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319933 A ri __B 6 五、發明説明（1 ) 技術節鼸 本發明傜關於有用以作為製造絲裂徽素C衍生物之中 間體（其中7 -胺基圍乃帶有併入二硫化物基團之有機取 代機）且亦有用以抑制哺乳類腫瘤生長之新穎精絲烷。 本發明另關於新穎精絲烷之製法。 本發明亦關於將上述新穎精絲烷轉換成7~ 〔2— （ 4 —硝基二硫基）乙胺基〕一9 a -甲氣基精絲烷之方法 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) .裝· 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 本發明之莆暑 絲裂徽素C為藉醱酵作用所産生之主要絲裂徽素，且 係為商用之形式。 形成Ϋ -經取代之胺基一 9 a -甲氣基精絲烷之有效 半合成方法乃集中在將絲裂徽素C經由絲裂徽素A中間體 而轉換成終産物之步驟上，其中，絲裂徽素C乃藉水解作 用以形成相關之7 —羥基精絲烷，再使用（例如）Vyas等 人於美國專利4, 691, 023號中所述之重氮甲烷， 或使用（例如）Vyas，P.M.等人於J. Ors. Chem. 1 9 86，51, 4307-4309 中所述之 3 — 甲基一 1 -對位一甲苯基三氮烯予以甲基化而轉換成絲裂徽素A, 使用重氮甲烷之步驟之缺點為此反應物在操作時極危險， 因此不適於供常規及大規模地合成。三氮烯路徑則有産生 副産生甲苯胺之缺點，彼可與絲裂徽素A反應，且因為三 訂· 甲 4 (210X297公釐）80. 5. 20,000張（H) -3 - 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 219933 A6 __B_6 五、發明説明（2 ) 氮烯反應物於水之存在時不安定，故需移去水或不存在水 Ο 本文之目的偽提供作為供製造7—經取代胺基，7— 胺基及7 —經取代氣基一 9 a —甲氧基精絲烷之中間體之 新穎化合物，彼乃使用比重氮甲烷安全得多之反應物合成 而不形成副産物，且可於水之存在下輕易製得，彼亦有用 以作為抗腫瘤劑。 本文之另一目的像提供此化合物之製法。 本文之另一目的偽提供將上述化合物轉換成7 —〔2 一 （4 一硝苯基二硫基）乙胺基〕一 9a —甲氣基精絲烷 之方法。 太發明$略要說明 本文命提供之新穎化合物為7 — （二苯甲基）氧基一 9 a —甲氣基精絲烷。 根據本文一體現之本化合物之製法偽經由已知化合物 7 —羥基一 9a —甲氣基精絲烷來進行，後者乃由絲裂徽 素C及絲裂徽素A中輕易合成。此製法包括令7—羥基一 9 a —甲氣基精絲烷與重氮二苯基甲烷起反應以製得上述 新穎化合物之步驟。 當此製備偽以絲裂徽素C起始時，則可使用含水性絲 裂徽素C之醱酵作用衍生性溶液或使用固狀之絲裂徽素C ，無論是於溶液中或為固狀形式，乃將絲裂徽素以水性氫 氧化物溶液處理以得鹼性7 —氣化鹽- 9 a —甲氣基精絲 甲 4 (210X297公釐）80. 5. 20,000張（H) ~ 4 - (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) •訂* 經濟部中央標準局員工消费合作社印51 Μ9 咖 Λο _Β6 五、發明説明（3 ) 烷之水性溶液。氫氣化鈉為理想之氫氧化物，與之反應後 可得7—Na* 0〃一9a—甲氣基精絲烷。所得之水性 鹽氧化物丨容液可予乾燥以得可與酸反應之不含水之餘留物 ，或者不必初次乾燥地與酸反應，即得7—羥基一9a— 甲氣基精絲烷。 首先我們先轉移至乾燥，亦卽移除水之過程。其中以 凍乾法較為理想，低壓凍乾産物（7 - Na* 〇 - — 9a 一甲氣基精絲烷，其中水性氫氣化鈉乃用以作為水性氫氧 化物溶液）乃使用中度極性之溶劑（例如丙酮）懸浮以供 以酸處理。酸可為陽離子交換樹脂或酸溶液之形式，且像 足量使用以將7-氧化鹽基園轉換成7—羥基。以使用氫 形式之強酸陽離子交換樹脂較為理想。當使用陽離子交換 樹脂時，待反應進行後，將樹脂予以分離，如果溶劑不可 與重氮二^基甲烷相容，則將溶劑蒸發。7_羥基一9 a -甲氣基精絲烷及與重氮二苯基甲烷於溶劑或溶劑結合劑 (與這兩者可容）（例如二氣甲烷）中起反應以形成7 — (二苯甲基）氣基一 9 a —甲氣基精絲烷産物；反應可於 〇*0至3〇它下使用過量重氮二苯基甲烷，例如2至5當 量重氮二苯基甲烷進行1至1 ◦小時。純化作用乃藉（例 如）於Α52 ◦：»或S i 〇2上進行色層分離法而輕易進 行。如不使用柱色層分離法，而僳藉濃縮法，使用非極性 溶劑予以分界以移去過量之重氮二苯基甲烷，繼而予以蒸 發，則可獲得較為不純之物質。由絲裂徽素C中通常可獲 得60%以上之産率。因為Sami, S.M.,等人於J. Med. 甲 4 (2!〇X297公釐）80. 5. 20,000張（Η) - 5 - .........................................> ......^..........................:玎..................... ·線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 219938 A 6 B 6 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（4 ) Chem. 1987, 30， 168— 173 中指出（169 頁）、、7 -羥基精絲烷溶液與適當重氮烷.........較大之重 氮烷乃無效〃起反應之步驟及170頁表1 (化合物第7 號）中之步驟均顯示苄基重氮甲烷與* 7 -羥基精絲烷反 應後之産率為10%,故此結果乃令人意外。 如果乾燥作用（亦即水之移除）不予進行•亦即鹼性 7 —氣化鹽一 9 a —甲氣基精絲烷之水性溶液係直接以酸 處理《則此酸最好為水性磷酸，且僳混合以提供4. 7至 6. 5之pH,(以5至6最佳），而得7—羥基一9a —甲氣基精絲烷之水性溶液。彼與重氮二苯基甲烷之反應 僳依下列步驟進行。重氮二苯基甲烷乃予混合。重氮二苯 基甲烷所溶解及/或彼所另行混合之溶劑係為可使7—羥 基一 9 a —甲氧基精絲烷及重氮二苯基甲烷均可溶之溶劑 或溶劑結备劑，最好為二氣甲烷與甲醇之結合劑，二氯甲 烷與甲醇之體積比率乃在◦. 5:1至3:1之範圍間。 7 —羥基一 9 a —甲氣基精絲烷間之反應係以萃取性烷基 化作用（無視水之存在）之方式來進行，其中，有機溶劑 係由水相中萃取出7 —羥基一 9 a —甲氣基精絲烷以供於 有機溶劑相（最好為二氣甲烷）中反應。烷基化以産生7 一（二苯甲基）氣基一 9a —甲氧基精絲烷之反應僳（例 如）於01C至3 Ot：下使用過量之重氮二苯基甲烷，例如 2至5當量重氮二苯基甲烷進行1至10小時。在烷基化 反應期間，必需定期地加入（最好為）水性磷酸以保持P Η在4. 7至6. 5之間，尤其在5至6之間。當烷基化 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂. 甲 4 (210X297公爱）80. 5· 20,000張（Η) - 6 - 經濟部中央標準局貝工消费合作社印製 ^10938 A 6 _B6_ 五、發明説明（5〉 反應完全時，乃將有機相分離，ϋ而藉乾燥作用移去水， 蒸發作用以移去有機溶劑，再藉於Αβ2 〇3或S i〇2 上進行色磨分離以由餘留物中復收産物，即得實質上為純 質之（二苯甲基）氣基一9a—甲氣基精絡院。其餘 産物可藉将水相與重氮二苯基甲烷於供彼及7 —羥基一 9 a —甲氧基精絲烷所用之溶劑最好於重氮甲烷中強烈混合 ，再於15*C至251C下反應10至20小時，而後藉色 層分離法而復收此添加之産物。由絲裂徽素C中所得之産 率（包括由水相之操作步驟中所得之産物）為40至60 %,有鑒於Sami等人於上述文獻中之所述，故這些産率乃 令人意外。 所得之纯化之7 — （二苯甲基）氧基一 9 a —甲氣基 精絲烷可與胺起反應，其中，胺中之胺基或經取代胺基團 乃取代7 —(二苯甲基）氧基團以得相關之7_胺基或7 一經取代胺基化合物，彼等偽已知之抗腫瘤劑。換言之， 7 — （二苯甲基）氣基一 9a —甲氣基精絲烷乃與RNH 或RNH2起反應以得7 — RN —或7 - RNH_9a — 甲氧基精絲烷，其中之R為經取代或未經取代之脂族或環 脂放或芳族基圍，或者R與N形成雜環基圍。例如，令7 一（二苯甲基）氣基一 9 a —甲氣基精絲烷與對位一硝苯 基二硫基乙胺（例如以氫氛化物酸加成鹽之形式）於三乙 胺/甲醇中，於0¾至3〇·〇下起反應，即7 —〔2 —( 4 —硝苯基二硫基）乙胺基一 9a -甲氧基精絲烷，彼於 Vyas等人之美國專利4，69 1, 023號中乃被教示為 甲 4 (210X297公釐）80. 5. 20,000張（H) - 7 - (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) Ο 0 933 A η Β 6 五、發明説明（6 ) 抗腫瘤劑。 所得之純化7 — （二苯甲基）氣基一9a —甲氣基精 絲烷亦可_鹼化之醇起反應，因而醇中之有機部分乃取代 7— （二苯甲基）。故當使用KOH/甲醇時，則産物為 絲裂徽素A。 當7— （二苯甲基）氣基圄被經取代之二硫基乙胺基 圃取代時，則最好經由7- 〔2— （2—吡啶基二硫基） 乙胺基〕一 9a —甲氣基精絲烷或7 —〔2 — （3 —硝基 —2 _耻陡基二硫基）乙胺基〕一9 a—甲氣基精絲院作 為中間體來進行。因此，如欲製備7 —〔2 — （4 一硝苯 基二硫基）乙胺基〕9a —甲氣基精絲烷，則將7 — （二 苯甲基）氣基一 9a —甲氣基精絲烷轉換成7 —〔2 — （ 2 —吡啶基二硫基）乙胺基〕一 9a —甲氧基精絲烷或7 一〔2 — (3 —硝基一 2—Dlt淀基二硫基）乙胺基〕一9 a—甲氣基精絲烷中，於第二步驟中，乃使用4一硝基硫 苯酚取代2 -硫代吡啶基或3 —硝基一 2 —硫代吡啶基而 轉換成産物。第一步驟偽藉令7 —(二苯甲基）氣基一 9 a—甲氣基精絲烷與2—吡啶基二硫基乙胺或2— （3— 硝基一2—吡啶基二硫基）乙胺，於甲醇中起反應，且於 15t：至25它之溫度下反應來進行。2 —吡啶基二硫基 乙胺或2— ί3_磁基~2—耻症基二硫基）乙胺反應物 可以氫氯化物酸加成鹽之形式與三乙胺或其它中和劑共同 加入以將酸加成鹽轉換成供反應用之游離鹼。雖然7— （ 二苯甲基Γ氣基一 9 a —甲氣基精絲烷與2 —吡啶基二硫 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) •裝. .線. 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 f 4 (210X297公釐）80. 5. 20,000張（H) — 8 - A 6 B 6 五、發明説明（7 ) 基乙胺或2— (3—硝基一2—吡啶基二硫基）乙胺之反 應乃類同於彼等與絲裂徽素A以産生類似産物之反應，然 而7 — 〔2 — (4 —硝苯基二硫基）乙胺基〕一 9a —甲 氧基精絲烷之産率比起直接路徑者更為增加，但絲裂徽素 A經由相同中間體所得之産率百分比乃比直接路徑者減少 或較未增加。 已被發現廣泛用於絲裂徽素文獻及用於本文中之通俗 命名法可辨認前述之環条統，包括絲裂徽素之數種特性取 代基，諸如精絲院。

(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) .裝. 訂· .線· 經濟部中央標準局員工消費合作杜印製 有關於本發明産物之立體化學構型方面，當欲採用根 名'"精絲烷〃或結構式來辨認時，則可辨認其立體化學結 構乃與絲裂徽素C相同。 詳翥說明 · 本文所提供之新穎化合物為下式之7- （二苯甲基） 氯基一 9 a —甲氧基精絲烷 甲 4 (210X297公釐）80. 5. 20,000張（H) -9 - 219933 A 6 B 6 五、發明説明（8 ) ρ

2 Η Η 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 其中、' Ph 〃代表苯基，其為暗紅色或褐紅色粉末，熔點 為96 — 97t!。其特性如下： iH-NMR (pyr-d5)符號：δ 1 . 8 5 ( 3 Η , s )， 2. 04(1. Η，t), 2 · 68 ( 1 Η , b r s ), 3 . 0 8 ( 1 Η , d ), 3 . 1 1 ( 3 Η , s )， 3 . 4 3 ( 1 Η , d )， 3. 96 ( 1 Η , d d )， 4 . ◦ 8 ( 1 Η , d )， 5 .〇 2 ( 1 Η , t )， 5.43 ( 1 Η , d d ), 7. 19 至 7.38(l〇H，m),及 7 . 4 2 ( 1 Η , s ); UVXmax (甲醇）206，325, 528mm; IR KBr主要光譜帶 甲 4 (2丨0X297 公釐）80. 5., 20,000張（Η) - 10 - (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) *裝. .訂. A 6 _B6_ 五、發明説明（9 ) 3427, 1730, 1632, 1578,1450, 1404 及 '133〇cm_i〇 現在我們將目標轉移至上述化合物之製法，其偽令7 一羥基一9 a —甲氣基精絲烷與重氮二苯基甲烷起反應。 7 —羥基一 9 a —甲氣基精絲烷乃具有下列公式 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

G 此化合物由絲裂徽素C乃由絲裂徽素A中製備之方法 乃述於 Maisui, M.，et al.，The Journal of Antibiotics’ Vol. XXI， No. 3， 189—198 (1968 年3月）中。 重氮二苯基甲烷乃具有下列公式 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

其可依 Adamson， R· J·» et ai’ J· Chem· Soc· Perkin I , 2030 - 2033 (1975)所述之法製得。 甲 4 (2! 0 X 297公釐）80. 5. 20,_張（Η) -11 - 2129 〇0 A6 B6 經濟部中央襟準局WT工消費合作杜印製 五、發明説明（10) 彼等係於水之存在或不存在下，於不對反應産生不利 影響且使二者均可溶之溶劑或溶劑結合劑中，於〇〇至3 0 t：之溫度下使用比7 —羥基一 9 a —甲氧基甲烷過量之 重氮二苯基甲烷，例如2至5當量之重氮二苯基甲烷反應 1至10小時。理想之溶劑為二氯甲烷，或為體積比為〇 .5:1至3:1之二氯甲烷/甲醇結合劑。其它之適當 溶劑包括（例如）乙酸乙酯，乙酸異丙酯，其它酯類，四 氫呋喃，二乙醚，其它醚類，鹵化之烴類諸如氣仿及1， 2—二氣乙烷等，醇類諸如乙醇及丙醇等，以及彼等之混 合液。 我們現在將目標轉移到本文供製備上述中間體之理想 方法，其包括令7 —羟基一 9a —甲氣基精絲烷與重氮二 苯基甲烷起反應之步驟，且彼傺以絲裂徽素C起始以作為 7 —羥基一9 a _甲氣基精絲烷之來源。 在這些理想之方法中，如同先前所述，理想之第一步 驟係令絲裂徽素C於水性氬氧化物溶液中起反應以形成驗 性7 —鹽一氧化物一 9 a —甲氧基精絲烷之水性溶液，彼 乃繼而轉換成7 -羥基一 9 a -甲氣基精絲烷以供與重氮 二苯基甲烷反應。理想之氫氧化物溶液為氫氣化鈉溶液。 其它之適當氫氧化物溶液包括（例如）水性氫氧化鉀溶液 ,及水性氫氧化鋰溶液。此輕易進行之第一步驟像採用大 於化學計量之量（例如1 一 1. 5當量）之氫氧化物，且 像於30t：至40*0下反應1又1/2至4小時。當氫氧 化物為氫氧化鈉時，則産物為7 -氧化鈉—9a -甲氧基 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) .丨裝 訂· 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS>甲4规格（210 X 297公釐> 一 12 _ 219988 Λ 6 __Β_6 五、發明説明（11) 精絲烷之水性溶液，亦即7—Na， ◦--9a—甲氣基 精絲烷，彼乃具有卞式

經濟部中央標準局員工消费合作社印製 水性溶液可予乾燥以供於水之缺乏或於僅有較小童水 之存在（例如H2 0 : 7 — Na* 0_ - 9a —甲氧基精 絲烷之比率小於1 0莫耳比）下進行以得7 — （二苯甲基 )氣基一 9a —甲氣基精絲烷（其後稱為乾路徑），或者 可於水之存在（例如0. 1莫耳7 — Na* 0 — — 9a_ 甲氣基精絲烷）下加工以形成7_ (二苯甲基）氣基一 9 a —甲氣i精絲烷（其後稱為濕路徑）。 首先先將目標轉移至乾路徑。在乾路徑中，鹼性水性 氧化鹽溶液乃予乾燥以形成實質乾燥（Η 2 0 : 7 — Naf —9a—甲氣基精絲烷乃小於10莫耳比）之 固狀7 —氧化鹽- 9 a —甲氣基精絲烷（當反應物為氫氧 化鈉時，則實質乾燥之固狀産物為7—氧化鈉_9a—甲 氣基精絲烷）。雖然其它乾燥法例如蒸發法或噴霧乾燥法 亦可使用，®較理想之乾燥法為凍乾法。當採用凍乾法時 ，則適當之循環包括冷卻至一5〇艺至—8〇υ,再於約 0. ImmHg真空下乾燥10 — 30小時之步驟。如前 所述，實質乾燥之固狀産物乃懸浮於中度極性之溶劑中。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 甲 4 (210X297公釐）80. 5. 20,000張（H) -13 - 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 。ί 9 9 3 3 A 6 _Β_β 五、發明説明（12) 如前所述，丙_為理想之中度極性溶劑。供乾燥産物懸浮 之其它適當溶劑包括（例如）其它酮類，四氫呋喃，酯類 諸如乙酸之酯等，及鹵化之烴類諸如氣仿及1, 2—二氣 乙烷等。如前所述，7_氣化鹽係與溶液或氫形式之強酸 陽離子交換樹脂形式之酸起反應以製備7 —羥基_9 a — 甲氣基精絲烷反應物。既然陽離子交換樹脂可於缺乏之水 之狀況下使用，故較為理想。適當之酸溶液包括（例如） 水性磷酸，硫酸，氫氣酸及其它無機酸。足量之酸乃用以 使氣化鹽質子化成7_羥基- 9 a -甲氣基精絲烷。與酸 之反應可於〇它至3〇t：下進行5分鐘或更少至約3小時 或更多。當使用強酸陽離子交換樹脂時，以20至2 5*0 之反應溫度及1至2小時之反應時間較為理想。待7 —羥 基一 9 a —甲氣基精絲烷産物形成後，將任何陽離子交換 樹脂分離i再依前述，如果溶劑不與7-羥基一 9 甲 氧基精絲烷及重氮二苯基甲烷反應之步驟相容，則予移去 。在乾路徑方面，7—羥基一9a-甲氣基精絲烷與重氮 二苯基甲烷反應之步驟最好使用二氯甲烷作為惟一溶劑來 進行，且此反應最好不予加熱或冷卻地進行3至5小時。 我們現在將目標轉至濕路徑上，其乃存在實質量之水 (例如0. 1莫耳7 — Na* Ο — —9a—甲氣基精絲烷 之水性溶液Γ以製得7 — （二苯甲基）氣基一9a —甲氣 基精絲烷。其所具有之極大優點為，因為絲裂徽素C可予 製得以供此路徑使用而不必將絲裂徽素C醱酵製造中所得 之混合物完全地純化（例如可使用醱酵衍生性溶液），因 甲 4 (210X297公釐）80. 5. 20,000張（H) - 14 - (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 219938 A 6 ___ 五、發明説明（13) 此可降低或消除由醱酵湯中進行分離作用及純化作用所發 生之絲裂徽素C之喪失。此路徑可令其它可能存在於醱酵 湯中之7 —氣代一9 a —甲氣基精絲烷及7 —胺基一 9 a 一甲氣基精絲烷轉換成7—羥基一9a_甲氣基精絲烷， 因而可增加産量。此外，旣然僳水性7—羥基一9a—甲 氣基精絲烷與重氮二苯基甲烷起反應，故7 —羥基一9 a 一甲氧基精絲烷製造過程中之乾燥作用可予免除。既然技 藝中並未教示重氮甲烷與7 —羥基一 9 a _甲氣基精絲烷 於水之存在下之反應，故重氮二苯基甲烷與7—羥基一9 a -甲氣基精絲烷於水之存在下起反應以得實質産率之7 一（二苯甲基）氧基一 9a —甲氯基精絲烷之作用乃造成 不明顯之結果。 現在將目標轉移至濕路徑之理想狀況，7—氧化鹽一 9 a -甲拿基精絲烷之水性溶液（當與絲裂徽素C反應之 氫氣化物溶液為水性氳氣化鈉時，則為7_Na* ◦- — 9 a —甲氣基精絲烷）乃直接與酸反應。雖然可使用水性 酸溶液或氫形式之陽離子交換樹脂作為酸化劑，但此事例 不像乾路徑一般，因為使用陽離子交換樹脂需要樹脂分離 之步驟，而與水性酸共同置入之水並不需於重氮二苯基甲 烷與7_羥基一9a—甲氧基精絲烷之反應時移去，故水 性酸溶液乃優於陽離子交換樹脂。此反應乃（例如）藉將 二苯基重氮甲烷溶液與7 —氧化鹽一 9 a —甲氧基精絲烷 溶液結合，使用酸溶液，最好使用5_15%磷酸以調整 pH至約4至7之期望範圍，藉定期加入酸溶液以保持P 甲 4 (210X297公釐）80. 5. 20,000張（H) - 15 - (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) •装. 訂- 經濟部中央標準局w工消費合作社印製 ^19938 Α ό _B_6 五、發明説明（14) Η於上述理想範圍，同時保持溫度於〇υ至3 01C之範圍 ,如需要的話再加入另外之二苯基重氮甲烷溶液而輕易進 行，如前所述，甲醇最好與二氦甲烷反應溶劑結合作用。 甲醇有助於由水相中萃取出所形成之7 —羥基_ 9 a —甲 氣基精絲烷以供於有機相中與重氮二苯基甲烷起反應。 現在我們將目標轉移至7-(二苯甲基）氣基-9 a 一甲氣基精絲烷與一级或二级胺之反應上，其中，胺反應 物中之胺基或經取代胺基圍乃取代7— （二苯甲基）氣基 團以得相關之7 —胺基或7 —經取代胺基一 9 a —甲氧基 精絲烷。適當之一级及二级胺反應物包括（例如）於Sch-roeder美國專利3, 306, 821號第3列第38行至 第4列第6行所示者，此Schroedei•美國專利3, 30 6 ，821號第3列第38行至第4列第6行之表乃併入本 文中以供i考。供與一级及二级胺反應之7 —(二苯甲氣 基）氣基- 9 a -甲氣基精絲烷乃示於下文供令彼與對位 -茴香胺，嗎啉，乙醇胺以及二硫代乙胺反應以産生胺基 二硫化物（諸如Vyas等人之美國專利4, 691，023 及Shirahata等人之美國專利4, 6 9 1, 0 2 4中所述 之胺基二硫化物）之特定實例中。下文所舉證之一種極重 要反應為7 — （二苯甲基）氣基一9 a —甲氧基精絲烷及 2 — （對位=硝苯基二硫基）乙胺（例如為氣化氫酸加成 鹽之形式）起反應以製得極有效之抗腫瘤化合物7 -〔2 一 （4 一硝苯基二硫基）乙胺基〕—9a —甲氧基精絲烷 之作用；此對位一硝苯基二硫基乙胺係以已知之二硫化物 甲 4 (210X297公釐）80. 5. 20,000張（H) - 16 _ .........................................„ ......^...........................tr.....................~ ♦ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 219938 A 6 B 6 經濟部中央標準局員工消f合作社. 五、發明説明（15) n3 C00CSSCH2 CH2 NH2 .HCi?作為起始 物質，並根據 Brois，S.F.，et al，J. Am. Chem，Soc. 92, 7629- 7 631 (1 9 7 0)之步驟令之與對 位一硝基硫苯酚起反應而輕易製得。7 - （二苯甲基）氧 基一 9 a -甲氣基精絲烷與胺之其它重要反應以産生極安 定中間體7— 〔2— （3—硝基一2—吡啶基二硫基）乙 肢基一 9 a —甲氣基精絲烷及7 —〔2 — （2 —吡啶基二 硫基）乙胺基〕_9a -甲氣基精絲烷之作用則於稍後述 及。通常，7 — （二苯甲基）氣基一 9a —甲氧基精絲烷 與一级或二级胺反應以産生7 —胺基及7 —經取代胺基一 9 a —甲氧基精絲烷之作用像於甲醇中，於0至3 01C下 進行1至5 0小時。當所用胺傜酸加成鹽形式時，則可藉 將三乙胺或其它適當中和劑加至反應混合物中而予輕易地 轉換成供皮應用之游離鹼。 我們現在將目標轉至7 — （二苯甲基）氣基一 9a — 甲氧基精絲烷與鹼化醇之反應，其中，醇中之有機部分乃 取代7 — （二苯甲基）。適當之醇包括（例如）甲醇，乙 醇，丙醇，丁醇及其它低级醇。適當之鹼化劑包括（例如 )KOH, NaOH,及Li〇H,此反應係於〇°至 3 0 C下進行1至1 0小時。 我們現茬將目標轉至使用經取代二硫基乙胺基園以替 代7 — （二苯甲基）氣基圃之反應，其首先偽將7 —(二 苯甲基）氣基一9a —甲氧基精絲烷轉換成7 — 〔2 — （ 2 —吡啶基二硫基）乙胺基—9a —甲氣基精絲烷或 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) •裝. 訂. •線- 甲4(21狀297公釐）80.5.20,000張汨） —17 - ^19938 A ο B 6 經濟部中央標準局員工消費合作社印3έ 五、發明説明（16) 〔2— (3—硝基一2—吡啶基二硫基）乙胺基〕一9a 一甲氣基精絲烷中間髏，而後将此中間體轉換成7—經取 代二硫基之胺基一 9 a —甲氧基精絲烷。 轉換成7- 〔2- （2-吡啶基二硫基）乙胺基一9 a—甲氧基精絲烷之方法包括令7— （二苯甲基）氧基一 9 a —甲氣基精絲烷與2 —吡啶基二硫基乙胺（例如為氫 氣化物鹽之形式）起反應。此反應僳於〇υ至3〇υ下， 於適當非反應性反應介質諸如甲醇，乙醇，其它低级醇， 低级酯，鹵化之烴及彼等之混合物中進行1至20小時。 理想之反應狀況像於甲醇中，於15t：至25°下進行2 至10小時。三乙胺或其它三级胺可用以將胺鹽轉換成供 反應用之游離龄。2—吡啶基二硫基乙胺氫氣化物俗以二 硫化物 Ha C0〇CSSCH2 CH2 NH2 .HCi 作 為初始物 _，並根據 Brois，S.J.，et al，J. Am. Chem. Soc. 92，7629 — 7631 (1970)之步驟令 之與3—硝基一2—镟基吡啶起反應而輕易形成。根據E P 116208， 2—吡啶基二硫基乙胺二氫氯化物乃 述於日本專利公開公報136， 261/80中。 轉換成7— 〔2— （3—硝基—2—吡啶基二硫基） 乙胺基〕_9a —甲氣基精絲烷之方法包括令7 — （二苯 甲基）氣基」9a —甲氣基精絲烷與2 — （3_硝基一 2 一吡啶基二硫基）乙胺（例如為氫氯化物鹽之形式）起反 應。此反應偽於0°至3〇^：下，於適當非反應性反應介 質諸如甲醇，乙醇，其它低级醇，鹵化之烴及彼等之混合 甲 4 (210X297公釐）80. 5. 20,000¾ (H) - 18 - <請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) •裝. 訂. ^19938 A 6 B 6 五、發明説明（17〉 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 物中進行1至20小時。理想之反應狀況係於甲醇中，於 ◦ "C至30t：下進行2至10小時。三乙胺或其它三级胺 可用以將胺鹽轉換成供反應用之游離鹼。2 - (3 —硝基 一2—吡啶基二硫基乙胺）氫氣化物偽已知之二硫化物Η jC0〇CSSCH2 CH2 NH2 *HC 又作為初始物 質，並根據 Brois，S. J，et al» J. Am. Chem. Soc*9 2, 7629-7631 (1970)之步驟令之與 3 — 硝基一2—巯基吡啶起反應而輕易形成。3—硝基一2— 魏基Hit旋之製法乃述於3111^67，八.1?.，6七珏1，<1.入111· Chem. S〇c.62, 1697-1698 (1940)中。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 中間體7 —〔2 — （2 —吡啶基二硫基）乙胺基一 9 a —甲氧基精絲烷像已知之化合物，且係述於Shi rahat a 等人之美國專利4, 69 1, 0 2 4號第4列及於K〇n〇等 人之歐洲％利4， 691， 024號第5頁中。其偽與硫 赶反應物以硫赶交換法輕易地反應。適當之硫赶反應物包 括於EP 116208及於Shi rahat a之美國專利4， 691， 024號中所指定者。反應係使用大於化學計量 之硫赶反應物（例如最高逹2當量或更多）於0Ϊ：至 30¾下，於惰性反應介質諸如甲醇，或其它可與反應相 容之溶劑中進行2分鐘至1 0小。在本反應之極重要體現 中，7 — 〔2· — (2 —吡啶基二硫基）乙胺基〕一 9a — 甲氧基精絲烷係與對位一硝基苯硫酚，最好於甲醇中，於 0至30^0下反應1 〇至20分鐘以得極有效之抗腫瘤劑 7 —〔2 — （4 一硝苯基二硫基）乙胺基〕一 9a —甲氧 I " " _'! 甲4(2!()><297公釐）80.5.20,000張（出 -19 - 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 2:19933 A 6 _B_6_ 五、發明説明（18) 基精絲烷。 中間體7 —〔2 — (3 —硝基_2 —吡啶基二硫基） 乙胺基〕一 9 a —甲氣基精絲烷係已知之化合物，且於V-yas等人之美國專利4, 69 1，023號中被指定為化 合物3 0 (步驟3 0)。此中間髏於二硫化物硫赶交換法 中之反應乃述於Vyas等人之美國專利条列第4，8 6 6, 18◦號中，而其文中指定用以與上述中間體反應之硫赶 則併入本文中以供參考。此中間髏與硫赶所進行之硫赶交 換反應偽於◦至6 01C下，於非反應性反應介質（最好可 使反應物溶解）中進行2分鐘至1 0小時。與水溶性硫赶 反應物之反應方面，以水為適當之反應介質。與非水溶性 硫赶反應物之反應方面，以有機溶劑較為理想。適當之有 機反應介質包括（例如）低级烷醇諸如甲醇，乙醇及異丙 醇，低级_酸低级烷酯諸如乙酸乙酯，丙酸甲酯及乙酸丁 酯等，低级脂族酮諸如丙酮及甲基乙基酮等，環狀脂族醚 諸如四氫呋喃等及低级多鹵化之脂族烴諸如二氣甲烷，二 氯化乙烯及氛仿等。在本文反應之極重要體現中，7 —〔 2 — (3 —硝基一2 —吡啶基二硫基）乙胺基〕一 9a — 甲氧基精絲烷係與對位一硝基苯硫酚，最好於甲醇中，於 0至301C下反應2至20分鐘，以得抗腫瘤劑7_〔2 一 （4 一硝辇基二硫基）乙胺基〕一 9 a —甲氣基精絲烷 Ο 本發明乃藉由下列之特定實例加以說明。實例中，Μ eOH代表甲醇，且EtOAc代表乙酸乙酯。 甲 4 (210X297公釐）80. 5. 20,000張（H) - 20 - 产請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 219938 A 6 _B_6_ 五、發明説明（19) 實例1 將絲襄徽素C(817mg;約95%純度）（ 2.45mM)置於圓底燒瓶中。再將1.1當量 Ο.1M NaOH水性溶液加入。而後將之於35C下 攪拌2又1/2小時，再將所得藍色溶液冷卻至一78¾ ，並於0.ImmHg真空下予以低壓凍乾。18小時後 ，可得本質為乾燥之暗色固狀物，繼而將丙酮（ 12. 2m又）加至此暗色固狀物中。再將之以懸浮液形 式攪拌15分鐘，其後加入Dowex AGX8氫形式 之強酸陽離子交換樹脂（3. 65g)。再將所得結合物 於22t：下徐缓地攪拌1又1/2小時。繼而將此物質予 以過濾，並將樹脂以1〇m5丙酮清洗。而後將濾液蒸發 ，再將25mi二氛甲烷加至此暗色餘留物中。其後加入 0. 7M重氮二苯基甲烷之二氯甲烷溶液（6· 6mL ; 約2當量）。1小時後，加入另6. 6m5重氮二苯基甲 烷溶液。共經過4小時後，TLC — Si〇2 7 % Μ eOH/CH2 指出初始物質已消失，而存在較不 具極性之紅色斑點。繼而將反應混合物倒至乾Α ί 2 柱頂上，並以CH2Ci?2，繼而梯度地洗提至約4% MeOH/C：‘H2 。再收集期望之部分，並予蒸發 ，即得暗褐红色固狀之7_ (二苯甲基）氣基一9a —甲 氣基精絲烷，775mg (1. 55mM)，産率為66 %,而後將此樣品由丙酮/CH2 Ci2 /乙醚/己烷之 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 甲 4 (210X297公釐）肌 5. 20,000張（H) -21 - 219933 A 6 B 6 五、發明説明（20) 混合液中予以結晶。分析後可得下列之結果： ^H — N^dR (pyr — d5)，符號 5 經濟部中央標準局員工消費合作社印^ 1 8 5 ( 3 H * s ) f 2 0 4 ( 1 H 9 t ) $ 2 6 8 ( 1 H 9 b Γ S 3 〇 8 ( 1 H $ d ) ， 3 1 1 ( 3 H 9 s ) $ 3 4 3 ( 1 H t d ) t 3 9 6 ( 1 H t d d ) 4 〇 8 ( 1 H 9 d ) 9 5 0 2 ( 1 H 9 t ) 9 5 4 3 ( 1 H f d d ) 7 i 9 至 7 * 3 8 ( 1 7 4 2 ( 1 H 9 s ) t U V λ m a jf (甲 醇 ) 2 〇 6 9 I R K B r 主 要 光 譜 帶 3 4 2 7 f 1 7 3 〇 t 1 1 5 7 8 9 1 4 5 〇 9 1 1 3 3 〇 c m -1 〇 産 物 之 熔點為 9 6 — 9 7 °C o 宵 例 I I 將 3 5 3 m g ( 1 〇 6 Ο Η , m )及 325, 528mm； 6 3 2, 4 Ο 4及 mM)絲裂徽素C (約95 .........................................” ......^...........................tr.....................(-後·_ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 甲 4 (210X297公釐）80_ 5. 20,000張（Η) — 22 - 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 219938 A 6 _B6_ 五、發明説明（21) %純度）置於3頸圓底燒瓶中。再將11. 6mi ◦ .IN Na ◦力0入。而後將之於35t：下攪拌2小時 。水解反雇於此時完全。冷卻至約01後，藉加入10% Η 3 Ρ Ο 4 (水性）將反應混合物之pH諝整至約6。而 後將3mi (約2. ImM) 0. 7莫耳重氮二苯基甲院 (DDM)之二氣甲烷溶液加至此反應混合物中。繼而加 入甲醇，再予快速攪拌1小時，其後藉加入更多1 0 % H3 P〇4並予連缠攪拌以調整pH至約5。經過 2小時定期地加入10% P〇4以保持pH介於5 一 6間後，加入另3mi? 0. 7莫耳重氮二苯基甲烷（ DDM)之二氣甲烷溶液。再令之徐缓加溫至221C,由 距初始加入DDM溶液之共6小時後，令反應混合物分界 於 10〇mJ2 CH2 Cj^2及2〇mj^H2 0 間。有機 相則於Na2 S〇4上乾燥並予蒸發。再將餘留物置於乾 中性柱上進行色層分離，並使用CH2CJ?2 至4% MeOH/CH2Ci?2之梯度洗提以洗提出期 望之化合物。繼而收集純質之諸部分，再予蒸發以得 2 0 9 m g 7 — （二苯甲基）氣基一 9a —甲氣基精絲 院（約4 2 %之産率），將分界後之水性層以6 m j? 0. 7莫耳DDM之CH2 Cp2溶液處理，繼而將結合 物於2 2 C f快速攪拌。1 6小時後，令反應混合物進行 上述之一般步驟，而後進行類同之色層分離作用，即得另 49mg (約10%之添加産率）7 — （二苯甲基）氣基 —9a —甲氣基精絲烷。總産率為52%。 .......................................」......^...........................ΤΓ.....................ί ·&.. (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 甲 4(2!〇Χ297公釐）80. 5. 20,000張出） -23 - 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 219935 A 6 ____BJ__ 五、發明説明（2£) 官例I I I 將7 — （二苯甲基）氣基一9a —甲氣基精絲烷（ 1 0 0 m g ) (0. 2mM)置於圓底燒瓶中。再令之溶 於甲醇中，而後加入123mg (5當量）對位一 茴香胺。反應混合物氫乃由褐紅色逐漸地轉為緣色。反應 則藉於硅膠上進行TLC並使用5% M e Ο Η X C Η 2 洗提而予以監視。共經2. 75小時後，將反應混 合物蒸發，並令餘留物溶於CH2 中。再將之置於 硅膠柱上進行色層分離並以5% MeOH/CH2C^2 裝填及洗提。繼而收集純缘色光譜帶並.予蒸發，即得 7 6 m g (86%) 7 — （4 —茴香基）氣基一 9a -甲 氧基精絲烷。經由/Η NMR可知産物與本化合物相符 Ο 奮例I V 將42mg 7 — （二苯甲基）氧基一 9a —甲氧基 精絲烷置於42mg圓底燒瓶中。再將2ιηβ甲醇及 1 0 0毫升嗎啉加入。而後將所得結合物於2 31〇下搜拌 48小時。此時之反應實質上乃完金。繼而將反應混合物 蒸發，再將之置於硅膠柱上進行色層分離，並以7% μ eOH/CH2 装瑱及洗提，即得22mg (65 %) 7 — （N—嗎啉基）一 9a —甲氧基精絲烷。經由 7 H NMR可知産物乃與本化合物相符。 甲 4 (210X297公釐）80. 5. 20,000張（H) - 24 - (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) .裝· 訂· •線· 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 212938 A 6 ___B_6_ 五、發明説明（23) 奮例V 令7 — （二苯甲基）氣基一 9a —甲氣基精絲烷（ 7 1ms) (〇. 14mM)溶於甲醇（6mi2)中，再 將所得溶液攪拌，而後將乙醇胺（100撤升）加至此已 攪拌之溶液中。繼而將反應混合物於2 210下攪拌，反應 則藉於Si〇2上進行TLC並使用15% Me〇H/ CH2 C52洗提而予以監視。2小時後，反應乃完全。 繼而將反應混合物以二氯甲烷（20mi2)稀釋。再將所 得溶液置於S i 〇2柱上進行色層分離，並使用1 0% MeOH/CH2Ci2d2〇% MeOH/CH2C 又2之梯度裝填及洗提。而後收集藍色光譜帶，並予蒸發 ，即得7 — （2 —羥乙基）胺基一 9a —甲氧基精絲烷（ 4 5 m g )' (83%産率）。經由NMR可知與本 化合物相符。 啻例V I 將7 —(二苯甲基）氧基一 9a —甲氣基精絲烷（ 178mg, 0. 355mM)置於圓底燒瓶中。而後加 入乾甲醇（15mi?)。繼而將所得溶液攪拌，再將 1. 62% ‘Κ0Η之甲醇溶液（301徹升）加至此已 攪拌之溶液中。反應則藉TLC Si〇2 , 1 0 % Μ eOH/CH2 Cp2加以監視。5又1/2小時後，顯 現反應已有>90%完全。而後藉加入乾冰（約◦. 5 g 甲 4 (210X297公釐）80. 5. 20,000張（Η) - 25 - (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 219938 A 6 _B_6 五、發明説明（24) )以令反應驟冷。再將反應混合物蒸發，而後將餘留物置 於Si〇2柱上進行色層分離並以7% MeOH/ CH2ci22 至 10% Me〇H/CH2C52 之梯度 洗提。繼而收集諸部分，並將類同之諸部份聚集，即得絲 裂徽素A (88mg) (. 252mM), 71%産率。 2 H NMR顯示與確實之樣品相同。 奮例V T T 將7 — （二苯甲基）氣基一 9 a —甲氣基精絲院（ 2 0 9 m g ) (0.417mM)置於圓底燒瓶中。再令 之溶於7. 3m5甲醇中，並將所得溶液冷卻至Ot：,繼 而加入1 16微升三乙胺（2當量）。其後加入 1 2 2 m g 2 — （對位一硝苯基二硫基）乙胺氫氯化物 。再令反-混合物加溫至22t：, 1又1/2小時後，將 反應混合物再度冷卻至Ot，再將232微升三乙胺及 2 4 4 m g 2 — （對位一硝苯基二硫基）乙胺氫氯化物 先後加入，而後令反應混合物再度加溫至2 2t：，6小時 後，經由Si〇2上進行TLC一10% MeOH/C Ci,顯示反應已完全。繼而將反應混合物蒸發，令 餘留物溶於CH2 中，再將所得溶液置於裝填S i 〇2之柱上進行色層分離並以5% MeOH/CH2 C ^2至10% MeOH/CH2 ce2之梯度洗提。繼 而收集含有期望藍色光譜帶之諸部分，並藉TLC分析。 再聚集純質之諸部分並予蒸發，即得12〇mg 5 3 96 甲 4 (210X297公釐）80. 5. 20,000張（Η) - 26 - (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) •裝· 訂. 219938 A 6 B 6 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（25) 産率之7—〔2 — （4—硝苯基二硫基）乙胺基〕一 9a 一甲氣基精絲烷。NMR顯示此物質與指定之化合 物相符。· 奮例V I I I 將 2: 50g Η 3 COOCSSCH2 CH2NH2 氫氯化物置於圓底燒瓶中。再令之溶於1 0 Om 5甲醇中 ,而後冷卻至一 lOt：,繼而將所得溶液~攪拌。再將 1. 37g (1當量）2 —硫代吡啶之40mi?甲醇液逐 滴加至此已攪拌之溶液中。而後將所得黃色溶液於 _ 10¾下攪拌1又1/2小時，再於201C下，於旋轉 蒸發器上蒸發。餘留物則以乙醚及乙酸乙酯碾磨，並予再 度蒸發。此時有淡黃色之固體存在。將此固狀物以乙醚碾 磨（2xg〇mi?)，而後予以蒸發以得2. 49g黃色 固狀物。將之由MeOH/ECt〇Ac中予以結晶後， 即得2. 22g α—吡啶基二硫基乙胺氫氯化物（82 %産率）。 將7 — （二苯甲基）氣基一 9a —甲氣基精絲烷（ 7 7 0 m g ) (1.537mM)置於圓底燒瓶中，再令 之溶於6mP甲醇中。繼而將2—吡啶基二硫基乙胺氫氣 化物（63rmg) (2.84mM)及435微升三乙 胺（3. 1 3 m Μ)(佔氫氯化物之1. 1當量）之 1〇m β甲醇溶液加入。再將所得溶液於2 2 t：下攪拌， 並藉 TLC(Si〇2,7% MeOH/CH2Ci?2 ..........................................~ …·裝...........................訂.....................\ ·線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 甲 4 (210X297公釐）80. 5. 20,000張（H) -27 - 219938 y A6 B6 經濟部中央標準屬負工消費合作社印製 五、發明説明（26 ) )以監視反應。8小時後，反應約有90%已完全。繼而 將反應混合物以120mi2 CH2 CH2稀釋，再以2 X 3 0 m 5 H2 ◦清洗，而後將有機層於NaS〇4上 乾燥並予蒸發，餘留物則置於S i 〇2上進行色層分離並 使用7% Me〇H/CH2CJ^洗提。即得 4 9 5 m g 64%産率7 —〔2 - (2 —吡啶基二硫基 )乙胺基〕_9a—甲氧基精絲烷（0. 98mM)。 將上一段落之合成法中所得之産物置於圓底燒瓶中， 再令之溶於8mi2甲醇中，其後將190mg ( 1. 23mM)1. 25當量對位一硝基硫苯酚之 1 6mi甲醇液分成兩次地加入。繼而將所得溶液攪拌1 5分鐘，此時顯示反應已有>9 5%完全。再將反應混合 物以120m义 CH2 Ci?2稀釋，以Ix30m5 H2 0, 2x30mP鹽水清洗，於Na2 S〇4上乾燥 ，再予蒸發，繼而置於S i 〇2上進行色層分離並以7% MeOH/CH2 Ci?2 洗提。即得 480mg 純 7 — 〔2— (4 —硝苯基二硫基）乙胺基〕一 9a_甲氧基精 絲烷，其後偶爾稱之為BMY 25067 (. 91mM ),8 8 %産率。 由7—(二苯甲基）氧基一 9a —甲氧基精絲烷中所 得之BMY 25067之産率約為56%,由絲裂徽素 C中所得者約為31%。 依實例VII單一步驟法由880mg 7- （二苯 甲基）氣基一 9a —甲氧基精絲烷中所得之BMY 25 (請先閱讀背面之注意事項再項窝本頁) 丨裝 •π· 本紙張尺度適用中國困家標準（CNS)甲4规格（210 X 297公釐） -28 - 218936 A D B 6 五、發明説明（27) ◦ 6 7之産率約佔絲裂徽素C之2 3%。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 窨例I X ’ 使用3 —甲基一1 一對位一甲苯基三氮烯將7 —羥基 一 9 a —甲氧基精絲烷予以烷基化，可得絲裂徽素A ,或 者使用重氮二苯基甲烷予以烷基化，則得7 —(二苯甲基 )氣基一 9a —甲氣基精絲烷（其後稱之為7 — ODPM 絲裂徽素）。 訂. 線· 經濟部中央標準局員工消費合作社印^ 吾人乃估測每一種中間體（絲裂徽素A及7 — ◦ D P Μ絲裂徽素）轉換成7 —〔2 — （4 一硝苯基二硫基）乙 胺基〕一 9a —甲氣基精絲烷（ΒΜΥ 2 5 0 6 7)之 能力，所採用之方法包括單一步驟法，亦即令中間體與2 一（對位一硝苯基二硫基）乙胺氫氣化物起反-，其分別 稱為路徑人及D;兩步驟法，第一步驟僳將中間髏轉換成 7_〔2 — （2 —吡啶基二硫基）乙胺基〕一 9a —甲氧 基精絲烷，第二步驟則予轉換成BMY — 25067,其 分別稱為路徑B及E;另一種兩步驟法中之第一步驟僳將 中間體轉換成7 —〔2 — (3 —硝基一2 —吡啶基二硫基 )乙胺基〕一 9a —甲氣基精絲烷，第二步驟則予轉換成 BMY—25067,其分別稱為路徑C及F,結果乃示 於下列表I中，其中，、' P 〇 T代表能力"。 甲 4(2U)X297公釐）80. 5. 20,_»；(H) -29 - 219988 A 6 B 6 五、發明説明（£8 ) 轰—. 初始物質 路徑 駄量 中間體産率 BMY-25067 座羊 iS産率 能力 效力産率 絲裂徽素A A 3.15 — 57.6 57.6 83·4 62.3"a, POT :81.7% B 4.02 82 43.7 35.S 82 35.9 C 4.02 100 84.9 84. S S5.9 1 Λ -, 0 ^ . ν.： 1- ?-ODPM r D O C 1 — 3S.3 0 ；' 0 πο η ί。., 29.0 絲裂緻素 g 3,70 61.7 72.8 44.3 87 39.6 P0T:98.6% F 3.70 97.0 r, -) n 〇d . 1 , O'J . L \ ——— 一 85.8 69.8 a)偶爾可得此痒苹库率通常校低(40¾) ...........................................-…我...........................π.......................ί f (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟郎中央標準局Μ工消費合作社印製 甲4(210父297公釐）80.5.20,0加張（>1) -30 219938 A 6 B 6 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（29) 奮例X 於2010下將7 — （二苯甲基）氣基一 9a —甲氣基 精絲烷（i71mg, 0. 355mM)加至飽和NH3 之甲醇溶液中。再將所得溶液於2〇υ下攪拌16小時。 而後將溶劑蒸發。再將餘留物置於S i 〇2柱上予以急驟 色層分離，並以10%甲醇/ (CH2 )裝填及洗 提。梯度乃進行至15%甲醇/CH2 Cp2。諸部分乃 藉由薄層色層分離法予以分析，再收集類同之純質諸部分 ，並予蒸發，即得絲裂徽素C, 1 0 1 m g (85%産率 )。此物質之NMR與確實之樣品相同。 奮例X I 將已由腹膜内接種1〇6 P—388個鼠白血病腹水 細胞之C0F,雌鼷鼠與以後文所示劑量之7 —(二苯甲 基）氧基一 9 a -甲氣基精絲烷處理。此處理之化合物傜 藉腹膜内注射法施入。以四隻鼷鼠為一群之鼠群乃用以供 每一種劑量測試，且每隻謅鼠係於接種之日以單一劑量之 處理化合物處理。一群含有十隻經鹽水處理之對照鼷鼠亦 包括於内，將鼸鼠於處理前稱重，並於第六天再度稱重。 重量之變化則作為藥物毒性之測定。吾人乃使用各重20 克之II鼠，鐘重喪失最高逹約2克者則不視為過度。結果 則以平均活存時間（Μ E D S . Τ . ) , % T / C (經 測試化合物處理之鼠群之平均活存時間與經鹽水處理之對 照鼠群之平均活存時間之比率），第六天之平均體重變化 甲 4 (210X297公釐）80. 5_ 20,000張（Η) - 31 ~ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 219938 A ό ._B_6 五、發明説明（30) (AW C )及第五天之鼠隻存活數/經處理之總鼠隻數（ A/T)表示。經鹽水處理之鼸鼠通常於9天内死亡。% 丁 /C之蕞低效應值乃認定為1 25。 量（mg/kg) MED. S.T. %/T/C AWC A/T 300 具毒性 具毒性 -0.7 2/4 150 13.5 150 0.0 4/4 (請先閱讀背面之注意事項再塡寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 由上述結果可知，具有抗腫瘤抑制效應之劑量為 1 50mg/kg〇 有鑒於實驗動物中所觀察到之抗腫瘤效力，故本發明 包括使用本發明新穎化合物以抑制哺乳類腫廇方面之用途 。欲達此目的，乃將實質上非毒性之有效抗腫瘤劑量糸統 性地施至_腫瘤之哺乳類體内。本化合物主要偽欲以與絲 裂徽素C大致相同之方法及某些相同之目的而藉注射法施 用。亦可依特定之腫瘤蚕敏度而採用較大或較小之劑量。 本文之新穎化合物可採用含有稀釋劑，缓衝液，安定劑， 溶解劑及可提供藥學優雅性之成分之乾燥藥學組成物之形 式。這些組成物乃於使用前臨時以可注射性液體介質予以 構成。適當之可注射性液體包括水，等張鹽水等。 熟知技ϋ者乃明顯地可知各種變異。故，本發明乃藉 由申請專利範圍加以定義。 .裝. .訂. 甲 4 (210X297公釐）80. 5. 20,000張（Η) -32 -

Claims (1)

1. I»1 2 3 4 5 ^ 2 年月 ru 本丨 A7 B7 C7 D7 六、申請專利範圍 附件1 ( A ) 第80102108號專利申請案 中文申請專利範圍修正本 民國82年丨月修訂 1 · 6~ (二苯甲基）氧基一9 a —甲氧基精絲烷， 其結構如下所示· (請先閲讀背面之注意事項再瑣寫本頁)

   HH 2 •裝· 鰻濟部中央襟準局Λ工消费合作社印* 第1項之7 — （二苯甲 方法，其包括令7 —羥 苯基甲烷起反應以製得 甲氧基精絲烷之步驟。 方法，其中，該步驟係 Ο 方法，其中，該步驟係 方法，其中，該步驟係 甲醇之體積比率爲 ，而於0至3 0°c之反 P Η下進行。 ，叮. 1 ·一種製備如申請專利範圍 基）氧基一9 a —甲氧基精絲烷的 基一 9 a —甲氧基精絲烷與重氮二 7 —(二苯基甲基）氧基一 9 a — 2 ·如申請專利範圍第2項之 使用含二氯甲烷之反應溶劑來進行 3 ·如申請專利範圍第2項之 於水之存在下進行。 4 ·如申請專利範圍第4項之 5 使用二氯甲烷及甲醇（二氯甲烷與 〇 . 5 : 1至3 : 1作爲反應溶劑 6 應溫度下及於約4 · 7至6 . 5之 本纸張又度適用中鷉家螵準（CNS)甲4現格（210 X 297公* ) 219938 A7 «濟部中央棣準局貝工消费合作社印製 B7 C7 D7 六、申請專利範圍 6 .如申請專利範圍第5項之方法，其中，該PH乃 在約5至6之範圍內。 7 ·—種製備如申請專利範圍第I項之7 一 （二苯甲 基）氧基一 9 a —甲氧基精絲烷的方法，其包括下列之步 驟： (a )令絲裂徽素C與水性氫氧化物溶液起反應以得 鹼性7 —氧化鹽一9 a —甲氧基精絲烷， (b )將鹼性7 —氧化鹽一 9 a —甲氧基精絲烷與酸 及重氮二苯基甲烷及溶劑（其中，7 —羥基一9a_甲氧 基精絲烷及重氮二苯基甲烷至少具有某些溶解度）混合， 再''予反應以形成7 —(二苯甲基）氧基一9 a —甲氧基精 絲烷。 8 ·如申請專利範圍第7項之方法，其中，步驟（a )中之水性氫氧化物溶液爲水性氫氧化鈉溶液，其中，步 驟（b)中之酸爲磷酸，且其中步驟（b)係於0°C至 3 0°C之溫度下，於二氯甲烷及甲醇之結合反應溶劑（二 氯甲烷與甲醇之體積比乃在0 ·5:1至3:1之範圍間 )中進行。 9 種製備如申請專利範圍第1項之7 —（二苯甲 基）氧基一 9 a —甲氧基精絲烷的方法，該方法包括下列 之步驟： (a )令7 —氧化鹽一 9 a —甲氧基精絲烷與足置之 氣形式之强酸陽離子交換樹脂起反應以將7 -氧化鹽基® 轉換成7 _羥基團，因而形成7 —羥基—9 a —甲氧基精 (請先聞讀背面之注意事項冉塡寫本頁) 丨裝· 訂· Ί； 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4规格（210 X 297公* > A7219938 B7 C7 D7 經濟部中央襟準局員工消费合作社印製 六、申請專利範圍 絲烷， (b )令7 —羥基—9 a —甲氧基精絲烷與重氮二苯 基甲烷起反應以形成7 —(二苯甲基）氧基一9 a —甲氧 基精絲烷。 1 〇 · —種由7 —(二苯甲基）氧基一9 a —甲氧基 精絲烷中製備7 —〔 2_ ( 4 —硝苯基二硫基）一乙胺基 〕一9 a —甲氧基精絲烷之方法，其包括下列之步驟： (a )將7 —(二苯甲基）氧基_9 a —甲氧基精絲 烷轉換成7 —〔 2 — ( 3 —硝基—2 —吡啶基二硫基）乙 胺基〕—9 a —甲氧基精絲烷或7 —〔 2— ( 2 —吡啶基 二硫基）乙胺基〕一9 a —甲氧基精絲烷，再 (b)將步驟（a)之產物轉換成7 —〔2 — (4 — 硝苯基二硫基）乙胺基〕一9 a —甲氧基精絲烷。 1 1 ·如申請專利範圍第1 〇項之方法，其中，步驟 (a )包括令7 —（二苯甲基）氧基一9 a —甲氧基精絲 烷與2 —吡啶基二硫基乙胺起反應以得7 -〔 2 — ( 2 — 吡啶基二\硫基）乙胺基〕一9 a —甲氧基精絲烷。 1 2 ·如申請專利範圍第1 1項之方法，其中，步驟 (a)包括令7 —（二苯甲基）氧基一9a —甲氧基精絲 焼溶於甲醇中，再將足量之2 _吡啶基二硫基乙胺氫氯化 物之甲醇及三乙胺溶液加入以將氫氧化物轉換成游離鹸， 繼而令之於1 5°C至2 5°C下起反應。 1 3 ·如申請專利範圍第1 〇項之方法，其中，步驟 (a )包括令7 —（ 一苯甲基）氧基_ 9 a —甲氧基精絲· (請先閲讀背面之注意事項再場寫本頁) 丨裝· 訂. 本紙張尺度遍《中《«家《準（CNS)甲4规格（210 X 297公釐> ^19938 A7 B7 C7 D7 六' 申請專利範園 燒與2 — ( 3 _硝基一 2 _吡啶基二硫基）乙胺起反應以 製得7 —〔 2 - ( 3 —硝基一 2 —妣啶基二硫基）乙胺基 〕一9 a —甲氧基精絲烷。 1 4 .如申請專利範園第1 3項之方法，其中，步驟 (a )包括令7 —(二苯甲基）氧基一9 a —甲氧基精絲 焼溶於甲醇中，再將足量之2 — ( 3 —硝基一2 —吡啶基 二硫基）乙胺氫氯化物之甲醇及三乙胺溶液加入以將氫氧 化物轉換成游離驗，繼而令之於0至3 0°C之溫度下起反 應。 (請先閲讀背面之注意事项再塡寫本頁) 裝， 訂· 經濟部中喪襻準局典工消费合作杜印製 本纸張A度適《中蹰家«準（CNS) f 4规格（210 X 297公釐）