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TWI836693B - 抑制lpa之基因表現之組合物及方法 - Google Patents

抑制lpa之基因表現之組合物及方法 Download PDF

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TWI836693B
TWI836693B TW111141660A TW111141660A TWI836693B TW I836693 B TWI836693 B TW I836693B TW 111141660 A TW111141660 A TW 111141660A TW 111141660 A TW111141660 A TW 111141660A TW I836693 B TWI836693 B TW I836693B
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史蒂芬 坎納
大衛 B 羅茲馬
大衛 L 路易士
羅倫 J 阿梅塔
戴倫 H 維克菲爾德
威拉帝摩 S 初巴斯科伊
濤 裴
艾倫 阿梅塔
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美商愛羅海德製藥公司
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Abstract

本發明描述用於抑制LPA (apo(a))基因之表現的RNA干擾(RNAi)劑及RNAi劑結合物。本發明亦描述包含一或多種LPA RNAi劑與視情況存在之一或多種額外治療劑的醫藥組合物。將該等描述之LPA RNAi劑遞送至活體內肝細胞提供LPA基因表現之抑制及心血管疾病及心血管相關之疾病之治療。

Description

抑制LPA之基因表現之組合物及方法
脂蛋白(a) [Lp(a)]為含有脂質內核及具有獨特組分載脂蛋白(a) (apo(a))之載脂蛋白B (apoB-100)之異質低密度脂蛋白(LDL)狀粒子,載脂蛋白(a)經由二硫鍵連接至apoB-100。 apo(a)基因( LPA)主要表現於肝中且表現受限於人類及非人類靈長類動物。人類中之Lp(a)含量經基因限定且不隨飲食、鍛煉或其他生活方式變化而顯著變化。 LPA之長度取決於存在之三環KIV2域之數目而變化且其表現與存在之域之數目逆相關。正常Lp(a)含量範圍介於0.1 mg/dl至25 mg/dl,美利堅合眾國約25%的人口具有30 mg/dl或更高之Lp(a)含量。 對多項研究中之Lp(a)含量之分析已表明高Lp(a)含量作為對於心血管疾病、中風及包括動脈粥樣硬化性狹窄之其他相關疾病之獨立風險因素。另外,全基因組關聯分析亦已表明LPA作為對於諸如動脈粥樣硬化性狹窄之疾病的基因風險因素。 當使用治療性脂蛋白清除術來降低高脂質血症患者中之Lp(a)含量及LDL含量二者時,已經觀測到心血管問題之顯著減少。因此,存在對於與此等及其他LPA相關之疾病相關之治療劑及療法之需求。
本文描述LPA (亦被稱為apo(a)) RNA干擾(RNAi)劑(亦被稱為RNAi觸發劑或觸發劑)及用於選擇性及有效抑制 LPA基因之表現的含有LPA RNAi劑之組合物。 LPA為編碼載脂蛋白(a) (apo(a))之基因之名稱,其為脂蛋白(a)粒子(Lp(a))之關鍵組份。本文所描述之LPA RNAi劑可用於包括(但不限於)以下疾病之預防或治療或用於預防或治療該等疾病之藥劑之製備:貝格爾氏(Berger's)疾病、外周動脈疾病、冠狀動脈疾病、代謝症候群、急性冠狀動脈症候群、主動脈瓣狹窄、主動脈瓣回流、主動脈剝離、視黃醛動脈閉塞、腦血管疾病、腸系膜局部缺血、腸系膜上動脈閉塞、腎動脈狹窄、穩定/不穩定心絞痛、急性冠狀動脈症候群、異型接合家族性高膽固醇血症或同型接合家族性高膽固醇血症、高β脂蛋白血症、腦血管動脈粥樣硬化、腦血管疾病及靜脈血栓。 每一LPA RNAi劑包括至少一條有義股及反義股。有義股與反義股可彼此間部分地、實質上或完全互補。本文所描述之RNAi劑有義股及反義股之長度各自可為17至30個核苷酸。在一些實施例中,有義股及反義股獨立地為17至26個核苷酸長。有義股及反義股可為相同長度或不同長度。在遞送至表現LPA基因之細胞後,本文所描述之RNAi劑活體外或活體內抑制LPA基因之表現。 LPA RNAi劑之有義股包含與 LPAmRNA中之序列在至少17個連續核苷酸之核心片段上具有至少90%一致性的核苷酸序列。在一些實施例中,與 LPAmRNA中之序列具有至少90%一致性之有義股核苷酸序列為17個、18個、19個、20個、21個、22個或23個核苷酸長。LPA RNAi劑之反義股包含與 LPAmRNA及對應有義股中之序列在至少16個連續核苷酸之核心片段上至少90%互補的核苷酸序列。在一些實施例中,與 LPAmRNA或對應有義股中之序列具有至少90%互補性之反義股核苷酸序列為17個、18個、19個、20個、21個、22個或23個核苷酸長。 在一些實施例中,使用此項技術中已知的任何寡核苷酸遞送技術,將或一多種LPA RNAi劑遞送至靶向細胞或組織。核酸遞送方法包括(但不限於):藉由囊封於脂質體中、藉由離子電滲或藉由併入其他媒劑中,該等媒劑諸如水凝膠、環糊精、生物可降解奈米膠囊及生物黏著微粒、蛋白質載體或Dynamic Polyconjugates™ (DPC(參見(例如)WO 2000/053722,WO 2008/0022309,WO 2011/104169及WO 2012/083185,其中之每一者以引用之方式併入本文中)。在一些實施例中,LPA RNAi劑與靶向基團結合。在一些實施例中,靶向基團可包括細胞受體配體(諸如,半乳糖簇),其包括包含N-乙醯基-半乳糖胺三聚體之簇。 在一些實施例中,描述包含一或多種LPA RNAi劑之醫藥組合物。在一些實施例中,LPA RNAi劑視情況與一或多種額外(亦即,第二、第三等)治療劑組合。額外治療劑可為另一種LPA RNAi劑(例如,靶向LPA靶內之不同序列之LPA RNAi劑)。額外治療劑亦可為小分子藥物、抗體、抗體片段及/或疫苗。在有或無一或多種額外治療劑之情況下,LPA RNAi劑可與一或多種賦形劑組合以形成醫藥組合物。 在一些實施例中,描述用於將LPA RNAi劑遞送至肝細胞(尤其為活體內肝細胞(hepatocytes))之組合物,該組合物包含結合至靶向基團之LPA RNAi劑。在一些實施例中,靶向基團為去唾液酸醣蛋白配體。 亦描述治療具有至少部分由LPA之表現介導之病理狀態或處於產生該病理狀態風險下之人類個體之方法,該等方法包含向個體投與治療有效量之LPA RNAi劑或含有LPA RNAi劑之組合物之一或多個步驟。使用LPA RNAi劑或含有LPA RNAi劑之組合物治療個體之方法可視情況與投與一或多種額外(亦即,第二)治療劑或療法之一或多個步驟組合。LPA RNAi劑及額外治療劑可以單一組合物投與或可將其分別投與。額外治療劑之實例包括(但不限於):HMg Co-A還原酶抑制劑(士他汀(statin))、依澤替米貝(ezetimibe)、PCSK-9抑制劑、CTEP抑制劑、靶向ANGPTL3之治療劑、靶向APOC3之治療劑及菸酸。 所描述之LPA RNAi劑之用途可用於針對包括(但不限於)以下疾病之治療性預防或治療之方法中:貝格爾氏(Berger's)疾病、外周動脈疾病、冠狀動脈疾病、代謝症候群、急性冠狀動脈症候群、主動脈瓣狹窄、主動脈瓣回流、主動脈剝離、視黃醛動脈閉塞、腦血管疾病、腸系膜局部缺血、腸系膜上動脈閉塞、腎動脈狹窄、穩定/不穩定心絞痛、急性冠狀動脈症候群、異型接合家族性高膽固醇血症或同型接合家族性高膽固醇血症、高β脂蛋白血症、腦血管動脈粥樣硬化、腦血管疾病及靜脈血栓。此等方法包含向個體(例如人類個體或動物個體)投與如本文所描述之LPA RNAi劑。 醫藥組合物可取決於是否需要局部或全身治療及取決於待治療之區域以多種方式投與。可藉由此項技術中通常已知之任何方式進行投與,諸如(但不限於)體表(例如藉由經皮貼片)、經肺(例如藉由粉劑或氣霧劑之吸入或吹入,包括藉由霧化器、氣管內、鼻內)、表皮、經皮、經口或非經腸。非經腸投與包括(但不限於):靜脈內、動脈內、皮下、腹膜內或肌肉內注射或輸注;皮下(例如經由植入裝置)、顱內、腦實質內、鞘內及心室內投與。在一些實施例中,藉由皮下注射投與本文所描述之醫藥組合物。 所描述之LPA RNAi劑及/或組合物可用於針對以下疾病之治療性治療之方法中,該等疾病包括(但不限於):貝格爾氏(Berger's)疾病、外周動脈疾病、冠狀動脈疾病、代謝症候群、急性冠狀動脈症候群、主動脈瓣狹窄、主動脈瓣回流、主動脈剝離、視黃醛動脈閉塞、腦血管疾病、腸系膜局部缺血、腸系膜上動脈閉塞、腎動脈狹窄、穩定/不穩定心絞痛、急性冠狀動脈症候群、異型接合家族性高膽固醇血症或同型接合家族性高膽固醇血症、高β脂蛋白血症、腦血管動脈粥樣硬化、腦血管疾病及靜脈血栓。此等方法包含向個體(例如人類個體或動物個體)投與如本文所描述之LPA RNAi劑。 除非另外定義,否則本文所使用的所有技術及科學術語均具有與一般熟習本發明所屬技術者通常所理解相同的含義。儘管類似或等效於本文所描述之彼等方法及材料之方法及材料可用於實踐或測試本發明,但下文描述適合的方法及材料。本文中所提及之所有公開案、專利申請案、專利及其他參考文獻均以全文引用之方式併入。在有矛盾的情況下,將以本說明書(包括定義)為準。另外,材料、方法及實例僅為說明性的且並不意欲限制。 本發明之其他特徵及優勢將自以下實施方式及申請專利範圍顯而易見。
本文描述用於抑制LPA基因之表現之RNAi劑(在本文中被稱為LPA RNAi劑)。本文所描述之RNAi劑在遞送至表現 LPA基因之細胞後,經由RNA干擾(RNAi)之生物方法在活體外及/或活體內抑制或阻斷LPA之表現。如本文所使用,除非特定指出,否則LPA可按需要指代 LPA基因、 LPAmRNA或LP(a)蛋白質。 LPA RNAi劑包含有義股及反義股。有義股及反義股各含有17至23個核鹼基長之核心序列。反義股核心序列與 LPAmRNA中存在之核苷酸序列(有時稱為(例如)靶向序列)100% (完全)互補或至少90% (大體上)互補。有義股核心序列與反義股中之序列100%(完全)互補或至少90%(大體上)互補,且因此有義股核心序列與存在於LPA mRNA中之核苷酸序列(靶向序列)完全一致或至少90%一致。有義股核心序列可為與對應反義核心序列相同長度或其可為不同長度。在一些實施例中,反義股核心序列為17、18、19、20、21、22或23個核苷酸長。在一些實施例中,有義股核心序列為17、18、19、20、21、22或23個核苷酸長。 LPA RNAi劑有義股與反義股退火而形成雙螺旋體。LPA RNAi劑之有義股及反義股與彼此部分、大體上或充分互補。在互補雙螺旋區內,有義股核心序列與反義核心序列至少90%互補或100%互補。在一些實施例中,有義股核心序列含有至少17、至少18、至少19、至少20或至少21個核苷酸之序列,該核苷酸序列與反義股核心序列之對應的17、18、19、20或21個核苷酸序列至少90%互補或100%互補(亦即,LPA RNAi劑之有義股及反義核心序列具有至少17、至少18、至少19、至少20或至少21個至少90%鹼基配對或100%鹼基配對的核苷酸區域)。 如本文所用,且除非另有指示,否則術語「互補」當用於描述第一核苷酸序列(例如RNAi劑有義股或LPA mRNA)與第二核苷酸序列(例如RNAi劑反義股)的關係時,係指包含第一核苷酸序列的寡核苷酸或聚核苷酸能夠與包含第二核苷酸序列的寡核苷酸或聚核苷酸在某些條件下雜交(形成鹼基對氫鍵)且形成雙螺旋體或雙螺旋結構。互補序列包括沃森-克里克鹼基對(Watson-Crick base pairs)或非沃森-克里克鹼基對,且包括天然或經修飾之核苷酸或核苷酸模擬物,只要滿足其能夠雜交的上述要求即可。「完全互補」或「充分互補」意謂第一聚核苷酸之鄰接序列中之所有(100%)鹼基將與第二聚核苷酸之鄰接序列中之相同數目的鹼基雜交。鄰接序列可包含第一或第二核苷酸序列的全部或一部分。如本文所用,「部分互補」意謂在雜交之核鹼基序列對中,第一聚核苷酸之鄰接序列中之至少70%鹼基將與第二聚核苷酸之鄰接序列中之相同數目的鹼基雜交。如本文所用,「大體上互補」意謂在雜交之核鹼基序列對中,第一聚核苷酸之鄰接序列中之至少85%鹼基將與第二聚核苷酸之鄰接序列中之相同數目的鹼基雜交。如本文所用,術語「互補」、「充分互補」及「大體上互補」可相對於RNAi劑之義股與反義股之間或RNAi劑之反義股與LPA mRNA之序列之間的鹼基匹配使用。序列一致性或互補性與修飾無關。出於測定一致性或互補性之目的,例如a及Af與U (或T)互補且與A一致。 本文所描述之LPA RNAi劑有義股及反義股之長度獨立地為17至30個核苷酸長。在一些實施例中,有義股及反義股獨立地為17至26個核苷酸長。在一些實施例中,有義股及反義股為19至26個核苷酸長。在一些實施例中,所描述之RNAi劑有義股及反義股獨立地為17、18、19、20、21、22、23、24、25或26個核苷酸長。有義股及反義股可為相同長度或其可為不同長度。在一些實施例中,有義股及反義股各為26個核苷酸長。在一些實施例中,有義股為23個核苷酸長且反義股為21個核苷酸長。在一些實施例中,有義股為22個核苷酸長且反義股為21個核苷酸長。在一些實施例中,有義股為21個核苷酸長且反義股為21個核苷酸長。在一些實施例中,有義股為19個核苷酸長且反義股為21個核苷酸長。 有義股及/或反義股可視情況且獨立地在核心序列之3'端、5'端或3'及5'端含有額外1、2、3、4、5或6個核苷酸(延伸部分)。反義股額外核苷酸(若存在)可與或不與LPA mRNA中之相應序列互補。有義股額外核苷酸(若存在)可與或不與LPA mRNA中的相應序列一致。反義股額外核苷酸(若存在)可與或不與相應有義股中的其他核苷酸(若存在)互補。 如本文所用,延伸部分在有義股核心序列及/或反義股核心序列之5'端及/或3'端包含1、2、3、4、5或6個核苷酸。有義股上的延伸核苷酸可與或不與對應反義股中之核苷酸(核心序列核苷酸或延伸核苷酸)互補。相反地,反義股上的延伸核苷酸可與或不與相應有義股中之核苷酸(核心序列核苷酸或延伸核苷酸)互補。在一些實施例中,RNAi劑之有義股與反義股含有3'及5'延伸部分。在一些實施例中,一股之一或多個3'延伸核苷酸與另一股之一或多個5'延伸核苷酸鹼基配對。在其他實施例中,一股之一或多個3'延伸核苷酸並不與另一股之一或多個5'延伸核苷酸鹼基配對。在一些實施例中,LPA RNAi劑具有含有3'延伸部分之反義股及含有5'延伸部分之有義股。 在一些實施例中,LPA RNAi劑包含具有1、2、3、4、5或6個核苷酸長之3'延伸部分之反義股。在其他實施例中,LPA RNAi劑包含具有1、2或3個核苷酸長之3'延伸部分之反義股。在一些實施例中,一或多個反義股延伸核苷酸包含尿嘧啶或胸腺嘧啶核苷酸或與相應LPA mRNA序列互補的核苷酸。在一些實施例中,3'反義股延伸部分包括或由以下組成(但不限於):Ab、AbAb、AUA、UGCUU、CUG、UG、UGCC、CUGCC、CGU、CUU、UGCCUA、CUGCCU、UGCCU、UGAUU、GCCUAU、T、TT(各自從5'至3'列出)。 在一些實施例中,LPA RNAi劑包含具有1、2、3、4或5個核苷酸長之5'延伸部分之反義股。在其他實施例中,LPA RNAi劑包含具有1或2個核苷酸長之5'延伸部分之反義股。在一些實施例中,一或多個反義股延伸核苷酸包含尿嘧啶或胸腺嘧啶核苷酸或與相應LPA mRNA序列互補的核苷酸。在一些實施例中,5'反義股延伸部分包括或由以下組成(但不限於):UA、TU、U、T、CUC (各自從5'至3'列出)。反義股可使任一個上述3'延伸部分與任一個所述5'反義股延伸部分(若存在)組合。 在一些實施例中,LPA RNAi劑包含具有1、2、3、4或5核苷酸長之3'延伸部分之有義股。在一些實施例中,一或多個有義股延伸核苷酸包含腺苷、尿嘧啶或胸腺嘧啶核苷酸、AT二核苷酸,或與LPA mRNA序列中之核苷酸對應的核苷酸。在一些實施例中,3'有義股延伸部分包括或由以下組成(但不限於):T、UUAb、UAb、Ab、UT、TT、UUT、TTT或TTTT(各自從5'至3'列出)。 在一些實施例中,LPA RNAi劑包含具有1、2、3、4、5或6個核苷酸長之5'延伸部分之有義股。在一些實施例中,一或多個有義股延伸核苷酸包含尿嘧啶或腺苷核苷酸或與LPA mRNA序列中之核苷酸對應的核苷酸。在一些實施例中,有義股5'延伸部分可為(但不限於):CA、AUAGGC、AUAGG、AUAG、AUA、A、AA、AC、GCA、GGCA、GGC、UAUCA、UAUC、Ab、UCA、UAU(各自從5'至3'列出)。有義股可具有3'延伸部分及/或5'延伸部分。 用於形成LPA RNAi劑之核苷酸序列之實例提供於表1、表2A、表2B、表3A及表3B中。如本文所使用,術語「序列」或「核苷酸序列」係指核鹼基、核苷酸及/或核苷之次序或順序,無論經修飾或未經修飾,其使用標準核苷酸命名法及用於本文所描述之經修飾之核苷酸之略語表藉由一連串字母來描述。 RNAi劑包括(但不限於):短干擾RNA (siRNA)、雙股RNA (dsRNA)、微RNA (miRNA)、短髮夾RNA (shRNA)及切酶受質(例如,美國專利第8084599號、第8349809號及第8513207號)。 未經修飾之LPA RNAi劑有義股及反義股序列提供於表1中。形成LPA RNAi劑時,表1中所列之各序列中的各核苷酸可為經修飾之核苷酸。 表1.未經修飾之LPA RNAi劑反義股及有義股序列。
反義股鹼基序列5'至3' SEQ ID NO. 有義股鹼基序列5'至3' SEQ ID NO.
TCGGCAGUCCCUUCUGCGUTT 1 ACGCAGAAGGGACUGCCGAT 190
TGUAGCACUCCUGCACCCCTT 2 GGGGUGCAGGAGUGCUACAT 191
TAAUAAGGGGCUGCCACAGTT 3 CUGUGGCAGCCCCUUAUUAT 192
TUAACAAUAAGGGGCUGCCTT 4 GGCAGCCCCUUAUUGUUAAT 193
TGUAUAACAAUAAGGGGCUTT 5 AGCCCCUUAUUGUUAUACAT 194
TCGUAUAACAAUAAGGGGCTT 6 GCCCCUUAUUGUUAUACGAT 195
TCGUCUGAGCAUUGUGUCATT 7 UGACACAAUGCUCAGACGAT 196
TGCGUCUGAGCAUUGUGUCTT 8 GACACAAUGCUCAGACGCAT 197
TUGCGUCUGAGCAUUGUGUTT 9 ACACAAUGCUCAGACGCAAT 198
TUCUGCGUCUGAGCAUUGUTT 10 ACAAUGCUCAGACGCAGAAT 199
TGGAUCUGGAUUUCGGCAGTT 11 CUGCCGAAAUCCAGAUCCAT 200
TCAGGAUCUGGAUUUCGGCTT 12 GCCGAAAUCCAGAUCCUGAT 201
TCAUCUGAGCAUCGUGUCATT 13 UGACACGAUGCUCAGAUGAT 202
TGCAUCUGAGCAUCGUGUCTT 14 GACACGAUGCUCAGAUGCAT 203
TUGCAUCUGAGCAUCGUGUTT 15 ACACGAUGCUCAGAUGCAAT 204
TUCUGCAUCUGAGCAUCGUTT 16 ACGAUGCUCAGAUGCAGAAT 205
TAAAGCCUCUAGGCUUGGATT 17 UCCAAGCCUAGAGGCUUUAT 206
TGUACCCCGGGGGUUUCCUTT 18 AGGAAACCCCCGGGGUACAT 207
TUGUACCCCGGGGGUUUCCTT 19 GGAAACCCCCGGGGUACAAT 208
TCUGUACCCCGGGGGUUUCTT 20 GAAACCCCCGGGGUACAGAT 209
TUCCAUAAUGGUAGUAGCATT 21 UGCUACUACCAUUAUGGAAT 210
TGUCCAUAAUGGUAGUAGCTT 22 GCUACUACCAUUAUGGACAT 211
TCUCUGUCCAUAAUGGUAGTT 23 CUACCAUUAUGGACAGAGAT 212
TCGACUAUGCUGGUGUGGUTT 24 ACCACACCAGCAUAGUCGAT 213
TCCGACUAUGCUGGUGUGGTT 25 CCACACCAGCAUAGUCGGAT 214
TUCCGACUAUGCUGGUGUGTT 26 CACACCAGCAUAGUCGGAAT 215
TGGUCCGACUAUGCUGGUGTT 27 CACCAGCAUAGUCGGACCAT 216
TUUUCUGGGGUCCGACUAUTT 28 AUAGUCGGACCCCAGAAAAT 217
TUUUUCUGGGGUCCGACUATT 29 UAGUCGGACCCCAGAAAAAT 218
TGCGAAUCUCAGCAUCUGGTT 30 CCAGAUGCUGAGAUUCGCAT 219
TCCAAGGGCGAAUCUCAGCTT 31 GCUGAGAUUCGCCCUUGGAT 220
TACCAAGGGCGAAUCUCAGTT 32 CUGAGAUUCGCCCUUGGUAT 221
TCACCAAGGGCGAAUCUCATT 33 UGAGAUUCGCCCUUGGUGAT 222
TACACCAAGGGCGAAUCUCTT 34 GAGAUUCGCCCUUGGUGUAT 223
TCCUGACACUGGGAUCCAUTT 35 AUGGAUCCCAGUGUCAGGAT 224
TUGCAAGGACACUUGAUUCTT 36 GAAUCAAGUGUCCUUGCAAT 225
TUUGCAAGGACACUUGAUUTT 37 AAUCAAGUGUCCUUGCAAAT 226
TUUGCUCCGUUGGUGCUUCTT 38 GAAGCACCAACGGAGCAAAT 227
TAAUGAGCCUCGAUAACUCTT 39 GAGUUAUCGAGGCUCAUUAT 228
TGAAUGAGCCUCGAUAACUTT 40 AGUUAUCGAGGCUCAUUCAT 229
TGGAUAAUAUUCUGUUGUCTT 41 GACAACAGAAUAUUAUCCAT 230
TCCAUGGUAUAACACCAAGTT 42 CUUGGUGUUAUACCAUGGAT 231
TGAUCCAUGGUAUAACACCTT 43 GGUGUUAUACCAUGGAUCAT 232
TAUUGGGAUCCAUGGUAUATT 44 UAUACCAUGGAUCCCAAUAT 233
TCAUUGGGAUCCAUGGUAUTT 45 AUACCAUGGAUCCCAAUGAT 234
TACAUUGGGAUCCAUGGUATT 46 UACCAUGGAUCCCAAUGUAT 235
TGACAUUGGGAUCCAUGGUTT 47 ACCAUGGAUCCCAAUGUCAT 236
TGACAUUGUGUCAGGUUGCTT 48 GCAACCUGACACAAUGUCAT 237
TCACUGGACAUUGUGUCAGTT 49 CUGACACAAUGUCCAGUGAT 238
TACUUGAUUCUGUCACUGGTT 50 CCAGUGACAGAAUCAAGUAT 239
TGAGAAUGAGCCUCGAUAATT 51 UUAUCGAGGCUCAUUCUCAT 240
TCCAUUUGGGUAGUAUUCUTT 52 AGAAUACUACCCAAAUGGAT 241
TCACCAUUUGGGUAGUAUUTT 53 AAUACUACCCAAAUGGUGAT 242
TCCACCAUUUGGGUAGUAUTT 54 AUACUACCCAAAUGGUGGAT 243
TAUAACACCAAGGGCGAAUTT 55 AUUCGCCCUUGGUGUUAUAT 244
TACUGGGAUCCAUGGUAUATT 56 UAUACCAUGGAUCCCAGUAT 245
TCACUGGGAUCCAUGGUAUTT 57 AUACCAUGGAUCCCAGUGAT 246
TACCACCGUGGGAGUUGUGTT 58 CACAACUCCCACGGUGGUAT 247
TCAAGACUGACAUGUUCUUTT 59 AAGAACAUGUCAGUCUUGAT 248
TGGGAGUUGUGAGGACACUTT 60 AGUGUCCUCACAACUCCCAT 249
TUCUCAGGUGGUGCUUGUUTT 61 AACAAGCACCACCUGAGAAT 250
TCACAGGGCUUUUCUCAGGTT 62 CCUGAGAAAAGCCCUGUGAT 251
TGAUGCCAGUGUGGUAUCATT 63 UGAUACCACACUGGCAUCAT 252
TUGAUGCCAGUGUGGUAUCTT 64 GAUACCACACUGGCAUCAAT 253
TGACACCUGAUUCUGUUUCTT 65 GAAACAGAAUCAGGUGUCAT 254
TGGACACCUGAUUCUGUUUTT 66 AAACAGAAUCAGGUGUCCAT 255
TCUAGGACACCUGAUUCUGTT 67 CAGAAUCAGGUGUCCUAGAT 256
TAUAAGGGGCUGCCACAGGTT 68 CCUGUGGCAGCCCCUUAUAT 257
TAACAAUAAGGGGCUGCCATT 69 UGGCAGCCCCUUAUUGUUAT 258
TGUCCGACUAUGCUGGUGUTT 70 ACACCAGCAUAGUCGGACAT 259
TUCUCAGCAUCUGGAUUCCTT 71 GGAAUCCAGAUGCUGAGAAT 260
TCGAAUCUCAGCAUCUGGATT 72 UCCAGAUGCUGAGAUUCGAT 261
TAAGGGCGAAUCUCAGCAUTT 73 AUGCUGAGAUUCGCCCUUAT 262
TUGACACUGGGAUCCAUGGTT 74 CCAUGGAUCCCAGUGUCAAT 263
TCCGUUGGUGCUUCUUCAGTT 75 CUGAAGAAGCACCAACGGAT 264
TCUUGAUUCUGUCACUGGATT 76 UCCAGUGACAGAAUCAAGAT 265
TCACCGUGGGAGUUGUGAGTT 77 CUCACAACUCCCACGGUGAT 266
TUCUAGGACACCUGAUUCUTT 78 AGAAUCAGGUGUCCUAGAAT 267
TAGUCUCUAGGACACCUGATT 79 UCAGGUGUCCUAGAGACUAT 268
TCAAUAAGGGGCUGCCACATT 80 UAUAGCCCCUUAUUGUUAUACAT 269
TCUGCGUCUGAGCAUUGUGTT 81 UAUGCCCCUUAUUGUUAUACGAT 270
TACAGGAUCUGGAUUUCGGTT 82 UAUGACACAAUGCUCAGACGCAT 271
TCCGGGGGUUUCCUCAGUCTT 83 UAUACACAAUGCUCAGACGCAAT 272
TUGUCCAUAAUGGUAGUAGTT 84 UAUUUAUCGAGGCUCAUUCUCAT 273
TUCUGUCCAUAAUGGUAGUTT 85 UAUGAAACAGAAUCAGGUGUCAT 274
TACUCUGUCCAUAAUGGUATT 86 UAUACACCAGCAUAGUCGGACAT 275
TAACUCUGUCCAUAAUGGUTT 87 UAUUCCAGAUGCUGAGAUUCGAT 276
TGGGCGAAUCUCAGCAUCUTT 88 UAUAUGCUGAGAUUCGCCCUUAT 277
TAGGGCGAAUCUCAGCAUCTT 89 UAUCCAUGGAUCCCAGUGUCAAT 278
TAACACCAAGGGCGAAUCUTT 90 UGUGGCAGCCCCUUAUUGAT 279
TAGGACACUUGAUUCUGUCTT 91 CACAAUGCUCAGACGCAGAT 280
TGGACCAAGACUGACAUGUTT 92 CCGAAAUCCAGAUCCUGUAT 281
TGGUCAGGCCACCAUUUGGTT 93 GACUGAGGAAACCCCCGGAT 282
TAUCCAUGGUAUAACACCATT 94 CUACUACCAUUAUGGACAAT 283
TGGGAUCCAUGGUAUAACATT 95 ACUACCAUUAUGGACAGAAT 284
TUGGACAUUGUGUCAGGUUTT 96 UACCAUUAUGGACAGAGUAT 285
TAUUCUGUCACUGGACAUUTT 97 ACCAUUAUGGACAGAGUUAT 286
TGGUGCUUGUUCAGAAACATT 98 AGAUGCUGAGAUUCGCCCAT 287
TGGAGAAUGAGCCUCGAUATT 99 GAUGCUGAGAUUCGCCCUAT 288
TGUGGAGAAUGAGCCUCGATT 100 AGAUUCGCCCUUGGUGUUAT 289
TCCGUGGGAGUUGUGAGGATT 101 GACAGAAUCAAGUGUCCUAT 290
TGGACCACCGUGGGAGUUGTT 102 ACAUGUCAGUCUUGGUCCAT 291
TUGCUUGUUCAGAAGGAGCTT 103 CCAAAUGGUGGCCUGACCAT 292
TCUGAUGCCAGUGUGGUAUTT 104 UGGUGUUAUACCAUGGAUAT 293
TUAGGACACCUGAUUCUGUTT 105 UGUUAUACCAUGGAUCCCAT 294
TCUCUAGGACACCUGAUUCTT 106 AACCUGACACAAUGUCCAAT 295
TUCUCUAGGACACCUGAUUTT 107 AAUGUCCAGUGACAGAAUAT 296
TGUCUCUAGGACACCUGAUTT 108 UGUUUCUGAACAAGCACCAT 297
TGAGAAUGAGCCUCGAUAACUCUUAU 109 UAUCGAGGCUCAUUCUCCAT 298
TGACACCUGAUUCUGUUUCUGAGUAU 110 UCGAGGCUCAUUCUCCACAT 299
TCGUAUAACAAUAAGGGGCUGCCUAU 111 UCCUCACAACUCCCACGGAT 300
TGCGUCUGAGCAUUGUGUCAGGUUAU 112 CAACUCCCACGGUGGUCCAT 301
TUGCGUCUGAGCAUUGUGUCAGGUAU 113 GCUCCUUCUGAACAAGCAAT 302
TAAGGGCGAAUCUCAGCAUCUGGUAU 114 AUACCACACUGGCAUCAGAT 303
UUAACAAUAAGGGGCUGCAb 115 ACAGAAUCAGGUGUCCUAAT 304
UGUAUAACAAUAAGGGGCAb 116 GAAUCAGGUGUCCUAGAGAT 305
UCGUAUAACAAUAAGGGGAb 117 AAUCAGGUGUCCUAGAGAAT 306
UGCGUCUGAGCAUUGUGUAb 118 AUCAGGUGUCCUAGAGACAT 307
UUGCGUCUGAGCAUUGUGAb 119 UAUAUAGUUAUCGAGGCUCAUUCUCA 308
UCAGGAUCUGGAUUUCGGAb 120 UAUAUCAGAAACAGAAUCAGGUGUCA 309
UUGCAUCUGAGCAUCGUGAb 121 UAUAUCAGCCCCUUAUUGUUAUACGA 310
UCGACUAUGCUGGUGUGGAb 122 UAUAUCUGACACAAUGCUCAGACGCA 311
UUUUCUGGGGUCCGACUAAb 123 UAUAUUGACACAAUGCUCAGACGCAA 312
UGCGAAUCUCAGCAUCUGAb 124 UAUAUAGAUGCUGAGAUUCGCCCUUA 313
UUGCAAGGACACUUGAUUAb 125 GCAGCCCCUUAUUGUUAA 314
UAAUGAGCCUCGAUAACUAb 126 GCCCCUUAUUGUUAUACA 315
UGAAUGAGCCUCGAUAACAb 127 CCCCUUAUUGUUAUACGA 316
UGACAUUGUGUCAGGUUGAb 128 ACACAAUGCUCAGACGCA 317
UGAGAAUGAGCCUCGAUAAb 129 CACAAUGCUCAGACGCAA 318
UCCAUUUGGGUAGUAUUCAb 130 CCGAAAUCCAGAUCCUGA 319
UCACCAUUUGGGUAGUAUAb 131 CACGAUGCUCAGAUGCAA 320
UGACACCUGAUUCUGUUUAb 132 CCACACCAGCAUAGUCGA 321
UGGACACCUGAUUCUGUUAb 133 UAGUCGGACCCCAGAAAA 322
UUAACAAUAAGGGGCUGAbAb 134 CAGAUGCUGAGAUUCGCA 323
UGUAUAACAAUAAGGGGAbAb 135 AAUCAAGUGUCCUUGCAA 324
UCGUAUAACAAUAAGGGAbAb 136 AGUUAUCGAGGCUCAUUA 325
UGCGUCUGAGCAUUGUGAbAb 137 GUUAUCGAGGCUCAUUCA 326
UUGCGUCUGAGCAUUGUAbAb 138 CAACCUGACACAAUGUCA 327
UCAGGAUCUGGAUUUCGAbAb 139 UAUCGAGGCUCAUUCUCA 328
UUGCAUCUGAGCAUCGUAbAb 140 GAAUACUACCCAAAUGGA 329
UCGACUAUGCUGGUGUGAbAb 141 AUACUACCCAAAUGGUGA 330
UUUUCUGGGGUCCGACUAbAb 142 AAACAGAAUCAGGUGUCA 331
UGCGAAUCUCAGCAUCUAbAb 143 AACAGAAUCAGGUGUCCA 332
UUGCAAGGACACUUGAUAbAb 144 CAGCCCCUUAUUGUUAA 333
UAAUGAGCCUCGAUAACAbAb 145 CCCCUUAUUGUUAUACA 334
UGAAUGAGCCUCGAUAAAbAb 146 CCCUUAUUGUUAUACGA 335
UGACAUUGUGUCAGGUUAbAb 147 CACAAUGCUCAGACGCA 336
UGAGAAUGAGCCUCGAUAbAb 148 ACAAUGCUCAGACGCAA 337
UCCAUUUGGGUAGUAUUAbAb 149 CGAAAUCCAGAUCCUGA 338
UCACCAUUUGGGUAGUAAbAb 150 ACGAUGCUCAGAUGCAA 339
UGACACCUGAUUCUGUUAbAb 151 CACACCAGCAUAGUCGA 340
UGGACACCUGAUUCUGUAbAb 152 AGUCGGACCCCAGAAAA 341
UGAGAAUGAGCCUCGAUAACUCUUAU 153 AGAUGCUGAGAUUCGCA 342
UGACACCUGAUUCUGUUUCUGAGUAU 154 AUCAAGUGUCCUUGCAA 343
UGAGAAUGAGCCUCGAUAACUCTUAU 155 GUUAUCGAGGCUCAUUA 344
UCGUAUAACAAUAAGGGGCUGCCUAU 156 UUAUCGAGGCUCAUUCA 345
UGAGAAUGAGCCUCGAUAATT 157 AACCUGACACAAUGUCA 346
UCGUAUAACAAUAAGGCGCUGCCUAU 158 AUCGAGGCUCAUUCUCA 347
UGAGAAUGAGCCUCGATAbAb 159 AAUACUACCCAAAUGGA 348
UGACACCUGAUUCUGTTAbAb 160 UACUACCCAAAUGGUGA 349
UCGUAUAACAAUAAGGGGCUGAUU 161 AACAGAAUCAGGUGUCA 350
UCGUAUAACAAUAAGGGGCUGCUU 162 ACAGAAUCAGGUGUCCA 351
UGAGAAUGAGCCUCGAUAACUCUU 163 UAUAUCAGCGCCUUAUUGUUAUACGA 352
UCGUAUAACAAUAAGGGGCUU 164 ATCGAGGCUCAUUCUCA 353
UGUAUAACAAUAAGGGG 165 UCAGCCCCUUAUUGUUAUACGAUUAb 354
UCGUAUAACAAUAAGGG 166 UCAGCCCCUUAUUGUUAUACGAAb 355
UGAGAAUGAGCCUCGAT 167 UAGUUAUCGAGGCUCAUUCUCAUUAb 356
UGACACCUGAUUCUGTT 168 AbGCCCCUUAUUGUUAUACGAUUAb 357
TUCGUAUAACAAUAAGGGGCUGCCUA 169 AUAUCAGCCCCUUAUUGUUAUACGAT 358
UAUCGUAUAACAAUAAGGGGCUGCCU 170 UAUCAGCCCCUUAUUGUUAUACGAUT 359
TCCGUAUAACAAUAAGGGGCUGCCUA 171 AUAUAGUUAUCGAGGCUCAUUCUCAT 360
CUCCGUAUAACAAUAAGGGGCUGCCU 172 UAUAGUUAUCGAGGCUCAUUCUCAUT 361
TUGAGAAUGAGCCUCGAUAACUCUUA 173 AbUUAUCGAGGCUCAUUCUCAUUAb 362
UAUGAGAAUGAGCCUCGAUAACUCUU 174 UAUAUAAUUAUCGAGGCUCAUUCUCAAb 363
TGGAGAAUGAGCCUCGAUAACUCUUA 175 GGCAGCCCCUUAUUGUUAUACGATT 364
GUGGAGAAUGAGCCUCGAUAACUCUU 176 GGCAGCCCCUUAUUGUUAUACGAUUT 365
UGAGAAUGAGCCUCGAUAAUU 177 CAGCCCCUUAUUGUUAUACGATTTT 366
TCGUAUAACAAUAAGGGGCUU 178 GCGAUAGUUAUCGAGGCUCAUUCUCA 367
UGAGAAUGAGCCUCGAUAAUUAUAUA 179 UGAAUAGUUAUCGAGGCUCAUUCUCA 368
UCGUAUAACAAUAAGGGGCUGCC 180 AUCGUAGUUAUCGAGGCUCAUUCUCA 369
TUCGUAUAACAAUAAGGGGCUGCC 181 UAUAAAGUUAUCGAGGCUCAUUCUCA 370
TUCGUAUAACAAUAAGGGGCUG 182 AGCCCCUUAUUGUUAUACGAAb 371
UGAGAAUGAGCCUCGAUAACUAUCGC 183 AAGCCCCUUAUUGUUAUACGAAb 372
UGAGAAUGAGCCUCGAUAACUAUUCA 184 GCAGCCCCUUAUUGUUAUACGAAb 373
UGAGAAUGAGCCUCGAUAACUACGAU 185 UAUAUAGUUAUCGAGGCUCAUUCUCAAb 374
UCGUAUAACAAUAAGGGGCGU 186 ACGCCCCUUAUUGUUAUACGAAb 375
UCGUAUAACAAUAAGGGGCUGCCU 187 GCCCCUUAUUGUUAUACGAUUAb 376
UCGUAUAACAAUAAGGGGCUG 188 AGCCCCUUAUUGUUAUACGAUUAb 377
TCGUAUAACAAUAAGGGGCUGCUU 189 AAGCCCCUUAUUGUUAUACGAUUAb 378
TCGUAUAACAAUAAGGGGC 1242 UAUCAGCCCCUUAUUGUUAUACGA 379
UCGUAUAACAAUAAGGGG 1244 UAGCAGCCCCUUAUUGUUAUACGA 380
UCGUAUAACAAUAAGGG 1246 GCAGCCCCUUAUUGUUAUACGA 381
TGAGAAUGAGCCUCGAUAA 1248 AUAAGAGUUAUCGAGGCUCAUUCUCA 382
UGAGAAUGAGCCUCGAUA 1250 AUAGGCAGCCCCUUAUUGUUAUACGA 383
UGAGAAUGAGCCUCGAU 1252 CAGCCCCUUAUUGUUAUACGA 384
UGUAUAACAAUAAGGGG 1254 UAUAUCAGCCCCTUAUUGUUAUACGA 385
CGUAUAACAAUAAGGGGC 1280 AbGCCCCTUAUUGUUAUACGAUUAb 1241
GAGAAUGAGCCUCGAUAA 1281 GCCCCUUAUUGUUAUACGA 1243
UCGUAUAACAAUAAGGGGC 1282 CCCCUUAUUGUUAUACGA 1245
UGAGAAUGAGCCUCGAUAA 1283 CCCUUAUUGUUAUACGA 1247
      UUAUCGAGGCUCAUUCUCA 1249
      UAUCGAGGCUCAUUCUCA 1251
      AUCGAGGCUCAUUCUCA 1253
      CCCCUUAUUGUUAUACA 1255
      UUAUCGAGGCUCAUUCUCA 1258
      GCCCCUUAUUGUUAUACGA 1259
      ACAGCCCCUUAUUGUUAUACGA 1260
      AAAGCCCCUUAUUGUUAUACGA 1261
      GCCCCUUAUUGUUAUACG 1284
      UUAUCGAGGCUCAUUCUC 1285
Ab=無鹼基核苷酸 本文所描述之LPA RNAi劑藉由反義股與有義股退火而形成。含有表1或表2B中所列序列之有義股可與含有表1或表2A所列序列之任何反義股雜交,限制條件為兩個序列在鄰接的16、17、18、19、20或21個核苷酸序列上具有至少90%互補之區域。 在一些實施例中,LPA RNAi劑反義股包含表1中的序列中之任一者的核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑反義股包含表1中之序列中之任一者的核苷酸1至17、2至17、1至18、2至18、1至19、2至19、1至20、2至20、1至21、2至21、1至22、2至22、1至23、2至23、1至24、2至24、1至25、2至25、1至26或2至26之序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑有義股包含表1中的序列中之任一者的核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑有義股包含表1中之序列中之任一者的核苷酸1至17、2至17、1至18、2至18、1至19、2至19、1至20、2至20、1至21、2至21、1至22、2至22、1至23、2至23、1至24、2至24、1至25、2至25、1至26或2至26之序列。 在一些實施例中,本文所描述之RNAi劑之有義股及反義股含有相同數目的核苷酸。在一些實施例中,本文所描述之RNAi劑的有義股及反義股含有不同數目之核苷酸。在一些實施例中,RNAi劑之有義股5'端及反義股3'端形成鈍端。在一些實施例中,RNAi劑之有義股3'端及反義股5'端形成鈍端。在一些實施例中,RNAi劑之兩端均形成鈍端。在一些實施例中,RNAi劑之末端皆非鈍端。如本文所用,鈍端係指雙股RNAi劑之一端,其中兩條退火股之末端核苷酸互補(形成互補鹼基對)。在一些實施例中,RNAi劑之有義股5'端及反義股3'端形成磨損端。在一些實施例中,RNAi劑之有義股3'端及反義股5'端形成磨損端。在一些實施例中,RNAi劑之兩端均形成磨損端。在一些實施例中,RNAi劑之末端皆非磨損端。如本文所用,磨損端係指雙股RNAi劑之一端,其中兩條退火股之末端核苷酸形成對(亦即不形成突出物),但並不互補(亦即形成非互補對)。如本文所用,突出物為位於雙股RNAi劑之一條股之末端的一或多個不成對核苷酸之延伸(stretch)。不成對核苷酸可位於有義股或反義股上,從而產生3'或5'突出物。在一些實施例中,RNAi劑含有:鈍端及磨損端、鈍端及5'突出端、鈍端及3'突出端、磨損端及5'突出端、磨損端及3'突出端、兩個5'突出端、兩個3'突出端、5'突出端及3'突出端、兩個磨損端或兩個鈍端。 核苷酸鹼基(或核鹼基)為雜環嘧啶或嘌呤化合物,其為所有核酸之組分且包括腺嘌呤(A)、鳥嘌呤(G)、胞嘧啶(C)、胸腺嘧啶(T)及尿嘧啶(U)。如本文所用,術語「核苷酸」可包括經修飾之核苷酸或核苷酸模擬物、無鹼基位點(Ab或X),或替代置換部分。 在一些實施例中,LPA RNAi劑以鹽、混合鹽或游離酸形式製備或提供。 經修飾之核苷酸 在一些實施例中,LPA RNAi劑含有一或多個經修飾之核苷酸。如本文所用,「經修飾之核苷酸」為除核糖核苷酸(2'-羥基核苷酸)以外之核苷酸。在一些實施例中,至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%或100%的核苷酸經修飾。經修飾之核苷酸包括(但不限於):脫氧核苷酸、核苷酸模擬物、無鹼基核苷酸(本文中表示為X、Ab)、2'-經修飾之核苷酸、3'至3'連接(反向)核苷酸(本文中表示為invdN、invN、invn、invX、invAb)、包含非天然鹼基之核苷酸、橋接核苷酸、肽核酸(PNA)、2',3'開環核苷酸模擬物(未封閉核鹼基類似物,本文中表示為N UNA或NUNA)、鎖定核苷酸(本文中表示為N LNA或NLNA)、3'-O-甲氧基(2'核苷間鍵聯)核苷酸(本文中表示為3'-OMen)、2'-F-阿糖核苷酸(本文中表示為NfANA或Nf ANA)、5'-Me,2'-氟基核苷酸(本文中表示為5Me-Nf)、嗎啉基核苷酸、膦酸乙烯酯脫氧核糖核苷酸(本文中表示為vpdN)、含有膦酸乙烯酯之核苷酸及含有膦酸環丙酯之核苷酸(cPrpN)。2'-經修飾之核苷酸(亦即在五員糖環之2'位之基團不為羥基的核苷酸)包括(但不限於):2'-O-甲基核苷酸(在本文中表示為核苷酸序列中之小寫字母『n』)、2'-脫氧-2'-氟核苷酸(在本文中表示為Nf,在本文中亦表示為2'-氟核苷酸)、2'-脫氧核苷酸(在本文中表示為dN)、2'-甲氧基乙基(2'-O-2-甲氧基乙基)核苷酸(在本文中表示為NM或2'-MOE)、2'-胺基核苷酸及2'-烷基核苷酸。給定化合物之所有位置無需經均一修飾。相反地,可在單一LPA RNAi劑中或甚至在其單一核苷酸中併入超過一個修飾。LPA RNAi劑有義股及反義股可藉由此項技術中已知之方法合成及/或修飾。一個核苷酸上之修飾獨立於另一核苷酸上之修飾。 經修飾之核苷酸亦包括具有經修飾之核鹼基的核苷酸。經修飾之核鹼基包括(但不限於):合成及天然核鹼基、經5-取代之嘧啶、6-氮雜嘧啶及經N-2、N-6及O-6取代之嘌呤,包括2-胺基丙基腺嘌呤、5-丙炔基尿嘧啶及5-丙炔基胞嘧啶、5-甲基胞嘧啶(5-me-C)、5-羥甲基胞嘧啶、黃嘌呤、次黃嘌呤、2-胺基腺嘌呤、腺嘌呤及鳥嘌呤之6-甲基及其他烷基衍生物、腺嘌呤及鳥嘌呤之2-丙基及其他烷基衍生物、2-硫基尿嘧啶、2-硫基胸腺嘧啶及2-硫基胞嘧啶、5-鹵基尿嘧啶及胞嘧啶、5-丙炔基尿嘧啶及胞嘧啶、6-偶氮尿嘧啶、胞嘧啶及胸腺嘧啶、5-尿嘧啶(假尿嘧啶)、4-硫基尿嘧啶;8-鹵基、8-胺基、8-硫醇、8-硫烷基、8-羥基及其他經8-取代之腺嘌呤及鳥嘌呤;5-鹵基(尤其5-溴、5-三氟甲基)及其他經5-取代之尿嘧啶及胞嘧啶;7-甲基鳥嘌呤及7-甲基腺嘌呤、8-氮鳥嘌呤及8-氮腺嘌呤、7-去氮鳥嘌呤及7-去氮腺嘌呤及3-去氮鳥嘌呤及3-去氮腺嘌呤。 經修飾之核苷間鍵 在一些實施例中,LPA RNAi劑之一或多個核苷酸藉由非標準鍵或主鏈(亦即經修飾之核苷間鍵或經修飾之主鏈)連接。在一些實施例中,經修飾之核苷間鍵為含有非磷酸酯之共價核苷間鍵。經修飾之核苷間鍵或主鏈包括(但不限於):具有正常3'-5'鍵聯之5'-硫代磷酸酯基(5'­phosphorothioate group) (在本文中表示為核苷酸前之小寫字母『s』,如在sN、sn、sNf或sdN中)、對掌性硫代磷酸酯基、硫代磷酸酯(thiophosphate)、二硫代磷酸酯基、磷酸三酯基、胺基烷基-磷酸三酯基、甲基及其他烷基膦酸酯基(包括3'-伸烷基膦酸酯及對掌性膦酸酯)、亞膦酸酯基、胺基磷酸酯(包括3'-胺基胺基磷酸酯)及胺基烷基胺基磷酸酯基、硫羰基胺基磷酸酯基、硫羰基烷基-膦酸酯基、硫羰基烷基磷酸三酯基、嗎啉基鍵聯、及硼烷磷酸酯基、此等基團之2'-5'連接之類似物以及具有反向極性之彼等基團(其中相鄰對核苷單元3'-5'至5'-3'或2'-5'至5'-2'連接)。在其他實施例中,經修飾之核苷間鍵或主鏈不具有磷原子。不具有磷原子之經修飾之核苷間鍵包括(但不限於)短鏈烷基或環烷基糖間鍵、混合雜原子及烷基或環烷基糖間鍵、或一或多個短鏈雜原子或雜環糖間鍵。在一些實施例中,經修飾之核苷間主鏈包括(但不限於):矽氧烷主鏈、硫化物、亞碸及碸主鏈;甲醯基及硫甲醯基主鏈、亞甲基甲醯基及硫甲醯基主鏈、含烯烴之主鏈、胺基磺酸酯基主鏈、亞甲基亞胺基及亞甲基肼基主鏈、磺酸酯基及磺醯胺主鏈、醯胺主鏈;及具有N、O、S及CH 2組分部分之其他主鏈。 在一些實施例中,LPA RNAi劑之有義股可含有1、2、3、4硫代磷酸酯鍵,LPA RNAi劑之反義股可含有1、2、3或4個硫代磷酸酯鍵,或有義股及反義股二者獨立地可含有1、2、3或4個硫代磷酸酯鍵。 在一些實施例中,LPA RNAi劑有義股含有兩個硫代磷酸酯核苷間鍵。在一些實施例中,兩個硫代磷酸酯核苷間鍵位於自有義股之3'端之位置1-3的核苷酸之間。在一些實施例中,兩個硫代磷酸酯核苷間鍵位於從有義股之5'端之位置1-3、2-4、3-5、4-6、4-5或6-8的核苷酸之間。在一些實施例中,LPA RNAi劑反義股含有四個硫代磷酸酯核苷間鍵。在一些實施例中,四個硫代磷酸酯核苷間鍵位於自有義股之5'端之位置1-3的核苷酸之間及自5'端之位置19-21、20-22、21-23、22-24、23-25或24-26的核苷酸之間。在一些實施例中,LPA RNAi劑含有有義股中之兩個硫代磷酸酯核苷間鍵及反義股中之四個硫代磷酸酯核苷酸間鍵。 在一些實施例中,LPA RNAi劑含有一或多個經修飾之核苷酸及一或多個經修飾之核苷間鍵。在一些實施例中,2'-經修飾之核苷酸與經修飾之核苷間鍵組合。 具有經修飾之核苷酸之LPA RNAi劑 含有經修飾之核苷酸之反義股之實例提供於表2A中。含有經修飾之核苷酸之有義股之實例提供於表2B中。在表2A及表2B中,使用以下標記指示經修飾之核苷酸: N             =   2'-OH(未經修飾)核糖核苷酸(無f或d指示的大寫字母) n            =   經2'-OMe修飾之核苷酸 Nf          =   經2'-氟修飾之核苷酸 dN         =   2'-脫氧核苷酸 N UNA=   2',3'-開環核苷酸模擬物(未封閉核鹼基類似物) N LNA=   鎖定核苷酸 Nf ANA=   2'-F-阿糖核苷酸 NM        =   2'-甲氧基乙基核苷酸 Ab         =   無鹼基核糖 (invdN)  =   反向脫氧核糖核苷酸(3'-3'連接型核苷酸) (invAb)  =   反向無鹼基核苷酸 (invn)     =   反向2'-OMe核苷酸 s            =   硫代磷酸酯連接型核苷酸 p            =   磷酸酯 vpdN      =   膦酸乙烯酯脫氧核糖核苷酸 (3'OMen) =   3'-OMe核苷酸 (5Me-Nf) =   5'-ME,2'-氟核苷酸 cPrp       =   膦酸環丙酯 epTcPr    =   參見表4 epTM      =   參見表4 另外,以下靶向基團及鍵聯基團列於表2A及表2B中:(Alk-PEG5-C6)、(C11-PEG3-NAG3)、(C12)、(C6-PEG4-NAG3)、(C6-SS-Alk-Me)、(Chol-TEG)、(Dy540)、(NAG13)、(NAG18)、(NAG24)、(NAG25)、(NAG26)、(NAG27)、(NAG28)、(NAG29)、(NAG30)、(NAG31)、(NAG32)、(NAG33)、(NAG34)、(NAG35)、(NAG36)、(NAG37)、(NAG4)、(PAZ)、(Sp18)、(固醇)、(Alk-SMPT-C6)。各有義股及/或反義股可具有以上指示之靶向基團或鍵聯基團以及結合至序列之5'及/或3'端之其他靶向或鍵聯基團中之任一者。此等基團之化學結構提供於表4中。 表2A.具有經修飾之核苷酸之LPA RNAi劑反義股。
反義股ID 反義股序列5'→3' SEQ ID NO. SEQ ID NO.
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AM01241-AS dTGfuAfgCfaCfuCfcUfgCfaCfcCfcdTsdT 387 2
AM01242-AS dTAfaUfaAfgGfgGfcUfgCfcAfcAfgdTsdT 388 3
AM01243-AS dTUfaAfcAfaUfaAfgGfgGfcUfgCfcdTsdT 389 4
AM01244-AS dTGfuAfuAfaCfaAfuAfaGfgGfgCfudTsdT 390 5
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AM04880-AS cPrpusGfsaGfaAfuGfaGfcCfuCfgAfuAfaCfucsusuAu 793 153
AM04969-AS cPrpTMsGfsaGfaAfuGfaGfcCfuCfgAfuAfaCfucsusuAu 794 109
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AM04972-AS cPrpTMsCfsgUfaUfaacaaUfaAfgGfgGfcUfgCfsusu 797 189
AM04979-AS usCfsgsUfaUfaAfcAfaUfaAfgGfgGfcusu 798 164
1532-AS01 usgsagaaugaGfccuCfgAfuAfaCfuCfsusuAu 799 153
1532-AS02 usgsagaauGfagccuCfgAfuAfaCfuCfsusuAu 800 153
1532-AS03 usgsagaAfugagccuCfgAfuAfaCfuCfsusuAu 801 153
1532-AS04 usgsaGfaaugagccuCfgAfuAfaCfuCfsusuAu 802 153
1532-AS05 usGfsagaaugagccuCfgAfuAfaCfuCfsusuAu 803 153
1532-AS06 dTsgsagaaugagccuCfgAfuAfaCfuCfsusuAu 804 109
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1532-AS08 dTsGfsaGfaAfugaGfccuCfgauAfaCfuCfsusuAu 806 109
1532-AS09 dTsGfsaGfaAfuGfagccuCfgauAfaCfuCfsusuAu 807 109
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1532-AS20 usgsagaaugagccuCfgAfuAfaCfuCfsusuAu 817 153
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1532-AS23 usGfsaGfaAfuGfagccuCfgauAfaCfuCfsusuAu 820 153
1532-AS24 usGfsaGfaAfugagccuCfgauAfaCfuCfsusuAu 821 153
1532-AS25 usGfsaGfaAfugagccuCfgAfuaaCfuCfsusuAu 822 153
1532-AS27 usGfsaGfaAfuGfagccuCfgauaaCfuCfsusuAu 823 153
1533-AS01 usgsaCfaCfcugAfuucUfgUfuUfcUfgAfsgsuAu 824 154
1533-AS02 usgsaCfaCfcUfgauucUfgUfuUfcUfgAfsgsuAu 825 154
1533-AS04 dTsgsaCfaCfcugauucUfgUfuUfcUfgAfsgsuAu 826 110
1533-AS05 dTsGfsaCfaCfcugAfuucUfguuUfcUfgAfsgsuAu 827 110
1533-AS06 dTsGfsaCfaCfcUfgauucUfguuUfcUfgAfsgsuAu 828 110
1533-AS07 dTsGfsaCfaCfcUfgauucUfgUfuucUfgAfsgsuAu 829 110
1533-AS08 dTsGfsaCfaCfcUfgAfuucUfguuucUfgAfsgsuAu 830 110
1533-AS09 dTsGfsaCfaCfcUfgAfuucUfguuUfcugAfsgsuAu 831 110
1533-AS10 dTsGfsaCfaCfcUfgAfuucUfgUfuucugAfsgsuAu 832 110
1533-AS11 dTsGfsaCfaCfcUfgAfuucUfguuucugAfsgsuAu 833 110
1533-AS12 dTsGfsaCfaCfcUfgAfuucUfguuucUfgasgsuAu 834 110
1533-AS13 dTsGfsaCfaCfcUfgAfuucUfguuUfcugasgsuAu 835 110
1533-AS16 dTsgsaCfaCfcugAfuucUfgUfuUfcUfgAfsgsuAu 836 110
1533-AS17 dTsgsaCfaCfcUfgauucUfgUfuUfcUfgAfsgsuAu 837 110
1533-AS19 usgsaCfaCfcugauucUfgUfuUfcUfgAfsgsuAu 838 154
1533-AS20 usGfsaCfaCfcugAfuucUfguuUfcUfgAfsgsuAu 839 154
1533-AS21 usGfsaCfaCfcUfgauucUfguuUfcUfgAfsgsuAu 840 154
1533-AS22 usGfsaCfaCfcUfgauucUfgUfuucUfgAfsgsuAu 841 154
1533-AS23 usGfsaCfaCfcUfgAfuucUfguuucUfgAfsgsuAu 842 154
1533-AS24 usGfsaCfaCfcUfgAfuucUfguuUfcugAfsgsuAu 843 154
1533-AS25 usGfsaCfaCfcUfgAfuucUfgUfuucugAfsgsuAu 844 154
1533-AS26 usGfsaCfaCfcUfgAfuucUfguuucugAfsgsuAu 845 154
1533-AS27 usGfsaCfaCfcUfgAfuucUfguuucUfgasgsuAu 846 154
1533-AS28 usGfsaCfaCfcUfgAfuucUfguuUfcugasgsuAu 847 154
1533-CfinAS dTsGfsacaccUfgAfuucUfgUfuUfcUfgAfsgsuAu 848 110
AM05490-AS usGfsasGfaAfuGfaGfcCfuCfgAfuAfausu 1262 177
AM05492-AS cPrpTMsCfsgsUfaUfaAfCfAfaUfaAfgGfgGfcusu 1263 178
AM05493-AS cPrpTMsCfsgsUfaUfaAfcAfaUfaAfgGfgGfcusu 1264 178
AM05495-AS usCfsguauaaCfaaUfaAfgggGfcugCfscsuAu 1265 156
AM05496-AS usCfsguaUfaaCfaaUfaAfgggGfcugCfscsuAu 1266 156
AM05497-AS usCfsgUfaUfaacaaUfaAfgGfgGfcsUfsu 1267 164
AM05498-AS usCfsgsUfaUfaAfCfAfaUfaAfgGfgGfcusu 1268 164
表2B.具有經修飾之核苷酸之LPA RNAi劑有義股。
有義股ID SS序列5'→3' SEQ ID NO. SEQ ID NO.
AM01173-SS AfcGfcAfgAfaGfgGfaCfuGfcCfgAf(invdT) 849 190
AM01174-SS GfgGfgUfgCfaGfgAfgUfgCfuAfcAf(invdT) 850 191
AM01175-SS CfuGfuGfgCfaGfcCfcCfuUfaUfuAf(invdT) 851 192
AM01176-SS GfgCfaGfcCfcCfuUfaUfuGfuUfaAf(invdT) 852 193
AM01177-SS AfgCfcCfcUfuAfuUfgUfuAfuAfcAf(invdT) 853 194
AM01178-SS GfcCfcCfuUfaUfuGfuUfaUfaCfgAf(invdT) 854 195
AM01179-SS UfgAfcAfcAfaUfgCfuCfaGfaCfgAf(invdT) 855 196
AM01180-SS GfaCfaCfaAfuGfcUfcAfgAfcGfcAf(invdT) 856 197
AM01181-SS AfcAfcAfaUfgCfuCfaGfaCfgCfaAf(invdT) 857 198
AM01182-SS AfcAfaUfgCfuCfaGfaCfgCfaGfaAf(invdT) 858 199
AM01183-SS CfuGfcCfgAfaAfuCfcAfgAfuCfcAf(invdT) 859 200
AM01184-SS GfcCfgAfaAfuCfcAfgAfuCfcUfgAf(invdT) 860 201
AM01185-SS UfgAfcAfcGfaUfgCfuCfaGfaUfgAf(invdT) 861 202
AM01186-SS GfaCfaCfgAfuGfcUfcAfgAfuGfcAf(invdT) 862 203
AM01187-SS AfcAfcGfaUfgCfuCfaGfaUfgCfaAf(invdT) 863 204
AM01188-SS AfcGfaUfgCfuCfaGfaUfgCfaGfaAf(invdT) 864 205
AM01189-SS UfcCfaAfgCfcUfaGfaGfgCfuUfuAf(invdT) 865 206
AM01190-SS AfgGfaAfaCfcCfcCfgGfgGfuAfcAf(invdT) 866 207
AM01191-SS GfgAfaAfcCfcCfcGfgGfgUfaCfaAf(invdT) 867 208
AM01192-SS GfaAfaCfcCfcCfgGfgGfuAfcAfgAf(invdT) 868 209
AM01193-SS UfgCfuAfcUfaCfcAfuUfaUfgGfaAf(invdT) 869 210
AM01194-SS GfcUfaCfuAfcCfaUfuAfuGfgAfcAf(invdT) 870 211
AM01195-SS CfuAfcCfaUfuAfuGfgAfcAfgAfgAf(invdT) 871 212
AM01196-SS AfcCfaCfaCfcAfgCfaUfaGfuCfgAf(invdT) 872 213
AM01197-SS CfcAfcAfcCfaGfcAfuAfgUfcGfgAf(invdT) 873 214
AM01198-SS CfaCfaCfcAfgCfaUfaGfuCfgGfaAf(invdT) 874 215
AM01199-SS CfaCfcAfgCfaUfaGfuCfgGfaCfcAf(invdT) 875 216
AM01200-SS AfuAfgUfcGfgAfcCfcCfaGfaAfaAf(invdT) 876 217
AM01201-SS UfaGfuCfgGfaCfcCfcAfgAfaAfaAf(invdT) 877 218
AM01202-SS CfcAfgAfuGfcUfgAfgAfuUfcGfcAf(invdT) 878 219
AM01203-SS GfcUfgAfgAfuUfcGfcCfcUfuGfgAf(invdT) 879 220
AM01204-SS CfuGfaGfaUfuCfgCfcCfuUfgGfuAf(invdT) 880 221
AM01205-SS UfgAfgAfuUfcGfcCfcUfuGfgUfgAf(invdT) 881 222
AM01206-SS GfaGfaUfuCfgCfcCfuUfgGfuGfuAf(invdT) 882 223
AM01207-SS AfuGfgAfuCfcCfaGfuGfuCfaGfgAf(invdT) 883 224
AM01208-SS GfaAfuCfaAfgUfgUfcCfuUfgCfaAf(invdT) 884 225
AM01209-SS AfaUfcAfaGfuGfuCfcUfuGfcAfaAf(invdT) 885 226
AM01210-SS GfaAfgCfaCfcAfaCfgGfaGfcAfaAf(invdT) 886 227
AM01211-SS GfaGfuUfaUfcGfaGfgCfuCfaUfuAf(invdT) 887 228
AM01212-SS AfgUfuAfuCfgAfgGfcUfcAfuUfcAf(invdT) 888 229
AM01213-SS GfaCfaAfcAfgAfaUfaUfuAfuCfcAf(invdT) 889 230
AM01214-SS CfuUfgGfuGfuUfaUfaCfcAfuGfgAf(invdT) 890 231
AM01215-SS GfgUfgUfuAfuAfcCfaUfgGfaUfcAf(invdT) 891 232
AM01216-SS UfaUfaCfcAfuGfgAfuCfcCfaAfuAf(invdT) 892 233
AM01217-SS AfuAfcCfaUfgGfaUfcCfcAfaUfgAf(invdT) 893 234
AM01218-SS UfaCfcAfuGfgAfuCfcCfaAfuGfuAf(invdT) 894 235
AM01219-SS AfcCfaUfgGfaUfcCfcAfaUfgUfcAf(invdT) 895 236
AM01220-SS GfcAfaCfcUfgAfcAfcAfaUfgUfcAf(invdT) 896 237
AM01221-SS CfuGfaCfaCfaAfuGfuCfcAfgUfgAf(invdT) 897 238
AM01222-SS CfcAfgUfgAfcAfgAfaUfcAfaGfuAf(invdT) 898 239
AM01223-SS UfuAfuCfgAfgGfcUfcAfuUfcUfcAf(invdT) 899 240
AM01224-SS AfgAfaUfaCfuAfcCfcAfaAfuGfgAf(invdT) 900 241
AM01225-SS AfaUfaCfuAfcCfcAfaAfuGfgUfgAf(invdT) 901 242
AM01226-SS AfuAfcUfaCfcCfaAfaUfgGfuGfgAf(invdT) 902 243
AM01227-SS AfuUfcGfcCfcUfuGfgUfgUfuAfuAf(invdT) 903 244
AM01228-SS UfaUfaCfcAfuGfgAfuCfcCfaGfuAf(invdT) 904 245
AM01229-SS AfuAfcCfaUfgGfaUfcCfcAfgUfgAf(invdT) 905 246
AM01230-SS CfaCfaAfcUfcCfcAfcGfgUfgGfuAf(invdT) 906 247
AM01231-SS AfaGfaAfcAfuGfuCfaGfuCfuUfgAf(invdT) 907 248
AM01232-SS AfgUfgUfcCfuCfaCfaAfcUfcCfcAf(invdT) 908 249
AM01233-SS AfaCfaAfgCfaCfcAfcCfuGfaGfaAf(invdT) 909 250
AM01234-SS CfcUfgAfgAfaAfaGfcCfcUfgUfgAf(invdT) 910 251
AM01235-SS UfgAfuAfcCfaCfaCfuGfgCfaUfcAf(invdT) 911 252
AM01236-SS GfaUfaCfcAfcAfcUfgGfcAfuCfaAf(invdT) 912 253
AM01237-SS GfaAfaCfaGfaAfuCfaGfgUfgUfcAf(invdT) 913 254
AM01238-SS AfaAfcAfgAfaUfcAfgGfuGfuCfcAf(invdT) 914 255
AM01239-SS CfaGfaAfuCfaGfgUfgUfcCfuAfgAf(invdT) 915 256
AM01795-SS CfcUfgUfgGfcAfgCfcCfcUfuAfuAf(invdT) 916 257
AM01797-SS UfgGfcAfgCfcCfcUfuAfuUfgUfuAf(invdT) 917 258
AM01799-SS AfcAfcCfaGfcAfuAfgUfcGfgAfcAf(invdT) 918 259
AM01801-SS GfgAfaUfcCfaGfaUfgCfuGfaGfaAf(invdT) 919 260
AM01803-SS UfcCfaGfaUfgCfuGfaGfaUfuCfgAf(invdT) 920 261
AM01805-SS AfuGfcUfgAfgAfuUfcGfcCfcUfuAf(invdT) 921 262
AM01807-SS CfcAfuGfgAfuCfcCfaGfuGfuCfaAf(invdT) 922 263
AM01809-SS CfuGfaAfgAfaGfcAfcCfaAfcGfgAf(invdT) 923 264
AM01811-SS UfcCfaGfuGfaCfaGfaAfuCfaAfgAf(invdT) 924 265
AM01813-SS CfuCfaCfaAfcUfcCfcAfcGfgUfgAf(invdT) 925 266
AM01815-SS AfgAfaUfcAfgGfuGfuCfcUfaGfaAf(invdT) 926 267
AM01817-SS UfcAfgGfuGfuCfcUfaGfaGfaCfuAf(invdT) 927 268
AM02006-SS (Chol-TEG)uAuAfgCfcCfcUfUfAfuUfgUfuAfuAfcAf(invdT) 928 269
AM02010-SS (Chol-TEG)uAuGfcCfcCfuUfAfUfuGfuUfaUfaCfgAf(invdT) 929 270
AM02014-SS (Chol-TEG)uAuGfaCfaCfaAfUfGfcUfcAfgAfcGfcAf(invdT) 930 271
AM02018-SS (Chol-TEG)uAuAfcAfcAfaUfGfCfuCfaGfaCfgCfaAf(invdT) 931 272
AM02022-SS (Chol-TEG)uAuUfuAfuCfgAfGfGfcUfcAfuUfcUfcAf(invdT) 932 273
AM02026-SS (Chol-TEG)uAuGfaAfaCfaGfAfAfuCfaGfgUfgUfcAf(invdT) 933 274
AM02030-SS (Chol-TEG)uAuAfcAfcCfaGfCfAfuAfgUfcGfgAfcAf(invdT) 934 275
AM02034-SS (Chol-TEG)uAuUfcCfaGfaUfGfCfuGfaGfaUfuCfgAf(invdT) 935 276
AM02038-SS (Chol-TEG)uAuAfuGfcUfgAfgAfuUfcGfcCfcUfuAf(invdT) 936 277
AM02042-SS (Chol-TEG)uAuCfcAfuGfgAfUfCfcCfaGfuGfuCfaAf(invdT) 937 278
AM02211-SS UfgUfgGfcAfGfCfcCfcUfuAfuUfgAf(invdT) 938 279
AM02212-SS CfaCfaAfuGfCfUfcAfgAfcGfcAfgAf(invdT) 939 280
AM02213-SS CfcGfaAfaUfCfCfaGfaUfcCfuGfuAf(invdT) 940 281
AM02214-SS GfaCfuGfaGfGfAfaAfcCfcCfcGfgAf(invdT) 941 282
AM02215-SS CfuAfcUfaCfCfAfuUfaUfgGfaCfaAf(invdT) 942 283
AM02216-SS AfcUfaCfcAfUfUfaUfgGfaCfaGfaAf(invdT) 943 284
AM02217-SS UfaCfcAfuUfAfUfgGfaCfaGfaGfuAf(invdT) 944 285
AM02218-SS AfcCfaUfuAfUfGfgAfcAfgAfgUfuAf(invdT) 945 286
AM02219-SS AfgAfuGfcUfGfAfgAfuUfcGfcCfcAf(invdT) 946 287
AM02220-SS GfaUfgCfuGfAfGfaUfuCfgCfcCfuAf(invdT) 947 288
AM02221-SS AfgAfuUfcGfCfCfcUfuGfgUfgUfuAf(invdT) 948 289
AM02222-SS GfaCfaGfaAfUfCfaAfgUfgUfcCfuAf(invdT) 949 290
AM02223-SS AfcAfuGfuCfAfGfuCfuUfgGfuCfcAf(invdT) 950 291
AM02224-SS CfcAfaAfuGfGfUfgGfcCfuGfaCfcAf(invdT) 951 292
AM02225-SS UfgGfuGfuUfAfUfaCfcAfuGfgAfuAf(invdT) 952 293
AM02226-SS UfgUfuAfuAfCfCfaUfgGfaUfcCfcAf(invdT) 953 294
AM02227-SS AfaCfcUfgAfCfAfcAfaUfgUfcCfaAf(invdT) 954 295
AM02228-SS AfaUfgUfcCfAfGfuGfaCfaGfaAfuAf(invdT) 955 296
AM02229-SS UfgUfuUfcUfGfAfaCfaAfgCfaCfcAf(invdT) 956 297
AM02230-SS UfaUfcGfaGfGfCfuCfaUfuCfuCfcAf(invdT) 957 298
AM02231-SS UfcGfaGfgCfUfCfaUfuCfuCfcAfcAf(invdT) 958 299
AM02232-SS UfcCfuCfaCfAfAfcUfcCfcAfcGfgAf(invdT) 959 300
AM02233-SS CfaAfcUfcCfCfAfcGfgUfgGfuCfcAf(invdT) 960 301
AM02234-SS GfcUfcCfuUfCfUfgAfaCfaAfgCfaAf(invdT) 961 302
AM02235-SS AfuAfcCfaCfAfCfuGfgCfaUfcAfgAf(invdT) 962 303
AM02236-SS AfcAfgAfaUfCfAfgGfuGfuCfcUfaAf(invdT) 963 304
AM02237-SS GfaAfuCfaGfGfUfgUfcCfuAfgAfgAf(invdT) 964 305
AM02238-SS AfaUfcAfgGfUfGfuCfcUfaGfaGfaAf(invdT) 965 306
AM02239-SS AfuCfaGfgUfGfUfcCfuAfgAfgAfcAf(invdT) 966 307
AM02441-SS uAuAusAfsgUfuAfuCfgAfgGfcUfcAfuUfcUfcAf(C6-SS-Alk-Me) 967 308
AM02442-SS uAuAusAfsgUfuAfuCfgaGfGfcUfcAfuUfcUfcAf(C6-SS-Alk-Me) 968 308
AM02443-SS uAuAusAfsgUfuAfuCfGfaGfGfcUfcAfuUfcUfcAf(C6-SS-Alk-Me) 969 308
AM02444-SS uAuAusasGfuUfaUfcGfaGfGfcUfcAfuUfcUfcAf(C6-SS-Alk-Me) 970 308
AM02445-SS uAuAusCfsaGfaAfaCfaGfaAfuCfaGfgUfgUfcAf(C6-SS-Alk-Me) 971 309
AM02446-SS uAuAusCfsaGfaAfaCfagAfAfuCfaGfgUfgUfcAf(C6-SS-Alk-Me) 972 309
AM02447-SS uAuAusCfsaGfaAfaCfAfgAfAfuCfaGfgUfgUfcAf(C6-SS-Alk-Me) 973 309
AM02448-SS uAuAuscsAfgAfaAfcAfgAfAfuCfaGfgUfgUfcAf(C6-SS-Alk-Me) 974 309
AM02537-SS uAuAusCfsaGfcCfcCfuUfAfUfuGfuUfaUfaCfgAf(C11-PEG3-NAG3) 975 310
AM02538-SS uAuAusCfsuGfaCfaCfaAfUfGfcUfcAfgAfcGfcAf(C11-PEG3-NAG3) 976 311
AM02539-SS uAuAusUfsgAfcAfcAfaUfGfCfuCfaGfaCfgCfaAf(C11-PEG3-NAG3) 977 312
AM02540-SS uAuAusAfsgUfuAfuCfgAfGfGfcUfcAfuUfcUfcAf(C11-PEG3-NAG3) 978 308
AM02541-SS uAuAusCfsaGfaAfaCfaGfAfAfuCfaGfgUfgUfcAf(C11-PEG3-NAG3) 979 309
AM02542-SS uAuAusAfsgAfuGfcUfgAfGfAfuUfcGfcCfcUfuAf(C11-PEG3-NAG3) 980 313
AM02793-SS gsCfsaGfcCfcCfuUfaUfuGfuUfa(invdA) 981 314
AM02794-SS gsCfscCfcUfuAfuUfgUfuAfuAfc(invdA) 982 315
AM02795-SS csCfscCfuUfaUfuGfuUfaUfaCfg(invdA) 983 316
AM02796-SS asCfsaCfaAfuGfcUfcAfgAfcGfc(invdA) 984 317
AM02797-SS csAfscAfaUfgCfuCfaGfaCfgCfa(invdA) 985 318
AM02798-SS csCfsgAfaAfuCfcAfgAfuCfcUfg(invdA) 986 319
AM02799-SS csAfscGfaUfgCfuCfaGfaUfgCfa(invdA) 987 320
AM02800-SS csCfsaCfaCfcAfgCfaUfaGfuCfg(invdA) 988 321
AM02801-SS usAfsgUfcGfgAfcCfcCfaGfaAfa(invdA) 989 322
AM02802-SS csAfsgAfuGfcUfgAfgAfuUfcGfc(invdA) 990 323
AM02803-SS asAfsuCfaAfgUfgUfcCfuUfgCfa(invdA) 991 324
AM02804-SS asGfsuUfaUfcGfaGfgCfuCfaUfu(invdA) 992 325
AM02805-SS gsUfsuAfuCfgAfgGfcUfcAfuUfc(invdA) 993 326
AM02806-SS csAfsaCfcUfgAfcAfcAfaUfgUfc(invdA) 994 327
AM02807-SS usAfsuCfgAfgGfcUfcAfuUfcUfc(invdA) 995 328
AM02808-SS gsAfsaUfaCfuAfcCfcAfaAfuGfg(invdA) 996 329
AM02809-SS asUfsaCfuAfcCfcAfaAfuGfgUfg(invdA) 997 330
AM02810-SS asAfsaCfaGfaAfuCfaGfgUfgUfc(invdA) 998 331
AM02811-SS asAfscAfgAfaUfcAfgGfuGfuCfc(invdA) 999 332
AM02812-SS CfsasGfcCfcCfuUfaUfuGfuUfa(invdA) 1000 333
AM02813-SS CfscsCfcUfuAfuUfgUfuAfuAfc(invdA) 1001 334
AM02814-SS CfscsCfuUfaUfuGfuUfaUfaCfg(invdA) 1002 335
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AM03243-SS uAuAusasguuaucgAfGfGfcucauucuca(C11-PEG3-NAG3) 1081 308
AM03424-SS (Chol-TEG)uAuAusasguuaucgaGfGfcucauucuc(invdA) 1082 308
AM03425-SS (Chol-TEG)uAuAusasguuaucgaGfGfcucauucuca 1083 308
AM03426-SS (Chol-TEG)uAuAusAfgUfuAfuCfgAfGfGfcUfcAfuUfcUfc(invdA) 1084 308
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AM03545-SS uAuAuscsagccccuuAfUfuGfuuauacga(NAG13) 1094 310
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AM03547-SS uAuAusAfsgUfuAfuCfgAfGfGfcUfcAfuUfcUfcAf(NAG13) 1096 308
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AM03743-SS CMsCMsccUfUfAfuuguuauaCMAM(NAG13) 1103 334
AM03746-SS cscscuUfAfUfuguuauacga(NAG13) 1104 335
AM03747-SS cscscuUfAfUfuguuauacGMAM(NAG13) 1105 335
AM03748-SS CMsCMscuUfAfUfuguuauacGMAM(NAG13) 1106 335
AM03751-SS asuscgAfGfGfcucauucuca(NAG13) 1107 347
AM03752-SS asuscgAfGfGfcucauucuCMAM(NAG13) 1108 347
AM03753-SS AMsTMscgAfGfGfcucauucuCMAM(NAG13) 1109 353
AM03757-SS asascaGfAfAfucagguguca(NAG13) 1110 350
AM03758-SS asascaGfAfAfucagguguCMAM(NAG13) 1111 350
AM03759-SS AMsAMscaGfAfAfucagguguCMAM(NAG13) 1112 350
AM03859-SS (NAG18)uauausasguuaucgAfGfGfcucauucuc(invdA) 1113 308
AM03861-SS (NAG18)uauauscsaGfcCfcCfuUfAfUfuGfuUfaUfaCfg(invdA) 1114 310
AM03879-SS (NAG4)uscaGfcCfcCfuUfAfUfuGfuUfaUfaCfgausu(invAb) 1115 354
AM03880-SS (NAG4)uscaGfcCfcCfuUfAfUfuGfuUfaUfaCfgsa(invAb) 1116 355
AM03881-SS (NAG24)uscaGfcCfcCfuUfAfUfuGfuUfaUfaCfgausu(invAb) 1117 354
AM03882-SS (NAG4)usaguuaucgAfGfGfcucauucucausu(invAb) 1118 356
AM03928-SS uAuAuscsagcccCfuUfAfUfuguuauacga(NAG13) 1119 310
AM03931-SS uAuAusasguuauCfgAfGfGfcucauucuca(NAG13) 1120 308
AM03968-SS (NAG4)uauauscaGfcCfcCfuUfAfUfuGfuUfaUfaCfgs(invdA) 1121 310
AM03970-SS (NAG4)(invAb)GfcCfcCfuUfAfUfuGfuUfaUfaCfgausu(invAb) 1122 357
AM04138-SS (NAG25)uauausasguuaucgAfGfGfcucauucuc(invdA) 1123 308
AM04152-SS (Alk-PEG5-C6)uauausasguuaucgAfGfGfcucauucuCM(invdA) 1124 308
AM04214-SS (Alk-SMPT-C6)uauausasguuaucgAfGfGfcucauucuCM(invdA) 1125 308
AM04233-SS (NAG26)uauausasguuaucgAfGfGfcucauucuCM(invdA) 1126 308
AM04372-SS (NAG27)uauausasguuaucgAfGfGfcucauucuCM(invdA) 1127 308
AM04381-SS (NAG25)auauscsagccccuUfAfUfuguuauacga(invdT) 1128 358
AM04382-SS (NAG25)uauscsagccccuUfAfUfuguuauacgau(invdT) 1129 359
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AM04392-SS (NAG25)uausasguuaucgAfGfGfcucauucucau(invdT) 1131 361
AM04412-SS (NAG25)uauauscsagccccuUfAfUfuguuauacg(invdA) 1132 310
AM04414-SS (NAG25)(invAb)gccccuUfAfUfuguuauacgauus(invAb) 1133 357
AM04416-SS (NAG25)(invAb)uuaucgAfGfGfcucauucucausu(invAb) 1134 362
AM04496-SS (NAG25)(invAb)GfcCfcCfuUfAfUfuGfuUfaUfaCfgausu(invAb) 1135 357
AM04497-SS (NAG29)uauausasguuaucgAfGfGfcucauucuc(invdA) 1136 308
AM04499-SS (NAG28)(invAb)GfcCfcCfuUfAfUfuGfuUfaUfaCfgausu(invAb) 1137 357
AM04498-SS (NAG29)uauauaasuuaucgaGfGfcucauucucsa(invAb) 1138 363
AM04500-SS (NAG30)(invAb)GfcCfcCfuUfAfUfuGfuUfaUfaCfgausu(invAb) 1139 357
AM04502-SS (NAG25)uauauaasuuaucgaGfGfcucauucucsa(invAb) 1140 363
AM04535-SS (NAG25)uauaucsasgccccuUfAfUfuguuauacg(invdA) 1141 310
AM04536-SS (NAG25)uauaucasgccccuUfAfUfuguuauacg(invdA) 1142 310
AM04537-SS (NAG25)uauauasgsuuaucgAfGfGfcucauucuc(invdA) 1143 308
AM04538-SS (NAG25)uauauagsuuaucgAfGfGfcucauucuc(invdA) 1144 308
AM04543-SS (NAG30)uscaGfcCfcCfuUfAfUfuGfuUfaUfaCfgsa(invAb) 1145 355
AM04578-SS (NAG25)ggcsagccccuUfAfUfuguuauacgAMs(invdT)dT 1146 364
AM04588-SS (NAG25)ggcsagccccuUfAfUfuguuauacgAMsuu(invdT) 1147 365
AM04579-SS (NAG25)G UNAgcsagccccuUfAfUfuguuauacgAMs(invdT)dT 1148 364
AM04580-SS (NAG25)ggcs(invdA)gccccuUfAfUfuguuauacgAMs(invdT)dT 1149 364
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AM04675-SS (NAG25)uaua(invdA)sasguuaucgAfGfGfcucauucuc(invdA) 1159 370
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AM04726-SS (NAG30)aGfcCfcCfuUfAfUfuGfuUfaUfaCfgsa(invAb) 1161 371
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AM04728-SS (NAG30)sasGfcCfcCfuUfAfUfuGfuUfaUfaCfgas(invAb) 1163 371
AM04729-SS (NAG30)gscaGfcCfcCfuUfAfUfuGfuUfaUfaCfgsa(invAb) 1164 373
AM04737-SS (NAG25)uauauagsuuaucgaGfGfcucauucucsa(invAb) 1165 374
AM04741-SS (NAG30)sgscaGfcCfcCfuUfAfUfuGfuUfaUfaCfgsa(invAb) 1166 373
AM04742-SS (NAG33)(invAb)GfcCfcCfuUfAfUfuGfuUfaUfaCfgausu(invAb) 1167 357
AM04743-SS (NAG34)(invAb)GfcCfcCfuUfAfUfuGfuUfaUfaCfgausu(invAb) 1168 357
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AM04803-SS (NAG30)acGfcCfcCfuUfAfUfuGfuUfaUfaCfgsa(invAb) 1170 375
AM04804-SS (NAG30)sasaGfcCfcCfuUfAfUfuGfuUfaUfaCfgas(invAb) 1171 372
AM04807-SS (NAG30)sascGfcCfcCfuUfAfUfuGfuUfaUfaCfgas(invAb) 1172 375
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AM04808-SS (NAG31)sGfcCfcCfuUfAfUfuGfuUfaUfaCfgausu(invAb) 1174 376
AM04809-SS (NAG31)saGfcCfcCfuUfAfUfuGfuUfaUfaCfgausu(invAb) 1175 377
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AM04812-SS (NAG31)sasaGfcCfcCfuUfAfUfuGfuUfaUfaCfg(invdA)usu(invAb) 1178 378
AM04813-SS (NAG31)uauausasguuaucgAfGfGfcucauucuc(invdA) 1179 308
AM04816-SS (NAG31)uauscsagccccuUfAfUfuguuauacgs(invdA) 1180 379
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AM04835-SS (NAG31)uaucagccccuUfAfUfuguuauacgs(invdA) 1182 379
AM04819-SS (NAG31)sgscagccccuUfAfUfuguuauacgs(invdA) 1183 381
AM04820-SS (NAG31)sgscagccccuUfAfUfuguuauacgsa(invAb) 1184 373
AM04862-SS (NAG25)auaagasguuaucgAfGfGfcucauucuc(invdA) 1185 382
AM04863-SS (NAG25)auaagsasguuaucgAfGfGfcucauucuc(invdA) 1186 382
AM04864-SS (NAG25)auaggcsagccccuUfAfUfuguuauacg(invdA) 1187 383
AM04865-SS (NAG25)auaggscsagccccuUfAfUfuguuauacg(invdA) 1188 383
AM04866-SS (NAG25)scsagccccuUfAfUfuguuauacgs(invdA) 1189 384
AM04867-SS (NAG31)scsagccccuUfAfUfuguuauacgs(invdA) 1190 384
AM04868-SS (NAG25)sgsccccuUfAfUfuguuauacgauus(invAb) 1191 376
AM04869-SS (NAG31)sgsccccuUfAfUfuguuauacgauus(invAb) 1192 376
AM04870-SS (NAG25)sGfsccccuUfAfUfuguuauacgauus(invAb) 1193 376
AM04978-SS (NAG31)sGfscCfcCfuUfAfUfuGfuUfaUfaCfgauus(invAb) 1194 376
AM05070-SS (NAG25)uauauscsagcccc(NOTA-dT)UfAfUfuguuauacg(invdA) 1195 385
AM05072-SS (NAG25)(invAb)GfcCfcCf(NOTA-dT)UfAfUfuGfuUfaUfaCfgausu(invAb) 1196 1241
1532-SS02 uAuAusAfsgUfuAfuCfgAfGfGfcucAfuucuca 1197 308
1532-SS03 uAuAusAfsgUfuAfuCfgAfGfGfcucauUfcuca 1198 308
1532-SS04 uAuAusAfsgUfuAfuCfgAfGfGfcucauucUfca 1199 308
1532-SS05 uAuAusAfsgUfuAfuCfgAfGfGfcucauucucAf 1200 308
1532-SS06 uAuAusAfsgUfuAfuCfgAfgGfcUfcauucucAf 1201 308
1532-SS07 uAuAusAfsgUfuAfuCfgAfgGfcucAfuucucAf 1202 308
1532-SS08 uAuAusAfsgUfuAfuCfgAfgGfcucauUfcucAf 1203 308
1532-SS09 uAuAusAfsgUfuAfuCfgAfgGfcucauucUfcAf 1204 308
1532-SS10 uAuAusAfsgUfuAfuCfgAfgGfcucauucucAf 1205 308
1532-SS11 uAuAusAfsgUfuAfuCfgaGfGfcucauucucAf 1206 308
1532-SS12 uAuAusAfsgUfuAfuCfgagGfcUfcauucucAf 1207 308
1532-SS13 uAuAusAfsgUfuAfuCfgagGfcucAfuucucAf 1208 308
1532-SS14 uAuAusAfsgUfuAfuCfgagGfcucauUfcucAf 1209 308
1532-SS15 uAuAusAfsgUfuAfuCfgagGfcucauucUfcAf 1210 308
1532-SS16 uAuAusAfsgUfuAfuCfgagGfcucauUfcUfcAf 1211 308
1532-SS17 uAuAusAfsgUfuauCfgAfgGfcucauUfcUfcAf 1212 308
1532-SS18 uAuAusAfsgUfuauCfgaGfGfcucauUfcUfcAf 1213 308
1532-SS19 uAuAusAfsgUfuauCfgagGfcUfcauUfcUfcAf 1214 308
1532-SS20 uAuAusAfsgUfuauCfgagGfcucAfuUfcUfcAf 1215 308
1532-SS21 uAuAusAfsgUfuauCfgagGfcUfcAfuUfcUfcAf 1216 308
1532-SS22 uAuAusAfsguuAfuCfgagGfcUfcAfuUfcUfcAf 1217 308
1532-SS23 uAuAusAfsguuauCfgAfgGfcUfcAfuUfcUfcAf 1218 308
1532-SS24 uAuAusAfsguuauCfgaGfGfcUfcAfuUfcUfcAf 1219 308
1533-CfinSS uAuAuscsaGfaAfacaGfAfAfucaGfgUfgUfcAf 1220 309
1533-SS00 uAuAusCfsaGfaAfaCfaGfAfAfuCfaGfgUfgUfcAf 1221 309
1533-SS01 uAuAusCfsaGfaAfaCfaGfAfAfuCfaGfguguca 1222 309
1533-SS02 uAuAusCfsaGfaAfaCfaGfAfAfuCfaggugUfca 1223 309
1533-SS03 uAuAusCfsaGfaAfaCfaGfAfAfuCfaggugucAf 1224 309
1533-SS04 uAuAusCfsaGfaAfaCfaGfAfAfuCfaggUfguca 1225 309
1533-SS05 uAuAusCfsaGfaAfaCfaGfaAfuCfaGfgugucAf 1226 309
1533-SS06 uAuAusCfsaGfaAfaCfaGfaAfuCfaggugUfcAf 1227 309
1533-SS07 uAuAusCfsaGfaAfaCfaGfaAfuCfaggUfgucAf 1228 309
1533-SS08 uAuAusCfsaGfaAfaCfagAfAfuCfaggugUfcAf 1229 309
1533-SS09 uAuAusCfsaGfaAfaCfagaAfuCfaggUfgUfcAf 1230 309
1533-SS10 uAuAusCfsaGfaAfaCfagaAfuCfaGfgugUfcAf 1231 309
1533-SS11 1533-SS20 uAuAusCfsaGfaaaCfagAfAfuCfaGfgUfgUfcAf 1232 309
1533-SS12 uAuAusCfsaGfaaaCfaGfaAfuCfaGfgUfgUfcAf 1233 309
1533-SS13 uAuAusCfsaGfaAfaCfagaAfuCfaGfgUfgUfcAf 1234 309
1533-SS14 uAuAusCfsaGfaaaCfagaAfuCfaGfgUfgUfcAf 1235 309
1533-SS15 uAuAusCfsagaAfaCfagaAfuCfaGfgUfgUfcAf 1236 309
1533-SS16 uAuAusCfsagaaaCfagAfAfuCfaGfgUfgUfcAf 1237 309
1533-SS17 uAuAusCfsagaaaCfaGfaAfuCfaGfgUfgUfcAf 1238 309
1533-SS18 uAuAusCfsagaaaCfaGfAfAfuCfaGfgUfgUfcAf 1239 309
1533-SS19 uAuAusCfsagaAfaCfagAfAfuCfaGfgUfgUfcAf 1240 309
AM05341-SS (NAG37)(invAb)GfcCfcCfuUfAfUfuGfuUfaUfaCfgausu(invAb) 1256 357
AM05342-SS (NAG37)scsagccccuUfAfUfuguuauacgs(invdA) 1257 381
AM05489-SS (NAG25)uauausasguuaucgAfGfGfcucauucucas(invAb) 1269 308
AM05491-SS (NAG25)(invAb)uuaucgAfGfGfcucauucucas(invAb) 1270 1258
AM05494-SS (NAG25)(invAb)GfcCfcCfuUfAfUfuGfuUfaUfaCfgas(invAb) 1271 1259
AM05499-SS (NAG25)(invAb)gccccuUfAfUfuguuauacgausu(invAb) 1272 357
AM05500-SS (NAG25)uauauscsagccccuUfAfUfuguuauacgas(invAb) 1273 310
AM05501-SS (NAG25)(invAb)gccccuUfAfUfuguuauacgas(invAb) 1274 1259
AM05502-SS (NAG25)sasagccccuUfAfUfuguuauacgs(invdA) 1275 1261
AM05503-SS (NAG25)scsagccccuUfAfUfuguuauacgas(invAb) 1276 1260
AM05504-SS (NAG25)sgsccccuUfAfUfuguuauacgas(invAb) 1277 371
AM05505-SS (NAG25)sgsccccuUfAfUfuguuauacgs(invdA) 1278 371
AM05506-SS (NAG25)sasagccccuUfAfUfuguuauacgas(invAb) 1279 1261
含有表2B中所列之序列的有義股可與含有表2A中所列之序列的任何反義股雜交,其限制條件為兩個序列在鄰接16、17、18、19、20或21核苷酸序列上具有至少90%互補之區域。代表性LPA RNAi劑由表3A及表3B中所示的雙螺旋體ID編號表示。 在一些實施例中,LPA RNAi劑包含本文中所呈現之雙螺旋體ID編號中之任一者。在一些實施例中,LPA RNAi劑由本文中所呈現之雙螺旋體ID編號中之任一者組成。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含本文中所呈現之雙螺旋體ID編號中之任一者的有義股及反義股核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含本文中所呈現之雙螺旋體ID編號中之任一者的有義股及反義股核苷酸序列及靶向基團及/或鍵聯基團,其中靶向基團及/或鍵聯基團經共價鍵聯(亦即,結合)至有義股或反義股。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含本文中所呈現之雙螺旋體ID編號中之任一者的經有義股及反義股修飾之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含本文中所呈現之雙螺旋體ID編號中之任一者的經有義股及反義股修飾之核苷酸序列及靶向基團及/或鍵聯基團,其中靶向基團及/或鍵聯基團經共價鍵聯至有義股或反義股。 表3A.具有雙螺旋體ID編號之LPA RNAi劑雙螺旋體。
雙螺旋體ID 反義股ID 有義股ID    雙螺旋體ID 反義股ID 有義股ID    雙螺旋體ID 反義股ID 有義股ID
AD00571 AM01240-AS AM01173-SS    AD02120 AM03257-AS AM03229-SS    AD02500 AM03107-AS AM03295-SS
AD00572 AM01241-AS AM01174-SS    AD02121 AM03257-AS AM03230-SS    AD02501 AM03279-AS AM03295-SS
AD00573 AM01242-AS AM01175-SS    AD02122 AM03257-AS AM03231-SS    AD02502 AM03280-AS AM03295-SS
AD00574 AM01243-AS AM01176-SS    AD02123 AM03257-AS AM03232-SS    AD02503 AM03281-AS AM03295-SS
AD00575 AM01244-AS AM01177-SS    AD02124 AM03257-AS AM03233-SS    AD02504 AM03282-AS AM03295-SS
AD00576 AM01245-AS AM01178-SS    AD02125 AM03257-AS AM03234-SS    AD02505 AM03283-AS AM03295-SS
AD00577 AM01246-AS AM01179-SS    AD02126 AM03257-AS AM03235-SS    AD02506 AM03284-AS AM03295-SS
AD00578 AM01247-AS AM01180-SS    AD02127 AM03257-AS AM03236-SS    AD02507 AM03300-AS AM03295-SS
AD00579 AM01248-AS AM01181-SS    AD02128 AM03257-AS AM03237-SS    AD02508 AM03301-AS AM03295-SS
AD00580 AM01249-AS AM01182-SS    AD02129 AM03258-AS AM03220-SS    AD02509 AM03107-AS AM03296-SS
AD00581 AM01250-AS AM01183-SS    AD02130 AM03258-AS AM03221-SS    AD02510 AM03279-AS AM03296-SS
AD00582 AM01251-AS AM01184-SS    AD02131 AM03258-AS AM03222-SS    AD02511 AM03280-AS AM03296-SS
AD00583 AM01252-AS AM01185-SS    AD02132 AM03258-AS AM03223-SS    AD02512 AM03281-AS AM03296-SS
AD00584 AM01253-AS AM01186-SS    AD02133 AM03258-AS AM03224-SS    AD02513 AM03282-AS AM03296-SS
AD00585 AM01254-AS AM01187-SS    AD02134 AM03258-AS AM03225-SS    AD02514 AM03283-AS AM03296-SS
AD00586 AM01255-AS AM01188-SS    AD02135 AM03258-AS AM03226-SS    AD02515 AM03284-AS AM03296-SS
AD00587 AM01256-AS AM01189-SS    AD02136 AM03258-AS AM03227-SS    AD02516 AM03300-AS AM03296-SS
AD00588 AM01257-AS AM01190-SS    AD02137 AM03258-AS AM03228-SS    AD02517 AM03301-AS AM03296-SS
AD00589 AM01258-AS AM01191-SS    AD02138 AM03258-AS AM03229-SS    AD02518 AM03107-AS AM03297-SS
AD00590 AM01259-AS AM01192-SS    AD02139 AM03258-AS AM03230-SS    AD02519 AM03279-AS AM03297-SS
AD00591 AM01260-AS AM01193-SS    AD02140 AM03258-AS AM03231-SS    AD02520 AM03280-AS AM03297-SS
AD00592 AM01261-AS AM01194-SS    AD02141 AM03258-AS AM03232-SS    AD02521 AM03281-AS AM03297-SS
AD00593 AM01262-AS AM01195-SS    AD02142 AM03258-AS AM03233-SS    AD02522 AM03282-AS AM03297-SS
AD00594 AM01263-AS AM01196-SS    AD02143 AM03258-AS AM03234-SS    AD02523 AM03283-AS AM03297-SS
AD00595 AM01264-AS AM01197-SS    AD02144 AM03258-AS AM03235-SS    AD02524 AM03284-AS AM03297-SS
AD00596 AM01265-AS AM01198-SS    AD02145 AM03258-AS AM03236-SS    AD02525 AM03300-AS AM03297-SS
AD00597 AM01266-AS AM01199-SS    AD02146 AM03258-AS AM03237-SS    AD02526 AM03301-AS AM03297-SS
AD00598 AM01267-AS AM01200-SS    AD02147 AM03259-AS AM03220-SS    AD02527 AM03107-AS AM03298-SS
AD00599 AM01268-AS AM01201-SS    AD02148 AM03259-AS AM03221-SS    AD02528 AM03279-AS AM03298-SS
AD00600 AM01269-AS AM01202-SS    AD02149 AM03259-AS AM03222-SS    AD02529 AM03280-AS AM03298-SS
AD00601 AM01270-AS AM01203-SS    AD02150 AM03259-AS AM03223-SS    AD02530 AM03281-AS AM03298-SS
AD00602 AM01271-AS AM01204-SS    AD02151 AM03259-AS AM03224-SS    AD02531 AM03282-AS AM03298-SS
AD00603 AM01272-AS AM01205-SS    AD02152 AM03259-AS AM03225-SS    AD02532 AM03283-AS AM03298-SS
AD00604 AM01273-AS AM01206-SS    AD02153 AM03259-AS AM03226-SS    AD02533 AM03284-AS AM03298-SS
AD00605 AM01274-AS AM01207-SS    AD02154 AM03259-AS AM03227-SS    AD02534 AM03300-AS AM03298-SS
AD00606 AM01275-AS AM01208-SS    AD02155 AM03259-AS AM03228-SS    AD02535 AM03301-AS AM03298-SS
AD00607 AM01276-AS AM01209-SS    AD02156 AM03259-AS AM03229-SS    AD02536 AM03107-AS AM03299-SS
AD00608 AM01277-AS AM01210-SS    AD02157 AM03259-AS AM03230-SS    AD02537 AM03279-AS AM03299-SS
AD00609 AM01278-AS AM01211-SS    AD02158 AM03259-AS AM03231-SS    AD02538 AM03280-AS AM03299-SS
AD00610 AM01279-AS AM01212-SS    AD02159 AM03259-AS AM03232-SS    AD02539 AM03281-AS AM03299-SS
AD00611 AM01280-AS AM01213-SS    AD02160 AM03259-AS AM03233-SS    AD02540 AM03282-AS AM03299-SS
AD00612 AM01281-AS AM01214-SS    AD02161 AM03259-AS AM03234-SS    AD02541 AM03283-AS AM03299-SS
AD00613 AM01282-AS AM01215-SS    AD02162 AM03259-AS AM03235-SS    AD02542 AM03284-AS AM03299-SS
AD00614 AM01283-AS AM01216-SS    AD02163 AM03259-AS AM03236-SS    AD02543 AM03300-AS AM03299-SS
AD00615 AM01284-AS AM01217-SS    AD02164 AM03259-AS AM03237-SS    AD02544 AM03301-AS AM03299-SS
AD00616 AM01285-AS AM01218-SS    AD02165 AM03260-AS AM03220-SS    AD02545 AM03301-AS AM03277-SS
AD00617 AM01286-AS AM01219-SS    AD02166 AM03260-AS AM03221-SS    AD02546 AM03107-AS AM03275-SS
AD00618 AM01287-AS AM01220-SS    AD02167 AM03260-AS AM03222-SS    AD02547 AM03107-AS AM03276-SS
AD00619 AM01288-AS AM01221-SS    AD02168 AM03260-AS AM03223-SS    AD02548 AM03107-AS AM03277-SS
AD00620 AM01289-AS AM01222-SS    AD02169 AM03260-AS AM03224-SS    AD02549 AM03107-AS AM03278-SS
AD00621 AM01290-AS AM01223-SS    AD02170 AM03260-AS AM03225-SS    AD02550 AM03107-AS AM03287-SS
AD00622 AM01291-AS AM01224-SS    AD02171 AM03260-AS AM03226-SS    AD02551 AM03107-AS AM03288-SS
AD00623 AM01292-AS AM01225-SS    AD02172 AM03260-AS AM03227-SS    AD02552 AM03107-AS AM03289-SS
AD00624 AM01293-AS AM01226-SS    AD02173 AM03260-AS AM03228-SS    AD02553 AM03107-AS AM03290-SS
AD00625 AM01294-AS AM01227-SS    AD02174 AM03260-AS AM03229-SS    AD02554 AM03279-AS AM02537-SS
AD00626 AM01295-AS AM01228-SS    AD02175 AM03260-AS AM03230-SS    AD02555 AM03280-AS AM02537-SS
AD00627 AM01296-AS AM01229-SS    AD02176 AM03260-AS AM03231-SS    AD02556 AM03281-AS AM02537-SS
AD00628 AM01297-AS AM01230-SS    AD02177 AM03260-AS AM03232-SS    AD02557 AM03282-AS AM02537-SS
AD00629 AM01298-AS AM01231-SS    AD02178 AM03260-AS AM03233-SS    AD02558 AM03283-AS AM02537-SS
AD00630 AM01299-AS AM01232-SS    AD02179 AM03260-AS AM03234-SS    AD02559 AM03284-AS AM02537-SS
AD00631 AM01300-AS AM01233-SS    AD02180 AM03260-AS AM03235-SS    AD02560 AM03300-AS AM02537-SS
AD00632 AM01301-AS AM01234-SS    AD02181 AM03260-AS AM03236-SS    AD02561 AM03301-AS AM02537-SS
AD00633 AM01302-AS AM01235-SS    AD02182 AM03260-AS AM03237-SS    AD02609 AM03375-AS AM03277-SS
AD00634 AM01303-AS AM01236-SS    AD02183 AM03261-AS AM03220-SS    AD02610 AM03376-AS AM03277-SS
AD00635 AM01304-AS AM01237-SS    AD02184 AM03261-AS AM03221-SS    AD02611 AM03375-AS AM03278-SS
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AD00637 AM01306-AS AM01239-SS    AD02186 AM03261-AS AM03223-SS    AD02613 AM03375-AS AM03289-SS
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AD01977 AM03120-AS AM02540-SS    AD02409 AM03273-AS AM03230-SS    AD03677 AM02860-AS AM04675-SS
AD01978 AM03121-AS AM02540-SS    AD02410 AM03273-AS AM03231-SS    AD03678 AM02860-AS AM04676-SS
AD01979 AM02857-AS AM03122-SS    AD02411 AM03273-AS AM03232-SS    AD03705 AM04501-AS AM04726-SS
AD01980 AM02857-AS AM03123-SS    AD02412 AM03273-AS AM03233-SS    AD03706 AM04501-AS AM04727-SS
AD01981 AM03119-AS AM03122-SS    AD02413 AM03273-AS AM03234-SS    AD03707 AM04501-AS AM04728-SS
AD01982 AM02857-AS AM03124-SS    AD02414 AM03273-AS AM03235-SS    AD03708 AM04544-AS AM04729-SS
AD01983 AM03107-AS AM02537-SS    AD02415 AM03273-AS AM03236-SS    AD03713 AM04733-AS AM04138-SS
AD01984 AM03108-AS AM02537-SS    AD02416 AM03273-AS AM03237-SS    AD03714 AM04734-AS AM04138-SS
AD01985 AM03107-AS AM03125-SS    AD02417 AM03274-AS AM03220-SS    AD03715 AM04735-AS AM04138-SS
AD01986 AM03107-AS AM03126-SS    AD02418 AM03274-AS AM03221-SS    AD03716 AM04736-AS AM04138-SS
AD01987 AM03127-AS AM02537-SS    AD02419 AM03274-AS AM03222-SS    AD03717 AM02860-AS AM04737-SS
AD01988 AM03129-AS AM03128-SS    AD02420 AM03274-AS AM03223-SS    AD03720 AM03884-AS AM04741-SS
AD01989 AM03130-AS AM02540-SS    AD02421 AM03274-AS AM03224-SS    AD03721 AM03972-AS AM04742-SS
AD01990 AM03131-AS AM02540-SS    AD02422 AM03274-AS AM03225-SS    AD03722 AM03972-AS AM04743-SS
AD02001 AM02860-AS AM02942-SS    AD02423 AM03274-AS AM03226-SS    AD03723 AM03972-AS AM04744-SS
AD02002 AM02857-AS AM03144-SS    AD02424 AM03274-AS AM03227-SS    AD03760 AM04805-AS AM04803-SS
AD02003 AM03149-AS AM02540-SS    AD02425 AM03274-AS AM03228-SS    AD03761 AM04501-AS AM04804-SS
AD02004 AM03149-AS AM02941-SS    AD02426 AM03274-AS AM03229-SS    AD03762 AM04805-AS AM04807-SS
AD02005 AM03149-AS AM02942-SS    AD02427 AM03274-AS AM03230-SS    AD03763 AM03884-AS AM04729-SS
AD02006 AM03150-AS AM02540-SS    AD02428 AM03274-AS AM03231-SS    AD03764 AM03884-AS AM04806-SS
AD02007 AM03150-AS AM02941-SS    AD02429 AM03274-AS AM03232-SS    AD03765 AM04501-AS AM04611-SS
AD02008 AM03150-AS AM02942-SS    AD02430 AM03274-AS AM03233-SS    AD03766 AM04501-AS AM04808-SS
AD02009 AM03151-AS AM02540-SS    AD02431 AM03274-AS AM03234-SS    AD03767 AM04501-AS AM04809-SS
AD02010 AM03151-AS AM02941-SS    AD02432 AM03274-AS AM03235-SS    AD03768 AM04501-AS AM04810-SS
AD02011 AM03151-AS AM02942-SS    AD02433 AM03274-AS AM03236-SS    AD03769 AM04501-AS AM04811-SS
AD02075 AM03255-AS AM03220-SS    AD02434 AM03274-AS AM03237-SS    AD03770 AM04501-AS AM04812-SS
AD02076 AM03255-AS AM03221-SS    AD02435 AM03255-AS AM03238-SS    AD03771 AM02860-AS AM04813-SS
AD02077 AM03255-AS AM03222-SS    AD02436 AM03256-AS AM03238-SS    AD03801 AM04821-AS AM04816-SS
AD02078 AM03255-AS AM03223-SS    AD02437 AM03255-AS AM03240-SS    AD03802 AM04822-AS AM04817-SS
AD02079 AM03255-AS AM03224-SS    AD02438 AM03256-AS AM03240-SS    AD03803 AM04823-AS AM04816-SS
AD02080 AM03255-AS AM03225-SS    AD02439 AM03255-AS AM02942-SS    AD03804 AM04821-AS AM04835-SS
AD02081 AM03255-AS AM03226-SS    AD02440 AM03256-AS AM02942-SS    AD03805 AM04824-AS AM04819-SS
AD02082 AM03255-AS AM03227-SS    AD02462 AM02857-AS AM03330-SS    AD03806 AM04824-AS AM04820-SS
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AD02089 AM03255-AS AM03234-SS    AD02469 AM03283-AS AM03291-SS    AD03847 AM04874-AS AM04866-SS
AD02090 AM03255-AS AM03235-SS    AD02470 AM03284-AS AM03291-SS    AD03848 AM04874-AS AM04867-SS
AD02091 AM03255-AS AM03236-SS    AD02471 AM03300-AS AM03291-SS    AD03849 AM04875-AS AM04867-SS
AD02092 AM03255-AS AM03237-SS    AD02472 AM03301-AS AM03291-SS    AD03850 AM04876-AS AM04866-SS
AD02093 AM03256-AS AM03220-SS    AD02473 AM03107-AS AM03292-SS    AD03851 AM04877-AS AM04866-SS
AD02094 AM03256-AS AM03221-SS    AD02474 AM03279-AS AM03292-SS    AD03852 AM04877-AS AM04867-SS
AD02095 AM03256-AS AM03222-SS    AD02475 AM03280-AS AM03292-SS    AD03853 AM04874-AS AM04868-SS
AD02096 AM03256-AS AM03223-SS    AD02476 AM03281-AS AM03292-SS    AD03854 AM04874-AS AM04869-SS
AD02097 AM03256-AS AM03224-SS    AD02477 AM03282-AS AM03292-SS    AD03855 AM04875-AS AM04869-SS
AD02098 AM03256-AS AM03225-SS    AD02478 AM03283-AS AM03292-SS    AD03856 AM04874-AS AM04870-SS
AD02099 AM03256-AS AM03226-SS    AD02479 AM03284-AS AM03292-SS    AD03857 AM03972-AS AM04808-SS
AD02100 AM03256-AS AM03227-SS    AD02480 AM03300-AS AM03292-SS    AD03858 AM03972-AS AM04811-SS
AD02101 AM03256-AS AM03228-SS    AD02481 AM03301-AS AM03292-SS    AD03859 AM04822-AS AM04819-SS
AD02102 AM03256-AS AM03229-SS    AD02482 AM03107-AS AM03293-SS    AD03860 AM04878-AS AM04819-SS
AD02103 AM03256-AS AM03230-SS    AD02483 AM03279-AS AM03293-SS    AD03861 AM04878-AS AM04820-SS
AD02104 AM03256-AS AM03231-SS    AD02484 AM03280-AS AM03293-SS    AD03862 AM04879-AS AM04138-SS
AD02105 AM03256-AS AM03232-SS    AD02485 AM03281-AS AM03293-SS    AD03863 AM04879-AS AM04863-SS
AD02106 AM03256-AS AM03233-SS    AD02486 AM03282-AS AM03293-SS    AD03864 AM04880-AS AM04138-SS
AD02107 AM03256-AS AM03234-SS    AD02487 AM03283-AS AM03293-SS    AD03920 AM04969-AS AM04138-SS
AD02108 AM03256-AS AM03235-SS    AD02488 AM03284-AS AM03293-SS    AD03921 AM04970-AS AM04412-SS
AD02109 AM03256-AS AM03236-SS    AD02489 AM03300-AS AM03293-SS    AD03922 AM04971-AS AM04867-SS
AD02110 AM03256-AS AM03237-SS    AD02490 AM03301-AS AM03293-SS    AD03923 AM04971-AS AM04869-SS
AD02111 AM03257-AS AM03220-SS    AD02491 AM03107-AS AM03294-SS    AD03924 AM04972-AS AM04820-SS
AD02112 AM03257-AS AM03221-SS    AD02492 AM03279-AS AM03294-SS    AD03925 AM04972-AS AM04819-SS
AD02113 AM03257-AS AM03222-SS    AD02493 AM03280-AS AM03294-SS    AD03931 AM04979-AS AM04978-SS
AD02114 AM03257-AS AM03223-SS    AD02494 AM03281-AS AM03294-SS    AD03932 AM04979-AS AM04811-SS
AD02115 AM03257-AS AM03224-SS    AD02495 AM03282-AS AM03294-SS    AD03933 AM04979-AS AM04869-SS
AD02116 AM03257-AS AM03225-SS    AD02496 AM03283-AS AM03294-SS    AD04017 AM03300-AS AM05070-SS
AD02117 AM03257-AS AM03226-SS    AD02497 AM03284-AS AM03294-SS    AD04018 AM03972-AS AM05072-SS
AD02118 AM03257-AS AM03227-SS    AD02498 AM03300-AS AM03294-SS    AD04017 AM03300-AS AM05070-SS
AD02119 AM03257-AS AM03228-SS    AD02499 AM03301-AS AM03294-SS    AD04018 AM03972-AS AM05072-SS
AD04170 AM03972-AS AM05341-SS    AD04171 AM04877-AS AM05342-SS    AD04110 AM04875-AS AM04866-SS
AD04263 AM04879-AS AM05489-SS    AD04272 AM04979-AS AM05499-SS    AD04281 AM05496-AS AM04412-SS
AD04264 AM05490-AS AM04416-SS    AD04273 AM03972-AS AM05494-SS    AD04282 AM04874-AS AM05503-SS
AD04265 AM05490-AS AM05491-SS    AD04274 AM05498-AS AM05494-SS    AD04283 AM04874-AS AM05502-SS
AD04266 AM05492-AS AM04496-SS    AD04275 AM04979-AS AM05494-SS    AD04284 AM04874-AS AM05506-SS
AD04267 AM05493-AS AM04496-SS    AD04276 AM03972-AS AM05501-SS    AD04285 AM04877-AS AM05503-SS
AD04268 AM05498-AS AM04496-SS    AD04277 AM05498-AS AM05501-SS    AD04286 AM05497-AS AM05502-SS
AD04269 AM04979-AS AM04496-SS    AD04278 AM04979-AS AM05501-SS    AD04287 AM05497-AS AM05506-SS
AD04270 AM03972-AS AM05499-SS    AD04279 AM03300-AS AM05500-SS    AD04288 AM04874-AS AM05504-SS
AD04271 AM05498-AS AM05499-SS    AD04280 AM05495-AS AM04412-SS    AD04289 AM04874-AS AM05505-SS
表3B.具有雙螺旋體ID編號之LPA RNAi劑雙螺旋體。
雙螺旋體ID 反義股ID 有義股ID    雙螺旋體ID 反義股ID 有義股ID    雙螺旋體ID 反義股ID 有義股ID
SD0001 1533-AS00 1533-SS00    SD0240 1533-AS08 1533-SS12    SD0479 1532-AS01 1532-SS09
SD0002 1533-AS01 1533-SS00    SD0241 1533-AS09 1533-SS12    SD0480 1532-AS02 1532-SS09
SD0003 1533-AS02 1533-SS00    SD0242 1533-AS10 1533-SS12    SD0481 1532-AS03 1532-SS09
SD0004 1533-AS03 1533-SS00    SD0243 1533-AS11 1533-SS12    SD0482 1532-AS04 1532-SS09
SD0005 1533-AS04 1533-SS00    SD0244 1533-AS12 1533-SS12    SD0483 1532-AS05 1532-SS09
SD0006 1533-AS05 1533-SS00    SD0245 1533-AS13 1533-SS12    SD0484 1532-AS06 1532-SS09
SD0007 1533-AS06 1533-SS00    SD0246 1533-AS14 1533-SS12    SD0485 1532-AS07 1532-SS09
SD0008 1533-AS07 1533-SS00    SD0247 1533-AS00 1533-SS13    SD0486 1532-AS08 1532-SS09
SD0009 1533-AS08 1533-SS00    SD0248 1533-AS01 1533-SS13    SD0487 1532-AS09 1532-SS09
SD0010 1533-AS09 1533-SS00    SD0249 1533-AS02 1533-SS13    SD0488 1532-AS10 1532-SS09
SD0011 1533-AS10 1533-SS00    SD0250 1533-AS03 1533-SS13    SD0489 1532-AS11 1532-SS09
SD0012 1533-AS11 1533-SS00    SD0251 1533-AS04 1533-SS13    SD0490 1532-AS12 1532-SS09
SD0013 1533-AS12 1533-SS00    SD0252 1533-AS05 1533-SS13    SD0491 1532-AS13 1532-SS09
SD0014 1533-AS13 1533-SS00    SD0253 1533-AS06 1533-SS13    SD0492 1532-AS00 1532-SS10
SD0015 1533-AS14 1533-SS00    SD0254 1533-AS07 1533-SS13    SD0493 1532-AS01 1532-SS10
SD0016 1533-AS00 1533-SS01    SD0255 1533-AS08 1533-SS13    SD0494 1532-AS02 1532-SS10
SD0017 1533-AS01 1533-SS01    SD0256 1533-AS09 1533-SS13    SD0495 1532-AS03 1532-SS10
SD0018 1533-AS02 1533-SS01    SD0257 1533-AS10 1533-SS13    SD0496 1532-AS04 1532-SS10
SD0019 1533-AS03 1533-SS01    SD0258 1533-AS11 1533-SS13    SD0497 1532-AS05 1532-SS10
SD0020 1533-AS04 1533-SS01    SD0259 1533-AS12 1533-SS13    SD0498 1532-AS06 1532-SS10
SD0021 1533-AS05 1533-SS01    SD0260 1533-AS13 1533-SS13    SD0499 1532-AS07 1532-SS10
SD0022 1533-AS06 1533-SS01    SD0261 1533-AS14 1533-SS13    SD0500 1532-AS08 1532-SS10
SD0023 1533-AS07 1533-SS01    SD0262 1533-AS00 1533-SS14    SD0501 1532-AS09 1532-SS10
SD0024 1533-AS08 1533-SS01    SD0263 1533-AS01 1533-SS14    SD0502 1532-AS10 1532-SS10
SD0025 1533-AS09 1533-SS01    SD0264 1533-AS02 1533-SS14    SD0503 1532-AS11 1532-SS10
SD0026 1533-AS10 1533-SS01    SD0265 1533-AS03 1533-SS14    SD0504 1532-AS12 1532-SS10
SD0027 1533-AS11 1533-SS01    SD0266 1533-AS04 1533-SS14    SD0505 1532-AS13 1532-SS10
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SD0238 1533-AS06 1533-SS12    SD0477 1532-AS13 1532-SS08            
SD0239 1533-AS07 1533-SS12    SD0478 1532-AS00 1532-SS09            
在一些實施例中,LPA RNAi劑包含反義股,該反義股包含SEQ ID NO:1242 (TCGUAUAACAAUAAGGGGC)之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含反義股,該反義股包含SEQ ID NO:1244 (UCGUAUAACAAUAAGGGG)之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含反義股,該反義股包含SEQ ID NO:1246 (UCGUAUAACAAUAAGGG)之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含反義股,該反義股包含SEQ ID NO:1248 (TGAGAAUGAGCCUCGAUAA)之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含反義股,該反義股包含SEQ ID NO:1250 (UGAGAAUGAGCCUCGAUA)之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含反義股,該反義股包含SEQ ID NO:1252 (UGAGAAUGAGCCUCGAU)之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含反義股,該反義股包含SEQ ID NO:1254 (UGUAUAACAAUAAGGGG)之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含反義股,該反義股包含SEQ ID NO:1280 (CGUAUAACAAUAAGGGGC)之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含反義股,該反義股包含SEQ ID NO:1281 (GAGAAUGAGCCUCGAUAA)之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含反義股,該反義股包含SEQ ID NO:1282 (UCGUAUAACAAUAAGGGGC)之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含反義股,該反義股包含SEQ ID NO:1283 (UGAGAAUGAGCCUCGAUAA)之核苷酸序列。在一些實施例中,核苷酸中之一或多者經修飾。 在一些實施例中,LPA RNAi劑包含有義股,該有義股包含SEQ ID NO:1243 (GCCCCUUAUUGUUAUACGA)之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含有義股,該有義股包含SEQ ID NO:1245 (CCCCUUAUUGUUAUACGA)之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含有義股,該有義股包含SEQ ID NO:1247 (CCCUUAUUGUUAUACGA)之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含有義股,該有義股包含SEQ ID NO: 1249 (UUAUCGAGGCUCAUUCUCA)之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含有義股,該有義股包含SEQ ID NO:1251 (UAUCGAGGCUCAUUCUCA)之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含有義股,該有義股包含SEQ ID NO: 1253 (AUCGAGGCUCAUUCUCA)之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含有義股,該有義股包含SEQ ID NO: 1255 (CCCCUUAUUGUUAUACA)之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含有義股,該有義股包含SEQ ID NO:1284 (GCCCCUUAUUGUUAUACG)之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含有義股,該有義股包含SEQ ID NO:1285 (UUAUCGAGGCUCAUUCUC)之核苷酸序列。在一些實施例中,核苷酸中之一或多者經修飾。 在一些實施例中,LPA RNAi劑包含反義股及有義股,該反義股包含SEQ ID NO:1242之核苷酸序列,該有義股包含SEQ ID NO:1243之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含反義股及有義股,該反義股包含SEQ ID NO:1244之核苷酸序列,該有義股包含SEQ ID NO:1245之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含反義股及有義股,該反義股包含SEQ ID NO:1246之核苷酸序列,該有義股包含SEQ ID NO:1247之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含反義股及有義股,該反義股包含SEQ ID NO:1248之核苷酸序列,該有義股包含SEQ ID NO:1249之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含反義股及有義股,該反義股包含SEQ ID NO:1250之核苷酸序列,該有義股包含SEQ ID NO:1251之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含反義股及有義股,該反義股包含SEQ ID NO:1252之核苷酸序列,該有義股包含SEQ ID NO:1253之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含反義股及有義股,該反義股包含SEQ ID NO:1254之核苷酸序列,該有義股包含SEQ ID NO:1255之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含反義股及有義股,該反義股包含SEQ ID NO:1280之核苷酸序列,該有義股包含SEQ ID NO:1284之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含反義股及有義股,該反義股包含SEQ ID NO:1281之核苷酸序列,該有義股包含SEQ ID NO:1285之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含反義股及有義股,該反義股包含SEQ ID NO:1282之核苷酸序列,該有義股包含SEQ ID NO:1259之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含反義股及有義股,該反義股包含SEQ ID NO:1283之核苷酸序列,該有義股包含SEQ ID NO:1249之核苷酸序列。在一些實施例中,核苷酸中之一或多者經修飾。 在一些實施例中,LPA RNAi劑包含反義股,該反義股包含SEQ ID NO. 156、SEQ ID NO. 164或SEQ ID NO. 188之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含反義股,該反義股包含SEQ ID NO. 310、SEQ ID NO. 357、SEQ ID NO. 384或SEQ ID NO. 376之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含反義股及有義股,其包含SEQ ID NO:156/310、SEQ ID NO:164/357、SEQ ID NO:188/384、SEQ ID NO:164/376或SEQ ID NO:164/384之核苷酸序列。在一些實施例中,核苷酸中之一或多者經修飾。 在一些實施例中,LPA RNAi劑包含反義股,該反義股包含SEQ ID NO. 637、SEQ ID NO. 709、SEQ ID NO. 790、SEQ ID NO. 787或SEQ ID NO. 788之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含有義股,該有義股包含SEQ ID NO:1132、SEQ ID NO:1135、SEQ ID NO:1189、SEQ ID NO:1191或SEQ ID NO:1186之核苷酸序列。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含反義股及有義股,其包含SEQ ID NO:637/1132、SEQ ID NO:709/1135、SEQ ID NO:790/1189、SEQ ID NO:787/1191或SEQ ID NO:788/1189之核苷酸序列。 在一些實施例中,LPA RNAi劑包含SEQ ID NO.637、SEQ ID NO.709、SEQ ID NO.790、SEQ ID NO.787或SEQ ID NO.788。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含SEQ ID NO:1132、SEQ ID NO:1135、SEQ ID NO:1189、SEQ ID NO:1191或SEQ ID NO:1186。在一些實施例中,LPA RNAi劑包含SEQ ID NO:637/1132、SEQ ID NO:709/1135、SEQ ID NO:790/1189、SEQ ID NO:787/1191或SEQ ID NO:788/1189。 在一些實施例中,LPA RNAi劑由SEQ ID NO. 637、SEQ ID NO. 709、SEQ ID NO. 790、SEQ ID NO. 787或SEQ ID NO. 788組成。在一些實施例中,LPA RNAi劑由SEQ ID NO:1132、SEQ ID NO:1135、SEQ ID NO:1189、SEQ ID NO:1191或SEQ ID NO:1186組成。在一些實施例中,LPA RNAi劑由SEQ ID NO:637/1132、SEQ ID NO:709/1135、SEQ ID NO:790/1189、SEQ ID NO:787/1191或SEQ ID NO:788/1189組成。 在一些實施例中,LPA RNAi劑包含具有表3A或表3B之反義股/有義股雙螺旋體中之任一者之核苷酸序列之反義股及有義股。 在一些實施例中,LPA RNAi劑包含具有表3A或表3B之反義股/有義股雙螺旋體中之任一者之核苷酸序列之反義股及有義股,且進一步包含去唾液酸醣蛋白受體配體靶向基團。 在一些實施例中,LPA RNAi劑包含具有表3A或表3B之反義股/有義股雙螺旋體中之任一者之核苷酸序列的反義股及有義股,且進一步包含選自由以下各者組成之群的靶向基團:(C11¬PEG3¬NAG3)、(C11-PEG3-NAG3)、(C6-PEG4-NAG3)、(NAG 3)、(NAG4)、(NAG3¬AA2)、(NAG3-Palm)、(NAG13)、(NAG18)、(NAG24)、(NAG25)、(NAG25)s、(NAG26)、(NAG27)、(NAG28)、(NAG29)、(NAG30)、(NAG30)s、(NAG31)、(NAG13)、(NAG31s)、(NAG32)、(NAG33)、(NAG34)、(NAG35)、(NAG36)及(NAG37)。 在一些實施例中,LPA RNAi劑包含具有表3A或表3B之反義股/有義股雙螺旋體中之任一者的經修飾之核苷酸序列的反義股及有義股。 在一些實施例中,LPA RNAi劑包含具有表3A或表3B之反義股/有義股雙螺旋體中之任一者的經修飾之核苷酸序列的反義股及有義股,且進一步包含去唾液酸醣蛋白受體配體靶向基團。 在一些實施例中,LPA RNAi劑包含具有表3A或表3B之反義股/有義股雙螺旋體中之任一者的經修飾之核苷酸序列之反義股及有義股,且進一步包含選自由以下各者組成之群的靶向基團:(C11-PEG3-NAG3)、(C11-PEG3-NAG3)、(C6-PEG4-NAG3)、(NAG 3)、(NAG4)、(NAG3-AA2)、(NAG3-Palm)、(NAG13)、(NAG18)、(NAG24)、 (NAG25)、(NAG25)s、(NAG26)、(NAG27)、(NAG28)、(NAG29)、(NAG30)、(NAG30)s、(NAG31)、(NAG13)、(NAG31s)、(NAG32)、(NAG33)、(NAG34)、(NAG35)、(NAG36)及(NAG37)。 在一些實施例中,LPA RNAi劑包含表3A或表3B之雙螺旋體中之任一者。 在一些實施例中,LPA RNAi劑由表3A或表3B之雙螺旋體中之任一者組成。 在一些實施例中,LPA RNAi劑包含具有核苷酸序列AD03460、AD03536、AD03851、AD03853、AD3847或AD04110之反義股及有義股。 在一些實施例中,LPA RNAi劑包含具有核苷酸序列AD03460、AD03536、AD03851、AD03853、AD3847或AD04110之反義股及有義股,且進一步包含去唾液酸醣蛋白受體配體靶向基團。 在一些實施例中,LPA RNAi劑包含具有核苷酸序列AD03460、AD03536、AD03851、AD03853、AD3847或AD04110之反義股及有義股,且進一步包含選自由以下各者組成之群的靶向基團:(C11-PEG3-NAG3)、(C11-PEG3-NAG3)、(C6-PEG4-NAG3)、(NAG 3)、(NAG4)、(NAG3-AA2)、(NAG3-Palm)、(NAG13)、(NAG18)、(NAG24)、(NAG25)、(NAG25)s、(NAG26)、(NAG27)、(NAG28)、(NAG29)、(NAG30)、(NAG30)s、(NAG31)、(NAG13)、(NAG31s)、(NAG32)、(NAG33)、(NAG34)、(NAG35)、(NAG36)及(NAG37)。 在一些實施例中,LPA RNAi劑包含具有經修飾之核苷酸序列AD03460、AD03536、AD03851、AD03853、AD3847或AD04110之反義股及有義股。 在一些實施例中,LPA RNAi劑包含具有經修飾之核苷酸序列AD03460、AD03536、AD03851、AD03853、AD3847或AD04110之反義股及有義股,且進一步包含去唾液酸醣蛋白受體配體靶向基團。 在一些實施例中,LPA RNAi劑包含具有經修飾之核苷酸序列AD03460、AD03536、AD03851、AD03853、AD3847或AD04110之反義股及有義股,且進一步包含選自由以下各者組成之群的靶向基團:(C11-PEG3-NAG3)、(C11-PEG3-NAG3)、(C6-PEG4-NAG3)、(NAG 3)、(NAG4)、(NAG3-AA2)、(NAG3-Palm)、(NAG13)、(NAG18)、(NAG24)、(NAG25)、(NAG25)s、(NAG26)、(NAG27)、(NAG28)、(NAG29)、(NAG30)、(NAG30)s、(NAG31)、(NAG13)、(NAG31s)、(NAG32)、(NAG33)、(NAG34)、(NAG35)、(NAG36)及(NAG37)。 在一些實施例中,LPA RNAi劑包含AD03460、AD03536、AD03851、AD03853、AD3847或AD04110。 在一些實施例中,LPA RNAi劑由AD03460、AD03536、AD03851、AD03853、AD3847或AD04110組成。 非核苷酸基團 在一些實施例中,LPA RNAi劑含有或結合至一或多個非核苷酸基團,該等非核苷酸基團包括(但不限於)靶向基團、鍵聯基團、遞送聚合物或遞送媒劑。非核苷酸基團可加強RNAi劑之靶向、遞送或連接。靶向基團及鍵聯基團之實例提供於表4中。非核苷酸基團可共價鍵聯至有義股及/或反義股中任一者之3'端及/或5'端。在一些實施例中,LPA RNAi劑含有鍵聯至有義股之3'端及/或5'端之非核苷酸基團。在一些實施例中,非核苷酸基團鍵聯至LPA RNAi劑有義股之5'端。非核苷酸基團可經由鍵聯劑/鍵聯基團直接或間接地鍵聯至RNAi劑。在一些實施例中,非核苷酸基團經由不穩定、可裂解或可逆轉鍵或鍵聯劑鍵聯至RNAi劑。 在一些實施例中,非核苷酸基團增強RNAi劑或與其連接之結合物之藥代動力學特性或生物分佈特性,以改良細胞特異性或組織特異性分佈及結合物之細胞特異性攝取。在一些實施例中,非核苷酸基團增強RNAi劑之胞吞作用。 靶向基團 靶向基團可為單價、二價、三價、四價或具有更高價數。代表性靶向基團包括(不限於):對細胞表面分子具有親和力之化合物、細胞受體配體、半抗原、抗體、單株抗體、抗體片段及對細胞表面分子具有親和力之抗體模擬物。在一些實施例中,使用鍵聯劑(諸如,PEG鍵聯劑或一個、兩個或三個無鹼基基團及/或核糖醇基團)將靶向基團鍵聯至RNAi劑。在一些實施例中,靶向基團包含半乳糖簇。 可合成在5'端具有諸如胺基之反應性基團之本文所描述之LPA RNAi劑。反應性基團可用於隨後使用此項技術中典型之方法來連接靶向部分。 在一些實施例中,靶向基團包含去唾液酸醣蛋白受體配體。在一些實施例中,去唾液酸醣蛋白受體配體包括一或多個半乳糖衍生物或半乳糖簇或由其組成。如本文所用,術語半乳糖衍生物包括半乳糖及對去唾液酸醣蛋白受體之親和力等於或大於半乳糖的半乳糖衍生物兩者。半乳糖衍生物包括(但不限於):半乳糖、半乳糖胺、N-甲醯基半乳糖胺、N-乙醯基-半乳糖胺、N-丙醯基-半乳糖胺、N-正丁醯基-半乳糖胺及N-異丁醯基半乳糖胺(參見(例如):Iobst, S. T.及Drickamer, K. J . B . C .1996, 271, 6686)。適用於將寡核苷酸及其他分子活體內靶向至肝之半乳糖衍生物及半乳糖簇為此項技術中已知的(參見(例如)Baenziger及Fiete,1980,Cell, 22, 611-620; Connolly等人,1982, J. Biol. Chem., 257, 939-945)。半乳糖衍生物已經由其結合於肝細胞表面上所表現之去唾液酸醣蛋白受體(ASGPr)而用於活體內將分子靶向肝細胞。 ASGPr配體結合於ASGPr有助於細胞特異性靶向肝細胞及分子進入肝細胞之胞吞作用。使用此項技術中已知之方法可將半乳糖簇連接至RNAi多核苷酸之3'端或5'端。 如本文所用,半乳糖簇包含具有兩個至四個末端半乳糖衍生物的分子。末端半乳糖衍生物經由其C-1碳連接至分子。在一些實施例中,半乳糖簇為半乳糖衍生物三聚體、三觸角半乳糖衍生物或三價半乳糖衍生物。在一些實施例中,半乳糖簇包含N-乙醯基半乳糖胺(GalNAc)。在一些實施例中,半乳糖簇包含三價N-乙醯基-半乳糖胺。在一些實施例中,半乳糖簇為半乳糖衍生物四聚體、四觸角半乳糖衍生物或四價半乳糖衍生物。在一些實施例中,半乳糖簇包含四價N-乙醯基-半乳糖胺。 如本文所用,半乳糖衍生物三聚體含有各鍵聯至中央分支點的三種半乳糖衍生物。如本文所使用,半乳糖衍生物四聚體含有各鍵聯至中央分支點的四種半乳糖衍生物。半乳糖衍生物可經由糖類之C-1碳連接至中央分支點。在一些實施例中,半乳糖衍生物經由鍵聯劑或間隔劑鍵聯至分支點。在一些實施例中,鍵聯劑或間隔劑為可撓性親水性間隔劑,諸如PEG基團(參見(例如)美國專利第5885968號;Biessen等人,J. Med. Chem. 1995.第39卷.第1538至1546頁)。在一些實施例中,PEG間隔劑為PEG 3間隔劑。分支點可為允許三種半乳糖衍生物連接且進一步允許分支點連接至RNAi劑的任何小分子。分支點基團之實例為二離胺酸或二麩胺酸。分支點連接至RNAi劑可經由鍵聯劑或間隔劑發生。在一些實施例中,鍵聯劑或間隔劑包含可撓性親水性間隔劑,諸如(但不限於) PEG間隔劑。在一些實施例中,PEG間隔劑為PEG 3間隔劑(三個伸乙基單元)。在其他實施例中,PEG間隔劑具有1至20個伸乙基單元(PEG 1至PEG 20)。在一些實施例中,半乳糖衍生物包含N-乙醯基半乳胺糖(GalNAc或NAG)。在一些實施例中,半乳糖簇包含半乳糖衍生物四聚體,該半乳糖衍生物四聚體可為(例如)N-乙醯基-半乳糖胺四聚體。 在一些實施例中,描述用於將LPA RNAi劑遞送至活體內肝細胞之醫藥組合物。此等醫藥組合物可包括(例如)結合至半乳糖簇之LPA RNAi劑。在一些實施例中,半乳糖簇包含半乳糖衍生物三聚體(該半乳糖衍生物三聚體可為(例如)N-乙醯基-半乳糖胺三聚體)或半乳糖衍生物四聚體(該半乳糖衍生物四聚體可為(例如)N-乙醯基-半乳糖胺四聚體)。 靶向基團包括(但不限於):(Chol-TEG)、(TEG-Chol)、(C11-PEG3-NAG3)、(C m-PEG n-NAG3)、(C x-PEG z-NAG3)、(NAG 3)、(NAG4)、(NAG3-AA2)、(NAG3-Palm)、(NAG13)、(NAG18)、(NAG24)、(NAG25)、(NAG25)s、(NAG26)、(NAG27)、(NAG28)、(NAG29)、(NAG30)、(NAG30)s、(NAG31)、(NAG13)、(NAG31s)、(NAG32)、(NAG33)、(NAG34)、(NAG35)、(NAG36)及(NAG37)。 鍵聯基團 在一些實施例中,鍵聯基團結合至RNAi劑。鍵聯基團有助於將製劑共價鍵聯至靶向基團或遞送聚合物或遞送媒劑。鍵聯基團可鍵聯至RNAi劑有義股或反義股之3'或5'端。在一些實施例中,鍵聯基團鍵聯至RNAi劑有義股。在一些實施例中,鍵聯基團結合至RNAi劑有義股之5'端或3'端。在一些實施例中,鍵聯基團結合至RNAi劑有義股之5'端。鍵聯基團之實例包括(但不限於):Alk-SMPT-C6、Alk-SS-C6、DBCO-TEG、Me-Alk-SS-C6及C6-SS-Alk-Me、反應性基團(諸如一級胺及炔烴)、烷基、無鹼基核糖、核糖醇及/或PEG基團。 鍵聯劑或鍵聯基團為兩個原子之間的連接,該連接經由一或多個共價鍵將相關的一個化學基團(諸如RNAi劑)或片段鍵聯至相關的另一化學基團(諸如靶向基團或遞送聚合物)或片段。不穩定鍵聯含有不穩定鍵。鍵聯可視情況包括使兩個經連接原子之間距離增加的間隔劑。間隔劑可進一步增加鍵聯的可撓性及/或長度。間隔劑可包括(但不限於):烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基、芳烯基及芳炔基;其中之每一者可含有一或多個雜原子、雜環、胺基酸、核苷酸及糖類。間隔基團在此項技術中已熟知且前述列舉並不意欲限制本發明之範疇。 鍵聯基團包括(但不限於):烷基、PEG、(C6-PEG n-烷)、(C n-SMPT-烷)及(C n-SS-烷-Me)。 表2A及表2B中所列之含有3'或5'靶向基團或鍵聯基團的LPA RNAi劑中之任一者可替代地不含有3'或5'靶向基團或鍵聯基團,或可含有不同的3'或5'靶向基團或鍵聯基團,該等基團包括(但不限於)表4中描繪之彼等基團。表1、表2A及表2B中所列之LPA RNAi劑核苷酸序列中之任一者(無論經修飾或未經修飾)可含有3'或5'靶向基團或鍵聯基團,該等基團包括(但不限於)表4中描繪之彼等基團。表3A及表3B中所列之LPA RNAi劑雙螺旋體中之任一者(無論經修飾或未經修飾)可進一步包含包括(但不限於)表4中描繪之彼等之靶向基團或鍵聯基團,且靶向基團或鍵聯基團可連接至LPA RNAi劑雙螺旋體之有義股抑或反義股中任一者之3'端或5'端。 表4.表示各種經修飾之核苷酸、靶向基團及鍵聯基團之結構。
 
 
 
 
  (烷-PEG n-C6)或(C6-PEG n-烷),其中n=1至12 在一些實施例中,n=5(例如,(烷-PEG5-C6))。
  (C n-SMPT-烷)或(烷-SMPT-C n),其中 n=1至10,在一些實施例中,n=4(例如,(C6-SMPT-烷))。
  (C n-SS-烷-Me)或(Me-烷-SS-C n),其中n=1至10 在一些實施例中,n=4(例如,(C6-SS-烷-Me))。
  (十八烷醯)
  (Chol-TEG),其中n=1至10,在一些實施例中,n= 2。
  (Chol-TEG),其中n=1至10,在一些實施例中,n= 3。
  (NAG3-PEG n-C m)或(C m-PEG n-NAG3),其中n=1至6且m=1至12 在一些實施例中,n=3且m=9(例如,(C11-PEG3-NAG3))
   (C x-PEG z-NAG3),其中x=1至10,y=1至10,且z=1至10 在一些實施例中,x=3,y=3,且z=4(C6-PEG4-NAG3)
  (NAG 3)
  (NAG4)
  (NAG3-AA2)
  (NAG3-Palm)
  (NAG13)
  (NAG18)
  (NAG24)
  (NAG25)
  (NAG25)s
  (NAG26)
  (NAG27)
  (NAG28)
  (NAG29)
  (NAG30)
  (NAG30)s
  (NAG31)
  (NAG31)s
  (NAG32)
  (NAG33)
  (NAG34)
  (NAG35)
  (NAG36)
  (NAG37)
在以上結構中之每一者中,NAG包含N-乙醯基-半乳糖胺或另一ASGPR配體。每一(NAGx)可經由磷酸酯基團(如同(NAG25)、(NAG30)及(NAG31)中)或硫代磷酸酯基團(如(NAG25)s、(NAG30)s及(NAG31)s)或另一鍵聯基團連接至LPA RNAi劑。替代地,可使用此項技術中已知的其他鍵聯基團。 遞送媒劑 在一些實施例中,遞送媒劑可用於將RNAi劑遞送至細胞或組織。遞送媒劑為使RNAi劑遞送至細胞或組織改良之化合物。遞送媒劑可包括(但不限於)以下各者或由其組成:聚合物(諸如兩性聚合物、膜活性聚合物)、肽、蜂毒素肽、蜂毒素樣肽(MLP)、脂質、經可逆修飾之聚合物或肽或經可逆修飾之膜活性多元胺。 在一些實施例中,RNAi劑可與脂質、奈米顆粒、聚合物、脂質體、微胞、DPC或此項技術中可利用之其他遞送系統組合。RNAi劑亦可化學結合至靶向基團、脂質(包括(但不限於)膽固醇及膽固醇基衍生物)、奈米粒子、聚合物、脂質體、微胞、DPC (參見(例如)WO 2000/053722,WO 2008/0022309,WO 2011/104169及WO 2012/083185,WO 2013/032829,WO 2013/158141,該等專利中之每一者以引用之方式併入本文中)或此項技術中可利用之其他遞送系統。 醫藥組合物 本文描述用於活體內遞送LPA RNAi劑至哺乳動物之肝細胞的方法。在一些實施例中,可使用遞送媒劑。遞送媒劑為使RNAi劑遞送至細胞改良之化合物。遞送媒劑可為(但不限於):聚合物(諸如,兩親性聚合物、膜活性聚合物)、肽(諸如,蜂毒素或蜂毒素樣肽、經可逆修飾之聚合物或肽)、或脂質。在一些實施例中,LPA RNAi劑鍵聯至包含去唾液酸醣蛋白配體之靶向配體。在一些實施例中,LPA RNAi劑鍵聯至包含半乳糖簇或由半乳糖簇組成之靶向配體。 LPA RNAi劑可用於抑制(例如個體中的)細胞、細胞群或組織中之LPA之表現。在一些實施例中,LPA RNAi劑用於調配用於投與個體之組合物,亦即醫藥組合物或藥劑。如本文所用,醫藥組合物或藥劑包含藥理學有效量之所描述之LPA RNAi劑中之至少一者及一或多種醫藥學上可接受之賦形劑。醫藥學上可接受之賦形劑(賦形劑)為除活性醫藥成分(API,治療劑產品,(例如) LPA RNAi劑)之外之物質,該等物質已針對安全性經恰當地評估且意欲包括於藥物遞送系統中。賦形劑在預定劑量下不發揮或不意欲發揮治療作用。賦形劑可用於:a)在製造期間輔助加工藥物遞送系統,b)保護、支持或增強API之穩定性、生物可用性或患者接受性,c)有助於產品鑑別,及/或d)在儲存或使用期間增強API遞送之總體安全性、有效性之任何其他屬性。醫藥學上可接受之賦形劑可為或可不為惰性物質。 賦形劑包括(但不限於):吸收增強劑、抗黏劑、消泡劑、抗氧化劑、黏合劑、緩衝劑、載劑、塗佈劑、顏料、遞送增強劑、遞送聚合物、葡聚糖、右旋糖、稀釋劑、崩解劑、乳化劑、增量劑、填充劑、調味劑、滑動劑、保濕劑、潤滑劑、油狀物、聚合物、防腐劑、生理鹽水、鹽、溶劑、糖類、懸浮劑、持續釋放型基質、甜味劑、增稠劑、張力劑、媒劑、防水劑及濕潤劑。 醫藥組合物可含有通常見於醫藥組合物中之其他額外組分。此類額外組分包括(但不限於):止癢劑、收斂劑、局部麻醉劑或消炎劑(例如抗組胺劑、苯海拉明(diphenhydramine)等)。亦設想表現或包含本文所定義之RNAi劑的細胞、組織或經分離器官可用作「醫藥組合物」。如本文所用,「藥理學有效量」、「治療有效量」或簡單的「有效量」係指產生預定藥理學、治療性或預防性結果的RNAi劑之量。 在一些實施例中,所描述之LPA RNAi劑合併一或多種額外治療劑或療法,該等額外治療劑或療法包括(但不限於)第二LPA RNAi劑或其他RNAi劑、小分子藥物、抗體、抗體片段及/或疫苗。額外治療劑之實例包括(但不限於):HMg Co-A還原酶抑制劑(士他汀)、依澤替米貝、PCSK-9抑制劑、CTEP抑制劑、靶向ANGPTL3的療法、靶向APOC3的療法及菸酸。 所述RNAi劑及包含本文揭示之LPA RNAi劑的醫藥組合物可封裝或包括於套組、容器、包裝或分配器中。LPA RNAi劑及包含該等LPA RNAi劑之醫藥組合物可封裝於預填充的針筒或小瓶中。 在一些實施例中,涵蓋包含所描述之LPA RNAi劑中之至少一者的醫藥組合物。此等醫藥組合物適用於抑制細胞、組織或生物體中之LPA基因表現。在一些實施例中,所描述之醫藥組合物係用以治療患有疾病、病狀或病症之個體,該等疾病、病狀或病症將得益於LPA表現中之降低或抑制。在一些實施例中,所描述之醫藥組合物係用以治療處於產生疾病、病狀或病症之風險下之個體,該等疾病、病狀或病症將得益於LPA表現中之降低或抑制。將得益於LPA表現中之降低或抑制之疾病、病狀或病症包括(但不限於):貝格爾氏疾病、外周動脈疾病、冠狀動脈疾病、代謝症候群、急性冠狀動脈症候群、主動脈瓣狹窄、主動脈瓣回流、主動脈剝離、視黃醛動脈閉塞、腦血管疾病、腸系膜局部缺血、腸系膜上動脈閉塞、腎動脈狹窄、穩定/不穩定心絞痛、急性冠狀動脈症候群、異型接合家族性高膽固醇血症或同型接合家族性高膽固醇血症、高β脂蛋白血症、腦血管動脈粥樣硬化、腦血管疾病及靜脈血栓。在一些實施例中,個體為哺乳動物,包括(但不限於)人類患者。 涵蓋包括本文所描述之LPA RNAi劑中之至少一者的細胞、組織及非人類生物體。藉由此項技術中可利用之任何方式將RNAi劑遞送至細胞、組織或非人類生物體來製得細胞、組織或非人類生物體。在一些實施例中,細胞為哺乳動物細胞,包括(但不限於)人類細胞。細胞、組織或非人類生物體適用於研究或適用作研究工具(例如藥物測試或診斷)。 治療方法 在一些實施例中,本文所描述之LPA RNAi劑係用以治療患有疾病、病狀或病症或處於患有疾病、病狀或病症風險下之個體,該等疾病、病狀或病症將得益於LPA表現中之降低或抑制。得益於LPA基因表現之降低及/或抑制之個體治療包括治療性及/或預防性治療。疾病、病狀或病症之實例包括(但不限於):貝格爾氏疾病、外周動脈疾病、冠狀動脈疾病、代謝症候群、急性冠狀動脈症候群、主動脈瓣狹窄、主動脈瓣回流、主動脈剝離、視黃醛動脈閉塞、腦血管疾病、腸系膜局部缺血、腸系膜上動脈閉塞、腎動脈狹窄、穩定/不穩定心絞痛、急性冠狀動脈症候群、異型接合家族性高膽固醇血症或同型接合家族性高膽固醇血症、高β脂蛋白血症、腦血管動脈粥樣硬化、腦血管疾病及靜脈血栓。在一些實施例中,該方法包含向待治療之哺乳動物投與組合物(諸如醫藥組合物),該組合物包含本文所描述之LPA RNAi劑。 在一些實施例中,將治療有效量(例如,可有效地抑制個體中之LPA之表現之量)之所描述之LPA RNAi劑中之一或多者投與個體,從而抑制個體中之LPA之表現。在一些實施例中,本文所描述之LPA RNAi劑中之一或多者係用以治療患有將得益於LPA表現中之降低或抑制之疾病或病症之個體。在一些實施例中,所描述之LPA RNAi劑係用以治療或預防患有將得益於LPA表現之降低或抑制之疾病或病症之個體中之至少一種症狀。向個體投與治療有效量之所描述之RNAi劑中之任何一或多者,由此治療該症狀。在一些實施例中,向個體投與預防有效量之所描述之RNAi劑中之任何一或多者從而預防至少一種症狀。 在一些實施例中,LPA RNAi劑係用以治療或控制臨床表現,其中向需要此類治療、預防或控制之個體投與治療或預防有效量之本文所描述之LPA RNAi劑或含有LPA RNAi劑之組合物中之一或多者。在一些實施例中,該方法包含向待治療之哺乳動物投與包含本文所描述之LPA RNAi劑的組合物。 在一些實施例中,該方法進一步包含投與第二治療劑或治療之步驟。在一些實施例中,第二治療劑為另一種LPA RNAi劑(例如靶向 LPA靶內之不同序列之 LPARNAi劑)。在其他實施例中,第二治療劑可選自包含以下各者之群:小分子藥物、抗體、抗體片段及疫苗。 投與之途徑為藉由使RNAi劑與身體達成接觸的路徑。一般而言,投與用於治療個體之藥物及核酸之方法為此項技術中所熟知且可應用於本文所描述之組合物的投與。本文所描述之化合物可經由任何適合之途徑以適當調適於特定途徑之製劑投與。因此,本文所描述之化合物可藉由注射投與,例如靜脈內、肌肉內、皮內、皮下或腹膜內注射。 在一些實施例中,可使用此項技術中已知的寡核苷酸遞送技術將LPA RNAi劑或本文所描述之組合物遞送至細胞、細胞群、組織或個體。一般而言,用於遞送核酸分子(活體外或活體內)之此項技術中認可的任何合適的方法可經調適與本文所描述之LPA RNAi劑使用。舉例而言,遞送可為局部投與(例如直接注射、植入或體表投與)、全身性投與或皮下、靜脈內、經口、腹膜內或非經腸途徑,包括顱內(例如室內、腦實質內及鞘內)、肌肉內、經皮、呼吸道(氣溶膠)、鼻、直腸或局部(包括頰內及舌下)投與。在某些實施例中,組合物藉由皮下或靜脈內輸注或注射來投與。 在一些實施例中,RNAi劑可與脂質、奈米顆粒、聚合物、脂質體、微胞、DPC或此項技術中可利用之其他遞送系統組合。RNAi劑亦可化學結合至靶向基團、脂質(包括(但不限於)膽固醇及膽固醇基衍生物)、奈米粒子、聚合物、脂質體、微胞、DPC (參見(例如) WO 2000/053722,WO 2008/0022309,WO 2011/104169,及WO 2012/083185,其中每一者以引用之方式併入本文中)或此項技術中可利用的其他遞送系統。 LPA RNAi劑可結合至遞送聚合物。在一些實施例中,遞送聚合物為經可逆遮蔽/修飾之兩親性膜活性多元胺。 表現之抑制 如本文所使用,術語「靜默」、「降低」、「抑制」、「下調」或「阻斷基因表現」當涉及LPA基因時,意謂當細胞、細胞群或組織經所描述之LPA RNAi劑處理時,基因之表現(如藉由自基因轉錄之RNA之含量或自細胞、細胞群或組織(其中LPA基因經轉錄)中之mRNA轉譯之多肽、蛋白質或蛋白質亞單位之含量所量測)相比於已經或未經此治療之第二細胞、細胞群或組織或相比於相同細胞、細胞群或組織在投與LPA RNAi劑之前降低。 在一些實施例中,經投與所描述之LPA RNAi劑之個體中之基因表現含量及/或LPA之mRNA含量相對於個體經投與LPA RNAi劑之前或相對於未接受LPA RNAi劑之個體降低至少約5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或98%。在個體之細胞、細胞群及/或組織中,個體之基因表現含量及/或mRNA含量可降低。在一些實施例中,已經投與所描述之LPA RNAi劑之個體中之蛋白質含量相對於個體經投與LPA RNAi劑之前或相對於未接受LPA RNAi劑之個體降低至少約5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或98%。在個體之細胞、細胞群、組織、血液及/或其他體液中,個體中之蛋白質含量可降低。基因表現、mRNA或蛋白質含量之降低可藉由此項技術中已知之任何方法來評定。LPA mRNA含量及/或蛋白質含量降低或減少在本文中統稱為LPA的降低或減少或抑制或降低LPA之表現。 當提及RNAi劑時,引入細胞中意謂將RNAi劑功能性遞送至細胞中。功能性遞送意謂RNAi劑經遞送至細胞且具有預期的生物活性(例如基因表現之序列特異性抑制)。 細胞及組織及非人類生物體 涵蓋包括本文所描述之LPA RNAi劑中之至少一者的細胞、組織及非人類生物體。藉由將RNAi劑遞送至細胞、組織或非人類生物體來製得細胞、組織或非人類生物體。 現利用以下非限制性實例來說明上文所提供的實施例及各項。 實例 實例1. RNAi 合成。 A)合成。根據寡核苷酸合成中所用的固相胺基磷酸酯技術來合成LPA RNAi劑。取決於規模,使用MerMade96E (Bioautomation)或MerMade12 (Bioautomation)。在由受控微孔玻璃(CPG,500 Å或600Å,獲自Prime Synthesis, Aston, PA,美國)製成之固體載體上進行合成。所有DNA、2'-經修飾之RNA及UNA胺基磷酸酯均購自Thermo Fisher Scientific (Milwaukee, WI,美國)。特定言之,使用以下2'-O-甲基胺基磷酸酯:(5'-O-二甲氧基三苯甲基-N 6-(苯甲醯基)-2'-O-甲基-腺苷-3'-O-(2-氰基乙基-N,N-二異丙基胺基)胺基磷酸酯、5'-O-二甲氧基-三苯甲基-N 4-(乙醯基)-2'-O-甲基-胞苷-3'-O-(2-氰基乙基-N,N-二異丙基胺基)胺基磷酸酯、(5'-O-二甲氧基三苯甲基-N 2-(異丁醯基)-2'-O-甲基-鳥苷-3'-O-(2-氰基-乙基-N,N-二異丙基胺基)胺基磷酸酯及5'-O-二甲氧基-三苯甲基-2'-O-甲基尿苷-3'-O-(2-氰基乙基-N,N-二異丙基胺基)胺基磷酸酯。2'-脫氧-2'-氟-胺基磷酸酯攜有與2'-O-甲基RNA胺基酸酯相同的保護基團。使用以下UNA胺基磷酸酯:5'-(4,4'-二甲氧基三苯甲基)-N-苯甲醯基-2',3'-開環-腺苷、2'-苯甲醯基-3'-[(2-氰基乙基)-(N,N-二異丙基)]-胺基磷酸酯、5'-(4,4'-二甲氧基三苯甲基)-N-乙醯基-2',3'-開環-胞嘧啶、2'-苯甲醯基-3'-[(2-氰基乙基)-(N,N-二異丙基)]-胺基磷酸酯、5'-(4,4'-二甲氧基三苯甲基)-N-異丁醯基-2',3'-開環-鳥苷、2'-苯甲醯基-3'-[(2-氰基乙基)-(N,N-二異丙基)]-胺基磷酸酯及5'-(4,4'-二甲氧基-三苯甲基)-2',3'-開環-尿苷、2'-苯甲醯基-3'-[(2-氰基乙基)-(N,N-二異丙基)]-胺基磷酸酯。將所有醯胺溶解於無水乙腈(50 mM)中且添加分子篩(3Å)。為將TEG-膽固醇引入寡聚物之5'端,使用Glen Research (Sterling, VA, USA)的1-二甲氧基三苯甲基氧基-3-O-(N-膽固醇基-3-胺基丙基)-三乙二醇-甘油基-2-O-(2-氰基乙基)-(N,N,-二異丙基)-胺基磷酸酯。在合成循環中無任何修飾的情況下引入5'-修飾。使用5-苯甲硫基-1H-四唑(含250 mM BTT之乙腈)作為活化劑溶液。偶合時間為10 min (RNA)、180 sec (膽固醇)、90 sec (2'OMe及UNA)及60 sec (2'F及DNA)。為了引入硫代磷酸酯鍵,使用3-苯基1,2,4-二噻唑啉-5-酮(POS,獲自PolyOrg, Inc., Leominster, MA,美國)於無水乙腈中之100 mM溶液。特定序列參見表1、表2A及表2B。 B . 載體所結合之寡聚物的裂解及去保護基。完成固相合成之後,經乾燥的固體載體在30℃下用40 wt%甲胺水溶液與28%氫氧化銨溶液(Aldrich)之1:1體積溶液處理兩小時。將溶液蒸發且固體殘餘物於水中復原(參見下文)。 C . 純化 使用Waters XBridge BEH300 C4 5u製備型管柱及Shimadzu LC-8系統,藉由逆相HPLC來純化含有膽固醇的粗寡聚物。緩衝液A為100 mM TEAA,pH 7.5且含有5%乙腈,而緩衝液B為100 mM TEAA且含有95%乙腈。記錄260 nm之UV痕量。接著使適當溶離份在尺寸排阻型HPLC上流動,其使用裝填有Sephadex G25介質之GE Healthcare XK 16/40管柱與100 mM碳酸氫銨pH 6.7及20%乙腈之流動緩衝液。使用TKSgel SuperQ-5PW 13u管柱及Shimadzu LC-8系統,藉由陰離子交換HPLC來純化其他粗寡聚物。緩衝液A為20 mM Tris、5 mM EDTA、pH 9.0且含有20%乙腈,而緩衝液B與緩衝液A相同並添加1.5 M氯化鈉。記錄260 nm之UV痕量。合併適當溶離份,接著在尺寸排阻型HPLC上流動,如針對含有寡聚物之膽固醇所述。 D . 退火 藉由將等莫耳溶液(有義及反義)合併於0.2×PBS (磷酸鹽緩衝生理鹽水, 1×, Corning, Cellgro)中來使互補股混合以形成RNAi劑。將此溶液置放於70℃熱混合器中,加熱至95℃,在95℃下保持5分鐘且緩慢冷卻至室溫。將一些RNAi劑凍乾且在−15℃至−25℃下儲存。藉由UV-Vis光譜儀量測0.2× PBS中之溶液吸光度來測定雙螺旋體濃度。接著將260 nm溶液吸光度乘以換算因數及稀釋因數以測定雙螺旋體濃度。除非另有說明,否則所有換算因數為0.037 mg/(mL∙cm)。在一些實驗中,換算因數係利用實驗測定的消光係數計算。 實例2. LPA RNAi 劑之初步活體外分析。篩分藉由人類及非人類靈長類在矽分析中之交叉反應識別之候選序列。合成且針對三個基團中之活體外功效篩分108種矽識別之潛在LPA RNAi劑。出於篩分目的,自市售之哺乳動物表現載體(Origene,Rockville,MD)將人類LPA cDNA序列(寄存編號NM_005577.1)次選殖至市售的基於報導子篩分質體psiCHECK2 (Promega, Madison, WI)中,該過程產生海腎螢光素酶/LPA融合mRNA。對於人類背景下之LPA RNAi劑功效而言,將Hep3B細胞(人類肝細胞癌株)以約每孔10,000個細胞塗覆於96孔格式中。藉由每孔50 ng至100 ng LPA-psiCHECK2質體DNA及每孔0.2 µL脂染胺2000來將108種LPA RNAi劑中之每一者在兩種或三種濃度下(1 nM及0.1 nM或0.02 nM、0.2 nM及2 nM)共轉染。藉由使用雙重螢光素酶報導子分析(Promega, Madison, WI)量測相對於組成性表現之螢火蟲螢光素酶(亦存在於上psiCHECK2質體上)之含量歸一化的海腎螢光素酶含量來測定基因表現的阻斷情況(表5A及表5B)。 表5A. LPA RNAi劑、LPA表現之抑制之活體外分析。
雙螺旋體ID# 相對R luc-LPA表現 雙螺旋體ID# 相對R luc-LPA表現
1nM 0.1nM 1nM 0.1nM
平均 SD 平均 SD 平均 SD 平均 SD
AD00571 1.012 0.146 1.107 0.174 AD00605 1.006 0.193 1.006 0.146
AD00572 0.776 0.062 1.075 0.089 AD00606 0.509 0.039 0.570 0.054
AD00573 0.708 0.054 0.708 0.134 AD00607 0.816 0.091 0.906 0.068
AD00574 0.441 0.028 0.525 0.056 AD00608 0.883 0.111 1.158 0.054
AD00575 0.242 0.038 0.365 0.035 AD00609 0.515 0.079 0.691 0.137
AD00576 0.166 0.047 0.341 0.073 AD00610 0.628 0.057 0.748 0.090
AD00577 0.702 0.115 0.934 0.036 AD00611 1.320 0.066 1.116 0.046
AD00578 0.272 0.008 0.599 0.200 AD00612 1.103 0.193 1.100 0.052
AD00579 0.290 0.031 0.447 0.066 AD00613 0.910 0.094 0.878 0.040
AD00580 0.825 0.145 0.991 0.123 AD00614 1.101 0.111 1.097 0.043
AD00581 0.654 0.095 0.986 0.127 AD00615 1.051 0.140 0.898 0.161
AD00582 0.610 0.178 0.791 0.244 AD00616 0.898 0.101 1.029 0.042
AD00583 0.824 0.208 0.845 0.240 AD00617 0.715 0.023 0.802 0.150
AD00584 0.800 0.150 0.683 0.077 AD00618 0.434 0.073 0.441 0.199
AD00585 0.387 0.059 0.488 0.151 AD00619 0.758 0.003 0.820 0.165
AD00586 0.754 0.116 0.927 0.103 AD00620 0.984 0.124 0.926 0.080
AD00587 0.921 0.074 0.923 0.052 AD00621 0.308 0.033 0.267 0.044
AD00588 0.763 0.203 0.954 0.169 AD00622 0.493 0.072 0.790 0.009
AD00589 0.838 0.115 1.026 0.216 AD00623 0.641 0.081 0.599 0.014
AD00590 0.959 0.091 0.991 0.285 AD00624 0.795 0.019 0.985 0.123
AD00591 0.970 0.172 0.984 0.244 AD00625 0.768 0.121 0.944 0.117
AD00592 0.600 0.060 0.886 0.069 AD00626 0.981 0.081 1.036 0.036
AD00593 0.555 0.097 0.883 0.130 AD00627 0.943 0.163 0.936 0.038
AD00594 0.645 0.056 0.567 0.008 AD00628 0.765 0.069 0.995 0.090
AD00595 0.812 0.132 1.076 0.285 AD00629 1.001 0.184 1.199 0.064
AD00596 0.658 0.116 0.787 0.153 AD00630 0.963 0.149 1.154 0.141
AD00597 0.999 0.120 1.083 0.143 AD00631 0.979 0.084 1.038 0.088
AD00598 0.501 0.067 0.631 0.036 AD00632 0.781 0.048 0.858 0.101
AD00599 0.890 0.098 0.871 0.143 AD00633 0.817 0.072 1.027 0.143
AD00600 0.393 0.018 0.729 0.172 AD00634 0.807 0.087 0.978 0.256
AD00601 0.896 0.180 1.142 0.140 AD00635 0.496 0.073 0.377 0.023
AD00602 0.653 0.134 0.955 0.062 AD00636 0.615 0.102 0.748 0.072
AD00603 0.730 0.118 0.799 0.187 AD00637 0.792 0.056 1.070 0.048
AD00604 0.892 0.058 0.956 0.107               
表5B. LPA RNAi劑、LPA表現之抑制之活體外分析。
雙螺旋體ID# 相對R luc-LPA表現
2nM 0.2nM 0.02nM
平均 SD 平均 SD 平均 SD
AD01068 0.780 0.110 0.792 0.326 0.861 0.138
AD01069 0.483 0.345 1.062 0.181 0.869 0.112
AD01070 0.747 0.441 1.010 0.015 1.015 0.319
AD01071 1.014 0.254 0.850 0.251 0.857 0.284
AD01072 0.919 0.107 1.137 0.345 0.727 0.124
AD01073 0.539 0.224 1.066 0.195 1.180 0.356
AD01074 0.713 0.545 0.953 0.419 0.841 0.077
AD01075 0.703 0.379 0.913 0.204 0.965 0.216
AD01076 1.145 0.485 1.027 0.287 0.647 0.154
AD01077 0.672 0.074 1.166 0.384 0.703 0.106
AD01078 0.575 0.192 0.847 0.237 0.908 0.071
AD01079 0.863 0.673 1.093 0.187 1.004 0.086
AD01328 0.623 0.089 1.205 0.367 1.238 0.089
AD01329 0.467 0.068 1.161 0.159 1.115 0.102
AD01330 1.158 0.124 0.920 0.143 1.156 0.107
AD01331 1.476 0.225 1.092 0.269 1.304 0.320
AD01332 1.145 0.109 1.100 0.454 0.941 0.510
AD01333 0.829 0.011 1.382 0.252 1.338 0.303
AD01334 0.653 0.122 1.323 0.183 1.095 0.109
AD01335 0.858 0.089 1.632 0.318 1.201 0.159
AD01336 1.019 0.081 1.724 0.353 1.008 0.072
AD01337 0.834 0.143 1.494 0.657 1.130 0.309
AD01338 1.276 0.340 0.719 0.118 0.896 0.118
AD01339 1.240 0.298 1.114 0.287 0.960 0.104
AD01340 1.055 0.423 1.272 0.136 1.338 0.299
AD01341 1.206 0.438 1.510 0.315 1.046 0.143
AD01342 1.243 0.324 1.137 0.298 1.159 0.047
AD01343 1.113 0.140 1.045 0.151 1.108 0.094
AD01344 0.931 0.182 1.317 0.244 1.328 0.037
AD01345 0.795 0.233 0.799 0.032 1.418 0.184
AD01346 1.095 0.224 1.045 0.073 1.465 0.109
AD01347 1.122 0.021 1.209 0.161 1.153 0.159
AD01348 1.022 0.068 1.228 0.244 1.097 0.049
AD01349 0.934 0.151 1.217 0.080 1.068 0.149
AD01350 0.871 0.295 1.318 0.225 0.942 0.395
AD01351 1.414 0.065 1.121 0.180 1.029 0.049
AD01352 0.868 0.088 1.024 0.385 1.049 0.176
AD01353 1.150 0.478 1.164 0.276 0.898 0.175
AD01354 0.999 0.119 1.378 0.292 1.507 0.289
AD01355 0.943 0.092 1.066 0.268 1.411 0.113
AD01356 1.116 0.351 1.072 0.196 1.000 0.145
表5C. 10 mM LPA RNAi劑、LPA表現之抑制之活體外分析。
雙螺旋體編號 LPA含量 雙螺旋體編號 LPA含量 雙螺旋體編號 LPA含量
AD01803 0.77 ± 0.06 AD01827 1.23 ± 0.07 AD01921 0.59 ± 0.06
AD01805 0.77 ± 0.02 AD01828 1.02 ± 0.09 AD01922 0.50 ± 0.04
AD01806 1.01 ± 0.02 AD01829 1.05 ± 0.07 AD01923 0.59 ± 0.04
AD01807 0.97 ± 0.09 AD01830 1.00 ± 0.35 AD01924 0.50 ± 0.02
AD01808 0.78 ± 0.12 AD01831 1.02 ± 0.07 AD01925 0.54 ± 0.05
AD01809 1.06 ± 0.13 AD01832 1.04 ± 0.06 AD01926 0.52 ± 0.05
AD01810 1.06 ± 0.05 AD01896 0.71 ± 0.14 AD01927 0.57 ± 0.04
AD01811 0.86 ± 0.05 AD01897 0.87 ± 0.10 AD01928 0.50 ± 0.06
AD01812 1.08 ± 0.04 AD01898 1.16 ± 0.03 AD01929 0.55 ± 0.04
AD01813 0.99 ± 0.13 AD01899 0.79 ± 0.11 AD01930 0.54 ± 0.06
AD01814 0.57 ± 0.05 AD01900 0.82 ± 0.06 AD01931 0.54 ± 0.07
AD01815 0.65 ± 0.00 AD01901 0.54 ± 0.04 AD01932 0.51 ± 0.01
AD01816 0.84 ± 0.08 AD01902 0.62 ± 0.00 AD01933 0.56 ± 0.06
AD01817 0.75 ± 0.10 AD01903 0.66 ± 0.08 AD01934 0.52 ± 0.08
AD01818 0.94 ± 0.07 AD01912 0.59 ± 0.01 AD01935 0.58 ± 0.03
AD01819 1.21 ± 0.08 AD01913 0.60 ± 0.04 AD01936 0.53 ± 0.02
AD01820 1.22 ± 0.12 AD01914 0.50 ± 0.03 AD01937 0.57 ± 0.04
AD01821 1.16 ± 0.01 AD01915 0.58 ± 0.08 AD01938 0.58 ± 0.03
AD01822 1.22 ± 0.04 AD01916 0.49 ± 0.04 AD01939 0.65 ± 0.05
AD01823 0.91 ± 0.05 AD01917 0.53 ± 0.04 AD01940 0.49 ± 0.03
AD01824 1.22 ± 0.13 AD01918 0.47 ± 0.04 AD01941 0.57 ± 0.02
AD01825 1.25 ± 0.05 AD01919 0.60 ± 0.02      
AD01826 1.18 ± 0.15 AD01920 0.60 ± 0.03      
表5D. 1 mM LPA RNAi劑、LPA表現之抑制之活體外分析。
雙螺旋體編號 LPA含量 雙螺旋體編號 LPA含量 雙螺旋體編號 LPA含量
AD01760 0.10 ± 0.01 AD02330 0.37 ± 0.01 AD02090 0.68 ± 0.04
AD01722 0.14 ± 0.01 AD02243 0.37 ± 0.02 AD02161 0.68 ± 0.04
AD01757 0.15 ± 0.00 AD02255 0.38 ± 0.02 AD02324 0.68 ± 0.02
AD01719 0.15 ± 0.00 AD02257 0.38 ± 0.00 AD02177 0.69 ± 0.07
AD01738 0.18 ± 0.01 AD02169 0.38 ± 0.02 AD02179 0.69 ± 0.07
AD01755 0.19 ± 0.01 AD02081 0.38 ± 0.00 AD02527 0.69 ± 0.03
AD01741 0.20 ± 0.00 AD02186 0.38 ± 0.02 AD02305 0.69 ± 0.06
AD01759 0.23 ± 0.02 AD01744 0.38 ± 0.03 AD02092 0.70 ± 0.02
AD01747 0.23 ± 0.03 AD02075 0.38 ± 0.01 AD02535 0.70 ± 0.10
AD01752 0.24 ± 0.03 AD02135 0.38 ± 0.03 AD02376 0.71 ± 0.04
AD01736 0.24 ± 0.02 AD02114 0.38 ± 0.04 AD01743 0.71 ± 0.02
AD02311 0.25 ± 0.05 AD02188 0.38 ± 0.04 AD02289 0.71 ± 0.04
AD02201 0.25 ± 0.03 AD02318 0.38 ± 0.02 AD02530 0.71 ± 0.06
AD01750 0.25 ± 0.00 AD02388 0.38 ± 0.02 AD01709 0.71 ± 0.12
AD01756 0.25 ± 0.01 AD02115 0.38 ± 0.04 AD02249 0.71 ± 0.06
AD02291 0.25 ± 0.03 AD02133 0.38 ± 0.00 AD02534 0.71 ± 0.03
AD02292 0.26 ± 0.01 AD02183 0.38 ± 0.04 AD02213 0.71 ± 0.02
AD02266 0.26 ± 0.02 AD02116 0.38 ± 0.02 AD02529 0.71 ± 0.03
AD01763 0.26 ± 0.01 AD02132 0.39 ± 0.03 AD01711 0.71 ± 0.06
AD02259 0.26 ± 0.03 AD02400 0.39 ± 0.02 AD02341 0.72 ± 0.06
AD02327 0.26 ± 0.02 AD02338 0.39 ± 0.04 AD02233 0.72 ± 0.06
AD02274 0.27 ± 0.03 AD02112 0.39 ± 0.01 AD02342 0.73 ± 0.04
AD02297 0.27 ± 0.02 AD02354 0.39 ± 0.05 AD02395 0.73 ± 0.06
AD02147 0.27 ± 0.03 AD01749 0.40 ± 0.06 AD02306 0.73 ± 0.09
AD02365 0.27 ± 0.04 AD02312 0.40 ± 0.02 AD02344 0.73 ± 0.04
AD02260 0.27 ± 0.03 AD02240 0.40 ± 0.00 AD02145 0.74 ± 0.09
AD02368 0.27 ± 0.01 AD02313 0.40 ± 0.03 AD02326 0.74 ± 0.06
AD02265 0.28 ± 0.03 AD01710 0.40 ± 0.05 AD02414 0.74 ± 0.04
AD02293 0.28 ± 0.04 AD02301 0.40 ± 0.05 AD02379 0.74 ± 0.06
AD02350 0.28 ± 0.02 AD02425 0.40 ± 0.04 AD02532 0.75 ± 0.04
AD02202 0.28 ± 0.03 AD02099 0.41 ± 0.04 AD02178 0.75 ± 0.11
AD02203 0.28 ± 0.03 AD01723 0.41 ± 0.04 AD02195 0.75 ± 0.05
AD02258 0.28 ± 0.05 AD02391 0.41 ± 0.03 AD02123 0.76 ± 0.07
AD02295 0.28 ± 0.03 AD02392 0.41 ± 0.05 AD02164 0.77 ± 0.09
AD02363 0.28 ± 0.04 AD02083 0.41 ± 0.01 AD01726 0.77 ± 0.01
AD02273 0.28 ± 0.02 AD02155 0.41 ± 0.02 AD02231 0.77 ± 0.05
AD02386 0.28 ± 0.02 AD02082 0.41 ± 0.01 AD02180 0.77 ± 0.04
AD02309 0.28 ± 0.03 AD02336 0.41 ± 0.01 AD02412 0.77 ± 0.05
AD02382 0.29 ± 0.01 AD02101 0.41 ± 0.02 AD02251 0.77 ± 0.02
AD02256 0.29 ± 0.02 AD01728 0.42 ± 0.01 AD02396 0.78 ± 0.13
AD02367 0.29 ± 0.03 AD02424 0.42 ± 0.04 AD02160 0.78 ± 0.04
AD02275 0.29 ± 0.04 AD02175 0.42 ± 0.02 AD02533 0.78 ± 0.05
AD02206 0.29 ± 0.01 AD02225 0.42 ± 0.05 AD02290 0.78 ± 0.03
AD02332 0.29 ± 0.02 AD02086 0.43 ± 0.02 AD02378 0.78 ± 0.07
AD01717 0.29 ± 0.03 AD01725 0.43 ± 0.06 AD02394 0.79 ± 0.04
AD02296 0.29 ± 0.01 AD02374 0.43 ± 0.03 AD02415 0.79 ± 0.05
AD02264 0.29 ± 0.03 AD02390 0.43 ± 0.04 AD02181 0.79 ± 0.08
AD02278 0.29 ± 0.03 AD02227 0.43 ± 0.02 AD02492 0.79 ± 0.06
AD02385 0.29 ± 0.00 AD02137 0.43 ± 0.06 AD02397 0.79 ± 0.05
AD02205 0.29 ± 0.04 AD02085 0.43 ± 0.01 AD02398 0.79 ± 0.09
AD02149 0.29 ± 0.02 AD02407 0.43 ± 0.03 AD02416 0.79 ± 0.04
AD02239 0.30 ± 0.05 AD02100 0.44 ± 0.04 AD02144 0.79 ± 0.09
AD01748 0.30 ± 0.02 AD02406 0.44 ± 0.04 AD02531 0.79 ± 0.06
AD02404 0.30 ± 0.01 AD02136 0.44 ± 0.02 AD02489 0.80 ± 0.04
AD01721 0.30 ± 0.03 AD02209 0.44 ± 0.03 AD02307 0.80 ± 0.10
AD02277 0.30 ± 0.05 AD02154 0.44 ± 0.02 AD02308 0.80 ± 0.11
AD02152 0.30 ± 0.01 AD02171 0.44 ± 0.01 AD02182 0.80 ± 0.08
AD02237 0.30 ± 0.02 AD02261 0.45 ± 0.02 AD02198 0.80 ± 0.11
AD02098 0.30 ± 0.03 AD02271 0.45 ± 0.00 AD02199 0.80 ± 0.10
AD02381 0.30 ± 0.02 AD02371 0.45 ± 0.03 AD02200 0.80 ± 0.06
AD02315 0.30 ± 0.02 AD02173 0.45 ± 0.07 AD02125 0.81 ± 0.06
AD02366 0.30 ± 0.01 AD02319 0.45 ± 0.01 AD02141 0.81 ± 0.01
AD02242 0.31 ± 0.03 AD02176 0.46 ± 0.01 AD02516 0.81 ± 0.06
AD02294 0.31 ± 0.02 AD02428 0.46 ± 0.02 AD02127 0.81 ± 0.06
AD02346 0.31 ± 0.04 AD02410 0.46 ± 0.01 AD02380 0.81 ± 0.03
AD02329 0.31 ± 0.02 AD01746 0.46 ± 0.05 AD02124 0.81 ± 0.05
AD02348 0.31 ± 0.01 AD01732 0.46 ± 0.02 AD02197 0.81 ± 0.02
AD01714 0.31 ± 0.05 AD02157 0.47 ± 0.02 AD02159 0.81 ± 0.09
AD01724 0.31 ± 0.01 AD02372 0.47 ± 0.03 AD02485 0.82 ± 0.04
AD02170 0.31 ± 0.02 AD02427 0.47 ± 0.02 AD02142 0.82 ± 0.08
AD02352 0.31 ± 0.02 AD02370 0.47 ± 0.01 AD02126 0.82 ± 0.08
AD02093 0.31 ± 0.01 AD02172 0.47 ± 0.04 AD02254 0.82 ± 0.10
AD02383 0.31 ± 0.02 AD02158 0.47 ± 0.02 AD02232 0.82 ± 0.04
AD02284 0.31 ± 0.04 AD02270 0.48 ± 0.04 AD02146 0.82 ± 0.04
AD02219 0.31 ± 0.04 AD02426 0.48 ± 0.04 AD02490 0.82 ± 0.03
AD02279 0.31 ± 0.03 AD02361 0.48 ± 0.04 AD01745 0.82 ± 0.09
AD02299 0.31 ± 0.05 AD02245 0.48 ± 0.02 AD02162 0.83 ± 0.04
AD01740 0.31 ± 0.02 AD02373 0.48 ± 0.01 AD02471 0.83 ± 0.11
AD02417 0.32 ± 0.01 AD02084 0.48 ± 0.05 AD02487 0.83 ± 0.09
AD02364 0.32 ± 0.02 AD02194 0.48 ± 0.03 AD02523 0.83 ± 0.10
AD02262 0.32 ± 0.03 AD01753 0.48 ± 0.06 AD02483 0.83 ± 0.03
AD02369 0.32 ± 0.01 AD02320 0.48 ± 0.03 AD02128 0.84 ± 0.09
AD01731 0.32 ± 0.02 AD02268 0.48 ± 0.05 AD02143 0.84 ± 0.05
AD02349 0.32 ± 0.01 AD02226 0.49 ± 0.01 AD02214 0.84 ± 0.13
AD02095 0.32 ± 0.02 AD02156 0.49 ± 0.01 AD02217 0.84 ± 0.07
AD02281 0.32 ± 0.01 AD02409 0.49 ± 0.03 AD02250 0.84 ± 0.08
AD02224 0.32 ± 0.06 AD02244 0.49 ± 0.02 AD02163 0.85 ± 0.04
AD02148 0.32 ± 0.04 AD02189 0.49 ± 0.06 AD02525 0.85 ± 0.06
AD01718 0.33 ± 0.01 AD01764 0.50 ± 0.02 AD02481 0.85 ± 0.03
AD02333 0.33 ± 0.01 AD02174 0.50 ± 0.04 AD02235 0.85 ± 0.03
AD02403 0.33 ± 0.01 AD02117 0.50 ± 0.01 AD02539 0.86 ± 0.05
AD02317 0.33 ± 0.03 AD02208 0.50 ± 0.05 AD02470 0.86 ± 0.07
AD02399 0.33 ± 0.02 AD02104 0.51 ± 0.03 AD02469 0.86 ± 0.04
AD02222 0.33 ± 0.01 AD02408 0.51 ± 0.06 AD02480 0.86 ± 0.07
AD02310 0.33 ± 0.02 AD02272 0.51 ± 0.04 AD02488 0.87 ± 0.05
AD01733 0.33 ± 0.01 AD02122 0.51 ± 0.06 AD02511 0.87 ± 0.05
AD02131 0.33 ± 0.01 AD02140 0.51 ± 0.04 AD02482 0.87 ± 0.04
AD02353 0.33 ± 0.03 AD02362 0.51 ± 0.04 AD02519 0.87 ± 0.08
AD02263 0.33 ± 0.03 AD01739 0.52 ± 0.04 AD02491 0.88 ± 0.05
AD02204 0.33 ± 0.01 AD02121 0.52 ± 0.06 AD02216 0.88 ± 0.00
AD02080 0.33 ± 0.00 AD02138 0.52 ± 0.04 AD02215 0.88 ± 0.03
AD02298 0.33 ± 0.03 AD02358 0.52 ± 0.02 AD02468 0.88 ± 0.06
AD01737 0.33 ± 0.01 AD01734 0.53 ± 0.06 AD02526 0.88 ± 0.06
AD02220 0.33 ± 0.04 AD01713 0.53 ± 0.04 AD02234 0.88 ± 0.14
AD02302 0.33 ± 0.00 AD02285 0.53 ± 0.03 AD02518 0.89 ± 0.05
AD02097 0.33 ± 0.00 AD02102 0.53 ± 0.07 AD02218 0.89 ± 0.04
AD02328 0.33 ± 0.02 AD02303 0.53 ± 0.03 AD02515 0.89 ± 0.03
AD02221 0.33 ± 0.01 AD02212 0.53 ± 0.01 AD02536 0.89 ± 0.11
AD02421 0.33 ± 0.02 AD02139 0.53 ± 0.03 AD02537 0.89 ± 0.04
AD02420 0.33 ± 0.03 AD02230 0.54 ± 0.08 AD02465 0.89 ± 0.07
AD02347 0.33 ± 0.04 AD02103 0.54 ± 0.04 AD02196 0.90 ± 0.03
AD02134 0.34 ± 0.01 AD02191 0.54 ± 0.03 AD02253 0.90 ± 0.05
AD02078 0.34 ± 0.03 AD02429 0.54 ± 0.02 AD02484 0.90 ± 0.09
AD02151 0.34 ± 0.02 AD01716 0.54 ± 0.09 AD02467 0.91 ± 0.00
AD02238 0.34 ± 0.03 AD02360 0.54 ± 0.02 AD02538 0.91 ± 0.10
AD02168 0.34 ± 0.00 AD01762 0.54 ± 0.01 AD02478 0.91 ± 0.01
AD02096 0.34 ± 0.03 AD01735 0.55 ± 0.07 AD02479 0.92 ± 0.05
AD01758 0.34 ± 0.05 AD02248 0.55 ± 0.05 AD02540 0.92 ± 0.08
AD02077 0.34 ± 0.02 AD02193 0.55 ± 0.01 AD02524 0.92 ± 0.03
AD02345 0.34 ± 0.02 AD02119 0.55 ± 0.01 AD02466 0.92 ± 0.05
AD02384 0.34 ± 0.02 AD02287 0.55 ± 0.02 AD02520 0.92 ± 0.06
AD02094 0.34 ± 0.01 AD02357 0.56 ± 0.01 AD02498 0.92 ± 0.06
AD02419 0.34 ± 0.04 AD01708 0.57 ± 0.06 AD02472 0.92 ± 0.05
AD02401 0.34 ± 0.02 AD02247 0.57 ± 0.06 AD02106 0.93 ± 0.08
AD02402 0.34 ± 0.03 AD02430 0.58 ± 0.07 AD02486 0.93 ± 0.02
AD01712 0.34 ± 0.04 AD02339 0.58 ± 0.03 AD02236 0.93 ± 0.04
AD02276 0.34 ± 0.01 AD02321 0.59 ± 0.03 AD02543 0.93 ± 0.12
AD02150 0.34 ± 0.02 AD02269 0.59 ± 0.02 AD02517 0.94 ± 0.05
AD02166 0.34 ± 0.03 AD02210 0.59 ± 0.04 AD02505 0.94 ± 0.10
AD02351 0.34 ± 0.02 AD02211 0.60 ± 0.02 AD02464 0.94 ± 0.06
AD02241 0.35 ± 0.04 AD02091 0.60 ± 0.03 AD02499 0.94 ± 0.16
AD02282 0.35 ± 0.01 AD02120 0.60 ± 0.07 AD02500 0.94 ± 0.05
AD02130 0.35 ± 0.04 AD02229 0.60 ± 0.03 AD02544 0.95 ± 0.07
AD01751 0.35 ± 0.03 AD01727 0.60 ± 0.02 AD02541 0.95 ± 0.15
AD02356 0.35 ± 0.03 AD01730 0.60 ± 0.02 AD02509 0.95 ± 0.09
AD02405 0.35 ± 0.04 AD02190 0.60 ± 0.07 AD02508 0.95 ± 0.10
AD02129 0.35 ± 0.01 AD02411 0.60 ± 0.06 AD02510 0.95 ± 0.03
AD02355 0.35 ± 0.01 AD02322 0.61 ± 0.03 AD02521 0.96 ± 0.16
AD02423 0.35 ± 0.06 AD02433 0.61 ± 0.02 AD02507 0.96 ± 0.03
AD02316 0.35 ± 0.02 AD01761 0.62 ± 0.05 AD02105 0.96 ± 0.09
AD02331 0.35 ± 0.02 AD01720 0.62 ± 0.02 AD02495 0.96 ± 0.05
AD02335 0.35 ± 0.01 AD02228 0.62 ± 0.06 AD02504 0.97 ± 0.04
AD02187 0.35 ± 0.03 AD02393 0.62 ± 0.03 AD02493 0.97 ± 0.06
AD02314 0.36 ± 0.04 AD02359 0.62 ± 0.03 AD02542 0.97 ± 0.06
AD02300 0.36 ± 0.03 AD02323 0.62 ± 0.05 AD02503 0.98 ± 0.05
AD02387 0.36 ± 0.06 AD02118 0.63 ± 0.05 AD02107 0.98 ± 0.05
AD02337 0.36 ± 0.04 AD02286 0.63 ± 0.04 AD02477 0.98 ± 0.06
AD01729 0.36 ± 0.01 AD02087 0.63 ± 0.04 AD02501 0.98 ± 0.07
AD02283 0.36 ± 0.02 AD01715 0.63 ± 0.06 AD02497 0.98 ± 0.05
AD02185 0.36 ± 0.01 AD02192 0.63 ± 0.02 AD02494 0.98 ± 0.13
AD02167 0.36 ± 0.01 AD02431 0.64 ± 0.06 AD02475 1.00 ± 0.07
AD02076 0.36 ± 0.04 AD02340 0.64 ± 0.03 AD02514 1.00 ± 0.00
AD02418 0.36 ± 0.01 AD02432 0.64 ± 0.02 AD02474 1.00 ± 0.03
AD02422 0.36 ± 0.03 AD02089 0.65 ± 0.07 AD02502 1.01 ± 0.01
AD02111 0.36 ± 0.02 AD02267 0.65 ± 0.11 AD02522 1.01 ± 0.04
AD02079 0.37 ± 0.02 AD02246 0.65 ± 0.07 AD02476 1.01 ± 0.09
AD01754 0.37 ± 0.04 AD02325 0.65 ± 0.03 AD02513 1.02 ± 0.03
AD02334 0.37 ± 0.02 AD02343 0.66 ± 0.05 AD02109 1.02 ± 0.06
AD02280 0.37 ± 0.05 AD02375 0.66 ± 0.04 AD02252 1.02 ± 0.08
AD02113 0.37 ± 0.03 AD02288 0.66 ± 0.06 AD02496 1.04 ± 0.05
AD02389 0.37 ± 0.03 AD02088 0.66 ± 0.01 AD02473 1.05 ± 0.04
AD02223 0.37 ± 0.04 AD02413 0.66 ± 0.03 AD02506 1.05 ± 0.05
AD02184 0.37 ± 0.02 AD02377 0.67 ± 0.05 AD01742 1.07 ± 0.24
AD02153 0.37 ± 0.02 AD02528 0.67 ± 0.04 AD02110 1.08 ± 0.07
AD02165 0.37 ± 0.02 AD02434 0.67 ± 0.05 AD02512 1.09 ± 0.17
AD02207 0.37 ± 0.01 AD02304 0.67 ± 0.02 AD02108 1.11 ± 0.04
實例3. LPA RNAi EC 50 測定。使用相同的細胞及轉染條件產生十點EC 50曲線,其中LPA RNAi劑濃度在150 fM至3 nM範圍內。使用GraphPad Prism軟體測定EC 50(表6)。 表6.對於所指示LPA RNAi劑活體外測定之EC 50值(nM)。
雙螺旋體ID# EC 50(nM) 雙螺旋體ID# EC 50(nM)
AD00575 0.073 AD00635 0.577
AD00576 0.038 AD01070 0.6388
AD00578 0.112 AD01072 0.1068
AD00579 0.083 AD01073 0.1154
AD00621 0.100 AD01074 0.2903
實例4. 對結構活性關係 ( SAR ) 設計之 LPA RNAi 劑之活體外分析。針對活體外功效合成及篩分LPA RNAi劑SAR集(基於AD01532之364個序列及基於AD01533之351個序列)。出於篩分目的,將2756 bp之自KIV-3至KIV-9 (寄存編號NM_005577.1)之人類LPA cDNA序列合成及選殖(GeneWiz,South Plainfield, NJ)至市售之基於報導子之篩分質體psiCHECK2 (Promega, Madison, WI)中,該過程產生海腎螢光素酶/LPA融合mRNA。對於人類背景下之LPA RNAi劑功效而言,將HuH7細胞(人類肝細胞癌株)以約每孔7500個細胞塗覆於96孔格式中。藉由每孔25 ng LPA-psiCHECK2質體DNA及每孔0.2µL脂染胺2000在兩種濃度下(1 nM及0.1 nM,或10 nM及1 nM)共轉染LPA RNAi劑中之每一者。藉由使用雙重螢光素酶報導子分析(Promega, Madison, WI)量測相對於組成性表現之螢火蟲螢光素酶(亦存在於上psiCHECK2質體上)之含量歸一化的海腎螢光素酶含量來測定基因表現的阻斷情況(表7A及表7B)。 表7A. 如藉由雙螢光素酶報導子分析所測定之活體外LPA RNAi劑之功效篩分結果。
雙螺旋體ID編號 相對R luc-LPA表現 雙螺旋體ID編號 相對R luc-LPA表現
1 nM 0.1 nM 1 nM 0.1 nM
SD0001 0.570 0.907 SD0117 0.946 1.021
SD0002 0.873 1.061 SD0118 0.879 0.977
SD0003 0.955 1.020 SD0119 0.963 1.016
SD0004 0.845 1.007 SD0120 0.967 0.948
SD0005 0.603 0.891 SD0121 0.651 0.897
SD0006 0.551 0.780 SD0122 1.085 1.111
SD0007 0.510 0.797 SD0123 1.153 1.052
SD0008 0.544 0.892 SD0124 0.955 0.936
SD0009 0.564 0.878 SD0125 0.928 0.928
SD0010 0.542 1.051 SD0126 1.033 0.933
SD0011 0.513 0.873 SD0127 0.637 0.717
SD0012 0.533 0.963 SD0128 0.630 0.653
SD0013 0.541 0.979 SD0129 1.052 1.192
SD0014 0.551 0.987 SD0130 1.025 1.107
SD0015 0.488 0.951 SD0131 1.280 1.059
SD0016 0.588 0.868 SD0132 1.094 1.024
SD0017 1.023 1.005 SD0133 1.113 1.031
SD0018 0.866 0.965 SD0134 0.928 0.991
SD0019 0.792 1.005 SD0135 0.804 1.023
SD0020 0.633 0.860 SD0136 1.028 1.104
SD0021 0.572 0.797 SD0137 0.902 1.149
SD0022 0.610 0.874 SD0138 0.942 1.015
SD0023 0.550 0.836 SD0139 0.984 1.068
SD0024 0.597 0.859 SD0140 0.953 1.091
SD0025 0.587 0.899 SD0141 0.925 1.022
SD0026 0.570 0.898 SD0142 0.906 0.994
SD0027 0.580 0.825 SD0143 0.898 0.990
SD0028 0.612 0.885 SD0144 0.858 0.972
SD0029 0.528 0.866 SD0145 0.917 0.947
SD0030 0.657 0.825 SD0146 0.850 0.906
SD0031 0.560 0.914 SD0147 0.933 0.995
SD0032 0.664 0.976 SD0148 0.856 0.994
SD0033 0.787 1.035 SD0149 0.882 0.985
SD0034 0.739 1.002 SD0150 0.810 1.002
SD0035 0.658 0.949 SD0151 0.813 0.909
SD0036 0.554 0.896 SD0152 0.963 1.031
SD0037 0.557 0.873 SD0153 1.058 0.936
SD0038 0.528 0.854 SD0154 0.968 0.944
SD0039 0.511 0.847 SD0155 0.969 0.940
SD0040 0.554 0.976 SD0156 0.933 0.807
SD0041 0.559 0.823 SD0157 0.906 0.913
SD0042 0.496 0.825 SD0158 0.926 0.964
SD0043 0.563 0.851 SD0159 0.805 0.850
SD0044 0.476 0.861 SD0160 0.895 0.965
SD0045 0.542 0.841 SD0161 0.865 1.006
SD0046 0.651 0.980 SD0162 0.935 1.029
SD0047 0.967 0.995 SD0163 0.928 0.985
SD0048 0.694 0.936 SD0164 0.920 0.957
SD0049 0.960 0.946 SD0165 1.039 1.110
SD0050 0.692 0.971 SD0166 1.061 1.023
SD0051 0.611 0.905 SD0167 1.020 0.982
SD0052 0.657 0.849 SD0168 1.053 0.989
SD0053 0.642 0.848 SD0169 1.002 1.018
SD0054 0.598 0.852 SD0170 1.078 0.982
SD0055 0.494 0.828 SD0171 0.838 0.923
SD0056 0.524 0.885 SD0172 1.025 0.934
SD0057 0.582 0.816 SD0173 0.864 0.963
SD0058 0.597 0.866 SD0174 1.020 1.043
SD0059 0.560 0.905 SD0175 1.128 1.046
SD0060 0.594 0.849 SD0176 1.009 1.110
SD0061 0.571 1.058 SD0177 0.735 0.975
SD0062 0.871 1.157 SD0178 0.824 1.074
SD0063 0.969 1.138 SD0179 0.690 0.895
SD0064 0.555 1.019 SD0180 0.572 0.914
SD0065 0.671 0.953 SD0181 0.904 1.028
SD0066 0.561 0.951 SD0182 1.176 1.093
SD0067 0.612 0.904 SD0183 1.247 1.090
SD0068 0.573 0.938 SD0184 1.097 0.974
SD0069 0.574 0.975 SD0185 1.045 0.985
SD0070 0.606 1.030 SD0186 0.940 0.943
SD0071 0.494 0.959 SD0187 0.883 0.994
SD0072 0.557 0.892 SD0188 ND ND
SD0073 0.593 0.984 SD0189 0.872 0.977
SD0074 0.544 0.894 SD0190 0.861 1.166
SD0075 0.552 0.937 SD0191 0.779 1.044
SD0076 0.513 1.058 SD0192 0.796 1.116
SD0077 0.930 1.071 SD0193 0.975 1.112
SD0078 0.984 1.006 SD0194 0.876 1.058
SD0079 0.853 1.031 SD0195 0.747 0.970
SD0080 0.577 0.942 SD0196 0.787 1.086
SD0081 0.595 1.044 SD0197 1.276 1.127
SD0082 0.652 0.962 SD0198 1.144 1.140
SD0083 0.583 0.928 SD0199 1.136 1.101
SD0084 0.540 1.049 SD0200 0.814 0.911
SD0085 0.523 0.961 SD0201 0.733 0.915
SD0086 0.536 0.956 SD0202 0.576 0.933
SD0087 0.586 0.987 SD0203 0.593 0.824
SD0088 0.563 0.892 SD0204 0.882 1.038
SD0089 0.555 0.947 SD0205 0.681 1.012
SD0090 0.599 0.928 SD0206 0.600 0.927
SD0091 0.665 0.854 SD0207 0.738 0.974
SD0092 1.002 0.917 SD0208 0.638 0.883
SD0093 1.047 0.880 SD0209 0.641 0.878
SD0094 0.867 0.911 SD0210 0.544 0.886
SD0095 0.919 0.868 SD0211 0.702 0.920
SD0096 0.666 0.887 SD0212 0.704 0.854
SD0097 0.673 0.737 SD0213 0.655 0.887
SD0098 0.567 0.809 SD0214 0.629 0.860
SD0099 0.604 0.909 SD0215 0.598 0.850
SD0100 0.557 0.880 SD0216 0.611 0.782
SD0101 0.545 0.806 SD0217 0.710 0.806
SD0102 0.728 0.900 SD0218 0.738 0.758
SD0103 0.719 0.928 SD0219 0.664 0.809
SD0104 0.766 0.955 SD0220 1.133 0.891
SD0105 0.965 0.927 SD0221 0.940 0.914
SD0106 1.161 1.006 SD0222 0.853 0.882
SD0107 1.048 0.966 SD0223 0.691 0.889
SD0108 1.066 0.985 SD0224 0.997 1.033
SD0109 1.111 0.917 SD0225 0.954 0.998
SD0110 1.152 0.954 SD0226 1.202 0.997
SD0111 1.045 0.944 SD0227 0.948 1.017
SD0112 1.089 1.019 SD0228 0.786 0.947
SD0113 0.949 0.935 SD0229 0.620 0.830
SD0114 0.875 1.033 SD0230 0.840 0.972
SD0115 1.022 1.077 SD0231 0.904 0.890
SD0116 0.947 1.028         
表7B. 如藉由雙螢光素酶報導子分析所測定之活體外LPA RNAi劑之功效篩分結果。
雙螺旋體ID# 相對R luc-LPA表現    雙螺旋體ID# 相對R luc-LPA表現   
   10nM 1nM    10nM 1nM
SD0232 0.659 0.699 SD0474 0.621 0.598
SD0233 0.942 1.252 SD0475 0.564 0.472
SD0234 0.967 1.358 SD0476 0.769 0.631
SD0235 0.910 0.890 SD0477 0.734 0.613
SD0236 0.742 0.822 SD0478 0.460 0.411
SD0237 0.758 0.831 SD0479 0.713 0.802
SD0238 0.700 0.737 SD0480 0.883 0.892
SD0239 0.645 0.765 SD0481 0.926 0.899
SD0240 0.701 0.773 SD0482 1.180 0.937
SD0241 0.770 0.821 SD0483 0.805 0.986
SD0242 0.626 0.719 SD0484 0.920 1.104
SD0243 0.759 0.848 SD0485 0.510 0.524
SD0244 0.798 0.953 SD0486 0.626 0.598
SD0245 0.764 0.821 SD0487 0.628 0.640
SD0246 0.812 0.690 SD0488 0.597 0.637
SD0247 0.786 0.844 SD0489 0.482 0.486
SD0248 1.011 1.167 SD0490 0.685 0.664
SD0249 1.118 1.189 SD0491 0.650 0.662
SD0250 1.021 1.239 SD0492 0.454 0.490
SD0251 1.041 1.151 SD0493 1.006 1.040
SD0252 1.070 1.124 SD0494 0.933 1.024
SD0253 1.044 1.131 SD0495 0.927 1.016
SD0254 0.861 0.948 SD0496 0.921 1.004
SD0255 0.751 0.829 SD0497 0.690 0.846
SD0256 0.931 1.037 SD0498 0.970 0.913
SD0257 1.024 1.037 SD0499 0.448 0.399
SD0258 0.935 1.030 SD0500 0.614 0.485
SD0259 1.089 1.081 SD0501 0.609 0.521
SD0260 0.955 1.008 SD0502 0.626 0.526
SD0261 0.923 0.980 SD0503 0.493 0.410
SD0262 0.908 1.107 SD0504 0.727 0.551
SD0263 1.060 1.449 SD0505 0.688 0.541
SD0264 1.041 1.419 SD0506 0.319 0.338
SD0265 1.065 1.373 SD0507 0.927 0.897
SD0266 0.950 1.376 SD0508 0.929 0.972
SD0267 0.963 1.214 SD0509 0.853 0.925
SD0268 1.023 1.299 SD0510 0.755 0.935
SD0269 0.908 1.066 SD0511 0.480 0.559
SD0270 0.963 1.081 SD0512 0.834 0.854
SD0271 1.088 1.189 SD0513 0.440 0.323
SD0272 0.966 1.135 SD0514 0.415 0.414
SD0273 0.953 1.192 SD0515 0.442 0.343
SD0274 1.049 1.217 SD0516 0.422 0.341
SD0275 1.006 1.206 SD0517 0.346 0.320
SD0276 0.969 1.064 SD0518 0.488 0.420
SD0277 0.686 0.796 SD0519 0.435 0.390
SD0278 0.985 1.305 SD0520 0.819 0.737
SD0279 0.985 1.301 SD0521 1.058 0.903
SD0280 0.978 1.237 SD0522 1.088 0.933
SD0281 1.038 1.230 SD0523 1.075 0.948
SD0282 0.933 1.191 SD0524 1.067 0.900
SD0283 0.930 1.152 SD0525 0.917 0.858
SD0284 0.907 1.117 SD0526 1.126 1.055
SD0285 0.625 0.870 SD0527 0.832 0.776
SD0286 0.984 1.056 SD0528 0.980 0.886
SD0287 0.906 0.965 SD0529 1.059 0.821
SD0288 1.052 1.123 SD0530 0.934 0.844
SD0289 0.997 1.215 SD0531 0.832 0.883
SD0290 0.892 1.197 SD0532 0.936 0.868
SD0291 0.907 1.065 SD0533 0.900 0.946
SD0292 0.689 0.862 SD0534 1.012 0.984
SD0293 0.955 1.190 SD0535 1.041 1.095
SD0294 1.095 1.157 SD0536 1.113 1.097
SD0295 0.851 1.004 SD0537 1.125 0.957
SD0296 1.018 1.106 SD0538 1.059 1.162
SD0297 0.737 0.760 SD0539 0.901 0.963
SD0298 0.790 0.828 SD0540 0.900 0.924
SD0299 0.721 0.713 SD0541 1.033 0.911
SD0300 0.796 0.869 SD0542 0.958 0.906
SD0301 0.781 0.841 SD0543 0.870 0.816
SD0302 0.621 0.720 SD0544 1.100 0.853
SD0303 0.684 0.852 SD0545 0.881 0.794
SD0304 0.774 0.842 SD0546 0.897 0.813
SD0305 0.778 0.799 SD0547 1.005 0.785
SD0306 0.718 0.793 SD0548 0.972 0.866
SD0307 0.982 0.883 SD0549 1.019 1.121
SD0308 1.297 1.193 SD0550 0.986 1.015
SD0309 1.123 1.208 SD0551 0.966 1.033
SD0310 0.961 1.073 SD0552 0.893 1.028
SD0311 1.168 1.019 SD0553 0.976 0.998
SD0312 0.923 0.824 SD0554 0.938 0.935
SD0313 0.883 0.871 SD0555 0.886 0.875
SD0314 0.670 0.650 SD0556 1.181 1.142
SD0315 0.988 0.958 SD0557 1.016 0.999
SD0316 0.908 0.880 SD0558 1.026 0.968
SD0317 0.754 0.850 SD0559 0.928 0.844
SD0318 0.963 0.944 SD0560 0.990 0.805
SD0319 0.945 0.862 SD0561 0.836 0.791
SD0320 0.961 0.875 SD0562 1.021 0.772
SD0321 0.841 0.797 SD0563 0.886 0.946
SD0322 0.546 0.521 SD0564 1.194 1.254
SD0323 0.581 0.895 SD0565 1.010 1.033
SD0324 0.692 0.900 SD0566 1.110 0.993
SD0325 0.506 0.796 SD0567 0.995 0.895
SD0326 0.634 0.709 SD0568 0.964 0.901
SD0327 0.522 0.592 SD0569 0.853 0.876
SD0328 0.602 0.632 SD0570 0.832 0.860
SD0329 0.504 0.615 SD0571 1.036 0.959
SD0330 0.445 0.601 SD0572 1.013 0.902
SD0331 0.457 0.579 SD0573 0.948 0.793
SD0332 0.500 0.601 SD0574 0.868 0.812
SD0333 0.447 0.618 SD0575 0.946 0.712
SD0334 0.490 0.528 SD0576 0.922 0.774
SD0335 0.421 0.555 SD0577 0.824 0.800
SD0336 0.488 0.533 SD0578 0.997 0.950
SD0337 1.714 0.978 SD0579 1.048 1.143
SD0338 1.262 1.350 SD0580 1.071 0.935
SD0339 1.259 1.357 SD0581 0.987 0.869
SD0340 0.996 1.277 SD0582 0.946 0.816
SD0341 1.190 1.183 SD0583 0.932 0.789
SD0342 0.818 0.923 SD0584 1.062 0.866
SD0343 0.803 0.855 SD0585 1.155 0.891
SD0344 0.708 0.883 SD0586 0.960 0.819
SD0345 1.132 0.901 SD0587 0.934 0.832
SD0346 0.847 0.890 SD0588 1.033 0.781
SD0347 0.659 0.780 SD0589 0.972 0.798
SD0348 0.730 0.945 SD0590 0.925 0.704
SD0349 0.825 0.886 SD0591 1.061 0.915
SD0350 0.826 0.897 SD0592 1.129 0.996
SD0351 0.730 0.842 SD0593 0.856 0.895
SD0352 0.297 0.276 SD0594 0.840 0.956
SD0353 0.773 0.746 SD0595 0.882 0.857
SD0354 0.663 0.722 SD0596 0.856 0.896
SD0355 0.620 0.626 SD0597 0.869 0.697
SD0356 0.546 0.599 SD0598 0.878 0.700
SD0357 0.298 0.411 SD0599 0.808 0.857
SD0358 0.313 0.318 SD0600 0.856 0.823
SD0359 0.273 0.282 SD0601 0.742 0.713
SD0360 0.256 0.257 SD0602 0.740 0.846
SD0361 0.269 0.276 SD0603 0.808 0.816
SD0362 0.270 0.276 SD0604 0.561 0.527
SD0363 0.350 0.272 SD0605 0.711 0.880
SD0364 0.227 0.243 SD0606 0.852 0.922
SD0365 0.228 0.233 SD0607 0.695 0.887
SD0366 0.264 0.241 SD0608 0.635 0.917
SD0367 0.262 0.252 SD0609 0.655 0.874
SD0368 0.571 0.597 SD0610 0.596 0.765
SD0369 0.539 0.531 SD0611 0.482 0.508
SD0370 0.521 0.545 SD0612 0.629 0.578
SD0371 0.302 0.319 SD0613 0.616 0.503
SD0372 0.353 0.335 SD0614 0.716 0.682
SD0373 0.279 0.255 SD0615 0.570 0.491
SD0374 0.266 0.194 SD0616 0.671 0.668
SD0375 0.246 0.238 SD0617 0.713 0.721
SD0376 0.258 0.238 SD0618 0.819 0.862
SD0377 0.246 0.226 SD0619 0.925 0.968
SD0378 0.237 0.226 SD0620 0.859 0.978
SD0379 0.262 0.226 SD0621 0.923 1.075
SD0380 0.247 0.240 SD0622 0.900 0.988
SD0381 0.639 0.657 SD0623 0.908 0.969
SD0382 0.267 0.517 SD0624 0.775 0.889
SD0383 0.473 0.547 SD0625 0.827 0.850
SD0384 0.456 0.563 SD0626 0.832 0.796
SD0385 0.264 0.393 SD0627 0.916 0.796
SD0386 0.329 0.325 SD0628 0.863 0.898
SD0387 0.186 0.231 SD0629 0.915 0.869
SD0388 0.217 0.248 SD0630 0.893 0.856
SD0389 0.230 0.275 SD0631 0.940 0.848
SD0390 0.210 0.270 SD0632 0.878 0.911
SD0391 0.247 0.224 SD0633 0.934 1.074
SD0392 0.257 0.236 SD0634 0.915 1.019
SD0393 0.252 0.253 SD0635 0.911 0.912
SD0394 0.267 0.251 SD0636 0.852 0.911
SD0395 0.594 0.675 SD0637 0.997 0.965
SD0396 0.511 0.678 SD0638 0.983 0.935
SD0397 0.457 0.618 SD0639 0.806 0.823
SD0398 0.516 0.601 SD0640 0.838 0.846
SD0399 0.261 0.389 SD0641 0.906 0.861
SD0400 0.327 0.300 SD0642 0.740 0.836
SD0401 0.230 0.250 SD0643 0.739 0.725
SD0402 0.231 0.260 SD0644 0.780 0.762
SD0403 0.237 0.221 SD0645 0.739 0.819
SD0404 0.258 0.243 SD0646 0.734 0.798
SD0405 0.253 0.246 SD0647 0.789 0.913
SD0406 0.228 0.230 SD0648 0.707 0.946
SD0407 0.228 0.215 SD0649 0.943 1.077
SD0408 0.247 0.255 SD0650 0.729 0.872
SD0409 0.565 0.667 SD0651 0.666 0.879
SD0410 0.796 0.863 SD0652 0.704 0.882
SD0411 0.633 0.646 SD0653 0.661 0.726
SD0412 0.613 0.699 SD0654 0.751 0.881
SD0413 0.294 0.439 SD0655 0.727 0.822
SD0414 0.416 0.310 SD0656 0.746 0.839
SD0415 0.275 0.238 SD0657 0.849 0.842
SD0416 0.241 0.290 SD0658 0.835 0.796
SD0417 0.257 0.284 SD0659 0.972 0.830
SD0418 0.267 0.306 SD0660 0.772 0.672
SD0419 0.249 0.229 SD0661 0.883 0.918
SD0420 0.243 0.240 SD0662 0.934 0.952
SD0421 0.250 0.241 SD0663 0.974 0.891
SD0422 0.230 0.237 SD0664 0.939 0.936
SD0423 0.555 0.684 SD0665 1.116 0.919
SD0424 0.614 0.682 SD0666 0.924 0.954
SD0425 0.592 0.733 SD0667 0.780 0.744
SD0426 0.604 0.699 SD0668 0.795 0.726
SD0427 0.281 0.449 SD0669 0.819 0.754
SD0428 0.301 0.330 SD0670 0.856 0.830
SD0429 0.230 0.261 SD0671 0.844 0.758
SD0430 0.241 0.273 SD0672 0.978 0.952
SD0431 0.232 0.255 SD0673 0.860 0.845
SD0432 0.247 0.288 SD0674 0.526 0.566
SD0433 0.238 0.280 SD0675 0.661 0.961
SD0434 0.224 0.293 SD0676 0.690 0.916
SD0435 0.249 0.240 SD0677 0.672 0.939
SD0436 0.428 0.445 SD0678 0.821 0.973
SD0437 0.542 0.829 SD0679 0.943 0.952
SD0438 1.106 1.048 SD0680 1.018 0.991
SD0439 0.930 1.096 SD0681 0.561 0.580
SD0440 1.033 1.023 SD0682 0.777 0.688
SD0441 0.630 0.657 SD0683 0.654 0.639
SD0442 0.912 0.913 SD0684 0.691 0.622
SD0443 0.392 0.375 SD0685 0.518 0.555
SD0444 0.552 0.441 SD0686 0.661 0.738
SD0445 0.561 0.514 SD0687 0.722 0.644
SD0446 0.550 0.442 SD0688 0.416 0.385
SD0447 0.415 0.362 SD0689 0.571 0.870
SD0448 0.566 0.503 SD0690 0.697 0.946
SD0449 0.579 0.475 SD0691 0.616 0.840
SD0450 0.463 0.424 SD0692 0.644 0.850
SD0451 0.925 0.929 SD0693 0.781 0.733
SD0452 0.963 0.939 SD0694 1.022 0.902
SD0453 0.967 0.952 SD0695 0.458 0.448
SD0454 0.948 0.883 SD0696 0.500 0.455
SD0455 0.746 0.645 SD0697 0.454 0.444
SD0456 0.840 0.860 SD0698 0.497 0.467
SD0457 0.473 0.402 SD0699 0.369 0.416
SD0458 0.555 0.514 SD0700 0.622 0.552
SD0459 0.566 0.472 SD0701 0.542 0.528
SD0460 0.609 0.478 SD0702 0.301 0.423
SD0461 0.408 0.355 SD0703 0.376 0.367
SD0462 0.630 0.532 SD0704 0.373 0.334
SD0463 0.631 0.497 SD0705 0.315 0.347
SD0464 0.549 0.510 SD0706 0.339 0.351
SD0465 0.966 0.809 SD0707 0.245 0.263
SD0466 0.910 0.841 SD0708 0.572 0.703
SD0467 0.904 0.878 SD0709 0.313 0.484
SD0468 0.999 1.009 SD0710 0.297 0.431
SD0469 0.734 0.760 SD0711 0.284 0.397
SD0470 0.925 0.806 SD0712 0.300 0.471
SD0471 0.559 0.482 SD0713 0.297 0.417
SD0472 0.572 0.543 SD0714 0.300 0.438
SD0473 0.652 0.594 SD0715 0.280 0.430
實例5. 對短暫轉殖基因小鼠及轉殖基因小鼠中之 RNAi 功效之活體內分析。A) 投與及樣品收集。為了評價LPA RNAi觸發劑之活體內功效,使用短暫轉殖基因小鼠。投與結合膽固醇之LPA RNAi劑之前至少30天,藉由流體動力尾部靜脈注射對野生型小鼠注射含有SEAP基因(其在小鼠白蛋白啟動子之控制下)之質體。在質體之3'UTR中選殖 LPA基因靶向序列。將此等小鼠標記為SEAP-LPA HTV小鼠。使用MLP遞送聚合物在第1天向小鼠投與結合膽固醇之LPA RNAi劑(WO 2012/083185,以引用之方式併入本文中;藉由CDM-NAG合成及修飾蜂毒素以產生如其中所描述之MLP遞送聚合物)。各小鼠接受靜脈內(IV)注射至尾部靜脈之含有LPA RNAi劑 + MLP遞送聚合物(在大多數情況下1:1 w/w RNAi劑:MLP遞送聚合物)之劑量的200 µL至250 µL溶液。在一些實驗中,LPA RNAi劑直接結合至遞送聚合物。將結合聚合物之LPA RNAi劑類似地注射至尾部靜脈中。將指定LPA RNAi劑(表8B)結合至具有54.4%乙基胺基丙烯酸乙氧酯(EEAA)胺單體及45.6%丙烯酸丙酯丙基單體(MW 41962 g/mol,如描述於WO 2013/158141中合成之聚合物)之聚丙烯酸酯聚合物ARF1164-106A-5,且經由3×ACit-NAG、6×ACit-PEG遮蔽(如描述於WO 2012/092373及PCT/US16/34512中遮蔽之聚合物)。在第-4天或第-1天,自注射前的小鼠獲取對照血清(治療前)樣品。在第4天、第8天、第15天、第22天、第29天、第36天及第43天自小鼠獲取注射後血清樣品。對於一些小鼠,在第3天或第5天而非第4天採集樣品。 在額外實驗中,使用表達全長 LPA之短暫轉殖基因小鼠在活體內評價LPA RNAi劑。在投與膽固醇靶向LPA RNAi劑之前至少30天,藉由流體動力尾部靜脈注射對免疫缺陷(Nod.scid)小鼠注射含有 LPAcDNA之小環(其在小鼠白蛋白啟動子之控制下)。將此等小鼠標記為LPA mc HTV小鼠。在第1天向小鼠投與膽固醇靶向抑或結合NAG (亦被稱為GalNAc)之LPA RNAi劑。對於膽固醇靶向RNAi劑,各小鼠接受靜脈內(IV)注射至尾部靜脈之含有RNAi劑 + MLP遞送聚合物(1:1 w/w RNAi劑:MLP遞送聚合物)之劑量的200 µL至250 µL溶液。對於結合NAG之LPA RNAi劑,各小鼠接受皮下(SC)注射至肩部之間的背部上之鬆弛皮膚中之含有於緩衝生理鹽水中之RNAi劑之劑量的300 µL溶液。對於一些樣品,在具有抑或不具有MLP遞送肽之情況下投與LPA RNAi劑。藉由(IV)注射至尾部靜脈中之含有RNAi劑 + MLP遞送聚合物(在大多數情況下1:2 w/w RNAi劑:MLP遞送聚合物)之劑量的200 µL至250 µL溶液來投與同MLP遞送肽遞送之RNAi劑。在第-4天或第-1天,自注射前的小鼠獲取對照血清(治療前)樣品。在第4天、第8天、第15天、第22天、第29天、第36天及第43天自小鼠獲取注射後血清樣品。對於一些小鼠,在第3天或第5天而非第4天採集樣品。 在其他實驗中,向apo(a)及Lp(a)轉殖基因小鼠投與LPA RNAi劑(Frazer KA等人1995,Nature Genetics 9:424-431)。此小鼠自含有具有額外序列5'及額外序列3'兩者之完全 LPA基因(編碼apo(a)蛋白質)之YAC表現人類apo(a)。藉由將含有apo(a) YAC之小鼠與表現人類apoB-100之小鼠雜交來培育Lp(a)小鼠(Callow MJ等人,1994,PNAS 91:2130-2134)。如上文所描述投與膽固醇靶向RNAi劑及結合NAG之RNAi劑。在第1天,自注射前的小鼠獲取對照血清(治療前)樣品。在第4天、第8天、第15天、第22天、第29天、第36天、第43天、第50天、第57天及第64天自小鼠獲取注射後血清樣品。 B)LPA表現阻斷基因表現分析。對於SEAP-LPA HTV小鼠,藉由使用Phospha-Light™ (化學發光報導基因分析系統) (Life Technologies)分析來自小鼠之血清來監測血清中之SEAP蛋白質含量。對於歸一化,將各動物在給定時間點下的SEAP含量除以該動物中之治療前表現量,以測定「相對於治療前歸一化」之表現比率。接著將群組內之個體在特定時間點之表現平均。 對於LPA mc HTV小鼠及轉殖基因小鼠,藉由使用針對apo (a)之ELISA (Abcam)分析來自小鼠之血清來監測血清中之人類apo(a)蛋白質含量。對於歸一化,將各動物在時間點的apo(a)含量除以該動物之治療前表現量(在此情況下,為第1天),以測定「相對於第1天歸一化」之表現比率。接著藉由將個別動物「相對於第1天歸一化」之比率除以生理鹽水對照組中所有小鼠「相對於第1天歸一化」之平均比率而使在一特定時間點之表現相對於對照組歸一化。由此將各時間點之表現相對於對照組之表現歸一化。 根據製造商的建議在Cobas Integra 400(Roche Diagnostics)上測定Lp(a)含量。對於歸一化,將各動物在時間點的apo(a)含量除以該動物之治療前表現量(在此情況下,為第1天),以測定「相對於第1天歸一化」之表現比率。接著藉由將個別動物「相對於第1天歸一化」之比率除以生理鹽水對照組中所有小鼠「相對於第1天歸一化」之平均比率而使在一特定時間點之表現相對於對照組歸一化。由此將各時間點之表現相對於對照組之表現歸一化。 表8A.靜脈內投與結合膽固醇之LPA RNAi劑 + MLP遞送聚合物之後小鼠中之相對LPA含量。
雙螺旋體ID LPA RNAi劑 (mg/kg) MLP (mg/kg) 相對LPA
AD01184 2 2 0.20
AD01187 2 2 0.18
AD01190 2 2 0.17
AD01193 2 2 0.22
AD01196 2 2 0.02
AD01197 2 2 0.065
AD01198 2 2 0.051
AD01199 2 2 0.070
AD01200 2 2 0.094
AD01201 2 2 0.029
AD01202 8 8 0.14
AD01205 2 2 0.21
AD01206 2 2 0.37
AD01207 2 2 0.19
AD01208 2 2 0.35
AD01209 2 2 0.16
AD01210 2 2 0.18
AD01211 2 2 0.38
AD01212 2 2 0.26
AD01213 2 2 0.30
AD02662 2 2 0.0010
AD02663 2 2 0.010
AD02664 2 2 0.0010
表8B.經靜脈內投與結合遞送聚合物之LPA RNAi劑之後小鼠中之相對LPA含量。
雙螺旋體ID LPA RNAi劑 (mg/kg) 相對LPA
AD01462 0.5 0.38
AD01463 0.5 0.41
AD01466 0.5 0.33
AD01467 0.5 0.46
表8C.經皮下投與結合NAG之LPA RNAi劑之後小鼠中之相對LPA含量。
雙螺旋體ID LPA RNAi劑 (mg/kg) 相對LPA 雙螺旋體ID LPA RNAi劑 (mg/kg) 相對LPA
AD01529 10 0.068 AD02920 10 0.050
AD01530 10 0.43 AD02921 10 0.040
AD01531 10 0.62 AD02922 10 0.080
AD01532 10 0.18 AD02923 10 0.040
AD01533 10 0.30 AD02924 10 0.050
AD01534 10 0.44 AD02925 10 0.030
AD01765 10 0.14 AD02926 10 0.17
AD01766 10 0.52 AD02927 10 0.31
AD01767 10 0.51 AD02928 10 0.081
AD01768 10 0.15 AD02929 10 0.065
AD01769 10 0.56 AD02930 10 0.15
AD01770 10 0.29 AD02931 10 0.13
AD01772 10 0.25 AD02932 10 0.11
AD01773 10 0.28 AD03049 3 0.20
AD01774 10 0.24 AD03050 3 0.087
AD01780 10 0.34 AD03051 3 0.070
AD01804 10 0.68 AD03052 3 0.080
AD01976 10 0.27 AD03053 3 0.23
AD01977 10 0.27 AD03054 3 0.050
AD01978 10 0.53 AD03058 3 0.27
AD01979 10 0.044 AD03059 3 0.22
AD01980 10 0.087 AD03060 3 0.31
AD01981 10 0.074 AD03061 3 0.16
AD01982 10 0.066 AD03062 3 0.20
AD01983 10 0.078 AD03063 3 0.13
AD01984 10 0.036 AD03064 3 0.21
AD01985 10 0.0070 AD03065 3 0.085
AD01986 10 0.019 AD03066 3 0.10
AD01987 10 0.019 AD03067 3 0.094
AD01988 10 0.042 AD03068 3 0.17
AD01989 10 0.053 AD03069 3 0.077
AD01990 10 0.017 AD03070 3 0.36
AD02001 10 0.021 AD03071 3 0.043
AD02003 10 0.050 AD03072 3 0.031
AD02004 10 0.050 AD03073 3 0.019
AD02005 10 0.040 AD03074 3 0.016
AD02006 10 0.11 AD03075 3 0.062
AD02007 10 0.21 AD03114 1 0.33
AD02008 10 0.080 AD03115 1 0.30
AD02009 10 0.090 AD03116 1 0.21
AD02010 10 0.16 AD03117 1 0.14
AD02011 10 0.070 AD03118 1 0.30
AD02435 10 0.038 AD03119 1 0.10
AD02436 10 0.027 AD03120 1 0.080
AD02437 10 0.052 AD03121 1 0.14
AD02438 10 0.063 AD03122 1 0.14
AD02439 10 0.073 AD03123 1 0.34
AD02440 10 0.13 AD03156 1 0.084
AD02545 10 0.079 AD03157 1 0.016
AD02546 10 0.045 AD03158 1 0.037
AD02547 10 0.055 AD03159 1 0.63
AD02548 10 0.13 AD03272 1 0.13
AD02549 10 0.071 AD03273 1 0.20
AD02550 10 0.039 AD03274 1 0.21
AD02551 10 0.057 AD03275 1 0.15
AD02552 10 0.033 AD03276 1 0.11
AD02553 10 0.14 AD03277 1 0.13
AD02554 10 0.14 AD03278 1 0.13
AD02555 10 0.18 AD03279 1 0.21
AD02556 10 0.10 AD03341 1 0.13
AD02557 10 0.10 AD03421 1 0.29
AD02558 10 0.071 AD03430 1 0.12
AD02559 10 0.039 AD03432 1 0.16
AD02560 10 0.058 AD03434 1 0.11
AD02561 10 0.12 AD03436 1 0.21
AD02609 3 0.59 AD03438 1 0.25
AD02610 3 0.36 AD03440 1 0.21
AD02611 3 0.35 AD03460 1 0.090
AD02612 3 0.37 AD03462 1 0.40
AD02613 3 0.24 AD03495 1 0.28
AD02614 3 0.24 AD03536 1 0.14
AD02615 3 0.14 AD03538 0.5 0.26
AD02616 3 0.25 AD03539 0.5 0.21
AD02617 3 0.090 AD03540 1 0.15
AD02618 3 0.11 AD03541 0.5 0.10
AD02619 3 0.020 AD03542 1 0.94
AD02620 3 0.11 AD03547 1 0.19
AD02682 10 0.11 AD03548 1 0.73
AD02683 10 0.14 AD03549 1 0.29
AD02684 10 0.79 AD03573 1 0.15
AD02685 10 0.78 AD03574 1 0.15
AD02686 10 0.19 AD03575 1 0.13
AD02687 10 0.27 AD03576 1 0.18
AD02696 3 0.050 AD03577 0.5 0.18
AD02710 3 0.040 AD03578 0.5 0.38
AD02711 3 0.040 AD03579 0.5 0.53
AD02712 3 0.49 AD03603 1 0.083
AD02713 3 0.040 AD03604 1 0.091
AD02714 3 0.040 AD03605 1 0.19
AD02715 3 0.070 AD03608 1 0.18
AD02716 3 0.080 AD03609 1 0.16
AD02717 3 0.12 AD03610 1 0.23
AD02745 3 0.25 AD03611 1 0.40
AD02746 3 0.22 AD03612 1 0.21
AD02747 3 0.081 AD03629 1 0.11
AD02748 3 0.17 AD03668 1 0.070
AD02749 3 0.17 AD03705 0.5 0.11
AD02750 3 0.066 AD03707 0.5 0.11
AD02751 3 0.070 AD03720 0.5 0.14
AD02752 3 0.044 AD03721 0.5 0.094
AD02753 3 0.071 AD03722 0.5 0.19
AD02819 1 0.022 AD03723 0.5 0.10
AD02820 1 0.042 AD03765 1 0.080
AD02821 1 0.038 AD03771 1 0.10
AD02825 3 0.050 AD03801 1 0.15
AD02826 3 0.050 AD03802 1 0.18
AD02827 3 0.050 AD03844 1 0.17
AD02828 3 0.050 AD03845 1 0.25
AD02829 3 0.040 AD03848 1 0.10
AD02830 3 0.040 AD03850 1 0.052
AD02831 3 0.030 AD03851 1 0.076
AD02832 3 0.030 AD03852 1 0.13
AD02841 3 0.061 AD03853 1 0.081
AD02842 3 0.16 AD03854 1 0.21
AD02843 3 0.10 AD03856 1 0.32
AD02844 3 0.11 AD03859 1 0.15
AD02845 3 0.22 AD03862 1 0.12
AD02846 3 0.16 AD03863 1 0.12
AD02847 3 0.066 AD03921 1 0.17
AD02848 3 0.055 AD03922 1 0.057
AD02849 3 0.083 AD03923 1 0.066
AD02850 3 0.042 AD03924 1 0.14
AD02851 3 0.063 AD03931 1 0.34
AD02852 3 0.11 AD03932 1 0.15
AD02907 10 0.10 AD03933 1 0.34
AD02908 10 0.11 AD03424 1 0.15
AD02909 10 0.049 AD03425 1 0.21
AD02910 10 0.23 AD03426 1 0.21
AD02911 10 0.20 AD03427 1 0.19
AD02912 10 0.10 AD03428 1 0.18
AD02913 10 0.070 AD03760 0.5 0.21
AD02914 10 0.050 AD03762 0.5 0.17
AD02915 10 0.10 AD03763 0.5 0.21
AD02916 10 0.090 AD03764 0.5 0.28
AD02917 10 0.060 AD03766 0.5 0.065
AD02918 10 0.020 AD03847 1 0.15
AD02919 10 0.030 AD04110 1 0.070
實例6. 活體內篩分 LPA RNAi 劑及 SEAP 基因表現阻斷之時程。向如上文所描述之短暫轉殖基因小鼠投與結合膽固醇之LPA RNAi劑。各小鼠接受具有8 mg/kg之MLP遞送聚合物之單次靜脈內(IV)劑量之8 mg/kg之LPA RNAi劑。監測血清中之SEAP蛋白質含量持續至多36天。基因表現阻斷程度及回應之持續時間展示於表9中。在投與所有經測試之LPA RNAi劑後獲得之大於85%之SEAP血清蛋白質含量減少;除兩種外所有經測試之LPA RNAi劑展示大於99.4%之基因表現阻斷。AD01196及AD01199在第36天展示>95%之基因表現阻斷。 實例7. 活體內篩分 LPA RNAi 劑及在較低 LPA RNAi 劑量下 LPA 基因表現阻斷之時程。向如上文所描述之短暫轉殖基因小鼠投與結合膽固醇之LPA RNAi劑。各小鼠接受具有2 mg/kg之MLP遞送聚合物之單次靜脈內(IV)劑量之2 mg/kg之LPA RNAi劑。監測血清中之SEAP蛋白質含量持續至多43天(表10)。 實例8. LPA RNAi 劑在 apo ( a ) 轉殖基因 ( Tg ) 小鼠中之活體內測試。向如上文所描述之小鼠投與AD01196。各小鼠接受單次靜脈內(IV)劑量之具有2 mg/kg之MLP遞送聚合物之2 mg/kg之LPA RNAi劑抑或生理鹽水。監測血清中之人類apo(a) (apo(a))含量持續至多64天(表11)。在第15天,生理鹽水群組中之動物接受單次IV劑量之具有2 mg/kg之MLP遞送聚合物之2 mg/kg之對照小鼠因子VII (F7) RNAi劑。在第22天,量測所有動物中之F7含量。在給藥7天後F7活性基因表現阻斷99%,而在血清apo(a)含量上無效果。AD01196展示在最低點>3 log10之apo(a)含量之基因表現阻斷,在3週之後觀測到>80%之基因表現阻斷(表11)。 表9.在投與具有8 mg/kgMLP遞送肽之8 mg/kg膽固醇-RNAi劑後SEAP-LPA HTV小鼠中之血清 SEAP蛋白質含量。SEAP含量相對於第-1天及生理鹽水對照歸一化。
治療 第-1天 第4天 第8天 第15天 第22天 第29天 第36天
Ave SD Ave SD Ave SD Ave SD Ave SD Ave SD Ave SD
生理鹽水 1.00 0.24 1.00 0.34 1.00 0.13 1.00 0.33 1.00 0.09 1.00 0.18 1.00 0.44
AD01184 1.00 0.39 0.27 0.10 0.15 0.06 0.01 0.00 0.07 0.04 0.43 0.39 0.98 0.73
AD01187 1.00 0.53 0.24 0.15 0.13 0.10 0.00 0.00 0.01 0.01 0.08 0.06 0.56 0.47
AD01190 1.00 0.77 0.26 0.20 0.14 0.11 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.02 0.01
AD01193 1.00 0.99 0.25 0.26 0.15 0.17 0.01 0.01 0.00 0.00 0.01 0.01 0.02 0.01
AD01196 1.00 0.59 0.24 0.13 0.14 0.08 0.00 0.00 0.00 0.00 0.01 0.01 0.04 0.03
AD01199 1.00 0.52 0.23 0.15 0.13 0.10 0.00 0.00 0.00 0.00 0.01 0.00 0.04 0.02
AD01202 1.00 0.93 0.25 0.24 0.17 0.16 0.14 0.12 0.56 0.55 0.78 0.66 2.09 2.00
表10.在投與具有2 mg/kg MLP遞送肽之2 mg/kg膽固醇-RNAi劑後SEAP-LPA HTV小鼠中之血清 SEAP蛋白質含量。SEAP含量相對於第-1天及生理鹽水對照歸一化。
治療 第-4天 第4天 第9天 第15天 第22天 第29天 第36天 第43天
Ave. SD Ave. SD Ave. SD Ave. SD Ave. SD Ave. SD Ave. SD Ave. SD
生理鹽水 1.00 0.00 1.00 0.72 1.00 0.72 1.00 0.71 1.00 0.43 1.00 0.79 1.00 0.48 1.00 0.54
AD01196 1.00 0.00 0.22 0.08 0.05 0.05 0.02 0.01 0.13 0.04 0.36 0.12 0.69 0.08 1.39 0.91
AD01199 1.00 0.00 0.27 0.28 0.07 0.06 0.17 0.17 0.59 0.51 0.74 0.74 0.83 0.82 1.01 0.58
AD01205 1.00 0.00 0.21 0.13 0.31 0.23 0.45 0.21 1.33 0.68 1.11 0.82 1.55 1.30 1.79 1.09
AD01208 1.00 0.00 0.43 0.20 0.35 0.15 0.68 0.19 1.45 0.44 1.32 0.26 1.39 0.52 0.99 0.12
AD01211 1.00 0.00 0.38 0.14 0.53 0.20 0.94 0.38 1.96 0.93 1.05 0.27 1.44 0.38 0.93 0.28
AD01184 1.00 0.00 0.26 0.07 0.20 0.05 0.61 0.17 1.28 0.14 1.21 0.51 1.39 0.80 ND ND
AD01187 1.00 0.00 0.37 0.18 0.09 0.07 0.18 0.17 0.86 0.84 0.77 0.33 1.80 0.36 ND ND
AD01190 1.00 0.00 0.26 0.08 0.17 0.07 0.36 0.13 1.16 0.37 1.39 0.69 1.96 1.64 ND ND
AD01193 1.00 0.00 0.39 0.27 0.22 0.33 0.32 0.37 0.67 0.58 0.84 0.46 1.27 0.23 ND ND
表11. 投與具有2 mg/kg MLP遞送聚合物之2 mg/kg結合膽固醇之LPA RNAi劑之後apo(a) Tg小鼠中的血清apo(a)蛋白質含量。apo(a)含量相對於第-1天及生理鹽水對照歸一化。
治療 第-1天 第4天 第8天 第15天 第22天
Ave SD Ave SD Ave SD Ave SD Ave SD
生理鹽水 1.00 0.00 1.00 0.06 1.00 0.27 1.00 0.06 1.00 0.17
AD01196 1.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.01 0.00 0.15 0.08
                                
   第29天 第36天 第43天 第50天      
   Ave SD Ave SD Ave SD Ave SD      
生理鹽水 1.00 0.12 1.00 0.04 1.00 0.26 1.00 0.24      
AD01196 0.40 0.23 0.74 0.61 0.75 0.67 0.77 0.52      
實例9. 在藉由 MLP 遞送聚合物遞送 LPA RNAi 劑之後 非人類靈長類動物中之載脂蛋白 ( a ) ( apo ( a )) 基因表現阻斷。製得MLP遞送聚合物與LPA RNAi劑且合併於如上文所描述之醫藥學上可接受之緩衝劑中。在第1天,向兩個獼猴(食蟹獼猴)靈長類動物(皆為雄性,分別5.0 kg及8.15 kg)注射2 mg/kg AD01196 + 2 mg/kg MLP遞送聚合物。對於每次注射,使用22至25號靜脈內導管將LPA RNAi劑 + MLP遞送聚合物(2 ml/kg)注入隱靜脈中。在指定時間點處(指定於表12中),抽取血液樣本並分析apo(a)含量、脂質含量及毒性標記。自股靜脈收集血液且靈長類動物在所有血液收集之前均禁食隔夜。在Meriter實驗室在自動化化學分析儀上,對於血液尿素氮(BUN)、丙胺酸轉胺酶(ALT)、天冬胺酸轉胺酶(AST)、肌酐、總膽固醇(TC)及甘油三酯(TG)進行血液測試。在自動化化學分析儀上,量測對於脂蛋白(a) (Lp(a))及低密度脂蛋白(LDL)之血液測試。藉由ELISA量測血清apo(a)含量。觀測到apo(a)之顯著基因表現阻斷,第22天觀測到94.5%之平均最大基因表現阻斷。第15天觀測到91.5%之Lp(a)之平均最大基因表現阻斷(圖3)。在經治療之動物中未觀測到劑量相關毒性。 表12.在投與具有2 mg/kg MLP遞送聚合物之2 mg/kg AD01196之後獼猴(食蟹獼猴)靈長類動物中之血清apo(a)蛋白質、脂蛋白(a) (mg/dL)、低密度脂蛋白(LDL)、總膽固醇及三酸甘油酯含量。apo(a)含量相對於給藥前歸一化。
血清apo(a)蛋白質含量 脂蛋白(a)含量(mg/dL) 所計算的低密度脂蛋白(mg/dL) 總膽固醇(mg/dL) 甘油三酯(mg/dL)
動物1 動物2 動物1 動物2 動物1 動物2 動物1 動物2 動物1 動物2
給藥前 1.00 1.00 77.1 126.7 48.4 84.7 95 149 41 36
3 0.47 0.55 46.0 65.0 53.6 83.5 93 143 33 28
8 0.12 0.15 9.3 16.5 53.4 75.9 101 147 36 30
15 0.10 0.10 5.0 7.3 49.8 60.9 106 136 79 34
22 0.05 0.06 7.9 10.3 47.5 63.9 97 136 34 36
29 0.08 0.11 13.4 27.0 55.7 47.5 101 116 20 36
36 0.15 0.25 22.2 50.6 56.8 73.1 - - - -
43 0.19 0.23 31.4 45.5 53.8 55.7 103 138 29 39
50 0.27 0.29 46.1 67.3 52.3 70.9 - - - -
57 0.27 0.3 52.7 69.7 52.1 78.6 104 157 34 39
64 0.33 0.31 68.4 73.7 52.4 75.8 - - - -
71 0.50 0.4 76.8 78.6 62.4 75.0 104 149 43 47
85 0.31 0.34 63.1 75.4 50.3 68.8 102 145 41 49
99 0.27 0.29 67.9 78.8 58.7 72.5 102 150 42 52
120 0.36 0.37 91.7 119.4 53.4 79.8 100 154 43 51
表13.投與具有2 mg/kg MLP遞送聚合物之2 mg/kg AD01196後,獼猴(食蟹獼猴)靈長類動物中的尿素氮、肌酐、丙胺酸轉胺酶及天冬胺酸轉胺酶含量。
   血液尿素氮(mg/dL) 肌酐(mg/dL) 丙胺酸轉胺酶(U/L) 天冬胺酸轉胺酶(U/L)
動物1 動物2 動物1 動物2 動物1 動物2 動物1 動物2
給藥前 16 16 0.79 0.70 37 32 32 33
3 11 14 0.70 0.61 40 42 33 35
8 14 13 0.78 0.58 33 38 25 31
15 15 15 0.67 0.59 51 35 47 32
22 15 15 0.8 0.55 47 35 29 30
29 12 12 0.61 0.59 30 31 23 36
36 - - - - - - - -
43 12 15 0.64 0.58 29 29 25 30
50 - - - - - - - -
57 14 15 0.72 0.64 32 35 28 31
64 - - - - - - - -
71 14 15 0.73 0.69 36 35 29 33
85 14 15 0.60 0.70 126 41 51 40
99 15 18 0.66 0.68 151 40 44 37
120 14 19 0.72 0.60 37 51 28 47
實例10.活體內篩分結合 NAG LPA RNAi劑及基因表現阻斷之時程。向如上文所描述之短暫轉殖基因小鼠投與結合NAG之LPA RNAi劑。各小鼠接受單次靜脈內(IV)劑量之具有1 mg/kg之MLP遞送聚合物之2 mg/kg之LPA RNAi劑,抑或單次皮下(SC)劑量之10 mg/kg之結合NAG之LPA RNAi劑。監測血清中之SEAP蛋白質含量持續至多22天。基因表現阻斷程度及回應之持續時間展示於表14至表15中。AD01529、AD01532及AD01533展示在IV投與MLP傳遞聚合物之後SEAP含量之≥85%基因表現阻斷,及在僅SC投與結合NAG之LPA RNAi劑之後SEAP含量之≥60%最大基因表現阻斷。 表14.在SC投與10 mg/kg結合NAG之LPA RNAi劑之後SEAP-LPA HTV小鼠中之血清SEAP蛋白質含量。SEAP含量相對於第-1天及生理鹽水對照歸一化。
治療 第-1天 第4天 第8天 第15天 第22天
Ave SD Ave SD Ave SD Ave SD Ave SD
生理鹽水 1.00 0.00 1.00 0.14 1.00 0.14 1.00 0.66 1.00 0.27
AD01529 1.00 0.00 0.45 0.07 0.36 0.03 0.60 0.08 0.90 0.37
AD01530 1.00 0.00 0.46 0.15 0.43 0.10 0.79 0.26 0.79 0.32
AD01531 1.00 0.00 0.64 0.13 0.62 0.06 0.99 0.28 1.17 0.29
AD01532 1.00 0.00 0.41 0.12 0.37 0.11 0.99 0.34 1.33 0.11
AD01533 1.00 0.00 0.40 0.03 0.22 0.08 0.37 0.15 0.63 0.13
AD01534 1.00 0.00 0.65 0.19 0.44 0.19 0.74 0.30 1.17 0.55
表15.在IV投與1 mg/kg結合NAG之LPA RNAi劑+ 2 mg/kg MLP遞送聚合物之後SEAP-LPA HTV小鼠中之血清SEAP蛋白質含量。SEAP含量相對於第-1天及生理鹽水對照歸一化。
治療 第-1天 第4天 第8天 第15天 第22天
Ave SD Ave SD Ave SD Ave SD Ave SD
生理鹽水 1.00 0.00 1.00 0.33 1.00 0.46 1.00 0.21 1.00 0.39
F7對照 1.00 0.00 0.61 0.05 0.71 0.45 1.25 0.44 1.05 0.49
AD01529 1.00 0.00 0.25 0.04 0.15 0.08 0.47 0.24 0.81 0.40
AD01530 1.00 0.00 0.26 0.06 0.28 0.19 0.78 0.60 1.06 0.63
AD01531 1.00 0.00 0.22 0.07 0.26 0.06 0.72 0.21 1.04 0.12
AD01532 1.00 0.00 0.18 0.05 0.06 0.03 0.13 0.08 0.29 0.18
AD01533 1.00 0.00 0.21 0.04 0.13 0.06 0.32 0.15 0.67 0.28
AD01534 1.00 0.00 0.17 0.04 0.22 0.06 0.66 0.24 0.94 0.24
實例11. 活體內篩分經修飾之結合 NAG LPA RNAi 劑及基因表現阻斷之時程。向如上文所描述之SEAP-LPA HTV小鼠投與指定之結合NAG之LPA RNAi劑。各小鼠接受單次皮下(SC)劑量之10 mg/kg的結合NAG之LPA RNAi劑。監測血清中之SEAP蛋白質含量持續至多22天。基因表現阻斷程度及回應之持續時間展示於表16至表17中。AD01765及AD01768展示89%之基因表現阻斷活性。 表16.在SC投與10 mg/kg結合NAG之LPA RNAi劑之後SEAP-LPA HTV小鼠中之血清SEAP蛋白質含量。SEAP含量相對於第-1天及生理鹽水對照歸一化。
治療 第-1天 第3天 第8天 第15天 第22天
Ave SD Ave SD Ave SD Ave SD Ave SD
生理鹽水 1.00 0.00 1.00 0.16 1.00 0.16 1.00 0.28 1.00 0.24
AD01533 1.00 0.00 0.41 0.08 0.22 0.02 0.47 0.20 0.66 0.29
 AD01772 1.00 0.00 0.46 0.13 0.18 0.00 0.34 0.09 0.61 0.14
 AD01773 1.00 0.00 0.47 0.08 0.20 0.08 0.45 0.15 0.83 0.12
 AD01774 1.00 0.00 0.49 0.09 0.18 0.03 0.44 0.13 0.68 0.08
 AD01780 1.00 0.00 0.52 0.13 0.25 0.09 0.44 0.26 0.65 0.37
表17.在SC投與10 mg/kg結合NAG之LPA RNAi劑之後SEAP-LPA HTV小鼠中之血清SEAP蛋白質含量。SEAP含量相對於第-1天及生理鹽水對照歸一化。
治療 第-1天 第3天 第8天 第15天 第22天
Ave SD Ave SD Ave SD Ave SD Ave SD
生理鹽水 1.00 0.00 1.00 0.27 1.00 0.73 1.00 0.87 1.00 0.80
 AD01532 1.00 0.00 0.42 0.19 0.35 0.21 0.85 0.25 1.27 0.57
 AD01765 1.00 0.00 0.35 0.02 0.11 0.08 0.25 0.14 0.47 0.19
 AD01766 1.00 0.00 0.52 0.10 0.36 0.09 1.05 0.13 1.15 0.08
 AD01767 1.00 0.00 0.49 0.03 0.44 0.05 1.43 0.23 1.33 0.71
 AD01768 1.00 0.00 0.34 0.15 0.11 0.07 0.39 0.13 0.76 0.19
 AD01769 1.00 0.00 0.54 0.17 0.46 0.14 1.32 0.12 1.38 0.37
 AD01770 1.00 0.00 0.41 0.07 0.20 0.10 0.80 0.52 1.04 0.67
實例12. 活體內測試 apo ( a ) Tg 小鼠中之結合 NAG LPA RNAi 劑。向如上文所描述之apo(a) Tg小鼠投與結合NAG之LPA RNAi劑。各小鼠接受單次皮下(SC)劑量之10 mg/kg之LPA RNAi劑抑或生理鹽水。監測血清中之人類apo(a) (apo(a))含量持續至多22天(表18)。AD01765展示在第8天96%基因表現阻斷之apo(a)含量之最大基因表現阻斷,及在給藥後3週之後觀測到的>74%之基因表現阻斷。 表18.在SC投與10 mg/kg結合NAG之LPA RNAi劑之後apo(a) Tg小鼠中之血清apo(a)蛋白質含量。apo(a)含量相對於第-1天及生理鹽水對照歸一化。
治療 第-1天 第4天 第8天 第15天 第22天
Ave SD Ave SD Ave SD Ave SD Ave SD
生理鹽水 1.00 0.00 1.00 0.10 1.00 0.16 1.00 0.42 1.00 0.21
AD01532 1.00 0.00 0.12 0.05 0.22 0.08 0.76 0.30 0.56 0.28
AD01765 1.00 0.00 0.09 0.03 0.04 0.02 0.14 0.02 0.26 0.04
AD01768 1.00 0.00 0.11 0.05 0.09 0.05 0.26 0.12 0.38 0.08
實例13. 活體內測試 LPA mc HTV 小鼠中之結合 NAG LPA RNAi 劑。向如上文所描述之LPA mc HTV小鼠投與指定之結合NAG之LPA RNAi劑。各小鼠接受單次皮下(SC)劑量之10 mg/kg之LPA RNAi劑抑或生理鹽水。在第4天分析血清中之人類apo(a) (apo(a))含量(表19)。AD02001、AD01765及AD01768展示在第4天>90%之基因表現阻斷。 表19.在SC投與10 mg/kg結合NAG之LPA RNAi劑之後LPA mc HTV小鼠中之血清apo(a)蛋白質含量。apo(a)含量相對於第-1天及生理鹽水對照歸一化。
治療 預取血 第4天
Ave SD Ave SD
生理鹽水 1.00 0.00 1.00 0.12
AD01765 1.00 0.00 0.05 0.02
AD01768 1.00 0.00 0.07 0.01
AD01804 1.00 0.00 0.68 0.16
AD02001 1.00 0.00 0.06 0.03
實例14. 在藉由 MLP 遞送聚合物遞送 LPA RNAi 劑之後 非人類靈長類動物中之載脂蛋白 ( a ) ( apo ( a )) 基因表現阻斷。製得MLP遞送聚合物與LPA RNAi劑且合併於醫藥學上可接受之緩衝劑中。在第1天及第71天,向兩個獼猴(食蟹獼猴)靈長類動物注射4 mg/kg AD01196 + 4 mg/kg MLP遞送聚合物抑或6 mg/kg AD01196 + 6 mg/kg MLP遞送聚合物。對於每次注射,使用22至25號靜脈內導管將LPA RNAi劑 + MLP遞送聚合物注入隱靜脈中。在指定時間點處(圖4),如先前所描述抽取血液樣本並分析apo(a)含量、脂質含量及毒性標記。在第一次給藥之後觀測到apo(a)之顯著基因表現阻斷,第15天對於4 mg/kg劑量觀測到96%之平均最大基因表現阻斷,且第15天對於6 mg/kg劑量觀測到96%之平均最大基因表現阻斷。Lp(a)之平均最大基因表現阻斷在第一次給藥之後對於4 mg/kg劑量在第29天為98.5%,且對於6 mg/kg劑量在第22天為98.5%。在經治療之動物中未觀測到劑量相關毒性。 實例15. 活體內測試 Lp ( a ) Tg 小鼠劑量反應中之結合 NAG LPA RNAi 劑。向如上文所描述之Lp(a) Tg小鼠投與結合NAG之LPA RNAi劑。各小鼠接受單次皮下(SC)劑量0.5 mg/kg或2 mg/kg劑量含量之LPA RNAi劑抑或生理鹽水。監測血清中之Lp(a)含量至多43天(圖1、圖2)。所有LPA RNAi劑展示具有較高劑量之劑量反應展示較大基因表現阻斷,其中最低點在第15天與第22天之間。 實例16. 在遞送 apo ( a ) 特異性 LPA RNAi 分子 之後 非人類靈長類動物中之載脂蛋白 ( a ) ( apo ( a )) 基因表現阻斷。將LPA RNAi劑製備於如本文所描述之醫藥學上可接受之緩衝劑,用於皮下(SC)注射。在第1天、第7天及第15天,向兩個獼猴(食蟹獼猴)靈長類動物皮下注射3 mg/kg之AD02713、AD02819、AD02820或AD02821。另外,在第57天及第85天向經AD02819治療之猴再次給藥3 mg/kg之AD02819。抽取血液樣本並分析如先前所描述之apo(a)含量、脂質含量及毒性標記。觀測到Lp(a)之顯著基因表現阻斷,對於AD02713在第43天觀測到89%之平均最大基因表現阻斷,對於AD02819在第36天觀測到87%之平均最大基因表現阻斷,對於AD02820在第36天觀測到79%之平均最大基因表現阻斷,且對於AD02821在第29天觀測到95%之平均最大基因表現阻斷(圖5)。經過實驗之時間在經治療之動物中未觀測到劑量相關毒性。 實例17. 在遞送 LPA RNAi 劑之後 非人類靈長類動物中之載脂蛋白 ( a ) ( apo ( a )) 基因表現阻斷。將LPA RNAi劑製備於如本文所描述之醫藥學上可接受之緩衝劑,用於皮下(SC)注射。在第1天,向兩個獼猴(食蟹獼猴)靈長類動物皮下注射3 mg/kg之AD03272、AD03462、AD03549、AD03547、AD03668、AD03460或AD03536。另外,在第48天向經AD03460及AD03536治療之猴再次給藥1 mg/kg之相對應的LPA RNAi劑。抽取血液樣本並分析如先前所描述之apo(a)含量、脂質含量及毒性標記。觀測到Lp(a)之顯著基因表現阻斷,對於AD03272在第15天觀測到62%之平均最大基因表現阻斷,對於AD03462在第15天觀測到28%之平均最大基因表現阻斷,對於AD03549在第29天觀測到47%之平均最大基因表現阻斷,對於AD03547在第15天觀測到44%之平均最大基因表現阻斷,對於AD03668在第22天觀測到53%之平均最大基因表現阻斷,對於AD03460在第29天觀測到79%之平均最大基因表現阻斷,且對於AD03536在第22天觀測到71%之平均最大基因表現阻斷(圖6)。經過實驗之時間在經治療之動物中未觀測到劑量相關毒性。 實例18. 在遞送 apo ( a ) 特異性 LPA RNAi 分子 之後 靈長類動物中之載脂蛋白 ( a ) ( apo ( a )) 基因表現阻斷。製得MLPLPA RNAi劑且合併於如上文所描述之醫藥學上可接受之緩衝劑中用於皮下(SQ)注射。在第1天,向獼猴(食蟹獼猴)靈長類動物皮下注射生理鹽水或2 mg/kg之AD03460、AD03536、AD03851、AD03853或AD04110。在第8天抽取血液樣本並分析如先前所描述之apo(a)含量、脂質含量及毒性標記。Lp(a)含量相對於三個給藥前值之平均值歸一化。 表20.在投與生理鹽水或2 mg/kg AD03460、AD03536、AD03851、AD03853或AD04110之後獼猴靈長類動物中之脂蛋白(a)含量。
   歸一化Lp(a) St Dev.
生理鹽水 1.01 0.06
AD03460 0.68 0.12
AD03536 0.54 0.07
AD03851 0.41 0.08
AD03853 0.50 0.23
AD04110 0.59 0.13
圖1。說明在單個皮下投與0.5 mg/kg(虛線)或2 mg/kg(實線)之指定LPA RNAi劑之後Lp(a)轉殖基因(Tg)小鼠中之血清Lp(a)蛋白質含量之曲線。Lp(a)含量相對於第1天及生理鹽水對照歸一化。 圖2。說明在投與三個皮下劑量之1 mg/kg(虛線)或3 mg/kg(實線)之指定LPA RNAi劑(一週一次投與三週(於第1天、第8天及第15天給藥))之後Lp(a)Tg小鼠血清Lp(a)蛋白質含量之曲線。Lp(a)含量相對於第1天及生理鹽水對照歸一化。 圖3。說明在第1天以1:1(wt/wt)投與單個2 mg/kg之遞送聚合物: AD01196 LPA RNAi劑之後獼猴血清中之Lp(a)粒子含量之曲線。將Lp(a)含量歸一化至兩個先前劑量之值(展示為第0天)。 圖4。說明在第1天及第71天以1:1(wt/wt)投與4 mg/kg或6 mg/kg之遞送聚合物:LPA RNAi之後獼猴血清中之Lp(a)粒子含量之曲線。將Lp(a)含量歸一化至兩個先前劑量之值(展示為第0天)。4 mg/kg劑量=黑色圓圈;6 mg/kg劑量=灰色方塊。 圖5。說明在第1天、第8天及第15天之三個每週皮下劑量之3 mg/kg之AD02819 LPA RNAi劑之後獼猴血清中之Lp(a)粒子含量之曲線。將Lp(a)含量歸一化至三個先前劑量之值(展示為第0天)。 圖6。說明在第1天單個皮下投與3 mg/kg之LPA RNAi劑之後獼猴血清中之Lp(a)粒子含量之曲線。AD03460及AD03536組在第48天接收到額外1 mg/kg劑量之LPA RNAi劑。將Lp(a)含量歸一化至三個先前劑量之值(展示為第0天)。
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          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
          <![CDATA[<222>  3,9,11,15]]>
          <![CDATA[<223>  /mod_base =「2'-去氧-2'-氟核苷」]]>
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          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
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          <![CDATA[<223>  /mod_base =「2'-O-甲基核苷」]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
          <![CDATA[<222>  3,4,24,25]]>
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          tggagaauga gccucgauaa cucuua                         26
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          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
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          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
          <![CDATA[<222>  1,3,5,6,7,8,9,11,13,14,15,17,18,19,20,21,22,23,24,25,26]]>
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          guggagaaug agccucgaua acucuu                         26
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          ucguauaaca auaaggggcu u                              21
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          ugagaaugag ccucgauaau u                              21
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          <![CDATA[<212>  DNA]]>
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          <![CDATA[<222>  2,4,6,8,10,12,14]]>
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          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<221]]>>  modified_base]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;222&gt;  1,3,5,7,9,11,13,15]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;223&gt;  /mod_base =「2'-O-甲基核苷」]]&gt;
          <br/>
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;220&gt;  ]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;221&gt;  modified_base]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;222&gt;  16,17]]&gt;
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          <br/>
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;220&gt;  ]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;221&gt;  modified_base]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;222&gt;  2,3]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;223&gt;  /mod_base =「硫代磷酸酯鍵聯之核苷」]]&gt;
          <br/>
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;220&gt;  ]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;221&gt;  modified_base]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;222&gt;  17]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;223&gt;  /mod_base =「3'端s(C12)s(PAZ)修飾」]]&gt;
          <br/>
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;400&gt;  ]]&gt;
          <br/><![CDATA[uguauaacaa uaagggg                                   17
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          ucguauaaca auaaggg                                   17
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          <![CDATA[<22]]>3>  /mod_base =「2'-O-甲基核苷」]]&gt;
          <br/>
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;220&gt;  ]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;221&gt;  modified_base]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;222&gt;  16,17]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;223&gt;  /mod_base =「2'-MOE核苷」]]&gt;
          <br/>
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;220&gt;  ]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;221&gt;  modified_base]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;222&gt;  2,3]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;223&gt;  /mod_base =「硫代磷酸酯鍵聯之核苷」]]&gt;
          <br/>
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;220&gt;  ]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;221&gt;  modified_base]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;222&gt;  17]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;223&gt;  /mod_base =「3'端s(C12)s(PAZ)修飾」]]&gt;
          <br/>
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;40]]&gt;<![CDATA[0>  ]]&gt;
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          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<221]]>>  modified_base]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;222&gt;  2,3,4,21]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;223&gt;  /mod_base =「硫代磷酸酯鍵聯之核苷」]]&gt;
          <br/>
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;220&gt;  ]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;221&gt;  modified_base]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;222&gt;  1]]&gt;
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;223&gt;  /mod_base =「5'端膦酸環丙酯修飾」]]&gt;
          <br/>
          <br/>&lt;![CDATA[&lt;400&gt;  ]]&gt;
          <br/><![CDATA[tcguauaaca auaaggggcu u                              21
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          <![CDATA[<400>  ]]>
          ugagaaugag ccucgauaau uauaua                         26
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          aacagaauca gguguca                                   17
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          uauauaguua ucgaggcuca uucuca                         26
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          <br/>&lt;![CDATA[&lt;220&gt;  ]]&gt;
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          <br/>&lt;![CDATA[&lt;221&gt;  modified_base]]&gt;
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          gccccuuauu guuauacga                                 19
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          <![CDATA[<212>  RNA]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<223>  LPA RNAi劑反義股]]>
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          ucguauaaca auaagggg                                  18
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          <![CDATA[<211>  18]]>
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          <![CDATA[<220>  ]]>
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          ccccuuauug uuauacga                                  18
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          ucguauaaca auaaggg                                   17
          <![CDATA[<210>  1247]]>
          <![CDATA[<211>  17]]>
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          <![CDATA[<223>  LPA RNAi劑有義股]]>
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          cccuuauugu uauacga                                   17
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          tgagaaugag ccucgauaa                                 19
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          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<223>  LPA RNAi劑有義股]]>
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          uuaucgaggc ucauucuca                                 19
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          <![CDATA[<211>  18]]>
          <![CDATA[<212>  RNA]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<223>  LPA RNAi劑反義股]]>
          <![CDATA[<400>  ]]>
          ugagaaugag ccucgaua                                  18
          <![CDATA[<210>  1251]]>
          <![CDATA[<211>  18]]>
          <![CDATA[<212>  RNA]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<223>  LPA RNAi劑有義股]]>
          <![CDATA[<400>  ]]>
          uaucgaggcu cauucuca                                  18
          <![CDATA[<210>  1252]]>
          <![CDATA[<211>  17]]>
          <![CDATA[<212>  RNA]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<223>  LPA RNAi劑反義股]]>
          <![CDATA[<400>  ]]>
          ugagaaugag ccucgau                                   17
          <![CDATA[<210>  1253]]>
          <![CDATA[<211>  17]]>
          <![CDATA[<212>  RNA]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<223>  LPA RNAi劑有義股]]>
          <![CDATA[<400>  ]]>
          aucgaggcuc auucuca                                   17
          <![CDATA[<210>  1254]]>
          <![CDATA[<211>  17]]>
          <![CDATA[<212>  RNA]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<223>  LP]]>A RNAi劑反義股
          <![CDATA[<400>  ]]>
          uguauaacaa uaagggg                                   17
          <![CDATA[<210>  1255]]>
          <![CDATA[<211>  17]]>
          <![CDATA[<212>  RNA]]>
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          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<223>  LPA RNAi劑有義股]]>
          <![CDATA[<400>  ]]>
          ccccuuauug uuauaca                                   17
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          <![CDATA[<212>  DNA]]>
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          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
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          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
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          <![CDATA[<223>  /mod_base =「硫代磷酸酯鍵聯之核苷」]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
          <![CDATA[<222>  1]]>
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          ngccccuuau uguuauacga uun                            23
          <![CDATA[<210>  1257]]>
          <![CDATA[<211>  21]]>
          <![CDATA[<212>  DNA]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<223>  LPA RNAi劑有義股]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
          <![CDATA[<223>  9,10,11]]>
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          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
          <![CDATA[<222>  1,2,3,4,5,6,7,8,12,13,14,15,16,17,18,19,20]]>
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          <![CDATA[<223>  /mod_base =「硫代磷酸酯鍵聯之核苷」]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
          <![CDATA[<222>  1]]>
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          cagccccuua uuguuauacg a                              21
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          gccccuuauu guuauacga                                 19
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          acagccccuu auuguuauac ga                             22
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          aaagccccuu auuguuauac ga                             22
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          <![CDATA[<222>  3,5,7,11,13,15,17,19,20,21]]>
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          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
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          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
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          <![CDATA[<223>  /mod_base =「5'端膦酸環丙酯修飾」]]>
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          <![CDATA[<222>  2,3,4,21]]>
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          tcguauaaca auaaggggcu u                              21
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          <br/>&lt;![CDATA[&lt;221&gt;  modified_base]]&gt;
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          <![CDATA[<223>  /mod_base =「硫代磷酸酯鍵聯之核苷」]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
          <![CDATA[<222>  1]]>
          <![CDATA[<223>  /mod_base =「5'端(NAG25)s修飾」]]>
          <![CDATA[<400>  ]]>
          aagccccuua uuguuauacg a                              21
          <![CDATA[<210>  1276]]>
          <![CDATA[<211>  22]]>
          <![CDATA[<212>  DNA]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<223>  LPA RNAi劑有義股]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
          <![CDATA[<223>  9,10,11]]>
          <![CDATA[<223>  /mod_base =「2'-去氧-2'-氟核苷」]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
          <![CDATA[<222>  1,2,3,4,5,6,7,8,12,13,14,15,16,17,18,19,20,21]]>
          <![CDATA[<223>  /mod_base =「2'-O-甲基核苷」]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
          <![CDATA[<222>  22]]>
          <![CDATA[<223>  /m]]>od_base =「反向核苷」
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
          <![CDATA[<222>  1,2,22]]>
          <![CDATA[<223>  /mod_base =「硫代磷酸酯鍵聯之核苷」]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
          <![CDATA[<222>  1]]>
          <![CDATA[<223>  /mod_base =「5']]>端(NAG25)s修飾」
          <![CDATA[<400>  ]]>
          cagccccuua uuguuauacg an                             22
          <![CDATA[<210>  1277]]>
          <![CDATA[<211>  20]]>
          <![CDATA[<212>  DNA]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<223>  LPA RNAi劑有義股]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
          <![CDATA[<223>  7,8,9]]>
          <![CDATA[<223>  /mod_base =「2'-去氧-2'-氟核苷」]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
          <![CDATA[<222>  1,2,3,4,5,6,10,11,12,13,14,15,16,17,18,19]]>
          <![CDATA[<223>  /mod_base =「2'-O-甲基核苷」]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
          <![CDATA[<222>  20]]>
          <![CDATA[<223>  /mod_base =「反向核苷」]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
          <![CDATA[<222>  1,2,20]]>
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          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
          <![CDATA[<222>  1]]>
          <![CDATA[<223>  /mod_base =「5'端(NAG25)s修飾」]]>
          <![CDATA[<400>  ]]>
          gccccuuauu guuauacgan                                20
          <![CDATA[<210>  1278]]>
          <![CDATA[<211>  19]]>
          <![CDATA[<212>  DNA]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<223>  LPA RNAi劑有義股]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
          <![CDATA[<223>  7,8,9]]>
          <![CDATA[<223>  /mod_base =「2'-]]><![CDATA[去氧-2'<氟核苷」]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
          <![CDATA[<222>  1,2,3,4,5,6,10,11,12,13,14,15,16,17,18]]>
          <![CDATA[<223>  /mod_base =「2'-O-甲基核苷」]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
          <![CDATA[<222>  1,2,19]]>
          <![CDATA[<223>  /mod_base =「硫代磷酸酯鍵聯之核苷」]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
          <![CDATA[<222>  1]]>
          <![CDATA[<223>  /mod_base =「5'端(NAG25)s修飾」]]>
          <![CDATA[<400>  ]]>
          gccccuuauu guuauacga                                 19
          <![CDATA[<210>  1279]]>
          <![CDATA[<211>  22]]>
          <![CDATA[<212>  DNA]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<223>  LPA RNAi劑有義股]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
          <![CDATA[<223>  9,10,11]]>
          <![CDATA[<223>  /mod_base =「2'-去氧-2'-氟核苷」]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
          <![CDATA[<222>  1,2,3,4,5,6,7,8,12,13,14,15,16,17,18,19,20,21]]>
          <![CDATA[<223>  /mod_base =「2'-O-甲基核苷」]]>
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          <![CDATA[<222>  1,2,22]]>
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          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<221>  modified_base]]>
          <![CDATA[<222>  1]]>
          <![CDATA[<223>  /mod_]]><![CDATA[base =「5'<(NAG25)s修飾」]]>
          <![CDATA[<400>  ]]>
          aagccccuua uuguuauacg an                             22
          <![CDATA[<210>  1280]]>
          <![CDATA[<211>  18]]>
          <![CDATA[<212>  RNA]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<223>  LPA RNAi劑反義股]]>
          <![CDATA[<400>  ]]>
          cguauaacaa uaaggggc                                  18
          <![CDATA[<210>  1281]]>
          <![CDATA[<211>  18]]>
          <![CDATA[<212>  RNA]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<223>  LPA RNAi劑反義股]]>
          <![CDATA[<400>  ]]>
          gagaaugagc cucgauaa                                  18
          <![CDATA[<210>  1282]]>
          <![CDATA[<211>  19]]>
          <![CDATA[<212>  RNA]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
          <![CDATA[<223>  LPA RNAi劑反義股]]>
          <![CDATA[<400>  ]]>
          ucguauaaca auaaggggc                                 19
          <![CDATA[<210>  1283]]>
          <![CDATA[<211>  19]]>
          <![CDATA[<212>  RNA]]>
          <![CDATA[<213>  人工序列]]>
          <![CDATA[<220>  ]]>
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          <![CDATA[<400>  ]]>
          ugagaaugag ccucgauaa                                 19
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          <![CDATA[<211>  18]]>
          <![CDATA[<212>  RNA]]>
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          <![CDATA[<400>  ]]>
          gccccuuauu guuauacg                                  18
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          <![CDATA[<211>  18]]>
          <![CDATA[<212>  RNA]]>
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          uuaucgaggc ucauucuc                                  18
          
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Claims (21)

  1. 一種LPA RNA干擾(RNAi)劑用於製造藥劑之用途,其中該藥劑係用於治療有需要之個體之冠狀動脈疾病,其中該LPA RNAi劑包含:(i)有義股及反義股,其中該反義股包含SEQ ID NO:1280之序列,其中該有義股包含與該反義股之序列互補之序列;以及(ii)靶向基團,其包含去唾液酸醣蛋白(asialoglycoprotein)受體配體,其中該靶向基團結合至(conjugate to)該有義股。
  2. 一種LPA RNA干擾(RNAi)劑用於製造藥劑之用途,其中該藥劑係用於治療有需要之個體之外周動脈疾病,其中該LPA RNAi劑包含:(i)有義股及反義股,其中該反義股包含SEQ ID NO:1280之序列,其中該有義股包含與該反義股之序列互補之序列;以及(ii)靶向基團,其包含去唾液酸醣蛋白(asialoglycoprotein)受體配體,其中該靶向基團結合至(conjugate to)該有義股。
  3. 如請求項1或2之用途,其中該靶向基團結合至該有義股之5'端。
  4. 如請求項1或2之用途,其中該有義股及反義股各為19至26個核苷酸長。
  5. 如請求項4之用途,其中該有義股及反義股各為21個核苷酸長。
  6. 如請求項1或2之用途,其中該LPA RNAi劑包含一或兩個鈍端。
  7. 如請求項6之用途,其中該LPA RNAi劑包含兩個鈍端。
  8. 如請求項1或2之用途,其中該有義股、該反義股、或該有義股及該反義股二者包含一或多個經修飾之核苷酸。
  9. 如請求項8之用途,其中該一或多個經修飾之核苷酸獨立地選自2'-經修飾之核苷酸、鎖定核苷酸、無鹼基核苷酸、反向脫氧核苷酸、嗎啉基核苷酸、2',3'開環核苷酸模擬物或含有非天然鹼基之核苷酸。
  10. 如請求項9之用途,其中該2'-經修飾之核苷酸係2'-O-甲基核苷酸、2'-脫氧-2'-氟核苷酸、2'-脫氧核苷酸、2'-甲氧基乙基核苷酸、2'-胺基核苷酸或2'-烷基核苷酸。
  11. 如請求項1或2之用途,其中該LPA RNAi劑包含一或多個硫代磷酸酯核苷間鍵。
  12. 如請求項11之用途,其中該有義股及反義股二者獨立地包含1、2、3或4個硫代磷酸酯核苷間鍵。
  13. 如請求項1或2之用途,其中該去唾液酸醣蛋白受體配體包含半乳糖、半乳糖胺或N-乙醯基半乳糖胺。
  14. 如請求項1或2之用途,其中該靶向基團包含:
    Figure 111141660-A0305-02-0851-1
    其中NAG係N-乙醯基-半乳糖胺且X係選自由O及S所組成之群。
  15. 如請求項1或2之用途,其中該反義股包含SEQ ID NO:188之序列且該有義股包含SEQ ID NO:384之序列。
  16. 如請求項15之用途,其中該反義股包含根據SEQ ID NO:790之經修飾核苷酸序列且該有義股包含根據SEQ ID NO:1189之經修飾核苷酸序列。
  17. 如請求項1或2之用途,其中該反義股包含SEQ ID NO:164之序列且該有義股包含SEQ ID NO:376之序列。
  18. 如請求項17之用途,其中該反義股包含根據SEQ ID NO:787之經修飾核苷酸序列且該有義股包含根據SEQ ID NO:1191之經修飾核苷酸序列。
  19. 如請求項1或2之用途,其中該反義股包含SEQ ID NO:164之序列且該有義股包含SEQ ID NO:357之序列。
  20. 如請求項19之用途,其中該反義股包含根據SEQ ID NO:709之經修飾核苷酸序列且該有義股包含根據SEQ ID NO:1135之經修飾核苷酸序列。
  21. 如請求項1或2之用途,其中該藥劑係經調配以用於經由皮下注射投與至該個體。
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