TWI806696B

TWI806696B - Gpdt綠蜂膠組合光動療法抗癌製劑

Info

Publication number: TWI806696B
Application number: TW111125754A
Authority: TW
Inventors: 陳耀寬; 陳子瑄; 邱惠敏
Original assignee: 陳耀寬; 歐思佛生物科技股份有限公司
Priority date: 2022-07-08
Filing date: 2022-07-08
Publication date: 2023-06-21
Also published as: GB202305047D0; GB2620468B; TW202402310A; DE102023206356A1; US20240009258A1; GB2620468A

Abstract

本發明揭示一種含有綠蜂膠的組成物，該含有綠蜂膠的組成物可被用來治療癌症，並且可進一步與光動療法組合使用，亦被稱為綠蜂膠光動療法GPDT (green propolis photodynamic therapy, GPDT)。

Description

GPDT綠蜂膠組合光動療法抗癌製劑

本發明是有關於一種抗癌組成物(anticancer composition)，其包含有綠蜂膠(green propolis)的乙醇萃取物、小麥草(wheatgrass)的乙醇萃取物以及桑葉(mulberry leaf)的乙醇萃取物。本發明亦有關於該抗癌組成物可被用來治療癌症。

癌症是現今造成人類死亡的主要原因之一，雖然癌症的發病機制尚未被完全瞭解，但目前已知的是，癌症發生(carcinogenesis)或腫瘤發生(tumorigenesis)可歸因於當細胞蓄積外源性或內生性因素而導致基因變異(genetic abnormalities)時，該等細胞內的信號傳遞途徑會發生錯誤而使得細胞週期(cell cycle)失去控制，最後該等細胞逐漸形成癌細胞。

目前臨床上針對癌症的治療方案主要包括抗癌藥物的使用，另外還包括光動療法(photodynamic therapy, PDT)，亦即藉由使用具有特定波長(例如620-750 nm)的光線來照射累積於癌細胞中的光敏劑(photosensitizer)[例如，福德靈(Photofrin)]，俾以激發該光敏劑產生對細胞有毒性的單重態氧(singlet oxygen)與自由基(free radicals)，進而導致癌細胞的損害。然而，這些治療方案對於癌症的治癒率(cure rate)仍相當有限，主要的原因包括：患者本身的個體差異、抗癌藥物的嚴重副作用(side effect)，以及癌細胞的多重抗藥性(multi-drug resistant)與轉移能力(metastatic ability)。因此，本領域的相關研究人員開始嘗試從天然植物來源中尋找有用的活性組分(active components)來發展出具有抗癌活性(anticancer activity)並且不會產生非所欲的副作用的藥物。

綠蜂膠(green propolis)是指在蜜蜂採集植物過程中，由植物所流出的黏液與蜜蜂的唾腺分泌物相互混合而產生的一種呈黃綠色的膠狀物質，通常在夏季採集。大約6萬隻的蜂群在一年中僅能生產出100 g至150 g的綠蜂膠，所採集到的綠蜂膠原塊既稀少又珍貴，因此被譽為「綠色黃金」。已有研究指出，綠蜂膠具有抗菌、抗寄生蟲以及抗發炎等效用。

在TW I679015 B中，揭示一種綠蜂膠的萃取方法，其是使用乙醇來對綠蜂膠進行萃取，繼而以丙二醇(propylene glycol)予以混合均勻並使用三酸甘油脂(triglycerides)來進行脫蠟。在此件專利案的實施例中，該方法所製得之綠蜂膠的萃取物被證實具有較高的濃度以及純度。然而，在該專利案中並未揭示該綠蜂膠的萃取物可被應用於癌症的治療。

發明概要

於本發明中，申請人經實驗而發現到，一包含有綠蜂膠(green propolis)的乙醇萃取物、小麥草(wheatgrass)的乙醇萃取物以及桑葉(mulberry leaf)的乙醇萃取物的抗癌組成物(anticancer composition)能夠有效地抑制癌細胞的生長，並且可進一步搭配光動療法(photodynamic therapy, PDT)來提升抗癌效用，亦被稱為綠蜂膠光動療法GPDT (green propolis photodynamic therapy, GPDT)，因而被預期具有治療癌症之高潛力。

於是，在第一個方面，本發明提供一種用於抗癌的組成物，其包含有綠蜂膠的乙醇萃取物、小麥草的乙醇萃取物以及桑葉的乙醇萃取物。

在第二個方面，本發明提供一種如上所述的組成物供應用於製備一用來治療癌症之醫藥品的用途。

在第三個方面，本發明提供一種用於治療癌症的方法，其包括對一有此需要的個體投予一如上所述的組成物。

較佳地，該組成物可進一步與光動療法合併使用。

發明的詳細說明

要被瞭解的是：若有任何一件前案刊物在此被引述，該前案刊物不構成一個下述承認：在台灣或任何其他國家之中，該前案刊物形成本技藝中的常見一般知識之一部分。

為了這本說明書之目的，將被清楚地瞭解的是：文字“包含有(comprising)”意指“包含但不限於”，以及文字“包括(comprises)”具有一對應的意義。

除非另外有所定義，在本文中所使用的所有技術性與科學術語具有熟悉本發明所屬技藝的人士所共同瞭解的意義。一熟悉本技藝者會認知到許多與那些被描述於本文中者相似或等效的方法和材料，它們可被用於實施本發明。當然，本發明決不受到所描述的方法和材料之限制。

本發明提供一種用於抗癌的組成物，其包含有綠蜂膠(green propolis)的乙醇萃取物、小麥草(wheatgrass)的乙醇萃取物以及桑葉(mulberry leaf)的乙醇萃取物。

較佳地，該綠蜂膠的乙醇萃取物、小麥草的乙醇萃取物以及桑葉的乙醇萃取物可呈一範圍落在1：0.1：0.1至1：1：1內的重量比。在本發明的一個較佳具體例中，該綠蜂膠的乙醇萃取物、小麥草的乙醇萃取物以及桑葉的乙醇萃取物的重量比是1：0.5：0.5。

依據本發明，有關綠蜂膠、小麥草以及桑葉的乙醇萃取物的萃取方法可以採用熟習此項技藝者所詳知且慣用的技術來進行。在此方面，可參考TW I679015 B。

可瞭解到的是，該等乙醇萃取物的萃取方法之操作條件會進一步隨著綠蜂膠、小麥草以及桑葉的處理方式以及它們與乙醇的用量比例等因素而被變動，以便達致最佳的萃取效果。而這些操作條件的選擇是熟習此項技藝者能例行性地自行決定的。

依據本發明，有關該等乙醇萃取物的萃取是在一範圍落在30℃至70℃內的溫度下被進行。在本發明的一個較佳具體例中，該萃取是在30℃至50℃的溫度下被進行。

依據本發明，該綠蜂膠、小麥草以及桑葉的乙醇萃取物可被配於丙二醇(propylene glycol)中。

較佳地，該綠蜂膠的乙醇萃取物在被配於丙二醇之後，可進一步進行一脫蠟處理(dewaxing treatment)。

依據本發明，綠蜂膠、小麥草以及桑葉可以是未經加工處理的(unprocessed)(亦即新鮮摘採的)，或者是經過一選自於由下列所構成之群組中的加工處理所製得的：乾燥處理(drying treatment)、研磨處理(grinding treatment)、切碎處理(chopping treatment)、粉碎處理(comminuting treatment)，以及它們的組合。

依據本發明，該桑葉在被拿來進行萃取之前可進行製茶工藝所詳知且慣用的茶葉加工處理。該加工處理包括，但不限於：萎凋(withering)(例如，日光萎凋以及熱風萎凋)、攪拌(stirring)、炒菁(panning)、揉捻(rolling)、酵素氧化(enzymatic oxidation)以及乾燥(drying)等。在此方面，可以參照，例如，行政院農業委員會茶業改良場-製茶加工技術的網站所公告之「臺灣特色茶分類及加工製成簡介」。較佳地，該日光萎凋是在30℃至35℃的溫度下被進行，以及該熱風萎凋是在35℃至38℃的溫度下被進行。

本發明亦提供一種如上所述的組成物供應用於製備一用來治療癌症之醫藥品的用途。

依據本發明，該癌症是選自於由下列所構成的群組：腦癌、腎臟癌、肺腺癌、皮膚癌、乳腺癌、肝癌、膀胱癌、大腸癌、胰臟癌、血癌，以及它們的組合。在本發明的一個較佳具體例中，該癌症是腦癌。在本發明的另一個較佳具體例中，該癌症是腎臟癌。

如本文中所使用的，“治療(treating)”或“治療(treatment)”意指預防(preventing)、減少(reducing)、減輕(alleviating)、改善(ameliorating)、緩解(relieving)、或控制(controlling)一疾病(disease)或障礙(disorder)的一或多個臨床徵兆(clinical sign)，以及降低(lowering)、停止(stopping)或逆轉(reversing)一正在被治療中的病況(condition)或症狀(symptom)之嚴重性(severity)的進展(progression)。

依據本發明，該醫藥品可與光動療法(photodynamic therapy, PDT)一起合併使用。

較佳地，該光動療法是藉由使用波長為400 nm至700 nm的光線照射而被進行。在本發明的一個較佳具體例中，使用的波長為570 nm。

依據本發明，該醫藥品可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成一適合於口服投藥(oral administration)、局部投藥(topical administration)或非經腸道投藥(parenteral administration)之劑型(dosage form)。

依據本發明，該醫藥品可進一步包含有一被廣泛地使用於藥物製造技術之藥學上可接受的載劑(pharmaceutically acceptable carrier)。例如，該藥學上可接受的載劑可包含一或多種選自於下列的試劑：溶劑(solvent)、緩衝液(buffer)、乳化劑(emulsifier)、懸浮劑(suspending agent)、分解劑(decomposer)、崩解劑(disintegrating agent)、分散劑(dispersing agent)、黏結劑(binding agent)、賦形劑(excipient)、安定劑(stabilizing agent)、螯合劑(chelating agent)、稀釋劑(diluent)、膠凝劑(gelling agent)、防腐劑(preservative)、潤濕劑(wetting agent)、潤滑劑(lubricant)、吸收延遲劑(absorption delaying agent)、脂質體(liposome)以及類似之物。有關這些試劑的選用與數量是落在熟習此項技術之人士的專業素養與例行技術範疇內。

依據本發明，該醫藥品可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成一適合於口服投藥的劑型，這包括，但不限於：無菌的粉末、錠劑(tablet)、片劑(troche)、口含錠(lozenge)、丸劑(pellet)、膠囊(capsule)、分散性粉末(dispersible powder)或細顆粒(granule)、溶液、懸浮液(suspension)、乳劑(emulsion)、糖漿(syrup)、酏劑(elixir)、濃漿(slurry)以及類似之物。

依據本發明，該醫藥品亦可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成一適合於局部地施用於皮膚上的外部製劑(external preparation)，這包括，但不限於：乳劑(emulsion)、凝膠(gel)、軟膏(ointment)、乳霜(cream)、貼片(patch)、擦劑(liniment)、粉末(powder)、氣溶膠(aerosol)、噴霧(spray)、乳液(lotion)、乳漿(serum)、糊劑(paste)、泡沫(foam)、滴劑(drop)、懸浮液(suspension)、油膏(salve)以及繃帶(bandage)。

依據本發明，該醫藥品亦可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成一適合於非經腸道投藥的劑型[包括注射品(injection)，例如，無菌的水性溶液(sterile aqueous solution)或分散液(dispersion)]，且以一選自於由下列所構成的群組中的途徑來投藥：腹膜內注射(intraperitoneal injection)、肌肉內注射(intramuscular injection)、靜脈內注射(intravenous injection)，以及皮下注射(subcutaneous injection)。

本發明亦提供一種用於治療癌症的方法，其包括對一有此需要的個體投予(administering)一如上所述的組成物。

如本文中所使用的，術語“投予”以及“投藥(administration)”可被交換地使用，並且意指藉由任何合適的途徑來對一個體導入(introducing)、提供(providing)或遞送(delivering)一預定的活性成分以執行其預期的效用。

如本文中所使用的，術語“個體(subject)”意指任何感興趣的哺乳類動物，諸如人(humans)、猴子(monkeys)、牛(cows)、綿羊(sheep)、馬(horses)、豬(pigs)、山羊(goats)、狗(dogs)、貓(cats)、小鼠(mice)以及大鼠(rats)。

依據本發明，該組成物的投藥劑量與投藥次數會視下列因素而變化：要被治療的疾病之嚴重性，投藥途徑，以及要被治療的個體之年齡、身體狀況與反應。一般而言，該組成物可呈單一劑量或是分成數個劑量的形式而被口服地、局部地或非經腸道地投藥。 較佳實施例之詳細說明

本發明將就下面的實施例來做進一步說明，但應瞭解的是，該等實施例僅是供例示說明用，而不應被解釋為本發明的實施上的限制。 實施例 一般實驗材料： 1. 綠蜂膠(green propolis)、小麥草(wheatgrass)以及桑葉(mulberry leaf)：

在下面實施例中所使用的綠蜂膠是得自於志城養蜂場(臺中市，霧峰區)以及明玉養蜂場(臺中市，外埔區)所飼養之蜜蜂蜂巢。

至於小麥草以及桑葉，它們分別是得自於方冠生物科技股份有限公司(南投縣，名間鄉)的溫室以及泉明生態教育蠶業農場(苗栗縣，獅潭鄉)所栽培的小麥苗草以及栽種桑葚的桑樹葉片。其中，桑葉在被拿來進行下面的實驗之前，有先參照製茶工藝所慣用的茶葉前處理步驟，依序進行萎凋(withering)、攪拌(stirring)、炒菁(panning)以及揉捻(rolling)。 2. 細胞株的來源與培養：

在下面的實施例中所使用的人類神經膠質母細胞瘤細胞株(human glioblastoma cell line) U87 (BCRC 60360)以及人類腎細胞癌細胞株(human renal cell carcinoma cell line) 786-O (BCRC60243)皆是購自於台灣的食品工業發展研究所(Food Industry Research and Development Institute, FIRDI)的生物資源保存及研究中心(Bioresource Collection and Research Center, BCRC)。

這2種細胞分別被培養於含有杜貝可氏改良的依格氏培養基(Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium, DMEM)(廠牌為Gibco，貨號為12100-038)[添加有10%胎牛血清(fetal bovine serum, FBS)以及1%盤尼西林-鏈黴素(penicillin-streptomycin)]的培養皿(petri dish)中，並在培養條件被設定為37℃、5% CO ₂的培養箱中進行培養。之後，大約每隔2-3天更換新鮮的培養基。當細胞密度達到約80-90%匯聚(confluence)時，進行繼代培養(subculture)。 實施例1. 本發明的抗癌組成物的製備： 實驗材料： 1. 製備綠蜂膠的乙醇萃取物：

申請人主要是參照TW I679015 B當中所述的方法，使用多層次超音波變頻萃取(multi-level ultrasonic frequency conversion extraction)來製備綠蜂膠的乙醇萃取物。

首先，將上面“一般實驗材料”的第1項中的綠蜂膠與95%乙醇以一為1：3 (w/w)的比例進行混合，並於30℃至50℃的溫度下使用超音波來進行震盪歷時1小時，接著以濾紙進行過濾並收取濾液。

另外，所得到的殘餘物(residue)被拿來重複進行上述乙醇混合-超音波處理-過濾步驟共計3次，其中第2次所進行乙醇混合的步驟是將該殘餘物與95%乙醇以一為3：5 (w/w)的比例來予以混合。接著，將所有收集到的濾液以減壓濃縮的方式來移除乙醇，藉此而得到綠蜂膠的乙醇萃取物。

將所得到的乙醇萃取物與丙二醇(propylene glycol)以一為1：1 (w/w)的比例進行混合並使用超音波來進行震盪歷時10分鐘。接著，於55℃至65℃的溫度下進行減壓濃縮以移除殘留的乙醇，而得到綠蜂膠的乙醇萃取物之丙二醇溶液。

之後，將該丙二醇溶液與三酸甘油脂(triglycerides)以一為2：1 (w/w)的比例進行混合並進行震盪歷時10分鐘，繼而靜置於薊頭漏斗內，接著收取下層溶液，藉此而得到一經脫蠟之綠蜂膠的乙醇萃取物之丙二醇溶液(下稱GP萃取物)。 2. 製備小麥草與桑葉的乙醇萃取物：

首先，將上面“一般實驗材料”第1項中的小麥草以及桑葉分別以水清洗乾淨，然後晾乾。接著，將100 g之經晾乾的小麥草以及100 g之經晾乾的桑葉分別添加至200 mL的95%乙醇中並充分混合，繼而於30℃至50℃的溫度下使用超音波變頻來進行震盪萃取。接著以濾紙進行過濾並收取濾液，藉此而分別得到小麥草與桑葉的乙醇萃取物。

之後，將小麥草與桑葉的乙醇萃取物以一為1：1 (w/w)的比例進行混合，並置於25℃的溫度下進行靜置歷時36小時，接著以濾紙進行過濾並收取濾液，繼而將之與丙二醇以一為1：1 (w/w)的比例進行震盪混合，並以減壓濃縮的方式來移除乙醇，藉此而得到一含有小麥草與桑葉的乙醇萃取物之丙二醇溶液(下稱WM萃取物)。 實驗方法：

將上面“實驗材料”的第1項與第2項當中所得到之GP萃取物以及WM萃取物以一為1：1 (w/w)的比例予以混合均勻，藉此而得到本發明的抗癌組成物(下稱GP-WM萃取物)來供隨後的實驗之用。 實施例 2. 本發明的抗癌組成物的高效能液相層析 (high performance liquid chromatography, HPLC) 分析 實驗方法：

有關HPLC分析是委託食品工業發展研究所(FIRDI)來進行。本實驗所使用的HPLC分析儀器如下：高效能液相層析系統(Hitachi)、幫浦(Hitachi，型號為5110)、光電二極體陣列偵測器(Hitachi，型號為5430)；分析管柱為C18 (Cosmosil，型號為5C18-MS-Ⅱ)，長度：250 mm × 4.6 mm。而有關HPLC操作條件被顯示於下面的表1中。表1. HPLC的操作條件

操作參數	條件
偵測波長	320 nm
移動相	甲醇/ 0.4%磷酸(phosphoric acid)(配於甲醇中)，80：20 (v/v)
移動相的梯度洗提(gradient elution)	在第0至9分鐘時，0.4%磷酸維持在20%；在第9至9.1分鐘時，0.4%磷酸由20%變至30%；在第9.1至12分鐘時，0.4%磷酸維持在30%；在第12至12.1分鐘時，0.4%磷酸由30%變至5%；在第12.1至15分鐘時，0.4%磷酸維持在5%；在第15至15.1分鐘時，0.4%磷酸由5%變至20%；在第15.1至20分鐘時，0.4%磷酸維持在20%。
流速(mL/分鐘)	0.3

結果：

圖1顯示將依據上面實施例1所製得的本發明的抗癌組成物拿來進行HPLC所得到的洗提圖形(elution profile)。從圖1可見，本發明的抗癌組成物在第0至20分鐘的滯留期間出現有2個主要的洗提波峰(分別被標示為波峰a1以及a2)。 實施例 3. 本發明的抗癌組成物在抗腦癌上的效用 評估 實驗方法： A. 使用本發明的抗癌組成物來處理人類神經膠質母細胞瘤細胞株 U87 ：

首先，將依據上面“一般實驗材料”的第2項來進行繼代培養的U87細胞以一為1×10 ⁴細胞/井的數量培養於含有100 µL的DMEM培養基(添加有10% FBS以及1%盤尼西林-鏈黴素)的96-井培養盤中，並在培養箱(37℃、5% CO ₂)中進行培養歷時24小時。

接著，將GP-WM萃取物、GP萃取物以及WM萃取物以不同用量(分別為0.25 µL、0.5 µL、1 µL、2 µL、4 µL以及8 µL)各自添加至各井的細胞培養物中，並進一步培養歷時24小時。在培養之前(作為對照組)與培養24小時之後，各井的細胞培養物被拿來進行細胞可活性分析。

有關細胞可活性分析是依照下面所示的步驟而被進行：首先，移除各井中的液體，將適量的3-[4,5-二甲基噻唑-2-基]-2,5-二苯四唑溴化物{3-[4,5-Dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide}(MTT，5 mg/mL)分別添加至各井中並予以培養歷時24小時。之後，移除各井中的液體並以磷酸鹽緩衝生理鹽水(phosphate buffered saline, PBS)(pH 7.4)來清洗細胞2次，繼而加入50 µL的二甲亞碸(dimethyl sulfoxide, DMSO)並予以混合均勻，然後於570 nm的波長下以一ELISA讀取機(ELISA reader)(廠牌為BioTek，型號為Synergy HTX)來讀取各井的吸光值(OD ₅₇₀)。

細胞可活性百分比(%)是藉由將所測得的吸光值(OD ₅₇₀)代入下列公式(1)而被計算出：公式 (1) ： A=( B/C) ×100其中：A=細胞可活性百分比(%) B=各井所測得的OD ₅₇₀吸光值 C=對照組所測得的OD ₅₇₀吸光值

此外，本發明的抗癌組成物的半數有效劑量(median effective dose, ED ₅₀)是藉由計算GP-WM萃取物會降低細胞可活性達50% (與對照組的細胞相較之下)的用量而從曲線的線性部份被測定出。 B. 組合使用本發明的抗癌組成物與光動療法 (photodynamic therapy, PDT) 來處理人類神經膠質母細胞瘤細胞株 U87 ：

為了瞭解本發明的抗癌組成物進一步組合使用光動療法在抗腦癌上的效用，申請人依據上面第A項當中所述的方法，使用不同用量的GP-WM萃取物、GP萃取物以及WM萃取物來處理U87細胞，並在培養箱(37℃、5% CO ₂)中進行培養歷時24小時。另外，不作任何處理的細胞培養物被使用作為對照組。接著，使用一日光燈(570 nm的波長)來對各井細胞進行照射歷時24小時。

之後，依據上面第A項當中所述的操作程序來對各井細胞進行細胞可活性分析以及本發明的抗癌組成物之ED ₅₀的測定。 結果：

圖2顯示不同用量的GP萃取物、WM萃取物以及GP-WM萃取物對於U87細胞的生長抑制效用。從圖2可見，GP萃取物、WM萃取物以及GP-WM萃取物皆能夠有效抑制U87細胞的生長，並會隨著該等萃取物之用量的增加而更趨於明顯。特別地，GP-WM萃取物對於U87細胞的生長抑制效用更是顯著優於GP萃取物以及WM萃取物其中任一者，具有較高的細胞毒性(ED ₅₀數值=6.581 µL)。這個實驗結果顯示：組合使用綠蜂膠、小麥草以及桑葉的乙醇萃取物能夠協同地抑制U87細胞的生長。

圖3顯示不同用量的GP萃取物、WM萃取物以及GP-WM萃取物在與光動療法之組合下對於U87細胞的生長抑制效用。從圖2可見，GP-WM萃取物與光動療法的組合使用對於U87細胞的生長抑制效用是顯著優於GP萃取物以及WM萃取物其中任一者與光動療法的組合使用所測得者，具有較高的細胞毒性(ED ₅₀數值=2.069 µL)。這個實驗結果顯示：組合使用綠蜂膠、小麥草以及桑葉的乙醇萃取物並進一步搭配光動療法在抑制U87細胞的生長上能夠展現更為優異的協同效應(synergic effect)。

綜合以上的實驗結果可知：本發明的抗癌組成物能夠有效地抑制神經膠質母細胞瘤細胞的生長，進而達到抗腦癌的效用，並且可進一步搭配光動療法來提升此效用。 實施例 4. 本發明的抗癌組成物在抗腎臟癌上的效用評估 實驗方法： A. 使用本發明的抗癌組成物來處理人類腎細胞癌細胞株 786-O ：

首先，將依據上面“一般實驗材料”的第2項來進行繼代培養的786-O細胞以一為1×10 ⁴細胞/井的數量培養於含有100 µL的DMEM培養基(添加有10% FBS以及1%盤尼西林-鏈黴素)的96-井培養盤中，並在培養箱(37℃、5% CO ₂)中進行培養歷時24小時。

接著，將GP-WM萃取物以不同用量(分別為0.125 µL、0.25 µL、0.5 µL、1 µL、2 µL、4 µL以及8 µL)各自添加至各井的細胞培養物中，並進一步培養歷時24小時。另外，不作任何處理的細胞培養物被使用作為對照組。

之後，依據上面實施例3的“實驗方法”的第A項當中所述的操作程序來對各井細胞進行細胞可活性分析以及本發明的抗癌組成物之ED ₅₀的測定。 結果：

圖4顯示不同用量的GP-WM萃取物對於786-O細胞的生長抑制效用。從圖4可見，GP-WM萃取物能夠有效抑制786-O細胞的生長，並會隨著GP-WM萃取物之用量的增加而更趨於明顯，且所測得的ED ₅₀數值為1.728 µL。這個實驗結果顯示：本發明的抗癌組成物能夠有效地抑制腎細胞癌細胞的生長，進而能展現出優異的抗腎臟癌效用。

綜合以上的實驗結果，申請人認為：依據本發明之含有綠蜂膠、小麥草以及桑葉的乙醇萃取物的抗癌組成物可供用於治療癌症(特別是腦癌以及腎臟癌)，並且可與光動療法作為癌症治療的組合療法，而有利於提升抗癌效用。

於本說明書中被引述之所有專利和文獻以其整體被併入本案作為參考資料。若有所衝突時，本案詳細說明(包含界定在內)將佔上風。

雖然本發明已參考上述特定的具體例被描述，明顯地在不背離本發明之範圍和精神之下可作出很多的修改和變化。因此意欲的是，本發明僅受如隨文檢附之申請專利範圍所示者之限制。

本發明的上述以及其它目的、特徵與優點，在參照以下的詳細說明與較佳實施例和隨文檢附的圖式後，將變得明顯，其中：圖1顯示將本發明的抗癌組成物拿來進行高效能液相層析所得到的洗提圖形，其中波峰a1與a2表示在第0至20分鐘的滯留期間所出現的2個主要成份；圖2顯示U87細胞在分別使用不同用量的GP萃取物、WM萃取物以及GP-WM萃取物予以處理後所測得的細胞可活性百分比；圖3顯示U87細胞在分別使用不同用量的GP萃取物、WM萃取物以及GP-WM萃取物與光動療法之組合予以處理後所測得的細胞可活性百分比；以及圖4顯示786-O細胞在分別使用不同用量的GP-WM萃取物予以處理後所測得的細胞可活性百分比。

Claims

一種用於抗癌的組成物，其包含有綠蜂膠的乙醇萃取物、小麥草的乙醇萃取物以及桑葉的乙醇萃取物。
如請求項1的組成物，其中該等乙醇萃取物是被配於丙二醇中。
如請求項1的組成物，其中該綠蜂膠的乙醇萃取物、小麥草的乙醇萃取物以及桑葉的乙醇萃取物是呈一範圍落在1：0.1：0.1至1：1：1內的重量比。
一種如請求項1至3中任一項的組成物供應用於製備一用來治療癌症之醫藥品的用途。
如請求項4的用途，其中該癌症是選自於由下列所構成的群組：腦癌、腎臟癌、肺腺癌、皮膚癌、乳腺癌、肝癌、膀胱癌、大腸癌、胰臟癌、血癌，以及它們的組合。
如請求項4的用途，其中該醫藥品可與光動療法一起合併使用。
如請求項6的用途，其中該光動療法是藉由使用波長為400 nm至700 nm的光線照射而被進行。
如請求項4的用途，其中該醫藥品是呈一供口服投藥、局部投藥或非經腸道投藥的劑型。