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TW202519235A - 突變型idh抑制劑化合物的鹽型、其晶型、包含其的組合物，及其用途 - Google Patents

突變型idh抑制劑化合物的鹽型、其晶型、包含其的組合物，及其用途 Download PDF

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TW202519235A
TW202519235A TW113135167A TW113135167A TW202519235A TW 202519235 A TW202519235 A TW 202519235A TW 113135167 A TW113135167 A TW 113135167A TW 113135167 A TW113135167 A TW 113135167A TW 202519235 A TW202519235 A TW 202519235A
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TW
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salt
ray powder
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TW113135167A
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徐曉峰
陳亮
趙新濤
宋西鎮
張俊
付勇
劉湘永
丁列明
家炳 王
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大陸商貝達藥業股份有限公司
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Abstract

本發明涉及化合物6-(5-氨基-6-氯-4-氟吡啶-2-基)- N 2, N 4-雙(( R)-1,1,1-三氟丙基-2-基)-1,3,5-三嗪-2,4-二胺的晶型，鹽型及所述鹽的晶型；以及包含所述化合物的晶型，鹽型及所述鹽的晶型的組合物，以及他們在治療疾病中的用途。本發明還涉及6-(5-氨基-6-氯-4-氟吡啶-2-基)- N 2, N 4-雙(( R)-1,1,1-三氟丙基-2-基)-1,3,5-三嗪-2,4-二胺的製備方法。

Description

突變型IDH抑制劑化合物的鹽型、其晶型、包含其的組合物，及其用途
本發明涉及6-(5-氨基-6-氯-4-氟吡啶-2-基)- N 2, N 4-雙(( R)-1,1,1-三氟丙基-2-基)-1,3,5-三嗪-2,4-二胺的晶型，鹽型及所述鹽型的晶型；以及包含所述化合物的晶型，鹽型及所述鹽型的晶型的藥物組合物，以及它們在抑制IDH1和/或IDH2活性方面的用途。本發明還涉及6-(5-氨基-6-氯-4-氟吡啶-2-基)- N 2, N 4-雙(( R)-1,1,1-三氟丙基-2-基)-1,3,5-三嗪-2,4-二胺及其鹽以及它們的晶型的製備方法，以及相關中間體化合物及其製備方法。本發明還涉及應用所述化合物或其鹽及藥物組合物用於治療與IDH1和/或IDH2雙突變相關的疾病或病症的方法。
近年來在腫瘤細胞中發現了3個代謝酶，分別為延胡索酸脫氫酶、琥珀酸脫氫酶和異檸檬酸脫氫酶（isocitratedehydrogenase，IDH），這些酶的基因突變改變了細胞代謝並可能與腫瘤的發生發展相關。
人類IDH有三種類型，分別為IDH1、IDH2和IDH3，IDH1定位於細胞質和過氧化物酶體中，IDH2和IDH3定位於線粒體中。該類蛋白酶可以將異檸檬酸氧化為草醯琥珀酸，然後再轉化為α-酮戊二酸（α-KG）。
2008年，進行人腦膠質母細胞瘤基因測序時無意中發現IDH1基因突變，揭開了IDH在腫瘤研究中的序幕。隨後多項大規模臨床膠質瘤的病例-對照研究發現，IDH1基因突變好發在超過75%的低級別膠質瘤和90%的繼發性成膠質細胞瘤；IDH2基因突變好發於約20%的急性髓系白血病。此外，在膽管癌（10%～23%）、黑色素瘤（10%）和軟骨樣腫瘤（75%）中也有IDH基因突變的報導。由此可見，多種腫瘤中均存在IDH突變。常見突變位點是位於催化中心的精氨酸殘基（IDH1/R132H、IDH1/R132C、IDH2/R140Q、IDH2/R172K）。突變後的IDH可以催化α-酮戊二酸（α-KG）轉化為2-羥基戊二酸（2-HG）。研究表明，α-KG與2-HG結構相似，2-HG與α-KG競爭，由此降低了α-KG依賴性酶的活性，導致染色質高度甲基化，這種超甲基化被認為干擾了正常的細胞分化，導致未成熟細胞過度增殖，從而引發癌症。
Agios Pharmaceuticals公司2013年在Science雜誌上公佈了其研究成果：該公司開發的突變IDH1酶抑制劑AGI-5198(Science，2013，340，626-630)和突變IDH2酶抑制劑AGI-6780(Science，2013，340，622-626)能有效抑制細胞中突變的IDH1/IDH2介導的2-HG的產生，誘導異常增殖的癌細胞的分化。用AGI-5198治療攜帶IDH1基因突變的神經膠質瘤細胞及用AGI-6780治療攜帶IDH2基因突變的白血病細胞，均導致了細胞中成熟標記物表達增高。
Agios Pharmaceuticals公司開發的突變IDH1抑制劑AG-120，其I期臨床試驗顯示：在具有IDH1基因突變的急性髓細胞性白血病(AML)或骨髓增生異常綜合症(MDS)患者中，可以觀察到98％的病人的α-羥基戊二酸(2-HG)水準有所下降。
2013年Agios Pharmaceuticals報導了IDH2 R140Q抑制劑AGI-6780和IDH2 R132H抑制劑AGI-5198以及該公司後來上市的另一IDH2 R140Q抑制劑AG-221。AGI-6780和AGI-5198能夠分別抑制攜帶常見IDH1和IDH2突變體的細胞中2-HG的生產。
對於由IDH1和IDH2突變造成的癌症，如腦膠質瘤、急性髓系白血病、膽管癌、黑色素瘤等，目前已有IDH1單抑制劑AG120和IDH2的單抑制劑AG221上市，為臨床提供了用藥選擇。新的研究發現IDH1和IDH2突變可能在同一腫瘤中共存，從而導致IDH1或IDH2單抑制劑療效有限及產生獲得性耐藥。雖然同時抑制突變型IDH1和IDH2以用於治療癌症的藥物研究已有報導，但仍然需要開發靶點抑制能力強、選擇性優異的新型突變型IDH1和IDH2雙抑制劑，用於治療由突變型IDH1和IDH2介導的相關疾病，克服單抑制劑長期用藥後的獲得性耐藥問題，為臨床提供一種新的用藥選擇。
本發明發現6-(5-氨基-6-氯-4-氟吡啶-2-基)- N 2, N 4-雙(( R)-1,1,1-三氟丙基-2-基)-1,3,5-三嗪-2,4-二胺具有優異的細胞抑制活性，良好的藥代動力學特徵，且具有優異的抗腫瘤活性，是優異的新型突變型IDH1和IDH2雙抑制劑。本發明還研究發現了6-(5-氨基-6-氯-4-氟吡啶-2-基)- N 2, N 4-雙(( R)-1,1,1-三氟丙基-2-基)-1,3,5-三嗪-2,4-二胺的優勢晶型，鹽型，及所述鹽型的晶體形式，具有有利於藥物開發所需的成藥性質。
本發明所提供的化合物1及其鹽的固體形式用作IDH1和IDH2雙抑制劑。另外，本發明涉及的化合物1及其鹽的優選固體形式具有優異的穩定性、吸濕性、藥代動力學等性質，有利於藥物的開發。儘管本文顯示和描述了本發明的優選實施方案，但這樣的實施方案僅以例舉方式提供，並不意在限制本發明的範圍。在實踐本發明的過程中，可以使用所描述的本發明實施方案的各種替代方案。
化合物1的晶體形式
化合物1晶型B
在一些實施方案中，所述化合物1的晶體形式為晶型B，所述晶型B的X射線粉末衍射圖包含2θ值為5.8 °±0.2 °、11.7 °±0.2 °和17.6 °±0.2 °的特徵峰。
在一些實施方案中，所述化合物1的晶體形式為晶型B，所述晶型B的X射線粉末衍射圖包含2θ值為5.8 °±0.2 °、11.7 °±0.2 °、17.6 °±0.2 °、19.6 °±0.2 °和23.5 °±0.2 °的特徵峰。
在一些實施方案中，所述化合物1的晶體形式為晶型B，所述晶型B的X射線粉末衍射圖包含5個或更多（例如6個或更多，7個或更多，或8個）2θ值選自5.8 °±0.2 °、11.7 °±0.2 °、14.2 °±0.2 °、16.8 °±0.2 °、17.6 °±0.2 °、18.6 °±0.2 °、19.6 °±0.2 °和23.5 °±0.2 °的特徵峰。
在一些實施方案中，所述晶型B具有基本上如圖2所示的X射線粉末衍射圖。
在一些實施方案中，所述晶型B具有基本上如圖3所示的熱重分析（TGA）圖譜，在200℃之前具有約0.2%的失重。
在一些實施方案中，所述晶型B具有基本上如圖4所示的差示掃描量熱（DSC）圖譜。
化合物1晶型D
在一些實施方案中，所述化合物1的晶體形式為晶型D，所述晶型D的X射線粉末衍射圖包含2θ值為8.6 °±0.2 °、10.5 °±0.2 °和21.1 °±0.2 °的特徵峰。
在一些實施方案中，所述化合物1的晶體形式為晶型D，所述晶型D的X射線粉末衍射圖包含2θ值為8.6 °±0.2 °、10.5 °±0.2 °、11.8 °±0.2 °、14.0 °±0.2 °、17.3 °±0.2 °和21.1 °±0.2 °的特徵峰。
在一些實施方案中，所述化合物1的晶體形式為晶型D，所述晶型D的X射線粉末衍射圖包含5個或更多（例如6個或更多，7個或更多，8個或更多，或9個）2θ值選自8.6 °±0.2 °、10.5 °±0.2 °、11.8 °±0.2 °、14.0 °±0.2 °、16.5 °±0.2 °、17.3 °±0.2 °、18.3 °±0.2 °、19.8 °±0.2 °和21.1 °±0.2 °的特徵峰。
在一些實施方案中，所述晶型D具有基本上如圖5所示的X射線粉末衍射圖。
在一些實施方案中，所述晶型D具有基本上如圖6所示的熱重分析（TGA）圖譜，在200℃之前具有約10.9%的失重。
在一些實施方案中，所述晶型D具有基本上如圖7所示的差示掃描量熱（DSC）圖譜。
化合物1的鹽型
本發明還提供了化合物1的優勢鹽型，在一些實施方式中，所述鹽型為化合物1硫酸鹽。在一些實施方式中，所述鹽型為化合物1磷酸鹽。在一些實施方式中，所述鹽型為化合物1的L-酒石酸鹽。在一些實施方式中，所述鹽型為化合物1的L-蘋果酸鹽。在一些實施方式中，所述鹽型為化合物1的L-乳酸鹽。在一些實施方式中，所述鹽型為化合物1的甲磺酸鹽。在一些實施方案中，所述鹽型最優選為化合物1鹽酸鹽。
化合物1鹽酸鹽及其晶體形式
本發明提供如下式II所表示的化合物1鹽酸鹽， 式II。
本發明還提供了式II所示的化合物1鹽酸鹽的晶體形式。
在一些實施方式中，所述化合物1鹽酸鹽的晶體形式為鹽酸鹽晶型A，所述鹽酸鹽晶型A的X射線粉末衍射圖包含2θ值為11.6 °±0.2 °、12.7 °±0.2 °、13.0 °±0.2 °、19.2 °±0.2 °和21.1±0.2 °的特徵峰。
在一些實施方案中，所述化合物1鹽酸鹽的晶體形式為鹽酸鹽晶型A，所述鹽酸鹽晶型A的X射線粉末衍射圖包含2θ值為11.6 °±0.2 °、12.7 °±0.2 °、13.0 °±0.2 °、17.3 °±0.2 °、18.3 °±0.2 °、19.2 °±0.2 °和21.1±0.2 °的特徵峰。
在一些實施方案中，所述化合物1鹽酸鹽的晶體形式為鹽酸鹽晶型A，所述鹽酸鹽晶型A的X射線粉末衍射圖包含2θ值為11.6 °±0.2 °、12.7 °±0.2 °、13.0 °±0.2 °、17.3 °±0.2 °、18.3 °±0.2 °、19.2 °±0.2 °、21.1±0.2 °、23.9±0.2 °和25.5±0.2 °的特徵峰。
在一些實施方案中，所述化合物1鹽酸鹽的晶體形式為鹽酸鹽晶型A，所述鹽酸鹽晶型A的X射線粉末衍射圖包含5個或更多（例如6個或更多，7個或更多，8個或更多，9個或更多，10個或更多，11個或更多，12個或更多，或13個或更多，或14個）2θ值選自11.6 °±0.2 °、12.7 °±0.2 °、13.0 °±0.2 °、15.4 °±0.2 °、16.3 °±0.2 °、17.3 °±0.2 °、18.3 °±0.2 °、19.2 °±0.2 °、21.1±0.2 °、22.6±0.2 °、23.9±0.2 °、25.5±0.2 °、28.0±0.2 °和31.8±0.2 °的特徵峰。
在一些實施方案中，所述鹽酸鹽晶型A具有基本上如圖8所示的X射線粉末衍射圖。
在一些實施方案中，所述鹽酸鹽晶型A的拉曼光譜包括在1572 cm -1±2 cm -1，1421 cm -1±2 cm -1，1289 cm -1±2 cm -1和1248 cm -1±2 cm -1處的峰位移。
在一些實施方案中，所述鹽酸鹽晶型A的拉曼光譜包括5個或更多選自1572 cm -1±2 cm -1，1421 cm -1±2 cm -1，1312 cm -1±2 cm -1，1289 cm -1±2 cm -1，1269 cm -1±2 cm -1和1248 cm -1±2 cm -1，1206 cm -1±2 cm -1，999 cm -1±2 cm -1，841 cm -1±2 cm -1，426 cm -1±2 cm -1，136 cm -1±2 cm -1處的峰位移。
在一些實施方案中，所述鹽酸鹽晶型A具有基本上如圖20所示的拉曼光譜。
在一些實施方案中，所述鹽酸鹽晶型A的紅外光譜包括波數在3421cm -1±2 cm -1, 3328 cm -1±2 cm -1，1655 cm -1±2 cm -1，1536 cm -1±2 cm -1，1268 cm -1±2 cm -1，1177 cm -1±2 cm -1，797 cm -1±2 cm -1處的特徵吸收峰。
在一些實施方案中，所述鹽酸鹽晶型A的紅外光譜包括5個或更多波數選自3421cm -1±2 cm -1，3328 cm -1±2 cm -1，3048 cm -1±2 cm -1，1655 cm -1±2 cm -1，1595 cm -1±2 cm -1，1536 cm -1±2 cm -1，1291 cm -1±2 cm -1，1268 cm -1±2 cm -1，1177 cm -1±2 cm -1，1154 cm -1±2 cm -1，797 cm -1±2 cm -1處的特徵吸收峰。
在一些實施方案中，所述鹽酸鹽晶型A具有基本如圖21所示的紅外光譜。
在一些實施方案中，所述鹽酸鹽晶型A具有基本上如圖9所示的熱重分析（TGA）圖譜，在200℃之前幾乎無失重。
在一些實施方案中，所述鹽酸鹽晶型A具有基本上如圖10所示的差示掃描量熱（DSC）圖譜。
所述鹽酸鹽晶型A已藉由單晶分析表徵，鹽酸鹽晶型A單晶的晶胞堆積投影圖基本上如圖14所示，晶胞參數如下所示：
晶體屬正交晶系，空間群為P2 12 12 1，晶胞參數： a= 10.6444(1)Å； b= 10.7997(1)Å； c= 17.4146(2)Å； α=β=γ=90.00°； 晶胞體積V= 2001.92(4) Å 3； 晶胞內不對稱單位數Z=4。
最終可靠因數R 1= 0.0283，wR 2= 0.0749，S= 1.088。最終確定不對稱單位的化學計量式為C 14H 13ClF 7N 7•HCl，計算單個分子的分子量為484.22，計算晶體密度為1.607g/cm 3。
化合物1甲磺酸鹽的晶體形式
本發明提供化合物1甲磺酸鹽，所述化合物1甲磺酸鹽結構如下式III表示， 。 式III
本發明還提供式III所示的化合物1甲磺酸鹽的晶體形式。
在一些實施方案中，所述化合物1甲磺酸鹽的晶體形式為甲磺酸鹽晶型A，所述甲磺酸鹽晶型A的X射線粉末衍射圖包含2θ值為6.6 °±0.2 °、8.2 °±0.2 °和19.3 °±0.2 °的特徵峰。
在一些實施方案中，所述化合物1甲磺酸鹽的晶體形式為甲磺酸鹽晶型A，所述甲磺酸鹽晶型A的X射線粉末衍射圖包含2θ值為6.6 °±0.2 °、8.2 °±0.2 °、17.3 °±0.2 °和19.3 °±0.2 °的特徵峰。
在一些實施方案中，所述化合物1甲磺酸鹽的晶體形式為甲磺酸鹽晶型A，所述甲磺酸鹽晶型A的X射線粉末衍射圖包含3個或更多（例如4個或更多，5個或更多，6個或更多，或7個）2θ值選自6.6 °±0.2 °、8.2 °±0.2 °、10.5 °±0.2 °、14.2 °±0.2 °、17.3 °±0.2 °、19.3 °±0.2 °和20.2 °±0.2 °的特徵峰。
在一些實施方案中，所述甲磺酸鹽晶型A具有基本上如圖11所示的X射線粉末衍射圖。
在一些實施方案中，所述甲磺酸鹽晶型A具有基本上如圖12所示的熱重分析（TGA）圖譜，在200℃之前具有約1.9%的失重。
在一些實施方案中，所述甲磺酸鹽晶型A具有基本上如圖13所示的差示掃描量熱（DSC）圖譜。
本發明的所有晶型都是基本上純的。
如非特殊說明，所述X射線粉末衍射圖均使用Cu靶的Kα譜線測得。
如非特殊說明，本發明的實驗溫度均為室溫。
本文所用的術語“基本上純的”是指所述晶型的含量以重量計，不小於85 %，優選不小於95 %，更優選不小於98 %。
需要說明的是，本發明中提及的數值及數值範圍不應被狹隘地理解為數值或數值範圍本身，本領域技術人員應當理解其可以根據具體技術環境的不同，在不背離本發明精神和原則的基礎上圍繞具體數值有所浮動，本發明中，這種本領域技術人員可預見的浮動範圍多以術語“約”或“基本上”來表示。
需要說明的是，本發明中提及的“鹽（鹽型）”包括API（例如式I所示化合物）和客體分子（例如鹽酸）之間發生顯著或者完全的質子交換而形成的經典意義上的鹽，也包括API（例如式I所示化合物）和客體分子（例如L-蘋果酸鹽）之間藉由氫鍵和可能的其他非共價鍵的相互作用而共存形成的多組分體系，例如共晶；即本發明所述的“鹽（鹽型）”包括本領域技術人員所熟知的經典意義上的鹽、共晶或他們的混合物等。
需要說明的是，在沒有確切的定一下，本發明化合物1的鹽型可以以各種物理形式存在，例如，可以是溶液，懸浮液或固體形式。當為固體形式是，所述化合物可以是非晶體形式，晶體形式或其混合物。
本發明所用的術語“晶體形式”是指具有相同化學組成但形成晶體的分子、原子和/或離子的不同空間排列的晶型，包括無水晶型、水合物和溶劑合物。在本文中“多晶型物”、“晶型”、“晶體形式”和“多晶型”可互換使用，均表示式I所示化合物及其鹽的固體形式，其不同於式I所示化合物及其鹽的非晶形形式。所述“非晶形”是指非-結晶固體形式。化合物的多晶型物可具有不同的化學和/或物理性質，包括但不限於例如穩定性、溶解度、溶出速率、光學性質、熔點、機械性質和/或密度等。這些性質可以影響原料藥的加工和/或製造，藥物的穩定性、溶出和/或生物利用度等。因此，多晶型現象可以影響藥物的至少一種性質，包括但不限於品質、安全和/或藥效。在沒有確切定義的情況下，式I所示化合物及其鹽包括任何多晶型物及無定型態。
可以藉由本領域已知的許多方法獲得分子的多晶型物。這樣的方法包括但不限於熔體重結晶、熔體冷卻、溶劑重結晶、去溶劑化、快速蒸發、快速冷卻、緩慢冷卻、蒸汽擴散和昇華。可以使用眾所周知的技術檢測、鑒定、分類和表徵多晶型物，所述技術是例如但不限於差示掃描量熱法(DSC)、熱重法(TGA)、X射線粉末衍射學(XRPD)、單晶X射線衍射學、固態核磁共振(NMR)、紅外(IR)光譜法、拉曼光譜法和熱台光學顯微術。
本發明中，“具有約如圖1所示的X射線粉末衍射圖”，“具有基本上如圖1所示的X射線粉末衍射圖”或“其X射線粉末衍射圖基本上如圖1所示”中所使用的術語“約”和“基本上”是表示附圖中的峰的精確位置不應當被解釋為絕對值。因為本領域技術人員可知，X射線粉末衍射圖的2θ值可能會由於不同的測量條件（如所用的設備和儀器）和不同的樣品（如不同批次的樣品）而產生誤差，X 射線粉末衍射圖的衍射角的測量誤差為5％或更小，通常，給定的值的±0.2°的差別被認為是恰當的。還應理解，峰值的相對強度可能隨實驗條件和樣品製備諸如顆粒在樣品中的優選的取向而波動。自動或固定的發散狹縫的使用也將會影響相對強度的計算。在這裡所包括的XRD曲線所示強度只是示例性的，不能被用作絕對比較，並且粉末衍射圖基本上與本文公開的那些粉末衍射圖相同的任何結晶形式均在本發明保護的範圍之內。
本領域的技術人員將會理解，由於不同樣品批次，樣品純度、樣品製備以及測量條件(例如加熱速率) 的變化，DSC測量的資料可能會發生小的變化，通常給定值± 5℃的差別是可以接受的（並且仍被認為是本文描述的特定晶型的特徵）。因此，本申請所引用的吸熱圖並不作為絕對值，且當解釋DSC資料時將考慮這樣的誤差。
在TGA檢測中，不受任何特定理論限制，重量損失對應痕量殘留溶劑或水的損失。由於不同樣品批次，樣品純度、樣品殘留溶劑含量、樣品製備以及測量條件( 例如加熱速率) 的變化，TGA測量的資料可能會發生一定的變化，因此，本申請所引用的熱重曲線圖並不作為絕對值，且當解釋TGA資料時將考慮這樣的誤差。
本領域還已知的是，可以獲得IR和拉曼光譜，其可根據測量條件而變化。儀器、實驗條件，採樣方式和儀器校準等都可以影響峰位置和強度。因此本發明所提供的光譜不應視為是絕對的，並且光譜基本上與本文公開的那些光譜相同的任何結晶形式均在本發明公開的範圍內。
藥物組合物
在一些實施方案中，本發明提供了一種藥物組合物，其中，所述藥物組合物含有0.5重量%-85重量%的化合物1，或其藥學上可接受的鹽，或它們的混合物。
在一些實施方案中，優選地，所述藥物組合物中含有0.5重量%-85重量%的化合物1，或其鹽酸鹽，磷酸鹽，硫酸鹽，甲磺酸鹽，L-蘋果酸鹽，L-酒石酸鹽或L-乳酸鹽，或它們的混合物。
在一些實施方案中，優選地，所述藥物組合物中含有0.5重量%-85重量%化合物1晶型B。
在一些實施方案中，優選地，所述藥物組合物中含有0.5重量%-85重量%化合物1晶型D。
在一些實施方案中，優選地，所述藥物組合物中含有0.5重量%-85重量%化合物1鹽酸鹽。
在一些實施方案中，優選地，所述藥物組合物中含有0.5重量%-85重量%化合物1鹽酸鹽晶型A。
在一些實施方案中，優選地，所述藥物組合物中含有0.5重量%-85重量%化合物1甲磺酸鹽晶型A。
在一些實施方式中，所述組合物用於口服給藥劑型。
在一些實施方式中，所述口服給藥劑型包括片劑、膠囊劑、扁囊劑、丸劑、顆粒劑、口服液、混懸劑、分散體、乳劑、粉劑。
在一些實施方案中，所述藥物組合物含有1重量%-70重量%的化合物1，或其藥學上可接受的鹽，或它們的混合物。
在一些實施方案中，所述藥物組合物還包含一種或多種藥學上可接受的載體。
在一些實施方案中，所述藥學上可接受的載體可以包含稀釋劑、填充劑、潤滑劑、粘合劑、崩解劑中的一種或多種。
在實踐中，根據常規的藥物混合技術，本發明化合物1，或其藥學上可接受的鹽，或它們的混合物作為活性組分，與藥物載體按照常規藥物混合技術緊密混合成藥物組合物。所述藥物載體可以採取各種各樣的形式，這取決於期望採用的給藥方式，例如，口服或注射 (包括靜脈注射)。因此，本發明的藥物組合物可以採用適於口服給藥的獨立單元單位，如包含預定劑量的活性組分的膠囊劑、扁囊劑或片劑。進一步地，本發明的藥物組合物可採用粉末、顆粒、溶液、水性懸浮液、非水液體、水包油型乳液，或油包水型乳液形式。另外，除了上述提到的常見的劑型，式I所示化合物或其藥學上可接受的鹽，也可以藉由控釋的方式和/或輸送裝置給藥。本發明的藥物組合物可以採用任何製藥學上的方法製備。一般情況下，這種方法包括使活性組分和組成一個或多個必要成分的載體締合的步驟。一般情況下，所述藥物組合物經由活性組分與液體載體或精細分割的固體載體或兩者的混合物經過統一均勻的密切和緊密的混合制得。另外，該產品可以方便地製備成所需要的外觀。
本發明採用的藥物載體可以是，例如，固體載體、液體載體或氣體載體。固體載體，包括乳糖、石膏粉、蔗糖、滑石粉、明膠、瓊脂、果膠、阿拉伯膠、硬脂酸鎂、硬脂酸。液體載體，包括糖漿、花生油、橄欖油和水。氣體載體，包括二氧化碳和氮氣。製備藥物口服製劑時，可以使用任何製藥學上方便的介質。例如，水、乙二醇、油類、醇類、增味劑、防腐劑、著色劑等可用於口服的液體製劑如懸浮劑、酏劑和溶液劑；而載體，如澱粉類、糖類、微晶纖維素、稀釋劑、造粒劑、潤滑劑、粘合劑、崩解劑等可用於口服的固體製劑如散劑、膠囊劑和片劑。考慮到易於施用，口服製劑首選片劑和膠囊，在此應用固體藥學載體。可選地，片劑包衣可使用標準的水製劑或非水製劑技術。
含有本發明化合物或藥物組合物的片劑可藉由壓制壓縮或模塑模制成型，可選地，可以與一種或多種輔助組分或輔藥一起製成片劑。活性組分以自由流動的形式如粉末或顆粒，與粘合劑、潤滑劑、惰性稀釋劑、表面活性劑或分散劑混合，在適當的機器中，藉由壓縮可以制得壓縮片。用一種惰性液體稀釋劑浸濕粉末狀的化合物或藥物組合物，然後在適當的機器中，藉由模塑可以制得模塑片。較優地，每個片劑含有大約0.05mg到5g的活性組分，每個扁囊劑或膠囊劑含有大約0.05mg到5g的活性組分。例如，擬用於人類口服給藥的配方包含約0.5mg到約5g的活性組分，與合適且方便計量的輔助材料複合，該輔助材料約占藥物組合物總量的5%至95％。單位劑型一般包含約1mg到約2g的活性組分，典型的是2.5mg、5mg、10mg、25mg、50mg、100mg、200mg、300mg、400mg、500mg、600mg、800mg或1000mg。
本發明提供的適用於胃腸外給藥的藥物組合物可將活性組分加入水中製備成水溶液或懸浮液。可以包含適當的表面活性劑如羥丙基纖維素。在甘油、液態聚乙二醇，及其在油中的混合物，也可以制得分散體系。進一步地，防腐劑也可以包含在本發明的藥物組合物中用於防止有害的微生物生長。
本發明提供適用於注射的藥物組合物，包括無菌水溶液或分散體系。進一步地，上述藥物組合物可以製備成無菌粉末形式以用於即時配製無菌注射液或分散液。無論如何，最終的注射形式必須是無菌的，且為了易於注射，必須是易於流動的。此外，所述藥物組合物在製備和儲存過程中必須穩定。因此，優選地，所述藥物組合物要在抗微生物如細菌和真菌污染的條件下保存。載體可以是溶劑或分散介質，例如，水、乙醇、多元醇 (如甘油、丙二醇、液態聚乙二醇)、植物油及其適當的混合物。
本發明提供的藥物組合物可以是適於局部用藥的形式，例如，氣溶膠、乳劑、軟膏、洗液、撒粉或其他類似的劑型。進一步地，本發明提供的藥物組合物可以採用適於經皮給藥設備使用的形式。利用本發明式I所示化合物，或其藥學上可接受的鹽，藉由常規的加工方法，可以製備這些製劑。作為一個例子，乳劑或軟膏藉由加入約5wt%到10wt%的親水性材料和水，制得具有預期一致性的乳劑或軟膏。
本發明提供的藥物組合物，可以以固體為載體，適用於直腸給藥的形式。單位劑量的栓劑是最典型常見的劑型。適當的輔料包括本領域常用的可哥脂和其他材料。栓劑可以方便地製備，首先將藥物組合物與軟化或熔化的輔料混合，然後冷卻和模具成型而制得。
除了上述提到的輔料組分外，上述製劑配方還可以包括，適當的，一種或多種附加的輔料組分，如稀釋劑、緩衝劑、調味劑、粘合劑、表面活性劑、增稠劑、潤滑劑和防腐劑 (包括抗氧化劑)等。進一步地，其他的輔藥還可以包括調節藥物與預期接受者血液等滲壓的促滲劑。包含式I所示化合物，或其藥學上可接受的鹽的藥物組合物，可以製備成粉劑或濃縮液的形式。
式I所示化合物的製備方法
一些實施方式中，本發明提供了式I所式化合物的製備方法： ， 式I 其中，所述方法包括使用式IV所示化合物進行脫保護反應， ， 式IV 其中，所述R 1為氨基保護基團，所述R 2為H或氨基保護基團。
優選地，所述氨基保護基團可選為-Boc、-Cbz、-Fmoc、-PMB和-Bn中的一種或兩種，更優選為-Boc基團。
優選地，所述氨基保護基為-Boc基團，所述式IV化合物在含有TFA的溶劑中進行反應。
在一些實施方式中，所述製備方法還包括使用式V所示化合物 與化合物A07 在堿和鈀催化劑存在下進行偶聯反應得到式IV所示化合物； 其中，所述R 1為氨基保護基團，所述R 2為H或氨基保護基團； 所述R 3選自H、C 1-4烷基，或兩個R 3與其相連的O原子共同形成含有兩個氧原子和1個硼原子的5或6元雜環，所述5或6元雜環可任選地被1或多個C 1-4烷基所取代。
在一些實施方式中，所述氨基保護基團可選為-Boc、-Cbz、-Fmoc、-PMB和-Bn中的一種或兩種，更優選為-Boc基團。
在一些實施方式中，式V所示化合物與化合物A07反應過程中的堿可選自K 2CO 3、AcOK、Na 2CO 3、AcONa、Cs 2CO 3、K 3PO 4、KF或TEA中的一種或多種。
在一些實施方式中，式V所示化合物與化合物A07反應過程中的鈀催化劑選自Pd(dppf)Cl 2或Pd(OAc) 2。
在一些實施方式中，式V所示化合物與化合物A07反應過程中的溶劑可選自甲苯，二氧六環，DMF，乙醇，乙腈，叔丁醇，乙二醇二甲醚，二乙氧基甲烷，四氫呋喃中的一種或多種，或上述溶劑中的一種與多種與水的混合物。
在一些實施方式中，式V所示化合物與化合物A07反應過程中還可以加入配體，所述配體可選自dppf，PPh 3，XantPhos，Xphos，PCy 3，SPhos，P(t-Bu) 3。
在一些實施方式中，式V所示化合物與化合物A07在70-100℃條件下進行反應。
在一些實施方式中，所述製備方法還包括使用式VI所示化合物 與聯硼酸頻那醇酯在堿和催化劑的存在下反應得到式V所示化合物； 其中所述R 1為氨基保護基團，所述R 2為H或氨基保護基團。
在一些實施方式中，所述氨基保護基團可選為-Boc、-Cbz、-Fmoc、-PMB和-Bn中的一種或兩種，更優選為-Boc基團。
在一些實施方式中，式VI所示化合物與聯硼酸頻那醇酯反應過程中的堿為AcOK。
在一些實施方式中，式VI所示化合物與聯硼酸頻那醇酯反應過程中的鈀催化劑選自Pd(dppf)Cl 2、Pd(PPh 3) 4和Pd(OAc) 2中的一種或多種。
在一些實施方式中，式VI所示化合物與聯硼酸頻那醇酯反應過程中的溶劑可選自二氧六環，DMSO，DMF，甲苯，2-甲基四氫呋喃，DMA，NMP中的一種或多種。
在一些實施方式中，式VI所示化合物與聯硼酸頻那醇酯反應過程中還可以加入配體，所述配體可選自dppf或PPh 3。
在一些實施方式中，式VI所示化合物與聯硼酸頻那醇酯在70-100℃條件下進行反應。
在一些實施方式中，所述製備方法還包括使用化合物A13 與Boc 2O在鹼性條件下反應得到式VI所示化合物（如化合物A101 或化合物A04 ）；優選地，所述堿選自LiHMDS或DIEA。
本發明還提供式化合物A13的製備方法：
方法1： ；或
方法2： 。
本發明還提供式I所示化合物的製備方法。
式I所示化合物的製備路線一如下： 。
式I所示化合物的製備路線二如下： 。
式I所示化合物的製備路線三如下： 。
本發明還提供製備式I所示化合物的中間體，選自如下式所示化合物： 、 、 ， 式IV                       式V                           式VI 其中，所述R 1為氨基保護基團，所述R 2為H或氨基保護基團； 所述R 3選自H、C 1-4烷基，或兩個R 3與其相連的O原子共同形成含有兩個氧原子和1個硼原子的5或6元雜環，所述5或6元雜環可任選地被1或多個C 1-4烷基所取代。
在一些實施方式中，所述氨基保護基團可選為-Boc、-Cbz、-Fmoc、-PMB和-Bn中的一種或兩種。
在一些實施方式中，所述中間體化合物選自一個或多個如下所述的化合物： ， ， ， ， ， ， ， ， 。
化合物1的晶型，鹽型及所述鹽型的晶型的用途，以及治療實體腫瘤癌症，血液惡性腫瘤，炎性疾病，自身免疫性疾病，及其他疾病的方法
本發明進一步提供了所述化合物1的晶型，鹽型及所述鹽型的晶型，或所述藥物組合物在製備藥物中的用途。
在一些實施方案中，優選地，提供了化合物1鹽酸鹽在製備藥物中的用途。
在一些實施方案中，優選地，提供了化合物1晶型B在製備藥物中的用途。
在一些實施方案中，優選地，提供了化合物1晶型D在製備藥物中的用途。
在一些實施方案中，優選地，提供了化合物1鹽酸鹽晶型A在製備藥物中的用途。
在一些實施方案中，所述藥物用於治療由突變型IDH1和/或IDH2介導的疾病。作為優選，所述疾病為癌症。
作為優選，所述癌症選自腦膠質瘤、黑素瘤、乳頭狀甲狀腺腫瘤、膽管癌、肺癌、乳腺癌、肉瘤、神經膠質瘤、多形性成膠質細胞瘤、急性髓性白血病、非霍奇金淋巴瘤等。在具體的實施方案中，待治療的癌症是腦膠質瘤、成膠質細胞瘤(神經膠質瘤)、骨髓增生異常綜合症(MDS)、骨髓組織增殖性贅生物(MPN)、急性骨髓性白血病(AML)、肉瘤、黑色素瘤、非小細胞肺癌、軟骨肉瘤、膽管癌或血管免疫母細胞性淋巴瘤。在更具體的實施方案中，待治療的癌症是腦膠質瘤、成膠質細胞瘤(神經膠質瘤)、骨髓增生異常綜合症(MDS)、骨髓組織增殖性贅生物(MPN)、急性骨髓性白血病(AML)、黑色素瘤、軟骨肉瘤、或血管免疫母細胞性非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)。
本發明還提供了一種在治療物件上施用治療有效量的至少任意一種化合物1的晶型，鹽型及鹽型的晶型，或藥物組合物用於治療和/或預防由IDH1和/或IDH2介導的疾病的方法。
作為優選，在上述方法中，所述IDH1和/或IDH2介導的疾病是癌症。
作為優選，在上述方法中，向治療物件施用治療有效量的化合物1的晶型B。
作為優選，在上述方法中，向治療物件施用治療有效量的化合物1鹽酸鹽晶型A。
本發明還提供了一種治療癌症的方法，包括向治療物件施用治療有效量的至少任意一種化合物1的晶型，鹽型及鹽型的晶型，或所述藥物組合物。在一些實施方案中，本發明涉及一種治療以突變型IDH1和/或IDH2的存在為特徵的癌症的方法，其包括給予所需患者治療有效量的化合物1的晶型，鹽型及鹽型的晶型，或藥物組合物，其中所述的癌症選自腦膠質瘤、黑素瘤、乳頭狀甲狀腺腫瘤、膽管癌、肺癌、乳腺癌、肉瘤、神經膠質瘤、多形性成膠質細胞瘤、急性髓性白血病、非霍奇金淋巴瘤等。
作為優選，在上述方法中，所述的治療物件為人類。
本文所用術語“疾病”或“病症”或“病狀”是指任意的疾病、不適、病、症狀或者適應症。
本文所用術語“治療有效量”是指一個化合物施用于治療物件時對於治療一種疾病、或一種疾病或病症的至少一種臨床症狀時，足以影響對疾病、病症或症狀的這種治療的量。“治療有效量”可以隨著化合物，疾病、病症和/或疾病或病症的症狀，疾病、病症和/或疾病或病症的症狀的嚴重程度，被治療的患者的年齡，和/或被治療的患者的體重等變化。在任意特定的情況下，一個合適的量對那些本領域的技術人員可以是顯而易見的，也可以是用常規實驗確定的。在聯合治療的情況下，“治療有效量”是指有效治療疾病、病症或病狀的聯用物件的總量。
本發明所述的化合物或晶型單獨或合併用藥作為活性組分，與藥物載體混合成藥物組合物。本發明的藥物組合物包括適於口腔、直腸、局部和不經腸道 (包括皮下給藥、肌肉注射、靜脈給藥)給藥的藥物組合物，儘管任何給定的情況下，最適合的活性組分給藥方式取決於接受給藥的特定的主體、主體性質和病情嚴重程度。本發明的藥物組合物可以方便地以本領域公知的單位劑型存在和藥學領域公知的任何製備方法製備。
一般情況下，治療上述所示的狀況或不適，藥物的劑量水準約為每天0.01mg/kg體重到150mg/kg體重，或者每個病人每天0.5mg到7g。但是，可以理解的是，可能需要比上述那些更低或更高的劑量。任何特定病人的具體劑量水準和治療方案將取決於多種因素，包括所用具體化合物的活性、年齡、體重、綜合健康狀況、性別、飲食、給藥時間、給藥途徑、排泄率、藥物聯用的情況和接受治療的特定疾病的嚴重程度。
藉由下面對本發明的書面描述，這些和其他方面將變得顯而易見。
提供以下實施例以更好地說明本發明。除非另有明確說明，否則所有份數和百分比均按重量計算，所有溫度均為攝氏度。
將藉由具體實施例更詳細地描述本發明。提供以下實施例用於說明性目的，並不旨在以任何方式限制本發明。本領域技術人員將容易地認識到可以改變或修改以產生基本相同結果的各種非關鍵參數。
除非另有說明，本發明所用到的檢測儀器資訊和檢測方法參數如下： 表1
設備名稱 X射線粉末衍射儀 (XRPD)
儀器 Bruker D8 Advance
技術指標 銅靶波長為 1.54Å 的 Kα radiation (40 kV, 40 mA)， θ-2θ測角儀， Ni單色儀，Lynxeye探測器
校準物質 Al 2O 3
參數 檢測角度 3-40°2θ
步長 0.02°2θ
速度 0.6或0.3 s.step -1
發散狹縫 0.6 mm
索拉狹縫 2.5 °
表2
設備名稱 差示掃描量熱儀（DSC）
儀器 Discovery DSC 2500
樣品盤 鋁坩堝
保護氣體 氮氣
氣體流速 50mL/min
常用檢測方法 Ramp 10℃/min
表3
設備名稱 熱重分析儀（TGA）
儀器 Discovery TGA 550
樣品盤 鉑金坩堝+鋁坩堝
保護氣體 氮氣
氣體流速 40mL/min
檢測方法 Ramp 10℃/min
表4
設備名稱 動態水分吸附儀（DVS）
廠家 Surface Measurement Systems
儀器 DVS Resolution
樣品盤 鋁坩堝
保護氣體 氮氣
氣體流速 200sccm
表5
儀器 核磁儀（NMR）
型號 Bruker Avance Neo 500
檢測類型 核磁氫譜
參數 NS: 32    D1: 1[sec]    O1P: 6.175ppm    SW: 19.9955ppm    TE: 298K
表6
設備名稱 高效液相色譜儀（HPLC）
廠家 Waters
型號 H-Class
儀器 恒溫恒濕箱
型號 賓得KBF720恒溫恒濕箱
單晶檢測
使用Bruker SMART APEX-II，在296 K 收集單晶資料，1.54 Å Cu Kα輻射，採用直接法（Shelxs97）解析晶體結構，使用最小二乘法修正結構參數和判別原子種類，使用幾何計算法獲得全部氫原子位置。
拉曼光譜
使用Thermo DXR3xi收集資料，鐳射功率1.5 mW, 曝光時間0.00235s，掃描次數為5次，物鏡倍數10x，25微米針孔。
紅外光譜
採用溴化鉀壓片，使用Bruker Tensor 27紅外光譜儀收集資料，範圍為400-4000波數（cm -1）。
具體實施方式
下面藉由給出的實施例對本發明作出進一步說明，但所述實施例並不對本發明要求保護的範圍構成任何限制。在本發明的具體實施例中，除非特別說明，所述技術或方法為本領域的常規技術或方法等。下面實施例中，除非另有說明，所述的原料、試劑藉由市售購買獲得；所述百分比、比例、比率或份數等按照重量計算。
縮略語： AcOK/ KOAc：醋酸鉀； AcONa：醋酸鈉； API：原料藥/活性藥用成分； Bn：苄基； Boc：叔丁基氧羰基； (BOC) 2O：二碳酸二叔丁酯； Cbz：苄氧羰基； DCM：二氯甲烷； DIEA： N, N-二異丙基乙基胺； DMF： N, N-二甲基甲醯胺； DMSO：二甲基亞碸； DPPA：疊氮磷酸二苯酯； DMA：二甲基乙醯胺； DMAP：4-二甲氨基吡啶； NMP： N-甲基吡咯烷酮； dppf：1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵； EA：乙酸乙酯； Fmoc：芴甲氧羰基； K 2CO 3：碳酸鉀； Na 2CO 3：碳酸鈉； Cs 2CO 3：碳酸銫； K 3PO 4：磷酸鉀； KF：氟化鉀；PMB：對甲氧基苄基； PPh 3：三苯基膦； PCy 3：三環己基膦； P(t-Bu) 3：三叔丁基膦； PG：保護基； SPhos：2-雙環己基膦-2',6'-二甲氧基聯苯；THF：四氫呋喃； TEA：三乙胺； TFA：三氟乙酸 DIEA：二異丙基乙基胺； LC-MS或LCMS：液相色譜-質譜； LiHMDS：雙（三甲基矽基）氨基鋰； NBS：N-溴代丁二醯亞胺； PE：石油醚； [PdCl 2(dppf)]CH 2Cl 2/Pd(dppf)Cl 2.DCM：[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡合物； Pd(dppf)Cl 2：[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀； Pd(PPh 3) 4：四（三苯基膦）合鈀； Pd(OAc) 2：醋酸鈀； XantPhos：4,5-雙二苯基膦-9,9-二甲基氧雜蒽； Xphos：2-二環己基磷-2',4',6'-三異丙基聯苯； Pre-HPLC：製備型高效液相色譜； RH：相對濕度； RRT：相對保留時間； hrs /h：小時； LC-MS/LCMS：液相色譜-質譜聯用； 1H-NMR/HNMR：核磁共振氫譜； XRD/XRPD：X射線粉末衍射； SCXRD：單晶X射線衍射； DSC：差示掃描量熱； TGA：熱重分析； DVS：動態水分吸附。
實施例1 中間體化合物A13合成
步驟1：化合物A01的合成
化合物2-氯-4-氟煙酸（64.66 g），TEA（102.4 ml），叔丁醇（54.6 g）溶於甲苯（600 mL）中，加熱至90 oC，加入DPPA（106.44 g）溶於甲苯（400 mL）的溶液。LCMS 監控反應完畢，冷卻至室溫。加入飽和碳酸氫鈉水溶液（750 mL）淬滅反應，EA（300 mL×3）萃取，合併有機相，水洗滌兩次，飽和氯化鈉水溶液洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥，抽濾，濾液減壓濃縮，濃縮殘餘物加入正庚烷/乙酸乙酯(V/V=15/1)攪拌洗滌，抽濾得固體53.41 g。LCMS [M+H] +： 247.06。
步驟2：化合物A12的合成
化合物A01（53.41 g）溶於DCM（530 mL）中，加入TFA（246.88 g），室溫攪拌2h，LCMS監控反應完畢，反應液減壓濃縮，濃縮殘餘物加入DCM 溶解，冰浴冷卻下滴加飽和碳酸鈉水溶液調節pH至7-8，分離有機相，水相DCM 萃取（100 mL×3），合併有機相，水洗滌3次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮。濃縮殘餘物加入正庚烷（500mL）加熱攪拌，趁熱過濾，濾液自然冷卻至室溫。過濾，所得固體40℃真空乾燥，得到目標化合物A12（23.61 g, 74.4%）。LCMS [M+H] +：147.00。
步驟3：化合物A13的合成
在反應瓶中依次加入2-氯-4-氟吡啶-3-胺（7.00g），DMF（100.00mL）和NBS（9.35g），室溫反應。LCMS監控反應完成後，向反應體系內加水，用乙酸乙酯萃取。收集有機相，用飽和氯化鈉洗滌，有機相旋幹，粗產品經柱層析（EA/PE=0-10%）純化得目標化合物A13( 10.10g , 93.79% )。 1H NMR (300 MHz, CDCl 3)：δ 7.16 (d, J= 8.3 Hz, 1H), 4.13 (s, 2H)。LCMS [M+H] +：224.92。
實施例2 化合物1的合成方法1
步驟1：化合物A04的合成
化合物A13（29.95g）溶於THF（300 mL）中，然後依次加入DIEA （51.51 g），(Boc) 2O（86.98 g），DMAP（8.12 g），室溫攪拌1 h。LCMS監控反應至原料消失。加水淬滅反應，分離有機相，水相用EA（100 mL×3）萃取。合併有機相，水洗三次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮。向濃縮殘餘物加入正庚烷（300 mL）加熱攪拌，趁熱過濾，濾液自然冷卻至室溫，過濾，所得固體真空40℃乾燥，得到目標化合物A04（33.45 g, 59.15%）。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d6)：δ 8.13 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 1.39 (s, 18H)。LCMS: 447.2, 449.0 ([M+Na] +)。
步驟2：化合物A05的合成
化合物A04（5.00 g）溶於甲苯（100 mL），室溫下依次加入聯硼酸頻那醇酯 （3.88 g），AcOK（3.46 g），Pd(dppf)Cl 2.DCM（285 mg），反應體系氮氣置換3次，80℃加熱反應4 h。LCMS監控反應至原料消失，反應液降至室溫，向反應體系中加入EA（50 mL）和水（50 mL）攪拌溶解，分液。有機相用飽和食鹽水洗，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，減壓濃縮得到目標化合物A05（4.73 g）。LCMS [M+H-82] +：391.12。 1H NMR (500 MHz, CDCl 3)：δ 7.58 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 1.40 (s, 18H), 1.39 (s, 12H)。
步驟3： 化合物A08 的合成
化合物A07（4.00g, 11.8 mmol），化合物A05（6.01 g）溶於甲苯（80 mL）和H 2O（20 mL）的混合溶液中， 室溫下依次加入Pd(dppf)Cl 2.DCM（0.48 g），K 2CO 3（4.90 g）。氮氣保護80 oC反應4.0 h。LCMS監控反應至原料消失，反應體系降溫至50℃，過濾，濾液減壓濃縮，濃縮殘餘物加入乙酸乙酯/正庚烷（V/V=1/20）加熱溶解，過濾，濾液減壓濃縮得到目標化合物A08（6.50 g，85.5%）。LCMS [M+H] +：648.19。
步驟4：化合物1的合成
將化合物A08（3 g）溶於DCM（30 mL）中，加入TFA ( 8.13 mL），室溫反應。LCMS監控原料消失，反應液旋幹，粗品經Pre-HPLC（流動相:A:0.1%TFA in水；B:乙腈；流速:40ml/min；梯度:37%-62%B in 20min；波長:254nm；色譜柱:luna C18(3)，10um，100A，30*250mm）純化得目標化合物1（270 mg，11.01%）。LCMS [M+H] +：448.08。 1H-NMR (500MHz, DMSO-d6) δ8.45, 8.34, 8.04, 7.84 (d, d, d, d, J= 9 Hz, J= 9 Hz, J= 9 Hz, J = 9 Hz, 2H), 8.14, 7.96 (d, d, J= 11 Hz, J= 11 Hz, 1H), 6.30 (s, 2H), 5.20 - 5.15, 4.96 - 4.88 (m, m, 2H), 1.33 (d, J= 7.0 Hz)。
實施例3 化合物1的合成方法2
步驟1：化合物A101的合成
6-溴-2-氯-4-氟吡啶-3-胺（10.00 g），THF（50 mL）和(BOC) 2O（10.65 g）的混合物在氮氣保護下降溫至-78℃，滴加LiHMDS（133.07 mL，1.00 mol/L），緩慢升至室溫反應。LCMS監控原料消失，向反應中加入冰，用乙酸乙酯萃取，分離有機相，乾燥，旋幹。粗產品經柱層析（EA/PE=0-4%）純化得目標化合物A101（6 g，41.55%）。LCMS [M+H] +：324.97。 1H NMR (500 MHz, 甲醇-d4)：δ 7.74 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 1.43 (s, 9H)。
步驟2：化合物A102的合成
在反應瓶中加入化合物A101（5.70 g），聯硼酸頻那醇酯（4.89 g)，[PdCl 2(dppf)]CH 2Cl 2（1.43 g），AcOK（5.15 g）和1,4-二氧六環（60 mL），氮氣置換3次，升溫至80 ℃反應3 h。LCMS監控反應完畢，反應液降至室溫，然後加入乙酸乙酯和水攪拌溶解，分液，有機相水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得目標化合物A102粗品（5.10 g），粗品未經純化直接用於下一步反應。
步驟3：化合物A103的合成
向化合物A102粗品（5.10 g）中依次加入化合物A07（4.65 g）， [PdCl 2(dppf)]CH 2Cl 2（1.41 g），K 2CO 3（7.14 g），1,4-二氧六環（100 mL）和水（10 mL），氮氣置換3次後，升溫至80℃反應。LCMS監控反應完成後，反應液倒入水中，加入乙酸乙酯萃取，分離有機相，有機相用飽和氯化鈉水溶液洗滌，減壓濃縮，殘餘物經柱色譜（EA/PE=0-30%）純化，得目標化合物A103（3 g，31.81%），LCMS [M+H] +：548.13。
步驟4：化合物1的合成
採用與實施例2步驟4相同的製備方法得到化合物1粗品，所得粗品經Prep-HPLC 純化(Column: Luna-C18(3)-10-100; Size: 30*250 nm，Conditions: 乙腈/水(0.1%甲酸) 35%-65%，20 min，UV：308 nm)，得到目標化合物1。
對得到的目標化合物1進行XRPD表徵，其具有基本上如圖1所示的XRPD譜圖，其X射線粉末衍射圖主要資料如表7所示，命名為化合物1晶型A。 表7
序號 2θ±0.2(°) 晶面間距 [Å] 相對強度（%）
1 5.812 15.19317 33.6
2 8.570 10.30997 9.5
3 9.006 9.81158 18.4
4 9.413 9.38755 17.7
5 9.733 9.08027 4.3
6 10.129 8.72629 5.7
7 10.633 8.31347 4.5
8 11.611 7.61535 60.2
9 12.643 6.99585 29.1
10 12.842 6.88803 7.5
11 13.682 6.46674 10.4
12 14.129 6.26340 19.4
13 14.950 5.92109 4.2
14 15.419 5.74222 41.1
15 16.185 5.47186 7.2
16 16.635 5.32487 35.0
17 16.887 5.24591 42.8
18 17.479 5.06978 100.0
19 18.066 4.90626 16.0
20 18.426 4.81125 4.2
21 18.886 4.69499 35.0
22 19.103 4.64227 16.6
23 19.528 4.54203 66.7
24 19.760 4.48934 15.7
25 20.033 4.42882 12.3
26 20.326 4.36560 52.9
27 20.794 4.26826 22.2
28 21.097 4.20776 48.5
29 21.445 4.14020 42.1
30 22.293 3.98464 10.0
31 22.692 3.91542 21.3
32 22.866 3.88599 16.2
33 23.225 3.82677 36.4
34 23.379 3.80188 30.3
35 23.615 3.76448 56.2
36 23.837 3.72986 23.8
37 25.436 3.49887 38.8
38 27.324 3.26132 23.1
39 29.927 2.98326 33.6
實施例5化合物1晶型B的製備
將10-20mg的化合物1晶型A使用TGA以10℃/min的升溫速率加熱至160℃並在160℃平衡15min後收集化合物1固體，對化合物1固體進行XRPD，TGA和DSC表徵，其顯示基本上如圖2所示的XRPD譜圖，基本上如圖3所示的TGA譜圖和基本上如圖4所示的DSC譜圖，DSC熔融吸熱峰值溫度約為226℃（Onset值），表明得到的產物為化合物1晶型B。化合物1晶型B的X射線粉末衍射圖主要資料如表8所示。 表8
序號 2θ±0.2(°) 晶面間距 [Å] 相對強度（%）
1 5.789 15.25491 45.5
2 7.846 11.25920 1.4
3 9.216 9.58836 4.6
4 11.659 7.58415 61.7
5 13.532 6.53833 2.1
6 14.221 6.22277 9.7
7 14.611 6.05781 4.8
8 16.778 5.27996 7.8
9 17.561 5.04612 100.0
10 18.576 4.77268 10.6
11 19.572 4.53207 17.7
12 20.171 4.39880 5.7
13 20.481 4.33295 8.6
14 21.206 4.18639 3.3
15 21.505 4.12874 7.6
16 22.587 3.93336 7.9
17 23.504 3.78191 33.3
18 26.511 3.35939 1.3
19 27.198 3.27615 4.3
20 27.641 3.22457 5.0
21 27.947 3.18995 6.0
22 29.518 3.02369 4.2
23 30.152 2.96160 5.2
24 30.387 2.93921 3.8
實施例6化合物1晶型D的製備
稱取約20mg的化合物1晶型A加入樣品瓶中，加入0.5ml的乙醇室溫攪拌溶清，向反應液中緩慢加入1.6ml的純化水後有固體析出，懸浮液攪拌過夜，固液分離後室溫乾燥3小時得到產物，對產物進行XRPD，TGA和DSC表徵，其顯示基本上如圖5所示的XRPD譜圖，基本上如圖6所示的TGA譜圖和基本上如圖7所示的DSC譜圖，表明得到的產物為化合物1晶型D。化合物1晶型D的X射線粉末衍射圖主要資料如表9所示。 表9
序號 2θ±0.2(°) 晶面間距 [Å] 相對強度（%）
1 5.866 15.05394 0.6
2 8.603 10.27037 100.0
3 10.488 8.42821 21.9
4 11.792 7.49853 4.6
5 13.979 6.33029 3.9
6 16.480 5.37484 3.8
7 17.352 5.10650 6.2
8 17.747 4.99364 1.2
9 18.191 4.87271 9.9
10 18.265 4.85322 11.2
11 19.455 4.55890 2.4
12 19.849 4.46928 9.3
13 20.888 4.24940 4.9
14 21.103 4.20647 32.5
15 21.531 4.12390 3.6
16 22.300 3.98343 4.8
17 23.726 3.74712 1.2
18 24.731 3.59702 3.4
19 25.388 3.50542 6.3
實施例7化合物1鹽型篩選實驗
取實施例4得到的樣品（20mg）和對應2摩爾當量的酸加入到樣品瓶中，加入對應溶劑（0.5mL），室溫攪拌3天，若反應體系為懸浮液，則進行固液分離後測試樣品XRPD；若反應體系為澄清溶液，則將澄清樣品室溫緩慢揮發，得到固體後測試樣品XRPD，實驗結果如表10所示。 表10 鹽型篩選實驗結果
對應酸 對應溶劑
EtOH Acetone EtOAc THF ACN
鹽酸 成鹽 成鹽 成鹽 成鹽 成鹽
硫酸 成鹽 固體潮解 成鹽 成鹽 成鹽
磷酸 固體潮解 固體潮解 成鹽 成鹽 成鹽
馬來酸 成鹽 未成鹽 未成鹽 膠狀物 未成鹽
L-酒石酸 成鹽 成鹽 未成鹽 成鹽 未成鹽
富馬酸 成鹽 未成鹽 未成鹽 未成鹽 未成鹽
L-蘋果酸 成鹽 成鹽 成鹽 成鹽 成鹽
馬尿酸 成鹽 未成鹽 未成鹽 未成鹽 未成鹽
L-乳酸 成鹽 成鹽 成鹽 成鹽 成鹽
琥珀酸 成鹽 未成鹽 未成鹽 未成鹽 未成鹽
苯磺酸 固體潮解 膠狀物 無定型 膠狀物 膠狀物
對甲苯磺酸（一水） 膠狀物 固體潮解 膠狀物 固體潮解 固體潮解
如表10所示的鹽型篩選實驗結果，“成鹽”代表著反應能夠形成經典意義上的鹽或共晶產物，且產物可以以穩定的固體形式存在。由上述結果可知，針對化合物1的成鹽具有不可預測性，僅有部分酸可以成功與化合物1形成穩定的鹽型。其中鹽酸，硫酸，磷酸，L-酒石酸，L-蘋果酸和L-乳酸具有顯著成鹽優勢。
實施例8式I所示化合物鹽酸鹽晶型A的製備
方法1
取化合物1晶型B（500mg）和1.1摩爾當量的鹽酸加入到樣品瓶中，加入ACN（5mL），室溫懸浮攪拌3天，離心分離固體，50℃真空乾燥3小時，得類白色固體（300mg）。 1H-NMR (500MHz, DMSO-d6) δ9.35, 9.11, 8.97 (br, br, br, 2H), 8.34, 7.94 (d, d, J= 11.0 Hz, J= 10.5 Hz, 1H), 6.94 (br, 3H), 5.37 - 5.31, 5.17 - 5.09, 4.91 - 4.84 (m, m, m, 2H), 1.39 - 1.35 (m, 6H)。
對固體進行XRPD，TGA，DSC和拉曼表徵，其顯示基本上如圖8所示的XRPD譜圖，基本上如圖9所示的TGA譜圖，基本上如圖10所示的DSC譜圖，基本上如圖20所示的拉曼譜圖，和基本上如圖21所示的紅外譜圖，表明得到的目標化合物為化合物1鹽酸鹽晶型A。
化合物1鹽酸鹽晶型A的X射線粉末衍射圖主要資料如表11所示。 表11
序號 2θ±0.2(°) 晶面間距 [Å] 相對強度（%）
1 9.663 9.145 2.4
2 11.590 7.629 37.6
3 12.651 6.992 43.0
4 12.972 6.819 32.0
5 15.411 5.745 4.1
6 16.321 5.427 9.3
7 16.582 5.342 2.8
8 17.118 5.176 6.0
9 17.293 5.124 21.5
10 18.331 4.836 42.8
11 18.505 4.791 17.7
12 19.195 4.620 82.6
13 19.467 4.556 7.7
14 21.139 4.200 100.0
15 21.917 4.052 0.9
16 22.580 3.935 8.4
17 23.477 3.786 3.7
18 23.923 3.717 33.2
19 25.164 3.536 5.8
20 25.535 3.486 41.9
21 26.026 3.421 2.5
22 26.198 3.399 3.3
23 26.537 3.356 7.1
24 26.776 3.327 9.4
25 27.061 3.292 10.7
26 27.636 3.225 5.5
27 28.017 3.182 27.0
28 28.306 3.150 9.8
29 29.419 3.034 3.9
30 30.492 2.929 8.9
31 31.788 2.813 24.1
32 33.849 2.646 12.0
方法2
100升反應釜中加入甲醇（15.0L），升溫至50℃，加入化合物1（1880.05g），體系溶清後過濾，濾液轉入100升反應釜中，50℃加熱攪拌。稱取鹽酸（830.07g（2.0eq））用甲醇（10.0L）稀釋後加入反應釜中，保溫攪拌下再加入甲醇（12.5L）。向反應體系緩慢滴加純化水（6.6L），滴加完成後加入18.81g晶種，向反應液中滴加純化水（31.0L），滴加完畢，反應體系緩慢降溫至室溫，繼續攪拌4小時後，過濾，濾餅用4.0L甲醇/水（1/1,v/v）混合溶劑淋洗，所得濾餅50℃真空乾燥，對產物進行XRPD，TGA和DSC表徵，證明得到鹽酸鹽晶型A（1869.43g）。
稱取約20mg的鹽酸鹽晶型A樣品加入樣品瓶中，加入1 mL 甲醇後溶清，過濾後用封口膜封住樣品瓶，並在封口膜上紮孔，放入二甲基四氫呋喃氛圍中室溫氣液擴散得到單晶樣品，對單晶樣品進行SCRXD檢測確證得到本發明所述化合物1鹽酸鹽晶型A，然後對其進行單晶測試和解析，鹽酸鹽晶型A單晶的晶胞堆積投影圖基本上如圖14所示，晶胞參數如下所示：
晶體屬正交晶系，空間群為P2 12 12 1，晶胞參數： a= 10.6444(1)Å； b= 10.7997(1)Å； c= 17.4146(2)Å； α=β=γ=90.00°； 晶胞體積V= 2001.92(4) Å 3； 晶胞內不對稱單位數Z=4。
最終可靠因數R 1= 0.0283，wR 2= 0.0749，S= 1.088。最終確定不對稱單位的化學計量式為C 14H 13ClF 7N 7•HCl，計算單個分子的分子量為484.22，計算晶體密度為1.607g/cm 3。
實施例9化合物1甲磺酸鹽晶型A的製備
取化合物1晶型A（150mg）和1當量的甲磺酸加入到EtOAc（2 mL）中，室溫懸浮攪拌3天，離心分離固體，室溫真空乾燥過夜，得類白色固體，XRPD檢測顯示其具有基本上如圖11所示的XRPD譜圖，DSC熔融吸熱峰值溫度約為 242℃（Onset值），表明得到的目標化合物為化合物1甲磺酸鹽晶型A。
化合物1甲磺酸鹽晶型A的X射線粉末衍射圖主要資料如表12所示。 表12
序號 2θ±0.2(°) 晶面間距 [Å] 相對強度（%）
1 4.039 21.85954 4.0
2 5.611 15.73864 5.1
3 6.639 13.30319 100.0
4 8.172 10.81108 70.1
5 10.535 8.39026 13.0
6 10.727 8.24107 8.4
7 11.307 7.81927 6.3
8 14.155 6.25190 11.8
9 14.718 6.01413 7.4
10 16.288 5.43771 6.6
11 16.656 5.31822 3.6
12 17.311 5.11856 28.3
13 17.841 4.96757 9.6
14 18.951 4.67902 20.5
15 19.309 4.59317 43.5
16 19.623 4.52044 12.5
17 20.168 4.39948 16.8
18 20.632 4.30153 9.0
19 21.629 4.10536 27.8
實施例10晶型穩定性實驗
樣品及實驗準備：取適量的化合物1鹽酸鹽晶型A置表面皿內，鋪成約3-5毫米厚度薄層，在下述實驗條件下放置。
實驗條件為：高溫（60℃，敞口）、高濕（RH92.5%，敞口）、光照（25 °C，4500lux±500lux，敞口）、長期（25℃/60%RH，鋁鋁包裝）和加速（40℃/75%RH，鋁鋁包裝）。
檢測項目：分別於第0天、第5天、第10天或第30天取樣檢測，對XRPD和HPLC進行檢測比較，檢測結果見表13。 表13穩定性測試結果
考察條件 純度 晶型
0天 99.27 鹽酸鹽晶型A
光照-10天 99.28 鹽酸鹽晶型A
高溫-30天 99.32 鹽酸鹽晶型A
高濕-30天 99.27 鹽酸鹽晶型A
加速-30天 99.30 鹽酸鹽晶型A
長期-30天 99.27 鹽酸鹽晶型A
由所述結果資料可知：鹽酸鹽晶型A物理和化學穩定性均較優異，有利於藥物開發。
實施例11晶型吸濕性實驗
使用動態水分吸附儀（DVS）對化合物1晶型A，化合物1晶型B，化合物1晶型D，化合物1鹽酸鹽晶型A和甲磺酸鹽晶型A進行吸濕性評估，對樣品進行0%RH（相對濕度）至95%RH範圍內吸濕增重變化檢測，樣品在25ºC/80%RH的吸濕增重檢測結果見圖15-19，檢測結果見表14。 表14樣品0%RH至80%RH範圍內重量變化
晶型 25ºC/80%RH的吸濕增重
化合物1晶型A 1.54%
化合物1晶型B 0.13%
化合物1晶型D 10.71%
化合物1鹽酸鹽晶型A 0.12%
化合物1甲磺酸鹽晶型A 4.8%
由所述檢測結果可知，化合物1鹽酸鹽晶型A和化合物1晶型B在吸濕性方面具有突出的優勢，相比化合物1晶型A而言，鹽酸鹽晶型A和化合物1晶型B的吸濕性大大降低。
實施例12化合物1的藥理試驗
實施例A：酶活性抑制試驗
檢測化合物1分別對IDH1 R132H和IDH2 R140Q酶活性的抑制能力，以半數抑制濃度（IC 50）值表示。以AG-881作為陽性對照化合物。在這個實驗中，採用螢光的方法，在IDH1 R132H和IDH2 R140Q酶上進行化合物的檢測，起始濃度10000 nM，3倍稀釋，10個濃度，單孔檢測。
（1）配製1×Assay buffer。
（2）化合物濃度梯度配製：化合物1測試起濃度為 10000 nM，3 倍稀釋，10 個濃度。在 384-well 板中稀釋成 200 倍終濃度的 100% DMSO 溶液。
（3）用 Echo 550 轉移 250 nL DMSO 和 250 nL 已經稀釋的化合物1到反應板裡。
（4）IDH2 R140Q酶檢測：加 25 µL IDH2 R140Q酶溶液，孵育 60 分鐘；再加 25 µL 底物溶液，孵育 150 分鐘；然後加 25 µL Detection buffer, 振盪 1 分鐘, 孵育 60 分鐘。最後讀數用 Synergy 2, Ex544/Em590 cutoff 590。
（5）IDH1 R132H酶檢測中：加 40 µL 的 1.25 倍終濃度IDH1 R132H 酶和NADPH 混合液，孵育 60 分鐘；再加 10 µL 的 5 倍終濃度 底物溶液，孵育 90 分鐘；然後加 25 µL 的 3 倍終濃度 Detection buffer, 振盪 1 min。最後讀數用 Synergy 2, Ex544/Em590 cutoff 590。。
（6）抑制率計算，公式：% Inhibition= (RFU_sample – RFU_min)/ (RFU_max – RFU_min)*100%。其中：RFU-sample是樣品的螢光強度；RFU-min是陰性對照孔均值，代表有酶螢光強度；RFU-max是陽性對照孔均值，代表沒有酶的螢光強度。用Graphpad Prism軟體進行曲線擬合，得到IC 50值，測試結果如表15所示。
實施例B：細胞2-HG實驗
檢測化合物1對穩定轉染IDH1-R132H的U87細胞系和穩定轉染IDH2-R140Q TF-1細胞培養上清中2-HG生成能力的抑制作用。
（1）離心收集培養的細胞，然後用細胞培養液懸起，細胞計數後將細胞接種于96孔細胞培養板中，160 μL細胞懸液/孔（U87-IDH1-R132H為20000個細胞/孔，TF-1-IDH2-R140Q為10000個細胞/孔）。。
（2）取96孔稀釋板，藉由DMSO以及細胞培養液將化合物1進行梯度稀釋，然後取40 μL梯度稀釋後的化合物1分別加入已鋪好細胞的96孔培養板中。U87-IDH1-R132H細胞起始濃度為2 μM，3倍梯度稀釋；TF-1-IDH2-R140Q細胞為起始濃度為10 μM，3倍梯度稀釋（DMSO終濃度均為0.2%），每孔終體積200μL，最後將其置於37℃含5% CO 2培養箱培養。
（3）化合物與細胞共孵育72小時後，取出細胞培養板，經1500 rpm，離心5分鐘，然後吸取培養基上清液100 μL用於2-HG測定。
（4）2-HG檢測：用純淨水對細胞上清液進行稀釋，取稀釋後的樣品30 μL於1.5 ml離心管中，加入200 μL內標溶液，渦旋混勻後，於4℃、3200 rpm的條件下離心15分鐘。取100 μL上清溶液與水1:1稀釋後，用LC-MS檢測。以Analyte Peak Area代表2-HG水準。
（5）抑制率計算，公式：% Inhibition=( 1 - Analyte Peak Area _sample / Analyte Peak Area _max) *100%。其中：Analyte Peak Area _sample是加化合物的樣品Analyte Peak Area；Analyte Peak Area _max是陽性對照孔Analyte Peak Area均值（代表沒有化合物）。用Graphpad Prism軟體進行曲線擬合，得到IC 50值，測試結果如表15所示。 表15
實施例 酶活性(IC 50, nM) 2-HG in medium(IC 50, nM)
IDH1 R132H IDH2 R140Q U87(IDH1 R132H) TF-1-IDH2-R140Q
化合物1 8 190 0.5 7.1
由此可見，本發明的化合物具有優異的酶學及細胞活性。
實施例C：犬藥代動力學檢測實驗
成年比格犬 (6 -12月齡) 分別接受化合物1和AG-881的靜脈（IV）或口服灌胃（PO）單次給藥。IV單次給藥中使用5% DMSO+5% Solutol+90%生理鹽水作為賦形劑將化合物1和AG-881溶清，以1 mg/kg的劑量進行靜脈注射給藥（2雌2雄），靜脈采血時間為5min、15min、0.5h、1h、2h、4h、6h、8h、10h、24h。PO單次給藥中使用5% DMSO+5% Solutol+90%純淨水作為賦形劑將化合物1和AG-881溶清，以5 mg/kg的劑量口服灌胃給藥（2雌2雄），口服采血時間：15min、0.5h、1h、2h、4h、6h、8h、10h、24h。採集的血樣及時置於含EDTA抗凝劑的試管中，然後在4℃、4000 rpm離心10 min，轉移上清至離心管-20℃保存。檢測時，取30 μL血漿上清樣品，加入200 μL內標溶液，3000 rpm離心10分鐘。然後取上清溶液100 μL與水1 : 1稀釋後進樣，進樣量為5 μL。採用液相色譜-串聯質譜（LC-MS/MS）分析血漿樣品中測試化合物的濃度。使用Sciex Analyst軟體分析個體動物的血漿濃度-時間資料。在濃度分析中引入非房室模型，使用WinNonlin（版本4.1；pHarsight）軟體計算測試化合物的藥代動力學參數（Cl_obs、C max、AUC last），測試結果見表16，PK曲線見圖22。 表 16
給藥方式 化合物 劑量 （mg/kg） Cl_obs (mL/min/kg) C max(ng/mL) AUC last(h·ng/mL) ）
IV AG-881 1 24.2 / 653
化合物1 1 5.1 / 2627
PO AG-881 5 / 658 2155
化合物1 5 / 1160 11713
注：“/”代表未檢測相應參數。
實施例D：不同固體形態犬藥代動力學檢測實驗
成年比格犬 (6 -12月齡) 分別接受化合物1晶型A和鹽酸鹽晶型A的口服灌胃（PO）單次給藥。將化合物1晶型A和鹽酸鹽晶型A灌入膠囊中，以10mg/kg的劑量口服灌胃給藥（1雌1雄），口服采血時間：15min、0.5h、1h、2h、4h、6h、8h、10h、24h、36h、48h。採集的血樣及時置於含EDTA抗凝劑的試管中，然後在4℃、4000 rpm離心10 min，轉移上清至離心管-20℃保存。檢測時，取30 μL血漿上清樣品，加入200 μL內標溶液，3000 rpm離心10分鐘。然後取上清溶液100 μL與水1 : 1稀釋後進樣，進樣量為5 μL。採用液相色譜-串聯質譜（LC-MS/MS）分析血漿樣品中測試化合物的濃度。使用Sciex Analyst軟體分析個體動物的血漿濃度-時間資料。在濃度分析中引入非房室模型，使用WinNonlin（版本4.1；BYkinginsun）軟體計算測試化合物的藥代動力學參數（Cl_obs、C max、AUC last），測試結果見表17，PK曲線見圖23。 表 17
化合物 劑量 （mg/kg） C max(ng/mL) AUC last(h·ng/mL) ）
化合物1晶型A 10 86.9 2295
化合物1鹽酸鹽晶型A 10 735 18316
圖1：化合物1晶型A的X射線粉末衍射圖譜。
圖2：化合物1晶型B的X射線粉末衍射圖譜。
圖3：化合物1晶型B的熱重分析（TGA）圖譜。
圖4：化合物1晶型B的差示掃描量熱（DSC）圖譜。
圖5：化合物1晶型D的X射線粉末衍射圖譜。
圖6：化合物1晶型D的熱重分析（TGA）圖譜。
圖7：化合物1晶型D的差示掃描量熱（DSC）圖譜。
圖8：化合物1鹽酸鹽晶型A的X射線粉末衍射圖譜。
圖9：化合物1鹽酸鹽晶型A的熱重分析（TGA）圖譜。
圖10：化合物1鹽酸鹽晶型A的差示掃描量熱（DSC）圖譜。
圖11：化合物1甲磺酸鹽晶型A的X射線粉末衍射圖譜。
圖12：化合物1甲磺酸鹽晶型A的熱重分析（TGA）圖譜。
圖13：化合物1甲磺酸鹽晶型A的差示掃描量熱（DSC）圖譜。
圖14：化合物1鹽酸鹽晶型A的單晶沿a方向的晶胞堆積投影圖。
圖15：化合物1晶型A的DVS曲線圖。
圖16：化合物1晶型B的DVS曲線圖。
圖17：化合物1晶型D的DVS曲線圖。
圖18：化合物1鹽酸鹽晶型A的DVS曲線圖。
圖19：化合物1甲磺酸鹽晶型A的DVS曲線圖。
圖20：化合物1鹽酸鹽晶型A的拉曼光譜圖。
圖21：化合物1鹽酸鹽晶型A的紅外光譜圖。
圖22：為成年比格犬分別進行靜脈給藥和口服灌胃給藥後血漿中化合物濃度變化曲線，其中橫坐標為給藥後的時間（h），縱坐標為犬血漿中化合物濃度（ng/ml），包括對照組AG-881（對照例1）和化合物1組。
圖23：為成年比格犬分口服灌胃給藥後血漿中化合物濃度變化曲線，其中橫坐標為給藥後的時間（h），縱坐標為犬血漿中化合物濃度（ng/ml）。

Claims (31)

  1. 一種式I所示化合物的鹽型及所述鹽型的晶型，其中該鹽型為鹽酸鹽，磷酸鹽，硫酸鹽，甲磺酸鹽，L-蘋果酸鹽，L-酒石酸鹽或L-乳酸鹽， 。 式I
  2. 一種式I所示化合物的晶型，其中該晶型的X射線粉末衍射圖包含2θ值為5.8 °±0.2 °、11.7 °±0.2 °和17.6 °±0.2 °的特徵峰， 。 式I
  3. 如請求項2之晶型，其中該晶型的X射線粉末衍射圖包含2θ值為5.8 °±0.2 °、11.7 °±0.2 °、17.6 °±0.2 °、19.6 °±0.2 °和23.5 °±0.2 °特徵峰。
  4. 如請求項2-3中任一項之晶型，其中該晶型的X射線粉末衍射圖包含5個或更多2θ值選自5.8 °±0.2 °、11.7 °±0.2 °、14.2 °±0.2 °、16.8 °±0.2 °、17.6 °±0.2 °、18.6 °±0.2 °、19.6 °±0.2 °和23.5 °±0.2 °的特徵峰。
  5. 如請求項2-3中任一項之晶型，其中該晶型具有基本上如圖3所示的TGA圖譜，和/或基本上如圖4所示的DSC圖譜。
  6. 一種式I所示化合物的晶型，其中該晶型的X射線粉末衍射圖包含2θ值為8.6 °±0.2 °、10.5 °±0.2 °和21.1 °±0.2 °的特徵峰， 。 式I
  7. 如請求項6之晶型，其中該晶型的X射線粉末衍射圖包含2θ值為8.6 °±0.2 °、10.5 °±0.2 °、11.8 °±0.2 °、14.0 °±0.2 °、17.3 °±0.2 °和21.1 °±0.2 °特徵峰。
  8. 如請求項6-7中任一項之晶型，其中該晶型的X射線粉末衍射圖包含5個或更多2θ值選自8.6 °±0.2 °、10.5 °±0.2 °、11.8 °±0.2 °、14.0 °±0.2 °、16.5 °±0.2 °、17.3 °±0.2 °、18.3 °±0.2 °、19.8 °±0.2 °和21.1 °±0.2 °的特徵峰。
  9. 如請求項6-7中任一項之晶型，其中該晶型具有基本上如圖6所示的TGA圖譜，和/或基本上如圖7所示的DSC圖譜。
  10. 如請求項1之鹽型及所述鹽型的晶型，其中該鹽型為如式II所示的鹽酸鹽： 。 式II
  11. 如請求項10之鹽型及所述鹽型的晶型，其中該晶型為鹽酸鹽晶型A，該鹽酸鹽晶型A的X射線粉末衍射圖包含2θ值為11.6 °±0.2 °、12.7 °±0.2 °、13.0 °±0.2 °、19.2 °±0.2 °和21.1±0.2 °的特徵峰。
  12. 如請求項11之鹽型及所述鹽型的晶型，其中該鹽酸鹽晶型A的X射線粉末衍射圖包含2θ值為11.6 °±0.2 °、12.7 °±0.2 °、13.0 °±0.2 °、17.3 °±0.2 °、18.3 °±0.2 °、19.2 °±0.2 °和21.1±0.2 °的特徵峰。
  13. 如請求項11-12中任一項之鹽型及所述鹽型的晶型，其中該鹽酸鹽晶型A的X射線粉末衍射圖包含2θ值為1.6 °±0.2 °、12.7 °±0.2 °、13.0 °±0.2 °、17.3 °±0.2 °、18.3 °±0.2 °、19.2 °±0.2 °、21.1±0.2 °、23.9±0.2 °和25.5±0.2 °的特徵峰。
  14. 如請求項11-12中任一項之鹽型及所述鹽型的晶型，其中該鹽酸鹽晶型A的X射線粉末衍射圖包含5個或更多2θ值選自11.6 °±0.2 °、12.7 °±0.2 °、13.0 °±0.2 °、15.4 °±0.2 °、16.3 °±0.2 °、17.3 °±0.2 °、18.3 °±0.2 °、19.2 °±0.2 °、21.1±0.2 °、22.6±0.2 °、23.9±0.2 °、25.5±0.2 °、28.0±0.2 °和31.8±0.2 °的特徵峰。
  15. 如請求項11-12中任一項之鹽型及所述鹽型的晶型，其中，該鹽酸鹽晶型A具有基本上如圖8所示的X射線粉末衍射圖。
  16. 如請求項11-12中任一項之鹽型及所述鹽型的晶型，其中該鹽酸鹽晶型A具有基本上如圖9所示的TGA圖譜，和/或基本上如圖7所示的DSC圖譜。
  17. 如請求項11-12中任一項之鹽型及所述鹽型的晶型，其中鹽酸鹽晶型A的晶胞參數如下： a= 10.6444(1)Å； b= 10.7997(1)Å； c= 17.4146(2)Å； α=β=γ=90.00°； 晶胞體積V= 2001.92(4) Å 3； 晶胞內不對稱單位數Z=4。
  18. 如請求項1之鹽型及所述鹽型的晶型，其中該鹽型為如式III所示的甲磺酸鹽： 。 式III
  19. 如請求項18之鹽型及所述鹽型的晶型，其中該晶型為甲磺酸鹽晶型A，該甲磺酸鹽晶型A的X射線粉末衍射圖包含2θ值為6.6 °±0.2 °、8.2 °±0.2 °和19.3 °±0.2 °的特徵峰。
  20. 如請求項18-19中任一項之鹽型及所述鹽型的晶型，其中該甲磺酸鹽晶型A的X射線粉末衍射圖包含3個或更多2θ值選自6.6 °±0.2 °、8.2 °±0.2 °、10.5 °±0.2 °、14.2 °±0.2 °、17.3 °±0.2 °、19.3 °±0.2 °和20.2 °±0.2 °的特徵峰。
  21. 如請求項18-19中任一項之鹽型及所述鹽型的晶型，其中該甲磺酸鹽晶型A具有基本上如圖12所示的TGA圖譜，和/或基本上如圖13所示的DSC圖譜。
  22. 一種藥物組合物，其中該藥物組合物含有0.5重量%-85重量%的式I所示化合物，或如請求項1-21中任一項之晶型，鹽型或鹽型的晶型，或它們的混合物， 。 式I
  23. 如請求項22之組合物，其中該藥物組合物還含一種或多種藥學上可接受的載體，該藥學上可接受的載體包含稀釋劑、填充劑、潤滑劑、粘合劑、崩解劑中的一種或多種。
  24. 如請求項1-21中任一項之晶型或鹽型，或如請求項22-23之組合物在製備藥物中的用途，其中該藥物用於治療由突變型IDH1和/或IDH2介導的疾病，其中該疾病為癌症。
  25. 如請求項24之用途，其中該癌症選自選自腦膠質瘤、黑素瘤、乳頭狀甲狀腺腫瘤、膽管癌、肺癌、乳腺癌、肉瘤、神經膠質瘤、多形性成膠質細胞瘤、急性髓性白血病、非霍奇金淋巴瘤。
  26. 一種式I所示化合物的製備方法，包括使用式IV所示化合物進行脫保護反應製備得到式I所示化合物； ； 式I 式IV 其中，該R 1為氨基保護基團，該R 2為H或氨基保護基團。
  27. 如請求項26之製備方法，其中該製備方法還包括使用如下式V所示化合物 式V 與化合物A07 進行偶聯反應得到式IV所示化合物； 其中，該R 1為氨基保護基團，該R 2為H或氨基保護基團； 該R 3選自H、C 1-4烷基，或兩個R 3與其相連的O原子共同形成含有兩個氧原子和1個硼原子的5或6元雜環，該5或6元雜環可任選地被1或多個C 1-4烷基所取代。
  28. 如請求項26-27中任一項之製備方法，其中該製備方法還包括使用如下式VI所示化合物與聯硼酸頻那醇酯反應得到式V所示化合物， ， 式VI 其中，該R 1為氨基保護基團，該R 2為H或氨基保護基團。
  29. 一種中間體化合物，其中該中間體化合物選自如下所述化合物， 式IV              式V                     式VI 其中，該R 1為氨基保護基團，該R 2為H或氨基保護基團； 該R 3選自H、C 1-4烷基，或兩個R 3與其相連的O原子共同形成含有兩個氧原子和1個硼原子的5或6元雜環，該5或6元雜環可任選地被1或多個C 1-4烷基所取代。
  30. 一種中間體化合物，其中該中間體化合物選自如下所述化合物， ， ， ， ， ， ， ， ， 。
  31. 一種中間體化合物6-溴-2-氯-4-氟吡啶-3-胺的製備方法，其中該製備方法選自如下方法1或方法2； 方法1： ； 方法2： 。
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