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TW202525781A - 可離子化脂質及其用途 - Google Patents

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TW202525781A
TW202525781A TW113140142A TW113140142A TW202525781A TW 202525781 A TW202525781 A TW 202525781A TW 113140142 A TW113140142 A TW 113140142A TW 113140142 A TW113140142 A TW 113140142A TW 202525781 A TW202525781 A TW 202525781A
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methyl
pyrazol
ethyl
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TW113140142A
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劉泫姃
孫智娟
潘在榮
姜善姬
朴俊英
金智媛
李定恩
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南韓商綠十字股份有限公司
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Abstract

本發明係關於一種由式(I)表示之新穎可離子化脂質化合物或其鹽及含有該可離子化脂質化合物或其鹽之脂質奈米粒子。含有根據本發明之新穎的可離子化脂質化合物之脂質奈米粒子具有優異核酸囊封效率且具有核酸之細胞遞送的高效率。

Description

可離子化脂質及其用途
本發明係關於一種新穎的可離子化脂質或其鹽、一種含有該可離子化脂質或其鹽之脂質奈米粒子，以及一種包含離子性藥物及該可離子化脂質或其鹽或該脂質奈米粒子之組成物。
一直在積極進行研究，藉由向體內遞送核酸來預防或治療疾病，諸如RNA干擾治療劑、反義寡核苷酸(ASO)、短干擾RNA (siRNA)、適體、信使RNA (mRNA) 、自擴增RNA (SAM)或環狀RNA。然而，核酸之缺點在於其在血液中容易被體內的酶，諸如RNA酶及核酸酶降解。而且，核酸中具有500個核苷酸或更多之長的長度的mRNA具有200 kDa或更多的大分子量，其使得難以將核酸遞送至體內的目標細胞。此外，核酸特有之負電荷係阻礙核酸遞送至體內的目標細胞的一個因素。
因此，脂質奈米粒子(LNP)作為藥物遞送物質的重要性日益增長，該物質係藉由防止體內的酶降解，將核酸安全地遞送至目標細胞或目標組織，同時將核酸安定地遞送至目標細胞或組織。脂質奈米粒子穿過細胞膜以促進將核酸遞送至細胞內部。順帶一提，LNP近來亦被用於基於mRNA的冠狀-19病毒疫苗 (Spikevax TM及Comirnaty TM)的開發過程中。
LNP一般已知由可離子化脂質、磷脂、膽固醇及PEG-脂質組成。
一般而言，構成LNP之可離子化脂質係由可離子化頭部、連接子及由烴鏈組成之末端組成，且已知其靜態結合至核酸以囊封核酸並允許核酸從細胞胞內體逃逸而在決定核酸遞送效率中發揮關鍵作用。此外，膽固醇係適於保持LNP粒子的堅固及安定，而PEG脂質係適於防止LNP粒子之間的聚集，並確保結構的安定性。而且，磷脂係適於維持LNP粒子之脂質雙層結構。
本發明之發明人藉由將諸如吡唑之環結構引進可離子化脂質之頭部部分中，將酯基團或支鏈酯基團添加至可離子化脂質之末端烴鏈及/或以另一基團重複地取代酯基來合成及製備新穎的可離子化脂質化合物，且本發明之發明人發現含有上述新穎的可離子化脂質之LNP具有核酸細胞遞送之優異效率，藉其完成本發明。 相關技術之文件[先前技術文件] (專利文件1)美國專利公開案號US 2020/0140378 A1
技術問題 本發明之一目的為提供一種新穎的可離子化脂質化合物，其具有最小化核酸降解，同時具有將核酸遞送至細胞之優異效率及核酸囊封效率的特徵，以及一種含有該新穎的可離子化脂質化合物之脂質奈米粒子，還有一種用於藥物遞送之組成物。 問題之解決方案
根據本發明的一個態樣，提供有一種由式(I)表示之化合物或其鹽。
根據本發明的另一態樣，提供有一種脂質奈米粒子，其含有化合物或其鹽、磷脂、膽固醇及PEG脂質。
根據本發明的又另一態樣，提供有一種組成物，其包含離子性藥物及(i)化合物或其鹽或(ii)化合物或其鹽、磷脂、膽固醇及PEG脂質。
根據本發明的甚至又另一態樣，提供有一種製備由式(I)表示之化合物或其鹽的方法。 本發明之有利功效
根據本發明之新穎的可離子化脂質化合物或其鹽在將核酸遞送至細胞的效率及核酸囊封效率係優異的，且因此可有助於改良核酸治療劑之活體內的安定性及治療效力。
此後，將詳細說明本發明。
在本說明書中，除另有說明外，術語「鹵素」意指F、Cl、Br或I。
除另有指明外，術語「烷基」意指直鏈或支鏈飽和烴基團。舉例而言，「C 1-10烷基」意指具有由1至10個碳原子組成的骨架的烷基。具體而言，C 1-10烷基可包括甲基、乙基、 n-丙基(正丙基)、 i-丙基(異丙基)、 n-丁基(正丁基)、 i-丁基(異丁基)、 sec-丁基(二級丁基)、 tert-丁基(三級丁基)、 n-戊基(正戊基)、 i-戊基(異戊基)、 tert-戊基(三級戊基)、 sec-戊基(二級戊基)、 neo-戊基、己基、庚基、辛基、辛基、壬基、癸基及類似者。
術語「烷氧基」意指藉由-O-連結的烷基基團。舉例而言，C 1-4烷氧基包括，但不限於，甲氧基、乙氧基、 n-丙氧基、 i-丙氧基、 n-丁氧基、 i-丁氧基、 sec-丁氧基、 tert-丁氧基及類似者，但不限於此。
術語「烯基」意指具有至少一雙鍵的烴基團。
術語「炔基」意指具有至少一參鍵的烴基團。
術語「伸烷基」在作為在兩個末端皆連接至母體結構，同時為飽和直鏈或支鏈烴基團的二價基基團時具有與「烷二基」相同之意義。
術語「雜原子」意指除碳(C)以外之原子，且具體地可為氮(N)原子、氧(O)原子或硫(S)原子。
術語「碳環基團」意指由碳原子及氫原子構成的環狀基團，其中該碳環基團可為飽和或不飽和的，可為芳族或非芳族的，且可為單環或多環的。舉例而言，「3員至6員碳環基團」意指具有由3至6個碳原子構成的骨架的環狀基團且可具有一或多個取代基。
術語「雜環基團」意指含有一或多個雜原子的環狀基團，且其可為飽和或不飽和的，可為芳族或非芳族的，且可為單環或多環的。舉例而言，「3員至6員雜環基團」意指具有由包括雜原子及碳原子之總共3至6個原子構成的骨架的環狀基團，且其可具有一或多個取代基。
術語「取代」係指以取代基置換分子結構本體中之一或多個氫原子，使得化合物於此類取代後係化學上安定的而不超過指定原子之價數。舉例而言，用語「基團A係經取代基B取代」或「基團A具有取代基B」可意指與諸如構成基團A之骨架的碳原子或雜原子之原子鍵結的氫原子係經取代基B置換，藉其基團A及取代基B形成共價鍵。結果，在不具有可拆離之氫原子的基團的情況中，實際上難以或不可能具有取代基。因此，當在本說明書中例示一系列各種基團，包括難以具有一取代基的基團及一系列取代基組合時，顯然不允許取代的基團及取代基組合係解釋為從上述範圍中排除。
在本說明書中所呈現的化學結構式中，碳原子的符號(C)及氫原子的符號(H)可根據用於化學結構式的習知標記系統而省略，並且應理解的是，實際上滿足構成骨架的碳原子(或雜原子)之價數的某一數量的氫原子係結合至該碳原子(或雜原子)，例如即使沒有氫原子的符號。
術語「脂質奈米粒子」(LNP)係指結構本體，其中脂質在正常溫度下與藥物(例如，核酸系藥物)混合以製備均勻相，且此分散於水性溶液中，以允許該藥物在脂質晶體之間以固體-溶液相存在。此類脂質奈米粒子使用存在於生物體中之物質，諸如磷脂、脂質、膽固醇及類似者。因此，其為具有高生體可用率及生物相容性之藥物遞送物質，可釋放及控制藥物，且具有對抗酶降解之高安定性及類似者。此外，脂質奈米粒子在酸性pH下帶正(+)電，於是可囊封RNA，且其在生理pH下帶中性電，於是可使毒性降至最低。 可離子化脂質化合物
根據本發明之一個態樣，提供一種由下式(I)表示之化合物或其鹽，其為可離子化脂質化合物。 (I) 其中Z為飽和或不飽和的5員或6員碳環基團或雜環基團， L1為由下式(II)表示之一基團、一3員至6員飽和雜環基團、鹵素、氰基或羥基，其中該3員至6員飽和雜環基團係經C 1-10烷基取代或未經取代， (II) L2及L3各自獨立地為一直接鍵或一直鏈C 1-12伸烷基，其中該C 1-12伸烷基係經一或多個C 1-10烷基或羥基取代或未經取代， L4為由下式(III)或(III')表示之一基團， (III) (III') R 1及R 2各自獨立地為直鏈C 1-30烷基或支鏈C 3-50烷基且係經選自由直鏈C 2-25烯基、Rx'-C(=O)-O、Rx'-O-C(=O)-、Rx'-C(=O)-、C 1-10烷氧基及羥基組成之群的至少一者取代或未經取代，其中Rx’為氫、直鏈C 1-25烷基、直鏈C 2-25烯基或支鏈C 3-25烷基， R 3及R 5各自獨立地為一直鏈C 1-12伸烷基，且係經R a-C(=O)取代或未經取代，其中R a為氫或一直鏈C 1-12烷基， X及Y各自獨立地為-Rx''-、-Rx''-CH(-OH)-、-CH(-OH)-Rx''-、-C(=O)-O-Rx''-、-O-C(=O)-Rx''-、-Rx''-C(=O)-O-、-Rx''-O-C(=O)-、-Rx''-C(=O)-、-C(=O)-Rx''-、-Rx''-NHC(=O)-、-Rx''-C(=O)NH-、-C(=O)NH-Rx''-、-NHC(=O)-Rx''-、-Rx''-O-、-O-Rx''-、-NH-Rx''-或-Rx''-NH-，其中Rx''為一直接鍵、一直鏈C 1-25伸烷基或一支鏈C 3-25伸烷基， R 4及R 6各自獨立地為一直鏈C 1-30烷基、一直鏈C 2-30烯基、一支鏈C 3-50烷基或C 4-40烷氧基，其中該直鏈C 1-30烷基、直鏈C 1-30烯基、支鏈C 3-50烷基及C 4-40烷氧基各自獨立地經選自由一C 1-12烷基、Rx'''-C(=O)-O-、Rx'''-O-C(=O)-、Rx'''-O-及胺組成之群的至少一者取代或未經取代，Rx'''為氫、一直鏈C 1-25烷基、一支鏈C 3-25烷基及一3員至6員飽和或不飽和碳環基團、經一3員至6員飽和或不飽和碳環基團取代之一直鏈或支鏈C 3-6烷基、一3員至6員飽和或不飽和雜環基團或經一3員至6員飽和或不飽和雜環基團取代之一直鏈或支鏈C 3-6烷基， p及q各自獨立地為1至3之一整數，且 該碳環基團為由碳原子及氫原子構成之一環狀基團，且該雜環基團為含有一或多個選自N、S或O的雜原子之一環狀基團。
本案所述之直鏈C 1-30烷基包括例如直鏈C 1-6烷基、直鏈C 1-12烷基、直鏈C 1-25烷基、直鏈C 11-30烷基等。本案所述之直鏈C 1-25烷基包括例如直鏈C 1-6烷基、直鏈C 1-12烷基、直鏈C 11-25烷基等。本案所述之直鏈C 1-12烷基包括例如直鏈C 1-3烷基、直鏈C 1-6烷基、直鏈C 3-12烷基等。本案所述之直鏈C 1-25伸烷基包括例如直鏈C 1-25伸烷基、直鏈C 1-12伸烷基、直鏈C 11-25伸烷基等。本案所述之直鏈C 1-12伸烷基包括例如直鏈C 1-3伸烷基、直鏈C 1-6伸烷基、直鏈C 3-12伸烷基等。本案所述之直鏈C 2-30烯基包括例如直鏈C 2-6烯基、直鏈C 2-12烯基、直鏈C 2-25烯基、直鏈C 11-30烯基等。本案所述之直鏈C 2-25烯基包括例如直鏈C 2-6烯基、直鏈C 2-12烯基、直鏈C 11-25烯基等。本案所述之支鏈C 3-50烷基包括例如支鏈C 4-50烷基、支鏈C 11-50烷基、支鏈C 3-20烷基、支鏈C 4-20烷基、支鏈C 3-40烷基、支鏈C 3-30烷基等。本案所述之支鏈C 3-25烷基包括例如支鏈C 4-25烷基、支鏈C 11-25烷基、支鏈C 3-12烷基、支鏈C 4-12烷基等。本案所述之支鏈C 3-25伸烷基包括例如支鏈C 4-25伸烷基、支鏈C 11-25伸烷基、支鏈C 3-12伸烷基、支鏈C 4-12伸烷基等。本案所述之C 4-40烷氧基包括例如C 4-12烷氧基、C 4-20烷氧基、C 4-30烷氧基、C 11-40烷氧基、C 11-30烷氧基等。
在式(I)之一個實施態樣中，Z為含有1至3個雜原子的5員至6員飽和或不飽和雜環基團，或5員或6員飽和碳環基團。
在另一實施態樣中，Z具有吡咯、吡唑、咪唑、三唑、四唑、五唑、噻唑、㗁唑、異㗁唑、吡咯啶、咪唑啉、咪唑啶、吡唑啉、吡唑啶、哌啶、𠰌啉、哌𠯤、四氫吡啶或環己烷的結構。
在另一實施態樣中，Z具有吡咯、吡唑、咪唑、三唑、四唑、五唑、噻唑、㗁唑、異㗁唑、吡咯啶、咪唑啉、咪唑啶、吡唑啉、吡唑啶、哌啶、𠰌啉、四氫吡啶或環己烷的結構。
在又另一實施態樣中，Z具有吡咯、吡唑、咪唑、三唑、四唑、五唑、噻唑、㗁唑、異㗁唑、吡咯啶、哌啶、哌𠯤或環己烷的結構。
在又另一實施態樣中，Z具有吡咯、吡唑、咪唑、三唑、四唑、五唑、噻唑、㗁唑、異㗁唑、吡咯啶、哌啶或環己烷的結構。
在又另一實施態樣中，Z具有吡唑、咪唑、三唑、吡咯啶、哌啶、哌𠯤或環己烷的結構。
在又另一實施態樣中，Z具有吡唑、咪唑、三唑、吡咯啶、哌啶或環己烷的結構。
在又另一實施態樣中，Z不包含哌𠯤結構。
在又另一實施態樣中，Z為飽和或不飽和的5員或6員碳環基團或雜環基團，但不包含哌𠯤結構。
在又另一實施態樣中，Z為含有1至3個雜原子的5員至6員飽和或不飽和雜環基團，或5員或6員飽和碳環基團，但不包含哌𠯤結構。
在又另一實施態樣中，Z可為單環或多環基團且具體而言為單環基團。
在又另一實施態樣中，Z為 、 、 、 、 、 或 。此處，Z之兩個鏈接點中之一者可鏈接至L2且其另一者可鏈接至L3。更具體而言，Z之兩個鏈接點之左側可鏈接至L2，且其右側可鏈接至L3。
在又另一實施態樣中，Z為 、 、 、 、 或 。此處，Z之兩個鏈接點中之一者可鏈接至L2且其另一者可鏈接至L3。更具體而言，Z之兩個鏈接點之左側可鏈接至L2，且其右側可鏈接至L3。
在又另一實施態樣中，Z可為5員或6員不飽和雜環基團，且具體而言為5員不飽和雜環基團。上述不飽和雜環基團可為芳香環，且例如可含有兩個雙鍵。此外，上述雜環基團可含有1至3個N，具體而言，可含有2或3個N，更具體而言，可含有2個N。在一具體實例中，Z可為具有2個N的5員芳香雜環基團。
在又另一實施態樣中，Z可具有吡唑、咪唑或三唑的結構。
在又另一實施態樣中，Z為 或 。
在式(I)之一個實施態樣中，L1為由式(II)表示之基團、5員或6員飽和雜環基團、鹵素、氰基或羥基，且其中該5員或6員飽和雜環基團含有至少一個N且係經C 1-6烷基取代或未經取代。
在另一實施態樣中，Z具有吡唑、咪唑、三唑、吡咯啶、哌啶、哌𠯤或環己烷的結構，且L1為由式(II)表示之基團、5員或6員飽和雜環基團、鹵素、氰基或羥基，且其中該5員或6員飽和雜環基團含有至少一個N且係經C 1-6烷基取代或未經取代。
在又另一實施態樣中，Z具有吡唑、咪唑、三唑、吡咯啶、哌啶或環己烷的結構，且L1為由式(II)表示之基團、5員或6員飽和雜環基團、鹵素、氰基或羥基，且其中該5員或6員飽和雜環基團含有至少一個N且係經C 1-6烷基取代或未經取代。
在另一實施態樣中，Z具有吡唑、咪唑或三唑的結構，且L1為由式(II)表示之基團、5員或6員飽和雜環基團、鹵素、氰基或羥基，且其中該5員或6員飽和雜環基團含有至少一個N且係經C 1-6烷基取代或未經取代。
在一具體實施例中，作為L1含有至少一個N的5員或6員飽和雜環基團為吡咯啶基、哌啶基、哌𠯤基或𠰌啉基，其係經C 1-3烷基取代或未經取代。更具體而言，其為 、 、 、 、 或 。
在式(I)之一個實施態樣中，L2為直接鍵或直鏈C 1-6伸烷基，其中該C 1-6伸烷基係經一或多個C 1-6烷基或羥基取代或未經取代，且L3為直鏈C 1-6伸烷基。
在另一實施態樣中，Z具有吡唑、咪唑、三唑、吡咯啶、哌啶、哌𠯤或環己烷的結構，L1為由式(II)表示之基團、5員或6員飽和雜環基團、鹵素、氰基或羥基，其中該5員或6員飽和雜環基團含有至少一個N且係經C 1-6烷基取代或未經取代，L2為直接鍵或直鏈C 1-6伸烷基，其中該C 1-6伸烷基係經一或多個C 1-6烷基或羥基取代或未經取代，且L3為直鏈C 1-6伸烷基。
在又另一實施態樣中，Z具有吡唑、咪唑、三唑、吡咯啶、哌啶或環己烷的結構，L1為由式(II)表示之基團、5員或6員飽和雜環基團、鹵素、氰基或羥基，其中該5員或6員飽和雜環基團含有至少一個N且係經C 1-6烷基取代或未經取代，L2為直接鍵或直鏈C 1-6伸烷基，其中該C 1-6伸烷基係經一或多個C 1-6烷基或羥基取代或未經取代，且L3為直鏈C 1-6伸烷基。
在又另一實施態樣中，Z具有吡唑、咪唑或三唑的結構，L1為由式(II)表示之基團、5員或6員飽和雜環基團、鹵素、氰基或羥基，其中該5員或6員飽和雜環基團含有至少一個N且係經C 1-6烷基取代或未經取代，L2為直接鍵或直鏈C 1-6伸烷基，其中該C 1-6伸烷基係經一或多個C 1-6烷基或羥基取代或未經取代，且L3為直鏈C 1-6伸烷基。
在式(I)之一個實施態樣中，R 1及R 2各自獨立地為直鏈C 1-10烷基或支鏈C 3-15烷基且係經選自由Rx'-C(=O)-O、Rx'-O-C(=O)-、Rx'-C(=O)-、C 1-10烷氧基及羥基組成之群的至少一者取代或未經其取代，其中Rx’為氫、直鏈C 1-10烷基、直鏈C 2-10烯基或支鏈C 3-15烷基。
在另一實施態樣中，Z具有吡唑、咪唑、三唑、吡咯啶、哌啶、哌𠯤或環己烷的結構，且L1為由式(II)表示之基團、5員或6員飽和雜環基團、鹵素、氰基或羥基，其中該5員或6員飽和雜環基團含有至少一個N且係經C 1-6烷基取代或未經取代，L2為直接鍵或直鏈C 1-6伸烷基，其中該C 1-6伸烷基係經一或多個C 1-6烷基或羥基取代或未經取代，L3為直鏈C 1-6伸烷基，且R 1及R 2各自獨立地為直鏈C 1-10烷基或支鏈C 3-15烷基且係經選自由Rx'-C(=O)-O、Rx'-O-C(=O)-、Rx'-C(=O)-、C 1-10烷氧基及羥基組成之群的至少一者取代或未經取代，其中Rx’為氫、直鏈C 1-10烷基、直鏈C 2-10烯基或支鏈C 3-15烷基。
在又另一實施態樣中，Z具有吡唑、咪唑、三唑、吡咯啶、哌啶或環己烷的結構，且L1為由式(II)表示之基團、5員或6員飽和雜環基團、鹵素、氰基或羥基，其中該5員或6員飽和雜環基團含有至少一個N且係經C 1-6烷基取代或未經取代，L2為直接鍵或直鏈C 1-6伸烷基，其中該C 1-6伸烷基係經一或多個C 1-6烷基或羥基取代或未經取代，L3為直鏈C 1-6伸烷基，且R 1及R 2各自獨立地為直鏈C 1-10烷基或支鏈C 3-15烷基且係經選自由Rx'-C(=O)-O、Rx'-O-C(=O)-、Rx'-C(=O)-、C 1-10烷氧基及羥基組成之群的至少一者取代或未經取代，其中Rx’為氫、直鏈C 1-10烷基、直鏈C 2-10烯基或支鏈C 3-15烷基。
在又另一實施態樣中，Z具有吡唑、咪唑或三唑的結構，L1為由式(II)表示之基團、5員或6員之飽和雜環基團、鹵素、氰基或羥基，其中該5員或6員飽和雜環基團含有至少一個N且係經C 1-6烷基取代或未經取代，L2為直接鍵或直鏈C 1-6伸烷基，其中該C 1-6伸烷基係經一或多個C 1-6烷基或羥基取代或未經取代，L3為直鏈C 1-6伸烷基，且R 1及R 2各自獨立地為直鏈C 1-10烷基或支鏈C 3-15烷基且係經選自由Rx'-C(=O)-O-、Rx'-C(=O)-、C 1-10烷氧基及羥基組成之群的至少一者取代或未經取代，其中Rx’為氫、直鏈C 1-10烷基、直鏈C 2-10烯基或支鏈C 3-15烷基。
在式(I)之一個實施態樣中，R 3及R 5各自獨立地為直鏈C 1-10伸烷基，且X及Y各自獨立地為-Rx''-、-Rx''-CH(-OH)-、-CH(-OH)-Rx''-、-C(=O)-O-Rx''-、-O-C(=O)-Rx''-、-Rx''-C(=O)-O-、-Rx''-O-C(=O)-、-Rx''-O-或-O-Rx''-，其中Rx''為直接鍵、直鏈C 1-10伸烷基或支鏈C 1-10伸烷基。
在另一實施態樣中，Z具有吡唑、咪唑、三唑、吡咯啶、哌啶、哌𠯤或環己烷的結構，且L1為由式(II)表示之基團、5員或6員飽和雜環基團、鹵素、氰基或羥基，其中該5員或6員飽和雜環基團含有至少一個N且係經C 1-6烷基取代或未經取代，L2為直接鍵或直鏈C 1-6伸烷基，其中該C 1-6伸烷基係經一或多個C 1-6烷基或羥基取代或未經取代，L3為直鏈C 1-6伸烷基，且R 1及R 2各自獨立地為直鏈C 1-10烷基或支鏈C 3-15烷基且係經選自由Rx'-C(=O)-O、Rx'-O-C(=O)-、Rx'-C(=O)-、C 1-10烷氧基及羥基組成之群的至少一者取代或未經取代，其中Rx'為氫、直鏈C 1-10烷基、直鏈C 2-10烯基或支鏈C 3-15烷基，R 3及R 5各自獨立地為直鏈C 1-10伸烷基，且X及Y各自獨立地為-Rx''-、-Rx''-CH(-OH)-、-CH(-OH)-Rx''-、-C(=O)-O-Rx''-、-O-C(=O)-Rx''-、-Rx''-C(=O)-O-、-Rx''-O-C(=O)-、-Rx''-O-或-O-Rx''-，其中Rx''為直接鍵、直鏈C 1-10伸烷基或支鏈C 1-10伸烷基，L2為直接鍵或直鏈C 1-6伸烷基，其中該C 1-6伸烷基係經一或多個C 1-6烷基或羥基取代或未經取代，L3為直鏈C 1-6伸烷基，R 1及R 2各自獨立地為直鏈C 1-10烷基或支鏈C 3-15烷基且係經選自由Rx'-C(=O)-O、Rx'-O-C(=O)-、Rx'-C(=O)-、C 1-10烷氧基及羥基組成之群的至少一者取代或未經取代，其中Rx'為氫、直鏈C 1-10烷基、直鏈C 2-10烯基或支鏈C 3-15烷基、R 3及R 5各自獨立地為直鏈C 1-10伸烷基，且X及Y各自獨立地為-Rx''-、-Rx''-CH(-OH)-、-CH(-OH)-Rx''-、-C(=O)-O-Rx''-、-O-C(=O)-Rx''-、-Rx''-C(=O)-O-、-Rx''-O-C(=O)-、-Rx''-O-或-O-Rx''-，其中Rx''為直接鍵、直鏈C 1-10伸烷基或支鏈C 1-10伸烷基。
在又另一實施態樣中，Z具有吡唑、咪唑、三唑、吡咯啶、哌啶、哌𠯤或環己烷的結構，且L1為由式(II)表示之基團、5員或6員飽和雜環基團、鹵素、氰基或羥基，其中該5員或6員飽和雜環基團含有至少一個N且係經C 1-6烷基取代或未經取代，L2為直接鍵或直鏈C 1-6伸烷基，其中該C 1-6伸烷基係經一或多個C 1-6烷基或羥基取代或未經取代，L3為直鏈C 1-6伸烷基，且R 1及R 2各自獨立地為直鏈C 1-10烷基或支鏈C 3-15烷基且係經選自由Rx'-C(=O)-O、Rx'-O-C(=O)-、Rx'-C(=O)-、C 1-10烷氧基及羥基組成之群的至少一者取代或未經取代，其中Rx'為氫、直鏈C 1-10烷基、直鏈C 2-10烯基或支鏈C 3-15烷基、R 3及R 5各自獨立地為直鏈C 1-10伸烷基，且X及Y各自獨立地為-Rx''-、-Rx''-CH(-OH)-、-CH(-OH)-Rx''-、-C(=O)-O-Rx''-、-O-C(=O)-Rx''-、-Rx''-C(=O)-O-、-Rx''-O-C(=O)-、-Rx''-O-或-O-Rx''-，其中Rx''為直接鍵、直鏈C 1-10伸烷基或支鏈C 1-10伸烷基，L2為直接鍵或直鏈C 1-6伸烷基，其中該C 1-6伸烷基係經一或多個C 1-6烷基或羥基取代或未經取代，L3為直鏈C 1-6伸烷基，R 1及R 2各自獨立地為直鏈C 1-10烷基或支鏈C 3-15烷基且係經選自由Rx'-C(=O)-O、Rx'-O-C(=O)-、Rx'-C(=O)-、C 1-10烷氧基及羥基組成之群的至少一者取代或未經取代，其中Rx'為氫、直鏈C 1-10烷基、直鏈C 2-10烯基或支鏈C 3-15烷基、R 3及R 5各自獨立地為直鏈C 1-10伸烷基，且X及Y各自獨立地為-Rx''-、-Rx''-CH(-OH)-、-CH(-OH)-Rx''-、-C(=O)-O-Rx''-、-O-C(=O)-Rx''-、-Rx''-C(=O)-O-、-Rx''-O-C(=O)-、-Rx''-O-或-O-Rx''-，其中Rx''為直接鍵、直鏈C 1-10伸烷基或支鏈C 1-10伸烷基。
在又另一實施態樣中，Z具有吡唑、咪唑或三唑的結構，L1為由式(II)表示之基團、5員或6員飽和雜環基團、鹵素、氰基或羥基，其中該5員或6員飽和雜環基團含有至少一個N且係經C 1-6烷基取代或未經取代，L2為直接鍵或直鏈C 1-6伸烷基，其中該C 1-6伸烷基係經一或多個C 1-6烷基或羥基取代或未經取代，L3為直鏈C 1-6伸烷基，R 1及R 2各自獨立地為直鏈C 1-10烷基或支鏈C 3-15烷基且係經選自由Rx'-C(=O)-O、Rx'-O-C(=O)-、Rx'-C(=O)-、C 1-10烷氧基及羥基組成之群的至少一者取代或未經取代，其中Rx'為氫、直鏈C 1-10烷基、直鏈C 2-10烯基或支鏈C 3-15烷基、R 3及R 5各自獨立地為直鏈C 1-10伸烷基，且X及Y各自獨立地為-Rx''-、-Rx''-CH(-OH)-、-CH(-OH)-Rx''-、-C(=O)-O-Rx''-、-O-C(=O)-Rx''-、-Rx''-C(=O)-O-、-Rx''-O-C(=O)-、-Rx''-O-或-O-Rx''-，其中Rx''為直接鍵、直鏈C 1-10伸烷基或支鏈C 1-10伸烷基。
在式(I)之一個實施態樣中，R 4及R 6各自獨立地為直鏈C 1-20烷基、直鏈C 2-20烯基或支鏈C 3-20烷基，且該直鏈C 1-20烷基、該直鏈 2-20烯基及該支鏈C 3-20烷基各自獨立地經選自由Rx'''-C(=O)-O-、Rx'''-O-C(=O)-及Rx'''-O-組成之群的至少一者取代或未經取代，其中Rx'''為氫、直鏈C 1-25烯基或支鏈C 3-25烷基。
在另一實施態樣中，Z具有吡唑、咪唑、三唑、吡咯啶、哌啶、哌𠯤或環己烷的結構，且L1為由式(II)表示之基團、5員或6員之飽和雜環基團、鹵素、氰基或羥基，且其中該5員或6員之飽和雜環基團含有至少一個N且係經C 1-6烷基取代或未經取代，L2為直接鍵或直鏈C 1-6伸烷基，其中該C 1-6伸烷基係經一或多個C 1-6烷基或羥基取代或未經取代，L3為直鏈C 1-6伸烷基，且R 1及R 2各自獨立地為直鏈C 1-10烷基或支鏈C 3-15烷基且係經選自由Rx'-C(=O)-O、Rx'-O-C(=O)-、Rx'-C(=O)-、C 1-10烷氧基及羥基組成之群的至少一者取代或未經取代，其中Rx'為氫、直鏈C 1-10烷基、直鏈C 2-10烯基或支鏈C 3-15烷基，R 3及R 5各自獨立地為直鏈C 1-10伸烷基，X及Y各自獨立地為-Rx''-、-Rx''-CH(-OH)-、-CH(-OH)-Rx''-、-C(=O)-O-Rx''-、-O-C(=O)-Rx''-、-Rx''-C(=O)-O-、-Rx''-O-C(=O)-、-Rx''-O-或-O-Rx''-，其中Rx''為直接鍵、直鏈C 1-10伸烷基或支鏈C 1-10伸烷基，且R 4及R 6各自獨立地為直鏈C 1-20烷基、直鏈C 2-20烯基或支鏈C 3-20烷基，其中該直鏈C 1-20烷基、該直鏈 2-20烯基及該支鏈C 3-20烷基各自獨立地經選自由Rx'''-C(=O)-O-、Rx'''-O-C(=O)-及Rx'''-O-組成之群的至少一者取代或未經取代，其中Rx'''為氫、直鏈C 1-25烯基或支鏈C 3-25烷基。
在又另一實施態樣中，Z具有吡唑、咪唑或三唑結構，L1為由上式(II)表示之基團、5員或6員飽和雜環基團、鹵素、氰基或羥基，其中該5員或6員飽和雜環基團含有至少一個N且係經C 1-6烷基取代或未經取代，L2為直接鍵或直鏈C 1-6伸烷基，其中該伸烷基係經一或多個C 1-6烷基或羥基取代或未經取代， L3為直鏈C 1-6伸烷基，R 1及R 2各自獨立地為直鏈C 1-10烷基或支鏈C 3-15烷基，該等經選自由Rx'-C(=O)-O-、Rx'-C(=O)-、C 1-10烷氧基及羥基組成之群的至少一者取代或未經取代，且Rx’為氫、直鏈C 1-10烷基、直鏈C 2-10烯基或支鏈C 3-15烷基，R 3及R 5各自獨立地為直鏈C 1-10伸烷基，X及Y各自獨立地為-Rx''-、-Rx''-CH(-OH)-、-CH(-OH)-Rx''-、-C(=O)-O-Rx''-、-O-C(=O)-Rx''-、-Rx''-C(=O)-O-、-Rx''-O-C(=O)-、-Rx''-O-或-O-Rx''-，且Rx''為直接鍵、直鏈C 1-10伸烷基或支鏈C 1-10伸烷基，且R 4及R 6各自獨立地為直鏈C 1-20烷基、直鏈C 2-20烯基或支鏈C 3-20烷基，且該直鏈C 1-20烷基、該直鏈 2-20烯基及該支鏈C 3-20烷基各自獨立地經選自由Rx'''-C(=O)-O-、Rx'''-O-C(=O)-及Rx'''-O-組成之群的至少一者取代或未經取代，其中Rx'''為氫、直鏈C 1-25烷基或支鏈C 3-25烷基。
在本發明之另一態樣中，可離子化脂質化合物係由式(IV)表示。 (IV) L5為由式(II)表示之基團、5員或6員飽和雜環基團、鹵素、氰基或羥基，其中該5員或6員飽和雜環基團含有至少一個N且經C 1-6烷基取代或未經取代， (II) L6及L7各自獨立地為一直接鍵或一直鏈C 1-12伸烷基，其中該C 1-12伸烷基係經一或多個C 1-3烷基或羥基取代或未經取代， L8為由式(III)或(III')表示之基團，且 (III) (III') R 1至R 6、X、Y、p及q係與上述者相同。
在式(IV)之一個實施態樣中，L5為由式(II)表示之基團。
在另一實施態樣中，L6為直接鍵或直鏈C 1-6伸烷基，其中該C 1-6伸烷基係經一或多個C 1-6烷基或羥基取代或未經取代，且L7為直鏈C 1-6伸烷基。
在又另一實施態樣中，L8為由式(III)表示之基團。
在又另一實施態樣中，L5為由式(II)表示之基團，L6為直接鍵或直鏈C 1-6伸烷基，其中C 1-6伸烷基係經一或多個C 1-6烷基或羥基取代或未經取代，L7為直鏈C 1-6伸烷基，且L8為由式(III)表示之基團。
在本發明之又另一態樣中，可離子化脂質化合物係由式(V)表示。 (V) m及n各自獨立地為0至10之整數， L9為由式(II)表示之基團、鹵素、氰基或羥基， (II) L10為由式(III)表示之基團，且 (III) R 3至R 6、X及Y係與上述者相同。
在式(V)之一個實施態樣中，L9為由式(II)表示之基團，且m及n各自獨立地為1至3之整數。
在另一實施態樣中，L9為鹵素、氰基或羥基，m為0至6之整數，且n為1至3之整數。
在本發明之又另一態樣中，可離子化脂質化合物係由式(VI)表示。 (VI) m及n各自獨立地為0至10之整數， L11為由式(II)表示之基團、鹵素、氰基或羥基， (II) L12為-R 3-X-R 4， L13為-R 5-Y-R 6，
R 3至R 6、X及Y係與上述者相同。
在式(V)之一個實施態樣中，L11為由式(II)表示之基團，且m及n各自獨立地為1至3之整數。
在式(VI)之一個實施態樣中，L11為鹵素、氰基或羥基，m為0至6之整數，且n為1至3之整數。
在本發明之另一態樣中，根據本發明之可離子化脂質化合物可為化合物或其鹽，該化合物或其鹽之特徵在於選自由以下化合物組成之群： (1)雙(2-丙基己基)6,6'-((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))二己酸酯； (2)雙(2-丙基己基)8,8'-((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))二辛酸酯； (3)雙(2-乙基戊基)4,4'-((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))二丁酸酯； (4)雙(2-乙基戊基)6,6'-((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))二己酸酯； (5)雙(2-乙基戊基)8,8'-((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))二辛酸酯； (6)(((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))雙(亞甲基))雙(丙烷-2,1,3-三基)四己酸酯； (7)(((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))雙(亞甲基))雙(丙烷-2,1,3-三基)四辛酸酯； (8)(((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))雙(亞甲基))雙(丙烷-2,1,3-三基)肆(癸酸酯)； (9)二(二十二烷-10-基)3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (10)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (11)1,1'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(十四烷-2-醇)； (12)(((1-(2-(雙(6-((2-己基癸醯基)氧基)己基)胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (13)二(( Z)-壬-2-烯-1-基)9,9'-(((1-(2-(雙(9-((( Z)-壬-2-烯-1-基)氧基)-9-側氧基壬基)胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二壬酸酯； (14) N-((1-(2-(二十四烷基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)- N-十四烷基十四烷-1-胺； (15)(((((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(乙烷-2,1-二基))雙(氮烷三基))肆(己烷-6,1-二基)肆(2-己基癸酸酯)； (16)(((1-(4-羥基丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (17)二(十五烷-7-基)6,6'-(((1-(4-羥基丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二己酸酯； (18)(((((1-(2-羥基乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(乙烷-2,1-二基))雙(氮烷三基))肆(己烷-6,1-二基)肆(2-己基癸酸酯)； (19)(((((1-(4-羥基丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(乙烷-2,1-二基))雙(氮烷三基))肆(己烷-6,1-二基)肆(2-己基癸酸酯)； (20)二(( Z)-壬-2-烯-1-基)9,9'-(((1-(2-(雙(2-羥基乙基)胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二壬酸酯； (21)雙十二烷基3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (22)雙十二烷基3,3'-(((1-(2-羥基乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (23)雙十二烷基3,3'-(((1-(4-羥基丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (24)((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (25)((3,3'-(((1-(2-羥基乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (26)((3,3'-(((1-(4-羥基丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (27)二辛基3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (28)雙十六烷基3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (29)((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))雙(丁烷-4,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (30)二(( Z)-壬-2-烯-1-基)9,9'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二壬酸酯； (31)二(( Z)-壬-2-烯-1-基)9,9'-(((1-(2-羥基乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二壬酸酯； (32)二(( Z)-壬-2-烯-1-基)9,9'-(((1-(4-羥基丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二壬酸酯； (33)雙(4-(丙醯基氧基)丁基)3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (34)((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))雙(丁烷-4,1-二基)二戊酸酯； (35)((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))雙(丁烷-4,1-二基)二庚酸酯； (36)((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))雙(丁烷-4,1-二基)二壬酸酯； (37)((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))雙(丁烷-4,1-二基)雙十一酸酯； (38)((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))雙(乙烷-2,1-二基)二庚酸酯； (39)((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))雙(丙烷-3,1-二基)二己酸酯； (40)((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))雙(戊烷-5,1-二基)二丁酸酯； (41)雙(2-乙基己基)4,4'-((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))二丁酸酯； (42)雙(2-乙基己基)6,6'-((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))二己酸酯； (43)雙(2-乙基己基)8,8'-((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))二辛酸酯； (44)雙(2-丙基己基)4,4'-((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))二丁酸酯； (45)(2 R,2' R)-1,1'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(癸-2-醇)； (46)( S)-1-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)(( R)-2-羥基癸基)胺基)癸-2-醇； (47)(2 R,2' R)-1,1'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(十二烷-2-醇)； (48)( S)-1-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)(( R)-2-羥基癸基)胺基)十二烷-2-醇； (49)(2 R,2' R)-1,1'-(((1-(2-羥基乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(十二烷-2-醇)； (50)( S)-1-((( R)-2-羥基十二烷基)((1-(2-羥基乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)胺基)十二烷-2-醇； (51)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-(雙(3-側氧基-3-(十五烷-7-基氧基)丙基)胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (52)二(十三烷-6-基)3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (53)二(十七烷-8-基)3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (54)二(十九烷-9-基)3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (55)(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (56) (((1-(4-氟基丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (57)(((1-(4-氯基丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (58)(((1-(4-氰基丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (59)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(3-(二甲基胺基)丙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (60)二(十五烷-7-基)3,3'-((2-(1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)乙基)氮烷二基)二丙酸酯； (61)二(十五烷-7-基)4,4'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丁酸酯； (62)二(十五烷-7-基)5,5'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二戊酸酯； (63)二(十五烷-7-基)6,6'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二己酸酯； (64)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(4-羥基丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (65)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(3-羥基丙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (66) 二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(4-(二甲基胺基)丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (67)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-(二乙基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (68) 二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-(二異丙基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (69)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-(吡咯啶-1-基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (70)二(十五烷-7-基)5,5'-(((1-(2-𠰌啉基乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二戊酸酯； (71)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(3-𠰌啉基丙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (72)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(3-(吡咯啶-1-基)丙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (73)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)-2-甲基丙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (74)二(十五烷-7-基) 3,3'-(((1-(2-(雙(2-羥基乙基)胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (75)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-((2-羥基乙基)(甲基)胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (76)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-(雙(甲氧基甲基)胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (77)(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(乙烷-2,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (78)(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙烷-3,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (79)(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丁烷-4,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (80)(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(戊烷-5,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (81)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-羥基乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (82)十七烷-9-基8-(((1-(2-羥基乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)(6-側氧基-6-(十一烷氧基)己基)胺基)辛酸酯； (83) (((1-(4-(二甲基胺基)丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (84)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-𠰌啉基乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (85)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-(4-甲基哌𠯤-1-基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (86)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (87)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-(哌啶-1-基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (88)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (89)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)吡咯啶-3-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (90) (((1-(4-羥基丁基)吡咯啶-3-基)甲基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (91) (((4-羥基環己基)甲基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (92) ((2-(4-羥基環己基)乙基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (93) ((2-(4-羥基哌啶-1-基)乙基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (94)二(十五烷-7-基)6,6'-(((1-(4-羥基丁基)吡咯啶-3-基)甲基)氮烷二基)二己酸酯； (95)二(十五烷-7-基)6,6'-(((4-羥基環己基)甲基)氮烷二基)二己酸酯； (96)二(十五烷-7-基)6,6'-((2-(4-羥基環己基)乙基)氮烷二基)二己酸酯； (97)二(十五烷-7-基)6,6'-((2-(4-羥基哌啶-1-基)乙基)氮烷二基)二己酸酯； (98)((2-(4-(3-羥基丙基)哌𠯤-1-基)乙基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (99)((2-(4-(3-羥基丙基)哌啶-1-基)乙基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (100)雙(3-己基壬基)6,6'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二己酸酯； (101)雙(3-己基壬基)6,6'-(((1-(4-羥基丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二己酸酯； (102)雙(4-戊基壬基)6,6'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二己酸酯； (103)雙(4-戊基壬基)6,6'-(((1-(4-羥基丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二己酸酯； (104)四(十五烷-7-基)4,4',4'',4'''-((3,3',3'',3'''-(((((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(乙烷-2,1-二基))雙(氮烷三基))肆(丙醯基))肆(氧基))四丁酸酯； (105)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-咪唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (106)(((1-(4-羥基丁基)-1 H-咪唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (107)二(十五烷-7-基)6,6'-(((1-(4-羥基丁基)-1 H-咪唑-4-基)甲基)氮烷二基)二己酸酯.； (108)二(十五烷-7-基)3,3'-((2-(4-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-1,2,3-三唑-1-基)乙基)氮烷二基)二丙酸酯； (109) ((2-(4-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-1,2,3-三唑-1-基)乙基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (110)二(十五烷-7-基)6,6'-((2-(4-(4-(二甲基胺基)丁基)-1 H-1,2,3-三唑-1-基)乙基)氮烷二基)二己酸酯； (111)二(十五烷-7-基)6,6'-((2-(4-(4-羥基丁基)-1 H-1,2,3-三唑-1-基)乙基)氮烷二基)二己酸酯； (112)十七烷-9-基8-(((1-(2-羥基乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)(8-側氧基-8-(十一烷氧基)辛基)胺基)辛酸酯； (113)十七烷-9-基8-(((1-(4-羥基丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)(6-側氧基-6-(十一烷氧基)己基)胺基)辛酸酯； (114)十七烷-9-基8-(((1-(4-羥基丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)(8-側氧基-8-(十一烷氧基)辛基)胺基)辛酸酯； (115)十七烷-9-基8-((2-(1-(2-羥基乙基)-1 H-吡唑-4-基)乙基)(8-側氧基-8-(十一烷氧基)辛基)胺基)辛酸酯； (116)十七烷-9-基8-((2-(1-(4-羥基丁基)-1 H-吡唑-4-基)乙基)(8-側氧基-8-(十一烷氧基)辛基)胺基)辛酸酯； (117)雙(3-(辛氧基)-2-((辛氧基)甲基)丙基)3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯；及 (118)((((((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙烷-3,1-二基))雙(氧基))雙(亞甲基))雙(丙烷-2,1,3-三基)四辛酸酯。
本發明之類別亦包括先前例示之可離子化脂質化合物之鹽。舉例而言，本發明之類別可包括上述可離子化脂質化合物之醫藥上可接受之鹽。換言之，根據本發明之化合物的鹽可意謂化合物之有機酸或無機酸之所有額外鹽中之任一者，其中由於此等鹽引起之副作用不會使母體化合物在相對無毒且對患者無害之濃度下的有益功效劣化，並具有有效之效果。
在本發明之一個實施態樣中，根據本發明之化合物可具有不對稱中心、掌性軸及掌性平面且可以消旋物、消旋混合物及個別非對映鏡像異構體形式存在，其中根據本發明之化合物包括所有可能的異構體，包括光學異構體及其混合物。
在本發明之另一實施態樣中，根據本發明之化合物可藉由根據反應式1至20中任一項之方法來製備；然而，其不限於藉由此類方法製備。
反應式1至20顯示根據製備步驟的根據本發明之代表性化合物的製備方法，且根據本發明之各種化合物可藉由改變在以下製備步驟中使用之試劑及溶劑或藉由改變反應順序來製備。
在以下製備實施例中所說明的反應式1至20中，R意謂直鏈烷基、支鏈烷基、直鏈烯基或氧基羰基烷基，且Z意謂烷基、環烷基或雜環烷基。 [反應式1]
對化合物 A於二氯甲烷中之經攪拌溶液添加三乙胺、4-二甲基胺基吡啶，接著在0 °C下逐滴添加化合物 B，並使反應混合物在室溫下攪拌，提供化合物 C。對化合物 D於乙腈中之經攪拌溶液，添加化合物 C及催化量的氫醌，並在80 oC下攪拌，提供可離子化脂質化合物。 [反應式2]
在室溫下對化合物 D於 tert-丁醇中之經攪拌溶液添加化合物 E。使反應混合物在70 oC下攪拌，提供可離子化脂質化合物。 [反應式3]
對二醇於二氯甲烷中之經攪拌溶液添加三乙胺、4-二甲基胺基吡啶，接著在0 °C下逐滴添加化合物 B，並使反應混合物在室溫下攪拌，提供化合物 F。在室溫下，對化合物 F於二氯甲烷中之經攪拌溶液添加吡啶鎓重鉻酸鹽，並使反應混合物在相同溫度下攪拌，提供化合物 G。在0 oC下，對化合物 H於四氫呋喃中之經攪拌溶液添加氫化鋰鋁。使反應混合物在60 oC下攪拌，提供化合物 I。在室溫下，對化合物 I於四氫呋喃中之經攪拌溶液添加化合物 G及乙酸。使反應混合物在相同溫度下攪拌。添加NaBH(OAc) 3且在室溫下攪拌，提供可離子化脂質化合物。 [反應式4]
在室溫下，對化合物 D於 N,N-二甲基甲醯胺中之經攪拌溶液添加K 2CO 3及化合物 J。使反應混合物在相同溫度下攪拌，提供化合物 K。在0 oC下，對化合物 K於二氯甲烷中之經攪拌溶液添加於1,4-二㗁烷中之HCl。使反應混合物在相同溫度下攪拌，提供化合物 L。在室溫下，對化合物 L於溶劑四氫呋喃與甲醇之混合物中之經攪拌溶液添加化合物 G及乙酸。使反應混合物在相同溫度下攪拌。添加NaBH(OAc) 3且在室溫下攪拌，提供可離子化脂質化合物。 [反應式5]
對化合物 M於甲醇中之經攪拌溶液，添加化合物 G及乙酸且在室溫下攪拌。添加NaBH(OAc) 3且在室溫下攪拌，提供化合物 N。在0 oC下，對化合物 N於二氯甲烷中之經攪拌溶液添加於1,4-二㗁烷中之HCl。隨後使反應混合物在相同溫度下攪拌，提供可離子化脂質化合物。 [反應式6]
在室溫下，對化合物 M於 N,N-二甲基甲醯胺中之經攪拌溶液中添加K 2CO 3及化合物 J。使反應混合物在相同溫度下攪拌，提供化合物 O。在0 oC下，對化合物 O於二氯甲烷中之經攪拌溶液添加於1,4-二㗁烷中之HCl。使反應混合物在相同溫度下攪拌，提供化合物 P。在室溫下，對化合物 P於溶劑四氫呋喃與甲醇之混合物中之經攪拌溶液，添加化合物 G及乙酸(3滴)。使反應混合物在相同溫度下攪拌。添加NaBH(OAc) 3且在室溫下攪拌，提供可離子化脂質化合物。 [反應式7]
在室溫下，對化合物 Q於 N,N-二甲基甲醯胺中之經攪拌溶液，添加K 2CO 3及化合物 R。使反應混合物攪拌，提供化合物S。對化合物 S於乙醇中之經攪拌溶液，添加阮尼Ni且在氫氣球壓力下攪拌，提供化合物 T。在室溫下，對化合物 T於溶劑四氫呋喃與甲醇之混合物中之經攪拌溶液，添加化合物 G及乙酸。使反應混合物在相同溫度下攪拌。添加NaBH(OAc) 3且在室溫下攪拌，提供化合物 U。在室溫下，對化合物 U於二氯甲烷中之經攪拌溶液，添加於1,4-二㗁烷中之HCl。使反應混合物攪拌，提供可離子化脂質化合物。 [反應式8]
將化合物 M及化合物 E於乙醇中之混合物在150 oC 下藉由微波照射，提供化合物 V。在0 oC下，對化合物 V於甲醇中之經攪拌溶液，添加於1,4-二㗁烷中之HCl。使反應混合物攪拌，提供可離子化脂質化合物。 [反應式9]
在室溫下，對可離子化脂質化合物添加鹵化試劑，諸如亞硫醯氯，並使反應混合物在60 °C下攪拌，提供目標可離子化脂質化合物。 [反應式10]
在室溫下，對可離子化脂質化合物添加氰化鈉，並使反應混合物在80 °C下攪拌，提供目標可離子化脂質化合物。 [反應式11]
在室溫下，對化合物 W於乙腈中之經攪拌溶液添加化合物 C、氫醌及三乙胺，並使反應混合物在80 oC下攪拌，提供可離子化脂質化合物。 [反應式12]
在室溫下，對化合物 X於四氫呋喃中之經攪拌溶液添加化合物 G及乙酸。使反應混合物在室溫下攪拌。在室溫下添加NaBH(OAc) 3(5.0 eq.)並使反應混合物在室溫下攪拌，提供可離子化脂質化合物。 [反應式13]
在室溫下，對化合物 Y於四氫呋喃中之經攪拌溶液添加化合物 G及三乙胺，並使反應混合物在相同溫度下攪拌1 h。添加NaBH(OAc) 3且在室溫下攪拌，提供可離子化脂質化合物。 [反應式14]
在室溫下，對化合物 Z於四氫呋喃中之經攪拌溶液添加化合物 G及三乙胺，並使反應混合物在相同溫度下攪拌。添加NaBH(OAc) 3且在室溫下攪拌，提供可離子化脂質化合物。 [反應式15]
在室溫下，對化合物 AA於四氫呋喃中之經攪拌溶液添加化合物 G，並使反應混合物在相同溫度下攪拌。在室溫下添加NaBH(OAc) 3並使反應混合物在相同溫度下攪拌，提供可離子化脂質化合物。 [反應式16]
在室溫下，對化合物 BB於四氫呋喃中之經攪拌溶液添加三乙胺及化合物 G，並使反應混合物在相同溫度下攪拌。添加NaBH(OAc) 3並使反應混合物在室溫下攪拌，提供可離子化脂質化合物。 [反應式17]
在室溫下，對化合物 CC於乙腈中之經攪拌溶液添加化合物 C及氫醌，並使反應混合物在80 oC下攪拌，提供可離子化脂質化合物。 [反應式18]
在室溫下，對化合物 DD於 N, N-二甲基甲醯胺中之經攪拌溶液添加化合物 R及碳酸鉀，並使反應混合物在相同溫度下攪拌，提供可離子化脂質化合物。在室溫下，對化合物 EE於甲醇中之經攪拌溶液添加阮尼鎳及氨溶液，並使反應混合物在相同溫度下在氫氣球壓力下攪拌，提供化合物 FF。在室溫下，對化合物 FF於四氫呋喃中之經攪拌溶液添加化合物 G、三乙胺，並使反應混合物在相同溫度下攪拌1 h。添加NaBH(OAc) 3並使反應混合物在室溫下攪拌，提供化合物 GG。在0 °C下，對化合物 GG於二氯甲烷中之經攪拌溶液添加於1,4-二㗁烷中之HCl，並使反應混合物在室溫下攪拌，提供可離子化脂質化合物。 [反應式19]
在0 °C下，對化合物 HH於二氯甲烷中之經攪拌溶液添加三乙胺，並使反應混合物在相同溫度下攪拌。在0 °C下逐滴添加甲磺醯氯並使反應混合物在室溫下攪拌，提供化合物 II。在0 °C下，對化合物 II於四氫呋喃中之經攪拌溶液添加二甲胺，並使反應混合物在室溫下攪拌，提供化合物 JJ。在室溫下，對化合物 JJ於乙腈中之經攪拌溶液添加碘化銅(I)、三乙胺，隨後添加化合物 KK，並使反應混合物在相同溫度下攪拌，提供化合物 LL。在室溫下，對化合物 LL於甲醇中之經攪拌溶液添加水合肼，並使反應混合物在相同溫度下攪拌，得到化合物 MM。對化合物 MM於乙腈中之經攪拌溶液添加化合物 C，在室溫下添加氫醌，並使反應混合物在80 °C下攪拌，提供可離子化脂質化合物。 [反應式20]
在0 °C下，對化合物 HH於二氯甲烷中之經攪拌溶液添加三乙胺及 tert-丁基二甲基矽基氯化物，並使反應混合物在室溫下攪拌，提供化合物 NN。在室溫下，對 NN於乙腈中之經攪拌溶液添加化合物 KK、碘化銅(I)及三乙胺，並使反應混合物在50 °C下攪拌，提供化合物 OO。在室溫下，對化合物 OO於甲醇中之經攪拌溶液添加水合肼，並使反應混合物在相同溫度下攪拌，得到化合物 PP。在室溫下，對化合物 PP於四氫呋喃中之經攪拌溶液添加 G(及三乙胺，並使反應混合物在相同溫度下攪拌。在室溫下添加NaBH(OAc) 3(5.0 eq.)並使反應混合物在相同溫度下攪拌，提供化合物 QQ。在0 oC下，對化合物 QQ於二氯甲烷中之經攪拌溶液添加於1,4-二㗁烷中之HCl，並使反應混合物在室溫下攪拌，提供可離子化脂質化合物。
為了純化根據反應式1至20所形成的化合物，使用本申請案之技術領域中用於純化化合物之一個或更多方法的組合是有可能的，例如過濾(例如，矽藻土過濾)、萃取(例如，使用乙酸乙酯或二氯甲烷萃取)及層析法(例如，製備型液相層析法(prep-HPLC)、使用NH-矽膠的管柱層析法(100或200篩目)。此外，根據反應式1至20製備之根據本發明之化合物可使用本申請案之技術領域中用於分離及純化化合物的一個或更多方法，例如再結晶及層析法分離及純化。可藉由TLC或LC-MS監測反應進度程度。 脂質奈米粒子
在本發明之一個態樣中，本發明可為一種脂質奈米粒子，其含有化合物或其鹽、磷脂、膽固醇及PEG脂質。
在本發明之另一態樣中，磷脂為含有磷酸鹽基團及一或多個脂肪酸鏈之脂質，其中磷脂可含有一或多個多重鍵且可與膜(例如，細胞膜)之一或多個帶負電磷脂相互作用。
在本發明之一個實施態樣中，磷脂可無限制地使用，只要其為能夠促進脂質奈米粒子融合之磷脂即可。作為磷脂，有可能使用選自由以下組成之群的一或多種磷脂：二油醯基磷脂醯乙醇胺(DOPE)、二硬脂醯基磷脂醯膽鹼(DSPC)、棕櫚醯基磷脂醯膽鹼(POPC)、1-棕櫚醯基-2-油醯基-sn-甘油基-3-磷酸膽鹼、蛋磷脂醯膽鹼(EPC)、二油醯基磷脂醯膽鹼(DOPC)、二棕櫚醯基磷脂醯膽鹼(DPPC)、二油醯基磷脂醯甘油(DOPG)、二棕櫚醯基磷脂醯甘油(DPPG)、二硬脂醯基磷脂醯乙醇胺(DSPE)、磷脂醯乙醇胺(PE)、二棕櫚醯基磷脂醯乙醇胺(DPPE)、1-棕櫚醯基-2-油醯基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺(POPE)、1,2-二油醯基-sn-甘油基-3-[磷酸-L-絲胺酸](DOPS)、1,2-雙十八醯基-sn-甘油基-3-磷酸絲胺酸(DSPS；18:0 PS)、1,2-二-(9Z-十八醯基)-sn-甘油基-3-磷酸-L-絲胺酸(DOPS；18:1 PS)及神經鞘磷脂，且期望地，其可為選自DSPC、DOPC、DSPE、DOPE或神經鞘磷脂中之一或多者；然而，磷脂不限於此。
在本發明之另一實施態樣中，PEG脂質包括直接附接至PEG或經由連接子部分連接至PEG的脂質。連接子部分可為選自由例如碳酸酯(-OC(O)O-)、琥珀醯基、磷酸酯(-O-(O)POH-O-)、磺酸酯、醯胺(-C(O)NH-)、胺基(-NR-)、羰基(-C(O)-)、胺甲酸酯(-NHC(O)O-)、脲(-NHC(O)NH-)、二硫化物(-SS-)、醚(-O-)、琥珀醯基(-(O)CCH 2CH 2C(O)-)及琥珀醯胺基(-NHC(O)CH 2CH 2C(O)-)；然而，連接子部分不限於此。
此外，磷脂及/或膽固醇可用作PEG脂質中所包括之脂質物質；然而，可結合至PEG之任何脂質均可不受限制地使用。具體而言，PEG脂質中所包括之脂質可為腦醯胺、二肉豆蔻醯基甘油(DMG)、琥珀醯基-二醯基甘油(s-DAG)、二硬脂醯基磷脂醯膽鹼(DSPC)、二硬脂醯基磷脂醯乙醇胺(DSPE)或膽固醇；然而，脂質不限於此。
在本發明之又另一實施態樣中，在脂質奈米粒子中，磷脂、膽固醇及PEG脂質組分與上述化合物或其鹽之組分組合的莫耳比率、重量比率或體積比率可為1:10至10:1；然而，其莫耳比率、重量比率或體積比率不限於此。
在本發明之又另一實施態樣中，脂質奈米粒子可含有20莫耳%至80莫耳%之上述化合物或其鹽、0莫耳%至20莫耳%之磷脂、20莫耳%至65莫耳%之膽固醇及0莫耳%至5莫耳%之PEG脂質。莫耳%意謂特定組分之莫耳數比總組分之莫耳數之總和的百分比。 組成物
根據另一態樣，本發明提供(i)一種包含離子性藥物及可離子化脂質化合物或其鹽的組成物或(ii)一種包含離子性藥物及脂質奈米粒子的組成物。
在一個實施態樣中，離子性藥物可為選自由以下組成之群的任一或多者：核酸或基於核酸之藥物、肽、蛋白質藥物、蛋白質-核酸結構主體及離子性生物聚合物-藥物綴合物。
在另一實施態樣中，核酸可為選自由以下組成之群的任一或多者：反義寡核苷酸(ASO)、短干擾RNA (siRNA)、微RNA (miRNA)、信使RNA (mRNA)、自身擴增RNA (SAM)、環狀RNA、crRNA、tracrRNA、單引導RNA (sgRNA)、轉移RNA (tRNA)、不對稱干擾RNA (aiRNA)、antagomir、核糖核酸酵素、核酸內切酶基體RNA、短髮夾RNA (shRNA)、質體DNA (pDNA)、雙股DNA (dsDNA)、部分雙股DNA、三股DNA、部分三股DNA、單股DNA (ssDNA)、單股RNA (ssRNA)、雙股RNA (dsRNA)、鎖核酸(LNA)、肽核酸(PNA)、miRNA類似物及抗miRNA；然而，核酸不限於此。
在又另一實施態樣中，離子性藥物可為用於治療疾病之治療劑或用於預防疾病之預防劑。
在本發明之又另一態樣中，組成物可用作用於治療疾病之醫藥組成物。
在一個實施態樣中，(i)包含離子性藥物及化合物或其鹽的組成物或(ii)包含離子性藥物及脂質奈米粒子的組成物，在與包含離子性藥物及諸如MC3之相關技術領域中已知的可離子化脂質的組成物比較的情況下，可展現在生物上等效或增加之藥物遞送作用。
在另一實施態樣中，(i)包含離子性藥物及化合物或其鹽的組成物或(ii)包含離子性藥物及脂質奈米粒子的組成物，在與包含相同離子性藥物及諸如MC3之相關技術領域中已知的可離子化脂質的組成物比較的情況下，可具有在生物上等效或增加之治療疾病或預防疾病之作用或具有經改良之免疫原性。
在本發明之一個態樣中，組成物可含有一無毒之醫藥上可接受之習知添加劑。可用於根據本發明之組成物中之添加劑可包括甜味劑、黏合劑、溶解劑、溶解助劑、濕潤劑、乳化劑、等張劑、吸附劑、崩解劑、抗氧化劑、防腐劑、潤滑劑、填料、調味劑及類似者。其實例可包括乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露糖醇、山梨糖醇、纖維素、甘胺酸、矽氧、滑石、硬脂酸、甘油硬脂酸酯(sterin)、硬脂酸鎂、矽酸鎂鋁、澱粉、明膠、黃蓍膠、海藻酸、海藻酸鈉、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、瓊脂、水、乙醇、聚乙二醇、聚乙烯吡咯啶酮、氯化鈉、氯化鈣、柳橙香精、草莓香精、香草香料等。
根據本發明之組成物可製備成用於經口投與之各種形式，諸如錠劑、丸劑、散劑、膠囊、糖漿及乳劑，或用於非經腸投與之形式，諸如肌內、靜脈內或皮下投與。
在根據本發明之組成物係調配成用於經口投與之形式的情況下，纖維素、硫酸鈣、玉米澱粉、乳糖、蔗糖、右旋糖、磷酸鈣、硬脂酸、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、明膠、滑石、表面活性劑、懸浮劑、乳化劑、稀釋劑及類似者可用作添加劑。
此外，在根據本發明之組成物係調配成用於注射投與之形式的情況下，水、鹽水、葡萄糖、糖類似物水溶液、醇、二醇、醚、油、脂肪酸、脂肪酸酯、甘油酯、表面活性劑、懸浮劑、乳化劑及類似者可用作添加劑。 用於本發明之模式
此後，將參照實施例進行詳細說明，以輔助對本發明的理解。然而，根據本發明之實施例可以各種其他形式修改，且不應將本發明之範疇解讀為限於以下實施例。 製備實施例.可離子化脂質化合物之製備
以下製備實施例僅用於例示以呈現一種使得有可能製備根據本發明之新穎可離子化脂質化合物且不意欲限制如所附申請專利範圍中所定義之本發明之範疇的方法。
本說明書中使用之縮寫的定義如下。 - AcOH：乙酸 - ACN：乙腈 - Boc： tert-丁氧羰基 - DCM：二氯甲烷 - DMAP：4-二甲基胺基吡啶 - DMF： N,N-二甲基甲醯胺 - Et 3N：三乙胺 - EtOH：乙醇 - LAH：氫化鋰鋁 - MeOH：甲醇 - OAc：乙酸鹽 - PDC：吡啶鎓重鉻酸鹽 - rt：室溫 - TBSO：三級丁基二甲基矽基氧基 - THF：四氫呋喃
在以下製備實施例中所說明的反應配方中，R意謂直鏈烷基、支鏈烷基、直鏈烯基或氧基羰基烷基，且Z意謂烷基、環烷基或雜環烷基。 製備實施例1.可離子化脂質化合物 ( 脂質 1-10 、 21 、 27-30 、 33-44 、 52-55 、 59-63 、 66-73 、 76-80 、 83-88 、 100 、 102 及 117-118) [步驟1]化合物 C之合成
對化合物 A(1.2 eq.)於二氯甲烷中之經攪拌溶液添加三乙胺(1.0 eq.)、4-二甲基胺基吡啶(0.1 eq.)，接著在0 °C下逐滴添加化合物 B(1.0 eq.)，並使反應混合物在室溫下攪拌2 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用水稀釋並用二氯甲烷萃取(兩次)。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，得到粗製化合物。藉由矽膠(100-200篩目)管柱層析法純化粗製化合物，提供化合物 C。 [步驟2]可離子化脂質化合物之合成
對化合物 D(1.0 eq.)於乙腈中之經攪拌溶液，添加化合物 C(2.5 eq.)及催化量的氫醌(0.1 eq.)，並在80 oC下攪拌48 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物在減壓下濃縮，得到粗製化合物。藉由prep-HPLC純化粗製化合物，提供 目標脂質 (1-10 、 21 、 27-30 、 33-44 、 52-55 、 59-63 、 66-73 、 76-80 、 83-88 、 100 、 102 及 117-118)。 製備實施例2.可離子化脂質化合物 ( 脂質 11 及 45-48)
在室溫下，對化合物 D(1.0 eq.)於 tert-丁醇中之經攪拌溶液添加化合物 E(2.0 eq.)。使反應混合物在70 oC下攪拌8 h。藉由LC-MS監測反應進度。反應完成後，將反應混合物在減壓下濃縮，得到粗製化合物。藉由prep-HPLC純化粗製化合物，提供 目標脂質 (11 及 45-48)。 製備實施例3.可離子化脂質化合物 ( 脂質 12-14 及 51) [步驟1]化合物 F之合成
對二醇(1.2 eq.)於二氯甲烷中之經攪拌溶液添加三乙胺(1.0 eq.)、4-二甲基胺基吡啶(0.1 eq.)，接著在0 °C下逐滴添加化合物 B(1.0 eq.)，並使反應混合物在室溫下攪拌2 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用水稀釋並用二氯甲烷萃取(兩次)。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，得到粗製化合物。藉由矽膠(100-200篩目)管柱層析法純化粗製化合物，提供化合物 F。 [步驟2]化合物 G之合成
在室溫下，對化合物 F(1.0 eq.)於二氯甲烷中之經攪拌溶液添加吡啶鎓重鉻酸鹽(2.0 eq.)，並使反應混合物在相同溫度下攪拌10 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物經由矽藻土墊片過濾並用二氯甲烷洗滌。在減壓下濃縮濾液，得到粗製化合物。以配於石油醚中之7%乙酸乙酯沖提，藉由矽膠(100-200篩目)管柱層析法純化粗製化合物，提供化合物 G。 [步驟3]化合物 I之合成
在0 oC下，對化合物 H(1.0 eq.)於四氫呋喃中之經攪拌溶液添加氫化鋰鋁(2 M，於四氫呋喃中，2.0 eq.)。使反應混合物在60 oC下攪拌4 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用NaHCO 3溶液淬熄且經由矽藻土墊片過濾。將濾液用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，提供化合物 I。 [步驟4]可離子化脂質化合物之合成
在室溫下，對化合物 I(1.0 eq.)於四氫呋喃中之經攪拌溶液添加化合物 G(6.0 eq.)及乙酸(3滴)。使反應混合物在相同溫度下攪拌2 h。添加NaBH(OAc) 3(12 eq.)並在室溫下攪拌12 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用水淬熄並用乙酸乙酯萃取(兩次)。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，得到粗製化合物。以於石油醚中之30%乙酸乙酯沖提，藉由矽膠(100-200篩目)管柱層析法純化粗製化合物，提供 目標脂質 (12-14 及 51)。 製備實施例4.可離子化脂質化合物 ( 脂質 15 及 104) [步驟1]化合物 K之合成
在室溫下，對化合物 D(1.0 eq.)於 N,N-二甲基甲醯胺中之經攪拌溶液添加K 2CO 3(3.0 eq.)及化合物 J(2.3 eq.)。使反應混合物在相同溫度下攪拌12 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用水淬熄並用乙酸乙酯萃取(兩次)。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，得到粗製化合物。將粗製化合物依原樣用於下一步。 [步驟2]化合物 L之合成
在0 oC下，對化合物 K(1.0 eq.)於二氯甲烷中之經攪拌溶液添加HCl (4 M，於1,4-二㗁烷中，3.0 eq.)。使反應混合物在相同溫度下攪拌6 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物在減壓下濃縮，得到粗製化合物。使粗製化合物通過amberlyst離子交換樹脂，提供化合物 L。 [步驟3]可離子化脂質化合物之合成
在室溫下，對化合物 L(1.0 eq.)於溶劑四氫呋喃與甲醇之混合物中之經攪拌溶液添加化合物 G(6.0 eq.)及乙酸(3滴)。使反應混合物在相同溫度下攪拌0.5 h。添加NaBH(OAc) 3(12 eq.)並在室溫下攪拌12 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用水淬熄並用於二氯甲烷之10%甲醇萃取(兩次)。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，得到粗製化合物。藉由prep-HPLC純化粗製化合物，提供 目標脂質 (15 及 104)。 製備實施例5.可離子化脂質化合物 ( 脂質 16-17 、 22-26 、 31-32 、 64-65 、 81-82 、 101 、 103 及 112-116) [步驟1]化合物 N之合成
對化合物 M(1.0 eq.)於甲醇中之經攪拌溶液，添加化合物 G(3.0 eq.)及乙酸(3滴)且在室溫下攪拌2 h。添加NaBH(OAc) 3(6.0 eq.)並在室溫下攪拌16 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用水稀釋並用二氯甲烷萃取。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，得到粗製化合物。以20%甲醇/二氯甲烷沖提，藉由矽膠(100-200篩目)管柱層析法純化粗製化合物，提供化合物 N。 [步驟2]可離子化脂質化合物之合成
在0 oC下，對化合物 N(1.0 eq.)於二氯甲烷中之經攪拌溶液添加HCl (4 M，於1,4-二㗁烷中，2.0 eq.)。隨後使反應混合物在相同溫度下攪拌2 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用NaHCO 3溶液淬熄並用於二氯甲烷之10%甲醇萃取。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，得到粗製化合物。藉由prep-HPLC純化粗製化合物，提供 目標脂質 (16-17 、 22-26 、 31-32 、 64-65 、 81-82 、 101 、 103 及 112-116)。 製備實施例6.可離子化脂質化合物 ( 脂質 18-19) [步驟1]化合物 O之合成
在室溫下，對化合物 M(1.0 eq.)於 N,N-二甲基甲醯胺中之經攪拌溶液添加K 2CO 3(3.0 eq.)及化合物 J(2.5 eq.)。使反應混合物在相同溫度下攪拌72 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用水淬熄並用乙酸乙酯萃取(兩次)。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，提供化合物 O。 [步驟2]化合物 P之合成
在0 oC下，對化合物 O(1.0 eq.)於二氯甲烷中之經攪拌溶液添加HCl (4 M，於1,4-二㗁烷中，5.0 eq.)。使反應混合物在相同溫度下攪拌12 h。藉由LC-MS監測反應進度。反應完成後，將反應混合物在減壓下濃縮，得到粗製化合物。使粗製化合物通過amberlyst離子交換樹脂，提供化合物 P。 [步驟3]可離子化脂質化合物之合成
在室溫下，對化合物 P(1.0 eq.)於溶劑四氫呋喃與甲醇之混合物中之經攪拌溶液，添加化合物 G(5.0 eq.)及乙酸(3滴)。使反應混合物在相同溫度下攪拌3 h。添加NaBH(OAc) 3(12 eq.)並在室溫下攪拌48 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用水淬熄並用二氯甲烷萃取(兩次)。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，得到粗製化合物。以於石油醚中之7%乙酸乙酯沖提，藉由NH-矽膠(100-200篩目)管柱層析法純化粗製化合物，提供 目標脂質 (18-19)。 製備實施例7.可離子化脂質化合物 ( 脂質 20 及 74-75) [步驟1] 化合物 S之合成
在室溫下，對化合物 Q(1.0 eq.)於 N,N-二甲基甲醯胺中之經攪拌溶液，添加K 2CO 3(3.0 eq.)及化合物 R(2.5 eq.) 。使反應混合物攪拌16 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用水淬熄並用乙酸乙酯萃取(兩次)。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，得到粗製化合物。以15%乙酸乙酯/石油醚沖提，藉由矽膠(100-200篩目)管柱層析法純化粗製化合物，提供化合物 S。 [步驟2] 化合物 T之合成
對化合物 S(1.0 eq.)於乙醇中之經攪拌溶液，添加阮尼Ni (2.0 eq.)且在氫氣球壓力(14 psi)下攪拌16 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物經由矽藻土墊片過濾並用甲醇洗滌。在減壓下濃縮濾液，提供粗製化合物。以15%乙酸乙酯/石油醚沖提，藉由NH-矽膠(100-200篩目)管柱層析法純化粗製化合物，提供化合物 T。 [步驟3] 化合物 U之合成
在室溫下，對化合物 T(1.0 eq.)於溶劑四氫呋喃與甲醇之混合物中之經攪拌溶液，添加化合物 G(6.0 eq.)及乙酸(3滴)。使反應混合物在相同溫度下攪拌3 h。添加NaBH(OAc) 3(12 eq.)並在室溫下攪拌16 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用水淬熄並用二氯甲烷萃取(兩次)。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，得到粗製化合物。以於石油醚中之7%乙酸乙酯沖提，藉由NH-矽膠(100-200篩目)管柱層析法純化粗製化合物，提供化合物 U。 [步驟4]可離子化脂質化合物之合成
在室溫下，對化合物 U(1.0 eq.)於二氯甲烷中之經攪拌溶液添加HCl (4 M，於1,4-二㗁烷中，4.0 eq.)。使反應混合物攪拌2 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物在減壓下濃縮，得到粗製化合物。以5%乙酸乙酯/石油醚沖提，藉由NH-矽膠(100-200篩目)管柱層析法純化粗製化合物，提供 目標脂質 (20 及 74-75)。 製備實施例8.可離子化脂質化合物(脂質49-50) [步驟1]化合物 V之合成
將化合物 M(1.0 eq.)及化合物 E(3.0 eq.)於乙醇中之混合物在150 oC下藉由微波照射2 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物在減壓下濃縮，得到粗製化合物。以20%乙酸乙酯/石油醚沖提，藉由矽膠(100-200篩目)管柱層析法純化粗製化合物，提供化合物 V。 [步驟2]可離子化脂質化合物之合成
在0 oC下，對化合物 V(1.0 eq.)於甲醇中之經攪拌溶液添加HCl (4 M，於1,4-二㗁烷中，4.0 eq.)。使反應混合物攪拌16 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物在減壓下濃縮，得到粗製化合物。藉由prep-HPLC純化粗製化合物，提供 目標脂質 (49-50)。 製備實施例9.可離子化脂質化合物 ( 脂質 56-57) 可離子化脂質化合物(脂質56)之合成
在0 °C下，對 目標脂質 16(1.0 eq.)於二氯甲烷中之經攪拌溶液添加三乙胺(3.0 eq.)及甲磺醯氯(1.5 eq.)，並使反應混合物在相同溫度下攪拌1 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用NaHCO 3溶液稀釋並用二氯甲烷萃取(兩次)。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，得到粗製化合物。在室溫下，對相應粗製化合物於四氫呋喃中之經攪拌溶液添加四丁基氟化銨(1.5 eq.)，並於70 °C下攪拌16 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用NaHCO 3溶液稀釋並用二氯甲烷萃取(兩次)。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，得到粗製化合物。藉由prep-HPLC純化粗製化合物，提供 目標脂質 56。 可離子化脂質化合物(脂質57)之合成
在室溫下，對 目標脂質 16(1.0 eq.)於甲苯中之經攪拌溶液添加亞硫醯氯(5.0 eq.)，並使反應混合物在60 °C下攪拌5 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用NaHCO 3溶液稀釋並用二氯甲烷萃取(兩次)。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，得到粗製化合物。以於石油醚中之7%乙酸乙酯沖提，藉由NH-矽膠(100-200篩目)管柱層析法純化粗製化合物，提供 目標脂質 57。 製備實施例10.可離子化脂質化合物(脂質58)
在室溫下，對 目標脂質 16(1.0 eq.)於 N, N-二甲基甲醯胺中之經攪拌溶液添加氰化鈉(5.0 eq.)，並使反應混合物在80 °C下攪拌12 h。藉由LCMS監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用冰冷的水淬熄並用乙酸乙酯萃取(兩次)。將合併的有機層用冰冷的水洗滌且用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，得到粗製化合物。以於石油醚中之5%乙酸乙酯沖提，藉由NH-矽膠(100-200篩目)管柱層析法純化粗製化合物，提供 目標脂質 58。 製備實施例11.可離子化脂質化合物(脂質89)
在室溫下，對化合物 W(1.0 eq.)於乙腈中之經攪拌溶液，添加化合物 C(2.5 eq.)、氫醌(0.02 eq.)及三乙胺(3.0 eq.)，並使反應混合物在80 oC下攪拌72 h。藉由TLC & LC-MS監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用水淬熄並用EtOAc萃取(兩次)。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，提供粗製化合物。藉由prep-HPLC純化粗製化合物，提供 目標脂質 89。 製備實施例12.可離子化脂質化合物(脂質90及94)
在室溫下，對化合物 X(1.0 eq.)於四氫呋喃中之經攪拌溶液添加化合物 G(2.5 eq.)及乙酸(0.1 eq.)。使反應混合物在室溫下攪拌1 h。在室溫下，添加NaBH(OAc) 3(5.0 eq.)並使反應混合物在室溫下攪拌16 h。藉由TLC及LCMS監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用水稀釋並用二氯甲烷萃取(兩次)。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，得到粗製化合物。以5%乙酸乙酯/石油醚沖提，藉由NH-矽膠(100-200篩目)管柱層析法純化粗製化合物，提供 目標脂質 (90 及 94)。 製備實施例13.可離子化脂質化合物(脂質91-92及95-96)
在室溫下，對化合物 Y(1.0 eq.)於四氫呋喃中之經攪拌溶液添加化合物 G(2.5 eq.)及三乙胺(2.0 eq.)，並使反應混合物在相同溫度下攪拌1 h。添加NaBH(OAc) 3(6.0 eq.)並在室溫下攪拌12 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用水稀釋並用乙酸乙酯萃取(兩次)。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，得到粗製化合物。以3%乙酸乙酯/石油醚沖提，藉由NH-矽膠(100-200篩目)管柱層析法純化粗製化合物，提供 目標脂質 (91-92 及 95-96)。 製備實施例14.可離子化脂質化合物 ( 脂質 93 及 97)
在室溫下，對化合物 Z(1.0 eq.)於四氫呋喃中之經攪拌溶液添加化合物 G(2.5 eq.)及三乙胺(2.0 eq.)，並使反應混合物在相同溫度下攪拌1 h。添加NaBH(OAc) 3(6.0 eq.)並在室溫下攪拌12 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用水稀釋並用乙酸乙酯萃取(兩次)。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，得到粗製化合物。藉由prep-HPLC純化粗製化合物，提供 目標脂質 (93 及 97)。 製備實施例15.可離子化脂質化合物(脂質98)
在室溫下，對化合物 AA(1.0 eq.)於四氫呋喃中之經攪拌溶液添加化合物 G(2.5 eq.)，並使反應混合物在相同溫度下攪拌4 h。在室溫下，添加NaBH(OAc) 3(3.0 eq.)並使反應混合物在相同溫度下攪拌16 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用水稀釋並用二氯甲烷萃取(兩次)。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，得到粗製化合物。以於石油醚中之20%乙酸乙酯沖提，使用NH-矽膠(100-200篩目)快速管柱層析法純化粗製化合物，提供 目標脂質 98。 製備實施例16.可離子化脂質化合物(脂質99)
在室溫下，對化合物 BB(1.0 eq.)於四氫呋喃中之經攪拌溶液添加三乙胺(2.0 eq.)及化合物 G(2.2 eq.)，並使反應混合物在相同溫度下攪拌4 h。添加NaBH(OAc) 3(3.0 eq.)並使反應混合物在室溫下攪拌16 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用水稀釋並用二氯甲烷萃取(兩次)。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，得到粗製化合物。以於石油醚中之20%乙酸乙酯沖提，使用NH-矽膠(100-200篩目)快速管柱層析法純化粗製化合物，提供 目標脂質 99。 製備實施例17.可離子化脂質化合物(脂質105)
在室溫下，對化合物 CC(1.0 eq.)於乙腈中之經攪拌溶液，添加化合物 C(2.5 eq.)及氫醌(0.02 eq.)，並使反應混合物在80 oC下攪拌72 h。藉由TLC及LC-MS監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用水稀釋並用乙酸乙酯萃取(兩次)。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，提供粗製化合物。藉由prep-HPLC純化粗製化合物。用NaHCO 3溶液鹼化所收集的餾分且用二氯甲烷萃取(兩次)。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，提供 目標脂質 105。 製備實施例18.可離子化脂質化合物 ( 脂質 106 及 107) [步驟1]化合物 EE之合成
在室溫下，對化合物 DD(1.0 eq.)於 N, N-二甲基甲醯胺中之經攪拌溶液添加化合物 R(1.3 eq.)及碳酸鉀(3.0 eq.)，並使反應混合物在相同溫度下攪拌16 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用冰冷的水淬熄，用石油醚萃取(兩次)。將合併的有機層用鹽水洗滌且用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，得到粗製化合物。以於石油醚中之10%乙酸乙酯沖提，使用矽膠(100-200篩目)管柱層析法純化粗製物，提供化合物 EE。 [步驟2]化合物 FF之合成
在室溫下，對化合物 EE(1.0 eq.) 於甲醇中之經攪拌溶液添加阮尼鎳、活化催化劑，配於水中之50%漿料(2.0 eq.)及氨溶液(7.0 M，於甲醇中，10 eq.)，且使反應混合物在相同溫度下、在氫氣球壓力下(14 psi)攪拌16 h。藉由TLC及LC-MS監測反應進度。反應完成後，將反應混合物經由矽藻土墊片過濾，用甲醇洗滌。將濾液用無水Na 2SO 4乾燥且在減壓下濃縮，得到粗製物。以於二氯甲烷中之5%甲醇沖提，使用NH-矽膠(100-200篩目)管柱層析法純化粗製物，提供化合物 FF。 [步驟3]化合物 GG之合成
在室溫下，對化合物 FF(1.0 eq.)於四氫呋喃中之經攪拌溶液添加化合物 G(2.5 eq.)、三乙胺(2.0 eq.)，並使反應混合物在相同溫度下攪拌1 h。添加NaBH(OAc) 3(5.0 eq.)並使反應混合物在室溫下攪拌12 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用水稀釋並用乙酸乙酯萃取(兩次)。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，得到粗製化合物。以乙酸乙酯沖提，使用矽膠(100-200篩目)管柱層析法純化粗製物，提供化合物 GG。 [步驟4]可離子化脂質化合物之合成
在0 °C下，對化合物 GG(1.0 eq.)於二氯甲烷中之經攪拌溶液添加HCl (4 M，於1,4-二㗁烷中，4.0 eq.)，並使反應混合物於室溫下攪拌1 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用NaHCO 3溶液稀釋並用二氯甲烷萃取(兩次)。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且濃縮濾液，得到粗製化合物。以於石油醚中之80%乙酸乙酯沖提，使用NH-矽膠(100-200篩目)管柱層析法純化粗製化合物。藉由prep-HPLC進一步純化，提供 目標脂質 (106 及 107)。 製備實施例19.可離子化脂質化合物 ( 脂質 108-110) [步驟1]化合物 II之合成
在0 °C下，對化合物 HH(1.0 eq.)於二氯甲烷中之經攪拌溶液添加三乙胺(5.0 eq.)，並使反應混合物在相同溫度下攪拌10 min。在0 °C下逐滴添加甲磺醯氯(1.5 eq.)並使反應混合物在室溫下攪拌1 h。藉由TLC及LC-MS監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用NaHCO 3溶液淬熄並用二氯甲烷萃取(兩次)。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，得到粗製化合物，提供化合物 II。 [步驟2]化合物 JJ之合成
在0 °C下，對化合物 II(1.0 eq.)於四氫呋喃中之經攪拌溶液添加二甲胺(5.0 eq.)，並使反應混合物在室溫下攪拌16 h。藉由TLC及LC-MS監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用NaHCO 3溶液稀釋並用二氯甲烷萃取(兩次)。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且使濾液靜置於燒杯中，在室溫下蒸發，得到粗製化合物，提供化合物 JJ。將粗製物依原樣運用於下一步，不經任何純化。 [步驟3]化合物 LL之合成
在室溫下，對化合物 JJ(1.0 eq.)於乙腈中之經攪拌溶液添加碘化銅(I) (1.5 eq.)、三乙胺(1.5 eq.)，隨後添加化合物 KK(1.0 eq.)，並使反應混合物在相同溫度下攪拌1 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物在減壓下濃縮，得到粗製化合物。以於二氯甲烷中之10%甲醇沖提，使用矽膠(100-200篩目)快速層析法純化粗製物，提供化合物 LL。 [步驟4]化合物 MM之合成
在室溫下，對化合物 LL(1.0 eq.)於甲醇中之經攪拌溶液添加水合肼(2.0 eq.)，並使反應混合物在相同溫度下攪拌16 h。藉由LCMS監測反應進度。反應完成後，將反應混合物過濾並用乙酸乙酯過濾，且在減壓下濃縮濾液，得到粗製化合物，提供化合物 MM。 [步驟5]可離子化脂質化合物之合成
在室溫下，對化合物 MM(1.0 eq.)於乙腈中之經攪拌溶液，添加化合物 C(2.5 eq.)、氫醌(0.1 eq.)，並使反應混合物在80 °C下攪拌16 h。藉由LCMS監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用水稀釋並用二氯甲烷萃取(兩次)。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，得到粗製化合物。以於石油醚中之30%乙酸乙酯沖提，使用NH-矽膠(100-200篩目)快速管柱層析法純化粗製化合物，提供 目標脂質 (108-110)。 製備實施例20.可離子化脂質化合物(脂質111) [步驟1]化合物 NN之合成
在0 °C下，對化合物 HH(1.0 eq.)於二氯甲烷中之經攪拌溶液添加三乙胺(2.0 eq.)及 tert-丁基二甲基矽基氯化物(0.9 eq.)，並使反應混合物在室溫下攪拌3 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用水淬熄並用二氯甲烷萃取(兩次)。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在真空下濃縮濾液。以於石油醚中之1%乙酸乙酯沖提，使用矽膠(100-200篩目)管柱層析法純化粗製化合物，提供化合物 NN。 [步驟2]化合物 OO之合成
在室溫下，對 NN(1.0 eq.)於乙腈中之經攪拌溶液，添加化合物 KK(1.0 eq.)、碘化銅(I) (1.5 eq.)及三乙胺(1.5 eq.)，並使反應混合物在50 °C下攪拌16。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用水稀釋並用二氯甲烷萃取(兩次)。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，得到粗製化合物。以於石油醚中之50%乙酸乙酯沖提，使用矽膠(100-200篩目)管柱層析法純化粗製化合物，提供化合物 OO。 [步驟3]化合物 PP之合成
在室溫下，對化合物 OO(1.0 eq.)於甲醇中之經攪拌溶液添加水合肼(2.0 eq.)，並使反應混合物在相同溫度下攪拌16 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物過濾並經由矽藻土墊片過濾，且在真空下濃縮濾液，得到粗製化合物，提供化合物 PP。 [步驟4]化合物 QQ之合成
在室溫下，對化合物 PP(1.0 eq.)於四氫呋喃中之經攪拌溶液添加 G(2.5 eq.)及三乙胺(2.0 eq.)，並使反應混合物在相同溫度下攪拌1 h。在室溫下，添加NaBH(OAc) 3(5.0 eq.)並使反應混合物在相同溫度下攪拌12 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用水稀釋並用乙酸乙酯萃取(兩次)。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液，得到粗製化合物。以於石油醚中之50%乙酸乙酯沖提，使用矽膠(100-200篩目)管柱層析法純化粗製化合物，提供化合物 QQ。 [步驟5]可離子化脂質化合物之合成
在0 oC下，對化合物 QQ(1.0 eq.)於二氯甲烷中之經攪拌溶液添加HCl (4.0 M，於1,4-二㗁烷中，3.0 eq.)，並使反應混合物於室溫下攪拌2 h。藉由TLC監測反應進度。反應完成後，將反應混合物用NaHCO 3溶液稀釋並用二氯甲烷萃取(兩次)。將合併的有機層用無水Na 2SO 4乾燥、過濾且在減壓下濃縮濾液。以於二氯甲烷中之10%甲醇沖提，使用矽膠(100-200篩目)管柱層析法純化粗製化合物，提供 目標脂質 111。
在製備實施例1至20中合成或藉由類似方法合成之可離子化脂質化合物1至118 (脂質1至118)之結構係列於下表1中。 [表1]
化合物 結構
脂質1
脂質2
脂質3
脂質4
脂質5
脂質6
脂質7
脂質8
脂質9
脂質10
脂質11
脂質12
脂質13
脂質14
脂質15
脂質16
脂質17
脂質18
脂質19
脂質20
脂質21
脂質22
脂質23
脂質24
脂質25
脂質26
脂質27
脂質28
脂質29
脂質30
脂質31
脂質32
脂質33
脂質34
脂質35
脂質36
脂質37
脂質38
脂質39
脂質40
脂質41
脂質42
脂質43
脂質44
脂質45
脂質46
脂質47
脂質48
脂質49
脂質50
脂質51
脂質52
脂質53
脂質54
脂質55
脂質56
脂質57
脂質 58
脂質 59
脂質 60
脂質 61
脂質 62
脂質 63
脂質 64
脂質 65
脂質 66
脂質 67
脂質 68
脂質 69
脂質70
脂質 71
脂質 72
脂質 73
脂質74
脂質 75
脂質 76
脂質 77
脂質 78
脂質 79
脂質 80
脂質 81
脂質 82
脂質 83
脂質 84
脂質 85
脂質 86
脂質 87
脂質 88
脂質 89
脂質 90
脂質 91
脂質 92
脂質 93
脂質 94
脂質 95
脂質 96
脂質 97
脂質 98
脂質 99
脂質 100
脂質 101
脂質 102
脂質 103
脂質 104
脂質 105
脂質 106
脂質 107
脂質 108
脂質 109
脂質 110
脂質 111
脂質 112
脂質 113
脂質 114
脂質 115
脂質 116
脂質 117
脂質 118
另一方面，使用Bruker Ultrashield 400及光譜儀中之任一者使上述所合成之可離子化脂質化合物經受 1H NMR光譜之量測。化學位移係以百萬分之一(ppm，δ單位)來表示。耦合常數具有赫茲(Hz)為單位，且分裂圖案說明多樣性且使用s (單一峰)、d (雙重峰)、t (三重峰)、q (四重峰)、quint (五重峰)、m (多重峰)或br (寬峰)來指示。可離子化脂質化合物之 1H NMR (400 MHz，CDCl 3)資料係如表2中所述。 [表2]
化合物 1H NMR (400 MHz, CDCl 3)
脂質1 雙 (2- 丙基己基 )6,6'-((3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 丙醯基 )) 雙 ( 氧基 )) 二己酸酯 (1). 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 0.91 (t, J= 8.0 Hz, 12H), 1.28-1.44 (m, 24H), 1.61-1.68 (m, 10H), 2.34 (t, J= 8.0 Hz, 4H), 2.48-2.51 (m, 10H), 2.76 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 3.05-3.12 (m, 2H), 3.58 (s, 2H), 3.99 (d, J= 5.6 Hz, 4H), 4.07 (t, J= 6.4 Hz, 4H), 4.35 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 7.45 (s, 1H), 7.62 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z793.70 [M+H] +.
脂質2 雙 (2- 丙基己基 )8,8'-((3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 丙醯基 )) 雙 ( 氧基 )) 二辛酸酯 (2). 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 0.91 (t, J= 6.8 Hz, 12H), 1.29-1.39 (m, 32H), 1.59-1.64 (m, 10H), 2.28 (s, 6H), 2.32 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 2.48 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 2.74 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 2.80 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 3.56 (s, 2H), 3.99 (d, J= 6 Hz, 4H), 4.06 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 4.24 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 7.41 (s, 1H), 7.59 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z849.60 [M+H] +.
脂質3 雙 (2- 乙基戊基 )4,4'-((3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 丙醯基 )) 雙 ( 氧基 )) 二丁酸酯 (3). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.80-0.90 (m, 12H), 1.24-1.38 (m, 12H), 1.55-1.62 (m, 2H), 1.92-2.01 (m, 4H), 2.26 (s, 6H), 2.39 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 2.46 (t, J= 7.6 Hz, 4H), 2.73-2.76 (m, 6H), 3.53 (s, 2H), 3.96-4.03 (m, 4H), 4.10 (t, J= 6.4 Hz, 4H), 4.18 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 7.34 (s, 1H), 7.36 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z681.59 [M+H] +.
脂質4 雙 (2- 乙基戊基 )6,6'-((3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 丙醯基 )) 雙 ( 氧基 )) 二己酸酯 (4). 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 0.85-0.90 (m, 12H), 1.30-1.44 (m, 16H), 1.55-1.69 (m, 10H), 2.34 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 2.48-2.53 (m, 10H), 2.76 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 3.10-3.12 (m, 2H), 3.58 (s, 2H), 4.00 (d, J= 5.6 Hz, 4H), 4.07 (t, J= 6.4 Hz, 4H), 4.37 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 7.48 (s, 1H), 7.64 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z737.54 [M+H] +.
脂質5 雙 (2- 乙基戊基 )8,8'-((3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 丙醯基 )) 雙 ( 氧基 )) 二辛酸酯 (5). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.89-0.93 (m, 12H), 1.20-1.40 (m, 26H), 1.50-1.70 (m, 10H), 2.27 (s, 6H), 2.30 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 2.48 (t, J= 6.0 Hz, 4H), 2.79 (t, J= 6.0 Hz, 4H), 3.56 (s, 2H), 3.99 (d, J= 5.6 Hz, 4H), 4.06 (t, J= 6.4 Hz, 4H), 4.24 (t, J= 8.0 Hz, 2H), 7.41 (s, 1H), 7.59 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z793.64 [M+H] +.
脂質6 (((3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 丙醯基 )) 雙 ( 氧基 )) 雙 ( 亞甲基 )) 雙 ( 丙烷 -2,1,3- 三基 ) 四己酸酯 (6). 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 0.93 (t, J= 7.2 Hz, 12H), 1.26-1.40 (m, 16H), 1.61 (q, J= 7.6 Hz, 8H), 2.26 (s, 6H), 2.33 (t, J= 7.2 Hz, 8H), 2.38-2.42 (m, 2H), 2.51 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 2.72-2.80 (m, 6H), 3.57 (s, 2H), 4.15 (d, J= 5.6 Hz, 12H), 4.24 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 7.41 (s, 1H), 7.60 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z881.65 [M+H] +.
脂質7 (((3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 丙醯基 )) 雙 ( 氧基 )) 雙 ( 亞甲基 )) 雙 ( 丙烷 -2,1,3- 三基 ) 四辛酸酯 (7). 1H NMR (400 MHz, MeOD ) δ 0.89 (t, J= 6.8 Hz, 12H), 1.26-1.32 (m, 32H), 1.58-1.63 (m, 8H), 2.33 (t, J= 4.0 Hz, 8H), 2.38 (m, 8H), 2.52 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 2.75 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 2.95-2.98 (m, 2H), 3.57 (s, 2H), 4.15-4.18 (m, 12H), 4.30 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 7.43 (s, 1H), 7.61 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z993.76 [M+H] +.
脂質8 (((3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 丙醯基 )) 雙 ( 氧基 )) 雙 ( 亞甲基 )) 雙 ( 丙烷 -2,1,3- 三基 ) 肆 ( 癸酸酯 ) (8). 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 0.90 (t, J= 6.8 Hz, 12H), 1.25-1.45 (m, 48H), 1.55-1.65 (m, 8H), 2.27 (s, 6H), 2.33 (t, J= 7.2 Hz, 8H), 2.37-2.43 (m, 2H), 2.51 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 2.72-2.81 (m, 6H), 3.57 (s, 2H), 4.14-4.18 (m, 12H), 4.25 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 7.41 (s, 1H), 7.60 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z1105.86 [M+H] +.
脂質9 二 ( 二十二烷 -10- 基 )3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (9). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.90 (t, J= 6.4 Hz, 12H), 1.20-1.40 (m, 64H), 1.50-1.60 (m, 8H), 2.26 (s, 6H), 2.48 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 2.73-2.80 (m, 6H), 3.56 (s, 2H), 4.23 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 4.85-4.86 (m, 2H), 7.41 (s, 1H), 7.58 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z901.77 [M+H] +.
脂質10 二 ( 十五烷 -7- 基 )3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (10). 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 0.89 (t, J= 6.8 Hz, 12H), 1.20-1.40 (m, 40H), 1.50-1.60 (m, 8H), 2.26 (s, 6H), 2.46-2.50 (m, 4H), 2.73-2.81 (m, 6H), 3.56 (s, 2H), 4.23 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 4.85 (m, 2H), 7.41 (s, 1H), 7.59 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z733.67 [M+H] +.
脂質11 1,1'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 十四烷 -2- 醇 ) (11). 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 0.89 (t, J= 7.2 Hz, 6H), 1.20-1.50 (m, 44H), 2.26 (s, 6H), 2.39-2.41 (m, 3H), 2.51-2.52 (m, 1H), 2.77 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 3.64-3.67 (m, 4H), 4.24 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 7.43 (s, 1H), 7.61 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z593.52 [M+H] +.
脂質12 (((1-(2-( 雙 (6-((2- 己基癸醯基 ) 氧基 ) 己基 ) 胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 己烷 -6,1- 二基 ) 雙 (2- 己基癸酸酯 ) (12). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.86-0.89 (m, 24H), 1.20-1.50 (m, 104H), 1.60-1.70 (m, 24H), 2.24-2.48 (m, 12H), 2.80-2.90 (m, 2H), 3.50 (bs, 2H), 4.06 (t, J= 6.4 Hz, 10H), 7.28-7.30 (m, 1H), 7.35-7.37 (m, 1H); LCMS (ESI) m/z1494.54 [M+H] +.
脂質13 二 (( Z)- 壬 -2- 烯 -1- 基 )9,9'-(((1-(2-( 雙 (9-((( Z)- 壬 -2- 烯 -1- 基 ) 氧基 )-9- 側氧基壬基 ) 胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二壬酸酯 (13). 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 0.80-0.95 (m, 12H), 1.20-1.40 (m, 68H), 1.50-1.65 (m, 12H), 2.10-2.15 (m, 8H), 2.30 (t, J= 7.2 Hz, 8H), 2.38 (t, J= 7.6 Hz, 4H), 2.45-2.55 (m, 4H), 2.80-2.90 (m, 2H), 3.60-3.70 (m, 2H), 4.10-4.20 (m, 2H), 4.62 (t, J= 6.8 Hz, 8H), 5.49-5.67 (m, 8H), 7.43 (s, 1H), 7.59 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z1262.25 [M+H] +.
脂質14 N -((1-(2-( 二十四烷基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 )- N- 十四烷基十四烷 -1- 胺 (14). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.88 (t, J= 6.8 Hz, 12H), 1.20-1.40 (m, 92H), 1.40-1.50 (m, 4H), 2.34-2.42 (m, 8H), 2.82 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 3.50-3.50 (bs, 2H), 4.11 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 7.28 (bs, 1H), 7.36 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z926.07 [M+H] +.
脂質15 (((((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 乙烷 -2,1- 二基 )) 雙 ( 氮烷三基 )) 肆 ( 己烷 -6,1- 二基 ) 肆 (2- 己基癸酸酯 ) (15). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.80-0.89 (m, 24H), 1.20-1.50 (m, 104H), 1.51-1.71 (m, 24H), 2.26 (s, 6H), 2.28-2.33 (m, 4H), 2.36-2.40 (m, 8H), 2.48-2.56 (m, 8H), 2.73 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 3.51-3.58 (m, 2H), 4.05 (t, J= 6.8 Hz, 8H), 4.18 (m, J= 6.8 Hz, 2H), 7.32-7.34 (m, 1H), 7.37-7.40 (m, 1H); LCMS (ESI) m/z1608.57 [M+H] +.
脂質16 (((1-(4- 羥基丁基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 己烷 -6,1- 二基 ) 雙 (2- 己基癸酸酯 )(16). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.83-0.92 (m, 12H), 1.19-1.37 (m, 48H), 1.38-1.48 (m, 6H), 1.51-1.66 (m, 12H), 1.91-2.00 (m, 2H), 2.26-2.40 (m, 6H), 3.47-3.52 (m, 2H), 3.62-3.68 (m, 2H), 4.03-4.09 (m, 4H), 4.12-4.21 (m, 2H), 7.26-7.29 (m, 1H), 7.34-7.42 (m, 1H); LCMS (ESI) m/z846.76 [M+H] +.
脂質17 二 ( 十五烷 -7- 基 )6,6'-(((1-(4- 羥基丁基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二己酸酯 (17). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.80-0.90 (m, 12H), 1.20-1.40 (m, 44H), 1.40-1.70 (m, 18H), 1.92-1.99 (m, 2H), 2.26-2.50 (m, 8H), 3.49-3.66 (m, 4H), 4.13-4.17 (m, 2H), 4.84-4.89 (m, 2H), 7.28-7.30 (s, 1H), 7.37 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z818.76 [M+H] +.
脂質18 (((((1-(2- 羥基乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 乙烷 -2,1- 二基 )) 雙 ( 氮烷三基 )) 肆 ( 己烷 -6,1- 二基 ) 肆 (2- 己基癸酸酯 )(18). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.83-0.89 (m, 24H), 1.20-1.50 (m, 120H), 1.51-1.71 (m, 8H), 2.28-2.51 (m, 20H), 3.55 (s, 2H), 3.95-3.98 (m, 2H), 4.06 (t, J= 6.8 Hz, 8H), 4.19-4.21 (m, 2H), 7.35 (s, 1H), 7.42 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z1581.41 [M+H] +.
脂質19 (((((1-(4- 羥基丁基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 乙烷 -2,1- 二基 )) 雙 ( 氮烷三基 )) 肆 ( 己烷 -6,1- 二基 ) 肆 (2- 己基癸酸酯 ) (19). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.80-0.89 (m, 24H), 1.20-1.50 (m, 120H), 1.60-1.71 (m, 10H), 1.90-2.00 (m, 2H), 2.27-2.35 (m, 4H), 2.36-2.41 (m, 8H), 2.48-2.58 (m, 8H), 3.50-3.58 (m, 4H), 4.05 (t, J= 6.8 Hz, 8H), 4.10-4.18 (m, 2H), 7.30 (s, 1H), 7.39 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z1609.43 [M+H] +.
脂質20 二 (( Z)- 壬 -2- 烯 -1- 基 )9,9'-(((1-(2-( 雙 (2- 羥基乙基 ) 胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二壬酸酯 (20). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.88 (t, J= 7.2 Hz, 6H), 1.20-1.50 (m, 36H), 1.50-1.70 (m, 4H), 2.00-2.20 (m, 4H), 2.29 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 2.34-2.38 (m, 4H), 2.65 (t, J= 4.8 Hz, 4H), 2.80-2.90 (m, 2H), 3.35 (t, J= 4.8 Hz, 4H), 3.45 (s, 2H), 4.10-4.20 (m, 2H), 4.62 (d, J= 6.8 Hz, 4H), 5.49-5.55 (m, 2H), 5.61-5.67 (m, 2H), 7.40 (s, 1H), 7.44 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z789.61 [M+H] +.
脂質21 雙十二烷基 3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (21). 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 0.85 (t, J= 6.8 Hz, 6H), 1.20-1.35 (m, 36H), 1.52-1.58 (m, 4H), 2.13 (s, 6H), 2.38-2.41 (m, 4H), 2.58-2.65 (m, 6H), 3.45 (s, 2H), 3.97 (t, J= 6.4 Hz, 4H), 4.11 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 7.25 (s, 1H), 7.55 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z649.56 [M+H] +.
脂質22 雙十二烷基 3,3'-(((1-(2- 羥基乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (22). 1H NMR (400 MHz, MeOD- d 4 ) δ 0.89 (t, J= 6.4 Hz, 6H), 1.27-1.42 (m, 37H), 1.61-1.68 (m, 4H), 2.48 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 2.74 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 3.60 (s, 2H), 3.85 (t, J= 5.6 Hz, 2H), 4.06 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 4.18 (t, J= 5.6 Hz, 2H), 7.40 (s, 1H), 7.56 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z622.58 [M+H] +.
脂質23 雙十二烷基 3,3'-(((1-(4- 羥基丁基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (23). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.88 (t, J= 6.8 Hz, 6H), 1.20-1.40 (m, 37H), 1.49-1.64 (m, 6H), 1.91-2.00 (m, 2H), 2.45 (t, J= 7.6 Hz, 4H), 2.75 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 3.52 (s, 2H), 3.61 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 4.05 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 4.14 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 7.29 (s, 1H), 7.37 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z650.67 [M+H] +.
脂質24 ((3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 丙醯基 )) 雙 ( 氧基 )) 雙 ( 己烷 -6,1- 二基 ) 雙 (2- 己基癸酸酯 )(24). 1H NMR (400 MHz, MeOD- d 4 ) δ 0.89 (t, J= 6.8 Hz, 12H), 1.28-1.49 (m, 52H), 1.55-1.67 (m, 12H), 2.30-2.36 (m, 8H), 2.49 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 2.74 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 2.83 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.57 (s, 2H), 4.06-4.10 (m, 8H), 4.25 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 7.41 (s, 1H), 7.59 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z989.66 [M+H] +.
脂質25 ((3,3'-(((1-(2- 羥基乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 丙醯基 )) 雙 ( 氧基 )) 雙 ( 己烷 -6,1- 二基 ) 雙 (2- 己基癸酸酯 )(25). 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 0.80-0.90 (m, 12H), 1.15-1.30 (m, 40H), 1.30-1.61 (m, 24H), 2.23-2.42 (m, 2H), 2.37-2.45 (m, 4H), 2.60 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 3.45 (s, 2H), 3.67-3.71 (m, 2H), 3.96-4.08 (m, 8H), 4.25 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 4.82 (t, J= 5.6 Hz, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.52 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z962.79 [M+H] +.
脂質26 ((3,3'-(((1-(4- 羥基丁基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 丙醯基 )) 雙 ( 氧基 )) 雙 ( 己烷 -6,1- 二基 ) 雙 (2- 己基癸酸酯 )(26). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.80-0.88 (m, 12H), 1.20-1.30 (m, 40H), 1.35-1.49 (m, 12H), 1.50-1.62 (m, 12H), 1.90-1.99 (m, 2H), 2.28-2.35 (m, 2H), 2.40-2.50 (m, 4H), 2.75 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 3.53 (s, 2H), 3.62 (t, J= 6.4 Hz, 4H), 4.04-4.08 (m, 8H), 4.14 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 7.29 (s, 1H), 7.37 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z990.81 [M+H] +.
脂質27 二辛基 3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (27). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.88 (t, J= 6.8 Hz, 6H), 1.20-1.40 (m, 20H), 1.58-1.65 (m, 4H), 2.31 (s, 6H), 2.46 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 2.75 (t, J= 8.0 Hz, 4H), 2.80-2.90 (m, 2H), 3.53 (s, 2H), 4.05 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 4.20-4.30 (m, 2H), 7.37-7.38 (m, 2H); LCMS (ESI) m/z537.52 [M+H] +.
脂質28 雙十六烷基 3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (28). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.88 (t, J= 6.4 Hz, 6H), 1.20-1.40 (m, 52H), 1.57-1.63 (m, 4H), 2.28 (s, 6H), 2.45 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 2.73-2.77 (m, 6H), 3.53 (s, 2H), 4.05 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 4.20 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 7.34 (s, 1H), 7.37 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z761.60 [M+H] +.
脂質29 ((3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 丙醯基 )) 雙 ( 氧基 )) 雙 ( 丁烷 -4,1- 二基 ) 雙 (2- 己基癸酸酯 )(29). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.86-0.89 (m, 12H), 1.20-1.35 (m, 40H), 1.40-1.45 (m, 6H), 1.56-1.61 (m, 2H), 1.68-1.71 (m, 8H), 2.28-2.34 (m, 8H), 2.46 (t, J= 7.6 Hz, 4H), 2.75 (t, J= 6.8 Hz, 6H), 3.53 (s, 2H), 4.08-4.11 (m, 8H), 4.18-4.22 (m, 2H), 7.35-7.37 (m, 2H); LCMS (ESI) m/z933.77 [M+H] +.
脂質30 二 (( Z)- 壬 -2- 烯 -1- 基 )9,9'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二壬酸酯 (30). 1 H NMR (400 MHz, MeOD- d 4 ) δ 0.98 (t, J= 6.0 Hz, 6H), 1.2-1.5 (m, 32H), 1.50-1.70 (m, 8H), 2.10-2.18 (m, 4H), 2.25 (s, 6H), 2.30 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 2.42-2.50 (m, 4H), 2.77 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 3.62 (s, 2H), 4.24 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 4.61 (d, J= 6.8 Hz, 4H), 5.50-5.65 (m, 4H), 7.41 (s, 1H), 7.62 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z729.64 [M+H] +.
脂質31 二 (( Z)- 壬 -2- 烯 -1- 基 )9,9'-(((1-(2- 羥基乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二壬酸酯 (31). 1 H NMR (500 MHz, DMSO- d 6 ) δ 0.85 (t, J= 6.8 Hz, 6H), 1.26-1.34 (m, 32H), 1.50-1.65 (m, 8H), 2.04-2.08 (m, 4H), 2.28 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 2.80-2.89 (m, 4H), 3.69-3.73 (m, 2H), 4.14-4.21 (m, 4H), 4.57 (d, J= 6.8 Hz, 4H), 4.89 (t, J= 4.8 Hz, 1H), 5.45-5.75 (m, 4H), 7.59 (s, 1H), 7.90 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z702.66 [M+H] +.
脂質32 二 (( Z)- 壬 -2- 烯 -1- 基 )9,9'-(((1-(4- 羥基丁基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二壬酸酯 (32). 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 0.85 (m, 6H), 1.15-1.45 (m, 34H), 1.48-1.68 (m, 8H), 1.70-1.90 (m, 2H), 2.00-2.10 (m, 4H), 2.20-2.45 (m, 4H), 2.80-2.90 (m, 4H), 3.30-3.40 (m, 2H), 4.10-4.16 (m, 4H), 4.42-4.45 (m, 1H), 4.56 (d, J= 6.8 Hz, 4H), 5.50-5.58 (m, 4H), 7.58 (s, 1H), 7.98 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z730.70 [M+H] +.
脂質33 雙 (4-( 丙醯基氧基 ) 丁基 )3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (33). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 1.14 (t, J= 7.6 Hz, 6H), 1.66-1.75 (m, 8H), 2.30-2.36 (m, 10H), 2.47 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 2.75 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 2.89-2.94 (m, 2H), 3.53 (s, 2H), 4.08-4.11 (m, 8H), 4.28-4.31 (m, 2H), 7.39-7.40 (m, 2H); LCMS (ESI) m/z569.57 [M+H] +.
脂質34 ((3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 丙醯基 )) 雙 ( 氧基 )) 雙 ( 丁烷 -4,1- 二基 ) 二戊酸酯 (34). 1 H NMR (400 MHz, MeOD- d 4 ) δ 0.92 (t, J= 7.6 Hz, 6H), 1.25-1.39 (m, 4H), 1.55-1.62 (m, 4H), 1.65-1.75 (m, 8H), 2.27 (s, 6H), 2.28-2.33 (m, 4H), 2.49 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 2.74 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 2.80 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.56 (s, 2H), 4.08-4.12 (m, 8H), 4.25 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 7.42 (s, 1H), 7.59 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z625.48 [M+H] +.
脂質35 ((3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 丙醯基 )) 雙 ( 氧基 )) 雙 ( 丁烷 -4,1- 二基 ) 二庚酸酯 (35). 1 H NMR (400 MHz, MeOD- d 4 ) δ 0.88-0.92 (m, 6H), 1.25-1.40 (m, 12H), 1.58-1.80 (m, 12H) 2.31 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 2.48-2.53 (m, 10H), 2.76 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 3.10-3.12 (m, 2H), 3.58 (s, 2H), 4.09-4.12 (m, 8H), 4.36 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 7.46 (s, 1H), 7.62 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z681.54 [M+H] +.
脂質36 ((3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 丙醯基 )) 雙 ( 氧基 )) 雙 ( 丁烷 -4,1- 二基 ) 二壬酸酯 (36). 1H NMR ( 400 MHz, MeOD- d 4 )δ 0.90 (t, J= 6.8 Hz, 6H), 1.20-1.40 (m, 20H), 1.58-1.73 (m, 12H), 2.29-2.33 (m, 10H), 2.49 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 2.75 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 2.86 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.56 (s, 2H), 4.08-4.12 (m, 8H), 4.27 (t, J= 6.6 Hz, 2H), 7.42 (s, 1H), 7.59 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z737.57 [M+H] +.
脂質37 ((3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 丙醯基 )) 雙 ( 氧基 )) 雙 ( 丁烷 -4,1- 二基 ) 雙十一酸酯 (37). 1H NMR ( 400 MHz, MeOD- d 4 )δ 0.91 (t, J= 6.8 Hz, 6H), 1.20-1.40 (m, 28H), 1.58-1.73 (m, 12H), 2.29-2.40 (m, 10H), 2.50 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 2.75 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 2.90-3.00 (m, 2H), 3.57 (s, 2H), 4.09-4.12 (m, 8H), 4.28-4.32 (m, 2H), 7.43 (s, 1H), 7.60 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z793.66 [M+H] +.
脂質38 ((3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 丙醯基 )) 雙 ( 氧基 )) 雙 ( 乙烷 -2,1- 二基 ) 二庚酸酯 (38). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.90 (t, J= 6.8 Hz, 6H), 1.28-1.36 (m, 12H), 1.56-1.64 (m, 4H), 2.32 (t, J= 7.6 Hz, 4H), 2.44 (s, 6H), 2.51 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 2.76 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 2.98-3.01 (m, 2H), 3.56 (s, 2H), 4.27 (s, 8H), 4.32 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 7.44 (s, 1H), 7.61 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z625.51 [M+H] +.
脂質39 ((3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 丙醯基 )) 雙 ( 氧基 )) 雙 ( 丙烷 -3,1- 二基 ) 二己酸酯 (39). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.91 (t, J= 6.4 Hz, 6H), 1.27-1.34 (m, 8H), 1.58-1.67 (m, 4H), 1.96 (q, J= 6.4 Hz, 4H), 2.28-2.33 (m, 10H), 2.46 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 2.75 (t, J= 7.2 Hz, 6H), 3.53 (s, 2H), 4.12-4.16 (m, 8H), 4.20-4.30 (m, 2H), 7.37-7.38 (m, 2H); LCMS (ESI) m/z625.44 [M+H] +.
脂質40 ((3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 丙醯基 )) 雙 ( 氧基 )) 雙 ( 戊烷 -5,1- 二基 ) 二丁酸酯 (40). 1H NMR ( 400 MHz, MeOD- d 4 )δ 0.94 (t, J= 7.2 Hz, 6H), 1.42-1.48 (m, 4H), 1.58-1.70 (m, 12H), 2.26-2.30 (m, 10H), 2.47-2.50 (m, 4H), 2.72-2.80 (m, 6H), 3.56 (s, 2H), 4.06-4.10 (m, 8H), 4.24 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 7.40 (s, 1H), 7.58 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z625.57 [M+H] +.
脂質41 雙 (2- 乙基己基 )4,4'-((3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 丙醯基 )) 雙 ( 氧基 )) 二丁酸酯 (41). 1H NMR ( 400 MHz, MeOD- d 4 )δ 0.89-0.92 (m, 12H), 1.29-1.40 (m, 16H), 1.50-1.60 (m, 2H), 1.92-1.97 (m, 4H), 2.28 (s, 6H), 2.42 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 2.49 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 2.74 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 2.81 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 3.56 (s, 2H), 4.01 (dd, J= 5.6, 1.2 Hz, 4H), 4.11 (t, J= 6 Hz, 4H), 4.25 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 7.41 (s, 1H), 7.59 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z709.60 [M+H] +.
脂質42 雙 (2- 乙基己基 )6,6'-((3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 丙醯基 )) 雙 ( 氧基 )) 二己酸酯 (42). 1H NMR (500 MHz, MeOD- d 4 )δ 0.85-0.95 (m, 12H), 1.30-1.44 (m, 20H), 1.55-1.69 (m, 10H), 2.27 (s, 6H), 2.34 (t, J= 7.6 Hz, 4H), 2.48 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 2.74 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 2.79 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 3.56 (s, 2H), 4.00 (d, J= 5.6 Hz, 4H), 4.07 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 4.24 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 7.41 (s, 1H), 7.59 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z765.67 [M+H] +.
脂質43 雙 (2- 乙基己基 )8,8'-((3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 丙醯基 )) 雙 ( 氧基 )) 二辛酸酯 (43). 1 H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 0.80-0.90 (m, 12H), 1.20-1.40 (m, 30H), 1.40-1.60 (m, 10H), 2.14 (s, 6H), 2.27 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 2.38-2.42 (m, 4H), 2.60 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 3.45 (s, 2H), 3.92 (d, J= 5.6 Hz, 4H), 3.97 (t, J= 6.4 Hz, 4H), 4.11 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 7.25 (s, 1H), 7.55 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z821.82 [M+H] +.
脂質44 雙 (2- 丙基己基 )4,4'-((3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 丙醯基 )) 雙 ( 氧基 )) 二丁酸酯 (44). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.88-0.91 (m, 12H), 1.25-1.33 (m, 20H), 1.58-1.65 (m, 2H), 1.96 (q, J= 7.2 Hz, 4H), 2.26 (s, 6H), 2.39 (t, J= 7.6 Hz, 4H), 2.46 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 2.72-2.76 (m, 6H), 3.53 (s, 2H), 3.99 (d, J= 5.6 Hz, 4H), 4.10 (t, J= 6.4 Hz, 4H), 4.18 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 7.34 (s, 1H), 7.36 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z737.53 [M+H] +.
脂質45 (2 R,2' R)-1,1'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 癸 -2- 醇 )(45). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.87 (t, J= 7.2 Hz, 6H), 1.27-1.44 (m, 30H), 2.26 (s, 6H), 2.39-2.45 (m, 2H), 2.57-2.61 (m, 2H), 2.74 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.60-3.70 (m, 4H), 4.20 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 7.38 (s, 2H); LCMS (ESI) m/z481.53 [M+H] +.
脂質46 ( S)-1-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 )(( R)-2- 羥基癸基 ) 胺基 ) 癸 -2- 醇 ( 46). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.87 (t, J= 7.2 Hz, 6H), 1.27-1.45 (m, 30H), 2.28 (s, 6H), 2.44-2.49 (m, 4H), 2.77 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 3.63-3.80 (m, 4H), 4.21 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 7.39 (s, 1H), 7.44 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z481.43 [M+H] +.
脂質47 (2 R,2' R)-1,1'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 十二烷 -2- 醇 )(47). 1 H NMR (400 MHz, MeOD- d 4 )δ 0.89 (t, J= 7.2 Hz, 6H), 1.20-1.40 (m, 34H), 1.40-1.50 (m, 4H), 2.25 (s, 6H), 2.37-2.42 (m, 2H), 2.50-2.54 (m, 2H), 2.77 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 3.60-3.70 (m, 4H), 4.24 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 7.42 (s, 1H), 7.61 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z537.65 [M+H] +.
脂質48 ( S)-1-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 )(( R)-2- 羥基癸基 ) 胺基 ) 十二烷 -2- 醇 ( 48). 1 H NMR (400 MHz, MeOD- d 4 )δ 0.89 (t, J= 7.2 Hz, 6H), 1.20-1.50 (m, 38H), 2.26 (s, 6H), 2.40-2.50 (m, 4H), 2.78 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 3.60-3.70 (m, 4H), 4.24 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 7.43 (s, 1H), 7.62 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z537.65 [M+H] +.
脂質49 (2 R,2' R)-1,1'-(((1-(2- 羥基乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 十二烷 -2- 醇 )(49). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.87 (t, J= 6.8 Hz, 6H), 1.20-1.40 (m, 38H), 2.39-2.44 (m, 2H), 2.55-2.59 (m, 2H), 2.80-3.20 (m, 1H), 3.60-3.70 (m, 4H), 3.95-3.98 (m, 2H), 4.21-4.23 (m, 2H), 7.38 (s, 1H), 7.42 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z510.45 [M+H] +.
脂質50 ( S)-1-((( R)-2- 羥基十二烷基 )((1-(2- 羥基乙基 )-1H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 胺基 ) 十二烷 -2- 醇 (50). 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ) δ 0.80-0.90 (t, J= 6.8 Hz , 6H), 1.10-1.40 (m, 36H), 2.20-2.30 (m, 4H), 3.45-3.53 (m, 4H), 3.67-3.71 (m, 2H), 4.07 (t, J= 5.6 Hz, 2H), 4.23-4.29 (m, 2H), 4.83 (t, J= 5.2 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.60 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z510.44 [M+H] +.
脂質51 二 ( 十五烷 -7- 基 )3,3'-(((1-(2-( 雙 (3- 側氧基 -3-( 十五烷 -7- 基氧基 ) 丙基 ) 胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (51). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.88 (t, J= 6.4 Hz, 18H), 1.18-1.38 (m, 66H), 1.45-1.50 (m, 8H), 2.40-2.50 (m, 6H), 2.70-2.80 (m, 4H), 2.85-2.93 (m, 2H), 3.00-3.10 (m, 1H), 3.53 (s, 2H), 4.15-4.22 (m, 2H), 4.80-4.90 (m, 3H), 7.31 (s, 1H), 7.39 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z988.02 [M+H] +.
脂質52 二 ( 十三烷 -6- 基 )3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (52). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.86-0.93 (m, 12H), 1.20-1.35 (m, 32H), 1.48-1.51 (m, 8H), 2.26 (s, 6H), 2.45 (t, J= 7.6 Hz, 4H), 2.72-2.77 (m, 6H), 3.53 (s, 2H), 4.18 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 4.80-4.90 (m, 2H), 7.34 (s, 1H), 7.37 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z677.85 [M+H] +.
脂質53 二 ( 十七烷 -8- 基 )3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (53). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.86-0.93 (m, 12H), 1.20-1.40 (m, 48H), 1.48-1.51 (m, 8H), 2.26 (s, 6H), 2.45 (t, J= 7.4 Hz, 4H), 2.75 (t, J= 7.4 Hz, 6H), 3.53 (s, 2H), 4.18 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 4.80-4.90 (m, 2H), 7.34 (s, 1H), 7.37 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z789.87 [M+H] +.
脂質54 二 ( 十九烷 -9- 基 )3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (54). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.88 (t, J= 6.8 Hz, 12H), 1.17-1.36 (m, 54H), 1.50 (d, J= 6.0 Hz, 10H), 2.26 (s, 6H), 2.45 (t, J= 7.4 Hz, 4H), 2.70-2.79 (m, 6H), 3.53 (s, 2H), 4.18 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 4.81-4.91 (m, 2H), 7.34 (s, 1H), 7.37 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z846.00 [M+H] +.
脂質55 (((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 己烷 -6,1- 二基 ) 雙 (2- 己基癸酸酯 )(55). 1H NMR (400 MHz, MeOD- d 4 )δ 0.86-0.93 (m, 12H), 1.23-1.48 (m, 54H), 1.50-1.70 (m, 10H), 2.26 (s, 6H), 2.30-2.38 (m, 2H), 2.41-2.49 (m, 4H), 2.78 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 3.61 (br s, 2H), 4.08 (t, J= 6.4 Hz, 4H), 4.25 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 7.42 (s, 1H), 7.62 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z846.00 [M+H] +.
脂質56 (((1-(4- 氟基丁基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 己烷 -6,1- 二基 ) 雙 (2- 己基癸酸酯 )(56). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.83-0.91 (m, 12H), 1.16-1.51 (m, 58H), 1.59-1.75 (m, 8H), 1.95-2.04 (m, 2H), 2.24-2.40 (m, 6H), 3.49 (s, 2H), 4.06 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 4.14 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 4.35-4.52 (m, 2H), 7.28 (s, 1H), 7.37 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z848.94 [M+H] +.
脂質57 (((1-(4- 氯基丁基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 己烷 -6,1- 二基 ) 雙 (2- 己基癸酸酯 )(57). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.83-0.91 (m, 12H), 1.19-1.51 (m, 56H), 1.56-1.67 (m, 8H), 1.71-1.79 (m, 2H), 1.97-2.06 (m, 2H), 2.26-2.38 (m, 6H), 3.48-3.55 (m, 4H), 4.06 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 4.13 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 7.26 (s, 1H), 7.37 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z864.81 [M+H] +.
脂質58 (((1-(4- 氰基丁基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 己烷 -6,1- 二基 ) 雙 (2- 己基癸酸酯 )(58). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.87 (t, J= 6.8 Hz, 12H), 1.19-1.38 (m, 50H), 1.40-1.52 (m, 8H), 1.60-1.73 (m, 8H), 1.94-2.06 (m, 2H), 2.21-2.43 (m, 8H), 3.48 (s, 2H), 4.06 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 4.14 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 7.27-7.29 (m, 1H), 7.37 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z855.87 [M+H] +.
脂質59 二 ( 十五烷 -7- 基 )3,3'-(((1-(3-( 二甲基胺基 ) 丙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (59). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.88 (t, J= 6.8 Hz, 12H), 1.20-1.42 (m, 40H), 1.49-1.51 (m, 8H), 1.97-2.01 (m, 2H), 2.21-2.25 (m, 8H), 2.45 (t, J= 7.4 Hz, 4H), 2.75 (t, J= 7.4 Hz, 4H), 3.54 (s, 2H), 4.13 (t, J= 7.0 Hz, 2H), 4.84-4.87 (m, 2H), 7.29 (s, 1H), 7.37 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z747.94 [M+H] +.
脂質60 二 ( 十五烷 -7- 基 )3,3'-((2-(1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 乙基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (60). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.84-0.91 (m, 12H), 1.21-1.33 (m, 40H), 1.51 (d, J= 6.0 Hz, 8H), 2.27 (s, 6H), 2.44 (t, J= 7.4 Hz, 4H), 2.55-2.66 (m, 4H), 2.71-2.76 (m, 2H), 2.84 (t, J= 7.4 Hz, 4H), 4.16 (t, J= 7.0 Hz, 2H), 4.82-4.92 (m, 2H), 7.25 (brs, 1H), 7.32 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z747.74 [M+H] +.
脂質61 二 ( 十五烷 -7- 基 )4,4'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丁酸酯 (61). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.88 (t, J= 6.8 Hz, 12H), 1.23-1.30 (m, 40H), 1.50 (d, J= 5.6 Hz, 12H), 1.62-1.68 (m, 4H), 2.25-2.31 (m, 10H), 2.74 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 3.45-3.55 (m, 2H), 4.19 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 4.86 (quint, J= 6.4 Hz, 2H), 7.31-7.40 (m, 2H); LCMS (ESI) m/z761.86 [M+H] +.
脂質62 二 ( 十五烷 -7- 基 )5,5'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二戊酸酯 (62). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.82-0.93 (m, 12H), 1.19-1.34 (m, 42H), 1.47-1.53 (m, 10H), 1.59-1.65 (m, 4H), 2.24-2.31 (m, 10H), 2.33-2.39 (m, 4H), 2.74 (t, J= 7.0 Hz, 2H), 3.48 (s, 2H), 4.18 (t, J= 7.0 Hz, 2H), 4.82-4.89 (m, 2H), 7.32 (s, 1H), 7.36 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z789.97 [M+H] +.
脂質63 二 ( 十五烷 -7- 基 )6,6'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二己酸酯 (63). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.88 (t, J= 7.0 Hz, 12H), 1.17-1.35 (m, 46H), 1.50 (d, J= 6.0 Hz, 10H), 1.74-1.83 (m, 4H), 2.25-2.32 (m, 10H), 2.41 (brs, 4H), 2.75 (t, J= 7.0 Hz, 2H), 3.47-3.55 (m, 2H), 4.19 (t, J= 7.0 Hz, 2H), 4.81-4.90 (m, 2H), 7.34-7.40 (m, 2H); LCMS (ESI) m/z817.84 [M+H] +.
脂質64 二 ( 十五烷 -7- 基 ) 3,3'-(((1-(4- 羥基丁基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (64). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.88 (t, J= 6.8 Hz, 12H), 1.21-1.34 (m, 41H), 1.47-1.54 (m, 10H), 1.90-1.99 (m, 2H), 2.45 (t, J= 7.4 Hz, 4H), 2.75 (t, J= 7.4 Hz, 4H), 3.53 (s, 2H), 3.58-3.64 (m, 2H), 4.14 (t, J= 7.0 Hz, 2H), 4.86 (quint, J= 6.0 Hz, 2H), 7.29 (s, 1H), 7.37 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z734.87 [M+H] +.
脂質65 二 ( 十五烷 -7- 基 )3,3'-(((1-(3- 羥基丙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (65). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.88 (t, J= 6.8 Hz, 12H), 1.23-1.31 (m, 40H), 1.51 (d, J= 6.0 Hz, 8H), 1.99-2.05 (m, 2H), 2.42-2.48 (m, 4H), 2.75 (t, J= 7.4 Hz, 4H), 2.96 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 3.51-3.59 (m, 4H), 4.26 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 4.82-4.89 (m, 2H), 7.32 (s, 1H), 7.38 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z720.79 [M+H] +.
脂質66 二 ( 十五烷 -7- 基 )3,3'-(((1-(4-( 二甲基胺基 ) 丁基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (66). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.85-0.91 (m, 12H), 1.19-1.35 (m, 40H), 1.46-1.54 (m, 10H), 1.80-1.90 (m, 2H), 2.19 (s, 6H), 2.23-2.29 (m, 2H), 2.45 (t, J= 7.4 Hz, 4H), 2.75 (t, J= 7.4 Hz, 4H), 3.53 (s, 2H), 4.09 (t, J= 7.0 Hz, 2H), 4.82-4.90 (m, 2H), 7.28 (s, 1H), 7.36 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z761.84 [M+H] +.
脂質67 二 ( 十五烷 -7- 基 )3,3'-(((1-(2-( 二乙基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (67). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.88 (t, J= 6.8 Hz, 12H), 0.99 (t, J= 7.0 Hz, 6H), 1.23-1.30 (m, 40H), 1.50 (d, J= 6.0 Hz, 8H), 2.42-2.48 (m, 4H), 2.53 (q, J= 7.2 Hz, 4H), 2.75 (t, J= 7.4 Hz, 4H), 2.85 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 3.54 (s, 2H), 4.13 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 4.82-4.89 (m, 2H), 7.33 (s, 1H), 7.37 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z761.84 [M+H] +.
脂質68 二 ( 十五烷 -7- 基 )3,3'-(((1-(2-( 二異丙基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (68). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.85-0.90 (m, 12H), 0.96 (d, J= 6.8 Hz, 12H), 1.23-1.30 (m, 40H), 1.50 (d, J= 6.0 Hz, 8H), 2.45 (t, J= 7.4 Hz, 4H), 2.75 (t, J= 7.4 Hz, 4H), 2.82 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 2.97 (sept, J= 6.8 Hz, 2H), 3.53 (s, 2H), 4.02 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 4.82-4.89 (m, 2H), 7.28 (s, 1H), 7.37 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z789.87 [M+H] +.
脂質69 二 ( 十五烷 -7- 基 )3,3'-(((1-(2-( 吡咯啶 -1- 基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (69). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.82-0.92 (m, 12H), 1.13-1.37 (m, 44H), 1.50 (d, J= 6.0 Hz, 8H), 1.72-1.90 (m, 4H), 2.41-2.78 (m, 10H), 3.53 (s, 2H), 4.20-4.36 (m, 2H), 4.82-4.88 (m, 2H), 7.35-7.42 (m, 2H); LCMS (ESI) m/z759.88 [M+H] +.
脂質70 二 ( 十五烷 -7- 基 )5,5'-(((1-(2- 𠰌 啉基乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二戊酸酯 (70). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.85-0.83 (m, 12H), 1.25-1.30 (m, 40H), 1.49-1.52 (m, 12H), 1.58-1.62 (m, 4H), 2.28 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 2.37 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 2.45-2.75 (m, 4H), 2.80 (t, J= 4.4 Hz, 2H), 3.48 (s, 2H), 3.68 (t, J= 4.8 Hz, 4H), 4.21 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 4.84-4.87 (m, 2H), 7.32 (s, 1H), 7.35 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z831.87 [M+H] +.
脂質71 二 ( 十五烷 -7- 基 )3,3'-(((1-(3- 𠰌 啉基丙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (71). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.90 (t, J= 6.8 Hz, 12H), 1.21-1.37 (m, 40H), 1.53 (d, J= 6.0 Hz, 8H), 2.00-2.08 (m, 2H), 2.33 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 2.41-2.50 (m, 8H), 2.77 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 3.56 (s, 2H), 3.71-3.75 (m, 4H), 4.17 (t, J= 7.0 Hz, 2H), 4.84-4.91 (m, 2H), 7.31 (s, 1H), 7.39 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z789.97 [M+H] +.
脂質72 二 ( 十五烷 -7- 基 )3,3'-(((1-(3-( 吡咯啶 -1- 基 ) 丙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (72). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.88 (t, J= 6.8 Hz, 12H), 1.25-1.40 (m, 40H), 1.50 (d, J= 6.0 Hz, 8H), 1.73-1.81 (m, 4H), 2.04 (quint, J= 7.0 Hz, 2H), 2.42-2.49 (m, 10H), 2.75 (t, J= 7.4 Hz, 4H), 3.54 (s, 2H), 4.15 (t, J= 7.0 Hz, 2H), 4.81-4.90 (m, 2H), 7.29 (s, 1H), 7.37 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z773.88 [M+H] +.
脂質73 二 ( 十五烷 -7- 基 )3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 )-2- 甲基丙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (73). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.88 (t, J= 6.8 Hz, 12H), 1.19-1.34 (m, 40H), 1.50 (d, J= 6.0 Hz, 8H), 1.57-1.59 (m, 6H), 1.97 (s, 6H), 2.45 (t, J= 7.4 Hz, 4H), 2.57 (s, 2H), 2.75 (t, J= 7.4 Hz, 4H), 3.54 (s, 2H), 4.81-4.91 (m, 2H), 7.40 (s, 1H), 7.43 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z761.91 [M+H] +.
脂質74 二 ( 十五烷 -7- 基 )3,3'-(((1-(2-( 雙 (2- 羥基乙基 ) 胺基 ) 乙基 )-1H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (74). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.83-0.91 (m, 12H), 1.15-1.37 (m, 44H), 1.51 (d, J= 6.0 Hz, 6H), 2.41-2.49 (m, 4H), 2.62-2.68 (m, 4H), 2.75 (t, J= 7.4 Hz, 4H), 2.87-2.91 (m, 2H), 3.38-3.43 (m, 4H), 3.52 (s, 2H), 4.14-4.20 (m, 2H), 4.81-4.91 (m, 2H), 7.40 (d, J= 6.8 Hz, 2H); LCMS (ESI) m/z793.93 [M+H] +.
脂質75 二 ( 十五烷 -7- 基 )3,3'-(((1-(2-((2- 羥基乙基 )( 甲基 ) 胺基 ) 乙基 )-1H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (75). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.88 (t, J= 7.0 Hz, 12H), 1.22-1.32 (m, 41H), 1.50 (d, J= 6.0 Hz, 8H), 2.29 (s, 3H), 2.45 (t, J= 7.4 Hz, 4H), 2.52-2.56 (m, 2H), 2.75 (t, J= 7.4 Hz, 4H), 2.87 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.48-3.55 (m, 4H), 4.17 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 4.81-4.92 (m, 2H), 7.33 (s, 1H), 7.39 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z763.78 [M+H] +.
脂質77 (((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 乙烷 -2,1- 二基 ) 雙 (2- 己基癸酸酯 )(77). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.79-0.94 (m, 12H), 1.17-1.35 (m, 40H), 1.38-1.48 (m, 4H), 1.53-1.59 (m, 4H), 2.26-2.36 (m, 8H), 2.70-2.81 (m, 6H), 3.62 (s, 2H), 4.11-4.23 (m, 6H), 7.37 (s, 1H), 7.40 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z733.91 [M+H] +.
脂質78 (((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 丙烷 -3,1- 二基 ) 雙 (2- 己基癸酸酯 )(78). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.84-0.91 (m, 12H), 1.14-1.35 (m, 40H), 1.35-1.48 (m, 4H), 1.55 (d, J= 7.8 Hz, 4H), 1.69-1.85 (m, 4H), 2.25-2.33 (m, 8H), 2.45 (t, J= 7.0 Hz, 4H), 2.74 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 3.50 (s, 2H), 4.10 (t, J= 6.4 Hz, 4H), 4.19 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 7.33 (s, 1H), 7.37 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z761.98 [M+H] +.
脂質79 (((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 丁烷 -4,1- 二基 ) 雙 (2- 己基癸酸酯 )(79). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.82-0.91 (m, 12H), 1.17-1.35 (m, 40H), 1.37-1.47 (m, 4H), 1.48-1.58 (m, 8H), 1.61-1.68 (m, 4H), 2.25-2.35 (m, 8H), 2.39 (brs, 4H), 2.75 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 3.49 (brs, 2H), 4.06 (t, J= 6.4 Hz, 4H), 4.19 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 7.32 (brs, 1H), 7.37 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z789.87 [M+H] +.
脂質80 (((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 戊烷 -5,1- 二基 ) 雙 (2- 己基癸酸酯 )(80). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.84-0.91 (m, 12H), 1.19-1.37 (m, 46H), 1.38-1.54 (m, 10H), 1.62-1.67 (m, 4H), 2.25-2.39 (m, 12H), 2.74 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 3.49 (s, 2H), 4.02-4.11 (m, 4H), 4.19 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 7.32 (s, 1H), 7.36 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z817.94 [M+H] +.
脂質81 二 ( 十五烷 -7- 基 )3,3'-(((1-(2- 羥基乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (81). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.83-0.92 (m, 12H), 1.18-1.35 (m, 40H), 1.50 (d, J= 6.0 Hz, 8H), 2.44 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 2.76 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 3.36 (t, J= 6.4 Hz, 1H), 3.51 (s, 2H), 3.96 (d, J= 4.0 Hz, 2H), 4.18-4.22 (m, 2H), 4.81-4.90 (m, 2H), 7.34 (s, 1H), 7.40 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z706.79 [M+H] +.
脂質82 十七烷 -9- 基 8-(((1-(2- 羥基乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 )(6- 側氧基 -6-( 十一烷氧基 ) 己基 ) 胺基 ) 辛酸酯 (82). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.83-0.92 (m, 9H), 1.20-1.36 (m, 50H), 1.39-1.54 (m, 10H), 1.62-1.68 (m, 4H), 2.24-2.40 (m, 7H), 3.49 (d, J= 1.6 Hz, 2H), 3.95-4.01 (m, 2H), 4.05 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 4.19-4.23 (m, 2H), 4.81-4.91 (m, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.40 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z790.99 [M+H] +.
脂質83 (((1-(4-( 二甲基胺基 ) 丁基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 己烷 -6,1- 二基 ) 雙 (2- 己基癸酸酯 )(83). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.87 (t, J= 6.8 Hz, 12H), 1.14-1.40 (m, 60H), 1.59-1.66 (m, 6H), 1.87 (quint, J= 7.6 Hz, 2H), 2.19 (s, 6H), 2.22-2.38 (m, 8H), 3.49 (s, 2H), 4.04-4.12 (m, 6H), 7.25 (s, 1H), 7.35 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z874.13 [M+H] +.
脂質84 二 ( 十五烷 -7- 基 )3,3'-(((1-(2- 𠰌 啉基乙基 )-1H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (84). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.88 (t, J= 6.8 Hz, 12H), 1.18-1.35 (m, 40H), 1.50 (d, J= 6.0 Hz, 8H), 2.42-2.50 (m, 8H), 2.73-2.81 (m, 6H), 3.54 (s, 2H), 3.66-3.71 (m, 4H), 4.20 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 4.82-4.92 (m, 2H), 7.34 (s, 1H) 7.37 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z775.91 [M+H] +.
脂質85 二 ( 十五烷 -7- 基 )3,3'-(((1-(2-(4- 甲基哌 𠯤 -1- 基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (85). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.87 (t, J= 6.8 Hz, 12H), 1.15-1.35 (m, 40H), 1.50 (d, J= 6.0 Hz, 8H), 2.28 (s, 3H), 2.38-2.50 (m, 12H), 2.72-2.83 (m, 6H), 3.54 (s, 2H), 4.20 (t, J= 7.0 Hz, 2H), 4.82-4.88 (m, 2H), 7.34 (s, 1H), 7.37 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z789.03 [M+H] +.
脂質86 二 ( 十五烷 -7- 基 )3,3'-(((1-(2-(1- 甲基哌啶 -4- 基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (86). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.88 (t, J= 6.8 Hz, 12H), 1.16-1.35 (m, 47H), 1.50 (d, J= 6.0 Hz, 6H), 1.66-1.72 (m, 2H), 1.77-1.83 (m, 2H), 2.25 (s, 3H), 2.45 (t, J= 7.4 Hz, 4H), 2.75 (t, J= 7.4 Hz, 4H), 2.80-2.95 (m, 2H), 3.53 (s, 2H), 4.07-4.13 (m, 2H), 4.82-4.90 (m, 2H), 7.27-7.27 (m, 1H), 7.36 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z788.01 [M+H] +.
脂質87 二 ( 十五烷 -7- 基 )3,3'-(((1-(2-( 哌啶 -1- 基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (87). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.88 (t, J= 6.8 Hz, 12H), 1.22-1.32 (m, 40H), 1.39-1.56 (m, 14H), 2.39-2.48 (m, 8H), 2.75 (t, J= 7.4 Hz, 6H), 3.54 (s, 2H), 4.20 (t, J= 7.0 Hz, 2H), 4.82-4.88 (m, 2H), 7.34 (s, 1H), 7.36 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z773.95 [M+H] +.
脂質88 二 ( 十五烷 -7- 基 )3,3'-(((1-(2-(1- 甲基哌啶 -4- 基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (88). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.88 (t, J= 6.8 Hz, 12H), 1.16-1.37 (m, 44H), 1.43-1.54 (m, 6H), 1.60-1.88 (m, 4H), 1.97-2.29 (m, 6H), 2.41-2.49 (m, 4H), 2.70-2.88 (m, 6H), 3.51-3.55 (m, 2H), 4.05-4.21 (m, 2H), 4.81-4.91 (m, 2H), 7.28 (brs, 1H), 7.37 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z787.99 [M+H] +.
脂質89 二 ( 十五烷 -7- 基 )3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 ) 吡咯啶 -3- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (89). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.80-0.95 (m, 12H), 1.17-1.35 (m, 40H), 1.37-1.54 (m, 10H), 1.89-1.92 (m, 1H), 2.15-2.29 (m, 7H), 2.36 (brs, 3H), 2.42 (q, J= 7.2 Hz, 6H), 2.47-2.63 (m, 4H), 2.64-2.82 (m, 4H), 4.86 (q, J= 6.2 Hz, 2H); LCMS (ESI) m/z736.87 [M+H] +.
脂質90 (((1-(4- 羥基丁基 ) 吡咯啶 -3- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 己烷 -6,1- 二基 ) 雙 (2- 己基癸酸酯 )(90). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.89 (t, J= 6.8 Hz, 12H), 1.20-1.53 (m, 56H), 1.62-1.80 (m, 16H), 1.90-2.00 (m, 1H), 2.30-2.40 (m, 9H), 2.42-2.68 (m, 3H), 2.70-2.80 (m, 1H), 3.50-3.60 (m, 2H), 4.06 (t, J= 6.6 Hz, 4H); LCMS (ESI) m/z836.03 [M+H] +.
脂質91 (((4- 羥基環己基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 己烷 -6,1- 二基 ) 雙 (2- 己基癸酸酯 )(91). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.79-0.96 (m, 12H), 1.15-1.48 (m, 60H), 1.57-1.68 (m, 10H), 1.80-1.90 (m, 2H), 1.94-2.03 (m, 2H), 2.12 (d, J= 7.0 Hz, 2H), 2.24-2.39 (m, 6H), 3.49-3.60 (m, 1H), 4.06 (t, J= 6.6 Hz, 4H); LCMS (ESI) m/z807.08 [M+H] +.
脂質92 ((2-(4- 羥基環己基 ) 乙基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 己烷 -6,1- 二基 ) 雙 (2- 己基癸酸酯 )(92). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.83-1.09 (m, 12H), 1.15-1.71 (m, 63H), 1.52-1.70 (m, 10H), 1.73-1.82 (m, 1H), 1.87-1.98 (m, 1H), 2.28-2.38 (m, 2H), 2.44-2.58 (m, 8H), 4.09 (t, J= 6.4 Hz, 4H); LCMS (ESI) m/z821.10 [M+H] +.
脂質93 ((2-(4- 羥基哌啶 -1- 基 ) 乙基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 己烷 -6,1- 二基 ) 雙 (2- 己基癸酸酯 )(93). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.83-0.91 (m, 12H), 1.12-1.48 (m, 56H), 1.56-1.66 (m, 11H), 1.84-1.93 (m, 2H), 2.12-2.21 (m, 2H), 2.26-2.35 (m, 2H), 2.36-2.46 (m, 6H), 2.52-2.60 (m, 2H), 2.74-2.83 (m, 2H), 3.64-3.73 (m, 1H), 4.06 (t, J= 6.6 Hz, 4H); LCMS (ESI) m/z822.00 [M+H] +.
脂質94 二 ( 十五烷 -7- 基 )6,6'-(((1-(4- 羥基丁基 ) 吡咯啶 -3- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二己酸酯 (94). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.85-0.87 (m, 12H), 1.25-1.29 (m, 50H), 1.39-1.51 (m, 20H), 2.26-2.37 (m, 14H), 3.58 (brs, 2H), 4.83-4.89 (m, 2H); LCMS (ESI) m/z821.99 [M+H] +.
脂質95 二 ( 十五烷 -7- 基 )6,6'-(((4- 羥基環己基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二己酸酯 (95). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.80-0.94 (m, 14H), 1.16-1.44 (m, 53H), 1.51 (d, J= 5.6 Hz, 8H), 1.61-1.64 (m, 4H), 1.79-1.88 (m, 2H), 1.94-2.02 (m, 2H), 2.12 (d, J= 7.0 Hz, 2H), 2.22-2.41 (m, 8H), 3.48-3.59 (m, 1H), 4.81-4.92 (m, 1H); LCMS (ESI) m/z778.88 [M+H] +.
脂質96 二 ( 十五烷 -7- 基 )6,6'-((2-(4- 羥基環己基 ) 乙基 ) 氮烷二基 ) 二己酸酯 (96). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.81-1.04 (m, 12H), 1.15-1.37 (m, 50H), 1.37-1.58 (m, 15H), 1.61-1.69 (m, 4H), 1.72-1.81 (m, 1H), 1.90-2.02 (m, 1H), 2.28 (t, J= 7.6 Hz, 4H), 2.34-2.46 (m, 6H), 3.48-3.59 (m, 1H), 4.82-4.91 (m, 2H); LCMS (ESI) m/z792.95 [M+H] +.
脂質97 二 ( 十五烷 -7- 基 )6,6'-((2-(4- 羥基哌啶 -1- 基 ) 乙基 ) 氮烷二基 ) 二己酸酯 (97).1H NMR (400 MHz, MeOD- d 4 ) δ 0.88-0.91 (m, 12H), 1.29-1.40 (m, 46H), 1.52-1.69 (m, 18H), 1.80-1.95 (m, 2H), 2.31-2.39 (m, 6H), 2.66-2.70 (m, 4H), 2.85-2.95 (m, 4H), 3.67-3.68(m, 1H), 4.87-4.91(m, 2H);  LCMS (ESI) m/z793.96 [M+H] +.
脂質98 ((2-(4-(3- 羥基丙基 ) 哌 𠯤 -1- 基 ) 乙基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 己烷 -6,1- 二基 ) 雙 (2- 己基癸酸酯 )(98). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.88 (t, J= 6.8 Hz, 12H), 1.15-1.48 (m, 58H), 1.61-1.75 (m, 11H), 2.25-2.64 (m, 18H), 3.77-3.82 (m, 2H), 4.06 (t, J= 6.8 Hz, 4H); LCMS (ESI) m/z864.97 [M+H] +.
脂質99 ((2-(4-(3- 羥基丙基 ) 哌啶 -1- 基 ) 乙基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 己烷 -6,1- 二基 ) 雙 (2- 己基癸酸酯 )(99). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.83-0.92 (m, 12H), 1.16-1.49 (m, 62H), 1.53-1.56 (m, 2H), 1.60-1.70 (m, 9H), 1.89-1.98 (m, 2H), 2.25-2.35 (m, 2H), 2.37-2.45 (m, 6H), 2.57 (dd, J= 9.2, 6.0 Hz, 2H), 2.91 (d, J= 11 Hz, 2H), 3.63 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 4.06 (t, J= 6.8 Hz, 4H); LCMS (ESI) m/z863.99 [M+H] +.
脂質100 雙 (3- 己基壬基 )6,6'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二己酸酯 (100). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.82-0.93 (m, 12H), 1.15-1.35 (m, 46H), 1.36-1.52 (m, 6H), 1.58-1.67 (m, 8H), 2.18-2.42 (m, 12H), 2.74 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 3.49 (s, 2H), 4.08 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 4.19 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 7.28-7.40 (m, 2H); LCMS (ESI) m/z818.04 [M+H] +.
脂質101 雙 (3- 己基壬基 )6,6'-(((1-(4- 羥基丁基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二己酸酯 (101). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.85-0.92 (m, 12H), 1.23-1.29 (m, 50H), 1.47 (brs, 5H), 1.53-1.56 (m, 6H), 1.90-2.00 (m, 2H), 2.24-2.40 (m, 8H), 3.45-3.53 (m, 2H), 3.64 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 4.04-4.18 (m, 6H), 7.27-7.28 (m, 1H), 7.36 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z818.88 [M+H] +.
脂質102 雙 (4- 戊基壬基 )6,6'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二己酸酯 (102). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.88 (t, J= 7.0 Hz, 12H), 1.13-1.37 (m, 50H), 1.43-1.56 (m, 8H), 2.24-2.32 (m, 12H), 2.74 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 4.04 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 4.19 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 7.35-7.39 (m, 2H); LCMS (ESI) m/z790.01 [M+H] +.
脂質103 雙 (4- 戊基壬基 )6,6'-(((1-(4- 羥基丁基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二己酸酯 (103). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.90 (t, J= 7.0 Hz, 12H), 1.16-1.39 (m, 44H), 1.51-1.62 (m, 10H), 1.66-1.72 (m, 4H), 1.92-2.02 (m, 2H), 2.27-2.49 (m, 8H), 3.66 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 4.06 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 4.18 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 7.40 (s, 2H); LCMS (ESI) m/z790.99 [M+H] +.
脂質104 四 ( 十五烷 -7- 基 )4,4',4'',4'''-((3,3',3'',3'''-(((((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 乙烷 -2,1- 二基 )) 雙 ( 氮烷三基 )) 肆 ( 丙醯基 )) 肆 ( 氧基 )) 四丁酸酯 (104). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.84-0.91 (m, 24H), 1.21-1.34 (m, 80H), 1.51 (d, J= 6.0 Hz, 16H), 1.91-1.99 (m, 8H), 2.26 (s, 6H), 2.34-2.45 (m, 16H), 2.46-2.57 (m, 8H), 2.71-2.81 (m, 10H), 3.52 (s, 2H), 4.09 (t, J= 6.8 Hz, 8H), 4.19 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 4.87 (quint, J= 6.0 Hz, 4H), 7.37-7.40 (m, 2H); LCMS (ESI) m/z1728.38 [M+H] +.
脂質105 二 ( 十五烷 -7- 基 )3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 咪唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (105). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.88 (t, J= 6.8 Hz, 12H), 1.22-1.32 (m, 40H), 1.50 (d, J= 6.0 Hz, 8H), 2.26 (s, 6H), 2.50 (t, J= 7.6 Hz, 4H), 2.60-2.65 (m, 2H), 2.83 (t, J= 7.6 Hz, 4H), 3.63 (s, 2H), 3.96 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 4.79-4.91 (m, 2H), 6.83 (s, 1H), 7.42 (d, J= 1.2 Hz, 1H); LCMS (ESI) m/z733.74 [M+H] +.
脂質106 (((1-(4- 羥基丁基 )-1 H- 咪唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 己烷 -6,1- 二基 ) 雙 (2- 己基癸酸酯 )(106). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.84-0.90 (m, 12H), 1.23-1.30 (m, 58H), 1.61-1.69 (m, 8H), 1.84-1.92 (m, 2H), 2.30 (tt, J= 8.8, 5.4 Hz, 2H), 2.40-2.48 (m, 4H), 3.58 (s, 2H), 3.66 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.94 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 4.05 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 6.78 (s, 1H), 7.38 (d, J= 1.2 Hz, 1H); LCMS (ESI) m/z846.83 [M+H] +.
脂質107 二 ( 十五烷 -7- 基 )6,6'-(((1-(4- 羥基丁基 )-1 H- 咪唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二己酸酯 (107). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.88 (t, J= 6.8 Hz, 12H), 1.15-1.36 (m, 46H), 1.44-1.55 (m, 12H), 1.60-1.69 (m, 4H), 1.83-1.92 (m, 2H), 2.27 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 2.38-2.48 (m, 4H), 3.58 (s, 2H), 3.66 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 3.93 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 4.79-4.90 (m, 2H), 6.79 (s, 1H), 7.37 (d, J= 1.2 Hz, 1H); LCMS (ESI) m/z818.96 [M+H] +.
脂質108 二 ( 十五烷 -7- 基 )3,3'-((2-(4-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) 乙基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (108). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.84-0.91 (m, 12H), 1.17-1.36 (m, 40H), 1.50 (d, J= 6.4 Hz, 8H), 2.29 (s, 6H), 2.37 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 2.58-2.64 (m, 2H), 2.78-2.94 (m, 8H), 4.37 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 4.81-4.91 (m, 2H), 7.43 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z748.93 [M+H] +.
脂質109 ((2-(4-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) 乙基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 己烷 -6,1- 二基 ) 雙 (2- 己基癸酸酯 )(109). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.85-0.90 (m, 12H), 1.21-1.39 (m, 56H), 1.60-1.67 (m, 8H), 2.25-2.38 (m, 8H), 2.40-2.46 (m, 4H), 2.58-2.64 (m, 2H), 2.83-2.92 (m, 4H), 4.06 (t, J= 6.8 Hz, 4H), 4.33 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 7.44 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z860.91 [M+H] +.
脂質110 二 ( 十五烷 -7- 基 )6,6'-((2-(4-(4-( 二甲基胺基 ) 丁基 )-1 H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) 乙基 ) 氮烷二基 ) 二己酸酯 (110). 1H NMR (400 MHz, MeOD- d 4 ) δ 0.86-0.94 (m, 12H), 1.17-1.45 (m, 50H), 1.48-1.77 (m, 14H), 2.27-2.31 (m, 4H), 2.41-2.53 (m, 10H), 2.67-2.77 (m, 4H), 2.88 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 4.40 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 4.87-4.91 (m, 2H), 7.76 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z861.08 [M+H] +.
脂質111 二 ( 十五烷 -7- 基 )6,6'-((2-(4-(4- 羥基丁基 )-1 H-1,2,3- 三唑 -1- 基 ) 乙基 ) 氮烷二基 ) 二己酸酯 (111). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.88 (t, J= 6.8 Hz, 12H), 1.16-1.42 (m, 50H), 1.50 (d, J= 5.6 Hz, 8H), 1.59-1.69 (m, 4H), 1.73-1.82 (m, 2H), 2.27 (t, J= 7.6 Hz, 4H), 2.39-2.45 (m, 4H), 2.76 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 2.84 (t, J= 6.2 Hz, 2H), 3.68 (t, J= 6.2 Hz, 2H), 4.33 (t, J= 6.2 Hz, 2H), 4.82-4.89 (m, 2H), 7.37-7.40 (m, 1H); LCMS (ESI) m/z833.96 [M+H] +.
脂質112 十七烷 -9- 基 8-(((1-(2- 羥基乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 )(8- 側氧基 -8-( 十一烷氧基 ) 辛基 ) 胺基 ) 辛酸酯 (112). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.84-0.90 (m, 9H), 1.21-1.36 (m, 50H), 1.38-1.53 (m, 10H), 1.58-1.63 (m, 7H), 2.24-2.37 (m, 8H), 3.47-3.51 (m, 2H), 3.96-4.01 (m, 2H), 4.03-4.08 (m, 2H), 4.19-4.23 (m, 2H), 4.82-4.90 (m, 1H), 7.31-7.33 (m, 1H), 7.40 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z818.99 [M+H] +.
脂質113 十七烷 -9- 基 8-(((1-(4- 羥基丁基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 )(6- 側氧基 -6-( 十一烷氧基 ) 己基 ) 胺基 ) 辛酸酯 (113). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.86-0.89 (m, 9H), 1.25-1.29 (m, 48H), 1.43-1.50 (m, 10H), 1.53-1.65 (m, 6H), 1.93-1.97 (m, 3H), 2.25-2.35 (m, 8H), 3.48 (s, 2H), 3.65 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 4.05 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 4.14 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 4.84-4.87 (m, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.26 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z818.96 [M+H] +.
脂質114 十七烷 -9- 基 8-(((1-(4- 羥基丁基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 )(8- 側氧基 -8-( 十一烷氧基 ) 辛基 ) 胺基 ) 辛酸酯 (114). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.87-0.89 (m, 9H), 1.25-1.28 (m, 52H), 1.40-1.52 (m, 12) 1.53-1.64 (m, 5H), 1.92-1.97 (m, 2H), 2.25-2.35 (m, 8H), 3.48 (s, 2H), 3.65 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 4.05 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 4.14 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 4.84-4.87 (m, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.26 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z847.12 [M+H] +.
脂質115 十七烷 -9- 基 8-((2-(1-(2- 羥基乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 乙基 )(8- 側氧基 -8-( 十一烷氧基 ) 辛基 ) 胺基 ) 辛酸酯 (115). 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.85-0.89 (m, 9H), 1.25-1.30 (m, 53H), 1.39-1.46 (m, 8H), 1.49-1.58 (m, 6H), 2.25-2.30 (m, 4H), 2.42-2.60 (m, 8H), 3.97 (t, J= 5.2 Hz, 2H), 4.05 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 4.18 (t, J= 4.8 Hz, 2H), 4.84-4.87 (m, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.36 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z833.03 [M+H] +.
脂質116 十七烷 -9- 基 8-((2-(1-(4- 羥基丁基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 乙基 )(8- 側氧基 -8-( 十一烷氧基 ) 辛基 ) 胺基 ) 辛酸酯 (116). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.86-0.89 (m, 9H), 1.25-1.30 (m, 56H), 1.40-1.45 (m, 12H), 1.90-1.96 (m, 2H), 2.25-2.60 (m, 12H), 3.31-3.65 (m, 2H), 4.03-4.06 (m, 2H), 4.11-4.14 (m, 2H), 4.84-4.87 (m, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.32 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z860.96 [M+H] +.
脂質117 雙 (3-( 辛氧基 )-2-(( 辛氧基 ) 甲基 ) 丙基 )3,3'-(((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 二丙酸酯 (117). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.84-0.92 (m, 12H), 1.19-1.36 (m, 42H), 1.50-1.54 (m, 8H), 2.16-2.23 (m, 2H), 2.26 (s, 6H), 2.46 (t, J= 7.4 Hz, 4H), 2.70-2.80 (m, 6H), 3.35-3.54 (m, 20H), 4.18 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 7.34 (s, 1H), 7.37 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z938.01 [M+H] +.
脂質118 ((((((1-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 ) 氮烷二基 ) 雙 ( 丙烷 -3,1- 二基 )) 雙 ( 氧基 )) 雙 ( 亞甲基 )) 雙 ( 丙烷 -2,1,3- 三基 ) 四辛酸酯 (118). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 0.85-0.91 (m, 12H), 1.20-1.36 (m, 32H), 1.56-1.62 (m, 8H), 1.68-1.75 (m, 4H), 2.23-2.34 (m, 16H), 2.42 (t, J= 7.2 Hz, 4H), 2.75 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 3.37-3.44 (m, 8H), 3.50 (s, 2H), 4.06-4.21 (m, 10H), 7.33 (s, 1H), 7.37 (s, 1H); LCMS (ESI) m/z965.87 [M+H] +.
實驗實施例1. 可離子化脂質之特徵[脂質奈米粒子(LNP)之製備]
為了製備LNP，使用購自Sigma Aldrich (USA)之膽固醇，且使用購自Avanti Polar Lipids (USA)之DMG-PEG2000 (1,2-二肉荳蔻醯基-rac-甘油基-3-甲氧基聚乙二醇-2000)作為一PEG脂質。此外，使用購自Avanti Polar Lipids (USA)的DOPE (1,2-二油醯基-sn-甘油基-3-磷脂醯乙醇胺)與DSPC (1,2-二硬脂醯基-sn-甘油基-3-PC)作為磷脂。
將先前製備之可離子化脂質化合物1至118 (脂質1至118)中之各者與DOPE、膽固醇及PEG-脂質一起溶解於乙醇中。在溶解於乙醇中之情況下，可離子化脂質化合物、磷脂、膽固醇及PEG-脂質之間的莫耳比率為50:10:38.5:1.5。
為了製備LNP，使用NanoAssemblr Ignite TM(Precision Nanosystems, Inc.，加拿大)，且總流量(TFR)採用12 mL/min的條件。使用Amico超離心過濾器MWCO 10 kDa (Millipore, USA)移除所製備之LNP的乙醇，交換緩衝液，且稍後進行濃縮。在稀釋、濃縮及交換時，用1X DPBS進行稀釋以自所製備之LNP移除乙醇，且於同時，濃縮LNP。 [用於LNP之物理化學特性的分析方法]
使用Zetasizer Pro (Malvern Instruments，英國)來分析z-平均直徑，其為粒子大小，以及多分散性指數(PDI)。"PDI"係說明系統中的粒子大小分布之均一性的比率，其中當PDI接近於0時，其指示單分散性，而當其接近於1時，其指示多分散性。 [用於mRNA定量及囊封效率(EE %)的量測方法]
使用Ribogreen RNA試驗套組(Invitrogen，美國)量測mRNA含量及EE%。簡言之，在所製備之mRNA/LNP中，量測經Triton X-100溶液處理之基團及未經Triton X-100溶液處理之基團的mRNA濃度，且相對於總mRNA，將囊封於LNP中之mRNA的比例計算為EE %。
圖1A、圖1B及圖1C顯示含有先前製備之可離子化脂質化合物中之各者的LNP的z平均直徑及PDI，且圖2A、圖2B及圖2C顯示LNP之EE (%)。表3顯示各個所製備之LNP的z平均直徑、PDI及EE (%)之量測值。 [表3]
LNP Z-平均(nm) PDI EE(%)
含有脂質1之LNP 104.9 0.024 86.77
含有脂質2之LNP 142.3 0.0809 94.21
含有脂質3之LNP 115 0.0907 81.98
含有脂質4之LNP 143.1 0.0262 84.1
含有脂質5之LNP 156 0.0564 87.47
含有脂質7之LNP 118.4 0.0465 97.2
含有脂質8之LNP 105.9 0.056 97.7
含有脂質9之LNP 111.75 0.0432 91.4
含有脂質10之LNP 89.33 0.0286 97.72
含有脂質11之LNP 61.4 0.094 98.6
含有脂質15之LNP 168.7 0.0671 81.55
含有脂質16之LNP 88.57 0.0193 74.22
含有脂質17之LNP 102.3 0.0297 90.9
含有脂質20之LNP 197.9 0.0533 97.34
含有脂質24之LNP 263.7 0.0378 88.03
含有脂質25之LNP 101.9 0.0452 70.94
含有脂質26之LNP 102.6 0.0532 76.2
含有脂質28之LNP 158.5 0.1832 88.08
含有脂質29之LNP 127.4 0.018 95.47
含有脂質31之LNP 128.7 0.0641 92.7
含有脂質32之LNP 115.2 0.0531 99.9
含有脂質35之LNP 126.2 0.0582 81.73
含有脂質38之LNP 92.27 0.1129 88.49
含有脂質42之LNP 194.2 0.049 72.81
含有脂質43之LNP 160.9 0.0504 89.72
含有脂質44之LNP 199 0.0183 71.26
含有脂質45之LNP 86.11 0.1284 95.1
含有脂質46之LNP 56.1 0.0631 95.6
含有脂質47之LNP 65.84 0.087 96.31
含有脂質48之LNP 56.05 0.1294 96.16
含有脂質51之LNP 107.4 0.1268 96.04
含有脂質52之LNP 92.11 0.03207 97.6
含有脂質53之LNP 92.51 0.025 94.66
含有脂質54之LNP 95.72 0.009993 92.11
含有脂質55之LNP 142.5 0.03129 93.8
含有脂質56之LNP 92.24 0.08074 83.82
含有脂質57之LNP 90.02 0.03829 80.15
含有脂質58之LNP 79.94 0.04211 89.92
含有脂質59之LNP 128.9 0.1482 97.01
含有脂質60之LNP 78.18 0.01525 95.80
含有脂質61之LNP 103.6 0.04356 95.07
含有脂質62之LNP 113.3 0.02826 95.34
含有脂質63之LNP 100.7 0.04092 100.0
含有脂質66之LNP 108.7 0.05115 95.91
含有脂質67之LNP 89.43 0.01272 92.32
含有脂質68之LNP 81.99 0.02727 89.72
含有脂質69之LNP 137.2 0.07412 92.56
含有脂質70之LNP 100 0.03716 87.01
含有脂質71之LNP 79.91 0.01771 87.30
含有脂質72之LNP 110.8 0.01371 98
含有脂質73之LNP 78.65 0.02923 86.21
含有脂質74之LNP 100.9 0.005941 89.92
含有脂質75之LNP 96.17 0.02894 88.65
含有脂質77之LNP 97.5 0.02768 89.1
含有脂質78之LNP 89.54 0.01949 93.7
含有脂質79之LNP 133.6 0.09816 93.3
含有脂質80之LNP 114.5 0.06312 95.4
含有脂質81之LNP 78.54 0.02766 70.3
含有脂質82之LNP 101.4 0.06371 93.2
含有脂質83之LNP 138.8 0.02101 92.2
含有脂質84之LNP 95.5 0.04051 76.8
含有脂質85之LNP 96.46 0.01355 96.9
含有脂質86之LNP 100.1 0.04527 96.4
含有脂質87之LNP 87.67 0.03417 90.4
含有脂質88之LNP 92.26 0.01942 91.6
含有脂質89之LNP 141.4 0.06795 97.6
含有脂質90之LNP 95.81 0.0183 97.8
含有脂質91之LNP 98.89 0.08222 81.2
含有脂質92之LNP 84.87 0.05715 91.3
含有脂質93之LNP 132.5 0.09111 90.4
含有脂質94之LNP 101.6 0.04712 97.7
含有脂質95之LNP 80.77 0.0243 86.6
含有脂質96之LNP 83.26 0.03544 94.6
含有脂質97之LNP 145.3 0.05822 96.3
含有脂質98之LNP 116.2 0.01791 95.6
含有脂質99之LNP 115.3 0.02809 89.3
含有脂質100之LNP 134.3 0.02976 95
含有脂質101之LNP 96.55 0.03383 90.9
含有脂質102之LNP 126.6 0.008128 96.8
含有脂質103之LNP 105 0.03272 91.2
含有脂質104之LNP 131.2 0.01567 93.8
含有脂質105之LNP 92.62 0.01318 100
含有脂質106之LNP 89.28 0.01484 97.2
含有脂質107之LNP 102.8 0.01841 97.1
含有脂質108之LNP 107.2 0.04344 96
含有脂質109之LNP 98.04 0.02468 96
含有脂質110之LNP 116.6 0.05497 95.1
含有脂質111之LNP 80.51 0.05055 84.4
含有脂質112之LNP 99.93 0.03163 93.4
含有脂質113之LNP 88.41 0.02045 95.2
含有脂質114之LNP 101.8 0.01989 94.7
含有脂質116之LNP 81.35 0.03252 94.7
含有脂質117之LNP 135.3 0.1105 87.53
含有脂質118之LNP 133 0.06609 95.7
對照組(MC3 LNP) 84.55 0.0081 95.17
如表3中可見，證實含有根據本申請案之可離子化脂質化合物之LNP具有z平均直徑為300 nm或更小且PDI小於0.2之粒度分布。 實驗實施例2.新穎可離子化脂質化合物之核酸遞送效力(活體外)。
使HEK293T細胞經受轉染效率測試，以檢查新穎可離子化脂質化合物之核酸遞送效應。
藉由使用添加有1%青黴素-鏈黴素之DMEM培養基(10%胎牛血清(FBS，Gibco))，將HEK293T (人類胚胎腎-293T，ATCC)細胞株以15,000個細胞/孔接種於96孔微量培養盤上，且隨後將HEK293T細胞株培養隔夜(37℃，5% CO 2培育器)。
為評估核酸遞送效力，使用含有先前製備之可離子化脂質化合物中之各者的LNP。首先，使用無LNP (游離mRNA)之螢火蟲螢光素酶mRNA作為陰性對照組，且使用含有可離子化胺基脂質MC3 (亦稱為DLin-MC3-DMA)之LNP (此後，稱為MC3 LNP)作為陽性對照組。
處理10 µL實驗實施例1之測試LNP及相當於每孔25 ng mRNA之樣本，隨後在5% CO 2培育器中培養24小時。在轉染之後24小時，處理Bright-Glo TM螢光素酶試驗系統(Promega，美國)之溶液，隨後量測螢光素酶活性。
針對各個LNP量測之平均RLU係說明於下表4中，且其各個數值顯示於圖3中。 [表4]
平均RLU
含有脂質7之LNP 1.91 x 10 8
含有脂質8之LNP 2.79 x 10 7
含有脂質10之LNP 1.69 x 10 7
含有脂質11之LNP 9.39 x 10 6
含有脂質16之LNP 3.00 x 10 7
含有脂質17之LNP 2.67 x 10 7
含有脂質24之LNP 5.51 x 10 7
含有脂質29之LNP 4.34 x 10 7
含有脂質52之LNP 2.25 x 10 6
含有脂質53之LNP 1.29 x 10 6
含有脂質54之LNP 6.81 x 10 5
含有脂質55之LNP 3.96 x 10 7
含有脂質58之LNP 2.84 x 10 5
含有脂質59之LNP 1.68 x 10 6
含有脂質60之LNP 5.13 x 10 5
含有脂質61之LNP 2.84 x 10 7
含有脂質62之LNP 8.45 x 10 7
含有脂質63之LNP 4.80 x 10 7
含有脂質66之LNP 1.60 x 10 6
含有脂質69之LNP 1.14 x 10 7
含有脂質70之LNP 4.30 x 10 6
含有脂質72之LNP 7.55 x 10 6
含有脂質74之LNP 1.31 x 10 6
含有脂質75之LNP 2.39 x 10 7
含有脂質77之LNP 3.89 x 10 5
含有脂質78之LNP 3.61 x 10 6
含有脂質79之LNP 4.91 x 10 7
含有脂質80之LNP 4.15 x 10 7
含有脂質82之LNP 2.85 x 10 7
含有脂質83之LNP 1.03 x 10 6
含有脂質85之LNP 3.73 x 10 6
含有脂質88之LNP 8.91 x 10 7
含有脂質89之LNP 3.41 x 10 6
含有脂質90之LNP 2.13 x 10 6
含有脂質92之LNP 2.48 x 10 6
含有脂質93之LNP 1.09 x 10 7
含有脂質94之LNP 3.79 x 10 7
含有脂質97之LNP 1.29 x 10 8
含有脂質99之LNP 9.65 x 10 7
含有脂質101之LNP 1.55 x 10 8
含有脂質103之LNP 1.88 x 10 8
含有脂質105之LNP 5.03 x 10 6
含有脂質106之LNP 1.26 x 10 6
含有脂質107之LNP 3.00 x 10 6
含有脂質108之LNP 1.31 x 10 7
含有脂質109之LNP 9.86 x 10 6
含有脂質110之LNP 2.65 x 10 6
含有脂質112之LNP 2.13 x 10 8
含有脂質113之LNP 2.62 x 10 6
含有脂質114之LNP 5.77 x 10 6
含有脂質117之LNP 6.24 x 10 7
含有脂質118之LNP 3.73 x 10 7
MC3 LNP 1.46 X 10 6
對照組(游離mRNA) 4.67 X 10 1
如上表4中所證實，證實相較於在單獨使用mRNA之情況下mRNA遞送至細胞的效率，在使用含有根據本申請案之可離子化脂質化合物之LNP之情況下，mRNA遞送至細胞之效率增加約0.2百萬倍至4.09百萬倍。此外，證實相較於在使用MC3 LNP之情況，在使用含有根據本申請案之可離子化脂質化合物之LNP之情況下，mRNA遞送至細胞之效率增加約6至131倍。 實驗實施例3. 新穎可離子化脂質化合物之核酸遞送效力( 活體內)
為了評估在全身投與所製備物質之後的藥物遞送分布及活體內轉染效率，在小鼠中進行靜脈內注射及肌內注射以供評估。 實驗實施例3.1. 新穎可離子化脂質化合物藉由靜脈內投與之核酸遞送效力
將含有MC3之LNP用作陽性對照組，PBS用作陰性對照組，且將含有先前製備之可離子化脂質化合物中之各者之LNP用作實驗組之物質。
對於靜脈內投與組，藉由將相當於0.5 mg/kg mRNA之脂質奈米粒子注射至尾靜脈中來投與Balb/c小鼠(雄性，5週齡)。在注射之後6小時，以150 mg/kg腹膜內投與D-螢光素(Perkin Elmer，美國)。15分鐘之後，使用IVIS成像系統Luminar XR (Perkin Elmer，美國)裝置定量地分析各小鼠之肝臟區域組織中之發光強度(總通量)，藉其量測新穎可離子化脂質化合物之活體內核酸遞送效力。
實驗組及對照組中之量化發光強度係如表5中所述。此外，圖4及5分別顯示實驗組及對照組中之相對發光強度。 [表5]
平均總通量
含有脂質7之LNP 8.85 E+10
含有脂質10之LNP 1.85 E+11
含有脂質16之LNP 4.72 E+11
含有脂質17之LNP 6.91 E+11
含有脂質52之LNP 5.75 E+11
含有脂質53之LNP 3.59 E+11
含有脂質54之LNP 3.58 E+11
含有脂質55之LNP 1.07 E+11
含有脂質58之LNP 2.35 E+10
含有脂質60之LNP 2.56 E+11
含有脂質61之LNP 1.59 E+11
含有脂質62之LNP 1.42 E+11
含有脂質69之LNP 1.13 E+11
含有脂質70之LNP 4.15 E+10
含有脂質74之LNP 1.82 E+10
含有脂質75之LNP 2.18 E+10
含有脂質77之LNP 4.52 E+11
含有脂質78之LNP 4.00 E+10
含有脂質79之LNP 4.99 E+10
含有脂質80之LNP 6.95 E+10
含有脂質88之LNP 1.83 E+11
含有脂質89之LNP 2.67 E+10
含有脂質92之LNP 1.82 E+11
含有脂質93之LNP 2.50 E+10
含有脂質97之LNP 4.80 E+10
含有脂質99之LNP 5.26 E+11
含有脂質101之LNP 1.83 E+11
含有脂質105之LNP 4.80 E+10
含有脂質106之LNP 2.53 E+10
含有脂質107之LNP 4.02 E+10
含有脂質117之LNP 1.13 E+11
含有脂質118之LNP 8.27 E+10
MC3 LNP 1.70 E+10
對照組(PBS) 7.23 E+04
如上表5中所證實，相較於對照組，根據本申請案之可離子化脂質化合物展現優異的活體內mRNA遞送效力。 實驗實施例3.2. 新穎可離子化脂質化合物藉由肌內投與之核酸遞送效力
將含有MC3之LNP用作陽性對照組，PBS用作陰性對照組，且將含有先前製備之可離子化脂質化合物中之各者之LNP用作實驗組之物質。
對於肌內投與組，藉由將相當於0.25 mg/kg mRNA之脂質奈米粒子注射至大腿肌肉中來投與Balb/c小鼠(雄性，5週齡)。使對照組小鼠經受以相同方式將PBS投與至大腿肌肉中。在注射之後6小時，以150 mg/kg腹膜內投與D-螢光素(Perkin Elmer，美國)。15分鐘之後，使用IVIS成像系統Luminar XR (Perkin Elmer，美國)裝置定量地分析各小鼠之大腿肌肉組織中之發光強度(總通量)，藉其量測新穎可離子化脂質化合物之活體內核酸遞送效力。
實驗組及對照組中之量化發光強度係如表6中所述。此外，圖6及7分別顯示實驗組及對照組中之相對發光強度。 [表6]
平均總通量
含有脂質7之LNP 3.25 E+9
含有脂質29之LNP 4.42 E+8
含有脂質31之LNP 1.49 E+8
MC3 LNP 1.14 E+8
對照組(PBS) 4.13 E+4
如上表6中所證實，相較於對照組，含有根據本申請案之可離子化脂質化合物之LNP展現極優異之活體內mRNA遞送效力。
(無)
圖1A、圖1B及圖1C顯示根據本發明之一實施態樣之含有可離子化脂質化合物的LNP之z平均直徑及多分散性指數(PDI)。
圖2A、圖2B及圖2C顯示根據本發明之一實施態樣之含有可離子化脂質化合物的LNP之囊封效率。
圖3顯示對實驗組(含有根據本發明一實施態樣之可離子化脂質化合物之LNP)、陽性對照組(MC3 LNP)及陰性對照組(游離mRNA)中之細胞遞送核酸的效率。
圖4顯示在實驗組(含有根據本發明一實施態樣之可離子化脂質化合物之LNP)及陽性對照組(MC3 LNP)與發光螢火蟲螢光素酶mRNA核酸混合，且隨後將所得混合物分別投與至小鼠之尾靜脈中之情況下，在小鼠之肝臟中的發光螢火蟲螢光素酶蛋白的表現位準。
圖5顯示在實驗組(含有根據本發明實施態樣之可離子化脂質化合物之LNP)及陽性對照組(MC3 LNP)與發光螢火蟲螢光素酶mRNA核酸混合，且隨後將所得混合物分別投與至小鼠之尾靜脈中或僅PBS (陰性對照組)投與至小鼠之尾靜脈中之情況下，發光螢火蟲螢光素酶蛋白在小鼠肝臟部分的表現程度。
圖6顯示在實驗組(含有根據本發明實施態樣之可離子化脂質化合物之LNP)及陽性對照組(MC3 LNP)與發光螢火蟲螢光素酶mRNA核酸混合，且隨後將所得混合物分別投與至小鼠之大腿肌肉中之情況下，遞送至該肌肉的發光螢火蟲螢光素酶mRNA蛋白的表現位準。
圖7顯示在實驗組(含有根據本發明實施態樣之可離子化脂質化合物之LNP)及陽性對照組(MC3 LNP)與發光螢火蟲螢光素酶mRNA核酸混合，且隨後將所得混合物分別投與至小鼠之大腿肌肉中或僅PBS (陰性對照組)投與至小鼠之大腿肌肉中之情況下，發光螢火蟲螢光素酶蛋白在該肌肉的表現程度。

Claims (17)

  1. 一種化合物或其一鹽，該化合物由下式(I)表示： (I) 其中Z為一飽和或不飽和的5員或6員碳環基團或雜環基團， L1為由下式(II)表示之一基團、一3員至6員飽和雜環基團、鹵素、氰基或羥基，其中該3員至6員飽和雜環基團係經C 1-10烷基取代或未經取代， (II) L2及L3各自獨立地為一直接鍵或一直鏈C 1-12伸烷基，其中該C 1-12伸烷基係經一或多個C 1-10烷基或羥基取代或未經取代， L4為由下式(III)或(III')表示之一基團， (III) (III') R 1及R 2各自獨立地為一直鏈C 1-30烷基或一支鏈C 3-50烷基且係經選自由一直鏈C 2-25烯基、Rx'-C(=O)-O、Rx'-O-C(=O)-、Rx'-C(=O)-、一C 1-10烷氧基及羥基組成之群的至少一者取代或未經取代，其中Rx’為氫、一直鏈C 1-25烷基、一直鏈C 2-25烯基或一支鏈C 3-25烷基， R 3及R 5各自獨立地為一直鏈C 1-12伸烷基，且係經R a-C(=O)取代或未經取代，其中R a為氫或一直鏈C 1-12烷基， X及Y各自獨立地為-Rx''-、-Rx''-CH(-OH)-、-CH(-OH)-Rx''-、-C(=O)-O-Rx''-、-O-C(=O)-Rx''-、-Rx''-C(=O)-O-、-Rx''-O-C(=O)-、-Rx''-C(=O)-、-C(=O)-Rx''-、-Rx''-NHC(=O)-、-Rx''-C(=O)NH-、-C(=O)NH-Rx''-、-NHC(=O)-Rx''-、-Rx''-O-、-O-Rx''-、-NH-Rx''-或-Rx''-NH-，其中Rx''為一直接鍵、一直鏈C 1-25伸烷基或一支鏈C 3-25伸烷基， R 4及R 6各自獨立地為一直鏈C 1-30烷基、一直鏈C 2-30烯基、一支鏈C 3-50烷基或C 4-40烷氧基，其中該直鏈C 1-30烷基、直鏈C 1-30烯基、支鏈C 3-50烷基及C 4-40烷氧基各自獨立地經選自由一C 1-12烷基、Rx'''-C(=O)-O-、Rx'''-O-C(=O)-、Rx'''-O-及胺組成之群的至少一者取代或未經取代，Rx'''為氫、一直鏈C 1-25烷基、一支鏈C 3-25烷基及一3員至6員飽和或不飽和碳環基團、經一3員至6員飽和或不飽和碳環基團取代之一直鏈或支鏈C 3-6烷基、一3員至6員飽和或不飽和雜環基團或經一3員至6員飽和或不飽和雜環基團取代之一直鏈或支鏈C 3-6烷基， p及q各自獨立地為1至3之一整數，且 該碳環基團為由碳原子及氫原子構成之一環狀基團，且該雜環基團為含有一或多個選自N、S或O的雜原子之一環狀基團。
  2. 如請求項1之化合物或其鹽，其中Z為含有1至3個雜原子的一5員至6員飽和或不飽和雜環基團，或一5員或6員飽和碳環基團。
  3. 如請求項1或2之化合物或其鹽，其中Z具有吡咯、吡唑、咪唑、三唑、四唑、五唑、噻唑、㗁唑、異㗁唑、吡咯啶、咪唑啉、咪唑啶、吡唑啉、吡唑啶、哌啶、𠰌啉、哌𠯤、四氫吡啶或環己烷的一結構。
  4. 如請求項1至3中任一項之化合物或其鹽，其中Z為 、 、 、 、 、 或 。
  5. 如請求項1至4中任一項之化合物或其鹽，其中L1為由式(II)表示之一基團、一5員或6員飽和雜環基團、鹵素、氰基或羥基，且其中該5員或6員飽和雜環基團含有至少一個N且係經C 1-6烷基取代或未經取代。
  6. 如請求項1至5中任一項之化合物或其鹽，其中L2為一直接鍵或一直鏈C 1-6伸烷基，其中該C 1-6伸烷基係經一或多個C 1-6烷基或羥基取代或未經取代，且L3為一直鏈C 1-6伸烷基。
  7. 如請求項1至6中任一項之化合物或其鹽，其中R 1及R 2各自獨立地為一直鏈C 1-10烷基或一支鏈C 3-15烷基且係經選自由Rx'-C(=O)-O、Rx'-O-C(=O)-、Rx'-C(=O)-、一C 1-10烷氧基及羥基組成之群的至少一者取代或未經取代，其中Rx’為氫、一直鏈C 1-10烷基、一直鏈C 2-10烯基或一支鏈C 3-15烷基。
  8. 如請求項1至7中任一項之化合物或其鹽，其中R 3及R 5各自獨立地為一直鏈C 1-10伸烷基，且X及Y各自獨立地為-Rx''-、-Rx''-CH(-OH)-、-CH(-OH)-Rx''-、-C(=O)-O-Rx''-、-O-C(=O)-Rx''-、-Rx''-C(=O)-O-、-Rx''-O-C(=O)-、-Rx''-O-或-O-Rx''-，其中Rx''為一直接鍵、一直鏈C 1-10伸烷基或一支鏈C 1-10伸烷基。
  9. 如請求項1至8中任一項之化合物或其鹽，其中R 4及R 6各自獨立地為一直鏈C 1-20烷基、一直鏈C 2-20烯基或一支鏈C 3-20烷基，且該直鏈C 1-20烷基、該直鏈C 2-20烯基及該支鏈C 3-20烷基各自獨立地經選自由Rx'''-C(=O)-O-、Rx'''-O-C(=O)-及Rx'''-O-組成之群的至少一者取代或未經取代，其中Rx''’為氫、一直鏈C 1-25烯基或一支鏈C 3-25烷基。
  10. 如請求項1至9中任一項之化合物或其鹽，其中該化合物係選自於由以下組成之群： (1)雙(2-丙基己基)6,6'-((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))二己酸酯； (2)雙(2-丙基己基)8,8'-((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))二辛酸酯； (3)雙(2-乙基戊基)4,4'-((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))二丁酸酯； (4)雙(2-乙基戊基)6,6'-((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))二己酸酯； (5)雙(2-乙基戊基)8,8'-((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))二辛酸酯； (6)(((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))雙(亞甲基))雙(丙烷-2,1,3-三基)四己酸酯； (7)(((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))雙(亞甲基))雙(丙烷-2,1,3-三基)四辛酸酯； (8)(((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))雙(亞甲基))雙(丙烷-2,1,3-三基)肆(癸酸酯)； (9)二(二十二烷-10-基)3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (10)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (11) 1,1'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(十四烷-2-醇)； (12)(((1-(2-(雙(6-((2-己基癸醯基)氧基)己基)胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (13)二(( Z)-壬-2-烯-1-基)9,9'-(((1-(2-(雙(9-((( Z)-壬-2-烯-1-基)氧基)-9-側氧基壬基)胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二壬酸酯； (14) N-((1-(2-(二十四烷基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)- N-十四烷基十四烷-1-胺； (15)(((((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(乙烷-2,1-二基))雙(氮烷三基))肆(己烷-6,1-二基)肆(2-己基癸酸酯)； (16)(((1-(4-羥基丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (17)二(十五烷-7-基)6,6'-(((1-(4-羥基丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二己酸酯； (18)(((((1-(2-羥基乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(乙烷-2,1-二基))雙(氮烷三基))肆(己烷-6,1-二基)肆(2-己基癸酸酯)； (19)(((((1-(4-羥基丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(乙烷-2,1-二基))雙(氮烷三基))肆(己烷-6,1-二基)肆(2-己基癸酸酯)； (20) 二(( Z)-壬-2-烯-1-基)9,9'-(((1-(2-(雙(2-羥基乙基)胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二壬酸酯； (21)雙十二烷基3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (22)雙十二烷基3,3'-(((1-(2-羥基乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (23)雙十二烷基3,3'-(((1-(4-羥基丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (24)((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (25)((3,3'-(((1-(2-羥基乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (26)((3,3'-(((1-(4-羥基丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (27)二辛基3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (28)雙十六烷基3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (29)((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))雙(丁烷-4,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (30)二(( Z)-壬-2-烯-1-基)9,9'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二壬酸酯； (31)二(( Z)-壬-2-烯-1-基)9,9'-(((1-(2-羥基乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二壬酸酯； (32)二(( Z)-壬-2-烯-1-基)9,9'-(((1-(4-羥基丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二壬酸酯； (33)雙(4-(丙醯基氧基)丁基)3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (34)((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))雙(丁烷-4,1-二基)二戊酸酯； (35)((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))雙(丁烷-4,1-二基)二庚酸酯； (36)((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))雙(丁烷-4,1-二基)二壬酸酯； (37)((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))雙(丁烷-4,1-二基)雙十一酸酯； (38)((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))雙(乙烷-2,1-二基)二庚酸酯； (39)((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))雙(丙烷-3,1-二基)二己酸酯； (40)((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))雙(戊烷-5,1-二基)二丁酸酯； (41)雙(2-乙基己基)4,4'-((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))二丁酸酯； (42)雙(2-乙基己基)6,6'-((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))二己酸酯； (43)雙(2-乙基己基)8,8'-((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))二辛酸酯； (44)雙(2-丙基己基)4,4'-((3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙醯基))雙(氧基))二丁酸酯； (45)(2 R,2' R)-1,1'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(癸-2-醇)； (46)( S)-1-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)(( R)-2-羥基癸基)胺基)癸-2-醇； (47)(2 R,2' R)-1,1'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(十二烷-2-醇)； (48)( S)-1-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)(( R)-2-羥基癸基)胺基)十二烷-2-醇； (49)(2 R,2' R)-1,1'-(((1-(2-羥基乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(十二烷-2-醇)； (50)( S)-1-((( R)-2-羥基十二烷基)((1-(2-羥基乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)胺基)十二烷-2-醇； (51)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-(雙(3-側氧基-3-(十五烷-7-基氧基)丙基)胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (52)二(十三烷-6-基)3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (53)二(十七烷-8-基)3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (54)二(十九烷-9-基)3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (55)(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (56)(((1-(4-氟基丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (57)(((1-(4-氯基丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (58)(((1-(4-氰基丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (59)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(3-(二甲基胺基)丙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (60)二(十五烷-7-基)3,3'-((2-(1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)乙基)氮烷二基)二丙酸酯； (61)二(十五烷-7-基)4,4'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丁酸酯； (62)二(十五烷-7-基)5,5'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二戊酸酯； (63) 二(十五烷-7-基)6,6'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二己酸酯； (64)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(4-羥基丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (65)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(3-羥基丙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (66)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(4-(二甲基胺基)丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (67)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-(二乙基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (68)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-(二異丙基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (69)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-(吡咯啶-1-基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (70)二(十五烷-7-基)5,5'-(((1-(2-𠰌啉基乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二戊酸酯； (71)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(3-𠰌啉基丙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (72)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(3-(吡咯啶-1-基)丙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (73)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)-2-甲基丙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (74)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-(雙(2-羥基乙基)胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (75)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-((2-羥基乙基)(甲基)胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (76)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-(雙(甲氧基甲基)胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (77)(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(乙烷-2,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (78)(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙烷-3,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (79)(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丁烷-4,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (80)(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(戊烷-5,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (81)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-羥基乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (82)十七烷-9-基8-(((1-(2-羥基乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)(6-側氧基-6-(十一烷氧基)己基)胺基)辛酸酯； (83) (((1-(4-(二甲基胺基)丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (84)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-𠰌啉基乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (85)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-(4-甲基哌𠯤-1-基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (86)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (87)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-(哌啶-1-基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (88)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-(1-甲基哌啶-4-基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (89)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)吡咯啶-3-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (90)(((1-(4-羥基丁基)吡咯啶-3-基)甲基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (91)(((4-羥基環己基)甲基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (92)((2-(4-羥基環己基)乙基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (93)((2-(4-羥基哌啶-1-基)乙基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (94)二(十五烷-7-基)6,6'-(((1-(4-羥基丁基)吡咯啶-3-基)甲基)氮烷二基)二己酸酯； (95)二(十五烷-7-基)6,6'-(((4-羥基環己基)甲基)氮烷二基)二己酸酯； (96)二(十五烷-7-基)6,6'-((2-(4-羥基環己基)乙基)氮烷二基)二己酸酯； (97)二(十五烷-7-基)6,6'-((2-(4-羥基哌啶-1-基)乙基)氮烷二基)二己酸酯； (98)((2-(4-(3-羥基丙基)哌𠯤-1-基)乙基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (99)((2-(4-(3-羥基丙基)哌啶-1-基)乙基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (100)雙(3-己基壬基)6,6'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二己酸酯； (101)雙(3-己基壬基)6,6'-(((1-(4-羥基丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二己酸酯； (102)雙(4-戊基壬基)6,6'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二己酸酯； (103)雙(4-戊基壬基)6,6'-(((1-(4-羥基丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二己酸酯； (104)四(十五烷-7-基)4,4',4'',4'''-((3,3',3'',3'''-(((((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(乙烷-2,1-二基))雙(氮烷三基))肆(丙醯基))肆(氧基))四丁酸酯； (105)二(十五烷-7-基)3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-咪唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯； (106)(((1-(4-羥基丁基)-1 H-咪唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (107)二(十五烷-7-基)6,6'-(((1-(4-羥基丁基)-1 H-咪唑-4-基)甲基)氮烷二基)二己酸酯.； (108)二(十五烷-7-基)3,3'-((2-(4-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-1,2,3-三唑-1-基)乙基)氮烷二基)二丙酸酯； (109)((2-(4-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-1,2,3-三唑-1-基)乙基)氮烷二基)雙(己烷-6,1-二基)雙(2-己基癸酸酯)； (110)二(十五烷-7-基)6,6'-((2-(4-(4-(二甲基胺基)丁基)-1 H-1,2,3-三唑-1-基)乙基)氮烷二基)二己酸酯； (111)二(十五烷-7-基)6,6'-((2-(4-(4-羥基丁基)-1 H-1,2,3-三唑-1-基)乙基)氮烷二基)二己酸酯； (112)十七烷-9-基8-(((1-(2-羥基乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)(8-側氧基-8-(十一烷氧基)辛基)胺基)辛酸酯； (113)十七烷-9-基8-(((1-(4-羥基丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)(6-側氧基-6-(十一烷氧基)己基)胺基)辛酸酯； (114)十七烷-9-基8-(((1-(4-羥基丁基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)(8-側氧基-8-(十一烷氧基)辛基)胺基)辛酸酯； (115)十七烷-9-基8-((2-(1-(2-羥基乙基)-1 H-吡唑-4-基)乙基)(8-側氧基-8-(十一烷氧基)辛基)胺基)辛酸酯； (116)十七烷-9-基8-((2-(1-(4-羥基丁基)-1 H-吡唑-4-基)乙基)(8-側氧基-8-(十一烷氧基)辛基)胺基)辛酸酯； (117)雙(3-(辛氧基)-2-((辛氧基)甲基)丙基)3,3'-(((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)二丙酸酯；及 (118)((((((1-(2-(二甲基胺基)乙基)-1 H-吡唑-4-基)甲基)氮烷二基)雙(丙烷-3,1-二基))雙(氧基))雙(亞甲基))雙(丙烷-2,1,3-三基)四辛酸酯。
  11. 一種脂質奈米粒子，其含有如請求項1至10中任一項之化合物或其鹽、一磷脂、膽固醇及一PEG脂質。
  12. 如請求項11之脂質奈米粒子，其中該磷脂係選自由以下組成之群：二油醯基磷脂醯乙醇胺(DOPE)、二硬脂醯基磷脂醯膽鹼(DSPC)、棕櫚醯基磷脂醯膽鹼(POPC)、1-棕櫚醯基-2-油醯基-sn-甘油基-3-磷酸膽鹼、蛋磷脂醯膽鹼(EPC)、二油醯基磷脂醯膽鹼(DOPC)、二棕櫚醯基磷脂醯膽鹼(DPPC)、二油醯基磷脂醯甘油(DOPG)、二棕櫚醯基磷脂醯甘油(DPPG)、二硬脂醯基磷脂醯乙醇胺(DSPE)、磷脂醯乙醇胺(PE)、二棕櫚醯基磷脂醯乙醇胺(DPPE)、1-棕櫚醯基-2-油醯基-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺(POPE)、1,2-二油醯基-sn-甘油基-3-[磷酸-L-絲胺酸](DOPS)、1,2-雙十八醯基-sn-甘油基-3-磷酸絲胺酸(DSPS；18:0 PS)、1,2-二-(9Z-十八醯基)-sn-甘油基-3-磷酸-L-絲胺酸(DOPS；18:1 PS)及神經鞘磷脂。
  13. 如請求項11之脂質奈米粒子，其中該PEG脂質包括直接附接至PEG或經由一連接子部分連接至PEG的一脂質， 該連接子部分為選自由碳酸酯(-OC(O)O-)、琥珀醯基、磷酸酯(-O-(O)POH-O-)、磺酸酯、醯胺(-C(O)NH-)、胺基(-NR-)、羰基(-C(O)-)、胺甲酸酯(-NHC(O)O-)、脲(-NHC(O)NH-)、二硫化物(-SS-)、醚(-O-)、琥珀醯基(-(O)CCH 2CH 2C(O)-)及琥珀醯胺基(-NHC(O)CH 2CH 2C(O)-)，及 該脂質為腦醯胺、二肉豆蔻醯基甘油(DMG)、琥珀醯基-二醯基甘油(s-DAG)、二硬脂醯基磷脂醯膽鹼(DSPC)、二硬脂醯基磷脂醯乙醇胺(DSPE)或膽固醇。
  14. 如請求項11之脂質奈米粒子，其含有20莫耳%至80莫耳%之該化合物或其鹽、0莫耳%至20莫耳%之該磷脂、20莫耳%至65莫耳%之該膽固醇及0莫耳%至5莫耳%之該PEG脂質。
  15. 一種組成物，包含： 一離子性藥物及 (i)如請求項1至10中任一項之化合物或其鹽，或 (ii)如請求項1至10中任一項之化合物或其鹽、一磷脂、膽固醇及一PEG脂質。
  16. 如請求項15之組成物，其中該離子性藥物為選自由以下組成之群的任一或多者：一核酸或一基於核酸之藥物、一肽、一蛋白質藥物、一蛋白質-核酸結構主體及一離子性生物聚合物-藥物綴合物。
  17. 如請求項16之組成物，其中該核酸為選自由以下組成之群的任一或多者：一反義寡核苷酸(ASO)、一短干擾RNA (siRNA)、一微RNA (miRNA)、一信使RNA (mRNA)、一自身擴增RNA (SAM)、一環狀RNA、一crRNA、一tracrRNA、一單引導RNA (sgRNA)、一轉移RNA (tRNA)、一不對稱干擾RNA (aiRNA)、一antagomir、一核糖核酸酵素、一核酸內切酶基體RNA、一短髮夾RNA (shRNA)、一質體DNA (pDNA)、一雙股DNA (dsDNA)、一部分雙股DNA、一三股DNA、一部分三股DNA、一單股DNA (ssDNA)、一單股RNA (ssRNA)、一雙股RNA (dsRNA)、一鎖核酸(LNA)、一肽核酸(PNA)、一miRNA類似物及一抗miRNA。
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WO2014028487A1 (en) * 2012-08-13 2014-02-20 Massachusetts Institute Of Technology Amine-containing lipidoids and uses thereof
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AU2017268394A1 (en) * 2016-05-18 2019-01-03 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding relaxin
WO2023078954A1 (en) * 2021-11-02 2023-05-11 Ziphius Vaccines Nv Lipid nanoparticles for oligonucleotide delivery
KR20240128683A (ko) * 2021-11-22 2024-08-26 세일 바이오메디슨스, 인크. 신규한 이온화 가능 지질 및 지질 나노입자, 및 이를 사용하는 방법
CN114507195B (zh) * 2022-01-14 2024-02-13 华南理工大学 一种脂质化合物、包含其的组合物及应用

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