UA126664C2 - Пробіотична композиція для лікування та/або профілактики атопічного дерматиту - Google Patents

Abstract

Винахід стосується пробіотичної композиції, що містить Bifidobacterium animalis subs, lactis (В. lactis), Bifidobacterium longum та Lactobacillus casei, зокрема штами В. lactis CECT 8145, В. longum CECT 7347 та/або L. casei CECT 9104, для лікування та/або профілактики атопічного дерматиту.

Description

Даний винахід стосується пробіотичної композиції і застосування зазначеної композиції для лікування та/або профілактики атопічного дерматиту. Отже, даний винахід можна розглядати як такий, що застосовується у галузі медицини, зокрема, при лікуванні шкірних захворювань.

РІВЕНЬ ТЕХНІКИ

Атопічний дерматит (скорочено АД) є зудним, запальним захворюванням шкіри хронічного перебігу, що характеризується розвитком екземи з характерною схемою розподілу, яка вражає пацієнтів із гіперчутливістю шкіри до різних екологічних факторів, що є нешкідливими для пацієнтів, несхильних до атопії. У хворих на атопічну хворобу часто є особистий або сімейний анамнез астми або алергічного риніту або АД, а також підвищений рівень ДЕ у сироватці.

Атопічний дерматит найчастіше вражає дітей, але може зберігатися та/або активно проявитися у підлітковому або дорослому віці.

Розповсюдженість АД становить від 4 до 20 95 населення. Існують великі відмінності між сільським і міським населенням, причому частота виникнення захворювання у останнього вища.

Коефіцієнт захворюваності на АД, ймовірно, зростає з таких причин: західний спосіб життя, більш пізній вік матері, забруднення, куріння матері та зменшення грудного вигодовування. У сорока п'яти відсотків (45 95) дітей АД розвивається у перші шість місяців життя, а у 85 95 - у перші п'ять років. Якщо захворювання починається у дітей у віці до двох років, 20 95 дітей мають стійкі симптоми у віці семи років.

Хоча атопічний дерматит клінічно проявляється як екзема, як в гострих, так і в хронічних станах, це захворювання має велику варіабельність у: 1) діапазоні клінічних проявів; 2) генетичній основі клінічних проявів, а також 3) патогенетичних механізмах, що лежать в основі клінічних проявів.

Одна з найпоширеніших гіпотез, які пояснюють походження атопічного дерматиту, припускає, що він є одним із проявів, які впливають на шкіру у випадку системного процесу та зачіпають інші органи і системи організму людини, породжуючи такі симптоми, як астма, харчова алергія і алергічний риніт, серед інших. Насправді, високий відсоток пацієнтів 3 цими захворюваннями має підвищений рівень ІДЕ і еозинофілів у периферичній крові, хоча причини і клінічні наслідки цього незрозумілі.

Щодо патофізіологічних механізмів вважається, що імунна відповідь відіграє важливу роль у його виникненні. Фактично останні дані виявляють вплив шкірних дендритних клітин (антиген- презентуючих клітин) і регуляції запальних-імунних сигналів, опосередкованих /-Тп2- лімфоцитами, на виникнення АД. Дані показують, що ці імунологічні механізми, включаючи антиген-презентуючі шкірні дендритні клітини та імунну регуляцію і запальні сигнали, опосередковані Тп2-лімфоцитами, виявляють патофізіологічне походження АД. Невідомим на сьогодні є джерело стимулу, ініціюючого імунологічний каскад, що спостерігається а АД.

Захворювання має широкий діапазон клінічних проявів, починаючи від незначних форм, таких як екзема рук, до більш серйозних форм, таких як еритродермічний висип. Оскільки специфічних змін патологічного або лабораторного типу не спостерігається, діагностика АД є клінічною, а стандартна діагностика проводиться з використанням критеріїв Ханіфіна-Райка (Напіїйп УМ, єї а). Асіа Оегт Мепегео! 1980; 92: 44-7).

Клінічні характеристики АД змінюються залежно від віку і включаються в діагностичні критерії; до них належать свербіж, екзематозні пошкодження і ураження від подряпин.

Свербіж один із найважливіших і систематичних проявів атопії. Атопічний свербіж є інтенсивним і зазвичай викликає спалахи захворювання. Свербіж призводить до травмування пацієнтів. Хоча причина свербіння недостатньо зрозуміла, причина його може полягати у вивільнення медіаторів запалення і цитокінів.

Екзема: екзематозні ураження можуть бути гострими і хронічними. Гострі ушкодження характеризуються макулами, папулами і еритематозними, везикулярними, ексудативними і дуже свербіжними бляшками. Повторні подряпини і саднини призводять до хронічних травм, які характеризуються вираженим потовщенням шкіри, що супроводжується ліхеніфікацією і очевидною наявністю сухих фіброзних папул.

Ліхеніфікація: спостерігаються характерні ліхеніфіковані ураження шкіри, які складаються з нечітко визначених бляшок з потовщенням шкіри, що мають виражені шкірні складки та лінії.

Свербець (пруріго): дрібні папули із незначними пухирями і вираженим подразненням, що є результатом енергійного розчухування.

Ексфоліативний дерматит: випадки екстенсивного атопії можуть клінічно проявлятися як генералізований ексфоліативний дерматит, включений в диференціальну діагностику еритродерм.

Окрім встановлення діагнозу необхідно оцінити або кількісно визначити тяжкість бо захворювання. З цією метою були розроблені різні методи і критерії для оцінки тяжкості і контролю реакції на лікування в клінічних випробуваннях та неекспериментальних дослідженнях і навіть у клінічній практиці, коли метою є представлення прогресу пацієнта більш детально, ніж просто опис суб'єктивної реакції пацієнта, особи, що дбає про пацієнта, або лікаря. У цьому відношенні найбільш валідованим і розповсюдженим методом є так званий метод за індексом

ЗСОВАЮ (бсопйпа Аюріс ЮОептаїййів), розроблений Європейською робочою групою з питань атопічного дерматиту в 1993 році (Еиореап Тавзк Рогсе оп Аюоріс ЮОептаїйів5. ОегптаїйоІоду 1993; 186: 23-31). Він виявився найкращим методом оцінки тяжкості атопічного дерматиту у порівняльних дослідженнях, а також є найбільш задокументованим стосовно достовірності, відтворюваності, чутливості та прийнятності. Метод 5СОВАЮО - це система оцінювання, яка враховує ступінь і інтенсивність п'яти типів основних уражень АД (еритема, набряк/папула, ексудація/утворення корочки, екскоріація і ліхеніфікація) і симптоми (свербіж і втрата сну).

Існують певні розбіжності щодо значень індексу 5СОВАЮ, які визначають різні ступені тяжкості. Окремі групи іспанських пацієнтів вважають легкими, середніми або важкими відповідно до індексу ФБСОВАО « 25, від 25 до 40 або » 40, в той час як інші автори, спираючись на кореляції з лабораторними тестами, використовують оцінки х 20, від 20 до 40 або » 40 відповідно для визначення легких, середньотяжких і тяжких симптомів.

Існує єдиний погляд на лікування АД, спрямований, у першу чергу, на запобігання свербінню і усунення запального ураження, і по-друге, на запобігання рецидивам (Мийог Е. 2002. ЧАМО, 1432: 52-7; Водипієем/їс2 М, Зсптід-Степаєї!теїег Р, і Геипд ОМ. 2006. У АїйПегду Сіїп Іптипої, 118: 40-3). Для запобігання свербінню і подряпинам призначають антигістамінні препарати НІ, хоча їх ефективність не чітко продемонстрована. Основною метою лікування екземи є контроль запального ураження, що також допомагає контролювати свербіж. Тому використовують кортикостероїди для місцевого застосування різної сили залежно від тяжкості травми і стану пацієнта. Більш ефективними препаратами є традиційні антигістамінні препарати НІ, які викликають седативну дію (гідроксизин, клемастин, дексхлорфенірамін) і антигістамінні препарати НІ нового покоління (дексфенфлурамін, лоратадин, цетиризин та похідні), які є менш седативними, але іноді показують результати, які не відрізняються із статистичною значущістю від плацебо (Водипієм/їся: М, еї а! 2006. Оцоїесй ай зирга).

Побічні ефекти місцевих кортикостероїдів обмежують їх застосування. Найбільш

Зо поширеними є побічні реакції на місці введення препарату. При періокулярному застосуванні зазвичай з'являються такі реакції: атрофія шкіри, петехії, атрофічні смуги, гіпертрихоз, депігментація, телеангієктазія, фолікуліт і глаукома. Рідше описані більш серйозні системні побічні ефекти, такі як пригнічення гіпоталамо-гіпофізарної надниркової залози, затримка росту або кушингоїд.

Відсутність реакції деяких пацієнтів на кортикостероїди та їх побічні ефекти обумовлює необхідність розробки нових препаратів для лікування запалення. До кращих досліджених препаратів належать інгібітори кальциневрину для місцевого застосування (такролімус і пімекролімус) І еипду, ОУМ і Віедетг, Т. 2003, І апсеї, 361: 151-60; Мийог Р. 2002, ЗАМО, 1432: 52- 7). Проте залишаються сумніви щодо безпеки цих препаратів при тривалому лікуванні.

Фактично у каталозі продуктів, що містять такролімус або пімекролімус, для місцевого лікування атопічного дерматиту, зазначено, що вони повинні застосовуватися лише для дітей старше двох років, для яких місцеве застосування кортикостероїдів не рекомендоване або попереднє застосування було невдалим.

Використання пробіотиків для лікування АД вивчалося в останні роки лише в деяких пілотних дослідженнях, і результати відрізняються залежно від використовуваного пробіотика та віку пацієнтів у дослідженні (500-РК Кіт, єї аІ. 2014. Апп АПегау Авійта Іттипої! 113: 217е226,

Сегавзітом, ЗМ вї аї., 2010. Ат У Сіїп ЮОептайті, 11: 351е361, Рагіа, В. єї аї., 2011. Ікап У Реадіаїк., 21: 2256230). Останні дослідження, включаючи мета-аналіз попередніх публікацій, демонструють позитивний результат при застосуванні пробіотиків за певних умов, пов'язаних з віком, бактеріальним штамом або комбінацією пробіотиків і використовуваної дози (Рагід, В. єї а! 2011 сіїєд ай зирга; Мап аеєї Аа І В, еї а. 2010. Сіїп Ехр АїІегду. 40:795е804; Воуїє, ВУ еї аї. 2008. Соспгапе Раїаразе Бузі Нем, 4: СОО006135: І ее, У. еї аі. 2008. У АїПеду Сіїп Іттипої. 121:116). Найбільш досліджені пробіотики, використовувані для лікування атопічного дерматиту і запобігання новим спалахам захворювання, належать до родів Війдобасієгцт і І асіобасіїив, оскільки вони демонструють кращі результати (І єе, .. еї аіІ. 2008. Оцоїєай ай 5ирга).

Існує загальновідома медична потреба у розробці якісних методів лікування, які є безпечними та ефективними для тривалого лікування АД, оскільки атопічний дерматит вражає значну частину населення, помітно впливаючи на якість їх життя, яку можуть погіршувати медичні ускладнення і таке інше. Прийом кортикостероїдів для місцевого застосування бо вважають дуже ефективним лікуванням, але передбачають високий ризик небажаних реакцій на препарат. Включення нових альтернативних засобів до місцевих кортикостероїдів (таких як інгібітори кальциневрину) відповідає цій потребі, хоча ризик побічних ефектів 3 циМИ НОВИМИ препаратами ще не визначений. Отже, попередній рівень техніки показує, що існує необхідність у розробці нових композицій для лікування АД, які б були ефективними і не мали типових побічних ефектів лікарських засобів, які використовуються на сьогоднішній день.

ДЕТАЛЬНИЙ ОПИС ВИНАХОДУ

Автори цього винаходу виявили, що введення пробіотичної композиції, що модифікує мікробіоту кишечника, особі, яка страждає на атопічний дерматит, разом з звичайним лікуванням, несподівано сприяє ремісії та/або позитивній динаміці спалахів атопічного дерматиту у пацієнта. Як показано в прикладах, що супроводжують даний опис, при введенні пробіотичної композиції (що містить мікроорганізми родів Вітдорасієтішт і І астюбасіи5) у поєднанні зі звичайним тривалим лікуванням у пацієнтів зі спалахами атопічного дерматиту спостерігалося покращення індексу ФСОВАО на 82,36 95, у той час як у пацієнтів, які проходили звичайний курс тривалого лікування без використання пробіотичної композиції, індекс покращився на 28,4 95, такі розбіжності визнали клінічно і статистично значущими. Більш того, покращення при застосуванні пробіотичної композиції спостерігалося з першого місяця прийому, зберігаючи або збільшуючи розбіжність при подальшому порівнянні через 2 і З місяці лікування. Крім того, ще однією перевагою лікування АД з використанням пробіотичної композиції даного винаходу є те, що застосування кортикостероїду пацієнтами в групі, яка приймала зазначену пробіотичну композицію, було нижчим, ніжу групі, яка приймала плацебо.

На додаток до такого сприятливого впливу на прогресування захворювання у пацієнтів зі спалахом атопічного дерматиту було виявлено, що через три місяці після припинення лікування зазначеною вище пробіотичною композицією особи, які отримували лікування зазначеною композицією, мали менше спалахів і більш тривалі проміжки часу без захворювання, ніж ті пацієнти, які не отримували такого лікування.

Таким чином, була продемонстрована корисність описаної тут пробіотичної композиції для лікування та/або профілактики атопічного дерматиту.

Автори винаходу розробили ряд аспектів винаходу, які будуть докладно описані нижче.

Склад пробіотичної композиції даного винаходу і її застосування у лікуванні атопічного

Зо дерматиту (АД)

В одному аспекті даний винахід стосується пробіотичної композиції, яка містить мікроорганізми Вітідобасієгішт апітаїїв. 5,ЇибБ5р. Іасії5 (надалі В. Іасіїв), Віїйдобасієтішт Іопдит і

І асіорасійс5 савеі.

У даному винаході термін "пробіотична композиція" означає композицію, що містить щонайменше один мікроорганізм, який при потраплянні в організм взаємодіє з метаболізмом людини і дає сприятливий ефект. У даному винаході пробіотична композиція містить мікроорганізми В. Іасіїв, В. Іопашт і І. сазеі, надалі - "пробіотична композиція винаходу".

В. Іасіїв - це бактерія, яку зазвичай використовують як пробіотик, в основному в йогурті та інших молочних продуктах, включаючи дитячі молочні суміші. Наукова класифікація В. Іасіїв: царство: Васієгіа, відділ: Ріктісцієв, клас: Асііпорасієга, порядок: Війдобрасієгіа, родина:

Вітідобасієгіасеає, рід: Вітідорасіелит, вид: Віїдобасіетіит апітаїї»в 5!,иБ5р. Іасіїв.

ГІ. сазеї - це бактерія, яку зазвичай використовують як пробіотик, в основному в йогурті та інших молочних продуктах, включаючи дитячі молочні суміші. Наукова класифікація /. савзеї: царство: Васієтіа, відділ: Рінптісціє5, клас: Васійї, порядок: І асіобрасійаІев5, родина:

І асюбасіПасеає, рід: І асіобасіїїив5, вид: І асіобасіїи5 савзвеі.

Більш того, В. Іопдит - грам-негативна, каталазо-негативна бактерія округлої форми, що знаходиться у шлунково-кишковому тракті, де виробляє молочну кислоту. Наукова класифікація

В. Іопдит: царство: Васієгіа, відділ: Рінтісціє5, клас: Асііпобасієла, порядок: Війдобасіегіа, родина: Війдобасієгіасеає, рід: Віїдобасіегіит, вид: Вітдобасієгит Іопдит.

У окремому варіанті здійснення винаходу пробіотична композиція винаходу включає 6. Іасії5

СЕСТ 8145 (та/або штами, одержані з неї), В. пдит СЕСТ 7347 (та/(або штами, одержані з неї) та/або І. сазєї СЕСТ 9104 (та/(або штами, одержані з неї).

Штам В. Іасіїз СЕСТ 8145 був виділений з калу здорової грудної дитини віком менше трьох (3) місяців. Цей штам був зданий на зберігання 14 травня 2012 року згідно з Будапештським договором в Іспанську колекцію культур як Міжнародний депозитарій (за адресою Виїйадіпду З

СИЕ, Раге Сіепійіс Опімегейаї де МаїЇепсіа, С/ Саїеагатісо Адивііп Езсагаїпо, 9, 46980 Раїєта (Валенсія) Іспанія). Депозиту був призначений номер СЕСТ 8145.

Штам Г. сазєї СЕСТ 9104 був виділений з калу здорової грудної дитини віком менше трьох (3) місяців. Цей штам був зданий на зберігання 25 лютого 2016 року згідно з Будапештським бо договором в Іспанську колекцію культур як Міжнародний депозитарій (за адресою Виїйадіпду З

СИЦЕ, Раге Сіепіййс Опімегейаї де МаїІепсіа, С/ Саїеадгайсо Адивіїп Евсагаїіпо, 9, 46980 Раїєта (Валенсія) Іспанія). Депозиту був призначений номер СЕСТ 9104.

Штам В. Іопдит вігаіп СЕСТ 7347 був виділений з калу здорової грудної дитини віком менше трьох (3) місяців. Цей штам був зданий на зберігання 20 грудня 2007 року згідно з

Будапештським договором в Іспанську колекцію культур як Міжнародний депозитарій (за адресою Виїйаіпу З СОЕ, Рагс Сіепійіс Опімег5йаї ае МаІепсіа, С/ Сазедгайсо Адивіїп Езсагаїпо, 9, 46980 Раїета (Валенсія) Іспанія). Депозиту був призначений номер СЕСТ 7347.

Даний винахід також розглядає такі мікроорганізми або бактерії, які були одержані з мікроорганізмів В. Іасіїв, В. Іопдит і | сазвї (або їх відповідних штамів В. Іасії СЕСТ 8145, 1. сазеії СЕСТ 9104 і В. пат СЕСТ 7347) і які можуть бути частиною пробіотичної композиції винаходу, оскільки вони зберігають здатність знижувати та/або покращувати розвиток атопічного дерматиту у осіб, які страждають на цю патологію. Прикладами штамів або мікроорганізмів, одержаних зі штамів, що входять до складу пробіотичної композиції винаходу, можуть бути мутанти і генетично модифіковані організми, які демонструють варіації в їх геномі порівняно з геномом штамів винаходу, але які не впливають на здатність штамів знижувати та/або покращувати розвиток атопічного дерматиту у пацієнта. Штами, одержані з 8. Іасіїв, В.

Іопаит і Ї.. сазеї (або зі штамів В. Іасії СЕСТ 8145, | сазєї СЕСТ 9104 і В. Іопаит СЕСТ 7347), можуть бути природним або навмисно продуковані мутагенезом, як відомо з рівня техніки, як, наприклад, такі, але не обмежуючись цими прикладами: зростання батьківського штаму в присутності мутагенних агентів або стресорів або за допомогою генної інженерії, спрямованої на модифікацію, делецію та/або введення специфічних генів. Таким чином, як зазначено вище, даний винахід також передбачає генетично модифіковані організми, одержані з В. Іасіїв, В.

Іопаит і Ї.. сазвї (або зі штамів 6. Іасіїє СЕСТ 8145, | сазєї СЕСТ 9104 і В. Іопаит СЕСТ 7347), що зберігають здатність знижувати та/(або покращувати розвиток атопічного дерматиту у пацієнта і таким чином можуть бути застосовані при лікуванні атопічного дерматиту. Приклад тесту для перевірки здатності організму знижувати та/"або покращувати розвиток атопічного дерматиту у пацієнта описаний нижче у прикладах.

Крім того, даний винахід також розглядає клітинні компоненти, метаболіти і молекули, що виділяються В. Іасії5, В. Іопдит і |. сазеї або їх відповідними штамами В. Іасії5 СЕСТ 8145, 1. сазеі СЕСТ 9104 та/або В. Юпдит СЕСТ 7347, а також композиції, що містять зазначені компоненти, такі як клітини, метаболіти або секретовані молекули, і їх застосування для лікування та/ або профілактики атопічного дерматиту. Клітинні компоненти бактерій можуть включати компоненти клітинної стінки (такі як, але не обмежуючись ними, пептидоглікани), нуклеїнові кислоти, компоненти мембрани та інші, такі як білки, ліпіди і вуглеводи та їх комбінації (такі як ліпопротеїни, гліколіпіди або глікопротеїни). Метаболіти включають будь-яку молекулу, що продукується або модифікується бактерією в результаті її метаболічної активності під час росту, її використання в технологічних процесах або при зберіганні продукту (пробіотична композиція винаходу). Приклади цих метаболітів включають, але не обмежуються ними, органічні і неорганічні кислоти, білки, пептиди, амінокислоти, ферменти, ліпіди, вуглеводи, ліпопротеїни, гліколіпіди, глікопротеїни, вітаміни, солі, мінерали і нуклеїнові кислоти. Виділені молекули включають будь-яку молекулу, що секретується або вивільняється назовні бактерією під час росту, її використовують в технологічних процесах (наприклад, обробка харчових продуктів або лікарських засобів) або під час зберігання продукту (пробіотична композиція винаходу). Приклади таких молекул включають, але не обмежуються ними, органічні і неорганічні кислоти, білки, пептиди, амінокислоти, ферменти, ліпіди, вуглеводи, ліпопротеїни, гліколіпіди, глікопротеїни, вітаміни, солі, мінерали і нуклеїнові кислоти.

Як вважають фахівці даної галузі, пробіотична композиція згідно з винаходом може бути одержана для фармацевтичного застосування, тобто бути складовою лікарських препаратів, які вводять суб'єкту (наприклад, перорально, місцево і т.д.), та/"або для харчового застосування, тобто бути складовою харчових продуктів, що входять до раціону суб'єкту. У даному винаході зазначена композиція призначена для послаблення, зменшення, лікування та/або запобігання атопічному дерматиту. Таким чином у окремому варіанті здійснення винаходу пробіотична композиція даного винаходу представляє собою фармацевтичну композицію та/або харчову композицію.

Фармацевтична композиція - це набір компонентів або сполук, що утворюється щонайменше мікроорганізмами в. Іасіїв, |. савзеї і В. Іопдит, зокрема штамами В. Іасіїз СЕСТ 8145, та/або І сазеї СЕСТ 9104, та/або В. Іопдит СЕСТ 7347 (або штамами, одержаними з них) при будь-якій концентрації і які додатково можуть включати один або більше компонентів або сполук, що проявляють будь-яку біологічну, фармакологічну та/або ветеринарну активність, які при бо введенні суб'єкту можуть додатково збільшувати, посилювати та/або стимулювати активності штамів, включених в пробіотичну композицію даного винаходу. Як вважають фахівці даної галузі, додаткові компоненти або сполуки повинні бути сумісними з штамами пробіотичної композиції даного винаходу. В контексті цього винаходу термін "фармацевтична композиція" також охоплює ветеринарні композиції.

Приклади придатних компонентів або сполук, використовуваних при лікуванні атопічного дерматиту, які можуть входити до складу фармацевтичної композиції, включають, але не обмежуються ними, традиційні антигістамінні препарати НІ (наприклад, гідроксизин, клемастин і дексхлорфенірамін), нещодавно розроблені антигістамінні препарати НІ (наприклад, дексфенфлурамін, лоратадин, цетиризин і їх похідні) та інгібітори кальциневрину (наприклад, такролімус і пімекролімус).

У окремому варіанті здійснення фармацевтична композиція додатково містить фармацевтично прийнятний носій та/або ексципієнт.

Термін "ексципієнт" (наповнювач) відноситься до речовини, яка сприяє абсорбції будь-яких компонентів або сполук пробіотичної композиції даного винаходу, зокрема штамів винаходу, або стабілізує компоненти або сполуки та/(або сприяє одержанню фармацевтичної композиції шляхом надання їй такої консистенції або смаку, щоб зробити її більш приємною. Таким чином наповнювачі можуть мати функцію, наприклад, але не обмежуючись цим, зв'язування компонентів (наприклад, крохмалів, цукрів або целюлози), підсолоджування, фарбування, захисту активного інгредієнта (наприклад, для ізоляції його від повітря та/або вологи), заповнюючи таблетку, капсулу або будь-яку іншу форму, або дезінтегруючу функцію для полегшення розчинення компонентів, не виключаючи інші допоміжні речовини, не перераховані в цьому абзаці. Отже, термін "ексципієнт" визначається як матеріал, що входить до складу галенових форм, який додають до активних інгредієнтів або їх композицій з метою сприяння їх приготуванню і стабільності, модифікації їх органолептичних властивостей та/або визначення фізико-хімічних властивостей фармацевтичної композиції та її біодоступності. "Фармацевтично прийнятний" ексципієнт повинен забезпечувати активність компонентів або сполук фармацевтичної композиції, тобто повинен бути сумісним із штамами винаходу. "Галенова форма" або "фармацевтична форма" - це конфігурація, до якої пристосовані активні інгредієнти і наповнювачі для одержання фармацевтичної композиції або лікарського

Зо засобу. Вона визначається комбінацією форми, в якій фармацевтична композиція представлена виробником, і формою, в якій вона вводиться. "Носій" є переважно інертною речовиною. Функціями носія є полегшення додавання інших компонентів або сполук, покращення дозування та/(або введення та/або надання фармацевтичній композиції консистенції і форми. Таким чином носій представляє собою речовину, що використовується у лікарському засобі з метою розведення будь-якого з компонентів або сполук фармацевтичної композиції даного винаходу до необхідного об'єму або ваги; або навіть без розведення цих компонентів або сполук він здатний забезпечити краще дозування і введення та/або надання лікарському засобу необхідної консистенції і форми. Коли композиція є рідкою, фармацевтично прийнятним носієм є розчинник. Носій може бути природним або неприродним. Приклади фармацевтично прийнятних носіїв включають, не обмежуючись цим переліком, воду, сольові розчини, спирт, рослинні масла, поліетиленгліколі, желатин, лактозу, крохмаль, амілозу, стеарат магнію, тальк, поверхнево-активні речовини, кремнієву кислоту, в'язкий парафін, парфумерне масло, моногліцериди і дигліцериди жирних кислот, естери жирних кислот, гідроксиметилцелюлоза, полівінілпіролідон тощо.

Крім того наповнювач і носій повинні бути фармакологічно прийнятними, тобто використовують такий наповнювач і носій, який не зашкодить суб'єкту, якому він вводиться.

Носій може бути природними, тобто зустрічатися в природі, або неприродними, тобто може зустрічатися або не зустрічатися в природі, однак якщо він зустрічається в природі, то його комбінація зі штамами винаходу є неприродньою.

У будь-якому випадку лікарська форма фармацевтичної композиції буде адаптована до типу її введення. Таким чином, композиція може бути представлена у вигляді розчинів або у будь- якій іншій формі клінічно прийнятного введення і в терапевтично ефективній кількості.

Фармацевтична композиція може входити до складу твердих, напівтвердих або рідких препаратів, таких як таблетки, капсули, порошки, гранули, розчини, супозиторії, гелі або мікросфери. У окремому варіанті здійснення винаходу фармацевтичну композицію вводять у рідкій формі або у твердій формі.

В іншому варіанті здійснення винаходу тверда композиція вибрана з групи, що включає таблетки, льодяники, солодощі, жувальні таблетки, жувальні гумки, капсули, саше, порошки, гранули, частинки, покриті оболонкою, або таблетки, покриті оболонкою, таблетки, пігулки,

троше, таблетки і капсули, покриті оболонкою, що розчиняється в кишечнику, та здатні до диспергування смужки та/або плівки.

В ще одному варіанті здійснення винаходу рідка композиція вибрана з групи, що включає пероральні розчини, суспензії, емульсії та сиропи.

Крім того відомі різні системи, які можуть бути використані для введення пробіотичної композиції даного винаходу з уповільненим вивільненням, включаючи, наприклад, інкапсуляцію в ліпосоми, мікробульбашки, мікрочастинки або мікрокапсули тощо. Відповідні форми з уповільненим вивільненням, а також матеріали і способи їх одержання добре відомі з рівня техніки. Таким чином перорально введена форма пробіотичної композиції згідно з винаходом знаходиться у формі уповільненого вивільнення і додатково має щонайменше одне покриття або матрицю. Покриття або матриця з уповільненим вивільненням включає, не обмежуючись цим переліком, природні, напівсинтетичні або синтетичні полімери, нерозчинні у воді або модифіковані, воски, жири, жирні спирти, жирні кислоти, природні, напівсинтетичні або синтетичні пластифікатори або комбінацію двох або більше зазначених вище компонентів.

Розчинну в кишечнику оболонку можна наносити звичайними способами, відомими фахівцям в даній галузі техніки.

Додатково до описаного вище даний винахід також передбачає можливість того, що пробіотична композиція винаходу може бути введена суб'єкту разом з іншими компонентами або сполуками, хоча вони і не є частиною пробіотичної композиції. Приклади таких компонентів або сполук були згадані вище.

У випадку якщо пробіотичну композицію згідно з винаходом готують у вигляді харчової композиції, зазначена харчова композиція може бути харчовим продуктом або може бути включена до складу харчового продукту призначеного для споживання людиною і тваринами.

Таким чином в окремому варіанті здійснення винаходу харчову композицію вибирають із харчового продукту (який може бути харчовим продуктом для специфічних харчових цілей або лікарським продуктом) і харчової добавки.

У даному винаході термін "харчова композиція" відноситься до таких харчових продуктів, які незалежно від забезпечення поживними речовинами особу, яка споживає ці продукти, позитивно впливають на одну або більше функцій організму, покращуючи здоров'я і самопочуття зазначеної особи. У даному винаході згадана харчова композиція призначена для послаблення, зменшення, лікування та/або запобігання атопічному дерматиту.

Термін "добавка", синонім будь-якого з термінів "дієтична добавка", "біологічно активна добавка", "живильна добавка", "харчова добавка" або "харчовий компонент", відноситься до продуктів або препаратів, метою яких є доповнення нормального харчування джерелами концентрованих поживних речовин або інших речовин з харчовим або фізіологічним впливом на суб'єкта. У даному винаході "речовиною", що має харчовий або фізіологічний вплив на суб'єкта при вживанні харчової добавки, є мікроорганізм В. Іасіїв, І. сазеї і В. Іопдит, зокрема штами Б.

Іастів СЕСТ 8145, та/або |. сазєї СЕСТ 9104, та/або В. Іпдит СЕСТ 7347, які є складовою пробіотичної композиції винаходу. Харчова добавка може бути представлена у простій або комбінованій формі, а також може продаватися у лікарській формі, тобто в капсулах, пігулках, таблетках та інших подібних формах, пакетиках з порошком, ампулах з рідинами і пляшечках для крапельного дозування та інших подібних формах, таких як рідини і порошки, призначені для одноразового дозування.

Існує широкий спектр поживних речовин та інших елементів, які можуть входити до складу харчових добавок, включаючи, але не обмежуючись ними, вітаміни, мінерали, амінокислоти, незамінні жирні кислоти, клітковину, ферменти, рослини та рослинні екстракти. Оскільки їх роль полягає в тому, щоб доповнювати вміст поживних речовин у раціоні, вони не повинні використовуватися як замінник збалансованого харчування, а прийом не повинен перевищувати добову дозу, рекомендовану лікарем або дієтологом. Пробіотична композиція може бути також частиною так званої "їжі для спеціальних груп", тобто харчових продуктів, які задовольняють специфічні потреби в харчуванні.

Приклади харчових продуктів, які можуть містити пробіотичну композицію даного винаходу (мікроорганізми В. Іасії5, Ї сазвї і В. Іопдит, зокрема штами В. Іасіїз СЕСТ 8145, та/або | савзеї

СЕСТ 9104, та/або В. Іпдит СЕСТ 7347 (або штами, одержані з них)) включають, але не обмежуються цим переліком, молочні продукти, продукти рослинного походження, м'ясні продукти, закуски, шоколад, напої, дитяче харчування, крупи, смажені продукти, промислові хлібобулочні вироби та печиво. Приклади молочних продуктів включають, але не обмежуються цим переліком, продукти, одержані з ферментованого молока (наприклад, але не обмежуючись ними, йогурт або сир) або з неферментованого молока (наприклад, але не обмежуючись ними, бо морозиво, масло, маргарин або сироватку). Рослинний продукт представляє собою, наприклад, б але не обмежуючись цим, крупу в будь-якій формі випуску, ферментовану (наприклад, але не обмежуючись цим, соєвий йогурт або вівсяний йогурт) або неферментовану, і закуску. Напій може бути, але не обмежуючись цим, неферментованим молоком. У окремому варіанті здійснення винаходу харчовий продукт вибирають із групи, що складається з фруктових або овочевих соків, морозива, дитячої молочної суміші, молока, йогурту, сиру, кисломолочного продукту, порошкового молока, злаків, хлібобулочних виробів, продуктів на молочній основі, м'ясних продуктів та напоїв.

Крім того пробіотична композиція даного винаходу може містити інші мікроорганізми додатково до В. Іасіїв, І. сазвї та В. Іопаит, зокрема штамів В. Іасії СЕСТ 8145, та/або І. сазеї

СЕСТ 9104, та/або В. Іопдит СЕСТ 7347. Таким чином у окремому варіанті здійснення винаходу пробіотична композиція даного винаходу додатково містить мікроорганізм, вибраний з групи, що включає Іасіобасійй5 5р., ЗйМеріососсив о5р., Війдорасієтішт 5р., Засснаготусев5 зр.,

Кісумеготусез 5р. та їх комбінації.

В іншому більш детальному варіанті здійснення винаходу І асіорбасійй5 5р. вибраний з 1. пПатпозив, І. аеІрпескії зибзр. БиїЇдагісив, І. Кеїїг, І. рагакеїіг, І. Бгемів, Ї. сазеї, І. ріапіагит, Ї.

Тептепшт, Г. рагасавзеї, І. асідорнішв, І. рагаріаптагит або І. гешіегі; Зігеріососсив 5р. вибраний з БІ. ІпепторпйЙив5; Вітдобасіегішт в5р. вибраний з В. Іопдит, В. Бгеме, В. Біїдит, В. саїепишашт,

В. адоІезсепіїв ог В. роеепдосаїепиіашт; Засспаготусез вибраний з 5. сегемізіає або 5. Вошагаїї; або Кіпсумеготусез 5р. вибраний з К. Іасії або К. тагхіапив.

В ще одному варіанті здійснення винаходу пробіотичну композицію даного винаходу вводять суб'єкту через дієту.

Як відомо фахівцям в даній галузі, мікроорганізми В. Іасії5, Ї савзеї і В. Іопдит, зокрема штами В. Іасіїз СЕСТ 8145, І. сазєї СЕСТ 9104 та/або в. Іопдит СЕСТ 7347, повинні міститися в пробіотичній композиції даного винаходу в терапевтично ефективній кількості так, щоб вони могли проявляти свій ефект послаблення, зменшення, лікування та/або запобігання атопічному дерматиту.

У даному винаході ""ерапевтично ефективна кількість" - це така кількість компонента або сполуки фармацевтичної композиції, яка при введенні суб'єкту є достатньою для одержання бажаного ефекту. Зазначений компонент або сполука фармацевтичної композиції відноситься

Зо до мікроорганізмів В. Іасіїв, І. сазеї і В. Іопдит, зокрема до штамів В. Іасії СЕСТ 8145, І. сазеї

СЕСТ 9104 та/або В. Іопашит СЕСТ 7347. Як відомо фахівцями в даній галузі, терапевтично ефективна кількість може змінюватися залежно, наприклад, від віку, маси тіла, загального стану здоров'я, статі і раціону суб'єкта, а також зокрема відповідно до режиму і часу введення, швидкості екскреції або комбінації ліків.

Таким чином ов окремому варіанті здійснення винаходу загальна концентрація мікроорганізмів В. Іасіїв, І. сазвї і В. Іопдит, зокрема штамів В. Іасіїє СЕСТ 8145, та/або І. савзеї

СЕСТ 9104, та/або В. Іопаит СЕСТ 7347 у композиції становить від 103 до 10'"КУО, переважно 109 КУО. В іншому варіанті здійснення винаходу доза введення мікроорганізмів В. Іасіїв5, І. сазві і В. Іопайт, зокрема В. Іасіїє СЕСТ 8145, Ї. сазвєї СЕСТ 9104 та/або В. Іопдит СЕСТ 7347, у композиції становить від 1059 до 102 КУО/день, переважно 107 КУО/день, в ще одному варіанті здійснення винаходу режим введення становить щонайменше один раз на день, зокрема, двічі на день і більше, зокрема, три рази на день, кожен раз з окремим прийомом їжі (сніданок, обід і вечеря).

В іншому варіанті здійснення винаходу концентрація В. Іопдит, зокрема штаму В. Іопдит

СЕСТ 7347, відносно загальної концентрації мікроорганізмів у композиції має одне з таких значень: 10 то, 15 то, 20 то, 25 то, Зо то, 35 то, 40 то, 45 то, 50 Зо, 55 9б, 6о0 то, 65 то, 70 о, 75 Уо або 80 95. В ще одному варіанті здійснення винаходу концентрація В. Іасіїз, зокрема штаму В.

Іасіів СЕСТ 8145, відносно загальної концентрації мікроорганізмів у композиції має одне з таких значень: 10 то, 15 то, 20 то, 25 то, Зо то, 35 то, 40 то, 45 то, 50 Зо, 55 9б, 6о0 то, 65 то, 70 о, 75 Уо або 80 95. В іншому варіанті здійснення винаходу концентрація |. сазеї, зокрема штаму І. сазвеі

СЕСТ 9104, відносно загальної концентрації мікроорганізмів у композиції має одне з таких значень: 10 то, 15 то, 20 то, 25 то, Зо то, 35 то, 40 то, 45 то, 50 Зо, 55 9б, 6о0 то, 65 то, 70 о, 75 Уо або 80 95. Як відомо фахівцям в даній галузі, композиція винаходу включає будь-яку комбінацію концентрацій для кожного з мікроорганізмів, описаних вище.

В іншому варіанті здійснення винаходу концентрація В. ІОпдит відносно загальної концентрації мікроорганізмів у композиції становить щонайменше від 25 95 до 45 95, переважно щонайменше 35 90; концентрація В. Іасіїє відносно загальної концентрації мікроорганізмів становить щонайменше від 25 95 до 45 95, переважно щонайменше 35 95; та/або концентрація Ї. сазеї відносно загальної концентрації мікроорганізмів становить від 20 9о до 40 95, переважно 60 ЗО об.

Пробіотична композиція даного винаходу може бути застосована при лікуванні та/або профілактиці атопічного дерматиту у пацієнта, а також для уповільнення розвитку атопічного дерматиту після прийому пробіотичної композиції, описаної тут.

Таким чином, інший описаний тут об'єкт відноситься до пробіотичної композиції, описаної тут для застосування в якості лікарського засобу.

Термін "лікарський засіб" в контексті даного винаходу відноситься до будь-якої речовини, що використовується для профілактики, діагностики, полегшення, лікування або подолання захворювання у людей і тварин. В контексті цього винаходу захворюванням є АД.

Інший описаний тут об'єкт відноситься до пробіотичної композиції, як описано вище, застосовуваної при лікуванні та/або профілактиці АД у особи, що страждає на це захворювання.

У даному винаході термін "суб'єкт" еквівалентний терміну "особа"; тому обидва терміни можуть бути використані як взаємозамінні. "Суб'єкт", окрім будь-якої особи, означає будь-яку тварину, що належить до будь-якого виду. Приклади суб'єктів включають, але не обмежуються цим переліком, тварин, що представляють комерційний інтерес, таких як птахи (кури, страуси, курчата, гуси, куріпки, тощо); кролики, зайці, домашні тварини (собаки, коти тощо); вівці, кози і т.д.; свині (кабани, тощо); кінна худоба (коні, поні тощо); велика рогата худоба (бики, корови, воли тощо); тварини, що представляють мисливський інтерес, такі як олені тощо; і людей.

Однак у конкретному варіанті здійснення винаходу суб'єкт є ссавцем, переважно ссавцем є людина будь-якої раси, статі або віку.

У даному винаході термін "профілактика" означає уникнути захворювання або патологічного стану у особи, зокрема якщо особа має схильність до патологічного стану, однак цей стан ще не був діагностований. У даному винаході захворювання або патологічний стан означає спалах атопічного дерматиту.

У даному винаході термін "лікувати" або "лікування" включає уповільнення захворювання або патологічного стану, тобто припинення його розвитку; полегшення захворювання або патологічного стану, тобто викликання регресії захворювання або патологічного стану; та/або стабілізацію захворювання або патологічного стану у особи. У даному винаході захворювання або патологічний стан означає атопічний дерматит.

У даному винаході під терміном "атопічний дерматит" (АД) розуміють запальні дерматози,

Зо свербіжний, хронічний перебіг захворювання, що характеризується розвитком екземи з характерною картиною поширення, яка вражає осіб з гуперреактивністю шкіри на різні фактори навколишнього середовища, нешкідливі для неатопічних осіб: Будучи хронічним запальним процесом, спостерігаються спалахи запального характеру, обумовлені такою гуперреактивністю шкіри, що спричиняє пошкодження як в ділянках шкіри, так і в місцях поширення, в результаті чого розвивається гостра або підгостра екзема. Атопічний дерматоз може проявлятися в багатьох формах і місцях, окрім шкіри.

Спосіб лікування та/або профілактики запальних захворювань шкіри

В іншому аспекті винахід стосується способу лікування атопічного дерматиту у суб'єкта, надалі способу лікування згідно з винаходом, що включає введення пробіотичної композиції, описаної у цьому винаході, суб'єкту, який страждає на атопічний дерматит.

Всі окремі терміни, визначення і варіанти здійснення попередніх аспектів винаходу можуть бути застосовні також до способу лікування згідно з даним винаходом.

В описі ії формулі винаходу слово "включає" і його синоніми не виключають наявність інших технічних характеристик, добавок, компонентів або стадій. Для фахівців в даній галузі техніки інші об'єкти, переваги та характеристики винаходу можуть бути очевидними, частково, з опису і, частково, в ході здійснення винаходу. Наведені нижче приклади і фігури надані з метою ілюстрації і не призначені для обмеження обсягу даного винаходу.

КОРОТКИЙ ОПИС ФІГУР

Фіг. 1 - це діаграма, що представляє аналіз основних компонентів мікробіологічних профілів зразків калу, взятих у пацієнтів, що страждають на атопічний дерматит (точка, позначена квадратом з чорною крапкою) порівняно зі здоровими особами, що належать до ентеротипу 1 (точка, позначена колом з темно-сірою крапкою), ентеротипу 2 (точка, позначена трикутником з сірою крапкою) і ентеротипу З (точка, позначена ромбом зі світгло-сірою крапкою).

Фіг. 2 - це діаграма, що представляє аналіз варіабельності зразків калу пацієнтів, що страждають на дерматит, порівняно зі здоровими особами у кожному з ентеротипів. На фігурі показані статистичні значення після застосування тесту Вілкоксона.

Фіг. З - це діаграма, що представляє аналіз головних компонентів пацієнтів, які страждають на дерматит або які класифіковані як такі, що належать до ентеротипу 1, (точка, позначена квадратом з чорною крапкою) порівняно зі зразками здорових осіб ентеротипу 1 (точка, бо позначена колом з сірою крапкою). Типи, найбільш представлені у зразках, розміщені у верхній правій частині фігури, зображені чорним кольором, а такі, що недостатньо представлені в даному аналізі, зображені сірим кольором. Що стосується зразків, розміщених у лівому нижньому кутку, то тенденція є протилежною: менш розповсюджені позначені чорним, а більш розповсюджені сірим.

Фіг. 4 - це діаграма, що представляє аналіз головних компонентів пацієнтів, які страждають на дерматит або які класифіковані як такі, що належать до ентеротипу 2, (точка, позначена квадратом з чорною крапкою) порівняно зі зразками здорових осіб ентеротипу 2 (точка, позначена колом з сірою крапкою). Типи, найбільш представлені у зразках, розміщені у верхній правій частині фігури, зображені чорним кольором, а такі, що недостатньо представлені в даному аналізі, зображені сірим кольором. Що стосується зразків, розміщених у лівому нижньому кутку, то тенденція є протилежною: менш розповсюджені позначені чорним, а більш розповсюджені сірим.

Фіг. 5 - це діаграма, що представляє аналіз головних компонентів пацієнтів, які страждають на дерматит або які класифіковані як такі, що належать до ентеротипу 3, (точка, позначена квадратом з чорною крапкою) порівняно зі зразками здорових осіб ентеротипу З (точка, позначена колом з сірою крапкою). Типи, найбільш представлені у зразках, розміщені у верхній правій частині фігури, зображені чорним кольором, а такі, що недостатньо представлені в даному аналізі, зображені сірим кольором. Що стосується зразків, розміщених у лівому нижньому кутку, то тенденція є протилежною: менш розповсюджені позначені чорним, а більш розповсюджені сірим.

На Фіг. 6 наведені показники індексу 5СОВАЮ протягом одного місяця після початку лікування пробіотичною композицією даного винаходу або плацебо. Результати показують абсолютне значення індексу БСОВАЮО для кожної групи (Фіг. бА) і зниження індексу БСОВАЮ у 95 протягом курсу лікування в обох групах (Фіг. 68). МУЗ - перевірка через 1 місяць. Група А - група, яка приймає плацебо; група В - група, яка приймає пробіотичну композицію.

На Фіг. 7 наведені показники індексу БХСОВАО протягом двох місяців після початку лікування пробіотичною композицією даного винаходу або плацебо. Результати показують абсолютне значення індексу БСОВАО для кожної групи (Фіг. 7А) і зниження індексу БСОВАОЮ у 95 протягом курсу лікування в обох групах (Фіг. 78). М5 - перевірка через 2 місяці. Група А - група, яка

Зо приймає плацебо; група В - група, яка приймає пробіотичну композицію.

На Фіг. 8 наведені показники індексу 5СОВАЮО протягом трьох місяців (закінчення дослідження) після початку лікування пробіотичною композицією даного винаходу або плацебо.

Результати показують абсолютне значення індексу 5СОНВАЮО для кожної групи (Фіг. 8А) і зниження індексу ФСОВАЮ у 95 протягом курсу лікування в обох групах (Фіг. 88). М7 - перевірка через З місяці. Група А - група, яка приймає плацебо; група В - група, яка приймає пробіотичну композицію.

Фіг. 9 показує покращення індексу БСОВАЮ у 95 протягом періоду дослідження, визначене протягом одного, двох і трьох місяців (закінчення дослідження) відносно вихідного рівня.

Відмінності між двома групами лікування були статистично значущими з першого місяця, і ці відмінності зростали у другому і третьому місяцях дослідження. Пунктирна лінія показує групу, що приймає пробіотичну композицію; безперервна лінія -групу, що приймає плацебо.

На Фіг. 10 показана тенденція зміни індексу БСОВАО з часом, виміряні протягом одного, двох і трьох місяців (закінчення дослідження) відносно вихідного рівня. Відмінності між двома групами лікування є статистично значущими. Пунктирна лінія показує групу, що приймає пробіотичну композицію; безперервна лінія - групу, що приймає плацебо.

На Фіг. 11 показана тенденція зміни кількості пацієнтів, які страждають на нові спалахи атопічного дерматиту (Фіг. 11 А), загальна кількість пацієнтів 3 новими спалахами атопічного дерматиту (Фіг. 118), а також відсоток пацієнтів, у яких не спостерігаються нові спалахи (Фіг. 110); протягом трьох місяців спостереження після припинення прийому плацебо або пробіотичної композиції даного винаходу. Відмінності між двома досліджуваними групами є статистично значущими після тримісячного спостереження від початку моніторингу для трьох досліджуваних показників. Чорна лінія: пацієнти, які приймали плацебо; сіра лінія: пацієнти, які приймали пробіотичну композицію.

ПРИКЛАДИ

Наведені нижче дослідження, проведені авторами, ілюструють даний винахід, показуючи властивості пробіотичної композиції винаходу.

ПРИКЛАД 1: Визначення бактеріальної мікробіоти у пацієнтів, що страждають на АД 11 МАТЕРІАЛ | МЕТОДИ

Екстракцію генетичного матеріалу (ДНК) зі зразків калу 49 хворих на дерматит проводили, бо використовуючи комбінацію механічного і ферментативного руйнування клітинних стінок і мембран з метою збільшення виходу екстракції і запобігання знищенню бактерій клітинною стінкою (Грам ж). Генетичний матеріал, одержаний екстракцією, вимірювали для оцінки якості та кількості спектрофотометром Маподгор 2000 ТНептовбсієпіййс для визначення співвідношень 260/280 і 260/230, що вказують на якість екстракції (наявність інгібіторів ПЛР, пігмент і т.д.).

Пізніше після перевірки якості були створені бібліотеки для масивного секвенування, що охоплюють гіперваріабельну ділянку У3-М4 гена 165 рРНК бактерій (на основі Кіїпажонпн А, еї аї. (2013) Мисівіс Асій5 Невз 41: е1) відповідно до протоколу, описаного Шитіпа для аналізу мікробного складу на основі захоплення 165 рРНК. Кожну бібліотеку визначали кількісно за допомогою Оцапії Рісостеєп фірми Іпмийгтодеп і змішували еквімолярно для подальшого секвенування.

Зразки секвенували на приладі Міб5ед в комбінації з 300 циклів парних прочитань. Одержані файли ГА5ЗТО обробляли для забезпечення високоякісного аналізу послідовності. З цією метою був проведений контроль якості, який складався з таких етапів: 1. Приєднання кінців до реконструкції унікальних послідовностей за допомогою програми "реаг м0.9.6. (папа «, еї а! (2014) Віоіптогптаїйсвь ЗО (5): 614-200). 2. Видалення послідовних адаптерів і захоплення праймерів з гіперваріабельних ділянок УЗ і М4 за програмою сиіадарі версії 1.9.1. (Мапіп М (2010) ЕМВпеї!.|оигтпаї Г5.ЦЇ, 17 (1): 10-12. ІЗ5М 2226-6089.) Відщеплення секвенційних адаптерів та захоплення праймерів від гіперваріабельних ділянок М3 і М4 за програмою сиіадарі версія 1.9.1. (Мапіп М (2010)

ЕМВпеї.|оштпаї (5... 17(1): 10-12. ІБ5М 2226-6089.). 3. Елімінація послідовностей низької якості із використанням ЕА5ТХ-ТооїКії версії 0.91 4. Ліквідація химер, одержаних методом ПЛР з використанням програми ОСНІМЕ (грудень 2015 р.) (Едодаг ВС, єї а! (2011) Аца 15; 27 (16): 2194-200) і остання база даних химер

Одержані зрази порівнювали з базою даних послідовностей 165 рРНК (МСВІ), використовуючи інструмент для швидкого пошуку послідовностей ВІ АТ (Айбспц! 5Е, еї аї (1990) У. Мої Віої. 215: 403-410).

Кожна з послідовностей, для якої був одержаний показник ідентичності 95 95, була досліджена на різних токсономічних рівнях: підцарство, родина, рід і вид.

АВ статистичний пакет був використаний для статистичного аналізу, щоб побудувати

Зо діаграму для аналізу основних компонентів (РСА).

Цікаво зазначити, що існує значна варіація у мікрофлорі травного тракту кожного індивідуума, епідеміологічні дослідження показують, що мікробіоти майже всіх з них можна віднести до трьох різних категорій, відомих як ентеротипи (Агитидат еї аї. (2011) Маїшге 473: 174-180). Ця класифікація заснована на переважанні в кожному з цих трьох ентеротипів членів родів Васієгоїдез5, РгємоївІа або ВКитіпососси5. Якщо переважає рід Васієгоїде5, йдеться про ентеротип 1 (епії), якщо переважає рід РгемоїеїПа - про ентеротип 2 (епіг), а якщо переважає рід

Витіпососсив - про ентеротип З (епіЗ) (Оаме еї аї., (2012). Ттап5. Нез. 160, 246-257).

І. РЕЗУЛЬТАТИ

Як зазначено вище, був досліджений мікробний склад зразків калу у осіб, які страждають на атопічний дерматит порівняно зі зразками калу здорових осіб.

Результати показують, що, як зображено на Фіг. 1, мікробіологічний склад зразків у пацієнтів з АД ближчий до здорових осіб з ентеротипом 3, ніж до інших здорових осіб. Як показано в лівому верхньому кутку зазначеної Фіг. 1, пацієнти з АД (точки, позначена квадратом з чорною крапкою) концентруються разом зі здоровими особами з ентеротипом З (точка, позначена ромбом зі світло-сірою крапкою), але з більшою дисперсією у випадку пацієнтів з АД, ніж у здорових осіб з ентеротипом 3. На відміну від цього, здорові особи з ентеротипом 1 (точка, позначена колом з темно-сірою крапкою) або ентеротипом 2 (точка, позначена трикутником з сірою крапкою) скупчуються у верхній частині, зліва направо, а з лівого боку зверху вниз відповідно. Також помітно, що зразки, сконцентровані у правій частині діаграми, містять переважну кількість бактерій роду Васієгоїдез і меншу кількість РгемоїеїІа і Раесаїїрасієтгійт, в той час як зразки, сконцентровані у верхній частині діаграми на Фіг. 1, не містять РгемоїеЇа; таким чином зразки здорових пацієнтів з ентеротипом 2 (більша кількість видів роду РгемоїеІІа) розміщені у нижньому лівому куті і показують збільшення вмісту Раєсаїїрасієгцт і

Витіпососсиб5. Ці дані дозволяють стверджувати, що мікробіота пацієнтів з АД ближче до здорових осіб з ентеротипом 3, але з іншим складом і бактеріальною варіабельністю.

Така варіабельність і мікробний склад серед здорових осіб з ентеротипом З і пацієнтів з АД є більш помітною, коли варіабельність мікрофлори досліджується у зразках здорових осіб (у порівнянні з кожним з трьох окремих ентеротипів) для зразків пацієнтів з АД з використанням індексу Шеннона (Фіг. 2). Як показано на фіг. 2, загалом пацієнти з АД мають більшу бо варіабельність у порівнянні зі здоровими особами, причому середній і міжквартильний діапазон у пацієнтів, що страждають на атопічний дерматит, становить 2,97 (від 2,84 до 3,06), а у здорових осіб з ентеротипами 1, 2 і З середній і міжквартильний діапазон становить 1,99 (від 1,37 до 2,52); 2,14 (від 1,50 до 2,62) та 2,23 (від 1,91 до 2,57) відповідно. Зокрема, пацієнти з АД мають значно вищу бактеріальну варіабельність, ніж будь-який з ентеротипів здорових осіб, оскільки в усіх випадках порівняння бактеріальної варіабельності пацієнтів з АД з бактеріальною варіабельністю здорових осіб з різними ентеротипами р-0,0001.

Для визначення бактерій, які відрізняють здорових осіб від осіб, що страждають на атопічний дерматит, пацієнти з атопічним дерматитом були класифіковані на основі переважання Васієгоіїде5 (епі), Ргєемоїеііа (епі2) або Витіпососсив (епі3). Після цього фахівці проаналізували, чи існували відмінності між різними ентеротипами здорового населення порівняно з різними ентеротипами осіб з АД. По-перше, із 49 пацієнтів з АД 25 осіб були класифіковані як епі!; 2 особи - як єпіг, а 22 особи - як єпі3. Аналогічно, із 324 здорових осіб 298 осіб були класифіковані як епі!ї; 21 особа - як епі, аб осіб - як епіЗ3. Потім була проаналізована варіабельність бактерій в межах кожного ентеротипу, 1, 2 або З серед пацієнтів з АД порівняно зі здоровими суб'єктами.

Фіг. З показує бактеріальну варіабельність здорових осіб у порівнянні з пацієнтами з АД, всі вони належать до ентеротипу 1. Як показано на Фіг. 3, здорові особи мають більшу кількість

Васієегоїде5, ніж пацієнти з АД, а пацієнти з АД виявляють більший вміст бактерій родів

Еаєсаїїбасіепит, Вітідобрасієгійт, та зокрема незначний вміст бактерій роду АЇівіїрев.

На Фіг. 4 показана бактеріальна варіабельність серед здорових суб'єктів порівняно з пацієнтами з АД, всі вони належать до ентеротипу 2. У цьому випадку неможливо визначити різницю відносно родів бактерій між пацієнтами з АД ентеротипу 2 і здоровими особами, що належать до того ж самого ентеротипу. З іншого боку, на цій фігурі показаний низький рівень пацієнтів з АД, які належать до ентеротипу 2.

Як і у випадку здорових осіб та пацієнтів з АД ентеротипу 1, у пацієнтів з АД, які належать до ентеротипу З (Фіг. 5), спостерігаються помітні відмінності між пацієнтами з АД і здоровими особами. Як показано на Фіг. 5, пацієнти з АД мають меншу кількість бактерій роду

Витіпососсив5, ніж здорові пацієнти, а також менша кількість видів, що належать до роду

Еаєсаїїбасієетгіит.

Зо Враховуючи всі наведені вище результати, зрозуміло, що мікробіота пацієнтів з АД відрізняється за складом і варіабельністю від мікробіоти здорових осіб. Крім того було продемонстровано, що було виявлено менше пацієнтів з АД, які належать до ентеротипу 2, а також що пацієнти з АД мають підвищену бактеріальну варіабельність, але з меншою кількістю бактерій, що належать до видів важливих родів у кожному ентеротипі, зокрема родів Васієгоїде5 і Витіпососсив для ентеротипів 1 і З відповідно.

ПРИКЛАД 2: Аналіз ефективності пробіотичної композиції згідно з винаходом при профілактиці та/або лікуванні атопічного дерматиту (АД).

І. МАТЕРІАЛИ І МЕТОДИ

Щоб оцінити ефективність пробіотичної композиції згідно з даним винаходом у зменшенні симптомів, разом з використанням кортикостероїдів для місцевого застосування у лікуванні атопічного дерматиту було проведено пілотне клінічне дослідження за методом довільного вибору в умовах подвійної анонімності з контролем за плацебо у групі із 20 пацієнтів, що страждають на атопічний дерматит, віком від 4 до 17 років.

З цією метою у пацієнтів, які були включені до дослідження, діагностували атопічний дерматит за критеріями Ханіфіна і Райка (Напіїйп УМ, еї аї. Ада Оеєгт Мепегео!ї! 1980; 92: 44-7), що відповідало всім критеріям включення та жодному з критеріїв виключення, встановлених у даному дослідженні. Суб'єкти дослідження також приймали або могли б приймати кортикостероїди для місцевого застосування для лікування спалахів атопічного дерматиту, а також інші активні сполуки, що використовуються при звичайному лікуванні, такі як пом'якшувачі, системні кортикостероїди, антигістамінні препарати тощо.

Кожний пацієнт був включений до групи, що одержувала лікування, або до контрольної групи, що одержувала плацебо, з використанням стратифікованої рандомізації 1:1 за блоками з урахуванням змінних величин: стать, вік, сімейний анамнез першого ступеня спорідненості атопії або атопічного дерматиту і прояв атопічного дерматиту до 4-річного віку.

Пробіотична композиція даного винаходу містить Війдорасієгцт Іасії СЕСТ 8145,

Вітідорасієтішт Іопдит СЕСТ 7347 ї І асіобасійш5 сазе/СЕСТ 9104 у складі цукрової основи і мальтодекстрину тапіоку, що містить 5 х 1019 КУО / грам.

Форма і зовнішній вигляд введеного плацебо були такими ж, як і композиції згідно з винаходом, однак плацебо містило лише мальтодекстрин тапіоку і цукор.

Схема прийому пробіотичної композиції згідно з винаходом або плацебо - одна капсула на день.

Для лікування спалахів атопічного дерматиту, які можуть виникнути у пацієнтів, включених у дослідження, як кортикостероїд для місцевого застосування використовували ацепонат метилпреднізолону, а тривалість такого лікування не перевищувала двох тижнів. При необхідності лікування системними кортикостероїдами призначали дефлазакорт. Дезлоратадин використовували для лікування свербіння, а звичайний антибіотик, такий як фузидова кислота, використовували у випадках інфекційного атопічного дерматиту.

Період лікування тривав дванадцять тижнів від набору пацієнтів до останньої перевірки.

Після контрольного аналізу на включення (вихідний рівень) та призначення лікування (група, що приймала лікування або плацебо) було запрограмовано сім обстежень, що відбувалися на 4, 8 та 12 тижнях від початку лікування композицією згідно з винаходом або плацебо. Під час цих перевірок оцінювався індекс БЄСОВАБ; і на 2, 6 і 10 тижнях журнал збору даних кожного пацієнта (ОСІ) був доповнений оновленими даними.

Всі медикаменти, прийняті пацієнтом під час дослідження, були зафіксовані в медичній карті пацієнта та в журналі ОСІ. із зазначенням доз, способу введення та тривалості лікування (дати початку та закінчення). Крім того кожна перевірка була зареєстрована в журналі ОСІ, а також кількість повернених капсул. Таблиця 1 показує демографічні та клінічні характеристики пацієнтів на початку дослідження в кожній групі лікування. Таблиця 2 відображає протокол клінічних досліджень.

Таблиця 1

Вихідні демографічні та клінічні характеристики пацієнтів в кожній групі лікування ше І ро значення вк 00000 ее ШЗ-(« А (Ю | - 2 5 5 1. - 5 0 5 5 - - кортикоїди" анти гістамін ні . ": дні лікування через 2 тижні; 50: стандартне відхилення; 5ЕМ: середньо-квадратичне відхилення.

Таблиця 2.

Протокол клінічного дослідження (Контрольнідослідження.д г | 0ОЛ | 2 | З | 4 | 5 | 6 | 7

Тижні 77777771 110112 | 4 | 6 | 8 | 1012 (Критерівключення/виключення.д/ ЇХ / / / ї/! / Ї

Підписанаїнформованазгодаї /-:/ |Х / / / / | ЇЇ

Медичнакартаї//-/-:/ 7777771 ЇХ 1 Її ЇЇ Її

Медичнийогляд.//-/:/ 77 ЇХ 7777 Їх ЇЇ Їх Її сх (Тестнавайітність/////////77777771 ЇХ 1 ЇЇ 17171 їх

Додатковідослідження.д/ ЇХ 77777 ЇЇ ЇХ ЇЇ Її

Індеєб5СОВАЮ С/г / ЇХ 17777 їх Її їх Її їх пишу те вени во ох ГКІ плацебо)

Журналзборуданих.ї//-://:/// | їх Її Їх Її їх їх

Відпусклікарськихзасобів.///: ЇХ 177777 Їх ЇЇ Їх ЇЇ Її

Поверненняіоблікневикористанихзасобів | ЇХ | |х | їх (Оцінкапобічнихефектів./-/-/:/ г | ХХ |Х |х Їх їх їх

Всі статистичні аналізи для одержання кінцевих результатів, наведених нижче, проводили з використанням програмного забезпечення 5РОБ5 20.0.

Крім того дослідження було проведене відповідно до Гельсінської декларації з поправками, прийнятими на наступними Всесвітніми асамблеями. Медична карта і лист про інформовану згоду були одержані для всіх пацієнтів (підписані пацієнтом або його/її опікуном або законним представником) відповідно до Гельсінської декларації та схвалені Комітетом інституційної етики наукових досліджень.

І. РЕЗУЛЬТАТИ

Спочатку фахівці проаналізували, чи були зразки, включені в кожну досліджувану групу, однорідними, тобто групу плацебо і групу, яка приймала пробіотичну композицію згідно з винаходом. Таблиця 3 показує, що ця вимога була виконана, оскільки не було виявлено відмінностей між будь-якою зі змінних, проаналізованих для кожної досліджуваної групи.

Таблиця З

Однорідність двох зразків. Статистичні дані? дослідження р фею ення»! «ен

Індекс . . . хо,

У2 Загалі кортикоїди антигістамінні

ЗСОВАр я препарати

МО-критерій

М/-критерій

Асимптотична значущість 0,619 0,317 0,930 0,151 (білатеральна) а Групувальна змінна: жодних відмінностей між основними змінними на вихідному рівні не спостерігалось; х; дні лікування через 2 тижні.

Як зазначалося вище, середні значення (середнє і серединне) і ї стандартне відхилення (50) були розраховані для глобальних змінних на вихідному рівні, на першому місяць, а також на другому і на третьому місяці лікування. Значення, представлені пацієнтом у кожний з цих періодів часу, порівнювали з такими, які були взяті на початку дослідження з використанням тесту Вілкоксона.

Ефективність композиції згідно з винаходом через місяць після початку лікування

Через один місяць лікування проаналізували індекс ЄЗСОВАЮ та порівняли одержані дані у групах, а також із показниками на вихідному рівні. Таблиця 4 демонструє зміни значень абсолютних показників у 95.

Таблиця 4

Індекс БСОВАЮ через один місяць після початку лікування пробіотичною композицією даного винаходу або плацебо

Лікування : . місяць 1 місяць значенняї/ 77777711

Композиція нюнитйиииииииинининнннинншш

Як показують результати, наведені в Таблиці 4 і на Фіг. 6, після місяця лікування були значні відмінності в індексі ФЗСОВАЮ для групи плацебо порівняно з групою, що приймала пробіотичну композицію згідно з винаходом. На фігурах 7 і 8 показані зміни індексу БЗСОВАО при перевірках, що відповідають двом місяцям (Фіг. 7) ії трьом місяцям (Фіг. 8) лікування, між групою, яка приймала пробіотичну композицію даного винаходу, і групою плацебо порівняно з вихідним рівнем

Фіг. 9 демонструє, що група, яка приймала композицією даного винаходу, має більш низький індекс БЄСОВАбБ, визначений на першому, другому і третьому місяці, відносно вихідного рівня у порівнянні з групою плацебо. Як видно з Фіг. 9, відмінності між двома групами лікування є статистично значущими вже на першому місяці лікування, причому ці відмінності зростають на другому (М5) і на третьому (У7) місяцях відносно вихідного рівня.

На Фіїг. 10 показані тенденції зміни індексу «СОВА, виміряні на першому (УЗ), другому (М5) і третьому (М7) місяцях від початку дослідження. Відмінності між групою, що приймала композицією даного винаходу, і групою плацебо були статистично значущими, демонструючи переваги використання композиції у лікуванні пацієнтів з АД.

Що стосується прийому кортикостероїдів для місцевого застосування у кожній дослідній групі, то протягом одного місяця лікування не було відмічено статистично значущих відмінностей між двома групами лікування протягом змінних днів використання кортикостероїдів для місцевого застосування (таблиця 5) при порівнянні обох лікувальних груп за тестом

Вілкоксона при статистичній значущості 595. Навпаки, тенденція спостерігалася, коли кортикостероїди для місцевого застосування не використовувалися, що було більш помітним у групі, яка приймала пробіотичну композицію згідно з винаходом, порівняно з групою плацебо, зокрема на другому і третьому місяцях дослідження. Примітно, що вона не досягла статистичної значущості, головним чином через розмір досліджуваного зразка.

Таблиця 5

Аналіз прийому кортикостероїдів для місцевого застосування, використовуваних у кожні групі лікування через один місяць після початку дослідження. Групувальна змінна, що використовувалась для одержання наведених даних, представляла собою вид лікування, тобто пробіотична композиція згідно з винаходом або плацебо.

Не було виявлено статистично значущих відмінностей між двома групами лікування, тобто пробіотичною композицією згідно з винаходом і плацебо, при аналізі змінної днів застосування антигістамінного препарату в перший місяць лікування (Таблиця 6). Цю змінну аналізували, використовуючи тест Вілкоксона з 5-відсотковим (595) рівнем статистичної значущості для кожної групи лікування.

Таблиця 6

Аналіз прийому антигістамінних препаратів, використовуваних у кожні групі лікування через один місяць після початку дослідження. Групувальна змінна, що використовувалась для одержання наведених даних, представляла собою вид лікування, тобто пробіотична композиція згідно з винаходом або плацебо.

Статистичний аналіз : . антигістамінними препаратами

Таблиця 7 узагальнює дані щодо ефективності пробіотичної композиції згідно з винаходом при лікуванні АД через один місяця введення, зокрема стосовно аналізованих змінних: індекс

ЗСОВАОР, використання кортикостероїдів для місцевого застосування і антигістамінних препаратів порівняно з групою плацебо.

Таблиця 7

Індекс 5СОВАБ, загальна кількість днів застосування кортикостероїдів і загальна кількість днів застосування антигістамінних препаратів у групі, яка одержувала пробіотичну композицію згідно з винаходом, порівняно з групою плацебо.

Сеня | ШЕ | нн | ЕЕ

Лікування . . . показник діапазонів значущість ов

ЗСОВАО 1 місяць ' кортикостероїди препарати

Був проведений лінійний множинний регресійний аналіз для оцінки незалежного ефекту лікування пробіотичною композицією згідно з винаходом порівняно з іншими змінними, які можуть впливати на індекс 5ЄСОВАЮ. У цьому аналізі змінна БСОВАО вводилась як залежна змінна. Додатково до змінної "тип лікування" були включені такі змінні: "загальна кількість днів лікування антигістамінним препаратом", "загальна кількість днів лікування кортикостероїдами" і "Індекс СОВА на вихідному рівні" клінічного випробування.

Через один місяць лікування єдиною змінною, значною мірою пов'язаною з індексом

ЗСОВАЮ, виявився тип лікування. Відповідно у групі, що приймала лікування пробіотичною композицією згідно з винаходом, спостерігалося абсолютне зниження індексу 5СОВАЮБ на 9,07 балів. Іншими словами внесок композиції згідно з винаходом у загальне зниження індексу

ЗСОВАЮ, що спостерігалося у групі, яка приймала пробіотичну композицію даного винаходу, протягом першого місяця лікування, становив шістдесят шість відсотків (66 9о) цієї зміни (9,07 з 13,69 балів індексу БСОНАЮ. Ані змінна "загальна кількість днів лікування антигістамінним препаратом", ані "загальна кількість днів лікування кортикостероїдами" не пов'язані з індексом

ЗСОВАЮ.

Крім того системний прийом кортикостероїдів оцінювали таким же чином, як описано у

Зо випадку кортикостероїдів для місцевого застосування, як попередньо задану вторинну змінну.

Результати, одержані у випадку системного прийому кортикостероїдів, не показували значних відмінностей, пов'язаних з використанням цих сполук, при порівнянні двох груп лікування: композиції згідно з винаходом і плацебо.

Пацієнти, включені в дослідження, зазначали, що вони страждали від незначних побічних ефектів, таких як метеоризм у перші п'ять днів лікування: тридцять відсотків (30 95) пацієнтів, які приймали композицію згідно з винаходом і чотирнадцять відсотків (14 95) у групі плацебо.

Таким чином у цьому прикладі результати показують, що прийом пробіотичної композиції згідно з винаходом для лікування АД забезпечує переваги з точки зору ефективності і переносимості порівняно з результатами для пацієнтів, які одержували плацебо. Отже, проаналізовані параметри показують значне покращення індексу СОВА у пацієнтів з АД, які приймали пробіотичну композицію згідно з винаходом порівняно з групою пацієнтів, які одержували плацебо. Це покращення можна спостерігати з першого місяця прийому пробіотичної композиції даного винаходу, причому таке покращення зберігається або збільшується при подальшому дослідження на другому і третьому місяцях лікування.

Крім того стосовно загальної кількості днів, протягом яких пацієнти в кожній групі повинні були використовувати кортикостероїди для місцевого застосування, хоча середнє значення трохи вище у групі, яка приймала пробіотичну композицію згідно з винаходом, порівняно з групою плацебо (3,3 95 проти 2,6 95), ця різниця є незначущою. | навпаки, при аналізі прийому кортикоїдів на внутрішньоїндивідуальному або внутрішньогруповому рівні (порівняння прийому кортикостероїдів на початковому етапі та в кінці дослідження в межах однієї групи) спостерігається пов'язана з часом тенденція зниження споживання стероїдів у групі, що приймала пробіотичну композицію згідно з винаходом (споживання стероїдів зменшується на п'ятдесят п'ять відсотків (55 95) порівняно з групою плацебо (вісім відсотків (8 95) зменшення протягом періоду спостереження), що досягає статистичної значущості в даному випадку.

ПРИКЛАД 3: Аналіз впливу застосування пробіотичної композиції згідно з винаходом на запобігання спалахів АД

Серед двадцяти (20) пацієнтів з АД, які були включені в дослідження, був проведений проміжний аналіз тих, хто досягав індексу 5БСОВАЮ 6. Ця група пацієнтів перебувала під специфічним спостереженням аж до завершення повного тримісячного періоду лікування.

Десять (10) пацієнтів приймали плацебо (фіг. 11, чорна лінія), а дев'ять (9) пацієнтів приймали

Зо пробіотик (Фіг. 11, сіра лінія).

На Фіг. 11 показані результати моніторингу кількості спалахів АД у всіх цих пацієнтів з моменту завершення З-місячного лікування пробіотиком до 12 тижнів після завершення лікування. Таким чином на Фіг. 11 показана кількості пацієнтів, які страждали на нові спалахи АД (Фіг. 11А), загальна кількість пацієнтів з новими спалахами АД (Фіг. 118), а також відсоток пацієнтів, у яких не спостерігались нові спалахи (Фіг. 11С). Враховуючи всіх пацієнтів, які раніше проходили лікування, Фіг. 11 демонструє, що кількість спалахів, кількість пацієнтів і відсоток пацієнтів, які страждали на нові спалахи АД протягом 12-тижневого періоду без лікування, вища серед тих, хто раніше приймав плацебо, ніж серед тих, хто раніше приймав пробіотик.

Таким чином у цій вибірці пацієнтів ті що приймали пробіотичну композицію згідно з винаходом, показали більш низький рівень рецидиву та/або швидкість погіршення стану порівняно з тими пацієнтами, які приймали плацебо (1 з 10 (10 95) проти 5 з 9 (55 9б5)), відповідно (Фіг. 118).

Відмінності між двома групами втручання є статистично значущими протягом тримісячного періоду оцінки від початку моніторингу для трьох аналізованих змінних.

Далі наведені дані, що підтверджують ефективність пробіотика у запобіганні виникненню нових спалахів АД: протягом трьох місяців після припинення лікування зазначеною вище пробіотичною композицією у осіб, які приймали зазначену композицію, спостерігалося менше спалахів, а отже вільний від захворювання період був більшим, ніж у тих пацієнтів, які не одержували лікування.

Ці результати показують, що застосування композиції згідно з винаходом є ефективним для запобігання новим спалахам АД. Таким чином протягом трьох місяців після припинення лікування пробіотичною композицією даного винаходу пацієнти, які одержували лікування зазначеною композицією, відрізнялися меншою кількістю спалахів захворювання, а отже більш тривалим період без захворювання, ніж пацієнти, які приймали плацебо.

Claims (13)

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ

1. Пробіотична композиція, що містить В/добрасіепит апіта!йв вир5р. ас (В. /асіів), Віїаобасіепит Іопдит та І асіорбасти» сазеї, де

В. Іасіїз являє собою В. /асії5 СЕСТ 8145, В. (Юпдит являє собою 8. Юпдит СЕСТ 7347, та І. сазеїі являє собою /. сазеі СЕСТ 9104, концентрація 8. /опдит становить щонайменше від 30 до 40 95 від загальної концентрації мікроорганізмів у композиції; концентрація 8. /асії5 становить щонайменше від 30 до 40 905 від загальної концентрації мікроорганізмів у композиції; та концентрація /. савзеї становить щонайменше від 25 до 35 95 від загальної концентрації мікроорганізмів у композиції, та призначена для застосування при лікуванні та/або профілактиці атопічного дерматиту.

2. Пробіотична композиція за п. 1, яка відрізняється тим, що пробіотична композиція являє собою фармацевтичну композицію або харчову композицію.

3. Пробіотична композиція за п. 2, яка відрізняється тим, що фармацевтична композиція містить фармацевтично прийнятний носій та/або наповнювач.

4. Пробіотична композиція за п. 2 або 3, яка відрізняється тим, що фармацевтична композиція сформована для введення у рідкій формі або у твердій формі.

5. Пробіотична композиція за п. 4, яка відрізняється тим, що тверда композиція вибрана з групи, яка включає таблетки, льодяники, солодощі, жувальні таблетки, жувальні гумки, капсули, саше, порошки, гранули, частинки, покриті оболонкою, або таблетки, покриті оболонкою, таблетки, таблетки і капсули, покриті оболонкою, що розчиняється в кишечнику, та здатні до диспергування смужки та/або плівки.

6. Пробіотична композиція за п. 4, яка відрізняється тим, що рідка композиція вибрана з групи, яка включає пероральні розчини, суспензії, емульсії та сиропи.

7. Пробіотична композиція за п. 2, яка відрізняється тим, що харчова композиція являє собою продукт харчування або харчову добавку.

8. Пробіотична композиція за п. 7, яка відрізняється тим, що продукт харчування вибраний з групи, яка включає фруктові або овочеві соки, морозиво, дитячу молочну суміш, молоко, йогурт, сир, кисломолочний продукт, порошкове молоко, злаки, хлібобулочні вироби, продукти на молочній основі, м'ясні продукти та напої.

9. Пробіотична композиція за будь-яким з пп. 1-8, яка відрізняється тим, що композиція додатково містить мікроорганізм, вибраний з групи, яка включає / асіобасійив5 5р., єгеріососсив

5р., Віїдобасіепит 5р., хасспаготусез 5р., Кішмууеготусез 5р. та їх комбінації. Зо 10. Пробіотична композиція за будь-яким з пп. 1-9, яка відрізняється тим, що загальна концентрація мікроорганізмів штамів 8. /асії5, 1. савзе/ та В. Іопдит у композиції становить від 103 до 1012 КУО, переважно 109 КУО.

11. Пробіотична композиція за будь-яким з пп. 1-10, яка відрізняється тим, що концентрація В. Іопдит становить 35 95 від загальної концентрації мікроорганізмів у композиції; концентрація В. Іасі5 становить 35 95 від загальної концентрації мікроорганізмів у композиції та/або концентрація /. сазе/ становить 30 95 від загальної концентрації мікроорганізмів у композиції.

12. Пробіотична композиція за будь-яким з пп. 1-11, призначена для застосування як лікарського засобу.

13. Пробіотична композиція за будь-яким з пп. 1-11, призначена для застосування при лікуванні та/або профілактиці атопічного дерматиту.

же ОКО, до Те хх зов ОС до х я В - х їх х х м Ж а Ж йо БОКОМ. Ж ДК : в УЖЕ : Ж х : са : г же ї ОВ. : їх ї У що ї : Ж ЯК: : ПО КО : з У Я: а КУ Ко ОК: ск Я: ГЕ Е БОЇ БЖ Ж КЗ : х ЕХ ї пе тк ХЕ Во ЕВ й 5

В. І Ж В ім хх ВЕ ЩЕ : ЗавВа т ре ї Я Її Ж . : Ве 5 : Б ш : ТВ з. Х ще : Ж с Ії дк : ГО су Ж

Ж. ПОН С х : ни шш О : : я ик шо 7 т : : ШО Ро З ї : : два З ж їх ак : : ТОК ОТАК Ж : ОА КО пох : ї 8ОТЯ х «ох а Що : ооо сег луя Що що : Б са : Я ЗВ ЗЗВнЕЧАНК Ви ЗНИК фіг. 1

ІГ.

ДУКУК ек КК К юки екю КА ККЮЮЮ КК пат У КК ие текти :; ї : ї : ї : ї ї ї ї ї : ї ї ї доееееееююуюктєсюнх і й ї ш ї їж ; | | а Н х З КЕ ї х х І ї х ї ї Ж т х ї ї ще ї х ї її ЕЕ Е хЕ ї їх ї 5 її ї 5 х кож : : 1 х 5 ї ї 2 Е ОК Е х х Е т В : х : Е їх Е х : Е ї : х ї х їх : х : З Ії : х ї : т Е Е ї ї : у : Е 1 ! і І Хотин, ї : ї ї : і т х ї ї : ї ї : Н Е ї : п ї Ко. і : ї Її ї пок 3 3 ї З ї ож ї : ї ї ОХ ї ї ї ї ї ОК ї ї ї ї : ї 5 її ї ї ї ї ї ро з: І ї ї ї ї ох і : : : ; : Ох 1: ї т 3 І ї ОБ 1: 3 ї З і ї І її пуск : фр линнннннтит ї Ж До фентеитююкиий ї З : : ? з : ї ї ї ї ї ; "У ї ї Її ї ї їй її . ї ї Ї їх ї Ії Ж ОР: ї ї ї ї ї : - ЕЕ ї ї ї : ї ї їж КУ ої ї ї ї ї ї ії ї їх в ї : і : і їх хо ї ї : ї ї 1 З ї ї ї ї : їх : Ж: ї т : : Ж т Ї їх ї ї Ходити княжни Ії З КО ї ЕЕ : ем Е ї їх ї І х Код ї

В. : 7 і ХХ ї ї кет юютюеюя юю З і У ї у т ї ї З в ї х х ї ї Е ї Ж їх ї ї ї : 5 їх Б І Е х ї Її х її ї х ї ї ї : ї ї 3 ї ї ї т КЕ В ї ї 3 ї ї ї ЕЕ : : ї ї ї їх Ж 1: яд і ї 3 й БІ 1: ї ! . Б 18 З : і ї НЕ вх хх От х ї ї ї ї ОВ З хх їОш х їх ї ї їолоОох х ї ї ЩОж Її х : ї З Б В : : і Б З то ї ї ї т ї ЗНЗ жо її ї 3 ї ї Її гі ї СУ ї У їх ї ї - ї КУ їОш ї ї ї ї : З ЩО ї ї ї ї І їх її х ї Е ї ї ОО її ї ї ї : І : щ ШО ї ї ї : ї тях ЩО ї ї ї т ї ОО ЕК шої ї ї : ї Її КЕ х сек юки ї : ЕКО 4 і 3 ТІ і ї щОх Її ї Її ХОЖ ож ої Ї : ХЕ І дику ї ї ХЕ І ши ї ї хОх ї х її ї Е хх : ТЕ: : : Ко х ї х її ї : її і 5 1: ї ї хх ї 3 хз й 1 ї хх ЩЕ ї хх: ї З її ж ТЕ по т: ї 2 їх КО п ОО: ї 7 КОЖ. ї їх ОТ: ї В ї х, КОЖ ох Та МОЖ ї не НН и НК Е х ї ! 1: і 1-Х ї ї ЕЕ ! Ж ї її 131: і 1 ї ї їі: З 1 ї х 1: : Ї Я х Я хх т ї ї х її: : КЕ Хомин ї Е ї : ї кН КН у У ДУ КК ни ААоіоннеккх херес дин нн тнтнний п ШЕ ТЕ Ех т. п ПЕ ; ЇЇ 2 їй І в че - У 5 Бо Кк м Шо 3 УЕ і в ! Н Ж: ї Я В : 1 : КУ І і : Зк : 1 Ст : ! жа : ї ТЕ й -. ї ї дО ї ї ОО ТЕ ї ї ї їй о ще ї : С Е з З : Б. ї З шо 7 хе ; ї ЖІ зо І щих Ом ТК во ї в. а : де СОМ кх КОН ї о В й хв ї : ї ШТММК Же За Е 7 І Кз : : В с : ї Ж дж Ко що ож с Ж а їй ЯН око ВІВ Ох В: А - ож з во - я т к ої ОО КО ОО: ї Ж ої щк К У зак ї : в Же ев І Ж 5 опа пен

Б. КЗЗ з МІВ роше ої ї о р Ко Ж а б з В ї Х У хх : км що в Зх ак Ме Вк Оу СЯ ; ї а : : І: КО М сх те : У ї Щ т ЩО Кз ке : : ТЕ о ЕМ - : і Ж она ЩО СЕ ї щі В як і ї КЗ ЯКО От : ї ЗП Ох ХХ. Її ї АК Кн ЩЕ о т ї Х ща За Ж ЖЕ ну ї «ОВК т ; що І : жу ЖК : в Же І Ж 5 та : Її Ж ї Ж ї ви В я : СЕ ве . ОА їзха а : Ж х Кз 5 ї

«Ж. ХХ. х ж Я т МНЕ ІН ЧО ЗК Ул як. п. ее іг. З хх Я х 5. що х В и ЖК Ще СК в ї : ї Іс с : і : г ї т : ї е Тех я УМ і я її ї І и З. х ї - т х ко щи іа і Оу Е - в ї р Б кої ї Й х : щої 2 що в : БО щ ої Ж : 7 хх : :

В. вх 5: ї ї : е Ж: ї 1: Я ж 18 ВІ ах МОЯ щеня й шої : щ: с шко: : ОР її ї : : Зх ої . : : З ої х Кн : : Ж

Б. ї г : ої т. 1 : БОЇ : т ї : ї : ї х ІЧ ї х ї і ї . і 1 : : Ж і : ї х, г : : У йо Ж

: . щ ї Ж/Х : ші й зо : т - 7 ї ї Ж : І : в г х «в х 5 ;

с. 4

Фіг.

З р З КЕ в и: КЕ ши во і ме ще Ї : : т ! : : : Я ї роя

Ж. г З ї з х : ПЕ : : В

Ж. Її 1; ож

Ж. ; І: : 8 Ж х х ш : - жк т ї Ї : КУ . ї Її : Е же й : х З : у х : С : В ОВ однлятянккх ї ж ї ї Е ж й У : - Н 2 Є 7 х : 3 : ї Х - хх ї фон Ко Ж К Ж х ее ; у Її 7 І : ї : ї Би ї : От Го ВО їж ід КІ Не х Ж с ї : ої «ї що ЕЕ ї : НЕ Ах ж ро х с 7 т -к ї 5 : пе х ке вЯ в : пк що й : о . Кг ! ї Я сет ЩЕ : Її Сх. днк : ї : Ух ужию лики : : фкнисхевковие КЕ я м

Фіг. 5 лев о зе ово ОБО . . :

м .

ФЕВ. еододююєю юю КК КА Ат ХА п КК Кн Кк ХК НН КК КК КК ААА А АХК ХК АКА, :

Фіг. 6

Ов . З : : ОО се ВЕДЕ В МІ жна НН : й в

Фіг. 7

А : дек, се Во жд вюня усу веж жо БЕ ! Середній індеке ЗСОМАЦНІ ! с юовнмнну пишним о. Ь щ- ЗА ЖЕД пічне НА ї К ЖИ ре сир ПО маги ОМАН : ТТ ЖЕПИШИИНИИИШИ ТИВ нини Пт : г т ЖКИППППИПИИИТ и я ХХ ХМах : нд 00 ОфшОвюют МЕ 2 ПМ ВО : спа о. їх о во м В ї хі ази км : з ЗНИЖЕННЯ У ОВМО, ! : ЩКХ ша . вал : РОН у, й : : Ц тло м ї : І РОД зе ЯВИ ! і ве Розд МИ КО : : ХМК г : : вд нн : й В :

Фіг. 8 я пудри вки їх. ІК м ЕК УЖ Ж я що ситне, й ЩЕ дили жачАУ НК я УК ККАКАНА НУ КК УК тн КИ КИ КК КК КК КК кн ююх ї ї т ї ок ї щі ї їх ї КК ї ЯКУ 2 ддкннтенкжюкккхккхккуккию юю ккккнних поетесу состсотонест КВК нокеютннй ої : ї ЗИ ї з ї ї ЕЕ, преетеетитиеияих Ї щ фунт етно тов ВВ КТ пут КК Є Ванни т Е ! ї за ії ї 1 у 1 ПАХ 3 т іч ї н ПІШАККТ 3 ї КУ ї Н ПЕК 1 т ї ФО фону КК уми и юю сок Я х со ї ПЕ ї по ВІВ ї ЖЕ Дена ен нка КК ек о КВ В В КК ооонннкналлннннннннно он МО ПДК ЕВ нн ВЕ КВ МК т їх се ПІДОМ КН МЕ ПИТИ ОКИТИМ ТИНИ т їх ЖЕ Босххнкккююккик я ОККО КЕКС КК ке юю ККУ У Ку у лу Акт п ФЕН ' ІЗ у хі М ї їх і СУ Хеєєєєєєюесс о ВТК КК ТИМ тет Ко КЮЕ т КЕР Т ОТ СТ КК кн нянні ккккккК хккекєкиккикй кн нн в кни

Фіг. 9

Я. звик КК КК ще св ЗВНЕНА Щек БЕОМКАЮ мий, КУХМУМММ: шк ЗЕ й Ї і пк. ВО лі ї ї у І ПИЛКИ ї І ї ХХ ши НН пікнжжко, ПО ШТИЖКИ т ХМК Ки : БК е У фенннетннеюнтнтнно рн ВЕД фотутттттттнненя педа МАЛІК жннлижжктнння й ЖУК, т Ж т ї х ; ї тя ї Ї ї ї ОК Н ! ЕХ ДУ КК КМ Кут у т мтс ї : Пн : ЖЕ ДРТ КК пихккккккВ пен АК ТТ Ки их иикти є : : : КК ї кож ї ї : МКК ї

ЗЕ. Дон ккінтлниккуААНА Ада УААН КААААААААНА КК ААААААК КАК Ж я КА Кф ї т І х І : х : ро. 7 со : | : вом нн и КК МЕ ЖЕ ЖЕ Б п ККАЛ КАААКАКК КК КК ККАЛ КЛАКАКК КК КК КК ХК ААЖААК КК КК Коток Фі 7 й

ЯНГ.)

3. не - . хх : : хх : : хх : : : Х : : 5 : : : я : є - хх ше ї ї З 7 : КО : : її ще ї : х : : 5 : : Я КУ : : ї т : Док Н Х Е ДК М ото зепнинннния пня мимхинииинни іти плн В ЩА х Ж ї їй Ж БУ Х ж син КК нн нин КК КН КК КК юн я КК ня Ук юю КЕ

Фіг. 11А

ІГ. і