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TW202525800A - Ｒａｓ抑制劑 - Google Patents

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TW202525800A
TW202525800A TW113133927A TW113133927A TW202525800A TW 202525800 A TW202525800 A TW 202525800A TW 113133927 A TW113133927 A TW 113133927A TW 113133927 A TW113133927 A TW 113133927A TW 202525800 A TW202525800 A TW 202525800A
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halogen
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尚爾昌
伯禹 仲
彥濤 張
宋光琳
姜峻
王龍飛
侯福良
王姬發
汪恒
鄭愛軍
董春蘭
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大陸商泰勵生物科技（上海）有限公司
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Abstract

本發明提供可用作RAS抑制劑的具有式(I)結構的化合物、包含這類化合物的醫藥組成物、製備這類化合物的方法以及這些化合物在治療癌症中的用途。

Description

RAS抑制劑
本發明涉及藥物化學領域。更具體地，本發明涉及一類可用作RAS抑制劑的具有新結構的化合物、包含這類化合物的醫藥組成物、製備這類化合物的方法以及這些化合物在治療癌症或腫瘤中的用途。
RAS，即大鼠肉瘤致癌基因同系物，代表一組密切相關的單體球形蛋白，屬於GTP酶蛋白家族。具體而言，在正常生理條件下，RAS接受生長因子和各種其他細胞外信號而被激活，負責調節細胞生長、存活、遷移和分化等功能。RAS的這些調節功能是藉由GDP結合狀態和GTP結合狀態之間的轉換即“分子開關”來進行(Alamgeer等人，Current Opin Pharmacol.2013,13：394-401)。與GDP結合的RAS是非活性形式，處於休眠或關閉狀態，此時信號系統關閉，當其暴露於一些促生刺激時會被活化，例如其可以被鳥嘌呤核苷酸交換因子(GEF)誘導而釋放GDP並與GTP結合，結果是RAS被由此“開啟”，從而轉化為RAS活性形式，其募集並活化各類下游效應子，進行信號傳遞，能夠將細胞表面的信號傳送至細胞質中，從而控制眾多關鍵的細胞過程如分化、存活和增殖(Zhi Tan等人，Mini-Reviews in Medicinal Chemistry,2016,16,345-357)。
RAS具有GTP酶活性，其可以裂解GTP的末端磷酸而將其轉化為GDP，即將其自身轉化為非活性狀態。但是RAS的內源性GTP酶活性非常低，將GTP-RAS轉化為GDP-RAS需要外源性蛋白GAP(GTP酶激活蛋白)。GAP與RAS相互作用並促進GTP向GDP的轉化。因此，任何影響RAS與GAP相互作用或者影響GTP向GDP轉化的RAS基因突變，都會導致RAS長時間處於活化狀態，由此向細胞持續傳達生長和分裂的信號，刺激細胞不斷增殖，最終導致腫瘤形成和發展。
在人類腫瘤相關的基因中，存在三種遍在表達的RAS基因H-RAS、K-RAS和N-RAS，其分別編碼高度同源的、約21KDa的HRAS、NRAS、KRAS蛋白。1982年，研究人員首次發現RAS在癌細胞系中突變活化(Chang,E.H.等人，Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America,1982,79(16),4848-4852)。隨後在不同癌症類型中進行的大型基因組測序研究揭示，RAS蛋白在超過30%的癌症類型中發生突變，尤其在胰腺癌(>90%)、結腸癌(45%)和肺癌(35%)中的突變率最高。轉基因和基因工程小鼠模型也已經揭示，突變的RAS蛋白足以驅動並引發多種類型的癌症，且RAS致癌基因對於多種癌症類型的腫瘤的維持和進展也是至關重要的，例如在RAS突變癌症細胞系和癌症動物模型中，已經顯示RNA干預能夠減緩腫瘤的生長。這些研究使得RAS腫瘤蛋白成為藥學領域中廣為接受的非常有吸引力的抗癌藥物靶點。
研究表明，RAS突變最常見於KRAS，約85%的RAS突變驅動的癌症中可以觀察到KRAS突變；絕大部分RAS突變發生在密碼子G12、G13和Q61上，其中約80%的KRAS突變又發生於密碼子12的甘 胺酸處，例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變及Q61H突變等。KRAS突變常見於胰腺癌、肺腺癌、結直腸癌、膽囊癌、甲狀腺癌和膽管癌，也可見於25%的非小細胞肺癌患者中(McCormick,F.等人，Clinical Cancer Research 21(8),1797-1801,2015)。因此，KRAS突變蛋白已經成為Ras藥物靶點研究中最重要的分支，對於其抑制劑的開發也被視為抗癌/腫瘤藥物開發中非常具有前景的研發方向。
但是，過去幾十年針對RAS的藥物研發顯示，由於RAS蛋白表面光滑，缺少明顯的用於結合小分子抑制劑的溝狀或口袋裝結構，而且其對鳥嘌呤受質的親和力非常高(皮莫耳級)，使得其小分子抑制劑的開發陷入了難以解決的困境，由此RAS在業內長久以來被認為是“不可成藥的”靶點。同時，目前仍然非常需要作為KRAS抑制劑的更多結構類型或模式的化合物，提供更多的治療選擇，或者提供相對於現有KRAS抑制劑而言進一步改進的抑制活性，從而為臨床提供更強效的治療藥物。
本發明解決了這些和其他需求。本發明提供了具有RAS蛋白抑制活性的新結構抑制劑化合物。這些本發明化合物因具有改進的結構模式，相比現有技術已有的RAS蛋白抑制劑，具有增強的抑制RAS蛋白的活性以及對相關腫瘤抑制活性，具有良好的藥物代謝動力學性質，從而具有良好的成藥性，比如能夠以方便的方式給藥後更容易在體內吸收，且毒副作用減少，具有改善的耐藥性和安全性，以及降低的藥物相互作用風險。
發明簡述
本發明提供了本文如下所定義的具有結構式(X)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物：
其中A選自取代的C6-10芳基或包含1至4個獨立地選自N、O、S、Se的雜原子的取代的6-10員雜芳基，具體地A選自以下片段：
，更具體地；；或；
其餘各個基團的定義如發明詳述部分相應所定義。
本發明第一方面提供了本文如下所定義的具有結構式(I)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物：
其中各個基團的定義如發明詳述部分所定義。
本發明第二方面提供了如下式(II)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物：
其中各個基團的定義如發明詳述部分所定義。
本發明還提供了如下式(III)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物：
其中各個基團的定義如發明詳述部分所定義。
本發明還提供了如下式(IV)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物：
其中各個基團的定義如發明詳述部分所定義。
本發明還提供了包含本發明化合物或其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物以及視需要的藥學可接受的賦形劑或載體的醫藥組成物。
本發明還提供了用作藥物的本發明化合物或其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物。
本發明還提供了本發明化合物或其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，用作RAS蛋白、尤其是KRAS突變蛋白(例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變及Q61H突變蛋白)及KRAS擴增型細胞的抑制劑。
本發明還提供了用於治療和/或預防由RAS蛋白、尤其是KRAS突變蛋白(例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變及Q61H突變蛋白)及KRAS擴增介導的疾病的本發明化合物或其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，或包含其的醫藥組成物。
本發明還提供了本發明化合物或其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物、或包含其的醫藥組成物用於治療和/或預防由RAS蛋白、尤其是KRAS突變蛋白(例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變及Q61H突變蛋白)及KRAS擴增介導的疾病的用途。
本發明還提供了本發明化合物或其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物、或包含其的醫藥組成物在製備用於治療和/或預防由RAS蛋白、尤其是KRAS突變蛋白(例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變及Q61H突變蛋白)及KRAS擴增介導的疾病的藥物中的用途。
本發明還提供了治療和/或預防由RAS蛋白、尤其是KRAS突變蛋白(例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變及Q61H突變蛋白)及KRAS擴增介導的疾病的方法，包括向有需要的對象施用治療有效量的本發明化合物或其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物、或包含其的醫藥組成物。
本發明還提供了一種治療腫瘤或癌症的方法，其包括向有需要的患者施用本發明化合物或其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物、或包含其的醫藥組成物。
本發明還提供了本發明的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物在研究中作為RAS抑制劑、特別是作為抑制KRAS突變蛋白(例如 G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變及Q61H突變蛋白)及KRAS擴增的研究工具化合物的用途。
本發明還提供了藥物組合，其包含本發明化合物其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物和一種或多種其他藥物活性劑。
本發明還提供了用於製備本發明化合物的方法。
發明詳述
定義
除非另外指出，說明書和申請專利範圍中使用的各個術語具有以下所示含義。在特定的術與或短語沒有特別定義的情況下，應該按照本領域的普通含義理解。在衝突的情況下，以本說明書(包括定義)為準。
在本文所揭露的化合物的化學結構和名稱發生衝突的情況下，以化學結構為準。
本文所用的術語“RAS突變”或“RAS突變蛋白”是指其中一個或多個密碼子發生突變的RAS基因所編碼和表達的蛋白，典型地包括但不限於RAS的密碼子12位的甘胺酸、密碼子13位的甘胺酸或密碼子61位的穀胺醯胺發生突變的RAS蛋白，例如突變的HRAS、NRAS或KRAS。這些殘基位於RAS的活性位點，其突變可損害RAS的固有的或GAP-催化的GTP酶活性，導致與GTP結合的RAS持續存在。
對本發明的目的而言，“RAS突變”或“RAS突變蛋白”以及描述抑制活性時所針對的“RAS”可互換使用，且一般地是指突變的HRAS、NRAS或KRAS，例如但不限於KRAS-G12C(密碼子G12處甘胺酸向半胱胺酸的突變)、KRAS-G12D(密碼子G12處甘胺酸向天冬胺酸的突變)、HRAS-G12D、NRAS-G12D、KRAS-G12V(密碼子G12處甘胺酸向纈胺酸的突變)、KRAS-G13D(密碼子G13處甘胺酸向天冬胺酸的突變)；特別地是指KRAS突變蛋白，更特別地是指KRAS-G12C突變蛋白、KRAS-G12D突變蛋白、KRAS-G12V突變蛋白、G12A突變蛋白、G12R突變蛋白、G12S突變蛋白、KRAS-G13D突變蛋白及Q61H突變蛋白。
本文所用的術語“治療”是指給患有該疾病、或者具有該疾病的症狀的受試者、例如哺乳動物、例如人施用一種或多種本文所述的本發明化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物，用以治癒、緩解、減輕或影響該疾病或該疾病的症狀。較佳地，治療是治癒性或改善性的。
本文所用的術語“預防”在本領域中是眾所周知的，是給懷疑患上或易感於如本文所定義的Ras介導的疾病、尤其是癌症或腫瘤的受試者、例如哺乳動物、例如人施用一種或多種本文所述的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物，使得罹患所定義疾病的風險降低，或預防疾病的發作。術語“預防”包含在診斷或確定任何臨床和/或病理症狀以前使用本發明的化合物。
本文所用的術語“抑制”和“降低”或這些術語的任何變體，是指生物活性劑的能力，其藉由直接或間接與靶點相互作用，降低目標靶點的信號傳導活性，且是指目標靶點活性的任何可以測量的減少或完全抑制。 例如，與正常情況相比，可以是活性(例如KRAS活性)降低量約、至多約或至少約5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、99%或更多、或其中可衍生的任何範圍。
本文所用的術語“RAS介導的疾病”是指RAS對該疾病的發生和發展起到促進作用，或抑制RAS將降低疾病的發生率、減少或消除疾病病狀的疾病。對於本發明而言，“RAS介導的疾病”較佳指的是KRAS介導的疾病，更進一步佳KRAS突變介導的癌症或腫瘤。
本文所用的術語“癌症”或“腫瘤”是指異常的細胞生長和增殖，無論是惡性的還是良性的，和所有的癌前期細胞和癌細胞和組織。對本發明的各個方面而言，該癌症或腫瘤包括但不限於肺腺癌、肺癌、骨癌、胰腺癌、皮膚癌、頭頸癌、皮膚或眼內黑色素瘤、子宮癌、卵巢癌、直腸癌、肛門區域癌、胃癌、結腸癌、乳腺癌、輸卵管癌、子宮內膜癌、子宮頸癌、陰道癌、外陰癌、霍奇金病、食道癌、小腸癌、內分泌系統癌、甲狀腺癌、甲狀旁腺癌、腎上腺癌、軟組織肉瘤、尿道癌、陰莖癌、前列腺癌、慢性或急性白血病、淋巴細胞性淋巴瘤、膀胱癌、腎臟或輸尿管癌、腎細胞癌、腎盂癌、中樞神經系統腫瘤(CNS)、原發性CNS淋巴瘤、脊柱腫瘤、腦幹神經膠質瘤或垂體腺瘤。
對於本發明的各個方面，較佳地，該癌症或腫瘤與RAS、尤其是KRAS突變及擴增相關，包括但不限於上述腫瘤類型以及其較佳範圍。本發明特別佳的腫瘤包括肺癌、肺腺癌、結腸癌、直腸癌、胰腺癌、子宮內膜癌、膽管癌、白血病和卵巢癌。
本文所用的術語“受試者”、“個體”或“患者”是指脊椎動物。在某些實施方案中，脊椎動物為哺乳動物。哺乳動物包括但不限於農場動物(如牛)、運動動物、寵物(如豚鼠、貓、狗、兔子和馬)、靈長類動物、小鼠和大鼠。在某些實施方案中，哺乳動物是人類。
本文所用的術語“治療有效量”是指通常足以對需要治療的該“RAS介導的疾病”如癌症或腫瘤患者產生有益治療效果的量或劑量。所屬技術領域中具有通常知識者可以藉由常規方法、結合常規影響因素來確定本發明中活性成分的有效量或劑量。
本文所用的術語“藥物組合”是指本發明化合物可與其它活性劑組合用於實現本發明的目的。該其他活性劑可以是一種或多種另外的本發明化合物，或可以是與本發明化合物相容即不會相互不利影響、或具有互補活性的第二種或另外的(例如第三種)化合物，例如這些活性劑已知調節其他生物活性通路，或者調節本發明化合物所涉及生物活性通路中的不同組分，或甚至是與本發明化合物的生物靶點相重疊。這類活性劑以達到預期目的的有效量適宜地組合存在。該其他活性劑可以與本發明化合物在單一醫藥組成物中共同施用，或與本發明化合物處於不同的離散單元中分別施用，當分別施用時可以同時或相繼進行。該相繼施用在時間上可以是接近或隔遠的。
本文所用的術語“藥學上可接受的”意指當向動物例如人類適量施用時不會產生不利、過敏或其它不良反應的分子實體和組成物。
本文所用的術語“藥學上可接受的鹽”是指保留了母體化合物的生物學有效性和性質並且在生物學或其它方面不是不可取的那些鹽， 包括酸加成鹽和鹼加成鹽。“藥學上可接受的酸加成鹽”可由具有鹼性基團的化合物與無機酸或有機酸形成，無機酸例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、碳酸、磷酸等，有機酸可以選自脂族、脂環族、芳香族、芳脂族、雜環類、羧酸類和磺酸類有機酸，如甲酸、乙酸、丙酸、乙醇酸、葡萄糖酸、乳酸、丙酮酸、草酸、蘋果酸、馬來酸、丙二酸、琥珀酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、天冬胺酸、抗壞血酸、谷胺酸、鄰胺基苯甲酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、雙羥萘酸、苯乙酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、對甲苯磺酸、水楊酸等。“藥學上可接受的鹼加成鹽”包括衍生自無機鹼如鈉、鉀、鋰、銨、鈣、鎂、鐵、鋅、銅、錳、鋁的鹽等的那些，以及衍生自藥學上可接受有機無毒鹼的鹽，包括但不限於一級胺、二級胺和三級胺、取代銨，包括天然存在的取代胺、環狀胺和鹼性離子交換樹脂，如胺、異丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、二乙醇胺、2-二甲胺基乙醇、2-二乙胺基乙醇、胺丁三醇、二環己胺、賴胺酸、精胺酸、組胺酸、咖啡因、普魯卡因、海巴明、膽鹼、甜菜鹼、乙二胺、葡糖胺、甲基葡糖胺、三乙醇胺、可可鹼、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、聚胺樹脂等。
本文所用的術語“異構體”是指化合物在結構上可能存在的任何立體異構體、對映體混合物、包括外消旋物、非對映異構體混合物、幾何異構體、阻旋異構體和/或互變異構體。該異構體立體化學的確定和分離方法為所屬技術領域中具有通常知識者所熟知(S.P.Parker,Ed.,McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms(1984)McGraw-Hill Book Company,New York；和Eliel,E.和Wilen,S.,“Stereochemistry of Organic Compounds”,John Wiley & Sons,Inc.,New York,1994)。
本發明的某些化合物包含至少一個不對稱中心，且由此產生立體異構體，故本發明涵蓋本文所定義化合物的所有可能的異構體形式，及其藥學可接受的鹽或溶劑合物，另有指示除外。
本文化合物結構式或結構片段中使用的“”或“”表示立體中心即手性中心的絕對構型，相應地在本發明所提供的化合物或中間體的命名中以R或S表示關於該手性中心的絕對構型；“”或 “”表示立體中心的相對構型，例如中OH及CN為順式構型， 中OH及CN為反式構型；在有些本發明化合物定義中也可以使用軸手性表示化合物構型，實線鍵表示所對應結構片段朝紙面外，虛線鍵表 示所對應結構片段朝紙面內，例如，表示苯并雜環 側朝外，表示苯并雜環側朝內；這些構型的命名使用所屬技術領域中具有通常知識者所熟知的Cahn-Ingold-Prelog規則。
在本發明化合物通式或者實施例中還使用星號“*”表示絕對 構型尚未確定的單一軸手性化合物，例如，標星號處可酌情(例如取決於R8和R9的取值)具有軸手性，包括 或者。
應當理解的是，當所屬技術領域中具有通常知識者基於本文所示化合物結構能夠判斷該化合物存在且僅存在一對手性異構體、且判斷基於本領域常規方法可以容易地拆分時，則本文對該化合物外消旋體的揭露(無論是結構式還是化學名)，均應視為已經分別揭露了該化合物的各個異構體。
本文所涉及結構片段中使用的“”指示與其交叉的鍵是結構片段連接於分子其餘部分的鍵。
除非另有定義，本文所涉及環狀結構片段中以橫跨化學鍵示出的取代基，例如中的-(R4)m，是指該所定義數量的取代基可以取代在環中可行的一個或多個位點，其中m為0時意味著環上不攜帶非H取代基，但環原子上仍攜帶化學價計量的氫原子。
本發明的化合物包括本發明化合物的未標記形式及其同位素 標記形式。化合物的同位素標記形式是僅在一個或多個原子被相應的同位素富集原子替換不同的化合物。可以併入本發明化合物中的同位素的實例包括例如氫、碳、氮、氧、氟、氯和碘的同位素，例如2H、3H、11C、13C、14C、15N、18O、17O、35S、18F、37Cl和125I。此類同位素標記的化合物可用作例如生物測定中的探針、分析工具或用作治療劑。在某些實施方案中，本發明的化合物以未標記的形式提供。
在一些實施方案中，本發明的化合物以未標記的形式提供。在另一些實施方案中，本發明的化合物以同位素標記的形式提供，例如以其中一個或多個H原子被氘原子(D)替代的化合物，例如作為RB的中，兩個R2各自獨立地可以是D，或可以是被D取代的所定義的各個基團；R5可以是被D取代的所定義的各個基團。
本文所用的術語“溶劑合物”是指包含化學計量的或非化學計量的溶劑的化合物的溶劑加成形式，包括本發明化合物的任何溶劑化形式，包括例如與水的溶劑合物，例如水合物，或與有機溶劑的溶劑合物，例如甲醇、乙醇或乙腈，即分別作為甲醇化物、乙醇化物或乙腈化物；或為任何多晶型物的形式。應當理解的是，本發明化合物的這類溶劑合物還包括本發明化合物的藥學上可接受鹽的溶劑合物。
本文所用的術語“代謝物”意指化合物經由體內代謝生成的產物。這類產物可例如源自所施用化合物的氧化、還原、水解、醯胺化、脫醯胺化、酯化、去酯化、酶促剪切等。代謝物產物的鑑定和分析以所屬 技術領域中具有通常知識者熟知的方式進行。
本文所用的術語“藥學上可接受的賦形劑”或“藥學上可接受的載體”是指一種或多種相容性固體或液體填料或凝膠物質，適合於人使用，且具有足夠的純度和足夠低的毒性，其實例包括但不限於纖維素及其衍生物(如羧甲基纖維素鈉、醋酸纖維素等)、明膠、滑石、固體潤滑劑(如硬脂酸鎂)、硫酸鈣、植物油、多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)、乳化劑(如吐溫類)、潤濕劑(如十二烷基硫酸鈉)、著色劑、調味劑、穩定劑、抗氧化劑、防腐劑等。
本文所用的術語“鹵素”或“鹵”意指F、Cl、Br或I。此外，本文定義基團時使用的術語“被鹵素取代的”基團旨在包括單鹵或多鹵基團，其中一個或多個相同或不同的鹵素取代相應基團中的一個或多個氫。
本文所用的術語“烷基”意指由碳原子和氫原子組成的直鏈或支鏈的單價飽和烴基團。具體地，烷基具有1-10個，例如1至8個、1至6個、1至5個、1至4個、1至3個或1至2個碳原子。例如，如本文中所使用，術語“C1-6烷基”指具有1至6個碳原子的直鏈或支鏈的飽和烴基團，其實例例如甲基、乙基、丙基(包括正丙基和異丙基)、丁基(包括正丁基、異丁基、二級丁基或三級丁基)、戊基(包括正戊基、異戊基、新戊基)、正己基、2-甲基戊基等。
本文所用的術語“亞(伸)烷基”意指由碳原子和氫原子組成的直鏈或支鏈的二價飽和烴基團，較佳直鏈二價飽和烴基團。一般地，亞(伸)烷基具有1至10個，例如1至8個、1至6個、1至5個、1至4個、1至3個或1至2個碳原子。例如，如本文中所使用，術語“-C1-3亞(伸)烷 基-”或“-(CH2)n-，其中n為1至3的整數”指具有1至3個碳原子的直鏈或支鏈的二價飽和烴基團。
本文所用的術語“烷氧基”意指藉由氧原子與分子其餘部分相連的本文定義的烷基。具體地，烷氧基具有1-10個，例如1至8個、1至6個、1至5個、1至4個、1至3個或1至2個碳原子。例如，如本文中所使用，術語“C1-6烷氧基”或“-O-C1-6烷基”指藉由氧原子與分子其餘部分相連的具有1至6個碳原子的直鏈或支鏈的飽和烴基團，進一步佳“-C1-3烷氧基”或“-O-C1-3烷基”，其實例例如-O-甲基、-O-乙基、-O-丙基(包括-O-正丙基和-O-異丙基)、-O-丁基(包括-O-正丁基、-O-異丁基、-O-二級丁基或-O-三級丁基)、-O-戊基(包括-O-正戊基、-O-異戊基、-O-新戊基)、-O-正己基、2-甲基戊基-O-等。
如本文中所使用的術語“視需要被鹵素取代的C1-6烷基”指上文所述的C1-6烷基，其中一個或多個(例如1、2、3、4或5個)氫原子視需要被鹵素代替。所屬技術領域中具有通常知識者應當理解，當鹵素取代基多於一個時，鹵素可以相同也可以不同，並且可以位於相同或不同的C原子上。“鹵素取代的C1-6烷基”的實例有例如-CH2F、-CHF2、-CF3、-CCl3、-C2F5、-C2Cl5、-CH2CF3、-CH2Cl、-CH2CH2CF3或-CF(CF3)2等。
本文所用的術語“烯基”指由碳原子和氫原子組成的包含至少一個雙鍵的直鏈或支鏈的不飽和烴基團。具體地，烯基具有2-8個，例如2至6個、2至5個、2至4個或2至3個碳原子。例如，如本文中所使用，術語“C2-6烯基”指具有2至6個碳原子的直鏈或支鏈的烯基，進一步佳“C2-4烯基”，例如乙烯基、丙烯基、烯丙基、丁烯基、戊烯基等，烯基中 與分子其餘部分相連的碳原子可以是飽和的，也可以是烯鍵碳原子。
本文所用的術語“炔基”指由碳原子和氫原子組成的包含至少一個三鍵的直鏈或支鏈的不飽和烴基團。具體地，炔基具有2-8個，例如2至6個、2至5個、2至4個或2至3個碳原子。例如，如本文中所使用，術語“C2-6炔基”指具有2至6個碳原子的直鏈或支鏈的炔基，進一步佳“C2-4炔基”，例如乙炔基、丙炔基、炔丙基、丁炔基等，炔基中與分子其餘部分相連的碳原子可以是飽和的，也可以是炔鍵碳原子。
如本文中所使用的術語“環烷基”意指具有指定環碳原子數的單環、稠合多環、橋接多環或螺環非芳族飽和單價烴環結構。環烷基可具有3至12個碳原子(即C3-12環烷基)，例如3至10個、3至8個、3至7個、3至6個、3至4個、5至6個碳原子。適合的環烷基的實例包括但不限於單環結構，如環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基或環辛基；或多環(例如雙環)結構，包括螺環、稠合或橋連系統，如雙環[1.1.1]戊基、雙環[2.2.1]庚基、螺[3.4]辛烷基、雙環[3.1.1]己烷基、雙環[3.1.1]庚基或雙環[3.2.1]辛基等。例如，如本文中所使用的術語“C3-6環烷基”或“C3-4環烷基”是指單環環丙基、環丁基、環戊基或環己基。
本文所用的術語“雜環烷基”意指包括一或多個(例如1、2、3或4個)獨立地選自O、N、P、Se及S的雜原子及指定環原子數的單環、稠合多環、螺環或橋接多環非芳族飽和或不飽和環結構，或其N-氧化物，或其S-氧化物或S-二氧化物。在多環雜環烷基的情況下，與分子其餘部分相連的環結構為非芳族環即可，即便與該非芳族環進一步稠合、螺合或橋接的環是芳族環，該雜環體系在本文仍定義為雜環烷基。雜環烷基可具有 3至12個環成員(可稱為3-12員雜環烷基)，例如3至10個環成員，3至8個環成員，3至7個環成員，4至7個環成員、4至6個環成員、5至7個環成員、5至6個環成員、6至10個環成員、6至12個環成員，例如5至7員單環雜環烷基如5-7員單環飽和雜環烷基，4至7員單環雜環烷基；或6至12員多環雜環烷基，如8-10員螺雜環烷基、8-10員稠合雜環烷基、9-10員稠合雜環烷基、9-11員稠合雜環烷基、9-12員稠合雜環烷基、6-10員螺雜環烷基、6-10員稠合雜環烷基和6-10員橋接雜環烷基。雜環烷基通常含有至少1個、至多4個(例如1個、2個、3個或4個)雜原子，例如含有1至3個獨立選自N、O、S的雜原子的5-7員單環雜環烷基如5-7員單環飽和雜環烷基，4-7員單環雜環烷基如4-7員單環飽和雜環烷基，例如含有1個或2個N原子的5-7員單環飽和雜環烷基、4-7員單環飽和雜環烷基，含有1個或2個選自N和O原子的雜原子的5-7員單環飽和雜環烷基、4-7員單環飽和雜環烷基，或含有1至4個獨立地選自N、O、P、Se和S的雜原子的6-12員多環雜環烷基，例如含有1-3個N原子和0-1個O原子的8-10員螺雜環烷基或稠合雜環烷基或橋接雜環烷基。適合的雜環烷基的實例包括但不限於氮雜環丁烷基、氧雜環丁烷基、硫雜環丁基、吡咯烷基(例如1-吡咯烷基、2-吡咯烷基及3-吡咯烷基)、四氫呋喃基(例如1-四氫呋喃基、2-四氫呋喃基及3-四氫呋喃基)、四氫噻吩基(例如1-四氫噻吩基、2-四氫噻吩基及3-四氫噻吩基)、哌啶基(例如1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基及4-哌啶基)、四氫吡喃基(例如4-四氫吡喃基)、四氫噻喃基(例如4-四氫噻喃基)、嗎啉基(例如N-嗎啉基)、硫嗎啉基、二噁烷基、哌嗪基或氮雜環庚烷基、二氮雜環庚烷基例如1,4-二氮雜環庚基、3,6- 二氮雜-雙環[3.1.1]庚基或3-氮雜-雙環[3.2.1]辛基、、、 。雜環烷基中與化合物其餘部分連接的原子可以是碳原子，也可以是雜原子，只要化學上可行即可。
本文所用的術語“雜芳基”意指包括一或多個(例如1、2、3或4個)獨立地選自O、N、P、Se及S的雜原子及指定環原子數的單環、稠合多環、螺環或橋接多環非芳族飽和或不飽和環結構，例如5-14員雜芳基、6-10員雜芳基，且與分子其餘部分相連的環是芳族環。具體地，適用於本發明化合物的雜芳基的實例包括但不限於：包含1至4個獨立地選自O、N、Se及S的雜原子的6-10員雜芳基；包含1或3個獨立地選自O、N及S的雜原子的5-7員單環雜芳基，例如包含1或2個獨立地選自O、N及S的雜原子的5-7員單環雜芳基(例如6員單環雜芳基)；包含1至4個獨立地選自O、N、Se及S的雜原子的9-10員稠合雙環雜芳基，例如包含1至4個獨立地選自O、N、Se及S的雜原子的9員稠合雙環雜芳基。
本文所用的術語“芳基”意指包括指定環碳原子數的單環或稠合多環芳族環結構，例如C6-14芳基、C6-10芳基，芳基的具體示例為苯基或萘基。
本文所用的術語“羥基”是指-OH基團。
本文所用的術語“氰基”是指-CN基團。
本文所用的術語“胺基”是指-NH2。
本文化合物定義中還存在被取代的胺基，例如-NHC1-6烷基、-N(C1-6烷基)2，其中的-C1-6烷基可進一步視需要被取代，如各個基團定義下所示。在一些實施方案中，取代的胺基為在-CON(Rb)2中的-N(Rb)2，其中的Rb為視需要被鹵素或氘取代的-C1-6烷基。取代的胺基的實例包括但不限於-NH2、-NH-CH3、-NH-CH2CH3、-NH-CF3、-NH-CH2CF3、-NH-CH2CN、-NH-CH2CH2CN、-N(CH3)2、-N(CD3)2、-N(CH3)(CH2CH3)、-N(CH3)(CF3)、-N(CH3)(CH2CF3)、-N(CH3)(CH2CH2CN)、-NHCH2-OCH3、N(CH3)(CH2CH2-OCH3)。
本文所用的術語“視需要取代的”，除非另外指出，表示基團可以是未取代的或被一個或多個(例如1、2、3、4或5或更多，或其中可衍生的任何範圍)對該基團所列的取代基取代，其中當存在多個取代基時，各個該取代基可以相同或不同。在一個實施方案中，視需要取代的基團具有1個取代基。在另一個實施方案中，視需要取代的基團具有2個相同或不同的取代基。在另一個實施方案中，視需要取代的基團具有3個相同或不同的取代基。在另一個實施方案中，視需要取代的基團具有4個相同或不同的取代基。在另一個實施方案中，視需要取代的基團具有5個相同或不同的取代基。
本文定義的許多基團都是視需要被取代的，該定義部分所給出的取代基列表僅僅是示例性的，不意欲限制本說明書和申請專利範圍中其他部分所定義的取代基。
在本文化合物定義中，飽和碳原子攜帶的H可以是未示出的，所屬技術領域中具有通常知識者可以容易地判斷原子所攜帶的H或非H取 代基的數量，例如結構片段中，當m為1且R4非H時，其所連接的環碳原子存在一個未示出的H；當m為2且R4非H時，其所連接的環碳原子不攜帶H原子，其攜帶的兩個R4可以分別以單鍵連接於所示環碳原子，或一起形成雙鍵連接於所示環碳原子，或一起與所示碳原子形成螺環。
除非另有規定，本發明化合物定義中的Cn-n+m或Cn-Cm包括n至n+m個碳的各種情況，例如C1-6包括C1、C2、C3、C4、C5和C6，也包括n至n+m中的任何一個範圍，例如C0-6包括C1、C2、C3、C4、C5、C6、C0-1、C0-2、C0-3、C0-4、C0-5、C1-2、C1-3、C1-4、C2-3等，C1-6包括C1-2、C1-3、C1-4、C2-6、C3-6等。同理，本發明化合物定義中的n員至n+m員表示環原子數為n至n+m個，例如3-12員環包括3員環、4員環、5員環、6員環、12員環等，也包括n至n+m員的任何一個範圍，例如3-12員環包括3-6員環、3-8員環、3-9員環、4-10員環、4-7員環、4-5員環、5-6員環、5-7員環、5-8員環、5-9員環、6-7員環、6-8員環、6-10員環和6至12員環等。
有機合成領域具有通常知識者均理解，本發明化合物結構上攜帶的各個基團，無論是未取代的還是被所定義的各種取代基所取代，均以使得化合物分子在化學上可行且穩定為前提，其中取代基的類型和數量由基團中原子的數量和化學價決定。
如在本說明書和隨後的申請專利範圍申請專利範圍中所使用的，詞語“包含”和該詞語的變體如“包括”和“含有”，意指“包括但不限於”，並且不意圖排除例如其他添加劑、成分、整數或步驟。當將要素描述為包括多個成分、步驟或條件時，應理解的是，該要素也可以被描述為包括該多個成分、步驟或條件的任何組合，或“由多個或組合的成分、步驟或條件組成”或“基本上由多個或組合的成分、步驟或條件組成”。
應理解，當本文描述本發明化合物、包含其的醫藥組成物、藥物組合、藥盒以及相關的用途和方法時所涉及的劑量，是基於游離形式的重量，不包括其任何鹽、水合物或溶劑化物，除非說明書中指出該劑量基於鹽、水合物或溶劑化物的重量。
本發明解決的問題
如上所述，能夠抑制RAS蛋白、尤其KRAS突變蛋白(例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變和Q61H突變蛋白)及KRAS野生擴增型細胞的化合物能夠用於治療或預防由該蛋白介導的疾病(例如癌症或腫瘤)。因此，在該領域，已經開發出多種結構類型的RAS抑制劑。但是，現有的KRAS抑制劑仍然存在需要解決的問題，包括例如很多抑制劑的抗腫瘤活性不能令人滿意、或具有毒副作用導致耐藥性差、或藥物代謝動力學性質不足以允許藉由方便的方式給藥即“成藥性”差，或因為對細胞色素P450酶系的抑制作用而導致不期望的藥物相互作用，等等。進一方面，即便是對於具有良好抗腫瘤活性的抑制劑，人們仍期望能夠藉由結構優化，來進一步提高其在體內對靶蛋白的選擇性抑制活性、進一步改進其耐藥性(更少的毒副作用或更好 的安全性)且進一步改善其藥物代謝動力學性質，以便為臨床上提供更多更好的治療選擇。
解決問題的方法
本發明人藉由廣泛且深入的研究，已經開發出一組對RAS蛋白、尤其KRAS突變蛋白(例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變和Q61H突變蛋白)及KRAS擴增細胞具有明顯抑制活性的化合物。本發明人藉由結構改造和活性驗證，發現在該KRAS抑制劑結構的苯并嘧啶環及喹唑啉的若干特定位點，進行特定類型的取代基修飾，所實施的若干取代位點和取代基類型的特定組合，獲得了相比現有技術抑制劑進一步提高的對對KRAS突變蛋白的抑制活性，而且這樣修飾得到的化合物具有良好的安全性，具有減少的藥物相互作用風險，還具有良好的、甚至是進一步改善的藥物代謝動力學性質，使得能夠以方便的方式給藥。
本發明主要提供有效的RAS抑制劑、具體地KRAS抑制劑(例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變、Q61H突變及KRAS擴增型抑制劑)化合物；含有此類化合物作為活性成分的醫藥組成物；作為藥物、用於治療或預防由RAS、具體地KRAS(例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變、Q61H突變及KRAS擴增)介導或得益於RAS、具體地KRAS(例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變、Q61H突變及KRAS擴增)抑制的腫瘤或癌症的該化合物；使用該化合物用於治療或預防由 RAS、具體地KRAS(例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變、Q61H突變及KRAS擴增)介導或得益於RAS、具體地KRAS(例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變、Q61H突變及KRAS擴增)抑制的疾病如腫瘤或癌症的方法；以及該化合物在製備用於治療或預防由RAS、具體地KRAS(例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變、Q61H突變及KRAS擴增)介導或得益於RAS、具體地KRAS(例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變、Q61H突變及KRAS擴增)抑制的疾病如腫瘤或癌症的藥物中的用途。
應當理解，本文所提及的各類KRAS突變也包括兩種或多種所列KRAS突變的組合。
本發明由此提供以下技術方案。
本發明化合物
本揭露通篇使用的術語“發明的化合物”和“本發明的化合物”等，除非另外限定，涵蓋本文各個實施方案及其較佳實施方案中定義的化合物或其各個具體實施方式、包括其異構體，包括阻轉異構體、對映體混合物、特別是外消旋體、非對映異構體混合物、幾何異構體、互變異構體、溶劑化物、代謝物、同位素變體和鹽(例如藥學上可接受的鹽)。
因此，本發明化合物的上述各類異構體和衍生物由此均涵蓋在本發明範圍內，其各自的含義、製備及具體示例如上文“定義”部分所定 義，或為本領域技術所熟知。然而，較佳地為本發明化合物和/或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物。
本發明還涵蓋本發明化合物的N-氧化物，只要這些化合物含有鹼性氮原子如存在於含氮雜環中的氮原子且化學和生物學上可行。本發明的某些化合物可以以多晶型或無定形形式存在，故它們也落入本發明的範圍內。
第一方面，本發明提供如下化合物實施方案：
實施方案1：式(I)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，
其中，
M選自N和C-R8；
W選自N和C-R9；
Z選自N和C-R10；
Y選自O、S、Se和N-Ra；
B選自包含1至3個獨立地選自N、O、P、S和Se的雜原子的5-7員單環雜環烷基，和包含1至4個獨立地選自N、O、P、S和Se的雜原子 的6-12員多環雜環烷基，條件是其中連接至分子嘧啶環部分的環原子是氮雜原子；
R1選自H、鹵素、-CN、-OH、-B(OH)2、-C1-6烷基、-O-C1-6烷基、-C(O)N(Rb)2，其中出現的C1-6烷基視需要被鹵素取代；
R2各自獨立地選自H、D、-C1-6烷基和-(CH2)n-C3-6環烷基，或者兩個R2與它們所連接的碳原子一起形成C3-4環烷基，其中的C1-6烷基、C3-6環烷基或C3-4環烷基各自獨立地視需要被鹵素、D、視需要被鹵素或D取代的C1-6烷基或視需要被鹵素或D取代的-O-C1-6烷基取代；
R3選自-C1-6烷基和-(CH2)n-C3-6環烷基，各自獨立地視需要被鹵素、D、視需要被鹵素或D取代的C1-6烷基或視需要被鹵素或D取代的-O-C1-6烷基取代；
R4選自H、D、鹵素、-CN、-OH、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-NH2、-NH-C1-6烷基、-N(C1-6烷基)2、-O-C1-6烷基、-O-C3-6環烷基和-(CH2)n-C3-6環烷基，其中每次出現的C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基或C3-6環烷基各自獨立地視需要被D、鹵素、CN或-OC1-6烷基取代，或者
連接於同一個碳原子上的兩個R4形成=C(Rc)2，或連接於同一個環碳原子上的兩個R4與它們所連接的環碳原子一起形成螺C3-6環烷基或螺4-7員雜環烷基，其中Rc各自獨立地選自H、鹵素和視需要被鹵素取代的-C1-6烷基，且該螺C3-6環烷基或螺4-7員雜環烷基視需要被鹵素和視需要被鹵素取代的-C1-6烷基取代；
R5選自H、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基和-(CH2)n-C3-6環烷基，其中的C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基或C3-6環烷基各自獨立地視需要被D、鹵素、CN、-O-C1-6烷基或-O-CON(Rb)2取代；
R6和R7各自獨立地選自H、D、鹵素、CN、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-O-C1-6烷基、-S-C1-6烷基和-Se-C1-6烷基，其中每次出現的-C1-6烷基、-C2-6烯基和-C2-6炔基各自獨立地視需要被鹵素取代；
R8選自H、D、鹵素、CN、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基和-ORb，其中的-C1-6烷基、-C2-6烯基和-C2-6炔基各自獨立地視需要被鹵素、CN或-O-C1-6烷基取代；或R8為-(CH2)n-C3-6環烷基，其中C3-6環烷基視需要被鹵素或CN取代；
R10選自H、D、鹵素、CN、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基和-ORb，其中的-C1-6烷基、-C2-6烯基和-C2-6炔基各自獨立地視需要被鹵素或CN取代；
R9選自H、鹵素、CN、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-ORb和-O-CON(Rb)2，其中的-C1-6烷基、-C2-6烯基和-C2-6炔基各自獨立地視需要被鹵素或CN取代；
Ra和Rb各自獨立地選自H和視需要被鹵素取代的-C1-6烷基，或者其中連接於同一個N原子上的兩個Rb與它們所連接的N原子一起形成4-7員雜環烷基；
n和p各自獨立地為0至3的整數；和
m和t各自獨立地為0至8的整數；
一個具體實施方案中，R8和R10各自獨立地選自H、D、鹵素、CN、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基和-ORb，其中的-C1-6烷基、-C2-6烯基和-C2-6炔基各自獨立地視需要被鹵素或CN取代；Ra和Rb各自獨立地選自H和視需要被鹵素取代的-C1-6烷基；且其餘各個基團如上式(I)所定義。
實施方案1.1：實施方案1的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中Z為N。
實施方案1.2：實施方案1的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中Z為C-R10。
實施方案1.2.1：實施方案1.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R10為H；或R10為D。
實施方案1.2.2：實施方案1.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R10為鹵素，例如F、Cl、Br、I。
實施方案1.2.3：實施方案1.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R10為CN。
實施方案1.2.4：實施方案1.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R10為-C1-6烷基，較佳-C1-3烷基，視需要被鹵素或CN取代；例如但不限於- CH3、-CH2CH3、-CH2CH2CH3、-CH(CH3)(CH3)、-CH2CH2CH2CH3、-CH2CH(CH3)CH3、-C(CH3)3、-CH2Cl、-CH2F、-CHF2、-CF3、-CCl3、-CH2CN、-CH2CH2F、-CH2CH2CN、-CH2CHF2、-CH2CF3、-CH2CH2CH2F、-CH2CH2CHF2、-CH2CH2CF3、-C(CH3)2CF3、-C2F5、-C2Cl5。
實施方案1.2.5：實施方案1.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R10為-C2-6烯基，較佳-C2-4烯基，視需要被鹵素或CN取代；例如但不限於-CH=CH2、-CH=CHF、-CH=CF2、-CF=CF2、-CH=CHCN、-CH2CH=CH2、-CH2CH=CHCN、-CH2CH=CF2、-CH2CF=CF2、-C(CH3)=CH2、-C(CF3)=CH2、-C(CH3)=CF2、-CH=CHCF3、-C(CH3)=CHCF3、-CH2CH=CHCF3。
實施方案1.2.6：實施方案1.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R10為-C2-6炔基，較佳-C2-4炔基，視需要被鹵素或CN取代；例如但不限於-C≡C(CF3)、-CH2C≡C(CF3)、、、、、、、。
實施方案1.2.7：實施方案1.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R10為-ORb，其中Rb為H或視需要被鹵素取代的-C1-6烷基，較佳-C1-3烷基；例如但不限於-OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH2CH3、-OCH(CH3)(CH3)、-OCH2Cl、-OCH2F、-OCHF2、-OCF3、-OCH2CH2F、-OCH2CHF2、-OCH2CF3、-OCH2CH2CH2F、-OCH2CH2CHF2、-OCH2CH2CF3。
實施方案1.3：實施方案1的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中Z為C-R10，較佳Z為C-CN。
實施方案2.1：實施方案1至1.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中p為0。
實施方案2.2：實施方案1至1.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中p為1；或p為2；或p為3。
實施方案2.2.1：實施方案1至1.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R6為H；或R6為D。
實施方案2.2.2：實施方案2.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R6為鹵素，例如F、Cl、Br、I，較佳F；
較佳地，存在一個為鹵素的R6，該R6位於所處苯并稠合環與分子其餘部分連接點的對位、鄰位或間位，更佳對位，如所示；或
較佳地，存在兩個為鹵素的R6，該兩個R6分別位於所處苯并稠合環與分子其餘部分連接點的對位和鄰位、或對位和間位、或鄰位和間位，更佳對位和鄰位，如所示。
實施方案2.2.3：實施方案2.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中存在一個R6，且選自CN、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-O-C1-6烷基、-S-C1-6烷基和-Se-C1-6烷基，其中每次出現的-C1-6烷基、-C2-6烯基和-C2-6炔基較佳-C1-3烷基、-C2-4烯基、-C2-4炔基，各自獨立地視需要被鹵素取代，該R6位於所處苯并稠合環與分子其餘部分連接點的對位、鄰位或間位；其中每次出現的視需要被鹵素取代的-C1-6烷基、-C2-6烯基和-C2-6炔基例如但不限於實施方案1.2.4~1.2.6分別所示。
實施方案2.2.4：實施方案2.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中存在兩個R6，其中之一選自鹵素(較佳F)或CN，另一個選自CN、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-O-C1-6烷基、-S-C1-6烷基和-Se-C1-6烷基，其中每次出現的-C1-6烷基、-C2-6烯基和-C2-6炔基較佳-C1-3烷基、-C2-4烯基、-C2-4炔基，各自獨立地視需要被鹵素取代，該兩個R6分別位於所處苯并稠合環與分子其餘部分連接點的對位和鄰位、或對位和間位、或鄰位和間位，更佳對位和鄰位；其中每次出現的視需要被鹵素取代的-C1-6烷基、-C2-6烯基和-C2-6炔基例如但不限於實施方案1.2.4~1.2.6分別所示。
實施方案2.2.5：實施方案2.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中存在兩個R6，各自獨立地選自-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-O-C1-6烷基、-S-C1-6烷基和-Se-C1-6烷基，其中每次出現的-C1-6烷基、-C2-6烯基和-C2-6炔基較佳-C1-3烷基、-C2-4烯基、-C2-4炔基，各自獨立地視需要被鹵素取代，該兩個R6分別位於所處苯并稠合環與分子其餘部分連接點的對位和鄰位、或對位和間位、或鄰位和間位，更佳對位和鄰位；其中每次出現的視需要被鹵素取代的-C1-6烷基、-C2-6烯基和-C2-6炔基例如但不限於實施方案1.2.4~1.2.6分別所示。
實施方案2.2.6：實施方案2.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中包含Z的苯并稠合環片段例如但不限於、、、
實施方案2.3：實施方案1至1.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中包含Z的苯并稠合環片段為，更具體地為 ，其中R6各自獨立地選自H和鹵素，較佳F；例如、
實施方案3.1：實施方案1至2.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中M為N。
實施方案3.2：實施方案1至2.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中M為C-R8。
實施方案3.2.1：實施方案3.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R8為H；或R8為D。
實施方案3.2.2：實施方案3.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R8為鹵素，例如F、Cl、Br、I。
實施方案3.2.3：實施方案3.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R8為CN。
實施方案3.2.4：實施方案3.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R8為-C1-6烷基，較佳-C1-3烷基，視需要被鹵素或CN取代，或視需要被-O-C1-6烷基取代；例如但不限於實施方案1.2.4所示；較佳R8為-CF3，或R8為-CH2-CH3，或R8為-CH2-O-CH3。
實施方案3.2.5：實施方案3.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R8為-C2-6烯基，較佳-C2-4烯基，視需要被鹵素或CN取代；例如但不限於實施方案1.2.5所示。
實施方案3.2.6：實施方案3.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R8為-C2-6炔基，較佳-C2-4炔基，視需要被鹵素或CN取代；例如但不限於實施方案1.2.6所示。
實施方案3.2.7：實施方案3.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R8為-ORb，其中Rb為H或視需要被鹵素取代的-C1-6烷基，較佳視需要被鹵素取代的-C1-3烷基；例如但不限於實施方案1.2.7所示。
實施方案3.2.8：實施方案3.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R8為-(CH2)n-C3-6環烷基，其中n為0至3的整數，較佳-C3-6烷基，例如但不限於實施方案8.4所示；此時包含M和W的稠合母環可以是例如
實施方案3.3：實施方案1至2.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中M為C-被鹵素取代的C1-6烷基，較佳C-被鹵素取代的C1-3烷基，更佳C-CF3；或M是C-C1-6烷基，較佳C-C1-3烷基，例如C-CH2-CH3；或M是C-C1-6烷基-O-C1-6烷基，較佳C-C1-3烷基-O-C1-3烷基，例如C-CH2-O-CH3。
實施方案4.1：實施方案1至3.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中W為N。
實施方案4.2：實施方案1至3.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中W為C-R9。
實施方案4.2.1：實施方案4.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R9為H。
實施方案4.2.2：實施方案4.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R9為鹵素，例如F、Cl、Br、I，較佳F。
實施方案4.2.3：實施方案4.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R9為CN。
實施方案4.2.4：實施方案4.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R9選自-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基，較佳-C1-3烷基、-C2-4烯基、-C2-4炔基，各自獨立地視需要被鹵素或CN取代，例如但不限於實施方案1.2.4~1.2.6分別所示。
實施方案4.2.5：實施方案4.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R9為-ORb，其中Rb為H或視需要被鹵素取代的-C1-6烷基，較佳視需要被鹵素取代的-C1-3烷基；例如但不限於實施方案1.2.7所示。
實施方案4.2.6：實施方案4.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R9為-O-CON(Rb)2，其中Rb為H或視需要被鹵素取代的-C1-6烷基，較佳視需要被鹵素取代的-C1-3烷基；例如但不限於-OCONH2、-O-CONHCH3、-O-CONHCF3、-OCON(CH3)2、-OCONHCH2CH3。
實施方案4.3：實施方案1至3.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中W選自N、C-鹵素或C-O-視需要被鹵素取代的C1-3烷基，較佳N、C-F、C-Cl、C-OCH3。
實施方案5.1：實施方案1至4.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R7為H；或為D。
實施方案5.2：實施方案1至4.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R7為鹵素，較佳F或Cl；
實施方案5.3：實施方案1至4.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R7為CN。
實施方案5.4：實施方案1至4.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R7為視需要被鹵素取代的-C1-6烷基，較佳視需要被鹵素取代的-C1-3烷基，例如但不限於實施方案1.2.4所示。
實施方案5.5：實施方案1至4.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R7為視需要被鹵素取代的-C2-6烯基，較佳視需要被鹵素取代的-C2-4烯基，例如但不限於實施方案1.2.5所示。
實施方案5.6：實施方案1至4.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R7為視需要被鹵素取代的-C2-6炔基，較佳視需要被鹵素取代的-C2-4炔基，例如但不限於實施方案1.2.6所示。
實施方案5.7：實施方案1至4.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R7選自-O-C1-6烷基、-S-C1-6烷基和-Se-C1-6烷基，其中的-C1-6烷基較佳-C1-3烷基，視需要被鹵素取代；例如但不限於實施方案1.2.7所示。
實施方案5.8：實施方案1至4.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中M為C-被鹵素取代的C1-6烷基，較佳C-被鹵素取代的C1-3烷基，更佳C-CF3；W選自N、C-鹵素或C-O-視需要被鹵素取代的C1-3烷基，較佳N、C-F、C-Cl、C-OCH3，更佳C-F；R7為H；包含M和W的稠合母環例如但不限於、、。
實施方案6.1：實施方案1至5.8中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中B為包含1至3個獨立地選自N、O、P、Se和S的雜原子的5-7員單環雜環烷基，藉由氮雜原子連接至分子的嘧啶環部分，例如但不限 於、、，其中各個環中的各個G可以均為C，或其中至多三個、較佳至多兩個為選自N、O、P、Se和S的雜原子，例如含有1-3個氮原子的5-7員單環雜環烷基、含有1個氮原子和1-2個選自O、P、Se和S的雜原子的5-7員單環雜環烷基、含有2個氮原子和1個選自O、P、Se和S的雜原子的5-7員單環雜環烷基、含有1個氮原子和1個選自O、P、Se和S的雜原子的5-7員單環雜環烷基(例如含有1個氮原子和1 個O原子的5-7員單環雜環烷基)，例如但不限於、、、、
、、、，各自被1-8個、較佳1-4個R1取代，更佳被1-2個R1取代，更佳R1取代在環碳原子上。
實施方案6.1.1：實施方案6.1的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中B 為，被1-2個R1取代，較佳在N的間位被R1取代，例如但不限於
實施方案6.1.1.1：實施方案6.1.1的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中B上的取代基R1酌情呈立體異構形式，例如R或S構型，只要化學上可行即可。
實施方案6.1.1.2：實施方案6.1至6.1.1.1的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中B上攜帶的取代基R1各自獨立地選自鹵素、CN、-OH、-B(OH)2、-C1-6烷基和-OC1-6烷基，其中的-C1-6烷基較佳-C1-3烷基，視需要被鹵素取代；較佳R1選自-OH和-C1-6烷基，其中的-C1-6烷基較佳-C1-3烷基，視需要被鹵素取代；更佳地，兩個R1連接在同一環碳原子上，其中之一為-OH且另一個為視需要被鹵素取代的-C1-6烷基，較佳-C1-3烷基，更佳甲基；更進一步佳在與分子其餘部分(例如嘧啶環)連接的N原子的間位環碳原子上連接兩個R1，其中之一為-OH且另一個為-C1-6烷基，較佳C1-3烷基，更佳甲基，例如B為，較佳。
實施方案6.1.1.3：實施方案6.1至6.1.1.1的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶 劑合物，其中B上攜帶的取代基R1選自-CONH2、-CONH(C1-6烷基)、-CON(C1-6烷基)2，其中的-C1-6烷基較佳C1-3烷基，視需要被鹵素取代；較佳-CON(C1-6烷基)2，更佳-CON(C1-3烷基)2，例如-CON(CH3)2；更進一步佳一個R1連接在與分子其餘部分(例如嘧啶環)連接的N原子的間位環碳原子上，例如B為。
實施方案6.1.2：實施方案6.1的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中B為，被1-2個R1取代，較佳在N的間位被R1取代，例如但不限於
實施方案6.1.2.1：實施方案6.1.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中B上的取代基R1酌情呈立體異構形式，例如R或S構型，只要化學上可行即可。
實施方案6.1.2.2：實施方案6.1.2或6.1.2.1的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中B上的R1各自獨立地選自-OH、鹵素、CN、-B(OH)2、-C1-6烷基和-OC1-6烷基，其中的-C1-6烷基較佳-C1-3烷基，視需要被鹵素取代；較佳R1選自-OH和-C1-6烷基，其中的-C1-6烷基較佳-C1-3烷基，視需要被 鹵素取代；更佳兩個R1連接在同一環碳原子上，其中之一為-OH且另一個為視需要被鹵素取代的-C1-6烷基，較佳-C1-3烷基，更佳甲基；更進一步佳在與分子其餘部分(例如嘧啶環)連接的N原子的間位環碳原子上連接兩個R1，其中之一為-OH且另一個為-C1-6烷基，較佳-C1-3烷基，更佳甲基，例如B為，較佳。
實施方案6.1.2.3：實施方案6.1.2或6.1.2.1的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中B上攜帶的取代基R1選自-CONH2、-CONH(C1-6烷基)、-CON(C1-6烷基)2，其中的-C1-6烷基較佳C1-3烷基，視需要被鹵素取代；較佳-CON(C1-6烷基)2，更佳-CON(C1-3烷基)2，例如-CON(CH3)2；更進一步佳一個R1連接在與分子其餘部分(例如嘧啶環)連接的N原子的間位環碳原子上，例如B為。
實施方案6.2：實施方案1至5.8中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中B為包含1至4個獨立地選自N、O、P、Se和S的雜原子的6-12員多環雜環烷基，例如6-12員螺雜環烷基，例如6-12員稠合雜環烷基，例如6-10員、6-9員、6-8員、6-7員、7-10員、7-9員、7-8員、8-10員螺雜環烷基或稠合雜環烷基，藉由氮雜原子連接至分子的嘧啶環部分；其中的雜原子可以是例如1-4個氮原子(例如1、2、3、4個氮原子)、 1個氮原子和1-3個選自O、S、P和Se的雜原子(例如1個氮原子和1個O、S、P或Se的雜原子)、2個氮原子和1-2個選自O、S、P和Se的雜原子、3個氮原子和1個選自O、S、P和Se的雜原子、1-3個氮原子和0-1個選自O、S、P或Se的雜原子(例如1-3個氮原子和0-1個O原子)，例如但不限於、、、、、、、、
、、，各自被0-8個、較佳0-4個R1取代，更佳被0-2個R1取代，更佳R1取代在環碳原子上。
實施方案6.2.1：實施方案6.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中B為、或，被0至8個、較佳0至2個R1取代，例 如但不限於、；或被1至3個、較佳1至2個R1取 代，例如但不限於。
實施方案6.2.2：實施方案6.2或6.2.1的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中B上攜帶的取代基R1各自獨立地選自H、鹵素、-CN、-CONH2、-CONH(C1-6烷基)、-CON(C1-6烷基)2，其中的-C1-6烷基較佳-C1-3烷基，視需要被鹵素取代；較佳五員環的氮原子鄰位的R1為-CON(C1-6烷基)2，更佳-CON(C1-3烷基)2，例如-CON(CH3)2，例如B為；或
B為，其上攜帶的取代基R1各自獨立地選自H、鹵素、-CN、-C1-6烷基、-CONH2、-CONHRb、-CON(Rb)2，其中的-C1-6烷基較佳-C1-3烷基，視需要被鹵素取代，其中連接N原子的Rb是-C1-6烷基，或兩個Rb可以與所連接的N原子一起形成4-7員雜環烷基，例如還包含1或2個選自N和O的雜原子的4-7員雜環烷基；較佳五員環的氮原子鄰位的R1選自-CON(Rb)2，例如-CON(C1-3烷基)2、-CO-氮連接的4-7員單環雜環烷基，例如-CON(CH3)2、、、、，其 餘R1各自獨立地選自H、鹵素和C1-6烷基，例如、
實施方案6.3：實施方案1至5.8中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中B為含有1個氮原子或含有1個氮原子和1個選自O、P、Se和S的雜原子的5-7員單環雜環烷基(較佳含有1個氮原子或含有一個氮原子和1個O原子的5-7員單環雜環烷基)，或包含1-3個氮原子和0-1個選自O、S、P或Se的雜原子(較佳1-3個氮原子和0-1個O原子)的8-10員螺雜環烷基或稠合雜環烷基，各自視需要被0-2個-OH、-C1-6烷基和-CON(C1-6烷基)2取代，其中的-C1-6烷基較佳-C1-3烷基，視需要被鹵素取代；
較佳地，B選自、，其中R1各自獨立地選自-OH和-C1-6烷基，其中的-C1-6烷基較佳-C1-3烷基，視需要被鹵素取代；較佳其中之一為-OH且另一個為-C1-6烷基，較佳-C1-3烷基，更佳甲基，最 佳或；或B選自、、，其中R1為-CON(C1-6烷基)2，較佳-CON(C1-3烷基)2，更佳-CON(CH3)2。
實施方案7.1：實施方案1至6.3的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中Y為O。
實施方案7.2：實施方案1至6.3的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中Y為S。
實施方案7.3：實施方案1至6.3的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中Y為Se。
實施方案7.4：實施方案1至6.3的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中Y為N-Ra，Ra為H；或Y為N-Ra，Ra為視需要被鹵素取代的-C1-6烷基，較佳視需要被鹵素取代的-C1-3烷基，例如但不限於-CH3、-CH2CH3。
實施方案8.1：實施方案1至7.4的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中每個R2均為H。
實施方案8.2：實施方案1至7.4的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中一個R2為氘(D)，另一個為H，或兩個R2均為氘(D)。
實施方案8.3：實施方案1至7.4的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中一個R2為H或D，另一個R2為-C1-6烷基，較佳-C1-3烷基，視需要被鹵素、D、視需要被鹵素或D取代的C1-6烷基、視需要被鹵素或D取代的-O-C1-6烷基取代，或者兩個R2各自獨立地為-C1-6烷基，較佳-C1-3烷基，視需要被鹵素、D、視需要被鹵素或D取代的C1-6烷基、視需要被鹵素或D取代的-O-C1-6烷基取代；R2的-C1-6烷基例如但不限於-CH3、-CH2D、-CD3、-CH2CH3、-CH2CD3、-CH2CH2CH3、-CH(CH3)(CH3)、-CH2CH2CH2CH3、-CH2CH(CH3)CH3、-C(CH3)3、-CH2-OCH3、-CH2-OCF3、-CH2-OCD3、-CH2-O-CH2CH3、-CH2CH2-O-CH3、-CH2CH2-O-CH2CH3、-CH2F、-CH2Cl、-CHF2、-CF3、-CCl3、-CH2CH2F、-CH2CHF2、-CH2CF3、-CH2CH2CH2F、-CH2CH2CHF2、-CH2CH2CF3、-C2F5、-C2Cl5、-CF(CF3)2。
實施方案8.4：實施方案1至7.4中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中一個R2為H或D，另一個R2為-(CH2)0-3-C3-6環烷基，較佳-(CH2)0-3-C3-4環烷基，其中的環烷基視需要被鹵素、D、視需要被鹵素或D取代的C1-6烷基、視需要被鹵素或D取代的-O-C1-6烷基取代；例如但不限於、、、、、、
實施方案8.5：實施方案1至7.4中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中兩個R2與它們所連接的碳原子一起形成螺C3-4環烷基，其中的C3-4環烷基視需要被鹵素、D、視需要被鹵素或D取代的C1-6烷基、視需要被鹵素或D取代的-O-C1-6烷基取代；例如但不限於、、
其中*表示與分子其餘部分連接的原子。
實施方案9.1：實施方案1至8.5中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑 合物，其中R3為-C1-6烷基，較佳-C1-3烷基，視需要被鹵素、D、視需要被鹵素或D取代的C1-6烷基或視需要被鹵素或D取代的-O-C1-6烷基取代，例如但不限於-CH3、-CH2CH3、-CH2CH2CH3、-CH(CH3)(CH3)、-CH2CH2CH2CH3、-CH2CH(CH3)CH3、-C(CH3)3、-CH2-OCH3、-CH2-O-CH2CH3、-CH2CH2-O-CH3、-CH2CH2-O-CH2CH3、-CH2F、-CH2Cl、-CHF2、-CF3、-CCl3、-CH2CH2F、-CH2CHF2、-CH2CF3、-CH2CH2CH2F、-CH2CH2CHF2、-CH2CH2CF3、-C2F5、-C2Cl5、-CF(CF3)2；較佳-CH3或-CH2CH3。
實施方案9.1.1：實施方案9.1的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R3為-氘代C1-6烷基，較佳-氘代C1-3烷基，例如但不限於-CH2D、-CHD2、-CD3。
實施方案9.1.2：實施方案9.1或9.1.1的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R3呈立體異構形式，例如R或S構型，較佳S構型。
實施方案9.2：實施方案1至8.5中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R3為-(CH2)0-3-C3-6環烷基，較佳-(CH2)0-3-C3-4環烷基，其中的環烷基視需要被鹵素、D、視需要被鹵素或D取代的C1-6烷基或視需要被鹵素或D取代的-O-C1-6烷基取代；例如但不限於實施方案8.4所示。
實施方案9.3：實施方案1至9.2中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中結構片段的立體構型如所示。
實施方案10.1：實施方案1至9.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R4為H。
實施方案10.2：實施方案1至9.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R4為1至8個D。
實施方案10.3：實施方案1至9.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R4為鹵素，例如F、Cl、Br、I，較佳F；或R1為CN。
實施方案10.4：實施方案1至9.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R4為-NH2、-NH-C1-6烷基、-N(C1-6烷基)2，其中的-C1-6烷基視需要被鹵素、D、CN或-OC1-6烷基取代；例如但不限於-NH2、-NH-CH3、-NH-CH2CH3、-NH-CF3、-NH-CH2CF3、-NH-CH2CN、-NH-CH2CH2CN、-N(CH3)2、-N(CH3)(CH2CH3)、-N(CH3)(CF3)、-N(CH3)(CH2CF3)、-N(CH3)(CH2CH2CN)、-NHCH2-OCH3、N(CH3)(CH2CH2- OCH3)，以及上述示例基團中烷基的一個或多個H被D替代所形成的基團。
實施方案10.5：實施方案1至9.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R4為-OH。
實施方案10.6：實施方案1至9.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R4為-O-C1-6烷基，較佳-O-C1-3烷基，其中的烷基視需要被鹵素、D、CN或C1-6烷氧基取代；例如但不限於-O-CH3、-O-CH2CH3、-O-CH2CH2CH3、-O-CH(CH3)(CH3)、-O-CH2CH2CH2CH3、-O-CH2CH(CH3)CH3、-O-C(CH3)3、-O-CH2Cl、-O-CH2CN、-O-CH2F、-O-CHF2、-O-CF3、-O-CCl3、-O-CH2CH2F、-O-CH2CH2CN、-O-CH2CHF2、-O-CH2CF3、-O-CH2CH2CH2F、-O-CH2CH2CHF2、-O-CH2CH2CF3、-O-C(CH3)2CF3、-O-C2F5、-O-C2Cl5、-O-CH2-OCH3、-O-CH2-O-CH2CH3、-O-CH2CH2-O-CH3、-O-CH2CH2-O-CH2CH3，以及上述示例基團中烷基的一個或多個H被D替代所形成的基團。
實施方案10.7：實施方案1至9.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R4為-C1-6烷基，較佳-C1-3烷基，視需要被鹵素、D、CN或-OC1-6烷基取代，較佳視需要被鹵素取代；例如但不限於-CH3、-CH2CH3、-CH2CH2CH3、-CH(CH3)(CH3)、-CH2CH2CH2CH3、-CH2CH(CH3)CH3、-C(CH3)3、-CH2-OCH3、-CH2-O-CH2CH3、-CH2CH2-O-CH3、-CH2CH2-O- CH2CH3、-CH2F、-CH2Cl、-CH2CN、-CHF2、-CF3、-CCl3、-CH2CH2F、-CH2CH2CN、-CH2CHF2、-CH2CF3、-CH2CH2CH2F、-CH2CH2CHF2、-CH2CH2CF3、-C2F5、-C2Cl5、-CF(CF3)2，以及上述基團中烷基的一個或多個H被D替代所形成的基團；較佳-CH3或-CHF2。
實施方案10.8：實施方案1至9.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R4為-O-C3-6環烷基，其中C3-6環烷基視需要被鹵素、D、CN或-OC1-6烷基取代；例如但不限於、、、
實施方案10.9：實施方案1至9.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R4為-(CH2)0-3-C3-6環烷基，較佳-(CH2)0-3-C3-4環烷基，更佳-C3-4環烷基，視需要被鹵素、D、CN或-OC1-6烷基取代，較佳視需要被鹵素取代；例如但不限於：、、、、
實施方案10.10：實施方案1至9.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R4為-C2-6烯基或-C2-6炔基，視需要被鹵素、D、CN或-C1-6烷氧基取代；例如但不限於各自視需要被鹵素、D、CN或-C1-6烷氧基取代的乙烯基、丙烯基、乙炔基。
實施方案10.11：實施方案1至9.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中連接於同一個碳原子上的兩個R4形成=C(Rc)2，其中Rc各自獨立地選自H、F、Cl、Br、I、視需要被鹵素取代的-C1-6烷基；例如但不限於=CH2、=CHF、=CF2、=CCl2、=C(CH3)2、=C(CF3)2。
實施方案10.11：實施方案1至9.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中連接於同一個環碳原子上的兩個R4與它們所連接的環碳原子一起形成螺C3-6環烷基或螺4-7員雜環烷基，且該螺C3-6環烷基或螺4-7員雜環烷基視需要被鹵素和視需要被鹵素取代的-C1-6烷基取代，例如但不限於螺環丙基、螺環丁基、螺環戊基、螺氮雜環丁烷、螺氮雜環戊烷，各 自視需要被鹵素(較佳F)或視需要被鹵素取代的C1-6烷基(較佳-CF3)取代；例如但不限於、，其中*表示與分子其餘部分連接的原子。
實施方案10.12：實施方案1至10.11中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R4取代在環N原子的對位，即，且其中m為1或2，R4選自前述R4實施方案中非H的各個取代基。
實施方案10.13：實施方案1至9.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R4選自鹵素、-O-C1-6烷基和-C1-6烷基，其中每次出現的C1-6烷基較佳C1-3烷基，各自獨立地視需要被鹵素取代，或者
連接於同一個碳原子上的兩個R4形成=C(Rc)2，其中Rc各自獨立地選自H、F、Cl、Br、I、視需要被鹵素取代的-C1-6烷基，較佳-C1-3烷基，
或者連接於同一個環碳原子上的兩個R4與它們所連接的環碳原子一起形成螺C3-6環烷基，且該螺C3-6環烷基較佳C3-4環烷基，視需要被鹵素和視需要被鹵素取代的-C1-6烷基(較佳-C1-3烷基)取代；
較佳地，R4取代在環N原子的對位。
實施方案10.14：實施方案1至9.3中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中m為1至8的整數；較佳1-4的整數；更佳1至2的整數。
實施方案11.1：實施方案1至10.14中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R5為H。
實施方案11.2：實施方案1至10.14中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R5為-C1-6烷基，較佳-C1-3烷基，視需要被D、鹵素、CN、-O-C1-6烷基或-O-CON(Rb)2取代，較佳視需要被鹵素或D取代；例如但不限於-CH3、-CD3、-CH2CH3、-CH2CH2CH3、-CH(CH3)(CH3)、-CH2CH2CH2CH3、-CH2CH(CH3)CH3、-C(CH3)3、-CH2-OCH3、-CH2-O-CH2CH3、-CH2CH2-O-CH3、-CH2CH2-O-CH2CH3、-CH2F、-CH2Cl、-CH2CN、-CHF2、-CF3、-CCl3、-CH2CH2F、-CH2CH2CN、-CH2CHF2、-CH2CF3、-CH2CH2CH2F、-CH2CH2CHF2、-CH2CH2CF3、-C2F5、-C2Cl5、-CF(CF3)2、-CH2-OCONH2、-CH2-OCONH(CH3)、-CH2-OCON(CH3)2；較佳-CH3或-CD3。
實施方案11.2.1：實施方案11.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R5為-氘代C1-6烷基，即其中的氫原子被一個或多個同位素D代替，例如-CD3。
實施方案11.3：實施方案1至10.14中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶 劑合物，其中R5為-C2-6烯基或-C2-6炔基，視需要被D、鹵素、CN、-O-C1-6烷基或-O-CON(Rb)2取代；例如但不限於各自視需要被D、鹵素、CN、-O-C1-6烷基或-O-CON(Rb)2取代的乙烯基、丙烯基、烯丙基、乙炔基。
實施方案11.4：實施方案1至10.14中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R5為-(CH2)0-3-C3-6環烷基，該-C3-6環烷基視需要被D、鹵素、CN、-O-C1-6烷基或-O-CON(Rb)2取代；例如但不限於、、
實施方案11.5：實施方案1至10.14中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R5選自-C1-6烷基、-氘代C1-6烷基和-C3-6環烷基，較佳選自-C1-3烷基和-氘代C1-3烷基，例如但不限於-CH3、-CD3、-CH2CH3和環丙基。
實施方案12.1：實施方案1至7.4中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中結構片段、具體地中，更具體地 中，R2各自獨立地選自H和D；R3選自-C1-6烷基和-氘代C1-6烷基；m為1或2；R4選自鹵素、-O-C1-6烷基和-C1-6烷基，其中每次出現的C1-6烷基各自獨立地視需要被鹵素取代，或者連接於同一個碳原子上的兩個R4形成=C(Rc)2，其中Rc各自獨立地選自H、鹵素、視需要被鹵素取代的-C1-6烷基，或者連接於同一個環碳原子上的兩個R4與它們所連接的環碳原子一起形成螺C3-6環烷基，且該螺C3-6環烷基視需要被鹵素和視需要被鹵素取代的-C1-6烷基取代，較佳地，R4取代在環N原子的對位，R4的具體示例包括但不限於氟、二氟、氟甲基、甲基、雙甲基、二氟甲基、甲氧基、氟亞甲基、二氟亞甲基、亞甲基、螺環丙基、一個或兩個F取代的螺環丙基；R5選自-C1-6烷基、-氘代C1-6烷基和-C3-6環烷基；
較佳地，R2各自獨立地選自H和D；R3選自-C1-3烷基；m為1或2；R4為鹵素、視需要被鹵素取代-C1-3烷基，或者連接於同一個碳原子上的兩個R4形成=C(Rc)2，其中Rc各自獨立地選自H、鹵素和視需要被鹵素取代的-C1-3烷基，或者連接於同一個環碳原子上的兩個R4與它們所連接的環碳原子一起形成視需要被鹵素取代的螺C3-4環烷基，例如但不 限於F、=CH2、=CHF、=CF2、=CCl2、-CH3、-CHF2、螺環丙基、被氟取代的螺環丙基；R5為-C1-3烷基或被一個或多個氘取代的-C1-3烷基，例如-CH3、-CH2CH3、-CD3。
實施方案12.2：實施方案1至7.4和12.1中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中結構片段、具體地、更具體地 的示例包括但不限於、、、、
較佳、、、、、、、
更佳、、、、、、
實施方案13.1：實施方案1的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中，M為C-R8且W為C-R9，其中R8、R9和通式(I)中其餘各個取代基如上述相應實施方案一般和較佳所定義。
實施方案13.2：實施方案1的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中，M為C-R8且W為N，其中R8和通式(I)中其餘各個取代基如上述相應實施方案一般和較佳所定義。
實施方案13.3：實施方案1的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中，M為N且W為C-R9，其中R9和通式(I)中其餘各個取代基如上述相應實施方案一般和較佳所定義。
實施方案13.4：實施方案1的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中，M為N且W為N，其中通式(I)中其餘各個取代基如上述相應實施方案一般和較佳所定義。
實施方案13.5：實施方案13.1至13.4中任一項的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中，Z為C-CN，且Y為O。
實施方案14.1：實施方案1的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其具有以下子通式：
其中各個取代基具有前述各個相應實施方案所定義的一般或較佳含義。
實施方案14.2：實施方案14.1的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中，
Y為O；
包含Z的苯并稠合環片段為，其中R6各自獨立地選自H和鹵素，較佳H和F；
R7為H；
R8為鹵素，較佳Cl；或
R8為被鹵素取代的C1-6烷基，較佳C-被鹵素取代的C1-3烷基，更佳C-CF3；或
R8為-C1-6烷基，較佳-C1-3烷基；或-C1-6烷基-O-C1-6烷基，較佳-C1-3烷基-O-C1-3烷基；
R9選自鹵素和-O-視需要被鹵素取代的C1-6烷基，較佳選自F、Cl和-O-視需要被鹵素取代的C1-3烷基；
對於式I-A-1、I-A-2、I-B-1和I-B-2及各自的子通式，R1選自-OH和-C1-6烷基，其中的-C1-6烷基較佳-C1-3烷基，視需要被鹵素取代；較佳其中之一為-OH且另一個為-C1-3烷基，較佳-C1-3烷基，更佳甲基；
對於式I-A-3和I-B-3及各自的子通式，五員環氮原子鄰位的R1為-CON(C1-6烷基)2，較佳-CON(C1-3烷基)2，更佳-CON(CH3)2，其餘R1各自獨立地選自H、鹵素和-C1-6烷基；
R2各自獨立地選自H和D；
R3為-C1-6烷基，較佳-C1-3烷基；
R4選自鹵素、-O-C1-6烷基和-C1-6烷基，其中每次出現的C1-6烷基較佳C1-3烷基，各自獨立地視需要被鹵素取代，或者
連接於同一個碳原子上的兩個R4形成=C(Rc)2，其中Rc各自獨立地選自H、F、Cl、Br、I、視需要被鹵素取代的-C1-6烷基(較佳-C1-3烷基)，
或者連接於同一個環碳原子上的兩個R4與它們所連接的環碳原子一起形成螺C3-6環烷基，且該螺C3-6環烷基較佳C3-4環烷基，視需要被鹵素和視需要被鹵素取代的-C1-6烷基(較佳-C1-3烷基)取代；
R5選自-C1-6烷基、-氘代C1-6烷基和-C3-6環烷基，較佳選自-C1-3烷基和-氘代C1-3烷基；
m和p各自獨立地為0至2的整數。
實施方案14.3：實施方案14.1或14.2的式(I)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合 物，其中結構片段、具體地中，更具體地中，R2各自獨立地選自H和D；R3選自-C1-3烷基；m為1或2；R4為鹵素、視需要被鹵素取代-C1-3烷基，或者連接於同一個碳原子上的兩個R4形成=C(Rc)2，其中Rc各自獨立地選自H、鹵素和視需要被鹵素取代的-C1-3烷基，或者連接於同一個環碳原子上的兩個R4與它們所連接的環碳原子一起形成視需要被鹵素取代的螺C3-4環烷基，例如但不限於F、=CH2、=CHF、=CF2、=CCl2、-CH3、-CHF2、螺環丙基、被氟取代的螺環丙基；R5為-C1-3烷基或被一個或多個氘取代的-C1-3烷基，例如-CH3、-CH2CH3、-CD3。
實施方案15：化合物，選自下文實施例的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物。
第二方面，本發明提供如下化合物實施方案：
實施方案II-1：式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，
其中，
M選自N和C-R8；
W選自N和C-R9；
Z選自N和C-R10；
X選自S或Se；
Q各自獨立地選自C-R6或N；
Y選自O、S、Se和N-Ra；
B選自包含1至3個獨立地選自N、O、P、S和Se的雜原子的4-7員單環雜環烷基，和包含1至4個獨立地選自N、O、P、S和Se的雜原子的6-12員多環雜環烷基，條件是其中連接至分子嘧啶環部分的環原子是氮雜原子；
R1選自H、鹵素、-CN、-OH、-NH2、-B(OH)2、側氧、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-O-C1-6烷基、-C(O)-C1-6烷基、-C(O)N(Rb)2，其中出現的C1-6烷基視需要被鹵素、氘、-OH或-O-C1-6烷基取代；
R2各自獨立地選自H、D、-C1-6烷基和-(CH2)n-C3-6環烷基，或者兩個R2與它們所連接的碳原子一起形成C3-4環烷基，其中的C1-6烷基、C3-6環烷基或C3-4環烷基各自獨立地視需要被鹵素、D、視需要被鹵素或D取代的C1-6烷基或視需要被鹵素或D取代的-O-C1-6烷基取代；
R3選自-C1-6烷基和-(CH2)n-C3-6環烷基，各自獨立地視需要被鹵素、D、視需要被鹵素或D取代的C1-6烷基或視需要被鹵素或D取代的-O-C1-6烷基取代；
R4選自H、D、鹵素、-CN、-OH、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-NH2、-NH-C1-6烷基、-N(C1-6烷基)2、-O-C1-6烷基、-O-C3-6環烷基和-(CH2)n-C3-6環烷基，其中每次出現的C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基或C3-6環烷基各自獨立地視需要被D、鹵素、CN或-OC1-6烷基取代，或者
連接於同一個碳原子上的兩個R4形成=C(Rc)2，或連接於同一個環碳原子上的兩個R4與它們所連接的環碳原子一起形成螺C3-6環烷基或螺4-7員雜環烷基，其中Rc各自獨立地選自H、鹵素和視需要被鹵素取代的-C1-6烷基，且該螺C3-6環烷基或螺4-7員雜環烷基視需要被鹵素和視需要被鹵素取代的-C1-6烷基取代；
R5選自H、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基和-(CH2)n-C3-6環烷基，其中的C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基或C3-6環烷基各自獨立地視需要被D、鹵素、CN、-O-C1-6烷基或-O-CON(Rb)2取代；
R6和R7各自獨立地選自H、D、鹵素、CN、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-O-C1-6烷基、-S-C1-6烷基和-Se-C1-6烷基，其中每次出現的- C1-6烷基、-C2-6烯基和-C2-6炔基各自獨立地視需要被鹵素、-O-C1-6烷基或D取代；
R8選自H、D、鹵素、CN、NO2、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基和-ORb其中的-C1-6烷基、-C2-6烯基和-C2-6炔基各自獨立地視需要被鹵素、CN或-O-C1-6烷基取代；或R8為-(CH2)n-C3-6環烷基，其中C3-6環烷基視需要被鹵素或CN取代；
R10選自H、D、鹵素、CN、NO2、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基和-ORb，其中的-C1-6烷基、-C2-6烯基和-C2-6炔基各自獨立地視需要被鹵素或CN取代；
R9選自H、鹵素、CN、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-ORb和-O-CON(Rb)2，其中的-C1-6烷基、-C2-6烯基和-C2-6炔基各自獨立地視需要被鹵素或CN取代；
Ra選自H、視需要被鹵素取代的-C1-6烷基；
Rb選自H、視需要被鹵素、-OH、-OC1-6烷基或氘取代的-C1-6烷基，和-C3-6環烷基，或者其中連接於同一個N原子上的兩個Rb與它們所連接的N原子一起形成視需要被鹵素或-C1-6烷基取代的4-7員雜環烷基；
n和p各自獨立地為0至3的整數；和
m和t各自獨立地為0至8的整數；
在一個具體實施方案中，R1選自H、鹵素、-CN、-OH、-NH2、-B(OH)2、側氧、-C1-6烷基、-O-C1-6烷基、-C(O)-C1-6烷基、-C(O)N(Rb)2，其中出現的C1-6烷基視需要被鹵素取代，R8和R10各自獨立地選自H、D、鹵素、CN、NO2、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基和-ORb，其中的-C1-6烷基、- C2-6烯基和-C2-6炔基各自獨立地視需要被鹵素或CN取代，Ra和Rb各自獨立地選自H和視需要被鹵素取代的-C1-6烷基，且其餘基團如上式II下所定義；
在一個具體實施方案中，R1選自H、鹵素、-CN、-OH、-NH2、-B(OH)2、側氧、-C1-6烷基、-O-C1-6烷基、-C(O)-C1-6烷基、-C(O)N(Rb)2，其中出現的C1-6烷基視需要被鹵素取代，Ra和Rb各自獨立地選自H和視需要被鹵素取代的-C1-6烷基，或者其中連接於同一個N原子上的兩個Rb與它們所連接的N原子一起形成4-7員雜環烷基，且其餘基團如上式II下所定義；
在一個具體實施方案中，R1選自H、鹵素、-CN、-OH、-NH2、-B(OH)2、側氧、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-O-C1-6烷基、-C(O)-C1-6烷基、-C(O)N(Rb)2，其中出現的C1-6烷基視需要被鹵素、氘或-O-C1-6烷基取代；Ra和Rb各自獨立地選自H和視需要被鹵素或氘取代的-C1-6烷基，或者其中連接於同一個N原子上的兩個Rb與它們所連接的N原子一起形成4-7員雜環烷基；且其餘基團如上式II下所定義；
實施方案II-2：實施方案II-1的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其為本發明第一方面提供的實施方案1至實施方案15中任一項的式(I)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物。
實施方案II-3：實施方案II-1或II-2的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑 合物，其中Z選自N和C-R10，其中R10如本發明第一方面的實施方案1.2.1至實施方案1.3中任一項所定義；較佳Z為C-CN。
實施方案II-4：實施方案II-1至II-3中任一項的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中p為0，或p為1，或p為2，或p為3，較佳p選自0至2的整數。
實施方案II-5：實施方案II-1至II-4中任一項的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中包含X、Z和Q的稠合環片段選自、、
在一個具體實施方案中，包含X、Z和Q的稠合環片段為或 ，例如或；
較佳，更佳。
實施方案II-6：實施方案II-1至II-5中任一項的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R6如本發明第一方面的實施方案2.2.1至實施方案2.2.5中任一項所定義；
較佳地，R6選自H、鹵素、CN和視需要被鹵素取代的-C1-6烷基，且p選自0至2的整數；
更佳地，存在一個R6，選自鹵素、CN和視需要被鹵素取代的-C1-6烷基，較佳選自鹵素、CN和被鹵素取代的-C1-6烷基，更佳為鹵素，最佳為F，且該R6位於所處稠合環與分子其餘部分連接點的對位、鄰位或間位， 較佳對位或鄰位，即，例如或，更具體 或，或，例如或， 更具體或，或
存在兩個R6，各自獨立地選自鹵素、CN和視需要被鹵素取代的-C1-6烷基，較佳選自鹵素、CN和被鹵素取代的-C1-6烷基，更佳為鹵素，最佳為F，且該兩個R6分別位於所處稠合環與分子其餘部分連接點的對位和鄰位、 或對位和間位、或鄰位和間位，更佳對位和鄰位，即，較佳 ，更佳。
實施方案II-7：實施方案II-1至II-5中任一項的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中包含X、Z和Q的稠合環片段的實例包括但不限於：
實施方案II-8：實施方案II-1至II-7中任一項的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中M如本發明第一方面的實施方案3.1至實施方案3.3中任一項所定義。
實施方案II-8-1：實施方案II-1至II-7中任一項的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中M為NO2。
實施方案II-8-2：實施方案II-1至II-7中任一項的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中M選自N、C-H、C-鹵素、C-CN、C-NO2、C-被鹵素取代的-C1-6烷基和C-被鹵素取代的-C2-6烯基；較佳M選自N、C-鹵素、C-CN、C-NO2、C-被鹵素取代的-C1-3烷基和C-被鹵素取代的-C2-4烯基； 更佳M選自N、C-Cl、C-F、C-CN、C-NO2、C-CF3、C-CHF2、C-CH=CHF；最佳M選自C-Cl和C-CF3；或
M選自C-C1-6烷基，較佳C-C1-3烷基，例如C-CH2-CH3；或
M選自C-C3-6環烷基，例如C-環丙基；或
M選自C-C1-6烷基-O-C1-6烷基，較佳C-C1-3烷基-O-C1-3烷基，例如C-CH2-O-CH3；
在一個實施方案中，M選自C-鹵素和C-被鹵素取代的-C1-6烷基，較佳C-鹵素和C-被鹵素取代的-C1-3烷基，例如C-Cl和C-CF3。
實施方案II-9：實施方案II-1至II-8-2中任一項的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中W如本發明第一方面的實施方案4.1至實施方案4.3中任一項所定義；較佳W為C-R9，其中R9為鹵素，較佳F；
在一個實施方案中，W為C-R9，其中R9選自鹵素、視需要被鹵素取代的-C1-6烷基、-OH、-OC1-6烷基，較佳選自鹵素、視需要被鹵素取代的-C1-3烷基、-OH、-OC1-3烷基，具體地F、Cl、-CH3、-CHF2、-OH和-OCH3，更佳地選自鹵素和-C1-3烷基，例如F或-CH3。
實施方案II-10：實施方案II-1至II-9中任一項的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R7如本發明第一方面的實施方案5.1至實施方案5.7中任一項所定義。
實施方案II-10-1：實施方案II-1至II-9中任一項的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受 的鹽或溶劑合物，其中R7選自-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基和-O-C1-6烷基，其中每次出現的-C1-6烷基、-C2-6烯基和-C2-6炔基各自獨立地視需要被-O-C1-6烷基或D取代，例如但不限於-CD3、-O-CD3、-CH2-O-CH3、-CH2-O-CD3。
實施方案II-10-2：實施方案II-1至II-9中任一項的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R7為H；或R7選自-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基和-O-C1-6烷基，其中每次出現的-C1-6烷基、-C2-6烯基和-C2-6炔基較佳分別為-C1-3烷基、-C2-4烯基和-C2-4炔基，且各自獨立地視需要被鹵素取代，或各自獨立地被-O-C1-3烷基或D取代。
實施方案II-11：實施方案II-1至II-7中任一項的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中，
M選自N、C-H、C-鹵素、C-CN、C-NO2、C-被鹵素取代的-C1-6烷基和C-被鹵素取代的-C2-6烯基；較佳M選自N、C-鹵素、C-CN、C-NO2、C-被鹵素取代的-C1-3烷基和C-被鹵素取代的-C2-4烯基；更佳M選自N、C-Cl、C-F、C-CN、C-NO2、C-CF3、C-CHF2、C-CH=CHF；
或M選自C-C1-6烷基，較佳C-C1-3烷基，例如C-CH2-CH3；或M選自C-C3-6環烷基，例如C-環丙基；或M選自C-C1-6烷基-O-C1-6烷基，較佳C-C1-3烷基-O-C1-3烷基，例如C-CH2-O-CH3；
或M選自C-鹵素和C-被鹵素取代的-C1-6烷基，較佳C-鹵素和C-被鹵素取代的-C1-3烷基，更佳地為C-Cl和C-CF3；
W為C-R9，其中R9為鹵素，較佳F；或R9為C1-6烷基，較佳-C1-3烷基，視需要被鹵素取代；或R9為-OC1-6烷基，較佳-OC1-3烷基；或R9為-OH；
R7為H；或R7選自-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基和-O-C1-6烷基，其中每次出現的-C1-6烷基、-C2-6烯基和-C2-6炔基較佳分別為-C1-3烷基、-C2-4烯基和-C2-4炔基，且各自獨立地視需要被鹵素取代，或各自獨立地被-O-C1-3烷基或D取代；
在實施方案II-1至II-7中任一項的化合物中，其中包含M和W的稠合母核例如但不限於、、、
、；較佳、、
在一些具體的實施方案中，包含M和W的稠合母核為；
在一些具體的實施方案中，包含M和W的稠合母核為；
在一些具體的實施方案中，包含M和W的稠合母核為；
在一些具體的實施方案中，包含M和W的稠合母核為；
在一些具體的實施方案中，包含M和W的稠合母核為；
在一些具體的實施方案中，包含M和W的稠合母核為；
在一些具體的實施方案中，包含M和W的稠合母核為；
在一些具體的實施方案中，包含M和W的稠合母核為‘’
在一些具體的實施方案中，包含M和W的稠合母核為；
在一些具體的實施方案中，包含M和W的稠合母核為、
存一些具體的實施方案中，包含M和W的稠合母核為；
在一些具體的實施方案中，包含M和W的稠合母核為；
在一些具體的實施方案中，包含M和W的稠合母核為；
在一些具體的實施方案中，包含M和W的稠合母核為；
在一些具體的實施方案中，包含M和W的稠合母核為；
在一些具體的實施方案中，包含M和W的稠合母核為。
實施方案II-12：實施方案II-1至II-11中任一項的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中B如本發明第一方面的實施方案6.1至實施方案6.3中任一項所定義；
在進一步的實施方案中，B為含有1個氮原子或含有1個氮原子和1個選自O、P、Se和S的雜原子的4-7員單環雜環烷基(較佳含有1個氮原子或含有一個氮原子和1個O原子的4-7員單環雜環烷基)，或包含1-3個氮原子和0-1個選自O、S、P或Se的雜原子(較佳1-3個氮原子和0-1個O原子)的8-10員螺雜環烷基或稠合雜環烷基，各自視需要被0-3個獨立地選自-OH、NH2、CN、鹵素、-C1-6烷基、-COC1-6烷基、-CON(Rb)2的基團取代；
在一個具體實施方案中，B為包含1至2個(較佳1個)獨立地選自N、O、P、Se和S(較佳N)的雜原子的4-7員單環雜環烷基，例如4員雜環烷基，藉由氮雜原子連接至分子的嘧啶環部分，例如，其中環中的各個G可以均為C，或其中至多1個為選自N、O、P、Se和S的雜原子，例如含有1個氮原子的4員單環雜環烷基、含有1個氮原子和1個選自O、P、Se和S的雜原子的4員單環雜環烷基(例如含有1個氮原子和1個O原子的4員單環雜環烷基)、含有2個氮原子的5-7員單環雜環烷基；例如B為 ，例如，其中的R1如實施方案II所定義，在一個實施方案 中，R1選自-C(O)-C1-6烷基和-C(O)N(Rb)2，例如R1選自-C(O)-C1-3烷基、-C(O)NH2、-C(O)NH(C1-3烷基)、-C(O)N(C1-3烷基)2。
實施方案II-12-1：實施方案II-1至II-11中任一項的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中B為，被1-2個R1取代，例如但不限於、 、、、、，其中的R1各自獨立地選自H、鹵素、-CN、-OH、-NH2、-B(OH)2、側氧、-C1-6烷基、-O-C1-6烷基、-C(O)-C1-6烷基、-C(O)N(Rb)2，其中出現的C1-6烷基視需要被鹵素取代；較佳選自鹵素、CN、-OH、-C1-6烷基和-OC1-6烷基，其中的-C1-6烷基較佳-C1-3烷基，視需要被鹵素取代；
在一個具體實施方案中，B為或，其中R1選自鹵素、CN、被鹵素取代的-C1-6烷基；
在一個具體實施方案中，B為或，也可以表示為，其中一個R1選自鹵素、CN、被鹵素取代的-C1-6烷基，較佳位於環N原子 的對位，另一個選自H、-OH、視需要被鹵素取代的-C1-6烷基或-O-C1-6烷基；例如但不限於、、、、；
在一個具體實施方案中，B為或，其中一個R1為-OH且另一個為視需要被鹵素取代的-C1-6烷基，較佳-C1-3烷基，更佳甲基；更進 一步佳，其中R1之一為-OH且另一個為-C1-6烷基，較佳C1-3烷基， 更佳甲基，例如B為，較佳。
實施方案II-12-2：實施方案II-1至II-11中任一項的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中B為包含1-2選自N、O和S的雜原子的7員單環飽和雜環烷基；
在一個具體實施方案中，B為，被1-2個R1取代，例如但不限於 、、、，較佳，如本發明第一方面的實施方案6.1.2至6.1.2.3中任一項所定義。
實施方案II-12-3：實施方案II-1至II-11中任一項的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接 受的鹽或溶劑合物，其中B為包含1至4個獨立地選自N、O、P、Se和S的雜原子的6-12員多環雜環烷基，例如6-12員螺雜環烷基，例如6-12員稠合雜環烷基，如本發明第一方面的實施方案6.2所具體定義和/或示例；
在一個具體實施方案中，B為哌啶螺4-5員雜環烷基，該雜環烷基包含1或2個選自N或O的雜原子，例如但不限於、、、
、；較佳；各自被0至8個、較佳0至2個R1取代；
在一個具體實施方案中，B為氧氮雜環庚烷並環丙烷或二氮雜環庚烷並環丙烷，例如但不限於、，較佳。
實施方案II-12-3-1：實施方案II-1至II-11中任一項的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中B在一個具體實施方案中，B為藉由氮原子連接的9-10員稠合雙環雜環烷基，還包含1至3個選自N和O的雜原子，例如六員并五員稠合雜環烷基、七員并五員稠合雜環烷基，具體地可以表示 為，其中表示該環可以是飽和的、部分不飽和的或芳族的，U1 選自C或N，U2選自N、C或O，例如但不限於、、、 、、、、，被0至8個、較佳1至3個、更佳1至2個R1取代，其中的R1各自獨立地選自H、鹵素、-CN、-OH、-NH2、-B(OH)2、側氧、-C1-6烷基、-O-C1-6烷基、-C(O)-C1-6烷基、-C(O)N(Rb)2，其中出現的C1-6烷基視需要被鹵素取代，較佳選自H、鹵素、-CN、-NH2、側氧、-C1-6烷基、-C(O)-C1-6烷基、-C(O)N(Rb)2，其中的-C1-6烷基較佳-C1-3烷基，視需要被鹵素取代，Rb較佳為H或-C1-3烷基，或者其中兩個Rb可以與所連接的N原子一起形成4-7員雜環烷基，例如還包含1或2個選自N和O的雜原子的4-7員雜環烷基；
較佳地，B選自，例如，其中R1選自H、鹵素、-CN、-NH2、-C1-6烷基、-C(O)-C1-6烷基和-C(O)N(Rb)2，其中的-C1-6烷基較佳-C1-3烷基，或者其中兩個Rb可以與所連接的N原子一起形成4-7員雜環烷基，例如還包含1或2個選自N和O的雜原子的4-7員雜環烷基；更佳五員環的氮雜原子鄰位的R1選自-C(O)-C1-6烷基和-C(O)N(Rb)2，例 如-CON(C1-3烷基)2、-CO-4-7員單環雜環烷基，例如-CON(CH3)2、、 、、，其餘R1各自獨立地選自H、鹵素、-CN、-NH2和-C1-6烷基，較佳選自H、鹵素和-C1-6烷基；
實施方案II-12-3-2：實施方案II-1至II-11中任一項的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中B為藉由氮原子連接的9-10員稠合雙環雜環烷 基，還包含1至2個選自N和O的雜原子，具體地為，其中表示該環可以是飽和的、部分不飽和的或芳族的，U1選自C或N，U2選 自N、C或O，例如但不限於、、、、、 、、、，被1至3個、例如1個、2個或3個R1取代，其中的R1各自獨立地選自H、鹵素、-CN、-OH、-NH2、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-O-C1-6烷基、-C1-6烷基-O-C1-6烷基、-C(O)N(Rb)2，較佳選自H、鹵素、-CN、-OH、-NH2、-C1-6烷基、-C1-6烷基-O-C1-6烷基、-C(O)N(Rb)2，其中的Rb各自獨立地為H或視需要被一個或多個氘取代的-C1-6烷基，其中R1中出現的-C1-6烷基較佳-C1-3烷基，視需要被一個或多個鹵素或氘取代；或者，其中Rb各自獨立地為H、視需要 被一個或多個鹵素、氘、-O-C1-6烷基取代的-C1-6烷基或-C3-6環烷基，或兩個Rb與它們連接的氮原子一起形成視需要被鹵素或-C1-6烷基取代的4-7員雜環烷基；
較佳地，B選自，例如，其中
五員環上氮雜原子鄰位的R1選自-C(O)-C1-6烷基和-C(O)N(Rb)2，較佳-C(O)N(Rb)2，Rb各自獨立地為H或視需要被一個或多個氘取代的-C1-6烷基，較佳各自獨立地為H或視需要被一個或多個氘取代的-C1-3烷基，例如-C(O)N(CH3)2、-C(O)N(CD3)2，
五員環上氮雜原子間位的R1選自H、鹵素、-CN、-OH、-NH2、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-O-C1-6烷基和-C1-6烷基-O-C1-6烷基，較佳選自H、鹵素、-CN、-OH、-NH2、-C1-3烷基、-C2-4烯基、-C2-4炔基、-O-C1-3烷基和-C1-3烷基-O-C1-3烷基，其中出現的烷基視需要被一個或多個鹵素或氘取代，該位置的R1例如但不限於H、F、Cl、-CN、-OH、-NH2、-CH3、-C≡CH、-O-CH3、-O-CD3、-O-CH2-CH3、-CH2-O-CH3、-CD2-O-CD3，
B與分子其餘部分連接氮的鄰位的R1選自H或-C1-6烷基，較佳H或-C1-3烷基，例如H、-CH3或-CH2CH3；
或者
五員環上氮雜原子鄰位的R1選自-C(O)-C1-6烷基和-C(O)N(Rb)2，較佳-C(O)N(Rb)2，Rb各自獨立地為H、視需要被一個或多個鹵素、氘、-O- C1-6烷基取代的-C1-6烷基、或-C3-6環烷基，較佳各自獨立地為H或視需要被一個或多個氘取代的-C1-3烷基，最佳各自獨立地為視需要被一個或多個氘取代的-C1-3烷基，例如-C(O)CH3、-C(O)N(CH3)(CH2CH2F)、-C(O)N(CH3)2、-C(O)N(CH3)(環丙基)、-C(O)NH(CH3)、-C(O)N(CD3)2、-C(O)N(CH3)(CH2CH2OCH3)；或兩個Rb與它們連接的氮原子一起形成視需要被鹵素或-C1-6烷基取代的4-7員雜環烷基，例如氮雜環丁烷基、3-F-氮雜環丁烷基、嗎啉基、吡咯烷基、哌嗪基、4-甲基哌嗪基，
五員環上氮雜原子間位的R1選自H、鹵素、CN、-OH、-NH2、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-O-C1-6烷基和-C1-6烷基-O-C1-6烷基，較佳選自H、鹵素、-CN、-OH、NH2、-C1-3烷基、-C2-4烯基、-C2-4炔基、-O-C1-3烷基和-C1-3烷基-O-C1-3烷基，更佳選自-C1-3烷基-O-C1-3烷基，其中出現的烷基視需要被一個或多個鹵素、OH或氘取代，較佳被一個或多個氘取代，該位置的R1例如但不限於H、F、Cl、-OH、-NH2、-CN、-O-CH3、-CH3、-乙炔基、-CH2F、-CHF2、-O-CD3、-CH2OH、-CH2-CH3、-O-CH2-CH3、-CH2-O-CH3、-CD2-O-CD3、-CH2-O-CD3、-CH2-O-CH2CH3，
B與分子其餘部分連接氮的鄰位的R1選自H或-C1-6烷基，較佳H或-C1-3烷基，例如H、-CH3或-CH2CH3；
作為該較佳方案的具體實施方式，B可以為、 、、，其中R1各自如該方案所定義，條件是各自不為H；
在一些實施方案中，B為藉由氮原子連接的9-11員稠合雙環雜環烷基，具體地為，其中表示該環可以是飽和的、部分不飽和的或 芳族的，U1選自C或N，U2選自N、C或O，例如但不限於、
被1至3個、例如1個、2個或3個R1取代，其中的R1各自獨立地選自H、鹵素、-CN、-OH、-NH2、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-O-C1-6烷基、-C1-6烷基-O-C1-6烷基、-C(O)-C1-6烷基、-C(O)N(Rb)2，較佳選自H、鹵素、-CN、-OH、-NH2、-C1-3烷基、-C2-4烯基、-C2-4炔基、-O-C1-3烷基、-C1-3烷基-O-C1-3烷基、-C(O)-C1-3烷基、-C1-3烷基-O-C1-3烷基、-C(O)N(Rb)2，其中的Rb各自獨立地為H、視需要被一個或多個鹵素、氘、-O-C1-6烷基取代的-C1-6烷基(較佳-O-C1-3烷基取代的-C1-3烷基)或-C3-6環 烷基，或兩個Rb與它們連接的氮原子一起形成視需要被鹵素或-C1-6烷基(較佳-C1-3烷基)取代的4-7員雜環烷基；
較佳地，B為，例如，其中
五員環上氮雜原子鄰位的R1選自-C(O)-C1-6烷基和-C(O)N(Rb)2，較佳-C(O)N(Rb)2，Rb各自獨立地為H、視需要被一個或多個鹵素、氘、-O-C1-6烷基取代的-C1-6烷基、或-C3-6環烷基，較佳各自獨立地為H或視需要被一個或多個氘取代的-C1-3烷基，最佳各自獨立地為視需要被一個或多個氘取代的-C1-3烷基，例如-C(O)CH3、-C(O)N(CH3)(CH2CH2F)、-C(O)N(CH3)2、-C(O)N(CH3)(環丙基)、-C(O)NH(CH3)、-C(O)N(CD3)2、-C(O)N(CH3)(CH2CH2OCH3)；或兩個Rb與它們連接的氮原子一起形成視需要被鹵素或-C1-6烷基取代的4-7員雜環烷基，例如氮雜環丁烷基、3-F-氮雜環丁烷基、嗎啉基、吡咯烷基、哌嗪基、4-甲基哌嗪基，
五員環上氮雜原子間位的R1選自H、鹵素、CN、-OH、-NH2、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-O-C1-6烷基和-C1-6烷基-O-C1-6烷基，較佳選自H、鹵素、-CN、-OH、NH2、-C1-3烷基、-C2-4烯基、-C2-4炔基、-O-C1-3烷基和-C1-3烷基-O-C1-3烷基，更佳選自-C1-3烷基-O-C1-3烷基，其中出現的烷基視需要被一個或多個鹵素、OH或氘取代，較佳被一個或多個氘取代，該位置的R1例如但不限於H、F、Cl、-OH、-NH2、-CN、-O-CH3、-CH3、-乙炔基、-CH2F、-CHF2、-O-CD3、-CH2OH、-CH2-CH3、-O-CH2-CH3、-CH2-O-CH3、-CD2-O-CD3、-CH2-O-CD3、-CH2-O-CH2CH3，
B與分子其餘部分連接氮的鄰位的R1選自H或-C1-6烷基，較佳H或-C1-3烷基，例如H、-CH3或-CH2CH3；
作為該較佳方案的具體實施方式，B可以為、、、，其中R1各自如該實施方案所定義，條件是各自不為H。
實施方案II-12-3-3：實施方案II-1至II-11中任一項的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中B的具體示例包括但不限於、
在一些實施方式中，B為；在另一些實施方式中，B為 或；在另一些實施方式中，B為或 ；在另一些實施方式中，B為，或 ；在另一些實施方式中，B為或；在 另一些實施方式中，B為、或； 在另一些實施方式中，B為、、、
、；在另一些實施方式中，B為 或；在另一些實施方式中，B為 ；在另一些實施方案中，B為、
實施方案II-12-3-4：實施方案II-12-3-1至II-12-3-3中任一項的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中在上述B的各個實施方案中，位於與分子其餘部分連接的環氮原子鄰位的R1存在時可呈立體異構形式，例如R或S構型，例如。
實施方案II-12-4：實施方案II-1至II-11中任一項的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中B選自實施方案II-12-1、II-12-2和II-12-3所一般或具體定義的結構片段；較佳地，B選自、，其中R1各自獨立地選自-OH和-C1-6烷基，其中的-C1-6烷基較佳-C1-3烷基，視需要被鹵素取代；較佳其中之一為-OH且另一個為-C1-6烷基，較佳-C1-3烷基， 更佳甲基，最佳或；或B選自、、 、，其中一個R1(較佳氮雜原子鄰位的R1)選自-C(O)-C1-6烷基和-C(O)N(Rb)2，其餘R1選自H、鹵素、-CN、-NH2和-C1-6烷基，其中的-C1-6烷基較佳-C1-3烷基；例如一個R1(較佳氮雜原子鄰位的R1)選自-CON(C1-6烷基)2、-CONHC1-6烷基、-CONH2、-COC1-6烷基，較佳-CON(C1- 3烷基)2、-CONHC1-3烷基、-COC1-3烷基，更佳-CON(CH3)2、-CONHCH3、-COCH3，其餘R1選自H、F、Cl、-CN、-NH2和-C1-3烷基(例如甲基)；或B為，其中一個R1選自鹵素、CN、被鹵素取代的-C1-6烷基，較佳位於環N原子的對位，另一個選自H、-OH、視需要被鹵素取代的-C1-6烷基或-O-C1-6烷基。
實施方案II-12-5：實施方案II-1至II-12-4中任一項的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中B上的取代基R1酌情呈立體異構形式，例如R或S構型。
實施方案II-13：實施方案II-1至II-12-5中任一項的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中Y如本發明第一方面的實施方案7.1至7.4中任一項所具體定義和/或示例；較佳Y為O。
實施方案II-14：實施方案II-1至II-13中任一項的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R2如本發明第一方面的實施方案8.1至8.4中任一項所具體定義和/或示例；較佳R2各自獨立地選自H和D；例如均為H，一個為H另一個為D，或兩個均為D。
實施方案II-15：實施方案II-1至II-14中任一項的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受 的鹽或溶劑合物，其中R3如本發明第一方面的實施方案9.1至9.4中任一項所具體定義和/或示例；較佳R3為-C1-6烷基，更佳-C1-3烷基，最佳甲基，視需要被一個或多個D取代；結構片段的立體構型較佳如 所示。
實施方案II-16：實施方案II-1至II-15中任一項的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R4如本發明第一方面的實施方案10.1至10.13中任一項所具體定義和/或示例；更佳地，
R4選自鹵素和-C1-6烷基，其中的-C1-6烷基較佳-C1-3烷基，被鹵素(較佳F)取代，例如-CHF2；或者連接於同一個碳原子上的兩個R4形成=C(Rc)2，其中Rc各自獨立地選自H、鹵素(較佳F)、視需要被鹵素取代的-C1-6烷基(較佳視需要被鹵素、較佳F取代的-C1-3烷基)，例如=CH2、=CHF、=CHCF3；
較佳地，R4取代在環N原子的對位，即，且其中m為1或2；
其中R4酌情呈立體異構形式，例如R或S構型。
實施方案II-17：實施方案II-1至II-16中任一項的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R5如本發明第一方面的實施方案11.1至11.5任一項所具體定義和/或示例；更佳地，R5選自-C1-6烷基和-氘代C1-6烷基，較佳選自-C1-3烷基和-氘代C1-3烷基，例如但不限於-CH3、-CD3和-CH2CH3。
實施方案II-18：實施方案II-1至II-12-5中任一項的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中結構片段如本發明第一方面的實施方 案12.1或12.2所具體定義和/或示例；更佳地，為，R2各自獨立地選自H和氘；R3選自視需要被一個或多個氘取代的-C1-3烷基；m為1或2；R4選自鹵素和被鹵素(較佳F)取代-C1-3烷基，或者連接於同一個碳原子上的兩個R4形成=C(Rc)2，其中Rc各自獨立地選自H、鹵素、被鹵素取代的-C1-3烷基，較佳地，R4取代在環N原子的對位，R4的具體示例包括但不限於氟、二氟、氟甲基、二氟甲基、氟亞甲基、二氟亞甲基，較佳氟、二氟甲基、氟亞甲基；R5選自視需要被一個或多個氘取代的-C1-3烷基，例如-CH3、-CH2CH3、-CD3；
較佳的片段示例為、、、、、
實施方案II-19：實施方案II-1或II-2的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其具有如本發明第一方面實施方案14.1至14.3中任一項所定義的子通式。
實施方案II-19-1：實施方案II-1或II-2的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其可以具有如下子通式：
其中各個基團或各個結構片段具有上文本發明第二方面的實施方案II-1至II-18相應給出的一般、具體或較佳的定義；
在上述子通式及其示例的一些具體實施方式中，
X選自S和Se；
Q各自獨立地選自C-R6和N；
R6各自獨立地選自H和鹵素；
包含X的稠合環片段較佳為，其中R6各自獨立地選自H和鹵素，其中鹵素較佳F；
M選自N和C-R8；
W選自N和C-R9；
R7為H；
R8為視需要被鹵素(較佳F)取代的C1-3烷基、視需要被鹵素(較佳F)取代的C2-4烯基、CN、NO2、鹵素(較佳Cl)；或R8為-C1-6烷基-O-C1-6烷基，較佳-C1-3烷基-O-C1-3烷基，例如-CH2-O-CH3；
R9選自F、Cl和-O-視需要被鹵素取代的C1-3烷基；
對於式II-1及其各個子通式，R1之一選自鹵素、CN、被鹵素取代的-C1-6烷基，較佳位於環N原子的對位，另一個選自H、-OH、視需要被鹵素取代的-C1-6烷基或-O-C1-6烷基；
對於式II-2及其各個子通式，R1之一為-OH且另一個為-C1-3烷基；
對於式II-3及其各個子通式，五員環上氮雜原子鄰位的R1選自-C(O)-C1-6烷基、-CONH2、-CONHC1-6烷基和-CON(C1-6烷基)2，或為-C(O)-氮原子連接的、還包含1或2個選自N和O的雜原子的4-7員單環雜環烷基，其餘的R1各自獨立地選自H、NH2、CN、鹵素和-C1-6烷基；
Y為O；
R2各自獨立地選自H和D；
R3為-C1-3烷基；
R4選自鹵素、-O-C1-3烷基和-C1-3烷基，其中每次出現的C1-3烷基各自獨立地視需要被鹵素取代，或者
連接於同一個碳原子上的兩個R4形成=C(Rc)2，其中Rc各自獨立地選自H、鹵素、視需要被鹵素取代的-C1-3烷基，或者
連接於同一個環碳原子上的兩個R4與它們所連接的環碳原子一起形成螺C3-4環烷基，且該螺C3-4環烷基視需要被鹵素和視需要被鹵素取代的-C1-3烷基取代；
R5選自-C1-3烷基和-氘代C1-3烷基；
m為1至2的整數，p為0至2的整數；
較佳地，R4位於所連接環的環氮原子的對位；
較佳地，結構片段為。
實施方案II-19-2：實施方案II-19-1的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中，對於式II-3及其各個子通式，B片段為，其中五員環上氮雜原子鄰位的R1選自-C(O)-C1-6烷基和-C(O)N(Rb)2，較佳-C(O)N(Rb)2，Rb各自獨立地為H或視需要被一個或多個氘取代的-C1-6烷基，較佳各自獨立地為H或視需要被一個或多個氘取代的-C1-3烷基，例如-C(O)N(CH3)2、-C(O)N(CD3)2；
五員環上氮雜原子間位的R1選自H、鹵素、-CN、-OH、-NH2、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-O-C1-6烷基和-C1-6烷基-O-C1-6烷基，較佳選自H、鹵素、-CN、-OH、-NH2、-C1-3烷基、-C2-4烯基、-C2-4炔基、-O-C1-3烷基和-C1-3烷基-O-C1-3烷基，其中出現的烷基視需要被一個或多個鹵素或氘取代，該位置的R1例如但不限於H、F、Cl、-CN、-OH、-NH2、-CH3、-C≡CH、-O-CH3、-O-CD3、-O-CH2-CH3、-CH2-O-CH3、-CD2-O-CD3，
B與分子其餘部分連接氮的鄰位的R1選自H或-C1-6烷基，較佳H或-C1-3烷基，例如H或-CH3；
例如，B選自、、、，其中的各個R1分別如上所定義，但不為H；
式II-3及其各個子通式中的其餘各個基團如實施方案II-19-1一般或具體所定義。
實施方案II-19-3：實施方案II-19-1的式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中，對於式II-3及其各個子通式(包括子通式示例)，
B片段為，其中
五員環上氮雜原子鄰位的R1選自-C(O)-C1-6烷基和-C(O)N(Rb)2，較佳-C(O)N(Rb)2，Rb各自獨立地為H、視需要被一個或多個鹵素、氘、-O- C1-6烷基取代的-C1-6烷基、或-C3-6環烷基，較佳各自獨立地為H或視需要被一個或多個氘取代的-C1-3烷基，最佳各自獨立地為視需要被一個或多個氘取代的-C1-3烷基，例如-C(O)CH3、-C(O)N(CH3)(CH2CH2F)、-C(O)N(CH3)2、-C(O)N(CH3)(環丙基)、-C(O)NH(CH3)、-C(O)N(CD3)2、-C(O)N(CH3)(CH2CH2OCH3)；或兩個Rb與它們連接的氮原子一起形成視需要被鹵素或-C1-6烷基取代的4-7員雜環烷基，例如氮雜環丁烷基、3-F-氮雜環丁烷基、嗎啉基、吡咯烷基、哌嗪基、4-甲基哌嗪基，
五員環上氮雜原子間位的R1選自H、鹵素、CN、-OH、-NH2、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-O-C1-6烷基和-C1-6烷基-O-C1-6烷基，較佳選自H、鹵素、-CN、-OH、NH2、-C1-3烷基、-C2-4烯基、-C2-4炔基、-O-C1-3烷基和-C1-3烷基-O-C1-3烷基，更佳選自-C1-3烷基-O-C1-3烷基，其中出現的烷基視需要被一個或多個鹵素、OH或氘取代，較佳被一個或多個氘取代，該位置的R1例如但不限於H、F、Cl、-OH、-NH2、-CN、-O-CH3、-CH3、-乙炔基、-CH2F、-CHF2、-O-CD3、-CH2OH、-CH2-CH3、-O-CH2-CH3、-CH2-O-CH3、-CD2-O-CD3、-CH2-O-CD3、-CH2-O-CH2CH3，
B與分子其餘部分連接氮的鄰位的R1選自H或-C1-6烷基，較佳H或-C1-3烷基，例如H、-CH3或-CH2CH3；
具體地B可以為、、、，其中R1各自如該實施方案所定義，條件是各自不為H；
包含X的稠合環片段為，其中R6各自獨立地選自H和鹵素(較佳F)；較佳
M為C-R8；
W為C-R9；
R7為H；
R8為鹵素(較佳Cl)、視需要被鹵素(較佳F)取代的C1-3烷基(例如CF3)、視需要被鹵素(較佳F)取代的C2-4烯基、CN、NO2、-C1-6烷基-O-C1-6烷基(較佳-C1-3烷基-O-C1-3烷基，例如-CH2-O-CH3)；較佳鹵素或被鹵素取代的C1-3烷基，例如Cl和CF3；
R9選自鹵素、-C1-3烷基、-OH和-O-視需要被鹵素取代的C1-3烷基；較佳鹵素和-C1-3烷基；例如F、Cl、CH3和-O-CH3；
Y為O；
R2各自獨立地選自H和D；
R3為-C1-3烷基；
R4為-C1-3烷基，被鹵素取代，或者連接於同一個碳原子上的兩個R4形成=C(Rc)2，其中Rc各自獨立地選自H和鹵素；
R5選自-C1-3烷基和-氘代C1-3烷基；
m為1至2的整數；
較佳地，R4位於所連接環的環氮原子的對位；
較佳地，結構片段為。
實施方案II-20：實施方案II的式(II)化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中為實施例所具體合成和表徵的化合物。
第三方面，本發明提供如下化合物實施方案：
實施方案III-1：式(III)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，
其中B、Y、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、M、W、t、m、p各自或組合具有本發明第二方面實施方案II-1至II-20對式(II)化合物一般或具體所定義的含義。
實施方案III-2：實施方案III-1的式(III)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中p為1，或p為2，或p為3，較佳p選自1至2的整數。
實施方案III-3：實施方案III-1或III-2的式(III)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶 劑合物，其中結構片段中，p為1或2，示例為或，R6各自獨立地選自H、D、鹵素、CN、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-O-C1-6烷基、-S-C1-6烷基和-Se-C1-6烷基，其中每次出現的-C1-6烷基、-C2-6烯基和-C2-6炔基各自獨立地視需要被鹵素、-O-C1-6烷基或D取代；較佳選自H、D、鹵素、CN、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基，其中的-C1-6烷基、-C2-6烯基和-C2-6炔基各自獨立地視需要被鹵素取代；
在一個具體實施方式中，該片段中的R6各自獨立地選自鹵素、-CN、視需要被鹵素取代的-C1-6烷基；較佳該片段與分子其餘部分連接點鄰位的R6為-C1-6烷基(較佳-C1-3烷基)，間位的R6存在時選自鹵素和CN(較佳F 或Cl)；示例包括但不限於、、、
實施方案III-4：實施方案III-1至III-3中任一項的式(III)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中M如實施方案II-8至II-8-2中任一項所一般或具體定義。
實施方案III-5：實施方案III-1至III-4中任一項的式(III)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中W如實施方案II-9所一般或具體定義。
實施方案III-6：實施方案III-1至III-5中任一項的式(III)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R7如實施方案II-10至II-10-2中任一項所一般或具體定義。
實施方案III-7：實施方案III-1至III-6中任一項的式(III)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中包含M和W的稠合母核如實施方案II-11所一般或具體定義。
實施方案III-8：實施方案III-1至III-7中任一項的式(III)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中結構片段中，t選自0至6的整數、0-4的整數、0-3的整數，例如t為0，或t為1，或t為2，或t為3；
在具體的實施方案中，結構片段如實施方案II-12至II-12-5中任一項所一般或具體定義；
較佳地，該結構片段為B選自，例如，其中R1選自H、鹵素、-CN、-NH2、-C1-6烷基、-C(O)-C1-6烷基和-C(O)N(Rb)2，其中的-C1-6烷基較佳-C1-3烷基，或者其中兩個Rb可以與所連接的N原子一起形成4-7員雜環烷基，例如還包含1或2個選自N和O的雜原子的4-7員雜環烷基；更佳五員環的氮雜原子鄰位的R1選自-C(O)-C1-6烷基和-C(O)N(Rb)2，例如-CON(C1-3烷基)2、-CO-4-7員單環雜環烷基，例如- CON(CH3)2、、、、，其餘R1各自獨立地選自H、鹵素、-CN、-NH2和-C1-6烷基，較佳選自H、鹵素和-C1-6烷基；其中，位於與分子其餘部分連接的環氮原子鄰位的R1存在時可呈立體 異構形式，例如R或S構型，例如。
實施方案III-9：實施方案III-1至III-8-1中任一項的式(III)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中結構片段如實施方案II-13至II-18中任一項一般或具體所定義。
實施方案III-10：實施方案III-1的式(III)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其可以具有如實施方案II-19-1所示的各個子通式及各個基團的定義，其中不同的是左側片段為實施方案III-1至III-3中任一項所定義的
第四方面，本發明提供如下化合物實施方案：
實施方案IV-1：式(IV)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，
其中B、Y、Q、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、M、W、t、m、p各自或組合具有本發明第二方面實施方案II-1至II-20對式(II)化合物一般或具體所定義的含義。
實施方案IV-2：實施方案IV-1的式(IV)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中p為1，或p為2，或p為3，較佳p選自1至2的整數。
實施方案IV-3：實施方案IV-1或IV-2的式(IV)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶 劑合物，其中結構片段為或，例如 、；其中R6各自獨立地選自H、D、鹵素、CN、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-O-C1-6烷基、-S-C1-6烷基和-Se-C1-6烷基，其中每次出現的-C1-6烷基、-C2-6烯基和-C2-6炔基各自獨立地視需要被鹵素、-O-C1-6烷基或D取代；較佳各自獨立地選自鹵素、CN、視需要被鹵素取代的-C1-6烷基；
在一個具體實施方式中，該片段中Q位攜帶的R6選自鹵素和CN，位於-NH2對位的R6為視需要被鹵素取代的-C1-6烷基，較佳被鹵素取代的-C1-3烷基，例如-CF3，間位的R6為-C1-6烷基，較佳-C1-3烷基，例如-CH3。
實施方案IV-4：實施方案IV-1至IV-3中任一項的式(IV)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中M如實施方案II-8至II-8-2中任一項所一般或具體定義。
實施方案IV-5：實施方案IV-1至IV-4中任一項的式(IV)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中W如實施方案II-9所一般或具體定義。
實施方案IV-6：實施方案IV-1至IV-5中任一項的式(IV)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受 的鹽或溶劑合物，其中R7如實施方案II-10至II-10-2中任一項所一般或具體定義。
實施方案IV-7：實施方案IV-1至IV-6中任一項的式(IV)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中包含M和W的稠合母核如實施方案II-11所一般或具體定義。
實施方案IV-8：實施方案IV-1至IV-7中任一項的式(IV)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中結構片段如實施方案III-8所一般或具體定義。
實施方案IV-9：實施方案IV-1至IV-8中任一項的式(IV)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中結構片段如實施方案II-13至II-18中任一項一般或具體所定義。
實施方案IV-10：實施方案IV-1的式(IV)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其可以具有如實施方案II-19-1所示的各個子通式及各個基團的定義，其 中不同的是左側片段為實施方案IV-1至IV-3中任一項所定義的
需要說明的是，本發明的化合物涵蓋以上各個獨立的實施方案或各個具體實施方案，還涵蓋上述各個實施方案或具體實施方案的任何組合或亞組合構成的實施方案，也涵蓋以上任何較佳或例舉的實施方案的任何組合所構成的實施方案。
發明的有益效果
如前文所述，已知RAS蛋白、尤其KRAS突變蛋白在腫瘤發生以及多種其它疾病中發揮作用。我們已令人驚訝地發現，具有上述結構特徵的本發明化合物在攜帶由KRAS突變蛋白(例如G12C突變、G12D突變、GI2V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變和Q61H突變蛋白)及KRAS野生擴增的細胞系中能夠強效抑制細胞增殖，從而在預防、遏制和/或治療相關腫瘤疾病方面具有潛在的、作為抗增殖、促凋亡和/或抗侵襲藥物的價值。特別地，預期本發明化合物可用於預防或治療那些RAS蛋白，尤其KRAS突變蛋白(例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變和Q61H突變蛋白)或KRAS野生擴增介導的或得益於RAS突變，尤其KRAS突變蛋白(例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變和Q61H突變)或KRAS野生擴增抑制的疾病或病症，例如本文所定義的癌症或腫瘤。
具體地，經研究發現，本發明的化合物能夠實現以下一種或多種技術效果：
‧高的突變蛋白抑制活性：本發明的化合物、尤其是本文上下文具體示例的化合物，在RAS相關細胞，特別是KRAS突變細胞(例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變和Q61H突變)及KRAS擴增細胞增殖抑制實驗中顯示出增殖抑制活性，IC50值在0.001nM-10μM範圍內，例如0.001nM-1μM，0.01nM-0.5μM，0.01nM-0.1μM，0.01nM-0.05μM範圍內，如活性實施例1、2、5、6、8所示；
‧具有良好的藥物代謝動力學性質，例如具有較長的t1/2，從而例如可以加大給藥間隔，更長的半衰期，使患者具有更好的依從性；具有安全性/活性綜合效應最佳的AUC0-t數據，具有更好的成藥性，更高的生物利用度，可以實現口服方便給藥，如活性實施例3所驗證；和/或
‧具有明顯令人滿意的安全性，藥物相互作用的風險降低，對於藥物代謝關鍵CYP亞型沒有顯著抑制作用，如活性實施例4所驗證。
‧口服給藥具有良好的腫瘤抑制效果，如活性實施例7或9所驗證。
基於以上本發明化合物的有益效果，本發明還提供以下各個方面的技術方案。
用於治療或用作藥物的本發明化合物
一方面，本發明提供了本發明化合物、較佳其藥學上可接受的鹽或溶劑合物，用作藥物。
另一方面，本發明提供了本發明化合物、較佳其藥學上可接受的鹽或溶劑合物用作RAS抑制劑，特別是KRAS突變蛋白(例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變、G12C-Q99L、G12C-R68M、G12C-Y96S、G12C-95H、G12C-A59S和Q61H突變或它們的組合)及KRAS野生擴增型細胞抑制劑。
另一方面，本發明提供本發明化合物、較佳其藥學上可接受的鹽或溶劑合物，用於治療和/或預防RAS蛋白、具體地KRAS突變蛋白(例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變和Q61H突變蛋白)及KRAS擴增介導的或得益於RAS突變、具體地KRAS突變蛋白(例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變和Q61H突變蛋白)及KRAS擴增抑制的疾病或病症。
在具體的實施方式中，本發明提供用於治療和/或預防RAS蛋白、具體地KRAS突變蛋白(例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變和Q61H突變蛋白)及KRAS擴增對該疾病的發生和發展起到促進作用或抑制RAS突變蛋白、具體地KRAS突變蛋白(例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變和Q61H突變蛋白)及KRAS擴增將降低疾病的發生率、減少或消除疾病病狀的疾病的本發明化合物，該疾病例如腫瘤或癌症，包括但不限於：肺癌、肺腺癌、骨癌、胰腺癌、皮膚癌、頭頸癌、皮膚或眼內黑色素瘤、子宮癌、卵巢癌、直腸癌、肛門區域癌、胃癌、結腸癌、乳腺癌、輸卵管癌、子宮內膜癌、子宮頸癌、陰道 癌、外陰癌、霍奇金病、食道癌、小腸癌、內分泌系統癌、甲狀腺癌、甲狀旁腺癌、腎上腺癌、軟組織肉瘤、尿道癌、陰莖癌、前列腺癌、慢性或急性白血病、淋巴細胞性淋巴瘤、膀胱癌、腎臟或輸尿管癌、腎細胞癌、腎盂癌、中樞神經系統腫瘤(CNS)、原發性CNS淋巴瘤、脊柱腫瘤、腦幹神經膠質瘤或垂體腺瘤。
本發明尤其提供可用於治療患有胰腺癌、結腸癌、直腸癌、肺腺癌、肺癌、膽管癌、子宮內膜癌、卵巢癌、白血病；最佳選自胰腺癌、結腸癌、直腸癌、肺腺癌、膽管癌的患者的式(I)化合物或其異構體、它們藥學上可接受的鹽或溶劑合物。
醫藥組成物及其施用
另一方面，本發明提供醫藥組成物，其包含以上定義的式(I)化合物、較佳其藥學上可接受的鹽或溶劑合物，以及可藥用載體或賦形劑。本發明的醫藥組成物可用於治療或預防由RAS、尤其KRAS突變介導的疾病，例如KRAS G12C、KRAS G12D、KRAS G12V、G12A、G12R、G12S或KRAS G13D突變、或KRAS Q61H突變、及KRAS擴增介導的疾病，例如腫瘤或癌症。
上述本發明醫藥組成物，可以藉由所屬技術領域中具有通常知識者已知的技術來配製，如在Remington’s Pharmaceutical Sciences第20版中揭露的技術。例如，可配製為片劑、粉末、膠囊、錠劑、顆粒、溶液、分散劑、混懸劑、糖漿、噴霧、栓劑、凝膠、乳劑、貼劑等。該組成物可含有藥物製劑中的常規組分，例如稀釋劑(例如葡萄糖、乳糖或甘露醇)、載體、pH調節劑、緩衝劑、甜味劑、填充劑、穩定劑、表面活性劑、潤濕 劑、潤滑劑、乳化劑、懸浮劑、防腐劑、抗氧化劑、遮光劑、助流劑、加工助劑、著色劑、加香劑、調味劑、其它已知添加劑以及其它活性劑。合適的載體和賦形劑為所屬技術領域中具有通常知識者熟知並詳述於例如Ansel,Howard C.，等，Ansel’s Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems.Philadelphia：Lippincott,Williams & Wilkins,2004中。
本發明醫藥組成物的給藥和施用均符合良好的醫學實踐。在此背景下需要考慮的因素包括所治療特定障礙、所治療的特定哺乳動物、個體患者的臨床情況、障礙的起因、藥劑遞送位置、施用方法、施用安排以及醫生從業者熟知的其它因素。本發明化合物或醫藥組成物的最佳劑量水平和給藥頻率可由所屬技術領域中具有通常知識者藉由藥學研究領域的標準試驗確定。
本發明的組成物可採取任意合適方式施用，包括口服、局部(包括頰和舌下)、直腸、陰道、透皮、胃腸外、皮下、腹膜內、肺內、皮內、鞘內、吸入和硬膜外和鼻內，和如需局部治療，也可採取病灶內施用。胃腸外輸注包括肌肉、靜脈內、動脈內、腹膜內或皮下施用。在一些實施方案中，本發明的醫藥組成物藉由口服施用。
對於70kg的人類對象，本發明化合物的適合的劑量範圍可由所屬技術領域中具有通常知識者常規確定，例如可以為1-1000mg/天。
當本文描述藥物或其藥學上可接受的鹽的劑量時，應理解，該劑量基於游離鹼的重量，不包括其任何水合物或溶劑化物，除非說明書中指出該劑量基於鹽、水合物或溶劑合物的重量。
治療方法和用途
如上所述，本發明的化合物及其各種具體實施方案的化合物、尤其是實施例中具體製備和表徵的化合物，顯示出對RAS、尤其是KRAS突變、例如KRAS G12C、KRAS G12D、KRAS G12V、G12A、G12R、G12S或KRAS G13D突變、或KRAS Q61H，及KRAS擴增型細胞的抑制作用。
因此，另一方面，本發明提供了一種抑制細胞中RAS、尤其是KRAS突變、較佳KRAS G12D突變的方法，包括使細胞與本發明的化合物、較佳其藥學上可接受的鹽或溶劑合物相接觸以抑制細胞中RAS突變、尤其是KRAS突變(例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變和Q61H突變)及KRAS擴增的活性。
基於同樣的性質，本發明還相應地提供一種抑制哺乳動物中異常細胞生長的方法，包括給該哺乳動物施用治療有效量的本發明的化合物、較佳其藥學上可接受的鹽或溶劑合物、或包含本發明的化合物、較佳其藥學上可接受的鹽或溶劑合物的醫藥組成物。
另一方面，本發明提供了用於治療和/或預防由RAS、尤其是KRAS突變(例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變和Q61H突變)及KRAS擴增介導的疾病的方法，包括向有需要的對象施用治療有效量的本發明化合物、較佳其藥學上可接受的鹽或溶劑合物、或包含本發明化合物較佳藥學上可接受的鹽或溶劑合物的醫藥組成物。
另一方面，本發明提供了本發明的化合物、較佳其藥學上可接受的鹽或溶劑合物、或包含本發明的化合物、較佳其藥學上可接受的鹽或溶劑合物的醫藥組成物的用途，用於抑制細胞中RAS、尤其是KRAS突變、較佳KRAS G12C、KRAS G12D、KRAS G12V、KRASG12A、KRASG12R、KRASG12S或KRAS G13D、或KRAS Q61H突變，及KRAS擴增介導的疾病。
另一方面，本發明提供了本發明的化合物、較佳其藥學上可接受的鹽或溶劑合物、或包含本發明的化合物、較佳其藥學上可接受的鹽或溶劑合物的醫藥組成物在製備用於治療和/或預防由RAS、尤其是KRAS突變(例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變和Q61H突變)及KRAS擴增介導的疾病的藥物中的用途。
對上述本發明提供的各個方法和用途技術方案而言，該異常細胞生長或由RAS、尤其KRAS突變、較佳KRAS G12C、KRAS G12D、KRAS G12V、KRASG12A、KRASG12R、KRASG12S或KRAS G13D、或KRAS Q61H突變，及KRAS擴增介導的疾病尤其指的是癌症或腫瘤。示例性的該癌症或腫瘤包括但不限於肺癌、肺腺癌、骨癌、胰腺癌、皮膚癌、頭頸癌、皮膚或眼內黑色素瘤、子宮癌、卵巢癌、直腸癌、肛門區域癌、胃癌、結腸癌、乳腺癌、輸卵管癌、子宮內膜癌、子宮頸癌、陰道癌、外陰癌、霍奇金病、食道癌、小腸癌、內分泌系統癌、甲狀腺癌、甲狀旁腺癌、腎上腺癌、軟組織肉瘤、尿道癌、陰莖癌、前列腺癌、慢性或急性白血病、淋巴細胞性淋巴瘤、膀胱癌、腎臟或輸尿管癌、腎細胞癌、腎盂 癌、中樞神經系統腫瘤(CNS)、原發性CNS淋巴瘤、脊柱腫瘤、腦幹神經膠質瘤或垂體腺瘤。
對上述本發明提供的各個方法和用途技術方案而言，該異常細胞生長或由RAS、尤其KRAS突變(例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變和Q61H突變)及KRAS擴增介導的疾病較佳選自胰腺癌、結腸癌、直腸癌、肺腺癌、肺癌、膽管癌、子宮內膜癌、卵巢癌、白血病；最佳選自胰腺癌、結腸癌、直腸癌、肺腺癌、膽管癌。
因此，在該方面的較佳實施方案中，本發明提供了用於藉由抑制RAS突變或擴增而治療或預防癌症或腫瘤的上述各項方法和用途技術方案。在更進一步佳的實施方案中，本發明提供了藉由抑制RAS突變或擴增而治療或預防胰腺癌、結腸癌、直腸癌、肺腺癌和膽管癌的上述各項方法和用途技術方案。
本發明還提供了本發明的化合物、較佳其藥學上可接受的鹽或溶劑合物在研究中作為RAS抑制劑，尤其KRAS抑制劑(例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變、Q61H突變及KRAS擴增抑制劑)的研究工具化合物的用途。因此，本發明涉及本發明化合物、較佳其藥學上可接受的鹽或溶劑合物作為RAS抑制劑的體外用途，特別地涉及本發明化合物、較佳其藥學上可接受的鹽或溶劑合物作為RAS抑制劑起效的研究工具化合物的體外用途。本發明同樣涉及抑制RAS，尤其KRAS(例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變、Q61H突變及KRAS 擴增)的方法，特別是體外方法，該方法包括將本發明的化合物、較佳其藥學上可接受的鹽或溶劑合物施用於樣品(例如生物樣品)。。應理解，術語“體外”在該特定上下文中以“活的人體或動物體外”的含義使用，其具體包括用細胞、細胞或亞細胞提取物和/或人工環境中的生物分子進行的實驗，例如可以在燒瓶、試管、培養皿、微量滴定板等中提供的水溶液或培養基。
藥物組合
本發明的化合物可以作為唯一的活性成分進行施用，也可以與另外的藥物或療法組合進行施用。
因此，另一方面，本發明提供了藥物組合，其包含本發明的化合物、較佳其藥學上可接受的鹽或溶劑合物以及其他活性劑，或由二者組成。該藥物組合用於抑制哺乳動物中異常細胞生長，或用於治療和/或預防由RAS、較佳KRAS突變(例如G12C突變、G12D突變、G12V突變、G12A突變、G12R突變、G12S突變、G13D突變和Q61H突變)及KRAS擴增介導的疾病。
該其他活性劑可以是一種或多種另外的本發明化合物，或可以是與本發明化合物相容即不會相互不利影響、或具有互補活性的第二種或另外的(例如第三種)化合物，例如這些活性劑可以是已知調節其他生物活性通路的化合物，或者可以是調節本發明化合物所涉及生物活性通路中的不同組分的化合物，或甚至是與本發明化合物的生物靶點相重疊的化合物。
在一個具體的實施方案中，可以與本發明化合物組合使用的其他活性劑包括但不限於化療劑、治療性抗體和放療，例如烷化劑、抗代 謝物、細胞週期抑制劑、有絲分裂抑制劑、拓撲異構酶抑制劑、抗激素類藥物、血管生成抑制劑、細胞毒性劑。
與本發明組合使用的其他活性劑可以與本發明的化合物藉由相同或不同的施用途徑同時、分別或依次地進行施用。該其他活性劑可以與本發明化合物在單一醫藥組成物中共同施用，或與本發明化合物處於不同的離散單員中分別施用，例如組合產品，較佳為藥盒形式，當分別施用時可以同時或相繼進行，該相繼施用在時間上可以是接近或隔遠的。它們可以由相同或不同的製造商製備和/或配製。而且，本發明的化合物和其他活性劑可以(i)在將組合產品發送給醫師之前(例如在包含本發明的化合物和另外的藥物的藥盒的情形中)；(ii)在臨施用前由醫師自身(或在醫師指導下)；(iii)由患者自身、例如在本發明的化合物和其他活性劑的依次施用期間一起加入組合治療中。
本發明的化合物還可以與抗腫瘤療法組合，該抗腫瘤療法包括但不限於手術、輻射治療、移植(例如幹細胞移植、骨髓移植)、腫瘤免疫療法和化療等。
因此，另一方面，本發明還提供了藥盒，其包含兩種或多種單獨的醫藥組成物，其中至少一種包含本發明的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物，以及分別容納該組成物的裝置，如容器、分裝瓶或分立的箔包裝，例如用於包裝片劑、膠囊等的泡罩包裝，還包括使用說明書。本發明的藥盒特別適用於施用不同的劑型，如口服劑型和胃腸外劑型，或者適合於以不同的劑量間隔施用不同的組成物。
對於上述本發明的醫藥組成物、藥物組合或藥盒的技術方案而言，其中所涉及的異常細胞生長或由RAS、尤其KRAS突變、較佳KRAS G12C、KRAS G12D、KRAS G12V、KRAS G12A、KRAS G12R、KRAS G12S或KRAS G13D、或KRAS Q61H突變，及KRAS擴增介導的疾病如上文對於本發明方法和用途所定義。
對於上述本發明化合物、醫藥組成物、方法、用途、藥物組合及藥盒而言，較佳本文實施例的化合物。
本發明化合物的製備方法
另一方面，本發明還提供了本發明所定義化合物的製備方法。
本發明的化合物可以藉由多種方法、包括下文給出的通用方法、實施例中揭露的方法或與之類似的方法製備。
用於製備有機化合物和官能團轉化和操作的標準合成方法和操作是本領域已知的並且可以在標準教科書中找到，例如Smith M.B.,“March’s Advanced Organic Chemistry：Reactions,Mechanisms,and Structure”，第7版，Wiley,2013)。對於各通用合成方案的各個反應步驟而言，適當的反應條件是所屬技術領域中具有通常知識者已知的或可以常規確定的。用於合成本發明化合物的方法步驟可以在本身已知的反應條件(包括具體提及的那些條件)下、在不存在或通常在存在溶劑或稀釋劑(包括例如對所用試劑而言是惰性的且可溶解所用試劑的溶劑或稀釋劑)的情況下、在不存在或存在催化劑、縮合劑或中和劑(例如離子交換劑，如陽離子交換劑，例如H+形式)的情況下、根據反應和/或反應物的性質在降低的、正常的或升高的溫度(例如約-100℃至約190℃，包括例如約-78℃至約150℃， 例如約0℃至約125℃、室溫、-20至40℃或回流溫度)下、在大氣壓力下或在密閉容器中、當適宜時在加壓下、和/或在惰性氣氛例如氬氣或氮氣氣氛下進行。
如果沒有特別說明，在製備化合物中使用的原料和試劑是商購可獲得的，或文獻中已知的化合物，或者可以藉由下文的方法、與下文給出的方法類似的方法或本領域已知的標準方法由所屬技術領域中具有通常知識者製得。除非在方法描述中另有說明，否則可以適用的溶劑是所屬技術領域中具有通常知識者熟知的適用於所涉及具體反應類型的那些常規溶劑，例如水、酯類、醚類、液體芳族烴類、醇類、腈類、鹵化烴類、醯胺類、鹼類、羧酸酐類、環狀、直鏈或支鏈烴類，或這些溶劑的混合物。該類溶劑混合物也可用於後處理，例如藉由色譜法或分配進行的後處理。
如果需要，合成反應流程中的原料和中間體可以採用常規技術進行分離和純化，該技術包括但不限於過濾、蒸餾、結晶、色譜法等。如果中間體和終產物以固體形式獲得，則純化也可以藉由再結晶或陳化來進行。該材料可以採用包括物理常數和波譜數據在內的常規方法表徵。反應混合物以常規方式後處理，例如藉由與水混合，分離各相，並在適當時藉由色譜法純化粗產物來進行。
所屬技術領域中具有通常知識者能認識到本發明化合物中是否存在立體中心。在反應的所有階段，所形成的異構體的混合物可被分離成單個異構體，例如非對映異構體或對映異構體，或者分離成任何所需的異構體混合物，例如外消旋物或非對映異構體的混合物，參見例如E.L. Eliel,S.H.Wilen和L.N.Mander的“Stereochemistry of Organic Compounds”(Wiley-Interscience,1994)。
在製備本發明化合物的過程中產生立體異構體混合物的情況下，本發明化合物的單個立體異構體可以藉由拆分獲得，例如，藉由從作為立體異構體混合物獲得的本發明化合物開始，使用種所周知的方法，例如形成非對映體對，藉由與旋光酸成鹽，然後分級結晶和再生游離鹼，或藉由手性製備型色譜法；或者，可以使用具有既定立體化學的原料或中間體、或者可以使用任何已知的手性拆分方法獲得光學純的或對映體富集的合成中間體，然後可以在上述合成過程的各個階段將其原樣用於後續步驟。
在某些特定情況下，可能有必要使用適當的保護基團保護特定的反應基團，以避免干擾其他反應性基團的反應。適合的保護基和採用這樣的適合保護基進行保護和脫保護的方法是所屬技術領域中具有通常知識者眾所周知的；其實例可以見於T.Greene和P.Wuts,Protective Groups in Organic Synthesis(第3版),John Wiley & Sons,NY(1999)中。
下文僅舉例說明合成本發明化合物的通用合成方案。本領域具有通常知識者已知的其他路線以及其他反應物和中間體也可以用於得到本發明的化合物。
為了清楚起見，在以下所述的示例性合成方案中，如無特別說明，各個中間體化合物結構式中出現的R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、X、Y、Z、n、m和t如上文對本發明化合物所定義，其中PG代表可由所屬技術領域中具有通常知識者基於有機化學知識確定的適合保護基。
合成方案A
本發明化合物的合成可以根據以下方案或其適當的變體製備。如無特殊說明，各個基團定義如上文所述。
化合物1商購可得、可以根據文獻報導已知方法獲得、或可以按照本文實施例所使用的方法或與其類似的方法得到，其中Hal表示鹵素原子，如Cl、Br、或I。在步驟A中，化合物1藉由芳香親核取代反應引入片段B-(R1)t，得到化合物2。典型的芳香親核取代條件為本領域熟知，例如DIEA/THF等。在步驟B中，化合物2藉由鹵素交換反應、在例如KF/DMSO等條件下進行氟取代，得到化合物3。在步驟C中，化合物3藉由金屬催化的偶聯反應引入苯并噻吩或苯并噻唑類片段，得到化合物4。典型的金屬催化偶聯反應如Suzuki-Miyaura偶聯反應，典型條件例如Ruphos Pd G4/K3PO4/二噁烷/水等。在步驟D中，化合物4藉由芳香親核取代反應，引入哌啶衍生物片段得到化合物5。後者在步驟E中脫除可能帶有的保護基得到通式為I的化合物。
合成方案B
本發明部分(Z=C-CN)化合物的合成還可以根據以下方案或其適當的變體製備。如無特殊說明，各個基團定義如上文所述。
在步驟A中，化合物3經金屬催化偶聯反應引入苯并噻吩類片段得到化合物4-1。在步驟B中化合物4-1與NIS發生碘取代反應生成化合物4-2。在步驟C中，化合物4-2發生金屬催化的氰基化反應得到化合物4-3，典型的氰基化條件如Zn(CN)2/Pd(PPh3)4等。在步驟D中，化合物4-3藉由芳香親核取代反應，引入哌啶衍生物片段得到化合物5-1。後者在步驟E中脫除可能帶有的保護基得到通式為I(Z=C-CN)的化合物。
合成方案C
本發明通式II化合物的合成可以根據以下方案或其適當的變體製備。如無特殊說明，各個基團定義如上文所述。
中間體6可以參照本發明實施例部分中間體的合成進行製備。在步驟A中，中間體6在例如草醯氯/DMF/DCM等條件下進行氯化反應，得到中間體7。在步驟B中，中間體7藉由芳香親核取代反應，在例如DIPEA/DMF等條件下進行取代反應，得到化合8。在步驟C中，化合物8藉由氧化反應，在例如單過氧鄰苯二甲酸鎂六水合物/DCM/水等條件下進行反應，得到化合物9。化合物9根據反應條件可以是碸或者亞碸，或者二者的混合物。在步驟D中，化合物9藉由芳香親核取代反應，在例如tBuONa/THF等條件下進行反應，得到化合物10。在步驟E的化合物10使用適當反應條件脫除保護基，得到通式為II的化合物。需要說明的是，最終得到通式II的化合物可以藉由Pre-HPLC或者SFC拆分非對映異構體得到手性單一的通式II化合物；也可以將中間體6藉由SFC手性拆分得到軸手性單一的中間體6A，後者根據上述方案得到手性單一的通式II化合物。
需要說明的是，本發明所涉及的典型的金屬催化偶聯反應為本領域眾所周知的，例如但不限於Suzuki-Miyaura偶聯，Negishi偶聯，Stille偶聯等。適合的催化劑例如XantPhos Pd G2、cataCXium® A Pd G3、氯化雙(三苯膦)鈀(II)、Pd(dppf)Cl2、Pd2dba3、四苯膦鈀和乙酸鈀(II)等；如果需要，適合的配體可以包括三環己膦和三苯膦等；適合的鹼還包括氟化鉀、碳酸銫、碳酸鈉、三級丁醇鉀和磷酸鉀一水合物等。
需要說明的是，步驟E中保護基的脫除，可以根據分子所攜帶的保護基進行調整，可以是一步反應，也可以是多步反應。
合成實施例
以下結合實施例對本發明作進一步的說明。需要說明的是，下述實施例是示例性的，不應視為對本發明保護範圍的限制。
本文在對實施方案和隨後的具體實施例的描述中，使用了以下縮寫：
ACN(乙腈)；Boc(三級丁氧基羰基)；CDCl3(氘代氯仿)；CSI(氯磺醯異氰酸酯)；DCM(二氯甲烷)；DephosPdCl2或DPEphosPdCl2(雙(二苯基膦苯基醚)二氯化鈀(II))；DIEA或者DIPEA(N,N-二異丙基乙胺)；DMF(N,N-二甲基甲醯胺)；DMSO(二甲亞碸)；DMSO-d 6 (六氘代二甲亞碸)；EA或EtOAc(乙酸乙酯)；EDTA-K2(乙二胺四乙酸二鉀鹽)；EtOH(乙醇)；FCC(快速管柱層析)；g(克)；h(小時)；HCl(氯化氫)；HCl-MeOH或者HCl/MeOH(氯化氫甲醇溶液)；HLM(人肝微粒體)；H2O(水)；H2SO4(硫酸)；IV(靜脈給藥)；K2CO3(碳酸鉀)；LCMS(液質連線)；LC-MS/MS(液譜-質譜-質譜連線)；MeOH(甲醇)；Methanol-d 4 (四氘代甲醇)；mg(毫克)；MHz(兆赫茲)；min(分鐘)；mL(毫升)；mmol(毫莫耳)；MMPP(單過氧鄰苯二甲酸鎂六水合物)；MOM(甲氧基甲基醚)；MTBE(甲基三級丁基醚)；m/z(質荷比)；N2(氮氣)；NaCl(氯化鈉)；NaH(氫化鈉)；NaHCO3(碳酸氫鈉)；Na2SO3(亞硫酸鈉)；Na2SO4(硫酸鈉)；NCS(氯丁二醯亞胺)；NH4Cl(氯化銨)；nM(鈉莫耳濃度)；NMR(核磁共振)；PdCl2(dtbpf)或者Pd(dtbpf)Cl2(1,1'-二(二三級丁基膦)二茂鐵二氯化鈀)；PdCl2(dppf)或者Pd(dppf)Cl2(1,1'-雙二苯基膦二茂鐵二氯化鈀)；Pd(OAc)(醋酸鈀)；Pd(PPh3)4(四三苯基膦鈀)；PE(石油醚)；PO(口服給藥)；POCl3(三氯氧磷)；r.t.(室溫)；Selectfluor(1-氯甲基-4-氟-1,4-重氮化雙環[2.2.2]辛烷二(四氟 硼酸鹽))；SiO2(矽膠)；TCDI(N,N'-硫羰基二咪唑)；TEA(三乙胺)；TFA(三氟乙酸)；THF(四氫呋喃)；TIPS(三異丙基甲矽烷基)；TLC(薄層色譜)；TsOH(對甲苯磺酸)；TsOH．H2O(對甲苯磺酸一水合物)；μL(微升)；μM(微莫耳濃度)；μmol(微莫耳)。
在如下實施例中，給出了所合成目標化合物的名稱及其結構。名稱與結構之間出現任何偏差並非有意，在這種情況下，結構為決定性的。
下列實施例中未註明具體條件的實驗方法，通常按照這類反應的常規條件，或按照製造廠商所建議的條件。除非另外說明，否則百分比和份數是重量百分比和重量份數。除非另外說明，否則液體的比為體積比。
以下實施例中所用的實驗材料和試劑如無特別說明均可從市售渠道獲得、依據現有技術的方法製得或根據與本揭露揭露的類似的方法製得。
在下列實施例中，1H-NMR譜是用Bruker(400MHz)記錄，化學位移以相對於氘代溶劑峰(CDCl3：δ=7.26ppm；CD3OD：δ=3.31ppm；DMSO-d 6 ：δ=2.50ppm)的δ(ppm)表示；液質聯用是用Aglient 1260液相色譜+Aglient G6125B質譜LCMS液質聯用儀記錄。氣相色譜質譜聯用儀使用Shimadzu GCMS-QP2010SE進行檢測。
中間體A
7-溴-2,4-二氯-8-氟-6-(三氟甲基)喹唑啉
步驟A：2-胺基-4-溴-3-氟苯甲酸甲酯
在0℃條件下，將SOCl2(156mL,210mmol)加入到2-胺基-4-溴-3-氟苯甲酸(50g,214mmol)和甲醇(300mL)的混合液中。將反應體系升溫至100℃攪拌16h。TLC監測反應結束，將反應液恢復至室溫，減壓濃縮後加入EA(1L)稀釋，加入飽和NaHCO3水溶液(500mL)洗滌，收集的有機相用無水Na2SO4乾燥，過濾，有機液濃縮後用FCC(SiO2，EA/PE=0-20%)純化，得到白色固體2-胺基-4-溴-3-氟苯甲酸甲酯(40g)。LCMS(m/z)：249.9(M+H)。
步驟B：2-胺基-4-溴-3-氟-5-(三氟甲基)苯甲酸甲酯
室溫條件下，將1-(三氟甲基)-1,2-苯碘醯-3(1H)-酮(19g,60mmol)加入到2-胺基-4-溴-3-氟苯甲酸甲酯(5g,20mmol)和CAN(20mL)的混合溶液中，置換N2三次後升溫至100℃反應72h。LCMS監測反應結束後，將反應液恢復至室溫，濃縮後加入EA(100mL)稀釋，水(50mL×2)洗滌，收集的有機相用無水Na2SO4乾燥，過濾，有機液濃縮後 用FCC(SiO2，EA/PE=0-10%)純化，得到淡黃色固體2-胺基-4-溴-3-氟-5-(三氟甲基)苯甲酸甲酯(1.2g)。LCMS(m/z)：317.1(M+H)。
步驟C：4-溴-3-氟-2-(3-(2,2,2-三氯乙醯基)脲)-5-(三氟甲基)苯甲酸甲酯
室溫條件下，將2,2,2-三氯乙醯異氰酸酯(0.7mL,5.7mmol)加入到2-胺基-4-溴-3-氟-5-(三氟甲基)苯甲酸甲酯(1.2g,3.8mmol)和THF(10mL)的混合溶液中。將反應體系在室溫下攪拌0.5h。TLC監測反應結束，將反應液直接濃縮後，得到白色固體4-溴-3-氟-2-(3-(2,2,2-三氯乙醯基)脲)-5-(三氟甲基)苯甲酸甲酯(1.6g)，直接用作下一步反應。
步驟D：7-溴-8-氟-6-(三氟甲基)喹唑啉-2,4-二醇
室溫條件下，將胺甲醇溶液(7M,20mL)加入到4-溴-3-氟-2-(3-(2,2,2-三氯乙醯基)脲)-5-(三氟甲基)苯甲酸甲酯(1.6g)中，在室溫下攪拌1h，TLC監測反應完全後，將反應液濃縮，得到白色固體7-溴-8-氟-6-(三氟甲基)喹唑啉-2,4-二醇(1.0g)，直接用於下一步反應。LCMS(m/z)：328.8(M+H)。
步驟E：7-溴-2,4-二氯-8-氟-6-(三氟甲基)喹唑啉
在0℃條件下，將DIEA(1.8g,14mmol)加入到7-溴-8-氟-6-(三氟甲基)喹唑啉-2,4-二醇(1.0g,3.0mmol)和POCl3(10mL)的混合液中。反應體系升溫至110℃攪拌2h。LCMS監測反應結束後，將反應液恢復至室溫，濃縮後加入乙腈(0.5mL)稀釋，後將所得混合物滴入水(10mL)中，固體析出，過濾並將濾餅烘乾後得到棕黃色固體7-溴-2,4-二氯-8-氟-6-(三氟甲基)喹唑啉(1.5g)LCMS(m/z)：365.8(M+H)。
中間體B
7-溴-2,4-二氯-6,8-二氟喹唑啉
步驟A：4-溴-3,5-二氟-2-(3-(2,2,2-三氯乙醯基)脲基)苯甲酸甲酯
室溫下，在置有攪拌子的圓底燒瓶中加入2-胺基-4-溴-3,5-二氟苯甲酸甲酯(10g,37.6mmol)和THF(100mL)。室溫攪拌下向體系中滴加2,2,2-三氯乙醯異氰酸酯(8.5g,45.1mmol)。所得混合物室溫攪拌2小時，減壓濃縮，得到棕色固體4-溴-3,5-二氟-2-(3-(2,2,2-三氯乙醯基)脲基)苯甲酸甲酯(粗品)，直接用於下一步。LCMS(ESI,m/z)：452.8(M+H)。
步驟B：7-溴-6,8-二氟喹唑啉-2,4-二醇
室溫下，將上步所得4-溴-3,5-二氟-2-(3-(2,2,2-三氯乙醯基)脲基)苯甲酸甲酯加入置有攪拌子的圓底燒瓶中加入，再加入NH3(100mL,7M MeOH溶液)。將所得混合物在室溫攪拌2小時，LCMS監測反應完全。減壓濃縮，將所得固體用甲基三級丁基醚打漿，過濾，得到淡黃色固體7-溴-6,8-二氟喹唑啉-2,4-二醇(14g，粗品)，無需進一步純化，直接用於下一步。LCMS(ESI,m/z)：277.0(M+H)。
步驟C：7-溴-2,4-二氯-6,8-二氟喹唑啉
在置有攪拌子的圓底燒瓶中加入7-溴-6,8-二氟喹唑啉-2,4-二醇(14g，粗品)、POCl3(112mL)。室溫下攪拌下，向體系中滴加DIEA(28mL)。滴加完畢後，將體系升溫至110℃攪拌反應過夜。將反應液減壓濃縮至約30mL，倒入水(600mL)中，析出沉澱過濾收集，乾燥後，得到黃色固體7-溴-2,4-二氯-6,8-二氟喹唑啉(11g，粗品)，直接用於後續反應。LCMS(ESI,m/z)：312.9(M+H)。
中間體C
7-溴-2,4-二氯-8-氟喹唑啉
步驟A：7-溴-8-氟喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
在室溫條件下，將2-胺基-4-溴-3-氟苯甲酸(10.0g,42.7mmol)和尿素(25.7g,427.3mmol)混合在一起，升溫到200℃，攪拌2h。反應逐漸由固態轉變為液態，然後再繼續轉變為固態，LCMS監測反應結束後，用熱水(250mL)洗滌，過濾收集固體，得到7-溴-8-氟喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(12g，粗品)。LCMS(ESI,m/z)：258.9(M+H)。
步驟B：7-溴-2,4-二氯-8-氟喹唑啉
在室溫條件下，將DIPEA(13.5mL,77.2mmol)加入到7-溴-8-氟喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(4.0g,15.4mmol)和POCl3(35.9mL,386.0mmol)的混合液中，升溫到100℃攪拌5h。LCMS監測反應結束後，濃縮除去大部分溶劑和鹼，加入ACN(10mL)稀釋。室溫攪拌下，將所得稀釋液慢慢滴加到水中，析出固體，過濾，烘乾後，得到黃色固體7-溴-2,4-二氯-8-氟喹唑啉(3.8g，收率83%)。LCMS(ESI,m/z)：296.8(M+H)。
根據上述合成方法製備以下中間體：
中間體F
7-氯-8-氟-2-(甲硫基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇
步驟A：4,6-二氯-5-氟煙醯氯
在室溫攪拌下，將氯化亞碸(2.25mL,31mmol)緩慢加入到4,6-二氯-5-氟煙酸(5.0g,23.4mmol)的DCM(100mL)溶液中，後加入DMF(175mg,2.4mmol)。將所得反應液在50℃下攪拌2h。TLC監測反應完全 後，濃縮，加入少量甲苯帶蒸後，得到黃色固體4,6-二氯-5-氟煙醯氯(4.5g，收率83%)，直接用於後續反應。
步驟B：(4,6-二氯-5-氟煙醯基)胺基甲醯亞胺硫代甲酯
在0℃攪拌下，將4,6-二氯-5-氟煙鹼醯氯(4.5g,19.8mmol)與乙二醇二甲醚(20ml)的混合溶液緩慢滴加入2-甲基異硫脲硫酸(15g,49.5mmol)與1M NaOH水溶液(70ml)的混合溶液中，保持溫度攪拌1h。將析出的固體沉澱物過濾、乾燥，得到產物(4,6-二氯-5-氟煙醯基)胺基甲醯亞胺硫代甲酯(5.0g，收率90%)。LCMS(m/z)：282.1(M+H)。
步驟C：7-氯-8-氟-2-(甲硫基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇
將(4,6-二氯-5-氟煙醯基)胺基甲醯亞胺硫代甲酯(5.0g,17.8mmol)溶於DMF(40mL)中，加熱至120℃攪拌反應3h。LCMS監測反應完全後，冷至室溫，加入水(200mL)。將析出的固體過濾、乾燥，得到產物7-氯-8-氟-2-(甲硫基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇(3.6g，收率82%)。LCMS(m/z)：245.6(M+H)。
中間體G
7-氯-8-氟-5-甲氧基-2-(甲硫基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇
步驟A：2,6-二氯-3-氟吡啶-4-胺
在室溫下，將Selectfluor(68g,180mmol)加入到2,6-二氯吡啶-4-胺(25g,154mmol)的甲醇/水(V/V=5：1,300mL)溶液中。所得混合物在50℃下攪拌48h，減壓濃縮，乙酸乙酯稀釋，依次用水和飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥。過濾濃縮，所得粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-10%)純化，得到白色固體2,6-二氯-3-氟吡啶-4-胺(10g)。LCMS(m/z)：180.9(M+H)。
步驟B：(三級丁氧基羰基)(2,6-二氯-3-氟吡啶-4-基)胺基甲酸三級丁基酯
室溫攪拌下，將4-二甲胺基吡啶(307mg,2.75mmol)、二碳酸二三級丁酯(30g,138mmol)加入到2,6-二氯-3-氟吡啶-4-胺(10g,55mmol)的四氫呋喃(100mL)溶液中。所得混合物加熱至60℃攪拌16h，TLC監測反應完成，濃縮，得粗品，經甲醇打漿，得到白色固體(三級丁氧基羰基)(2,6-二氯-3-氟吡啶-4-基)胺基甲酸三級丁基酯(16g)。LCMS(m/z)：381.2(M+H)。
步驟C：4-((三級丁氧基羰基)胺基)-2,6-二氯-5-氟煙酸三級丁酯
乾冰乙醇浴下，將LDA(2.0M，63mL，126mmol)緩慢加入到(三級丁氧基羰基)(2,6-二氯-3-氟吡啶-4-基)胺基甲酸三級丁基酯(16g,42mmol)的THF(200mL)溶液中，所得混合物保持溫度攪拌1h。TLC監測反應完成，加入適量醋酸淬滅反應，用EA稀釋，水洗，無水硫酸鈉乾燥。過濾，濃縮後所得粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-20%)純化，得到4-((三級丁氧基羰基)胺基)-2,6-二氯-5-氟煙酸三級丁酯(13g)。
步驟D：4-胺基-2,6-二氯-5-氟煙酸．鹽酸鹽
室溫條件下將濃鹽酸(30ml)加入到4-((三級丁氧基羰基)胺基)-2,6-二氯-5-氟煙酸三級丁酯(13g,34mmol)的二噁烷(90mL)溶液中。所得混合物在室溫下攪拌3h。LCMS監測反應完成後，濃縮得到4-胺基-2,6-二氯-5-氟煙酸．鹽酸鹽(8g)。LCMS(m/z)：224.9(M+H)。
步驟E：5,7-二氯-8-氟-2-巰基吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇
將4-胺基-2,6-二氯-5-氟煙酸(8g,30.8mmol)與氯化亞碸(200mL)的混合溶液在50℃下攪拌3h。然後濃縮，將殘留物溶解在丙酮中(50mL)得到溶液1。在室溫下將硫氰酸銨(7g,92mmol)與丙酮溶液(160mL)的混合溶液滴入溶液1中，所得反應液在室溫下繼續攪拌1h。LCMS監測反應完成後，將反應液倒入水中，過濾，濾餅乾燥後，得到5,7-二氯-8-氟-2-巰基吡啶并[4,3-d]嘧啶-4(3H)-酮(5g)。LCMS(m/z)：265.9(M+H)。
步驟F：5,7-二氯-8-氟-2-(甲硫基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇
在室溫下，將5,7-二氯-8-氟-2-巰基吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇(5g,18.8mmol)、甲醇(380mL)、氫氧化鈉水溶液(0.1M,380mL,380mmol)及碘甲烷(5.3g,380mmol)的混合溶液攪拌2h。LCMS監測反應完成後，將 反應液倒入1000ml水中，用濃鹽酸酸化至pH~6。將溶液過濾，濾餅乾燥後，得到產物5,7-二氯-8-氟-2-(甲硫基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇(4g)。LCMS(m/z)：279.9(M+H)。
步驟G：7-氯-8-氟-5-甲氧基-2-(甲硫基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇
將5,7-二氯-8-氟-2-(甲硫基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇(6.0g,22mmol)、甲醇鈉(10.3g,330mmol)、DMA(100mL)與甲醇(10mL)的混合物在50℃攪拌16h。LCMS監測反應完成後，加水稀釋，用濃鹽酸調節到pH~3，過濾，收集濾餅，乾燥後，得產品7-氯-8-氟-5-甲氧基-2-(甲硫基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇(5.5g)。LCMS(m/z)：276.0(M+H)。
中間體H
5-溴-7-氯-8-氟-2-(甲硫基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇
步驟A：2-氯-3-氟-5-碘吡啶-4-胺
室溫條件下，將2-氯-3-氟-4-胺基吡啶(25.0g,171mmol)溶解到250mL乙腈中。然後把NIS(35.4g,205mmol)和對甲苯磺酸一水合物(3.24g,17.1mmol)分別加入上面體系中。所得混合物加熱到70℃，攪拌反應過夜。LCMS監測反應結束，冷卻到室溫，將反應液倒入水(500mL)中淬 滅，乙酸乙酯萃取(800mL×3)。合併有機相，分別用飽和NaHCO3水洗，飽和Na2S2O3水洗，食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到的粗產品經FCC(SiO2，EA/PE=0-50%)純化，得到白色固體2-氯-3-氟-5-碘吡啶-4-胺(42g，收率90%)。LCMS(m/z)：272.9(M+H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.10(s,1H),6.69(s,2H)。19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ-138.90。
步驟B：4-胺基-6-氯-5-氟煙酸乙酯
室溫條件下，將2-氯-3-氟-5-碘吡啶-4-胺(40g,147mmol)溶解到400mL無水乙醇中。用CO置換體系，反復三次。後將Pd(PPh3)2Cl2(10.3g,14.7mmol)和TEA(95.0g,735mmol)加入反應瓶中，置換CO氣體三次。所得混合物在CO氣體氛圍中，加熱到80℃反應過夜。LCMS監測反應結束，冷卻到室溫，將反應液用矽藻土過濾。濾液濃縮至乾，得到得粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-50%)純化，得到白色固體4-胺基-6-氯-5-氟煙酸乙酯(30g，收率93%)。LCMS(m/z)：219.0(M+H)。
步驟C：4-(雙(三級丁氧基羰基)胺基)-6-氯-5-氟煙酸乙酯
室溫攪拌下，將Boc2O(65.9g,302mmol)滴加到4-胺基-6-氯-5-氟煙酸乙酯(30.0g,137mmol)和DMAP(3.4g,27.5mmol)的無水二氯甲烷(600mL)溶液中。滴加完成後加熱到45℃反應過夜。向體系中加入咪唑(9.33g,137mmol)，攪拌半小時後，加入飽和氯化銨溶液洗滌(300mL×3)，分液，有機相再用飽和食鹽水(300mL×2)洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮至乾，得得到黃色固體4-(雙(三級丁氧基羰基)胺基)-6-氯-5-氟煙酸乙酯(45.9g，收率80%)。LCMS(m/z)：419.1(M+H)。
步驟D：4-(雙(三級丁氧基羰基)胺基)-2-溴-6-氯-5-氟煙酸乙酯
將4-(雙(三級丁氧基羰基)胺基)-6-氯-5-氟煙酸乙酯(45.0g,107mmol)的無水THF(450mL)溶液用乾冰乙腈浴冷卻到-40℃。此溫度下攪拌滴加TMPMgCl-LiCl的THF溶液(161mL,161mmol,1M)。加畢後，保持此溫度繼續攪拌4h，再滴加二溴四氯乙烷(42.0g，129mmol)的THF(100mL)溶液。在-40℃下繼續攪拌4h。加入500mL飽和氯化銨溶液淬滅，再用EtOAc萃取(500mL×3)。合併有機相，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮，得到的粗產品經FCC(SiO2，EA/DCM=0-50%)純化，得到白色固體4-(雙(三級丁氧基羰基)胺基)-2-溴-6-氯-5-氟煙酸乙酯(17.0g，收率32%)。LCMS(m/z)：497.0(M+H)。
步驟E：4-胺基-2-溴-6-氯-5-氟煙酸乙酯‧HCl
室溫條件下，將4-(雙(三級丁氧基羰基)胺基)-2-溴-6-氯-5-氟煙酸乙酯(28.0g,56.3mmol)溶解到4M鹽酸-二噁烷(500mL)中。室溫下攪拌1h，LCMS監測反應完成，體系濃縮乾，得到粗產品白色固體4-胺基-2-溴-6-氯-5-氟煙酸乙酯‧HCl(19.1g，粗品)。LCMS(m/z)：296.9(M+H)。
步驟F：4-胺基-2-溴-6-氯-5-氟煙酸
室溫條件下，將1N NaOH(45.0mL,45.0mmol)加入到4-胺基-2-溴-6-氯-5-氟煙酸乙酯‧HCl(5.00g,15.0mmol)的MeOH/THF(V：V=1：1,100mL)溶液中。所得混合物室溫下攪拌1h，TLC監測反應結束，將反應液濃縮除去有機溶劑，殘留物用1M HCl調pH=5-6，用EA萃取(80mL×3)。合併有機相後用飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮， 得到白色固體產物4-胺基-2-溴-6-氯-5-氟煙酸(1.90g，收率47%)。LCMS(m/z)：269.0(M+H)。
步驟G：5-溴-7-氯-8-氟-2-巰基吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇
室溫條件下，將4-胺基-2-溴-6-氯-5-氟煙酸(1.90g,7.05mmol)溶解到二氯亞碸(40mL,551mmol)。催化量DMF(2滴)加入反應體系後，升溫到80℃攪拌反應4h。反應液直接濃縮乾得中間體醯氯。室溫下，將所得醯氯用無水丙酮(50mL)攪拌溶解，緩慢加入硫氰酸銨(2.15g,28.2mmol)。所得混合物室溫攪拌反應3h，大量固體產生。反應結束後，反應液慢慢倒入攪拌的水(400mL)中，析出固體，攪拌15min後過濾，濾餅烘乾，得5-溴-7-氯-8-氟-2-巰基吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇(1.55g，收率71%)。LCMS(m/z)：309.8(M+H)。
步驟H：5-溴-7-氯-8-氟-2-(甲硫基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇
室溫條件下，將0.1M NaOH(100mL,10.0mmol)和碘甲烷(1.42g,9.98mmol)依次加入到5-溴-7-氯-8-氟-2-巰基吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇(1.55g,4.99mmol)的甲醇(50mL)溶液中。所得混合物室溫攪拌反應2h。反應結束後，將反應液慢慢倒入攪拌的水(400mL)中。再用1M HCl調pH中性，析出白色固體，攪拌約15min後過濾，濾餅烘乾，得5-溴-7-氯-8-氟-2-(甲硫基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇(1.5g，收率93%)。LCMS(m/z)：323.8(M+H)。
中間體I
7-氯-8-氟-2-(甲硫基)-5-((三異丙基矽基)乙炔基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇
步驟A：7-氯-8-氟-2-(甲硫基)-5-((三異丙基矽基)乙炔基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇
室溫條件下，將5-溴-7-氯-8-氟-2-(甲硫基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇(500mg，1.54mmol)，Pd(PPh3)2Cl2(216mg，0.31mmol)和CuI(147mg，0.77mmol)溶解到10mL無水THF中。體系氮氣置換三次，加入三異丙基矽基乙炔(562mg,3.08mmol)和TEA(779mg,7.70mmol)，再次氮氣置換三次。所得混合物，加熱到50℃反應16h。LCMS監測反應結束，冷卻到室溫，將反應液用矽藻土過濾。濾液濃縮乾得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-50%)純化，得到白色固體7-氯-8-氟-2-(甲硫基)-5-((三異丙基矽基)乙炔基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇(330mg，收率46%)。LCMS(m/z)：426.0(M+H)。
中間體J
7-溴-8-氟-2-甲硫基-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-醇
步驟A：2-胺基-4-溴-3-氟-5-(三氟甲基)苯甲酸
室溫條件下，將LiOH(15.17g,630mmol)的水溶液(100mL)加入到2-胺基-4-溴-3-氟-5-(三氟甲基)苯甲酸甲酯(20g,63mmol)和THF(100mL)、MeOH(100mL)的混合液中，所得混合物在室溫條件下攪拌反應16h。TLC和LCMS監測反應結束，加入1M HCl調節pH~6，EA(100mL×3)萃取，收集有機相，飽和食鹽水洗，收集有機相，濃縮，得黃色固體產物2-胺基-4-溴-3-氟-5-(三氟甲基)苯甲酸(19g，收率99%)。LCMS(m/z)：301.9(M+H)。
步驟B：2-胺基-4-溴-3-氟-5-(三氟甲基)苯甲醯氯
室溫條件下，將2-胺基-4-溴-3-氟-5-(三氟甲基)苯甲酸(19g,63mmol)加入到SOCl2(200mL)中，並升溫至50℃攪拌3h。LCMS監測反應結束，反應液溫度恢復至室溫。濃縮反應液，得黃色油狀物2-胺基-4-溴-3-氟-5-(三氟甲基)苯甲醯氯(20g，收率99%)。LCMS(m/z)：315.9(M-Cl+OMe)。
步驟C：7-溴-8-氟-2-巰基-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-醇
室溫條件下，將2-胺基-4-溴-3-氟-5-(三氟甲基)苯甲醯氯(20g,62.4mmol)加入到丙酮(200mL)中，將硫氰酸銨(14.2g,187mmol)溶 解在丙酮(100mL)中並加入到上述反應液，攪拌2h。LCMS監測反應結束。將反應液緩慢倒入攪拌的水(1000mL)中，絮狀不溶物產生，過濾收集濾餅，烘乾，得到黃色固體7-溴-8-氟-2-巰基-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-醇(20g，收率93%)。LCMS(m/z)：342.9(M+H)。
步驟D：7-溴-8-氟-2-甲硫基-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-醇
室溫條件下，將MeI(20.68g,146mmol)加入到7-溴-8-氟-2-巰基-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-醇(20g,58.3mmol)、MeOH(200mL)和0.1M NaOH(200mL)的混合溶液中，攪拌2h。LCMS監測反應結束，後緩慢倒入攪拌的水(1000mL)中，用濃鹽酸調節反應pH~6，絮狀不溶物產生，過濾收集濾餅，烘乾，得到黃色固體7-溴-8-氟-2-甲硫基-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-醇(20g，收率96%)。LCMS(m/z)：356.9(M+H)。
中間體K
7-溴-2,4-二氯-8-氟-6-硝基喹唑啉
步驟A：7-溴-8-氟-6-硝基喹唑啉-2,4-二醇
將7-溴-8-氟喹唑啉-2,4-二醇(11.0g,42.5mmol)溶於濃硫酸(60mL)中，冰浴下加入硝酸鉀(8.6g,84.9mmol)，攪拌1h。將反應液倒入冰水(200mL)中，過濾收集析出的固體，用清水(50mL)洗滌，真空乾燥後， 得到黃色固體7-溴-8-氟-6-硝基喹唑啉-2,4-二醇(12.0g，收率93%)。LCMS(m/z)：303.9(M+H)。
步驟B：7-溴-2,4-二氯-8-氟-6-硝基喹唑啉
將7-溴-8-氟-6-硝基喹唑啉-2,4-二醇(10.0g,32.9mmol)分散於甲苯(60mL)中，加入三氯氧磷(30mL)和DIPEA(10mL)，90℃下攪拌2h。反應液濃縮，加入適量乙腈(15mL)，後倒入冰水(100mL)中。過濾收集析出的固體，用清水(50mL)洗滌，真空乾燥後，得到黃色固體7-溴-2,4-二氯-8-氟-6-硝基喹唑啉(10.0g，收率89%)。LCMS(m/z)：341.9(M+H)。
中間體L
7-溴-2,4,6-三氯-8氟喹啉-3-碳腈
中間體L的合成參照文獻WO2022095960進行。
中間體O
7-溴-2,4-二氯-6-(二氟甲基)-8-氟喹唑啉
步驟A：2-胺基-4-溴-3-氟-5-乙烯基苯甲酸甲酯
室溫條件下，依次將2-胺基-4-溴-3-氟-5-碘苯甲酸甲酯(20g,53.76mmol)、乙烯基硼酸頻哪醇(16.4g,107.52mmol)、Pd(dppf)Cl2‧DCM(2.2g,2.68mmol)、K2CO3(22g,161.28mmol)加入到DMF(300mL)中，N2置換三次後，升溫至60℃攪拌48h。LCMS監測反應結束，將反應液恢復至室溫，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，母液濃縮所得的粗產品經過FCC(SiO2,EA/PE=0-8%)純化，得到黃色固體產物2-胺基-4-溴-3-氟-5-乙烯基苯甲酸甲酯(8.5g，收率57%)。LCMS(m/z)：274.0(M+H)。
步驟B：2-胺基-4-溴-3-氟-5-甲醯基苯甲酸甲酯
室溫條件下，依次將2-胺基-4-溴-3-氟-5-乙烯基苯甲酸甲酯(3g,10.99mmol)K2OsO4‧2H2O(1.2g,3.3mmol)NaIO4(9.2g,43.92mmol)加入到THF/H2O(V/V=1：1,60mL)中，室溫下攪拌16h。LCMS監測反應結束，反應液過濾用EA(50mL×3)萃取。有機相用飽和食鹽水(50mL)洗滌，乾燥，過濾，濃縮反應液得的粗產品經過FCC(SiO2,EA/PE=0-10%)純化，得到灰色固體2-胺基-4-溴-3-氟-5-甲醯基苯甲酸甲酯(2.3g，收率76%)。LCMS(m/z)：275.9(M+H)。
步驟C：2-胺基-4-溴-5-(二氟甲基)-3-氟苯甲酸甲酯
0℃下，將DAST(1.2g,7.25mmol)緩慢滴加到2-胺基-4-溴-3-氟-5-甲醯基苯甲酸甲酯(1g,3.62mmol)的DCM(20mL)溶液中，室溫攪拌16h。LCMS監測反應結束，加入DCM(20mL)，有機相用飽和碳酸氫鈉溶液(20mL×2)洗滌，反應液乾燥，濃縮反應液得的粗產品經過 FCC(SiO2,EA/PE=0-5%)純化，得到灰色固體2-胺基-4-溴-5-(二氟甲基)-3-氟苯甲酸甲酯(500mg，收率46%)。LCMS(m/z)：298.0(M+H)。
步驟D：4-溴-5-(二氟甲基)-3-氟-2-(3-(2,2,2-三氯乙醯基)脲基)苯甲酸甲酯
室溫條件下，依次將2-胺基-4-溴-5-(二氟甲基)-3-氟苯甲酸甲酯(450mg,1.5mmol)、2,2,2-三氯-1-異氰基乙烷-1-酮(432mg,2.25mmol)加入到THF(10mL)中，室溫下攪拌0.5h。LCMS監測反應結束，濃縮反應液，得到黃色固體4-溴-5-(二氟甲基)-3-氟-2-(3-(2,2,2-三氯乙醯基)脲基)苯甲酸甲酯(600mg，粗品)。LCMS(m/z)：484.9(M+H)。
步驟E：7-溴-6-(二氟甲基)-8-氟喹唑啉-2,4-二醇
室溫條件下，依次將4-溴-5-(二氟甲基)-3-氟-2-(3-(2,2,2-三氯乙醯基)脲基)苯甲酸甲酯(600mg)、NH3/MeOH(1mL，7M)加入到MeOH(10mL)中，室溫攪拌0.5h。LCMS監測反應結束，反應液濃縮。殘留物用MeOH(5mL)打漿。過濾收集濾餅，乾燥，得到白色固體7-溴-6-(二氟甲基)-8-氟喹唑啉-2,4-二醇(400mg)。
步驟F：7-溴-2,4-二氯-6-(二氟甲基)-8-氟喹唑啉
冰浴下，將DIEA(1.2ml,6.45mmol)緩慢滴加到7-溴-6-(二氟甲基)-8-氟喹唑啉-2,4-二醇(400mg,1.29mmol)的POCl3(3mL,30.32mmol)的混合溶液中，升溫至105℃並攪拌1h。LCMS監測反應結束，反應液濃縮，將殘留物緩慢倒入H2O(20mL)中，絮狀物產生，過濾，收集濾餅，真空乾燥箱乾燥，得到黃色固體7-溴-2,4-二氯-6-(二氟甲基)-8-氟喹唑啉(350mg，收率78%)。
中間體P
(Z)-7-溴-2,4-二氯-8-氟-6-(2-氟乙烯基)喹唑啉
步驟A：(Z)-2-胺基-4-溴-3-氟-5-(2-氟乙烯基)苯甲酸甲酯(P-1)和(E)-2-胺基-4-溴-3-氟-5-(2-氟乙烯基)苯甲酸甲酯(Q-1)
將(氟甲基)三苯基膦四氟硼酸鹽(2.49g,6.525mmol)溶於THF(15mL)，降溫至-78℃，加入三級丁醇鉀(1M THF溶液，6.53mL,6.53mmol)。攪拌反應1h後，加入2-胺基-4-溴-3-氟-5-甲醯基苯甲酸甲酯(1.2g,4.35mmol)，緩慢升回室溫，繼續攪拌1h。TLC和LCMS監測反應結束，加入飽和NH4Cl(200mL)和EA(80mL×3)萃取，收集有機相，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥。過濾，減壓濃縮得的粗產品經過FCC(SiO2,EA/PE=3%)純化，得到白色固體(Z)-2-胺基-4-溴-3-氟-5-(2-氟乙烯基)苯甲酸甲酯(390mg，收率31%)。LCMS(m/z)：294.0(M+H).1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.16(t,J=1.6Hz,1H),6.70(dd,J 1=82.8Hz,J 2=5.6Hz,1H),5.88(dd,J 1=43.2Hz,J 2=5.6Hz,1H),3.90(s,3H).和白色固 體(E)-2-胺基-4-溴-3-氟-5-(2-氟乙烯基)苯甲酸甲酯(612mg，收率48%)。LCMS(m/z)：294.0(M+H).1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.64(d,J=2.0Hz,1H),7.03(dd,J 1=82.8Hz,J 2=11.2Hz,1H),6.55(dd,J 1=18.0Hz,J 2=11.2Hz,1H),3.90(s,3H).
步驟B：(Z)-4-溴-3-氟-5-(2-氟乙烯基)-2-(3-(2,2,2-三氯乙醯基)脲基)苯甲酸甲酯
將(Z)-2-胺基-4-溴-3-氟-5-(2-氟乙烯基)苯甲酸甲酯(390mg,1.335mmol)溶於THF(6.7mL)中，降溫至0℃。加入三氯乙醯異氰酸酯(238μL,2mmol)，攪拌10min後緩慢升至室溫，繼續攪拌30min。LCMS監測反應結束，反應液經減壓濃縮，得白色固體，直接用於下一步。LCMS(m/z)：502.9(M+Na)。
步驟C：(Z)-7-溴-8-氟-6-(2-氟乙烯基)喹唑啉-2,4-二醇
向步驟B所得粗品中加入MeOH(6.7mL)，得白色懸濁液，室溫下加入NH3(7N MeOH溶液，1.34mL,9.38mmol)。所得混合物攪拌30min後得淡黃色澄清溶液，繼續攪拌2h。大量白色固體析出，經LCMS監測反應結束。過濾，取濾餅烘乾，得白色固體產物(Z)-7-溴-8-氟-6-(2-氟乙烯基)喹唑啉-2,4-二醇(404mg，收率99%)。LCMS(m/z)：304.9(M+H)。
步驟D：(Z)-7-溴-2,4-二氯-8-氟-6-(2-氟乙烯基)喹唑啉
將(Z)-7-溴-8-氟-6-(2-氟乙烯基)喹唑啉-2,4-二醇(404mg,1.33mmol)溶於POCl3(3mL,32.16mmol)中，降溫至0℃。加入DIEA(1.9mL,10.72mmol)，攪拌10min後置於110℃油浴中回流4h。LCMS監測反應結束，反應液經減壓濃縮，加入飽和NaHCO3(100mL)和EA(80 mL×3)萃取。收集有機相，飽和食鹽水洗滌，有機相經乾燥後，減壓濃縮得的粗產品經過FCC(SiO2,EA/PE=8%)純化，得到白色固體(Z)-7-溴-2,4-二氯-8-氟-6-(2-氟乙烯基)喹唑啉(301mg，收率67%)。LCMS(m/z)：333.0(M-2Cl+2MeO+H)。
中間體Q
(Z)-7-溴-2,4-二氯-8-氟-6-(2-氟乙烯基)喹唑啉
中間體Q的合成參照中間體P，在步驟B中使用(E)-2-胺基-4-溴-3-氟-5-(2-氟乙烯基)苯甲酸甲酯代替(Z)-2-胺基-4-溴-3-氟-5-(2-氟乙烯基)苯甲酸甲酯。
中間體T
步驟A：化合物T-1
室溫條件下，將LiOH．H2O(67.7g,1612.9mmol)加入到2-胺基-4-溴-3-氟-5-碘苯甲酸甲酯(O-1，60g,161.3mmol)和THF(200mL)、MeOH(200mL)、H2O(200mL)的混合液中，室溫條件下攪拌反應16h。TLC和LCMS監測反應結束，加入1M HCl調節PH=6，EA(300mL×3)萃取，收集有機相，飽和食鹽水洗，收集有機相，濃縮所得黃色固體產物T-1(56g，收率97%)。LCMS(m/z)：359.9(M+H)。
步驟B：化合物T-2
室溫條件下，將化合物T-1(56g,155.6mmol)加入到SOCl2(200mL)中，並升溫至70℃攪拌3h。LCMS監測反應結束，反應液溫度恢復至室溫。濃縮反應液，得黃色油狀物T-2(57.5g，收率98%)。LCMS(m/z)：374.9(M-Cl+OMe)。
步驟C：化合物T-3
室溫條件下，將化合物T-2(57.5g,153.2mmol)加入到丙酮(500mL)中，將硫氰酸銨(34.9g,459.7mmol)溶解在丙酮(500mL)中並加入到上述反應液，攪拌2h。LCMS監測反應結束。將體系緩慢倒入攪拌的水(1000mL)中，絮狀不溶物產生，過濾收集濾餅，烘乾，得到黃色固體化合物T-3(60g，收率98%)。LCMS(m/z)：400.8(M+H)。
步驟D：化合物T-4
室溫條件下，將MeI(63.9g,450mmol)加入到化合物T-3(60g,150mmol)、MeOH(400mL)和NaOH(24g,600mmol)的混合溶液中，攪拌2h。LCMS監測反應結束。然後慢慢倒入攪拌的水(1000mL)中，用濃 鹽酸調節反應pH=6，絮狀不溶物產生，過濾收集濾餅，烘乾，得到黃色固體化合物T-4(61g，收率98%)。LCMS(m/z)：414.8(M+H)。
步驟E：化合物T-5
0℃下，將DIEA(57.3g,442.1mmol)緩慢滴加到POCl3(530.3g,3462.5mmol)和化合物T-4(61g,147.3mmol)的混合溶液中，並升溫至110℃攪拌1h。LCMS監測反應結束。反應液濃縮，殘留物緩慢加入到冰水中。絮狀不溶物產生，過濾收集濾餅，烘乾，得到黃色固體化合物T-5(60g，收率94%)。LCMS(m/z)：434.8(M+H)。
步驟F：中間體T
0℃下，將t-BuOK(152.7mL,1M THF溶液，152.7mmol)加入到化合物T-5(60g,138.8mmol)和THF(1000mL)的混合溶液中，並在0℃攪拌1h，溫度升至室溫攪拌1h。LCMS和TLC監測反應結束。將反應液倒入半飽和的NH4Cl(200mL)溶液中，EA(500mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(300mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機相經FCC(SiO2，THF/PE=0-5%)純化，得到黃色固體產物中間體T(45g，收率69.2%)。LCMS(m/z)：414.9(M-56+H)。
中間體n-1
步驟A：化合物n-1-2
室溫條件下，將(S)-3-胺基丁醇(19.9g,223mmol)加入到5-甲醯基吡唑-3-甲酸乙酯(n-1-1，25.0g,149mmol)和無水甲醇(250mL)的溶液中，攪拌30min。用冰水冷卻反應液到0-5℃，硼氫化鈉(11.3g,297mmol)慢慢加入反應體系中，且保持內溫不超過20℃。加完料後，室溫攪拌2h。LCMS監測反應完成。補加等體積水(250mL)，室溫下將Boc2O(64.9g,297mmol)一次加入反應體系中，室溫攪拌過夜。LCMS監測反應結束，將反應液倒入H2O(500mL)，再用EtOAc(500mL×3)萃取。合併有機相，無水Na2SO4乾燥，過濾。濾液濃縮乾，得粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-100%)純化，得無色油狀產物n-1-2(26.2g，收率52%)。LCMS(m/z)：342.4(M+H)。
步驟B：化合物n-1-3
冰水浴下，將DIAD(31.0g,153mmol)滴加入到化合物n-1-2(26.2g,76.4mmol)、三苯基膦(38.1g,153mmol)和無水THF(500mL)的混合液中，自然升溫到室溫，攪拌反應過夜。LCMS監測反應結束，將反應液倒入H2O(400mL)，再用EtOAc(400mL×3)萃取。合併有機相，無水Na2SO4乾燥，過濾。濾液濃縮乾，得粗品經過FCC(SiO2,EA/PE=0-100%)純化，得無色油狀產物n-1-3(18.0g，收率73%)。LCMS(m/z)：324.1(M+H)。
步驟C：化合物n-1-4
冰浴下，將NaOH(11.3g,278mmol)加入到化合物n-1-3(18.0g,55.7mmol)和MeOH/THF/H2O(450mL,1：1：1)的溶液中，室溫攪拌反應1h。LCMS監測反應結束，先濃縮掉反應液中有機溶液，殘留下的 水相用冰水浴冷卻到0-10℃後，用2N HCl調pH=3-4，再用EtOAc(400mL×5)萃取。合併有機相，無水Na2SO4乾燥，過濾。濾液濃縮乾，得白色固體粗品化合物n-1-4(16g，收率97%)。LCMS(m/z)：296.1(M+H)。
步驟D：化合物n-1-5
室溫條件下，將HATU(34.7g,91.4mmol)加入到化合物n-1-4(18.0g,60.9mmol)、二甲胺鹽酸鹽(9.82g,122mmol)、DIPEA(39.4g,305mmol)和DMF(250mL)的混合液中，室溫攪拌反應1h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入LiCl水溶液(5wt%，500mL)，再用EtOAc(400mL×3)萃取。合併有機相，無水Na2SO4乾燥，過濾。濾液濃縮乾，得粗品經過FCC(SiO2,EA/PE=0-100%)純化，得白色產物n-1-5(12.4g，收率63%)。LCMS(m/z)：323.2(M+H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 6.39(s,1H),4.88-4.53(m,1H),4.51-4.11(m,3H),4.09-3.93(m,1H),3.23(s,3H),2.94(s,3H),2.18-1.93(m,2H),1.45-1.24(m,9H),1.20(d,J=6.6Hz,3H)。
步驟E：中間體n-1
室溫條件下，將4M HCl-乙酸乙酯(200mL,800mmol)加入到化合物n-1-5(12.4g,60.9mmol)中，保持室溫攪拌1h。LCMS監測反應結束，濃縮除去酸溶液，得到油狀產物中間體n-1(10.0g，收率100%)。LCMS(m/z)：223.1(M+H)。
中間體n-1E
中間體n-1E的合成參照中間體n-1的合成方案進行，在步驟A中使用(S)-3-胺基-1-戊醇代替(S)-3-胺基丁醇。LCMS(m/z)：237.1(M+H)。
中間體n-1-d6
中間體n-1-d6的合成參照n-1的合成製備，在步驟D中使用氘代二甲胺鹽酸鹽代替二甲胺鹽酸鹽。LCMS(m/z)：229.3(M+H)。
中間體n-2
步驟A：化合物n-2-1
室溫條件下，將NCS(311mg,2.33mmol)加入到化合物n-1-5(500mg,1.55mmol)和無水DMF(5mL)的溶液中，加熱到40-50℃攪拌3h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入5%LiCl水液(50mL)，再用EtOAc(40mLx3)萃取。合併有機相，無水Na2SO4乾燥，過濾。濾液濃縮乾，得粗品經過FCC(SiO2,EA/PE=0-100%)純化，得無色油狀產物n-2-1(370mg，收率67%)。LCMS(m/z)：357.1(M+H)。
步驟B：中間體n-2
室溫條件下，將4M HCl-乙酸乙酯(20mL,80mmol)加入到化合物n-2-1(370mg,1.04mmol)中，保持室溫攪拌1h。LCMS監測反應結束，濃縮除去酸溶液，得到的半固態油狀產物中間體n-2(300mg)。LCMS(m/z)：257.3(M+H)。
中間體n-3
步驟A：化合物n-3-1
在室溫下，向化合物n-1-5(270mg,0.8mmol)的乙腈(15mL)溶液中加入1-氯甲基-4-氟-1,4-二氮雜雙環[2.2.2]辛烷二(四氟硼酸)鹽(2.26g,6.4mmol)。升溫至40℃攪拌反應24h。LCMS監測反應結束後，反應液經矽藻土過濾，濾液濃縮乾，所得粗產品經過FCC(SiO2,THF/PE=0-50%)純化，得淡黃色油狀產物n-3-1(60mg，收率21%)。LCMS(m/z)：341.2(M+H)。
步驟B：中間體n-3
在室溫下，向化合物n-3-1(60mg,0.17mmol)中加入4N的HCl/EA溶液(2mL)。所得反應液溫度攪拌反應1h。LCMS監測反應結束 後，將反應液濃縮乾，得黃色油狀粗產物中間體n-3(62mg)。LCMS(m/z)：241.1(M+H)。
中間體n-4
步驟A：化合物n-4-1
室溫條件下，將NIS(1.40g,6.20mmol)加入到化合物n-1-5(1.00g,3.10mmol)和無水DMF(10mL)的溶液中，室溫攪拌16h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入5%LiCl水溶液(50mL)，用EtOAc(50mL×3)萃取。合併有機相，用飽和硫代硫酸鈉(50mL)洗。最後無水Na2SO4乾燥，過濾。濾液濃縮乾，得粗品經過FCC(SiO2,EA/PE=0-100%)純化，得無色油狀產物n-4-1(750mg，收率54%)。LCMS(m/z)：449.0(M+H)。
步驟B：化合物n-4-2
室溫條件下，依次將化合物n-4-1(300mg,0.669mmol)、甲基硼酸(80.1mg,1.34mmol)、cataCXium-A-Pd-G3(48.7mg，0.067mmol)、K3PO4(426mg,2.01mmol)加入到1,4-二噁烷和水(5mL,V/V=5：1)混合溶液中，N2置換三次後，升溫至80℃攪拌過夜。LCMS監測反應結束後，反應冷卻到室溫，直接濃縮乾，得粗品經過FCC(SiO2,EA/PE=0-100%)純化，得白色固體產物n-4-2(185mg，收率82%)。LCMS(m/z)：337.2(M+H)。
步驟C：中間體n-4
室溫條件下，將4M HCl-乙酸乙酯(20mL,80mmol)加入到化合物n-4-2(185mg,0.55mmol)中，保持室溫攪拌1h。LCMS監測反應結束，濃縮除去酸溶液，得到半固態油狀產物中間體n-4(150mg)。LCMS(m/z)：237.1(M+H)。
中間體n-5
步驟A：化合物n-5-1
室溫條件下，依次將化合物n-4-1(200mg,0.446mmol)、三異丙基矽基乙炔(162mg,0.890mmol)、雙三苯基磷二氯化鈀(31mg，0.044mmol)、CuI(10mg，0.052mmol)、TEA(225mg,2.28mmol)加入到四氫呋喃(5mL)中，N2置換三次後，升溫至50℃攪拌過夜。LCMS監測反應結束後，反應冷卻到室溫，直接濃縮乾，得粗品經過FCC(SiO2，EA/PE=0-100%)純化，得白色固體產物n-5-1(50mg，收率22%)。LCMS(m/z)：503.2(M+H)。
步驟B：中間體n-5
室溫條件下，將4M HCl-乙酸乙酯(10mL,40mmol)加入到化合物n-4-1(50mg,0.099mmol)中，保持室溫攪拌1h。LCMS監測反應結 束，濃縮除去酸溶液，得到半固態油狀產物中間體n-5(40mg)。LCMS(m/z)：403.2(M+H)。
中間體n-6A及n-6B
步驟A：化合物n-6-1A及n-6-1B
化合物n-6-1(2.10g)經SFC拆分(Waters SFC 150，分離管柱：DAICELCHIRALPAK®AD,250*30mm 10μm；流動相：CO2/MeOH(+0.1% 7.0mol/l NH3-MeOH)=70/30；流速：120mL/min)得首先沖提出來的異構體1為化合物n-6-1A(1.04g，相對保留時間較小)，手性分析方法SFC-n-6，Rt=1.184，LCMS(m/z)：217.1(M+H)；隨後沖提出來的異構體2為化合物n-6-1B(1.05g，相對保留時間較大)。手性分析方法SFC-n-6，Rt=2.250，LCMS(m/z)：217.1(M+H)。
手性分析方法SFC-n-6：Waters UPCC，分析管柱：Daicel Chiralpak®AD，100*3mm 3μm；流動相A：CO2，流動相B：MeOH(+0.1% DEA)；流速：1.5mL/min；管柱溫度：35℃；反壓：1800psi；梯度：0-5.0min A/B=80/20。
步驟B：中間體n-6A
室溫條件下，依次將化合物n-6-1A(1.04g,48.1mmol)、Pd/C(10wt%，1g，9.6mmol)加入到MeOH(10mL)溶液中，H2氣球置換三次後，室溫攪拌16h。LCMS監測反應結束，將反應液藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，收集母液。濃縮有機液得到中間體n-6A(2.4g，收率20.7%)。LCMS(m/z)：127.0(M+H)。
採用相同方法，由化合物n-6-1B製備得到中間體n-6B。
中間體n-7A及n-7B
步驟A：化合物n-7-2
室溫條件下，依次將化合物n-7-1(7.0g,30.9mmol)、對硝基苯甲酸(5.2g,30.9mmol)、PPh3(9.7g,37.1mmol)、DIAD(7.5g,37.1mmol)加入到THF(100mL)溶液中，N2置換三次後，室溫攪拌16h。LCMS和TLC監測反應結束，將反應液加入水(200mL)中，EA(100mL×3)萃取，收集的有機相用飽和食鹽水(100mL)洗，無水Na2SO4乾燥。濃縮有機液得到的粗品經FCC(SiO2,DCM/PE=0-100%)純化，得到白色固體化合物n-7-2(2.4g，收率20.7%)。LCMS(m/z)：398.0(M+Na)。
步驟B：化合物n-7-2A及n-7-2B
化合物n-7-2(2.4g)經SFC拆分(Waters SFC 150，分離管柱：DAICELCHIRALPAK®AD,250*30mm 10μm；流動相：CO2/MeOH(+0.1% 7.0mol/l NH3-MeOH)=75/25；流速：120mL/min)得首先沖提出來的異構體1為化合物n-7-2A(1.25g，相對保留時間較小)，手性分析方法SFC-n-7，Rt=0.861；隨後沖提出來的異構體2為化合物n-7-2B(1.15g，相對保留時間較小)，手性分析方法SFC-n-7，Rt=1.883。
手性分析方法SFC-n-7：Waters UPCC，分析管柱：Daicel Chiralpak®AD，100*3mm 3μm；流動相A：CO2，流動相B：MeOH(+0.1% DEA)；流速：1.5mL/min；管柱溫度：35℃；反壓：1800psi；梯度：0-5.0min A/B=80/20。
步驟C：化合物n-7-3A
室溫條件下，將化合物n-7-2A(200mg,0.53mmol)和K2CO3(147mg,1.07mmol)加入到MeOH(5mL)溶液中並攪拌20h。LCMS和TLC監測反應結束，將反應液倒入H2O(20mL)中，EA(20mL×3)萃取，收集有機相用飽和食鹽水(20mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。濃縮有機相得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-50%)純化，得白色固體產物化合物n-7-2A(120mg，收率99.5%)。LCMS(m/z)：227.3(M+H)。
採用相同方法，由化合物n-7-2B製備n-7-3B。
步驟D：中間體n-7A
室溫條件下，將化合物n-7-3A(120mg,0.53mmol)加入到DCM(3mL)和TFA(1mL)的混合溶液中並攪拌1h。LCMS監測反應結束。將反應液濃縮並倒入飽和NaHCO3(10mL)，EA(10mL×3)萃取，收集有機 相後，飽和食鹽水(20mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機相，得中間體n-7A(90mg，收率70.6%)。LCMS(m/z)：127.0(M+H)。
採用相同方法，由化合物n-7-3B製備中間體n-7B。
中間體n-8
步驟A：化合物n-8-1
室溫條件下，將NBS(5.0g,27.9mmol)加入到化合物n-1-5(6.0g,18.6mmol)和DMF(60mL)的混合液中，室溫攪拌反應3h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入5% LiCl水液(200mL)，再用EtOAc(200mL×3)萃取。合併有機相，無水Na2SO4乾燥，過濾。濾液濃縮乾，得粗品經過FCC(SiO2,EA/PE=0-100%)純化，凍乾，得白色固體化合物n-8-1(7.0g，收率94%)。LCMS(m/z)：401.1/403.1(M+H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 4.68-4.58(m,1H),4.45-4.39(m,2H),4.31-4.20(m,1H),4.09-3.90(m,1H),2.96(s,3H),2.95(s,3H),2.18-2.05(m,2H),1.33(s,9H),1.19(d,J=6.4Hz,3H)。
步驟B：化合物n-8-2
室溫條件下，將化合物n-8-1(1g,2.5mmol)溶於無水四氫呋喃(15mL)，乾冰-乙醇浴冷卻10min，正丁基鋰(1.6M,2.4mL,3.75mmol)緩慢滴加入反應體系，滴加完成後在乾冰-乙醇浴下繼續攪拌10min，將溴甲基甲基醚(468mg,3.75mmol)溶於無水四氫呋喃(1.5mL)緩慢滴加入反應體系，加完後保持溫度繼續攪拌10min，後升至室溫攪拌反應20min。LCMS 監測反應結束，氯化銨水溶液(5mL)淬滅反應，加入20ml水，再用EtOAc(30mL×3)萃取。合併有機相，無水Na2SO4乾燥，過濾。濾液濃縮乾，得粗品經過FCC(SiO2,EA/PE=0-100%)純化，得白色固體化合物n-8-2(465mg，收率49%)。LCMS(m/z)：367.2(M+H)。
步驟C：中間體n-8
室溫條件下，將4M HCl-乙酸乙酯(10mL,40mmol)加入到化合物n-8-2(465mg,1.27mmol)中，保持室溫攪拌1h。LCMS監測反應結束，濃縮除去酸溶液，得到半固態油狀產物中間體n-8(385mg,100%)。LCMS(m/z)：267.1(M+H)。
參照上述中間體合成製備下列中間體
中間體n-9
步驟A：化合物n-9-2
室溫下，將CH3I(1.44g,10.2mmol)加入到化合物n-1-4(1.00g,3.39mmol)、K2CO3(1.40g,10.2mmol)和CAN(20mL)的混合體系中，並在40℃攪拌過夜。LCMS監測反應結束，反應先後經過矽藻土和濾頭濃縮得到澄清的有機相，濃縮完全後，得到黃色固體化合物n-9-2(1.03g，收率98%)。LCMS(m/z)：310.2(M+H)。
步驟B：化合物n-9-3
室溫下，將NIS(1.60g,7.11mmol)加入到化合物n-9-2(1.10g,3.56mmol)和AcOH(15mL)的混合體系中，並在80℃攪拌1h。LCMS監測反應結束，濃縮除去酸液後經FCC(SiO2,EA/PE=0-60%)純化得到深黃色固體，再經(PE：EA=10：1,15mL)打漿純化，過濾得黃色固體化合物n-9-3(980mg，收率63%)。LCMS(m/z)：436.1(M+H)。
步驟C：化合物n-9-4
室溫條件下，依次將化合物n-9-3(960mg,2.21mmol)、4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(2.82g,22.1mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(155mg,0.221mmol)、TEA(1.12g,11.0mmol)加入到ACN(15mL)中，N2置換三次後，升溫至40℃攪拌過夜。LCMS監測反應結束，將反應液恢復 至室溫，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，收集母液，加入水(50mL)，EA(50mL×3)萃取，收集的有機相濃縮，得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-60%)純化，得到棕黃色固體化合物n-9-4(960mg,crude)。硼酯LCMS(m/z)：436.3(M+H)/和硼酸LCMS(m/z)：354.2(M+H)。
步驟D：化合物n-9-5
室溫下，將H2O2(1.52g,30% in H2O,13.4mmol)加入到化合物n-9-4(950mg,2.69mmol)、NaOH(215mg,5.38mmol)和THF(15mL)的混合體系中，室溫攪拌1h。LCMS監測反應結束，加入水(50mL)，EA(100mL)，用1M HCl調節pH~6，EA(50mL×3)萃取，收集的有機相用飽和食鹽水洗，無水Na2SO4乾燥，過濾，收集有機液濃縮，得到黃色固體化合物n-9-5(800mg,91%)。LCMS(m/z)：326.1(M+H)。
步驟E：化合物n-9-6
室溫條件下，將LiOH‧H2O(774mg,18.4mmol)加入到化合物n-9-5(500mg,1.54mmol)和MeOH：H2O(V/V=1：1，10mL)的溶液中，並在室溫下攪拌過夜。LCMS監測反應結束，反應液濃縮除去MeOH，加入EA(50mL)稀釋，用1M HCl調節pH~6，EA(50mL×5)萃取，收集的有機相用飽和食鹽水洗，無水Na2SO4乾燥，過濾，收集有機液濃縮，得到黃色油狀產物化合物n-9-6(400mg,84%)。LCMS(m/z)：256(M+H-56)。
步驟F：化合物n-9-7
室溫條件下，將TEA(650mg,6.42mmol)加入到化合物n-9-6(400mg,1.28mmol)、二甲胺鹽酸鹽(207mg,2.57mmol)、HATU(732mg,1.93mmol)和DCM(10mL)的混合體系中，室溫攪拌2h。LCMS監測反應 結束，濃縮後經FCC(SiO2,EA/PE=0-80%)純化，得到黃油狀化合物n-9-7(250mg，粗品)。LCMS(m/z)：339.2(M+H)。
步驟G：中間體n-9
室溫條件下，將TFA：DCM(V/V=3：1，20mL)加入到化合物n-9-7(150mg,0.443mmol)體系中，室溫攪拌1h。LCMS監測反應結束，濃縮除去酸液，加少許ACN和水凍乾，得到黃色油狀產物中間體n-9(160mg)，直接用於後續反應。LCMS(m/z)：239.1(M+H)。
中間體n-10
步驟A：化合物n-10-2
室溫下，將CH3I(1.31g,9.22mmol)加入到化合物n-9-5(300mg,0.922mmol)、K2CO3(637mg,4.16mmol)和ACN(15mL)的混合體系中，並在40℃攪拌過夜。LCMS監測反應結束，反應液經過矽藻土濃縮得到粗品，濃縮後經FCC(SiO2,EA/PE=0-80%)純化，得到黃色固體得到白色固體化合物n-10-2(160mg，收率51%)。LCMS(m/z)：340.2(M+H)。
步驟B：化合物n-10-3
室溫條件下，將LiOH‧H2O(238mg,5.66mmol)加入到化合物n-10-2(160mg,0.471mmol)和MeOH：H2O(V/V=1：1，10mL)的溶液中， 並在室溫下攪拌過夜。LCMS監測反應結束，反應液濃縮除去MeOH，加入EA(50mL)稀釋，用1M HCl調節pH~6，EA(50mL×5)萃取，收集的有機相用飽和食鹽水洗，無水Na2SO4乾燥，過濾，收集有機液濃縮，得到黃色油狀化合物n-10-3(150mg,98%)。LCMS(m/z)：326.2(M+H)。
步驟C：化合物n-10-4
室溫條件下，將DIPEA(298mg,2.31mmol)加入到化合物n-10-3(150mg,0.461mmol)、二甲胺鹽酸鹽(74.3mg,0.922mmol)、HATU(263mg,0.692mmol)和DCM(10mL)的混合體系中，室溫攪拌2h。LCMS監測反應結束，濃縮後經FCC(SiO2,EA/PE=0-80%)純化，得到白色固體化合物n-10-4(140mg，收率86%)。LCMS(m/z)：353.2(M+H)。
步驟D：中間體n-10
室溫條件下，將TFA：DCM(V/V=3：1，20mL)加入到化合物n-10-4(140mg,0.397mmol)體系中，室溫攪拌1h。LCMS監測反應結束，濃縮除去酸液，加少許ACN和水凍乾，得到白色固體中間體n-10(160mg)，直接用於後續反應。LCMS(m/z)：253.2(M+H)。
中間體n-11
參照中間體n-10方法製備中間體n-11，LCMS(m/z)：267.2(M+H)。
參照上述合成方案或適當變體，本發明還製備並表徵了下列中間體：
中間體n-22
步驟A：化合物n-22-1
在室溫條件下，將N-甲基-O-甲基羥胺鹽酸鹽(992mg,10.17mmol)加入到化合物n-1-4(2g,6.78mmol)、HATU(3.86g,10.17mmol)、DIEA(2.04g,20.34mmol)和THF(40mL)的混合溶液中。室溫攪拌2小時，TLC和LCMS監測反應完成。將反應液倒入水中(200mL)，EA(50mL×3)萃取，收集的有機相用飽和NaCl(50mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。濃縮有機相得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=10~40%)分離，得到白色固體化合物n-22-1(3.1g)。LCMS(m/z)：339.1(M+H)
步驟B：化合物n-22-2
在0℃條件下，將甲基溴化鎂溶液(1M)，1.76mL,1.76mmol)加入到化合物n-22-1(300mg)和THF(5mL)的混合溶液中。0℃攪拌0.5小時，LCMS監測反應完成，將反應液倒入H2O(20mL)中，EA(10mL×3)萃取。收集的有機相用飽和NaCl(20mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。濃縮有機相得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=10~30%)分離，得到無色油狀化合物n-22-2(150mg，兩步收率58%)。LCMS(m/z)：294.1(M+H)。
步驟C：中間體n-22
室溫條件下，將化合物n-22-2(150mg,0.51mmol)加入到HCl-EA(5mL,4M)溶液中。室溫攪拌1小時，LCMS監測反應完成，濃縮反應液，得到白色固體中間體n-22(88mg，收率89%)。LCMS(m/z)：194.1(M+H)。
中間體n-23
步驟A：化合物n-23-1
在室溫下，向化合物n-1-5(1.0g,3.1mmol)的DMF(15mL)和醋酸(0.5mL)溶液中加入N-碘丁二醯亞胺(768mg,3.4mmol)。升溫至60℃攪拌反應12h。LCMS監測反應結束後，將反應液緩慢加入到冰水中，用乙酸乙酯萃取。有機相合併後，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮乾，所得粗產品經過FCC(SiO2,EA/PE=0-70%)純化，得淡黃色固體化合物n-23-1(1.3g，收率93%)。LCMS(m/z)：449.1(M+H)。
步驟B：化合物n-23-2
在N2下，向化合物n-23-1(1.3g,2.9mmol)的DMF(20mL)溶液中加入乙烯基硼酸頻哪醇酯(1.34g,8.7mmol)、碳酸鉀(1.4g,10.1mmol)和Pd(dppf)Cl2(222mg，0.29mmol)。所得反應液在90℃條件 下攪拌反應15h。LCMS監測反應結束後，反應液經矽藻土過濾，濾液濃縮乾，所得粗產品經過FCC(SiO2,EA/PE=0-75%)純化，得黃色油狀化合物n-23-2(820mg，收率81%)。LCMS(m/z)：349.2(M+H)。
步驟C：化合物n-23-3
在室溫下，向化合物n-23-2(300mg,0.86mmol)的甲醇(10mL)溶液中，加入Pd/C(9.2mg,0.08mmol,10%)，室溫攪拌反應2h。LCMS監測反應結束後，反應液經矽藻土過濾，濾液濃縮乾，所得粗產品經過FCC(SiO2,EA/PE=0-75%)純化，得黃色油狀化合物n-23-3(260mg，收率86%)。LCMS(m/z)：351.2(M+H)。
步驟D：中間體n-23
在0℃下，向化合物n-23-2(260mg,0.74mmol)中加入HCl/EA(5mL,4N)，溫度攪拌反應1h。LCMS監測反應結束後，將反應液濃縮乾，得到黃色油狀中間體n-23(270mg)。LCMS(m/z)：251.2(M+H)。
中間體n-24
步驟A：化合物n-24-1
在室溫下，向化合物n-23-2(500mg,2.9mmol)的THF(10mL)和水(5mL)溶液中加入鋨酸鉀(45mg,0.29mmol)。所得反應液在室溫條件 下攪拌反應0.5h。將高碘酸鈉(1.23g,5.75mmol)加入到上述反應液中，所得反應液在室溫條件下繼續攪拌反應12h。LCMS監測反應結束後，將反應液緩慢加入到水中，用乙酸乙酯萃取。有機相合併後，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮乾，所得粗產品經過FCC(SiO2,EA/PE=0-80%)純化，得黃色油狀化合物n-24-1(120mg，收率24%)。LCMS(m/z)：351.2(M+H)。
步驟B：化合物n-24-2
在室溫下，向化合物n-24-1(120mg,0.86mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液中，加入二乙胺基三氟化硫(552mg,3.4mmol)，升溫至40℃攪拌反應6h。LCMS監測反應結束後，將反應液緩慢加入到飽和碳酸氫鈉水溶液中，用二氯甲烷萃取。有機相合併後，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮乾，所得粗產品經過pre-TLC(EA)純化，得黃色油狀化合物n-24-2(42mg，收率33%)。LCMS(m/z)：373.2(M+H)。
步驟C：中間體n-24
在0℃下，向化合物n-24-2(42mg,0.11mmol)中加入HCl/EA(2mL,4N)，溫度攪拌反應1h。LCMS監測反應結束後，將反應液濃縮乾，得到黃色油狀中間體n-24(45mg)。LCMS(m/z)：273.2(M+H)。
中間體n-25
步驟A：化合物n-25-2
0℃下，將PMBCl(12.9g,82.7mmol)緩慢滴加到化合物n-25-1(6.70g,75.2mmol)、K2CO3(20.0g,225mmol)的MeCN(200mL)的混合液中。室溫攪拌16h，LCMS監測反應結束。過濾，濃縮所得的粗產品經過FCC(SiO2,THF/PE=0-15%)純化，得到無色油狀化合物n-25-2(2.3g，收率15%)。LCMS(m/z)：210.1(M+H)。
步驟B：化合物n-25-3
室溫下，依次將化合物n-25-2(2.0g,9.56mmol)、3-氯丙炔(848mg,11.4mmol)、K2CO3(2.64g,19.1mmol)加入到MeCN(40mL)溶液中。升溫至80℃攪拌16h，LCMS監測反應結束。過濾，濃縮所得的粗產品經過FCC(SiO2,THF/PE=0-10%)純化，得到無色油狀化合物n-25-3(1.7g，收率74%)。LCMS(m/z)：247.1(M+H)。
步驟C：化合物n-25-4
0℃下，將SOCl2(1.06mL,14.5mmol)緩慢滴加到吡啶(0.883mL,10.9mmol)、化合物n-25-3(1.7g,6.88mmol)的DCM(30mL)混合液中。0℃下攪拌6h，LCMS監測反應結束。用NaHCO3淬滅反應，乙酸乙酯(30mL×3)萃取，有機相乾燥濃。向上一步粗品的DMF(20mL)溶液 中加入NaN3(450mg,6.88mmol)，80℃下攪拌16h，LCMS監測反應結束。加入乙酸乙酯(50mL)，飽和食鹽水(15mL×3)洗滌。有機相乾燥濃縮，得到粗品化合物n-25-4(1.8g)。LCMS(m/z)：273.1(M+H)。
步驟D：化合物n-25-5
室溫條件下，依次將化合物n-25-4(1.30g)、CuI(89.3mg,0.476mmol)、DIEA(1.85g,14.28mmol)加入到DMF(10mL)溶液中，80℃攪拌0.5h。LCMS監測反應結束，加入乙酸乙酯(50mL)，飽和食鹽水(15mL×3)洗滌。有機相乾燥濃縮，得到粗品經過FCC(SiO2,THF/PE=0-20%)純化，得到無色油狀化合物n-25-4(550mg，兩步收率42%)。LCMS(m/z)：273.1(M+H)。
步驟E：化合物n-25-6
室溫條件下，將化合物n-25-5(550mg,2.02mmol)加入到TFA(8mL)中，80℃攪拌2h。LCMS監測反應結束，反應液濃縮，得到棕色化合物n-25-6(246mg，粗品)。LCMS(m/z)：153.1(M+H)。
步驟F：化合物n-25-7
室溫條件下，依次將化合物n-25-6(246mg,1.61mmol)、TEA(0.801mg,8.05mmol)、Boc2O(702mg,3.22mmol)加入到DCM(10mL)中，室溫攪拌2h。LCMS監測反應結束，反應液經過FCC(SiO2,THF/PE=0-20%)純化，得到無色油狀化合物n-25-7(400mg，兩步收率90%)。LCMS(m/z)：253.1(M+H)。
步驟G：化合物n-25-8
室溫條件下，依次將化合物n-25-7(93.1mg，0.369mmol)、NCS(73.3mg，0.551mmol)加入到MeCN(3mL)中，60℃攪拌2h。LCMS監測反應結束，反應液經C18(H2O/MeOH=0-40%)純化，得到白色固體化合物n-25-8(88.7mg，收率79%)。LCMS(m/z)：287.1(M+H)。
步驟H：化合物n-25
室溫條件下，將化合物n-25-8(88.7mg,0.309mmol)加入到EA/HCl(10mL)中，室溫攪拌2h。LCMS監測反應結束，反應濃縮，得到白色固體化合物n-25(56mg，收率92%)。LCMS(m/z)：187.1(M+H)。
中間體n-26
按照上述方案製備中間體n-26。LCMS(m/z)：281.2(M+H)。
中間體n-8-d3
中間體n-8-d3的合成參照中間體n-26方案進行。LCMS(m/z)：270.2(M+H)。
中間體A-I-F
(R)-1-(7-溴-2,8-二氟-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌啶-3-醇
步驟A：(R)-1-(7-溴-2-氯-8-氟-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌啶-3-醇
在0℃下，將DIEA(2.45mL,13.62mmol)加入到7-溴-2,4-二氯-8-氟-6-(三氟甲基)喹唑啉(1.8g,3.79mmol)、(R)-3-甲基-3-哌啶醇鹽酸鹽(600mg,3.79mmol)和THF(30mL)的混合溶液中，室溫攪拌2h。TLC監測反應完成，冷卻後將反應液倒入水中(100mL)，EA(50mL×3)萃取，收集的有機相用飽和NaCl(20mL)洗滌。有機液濃縮得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0~20%)純化，得到黃色固體(R)-1-(7-溴-2-氯-8-氟-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌啶-3-醇(1.38g，收率79.3%)。
步驟B：(R)-1-(7-溴-2,8-二氟-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌啶-3-醇
室溫條件下，將(R)-1-(7-溴-2-氯-8-氟-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌啶-3-醇(1.33g,3mmol)加入到1,4-二氮雜雙環[2.2.2]辛烷(34mg,301μmol)、KF(1.75g,30mmol)、MsOH(29mg,301μmol)和DMSO(15mL)的混合溶液中。65℃攪拌16h，LCMS監測反應完成，冷卻 後將反應液倒入H2O(100mL)中，棕黃色固體析出。過濾，H2O(100mL)洗濾餅，烘乾濾餅，得到棕色固體(R)-1-(7-溴-2,8-二氟-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌啶-3-醇(1g，收率78.1%)。LCMS(m/z)：427.9(M+H)。
中間體A-II-F
(S)-4-(7-溴-2,8-二氟-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)-6-甲基-1,4-噁唑-6-醇
步驟A：(S)-4-(7-溴-2-氯-8-氟-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)-6-甲基-1,4-噁唑-6-醇
室溫條件下，將DIPEA(2.70mL,15.8mmol)加入到7-溴-2,4-二氯-8-氟-6-(三氟甲基)喹唑啉(1.80g,3.95mmol)、(S)-6-甲基-1,4-氧雜環己烷-6-醇鹽酸鹽(660mg,3.95mmol)和THF(20mL)的混合液中，室溫條件下攪拌反應1h。TLC和LCMS監測反應結束，加入H2O(100mL)和EA(100mL×3)萃取，收集有機相，飽和食鹽水洗，收集有機相，濃縮所得的粗產品經過FCC(SiO2,EA/PE=0-30%)純化，得到黃色固體產物(S)-4-(7-溴-2-氯-8-氟-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)-6-甲基-1,4-噁唑-6-醇(1.4g，收率78%)。LCMS(m/z)：459.9(M+H)。
步驟B：(S)-4-(7-溴-2,8-二氟-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)-6-甲基-1,4-噁唑-6-醇
室溫條件下，依次將(S)-4-(7-溴-2-氯-8-氟-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)-6-甲基-1,4-噁唑-6-醇(1.40g,3.05mmol)，KF(1.77g,30.5mmol)，DABCO(34mg,0.31mmol)，MsOH(29mg,0.31mmol)加入到DMSO(15mL)中，並升溫至65℃攪拌3h。LCMS監測反應結束，反應液恢復至室溫。然後慢慢倒入攪拌的水(200mL)中，絮狀不溶物產生，過濾收集濾餅烘乾，得到黃色固體(S)-4-(7-溴-2,8-二氟-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)-6-甲基-1,4-噁唑-6-醇(1.1g，收率81%)。LCMS(m/z)：443.9(M+H)。
中間體B-I-F
(R)-1-(7-溴-2,6,8-三氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌啶-3-醇
步驟A：(R)-1-(7-溴-2-氯-6,8-二氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌啶-3-醇
室溫條件下，將DIPEA(39.9mL,229mmol)加入到7-溴-2,4-二氯-6,8-二氟喹唑啉(18.0g,57mmol)、(R)-3-甲基哌啶-3-醇．鹽酸鹽(8.69g,57mmol)和THF(200mL)的混合液中，室溫條件下攪拌反應2h。TLC和LCMS監測反應結束，濃縮除去THF，加入乙腈(15mL)，將乙腈 和化合物的混合液慢慢倒入攪拌的水(600mL)中，產生絮狀不溶物，過濾並將濾餅烘乾後，得到黃色固體(R)-1-(7-溴-2-氯-6,8-二氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌啶-3-醇(21.7g，收率96%)。LCMS(m/z)：393.9(M+H)。
步驟B：(R)-1-(7-溴-2,6,8-三氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌啶-3-醇
室溫條件下，依次將(R)-1-(7-溴-2-氯-6,8-二氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌啶-3-醇(12.0g,30.6mmol)、KF(17.8g,306mmol)、DABCO(137mg,1.22mmol)、MsOH(117mg,1.22mmol)加入到DMSO(60mL)中，並升溫至65℃攪拌10h。LCMS監測反應結束後，反應液恢復至室溫。然後慢慢倒入攪拌的水(600mL)中，產生絮狀不溶物，過濾並將濾餅烘乾，得到黃色固體(R)-1-(7-溴-2,6,8-三氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌啶-3-醇(11.3g，收率98%)。LCMS(m/z)：378.0(M+H)。
中間體B-II-F
(S)-4-(7-溴-2,6,8-三氟喹唑啉-4-基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇
步驟A：(S)-4-(7-溴-2-氯-6,8-二氟唑唑啉-4-基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇
室溫條件下，將DIPEA(1.55mL,8.92mmol)加入到7-溴-2,4-二氯-6,8-二氟喹唑啉(700mg,2.23mmol)、(S)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇．鹽酸鹽(374mg,2.23mmol)和THF(12mL)的混合液中，所得混合物室溫條件下攪拌反應2h。TLC和LCMS監測反應結束，濃縮除去THF，加入乙腈(2mL)，慢慢倒入攪拌的水(50mL)中，絮狀不溶物產生，過濾並將濾餅烘乾後，得到棕黃色固體(S)-4-(7-溴-2-氯-6,8-二氟喹唑啉-4-基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇(720mg，收率79%)。LCMS(m/z)：409.9(M+H)。
步驟B：(S)-4-(7-溴-2,6,8-三氟喹唑啉-4-基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇
室溫條件下，依次將(S)-4-(7-溴-2-氯-6,8-二氟喹唑啉-4-基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇(700mg,1.71mmol)、KF(995mg,17.1mmol)、MsOH(16mg,171umol)、DABCO(19mg,171umol)加入到DMSO(10mL)中，並升溫至65℃攪拌18h。LCMS監測反應結束，反應液恢復至室溫。然後慢慢倒入攪拌的水(60mL)中，黃色絮狀不溶物產生，過濾並將濾餅烘乾，得到黃色固體(S)-4-(7-溴-2,6,8-三氟喹唑啉-4-基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇(600mg，收率89%)。LCMS(m/z)：392.0(M+H)。
中間體D-I-F
(R)-1-(7-溴-6-氯-2,8-二氟-4-喹唑啉基)-3-甲基-3-哌啶醇
步驟A：(R)-1-(7-溴-2,6-二氯-8-氟-4-喹唑啉基)-3-甲基-3-哌啶醇
在0℃下，將DIEA(4.5mL,27.24mmol)加入到7-溴-2,4,6-三氯-8-氟喹唑啉(3.0g,3.03mmol)、(R)-3-甲基-3-哌啶醇．鹽酸鹽(1.38g,9.08mmol)和THF(50mL)的混合溶液中，所得混合物室溫攪拌2h。TLC監測反應完成，反應液濃縮後得到油狀物，加入乙腈(5mL)溶解。將此溶液倒入H2O(300mL)中，棕黃色固體析出，過濾，H2O(100mL)洗濾餅。烘乾濾餅，得到棕色固體(R)-1-(7-溴-2,6-二氯-8-氟-4-喹唑啉基)-3-甲基-3-哌啶醇(3.7g，9.04mmol，收率99%)。
步驟B：(R)-1-(7-溴-6-氯-2,8-二氟-4-喹唑啉基)-3-甲基-3-哌啶醇
室溫條件下，將(R)-1-(7-溴-2,6-二氯-8-氟-4-喹唑啉基)-3-甲基-3-哌啶醇(3.7g,9.04mmol)加入到DABCO(102mg,904μmol)、KF(5.25g,90.45mmol)、MsOH(87mg,904μmol)和DMSO(50mL)的混合溶液中，所得混合物加熱至65℃攪拌16h。LCMS監測反應完成，冷卻後將反應液倒入H2O(400mL)中，棕黃色固體析出，過濾，H2O(100mL)洗濾餅。烘乾濾餅，得到棕色固體(R)-1-(7-溴-6-氯-2,8-二氟-4-喹唑啉基)-3-甲基-3-哌啶醇(3.0g，收率84%)。LCMS(m/z)：393.9(M+H)。
中間體D-II-F
(S)-4-(7-溴-6-氯-2,8-二氟-4-喹唑啉基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇
步驟A：(S)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇鹽酸鹽
室溫條件下，將HCl-二噁烷(4M)(10mL,10V)加入到(S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-羧酸三級丁酯(1.00g,4.32mmol)中並在室溫下攪拌1h。LCMS監測反應結束，反應液濃縮後，得到白色固體(S)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇鹽酸鹽(840mg，粗品)。LCMS(m/z)：132.1(M+H)。
步驟B：(S)-4-(7-溴-2,6-二氯-8-氟-4-喹唑啉基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇
室溫條件下，將DIPEA(1.56g,12.1mmol)加入到7-溴-2,4,6-三氯-8-氟喹唑啉(1.00g,3.03mmol)、(S)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇鹽酸鹽(655mg,12.1mmol)和THF(20mL)的混合液並在室溫條件下攪拌1h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入飽和NH4Cl水溶液(50mL)中，EA(30mL×3)萃取。收集有機相，飽和NaCl水溶液(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾，濃縮，得到白色固體(S)-4-(7-溴-2,6-二氯-8-氟-4-喹 唑啉基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇(1.2g，收率93%)。LCMS(m/z)：425.9(M+H)。
步驟C：(S)-4-(7-溴-6-氯-2,8-二氟-4-喹唑啉基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇
室溫條件下，將MsOH(27.0mg,0.282mmol)加入到(S)-4-(7-溴-2,6-二氯-8-氟-4-喹唑啉基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇(1.20g,2.82mmol)、KF(1.64g,28.2mmol)、DABCO(31.7mg,0.282mmol)和DMSO(30mL)的混合溶液中，將反應液升溫至100℃並攪拌1h。LCMS監測反應結束，將反應液緩慢滴加入水(150mL)中析出固體，過濾，濾餅用EA(100mL)溶解後用無水Na2SO4乾燥，過濾，有機液濃縮，得到黃色固體(S)-4-(7-溴-6-氯-2,8-二氟-4-喹唑啉基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇(1.0g，收率87%)。LCMS(m/z)：409.9(M+H)。
中間體F-I
(3R)-1-(7-氯-8-氟-2-(甲硫基)-3,4-二氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌啶-3-醇
步驟A：(3R)-1-(7-氯-8-氟-2-(甲硫基)-3,4-二氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌啶-3-醇
室溫條件下，將DIPEA(2.37g,18.3mmol)加入到7-氯-8-氟-2-(甲硫基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇(1.50g,6.11mmol)、(R)-3-甲基哌啶-3-醇．鹽酸鹽(1.06g,7.02mmol)、BOP(5.40g,12.2mmol)和DMF(20mL)的混合液中。將反應體系升溫至45℃攪拌18h。TLC監測反應結束，反應液恢復至室溫後緩慢倒入攪拌著的H2O(200mL)中，固體析出，過濾，H2O(100mL)洗濾餅，烘乾濾餅，得到棕色固體(3R)-1-(7-氯-8-氟-2-(甲硫基)-3,4-二氫吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌啶-3-醇(2.0g，收率98%)。
中間體F-II
(S)-4-(7-氯-8-氟-2-(甲硫基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇
中間體F-II的合成參照中間體F-I該方案進行，在步驟A中使用(S)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇．鹽酸鹽代替(R)-3-甲基哌啶-3-醇．鹽酸鹽。
中間體G-II
(S)-4-(7-氯-8-氟-5-甲氧基-2-(甲硫基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇
步驟A：(S)-4-(7-氯-8-氟-5-甲氧基-2-(甲硫基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇
室溫條件下，將DIEA(1.4g,11mmol)加入到7-氯-8-氟-5-甲氧基-2-(甲硫基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇(1.0g,3.6mmol)、(S)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇．鹽酸鹽(770mg,4.64mmol)、BOP(2.4g,5.4mmol)和DMF(15mL)的混合溶液中。將反應體系升溫至50℃攪拌2h。LCMS監測反應結束，反應液恢復至室溫後緩慢倒入攪拌著的H2O(100mL)中，固體析出，過濾並將濾餅烘乾後，得到棕黃色固體(S)-4-(7-氯-8-氟-5-甲氧基-2-(甲硫基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇(900mg，收率64%)。LCMS(m/z)：389.0(M+H)。
中間體G-I
(R)-1-(7-氯-8-氟-5-甲氧基-2-甲硫基吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌啶-3-醇
中間體G-I的合成參照中間體G-II該方案進行，在步驟A中使用(R)-6-甲基哌啶-3-醇．鹽酸鹽代替(S)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇‧鹽酸鹽。
中間體I-I
(R)-1-(7-氯-8-氟-2-(甲硫基)-5-((三異丙基矽基)乙炔基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌啶-3-醇
步驟A：(R)-1-(7-氯-8-氟-2-(甲硫基)-5-((三異丙基矽基)乙炔基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌啶-3-醇
室溫條件下，將7-氯-8-氟-2-(甲硫基)-5-((三異丙基矽基)乙炔基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-醇(200mg,0.47mmol)溶於POCl3(2mL)，加入DIPEA(360mg,2.35mmol)。所得體系加熱至100℃反應3h，減壓濃縮乾。冷至室溫，加入5mL無水THF，後加入(R)-3-甲基-3-羥基哌啶‧鹽酸鹽(107mg,0.704mmol)和DIPEA(360mg,2.35mmol)。所得混合物室溫攪拌反應2h，LCMS監測反應完。反應液濃縮乾，得到的粗產品經FCC(SiO2，EA/PE=0-50%)純化，得到白色固體(R)-1-(7-氯-8-氟-2-(甲硫基)-5-((三異丙基矽基)乙炔基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌啶-3-醇(200mg，收率81%)。LCMS(m/z)：523.2(M+H)。
中間體I-II
(S)-4-(7-氯-8-氟-2-(甲硫基)-5-((三異丙基矽基)乙炔基)吡啶并[4,3-d]嘧啶-4-基)-6-甲基-1,4-氧氮雜環庚烷-6-醇
中間體I-II的合成參照中間體I-I該方案進行，在步驟A中使用(S)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇．鹽酸鹽代替(R)-3-甲基-3-羥基哌啶‧鹽酸鹽。
根據上述合成方案製備以下中間體：
中間體X
化合物3-甲基-4-側氧哌啶-1,3-二羧酸1-(三級丁基)酯3-甲基酯(CAS：193274-53-2，120g)經SFC(SFC150,Waters)拆分(分離管柱： DAICEL CHIRALPAK®IG,250*50mm,10μm；流動相：CO2/MeOH=90/10；流速：120mL/min)，得到首先沖提出來的異構體1，為化合物X(52.8g，相對保留時間較小)。手性分析方法-X，Rt=0.682min。1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ 4.59-4.42(m,1H),4.26-3.98(m,1H),3.73(s,3H),3.42-3.24(m,1H),3.16-3.01(m,1H),2.93-2.63(m,1H),2.58-2.40(m,1H),1.49(s,9H),1.31(s,3H)。LCMS(m/z)：216.1(M-56+H)。隨後沖提出來的異構體2，為化合物X-1(52.4g，相對保留時間較大)。手性分析方法-X，Rt=1.035min。1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ 4.60-4.41(m,1H),4.24-3.94(m,1H),3.73(s,3H),3.42-3.24(m,1H),3.17-3.00(m,1H),2.93-2.64(m,1H),2.56-2.40(m,1H),1.49(s,9H),1.31(s,3H)。
手性分析方法-X：Waters UPCC，分析管柱：Daicel Chiralpak®IG，100*3mm 3μm；流動相A：CO2，流動相B：MeOH；流速：1.5mL/min；管柱溫度：35℃；反壓：1800psi；梯度：0-8.0min A/B=90/10。
中間體a
((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲醇
步驟A：(S)-4-(二氟亞甲基)-3-甲基哌啶-1,3-二羧酸-1-(三級丁基)-3-甲基酯
將(R)-3-甲基-4-氧哌啶-1,3-二羧酸-1-(三級丁基)-3-甲基酯(10.0g,36.86mmol)和2-((二氟甲基)磺醯基)吡啶(10.68g,55.29mmol)溶解到無水DMF(100mL)中，氮氣置換三次。將體系用乾冰乙醇浴冷卻，滴加1莫耳的三級丁醇鉀四氫呋喃溶液(66.34mL,66.34mmol)。所得混合液保持溫度攪拌2h，後緩慢升至室溫後繼續攪拌3h。LCMS監測反應結束後，用飽和氯化銨水溶液(50mL)淬滅反應，加入水(200mL)、DCM/MeOH(100mL,v/v=10/1)萃取5次。LiCl水溶液(100mL,4% w/w)洗滌3次，飽和食鹽水(100mL)洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮乾。所得粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-20%)純化後，得到淡黃色油狀產物(5.2g，收率46%)。LCMS(m/z)：250.1(M-56+H)。
步驟B：(3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基哌啶-1,3-二羧酸-1-(三級丁基)-3-甲基酯
室溫條件下，將(S)-4-(二氟亞甲基)-3-甲基哌啶-1,3-二羧酸-1-(三級丁基)-3-甲基酯(6.20g,20.31mmol)溶解到甲醇(150mL)中，用氮氣置換三次。加入鈀碳(2.16g,10% w/w)，用氫氣置換三次。在15Psi的氫氣氛圍下30℃攪拌4h。LCMS監測反應結束後，反應液用矽藻土過濾，濾餅用甲醇洗滌三遍。收集濾液，濃縮乾，得到無色油狀產物(3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基哌啶-1,3-二羧酸-1-(三級丁基)-3-甲基酯(5.53g，收率89%)。LCMS(m/z)：252.1(M-56+H)。
步驟C：(3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基哌啶-3-羧酸甲酯‧鹽酸鹽
室溫條件下，將(3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基哌啶-1,3-二羧酸-1-(三級丁基)-3-甲基酯(5.53g,17.99mmol)溶解於4M HCl/二噁烷(60mL)中，所得混合液室溫攪拌1h，濃縮除去酸溶液，得到白色固體(3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基哌啶-3-羧酸甲酯‧鹽酸鹽(4.38g，收率100%)。LCMS(m/z)：208.1(M+H)。
步驟D：(3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-羧酸甲酯
室溫下，將(3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基哌啶-3-羧酸甲酯‧鹽酸鹽(3.58g,14.69mmol)，溶解至甲醇(40mL)中，加入甲醛水溶液(3.58g,37%w/w，44.07mmol)。所得混合物在室溫下攪拌30min。加入氰基硼氫化鈉(1.11g,17.63mmol)，所得混合液在室溫下攪拌1.5h。LCMS監測反應結束後，將體系濃縮乾，加入乙酸乙酯溶解粗產物，矽藻土過濾。所得濾液經FCC(SiO2,MeOH/DCM(含0.3% DIEA)=0-4%)純化後，得到無色油狀產物(3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-羧酸甲酯(3.0g，收率92%)。LCMS(m/z)：222.1(M+H)。
步驟E：(3S,4S)-(4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲醇
在冰浴條件下，將1M的LiAlH4-THF(17.63mL,17.63mmol)滴加到(3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-羧酸甲酯(3.0g,13.56mmol)的無水THF(30mL)溶液中。所得混合液在0℃攪拌15min。LCMS監測反應結束後，加入十水合的硫酸鈉淬滅反應，直到沒有氣泡產生。加入約8g無水硫酸鈉。矽藻土過濾，濾餅用無水四氫呋喃洗滌3次。收集濾液，濃縮乾，得到無色固體產物(3S,4S)-(4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲醇(2.6g，收率99%)。LCMS(m/z)：194.1(M+H)。
中間體b
(S,E)-(4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲醇
步驟A：(S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基哌啶-1,3-二羧酸-1-三級丁基酯-3-甲基酯及(S,Z)-4-(氟亞甲基)-3-甲基哌啶-1,3-二羧酸-1-三級丁基酯-3-甲基酯
將(氟亞甲基)三苯基膦四氟硼酸鹽(10.56g,27.64mmol)溶解到無水THF(50mL)中，氮氣置換三次。在乾冰乙醇條件下，把反應液的溫度降至-70℃，將三級丁醇鉀-四氫呋喃(27.64mL,1M,27.64mmol)溶液逐滴地滴加到反應體系中。保持溫度繼續攪拌1h。後將(R)-3-甲基-4-側氧哌啶-1,3-二羧酸-1-(三級丁基)-3-甲基酯(5.0g,18.43mmol)的無水四氫呋喃(15mL)溶液滴加到反應體系中。滴加完成後，所得混合物緩慢升至室溫攪拌過夜。TLC監測反應結束後，將反應液緩慢倒入水(100mL)中，用乙酸乙酯萃取3次。有機相合併後，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮乾，得到粗產品。粗產物藉由FCC(SiO2，EA/PE=0-15%)純化，得到無 色油狀產物(S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基哌啶-1,3-二羧酸-1-三級丁基酯-3-甲基酯(1.98g，收率37%)。LCMS(m/z)：232.1(M-56+H)。1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ 6.55(d,J=84.7,1H),4.35(d,J=13.2Hz,1H),4.10-3.82(m,1H),3.69(s,3H),3.00-2.85(m,1H),2.76(d,J=13.1Hz,1H),2.71-2.60(m,1H),2.31-2.08(m,1H),1.46(s,9H),1.29(s,3H)；及無色油狀產物(S,Z)-4-(氟亞甲基)-3-甲基哌啶-1,3-二羧酸-1-三級丁基酯-3-甲基酯(600mg，收率11%)。LCMS(m/z)：232.1(M-56+H)。1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ 6.43(d,J=83.7,1H),3.86-3.75(m,1H),3.71(s,3H),3.62-3.47(m,1H),3.42-3.29(m,2H),2.24-2.06(m,2H),1.46(s,9H),1.43-1.39(m,3H)。
步驟B：(S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基哌啶-3-羧酸甲酯．鹽酸鹽
室溫條件下，將4M HCl-二噁烷(10mL)加入到(S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基哌啶-1,3-二羧酸-1-三級丁基酯-3-甲基酯(600mg,2.09mmol)中，保持室溫攪拌1h。濃縮除去酸溶液，得到白色固體(S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基哌啶-3-羧酸甲酯‧鹽酸鹽(572mg，收率100%)。LCMS(m/z)：188.1(M+H)。
步驟C：(S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-羧酸甲酯
室溫條件下，將(S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基哌啶-3-羧酸甲酯．鹽酸鹽(370mg,1.98mmol)溶解至甲醇(5mL)中，滴加三乙胺至反應液pH~10，攪拌10分鐘，後滴加冰醋酸至反應液pH~4。將甲醛水溶液(481.15mg,5.93mmol)加入反應液中，在室溫下攪拌30min。將氰基硼氫化鈉(136.62mg,2.17mmol)加入反應液中，在室溫下攪拌2h。LCMS監測 反應結束後，減壓濃縮除去溶劑，無水四氫呋喃帶蒸兩遍後，得到白色固體(S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-羧酸甲酯(380mg，收率96%)。LCMS(m/z)：202.1(M+H)。
步驟D：(S,E)-(4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲醇
在冰浴條件下，將1M的LiAlH4-THF溶液(2.83mL,107.5mg,2.83mmol)滴加到(E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-羧酸甲酯(380mg,1.89mmol)的無水四氫呋喃(5mL)溶液中。所得混合物在室溫下攪拌20min。LCMS監測反應結束後，反應液用十水合硫酸鈉淬滅，直到沒有氣泡產生。加入約5g無水硫酸鈉除水。反應液用矽藻土過濾，濾餅用無水四氫呋喃洗滌三遍。收集濾液，濃縮至乾，得無色油狀產物(S,E)-(4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲醇(300mg，收率92%)。LCMS(m/z)：174.1(M+H)。
中間體c
((3S,4S)-4-(氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲醇
步驟A：(S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基哌啶-1,3-二羧酸-1-三級丁基酯-3-甲基酯及(S,Z)-4-(氟亞甲基)-3-甲基哌啶-1,3-二羧酸-1-三級丁基酯-3-甲基酯
步驟A的合成參照中間體b步驟A合成該進行。
步驟B：(3S,4S)-4-(氟甲基)-3-甲基哌啶-1,3-二羧酸酯-1-(三級丁基)-3-甲基酯
室溫氮氣保護下，將濕Pd/C(400mg,10%w/w)加入到(S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基哌啶-1,3-二羧酸-1-三級丁基酯-3-甲基酯及(S,Z)-4-(氟亞甲基)-3-甲基哌啶-1,3-二羧酸-1-三級丁基酯-3-甲基酯混合物(850mg,2.96mmol)的甲醇(10mL)溶液中。用氫氣球置換體系，在氫氣氛圍中攪拌反應過夜。TLC監測反應結束後，用矽藻土過濾，濾液濃縮至乾，得到粗產品，藉由FCC(SiO2，EA/PE=0-10%)純化，得到無色油狀產物(3S,4S)-4-(氟甲基)-3-甲基哌啶-1,3-二羧酸酯-1-(三級丁基)-3-甲基酯(600mg，收率70%)。LCMS(m/z)：234.1(M-56+H),312.1(M+Na)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ 4.76-4.70(m,0.5 H),4.64-4.52(m,1H),4.46-4.41(m,0.5 H),4.23(d,J=13.7Hz,1H),4.08-3.99(m,1H),3.67(s,3H),3.06-2.86(m,1H),2.86-2.70(m,1H),1.95-1.81(m,1H),1.80-1.68(m,2H),1.46(s,9H),1.27(s,3H).19F NMR(376MHz,甲醇-d4)δ 221.80.
步驟C：(3S,4S)-4-(氟甲基)-3-甲基哌啶-3-羧酸甲酯‧鹽酸鹽
室溫下，將3M鹽酸-二噁烷(10mL,30mmol)滴加到(3S,4S)-4-(氟甲基)-3-甲基哌啶-1,3-二羧酸酯-1-(三級丁基)-3-甲基酯(600mg, 2.07mmol)的乙酸乙酯(10mL)溶液中，所得混合物在室溫攪拌反應1h。LCMS監測反應完成，減壓濃縮，得到白色固體(3S,4S)-4-(氟甲基)-3-甲基哌啶-3-羧酸甲酯‧鹽酸鹽(500mg，粗品)。LCMS(m/z)：190.1(M+H)。
步驟D：(3S,4S)-4-(氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-羧酸甲酯
室溫下，將(3S,4S)-4-(氟甲基)-3-甲基哌啶-3-羧酸甲酯鹽酸鹽(500mg，上步粗品)溶於甲醇(10mL)，加入甲醛水溶液(2mL,35~40%w/w,~24mmol)，室溫攪拌2h。分批加入氰基硼氫化鈉(696mg,11.1mmol)，所得混合物室溫攪拌反應2h。LCMS監測反應結束，飽和NH4Cl水溶液加入反應液中，用乙酸乙酯提取產物三次，合併有機相濃縮得到粗產品，藉由FCC(SiO2，EA/PE=0-100%)純化，得到無色油狀產物(3S,4S)-4-(氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-羧酸甲酯(200mg，收率44%)。LCMS(m/z)：204.1(M+H)。
步驟E：((3S,4S)-4-(氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲醇
在室溫條件下，將LiAlH4-THF(1.7mL,1M,1.7mmol)慢慢滴加到(3S,4S)-4-(氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-羧酸甲酯(200mg,0.869mmol)的無水THF(2mL)溶液中，所得混合物室溫攪拌反應0.5小時。TLC監測反應結束，冰浴冷卻，加入十水硫酸鈉淬滅反應直至無氣泡產生。補加適量的乙酸乙酯，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮至乾，得到無色油狀粗產物((3S,4S)-4-(氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲醇(100mg，收率58%)。LCMS(m/z)：176.1(M+H)。
中間體d
(3S)-(4-氟-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲醇
步驟A：(S)-4-氟-3-甲基-3,6-二氫吡啶-1,3(2H)-二羧酸-1-(三級丁基)酯-3-甲基酯
冰浴條件下，將BAST(19.57g,16.3mL,88.46mmol)滴入到(R)-3-甲基-4-側氧哌啶-1,3-二羧酸1-(三級丁基)酯3-甲基酯(8.0g,29.49mmol)和DCM(40mL)的混合溶液中，滴加完畢後恢復室溫攪拌過夜。TLC監測反應結束後，將反應液緩慢倒入半飽和的NaHCO3(100mL)溶液中，用DCM(100mL×3)萃取。合併有機相濃縮後藉由FCC(SiO2,EA/PE=0-10%)純化，得到無色油狀物(S)-4-氟-3-甲基-3,6-二氫吡啶-1,3(2H)-二羧酸-1-(三級丁基)酯-3-甲基酯(1.0g，收率12%)。LCMS(m/z)：218.1(M-56+H)。
步驟B：(S)-(4-氟-1,3-二甲基-1,2,3,6-四氫吡啶-3-基)甲醇
室溫條件下，將LiAH4(4.02mL,4.02mmol,1MTHF溶液)加到(S)-4-氟-3-甲基-3,6-二氫吡啶-1,3(2H)-二羧酸-1-(三級丁基)酯-3-甲基酯(500mg,1.83mmol)中並升溫至70℃攪拌1h。LCMS監測反應結束後，在冰浴條件下，緩慢將Na2SO4‧10H2O加入反應液中淬滅LiAH4，直到反應不再生成氣體為止，再加入無水硫酸鈉乾燥溶液，過濾，收集母液濃 縮，得到無色油狀液體(S)-(4-氟-1,3-二甲基-1,2,3,6-四氫吡啶-3-基)甲醇(284mg，收率98%)。LCMS(m/z)：160.1(M+H)。
步驟C：(3S)-(4-氟-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲醇
室溫氮氣保護下，將Pd/C(5% w/w,374mg,0.176mmol)加入到(S)-(4-氟-1,3-二甲基-1,2,3,6-四氫吡啶-3-基)甲醇(280mg,1.76mmol)和EA：MeOH=1：1(20mL)的混合溶液中，所的混合物氫氣置換，後在60psi H2壓力下室溫反應2h。TLC監測反應結束後，反應液經矽藻土過濾，EA(50ml)洗滌，有機相濃縮，得到無色油狀液體(3S)-(4-氟-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲醇(220mg，收率78%)。LCMS(m/z)：162(M+H)。
參照上述合成方案或者適當變體製備了以下中間體：
中間體b-d3
(S,E)-(4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲醇
步驟A：(S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-甲酸甲酯
室溫下，將碳酸鉀(5.55g，40.2mmol)加入到(S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基哌啶-3-羧酸甲酯鹽酸鹽(3.00g,13.4mmol)、氘代碘甲烷(2.33g,16.1mmol)和ACN(100mL)的混合溶液中，加完後加熱至90℃攪拌過夜。LCMS監測反應結束後，過濾，用EA(50mL)淋洗濾餅。收集濾液濃縮並進一步FCC(SiO2，EA/PE=0-20%)純化，得到無色液體(S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-甲酸甲酯(1.9g，收率69%)。LC-MS(m/z)：205.1(M+H)。
步驟B：(S,E)-(4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲醇
冰浴下，將LiAlH4(1M-THF,9.3mmol,9.3mL)滴入(S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-甲酸甲酯(1.9g,9.3mmol)和THF(50mL)的混合溶液中，加完後在0℃冰浴攪拌0.5h。LCMS監測反應結束後，用Na2SO4‧10H2O淬滅反應直到沒有氣體產生為止，反應液藉由矽藻土過濾，得到的濾液低溫(35℃)濃縮，得到無色液體4-氟亞甲基-3-甲基-1-甲基-D3-哌啶-3-甲醇(1.3g,79%收率)。LC-MS(m/z)：177.1(M+H)。
中間體b-d5
(S,E)-(4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)亞甲基-d 2-醇
步驟A：(S,E)-(4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)亞甲基-d 2-醇
在冰浴條件下，將LiAlD4粉末(271.28mg,6.46mmol)加入到(S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-甲酸甲酯(1.10g,5.39mmol)的無水四氫呋喃(15mL)溶液中。所得混合物在室溫下攪拌15min。LCMS監測反應結束後，反應液用十水合硫酸鈉淬滅，直到沒有氣泡產生。再向反應液中加入約5克的無水硫酸鈉除水。反應液用矽藻土過濾，濾餅用無水四氫呋喃洗滌三遍。收集濾液，濃縮至乾，得到無色油狀產物(S,E)-(4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)亞甲基-d 2-醇(951mg，收率99%)。該產品沒有經過純化直接用於下一步反應。LCMS(m/z)：179.1(M+H)。
參照上述方法合成下列中間體。
中間體w1
(3-氰基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁基酯
步驟A：(4-溴-3-氰基苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸乙酯
冰浴、氮氣氛圍條件下，向2-(2,6-二溴苯)乙腈(5.0g,18mmol)的DMF(50mL)溶液中加入氫化鈉(60wt%,0.73g,22mmol)，反應體系在0℃下攪拌10min。將異硫氰醯甲酸乙酯(2.14mL,18mmol)緩慢加入反應體系中，加畢，反應升至室溫並持續攪拌1h。後將反應體系升至100℃攪拌1h。減壓濃縮移除DMF，加入水(100mL)及乙酸乙酯(10mL)，所得混合物室溫條件下攪拌15min。攪拌結束後有大量黃色固體析出，過濾，水洗，乾燥，得到黃色固體(4-溴-3-氰基苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸乙酯(3.9g)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 11.69(s,1H),7.93(dd,J=8.0,1.0Hz,1H),7.60(dd,J=7.8,1.0Hz,1H),7.28-7.14(m,1H),4.24(q,J=7.1Hz,2H),1.29(t,J=7.1Hz,3H).
步驟B：2-胺基-4-溴苯并[b]噻吩-3-腈
向(4-溴-3-氰基苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸乙酯(3.9g，12mmol)的DMSO(12mL)和水(18mL)混合溶液中加入氫氧化鈉(3.7g，93mmol)。反應體系在125℃下攪拌16h。將反應體系冷卻至室溫，倒入100mL的冰水中，過濾，水洗，乾燥，得到淡黃色固體2-胺基-4-溴苯并[b]噻吩-3-腈(2.2g)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 7.96(s,2H),7.70(dd,J=7.9,1.0Hz,1H),7.46(dd,J=7.9,1.0Hz,1H),7.14-6.96(m,1H).
步驟C：(4-溴-3-氰基苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
向溶有2-胺基-4-溴苯并[b]噻吩-3-腈(2.2g，8.7mmol)的DMF(29mL)和THF(4.5mL)混合溶液中依次加入4-二甲胺基吡啶(104mg,0.85mmol)和二異丙基乙基胺(2.3mL,26mmol)。之後，緩慢滴加二碳酸二三級丁酯(2.2mL,9.5mmol)。加畢，反應體系在室溫條件下攪拌24h。反應 結束後，向反應體系加水(100mL)，有黃色固體析出，過濾收集固體，水洗，乾燥，得到淡黃色固體(4-溴-3-氰基苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(1.4g)。
步驟D：(3-氰基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁基酯
將(4-溴-3-氰基苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(1.4g，3.9mmol)、聯硼酸頻哪醇酯(1.5g,5.9mmol)、乙酸鉀(0.77g,7.8mmol)、1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡合物(0.3g,0.35mmol)依次加入到50mL的圓底燒瓶中，並向反應瓶中加入1,4-二噁烷(5mL)。之後，將反應置換為氮氣氛圍。加熱至105℃下反應3h。反應結束後過濾收集濾液，濃縮，得粗品經過FCC(SiO2，石油醚/四氫呋喃~0-30%)純化，得到淡黃色固體(3-氰基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁基酯(1.6g)。LCMS(m/z)：423.0(M+Na)。
中間體w1b
(3-氰基-4-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環己烷-2-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
中間體w1b的合成參照中間體w1進行，在步驟D中使用5,5,5',5'-四甲基-2,2'-雙(1,3,2-二氧雜硼雜環己烷)代替聯硼酸頻哪醇酯。
中間體w2
(4-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環己烷-2-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
步驟A：4-溴苯并[b]噻吩-2-羧酸甲酯
室溫下，將化合物2,6-二溴苯甲醛(15.7g,59.5mmol)、巰基乙酸甲酯(5.6mL,65.4mmol)、K2CO3(15.7g,119.0mmol)、DMF(200mL)依次加入到置有磁子的反應瓶中，所得混合物升溫至110℃並攪拌10h。TLC監測反應結束，將反應液倒入300mL的水中，有大量黃色固體析出，過濾，濾餅經水洗，50℃烘乾，得到粗品4-溴苯并[b]噻吩-2-羧酸甲酯(18g)，LCMS(m/z)：270.9(M+H)。
步驟B：4-溴苯并[b]噻吩-2-羧酸
將LiOH．H2O(5.4mL,129.7mmol)、4-溴苯并[b]噻吩-2-羧酸甲酯(7.0g,25.9mmol)依次加入到THF(10mL)和H2O(2mL)的混合溶液中，所得混合物室溫攪拌16h。LCMS監測反應結束後，用1M鹽酸將體系pH調至3，EA(60mL×3)萃取，無水Na2SO4乾燥，過濾，減壓濃縮，得到粗品1-苯并噻吩-2-羧酸(8.0g)，LCMS(m/z)：256.9(M+H)。
步驟C：(4-溴苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
將4-溴苯并[b]噻吩-2-羧酸(2.5g)、DPPA(3.2mL,14.7mmol)、DIEA(2.0mL，19.5mmol)、甲苯(25mL)、三級丁醇(1.4mL，14.7mmol)依次加入到反應瓶中，所得混合物在100℃條件下攪拌16h。LCMS監測反應結束後，減壓濃縮，粗產物經過FCC(SiO2,EA/PE=0-30%)純化，得(4-溴-1-苯并噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(3.0g)，LCMS(m/z)：271.9(M-56)。
步驟D：(4-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環己烷-2-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
將(4-溴苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(2.9g,8.9mmol)、5,5,5’,5’-四甲基-2,2’-雙(1,3,2-二氧雜硼雜環己烷)(5.0g,22.3mmol)、DephosPdCl2(0.64g,0.9mmol)、KOAc(2.6g,26.7mmol)、1,4-二噁烷(30mL)依次加入到反應瓶中，氮氣置換三次，反應液在95℃條件下攪拌1h。LCMS監測反應結束後，減壓濃縮，粗產物經過FCC(SiO2,EA/PE=0-30%)純化，得(4-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環己烷-2-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(3.1g，收率98%)。
中間體w3
步驟A：化合物w3-2
在室溫氮氣保護下，向化合物w3-1(30g，135.7mmol)的THF(500mL)溶液中加入碳酸鉀(37.5g,271.4mmol)和巰基乙酸甲酯(17.3g，169.2mmol)。所得反應液升溫至45℃攪拌反應4h，隨後將反應液升溫至90℃攪拌反應16h。LCMS監測反應結束後，反應液濃縮乾，將水加入濃縮液中，再用乙酸乙酯萃取。有機相合併，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮乾，所得粗產品經過FCC(SiO2,DCM/PE=0-8%)純化，得類白色固體化合物w3-2(24.3g，收率62%)。LCMS(m/z)：288.9(M+H)。
步驟B：化合物w3-3
在氮氣保護下，向化合物w3-2(24.3g,84.1mmol)的THF(170mL)和水(57mL)溶液中，加入一水合氫氧化鋰(10.6g,252.2mmol)。所得混合物在室溫條件下繼續攪拌3h。LCMS監測反應結束後，反應液濃縮乾，將稀鹽酸水溶液(1N)加入濃縮殘渣中至pH5，固體析出，室溫條件下繼續攪拌0.5h，過濾。濾餅用水淋洗，真空乾燥，得類白色固體化合物w3-3(22.5g，收率98%)。LCMS(m/z)：274.9(M+H)。
步驟C：化合物w3-4
在氮氣保護下，向化合物w3-3(22.5g,82.4mmol)的無水甲苯(135mL)和無水三級丁醇(45mL)溶液中，加入三乙胺(11.6g,115.4mmol)和疊氮磷酸二苯酯(27.2g,98.9mmol)。所得混合物在100℃條件下攪拌16h。LCMS監測反應結束後，將反應液倒入100mL飽和碳酸氫鈉水溶液中，再用乙酸乙酯萃取。有機相合併後，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮乾，所得粗產品經過EA/PE=1/10(80mL)打漿純化，得到黃色固體化合物w3-4(28g，收率98%)。LCMS(m/z)：289.9(M+H)。
步驟D：中間體w3
在室溫氮氣保護下，向化合物w3-4(5g,14.5mmol)的1,4-二噁烷(80mL)溶液加入5,5,5’,5’-四甲基-2,2’-雙(1,3,2-二氧雜硼雜環己烷)(4.88g,21.7mmol)、醋酸鉀(2.83g,28.9mmol)和DPEphosPdCl2(1.04g，1.45mmol)。所得反應液升溫至90℃攪拌反應16h。LCMS監測反應結束後，反應液經矽藻土過濾，濾餅經乙酸乙酯淋洗，濾液濃縮乾，所得粗產品經過FCC(SiO2,EA/PE=0-10%)純化，得白色固體產品中間體w3(3.2g，收率58%)。LCMS(m/z)：256.0(M+H-68-56).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 10.73(s,1H),7.86-7.77(m,1H),7.14(d,J=0.7Hz,1H),6.90(dd,J=9.8,8.6Hz,1H),3.81(s,4H),1.49(s,9H),1.02(s,6H).
中間體w4
步驟A：化合物w4-2
在乾冰乙醇浴條件下，將LDA(143mL,2M THF溶液,285mmol)加入到化合物w4-1(25.0g,190mmol)和THF(300mL)的混合溶液中並在乾冰乙醇浴條件下攪拌5.0h，在乾冰乙醇浴條件下，將DMF (41.7g,570mmol)加入到反應溶液中並在升溫至室溫後攪拌1.0h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入飽和的NH4Cl(300mL)溶液中淬滅，EA(200mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(500mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾後濃縮有機相得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-15%)純化，得到淡黃色油狀產物w4-2(13.9g，收率46%)。LCMS(m/z)：177.9(M+H2O)。
步驟B：化合物w4-3
室溫條件下，依次將K2CO3(18.0g,130mmol)、巰基乙酸甲酯(10.7g,100mmol)加入到化合物w4-2(16.0g,100mmol)和DMF(250mL)的混和溶液中，並在室溫條件下攪拌2.0h。LCMS監測反應結束，將反應液滴入水(1000mL)中，並在室溫條件下攪拌0.5h。過濾後得到濾餅，經過真空乾燥箱(50℃,16h)乾燥後，得到白色固體產物w4-3(15.0g，收率71%)。LCMS(m/z)：212.0(M+H)。
步驟C：化合物w4-4
室溫條件下，依次將LiOH．H2O(8.94g,213mmol)、化合物w4-3(15.0g,71.0mmol)加入到MeOH(80.0mL)、H2O(80.0mL)和THF(160mL)的混和溶液中，並在室溫條件下攪拌0.5h。LCMS監測反應結束，將反應液濃縮得到粗品加入水(150mL)中，用HCl(1M)的鹽酸調至PH=3。過濾後得到的濾餅經過真空乾燥箱(50℃,16h)乾燥後，得到白色固體產物w4-4(14.0g，收率100%)。LCMS(m/z)：198.0(M+H)。
步驟D：化合物w4-5
室溫條件下，依次將DPPA(29.3g,107mmol)、TEA(14.4g,142mmol)、化合物w4-4(14.0g,71.0mmol)加入到甲苯(150mL)和三級丁醇(50mL)的混和溶液中，並在升溫至90℃攪拌16h。LCMS監測反應結束，將反應液濃縮得到的粗品加入飽和碳酸氫鈉水溶液(150mL)中淬滅，EA(80mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(150mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾後濃縮有機相得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-50%)純化，得到白色固體產物w4-5(9.0g，收率47%)。LCMS(m/z)：269.1(M+H)。
步驟E：化合物w4-6
室溫條件下，將m-CPBA(13.6g,67.1mmol,85%)加入到化合物w4-5(9.00g,33.5mmol)和DCM(800mL)的混合溶液中並在室溫條件下攪拌16h。LCMS監測反應結束，濃縮反應液得到的粗品經FCC(SiO2，MeOH/DCM=0-5%)純化，得到白色固體產物w4-6(8.1g，收率85%)。LCMS(m/z)：285.0(M+H)。
步驟F：化合物w4-7
在冰水浴條件下，將POCl3(21.8g,142mmol)滴加到化合物w4-6(8.10g,28.4mmol)和DMF(250mL)的混和溶液中，升至室溫後攪拌1.0h。LCMS監測反應結束，將反應液滴入水(800mL)中，並在室溫條件下攪拌0.5h。過濾後得到濾餅粗品經FCC(SiO2，THF/PE=0-50%)純化，得到黃色固體產物w4-7(4.2g，收率49%)。LCMS(m/z)：303.0(M+H)。
步驟G：中間體w4
在冰水浴條件下，將CSI(5.42g,38.3mmol)加入到化合物w4-7(2.90g,9.58mmol)和ACN(300mL)的混和溶液中，升至室溫後攪拌 1.5h。在冰水浴條件下，將DMF(6.0mL)滴加入到以上反應液中，升至室溫後攪拌1.5h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入水(300mL)中，並在室溫條件下攪拌0.5h。過濾後得到的濾餅用EA(200mL)溶解後無水Na2SO4乾燥，過濾後濃縮有機相，得到白色固體產物w4(2.0g，收率64%)。LCMS(m/z)：328.0(M+H)。
中間體w5
步驟A：化合物w5-2
將化合物w5-1(10g,56.8mmol)、巰基乙酸甲酯(6g,56.8mmol)溶於DMF(100mL)中，加入碳酸鉀(11.8g,85.2mmol)，在40℃下攪拌2h，再升溫至60℃攪拌16h。LCMS和TLC監測反應結束，將反應液恢復至室溫，倒入水(500mL)中，析出固體。過濾收集的固體，用清水(200ml)洗滌，減壓乾燥後得到化合物w5-2(10.5g，收率81%)。LCMS(m/z)：227.9(M+H)。
步驟B：化合物w5-3
將化合物w5-2(10.5g,46.1mmol)溶解在THF(100mL)中，加入甲醇(50mL)和水(50mL)，攪拌下加入LiOH(5.8g,138.3mmol)，室溫攪拌1h。LCMS和TLC監測反應結束，減壓蒸餾除去有機溶劑，剩餘的水相加入100mL水稀釋，用1N HCl調節pH~4，析出固體。過濾收集的 固體，用清水(200ml)洗滌，減壓乾燥後，得到化合物w5-3(8g，收率81%)。LCMS(m/z)：213.9(M+H)。
步驟C：化合物w5-4
將化合物w5-3(8g,37.4mmol)和DPPA(13.4g,48.7mmol)溶於甲苯(66mL)和三級丁醇(34mL)中，加入三乙胺(5.68g,56.2mol)，所得混合物在90℃下攪拌16h。LCMS和TLC監測反應結束，冷卻至室溫後，加入飽和碳酸氫鈉水溶液(100mL)，EA(50mL×3)萃取，收集的有機相用飽和食鹽水洗，無水Na2SO4乾燥，過濾，濃縮有機相得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-100%)純化，得到白色固體化合物w5-4(4g，收率38%)。LCMS(m/z)：285.0(M+H)。
步驟D：中間體w5
步驟D的合成參照中間體w4中步驟G合成所述方法進行。LCMS(m/z)：310.0(M+H)。
中間體w6
步驟A：中間體w6
在-10℃條件下，向化合物w3-4(7.00g,20.2mmol)的MeCN(175mL)溶液中加入CSI(3.42g,24.3mmol)保持溫度攪拌反應1.0h，將 DMF(7.28g,101.2mmol)加入到反應液中。所得反應液在-10℃下繼續反應1.0h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入水(300mL)溶液中，室溫攪拌0.5h，過濾，濾餅經真空乾燥箱乾燥，得到白色固體中間體w6(6.6g，收率88%)。LCMS(m/z)：371.1(M+H)。
中間體w7
中間體w7參照文獻WO2024067714所述方法進行製備。
中間體J-W1
步驟A：7-溴-4-氯-8-氟-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)喹唑啉
室溫條件下，將POCl3(20.6g,134mmol)加入到7-溴-8-氟-2-甲硫基-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-醇(16g,44.8mmol)、DIEA(17.37g,134mmol)和THF(200mL)的混合溶液中，並升溫至60℃攪拌1h。LCMS監測反應結束。反應液濃縮並經FCC純化，得黃色油狀產物7-溴-4-氯-8- 氟-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)喹唑啉(15g，收率89.2%)。LCMS(m/z)：374.8(M+H)。
步驟B：7-溴-4-三級丁氧基-8-氟-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)喹唑啉
在乾冰乙醇浴條件下，將tBuOK(26.6mL,1M THF溶液，26.6mmol)加入到7-溴-4-氯-8-氟-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)喹唑啉(10g,26.6mmol)和THF(200mL)的混合溶液中，並在此溫度下攪拌1h，後升至室溫繼續攪拌1h。LCMS和TLC監測反應結束。將反應液倒入半飽和的NH4Cl(100mL)溶液中，EA(100mL×3)萃取。收集有機相後，飽和食鹽水(100mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮有機相經FCC(SiO2，EA/PE=0-20%)純化，得到黃色固體產物7-溴-4-三級丁氧基-8-氟-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)喹唑啉(10g，收率90.1%)。LCMS(m/z)：412.9(M+H)。
步驟C：(4-(4-(三級丁氧基)-8-氟-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
室溫條件下，依次將7-溴-4-三級丁氧基-8-氟-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)喹唑啉(6.00g,14.52mmol)、(4-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環己烷-2-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(7.87g,21.78mmol)、DPEphosPdCl2(2.07g,2.9mmol)、Cs2CO3(14.19g,43.56mmol)加入到1,4-二噁烷(100mL)和水(20mL)溶液中，N2置換三次後，升溫至80℃攪拌5h。LCMS和TLC監測反應結束，將反應液恢復至室溫，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，收集母液，加入水(100mL)，EA(100mL×3)萃取。收集的有機相用飽和食鹽水(50mL)洗，濃縮有機液得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-40%)純化，得到黃色固體(4-(4-(三級丁氧基)-8-氟-2-(甲硫基)- 6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(7.2g，收率85.2%)。LCMS(m/z)：526.0(M+H-56)。
步驟D：(3-氰基-4-(8-氟-4-羥基-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
在乾冰乙腈浴條件下，將CSI(2.76g,19.26mmol)加入到(4-(4-(三級丁氧基)-8-氟-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(2.8g,4.8mmol)和乙腈(300mL)的混合溶液中並攪拌1h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入冰水浴的DMF(100mL)中，繼續攪拌1h。將反應液倒入飽和的NaHCO3(200mL)溶液中，EA(100mL×3)萃取。收集有機相後，飽和食鹽水(100mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮有機相經FCC(SiO2,EA/PE=0-50%)純化，得到黃色固體產物(3-氰基-4-(8-氟-4-羥基-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(2g，收率75.4%)。LCMS(m/z)：551.0(M+H)。
中間體J-W3
(3-氰基-5-氟-4-(8-氟-4-羥基-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
步驟A：(4-(4-(三級丁氧基)-8-氟-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
室溫條件下，依次將7-溴-4-三級丁氧基-8-氟-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)喹唑啉(4.00g,9.68mmol)、(4-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環己烷-2-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(5.51g，14.52mmol)、RuphosPdG4(1.64g,0.19mmol)和DIEA(3.75g,29.04mmol)加入到1,4-二噁烷(80mL)和水(16mL)的混合溶液中。N2置換三次後，升溫至80℃攪拌4h。LCMS和TLC監測反應結束，將反應液冷至室溫，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，收集母液，加入水(100mL)，EA(100mL×3)萃取。收集的有機相用飽和食鹽水(50mL)洗，濃縮有機液得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-40%)純化，得到黃色固體(4-(4-(三級丁氧基)-8-氟-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(3g，收率51.6%)。LCMS(m/z)：544.0(M+H-56)。
步驟B：(3-氰基-5-氟-4-(8-氟-4-羥基-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
在乾冰乙腈浴條件下，將CSI(2.83g,20mmol)加入到(4-(4-(三級丁氧基)-8-氟-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)唑唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(3g,5mmol)和乙腈(500mL)的混合溶液中並攪拌1h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入冰浴冷卻的DMF(200mL)中， 繼續攪拌1h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入飽和的NaHCO3(200mL)溶液中，EA(100mL×3)萃取。合併有機相，飽和食鹽水(100mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮，經FCC(SiO2，EA/PE=0-40%)純化，得到黃色固體產物(3-氰基-5-氟-4-(8-氟-4-羥基-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(1.3g，收率45.7%)。LCMS(m/z)：569.0(M+H)。
中間體J-W3A及中間體J-W3B
中間體J-W3(5.0g)經SFC拆分(Waters SFC 150，分離管柱：DAICELCHIRALCEL®IC 250*25mm 10μm；流動相CO2/MeOH(+0.1% 7.0mol/l NH3-MeOH)=90/10；流速：140mL/min)，得到首先沖提出來的異構體1為中間體J-W3B(2.1g，相對保留時間較小)。手性分析方法SFC-J-W3，Rt=2.692min。LCMS(m/z)：569.0(M+H)。隨後沖提出來的異構體2為中間體J-W3A(2.0g，相對保留時間較大)。手性分析方法SFC-J-W3，Rt=3.424min。LCMS(m/z)：569.0(M+H)。
手性分析方法SFC-J-W3：Waters UPCC，分析管柱：DAICELCHIRALPAK®IC，100*3mm 3μm；流動相A：CO2，流動相B： MeOH(+0.1%DEA)；流速：1.5mL/min；管柱溫度：35℃；反壓：1800psi；梯度：0-8.0min A/B=85/15.
中間體J-W3A-Cl
步驟A：中間體J-W3A-Cl
冰水浴條件下，將DMF(25.7mg,0.35mmol)加入到草醯氯(178.6mg,1.41mmol)的DCM(5mL)溶液中，升至室溫攪拌30min。後降至冰水浴條件，將中間體J-W3A-Cl(200mg,0.35mmol)加入到上述反應液中，升至室溫攪拌1h。LCMS和TLC監測反應結束。將反應液倒入飽和NaHCO3(50mL)中，DCM(10mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(10mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機相得到黃色固體中間體J-W3A-Cl(200mg，收率97%)。LCMS(m/z)：587.0(M+H)。
參照上述方法製備中間體J-W3B-Cl，LCMS(m/z)：587.0(M+H)。
中間體N1
(3-氰基-4-(8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-羥基-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸 三級丁酯
步驟A：7-溴-4-三級丁氧基-2-氯-8-氟-6-三氟甲基喹唑啉
在乾冰-乙醇浴條件下，將t-BuOK(30.2mL,30.2mmol,1MTHF溶液)滴加到7-溴-2,4-二氯-8-氟-6-(三氟甲基)喹唑啉(10.0g,27.5mmol)和THF(100mL)的混合溶液中，滴加完畢後，使體系自然由低溫恢復至室溫共攪拌3h。LCMS監測反應結束，把反應液倒入半飽和的NH4Cl(100mL)溶液中淬滅，EA(150mL×3)萃取，有機相用飽和食鹽水(50mL)洗滌，收集有機相濃縮後得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-10%)純化，得到黃色固體7-溴-4-三級丁氧基-2-氯-8-氟-6-三氟甲基喹唑啉(9.49g，收率85%)。LCMS(m/z)：346.9(M+H-56)。
步驟B：(S,E)-7-溴-4-(三級丁氧基)-8-氟-2-((4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-6-(三氟甲基)喹唑啉
在室溫條件下，將DABCO(152mg,1.35mmol)加入到7-溴-4-三級丁氧基-2-氯-8-氟-6-三氟甲基喹唑啉(2.17g,5.40mmol)、(S,E)-(4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲醇(1.22g,7.02mmol)、Cs2CO3(4.93g,15.1mmol)和ACN(30mL)的混合溶液中，25℃攪拌過夜。LCMS監測反應結束，把反應液倒入H2O(100mL)溶液中，EA(60mL×3)萃取，有機相用飽和食鹽水(30mL)洗滌，收集有機相濃縮後得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-60%)純化，得到黃色固體(S,E)-7-溴-4-(三級丁氧基)-8-氟-2-((4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-6-(三氟甲基)喹唑啉(1.03g，收率35%)。LCMS(m/z)：540.1(M+H)。
步驟C：(4-(4-(三級丁氧基)-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
室溫條件下，依次將(S,E)-7-溴-4-(三級丁氧基)-8-氟-2-((4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-6-(三氟甲基)喹唑啉(4.1g,7.62mmol)、(4-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環己烷-2-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(4.13g,11.4mmol)、DPEphosPdCl2(1.09mg,1.52mmol)、Cs2CO3(7.44g,22.8mmol)加入到1,4-二噁烷(125mL)與H2O(25mL)的混合溶液中，N2置換三次後，升溫至80℃攪拌3h。LCMS監測反應結束，反應液恢復至室溫。矽藻土過濾除去鈀催化劑，收集母液，加入飽和食鹽水(20mL)洗滌，收集有機相濃縮後得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-60%)純化，得到黃色固體(4-(4-(三級丁氧基)-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并 [b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(3.8g，收率70%)。LCMS(m/z)：707.1(M+H)。
步驟D：(3-氰基-4-(8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-羥基-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
在-15℃條件下，將CSI(3.04g,21.5mmol)和ACN(10mL)的稀釋液滴加到(4-(4-(三級丁氧基)-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(3.80g,5.38mmol)和ACN(700mL)的混合溶液中，滴加完畢後，使體系保持低溫並攪拌1h。而後在-15℃下將DMF(8mL)和ACN(10mL)的稀釋液滴入反應體系並攪拌1h。LCMS監測反應結束，把反應液倒入半飽和的NaHCO3(50mL)溶液和飽和食鹽水(50mL)的混合溶液中，EA(100mL×2)萃取。收集有機相，濃縮得到粗品經FCC(SiO2,MeOH/DCM=0-10%)純化，得到黃色油狀產物，凍乾後得到(3-氰基-4-(8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-羥基-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(2.8g，收率77%)。LCMS(m/z)：676.0(M+H)。
中間體N1A及中間體N1B
中間體N1(4.0g)經SFC拆分(Waters SFC 150，分離管柱：REGIS(S,S)WHELK-O1 250*40mm 10μm；流動相CO2/MeOH(+0.1% 7.0mol/l NH3-MeOH)=70/30；流速：140mL/min)，得到首先沖提出來的異構體1為中間體N1B(1.6g，相對保留時間較小)。手性分析方法SFC-N1，Rt=1.463min。LCMS(m/z)：676.0(M+H)。隨後沖提出來的異構體2為中間體N1A(1.9g，相對保留時間較大)。手性分析方法SFC-N1，Rt=1.989min。LCMS(m/z)：676.0(M+H)。
手性分析方法N1：Waters UPCC，分析管柱：REGIS(S,S)WHELK-O1，100*3mm 3μm；流動相A：CO2，流動相B：MeOH(+0.1%DEA)；流速：1.5mL/min；管柱溫度：35℃；反壓：1800psi；梯度：0-8.0min A/B=65/35。
中間體N2
(4-(6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-羥基喹唑啉-7-基)-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
步驟A：7-溴-2,6-二氯-8-氟-4-甲氧基喹唑啉
在乾冰乙腈浴條件下，將NaOMe(5.45g,30.3mmol,30% MeOH溶液)和MeOH(10mL)的稀釋溶液滴加到7-溴-2,4,6-三氯-8-氟喹唑啉(10.0g,30.3mmol)和MeOH(100mL)的體系中，滴加完畢後，使體系自然由低溫恢復至室溫並攪拌5h。LCMS監測反應結束，把反應液倒入半飽和的NH4Cl(100mL)溶液中淬滅，再將混合液濃縮除去MeOH，白色固體析出，熱過濾，收集濾餅，烘乾，得到白色固體7-溴-2,6-二氯-8-氟-4-甲氧基喹唑啉(9.6g，收率97%)。LCMS(m/z)：326.8(M+H)。
步驟B：(S,E)-7-溴-6-氯-8-氟-2-((4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-甲氧基喹唑啉
在室溫條件下，將DABCO(172mg,1.53mmol)加入到7-溴-2,6-二氯-8-氟-4-甲氧基喹唑啉(1.00g,3.07mmol)、(S,E)-(4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲醇(797mg,4.60mmol)、Cs2CO3(3.00g,9.20mmol)和ACN(10mL)的混合溶液中，室溫攪拌1.5h。LCMS監測反應結束，把反應液倒入H2O(100mL)溶液中白色固體析出，過濾，收集濾餅。TLC顯示析出產物純度不好，故DCM(100mL)溶解濾餅，並加入適量無水硫酸鈉乾燥，濃縮所得的粗產品經FCC(SiO2,EA/PE=0-30%)純化，得到白色固 體(S,E)-7-溴-6-氯-8-氟-2-((4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-甲氧基喹唑啉(670mg，收率47%)。LCMS(m/z)：462.0(M+H)。
步驟C：(4-(6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-甲氧基喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
室溫條件下，依次將(S,E)-7-溴-6-氯-8-氟-2-((4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-甲氧基喹唑啉(600mg,1.30mmol)、(4-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環己烷-2-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(738mg,1.95mmol)、RuPhos Pd G4(110mg,0.13mmol)、DIPEA(670mg,5.19mmol)加入到Me-THF(16mL)與H2O(4mL)的混合溶液中，N2置換三次後，升溫至70℃攪拌3h。LCMS監測反應結束，反應液恢復至室溫。矽藻土過濾除去鈀催化劑，收集母液，加入水(50mL)，EA(50mL×3)萃取。合併有機相用飽和食鹽水(20mL)洗滌，收集有機相濃縮後得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-60%)純化，得到黃色固體(4-(6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-甲氧基喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(650mg，收率77%)。LCMS(m/z)：649.2(M+H).
步驟D：(4-(6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-甲氧基喹唑啉-7-基)-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
在-15℃乾冰乙腈浴條件下，將CSI(394mg,2.77mmol)和ACN(5mL)的稀釋液滴加到(4-(6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-甲氧基喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺 基甲酸三級丁酯(600mg,0.924mmol)和ACN(50mL)的體系中，滴加完畢後，使體系保持低溫並攪拌1.5h。而後在-15℃下將DMF(5mL)和ACN(5mL)的稀釋液滴入反應體系並攪拌1h。LCMS監測反應結束，把反應液倒入半飽和的NaHCO3(50mL)溶液中淬滅反應，EA(50mL×3)萃取。收集有機相，用飽和食鹽水(20mL)洗滌，濃縮得到粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-60%)純化，得到黃色油狀產物(4-(6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-甲氧基喹唑啉-7-基)-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(600mg，收率96%)。LCMS(m/z)：674.1(M+H)。
步驟E：(4-(6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-羥基喹唑啉-7-基)-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
在室溫條件下，將MeSNa(1.2g,17.8mmol)加入到(4-(6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-甲氧基喹唑啉-7-基)-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(600mg,0.890mmol)和DMF(20mL)的混合溶液中，升溫至90℃並攪拌2h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入水(100mL)中，用1M HCl調節pH=6，再用NaHCO3水溶液調至鹼性，EA(50mL×3)萃取。收集有機相，飽和食鹽水(20mL)洗滌，濃縮有機相得到粗品經FCC(SiO2,(EA/EtOH=3：1)/PE=0-50%)純化得到黃色固體(4-(6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-羥基喹唑啉-7-基)-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(490mg，收率83%)。LCMS(m/z)：660.0(M+H)。
中間體N3
(4-(6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-羥基喹唑啉-7-基)-3-氰基苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
中間體N3的合成參照中間體N2該方案進行，在步驟C中使用(4-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環己烷-2-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯代替(4-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環己烷-2-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯。LCMS(m/z)：642.2(M+H)。
中間體N4及N4-OH
步驟A：化合物N4-1
室溫條件下，依次將中間體T(4.0g,8.5mmol)、乙烯基硼酸頻哪醇酯(2.62g,17.02mmol)、Pd(dppf)Cl2(622mg,0.85mol)、K2CO3(3.52g,25.53mmol)加入到DMF(60mL)溶液中，N2置換三次後，升溫至80℃攪拌1.5h。LCMS和TLC監測反應結束，將反應液恢復至室溫，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，收集母液，加入水(50mL)，EA(50mL×3)萃 取，收集的有機相用飽和食鹽水洗，無水Na2SO4乾燥，過濾，濃縮有機液得到的粗品經FCC(SiO2，THF/PE=0-3%)純化，得到淡黃色固體化合物N4-1(1.74g，收率55%)。LCMS(m/z)：316.9(M+H-56)。
步驟B：化合物N4-2
室溫條件下，依次將化合物N4-1(1.74g,4.70mmol)、中間體w3(2.67g,7.05mmol)、RuPhos Pd G4(400mg,0.1mol)、DIEA(3.03mg,23.50mmol)加入到1,4-二噁烷(25mL)和水(5mL)溶液中，N2置換三次後，升溫至70℃攪拌2h。LCMS和TLC監測反應結束，將反應液恢復至室溫，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，收集母液，加入水(50mL)，EA(50mL×3)萃取，收集的有機相用飽和食鹽水洗，無水Na2SO4乾燥，過濾，濃縮有機液得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-20%)純化，得到棕色固體化合物N4-2(1.80g，收率69%)。LCMS(m/z)：558.2(M+H)。
步驟C：化合物N4-3
室溫條件下，依次將化合物N4-2(1.80g,3.12mmol)、PtO2(71mg)加入到甲醇(30mL)溶液中，H2置換三次後，室溫攪拌16h。LCMS和TLC監測反應結束，將反應液藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，收集母液，濃縮有機液得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-11%)純化，得到白色固體化合物N4-3(1.30g，收率72%)。LCMS(m/z)：560.2(M+H)。
步驟D：中間體N4-OH
在冰鹽浴條件下(-10℃)，向化合物N4-3(1.30g,2.33mmol)的MeCN(130mL)的溶液中加入CSI(1.31mg,9.30mmol)保持溫度攪拌反應1.0h，將DMF(20mL)加入到反應液中。所得反應液在室溫條件下繼續 反應1小時。TLC監測反應結束，將反應液倒入半飽和的NaHCO3(50mL)溶液中，EA(50mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(30mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾，濃縮有機相經FCC(SiO2，THF/PE=0-78%)純化，得到黃色固體化合物N4-OH(725mg，收率59%)。LCMS(m/z)：529.2(M+H)。
步驟E：中間體N4
在冰浴條件下，向草醯氯(144mg,1.13mmol)的DCM(5mL)溶液中加入DMF(28mg,0.38mmol)，保持溫度攪拌反應0.5h，將化合物N4-4(200mg,0.38mmol)加入到反應液中。所得反應液在室溫條件下繼續反應1小時。LCMS監測反應結束，將反應液倒入水(20mL)中，DCM(20mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機相經FCC(SiO2，THF/PE=0-15%)純化，得到白色固體中間體N4(150mg，收率73%)。LCMS(m/z)：547.1(M+H)。
中間體N5及N5-OH
步驟A：化合物N5-1
室溫條件下，依次將中間體w6(2.00g,5.41mmol)、化合物N11-3(1.79g,6.49mmol)、Pd-118(353mg,0.541mmol)、K3PO4(3.44g,16.2mmol)加入到1,4-二噁烷(30mL)和水(6mL)溶液中，N2置換三次後，升溫至80℃攪拌2h。LCMS和TLC監測反應結束，將反應液恢復至室溫，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，收集母液，加入水(50mL)，EA(50mL×3)萃取，收集的有機相用飽和食鹽水洗，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮有機液得到的粗品經FCC(SiO2，THF/PE=0-57%)純化，得到灰色固體化合物N5-1(1.69g，收率71%)。LCMS(m/z)：441.1(M+H)。
步驟B：化合物N5-2
室溫條件下，向化合物N5-1(1.69g,3.84mmol)的乙腈(25mL)溶液中依次加入TFA(876mg,7.68mmol)、NCS(615mg,4.61mmol)。所得反應液升溫至40℃攪拌1.5h。LCMS和TLC監測反應結束。將反應液倒入半飽和的NaHCO3(50mL)溶液中，EA(50mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮有機液得到的粗品經FCC(SiO2，THF/PE=0-58%)純化，得到黃色固體化合物N5-2(1.13g，收率62%)。LCMS(m/z)：475.1(M+H)。
步驟C：化合物N5-3
室溫條件下，向化合物N5-2(1.13g,2.38mmol)的四氫呋喃(25mL)溶液中加入氫化鈉(60%分散在礦物油中，334mg，8.34mmol)。所得反應液在40℃攪拌0.5h，將TCDI(635mg,3.57mmol)加入到反應液中，升溫至60℃攪拌16h。LCMS監測反應結束，將反應液恢復至室溫，倒入半飽和的NH4Cl(20mL)溶液中，鹽酸調節pH~5，EA(50mL×3)萃取，收 集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮有機液得到棕色固體化合物N5-3(1.11g，粗品)。LCMS(m/z)：517.1(M+H)。
步驟D：中間體N5-OH
室溫條件下，依次將化合物N5-3(1.11g)、NaOH(344mg，8.59mmol)、碘甲烷(458mg,3.23mmol)加入到甲醇(10mL)和水(10mL)溶液中，室溫攪拌2h。LCMS監測反應結束，將反應液用鹽酸調節pH~5，EA(50mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮有機液得到的粗品經FCC(SiO2，THF/PE=0-38%)純化，得到白色固體中間體N5-OH(266mg)。LCMS(m/z)：531.1(M+H)。
步驟E：中間體N5
在冰浴條件下，向草醯氯(139mg,1.09mmol)的DCM(5mL)溶液中加入DMF(20.0mg,0.274mmol)，保持溫度攪拌反應0.5h，將中間體N5-OH(145mg,0.274mmol)加入到反應液中。所得反應液在室溫條件下繼續反應1h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入水(30mL)中，DCM(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥。濃縮有機相經FCC(SiO2,THF/PE=0-12%)純化，得到白色固體中間體N5(126mg，收率84%)。LCMS(m/z)：548.9(M+H)。
中間體N5-OH-A及N5-OH-B
中間體N5-OH(5g)經SFC拆分(Waters SFC 150，分離管柱：DAICELCHIRALPAK®OJ 250*30mm 10μm；流動相CO2/MeOH(+0.1% 7.0mol/l NH3-MeOH)=80/20；流速：140mL/min)，得到首先沖提出來的異構體1為中間體N5-OH-A(2g，相對保留時間較小)。手性分析方法SFC-N5-OH，Rt=2.004min。LCMS(m/z)：531.1(M+H)。隨後沖提出來的異構體2為中間體N5-OH-B(2g，相對保留時間較大)。手性分析方法SFC-N5-OH，Rt=3.151min。LCMS(m/z)：531.1(M+H)。
手性分析方法SFC-N5-OH：Waters UPCC，分析管柱：DAICELCHIRALPAK®OJ，100*3mm 3μm；流動相A：CO2，流動相B：MeOH(+0.1%DEA)；流速：1.5mL/min；管柱溫度：35℃；反壓：1800psi；梯度：0-7.0min A/B=85/15。
中間體N5A及N5B
中間體N5A及N5B分別由中間體N5-OH-A及N5-OH-B參照中間體N5的合成方法製備。LCMS(m/z)：548.9(M+H)。
中間體N6及N6-OH
步驟A：化合物N6-1
室溫條件下，向化合物N5-1(1.50g,3.41mmol)的乙腈(25mL)溶液中依次加入TFA(389mg，3.41mmol)、NIS(1.53g，6.81mmol)，所得反應液室溫攪拌過夜。LCMS和TLC監測反應結束。將反應液倒入半飽和的Na2SO3(50mL)溶液中，EA(100mL×3)萃取，收集有機相。飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥。濃縮有機液得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-50%)純化，得到棕灰色固體化合物N6-1(1.00g，收率52%)。LCMS(m/z)：566.9(M+H)。
步驟B：化合物N6-2
室溫條件下，依次將化合物N6-1(1.00g,1.77mmol)、乙烯基硼酸頻哪酯(816mg，5.30mmol)、Pd-118(228mg，0.353mmol)、K3PO4(1.50g，7.06mmol)加入到1,4-二噁烷(20mL)和水(5mL)溶液中，N2置換三次後，升溫至90℃攪拌3h。LCMS監測反應結束，將反應液恢復至室溫，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑。收集母液，加入水(50mL)，EA(50mL×3)萃取，收集的有機相用飽和食鹽水洗，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮有機液得到的粗品依次經FCC(SiO2,EA/PE=0-60%)及FCC(C18, ACN/(0.05%TFA/H2O)=5-60%)純化，得到黃色固體化合物N6-2(350mg，收率42%)。LCMS(m/z)：467.1(M+H)。
步驟C：化合物N6-3
室溫下，將化合物N6-2(350mg,0.75mmol)溶於甲醇(20mL)，加入Pd/C(160mg,10wt%,0.15mmol)，H2氣球置換兩次並在室溫攪拌3h。LCMS監測反應結束，反應液過濾頭得到澄清的有機相，濃縮完全後，得到黃色固體化合物N6-3(350mg，收率99%)。LCMS(m/z)：469.1(M+H)。
步驟D：化合物N6-4
室溫條件下，向化合物N6-3(350mg,0.747mmol)的四氫呋喃(12mL)溶液中加入氫化鈉(60%分散在礦物油中，105mg,2.61mmol)。所得反應液在40℃攪拌0.Sh，將N,N'-硫羰基二咪唑(200mg,1.12mmol)加入到反應液中，升溫至60℃攪拌3h。LCMS監測反應結束，將反應液恢復至室溫，倒入半飽和的NH4Cl(20mL)溶液中，鹽酸調節pH~5，EA(50mL×3)萃取。收集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥。濃縮有機液，得到棕色固體化合物N6-4(360mg，粗品)。LCMS(m/z)：511.0(M+H)。
步驟E：中間體N6-OH
室溫條件下，依次將化合物N6-4(360mg)、NaOH(113mg，2.82mmol)、碘甲烷(150mg，1.06mmol)加入到甲醇(5mL)和水(5mL)溶液中，室溫攪拌1h。LCMS監測反應結束，將反應液用鹽酸調節pH~5，EA(50mL×3)萃取。收集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥。 過濾，濃縮有機液得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-40%)純化，得到白色固體中間體N6-OH(220mg)。LCMS(m/z)：525.2(M+H)。
步驟F：中間體N6
在冰浴條件下，向草醯氯(110mg，0.944mmol)的DCM(3mL)溶液中加入DMF(15.3mg，0.210mmol)，保持溫度攪拌反應0.5h，將中間體N6-OH(110mg,0.210mmol)加入到反應液中。所得反應液在室溫條件下繼續反應1h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入NaHCO3水溶液(30mL)中，DCM(30mL×3)萃取。收集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥。濃縮有機相經FCC(SiO2，EA/PE=0-12%)純化，得到白色固體中間體N6(110mg，收率96%)。LCMS(m/z)：543.0(M+H)。
中間體N7及N7-OH
步驟A：化合物N7-2
室溫條件下，將NIS(73.4g,326mmol)加入到化合物N7-1(50.0g,217mmol)和ACN(500mL)的混和溶液中並在室溫下攪拌72h。 LCMS監測反應結束，將反應液濃縮後用EA(2L)溶解，然後依次用水(500mL×3)，飽和NaS2O3(500mL)洗滌，收集有機相後用無水Na2SO4乾燥，過濾後濃縮有機相，得到棕色固體產物N7-2(70g，收率90%)。LCMS(m/z)：355.9(M+H)和357.9(M+H)。
步驟B：化合物N7-3
室溫條件下，依次將化合物N7-2(10.0g,28.1mmol)、乙烯基硼酸頻哪醇酯(8.43g，56.2mmol)、Pd(dppf)Cl2(2.05g，2.81mmol)、K2CO3(11.6g，84.3mmol)加入到DMF(150mL)溶液中，N2置換三次後，升溫至80℃攪拌2h。LCMS監測反應結束，降至室溫後，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，收集母液，加入水(500mL)，EA(150mL×3)萃取，收集的有機相用飽和食鹽水(300mL)洗滌，濃縮有機相得到的粗品經FCC(SiO2，(DCM/PE=0-80%)純化，得到棕色固體產物N7-3(4.94g，收率69%)。LCMS(m/z)：256.0(M+H)和258.0(M+H)。
步驟C：化合物N7-4
室溫條件下，將PtO2(388mg,0.1wt)加入到化合物N7-3(3.88g，15.2mmol)和EtOH(50mL)的混和溶液中，H2置換三次後，並在H2(氣球)氛圍下室溫攪拌1.0h。LCMS監測反應結束，將反應液過濾後，濃縮有機相得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-30%)純化，得到黃色固體產物N7-4(2.7g，收率69%)。LCMS(m/z)：258.0(M+H)和260.0(M+H)。
步驟D：化合物N7-5
室溫條件下，依次將化合物N7-4(2.70g,10.5mmol)、聯硼酸頻那醇酯(5.31g,20.9mmol)、Pd(dppf)Cl2(765mg，1.05mmol)、KOAc (3.08g，31.4mmol)加入到1,4-二噁烷(100mL)中，N2置換三次後，升溫至90℃攪拌3.0h。LCMS監測反應結束，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，收集母液濃縮後得到的粗品經FCC(SiO2，DCM/PE=0-80%)純化，得到黃色固體產物N7-5(3.2g，收率100%)。LCMS(m/z)：306.2(M+H)。
步驟E：化合物N7-6
室溫條件下，依次將化合物N7-5(2.30g,7.54mmol)、中間體w6(5.59g，15.1mmol)、Pd(dtbpf)Cl2(487mg，0.754mmol)、K3PO4(4.79g，22.6mmol)加入到1,4-二噁烷(45mL)和水(9.0mL)溶液中，N2置換三次後，升溫至110℃攪拌1.0h。LCMS監測反應結束，降至室溫後，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑。收集母液，加入水(80mL)，EA(50mL×3)萃取，收集的有機相用飽和食鹽水(90mL)洗滌，濃縮有機相得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-80%)純化，得到粗品，粗品經pre-HPLC(C18,ACN/H2O)=10-100%)純化，得到白色固體化合物N7-6(1.76g，收率50%)。LCMS(m/z)：470.2(M+H)。
步驟F：化合物N7-7
室溫條件下，依次將NCS(501mg，3.75mmol)、TFA(427mg，3.75mmol)加入到化合物N7-6(1.76g，3.75mmol)和ACN(50mL)的混和溶液中並升溫至45℃攪拌4.0h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入飽和硫代硫酸鈉(70mL)中，EA(50mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾後濃縮有機相，得到黃色固體產物N7-7(1.89g，收率100%)。LCMS(m/z)：504.1(M+H)。
步驟G：化合物N7-8
室溫條件下，將NaOH(7.50mL,15.0mmol,2M)加入到化合物N7-7(1.89g,3.75mmol)和MeOH(37.5mL)的混和溶液中，升溫至60℃攪拌2h。LCMS監測反應結束，降至室溫後，將反應液濃縮得到粗品加入水(70mL)，用HCl(1N)調至PH~3。EA(50mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾後濃縮有機相，得到棕色固體產物N7-8(1.83g，收率100%)。LCMS(m/z)：490.1(M+H)。
步驟H：化合物N7-9
室溫條件下，依次將化合物N7-8(1.83g，3.74mmol)、NH4Cl(1.00g，18.7mmol)、HATU(2.84g，7.47mmol)、DIEA(3.85g，29.9mmol)加入到DME(40mL)溶液中並在室溫下攪拌1.0h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入水(200mL)中，EA(50mL×3)萃取。收集有機相後，飽和食鹽水(80mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾後濃縮有機相得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-80%)純化，得到黃色固體產物N7-9(1.73g，收率95%)。LCMS(m/z)：489.1(M+H)。
步驟I：化合物N7-10
室溫條件下，將NaH(143mg，3.58mmol)加入到化合物N7-9(700mg，1.43mmol)和THF(20mL)的混和溶液中，升溫至40℃攪拌0.5h。在40℃條件下，將TCDI(383mg，2.15mmol)加入到反應液中，升溫至60℃攪拌2.0h。LCMS監測反應結束，降至室溫後，將反應液倒入飽和氯化銨水溶液(50mL)中，然後用HCl(1N)調至PH~5。EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾後濃縮有機 相，得到棕色固體產物N7-10(760mg，收率100%)。LCMS(m/z)：531.1(M+H)。
步驟J：中間體N7-OH
室溫條件下，依次將碘甲烷(305mg，2.15mmol)、NaOH(229mg，5.72mmol)、化合物N7-10(760mg，1.43mmol)加入到MeOH(15mL)和H2O(15mL)的混和溶液中，並在室溫下攪拌1.0h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入水(30mL)中，然後用HCl(1M)調至PH~5，EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾後濃縮有機相，得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-50%)純化，得到黃色固體中間體N7-OH(610mg，收率78%)。LCMS(m/z)：545.1(M+H)。
步驟K：中間體N7
在冰水浴條件下，將DMF(20.1mg，0.275mmol)加入到草醯氯(105mg，0.826mmol)和DCM(3mL)的混和溶液中，並在在冰水浴條件下攪拌0.5h。在冰水浴條件下將中間體N7-OH(150mg，0.275mmol)的DCM(2mL)的溶液加入到以上反應液中，升至室溫後攪拌1.0h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入水(50mL)中，EA(30mL×3)萃取，收集有機相。飽和食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾後濃縮有機相，粗品經FCC(SiO2，THF/PE=0-20%)純化，得到黃色固體產物中間體N7(150mg，收率97%)。LCMS(m/z)：563.1(M+H)。
中間體N8及N8-OH
步驟A：化合物N8-1
室溫條件下，依次將化合物O-1(30g,80.4mmol)、環丙基硼酸(21g,241.3mmol)、Pd(dppf)Cl2(5.88g,8.04mmol)、K3PO4(51g,241.3mmol)加入到1,4-二噁烷(300mL)和水(60mL)溶液中，N2置換三次後，升溫至100℃攪拌36h。LCMS和TLC監測反應結束，將反應液恢復至室溫，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，收集母液，加入水(150mL)，EA(150mL×3)萃取。收集的有機相用飽和食鹽水洗，無水Na2SO4乾燥，過濾，濃縮有機液得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-16%)純化，得到黃色油狀化合物N8-1(11.4g，收率50%)。LCMS(m/z)：228.1(M+H)。
步驟B：化合物N8-2
室溫條件下，依次將化合物N8-1(1.30g,4.48mmol)、中間體w3(2.55g,6.72mmol)、RuPhos Pd G4(381mg,0.45mol)、DIEA(2.89g,22.4mmol)加入到1,4-二噁烷(25mL)和水(5mL)溶液中，N2置換三次後，升溫至70℃攪拌2h。LCMS和TLC監測反應結束，將反應液恢復至室溫，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，收集母液，加入水(50mL)，EA(50mL×3)萃取，收集的有機相用飽和食鹽水洗，無水Na2SO4乾燥，過濾，濃縮有機 液得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-16%)純化，得到棕色固體化合物N8-2(1.52g，收率72%)。LCMS(m/z)：475.1(M+H)。
步驟C：化合物N8-3
室溫條件下，依次將化合物N8-2(1.52g,3.21mmol)、氫氧化鋰一水合物(1.35g,32.1mmol)加入到甲醇(15mL)和水(15mL)溶液中，升溫至60℃攪拌1h。LCMS和TLC監測反應結束，用稀鹽酸調節反應液pH約為5，加入水(50mL)，EA(50mL×3)萃取，收集的有機相用飽和食鹽水洗，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮有機液，得到棕色固體化合物N8-3(1.48g，收率100%)。LCMS(m/z)：461.1(M+H)。
步驟D：化合物N8-4
室溫條件下，依次將化合物N8-3(1.48g，3.22mmol)、NH4Cl(860mg，16.1mmol)、HATU(2.43g，6.44mmol)、DIEA(3.32g，25.7mmol)加入到DMF(20mL)中。所得反應液在室溫條件下繼續反應3h。LCMS和TLC監測反應結束。將反應液倒入水(300mL)中，EA(50mL×3)萃取，收集的有機相用飽和食鹽水洗，無水Na2SO4乾燥，過濾，濃縮有機液得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-59%)純化，得到白色固體化合物N8-4(1.34g，收率91%)。LCMS(m/z)：460.1(M+H)。
步驟E：化合物N8-5
室溫條件下，向化合物N8-4(1.24g,2.70mmol)的四氫呋喃(30mL)溶液中加入氫化鈉(60wt%，270mg,6.75mmol)。所得反應液在40℃攪拌0.5h，將TCDI(721mg,4.05mmol)加入到反應液中，升溫至60℃攪拌2h。LCMS監測反應結束，將反應液恢復至室溫，倒入半飽和的NH4Cl (30mL)溶液中，稀鹽酸調節pH=5，EA(50mL×3)萃取。收集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機液，得到棕色固體化合物N8-5(1.35mg，粗品)。LCMS(m/z)：502.1(M+H)。
步驟F：化合物N8-6
室溫條件下，依次將化合物N8-5(1.35g,2.70mmol)、NaOH(432mg,10.8mmol)、碘甲烷(575mg,4.05mmol)加入到甲醇(15mL)和水(15mL)溶液中，室溫攪拌2h。LCMS監測反應結束，將反應液用鹽酸調節pH=5，EA(50mL×3)萃取。收集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥，過濾，濃縮有機液得到的粗品經FCC(SiO2，THF/PE=0-31%)純化，得到黃色固體化合物N8-6(1.21g，收率87%)。LCMS(m/z)：516.1(M+H)。
步驟F：中間體N8及N8-OH
在冰鹽浴條件下(-10℃)，向化合物N8-5(2g,3.88mmol)的MeCN(150mL)的溶液中加入CSI(2.19g,15.5mmol)，保持溫度攪拌反應1h，將DMF(20mL)加入到反應液中。所得反應液在室溫條件下繼續反應2h。TLC監測反應結束，將反應液倒入水(50mL)中，EA(50mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(50mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮有機相經FCC(SiO2，THF/PE=0-38%)純化，得到白色固體中間體N8(501mg，收率23%)，淡黃色固體中間體N8-OH(1.0g，收率48%)。LCMS(m/z)：559.1(M+H)，541.1(M+H).
中間體N9及N9-OH
步驟A：化合物N9-1
室溫條件下，依次將中間體T(1.50g,3.18mmol)、環丙基硼酸(547mg,6.37mmol)、Pd(dppf)Cl2(233mg,0.318mmol)、K3PO4(2.02g,9.55mmol)加入到1,4-二噁烷(45mL)和水(9.0mL)溶液中，N2置換三次後，升溫至100℃攪拌2h。LCMS監測反應結束，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，收集母液，加入水(50mL)，EA(30mL×3)萃取，收集的有機相用飽和食鹽水(70mL)洗，過濾後濃縮有機相，得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-10%)純化，得到黃色固體產物化合物N9-1(1.03g，收率85%)。LCMS(m/z)：329.0和331.0(M+H)。
步驟B：化合物N9-2
室溫條件下，依次將化合物N9-1(900mg,2.34mmol)、聯硼酸頻那醇酯(1.48g,5.84mmol)、Pd(OAc)2(52.9mg,0.234mmol)、BIDIME(154mg,0.467mmol)、K3PO4(1.49g,7.01mmol)加入到1,4-二噁烷(20mL)中，N2置換三次後，升溫至110℃攪拌16h。LCMS監測反應結束，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，收集母液濃縮後得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-15%)純化，得到黃色固體產物化合物N9-2(400mg，收率40%)。LCMS(m/z)：433.2(M+H)。
步驟C：化合物N9-3
室溫條件下，依次將化合物N9-2(400mg,0.925mmol)、中間體w4(243mg,0.740mmol)、Pd(dtppf)Cl2(59.7mg,0.0925mmol)、K3PO4(588mg,2.78mmol)加入到1,4-二噁烷(10mL)和水(2.0mL)溶液中，N2置換三次後，升溫至110℃攪拌2h。LCMS監測反應結束，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，收集母液，加入水(50mL)，EA(30mL×3)萃取，收集的有機相用飽和食鹽水(70mL)洗，過濾後濃縮有機相，得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-50%)純化，得到黃色固體產物化合物N9-3(200mg，收率36%)。LCMS(m/z)：598.2(M+H)。
步驟D：中間體N9-OH
室溫條件下，將鹽酸(1mol/L,6.0mL)加入到化合物N9-3(200mg,0.335mmol)的DMF(10mL)混合溶液中並在室溫下攪拌2.0h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入水(50mL)中，EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾後濃縮有機相，得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-80%)純化，得到黃色固體產物中間體N9-OH(90mg，收率50%)。LCMS(m/z)：542.0(M+H)。
步驟E：中間體N9
在冰水浴條件下，將DMF(4.00mg,0.0.0554mmol)加入到草醯氯(21.1mg,0.166mmol)的DCM(3.0mL)混合溶液中並在冰水浴條件下攪拌0.5h。在冰水浴條件下，將中間體N9-OH(30.0mg,0.0554mmol)的DCM(1.0mL)混合溶液滴入以上反應液中並在恢復到室溫後攪拌1.0h。LCMS監測反應結束，將反應液恢復到室溫後倒水(50mL)中淬滅，EA (30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾後濃縮有機相，得到的粗品經FCC(SiO2，THF/PE=0-15%)純化，得到黃色固體產物中間體N9(25mg，收率81%)。LCMS(m/z)：560.1(M+H)。
中間體N10及N10-OH
步驟A：化合物N10-2
室溫條件下，依次將化合物N10-1(1.90g,6.44mmol)、化合物w4(2.32g,7.08mmol)、Pd(dtppf)Cl2(416mg,0.644mmol)、K3PO4(4.09g,19.3mmol)加入到1,4-二噁烷(45mL)和水(9.0mL)溶液中，N2置換三次後，升溫至90℃攪拌2h。LCMS監測反應結束，降至室溫後，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，收集母液，加入水(80mL)，EA(50mL×3)萃取，收集的有機相用飽和食鹽水(90mL)洗滌，濃縮有機相得到的粗品經 FCC(SiO2，EA/PE=0-40%)純化，得到黃色固體化合物N10-2(2.24g，收率76%)。LCMS(m/z)：461.0(M+H)。
步驟B：化合物N10-3
室溫條件下，依次將NIS(4.32g,17.0mmol)、Ag2SO4(5.31g,17.0mmol)加入到化合物N10-2(2.24g,4.86mmol)和DMF(50mL)的混和溶液中並在室溫下攪拌0.5h。LCMS監測反應結束，將反應液過濾後倒入飽和硫代硫酸鈉(100mL)中，EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾後濃縮有機相，得到黃色固體產物化合物N10-2(2.31g，收率81%)。LCMS(m/z)：587.0(M+H)。
步驟C：化合物N10-4
室溫條件下，依次將化合物N10-3(2.05g,3.50mmol)、乙烯基硼酸頻哪醇酯(1.08g,6.99mmol)、Pd(dtppf)Cl2(226mg,0.350mmol)、K3PO4(2.22g,10.5mmol)加入到1,4-二噁烷(45mL)和水(9.0mL)溶液中，N2置換三次後，升溫至90℃攪拌2h。LCMS監測反應結束，降至室溫後，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，收集母液，加入水(60mL)，EA(30mL×3)萃取，收集的有機相用飽和食鹽水(70mL)洗滌，濃縮有機相得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-40%)純化，得到黃色固體化合物N10-4(1.28g，收率75%)。LCMS(m/z)：487.1(M+H)。
步驟D：化合物N10-5
室溫條件下，將Pd/C(10wt%，128mg)加入到化合物N10-4(1.28g,2.63mmol)和MeOH(50mL)的混和溶液中，H2置換三次後，並在H2(氣球)氛圍下室溫攪拌2.0h。LCMS監測反應結束，將反應液過濾後濃 縮有機相，得到棕色固體化合物N10-5(1.15g，收率90%)。LCMS(m/z)：489.0(M+H)。
步驟E：化合物N10-6
室溫條件下，將NaOH(4.7mL,9.42mmol,2M)加入到化合物N10-5(1.15g,2.35mmol)和MeOH(25mL)的混和溶液中，升溫至60℃攪拌2h。LCMS監測反應結束，降至室溫後，將反應液濃縮得到粗品加入水(50mL)中，用HCl(1M)的鹽酸調至PH=3。EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾後濃縮有機相，得到棕色固體化合物N10-6(1.03g，收率92%)。LCMS(m/z)：475.1(M+H)。
步驟F：化合物N10-7
室溫條件下，依次將化合物N10-6(1.03g,2.17mmol)、NH4Cl(581mg,10.9mmol)、HATU(1.65g,4.34mmol)、DIEA(2.24g,17.4mmol)加入到DMF(20mL)溶液中並在室溫下攪拌1.0h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入水(100mL)中，EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾後濃縮有機相，得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-80%)純化，得到黃色固體化合物N10-7(990mg，收率96%)。LCMS(m/z)：474.1(M+H)。
步驟G：化合物N10-8
室溫條件下，將NaH(116mg,2.50mmol)加入到化合物N10-7(550mg,1.16mmol)和THF(10mL)的混和溶液中，升溫至40℃攪拌0.5h。在40℃條件下，將TCDI(223mg,1.74mmol)加入到反應液中，升溫至60℃ 攪拌2.0h。LCMS監測反應結束，降至室溫後，將反應液倒入飽和氯化銨水溶液(50mL)中，然後用HCl(1M)的鹽酸調至PH=5。EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾後濃縮有機相，得到棕色固體化合物N10-8(599mg，收率100%)。LCMS(m/z)：516.1(M+H)。
步驟H：中間體N10-OH
室溫條件下，依次將碘甲烷(248mg,1.75mmol)、NaOH(186mg,4.66mmol)、化合物N10-8(600mg,1.16mmol)加入到MeOH(10mL)和H2O(10mL)的混和溶液中，並在室溫下攪拌1.0h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入水(30mL)中，然後用HCl(1M)的鹽酸調至PH=5，EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾後濃縮有機相，得到的粗品經FCC(SiO2,(EA/PE=0-50%)純化，得到黃色固體產物中間體N10-OH(371mg，收率60%)。LCMS(m/z)：530.2(M+H)。
步驟I：中間體N10
在冰水浴條件下，將DMF(20.7mg,0.283mmol)加入到草醯氯(108mg,0.849mmol)和DCM(5mL)的混和溶液中，並在在冰水浴條件下攪拌0.5h。在冰水浴條件下將中間體N10-OH(150mg,0.283mmol)的DCM(2mL)的溶液加入到以上反應液中，升至室溫後攪拌1.0h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入水(50mL)中，EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾後濃縮有機相，粗 品經FCC(SiO2,(THF/PE=0-15%)純化，得到黃色固體產物中間體N10(140mg，收率90%)。LCMS(m/z)：548.1(M+H)。
中間體N11及N11-OH
步驟A：化合物N11-2
室溫條件下，依次將化合物N11-1(5.0g,21.8mmol)、NH4Cl(3.5g,65.4mmol)、HATU(16.6g，43.6mmol)、DIEA(14.0g，109.0mmol)加入到DMF(25mL)中。所得反應液在室溫條件下繼續反應3h。LCMS和TLC監測反應結束。將反應液倒入水(300mL)中，室溫攪拌30分鐘，過濾，濾餅經真空乾燥箱乾燥得到棕色固體2(4g，收率80%)。LCMS(m/z)：231.1(M+H)。
步驟B：化合物N11-3
室溫條件下，依次將化合物N11-2(4.0g,17.5mmol)、雙聯頻那醇硼酸酯(5.35g,21.1mmol)、Pd(dppf)Cl2(640mg,0.875mmol)、醋酸鉀(2.57g,26.3mmol)加入到1,4-二噁烷(60mL)中，N2置換三次後，升溫至90℃攪拌2h。LCMS和TLC監測反應結束，將反應液恢復至室溫，藉 由矽藻土過濾除去鈀催化劑，濃縮母液得到的粗品經FCC(SiO2,THF/PE=0-49%)純化，得到黃色固體化合物N11-3(4.4g，收率91%)。LCMS(m/z)：277.1(M+H)。
步驟C：化合物N11-4
室溫條件下，依次將化合物N11-3(633mg,2.29mmol)、w4(500mg,1.53mmol)、Pd-118(100mg，0.153mmol)、K3PO4(973mg，4.59mmol)加入到1,4-二噁烷(10mL)和水(2mL)溶液中，N2置換三次後，升溫至90℃攪拌3h。LCMS和TLC監測反應結束，將反應液恢復至室溫，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，收集母液，加入水(30mL)，EA(30mL×3)萃取。收集的有機相用飽和食鹽水洗，無水Na2SO4乾燥，過濾，濃縮有機液得到的粗品經FCC(SiO2，THF/PE=0-62%)純化，得到黃色固體化合物N11-4(630mg，收率93%)。LCMS(m/z)：442.1(M+H)。
步驟D：化合物N11-5
室溫條件下，向化合物N11-4(630mg,1.43mmol)的乙腈(15mL)溶液中依次加入TFA(326mg，2.86mmol)、NCS(381mg，2.86mmol)。所得反應液在室溫條件下繼續反應16h。LCMS和TLC監測反應結束，將反應液濃縮，得到的粗品經FCC(SiO2,THF/PE=0-55%)純化，得到黃色固體化合物N11-5(630mg，收率59%)。LCMS(m/z)：476.1(M+H)。
步驟E：化合物N11-6
室溫條件下，向化合物N11-5(399mg,0.84mmol)的四氫呋喃(10mL)溶液中加入氫化鈉(60wt%，84mg,2.09mmol)。所得反應液在 40℃攪拌0.5h，將TCDI(224g,21.26mmol)加入到反應液中，升溫至60℃攪拌2h。LCMS監測反應結束，將反應液恢復至室溫，倒入半飽和的NH4Cl(20mL)溶液中，鹽酸調節pH=5，EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機液，得到棕色固體化合物N11-6(430mg，粗品)。LCMS(m/z)：518.1(M+H)。
步驟F：中間體N11-OH
室溫條件下，依次將化合物N11-6(430mg,0.84mmol)、NaOH(134mg,3.36mmol)、碘甲烷(155mg,1.09mmol)加入到甲醇(5mL)和水(5mL)溶液中，室溫攪拌2h。LCMS監測反應結束，將反應液用鹽酸調節pH=5，EA(30mL×3)萃取，收集有機相，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮有機液，得到的粗品經FCC(SiO2,THF/PE=0-34%)純化，得到白色固體中間體N11-OH(275mg，收率62%)。LCMS(m/z)：532.1(M+H)。
步驟G：中間體N11
在冰浴條件下，向草醯氯(197mg,1.55mmol)的DCM(5mL)溶液中加入DMF(38mg,0.52mmol)，保持溫度攪拌反應0.5h，將中間體N11-OH(274mg,0.52mmol)加入到反應液中。所得反應液在室溫條件下繼續反應1h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入水(30mL)中，DCM(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機相經FCC(SiO2,THF/PE=0-13%)純化，得到白色固體中間體N11(203mg，收率71%)。LCMS(m/z)：550.1(M+H)。
參照上述中間體製備方案及適當變體製備下列中間體
中間體N18
步驟A：化合物N18-2
室溫條件下，依次將化合物N18-1(492mg,1.44mmol)、化合物N4-1(450mg,1.20mmol)、Pd(PPh3)4(277mg,0.240mol)、K3PO4(763mg,3.60mmol)加入到1,4-二噁烷(8mL)和水(2mL)溶液中，N2置換三次後，升溫至85℃攪拌16h。LCMS和TLC監測反應結束，將反應液恢復至室溫，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，收集母液，加入水(50mL)，EA(50mL×3)萃取，收集的有機相用飽和食鹽水洗，無水Na2SO4乾燥，過濾，濃縮有機液得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-10%)純化，得到白色固體化合物N18-2(203g，收率33%)。LCMS(m/z)：507.1(M+H)。
步驟D：化合物N18-3
室溫條件下，依次將化合物N18-2(203mg)、PtO2(20mg)加入到甲醇(4mL)溶液中，H2置換三次後，室溫攪拌4h。LCMS和TLC監測反應結束，將反應液藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，收集母液，濃縮有 機液，得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-11%)純化，得到白色固體化合物N18-3(175mg，收率86%)。LCMS(m/z)：509.1(M+H)。
步驟E：中間體N18
在冰浴條件下，向草醯氯(130mg,1.02mmol)的DCM(4mL)溶液中加入DMF(25mg,0.34mmol)，保持溫度攪拌反應0.5h，將化合物N18-3(173mg,0.34mmol)加入到反應液中。所得反應液在室溫條件下繼續反應1h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入水(30mL)中，DCM(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機相經FCC(SiO2,THF/PE=0-9%)純化，得到白色固體中間體N18(126mg，收率79%)。LCMS(m/z)：550.1(M+H)。
中間體N19-OH，N19-OH-A及N19-OH-B
步驟A：化合物N19-2
室溫條件下，依次將化合物2-胺基-3-氟-4-溴苯甲酸(60.0g,256mmol)、NH4Cl(41.2g,769mmol)、HATU(146g,385mmol)、DIEA(99.2g,769mmol)加入到DMF(400mL)中。所得反應液在室溫條件下繼續 反應3h。LCMS和TLC監測反應結束。將反應液倒入水(4L)中，室溫攪拌30分鐘，過濾，濾餅經真空乾燥箱乾燥，得到灰色固體化合物N19-2(50.8g，收率85%)。LCMS(m/z)：233.1(M+H)。
步驟B：化合物N19-3
室溫條件下，依次將化合物N19-2(22.1g,94.8mmol)、雙聯頻那醇硼酸酯(28.9g,113.8mmol)、Pd(dppf)Cl2(3.47g,4.74mmol)、醋酸鉀(139g,142.2mmol)加入到1,4-二噁烷(400mL)中，N2置換三次後，升溫至90℃攪拌4h。LCMS和TLC監測反應結束，將反應液恢復至室溫，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，濃縮母液得到的粗品化合物N19-3，直接用於下一步。LCMS(m/z)：281.1(M+H)。
步驟C：化合物N19-5
室溫條件下，依次將化合物N19-3(26.6g,94.8mmol)、中間體w6(23.5g,63.5mmol)、Pd-118(4.14g,6.35mmol)、K3PO4(40.4g,190.5mmol)加入到1,4-二噁烷(400mL)和水(80mL)溶液中，N2置換三次後，升溫至90℃攪拌2h。LCMS和TLC監測反應結束，將反應液恢復至室溫，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，收集母液，加入水(300mL)，EA(200mL×3)萃取，收集的有機相用飽和食鹽水洗，無水Na2SO4乾燥，過濾，濃縮有機液得到的粗品經FCC(SiO2,THF/PE=0-55%)純化，得到黃色固體化合物N19-5(22.1g，兩步收率78%)。LCMS(m/z)：445.3(M+H)。
步驟D：化合物N19-6
室溫條件下，向化合物N19-5(22.1g,49.8mmol)的DMF(200mL)溶液中加入NCS(7.97g,59.7mmol)。所得反應液在室溫條件下繼 續反應16h。LCMS和TLC監測反應結束，將反應液濃縮得到的粗品經FCC(SiO2,THF/PE=0-55%)純化，得到黃色固體化合物N19-6(23.1g，收率97%)。LCMS(m/z)：479.1(M+H)。
步驟E：化合物N19-7
室溫條件下，向化合物N19-6(23.1g,48.3mmol)的四氫呋喃(400mL)溶液中加入氫化鈉(60wt%,7.73g,193.2mmol)。所得反應液在40℃攪拌0.5h，將N,N'-硫羰基二咪唑(10.3g,58.0mmol)加入到反應液中，升溫至60℃攪拌2h。LCMS監測反應結束，將反應液恢復至室溫，鹽酸調節pH=3~5，EA(150mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機液，得到棕色固體化合物N19-7(26.5g，粗品)。LCMS(m/z)：521.1(M+H)。
步驟F：中間體N19-OH
室溫條件下，依次將化合物N19-7(26.5g,51.0mmol)、NaOH(8.15g,20.4mmol)、碘甲烷(21.7g,153mmol)加入到甲醇(200mL)和水(200mL)溶液中，室溫攪拌2h。LCMS監測反應結束，將反應液用鹽酸調節pH=3~5，EA(150mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮有機液，得到的粗品經FCC(SiO2,THF/PE=0-34%)純化，得到白色固體中間體N19-OH(19g，兩步收率74%)。LCMS(m/z)：535.1(M+H)。
步驟G：中間體N19-OH-A和N19-OH-B
從步驟F得到的中間體N19-OH(10g)經SFC拆分(Waters SFC 150，分離管柱：DAICELCHIRALCEL®IC 250*50mm 10μm；流動 性相：CO2/MeOH=55/45；流速：150mL/min)得到首先沖提出來的異構體P1為中間體N19-OH-B(4.4g，收率44%，相對保留時間較小)。手性分析方法SFC-N19,Rt=2.501min。LCMS(m/z)：535.1(M+H)。隨後沖提出來的異構體P2為中間體N19-OH-A(4.6g，收率46%，相對保留時間較大)。手性分析方法SFC-N19,Rt=3.208min。LCMS(m/z)：535.1(M+H)。
手性分析方法SFC-N19：Waters UPCC(CA-352)，分析管柱：DAICELCHIRALPAK®IC,100*3mm 3μm，流動相A：CO2，流動相B：MeOH；流速：1.5mL/min；管柱溫度：35℃；反壓：1800psi；梯度：0-8min A/B=70/30。
中間體N19A
步驟A：中間體N19A
在冰浴條件下，向草醯氯(2.21g,17.4mmol)的DCM(45mL)溶液中加入DMF(85mg,1.16mmol)，保持溫度攪拌反應0.5h，將中間體N19-OH-A(3.1g,5.81mmol)加入到反應液中。所得反應液在室溫條件下繼續反應1h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入水(50mL)中，DCM(50mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥， 濃縮有機相，經FCC(SiO2,THF/PE=0-15%)純化，得到白色固體中間體N19A(2.34g，收率73%)。LCMS(m/z)：553.0(M+H)。
使用相同方法製備中間體N19及N19B：
中間體N19由中間體N19-OH製備，LCMS(m/z)：553.0(M+H)。中間體N19B由中間體N19-OH-B製備，LCMS(m/z)：553.0(M+H)。
中間體N20-OH
步驟A：化合物N20-2
室溫條件下，依次將Cs2CO3(52.2g,160mmol)、碘甲烷(18.2g,128mmol)加入到化合物N19-1(25.0g,107mmol)的DMF(200mL) 混合溶液中並在室溫下攪拌16h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入水(800mL)中，EA(150mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(500mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾後濃縮有機相，得到的粗品經PE(150mL)打漿純化，過濾後濾餅經真空乾燥後，得到白色固體化合物N20-2(17.3g，收率65%)。LCMS(m/z)：249.9(M+H)。
步驟B：化合物N10-1
室溫條件下，依次將化合物N20-2(8.00g,32.3mmol)、聯硼酸頻那醇酯(9.83g,38.7mmol)、Pd(dppf)Cl2(1.18g,1.61mmol)、KOAc(9.48g,96.8mmol)加入到1,4-二噁烷(200mL)中，N2置換三次後，升溫至100℃攪拌4h。LCMS監測反應結束，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，收集母液，濃縮後得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-25%)純化，得到白色固體化合物N10-1(9.5g，粗品)。LCMS(m/z)：214.1(M+H)。
步驟C：化合物N20-5
室溫條件下，依次將中間體w4(2.70g,8.24mmol)、化合物N10-1(3.16g,10.7mmol)、Pd(dtbpf)Cl2(537mg,0.824mmol)、K3PO4(5.24g,24.7mmol)加入到1,4-二噁烷(80mL)和水(20mL)溶液中，N2置換三次後，升溫至90℃攪拌2h。LCMS監測反應結束，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，收集母液，加入水(100mL)，EA(50mL×3)萃取，收集的有機相用飽和食鹽水(100mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾後濃縮有機相，得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-50%)純化，得到黃色固體化合物N20-5(3.8g，收率100%)。LCMS(m/z)：461.1(M+H)。
步驟D：化合物N20-6
室溫條件下，依次將I2(4.19g，16.5mmol)、Ag2SO4(5.15g，16.5mmol)加入到化合物N20-5(3.80g，8.25mmol)和DMF(80mL)的混和溶液中並在室溫下攪拌1h。LCMS監測反應結束，將反應液過濾後倒入飽和硫代硫酸鈉(400mL)中，EA(80mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(200mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾後濃縮有機相，得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-50%)純化，得到棕色固體化合物N20-6(3.9g，收率81%)。LCMS(m/z)：587.0(M+H)。
步驟E：化合物N20-7
室溫條件下，依次將CuI(6.50g,34.1mmol)、TEA(3.45g，34.1mmol)、氟磺醯基二氟乙酸甲酯(6.55g，34.1mmol)加入到化合物N20-6(2.00g，3.41mmol)和NMP(40mL)的混和溶液中N2置換三次後，升溫至90℃攪拌1h。LCMS監測反應結束，藉由矽藻土過濾除去銅催化劑，收集母液，加入水(300mL)並在室溫下攪拌0.5h。過濾後得到的濾餅粗品經FCC(SiO2，THF/PE=0-50%)純化，得到黃色固體化合物N20-7(1.2g，收率67%)。LCMS(m/z)：529.1(M+H)。
步驟F：化合物N20-8
室溫條件下，將NaOH(3.60mL，7.19mmol，2M)加入到化合物N20-7(950mg，1.80mmol)和MeOH(18.0mL)的混和溶液中，升溫至60℃攪拌1h。LCMS監測反應結束，降至室溫後，將反應液濃縮得到粗品加入水(50mL)中，用HCl(1M)的鹽酸調至PH=3。EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾後濃縮 有機相，得到白色固體化合物N20-8(850mg，收率92%)。LCMS(m/z)：515.1(M+H)。
步驟G：化合物N20-9
室溫條件下，依次將化合物N20-8(850mg,1.65mmol)、NH4Cl(442mg,8.26mmol)、HATU(1.26g,3.30mmol)，DIEA(1.71g,13.2mmol)加入到DMF(16mL)溶液中並在室溫下攪拌1h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入水(100mL)中，EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾後濃縮有機相，得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-80%)純化，得到黃色固體化合物N20-9(650mg，收率77%)。LCMS(m/z)：514.1(M+H)。
步驟H：化合物N20-10
室溫條件下，將NaH(127mg,3.16mmol)加入到化合物N20-9(650mg,1.27mmol)和THF(20mL)的混和溶液中，升溫至40℃攪拌0.5h。在40℃條件下，將TCDI(338mg,1.90mmol)加入到反應液中，升溫至60℃攪拌2.0h。LCMS監測反應結束，降至室溫後，將反應液倒入飽和氯化銨水溶液(50mL)中，然後用HCl(1M)的鹽酸調至PH=5。EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾後濃縮有機相，得到棕色固體化合物N20-10(703mg，收率100%)。LCMS(m/z)：556.1(M+H)。
步驟I：中間體N20-OH
室溫條件下，依次將碘甲烷(270mg,1.90mmol)、NaOH(202mg,5.06mmol)、化合物N20-10(703mg,1.27mmol)加入到MeOH (10mL)和H2O(10mL)的混和溶液中，並在室溫下攪拌1h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入水(50mL)中，然後用HCl(1M)的鹽酸調至PH=5，EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾後，濃縮有機相，得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-60%)純化，得到黃色固體中間體N20-OH(265mg，收率37%)。LCMS(m/z)：570.1(M+H)。
中間體N20
步驟A：中間體N20
在冰水浴條件下，將DMF(29.5mg,0.404mmol)加入到草醯氯(230mg,1.21mmol)和DCM(5mL)的混和溶液中，並在在冰水浴條件下攪拌0.5h。在冰水浴條件下將中間體N20-OH(230mg,0.404mmol)的DCM(2mL)的溶液加入到以上反應液中，升至室溫後攪拌2.0h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入水(50mL)中，EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾後，濃縮有機相，粗品經FCC(SiO2，THF/PE=0-20%)純化，得到黃色固體中間體N20(210mg，收率88%)。LCMS(m/z)：588.1(M+H)。
中間體N21-OH
步驟A：化合物N21-1
室溫條件下，依次將中間體w4(4.0g,12.2mmol)、化合物N19-3(4.45g,15.9mmol)、Pd-118(797mg,1.22mmol)、K3PO4(7.78g,36.7mmol)加入到1,4-二噁烷(50mL)和水(10mL)溶液中，N2置換三次後，升溫至80℃攪拌2h。LCMS和TLC監測反應結束，將反應液恢復至室溫，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，收集母液，加入水(50mL)，EA(50mL×3)萃取，收集的有機相用飽和食鹽水洗，無水Na2SO4乾燥，過濾，濃縮有機液，得到的粗品經FCC(SiO2,THF/PE=0-42%)純化，得到黃色固體化合物N21-1(2.45g，收率45%)。LCMS(m/z)：446.1(M+H)。
步驟B：化合物N21-2
室溫條件下，向化合物N21-1(2.45g,5.51mmol)的DMF(25mL)溶液中加入NCS(882mg,6.61mmol)。所得反應液在室溫條件下繼續反應16h。LCMS和TLC監測反應結束，將反應液加入水(50mL)，EA(50mL×3)萃取，收集的有機相用飽和食鹽水洗，無水Na2SO4乾燥， 過濾，濃縮有機液，得到的粗品經FCC(SiO2,THF/PE=0-53%)純化，得到黃色固體化合物N21-2(1.7g，收率64%)。LCMS(m/z)：480.1(M+H)。
步驟C：化合物N21-3
室溫條件下，向化合物N21-2(1.7g,3.55mmol)的四氫呋喃(40mL)溶液中加入氫化鈉(60wt%，568mg,14.2mmol)。所得反應液在40℃攪拌0.5h，將N,N'-硫羰基二咪唑(758mg,4.26mmol)加入到反應液中，升溫至60℃攪拌2h。LCMS監測反應結束，將反應液恢復至室溫，鹽酸調節pH=4~5，EA(50mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機液，得到黃色固體化合物N21-3(1.75g，粗品)。LCMS(m/z)：522.1(M+H)。
步驟D：中間體N21-OH
室溫條件下，依次將化合物N21-3(1.75g)、NaOH(568mg,14.2mmol)、碘甲烷(1.51g,10.7mmol)加入到甲醇(10mL)和水(10mL)溶液中，室溫攪拌2h。LCMS監測反應結束，將反應液用鹽酸調節pH=4~5，EA(50mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥，過濾，濃縮有機液，得到的粗品經FCC(SiO2,THF/PE=0-52%)純化，得到黃色固體中間體N21-OH(1.3g，兩步收率68%)。LCMS(m/z)：536.0(M+H)。
中間體N21
中間體N21的合成參照中間體N20進行。LCMS(m/z)：554.0(M+H)。
中間體N22
步驟A：化合物N22-1
在室溫下，向中間體N19-OH(1.00g,1.87mmol)的二氯甲烷(15mL)和H2O(15mL)的混合溶液中，加入單過氧鄰苯二甲酸鎂鹽六水合物(2.77g,87wt%，5.61mmol)，並室溫攪拌2h。LCMS監測反應結束，加水(30mL)，DCM(150mL×3)萃取。合併有機相後，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得黃色固體化合物N22-1(1.0g，收率97%)。LCMS(m/z)：555.1(M+H)。
步驟B：化合物N22-2
乾冰乙醇浴條件下，向溶有化合物N22-1(1.00g,1.81mmol)、中間體b-E(680mg,3.63mmol)的THF(30mL)中滴加NaOtBu(2M in THF,4.5mL,9.05mmol)，並在此溫度下反應0.5小時後，升至室溫反應過夜。LCMS監測反應結束，將反應液倒入飽和NH4Cl水溶液(50mL)中，EA(50mL×3)萃取，收集的有機相濃縮，得到的粗品經FCC(SiO2, EA/PE=0-80%)純化，得到黃色固體化合物N22-2(1.0g,82%)。LCMS(m/z)：674.1(M+H)。
步驟C：中間體N22
在冰浴條件下，向草醯氯(271mg,2.14mmol)的DCM(9mL)溶液中加入DMF(35mg,0.475mmol)並在該溫度下攪拌0.5h，將化合物N22-2(320mg,0.475mmol)加入到反應液中。所得反應液在室溫條件下繼續反應1h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入NaHCO3水溶液(50mL)中，DCM(50mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機相，得到黃色固體中間體N22(280mg，收率85%)。LCMS(m/z)：692.1(M+H)。
中間體N23-OH
步驟A：化合物N23-2
在室溫下，向化合物2-胺基-4-溴-5-氯苯甲酸(N23-1,10.0g,39.9mmol)的DMF(100mL)溶液中加N-碘丁二醯亞胺(9.9g,43.9mmol)和對甲基苯磺酸(688mg,3.99mmol)，所得反應液升溫至70℃攪拌反應12h。LCMS監測反應結束後，將反應液倒入300mL冰水中，再用乙酸乙酯萃取。有機相合併後，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮乾，所得粗產品經過FCC(SiO2,THF/PE=0-35%)純化，得到黃色固體化合物N23-2(10.5g，收率70%)。LCMS(m/z)：375.8(M+H)。
步驟B：化合物N23-3
在室溫下，向化合物N23-2(9.0g，23.9mmol)的DMF(100ml)溶液中加入碳酸鉀(6.6g,47.8mmol)和碘甲烷(5.1g,35.9mmol)。保持溫度攪拌反應2h。LCMS監測反應結束後，將反應液倒入300mL冰水中，再用乙酸乙酯萃取。有機相合併後，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮乾，所得粗產品經過FCC(SiO2,EA/PE=0-15%)純化，得到黃色固體化合物N23-3(8.1g，收率87%)。LCMS(m/z)：392.0(M+H)。
步驟C：化合物N23-4
在N2下，向化合物N23-3(7.5g,19.2mmol)的DMF溶液中加入乙烯基硼酸頻哪醇酯(5.9g,38.4mmol)，碳酸鉀(5.3g,38.4mmol)和Pd(dppf)Cl2(1.4g，1.92mmol)。所得反應液在80℃條件下攪拌反應2h。LCMS監測反應結束後，反應液經矽藻土過濾，濾液濃縮乾，所得粗產品經過FCC(SiO2,DCM/PE=0-15%)純化，得黃色固體化合物N23-4(2.9g，收率52%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 7.81(s,1H),6.70(s,2H), 6.49(dd,J=18.0,11.5Hz,1H),5.75(dd,J=11.4,1.4Hz,1H),5.54(dd,J=18.0,1.4Hz,1H),3.82(s,3H).LCMS(m/z)：290.0(M+H)。
步驟D：化合物N23-5
在室溫下，向化合物N23-4(2.9g,10.0mmol)的1,4-二噁烷(30mL)和水(10mL)溶液中加入鋨酸鉀一水合物(316mg,1.0mmol)，和高碘酸鈉(8.5g，40.0mmol)。保持溫度攪拌反應20h。LCMS監測反應結束後，反應液經矽藻土過濾，EA(80mL)洗滌。濾液經過飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮乾，所得粗產品經過FCC(SiO2,DCM/PE=0-10%)純化，得黃色固體化合物N23-5(1.3g，收率45%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 10.31(s,1H),8.66(s,2H),8.11(s,1H),3.85(s,3H).LCMS(m/z)：291.9(M+H)。
步驟E：化合物N23-6
在氮氣保護下，向化合物N23-5(1.1g,3.76mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液中加入二乙胺基三氟化硫(3.64g,22.4mmol)。升溫至40℃攪拌反應6h。LCMS監測反應結束後，將反應液倒入30mL水中，再用二氯甲烷萃取。有機相合併，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮乾。所得粗產品經過FCC(SiO2,DCM/PE=0-10%)純化，得到黃色固體產物化合物N23-6(600mg，收率51%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.01(s,1H),7.43(t,J=52.1Hz,1H),7.15(s,2H),3.83(s,3H).LCMS(m/z)：314.0(M+H)。
步驟F：化合物N23-7
在N2下，向化合物N23-6(660mg,2.1mmol)的1,4-二噁烷(10mL)和水(2mL)溶液中加入中間體w3(1.2g,3.1mmol)，DIPEA(1.35g,10.5mmol)和RuphosPd-G4(178mg，0.21mmol)。所得反應液在70℃條件下攪拌反應2h。LCMS監測反應結束後，反應液經矽藻土過濾，濾液濃縮乾，所得粗產品經過FCC(SiO2,THF/PE=0-15%)純化，得黃色固體化合物N23-7(315mg，收率30%)。LCMS(m/z)：501.0(M+H)。
步驟G：化合物N23-8
在室溫下，向化合物N23-7(310mg,0.62mmol)的無水四氫呋喃(3mL)、甲醇(1mL)和水(1mL)溶液中，加入氫氧化鋰一水合物(104mg,2.84mmol)。保持溫度攪拌反應2h。LCMS監測反應結束後，將反應液倒入1N的鹽酸水溶液(10mL)中。再用乙酸乙酯萃取。有機相合併後，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮乾，得到黃色固體粗產品化合物N23-8(310mg)。LCMS(m/z)：487.0(M+H)。
步驟H：化合物N23-9
在0℃氮氣保護下，向化合物N23-8(310mg)的無水DMF(6mL)中，加入氯化銨(168mg,3.2mmol)，HATU(365mg,0.96mmol)和DIPEA(412mg,3.2mmol)，保持溫度攪拌反應2h。LCMS監測反應結束後，將反應液倒入50mL冰水中，再用乙酸乙酯萃取。有機相合併後，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮乾，所得粗產品經過FCC(SiO2,THF/PE=0-30%)純化，得黃色固體化合物N23-9(300mg，兩步收率97%)。LCMS(m/z)：486.3(M+H)。
步驟I：化合物N23-10
在氮氣保護下，向化合物N23-9(300mg,0.62mmol)的無水THF(3mL)中，加入NaH(99mg,2.48mmol，60wt%)。所得反應液在40℃條件下攪拌反應20min後。將N,N'-硫羰基二咪唑(132mg,0.74mmol)加入到反應液中，升溫至60℃攪拌反應2h。LCMS監測反應結束後，將反應液倒入0.5N鹽酸溶液(20mL)水中。再用乙酸乙酯萃取。有機相合併後，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮乾，得到黃色固體粗產品化合物N23-10(300mg)。LCMS(m/z)：528.1(M+H)。
步驟J：化合物N23-11
在冰浴下，向化合物N23-10(300mg,0.57mmol)的甲醇(3mL)和水(3mL)溶液中，加入氫氧化鈉(114mg,2.84mmol)和碘甲烷(121mg,0.85mmol)，保持溫度攪拌反應1h。LCMS監測反應結束後，將反應液倒入0.5N鹽酸溶液(20mL)水中。再用乙酸乙酯萃取。有機相合併後，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮乾，所得粗產品經過FCC(SiO2,THF/PE=0-20%)純化，得黃色固體化合物N23-11(167mg，收率54%)。LCMS(m/z)：542.0(M+H)。
步驟K：中間體N23-OH
在冰浴氮氣保護下，向化合物N23-11(166mg,0.31mmol)的乙腈(8ml)溶液中加入氯磺醯異氰酸酯(130mg,0.93mmol)。保持溫度攪拌反應0.5h，再加入DMF(1mL)，所得反應液在室溫下攪拌反應0.5h。LCMS監測反應結束後，將反應液倒入飽和碳酸氫鈉水溶液(50mL)中，再用乙酸乙酯取。有機相合併，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮乾。所 得粗產品經過FCC(SiO2,THF/PE=0-20%)純化，得到黃色固體中間體N23-OH(116mg，收率67%)。LCMS(m/z)：567.0(M+H)。
中間體N23
步驟A：中間體N23
在0℃氮氣保護下，向化合物草醯氯(74mg,0.58mmol)的無水二氯甲烷(5mL)中，加入DMF(3mg,0.04mmol)。保持溫度攪拌反應0.5h後，將中間體N23-OH(110mg,0.19mmol)加入到反應液中，所得反應液在0℃條件下繼續反應3h。LCMS監測反應結束後，將反應液倒入20mL飽和碳酸氫鈉溶液中。再用二氯甲烷萃取。有機相合併後，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮乾，所得粗產品經過FCC(SiO2,EA/PE=0-15%)純化，得到黃色固體中間體N23(80mg，收率70%)。LCMS(m/z)：585.0(M+H)。
中間體N24-OH及N24
步驟A：化合物N24-1
在冰浴氮氣保護下，向中間體w7(1.1g,2.97mmol)的乙腈(55ml)溶液中加入氯磺醯異氰酸酯(1.29g,9.13mmol)。保持溫度攪拌反應0.5h，再加入DMF(2mL)，所得反應液在室溫下攪拌反應0.5h。LCMS監測反應結束後，將反應液過濾，乾燥濾餅，得到黃色固體化合物N24-1(610mg，收率52%)。LCMS(m/z)：332.9(M-56)。
步驟B：化合物N24-2
在N2下，向化合物N24-1(650mg,1.67mmol)的1,4-二噁烷(10mL)和水(2mL)溶液中加入化合物N19-3(667mg,2.51mmol)、磷酸鉀(1.06g,5.01mmol)和Pd(dtbpf)Cl2(108mg，0.17mmol)。所得反應液在100℃條件下攪拌反應2h。LCMS監測反應結束後，反應液經矽藻土過濾，濾液濃縮乾，所得粗產品經過FCC(SiO2,THF/PE=0-35%)純化，得黃色固體化合物N24-2(640mg，收率83%)。LCMS(m/z)：643.1(M+H)。
步驟C：化合物N24-3
在室溫下，向化合物N24-2(640mg,1.38mmol)的DMF(10mL)溶液中加N-氯丁二醯亞胺(203mg,1.52mmol)，所得反應液室溫攪拌反應12h。LCMS監測反應結束後，將反應液倒入50mL冰水中，再用 乙酸乙酯萃取。有機相合併後，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮乾，所得粗產品經過FCC(SiO2,THF/PE=0-35%)純化，得到黃色固體化合物N24-3(635mg，收率93%)。LCMS(m/z)：497.1(M+H)。
步驟D：化合物N24-4
在氮氣保護下，向化合物N24-3(635mg,1.28mmol)的無水THF(10mL)中，加入NaH(123mg,5.11mmol，60%含量)。所得反應液在40℃條件下攪拌反應20min後。將N,N'-硫羰基二咪唑(296mg,1.66mmol)加入到反應液中，升溫至60℃攪拌反應2h。LCMS監測反應結束後，將反應液倒入0.5N鹽酸水溶液(10mL)和水(20mL)中。再用乙酸乙酯萃取。有機相合併後，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮乾，得到黃色固體粗產品化合物N24-4(600mg)。LCMS(m/z)：539.2(M+H)。
步驟E：中間體N24-OH
在冰浴下，向化合物N24-4(600mg,1.11mmol)的甲醇(5mL)和水(5mL)溶液中，加入氫氧化鈉(256mg,6.39mmol)和碘甲烷(272mg,1.92mmol)，保持溫度攪拌反應0.5h。LCMS監測反應結束後，將反應液倒入0.5N鹽酸水溶液(20mL)中。再用乙酸乙酯萃取。有機相合併後，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮乾，所得粗產品經過FCC(SiO2,THF/PE=0-30%)純化，得黃色固體中間體N24-OH(420mg，收率59%)。LCMS(m/z)：553.1(M+H)。
步驟F：中間體N24
在0℃氮氣保護下，向草醯氯(289mg,2.28mmol)的無水二氯甲烷(10mL)中，加入DMF(11mg,0.15mmol)。保持溫度攪拌反應0.5h後， 將中間體N24-OH(420mg,0.76mmol)加入到反應液中，所得反應液在0℃條件下繼續反應3h。LCMS監測反應結束後，將反應液倒入20mL飽和碳酸氫鈉溶液中。再用二氯甲烷萃取。有機相合併後，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮乾，所得粗產品經過FCC(SiO2,EA/PE=0-12%)純化，得到黃色固體中間體N24(360mg，收率83%)。LCMS(m/z).571.0(M+H)。
中間體N25-OH及N25
步驟A：化合物N25-2
室溫條件下，將化合物N25-1(6.0g,27.6mmol)溶於濃硫酸(138mL)中，室溫攪拌30min。冰水浴條件下，將濃硝酸(69mL)加入到上述反應液中，保持溫度攪拌30min。將反應液倒入冰水(1L)中，EA(250mL×3)萃取，收集有機相，飽和食鹽水(100mL)洗滌，無水Na2SO4乾 燥。濃縮有機相，得到黃色固體化合物N25-2(含部分化合物N25-2BP)(8.0g)。
步驟B：化合物N25-3
冰水浴條件下，將SOCl2(9.08mL,0.77mmol)加入到化合物N25-2(8.0g，粗品)和MeOH(110mL)的混合溶液中。升溫至70℃攪拌16小時，TLC監測反應完成，將反應液濃縮，得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=5-30%)純化，得到黃色固體化合物N25-3(1HNMR顯示含18% N25-3BP)(5.2g，兩步收率68%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 7.91(d,J=8.4Hz,1H),7.43(d,J=8.4Hz,1H),3.83(s,3H).
步驟C：化合物N25-4
在室溫條件下，將碘甲烷(5.4g,37.8mmol)加入到化合物N25-3(5.2g,18.9mmol)、K2CO3(7.8g,56.7mmol)和ACN(150mL)的混合溶液中。升溫至50℃攪拌16小時，LCMS監測反應完成。將反應液過濾，EA(100mL)洗滌。收集的有機相濃縮，得到粗品經FCC(SiO2,DCM/PE=5-30%)純化，得到黃色固體化合物N25-4(4.1g，收率75%)，及黃色固體N25-4BP(900mg，收率16%)。
步驟D：化合物N25-5
在室溫條件下，將Na2S2O4(2.4g,13.8mmol)溶解在H2O(15mL)中，加入到化合物N25-4(1.0g,3.46mmol)和THF(15mL)的混合溶液中。室溫攪拌16小時，LCMS監測反應完成。將反應液倒入H2O(20mL)中，EA(20mL×3)萃取，收集的有機相用飽和NaCl水溶液(20mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮有機相得到粗品，經FCC(SiO2, EA/PE=5-30%)純化，得到黃色固體化合物N25-5(500mg，收率56%)。LCMS(m/z)：260.0(M+H)。
步驟E：化合物N25-6
在室溫條件下，將Pd(dppf)Cl2(141mg,0.2mmol)加入到化合物N25-5(500mg,1.93mmol)、2-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環己烷-2-基)-5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環己烷(524mg,2.32mmol)、KOAc(284mg,2.90mmol)和二噁烷(10mL)的混合溶液中。氮氣球置換3次，升溫至90℃攪拌2小時，LCMS監測反應完成。將反應液倒入H2O(20mL)中，EA(20mL×3)萃取，收集的有機相用飽和NaCl(20mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮有機相得到粗品，經FCC(SiO2,EA/PE=5-30%)純化，得到黃色固體化合物N25-6(350mg，收率62%)。LCMS(m/z)：226.1(M+H-68)。
步驟F：化合物N25-7
在室溫條件下，將Pd-118(77.9mg,0.12mmol)加入到化合物N25-6(350mg,1.19mmol)、中間體w6(530mg,1.43mmol)、K3PO4(760mg,3.57mmol)和二噁烷(10mL)、H2O(3mL)的混合溶液中。氮氣球置換3次，升溫至90℃攪拌2小時，LCMS監測反應完成，將反應液倒入H2O(20mL)中，EA(20mL×3)萃取。收集的有機相用飽和NaCl(20mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。濃縮有機相得到粗品，經FCC(SiO2,EA/PE=5-30%)純化，得到黃色固體化合物N25-7(320mg，收率57%)。LCMS(m/z)：472.1(M+H)。
步驟G：化合物N25-8
在室溫條件下，將NCS(109mg,0.82mmol)加入到化合物N25-7(320mg,0.68mmol)和DMF(3mL)的混合溶液中。室溫攪拌16小時，LCMS監測反應完成，將反應液倒入H2O(20mL)中，EA(10mL×3)萃取。收集的有機相用飽和NaCl(20mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。濃縮有機相得到粗品，經FCC(SiO2,EA/PE=5-20%)純化，得到黃色油狀化合物N25-8(300mg，收率87%)。LCMS(m/z)：506.0(M+H)。
步驟H：化合物N25-9
在室溫條件下，將LiOH(143mg,5.9mmol)加入到化合物N25-8(300mg,0.59mmol)和MeOH(3mL)、H2O(3mL)、THF(3mL)的混合溶液中。室溫攪拌16小時，LCMS監測反應完成。將反應液倒入H2O(20mL)中，EA(10mL×3)萃取。收集的有機相用飽和NaCl(20mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮有機相，得黃色油狀化合物N25-9(300mg，粗品)。LCMS(m/z)：492.1(M+H)。
步驟I：化合物N25-10
在室溫條件下，將NH4Cl(163mg,3.05mmol)加入到化合物N25-9(300mg)、DIEA(630mg,4.88mmol)、HATU(463mg,1.22mmol)和DME(5mL)的混合溶液中。室溫攪拌3小時，LCMS監測反應完成，將反應液倒入H2O(20mL)中，EA(10mL×3)萃取。收集的有機相用飽和NaCl(20mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。濃縮有機相得到粗品，經FCC(SiO2,EA/PE=10-30%)分離，得到黃色固體化合物N25-10(260mg，兩步收率87%)。LCMS(m/z)：491.2(M+H)。
步驟J：化合物N25-11
在室溫條件下，將NaH(60wt%,212mg,3.18mmol)加入到化合物N25-10(260mg,0.53mmol)和THF(5mL)的混合溶液中。升溫至40℃並攪拌1小時，向反應液中加入TCDI(142mg,0.80mmol)，升溫至60℃並攪拌2小時。LCMS監測反應完成，1N稀鹽酸調節pH~4，EA(10mL×3)萃取。收集的有機相用飽和NaCl(20mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。濃縮有機相，得到黃色油狀化合物N25-11(280mg，粗品)。LCMS(m/z)：533.2(M+H)。
步驟K：化合物N25-OH
在冰水浴條件下，將NaOH(84.2mg,2.12mmol)加入到化合物N25-11(280mg,0.53mmol)和MeOH/H2O(3mL/3mL)的混合溶液中，再向反應液中加入MeI(225mg,1.59mmol)，室溫攪拌1小時。LCMS監測反應完成，1N稀鹽酸調節pH~4，EA(10mL×3)萃取。收集的有機相用飽和NaCl(20mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。濃縮有機相得粗品，經FCC(SiO2,EA/PE=15-40%)純化，得到黃色固體化合物N25-OH(160mg，兩步收率56%)。LCMS(m/z)：547.1(M+H)。
中間體N25的合成由中間體N25-OH參照上述中間體N24合成方法進行。
參照上述中間體合成方案，可製備下列中間體：
實施例1
2-胺基-4-(6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈
步驟A：(4-(6-氯-2,8-二氟-4-(R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
室溫下，將(R)-1-(7-溴-6-氯-2,8-二氟喹唑啉-4-基)-3-甲基哌啶-3-醇(900mg，2.29mmol)、(4-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環己烷-2-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(2.15g，5.96mmol)、Pd(dppf)Cl2(167mg，229μmol)、K3PO4(1.49g，6.88mmol)和1,4-二噁烷/H2O(V/V=4：1，15mL)的混合溶液用N2置換三次，升溫至110℃攪拌16h。LCMS監測反應完成，冷卻後將反應液倒入水中(100mL)，EA(50mL×3)萃取，收集的有機相用飽和NaCl水溶液(20mL)洗滌，有機液濃縮得到的粗品經FCC(SiO2，(EtOH/EA=1：3)/PE=0-20%)純化，得到棕色固體(4-(6-氯-2,8- 二氟-4-(R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(1.2g，收率93%)。LCMS(m/z)：561.1(M+H)。
步驟B：(4-(6-氯-2,8-二氟-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)喹唑啉-7-基)-3-碘苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
室溫下，將NIS(962mg,4.28mmol)加入到(4-(6-氯-2,8-二氟-4-(R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(1.2g,2.14mmol)和DMF(15mL)的混合溶液中並攪拌2h，LCMS監測反應完成，將反應液倒入水中(100mL)，EA(50mL×3)萃取，收集的有機相用飽和NaCl水溶液(20mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，有機液濃縮得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=30-100%)純化，得到黃色固體(4-(6-氯-2,8-二氟-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)喹唑啉-7-基)-3-碘苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(600mg，收率41%)。LCMS(m/z)：687.0(M+H)。
步驟C：2-胺基-4-(6-氯-2,8-二氟-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈
室溫下，將Zn(CN)2(1.03g，8.73mmol)、Pd(PPh3)4(90mg，87.3μmol)加入到置有(4-(6-氯-2,8-二氟-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)喹唑啉-7-基)-3-碘苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(600mg,873μmol)的DMF(15mL)溶液的微波管中。將上述反應液在微波130℃下攪拌2h，LCMS監測反應完成，將反應液倒入水中(50mL)，EA(50mL×3)萃取。收集有機相，飽和NaCl水溶液(20mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機相經FCC(SiO2，EA/PE=20-60%)分離，得到黃色固體2-胺基-4-(6-氯-2,8- 二氟-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈(200mg，收率47%)。LCMS(m/z)：486.1(M+H)。
步驟D：2-胺基-4-(6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈
在0℃條件下，將NaH(49mg，60wt%，1.23mmol)加入到(S,E)-(4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲醇(71mg,412μmol)的THF(3mL)溶液中並攪拌30min，再將2-胺基-4-(6-氯-2,8-二氟-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈(100mg,206μmol)一次性加入到上述反應液中並在25℃攪拌1h。LCMS監測反應完成，將反應液倒入半飽和的NH4Cl水溶液(20mL)中，EA(20mL×3)萃取，收集有機相，飽和NaCl水溶液(20mL)溶液洗滌，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機相經Pre-HPLC(ACN/(10mM NH4HCO3)=55-75%)純化，得到黃色固體2-胺基-4-(6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈(6mg，收率5%)。LCMS(m/z)：639.2(M+H).1H NMR(400MHz,Methanol-d 4)δ 8.05(d,J=1.7Hz,1H),7.69-7.63(m,1H),7.27-7.22(m,1H),7.18-7.14(m,1H),6.78-6.54(m,1H),4.56-4.51(m,1H),4.46-4.40(m,1H),4.25-4.16(m,1H),4.06-3.99(m,1H),3.57-3.50(m,1H),3.50-3.39(m,1H),2.93-2.84(m,1H),2.81-2.71(m,1H),2.69-2.61(m,1H),2.38-2.22(m,4H),2.20-1.98(m,3H),1.87-1.71(m,3H),1.26(s,3H),1.21(s,3H).19F NMR(376MHz,Methanol-d 4)δ -123.94,-139.66.
實施例2
2-胺基-4-(6-氯-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈
步驟A：2-胺基-4-(6-氯-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈
在0℃條件下，將NaH(49mg，60wt%，1.23mmol)加入到((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲醇(79mg,412μmol)和THF(3mL)的混合溶液中並攪拌30分鐘，再將2-胺基-4-(6-氯-2,8-二氟-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈(100mg,206μmol)一次加入到上述反應液中並在25℃攪拌1h。LCMS監測反應完成，將反應液倒入半飽和的NH4Cl水溶液(20mL)中，EA(20mL×3)萃取，收集有機相，飽和NaCl水溶液(20mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機相經Pre-HPLC(ACN/(10mM NH4HCO3)=55-75%)純化，得到黃色固體2-胺基-4-(6-氯-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-8- 氟-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈(2mg,3.1μmol，收率2%)。LCMS(m/z)：659.2(M+H).1H NMR(400MHz,Methanol-d 4)δ 8.05(d,J=1.7Hz,1H),7.68-7.65(m,1H),7.27-7.22(m,1H),7.18-7.14(m,1H),6.38-6.04(m,1H),4.53-4.47(m,1H),4.27-4.17(m,1H),4.08-4.01(m,1H),3.58-3.51(m,1H),3.49-3.41(m,1H),3.14-3.04(m,1H),2.99-2.91(m,1H),2.23(s,3H),2.19-2.09(m,1H),2.06-1.94(m,2H),1.87-1.69(m,7H),1.25(s,3H),1.21(s,3H).19F NMR(376MHz,Methanol-d 4)δ -118.49,-121.55,-123.98.
實施例3A及3B
(3-氰基-4-(2,8-二氟-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
步驟A：(3-氰基-4-(2,8-二氟-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
室溫條件下，將(R)-1-(7-溴-2,8-二氟-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)-3-甲基哌啶-3-醇(1g,2.35mmol)、[4-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環己烷-2-基)-1-苯并噻吩-2-基]胺基甲酸三級丁酯(1.52g,3.52mmol)、Pd-117(170mg,234μmol)、Cs2CO3(2.3g,7.04mmol)和1,4-二噁烷/H2O(20mL,V/V=4：1)的混合溶液用N2置換三次，升溫至80℃攪拌4h。LCMS監測反應完成，冷卻至室溫後將反應液倒入水中(100mL)，EA(50mL×3)萃取，收集的有機相用飽和NaCl水溶液(20mL)洗滌，有機液濃縮，經FCC(SiO2，(EtOH/EA=1/3)/PE=0~20%)純化，得到棕色固體(3-氰基-4-(2,8-二氟-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(970mg，收率69.3%)。LCMS(m/z)：595.1(M+H)。
步驟B：(4-(2,8-二氟-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)-3-碘苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
在室溫條件下，將N-碘丁二醯亞胺(440mg,1.96mmol)加入到(3-氰基-4-(2,8-二氟-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(970mg,1.63mmol)和DMF(8mL)的混合溶液中並攪拌1h。LCMS監測反應完成，將反應液倒入水中(100mL)，灰色固體析出，過濾，H2O(100mL)洗濾餅，濾餅用EA(50mL)溶解，收集的有機相用飽和NaCl(20mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾，濃縮，得到棕色固體(4-(2,8-二氟-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)-3-碘苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(1.07g，收率90.7%)。LCMS(m/z)：721.0(M+H)。
步驟C：(3-氰基-4-(2,8-二氟-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
在室溫條件下，將Zn(CN)2(1.69g,14.4mmol)、Pd(PPh3)4(167mg,144μmol)加入到(4-(2,8-二氟-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)-3-碘苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(1.04g,1.44mmol)和DMF(15mL)的混合溶液中。將上述反應液在105℃下攪拌16h，LCMS監測反應完成，將反應液倒入水中(50mL)，EA(50mL×3)萃取。收集有機相，飽和NaCl(20mL)溶液洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾，濃縮得粗品經FCC(SiO2，EA/PE=20-60%)純化，得到黃色固體(3-氰基-4-(2,8-二氟-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(410mg，收率54.7%)。LCMS(m/z)：520.0(M+H)。
步驟D：(R)-2-胺基-4-(2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈(3A)及(S)-2-胺基-4-(2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈(3B)
在-78℃條件下，將t-BuONa(49mg,2M THF溶液，1.23mmol)加入到((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲醇(79mg,412μmol)和(3-氰基-4-(2,8-二氟-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(120mg,206μmol)的THF(5mL)溶液中並攪拌1h。LCMS監測反應完成，將反應 液倒入半飽和的NH4Cl(20mL)中，EA(20mL×3)萃取。收集有機相，飽和NaCl(20mL)溶液洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾，濃縮後Pre-HPLC(ACN/(10mM NH4HCO3/H2O)60%-80%)分離，得到首先沖提出來的黃色固體異構體1為實施例3A(24mg，保留時間11.31min)。LCMS(m/z)：693.3(M+H).1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.39(s,1H),7.72-7.62(m,1H),7.28-7.08(m,2H),6.46-5.83(m,1H),4.66-4.56(m,1H),4.55-4.48(m,1H),4.41-4.29(m,1H),4.19-4.02(m,1H),3.65-3.52(m,1H),3.51-3.35(m,1H),3.07(d,J=11.8Hz,1H),3.00-2.88(m,1H),2.22(s,3H),2.19-2.09(m,1H),2.04-1.92(m,1H),1.88-1.70(m,7H),1.26(s,3H),1.21(s,3H).19F NMR(376MHz,CD3OD)δ -59.78,-118.58,-121.62,-125.04.隨後沖提出來的黃色固體異構體2為實施例3B(22mg，保留時間13.0min)。LCMS(m/z)：693.3(M+H).1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.33(s,1H),7.75-7.59(m,1H),7.30-7.11(m,2H),6.42-5.99(m,1H),4.66-4.47(m,2H),4.44-4.26(m,1H),4.18-4.02(m,1H),3.64-3.53(m,1H),3.51-3.36(m,1H),3.17-3.03(m,1H),3.02-2.87(m,1H),2.22(s,3H),2.20-2.09(m,1H),2.08-1.91(m,1H),1.88-1.66(m,7H),1.26(s,3H),1.21(s,3H).19F NMR(376MHz,CD3OD)δ -59.85,-118.70,-121.55,-125.21.
實施例4A及4B
(R)-2-胺基-4-(8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈(4A)及(R)-2-胺基-4-(8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈(4B)
步驟A：(R)-2-胺基-4-(8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈(4A)及(R)-2-胺基-4-(8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈(4B)
在-78℃條件下，將t-BuONa(49mg,2M THF溶液，1.23mmol)加入到(S,E)-(4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲醇(60mg,412μmol)和(3-氰基-4-(2,8-二氟-4-((R)-3-羥基-3-甲基哌啶-1-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(120mg,206μmol)的THF(5mL)溶液中並攪拌1h。LCMS監測反應完成，將反應液倒入半飽和的NH4Cl(20mL)中，EA(20mL×3)萃取。收集有機相，飽和NaCl(20mL)溶液洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾，濃縮後經Pre-HPLC(ACN/(10mM NH4HCO3/H2O)=60%-80%)分離，得到首先沖提出來的黃色固體異構體1 為實施例4A(31mg，保留時間11.8min).LCMS(m/z)：673.3(M+H).1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.40(s,1H),7.74-7.62(m,1H),7.30-7.14(m,2H),6.86-6.49(m,1H),4.64-4.53(m,1H),4.49-4.38(m,1H),4.37-4.23(m,1H),4.18-4.00(m,1H),3.62-3.52(m,1H),3.50-3.38(m,1H),2.90-2.83(m,1H),2.80-2.71(m,1H),2.69-2.59(m,1H),2.37-2.26(m,1H),2.24(s,3H),2.19-2.09(m,1H),2.08-2.00(m,1H),1.99-1.92(m,1H),1.88-1.71(m,3H),1.27(s,3H),1.20(s,3H).19F NMR(376MHz,CD3OD)δ -59.78,-124.97,-139.64。隨後沖提出來的黃色固體異構體2為實施例4B(29mg，保留時間13.6min)。LCMS(m/z)：673.3(M+H).1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.34(s,1H),7.73-7.61(m,1H),7.32-7.15(m,2H),6.85-6.48(m,1H),4.68-4.54(m,1H),4.49-4.39(m,1H),4.38-4.25(m,1H),4.16-3.99(m,1H),3.61-3.50(m,1H),3.47-3.36(m,1H),2.92-2.83(m,1H),2.80-2.71(m,1H),2.69-2.60(m,1H),2.39-2.10(m,5H),2.07-1.90(m,2H),1.88-1.69(m,3H),1.27(s,3H),1.20(s,3H).19F NMR(376MHz,CD3OD)δ -59.83,-125.08,-139.62.
參照上述化合物的合成方法，還製備並表徵了以下實施例：
實施例5，實施例5A，及實施例5B
2-胺基-4-(2-((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-噁唑-4-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7- 基)苯并噻吩-3-腈(實施例5)，(S)-2-胺基-4-(2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-噁唑-4-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-腈(實施例5A)，及(R)-2-胺基-4-(2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-噁唑-4-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-腈(實施例5B)
步驟A：(4-(2,8-二氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-噁唑-4-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
室溫條件下，依次將(S)-4-(7-溴-2,8-二氟-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)-6-甲基-1,4-噁唑-6-醇(1.00g,2.26mmol)、(4-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環己烷-2-基)苯并噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(1.63g,4.52mmol)、Pd-117(162mg,0.0226umol)、Cs2CO3(2.21g,6.78mmol)加入到1,4-二噁烷(15mL)和水(3mL)溶液中，N2置換三次後，升溫至80℃攪拌3h。LCMS和TLC監測反應結束，將反應液恢復至室溫，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，收集母液，加入水(100mL)，EA(100mL×3)萃取，收集的有機相用飽和食鹽水(50mL)洗，濃縮有機液得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-40%)純化，得到黃色固體(4-(2,8-二氟-4-((S)-6-羥基-6-甲 基-1,4-噁唑-4-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(1.1g，收率80%)。LCMS(m/z)：611.1(M+H)。
步驟B：(4-(2,8-二氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-噁唑-4-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)-3-碘苯并噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
室溫條件下，將NIS(407mg,1.81mmol)加入到(4-(2,8-二氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-噁唑-4-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(920mg,1.51mmol)和DMF(10mL)的混合溶液中並攪拌0.5h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入H2O(200mL)中，絮狀物產生，過濾，收集濾餅，再用EA(100mL)溶解濾餅後，用硫代硫酸鈉水溶液(20mL)萃取洗滌，收集的有機相用飽和食鹽水(30mL)洗，無水Na2SO4乾燥，濃縮，得到黃色固體(4-(2,8-二氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-噁唑-4-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)-3-碘苯并噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(940mg，收率85%)。LCMS(m/z)：737.0(M+H)。
步驟C：2-胺基-4-(2,8-二氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-噁唑-4-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并噻吩-3-腈
室溫條件下，依次將(4-(2,8-二氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-噁唑-4-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)-3-碘苯并噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(880mg,1.19mmol)、Zn(CN)2(701mg,5.97mmol)、Pd(PPh3)4(138mg,0.120mmol)加入到DMF(15mL)中，N2置換三次後，升溫至105℃攪拌過夜。LCMS和TLC監測反應結束，將反應液恢復至室溫，將反應液倒入H2O(200mL)中，絮狀物產生，過濾，收集濾餅，再用EA(100mL)溶解濾餅後濃縮有機液，得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-60%)純化，得到黃 色固體2-胺基-4-(2,8-二氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-噁唑-4-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并噻吩-3-腈(400mg，收率63%)。LCMS(m/z)：611.1(M+H)。
步驟D：2-胺基-4-(2-((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-噁唑-4-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并噻吩-3-腈(實施例5)
在乾冰乙醇浴條件下，將tBuONa(0.7mL,2M THF溶液，1.4mmol)加入到2-胺基-4-(2,8-二氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-噁唑-4-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并噻吩-3-腈(150mg,0.28mmol)、((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲醇(81mg,0.42mmol)和THF(10mL)的混合溶液中並攪拌1.5h。TLC監測反應結束，將反應液恢復到室溫後倒入半飽和的NH4Cl(30mL)溶液中，EA(50mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(30mL)滌，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機相經FCC(SiO2,(EA/EtOH=3/1)/PE=0-40%)純化，得到的粗品再經pre-HPLC(C18,ACN/(10mmol NH4HCO3/H2O)=55-75%)純化，得到白色固體2-胺基-4-(2-((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-噁唑-4-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并噻吩-3-腈(實施例5，36mg，收率18%)。LCMS(m/z)：709.3(M+H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 9.03-8.81(m,1H),7.99-7.71(m,3H),7.31-7.11(m,2H),6.52-6.10(m,1H),5.48-5.25(m,1H),4.45(s,2H),4.36-4.21(m,1H),4.20-4.00(m,2H),3.99-3.82(m,2H),3.79-3.67(m,1H),3.63-3.53(m,2H),2.88-2.76(m,2H),2.20-2.05(m,3H),1.91-1.52 (m,5H),1.19-1.12(m,3H),1.11(s,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -56.79,-114.37- -117.55(m),-117.84- -119.97(m),-123.82.
步驟E：(S)-2-胺基-4-(2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-噁唑-4-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-腈(實施例5A)和(R)-2-胺基-4-(2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-噁唑-4-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-腈(實施例5B)
從步驟D得到的化合物2-胺基-4-(2-((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-噁唑-4-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并噻吩-3-腈(30mg)經SFC拆分(Waters SFC 150，分離管柱：DAICELCHIRALCEL®IC 250*30mm 10μm；流動相CO2/MeOH(+0.3% 7.0mol/l NH3-MeOH)=82/1；流速：130mL/min)，得到首先沖提出來的異構體1為實施例5A(7.6mg，收率25%，相對保留時間較小)。手性分析方法SFC-5，Rt=2.223min。LCMS(m/z)：709.3(M+H)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.28(s,1H),7.63(d,J=7.7Hz,1H),7.32-7.27(m,1H),7.25-7.23(m,1H),6.29-5.90(m,1H),5.73(s,1H),5.21(s,2H),4.68-4.46(m,3H),4.29(d,J=14.8Hz,1H),3.98-3.86(m,1H),3.83-3.73(m,2H),3.66(dd,J=25.4,13.7Hz,2H),3.47(d,J=12.5Hz,1H),3.01-2.81(m,2H),2.18(s,3H),1.93-1.80(m,2H),1.77-1.67(m,3H),1.36(s,3H),1.18(s,3H).19F NMR(376MHz,CDCl3)δ -58.60,-116.36,-119.40,-121.44。隨後沖提出來的異構體2為實施例5B(15mg，收率51%，相對保留時間較大)。手性分析方法SFC- 5，Rt=2.809min。LCMS(m/z)：709.3(M+H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.96(s,1H),7.87-7.70(m,3H),7.26-7.17(m,1H),7.17-7.10(m,1H),6.48-6.09(m,1H),5.36(s,1H),4.45(s,2H),4.35-4.22(m,1H),4.16(d,J=14.9Hz,1H),4.08-3.99(m,1H),3.98-3.89(m,1H),3.88-3.82(m,1H),3.78-3.65(m,1H),3.63-3.50(m,2H),2.91-2.76(m,2H),2.11(s,3H),1.87-1.55(m,5H),1.16(s,3H),1.11(s,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -56.74,-115.74,-118.87,-123.80.
手性分析方法SFC-5：Waters UPCC，分析管柱：Daicel ChiralCEL®IC，100*3mm 3μm；流動相A：CO2，流動相B：MeOH(+0.1%DEA)；流速：1.5mL/min；管柱溫度：35℃；反壓：1800psi；梯度：0-8.0min A/B=75/25。
實施例6，實施例6A，及實施例6B
2-胺基-4-(8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-噁唑-4-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-腈(實施例6)，(S)-2-胺基-4-(8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-噁唑-4-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-腈(實施例6A)，及(R)-2-胺基-4-(8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基 -6-甲基-1,4-噁唑-4-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-腈(實施例6B)
步驟A：2-胺基-4-(8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-噁唑-4-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并噻吩-3-腈(實施例6)
在乾冰乙醇浴條件下，將tBuONa(0.7mL,2M THF溶液，1.4mmol)加入到2-胺基-4-(2,8-二氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-噁唑-4-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并噻吩-3-腈(150mg,0.280mmol)、(S,E)-(4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲醇(73mg,0.42mmol)和THF(10mL)的混合溶液中並攪拌1.5h。TLC監測反應結束，將反應液恢復到室溫後倒入半飽和的NH4Cl(30mL)溶液中，EA(50mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機相經FCC(SiO2,(EA/EtOH=3/1)/PE=0-40%)純化，得到的粗品再經pre-HPLC(C18,ACN/(10mmol NH4HCO3/H2O)=55-75%)純化，得到白色固體2-胺基-4-(8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-噁唑-4-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并噻吩-3-腈(實施例6，38mg，收率20%)。LCMS(m/z)：689.3(M+H).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 9.06-8.85(m,1H),8.00-7.64(m,3H),7.30-7.09(m,2H),6.88-6.54(m,1H),5.47-5.29(m,1H),4.69-4.57(m,1H),4.35-4.22(m, 2H),4.20-3.89(m,4H),3.87-3.78(m,1H),3.76-3.65(m,1H),3.63-3.54(m,2H),2.71-2.67(m,2H),2.27-2.19(m,1H),2.14(s,3H),1.93-1.79(m,2H),1.16(s,3H),1.11(s,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -56.74,-123.93,-138.77.
步驟B：(S)-2-胺基-4-(2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-噁唑-4-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-腈和(R)-2-胺基-4-(2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-噁唑-4-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-腈
從步驟A得到的化合物2-胺基-4-(8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-噁唑-4-基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并噻吩-3-腈(30mg)經SFC拆分(Waters SFC 150，分離管柱：DAICELCHIRALCEL®IC 250*30mm 10μm；流動相CO2/MeOH(+0.3% 7.0mol/l NH3-MeOH)=75/25；流速：100mL/min)，得到首先沖提出來的異構體1為實施例6A(4.6mg，收率15%，相對保留時間較小)。手性分析方法SFC-6，Rt=2.680。LCMS(m/z)：689.2(M+H)；隨後沖提出來的異構體2為實施例6B(18mg，收率61%，保留時間相對較大)。手性分析方法SFC-6，Rt=3.589。LCMS(m/z)：689.2(M+H).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.99(s,1H),7.78(d,J=6.2Hz,3H),7.26-7.08(m,2H),6.70(d,J=86.8Hz,1H),5.36(s,1H),4.63(d,J=10.6Hz,1H),4.36-4.21(m,2H),4.20-4.09(m,1H),4.08-3.99(m,1H),3.98-3.89(m,1H),3.87-3.78(m,1H),3.75-3.64(m,1H),3.62-3.51 (m,2H),2.76-2.63(m,2H),2.29-2.19(m,2H),2.14(s,3H),1.92-1.79(m,2H),1.16(s,3H),1.10(s,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -56.70,-123.94,-138.79.
手性分析方法SFC-6：Waters UPCC，分析管柱：Daicel Chiralpak®IC，100*3mm 3μm；流動相A：CO2，流動相B：MeOH(+0.1%DEA)；流速：1.5mL/min；管柱溫度：35℃；反壓：1800psi；梯度：0-8.0min A/B=75/25。
實施例7
5-(7-(2-胺基-3-氰基苯并[b]噻吩-4-基)-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)-N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺
步驟A：(3-氰基-4-(4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
室溫條件下，將BOP(241mg,0.545mmol)加入到(3-氰基-4-(8-氟-4-羥基-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(150mg,0.272mmol)、N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺鹽酸鹽(133mg,0.545mmol)、DIPEA(176mg,1.36mmol)和DMF(3mL)的混合液中。所得混合物加熱到60℃攪拌反應過夜。LCMS監測反應結束，將反應液倒入H2O(30mL)，再用EtOAc(30mL×3)萃取。合併有機相，無水Na2SO4乾燥，過濾。濾液濃縮乾，得粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-100%)純化，得白色固體3-氰基-4-(4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(60mg，收率30%)。LCMS(m/z)：309.1(M+H)。
步驟B：(3-氰基-4-(4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-2-(甲基亞磺醯基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
室溫條件下，向化合物(3-氰基-4-(4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(60mg,0.081mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液中，加入間氯過氧苯甲酸(24.7mg,85%純度，0.121mmol)，保持溫度攪拌反應1h。LCMS監測反應結束後，將10mL飽和碳酸氫鈉水溶液加入反應液中，再用二氯甲烷萃取。有機相合併，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮乾，得白色固體(3-氰基-4-(4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)- 基)-8-氟-2-(甲基亞磺醯基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(70mg，粗品)。LCMS(m/z)：757.1(M+H)。
步驟C：(3-氰基-4-(2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
在乾冰乙醇浴條件下，將tBuONa(0.23mL,2M THF溶液，0.46mmol)加入到(3-氰基-4-(4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-2-(甲基亞磺醯基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(70mg,0.092mmol)、((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲醇(26.8mg,0.139mmol)和無水THF(5mL)的混合溶液中並攪拌1h。TLC監測反應結束，用飽和NH4Cl(20mL)溶液淬滅反應，EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水洗，無水Na2SO4乾燥，濃縮乾，得白色固體(3-氰基-4-(2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(90mg，粗品)。LCMS(m/z)：886.2(M+H)。
步驟D：5-(7-(2-胺基-3-氰基苯并[b]噻吩-4-基)-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)-N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺
室溫條件下，將4M HCl-乙酸乙酯(10mL,40mmol)加入到(3-氰基-4-(2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(90mg,0.102mmol)中，保持室溫攪拌1h。LCMS監測反應結束，濃縮除去酸溶液得粗產品，再經pre-HPLC(C18,ACN/(10mmol NH4HCO3/H2O)=40-75%)純化，凍乾，得白色固體產物5-(7-(2-胺基-3-氰基苯并[b]噻吩-4-基)-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)-N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺(2.2mg)。LCMS(m/z)：786.3(M+H)。
實施例7A及實施例7B
實施例7經過適當條件的pre-HPLC或者手性SFC拆分得到實施例7A及7B。
實施例8
5-(7-(2-胺基-3-氰基苯并[b]噻吩-4-基)-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)-N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺
步驟A：(3-氰基-4-(4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
室溫條件下，將BOP(78.8mg,0.178mmol)加入到(3-氰基-4-(8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-羥基-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(60mg,0.089mmol)、N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺鹽酸鹽(43.4mg,0.178mmol)、DIPEA(230mg,1.78mmol)和DMF(2mL)的混合液中，加熱到60℃攪拌反應過夜。LCMS監測反應結束，將反應液倒入H2O(10mL)，再用EtOAc(30mL×3)萃取。合併有機相，無水Na2SO4乾燥，過濾。濾液濃縮乾，得白色固體產物(3-氰基-4-(4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-6-(三氟甲基)喹唑 啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(90mg，粗品)。LCMS(m/z)：866.3(M+H)。
步驟B：5-(7-(2-胺基-3-氰基苯并[b]噻吩-4-基)-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)-N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺
室溫條件下，將4M HCl-乙酸乙酯(10mL,40mmol)加入到(3-氰基-4-(4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(90mg,0.104mmol)中，保持室溫攪拌1h。LCMS監測反應結束，濃縮除去酸溶液得粗產品，再經pre-HPLC(C18,ACN/(10mmol NH4HCO3/H2O)=40-75%)純化，凍乾，得白色固體產物5-(7-(2-胺基-3-氰基苯并[b]噻吩-4-基)-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)-N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺(3.0mg，收率4%)。LCMS(m/z)：766.2(M+H)。
實施例8A及8B
將實施例8經Pre-HPLC(C18,ACN/(0.1%FA/H2O)=25-45%)純化，得到首先沖提出來的異構體1(保留時間10.7min)，經離子交換樹脂中和得到實施例8A，LCMS(m/z)：766.3(M+H).1H NMR(400MHz, DMSO-d 6)δ 8.15(s,1H),7.83-7.75(m,3H),7.25-7.18(m,1H),7.18-7.13(m,1H),6.83(s,0.5H),6.64(s,1H),6.61(s,0.5H),5.24-5.12(m,1H),5.01-4.88(m,1H),4.64-4.56(m,1H),4.55-4.41(m,2H),4.37-4.22(m,2H),4.17-4.04(m,1H),3.26(s,3H),2.96(s,3H),2.74-2.65(m,2H),2.56-2.52(m,2H),2.42-2.24(m,2H),2.23-2.08(m,4H),1.94-1.79(m,2H),1.10(s,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -56.95,-123.21,-138.68；隨後沖提出來的異構體2(保留時間11.6)，經離子交換樹脂中和得到實施例8B，LCMS(m/z)：766.3(M+H)。
參照上述化合物的合成方法，製備並表徵了以下實施例：
實施例67
5-(7-(2-胺基-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-4-基)-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)-N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺
步驟A：(3-氰基-4-(4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
室溫條件下，依次將(3-氰基-5-氟-4-(8-氟-4-羥基-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(200mg,0.35mmol)、N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺鹽酸鹽(172mg,0.74mmol)、BOP(312mg,0.74mmol)、DIEA(228mg,1.76mmol)加入到DMF(5mL)中，N2置換三次後，升溫至50℃攪拌5h。LCMS和TLC監測反應結束，體系冷至室溫，將反應液倒入H2O(50mL)中，絮狀固體產生。過濾，收集濾餅，再用EA(50mL)溶解濾餅後用無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮，得到的黃色固體(3-氰基-4-(4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(240mg，收率90%)。LCMS(m/z)：758.9(M+H)。
步驟B：(3-氰基-4-(4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-2-(甲基亞磺醯基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
室溫條件下，將m-CPBA(85%w/w，128mg，0.63mmol)和(3-氰基-4-(4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-2-(甲硫基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(240mg,0.32mmol)加入到DCM(5mL)中，室溫攪拌1h。LCMS和TLC監測反應結束，將反應液倒入飽和NaHCO3(10mL)中，EA(10mL×3)萃取。收集有機相，飽和食鹽水(20mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮，得到黃色固體產物(3-氰基-4-(4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-2-(甲基亞磺醯 基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(240mg，收率98%)。LCMS(m/z)：774.9(M+H)。
步驟C：(3-氰基-4-(2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
在乾冰乙醇浴條件下，將tBuOK(0.39mL,1M THF溶液，0.39mmol)加入到(3-氰基-4-(4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-2-(甲基亞磺醯基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(100mg,0.13mmol),((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲醇(38mg,0.19mmol)和THF(5mL)的混合溶液中並攪拌1h。LCMS監測反應結束，將反應液恢復到室溫後倒入半飽和的NH4Cl(30mL)溶液中，EA(10mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(30mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮，得到黃色固體(3-氰基-4-(2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(100mg，收率85%)。LCMS(m/z)：907.0(M+H)。
步驟D：5-(7-(2-胺基-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-4-基)-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-6-(三氟甲基)喹唑 啉-4-基)-N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺
室溫條件下，將(3-氰基-4-(2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(100mg,0.11mmol)加入到DCM(2mL)和TFA(2mL)的混合溶液中，室溫攪拌1h。LCMS監測反應結束，將反應液濃縮並倒入飽和NaHCO3(10mL)，EA(10mL×3)萃取。收集有機相後，飽和食鹽水(20mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮後經pre-HPLC(C18,ACN/(10mmol NH4HCO3/H2O)=50-65%)純化，得到白色固體5-(7-(2-胺基-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-4-基)-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)-N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺(5mg，收率5.6%)。LCMS(m/z)：807.3(M+H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.20(s,1H),8.03-7.93(m,2H),7.89-7.78(m,1H),7.16-7.05(m,1H),6.72-6.61(m,1H),6.49-6.07(m,1H),5.25-5.13(m,1H),5.05-4.88(m,1H),4.58-4.39(m,4H),4.38-4.24(m,1H),4.22-4.04(m,1H),3.26(s,3H),2.95(s,3H),2.88-2.76(m,2H),2.41-2.26(m,2H),2.05-1.92(m,1H),1.89-1.78(m,1H),1.74-1.58(m,3H),1.13-1.04(m,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -59.03,-115.65,-117.70,-118.82,-122.57.
實施例68
(3-氰基-4-(4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
步驟A：(3-氰基-4-(4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
在乾冰乙醇浴條件下，將tBuOK(0.54mL,1M THF溶液，0.54mmol)加入到(3-氰基-4-(4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-2-(甲基亞磺醯基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(140mg,0.18mmol),(S,E)-(4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲醇(48mg,0.27mmol)和THF(5mL)的混合溶液中並攪拌1h。LCMS監測反應結束，將反應液恢復到室溫後倒入半飽和的NH4Cl(30mL)溶液中， EA(10mL×3)萃取。收集有機相後，飽和食鹽水(30mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮，得到黃色固體(3-氰基-4-(4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(150mg，收率93%)。LCMS(m/z)：887.3(M+H)。
步驟B：5-(7-(2-胺基-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-4-基)-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)-N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺
室溫條件下，將3-氰基-4-(4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(150mg,0.17mmol)加入到DCM(2mL)和TFA(2mL)的混合溶液中，室溫攪拌1h。LCMS監測反應結束，將反應液濃縮並倒入飽和NaHCO3(10mL)，EA(10mL×3)萃取。收集有機相，飽和食鹽水(20mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機相得粗品。再經pre-HPLC(C18,ACN/(10mmol NH4HCO3/H2O)=50-65%)純化，得到白色固體5-(7-(2-胺基-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-4-基)-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-6-(三氟甲基)喹唑啉-4-基)-N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺(8mg，收率6.4%)。LCMS(m/z)：787.3(M+H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.19(s,1H),7.96(s,2H),7.93-7.71(m,1H),7.18-7.09(m,1H), 6.90-6.79(m,0.5H),6.65(s,1H),6.62-6.55(m,0.5H),5.29-5.15(m,1H),5.05-4.90(m,1H),4.68-4.57(m,1H),4.56-4.42(m,2H),4.37-4.24(m,2H),4.18-4.02(m,1H),3.29-3.21(m,3H),2.96(s,3H),2.78-2.66(m,2H),2.43-2.27(m,2H),2.25-2.10(m,1H),2.07-1.96(m,1H),1.94-1.80(m,2H),1.16-1.03(m,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -59.02,-117.67,-122.68,-138.71.
實施例68A及實施例68B
實施例68經pre-HPLC(C18,ACN/(0.1%FA/H2O)=25-45%)分離，得到首先沖提出來的異構體1為實施例68A，相對保留時間較小，Rt=10.9min，LCMS(m/z)：787.3(M+H)；以及隨後沖提出來的異構體2為實施例68B，相對保留時間較大，Rt=11.8min，LCMS(m/z)：787.3(M+H)。
實施例83
2-胺基-4-(6-氯-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈
步驟A：(S)-4-(7-溴-6-氯-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟喹唑啉-4-基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇
室溫條件下，將NaH(73.4mg,1.84mmol)加入到((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲醇(144mg,0.734mmol)和THF(10mL)的混合溶液中並攪拌0.5h。將(S)-4-(7-溴-6-氯-2,8-二氟-4-喹唑啉基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇(250mg,0.612mmol)加入到反應液中並攪拌1.0h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入飽和的NH4Cl(50mL)溶液中，EA(50mL×3)萃取。收集有機相後，飽和食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾後濃縮有機相經FCC(SiO2，EA/PE=0-80%)純化，得到棕色固體產物(S)-4-(7-溴-6-氯-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟喹唑啉-4-基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜 環庚烷-6-醇(60mg，收率17%)。LCMS(m/z)：584.1(M+H)和586.1(M+H)。
步驟B：(4-(6-氯-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-7-基)-3-氰基苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
室溫條件下，依次將(S)-4-(7-溴-6-氯-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟喹唑啉-4-基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇(60.0mg,0.103mmol)、(3-氰基-4-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環己烷-2-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(99.0mg,0.256mmol)、Pd-117(7.35mg,0.010umol)、Cs2CO3(100mg,0.308mmol)加入到甲苯(5mL)溶液中，N2置換三次後，升溫至120℃攪拌2h。LCMS監測反應結束，將反應液恢復至室溫，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，收集母液，濃縮得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-90%)純化，得到棕色固體(4-(6-氯-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-7-基)-3-氰基苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(60mg，收率75%)。LCMS(m/z)：778.3(M+H)。
步驟C：2-胺基-4-(6-氯-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈
室溫條件下，將(4-(6-氯-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚 烷-4-基)喹唑啉-7-基)-3-氰基苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(60mg,0.077mmol)加入TFA(1.0mL)和DCM(1.0mL)的混合溶液中並攪拌1h。LCMS監測反應結束，將反應液濃縮後加入飽和NaHCO3水溶液(50mL)中淬滅，EA(30mL×3)萃取。收集有機相後，飽和食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮有機相得到的粗品經pre-HPLC(C18,0.1%NH4HCO3)純化，得到白色固體2-胺基-4-(6-氯-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈(13.6mg，收率26%)。LCMS(m/z)：678.3(M+H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.59-8.39(m,1H),7.92-7.74(m,3H),7.29-7.21(m,1H),7.18(d,J=7.5Hz,1H),6.51-6.11(m,1H),5.31(d,J=37.4Hz,1H),4.51-4.36(m,2H),4.33-4.19(m,1H),4.18-4.06(m,1H),4.03-3.80(m,3H),3.80-3.68(m,1H),3.55(d,J=5.5Hz,2H),2.93-2.71(m,2H),1.95-1.53(m,5H),1.18-1.08(m,6H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -115.24,-116.01,-118.50,-119.27,-122.73.
實施例84
2-胺基-4-(6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈
步驟A：(S)-4-(7-溴-6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇
室溫條件下，將NaH(88.0mg,2.20mmol)加入到(S,E)-(4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲醇(194mg,1.10mmol)和THF(10mL)的混合溶液中並攪拌0.5h。將(S)-4-(7-溴-6-氯-2,8-二氟-4-喹唑啉基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇(300mg,0.734mmol)加入到反應液中並攪拌1.0h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入飽和的NH4Cl(50mL)溶液中，EA(50mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾濃縮有機相得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-80%)純化，得到棕色固體產物(S)-4-(7-溴-6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇(80mg，收率20%)。LCMS(m/z)：564.0(M+H)和566.0(M+H)。
步驟B：(4-(6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-7-基)-3-氰基苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
室溫條件下，依次將(S)-4-(7-溴-6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇(80.0mg,0.142mmol)、(3-氰基-4-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環己烷-2-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(137mg, 0.354mmol)、Pd-117(10.1mg,0.014umol)、Cs2CO3(138mg,0.425mmol)加入到甲苯(5mL)溶液中，N2置換三次後，升溫至120℃攪拌2h。LCMS監測反應結束，將反應液恢復至室溫，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，收集母液，濃縮得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-90%)純化，得到棕色固體(4-(6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-7-基)-3-氰基苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(60mg，收率56%)。LCMS(m/z)：758.3(M+H)。
步驟C：2-胺基-4-(6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈
室溫條件下，將(4-(6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-7-基)-3-氰基苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(60mg,0.079mmol)加入TFA(1.0mL)和DCM(1.0mL)的混合溶液中並攪拌1h。LCMS監測反應結束，將反應液濃縮後加入飽和NaHCO3水溶液(50mL)中淬滅，EA(30mL×3)萃取。收集有機相後，飽和食鹽水(70mL)洗，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮有機相經pre-HPLC(C18,0.1%NH4HCO3)純化，得到白色固體2-胺基-4-(6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-3-甲腈(5.0mg，收率10%)。LCMS(m/z)：658.3(M+H)。
實施例85A及85B
(Ra)-2-胺基-4-(6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-3-甲腈甲酸酯．甲酸鹽(85A)及(Sa)-2-胺基-4-(6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-3-甲腈甲酸酯．甲酸鹽(85B)
步驟A：(4-(6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-7-基)-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
室溫條件下，將DIEA(176mg,1.36mmol)加入到(4-(6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-羥基喹唑啉-7-基)-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(150mg,0.227mmol)、(S)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-6-醇鹽酸鹽(75mg,0.46mmol)、BOP(201mg,0.455mmol)和DMF(3mL)的混合液中。將反應體系升溫至50℃攪拌過夜。LCMS監測反應結束，將反應液藉由FCC(SiO2,EA/PE=0-100%)純化，得到黃色油狀產物(4-(6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞 甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-7-基)-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(90mg，收率51%)。LCMS(m/z)：773.0(M+H)。
步驟B：(Ra)-2-胺基-4-(6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-3-甲腈甲酸酯．甲酸鹽(85A)及(Sa)-2-胺基-4-(6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-3-甲腈甲酸酯．甲酸鹽(85B)
室溫條件下，將TFA/DCM(V/V=3：1，10mL)加入到(4-(6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-7-基)-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(90mg,0.12mmol)中攪拌1h。LCMS監測反應結束，反應液濃縮後所得的粗品經pre-HPLC(C18,ACN/(0.1%FA/H2O)=25-40%)純化，得到首先沖提出來的異構體1為實施例85A(白色固體，8mg，收率20%，保留時間11.0min)。LCMS(m/z)：673.2(M+H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.58(s,1H),8.15(s,1H),8.06-7.96(m,2H),7.85(dd,J=8.7,4.9Hz,1H),7.20-7.10(m,1H),6.95-6.57(m,1H),5.41-5.21(m,1H),4.57(d,J=10.6Hz,1H),4.34-4.20(m,2H),4.13-3.85(m,5H),3.75-3.67(m,1H),3.55(s,2H),2.76-2.65(m,2H),2.28-2.10(m,5H),2.06-1.83(m,3H),1.14(s,3H),1.12-1.08(m,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -118.95,-121.94,-138.68。隨後沖提出來的 異構體2為實施例85B(白色固體，8mg，收率20%，保留時間12.5min)。LCMS(m/z)：673.2(M+H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.65(s,1H),8.14(s,1H),8.01(s,2H),7.86(dd,J=8.8,5.0Hz,1H),7.21-7.08(m,1H),6.98-6.62(m,1H),5.35(s,1H),4.62-4.54(m,1H),4.35-4.26(m,2H),4.22-4.10(m,2H),3.99-3.92(m,2H),3.80(d,J=14.8Hz,1H),3.74-3.64(m,1H),3.62-3.55(m,2H),2.78-2.59(m,3H),2.47-2.16(m,5H),2.09-1.89(m,2H),1.23-1.13(m,6H)。
實施例86，86A和86B
4-(2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1-((氘代甲基)-3-甲基-3-哌啶基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-8-氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-胺基-1-苯并噻吩-3-腈(86)，(Ra)-4-(2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1-((氘代甲基)-3-甲基-3-哌啶基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-8-氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-胺基-1-苯并噻吩-3-腈(86A)和(Sa)-4-(2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1-((氘代甲基)-3-甲基-3-哌啶基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-8-氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-胺基-1-苯并噻吩-3-腈(86B)
步驟A：4-(4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-2,8-二氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-((三級丁基)(氧羰基胺基))-1-苯并噻吩
室溫條件下，依次將(S)-4-(7-溴-2,8-二氟-6-硝基-4-喹唑啉基)-6-甲基-1,4-噁嗪-6-醇(700mg,1.67mmol)、(4-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環己烷-2-基)苯并噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(723mg,2.0mmol)、DPEphosPdCl2(119mg,0.16umol)、K3PO4(845mg,3.99mmol)加入到1,4-二噁烷(8mL)和水(2mL)溶液中，N2置換三次後，升溫至85℃攪拌2h。LCMS監測反應結束，將反應液恢復至室溫，矽藻土過濾，收集母液，加入水(50mL)，EA(50mL×3)萃取，有機相經過飽和食鹽水(30mL)洗，無水Na2SO4乾燥，濃縮。所得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-60%)純化，得到黃色固體4-(4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-2,8-二氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-((三級丁基)(氧羰基胺基))-1-苯并噻吩(520mg，收率53%)。LCMS(m/z)：588.0(M+H)。
步驟B：4-(4-((S)-6-((三級丁基)雙(甲基)甲矽烷氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-2,8-二氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-((三級丁基)(氧羰基胺基))-1-苯并噻吩
室溫條件下，將三級丁基二甲矽基三氟甲磺酸酯(945mg,3.57mmol)加入到4-(4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-2,8-二氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-((三級丁基)(氧羰基胺基))-1-苯并噻吩(700mg,1.19mmol)的DCM(10mL)溶液中並攪拌20h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入H2O(50mL)中，EA(20mL×3)萃取，收集有機相，飽和食鹽水(10mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機相，所得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-15%)純化，得到黃色固體產物4-(4-((S)-6-((三級丁基)雙(甲基)甲矽烷氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-2,8-二氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-((三級丁基)(氧羰基胺基))-1-苯并噻吩(750mg，收率89%)。LCMS(m/z)：702.3(M+H)。
步驟C：4-(4-((S)-6-((三級丁基)雙(甲基)甲矽烷氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-2,8-二氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-((三級丁基)(氧羰基胺基))-1-苯并噻吩-3-腈
冰浴條件下，將氯磺醯異氰酸酯(472mg,3.0mmol)加入到4-(4-((S)-6-((三級丁基)雙(甲基)甲矽烷氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-2,8-二氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-((三級丁基)(氧羰基胺基))-1-苯并噻吩(700mg,1.0mmol)的乙腈(10mL)溶液中，保持溫度攪拌反應1h後，加入DMF(0.5mL)，保持冰浴條件下繼續攪拌反應0.5h，LCMS監測反應結束。飽和碳酸氫鈉溶液(30mL)加入到反應液中，EA(20mL×3)萃取，收集 有機相，飽和食鹽水(10mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機相，所得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-20%)純化，得到黃色固體產物4-(4-((S)-6-((三級丁基)雙(甲基)甲矽烷氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-2,8-二氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-((三級丁基)(氧羰基胺基))-1-苯并噻吩-3-腈(180mg，收率25%)。LCMS(m/z)：727.2(M+H)。
步驟D：4-(2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1-((氘代甲基)-3-甲基-3-哌啶基)甲氧基)-4-((S)-6-((三級丁基)雙(甲基)甲矽烷氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-8-氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-((三級丁基)(氧羰基胺基))-1-苯并噻吩-3-腈
在乾冰乙醇浴條件下，將tBuONa(0.24mL,1M THF溶液，0.22mmol)加入到4-(4-((S)-6-((三級丁基)雙(甲基)甲矽烷氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-2,8-二氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-((三級丁基)(氧羰基胺基))-1-苯并噻吩-3-腈(90mg,0.12mmol)和((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲醇(36mg,0.18mmol)的THF(2mL)溶液中並攪拌0.5h。LCMS監測反應結束後，加入半飽和的NH4Cl(30mL)溶液，EA(20mL×2)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(30mL)滌，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機相，得到黃色油狀粗產品4-(2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1-((氘代甲基)-3-甲基-3-哌啶基)甲氧基)-4-((S)-6-((三級丁基)雙(甲基)甲矽烷氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-8-氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-((三級丁基)(氧羰基胺基))-1-苯并噻吩-3-腈(95mg，收率85%)。LCMS(m/z)：903.4(M+H)。
步驟E：4-(2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1-((氘代甲基)-3-甲基-3-哌啶基)甲氧基)-4-((S)-6-((三級丁基)雙(甲基)甲矽烷氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-8-氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-胺基-1-苯并噻吩-3-腈
在室溫下，向化合物4-(2-(((3S，4S)-4-(二氟甲基)-1-((氘代甲基)-3-甲基-3-哌啶基)甲氧基)-4-((S)-6-((三級丁基)雙(甲基)甲矽烷氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-8-氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-((三級丁基)(氧羰基胺基))-1-苯并噻吩-3-腈(95mg,0.1mmol)的DCM(1.5mL)溶液中加入TFA(0.5mL)，保持溫度攪拌反應1h。LCMS監測反應結束後，濃縮反應液，得黃色油狀粗產品4-(2-(((3S，4S)-4-(二氟甲基)-1-((氘代甲基)-3-甲基-3-哌啶基)甲氧基)-4-((S)-6-((三級丁基)雙(甲基)甲矽烷氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-8-氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-胺基-1-苯并噻吩-3-腈(120mg)。LCMS(m/z)：803.3(M+H)。
步驟F：4-(2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1-((氘代甲基)-3-甲基-3-哌啶基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-8-氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-胺基-1-苯并噻吩-3-腈(86)
在室溫下，向化合物4-(2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1-((氘代甲基)-3-甲基-3-哌啶基)甲氧基)-4-((S)-6-((三級丁基)雙(甲基)甲矽烷氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-8-氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-胺基-1-苯并噻吩-3-腈(120mg,0.15mmol)的DMF(2.0mL)溶液中加入CsF(454mg,3.0mmoL)，升溫至55℃攪拌反應6h。LCMS監測反應結束後，0.5mL反應液經過pre-HPLC(C18,ACN/(10mmol NH4HCO3/H2O)=40-80%)純化，得白色固體產品4-(2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1-((氘代甲基)-3-甲基-3-哌 啶基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-8-氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-胺基-1-苯并噻吩-3-腈(3mg).LCMS(m/z)：689.2(M+H).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 9.53-9.21(m,1H),7.84(s,2H),7.77(d,J=7.7Hz,1H),7.28-7.06(m,2H),6.30(t,J=55.6Hz,1H),5.42-5.23(m,1H),4.54-4.41(m,2H),4.37-4.01(m,4H),4.00-3.88(m,2H),3.82-3.72(m,1H),3.61-3.55(m,2H),2.91-2.74(m,2H),1.89-1.74(m,2H),1.68-1.57(m,2H),1.23(s,3H),1.11(s,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6 )δ -115.05 - -119.89(m),-121.71 - -123.20(m).
步驟G：(Ra)-4-(2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1-((氘代甲基)-3-甲基-3-哌啶基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-8-氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-胺基-1-苯并噻吩-3-腈(86A)和(Sa)-4-(2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-1-((氘代甲基)-3-甲基-3-哌啶基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-8-氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-胺基-1-苯并噻吩-3-腈(86B)
將1.5mL步驟F的反應液經過pre-HPLC(C18,ACN/(0.1% FA/H2O)=25-38%)純化，得到首先沖提出來的異構體1為實施例86A(白色固體，7.1mg，收率6.9%，保留時間11.0min)。LCMS(m/z)：689.2(M+H).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 9.44-9.25(m,1H),8.20(s,1H),7.85(s,1H),7.77(dd,J=7.6,1.6Hz,1H),7.26-7.13(m,2H),6.29(t,J=55.5Hz,1H),5.35(d,J=33.2Hz,1H),4.51-4.39(m,2H),4.36-4.24(m,1H),4.23-4.13(m,1H),4.12-4.04(m,1H),4.01-3.93(m,2H),3.82-3.72(m,2H),3.59-3.56(m,2H),2.87-2.76(m,2H),1.88-1.71(m,2H),1.68-1.57(m,2H),1.24-1.08(m,6H).19F NMR(376MHz, DMSO-d 6 )δ -114.89 - -119.98(m),-123.48(d,J=681.4Hz)；隨後沖提出來的異構體2為實施例86B(白色固體，5.7mg，收率5.5%，保留時間13.5min)。LCMS(m/z)：689.3(M+H).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 9.44(s,1H),8.24(s,1H),7.85(s,2H),7.77(d,J=7.7Hz,1H),7.22-7.15(m,1H),7.11(d,J=7.4Hz,1H),6.29(t,J=55.6Hz,1H),5.38(s,1H),4.53-4.42(m,2H),4.32-4.19(m,2H),4.11-4.04(m,1H),3.98-3.91(m,2H),3.79-3.70(m,2H),3.59-3.57(m,2H),2.86-2.79(m,2H),1.87-1.72(m,2H),1.69-1.59(m,2H),1.21(s,3H),1.11(s,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6 )δ -113.88 - -120.65(m),-122.43.
實施例87，87A和87B
4-(2-(((S)-(E)-4-氟亞甲基-1-((氘代甲基)-3-甲基-3-哌啶基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-8-氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-胺基-1-苯并噻吩-3-腈(87)、(Ra)-4-(2-(((S)-(E)-4-氟亞甲基-1-((氘代甲基)-3-甲基-3-哌啶基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-8-氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-胺基-1-苯并噻吩-3-腈(87A)和(Sa)-4-(2-(((S)-(E)-4-氟亞甲基-1-((氘代甲基)-3-甲基-3-哌啶基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-8-氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-胺基-1-苯并噻吩-3-腈(87B)
步驟A：4-(2-(((3S,4S)-(E)-4-氟亞甲基-1-((氘代甲基)-3-甲基-3-哌啶基)甲氧基)-4-((S)-6-((三級丁基)雙(甲基)甲矽烷氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-8-氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-((三級丁基)(氧羰基胺基))-1-苯并噻吩-3-腈
在乾冰乙醇浴條件下(-70℃)，將tBuONa(0.22mL,1M THF溶液，0.22mmol)加入到4-(4-((S)-6-((三級丁基)雙(甲基)甲矽烷氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-2,8-二氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-((三級丁基)(氧羰基胺基))-1-苯并噻吩-3-腈(80mg,0.11mmol)和((S)-(E)-4-氟亞甲基-1-((氘代甲基)-3-甲基-3-哌啶基)甲醇(30mg,0.16mmol)的THF(2mL)溶液中並攪拌0.5h。LCMS監測反應結束後，加入半飽和的NH4Cl(30mL)溶液，EA(20mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(30mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機相，得到黃色油狀粗產品4-(2-(((3S,4S)-(E)-4-氟亞甲基-1-((氘代甲基)-3-甲基-3-哌啶基)甲氧基)-4-((S)-6-((三級丁基)雙(甲基)甲矽烷氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-8-氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-((三級丁基)(氧羰基胺基))-1-苯并噻吩-3-腈(82mg，收率84%)。LCMS(m/z)：883.3(M+H)。
步驟B：4-(2-(((3S,4S)-(E)-4-氟亞甲基-1-((氘代甲基)-3-甲基-3-哌啶基)甲氧基)-4-((S)-6-((三級丁基)雙(甲基)甲矽烷氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-8-氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-胺基-1-苯并噻吩-3-腈
在室溫下，向化合物4-(2-(((3S,4S)-(E)-4-氟亞甲基-1-((氘代甲基)-3-甲基-3-哌啶基)甲氧基)-4-((S)-6-((三級丁基)雙(甲基)甲矽烷氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-8-氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-((三級丁基)(氧羰基胺基))-1-苯并噻吩-3-腈(82mg,0.09mmol)的DCM(1.5mL)溶液中加入TFA(0.5mL)，保持溫度攪拌反應1h。LCMS監測反應結束後，濃縮反應液，得黃色油狀粗產品4-(2-(((3S,4S)-(E)-4-氟亞甲基-1-((氘代甲基)-3-甲基-3-哌啶基)甲氧基)-4-((S)-6-((三級丁基)雙(甲基)甲矽烷氧基)-6-甲基-1,4-氧雜環戊烯-4-基)-8-氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-胺基-1-苯并噻吩-3-腈(130mg)。LCMS(m/z)：783.3(M+H)。
步驟C：4-(2-(((S)-(E)-4-氟亞甲基-1-((氘代甲基)-3-甲基-3-哌啶基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-8-氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-胺基-1-苯并噻吩-3-腈(86)
在室溫下，向化合物4-(2-(((3S，4S)-(E)-4-氟亞甲基-1-((氘代甲基)-3-甲基-3-哌啶基)甲氧基)-4-((S)-6-((三級丁基)雙(甲基)甲矽烷氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-8-氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-胺基-1-苯并噻吩-3-腈(130mg,0.16mmol)的DMF(2.0mL)溶液中加入CsF(504mg,3.3mmoL)，升溫至55℃攪拌反應6h。LCMS監測反應結束後，0.5mL反應液經過pre-HPLC(C18,ACN/(10mmol NH4HCO3/H2O)=40-80%)純化，得白色固體產品4-(2-(((S)-(E)-4-氟亞甲基-1-((氘代甲基)- 3-甲基-3-哌啶基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-8-氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-胺基-1-苯并噻吩-3-腈(4mg).LCMS(m/z)：669.3(M+H).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 9.53-9.25(m,1H),7.84(s,2H),7.79-7.73(m,1H),7.23-7.10(m,2H),6.86-6.57(m,1H),5.44-5.26(m,1H),4.68-4.56(m,1H),4.39-4.01(m,4H),4.01-3.86(m,2H),3.81-3.68(m,1H),3.66-3.50(m,2H),2.75-2.64(m,2H),2.56-2.51(m,1H),2.27-2.11(m,1H),1.96-1.79(m,2H),1.25-1.21(m,3H),1.11(s,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6 )δ -120.72 - -125.05,-136.09 - -145.14.
步驟D：(Ra)-4-(2-(((S)-(E)-4-氟亞甲基-1-((氘代甲基)-3-甲基-3-哌啶基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-8-氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-胺基-1-苯并噻吩-3-腈(87A)和(Sa)-4-(2-(((S)-(E)-4-氟亞甲基-1-((氘代甲基)-3-甲基-3-哌啶基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚-4-基)-8-氟-6-硝基-7-喹唑啉基)-2-胺基-1-苯并噻吩-3-腈(87B)
將1.5mL步驟C所得反應液經過pre-HPLC(C18,ACN/(0.1% FA/H2O)=25-45%)純化，得到首先沖提出來的異構體1為實施例87A(白色固體產品，6.3mg，收率5.6%，保留時間11.0min)。LCMS(m/z)：669.3(M+H).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.35(s,1H),8.25(s,1H),7.85(s,2H),7.77(d,J=7.5Hz,1H),7.24-7.13(m,2H),6.72(d,J=86.7Hz,1H),5.34(s,1H),4.61(d,J=10.6Hz,1H),4.33(d,J=10.4Hz,1H),4.30-4.13(m,2H),4.12-3.90(m,4H),3.77-3.70(m,2H),2.71-2.63(m,2H),2.55-2.51(m,1H),2.26-2.13(m,1H),1.94-1.80 (m,2H),1.22-1.09(m,6H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6 )δ -122.74,-138.67。隨後沖提出來的異構體2為實施例87B(白色固體，6.4mg，收率5.7%，保留時間12.3min)。LCMS(m/z)：669.3(M+H).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 9.47(s,1H),8.25(s,1H),7.86(s,2H),7.77(d,J=7.7Hz,1H),7.23-7.14(m,1H),7.11(d,J=7.4Hz,1H),6.71(d,J=86.3Hz,1H),5.40(s,1H),4.63(d,J=10.6Hz,1H),4.32(d,J=10.7Hz,1H),4.28-4.18(m,2H),4.11-3.97(m,2H),3.96-3.90(m,2H),3.74-3.71(m,2H),2.71-2.65(m,2H),2.56-2.51(m,1H),2.27-2.18(m,1H),1.92-1.80(m,2H),1.21(s,3H),1.10(s,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6 )δ -122.56,-138.69.
實施例88
7-(2-胺基-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-4-基)-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-6-甲腈
步驟A：(S)-7-溴-4-(6-((三級丁基二甲基矽烷基)氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)-2,8-二氟喹唑啉-6-甲腈
冰浴條件下，依次將(S)-7-溴-2,8-二氟-4-(6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-6-甲腈(1.7g,4.25mmol)、三級丁基二甲矽基三氟甲磺酸酯(2.25g,8.5mmol)、TEA(1.7g,17mmol)加入到DCM(50mL)中，室溫攪拌16h。LCMS監測反應結束，加入DCM(100mL)，溶液用飽和食鹽水(30mL×3)洗滌。有機相用無水Na2SO4乾燥，過濾，濃縮有機液得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-15%)純化，得到黃色固體(S)-7-溴-4-(6-((三級丁基二甲基矽烷基)氧基)-6-甲基-1,4-氧氮雜環庚烷-4-基)-2,8-二氟喹唑啉-6-甲腈(2.3g，收率95%)。LCMS(m/z)：513.1(M+H)。
步驟B：(4-(4-((S)-6-((三級丁基二甲基矽烷基)氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)-6-氰基-2,8-二氟喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
室溫條件下，依次將(S)-7-溴-4-(6-((三級丁基二甲基矽烷基)氧基)-6-甲基-1,4-氧氮雜環庚烷-4-基)-2,8-二氟喹唑啉-6-甲腈(1.10g,2.14mmol)、(4-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環己烷-2-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(1.0g,2.6mmol),Ruphous-Pd-G4(100mg,0.118mmol)、DIEA(900mg,6.98mmol)加入到1,4-二噁烷(15mL)和水(5mL)溶液中，N2置換三次後，升溫至80℃攪拌2h。LCMS監測反應結束，將反應液恢復至室溫，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑。收集母液，加入水(80mL)，EA(100mL×2)萃取。收集的有機相用飽和食鹽水(50mL)洗，濃縮有機液得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-70%)純化，得到黃色固體 (4-(4-((S)-6-((三級丁基二甲基矽烷基)氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)-6-氰基-2,8-二氟喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(1.2g，收率80%)。LCMS(m/z)：700.2(M+H)。
步驟C：(4-(4-((S)-6-((三級丁基二甲基矽烷基)氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)-6-氰基-2,8-二氟喹唑啉-7-基)-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
在冰鹽浴條件下，將CSI(363mg,2.57mmol)緩慢滴入到(4-(4-((S)-6-((三級丁基二甲基矽烷基)氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)-6-氰基-2,8-二氟喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(1.2g,1.71mmol)與ACN(60mL)的混合溶液中，並在冰鹽浴條件下攪拌1h。然後慢慢滴加入DMF(2mL)並在冰鹽浴條件下繼續攪拌1h。LCMS監測反應結束，將反應液恢復到室溫後倒入水(100mL)溶液中，EA(100mL×2)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(50mL)滌，無水Na2SO4乾燥，過濾後濃縮有機相，得到黃色固體(4-(4-((S)-6-((三級丁基二甲基矽烷基)氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)-6-氰基-2,8-二氟喹唑啉-7-基)-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(800mg，收率65%)。LCMS(m/z)：725.2(M+H)。
步驟D：(4-(4-((S)-6-((三級丁基二甲基矽烷基)氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)-6-氰基-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)喹唑啉-7-基)-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
在乾冰乙醇浴條件下，將tBuONa(0.5mL,2M THF溶液，1.0mmol)加入到(4-(4-((S)-6-((三級丁基二甲基矽烷基)氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)-6-氰基-2,8-二氟喹唑啉-7-基)-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(250mg,0.345mmol)、(S,E)-(4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲醇(73mg,0.41mmol)和THF(5mL)的混合溶液中並攪拌1h。LCMS及TLC監測反應結束，將反應液恢復到室溫後倒入半飽和的NH4Cl(30mL)溶液中，EA(50mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(30mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機相，得到黃色固體粗產物(4-(4-((S)-6-((三級丁基二甲基矽烷基)氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)-6-氰基-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)喹唑啉-7-基)-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(200mg，收率64%)。LCMS(m/z)：881.2(M+H)。
步驟E：(3-氰基-4-(6-氰基-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
在室溫條件下，依次將(4-(4-((S)-6-((三級丁基二甲基矽烷基)氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)-6-氰基-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)喹唑啉-7-基)-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(200mg,0.244mmol)、CsF(200mg,1.32mmol)加入到DMF(3mL)溶液中並升溫至55℃攪拌16h。LCMS監測反應結束，將反應液恢復到室溫後倒入H2O(20mL)中，EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(30mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機相， 得到黃色固體粗產物(3-氰基-4-(6-氰基-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(150mg，收率80%)。LCMS(m/z)：766.3(M+H)。
步驟F：7-(2-胺基-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-4-基)-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-6-甲腈
室溫條件下，將HCl(3mL,4M，於1,4-二噁烷中)加入(3-氰基-4-(6-氰基-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(150mg,0.195mmol)中並攪拌1h。LCMS監測反應結束，將反應液濃縮後加入飽和NaHCO3水溶液(20mL)中淬滅，EA(20mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(30mL)滌，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機相經pre-HPLC(C18,ACN/(10mmol NH4HCO3/H2O)=55-75%)純化，得到白色固體7-(2-胺基-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-4-基)-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-6-甲腈(19mg，收率15%)。LCMS(m/z)：667.3(M+H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 9.13-9.01(m,1H),8.08(s,2H),7.95-7.87(m,1H),7.23-7.15(m,1H),6.85-6.57(m,1H),5.41-5.29(m,1H),4.66-4.56(m,1H),4.43-4.28(m,2H),4.25-4.09(m,1H),4.05-3.81(m,3H),3.79-3.67(m,1H),3.63-3.52(m,2H),2.75-2.63(m,2H),2.54(s,1H), 2.28-2.14(m,1H),1.96-1.80(m,2H),1.20-1.13(m,3H),1.12-1.07(m,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d6)δ -118.67 - -118.83,-122.96 - -123.28,-138.72.
實施例89
7-(2-胺基-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-4-基)-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-6-甲腈
步驟A：(4-(4-((S)-6-((三級丁基二甲基矽烷基)氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)-6-氰基-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟喹唑啉-7-基)-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
在乾冰乙醇浴條件下(-70℃)，將tBuONa(0.5mL,2M THF溶液，1.0mmol)加入到(4-(4-((S)-6-((三級丁基二甲基矽烷基)氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)-6-氰基-2,8-二氟喹唑啉-7-基)-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(250mg,0.345mmol)、((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲醇(81mg,0.41mmol)和THF(5mL) 的混合溶液中並攪拌1h。LCMS,TLC監測反應結束，將反應液恢復到室溫後倒入半飽和的NH4Cl(30mL)溶液中，EA(50mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(30mL)滌，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機相，得到黃色固體粗產物(4-(4-((S)-6-((三級丁基二甲基矽烷基)氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)-6-氰基-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟喹唑啉-7-基)-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(200mg，收率63%)。LCMS(m/z)：902.2(M+H)。
步驟B：(3-氰基-4-(6-氰基-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
在室溫條件下，依次將(4-(4-((S)-6-((三級丁基二甲基矽烷基)氧基)-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)-6-氰基-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟喹唑啉-7-基)-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(200mg,0.221mmol)、CsF(200mg,1.32mmol)加入到DMF(3mL)溶液中並升溫至55℃攪拌16h。LCMS監測反應結束，將反應液恢復到室溫後倒入H2O(20mL)中，EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(30mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機相，得到黃色固體粗產物(3-氰基-4-(6-氰基-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(140mg，收率81%)。LCMS(m/z)：766.3(M+H)。
步驟C：7-(2-胺基-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-4-基)-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-6-甲腈
室溫條件下，將HCl(3mL,4M 1,4-二噁烷溶液)加入(3-氰基-4-(6-氰基-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-7-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(140mg,0.178mmol)中並攪拌1h。LCMS監測反應結束，將反應液濃縮後加入飽和NaHCO3水溶液(20mL)中淬滅，EA(20mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(30mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機相經pre-HPLC(C18,ACN/(10mmol NH4HCO3/H2O)=55-75%)純化，得到白色固體7-(2-胺基-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-4-基)-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-6-甲腈(32mg，收率26%)。LCMS(m/z)：687.3(M+H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 9.11-8.97(m,1H),8.08(s,2H),7.95-7.86(m,1H),7.24-7.11(m,1H),6.49-6.13(m,1H),5.44-5.23(m,1H),4.51-4.42(m,2H),4.42-4.27(m,1H),4.23-4.07(m,1H),4.03-3.84(m,3H),3.81-3.70(m,1H),3.62-3.51(m,2H),2.89-2.76(m,2H),2.54(s,1H),1.85-1.61(m,4H),1.20-1.07(m,6H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -115.11 - -116.62,-118.23 - -119.45,-122.60 - -123.39.
實施例90
7-(2-胺基-3-氰基苯并[b]噻吩-4-基)-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-4-((S)-6-羥基-6-甲基-1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)喹唑啉-6-甲腈
實施例90的合成，參照實施例88該方案進行，在步驟B中使用(4-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環己烷-2-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯代替(4-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環己烷-2-基)-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯。LCMS(m/z)：649.3(M+H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 9.03(d,J=31.2Hz,1H),7.91(s,2H),7.85(m,1H),7.33-7.20(m,2H),6.89-6.54(m,1H),5.37(d,J=29.3Hz,1H),4.62(dd,J=16.0,10.6Hz,1H),4.32(m,2H),4.15(t,J=14.5Hz,1H),4.05-3.81(m,3H),3.78-3.66(m,1H),3.57(d,J=5.6Hz,2H),2.68(m,2H),2.21(m,1H),1.87(m,2H),1.17(d,J=9.0Hz,3H),1.12-1.04(s,3H).
參照上述製備方法及適當分離手段，本發明還製備了下述化合物。
實施例93A及93B
(Ra)-5-(7-(2-胺基-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-4-基)-6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺．甲酸鹽(93A)及(Sa)-5-(7-(2-胺基-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-4-基)-6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺‧甲酸鹽(93B)
步驟A：(4-(6-氯-4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)喹唑啉-7-基)-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
室溫條件下，將DIEA(176mg,1.36mmol)加入到(4-(6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-羥基喹唑啉-7-基)-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(150mg,0.227mmol)、N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺鹽酸鹽(111mg,0.455mmol)、BOP(201mg,0.455mmol)和DMF(3mL)的混合液中。將反應體系升溫至50℃攪拌過夜。LCMS監測反應結束，將反應液藉由FCC(SiO2,MeOH/DCM=0-10%)純化，得到黃色固體產物(4-(6-氯-4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)喹唑啉-7-基)-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(110mg，收率57%)。LCMS(m/z)：850.1(M+H)。
步驟B：(Ra)-5-(7-(2-胺基-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-4-基)-6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺．甲酸鹽(93A)及(Sa)-5-(7-(2-胺基-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-4-基)-6-氯-8-氟-2- (((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺．甲酸鹽(93B)
室溫條件下，將TFA：DCM=3：1(10mL)加入到(4-(6-氯-4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)喹唑啉-7-基)-3-氰基-5-氟苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(110mg,0.13mmol)中攪拌1h。LCMS監測反應結束，反應液濃縮後所得的粗品經pre-HPLC(C18,ACN/(0.1%FA/H2O)=25-40%)純化，得到首先沖提出來的異構體1為實施例93A(白色固體，8mg，收率17%，保留時間14.2min)。LCMS(m/z)：750.2(M+H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.17-7.94(m,3H),7.86(dd,J=8.7,5.0Hz,1H),7.22-7.10(m,1H),7.02-6.55(m,2H),5.22-4.89(m,2H),4.63-4.42(m,3H),4.38-4.08(m,3H),3.54-3.42(m,4H),3.27(s,3H),2.96(s,3H),2.84-2.57(m,3H),2.40-1.75(m,6H),1.15(s,3H)。19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -118.82,-121.18,-138.75。隨後沖提出來的異構體2為實施例93B(白色固體，7mg，收率15%，保留時間15.6min)。LCMS(m/z)：750.2(M+H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.18-7.96(m,3H),7.86(dd,J=8.7,4.9Hz,1H),7.22-7.10(m,1H),6.91-6.58(m,2H),5.20-4.88(m,2H),4.63-4.41(m,3H),4.35-4.06(m,3H),3.51-3.33(m,4H),3.27(s,3H),2.95(s,3H),2.86-2.66(m,2H),2.39-1.96(m,7H),1.12(s,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -118.77,-121.18,-138.75。
實施例94A及94B
(Sa)-5-(7-(2-胺基-3-氰基苯并[b]噻吩-4-基)-6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺．甲酸鹽(94A)及(Ra)-5-(7-(2-胺基-3-氰基苯并[b]噻吩-4-基)-6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺(94B)
步驟A：(4-(6-氯-4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)喹唑啉-7-基)-3-氰基苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
室溫條件下，依次將(4-(6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)-4-羥基喹唑啉-7-基)-3-氰基苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(320mg,0.500mmol)、N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺鹽酸鹽(242mg,242mmol)、BOP (441mg,1.00mmol)、DIEA(386mg,2.99mmol)加入到DMF(10mL)溶液中並升溫至50℃攪拌16h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入飽和碳酸氫鈉(100mL)中，EA(50mL×3)萃取。收集有機相後，飽和食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮有機相經FCC(SiO2，MeOH/DCM=0-10%)純化，得到黃色固體產物(4-(6-氯-4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)喹唑啉-7-基)-3-氰基苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(400mg，收率96%)。LCMS(m/z)：832.2(M+H)。
步驟B：(Sa)-5-(7-(2-胺基-3-氰基苯并[b]噻吩-4-基)-6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺．甲酸鹽(94A)及(Ra)-5-(7-(2-胺基-3-氰基苯并[b]噻吩-4-基)-6-氯-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺(94B)
室溫條件下，將(4-(6-氯-4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-2-(((S,E)-4-(氟亞甲基)-1,3-二甲基哌啶-3-基)甲氧基)喹唑啉-7-基)-3-氰基苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(820mg,0.480mmol)加入TFA(5.0mL)和DCM(5.0mL)的混合溶液中並攪拌1h。LCMS監測反應結束，將反應液濃縮後加入飽和NaHCO3水溶液(50mL)中淬滅，EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(70mL)洗，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮有機相得到的粗品經pre-HPLC(C18,ACN/(10mmol FA/H2O)=26-36%)純化，得到首先沖提出來的 異構體1為實施例94A(白色固體，143mg，收率20%，保留時間9.5min)。LCMS(m/z)：732.3(M+H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.16(s,1H),7.99-7.91(m,1H),7.84(s,2H),7.82-7.76(m,1H),7.29-7.21(m,1H),7.20-7.12(m,1H),6.86-6.77(m,0.5H),6.64(s,1H),6.61(s,0.5H),5.19-5.02(m,1H),5.01-4.84(m,1H),4.64-4.53(m,1H),4.52-4.41(m,2H),4.31-4.18(m,2H),4.16-4.00(m,1H),3.26(s,3H),2.95(s,3H),2.74-2.64(m,2H),2.55-2.51(m,1H),2.37-2.24(m,2H),2.20-2.16(m,1H),2.15(s,3H),1.93-1.79(m,2H),1.10(s,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -122.20,-138.77；隨後沖提出來的異構體2為化合物94B’(140mg，保留時間11.0min)。化合物94B’用DIEA游離後經pre-TLC(MeOH/EA=5%)進一步純化，得到白色固體實施例94B。LCMS(m/z)：732.3(M+H)。1H NMR(400MHz,Methanol-d 4)δ 8.10-8.01(m,1H),7.73-7.64(m,1H),7.31-7.23(m,1H),7.21-7.13(m,1H),7.02-6.92(m,0.5H),6.78-6.74(m,0.5H),6.73(s,1H),5.16-5.05(m,2H),4.57-4.43(m,3H),4.42-4.26(m,3H),3.80-3.65(m,1H),3.34(s,3H),3.26-3.18(m,1H),3.08(s,3H),3.03-2.64(m,6H),2.63-2.48(m,1H),2.45-2.31(m,2H),1.29(s,3H).
實施例95
5-(7-(2-胺基-3-氰基苯并[b]噻吩-4-基)-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d3)哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-6-硝基喹唑啉-4-基)-N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺
步驟A：(4-(4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-2,8-二氟-6-硝基喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
室溫條件下，依次將5-(7-溴-2,8-二氟-6-硝基喹唑啉-4-基)-N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺(300mg,0.605mmol)、(4-(5,5-二甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環己烷-2-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(328mg,0.907mmol)、Pd-117(43.3mg,0.0600mmol)、K3PO4(384mg,1.81mmol)加入到加入到1,4-二噁烷(10mL)和水(2mL)溶液中，N2置換三次後，升溫至80℃攪拌1.5h。LCMS監測反應結束，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑。收集母液，加入水(50mL)，EA(30mL×3)萃取，收集的有機相用飽和食鹽水(70mL)洗，濃縮有機相得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-90%)純化，得到黃色固體(4-(4-(2-(二甲基胺 基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-2,8-二氟-6-硝基喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(300mg，收率75%)。LCMS(m/z)：565.2(M-Boc)。
步驟B：(3-氰基-4-(4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-2,8-二氟-6-硝基喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
在冰水浴條件下，將CSI(319mg,2.26mmol)加入到(4-(4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-2,8-二氟-6-硝基喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(300mg,0.450mmol)和ACN(12mL)的混合溶液中並在相同溫度下攪拌1.0h。將DMF(3mL)滴加入以上反應液中並在冰水浴條件下繼續攪拌1.0h。LCMS監測反應結束，將反應液恢復到室溫後倒入水(50mL)溶液中，EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾後濃縮有機相，得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-90%)純化，得到的黃色固體(3-氰基-4-(4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-2,8-二氟-6-硝基喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(220mg，收率71%)。LCMS(m/z)：690.2(M+H)。
步驟C：(3-氰基-4-(2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-6-硝基喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯
在乾冰乙醇浴條件下，將tBuONa(0.13mL,2M THF溶液，0.26mmol)加入到(3-氰基-4-(4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-2,8-二氟-6-硝基喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(60mg,0.087mmol)、((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲醇(25mg,0.13mmol)和THF(5mL)的混合溶液中並在乾冰乙醇浴條件下攪拌1.0h。將反應液恢復到室溫後攪拌1.0h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入飽和的NH4Cl(50mL)水溶液中，EA(30mL×3)萃取。收集有機相後，飽和食鹽水(70mL)溶液洗，無水Na2SO4乾燥。過濾後濃縮有機相，得到黃色固體(3-氰基-4-(2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-6-硝基喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(80mg，收率95%)。LCMS(m/z)：866.3(M+H)。
步驟D：5-(7-(2-胺基-3-氰基苯并[b]噻吩-4-基)-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d3)哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-6-硝基喹唑啉-4-基)-N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺
室溫條件下，將(3-氰基-4-(2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d 3)哌啶-3-基)甲氧基)-4-(2-(二甲基胺基甲醯基)-7,8-二氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-5(6H)-基)-8-氟-6-硝基喹唑啉-7-基)苯并[b]噻吩-2-基)胺基甲酸三級丁酯(80mg,0.092mmol)加入TFA(1.0mL)和DCM(1.0mL)的混合溶液中並攪拌1h。LCMS監測反應結束，將反應液濃縮後加入飽和NaHCO3水溶液(50mL)中淬滅，EA(30mL×3)萃取，收集有 機相後，飽和食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機相經pre-HPLC(C18,ACN/(10mmol NH4HCO3/H2O)=45-65%)純化，得到白色固體5-(7-(2-胺基-3-氰基苯并[b]噻吩-4-基)-2-(((3S,4S)-4-(二氟甲基)-3-甲基-1-(甲基-d3)哌啶-3-基)甲氧基)-8-氟-6-硝基喹唑啉-4-基)-N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺(143mg，收率20%)。LCMS(m/z)：766.3(M+H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.68(s,1H),7.85(s,2H),7.80-7.76(m,1H),7.23-7.18(m,1H),7.17-7.09(m,1H),6.71(d,J=4.8Hz,1H),6.46-6.15(m,1H),5.27-5.17(m,1H),5.13-5.03(m,1H),4.58-4.09(m,7H),3.25(s,3H),2.95(s,3H),2.86-2.75(m,2H),1.91-1.54(m,6H),1.11(s,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -115.33,-115.38,-116.08,-116.13,-118.46,-118.49,-119.21,119.24,121.73,121.76.
參照上述製備方法及適當分離手段，本發明製備了下述化合物。
實施例112A及實施例112B
步驟A：實施例112A及112B
實施例112(85mg)經手性Waters SFC 150拆分(分離管柱：DAICELCHIRALPAK®AD，250*30mm，10μm；流動相：CO2/EtOH(0.1% 7.0mol/l Ammonia in MEOH)=60/40；流速：120mL/min)，得到首先沖提出來的異構體1為實施例112A(32.7mg，相對保留時間較小)。手性分析方法SFC-112，Rt=0.97min。LCMS(m/z)：742.3(M+H).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.17(s,1H),7.80-7.78(m,3H),7.24(t,J=7.6Hz,1H),7.11(dd,J 1=7.6Hz,J 2=0.8Hz,1H),6.89(dd,J 1=83.6Hz,J 2=5.6Hz,1H),6.70(d,J=86.8Hz,1H),6.57(s,1H),5.23(dd,J 1=44.8Hz,J 2=4.8Hz,1H),5.07(dd,J 1=25.2Hz,J 2=16.0Hz,2H),4.61(d,J=10.8Hz,1H),4.55-4.45(m,2H),4.24-4.14(m,3H),3.25(s,3H),2.94(s,3H),2.70(d,J=10.8Hz,2H),2.52(m,1H),2.34-2.19(m,3H),2.15(s,3H),1.91-1.81(m,2H),1.09(s,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -122.79,-126.05,-138.84.隨後沖提出來的異構體2為實施例112B(27.2mg，相對保留時間較大)。手性分析方法SFC-112， Rt=1.90min。LCMS(m/z)：742.3(M+H).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.17(s,1H),7.80-7.78(m,3H),7.24(t,J=7.6Hz,1H),7.11(dd,J 1=7.2Hz,J 2=0.8Hz,1H),6.89(dd,J 1=83.6Hz,J 2=5.6Hz,1H),6.72(d,J=86.8Hz,1H),6.57(s,1H),5.23(dd,J 1=44.8Hz,J 2=5.2Hz,1H),5.08(dd,J 1=33.2Hz,J 2=16.0Hz,2H),4.58(d,J=10.8Hz,1H),4.52-4.49(m,2H),4.25(d,J=10.8Hz,1H),4.22-4.12(m,2H),3.24(s,3H),2.94(s,3H),2.68(d,J=10.8Hz,2H),2.53(m,1H),2.30-2.17(m,3H),2.15(s,3H),1.93-1.83(m,2H),1.10(s,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -122.78,-126.07,-138.80.
手性分析方法SFC-112：Waters UPCC(CA-352)，分析管柱：DAICELCHIRALPAK®AD；流動相A：CO2，流動相B：EtOH(0.1% DEA)；流速：1.5mL/min；管柱溫度：35℃；反壓：1800psi；梯度：0-8.0min A/B=60/40。
實施例161A及161B
步驟G：化合物161-1
室溫條件下，依次將化合物N8-6(200mg,0.388mmol)、3-氯-N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺‧鹽酸鹽(CAS：2791277-01-3,129mg,0.466mmol)、BOP(246mg,0.582mmol)、DBU(295mg,1.94mmol)加入到DMF(5mL)中。所得反應液在55℃下反應1h。LCMS和TLC監測反應結束。將反應液倒入水(30mL)中，EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(30mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮有機相經FCC(SiO2,EA/PE=0-82%)純化，得到黃色固體化合物161-1(175mg，收率61%)。LCMS(m/z)：740.2(M+H)。
步驟H：化合物161-2
在冰鹽浴條件下(-10℃)，向化合物161-1(155mg,0.210mmol)的MeCN(15mL)的溶液中加入CSI(118mg,0.839mmol)保持溫度 攪拌反應1h，將DMF(5mL)加入到反應液中。所得反應液在室溫條件下繼續反應1h。TLC監測反應結束，將反應液倒入半飽和的NaHCO3(30mL)溶液中，EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(30mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾，濃縮有機相經FCC(SiO2,THF/PE=0-68%)純化，得到白色固體化合物161-2(166mg，收率100%)。LCMS(m/z)：765.0(M+H)。
步驟I：化合物161-3
室溫條件下，將間m-CPBA(53mg,0.26mmol)加入到化合物161-2(170mg,0.23mmol)的DCM(3mL)的溶液中，室溫攪拌1h。LCMS反應結束，將反應液倒入NaHCO3(30mL)溶液淬滅，DCM(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥。濃縮得到黃色固體化合物161-3(177mg，粗品)，直接用於下一步。LCMS(m/z)：781.1(M+H)。
步驟J：化合物161-3
在乾冰乙醇浴條件下(-70℃)，將tBuONa(0.23mL,2M in THF,0.45mmol)加入到化合物161-3(87mg,0.11mmol)、中間體b(29mg,0.17mmol)和THF(3mL)的溶液中。所得反應液在室溫條件下繼續反應1h。TLC監測反應結束，將反應液倒入半飽和的NH4Cl(30mL)溶液中，EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥。濃縮有機相經FCC(SiO2,MeOH/DCM=0-4%)純化，得到棕色固體化合物161-4(90mg，收率91%)。LCMS(m/z)：890.1(M+H)。
步驟K：實施例161A及161B
在室溫條件下，將化合物161-4(90mg)和TFA/DCM(V/V=1：1,5mL)的混合液，在室溫條件下攪拌1h。LCMS檢測反應結束後，濃縮後加入飽和碳酸氫鈉水溶液(30mL)，然後用EA(30mL×2)萃取，收集萃取液，食鹽水(30mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機相經pre-HPLC(C18,ACN/(10mmol FA/H2O)=35-45%)純化，得到白色固體異構體1為實施例161A(Rt1=7.0min)(13.1mg，收率15%)。LCMS(m/z)：790.2(M+H).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.38(s,1H),7.90(s,2H),7.81(dd,J=8.7,5.0Hz,1H),7.28(s,1H),7.18-7.08(m,1H),6.83-6.53(m,1H),5.15-4.86(m,2H),4.47-4.38(m,3H),4.28-4.13(m,3H),3.02(s,3H),2.97(s,3H),2.71-2.65(m,2H),2.58-2.51(m,1H),2.38-2.28(m,2H),2.19-2.09(m,4H),1.95-1.78(m,2H),1.55-1.47(m,1H),1.08(s,3H),0.69-0.59(m,4H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -118.66,-126.21,-138.90；得到白色固體異構體2為實施例161B(Rt2=9.0min)(14.8mg，收率17%)。LCMS(m/z)：790.2(M+H).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.30(s,1H),7.89(s,2H),7.81(dd,J=8.7,4.9Hz,1H),7.28(s,1H),7.18-7.09(m,1H),6.83-6.53(m,1H),5.09-4.94(m,2H),4.54-4.39(m,3H),4.26-4.10(m,3H),3.02(s,3H),2.97(s,3H),2.72-2.65(m,2H),2.49-2.46(m,1H),2.40-2.27(m,2H),2.24-2.15(m,1H),2.13(s,3H),1.93-1.77(m,2H),1.57-1.46(m,1H),1.07(s,3H),0.73-0.55(m,4H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -118.63,-126.20,-138.94.
實施例162A及162B
步驟A：化合物162-1
室溫條件下，依次將中間體N8(100mg,0.18mmol)、n-1(60mg,0.234mmol)、DIEA(116mg,0.90mmol)加入到DMF(3mL)中。所得反應液在35℃下反應16h。LCMS和TLC監測反應結束。將反應液倒入水(30mL)中，EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(30mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮有機相經FCC(SiO2,EA/PE=0-20%)純化，得到黃色固體化合物162-1(80mg，收率60%)。LCMS(m/z)：745.3(M+H)。
步驟B：化合物162-2
室溫條件下，將m-CPBA(26mg,0.13mmol)加入到化合物162-1(80mg,0.11mmol)的DCM(3mL)的溶液中，室溫攪拌1h。LCMS反應結束，將反應液倒入NaHCO3(30mL)溶液淬滅，DCM(30mL×3)萃取， 收集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥。濃縮得到黃色固體化合物162-2(80mg，粗品)，直接用於下一步。LCMS(m/z)：761.3(M+H)。
步驟C：化合物162-3
在乾冰乙醇浴條件下(-70℃)，將tBuONa(0.21mL,2M in THF,0.42mmol)加入到化合物162-2(80mg,0.11mmol)、中間體b(27mg,0.16mmol)和THF(3mL)的溶液中。所得反應液在室溫條件下繼續反應1h。TLC監測反應結束，將反應液倒入半飽和的NH4Cl(30mL)溶液中，EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥。濃縮有機相經FCC(SiO2,MeOH/DCM=0-4%)純化，得到棕色固體化合物162-3(81mg，收率88%)。LCMS(m/z)：870.3(M+H)。
步驟D：實施例162A及162B
在室溫條件下，將化合物162-3(81mg)和TFA/DCM(V/V=1：1,5mL)的混合液，在室溫條件下攪拌1h。LCMS監測反應結束，濃縮後加入飽和碳酸氫鈉水溶液(30mL)，用EA(30mL×2)萃取。收集萃取液，食鹽水(30mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機相經pre-HPLC(C18,ACN/(10mmol FA/H2O)=35-45%)純化，得到白色固體異構體1為實施例162A(Rt1=5.8min)(34.2mg，收率45%)。LCMS(m/z)：770.3(M+H).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.32(s,1H),7.89(s,2H),7.83-7.78(m,1H),7.30(s,1H),7.18-7.09(m,1H),6.82-6.54(m,2H),5.11(d,J=17.0Hz,1H),4.87-4.70(m,2H),4.50-4.33(m,2H),4.25-4.07(m,2H),3.27(s,3H),2.96(s,3H),2.69-2.59(m,2H),2.47-2.38(m,2H),2.33-2.24(m,1H),2.14(s,3H),2.13-2.03(m,1H),1.96-1.79(m, 2H),1.59-1.49(m,4H),1.07(s,3H),0.77-0.45(m,4H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -118.45,-125.73,-138.95；白色固體異構體2為實施例162B(Rt2=7.8min)(12.5mg，收率16%)。LCMS(m/z)：770.3(M+H).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.36(s,1H),7.90(s,2H),7.83-7.77(m,1H),7.28(s,1H),7.16-7.08(m,1H),6.82-6.55(m,2H),4.99(d,J=16.9Hz,1H),4.85-4.71(m,2H),4.50-4.41(m,2H),4.23(d,J=10.6Hz,1H),4.07-3.93(m,1H),3.26(s,3H),2.96(s,3H),2.69-2.63(m,2H),2.47-2.34(m,2H),2.31-2.15(m,2H),2.14(s,3H),1.94-1.78(m,2H),1.56(d,J=6.3Hz,3H),1.52-1.42(m,1H),1.07(s,3H),0.72-0.42(m,4H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -118.79,-126.47,-138.96.
實施例163A及163B
步驟A：化合物163-1
室溫條件下，依次將中間體N4-OH(200mg,0.38mmol)、3-氯-N,N-二甲基-5,6,7,8-四氫-4H-吡唑并[1,5-a][1,4]二氮雜-2-甲醯胺‧鹽酸鹽(CAS：2791277-01-3,127mg,0.45mmol)、BOP(241mg,0.57mmol)、DBU(288mg,1.89mmol)加入到DMF(5mL)中。所得反應液在55℃下攪拌反應1h。LCMS和TLC監測反應結束。將反應液倒入水(30mL)中，EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(30mL)滌，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮有機相經FCC(SiO2,THF/PE=0-64%)純化，得到黃色固體化合物163-1(180mg，收率63%)。LCMS(m/z)：753.1(M+H)。
步驟B~C：化合物163-3的合成參照實施例162A/162B中相關步驟進行。
步驟D：實施例163A及163B
在室溫條件下，將化合物163-3(200mg)和DCM/TFA(V/V=1：1,8mL)的混合液，在室溫條件下攪拌1h。LCMS檢測反應結束後，濃縮後加入飽和碳酸氫鈉水溶液(50mL)，然後用EA(50mL×2)萃取，收集萃取液。食鹽水(50mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機相經pre-HPLC(C18,ACN/(10mmol FA/H2O)=25-45%)純化，得到白色固體異構體1為實施例163A(Rt1=11.5min)(26.5mg，收率15%)。LCMS(m/z)：778.2(M+H).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 7.90(s,2H),7.82(dd,J=8.7,5.0Hz,1H),7.59(s,1H),7.17-7.09(m,1H),6.83-6.55(m,1H),5.10-4.93(m,2H),4.49-4.41(m,3H),4.29-4.15(m,3H),3.01(s,3H),2.97(s,3H),2.71-2.65(m,2H),2.49-2.46(m,1H),2.45-2.28(m,4H),2.13(s,3H),1.95-1.79(m,2H),1.09(s,3H),0.97(t,J=7.5Hz,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -118.75,-125.74,-138.91；白色固體異構體2為實施例163B(Rt2=12.7min)(20.7mg，收率12%)。LCMS(m/z)：778.2(M+H).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 7.90(s,2H),7.82(dd,J=8.7,5.0Hz,1H),7.58(s,1H),7.17-7.09(m,1H),6.82-6.54(m,1H),5.09-4.94(m,2H),4.54-4.41(m,3H),4.27-4.13(m,3H),3.01(s,3H),2.97(s,3H),2.72-2.66(m,2H),2.46(s,1H),2.45-2.26(m,4H),2.25-2.16(m,1H),2.14(s,3H),1.84(s,2H),1.08(s,3H),0.97(t,J=7.5Hz,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -118.72,-118.74,-125.74,-138.93.
實施例164A及164B
步驟A：化合物164-1
室溫條件下，將DIPEA(277mg,2.74mmol)加入到中間體N4(150mg,0.274mmol)、n-1(122mg,0.548mmol)和DMF(3mL)的混合液中 並在室溫條件下攪拌過夜。LCMS監測反應結束，將反應液倒入飽和NH4Cl水溶液(30mL)中，EA(30mL×3)萃取。收集有機相，飽和NaCl溶液(30mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-90%)純化，得到白色固體化合物164-1(150mg，收率75%)。LCMS(m/z)：733.1(M+H)。
步驟B：化合物164-2
在室溫下，向化合物164-1(150mg,0.205mmol)的二氯甲烷(5mL)和H2O(5mL)的混合溶液中，加入MMPP(85wt%，357mg,0.614mmol)，並攪拌反應2h。LCMS監測反應結束後，加水(30mL)，用二氯甲烷(50mL×3)萃取。合併有機相後，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得粗產品化合物164-2(150mg,98%)。LCMS(m/z)：749.1(M+H)。
步驟C：化合物164-3
乾冰乙醇浴條件下，向溶有化合物164-2(150mg,0.2mmol)、中間體b(69mg,0.401mmol)的四氫呋喃(5mL)中滴加NaOtBu(2M THF溶液，0.501mL,0.1mmol)，並在此溫度下反應0.5小時後，升至室溫反應1h。LCMS監測反應結束後，將反應液倒入飽和NH4Cl水溶液(30mL)中，EA(30mL×3)萃取。收集有機相，飽和NaCl溶液(30mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾，濃縮得到粗品化合物164-3(160mg，收率93%)。LCMS(m/z)：858.1(M+H)。
步驟D：實施例164A及164B
室溫條件下，將三氟乙酸(10mL)加入到化合物164-3(150mg,0.175mmol)中並在室溫條件下攪拌1小時，LCMS監測反應結束 後，減壓濃縮，飽和碳酸氫鈉溶液中和，乙酸乙酯(40mL×3)萃取，減壓濃縮，粗品經pre-HPLC(C18,ACN/(10mmol FA/H2O)=35-45%)純化，得到白色粉末狀異構體1為實施例164A(Rt1=11min)(53mg，收率80%)LCMS(m/z)：758.1(M+H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.22(s,0.5H),7.90(s,2H),7.82(dd,J=8.7,4.9Hz,1H),7.65(s,1H),7.18-7.08(m,1H),6.80(s,0.5H),6.67(s,1H),6.58(s,0.5H),5.15(d,J=17.1Hz,1H),4.94-4.72(m,2H),4.51-4.35(m,2H),4.29-4.09(m,2H),3.25(s,3H),2.96(s,3H),2.70-2.61(m,2H),2.48-2.25(m,5H),2.21-2.08(m,4H),1.95-1.87(m,1H),1.83(d,J=11.3Hz,1H),1.57(d,J=6.2Hz,3H),1.08(s,3H),0.99(t,J=7.5Hz,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d6)δ -118.58,-125.47,-138.94；和白色固體異構體2為實施例164B(Rt2=14min)(15mg，收率23%)。LCMS(m/z)：758.1(M+H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.36(s,0.5H),7.98(s,2H),7.87(dd,J=8.7,5.0Hz,1H),7.69(s,1H),7.24-7.12(m,1H),6.86(s,0.5H),6.73-6.66(m,1H),6.64(s,0.5H),5.15-5.04(m,1H),5.00-4.82(m,2H),4.60-4.45(m,2H),4.37-4.25(m,1H),4.18-4.00(m,1H),3.30(s,3H),3.01(s,3H),2.76-2.66(m,2H),2.54-2.26(m,5H),2.24-2.17(m,4H),2.01-1.91(m,1H),1.88(d,J=11.2Hz,1H),1.66-1.60(m,3H),1.14(s,3H),1.02(t,J=7.5Hz,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -118.96,-126.07,-138.93.
參照上述合成方案及適當變體，製備並表徵下列實施例：
實施例213A及214B
步驟A：化合物213-2
在冰水浴條件下，將NaH(3.21g,80.2mmol)加入到化合物213-1(5.00g,26.7mmol)和DMF(100mL)的混和溶液中，升溫至室溫後攪拌1.0h。在冰水浴條件下，將PMBCl(9.21g,58.8mmol)加入到反應液中，升溫至室溫後攪拌2.0h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入飽和氯化銨水溶液(500mL)中，EA(100mL×3)萃取。收集有機相後，依次用5%LiCl水溶液(300mL)，飽和食鹽水(300mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾後濃縮有機相，得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-30%)純化，得到黃色固體化合物213-2(10.9g，收率96%)。LCMS(m/z)：427.1和429.1(M+H)。
步驟B：化合物213-3
室溫條件下，依次將化合物213-2(3.00g,7.02mmol)、六正丁基二錫(4.89g，8.42mmol)、Pd2(dba)3(643mg，0.702mmol)、P(Cy)3(394mg，1.40mmol)、LiCl(1.49g,35.1mmol)加入到1,4-二噁烷(60mL)溶液中。N2置換三次後，升溫至110℃攪拌16h。LCMS監測反應結束，藉由矽藻土過濾除去鈀催化劑，過濾後濃縮有機相，得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-5%)純化，得到黃色油狀產物213-3(4.5g，收率100%)。LCMS(m/z)：639.3(M+H)。
步驟C：化合物213-5
室溫條件下，依次將化合物213-3(3.71g,5.83mmol)、213-4(1.20g,3.88mmol)、Pd(PPh3)4(897mg，0.777mmol)、CuI(222mg，1.17mmol)、LiCl(408mg，9.71mmol)加入到1,4-二噁烷(100mL)溶液中。N2置換三次後，升溫至110℃攪拌16h。LCMS監測反應結束，藉由矽藻 土過濾除去鈀催化劑。過濾後濃縮有機相，得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-25%)純化，得到黃色固體化合物213-5(800mg，收率36%)。LCMS(m/z)：577.2(M+H)。
步驟D：化合物213-6
室溫條件下，依次將NIS(1.56g，6.93mmol)、TsOH(11.9mg，0.0690mmol)加入到化合物213-5(800mg，1.39mmol)和DMF(20mL)的混和溶液中並在室溫下攪拌6.0h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入飽和硫代硫酸鈉(120mL)中，EA(30mL×3)萃取，收集有機相後。飽和食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾後濃縮有機相，得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-35%)純化，得到黃色固體化合物213-6(830mg，收率85%)。LCMS(m/z)：703.1(M+H)。
步驟E：化合物213-8
室溫條件下，依次將化合物213-7(5.47g，28.5mmol)、CuI(2.60g，13.7mmol)加入到化合物213-6(800mg,1.14mmol)和DMA(30mL)的混和溶液中並升溫至90℃攪拌16.0h。LCMS監測反應結束，將反應液EA(30mL)稀釋後過濾，濾液倒入水(150mL)中，EA(50mL×3)萃取。收集有機相後，飽和食鹽水(100mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾後濃縮有機相，得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-20%)純化，得到黃色油狀化合物213-8(550mg，收率75%)。LCMS(m/z)：645.2(M+H)。
步驟F：化合物213-9
在室溫條件下，將NaH(55.8mg,1.40mmol)加入到中間體b(121mg，0.698mmol)和THF(10mL)的混和溶液中並在室溫下攪拌0.5h。 在室溫條件下，將化合物213-8(300mg，0.465mmol)加入到反應液中並在室溫下攪拌1.5h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入飽和氯化銨水溶液(600mL)中，EA(30mL×3)萃取。收集有機相後，飽和食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾後濃縮有機相，得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-60%)純化，得到黃色固體化合物213-9(150mg，收率40%)。LCMS(m/z)：798.3(M+H)。
步驟G：化合物213-10
室溫條件下，將甲硫醇鈉(263mg,3.76mmol)加入到化合物213-9(150mg,0.188mmol)的DMF(2mL)混合溶液中並升溫至90℃攪拌2.0h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入水(50mL)中，然後用1M鹽酸調至PH=5，EA(30mL×3)萃取。收集有機相後，依次用飽和碳酸氫鈉(50mL)、飽和食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾後濃縮有機相，得到的粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-90%)純化，得到黃色固體化合物213-10(140mg，收率95%)。LCMS(m/z)：784.3(M+H)。
步驟H：化合物213-11
在冰水浴條件下，將DMF(13.0mg，0.179mmol)加入到草醯氯(68.0mg，0.536mmol)和DCM(3mL)的混和溶液中，並在冰水浴條件下攪拌0.5h。在冰水浴條件下將化合物213-10(140mg，0.179mmol)的DCM(2mL)溶液加入到以上反應液中，升至室溫後攪拌1.0h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入水(50mL)中，EA(30mL×3)萃取。收集有機相後，飽和食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾後濃縮有機相，粗品經FCC (SiO2，EA/PE=0-50%)純化，得到棕色固體化合物213-11(100mg，收率70%)。LCMS(m/z)：802.0(M+H)。
步驟I：化合物213-12
室溫條件下，依次將化合物213-11(100mg，0.125mmol)、中間體n-1(64.2mg，0.249mmol)、DIEA(80.5mg，0.623mmol)加入到DMF(2.0mL)中，升溫至35℃攪拌24.0h。LCMS監測反應結束，將反應液恢復到室溫後倒水(50mL)中淬滅，EA(30mL×3)萃取。收集有機相後，飽和食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾後濃縮有機相，粗品經FCC(SiO2，EA/PE=0-80%)純化，得到黃色固體化合物213-12(40mg，收率33%)。LCMS(m/z)：802.0(M+H)。
步驟J：實施例213A和213B
在室溫條件下，將化合物213-12(40mg,0.040mmol)加入到TFA(5.0mL)中並升溫至50℃攪拌4.0h。LCMS監測反應結束，濃縮後加入飽和碳酸氫鈉水溶液(50mL)淬滅，然後用EA(30mL×3)萃取。收集有機相後，食鹽水(70mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾後濃縮有機相，得到的粗品經pre-HPLC(C18,ACN/(10mmol FA/H2O)=30-45%)純化，得到白色固體實施例213A(1.13mg，收率4.0%)，RT=8.0min，LCMS(m/z)：748.3(M+H)；和白色固體實施例213B(2.49mg，收率8.0%)，RT=10.5minLCMS(m/z)：748.3(M+H)。
參照上述實施例方案及適當變體，製備並表徵下列化合物。
實施例226A及226B
步驟A：化合物226-1
在室溫下，向中間體T(5.0g,10.5mmol)的甲醇(60mL)溶液中加入Pd(dppf)Cl2(776mg，1.05mmol)和三乙胺(3.2g，30.5mmol)，一氧化碳(15psi)置換三次，所得反應液升溫至80℃攪拌反應24h。LCMS監測反應結束後，反應液經矽藻土過濾，濾液濃縮乾，所得粗產品經過FCC(SiO2,PE/DCM=0-10%)純化，得黃色固體化合物226-1(2.8g，收率65%)。LCMS(m/z)：403.9(M+H)。
步驟B：化合物226-2
在冰浴氮氣保護下，向化合物226-1(2.8g,6.9mmol)的二氯甲烷(30ml)溶液中加入1N的二異丁基氫化鋁(17.3mL,17.3mmol)，保持溫度攪拌反應3h。LCMS監測反應結束後，將十水硫酸鈉加入反應液中至不產生氣泡。反應液過濾濃縮乾。所得粗產品經過FCC(SiO2，EA/PE=0- 15%)純化，得到黃色固體化合物226-2(2.2g，收率85%)。LCMS(m/z)：374.9(M+H)。
步驟C：化合物226-3
在冰浴下，向化合物226-2(2.2g,5.9mmol)的無水DMF(30mL)溶液中，加入鈉氫(352mg,8.8mmol)，保持溫度攪拌反應0.5h後，將碘甲烷(1.2g,8.8mmol)加入到反應液中。所得混合物在室溫條件下繼續攪拌1h。LCMS監測反應結束後，將反應液倒入50mL飽和氯化銨水溶液中。再用乙酸乙酯萃取。有機相合併後，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮乾，所得粗產品經過FCC(SiO2,EA/PE=0-5%)純化，得到黃色固體化合物226-3(1.93g，收率85%)。LCMS(m/z)：391.0(M+H)。
步驟D：化合物226-4
在N2下，向化合物226-3(400mg,1.0mmol)的1,4-二噁烷(5mL)和水(1mL)溶液中加入中間體w3(585mg,1.5mmol),DIPEA(664mg,5.0mmol)和RuphosPd-G4(85mg，0.1mmol)。所得反應液在70℃條件下攪拌反應2h。LCMS監測反應結束後，反應液經矽藻土過濾，濾液濃縮乾，所得粗產品經過FCC(SiO2,EA/PE=0-10%)純化，得黃色固體化合物226-4(360mg，收率60%)。LCMS(m/z)：576.1(M+H)。
步驟E：化合物226-5
在冰浴氮氣保護下，向化合物226-4(360mg,0.62mmol)的乙腈(26ml)溶液中加入氯磺醯異氰酸酯(293mg,1.86mmol)。保持溫度攪拌反應0.5h，再加入1mLDMF，所得反應液在室溫下攪拌反應0.5h。LCMS監測反應結束後，將50mL飽和碳酸氫鈉水溶液加入反應液中，再用乙酸乙 酯取。有機相合併，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮乾。所得粗產品經過FCC(SiO2，EA/PE=0-10%)純化，得到黃色固體化合物226-5(290mg，收率77%)。LCMS(m/z)：601.1(M+H)。
步驟F：化合物226-6
在室溫下，向化合物226-5(290mg,0.48mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液中，加入單過氧鄰苯二甲酸鎂六水合物(MMPP，864mg,1.45mmol)的水(2mL)溶液，保持溫度攪拌反應3h。LCMS監測反應結束後，將30mL水加入反應液中，再用二氯甲烷(30mLx2)萃取。有機相合併，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮乾，得黃色固體粗產品化合物226-6(310mg)。LCMS(m/z)：681.0(M+H)。
步驟G：化合物226-7
在-70℃氮氣保護下，向化合物226-6(310mg,0.55mmol)和((S)-(E)-4-氟亞甲基-1-甲基-3-甲基-3-哌啶基)甲醇(中間體b，191mg,1.1mmol)的無水四氫呋喃(6mL)中，加入1N的三級丁醇鈉THF溶液(1.6mL,1.6mmol)。所得反應液在-70℃到室溫條件下繼續反應2h。LCMS監測反應結束後，反應液倒入30mL飽和氯化銨溶液中。再用乙酸乙酯萃取。有機相合併後，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮乾，所得粗產品經FCC(THF/PE=0-70%)純化，得到黃色固體化合物226-7(140mg，收率38%)。LCMS(m/z)：670.1(M+H)。
步驟H：化合物226-8
在0℃氮氣保護下，向化合物草醯氯(80mg,0.63mmol)的無水二氯甲烷(5mL)中，加入DMF(3mg,0.04mmol)。保持溫度攪拌反應0.5h 後，將化合物226-7(140mg,0.21mmol)加入到反應液中，所得反應液在0℃條件下繼續反應1h。LCMS監測反應結束後，反應液倒入20mL飽和碳酸氫鈉溶液中。再用二氯甲烷萃取。有機相合併後，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮乾，得到黃色固體粗產品化合物226-8(150mg)。LCMS(m/z)：688.0(M+H)。
步驟I：化合物226-9
在氮氣保護下，向化合物226-8(150mg,0.22mmol)和中間體n-1(97mg,0.44mmol)的無水DMF(3mL)中，加入DIPEA(142mg,1.1mmol)。所得反應液在70℃條件下攪拌反應16h。LCMS監測反應結束後，反應液倒入30mL水中。再用乙酸乙酯萃取。有機相合併後，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮乾，所得粗產品經pre-TLC(MeOH/DCM=10%)純化，得到黃色固體化合物226-9(40mg，收率21%)。LCMS(m/z)：875.1(M+H)。
步驟J：實施例226A及226B
在室溫下，向化合物226-9(40mg,0.04mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液中，加入1mL三氟乙酸，保持溫度攪拌反應1h。LCMS監測反應結束後，反應液經pre-HPLC(C18,CAN/(0.1%FA/H2O)=25-40%)純化，得第一個沖提出來的白色固體為實施例226A(5.1mg，收率15%,Rt=8.5min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.30(s,1H),7.94-7.86(m,3H),7.82(dd,J=8.7,4.9Hz,1H),7.16-7.07(m,1H),6.87-6.55(m,2H),5.19-5.08(m,1H),4.96-4.85(m,1H),4.84-4.74(m,1H),4.54-4.38(m,2H),4.27-4.09(m,4H),3.27(s,3H),3.16(s,3H),2.96 (s,3H),2.69-2.63(m,2H),2.46-2.24(m,3H),2.17-2.10(m,4H),1.95-1.80(m,2H),1.53(d,J=6.2Hz,3H),1.09(s,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -118.74,-125.91,-138.91.LCMS(m/z)：774.1(M+H)；和第二個沖提出來的白色固體為實施例226B(1.3mg，收率4%,Rt=10.3min)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.36(s,2H),7.94(s,2H),7.86(s,1H),7.81(dd,J=8.7,4.9Hz,1H),7.16-7.07(m,1H),6.84-6.55(m,2H),5.09-4.97(m,1H),4.93-4.79(m,2H),4.54-4.42(m,2H),4.30-4.00(m,4H),3.26(s,3H),3.17(s,3H),2.95(s,3H),2.70-2.63(m,2H),2.47-2.23(m,3H),2.20-2.12(m,4H),1.95-1.77(m,2H),1.53(d,J=6.3Hz,3H),1.08(s,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -118.94,-126.40,-138.93.LCMS(m/z)：774.1(M+H)。
參照上述實施例方案及適當變體，製備並表徵下列化合物。
實施例228A及228B
步驟A：化合物228-1
室溫條件下，依次將中間體n-8(163mg,0.54mmol),N19(150mg,0.27mmol),DIEA(350mg,2.7mmol)加入到DMF(4mL)中，N2置換三次後，升溫至50℃攪拌16小時。LCMS和TLC監測反應結束，將反應液恢復至室溫，加入水(30mL)，EA(30mL×3)萃取，收集的有機相用飽和食鹽水洗，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮有機液得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-100%)純化得到淡黃色固體化合物228-1(100mg)。LCMS(m/z)：783.2(M+H)。
步驟B：化合物228-2
室溫條件下，將單過氧鄰苯二甲酸鎂六水合物(316mg,0.64mmol)加入到化合物228-1(100mg,0.13mmol)和DCM/H2O(V/V=1： 1,5mL)的混合溶液中，室溫攪拌16h。LCMS反應結束，將反應液倒入NaHCO3(30mL)溶液淬滅，DCM(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥。濃縮得到黃色固體化合物228-2(110mg,粗品)，直接用於下一步。LCMS(m/z)：815.2(M+H)。
步驟C：化合物228-3
在乾冰乙醇浴條件下，將t-BuONa(0.33mL,2M in THF,0.65mmol)加入到化合物228-2(110mg)，中間體b-E(50mg,0.26mmol)和THF(4mL)的混合溶液中並保持溫度繼續攪拌10min，後升至室溫攪拌30min。LCMS監測反應結束，將反應液倒入半飽和的水溶液NH4Cl(20mL)中，EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮得到淡黃色固體化合物228-3(120mg，粗品)。LCMS(m/z)：922.3(M+H)。
步驟D：實施例228A及228B
在室溫條件下，將4M HCl-乙酸乙酯(5mL,20mmol)加入到化合物228-3(120mg)中，保持室溫攪拌1h。LCMS監測反應結束，濃縮後加入飽和碳酸氫鈉水溶液(20mL)，然後用EA(30mL×2)萃取，收集萃取液，食鹽水(40mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮有機相經pre-HPLC(C18,ACN/(10mmol FA/H2O)=30-38%)純化得到首先沖提出來的白色固體異構體1為實施例228A(21.10mg，Rt=8.75min)，後沖提出來的白色固體異構體2為實施例228B(10.05mg，Rt=11.88min)。LCMS(m/z)：822.3(M+H).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.39(s,1.54H),8.02(s,2H),7.85(dd,J=8.8,4.8Hz,1H),768(s,1H),7.14(t,J=9.2Hz,1H), 6.80(s,0.5H),6.58(s,0.5H),4.98(d,J=16.8Hz,1H),4.81-4.76(m,2H),4.54(s,2H),4.48-4.43(m,2H),4.29(d,J=10.4Hz,1H),4.12-4.05(m,1H),3.23(s,3H),3.06(s,3H),2.95(s,3H),2.78-2.75(m,2H),2.56-2.48(m,1H),2.42-2.26(m,6H),1.95-1.89(m,1H),1.83(d,J=11.2Hz,1H),1.55(d,J=6.0Hz,3H),1.09(s,3H),0.96(t,J=7.2Hz,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -119.08,-121.45，-139.18.
其中實施例228A進一步經SFC(Waters SFC 150，分離管柱：DAICELCHIRALPAK®IH,250*30mm 10μm，流動相：CO2/MeOH(+0.2% 7.0mol/L NH3-MeOH)=75/25；流速：140mL/min)純化除去少量非異構體雜質得到白色固體實施例228A(21.10mg)。手性分析方法SFC-228，Rt=2.202。LCMS(m/z)：822.3(M+H).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 7.99(s,2H),7.85(dd,J=8.8,4.8Hz,1H),7.74(s,1H),7.14(t,J=9.2Hz,1H),6.80(s,0.5H),6.58(s,0.5H),5.12(d,J=16.8Hz,1H),4.86-4.80(m,2H),4.72(d,J=16.0Hz,1H),4.62-4.52(m,2H),4.40-4.35(m,1H),4.72(d,J=10.4Hz,1H),4.16-4.08(m,1H),3.23(s,3H),3.07(s,3H),2.96(s,3H),2.79-2.73(m,2H),2.54-2.48(m,1H),2.35-2.27(m,4H),2.15-2.07(m,1H),1.95-1.87(m,1H),1.82(d,J=11.2Hz,1H),1.56(d,J=6.0Hz,3H),1.08(s,3H),0.95(t,J=7.2Hz,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -118.67,-120.61，-139.16.
手性分析方法SFC-228：Waters UPCC(CA-352)，分析管柱：DAICELCHIRALPAK®IH，100*3mm 3μm；流動相A：CO2，流動相B：MeOH(0.1%DEA)；流速：1.5mL/min；管柱溫度：35℃；反壓：1800psi；梯度：0-8.0min A/B=75/25。
實施例229A及229B
步驟A：化合物229-1
室溫條件下，依次將中間體N5(183mg,0.33mmol),n-8(106mg,0.40mmol),DIEA(340mg,2.64mmol)加入到DMF(3mL)中。所得反應液在60℃下反應16h。LCMS和TLC監測反應結束。將反應液倒入水(30mL)中，EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(30mL)滌，無水Na2SO4乾燥，過濾，濃縮有機相經FCC(SiO2,EA/PE=0-63%)純化得到黃色固體化合物229-1(200mg，收率77%)。LCMS(m/z)：779.3(M+H)。
步驟B：化合物229-2
室溫條件下，將間單過氧鄰苯二甲酸鎂六水合物(584mg,1.03mmol)加入到化合物229-1(200mg,0.257mmol)的DCM(4mL)和水 (4mL)的混合溶液中，室溫攪拌1h。LCMS反應結束，將反應液倒入NaHCO3(30mL)溶液淬滅，DCM(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥，濃縮得到黃色固體化合物229-2(250mg,粗品)，直接用於下一步。LCMS(m/z)：795.3(M+H)。
步驟C：化合物229-3
在乾冰乙醇浴條件下，將tBuONa(0.63mL,2M in THF,1.26mmol)加入到化合物229-2(250mg,0.315mmol)，中間體b-E(88mg,0.472mmol)和THF(4mL)的溶液中。所得反應液在室溫條件下繼續反應1h。TLC監測反應結束，將反應液倒入半飽和的NH4Cl(30mL)溶液中，EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥，得到黃色固體化合物229-3(203mg，兩步收率86%)，直接用於下一步。LCMS(m/z)：918.3(M+H)。
步驟D：實施例229A及229B
在室溫條件下，將化合物229-3(203mg)和HCl-EA(4N,5mL)的混合液，在室溫條件下攪拌1h。LCMS檢測反應結束後，濃縮後加入飽和碳酸氫鈉水溶液(30mL)，然後用EA(30mL×2)萃取，收集萃取液，食鹽水(30mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，濃縮有機相經pre-HPLC(C18,ACN/(10mmol FA/H2O)=30-37%)純化得到首先沖提出來的白色固體異構體1為實施例229A 15-1(47.1mg，Rt=9.47min)。後沖提出來的白色固體異構體2為實施例229B(27.9mg，Rt=12.18min)。LCMS(m/z)：818.3(M+H).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.35(s,1H),7.90(s,2H),7.79(dd,J=8.7,5.0Hz,1H),7.65(s,1H),7.16-7.08(m,1H),6.86-6.58 (m,1H),5.00-4.90(m,1H),4.83-4.69(m,2H),4.57-4.32(m,5H),4.11-3.99(m,1H),3.22(s,3H),3.05(s,3H),2.95(s,3H),2.75(d,J=10.6Hz,2H),2.59-2.52(m,1H),2.42-2.25(m,4H),2.23(s,3H),2.20-2.11(m,1H),2.00-1.93(m,1H),1.90-1.83(m,1H),1.56(d,J=6.4Hz,3H),1.10(s,3H),0.96(t,J=7.1Hz,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -120.08,-139.30.
實施例229A(44mg)進一步經SFC(Waters SFC 150，分離管柱：DAICELCHIRALCEL®IH 250*30mm 10μm；流動性相：CO2/MeOH(+0.1% 7.0mol/L NH3-MeOH)=70/30；流速：140mL/min)純化除去少量非異構體雜質得白色固體實施例229A(27.8mg)。手性分析方法SFC-229,Rt=2.059min。LCMS(m/z)：818.3(M+H).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 7.87(s,2H),7.79(dd,J=8.7,4.9Hz,1H),7.73(s,1H),7.14-7.08(m,1H),6.83-6.54(m,1H),5.08(d,J=16.9Hz,1H),4.85-4.75(m,1H),4.72-4.57(m,2H),4.53(d,J=11.8Hz,1H),4.49-4.23(m,3H),4.12(t,J=12.2Hz,1H),3.29(s,2H),3.22(s,3H),3.06(s,3H),2.96(s,3H),2.74(d,J=10.8Hz,2H),2.42-2.25(m,4H),2.23(s,3H),2.19-2.08(m,1H),2.01-1.91(m,1H),1.85(d,J=11.3Hz,1H),1.58(d,J=6.3Hz,3H),1.09(s,3H),0.95(t,J=7.1Hz,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -119.52,-139.29.
手性分析方法SFC-229：Waters UPCC(CA-352)，分析管柱：DAICELCHIRALPAK®IH,100*3mm 3μm，流動相A：CO2，流動相B：MeOH(0.1%DEA)；流速：1.5mL/min；管柱溫度：35℃；反壓：1800psi；梯度：0-8min A/B=75/25。
實施例230A及230B
實施例230A及230B的合成參照上述方法進行，步驟D所得粗品經pre-HPLC(C18,ACN/(10mmol FA/H2O)=29-34%)純化得到首先沖提出來的白色固體異構體1為實施例230A(19.6mg,Rt=9.1min)。LCMS(m/z)：857.3(M+H)。隨後沖提出來的白色固體異構體2為實施例230B(20.2mg,Rt=10.7min)。LCMS(m/z)：857.3(M+H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.46(s,2H),8.43(s,1H),8.35(s,1H),7.96(s,1H),6.84-6.75(m,0.5H),6.62-6.53(m,0.5H),5.11-4.96(m,1H),4.91-4.61(m,2H),4.58-4.35(m,4H),4.29(d,J=10.5Hz,1H),4.17-3.81(m,1H),3.22(s,3H),3.06(s,3H),2.96(s,3H),2.85-2.72(m,2H),2.59-2.51(m,1H),2.44-2.22(m,3H),2.19-2.09(m,1H),2.04-1.94(m,1H),1.94-1.85(m,1H),1.81(d,J=11.3Hz,1H),1.62(d,J=6.3Hz, 3H),1.08(s,3H),0.94(t,J=7.1Hz,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -57.47,-125.18,-131.61,-139.02.
實施例230A進一步經SFC(Waters SFC 150，分離管柱：DAICELCHIRALPAK®IH,250*30mm 10μm，流動相：CO2/MeOH(+0.1% 7.0mol/L NH3-MeOH=80：20)純化除去少量非異構體雜質得到實施例230A(8.9mg)。手性分析方法SFC-230,Rt=3.103min。LCMS(m/z)：857.3(M+H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.42(s,3H),8.00(s,1H),6.84-6.75(m,0.5H),6.61-6.54(m,0.5H),5.12(d,J=16.8Hz,1H),4.89-4.69(m,2H),4.51(s,2H),4.45-4.32(m,2H),4.31-4.24(m,1H),4.20-4.06(m,1H),3.24(s,3H),3.06(s,3H),2.96(s,3H),2.78(t,J=12.0Hz,2H),2.55-2.51(m,1H),2.42-2.35(m,1H),2.34-2.31(m,1H),2.31-2.28(m,1H),2.19-2.03(m,1H),1.95-1.87(m,1H),1.82(d,J=11.3Hz,1H),1.79-1.73(m,1H),1.63(d,J=6.2Hz,3H),1.08(s,3H),0.95(t,J=7.1Hz,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -57.39,-124.97,-131.67,-139.03.
手性分析方法SFC-230：Waters UPCC(CA-352)，分析管柱：DAICELCHIRALPAK®IH,100*3mm 3μm，流動相A：CO2，流動相B：MeOH(0.1%DEA)；流速：1.5mL/min；管柱溫度：35℃；反壓：1800psi；梯度：0-8min A/B=85/15。
實施例231A及231B
實施例231A及231B的合成由中間體N21出發參照上述方法進行。步驟D所得粗品經pre-HPLC(C18,ACN/(10mmol FA/H2O)=20%-35%)純化得到活性首先沖提出來的白色固體異構體1為實施例231A(20.5mg，收率12%，Rt=10.0min).LCMS(m/z)：779.3(M+H).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.57-8.29(m,4H),7.87(s,1H),6.84-6.56(m,2H),5.13(d,J=17.2Hz,1H),4.92-4.75(m,2H),4.53-4.40(m,2H),4.32-4.13(m,2H),3.25(s,3H),2.95(s,3H),2.81-2.71(m,2H),2.44-2.37(m,1H),2.37-2.22(m,3H),2.17-2.05(m,1H),1.99-1.89(m,1H),1.84(d,J=11.2Hz,1H),1.53(d,J=6.2Hz,3H),1.09(s,3H),0.97(t,J=7.1Hz,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -123.76,-131.51,-139.13.後沖提出來的白色固體異構體2為實施例231B(17.1mg，收率10%，Rt=11.7min).LCMS(m/z)：779.3(M+H).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.63-8.28(m,4H),7.91(s,1H),6.84-6.52(m,2H),5.02(d,J=17.2Hz,1H),4.94-4.76(m,2H),4.58-4.41(m,2H),4.26(d,J=10.6Hz,1H),4.20-4.03(m,1H),3.24(s,3H),2.95(s,3H),2.80-2.74(m,2H),2.44-2.38(m,1H),2.35-2.23(m,3H),2.22-2.09(m,1H),1.99-1.88(m,1H),1.82(d,J=11.2Hz,1H),1.53(d,J=6.3Hz,3H),1.09(s,3H),0.97(t,J=7.1Hz,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -123.68,-131.48,-139.11.
實施例232A
實施例232A由中間體J-W3A-Cl參照上述方法製備。LCMS(m/z)：856.3(M+H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.04(s,1H),7.95(s,2H),7.84(dd,J=8.7,4.9Hz,1H),7.12(t,J=9.1Hz,1H),6.80(s,0.5H),6.58(s,0.5H),5.14(d,J=16.6Hz,1H),4.92-4.67(m,2H),4.62-4.45(m,2H),4.44-4.32(m,2H),4.31-4.23(m,1H),4.20-4.06(m,1H),3.24(s,3H),3.06(s,3H),2.96(s,3H),2.85-2.70(m,2H),2.59-2.53(m,1H),2.44-2.24(m,4H),2.17-2.02(m,1H),1.99-1.77(m,2H),1.64(d,J=6.2Hz,3H),1.08(s,3H),0.95(t,J=7.1Hz,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -59.39,-117.50,-122.29,-139.05.
實施例233A及233B
步驟A：化合物233-1
室溫條件下，將DIPEA(280mg,2.17mmol)加入到中間體N22(150mg,0.217mmol),n-8(152mg,0.433mmol)和THF/DMF(V/V=1：4,5mL)的混合液中，65℃攪拌4h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入飽和NH4Cl水溶液(30mL)中，EA(30mL×3)萃取。收集有機相濃縮得到的粗品經FCC(SiO2,EA/PE=0-100%)純化得到黃色固體化合物233-1(150mg，粗品)。LCMS(m/z)：894.2(M+H)。
步驟B：實施例233A及233B
室溫條件下，將TFA/DCM(V/V=3：1,20mL)加入到化合物233-1(150mg)，室溫攪拌1h。LCMS監測反應結束，濃縮除去酸液，EA(50mL)稀釋後，飽和碳酸氫鈉溶液中和，EA(50mL×3)萃取，減壓濃縮，粗品經pre-HPLC(C18,ACN/(10mmol FA/H2O)=30-40%)純化得到首先沖提出來的白色粉末狀異構體1為實施例233A(30mg，收率68%，Rt=11.1min)。LCMS(m/z)：794.1(M+H).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.35(s,1H),7.98(s,2H),7.85(dd,J=8.7,4.9Hz,1H),7.80(s,1H),7.26-7.07(m,1H),6.69(d,J=86.9Hz,1H),5.01(d,J=17.1Hz,1H),4.90-4.79(m,1H),4.68(d,J=17.1Hz,1H),4.48(d,J=10.7Hz,1H),4.42-4.34(m,1H),4.29(d,J=10.6Hz,1H),4.24-4.09(m,1H),3.25(s,3H),2.99(s,3H),2.81-2.70(m,2H),2.41-2.22(m,4H),2.17-1.79(m,5H),1.50(d,J=6.2Hz,3H),1.10(s,3H),0.98(t,J=7.1Hz,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -118.73,-120.86,-139.11。後沖提出來的白色固體異構體2為實施例233B(11mg，收率25%，Rt=13.8min)。LCMS(m/z)：794.3(M+H).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6) δ 8.39(s,1H),8.02(s,2H),7.89-7.77(m,2H),7.13(t,J=9.1Hz,1H),6.80(s,0.5H),6.58(s,0.5H),4.99-4.90(m,1H),4.90-4.80(m,1H),4.79-4.69(m,1H),4.56-4.45(m,1H),4.45-4.34(m,1H),4.34-4.25(m,1H),4.14-3.99(m,1H),3.29(s,3H),2.99(s,3H),2.82-2.72(m,2H),2.46-2.36(m,1H),2.36-2.22(m,3H),2.21-2.09(m,1H),2.06-1.89(m,2H),1.88-1.79(m,1H),1.51(d,J=6.3Hz,3H),1.10(s,3H),0.98(t,J=7.1Hz,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6 )δ-118.90,-121.00,-139.14.
實施例234A及234B
實施例234A及234B參照實施例的合成參照實施例233A及233B進行。步驟B所得粗品經pre-HPLC(C18,ACN/(10mmol FA/H2O)=30-35%)純化得到首先沖提出來的白色粉末狀異構體1為實施例234A(32mg，收率72%，Rt=10.8min)。LCMS(m/z)：808.2(M+H).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.34(s,1H),7.99(s,2H),7.89-7.72(m,2H),7.23-7.07(m,1H),6.64(d,J=86.9Hz,1H),5.02(d,J=16.9Hz,1H),4.91-4.78(m,1H),4.70(d,J=16.9Hz,1H),4.45(d,J=10.5Hz,1H),4.36-4.22(m,2H),4.16-4.03(m,1H),3.86(s,3H),3.02(s,3H),2.97(s,3H),2.79-2.65(m,2H),2.43-2.23(m,4H),2.18-1.88(m,3H),1.83(d,J=11.2Hz,1H),1.54(d,J=6.2Hz,3H),1.07(s,3H),0.94(t, J=7.1Hz,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6 )δ -118.64,-120.63,-139.24.後沖提出來的白色粉末狀異構體2為實施例234B(14mg，收率31%，Rt=14.8min)。LCMS(m/z)：808.3(M+H).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 8.40(s,1H),8.03(s,2H),7.91-7.75(m,2H),7.20-7.04(m,1H),6.65(d,J=86.9Hz,1H),5.01-4.86(m,1H),4.84-4.69(m,2H),4.48(d,J=10.6Hz,1H),4.33(dd,J=13.7,8.4Hz,2H),4.04-3.90(m,1H),3.83(s,3H),3.01(s,3H),2.96(s,3H),2.80-2.68(m,2H),2.47-1.78(m,8H),1.55(d,J=6.2Hz,3H),1.08(s,3H),0.95(t,J=7.1Hz,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6 )δ -118.91,-121.03,-139.28.
實施例235A
實施例235A由中間體N19A，n-8-d6及b-E-d2參照上述實施例合成方法進行製備。LCMS(m/z)：830.3(M+H).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.17(s,0.6H),7.99(s,2H),7.85(dd,J=8.7,5.0Hz,1H),7.74(s,1H),7.14(t,J=9.1Hz,1H),6.80(s,0.5H),6.58(s,0.5H),5.18-5.06(m,1H),4.90-4.78(m,1H),4.78-4.67(m,1H),4.67-4.50(m,2H),4.50-4.35(m,1H),4.22-4.06(m,1H),3.24(s,3H),2.84-2.69(m,2H),2.57-2.53(m,1H),2.43-2.25(m,4H),2.19-2.05(m,1H),1.98-1.87(m,1H),1.87-1.79(m,1H),1.58(d,J=6.2Hz,3H),1.08 (s,3H),0.95(t,J=7.1Hz,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -118.68,-120.62,-139.14。
參照上述實施例合成方案或其類似變體，製得下列本發明化合物。
實施例243A
步驟A：化合物243A-1
室溫條件下，依次將中間體N19A(2.00g,3.61mmol)，n-8(1.31g,4.34mmol)，DIEA(4.67g,36.1mmol)加入到DMF(40mL)中。所得反應液在60℃下反應過夜。LCMS監測反應結束。將反應液倒入5%LiCl水液(200mL)中，EtOAc(150mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(50mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾，濃縮有機相經FCC(SiO2,THF/PE=0-100%)純化得到棕色固體化合物243A-1(2.32g，收率82%)。LCMS(m/z)：783.4(M+H)。(Page：0202-HFL-112)
步驟B：化合物243A-2
室溫條件下，將間單過氧鄰苯二甲酸鎂六水合物(9.15g,80wt%,14.8mmol)加入到化合物243A-1(2.32g,2.96mmol)的甲苯(50mL)和水(50mL)的混合溶液中，室溫攪拌過夜。LCMS反應結束，將反應液用EtOAc(50mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥，過濾，濃縮有機相經FCC(SiO2,THF/PE=0-100%)純化得到白色固體化合物243A-2(2.05g，收率85%)。LCMS(m/z)：815.3(M+H)。
步驟C：化合物243A-3
在乾冰乙醇浴條件下，將t-BuONa(2.9mL,2M in THF,5.9mmol)加入到化合物243A-2(1.20g,1.47mmol)，中間體b-E-d5(425mg,2.21mmol)和THF(50mL)的混合溶液中並在乾冰乙醇浴條件下攪拌0.5h，升溫至室溫後攪拌1.0h。LCMS監測反應結束，將反應液倒入飽和的NH4Cl(80mL)溶液中淬滅，EtOAc(50mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(100mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾後濃縮有機相得到的粗 品經FCC(SiO2,THF/PE=0-70%)純化得到黃色固體化合物243A-3(1.1g，收率81%)。LCMS(m/z)：927.3(M+H)。
步驟D：實施例243A
在室溫條件下，將化合物243A-3(1.10g,1.19mmol)加入到DCM/TFA(V/V=1：1,20mL)的混合液中，在室溫條件下攪拌1h。LCMS監測反應結束，濃縮後加入飽和碳酸氫鈉水溶液(80mL)淬滅，然後用EtOAc(50mL×3)萃取，收集有機相後，食鹽水(100mL)洗洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾後濃縮有機相得到黃色的固體(1.0g，粗品)。取粗品(250mg)經pre-HPLC(C18,ACN/(10mmol FA/H2O)=28-35%,Rt=9.4min)純化得到白色固體實施例243A(113.6mg，收率45%)。LCMS(m/z)：827.3(M+H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.16(s,0.66H),7.99(s,2H),7.89-7.82(m,1H),7.74(s,1H),7.20-7.10(m,1H),6.83-6.78(m,0.5H),6.61-6.55(m,0.5H),5.13(d,J=16.9Hz,1H),4.91-4.78(m,1H),4.72(d,J=17.1Hz,1H),4.66-4.51(m,2H),4.49-4.33(m,2H),4.29-4.21(m,1H),4.21-4.07(m,1H),3.26-3.23(m,3H),3.07(s,3H),2.96(s,3H),2.82-2.71(m,2H),2.58-2.53(m,1H),2.41-2.31(m,2H),2.18-2.05(m,1H),1.97-1.88(m,1H),1.83(d,J=11.1Hz,1H),1.59(s,3H),1.08(s,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -118.68,-120.62,-139.17.
實施例243B
實施例243B參照上述合成方案，使用中間體N19B代替N19A進行製備。LCMS(m/z)：827.3(M+H)。
參照上述實施例合成方案或其類似變體，製得下列本發明化合物。
實施例249A及249B
步驟A：化合物249-1
室溫條件下，依次將中間體N5(400mg,0.73mmol)，n-8(265mg,0.88mmol)，DIEA(753mg,5.84mmol)加入到DMF(6mL)中。所得反應液在60℃下反應16h。LCMS和TLC監測反應結束。將反應液倒入水(30mL)中，EA(30mL×3)萃取，收集有機相後，飽和食鹽水(30mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮有機相經FCC(SiO2,EA/PE=0-63%)純化得到黃色固體化合物249-1(405mg，收率71%)。LCMS(m/z)：779.2(M+H)。
步驟B：化合物249-2
室溫條件下，將間單過氧鄰苯二甲酸鎂六水合物(1.16mg,2.04mmol)加入到化合物249-1(405mg,0.51mmol)的DCM(10mL)和水(10mL)的混合溶液中，室溫攪拌1h。LCMS反應結束，將反應液倒入NaHCO3水溶液(30mL)淬滅，DCM(30mL×3)萃取。收集有機相後，飽和 食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮得到黃色固體化合物249-2(410mg，粗品)，直接用於下一步。LCMS(m/z)：795.3(M+H)。
步驟C：化合物249-3
在乾冰乙醇浴條件下，將tBuONa(0.76mL,2M in THF,1.51mmol)加入到化合物249-2(300mg,0.378mmol)，中間體b-E-d5(109mg,0.567mmol)和THF(8mL)的溶液中。所得反應液在室溫條件下繼續反應1h。TLC監測反應結束，將反應液倒入半飽和的NH4Cl水溶液(30mL)中，EA(30mL×3)萃取。收集有機相後，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮有機相經FCC(SiO2,EA/PE=0-57%)純化得到黃色固體化合物249-3(258mg，兩步收率54%)，直接用於下一步。LCMS(m/z)：923.4(M+H)。
步驟D：實施例249A及249B
在室溫條件下，將化合物249-3(258mg)加入到TFA(3mL)和DCM(3mL)的混合溶液中。所得反應液在室溫條件下繼續反應1h。LCMS監測反應結束後，濃縮後加入飽和碳酸氫鈉水溶液(30mL)，然後用EA(30mL×2)萃取。收集萃取液，食鹽水(30mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮有機相經pre-HPLC(C18,ACN/(10mmol FA/H2O)=30-35%)純化得到首先沖提出來的白色固體異構體1為實施例249A(83.3mg,Rt1=10.4min，收率35%)。LCMS(m/z)：823.3(M+H).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.36(s,1H),7.87(s,2H),7.79(dd,J=8.7,5.0Hz,1H),7.73(s,1H),7.16-7.05(m,1H),6.84-6.53(m,1H),5.08(d,J=16.9Hz,1H),4.85-4.74(m,1H),4.68(d,J=16.9Hz,1H),4.61(d,J=11.8 Hz,1H),4.56-4.49(m,1H),4.49-4.40(m,1H),4.39-4.34(m,1H),4.31(d,J=10.5Hz,1H),4.17-4.04(m,1H),3.23(s,3H),3.06(s,3H),2.96(s,3H),2.78-2.69(m,2H),2.56-2.51(m,1H),2.41-2.26(m,2H),2.23(s,3H),2.18-2.08(m,1H),2.01-1.91(m,1H),1.89-1.80(m,1H),1.58(d,J=6.3Hz,3H),1.09(s,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -119.52,-139.30.隨後沖提出來的白色固體異構體2為實施例249B(39.8mg,Rt2=13.2min，收率16%)。LCMS(m/z)：823.3(M+H).1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.36(s,1H),7.90(s,2H),7.79(dd,J=8.7,4.9Hz,1H),7.65(s,1H),7.17-7.07(m,1H),6.84-6.57(m,1H),5.02-4.87(m,1H),4.83-4.68(m,2H),4.58-4.30(m,5H),4.04(t,J=12.5Hz,1H),3.22(s,3H),3.05(s,3H),2.95(s,3H),2.78-2.70(m,2H),2.58-2.51(m,1H),2.42-2.32(m,1H),2.31-2.24(m,1H),2.23(s,3H),2.20-2.08(m,1H),2.01-1.90(m,1H),1.86(d,J=11.3Hz,1H),1.56(d,J=6.3Hz,3H),1.10(s,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -120.08,-139.32.
參照上述實施例合成方案或其類似變體，製得下列本發明化合物。需要說明的是，由軸手性消旋中間體製備的最終非對映體混合物，藉由常規製備HPLC可以進行分離，或者藉由SFC進行分離。
實施例279A
步骤A：實施例279A
在冰水浴條件下，將BBr3(2M，0.5mL)加入到實施例273A(20mg,0.024mmol)和DCM(1mL)的混合溶液中，保持溫度攪拌20分鐘。LCMS監測反應完成，將反應液倒入飽和NaHCO3中(10mL)，DCM(10mL×3)萃取。收集的有機相用飽和NaCl水溶液(50mL)洗滌，無水Na2SO4乾燥。過濾，濃縮有機相得到的粗品經prep-HPLC(C18,ACN/(10mmol FA/H2O)=25-40%)純化得到白色固體實施例279A(3mg,Rt=11.3min，收率16%)。LCMS(m/z)：806.3(M+H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.43(s,2H),7.89-7.71(m,3H),7.35(s,1H),7.11-7.04(m,1H),6.82(s,0.5H),6.60(s,0.5H),5.16(d,J=17.2Hz,1H),4.95-4.79(m,1H),4.71-4.58(m,3H),4.51-4.38(m,2H),4.30-4.20(m,1H),4.17-4.06(m,1H),3.12(s,3H),2.97(s,3H),2.71-2.61(m,2H),2.47-2.35(m,2H),2.32-2.16(m,5H),2.08-1.98(m,1H),1.93(d,J =11.2Hz,1H),1.56(d,J=6.3Hz,3H),1.10(s,3H),0.95(t,J=7.2Hz,3H).19F NMR(376MHz,DMSO-d 6)δ -118.74,-139.63.
參照上述實施例或適當變體製備下列化合物：
活性實施例
實施例1：本發明化合物對KRAS G12V突變的NCI-H727細胞的增殖抑制效果
本實驗評估並驗證了本發明代表性化合物對KRAS G12V突變細胞NCI-H727細胞的增殖抑制活性。
方法A：
將NCI-H727細胞(南京科佰生物科技有限公司，貨號為CBP60182，貼壁，培養基RPMI-1640+10%FBS(GIBCO,Cat#10091-148))置於37℃、5%CO2、95%濕度條件下培養。
3D細胞活力檢測：收穫處於對數生長期的細胞並採用血小板計數器進行細胞計數。用台盼藍排斥法檢測細胞活力，確保細胞活力在90%以上。配製含1%MC(甲基纖維素，Sigma,Cat#M0512)RPMI-1640培養基並加入10% FBS配製成3D細胞培養基，用3D培養基調整細胞濃度約為14815個細胞/mL並使甲基纖維素(MC)的含量為0.65%；分別添加135μL細胞懸液至96孔透明平底黑壁板(Greiner,Cat# 655096)中；將96孔板中的細胞置於37℃、5%CO2條件下過夜培養。
IC50測定藥物配製：用培養基配製10倍藥物溶液，在接種有細胞的96孔板中每孔加入10μL藥物溶液，使得工作濃度為最高10μM，3×稀釋，9個濃度，每個藥物濃度設置2個複孔。將已加藥的96孔板中的細胞置於37℃、5%CO2條件下繼續培養7天，然後進行CTG檢測(CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay(Promega，Cat#G7573))。
平衡細胞板至室溫30分鐘並融化CTG試劑，每孔加入75微升的CTG溶液檢測，在定軌搖床上振動5分鐘使細胞裂解。將細胞板放置於室溫25分鐘以穩定冷光信號，讀取冷光值(EnVision®多功能酶標儀，PerkinElmer#2105)。
使用GraphPad Prism軟體分析數據，利用Dose-response-inhibition方程來擬合數據得出劑量-效應曲線，並由此計算IC50值。
細胞存活率(%)=(Lum待測藥-Lum培養液對照)/(Lum細胞對照-Lum培養液對照)×100%。
代表性本發明化合物對KRAS G12V突變的NCI-H727人肺癌細胞顯示出令人滿意的抗增殖活性，IC50範圍在<1uM，較佳<0.1uM。
方法B：
將NCI-H727細胞(南京科佰生物科技有限公司，貨號為CBP60182，貼壁，培養基RPMI-1640+10%FBS(GIBCO,Cat#10091-148))置於37℃、5%CO2、95%濕度條件下培養。
3D細胞活力檢測：收穫處於對數生長期的細胞並採用血小板計數器進行細胞計數。用台盼藍排斥法檢測細胞活力，確保細胞活力在90%以上。配製含1%MC(甲基纖維素，Sigma,Cat#M0512)RPMI-1640培養基並加入10% FBS配製成3D細胞培養基，用3D培養基調整細胞濃度約為25000個細胞/mL並使甲基纖維素(MC)的含量為0.65%；分別添加80μL細胞懸液至96孔透明平底黑壁板(Greiner,Cat# 655096)中；將96孔板中的細胞置於37℃、5%CO2條件下過夜培養。
IC50測定藥物配製：用培養基配製5倍藥物溶液，在接種有細胞的96孔板中每孔加入20μL藥物溶液，使得工作濃度為最高10μM，3×稀釋，9個濃度，每個藥物濃度設置2個複孔。將已加藥的96孔板中的細胞置於37℃、5%CO2條件下繼續培養5天，然後進行CTG檢測(CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay(Promega，Cat#G7573))。
平衡細胞板至室溫30分鐘並融化CTG試劑，每孔加入50微升的CTG溶液檢測，在定軌搖床上振動5分鐘使細胞裂解。將細胞板放置於室溫25分鐘以穩定冷光信號，讀取冷光值(EnVision®多功能酶標儀，PerkinElmer#2105)。
使用GraphPad Prism軟體分析數據，利用Dose-response-inhibition方程來擬合數據得出劑量-效應曲線，並由此計算IC50值(nM)。
細胞存活率(%)=(Lum待測藥-Lum培養液對照)/(Lum細胞對照-Lum培養液對照)×100%。
本發明化合物對KRAS G12V突變的NCI-H727人肺癌細胞顯示出令人滿意的抗增殖活性，IC50範圍在<1uM，較佳<0.1uM，例如0.01nM-100nM，更佳0.01nM-50nM。代表性化合物的IC50值(方法B)如下表所示：
實施例2：本發明化合物對KRAS G12D突變的AGS細胞的增殖抑制效果
本實驗評估並驗證了本發明代表性化合物對KRAS G12D突變細胞AGS細胞的增殖抑制活性。
將AGS細胞(南京科佰生物科技有限公司，貨號CBP60476，貼壁，培養基(F12K Nutrient Mixture+10%FBS(GIBCO,Cat#10091-148))在37℃、5%CO2、95%濕度條件下培養，1500/孔，收穫處於對數生長期的細胞並採用基於經典台盼藍染色法原理的Countstar自動細胞計數儀進行細胞計數及檢測細胞活力，確保細胞活力在90%以上。調整細胞濃度；分別添加80μL細胞懸液至96孔透明平底黑壁板(Greiner,Cat# 655090)中，將96孔板中的細胞置於37℃、5%CO2條件下培養。
IC50測定藥物配製：用培養基配製5倍藥物溶液，在接種有細胞的96孔板中每孔加入20μL藥物溶液，使得工作濃度為最高10μM，3×稀釋，9個濃度，每個藥物濃度設置2個複孔。將已加藥的96孔板中的細胞置於37℃、5%CO2條件下繼續培養3天，然後進行CTG檢測。
平衡細胞板至室溫30分鐘並融化CTG試劑(CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay(Promega,Cat#G7573))，每孔加入50 微升的CTG溶液，在定軌搖床上振動2分鐘使細胞裂解。將細胞板放置於室溫10分鐘以穩定冷光信號，讀取冷光值(EnVision®多功能酶標儀，PerkinElmer#2105)。
使用GraphPad Prism軟體分析數據，利用Dose-response-inhibition方程來擬合數據得出劑量-效應曲線，並由此計算IC50值(nM)。
細胞存活率(%)=(Lum待測藥-Lum培養液對照)/(Lum細胞對照-Lum培養液對照)×100%。
結果顯示，本發明化合物對KRAS G12D突變的AGS人胃腺癌細胞顯示出令人滿意的抗增殖活性，IC50範圍在<1000nM，較佳<100nM，例如0.01nM-100nM，更佳0.01nM-50nM。代表性化合物的IC50值如下表所示：
實施例3：本發明化合物的小鼠藥物代謝動力學特性
藉由小鼠藥物代謝動力學實驗評價了本發明部分化合物的藥物代謝動力學特徵。
雄性CD-1小鼠，周齡：6-8週，購自浙江浙江維通利華實驗動物有限公司。
對於IV給藥組，將化合物配製到20% Captisol(磺丁基β環糊精)的醋酸鈉緩衝液(10mM醋酸鈉溶液，醋酸調pH至4.0)中或5% DMSO和95%(20% Captisol(磺丁基β環糊精))混合溶液中，使得最終每個化合物的濃度為0.6mg/mL或0.2mg/mL，將藥物製劑按照5mL/kg的注射體積尾靜脈注射給CD-1小鼠，給藥後分別在5min、15min、30min、1h、2h、3h、4h、6h、8h從頜下靜脈或其它合適方式採血，血液樣品低溫離心6分鐘，收集血漿，-80℃保存待測。對於PO給藥組，將化合物配製到0.5%Tween 80和99.5%(0.5%MC(400cp))的溶劑或0.5%MC(400cp)的溶劑中，使得最終每個化合物的濃度為1mg/mL或者2mg/mL，將藥物製劑按照10mL/kg的給藥體積灌胃給藥CD-1小鼠，給藥後15min、30min、1h、2h、4h、6h、8h、24h從頜下靜脈或其它合適方式採血，血液樣品低溫離心5分鐘，收集血漿，-80℃保存待測。
取10μL血漿樣品，加入200μL含有內標的甲醇作為沉澱劑，沉澱血漿蛋白，萃取血漿中的待測化合物，低溫離心，取上清液10μL進樣，採用LC-MS/MS分析藥物血藥濃度。藉由不同時間點血藥濃度數據，運用Winnonlin計算藥物代謝動力學參數。
實驗結果顯示，在小鼠藥物代謝動力學評價中，本發明化合物、例如實施例化合物顯示良好的藥物代謝動力學性質。
實施例4：本發明化合物對細胞色素P450抑制試驗
本實驗評價發明化合物對細胞色素P450的抑制作用。
本實驗使用如下試劑進行：人肝微粒體(Corning公司，貨號452161)；還原型煙醯胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH，MCE公司，貨號HY-F0003/CS-4998)；非那西丁，雙氯酚酸，α-萘黃酮，奧美拉唑和酮康唑均購自TCI公司；S-美芬妥英和睾酮購自CAYMAN公司；咪達唑侖購自Bioreclamation IVT；奎尼丁購自Damas-beta；磺胺苯吡唑購自MCE；丁呋洛爾購自TRC。
用磷酸二氫鉀和磷酸氫二鉀配製100mM磷酸鉀緩衝液(K-buffer)，調節pH到7.4，配製0.1M磷酸鉀緩衝液(K-buffer)。
400×受試化合物及陽性對照抑制劑的配製：將8μL的10mM受試化合物儲備液溶於12μL乙腈中。配製受試化合物溶液；將12μL 1mM α-萘黃酮，10μL 40mM磺胺苯吡唑，10μL 10mM奎尼丁和8μL DMSO溶液混合，配製CYP1A2、CYP2C9和CYP2D6抑制劑的混合溶液；將8μL 2.5mM的酮康唑DMSO溶液溶於12μL乙腈中，配製CYP3A4的抑制劑溶液；將8μL100mM的奧美拉唑DMSO溶液溶於12μL乙腈中，配製CYP2C19的抑制劑溶液。
將66.7mg NADPH加入到10mL 0.1M K-buffer,pH7.4，配製4×NADPH磷酸鉀溶液。將各個受質按照濃度要求用10mL 0.1M K-buffer配製成4倍濃度測定所需溶液，配製4×受質磷酸鉀溶液。將10μL 20mg/mL的人肝微粒體加入到990μL K-buffer中，配製0.2mg/mL人肝微粒體(HLM)溶液，冰浴保存待用。
將600μL的0.2mg/mL HLM加入到96孔板中，加入3μL 400倍受試化合物溶液；將200μL的0.2mg/mL HLM加入到96孔板中，加入1μL稀釋後的陽性對照抑制劑溶液。分裝30μL化合物與人的肝微粒體的混合溶液到96孔板中，然後再加入15μL的受質溶液。將上述獲得的溶液和配製好的NADPH溶液於37℃預熱5min。將15μL預熱的NADPH溶液加入反應板，混勻，開始反應。37℃孵育反應板。3A4反應5分鐘；1A2，2C9，2D6反應10分鐘；2C19反應45分鐘。反應結束時，加入120μL含內標的乙腈終止反應。樣品渦旋振盪10min，採用5594g離心15分鐘，製備樣品送至LC-MS/MS分析。
實驗結果顯示，在測試濃度下，本發明化合物、例如實施例化合物對於藥物代謝關鍵CYP亞型沒有顯著抑制作用，表現出更好的藥物-藥物相互作用安全性。
實施例5：本發明化合物對KRAS G12C突變的NCI-H358細胞的增殖抑制效果
本實驗評估並驗證了本發明代表性化合物對KRAS G12C突變細胞NCI-H358細胞的增殖抑制活性。
將NCI-H358細胞(南京科佰生物科技有限公司，貨號為CBP60136，貼壁，培養基RPMI-1640+10%FBS(GIBCO,Cat#10091-148))置於37℃、5%CO2、95%濕度條件下培養。
3D細胞活力檢測：收穫處於對數生長期的細胞並採用血小板計數器進行細胞計數。用台盼藍排斥法檢測細胞活力，確保細胞活力在90%以上。配製含1%MC(Sigma,Cat#M0512)RPMI-1640培養基並加入10% FBS配製成3D細胞完全培養基，用3D培養基調整細胞濃度為12500個細胞/mL並使MC的含量為0.65%；分別添加80μL細胞懸液至96孔透明平底黑壁板(Greiner,Cat# 655096)中；將96孔板中的細胞置於37℃、5%CO2條件下過夜培養。
IC50測定藥物配製：用培養基配製5倍藥物溶液，在接種有細胞的96孔板中每孔加入20μL藥物溶液，使得工作濃度為最高10μM，3×稀釋，9個濃度，每個藥物濃度設置2個複孔。將已加藥的96孔板中的細胞置於37℃、5%CO2條件下繼續培養5天，然後進行CTG檢測(CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay(Promega，Cat#G7573))。
平衡細胞板至室溫30分鐘並融化CTG試劑，每孔加入50微升的CTG溶液檢測，在定軌搖床上振動5分鐘使細胞裂解。將細胞板放置於室溫25分鐘以穩定冷光信號，讀取冷光值(EnVision®多功能酶標儀，PerkinElmer#2105)。
使用GraphPad Prism軟體分析數據，利用Dose-response-inhibition方程來擬合數據得出劑量-效應曲線，並由此計算IC50值(nM)。
細胞存活率(%)=(Lum待測藥-Lum培養液對照)/(Lum細胞對照-Lum培養液對照)×100%。
代表性本發明化合物對KRAS G12C突變的NCI-H358人肺癌細胞顯示出令人滿意的抗增殖活性，IC50範圍在<1000nM，較佳<100nM。
實施例6：本發明化合物對7株腫瘤細胞的增殖抑制效果
本實驗評估並驗證了本發明代表性化合物對下列6株KRAS相關腫瘤細胞的增殖抑制活性。
本實驗中使用如下材料、試劑和儀器：6株細胞均來自康源博創生物科技(北京)有限公司(NCI-H441，KC-0510；Capan-2，KC-0185；A549，KC-0284；HCT116，KC-0281；NCI-H460，KC-0512；EBC-1，KC-0195；A375，KC-0158)；RPMI-1640(Hyclone,SH30809.01)；胎牛血清FBS(GIBCO,10099-141)；甲基纖維素(methylcellulose，SIGMA，9004-67-5)；磷酸鹽緩衝液PBS(Solarbio,P1020-500)；CellCounting-Lite 2.0 Luminescent Cell Viability Assay(南京諾唯贊，DD1101-04)；96孔透明平底黑壁板(Thermo,165305)；多功能酶標儀(BMG LABTECH，CLARIOstar® Plus)；CO2培養箱(Thermo Scientific，Model 3100 Series)。
實驗方法：
提前配置滅菌的1%甲基纖維素3D培養基。收穫處於對數生長期的細胞並採用血小板計數器進行細胞計數。用台盼藍排斥法檢測細 胞活力，確保細胞活力在90%以上。調整NCI-H441，A549，HCT116，NCI-H460，EBC-1及A375等細胞濃度，使得甲基纖維素終濃度為0.65%，混勻靜置；待細胞懸液中無可見氣後分別添加180μL細胞懸液至96孔板中，共2500個細胞。使用完全培養基調整capan-2細胞濃度，分別添加180μL細胞懸液至96孔板中，共3000個細胞。將96孔板中的細胞置於37℃、5%CO2、95%濕度條件下培養過夜。
IC50測定藥物配製：首先配製各化合物10mM DMSO儲存液。第一次以DMSO為溶劑，3.16倍稀釋，9個濃度，製備各化合物不同濃度DMSO溶液。第二次1：100稀釋配製10倍各化合物稀釋液，以完全培養基為溶劑。最後，在接種有細胞的96孔板中每孔加入20μL各化合物稀釋液，最終藥物最高濃度為10μM，9個濃度，3.16倍稀釋，每個濃度設置三個複孔。
將已加藥的96孔板中的細胞置於37℃、5% CO2條件下繼續培養144小時，之後進行CTG分析。融化CTG試劑並平衡細胞板至室溫30分鐘。每孔加入等體積的CTG溶液。在定軌搖床上振動5分鐘使細胞裂解。將細胞板放置於室溫20分鐘以穩定冷光信號。讀取冷光值，收集數據。
使用GraphPad Prism 7.0軟體分析數據，利用非線性S曲線回歸來擬合數據得出劑量-效應曲線，並由此計算IC50值。
細胞存活率(%)=(Lum待測藥-Lum培養液對照)/(Lum溶劑對照-Lum培養液對照)×100%
代表性本發明化合物對本實施例5中KRAS突變細胞及野生擴增型細胞顯示出令人滿意的抗增殖活性，IC50範圍在<1000nM，較佳<500nM。
實施例7：本發明化合物在KRAS-G12D突變的人結腸癌細胞GP2d皮下異種移植BALB/c nude小鼠動物模型中的抗腫瘤作用
GP2d細胞購自南京科佰生物科技有限公司.BALB/c nude小鼠，雌性，購自江蘇集萃藥康生物科技有限公司。將GP2d細胞在含DMEM和10%FBS的培養液中進行培養，收集對數生長期的細胞，PBS重新懸浮至合適濃度以用於小鼠皮下腫瘤接種。實驗小鼠於右後側背部皮下接種，GP2d細胞接種量為：1×107/隻，細胞重新懸浮於1：1的PBS與基質膠中(接種體積為0.1mL)。當腫瘤平均體積生長至~150mm3時，根據腫瘤大小和小鼠體重隨機分組給藥。分組後隨即開始給藥，給藥當天視為第0天。每天給藥2次，灌胃給藥，劑量為10mg/kg、30mg/kg或溶劑對照(0.5%Tween 80+99.5%的(0.5%MC(400cp))。實驗期間，每週測量2次小鼠的體重和腫瘤的大小。
腫瘤大小計算公式：腫瘤體積(mm3)=0.5×(腫瘤長徑×腫瘤短徑2)。
相對腫瘤抑制率TGI(%)：TGI%=[1-(某處理組給藥結束時平均瘤體積-該處理組開始給藥時平均瘤體積)/(溶劑對照組治療結束時平均瘤體積-溶劑對照組開始治療時平均瘤體積)]×100%。
代表性本發明化合物能夠顯著抑制GP2d腫瘤生長。
實施例8：本發明化合物對KRAS G12S突變的A549細胞的增殖抑制效果
本實驗評估並驗證了本發明代表性化合物對KRAS G12S突變細胞A549細胞的增殖抑制活性。
將A549細胞(南京科佰生物科技有限公司，貨號為CBP60084，貼壁，培養基(F12K Nutrient Mixture+10%FBS(GIBCO，Cat#10091-148)置於37℃、5%CO2、95%濕度條件下培養。
3D細胞活力檢測：收穫處於對數生長期的細胞並採用血小板計數器進行細胞計數。用台盼藍排斥法檢測細胞活力，確保細胞活力在90%以上。配製含1%MC(甲基纖維素，Sigma,Cat#M0512)F-12K培養基並加入10% FBS配製成3D細胞培養基，用3D培養基調整細胞濃度約為7407個細胞/mL並使甲基纖維素(MC)的含量為0.65%；分別添加135μL細胞懸液至96孔透明平底黑壁板(Greiner,Cat# 655096)中；將96孔板中的細胞置於37℃、5%CO2條件下過夜培養。
IC50測定藥物配製：用培養基配製10倍藥物溶液，在接種有細胞的96孔板中每孔加入10μL藥物溶液，使得工作濃度為最高10μM，3×稀釋，9個濃度，每個藥物濃度設置2個複孔。將已加藥的96孔板中的細胞置於37℃、5%CO2條件下繼續培養5天，然後進行CTG檢測(CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay(Promega，Cat#G7573))。
平衡細胞板至室溫30分鐘並融化CTG試劑，每孔加入75微升的CTG溶液檢測，在定軌搖床上振動5分鐘使細胞裂解。將細胞板放置於室溫25分鐘以穩定冷光信號，讀取冷光值(EnVision®多功能酶標儀，PerkinElmer#2105)。
使用GraphPad Prism軟體分析數據，利用Dose-response-inhibition方程來擬合數據得出劑量-效應曲線，並由此計算IC50值(nM)。
細胞存活率(%)=(Lum待測藥-Lum培養液對照)/(Lum溶劑對照-Lum培養液對照)×100%
代表性本發明化合物對本實施例5中KRAS突變細胞及野生擴增型細胞顯示出令人滿意的抗增殖活性，IC50範圍在<1000nM，較佳<500nM，例如0.01nM-100nM，更佳0.01nM-50nM。
實施例9：本發明化合物在KRAS-G12V突變的人肺癌細胞NCI-H441皮下異種移植NU/NU小鼠動物模型中的抗腫瘤作用
NCI-H441細胞購自ATCC(貨號：HTB-174)。NU/NU小鼠，雄性，購自江蘇集萃藥康生物科技有限公司。
將NCI-H441細胞在含10%FBS的RPMI-1640培養液中進行培養，收集對數生長期的細胞，PBS重新懸浮至合適濃度以用於小鼠皮下腫瘤接種。實驗小鼠於右後側背部皮下接種，細胞接種量為：1×106/隻+Matrigel，接種體積為0.1mL。當腫瘤平均體積生長至~150mm3時，根據腫瘤大小和小鼠體重隨機分組給藥。分組後隨即開始給藥，給藥當天視為第0天。每天給藥2次，灌胃給藥，藥物劑量為10mpk、20mpk、30mpk或溶劑對照(0.5%Tween 80+99.5%的(0.5%MC(400cp)或0.5%MC(400cp))。實驗期間，每週測量2次小鼠的體重和腫瘤的大小。腫瘤大小計算公式：腫瘤體積(mm3)=0.5×(腫瘤長徑×腫瘤短徑2)。相對腫瘤抑制率TGI(%)：TGI%=[1-(某處理組給藥結束時平均瘤體積-該處理組開始給藥時平均瘤體積)/(溶劑對照組治療結束時平均瘤體積-溶劑對照組開始治療時平均瘤體積)]×100%。
本發明化合物能夠顯著抑制NCI-H441腫瘤生長，例如在10mpk劑量下TGI%50%。
實施例10：本發明化合物對人胰腺癌細胞HPAC皮下異種移植腫瘤NOD/SCID小鼠模型的體內藥效學研究
本實驗使用如下材料：NOD/SCID小鼠，6-8週齡，雌性，江蘇集萃藥康生物科技股份有限公司；HPAC細胞(攜帶KRas G12D突變蛋白，ATCC)；Captisol(武漢峰耀同輝化學製品有限公司，Cas#182410-00-0)；醋酸鈉(aladdin)MC(sigma，9004-67-5)。
本實驗如下進行：將6~8週齡雌性NOD/SCID小鼠於右後側背部皮下接種1×107個HPAC細胞，接種體積為0.1mL。當腫瘤生長至平均體積150mm3時，根據腫瘤大小和小鼠體重隨機分組給藥。給藥當天視為第0天。供試化合物經灌胃給藥，每組4隻小鼠，對照組經灌胃給予同等體積的溶劑對照。
實驗期間，每週2次測量腫瘤體積和體重。腫瘤體積計算公式為：腫瘤體積(mm3)=0.5×(腫瘤長徑×腫瘤短徑2)。平均腫瘤抑制率TGI%=[(對照組腫瘤體積平均值-對照組初始腫瘤體積平均值)-(給藥組腫 瘤體積平均值-給藥組初始腫瘤體積平均值)]/(對照組腫瘤體積平均值-對照組初始腫瘤體積平均值)。
實驗結果顯示，本發明代表性化合物在人胰腺癌HPAC模型上體現靶點相關的優異腫瘤抑制活性。同時，各組小鼠體重均無明顯變化。
實施例11：本發明化合物對Ba/F3-KRAS突變工程細胞的增殖抑制效果
本實驗利用CellCounting-Lite® 2.0方法評估本發明化合物對Ba/F3-KRAS突變細胞株細胞增殖的抑制作用。
本實驗中使用如下材料、試劑和儀器：細胞均來自康源博創生物科技(北京)有限公司RPMI-1640(Hyclone,SH30809.01)；胎牛血清FBS(GIBCO,10099-141)；磷酸鹽緩衝液PBS(Solarbio,P1020-500)；CellCounting-Lite 2.0 Luminescent Cell Viability Assay(Vazyme，DD1101-02)；96孔板(Absin,abs7016)；多功能酶標儀(BMG LABTECH， CLARIOstar® Plus)；CO2培養箱(Thermo Scientific，Model 3100 Series)。
實驗方法：
所有細胞株於37℃，5% CO2條件下培養於完全培養基。收穫處於對數生長期的細胞並採用血小板計數器進行細胞計數。用台盼藍排斥法檢測細胞活力，確保細胞活力在90%以上。使用完全培養基(RPMI1640+10%FBS)調整細胞密度，隨後接種於96孔細胞培養板，每孔接種90μL，共3000個細胞。將96孔板中的細胞置於37℃、5% CO2條件下培養。使用完全培養基配製10倍藥物溶液，然後轉移連續稀釋化合物各10μL至96孔細胞板的相應實驗孔中，每個藥物濃度設置兩個複孔。將已加藥的96孔板中的細胞置於37℃、5% CO2條件下繼續培養72h，之後進行CellCounting-Lite 2.0分析。
融化CellCounting-Lite 2.0 Luminescent Cell Viability Assay試劑並平衡細胞板至室溫30分鐘。每孔加入等體積的CellCounting-Lite 2.0 Luminescent Cell Viability Assay溶液。在定軌搖床上振動5分鐘使細胞裂解。將細胞板放置於室溫20分鐘以穩定冷光信號。讀取冷光值，收集數據。
數據分析：
使用GraphPad Prism 7.0軟體分析數據，利用非線性S曲線回歸來擬合數據得出劑量-效應曲線，並由此計算IC50值。細胞存活率(%)=(Lum待測藥-Lum培養液對照)/(Lum溶劑對照-Lum培養液對照)×100%。細胞增殖抑制率(%)=(1-細胞存活率)×100%。
實驗表明，本發明化合物對一系列KRAS突變細胞系顯示出優異抗增殖抑制活性，代表性化合物實施例228A測試結果示例如下。
應當理解，對本文所述的目前較佳的實施方案作出的各種變化和修改對於所屬技術領域中具有通常知識者將為顯而易見的。可在不脫離本發明主題的實質和範圍且不減弱其預期優點的前提下作出這些變化和修改。因此，此類變化和修改旨在由所附申請專利範圍涵蓋。
本說明書中所引用的所有公開出版物以引用方式併入本文中。

Claims (26)

  1. 一種式(II)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，
    其中，
    M選自N和C-R8；
    W選自N和C-R9；
    Z選自N和C-R10；
    X選自S或Se；
    Q各自獨立地選自C-R6或N；
    Y選自O、S、Se和N-Ra；
    B選自包含1至3個獨立地選自N、O、P、S和Se的雜原子的4-7員單環雜環烷基，和包含1至4個獨立地選自N、O、P、S和Se的雜原子的6-12員多環雜環烷基，條件是其中連接至分子嘧啶環部分的環原子是氮雜原子；
    R1選自H、鹵素、-CN、-OH、-NH2、-B(OH)2、側氧、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-O-C1-6烷基、-C(O)-C1-6烷基、-C(O)N(Rb)2，其中出現的C1-6烷基視需要被鹵素、氘、OH或-OC1-6烷基取代；
    R2各自獨立地選自H、D、-C1-6烷基和-(CH2)n-C3-6環烷基，或者兩個R2與它們所連接的碳原子一起形成C3-4環烷基，其中的C1-6烷基、C3-6環烷基或C3-4環烷基各自獨立地視需要被鹵素、D、視需要被鹵素或D取代的C1-6烷基或視需要被鹵素或D取代的-O-C1-6烷基取代；
    R3選自-C1-6烷基和-(CH2)n-C3-6環烷基，各自獨立地視需要被鹵素、D、視需要被鹵素或D取代的C1-6烷基或視需要被鹵素或D取代的-O-C1-6烷基取代；
    R4選自H、D、鹵素、-CN、-OH、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-NH2、-NH-C1-6烷基、-N(C1-6烷基)2、-O-C1-6烷基、-O-C3-6環烷基和-(CH2)n-C3-6環烷基，其中每次出現的-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基或C3-6環烷基各自獨立地視需要被D、鹵素、CN或-OC1-6烷基取代，或者
    連接於同一個碳原子上的兩個R4形成=C(Rc)2，或連接於同一個環碳原子上的兩個R4與它們所連接的環碳原子一起形成螺C3-6環烷基或螺4-7員雜環烷基，其中Rc各自獨立地選自H、鹵素和視需要被鹵素取代的-C1-6烷基，且該螺C3-6環烷基或螺4-7員雜環烷基視需要被鹵素和視需要被鹵素取代的-C1-6烷基取代；
    R5選自H、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基和-(CH2)n-C3-6環烷基，其中的C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基或C3-6環烷基各自獨立地視需要被D、鹵素、CN、-O-C1-6烷基或-O-CON(Rb)2取代；
    R6和R7各自獨立地選自H、D、鹵素、CN、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-O-C1-6烷基、-S-C1-6烷基和-Se-C1-6烷基，其中每次出現的- C1-6烷基、-C2-6烯基和-C2-6炔基各自獨立地視需要被鹵素、-O-C1-6烷基或D取代；
    R8選自H、D、鹵素、CN、NO2、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基和-ORb，其中的-C1-6烷基、-C2-6烯基和-C2-6炔基各自獨立地視需要被鹵素、CN或-O-C1-6烷基取代；或R8為-(CH2)n-C3-6環烷基，其中C3-6環烷基視需要被鹵素或CN取代；
    R10選自H、D、鹵素、CN、NO2、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基和-ORb，其中的-C1-6烷基、-C2-6烯基和-C2-6炔基各自獨立地視需要被鹵素或CN取代；
    R9選自H、鹵素、CN、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-ORb和-O-CON(Rb)2，其中的-C1-6烷基、-C2-6烯基和-C2-6炔基各自獨立地視需要被鹵素或CN取代；
    Ra選自H、視需要被鹵素取代的-C1-6烷基；
    Rb選自H、視需要被鹵素、-OH、-OC1-6烷基或氘取代的-C1-6烷基，和-C3-6環烷基，或者其中連接於同一個N原子上的兩個Rb與它們所連接的N原子一起形成視需要被鹵素或-C1-6烷基取代的4-7員雜環烷基；
    n和p各自獨立地為0至3的整數；和
    m和t各自獨立地為0至8的整數。
  2. 一種式(I)的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，
    其中，
    M選自N和C-R8；
    W選自N和C-R9；
    Z選自N和C-R10；
    Y選自O、S、Se和N-Ra；
    B選自包含1至3個獨立地選自N、O、P、S和Se的雜原子的5-7員單環雜環烷基，和包含1至4個獨立地選自N、O、P、S和Se的雜原子的6-12員多環雜環烷基，條件是其中連接至分子嘧啶環部分的環原子是氮雜原子；
    R1選自H、鹵素、-CN、-OH、-B(OH)2、-C1-6烷基、-O-C1-6烷基、-C(O)N(Rb)2，其中出現的C1-6烷基視需要被鹵素取代；
    R2各自獨立地選自H、D、-C1-6烷基和-(CH2)n-C3-6環烷基，或者兩個R2與它們所連接的碳原子一起形成C3-4環烷基，其中的C1-6烷基、C3-6環烷基或C3-4環烷基各自獨立地視需要被鹵素、D、視需要被鹵素或D取代的C1-6烷基或視需要被鹵素或D取代的-O-C1-6烷基取代；
    R3選自-C1-6烷基和-(CH2)n-C3-6環烷基，各自獨立地視需要被鹵素、D、視需要被鹵素或D取代的C1-6烷基或視需要被鹵素或D取代的-O-C1-6烷基取代；
    R4選自H、D、鹵素、-CN、-OH、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-NH2、-NH-C1-6烷基、-N(C1-6烷基)2、-O-C1-6烷基、-O-C3-6環烷基和-(CH2)n-C3-6環烷基，其中每次出現的C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基或C3-6環烷基各自獨立地視需要被D、鹵素、CN或-OC1-6烷基取代，或者
    連接於同一個碳原子上的兩個R4形成=C(Rc)2，或連接於同一個環碳原子上的兩個R4與它們所連接的環碳原子一起形成螺C3-6環烷基或螺4-7員雜環烷基，其中Rc各自獨立地選自H、鹵素和視需要被鹵素取代的-C1-6烷基，且該螺C3-6環烷基或螺4-7員雜環烷基視需要被鹵素和視需要被鹵素取代的-C1-6烷基取代；
    R5選自H、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基和-(CH2)n-C3-6環烷基，其中的C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基或C3-6環烷基各自獨立地視需要被D、鹵素、CN、-O-C1-6烷基或-O-CON(Rb)2取代；
    R6和R7各自獨立地選自H、D、鹵素、CN、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-O-C1-6烷基、-S-C1-6烷基和-Se-C1-6烷基，其中每次出現的-C1-6烷基、-C2-6烯基和-C2-6炔基各自獨立地視需要被鹵素取代；
    R8和R10各自獨立地選自H、D、鹵素、CN、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基和-ORb，其中的-C1-6烷基、-C2-6烯基和-C2-6炔基各自獨立地視需要被鹵素或CN取代；
    R9選自H、鹵素、CN、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-ORb和-O-CON(Rb)2，其中的-C1-6烷基、-C2-6烯基和-C2-6炔基各自獨立地視需要被鹵素或CN取代；
    Ra和Rb各自獨立地選自H和視需要被鹵素取代的-C1-6烷基；
    n和p各自獨立地為0至3的整數；和
    m和t各自獨立地為0至8的整數。
  3. 如請求項1或2所述的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中Z為C-CN。
  4. 如請求項1至3中任一項所述的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中包含Z的苯并稠合環片段為，其中R6各自獨立地選自H和鹵素，其中鹵素較佳F。
  5. 如請求項1至4中任一項所述的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中M為C-被鹵素取代的C1-6烷基、C-被鹵素取代的C2-6烯基、C-鹵素、C-CN、C-NO2，較佳M為C-被鹵素取代的C1-6烷基或C-鹵素。
  6. 如請求項1至5中任一項所述的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中W選自N、C-鹵素或C-O-視需要被鹵素取代的C1-3烷基；或W選自C-鹵素或C-C1-3烷基。
  7. 如請求項1至6中任一項所述的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中B為含有1個氮原子的5-7員單環雜環烷基、含有1個氮原子和1個O原子的5-7員單環雜環烷基、包含1-3個氮原子和0-1個O原子的8-10員螺雜環烷基或8-10稠合雜環烷基，各自視需要被0-3個獨立地選自-OH、NH2、CN、鹵素、-C1-6烷基、-CO-C1-6烷基和-CON(Rb)2的基團取代。
  8. 如請求項7所述的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中B選自、 ，其中R1各自獨立地選自-OH和-C1-6烷基，視需要被鹵素取代； 或B選自、、，其中五員環上氮雜原子鄰位的R1選自-COC1-6烷基、-CONH2、-CONHC1-6烷基和-CON(C1-6烷基)2，其 餘的選自H、NH2、CN、鹵素和-C1-6烷基；或B為，其中一個R1選自鹵素、CN、被鹵素取代的-C1-6烷基，較佳位於環N原子的對位，另一個選自H、-OH、視需要被鹵素取代的-C1-6烷基或視需要被鹵素取代的-O-C1-6烷基。
  9. 如請求項1至6中任一項所述的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中B為，例如，其中
    五員環上氮雜原子鄰位的R1選自-C(O)-C1-6烷基和-C(O)N(Rb)2，較佳-C(O)N(Rb)2，Rb各自獨立地為H、視需要被一個或多個鹵素、氘、-O-C1-6烷基取代的-C1-6烷基、或-C3-6環烷基，較佳各自獨立地為H或視需要被一個或多個氘取代的-C1-3烷基，最佳各自獨立地為視需要被一個或多個氘取代的-C1-3烷基，例如-C(O)CH3、-C(O)N(CH3)(CH2CH2F)、-C(O)N(CH3)2、-C(O)N(CH3)(環丙基)、-C(O)NH(CH3)、-C(O)N(CD3)2、-C(O)N(CH3)(CH2CH2OCH3)；或兩個Rb與它們連接的氮原子一起形成視需要被鹵素或-C1-6烷基取代的4-7員雜環烷基，例如氮雜環丁烷基、3-F-氮雜環丁烷基、嗎啉基、吡咯烷基、哌嗪基、4-甲基哌嗪基，
    五員環上氮雜原子間位的R1選自H、鹵素、CN、-OH、-NH2、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-O-C1-6烷基和-C1-6烷基-O-C1-6烷基，較佳選自H、鹵素、-CN、-OH、NH2、-C1-3烷基、-C2-4烯基、-C2-4炔基、-O-C1-3烷基和-C1-3烷基-O-C1-3烷基，更佳選自-C1-3烷基-O-C1-3烷基，其中出現的烷基視需要被一個或多個鹵素、OH或氘取代，較佳被一個或多個氘取代，該位置的R1例如但不限於H、F、Cl、-OH、-NH2、-CN、-O-CH3、-CH3、-乙炔基、-CH2F、-CHF2、-O-CD3、-CH2OH、-CH2-CH3、-O-CH2-CH3、-CH2-O-CH3、-CD2-O-CD3、-CH2-O-CD3、-CH2-O-CH2CH3，
    B與分子其餘部分連接氮的鄰位的R1選自H或-C1-6烷基，較佳H或-C1-3烷基，例如H、-CH3或-CH2CH3；
    較佳地，B選自、、、，其中R1各自如請求項所定義，條件是各自不為H。
  10. 如請求項1至9中任一項所述的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中Y為O。
  11. 如請求項1至10中任一項所述的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中每個R2各自獨立地為H或D。
  12. 如請求項1至11中任一項所述的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R3為-C1-6烷基。
  13. 如請求項1至12中任一項所述的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R4選自鹵素、-O-C1-6烷基和-C1-6烷基，其中每次出現的C1-6烷基各自獨立地視需要被鹵素取代，或者
    連接於同一個碳原子上的兩個R4形成=C(Rc)2，其中Rc各自獨立地選自H、鹵素、視需要被鹵素取代的-C1-6烷基，或者
    連接於同一個環碳原子上的兩個R4與它們所連接的環碳原子一起形成螺C3-6環烷基，且該螺C3-6環烷基視需要被鹵素和視需要被鹵素取代的-C1-6烷基取代；
    較佳地，R4取代在環N原子的對位。
  14. 如請求項1至13中任一項所述的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中R5選自-C1-6烷基、-氘代C1-6烷基和-C3-6環烷基，較佳選自-C1-3烷基和-氘代C1-3烷基。
  15. 如請求項1至14中任一項所述的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中結構片段為，較佳為，其中R2各自獨立地選自H和D；R3選自-C1-3烷基；m為1或2；R4為鹵素、視需要被鹵素取代-C1-3烷基，或者連接於同一個碳原子上的兩個R4形成=C(Rc)2，其中Rc各自獨立地選自H、鹵素和視需要被鹵素取代的-C1-3烷基，或者連接於同一個環碳原子上的兩個R4與它們所連接的環碳原子一起形成視需要被鹵素取代的螺C3-4環烷基；R5為-C1-3烷基或被一個或多個氘取代的-C1-3烷基。
  16. 如請求項15所述的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其中結構片段 選自、、、、、
  17. 如請求項1或2所述的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其具有以下子通式：
    其中各個基團具有如請求項1至15中任一項所相應定義的含義，較佳地
    X選自S和Se；
    Q各自獨立地選自C-R6和N；
    R6各自獨立地選自H和鹵素；
    包含Z的苯并稠合環片段較佳為，其中R6各自獨立地選自H和鹵素，其中鹵素較佳F；
    M選自N和C-R8；
    W選自N和C-R9；
    R7為H；
    R8為被鹵素(較佳F)取代的C1-3烷基、被鹵素(較佳F)取代的C2-4烯基、CN、NO2、鹵素(較佳Cl)；或R8為-C1-6烷基-O-C1-6烷基，較佳-C1-3烷基-O-C1-3烷基；
    R9選自F、Cl和-O-視需要被鹵素取代的C1-3烷基；
    對於式I-A-1、I-A-2和II-2，R1之一為-OH且另一個為-C1-3烷基；
    對於式II-1，一個R1選自鹵素、CN、被鹵素取代的-C1-6烷基，較佳位於環N原子的對位，另一個選自H、-OH、視需要被鹵素取代的-C1-6烷基或-O-C1-6烷基；
    對於式I-A-3和II-3’，五員環上氮雜原子鄰位的R1選自-COC1-6烷基、-CONH2、-CONHC1-6烷基和-CON(C1-6烷基)2，其餘的R1選自H、NH2、CN、鹵素和-C1-6烷基；
    Y為O；
    R2各自獨立地選自H和D；
    R3為-C1-3烷基；
    R4選自鹵素、-O-C1-3烷基和-C1-3烷基，其中每次出現的C1-3烷基各自獨立地視需要被鹵素取代，或者
    連接於同一個碳原子上的兩個R4形成=C(Rc)2，其中Rc各自獨立地選自H、鹵素、視需要被鹵素取代的-C1-3烷基，或者
    連接於同一個環碳原子上的兩個R4與它們所連接的環碳原子一起形成螺C3-4環烷基，且該螺C3-4環烷基視需要被鹵素和視需要被鹵素取代的-C1-3烷基取代；
    R5選自-C1-3烷基和-氘代C1-3烷基；
    m為1至2的整數，p為0至2的整數；
    較佳地，R4位於所連接環的環氮原子的對位；
    較佳地，結構片段為；
    更佳地，結構片段選自選自、、、
  18. 如請求項1所述的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，其具有以下通式：
    其中，
    攜帶R1的稠合雜環片段為，其中
    五員環上氮雜原子鄰位的R1選自-C(O)-C1-6烷基和-C(O)N(Rb)2，較佳-C(O)N(Rb)2，Rb各自獨立地為H、視需要被一個或多個鹵素、氘、-O-C1-6烷基取代的-C1-6烷基、或-C3-6環烷基，較佳各自獨立地為H或視需要被一個或多個氘取代的-C1-3烷基，最佳各自獨立地為視需要被一個或多個氘取代的-C1-3烷基，例如-C(O)CH3、-C(O)N(CH3)(CH2CH2F)、-C(O)N(CH3)2、-C(O)N(CH3)(環丙基)、-C(O)NH(CH3)、-C(O)N(CD3)2、-C(O)N(CH3)(CH2CH2OCH3)；或兩個Rb與它們連接的氮原子一起形成視需要被鹵素或-C1-6烷基取代的4-7員雜環烷基，例如氮雜環丁烷基、3-F-氮雜環丁烷基、嗎啉基、吡咯烷基、哌嗪基、4-甲基哌嗪基，
    五員環上氮雜原子間位的R1選自H、鹵素、CN、-OH、-NH2、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-O-C1-6烷基和-C1-6烷基-O-C1-6烷基，較佳選自H、鹵素、-CN、-OH、NH2、-C1-3烷基、-C2-4烯基、-C2-4炔基、-O-C1-3烷基和-C1-3烷基-O-C1-3烷基，更佳選自-C1-3烷基-O-C1-3烷基，其中出現的烷基視需要被一個或多個鹵素、OH或氘取代，較佳被一個或多個氘 取代，該位置的R1例如但不限於H、F、Cl、-OH、-NH2、-CN、-O-CH3、-CH3、-乙炔基、-CH2F、-CHF2、-O-CD3、-CH2OH、-CH2-CH3、-O-CH2-CH3、-CH2-O-CH3、-CD2-O-CD3、-CH2-O-CD3、-CH2-O-CH2CH3，
    該片段與分子其餘部分連接氮的鄰位的R1選自H或-C1-6烷基，較佳H或-C1-3烷基，例如H、-CH3或-CH2CH3；
    具體地該片段可以為、、、，其中R1各自如此處所定義，條件是各自不為H；
    R6各自獨立地選自H和鹵素(較佳F)；攜帶R6的片段較佳；
    M為C-R8；
    W為C-R9；
    R7為H；
    R8為鹵素(較佳Cl)、視需要被鹵素(較佳F)取代的C1-3烷基(例如CF3)、視需要被鹵素(較佳F)取代的C2-4烯基、CN、NO2、-C1-6烷基-O-C1-6烷基(較佳-C1-3烷基-O-C1-3烷基，例如-CH2-O-CH3)；較佳鹵素或被鹵素取代的C1-3烷基，例如Cl和CF3；
    R9選自鹵素、-C1-3烷基、-OH和-O-視需要被鹵素取代的C1-3烷基；較佳鹵素和-C1-3烷基；例如F、Cl、CH3和-O-CH3；
    Y為O；
    R2各自獨立地選自H和D；
    R3為-C1-3烷基；
    R4為-C1-3烷基，被鹵素取代，或者連接於同一個碳原子上的兩個R4形成=C(Rc)2，其中Rc各自獨立地選自H和鹵素；
    R5選自-C1-3烷基和-氘代C1-3烷基；
    m為1至2的整數。
  19. 一種化合物，其選自實施例的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物。
  20. 一種醫藥組成物，包含如請求項1至19中任一項所述的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物，以及藥學上可接受的賦形劑。
  21. 如請求項1至19中任一項所述的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物或如請求項20所述的醫藥組成物，用作藥物，用於治療和/或預防由RAS突變及RAS擴增介導的疾病。
  22. 一種如請求項1至19中任一項所述的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物或如請求項20所述的醫藥組成物在製備用於預防或治療由RAS突變及RAS擴增介導的疾病的用藥物中的用途。
  23. 如請求項22所述的用途，其中由RAS突變及RAS擴增介導的疾病選自：胰腺癌、肺癌、肺腺癌、骨癌、皮膚癌、頭頸癌、皮膚或 眼內黑色素瘤、子宮癌、卵巢癌、直腸癌、肛門區域癌、胃癌、結腸癌、乳腺癌、輸卵管癌、子宮內膜癌、子宮頸癌、陰道癌、外陰癌、霍奇金病、食道癌、小腸癌、內分泌系統癌、甲狀腺癌、甲狀旁腺癌、腎上腺癌、軟組織肉瘤、尿道癌、陰莖癌、前列腺癌、慢性或急性白血病、淋巴細胞性淋巴瘤、膀胱癌、腎臟或輸尿管癌、腎細胞癌、腎盂癌、中樞神經系統腫瘤(CNS)、原發性CNS淋巴瘤、脊管柱腫瘤、腦乾神經膠質瘤或垂體腺瘤。
  24. 如請求項22所述的用途，其中由RAS突變及RAS擴增介導的疾病選自胰腺癌、結腸癌、直腸癌、肺腺癌、肺癌、膽管癌、子宮內膜癌、卵巢癌、白血病；最佳選自胰腺癌、結腸癌、直腸癌、肺腺癌、膽管癌。
  25. 一種治療和/或預防由RAS蛋白、尤其是KRAS突變蛋白及KRAS擴增介導的疾病的方法，包括向有需要的對象施用治療有效量的根據如請求項1至19中任一項所述的化合物、其立體異構體、互變異構體、穩定的同位素變體、藥學上可接受的鹽或溶劑合物或如請求項20所述的醫藥組成物。
  26. 如請求項25所述的方法，其中由RAS突變及RAS擴增介導的疾病選自胰腺癌、結腸癌、直腸癌、肺腺癌、肺癌、膽管癌、子宮內膜癌、卵巢癌、白血病；最佳選自胰腺癌、結腸癌、直腸癌、肺腺癌、膽管癌。
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