TWI522367B - Urine biomarkers are used to predict bladder and kidney cancer - Google Patents
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Description
本發明係有關於一種尿液生物標記，特別是一種尿液生物標記作為預測膀胱及腎臟癌的用途。
根據台灣行政院衛生署統計，泌尿道癌症是國人重要的癌症之一，2003年台灣地區死於泌尿道癌症合計約有一千九百人，其中男性以攝護腺癌、膀胱癌以及腎臟癌為主；而女性以膀胱癌及腎臟癌為主。在泌尿道癌症中，膀胱癌的死亡率是排行第二的惡性癌症，並且膀胱癌的死亡率有逐年增加的趨勢；腎臟癌不易早期發現，但是腎臟癌唯一能根治的機會就是早期診斷，早期切除，腎臟摘除手術後五年存活率可達80%。若是晚期疾病，則只能施以化學治療加免疫療法、但預後效果皆不太好，五年存活率只有10~40%間。因此，早期診斷十分重要。雖然至今已有許多膀胱癌特異性指標分子被發表，但是其特異性及靈敏度仍嫌不足。近幾年來，在人體體液中尋找各種疾病的新特異性指標分子漸趨盛行，其中尿液是一種非入侵性的檢體，且因為有一些泌尿系統腫瘤相關的分子會直接釋放於泌尿道系統中，所以利用特異性指標分子預測膀胱及腎臟癌的發生及進展是一種具有高度臨床應用潛力的方法。
目前臨床上主流的膀胱癌檢測方式如下：
(一)血尿：血尿存在於絕大部分膀胱癌患者，甚至是早期的膀胱癌患者，而且血尿檢測試劑費用低、檢測容易，所以在早期血尿被廣泛使用在檢測膀胱癌。但是血尿對於膀胱癌的檢測是低特異性，且對於膀胱癌不是個有效的檢測方式。
(二)細胞學檢測：檢測尿液中是否存在癌細胞，但是這個方法
之所以沒有被廣泛利用是因為低靈敏度，且需要病理學家解釋，以及檢測費用高。
(三)膀胱內視鏡檢測：膀胱內視鏡檢測是一種侵入性的方式，是目前膀胱癌檢測的主要方式，但費用不低。
至於腎臟癌通常不易被察覺，幾乎沒有症狀，因此患者在被診斷出有腎癌時通常已是晚期。少數臨床有血尿、疼痛、腹部腫塊、體重減輕、貧血、發燒等現象，且多出現在晚期。診斷腎臟癌最常用的是X光檢查，並搭配靜脈注射顯影劑、尿路攝影、超音波檢查、電腦層攝影、膀胱鏡等檢查。因此，定期健康檢查對早期發現腎癌是非常重要的
本申請案之發明人乃利用蛋白質體技術預測泌尿系統癌症所造成之尿液蛋白質圖譜變化，發現一種濃度改變具有顯著意義之TACSTD2蛋白質，可做為膀胱及腎臟癌癌症檢測的標的分子，且目前已知文獻或專利中的相關技術均未提及膀胱癌或腎臟癌與本發明所發現之TACSTD2尿液蛋白質之相關性。
鑒於先前技術的問題，本發明的主要目在於提供一種尿液生物標記作為預測膀胱及腎臟癌的用途，其係用以協助以非侵入式方式診斷膀胱及腎臟癌及區分癌細胞的侵犯或是惡性程度，以幫助了解膀胱及腎臟癌患者的病情，從而對症下藥，並提高治療成效。
本發明之另一目的在於提供一種尿液生物標記作為預測膀胱及腎臟癌的用途，其可與現有方法，例如潛血、NMP22分子檢驗、膀胱鏡與細胞學檢驗等合併，以利於膀胱及腎臟癌檢測與/或癌組織侵入或惡性的判斷。
為實現上述目的，本發明提供一種用以預測膀胱及腎臟癌的尿液生物標記，其存在於受檢測者之尿液檢體中，此尿液生物標記包含有TACSTD2蛋白質，尿液生物標記含量高則表示受檢測者罹患膀胱或是腎臟癌之機率或惡化或侵入程度相對較高，因此可用於膀胱及腎臟癌之早期診斷，並可以輔助現有的檢查方式，提升診斷的正確性。
本發明亦提供一種尿液生物標記作為預測膀胱及腎臟癌的用途，此尿液生物標存在於受檢測者之尿液檢體中，且包含有前述TACSTD2蛋白質。由於TACSTD2蛋白質在罹患膀胱及腎臟癌患者尿液中相較於對照組含量會顯著增加，表示罹患膀胱癌或是腎臟癌的機率增加或是患者的腫瘤侵入及惡化程度較嚴重，故TACSTD2蛋白質可以作為非侵入式尿液生物標記，並用來預測膀胱及腎臟癌的發生或其侵入或惡化程度。
本發明更提供一種膀胱及腎臟癌的預測方法，其包含有下列步驟：首先，提供受檢測者之尿液檢體，再以定量方法，以TACSTD2蛋白質作為尿液生物標記，檢測尿液檢體中TACSTD2蛋白質的受測表現量，接著，將受檢測者之尿液檢體中TACSTD2蛋白質的受測表現量，和對照組中尿液生物標記的對照表現量進行比對，最後，根據受測表現量與對照表現量的比對結果，來預測受檢測者之膀胱及腎臟癌的存在機率或其侵入或惡性程度。而對照組係可為無罹患該膀胱及腎臟癌之健康對象之尿液檢體，亦可為受檢測者先前之尿液檢體，當受測表現量高於對照表現量時，受測表現量相對於對照表現量的差異程度越高，則可預測受檢測者之膀胱及腎臟癌的存在機率或其侵入或惡性程度越高。
本發明還提供一種檢驗膀胱及腎臟癌的套組，其包含至少一種用以實施前述膀胱及腎臟癌的預測方法的檢驗試劑。
底下藉由具體實施例配合所附的圖式詳加說明，當更容易瞭解本發明之目的、技術內容、特點及其所達成之功效。
第1圖係為本發明所提供之膀胱及腎臟癌的預測方法之流程圖。
第2圖係為本發明之實施例之利用LC-MRM/MS方法對於48個個別的尿液檢體中的TACSTD2蛋白質的分析結果。
第3圖係為本發明之實施例對於277位個別患者的原始尿液檢體中的TACSTD2蛋白質的ROC曲線分析圖。
第4A圖係本發明之實施例利用ELISA方法針對尿液檢體中的TACSTD2蛋
白質的定量檢測結果。
第4B圖係為本發明之實施例比對疝氣患者組和膀胱癌患者組之尿液檢體中的TACSTD2蛋白質的ROC曲線分析圖。
第4C圖係為本發明之實施例比對LgEs膀胱癌患者和疝氣患者組之尿液檢體中的TACSTD2蛋白質的ROC曲線分析圖。
第5A圖係本發明之實施例對於疝氣尿液微粒、膀胱癌尿液微粒和細胞溶胞產物的膀胱癌細胞系尿液微粒中的TACSTD2蛋白質的檢測結果。
第5B和5C圖係本發明之實施例對於10位疝氣患者、5位LgEs膀胱癌患者、5位HgEs膀胱癌患者和6位HgAs膀胱癌患者之尿液微粒中的TACSTD2蛋白質的檢測結果。
第5D圖係為本發明之實施例對於10位疝氣患者、5位LgEs膀胱癌患者、5位HgEs膀胱癌患者和6位HgAs膀胱癌患者之尿液微粒中的TACSTD2蛋白質的西方墨點法之定量量測結果。
本發明乃利用定量蛋白質體技術找到TACSTD2蛋白質作為膀胱及腎臟癌癌症檢測的尿液生物標記，並提供此尿液生物標記在預測膀胱及腎臟癌在癌症診斷、癌症進展上的用途及使用方法。
請參考第1圖所示，說明本發明所提供之膀胱及腎臟癌的預測方法之流程，包含有下列步驟：
如步驟S10所述，首先，提供受檢測者之尿液檢體。
然後，如步驟S20所述，定量檢測尿液檢體中尿液生物標記的受測表現量，尿液生物標記包含有TACSTD2蛋白質。TACSTD2蛋白質(Tumor-associated calcium signal transducer 2，又稱TACD2或Trop-2)可包含選自SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6和SEQ ID NO：7之胺基酸序列所構成的群組之一或其組合。
接著，如步驟S30所述，再去比對受測表現量以及對照組中尿液生物標記的對照表現量。對照組可為無罹患膀胱及腎臟癌之健康對象之尿液檢體，或者為受檢測者先前之尿液檢體。
最後，如步驟S40所述，則根據受測表現量與對照表現量的比對結果，來預測受檢測者之膀胱及腎臟癌的存在機率或其侵入或惡性程度。當受測表現量高於對照表現量時，受測表現量相對於對照表現量的差異程度越高，則預測受檢測者之膀胱及腎臟癌的存在機率或其侵入或惡性程度越高。其中，當對照表現量訂為2.43納克/毫升(ng/mL)，而受測表現量低於對照表現量時，則預測受檢測者為非癌症患者；受測表現量高於對照表現量時，則預測受檢測者為罹患至少為早期膀胱及腎臟癌症(LgEs)患者。再者，當對照表現量訂為2.47納克/毫升(ng/mL)，而受測表現量低於對照表現量時，則預測受檢測者為非癌症患者；受測表現量高於對照表現量時，則預測受檢測者為罹患膀胱及腎臟癌症患者。
本發明中，係利用準確定量技術，包含西方墨點法、酵素免疫分析法(ELISA)、質譜法，測量個別樣品中尿液檢體中TACSTD2蛋白質的含量，並用來驗證本發明之尿液生物標記用於膀胱及腎臟癌之早期診斷之可行性，並可以輔助現有的檢查方式，提升診斷的正確性。雖然本發明對該尿液生物標記的含量是利用上述方法進行確認，當然，實務上也可使用抗體偵測法、螢光、冷光或層析等技術進行檢測。
以下提供一實施例詳細說明如何達成本發明的目的、功效和原理。
1、收集尿液：
以蛋白酶抑製劑的雞尾酒藥錠(protease inhibitor cocktail tablet)(1錠/50毫升尿液；Roche,Mannheim,Germany)和疊氮化鈉(sodium azide)(1mM)，從非罹癌患者之對照組和膀胱癌患者的尿液中收集尿液檢體。
2、利用超速離心，濃縮尿液
通過超速離心法，對於尿液微粒蛋白質進行純化。簡而言之，將12.5毫升的尿液檢體在4℃解凍，17,000 xg離心30分鐘(於4℃)，以除去大細胞和其他雜質。再對於離心後的上清液，在4℃下以100,000 xg離心70分鐘(L8-80M；Beckman)，以沉澱對應於微粒的小囊泡。將所得到的沉澱物轉移到一個離心管中，用5ml的磷酸鹽緩衝鹽水(PBS)，來消除污染
的蛋白質，並在4℃下以100,000 xg進行離心70分鐘(CS150 GXL；日立)。然後，除去上清液，並將顆粒(微粒)懸浮於50μlPBS中。將顆粒經過真空乾燥之後，加入5微升的裂解緩衝液(10mM的Tris-HCl、1mM的EDTA、1mM的EGTA、50mM NaCl、50mM的氟化鈉、20mM的焦磷酸鈉、1mM的四氧嘧啶、和1%的Triton X-100)，再加入45微升PBS，並將試管在冰中保存15分鐘。尿蛋白質經過濃縮後，蛋白質總量利用DC protein assay量測，之後，將尿液檢體儲存在20℃下以進行後續處理。
3、西方墨點法分析
在此步驟，以西方墨點法分析每一尿液檢體。將來自於個別尿液檢體的尿蛋白質(100克)溶解於SDS膠體中並且電泳轉換至PVDF膜(Millipore,Billerica,MA)，以進行尿液生物標記的驗證。PVDF膜的封閉(block)是利用具有5%脫脂奶粉的trisbuffered saline(J.T.Baker,Phillipsburg,NJ)與0.1%Tween-20(Sigma,St Louis)的TBST在室溫下進行1小時。之後，PVDF膜之探測是以抗TACSTD2的抗體(BAF650,R&D,USA)1：500在4℃下過夜來進行。PVDF膜是由streptavidin-alkaline horseradish peroxidase-conjugated的次級抗體隨後與初級抗體來進行探測，並且依據製造商的說明(Millipore,Billerica,MA)利用強化的化學發光偵測來建構。西方墨點法中所檢測到TACSTD2蛋白質之相對信號強度是使用computing densitometer(Molecular Dynamics,Sunnyvale,CA)來進行定量分析。
4、LC-MRM/MS分析
一個具有奈米流速離子源的AB/MDS SCIEX5500 QTRAP是由Analyst 1.5.1 software(AB Sciex)所控制並用於所有LC-MRM/MS分析。使用以下這些參數擷取數據：離子噴霧電壓，1900-2000V；氣簾氣體設定，20psi(UHP nitrogen)；接口加熱器溫度，150℃；及MS的操作壓力，3.5×10-5Torr；Q1和Q3設置的unit resolution(半高全寬為0.6-0.8Da)。MRM之數據擷取方法，其建構在每個胜肽使用三種MRM離子對，並具有特定片段離子調校碰撞能量(CE)電壓和保留時間的限制。預設的碰撞單元退出電位35V適用於所有的MRM離子對，且預定的MRM選項會用於所有的數據擷取過程中，其包括2秒的目標週期時間和4分鐘的MRM檢測窗口。在
LC-MRM/MS操作期間，係將相對於29個目標蛋白質之82胜肽(41 light peptides和41 heavy peptides)進行定量測量。
5、三明治酵素免疫分析法(Sandwich ELISA)
使用白色聚苯乙烯96孔微量滴定板(Corning Corp.,Corning,NY)，其塗佈有goat anti-TROP2(AF650,R&D,USA)的抗體，以4000ng/mL在PBS中(每孔50μL)室溫下溫育2小時。洗滌之後，將板的每孔中加入200μL 1%的BSA(Sigma)/PBS來封閉，並在4℃下溫育過夜。將來自81位疝氣患者、40位LgEs患者和63位HgEs患者的五十微升之原始尿蛋白以1：2稀釋於封閉緩衝液中，加入並在室溫下溫育1小時。將重組TACSTD2蛋白(650-T2,R&D,USA)作為一個標準。接續，使用biotinylated anti-huamn TACSTD2(BAF650,R&D,USA)抗體(1：50稀釋於含1%BSA的PBS中)，於室溫下再溫育一個1小時。加入streptavidin-alkaline phosphatase(RPN1234,Amersham bioscience,UK)(50μL，在含有1%BSA的PBS中稀釋3000倍)，並在室溫下溫育40分鐘。將基底4-methylumbelliferyl phosphate(Molecular Probes,Eugene,OR)於混合鹼性磷酸酶緩衝液(鹼性磷酸酶緩衝液：PBS=1：2)中稀釋至100μM，並在各孔中加入100μL。使用SpectraMax M5 microplate reader(Molecular Devices,Sunnyvale,CA)，分別以355和460nm的激發光和發射光之波長，來測定螢光。
6、統計分析
根據不同的臨床群體中，針對目標尿蛋白於濃度上的差異(利用LC-orbitrap-MS/MS或LC-MRM/MS來測量)使用非參數的Mann-Whitney test來分析。藉由受測試者操作特徵(Receiver Operator Characteristic；ROC)曲線和曲線下面積(Area-Under-the-Curve；AUC)分析，以確定最佳臨界值，產生可識別不同臨床分類之最佳的總準確率。最佳臨界值是使用Youden’s index(J)來決定，其計算式為J=1-(偽陽性率+偽陰性率)=1-[(1-靈敏度)+(1-特異性)]=靈敏度+特異度-1。
本實施例中，係使用LC-MRM/MS驗證了本發明之尿液生物標誌，TACSTD2蛋白質之存在，並透過免疫組織切片可以得知腫瘤細胞內的確有TACSTD2蛋白質表現。
再者，請參照第2圖，其為在48個個別的尿液檢體(受檢測者為28位膀胱癌患者，及對照組為12位疝氣患者和8位UTI/HU患者，在圖式中分別以BC、Hernia、UTI+HU簡單表示之)中，使用LC-MRM/MS分析來對於TACSTD2蛋白質進行驗證。圖中的每一點表示平均濃度比率和p值。圖式頂部的p值是利用比較膀胱癌患者組和UTI/HU患者組所計算出來，左邊的p值是利用比較膀胱癌患者組和疝氣患者組所計算出來，且右邊的p值是利用比較疝氣患者組和UTI/HU患者組所計算出來。比對疝氣患者組和UTI/HU患者組(n=48)，膀胱癌患者組之尿液檢體中的蛋白質呈現高度的受測表現量(p<0.05)。對於TACSTD2蛋白質的ROC曲線之分析，則由第3圖來決定，其產生了AUC值0.74，表示本發明之尿液生物標誌確實能夠用來鑑別膀胱癌患者組(28例)與對照組(疝氣患者組，12例)。
此外，請參照第4A圖，利用ELISA方法對於277位個別患者的原始尿液檢體中TACSTD2蛋白質予以定量檢測，圖式中Hernia、LgEs、HgEs、HgAs、Kca_AML、Kca_RCC和Kca_TCC分別表示疝氣患者組、LgEs膀胱癌患者組、HgEs膀胱癌患者組、HgAs膀胱癌患者組、和腎血管平滑肌脂肪瘤患者組、腎細胞癌(Renal cell carcinoma)腎臟癌患者組和腎移行細胞癌(transitional cell carcinoma)患者組，腎血管平滑肌脂肪瘤患者組為腎臟癌案例之對照組。結果顯示，膀胱癌患者組尿液檢體中的TACSTD2含量是疝氣患者的2.1至3.9倍高。且第4B圖為比對疝氣患者組和膀胱癌患者組之尿液檢體中的TACSTD2蛋白質的ROC曲線分析，其產生了AUC值0.80，表示本發明之尿液生物標誌確實能夠用來鑑別疝氣患者組和膀胱癌患者組。第4C圖則為比對LgEs膀胱癌患者和疝氣患者組之尿液檢體中的TACSTD2蛋白質的ROC曲線分析，其產生了AUC值0.72，表示本發明之尿液生物標誌確實能夠用來鑑別LgEs膀胱癌患者組和疝氣患者組。腎細胞癌腎臟癌患者組較腎血管平滑肌脂肪瘤患者組之TACSTD2蛋白質濃度增加3.9倍，腎移行細胞癌腎臟癌患者組較腎血管平滑肌脂肪瘤患者組之TACSTD2蛋白質濃度增加9.4倍，表示本發明之尿液生物標誌確實能夠用來鑑別腎血管平滑肌脂肪瘤患者組和腎臟癌患者組。
第5A圖顯示來自疝氣患者、膀胱癌患者和細胞溶胞產物的
膀胱癌細胞系(cell lysate of a bladder carcinoma cell line)(TSGH 8301)患者之尿液檢體中，其TACSTD2蛋白質的檢測結果。第5B、5C圖則顯示來自10位疝氣患者、5位LgEs膀胱癌患者、5位HgEs膀胱癌患者和6位HgAs膀胱癌患者之尿液檢體中，其TACSTD2蛋白質的檢測結果，而第5D圖為其西方墨點法之定量量測結果。癌症患者之尿液檢體中TACSTD2蛋白質的平均濃度為疝氣患者的3.0至3.7倍。上述圖式中係分別以Hernia、BC和BC cell lysate(TSGH 8301)簡單表示疝氣患者、膀胱癌患者和細胞溶胞產物的膀胱癌細胞系患者，並以LgEs、HgEs和HgAs簡單表示LgEs膀胱癌患者、HgEs膀胱癌患者和HgAs膀胱癌患者，且IS表示HgAs膀胱癌尿蛋白並作為定量比較內標準品來使用。
如上所述，膀胱癌患者之尿液檢體中TACSTD2蛋白質濃度為疝氣患者的2.1-3.9倍，疝氣對照組平均濃度為2.33ng/mL，在早期低惡性(LgEs)、早期高惡性(HgEs)及晚期高惡性(HgAs)之平均濃度分別為4.89,7.32,及9.10ng/mL，可見TACSTD2蛋白質在尿液檢體中的濃度會隨著膀胱癌癌症的嚴重性而增加。因此，當門檻值訂為2.43ng/mL，超過此值則預測為罹患至少為早期泌尿系統癌症(LgEs)患者，否則為非癌症患者；則分辨早期膀胱癌與控制組之表現達到感度65.0%及靈敏度75.6%(p<0.001,AUC=0.72,n=121)。當門檻值訂為2.47ng/mL，超過此值則預測為罹患泌尿系統癌症患者，否則為非癌症患者；則分辨膀胱癌與控制組之表現達到感度73.6%，靈敏度76.5%,positive predictive value 84.4%以及negative predictive value 62.6%(p<0.001,AUC=0.80,n=221)。另外，由於尿液檢體中的TACSTD2蛋白質在low-grade及high-grade腫瘤患者之濃度有顯著差異(p=0.014)，故可用來區分腫瘤的惡性程度(grade)。
特別說明，膀胱癌的侵入程度(Stage)主要描述癌細胞侵入膀胱組織之深度。惡性程度(grade)主要用於描述癌細胞的異常程度，包括異常生長及傳播速度。低惡性度膀胱癌(Low grade bladder cancer)的癌細胞較接近正常細胞，分化較完全，生長較慢，較不容易擴散；高惡性度膀胱癌(High grade bladder cancer)的癌細胞性質外觀與正常細胞差異大，通常分化不完全，生長較快且容易擴散，在早期膀胱癌的情況下，細胞惡性程度是決定
治療方式的主要考量之一，高惡性度膀胱癌的患者建議接受更積極性的治療以預防復發。早期膀胱癌(Early stage bladder cancer)也稱為非肌肉侵入性膀胱癌(non muscle invasive bladder cancer)或是表淺性膀胱癌(superficial bladder cancer)，癌細胞僅出現在膀胱的內層表面或邊緣，精由膀胱鏡或是手術後即可去除乾淨；當癌細胞侵入肌肉層的結締組織後，被稱為晚期膀胱癌或是侵入性膀胱癌(advanced-stage bladder cancer or invasive bladder cancer)，治療上必須部分或是完全切除膀胱，再搭配放射療法以積極治療。
本發明中，已將患者分類為非癌症組、早期及低惡性度(low grade with early stage，LgEs)、早期及高惡性度(high grade with early stage，HgEs)及晚期高惡性度(high grade with advanced stage，HgAs)三類膀胱癌患者，並由實驗結果顯示，藉由比較非膀胱癌及膀胱癌患者、低惡性及高惡性、早期及晚期膀胱癌患者之尿液檢體中TACSTD2蛋白質濃度，高惡性患者之尿液檢體TACSTD2蛋白質會顯著增加(p<0.05，故具有統計意義)。而對於腎臟癌患者亦有類似的實驗結果，根據本發明之另一實施例的檢測結果發現，腎臟癌患者尿液檢體中的TACSTD2含量甚至為良性腎臟病患者的3.8至9.4倍高。因此，TACSTD2蛋白質確實可用來作為非侵入式的膀胱及腎臟癌癌症檢測之尿液生物標記，而且，此尿液生物標記具有高度的特異性和靈敏度，可以有效預測膀胱及腎臟癌的發生，將有助於提升膀胱及腎臟癌的癌症篩檢效率，達到早期發現、早期治療，並可監控癌細胞的惡性程度，從而可對症下藥，以提高治療成效。
就未來應用上，本發明所提出的膀胱與腎臟癌的預測方法亦可與現有方法，例如潛血、NMP22分子檢驗、膀胱鏡與細胞學檢驗等合併，以利於膀胱及腎臟癌檢測與/或癌組織侵入或惡性的判斷。
再者，前述膀胱與腎臟癌的預測方法係可藉由發展一種檢驗試劑來實施，並提供用於檢驗膀胱及腎臟癌的套組，幫助達到膀胱及腎臟癌的早期診斷與有效的預測。
雖然本發明以前述之實施例揭露如上，然其並非用以限定本發明。在不脫離本發明之精神和範圍內，所為之更動與潤飾，均屬本發明之專利保護範圍。關於本發明所界定之保護範圍請參考所附之申請專利範
圍。
Claims (2)
- 一種尿液生物標記作為預測膀胱及腎臟癌的用途，該尿液生物標記係存在於一受檢測者之尿液檢體中，並包含有TACSTD2蛋白質，且該TACSTD2蛋白質在該尿液檢體中的濃度越高，則預測該受檢測者之膀胱及腎臟癌的存在機率或其侵入或惡性程度越高；其中，當該TACSTD2蛋白質在該尿液檢體中的濃度係低於2.43納克/毫升(ng/mL)，則預測該受檢測者為非癌症患者，否則預測為罹患至少為早期膀胱及腎臟癌症(LgEs)患者；或當該TACSTD2蛋白質在該尿液檢體中的濃度係低於2.47納克/毫升(ng/mL)，則預測該受檢測者為非癌症患者，否則預測為罹患膀胱及腎臟癌症患者。
- 如申請專利範圍第1項所述之用途，其中該TACSTD2蛋白質具有選自SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6和SEQ ID NO：7之胺基酸序列所構成的群組之一或其組合。
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