каже Же М фак я о ВЕ
СК хом вва.
Ка дк о в В Ж я жу
ОК ВОВК 8 хо оо с ВО ї с, ЦХ З ЖК ї
КТК. зерюе
ЕЗБі ликпи ни
Фіг. АЕ піхв
І ні «Я ха в нив
Мн НН
МНК джжжхххкккх МЕТІ КН
ШИ ОД ДИ ММК пи аа
Хоекжлиюти ил чем соге сого мех мем соговова а З Пе КМТ Олю
ПБС вися ГУ ВК ові
КИ Ж о рожаслечяаючи В ХО Ию
ЕВ; мур З5З5ОС ку ув змі
В
ЕК КК ев в
Ж сх скжтнтня сла оку ЖК ИХХИМИВИХМИ МИ ДДТУ УЖЕ хя ї Ж пн ва анна
Уклжжилтухююкккижианккккиююнн СОУ КМУ МАМИ ММС АЛ ДАМ МУХА УМАВ. ВКА ММА МА Ох пліт - х т ЧННЯ
ПОЗ хм пеЗс-хеих
ЗК мутані ТЕО
Фіг. 58 де ш НІ СМТ -- їз як -е й о Мо я т от о т ж ме с лу У 5 Ж. во клав
Б в ме Е шко
ЕЕ п ї «ен РитеК ще зо БОШ 7 т х їх - сх З ве Я
Я: шк -ї - :
ББНО: мутант ПЗ
Фіг. 5С
Бносцнило ща ово З Ж я ОО п С пд : БОКИ КО ще О, Б
ГК Пи. ЖЖ В шо од ПОМ ЕжКЯ В
ЯМ Лиш ПТ Ще БО Пили. В я В ши ДЕ й о ва пити ши пКЕ
Бо хо Б КЗЯ п щі шок В
З Же щ- я З Ї х те я Ж З
В З ВК : б пи ; да З ЕКО Ба - ії щй
ЖЕ о Ж к СЕ ба. В
З Б ПОЕМ, де В ! до ях в і
БАК мутант ПКС
Фіг. 50 м
Фан 1 ж КЕ СКК дере р ; Е ох й Що що, яко ; Же Я
БОсн ; х що
ОБЖ ка я Бі шо МКК Б 3 я
Мо З КЕ зр ше ; ! її я ; шк ний А б Ж ве - : З Кн «у
ІТ овіавснавиклю мМ
ЕВ: мутант ПОЗ
Фіг. БЕ
Айемацинкто
ВОК ЮЄТВ Гах нм
СК шо ЖЕ х Б ек я « же шо В пт : я Ех Х рем кое. ії х ; в в к ана ї З ї
БЗНКІ мутант Я ЛЯС
Фіг. ЗЕ гурк вук чн св ей п Енн А
З вм й ни в
ИН пк ву
ПАКТ У ОО, хх УМ ТЯМ ше полян «КТК МКК КК конання х ХК юю ККУ, склу АХА нник мух Мемх ХУУХ ММХМ доме. дому Мих Ух моде юю дехх я «А ш ШИ МКК АК АХААХАНЮККМ У ож котра, й пут зркстютугх я
ЖЗуУТ ДЕК у Ме-рянх: -альї ще пух ЕТ Ж
СаО. хухтаиіву ГЕ
ДО: У ОНИ КЗ ВИ
Фіг. вА чи
ЗП я
Кш кВ х У паж ЗМК
Коні ВВ о я
МАК ЖИ нн ке и ОН мнннчнячнят
Фор клпдлллуююлалнняжютни Я ТКУ если Пи ї ї УЖ ект я у
Хжколлллороллллнтт кю «о хх о ФКхИх МКМ МУ хи ЖиКих фею» Фойхх ХХ ЕК
КХХАКАКХ КАК КАКя
ТЕТ ашцеока? дит я х ї Я асеа Ул кл
У ЛЕ Ех тот ща та яю
ЕК: мутантіу ЗАТВ ах
Кос мк щоща зх ї
СЕ. .Х шу а я,
ЗБ. ї Еш ще щу юку т ш чи ша З дір, й Ух т пенні п ж ех - Ж ше З Те як» и ка - й п йоч М - ї
Фе у о ж чі 7х. і -ї т т-х дО У :
ПЕОМ ся Е НУ ех пт. ек те у т. ит Їй З с їж
ЗЕМОооян «Як, щоОще о од та
ЕЕ Е; - осо - зно ков ш Я Рибу щ ш т дет лях -- тери ВН щи Бе : їх Е ї ї щ «ех ту з те су пе сх тк У хх т тод Поле, шен ж де
Ток Грибогпиклів схаДУг пу ж нах. пед
ТТ» лит ТЕ
ЕЗБІ: мутант Уа
Фіг. 8С
Гнооциклю
Контроль РН ня
ДУ К КК КАК КК КК РОС ВККС КК юю х ЕХ х ї ї ЖЕ т х у шк ко Х ще я Ж
Зщну 5 Ж о. що ЖЕ ї
Х шк ЩІ с - кі Ж ї : Я : . ї ши ХХ СК їх
АЖ Кс 5 . ї ваш 1070 ЩО з ще ї а Б. Б Ов
Х жо Кт 7 ї Ії х ї ї Ж з ШЕЛЖИ х
Хоохххххххю ооо оосоюсоококоооососо сосок
ЕВ: мутзиті 575
У . і
Фіг. 60 м : За тя 8 ЩЕ ї й у важ
Ше : з те з ш | де З
Же 25 : . х є " ж
ЩО . б яв
ОБ М х ; -х Я І
ВЕ ї х5 Тена -3 - -3 щ Її
Те абсмалякто м
ЕБКі: мутант і ї5ІтЖі
Фіг. бЕ
Авбгмациклих х
ТЕМ с крук -е
Контроль СО У ї х х : 5 ї ї : т ї ї о РИ: - З ї дав о 5 : ї ї КЕ У пох х хо ЖЕ ХХ й ж х ще ОЗОН З сх х ще що ж і ї ї К у х їх пз: Ко ї : що ВМО ; я с ї ї ОД Н у ж х ї ї х Х : ї Я а ї те З ЕКО ще : дер В ШК
Ес Ж Ж о КК їх дон ж, Кт З. що пло ЖЖ АК х
Ж о - т З щи ще С Ж
Кл ДО т ШМК т Кох ОКХ їх пЕДО ИН оди, що КЕ ШІ п. х ї ще ха у пу КЕ. х
Хикккккккккк К КККККККККкхкк Кк КК КК КК КК КК КАК АК КК КК КК
ЕБВІ мутант Я ЯТ --РЕГЕНЕ; дз НЕ Нторів СО «Вр. палівопнклих тк в ід. УЖЕ некхствве Кі отяекутву, о шо ке і рн ННКяю тет - пнмохвання шосте, Бе ЗЕМО св весМмацнКл Б) - дивні хни "ооо осо ооо ооо
З тет ях ; ЕБВІ ш М В двкогОо тла
ЩА З Ку З ох. З ее й, З е ЕК З А-я З УТА Де ше же З о» ї почи вх
Ж тт З о Ж ЗЕ В ВЕ ОМ МЕ ща Ех х те и т. зи х в о т
ЖОВ сп и СК вро лк з ЕЕ ож М до му, т Кк х сю З но Кетрін К-Я - т ЖЕ У рН ки дея Кк: т ще З я ринв ТИХ х - Б са щожою З ж 8 палозниклі Ла ще ; З я Ще ка
Ж З ВЕ внйоНнЕЬ" З щ шок Є і 5 - «їх
ОВ -ї Не їй ї БУ В Мем алиКт п «ЩЕ ту ут -- «а я Бдв елацеетранвх МНЕ
Бозі -МУЇАНІ пінг еУнантя росту, ЄКке ЦО
ПІ ; ; щш ; мутантТинНМ
Мт Х щ. Ї рук тя :
Еш 1» : ЗО в м У Х т с:
ЩА Х. ил Є Е до ов З Ко. ! ЧУБЯБВІ ВО з ХО х ва ти з Кк хо хоч и - 5
Ж ше ка а нн зЕвГІСТОВМВ СІЗО ах :
Шов Я паж чн, ; : в Ох Х Еф тоф ннфсотнов ї 5 - то х пат ие з З ехо Я х у
ЩО У І Х - з-В що :
АК 3 Я пилюспивае БЖ ; дЕОв З З Ї ;
Ше з х у й А 5 то З ; кер ртх т и 4 і - т ці півівінівнірівнін я 0 ршронинкли «ї і - ш т хх у ї - «- х і те жо олувнхх п х яОеМмациктиЗ за
Фіг. 78 совно ЧУЕЛНВ Дю Ву МН СКК ж» вВлОсНнЕлВ зов ооо ово ов ооо ов ооо ов ооо овк в с КК кк Фуко Кі о Я пдв етктк слоти ЗИ. бер пита КНо ЕК - мутант і інгібування васту, Без ін) ссср ярок 7 " о я З пеня» ВНТ КЕ «как у
Кон Ва я шк
З муУпнкнМК в ; їжу
КЕ х З я Ше і чутливі до по ж - Ж Я ен ичмулух .
Бе ож і інгийтоюив СІМКА тк
Ом тд В З
Жощо: ВЕК. пок, ! м пе, в у шк: ТА, ОВ с Я
ЩО 5 ян В Х ше ЯК ща шо В УКЛ Кесовсосв у падоснивл же виг, Є В 7
Ол З НН ХВЖ НІХ Я - Ж я У; З ї У З - КИ Що - хх 4 й 5 з і хОеманиц ЗА -хЕ -3 Кк ї х З
Ї у я У
Товісланестилит інн
ЗТУЕлНВ де зигНЗКОгтеВ : і де шо пев як Ж по ІК, зв уча ув Ваша ла
СКУ супе Кон ЕМ дек ик ккнннннння нн он: ее оре но дня з
КО ово Км, Ах З, п НИ НН и
КОВО ок МКК Во Ом Її ер їх т МКК Кия ся МЖК Ко о В у то Уа х я в з Я ах жк ак З нки КК КК я ЕТО а ПЕ
ВЕК В ВК ов В БО о о ВК ов ВХ ВК
Те ко КТ ще Зах ах не: а, сх ХЕ ї КЗ Зк рої п В З Ж о А В В НН пд шо
Ж и КК Ж кт а КК о КХ КО Кк о НК
Я і УНН Ку КК В ОКО Кв ков. її З ах т її в » ка сивуче ВОК і Кн по Ку я М КК З ЖК М
Ка жи ти КОЖ ж о МК ви ПЕК А В
Я.О З ї Ж МУ Б СКК КК Кия : М КК то
ШШ- я нн вн
Є ее КУ доонан вна ве ит 7 х ТИ ї Ходжу ПВ МИТ ШО Ж пт як 1 У ут
ВЕ м ЕК Зою Кн ння АТХ,
Фотюх ще по т Вл МИ Ж ки ЖИВ, КК ЕК КК т я
ЗУ давпертюзняї 5 ТК ж т и В КТ ЕК, ї ТЕ ши
МУК х Ід їх коди Кк КК я пт В Еш Я ПЕ мя хз ск КВ ШК В у В КК А В
ХНН лат ПИЛИ ППИПИМИИЦИ ЯМ ПОПУ пк сим ек ВИ Кн р Км кт КА хо ю МО ї ДЕ ЖІ КВ ИН т ПЕ и ЕК Вони КК : ОБ а бе ко вн
Кох То ки тм Ж шок Ежі кон ВОД ККД М Мо што
КО столи ши х Еш ПЕК ж н й пи ДИ ї МИХ ПОГ ЖОВ Ж ЗШ ИН иВн ї ДЖ удюИ ї в ДЕКО ЕК ЕТ Ме ї лож пров до інгібітоуюв Й во ие ка пилооцнЕлій МНОЮ посаеВуКЕВКУ о В шо в 0 си а Ша М вовк . я іш и і В ОО С в
Кожен
ЕЕ ЩО в щі вк В Як ще - . Че КТ Ме во ХЕ я В ШВУ
БЕН яретане о ВВ кукв | ш я 5 й пед акокех Я ЕКО Бо ОД і рос В ов ї
Я пт вия х пом В ше шия В ШК, 5
Блавестранті 5 Б я п дно п сю кОм ШННИ ВЖОЖ 5 : ше: 2 . плн Ан кн кн АК нку нникнн В КТ КАК ВА А Анни
Фіг. ВЕ «ТУ КН: де
ТОТЕО НВ - що мок
Й СІ палезнека ДІНООЦт СМ ЕВЕВ фр нан нн, УНН нн опи кн, чно со впео нн нм нд мк осо н нмнннкмнннкннЕ їж У по шо шк МВ Її ех сш й лит : Е їх х Б що пи КК їх т Ж Пт, К ши и к
КЕ СЛУХ С ОО М В ох пе В шия ху Е і с: Б «у о аа
Ко учи і щ я ях ВОК 8 ОО : ПЕ У і ' її с Ух я о г бетольо бе нн з ї АК т х шо ж а і: КО жити т. ЖЕ : я З й хо ще ще хо: З зе Є х те ВК -
БЕБІ метану ОО щу РО ше с я.
УЗИ т 7 . - клацеєтванії тт ; ; - ї
Н кВ ; -Е
Е пол й : х
Е кі п Є х к
Е К Е Е
Кох оАХиМ Муки к м УХА ААХММ КУ ААУ ААУ
Фіг. С
КЕ есе шере овиежее
К- Я - дтлоормамвиквях
КИ х г ще
ІДО ен ве фулвестурмх. З мтодюза
В е ст. - З ї, х Б
Ж сю слаестражх, З ВЕ ЖК ж
Е й жен ой сет пане стЕнНИ. МИ МцЗЖК У ; те ЖАЛА В я ч є " В в. | с
ЖІ В б хх Е пон
Ж : ще вх Е «и -. ех. І: ги (С
Ма І: Шк ОК дн и о В х а НЕ 3: ета
Ак ; КД г ко хек Ж - яти - ми ТИХ й ОО На кн а
К й ск ден дон вони ки и : . як АЖ нев а
ЗІ се ї сени
Ж «а м
К ки
КО ов
Ж М па Зовя ;
Є т «М о щи ще ЕС
ДВО осзвая
Фіг. ЗА я м
ВХ т 7 «ОО
Тож В ще ек то Я нін ВІ ш- В КО -ш ож ОК: "ВО Ж М ОК: що о ЕМО: ж кое КІ ЗК:
З Жетрж й Б В:
ОБ Мр НО ВІ гот КЕ КК
МОВО КОЖ: що БО кедами ЕЙ КА
Ії ЕМ ОВК: со
Зоо м А Б ВИМ У ща що МО т ї ня ОМ - ше и Ше ОнЖ
ЯК аю ак В
ЯК у пе МО
Лю ЖЕ уч Я шт су С С ся ук но кое Ше а ще ді
ОК з сх її шу
Се 7
- о се се я щи : ще тк КО Її оч ЖУВ жде. В ж Ох З БК ди М
В
ДК о-н Ж з ШІ МАХ
МФО ТО МІЖ
ОМ З ЕМ ОМА
ТОЖ ТОК МІЖ
"МОТО І ЕЕ Ж
ОРІ Ж жук З ОМ МАХ Б
Сх М ЖІ; ОЇ МОМ ОМ... п МОМ Я МІЖ ОБЖ «щу ще о РЕ АВ ще В то ТЕ МІЖ ОО ОМ я ям ошовЕО РОМ 5 0 дк
ЖЕ І Б ЩЕ ЩО З ща я І А МА ЗО КА КЕ о 23 пра Мн они
БО Дуга веВ НУ ик нок я ення
ОО АЖ ям
Ж. ок ХК не я і м о сх ща УЖ и КК
ОЦ ВАТ
ЯКО м ни им щі ПК ох т 7
ХО ще --
ЯК ко я «й дея де а ще Кі де я Я
ЯКО мох - а яко я ше
Фіг. 9С
Е
Ж с ще ТЕ
МО шо здох ж пт ту
Ж жу чу ЖК:
ЩО ЛОГО шХд КІВ:
Жак М КОШИКУ:
Бе ЦО КМ:
Оу БЖ КК:
ОКО ШИХ ОКХ т
ПОМ ож ШЖЩО КМ 1
МІЖ ОЖ БО ОБ рем.
СО МО КУВІ КИМ хе вх сш 08000. ОБО БВ: Б Шо я Ж рак КК КИ ОКО лим М х ШО КЖК:І БЖ ОСМИК ек НО, МО КАІ БОЇ : г ЖІ КІ КОХ БО ЖЕО зе дю БМ КІВІ ВЖИ М З я М ОБ: БМ ОБО КОЖ - В Бе охо ДОЗ УЗВІ БАБІ БЖ ж БД х т т «У С Ок нії,
Я
ЦК жи і «й о не 7 оо ох
ОО оо
АК шок х с. лиж о шКОоще оон й
СУ кох хе к ТЕ р :
Фіг. 30
Зервху КК а
Ті ЗЕ Ко їх
К Ех що ї хх їх с: щЩ х
ХЕ їх х ДУХ
ТУ КАЖЕ ЖТИХ хм х ЕТО - Ж пи :
МО З Її.
Ж ЇХ ПИЛЖ ОД
МОЖ ПИШИ ДИ
Мк МО З ВИН тож КОЖ ПІШКИ ЩЕШЕ -О В ДИЛИ РЕ
Ж м ВИК БО ехо ЩО ПИЛИ, ШЕ
ЖЕО Одже ЖК ЗЕ
МОБ МО о лиж ХО КИТИ ТНТЕ
ЩО КИЛИМИ ПИЛ хх в Ж ЗОНИНЕ
ШО ШК ЖЕ мк Ж ПК ЗМО жх
Б КИЛИТИлВ ШОК О ом Е
Ах ПИВ ПЕ ех с хе с ПИЛ ПлТЖ ОКХ вом х ПИВ, ПІШЕ ОЖМВ ех У. т ТИПИ ПИШЕ ДИЛИ ЗІ ЕЬ ве м ска Ж ПІТИ ЛИШЕ ЖИТИ со
У А т З т -
Ж з. с ї : сх ех о А КОН. с хе Кк КЗ ще я Шо
ХХ ХУ ких ке
ОО щеМ У ких Рез. г ХЕ ке а с
Ох 2 й ще -х
ОО Ка як
Ж ЇХ" Х ше я
БК Ух
З ШО У яд ХЕ
Х Ка С
Її м Ж «йХ в Ц
Фіг. ЗЕ ї Х х 5 х Ї х . не ще
Х. Ки : ХНМУ КНЕ МОМЕНТ КНУ о с Ве Х ок х ширма. з сш Ме дики. зкоевонннНО о флвееюрннт у УРНИ о За ме МО же же х х х х х х х. х х : зно х я. т пп нини їх
НК в В о я М хи о Коен А вод коп дес в Не ВН і ЕВ ВЕ
ХВ В Во ХХ
Такавик мох ДЛ догрпактев м Ку шт сук ВІ кт и сорту юр
КХуЛЕМОВХ ВАЗІ Х МеВ У МЕШКО МІВ ВИ Я ДЕК КВІЯВКО
ЕБКІ. жикній тет
Сей -ш ; ех - «евкх овен що во о. ТЯ х МЕКИХ
Ме ВЕ 8
КОТІВ ОКУ Ж ; гОжЗ е
З ит їх Фени ОО Мін тт ятоажАх зн МОЖ її - узі цЦЕ ше М онкамой ЗВ ІЛ век шою хі зве галію можн в ЗЕКІЦИЖНХ
КО ВЖЕ В я ПО ІМ два тя Й ве ОТЖЕ ВВ ет в
МО С КВ: КТЗ у маш С ТТ павдай Ж Об ща: шт кру - Щ - В Шляниї ВОЯИНИХ ха Ж ще ! Зони ВІВЛКНЕ МУ - Ж Я: МА ВЕ що В: щищох Я: м В
ФО А Ж нні В х Кеш ек В зв ЩО МУК ВІ ОО ОМ: сх я що ШО ЗМ: по В: ча Ох Я З - Я их що їх я:
Оу В: ом А ЯК ЯКО я: Ж Оп Я: «АЖ. Зк: и Я ЯКО пе ОВ В: о ЩО ВК: с. що у КЕ я З Я: я тд І ХЕ СОС т КО В: Ко Я с х хОК я Я: з сш м Як: ок . що МЕ: БО Кі шт АТ: я: щі жо жо У: ЯК сх Я ух аУниНьЗ х с х я їх х чт МИ М х що Цю МКФ мех хе ТК ЗП мМ ВЕК мк МО ОП ій БО мк
Еланесте я КАК ТЕН - Імівиекраняі
Фіг. 10д Фіг. ЛОБ Фіг. 10 зн ". ак, з . " є
Коко о
ЕК. мутавт ЛЕЗО - с з я - ах -- в ше п хоча ст кі 2 п
ЕКлу РОК Ж ТА В Еш ду роя Ж
КО ЕО ож -ї Ж ее а. и Я :
Ж ше У г т де
ЗЕ т м ОКО ї те лк ї ще ї-6-йО Ж жо зва с лажее ОБЛ кї З соня ЗНОВ їі: Я Трулих це ВІВ я КИ ОО В МиЖяС де шт Трах
МО ТІК дк о о ОО не ТАЗ ва у дено моошофво ПОЗ ду ПЛАТУ ау денно урни ве пох ЯКІ С зак їди ВЕ: І ПО Хомин Мо ІВ: КО Мозвьсих
Жотош ВК ОО ЖХ тх ВІ тм ГЕ с ЗЕ: І, дж ме Та КІ З ВІ их з: ж ох ВК ще ВО ВІ р з: зе МО ШО ТЕЗА КІ ЗД ІМ ВІ щ 53 3 пе ВІ
В тр я | що чи І мо ом Я «ОМ ж З доку ох щу КІ
ТО МІТЕ С: ЩО ВУХ аж пк ЩО У: я я В як КОХ ВО ВІЇ их сщош ІІ ово ВІ які во ШО ше В ОО ЖОВ: МОМ І:
Мо о па І і ев АВ В ОО АВ юні ові щ ПІ В ж ке ТО ЗЕ мат БІК о С Зод вм МК с Ж тт - У. ск
Елацестрант - Блзиеехранх - БлашестоанІ
Фіг. 11А Фіг. 11 Фіг. 11С
ЕБКі-мутянт ІТ
В вав чех ; - т х 4 ча й кдд
Хо 8 - Тв с БЕ
Ух 2 ж МУК
Б к й вм У. с з «Ж
То же дкоч ї ни ду
І г їж шо рон х тричі ок МЕ ТТ є ща
КО ТНК шо ЗУ осла ОЇ ВеЕтррнщй ОБОш - тей хе мо Мк вк у Пай З НЕ МІ аб сх я ЮА МО жа чу За сим В: ве Балко в І ВМО СК вх дент М НВ Пашо
ВК: М ЗМЕН ек СП КОсОВЯ ше пім. Км диеесю з ок
Ж ря я В: ко ЕК ї Мне ТО се ЕВ КІ ЕІАМ як ща: око ЕЕ М: Майо с КВ
М Ж АВ: 5 ш ле т: з М В: пОощо де жу ЯК: с МИ оодому МОЖНО ШМК В: шо ЗМК: М кн В: зн шок В з- ЩО 000ОЕ ВЖК що о ВІ т ща ОО СМ В:
ОО с ЕЕ щОош ТВ: Уч З З -8 ВІ це й ЖК: с КО КСВ 11 «її У ша ОЕ ак «ВЕ.-ТИ ТЕ В: РК: т л-- В Ж І: ов хх В
А ОХ В: З: рі МО В І: РО: -щ М В
ОшОЖО ЛЮКИ мем мь Хоонньх ОАЕ о ВК ОО, ше В: вва уиту
Ж ях йтохгех од я пу сок кн що по осей ою з ї ТМ ку те ди ої о я - пох Оп жмО Ох і сін ск ше ПОМ КМ БшймеМм хе В поіпічим МюкомиМ іх го спутчнукя мя в пеня з ож мах КМ кох ПпоіптнМм БНМ з
ЛОЖЕ АХ -е С сту кену кіт х Трерв квоти хати,
ММУх ш Елюпес ОН Е ще Бета ж 7 х
Фіг. 12А Фіг. 128 Фіг. 120 іг. Фіг. 120 ге. Са х ак аз
ІнтяаКІнНнН за паліни км
ПОЧатТКеВНК ПИшахк. -. середовище с. Дехгтрвавие Вова тркщї че сем, ЖАЛА 45 зУлвиетяН 12 МОДІ - 5 прліюютнвлніі.З вит
ЕКО лоту я . Н ях 3 Ж» хе песен Жфуе сота тру лиш с Ффулвострант, о мг'лаза ж ее Кк с шо ГИ в ЗО АК ван - В т я да Х шк КЕ я ря Ж ЗІ Ж шо 3 й ще т й б тт. КУ БІ» ще о ут и з, я пл вже шк з зе ДУ лях дн ки бе т пеоиритт ї- хх Ка с вх жу. х ВК. ле дж Ж, ж АКА Ое шо кл -й я о ж
Ва шко М ях і и с появ зе за жа хе - н хх М «МИХ х ОО я що ТК скаче, ко й Дю єни б
МАКОМ ООк О о о ек. ц я з й
Є гук ке й БІК
Й важ Тан х
Х перен ї ї ре а і од сгрізатк утри 5 кідлЕжилНК ЛІНІ 5 - т першни пасаж ї х т х х х т ек кщх, ї з зл х з Ж стю ту йога т ! : -ксспедовне ї ! : ї з 1 СХ прати скло ї а у х ! а грфулееетрани | а мгодоазаі З ї есе Б ЗК зт иажусиот су т й ї
ІА к кое Я мк . ! жі т ; ї ян з хі о с шин сеї, х Ах х од» : і - еванпестрант Іа ми ДИ! ї зх ! ох : ! ї що крик Я у
І ОК ей ї ад з МУ 5 ме жу ! я пи у вн ! т де т т і ї
Мдіюжж ! й «ЕЕ х ше клин Б оо Її ЕОМ т ке це КК зе шо Ж ве Р ке ї ке ! я -о й ї - ї п В з Х мех : 3-х : лаб ЖЖ ! г де нт х я з Ко ну Є - х 3 м сш Вр У ' х к-я ЕМ о дея свою ТЕООУ х ща ІЗ КУ ще с 1 ї Ж: ей ї й ве й а . ях: х щ ї з ї 5 Щі
Ж зх ї я ї я т . ; х с сх тк сх кох сук Я
Я й щ КО ве С Б щ й йо з ее сороки я .
Фіг. 15

Claims (39)

1. Застосування елацестранту, який являє собою (6К)-6-(2-0М4-04-(4-(2- (етиламін)етил)бензил)-М-етиламін)-4-метоксифеніл)-5,6,7,6-тетрагідронафталін-2-олу дигідрохлорид, в способі інгібування й ослаблення стійкого до палбоциклібу, рибоциклібу або абемациклібу, позитивного за естрогеновими рецепторами альфа раку у суб'єкта, при цьому метод включає в себе введення суб'єкту елацестранту.
2. Застосування елацестранту за п. І, причому позитивний за естрогеновими рецепторами альфа рак є стійким, або прогресує, до палбоциклібу.
3. Застосування елацестранту за п. І, причому позитивний за естрогеновими рецепторами альфа рак є стійким, або прогресує, до рибоциклібу.
4. Застосування елацестранту за п. І, причому позитивний за естрогеновими рецепторами альфа рак є стійким, або прогресує, до абемациклібу.
5. Застосування елацестранту за будь-яким з пп. 1-4, причому позитивний за естрогеновими рецепторами альфа рак характеризується однією або декількома мутаціями, вибраними з групи, що складається з 05380, У537ХІ, 1536Х2, Р535Н, У534Е, 5463Р, У3921, Е3800 і їх комбінацій, де: ХІ являє собою 5, М або С; а Х2 являє собою К або 0.
6. Застосування елацестранту за п. 5, причому мутація являє собою У 5375.
7. Застосування елацестранту за п. 5, причому мутація являє собою 5380.
8. Застосування елацестранту за будь-яким з пп. 1-7, причому позитивний за естрогеновими рецепторами альфа рак є додатково стійким, або прогресує, до лікарського засобу, вибраного з групи, що складається з антиестрогенів, інгібіторів ароматази та їх комбінацій.
9, Застосування елацестранту за будь-яким з пп. 1-8, причому позитивний за естрогеновими рецепторами альфа рак є вибраним з групи, що складається з раку молочної залози, раку матки, раку яєчників, метастазів раку молочної залози в мозок і раку гіпофіза.
10. Застосування елацестранту за будь-яким з пп. 1-9, причому позитивний за естрогеновими рецепторами альфа рак являє собою рак на пізній стадії або метастатичний рак молочної залози.
11. Застосування елацестранту за будь-яким з пп. 1-9, причому позитивний за естрогеновими рецепторами альфа рак являє собою рак молочної залози.
12. Застосування елацестранту за будь-яким з пп. 1-11, причому суб'єктом є жінка в постменопаузі.
13. Застосування елацестранту за будь-яким з пп. 1-11, причому суб'єктом є жінка в передменопаузі.
14. Застосування елацестранту за будь-яким з пп. 1-11, причому суб'єктом є жінка в постменопаузі, в якої був рецидив або прогресування після попереднього лікування селективними модуляторами естрогенових рецепторів (БЕКМ) 1/або інгібіторами ароматази (АТ).
15. Застосування елацестранту за будь-яким з пп. 1-14, причому елацестрант вводять суб'єкту в дозі від 200 до 500 мг/доба.
16. Застосування елацестранту за будь-яким з пп. 1-15, причому елацестрант вводять суб'єкту в дозі 200, 300, 400 або 500 мг/доба.
17. Застосування елацестранту за будь-яким з пп. 1-16, причому спосіб додатково передбачає ідентифікацію суб'єкта для лікування шляхом вимірювання підвищеної експресії одного або декількох генів, вибраних з АВІЇ, АКТІ, АКТ2, АК, АРС, АК, АКА, А5ХІ, АТМ, АШККА, ВАР, ВАРІ, ВСІ2ІЛІ, ВСК, ВКАЕ, ВКСА!, ВКСА?2, ССМОІ, ССМО2, ССМОЗ, ССМЕІ, СОНІ, СОКЯі, СОКе, СОКї, СОКМІА, СОКМІВ, СОКМ2А, СОКМ2В, СЕВРА, СТММВІ, ОКО, ОММТЗА, Е2Е3, ЕСЕК, ЕМІ4, ЕРНВ2, ЕКВВ2, ЕКВВ3З, Е5КІ, ЕМ/5КІ, ЕВХУМ7, ЕОБ4, ЕОСЕКІ, ЕОСЕК2О, ЕОЕКЗ, ЕІ/Т3, ЕК52, НІЕ1А, НКА5Б, ІОЮНІ, ІРНО, ІСЕ1К, УАК2, КОМбА, КОК, КІЕ5В, КІТ, ККА5, ТКРІВ, МАРОКІ, МАРО2К4і, МС, МОМ, МОМА, МЕТ, МОМТ, МІ, МРІ,, М5Нб, МТОК, МУС, МЕ, МЕ2, МКХ2-1, МОТСНІ, МРМ, МКА5, РООЕКА, РІКЗСА, РІКЗКІ, РМІ,, РТЕМ, РТРКО, КАКА, КВІ, КЕТ, КІСТОК, КОБІ, ВЕРТОК, ВОМХІ, 5МА04, БМАКСАЯ, 50Х2, 5ТК11, ТЕТ2, ТР53, Т5СІ, Т5021 УНІ.
18. Застосування елацестранту за п. 17, причому один або декілька генів вибрані з АКТІ, АКТ2, ВКАЕ, СОКА, СОКО, РІКЗСА, РІЮЗКІ і МТОК.
19. Застосування елацестранту за будь-яким з пп. 1-18, причому співвідношення концентрації елацестранту або його солі або сольвату в пухлині і концентрації елацестранту або його солі або сольвату в плазмі (Т/Р) після введення становить щонайменше 15.
20. Застосування елацестранту, який являє собою (6К)-6-(2-0М4-04-(4-(2- (етиламін)етил)бензил)-М-етиламін)-4-метоксифеніл)-5,6,7,6-тетрагідронафталін-2-олу дигідрохлорид, в способі лікування позитивного за естрогеновими рецепторами альфа, стійкого до палбоциклібу, рибоциклібу або абемациклібу раку у суб'єкта, який має естрогеновий рецептор альфа дикого типу й/або мутантний естрогеновий рецептор альфа, причому спосіб передбачає введення суб'єкту елацестранту, причому мутантний естрогеновий рецептор альфа містить одну або декілька мутацій, вибраних з групи, що складається з 5380, У537ХІ1, 1536Х2, Р5УЗ35УН, У534Е, 5463Р, У3921, Ез3500 1 їх комбінацій, де: ХІ являє собою 5, М або С; а Х2 являє собою К або 0.
21. Застосування елацестранту за п. 20, причому позитивний за естрогеновими рецепторами альфа рак є стійким, або прогресує, до палбоциклібу.
22. Застосування елацестранту за п. 20, причому позитивний за естрогеновими рецепторами альфа рак є стійким, або прогресує, до рибоциклібу.
23. Застосування елацестранту за п. 20, причому позитивний за естрогеновими рецепторами альфа рак є стійким, або прогресує, до абемациклібу.
24. Застосування елацестранту за будь-яким з пп. 20-23, причому позитивний за естрогеновими рецепторами альфа рак є додатково стійким, або прогресує, до лікарського засобу, вибраного з групи, що складається з антиестрогенів, інгібіторів ароматази та їх комбінацій.
25. Застосування елацестранту за п. 24, причому антиестрогени вибрані з групи, що складається з тамоксифену, тореміфену й фулвестранту, а інгібітори ароматази вибрані з групи, що складається з екземестану, летрозолу й анастрозолу.
26. Застосування елацестранту за будь-яким з пп. 20-25, причому позитивний за естрогеновими рецепторами альфа рак є вибраним з групи, що складається з раку молочної залози, раку матки, раку яєчників, метастазів раку молочної залози в мозок 1 раку гіпофіза.
27. Застосування елацестранту за будь-яким з пп. 20-26, причому позитивний за естрогеновими рецепторами альфа рак являє собою рак на пізній стадії або метастатичний рак молочної залози.
28. Застосування елацестранту за будь-яким з пп. 20-26, причому позитивний за естрогеновими рецепторами альфа рак являє собою рак молочної залози.
29. Застосування елацестранту за будь-яким з пп. 20-28, причому суб'єктом є жінка в постменопаузі.
30. Застосування елацестранту за будь-яким з пп. 20-28, причому суб'єктом є жінка в передменопаузі.
31. Застосування елацестранту за будь-яким з пп. 20-28, причому суб'єктом є жінка в постменопаузі, в якої був рецидив або прогресування після попереднього лікування за допомогою 5БЕКМ і/або АЇ.
32. Застосування елацестранту за будь-яким з пп. 20-31, причому у суб'єкта експресується щонайменше один мутантний естрогеновий рецептор альфа, вибраний з групи, що складається з 5380, 5375, 537М, У537С, Е380О, 5463Р, 1,536К, 15360, Р5УЗ35Н, У39211 У534Б.
33. Застосування елацестранту за п. 32, причому мутація включає У5375.
34. Застосування елацестранту за п. 32, причому мутація включає 5380.
35. Застосування елацестранту за будь-яким з пп. 20-34, причому спосіб додатково передбачає:
ідентифікацію суб'єкта для лікування шляхом вимірювання підвищеної експресії одного або декількох генів, вибраних з АВІ1, АКТІ, АКТ2, АК, АРС, АК, АКТА, А5ХІ1, АТМ, АШККА, ВАР, ВАРІ, ВСІ2ІЛ1І, ВСК, ВКАЕ, ВКСА1, ВКСА2, ССМОІ, ССМО2, ССМОЗ3, ССМЕІ, СОНІ, СОКА, СОКб6, СОКї, СОКМІА, СОКМІВ, СОКМ2А, СОКМ2В, СЕВРА, СТММВІ, ОКО, ОММТЗА, Е2ЕЗ3, ЕСЕК, ЕМІА, ЕРНВ2, ЕКВВ2, ЕКВВЗ, Е5КІ, ЕМ5КІ, ЕВХУ7, ЕОБ4, ЕСЕКІ, ЕСЕК2, ЕСЕКЗ, ЕГ/Т3, ЕК52, НІБІА, НКА», ІЮНІ, ІЮН2О, ІСЕ1К, УАК2, КОМбА, КОК, КІЕ5В, КІТ, ККА5, ІКРІВ, МАРОКІ, МАРКА, МСТЛ, МОМ, МОМА4, МЕТ, МОМТ, МІ, МРІ,, М5Нб, МТОК, МУС, МЕ, МЕ2, МКХ2-1, МОТСНІ, МРМ, МКАБ5, РОСЕКА, РІКЗСА, РІКЗКІ, РМІ,, РТЕМ, РТРКО, КАКА, КВІ, КЕТ, КІСТОК, КОБІ, КРТОК, КОМХІ, БМА04, 5МАКСАЯ4, 50Х2, 5ТК11, ТЕТ2, ТР53, Т5СІ1, Т5021 УНІ.
36. Застосування елацестранту за п. 35, причому один або декілька генів вибрані з АКТІ, АКТ2, ВКАЕ, СОКА, СОКО, РІКЗСА, РІКЗКІ ії МТОК.
37. Застосування елацестранту за будь-яким з пп. 20-36, причому елацестрант вводять суб'єкту в дозі від 200 до 500 мг/доба.
38. Застосування елацестранту за будь-яким з пп. 20-37, причому елацестрант вводять суб'єкту в дозі 200, 300, 400 або 500 мг.
39. Застосування елацестранту за будь-яким з пп. 20-38, причому співвідношення концентрації елацестранту або його солі або сольвату в пухлині і концентрації елацестранту або його солі або сольвату в плазмі (Т/Р) після введення становить щонайменше 15.
UAA202103017A 2018-12-06 2019-12-06 Спосіб лікування стійкого до інгібітору cdk4/6 раку UA130036C2 (uk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201862776323P 2018-12-06 2018-12-06
PCT/US2019/065005 WO2020118213A1 (en) 2018-12-06 2019-12-06 Methods for treating cancer resistant to cdk4/6 inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA130036C2 true UA130036C2 (uk) 2025-10-22

Family

ID=69063871

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA202103017A UA130036C2 (uk) 2018-12-06 2019-12-06 Спосіб лікування стійкого до інгібітору cdk4/6 раку

Country Status (17)

Country Link
US (2) US20210330612A1 (uk)
EP (1) EP3890834A1 (uk)
JP (1) JP7504097B2 (uk)
KR (1) KR20210100137A (uk)
CN (2) CN113164779A (uk)
AU (1) AU2019395093B2 (uk)
BR (1) BR112021010110A2 (uk)
CA (1) CA3121930A1 (uk)
EA (1) EA202191283A1 (uk)
IL (1) IL283659A (uk)
JO (1) JOP20210137A1 (uk)
MA (1) MA54388A (uk)
MX (1) MX2021006411A (uk)
PH (1) PH12021551319A1 (uk)
SG (1) SG11202105531XA (uk)
UA (1) UA130036C2 (uk)
WO (1) WO2020118213A1 (uk)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL297717A (en) 2016-12-01 2022-12-01 Arvinas Operations Inc History of tetrahydronaphthalene and tetrahydroisoquinoline as estrogen receptor antagonists
EP4021450B1 (en) 2019-08-26 2025-11-05 Arvinas Operations, Inc. Methods of treating breast cancer with tetrahydronaphthalene derivatives as estrogen receptor degraders
CA3202592A1 (en) * 2020-12-14 2022-06-23 Arvinas Operations, Inc. Methods of treating breast cancer with tetrahydronaphthalene derivatives as estrogen receptor degraders
GB202116745D0 (en) * 2021-11-19 2022-01-05 Institute Of Cancer Res Royal Cancer Hospital Prognostic and treatment response predictive method
CN115369089A (zh) * 2022-08-11 2022-11-22 中山大学孙逸仙纪念医院 两种er阳性her-2阴性乳腺癌cdk4/6抑制剂耐药株及其构建方法和用途
CN116327894A (zh) * 2023-04-10 2023-06-27 上海市第一妇婴保健院 一种治疗kras突变的卵巢癌的组合药物及其应用
WO2025202871A1 (en) * 2024-03-27 2025-10-02 Pfizer Inc. Methods for identifying biomarkers of treatment response and use thereof with a cdk4 inhibitor

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9421264B2 (en) * 2014-03-28 2016-08-23 Duke University Method of treating cancer using selective estrogen receptor modulators
EP3288383A4 (en) * 2015-04-29 2019-01-23 Radius Pharmaceuticals, Inc. METHOD FOR THE TREATMENT OF CANCER
ES2981967T3 (es) * 2017-01-05 2024-10-14 Radius Pharmaceuticals Inc Formas polimórficas de RAD1901-2HCl
JP7473486B2 (ja) * 2018-07-04 2024-04-23 ラジウス ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド Ｒａｄ１９０１－２ｈｃｌの多形形態

Also Published As

Publication number Publication date
EA202191283A1 (ru) 2021-10-13
MX2021006411A (es) 2021-07-21
US20210330612A1 (en) 2021-10-28
PH12021551319A1 (en) 2022-05-16
JP2022511498A (ja) 2022-01-31
US20250319044A1 (en) 2025-10-16
JOP20210137A1 (ar) 2023-01-30
EP3890834A1 (en) 2021-10-13
KR20210100137A (ko) 2021-08-13
AU2019395093B2 (en) 2025-01-23
IL283659A (en) 2021-07-29
SG11202105531XA (en) 2021-06-29
JP7504097B2 (ja) 2024-06-21
MA54388A (fr) 2021-10-13
BR112021010110A2 (pt) 2021-08-24
CN119548484A (zh) 2025-03-04
CA3121930A1 (en) 2020-06-11
WO2020118213A1 (en) 2020-06-11
AU2019395093A1 (en) 2021-06-24
CN113164779A (zh) 2021-07-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA130036C2 (uk) Спосіб лікування стійкого до інгібітору cdk4/6 раку
Ciruelos et al. Palbociclib and trastuzumab in HER2-positive advanced breast cancer: results from the phase II SOLTI-1303 PATRICIA trial
US20220339126A1 (en) Methods for treating cancer
Levitzki et al. Signal transduction therapy of cancer
KR102035361B1 (ko) 암의 병용 치료
KR102258698B1 (ko) B-Raf 억제제와 제2 억제제를 포함하는 조합 요법
Metzger Filho et al. Phase I dose-escalation trial of tucatinib in combination with trastuzumab in patients with HER2-positive breast cancer brain metastases
JP2022520079A (ja) Ｔｎｏ１５５及びｋｒａｓｇ１２ｃ阻害剤を含む医薬組合せ
JP2022519375A (ja) Ｔｎｏ１５５及びリボシクリブを含む医薬組合せ
CN109310684B (zh) 用于治疗癌症的notch和cdk4/6抑制剂的组合疗法
KR102615210B1 (ko) 난소암의 치료에 사용되는 티노스타무스틴
JP2015502366A (ja) 薬物療法を改善するための方法
TW201943428A (zh) 預防或治療腫瘤療法副作用的方法
JP2020169222A (ja) 癌を治療するための方法
US20230118053A1 (en) Combination of anti-her2 antibody and cdk inhibitior for tumor treatment
KR20220067657A (ko) 면역치료요법의 효능, 예후, 또는 내성 예측을 위한 바이오마커, 및 면역치료요법의 효능 증진을 위한 표적으로서 tctp의 용도
AU2025204567B2 (en) Combination Of Lurbinectedin And Immune Checkpoint Inhibitor
WO2021073535A1 (zh) 预防或治疗与vegfr和/或vegf被抑制相关疾病的方法
Trédaniel et al. Final results of the IFCT-0803 study, a phase II study of cetuximab, pemetrexed, cisplatin, and concurrent radiotherapy in patients with locally advanced, unresectable, stage III, non-squamous, non-small-cell lung cancer
RU2820478C2 (ru) Способы лечения устойчивого к ингибиторам cdk4/6 рака
JPWO2021021882A5 (uk)
Nuzzolese et al. The Role of Cetuximab in Non-Melanoma Skin Cancer: A Review of Clinical Evidence and Emerging Strategies
US20250241875A1 (en) Methods for treating cancer in models harboring esr1 mutations
KR101734652B1 (ko) 독소루비신 내성 관련 유전자 및 이의 용도
Lang et al. P06. 10. A THE MIRNA 216B-5P ACTS AS A PROMISING TUMOR-SUPPRESSOR BY MANIPULATING CELL CYCLE PROGRESSION IN HIGH-GRADE GLIOMA CELLS