TWI886840B - 短菌絲菌絲體及其製造方法暨含此之口服組成物 - Google Patents

Abstract

本發明有關於一種短菌絲菌絲體及其製造方法暨含此之口服組成物，其利用含鋅離子的培養基，對絲狀真菌進行多步驟製程，在不影響其乾重產率及/或蛋白質產率的條件下，藉此獲得短菌絲菌絲體，從而可應用於銀髮友善食品。

Description

短菌絲菌絲體及其製造方法暨含此之口服組成物

本發明係有關一種菌絲體及其製造方法暨含此之組成物，特別是有關於一種利用鋅離子培養短菌絲菌絲體暨含此之組成物。

為了健康、防疫、體重管理、動物福祉或動物權利、宗教信仰、環境保護及/或減少資源使用等因素，越來越多人選擇純素、素食或彈性素食的飲食方式。其中，彈性素食的飲食方式是指大量攝取植物性、真菌性及/或藻類性食物等的非動物性食物，並適量攝取魚、禽類、蛋及乳製品，但少量攝取紅肉及加工肉，或者一周至少一天進行純素的飲食方式。根據全球市調公司於2021年的調查結果，彈性素食的人口已佔總人口的4成以上。

全球人口數不斷增長，從1970年的約36億人增加到2020年的超過75億人，而未來的增長趨勢更是令人擔憂。這種爆炸性的人口增長直接導致了糧食供應的 壓力。儘管人類是雜食動物，但肉類仍然是許多人飲食的主要來源，其中畜牧業更是肉品的主要來源之一。根據統計，全球高達70%的農業用地是用於畜牧業，還需要額外的10%的用地來種植畜牧動物所需的飼料。此外，畜牧業的碳排放造成環境問題。在上述的背景下，越來越多的人選擇素食，進而推動了素食市場的需求增長。與傳統素食不同，這些人選擇素食並非出於宗教或健康因素，而是追求食物的美味和品質。

過去的素肉製造方法主要是將大豆或豌豆打碎後與調味料和其他食品原料混合，經過高速攪拌後再擠壓成型。由於製作過程中的高速攪拌，所得到的素肉多為碎肉狀，因此常見於火腿或漢堡等形式。然而，在新技術的推動下，食品工業開始尋求更加接近動物肌肉纖維的素肉製作方法，從而提升素肉的口感和品質。通過使用低轉速設備和重新調配食品原料，在發酵生產過程中對菌絲原料的剪切力降低，使得素肉的纖維更加拉長，口感更加接近動物肉類。

除了口感的提升外，直接成形的素肉無需添加大量的食品添加劑，這不僅帶來了更好的口味和健康的好處，還降低了製作成本。目前，這一技術甚至能夠根據不同動物的肌肉纖維特性，生產出與真肉非常相似的素肉產品，包括牛肉、雞肉、豬肉等，滿足不同消費者的需求。

但如果產品需要較為細緻的口感或是容易吞嚥的劑型，短纖維的適口性較佳。習知技術之一是在醱酵過程 中增加攪拌時的剪切力，使菌絲纖維變短。然而，過大的剪切力也會使得菌絲生長受到阻礙，導致單位產量嚴重降低。

因此，亟需開發一種短菌絲菌絲體之製造方法，在不影響產量的情況下來使菌絲纖維變短，以解決上述問題。

因此，本發明之一態樣是提供一種短菌絲菌絲體的製造方法，其係利用含鋅離子的培養基培養絲狀真菌，在不影響其乾重產率及/或蛋白質產率的條件下，藉此獲得短菌絲菌絲體。

其次，本發明之另一態樣是提供一種短菌絲菌絲體，其係利用上述方法製得，其中短菌絲菌絲體的單一菌絲的平均長寬比不大於5。

再者，本發明之又一態樣是提供一種口服組成物，包含短菌絲菌絲體，其中短菌絲菌絲體之一單一菌絲具有特定的平均長度及特定的平均寬度。

根據本發明之上述態樣，提出一種短菌絲菌絲體的製造方法，包含利用固體培養基對絲狀真菌的第一菌絲體進行固態培養步驟，以獲得第二菌絲體，其中絲狀真菌可包括但不限於金黃色鐮孢菌(Fusarium venenatum)、米麴菌(Aspergillus oryzae)及/或間型脈孢菌(Neurospora intermedia)；利用第一液體培養基對第 二菌絲體進行液態培養步驟，以獲得第三菌絲體；以及利用第二液體培養基對第三菌絲體進行醱酵步驟，以獲得醱酵物，其中醱酵物含有短菌絲菌絲體，固體培養基、第一液體培養基以及第二液體培養基之至少一者含有鋅離子，且鋅離子之含量為0.001重量百分比至0.2重量百分比。

在上述實施例中，前述金黃色鐮孢菌可例如購自於美國典型培養物保藏中心(American Type Culture Collection，ATCC)且寄存編號為ATCC 20334之菌株A3/5。

在上述實施例中，前述固體培養基包括麥芽萃取瓊脂(Malt extract agar，MEA)培養基、沙氏瓊脂(Sabouraud's agar)培養基及/或其改良配方。

在上述實施例中，前述第一液體培養基及該第二液體培養基包含穀類、豆類、無機鹽類、醣類、酵母萃取物及/或麥芽萃取物，且該無機鹽類包含硝酸鉀(KNO₃)、硫酸鎂(MgSO₄)、氯化鈣(CaCl₂)、磷酸二氫銨(NH₄H₂PO₄)及/或磷酸二氫鉀(KH₂PO₄)。

在上述實施例中，前述該鋅離子的來源包含氧化鋅、硫酸鋅、氯化鋅、硝酸鋅、碳酸鋅或上述之任意組合。

在上述實施例中，前述該固態培養步驟係於例如15℃至30℃進行例如3天至5天。

在上述實施例中，前述該液態培養步驟及該醱酵步驟係於例如15℃至30℃進行例如3天至7天。

在上述實施例中，前述第一菌絲體、第二菌絲體、第三菌絲體及短菌絲菌絲體排除經物理性剪切處理或化學性分解處理。

根據本發明之另一態樣，提出一種短菌絲菌絲體，其係利用上述方法製得，其中短菌絲菌絲體的單一菌絲之平均長寬比可例如為2至5。

根據本發明之再一態樣，提出一種口服組成物，包含短菌絲菌絲體，其中短菌絲菌絲體之單一菌絲的平均長度可例如為1000μM至1500μM，且單一菌絲的平均寬度可例如為400μM至500μM。

在上述實施例中，前述口服組成物可例如為食品組成物或醫藥組成物。

應用本發明上述之短菌絲菌絲體及其製造方法暨含此之口服組成物，其利用含鋅離子的培養基培養絲狀真菌，在不影響其乾重產率及/或蛋白質產率的條件下，藉此獲得短菌絲菌絲體，從而可應用於銀髮友善食品。

可以理解的是，前述的概括說明及下述的詳細說明僅為例示，旨在對要求保護的發明提供進一步的解釋。

為讓本發明之上述和其他目的、特徵、優點與實施例能更明顯易懂，所附圖式之詳細說明如下：圖1係顯示根據本發明之一實施例以添加不同陽離子的第一及第二液體培養基培養所得之金黃色鐮孢菌菌 絲體之單一菌絲平均長度的長條圖。

圖2係顯示根據本發明之一實施例以添加不同陽離子的第一及第二液體培養基培養所得之金黃色鐮孢菌菌絲體之單一菌絲平均寬度的長條圖。

圖3係顯示根據本發明之一實施例以添加不同陽離子的第一及第二液體培養基培養所得之金黃色鐮孢菌菌絲體之單一菌絲長寬比的長條圖。

圖4A及圖4B係分別顯示根據本發明之製備比較例1(圖4A)及製備例1(圖4B)的金黃色鐮孢菌之菌絲體的光學顯微照片(放大倍率為50倍)。

圖5係分別顯示根據本發明之製備比較例1至3及製備例1的金黃色鐮孢菌之菌絲體的乾重百分比與蛋白產率百分比的長條圖。

倘若引用文獻對一術語的定義或用法，與此處對該術語的定義不一致或相反，則適用此處對該術語的定義，而不適用該引用文獻對該術語的定義。其次，除非上下文另有定義，單數術語可包括複數，而複數術語亦可包括單數。

如前所述，本發明是提供一種短菌絲菌絲體及其製造方法暨含此之口服組成物，其可包含但不限於利用含鋅離子的培養基培養絲狀真菌，在不影響其乾重產率及/或蛋白質產率的條件下，藉此獲得短菌絲菌絲體，由此製 得的食品更容易咀嚼與消化，從而可應用於銀髮友善食品。

在一實施例中，此處所稱之「絲狀真菌」亦稱為黴菌，是指可產生具有分支菌絲的菌絲體，但不產生大型子囊的真菌。絲狀真菌可為任何可食用的菌種。在一些實施例中，絲狀真菌可例如為子囊菌門，包含但不限於鐮孢菌屬(Fusarium)、麴菌屬(Aspergillus)及/或脈孢菌屬(Neurospora)。在一些具體例中，絲狀真菌可包含但不限於金黃色鐮孢菌(Fusarium venenatum)、米麴菌(Aspergillus oryzae)及/或間型脈孢菌(Neurospora intermedia)。

上述金黃色鐮孢菌亦稱為金黃色鐮刀菌或腐皮鐮孢菌，是一種廣泛存在於土壤中的真菌。金黃色鐮孢菌可提供高含量的蛋白質，且可藉由醱酵步驟大規模生產，因此常應用於製造食品組成物。一般而言，金黃色鐮孢菌的菌株沒有特別限制，任何可藉由醱酵步驟大規模生產、可食用且無致病性的菌株，皆可適用於本發明。在一些具體例中，金黃色鐮孢菌之菌株可包含但不限於從美國典型培養物保藏中心(American Type Culture Collection，ATCC)購得、寄存編號為ATCC 20334的菌株A3/5。

在一些實施例中，金黃色鐮孢菌之菌絲體可藉由多步驟製程製得，其中多步驟製程可包含但不限於固態培養步驟、液態培養步驟及醱酵步驟或上述之任意組合。

在一具體例中，上述固態培養步驟可利用固體培 養基對金黃色鐮孢菌的第一菌絲體進行固態培養步驟，藉以獲得第二菌絲體，其中前述固體培養基的配方詳如後述。

前述固態培養步驟的溫度沒有特別限制，可例如為15℃至30℃。惟固態培養步驟的溫度若過高或過低，皆會使得第二菌絲體的生長活性降低或甚至喪失。前述固態培養步驟的時間並無別限制，可視製造效率及菌絲體的生長活性而定。在一些實施例中，固態培養步驟的時間可例如為3天至5天，惟液態培養步驟的時間若少於3天或超過5天，將無法獲得生長活性較佳的第二菌絲體。

前述液態培養步驟是利用第一液體培養基對第二菌絲體進行液態培養步驟，藉以獲得第三菌絲體，其中前述第一液體培養基的配方詳如後述。

前述液態培養步驟的可在習知適宜的溫度下進行，可例如為15℃至30℃。惟液態培養步驟的溫度若過高或過低，皆會使得第三菌絲體的生長活性降低或甚至喪失。液態培養步驟進行的時間沒有特別限制，可依據製造效率及菌絲體的生長活性而定。在一些實施例中，液態培養步驟的時間並無特別限制，可例如為3天至7天。惟液態培養步驟的時間若少於3天，將無法獲得生長活性較佳的第三菌絲體；而液態培養步驟的時間若超過7天，在時間成本增加的前提下，第三菌絲體之濕重產率、乾重產率及/或蛋白質產率亦未有所提升。在一些實施例中，液態培養步驟的震盪速率可例如為10rpm至100rpm，以增加 第一液體培養基的換氣率，從而促進第三菌絲體的生長。

在一些實施例中，醱酵步驟可利用第二液體培養基對第三菌絲體進行，藉以獲得醱酵物，其中前述第二液體培養基的配方詳如後述。

前述醱酵步驟進行的溫度及時間可與液態培養步驟相同，但生產規模有所差異。在一些實施例中，醱酵步驟可於醱酵槽中進行，且可選擇性合併攪拌處理，其中攪拌處理的轉速為10rpm至100rpm，或者10rpm至40rpm。在一些具體例中，前述醱酵槽是噸級醱酵槽。在一些實施例中，第一液體培養基及第二液體培養基的體積比可例如為1：10至1：200，或者1：150至1：170，抑或1：155至1：165。

在另一些實施例中，於醱酵槽中進行醱酵步驟時，可選擇性導入氣體於醱酵槽中，其中氣體可選自於例如由空氣、氧氣、二氧化碳、氦氣或上述任意組合所組成之一族群。在一些具體例中，醱酵槽之通氣速率可例如為0.01每單位時間通入單位培養基體積之氣體體積(volume of air per unit volume of culture medium per minute，VVM)至1.5VVM。在一些具體例中，醱酵槽之槽壓可例如為0.1kg/cm²至1.0kg/cm²，或者0.1kg/cm²至0.5kg/cm²，藉以促進第三菌絲體之生長。

上述固體培養基、第一液體培養基及第二液體培養基的種類沒有特別限制。在一些實施例中，前述固體培 養基可例如為麥芽萃取瓊脂(Malt extract agar，MEA)培養基、沙氏瓊脂(Sabouraud's agar)培養基及/或其改良配方。在一些具體例中，固體培養基可例如為325麥芽萃取瓊脂培養基(ATCC® medium 325，Malt extract agar，Blakeslee’s formula)，其包含20.0g/L的麥芽萃取物、20.0g/L的葡萄糖、1.0g/L的蛋白腖、20.0g/L的瓊脂及平衡量的水。

上述第一液體培養基與第二液體培養基的配方可為相同或相異，端視實際需求而調整。其次，第一液體培養基與第二液體培養基的酸鹼值可例如為pH 5至pH 8，或如：pH 5至pH 6。在上述實施例中，第一液體培養基及第二液體培養基的酸鹼值倘若不在pH 5至pH 8的範圍內，則第二菌絲體及第三菌絲體的生長活性不佳。

在一些實施例中，前述第一液體培養基及第二液體培養基可包含但不限於穀類、豆類、無機鹽類、醣類、酵母萃取物及/或麥芽萃取物，以提供第二菌絲體及第三菌絲體充足的氮源及/或碳源，但可視需求調整。舉例而言，在另一些實施例中，第一液體培養基及第二液體培養基可包含但不限於醣類、有機酸鹽及無機鹽類。

在一些具體例中，前述穀類的種類可包含但不限於大麥、小麥、黑麥、燕麥、稻米、小米、高粱及/或黍米。在上述具體例中，依據加工程度而異，稻米可包含但不限於白米、胚芽米及/或糙米。在上述具體例中，依據所含的澱粉種類而異，稻米可包含但不限於糯米、秈米及/或梗 米。

在一些具體例中，豆類可包含但不限於紅豆、花豆、皇帝豆、黃豆、綠豆及/或夏威夷豆。

在一些具體例中，無機鹽類係指鋅離子以外的無機鹽類，可包含但不限於硝酸鉀(KNO₃)、硫酸鎂(MgSO₄)、氯化鈣(CaCl₂)、磷酸二氫銨(NH₄H₂PO₄)及/或磷酸二氫鉀(KH₂PO₄)。

在一些具體例中，醣類可包含但不限於單醣、雙醣、寡醣及/或多醣，其中單醣可包含但不限於果糖、葡萄糖、核醣、半乳糖及/或甘露糖，雙醣可包含但不限於蔗糖、乳糖、麥芽糖及/或海藻糖，寡醣可包含但不限於果寡糖、麥芽寡糖、異麥芽寡糖、半乳糖寡糖及/或大豆寡糖，且多醣可包含但不限於菊糖、澱粉、肝糖、燕麥β-葡聚醣及/或幾丁質。

在一些具體例中，有機酸鹽係指鋅離子以外的有機鹽類，可包含但不限於檸檬酸鹽(如：檸檬酸鈉)、醋酸鹽、蘋果酸鹽、酒石酸鹽及/或奎寧酸鹽。

本發明的技術特徵之一在於固體培養基、第一液體培養基及第二液體培養基之至少一者含有鋅離子鹽類，藉此培養出短菌絲菌絲體。在一些具體例中，鋅離子鹽類並無特別限制，可包含但不限於氧化鋅、硫酸鋅、氯化鋅、硝酸鋅、碳酸鋅或上述之任意組合。前述鋅離子鹽類的濃度可包括但不限於大於0重量百分比至0.3重量百分比，然以0.001重量百分比至0.2重量百分比為較佳，又以 0.1重量百分比為更佳。倘若固體培養基、第一液體培養基及第二液體培養基之至少一者不含鋅離子鹽類，則所得的醱酵物難以含有以短菌絲為主的菌絲體；倘若前述鋅離子鹽類的濃度超過0.3重量百分比，則會抑制菌絲生長。補充說明的是，本發明係藉由添加鋅離子鹽類的培養基而培養出短菌絲，故第一菌絲體、第二菌絲體、第三菌絲體及短菌絲菌絲體排除經物理性剪切處理或化學性分解處理使菌絲纖維變短，以避免短菌絲菌絲體受到物理性或化學性的損傷。

上述所得的「短菌絲菌絲體」的尺寸並無特別限制，在一些實施例中，短菌絲菌絲體之單一菌絲的平均長寬比可例如為2至5。在一些具體例中，短菌絲菌絲體之單一菌絲的平均長度可例如為1000μM至1500μM，而其平均寬度可例如為400μM至500μM。

以金黃色鐮孢菌為例，在一些實施例中，上述醱酵物所含的菌絲體可進一步經乾燥步驟及/或研磨步驟，藉以獲得金黃色鐮孢菌的菌絲體之乾燥物。此處所稱的乾燥物及凍乾粉二者可交替使用。

前述乾燥步驟的方法並無特別限制，例如：冷凍乾燥法、真空乾燥法或噴霧乾燥法，以除去菌絲體一部或全部的水分。在一些實施例中，金黃色鐮孢菌的菌絲體經冷凍乾燥後，所得之乾燥物為凍乾粉。研磨步驟可利用習知方法進行，如：機械力研磨法、滾筒式研磨法或氣動研磨法。

上述醱酵物、醱酵物經固液分離步驟所獲得之菌絲體、菌絲體經乾燥步驟及/或研磨步驟後所製得之乾燥物，皆可應用於口服組成物，例如食品組成物或醫藥組成物。在一些實施例中，醱酵步驟所得的菌絲體可選擇性不進行擠壓步驟(例如直接離心)，而直接進行乾燥步驟，以製得具有纖維口感的素肉製品。在一些實施例中，菌絲體之乾燥物可做為高蛋白粉的原料。

在一些實施例中，上述食品組成物或醫藥組成物的劑型可例如為錠劑、膠囊、顆粒、丸劑、片劑、粉劑、乳化劑、液狀懸浮液、分散劑或溶劑。在一些實施例中，上述食品組成物或醫藥組成物可選擇性添加藥學及/或食品可接受的添加物，其中添加物可包含但不限於載劑、賦形劑、稀釋劑、輔劑、溶媒、分散劑、包衣、抗菌劑及/或抗真菌劑。

上述添加物可依據各種劑型而進行調整。在一些實施例中，當劑型是錠劑時，載劑可包含但不限於乳糖、玉米澱粉及/或潤滑劑。在一些具體例中，上述潤滑劑可包含但不限於硬脂酸鎂及/或硬脂富馬酸鈉。

在一些實施例中，當劑型是膠囊時，稀釋液可包含但不限於乳糖及/或乾燥玉米澱粉。

在一些實施例中，當劑型是液狀懸浮液或乳化劑時，用以溶解或懸浮醱酵物、菌絲體及/或乾燥物的乳化劑或懸浮劑可為油狀物質。

在一些實施例中，食品組成物或醫藥組成物可選 擇性添加甜味劑、風味劑及/或色素。

可以理解的是，下述特定的成分、特定的配方、特定的使用劑量、特定的檢測方式、觀點、例示及實施例僅供舉例說明，並非做為本發明的限制條件。在不脫離本發明之精神和範圍內，本發明的主要特徵可用於各種實施例。因此本發明所屬技術領域中具有通常知識者，在不脫離本發明之精神和範圍內，當可輕易確定本案的必要技術特徵，對本發明作各種更動及潤飾，以適用不同的用途及條件。

實施例一：製備金黃色鐮孢菌的醱酵物

製備例1

此實施例所使用的菌株係自美國典型培養物保藏中心(American Type Culture Collection，ATCC)購買、寄存編號為ATCC 20334的金黃色鐮孢菌(Fusarium venenatum，以下簡稱為FV)菌株A3/5做為第一菌絲體。

首先，將FV之第一菌絲體接種於固體培養基上，於25℃進行固態培養步驟達3天至5天，藉以獲得第二菌絲體。上述固體培養基是325麥芽萃取瓊脂培養基，其包含20.0g/L的麥芽萃取物、20.0g/L的葡萄糖、1.0g/L的蛋白腖、20.0g/L的瓊脂及平衡量的純水。

接著，將第二菌絲體接種於第一液體培養基，並於25℃、pH 7、轉速為10rpm至100rpm、通氣速率為0.01VVM至1.5VVM下，進行第一液態培養步 驟達3天，藉以獲得第三菌絲體。其中，第一液體培養基包含1.0重量百分比的葡萄糖、0.3重量百分比的檸檬酸鈉、0.3重量百分比的硝酸鉀(KNO₃)、0.1重量百分比的磷酸二氫銨(NH₄H₂PO₄)及平衡量的純水。第一液體培養基額外添加0.1重量百分比的硫酸鋅(ZnSO₄)。

然後，將第三菌絲體置於醱酵槽中，並利用第二液體培養基於25℃、pH 7、轉速為10rpm至100rpm、通氣速率為0.01VVM至1.5VVM下進行醱酵步驟達3天，藉以獲得醱酵物。此第二液體培養基包含1.0重量百分比的葡萄糖、0.3重量百分比的檸檬酸鈉、0.3重量百分比的硝酸鉀(KNO₃)、0.1重量百分比的磷酸二氫銨(NH₄H₂PO₄)及平衡量的純水。第二液體培養基額外添加0.1重量百分比的硫酸鋅(ZnSO₄)。

然後，對上述醱酵物進行離心處理，藉以獲得菌泥(pellet，或稱菌絲體)。

製備比較例1至3

製備比較例1的醱酵物之製造方法與製備例1相同，其差異僅在於製備比較例1的第一液體培養基及第二液體培養基(以下合稱為第一及第二液體培養基)皆不含硫酸鈣(CaSO₄)、硫酸鐵(FeSO₄)或硫酸鋅(ZnSO₄)。

製備比較例2至3的醱酵物之製造方法與製備例1相同，其差異僅在於製備比較例2至3的第一及第二液體培養基分別額外添加0.1重量百分比的硫酸鈣(CaSO₄，製備比較例2)、0.1重量百分比的硫酸鐵(FeSO₄，製備 比較例3)。

實施例二：評估鋅離子對金黃色鐮孢菌的菌絲體的影響

2.1 評估短菌絲菌絲體的菌絲長度

請參閱圖1，其係顯示根據本發明之製備例1及製備比較例1至3以添加(或不添加)不同陽離子的第一及第二液體培養基培養所得之FV菌絲體之單一菌絲平均長度之長條圖，其中圖號「*」表示該組與製備比較例1相比具有統計上的顯著差異(p<0.05)。

由圖1結果可知，製備例1的第一及第二液體培養基添加鋅離子，確實可降低金黃色鐮孢菌(FV)菌絲體之單一菌絲平均長度，且具有統計上的顯著差異。相較之下，製備例1至3則未能有效降低單一菌絲平均長度。

2.2 評估短菌絲菌絲體的菌絲寬度

請參閱圖2，其係顯示根據本發明之製備例1及製備比較例1至3以添加(或不添加)不同陽離子的第一及第二液體培養基培養所得之FV菌絲體之單一菌絲平均寬度之長條圖，其中圖號「*」表示該組與製備比較例1相比具有統計上的顯著差異(p<0.05)。

由圖2結果可知，製備例1的第一及第二液體培養基添加鋅離子，確實可提高金黃色鐮孢菌(FV)菌絲體之單一菌絲平均寬度，且具有統計上的顯著差異。相較之下，製備例1至3則未能有效提高單一菌絲平均寬度。

2.3 評估短菌絲菌絲體的菌絲長寬比

請參閱圖3，其係顯示根據本發明之製備例1及製備比較例1至3以添加(或不添加)不同陽離子的第一及第二液體培養基培養所得之FV菌絲體之單一菌絲平均長寬比之長條圖，其中圖號「*」表示該組與製備比較例1相比具有統計上的顯著差異(p<0.05)。

由圖3結果可知，製備例1的第一及第二液體培養基添加鋅離子，確實可降低金黃色鐮孢菌(FV)菌絲體之單一菌絲平均長寬比，且具有統計上的顯著差異。相較之下，製備例1至3則未能有效降低單一菌絲平均長寬比。

請參閱圖4A及圖4B，其係分別顯示根據本發明之製備比較例1(圖4A)及製備例1(圖4B)的金黃色鐮孢菌之菌絲體的光學顯微照片(放大倍率為50倍，比例尺為100μm)。由圖4A及圖4B結果顯示，相較於製備比較例1(圖4A)，製備例1(圖4B)確實可獲得短菌絲菌絲體。

2.4 評估短菌絲菌絲體的乾重產率及/或蛋白質產率

請參閱圖5，其係分別顯示根據本發明之製備比較例1至3及製備例1的金黃色鐮孢菌之菌絲體的乾重百分比與蛋白產率百分比的長條圖。由圖5結果顯示，製備比較例1至3及製備例1之菌絲體的乾重百分比(2~2.5%左右)與蛋白產率百分比(40~60%左右)確實不具有統計上的顯著差異(p>0.05)，代表上述方法並不影響絲狀真菌菌絲體的乾重產率及/或蛋白質產率。

由於利用上述方法以含鋅離子的培養基培養絲狀真菌，在不影響其乾重產率及/或蛋白質產率的條件下，確實可培養出短菌絲菌絲體，未來可應用於銀髮友善食品。

綜言之，本發明以特定的絲狀真菌、特定的菌株、特定的離子、特定的培養基、特定的製程或特定的評估方法僅用於例示說明本發明的短菌絲菌絲體及其製造方法暨含此之口服組成物。然而，本發明所屬技術領域中具有通常知識者應可理解，在不脫離本發明的精神及範圍內，其他的絲狀真菌、其他的菌株、其他鋅離子鹽類、其他的培養基、其他的製程或其他的評估方法亦可用於說明本發明的短菌絲菌絲體及其製造方法暨含此之口服組成物，並不限於上述所載。舉例而言，以添加鋅離子的培養基對絲狀真菌的菌絲體進行固態培養步驟、液態培養步驟及醱酵步驟之至少一者，亦可降低單一菌絲的平均長寬比。

根據上述實施例，本發明的短菌絲菌絲體及其製造方法暨含此之口服組成物，其優點在於利用含鋅離子的培養基培養絲狀真菌，在不影響其乾重產率及/或蛋白質產率的條件下，藉此獲得短菌絲菌絲體。所得的短菌絲菌絲體確實有效降低單一菌絲的平均長寬比，由此製得的食品更容易咀嚼與消化，從而可應用於銀髮友善食品。

雖然本發明已以數個特定實施例揭露如上，但其他實施例亦有可能。因此，本發明後附請求項之精神及範圍不應限於這裡包含的實施例所述。

Claims (10)

1. 一種短菌絲菌絲體的製造方法，包含：利用一固體培養基對一絲狀真菌的一第一菌絲體進行一固態培養步驟，以獲得一第二菌絲體，其中該絲狀真菌係購自於美國典型培養物保藏中心(American Type Culture Collection，ATCC)的金黃色鐮孢菌(Fusarium venenatum)寄存編號為ATCC 20334之菌株A3/5；利用一第一液體培養基對該第二菌絲體進行一液態培養步驟，以獲得一第三菌絲體；以及利用一第二液體培養基對該第三菌絲體進行一醱酵步驟，以獲得一醱酵物，其中該醱酵物含有該短菌絲菌絲體，該第一液體培養基以及該第二液體培養基含有鋅離子鹽類，該鋅離子鹽類之含量為0.1重量百分比。
2. 如請求項1所述之短菌絲菌絲體的製造方法，其中該固體培養基包括麥芽萃取瓊脂(Malt extract agar，MEA)培養基、沙氏瓊脂(Sabouraud's agar)培養基及/或其改良配方。
3. 如請求項1所述之短菌絲菌絲體的製造方法，其中該第一液體培養基及該第二液體培養基包含穀類、豆類、無機鹽類、醣類、酵母萃取物及/或麥芽萃取物，且該無機鹽類包含硝酸鉀(KNO₃)、硫酸鎂(MgSO₄)、氯化鈣(CaCl₂)、磷酸二氫銨(NH₄H₂PO₄)及/或磷酸二氫鉀(KH₂PO₄)。
4. 如請求項1所述之短菌絲菌絲體的製造方法，其中該鋅離子鹽類的來源包含氧化鋅、硫酸鋅、氯化鋅、硝酸鋅、碳酸鋅或上述之任意組合。
5. 如請求項1所述之短菌絲菌絲體的製造方法，其中該固態培養步驟係於15°C至30°C進行3天至5天。
6. 如請求項1所述之短菌絲菌絲體的製造方法，其中該液態培養步驟及該醱酵步驟係於15°C至30°C進行3天至7天。
7. 如請求項1所述之短菌絲菌絲體的製造方法，其中該第一菌絲體、該第二菌絲體、該第三菌絲體及該短菌絲菌絲體排除經物理性剪切處理或化學性分解處理。
8. 一種短菌絲菌絲體，其係利用如請求項1至7任一項所述的方法製得，其中該短菌絲菌絲體的一單一菌絲的平均長度為1000 μM至1500 μM，且該單一菌絲的平均寬度為400 μM至450 μM。
9. 一種口服組成物，如請求項8所述之短菌絲菌絲體。
10. 如請求項9所述之口服組成物，其中該口服組成物包含一食品組成物或一醫藥組成物。